JP2019031552A - Ｐｄ−１系結合アンタゴニストおよび抗ｇｐｃ３抗体を使用して癌を治療する方法 - Google Patents

Abstract

【課題】癌を治療するための組成物および方法の提供。【解決手段】ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体を投与することを含む方法。ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体を含む癌を治療するための医薬組成物を含む組成物。有効成分として抗ＧＰＣ３抗体を含む、癌を治療するためにＰＤ−１系結合アンタゴニストと組み合わせて使用されるべき医薬組成物および有効成分としてＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む、癌を治療するために抗ＧＰＣ３抗体と組み合わせて使用されるべき医薬組成物。【選択図】なし

Description

本発明は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体を投与することによっ
て癌を治療する方法に関する。

肝細胞癌は、報告によれば、世界中で癌による死亡の５番目の主因であり、毎年およそ
６００，０００人の死亡に相当する（非特許文献１）。ほとんどの肝細胞癌の患者は、疾
患を有すると診断された後１年以内に死亡する。残念ながら、肝細胞癌の症例は、治癒的
療法に対して稀にしか応答しない後期で診断されることが頻繁にある。さらに、化学療法
、化学塞栓療法、アブレーションおよび陽子線治療を含めた医学的処置は、このような患
者には不十分にしか有効ではない。多数の患者が、血管進入および複数の肝内転移を伴う
疾患の再発を示し、これは、進行期へと迅速に進行する。その５年生存率は、わずか７％
である（非特許文献２）。局所病巣の摘出に適している肝細胞癌の患者は、その５年生存
率は依然として１５％および３９％のレベルのままであるものの、比較的良好な予後を有
する（非特許文献３）。したがって、当技術分野では、このような悪性疾患肝細胞癌の新
規療法が求められてきた。

肝細胞癌は、報告によれば、日本では、原発性肝癌の症例の９０％超に相当する。この
ような肝細胞癌を治療するための医学的方法として、例えば、化学療法ベースの経カテー
テル動脈塞栓（ＴＡＥ）療法が挙げられ、これは、肝動脈（腫瘍への栄養供給経路として
役立つ）へオイルベースの造影剤（リピオドール）、抗癌剤および閉塞物質（ゲルフォー
ム）の混合物を注入し、栄養動脈の閉塞をもたらすことによって、肝細胞癌の選択的壊死
を誘導することを含む。さらに、経皮エタノール注入、経皮マイクロ波血液凝固療法およ
び高周波アブレーションなどの侵襲的アプローチが使用される。また、治験が、フルオロ
ウラシル（５−ＦＵ）、ウラシル−テガフール（ＵＦＴ）、マイトマイシンＣ（ＭＭＣ）
、ミトキサントロン（ＤＨＡＤ）、アドリアマイシン（ＡＤＲ）、エピルビシン（ＥＰＩ
）およびシスプラチン（ＣＤＤＰ）などの化学療法薬を、単独でまたはインターフェロン
（ＩＦＮ）と組み合わせて使用する全身化学療法で実施されている（非特許文献４）。

一方、ソラフェニブの経口活性形態（ネクサバール、ＢＡＹ４３−９００６）が承認さ
れており、より有利なことに、これは、Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫシグナル伝達においてＲ
ａｆキナーゼを阻害し、一方で、ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥＧＦＲ−３およびＰＤＧＦＲ−β
チロシンキナーゼを標的化することによって血管新生抑制効果を発揮することによって癌
細胞の増殖を阻止し、上記の化学療法薬よりも有効である。ソラフェニブの有効性は、進
行肝細胞癌を標的とする２種の第ＩＩＩ相多施設プラセボコントロール試験（ソラフェニ
ブＨＣＣ評価無作為化プロトコール（ＳＨＡＲＰ）治験およびアジア−太平洋（Ａｓｉａ
−Ｐａｃｉｆｉｃ）治験）において研究されている。ソラフェニブは、生存期間を延長す
ると確認され、これらの治験の両方において０．６８のＨＲを有する。ＳＨＡＲＰ治験で
は、ソラフェニブは、生存期間をプラセボを用いた場合の７．９カ月に対して１０．７カ
月に延長した。アジア治験では、この薬剤は、生存期間をプラセボを用いた場合の４．２
カ月に対して６．５カ月に延長した。しかし、この薬剤は、低い客観的奏効率を有してお
り、画像で腫瘍悪化までの時間を延長したが（欧州および米国の治験における２．８カ月
に対して５．５カ月およびアジアの治験における１．４カ月に対して２．８カ月）、臨床
症状悪化までの時間の延長を示さなかった。アジアのコホートは、おそらくは、その治療
が、アジア領域では、欧州および米国と比較して、疾患プロセスの間のわずかに遅いステ
ージで開始したために、短期間の延命を示した（非特許文献５および６）。

肝癌が進行するにつれ、一般に、拒食症、体重減少、全身倦怠、触知できる右季肋部塊
、右季肋部疼痛、腹部膨満感、発熱および黄疸などの肝臓機能障害と関連しているその特
定の症状が観察される。しかし、化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）は、下痢または便
秘、貧血、感染または敗血症（致死的重症度を有する）を引き起こす免疫系の抑制、出血
、心臓毒性、肝臓毒性、腎毒性、拒食症および体重減少などのその固有の有害反応を含め
た克服されるべき合併症を有する。

肝癌では、特に初期ステージの症状は最初に観察されないが、一般に、拒食症、体重減
少、全身倦怠、触知できる右季肋部塊、右季肋部疼痛、腹部膨満感、発熱および黄疸など
の肝臓機能障害と関連しているその特定の症状が、肝癌の進行につれて観察される。臨床
観察結果によれば、このような症状は、化学療法薬の使用によって増強される。例えば、
検出可能な肝癌細胞を有する患者における拒食症および拒食症と関連しているか、または
それとは独立している体重減少などの症状は、患者への化学療法薬の投与によって、化学
療法薬の使用を伴わない場合よりも増強され得る。いくつかの場合には、化学療法薬の使
用は、このような症状を有する患者に対しては中止されなくてはならない。これらの増強
される症状は、化学療法薬を用いる治療にとって障害である。したがって、例えば、治療
効果の改善または治療されるべき患者のＱＯＬの改善の観点から優れた療法の確立が求め
られてきた。

グリピカン３（ＧＰＣ３）は、肝癌において高レベルで発現されることが頻繁にあり、
そのようなものとして、肝癌におけるその機能の同定において、または肝癌の治療もしく
は診断標的として有用であると思われる。

上記の状況下で、肝癌の治療標的としてＧＰＣ３を用いる薬物が開発中である。有効成
分として抗ＧＰＣ３抗体を含む肝癌薬が開発されており、抗体は、ＧＰＣ３を発現する細
胞に対して、抗体依存性細胞性細胞傷害（本明細書において以下、「ＡＤＣＣ」と呼ばれ
る）活性および／または補体依存性細胞傷害（本明細書において以下、「ＣＤＣ」と呼ば
れる）活性を有する（特許文献１）。また、有効成分としてＡＤＣＣ活性およびＣＤＣ活
性を有するヒト化抗ＧＰＣ３抗体を含むＧＰＣ３を標的とする薬物が開発されている（特
許文献２）。さらなるＧＰＣ３を標的とする薬物が開発されており、これは、ＡＤＣＣ活
性が増強されたヒト化抗ＧＰＣ３抗体（特許文献３および４）またはＡＤＣＣ活性および
ＣＤＣ活性を有し、ならびに血漿動態が改善された抗ＧＰＣ３抗体（特許文献５）を含む
。ソラフェニブなどの化学療法薬との併用療法におけるこれらの抗ＧＰＣ３抗体は、例え
ば、化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）の単独療法によって引き起こされる有害反応を
減弱するとわかっており、また、これらの薬剤をベースとする相互作用を示すとわかった
（特許文献６）。したがって、肝癌を治療するための優れた方法は、例えば、治療効果の
改善または治療されるべき患者のＱＯＬの改善の観点から、中軸としてＧＰＣ３を標的と
する薬物を使用して確立されている過程にある。

他方で、Ｔ細胞への２つの異なるシグナルの提供は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）による休
止Ｔリンパ球のリンパ球活性化についての広く受容されたモデルである。Ｌａｆｆｅｒｔ
ｙ等、Ａｕｓｔ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ ５３：２７〜４２（１９７５
）。このモデルは、非自己からの自己の識別および免疫寛容をさらに提供する。Ｂｒｅｔ
ｓｃｈｅｒ等、Ｓｃｉｅｎｃｅ １６９：１０４２〜１０４９（１９７０）；Ｂｒｅｔｓ
ｃｈｅｒ、Ｐ．Ａ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９６：１８５〜１
９０（１９９９）；Ｊｅｎｋｉｎｓ等、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６５：３０２〜３１９（
１９８７）。一次シグナル、または抗原特異的シグナルは、主要組織適合性遺伝子複合体
（ＭＨＣ）に関連して提示された外来抗原ペプチドの認識後にＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を
介して伝達される。第２のまたは共刺激シグナルは、抗原提示細胞（ＡＰＣ）上に発現さ
れた共刺激分子によってＴ細胞に送達され、Ｔ細胞を誘導して、クローン増殖、サイトカ
イン分泌およびエフェクター機能を促進させる。Ｌｅｎｓｃｈｏｗ等、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４：２３３（１９９６）。共刺激の非存在下では、Ｔ細胞は、抗原刺
激に対して不応性になり得、有効な免疫応答を開始せず、消耗、または外来抗原に対する
寛容をさらに生じ得る。

この２シグナルモデルでは、Ｔ細胞は、陽性および陰性の両方の二次共刺激シグナルを
受ける。かかる陽性および陰性シグナルの調節は、免疫寛容を維持し、自己免疫を防止し
つつ、宿主の防御免疫応答を最大化するために重要である。陰性二次シグナルは、Ｔ細胞
寛容の誘導に必要であると思われるが、陽性シグナルは、Ｔ細胞活性化を促進する。単純
な２シグナルモデルは、ナイーブリンパ球についての妥当な説明をなおも提供するが、宿
主の免疫応答は、ダイナミックなプロセスであり、共刺激シグナルは、抗原曝露されたＴ
細胞にも提供され得る。共刺激の機構は、治療的に興味を持たれるが、それは、共刺激シ
グナルの操作が、細胞ベースの免疫応答を増強または終結させるための手段を提供するこ
とが示されているからである。近年、Ｔ細胞機能不全またはアネルギーが、阻害受容体、
誘導された持続性のプログラム死１ポリペプチド（ＰＤ−１）の発現と同時発生的に生じ
ることが発見されている。結果として、ＰＤ−１、ならびにプログラム死リガンド１（Ｐ
Ｄ−Ｌｌ）およびプログラム死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２）などの、ＰＤ−１との相互作用
を介してシグナル伝達する他の分子の治療的標的化は、強く興味を持たれる領域である。

ＰＤ−Ｌ１は、多くの癌において過剰発現され、予後不良と関連する場合が多い（Ｏｋ
ａｚａｋｉ Ｔ等、Ｉｎｔｅｒｎ．Ｉｍｍｕｎ．２００７ １９（７）：８１３）（Ｔｈ
ｏｍｐｓｏｎ ＲＨ等、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００６、６６（７）：３３８１）。興
味深いことに、腫瘍反応性Ｔ細胞上のＰＤ−１の上方調節が、障害された抗腫瘍免疫応答
に寄与し得ることを示す、正常組織中のＴリンパ球および末梢血Ｔリンパ球とは対照的に
、腫瘍浸潤性Ｔリンパ球の大部分は、ＰＤ−１を優勢に発現する（Ｂｌｏｏｄ ２００９
１１４（８）：１５３７）。これは、ＰＤ−１発現Ｔ細胞と相互作用するＰＤ−Ｌ１発
現腫瘍細胞により媒介されたＰＤ−Ｌ１シグナル伝達の活用によるものである可能性があ
り、この結果Ｔ細胞の活性が弱まり、免疫監視は回避される（Ｓｈａｒｐｅ等、Ｎａｔ
Ｒｅｖ ２００２）（Ｋｅｉｒ ＭＥ等、２００８ Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
．２６：６７７）。したがって、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１相互作用の阻害は、腫瘍のＣＤ８
＋Ｔ細胞媒介性死滅化を増強し得る。

ＰＤ−１、ならびにプログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）およびプログラム死リガン
ド２（ＰＤ−Ｌ２）などの、ＰＤ−１との相互作用を介してシグナル伝達する他の分子の
治療的標的化は、強く興味を持たれる領域である。ＰＤ−Ｌ１シグナル伝達の阻害は、癌
（例えば、腫瘍免疫）ならびに急性および慢性（例えば、持続性）の両方の感染を含む感
染の治療のためにＴ細胞免疫を増強するための手段として提唱されてきた。最適な治療的
処置は、腫瘍増殖を直接阻害する薬剤によるＰＤ−１受容体／リガンド相互作用の遮断を
組み合わせ得る。種々の癌の発達を治療、安定化、予防および／または遅延させるための
最適な療法が、なおも必要とされている。

特許出願、特許公開およびＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ寄託番号を含む
、本明細書で引用される全ての参考文献は、各個々の参考文献が出典明示により援用され
ると具体的かつ個々に示されるかのように、その全内容が本明細書に出典明示により援用
される。

本発明は、以下を提供する：
［１］ＰＤ−１系結合アンタゴニストと組み合せて使用するための、個体において癌を
治療するまたはその進行を遅延するための医薬組成物であって、有効成分として抗ＧＰＣ
３抗体を含む、医薬組成物。
［２］抗ＧＰＣ３抗体が、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与の前に、ＰＤ−１系結
合アンタゴニストの投与と同時に、またはＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与後に投与
される、［１］に記載の医薬組成物。
［３］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結
合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される、［１
］または［２］に記載の医薬組成物。
［４］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニストである、［３］
に記載の医薬組成物。
［５］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のそのリガンド結合パートナーとの結
合を阻害する、［４］に記載の医薬組成物。
［６］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１との結合を阻害する、［
５］に記載の医薬組成物。
［７］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ２との結合を阻害する、［
５］に記載の医薬組成物。
［８］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１の、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２両方
との結合を阻害する、［５］に記載の医薬組成物。
［９］ＰＤ−１結合アンタゴニストが抗体である、［５］に記載の医薬組成物。
［１０］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ニボルマブ、ランブロリズマブ（ペムブロリ
ズマブ）およびピディリズマブからなる群から選択される、［５］に記載の医薬組成物。
［１１］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである、［
２］に記載の医薬組成物。
［１２］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１との結合を阻害する
、［１１］に記載の医薬組成物。
［１３］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１のＢ７−１との結合を阻害する
、［１１］に記載の医薬組成物。
［１４］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１およびＢ７−１両
方との結合を阻害する、［１１］に記載の医薬組成物。
［１５］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である、［１２］〜［１
４］のいずれか一方に記載の医薬組成物。
［１６］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、アテゾリズマ
ブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＤＸ−１１０５、アベルマブおよびＭＥＤＩ４７３６（デュ
ルバルマブ）からなる群から選択される、［１１］に記載の医薬組成物。
［１７］抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号１９のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２０のＨＶ
Ｒ−Ｈ２配列および配列番号２１のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号２２のＨＶ
Ｒ−Ｌ１配列、配列番号２３のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号２４のＨＶＲ−Ｌ３配列
を含む軽鎖とを含む、［１５］に記載の医薬組成物。
［１８］抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２５または２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変
領域および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、［１５］に記載の医薬
組成物。
［１９］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストである、［
３］に記載の医薬組成物。
［２０］ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが、抗体である、［１９］に記載の医薬組成物
。
［２１］ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが、イムノアドヘシンである、［１９］に記載
の医薬組成物。
［２２］抗ＧＰＣ３抗体が、配列番号３４のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号３５のＨＶＲ
−Ｈ２配列および配列番号３６のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号３７のＨＶＲ
−Ｌ１配列、配列番号３８のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号３９のＨＶＲ−Ｌ３配列を
含む軽鎖とを含む、［１］〜［２１］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［２３］抗ＧＰＣ３抗体が、第２の抗体が結合し得るエピトープと結合可能であり、こ
こで、前記の第２の抗体が、配列番号４２のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号４３のＨＶＲ−
Ｈ２配列および配列番号４４のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号４５のＨＶＲ−
Ｌ１配列、配列番号４６のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号４７のＨＶＲ−Ｌ３配列を含
む軽鎖とを含む、［１］〜［２１］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［２４］抗ＧＰＣ３抗体が、ヒト化抗体である、［１］〜［２３］のいずれか１つに記
載の医薬組成物。
［２５］抗ＧＰＣ３抗体が、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列
番号５２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、［２４］に記載の医薬組成物。
［２６］癌が、肝癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、胃癌、膀胱癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結腸
癌、腎臓癌、食道癌および前立腺癌からなる群から選択される、［１］〜［２５］のいず
れか１つに記載の医薬組成物。

本発明はまた、以下を提供する：
［２７］抗ＧＰＣ３抗体と組み合せて使用するための、個体において癌を治療するまた
はその進行を遅延するための医薬組成物であって、有効成分としてＰＤ−１系結合アンタ
ゴニストを含む、医薬組成物。
［２８］抗ＧＰＣ３抗体が、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与の前に、ＰＤ−１系
結合アンタゴニストの投与と同時に、またはＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与後に投
与される、［２７］に記載の医薬組成物。
［２９］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１
結合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される、［
２７］または［２８］に記載の医薬組成物。
［３０］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニストである、［２
９］に記載の医薬組成物。
［３１］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のそのリガンド結合パートナーとの
結合を阻害する、［３０］に記載の医薬組成物。
［３２］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１との結合を阻害する、
［３１］に記載の医薬組成物。
［３３］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ２との結合を阻害する、
［３１］に記載の医薬組成物。
［３４］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１の、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２両
方との結合を阻害する、［３１］に記載の医薬組成物。
［３５］ＰＤ−１結合アンタゴニストが抗体である、［３１］に記載の医薬組成物。
［３６］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ニボルマブ、ランブロリズマブ（ペムブロリ
ズマブ）およびピディリズマブからなる群から選択される、［３１］に記載の医薬組成物
。
［３７］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである、［
２８］に記載の医薬組成物。
［３８］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１との結合を阻害する
、［３７］に記載の医薬組成物。
［３９］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１のＢ７−１との結合を阻害する
、［３７］に記載の医薬組成物。
［４０］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１およびＢ７−１両
方との結合を阻害する、［３７］に記載の医薬組成物。
［４１］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である、［３８］〜［４
０］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［４２］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、アテゾリズマ
ブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＤＸ−１１０５、アベルマブおよびＭＥＤＩ４７３６（デュ
ルバルマブ）からなる群から選択される、［３７］に記載の医薬組成物。
［４３］抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号１９のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２０のＨＶ
Ｒ−Ｈ２配列および配列番号２１のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号２２のＨＶ
Ｒ−Ｌ１配列、配列番号２３のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号２４のＨＶＲ−Ｌ３配列
を含む軽鎖とを含む、［４１］に記載の医薬組成物。
［４４］抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２５または２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変
領域および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、［４１］に記載の医薬
組成物。
［４５］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストである、［
２９］に記載の医薬組成物。
［４６］ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが、抗体である、［４５］に記載の医薬組成物
。
［４７］ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが、イムノアドヘシンである、［４５］に記載
の医薬組成物。
［４８］抗ＧＰＣ３抗体が、配列番号３４のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号３５のＨＶＲ
−Ｈ２配列および配列番号３６のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号３７のＨＶＲ
−Ｌ１配列、配列番号３８のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号３９のＨＶＲ−Ｌ３配列を
含む軽鎖とを含む、［２７］〜［４７］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［４９］抗ＧＰＣ３抗体が、第２の抗体が結合し得るエピトープと結合可能であり、こ
こで、前記の第２の抗体が、配列番号４２のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号４３のＨＶＲ−
Ｈ２配列および配列番号４４のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号４５のＨＶＲ−
Ｌ１配列、配列番号４６のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号４７のＨＶＲ−Ｌ３配列を含
む軽鎖とを含む、［２７］〜［４７］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［５０］抗ＧＰＣ３抗体が、ヒト化抗体である、［２７］〜［４９］のいずれか１つに
記載の医薬組成物。
［５１］抗ＧＰＣ３抗体が、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列
番号５２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、［５０］に記載の医薬組成物。
［５２］癌が、肝癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、胃癌、膀胱癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結腸
癌、腎臓癌、食道癌および前立腺癌からなる群から選択される、［２７］〜［５１］のい
ずれか１つに記載の医薬組成物。

本発明はまた、以下を提供する：
［５３］有効成分としてＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体の組合せ
を含んでなる、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延するための医薬組成物。
［５４］配合剤である、［５３］に記載の医薬組成物。
［５５］抗ＧＰＣ３抗体が、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与の前に、ＰＤ−１系
結合アンタゴニストの投与と同時に、またはＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与後に投
与される、［５３］に記載の医薬組成物。
［５６］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１
結合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される、［
５３］または［５５］に記載の医薬組成物。
［５７］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニストである、［５
６］に記載の医薬組成物。
［５８］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のそのリガンド結合パートナーとの
結合を阻害する、［５７］に記載の医薬組成物。
［５９］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１との結合を阻害する、
［５８］に記載の医薬組成物。
［６０］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ２との結合を阻害する、
［５８］に記載の医薬組成物。
［６１］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１の、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２両
方との結合を阻害する、［５８］に記載の医薬組成物。
［６２］ＰＤ−１結合アンタゴニストが抗体である、［５８］に記載の医薬組成物。
［６３］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ニボルマブ、ランブロリズマブ（ペムブロリ
ズマブ）およびピディリズマブからなる群から選択される、［５８］に記載の医薬組成物
。
［６４］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである、［
５５］に記載の医薬組成物。
［６５］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１との結合を阻害する
、［６４］に記載の医薬組成物。
［６６］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１のＢ７−１との結合を阻害する
、［６４］に記載の医薬組成物。
［６７］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１およびＢ７−１両
方との結合を阻害する、［６４］に記載の医薬組成物。
［６８］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である、［６５］〜［６
７］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［６９］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、アテゾリズマ
ブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＤＸ−１１０５、アベルマブおよびＭＥＤＩ４７３６（デュ
ルバルマブ）からなる群から選択される、［６４］に記載の医薬組成物。
［７０］抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号１９のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２０のＨＶ
Ｒ−Ｈ２配列および配列番号２１のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号２２のＨＶ
Ｒ−Ｌ１配列、配列番号２３のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号２４のＨＶＲ−Ｌ３配列
を含む軽鎖とを含む、［６８］に記載の医薬組成物。
［７１］抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２５または２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変
領域および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、［６８］に記載の医薬
組成物。
［７２］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストである、［
５６］に記載の医薬組成物。
［７３］ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが、抗体である、［７２］に記載の医薬組成物
。
［７４］ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが、イムノアドヘシンである、［７２］に記載
の医薬組成物。
［７５］抗ＧＰＣ３抗体が、配列番号３４のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号３５のＨＶＲ
−Ｈ２配列および配列番号３６のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号３７のＨＶＲ
−Ｌ１配列、配列番号３８のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号３９のＨＶＲ−Ｌ３配列を
含む軽鎖とを含む、［５３］〜［７４］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［７６］抗ＧＰＣ３抗体が、第２の抗体が結合し得るエピトープと結合可能であり、こ
こで、前記の第２の抗体が、配列番号４２のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号４３のＨＶＲ−
Ｈ２配列および配列番号４４のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号４５のＨＶＲ−
Ｌ１配列、配列番号４６のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号４７のＨＶＲ−Ｌ３配列を含
む軽鎖とを含む、［５３］〜［７４］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［７７］抗ＧＰＣ３抗体が、ヒト化抗体である、［５３］〜［７６］のいずれか１つに
記載の医薬組成物。
［７８］抗ＧＰＣ３抗体が、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列
番号５２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、［７７］に記載の医薬組成物。
［７９］癌が、肝癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、胃癌、膀胱癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結腸
癌、腎臓癌、食道癌および前立腺癌からなる群から選択される、［５３］〜［７８］のい
ずれか１つに記載の医薬組成物。

本発明はまた、以下を提供する：
［８０］ＰＤ−１系結合アンタゴニストと組み合せて使用するための、個体において腫
瘍細胞に対する免疫応答を増強するための医薬組成物であって、有効成分として抗ＧＰＣ
３抗体を含んでなる、医薬組成物。
［８１］抗ＧＰＣ３抗体と組み合わせて使用するための、個体において腫瘍細胞に対す
る免疫応答を増強するための医薬組成物であって、有効成分としてＰＤ−１系結合アンタ
ゴニストを含む、医薬組成物。
［８２］有効成分としてＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体の組合せ
を含む、個体において腫瘍細胞に対する免疫応答を増強するための医薬組成物。
［８３］抗ＧＰＣ３抗体が、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与の前に、ＰＤ−１系
結合アンタゴニストの投与と同時に、またはＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与後に投
与される、［８０］〜［８２］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［８４］癌が、肝癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、胃癌、膀胱癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結腸
癌、腎臓癌、食道癌および前立腺癌からなる群から選択される、［８０］〜［８３］のい
ずれか１つに記載の医薬組成物。

本発明はまた、以下を提供する：
［８５］個体において癌を治療するまたはその進行を遅延する方法であって、個体に、
有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体を投与することを含む、方
法。
［８６］抗ＧＰＣ３抗体が、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与の前に、ＰＤ−１系
結合アンタゴニストの投与と同時に、またはＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与後に投
与される、［８５］に記載の方法。
［８７］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１
結合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される、［
８５］または［８６］に記載の方法。
［８８］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニストである、［８
７］に記載の方法。
［８９］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のそのリガンド結合パートナーとの
結合を阻害する、［８８］に記載の方法。
［９０］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１との結合を阻害する、
［８９］に記載の方法。
［９１］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ２との結合を阻害する、
［８９］に記載の方法。
［９２］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−１の、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２両
方との結合を阻害する、［８９］に記載の方法。
［９３］ＰＤ−１結合アンタゴニストが抗体である、［８９］に記載の方法。
［９４］ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ニボルマブ、ランブロリズマブ（ペムブロリ
ズマブ）およびピディリズマブからなる群から選択される、［８９］に記載の方法。
［９５］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである、［
８１］に記載の方法。
［９６］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１との結合を阻害する
、［９５］に記載の方法。
［９７］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１のＢ７−１との結合を阻害する
、［９５］に記載の方法。
［９８］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１およびＢ７−１両
方との結合を阻害する、［９５］に記載の方法。
［９９］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である、［９６］〜［９
８］のいずれか１つに記載の方法。
［１００］ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、アテゾリズ
マブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＤＸ−１１０５、アベルマブおよびＭＥＤＩ４７３６（デ
ュルバルマブ）からなる群から選択される、［９５］に記載の方法。
［１０１］抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号１９のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２０のＨ
ＶＲ−Ｈ２配列および配列番号２１のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号２２のＨ
ＶＲ−Ｌ１配列、配列番号２３のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号２４のＨＶＲ−Ｌ３配
列を含む軽鎖とを含む、［９９］に記載の方法。
［１０２］抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２５または２６のアミノ酸配列を含む重鎖可
変領域および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、［９９］に記載の方
法。
［１０３］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストである、
［８７］に記載の方法。
［１０４］ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが、抗体である、［１０３］に記載の方法。
［１０５］ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが、イムノアドヘシンである、［１０３］に
記載の方法。
［１０６］抗ＧＰＣ３抗体が、配列番号３４のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号３５のＨＶ
Ｒ−Ｈ２配列および配列番号３６のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号３７のＨＶ
Ｒ−Ｌ１配列、配列番号３８のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号３９のＨＶＲ−Ｌ３配列
を含む軽鎖とを含む、［８５］〜［１０５］のいずれか１つに記載の方法。
［１０７］抗ＧＰＣ３抗体が、第２の抗体が結合し得るエピトープと結合可能であり、
ここで、前記の第２の抗体が、配列番号４２のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号４３のＨＶＲ
−Ｈ２配列および配列番号４４のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号４５のＨＶＲ
−Ｌ１配列、配列番号４６のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号４７のＨＶＲ−Ｌ３配列を
含む軽鎖とを含む、［８５］〜［１０５］のいずれか１つに記載の方法。
［１０８］抗ＧＰＣ３抗体が、ヒト化抗体である、［８５］〜［１０７］のいずれか１
つに記載の方法。
［１０９］抗ＧＰＣ３抗体が、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配
列番号５２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、［１０８］に記載の方法。
［１１０］癌が、肝癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、胃癌、膀胱癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結
腸癌、腎臓癌、食道癌および前立腺癌からなる群から選択される、［８５］〜［１０９］
のいずれか１つに記載の方法。

本発明はまた、以下を提供する：
［１１１］ＰＤ−１系結合アンタゴニストと併用し、個体において腫瘍細胞に対する免
疫応答を増強する方法であって、前記組成物が有効成分として抗ＧＰＣ３抗体を含む方法
。
［１１２］抗ＧＰＣ３抗体と併用し、個体において腫瘍細胞に対する免疫応答を増強す
るための方法であって、有効成分としてＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む、前記方法
。
［１１３］有効成分としてＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体の組合
せを含んでなる、個体において腫瘍細胞に対する免疫応答を増強するための方法。
［１１４］抗ＧＰＣ３抗体が、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与の前に、ＰＤ−１
系結合アンタゴニストの投与と同時に、またはＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与後に
投与される、［１１１］〜［１１３］のいずれか１つに記載の方法。
［１１５］癌が、肝癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、胃癌、膀胱癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結
腸癌、腎臓癌、食道癌および前立腺癌からなる群から選択される、［１１１］〜［１１４
］のいずれか１つに記載の方法組成物。

本発明はまた、以下を提供する：
［１１６］ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体を含む、個体において
癌を治療するまたはその進行を遅延するための組合せ。
［１１７］抗ＧＰＣ３抗体が、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与の前に、ＰＤ−１
系結合アンタゴニストの投与と同時に、またはＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与後に
投与される、［１１６］に記載の組合せ。
［１１８］癌が、肝癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、胃癌、膀胱癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結
腸癌、腎臓癌、食道癌および前立腺癌からなる群から選択される、［１１６］または［１
１７］に記載の組合せ。

本発明はまた、以下を提供する：
［１１９］（１）有効成分として抗ＧＰＣ３抗体を含む医薬組成物
（２）容器
（３）個体において癌を治療するまたはその進行を遅延するための、ＰＤ−１系結合ア
ンタゴニストと組み合わせた医薬組成物の投与のための指示を含む添付文書またはラベル
を含むキット。
［１２０］有効成分としてＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む第１の医薬組成物と、
有効成分として抗ＧＰＣ３抗体を含む第２の医薬組成物とを含むキット。
［１２１］癌が、肝癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、胃癌、膀胱癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結
腸癌、腎臓癌、食道癌および前立腺癌からなる群から選択される、［１１９］または［１
２０］に記載のキット。

本発明はまた、以下を提供する：
［１２２］個体において癌を治療するまたはその進行を遅延するための医薬の製造にお
ける、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの使用であって、ここで、該医薬が、ＰＤ−１系結
合アンタゴニストを含み、医薬上許容される担体を含んでいてもよく、該治療が、抗ＧＰ
Ｃ３抗体および含んでいてもよい医薬上許容される担体を含む組成物と組み合わせた該医
薬の投与を含む、使用。
［１２３］個体において癌を治療するまたはその進行を遅延するための医薬の製造にお
ける、抗ＧＰＣ３抗体の使用であって、ここで、該医薬が、抗ＧＰＣ３抗体を含み、医薬
上許容される担体を含んでいてもよく、該治療が、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび
含んでいてもよい医薬上許容される担体を含む組成物と組み合わせた該医薬の投与を含む
、使用。

本発明者らは、抗ＧＰＣ３抗体を、ヒトＰＤ−１系結合アンタゴニストと組み合わせる
ことによって、癌患者において、抗ＧＰＣ３抗体またはヒトＰＤ−１系結合アンタゴニス
トが単独で使用される場合よりも良好な治療効果が達成され得ることを発見した。

一態様では、個体に、有効量のヒトＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗
体を投与することを含む、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延するための方
法が、本明細書において提供される。

別の態様では、有効量の、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体を投与
することを含む、癌を有する個体において腫瘍細胞に対する免疫応答を増強する方法が、
本明細書において提供される。例えば、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、マクロ
ファージおよび多核巨細胞を含む免疫細胞の、腫瘍組織への浸潤が挙げられる。別の例に
ついては、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、腫瘍が浸潤したリンパ球（ＴＩＬ）
におけるＣＤ４５陽性リンパ球、ＣＤ３ε陽性リンパ球およびＣＤ８陽性Ｔリンパ球の増
大が挙げられる。

別の一態様では、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延させるための医薬の
製造におけるヒトＰＤ−１系結合アンタゴニストの使用であって、該医薬は、ヒトＰＤ−
１系結合アンタゴニストを含み、薬学的に許容される担体を含んでいてもよく、該治療は
、抗ＧＰＣ３抗体を含む組成物（組成物は薬学的に許容される担体を含んでいてもよい）
と併用した該医薬の投与を含む、使用が、本明細書で提供される。

別の一態様では、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延させるための医薬の
製造における抗ＧＰＣ３抗体の使用であって、該医薬は、抗ＧＰＣ３抗体を含み、薬学的
に許容される担体を含んでいてもよく、該治療は、ヒトＰＤ−１系結合アンタゴニストを
含む組成物（組成物は薬学的に許容される担体を含んでいてもよい）と併用した該医薬の
投与を含む、使用が、本明細書で提供される。

別の一態様では、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延させることに用いる
ための、ヒトＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む組成物（組成物は薬学的に許容される
担体を含んでいてもよい）であって、該治療は、第２の組成物と併用した前記組成物の投
与を含み、第２の組成物は、抗ＧＰＣ３抗体を含み、薬学的に許容される担体を含んでい
てもよい、組成物が、本明細書で提供される。

別の一態様では、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延させることに用いる
ための、抗ＧＰＣ３抗体を含む組成物（組成物は薬学的に許容される担体を含んでいても
よい）であって、該治療は、第２の組成物と併用した前記組成物の投与を含み、第２の組
成物は、ヒトＰＤ−１系結合アンタゴニストを含み、薬学的に許容される担体を含んでい
てもよい、組成物が、本明細書で提供される。

別の一態様では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む医薬（医薬は薬学的に許容され
る担体を含んでいてもよい）と、抗ＧＰＣ３抗体を含む組成物（組成物は薬学的に許容さ
れる担体を含んでいてもよい）と組み合わせて該医薬を投与するための指示を含む添付文
書とを含む、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延させるためのキットが、本
明細書で提供される。

別の一態様では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む第１の医薬（該医薬は薬学的に
許容される担体を含んでいてもよい）、および抗ＧＰＣ３抗体を含む第２の医薬（該医薬
は薬学的に許容される担体を含んでいてもよい）を含むキットが、本明細書で提供される
。一部の実施形態では、このキットは、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延
させるために第１の医薬および第２の医薬を投与するための指示を含む添付文書をさらに
含む。

別の一態様では、抗ＧＰＣ３抗体を含む医薬（該医薬は薬学的に許容される担体を含ん
でいてもよい）と、ＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む組成物（該組成物は薬学的に許
容される担体を含んでいてもよい）と組み合わせて該医薬を投与するための指示を含む添
付文書とを含む、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延させるためのキットが
、本明細書で提供される。

上述および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態で
は、このＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結
合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される。一部
の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストは、抗体である。一部の実施形態で
は、この抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体またはヒト抗体である。一部の実施形態では、
この抗体は、抗原結合断片である。一部の実施形態では、この抗原結合断片は、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖおよびＦｖからなる群から選択される。

一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニ
ストである。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、そのリガンド結
合パートナーへのＰＤ−１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合ア
ンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１へのＰＤ−１の結合を阻害する。一部の実施形態では、この
ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２へのＰＤ−１の結合を阻害する。一部の実施
形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２の両方への
ＰＤ−１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、
抗体である。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＭＤＸ−１１０
６（ニボルマブ（Ｎｉｖｏｌｕｍａｂ））、ＭＫ−３４７５（ペンブロリズマブ（Ｐｅｍ
ｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ）、ラムブロリズマブ（Ｌａｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ））、ＣＴ−
０１１（ピディリズマブ（Ｐｉｄｉｌｉｚｕｍａｂ））、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１
０、ＢＧＢＡ３１７、ＳＨＲ−１２１０、ＡＭＰ−５１４（ＭＥＤＩ０６８０）およびＡ
ＭＰ−２２４からなる群から選択される。

一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴ
ニストである。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１へ
のＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニス
トは、Ｂ７−１へのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ１
結合アンタゴニストは、ＰＤ−１およびＢ７−１の両方へのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する
。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗体である。一部の実施
形態では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、アテゾリ
ズマブ（Ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＤＸ−１１０５、アベル
マブ（Ａｖｅｌｕｍａｂ）およびＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ（Ｄｕｒｖａｌｕｍ
ａｂ））からなる群から選択される。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、配
列番号１９のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２０のＨＶＲ−Ｈ２配列および配列番号２１の
ＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖；ならびに／または配列番号２２のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列
番号２３のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号２４のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖を含む。
一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２５もしくは２６のアミノ酸配
列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を
含む。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に引用により援用される
ＷＯ２０１０／０７７６３４および米国特許第８，２１７，１４９号に記載される抗体Ｙ
Ｗ２４３．５５．Ｓ７０の３つの重鎖ＨＶＲ配列および／または抗体ＹＷ２４３．５５．
Ｓ７０の３つの軽鎖ＨＶＲ配列を含む。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、
抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０の重鎖可変領域配列および／または抗体ＹＷ２４３．５５
．Ｓ７０の軽鎖可変領域配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ア
テゾリズマブである。

いくつかの実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴ
ニストである。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、抗体である
。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、イムノアドヘシンである
。

上述および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットのいくつかの実施形
態では、抗ＧＰＣ３抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体またはヒト抗体である。いくつかの
実施形態では、抗体は、抗原結合断片である。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は
、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖおよびＦｖからなる群から選択される。

いくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、ＧＣ３３またはコドリツズマブである。
一部の実施形態では、この抗ＧＰＣ３抗体は、配列番号４２のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番
号４３のＨＶＲ−Ｈ２配列および配列番号４４のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖；ならびに
／または配列番号４５のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号４６のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列
番号４７のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、この抗ＧＰＣ３抗
体は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号５１の
アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、この抗ＧＰＣ３抗体は、
配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖および／または配列番号５２のアミノ酸配列を含
む軽鎖を含む。任意の他の実施形態と組み合わされ得る一部の実施形態では、抗ＧＰＣ３
抗体は、ＧＣ３３でもコドリツズマブでもない。

一部の実施形態では、本明細書に記載される抗体（例えば、ＰＤ−１系結合アンタゴニ
スト抗体または抗ＧＰＣ３抗体）は、非グリコシル化部位変異を含む。一部の実施形態で
は、この非グリコシル化部位変異は、置換変異である。一部の実施形態では、この置換変
異は、アミノ酸残基Ｎ２９７、Ｌ２３４、Ｌ２３５および／またはＤ２６５（ＥＵ番号付
け）にある。一部の実施形態では、この置換変異は、Ｎ２９７Ｇ、Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４
Ａ、Ｌ２３５ＡおよびＤ２６５Ａからなる群から選択される。一部の実施形態では、この
置換変異は、Ｄ２６５Ａ変異およびＮ２９７Ｇ変異である。一部の実施形態では、この非
グリコシル化部位変異は、この抗体のエフェクター機能を低減させる。一部の実施形態で
は、このＰＤ−１系結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体ま
たは抗ＰＤ−Ｌ２抗体）は、ＥＵ番号付けに従って２９７位においてＡｓｎからＡｌａへ
の置換を有するヒトＩｇＧ１である。

上述および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態で
は、この癌はＧＰＣ３陽性癌である。一部の実施形態では、この癌は、肝癌、乳癌、肺癌
、卵巣癌、胃癌、膀胱癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結腸癌、腎臓癌、食道癌、前立腺癌、ま
たは本明細書に記載される他の癌である。一部の実施形態では、この個体は、癌を有する
、または癌と診断されている。一部の実施形態では、この個体中の癌細胞は、ＰＤ−Ｌ１
を発現する。

上述および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態で
は、この治療、またはヒトＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体の投与は
、治療の休止後に、個体において持続性の応答をもたらす。一部の実施形態では、この抗
ＧＰＣ３抗体は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの前に、ＰＤ−１系結合アンタゴニスト
と同時に、またはＰＤ−１系結合アンタゴニストの後に投与される。一部の実施形態では
、このＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体は、同じ組成物中にある。一
部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体は、別々の
組成物中にある。

上述および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態で
は、このＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／または抗ＧＰＣ３抗体は、静脈内、筋肉
内、皮下、局所、経口、経皮、腹腔内、眼窩内、移植により、吸入により、髄腔内、脳室
内または鼻腔内投与される。上記および本明細書に記載される方法、使用、組成物および
キットの一部の実施形態では、この治療は、個体において癌を治療するまたはその進行を
遅延させるための化学療法剤を投与することをさらに含む。一部の実施形態では、個体は
、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体との併用治療の前に、化学療法剤
で治療されている。一部の実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／または
抗ＧＰＣ３抗体の組合せによって治療された個体は、化学療法剤治療に対して難治性であ
る。本出願を通じて記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態は、癌
を治療するまたはその進行を遅延させるための化学療法剤を投与することをさらに含む。

上記および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態で
は、この個体中のＣＤ８ Ｔ細胞は、この組合せの投与の前と比較して増強されたプライ
ミング、活性化、増殖および／または細胞溶解活性を有する。一部の実施形態では、ＣＤ
８ Ｔ細胞の数は、この組合せの投与の前と比較して上昇する。一部の実施形態では、こ
のＣＤ８ Ｔ細胞は、抗原特異的ＣＤ８ Ｔ細胞である。

本明細書に記載される種々の実施形態の特性のうち１つ、一部または全てが組み合わさ
れて、本発明の他の実施形態を形成し得ることを、理解すべきである。本発明のこれらお
よび他の態様は、当業者に明らかとなる。本発明のこれらおよび他の実施形態は、以下の
詳細な説明によってさらに記載される。

溶媒対照、１ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３のいずれかで週３回処置された各マウスにおける、ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６腫瘍体積変化を示す図である。矢印は、注射の日付を示す。各群あたり５匹のマウスを処置した。 溶媒対照または５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３のいずれかで処置されたマウスから摘出された組織のヘマトキシリンおよびエオシン染色（ＨＥ）またはＦ４／８０免疫組織化学的染色（ＩＨＣ）の画像を示す図である。 溶媒対照または５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３のいずれかで処置されたマウスから摘出された組織のヘマトキシリンおよびエオシン染色（ＨＥ）またはＰＤ−Ｌ１免疫組織化学的染色（ＩＨＣ）の画像を示す図である。矢印は、浸潤免疫細胞の細胞膜において観察されたＰＤ−Ｌ１免疫反応性を示す。 単独療法（ｍＧＣ３３または１０Ｆ．９Ｇ２（抗ＰＤ−Ｌ１））または組合せ（ｍＧＣ３３＋１０Ｆ．９Ｇ２）のいずれかで処置された各マウスにおける、ヒトＧＰＣ３を発現するＣＴ２６腫瘍体積変化を示す図である。矢印は、注射の日付を示す。各群あたり５匹のマウスを処置した。各群における腫瘍体積の平均およびＳＤバーをプロットした。 単独療法（ｍＧＣ３３または１０Ｆ．９Ｇ２（抗ＰＤ−Ｌ１））または組合せ（ｍＧＣ３３＋１０Ｆ．９Ｇ２）のいずれかで処置された、ＣＴ２６／ｈＧＰＣ３担癌マウスにおける無増悪生存率を示す図である。増悪は、腫瘍の大きさが１００ｍｍ³超に達した場合に定義された。 単独療法または組合せのいずれかで処置された各マウスにおけるヒトＧＰＣ３を発現するＣＴ２６腫瘍体積変化を示す図である。矢印は、投与の日付を示す。各群あたり５匹のマウスを処置した。各群における腫瘍体積の平均およびＳＤバーをプロットした。５ｍｇ／ｋｇまたは２５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３、１０Ｆ．９Ｇ２、５ｍｇ／ｋｇまたは２５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３＋１０Ｆ．９Ｇ２の腫瘍増殖阻害値は、それぞれ、５２％、５８％、６８％、７５％および８５％であった。 ２９日目の個体別の腫瘍体積を示す図である。各群における腫瘍体積の平均（＊）もプロットした。 溶媒対照、１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは２５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３、１０Ｆ．９Ｇ２または５ｍｇ／ｋｇもしくは２５ｍｇ／ｋｇのＧＣ３３および１０Ｆ．９Ｇ２の組合せのいずれかで処置された各マウスにおける、ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６腫瘍体積変化を示す図である。矢印は、注射の日付を示す。各群あたり５匹のマウスを処置した。 ３４日目の各処置群における個体別の腫瘍面積または腫瘍面積の平均＋ＳＤを示す図である。腫瘍面積（ｍｍ²）は、各マウスから摘出された腫瘍組織のＨＥ染色後に（腫瘍組織の長径の長さ（ｍｍ））ｘ（腫瘍組織の短径の長さ（ｍｍ））によって算出した。各腫瘍組織の病理学的評価の結果をグラフの下に加えた。疾患の病理学的な進行（ｐＰＤ）は、「腫瘍の退縮が見られなかった」と定義した。病理学的な部分退縮（ｐＰＲ）は、「免疫細胞浸潤を伴う腫瘍細胞の変性および／または壊死が見られた」と定義した。病理学的な完全退縮（ｐＣＲ）は、「腫瘍移植部位に腫瘍細胞が見られなかった」と定義した。 図示された種々の用量段階およびスケジュールを用いた単独療法またはｍＧＣ３３および６Ｅ１１（抗ＰＤ−Ｌ１）の組合せのいずれかで処置された各マウスにおける、ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６腫瘍体積変化を示す図である。矢印は、注射の日付を示す。各群あたり５匹のマウスを処置した。 単独療法またはｍＧＣ３３および６Ｅ１１の組合せのいずれかで処置された各マウス群における、ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６腫瘍体積変化の平均値を示す図である。組合せ群における腫瘍増殖は、ＧＣ３３または６Ｅ１１単独療法のいずれかで処置された群におけるものと比較して大幅に阻害された。矢印は、注射の日付を示す。各群あたり５匹のマウスを処置した。＊：Ｗｉｌｃｏｘｏｎ（ＳＡＳ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｉｎｃ．）によるＰ＜０．０５ ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６担癌マウスの各処置群における体重変化の平均値を示す図である。ＳＤバーを加えた。 各群における皮下組織における腫瘍組織の顕微鏡写真を示す図である。灰色部分は、壊死を伴わない腫瘍部分またはリンパ／肉芽組織を示す。青色部分は、壊死を伴う腫瘍部分または肉芽組織を示す。点線は、腫瘤の境界を示す。Ｌはリンパ組織を表し、Ｇは肉芽組織を表し、ｐＣＲは病理学的な完全奏功（病理組織スライド上に腫瘍組織なし）を表し、ＭＯＲは、腫瘍の進行による瀕死屠殺動物を表す。 各処置群における間質に適応する腫瘤辺縁部におけるＨＥ染色された腫瘍組織の代表的な顕微鏡写真を示す図である。マクロファージ／多核巨細胞を含む免疫細胞の浸潤を伴う腫瘍の壊死が全ての処置群において見られる。病変の重症度は以下の順序である：ｍＧＣ３３ ５ｍｇ／ｋｇ単回＋６Ｅ１１ ｑ７ｄｘ３＞ｍＧＣ３３ ５ｍｇ／ｋｇ単回または６Ｅ１１ ｑ７ｄｘ３。Ｓは腫瘤に適応する間質を表し、Ｐは腫瘤の辺縁を表す。 各処置群における間質に適応する腫瘤の辺縁部における腫瘍組織のＦ４／８０ ＩＨＣの代表的な顕微鏡写真を示す図である。溶媒では、Ｆ４／８０陽性細胞は、主に間質で見られる。一方、全ての処置群において、マクロファージ／多核巨細胞を含むＦ４／８０陽性免疫細胞の重症度の増大が、主に腫瘤の辺縁で見られる。陽性細胞浸潤の重症度は、以下の順序である：ｍＧＣ３３ ５ｍｇ／ｋｇ単回＋６Ｅ１１ ｑ７ｄｘ３＞ｍＧＣ３３ ５ｍｇ／ｋｇ単回または６Ｅ１１ ｑ７ｄｘ３。Ｓは腫瘤に適応する間質を表し、Ｐは腫瘤の辺縁部を表す。 各処置群における間質に適応する腫瘤の辺縁部における腫瘍組織のＰＤ−Ｌ１ ＩＨＣの代表的な顕微鏡写真を示す図である。溶媒では、ＰＤ−Ｌ１陽性反応は、主に腫瘍細胞の細胞質において弱い強度で見られる。一方、マクロファージ／多核巨細胞を含む免疫細胞におけるＰＤ−Ｌ１陽性反応の重症度の増大は、全ての処置群において、弱〜中等度の強度で見られる。Ｓは腫瘤に適応する間質を表し、Ｐは腫瘤の辺縁部を表す。 各処置群において腫瘍組織において観察されたマーカー陽性細胞のパーセンテージを示す図である。各グラフに、各群における個々の値および平均がプロットされ、平均値が示されている。

発明の詳細な説明

本願におけるデータは、抗ＧＰＣ３抗体の抗ＰＤ−Ｌ１免疫療法との組合せが、腫瘍増
殖の阻害の増強、奏効率の増大および持続性応答をもたらしたことを示す。本発明者らは
、２種の療法を組み合わせることの利益を実証した：ＧＰＣ３発現腫瘍細胞に対する細胞
傷害性活性は、Ｔ細胞抑制性ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１シグナル伝達の阻害と一緒に、治療効
果の増大および持続性の長期間反応をもたらす。

一態様では、有効量のヒトＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体を投与
することを含む、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延するための方法、組成
物および使用が本明細書において提供される。

別の態様では、有効量のヒトＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体を投
与することを含む、癌を有する個体において腫瘍細胞に対する免疫応答を増強するための
方法、組成物および使用が、本明細書において提供される。例えば、腫瘍細胞に対する免
疫応答の増強として、マクロファージおよび多核巨細胞を含む免疫細胞の腫瘍組織への浸
潤が挙げられる。別の例については、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、腫瘍浸潤
リンパ球（ＴＩＬ）におけるＣＤ４５陽性リンパ球、ＣＤ３ε陽性リンパ球およびＣＤ８
陽性Ｔリンパ球の増大が挙げられる。

Ｉ．定義
本発明を詳細に記載する前に、本発明が、特定の組成物または生物学的系に限定されず
、当然変動し得ることを理解すべきである。本明細書で使用される用語法は、特定の実施
形態を記載することのみを目的としており、限定を意図しないこともまた、理解すべきで
ある。

本明細書および添付の特許請求の範囲で使用する場合、単数形「１つの（ａ）」、「１
つの（ａｎ）」および「この（ｔｈｅ）」は、文脈が明らかに他を示さない限り、複数の
指示対象を含む。したがって、例えば、「１つの（ａ）分子」に対する言及は、任意選択
的に、２つ以上のかかる分子の組合せなどを含む。

用語「約」とは、本明細書で使用する場合、本技術分野の当業者に容易に公知のそれぞ
れの値についての、通常の誤差範囲を指す。本明細書の「約」値またはパラメータに対す
る言及は、その値またはパラメータ自体に関する実施形態を含む（および記述する）。

本明細書に記載される本発明の態様および実施形態は、その態様および実施形態を「含
む」、それら「からなる」およびそれら「から本質的になる」ことを含むと理解される。

用語「ＰＤ−１系結合アンタゴニスト」とは、ＰＤ−１シグナル伝達系に対するシグナ
ル伝達から生じるＴ細胞機能不全を除去するように、ＰＤ−１系結合パートナーとその結
合パートナーのうちいずれか１または複数との相互作用を阻害する分子を指し、Ｔ細胞機
能（例えば、増殖、サイトカイン産生、標的細胞死滅）を回復または増強させる結果とな
る。本明細書で使用する場合、ＰＤ−１系結合アンタゴニストには、ＰＤ−１結合アンタ
ゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが含まれ
る。

用語「ＰＤ−１結合アンタゴニスト」とは、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２などの
その結合パートナーのうち１または複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮
断、阻害、無効化または干渉する分子を指す。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合ア
ンタゴニストは、その結合パートナーのうち１または複数へのＰＤ−１の結合を阻害する
分子である。具体的な一態様では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１およ
び／またはＰＤ−Ｌ２へのＰＤ−１の結合を阻害する。例えば、ＰＤ−１結合アンタゴニ
ストには、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２との相互作用から生じるシグ
ナル伝達を減少、遮断、阻害、無効化または干渉する抗ＰＤ−１抗体、その抗原結合断片
、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、ならびに他の分子が含まれる。
一実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１を通したＴリンパ球媒介性シ
グナル伝達上に発現される細胞表面タンパク質により媒介されるか、又はそのようなタン
パク質を通したネガティブ同時刺激シグナルを低減させて、機能不全Ｔ細胞の非機能不全
性を低下させる（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）。一部の実施
形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体である。具体的な一態様
では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書に記載されるＭＤＸ−１１０６（ニボル
マブ）である。別の具体的な一態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書に記
載されるＭＫ−３４７５（ラムブロリズマブ）である。別の具体的な一態様では、ＰＤ−
１結合アンタゴニストは、本明細書に記載されるＣＴ−０１１（ピディリズマブ）である
。別の具体的な一態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書に記載されるＡＭ
Ｐ−２２４またはＡＭＰ−５１４（ＭＥＤＩ０６８０）である。別の特定の態様では、Ｐ
Ｄ−１アンタゴニストは、本明細書に記載されるＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、ＢＧ
Ｂ Ａ３１７およびＳＨＲ−１２１０からなる群から選択される。

用語「ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト」とは、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１、Ｂ７−１などの
その結合パートナーのうちいずれか１または複数との相互作用から生じるシグナル伝達を
減少、遮断、阻害、無効化または干渉する分子を指す。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１
結合アンタゴニストは、その結合パートナーへのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する分子である
。具体的な一態様では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１および／または
Ｂ７−１へのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ１結合ア
ンタゴニストには、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１、Ｂ７−１などのその結合パートナーのうち１
または複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、無効化または干渉
する抗ＰＤ−Ｌ１抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴ
ペプチド、ならびに他の分子が含まれる。一実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニスト
は、ＰＤ−１を通したＴリンパ球媒介性シグナル伝達上に発現される細胞表面タンパク質
により媒介されるか、又はそのようなタンパク質を通したネガティブ同時刺激シグナルを
低減させて、機能不全Ｔ細胞の非機能不全性を低下させる（例えば、抗原認識に対するエ
フェクター応答を増強する）。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、
抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。具体的な一態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載さ
れるＹＷ２４３．５５．Ｓ７０またはアテゾリズマブである。別の具体的な一態様では、
抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載されるＭＤＸ−１１０５である。別の特定の態様で
は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載されるアベルマブである。なお別の具体的な一
態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載されるＭＰＤＬ３２８０Ａである。なお
別の具体的な一態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載されるＭＥＤＩ４７３６
（デュルバルマブ）である。

用語「ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニスト」とは、ＰＤ−Ｌ２とＰＤ−１などのその結合パ
ートナーのうちいずれか１または複数との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断
、阻害、無効化または干渉する分子を指す。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタ
ゴニストは、その結合パートナーのうち１または複数へのＰＤ−Ｌ２の結合を阻害する分
子である。具体的な一態様では、このＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−１へのＰ
Ｄ−Ｌ２の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ２アンタゴニストには、
ＰＤ−Ｌ２とＰＤ−１などのその結合パートナーのうちいずれか１または複数との相互作
用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、無効化または干渉する抗ＰＤ−Ｌ２抗体
、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、ならびに他
の分子が含まれる。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、機能不全性Ｔ細
胞をあまり機能不全でなくする（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する
）ように、ＰＤ−Ｌ２を介したシグナル伝達を媒介したＴリンパ球上で発現される細胞表
面タンパク質によってまたはそれを介して媒介される陰性共刺激シグナルを低減させる。
一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、イムノアドヘシンである。

用語「機能不全」とは、免疫機能不全の文脈において、抗原性刺激に対する免疫応答性
が低減した状態を指す。この用語は、消耗、および／または、抗原認識が生じ得るが、次
の免疫応答が、感染または腫瘍増殖を制御するには効果がないアネルギーの、両方の共通
要素を含む。

用語「機能不全性」は、本明細書で使用する場合、抗原認識に対する耐性または不応答
性、具体的には、抗原認識を下流のＴ細胞エフェクター機能、例えば、増殖、サイトカイ
ン産生（例えば、ＩＬ−２）および／または標的細胞死滅へと転換する能力の障害もまた
含む。

用語「アネルギー」（ａｎｅｒｇｙ）とは、Ｔ細胞受容体を介して伝達される不完全ま
たは不十分なシグナル（例えば、ｒａｓ活性化の非存在下での細胞内Ｃａ⁺²増加）から生
じる、抗原刺激に対する不応答性の状態を指す。Ｔ細胞アネルギーは、共刺激の非存在下
での抗原による刺激の際にも生じ得、これによって、共刺激の情況であっても、抗原によ
る引き続く活性化に対して耐性になる細胞を生じる。この不応答性状態は、インターロイ
キン−２の存在によってしばしば覆され得る。アネルギー性Ｔ細胞は、クローン増殖を受
けず、および／またはエフェクター機能を獲得しない。

用語「消耗」とは、多くの慢性感染および癌の間に生じる持続性のＴＣＲシグナル伝達
から生じるＴ細胞機能不全の状態としての、Ｔ細胞消耗を指す。これは、不完全なまたは
欠損したシグナル伝達を介してではなく、持続性のシグナル伝達から生じるという点で、
アネルギーから識別される。これは、乏しいエフェクター機能、阻害受容体の持続性の発
現、および機能的エフェクターまたはメモリーＴ細胞のものとは異なる転写状態によって
規定される。消耗は、感染および腫瘍の最適な制御を防止する。消耗は、外的陰性調節経
路（例えば、免疫調節性サイトカイン）ならびに細胞固有の陰性調節（共刺激）経路（Ｐ
Ｄ−１、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４など）の両方から生じ得る。

「Ｔ細胞機能を増強する」とは、持続性のもしくは増幅された生物学的機能を有するよ
うに、または消耗したもしくは不活性なＴ細胞を再生もしくは再活性化するようにＴ細胞
を誘導する、そのようにさせるまたはそのように刺激することを意味する。Ｔ細胞機能を
増強することの例には、以下が含まれる：介入前のそのレベルと比較した、ＣＤ８⁺Ｔ細
胞からのγ−インターフェロンの増加した分泌、増加した増殖、増加した抗原応答性（例
えば、ウイルス、病原体または腫瘍のクリアランス）。一実施形態では、増強のレベルは
、少なくとも５０％、あるいは６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２０％、
１５０％、２００％である。この増強を測定する方法は、当業者に公知である。

「Ｔ細胞機能不全性障害」は、抗原性刺激に対する応答性の減少によって特徴付けられ
る、Ｔ細胞の障害または状態である。特定の一実施形態では、Ｔ細胞機能不全性障害は、
ＰＤ−１を介した不適切な増加したシグナル伝達と特異的に関連する障害である。別の一
実施形態では、Ｔ細胞機能不全性障害は、Ｔ細胞が、アネルギー性であるか、またはサイ
トカインを分泌する能力、増殖する能力もしくは細胞溶解活性を実行する能力が減少して
いる、障害である。具体的な一態様では、この減少した応答性は、免疫原を発現する病原
体または腫瘍の、制御の効果がなくなる。Ｔ細胞機能不全によって特徴付けられるＴ細胞
機能不全性障害の例としては、未解決の急性感染、慢性感染および腫瘍免疫が挙げられる
。

「腫瘍免疫」とは、腫瘍が免疫認識およびクリアランスを逃れるプロセスを指す。した
がって、治療概念として、腫瘍免疫は、かかる回避が減弱され、腫瘍が免疫系によって認
識および攻撃される場合に、「治療される」。腫瘍認識の例としては、腫瘍結合、腫瘍収
縮および腫瘍クリアランスが挙げられる。

「免疫原性」とは、特定の物質が免疫応答を誘発する能力を指す。腫瘍は、免疫原性で
あり、腫瘍免疫原性を増強させることは、免疫応答による腫瘍細胞のクリアランスを助け
る。腫瘍免疫原性を増強させることの例には、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗Ｇ
ＰＣ３抗体による治療が含まれる。

「持続性の応答」とは、治療の休止後に腫瘍増殖を低減させることに対する持続性の効
果を指す。例えば、腫瘍サイズは、投与期の開始時のサイズと比較して、同じまたはより
小さいままであり得る。一部の実施形態では、この持続性の応答は、治療持続期間と少な
くとも同じ持続期間、治療持続期間の少なくとも１．５×、２．０×、２．５×または３
．０×の長さの持続期間を有する。

用語「医薬製剤」とは、活性成分の生物活性を有効にするような形態であり、その製剤
が投与される対象に対して許容できないほどに毒性であるさらなる成分を含まない、調製
物を指す。かかる製剤は、滅菌状態である。「薬学的に許容される」賦形剤（ビヒクル、
添加剤）は、使用される活性成分の有効用量を提供するために、対象哺乳動物に合理的に
投与され得る賦形剤である。

本明細書で使用する場合、用語「治療」とは、臨床病理学の過程の間に、治療される個
体または細胞の天然の過程を改変するように設計された臨床的介入を指す。治療の望まし
い効果としては、疾患進行の速度を減少させること、病状を改善または緩和すること、お
よび寛解または予後の改善が挙げられる。例えば、癌に関連付けられる一又は複数の症状
が緩和又は消去される場合、個体は成功裏に「治療」されたことになる。このような症状
の緩和又は消去には、癌細胞の増殖の低減（又は癌細胞の破壊）、腫瘍増大の低減、疾患
に起因する症状の低減、疾患罹患者の生活の質の上昇、疾患を治療するために必要な他の
薬剤の用量の減少、および／または個体生存の延長が含まれるが、これらに限定されない
。

本明細書で使用する場合、「疾患の進行を遅延させる」とは、疾患（例えば、癌）の発
達を延期する、邪魔する、減速する、遅らせる、安定化する、および／または先延ばしに
することを意味する。この遅延は、治療されている疾患および／または個体の履歴に依存
して、変動する長さの時間であり得る。当業者に明らかなように、十分なまたは顕著な遅
延は、個体が疾患を発達させないという点において、事実上、予防を包含し得る。例えば
、後期癌、例えば、転移の発達が、遅延され得る。

「有効量」は、特定の障害の測定可能な改善または予防をもたらすために必要とされる
、少なくとも最小量である。本明細書では、有効量は、患者の病状、年齢、性別および体
重、ならびに抗体が個体において所望の応答を惹起する能力などの因子に従って変動し得
る。有効量は、治療的に有益な効果が治療の任意の毒性または有害な効果を上回る量でも
ある。予防的使用について、有益なまたは所望の結果には、リスクを排除もしくは低減さ
せること、重症度を低下させること、または疾患、その合併症、および疾患の発達の間に
示される中間の病理学的表現型の生化学的、組織学的および／もしくは行動学的症候を含
む疾患の発病を遅延させることなどの結果が含まれる。治療的使用について、有益なまた
は所望の結果には、疾患から生じる１もしくは複数の症候を減少させること、疾患に罹患
している者の生活の質を増加させること、疾患を治療するために必要とされる他の薬物療
法の用量を減少させること、標的化などを介した別の療法の効果を増強すること、疾患の
進行を遅延させること、および／または生存を延長させることなどの臨床結果が含まれる
。癌または腫瘍の場合、有効量の薬物は、癌細胞の数を低減させること；腫瘍サイズを低
減させること；末梢臓器中への癌細胞浸潤を阻害すること（即ち、ある程度まで減速させ
ること、または望ましくは停止させること）；腫瘍転移を阻害すること（即ち、ある程度
まで減速させること、または望ましくは停止させること）；腫瘍増殖をある程度まで阻害
すること；および／または障害と関連する症候のうち１もしくは複数をある程度まで軽減
することにおいて、効果を有し得る。有効量は、１または複数の投与で投与され得る。本
発明の目的のために、薬物、化合物または医薬組成物の有効量は、直接的または間接的の
いずれかで予防的または治療的処置を達成するために十分な量である。臨床的状況におい
て理解されるように、薬物、化合物または医薬組成物の有効量は、別の薬物、化合物また
は医薬組成物と併せて達成されてもされなくてもよい。したがって、「有効量」は、１ま
たは複数の治療剤を投与する観点から考慮されてよく、１または複数の他の薬剤と併せて
所望の結果が達成され得るまたは達成される場合、単一の薬剤が有効量で与えられたとみ
なされ得る。

本明細書で使用する場合、「〜と併せて」とは、別の治療モダリティーに加えた、１つ
の治療モダリティーの投与を指す。このように、「〜と併せて」とは、個体への他の治療
モダリティーの投与の前、その間またはその後の、１つの治療モダリティーの投与を指す
。

「障害」は、哺乳動物を問題の障害に罹りやすくする病理学的状態を含む慢性および急
性の障害または疾患が含まれるがこれらに限定されない、治療から利益を得る任意の状態
である。

用語「細胞増殖性疾患」および「増殖性疾患」とは、ある程度の異常な細胞増殖と関連
する障害を指す。一実施形態では、この細胞増殖性疾患は、癌である。一実施形態では、
この細胞増殖性疾患は、腫瘍である。

「腫瘍」とは、本明細書で使用する場合、悪性であるか良性であるかに関わらない、全
ての新生物性の細胞増殖（ｇｒｏｗｔｈ）および増殖（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）、
ならびに全ての前癌性および癌性の細胞および組織を指す。用語「癌」、「癌性」、「細
胞増殖性疾患」、「増殖性疾患」および「腫瘍」は、本明細書では、相互に排他的に言及
されるわけではない。

用語「癌」および「癌性」とは、典型的には調節されない細胞増殖によって特徴付けら
れる哺乳動物における生理的状態を指す、またはかかる状態を記述する。癌の例としては
、癌腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、および白血病またはリンパ系腫瘍が挙げられるがこれら
に限定されない。かかる癌のより特定の例としては、扁平上皮癌（例えば、上皮性扁平細
胞癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌および肺扁平上皮癌腫などの肺癌、腹膜の
癌、肝細胞癌、胃腸癌および消化管間質癌を含む胃（ｇａｓｔｒｉｃ）または胃（ｓｔｏ
ｍａｃｈ）癌、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝癌、膀胱癌、尿路の癌、肝癌
、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓または腎
癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝細胞癌、肛門癌、陰茎癌、メラノーマ、表在性伸
展メラノーマ、悪性黒子型メラノーマ、末端黒子型メラノーマ、結節性メラノーマ、多発
性骨髄腫およびＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；小リ
ンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ；中悪性度／濾胞性ＮＨＬ；中悪性度びまん性ＮＨＬ；高悪性度
免疫芽球性ＮＨＬ；高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ；高悪性度小型非切れ込み核細胞性ＮＨ
Ｌ；巨大腫瘤病変ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；およびワルデ
ンシュトレーム型マクログロブリン血症を含む）；慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）；急
性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；ヘアリー細胞白血病；慢性骨髄芽球性白血病；および
移植後リンパ増殖性疾患（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症と関連する異常な血管増殖、浮腫
（例えば、脳腫瘍に関連するもの）、メイグス症候群、脳、および頭頸部癌、ならびに関
連する転移が挙げられるがこれらに限定されない。特定の実施形態では、本発明の抗体に
よる治療に適した癌には、乳癌、結腸直腸癌、直腸癌、非小細胞肺癌、膠芽細胞腫、非ホ
ジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、腎細胞癌、前立腺癌、肝癌、膵臓癌、軟組織肉腫、カポジ肉
腫、カルチノイド癌腫、頭頸部癌、卵巣癌、中皮腫および多発性骨髄腫が含まれる。一部
の実施形態では、癌は、小細胞肺癌、神経膠芽腫、神経芽腫、メラノーマ、乳癌、胃癌、
結腸直腸癌（ＣＲＣ）および肝細胞癌から選択される。さらに、一部の実施形態では、癌
は、これらの癌の転移型を含む、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、神経膠芽腫、乳癌および肝
細胞癌から選択される。

用語「細胞傷害性剤」とは、本明細書で使用する場合、細胞にとって有害な（例えば、
細胞死を引き起こす、増殖を阻害する、または細胞機能を他の方法で邪魔する）、任意の
薬剤を指す。細胞傷害性剤としては、放射性同位体（例えば、Ａｔ²¹¹、Ｉ¹³¹、Ｉ¹²⁵、
Ｙ⁹⁰、Ｒｅ¹⁸⁶、Ｒｅ¹⁸⁸、Ｓｍ¹⁵³、Ｂｉ²¹²、Ｐ³²、Ｐｂ²¹²、およびＬｕの放射性同位
体）；化学療法剤；増殖阻害性剤；酵素およびその断片、例えば核酸分解酵素；および毒
素、例えば、低分子毒素、または、細菌、真菌、植物もしくは動物起源の酵素的に活性な
毒素（それらの断片および／もしくは変異体を含む）が挙げられるがこれらに限定されな
い。例示的な細胞傷害性剤としては、抗微小管剤、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物
質剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗薬、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモン
およびホルモンアナログ、シグナル伝達経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ血管新生
阻害剤、免疫療法剤、アポトーシス促進剤、ＬＤＨ−Ａの阻害剤、脂肪酸生合成の阻害剤
、細胞周期シグナル伝達阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、および癌代謝
の阻害剤から選択され得る。一実施形態では、この細胞傷害性剤は、タキサンである。一
実施形態では、このタキサンは、パクリタキセルまたはドセタキセルである。一実施形態
では、この細胞傷害性剤は、白金剤である。一実施形態では、この細胞傷害性剤は、ＥＧ
ＦＲのアンタゴニストである。一実施形態では、このＥＧＦＲのアンタゴニストは、Ｎ−
（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）キナゾリン−４−ア
ミン（例えば、エルロチニブ）である。一実施形態では、この細胞傷害性剤は、ＲＡＦ阻
害剤である。一実施形態では、このＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦおよび／またはＣＲＡＦ阻
害剤である。一実施形態では、このＲＡＦ阻害剤は、ベムラフェニブである。一実施形態
では、この細胞傷害性剤は、ＰＩ３Ｋ阻害剤である。

「化学療法薬」としては、ナイトロジェンマスタード類似体、アルキルスルホネート、
エチレンイミン、ニトロソウレア、エポキシド、その他のアルキル化剤、葉酸類似体、プ
リン類似体、ピリミジン類似体、その他の代謝拮抗剤、ビンカアルカロイドまたは類似体
、ポドフィロトキシン誘導体、カンプトテカン（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃａｎ）類似体、コ
ルヒチン誘導体、タキサン、その他の植物アルカロイドまたは天然物、アクチノマイシン
、アントラサイクリンまたは関連物質、その他の細胞傷害性抗生物質、白金化合物、メチ
ルヒドラジン、キナーゼ阻害剤、酵素、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、レチノイド、免
疫チェックポイント阻害剤、抗体およびその他の分子標的薬が挙げられるが、これらに限
定されない。

「化学療法剤」としてはまた、癌の治療において有用な化合物が挙げられる。化学療法
剤の例としては、エルロチニブ（タルセバ（商標）、ジェネンテック／ＯＳＩ Ｐｈａｒ
ｍ．）、ボルテゾミブ（ベルケード（商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍ．）、
ジスルフィラム、エピガロカテキンガレート、サリノスポラミドＡ、カーフィルゾミブ、
１７−ＡＡＧ（ゲルダナマイシン）、ラディシコール、乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨ
−Ａ）、フルベストラント（フェソロデックス（商標）、アストラゼネカ）、スニチニブ
（スーテント（商標）、ファイザー／Ｓｕｇｅｎ）、レトロゾール（フェマーラ（商標）
、ノバルティス）、イマチニブメシル酸塩（グリベック（商標）、ノバルティス）、フィ
ナスネート（ｆｉｎａｓｕｎａｔｅ）（バタラニブ（商標）、ノバルティス）、オキサリ
プラチン（エロキサチン（商標）、サノフィ）、５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）、ロ
イコボリン、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（商標）、ワイス）、ラパチ
ニブ（タイケルブ（商標）、ＧＳＫ５７２０１６、グラクソスミスクライン）、ロナファ
ルニブ（ＳＣＨ ６６３３６）、ソラフェニブ（ネクサバール（商標）、バイエルラボ）
、ゲフィチニブ（イレッサ（商標）、アストラゼネカ）、ＡＧ１４７８、アルキル化剤、
例えば、チオテパおよびシトキサン（商標）シクロホスファミド；スルホン酸アルキル、
例えば、ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファン；アジリジン、例えば
、ベンゾドパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボコン、メツレドパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ
）およびウレドパ（ｕｒｅｄｏｐａ）；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエ
チレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホルアミドおよびトリメチロメラミン（ｔｒ
ｉｍｅｔｈｙｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）などのエチレンイミンおよびメチルメラミン；アセ
トゲニン（特に、ブラタシンおよびブラタシノン（ｂｕｌｌａｔａｃｉｎｏｎｅ））；カ
ンプトテシン（トポテカンおよびイリノテカンなど）；ブリオスタチン；カリスタチン；
ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン（ｃａｒｚｅｌｅｓｉｎ）およびビセ
レシン合成アナログなど）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１およびクリプ
トフィシン８）；副腎皮質ステロイド（プレドニゾンおよびプレドニゾロンなど）；シプ
ロテロンアセテート；５α−レダクターゼ（フィナステリドおよびデュタステリドなど）
；ボリノスタット、ロミデプシン、パノビノスタット、バルプロ酸、モセチノスタット
ドラスタチン；アルデスロイキン、タルク デュオカルマイシン（合成アナログ、ＫＷ−
２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１など）；エリュテロビン；パンクラチスタチン（ｐａｎｃ
ｒａｔｉｓｔａｔｉｎ）；サルコジクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンジスタ
チン（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ）；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシ
ル、クロマファジン（ｃｈｌｏｍａｐｈａｚｉｎｅ）、クロロホスファミド（ｃｈｌｏｒ
ｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メ
クロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）
、フェネステリン（ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン、トロホスファミド
、ウラシルマスタード；ニトロソウレア類、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フ
ォテムスチン、ロムスチン、ニムスチンおよびラニムスチン；抗生物質、例えば、エンジ
イン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特に、カリケアマイシンγ１Ｉおよびカリケ
アマイシンω１Ｉ（Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．１９９４ ３３
：１８３〜１８６）；ダイネミシン（ｄｙｎｅｍｉｃｉｎ）Ａを含むダイネミシン；ビス
ホスホネート、例えば、クロドロネート；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチ
ンクロモフォアおよび関連の色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマ
イシン、アクチノマイシン、アントラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノ
マイシン（ｃａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カミノマ
イシン（ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルチノフィリン（ｃａｒｚｉｎｏｐｈｉｌｉｎ）
、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（ｄｅｔｏｒｕｂ
ｉｃｉｎ）、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、アドリアマイシン（商標）（
ドキソルビシン）、モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、
２−ピロリノ−ドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソル
ビシン（ｅｓｏｒｕｂｉｃｉｎ）、イダルビシン、マルセロマイシン（ｍａｒｃｅｌｌｏ
ｍｙｃｉｎ）、マイトマイシン、例えば、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラ
マイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、
ケラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ス
トレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾ
ルビシン；代謝拮抗剤、例えば、メトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−Ｆ
Ｕ）；葉酸アナログ、例えば、デノプテリン（ｄｅｎｏｐｔｅｒｉｎ）、メトトレキサー
ト、プテロプテリン（ｐｔｅｒｏｐｔｅｒｉｎ）、トリメトレキサート；プリンアナログ
、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン（ｔｈｉａｍｉｐｒｉｎ
ｅ）、チオグアニン；ピリミジンアナログ、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−
アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エ
ノシタビン、フロクスウリジン；アンドロゲン、例えば、カルステロン（ｃａｌｕｓｔｅ
ｒｏｎｅ）、ドロモスタノロンプロピアナート、エピチオスタノール、メピチオスタン、
テストラクトン；抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉
酸補充薬、例えば、フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）；アセグラトン；アルド
ホスファミドグリコシド（ａｌｄｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ）；ア
ミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル（ｂｅｓｔｒａｂｕｃ
ｉｌ）；ビスアントレン（ｂｉｓａｎｔｒｅｎｅ）；エダトレキサート；デフォファミン
（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルチン；ジアジコン（ｄｉａｚｉｑｕｏｎｅ）；エル
フォミチン（ｅｌｆｏｍｉｔｈｉｎｅ）；エリプチニウムアセタート（ｅｌｌｉｐｔｉｎ
ｉｕｍ ａｃｅｔａｔｅ）；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレ
ア；レンチナン；ロニダミン；メイタンシノイド、例えば、メイタンシンおよびアンサミ
トシン（ａｎｓａｍｉｔｏｃｉｎ）；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダムノール
（ｍｏｐｉｄａｍｎｏｌ）；ニトラエリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）；ペントスタチン；
フェナメット（ｐｈｅｎａｍｅｔ）；ピラルビシン；ロソキサントロン（ｌｏｓｏｘａｎ
ｔｒｏｎｅ）；ポドフィリン酸（ｐｏｄｏｐｈｙｌｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）；２−エチル
ヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（商標）多糖複合体（ＪＨＳ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐ
ｒｏｄｕｃｔｓ、Ｅｕｇｅｎｅ、Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン（ｒｈｉｚｏｘ
ｉｎ）；シゾフラン（ｓｉｚｏｆｕｒａｎ）；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリ
アジコン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ−
２毒素、ベラクリンＡ（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ Ａ）、ロリジンＡおよびアングイジン（
ａｎｇｕｉｄｉｎｅ））；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミト
ブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；
アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば
、タキソール（パクリタキセル；ブリストルマイヤーズスクイブ オンコロジー、Ｐｒｉ
ｎｃｅｔｏｎ、Ｎ．Ｊ．）、アブラキサン（商標）（cureモルホールフリー）、パクリタ
キセルのアルブミン操作ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ
ｌ Ｐａｒｔｎｅｒｓ、Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ、Ｉｌｌ．）およびタキソテール（商標）
（ドセタキセル、ドキセタキセル（ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）；サノフィアベンティス）；ク
ロラムブシル；ジェムザール（商標）（ゲムシタビン）；６−チオグアニン；メルカプト
プリン；メトトレキサート；白金アナログ、例えば、シスプラチンおよびカルボプラチン
；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビ
ンクリスチン；ナベルビン（商標）（ビノレルビン）；ノバントロン（ｎｏｖａｎｔｒｏ
ｎｅ）；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビ
ン（ゼローダ（商標））；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤Ｒ
ＦＳ ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド、例えば、レチ
ノイン酸；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸および誘導体が挙げられ
る。

化学療法剤としては、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ）、ベバシズマブ（アバスチン
（商標）、ジェネンテック）；セツキシマブ（アービタックス（商標）、Ｉｍｃｌｏｎｅ
）；パニツムマブ（ベクチビックス（商標）、アムジェン）、リツキシマブ（リツキサン
（商標）、ジェネンテック／バイオジェン Ｉｄｅｃ）、ペルツズマブ（オムニターグ（
商標）、２Ｃ４、ジェネンテック）、トラスツズマブ（ハーセプチン（商標）、ジェネン
テック）、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ、Ｃｏｒｉｘｉａ）および抗体薬物コンジュゲー
ト、ゲムツズマブオゾガミシン（マイロターグ（商標）、ワイス）などの抗体が挙げられ
る。本発明の化合物との併用薬剤としての治療可能性を有するさらなるヒト化モノクロー
ナル抗体には、以下が含まれる：アポリズマブ、アセリズマブ（ａｓｅｌｉｚｕｍａｂ）
、アトリズマブ、バピニューズマブ、ビバツズマブメルタンシン（ｂｉｖａｔｕｚｕｍａ
ｂ ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ（ｃｅｄｅｌｉ
ｚｕｍａｂ）、セルトリズマブペゴル、シドフシツズマブ（ｃｉｄｆｕｓｉｔｕｚｕｍａ
ｂ）、シドツズマブ（ｃｉｄｔｕｚｕｍａｂ）、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリ
ズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ（ｅｒｌｉｚｕｍａｂ）、フェルビズマブ（ｆｅ
ｌｖｉｚｕｍａｂ）、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガミシン、イノツズマブオゾ
ガミシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モ
タビズマブ、モトビズマブ（ｍｏｔｏｖｉｚｕｍａｂ）、ナタリズマブ、ニモツズマブ（
ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ）、ノロビズマブ（ｎｏｌｏｖｉｚｕｍａｂ）、ヌマビズマブ（
ｎｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズ
マブ（ｐａｓｃｏｌｉｚｕｍａｂ）、ペクフシツズマブ（ｐｅｃｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ
）、ペクツズマブ（ｐｅｃｔｕｚｕｍａｂ）、パキセリズマブ、ラリビズマブ（ｒａｌｉ
ｖｉｚｕｍａｂ）、ラニビズマブ、レスリビズマブ（ｒｅｓｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、レス
リズマブ、レシビズマブ（ｒｅｓｙｖｉｚｕｍａｂ）、ロベリズマブ（ｒｏｖｅｌｉｚｕ
ｍａｂ）、ルプリズマブ（ｒｕｐｌｉｚｕｍａｂ）、シブロツズマブ（ｓｉｂｒｏｔｕｚ
ｕｍａｂ）、シプリズマブ、ソンツズマブ（ｓｏｎｔｕｚｕｍａｂ）、タカツズマブテト
ラキセタン（ｔａｃａｔｕｚｕｍａｂ ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、タドシズマブ（ｔａｄ
ｏｃｉｚｕｍａｂ）、タリズマブ、テフィバズマブ（ｔｅｆｉｂａｚｕｍａｂ）、トシリ
ズマブ、トラリズマブ（ｔｏｒａｌｉｚｕｍａｂ）、ツコツズマブセルモロイキン（ｔｕ
ｃｏｔｕｚｕｍａｂ ｃｅｌｍｏｌｅｕｋｉｎ）、ツクシツズマブ（ｔｕｃｕｓｉｔｕｚ
ｕｍａｂ）、ウマビズマブ（ｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、ウルトキサズマブ、ウステキヌマ
ブ、ビジリズマブ、およびインターロイキン−１２ ｐ４０タンパク質を認識するように
遺伝的に改変された組換えの排他的にヒト配列の全長ＩｇＧ１λ抗体である抗インターロ
イキン−１２（ＡＢＴ−８７４／Ｊ６９５、ワイスリサーチおよびアボットラボラトリー
ズ）。

「増殖阻害性剤」とは、本明細書で使用する場合、インビトロまたはインビボのいずれ
かで細胞の増殖を阻害する化合物または組成物を指す。一実施形態では、増殖阻害性剤は
、その抗体が結合する抗原を発現する細胞の増殖を防止または低減させる増殖阻害性抗体
である。別の一実施形態では、この増殖阻害性剤は、Ｓ期にある細胞の百分率を顕著に低
減させる薬剤であり得る。増殖阻害性剤の例としては、細胞周期進行を（Ｓ期以外の場所
で）ブロックする薬剤、例えば、Ｇ１停止およびＭ期停止を誘導する薬剤が挙げられる。
古典的なＭ期ブロッカーとしては、ビンカ（ビンクリスチンおよびビンブラスチン）、タ
キサン、ならびにトポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えば、ドキソルビシン、エピルビシン
、ダウノルビシン、エトポシドおよびブレオマイシンが含まれる。Ｇ１停止させる薬剤、
例えば、ＤＮＡアルキル化剤、例えば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、
メクロレタミン、シスプラチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシルおよびａｒａ
−Ｃは、Ｓ期停止にも波及する。さらなる情報は、ＭｅｎｄｅｌｓｏｈｎおよびＩｓｒａ
ｅｌ編、Ｔｈｅ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ、Ｃｈａｐｔｅ
ｒ １、Ｍｕｒａｋａｍｉ等による表題「Ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ
，ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ，ａｎｄ ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ ｄｒｕｇｓ」（Ｗ．Ｂ
．Ｓａｕｎｄｅｒｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、１９９５）の、例えばｐ．１３中に見
出され得る。タキサン（パクリタキセルおよびドセタキセル）は、イチイの木から共に誘
導される抗癌薬物である。ヨーロッパイチイから誘導されたドセタキセル（タキソテール
（商標）、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ）は、パクリタキセルの半合成アナ
ログ（タキソール（商標）、ブリストルマイヤーズスクイブ）である。パクリタキセルお
よびドセタキセルは、チューブリンダイマーからの微小管のアセンブリを促進し、脱重合
を防止することによって微小管を安定化して、細胞における有糸分裂の阻害を生じる。

「放射線療法」とは、正常に機能するその能力または細胞を完全に破壊するその能力を
制限するような細胞への十分な損傷を誘導するための定方向のガンマ線またはベータ線の
使用を意味する。投薬量および治療の持続期間を決定するための当該技術分野で公知の多
くの方法が存在することが理解される。典型的な治療は、１回限りの投与として与えられ
、典型的な投薬量は、１日当たり１０から２００単位（グレイ）までの範囲である。

治療を目的とした「対象」または「個体」とは、ヒト、飼育動物および家畜、ならびに
動物園動物、競技用動物または愛玩動物、例えば、イヌ、ウマ、ネコ、乳牛などを含む、
哺乳動物として分類される任意の動物を指す。好ましくは、この哺乳動物はヒトである。

本明細書で、用語「抗体」は、最も広い意味で使用され、それらが所望の生物活性を示
す限り、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、
多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）および抗体断片を具体的にカバーする。

「単離された」抗体は、同定されており、かつその天然の環境の成分から分離および／
または回収された抗体である。その天然の環境の夾雑物成分は、抗体についての研究、診
断的または治療的使用に干渉する物質であり、酵素、ホルモン、および他のタンパク質性
または非タンパク質性の溶質が含まれ得る。一部の実施形態では、抗体は、（１）例えば
Ｌｏｗｒｙ法によって決定されるように、９５重量％超の抗体まで、一部の実施形態では
９９重量％超まで；（２）例えばスピニングカップシークエネーターの使用によって、Ｎ
末端もしくは内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を取得するのに十分な程度まで、ま
たは（３）例えば、クマシーブルーもしくは銀染色を使用して、還元もしくは非還元条件
下でのＳＤＳ−ＰＡＧＥによって均質になるまで、精製される。抗体の天然の環境の少な
くとも１つの成分が存在しないので、単離された抗体には、組換え細胞内のｉｎ ｓｉｔ
ｕの抗体が含まれる。しかし、通常、単離された抗体は、少なくとも１回の精製工程によ
って調製される。

「天然抗体」は、通常、２つの同一の軽（Ｌ）鎖および２つの同一の重（Ｈ）鎖から構
成される、約１５０，０００ダルトンのヘテロ４量体糖タンパク質である。各軽鎖は、１
つのジスルフィド共有結合によって重鎖に連結されるが、ジスルフィド連結の数は、異な
る免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で変動する。各重鎖および軽鎖は、一定の間隔を
空けた鎖内ジスルフィド架橋もまた有する。各重鎖は、一方の末端において１つの可変ド
メイン（Ｖ_H）を有し、その後にいくつかの定常ドメインを有する。各軽鎖は、一方の末
端において１つの可変ドメイン（Ｖ_L）を有し、その他方の末端において１つの定常ドメ
インを有する；軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１の定常ドメインとアラインメントされ
、軽鎖可変ドメインは、重鎖の可変ドメインとアラインメントされる。特定のアミノ酸残
基は、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間の接触面を形成すると考えられる。

用語「定常ドメイン」とは、免疫グロブリンの他の部分、抗原結合部位を含む可変ドメ
インと比較してより保存されたアミノ酸配列を有する、免疫グロブリン分子の部分を指す
。定常ドメインは、重鎖のＣ_H１、Ｃ_H２およびＣ_H３ドメイン（集合的に、ＣＨ）、なら
びに軽鎖のＣＨＬ（またはＣＬ）ドメインを含む。

抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」とは、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端
ドメインを指す。重鎖の可変ドメインは、「Ｖ_H」と呼ばれ得る。軽鎖の可変ドメインは
、「Ｖ_L」と呼ばれ得る。これらのドメインは、一般に、抗体の最も可変性の部分であり
、抗原結合部位を含む。

用語「可変」とは、可変ドメインの特定の部分が、抗体間で配列において広範に異なり
、その特定の抗原に対する各特定の抗体の結合および特異性において使用されるという事
実を指す。しかし、可変性は、抗体の可変ドメインの全体に均等に分布するわけではない
。可変性は、軽鎖および重鎖の両方の可変ドメイン中の、超可変領域（ＨＶＲ）と呼ばれ
る３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高く保存された部分は、フレー
ムワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然の重鎖および軽鎖の可変ドメインは、各々、ベー
タ−シート構造を接続し、一部の場合にはベータ−シート構造の一部を形成するループを
形成する３つのＨＶＲによって接続された、ベータ−シート立体配置を主として取る４つ
のＦＲ領域を含む。各鎖中のＨＶＲは、ＦＲ領域によって、他方の鎖由来のＨＶＲとごく
接近して一緒に維持され、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ等、Ｓｅｑ
ｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅ
ｒｅｓｔ、Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ
Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９９１）を参照のこと）。定常ドメイン
は、抗原への抗体の結合に直接関与しないが、種々のエフェクター機能、例えば、抗体依
存性細胞傷害における抗体の関与を示す。

任意の哺乳動物種由来の抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、それらの定常ドメイン
のアミノ酸配列に基づいてカッパ（「κ」）およびラムダ（「λ」）と呼ばれる、２つの
明らかに異なる型のうちの１つに割り当てられ得る。

用語ＩｇＧ「アイソタイプ」または「サブクラス」は、本明細書で使用する場合、それ
らの定常領域の化学的および抗原性特性によって規定される免疫グロブリンのサブクラス
のいずれかを意味する。

それらの重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に依存して、抗体（免疫グロブリン）は、
異なるクラスに割り当てられ得る。免疫グロブリンの５つの主要なクラス：ＩｇＡ、Ｉｇ
Ｄ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭが存在し、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタ
イプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１お
よびＩｇＡ２へとさらに分けられ得る。異なるクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定
常ドメインは、それぞれ、α、γ、ε、γおよびμと呼ばれる。異なるクラスの免疫グロ
ブリンのサブユニット構造および３次元立体配置は、周知であり、例えば、Ａｂｂａｓ等
Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、４ｔｈ ｅｄ．（Ｗ．Ｂ
．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｃｏ．、２０００）に、一般に記載されている。抗体は、抗体と１
または複数の他のタンパク質またはペプチドとの共有結合的または非共有結合的会合によ
って形成される、より大きい融合分子の一部であり得る。

用語「全長抗体」、「インタクトな抗体」および「全抗体」は、本明細書で相互交換可
能に使用されて、その実質的にインタクトな形態での抗体を指し、以下に定義される抗体
断片ではない。これらの用語は、特に、Ｆｃ領域を含む重鎖を有する抗体を指す。

本明細書の目的のために、「ネイキッド抗体」は、細胞傷害性部分または放射標識にコ
ンジュゲートされていない抗体である。

「抗体断片」は、好ましくはその抗原結合領域を含む、インタクトな抗体の一部分を含
む。一部の実施形態では、本明細書に記載される抗体断片は、抗原結合断片である。抗体
断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）₂、ｓｃＦｖおよびＦｖ断片；ディ
アボディ；直鎖状抗体；単鎖抗体分子；ならびに抗体断片から形成された多重特異性抗体
が挙げられる。

抗体のパパイン消化は、各々が単一抗原結合部位を有する、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる
２つの同一の抗原結合断片、およびその名称が容易に結晶化するその能力を反映している
１つの残留「Ｆｃ」断片を生じる。ペプシン処理は、２つの抗原結合部位を有し、なおも
抗原を架橋することが可能である、１つのＦ（ａｂ’）₂断片を生じる。

「Ｆｖ」は、完全な抗原結合部位を含む最小抗体断片である。一実施形態では、二鎖Ｆ
ｖ種は、緊密に非共有結合的に会合した１つの重鎖および１つの軽鎖可変ドメインのダイ
マーからなる。単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）種では、１つの重鎖および１つの軽鎖可変ドメイン
は、軽鎖および重鎖が、二鎖Ｆｖ種中のものと類似の「ダイマー」構造で会合し得るよう
に、柔軟なペプチドリンカーによって共有結合的に連結され得る。「Ｆｖ」は、各可変ド
メインの３つのＨＶＲが相互作用してＶＨ−ＶＬダイマーの表面上の抗原結合部を規定す
る、この立体配置にある。集合的に、６つのＨＶＲが、抗体に抗原結合特異性を付与する
。しかし、単一可変ドメイン（または抗原に対して特異的な３つのＨＶＲのみを含むＦｖ
の半分）でさえ、結合部位全体よりもより低い親和性ではあるが、抗原を認識および結合
する能力を有する。

Ｆａｂ断片は、重鎖および軽鎖可変ドメインを含み、軽鎖の定常ドメインおよび重鎖の
第１の定常ドメイン（ＣＨ１）もまた含む。Ｆａｂ’断片は、抗体ヒンジ領域由来の１ま
たは複数のシステインを含む重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端における数残基の追加
の分、Ｆａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’−ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数
可）が遊離チオール基を有する、Ｆａｂ’についての本明細書での命名である。Ｆ（ａｂ
’）₂抗体断片は、元々、それらの間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対とし
て産生された。抗体断片の他の化学カップリングも公知である。

「単鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨおよびＶＬドメインを含み、
これらのドメインは、単一ポリペプチド鎖中に存在する。一般に、ｓｃＦｖポリペプチド
は、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間に、ｓｃＦｖが抗原結合にとって所望の構造を形
成するのを可能にするポリペプチドリンカーをさらに含む。ｓｃＦｖの総説については、
Ｐｌｕｃｋｔｈｕｅｎ、Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａ
ｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、ｖｏｌ．１１３、ＲｏｓｅｎｂｕｒｇおよびＭｏｏｒｅ編、
（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９９４）、ｐｐ．２６９〜３
１５を参照のこと。

用語「ディアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）」とは、２つの抗原結合部位を有する抗体断片
を指し、これらの断片は、同じポリペプチド鎖（ＶＨ−ＶＬ）中に、軽鎖可変ドメイン（
ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。同じ鎖上の２つのドメイン間のペ
アリングを可能にするには短すぎるリンカーを使用することによって、これらのドメイン
は、別の鎖の相補的ドメインとペアリングするようにさせられ、２つの抗原結合部位を創
出する。ディアボディは、二価または二重特異性であり得る。ディアボディは、例えば、
ＥＰ４０４，０９７；ＷＯ１９９３／０１１６１；Ｈｕｄｓｏｎ等、Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９
：１２９〜１３４（２００３）；およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａ
ｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４〜６４４８（１９９３）中に、より完全に記載
されている。トリアボディ（ｔｒｉａｂｏｄｙ）およびテトラボディ（ｔｅｔｒａｂｏｄ
ｙ）もまた、Ｈｕｄｓｏｎ等、Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９〜１３４（２００３）中に記
載されている。

用語「モノクローナル抗体」とは、本明細書で使用する場合、実質的に均一な抗体の集
団から取得された抗体を指し、例えば、この集団を構成する個々の抗体は、微量で存在し
得る可能な変異、例えば、天然に存在する変異を除き、同一である。したがって、修飾語
「モノクローナル」は、別々の抗体の混合物ではない抗体の特性を示す。特定の実施形態
では、かかるモノクローナル抗体には、典型的には、標的を結合するポリペプチド配列を
含む抗体が含まれ、ここで、標的結合ポリペプチド配列は、複数のポリペプチド配列から
の単一標的結合ポリペプチド配列の選択を含むプロセスによって取得されたものである。
例えば、この選択プロセスは、複数のクローン、例えば、ハイブリドーマクローン、ファ
ージクローンまたは組換えＤＮＡクローンのプールからの独自のクローンの選択であり得
る。選択された標的結合配列は、例えば、標的に対する親和性を改善するため、標的結合
配列をヒト化するため、細胞培養物中でのその産生を改善するため、そのインビボでの免
疫原性を低減させるため、多重特異性抗体を創出するためなどに、さらに変更され得、変
更された標的結合配列を含む抗体もまた、本発明のモノクローナル抗体であることを、理
解すべきである。異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を典型的には含むポリ
クローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体
は、抗原上の単一決定基に対するものである。それらの特異性に加えて、モノクローナル
抗体調製物は、典型的には他の免疫グロブリンが夾雑していないという点で、有利である
。

修飾語「モノクローナル」は、抗体の実質的に均一な集団から取得されるという抗体の
特性を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするとは解釈されるべきではな
い。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、例えば以下を含む種々の
技術によって作製され得る：ハイブリドーマ法（例えば、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔ
ｅｉｎ、Ｎａｔｕｒｅ、２５６：４９５〜９７（１９７５）；Ｈｏｎｇｏ等、Ｈｙｂｒｉ
ｄｏｍａ、１４（３）：２５３〜２６０（１９９５）、Ｈａｒｌｏｗ等、Ａｎｔｉｂｏｄ
ｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒ
ｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、２ｎｄ ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒ
ｌｉｎｇ等、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｈ
ｙｂｒｉｄｏｍａｓ ５６３〜６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、Ｎ．Ｙ．、１９８１））、組
換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照のこと）、ファージディ
スプレイテクノロジー（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ等、Ｎａｔｕｒｅ、３５２：６２４〜
６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１〜５９７（
１９９２）；Ｓｉｄｈｕ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９〜３１０（２
００４）；Ｌｅｅ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３〜１０９３（２０
０４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（
３４）：１２４６７〜１２４７２（２００４）；およびＬｅｅ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．
Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１−２）：１１９〜１３２（２００４）を参照のこと）、なら
びにヒト免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリン遺伝子座または遺伝子の一
部または全てを有する動物においてヒトまたはヒト様抗体を産生するためのテクノロジー
（例えば、ＷＯ１９９８／２４８９３；ＷＯ１９９６／３４０９６；ＷＯ１９９６／３３
７３５；ＷＯ１９９１／１０７４１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａ
ｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ等、Ｎａ
ｔｕｒｅ ３６２：２５５〜２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ等、Ｙｅａｒ
ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）；米国特許第５，５４５，８０７号；米国
特許第５，５４５，８０６号；米国特許第５，５６９，８２５号；米国特許第５，６２５
，１２６号；米国特許第５，６３３，４２５号；および米国特許第５，６６１，０１６号
；Ｍａｒｋｓ等、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９〜７８３（１９９２）；
Ｌｏｎｂｅｒｇ等、Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６〜８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓ
ｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２〜８１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ等、Ｎａ
ｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５〜８５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇ
ｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）；ならびにＬｏ
ｎｂｅｒｇおよびＨｕｓｚａｒ、Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５〜
９３（１９９５）を参照のこと）。

本明細書のモノクローナル抗体には、重鎖および／または軽鎖の一部が、特定の種に由
来する抗体または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配
列と同一または相同であるが、鎖（複数可）の残部が、別の種に由来する抗体または別の
抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または相同であ
る「キメラ」抗体、ならびにそれらが所望の生物活性を示す限りにおいてかかる抗体の断
片が、具体的に含まれる（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号；およびＭｏｒｒｉ
ｓｏｎ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：６８５１〜６８５５
（１９８４）を参照のこと）。キメラ抗体には、抗体の抗原結合領域が、例えば目的の抗
原を用いてマカクザルを免疫化することによって産生される抗体から誘導される、ＰＲＩ
ＭＡＴＴＺＥＤ（商標）抗体が含まれる。

非ヒト（例えば、マウス）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリン由来の最小
配列を含むキメラ抗体である。一実施形態では、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲ由
来の残基が、所望の特異性、親和性、および／または能力を有する、マウス、ラット、ウ
サギまたは非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）のＨＶＲ由来の残基によって置き
換えられた、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の例では、ヒト免疫
グロブリンのＦＲ残基は、対応する非ヒト残基によって置き換えられる。さらに、ヒト化
抗体は、レシピエント抗体中にもドナー抗体中にも見出されない残基を含み得る。これら
の改変は、抗体の性能をさらに洗練するために行われ得る。一般に、ヒト化抗体は、少な
くとも１つの、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ここで、超可変ル
ープの全てまたは実質的に全ては、非ヒト免疫グロブリンのものと対応し、ＦＲの全てま
たは実質的に全ては、ヒト免疫グロブリン配列のものである。このヒト化抗体は、免疫グ
ロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部分、典型的にはヒト免疫グロブリンの一部を
含んでいてもよい。さらなる詳細については、例えば、Ｊｏｎｅｓ等、Ｎａｔｕｒｅ ３
２１：５２２〜５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ等、Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３
２３〜３２９（１９８８）；およびＰｒｅｓｔａ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉ
ｏｌ．２：５９３〜５９６（１９９２）を参照のこと。例えば、ＶａｓｗａｎｉおよびＨ
ａｍｉｌｔｏｎ、Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ、Ａｓｔｈｍａ ＆ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１
０５〜１１５（１９９８）；Ｈａｒｒｉｓ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔ
ｉｏｎｓ ２３：１０３５〜１０３８（１９９５）；ＨｕｒｌｅおよびＧｒｏｓｓ、Ｃｕ
ｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８〜４３３（１９９４）；ならびに米国特許第６
，９８２，３２１号および米国特許第７，０８７，４０９号もまた参照のこと。

「ヒト抗体」は、ヒトによって産生され、および／または本明細書に開示されるような
ヒト抗体を作製するための技術のいずれかを使用して作製された抗体のものと対応するア
ミノ酸配列を有する抗体である。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト
化抗体を具体的に排除する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリーを含む、当
該技術分野で公知の種々の技術を使用して産生され得る。ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷ
ｉｎｔｅｒ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓ等、Ｊ
．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２２：５８１（１９９１）。ヒトモノクローナル抗体の調製の
ために、Ｃｏｌｅ等、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃ
ｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ、ｐ．７７（１９８５）；Ｂｏｅｒｎｅ
ｒ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７（１）：８６〜９５（１９９１）に記載される方法
もまた、利用可能である。ｖａｎ Ｄｉｊｋおよびｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ、Ｃｕｒ
ｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、５：３６８〜７４（２００１）もまた参照のこと
。ヒト抗体は、抗原性曝露に応答してかかる抗体を産生するように改変されているが、そ
の内因性の遺伝子座が無効化にされている、トランスジェニック動物、例えば、免疫ゼノ
マウスに抗原を投与することによって調製され得る（例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標
）テクノロジーに関しては、米国特許第６，０７５，１８１号および米国特許第６，１５
０，５８４号を参照のこと）。例えば、ヒトＢ細胞ハイブリドーマテクノロジーを介して
生成されるヒト抗体に関しては、Ｌｉ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ、１０３：３５５７〜３５６２（２００６）もまた参照のこと。

「種依存的抗体」は、第２の哺乳動物種由来の抗原のホモログに対して有する結合親和
性よりも、第１の哺乳動物種由来の抗原に対してより強い結合親和性を有する抗体である
。通常、この種依存的抗体は、ヒト抗原に「特異的に結合する」（例えば、約１×１０^-7
Ｍ以下、好ましくは約１×１０^-8Ｍ以下、好ましくは約１×１０^-9Ｍ以下の結合親和性（
Ｋｄ）値を有する）が、第２の非ヒト哺乳動物種由来の抗原のホモログに対して、ヒト抗
原に対するその結合親和性よりも、少なくとも約５０分の１または少なくとも約５００分
の１または少なくとも約１０００分の１弱い、結合親和性を有する。この種依存的抗体は
、上に定義したような種々の型の抗体のいずれかであり得るが、好ましくは、ヒト化また
はヒト抗体である。

用語「超可変領域」、「ＨＶＲ」または「ＨＶ」とは、本明細書で使用する場合、配列
が超可変であるおよび／または構造的に規定されたループを形成する、抗体可変ドメイン
の領域を指す。一般に、抗体は、６つのＨＶＲを含む；３つはＶＨ中（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３
）、３つはＶＬ中（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）。天然抗体では、Ｈ３およびＬ３は、６つのＨＶ
Ｒのうち最大の多様性を示し、特に、Ｈ３は、抗体に優れた特異性を付与することにおい
て独自の役割を果たすと考えられている。例えば、Ｘｕ等、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １３：３
７〜４５（２０００）；ＪｏｈｎｓｏｎおよびＷｕ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１〜２５（Ｌｏ編、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏ
ｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００３）を参照のこと。実際、重鎖のみからなる天然に存在する
ラクダ科の抗体は、軽鎖の非存在下で、機能的かつ安定である。例えば、Ｈａｍｅｒｓ−
Ｃａｓｔｅｒｍａｎ等、Ｎａｔｕｒｅ ３６３：４４６〜４４８（１９９３）；Ｓｈｅｒ
ｉｆｆ等、Ｎａｔｕｒｅ Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．３：７３３〜７３６（１９９６）を
参照のこと。

いくつかのＨＶＲ表現が使用されており、本明細書において包含される。カバット相補
性決定領域（ＣＤＲ）は、配列可変性に基づいており、最も一般的に使用されるものであ
る（Ｋａｂａｔ等、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏ
ｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、５ｔｈ Ｅｄ． Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓ
ｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔ
ｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９９１））。Ｃｈｏｔｈｉａは、代わりに、構造的ループの位置
に言及している（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０
１〜９１７（１９８７））。ＡｂＭ ＨＶＲは、カバットのＨＶＲとＣｈｏｔｈｉａの構
造的ループとの間の妥協を示しており、Ｏｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体
モデル化ソフトウェアによって使用されている。「ｃｏｎｔａｃｔ」ＨＶＲは、入手可能
な複雑な結晶構造の解析に基づく。これらのＨＶＲの各々由来の残基は、以下に示される
。

ＨＶＲは、以下のような「拡大ＨＶＲ」を含み得る：ＶＬ中の２４−３６または２４−
３４（Ｌ１）、４６−５６または５０−５６（Ｌ２）および８９−９７または８９−９６
（Ｌ３）ならびにＶＨ中の２６−３５（Ｈ１）、５０−６５または４９−６５（Ｈ２）お
よび９３−１０２、９４−１０２または９５−１０２（Ｈ３）。これらの可変ドメイン残
基は、これらの定義の各々について、Ｋａｂａｔ等、上記に従って番号付けされる。

「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書に定義されるようなＨＶＲ残基以
外の可変ドメイン残基である。

用語「カバットの可変ドメイン残基番号付け」または「カバットのアミノ酸位置番号付
け」およびそれらのバリエーションは、Ｋａｂａｔ等における、上記中の抗体のコンパイ
ルの重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインのために使用される番号付けシステムを指
す。この番号付けシステムを使用して、実際の直鎖状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦ
ＲもしくはＨＶＲの短縮またはそれら中への挿入に対応する、より少ないまたはさらなる
アミノ酸を含み得る。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２の後の単一アミノ酸
挿入（カバットに従う残基５２ａ）および重鎖ＦＲの残基８２の後の挿入された残基（例
えば、カバットに従う残基８２ａ、８２ｂおよび８２ｃなど）を含み得る。残基のカバッ
ト番号付けは、抗体の配列と「標準的な」カバット番号付けされた配列との相同性の領域
におけるアラインメントによって、所与の抗体について決定され得る。

このカバット番号付けシステムは、可変ドメイン中の残基（軽鎖のおよそ残基１−１０
７および重鎖の残基１−１１３）に言及する場合に、一般に使用される（例えば、Ｋａｂ
ａｔ等、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．
５ｔｈ Ｅｄ． Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉ
ｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９９１））。
「ＥＵ番号付けシステム」または「ＥＵインデックス」は、免疫グロブリン重鎖定常領域
中の残基に言及する場合に、一般に使用される（例えば、上記Ｋａｂａｔ等において報告
されたＥＵインデックス）。「カバットのＥＵインデックス」とは、ヒトＩｇＧ１ ＥＵ
抗体の残基番号付けを指す。

表現「直鎖状抗体」とは、Ｚａｐａｔａ等（１９９５ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ、８（
１０）：１０５７〜１０６２）に記載される抗体を指す。簡潔に述べると、これらの抗体
は、相補的軽鎖ポリペプチドと一緒になって一対の抗原結合領域を形成する一対のタンデ
ムＦｄセグメント（ＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１）を含む。直鎖状抗体は、二重特異性ま
たは単一特異性であり得る。

本明細書で使用する場合、用語「結合する」、「〜に特異的に結合する」または「〜に
対して特異的である」とは、測定可能かつ再現性のある相互作用、例えば、標的と抗体と
の間の結合を指し、生体分子を含む分子の不均一な集団の存在下での標的の存在を決定す
る。例えば、標的（これはエピトープであり得る）に結合するまたは特異的に結合する抗
体は、他の標的に結合するよりも、より大きい親和性、結合活性で、より容易に、および
／またはより長い持続期間で、この標的を結合する抗体である。一実施形態では、無関係
な標的への抗体の結合の程度は、例えばラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定さ
れる場合、標的への抗体の結合の約１０％未満である。特定の実施形態では、標的に特異
的に結合する抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭまたは≦０．１ｎ
Ｍの解離定数（Ｋｄ）を有する。特定の実施形態では、抗体は、異なる種由来のタンパク
質間で保存されたタンパク質上のエピトープに特異的に結合する。別の一実施形態では、
特異的結合は、排他的な結合を含み得るが、それを必要としない。

ＩＩ．ＰＤ−１系結合アンタゴニスト
有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体を個体に投与することを
含む、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延させるための方法が、本明細書で
提供される。また、個体に、有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗
体を投与することを含む、癌を有する個体において腫瘍細胞に対する免疫応答を増強する
方法も、本明細書において提供される。例えば、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として
、マクロファージおよび多核巨細胞を含む免疫細胞の、腫瘍組織への浸潤が挙げられる。
別の例については、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ
）におけるＣＤ４５陽性リンパ球、ＣＤ３ε陽性リンパ球およびＣＤ８陽性Ｔリンパ球の
増大が挙げられる。例えば、ＰＤ−１系結合アンタゴニストには、ＰＤ−１結合アンタゴ
ニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが挙げられ
る。ＰＤ−１（プログラム死１）は、当該技術分野で、「プログラム細胞死１」、ＰＤＣ
Ｄ１、ＣＤ２７９およびＳＬＥＢ２とも呼ばれる。ＰＤ−Ｌ１（プログラム死リガンド１
）は、当該技術分野で、「プログラム細胞死１リガンド１」、ＰＤＣＤ１ＬＧ１、ＣＤ２
７４、Ｂ７−ＨおよびＰＤ−Ｌ１とも呼ばれる。ＰＤ−Ｌ２（プログラム死リガンド２）
は、当該技術分野で、「プログラム細胞死１リガンド２」、ＰＤＣＤ１ＬＧ２、ＣＤ２７
３、Ｂ７−ＤＣ、ＢｔｄｃおよびＰＤＬ２とも呼ばれる。一部の実施形態では、ＰＤ−１
、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２は、ヒトのＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２である
。

一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、そのリガンド結合パートナ
ーへのＰＤ−１の結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、このＰＤ−１リガン
ド結合パートナーは、ＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２である。ある実施形態では、
ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、その結合パートナーへのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する
分子である。具体的な一態様では、ＰＤ−Ｌ１結合パートナーは、ＰＤ−１および／また
はＢ７−１である。ある一実施形態では、このＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、その結
合パートナーへのＰＤ−Ｌ２の結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、ＰＤ−
Ｌ２結合パートナーは、ＰＤ−１である。このアンタゴニストは、抗体、その抗原結合断
片、イムノアドヘシン、融合タンパク質またはオリゴペプチドであり得る。

一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体（例えば、
ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体）である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−１
抗体は、ＭＤＸ−１１０６（ニボルマブ）、ＭＫ−３４７５（ラムブロリズマブ）および
ＣＴ−０１１（ピディリズマブ）からなる群から選択される。一部の実施形態では、この
ＰＤ−１結合アンタゴニストは、イムノアドヘシン（例えば、定常領域（例えば、免疫グ
ロブリン配列のＦｃ領域）に融合されたＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の細胞外またはＰＤ
−１結合部分を含むイムノアドヘシン）である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合
アンタゴニストは、ＡＭＰ−２２４またはＡＭＰ−５１４（ＭＥＤＩ０６８０）である。
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８
１０、ＢＧＢ Ａ３１７およびＳＨＲ−１２１０からなる群から選択される。いくつかの
実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。いくつかの
実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、アテゾ
リズマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＤＸ−１１０５、アベルマブおよびＭＥＤＩ４７３６
（デュルバルマブ）からなる群から選択される。抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０は、ＷＯ
２０１０／０７７６３４に記載された抗ＰＤ−Ｌ１である。ＭＤＸ−１１０５は、ＢＭＳ
−９３６５５９としても知られ、ＷＯ２００７／００５８７４に記載された抗ＰＤ−Ｌ１
抗体である。アベルマブは、ＷＯ２０１３０７９１７４に記載された抗ＰＤＬ１抗体であ
る。ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）は、ＷＯ２０１１／０６６３８９およびＵＳ２
０１３／０３４５５９に記載された抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体である。ニボルマブ
は、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＭＤＸ−１１０６、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５
５８およびＯＰＤＩＶＯ（商標）としても知られ、ＷＯ２００６／１２１１６８に記載さ
れた抗ＰＤ−１抗体である。ペンブロリズマブは、ＭＫ−３４７５、Ｍｅｒｃｋ ３４７
５、ラムブロリズマブ、キイトルーダ（商標）およびＳＣＨ−９００４７５としても知ら
れ、ＷＯ２００９／１１４３３５に記載された抗ＰＤ−１抗体である。ＣＴ−０１１は、
ｈＢＡＴ、ｈＢＡＴ−１またはピディリズマブとしても知られ、ＷＯ２００９／１０１６
１１に記載された抗ＰＤ−１抗体である。ＡＭＰ−２２４は、Ｂ７−ＤＣＩｇとしても知
られ、ＷＯ２０１０／０２７８２７およびＷＯ２０１１／０６６３４２に記載されたＰＤ
−Ｌ２−Ｆｃ融合可溶型受容体である。

一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である
。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１との間および／
またはＰＤ−Ｌ１とＢ７−１との間の結合を阻害することが可能である。一部の実施形態
では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、この
抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖおよび（Ｆａｂ’）₂断
片からなる群から選択される抗体断片である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗
体は、ヒト化抗体である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒト抗体であ
る。

本発明の方法のために有用な抗ＰＤ−Ｌ１抗体およびそれを作製するための方法の例は
、本明細書に引用することにより援用される、ＰＣＴ特許出願ＷＯ２０１０／０７７６３
４、ＷＯ２００７／００５８７４、ＷＯ２０１１／０６６３８９および米国特許出願公開
第２０１３／０３４５５９号に記載されている。本発明において有用な抗ＰＤ−Ｌ１抗体
は、かかる抗体を含む組成物を含め、癌を治療するために抗ＧＰＣ３抗体と組み合わせて
使用され得る。

抗ＰＤ１抗体
一部の実施形態では、この抗ＰＤ−１抗体は、ＭＤＸ−１１０６である。「ＭＤＸ−１
１０６」の代替的名称としては、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−
９３６５５８またはニボルマブが挙げられる。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−１抗体
は、ニボルマブ（ＣＡＳ登録番号：９４６４１４−９４−４）である。なおさらなる一実
施形態では、配列番号１由来の重鎖可変領域アミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／ま
たは配列番号２由来の軽鎖可変領域アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、単離された
抗ＰＤ−１抗体が提供される。なおさらなる一実施形態では、重鎖および／または軽鎖配
列を含む単離された抗ＰＤ−１抗体が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号１に記載の重鎖配列と、少なくとも８５％、少なくと
も９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％
、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なく
とも９９％または１００％の配列同一性を有し、
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号２に記載の軽鎖配列と、少なくとも８５％、少なくと
も９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％
、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なく
とも９９％または１００％の配列同一性を有する。

抗ＰＤ−Ｌ１抗体
一部の実施形態では、製剤中の抗体は、重鎖および／または軽鎖配列中に、少なくとも
１つのトリプトファン（例えば、少なくとも２つ、少なくとも３つまたは少なくとも４つ
）を含む。一部の実施形態では、アミノ酸トリプトファンは、抗体のＣＤＲ領域、フレー
ムワーク領域および／または定常領域中にある。一部の実施形態では、この抗体は、ＣＤ
Ｒ領域中に２つまたは３つのトリプトファン残基を含む。一部の実施形態では、製剤中の
抗体は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。ＰＤ−Ｌ１（プログラム死リガンド１）は、ＰＤ−Ｌ
１、Ｂ７−Ｈ１、Ｂ７−４、ＣＤ２７４およびＢ７−Ｈとしても知られ、膜貫通タンパク
質であり、ＰＤ−１とのその相互作用は、Ｔ細胞活性化およびサイトカイン産生を阻害す
る。一部の実施形態では、本明細書に記載される抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒトＰＤ−Ｌ１に
結合する。本明細書に記載される方法において使用され得る抗ＰＤ−Ｌ１抗体の例は、本
明細書に引用することにより援用される、ＰＣＴ特許出願ＷＯ２０１０／０７７６３４Ａ
１および米国特許第８，２１７，１４９号に記載されるアテゾリズマブまたは抗ＰＤ−Ｌ
１抗体である。

一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１との間および／
またはＰＤ−Ｌ１とＢ７−１との間の結合を阻害することが可能である。一部の実施形態
では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、この
抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖおよび（Ｆａｂ’）₂断
片からなる群から選択される抗体断片である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗
体は、ヒト化抗体である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒト抗体であ
る。

ＷＯ２０１０／０７７６３４Ａ１および米国特許第８，２１７，１４９号に記載される
抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載される方法において使用され得る。一部の実施形態
では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号３の重鎖可変領域配列および／または配列番号
４の軽鎖可変領域配列を含む。なおさらなる一実施形態では、重鎖および／または軽鎖配
列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号３に記載の重鎖配列と、少なくとも８５％、少なくと
も９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％
、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なく
とも９９％または１００％の配列同一性を有し、
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号４に記載の軽鎖配列と、少なくとも８５％、少なくと
も９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％
、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なく
とも９９％または１００％の配列同一性を有する。

一実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ
−Ｈ３配列を含む重鎖可変領域ポリペプチドを含み、ここで、
（ａ）このＨＶＲ−Ｈ１配列は、ＧＦＴＦＳＸ₁ＳＷＩＨ（配列番号５）であり；
（ｂ）このＨＶＲ−Ｈ２配列は、ＡＷＩＸ₂ＰＹＧＧＳＸ₃ＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号
６）であり；
（ｃ）このＨＶＲ−Ｈ３配列は、ＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号７）であり；
ここでさらに、Ｘ₁は、ＤまたはＧであり；Ｘ₂は、ＳまたはＬであり；Ｘ₃は、Ｔまた
はＳである。具体的な一態様では、Ｘ₁はＤであり；Ｘ₂はＳであり、Ｘ₃はＴである。

ある態様では、このポリペプチドは、式：（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（Ｈ
Ｃ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ
４）に従う、ＨＶＲ間に並べられた可変領域重鎖フレームワーク配列をさらに含む。なお
ある態様では、これらのフレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に
由来する。さらなる一態様では、これらのフレームワーク配列は、ＶＨサブグループＩＩ
Ｉコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらのフレームワー
ク配列のうち少なくとも１つは、以下である：
ＨＣ−ＦＲ１は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳ（配列番号８
）であり
ＨＣ−ＦＲ２は、ＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶ（配列番号９）であり
ＨＣ−ＦＲ３は、ＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡ
Ｒ（配列番号１０）であり
ＨＣ−ＦＲ４は、ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ（配列番号１１）である。

なおさらなる一態様では、この重鎖ポリペプチドは、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およ
びＨＶＲ−Ｌ３を含む可変領域軽鎖とさらに組み合わされ、ここで、
（ａ）このＨＶＲ−Ｌ１配列は、ＲＡＳＱＸ₄Ｘ₅Ｘ₆ＴＸ₇Ｘ₈Ａ（配列番号１２）であ
り；
（ｂ）このＨＶＲ−Ｌ２配列は、ＳＡＳＸ₉ＬＸ₁₀Ｓ（配列番号１３）であり；
（ｃ）このＨＶＲ−Ｌ３配列は、ＱＱＸ₁₁Ｘ₁₂Ｘ₁₃Ｘ₁₄ＰＸ₁₅Ｔ（配列番号１４）であ
り；
ここで、Ｘ₄は、ＤまたはＶであり；Ｘ₅は、ＶまたはＩであり；Ｘ₆は、ＳまたはＮで
あり；Ｘ₇は、ＡまたはＦであり；Ｘ₈は、ＶまたはＬであり；Ｘ₉は、ＦまたはＴであり
；Ｘ₁₀は、ＹまたはＡであり；Ｘ₁₁は、Ｙ、Ｇ、ＦまたはＳであり；Ｘ₁₂は、Ｌ、Ｙ、Ｆ
またはＷであり；Ｘ₁₃は、Ｙ、Ｎ、Ａ、Ｔ、Ｇ、ＦまたはＩであり；Ｘ₁₄は、Ｈ、Ｖ、Ｐ
、ＴまたはＩであり；Ｘ₁₅は、Ａ、Ｗ、Ｒ、ＰまたはＴである。なおさらなる一態様では
、Ｘ₄はＤであり；Ｘ₅はＶであり；Ｘ₆はＳであり；Ｘ₇はＡであり；Ｘ₈はＶであり；Ｘ₉
はＦであり；Ｘ₁₀はＹであり；Ｘ₁₁はＹであり；Ｘ₁₂はＬであり；Ｘ₁₃はＹであり；Ｘ₁₄
はＨであり；Ｘ₁₅はＡである。

なおさらなる一態様では、この軽鎖は、式：（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（
ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−Ｆ
Ｒ４）に従ってＨＶＲ間に並べられた可変領域軽鎖フレームワーク配列をさらに含む。な
おさらなる一態様では、これらのフレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワー
ク配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらのフレームワーク配列は、ＶＬカッ
パＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらのフレームワ
ーク配列のうち少なくとも１つは、以下である：
ＬＣ−ＦＲ１は、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣ（配列番号１５）
であり
ＬＣ−ＦＲ２は、ＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹ（配列番号１６）であり
ＬＣ−ＦＲ３は、ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹ
Ｃ（配列番号１７）であり
ＬＣ−ＦＲ４は、ＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号１８）である。

別の一実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体
または抗原結合断片が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖は、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含み、ここでさ
らに、
（ｉ）このＨＶＲ−Ｈ１配列は、ＧＦＴＦＳＸ₁ＳＷＩＨであり；（配列番号５）
（ｉｉ）このＨＶＲ−Ｈ２配列は、ＡＷＩＸ₂ＰＹＧＧＳＸ₃ＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列
番号６）であり
（ｉｉｉ）このＨＶＲ−Ｈ３配列は、ＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号７）であり、
（ｂ）この軽鎖は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含み、ここでさ
らに、
（ｉ）このＨＶＲ−Ｌ１配列は、ＲＡＳＱＸ₄Ｘ₅Ｘ₆ＴＸ₇Ｘ₈Ａ（配列番号１２）で
あり
（ｉｉ）このＨＶＲ−Ｌ２配列は、ＳＡＳＸ₉ＬＸ₁₀Ｓであり；（配列番号１３）か
つ
（ｉｉｉ）このＨＶＲ−Ｌ３配列は、ＱＱＸ₁₁Ｘ₁₂Ｘ₁₃Ｘ₁₄ＰＸ₁₅Ｔであり；（配列
番号１４）
ここで、Ｘ₁は、ＤまたはＧであり；Ｘ₂は、ＳまたはＬであり；Ｘ₃は、ＴまたはＳで
あり；Ｘ₄は、ＤまたはＶであり；Ｘ₅は、ＶまたはＩであり；Ｘ₆は、ＳまたはＮであり
；Ｘ₇は、ＡまたはＦであり；Ｘ₈は、ＶまたはＬであり；Ｘ₉は、ＦまたはＴであり；Ｘ_1
0は、ＹまたはＡであり；Ｘ₁₁は、Ｙ、Ｇ、ＦまたはＳであり；Ｘ₁₂は、Ｌ、Ｙ、Ｆまた
はＷであり；Ｘ₁₃は、Ｙ、Ｎ、Ａ、Ｔ、Ｇ、ＦまたはＩであり；Ｘ₁₄は、Ｈ、Ｖ、Ｐ、Ｔ
またはＩであり；Ｘ₁₅は、Ａ、Ｗ、Ｒ、ＰまたはＴである。具体的な一態様では、Ｘ₁は
Ｄであり；Ｘ₂はＳであり、Ｘ₃はＴである。別の一態様では、Ｘ₄はＤであり；Ｘ₅はＶで
あり；Ｘ₆はＳであり；Ｘ₇はＡであり；Ｘ₈はＶであり；Ｘ₉はＦであり；Ｘ₁₀はＹであり
；Ｘ₁₁はＹであり；Ｘ₁₂はＬであり；Ｘ₁₃はＹであり；Ｘ₁₄はＨであり；Ｘ₁₅はＡである
。なお別の一態様では、Ｘ₁はＤであり；Ｘ₂はＳであり、Ｘ₃はＴであり、Ｘ₄はＤであり
；Ｘ₅はＶであり；Ｘ₆はＳであり；Ｘ₇はＡであり；Ｘ₈はＶであり；Ｘ₉はＦであり；Ｘ_1
0はＹであり；Ｘ₁₁はＹであり；Ｘ₁₂はＬであり；Ｘ₁₃はＹであり；Ｘ₁₄はＨであり、Ｘ_1
5はＡである。

さらなる一態様では、この重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（
ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−Ｆ
Ｒ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１または複数のフレームワーク配列を含み、かつ、
この軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶ
Ｒ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間
に並べられた１または複数のフレームワーク配列を含む。なおさらなる一態様では、これ
らのフレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさら
なる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列は、カバットサブグループＩ、ＩＩま
たはＩＩＩ配列に由来する。なおさらなる一態様では、この重鎖フレームワーク配列は、
ＶＨサブグループＩＩＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、
これらの重鎖フレームワーク配列のうち１または複数は、配列番号８、９、１０および１
１として示される。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、カバ
ットカッパＩ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶサブグループ配列に由来する。なおさらなる一態
様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワーク
である。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列のうち１または複数
は、配列番号１５、１６、１７および１８として示される。

なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、ヒトまたはマウスの定常領域をさらに
含む。なおさらなる一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２
Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらなる具体的な一態様では、
このヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は
、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらな
る一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらなる具体的な一態様
では、この抗体は、低減されたまたは最小のエフェクター機能を有する。なおさらなる具
体的な一態様では、この最小のエフェクター機能は、「エフェクターなしＦｃ変異」また
は非グリコシル化から生じる。なおさらなる一実施形態では、このエフェクターなしＦｃ
変異は、定常領域中のＮ２９７ＡまたはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。

なお別の一実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供
され、ここで、
（ａ）この重鎖は、それぞれ、ＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨ（配列番号１９）、ＡＷＩＳＰＹ
ＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２０）およびＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号２１）
と少なくとも８５％の配列同一性を有する、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−
Ｈ３配列をさらに含む、または
（ｂ）この軽鎖は、それぞれ、ＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号２２）、ＳＡＳＦＬ
ＹＳ（配列番号２３）およびＱＱＹＬＹＨＰＡＴ（配列番号２４）と少なくとも８５％の
配列同一性を有する、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３配列をさらに含む
。具体的な一態様では、この配列同一性は、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、
９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１０
０％である。

ある態様では、この重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−
ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）
として、ＨＶＲ間に並べられた１または複数のフレームワーク配列を含み、かつ、この軽
鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ
２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べ
られた１または複数のフレームワーク配列を含む。ある態様では、これらのフレームワー
ク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる一態様では、
これらの重鎖フレームワーク配列は、カバットサブグループＩ、ＩＩまたはＩＩＩ配列に
由来する。なおさらなる一態様では、この重鎖フレームワーク配列は、ＶＨサブグループ
ＩＩＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの重鎖フレ
ームワーク配列のうち１または複数は、配列番号８、９、１０および１１として示される
。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、Ｉ
Ｉ、ＩＩＩまたはＩＶサブグループ配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの
軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさら
なる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列のうち１または複数は、配列番号１５
、１６、１７および１８として示される。

なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、ヒトまたはマウスの定常領域をさらに
含む。なおさらなる一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２
Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらなる具体的な一態様では、
このヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は
、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらな
る一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらなる具体的な一態様
では、この抗体は、低減されたまたは最小のエフェクター機能を有する。なおさらなる具
体的な一態様では、この最小のエフェクター機能は、「エフェクターなしＦｃ変異」また
は非グリコシル化から生じる。なおさらなる一実施形態では、このエフェクターなしＦｃ
変異は、定常領域中のＮ２９７ＡまたはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。

さらなる一実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む単離された抗ＰＤＬ１抗
体が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号２５に記載の重鎖配列と少なくとも８５％の配列同一
性を有し、および／または
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号４に記載の軽鎖配列と少なくとも８５％の配列同一性
を有する。
具体的な一態様では、この配列同一性は、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９
１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００
％である。ある態様では、この重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−
（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−
ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１または複数のフレームワーク配列を含み、かつ
、この軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（Ｈ
ＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ
間に並べられた１または複数のフレームワーク配列を含む。更なる態様では、これらのフ
レームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。さらなる一態様
では、これらの重鎖フレームワーク配列は、カバットサブグループＩ、ＩＩまたはＩＩＩ
配列に由来する。なおさらなる一態様では、この重鎖フレームワーク配列は、ＶＨサブグ
ループＩＩＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの重
鎖フレームワーク配列のうち１または複数は、配列番号８、９、１０およびＷＧＱＧＴＬ
ＶＴＶＳＳ（配列番号２７）として示される。
なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、ＩＩ
、ＩＩＩまたはＩＶサブグループ配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの軽
鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらな
る一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列のうち１または複数は、配列番号１５、
１６、１７および１８として示される。

なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、ヒトまたはマウスの定常領域をさらに
含む。なおさらなる一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２
Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらなる具体的な一態様では、
このヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は
、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらな
る一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらなる具体的な一態様
では、この抗体は、低減されたまたは最小のエフェクター機能を有する。なおさらなる具
体的な一態様では、この最小のエフェクター機能は、原核細胞における産生から生じる。
なおさらなる具体的な一態様では、この最小のエフェクター機能は、「エフェクターなし
Ｆｃ変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる一実施形態では、このエフェ
クターなしＦｃ変異は、定常領域中のＮ２９７ＡまたはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換であ
る。

さらなる一態様では、この重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（
ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−Ｆ
Ｒ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１または複数のフレームワーク配列を含み、かつ、
この軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶ
Ｒ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間
に並べられた１または複数のフレームワーク配列を含む。なおさらなる一態様では、これ
らのフレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさら
なる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列は、カバットサブグループＩ、ＩＩま
たはＩＩＩ配列に由来する。なおさらなる一態様では、この重鎖フレームワーク配列は、
ＶＨサブグループＩＩＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、
これらの重鎖フレームワーク配列のうち１または複数は、以下である：
ＨＣ−ＦＲ１は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳ
（配列番号２９）であり、
ＨＣ−ＦＲ２は、ＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡ（配列番号３０）であり、
ＨＣ−ＦＲ３は、ＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣ
ＡＲ（配列番号１０）であり、
ＨＣ−ＦＲ４は、ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２７）である。

なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、Ｉ
Ｉ、ＩＩＩまたはＩＶサブグループ配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの
軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさら
なる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列のうち１または複数は、以下である：
ＬＣ−ＦＲ１は、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣ（配列番号１５
）であり、
ＬＣ−ＦＲ２は、ＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹ（配列番号１６）であり、
ＬＣ−ＦＲ３は、ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹ
ＹＣ（配列番号１７）であり、
ＬＣ−ＦＲ４は、ＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２８）である。

なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、ヒトまたはマウスの定常領域をさらに
含む。なおさらなる一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２
Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらなる具体的な一態様では、
このヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は
、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらな
る一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらなる具体的な一態様
では、この抗体は、低減されたまたは最小のエフェクター機能を有する。なおさらなる具
体的な一態様では、この最小のエフェクター機能は、「エフェクターなしＦｃ変異」また
は非グリコシル化から生じる。なおさらなる一実施形態では、このエフェクターなしＦｃ
変異は、定常領域中のＮ２９７ＡまたはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。

さらなる実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供さ
れ、ここで、
（ｃ）この重鎖は、それぞれ、ＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨ（配列番号１９）、ＡＷＩＳＰＹ
ＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２０）およびＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号２１）
と少なくとも８５％の配列同一性を有する、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−
Ｈ３配列をさらに含み、
および／または
（ｄ）この軽鎖は、それぞれ、ＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号２２）、ＳＡＳＦＬ
ＹＳ（配列番号２３）およびＱＱＹＬＹＨＰＡＴ（配列番号２４）と少なくとも８５％の
配列同一性を有する、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３配列をさらに含む
。
具体的な一態様では、この配列同一性は、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９
１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００
％である。

ある態様では、この重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−
ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）
として、ＨＶＲ間に並べられた１または複数のフレームワーク配列を含み、かつ、この軽
鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ
２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べ
られた１または複数のフレームワーク配列を含む。さらなる一態様では、これらのフレー
ムワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる一態様
では、これらの重鎖フレームワーク配列は、カバットサブグループＩ、ＩＩまたはＩＩＩ
配列に由来する。なおさらなる一態様では、この重鎖フレームワーク配列は、ＶＨサブグ
ループＩＩＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの重
鎖フレームワーク配列のうち１または複数は、配列番号８、９、１０およびＷＧＱＧＴＬ
ＶＴＶＳＳＡＳＴＫ（配列番号３１）として示される。

なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、Ｉ
Ｉ、ＩＩＩまたはＩＶサブグループ配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの
軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさら
なる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列のうち１または複数は、配列番号１５
、１６、１７および１８として示される。なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は
、ヒトまたはマウスの定常領域をさらに含む。なおさらなる一態様では、このヒト定常領
域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択され
る。なおさらなる具体的な一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさら
なる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３
からなる群から選択される。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ２
Ａである。なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、低減されたまたは最小のエフ
ェクター機能を有する。なおさらなる具体的な一態様では、この最小のエフェクター機能
は、「エフェクターなしＦｃ変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる一実
施形態では、このエフェクターなしＦｃ変異は、定常領域中のＮ２９７ＡまたはＤ２６５
Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。

なおさらなる一実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む単離された抗ＰＤ−
Ｌ１抗体が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号２６に記載の重鎖配列と少なくとも８５％の配列同一
性を有し、または
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号４に記載の軽鎖配列と少なくとも８５％の配列同一性
を有する。

一部の実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体
が提供され、ここで、この軽鎖可変領域配列は、配列番号４のアミノ酸配列と、少なくと
も８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％
、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なく
とも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８
％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する。一部の実施形態では、重鎖
および軽鎖可変領域配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、この重
鎖可変領域配列は、配列番号２６のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６
％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少な
くとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９
５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％また
は１００％の配列同一性を有する。一部の実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を
含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、この軽鎖可変領域配列は、配列番
号４のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少な
くとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９
２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少
なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有
し、かつ、この重鎖可変領域配列は、配列番号２６のアミノ酸配列と、少なくとも８５％
、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なく
とも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４
％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少な
くとも９９％または１００％の配列同一性を有する。一部の実施形態では、重鎖および／
または軽鎖のＮ末端における１、２、３、４または５つのアミノ酸残基は、欠失、置換ま
たは改変され得る。

なおさらなる一実施形態では、重鎖および軽鎖配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体
が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号３２に記載の重鎖配列と少なくとも８５％の配列同一
性を有し、および／または
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号３３に記載の軽鎖配列と少なくとも８５％の配列同一
性を有する。
なおさらなる一実施形態では、重鎖および軽鎖配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が
提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号５５に記載の重鎖配列と少なくとも８５％の配列同一
性を有し、および／または
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号３３に記載の軽鎖配列と少なくとも８５％の配列同一
性を有する。

一部の実施形態では、重鎖および軽鎖配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供さ
れ、ここで、この軽鎖配列は、配列番号３３のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少な
くとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９
０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少
なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なく
とも９９％の配列同一性を有する。一部の実施形態では、重鎖および軽鎖配列を含む単離
された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、この重鎖配列は、配列番号３２または５５
のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくと
も８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％
、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なく
とも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％の配列同一性を有する。一部の実
施形態では、重鎖および軽鎖配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで
、この軽鎖配列は、配列番号３３のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６
％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少な
くとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９
５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％
の配列同一性を有し、かつ、この重鎖配列は、配列番号３２または５５のアミノ酸配列と
、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なく
とも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３
％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少な
くとも９８％または少なくとも９９％の配列同一性を有する。

一部の実施形態では、この単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、非グリコシル化されている
。抗体のグリコシル化は、典型的には、Ｎ−結合型またはＯ−結合型のいずれかである。
Ｎ−結合型とは、アスパラギン残基の側鎖への糖（炭水化物）部分の結合を指す。トリペ
プチド配列アスパラギン−Ｘ−セリンおよびアスパラギン−Ｘ−スレオニン（ここで、Ｘ
はプロリン以外の任意のアミノ酸である）は、アスパラギン側鎖への糖（炭水化物）部分
の酵素的付加のための認識配列である。したがって、ポリペプチド中のこれらのトリペプ
チド配列のいずれかの存在は、潜在的グリコシル化部位を創出する。Ｏ結合グリコシル化
とは、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはスレオニンへの、糖類Ｎ−アセ
チルガラクトサミン、ガラクトースまたはキシロースのうち１つの付加を指すが、５−ヒ
ドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンもまた使用され得る。抗体からのグリコシ
ル化部位の除去は、上記トリペプチド配列（Ｎ結合グリコシル化部位について）のうち１
つが除去されるようにアミノ酸配列を変更することによって、簡便には達成される。この
変更は、グリコシル化部位内のアスパラギン、セリンまたはスレオニン残基の、別のアミ
ノ酸残基（例えば、グリシン、アラニンまたは保存的置換）による置換によって行われ得
る。

本明細書の実施形態のいずれかでは、この単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒトＰＤ−
Ｌ１、例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ寄託番号Ｑ９ＮＺＱ７．１に
示されるヒトＰＤ−Ｌ１、またはその変異体に結合し得る。

なおさらなる一実施形態では、本明細書に記載される抗体のいずれかをコードする単離
された核酸が提供される。一部の実施形態では、この核酸は、以前に記載した抗ＰＤ−Ｌ
１抗体のいずれかをコードする核酸の発現に適切なベクターをさらに含む。なおさらなる
具体的な一態様では、このベクターは、核酸の発現に適切な宿主細胞中にある。なおさら
なる具体的な一態様では、この宿主細胞は、真核細胞または原核細胞である。なおさらな
る具体的な一態様では、この真核細胞は、哺乳動物細胞、例えば、チャイニーズハムスタ
ー卵巣（ＣＨＯ）細胞である。

抗体またはその抗原結合断片は、当該技術分野で公知の方法を使用して、例えば、以前
に記載した抗ＰＤ−Ｌ１抗体または抗原結合断片のいずれかをコードする核酸を発現に適
切な形態で含む宿主細胞を、かかる抗体または断片を産生するのに適切な条件下で培養す
ること、およびこの抗体または断片を回収することを含むプロセスによって、作製され得
る。

ＩＩＩ．抗ＧＰＣ３抗体
有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体を個体に投与することを
含む、個体において癌を治療するまたはその進行を遅延させるための方法が、本明細書で
提供される。また、個体に、有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗
体を投与することを含む、癌を有する個体において腫瘍細胞に対する免疫応答を増強する
方法も本明細書において提供される。例えば、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、
マクロファージおよび多核巨細胞を含む免疫細胞の、腫瘍組織への浸潤が挙げられる。別
の例については、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）
におけるＣＤ４５陽性リンパ球、ＣＤ３ε陽性リンパ球およびＣＤ８陽性Ｔリンパ球の増
大が挙げられる。

ヒトグリピカン３（ＧＰＣ３）と結合する抗体が、本明細書において提供される。「Ｇ
ＰＣ３」の別名として、ＳＧＢ、ＤＧＳＸ、ＭＸＲ７、ＳＤＹＳ、ＳＧＢＳ、ＯＣＩ−５
、ＳＧＢＳ１およびＧＴＲ２−２が挙げられる。用語「ＧＰＣ３」とは、本明細書におい
て、任意のヒト供給源由来の任意の天然ＧＰＣ３を指す。この用語は、「全長」およびプ
ロセシングされていないＧＰＣ３ならびに限定されるものではないが、ＧＰＣ３のＣ末端
ペプチドを含む、細胞におけるプロセシングに起因するＧＰＣ３の任意の形態（例えば、
成熟タンパク質）を包含する。この用語はまた、ＧＰＣ３の天然に存在する変異体および
アイソフォーム、例えば、スプライス変異体または対立遺伝子変異体を包含する。例えば
、ＧＰＣ３の説明および配列は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ
５１６５４．１で提供されている。

いくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、ＧＰＣ３と結合し、癌細胞の細胞増殖（
ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）または増殖（ｇｒｏｗｔｈ）を阻害する。いく
つかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、コドリツズマブ（ｃｏｄｒｉｔｕｚｕｍａｂ）
である。

いくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体としては、細胞傷害性物質とコンジュゲート
している１Ｇ１２抗体（ＷＯ２００３／１００４２９）（ＢｉｏＭｏｓａｉｃｓ Ｉｎｃ
．によってカタログ番号Ｂ０１３４Ｒの下で販売される）を含む抗体−薬物コンジュゲー
ト（ＡＤＣ）（ＷＯ２００７／１３７１７０）を挙げることができる。

いくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、ＷＯ２００６／００６６９３またはＷＯ
２００７／０４７２９１に記載されたヒト化抗ＧＰＣ３抗体である。

いくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、ＷＯ２００６／００６６９３またはＷＯ
２００９／０４１０６２に記載されたヒト化抗ＧＰＣ３抗体を含む。いくつかの実施形態
では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含むヒト化抗ＧＰＣ３抗体が提供され、ここで、
（ａ）重鎖は、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含み、さらに
（ｉ）ＨＶＲ−Ｈ１配列は、ＤＹＳＭＨ（配列番号３４）であり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ２配列は、ＷＩＮＴＥＴＧＥＰＴＹＡＤＤＦＫＧ（配列番号３５
）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ３配列は、ＬＹ（配列番号３６）であり、
（ｂ）軽鎖は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含み、さらに
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１配列は、ＫＳＳＱＳＬＬＨＳＤＧＫＴＦＬＮ（配列番号３７）で
あり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２配列は、ＬＶＳＲＬＤＳ（配列番号３８）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３配列は、ＣＱＧＴＨＦＰＲＴ（配列番号３９）である。
特定の態様では、抗ＧＰＣ３抗体は、ヒト化されている。ヒト化抗ＧＰＣ３抗体は、ヒ
ト化の鋳型として、配列番号４０によって表される重鎖フレームワーク配列または配列番
号４１によって表される軽鎖フレームワーク配列に対して高い配列同一性を有する適切に
選択されたヒトフレームワーク配列を使用して調製され得る。

いくつかの実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む抗ＧＰＣ３キメラ抗体ま
たはヒト化抗ＧＰＣ３抗体が本明細書において提供され、ここで、
（ａ）重鎖は、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含み、さらに
（ｉ）ＨＶＲ−Ｈ１配列は、ＤＹＥＭＨ（配列番号４２）であり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ２配列は、ＡＬＤＰＫＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号４３
）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ３配列は、ＦＹＳＹＴＹ（配列番号４４）であり、
（ｂ）軽鎖は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含み、さらに、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１配列は、ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＮＲＮＴＹＬＨ（配列番号４５）で
あり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２配列は、ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号４６）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３配列は、ＳＱＮＴＨＶＰＰＴ（配列番号４７）である。
ヒト化抗ＧＰＣ３抗体は、ヒト化の鋳型として、配列番号４８によって表される重鎖フ
レームワーク配列または配列番号４９によって表される軽鎖フレームワーク配列に対して
高い配列同一性を有する適切に選択されたヒトフレームワーク配列を使用して調製され得
る。

さらなる実施形態では、第２の抗体が結合し得るエピトープと結合可能であり、前記の
第２の抗体が、
重鎖および軽鎖可変領域配列を含み、ここで、
（ａ）重鎖は、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含み、さらに
（ｉ）ＨＶＲ−Ｈ１配列は、ＤＹＥＭＨ（配列番号４２）であり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ２配列は、ＡＬＤＰＫＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号４３
）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ３配列は、ＦＹＳＹＴＹ（配列番号４４）であり、
（ｂ）軽鎖は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含み、さらに、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１配列は、ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＮＲＮＴＹＬＨ（配列番号４５）で
あり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２配列は、ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号４６）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３配列は、ＳＱＮＴＨＶＰＰＴ（配列番号４７）である、
ヒト化抗ＧＰＣ３抗体が、本明細書において提供される。

さらなる実施形態では、配列番号５０によって表される重鎖可変領域の群から選択され
る重鎖可変領域および配列番号５１によって表される軽鎖可変領域を含むヒト化抗ＧＰＣ
３抗体が提供される。さらなる代替非制限態様では、配列番号５０によって表される重鎖
可変領域の群から選択される重鎖可変領域および配列番号５２によって表される軽鎖可変
領域の群から選択される軽鎖可変領域を含むヒト化抗ＧＰＣ３抗体が提供される。

さらなる実施形態では、配列番号５３によって表される重鎖可変領域および配列番号５
４によって表される軽鎖可変領域を含むヒト化抗ＧＰＣ３抗体が提供される。

本発明の抗ＧＰＣ３抗体の代替の例として、細胞傷害性活性を有する抗ＧＰＣ３抗体が
挙げられる。本発明では、細胞傷害性活性の限定されない例として、抗体依存性細胞媒介
性細胞傷害性または抗体依存性細胞性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）活性、補体依存性細胞傷害
性（ＣＤＣ）活性およびＴ細胞をベースとする細胞傷害性活性が挙げられる。本発明では
、ＣＤＣ活性は、補体系によって引き起こされる細胞傷害性活性を意味する。他方、ＡＤ
ＣＣ活性は、標的細胞の細胞膜上に発現された膜分子と結合可能な抗原結合ドメインを含
む抗原結合分子のＦｃ領域との、免疫細胞上に発現されたＦｃγ受容体を介した免疫細胞
の結合によって、例えば、免疫細胞によって標的細胞を損傷する活性を意味する。対象の
抗原結合分子が、ＡＤＣＣ活性を有するか、またはＣＤＣ活性を有するか否かは、当技術
分野で公知の方法によって決定され得る（例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ
ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， Ｃｈａｐｔｅｒ ７． Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ ｓ
ｔｕｄｉｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎｓ、Ｃｏｌｉｇａｎ等．， ｅｄ． （１９９３））。

いくつかの実施形態では、本発明の抗ＧＰＣ３抗体の代替の例として、細胞傷害性物質
とコンジュゲートしている抗ＧＰＣ３抗体が挙げられる。このような抗ＧＰＣ３抗体−薬
物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、例えば、ＷＯ２００７／１３７１７０において具体的に
開示されているが、本発明のコンジュゲートは、そこに記載されるものに限定されない。
具体的には、細胞傷害性物質は、以下に列挙された化学療法薬のいずれかであり得るか、
またはＡｌｌｅｙ等（Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｃｈｅｍ． Ｂｉｏｌ． （２０１０）
１４、５２９−５３７）もしくはＷＯ２００９／１４０２４２において開示される化合
物であり得る。抗原−結合分子は、適切なリンカーなどを介してこれらの化合物とコンジ
ュゲートしている。

いくつかの実施形態では、本発明の抗ＧＰＣ３抗体の代替の例として、Ｆｃγ受容体に
対する天然ヒトＩｇＧのＦｃ領域の結合活性よりも高い、Ｆｃγ受容体に対する結合活性
を有するＦｃγＲ結合が改変されたＦｃ領域を含む抗ＧＰＣ３抗体が挙げられる。改変は
、得られたＦｃ領域が、Ｆｃγ受容体に対する天然ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域の結合活性より
も高い、Ｆｃγ受容体に対する結合活性を有する限り、任意の位置でのアミノ酸修飾を含
み得る。抗原結合分子が、ヒトＦｃ領域としてヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含有する場合に
は、改変は、好ましくは、Ｆｃ領域が、位置２９７（ＥＵ番号付け）と結合している糖鎖
として、フコース含有糖鎖を含有することを可能にし、Ｆｃγ受容体に対する天然ヒトＩ
ｇＧ Ｆｃ領域の結合活性よりも高い、Ｆｃγ受容体に対する結合活性をもたらすために
有効である。このようなアミノ酸改変は、例えば、国際公開公報番号ＷＯ２００７／０２
４２４９、ＷＯ２００７／０２１８４１、ＷＯ２００６／０３１３７０、ＷＯ２０００／
０４２０７２、ＷＯ２００４／０２９２０７、ＷＯ２００４／０９９２４９、ＷＯ２００
６／１０５３３８、ＷＯ２００７／０４１６３５、ＷＯ２００８／０９２１１７、ＷＯ２
００５／０７０９６３、ＷＯ２００６／０２０１１４、ＷＯ２００６／１１６２６０、Ｗ
Ｏ２００６／０２３４０３およびＷＯ２０１４／０９７６４８において報告されている。

いくつかの実施態様では、本発明によって提供される抗ＧＰＣ３抗体中に含有されるＦ
ｃ領域としてはまた、高い割合のフコース欠損糖鎖がＦｃ領域と結合するか、または高い
割合の二分Ｎ−アセチルグルコサミンがＦｃ領域と結合する糖鎖の組成においてＦｃ領域
に加えられるように改変されたＦｃ領域を含み得る。ＷＯ２００６／０４６７５１および
ＷＯ２００９／０４１０６２は、高い割合のフコース欠損糖鎖がＦｃ領域と結合するか、
または高い割合の二分Ｎ−アセチルグルコサミンが、Ｆｃ領域と結合する糖鎖の組成にお
いてＦｃ領域に加えられるように改変されたＦｃ領域を含む抗ＧＰＣ３抗体の特定の実施
例を開示する。

いくつかの実施態様では、本発明において使用され得る抗ＧＰＣ３抗体として、アミノ
酸残基がその等電点（ｐＩ）を変更するように改変された抗ＧＰＣ３抗体が挙げられる。
抗ＧＰＣ３抗体における「アミノ酸残基の電荷の変更」の好ましい実施例は、ＷＯ２００
９／０４１０６２に記載されている。

いくつかの実施態様では、抗ＧＰＣ３抗体は、抗ＧＰＣ３抗体の一次構造を構成するポ
リペプチドの翻訳後修飾を受けている抗体の修飾された形態を含む。ポリペプチドの翻訳
後修飾とは、ポリペプチド生合成の際に翻訳されたポリペプチドに与えられる化学修飾を
指す。例えば、Ｎ末端グルタミンのピログルタミル化によるピログルタミン酸への修飾を
受けている抗ＧＰＣ３抗体もまた、当然のことながら、本発明の抗ＧＰＣ３抗体中に含ま
れる。また、例えば、２個の硫黄原子間で形成される共有結合を意味する「ジスルフィド
結合」によって連結している重鎖および軽鎖または重鎖を含む翻訳後修飾された抗ＧＰＣ
３抗体も、本発明の抗ＧＰＣ３抗体中に含まれる。アミノ酸システイン中に含有されるチ
オール基は、ジスルフィド結合を形成し得るまたは第２のチオール基と架橋し得る。一般
に、ＩｇＧ分子において、ＣＨ１およびＣＬ領域は、ジスルフィド結合によって連結され
、重鎖を構成する２つのポリペプチドは、ＥＵ番号付けに基づいて位置２２６および２２
９のシステイン残基間のジスルフィド結合によって連結される。ジスルフィド結合による
このような連結を有する翻訳後修飾された抗ＧＰＣ３抗体もまた、本発明の抗ＧＰＣ３抗
体中に含まれる。

なおさらなる実施態様では、本明細書に記載される抗体のいずれかをコードする単離さ
れた核酸が提供される。いくつかの実施態様では、核酸は、これまでに記載された抗ＧＰ
Ｃ３抗体のいずれかをコードする核酸の発現に適したベクターをさらに含む。なおさらな
る特定の態様では、ベクターは、核酸の発現に適した宿主細胞中にある。なおさらなる特
定の態様では、宿主細胞は、真核細胞または原核細胞である。なおさらなる特定の態様で
は、真核細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞などの哺乳動物細胞である
。

抗体またはその抗原結合断片は、例えば、発現に適した形態のこれまでに記載された抗
ＧＰＣ３抗体または抗原結合断片のいずれかをコードする核酸を含有する宿主細胞を、こ
のような抗体または断片を製造するのに適した条件下で培養することおよび抗体または断
片を回収することを含むプロセスによって、当技術分野で公知の方法を使用して製造され
得る。

ＩＶ．抗体調製
本明細書に記載される抗体は、抗体を生成するために当該技術分野で利用可能な技術を
使用して調製され、その例示的な方法は、以下のセクションに、より詳細に記載されてい
る。

この抗体は、目的の抗原（即ち、ＰＤ−Ｌ１（例えばヒトＰＤ−Ｌ１）またはＧＰＣ３
（例えばヒトグリピカン３））に対するものである。好ましくは、この抗原は、生物学的
に重要なポリペプチドであり、障害に罹患している哺乳動物へのこの抗体の投与は、その
哺乳動物において治療的利益を生じ得る。

特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、≦１μＭ、≦１５０ｎＭ、≦１０
０ｎＭ、≦５０ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭまたは≦０
．００１ｎＭ（例えば、１０^-8Ｍ以下、例えば、１０^-8Ｍから１０^-13Ｍ、例えば、１０^-
9Ｍから１０^-13Ｍ）の解離定数（Ｋｄ）を有する。

一実施形態では、Ｋｄは、以下のアッセイによって記載されるように、Ｆａｂバージョ
ンの目的の抗体およびその抗原を用いて実施される放射標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）
によって測定される。抗原に対するＦａｂの溶液結合親和性は、標識されていない抗原の
滴定系列の存在下で、最小濃度の（¹²⁵Ｉ）標識された抗原によってＦａｂを平衡化し、
次いで、抗Ｆａｂ抗体でコートされたプレートを用いて結合した抗原を捕捉することによ
って測定される（例えば、Ｃｈｅｎ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５〜８８１
（１９９９）を参照のこと）。アッセイのための条件を確立するために、ＭＩＣＲＯＴＩ
ＴＥＲ（商標）マルチウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）が、５０
ｍＭ炭酸ナトリウム（ｐＨ９．６）中５μｇ／ｍｌの捕捉抗Ｆａｂ抗体（Ｃａｐｐｅｌ
Ｌａｂｓ）で一晩コートされ、引き続いて、室温（およそ２３℃）で２から５時間にわた
ってＰＢＳ中２％（ｗ／ｖ）のウシ血清アルブミンでブロッキングされる。非吸着剤プレ
ート（Ｎｕｎｃ＃２６９６２０）中で、１００ｐＭまたは２６ｐＭの［¹²⁵Ｉ］−抗原が
、目的のＦａｂの希釈系列と混合される。次いで、目的のＦａｂは、一晩インキュベート
される；しかし、このインキュベーションは、平衡化が達成されることを確実にするため
に、より長い期間（例えば、約６５時間）にわたって継続し得る。その後、この混合物は
、室温でのインキュベーション（例えば１時間にわたる）のために、捕捉プレートに移さ
れる。次いで、溶液が除去され、プレートが、ＰＢＳ中０．１％のポリソルベート２０（
ＴＷＥＥＮ−２０（商標））で８回洗浄される。プレートが乾燥したら、１５０μｌ／ウ
ェルの閃光物質（ＭＩＣＲＯＳＣＩＮＴ−２０（商標）；Ｐａｃｋａｒｄ）が添加され、
プレートは、ＴＯＰＣＯＵＮＴ（商標）ガンマカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ）で１０分間
計数される。最大結合の２０％以下を与える各Ｆａｂの濃度は、競合的結合アッセイにお
ける使用のために選択される。

別の実施形態によれば、Ｋｄは、約１０反応単位（ＲＵ）で、固定化されている抗原Ｃ
Ｍ５チップと共に２５℃でＢＩＡＣＯＲＥ（商標）−２０００またはＢＩＡＣＯＲＥ（商
標）−３０００（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）を使用する
表面プラズモン共鳴アッセイを使用して測定される。簡潔に述べると、カルボキシメチル
化デキストランバイオセンサーチップ（ＣＭ５、ＢＩＡＣＯＲＥ，Ｉｎｃ．）は、供給業
者の指示書に従ってＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミ
ド塩酸塩（ＥＤＣ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を用いて活性化され
る。抗原は、およそ１０反応単位（ＲＵ）のカップリングされたタンパク質を達成するた
めに、５μｌ／分の流速での注入前に、１０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ４．８で５μｇ／
ｍｌ（約０．２μＭ）に希釈される。抗原の注入後、１Ｍエタノールアミンが、未反応の
基をブロッキングするために注入される。反応速度論的な測定のため、０．０５％ポリソ
ルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（商標））界面活性剤を有するＰＢＳ（ＰＢＳＴ）中２
倍希釈系列のＦａｂ（０．７８ｎＭから５００ｎＭ）が、およそ２５μｌ／分の流速で２
５℃で注入される。会合速度（ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ）（ｋ_on）および解離
速度（ｋ_off）は、会合および解離センサーグラムを同時にフィットさせることによって
、単純な一対一Ｌａｎｇｍｕｉｒ結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（商標）Ｅｖａｌｕａｔｉ
ｏｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅバージョン３．２）を使用して計算される。平衡解離定数（Ｋｄ
）は、比ｋ_off／ｋ_onとして計算される。例えば、Ｃｈｅｎ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．
２９３：８６５〜８８１（１９９９）を参照のこと。会合速度（ｏｎ−ｒａｔｅ）が、上
記表面プラズモン共鳴アッセイによって１０⁶Ｍ^-1ｓ^-1を超える場合、この会合速度（ｏ
ｎ−ｒａｔｅ）は、ストップフロー搭載分光光度計（Ａｖｉｖ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ
）または撹拌キュベットを備えた８０００シリーズＳＬＭ−ＡＭＩＮＣＯ（商標）分光光
度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）などの分光計で測定した場合、漸増濃度の抗
原の存在下で、ＰＢＳ、ｐＨ７．２中の２０ｎＭ抗抗原抗体（Ｆａｂ形態）の、２５℃に
おける蛍光放出強度（励起＝２９５ｎｍ；放出＝３４０ｎｍ、１６ｎｍ帯域通過）におけ
る増加または減少を測定する蛍光消光技術を使用することによって、決定され得る。

（ｉ）抗原調製
可溶型抗原またはその断片は、他の分子にコンジュゲートされていてもよいが、抗体を
生成するための免疫原として使用され得る。膜貫通分子、例えば、受容体について、これ
らの断片（例えば、受容体の細胞外ドメイン）は、免疫原として使用され得る。あるいは
、膜貫通分子を発現する細胞が、免疫原として使用され得る。かかる細胞は、天然供給源
（例えば、癌細胞株）から誘導され得るか、または膜貫通分子を発現するように組換え技
術によって形質転換された細胞であり得る。抗体を調製するために有用な他の抗原および
その形態は、当業者に明らかである。

（ｉｉ）特定の抗体ベースの方法
ポリクローナル抗体は、好ましくは、適切な抗原およびアジュバントの複数回の皮下（
ｓｃ）または腹腔内（ｉｐ）注射によって、動物において惹起される。二官能性または誘
導体化剤、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル（システイン残
基を介したコンジュゲーション）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（リジン残基を介する
）、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、ＳＯＣｌ₂またはＲ¹Ｎ＝Ｃ＝ＮＲ、式中、Ｒお
よびＲ¹は、異なるアルキル基である、を使用して、免疫化される種において免疫原性で
あるタンパク質、例えば、キーホールリンペットヘモシアニン、血清アルブミン、ウシサ
イログロブリンまたはダイズトリプシン阻害因子に、適切な抗原をコンジュゲートさせる
ことが有用であり得る。

動物は、例えば、１００μｇまたは５μｇのタンパク質またはコンジュゲート（それぞ
れ、ウサギまたはマウスについて）を、３容積の完全フロイントアジュバントと組み合わ
せ、この溶液を複数の部位に皮内注射することによって、抗原、免疫原性コンジュゲート
または誘導体に対して免疫化される。１カ月後、動物は、完全フロイントアジュバント中
で、元の量の１／５から１／１０のペプチドまたはコンジュゲートにより、複数の部位に
おける皮下注射によって追加免疫される。７から１４日間後、動物は出血させられ、血清
が、抗体価についてアッセイされる。動物は、力価がプラトーになるまで追加免疫される
。好ましくは、この動物は、同じ抗原のコンジュゲートではあるが、異なるタンパク質に
および／または異なる架橋試薬を介してコンジュゲートされたコンジュゲートで、追加免
疫される。コンジュゲートは、タンパク質融合物として組換え細胞培養物中でも作製され
得る。また、凝集剤、例えばミョウバンが、免疫応答を増強するために適切に使用される
。

本発明のモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ等、Ｎａｔｕｒｅ、２５６：４９５（１
９７５）によって最初に記載され、例えば、Ｈｏｎｇｏ等、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ、１４（
３）：２５３〜２６０（１９９５）、Ｈａｒｌｏｗ等、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａ
ｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏ
ｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、２ｎｄ ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ等、Ｍｏ
ｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ
ｓ ５６３〜６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、Ｎ．Ｙ．、１９８１）、およびヒト−ヒトハイ
ブリドーマに関するＮｉ、Ｘｉａｎｄａｉ Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ、２６（４）：２６５〜
２６８（２００６）中にさらに記載されたハイブリドーマ法を使用して作製され得る。さ
らなる方法としては、例えば、ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒト天然Ｉｇ
Ｍ抗体の産生に関する米国特許第７，１８９，８２６号に記載される方法が挙げられる。
ヒトハイブリドーマテクノロジー（トリオーマテクノロジー）は、Ｖｏｌｌｍｅｒｓおよ
びＢｒａｎｄｌｅｉｎ、Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ、
２０（３）：９２７〜９３７（２００５）ならびにＶｏｌｌｍｅｒｓおよびＢｒａｎｄｌ
ｅｉｎ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ
ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２７（３）：１８５〜９１（
２００５）に記載されている。

種々の他のハイブリドーマ技術については、例えば、米国特許出願公開第２００６／２
５８８４１号；米国特許出願公開第２００６／１８３８８７号（完全ヒト抗体）、米国特
許出願公開第２００６／０５９５７５号；米国特許出願公開第２００５／２８７１４９号
；米国特許出願公開第２００５／１００５４６号；米国特許出願公開第２００５／０２６
２２９号；ならびに米国特許第７，０７８，４９２号および米国特許第７，１５３，５０
７号を参照のこと。ハイブリドーマ法を使用してモノクローナル抗体を産生するための例
示的なプロトコールは、以下に記載される。一実施形態では、マウスまたは他の適切な宿
主動物、例えば、ハムスターは、免疫化のために使用されるタンパク質に特異的に結合す
る抗体を産生するまたは産生することが可能なリンパ球を惹起するために免疫化される。
抗体は、本発明のポリペプチドまたはその断片、およびアジュバント、例えば、モノホス
ホリルリピドＡ（ＭＰＬ）／トレハロースジコリノミコラート（ＴＤＭ）（Ｒｉｂｉ Ｉ
ｍｍｕｎｏｃｈｅｍ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｉｎｃ．、Ｈａｍｉｌｔｏｎ、Ｍｏｎｔ．）の
複数回の皮下（ｓｃ）または腹腔内（ｉｐ）注射によって、動物において惹起される。本
発明のポリペプチド（例えば、抗原）またはその断片は、当該技術分野で周知の方法、例
えば組換え方法を使用して調製され得、そのうちいくつかは、本明細書にさらに記載され
る。免疫化した動物由来の血清が、抗抗原抗体についてアッセイされ、追加免疫が、投与
されてもよい。抗抗原抗体を産生する動物からリンパ球が単離される。あるいは、リンパ
球は、インビトロで免疫化され得る。

次いで、リンパ球は、ハイブリドーマ細胞を形成するために、適切な融剤、例えばポリ
エチレングリコールを使用して、骨髄腫細胞と融合される。例えば、Ｇｏｄｉｎｇ、Ｍｏ
ｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔ
ｉｃｅ、ｐｐ．５９〜１０３（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、１９８６）を参照のこと
。効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による抗体の安定な高レベル産生を支持し、
ＨＡＴ培地などの培地に対して感受性である骨髄腫細胞が、使用され得る。例示的な骨髄
腫細胞としては、マウス骨髄腫株、例えば、Ｓａｌｋ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌｌ
Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆ．ＵＳＡか
ら入手可能なＭＯＰＣ−２１およびＭＰＣ−１１マウス腫瘍由来のもの、およびアメリカ
ンタイプカルチャーコレクション、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、Ｍｄ．ＵＳＡから入手可能なＳ
Ｐ−２またはＸ６３−Ａｇ８−６５３細胞が挙げられるが、これらに限定されない。ヒト
骨髄腫およびマウス−ヒトヘテロ骨髄腫（ｈｅｔｅｒｏｍｙｅｌｏｍａ）細胞株もまた、
ヒトモノクローナル抗体の産生のために記載されている（Ｋｏｚｂｏｒ、Ｊ．Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ．、１３３：３００１（１９８４）；Ｂｒｏｄｅｕｒ等、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａ
ｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃ
ａｔｉｏｎｓ、ｐｐ．５１〜６３（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙ
ｏｒｋ、１９８７））。

こうして調製されたハイブリドーマ細胞は、適切な培地、例えば、未融合の親骨髄腫細
胞の増殖または生存を阻害する１または複数の物質を含む培地中で、播種および増殖され
る。例えば、親骨髄腫細胞が、酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェ
ラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠く場合、ハイブリドーマのための培地は、典型
的には、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の増殖を防止する物質、ヒポキサンチン、アミノプテリンお
よびチミジンを含む（ＨＡＴ培地）。好ましくは、無血清ハイブリドーマ細胞培養法は、
例えば、Ｅｖｅｎ等、Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、２４（３）、
１０５〜１０８（２００６）に記載されるように、動物由来の血清、例えば、ウシ胎児血
清の使用を低減させるために使用される。

ハイブリドーマ細胞培養物の生産性を改善するためのツールとしてのオリゴペプチドが
、Ｆｒａｎｅｋ、Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｒｅ
ｓｅａｒｃｈ、１１１〜１２２（２００５）に記載されている。具体的には、標準的な培
地は、特定のアミノ酸（アラニン、セリン、アスパラギン、プロリン）が、またはタンパ
ク質加水分解物画分が富化されており、アポトーシスは、３から６アミノ酸残基から構成
される合成オリゴペプチドによって顕著に抑制され得る。これらのペプチドは、ミリモル
またはそれより高い濃度で存在する。

ハイブリドーマ細胞が増殖している培地は、本発明の抗体に結合するモノクローナル抗
体の産生についてアッセイされ得る。ハイブリドーマ細胞によって産生されるモノクロー
ナル抗体の結合特異性は、免疫沈降法によって、またはインビトロ結合アッセイ、例えば
、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）もしくは酵素結合性免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）に
よって、決定され得る。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、スキャッチャード
解析によって決定され得る。例えば、Ｍｕｎｓｏｎ等、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１
０７：２２０（１９８０）を参照のこと。

所望の特異性、親和性および／または活性の抗体を産生するハイブリドーマ細胞が同定
された後、それらのクローンは、限界希釈手順によってサブクローニングされ得、標準的
な方法によって増殖され得る。例えば、Ｇｏｄｉｎｇ、上記を参照のこと。この目的のた
めに適切な培地には、例えば、Ｄ−ＭＥＭまたはＲＰＭＩ−１６４０培地が含まれる。さ
らに、ハイブリドーマ細胞は、動物において腹水腫瘍としてインビボで増殖され得る。こ
れらのサブクローンによって分泌されるモノクローナル抗体は、例えば、プロテインＡ−
セファロース、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析または
アフィニティークロマトグラフィーなどの従来の免疫グロブリン精製手順によって、培地
、腹水または血清から適切に分離される。ハイブリドーマ細胞からのタンパク質の単離の
ための１つの手順は、米国特許出願公開第２００５／１７６１２２号および米国特許第６
，９１９，４３６号に記載されている。この方法は、結合プロセスにおいて、最小の塩、
例えば、リオトロピックな塩を使用すること、および好ましくは、溶出プロセスにおいて
少量の有機溶媒もまた使用することを含む。

（ｉｉｉ）ライブラリー由来抗体
本発明の抗体は、所望の活性（単数または複数）を有する抗体についてコンビナトリア
ルライブラリーをスクリーニングすることによって単離され得る。例えば、種々の方法が
、ファージディスプレイライブラリーを生成し、所望の結合特性を有する抗体についてか
かるライブラリーをスクリーニングするために、当該技術分野で公知である。さらなる方
法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ等、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１〜３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ等編、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔ
ｏｔｏｗａ、ＮＪ、２００１）に概説され、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ等、Ｎａｔｕ
ｒｅ ３４８：５５２〜５５４；Ｃｌａｃｋｓｏｎ等、Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４〜
６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１〜５９７（
１９９２）；ＭａｒｋｓおよびＢｒａｄｂｕｒｙ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕ
ｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１６１〜１７５（Ｌｏ編、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、
Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ、２００３）；Ｓｉｄｈｕ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）
：２９９〜３１０（２００４）；Ｌｅｅ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０
７３〜１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃ
ｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７〜１２４７２（２００４）；ならびにＬｅｅ等
、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１−２）：１１９〜１３２（２００４
）にさらに記載されている。

特定のファージディスプレイ法では、ＶＨおよびＶＬ遺伝子のレパートリーは、ポリメ
ラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別々にクローニングされ、Ｗｉｎｔｅｒ等、Ａｎｎ．
Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１２：４３３〜４５５（１９９４）に記載されるように、抗
原結合ファージについて次いでスクリーニングされ得るファージライブラリーにおいてラ
ンダムに組換えられる。ファージは、典型的には、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片またはＦａ
ｂ断片のいずれかとして、抗体断片をディスプレイする。免疫化された供給源由来のライ
ブラリーは、ハイブリドーマを構築する必要なしに、免疫原に対して高親和性の抗体を提
供する。あるいは、ナイーブなレパートリーが、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ等、ＥＭＢＯ Ｊ、
１２：７２５〜７３４（１９９３）に記載されるように、いずれの免疫化もなしに、広範
な非自己およびまた自己抗原に対する抗体の単一供給源を提供するために、（例えば、ヒ
トから）クローニングされ得る。最後に、ナイーブなライブラリーは、Ｈｏｏｇｅｎｂｏ
ｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８１〜３８８（１９９２
）によって記載されるように、再編成されていないＶ遺伝子セグメントを幹細胞からクロ
ーニングし、高度に可変性のＣＤＲ３領域をコードし、再編成をインビトロで達成するた
めにランダム配列を含むＰＣＲプライマーを使用することによって、合成的にも作製され
得る。ヒト抗体ファージライブラリーを記載している特許公開には、例えば、以下が含ま
れる：米国特許第５，７５０，３７３号ならびに米国特許出願公開第２００５／００７９
５７４号、米国特許出願公開第２００５／０１１９４５５号、米国特許出願公開第２００
５／０２６６０００号、米国特許出願公開第２００７／０１１７１２６号、米国特許出願
公開第２００７／０１６０５９８号、米国特許出願公開第２００７／０２３７７６４号、
米国特許出願公開第２００７／０２９２９３６号および米国特許出願公開第２００９／０
００２３６０号。

ヒト抗体ライブラリーから単離された抗体または抗体断片は、本明細書で、ヒト抗体ま
たはヒト抗体断片とみなされる。

（ｉｖ）キメラ、ヒト化およびヒト抗体
特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、キメラ抗体である。特定のキメラ
抗体は、例えば、米国特許４，８１６，５６７号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎ等、Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８１：６８５１〜６８５５（１９８４））に記
載されている。１つの例では、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット
、ハムスター、ウサギ、または非ヒト霊長類、例えばサル由来の可変領域）およびヒト定
常領域を含む。さらなる一例では、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体のも
のから変化している「クラススイッチされた」抗体である。キメラ抗体には、その抗原結
合断片が含まれる。

特定の実施形態では、キメラ抗体はヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体は、親
非ヒト抗体の特異性および親和性を保持したまま、ヒトに対する免疫原性を低減させるた
めにヒト化される。一般に、ヒト化抗体は、ＨＶＲ、例えばＣＤＲ（またはその一部）が
非ヒト抗体に由来し、ＦＲ（またはその一部）がヒト抗体配列に由来する、１または複数
の可変ドメインを含む。ヒト化抗体は、ヒト定常領域の少なくとも一部分もまた含んでい
てもよい。一部の実施形態では、ヒト化抗体中のいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体の
特異性または親和性を回復させるまたは改善するために、非ヒト抗体（例えば、ＨＶＲ残
基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換される。

ヒト化抗体およびそれらを作製する方法は、例えば、ＡｌｍａｇｒｏおよびＦｒａｎｓ
ｓｏｎ、Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９〜１６３３（２００８）に概説され
、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ等、Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３〜３２９（１９８８）
；Ｑｕｅｅｎ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：１００２９
〜１００３３（１９８９）；米国特許第５，８２１，３３７号、米国特許第７，５２７，
７９１号、米国特許第６，９８２，３２１号および米国特許第７，０８７，４０９号；Ｋ
ａｓｈｍｉｒｉ等、Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：２５〜３４（２００５）（ＳＤＲ（ａ−ＣＤ
Ｒ）移植を記載している）；Ｐａｄｌａｎ、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９〜４
９８（１９９１）（「リサーフェイシング」を記載している）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ等
、Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：４３〜６０（２００５）（「ＦＲシャッフリング」を記載して
いる）；ならびにＯｓｂｏｕｒｎ等、Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：６１〜６８（２００５）お
よびＫｌｉｍｋａ等、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、８３：２５２〜２６０（２０００）（Ｆ
Ｒシャッフリングのための「ガイドされた選択」手法を記載している）にさらに記載され
ている。

ヒト化に使用され得るヒトフレームワーク領域には、特に限定されないが：「ベストフ
ィット」方法を使用して選択されたフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓ等 Ｊ．Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照のこと）；軽鎖または重鎖可変領域の
特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列由来のフレームワーク領域（例えば、
Ｃａｒｔｅｒ等 Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８９：４２８５（１
９９２）；およびＰｒｅｓｔａ等 Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ、１５１：２６２３（１９９３）
を参照のこと）；ヒト成熟（体細胞性に変異した）フレームワーク領域またはヒト生殖系
列フレームワーク領域（例えば、ＡｌｍａｇｒｏおよびＦｒａｎｓｓｏｎ、Ｆｒｏｎｔ．
Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９〜１６３３（２００８）を参照のこと）；ならびにＦＲラ
イブラリーをスクリーニングすることから誘導されたフレームワーク領域（例えば、Ｂａ
ｃａ等、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８〜１０６８４（１９９７）および
Ｒｏｓｏｋ等、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１〜２２６１８（１９９６）
を参照のこと）が挙げられる。

特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当
該技術分野で公知の種々の技術を使用して産生され得る。ヒト抗体は、ｖａｎ Ｄｉｊｋ
およびｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３
６８〜７４（２００１）ならびにＬｏｎｂｅｒｇ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
．２０：４５０〜４５９（２００８）に、一般に記載されている。

ヒト抗体は、抗原性曝露に応答して、ヒト可変領域を有するインタクトなヒト抗体また
はインタクトな抗体を産生するように改変されたトランスジェニック動物に免疫原を投与
することによって、調製され得る。かかる動物は、典型的には、ヒト免疫グロブリン遺伝
子座の全てまたは一部分を含み、これが、内因性の免疫グロブリン遺伝子座に置き換わっ
ているか、または染色体外に存在するか、もしくは動物の染色体中にランダムに組み込ま
れている。かかるトランスジェニックマウスでは、内因性の免疫グロブリン遺伝子座は、
一般に、不活性化されている。トランスジェニック動物からヒト抗体を取得するための方
法の概説については、Ｌｏｎｂｅｒｇ、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７〜１１
２５（２００５）を参照のこと。例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）テクノロジーを記
載している米国特許第６，０７５，１８１号および米国特許第６，１５０，５８４号；Ｈ
ＵＭＡＢ（登録商標）テクノロジーを記載している米国特許第５，７７０，４２９号；Ｋ
−Ｍ ＭＯＵＳＥ（登録商標）テクノロジーを記載している米国特許第７，０４１，８７
０号、およびＶＥＬＯＣＩＭＯＵＳＥ（登録商標）テクノロジーを記載している米国特許
出願公開第２００７／００６１９００号もまた参照のこと。かかる動物によって生成され
たインタクトな抗体由来のヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせる
ことによって、さらに改変され得る。

ヒト抗体は、ハイブリドーマベースの方法によっても作製され得る。ヒトモノクローナ
ル抗体の産生のためのヒト骨髄腫およびマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株は、記載されて
いる（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ、１３３：３００１（１９８４）；Ｂ
ｒｏｄｅｕｒ等、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔ
ｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、ｐｐ．５１〜６３（Ｍａｒｃ
ｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８７）；およびＢｏｅｒｎｅｒ
等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７：８６（１９９１）を参照のこと）。ヒトＢ細胞ハイ
ブリドーマテクノロジーにより生成されたヒト抗体は、Ｌｉ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａ
ｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１０３：３５５７〜３５６２（２００６）にも記載されている
。さらなる方法としては、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細
胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生を記載している）およびＮｉ、Ｘｉａｎ
ｄａｉ Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ、２６（４）：２６５〜２６８（２００６）（ヒト−ヒトハ
イブリドーマを記載している）に記載された方法が挙げられる。ヒトハイブリドーマテク
ノロジー（トリオーマテクノロジー）は、ＶｏｌｌｍｅｒｓおよびＢｒａｎｄｌｅｉｎ、
Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ、２０（３）：９２７〜９
３７（２００５）ならびにＶｏｌｌｍｅｒｓおよびＢｒａｎｄｌｅｉｎ、Ｍｅｔｈｏｄｓ
ａｎｄ Ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃ
ａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２７（３）：１８５〜９１（２００５）にも記載され
ている。

ヒト抗体は、ヒト由来のファージディスプレイライブラリーから選択されたＦｖクロー
ン可変ドメイン配列を単離することによっても生成され得る。次いで、かかる可変ドメイ
ン配列は、所望のヒト定常ドメインと組み合わされ得る。抗体ライブラリーからヒト抗体
を選択するための技術は、以下に記載される。

（ｖ）抗体断片
抗体断片は、伝統的手段、例えば酵素的消化によって、または組換え技術によって、生
成され得る。ある特定の状況では、抗体全体ではなく抗体断片を使用することに利点があ
る。より小さいサイズの断片は、迅速なクリアランスを可能にし、固形腫瘍への改善され
たアクセスをもたらし得る。特定の抗体断片の概説については、Ｈｕｄｓｏｎ等（２００
３）Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９〜１３４を参照のこと。

種々の技術が、抗体断片の産生のために開発されてきた。伝統的には、これらの断片は
、インタクトな抗体のタンパク質分解消化を介して誘導された（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔ
ｏ等、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ
ｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ２４：１０７〜１１７（１９９２）；およびＢｒｅｎｎａｎ等、Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ、２２９：８１（１９８５）を参照のこと）。しかし、これらの断片は、現
在、組換え宿主細胞によって直接産生され得る。Ｆａｂ、ＦｖおよびＳｃＦｖ抗体断片は
全て、Ｅ．ｃｏｌｉ中で発現され得、Ｅ．ｃｏｌｉから分泌され得、したがって、大量の
これらの断片の容易な産生を可能にする。抗体断片は、上で議論した抗体ファージライブ
ラリーから単離され得る。あるいは、Ｆａｂ’−ＳＨ断片は、Ｅ．ｃｏｌｉから直接回収
され得、Ｆ（ａｂ’）２断片を形成するために化学カップリングされ得る（Ｃａｒｔｅｒ
等、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：１６３〜１６７（１９９２））。別の手法に
よれば、Ｆ（ａｂ’）２断片は、組換え宿主細胞培養物から直接単離され得る。サルベー
ジ受容体結合エピトープ残基を含む、増加したインビボ半減期を有するＦａｂおよびＦ（
ａｂ’）２断片は、米国特許第５，８６９，０４６号に記載されている。抗体断片の産生
のための他の技術は、熟練の施術者に明らかである。特定の実施形態では、抗体は、単鎖
Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）である。ＷＯ９３／１６１８５；米国特許第５，５７１，８９４号
；および米国特許第５，５８７，４５８号を参照のこと。ＦｖおよびｓｃＦｖは、定常領
域を欠く、インタクトな結合部位を有する唯一の種である；したがって、これらは、イン
ビボでの使用の間の低減された非特異的結合に適切であり得る。ｓｃＦｖ融合タンパク質
は、ｓｃＦｖのアミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかにおいて、エフェクタータン
パク質の融合を生じるように、構築され得る。Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎ
ｇ、編Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ、上記を参照のこと。この抗体断片は、例えば、米国特許第
５，６４１，８７０号などに記載される、「直鎖状抗体」でもあり得る。かかる直鎖状抗
体は、単一特異性または二重特異性であり得る。

（ｖｉ）単一ドメイン抗体
一部の実施形態では、本発明の抗体は、単一ドメイン抗体である。単一ドメイン抗体は
、抗体の重鎖可変ドメインの全てもしくは一部分または軽鎖可変ドメインの全てもしくは
一部分を含む単一ポリペプチド鎖である。特定の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒ
ト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．、Ｗａｌｔｈａｍ、Ｍａｓｓ．
；例えば、米国特許第６，２４８，５１６号を参照のこと）。一実施形態では、単一ドメ
イン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全てまたは一部分からなる。

（ｖｉｉ）抗体変異体
一部の実施形態では、本明細書に記載される抗体のアミノ酸配列改変（複数可）が企図
される。例えば、抗体の結合親和性および／または他の生物特性を改善することが望まれ
得る。抗体のアミノ酸配列変異体は、抗体をコードするヌクレオチド配列中に適切な変化
を導入することによって、またはペプチド合成によって、調製され得る。かかる改変には
、例えば、抗体のアミノ酸配列からの残基の欠失、および／またはかかるアミノ酸配列中
への残基の挿入、および／またはかかるアミノ酸配列内の残基の置換が挙げられる。欠失
、挿入および置換の任意の組合せが、最終コンストラクトが所望の特性を有することを条
件として、最終コンストラクトに到達するために行われ得る。アミノ酸の変更は、配列が
作製された時点で、対象抗体アミノ酸配列中に導入され得る。

（ｖｉｉｉ）置換、挿入および欠失変異体
特定の実施形態では、１または複数のアミノ酸置換を有する抗体変異体が提供される。
置換変異導入のための目的の部位には、ＨＶＲおよびＦＲが含まれる。保存的置換は、表
１中に、「好ましい置換」の見出しの下に示される。より実質的な変化は、表１中に、「
例示的置換」の見出しの下に提供され、アミノ酸側鎖クラスを参照して以下にさらに記載
される。アミノ酸置換は、目的の抗体中に導入され得、産物が、所望の活性、例えば、保
持／改善された抗原結合、減少した免疫原性または改善されたＡＤＣＣもしくはＣＤＣに
ついてスクリーニングされ得る。

アミノ酸は、共通する側鎖特性に従ってグループ分けされ得る：
ａ．疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
ｂ．中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
ｃ．酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
ｄ．塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
ｅ．鎖配向に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
ｆ．芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。

非保存的置換は、これらのクラスのうち１つのメンバーを別のクラスに交換することを
伴う。

１つの型の置換変異体には、親抗体（例えば、ヒト化またはヒト抗体）の１または複数
の超可変領域残基を置換することが関与する。一般に、さらなる研究のために選択される
得られた変異体（複数可）は、親抗体と比較して、特定の生物特性（例えば、増加した親
和性、低減された免疫原性）における改変（modifications）（例えば、改善）を有し、
および／または親抗体の特定の生物特性を実質的に保持している。例示的な置換変異体は
、例えば、本明細書に記載されるものなどのファージディスプレイベースの親和性成熟技
術を使用して簡便に生成され得る、親和性成熟抗体である。簡潔に述べると、１または複
数のＨＶＲ残基が変異され、変異体抗体がファージ上にディスプレイされ、特定の生物活
性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。

変更(alterations)（例えば、置換）は、例えば、抗体親和性を改善するために、ＨＶ
Ｒ中に行われ得る。かかる変更は、ＨＶＲ「ホットスポット」、即ち、体細胞成熟プロセ
スの間に高頻度で変異を受けるコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈ
ｕｒｙ、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９〜１９６（２００８）を参
照のこと）、および／またはＳＤＲ（ａ−ＣＤＲ）において作製され得、得られた変異体
のＶＨまたはＶＬは、結合親和性について試験される。二次ライブラリーを構築しそこか
ら再選択することによる親和性成熟は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ等、Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１〜３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ等
編、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ、（２００１））中に記載されている
。親和性成熟の一部の実施形態では、多様性が、種々の方法のいずれか（例えば、エラー
プローンＰＣＲ、鎖シャッフリングまたはオリゴヌクレオチド特異的変異導入法）によっ
て、成熟のために選択された可変遺伝子中に導入される。次いで、二次ライブラリーが創
出される。次いで、このライブラリーは、所望の親和性を有する任意の抗体変異体を同定
するためにスクリーニングされる。多様性を導入するための別の方法には、いくつかのＨ
ＶＲ残基（例えば、一度に４−６残基）がランダム化される、ＨＶＲ特異的な手法を含む
。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異導入またはモデ
ル化を使用して、具体的に同定され得る。特に、ＣＤＲ−Ｈ３およびＣＤＲ−Ｌ３が標的
化される場合が多い。

特定の実施形態では、置換、挿入または欠失は、かかる変更が抗原に結合する抗体の能
力を実質的に低減させない限り、１または複数のＨＶＲ内で生じ得る。例えば、結合親和
性を実質的に低減させない保存的変更（例えば、本明細書で提供されるような保存的置換
）が、ＨＶＲ中に作製され得る。かかる変更は、ＨＶＲ「ホットスポット」またはＳＤＲ
の外側であり得る。上に提供される変異体ＶＨおよびＶＬ配列の特定の実施形態では、各
ＨＶＲのいずれかは未変更であるか、または１、２もしくは３以下のアミノ酸置換を含む
。

変異導入のために標的化され得る抗体の残基または領域の同定のための有用な方法は、
ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍおよびＷｅｌｌｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４４：１０８１
〜１０８５に記載されるように、「アラニンスキャニング変異導入法」と呼ばれる。この
方法では、抗体と抗原との相互作用が影響されるかどうかを決定するために、標的残基（
例えば、荷電残基、例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓおよびｇｌｕ）の残基また
は群が同定され、中性または負に荷電したアミノ酸（例えば、アラニンまたはポリアラニ
ン）によって置き換えられる。さらなる置換が、最初の置換に対する機能的感受性を示す
アミノ酸位置において導入され得る。あるいは、またはさらに、抗体と抗原との間の接触
点を同定するための抗原−抗体複合体の結晶構造。かかる接触残基および隣接残基は、置
換のための候補として、標的化または排除され得る。変異体は、それらが所望の特性を含
むかどうかを決定するために、スクリーニングされ得る。

アミノ酸配列挿入には、１残基から１００以上の残基を含むポリペプチドまでの長さの
範囲のアミノ末端および／またはカルボキシル末端融合、ならびに単一または複数のアミ
ノ酸残基の配列内挿入が含まれる。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を有す
る抗体が挙げられる。抗体分子の他の挿入変異体としては、酵素（例えば、ＡＤＥＰＴに
ついて）または抗体の血清半減期を増加させるポリペプチドへの、抗体のＮ末端またはＣ
末端への融合が挙げられる。

（ｉｘ）グリコシル化変異体
特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、抗体がグリコシル化される程度を
増加または減少させるように変更される。抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は
、１または複数のグリコシル化部位が創出または除去されるように、アミノ酸配列を変更
することによって、簡便に達成され得る。

抗体がＦｃ領域を含む場合、それに結合した炭水化物が変更され得る。哺乳動物細胞に
よって産生される天然抗体は、典型的には、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７に
Ｎ−結合によって一般に結合された、分枝状の二分岐オリゴ糖を含む。例えば、Ｗｒｉｇ
ｈｔ等 ＴＩＢＴＥＣＨ １５：２６〜３２（１９９７）を参照のこと。このオリゴ糖に
は、種々の炭水化物、例えば、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）
、ガラクトースおよびシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「ステム」中のＧｌｃＮ
Ａｃに結合したフコースが含まれ得る。一部の実施形態では、本発明の抗体中のオリゴ糖
の修飾は、特定の改善された特性を有する抗体変異体を創出するために、行われ得る。

一実施形態では、Ｆｃ領域を含む抗体変異体が提供され、ここで、Ｆｃ領域に結合した
炭水化物構造は、ＡＤＣＣ機能を改善し得るフコースが低減されている、またはフコース
を欠く。具体的には、野生型ＣＨＯ細胞において産生された同じ抗体上のフコースの量と
比較して低減されたフコースを有する抗体が、本明細書で企図される。即ち、これらは、
別のやり方で、天然ＣＨＯ細胞（例えば、天然グリコシル化パターンを生じるＣＨＯ細胞
、例えば、天然ＦＵＴ８遺伝子を含むＣＨＯ細胞）によって産生される場合に有するフコ
ースよりも低い量のフコースを有することによって特徴付けられる。特定の実施形態では
、この抗体は、その上のＮ−結合グリカンの約５０％、４０％、３０％、２０％、１０％
または５％未満がフコースを含む抗体である。例えば、かかる抗体中のフコースの量は、
１％から８０％まで、１％から６５％まで、５％から６５％まで、または２０％から４０
％までであり得る。特定の実施形態では、この抗体は、その上のＮ−結合グリカンのいず
れもがフコースを含まない抗体であり、即ち、ここで、この抗体は、完全にフコースがな
い、またはフコースを有さない、またはアフコシル化されている。フコースの量は、例え
ばＷＯ２００８／０７７５４６に記載されるように、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析によっ
て測定される場合、Ａｓｎ２９７に結合した全ての糖構造体（例えば、複合体、ハイブリ
ッドおよび高マンノース構造）の合計に対するＡｓｎ２９７における糖鎖内のフコースの
平均量を計算することによって、決定される。Ａｓｎ２９７とは、Ｆｃ領域中の約２９７
位（Ｆｃ領域残基のＥｕ番号付け）に位置するアスパラギン残基を指す；しかし、Ａｓｎ
２９７は、抗体における軽微な配列差異に起因して、２９７位の約±３アミノ酸上流また
は下流、即ち、２９４位と３００位との間にも位置し得る。かかるフコシル化変異体は、
改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。例えば、米国特許出願公開第２００３／０１５７１
０８号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）；米国特許出願公開第２００４／００９３６２１号（Ｋｙ
ｏｗａ Ｈａｋｋｏ Ｋｏｇｙｏ Ｃｏ．，Ｌｔｄ）を参照のこと。「脱フコシル化」ま
たは「フコース欠損」抗体変異体に関する刊行物の例には、以下が含まれる：ＵＳ２００
３／０１５７１０８；ＷＯ２０００／６１７３９；ＷＯ２００１／２９２４６；ＵＳ２０
０３／０１１５６１４；ＵＳ２００２／０１６４３２８；ＵＳ２００４／００９３６２１
；ＵＳ２００４／０１３２１４０；ＵＳ２００４／０１１０７０４；ＵＳ２００４／０１
１０２８２；ＵＳ２００４／０１０９８６５；ＷＯ２００３／０８５１１９；ＷＯ２００
３／０８４５７０；ＷＯ２００５／０３５５８６；ＷＯ２００５／０３５７７８；ＷＯ２
００５／０５３７４２；ＷＯ２００２／０３１１４０；Ｏｋａｚａｋｉ等 Ｊ．Ｍｏｌ．
Ｂｉｏｌ．３３６：１２３９〜１２４９（２００４）；Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ等
Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）。脱フコシル化抗体を産生す
ることが可能な細胞株の例としては、以下が挙げられる：タンパク質フコシル化が欠損し
たＬｅｃ１３ ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ等 Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ
．２４９：５３３〜５４５（１９８６）；米国特許公開第２００３／０１５７１０８号、
Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ；およびＷＯ２００４／０５６３１２、Ａｄａｍｓ等、特に、実施例１
１）、およびノックアウト細胞株、例えば、アルファ−１，６−フコシルトランスフェラ
ーゼ遺伝子、ＦＵＴ８ノックアウトＣＨＯ細胞（例えば、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ等
Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）；Ｋａｎｄａ，Ｙ．等、Ｂ
ｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．、９４（４）：６８０〜６８８（２００６）；およ
びＷＯ２００３／０８５１０７を参照のこと）。

抗体変異体には、例えば、抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃに
よって二分された、二分されたオリゴ糖が、さらに提供される。かかる抗体変異体は、低
減されたフコシル化および／または改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。かかる抗体変異
体の例は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ−Ｍａｉｒｅｔ等）；米国特
許第６，６０２，６８４号（Ｕｍａｎａ等）；米国特許出願公開第２００５／０１２３５
４６号（Ｕｍａｎａ等）、およびＦｅｒｒａｒａ等、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎ
ｄ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、９３（５）：８５１〜８６１（２００６）に記載さ
れている。Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖中に少なくとも１つのガラクトース残基を有する
抗体変異体もまた、提供される。かかる抗体変異体は、改善されたＣＤＣ機能を有し得る
。かかる抗体変異体は、例えば、ＷＯ１９９７／３００８７（Ｐａｔｅｌ等）；ＷＯ１９
９８／５８９６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）；およびＷＯ１９９９／２２７６４（Ｒａｊｕ，Ｓ
．）に記載されている。

特定の実施形態では、本明細書に記載されるＦｃ領域を含む抗体変異体は、ＦｃγＲＩ
ＩＩに結合することが可能である。特定の実施形態では、本明細書に記載されるＦｃ領域
を含む抗体変異体は、ヒトエフェクター細胞の存在下でＡＤＣＣ活性を有する、またはヒ
ト野生型ＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む他の点では同じ抗体と比較して、ヒトエフェクター細
胞の存在下で増加したＡＤＣＣ活性を有する。

（ｘ）Ｆｃ領域変異体
特定の実施形態では、１または複数のアミノ酸改変が、本明細書で提供される抗体のＦ
ｃ領域中に導入され得、それによって、Ｆｃ領域変異体を生成する。このＦｃ領域変異体
は、１または複数のアミノ酸位置においてアミノ酸改変（例えば、置換）を含むヒトＦｃ
領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４のＦｃ領域）を含
み得る。

特定の実施形態では、本発明は、いくつかの、しかし全てではないエフェクター機能を
有する抗体変異体を企図し、これにより、かかる抗体変異体は、インビボでの抗体の半減
期が重要であるが、特定のエフェクター機能（例えば、補体およびＡＤＣＣ）が不要また
は有害である応用のための、望ましい候補になる。インビトロおよび／またはインビボの
細胞傷害性アッセイが、ＣＤＣおよび／またはＡＤＣＣ活性の低減／枯渇を確認するため
に実施され得る。例えば、抗体が、ＦｃγＲ結合を欠く（したがって、ＡＤＣＣ活性を欠
く可能性が高い）が、ＦｃＲｎ結合能を保持することを確実にするために、Ｆｃ受容体（
ＦｃＲ）結合アッセイが実施され得る。ＡＤＣＣを媒介するための初代細胞、ＮＫ細胞は
、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現するが、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩおよびＦｃγＲ
ＩＩＩを発現する。造血細胞上でのＦｃＲ発現は、ＲａｖｅｔｃｈおよびＫｉｎｅｔ、Ａ
ｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７〜４９２（１９９１）のｐ４６４の表３に
まとめられている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの非
限定的な例は、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．等
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８３：７０５９〜７０６３（１９
８６）を参照のこと）およびＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：１４９９〜１５０２（１９８５）；米国特許第５，８２１，
３３７号（Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ，Ｍ．等、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６６：１３５１〜１
３６１（１９８７）を参照のこと）に記載されている。あるいは、非放射性アッセイ方法
が使用され得る（例えば、フローサイトメトリー用のＡＣＴＩ（商標）非放射性の細胞傷
害性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、
ＣＡ；およびＣｙｔｏＴｏｘ ９６（商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇ
ａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を参照のこと）。かかるアッセイのために有用なエフェクタ
ー細胞には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が含まれ
る。あるいは、またはさらに、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ等
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９５：６５２〜６５６（１９９８）
に開示されるものなどの動物モデルにおいて、インビボで評価され得る。Ｃ１ｑ結合アッ
セイもまた、抗体がＣ１ｑを結合することができず、したがってＣＤＣ活性を欠くことを
確認するために、実施され得る。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９およびＷＯ２００
５／１００４０２におけるＣ１ｑおよびＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照のこと。補体活性化
を評価するために、ＣＤＣアッセイが実施され得る（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔ
ｏｒｏ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０２：１６３（１９９６）；Ｃｒａ
ｇｇ，Ｍ．Ｓ．等、Ｂｌｏｏｄ １０１：１０４５〜１０５２（２００３）；ならびにＣ
ｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．およびＭ．Ｊ．Ｇｌｅｎｎｉｅ、Ｂｌｏｏｄ １０３：２７３８〜２
７４３（２００４）を参照のこと）。ＦｃＲｎ結合およびインビボクリアランス／半減期
の決定もまた、当該技術分野で公知の方法を使用して実施され得る（例えば、Ｐｅｔｋｏ
ｖａ，Ｓ．Ｂ．等、Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８（１２）：１７５９〜１７６９（
２００６）を参照のこと）。

低減されたエフェクター機能を有する抗体には、Ｆｃ領域の残基２３８、２６５、２６
９、２７０、２９７、３２７および３２９のうち１または複数の置換を有するものが含ま
れる（米国特許第６，７３７，０５６号）。かかるＦｃ変異体には、残基２６５および２
９７のアラニンへの置換を有するいわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異体を含む、アミノ酸位置
２６５、２６９、２７０、２９７および３２７のうち２つ以上において置換を有するＦｃ
変異体が含まれる（米国特許第７，３３２，５８１号）。

ＦｃＲへの改善または減退された結合を有する特定の抗体変異体が記載されている（例
えば、米国特許６，７３７，０５６号；ＷＯ２００４／０５６３１２およびＳｈｉｅｌｄ
ｓ等、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１〜６６０４（２００１）を参照のこ
と）。

特定の実施形態では、抗体変異体は、ＡＤＣＣを改善する１または複数のアミノ酸置換
、例えば、Ｆｃ領域の２９８位、３３３位および／または３３４位（残基のＥＵ番号付け
）における置換を有するＦｃ領域を含む。例示的な一実施形態では、そのＦｃ領域中に以
下のアミノ酸置換を含む抗体：Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３ＡおよびＫ３３４Ａ。

一部の実施形態では、変更された（即ち、改善された、または減退された、のいずれか
の）Ｃ１ｑ結合および／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を生じる変更が、例えば、
米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ９９／５１６４２およびＩｄｕｓｏｇｉｅ等 Ｊ
．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８〜４１８４（２０００）に記載されるように、Ｆｃ
領域中になされる。

増加した半減期、および胎児への母体ＩｇＧの移行を担う新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ
）（Ｇｕｙｅｒ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）およびＫｉｍ等、
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））に対する改善された結合を有する抗体
は、ＵＳ２００５／００１４９３４号（Ｈｉｎｔｏｎ等）に記載されている。これらの抗
体は、その中にＦｃＲｎへのＦｃ領域の結合を改善する１または複数の置換を有するＦｃ
領域を含む。かかるＦｃ変異体には、Ｆｃ領域残基：２３８、２５６、２６５、２７２、
２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、
３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４または４３４のうち１または
複数における置換、例えば、Ｆｃ領域残基４３４の置換を有するものが含まれる（米国特
許第７，３７１，８２６号）。Ｆｃ領域変異体の他の例については、Ｄｕｎｃａｎおよび
Ｗｉｎｔｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ ３２２：７３８〜４０（１９８８）；米国特許５，６４８
，２６０号；米国特許５，６２４，８２１号；ならびにＷＯ９４／２９３５１もまた参照
のこと。

（ｘｉ）抗体誘導体
本発明の抗体は、当該技術分野で公知であり、容易に入手可能なさらなる非タンパク質
性部分を含むように、さらに改変され得る。特定の実施形態では、抗体の誘導体化に適切
な部分は、水溶性ポリマーである。水溶性ポリマーの非限定的な例としては、特に限定さ
れないが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコ
ールの共重合体、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、
ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキサン
、エチレン／無水マレイン酸共重合体、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダム共重
合体のいずれか）、およびデキストランまたはポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレ
ングリコール、プロプロピレングリコール（ｐｒｏｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）
ホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシド共重合体、ポリオキシエチル
化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合
物が挙げられる。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性
に起因して、製造における利点を有し得る。このポリマーは、任意の分子量のものであり
得、分枝状または非分枝状であり得る。抗体に結合したポリマーの数は、変動し得、１つ
よりも多いポリマーが結合している場合、それらは、同じまたは異なる分子であり得る。
一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数および／または型は、特に限定されないが、
改善すべき抗体の特定の特性または機能、抗体誘導体が規定された条件下で療法に使用さ
れるかどうかなどを含む検討に基づいて、決定され得る。

（ｘｉｉ）ベクター、宿主細胞および組換え方法
抗体は、組換え方法を使用しても産生され得る。抗抗原抗体の組換え産生のために、抗
体をコードする核酸が単離され、さらなるクローニング（ＤＮＡの増幅）または発現のた
めに、複製可能なベクター中に挿入される。抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を使
用して（例えば、抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することが可
能なオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）容易に単離および配列決定さ
れ得る。多くのベクターが利用可能である。ベクター成分としては、一般に、特に限定さ
れないが、シグナル配列、複製開始点、１または複数のマーカー遺伝子、エンハンサーエ
レメント、プロモーターおよび転写終結配列のうち１または複数が挙げられる。

（ａ）シグナル配列成分
本発明の抗体は、直接組換え産生され得るだけでなく、異種ポリペプチドとの融合ポリ
ペプチドとしても、産生され得、異種ポリペプチドは、好ましくはシグナル配列または成
熟タンパク質もしくはポリペプチドのＮ末端において特異的切断部位を有する他のポリペ
プチドである。選択された異種シグナル配列は、好ましくは、宿主細胞によって認識およ
びプロセシングされる（例えば、シグナルペプチターゼによって切断される）シグナル配
列である。天然抗体シグナル配列を認識およびプロセシングしない原核宿主細胞のために
、このシグナル配列は、例えば、アルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、ｌｐｐまた
は熱安定性エンテロトキシンＩＩリーダーの群から選択される原核生物シグナル配列によ
って置換される。酵母分泌のために、天然シグナル配列は、例えば、酵母インベルターゼ
リーダー、因子リーダー（ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓおよびＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅ
ｓのα−因子リーダーを含む）、もしくは酸性ホスファターゼリーダー、Ｃ．ａｌｂｉｃ
ａｎｓグルコアミラーゼリーダー、またはＷＯ９０／１３６４６に記載されるシグナルに
よって、置換され得る。哺乳動物細胞発現では、哺乳動物シグナル配列ならびにウイルス
分泌リーダー、例えば、単純ヘルペスｇＤシグナルが、利用可能である。

（ｂ）複製開始点
発現およびクローニングベクターの両方が、１または複数の選択された宿主細胞におい
てベクターが複製するのを可能にする核酸配列を含む。一般に、クローニングベクターで
は、この配列は、宿主染色体ＤＮＡとは独立してベクターが複製するのを可能にするもの
であり、複製開始点または自律的に複製する配列を含む。かかる配列は、種々の細菌、酵
母およびウイルスについて周知である。プラスミドｐＢＲ３２２由来の複製開始点は、ほ
とんどのグラム陰性細菌に適切であり、２μプラスミド開始点は、酵母に適切であり、種
々のウイルス開始点（ＳＶ４０、ポリオーマ、アデノウイルス、ＶＳＶまたはＢＰＶ）が
、哺乳動物細胞においてクローニングベクターとして有用である。一般に、複製開始点成
分は、哺乳動物発現ベクターには必要でない（ＳＶ４０開始点は、それが早期プロモータ
ーを含むことのみに起因して、典型的に使用され得る）。

（ｃ）選択遺伝子成分
発現およびクローニングベクターは、選択マーカーとも呼ばれる選択遺伝子を含み得る
。典型的な選択遺伝子は、（ａ）抗生物質もしくは他の毒素、例えば、アンピシリン、ネ
オマイシン、メトトレキサートもしくはテトラサイクリンに対する耐性を付与するタンパ
ク質、（ｂ）栄養要求性欠損を補完するタンパク質、または（ｃ）複合培地からは利用可
能でない必須栄養素を供給するタンパク質をコードする、例えば、Ｂａｃｉｌｌｉのため
のＤ−アラニンラセマーゼをコードする遺伝子。

選択スキームの一例は、宿主細胞の増殖を停止させる薬物を利用する。異種遺伝子で首
尾よく形質転換された細胞は、薬物耐性を付与するタンパク質を産生し、したがって、選
択レジメンを生き残る。かかる優性選択の例は、薬物ネオマイシン、ミコフェノール酸お
よびハイグロマイシンを使用する。

哺乳動物細胞に適切な選択マーカーの別の例は、抗体コード核酸を取り込む能力がある
細胞の同定を可能にするもの、例えば、ＤＨＦＲ、グルタミンシンテターゼ（ＧＳ）、チ
ミジンキナーゼ、メタロチオネイン−Ｉおよび−ＩＩ、好ましくは霊長類メタロチオネイ
ン遺伝子、アデノシンデアミナーゼ、オルニチンデカルボキシラーゼなどである。

例えば、ＤＨＦＲ遺伝子で形質転換された細胞は、ＤＨＦＲの競合的アンタゴニストで
あるメトトレキサート（Ｍｔｘ）を含む培地中で形質転換体を培養することによって同定
される。これらの条件下で、ＤＨＦＲ遺伝子は、任意の他の共形質転換された核酸と一緒
に増幅される。内因性のＤＨＦＲ活性が欠損したチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）
細胞株（例えば、ＡＴＣＣ ＣＲＬ−９０９６）が使用され得る。

あるいは、ＧＳ遺伝子で形質転換された細胞は、ＧＳの阻害剤であるＬ−メチオニンス
ルホキシイミン（Ｍｓｘ）を含む培地中で形質転換体を培養することによって同定される
。これらの条件下で、ＧＳ遺伝子は、任意の他の共形質転換された核酸と一緒に増幅され
る。ＧＳ選択／増幅系は、上記ＤＨＦＲ選択／増幅系と組み合わせて使用してもよい。

あるいは、目的の抗体、野生型ＤＨＦＲ遺伝子および別の選択マーカー、例えば、アミ
ノグリコシド３’−ホスホトランスフェラーゼ（ＡＰＨ）をコードするＤＮＡ配列で形質
転換または共形質転換された宿主細胞（特に、内因性のＤＨＦＲを含む野生型宿主）は、
その選択マーカーのための選択剤、例えば、アミノグリコシド抗生物質、例えば、カナマ
イシン、ネオマイシンまたはＧ４１８を含む培地中での細胞増殖によって選択され得る。
米国特許第４，９６５，１９９号を参照のこと。

酵母での使用に適切な選択遺伝子は、酵母プラスミドＹＲｐ７中に存在するｔｒｐ１遺
伝子である（Ｓｔｉｎｃｈｃｏｍｂ等、Ｎａｔｕｒｅ、２８２：３９（１９７９））。こ
のｔｒｐ１遺伝子は、トリプトファン中で増殖する能力を欠く酵母の変異体株、例えば、
ＡＴＣＣ番号４４０７６またはＰＥＰ４−１に対して選択マーカーを提供する。Ｊｏｎｅ
ｓ、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ、８５：１２（１９７７）。次いで、酵母宿主細胞ゲノム中のｔｒ
ｐ１病変の存在が、トリプトファンの非存在下での増殖によって形質転換を検出するため
の有効な環境を提供する。同様に、Ｌｅｕ２欠損酵母株（ＡＴＣＣ ２０，６２２または
３８，６２６）は、Ｌｅｕ２遺伝子を有する公知のプラスミドによって補完される。

さらに、１．６μｍ環状プラスミドｐＫＤ１由来のベクターは、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙ
ｃｅｓ酵母の形質転換に使用され得る。あるいは、組換え仔ウシキモシンの大規模産生の
ための発現系が、Ｋ．ｌａｃｔｉｓについて報告された。Ｖａｎ ｄｅｎ Ｂｅｒｇ、Ｂ
ｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、８：１３５（１９９０）。Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓの
工業株による成熟組換えヒト血清アルブミンの分泌のための安定な多コピー発現ベクター
もまた、開示されている。Ｆｌｅｅｒ等、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、９：９６８〜
９７５（１９９１）。

（ｄ）プロモーター成分
発現およびクローニングベクターは、一般に、宿主生物によって認識され、抗体をコー
ドする核酸に動作可能に連結された、プロモーターを含む。原核生物宿主との使用に適切
なプロモーターには、ｐｈｏＡプロモーター、β−ラクタマーゼおよびラクトースプロモ
ーター系、アルカリホスファターゼプロモーター、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモータ
ー系、ならびにハイブリッドプロモーター、例えば、ｔａｃプロモーターが含まれる。し
かし、他の公知の細菌プロモーターが適切である。細菌系における使用のためのプロモー
ターは、抗体をコードするＤＮＡに動作可能に連結されたシャインダルガノ（Ｓ．Ｄ．）
配列もまた含む。

プロモーター配列は、真核生物について公知である。事実上全ての真核生物遺伝子が、
転写が開始される部位からおよそ２５から３０塩基上流に位置するＡＴリッチ領域を有す
る。多くの遺伝子の転写の開始から７０から８０塩基上流に見出される別の配列は、ＣＮ
ＣＡＡＴ領域であり、ここで、Ｎは任意のヌクレオチドであり得る。ほとんどの真核生物
遺伝子の３’末端には、コード配列の３’末端へのポリＡテイルの付加のためのシグナル
であり得るＡＡＴＡＡＡ配列がある。これらの配列は全て、真核生物発現ベクター中に適
切に挿入される。

酵母宿主との使用に適切なプロモーター配列の例としては、３−ホスホグリセリン酸キ
ナーゼまたは他の解糖酵素、例えば、エノラーゼ、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒ
ドロゲナーゼ、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ホスホフルクトキナー
ゼ、グルコース−６−リン酸イソメラーゼ、３−ホスホグリセリン酸ムターゼ、ピルビン
酸キナーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ、ホスホグルコースイソメラーゼおよびグル
コキナーゼについてのプロモーターが挙げられる。

増殖条件によって制御される転写のさらなる利点を有する誘導性プロモーターである他
の酵母プロモーターは、アルコールデヒドロゲナーゼ２、イソチトクロムＣ（ｉｓｏｃｙ
ｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｃ）、酸性ホスファターゼ、窒素代謝と関連する分解性酵素、メタロ
チオネイン、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ならびにマルトースお
よびガラクトース利用を担う酵素についてのプロモーター領域である。酵母発現での使用
に適切なベクターおよびプロモーターは、ＥＰ７３，６５７にさらに記載されている。酵
母エンハンサーもまた、酵母プロモーターと共に有利に使用される。

哺乳動物宿主細胞におけるベクターからの抗体転写は、例えば、ウイルス、例えば、ポ
リオーマウイルス、鶏痘ウイルス、アデノウイルス（例えば、アデノウイルス２）、ウシ
パピローマウイルス、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型
肝炎ウイルス、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）のゲノムから、または異種哺乳動物プ
ロモーター、例えば、アクチンプロモーターもしくは免疫グロブリンプロモーターから、
熱ショックプロモーターから取得されたプロモーターによって制御され得るが、かかるプ
ロモーターが宿主細胞系と適合性であることを条件とする。

ＳＶ４０ウイルスの初期および後期プロモーターは、簡便には、ＳＶ４０ウイルス複製
開始点もまた含むＳＶ４０制限断片として取得される。ヒトサイトメガロウイルスの最初
期プロモーター（immediate early promoter）は、簡便には、ＨｉｎｄＩＩＩ Ｅ制限断
片として取得される。ウシパピローマウイルスをベクターとして使用して哺乳動物宿主に
おいてＤＮＡを発現させるための系は、米国特許第４，４１９，４４６号に開示されてい
る。この系の改変は、米国特許第４，６０１，９７８号に記載されている。単純ヘルペス
ウイルス由来のチミジンキナーゼプロモーターの制御下でのマウス細胞におけるヒトβ−
インターフェロンｃＤＮＡの発現については、Ｒｅｙｅｓ等、Ｎａｔｕｒｅ ２９７：５
９８〜６０１（１９８２）もまた参照のこと。あるいは、ラウス肉腫ウイルス長末端反復
が、プロモーターとして使用され得る。

（ｅ）エンハンサーエレメント成分
高等真核生物による本発明の抗体をコードするＤＮＡの転写は、ベクター中にエンハン
サー配列を挿入することによってしばしば増加される。多くのエンハンサー配列が、現在
、哺乳動物遺伝子から公知である（グロビン、エラスターゼ、アルブミン、α−フェトプ
ロテインおよびインスリン）。しかし、典型的には、真核細胞ウイルス由来のエンハンサ
ーを使用する。例としては、複製開始点（ｂｐ１００−２７０）の後ろ側のＳＶ４０エン
ハンサー、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製開始点の後ろ側の
ポリオーマエンハンサー、およびアデノウイルスエンハンサーが挙げあられる。真核性プ
ロモーターの活性化のための増強エレメントについては、Ｙａｎｉｖ、Ｎａｔｕｒｅ ２
９７：１７〜１８（１９８２）もまた参照のこと。エンハンサーは、抗体コード配列に対
して５’側または３’側の位置においてベクター中に継ぎ合わされ得るが、好ましくは、
プロモーターの５’側の部位に位置する。

（ｆ）転写終結成分
真核宿主細胞（酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト、または他の多細胞生物由来の有
核細胞）において使用される発現ベクターは、転写の終結およびｍＲＮＡの安定化に必要
な配列もまた含む。かかる配列は、真核生物またはウイルスのＤＮＡまたはｃＤＮＡの５
’非翻訳領域および時折３’非翻訳領域から、一般に入手可能である。これらの領域は、
抗体をコードするｍＲＮＡの非翻訳部分においてポリアデニル化断片として転写されるヌ
クレオチドセグメントを含む。１つの有用な転写終結成分は、ウシ成長ホルモンポリアデ
ニル化領域である。ＷＯ９４／１１０２６およびそこに開示された発現ベクターを参照の
こと。

（ｇ）宿主細胞の選択および形質転換
本明細書のベクター中のＤＮＡをクローニングまたは発現するために適切な宿主細胞は
、上記原核生物、酵母または高等真核生物細胞である。この目的のために適切な原核生物
には、真正細菌、例えば、グラム陰性またはグラム陽性生物、例えば、腸内細菌科、例え
ば、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｅｒ
ｗｉｎｉａ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、例えば、
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓｅｒｒａｔｉａ、例えば、Ｓｅｒｒ
ａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃａｎｓ、およびＳｈｉｇｅｌｌａ、ならびにＢａｃｉｌｌｉ、
例えば、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓおよびＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ（例えば、１９８
９年４月１２日に公開されたＤＤ２６６，７１０中に開示されたＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏ
ｒｍｉｓ ４１Ｐ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、例えば、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、お
よびＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓが含まれる。１つの好ましいＥ．ｃｏｌｉクローニング宿
主は、Ｅ．ｃｏｌｉ ２９４（ＡＴＣＣ ３１，４４６）であるが、他の株、例えば、Ｅ
．ｃｏｌｉ Ｂ、Ｅ．ｃｏｌｉ Ｘ１７７６（ＡＴＣＣ ３１，５３７）およびＥ．ｃｏ
ｌｉ Ｗ３１１０（ＡＴＣＣ ２７，３２５）が適切である。これらの例は、限定ではな
く例示である。

全長抗体、抗体融合タンパク質および抗体断片は、特に、グリコシル化およびＦｃエフ
ェクター機能が必要ない場合、例えば、治療抗体が、腫瘍細胞破壊においてそれ自体有効
性を示す細胞傷害性剤（例えば、毒素）にコンジュゲートされる場合、細菌において産生
され得る。全長抗体は、循環におけるより長い半減期を有する。Ｅ．ｃｏｌｉにおける産
生は、より速く、よりコスト効率が高い。細菌における抗体断片およびポリペプチドの発
現については、例えば、米国特許第５，６４８，２３７号（Ｃａｒｔｅｒ等）、米国特許
第５，７８９，１９９号（Ｊｏｌｙ等）、発現および分泌を最適化するための翻訳開始領
域（ＴＩＲ）およびシグナル配列を記載する米国特許第５，８４０，５２３号（Ｓｉｍｍ
ｏｎｓ等）を参照のこと。Ｅ．ｃｏｌｉにおける抗体断片の発現を記載する、Ｃｈａｒｌ
ｔｏｎ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ．２４８
（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ編、Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００３
）、ｐｐ．２４５〜２５４もまた参照のこと。発現後、抗体は、可溶型画分中のＥ．ｃｏ
ｌｉ細胞ペーストから単離され得、例えば、アイソタイプに依存して、プロテインＡまた
はＧカラムを介して精製され得る。例えばＣＨＯ細胞において発現された抗体を精製する
ためのプロセスと類似の最終精製が、実施され得る。

原核生物に加えて、真核微生物、例えば、糸状菌または酵母は、抗体コードベクターに
適切なクローニングまたは発現宿主である。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉ
ｓｉａｅまたは一般的なパン酵母は、下等真核宿主微生物の中で最も一般的に使用される
。しかし、いくつかの他の属、種および株が、一般に入手可能であり、本明細書で有用で
ある、例えば、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ；Ｋｌｕｙｖｅｒ
ｏｍｙｃｅｓ宿主、例えば、Ｋ．ｌａｃｔｉｓ、Ｋ．ｆｒａｇｉｌｉｓ（ＡＴＣＣ １２
，４２４）、Ｋ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ（ＡＴＣＣ １６，０４５）、Ｋ．ｗｉｃｋｅｒ
ａｍｉｉ（ＡＴＣＣ ２４，１７８）、Ｋ．ｗａｌｔｉｉ（ＡＴＣＣ ５６，５００）、
Ｋ．ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｒｕｍ（ＡＴＣＣ ３６，９０６）、Ｋ．ｔｈｅｒｍｏｔｏｌ
ｅｒａｎｓおよびＫ．ｍａｒｘｉａｎｕｓなど；ｙａｒｒｏｗｉａ（ＥＰ４０２，２２６
）；Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ（ＥＰ１８３，０７０）；Ｃａｎｄｉｄａ；Ｔｒｉ
ｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｉａ（ＥＰ２４４，２３４）；Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ ｃｒ
ａｓｓａ；Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ、例えば、Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ ｏ
ｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ；ならびに糸状菌、例えば、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ、Ｐｅｎｉｃ
ｉｌｌｉｕｍ、Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍなど、およびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ宿主、
例えば、Ａ．ｎｉｄｕｌａｎｓおよびＡ．ｎｉｇｅｒ。治療タンパク質の産生のための酵
母および糸状菌の使用を議論する概説については、例えば、Ｇｅｒｎｇｒｏｓｓ、Ｎａｔ
．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２２：１４０９〜１４１４（２００４）を参照のこと。

グリコシル化経路が「ヒト化」され、部分的にまたは完全にヒトのグリコシル化パター
ンを有する抗体の産生を生じる、特定の真菌および酵母株が選択され得る。例えば、Ｌｉ
等、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２４：２１０〜２１５（２００６）（Ｐｉｃｈｉａ ｐａ
ｓｔｏｒｉｓにおけるグリコシル化経路のヒト化を記載している）；およびＧｅｒｎｇｒ
ｏｓｓ等、上記を参照のこと。

グリコシル化された抗体の発現に適切な宿主細胞は、多細胞生物（無脊椎動物および脊
椎動物）からも誘導される。無脊椎動物細胞の例には、植物および昆虫細胞が含まれる。
多数のバキュロウイルス株および変種、ならびにＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅ
ｒｄａ（イモムシ）、Ａｅｄｅｓ ａｅｇｙｐｔｉ（蚊）、Ａｅｄｅｓ ａｌｂｏｐｉｃ
ｔｕｓ（蚊）、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ（ショウジョウバエ）
およびＢｏｍｂｙｘ ｍｏｒｉなどの宿主由来の対応する許容される昆虫宿主細胞が、同
定されている。トランスフェクションのための種々のウイルス株、例えば、Ａｕｔｏｇｒ
ａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ ＮＰＶのＬ−１変異体およびＢｏｍｂｙｘ ｍｏｒ
ｉ ＮＰＶのＢｍ−５株が、公に入手可能であり、かかるウイルスは、特にＳｐｏｄｏｐ
ｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞のトランスフェクションのために、本発明に従って
本明細書でウイルスとして使用され得る。

ワタ、トウモロコシ、ジャガイモ、ダイズ、ペチュニア、トマト、ウキクサ（Ｌｅｎｉ
ｎａｃｅａｅ）、アルファルファ（Ｍ．ｔｒｕｎｃａｔｕｌａ）およびタバコの植物細胞
培養物もまた、宿主として利用され得る。例えば、米国特許第５，９５９，１７７号、米
国特許第６，０４０，４９８号、米国特許第６，４２０，５４８号、米国特許第７，１２
５，９７８号および米国特許第６，４１７，４２９号（トランスジェニック植物において
抗体を産生するためのＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ（商標）テクノロジーを記載している）
を参照のこと。

脊椎動物細胞が宿主として使用され得、培養物（組織培養物）中での脊椎動物細胞の増
殖は、常套的手順になっている。有用な哺乳動物宿主細胞株の例は、ＳＶ４０によって形
質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣ ＣＲＬ １６５１）；ヒト胚性
腎臓株（懸濁培養での増殖のためにサブクローニングされた２９３または２９３細胞、Ｇ
ｒａｈａｍ等、Ｊ．Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７））；ベビーハムスター
腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ １０）；マウスセルトリ細胞（ＴＭ４、Ｍａｔｈ
ｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３〜２５１（１９８０））；サル腎臓細胞（
ＣＶ１ ＡＴＣＣ ＣＣＬ ７０）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６、Ａ
ＴＣＣ ＣＲＬ−１５８７）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ２）；
イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ３４）；バッファローラット肝臓細胞（Ｂ
ＲＬ ３Ａ、ＡＴＣＣ ＣＲＬ １４４２）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ ＣＣＬ
７５）；ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ Ｇ２、ＨＢ ８０６５）；マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ
０６０５６２、ＡＴＣＣ ＣＣＬ５１）；ＴＲＩ細胞（Ｍａｔｈｅｒ等、Ａｎｎａｌｓ
Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４〜６８（１９８２））；ＭＲＣ ５細胞；ＦＳ
４細胞；およびヒト肝癌株（Ｈｅｐ Ｇ２）である。他の有用な哺乳動物宿主細胞株には
、ＤＨＦＲ^-ＣＨＯ細胞（Ｕｒｌａｕｂ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ
ＳＡ ７７：４２１６（１９８０））を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞
；ならびに骨髄腫細胞株、例えば、ＮＳ０およびＳｐ２／０が含まれる。抗体産生に適切
な特定の哺乳動物宿主細胞株の概説については、例えば、ＹａｚａｋｉおよびＷｕ、Ｍｅ
ｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ
．Ｌｏ編、Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００３）、ｐｐ．２
５５〜２６８を参照のこと。

宿主細胞は、抗体産生のために上記発現またはクローニングベクターで形質転換され、
プロモーターを誘導するため、形質転換体を選択するため、または所望の配列をコードす
る遺伝子を増幅するために必要に応じて改変された従来の栄養培地中で培養される。

（ｈ）宿主細胞を培養する
本発明の抗体を産生するために使用される宿主細胞は、種々の培地中で培養され得る。
市販の培地、例えば、Ｈａｍ’ｓ Ｆ１０（Ｓｉｇｍａ）、最小必須培地（（ＭＥＭ）、
（Ｓｉｇｍａ）、ＲＰＭＩ−１６４０（Ｓｉｇｍａ）およびダルベッコ変法イーグル培地
（（ＤＭＥＭ）、Ｓｉｇｍａ）が、宿主細胞を培養するために適切である。さらに、Ｈａ
ｍ等、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．５８：４４（１９７９）、Ｂａｒｎｅｓ等、Ａｎａｌ．Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ．１０２：２５５（１９８０）、米国特許第４，７６７，７０４号；米国特許第
４，６５７，８６６号；米国特許第４，９２７，７６２号；米国特許第４，５６０，６５
５号；もしくは米国特許第５，１２２，４６９号；ＷＯ９０／０３４３０；ＷＯ８７／０
０１９５；または米国再特許第３０，９８５号に記載された培地のいずれかが、宿主細胞
のための培地として使用され得る。これらの培地のいずれかには、必要に応じて、ホルモ
ンおよび／または他の増殖因子（例えば、インスリン、トランスフェリンまたは上皮増殖
因子）、塩（例えば、塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウムおよびリン酸塩）、バ
ッファー（例えば、ＨＥＰＥＳ）、ヌクレオチド（例えば、アデノシンおよびチミジン）
、抗生物質（例えば、ゲンタマイシン（商標）薬物）、微量元素（マイクロモル範囲の最
終濃度で通常存在する無機化合物として規定される）、ならびにグルコースまたは等価な
エネルギー供給源が補充され得る。任意の他の必要なサプリメントもまた、当業者に公知
の適切な濃度で含まれ得る。培養条件、例えば、温度、ｐＨなどは、発現のために選択さ
れた宿主細胞と共に以前に使用されたものであり、当業者に明らかである。

（ｘｉｉｉ）抗体の精製
組換え技術を使用する場合、抗体は、細胞内で産生され得、細胞周辺腔中に、または培
地に直接分泌され得る。抗体が細胞内で産生される場合、第１の工程として、宿主細胞ま
たは溶解された断片のいずれかの特定のデブリが、例えば、遠心分離または限外濾過によ
って除去される。Ｃａｒｔｅｒ等、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：１６３〜１６
７（１９９２）は、Ｅ．ｃｏｌｉの細胞周辺腔に分泌される抗体を単離するための手順を
記載している。簡潔に述べると、細胞ペーストが、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤ
ＴＡおよびフェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）の存在下で、約３０分にわ
たって解凍される。細胞デブリは、遠心分離によって除去され得る。抗体が培地中に分泌
される場合、かかる発現系からの上清は、一般に、市販のタンパク質濃縮フィルター、例
えば、ＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外濾過ユニットを使
用して、最初に濃縮される。プロテアーゼ阻害剤、例えば、ＰＭＳＦが、タンパク質分解
を阻害するために、上述の工程のいずれか中に含まれ得、抗生物質が、偶発的な夾雑物の
増殖を防止するために含まれ得る。

細胞から調製された抗体組成物は、例えば、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィ
ー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析およびアフィニティークロ
マトグラフィーを使用して精製され得、アフィニティークロマトグラフィーが、典型的に
好ましい精製工程の１つの中にある。親和性リガンドとしてのプロテインＡの適切性は、
抗体中に存在する任意の免疫グロブリンＦｃドメインの種およびアイソタイプに依存する
。プロテインＡは、ヒトγ１、γ２またはγ４重鎖に基づく抗体を精製するために使用さ
れ得る（Ｌｉｎｄｍａｒｋ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．６２：１〜１３（１９８
３））。プロテインＧは、全てのマウスアイソタイプおよびヒトγ３に推奨される（Ｇｕ
ｓｓ等、ＥＭＢＯ Ｊ．５：１５６７１５７５（１９８６））。親和性リガンドが結合さ
れるマトリックスは、アガロースである場合が最も多いが、他のマトリックスが利用可能
である。機械的に安定なマトリックス、例えば、孔制御ガラスまたはポリ（スチレンジビ
ニル）ベンゼンは、アガロースを用いて達成できるものよりも、速い流速および短い処理
時間を可能にする。抗体がＣＨ３ドメインを含む場合、Ｂａｋｅｒｂｏｎｄ ＡＢＸ（商
標）樹脂（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ、Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ、Ｎ．Ｊ．）が、精製に有用
である。タンパク質精製のための他の技術、例えば、イオン交換カラム上での分画、エタ
ノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカ上でのクロマトグラフィー、陰イオンまたは陽イオン
交換樹脂（例えば、ポリアスパラギン酸カラム）上のヘパリンＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（商標
）クロマトグラフィー上でのクロマトグラフィー、クロマトフォーカシング、ＳＤＳ−Ｐ
ＡＧＥ、および硫酸アンモニウム沈殿もまた、回収される抗体に依存して利用可能である
。

一般に、研究、試験および臨床における使用のための抗体を調製するための種々の方法
は、上記方法と一致して、および／または目的の特定の抗体のために当業者に適切と思わ
れるように、当該技術分野で十分に確立されている。

Ｃ．生物学的に活性な抗体を選択する
上記のように産生された抗体は、治療展望から有益な特性を有する抗体を選択するため
、または抗体の生物活性を保持する製剤もしくは条件を選択するために、１または複数の
「生物活性」アッセイに供され得る。抗体は、その抗体が惹起された抗原に結合するその
能力について試験され得る。例えば、当該技術分野で公知の方法（例えば、ＥＬＩＳＡ、
ウェスタンブロットなど）が使用され得る。

例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体について、抗体の抗原結合特性は、ＰＤ−Ｌ１に結合する能
力を検出するアッセイにおいて評価され得る。一部の実施形態では、抗体の結合は、例え
ば、飽和結合；ＥＬＩＳＡ；および／または競合アッセイ（例えば、ＲＩＡ）によって決
定され得る。また、抗体は、例えば、治療剤としてのその効率を評価するために、他の生
物活性アッセイに供され得る。かかるアッセイは、当該技術分野で公知であり、標的抗原
および抗体についての目的の使用に依存する。例えば、抗体によるＰＤ−Ｌ１遮断の生物
学的効果は、例えば、米国特許第８，２１７，１４９号に記載されるように、ＣＤ８＋Ｔ
細胞、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）マウスモデルおよび／または同系腫瘍
モデルにおいて評価され得る。

目的の抗原上の特定のエピトープに結合する抗体（例えば、ＰＤ−Ｌ１への実施例の抗
ＰＤ−Ｌ１抗体の結合をブロックするもの）についてスクリーニングするために、常套的
クロスブロッキングアッセイ、例えば、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒ
ｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｅ
ｄ Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｄａｖｉｄ Ｌａｎｅ（１９８８）に記載されるものが、実
施され得る。あるいは、例えば、Ｃｈａｍｐｅ等、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：１
３８８〜１３９４（１９９５）に記載されるようなエピトープマッピングが、目的のエピ
トープに抗体が結合するかどうかを決定するために実施され得る。

Ｄ．医薬組成物および製剤
ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／または活性成分として本明細書に記載される抗
体（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体または抗ＧＰＣ３抗体）および薬学的に許容される担体を
含む医薬組成物および製剤もまた、本明細書で提供される。

本明細書に記載される「組合せ」とは、併用のための有効成分の組合せを指し、投与の
際に組合せ中に別個の物質が使用されるか、またはそれらが混合物（配合剤）として提供
される両方の様式を含む。

本明細書に記載されるような医薬組成物および製剤は、所望の程度の純度を有する活性
成分（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体および／または抗ＧＰＣ３抗体）を、１または複数の任
意選択の薬学的に許容される担体（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃ
ａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｏｓｏｌ，Ａ．編（１９８０））
と混合することによって、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で、調製され得る。薬学的に
許容される担体は、一般に、使用される投薬量および濃度においてレシピエントにとって
非毒性であり、特に限定されないが、バッファー、例えば、リン酸、クエン酸および他の
有機酸；アスコルビン酸およびメチオニンなどの抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシ
ルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；ヘキサメトニウムクロライド；ベンザルコニ
ウムクロライド；ベンゼトニウムクロライド；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコ
ール；アルキルパラベン、例えば、メチルまたはプロピルパラベン；カテコール；レゾル
シノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；およびｍ−クレゾール）；低分子量
（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチンまた
は免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば
、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニンまたはリジン；グルコ
ース、マンノースまたはデキストリンなどの、単糖類、二糖類および他の糖（炭水化物）
；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖類、例えば、ショ糖、マンニトール、トレハロース
またはソルビトール；塩形成対イオン、例えば、ナトリウム；金属錯体（例えば、Ｚｎ−
タンパク質錯体）；および／または非イオン性界面活性剤、例えば、ポリエチレングリコ
ール（ＰＥＧ）が挙げられる。本明細書の例示的な薬学的に許容される担体としては、間
質性薬物分散剤、例えば、可溶型中性−活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥ
ＧＰ）、例えば、ヒト可溶型ＰＨ−２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質、例えば、ｒＨｕ
ＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（商標）、Ｂａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎ
ｃ．）がさらに挙げられる。ｒＨｕＰＨ２０を含む、特定の例示的ｓＨＡＳＥＧＰおよび
使用の方法は、米国特許出願公開第２００５／０２６０１８６号および米国特許出願公開
第２００６／０１０４９６８号に記載されている。一態様では、ｓＨＡＳＥＧＰは、１ま
たは複数のさらなるグリコサミノグリカナーゼ、例えばコンドロイチナーゼと組み合わさ
れる。

例示的な凍結乾燥抗体製剤は、米国特許第６，２６７，９５８号に記載されている。水
性抗体製剤としては、米国特許第６，１７１，５８６号およびＷＯ２００６／０４４９０
８に記載されるものが挙げられ、後者の製剤は、ヒスチジンアセテートバッファーを含む
。一部の実施形態では、本明細書に記載される抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、約６０ｍｇ／ｍＬの
濃度の抗体、約２０ｍＭの濃度のヒスチジンアセテート、約１２０ｍＭの濃度のショ糖、
および０．０４％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０）を
含む製剤中にあり、この製剤は、約５．８のｐＨを有する。一部の実施形態では、本明細
書に記載される抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、約１２５ｍｇ／ｍＬの濃度の抗体、約２０ｍＭの濃
度のヒスチジンアセテート、約２４０ｍＭの濃度のショ糖、および０．０２％（ｗ／ｖ）
の濃度のポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０）を含む製剤中にあり、この製剤
は、約５．５のｐＨを有する。

本明細書の組成物および製剤は、治療されている特定の適応症にとって必要な場合には
１つよりも多い活性成分、好ましくは、互いに有害な影響を与えない相補的活性を有する
もの、もまた含み得る。かかる活性成分は、意図した目的のために有効な量で組合せ中に
適切に存在する。

活性成分は、例えば、コアセルベーション技術または界面重合によって調製されたマイ
クロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースもしくはゼラチン−マイ
クロカプセルおよびポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセル中に、コロイド状
薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、
ナノ粒子およびナノカプセル）中に、またはマクロエマルジョン中に、封入され得る。か
かる技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ
ｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｏｓｏｌ，Ａ．編（１９８０）に開示されている。

徐放性調製物が調製され得る。徐放性調製物の適切な例には、抗体を含む固体疎水性ポ
リマーの半透性マトリックスが含まれ、このマトリックスは、造形品、例えば、フィルム
またはマイクロカプセルの形態である。インビボ投与に使用される製剤は、一般に滅菌で
ある。無菌状態は、例えば、滅菌濾過膜を介した濾過によって、容易に達成され得る。

ＩＶ．治療の方法
有効量のヒトＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体を個体に投与するこ
とを含む、個体において癌を治療する、防止するまたはその進行を遅延させる方法が、本
明細書で提供される。一部の実施形態では、この治療は、治療の休止後に、個体において
持続性の応答をもたらす。本明細書に記載される方法は、増強された免疫原性が所望され
る状態を治療すること、例えば、癌の治療のために腫瘍免疫原性を増加させることにおけ
る使用であると分かり得る。有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗
体を個体に投与することを含む、癌を有する個体において腫瘍細胞に対する免疫応答を増
強する方法もまた、本明細書で提供される。例えば、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強と
して、マクロファージおよび多核巨細胞を含む免疫細胞の、腫瘍組織への浸潤が挙げられ
る。別の例については、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、腫瘍浸潤リンパ球（Ｔ
ＩＬ）におけるＣＤ４５陽性リンパ球、ＣＤ３ε陽性リンパ球およびＣＤ８陽性Ｔリンパ
球の増大が挙げられる。当該技術分野で公知のまたは本明細書に記載されるＰＤ−１系結
合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体のいずれかが、これらの方法において使用され得
る。

一部の実施形態では、この個体はヒトである。一部の実施形態では、この個体は、ＧＰ
Ｃ３陽性癌を有する。一部の実施形態では、ＧＰＣ３陽性癌は、肝癌、乳癌、肺癌、卵巣
癌、胃癌、膀胱癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結腸癌、腎臓癌、食道癌または前立腺癌である
。いくつかの実施態様では、この肝癌は、肝細胞癌腫である。一部の実施形態では、この
乳癌は、乳房癌または乳腺癌である。一部の実施形態では、この乳房癌は、浸潤腺管癌で
ある。一部の実施形態では、この肺癌は、肺腺癌である。一部の実施形態では、この結腸
癌は、結腸直腸腺癌である。一部の実施形態では、個体中の癌細胞は、ＰＤ−Ｌ１を発現
する。一部の実施形態では、個体中の癌細胞は、検出可能な（例えば、当該技術分野で公
知の方法を使用して検出可能な）レベルでＧＰＣ３タンパク質を発現する。

一部の実施形態では、この個体は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗
体との併用治療の前に、ＧＰＣ３標的療法で治療されている。一部の実施形態では、この
ＧＰＣ３標的療法は、１または複数の低分子、例えばソラフェニブによる治療を含む。

一部の実施形態では、本発明の併用療法は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗Ｇ
ＰＣ３抗体の投与を含む。このＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体は、
当該技術分野で公知の任意の適切な様式で投与され得る。例えば、このＰＤ−１系結合ア
ンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体は、連続的に（異なる時点で）または同時発生的に（
同時に）投与され得る。一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストは、抗
ＧＰＣ３抗体とは別々の組成物中にある。一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アン
タゴニストは、抗ＧＰＣ３抗体と同じ組成物中にある。

このＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体は、同じ投与経路または異な
る投与経路によって投与され得る。一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニ
ストは、静脈内で、筋肉内で、皮下で、局所で、経口で、経皮で、腹腔内で、眼窩内で、
移植により、吸入により、髄腔内で、脳室内でまたは鼻腔内で投与される。一部の実施形
態では、この抗ＧＰＣ３抗体は、静脈内で、筋肉内で、皮下で、局所で、経口で、経皮で
、腹腔内で、眼窩内で、移植により、吸入により、髄腔内で、脳室内でまたは鼻腔内で投
与される。有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体が、疾患の予防
または治療のために投与され得る。ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／または抗ＧＰ
Ｃ３抗体の適切な投薬量は、治療される疾患の型、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび
抗ＧＰＣ３抗体の型、疾患の重症度および過程、個体の臨床状態、個体の臨床歴および治
療に対する応答、ならびに主治医の裁量に基づいて決定され得る。

一般的な計画として、ヒトに投与される抗体の治療的有効量は、１回の投与によるもの
であれ複数回の投与によるものであれ、患者の体重１ｋｇ当たり約０．０１から約５０ｍ
ｇの範囲である。一部の実施形態では、使用される抗体は、例えば、毎日投与される約０
．０１から約４５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約３５
ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約２５ｍｇ／ｋｇ、約０
．０１から約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約１０
ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約５ｍｇ／ｋｇまたは約０．０１から約１ｍｇ／ｋｇである
。一部の実施形態では、この抗体は、１５ｍｇ／ｋｇで投与される。しかし、他の投薬レ
ジメンが有用であり得る。一実施形態では、本明細書に記載される抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、
２１日サイクルの１日目に、約１００ｍｇ、約２００ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ
、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、約７００ｍｇ、約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１００
０ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇまたは約１４００ｍｇの用量
でヒトに投与される。この用量は、点滴など、単一用量または複数用量（例えば、２また
は３用量）として投与され得る。併用治療で投与される抗体の用量は、単一治療と比較し
て低減され得る。この療法の進行は、従来の技術によって容易にモニタリングされる。

一部の実施形態では、これらの方法は、さらなる療法をさらに含み得る。このさらなる
療法は、放射線療法、手術（例えば、乳腺腫瘍摘出手術および乳房切除術）、化学療法、
遺伝子療法、ＤＮＡ療法、ウイルス療法、ＲＮＡ療法、免疫療法、骨髄移植、ナノ療法、
モノクローナル抗体療法、または上述の組合せであり得る。このさらなる療法は、アジュ
バントまたはネオアジュバント療法の形態であり得る。一部の実施形態では、このさらな
る療法は、低分子酵素阻害剤または抗転移剤の投与である。一部の実施形態では、このさ
らなる療法は、副作用制限剤（例えば、治療の副作用の発生および／または重症度を低下
させるための目的の薬剤、例えば、抗悪心剤など）の投与である。一部の実施形態では、
このさらなる療法は、放射線療法である。一部の実施形態では、このさらなる療法は、手
術である。一部の実施形態では、このさらなる療法は、放射線療法および手術の組合せで
ある。一部の実施形態では、このさらなる療法は、ガンマ照射である。一部の実施形態で
は、このさらなる療法は、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ｍＴＯＲ経路を標的化する療法、ＨＳＰ９
０阻害剤、チューブリン阻害剤、アポトーシス阻害剤および／または化学防御剤である。
このさらなる療法は、本明細書に記載される化学療法剤のうち１または複数であり得る。

Ｖ．製造品またはキット
本発明の別の一実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／または抗ＧＰＣ
３抗体を含む製造品またはキットが提供される。一部の実施形態では、この製造品または
キットは、個体において癌を治療するもしくはその進行を遅延させるため、または癌を有
する個体の腫瘍細胞に対する免疫応答を増強するために、抗ＧＰＣ３抗体と組み合わせて
ＰＤ−１系結合アンタゴニストを求めるための指示を含む添付文書をさらに含む。例えば
、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、マクロファージおよび多核巨細胞を含む免疫
細胞の、腫瘍組織への浸潤が挙げられる。別の例については、腫瘍細胞に対する免疫応答
の増強として、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）におけるＣＤ４５陽性リンパ球、ＣＤ３ε陽
性リンパ球およびＣＤ８陽性Ｔリンパ球の増大が挙げられる。本明細書に記載されるＰＤ
−１系結合アンタゴニストおよび／または抗ＧＰＣ３抗体のいずれかが、この製造品また
はキット中に含まれ得る。

一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体は、同
じ容器中または別々の容器中にある。適切な容器としては、例えば、ビン、バイアル、バ
ッグおよびシリンジが挙げられる。この容器は、種々の材料、例えば、ガラス、プラスチ
ック（例えば、ポリ塩化ビニルまたはポリオレフィン）または金属合金（例えば、ステン
レス鋼またはハステロイ）から形成され得る。一部の実施形態では、この容器は、製剤を
保持し、この容器上のまたはこの容器に関連したラベルが、使用のための指示を示し得る
。この製造品またはキットは、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針、シリンジおよ
び使用のための指示を伴う添付文書を含む、商業的および使用者の観点から望ましい他の
材料を、さらに含み得る。一部の実施形態では、この製造品は、別の薬剤（例えば、化学
療法剤および抗腫瘍剤）のうち１または複数をさらに含む。１または複数の薬剤に適切な
容器には、例えば、ビン、バイアル、バッグおよびシリンジが含まれる。

本明細書は、当業者が本発明を実施することを可能にするのに十分であるとみなされる
。本明細書に示され記載されたものに加えた、本発明の種々の改変は、上述の説明から当
業者に明らかとなり、添付の特許請求の範囲の範囲内である。本明細書で引用された全て
の刊行物、特許および特許出願は、全ての目的のために、その全内容が本明細書に出典明
示により援用される。

［実施例１］
ヒトグリピカン−３（ＧＰＣ３）を発現するマウス細胞株
マウス癌細胞株、Ｈｅｐａ１−６（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１８３０）およびＣＴ２
６（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−２６３８）を、ＦｕＧＥＮＥ６（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎ
ｏｓｔｉｃｓ Ｃｏｒｐ）を用いヒトＧＰＣ３発現ベクター、ｐＣＸＮＤ２／ｈＧＰＣ３
（ＦＬ）[Ishiguro T.等, Cancer Res. 2008; 68: 9832-9838]をトランスフェクトし、１
ｍｇ／ｍＬのＧ４１８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて選択した。Ｇ４１８の存在下で
も増殖した細胞を集め、限界希釈によってコロニーを単離した。抗ヒトＧＰＣ３抗体、Ｇ
Ｃ３３[Ishiguro T.等, Cancer Res. 2008; 68: 9832-9838]を用いたＦＡＣＳによってヒ
トＧＰＣ３の発現を確認した。代表的なコロニーを選択し、実験に使用した。

［実施例２］
ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６細胞株を用いたシンジェニックマウスモデルにお
ける抗ＧＰＣ３抗体の抗腫瘍活性
Ｈｅｐａ１−６／ｈＧＰＣ３細胞を、インキュベーター（３７℃および５％ ＣＯ２に
設定した）中で細胞培養フラスコを使用して培養した。細胞を、トリプシンを用いてフラ
スコから剥離し、１０％（ｖ／ｖ）ＦＢＳ、０．６ｍｇ／ｍＬのＧ４１８を含有するＤ
ＭＥＭを用いて洗浄した。次いで、細胞をＤ−ＭＥＭ（２×１０⁸個細胞／ｍＬ）に再懸
濁し、等容量のＭａｔｒｉｇｅｌを添加した。移植のための細胞濃度は、１×１０⁸個細
胞／ｍＬとした。細胞を、各Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌ
ａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｊａｐａｎ）の右側腹部に皮下接種した（１×１０⁷個細胞／
マウス）。ひとたび、触知できる腫瘍が確立されると、動物を、各群が試験開始時に同様
の平均腫瘍体積を有するように試験群にランダム化した。ＰＢＳに希釈した、１または５
ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３抗ヒトＧＰＣ３モノクローナル抗体［ＷＯ２００６／００６
６９３］のいずれかまたは溶媒対照としてのＰＢＳを、腫瘍接種後１４、２１および２８
日目に静脈内に注射した。マウスＧＣ３３は、溶媒対照と比較して、用量依存的に腫瘍増
殖の阻害を示した（図１）。

［実施例３］
ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６細胞株を用いたシンジェニックマウスモデルにお
いて抗ＧＰＣ３抗体によって誘導された病理学的変化
マウスＧＣ３３治療によるＨｅｐａ１−６腫瘍組織における変化を評価するために、マ
ウスＧＣ３３抗体または溶媒対照いずれかの単回注射から３または７日後のいずれかで単
離された腫瘍組織を、病理学的検査に使用した。腫瘍組織を４％パラホルムアルデヒド（
ＰＦＡ）によって固定し、ＡＭｅＸ法[Suzuki等, J Toxicol Sci. 2002; 27:165-172、Wa
tanabe等, J Toxicol Pathol. 2015; 28: 43-49]によってパラフィン中に包埋した。３マ
イクロメートルパラフィン切片を、ヘマトキシリンおよびエオシン（ＨＥ）を用いて、ま
たは免疫組織化学的（ＩＨＣ）に染色した。ＩＨＣ染色は、標識ストレプトアビジン−ビ
オチン（ＬＳＡＢ）法（ＲＴＵセイヨウワサビペルオキシダーゼストレプトアビジン）に
従って実施した。Ｆ４／８０に対する抗体（マウスマクロファージのマーカー抗原；Ａ３
−１、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）、ＰＤ−Ｌ１に対する抗体（マウスＢ７−Ｈ１／ＰＤ−Ｌ１
のマーカー抗原；ＡＦ１０１９、Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）を、一次抗体として使用した
。ペルオキシダーゼ−ジアミノベンジジン反応によって陽性シグナルを可視化し、切片は
ヘマトキシリンを用いて対比染色した。

マウスＧＣ３３注射によって、腫瘍組織の末梢領域における免疫細胞浸潤および腫瘍細
胞死を観察した。また、マウスＧＣ３３によって治療された腫瘍組織では、腫瘍細胞死が
観察された領域におけるＦ４／８０陽性マクロファージ細胞の浸潤の増大も観察されたが
、溶媒対照を用いた場合にはＦ４／８０陽性細胞は、主に、腫瘍組織における間質領域に
おいて観察された（図２Ａ）。その後、溶媒対照と比較して、特に、浸潤した免疫細胞で
、マウスＧＣ３３によってＰＤ−Ｌ１発現が増大され、これは、マウスＧＣ３３によって
抗腫瘍活性を抑制するようにＰＤ−Ｌ１が誘導され得ることを示唆した（図２Ｂ）。

［実施例４］
ヒトＧＰＣ３を発現するＣＴ２６細胞株を用いたシンジェニックマウスモデルにおける、
抗ＧＰＣ３抗体（ＧＣ３３）および抗ＰＤ−Ｌ１抗体（１０Ｆ．９Ｇ２）の併用における
抗腫瘍活性
マウスＣＴ２６／ｈＧＰＣ３モデルにおける抗ＧＰＣ３または抗ＰＤ−Ｌ１単独療法ま
たは併用の抗腫瘍活性を評価するために、１×１０⁶個のＣＴ２６／ｈＧＰＣ３細胞の皮
下接種後、３日目（早期治療モデル）または１５日目（確立されたモデル）のいずれかに
、マウスＧＣ３３抗体および／または５００μｇの抗マウスＰＤ−Ｌ１ラット抗体、１０
Ｆ．９Ｇ２（ＢｉｏＸＣｅｌｌから購入した）のいずれかを注射した。早期治療モデルで
は、５または２５ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３のいずれかを、３、６、１０および１３日
目に静脈内に注射し、５００μｇの抗ＰＤ−Ｌ１抗体、１０Ｆ．９Ｇ２を、単独または組
合せとして同一スケジュールで注射した。確立モデルでは、５または２５ｍｇ／ｋｇのマ
ウスＧＣ３３のいずれかを、１５および１８日目に静脈内に注射し、５００μｇの抗ＰＤ
−Ｌ１抗体、１０Ｆ．９Ｇ２を、単独または併用として同一スケジュールで注射した。

両モデルにおいて、２５ｍｇ／ｋｇのＧＣ３３および１０Ｆ．９Ｇ２の併用が、各単独
療法によるものと比較して最も強力な抗腫瘍活性を示した（図３および４）。

［実施例５］
ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６細胞株を用いたシンジェニックマウスモデルにお
ける、抗ＧＰＣ３抗体（ＧＣ３３）および抗ＰＤ−Ｌ１抗体（１０Ｆ．９Ｇ２）の併用に
おける抗腫瘍活性
週に１回１、５もしくは２５ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３抗体のいずれかを３週間、ま
たは２００μｇの抗マウスＰＤ−Ｌ１ラット抗体、１０Ｆ．９Ｇ２と、それに続き１００
μｇを週に１回を２週間、単独または併用として、上記と同様のＨｅｐａ１−６を有する
マウスに静脈内に注射した。上記の従来法を用いて調製したＨＥ染色切片を用いて病理学
的検査を実施した。ＩＨＣについては、各マーカーについて表２に列挙された一次抗体を
使用し、上記のＬＳＡＢ法またはＥＮＶ＋法のいずれかによって可視化した。各群から３
匹の代表的な動物についてＩＨＣを実施した。

マウスＧＣ３３または１０Ｆ．９Ｇ２は、溶媒対照と比較して、腫瘍増殖の阻害を示し
たが、マウスＧＣ３３および１０Ｆ．９Ｇ２の併用は、最も強い抗腫瘍活性を示した（図
５Ａ）。３回目の注射の５日後、全てのマウスを剖検し、腫瘍組織を病理学的に評価した
。調べた腫瘍組織では、ＰＤ−Ｌ１抗体と併用した２５ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３で処
置された全てのマウスにおいて、およびＰＤ−Ｌ１抗体と併用した５ｍｇ／ｋｇのマウス
ＧＣ３３で治療された５匹のマウスのうち４匹において、生存した腫瘍細胞は観察されな
かった（図５Ｂ）。

病理学的検査によって、溶媒対照と比較すると、治療された腫瘍組織各々において、Ｆ
４／８０−陽性細胞数、腫瘍組織に浸潤した多核巨細胞（ＭＮＧＣ）およびＣＤ３陽性細
胞でのＰＤ−Ｌ１発現の増大ならびにＣＤ２０６、ＣＤ１６３およびＣＤ１１ｂ陽性細胞
数の減少および単核細胞（ＭＮＣ）でのＰＤ−Ｌ１発現が示された。併用によって、ＣＤ
３陽性Ｔ細胞の浸潤は、各単独療法よりも増加し、これは、抗腫瘍活性と関連している傾
向がある（表３）。

［実施例６］
ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６細胞株を用いたシンジェニックマウスモデルにお
ける抗ＧＰＣ３（ＧＣ３３）および抗ＰＤ−Ｌ１抗体（６Ｅ１１）の併用における抗腫瘍
活性
１ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３を、Ｈｅｐａ１−６／ｈＧＰＣ３腫
瘍が確立しているＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスに週に１回または３回静脈内に与えた（ｑ７ｄ
×３）。１０ｍｇ／ｋｇの抗マウスＰＤ−Ｌ１ ｍＡｂ（クローン６Ｅ１１、ｍＩｇＧ２
Ａ、Ｄ２６５ＡおよびＮ２９７Ａ；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ［ＷＯ２０１５／０９５４１８］
）を静脈内に１回、続いて、５ｍｇ／ｋｇを腹膜内に週に２回（ｑ７ｄ×３）与えた。

併用療法は、いずれかの単独療法を用いる治療と比較して腫瘍増殖の阻害を増強した（
図６Ａ、Ｂ）。１ｍｇ／ｋｇ ｍＧＣ３３単回、５ｍｇ／ｋｇ ｍＧＣ３３単回、１ｍｇ
／ｋｇのｍＧＣ３３ ｑ７ｄ×３、５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３ ｑ７ｄ×３、６Ｅ１１
ｑ７ｄ×３、６Ｅ１１ ｑ７ｄ×３＋１ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３単回、６Ｅ１１ ｑ７ｄ
×３＋５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３単回および６Ｅ１１ ｑ７ｄ×３＋１ｍｇ／ｋｇのｍＧ
Ｃ３３ ｑ７ｄ×３、６Ｅ１１ ｑ７ｄ×３＋５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３ ｑ７ｄ×３の
腫瘍増殖阻害値の最終測定は、それぞれ、７３％、８４％、７３％、８０％、８８％、８
５％、９５％、８８％および１０４％であった。５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３ ｑ７ｄ×３
群中の１匹のマウス、１ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３ ｑ７ｄ×３群中の１匹のマウス、５ｍ
ｇ／ｋｇ ｍＧＣ３３単回中の１匹のマウス、１ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３単回群中の２匹
のマウスを、腫瘍進行によって安楽死させた。投与期間の間に死亡したマウスはなく、重
度の体重減少も観察されなかった（図６Ｃ）。

組織病理学の結果から、ｍＧＣ３３、６Ｅ１１およびそれらの併用投与によって壊死の
重症度の増加を伴う、または伴わない腫瘍領域の減少が観察された（図７）。６Ｅ１１
ｑ７ｄ×３＋５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３単回またはｑ７ｄ×３群では、５匹のマウスのう
ち１または２匹において、病理学的完全奏功（ｐＣＲ；組織病理学スライド上に腫瘍組織
なし）が観察された。さらに、全ての治療群においてマクロファージ／多核巨細胞を含む
免疫細胞の浸潤を伴う腫瘍の壊死が見られ、病変の重症度は、以下の順序であった：ｍＧ
Ｃ３３ ５ｍｇ／ｋｇ単回またはｑ７ｄ×３、６Ｅ１１ ｑ７ｄ×３＜ｍＧＣ３３ ５ｍ
ｇ／ｋｇ単回またはｑ７ｄ×３＋６Ｅ１１ ｑ７ｄ×３（図８Ａ）。図８Ｂに示されるよ
うに、腫瘍塊の周辺部において観察されたＦ４／８０陽性細胞は、併用の場合に最も多く
、次いで、ｍＧＣ３３または６Ｅ１１ ｑ７ｄ×３および溶媒の順序であった（図８Ｂ）
。溶媒では、ＰＤ−Ｌ１陽性応答は、腫瘍細胞の細胞質において主に見られ、弱い強度で
あった。他方、全ての治療群において、マクロファージ／多核巨細胞を含む免疫細胞にお
けるＰＤ−Ｌ１陽性応答の強度の増大（弱いから中程度）および頻度の増大が見られた（
図８Ｃ）。

［実施例７］
ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６細胞株を用いたシンジェニックマウスモデルにお
ける細胞傷害性Ｔ細胞の誘導
ＮＫ細胞およびマクロファージによる自然免疫性に加えて、細胞傷害性Ｔ細胞による獲
得免疫の誘導は、腫瘍細胞を死滅させるために重要である。治療されたマウスにおける獲
得免疫の誘導を評価するために、腫瘍組織中に浸潤したＴ細胞を評価した。ヒトＧＰＣ３
を発現するＨｅｐａ１−６細胞を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスに皮下接種した。ひとたび、
触知できる腫瘍が確立すると、マウスを１２群に割り当てた；３群はコントロールとし、
３群は、腫瘍接種後１３日目および２０日目に２回、５ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３によ
って治療し、３群は、腫瘍接種後１３日目の１０ｍｇ／ｋｇの６Ｅ１１および２０日目の
５ｍｇ／ｋｇの６Ｅ１１によって治療するか、または３群は、マウスＧＣ３３（腫瘍接種
後１３および２０日目の２回）および６Ｅ１１（腫瘍接種後１３日目の１０ｍｇ／ｋｇの
６Ｅ１１および２０日目の５ｍｇ／ｋｇの６Ｅ１１）の組合せで治療した。２回目の投与
の１、３および８日後、腫瘍組織を単離し、細かく刻んだ。ｇｅｎｔｌｅＭＡＣＳ（商標
）Ｏｃｔｏ Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｏｒによって消化した後、細胞を洗浄し、フローサイト
メトリーに使用して、ＣＤ４５、ＣＤ３ε、ＣＤ４またはＣＤ８陽性腫瘍浸潤リンパ球（
ＴＩＬ）を定量した。

図９に示されるように、マウスＧＣ３３または６Ｅ１１のいずれかを用いて治療された
マウスでは、ＣＤ４５陽性リンパ球、ＣＤ３ε陽性およびＣＤ８陽性Ｔリンパ球の増大は
観察されたが、ＣＤ４陽性リンパ球の増加は観察されなかった。上記の抗腫瘍活性と同様
に、マウスＧＣ３３および６Ｅ１１の併用では、各単独療法よりもＣＤ８陽性ＴＩＬを含
むリンパ球の強力な誘導が観察された。

本発明は、互いに組み合わせることによるＰＤ−１系結合アンタゴニストまたは抗ＧＰ
Ｃ３抗体の有効性の改善および治療されるべき患者のＱＯＬの改善に貢献し、肝癌を含む
癌の治療において有用である。

Claims (15)

1. ＰＤ−１系結合アンタゴニストと組み合せて使用するための、個体において癌を治療す
   るまたはその進行を遅延するための医薬組成物であって、有効成分として抗ＧＰＣ３抗体
   を含む、医薬組成物。
2. 抗ＧＰＣ３抗体が、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与の前に、ＰＤ−１系結合アン
   タゴニストの投与と同時に、またはＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与後に投与される
   、請求項１に記載の医薬組成物。
3. ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アン
   タゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される、請求項１ま
   たは２に記載の医薬組成物。
4. ＰＤ−１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１との結合を阻害する、請求項３
   に記載の医薬組成物。
5. ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１のＢ７−１との結合を阻害する、請求項
   ３に記載の医薬組成物。
6. ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１およびＢ７−１両方との結
   合を阻害する、請求項３に記載の医薬組成物。
7. ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である、請求項４から６のいずれ
   か一項に記載の医薬組成物。
8. ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、アテゾリズマブ、ＭＰ
   ＤＬ３２８０Ａ、ＭＤＸ−１１０５およびＭＥＤＩ４７３６からなる群から選択される、
   請求項３に記載の医薬組成物。
9. 抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号１９のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２０のＨＶＲ−Ｈ２
   配列および配列番号２１のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号２２のＨＶＲ−Ｌ１
   配列、配列番号２３のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号２４のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽
   鎖とを含む、請求項７に記載の医薬組成物。
10. 抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、配列番号２５または２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域およ
    び配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項７に記載の医薬組成物。
11. 抗ＧＰＣ３抗体が、配列番号３４のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号３５のＨＶＲ−Ｈ２配
    列および配列番号３６のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号３７のＨＶＲ−Ｌ１配
    列、配列番号３８のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号３９のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖
    とを含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
12. 抗ＧＰＣ３抗体が、第２の抗体が結合し得るエピトープと結合可能であり、ここで、前
    記の第２の抗体が、配列番号４２のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号４３のＨＶＲ−Ｈ２配列
    および配列番号４４のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号４５のＨＶＲ−Ｌ１配列
    、配列番号４６のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号４７のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖と
    を含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
13. 抗ＧＰＣ３抗体が、ヒト化抗体である、請求項１から１２のいずれか一項に記載の医薬
    組成物。
14. 抗ＧＰＣ３抗体が、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号５２
    のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、請求項１３に記載の医薬組成物。
15. 癌が、肝癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、胃癌、膀胱癌、膵臓癌、子宮内膜癌、結腸癌、腎臓
    癌、食道癌および前立腺癌からなる群から選択される、請求項１から１４のいずれか一項
    に記載の医薬組成物。