JP2016073298A5 - - Google Patents

Claims (18)

1. 配列番号：２５で表されるアミノ酸配列に関し、Ｌ１３９突然変異を有するモロニーマウス白血病ウイルス（ＭＭＬＶ）逆転写酵素を含む逆転写酵素であって、
   ４２℃超の温度で最適活性を有し、
   任意に、前記アミノ酸配列は、更に、以下のアミノ酸位置のうちの１以上に突然変異を含むことを特徴とする逆転写酵素：
   Ｌ６０３、Ｄ２００、Ｔ３３０、Ｅ６０７、Ｔ２８７、Ｑ２２１、Ｉ４９、Ｎ４７９、Ｈ５９４、Ａ５０２、Ｄ６５３、Ｋ６５８、Ｐ１３０、Ｑ２３７、Ｈ６３４、Ｄ５２４、Ａ３０７、Ｙ３４４、Ｑ４３０、Ｄ４４９、Ａ６４４、Ｎ６４９、Ｌ６７１、Ｅ６７３、Ｍ３９、Ｑ９１、Ｍ６６、Ｗ３８８、Ｉ１７９、Ｌ３３３、Ｒ３９０、Ｑ３７４、及びＥ５。
2. 少なくとも５０℃における活性が対応する野生型酵素の少なくとも５０℃における活性よりも高い請求項１に記載の逆転写酵素。
3. ５０℃における活性が対応する野生型酵素の５０℃における活性よりも高い請求項１から２のいずれかに記載の逆転写酵素。
4. ５０℃における比活性が対応する野生型酵素の５０℃における比活性の少なくとも１１０％である請求項１から３のいずれかに記載の逆転写酵素。
5. ４７．８℃において、ｃＤＮＡを合成する能力を有する請求項１から４のいずれかに記載の逆転写酵素。
6. Ｌ１３９Ｐの突然変異と、任意に、以下の突然変異のうちの１以上を有する請求項１から５のいずれかに記載の逆転写酵素：
   Ｌ６０３Ｗ、Ｌ６０３Ｍ、Ｄ２００Ｎ、Ｄ２００Ａ、Ｄ２００Ｇ、Ｔ３３０Ｐ、Ｅ６０７Ｋ、Ｅ６０７Ｇ、Ｅ６０７Ａ、Ｔ２８７Ａ、Ｑ２２１Ｒ、Ｉ４９Ｖ、Ｉ４９Ｔ、Ｎ４７９Ｄ、Ｈ５９４Ｋ、Ｈ５９４Ｒ、Ｈ５９４Ｑ、Ｈ６３４Ｙ、Ｄ５２４Ａ、Ｄ５２４Ｎ、Ｄ５２４Ｇ、Ａ５０２Ｖ、Ｄ６５３Ｇ、Ｄ６５３Ａ、Ｄ６５３Ｈ、Ｄ６５３Ｖ、Ｋ６５８Ｒ、Ｋ６５８Ｑ、Ｐ１３０Ｓ、Ｑ２３７Ｒ、Ａ３０７Ｖ、Ｙ３４４Ｈ、Ｑ４３０Ｒ、Ｄ４４９Ｇ、Ｄ４４９Ａ、Ａ６４４Ｖ、Ａ６４４Ｔ、Ｎ６４９Ｓ、Ｌ６７１Ｐ、Ｅ６７３Ｇ、Ｅ６７３Ｋ、Ｍ３９Ｖ、Ｍ３９Ｌ、Ｑ９１Ｒ、Ｑ９１Ｌ、Ｍ６６Ｌ、Ｗ３８８Ｒ、Ｉ１７９Ｔ、Ｉ１７９Ｖ、Ｌ３３３Ｑ、Ｒ３９０Ｗ、Ｑ３７４Ｒ、及びＥ５Ｋ。
7. 少なくとも２つの突然変異を有する請求項１から６のいずれかに記載の逆転写酵素。
8. 少なくとも２つの突然変異が、Ｌ１３９及びＤ２００に存在する請求項７に記載の逆転写酵素。
9. 少なくとも２つの突然変異が、Ｌ１３９Ｐ及びＤ２００Ｎである請求項８に記載の逆転写酵素。
10. 少なくとも２つの突然変異が、Ｌ１３９及びＴ３３０に存在する請求項７に記載の逆転写酵素。
11. 少なくとも２つの突然変異が、Ｌ１３９Ｐ及びＴ３３０Ｐである請求項１０に記載の逆転写酵素。
12. 少なくとも２つの突然変異が、Ｌ１３９及びＮ４７９に存在する請求項７に記載の逆転写酵素。
13. 少なくとも２つの突然変異が、Ｌ１３９Ｐ及びＮ４７９Ｄである請求項１２に記載の逆転写酵素。
14. 少なくとも２つの突然変異が、Ｌ１３９及びＬ６０３に存在する請求項７に記載の逆転写酵素。
15. 少なくとも２つの突然変異が、Ｌ１３９Ｐ及びＬ６０３Ｗである請求項１４に記載の逆転写酵素。
16. アミノ酸位置Ｄ６５３の突然変異は、Ｄ６５３Ｎではない請求項１に記載の逆転写酵素。
17. アミノ酸位置Ｈ５９４の突然変異は、Ｈ５９４Ａではない請求項１に記載の逆転写酵素。
18. 請求項１から１７のいずれかに記載の逆転写酵素をコードするポリヌクレオチド。