JP2018531624A5 - - Google Patents

Claims (16)

1. 配列番号１からなるＰ２３Ｈ認識配列と結合及び切断する設計されたメガヌクレアーゼであって、第１のサブユニット及び第２のサブユニットを含み、
   前記第１のサブユニットが前記Ｐ２３Ｈ認識配列の第１の認識ハーフサイトと結合し、且つ第１の超可変（ＨＶＲ１）領域を含み、
   前記第２のサブユニットが前記Ｐ２３Ｈ認識配列の第２の認識ハーフサイトと結合し、且つ第２の超可変（ＨＶＲ２）領域を含み、
   前記組換えメガヌクレアーゼは、配列番号７と少なくとも９７％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、設計されたメガヌクレアーゼ。
2. 前記第１のサブユニットが、配列番号７の残基１９８〜３４４と少なくとも９７％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、前記第２のサブユニットが、配列番号７の残基７〜１５３と少なくとも９７％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の設計されたメガヌクレアーゼ。
3. 前記第１のサブユニットが、配列番号７の残基１９８〜３４４を含む、請求項１又は２に記載の設計されたメガヌクレアーゼ。
4. 前記第２のサブユニットが、配列番号７の残基７〜１５３を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の設計されたメガヌクレアーゼ。
5. 配列番号７のアミノ酸配列を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の設計されたメガヌクレアーゼ。
6. 配列番号５からなる認識配列と比べて、配列番号１からなるＰ２３Ｈ認識配列を優先的に認識及び切断する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の設計されたメガヌクレアーゼ。
7. 請求項１〜６のいずれか１項に記載の設計されたメガヌクレアーゼをコードする核酸配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
8. 請求項７に記載の単離されたポリヌクレオチドを含む、組換えＤＮＡ構築物。
9. 組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターをコードする、請求項８に記載の組換えＤＮＡ構築物。
10. 請求項１〜６のいずれか１項に記載の設計されたメガヌクレアーゼをコードする核酸を含むポリヌクレオチドを含み、前記設計されたメガヌクレアーゼをコードする前記核酸は、プロモーターに作動可能に連結されている、組換えＡＡＶベクター。
11. 血清型５である、請求項１０に記載の組換えＡＡＶベクター。
12. 血清型２である、請求項１０に記載の組換えＡＡＶベクター。
13. 自己相補的ＡＡＶベクターである、請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の組換えＡＡＶベクター。
14. 前記プロモーターが網膜細胞特異的プロモーターである、請求項１０〜１３のいずれか１項に記載の組換えＡＡＶベクター。
15. 前記プロモーターが桿体視細胞特異的プロモーターである、請求項１０〜１４のいずれか１項に記載の組換えＡＡＶベクター。
16. 前記プロモーターがヒトＧタンパク質共役型受容体プロテインキナーゼ１（ＧＲＫ１）プロモーターである、請求項１５に記載の組換えＡＡＶベクター。