JP2015051980A

JP2015051980A - Ｂａｃｅ阻害剤

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Publication number: JP2015051980A
Application number: JP2014208277A
Authority: JP
Inventors: ジェイムズ・エドマンド・オーディア; Edmund Audia James; ダスティン・ジェイムズ・マーゴット; James Mergott Dustin; スコット・マーティン・シーハン; Martin Sheehan Scott; ブライアン・モーガン・ワトソン; Morgan Watson Brian
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 2008-05-02
Filing date: 2014-10-09
Publication date: 2015-03-19
Also published as: MX2010011972A; RS54260B1; IL208350A; KR20100125475A; TWI431004B; SV2010003718A; US20090275566A1; CN102015667A; ZA201006868B; ES2549087T3; CR11776A; KR101253835B1; SI2297120T1; JP5658139B2; PT2297120E; CO6311079A2; JP2017048212A; HRP20150941T1; AU2009241515B2; CL2009000860A1

Abstract

【課題】アルツハイマー病等の神経毒であるアミロイドβペプチドに対し、β−セクレターゼまたはβ部位アミロイド前駆体タンパク質切断酵素（ＢＡＣＥ）の強力な阻害剤の提供。【解決手段】式Ｉで表される、ＢＡＣＥ阻害剤。（ｎは０〜２の整数；Ｒ１はピリミジニル、クロロ若しくはフルオロで必要に応じて置換されたピラジニル、又はクロロ、フルオロ、及びＣ１−Ｃ３アルコキシから各々独立に選択される１つもしくは２つの置換基で必要に応じて置換されたピリジニル）【選択図】なし

Description

本発明は、アルツハイマー病ならびにアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の神経毒かつ高い凝集ペプチドセグメントである、アミロイドβ（Ａβ）ペプチドに関連する他の疾患および障害を治療する分野である。具体的には、β−セクレターゼまたはβ部位アミロイド前駆体タンパク質切断酵素（ＢＡＣＥ）の強力な阻害剤を提供する。ＢＡＣＥの完全または部分的阻害は、マウスモデルにおいてプラーク関連およびプラーク依存性病変に対して顕著な効果を有することが示されており、Ａβレベルの低い減少でさえ、プラーク断面積およびシナプス欠損において長期間の顕著な減少を生じる場合があることが示唆されており、従って顕著な治療有効性を与える。

現在記載されているＢＡＣＥ阻害剤はペプチド模倣剤の遷移状態類似体であり、典型的にヒドロキシエチル部分を含む。これらの化合物の多くは、ＢＡＣＥの強力な阻害剤であるが、それらの高分子量および低い膜透過性により、それらは不十分な薬物候補となっている。種々のヒドロキシエチルアミン骨格および複素環を含む骨格などのペプチド模倣剤の高分子から低分子への進行が存在する。例えば、非特許文献１を参照のこと。特定のアミノチアジン化合物は、特許文献１においてＢＡＣＥ阻害剤として記載されている。

国際公開第２００７／０４９５３２号パンフレット

ＤｕｒｈａｍおよびＳｈｅｐｈｅｒｄ，ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＤｒｕｇＤｉｓｃｏｖｅｒｙ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２００６年，９（６），ｐ．７７６−７９１

強力かつより有効なＢＡＣＥ阻害剤は、アルツハイマー病などのＡβペプチドにより媒介される疾患についての治療を与えるために必要である。本発明は新規の強力かつ有効なＢＡＣＥの阻害剤を提供する。

本発明は、式Ｉの化合物

（式中、
ｎは、０、１、または２であり、
Ｒ^１は、ピリミジニル、クロロもしくはフルオロで必要に応じて置換されたピラジニル、またはクロロ、フルオロ、およびＣ_１−Ｃ_３アルコキシから各々独立して選択される１つもしくは２つの置換基で必要に応じて置換されたピリジニルであり、
Ｒ^２は、各々の場合においてクロロおよびフルオロから独立して選択され、
Ｒ^３は、水素またはヒドロキシで必要に応じて置換されたＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^４は、水素またはＣ_１−Ｃ_３アルキルである）
あるいはその薬理学的に許容可能な塩を提供する。

本発明はまた、患者におけるアルツハイマー病を治療する方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む。

本発明はさらに、患者における軽度認識障害のアルツハイマー病への進行を予防する方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む。

本発明はさらに、アルツハイマー病を進行する危険性のある患者における進行を予防する方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む。

本発明はまた、患者におけるＢＡＣＥを阻害する方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む。

本発明はまた、アミロイド前駆体タンパク質のβ−セクレターゼにより媒介される切断を阻害する方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む。

本発明はさらに、Ａβペプチドの産生を阻害するための方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む。

本発明はまた、式Ｉの化合物を、薬理学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と併せて含む医薬製剤を提供する。

さらに、本発明は、治療、特にアルツハイマー病の治療または軽度認識障害のアルツハイマー病への進行の予防に使用するための式Ｉの化合物を提供する。本発明はまた、アルツハイマー病を治療するための医薬の製造のための式Ｉの化合物の使用を提供する。本発明はさらに、軽度認識障害のアルツハイマー病への進行を予防するための医薬の製造のための式Ｉの化合物の使用を提供する。本発明はまた、ＢＡＣＥを阻害するための医薬の製造のための式Ｉの化合物の使用を提供する。本発明はさらに、Ａβペプチドの産生を阻害するための医薬の製造のための式Ｉの化合物の使用を提供する。

さらに、本発明は、アルツハイマー病の治療に適した医薬製剤を提供する。さらに、本発明は、軽度認識障害のアルツハイマー病への進行の予防に適した医薬製剤を提供する。本発明はまた、ＢＡＣＥの阻害に適した医薬製剤を提供する。

さらに、本発明は、アミロイド前駆体タンパク質のβ−セクレターゼにより媒介される切断の阻害に適した医薬製剤を提供する。本発明はまた、過剰レベルのＡβペプチドから生じる状態の治療に適した医薬製剤を提供し、それは、式Ｉの化合物またはその薬理学的に許容可能な塩と、１つ以上の薬理学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤とを併せて含む。

上記の式に使用される一般的化学用語は、それらの通常の意味を有する。例えば、用語「Ｃ_１−Ｃ_３アルキル」とは、メチル、エチル、プロピルおよびイソプロピルを指す。用語「Ｃ_１−Ｃ_４アルキル」とは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチル部分を指す。

「ヒドロキシで必要に応じて置換されたＣ_１−Ｃ_４アルキル」は、水素原子の１つがヒドロキシ部分で置換されるＣ_１−Ｃ_４アルキル基である。

用語「Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ」は、酸素原子に結合されるＣ_１−Ｃ_３アルキル基であり、メトキシ、エトキシ、プロポキシおよびイソ−プロポキシを指す。

用語「窒素保護基」は、計画された反応条件に安定であり、さらに、試薬および再生成されるアミンと適合される反応条件により選択的に除去できる部分を意味するととられる。そのような基は当業者により周知であり、文献に記載される。例えば、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ，ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，第３版，第７章，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓＩｎｃ．，（１９９９）を参照のこと。

用語「Ａβペプチドの産生の阻害」とは、過剰な場合、正常または必要とされる場合、正常以下まで患者におけるＡβペプチドのインビボでのレベルを減少させることを意味するととられる。

用語「有効量の式Ｉの化合物」とは、正常または正常以下のレベルまで患者におけるＡβペプチドのインビボでのレベルを減少させるのに十分なＢＡＣＥを阻害するのに必要とされる式Ｉの化合物の用量（複数も含む）を意味するととられる。

用語「治療」とは、患者における疾患の進行を遅延させるかまたは停止させることを含むととられる。

軽度認知障害は、臨床所見および軽度認知障害を示す患者の経時的なアルツハイマー型認知症への進行に基づいたアルツハイマー疾患に関連する認知症の潜在的な前駆期と定義される（Ｍｏｒｒｉｓら，Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５８，３９７−４０５（２００１）；Ｐｅｔｅｒｓｅｎら，Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５６，３０３−３０８（１９９９））。用語「軽度認知障害のアルツハイマー病への進行の予防」とは、患者における軽度認知障害のアルツハイマー病への進行を遅延、停止、または反転させることを含む。

当業者は、図（１）に描かれるように式Ｉの化合物が互変異性型で存在できることを理解するだろう。本出願において、式Ｉの化合物の特定の互変異性体の１つに対する任意の参照が与えられる場合、互変異性型およびそれらの全ての混合物の両方を含むことが理解される。

当業者は、式Ｉの化合物が少なくとも１つのキラル中心を含むコアから構成されることを理解するだろう。

本発明は、全ての個々の鏡像異性体、およびラセミ体を含む、前記化合物の鏡像異性体の混合物を意図するが、図（２）に例示される原子標識された１位で絶対配置を有する化合物が好ましい式Ｉの化合物である。

さらに、適切に置換された場合、図（３）に例示される原子標識された２位の絶対配置を有する化合物が好ましい式Ｉの化合物である。

さらに、当業者は、さらなるキラル中心が、特定の可変物の選択により本発明の化合物において作製され得ることを理解するだろう。本発明は、全ての個々の鏡像異性体またはジアステレオマーならびにラセミ体を含む、前記化合物の鏡像異性体およびジアステレオマーの混合物を意図する。

当業者はまた、全てのキラル中心についてのカーン・インゴルド・プレローグ（Ｒ）または（Ｓ）規則が、特定の化合物の置換パターンに依存して変化することを理解するだろう。単一の鏡像異性体またはジアステレオマーは、キラル試薬と開始することで、または立体選択的もしくは立体特異的合成技術によって調製され得る。あるいは、単一の鏡像異性体またはジアステレオマーは、本発明の化合物の合成における任意の都合の良い点での標準的なキラルクロマトグラフまたは結晶化技術により混合物から単離され得る。本発明の化合物の単一の鏡像異性体およびジアステレオマーは、本発明の好ましい実施形態である。

本発明の化合物はアミンであり、従って、任意の数の無機酸および有機酸と反応して、薬理学的に許容可能な酸付加塩を形成する。薬理学的に許容可能な塩およびそれらを調製するための一般的な方法は、当該分野において周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら，ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ＳｅｌｅｃｔｉｏｎａｎｄＵｓｅ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２）；Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら，「ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳａｌｔｓ」，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．６６，Ｎｏ．１，１９７７年１月を参照のこと。好ましい薬理学的に許容可能な塩は、塩酸で形成されたものである。

式Ｉの化合物の全ては有用なＢＡＣＥの阻害剤であるが、特定のクラスの化合物が好ましい。以下の項はそのような好ましいクラスを記載する。
ａ）Ｒ^１はピリミジニルであり、
ｂ）Ｒ^１はフルオロで必要に応じて置換されたピラジニルであり、
ｃ）Ｒ^１はクロロ、フルオロ、またはメトキシから独立して選択される各々場合において１回または２回必要に応じて置換されたピリジニルであり、
ｄ）Ｒ^１はフルオロまたはメトキシで必要に応じて置換されたピリジニルであり、
ｅ）Ｒ^１はフルオロで必要に応じて置換されたピリジニルであり、
ｆ）Ｒ^２はフルオロであり、
ｇ）Ｒ^２はクロロであり、
ｈ）ｎは０であり、
ｉ）ｎは１であり、
ｊ）ｎは２であり、
ｋ）Ｒ^３は水素であり、
ｌ）Ｒ^３はヒドロキシで置換されたメチルであり、
ｍ）Ｒ^３はメチルであり、
ｎ）Ｒ^３はヒドロキシで置換されたイソプロピルであり、
ｏ）Ｒ^４は水素であり、
ｐ）Ｒ^４はメチルであり、
ｑ）式Ｉの化合物は、アミノチアジン環の窒素に隣接するキラル中心に（Ｓ）の絶対配置を有し
ｒ）式Ｉの化合物は遊離塩基であり、
ｓ）式Ｉの化合物は薬理学的に許容可能な塩であり、
ｔ）式Ｉの化合物は塩酸塩であり、
ｕ）式Ｉの化合物は二塩酸塩である。

本発明の好ましい化合物は式Ｉの化合物（式中、Ｒ^１はピリミジニル、クロロ、フルオロ、もしくはメトキシから独立して選択される各々の場合において１回または２回必要に応じて置換されたピリジニル、またはフルオロで必要に応じて置換されたピラジニルであり、Ｒ^２はクロロまたはフルオロであり、Ｒ^３は水素、メチル、ヒドロキシで置換されたメチル、またはヒドロキシで置換されたイソプロピルであり、Ｒ^４は水素またはメチルであり、ｎは０、１または２である）あるいはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、アミノチアジン環の窒素に隣接するキラル中心の絶対配置が（Ｓ）である化合物またはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

本発明の別の好ましい実施形態は、式Ｉの化合物（式中、Ｒ^１はピリミジニル、クロロ、フルオロ、またはメトキシから独立して選択される各々の場合において１回または２回必要に応じて置換されたピリジニル、フルオロで必要に応じて置換されたピラジニルであり、Ｒ^２はクロロまたはフルオロであり、Ｒ^３は水素、メチル、ヒドロキシで置換されたメチル、またはヒドロキシで置換されたイソプロピルであり、Ｒ^４は水素であり、ｎは０、１または２である）あるいはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、アミノチアジン環の窒素に隣接するキラル中心の絶対配置が（Ｓ）である化合物またはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

本発明のより好ましい実施形態は、式Ｉの化合物（式中、Ｒ^１はピリミジニル、クロロまたはフルオロから独立して選択される各々の場合において１回または２回必要に応じて置換されたピリジニル、またはフルオロで必要に応じて置換されたピラジニルであり、Ｒ^２はクロロまたはフルオロであり、Ｒ^３は水素、メチルであり、Ｒ^４は水素であり、ｎは０、１または２である）あるいはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、アミノチアジン環の窒素に隣接するキラル中心の絶対配置が（Ｓ）である化合物またはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

本発明のさらなる実施形態は、式Ｉの化合物（式中、Ｒ^１はピリミジニル、フルオロもしくはメトキシで必要に応じて置換されたピリジニル、またはフルオロで必要に応じて置換されたピラジニルであり、Ｒ^２はフルオロであり、Ｒ^３は水素またはメチルであり、Ｒ^４は水素であり、ｎは１または２である）あるいはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、アミノチアジン環の窒素に隣接するキラル中心の絶対配置が（Ｓ）である化合物またはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

本発明の最も好ましい実施形態は、式Ｉの化合物（式中、Ｒ^１はピリミジニル、フルオロで必要に応じて置換されたピリジニル、またはフルオロで必要に応じて置換されたピラジニルであり、Ｒ^２はフルオロであり、Ｒ^３は水素またはメチルであり、Ｒ^４は水素であり、ｎは１または２である）またはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、アミノチアジン環の窒素に隣接するキラル中心の絶対配置が（Ｓ）である化合物またはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

本発明の特に好ましい実施形態は、式Ｉの化合物（式中、Ｒ^１はピリミジニルであり、Ｒ^２はフルオロであり、Ｒ^３は水素であり、Ｒ^４は水素であり、ｎは２である）またはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、アミノチアジン環の窒素に隣接するキラル中心の絶対配置が（Ｓ）である化合物またはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

式Ｉの化合物に関する本発明のさらに特に好ましい実施形態は

またはその薬理学的に許容可能な塩である。

式Ｉの化合物に関する本発明の別の特に好ましい実施形態は

またはその薬理学的に許容可能な塩である。

式Ｉの化合物はＢＡＣＥの阻害剤である。従って、本発明はまた、患者におけるＢＡＣＥを阻害する方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に、ＢＡＣＥを阻害する量の式Ｉの化合物を投与することを含む。式Ｉの化合物の投与により治療される患者はヒトであることが好ましい。

ＢＡＣＥの阻害剤として、本発明の化合物は、Ａβペプチドの産生を抑制するのに有用であり、従って、Ａβペプチドの過剰産生および／または低下したクリアランスに起因する過剰なＡβペプチドレベルから生じる障害の治療に有用である。本発明のさらなる実施形態は、ＢＡＣＥの阻害によって改善または予防できる疾患または状態を治療するための医薬を製造するための式Ｉの化合物の使用である。従って、式Ｉの化合物は、アルツハイマー病、軽度認識障害、ダウン症候群、Ｄｕｔｃｈ型アミロイド症を伴う遺伝性脳出血、脳アミロイド血管症、混合型の血管および進行性起源の認知症などの他の変性認知症、パーキンソン病に伴う認知症、進行性核上麻痺に伴う認知症、大脳皮質基底核変性症に伴う認知症、およびアルツハイマー病のびまん性Ｌｅｗｙ小体型の治療または予防に有用であると考えられる。

本発明の化合物は当該分野において公知の種々の手順によって調製され得、そのうちのいくつかは以下のスキームに例示される。以下のスキームにおける個々の工程は、式Ｉの化合物を与えるために変更されてもよいことは、当業者により認識されるだろう。式Ｉの化合物を生成するために必要とされる工程の特定の順序は、合成される特定の化合物、出発化合物、および置換部分の相対的不安定性に依存する。以下のスキームにおける各々の工程の生成物は、抽出、蒸発、沈殿、クロマトグラフィー、濾過、粉砕、および結晶化を含む、従来の方法によって回収することができる。

明確さの目的のために以下のスキームにおいて、特定の立体化学的中心は指定されないままであり、特定の置換基は除去されており、スキームの教示を限定することを決して意図するものではない。さらに、個々の異性体、鏡像異性体、またはジアステレオマーは、キラルクロマトグラフィーなどの方法によって式Ｉの化合物の合成における任意の都合の良い点で分離されてもよい。

さらに、以下のスキームに記載される中間体は、多くの窒素保護基を含む。可変の保護基は、実施される特定の反応条件および特定の変換に依存する各々の発生において同じであってもよいか、または異なっていてもよい。保護および脱保護条件は当業者に周知であり、文献に記載されている。例えば、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ，ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，前出を参照のこと。

以下のスキームにおいて、他に示されない限り、全ての置換基は以前に定義されている。理解されるように、式（１ａ）〜（１ｅ）、（２）および（３）の化合物は、本明細書に記載されるものと同様の方法および手順を含む、当該分野において周知かつ確立された方法によって容易に調製され得る。必要な出発物質は、商業的に利用可能であるか、または当業者に周知の方法によって商業的に利用可能な物質から調製され得るかのいずれかである。

スキーム１は、式（１ａ）〜（１ｅ）のいずれかの適切な化合物（式中、Ｒ^５は、アセチル、ベンゾイル、またはｔ−ブトキシカルボニルなどの窒素保護基である）と、式（２）または式（３）の適切な化合物との反応を示し、中間体（４）の脱保護の後に式Ｉの化合物を得る。

式（１ａ）〜（１ｅ）のいずれかの化合物は、炭酸セシウム、炭酸ナトリウム、または炭酸カリウムなどの適切な塩基の存在下において、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド、パラジウムテトラキストリフェニルホスフィン、ＰｄＣｌ_２、または酢酸パラジウム（ＩＩ）などの適切なパラジウム試薬を用いて、Ｓｕｚｕｋｉカップリング反応において式（２）の化合物と反応する。そのような反応は、１，２−ジメトキシエタン、水、エタノール、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、またはジオキサン、あるいはそれらの混合物などの適切な溶媒中で実施される。

あるいは、式（１ａ）〜（１ｅ）のいずれかの化合物は、塩化リチウムまたはフッ化セシウムなどの適切な添加剤の存在下において、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド、ＰｄＣｌ_２、またはパラジウムテトラキスフェニルホスフィンなどの適切なパラジウム試薬を用いて、Ｓｔｉｌｌｅカップリング反応において式（３）の化合物と反応される。そのような反応は、トルエンまたはＤＭＦ、あるいはそれらの混合物などの適切な溶媒中で実施される。

任意の工程において、式Ｉの化合物の薬理学的に許容可能な塩が、標準的な条件下で適切な溶媒において、式Ｉの適切な遊離塩基と、適切な薬理学的に許容可能な酸との反応によって形成されてもよい。さらに、そのような塩の形成は、窒素保護基の脱保護時に同時に生じ得る。そのような塩の形成は周知であり、当該分野において理解される。

式（１ａ）の化合物は２つの変形体によって調製できる。スキームＩＩおよびＩＩＩは、式（ｉ）の適切な化合物で出発する合成工程を示し、式（１ａ）の化合物を得る（式中、Ｒ^６はメチルまたはエチルであり、Ｒ^５は、アセチル、ベンゾイル、またはｔ−ブトキシカルボニルなどの適切な窒素保護基である）。

スキームＩＩにおいて、式（ｉ）の化合物は、ＴＨＦなどの適切な溶媒中でＴｉ（ＯＥｔ）_４の存在下において２−メチル−プロパン−２−スルフィン酸アミドと反応されて、式（ｉｉ）の化合物を得る。式（ｉｉｉ）の化合物は、ＴＨＦなどの適切な溶媒中でｎ−ＢｕＬｉをジイソプロピルアミンに加えることによって調製される。適切な酢酸化合物が加えられ、続いて、過剰なクロロチタニウムトリイソプロポキシドが加えられる。式（ｉｉ）の化合物は式（ｉｉｉ）の化合物の溶液に加えられて、式（ｉｖ）の化合物を得る。アミンの脱保護は当該分野において公知の方法によって実施され、続いて、例えば、水素化アルミニウムリチウムまたは水素化ホウ素リチウムの使用による、当該分野において周知の方法によってアルコールまでエステルの還元が実施される。アルコール（ｖ）にイソチオシアン酸ベンゾイルを加える。中間化合物は、チアゼン形成およびベンゾイル基の除去の両方を促進するためにＨＣｌと処理され、次いで、適切な窒素保護基が加えられて、式（１ａ）の化合物を得る。

スキームＩＩＩにおいて、過剰なビニルマグネシウムブロミドが、ＴＨＦなどの適切な溶媒中で式（ｉ）の化合物に加えられて、式（ｖｉ）の化合物を得る。アルコール（ｖｉ）は、ヘキサンまたはエタノールなどの適切な溶媒中で塩化チオニルまたはＰＢｒ_３で処理され、続いてチオ尿素を加えることによって、式（ｖｉｉ）の化合物を得る。式（ｖｉｉ）の化合物は、高温で酸で処理されて、ラセミ体のアミノチアジンを生じ、それは適切な窒素保護基で保護され、キラルクロマトグラフィーまたは結晶化などの精製条件に供されて、式（１ａ）の化合物を得る。

スキームＩＶは、式（ｉｉ）の適切な化合物で出発して、式（１ｂ）の化合物を得る合成工程を示す。過剰な２−メチルアリルマグネシウムクロリドが、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中で式（ｉｉ）の化合物の溶液に加えられる。得られる中間体は、ジオキサンなどの適切な溶媒中でＨＣｌ溶液で処理されて、式（ｖｉｉｉ）の化合物を得る。アミン（ｖｉｉｉ）はＴＨＦなどの適切な溶媒中でイソチオシアン酸ベンゾイルと反応されて、式（ｉｘ）の化合物を得る。ジクロロメタンなどの適切な溶媒中での式（ｉｘ）の化合物と過剰なヨウ素との処理により、式（ｘ）の化合物を得る。最終的に、トルエンなどの適切な溶媒中に水素化トリブチル錫およびＡＩＢＮを加えることにより、式（１ｂ）の化合物を得る。

スキームＶは、式（ｉｖ）の適切な化合物で開始して式（１ｃ）の化合物を得るための合成工程を示す。Ｘはブロモまたはクロロである。Ｒ^５は適切な窒素保護基である。Ｒ^６はメチルまたはエチルである。化合物（ｘｉ）は、ＴＨＦなどの適切な溶媒中でＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミンと過剰なブチルリチウムとを反応することによって調製される。式（ｉｖ）の化合物が化合物（ｘｉ）の溶液に加えられて、式（ｘｉｉ）の化合物を得る。過剰な適切なハロゲン化マグネシウム（ｘｉｉｉ）は、ＴＨＦなどの適切な溶媒中で式（ｘｉｉ）の化合物の溶液に加えられる。得られるケトン（ｘｉｖ）は、当該分野において周知かつ適切な条件によって、例えばメタノールなどの適切な溶媒中の水素化ホウ素ナトリウムによって、アルコール（ｘｖ）まで還元される。アルコール（ｘｖ）にイソチオシアン酸ベンゾイルを加える。中間化合物をＨＣｌで処理し、次いで適切な窒素保護基を加えて、式（１ｃ）の化合物を得る。

スキームＶＩは、適切な式（ｘｖｉ）の化合物で開始する、式（１ｄ）の化合物および式（１ｅ）の化合物を得るための合成工程を示し、式中、Ｒ^５は適切な窒素保護基である。

式（ｘｖｉｉ）の化合物はまず、ＴＨＦなどの適切な溶媒中で（メチル）トリフェニルホスホニウムブロミドとｎ−ブチルリチウムとを反応させることによって調製される。この溶液に、式（ｘｖｉ）の化合物を、例えば添加漏斗またはシリンジポンプによってゆっくりと加える。式（ｘｖｉｉｉ）の化合物は、アセトニトリルなどの適切な溶媒中の式（ｘｖｉｉ）の化合物にグリオキシル酸エチルおよびトリフルオロメタンスルホン酸イッテルビウムを加えることによって調製される。

式（ｘｉｘ）の化合物は３つの工程プロセスによって調製される：まず、式（ｘｖｉｉｉ）の化合物のアルコールが、例えば、塩化メチレンなどの適切な溶媒中で２，６−ルチジンまたはジイソプロピルエチルアミンなどの適切なアミン塩基の存在下においてトリフルオロメタンスルホン酸無水物との反応により離脱基に変換される。過剰なチオ尿素を加え、次いで得られる中間体を過剰な硫酸に加える。式（ｘｉｘ）の化合物の得られるアミノ基を、当該分野において周知かつ記載される方法によって適切な窒素保護基で保護して、式（ｘｘ）の化合物を得る。式（ｘｘ）の化合物の反応を、２つの変形体で実施して、式（１ｄ）の化合物または式（１ｅ）の化合物のいずれかを得ることができる。

（１ｄ）の化合物は、当該分野において周知または記載される方法、例えばＴＨＦなどの適切な溶媒中の過剰な水素化ホウ素リチウムによって化合物（ｘｘ）のエステルの還元によって調製できる。

（１ｅ）の化合物は、ＴＨＦなどの適切な溶媒中で式（ｘｘ）の化合物と過剰な塩化メチルマグネシウムとを反応させることによって調製できる。

調製物および実施例
以下の調製物および実施例は、本発明を更に示す。

本発明の化合物に関する名称は、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａ，バージョン１０．０により提供される。

本明細書において用いられる略語は、ＡｌｄｒｉｃｈｉｍｉｃａＡｃｔａ，第１７巻，第１号，１９８４年に従って定義される。その他の略語は、以下にように定義される。「ＳＣＸ」は、強カチオン交換；「ｃａ．」は、約またはおよそ；「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチル；「ＭｅＯＨ」は、メタノール；「ＤＣＭ」は、ジクロロメタン；「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフラン；「Ｅｔ_２Ｏ」は、ジエチルエーテル；「（ＯＥｔ）」は、エトキシド；「ｅｑｕｉｖ」は、当量；「ＦＲＥＴ」は、蛍光共鳴エネルギー移動；「ＲＦＵ」は、相対蛍光単位；「ＤＭＥＭ」は、ダルベッコ改変イーグル培地；「Ｆ１２」は、ハムＦ１２倍地；「ＦＢＳ」は、ウシ胎児血清を示す。

質量分析データは、特に指定されない限り、ＬＣ／ＭＳ（ＸｂｒｉｄｇｅＣ１８（２．１×５０μｍ×３．５μｍ）カラム、５０℃＋／−１０℃の温度にて１ｍＬ／分間のフローレート）を介して得られる。溶離系は、５〜１００重量％のＡＣＮ／１０ｍＭの重炭酸アンモニウム（ｐＨ１０）で７．０分間、その後、１００％のＡＣＮで１．０分間保持し、エレクトロスプレーイオン化で結合させる（１００〜８００の原子質量単位（ａｍｕ）スキャンレンジ；０．２の原子質量単位ステップ；８０ｖのフラグメンター（Ｆｒａｇｍｅｎｔｏｒ）；１．０ゲイン（ｇａｉｎ）；８０の閾値）。

特定の化合物は、ＨＰＬＣを介して精製される。方法Ａ：Ｘｔｅｒｒａ（登録商標）ＲＰ１８（３０×３００ｍｍ）カラム、周囲温度にて４０ｍＬ／分間のフローレート。溶離系は、１〜５分間における０：１００（アセトニトリル：（０．１％のＨＣｌ入りのＨ_２Ｏ））のアイソクラチックグラジェントで構成され、その後、２０分間にわたる０：１００（アセトニトリル：（０．１％のＨＣｌ入りのＨ_２Ｏ））から５０：５０（アセトニトリル：（０．１％のＨＣｌ入りのＨ_２Ｏ））までのリニアグラジェントが続く。その他にもあらゆるＨＰＬＣ条件が考えられ、特に限定されない。

調製物１
（Ｒ）−２−メチル−プロパン−２−スルフィン酸［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−エチリデン］−アミド

１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−エタノン（１９ｇ，６４．７ｍｍｏｌ，１当量）および（Ｒ）−２−メチル−プロパン−２−スルフィン酸アミド（１０．２ｇ，８４．１ｍｍｏｌ，０．７６当量）入りのＴＨＦ（０．３Ｍ，２１５ｍＬ）の溶液に、Ｔｉ（ＯＥｔ）_４（２９．５ｇ，１２９ｍｍｏｌ，２．０当量）を１度で周囲温度にて加える。反応物を７０℃まで加熱し、１８時間、攪拌する。反応物を周囲温度まで冷却し、水の中に注ぐ。得られた懸濁液を珪藻土のパッドを介して濾過し、酢酸エチルで洗浄する。濾過物を収集し、酢酸エチルで抽出する。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で残留物を得るまで濃縮する。残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、２０分間にわたってヘキサンからヘキサン：酢酸エチル（３：１）までのリニアグラジェントで溶離して、標題の化合物（８１％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３３８，３４０（Ｍ＋１）。

以下の表１中の化合物を、（Ｒ）−２−メチル−プロパン−２−スルフィン酸［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−エチリデン］−アミドの調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物２
（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−メチル−プロパン−２−スルフィニルアミノ）−３−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−酪酸メチルエステル

ｎ−ブチルリチウム（４１．９ｍＬ，１０５ｍｍｏｌ，２当量）（ヘキサン中に２．５Ｍ）を、ジイソプロピルアミン（１０．６ｇ，１０５ｍｍｏｌ，２当量）入りのＴＨＦ（２６２ｍＬ）の−７８℃の溶液に加える。１５分後、酢酸メチル（７．７ｇ，１０５ｍｍｏｌ，２当量）を液滴にて加え、反応物を３０分間攪拌する。反応物を液滴にてクロロチタニウムトリイソプロポキシド（３１．６ｇ，１１５ｍｍｏｌ，２．２当量）入りのＴＨＦ（５０ｍＬ）の溶液に加える。６０分間、−７８℃にて攪拌した後、２−メチル−プロパン−２−スルフィン酸［１−（３−ブロモ−フェニル）−エチリデン］−アミド（１２．２ｇ，４０．４ｍｍｏｌ，１当量）入りのＴＨＦ（５０ｍＬ）の溶液を液滴にて加える。反応物を３時間、−７８℃にて攪拌する。反応物を塩化アンモニウム（１００ｍＬ）の飽和溶液で急冷し、周囲温度まで温め、水（１００ｍＬ）で希釈する。得られた懸濁液を珪藻土のパッドを介して濾過し、酢酸エチルで洗浄する。濾過物を収集し、酢酸エチルで抽出する。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、そして、減圧下で濃縮して残留物を得る。残留物を、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、２０分間にわたってヘキサン：酢酸エチル（５：１）からヘキサン：酢酸エチル（１０：７）までのリニアグラジェントで溶離して、標題の化合物（７２％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１２，４１４（Ｍ＋１）。

以下の表２中の化合物を、（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−メチル−プロパン−２−スルフィニルアミノ）−３−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−酪酸メチルエステルの調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物３
（Ｓ）−メチル３−アミノ−３−（２，４−ジフルオロフェニル）−ブタノエート塩酸塩

（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−メチル−プロパン−２−スルフィニルアミノ）−３−フェニル−酪酸メチルエステル（１５．５ｇ；３７．６ｍｍｏｌ；１当量）およびメタノール（１００ｍＬ）の溶液に、塩化水素（ジオキサン中に４Ｍ）（１００ｍＬ，４００ｍｍｏｌ，１１当量）を１度に加える。反応物を室温にて１時間、攪拌する。溶媒を減圧下で除去して、標題の化合物（９５％を超える収率）を得て、それを更に精製せずに用いる：ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０６，３０８（Ｍ＋１）。

以下の表３中の化合物を、（Ｓ）−メチル３−アミノ−３−（２，４−ジフルオロフェニル）−ブタノエート塩酸塩の調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物４
（Ｓ）−３−アミノ−３−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）ブタン−１−オール

（Ｓ）−エチル−３−アミノ−３−（２，４−ジフルオロフェニル）−ブタノエート塩酸塩（４０．２ｇ，９０．５ｍｍｏｌ，１当量）入りのＴＨＦ（１８０ｍＬ）の０℃の溶液に、水素化アルミニウムリチウム（ＴＨＦ中に１Ｍ）（１１８ｍＬ，１１８ｍｍｏｌ）を、内部の反応物の温度を１５℃以下に維持しながら、４５分間にわたって加える。反応混合物を、周囲温度まで温め、１．５時間、攪拌する。反応物を０℃まで冷却し、水（４．５ｍＬ）、２Ｍの水酸化ナトリウム（４．５ｍＬ）および水（１３．６ｍＬ）を液滴にて加えることにより、急冷する。得られた固体を濾過により除去し、酢酸エチルでリンスする。濾過物をＭｇＳＯ_４を介して乾燥させ、濾過する。溶媒を減圧下で除去して、更に精製せずに用いられる標題の化合物（７１％の収率、ＬＣＭＳにより決定された７３％の純度）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２８０，２８２。

調製物５
（Ｓ）−３−アミノ−３−（３−ブロモ−フェニル）−ブタン−１−オール

（Ｓ）−メチル３−アミノ−３−（４−フルオロフェニル）−ブタノエート塩酸塩（１４ｇ，３８．６ｍｍｏｌ，１当量）入りのＴＨＦ（２００ｍＬ）の０℃の溶液に、水素化ホウ素リチウム（１．６７ｇ，７７．１ｍｍｏｌ，２当量）を注意して加える。５分後、反応混合物を５０℃まで加熱し、攪拌する。完了次第、反応物を氷槽内で冷却し、水の液滴を加えることにより急冷する。反応物を１ＮのＨＣｌ（１００ｍＬ）で酸性化する。１時間攪拌後、溶液を５ＮのＮａＯＨで塩基性にし、ジクロロメタンで抽出する。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題の化合物（９４％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２４４．０および２４６．０（Ｍ＋１）。

以下の表４中の化合物を、（Ｓ）−３−アミノ−３−（３−ブロモ−フェニル）−ブタン−１−オールの調製物に従って基本的に調製する。

調製物６
（Ｓ）−１−ベンゾイル−３−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−１−メチル−プロピル］−チオ尿素

（Ｓ）−３−アミノ−３−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−ブタン−１−オール（９．５ｇ，３４ｍｍｏｌ，１当量）入りのＴＨＦ（５０ｍＬ）の溶液に、ビス（トリメチルシリル）トリフルオロアセトアミド（８．７ｇ，３４ｍｍｏｌ，１当量）を加える。２時間後、イソチオシアン酸ベンゾイル（５．５ｇ，３４ｍｍｏｌ，１当量）を液滴にて加える。反応物を１８時間、攪拌し、水で急冷し、酢酸エチルで抽出する。合わせた有機層を、１ＮのＨＣｌおよびＮａＣｌ飽和水溶液で抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題の化合物（９５％を超える収率、ＬＣＭＳにより決定された９０％の純度）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４４３，４４５（Ｍ＋１）。

以下の表５中の化合物を、（Ｓ）−１−ベンゾイル−３−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−１−メチル−プロピル］−チオ尿素の調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物７
（Ｓ）−４−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン

（Ｓ）−１−ベンゾイル−３−［１−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−１−メチル−プロピル］−チオ尿素（４１ｇ，６８ｍｍｏｌ）入りの１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）の溶液に、ＨＣｌ（５Ｎ，４０７ｍＬ，２．０ｍｏｌ，３０当量）の水溶液を加える。得られた懸濁液を１００℃まで温める。２０時間攪拌後、反応物を減圧下で濃縮する。得られた混合物を、ＨＣｌ（５Ｎ，４０７ｍＬ，２．０ｍｏｌ）の水溶液で処理し、１００℃にて１８時間、攪拌する。懸濁液を１０℃まで冷却し、ｐＨをｐＨ１０まで５０％のＮａＯＨ水溶液で調整する。得られた水溶液を酢酸エチルで抽出する。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン：アセトン（４：１）からヘキサン：アセトン（３：１）までのステップグラジェントで溶離して、標題の化合物（５７％の収率、ＬＣＭＳにより決定された８５％の純度）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３２１，３２３（Ｍ＋１）。

以下の表６中の化合物を、（Ｓ）−４−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミンの調製物に従って基本的に調製する。

調製物８
（Ｓ）−［４−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
（Ｓ）−１−ベンゾイル−３−［１−（５−ブロモ−２−フルオロ−フェニル）−３−ヒドロキシ−１−メチル−プロピル］−チオ尿素（０．７９ｇ，１．８ｍｍｏｌ）および含水ＨＣｌ（５Ｎ，２５ｍＬ，７１ｍｍｏｌ）の溶液を１００℃まで温める。６時間攪拌後、反応物を周囲温度まで冷却し、一晩置く。反応物を減圧下で濃縮して、粗（Ｓ）−４−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン塩酸塩を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０３，３０５（Ｍ＋１）。

（Ｓ）−４−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン塩酸塩入りのＴＨＦ（３０ｍＬ）および飽和炭酸水素ナトリウム（１５ｍＬ）水溶液に、ジ−ｔ−二炭酸ブチル（０．７７ｇ，３．５ｍｍｏｌ）を加える。４時間後、反応物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサンからヘキサン：酢酸エチル（３：１）までのリニアグラジェントで溶離して、標題の化合物（６９％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４０３，４０５（Ｍ＋１）。

調製物９
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート

（Ｓ）−４−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン（１４．３ｇ，３９ｍｍｏｌ，１当量）入りの１，４−ジオキサン（１９０ｍＬ）の溶液に、炭酸水素ナトリウム（１９０ｍＬ）の飽和水溶液および水（３０ｍＬ）を周囲温度にて加える。懸濁液を５分間攪拌し、その後、ジ−ｔｅｒｔ−二炭酸ブチル（１７ｇ，７８ｍｍｏｌ，２当量）を追加する。１時間後、反応物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、硫酸マグネシウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、ヘキサン：酢酸エチル（４：１）で溶離して、標題の化合物（７８％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２１，４２３（Ｍ＋１）。

以下の表７中の化合物を、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメートの調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物１０
２−ブロモ−３−イル−ブト−３−エン−２−オール

３−ブロモアセトフェノン（５０ｇ，２５０ｍｍｏｌ；１当量）入りのＭＴＢＥ（３７５ｍＬ）の溶液に、１０℃にて、ビニルマグネシウムブロミド（ＴＨＦ中に０．７Ｍ，２５０ｍｍｏｌ；３６０ｍＬ，１当量）を液滴にて加える。反応物を加熱し、１６時間還流させる。反応物を冷却し、塩化アンモニウムの飽和水溶液で急冷する。混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出し、硫酸マグネシウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、ヘキサン：酢酸エチル（９：１）からヘキサン：酢酸エチル（４：１）までのステップグラジェントで溶離して、標題の化合物（４０ｇ，４２％の収率）を得る。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：１．６４（ｓ，３Ｈ），５．１８（ｄ，Ｊ＝１４Ｈｚ，１Ｈ），５．３０（ｄ，Ｊ＝２３Ｈｚ，１Ｈ），６．１３（ｄｄ，Ｊ＝１４，２３Ｈｚ，１Ｈ），７．２１（ｔ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１Ｈ），７．３６−７．４０（ｍ，２Ｈ），７．６３（ｓ，１Ｈ）。

調製物１１
２−［３−（３−ブロモ−フェニル）−ブト−２−エニル］−イソチオ尿素塩酸塩

２−ブロモ−３−イル−ブト−３−エン−２−オール（１１ｇ，２９ｍｍｏｌ，１当量）およびヘキサン（２０ｍＬ）の０℃の溶液に、塩化チオニル（６．９ｇ，５８ｍｍｏｌ，２当量）を加える。反応物を周囲温度にて、ガスが活発に発生する時点まで温める。反応物を周囲温度にてガスの発生が終わるまで攪拌し、溶媒を減圧下で除去する。得られた残留物をアセトニトリル（１００ｍＬ）中に溶解する。チオ尿素（２．２ｇ，２９ｍｍｏｌ，１当量）を加え、反応物を５０℃まで加熱する。２時間後、反応物を周囲温度まで冷却する。得られた沈殿物を濾過により収集し、アセトニトリルで洗浄して、標題の化合物（９０％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２８５．０，２８７．０（Ｍ＋１）。

調製物１２
４−（３−ブロモ−フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イルアミン

２−［３−（３−ブロモ−フェニル）−ブト−２−エニル］−イソチオ尿素塩酸塩（１７ｇ，５２ｍｍｏｌ）入りの１２ＭのＨＣｌ（５３ｍＬ，６４０ｍｍｏｌ，１２当量）の懸濁液を１００℃まで加熱する。２４時間後、溶液を周囲温度まで冷却する。溶液のｐＨを２ＮのＮａＯＨの水溶液を用いてｐＨ１０に調整し、酢酸エチルで抽出する。有機層を合わせ、硫酸マグネシウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題の化合物（７０％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２８５．０，２８７．０（Ｍ＋１）。

調製物１３
Ｎ−（４−（３−ブロモフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）アセトアミド

４−（３−ブロモ−フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イルアミン（１０ｇ，３５ｍｍｏｌ，１当量）およびトリエチルアミン（４．３ｇ，４２ｍｍｏｌ，１．２当量）入りのジクロロメタン（７０ｍＬ）の０℃の溶液に、塩化アセチル（２．８ｇ，３５ｍｍｏｌ，１当量）を５分間にわたって、液滴にて加える。反応物を周囲温度まで温める。１時間後、反応物をジクロロメタンで希釈し、水で抽出する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、ヘキサン：酢酸エチル（１：１）で溶離して、標題の化合物（８７％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３２７，３２９（Ｍ＋１）。

調製物１４
（Ｓ）−Ｎ−［４−（３−ブロモ−フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イル］−アセトアミド
４−（３−ブロモ−フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イルアミン（２０ｇ，６１ｍｍｏｌ）を、ＨＰＬＣキラル分離［カラム：８×３２ｃｍｃｈｉｒａｌｐａｋＡＤ；溶離液：６０：４０：０．２（イソプロピルアルコール：ヘプタン：ジメチルエチルアミン）；フロー：３５０ｍＬ／分間にてＵＶ２６０ｎｍ］により精製する。第２の溶離異性体を単離して、鏡像異性的に濃縮された標題の化合物（３５％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３２７，３２９（Ｍ＋１）。

調製物１５
（Ｓ）−［４−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

（Ｓ）−４−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン（１２．６ｇ，２９．９ｍｍｏｌ，１当量）入りの１，２−ジメトキシエタン：水：エタノール（１５：７：５，３００ｍＬ）の１００℃の溶液に、ピリミジン−５−ボロン酸（２５ｇ，２０３ｍｍｏｌ，６．８当量）を加え、その後、炭酸セシウム（５８ｇ，１８０ｍｍｏｌ，６当量）およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（４．２ｇ，６．０ｍｏｌ，０．２当量）を加える。４０分後、反応物を周囲温度まで冷却し、水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層を硫酸マグネシウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、ヘキサン：酢酸エチル（７：３）からヘキサン：酢酸エチル（１：１）までのステップグラジェントで溶離して、標題の化合物（６７％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２１（Ｍ＋１）。

以下の表８中の化合物を、（Ｓ）−［４−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物１６
（Ｓ）−４−（３−（２−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン

（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−（２−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）アセトアミド（４５０ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ）入りのメタノール（４０ｍＬ）の溶液に、Ｋ_２ＣＯ_３（２１０ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）入りのメタノール：水（２：１，１５ｍＬ）の溶液を加える。反応物を室温にて６時間、攪拌する。溶媒を減圧下で除去し、残留物を酢酸エチル中に溶解する。酢酸エチル層を水およびＮａＣｌ飽和水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、残留物を得る。残留物をＳＣＸカラムクロマトグラフィーを用いて精製して、標題の化合物（６５％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０２（Ｍ＋１）。

調製物１７
（Ｓ）−４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート（１．１ｇ，２．７ｍｍｏｌ）およびメタノール（１０ｍＬ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を加える。反応混合物を６０℃まで温める。１５時間後、溶媒を減圧下で除去する。水を得られた残留物に加え、混合物を飽和炭酸水素ナトリウムで塩基性にする。塩基性の水層をジクロロメタンで抽出する。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、標題の化合物（６２％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０３，３０５（Ｍ＋１）。

調製物１８
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）アセトアミド
（Ｓ）−４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン（５５０ｍｇ，１．８ｍｍｏｌ，１．０当量）入りのテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）の溶液に、ピリジン（７２０ｍｇ，９．０ｍｍｏｌ，５当量）および無水酢酸（２２０ｍｇ，２．２ｍｍｏｌ，１．２当量）を加える。１０分後、反応物を水に注ぎ、水性混合物をジクロロメタンで抽出する。有機層を分離し、１ＮのＨＣｌおよびＮａＣｌ飽和水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題の化合物（８３％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）３４５，３４７（Ｍ＋１）。

調製物１９
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−フルオロ−３−（ピラジン−２−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート

（Ｓ）−［４−（３−ブロモ−４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１００ｍｇ，２５０μｍｏｌ，１当量）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１４ｍｇ，１２．４０μｍｏｌ，０．０５当量）、および２−トリブチルスタンニルピラジン（９６ｍｇ，２５０μｍｏｌ，１当量）入りのジオキサン（３ｍＬ）の溶液に、１３０℃の温度まで、研究室級の電子レンジ内で放射線照射を受けさせ、２０分間保持する。溶媒を減圧下で除去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、ヘキサンからヘキサン：酢酸エチル（１：４）勾配（ｒａｍｐ）までのリニアグラジェントで２０分間溶離して、標題の化合物（１４％の収率，ＬＣＭＳにより決定された９０％の純度）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４０３（Ｍ＋１）。

調製物２０
（Ｓ）−Ｎ−（４−（４−フルオロ−３−（３−フルオロピラジン−２−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）アセトアミド
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）アセトアミド（５００ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ，１当量）、２−フルオロ−３−（トリブチルスタンニル）ピラジン（１．７ｇ，４．３ｍｍｏｌ，３．０当量）入りのトルエン（１５ｍＬ）の溶液に、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（５１ｍｇ，７２μｍｏｌ，０．０５当量）および塩化リチウム（９２ｍｇ，２．２ｍｍｏｌ，１．５当量）を加える。反応物に、１３０℃の温度まで、研究室級の電子レンジ内で放射線照射を受けさせ、３時間保持する。溶媒を減圧下で除去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、ヘキサンからヘキサン：酢酸エチル（１：１）勾配（ｒａｍｐ）までのリニアグラジェントで２０分間溶離して、標題の化合物（３１％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３６３（Ｍ＋１）。

以下の表９中の化合物を、（Ｓ）−Ｎ−（４−（４−フルオロ−３−（３−フルオロピラジン−２−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）アセトアミドの調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物２１
（Ｒ）−Ｎ−（（Ｓ）−２−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−メチルペンタ−４−エン−２−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド

（Ｒ，Ｚ）−Ｎ−（１−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）エチリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（１０ｇ，３１ｍｍｏｌ，１．０当量）入りのジクロロメタン（１００ｍＬ）の０℃の溶液に、２−メチルアリルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中に０．５Ｍ，２５０ｍＬ，１２５．９２ｍｍｏｌ，４当量）をゆっくりと加える。２時間後、反応物を飽和塩化アンモニウムで急冷し、酢酸エチルで抽出する。溶媒を減圧下で除去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、ジクロロメタンから１０％のジクロロメタン：酢酸エチルまでのリニアグラジェントで溶離して、標題の化合物（３５％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３７６，３７８（Ｍ＋１）。

調製物２２
（Ｓ）−２−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−メチルペンタ−４−エン−２−アミン

（Ｒ）−Ｎ−（（Ｓ）−２−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−メチルペンタ−４−エン−２−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（１．８ｇ，５．１ｍｍｏｌ，１当量）入りの１，４−ジオキサン（６ｍＬ）の溶液に、塩化水素（１，４−ジオキサン中に４．０Ｍ、１５ｍＬ）を加える。反応物を５分間、攪拌し、溶媒を減圧下で除去する。残留物に炭酸水素ナトリウム飽和水溶液を加え、混合物を酢酸エチルで抽出する。合わせた有機層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題の化合物（９７％の収率）を得る。^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ７．６６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．４０，Ｊ＝２．８０Ｈｚ），７．３７−７．３３（ｍ，１Ｈ），７．０２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．４０Ｈｚ），４．８３（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｓ，１Ｈ），２．４７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ），２．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ），１．４４（ｓ，３Ｈ），１．３６（ｓ，３Ｈ）。

調製物２３
（Ｓ）−Ｎ−（２−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−メチルペンタ−４−エン−２−イルカルバモチオイル）ベンズアミド

（Ｓ）−２−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−メチルペンタ−４−エン−２−アミン（１．３ｇ，４．６ｍｍｏｌ，１．０当量）入りのＴＨＦ（５ｍＬ）の溶液に、イソチオシアン酸ベンゾイル（０．６３ｍＬ，４．６ｍｍｏｌ，１当量）を加える。反応物を室温にて３時間、攪拌する。溶媒を減圧下で除去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、２０％のジクロロメタン：ヘキサンから５０％のジクロロメタン：ヘキサンまでのリニアグラジェントで溶離して、標題の化合物（８４％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４５７，４５９（Ｍ＋２３）。

調製物２４
Ｎ−（（４Ｓ）−４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−６−（ヨードメチル）−４，６−ジメチル５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）ベンズアミド

（Ｓ）−Ｎ−（２−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−メチルペンタ−４−エン−２−イルカルバモチオイル）ベンズアミド（１．３ｇ，３．０ｍｍｏｌ，１．０当量）入りのジクロロメタン（４０ｍＬ）の０℃の溶液に、ヨウ素（１．５ｇ，５．９ｍｍｏｌ，２．０当量）を加える。反応物を０℃にて１時間攪拌し、徐々に室温まで温める。反応混合物をチオ硫酸ナトリウム飽和水溶液で急冷する。水層をジクロロメタンで抽出する。合わせた有機層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題の化合物（８２％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５６１，５６３（Ｍ＋１）。

調製物２５
（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４，６，６−トリメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）ベンズアミド

Ｎ−（（４Ｓ）−４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−６−（ヨードメチル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）ベンズアミド（０．１３ｇ，０．２３ｍｍｏｌ，１．０当量）入りのトルエン（１．５ｍＬ）の溶液に、２−２’−アゾ−ビス−イソブチロニトリル（０．００６ｇ，０．０３ｍｍｏｌ，０．１５当量）および水素化トリブチル錫を加える。反応混合物を室温にて３時間攪拌し、減圧下で濃縮する。溶媒を減圧下で除去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、５％の酢酸エチル：ヘキサンから２０％の酢酸エチル：ヘキサンまでのリニアグラジェントで溶離して、標題の化合物（２５％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３５，４３７（Ｍ＋１）。

調製物２６
（Ｓ）−Ｎ−（４−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４，６，６−トリメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）ベンズアミド

（Ｓ）−Ｎ−（４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４，６，６−トリメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）ベンズアミド（０．０６７ｇ，０．１５ｍｍｏｌ，１．０当量）入りの１，２−ジメトキシエタン（１．５ｍＬ）、エタノール（０．７ｍＬ）、および、水（１．０ｍＬ）の９７℃の溶液に、ピリミジン−５−ボロン酸（０．０９５ｇ，０．７７ｍｍｏｌ，５．０当量）、炭酸セシウム（０．３０１ｇ，０．９２ｍｍｏｌ，６．１当量）、およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（０．０２２ｇ，０．０３ｍｍｏｌ，０．２当量）を加える。反応混合物を９７℃にて２０分間、攪拌する。室温まで冷却した後、反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。溶媒を減圧下で除去し、残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、ジクロロメタンから１５％の酢酸エチル：ジクロロメタンまでのリニアグラジェントで溶離して、標題の化合物（４６％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３５（Ｍ＋１）。

調製物２７
（Ｓ）−３−（３−ブロモ−フェニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−３−（Ｒ）−（２−メチル−プロパン−２−スルフィニルアミノ）−ブチルアミド

Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１２ｇ，１３０ｍｍｏｌ，５．０当量）入りのＴＨＦ（２００ｍＬ）の−７８℃の溶液に、ｎ−ブチルリチウム（１００ｍＬ，２５０ｍｍｏｌ，１０当量）（ヘキサン中に２．５Ｍ）をカニューレを介して加える。反応物を１５分間攪拌し、（Ｓ）−３−（（Ｒ）−２−メチル−プロパン−２−スルフィニルアミノ）−３−フェニル−酪酸メチルエステル（９．５ｇ，２５ｍｍｏｌ，１．０当量）入りのＴＨＦ（５０ｍＬ）の溶液を液滴にて加える。反応物を−６０℃まで温め、その温度にて１時間保持する。反応物を、塩化アンモニウム飽和水溶液で急冷し、水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層を水およびＮａＣｌ飽和水溶液で抽出し、硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題の化合物（６０％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４０５，４０７（Ｍ＋１）。

以下の表１０中の化合物を、（Ｓ）−３−（３−ブロモ−フェニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−３−（Ｒ）−（２−メチル−プロパン−２−スルフィニルアミノ）−ブチルアミドの調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物２８
（Ｒ）−２−メチル−プロパン−２−スルフィン酸［（Ｓ）−１−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−３−オキソ−ブチル］−アミド

（Ｓ）−３−（３−ブロモ−フェニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−３−（Ｒ）−（２−メチル−プロパン−２−スルフィニルアミノ）−ブチルアミド（１．５ｇ，３．７ｍｍｏｌ；１．０当量）入りのＴＨＦ（５３ｍＬ）の−７８℃の溶液に、メチルマグネシウムブロリド（６．２ｍＬ，１８．５ｍｍｏｌ，５．０当量）を加え、反応物を周囲温度まで温める。１時間後、反応物を−７８℃まで冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液で急冷する。混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題の化合物（９５％を超える収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）３６０，３６２（Ｍ＋１）。

以下の表１１中の化合物を、（Ｒ）−２−メチル−プロパン−２−スルフィン酸［（Ｓ）−１−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−３−オキソ−ブチル］−アミドの調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物２９
（Ｒ）−Ｎ−（（２Ｓ）−２−（３−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシペンタン−２−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド

（Ｒ）−２−メチル−プロパン−２−スルフィン酸［（Ｓ）−１−（３−ブロモ−フェニル）−１−メチル−３−オキソ−ブチル］−アミド（１．３４ｇ，３．５ｍｍｏｌ，１．０当量）入りのメタノール（２０ｍＬ）の溶液に、テトラヒドロホウ酸ナトリウム（１．４ｇ，３５ｍｍｏｌ，１０．０当量）を加える。反応物を周囲温度にて一晩、攪拌する。反応物を水で注意して急冷し、酢酸エチルで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、混合物にジアステレオマーを与える。ジアステレオマーを、シリカゲル（１２０ｇ）上のクロマトグラフィーにより分離し、（５０：５０）酢酸エチル：ヘキサンから（１００：０）酢酸エチル：ヘキサンまでのグラジェントで溶離する。第２の溶離異性体を分離し、溶媒を減圧下で除去して、標題の化合物（４５％の収率）を単一のジアステレオマーとして得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３６２，３６４（Ｍ＋１）。

以下の表１２中の化合物を、（Ｒ）−Ｎ−（（２Ｓ）−２−（３−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシペンタン−２−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドの調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物３０
（Ｓ）−４−アミノ−４−（３−ブロモ−フェニル）−ペンタン−２−オール

塩化水素（５ｍＬ；１３当量；２０ｍｍｏｌ）（ジオキサン中に４Ｍ）および単一ジアステレオマーとしての（Ｒ）−２−メチル−プロパン−２−スルフィン酸［（Ｓ）−１−（３−ブロモ−フェニル）−３−ヒドロキシ−１−メチル−ブチル］−アミド（５７０ｍｇ，１．６ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液を、５分間攪拌する。溶媒を減圧下で除去し、残留物を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液で塩基性にする。水層をジクロロメタンで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、標題の化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３５８，３６０（Ｍ＋１）。

以下の表１３中の化合物を、（Ｓ）−４−アミノ−４−（３−ブロモ−フェニル）−ペンタン−２−オールの調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物３１
Ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｒ）−４−（３−ブロモフェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート

単一ジアステレオマーとしての（Ｓ）−４−アミノ−４−（３−ブロモ−フェニル）−ペンタン−２−オール（４１０ｍｇ，７９４μｍｏｌ）の入りのＴＨＦ（１０ｍＬ）の溶液に、ビス（トリメチルシリル）トリフルオロアセトアミド（２０４ｍｇ，０．７９ｍｍｏｌ）を加える。１時間後、イソチオシアン酸ベンゾイル（２５９ｍｇ，１．７ｍｍｏｌ）を液滴にて加える。反応物を１時間攪拌する。反応混合物を減圧下で濃縮する。得られた残留物に、５Ｎの塩化水素（２５ｍＬ，１２５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を１００℃まで加熱する。４８時間後、溶媒を減圧下で除去し、残留物をＴＨＦ（２０ｍＬ）と飽和炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）の間で分ける。混合物にジ−ｔｅｒｔ−二炭酸ブチル（３４７ｍｇ，１．６ｍｍｏｌ）を加え、反応物を４８時間攪拌する。反応物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。生成物をシリカゲルにより精製し、２０分間にわたってヘキサンからヘキサン：酢酸エチル（５：２）までのリニアグラジェントで溶離して、標題の化合物（５２％の収率，ＬＣＭＳにより決定された７０％の純度）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３９９，４０１（Ｍ＋１）。

調製物３２
Ｔｅｒｔ−ブチル−（４Ｓ，６Ｒ）−４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート
ジアステレオマーの１：５の混合物としての（Ｒ）−Ｎ−（（２Ｓ）−２−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシペンタン−２−イル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（２ｇ，１．０当量）入りのジオキサンの溶液（５ｍＬ）に、４Ｎの塩化水素入りのジオキサン（２０ｍＬ，８０ｍｍｏｌ）の溶液を０℃において液滴にて加える。反応物を室温まで温め、５分間攪拌する。溶媒を減圧下で除去し、残留物を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液で塩基性にする。水層をジクロロメタンで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。

得られた残留物をＴＨＦ（５０ｍＬ）中に溶解し、０℃まで冷却する。イソチオシアン酸ベンゾイル（１．７ｇ，１０．５ｍｍｏｌ）を液滴にて加える。反応物を１時間攪拌する。反応混合物を減圧下で濃縮する。残留物をジオキサン（５ｍＬ）中に溶解し、壁の厚いガラス反応管に移動させる。溶液に５Ｎの塩化水素（７５ｍＬ，３７５ｍｍｏｌ）を加える。反応管を覆って、１００℃まで加熱する。２４時間後、溶媒を減圧下で除去し、残留物をＴＨＦ（２０ｍＬ）および炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ）の間で分ける。混合物に、ジ−ｔｅｒｔ−二炭酸ブチル（１．７ｇ，７．９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を２時間攪拌する。反応混合物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。残留物をシリカゲル（３４０ｇ）を用いてカラムクロマトグラフィーにより精製し、２５分間にわたって（０：１００）酢酸エチル：ヘキサンから（５０：５０）酢酸エチル：ヘキサンまでのグラジェントで溶離する。第２の溶離ジアステレオマーを収集し、溶媒を減圧下で除去して、以下に示す５９５ｍｇの混合物を得る。
調製物３２：標題の化合物，ｔｅｒｔ−ブチル−（４Ｓ，６Ｒ）−４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート：ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１７，４１９（Ｍ＋１）；および
調製物３２ａ：Ｎ−（（４Ｓ，６Ｒ）−４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）ベンズアミド：ＭＳ（ｍ／ｚ）４２１，４２３（Ｍ＋１）。

調製物３３
（４Ｓ）−４−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン

ジアステレオマーの混合物としての（４Ｓ）−４−アミノ−４−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）ペンタン−２−オール（１．３ｇ，４．４ｍｍｏｌ）入りのＴＨＦ（５０ｍＬ）の０℃の溶液に、イソチオシアン酸ベンゾイル（１．４ｇ，１．２ｍｍｏｌ）を液滴にて加え、反応物を１時間攪拌する。反応混合物を減圧下で濃縮する。残留物をジオキサン（５ｍＬ）中に溶解し、壁の厚いガラス反応管に移動させる。混合物に５Ｎの塩化水素（７５ｍＬ，３７５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を１００℃まで加熱する。３６時間後、溶媒を減圧下で除去し、残留物を水中に溶解する。水混合物を酢酸エチルで抽出する。水層を５ＮのＮａＯＨで塩基性にし、３：１のクロロホルム：ＩＰＡで抽出する。クロロホルム：ＩＰＡ層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、標題の化合物を得る。

酢酸エチル抽出物を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去する。得られた残留物をＭｅＯＨ−平衡化ＳＣＸカラムに通し、メタノールで洗浄し、その後、２ＮのＮＨ_３入りのＭｅＯＨ（５０ｍＬ）で溶離する。２ＮのＮＨ_３入りのＭｅＯＨの洗浄物（ｗａｓｈ）を収集し、溶媒を減圧下で除去する。残留物をクロロホルム：ＩＰＡ抽出物からの標題の化合物と合わせ、標題の化合物を、（６Ｒおよび６Ｓ）（４Ｓ）−４−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン（６４％の収率，ＬＣＭＳにより決定された８０％の純度）の混合物として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３３５，３３７（Ｍ＋１）。

調製物３４
ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｒ）−４−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート

（６Ｒおよび６Ｓ）（４Ｓ）−４−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン入りのＴＨＦ（２０ｍＬ）および炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（１０ｍＬ）の混合物に、ジ−ｔｅｒｔ−二炭酸ブチル（９００ｍｇ，４．１ｍｍｏｌ）を加える。２時間後、反応物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。生成物をシリカゲルにより精製して、５分間にわたってヘキサンからヘキサン：酢酸エチル（４：１）までのリニアグラジェントで溶離する。第２のジアステレオマーを収集し、溶媒を減圧下で除去して、標題の化合物（４３％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３５，４３７（Ｍ＋１）。

調製物３５
［（４Ｓ，６Ｒ）−４，６−ジメチル−４−（３−ピリミジン−５−イル−フェニル）−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｒ）−４−（３−ブロモフェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート入りの１，２−ジメトキシエタン：水：エタノール［（３：１．５：１），１２ｍＬ］の１００℃の溶液に、ピリミジン−５−ボロン酸（１２８ｍｇ，５．９ｍｍｏｌ，２．５当量）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（２９ｍｇ，４１μｍｏｌ，０．１当量）、および炭酸セシウム（１．２４ｇ，１．２４ｍｍｏｌ，３当量）を一度に加える。２０分後、反応物を周囲温度まで冷却し、水で希釈し、ジクロロメタンで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、２０分間にわたってヘキサンからヘキサン：酢酸エチル（５：２）までのリニアグラジェントで溶離して、標題の化合物（３９％の収率）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３９９（Ｍ＋１）。

以下の表１４中の化合物を、［（４Ｓ，６Ｒ）−４，６−ジメチル−４−（３−ピリミジン−５−イル−フェニル）−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製物において基本的に記載されたように調製する。

調製物３６
１−ブロモ−３−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゼン

メチルトリフェニルホスホニウムブロミド（３５．７ｇ，９７．９ｍｍｏｌ，１．３当量）をテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中に懸濁し、０℃まで冷却する。Ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中に２．５Ｍ，２７．０ｇ，９７．７ｍｍｏｌ，３９．２ｍＬ，１．３当量）を混合物に添加漏斗を介してゆっくりと加える。得られた溶液を１時間０℃にて攪拌する。３−ブロモアセトフェノン（１５．０ｇ，７５．３ｍｍｏｌ，１０．０ｍＬ，１．０当量）入りのテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）の溶液を、添加漏斗を介してゆっくりと加える。得られた混合物を室温まで温め、３時間攪拌する。反応物を０℃まで冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液で急冷する。層を分液漏斗内で分け、水層をヘキサンで抽出する。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムを介して乾燥させ、濾過し、一晩室温にて置く。有機層を沈殿物から静かに注ぎ、減圧下で濃縮する。得られた固体をヘキサンで希釈し、濾過する。沈殿物をヘキサンで洗浄する。濾過物を濃縮し、得られた混合物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン）により精製して、標題の化合物（８３％の収率）を得る。^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ７．５９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．７２Ｈｚ），７．４０−７．３６（ｍ，２Ｈ），７．１８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），５．３６（ｓ，１Ｈ），５．１２−５．１０（ｍ，１Ｈ），２．１３−３．１１（ｍ，３Ｈ）。

表１５における以下の化合物を、１−ブロモ−３−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゼンの調製に従って本質的に調製する。

調製物３７
エチル４−（３−ブロモフェニル）−２−ヒドロキシペント−４−エノエート

２−ブロモ−１−フルオロ−４−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゼン（１２．３ｇ，６２．２ｍｍｏｌ，１．０当量）入りのアセトニトリル（１２４ｍＬ，０．５Ｍ）の溶液に、グリオキシル酸エチル（３８．１ｇ，３７ｍＬ，１８７ｍｍｏｌ，３当量）およびトリフルオロメタンスルホン酸イッテルビウム、水和物（７．７２ｇ，１２．４ｍｍｏｌ，０．２当量）を加える。混合物を室温で一晩攪拌する。混合物を減圧下で濃縮し、ジエチルエーテルで希釈する。得られた溶液を水で２回洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。残留物を、０〜１００％の酢酸エチル／へキサンのグラジェントを用いて２つのバッチ中でシリカゲル（３３０ｇ）上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題の化合物（８７％収率）を得る：^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）：δ７．５３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．９Ｈｚ），７．４１−７．３７（ｄｔ，１Ｈ），７．３３−７．３０（ｄｔ，１Ｈ），７．１８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），５．３７（ｓ，１Ｈ），５．２２（ｓ，１Ｈ），４．２６−４．２１（ｍ，１Ｈ），４．１７−３．９９（ｍ，２Ｈ），２．９９（ｄｄ，Ｊ＝１４．８，４．８Ｈｚ），２．８３−２．７２（ｍ，２Ｈ），１．２３（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）。

表１６における以下の化合物を、エチル４−（３−ブロモフェニル）−２−ヒドロキシペント−４−エノエートの調製に従って本質的に調製する。

調製物３８
エチル２−アミノ−４−（３−ブロモフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−カルボキシレート

エチル４−（３−ブロモフェニル）−２−ヒドロキシペント−４−エノエート（５．１ｇ，１７ｍｍｏｌ）入りのアセトニトリル（６８ｍＬ）の溶液に、２，６−ルチジン（２．１９ｇ，２０．４ｍｍｏｌ，１．２当量）を加える。反応物を０℃まで冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（３．３０ｍＬ，１９．６ｍｍｏｌ，１．１５当量）を約５分にわたって液滴にて加える。混合物を０℃で２０分間攪拌する。チオ尿素（２．５９ｇ，３４．０ｍｍｏｌ，２当量）を加え、反応物を室温まで温める。４５分後、混合物を減圧下で濃縮する。次いで、得られた粘性の橙色の油を、大きなピペットによって室温で攪拌している硫酸（１７．８Ｍ，８ｍＬ）に加える。２０分後、混合物を、激しく攪拌している、５０ｍＬのＨ_２Ｏ中のＫ_２ＣＯ_３（約５０ｇ）の０℃の溶液に液滴にて加える。急冷している間、固体の形成時に攪拌できるようにさらなる水を加える。黄褐色／橙色の固体を濾過により回収する。固体を、１時間、空気ストリームによって濾紙上で乾燥して、ジアステレオマーの混合物として標題の化合物を得て、それをさらに精製せずに用いる：ＭＳ（ｍ／ｚ）：３５７，３５９（Ｍ＋１）。

表１７における以下の化合物を、エチル２−アミノ−４−（３−ブロモフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−カルボキシレートの調製に記載されるように本質的に調製する。

調製物３９
エチル４−（３−ブロモフェニル）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−カルボキシレート

エチル２−アミノ−４−（３−ブロモフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−カルボキシレート（６．１ｇ，１７ｍｍｏｌ）入りの１，４−ジオキサン（３５ｍＬ）、水（１８ｍＬ）、および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１８ｍＬ）の懸濁液に、ジ−ｔ−ブチルジカルボネート（７．４２ｇ，３４．０ｍｍｏｌ，２当量）を加える。混合物を約６０時間攪拌する。反応物を水で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で３回抽出する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、茶色の油を得る。その油を、０〜１００％の酢酸エチル／ヘキサンのグラジェントで溶離するシリカゲル（１５０ｇ）上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、ジアステレオマーの混合物として標題の化合物（６４％収率）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：４５７，４５９（Ｍ＋１）。

表１８における以下の化合物を、エチル４−（３−ブロモフェニル）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−カルボキシレートの調製に従って本質的に調製する。

調製物４０
（４Ｓ，６Ｓ）−エチル４−（３−ブロモフェニル）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−カルボキシレート

エチル４−（３−ブロモフェニル）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−カルボキシレート（３．５ｇ，７．７ｍｍｏｌ）を、２段階においてキラルＨＰＬＣによって精製する：（カラム：ＣｈｉｒａｌｃｅｌＯＪ８×３２ｃｍ；溶離液：１：３（３Ａアルコール：ヘプタン）；フロー：ＵＶ２４０ｎｍで４００ｍＬ／分）、３つのうちのピーク１および２を含むカット１を得て、次いでピーク１および２を、さらなるキラルクロマトグラフィー（カラム：ＣｈｉｒａｌｃｅｌＯＤ８×３２ｃｍ；溶離液１：９（イソプロピルアルコール：ヘプタン）；フロー：ＵＶ２４０ｎｍで４００ｍＬ／分）によってさらに精製する。第２の溶離異性体の分離により、減圧下で画分の濃縮後に標題の化合物（１４％収率）を得る。

調製物４１
（＋／−）Ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−４−（３−ブロモフェニル）−６−（ヒドロキシメチル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート

エチル４−（３−ブロモフェニル）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−カルボキシレート（２．０ｇ，４．４ｍｍｏｌ）入りのテトラヒドロフラン（８７ｍＬ）およびエタノール（２５ｍＬ）の０℃の溶液に、水素化ホウ素チリウム（２８９ｍｇ，１３．１ｍｍｏｌ，３当量）を加える。反応物を室温まで温め、４時間攪拌する。反応混合物を飽和ＮＨ_４Ｃｌで急冷する。層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥する。混合物を濾過し、濃縮して、淡い黄色の油を得る。その油を、０〜１００％の酢酸エチル／へキサンのグラジェントを用いるシリカゲル（１２０ｇ）上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題の化合物（２９％収率）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１５，４１７（Ｍ＋１）。

調製物４２
Ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−４−（３−ブロモフェニル）−６−（ヒドロキシメチル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート
（＋／−）Ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−４−（３−ブロモフェニル）−６−（ヒドロキシメチル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート（８７０ｍｇ，２．１ｍｍｏｌ）を、ＨＰＬＣキラル分離：（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ８×３６ｃｍ×２０μｍ；溶離液：１００％３Ａエチルアルコール；フロー：ＵＶ２５０ｎｍで４００ｍＬ／分）により精製する。第２の溶離異性体を分離して、鏡像異性的に濃縮された標題の化合物（３８．５％収率）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１５，４１７（Ｍ＋１）。

調製物４３
（＋／−）Ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−６−（ヒドロキシメチル）−４−メチル−４−（３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート

（＋／−）ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−４−（３−ブロモフェニル）−６−（ヒドロキシメチル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート（１５０ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）入りの１，２−ジメトキシエタン（４．５ｍＬ）、エタノール（１．５ｍＬ）、および水（２．３ｍＬ）の１１０℃の溶液に、ピリミジン−５−ボロン酸（１１２ｍｇ，０．９０ｍｍｏｌ，２．５当量）、炭酸セシウム（３５３ｍｇ，１．０８ｍｍｏｌ，３当量）、およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（２５ｍｇ，０．０３６ｍｍｏｌ，０．１当量）を加える。反応物を１１０℃で攪拌する。２０分後、反応混合物をＥｔＯＡｃおよびＨ_２Ｏで希釈する。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。粗残留物を、シリカゲル（５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題の化合物（２９％収率）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：４１５（Ｍ＋１）。

表１９における以下の化合物を、（＋／−）ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−６−（ヒドロキシメチル）−４−メチル−４−（３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメートの調製に従って本質的に調製する。

調製物４４
（＋／−）Ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−４−（３−ブロモフェニル）−６−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート

エチル２−アミノ−４−（３−ブロモフェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−カルボキシレート（２５０ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）入りのテトラヒドロフラン（５．５ｍＬ）の０℃の溶液に、塩化メチルマグネシウム（０．５８ｍＬ，１．７５ｍｍｏｌ，３．２当量）を加える。１５分後、追加の塩化メチルマグネシウム（０．３８ｍＬ，１．２ｍｍｏｌ，２当量）を加える。３０分後、反応混合物を飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液で急冷し、酢酸エチルで希釈する。層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。粗残留物を、０〜１００％の酢酸エチル／ヘキサンのグラジェントで溶離するシリカゲル（８０ｇ）上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題の化合物（２６％収率）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：４４３，４４５（Ｍ＋１）。

表２０における以下の化合物を、（＋／−）ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−４−（３−ブロモフェニル）−６−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメートの調製に従って本質的に調製する。

調製物４５
（＋／−）Ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−４−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−６−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート

ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−６−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート（１．１１ｇ，２．４１ｍｍｏｌ，１．０当量）入りの１，２−ジメトキシエタン（２２ｍＬ）および水（７ｍＬ）の１００℃の溶液に、ピリミジン−５−ボロン酸（１．２ｇ，９．６ｍｍｏｌ，４当量）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（５０８ｍｇ，０．７２３ｍｍｏｌ，０．３当量）、および炭酸セシウム（２．３６ｇ，７．２ｍｍｏｌ，３当量）を加える。２５分後、混合物を室温まで冷す。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ＥｔＯＡｃと水との間に分ける。水層をＥｔＯＡｃで３回抽出する。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗生成物を得る。粗残留物を、ＥｔＯＡｃで溶離するシリカゲル（８０ｇ）上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して以下を得る：
調製物４５：標題の化合物（４６０ｍｇ,４１％収率）：ＭＳ（ｍ／ｚ）：４６１（Ｍ＋１）；および
調製物４５ａ：（＋／−）２−（（４Ｓ，６Ｓ）−２−アミノ−４−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−イル）プロパン−２−オール、（１４５ｍｇ）：ＭＳ（ｍ／ｚ）：３６１（Ｍ＋１）。

表２１における以下の化合物を、（＋／−）ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−４−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−６−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメートの調製に従って本質的に調製する。

調製物４６
Ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−４−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−６−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバミメート

（＋／−）Ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−４−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−６−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート（４５５ｍｇ，０．９９ｍｍｏｌ）を、ＨＰＬＣキラル分離（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ−Ｈ２．１×２５ｃｍ×５μｍ；溶離液：２０％ＥｔＯＨ／ＣＯ_２；フロー：ＵＶ２２５ｎｍにて７０ｍＬ／分）により精製する。第２の溶離異性体を分離して、鏡像異性的に濃縮された標題の化合物（２９％）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：４６１（Ｍ＋１）。

実施例１
（Ｓ）−４−（３−（２−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン二塩酸塩

ＴＨＦ（４ｍＬ）中の（Ｓ）−４−（３−（２−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン（１６０ｍｇ，０．５３１ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でジオキサン（２ｍＬ）中のＨＣｌの飽和溶液を加える。反応混合物を４時間室温で攪拌する。溶媒を減圧下で除去する。得られる固体を無水エーテルで繰り返し洗浄し、減圧下で乾燥して、標題の化合物（８７％収率）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０２（Ｍ＋１）。

実施例２
（Ｓ）−４−［３−（５−クロロ−２−フルオロ−ピリジン−３−イル）−フェニル］−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イルアミン二塩酸塩

トリフルオロ酢酸（５０ｍＬ）およびメタノール（５０ｍＬ）中の（Ｓ）−Ｎ−｛４−［３−（５−クロロ−２−フルオロ−ピリジン−３−イル）−フェニル］−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イル｝−アセトアミド（４３０ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ）の溶液を、６０℃で８時間攪拌する。溶媒を減圧下で除去する。残留物を水に溶解し、飽和炭酸水素塩で中和し、酢酸エチルで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、残留物を得る。その残留物を酢酸エチルで溶離するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製する。得られたアミンをジクロロメタンに溶解し、ＨＣｌガスを３０秒間溶液に通して泡立てる。溶媒を減圧下で除去して、標題の化合物（５２％）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：３３６（Ｍ＋１）。

表２２の以下の化合物を、（Ｓ）−４−［３−（５−クロロ−２−フルオロ−ピリジン−３−イル）−フェニル］−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イルアミン二塩酸の調製に記載されるように本質的に調製する。

実施例５
（Ｓ）−４−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イルアミン

周囲温度にて、ジクロロメタン（１５ｍＬ）中の（Ｓ）−［４−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２６３ｍｇ，６２５μｍｏｌ）の溶液を、１分間ＨＣｌガスで泡立てる。反応物をセプタムで密閉し、１８時間攪拌する。溶媒を減圧下で除去して、標題の化合物（９５％より多い収率）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：３２１（Ｍ＋１）。

表２３の以下の化合物を、（Ｓ）−４−（２，４−ジフルオロ−５−ピリミジン−５−イル−フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イルアミンの調製に従って本質的に調製する。

実施例１８
（Ｓ）−４−メチル−４−（３−ピリミジン−５−イル−フェニル）−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イルアミン二塩酸塩
１００℃にて、（Ｓ）−Ｎ−［４−メチル−４−（３−ピリミジン−５−イル−フェニル）−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イル］−アセトアミド（２．７ｇ，８．３ｍｍｏｌ，１．０当量）の溶液を、５Ｎの塩化水素（５０ｍＬ，２５０ｍｍｏｌ，３０当量）中で２時間攪拌する。反応物を冷却し、揮発性物質を減圧下で除去する。得られた残留物を水に溶解し、酢酸エチルで抽出する。水層を飽和炭酸水素ナトリウムで中和し、酢酸エチルで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、残留物を得る。その残留物をシリカゲルプラグで濾過し、酢酸エチルで洗浄する。シリカゲルプラグをさらに、酢酸エチルおよび１０％のイソプロピルアミンを含む酢酸エチルで洗浄する。酢酸エチル洗浄液中の１０％のイソプロピルアミンを回収し、減圧下で溶媒を除去する。得られた遊離アミンを、１４ｍＬの１ＮＨＣｌを含む１００ｍＬの水溶液に溶解する。得られた溶液を凍結乾燥して、標題の化合物（８１％収率）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：２８５（Ｍ＋１）。

表２４の以下の化合物を、（Ｓ）−４−メチル−４−（３−ピリミジン−５−イル−フェニル）−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−［１，３］チアジン−２−イルアミン二塩酸塩の調製に記載されるように本質的に調製する。

実施例２２
（４Ｓ，６Ｒ）−４−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン二塩酸塩
周囲温度にて、ジクロロメタン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｒ）−４−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバミン酸塩とＮ−（（４Ｓ，６Ｒ）−４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）ベンズアミドの１：１混合物（３６０ｍｇ）を、１分間ＨＣｌガスで泡立てる。反応物をセプタムで密閉し、１８時間攪拌する。溶媒を減圧下で除去する。得られた残留物を水に溶解し、酢酸エチルで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、残留物としてＮ−（（４Ｓ，６Ｒ）−４−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４，６−ジメチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イル）ベンズアミドを得る。得られた残留物に５ＮＨＣｌ（５ｍＬ）を加え、反応物を２時間１００℃まで加熱する。溶媒を減圧下で除去して、粗標題の化合物を得る。

最初の酢酸エチル洗浄液からの水層を飽和炭酸水素ナトリウムで中和し、（３：１）ＣＨＣｌ_３：イソプロピルアルコールで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮する。この物質を粗生成物と合わせ、周囲温度および４０ｍＬ／分のフローにて分取ＨＰＬＣ：Ｘｔｅｒｒａ（登録商標）ＲＰ１８（３０×３００ｍｍ）カラムにより精製する。溶離系は、１〜５分間、０：１００（アセトニトリル：（Ｈ_２Ｏ中の０．１％ＨＣｌ））のアイソクラチックグラジェント、続いて、２０分にわたって１０：９０（アセトニトリル：（Ｈ_２Ｏ中の０．１％ＨＣｌ））から３０：７０（アセトニトリル：（Ｈ_２Ｏ中の０．１％ＨＣｌ））までのリニアグラジェントからなる。画分を合わせ、減圧下で濃縮して、標題の化合物（５０％収率）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：３１７（Ｍ＋１）。

実施例２３
（＋／−）２−（（４Ｓ，６Ｓ）−２−アミノ−４−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−イル）プロパン−２−オール
塩化水素ガスを、ジクロロメタン（５ｍＬ）中の（＋／−）ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−６−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−４−メチル−（３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバメート（３３ｍｇ，０．０７５ｍｍｏｌ）の溶液に通して泡立て、得られた混合物を密閉し、室温にて１６時間攪拌する。反応混合物を減圧下で濃縮し、ＭｅＯＨ中の７ＮＮＨ_３で溶離する、ＭｅＯＨにより平衡化したＳＣＸカラムを通過させることにより精製する。得られた遊離塩基をＭｅＯＨに溶解し、Ｅｔ_２Ｏ中の１ＮＨＣｌ（約５当量）を加える。混合物を濃縮し、Ｅｔ_２Ｏとともに２回共蒸発させて、標題の化合物（８７％収率）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：３４３（Ｍ＋１）。

実施例２４
２−（（４Ｓ，６Ｓ）−２−アミノ−４−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−イル）プロパン−２−オール

トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ，６Ｓ）−６−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−４−メチル−４−（３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−イルカルバミメート（２２１ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）の溶液を、８０分間室温で攪拌する。混合物をＭｅＯＨにより平衡化したＳＣＸカラムに直接加える。カラムをＭｅＯＨ（１００ｍＬ）で洗浄し、生成物をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の７ＮＮＨ_３で溶離する。溶液を減圧下で濃縮する。残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈し、ＨＣｌ（ｇ）を５分間通して泡立てる。反応混合物を濃縮して、標題の化合物（６７．５％収率）を得る：ＭＳ（ｍ／ｚ）：３４３（Ｍ＋１）。

表２５の以下の化合物を、２−（（４Ｓ，６Ｓ）−２−アミノ−４−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−６−イル）プロパン−２−オールの調製に記載されるように本質的に調製する。

インビトロでのアッセイ手順
インビトロでの酵素および細胞アッセイのために、試験化合物をＤＭＳＯ中で調製して、１０ｍＭのストック溶液を作製する。そのストック溶液をＤＭＳＯ中で連続希釈して、９６ウェル丸底プレート中で最終化合物濃度が１０ｍＭ〜１ｐＭの範囲である１０点の希釈曲線を得て、その後、インビトロでの酵素および全細胞アッセイを実施する。

インビトロでのプロテアーゼ阻害アッセイ
ＢＡＣＥＦＲＥＴアッセイ
試験化合物の連続希釈を上記のように調製する。化合物をさらにＫＨ_２ＰＯ_４緩衝液中で２０倍に希釈する。各希釈液の１０μＬを、反応混合物（２５μＬの５０ｍＭＫＨ_２ＰＯ_４、ｐＨ４．６、１ｍＭＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ−１００、１ｍｇ／ｍＬウシ血清アルブミン、および１５μＭのＦＲＥＴ基質）（Ｙａｎｇら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，９１（６）１２４９−５９（２００４）を参照のこと）を含む対応する低タンパク質結合ブラックプレートの列Ａ〜Ｈで各ウェルに加える。内容物を１０分間プレートシェーカーでウェル中で混合する。ＫＨ_２ＰＯ_４緩衝液中の１５μＬの２００ｐＭのヒトＢＡＣＥ（１〜４６０）：Ｆｃ（Ｖａｓｓｅｒら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８６，７３５−７４１（１９９９））を、基質および試験化合物を含むそのプレートに加えて、反応を開始する。プレートシェーカーで簡単に混合した後、０時の混合物のＲＦＵを３５５ｎｍの励起波長および４６０ｎｍの発光波長で記録する。反応プレートをアルミニウム箔で覆い、室温で１６〜２４時間、暗所の加湿オーブン中に維持する。インキュベーションの終わりにＲＦＵを、同じ励起および発光の設定で記録する。インキュベーションの０時と終了時でのＲＦＵの差は、化合物処理下でのＢＡＣＥの活性を表す。ＲＦＵの差を阻害濃度に対してプロットし、曲線を４−パラメーターロジスティック式にフィットさせて、ＥＣ_５０およびＩＣ_５０値を得る（Ｓｉｎｈａら，Ｎａｔｕｒｅ，４０２，５３７−５４０（２０００）を参照のこと）。

本明細書に例示した化合物を上記のように本質的に試験すると、１μＭ未満のＢＡＣＥについてのＩＣ_５０値を示した。以下の例示した化合物を上記のように本質的に試験すると、ＢＡＣＥについて以下の活性を示した。

これらのデータは、表２６の化合物が、インビトロにおいて精製された組み換えＢＡＣＥ酵素活性を阻害することを示す。

ヒトＢＡＣＥの発現
ヒト（受託番号：ＡＦ１９０７２５）を、室温ＰＣＲによって全脳ｃＤＮＡからクローニングする。アミノ酸配列＃１〜４６０に対応するヌクレオチド配列を、ヒトＩｇＧ_１（Ｆｃ）ポリペプチド（Ｖａｓｓａｒら，１９９９）をコードするｃＤＮＡに挿入する。ｈｕＢＡＣＥ：Ｆｃと名付けたＢＡＣＥ（１〜４６０）およびヒトＦｃのこの融合タンパク質をｐＪＢ０２ベクター中に構築する。ヒトＢＡＣＥ（１〜４６０）：Ｆｃ（ｈｕＢＡＣＥ：Ｆｃ）を、ＨＥＫ２９３細胞において一過性に発現する。各構築物の２５０μｇのｃＤＮＡをＦｕｇｅｎｅ６と混合し、１リットルのＨＥＫ２９３細胞に加える。トランスフェクションの４日後、馴化培地を精製のために収集する。

ｈｕＢＡＣＥ：Ｆｃの精製
ｈｕＢＡＣＥ：ＦｃをプロテインＡクロマトグラフィーにより精製する。酵素を少ないアリコートで−８０℃にて保存する。

β−セクレターゼ活性の阻害を測定するための全細胞アッセイ
ＨＥＫ２９３Ｓｗｅ全細胞アッセイ
β−セクレターゼ活性の阻害を測定するための慣例の全細胞アッセイは、一般にＳｗｅｄｉｓｈ変異（ＨＥＫ２９３／ＡＰＰ７５１ｓｗと記される）と呼ばれ、Ａｂｅｔａを過剰産生することが示されている（Ｃｉｔｒｏｎら，Ｎａｔｕｒｅ，３６０，６７２−６７４（１９９２））、天然の二重変異Ｌｙｓ６５１Ｍｅｔ６５２からＡｓｎ６５１Ｌｅｕ６５２を含むヒトＡＰＰ７５１ｃＤＮＡを安定に発現するヒト胎児腎臓細胞株ＨＥＫ２９３ｐ（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１５７３）を利用する。インビトロでのＡβ減少アッセイは文献に記載されている（Ｄｏｖｅｙら，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７６，１７３−１８１（２００１）；Ｓｅｕｂｅｒｔら，Ｎａｔｕｒｅ，３６１，２６０（１９９３）；およびＪｏｈｎｓｏｎ−Ｗｏｏｄら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９４，１５５０−１５５５（１９９７）を参照のこと）。

細胞（２００μＬの培地（１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ）を含む、３．５×１０^４細胞／ウェルでのＨＥＫ２９３／ＡＰＰ７５１ｓｗ）を、所望の濃度で阻害剤（ＤＭＳＯで希釈した）の存在／非存在下において４〜２４時間３７℃でインキュベートする。インキュベーションの終わりに、馴化培地を、例えばＡｂｅｔａペプチドの解析によって、β−セクレターゼ活性を証明するために解析する。全Ａｂｅｔａペプチド（Ａｂｅｔａ１〜ｘ）を、捕捉抗体としてモノクローナル２６６および報告している抗体としてビオチン化３Ｄ６を用いてサンドイッチＥＬＩＳＡによって測定する。あるいは、Ａｂｅｔａ１〜４０およびＡｂｅｔａ１〜４２ペプチドを、Ａｂｅｔａ１〜４０についての捕捉抗体としてモノクローナル２Ｇ３、およびＡｂｅｔａ１〜４２についての捕捉抗体としてモノクローナル２１Ｆ２１を用いてサンドイッチＥＬＩＳＡによって測定する。Ａｂｅｔａ１〜４０およびＡｂｅｔａ１〜４２ＥＬＩＳＡの両方は、報告している抗体としてビオチン化３Ｄ６を使用する。化合物の処理後に馴化培地に放出されるＡｂｅｔａの濃度は、このような条件下でＢＡＣＥの活性に対応する。１０点の阻害曲線をプロットし、４−パラメーターロジスティック式にフィットさせ、Ａｂｅｔａにより低下した効果についてＥＣ_５０およびＩＣ_５０値を得る。以下の例示した化合物を上記のように本質的に試験すると、Ａｂｅｔａにより低下した効果について以下の活性を示した。

これらのデータは、表２７の化合物がインビトロで細胞において生来の内因性ヒトＢＡＣＥを阻害することを示す。

ＰＤＡＰＰ初代ニューロンアッセイ
確認全細胞アッセイもまた、ＰＤＡＰＰトランスジェニック胎仔マウスから生成した初代ニューロン培地中で実施する。初代皮質ニューロンを、１６日の胎仔のＰＤＡＰＰ胚から調製し、９６ウェルプレート（ＤＭＥＭ／Ｆ１２（１：１）および１０％ＦＢＳ中に１５×１０^４細胞／ウェル）で培養する。インビトロで４〜６日後、培地を、Ｂ２７補足物を含む無血清ＤＭＥＭ／Ｆ１２（１：１）と取替え、ニューロンを、所望の濃度で阻害剤（ＤＭＳＯ中で希釈する）の存在／非存在下において２４時間３７℃でインキュベートする。インキュベーションの終わりに、馴化培地を、例えばＡｂｅｔａペプチドの解析によって、β−セクレターゼ活性の証明のために解析する。全Ａｂｅｔａペプチド（Ａｂｅｔａ１〜Ｘ）を、捕捉抗体としてモノクローナル２６６および報告している抗体としてビオチン化３Ｄ６を用いてサンドイッチＥＬＩＳＡによって測定する。あるいは、Ａｂｅｔａ１〜４０およびＡｂｅｔａ１〜４２ペプチドを、Ａｂｅｔａ１〜４０についての捕捉抗体としてモノクローナル２Ｇ３、およびＡｂｅｔａ１〜４２についての捕捉抗体としてモノクローナル２１Ｆ１２を用いてサンドイッチＥＬＩＳＡによって測定する。Ａｂｅｔａ１〜４０およびＡｂｅｔａ１〜４２ＥＬＩＳＡの両方は、報告している抗体としてビオチン化３Ｄ６を使用する。化合物処理後に馴化培地に放出されるＡｂｅｔａの濃度は、このような条件下でＢＡＣＥの活性に対応する。１０点の阻害曲線をプロットし、４−パラメーターロジスティック式にフィットさせて、Ａｂｅｔａにより低下した効果についてＥＣ_５０およびＩＣ_５０値を得る。以下の例示した化合物を上記のように本質的に試験すると、Ａｂｅｔａにより低下した効果について以下の活性を示した。

これらのデータは、表２８の化合物がインビトロで細胞において生来の内因性マウスＢＡＣＥを阻害することを示す。

β−セクレターゼのインビボでの阻害
マウス、モルモット、イヌおよびサルを含む、いくつかの動物モデルを、化合物処理後のインビボでのβ−セクレターゼ活性の阻害をスクリーニングするために使用できる。本発明に使用する動物は、野生型、トランスジェニック、または遺伝子ノックアウト動物であってもよい。例えば、Ｇａｍｅｓら，Ｎａｔｕｒｅ３７３，５２３−５２７（１９９５）に記載されるように調製されるＰＤＡＰＰマウスモデル、および他の非トランスジェニックまたは遺伝子ノックアウト動物は、阻害化合物の存在下においてＡｂｅｔａのインビボでの阻害およびｓＡＰＰｂｅｔａ産生を解析するのに有用である。一般に、２〜１２ヶ月齢のＰＤＡＰＰマウス、遺伝子ノックアウトマウス、または非トランスジェニック動物に、コーンオイル、シクロデキストラン、リン酸緩衝液、ＰＨＡＲＭＡＳＯＬＶＥ（登録商標）などのビヒクル、または他の適切なビヒクルで処方される化合物を投与する。化合物の投与の１〜２４時間後、動物を屠殺し、脳ならびに脳脊髄液および血漿を、Ａｂｅｔａ、Ｃ９９およびｓＡＰＰフラグメントの解析のために除去する（Ｄｏｖｅｙら，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７６，１７３−１８１（２００１）；およびＪｏｈｎｓｏｎ−Ｗｏｏｄら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９４，１５５０−１５５５（１９９７）を参照のこと）。

標準的な有効性研究のために、動物に種々の濃度の化合物を投与し、同じ時間に投与したビヒクル処置したコントロール群と比較する。いくらかの経時変化研究のために、脳組織、血漿または脳脊髄液を選択した動物から得て、０時で開始し、ベースラインを確立する。化合物を他の群に投与し、投与後、種々の時間で屠殺する。脳組織、血漿または脳脊髄液を選択した動物から得て、例えば特異的サンドイッチＥＬＩＳＡアッセイによって、Ａｂｅｔａペプチド、ｓＡＰＰｂｅｔａおよび他のＡＰＰフラグメントを含む、ＡＰＰ切断産物の存在について解析する。試験期間の終わりに、動物を屠殺し、脳組織、血漿または脳脊髄液を、Ａｂｅｔａペプチド、Ｃ９９およびｓＡＰＰｂｅｔａの存在について解析する。ＡＰＰトランスジェニック動物の脳組織もまた、化合物の処置後のβ−アミロイドプラークの量について解析する。

阻害化合物を投与した動物（ＰＤＡＰＰまたは他のＡＰＰトランスジェニックまたは非トランスジェニックマウス）は、ビヒクル処置したコントロールまたは０時のコントロールと比較した場合、脳組織、血漿または脳脊髄液におけるＡｂｅｔａまたはｓＡＰＰｂｅｔａの減少および脳組織におけるβアミロイドプラークの低下を示し得る。例えば、若い雄性ＰＤＡＰＰマウスに対する実施例１９の化合物の１００ｍｇ／ｋｇの皮下投与の３時間後、Ａｂｅｔａ１〜ｘペプチド、Ｃ９９およびｓＡＰＰｂレベルは、ビヒクル処置したマウスと比較して、それぞれ、大脳皮質において約３０％、５０％および２０％低下する。同様に、若い雄性ＰＤＡＰＰマウスに対する実施例５の化合物の３０ｍｇ／ｋｇの皮下投与の３時間後、Ａｂｅｔａ１〜Ｘペプチド、Ｃ９９およびｓＡＰＰｂレベルは、ビヒクル処置したマウスと比較して、それぞれ、約５０％、４５％および３０％低下する。実施例５の化合物の１０ｍｇ／ｋｇ用量の経口投与の３時間後、脳Ａｂｅｔａ、Ｃ９９およびｓＡＰＰｂの変化と一致して、血漿およびＣＳＦＡｂｅｔａ１〜ｘレベルは、それぞれ、約５０％および６０％減少する。

国際公開第２００７／０４９５３２号に例示される化合物およびその鏡像異性体を上記のアッセイに本質的に記載されるように試験すると、以下の活性を示した。

本発明の化合物は好ましくは、種々の経路によって投与される医薬組成物として処方される。最も好ましくは、このような化合物は経口投与用である。このような医薬組成物およびそれを調製するためのプロセスは、当該分野において周知である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ＴｈｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙ（Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏら，ｅｄｓ．，第１９版，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．，１９９５）を参照のこと。

式Ｉの化合物は、通常、広い用量範囲にわたって有効である。例えば、１日あたりの用量は、通常、体重１ｋｇあたり約０．０１〜約３０ｍｇの範囲内である。一部の例において、前述の範囲の下限より低い用量レベルがより適切であってもよく、一方、他の場合において、さらに多い用量が、いかなる有害な副作用も引き起こさずに利用されてもよく、従って、上記の用量範囲は、本発明の範囲を限定することを決して意図するものではない。実際に投与される化合物の量は、治療される状態、選択される投与経路、投与される実際の化合物（複数も含む）、年齢、体重、および個々の患者の反応、ならびに患者の症状の重症度を含む、関連する状況を考慮して医師によって決定されることは理解されるだろう。

Claims

式Ｉの化合物

（式中、
ｎは、０、１、または２であり、
Ｒ^１は、ピリミジニル、クロロもしくはフルオロで必要に応じて置換されたピラジニル、またはクロロ、フルオロ、およびＣ_１−Ｃ_３アルコキシから各々独立して選択される１つもしくは２つの置換基で必要に応じて置換されたピリジニルであり、
Ｒ^２は、各々の場合においてクロロまたはフルオロから独立して選択され、
Ｒ^３は、水素またはヒドロキシで必要に応じて置換されたＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^４は、水素またはＣ_１−Ｃ_３アルキルである）
あるいはその薬理学的に許容可能な塩。
Ｒ^１は、ピリミジニル、クロロ、フルオロ、もしくはメトキシから独立して選択される各々の場合において必要に応じて１回または２回置換されたピリジニル、またはフルオロで必要に応じて置換されたピラジニルであり、Ｒ^２は、クロロまたはフルオロであり、Ｒ^３は、水素、メチル、ヒドロキシで置換されたメチル、またはヒドロキシで置換されたイソプロピルであり、Ｒ^４は水素であり、ｎは０、１または２である、請求項１に記載の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩。
Ｒ^１は、ピリミジニル、フルオロで必要に応じて置換されたピリジニル、またはフルオロで必要に応じて置換されたピラジニルであり、Ｒ^２はフルオロであり、Ｒ^３は水素またはメチルであり、Ｒ^４は水素であり、ｎは１または２である、請求項１または２のいずれかに記載の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩。
Ｒ^１はピリミジニルであり、Ｒ^２はフルオロであり、Ｒ^３は水素であり、Ｒ^４は水素であり、ｎは２である、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩。
アミノチアジンの窒素に隣接するキラル中心の配置が（Ｓ）である、請求項１〜４のいずれかに記載の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩。
化合物４−（２，４−ジフルオロ−５−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン

またはその薬理学的に許容可能な塩。
前記化合物は、（Ｓ）−４−（２，４−ジフルオロ−５−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４−メチル−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−チアジン−２−アミン

である、請求項６に記載の化合物またはその薬理学的に許容可能な塩。
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物を、薬理学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と併せて含む医薬製剤あるいはその薬理学的に許容可能な塩。
治療に使用するための請求項１〜７のいずれかに記載の化合物。
アルツハイマー病の処置に使用するための請求項１〜７のいずれかに記載の化合物。