TWI593692B - 四氫吡咯并噻嗪化合物 - Google Patents

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布萊恩 摩根 華森
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美國禮來大藥廠
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    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
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Description

四氫吡咯并噻嗪化合物
本發明係關於新穎四氫吡咯并噻嗪化合物、包含該等化合物之醫藥組合物、使用該等化合物治療生理失調之方法、及可用於合成該等化合物之中間物及方法。
本發明係屬於治療阿茲海默氏症(Alzheimer’s disease)及其他涉及β澱粉樣(Aβ)肽(澱粉樣前驅蛋白質(APP)之具神經毒性且高度聚集之肽片段)之疾病及病症之領域。阿茲海默氏症係一種影響全世界數百萬患者之嚴重神經退行性病症。鑒於當前獲批上市的藥劑僅為患者提供短暫症狀性效益，對於治療阿茲海默氏症存在明顯未滿足的需求。
阿茲海默氏症之特徵在於在大腦中產生、聚集並沉積Aβ。已顯示，完全或部份抑制β-分泌酶(β-位澱粉樣前驅蛋白質裂解酶；BACE)對小鼠模型中斑塊相關性或斑塊相依性病理具有顯著效果，此表明Aβ肽含量即使小幅下降亦可長期顯著減少斑塊負荷及突觸不足，從而提供顯著治療效益，尤其係在治療阿茲海默氏症中。
US 2009/0209755揭示具有BACE抑制活性且經進一步揭示為可用於治療由Aβ肽引起之神經退行性疾病(諸如阿茲海默型癡呆)之治療劑之稠合胺基二氫噻嗪衍生物。此外，J.Neuroscience,31(46)，第16507-16516頁(2011)揭示(S)-4-(2,4-二氟-5-嘧啶-5-基-苯基)-4-甲基-5,6-二氫-4H-[1,3]曝嗪-2-基胺，其係一種口服投與的CNS-活性BACE抑制劑。
希望具有足夠強CNS滲透性之BACE抑制劑可治療Aβ肽介導型病 症(諸如阿茲海默氏症)。本發明提供若干種新穎化合物，其等係BACE之強效抑制劑。此外，本發明提供若干種具有CNS滲透性之新穎化合物。
因此，本發明提供式I化合物：
其中R係H或F；且 A係：，，或； 或其醫藥上可接受的鹽。
本發明亦提供一種治療患者之阿茲海默氏症之方法，其包括向有此治療需求之患者投與有效量之式I化合物或其醫藥上可接受的鹽。
本發明另外提供一種預防患者之輕度認知障礙發展為阿茲海默氏症之方法，其包括向有此治療需求之患者投與有效量之式I化合物或其醫藥上可接受的鹽。
本發明亦提供一種抑制患者之BACE之方法，其包括向有此治療需求之患者投與有效量之式I化合物或其醫藥上可接受的鹽。
本發明亦提供一種抑制澱粉樣前驅蛋白質之BACE介導型裂解之方法，其包括向有此治療需求之患者投與有效量之式I化合物或其醫藥上可接受的鹽。
本發明另外提供一種抑制產生Aβ肽之方法，其包括向有此治療需求之患者投與有效量之式I化合物或其醫藥上可接受的鹽。
此外，本發明提供一種用於療法，特定言之用於治療阿茲海默氏症或用於預防輕度認知障礙發展為阿茲海默氏症之式I化合物或其醫藥上可接受的鹽。此外，本發明提供一種式I化合物或其醫藥上可接受的鹽於製造用於治療阿茲海默氏症之藥劑之用途。本發明亦提供一種式I化合物或其醫藥上可接受的鹽於製造用於預防輕度認知障礙發展為阿茲海默氏症之藥劑之用途。本發明亦提供一種式I化合物或其醫藥上可接受的鹽於製造用於抑制BACE之藥劑之用途。本發明另外提供一種式I化合物或其醫藥上可接受的鹽於製造用於抑制產生Aβ肽之藥劑之用途。
本發明另外提供一種醫藥組合物，其包含式I化合物或其醫藥上可接受的鹽與一或多種醫藥上可接受的載劑、稀釋劑或賦形劑之組合。在一特定實施例中，該組合物另外包含一或多種其他治療劑。本發明亦涵蓋用於合成式I化合物之新穎中間物及方法。
已基於臨床表現及展現輕度認知障礙之患者經時發展為阿茲海默氏癡呆將輕度認知障礙定義為與阿茲海默氏症相關的癡呆之潛伏前驅期。(Morris等人，Arch.Neurol.,58,397-405(2001)；Petersen等人，Arch.Neurol.,56,303-308(1999))。術語「預防輕度認知障礙發展為阿茲海默氏症」包括減緩、阻止或逆轉患者之輕度認知障礙發展為阿茲海默氏症。
較佳的化合物係： 或其醫藥上可接受的鹽，其中以游離鹼特佳。
如本文所使用，術語「治療」包括抑制、減緩、阻止或逆轉現 有症狀或病症之發展或嚴重度。
如本文所使用，術語「患者」係指人類。
術語「抑制產生Aβ肽」意指減少患者之Aβ肽之活體內含量。
如本文所使用，術語「有效量」係指在對診斷或治療下之患者單次或多次投與時，在該患者中提供所需效果之本發明化合物或其醫藥上可接受的鹽之用量或劑量。
熟習此項技術之主治醫師可藉由使用已知技術及藉由觀察類似情形下所得結果輕易確定有效量。在確定針對某一患者之有效量時，主治醫師要考慮許多因素，包括(但不限於)：患者類型；其體型、年齡及一般健康狀況；所涉及的具體疾病或病症；該疾病或病症之介入度或嚴重度；個別患者之反應；所投與的特定化合物；投與模式；所投與製劑之生物利用率特性；所選擇的給藥方案；併用藥物之使用及其他相關情況。
本發明化合物通常係在寬廣劑量範圍內有效。例如，每日劑量通常係在約0.01至約20mg/kg體重之範圍內。在一些實例中，低於上述範圍之下限之劑量水平可能足矣，而在其他情形下，可在可接受的副作用下採用更大劑量，且因此上述劑量範圍無意以任何方式限制本發明範圍。
本發明化合物較佳係調配成藉由任何使得該化合物係生物可利用之途徑(包括口服及非經腸途徑)投與之醫藥組合物。最佳地，此等組合物係用於口服投與。此等醫藥組合物及其製備方法係此項技術中所熟知。(參見，例如Remington：The Science and Practice of Pharmacy(D.B.Troy,Editor，第21版，Lippincott,Williams & Wilkins,2006)。
一般技術者將瞭解，本發明化合物可以如簡圖A中所繪之互變異構體形式存在。當在本申請案中任何時候提及所給出之本發明化合物之特定互變異構體之一時，應理解其涵蓋兩種互變異構體形式及其所 有混合物。
可藉由此項技術中已知的各種程序來製備本發明化合物或其鹽，其中一些程序係顯示於下文之流程圖、製法及實例中。各所述途徑之具體合成步驟可以不同方式組合或結合來自不同流程圖之步驟來製備式I化合物及其鹽。可藉由習知方法回收以下流程圖中各步驟之產物，包括萃取、蒸發、沈澱、層析、過濾、研磨及結晶。
為明晰起見，在以下流程圖中未指明某些立體化學中心，且已忽略某些取代基，且無意以任何方式限制該等流程圖之教示。此外，一般技術者可在式I化合物合成中之任何方便時間點藉由諸如選擇性結晶技術或對掌性層析之方法來分離或離析個別異構體、對映異構體或非對映異構體(參見例如，J.Jacques等人，「Enantiomers,Racemates,and Resolutions」,John Wiley and Sons,Inc.,1981，及E.L.Eliel and S.H.Wilen,「Stereochemistry of Organic Compounds」,Wiley-Interscience,1994)。名稱「異構體1」及「異構體2」分別係指第一種及第二種自對掌性層析溶離出之化合物，且若在合成早期開始對掌性層析，則相同名稱適用於後續中間物及實例。此外，以下流程圖中所述之中間物含有許多氮保護基。可變保護基在每次出現時可係相同或不同，端看特定反應條件及欲進行的特定轉變而定。保護及去保護條件係熟練技術者所熟知，且描述在文獻(參見例如「Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis」，第四版，Peter G.M.Wuts及Theodora W.Greene著，John Wiley and Sons,Inc.2007)中。
一般技術者將瞭解，本發明化合物係由含有至少兩個對掌性中心的核心組成：
雖然本發明涵蓋該等化合物之所有個別對映異構體及對映異構體混合物，但在如簡圖B中所示之標記為1及2之碳原子處具有絕對組態之化合物係較佳的本發明化合物。
本文所使用的縮寫詞係根據Aldrichimica Acta，第17卷，第1期，1984加以定義。其他縮寫詞係如下所定義：「APP」係指澱粉樣前驅蛋白質；「BOC」係指第三丁氧羰基；「CSF」係指腦脊髓液；「DCC」係指1,3-二環己基碳化二亞胺；「DIC」係指二異丙基碳化二亞胺；「DMEM」係指杜貝卡氏改良依格培養基(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium)；「DMSO」係指二甲基亞碸；「EDCI」係指1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽；「ee」係指對映異構體過量；「EtOAc」係指乙酸乙酯；「Ex」係指實例；「F12」係指Ham’s F12培養基；「FBS」係指胎牛血清；「FRET」係指螢光共振能量轉移；「HEK」係指人類胚腎；「HOAc」係指乙酸；「HOAt」係指1-羥基-7-偶氮苯并三唑；「HOBt」係指1-羥基苯并三唑水合物；「HPLC」係指高效液相層析；「hr」係指小時；「IC50」係指某一藥劑可產生50%最大抑制反應之藥劑濃度；「min」係指分鐘；「MTBE」係指甲基第三丁基醚；「PDAPP」係指血小板所衍生的澱粉樣前驅蛋白質；「Prep」係指製備；「RFU」係指相對螢光單位；「Rt」係指滯留時間；「RT」係指室溫；「SCX」係指強陽離子交換；「SFC」係指超臨 界流體層析；且「THF」係指四氫呋喃。
在下文流程圖中，除非另有說明，否則所有取代基係如先前所定義。一般技術者通常可容易獲得試劑及起始材料。其他材料可藉由與已知的結構類似化合物之合成法及下文之製法及實例中所述程序(包括任何新穎程序)類似之有機雜環化學之標準技術製得。
流程圖1描繪肟(4)及(8)之形成。該等肟各可用以形成雙環異噁唑(5)。可在流程圖1中所示製法之任何時間點(步驟1及步驟7)插入經取代之芳族基團。「PG」係係針對胺基而形成之保護基，諸如胺基甲酸酯基及烯丙基。此等基團係此項技術中所熟知及瞭解。
在2步驟反應中，可使用無機鹼(諸如碳酸鉀)使具有β鹵素之酮(1)經受保護的烯丙胺(2)烷基化(3，步驟1)，然後在極性質子溶劑(諸如乙醇)中用羥胺鹽酸鹽及有機鹼(諸如吡啶)處理以得到肟(4，步驟2)。然後，肟(4)可在3+2環化反應中藉由若干種方法轉化為雙環異噁唑(5)，諸如在非極性溶劑(諸如甲苯或二甲苯)中加熱該肟(4)，以形 成雙環異噁唑(5，步驟3)。或者，可自二甲縮醛(6)開始形成肟，用酸(諸如甲酸)處理二甲縮醛(6)以形成醛(7，步驟4)。然後，在步驟5中，可用羥胺鹽酸鹽及鹼(諸如三水乙酸鈉)將醛(7)轉化為肟(8)。雙環異噁唑(9)可如步驟6中所示使用次氯酸鈉水溶液自肟(8)形成。然後，在步驟7中，使受保護的雙環異噁唑(9)與芳族有機鋰試劑或格林納(Grignard)試劑反應以得到受保護的雙環異噁唑(5)。
流程圖2顯示得到受保護吡咯并噻嗪(12)之不同途徑。可在加壓氫化條件下，在乙酸中用Zn粉或在極性溶劑(諸如乙醇)中用阮內鎳(Raney Nickel)處理受保護的雙環異噁唑(5)，以得到胺基吡咯啶甲醇(13，步驟11)。然後，使胺基吡咯啶甲醇(13)與苯甲醯基異硫氰酸酯在極性溶劑(諸如THF)中反應，隨後添加1,1'-羰基二咪唑(CDI)，以得到受保護的稠合吡咯啶噻嗪(12，步驟12)。或者，可使雙環異噁唑(5)之胺與苯甲醯基異硫氰酸酯反應以得到硫脲(10，步驟8)，然後，在步驟9中，可在乙酸中用鋅粉打開異噁唑環，以得到羥基化合物(11)。然後，可在極性非質子溶劑(諸如THF)中用CDI或在DCM中用1-氯-N,N,2-三甲基丙烯基胺處理羥基化合物(11)，以形成受保護的稠合 吡咯啶噻嗪(12，步驟10)。稠合吡咯啶噻嗪(12)亦可自光延(Mitsunobu)反應(諸如使用三苯基膦及偶氮二羧酸二異丙酯(DIAD))形成。
流程圖3描繪將吡咯并噻嗪(12)轉化為苯胺(14，步驟13)，其然後可在吡咯啶之去保護及雜芳基化後醯化。噻嗪胺之去保護得到式I化合物。
在疊氮化物源(諸如疊氮化鈉)之存在下對適宜吡咯并噻嗪(12)進行疊氮-去鹵反應。此等疊氮-去鹵反應係此項技術中所熟知及瞭解。可藉由眾所周知及描述在此項技術中之氫化條件或藉由此項技術中所 熟知的還原劑(諸如LiAlH4、NaBH4、PPh3)使所得疊氮化物中間物還原為苯胺(14，步驟13)。
可在此項技術中所熟知的酸性條件下使受BOC保護的吡咯啶去保護(步驟14之步驟1)。然後，可在親核芳族取代反應(SNAr)中使用有機鹼(諸如二異丙基乙胺、三乙胺或N,N,N,N’-四甲基胍)以經取代之芳族嘧啶使該去保護吡咯啶雜芳基化，以得到化合物15(步驟14之步驟2)。苯胺(15)可與雜芳族羧酸(16)在偶合條件下偶合(步驟15之步驟1)。熟習此項技術者將瞭解，存在許多用於自羧酸及胺之反應形成醯胺之方法及試劑。例如，適宜苯胺(15)與化合物16之適宜酸在偶合試劑及胺鹼(諸如DIPEA或三乙胺)存在下之反應將在噻嗪胺之去保護後得到式I化合物。偶合試劑包括碳化二亞胺(諸如DCC、DIC、EDCI)及芳族肟(諸如HOBt及HOAt)。此外，可使用非親核陰離子之脲鎓或鏻鹽(諸如HBTU、HATU、PyBOP及PyBrOP)代替較傳統的偶合試劑。可使用添加劑(諸如DMAP)來增強反應。或者，可使用經取代之苯甲醯氯在鹼(諸如三乙胺或吡啶)存在下使受保護的苯胺(15)醯化。然後，可在極性非質子溶劑(諸如乙醇)中用有機鹼(諸如吡啶及甲基羥胺鹽酸鹽)或在甲醇中用無機鹼(諸如氫氧化鋰)使該受保護噻嗪胺去保護，以得到式I化合物。
在可選步驟中，可藉由使適宜之式I游離鹼與適宜之醫藥上可接受的酸在適宜溶劑中及標準條件下反應來形成式I化合物之醫藥上可接受的鹽。此外，此等鹽之形成可在氮保護基之去保護時同時發生。此等鹽之形成係此項技術中所熟知及瞭解。參見，例如，Gould,P.L.,「Salt selection for basic drugs,」International Journal of Pharmaceutics,33：201-217(1986)；Bastin,R.J.，等人「Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities,」Organic Process Research and Development,4：427-435 (2000)；及Berge,S.M.等人，「Pharmaceutical Salts,」Journal of Pharmaceutical Sciences,66：1-19,(1977)。一般技術者將瞭解，式I化合物係易於轉化為醫藥上可接受的鹽(諸如鹽酸鹽)且可以此形式分離。
製法及實例
以下製法及實例進一步說明本發明。除非有相反指示，否則本文所述化合物係利用Symyx® Draw第3.2版或第4.0版(Symyx Solutions,Inc.)或IUPACNAME ACDLABS命名及編號。
製法1
1-(3-溴苯基)-2-(二烯丙基胺基)乙酮
將碳酸鉀(38.8g，281mmol)添加至含於乙腈(430mL)中之溴化3-溴苯乙酮(60g，216mmol)中，並在氮氣下將該混合物冷卻至0℃。歷時1小時滴加二烯丙胺(34.6mL，280.63mmol)，並使該反應升溫至22℃隔夜。濃縮粗反應混合物，並將殘餘物分配於水(300mL)及MTBE(300mL)中。棄去水層，並用水(100mL，2×)及鹽水(100mL)清洗有機層。在硫酸鈉上乾燥有機層，過濾，將溶劑蒸發至恆重，以得到標題化合物(62g，98%)。ES/MS(m/e)：294(M+1)。
製法2
N-(2,2-二甲氧基乙基)胺基甲酸苄酯
在0℃下，用4.85M氫氧化鈉溶液(70.8mL，343.5mmol)處理胺 基乙醛縮二甲醇(25mL，229mmol)之甲苯(120mL)溶液。在0℃下攪拌該混合物10分鐘，並添加氯甲酸苄酯(33.8mL，229mmol)，在添加期間保持內部溫度低於20℃。歷時4小時使該混合物升溫至室溫。分離出有機層，用鹽水清洗，在硫酸鈉上乾燥，並濃縮至乾，以得到標題化合物(54g，98%)。ES/MS(m/e)：240(M+H)。
製法3
N-烯丙基-N-(2,2-二甲氧基乙基)胺基甲酸苄酯
在氮氣下，用固體氫氧化鉀(51.6g，919.69mmol)處理N-(2,2-二甲氧基乙基)胺基甲酸苄酯(50g，208.9mmol)之甲苯(180mL)溶液。10分鐘後，添加苄基三乙基氯化銨(0.8g，3.1mmol)。再過10分鐘後，歷時10分鐘滴加溴丙烯(33g，272.8mmol)之甲苯(50mL)溶液。在50℃下攪拌所得混合物48小時。將該混合物冷卻至室溫，並用水淬滅。分離出有機層，用鹽水清洗，在硫酸鎂上乾燥，並濃縮至乾，以得到標題化合物(44g，75%)。ES/MS(m/e)：280(M+H)。
製法4
N-烯丙基-N-(2-側氧基乙基)胺基甲酸苄酯
在室溫下攪拌N-烯丙基-N-(2,2-二甲氧基乙基)胺基甲酸苄酯(30g，107mmol)含於甲酸(36.8mL，860mmol)及水(4.84mL)中之溶液隔夜。濃縮該混合物，並用己烷/乙酸乙酯(1：2)及水加以稀釋。分離出有機層，用鹽水溶液清洗直至pH=6，並在硫酸鈉上乾燥。蒸發溶 劑以得到標題化合物(25g，99%)。ES/MS(m/e)：234(M+H)。
製法5
1-(3-溴苯基)-2-(二烯丙基胺基)乙酮肟
在22℃下，攪拌1-(3-溴苯基)-2-(二烯丙基胺基)乙酮(60g，204.7mmol)含於乙醇(720mL)及吡啶(24.8mL，307mmol)中之溶液15分鐘。歷時1小時向該溶液逐份添加羥胺鹽酸鹽(17g，246mmol)。歷時2小時使該反應升溫至50℃，然後歷時16小時加熱至70℃。蒸發溶劑，並將殘餘物分配於水(300mL)及甲基第三丁基醚(300mL)中。分離出有機層，並用水(100mL，2×)及鹽水(100mL)清洗。在硫酸鈉上乾燥有機層，過濾，並蒸發至乾，以得到標題化合物(75.5g，79%)。ES/MS(m/e)：309(M+1)。
製法6
N-烯丙基-N-[2-羥基亞胺基乙基]胺基甲酸苄酯
用羥胺鹽酸鹽(9.68g，139mmol)及三水乙酸鈉(16g，117.9mmol)於水(75mL)中之溶液處理N-烯丙基-N-(2-側氧基乙基)胺基甲酸苄酯(25g，107mmol)於乙腈(150mL)中之溶液。在室溫攪拌該混合物隔夜。蒸發乙腈，並用乙酸乙酯萃取該水溶液。分離有機層，在硫酸鎂上乾燥，並在真空下濃縮，得到標題化合物(24g，90%)。ES/MS(m/e)：249(M+H)。
製法7
5-烯丙基-6a-(3-溴苯基)-3,3a,4,6-四氫-1H-吡咯并[3,4-c]異噁唑
將粗製1-(3-溴苯基)-2-(二烯丙基胺基)乙酮肟(75.5g，195.34mmol)溶解於甲苯(600mL)中，並回流12小時。在真空中蒸發溶劑，並將殘餘物溶解於1N HCl水溶液(1L)及甲基第三丁基醚(300mL)之混合物中。攪拌該混合物15分鐘，並添加矽藻土(10g)。該混合物再攪拌20分鐘，並經矽藻土過濾。用另外的1N HCl水溶液(200mL)及甲基第三丁基醚(200mL)洗濾餅。分離有機層，並用1N HCl(2×100mL)洗。合併水層，並用50% w/w NaOH將pH調至9。用甲基第三丁基醚(3×250mL)萃取混合物水溶液。合併有機層，在硫酸鈉上乾燥，並過濾。蒸發濾液，並在真空下乾燥，得到紅色固體(60g)。用己烷(600mL)稀釋該紅色固體，並將該混合物加熱至回流20分鐘。添加木炭(2g)，並使該混合物濾過矽藻土。濾液在大氣壓下濃縮，以將最終體積調整為300mL。將溶液冷卻至22℃，並攪拌3小時。由過濾收集淺黃色固體，並在真空下乾燥至恆重，得到標題化合物(40g，60%)。ES/MS(m/e)：309(M+1)。
製法8
3,3a,4,6-四氫吡咯并[3,4-c]異噁唑-5-甲酸苄酯
在10分鐘內用次氯酸鈉之5重量%水溶液(106.08mmol，143.06mL)逐滴處理N-烯丙基-N-[2-羥基亞胺基乙基]胺基甲酸苄酯(24g，96.6mmol)之二氯甲烷(338mL)溶液。在室溫下攪拌所得混合物隔 夜。用亞硫酸氫鈉之40%水溶液(7g)使反應中止。分離出有機層，在硫酸鎂上乾燥，並在真空下濃縮。在矽膠上純化粗產物(用5%乙酸乙酯/己烷進行溶離)，以得到標題化合物(18g，75%)。ES/MS(m/e)：247(M+H)。
製法9
6a-(5-溴-2-氟-苯基)-3,3a,4,6-四氫-1H-吡咯并[3,4-c]異噁唑-5-甲酸苄酯
將正丁基鋰(25.4mL，40.6mmol)之1.6M己烷溶液滴加至4-溴-1-氟-2-碘苯(12.22g，40.6mmol)之-78℃四氫呋喃(60mL)溶液中，以得到黃色溶液，並在-78℃下將其攪拌15分鐘。
將三氟化硼合乙醚(5.14mL，40.6mmol)添加至3,3a,4,6-四氫吡咯并[3,4-c]異噁唑-5-甲酸苄酯(5g，20.3mmol)含於四氫呋喃(60mL)之另一-78℃溶液中，並在-78℃下攪拌該混合物5分鐘。經由套管將該溶液添加至先前製得的-78℃有機鋰混合物中。在-78℃下攪拌合併混合物30分鐘。用氯化銨飽和水溶液使該混合物驟冷，並升溫至室溫。用乙酸乙酯(3×)萃取該混合物，並合併有機萃取物，在硫酸鈉上乾燥，過濾並在真空中移除溶劑。在矽膠上以5%至100%乙酸乙酯/己烷之梯度純化粗產物35分鐘，以得到標題化合物(2.27g，27%)。ES/MS(m/e)：(79Br/81Br)421/423(M+H)。
製法10
1-(苯甲醯基硫代胺甲醯基)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-3,3a,4,6-四氫吡咯并[3,4-c]異噁唑-5-甲酸苄酯
將苯甲醯基異硫氰酸酯(2.87mL，21.28mmol)滴加至6a-(5-溴-2-氟-苯基)-3,3a,4,6-四氫-1H-吡咯并[3,4-c]異噁唑-5-甲酸苄酯(5.977g，14.2mmol)之四氫呋喃(95mL)溶液中，並在氮氣下攪拌隔夜。在真空中移除溶劑。在矽膠上以5%至100% EtOAc/己烷之梯度純化粗產物30分鐘，以得到標題化合物(6.05g，73%)。ES/MS(m/e)：(79Br/81Br)584/586(M+H)。
製法11
[1-烯丙基-4-胺基-4-(3-溴苯基)吡咯啶-3-基]甲醇
用鋅粉(42.3g，646.8mmol)一次性處理5-烯丙基-6a-(3-溴苯基)-3,3a,4,6-四氫-1H-吡咯并[3,4-c]異噁唑(40g，129.4mmol)之22℃乙酸(400mL)溶液。在室溫下強力攪拌該反應1小時。添加乙酸乙酯(400mL)，並使該混合物濾過矽藻土。蒸發濾液，並在真空下乾燥殘餘物。將殘餘物分配於水(300mL)及MTBE(300mL)中。用50重量%氫氧化鈉將pH調至8，並分離出有機層，在硫酸鈉上乾燥，並進行過濾。蒸發濾液，並在真空下乾燥殘餘物，以得到標題化合物(41g，97%)。ES/MS(m/e)：311(M+1)。
製法12
3-(苯甲醯基硫代胺甲醯基胺基)-3-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(羥甲基)吡咯啶-1-甲酸苄酯
在氮氣下，在室溫下，在乙酸(52mL)中攪拌1-(苯甲醯基硫代胺甲醯基)-6a-(5-溴-2-氟-苯基)-3,3a,4,6-四氫吡咯并[3,4-c]異噁唑-5-甲酸苄酯(6.05g10.4mmol)及鋅(粉末，<10微米)(6.77g，103.5mmol)之混合物隔夜。用乙酸乙酯稀釋該反應，並濾過矽藻土。在真空中移除溶劑，並用乙酸乙酯、水及碳酸氫鈉飽和水溶液稀釋殘餘物。用乙酸乙酯(3×)萃取該混合物，合併有機層，並在硫酸鈉上乾燥，過濾，並在真空中移除溶劑。在矽膠上以5%至100% EtOAc/己烷之梯度純化粗產物30分鐘，以得到標題化合物(5.222g，86%)。ES/MS(m/e)：(79Br/81Br)586/588(M+H)。
製法13
[(3R,4S)-1-烯丙基-4-胺基-4-(3-溴苯基)吡咯啶-3-基]甲醇；(2R,3R)-2,3-雙[(4-甲基苯甲醯基)氧基]丁二酸
將[1-烯丙基-4-胺基-4-(3-溴苯基)吡咯啶-3-基]甲醇(77g，235mmol)之異丙醇(914mL)溶液加熱至70℃。添加二對甲苯醯基-L-酒石酸(86.2g，223mmol)，並歷時2小時將混合物冷卻至22℃，並攪拌隔夜。過濾漿液以收集淺黃色固體，並用異丙醇清洗。在真空下乾燥固體，以得到標題化合物(63g，36%)。ES/MS(m/e)：311(M+1)。藉由逆相對掌性層析分析產物：第一溶離異構體之分析(管柱：Chiralpak ID-3 4.6 x 50mm；溶離液：70：30之20mM碳酸氫銨水溶液：乙腈；流 速：1.5mL/min，在UV 215nm下)確定Rt=1.26分鐘之對映體富集型(96% ee)對映異構體。
製法14
[(3R,4S)-1-烯丙基-4-胺基-4-(3-溴苯基)吡咯啶-3-基]甲醇
將[(3R,4S)-1-烯丙基-4-胺基-4-(3-溴苯基)吡咯啶-3-基]甲醇；(2R,3R)-2,3-雙[(4-甲基苯甲醯基)氧基]丁二酸(63g 85.8mmol)與1N HCl水溶液(800mL)及乙酸乙酯(400mL)合併在一起，並在22℃下攪拌該混合物15分鐘。使層分離，並用50重量%氫氧化鈉將水層之pH調至10。用甲基第三丁基醚(3×250mL)萃取混合物水溶液。在硫酸鎂上乾燥合併的有機層，過濾並蒸發至乾，以得到標題化合物(27g，99%)。ES/MS(m/e)：311(M+1)。
製法15
N-[(4aR,7aS)-6-烯丙基-7a-(3-溴苯基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺
在氮氣氛下，將[(3R,4S)-1-烯丙基-4-胺基-4-(3-溴苯基)吡咯啶-3-基]甲醇(27g；86.7mmol)之四氫呋喃(270mL)溶液冷卻至-5℃。滴加苯甲醯基異硫氰酸酯(12.3mL，91mmol)，將溫度保持在低於0℃。使反應歷時1小時升溫至22℃。一次性添加1,1'-羰基二咪唑(28.1g，173.5mmol)，並在下22℃下攪拌該反應1小時，然後加熱至回流16小 時。在真空中移除溶劑，並在真空中乾燥殘餘物。將該粗物質分配於甲基第三丁基醚(500mL)及水(250mL)中。分離出有機層，在硫酸鎂上乾燥，過濾並蒸發至乾。在矽膠上純化粗物質(二氯甲烷/乙酸乙酯梯度為90/10至60/40)，以得到標題化合物(27g，68%)。ES/MS(m/e)：456(M+1)。
製法16
2-苯甲醯胺基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸苄酯
將1,1'-羰基二咪唑(2.87g，17.7mmol)添加至3-(苯甲醯基硫代胺甲醯基胺基)-3-(5-溴-2-氟-苯基)-4-(羥甲基)吡咯啶-1-甲酸苄酯(5.198g，8.86mmol)之四氫呋喃(52mL)溶液中。在室溫下攪拌該混合物1.5小時，及然後在氮氣下將該反應加熱至回流隔夜。使該反應冷卻，用水稀釋，並用乙酸乙酯(3×)萃取。合併有機層，在硫酸鈉上乾燥，過濾，並在真空中移除溶劑。在矽膠上以5%至100%EtOAc/己烷之梯度純化粗產物30分鐘，以得到標題化合物(2.93g，58%)。ES/MS(m/e)：(79Br/81Br)568/570(M+H)。
製法17
N-[(4aR,7aS)-7a-(3-溴苯基)-4a,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺
N-[(4aR,7aS)-6-烯丙基-7a-(3-溴苯基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4- d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(1g，2.19mmol)及N,N-二甲基巴比妥酸(0.868g，5.48mmol)含於氯仿(22mL)中之室溫混合物係藉由在RT下向所得漿液鼓入氮氣5分鐘而脫氣。用肆(三苯基膦)鈀(0.261g，219莫耳)處理該混合物，並在氮氣下攪拌1.5小時。
在另一燒瓶中，N-[(4aR,7aS)-6-烯丙基-7a-(3-溴苯基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(22.2g，48.6mmol)及N,N-二甲基巴比妥酸(19.28g，121.6mmol)含於氯仿(486mL)中之混合物係藉由在RT下向所得漿液鼓入氮氣5分鐘而脫氣。用肆(三苯基膦)鈀(5.79g，4.86mmol)處理該混合物，並在氮氣下攪拌2小時。
將該兩種反應合併在一起，並在真空中移除溶劑，以得到粗產物。在矽膠上以0.5%至10%甲醇/二氯甲烷之梯度純化該粗物質30分鐘，以得到標題化合物(22.4g，100%)。ES/MS(m/e)：(79Br/81Br)416/418(M+H)。
製法18
N-[7a-(5-溴-2-氟-苯基)-4a,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺
將碘三甲基矽烷(2.21mL，15.46mmol)滴加至2-苯甲醯胺基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸苄酯(2.93g，5.15mmol)之乙腈(44mL)室溫溶液中。在室溫下攪拌該反應兩小時，並在真空中移除溶劑。藉助SCX管柱，先後使用3：1之二氯甲烷：甲醇及2：1之二氯甲烷：7N氨甲醇溶液來純化粗產物，以得到標題化合物(2.098g，94%)。ES/MS(m/e)：(79Br/81Br)434/436(M+H)。
製法19
(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-7a-(3-溴苯基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸第三丁酯
先後用二碳酸二第三丁酯(8.81g，40.36mmol)及三乙胺(7.67mL，55.04mmol)處理N-[(4aR,7aS)-7a-(3-溴苯基)-4a,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(22.4g，36.69mmol)之二氯甲烷(367mL)室溫溶液，並在氮氣下在室溫下攪拌該反應1小時。在真空中移除溶劑，並在矽膠上以5%至100%乙酸乙酯/己烷之梯度純化粗產物25分鐘，以得到標題化合物(20.22g，100%)。ES/MS(m/e)：(79Br/81Br)516/518(M+H)。
製法20
2-苯甲醯胺基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸第三丁酯
將二碳酸二第三丁酯(1.16g，5.31mmol)及三乙胺(1.01mL，7.25mmol)添加至N-[7a-(5-溴-2-氟-苯基)-4a,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(2.098g，4.83mmol)之二氯甲烷(48mL)溶液中。在氮氣下，於室溫下攪拌該反應1小時。在真空中移除溶劑，並在矽膠上以5%至100%EtOAc/己烷之梯度純化粗產物30分鐘，以得到標題化合物(2.556g，99%)。ES/MS(m/e)：(79Br/81Br)534/536(M+H)。
製法21
(4aR,7aS)-7a-(3-胺基苯基)-2-苯甲醯胺基-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸第三丁酯
用疊氮化鈉(1.30g，19.4mmol)處理(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-7a-(3-溴苯基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸第三丁酯(5g，9.7mmol)及反式-N,N’-二甲基-1,2-環己烷二胺(220.3mg，1.5mmol)之乙醇(100mL)溶液。添加L-抗壞血酸鈉鹽(0.66M，3.2mL，2.1mmol)及水(10mL)之水溶液，並用氮氣清洗燒瓶頂部。用五水硫酸銅(II)水溶液(0.33M，3.2mL，1.1mmol)處理該混合物，並立即在氮氣下在預先加熱的82℃熱板上加熱該混合物1.5小時。加熱後得到均質混合物。使該反應冷卻，並添加冰水。用乙酸乙酯(3×)萃取該混合物。合併有機層，並在硫酸鈉上乾燥，過濾，並在真空中移除溶劑，以得到粗製疊氮化物產物。在冷乙醇(150mL)中將該粗製疊氮化物產物與10%碳載鈀(2g)合併在一起，並先後用真空/氮氣及真空/氫氣清洗該混合物。在30psi氫氣下，於室溫下攪拌該混合物2小時。釋放該反應之壓力，並使該混合物濾過矽藻土，使用二氯甲烷漂洗濾餅。在真空中移除濾液之溶劑，並在矽膠上用50%乙酸乙酯/二氯甲烷純化粗產物，以得到標題化合物(4g，91%)。ES/MS(m/e)：453(M+H)。
製法22
7a-(5-胺基-2-氟-苯基)-2-苯甲醯胺基-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸第三丁酯
用疊氮化鈉(933mg，14.3mmol)處理2-苯甲醯胺基-7a-(5-溴-2-氟-苯基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸第三丁酯(2.556g，4.8mmol)及反式-N,N’-二甲基-1,2-環己烷二胺(150mg，1.1mmol)之乙醇(50mL)溶液。添加L-抗壞血酸鈉鹽(0.66M，3.2mL，2.1mmol)及水(1mL)之水溶液，並用氮氣清洗燒瓶頂部。用五水硫酸銅(II)水溶液(0.33M，3.2mL，1.1mmol)處理該混合物，並立即在氮氣下在預先加熱的80℃熱板上加熱該混合物1.5小時。加熱後得到均質混合物。使該反應冷卻，用冰水稀釋，並用乙酸乙酯(3×)萃取該混合物。合併有機層，並在硫酸鈉上乾燥，過濾，並在真空中移除溶劑，以得到粗製疊氮化物產物。在冷乙醇(150mL)中將該粗製疊氮化物產物與10%碳載鈀(1g)合併在一起，並先後用真空/氮氣及真空/氫氣清洗該混合物。在30psi氫氣下，於室溫下攪拌該混合物5小時。釋放該反應之壓力，濾過矽藻土，並用二氯甲烷漂洗濾餅。在真空中移除濾液之溶劑，並在矽膠上用50%乙酸乙酯/二氯甲烷純化粗產物，以得到標題化合物(2.014g，89%)。ES/MS(m/e)：471(M+H)。
製法23
(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-7a-[3-[(5-氟吡啶-2-羰基)胺基]苯基]-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸第三丁酯
用二異丙基乙胺(179.2μL，1.03mmol)處理(4aR,7aS)-7a-(3-胺基 苯基)-2-苯甲醯胺基-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸第三丁酯(93mg，0.21mmol)、5-氟吡啶-2-羧酸(31.9mg，0.23mmol)、1-羥基苯并三唑水合物(56.7mg，0.41mmol)及1-(2-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(40mg，0.21mmol)含於含二甲基甲醯胺(1ml)之二氯甲烷(4mL)中之漿液，並在室溫下攪拌所得混合物隔夜。用二氯甲烷(5mL)及碳酸氫鈉飽和水溶液(15mL)稀釋反應混合物。分離出有機層，並用氯化鈉飽和水溶液(10mL)加以清洗，在硫酸鈉上乾燥，過濾，並在真空中移除溶劑，以得到粗製標題化合物(105mg，89%)。ES/MS(m/e)：576(M+H)。
製法24
N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-4a,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-5-氟-吡啶-2-甲醯胺；2,2,2-三氟乙酸
將(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-7a-[3-[(5-氟吡啶-2-羰基)胺基]苯基]-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸第三丁酯(105mg，0.18mmol)溶解於二氯甲烷(2mL)中，並用三氟乙酸(500μL，6.6mmol)加以處理。在室溫下攪拌所得黃色溶液4小時，並在真空中移除溶劑，以得到粗製標題產物(190mg，100%)。ES/MS(m/e)：476(M+H)。
製法25
N-[(4aR,7aS)-7a-(3-胺基苯基)-4a,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺
將三氟乙酸(25mL)添加至(4aR,7aS)-7a-(3-胺基苯基)-2-苯甲醯胺基-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸第三丁酯(4g，8.84mmol)之二氯甲烷(100mL)溶液中，並在氮氣下，在室溫下攪拌該混合物4小時。在真空中移除溶劑，並藉助SCX管柱，先後使用3：1之二氯甲烷：甲醇及2：1之二氯甲烷：7N氨甲醇溶液來純化粗產物，以得到標題化合物(2.49g，80%)。ES/MS(m/e)：353(M+H)。
製法26
N-[7a-(5-胺基-2-氟-苯基)-4a,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺
將三氟乙酸(10mL)添加至7a-(5-胺基-2-氟-苯基)-2-苯甲醯胺基-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-6-甲酸第三丁酯(2.013g，4.28mmol)之二氯甲烷(30mL)溶液中，並在氮氣下，在室溫下攪拌該混合物4小時。在真空中移除溶劑，並藉助SCX管柱，先後使用3：1之二氯甲烷：甲醇及2：1之二氯甲烷：7N氨甲醇溶液來純化粗產物，以得到標題化合物(1.555g，98%)。ES/MS(m/e)：371(M+H)。
製法27
N-[(4aR,7aS)-7a-(3-胺基苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺
在氮氣下，將N-[(4aR,7aS)-7a-(3-胺基苯基)-4a,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(2.49g，7.06mmol)、5-氟-2-氯嘧啶(3.74g，28.26mmol)及二異丙基乙胺(6.16mL，35.32mmol)之1,4-二噁烷(60mL)溶液加熱至回流達4小時。使該反應冷卻，用水加以稀釋，並用乙酸乙酯(3×)萃取。在硫酸鈉上乾燥合併的有機萃取物，過濾並在真空中移除溶劑，以得到粗產物。在矽膠上以5%至100%乙酸乙酯/己烷之梯度純化粗產物25分鐘，以得到標題化合物(2.51g，79%)。ES/MS(m/e)：449(M+H)。
製法28
N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-5-氟-吡啶-2-甲醯胺
在40℃下，在二甲基亞碸(5mL)中對N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-4a,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-5-氟-吡啶-2-甲醯胺、2,2,2-三氟乙酸(150mg，254μmol)、5-氟-2-氯嘧啶(68mg，51μmol)及二異丙基乙胺(98μL，56μmol)之溶液加熱隔夜。添加額外的5-氟-2-氯嘧啶(68mg，51μmol)及二異丙基乙胺(98μL，56μmol)，並在50℃下加熱該混合物隔夜。添加額外的5-氟-2-氯嘧啶(68mg，51μmol)及二異丙基乙胺(98μL，56μmol)，並在第三晚在50℃下加熱該混合物隔夜。使該反應冷卻，用碳酸鈉飽和水溶液(50mL) 加以稀釋以得到漿液，過濾，並在50℃下於真空烘箱中乾燥4小時，以得到標題化合物(60mg，41%)。ES/MS(m/e)：449(M+H)。
替代性製法28
將N-[(4aR,7aS)-7a-(3-胺基苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(282mg，628.73μmol)及5-氟吡啶-2-羧酸(106.46mg，754.47μmol)在二氯甲烷(3mL)及二甲基甲醯胺(0.5mL)中合併在一起。添加1-羥基苯并三唑(112.70mg，817.35μmol)及然後添加1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(159.07mg，817.35μmol)，並在氮氣下於室溫攪拌所得混合物5小時。用水稀釋反應混合物，用1N NaOH將pH調整至~12。用乙酸乙酯(3×)萃取混合物。合併有機萃取物，在硫酸鈉上乾燥，過濾，並在真空中移除溶劑，得到粗產物。粗產物在矽膠上以20分鐘5%至100%乙酸乙酯於己烷中之梯度純化，得到標題化合物(327mg，91%)。ES/MS(m/e)：571(M+H)。
製法29
N-[7a-(5-胺基-2-氟-苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺
在氮氣下，N-[7a-(5-胺基-2-氟-苯基)-4a,5,6,7-四氫-4H-吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(705mg，1.90mmol)、5-氟-2-氯嘧啶(1.01g，7.61mmol)及二異丙基乙胺(1.66mL，9.52mmol)之溶液在1,4-二噁烷(20mL)中加熱至回流4小時。使該反應物冷卻，用水稀釋，並用乙酸乙酯(3×)萃取。合併有機層，在硫酸鈉上乾燥，過濾並在真空中移除溶劑，得到粗產物。粗產物在矽膠上以25分鐘5%至 100%乙酸乙酯於己烷中之梯度純化，得到標題化合物(590mg，66%)。ES/MS(m/e)：467(M+H)。
製法30
N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲醯胺
在二氯甲烷(4mL)及二甲基甲醯胺(0.5mL)中將N-[(4aR,7aS)-7a-(3-胺基苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(400mg，891.81μmole)及5-甲氧基吡嗪-2-羧酸(165mg，1.07mmol)合併在一起。先後添加1-羥基苯并三唑(160mg，1.16mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(226mg，1.16mmol)，並在氮氣下，在室溫下加熱所得混合物5小時。用水稀釋反應混合物，並用1N NaOH將pH調整至~12。用乙酸乙酯(3×)萃取該混合物。在硫酸鈉上乾燥合併的有機萃取物，過濾，並在真空中移除溶劑。在矽膠上以5%至100%乙酸乙酯/己烷之梯度純化粗產物20分鐘，以得到標題化合物(482mg，92%)。ES/MS(m/e)：585(M+H)。
製法31
N-[3-[2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-氟-吡啶-2-甲醯胺
在二氯甲烷(3mL)及二甲基甲醯胺(0.5mL)中將N-[7a-(5-胺基-2-氟-苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(302mg，647μmol)及5-氟吡啶-2-羧酸(110mg，777μmol)合並在一起。先後添加1-羥基苯并三唑(116mg，842μmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(164mg，842μmol)，並在氮氣下，在室溫下攪拌該混合物隔夜。用水稀釋反應混合物，並用1N NaOH將pH調整至~12，及然後用乙酸乙酯(3×)加以萃取。合併有機層，並過濾，以收集不可溶材料。用水及乙酸乙酯清洗固體，並在真空下乾燥，以得到標題化合物。在硫酸鈉上乾燥來自濾液之有機層，過濾並在真空中移除溶劑。在矽膠上以5%至100%乙酸乙酯/己烷之梯度純化殘餘物20分鐘，以得到具有組合產率(275mg，72%)之額外標題化合物。ES/MS(m/e)：590(M+H)。
製法32
N-[(4aR,7aS)-7a-(5-胺基-2-氟-苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(異構體1)
藉由HPLC(管柱：Chiralcel OJ，8 x 35cm；溶離液：90%甲醇(0.2%二甲基乙胺)及10%乙腈；流速：400mL/min，在UV 280nm下)對外消旋N-[7a-(5-胺基-2-氟-苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(1.694g，3.63mmol)進行對掌性純化。第一溶離異構體之分析(管柱：Chiralcel OJ-H 0.46 x 15cm；溶離液：10：90乙腈：甲醇(具有0.2%二甲基乙胺)；流速：0.6mL/min，在UV 280nm下)確定Rt=6.70分鐘之對映體富集型(99% ee)對映異構體(723mg，43%)。ES/MS(m/e)：467(M+H)。
製法33
N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲醯胺(異構體1)
將N-[(4aR,7aS)-7a-(5-胺基-2-氟-苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(0.361g，0.77mmol，異構體1)溶解於二氯甲烷(4mL)及DMF(0.5mL)之混合物中。 將5-甲氧基吡嗪-2-羧酸(240mg，1.55mmol)、1-羥基苯并三唑(210mg，1.55mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(300mg，1.55mmol)添加至該混合物中，並在室溫下攪拌該混合物隔夜。將反應溶液直接添加至12g矽膠負載管柱上，並使用40g矽膠管柱純化，並用0-100%乙酸乙酯/己烷梯度溶離。將產物溶解於乙酸乙酯(200mL)中，用1N NaOH(2×50mL)及鹽水(1×50mL)加以清洗。如上所述重複矽膠純化，以得到標題化合物(350mg，74%)。ES/MS(m/e)：603(M+H)。
製法34
N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-5-氰基-吡啶-2-甲醯胺
將N-[(4aR,7aS)-7a-(3-胺基苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(0.30g，0.67mmol)溶解於二氯甲烷(10mL)中，並添加5-氰基吡啶-2-羧酸(129mg，0.87mmol)、1-羥基苯并三唑(185mg，1.34mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(169mg，0.87mmol)。添加二異丙基乙胺(0.35mL，2mmol)，並在室溫下攪拌該反應隔夜。直接藉助矽膠層析，用0-100%乙酸乙酯/己烷梯度溶離來純化材料，以得到標題化合物(360mg，88%)。ES/MS(m/e)：579(M+H)。
製法35
N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-3,5-二氟-吡啶-2-甲醯胺
將N-[(4aR,7aS)-7a-(3-胺基苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]曝嗪-2-基]苯甲醯胺(0.30g，0.67mmol)溶解於二氯甲烷(10mL)中，並添加3,5-二氟吡啶-2-羧酸(138mg，0.87mmol)、1-羥基苯并三唑(185mg，1.34mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(169mg，0.87mmol)。添加二異丙基乙胺(0.35mL， 2mmol)，並在室溫下攪拌該反應隔夜。直接藉助矽膠層析，用0-100%乙酸乙酯/己烷梯度溶離來純化該反應，以得到標題化合物(330mg，84%)。ES/MS(m/e)：590(M+H)。
製法36
N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-氰基-吡啶-2-甲醯胺(異構體l)
將N-[(4aR,7aS)-7a-(5-胺基-2-氟-苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(0.180g，0.39mmol，異構體1)溶解於二氯甲烷(2mL)及DMF(0.25mL)之混合物中。添加5-氰基吡啶-2-羧酸(114mg，0.77mmol)、1-羥基苯并三唑(106mg，0.77mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(150mg，0.77mmol)，並在室溫下攪拌該反應隔夜。用水(10mL)、乙酸乙酯(10mL)稀釋該混合物，並添加至1N NaOH溶液(100mL)中。用EtOAc(2×100mL)萃取該混合物，並合併有機層，及用鹽水加以清洗。在MgSO4上乾燥有機層，過濾及濃縮。藉助矽膠層析，用0-100%乙酸乙酯/己烷梯度來純化殘餘物，以得到標題化合物(133mg，57%)。ES/MS(m/e)：597(M+H)。
製法37
N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-3,5-二氟-吡啶-2-甲醯胺(異構 體1)
將N-[(4aR,7aS)-7a-(5-胺基-2-氟-苯基)-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-2-基]苯甲醯胺(0.180g，0.39mmol，異構體1)溶解於二氯甲烷(2mL)及DMF(0.25mL)之混合物中。添加5-氰基吡啶-2-羧酸(114mg，0.77mmol)、1-羥基苯并三唑(106mg，0.77mmol)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(150mg，0.77mmol)，並在室溫下攪拌該反應隔夜。用水(10mL)及乙酸乙酯(10mL)稀釋該混合物，並傾倒於1N NaOH溶液(100mL)中。用EtOAc(2×100mL)萃取該混合物，合併有機萃取物，並用鹽水清洗。在MgSO4上乾燥有機層，過濾及濃縮。藉助矽膠層析，用0-100%乙酸乙酯/己烷之梯度純化殘餘物，以得到標題化合物(190mg，80%)。ES/MS(m/e)：608(M+H)。
實例A
N-[3-[2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-氟-吡啶-2-甲醯胺
在加蓋燒瓶中，在乙醇(13mL)中將N-[3-[2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5- 氟-吡啶-2-甲醯胺(293mg，497μmol)、O-甲基羥胺鹽酸鹽(430mg，4.97mmol)及吡啶(402μL，4.97mmol)之混合物加熱至70℃達2.5小時。添加二甲基亞碸(3mL)，並在70℃下加熱該混合物隔夜。添加額外的二甲基亞碸(10mL)，並在70℃下繼續加熱4小時。添加額外的O-甲基羥胺鹽酸鹽(208mg，2.48mmol)及吡啶(201μL，2.48mmol)，並將該混合物加熱至60℃達3小時，並在室溫下攪拌該混合物3天。在另一燒瓶中，於加蓋燒瓶中，在乙醇(15mL)及二甲基亞碸(4mL)中，在70℃下加熱N-[3-[2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-氟-吡啶-2-甲醯胺(276mg，468μmol)、O-甲基羥胺鹽酸鹽(405mg，4.68mmol)及吡啶(478μL，4.68mmol)之混合物隔夜。添加額外的二甲基亞碸(10mL)，並在70℃下繼續加熱4小時。添加額外的O-甲基羥胺鹽酸鹽(195mg，2.34mmol)及吡啶(189μL，2.34mmol)，並在70℃下繼續加熱3小時，隨後在室溫下攪拌該混合物3天。合併該兩種反應混合物，並在真空中移除大部份溶劑。在SCX管柱上先後用3：1二氯甲烷：甲醇及2：1二氯甲烷：7N氨甲醇溶液純化粗產物。在矽膠上以0.5%至10%7N氨甲醇溶液/二氯甲烷之梯度進一步純化粗產物20分鐘，以得到標題化合物(451mg，96%)。ES/MS(m/e)：486(M+H)。
實例1
N-{3-[(4aR,7aS)-2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4a,5,6,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a(4H)-基]苯基}-5-氟吡啶-2-甲醯胺鹽酸鹽
在加蓋小瓶中，在65℃下加熱N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6- (5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-5-氟-吡啶-2-甲醯胺(320mg，560μmol)、O-甲基羥胺鹽酸鹽(485mg，5.60mmol)及吡啶(453μL，5.60mmol)含於乙醇(15mL)中之混合物5小時。使該反應冷卻，並在真空中移除溶劑。在矽膠上以0.5%至10%7N氨甲醇溶液/二氯甲烷之梯度純化粗產物30分鐘，以得到N-[3-[(4aR,7aS)-2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-5-氟-吡啶-2-甲醯胺(219mg，84%)。將該材料溶解於二氯甲烷(1mL)及甲醇(0.5mL)中，並添加1M氯化氫乙醚溶液(0.47mL，470μmol)。在真空中移除溶劑，以得到標題化合物(228mg，81%)。ES/MS(m/e)：468(M+H)。
實例2
N-{3-[(4aR,7aS)-2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4a,5,6,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a(4H)-基]苯基}-5-甲氧基吡嗪-2-甲醯胺鹽酸鹽
在加蓋燒瓶中，在50℃下加熱N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲醯胺(479mg，819μmol)、O-甲基羥胺鹽酸鹽(709mg，8.19mmol)及吡啶(663μL，8.19mmol)含於乙醇(20mL)中之混合物隔夜。添加二甲基亞碸(4mL)，並將該混合物加熱至70℃，加熱時間4小時，以得到溶液。使該反應冷卻，並在真空中移除大部份溶劑。添加水，並用1N氫氧化鈉將pH調整至~12。用乙酸乙酯(5×)萃取該混合物。在硫酸鈉上乾燥合併的有機萃取物，過濾，並在真空中移除溶劑。在矽膠上以0.5%至10%7N氨甲醇溶液/二氯甲烷之梯度純 化粗產物30分鐘。在SCX管柱上先後用3：1二氯甲烷：甲醇及2：1二氯甲烷：7N氨甲醇溶液再純化該混合物，以移除殘餘二甲基亞碸。最後在矽膠上以0.5%至10%7N氨甲醇溶液/二氯甲烷之梯度純化該混合物20分鐘，以得到N-[3-[(4aR,7aS)-2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲醯胺。將該材料溶解於二氯甲烷(1mL)及甲醇(0.5mL)中，並添加1M氯化氫乙醚溶液(0.66mL，660μmol)。在真空中移除溶劑，以得到標題化合物(329mg，78%)。ES/MS(m/e)：481(M+H)。
實例3
N-[3-[(4aR,7aS)-2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-氟-吡啶-2-甲醯胺鹽酸鹽
藉由SFC(管柱：Chiralcel OD-H(5um)，2.1 x 25cm；溶離液：40%甲醇(0.2%異丙胺)/CO2；流速：70mL/min，在UV 225nm下)對外消旋N-[3-[2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-氟-吡啶-2-甲醯胺(451mg，929μmol)進行對掌性純化。第一溶離異構體之對掌性分析(管柱：Chiralcel OD-H(5μm)，4.6×150mm；溶離液：40%甲醇(0.2%異丙胺)/CO2；流速：5mL/min，在UV 225nm下)確定Rt=1.01分鐘之對映體富集型(>99% ee)對映異構體(175mg，360μmole)。將該材料(游離鹼，異構體1)溶解於二氯甲烷(1mL)及甲醇(0.5mL)中，並添加1M氯化氫乙醚溶液(0.36mL，360μmole)。在真空中移除溶劑，以得到標題化合物(183mg，38%)。ES/MS(m/e)：486(M+H)。
實例4
N-[3-[(4aR,7aS)-2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲醯胺鹽酸鹽
將N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲醯胺(0.350g，0.58mmol，異構體1)溶解於THF(2mL)中，然後添加甲醇(4mL)及乙醇(4mL)。將O-甲基羥胺鹽酸鹽(495mg，5.81mmol)及吡啶(470μL，5.81mmol)添加至該混合物中，並使該反應升溫至50℃，並攪拌隔夜。將矽膠(~10g)添加至該反應中，並濃縮該混合物。將於矽膠上乾燥之樣品加載於空濾筒上，並以0-10%7N氨甲醇溶液/二氯甲烷之梯度溶離純化。再次在SCX管柱上先後用3：1二氯甲烷：甲醇及2：1二氯甲烷：7N氨甲醇溶液純化該產物。最後在矽膠上以0%至10%7N氨甲醇溶液/二氯甲烷之梯度純化該產物，以得到標題化合物之游離鹼。將該材料溶解於二氯甲烷(5mL)中，並添加1M氯化氫乙醚溶液(0.20mL，660μmol)。在真空中移除溶劑，以得到標題化合物(71mg，23%)。ES/MS(m/e)：498(M+H)。
實例5
N-[3-[(4aR,7aS)-2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]曝嗪-7a-基]苯基]-5-氰基-吡啶-2-甲醯胺鹽酸鹽
將N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-5-氰基-吡啶-2-甲醯胺(360mg，0.59mmol)溶解於乙醇(10mL)及二氯甲烷(2mL)中。添加O-甲基羥胺鹽酸鹽(504mg，5.91mmol)及吡啶(478μL，5.91mmol)，並在室溫下攪拌該反應整個週末(70hr)。使該反應升溫至60℃，並攪拌24小時。使該反應濃縮，以得到粗產物，並藉助矽膠層析，使用0-10%7N氨甲醇溶液/二氯甲烷之梯度加以純化，以得到標題化合物之游離鹼。將該材料溶解於二氯甲烷(5mL)中，並添加1M氯化氫乙醚溶液(0.54mL，540μmol)。在真空中移除溶劑，以得到標題化合物(240mg，75%)。ES/MS(m/e)：475(M+H)。
實例6
N-[3-[(4aR,7aS)-2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-3,5-二氟-吡啶-2-甲醯胺鹽酸鹽
將N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]苯基]-3,5-二氟-吡啶-2-甲醯胺(330mg，0.53mmol)溶解於THF(10mL)中，並用乙醇(10mL)加以稀釋。添加O-甲基羥胺鹽酸鹽(453mg，5.32mmol)及吡啶(430μL，5.91mmol)並在室溫下攪拌該反應整個週末(70hr)。使該反應升溫至60℃ 並攪拌24小時。將該混合物濃縮於矽膠(~10g)上，並藉助矽膠層析，使用0-10%7N氨甲醇溶液/二氯甲烷之梯度加以純化，以得到標題化合物之游離鹼。將該材料溶解於二氯甲烷(5mL)中並添加1M氯化氫乙醚溶液(0.49mL，490μmol)。在真空中移除溶劑，以得到標題化合物(159mg，54%)。ES/MS(m/e)：486(M+H)。
實例7
N-[3-[(4aR,7aS)-2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-氰基-吡啶-2-甲醯胺鹽酸鹽
將N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-氰基-吡啶-2-甲醯胺(133mg，0.22mmol，異構體1)溶解於THF(1mL)中，並用甲醇(3mL)及乙醇(3mL)加以稀釋。添加O-甲基羥胺鹽酸鹽(190mg，2.2mmol)及吡啶(180μL，2.2mmol)。使該反應升溫至50℃並攪拌隔夜。將該混合物濃縮於矽膠(~10g)上，並藉助矽膠層析，用0-10%7N氨甲醇溶液/二氯甲烷之梯度溶離純化。再次在SCX管柱上先後用3：1二氯甲烷：甲醇及2：1二氯甲烷：7N氨甲醇溶液純化該材料。最後在矽膠上以0%至10%7N氨甲醇溶液/二氯甲烷之梯度純化該混合物，以得到標題化合物之游離鹼。將該材料溶解於二氯甲烷(5mL)中並添加1M氯化氫乙醚溶液(0.27mL，270μmol)。在真空中移除溶劑，以得到標題化合物(114mg，97%)。ES/MS(m/e)：493(M+H)。
實例8
N-[3-[(4aR,7aS)-2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并 [3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-3,5-二氟-吡啶-2-甲醯胺鹽酸鹽
將N-[3-[(4aR,7aS)-2-苯甲醯胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-3,5-二氟-吡啶-2-甲醯胺(190mg，0.31mmol，異構體1)溶解於THF(1mL)中，並用甲醇(3mL)及乙醇(3mL)加以稀釋。添加O-甲基羥胺鹽酸鹽(267mg，3.1mmol)及吡啶(253μL，3.1mmol)，並使該反應升溫至50℃，並攪拌隔夜。 在SCX管柱上先後使用3：1二氯甲烷：甲醇及2：1二氯甲烷：7N氨甲醇溶液純化該反應。最後在矽膠上以0%至10%7N氨甲醇溶液/二氯甲烷之梯度純化該材料，以得到標題化合物之游離鹼。將該材料溶解於二氯甲烷(5mL)中並添加1M氯化氫乙醚溶液(0.20mL，200μmol)。在真空中移除溶劑，以得到標題化合物(101mg，60%)。ES/MS(m/e)：504(M+H)。
活體外分析步驟：
就活體外酶促及細胞分析而言，在DMSO中製備測試化合物，以形成10mM原液。在進行活體外酶促及全細胞分析前，在96孔圓底板中，將該原液連續稀釋於DMSO中，以得到十點稀釋曲線，其中最終化合物濃度係介於10mM至0.05nM之範圍內。
活體外蛋白酶抑制分析：
人類BACE1之表現
藉由RT-PCR自全腦cDNA選殖人類BACE1(寄存編號：AF190725)。將對應胺基酸序列#1至460之核苷酸序列插入編碼人類IgG1(Fc)多肽之cDNA中(Vassar等人1999)。將該BACE1(1-460)及人 類Fc之融合蛋白(命名為huBACE1：Fc)構築於pJB02載體中。於HEK293細胞中瞬時表現人類BACE1(1-460)：Fc(huBACE1：Fc)。將各構築體之250μg cDNA與Fugene 6混合在一起，並添加至1公升HEK293細胞中。轉染四天後，收集調整培養基以供純化。
huBACE1：Fc之純化
藉由蛋白質A層析法純化huBACE1：Fc。以少量等分試樣將酶儲存在-80℃下。
BACE1 FRET分析
如上所述製備測試化合物之連續稀釋液。在KH2PO4緩衝液中將化合物進一步稀釋20倍。將10μL各稀釋液添加至相應低蛋白結合黑板之第A至H排上之各孔中，各孔含有反應混合物(25μL 50mMKH2PO4(pH 4.6)，1mM TRITON® X-100，1mg/mL牛血清白蛋白及15μM FRET底物)(參見Yang等人，J.Neurochemistry,91(6)1249-59(2004))。在板振盪儀上充分混合內容物10分鐘。將15μL含於KH2PO4緩衝液中之200pM人類BACE1(1-460)：Fc(參見Vasser等人，Science,286,735-741(1999))添加至該含有底物及測試化合物之板中，以引發反應。在板振盪儀上簡單混合後，在355nm激發波長及460nm發射波長下記錄該混合物在時間0時之RFU。用鋁箔覆蓋該反應板，並在室溫下於黑暗加濕烘箱中保持16至24小時。使用在時間0時所用之相同激發及發射設置記錄在培育結束後之RFU。在時間0時及培育結束後之RFU之差異表示BACE1在化合物處理下之活性。針對抑制劑濃度繪出RFU差異，並用四參數邏輯斯方程式擬合出曲線，以得到EC50及IC50值。(參見Sinha等人，Nature,402,537-540(2000))。
以下示例化合物係實質上如上文所述進行測試，且展示以下針對BACE1之活性：
該等數據顯示，表1之化合物強效地抑制純化重組BACE1酶的活體外活性。
用於測量對β-分泌酶活性之抑制作用之全細胞分析
HEK293Swe全細胞分析
用於測量對β-分泌酶活性之抑制作用之常規全細胞分析採用人類胚腎細胞株HEK293p(ATCC寄存編號CRL-1573)，其穩定地表現含有Lys651Met652至Asn651Leu652之天然雙突變(常稱為瑞典(Swedish)突變(表示為HEK293Swe))之人類APP751 cDNA，且顯示過度產生Aβ(Citron等人，Nature, 360,672-674(1992))。活體外Aβ減少分析已描述在文獻中(參見Dovey等人，Journal of Neurochemistry,76,173-181(2001)；Seubert等人，Nature,361,260(1993)；及Johnson-Wood等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,94,1550-1555(1997))。
在存在/不存在所需濃度之抑制劑(稀釋於DMSO中)之情形下，於37℃下培育細胞(HEK293Swe，3.5x104個細胞/孔，含有200μL培養基，含10%FBS之DMEM)4至24小時。在培育結束時，分析調整培養基之β-分泌酶活性之證據，例如，藉由分析Aβ肽。藉由夾層ELISA，使用單株266作為捕獲抗體並使用生物素化3D6作為報告抗體來測定全部的Aβ肽(Aβ 1-x)。或者，藉由夾層ELISA，使用單株2G3作為Aβ 1-40之捕獲抗體並使用單株21F12作為Aβ 1-42之捕獲抗體來測定Aβ 1- 40及Aβ 1-42肽。Aβ 1-40及Aβ 1-42ELISA均使用生物素化3D6作為報告抗體。在化合物處理後釋放於該調整培養基中之Aβ之濃度對應於BACE1在此等條件下之活性。繪製10點抑制曲線，並與四參數邏輯斯方程式擬合，以得到Aβ-降低效應之EC50及IC50值。以下示例化合物係實質上如上文所述經測試，並展現以下Aβ降低效應之活性：
該等數據顯示，表2之化合物強效地抑制在全細胞中產生內源性Aβ。
PDAPP原代神經元分析
亦在自PDAPP轉基因胚胎小鼠產生之原代神經元培養物中進行確認性全細胞分析。自胚齡16天的PDAPP胚製備原代皮層神經元，並培養在96孔板(15 x 104個細胞/孔，含於DMEM/F12(1：1)加10%FBS中)中。在活體外培養2天後，用含有B27補充物及2μM(最終濃度)Ara-C(Sigma,C1768)之無血清DMEM/F12(1：1)替換培養基。在活體外第5天時，在存在/不存在所需濃度之抑制劑(稀釋於DMSO中)之情形下，將神經元在37℃下培育24小時。在培育結束時，分析調整培養基之β-分泌酶活性之證據，例如，藉由分析Aβ肽。藉由夾層ELISA，使用單株266作為捕獲抗體並使用生物素化3D6作為報告抗體來測定總Aβ肽(Aβ 1-x)。或者，藉由夾層ELISA，使用單株2G3作為Aβ 1-40之捕獲抗體並使用單株21F12作為Aβ 1-42之捕獲抗體來測定Aβ 1-40及Aβ 1- 42肽。Aβ 1-40及Aβ 1-42 ELISA均使用生物素化3D6作為報告抗體。在化合物處理後釋放於調整培養基中之Aβ之濃度對應於BACE1在此等條件下之活性。繪製10點抑制曲線，並與四參數邏輯斯方程式擬合，以得到Aβ降低效應之EC50及IC50值。以下示例化合物係實質上如上文所述經測試，並展現以下Aβ降低效應之活性：
該等數據顯示，表3之化合物強效地抑制在全細胞中產生Aβ。
β-分泌酶之活體內抑制
可使用若干種動物模型(包括小鼠、豚鼠、狗及猴)來篩選β-分泌酶活性在化合物處理後之活體內抑制作用。本發明中所使用的動物可係野生型、轉基因或基因剔除動物。例如，如Games等人，Nature 373,523-527(1995)中所述準備的PDAPP小鼠模型及其他非轉基因或基因剔除動物可用於分析在抑制化合物存在下Aβ及sAPPβ產生之活體內抑制。通常，向2至12個月齡的PDAPP小鼠、基因剔除小鼠或非轉基因動物投與調配於媒劑(諸如玉米油、環糊精、磷酸鹽緩衝液、PHARMASOLVE®或其他適宜媒劑)中之化合物。在投與化合物1至24小時後，殺死動物，並移除腦以及腦脊髓液及血漿以用於分析Aβ、C99及sAPP片段(參見May等人，Journal of Neuroscience,31,16507- 16516(2011))。
就標準活體內藥理學研究而言，給動物服用不同濃度的化合物，並與同時服藥的媒劑治療對照組進行比較。就一些時程研究而言，自所選動物獲取腦組織、血漿或腦脊髓液，在時間0時開始以建立基線。向其他群組投與化合物或適宜媒劑，並在服藥後不同時間點殺死。自所選動物獲取腦組織、血漿或腦脊髓液，並分析包括Aβ肽、sAPPβ及其他APP片段的APP裂解產物之存在(例如，藉由特異性夾層ELISA分析)。在測試期結束時，殺死動物，並視情況分析腦組織、血漿或腦脊髓液之Aβ肽、C99及sAPPβ之存在。亦可分析APP轉基因動物之腦組織在化合物處理後之β-澱粉樣斑塊之數量。如本文中所使用，「Aβ 1-x肽」係指以殘基1開始並以大於殘基28之C-端結束之Aβ種類之總稱。此檢測Aβ種類中之大多數，且通常稱為「總Aβ」。
與經媒劑治療的對照組或零時對照組相比，投與抑制化合物的動物(PDAPP或其他APP轉基因或非轉基因小鼠)可顯示腦組織、血漿或腦脊髓液中之Aβ或sAPPβ減少及腦組織中之β澱粉樣斑塊減少。例如，在向年幼雌性PDAPP小鼠投與1、3或10mg/kg口服劑量的實例1化合物3小時後，與經媒劑治療的小鼠相比，腦海馬體中之Aβ 1-x肽濃度分別下降約34%、48%及53%，且腦皮質中之Aβ 1-x肽濃度分別下降約43%、59%及66%。
例如，在投與1或3mg/kg口服劑量的實例3化合物3小時後，與經媒劑治療的小鼠相比，腦海馬體中之Aβ 1-x肽濃度分別下降約38%及50%，且腦皮質中之Aβ 1-x肽濃度分別下降約34%及53%。
鑒於實例1及3對BACE酶之活體外活性，此等Aβ降低效應係與活體內BACE抑制相一致，且進一步證明實例1及3之CNS滲透性。
此等研究顯示，本發明化合物可抑制BACE，且因此可用於降低Aβ量。

Claims (12)

  1. 一種下式化合物： 或其醫藥上可接受的鹽。
  2. 一種下式化合物：
  3. 如請求項1之化合物或其醫藥上可接受的鹽，其係用於治療。
  4. 如請求項2之化合物，其係用於治療。
  5. 如請求項1之化合物或其醫藥上可接受的鹽，其係用於治療阿茲海默氏症(Alzheimer’s disease)。
  6. 如請求項2之化合物，其係用於治療阿茲海默氏症。
  7. 一種如請求項1之化合物或其醫藥上可接受的鹽之用途，其係用於製造用於治療患者之阿茲海默氏症之藥劑。
  8. 一種如請求項2之化合物之用途，其係用於製造用於治療患者之阿茲海默氏症之藥劑。
  9. 一種如請求項1之化合物或其醫藥上可接受的鹽之用途，其係用於製造用於預防患者之輕度認知障礙發展為阿茲海默氏症之藥劑。
  10. 一種如請求項2之化合物之用途，其係用於製造用於預防患者之 輕度認知障礙發展為阿茲海默氏症之藥劑。
  11. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1之化合物或其醫藥上可接受的鹽及一或多種醫藥上可接受的載劑、稀釋劑或賦形劑。
  12. 一種醫藥組合物，其包含如請求項2之化合物及一或多種醫藥上可接受的載劑、稀釋劑或賦形劑。
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Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11201407534PA (en) 2012-06-13 2014-12-30 Hoffmann La Roche New diazaspirocycloalkane and azaspirocycloalkane
IN2015DN00960A (zh) 2012-09-25 2015-06-12 Hoffmann La Roche
JP6243921B2 (ja) 2012-10-26 2017-12-06 イーライ リリー アンド カンパニー Ｂａｃｅ阻害剤
AR095079A1 (es) 2013-03-12 2015-09-16 Hoffmann La Roche Derivados de octahidro-pirrolo[3,4-c]-pirrol y piridina-fenilo
MY187449A (en) 2013-11-26 2021-09-22 Hoffmann La Roche New octahydro-cyclobuta [1,2-c;3,4-c']dipyrrol-2-yl
TWI684452B (zh) 2014-03-14 2020-02-11 美國禮來大藥廠 胺基噻嗪化合物
JP6554481B2 (ja) 2014-03-26 2019-07-31 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ オートタキシン（ａｔｘ）及びリゾホスファチジン酸（ｌｐａ）産生の阻害剤としての縮合［１，４］ジアゼピン化合物
HUE046820T2 (hu) 2014-03-26 2020-03-30 Hoffmann La Roche Biciklusos vegyületek autotaxin (ATX) és lizofoszfatidsav (LPA) termelésgátlókként
TWI570127B (zh) * 2014-09-15 2017-02-11 美國禮來大藥廠 結晶型N-[3-[(4aR,7aS)-2-胺基-6-(5-氟嘧啶-2-基)-4,4a,5,7-四氫吡咯并[3,4-d][1,3]噻嗪-7a-基]-4-氟-苯基]-5-甲氧基-吡嗪-2-甲醯胺、其用途及醫藥組合物
TWI599358B (zh) * 2014-09-16 2017-09-21 美國禮來大藥廠 組合療法
AR103406A1 (es) * 2015-01-30 2017-05-10 Lilly Co Eli Sal de tosilato
AR103680A1 (es) 2015-02-23 2017-05-24 Lilly Co Eli Inhibidores selectivos de bace1
MA41898A (fr) 2015-04-10 2018-02-13 Hoffmann La Roche Dérivés de quinazolinone bicyclique
AR104241A1 (es) 2015-04-29 2017-07-05 Lilly Co Eli Derivados de tetrahidrofuro tiazina como inhibidores de bace1 selectivos
CR20180058A (es) 2015-09-04 2018-02-26 Hoffmann La Roche Nuevos derivados de fenoximetilo
CN107922415B (zh) 2015-09-24 2022-04-15 豪夫迈·罗氏有限公司 新的作为双重atx/ca抑制剂的二环化合物
KR20180054830A (ko) 2015-09-24 2018-05-24 에프. 호프만-라 로슈 아게 오토탁신(atx) 억제제로서의 이환형 화합물
MX2017015034A (es) 2015-09-24 2018-04-13 Hoffmann La Roche Nuevos compuestos biciclicos como inhibidores duales de autotaxina (atx)/anhidrasa carbonica (ca).
MX2018001890A (es) 2015-09-24 2018-06-20 Hoffmann La Roche Compuestos biciclicos como inhibidores de autotaxina (atx).
AR107774A1 (es) * 2016-03-16 2018-05-30 Lilly Co Eli Terapia de combinación, método para el tratamiento de la enfermedad de alzheimer
TWI798751B (zh) 2016-07-01 2023-04-11 美商美國禮來大藥廠 抗－N3pGlu類澱粉β肽抗體及其用途
MX2019007104A (es) 2016-12-15 2019-11-05 Amgen Inc Derivados de dioxido de 1,4-tiazina y dioxido de 1,2,4-tiadiazina como inhibidores de beta-secretasa y metodos de uso.
MX2019007103A (es) 2016-12-15 2019-11-05 Amgen Inc Derivados de tiazina condensados con ciclopropilo como inhibidores de beta-secretasa y metodos de uso.
CA3047288A1 (en) 2016-12-15 2018-06-21 Amgen Inc. Thiazine derivatives as beta-secretase inhibitors and methods of use
CA3047285A1 (en) 2016-12-15 2018-06-21 Amgen Inc. Bicyclic thiazine and oxazine derivatives as beta-secretase inhibitors and methods of use
AU2017376441B2 (en) 2016-12-15 2021-10-14 Amgen Inc. Oxazine derivatives as beta-secretase inhibitors and methods of use
WO2018167113A1 (en) 2017-03-16 2018-09-20 F. Hoffmann-La Roche Ag New bicyclic compounds as atx inhibitors
CR20190423A (es) 2017-03-16 2019-11-01 Hoffmann La Roche Nuevos compuestos biciclícos como inhibidores dobles de atx/ca

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101910143A (zh) * 2008-01-18 2010-12-08 卫材R&D管理有限公司 稠合的氨基二氢噻嗪衍生物

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5284957A (en) * 1992-09-03 1994-02-08 Eli Lilly And Company Excitatory amino acid receptor antagonists
AU2003219955A1 (en) * 2002-03-22 2003-10-13 Eli Lilly And Company Isoquinoline-3-carboxylic acid derivatives as excitatory amino acid receptor antagonists
US7868000B2 (en) * 2005-06-14 2011-01-11 Schering Corporation Aspartyl protease inhibitors
CN103936690B (zh) 2005-10-25 2016-06-08 盐野义制药株式会社 氨基二氢噻嗪衍生物
EP2151435A4 (en) 2007-04-24 2011-09-14 Shionogi & Co PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR THE TREATMENT OF ALZHEIMER'S DISEASE
JP2011518225A (ja) 2008-04-22 2011-06-23 シェーリング コーポレイション Ｂａｃｅ−１阻害剤としてのフェニル置換２−イミノ−３−メチルピロロピリミジノン化合物、組成物、およびそれらの使用
TWI431004B (zh) * 2008-05-02 2014-03-21 Lilly Co Eli Ｂａｃｅ抑制劑
KR20130018370A (ko) 2008-06-13 2013-02-20 시오노기세야쿠 가부시키가이샤 β 세크레타제 저해 작용을 갖는 황 함유 복소환 유도체
EP2332943B1 (en) 2008-09-30 2015-04-22 Eisai R&D Management Co., Ltd. Novel fused aminodihydrothiazine derivative
AR077277A1 (es) 2009-07-09 2011-08-17 Lilly Co Eli Compuestos de biciclo (1,3)tiazin-2-amina formulacion farmaceutica que lo comprende y su uso para la manufactura de un medicamento util para el tratamiento de la enfermedad de alzheimer
WO2011071109A1 (ja) 2009-12-11 2011-06-16 塩野義製薬株式会社 アミノ基を有する縮合ヘテロ環化合物
GB201100181D0 (en) 2011-01-06 2011-02-23 Eisai Ltd Fused aminodihydrothiazine derivatives
GB201101140D0 (en) 2011-01-21 2011-03-09 Eisai Ltd Fused aminodihydrothiazine derivatives
GB201101139D0 (en) * 2011-01-21 2011-03-09 Eisai Ltd Fused aminodihydrothiazine derivatives
EP2694521B1 (en) 2011-04-07 2015-11-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Pyrrolidine-fused thiadiazine dioxide compounds as bace inhibitors, compositions, and their use
WO2012162334A1 (en) 2011-05-24 2012-11-29 Bristol-Myers Squibb Company Compounds for the reduction of beta-amyloid production
JO3143B1 (ar) * 2012-04-03 2017-09-20 Lilly Co Eli مركبات تتراهيدرو بيرولو ثيازين

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101910143A (zh) * 2008-01-18 2010-12-08 卫材R&D管理有限公司 稠合的氨基二氢噻嗪衍生物

Also Published As

Publication number Publication date
HK1212694A1 (zh) 2016-06-17
CL2015002529A1 (es) 2016-03-28
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BR112015018738A2 (pt) 2017-07-18
EA201591491A1 (ru) 2016-01-29
PH12015502031B1 (en) 2016-01-18
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CA2898500C (en) 2017-11-14
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CY1119585T1 (el) 2018-03-07
US20140275044A1 (en) 2014-09-18
MA38390B1 (fr) 2020-01-31
MY180083A (en) 2020-11-20
US20150157641A1 (en) 2015-06-11
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EP2970336A1 (en) 2016-01-20
US8841293B1 (en) 2014-09-23
SI2970336T1 (sl) 2017-11-30
KR20150119070A (ko) 2015-10-23
MX2015012628A (es) 2016-07-07
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JP2016512252A (ja) 2016-04-25
KR101688761B1 (ko) 2016-12-21
TW201520217A (zh) 2015-06-01
US8987254B2 (en) 2015-03-24
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