JP2013541335A5 - - Google Patents

Claims (24)

1. 免疫グロブリンＦｃドメインに融合したＩＬ−１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン（ＩＬ−１５ＲαＳｕ／Ｆｃ）の二量体、及びＩＬ−１５配列の７２位でＮからＤへの置換を有するＩＬ−１５変異体（ＩＬ−１５Ｎ７２Ｄ）の２分子を含んでなる、ＩＬ−１５結合部位が完全に占有されているＩＬ−１５Ｎ７２Ｄ：ＩＬ−１５ＲαＳｕ／Ｆｃ複合体。
2. ＩＬ−１５Ｎ７２Ｄ及び／又はＩＬ−１５ＲαＳｕ／Ｆｃ融合タンパク質がグリコシル化されている、請求項１に記載の複合体。
3. 請求項１又は２に記載の複合体をコードする配列を含んでなる、核酸。
4. 請求項３に記載の核酸を含んでなる、ＤＮＡベクター。
5. 請求項３に記載の核酸を含んでなる、細胞。
6. 請求項１又は２に記載の完全に占有されているＩＬ−１５Ｎ７２Ｄ：ＩＬ−１５ＲαＳｕ／Ｆｃ複合体を含んでなる、対象における免疫応答を増大又は減少するための医薬組成物。
7. 請求項１又は２に記載の完全に占有されているＩＬ−１５Ｎ７２Ｄ：ＩＬ−１５ＲαＳｕ／Ｆｃ複合体を含んでなる、腫瘍を有している対象における免疫応答を増強するための医薬組成物。
8. 請求項１又は２に記載の完全に占有されているＩＬ−１５Ｎ７２Ｄ：ＩＬ−１５ＲαＳｕ／Ｆｃ複合体を含んでなる、ウィルス感染に対する免疫応答を増強するための医薬組成物。
9. 少なくとも２つの可溶性融合タンパク質を含んでなる、可溶性融合タンパク質複合体であって、
   第１の融合タンパク質が、インターロイキン−１５（ＩＬ−１５）ポリペプチド（ｂ）又はその機能的断片と共有結合している第１生物活性ポリペプチド（ａ）を含み；そして
   第２の融合タンパク質が、可溶性インターロイキン−１５受容体アルファ（ＩＬ−１５Ｒα）ポリペプチド（ｄ）又はその機能的断片と共有結合している第２生物活性ポリペプチド（ｃ）を含み、
   第１及び第２融合タンパク質の一方又は両方が更に免疫グロブリンＦｃドメイン又はその機能的断片を含み、
   第１融合タンパク質のＩＬ−１５ドメインが第２融合タンパク質の可溶性ＩＬ−１５Ｒαドメインと結合して可溶性融合タンパク質複合体を形成しており、ＩＬ−１５ポリペプチドがＩＬ−１５配列の７２位でＮからＤへの置換を有するＩＬ−１５変異体（ＩＬ−１５Ｎ７２Ｄ）であり、ＩＬ−１５ＲαポリペプチドがＩＬ−１５Ｒαｓｕｓｈｉドメインを含んでいる、可溶性融合タンパク質複合体。
10. 第１及び第２生物活性ポリペプチドの一方が第１可溶性Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）若しくはその機能的断片を含んでいる、又は、他方の生物活性ポリペプチドが第１可溶性ＴＣＲと異なる第２可溶性ＴＣＲ若しくはその機能的断片を含んでいる、請求項９に記載の可溶性融合タンパク質複合体。
11. Ｆｃドメインに融合したＩＬ−１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン（ＩＬ−１５ＲαＳｕ／Ｆｃ）及びＮ７２Ｄ突然変異を含むＩＬ−１５変異体ポリペプチド（ＩＬ−１５Ｎ７２Ｄ）を含んでなる（ＩＬ−１５Ｎ７２Ｄ：ＩＬ−１５ＲαＳｕ／Ｆｃ複合体）、請求項９に記載の可溶性融合タンパク質複合体。
12. 請求項９〜１１の何れか一項に記載の第１融合タンパク質をコードする配列を有する、核酸。
13. 請求項９〜１１の何れか一項に記載の第２融合タンパク質をコードする配列を有する、核酸。
14. 請求項１２に記載の核酸を含んでなる、ＤＮＡベクター。
15. 請求項１３に記載の核酸を含んでなる、ＤＮＡベクター。
16. 請求項１２及び１３に記載の核酸を含んでなる、ＤＮＡベクター。
17. 請求項１２に記載の核酸、請求項１３に記載の核酸、及び請求項１２及び１３に記載の核酸の群から選ばれる核酸を含んでなる、細胞。
18. 方法が、
    ａ）第１融合タンパク質をコードする請求項１４に記載のＤＮＡベクターを第１宿主細胞内に導入すること、
    ｂ）細胞又は培地中に第１融合タンパク質を発現するのに十分な条件下で、培地中で第１宿主細胞を培養すること、
    ｃ）宿主細胞又は培地から第１融合タンパク質を精製すること、
    ｄ）第２融合タンパク質をコードする請求項１５に記載のＤＮＡベクターを第２宿主細胞内に導入すること、
    ｅ）細胞又は培地中に第２融合タンパク質を発現するのに十分な条件下で、培地中で第２宿主細胞を培養すること、
    ｆ）宿主細胞又は培地から第２融合タンパク質を精製すること、及び
    ｇ）第１融合タンパク質のＩＬ−１５ドメインと第２融合タンパク質の可溶性ＩＬ−１５Ｒαドメインの間を結合させるのに十分な条件下で、第１及び第２融合タンパク質を混合して可溶性融合タンパク質複合体を形成すること、
    を含んでなる、請求項９〜１１の何れか一項に記載の可溶性融合タンパク質複合体を製造する方法。
19. 方法が、
    ａ）第１融合タンパク質をコードする請求項１４に記載のＤＮＡベクター及び第２融合タンパク質をコードする請求項１５に記載のＤＮＡベクターを宿主細胞に導入すること、
    ｂ）細胞又は培地中に融合タンパク質を発現して、第１融合タンパク質のＩＬ−１５ドメインと第２融合タンパク質の可溶性ＩＬ−１５Ｒαドメインの間を会合させて可溶性融合タンパク質複合体の形成を可能にするのに十分な条件下で、宿主細胞を培地中で培養すること、及び
    ｃ）宿主細胞又は培地から可溶性融合タンパク質複合体を精製すること、
    を含んでなる、請求項９〜１１の何れか一項に記載の可溶性融合タンパク質複合体を製造する方法。
20. 方法が、
    ａ）複数の細胞を請求項９〜１１の何れか一項に記載の可溶性融合タンパク質複合体と接触させること、該複数の細胞は更に、請求項９に記載のＩＬ−１５ドメインによって認識されるＩＬ−１５Ｒ鎖を担持している免疫細胞又は請求項９に記載のＦｃドメインによって認識されるＦｃ受容体鎖を担持している免疫細胞、及び請求項９に記載の生物活性ポリペプチドの少なくとも１つによって認識される抗原を担持している標的細胞を含んでいる、
    ｂ）標的細胞上の抗原と、免疫細胞上のＩＬ−１５Ｒ又はＦｃ受容体鎖の間に、免疫細胞を結合及び活性化するのに十分に、特異的結合複合体（架橋）を形成すること、及び
    ｃ）結合した活性化免疫細胞によって標的細胞を殺傷すること、
    を含んでなる、インビトロで標的細胞を殺傷する方法。
21. 疾患関連抗原を認識する生物活性ポリペプチドを含んでいる請求項９〜１１の何れか一項に記載の可溶性融合タンパク質複合体を含んでなる、疾患細胞が疾患関連抗原を発現している、患者の疾患を予防又は治療するための医薬組成物。
22. ＩＬ−１５Ｒ鎖又はＦｃ受容体鎖を担持している免疫細胞を、疾患関連抗原を認識する生物活性ポリペプチドを含んでいる請求項９〜１１の何れか一項に記載の可溶性融合タンパク質複合体と混合することによって得られる免疫細胞−融合タンパク質複合体混合物を含んでなる、疾患細胞が疾患関連抗原を発現している、患者の疾患を予防又は治療するための医薬組成物。
23. 疾患が癌又はウィルス感染症である、請求項２１又は２２に記載の医薬組成物。
24. 請求項９〜１１の何れか一項に記載の可溶性融合タンパク質複合体を含んでなる、哺乳動物における免疫応答を刺激又は抑制するための医薬組成物。