JP2008501693A - 遺伝子調節で使用するための個別に調節された鎖を有する二本鎖組成物 - Google Patents
遺伝子調節で使用するための個別に調節された鎖を有する二本鎖組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2008501693A JP2008501693A JP2007515521A JP2007515521A JP2008501693A JP 2008501693 A JP2008501693 A JP 2008501693A JP 2007515521 A JP2007515521 A JP 2007515521A JP 2007515521 A JP2007515521 A JP 2007515521A JP 2008501693 A JP2008501693 A JP 2008501693A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- modified
- composition
- nucleoside
- nucleosides
- sugar
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/111—General methods applicable to biologically active non-coding nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/321—2'-O-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/322—2'-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/323—Chemical structure of the sugar modified ring structure
- C12N2310/3231—Chemical structure of the sugar modified ring structure having an additional ring, e.g. LNA, ENA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/341—Gapmers, i.e. of the type ===---===
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/346—Spatial arrangement of the modifications having a combination of backbone and sugar modifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/50—Methods for regulating/modulating their activity
- C12N2320/51—Methods for regulating/modulating their activity modulating the chemical stability, e.g. nuclease-resistance
Abstract
【選択図】 なし
Description
本明細書は、1)2004年6月29日に出願された米国仮出願番号第60/584,045号および2004年9月7日に出願された米国仮出願番号第60/607,927号、2)2004年6月3日に出願された米国一部継続出願番号第10/859,825号および2004年9月20日に出願された米国出願番号第10/946,147号、および3)2004年6月3日に出願された国際出願の一部継続出願番号第PCT/US2004/017485号およびに2004年6月3日に出願された国際出願番号第PCT/US2004/017522号対して優先権を主張しており、それぞれの全体はこの参照によって本明細書に組み込まれる。
1実施形態において、前記第二のオリゴマー化合物は、ギャップトモチーフを有する。別の実施形態において、前記第二のギャップトオリゴマー化合物の外部領域は、2’−修飾ヌクレオシド、4’−チオ修飾ヌクレオシド、4’−チオ−2’−修飾ヌクレオシド、または二環式糖部分を有するヌクレオシドを有する。更なる実施形態において、前記第二のギャップトオリゴマー化合物の外部領域の少なくとも1つは、ハロゲン、アリル、アミノ、アジド、O−アリル、O−C1〜C10アルキル、−OCF3、O−(CH2)2−O−CH3、2’−O(CH2)2SCH3、O−(CH2)2−O−N(Rm)(Rn)、またはO−CH2−C(=O)−N(Rm)(Rn)から選択され、各RmおよびRnは個別に、H、アミノ保護基、または置換或いは非置換C1〜C10アルキルである。別の実施形態において、前記第二のギャップトオリゴマー化合物の外部領域の少なくとも1つは、アリル、O−アリル、O−C2〜C10アリル、O−(CH2)2−O−CH3、または2’−O(CH2)2SCH3から選択される2’−修飾ヌクレオシドを有する。別の実施形態において、前記第二ギャップトオリゴマー化合物の各2’−修飾ヌクレオシドは、2’−O−(CH2)2−O−CH3修飾ヌクレオシドである。
5’−A(−L−B−L−A)n(−L−B)nn−3’
を有する交互モチーフを有し、ここで、
各Lは、個別にインターヌクレオシド結合基であり、
各Aは、β−D−リボヌクレオシドまたは糖修飾ヌクレオシドであり、
各Bは、β−D−リボヌクレオシドまたは糖修飾ヌクレオシドであり、
nは、約7〜約11であり、
nnは、0または1であって、
各Aヌクレオシドを有する前記糖鎖は同一であり、各Bヌクレオシドを有する前記糖鎖は同一であり、Aヌクレオシドの前記糖鎖はBヌクレオシドの前記糖鎖とはことなり、AおよびBの少なくとも1つは糖修飾ヌクレオシドである。
(X1)j−(Y1)i−X2−Y2−X3−Y3−X4
を有しており、ここで、
X1は、1〜約3糖修飾ヌクレオシドの配列であり、
Y1は、1〜約5β−D−リボヌクレオシドの配列であり、
X2は、1〜約3糖修飾ヌクレオシドの配列であり、
Y2は、2〜約7β−D−リボヌクレオシドの配列であり、
X3は、1〜約3糖修飾ヌクレオシドの配列であり、
Y3は、4〜約6β−D−リボヌクレオシドの配列であり、
X4は、1〜約3糖修飾ヌクレオシドの配列であり、
iは、0または1であり、
jは、0または1であり、iが1の場合は1またはiが0のとき0である。
1実施形態において、第一および第二のオリゴマー化合物はそれぞれ個別に、約12〜約30ヌクレオシドから成る。更なる実施形態において、前記第一および第二のオリゴマー化合物のそれぞれは個別に、約17〜約23ヌクレオシドから成る。別の実施形態において、前記第一および第二のオリゴマー化合物のそれぞれは個別に、約19〜約21ヌクレオシドから成る。
本発明のオリゴマー化合物は、1若しくはそれ以上の末端リン酸部位も含むことができる。末端リン酸部位は、あらゆる末端ヌクレオシドに位置付けられ得るが、5’−末端ヌクレオシドが適しており、アンチセンス鎖の5’−末端ヌクレオシドも適している。1観点において、前記末端リン酸は、構造式−O−P(=O)(OH)OHを持ち非修飾である。別の観点において、前記末端リン酸は、OおよびOH基の1若しくはそれ以上がH、O、S、N(R)、またはアルキルで置換されるように修飾されており、ここにおいてRはH、アミノ保護基、または非置換または置換アルキルである。
Rbは、O、S、またはNHであり;
Rdは、単結合、O、S、またはC(=O)であり;
Reは、C1〜C10アルキル、N(Rk)(Rm)、N(Rk)(Rn)、N=C(Rp)(Rq)、N=C(Rp)(Rr)、または以下の構造式IIIaを持ち;
Rrは、−Rx−Ryであり;
Rs、Rt、Ru、およびRvはそれぞれ個別に、水素、C(O)Rw、置換或いは非置換C1〜C10アルキル、置換或いは非置換C2〜C10アルケニル、置換或いは非置換C2〜C10アルキニル、アルキルスルフォニル、アリールスルフォニル、化学官能基または共役基であり、ここにおいて前記置換基は、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、カルボキシ、ベンジル、フェニル、ニトロ、チオール、チオアルコキシ、ハロゲン、アルキル、アリール、アルケニル、およびアルキニルから選択されるものであり;
または選択的にRuおよびRvは、それらが結合した窒素原子とフタルイミド部位を共に形成し;
各Rwは個別に、置換或いは非置換C1〜C10アルキル、トリフルオロメチル、シアノエチルオキシ、メトキシ、エトキシ、t−ブトキシ、アリルオキシ、9−フルオレニルメトキシ、2−(トリメチルシリル)−エトキシ、2,2,2−トリクロロエトキシ、ベンジルオキシ、ブチリル、イソ−ブチリル、フェニル、またはアリールであり;
Rkは、水素、窒素保護基、または−Rx−Ryであり;
Rpは、水素、窒素保護基、または−Rx−Ryであり;
Rxは、結合または結合部位であり;
Ryは、化学官能基、共役基、あるいは固体支持媒体であり;
RmおよびRnはそれぞれ個別に、H、窒素保護基、置換或いは非置換C1〜C10アルキル、置換或いは非置換C2〜C10アルケニル、置換或いは非置換C2〜C10アルキニルであり、ここにおいて前記置換基は、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、カルボキシ、ベンジル、フェニル、ニトロ、チオール、チオアルコキシ、ハロゲン、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、NH3 +、N(Ru)(Rv)、グアニジノ、およびアシルから選択されるものであり、ここにおいて前記アシルは酸アミドまたはエステルであり;
またはRmおよびRnは、共に窒素保護基であり、NおよびOから選択された付加的なヘテロ原子を選択的に含む環構造に結合されており、または化学機能基であり;
Riは、ORz、SRz、またはN(Rz)2であり;
Rzはそれぞれ個別に、H、C1〜C8アルキル、C1〜C8ハロアルキル、C(=NH)N(H)Ru、C(=O)N(H)Ru、またはOC(=O)N(H)Ruであり;
Rf、Rg、およびRhは、約4〜約7炭素原子を保持する、または約3〜約6炭素原子を保持し、1または2ヘテロ原子を保持する環システムを有する環システムであり、ここにおいて前記へテロ原子は酸素、窒素、および硫黄から選択されたものであり、前記環システムは脂肪族、不飽和脂肪族、芳香族、または飽和または不飽和複素環であり;
Rjは、1〜約10炭素原子を保持するアルキルまたはハロアルキル、2〜約10炭素原子を保持するアルケニル、2〜約10炭素原子を保持するアルキニル、6〜約14炭素原子を保持するアリール、N(Rk)(Rm)ORk、ハロ、SRkまたはCNであり;
maは、1〜約10であり;
mbはそれぞれ個別に、0または1であり;
mcは、0または1〜10の整数であり;
mdは、1〜10の整数であり;
meは、0、1、または2であり;
mcが0の時、mdは1以上の場合とする。
TBDMS=5’−O−DMT−2’−O−t−ブチルジメチルシリル;
TOM=2’−O−ビス(2−アセトキシエトキリ)メチル;
DOD/ACE=5’−O−ビス(トリメチルシロキシ)シクロドデシルオキシシリルエーテル−2’−O−ビス(2−アセトキシエトキリ)メチル;
FPMP=5’−O−DMT−2’−O−[1(2−フルオロフェニル)−4−メトキシピペリジン−4−イル]である。
概要
実施例において記載した配列は、修飾ヌクレオシドまたはインターヌクレオシド結合がある場所を指示するように注釈が付けられている。全ての注釈のないヌクレオシドは、ホスホジエステルインターヌクレオシド結合によって結合されたβ−D−リボヌクレオシドである。ホスホチオエートインターヌクレオシド結合は、下線によって指示されている。修飾ヌクレオシドはヌクレオシドを指示する大文字の次の下付き文字によって指示されている。特に、下付きの「f」は2−フルオロを指示しており;下付きの「m」は2’−O−メチルを指示しており;下付きの「l」はLNAを指示しており;下付きの「e」は2−O−メトキシエチル(MOE)を指示しており;下付きの「t」は4’−チオを指示している。例えば、Umは2−OCH3基を保持する修飾ウリジンである。’ヌクレオシドの前の「d」は、例えばdTはデオキシチミジンといったように、デオキシヌクレオシドを指示する。5’−リン酸機を保持する鎖のいくつかは「P−」として指定された。太字およびイタリック体「C」は、5−メチルCリボヌクレオシドを意味している。化合物のISIS数の次に記載された「as」はアンチセンス鎖を意味し、「s」は前記標的配列に対して二本鎖のセンス鎖を指定している。
ヌクレオシドホスホラミダイトの調合は、これに限定されるものではないが米国特許番号第6,426,220号明細書および国際公開公報番号第WO02/36743号などの本分野で広範囲に説明されている手順に従って実行される。
本発明に従って使用されたオリゴマー化合物は、固相合成のよく知られた技術によって都合よくおよびルーティンに製造する。そのような合成のための装置は、例えばApplied Biosystems(Foster City,CA)などを含むいくつかの製造供給元によって販売されている。本分野で既知なそのような合成に対するあらゆる他の手段を、付加的にまたは代替的に利用する。ホスホチオエートおよびアルキル化誘導体などのオリゴヌクレオチドを調合するための同様な技術を使用することはよく知られている。
制御孔ガラス固体支持体から切断し、55℃で12〜16時間、濃縮アンモニウムヒドロキシドにおいて非ブロック化した後、前記オリゴヌクレオチドまたはオリゴヌクレオシドは、1M NH4OAcからエタノールの3倍以上の容量で沈殿させることによって回収した。合成オリゴヌクレオチドはエレクトロスプレー質量分析(分子量決定)によって、および毛細管下ゲル電気泳動法によって解析し、少なくとも70%完全長物質となることを判断した。合成において獲得したホスホロチオエートおよびホスホジエステル結合の相対量は、−16amu産物(+/―32+/−48)に対する正確な分子量の割合によって決定した。いくつかの研究に対して、オリゴヌクレオチドは、Chiang et al.,J.Biol.Chem.1991,266,18162〜18171に記載されたように、HPLCによって精製した。HPLC精製物質で得られた結果は、非HPLC精製物質で得られた結果と同じであった。
オリゴヌクレオチドは、96ウェル形式において同時に96配列を構築することができる自動合成機上の固相P(III)ホスホラミダイト化学を介して合成できる。ホスホジエステルインターヌクレオチド結合は、水溶性ヨードでの酸化によって産生した。ホスホロチオエートインターヌクレオチド結合は、無水アセトニトリル中で3,H−1,2−ベンゾジチオール−3−オン1,1−ジオキシド(Beaucage試薬)を利用した硫化によって産生した。標準的塩基保護性ベータ−シアノエチル−ジイソ−プロピルホスホラミダイトは商業的製造供給元(例えば、PE−Applied Biosystems、カリフォルニア州Foster City、またはPharmacia、ニュージャージー州Piscataway)から購入した。非標準的ヌクレオシドは、標準的または特許化された方法のように合成した。それらは塩基保護性ベータ−シアノエチルジイソプロピルホスホラミダイトとして利用した。
各ウェルのオリゴヌクレオチドの濃度はサンプルの希釈およびUV吸収分光法によって推定した。個々の産物の完全長整合性は、96ウェルプレート形式(Beckman P/ACE(商標)MDQ)において、または商業的CE装置(例えば、Beckman P/ACE(商標)5000、ABI270)などで個々に調合されたサンプルに対して、キャピラリー電気泳動法(CE)によって評価した。塩基およびバックボーン組成物は、エレクトロスプレー−質量分析法を利用したオリゴマー化合物の質量解析によって確認した。全てのアッセイテストプレートは、単一および複数チャネルロボットピペットを使用してマスタープレートから希釈した。プレート上の少なくとも85%のオリゴマー化合物が少なくとも85%完全長である条件を満たしているか、プレートを判断した。
標的核酸発現に対するオリゴマー化合物の効果は、前記標的核酸が測定可能レベルで存在する場合、あらゆる様々な細胞タイプでテストすることができる。これは例えばPCRまたはノーザンブロット解析などを用いてルーティンに決定することができる。複数の組織および種に由来した細胞株はアメリカ培養細胞系統保存機関(ACTT,バージニア州Manassas)から入手することができる。
細胞が適切なコンフルエンスに達した場合、その細胞を記載されたような形質移入方法を用いてオリゴマー化合物で処理した。
細胞が65〜75%のコンフルエンスに達した場合、その細胞をオリゴヌクレオチドで処理した。オリゴヌクレオチドは、Opti−MEM(商標)−1低減血清培養液(Invitrogen Life Technologies,カリフォルニア州Carlsbad)中のLIPOFECTIN(商標)(Invitrogen Life Technologies,カリフォルニア州Carlsbad)と混合し、望ましい濃度のオリゴヌクレオチド、および100nMオリゴヌクレオチド当たり2.5または3μg/mLのLIPOFECTIN(商標)濃度を達成した。この形質移入混合物は室温で約0.5時間インキュベートした。96ウェルプレートにおいて細胞を増殖させる場合、ウェルは100μLのOpti−MEM(商標)−1で一度洗浄し、次に130μLの前記形質移入混合物で処理した。24ウェルプレートまたは他の標準的組織培養プレートで増殖させた細胞は、培養液およびオリゴヌクレオチドの適切な容量を用いて、同様に処理した。細胞を処理し、データは二つ組または三つ組で取得した。37℃での処理の約4〜7時間後、前記形質移入混合物を含有した培養液は新鮮な培養液と交換した。細胞はオリゴヌクレオチド処理後16〜24時間で回収した。
標的発現のアンチセンス調節は、本分野で既知である様々な方法でアッセイすることができる。例えば、標的mRNAレベルは、例えばノーザンブロット解析、競合的ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)、またはリアルタイムPCRなどによって定量化することができる。リアルタイム定量化PCRは現在望ましい。RNA解析は総細胞RNAまたはポリ(A)+mRNAで実施することができる。本発明のRNA解析の1つの方法は、本明細書の他の実施例で記載されたような総細胞RNAの使用である。RNA単離の方法は本分野でよく知られている。ノーザンブロット解析も本分野ではルーティンである。リアルタイム定量化(PCR)は商業的に利用可能なABI PRISM(商標)7600、7700、または7900配列検出システム(PE−Applied Biosystems,カリフォルニア州Foster Cityから利用可能)を用いて都合よく達成することができ、製造業者の取扱い説明書に従って使用した。
表現型アッセイ
標的阻害剤を本明細書で開示された方法によって同定した場合、前記オリゴマー化合物はさらに1若しくはそれ以上の表現型アッセイで検討し、それぞれは特定の病状または状態の治療において有効であると予想する測定可能なエンドポイントを有している。
本明細書で記載されるin vivo研究の個々の対象は、ヒトを含む温血脊椎動物である。
ポリ(A)+mRNA単離
ポリ(A)+mRNAは、Miuraら(Clin.Chem.,1996,42,1758〜1764)に従って単離した。ポリ(A)+mRNA単離のための他の方法は、本分野ではルーティンである。簡潔には、96ウェルでの細胞増殖に対して増殖培養液を細胞から除去し、各ウェルを200μL冷PBSで洗浄した。60μLの溶解バッファー(10mM Tris−HCl(pH7.6)、1mM EDTA、0.5M NaCl、0.5% NP−40、20mM バナジル−リボヌクレオシド複合体)を各ウェルに添加し、そのプレートを穏やかに撹拌し、次に5分間室温でインキュベートした。55μLの溶解液をOligo d(T)コーティング96ウェルプレート(AGCT Inc.カリフォルニア州Irvine)へ移した。プレートを60分間室温でインキュベートし、200μLの洗浄バッファー(10mM Tris−HCl(pH7.6)、1mM EDTA、0.3M NaCl)で3回洗浄した。最後の洗浄後、過剰な洗浄バッファーを除去するためにそのプレートをペーパータオルで拭き、次に5分間空気乾燥した。70℃に予め加熱した60μLの溶出バッファー(5mM Tris−HCl(pH7.6))を各ウェルに添加し、そのプレートを90℃のホットプレート上で5分間インキュベートし、次に溶出液を新しい96ウェルプレートに移した。
総RNAは、QiagenInc.(カリフォルニア州Valencia)から購入したRNEASY96(商標)キットおよびバッファーを用い、製造者推薦手順に従って単離した。簡潔には、96ウェルで増殖した細胞に対して増殖培養液を細胞から除去し、各ウェルを200μL冷PBSで洗浄した。150μLのバッファーRLTを各ウェルに添加し、そのプレートを20秒間穏やかに撹拌した。150μLの70%エタノールを各ウェルに添加し、内容物を3回上下にピペッティングすることによって混合した。そのサンプルを、廃棄物回収トレイが取り付けられたQIAVAC(商標)マニフォールドに接着され、真空源に接着されたRNEASY96(商標)ウェルプレートへ移した。1分間真空にした。500μLのバッファーRW1をRNEASY96(商標)プレートの各ウェルに添加し、15分間インキュベートし、再度1分間真空にした。付加的な500μLのバッファーRW1をRNEASY96(商標)プレートの各ウェルに添加し、2分間真空にした。1mLのバッファーRPEをRNEASY96(商標)プレートの各ウェルに添加し、90秒間真空にした。バッファーRPE洗浄を繰り返し、付加的に3分間真空にした。そのプレートをQIAVAC(商標)マニフォールドから外し、ペーパータオル上で乾燥させるために拭いた。次にそのプレートを、1.2mL回収チューブを含む回収チューブラックが取り付けられたQIAVAC(商標)マニフォールドに再設置した。RNAを140μLのRNAseを含まない水でピペッティングし、1分間インキュベートし、3分間真空にすることによって各ウェルへ溶出した。
本発明に従うと、本発明の化合物とそれらの相補鎖を有する一連の核酸二本鎖を設計することができる。前記二本鎖のアンチセンス鎖の核酸塩基配列は、本明細書において記載されたように標的配列を標的化したアンチセンスオリゴヌクレオチドの少なくとも一部を有する。前記鎖の末端は、オーバーハングを形成するように1若しくはそれ以上の天然または修飾核酸塩基の付加によって修飾されている。dsRNAのセンス鎖は前記アンチセンス鎖に相補的に設計し合成し、両末端に修飾または付加も含む。例えば、1実施形態においてdsRNA二本鎖の両鎖は中心核酸塩基に対して相補的であり、それぞれは1若しくは両末端にオーバーハングを有する。
調合したら、前記二本鎖化合物を、標的mRNAレベルを調節するための能力を評価した。細胞が80%コンフルエンスに達した場合、その細胞を本発明の二本鎖化合物で処理した。96ウェルプレートで増殖した細胞に対してウェルは200μLのOPTI−MEM−1(商標)低減血清培養液(Gibco BRL)で1回洗浄し、5μg/mLのLIPOFECTAMINE 2000(商標)(Invitrogen Life Technologies,カリフォルニア州Carlsbad)および望ましい最終濃度の前記二本鎖アンチセンス化合物を含有した130μLのOPTI−MEM−r(商標)で処理した。処理後約4時間で、前記培養液を新鮮な培養液と交換した。RNAが単離され、標的減少が本明細書で記載されたような定量化リアルタイムPCRによって測定された時点である、処理後16時間で細胞を回収した。
標的mRNAレベルの定量化はABI PRISM(商標) 7600、7700、または7900配列検出システム(PE−Applied Biosystems,カリフォルニア州Foster City)を用いたリアルタイム定量化PCRによって、取扱い説明書に従って達成した。これは密閉チューブで非ゲルベースの蛍光検出システムであり、リアルタイム(同時)でのポリメラーゼ連鎖反応(PCR)産物の高処理定量化を可能にする。増幅産物はPCRが終了後に定量する標準的なPCRとは対照的に、リアルタイム定量化PCRにおける産物はそれらが蓄積するのに従って定量する。これはPCR反応において、フォワード(順方向)とリバース(逆方向)PCRプライマーとの間に特異的にアニーリングし、2つの蛍光色素を含有するオリゴヌクレオチドプローブを含むことによって達成される。レポーター色素(例えば、FAMまたはJOE、PE−Applied Biosystems,カリフォルニア州Foster City、Operon Technologies Inc.カリフォルニア州Alameda、またはIntegrated DNA Technologies Inc.アイオワ州Coralvilleから入手)を前記プローブの5’末端に結合し、クエンチャー(消光)色素(例えば、TAMRA、PE−Applied Biosystems,カリフォルニア州Foster City、Operon Technologies Inc.カリフォルニア州Alameda、またはIntegrated DNA Technologies Inc.アイオワ州Coralvilleから入手)を前記プローブの3’末端に結合した。記プローブと色素が無傷である場合、レポーター色素発光は近接した3’クエンチャー色素によって消光された。増幅中、前記プローブの標的配列へのアニーリングによって、Taqポリメラーゼの5−エキソヌクレアーゼ活性によって切断され得る基質が作られた。’PCR増幅サイクルの伸長相の間、前記Taqポリメラーゼによる前記プローブの切断によって、前記プローブの残部から(そしてクエンチャー部位から)のレポーター色素が放出され、配列特異的蛍光シグナルを生成した。各サイクルにおいて、付加的なレポーター色素分子がそれぞれのプローブから切断され、ABI PRISM(商標)配列検出システムに組み込まれたレーザー光学によって蛍光輝度を定期的にモニタリングした。各アッセイにおいて、未処理対照サンプルからの、mRNAの連続的な希釈を含む一連の平行反応によって、テストサンプルのアンチセンスオリゴヌクレオチド処理後のパーセント阻害を定量化するために使用される標準曲線を算出した。
プローブおよびプライマーは、公開された配列情報を用いて標的配列にハイブリダイズするように設計した。
フォワードプライマー:AATGGCTAAGTGAAGATGACAATCAT(配列ID番号:5)
リバースプライマー:TGCACATATCATTACACCAGTTCGT (配列ID番号:6)
そしてPCRプローブは、
FAM−TTGCAGCAATTCACTGTAAAGCTGGAAAGG−TAMRA(配列ID番号:7)であり、ここにおいてFAMは蛍光色素でTAMRAはクエンチャー色素である。
フォワードプライマー:CACCACTTCCAGGGTTTATTCC(配列ID番号:9)
リバースプライマー:TGATCTCCTTTCCTAAGACATTGCT(配列ID番号:10)
そしてPCRプローブは、
FAM−ACCAGCCTTCCTGTGGGCCCCT−TAMRA(配列ID番号:11)であり、ここにおいてFAMは蛍光色素でTAMRAはクエンチャー色素である。
。
フォワードプライマー:TGGCGACTGTCGAACCG (配列ID番号:13)
リバースプライマー:AGATTCCGTTTTCTCCTCTTCTGTAG(配列ID番号:14)
そしてPCRプローブは、
FAM−AAACCACCCCTACTCCTAATCCCCCG−TAMRA(配列ID番号:15)であり、ここにおいてFAMは蛍光色素でTAMRAはクエンチャー色素である。
フォワードプライマー:AGGACGGTGGCTGATCACA(配列ID番号:17)
リバースプライマー:TCTCTAGCCAGAAGCGATCGA(配列ID番号:18)
更にPCRプローブは、
FAM−TGAACAAGCAGCAGAGACGGAGTGA−TAMRA(配列ID番号:19)であり、ここにおいてFAMは蛍光色素でTAMRAはクエンチャー色素である。
アンチセンス処理後18時間で、細胞単層を冷PBSで2回洗浄し、1mLのRNAZOL(商標)(TEL−TESTB灯Inc.テキサス州Friendswood)で溶解した。総RNAは製造者推薦プロトコールに従って調合した。20マイクログラムの総RNAは、MOPSバッファーシステム(AMRESCO,Inc.オハイオ州Solon)を用いて、1.1%ホルムアルデヒドを含有した1.2%アガロースゲルを介した電気泳動によって分画した。RNAは、ノーザン/サザントランスファーバッファーシステム(TEL−TESTB灯Inc.テキサス州Friendswood)を用いたオーバナイトキャピラリートランスファーによって、ゲルからHYBOND(商標)−N+ナイロン膜(Amersham Pharmacia Biotech,ニュージャージー州Piscataway)へ移した。RNAトランスファーはUV可視化によって確認した。膜は、STRATALINKER(商標)UVクロスリンカー 2400(Stratagene,Inc,カリフォルニア州La Jolla)も用いたUVクロスリングによって固定し、QUICKHYB(商標)ハイブリダイゼーション溶液(Stratagene,カリフォルニア州La Jolla)を用いて、厳密な条件での製造者推薦に従ってプローブ化した。
ウエスタンブロット解析(免疫ブロット解析)は、標準的な方法を用いて実行した。細胞はオリゴヌクレオチドヌクレオチド処理後16〜20時間で回収し、PBSで1回洗浄し、Laemmliバッファー(100μl/ウェル)に懸濁し、5分間煮沸し、16%SDS−PAGEゲルに添加した。ゲルを150Vで1.5時間流し、ウエスタンブロッティング用の膜へ移した。標的に対して適切な一次抗体、さらに一次抗体に対する放射線標識または蛍光標識した二次抗体と共に使用した。バンドはPHOSPHORIMAGER(商標)(Molecular Dynamics,カリフォルニア州Sunnyvale)を用いて可視化した。
公開された配列情報を用いてヒトサバイビンを標的化するように設計した、異なって修飾されたsiRNA二本鎖を調合し、以下に記載したようにアッセイした。アンチセンス鎖は4’−チオギャップト鎖として一定にし、3つの異なるセンス鎖を比較した。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。
本発明に従うと、一連のオリゴマー化合物を合成し、未修飾化合物と比較して、用量の範囲に亘って標的発現を減少させる能力をテストした。テストした前記化合物は、全体にホスホロチオエートインターヌクレオシド結合を保持する、長さ19ヌクレオチドであった。
選択されたsiRNA(前記二本鎖のアンチセンス鎖の次にセンス鎖の順で以下に示した)を調合し、様々な用量の前記選択されたsiRNAで本明細書に記載されたように処理したHeLa細胞において評価した。mRNAレベルは、本明細書で記載したようにリアルタイムPCRを用いて定量化し、未処理対照レベル(%UTC)と比較した。そのIC50は、使用した濃度の対数に対して規準化したmRNAレベルをプロットすることによって算出された直線回帰方程式を用いて計算した。
本発明に従うと、一連のオリゴマー化合物を合成し、用量の範囲に亘って標的発現を減少させる能力をテストした。HeLa細胞は、0.0006nM、0.084nM、0.16nM、0.8nM、4nMまたは20nMの濃度の以下に示した(二本鎖のアンチセンス鎖の次にセンス鎖)二本鎖オリゴマー化合物(siRNAコンストラクト)で、本明細書に記載した方法を用いて処理した。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。ヒトサバイビンの発現レベルは本明細書で記載したようにリアルタイムPCRを用いて定量化した。サバイビンmRNAレベルに対する20nM用量の効果は以下のようである。結果は未処理対照mRNAレベルのパーセンテージとして示した。
本発明に従うと、一連のオリゴマー化合物を合成し、用量の範囲に亘ってeIF4E発現を減少させる能力をテストした。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。HeLa細胞は、0.0006nM、0.032nM、0.16nM、0.8nM、4nMまたは20nMの濃度の以下に示した(二本鎖のアンチセンス鎖の次にセンス鎖)二本鎖オリゴマー化合物(siRNAコンストラクト)で、本明細書に記載した方法を用いて処理した。ヒトeIF4Eの発現レベルは本明細書で記載したようにリアルタイムPCRを用いて定量化した。結果生じた用量−反応曲線は以下に示したように各ペアに対するIC50を決定するために使用した。
本発明に従うと、一連のオリゴマー化合物を合成し、用量の範囲に亘ってeIF4E発現を減少させる能力をテストした。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。b.END細胞は、0.0625nM、0.25nM、1nM、または4nMの濃度の以下に示した(二本鎖のアンチセンス鎖の次にセンス鎖)二本鎖オリゴマー化合物(siRNAコンストラクト)で、本明細書に記載した方法を用いて処理した。マウスeIF4Eの発現レベルは本明細書で記載したようにリアルタイムPCRを用いて定量化した。結果生じた用量−反応曲線は以下に示したように各ペアに対するIC50を決定するために使用した。
以下に記載したアンチセンス(AS)鎖はヒトPTENを標的化するように設計し、それぞれは同じセンス鎖(ISIS271790、以下に示した)を有する二本鎖であった。前記二本鎖は、本明細書で記載された方法を用いて5つの修飾の相対位置的効果を決定するために、用量の範囲に亘ってPTEN発現を減少する能力をテストした。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。PTENの発現レベルは本明細書で記載したようなリアルタイムPCR方法を用いて決定し、未処理対照に対して決定されたレベルと比較した。
以下に記載したアンチセンス(AS)鎖はヒトPTENを標的化するように設計し、それぞれは同じセンス鎖271790を有する二本鎖であった。前記二本鎖は、結果生じたsiRNAの3’末端に9または14の2’−O−メチル修飾ヌクレオシドを付加する相対的な効果を決定するために、用量の範囲に亘ってPTEN発現を減少する能力をテストした。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。PTENの発現レベルは本明細書で記載したようなリアルタイムPCR方法を用いて決定し、未処理対照に対して決定されたレベルと比較した。
一連のブロックマーは、一本鎖アンチセンスRNA(asRNA)として調合した。以下に記載した前記アンチセンス(AS)鎖は、PTENを標的化するように設計し、それぞれは、同じセンス鎖(ISIS308746、以下に示した)を有する二本鎖の一部としてPTEN発現レベルを減少する能力をアッセイした。T24細胞は、本明細書に記載された方法を用いて、以下に示したアンチセンス化合物で産生した一本鎖または二本鎖オリゴマー化合物で処理した。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。ヒトPTENの発現レベルは本明細書で記載したようなリアルタイムPCR方法を用いて決定し、未処理対照に対して決定されたレベルと比較した。
3つのsiRNAヘミマーコンストラクトを調合し、PTEN発現レベルを減少する能力をテストした。前記ヘミマーコンストラクトは3末端に7つの2’−O−メチルヌクレオシドを保持していた。前記ヘミマーはセンス鎖のみ、アンチセンス鎖のみ、および両鎖に挿入し、効果を比較した。細胞は、以下に示した(二本鎖のアンチセンス鎖の次にセンス鎖)二本鎖オリゴマー化合物(siRNAコンストラクト)で、本明細書に記載した方法を用いて処理した。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。PTENの発現レベルは本明細書で記載したようなリアルタイムPCR方法を用いて決定し、未処理対照に対して決定されたレベルと比較した。
以下のPTENを標的化した選択されたsiRNA二本鎖のアンチセンス鎖は、それらの相補的完全ホスホジエステルセンス鎖とハイブリダイズさせた。本明細書に記載された方法を用いて活性を測定した。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。
以下のPTENを標的化したsiRNA二本鎖のアンチセンス鎖は、一本鎖単独としてテストした、またはそれらの相補的完全ホスホジエステルセンス鎖とハイブリダイズし二本鎖でテストした。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。太字およびイタリック体「C」は、5−メチルCリボヌクレオシドを意味している。
PTENを標的化したsiRNAコンストラクトを調合し、ここにおいて以下のセンス鎖およびアンチセンス鎖をハイブリダイズした。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。
PTENを標的化したsiRNAコンストラクトを調合し、ここにおいて以下のセンス鎖を相補的完全ホスホジエステルセンス鎖とハイブリダイズした。
以下に示した二本鎖コンストラクト(二本鎖のアンチセンス鎖の次にセンス鎖)を調合した。アンチセンス(as)の名称の後の「P」は標的がPTENであることを示し、「S」は標的がサバイビンであることを示している。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。
選択されたsiRNAコンストラクトを調合し、定量化リアルタイムPCRによって測定されたようなより低い標的RNAに対する能力をテストした。前記二本鎖は以下に示した(二本鎖のアンチセンス鎖の次にセンス鎖)。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。
以下の表は、本発明に従って調合された例示的な位置的に修飾された組成物を示したものである。標的の標示は:P=PTEN;S=サバイビン:E=eIF4Eであり、以下のアンチセンス鎖名称の次に示されている。
以下の表は本発明のいくつかの適切な位置的組成物を記載したものである。記載されたコンストラクトにおいて、センス鎖の5末端ヌクレオシド(上段)は、アンチセンス鎖の3’末端ヌクレオシド(下段)とハイブリダイズした。
用量反応実験は、交互2’−O−メチル/2’−F siRNAの位置的効果を検討するためにPTENシステムにおいて実行した。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。
用量反応は、活性に対する選択された末端基の効果を決定するために、HeLa細胞においてeIF4Eを標的化して実行した。より具体的には、交互2’−O−メチル/2’−F修飾を含む19−塩基対siRNAによるHeLa細胞におけるeIF4E mRNAの減少が、この実施例において示された。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。5’−P(S)は5’−チオリン酸基(5−O−P(=S)(OH)OH)であり、5’−P(H)は5’−H−リン酸基(5’−O−P(=O)(H)OH)であり、5’−P(CH3)はメチルホスホネート基(5’−O−P(=O)(CH3)OH)である。このアッセイにおける全てのコンストラクトは完全なホスホジエステル結合されている。
以下に記載したコンストラクトは、未処理対照レベルに対する、HeLa細胞におけるヒトPTEN mRNAのレベルを測定することによって活性をアッセイした。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。「P(S)−」はチオリン酸基(−O−P(=S)(OH)OH)を意味している。
以下に記載したPTENを標的化したコンストラクトは示したように(二本鎖のアンチセンス鎖の次にセンス鎖)二本鎖であり、本明細書に記載された方法を用いて活性をアッセイした。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。
6〜7週齢Balb/cマウス(Jackson Laboratory,メイン州Bar Harbor)に、PTENを標的化した一本鎖および二本鎖組成物を注射した。前記ヌクレオシドは、実施例の最初の説明のように化学修飾に関して注釈をつけた。各処理群は4匹の動物から成る。動物は腹腔内注射を介して1日2回4.5日間、動物当たり全9回投与した。生理食塩水注射動物をネガティブコントロールとした。動物は最後の用量が投与された後6時間で屠殺し、血漿サンプルおよび組織を回収した。肝臓における標的減少も本研究の終了時に測定した。
6〜7週齢Balb/cマウス(Jackson Laboratory,メイン州Bar Harbor)に、PTENを標的化した化合物を注射した。各処理群は4匹の動物から成る。動物は腹腔内注射を介して1日2回4.5日間、動物当たり全9回投与した。生理食塩水注射動物をネガティブコントロールとした。動物は最後の用量が投与された後6時間で屠殺し、血漿サンプルおよび組織を回収した。肝臓における標的減少も本研究の終了時に測定した。
無傷二本鎖RNAは、以前に記載された方法(Leeds et al.,Anal.Biochem.,1996,235,36−43;Geary,Anal.Biochem.,1999,274,241〜248)と同様な抽出およびキャピラリー電気泳動方法を用いて、希釈マウス血漿から解析した。3〜6月齢メスBalb/c(Charles River Labs)からのマウスへパリン−処理マウス血漿は、−80℃から解凍し、25%(v/v)までリン酸緩衝生理食塩水(140mM NaCl、3mM KCl、2mM リン酸カリウム、10mM リン酸ナトリウム)で希釈した。約10nmolのプレアニーリングsiRNAを100μMの濃度で、25%血漿に添加し、37℃で0、15、30、45、60、120、180、240、360、および420分間インキュベートした。一定量を指示された時間に取り、最終濃度の2mMまでEDTAで処理し、キャピラリーゲル電気泳動(eCap DNAキャピラリーチューブを有するBeckman P/ACE MDQ−UV)で解析するまで氷上に放置した。siRNA二本鎖ピークの領域を測定し、残りの無傷siRNAのパーセントを計算するために使用した。アデノシントリリン酸(ATP)を、内部キャリブレーション標準として各注射に対して2.5mMの濃度で添加した。ゼロ時点は、キャピラリー電気泳動の後のリン酸緩衝生理食塩水でsiRNAを希釈する時点でとる。パーセント無傷siRNAは時間に対してプロットし、これによって仮性一次半減期の計算を可能となる。結果は以下の表に示した。ISIS338918(UCUUAUCACCUUUAGCUCUA配列ID番号:54)およびISIS338943は全体にホスホジエステル結合を有する非修飾RNA鎖である。本明細書の他の例において、ISIS351831はUmCfUmUfAmUfCmAfCmCfUmUfUmAfGmCfUmCfUmとして、ISIS351832はAfGmAfGmCfUmAfAmAfGmGfUmGfAmUfAmAfGmAfとして注釈をつけた。
U−87MGヒトグリア芽細胞腫異種移植腫瘍モデル(Kiaris et al.,2000,May−Jun;2(3):242〜50)は、本発明の選択された組成物の抗腫瘍活性を示すために使用した。全8CD1nu/nu(Charles River)マウスを各群に対して使用した。移植のために、腫瘍細胞をトリプシン処理し、PBSで洗浄し、DMEM中4x106細胞/mLでPBSへ再懸濁した。移植の直前に、動物を照射(450TBI)し、細胞をマトリゲルと混合した(1:1)。0.2mL容量の全4x106腫瘍細胞を各マウスの左背面側面において皮下(s.c.)に注射した。選択された二本鎖組成物(0.9% NaClに溶解、注射段階)、または溶媒(0.9% NaCl)での処理は、腫瘍細胞移植後4日で開始した。前記組成物は、1日目は8時間おいて、2日目は4時間おいて、0.2mL容量で静脈内(i.v.)に投与した。組織(腫瘍、肝臓、腎臓、血漿)を最後の投与後2時間で回収した。各群の8匹の動物からの腫瘍はウエスタン評価のためにホモジナイズした。サバイビンレベルを決定し、生理食塩水対照と比較した。
Claims (73)
- 第一のオリゴマー化合物と第二のオリゴマー化合物とを有する組成物であって、
前記第一のオリゴマー化合物の少なくとも一部は、前記第二のオリゴマー化合物の少なくとも一部とハイブリダイズすることができるものであり、
前記第一のオリゴマー化合物の少なくとも一部は、選択された標的核酸と相補的であり、ハイブリダイズすることができるものであり、
第一および第二のオリゴマー化合物の1つは、インターヌクレオシド結合基によって結合されているヌクレオシドを有し、前記結合されたヌクレオシドはギャップトモチーフを有するものであり、
もう1つの前記第一および第二のオリゴマー化合物は、インターヌクレオシド結合基によって結合されたヌクレオシドを有し、前記結合されたヌクレオシドはギャップトモチーフ、交互モチーフ、位置的に修飾されたモチーフ、または完全に修飾されたモチーフを有するものであり、
前記組成物はさらに、1若しくはそれ以上の選択的なオーバーハング、リン酸部位、共役基、又はキャッピング基を有するものであり、
この時、前記第一および第二のオリゴマー化合物それぞれは個別に、ギャップトモチーフを有し、次に前記第一および第二のオリゴマー化合物の少なくとも1つの3’または5’末端の少なくとも一方は、2’−OCH3修飾ヌクレオシド以外の修飾ヌクレオシドを有する、または前記第一および第二のオリゴマー化合物の少なくとも1つは、非対称ギャップトモチーフを有するものである、組成物。 - 請求項1記載の組成物において、ギャップトモチーフを有する各オリゴマー化合物は、結合ヌクレオシドの外部領域2つに隣接した結合ヌクレオシドの内部領域を有し、前記内部領域のヌクレオシドは前記外部領域それぞれのヌクレオシドと異なり、前記外部領域それぞれのヌクレオシドは個別に2’−修飾ヌクレオシド、4’−チオ修飾ヌクレオシド、4’−チオ−2’−修飾ヌクレオシド、および二環式糖部位を有するヌクレオシドから選択されるものである。
- 請求項2記載の組成物において、ギャップトモチーフを有する前記オリゴマー化合物の少なくとも1つの内部領域は、β−D−リボヌクレオシド配列である。
- 請求項2記載の組成物において、ギャップトモチーフを有する前記オリゴマー化合物の少なくとも1つの内部領域は、修飾ヌクレオシド配列である。
- 請求項4記載の組成物において、前記修飾ヌクレオシドは、2’−F修飾ヌクレオシドまたは4’−チオ修飾ヌクレオシドから選択されるものである。
- 請求項2記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の少なくとも1つは、対称ギャップトモチーフを有するものである。
- 請求項2記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の少なくとも1つは、非対称ギャップトモチーフを有するものである。
- 請求項7記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物のもう一方は、対称ギャップトモチーフを有するものである。
- 請求項2記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の少なくとも1つの外部領域の少なくとも1つは、2’−修飾ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項9記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の少なくとも1つの各外部領域は、2’−修飾ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項9記載の組成物において、前記2’−置換基それぞれは個別に、ハロ、アリル、アミノ、アジド、O−アリル、O−C1〜C10アルキル、OCF3、O−(CH2)2−O−CH3、2’−O(CH2)2SCH3、O―(CH2)2―O−N(Rm)(Rn)、またはO−CH2−C(=O)−N(Rm)(Rn)であり、各RmおよびRnは個別に、H、アミノ保護基、または置換或いは非置換C1〜C10アルキルである。
- 請求項11記載の組成物において、前記2’−修飾基それぞれは個別に、−F、−OCH3、または−O−(CH2)2−O−CH3である。
- 請求項2記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の少なくとも1つの外部領域の少なくとも1つは、4’−チオ修飾ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項2記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の少なくとも1つの外部領域の少なくとも1つは、4’−チオ−2’−修飾ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項14記載の組成物において、前記4’−チオ−2’−修飾ヌクレオシドの2’−置換基は、ハロゲン、アリル、アミノ、アジド、O−アリル、O−C1〜C10アルキル、−OCF3、O−(CH2)2−O−CH3、2’−O(CH2)2SCH3、O―(CH2)2―O−N(Rm)(Rn)、またはO−CH2−C(=O)−N(Rm)(Rn)から選択されるものであり、各RmおよびRnは個別に、H、アミノ保護基、または置換或いは非置換C1〜C10アルキルである。
- 請求項15記載の組成物において、前記2’−置換基のそれぞれは個別に、−F、−OCH3、−OCF3、または−O−(CH2)2−O−CH3である。
- 請求項16記載の組成物において、前記2’−修飾基のそれぞれは個別に、−OCH3、または−O−(CH2)2−O−CH3である。
- 請求項2記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の少なくとも1つの外部領域の少なくとも1つは、二環式糖部分を有するものである。
- 請求項18記載の組成物において、前記二環式糖部分はそれぞれ個別に、2’−O−(CH2)n−4’架橋を有し、nは1または2である。
- 請求項1記載の組成物において、前記第一オリゴマー化合物はギャップトモチーフを有するものである。
- 請求項20記載の組成物において、前記ギャップトオリゴマー化合物の外部領域は、それぞれ個別に、4’−チオ修飾ヌクレオシドまたは2’−修飾ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項20記載の組成物において、前記ギャップトオリゴマー化合物の外部領域の1つは4’−チオ修飾ヌクレオシドを有し、もう一方の外部領域は2’−修飾ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項22記載の組成物において、前記第一オリゴマー化合物の5’−末端に位置する前記外部領域は、2’−OCH3、2’−F、または4’−チオ修飾ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項22記載の組成物において、前記2’−修飾ヌクレオシドは、2’−OCH3または2’−F修飾ヌクレオシドである。
- 請求項24記載の組成物において、前記2’−修飾ヌクレオシドは、2’−OCH3修飾ヌクレオシドである。
- 請求項1記載の組成物において、前記第二のオリゴマー化合物はギャップトモチーフを有するものである。
- 請求項26記載の組成物において、前記ギャップトオリゴマー化合物の外部領域は、2’−修飾ヌクレオシド、4’−チオ修飾ヌクレオシド、4’−チオ−2’−修飾ヌクレオシド、または二環式糖部分を有するヌクレオシドを有するものである。
- 請求項27記載の組成物において、前記ギャップトオリゴマー化合物の外部領域の少なくとも1つは、ハロゲン、アリル、アミノ、アジド、O−アリル、O−C1〜C10アルキル、−OCF3、O−(CH2)2−O−CH3、2’−O(CH2)2SCH3、O―(CH2)2−O−N(Rm)(Rn)、またはO−CH2−C(=O)−N(Rm)(Rn)から選択される2’−修飾ヌクレオシドを有するものであり、各RmおよびRnは個別に、H、アミノ保護基、または置換或いは非置換C1〜C10アルキルである。
- 請求項28記載の組成物において、前記ギャップトオリゴマー化合物の外部領域の少なくとも1つは、アリル、O−アリル、O−C2〜C10アルキル、O−(CH2)2−O−CH3、または2’−O(CH2)2SCH3から選択される2’−修飾ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項29記載の組成物において、前記2’−修飾基のそれぞれは、−O−(CH2)2−O−CH3である。
- 請求項1記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の少なくとも1つの外部領域の少なくとも1つは、二環式糖部分を有するものである。
- 請求項31記載の組成物において、前記二環式糖部分はそれぞれ個別に2’−O−(CH2)n−4’架橋を有し、nは1または2である。
- 請求項2記載の組成物において、ギャップトモチーフを有する前記オリゴマー化合物の各外部領域は、それぞれ個別に約1〜約6ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項2記載の組成物において、ギャップトモチーフを有する前記オリゴマー化合物の各外部領域は、それぞれ個別に約1〜約4ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項2記載の組成物において、ギャップトモチーフを有する前記オリゴマー化合物の各外部領域は、それぞれ個別に約1〜約3ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項1記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の1つは、下記の構造式:
5’−A(−L−B−L−A)n(−L−B)nn−3’
を有する交互モチーフを有するものであり、
各Lは、個別にインターヌクレオシド結合基であり、
各Aは、β−D−リボヌクレオシドまたは糖修飾ヌクレオシドであり、
各Bは、β−D−リボヌクレオシドまたは糖修飾ヌクレオシドであり、
nは、約7〜約11であり、
nnは、0または1であり、
各Aヌクレオシドを有する前記糖部分は同一であり、各Bヌクレオシドを有する前記糖部分は同一であり、前記Aヌクレオシドの糖部分は前記Bヌクレオシドの糖部分とは異なり、AおよびBの少なくとも1つは糖修飾ヌクレオシドである。 - 請求項36記載の組成物において、各Aまたは各Bは、β−D−リボヌクレオシドである。
- 請求項36記載の組成物において、各Aまたは各Bは、2’−修飾ヌクレオシドであり、前記2’−置換基は、ハロゲン、アリル、アミノ、アジド、O−アリル、O−C1〜C10アルキル、−OCF3、O−(CH2)2−O−CH3、2’−O(CH2)2SCH3、O―(CH2)2―O−N(Rm)(Rn)、またはO−(CH2)−C(=O)−N(Rm)(Rn)から選択され、各RmおよびRnは個別に、H、アミノ保護基、または置換或いは非置換C1〜C10アルキルである。
- 請求項38記載の組成物において、前記2’−置換基は、アリル、O−アリル、O−C1〜C10アルキル、O−(CH2)2−O−CH3、または2’−O(CH2)2SCH3である。
- 請求項39記載の組成物において、前記2’−置換基はO−(CH2)2−O−CH3である。
- 請求項36記載の組成物において、各AおよびBは修飾ヌクレオシドである。
- 請求項41記載の組成物において、各AおよびBの一方は、2’−OCH3修飾ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項42記載の組成物において、各AおよびBのもう一方は、2’−F修飾ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項36記載の組成物において、前記第二のオリゴマー化合物は交互モチーフを有し、各Aおよび各Bの一方はβ−D−リボヌクレオシドである。
- 請求項44記載の組成物において、各Aおよび各Bのもう一方は、2’−修飾ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項45記載の組成物において、前記2’−修飾ヌクレオシドの各2’−置換基は、アリル、O−アリル、O−C1〜C10アルキル、O−(CH2)2−O−CH3、または2’−O(CH2)2SCH3である。
- 請求項46記載の組成物において、前記2’−修飾ヌクレオシドの各2’−置換基は、O−(CH2)2−O−CH3である。
- 請求項36記載の組成物において、各Lは個別に、ホスホジエステル、またはホスホロチオエートインターヌクレオシド結合基である。
- 請求項1記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の1つは、完全に修飾されたモチーフを有し、前記オリゴマー化合物の各ヌクレオシドは基本的に糖修飾ヌクレオシドであり、各糖修飾は同じである。
- 請求項49記載の組成物において、各糖修飾ヌクレオシドは、2’−修飾ヌクレオシド、4’−チオ修飾ヌクレオシド、4’−チオ−2’−修飾ヌクレオシド、および二環式糖部分を有するヌクレオシドから選択されるものである。
- 請求項50記載の組成物において、前記完全に修飾されたオリゴマー化合物の各ヌクレオシドは、2’−修飾ヌクレオシドである。
- 請求項51記載の組成物において、前記完全に修飾されたオリゴマー化合物の各ヌクレオシドは、2’−OCH3、または2’−F修飾ヌクレオシドである。
- 請求項52記載の組成物において、前記完全に修飾されたオリゴマー化合物の各ヌクレオシドは、2’−OCH3修飾ヌクレオシドである。
- 請求項49記載の組成物において、前記3’および5’末端の1若しくは両方は、β−D−リボヌクレオシドである。
- 請求項1記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の一方は、位置的に修飾されたモチーフを有するものである。
- 請求項55記載の組成物において、位置的に修飾されたモチーフを有する前記オリゴマー化合物は、約4〜約8領域から成る結合ヌクレオシドの連続配列を有するものであって、各領域は、β−D−リボヌクレオシドの配列または糖修飾ヌクレオシドの配列であり、前記領域は交互であり、前記β−D−リボヌクレオシド領域のそれぞれは、糖修飾ヌクレオシドの領域によって両側に隣接され、糖修飾ヌクレオシドの各領域は、片側にのみ隣接されるであろう3’および5’末端に位置付けられた領域を除き、β−D−リボヌクレオシド領域によって両側に隣接されるものであり、前記糖修飾ヌクレオシドは、2’−修飾ヌクレオシド、4’−チオ修飾ヌクレオシド、4’−チオ−2’−修飾ヌクレオシド、および二環式糖部分を有するヌクレオシドから選択されるものである。
- 5〜7領域を有する、請求項56記載の組成物。
- 請求項56記載の組成物において、前記β−D−リボヌクレオシド領域のそれぞれは、長さ2〜8ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項56の組成物において、前記糖修飾ヌクレオシド領域のそれぞれは、長さ1〜4ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項59の組成物において、前記糖修飾ヌクレオシド領域のそれぞれは、長さ2〜3ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項56記載の組成物において、位置的に修飾されたモチーフを有する前記オリゴマー化合物は以下の化学式を有するものであり、
(X1)j−(Y1)i−X2−Y2−X3−Y3−X4
X1は、1〜約3の糖修飾ヌクレオシドの配列であり、
Y1は、1〜約5のβ−D−リボヌクレオシドの配列であり、
X2は、1〜約3の糖修飾ヌクレオシドの配列であり、
Y2は、2〜約7のβ−D−リボヌクレオシドの配列であり、
X3は、1〜約3の糖修飾ヌクレオシドの配列であり、
Y3は、4〜約6のβ−D−リボヌクレオシドの配列であり、
X4は、1〜約3の糖修飾ヌクレオシドの配列であり、
iは、0または1であり、
jは、0または1であり、iが1の場合は1またはiが0のとき0である。 - 請求項61記載の組成物において、
X4は、3の糖修飾ヌクレオシドの配列であり、
Y3は、5のβ−D−リボヌクレオシドの配列であり、
X3は、2の糖修飾ヌクレオシドの配列であり、
Y1は、2のβ−D−リボヌクレオシドの配列である。 - 請求項62記載の組成物において、iは0であり、Y2は7のβ−D−リボヌクレオシドの配列である。
- 請求項62記載の組成物において、iは1であり、jは0であり、Y2は2のβ−D−リボヌクレオシドの配列であり、Y1は5のβ−D−リボヌクレオシドの配列である。
- 請求項62記載の組成物において、iは1であり、jは1であり、Y2は2のβ−D−リボヌクレオシドの配列であり、Y1は3のβ−D−リボヌクレオシドの配列であり、X1は2の糖修飾ヌクレオシドの配列である。
- 請求項61記載の組成物において、前記糖修飾ヌクレオシドのそれぞれは、2’−修飾ヌクレオシド、または4’−チオ修飾ヌクレオシドである。
- 請求項55記載の組成物において、前記第一鎖は、前記位置的モチーフを有するものである。
- 請求項1記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物の各インターヌクレオシド結合基は個別に、ホスホジエステル、またはホスホロチオエートから選択されるものである。
- 請求項1記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物のそれぞれは個別、に約12〜約30ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項1記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物のそれぞれは個別、に約17〜約23ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項1記載の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物のそれぞれは個別に、約19〜約21ヌクレオシドを有するものである。
- 請求項1の組成物において、前記第一および第二のオリゴマー化合物は、相補的アンチセンス/センスsiRNA二本鎖を形成するものである。
- 細胞、組織、または動物の遺伝子発現を阻害する薬物の調合における、請求項1記載の組成物の使用。
Applications Claiming Priority (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/US2004/017522 WO2005121368A1 (en) | 2004-06-03 | 2004-06-03 | Chimeric gapped oligomeric compositions |
US10/859,825 US20050053976A1 (en) | 1996-06-06 | 2004-06-03 | Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation |
PCT/US2004/017485 WO2005120230A2 (en) | 2004-06-03 | 2004-06-03 | POSITIONALLY MODIFIED siRNA CONSTRUCTS |
US58404504P | 2004-06-29 | 2004-06-29 | |
US60792704P | 2004-09-07 | 2004-09-07 | |
US10/946,147 US7875733B2 (en) | 2003-09-18 | 2004-09-20 | Oligomeric compounds comprising 4′-thionucleosides for use in gene modulation |
PCT/US2005/019219 WO2005121371A2 (en) | 2004-06-03 | 2005-06-02 | Double strand compositions comprising differentially modified strands for use in gene modulation |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008501693A true JP2008501693A (ja) | 2008-01-24 |
JP2008501693A5 JP2008501693A5 (ja) | 2008-09-04 |
Family
ID=35503738
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007515522A Pending JP2008501694A (ja) | 2004-06-03 | 2005-06-02 | 遺伝子調節の使用のために個別に修飾された鎖を有する二本鎖組成物 |
JP2007515521A Pending JP2008501693A (ja) | 2004-06-03 | 2005-06-02 | 遺伝子調節で使用するための個別に調節された鎖を有する二本鎖組成物 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007515522A Pending JP2008501694A (ja) | 2004-06-03 | 2005-06-02 | 遺伝子調節の使用のために個別に修飾された鎖を有する二本鎖組成物 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (16) | US20080119427A1 (ja) |
EP (3) | EP1765416A4 (ja) |
JP (2) | JP2008501694A (ja) |
AU (2) | AU2005252662B2 (ja) |
CA (2) | CA2568735A1 (ja) |
WO (3) | WO2005121372A2 (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008501694A (ja) * | 2004-06-03 | 2008-01-24 | アイシス ファーマシューティカルズ、インク. | 遺伝子調節の使用のために個別に修飾された鎖を有する二本鎖組成物 |
JP2012510816A (ja) * | 2008-12-04 | 2012-05-17 | オーピーケーオー・クルナ・エルエルシー | Vegfに対する天然アンチセンス転写物の抑制による血管内皮増殖因子(vegf)関連疾患の治療 |
JP2013514761A (ja) * | 2009-12-09 | 2013-05-02 | 日東電工株式会社 | Hsp47発現の調節 |
Families Citing this family (218)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1668130A2 (en) * | 2003-09-18 | 2006-06-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of eif4e expression |
WO2005054494A2 (en) | 2003-11-26 | 2005-06-16 | University Of Massachusetts | Sequence-specific inhibition of small rna function |
US20070265220A1 (en) * | 2004-03-15 | 2007-11-15 | City Of Hope | Methods and compositions for the specific inhibition of gene expression by double-stranded RNA |
US8394947B2 (en) | 2004-06-03 | 2013-03-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Positionally modified siRNA constructs |
AU2004320622B2 (en) * | 2004-06-03 | 2012-06-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Chimeric gapped oligomeric compositions |
NZ553987A (en) * | 2004-09-28 | 2011-01-28 | Quark Pharmaceuticals Inc | Oligoribonucleotides and methods of use thereof for treatment of alopecia, acute renal failure and other diseases |
US7825099B2 (en) * | 2006-01-20 | 2010-11-02 | Quark Pharmaceuticals, Inc. | Treatment or prevention of oto-pathologies by inhibition of pro-apoptotic genes |
US8129515B2 (en) * | 2006-01-27 | 2012-03-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds and compositions for the use in modulation of microRNAs |
KR20130042043A (ko) | 2006-01-27 | 2013-04-25 | 아이시스 파마수티컬즈 인코포레이티드 | 6-변형된 바이시클릭 핵산 유사체 |
US7910566B2 (en) * | 2006-03-09 | 2011-03-22 | Quark Pharmaceuticals Inc. | Prevention and treatment of acute renal failure and other kidney diseases by inhibition of p53 by siRNA |
US20090306178A1 (en) * | 2006-03-27 | 2009-12-10 | Balkrishen Bhat | Conjugated double strand compositions for use in gene modulation |
US20090326042A1 (en) | 2006-05-05 | 2009-12-31 | Isis Pharmaceuticals, Inc | Compounds and methods for modulating expression of crp |
EP2505649A1 (en) | 2006-05-05 | 2012-10-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating expression of GCGR |
EP2026843A4 (en) * | 2006-06-09 | 2011-06-22 | Quark Pharmaceuticals Inc | THERAPEUTIC USES OF RTP801L INHIBITORS |
EP2410053B2 (en) | 2006-10-18 | 2020-07-15 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense compounds |
JP5876637B2 (ja) * | 2006-10-18 | 2016-03-02 | マリーナ バイオテック,インコーポレイテッド | ニックまたはギャップの入った核酸分子およびそれらの使用 |
US8093222B2 (en) | 2006-11-27 | 2012-01-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating hypercholesterolemia |
EA200900741A1 (ru) | 2006-11-27 | 2010-04-30 | Айзис Фармасьютикалз, Инк. | Способы лечения гиперхолестеринемии |
JP4900943B2 (ja) * | 2006-12-25 | 2012-03-21 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | ヌクレアーゼ耐性及びrna干渉効果に優れた修飾型二本鎖rna |
WO2008094945A2 (en) * | 2007-01-29 | 2008-08-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating protein expression |
WO2008104978A2 (en) * | 2007-02-28 | 2008-09-04 | Quark Pharmaceuticals, Inc. | Novel sirna structures |
CA2679342A1 (en) * | 2007-03-02 | 2008-09-12 | Mdrna, Inc. | Nucleic acid compounds for inhibiting hif1a gene expression and uses thereof |
US20100041140A1 (en) * | 2007-03-02 | 2010-02-18 | Mdrna, Inc. | Nucleic acid compounds for inhibiting bcl2 gene expression and uses thereof |
US7812002B2 (en) * | 2007-03-21 | 2010-10-12 | Quark Pharmaceuticals, Inc. | Oligoribonucleotide inhibitors of NRF2 and methods of use thereof for treatment of cancer |
MY153691A (en) * | 2007-05-22 | 2015-03-13 | Arcturus Therapeutics Inc | Hydroxymethyl substituted rna oligonucleotides and rna complexes |
US20100273854A1 (en) * | 2007-06-15 | 2010-10-28 | Hagar Kalinski | Compositions and methods for inhibiting nadph oxidase expression |
US20110046206A1 (en) * | 2007-06-22 | 2011-02-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Double strand compositions comprising differentially modified strands for use in gene modulation |
DK2170403T3 (da) * | 2007-06-27 | 2014-06-16 | Quark Pharmaceuticals Inc | Sammensætninger og fremgangsmåder til hæmning af ekspressionen af proapoptotiske gener |
EP2188298B1 (en) | 2007-08-15 | 2013-09-18 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Tetrahydropyran nucleic acid analogs |
JP5646997B2 (ja) * | 2007-10-03 | 2014-12-24 | クォーク ファーマシューティカルズ インコーポレーティッドQuark Pharmaceuticals,Inc. | 新規siRNA構造 |
US8637478B2 (en) | 2007-11-13 | 2014-01-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating protein expression |
US8546556B2 (en) | 2007-11-21 | 2013-10-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc | Carbocyclic alpha-L-bicyclic nucleic acid analogs |
US20110105584A1 (en) * | 2007-12-12 | 2011-05-05 | Elena Feinstein | Rtp80il sirna compounds and methods of use thereof |
US8614311B2 (en) | 2007-12-12 | 2013-12-24 | Quark Pharmaceuticals, Inc. | RTP801L siRNA compounds and methods of use thereof |
WO2009090639A2 (en) * | 2008-01-15 | 2009-07-23 | Quark Pharmaceuticals, Inc. | Sirna compounds and methods of use thereof |
WO2009102427A2 (en) | 2008-02-11 | 2009-08-20 | Rxi Pharmaceuticals Corp. | Modified rnai polynucleotides and uses thereof |
EP2268316A4 (en) * | 2008-03-20 | 2011-05-25 | Quark Pharmaceuticals Inc | NEW SIRNA COMPOUNDS FOR INHIBITING RTP801 |
EP2282744B1 (en) | 2008-03-21 | 2018-01-17 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds comprising tricyclic nucleosides and methods for their use |
EP2285819B1 (en) | 2008-04-04 | 2013-10-16 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds comprising neutrally linked terminal bicyclic nucleosides |
WO2009144704A2 (en) * | 2008-04-15 | 2009-12-03 | Quark Pharmaceuticals, Inc. | siRNA COMPOUNDS FOR INHIBITING NRF2 |
EP2297322A1 (en) | 2008-06-04 | 2011-03-23 | The Board of Regents of The University of Texas System | Modulation of gene expression through endogenous small rna targeting of gene promoters |
TWI455944B (zh) | 2008-07-01 | 2014-10-11 | Daiichi Sankyo Co Ltd | 雙股多核苷酸 |
WO2010008582A2 (en) * | 2008-07-18 | 2010-01-21 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Phagocytic cell drug delivery system |
US8901095B2 (en) | 2008-07-29 | 2014-12-02 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Selective inhibition of polyglutamine protein expression |
US10138485B2 (en) | 2008-09-22 | 2018-11-27 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Neutral nanotransporters |
US8987435B2 (en) | 2008-10-24 | 2015-03-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds and methods |
WO2010059226A2 (en) * | 2008-11-19 | 2010-05-27 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Inhibition of map4k4 through rnai |
KR101881596B1 (ko) | 2008-12-02 | 2018-07-24 | 웨이브 라이프 사이언시스 재팬 인코포레이티드 | 인 원자 변형된 핵산의 합성 방법 |
BRPI0922355A8 (pt) | 2008-12-03 | 2017-12-12 | Marina Biotech Inc | Ácidos nucléicos, métodos para reduzir a expressão de um gene em uma célula in vitro, uso do ácido nucléico, complexo de rna e uso do complexo de rna |
US11408003B2 (en) * | 2008-12-18 | 2022-08-09 | Dicerna Pharmaceuticals, Inc. | Extended dicer substrate agents and methods for the specific inhibition of gene expression |
WO2010078536A1 (en) | 2009-01-05 | 2010-07-08 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Inhibition of pcsk9 through rnai |
US9745574B2 (en) | 2009-02-04 | 2017-08-29 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | RNA duplexes with single stranded phosphorothioate nucleotide regions for additional functionality |
US20120021515A1 (en) | 2009-02-06 | 2012-01-26 | Swayze Eric E | Oligomeric compounds and methods |
WO2010090969A1 (en) | 2009-02-06 | 2010-08-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Tetrahydropyran nucleic acid analogs |
WO2010120969A1 (en) * | 2009-04-15 | 2010-10-21 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Targeting of the mir-30 family and let-7 family as a treatment for heart disease |
EP2421972A2 (en) | 2009-04-24 | 2012-02-29 | The Board of Regents of The University of Texas System | Modulation of gene expression using oligomers that target gene regions downstream of 3' untranslated regions |
SG177564A1 (en) | 2009-07-06 | 2012-02-28 | Ontorii Inc | Novel nucleic acid prodrugs and methods of use thereof |
US9012421B2 (en) | 2009-08-06 | 2015-04-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic cyclohexose nucleic acid analogs |
US20110110860A1 (en) | 2009-11-02 | 2011-05-12 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Modulation of ldl receptor gene expression with double-stranded rnas targeting the ldl receptor gene promoter |
CA2776568A1 (en) | 2009-11-26 | 2011-06-03 | Quark Pharmaceuticals, Inc. | Sirna compounds comprising terminal substitutions |
WO2011084193A1 (en) | 2010-01-07 | 2011-07-14 | Quark Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide compounds comprising non-nucleotide overhangs |
US8779118B2 (en) | 2010-01-11 | 2014-07-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Base modified bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
WO2011097388A1 (en) | 2010-02-03 | 2011-08-11 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Selective inhibition of polyglutamine protein expression |
JP6018506B2 (ja) * | 2010-02-08 | 2016-11-02 | アイオーニス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッドIonis Pharmaceuticals,Inc. | 対立遺伝子多様体の選択的低減 |
US8957040B2 (en) * | 2010-02-08 | 2015-02-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Selective reduction of allelic variants |
WO2011115818A1 (en) | 2010-03-17 | 2011-09-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5'-substituted bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
RU2615143C2 (ru) | 2010-03-24 | 2017-04-04 | Адвирна | Самодоставляющие PHKi соединения уменьшенного размера |
KR20180044433A (ko) | 2010-03-24 | 2018-05-02 | 알엑스아이 파마슈티칼스 코포레이션 | 진피 및 섬유증성 적응증에서의 rna 간섭 |
US9095504B2 (en) | 2010-03-24 | 2015-08-04 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | RNA interference in ocular indications |
US8957200B2 (en) | 2010-06-07 | 2015-02-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
WO2011156202A1 (en) | 2010-06-08 | 2011-12-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Substituted 2 '-amino and 2 '-thio-bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
WO2012012467A2 (en) | 2010-07-19 | 2012-01-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of nuclear-retained rna |
EP2412724A1 (en) | 2010-07-29 | 2012-02-01 | Centre National de la Recherche Scientifique (C.N.R.S) | Regulation of Glypican 4 activity to modulate the fate of stem cells and uses thereof |
WO2012039448A1 (ja) | 2010-09-24 | 2012-03-29 | 株式会社キラルジェン | 不斉補助基 |
ES2716158T3 (es) | 2010-11-30 | 2019-06-10 | Gilead Pharmasset Llc | 2'-spiro-nucleótidos para el tratamiento de hepatitis C |
JP5952197B2 (ja) * | 2011-01-19 | 2016-07-13 | 協和発酵キリン株式会社 | 標的遺伝子の発現を抑制する組成物 |
US10017764B2 (en) | 2011-02-08 | 2018-07-10 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds comprising bicyclic nucleotides and uses thereof |
WO2012170347A1 (en) | 2011-06-09 | 2012-12-13 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
EP2717923B1 (en) | 2011-06-10 | 2017-09-27 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for modulating kallikrein (klkb1) expression |
CA2840614A1 (en) | 2011-06-29 | 2013-01-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for modulating kallikrein (klkb1) expression |
EP2734208B1 (en) | 2011-07-19 | 2017-03-01 | Wave Life Sciences Ltd. | Methods for the synthesis of functionalized nucleic acids |
US10202599B2 (en) | 2011-08-11 | 2019-02-12 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Selective antisense compounds and uses thereof |
CA2848753C (en) | 2011-09-14 | 2022-07-26 | Rana Therapeutics, Inc. | Multimeric oligonucleotide compounds |
MD4589C1 (ro) | 2011-09-16 | 2019-03-31 | Gilead Pharmasset Llc | Compoziţie farmaceutică cu conţinut de sofosbuvir şi utilizarea acesteia în tratamentul hepatitei virale C |
WO2013074974A2 (en) | 2011-11-18 | 2013-05-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Modified rnai agents |
KR102263352B1 (ko) | 2011-11-18 | 2021-06-11 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 트랜스티레틴(TTR) 관련 질병을 치료하기 위한 RNAi 제제, 조성 및 그의 사용방법 |
US8889159B2 (en) | 2011-11-29 | 2014-11-18 | Gilead Pharmasset Llc | Compositions and methods for treating hepatitis C virus |
AU2012358238B2 (en) | 2011-12-22 | 2017-12-07 | C. Frank Bennett | Methods for modulating Metastasis-Associated-in-Lung-Adenocarcinoma-Transcript-1(MALAT-1) expression |
EP2812342B1 (en) | 2012-02-08 | 2017-11-15 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of rna by repeat targeting |
WO2013142514A1 (en) | 2012-03-19 | 2013-09-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for modulating alpha-1-antitrypsin expression |
EP2850092B1 (en) | 2012-04-09 | 2017-03-01 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Tricyclic nucleic acid analogs |
WO2013154799A1 (en) | 2012-04-09 | 2013-10-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Tricyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
WO2013159108A2 (en) | 2012-04-20 | 2013-10-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds comprising bicyclic nucleotides and uses thereof |
EA201492116A1 (ru) | 2012-05-16 | 2015-05-29 | Рана Терапьютикс, Инк. | Композиции и способы для модулирования экспрессии mecp2 |
EP2850188A4 (en) | 2012-05-16 | 2016-01-20 | Rana Therapeutics Inc | COMPOSITIONS AND METHODS FOR MODULATING THE EXPRESSION OF THE MULTIGENIC FAMILY OF HEMOGLOBIN |
WO2013173598A1 (en) | 2012-05-16 | 2013-11-21 | Rana Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for modulating atp2a2 expression |
US10837014B2 (en) | 2012-05-16 | 2020-11-17 | Translate Bio Ma, Inc. | Compositions and methods for modulating SMN gene family expression |
US9518261B2 (en) | 2012-05-22 | 2016-12-13 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of enhancer RNA mediated gene expression |
ES2688831T3 (es) | 2012-06-25 | 2018-11-07 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulación de la expresión de UBE3A-ATS |
EP2872485B1 (en) | 2012-07-13 | 2020-12-16 | Wave Life Sciences Ltd. | Asymmetric auxiliary group |
KR102213609B1 (ko) | 2012-07-13 | 2021-02-08 | 웨이브 라이프 사이언시스 리미티드 | 키랄 제어 |
EP3693460A1 (en) | 2012-07-27 | 2020-08-12 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of renin-angiotensin system (ras) related diseases by angiotensinogen |
KR102237882B1 (ko) | 2012-08-15 | 2021-04-07 | 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 | 변형된 캡핑 프로토콜을 이용하는 올리고머 화합물 제조 방법 |
CA2884608A1 (en) | 2012-09-14 | 2014-03-20 | Rana Therapeutics, Inc. | Multimeric oligonucleotide compounds |
US9993522B2 (en) | 2012-09-18 | 2018-06-12 | Uti Limited Partnership | Treatment of pain by inhibition of USP5 de-ubiquitinase |
US9175291B2 (en) | 2012-10-11 | 2015-11-03 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Modulation of androgen receptor expression |
WO2014059353A2 (en) | 2012-10-11 | 2014-04-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds comprising bicyclic nucleosides and uses thereof |
EP4052709A1 (en) | 2012-10-11 | 2022-09-07 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods of treating kennedy's disease |
US20150275208A1 (en) | 2012-10-12 | 2015-10-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Selective antisense compounds and uses thereof |
US9029335B2 (en) | 2012-10-16 | 2015-05-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Substituted 2′-thio-bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
US20150291957A1 (en) * | 2012-10-26 | 2015-10-15 | Larry J. Smith | METHODS AND COMPOSITIONS TO PRODUCE ss-RNAi ACTIVITY WITH ENHANCED POTENCY |
NZ625087A (en) | 2013-01-31 | 2017-05-26 | Gilead Pharmasset Llc | Combination formulation of two antiviral compounds |
US9701708B2 (en) | 2013-01-31 | 2017-07-11 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Method of preparing oligomeric compounds using modified coupling protocols |
WO2014121287A2 (en) | 2013-02-04 | 2014-08-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Selective antisense compounds and uses thereof |
AU2014216137B2 (en) | 2013-02-14 | 2018-05-10 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of Apolipoprotein C-III (ApoCIII) expression in lipoprotein lipase deficient (LPLD) populations |
EP2961853B1 (en) | 2013-02-28 | 2018-09-19 | The Board of Regents of The University of Texas System | Methods for classifying a cancer as susceptible to tmepai-directed therapies and treating such cancers |
US20160108395A1 (en) * | 2013-03-01 | 2016-04-21 | National University Corporation Tokyo Medical And Dental University | Chimeric single-stranded antisense polynucleotides and double-stranded antisense agent |
EP2970355A1 (en) * | 2013-03-15 | 2016-01-20 | Universität Bern | Tricyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
US9822418B2 (en) | 2013-04-22 | 2017-11-21 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Mutations in PDGFRB and NOTCH3 as causes of autosomal dominant infantile myofibromatosis |
AU2014259759B2 (en) | 2013-05-01 | 2020-06-18 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods |
WO2014205449A2 (en) | 2013-06-21 | 2014-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating apolipoprotein c-iii expression for improving a diabetic profile |
RU2700244C2 (ru) | 2013-07-02 | 2019-09-13 | Ионис Фармасьютикалз, Инк. | Модуляторы рецептора гормона роста |
TW201536329A (zh) | 2013-08-09 | 2015-10-01 | Isis Pharmaceuticals Inc | 用於調節失養性肌強直蛋白質激酶(dmpk)表現之化合物及方法 |
CN105658797A (zh) * | 2013-08-16 | 2016-06-08 | Rana医疗有限公司 | 用于调节rna的组合物和方法 |
JP6652922B2 (ja) | 2013-08-28 | 2020-02-26 | アイオーニス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッドIonis Pharmaceuticals,Inc. | プレカリクレイン(pkk)発現の調節 |
PE20190354A1 (es) | 2013-09-13 | 2019-03-07 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Moduladores del factor del complemento b |
US9758546B2 (en) | 2013-10-21 | 2017-09-12 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Method for solution phase detritylation of oligomeric compounds |
EP3079707A4 (en) | 2013-12-02 | 2017-10-18 | RXi Pharmaceuticals Corporation | Immunotherapy of cancer |
CN105814205B (zh) * | 2013-12-12 | 2019-11-19 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 补体成分iRNA组合物及其使用方法 |
AU2014369900B2 (en) | 2013-12-24 | 2021-05-20 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of angiopoietin-like 3 expression |
WO2015108047A1 (ja) | 2014-01-15 | 2015-07-23 | 株式会社新日本科学 | 免疫誘導活性を有するキラル核酸アジュバンド及び免疫誘導活性剤 |
JPWO2015108048A1 (ja) | 2014-01-15 | 2017-03-23 | 株式会社新日本科学 | 抗腫瘍作用を有するキラル核酸アジュバンド及び抗腫瘍剤 |
AU2015207773B2 (en) | 2014-01-16 | 2021-06-17 | Wave Life Sciences Ltd. | Chiral design |
US10036019B2 (en) | 2014-03-17 | 2018-07-31 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic carbocyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
JP6771387B2 (ja) | 2014-03-25 | 2020-10-21 | アークトゥラス・セラピューティクス・インコーポレイテッドArcturus Therapeutics,Inc. | 遺伝子サイレンシング用トランスサイレチン対立遺伝子選択的unaオリゴマー |
US9856475B2 (en) | 2014-03-25 | 2018-01-02 | Arcturus Therapeutics, Inc. | Formulations for treating amyloidosis |
CN106460025A (zh) | 2014-03-25 | 2017-02-22 | 阿克丘勒斯治疗公司 | 在基因沉默中具有降低的脱靶效应的una寡聚物 |
EP3757214B1 (en) | 2014-04-01 | 2022-06-15 | Biogen MA Inc. | Compositions for modulating sod-1 expression |
WO2015164693A1 (en) | 2014-04-24 | 2015-10-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds comprising alpha-beta-constrained nucleic acid |
EP3137119B1 (en) | 2014-04-28 | 2020-07-01 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Methods for treating cancer using a nucleic acid targeting mdm2 |
WO2015168514A1 (en) | 2014-05-01 | 2015-11-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Method for synthesis of reactive conjugate clusters |
PL3608406T3 (pl) | 2014-05-01 | 2023-05-22 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Kompozycje i sposoby modulowania ekspresji czynnika B dopełniacza |
MX2016014140A (es) | 2014-05-01 | 2017-09-15 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Composiciones y metodos para modular la expresion de pkk. |
EP3845547A1 (en) | 2014-05-01 | 2021-07-07 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Galnac3 conjugated modified oligonucleotide for modulating angiopoietin-like 3 expression |
JP6667453B2 (ja) | 2014-05-01 | 2020-03-18 | アイオーニス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッドIonis Pharmaceuticals,Inc. | 成長ホルモン受容体発現を調節するための組成物及び方法 |
CN107073294A (zh) | 2014-09-05 | 2017-08-18 | 阿克赛医药公司 | 使用靶向tyr或mmp1的核酸治疗老化和皮肤病症的方法 |
WO2016041058A1 (en) | 2014-09-18 | 2016-03-24 | The University Of British Columbia | Allele-specific therapy for huntington disease haplotypes |
US10400243B2 (en) | 2014-11-25 | 2019-09-03 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of UBE3A-ATS expression |
US20170369872A1 (en) | 2014-12-18 | 2017-12-28 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Reversir tm compounds |
US9688707B2 (en) | 2014-12-30 | 2017-06-27 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic morpholino compounds and oligomeric compounds prepared therefrom |
WO2016130943A1 (en) | 2015-02-13 | 2016-08-18 | Rana Therapeutics, Inc. | Hybrid oligonucleotides and uses thereof |
US10450342B2 (en) | 2015-02-23 | 2019-10-22 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Method for solution phase detritylation of oligomeric compounds |
AU2016222546B2 (en) | 2015-02-26 | 2020-01-23 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Allele specific modulators of P23H rhodopsin |
WO2016161299A1 (en) | 2015-04-01 | 2016-10-06 | Arcturus Therapeutics, Inc. | Therapeutic una oligomers and uses thereof |
JP6892433B2 (ja) | 2015-04-03 | 2021-06-23 | ユニバーシティ・オブ・マサチューセッツUniversity Of Massachusetts | 十分に安定化された非対称sirna |
CA2980337A1 (en) | 2015-04-03 | 2016-10-06 | University Of Massachusetts | Oligonucleotide compounds for targeting huntingtin mrna |
EP3277815B1 (en) | 2015-04-03 | 2021-09-22 | University of Massachusetts | Oligonucleotide compounds for treatment of preeclampsia and other angiogenic disorders |
PL3283080T3 (pl) | 2015-04-16 | 2020-07-27 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Kompozycja do modulowania ekspresji c9orf72 |
US10787664B2 (en) * | 2015-05-26 | 2020-09-29 | City Of Hope | Compounds of chemically modified oligonucleotides and methods of use thereof |
JP6983752B2 (ja) | 2015-07-06 | 2021-12-17 | フィオ ファーマシューティカルズ コーポレーションPhio Pharmaceuticals Corp. | スーパーオキシドディスムターゼ1(sod1)を標的とする核酸分子 |
WO2017007825A1 (en) | 2015-07-06 | 2017-01-12 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Methods for treating neurological disorders using a synergistic small molecule and nucleic acids therapeutic approach |
US11053495B2 (en) | 2015-07-17 | 2021-07-06 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Multi-targeted single entity conjugates |
WO2017015671A1 (en) | 2015-07-23 | 2017-01-26 | Arcturus Therapeutics, Inc. | Compositions for treating amyloidosis |
LT3329002T (lt) | 2015-07-31 | 2021-01-11 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Transtiretino (ttr) irnr kompozicijos ir jų naudojimo būdai, skirti naudoti su ttr susijusių ligų gydymui arba prevencijai |
CA2995110A1 (en) | 2015-08-14 | 2017-02-23 | University Of Massachusetts | Bioactive conjugates for oligonucleotide delivery |
PE20181085A1 (es) | 2015-10-08 | 2018-07-05 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Composiciones y metodos para modular la expresion de angiotensinogeno |
CA3002744A1 (en) | 2015-10-19 | 2017-04-27 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Reduced size self-delivering nucleic acid compounds targeting long non-coding rna |
EP3371211A4 (en) | 2015-11-04 | 2019-08-21 | Icahn School of Medicine at Mount Sinai | METHOD FOR THE TREATMENT OF TUMORS AND CANCER AND IDENTIFICATION OF CANDIDATE PATIENTS FOR SUCH TREATMENT |
US10557137B2 (en) | 2015-11-06 | 2020-02-11 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulating apolipoprotein (a) expression |
CA3011894A1 (en) | 2016-01-31 | 2017-08-03 | University Of Massachusetts | Branched oligonucleotides |
US11246868B2 (en) | 2016-04-26 | 2022-02-15 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Treatment of hippo pathway mutant tumors and methods of identifying subjects as candidates for treatment |
US11542544B2 (en) * | 2016-05-11 | 2023-01-03 | Illumina, Inc. | Polynucleotide enrichment and amplification using CRISPR-Cas or Argonaute systems |
CA3033368A1 (en) | 2016-08-12 | 2018-02-15 | University Of Massachusetts | Conjugated oligonucleotides |
WO2018067900A1 (en) | 2016-10-06 | 2018-04-12 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Method of conjugating oligomeric compounds |
US20190338286A1 (en) * | 2017-01-13 | 2019-11-07 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Antisense oligonucleotides for modulating rel expression |
WO2018152524A1 (en) | 2017-02-20 | 2018-08-23 | Northwestern University | Toxic rnai active seed sequences for killing cancer cells |
US11180756B2 (en) | 2017-03-09 | 2021-11-23 | Ionis Pharmaceuticals | Morpholino modified oligomeric compounds |
MA50267A (fr) | 2017-09-19 | 2020-07-29 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Compositions et méthodes de traitement de l'amylose médiée par la transthyrétine (ttr) |
WO2019089922A1 (en) | 2017-11-01 | 2019-05-09 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Complement component c3 irna compositions and methods of use thereof |
JP7353301B2 (ja) | 2018-05-07 | 2023-09-29 | アルニラム ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド | 肝臓外送達 |
US20210260002A1 (en) | 2018-06-18 | 2021-08-26 | University Of Rochester | Methods of treating schizophrenia and other neuropsychiatric disorders |
KR20210054502A (ko) | 2018-06-21 | 2021-05-13 | 유니버시티 오브 로체스터 | 헌팅턴병을 치료하거나 이의 발병을 저해하는 방법 |
JP2021533762A (ja) | 2018-08-10 | 2021-12-09 | ユニバーシティ・オブ・マサチューセッツUniversity Of Massachusetts | Snpを標的化する修飾オリゴヌクレオチド |
WO2020041769A1 (en) | 2018-08-23 | 2020-02-27 | University Of Massachusetts | O-methyl rich fully stabilized oligonucleotides |
EP3856907A1 (en) | 2018-09-28 | 2021-08-04 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Transthyretin (ttr) irna compositions and methods of use thereof for treating or preventing ttr-associated ocular diseases |
AU2019396450A1 (en) | 2018-12-11 | 2021-06-24 | University Of Rochester | Methods of treating schizophrenia and other neuropsychiatric disorders |
WO2020167822A2 (en) | 2019-02-13 | 2020-08-20 | University Of Rochester | Gene networks that mediate remyelination of the human brain |
EP3931328A4 (en) | 2019-02-27 | 2023-09-13 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | MODULATORS OF MALAT1 EXPRESSION |
CA3198063A1 (en) | 2019-03-29 | 2020-10-08 | Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation | Compound, method and pharmaceutical composition for modulating expression of dux4 |
AU2020253821A1 (en) | 2019-03-29 | 2021-10-28 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating UBE3A-ATS |
US20220211743A1 (en) | 2019-05-17 | 2022-07-07 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Oral delivery of oligonucleotides |
WO2021011936A2 (en) | 2019-07-18 | 2021-01-21 | University Of Rochester | Cell-type selective immunoprotection of cells |
CN114555621A (zh) | 2019-08-15 | 2022-05-27 | Ionis制药公司 | 键修饰的寡聚化合物及其用途 |
MX2022005220A (es) | 2019-11-06 | 2022-08-11 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Suministro extrahepático. |
EP4055165A1 (en) | 2019-11-06 | 2022-09-14 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Transthyretin (ttr) irna compositions and methods of use thereof for treating or preventing ttr-associated ocular diseases |
US20230227824A1 (en) | 2020-05-12 | 2023-07-20 | Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation | Compound, method and pharmaceutical composition for regulating expression of ataxin 3 |
US20230257745A1 (en) | 2020-07-10 | 2023-08-17 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Circular siRNAs |
AU2021381363A1 (en) | 2020-11-18 | 2023-06-15 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds and methods for modulating angiotensinogen expression |
KR20230136130A (ko) | 2020-12-31 | 2023-09-26 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 시클릭-디설파이드 개질된 인산염 기반 올리고뉴클레오티드전구약물 |
EP4271695A2 (en) | 2020-12-31 | 2023-11-08 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | 2'-modified nucleoside based oligonucleotide prodrugs |
EP4314016A1 (en) | 2021-03-31 | 2024-02-07 | Entrada Therapeutics, Inc. | Cyclic cell penetrating peptides |
WO2022240721A1 (en) | 2021-05-10 | 2022-11-17 | Entrada Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for modulating interferon regulatory factor-5 (irf-5) activity |
AU2022271873A1 (en) | 2021-05-10 | 2024-01-04 | Entrada Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for intracellular therapeutics |
EP4337261A2 (en) | 2021-05-10 | 2024-03-20 | Entrada Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for modulating mrna splicing |
WO2022271818A1 (en) | 2021-06-23 | 2022-12-29 | Entrada Therapeutics, Inc. | Antisense compounds and methods for targeting cug repeats |
EP4359539A1 (en) | 2021-06-23 | 2024-05-01 | University Of Massachusetts | Optimized anti-flt1 oligonucleotide compounds for treatment of preeclampsia and other angiogenic disorders |
WO2023283403A2 (en) | 2021-07-09 | 2023-01-12 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Bis-rnai compounds for cns delivery |
KR20240036041A (ko) | 2021-07-21 | 2024-03-19 | 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 대사 장애-연관 표적 유전자 iRNA 조성물 및 이의 사용 방법 |
WO2023014677A1 (en) | 2021-08-03 | 2023-02-09 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Transthyretin (ttr) irna compositions and methods of use thereof |
WO2023034817A1 (en) | 2021-09-01 | 2023-03-09 | Entrada Therapeutics, Inc. | Compounds and methods for skipping exon 44 in duchenne muscular dystrophy |
WO2023064530A1 (en) | 2021-10-15 | 2023-04-20 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Extra-hepatic delivery irna compositions and methods of use thereof |
TW202333749A (zh) | 2021-10-29 | 2023-09-01 | 美商艾拉倫製藥股份有限公司 | 補體因子b(cfb)irna組成物及其使用方法 |
WO2023092060A1 (en) | 2021-11-18 | 2023-05-25 | Cornell University | Microrna-dependent mrna switches for tissue-specific mrna-based therapies |
WO2023150553A1 (en) | 2022-02-01 | 2023-08-10 | University Of Rochester | Gpr17 promoter-based targeting and transduction of glial progenitor cells |
WO2023220744A2 (en) | 2022-05-13 | 2023-11-16 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Single-stranded loop oligonucleotides |
WO2024006999A2 (en) | 2022-06-30 | 2024-01-04 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Cyclic-disulfide modified phosphate based oligonucleotide prodrugs |
WO2024039776A2 (en) | 2022-08-18 | 2024-02-22 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Universal non-targeting sirna compositions and methods of use thereof |
WO2024073732A1 (en) | 2022-09-30 | 2024-04-04 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Modified double-stranded rna agents |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004015107A2 (en) * | 2002-08-05 | 2004-02-19 | Atugen Ag | Further novel forms of interfering rna molecules |
WO2004044133A2 (en) * | 2002-11-05 | 2004-05-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modified oligonucleotides for use in rna interference |
WO2004044138A2 (en) * | 2002-11-05 | 2004-05-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation |
JP2008501694A (ja) * | 2004-06-03 | 2008-01-24 | アイシス ファーマシューティカルズ、インク. | 遺伝子調節の使用のために個別に修飾された鎖を有する二本鎖組成物 |
Family Cites Families (242)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4500707A (en) * | 1980-02-29 | 1985-02-19 | University Patents, Inc. | Nucleosides useful in the preparation of polynucleotides |
US4381344A (en) * | 1980-04-25 | 1983-04-26 | Burroughs Wellcome Co. | Process for producing deoxyribosides using bacterial phosphorylase |
US4511713A (en) * | 1980-11-12 | 1985-04-16 | The Johns Hopkins University | Process for selectively controlling unwanted expression or function of foreign nucleic acids in animal or mammalian cells |
US4668777A (en) * | 1981-03-27 | 1987-05-26 | University Patents, Inc. | Phosphoramidite nucleoside compounds |
US4401796A (en) * | 1981-04-30 | 1983-08-30 | City Of Hope Research Institute | Solid-phase synthesis of polynucleotides |
US4373071A (en) * | 1981-04-30 | 1983-02-08 | City Of Hope Research Institute | Solid-phase synthesis of polynucleotides |
US4426330A (en) * | 1981-07-20 | 1984-01-17 | Lipid Specialties, Inc. | Synthetic phospholipid compounds |
US5023243A (en) * | 1981-10-23 | 1991-06-11 | Molecular Biosystems, Inc. | Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same |
JPS5927900A (ja) * | 1982-08-09 | 1984-02-14 | Wakunaga Seiyaku Kk | 固定化オリゴヌクレオチド |
FR2540122B1 (fr) * | 1983-01-27 | 1985-11-29 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux composes comportant une sequence d'oligonucleotide liee a un agent d'intercalation, leur procede de synthese et leur application |
US4824941A (en) * | 1983-03-10 | 1989-04-25 | Julian Gordon | Specific antibody to the native form of 2'5'-oligonucleotides, the method of preparation and the use as reagents in immunoassays or for binding 2'5'-oligonucleotides in biological systems |
DE3329892A1 (de) * | 1983-08-18 | 1985-03-07 | Köster, Hubert, Prof. Dr., 2000 Hamburg | Verfahren zur herstellung von oligonucleotiden |
US4587044A (en) * | 1983-09-01 | 1986-05-06 | The Johns Hopkins University | Linkage of proteins to nucleic acids |
US4507433A (en) * | 1983-10-07 | 1985-03-26 | The Johns Hopkins University | Preparation of oligodeoxyribonucleoside alkyl or arylphosphonates |
NZ209840A (en) * | 1983-10-17 | 1988-11-29 | Kaji Akira | A method of inhibiting viral propagation by hybridising dna with the viral rna thus blocking its action |
US4849513A (en) * | 1983-12-20 | 1989-07-18 | California Institute Of Technology | Deoxyribonucleoside phosphoramidites in which an aliphatic amino group is attached to the sugar ring and their use for the preparation of oligonucleotides containing aliphatic amino groups |
US5118800A (en) * | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide |
US5118802A (en) * | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | DNA-reporter conjugates linked via the 2' or 5'-primary amino group of the 5'-terminal nucleoside |
US5643889A (en) * | 1984-07-11 | 1997-07-01 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Pennsylvania | Cholesterol conjugates of 2'5'-oligoadenylate derivatives and antiviral uses thereof |
FR2567892B1 (fr) * | 1984-07-19 | 1989-02-17 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons |
US4828979A (en) * | 1984-11-08 | 1989-05-09 | Life Technologies, Inc. | Nucleotide analogs for nucleic acid labeling and detection |
DE3500180A1 (de) * | 1985-01-04 | 1986-07-10 | Ernst Prof. Dr. 7400 Tübingen Bayer | Pfropfcopolymerisate aus vernetzten polymeren und polyoxyethylen, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
ATE78040T1 (de) * | 1985-01-16 | 1992-07-15 | Ciba Geigy Ag | Oligopeptide sowie zwischenprodukte und verfahren zu ihrer herstellung. |
US5405938A (en) * | 1989-12-20 | 1995-04-11 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
US5506337A (en) * | 1985-03-15 | 1996-04-09 | Antivirals Inc. | Morpholino-subunit combinatorial library and method |
US5185444A (en) * | 1985-03-15 | 1993-02-09 | Anti-Gene Deveopment Group | Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages |
EP0215942B1 (en) * | 1985-03-15 | 1995-07-12 | Antivirals Inc. | Polynucleotide assay reagent and method |
FR2584090B1 (fr) * | 1985-06-27 | 1987-08-28 | Roussel Uclaf | Nouveaux supports, leur preparation et les intermediaires obtenus, leur application a la synthese d'oligonucleotides et les nouveaux nucleosides et oligonucleotides relies aux supports ainsi obtenus |
US4757141A (en) * | 1985-08-26 | 1988-07-12 | Applied Biosystems, Incorporated | Amino-derivatized phosphite and phosphate linking agents, phosphoramidite precursors, and useful conjugates thereof |
US4760017A (en) * | 1985-12-23 | 1988-07-26 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Arabinonucleic acid probes for DNA/RNA assays |
US5317098A (en) * | 1986-03-17 | 1994-05-31 | Hiroaki Shizuya | Non-radioisotope tagging of fragments |
CH678897A5 (ja) * | 1986-05-10 | 1991-11-15 | Ciba Geigy Ag | |
US5276019A (en) * | 1987-03-25 | 1994-01-04 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products |
US4904582A (en) * | 1987-06-11 | 1990-02-27 | Synthetic Genetics | Novel amphiphilic nucleic acid conjugates |
US5188897A (en) * | 1987-10-22 | 1993-02-23 | Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education | Encapsulated 2',5'-phosphorothioate oligoadenylates |
US4924624A (en) * | 1987-10-22 | 1990-05-15 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof |
US5525465A (en) * | 1987-10-28 | 1996-06-11 | Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine | Oligonucleotide-polyamide conjugates and methods of production and applications of the same |
DE3738460A1 (de) * | 1987-11-12 | 1989-05-24 | Max Planck Gesellschaft | Modifizierte oligonukleotide |
US5082830A (en) * | 1988-02-26 | 1992-01-21 | Enzo Biochem, Inc. | End labeled nucleotide probe |
JPH03503894A (ja) * | 1988-03-25 | 1991-08-29 | ユニバーシィティ オブ バージニア アランミ パテンツ ファウンデイション | オリゴヌクレオチド n‐アルキルホスホラミデート |
US5278302A (en) * | 1988-05-26 | 1994-01-11 | University Patents, Inc. | Polynucleotide phosphorodithioates |
US5750666A (en) * | 1988-05-26 | 1998-05-12 | Competitve Technologies, Inc. | Polynucleotide phosphorodithioate compounds |
US5109124A (en) * | 1988-06-01 | 1992-04-28 | Biogen, Inc. | Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine |
US5216141A (en) * | 1988-06-06 | 1993-06-01 | Benner Steven A | Oligonucleotide analogs containing sulfur linkages |
US5149782A (en) * | 1988-08-19 | 1992-09-22 | Tanox Biosystems, Inc. | Molecular conjugates containing cell membrane-blending agents |
US5000000A (en) * | 1988-08-31 | 1991-03-19 | University Of Florida | Ethanol production by Escherichia coli strains co-expressing Zymomonas PDC and ADH genes |
US5194599A (en) * | 1988-09-23 | 1993-03-16 | Gilead Sciences, Inc. | Hydrogen phosphonodithioate compositions |
US5512439A (en) * | 1988-11-21 | 1996-04-30 | Dynal As | Oligonucleotide-linked magnetic particles and uses thereof |
US5599923A (en) * | 1989-03-06 | 1997-02-04 | Board Of Regents, University Of Tx | Texaphyrin metal complexes having improved functionalization |
US5108921A (en) * | 1989-04-03 | 1992-04-28 | Purdue Research Foundation | Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules |
US5082934A (en) * | 1989-04-05 | 1992-01-21 | Naxcor | Coumarin derivatives for use as nucleotide crosslinking reagents |
US5391723A (en) * | 1989-05-31 | 1995-02-21 | Neorx Corporation | Oligonucleotide conjugates |
US4958013A (en) * | 1989-06-06 | 1990-09-18 | Northwestern University | Cholesteryl modified oligonucleotides |
US5591722A (en) * | 1989-09-15 | 1997-01-07 | Southern Research Institute | 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity |
US5527528A (en) * | 1989-10-20 | 1996-06-18 | Sequus Pharmaceuticals, Inc. | Solid-tumor treatment method |
US5013556A (en) * | 1989-10-20 | 1991-05-07 | Liposome Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
US5399676A (en) * | 1989-10-23 | 1995-03-21 | Gilead Sciences | Oligonucleotides with inverted polarity |
US5721218A (en) * | 1989-10-23 | 1998-02-24 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotides with inverted polarity |
EP0942000B1 (en) * | 1989-10-24 | 2004-06-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-Modified oligonucleotides |
US5292873A (en) * | 1989-11-29 | 1994-03-08 | The Research Foundation Of State University Of New York | Nucleic acids labeled with naphthoquinone probe |
US5177198A (en) * | 1989-11-30 | 1993-01-05 | University Of N.C. At Chapel Hill | Process for preparing oligoribonucleoside and oligodeoxyribonucleoside boranophosphates |
US5486603A (en) * | 1990-01-08 | 1996-01-23 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide having enhanced binding affinity |
US6399754B1 (en) * | 1991-12-24 | 2002-06-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Sugar modified oligonucleotides |
US5914396A (en) * | 1990-01-11 | 1999-06-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-O-modified nucleosides and phosphoramidites |
US5506351A (en) * | 1992-07-23 | 1996-04-09 | Isis Pharmaceuticals | Process for the preparation of 2'-O-alkyl guanosine and related compounds |
US6358931B1 (en) * | 1990-01-11 | 2002-03-19 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating RNA |
US5872232A (en) * | 1990-01-11 | 1999-02-16 | Isis Pharmaceuticals Inc. | 2'-O-modified oligonucleotides |
US5212295A (en) * | 1990-01-11 | 1993-05-18 | Isis Pharmaceuticals | Monomers for preparation of oligonucleotides having chiral phosphorus linkages |
US5623065A (en) * | 1990-08-13 | 1997-04-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Gapped 2' modified oligonucleotides |
US5859221A (en) * | 1990-01-11 | 1999-01-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-modified oligonucleotides |
US5506212A (en) * | 1990-01-11 | 1996-04-09 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides with substantially chirally pure phosphorothioate linkages |
US6005087A (en) * | 1995-06-06 | 1999-12-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-modified oligonucleotides |
US5587470A (en) * | 1990-01-11 | 1996-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 3-deazapurines |
US5852188A (en) * | 1990-01-11 | 1998-12-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having chiral phosphorus linkages |
US6395492B1 (en) * | 1990-01-11 | 2002-05-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Derivatized oligonucleotides having improved uptake and other properties |
US5635488A (en) * | 1991-10-15 | 1997-06-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds having phosphorodithioate linkages of high chiral purity |
US5514786A (en) * | 1990-01-11 | 1996-05-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions for inhibiting RNA activity |
AU7579991A (en) * | 1990-02-20 | 1991-09-18 | Gilead Sciences, Inc. | Pseudonucleosides and pseudonucleotides and their polymers |
US5214136A (en) * | 1990-02-20 | 1993-05-25 | Gilead Sciences, Inc. | Anthraquinone-derivatives oligonucleotides |
US5321131A (en) * | 1990-03-08 | 1994-06-14 | Hybridon, Inc. | Site-specific functionalization of oligodeoxynucleotides for non-radioactive labelling |
US5658731A (en) * | 1990-04-09 | 1997-08-19 | Europaisches Laboratorium Fur Molekularbiologie | 2'-O-alkylnucleotides as well as polymers which contain such nucleotides |
US5151510A (en) * | 1990-04-20 | 1992-09-29 | Applied Biosystems, Inc. | Method of synethesizing sulfurized oligonucleotide analogs |
ES2116977T3 (es) * | 1990-05-11 | 1998-08-01 | Microprobe Corp | Soportes solidos para ensayos de hibridacion de acidos nucleicos y metodos para inmovilizar oligonucleotidos de modo covalente. |
DK0464638T3 (da) * | 1990-07-02 | 1997-10-13 | Hoechst Ag | Oligonukleotidanaloge med terminale 3-3- eller 5-5-internukleotidbindinger. |
US5223618A (en) * | 1990-08-13 | 1993-06-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 4'-desmethyl nucleoside analog compounds |
US5618704A (en) * | 1990-07-27 | 1997-04-08 | Isis Pharmacueticals, Inc. | Backbone-modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through radical coupling |
US5378825A (en) * | 1990-07-27 | 1995-01-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
US5610289A (en) * | 1990-07-27 | 1997-03-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogues |
US5386023A (en) * | 1990-07-27 | 1995-01-31 | Isis Pharmaceuticals | Backbone modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through reductive coupling |
US5218105A (en) * | 1990-07-27 | 1993-06-08 | Isis Pharmaceuticals | Polyamine conjugated oligonucleotides |
US5608046A (en) * | 1990-07-27 | 1997-03-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated 4'-desmethyl nucleoside analog compounds |
BR9106702A (pt) * | 1990-07-27 | 1993-06-08 | Isis Pharmaceuticals Inc | Analogo de oligonucleotideos e processos para modular a producao de uma proteina por um organismo e para tratar um organismo |
US5489677A (en) * | 1990-07-27 | 1996-02-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms |
US5623070A (en) * | 1990-07-27 | 1997-04-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Heteroatomic oligonucleoside linkages |
US5602240A (en) * | 1990-07-27 | 1997-02-11 | Ciba Geigy Ag. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
US5792844A (en) * | 1990-07-27 | 1998-08-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleoside linkages containing adjacent nitrogen atoms |
US5177196A (en) * | 1990-08-16 | 1993-01-05 | Microprobe Corporation | Oligo (α-arabinofuranosyl nucleotides) and α-arabinofuranosyl precursors thereof |
US5512667A (en) * | 1990-08-28 | 1996-04-30 | Reed; Michael W. | Trifunctional intermediates for preparing 3'-tailed oligonucleotides |
US5214134A (en) * | 1990-09-12 | 1993-05-25 | Sterling Winthrop Inc. | Process of linking nucleosides with a siloxane bridge |
CA2092002A1 (en) * | 1990-09-20 | 1992-03-21 | Mark Matteucci | Modified internucleoside linkages |
ATE198598T1 (de) * | 1990-11-08 | 2001-01-15 | Hybridon Inc | Verbindung von mehrfachreportergruppen auf synthetischen oligonukleotiden |
EP0503597B1 (en) * | 1991-03-13 | 1998-06-10 | Otsuka Kagaku Kabushiki Kaisha | Penam derivatives and processes for producing the same |
DK51092D0 (da) * | 1991-05-24 | 1992-04-15 | Ole Buchardt | Oligonucleotid-analoge betegnet pna, monomere synthoner og fremgangsmaade til fremstilling deraf samt anvendelser deraf |
US5714331A (en) * | 1991-05-24 | 1998-02-03 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility |
US5719262A (en) * | 1993-11-22 | 1998-02-17 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having amino acid side chains |
US5214135A (en) * | 1991-08-30 | 1993-05-25 | Chemgenes Corporation | N-protected-2'-O-methyl-ribonucleosides and N-protected 2'-O-methyl-3'-cyanoethyl-N-,N-diisopropyl phosphoramidite ribonucleosides |
US5521291A (en) * | 1991-09-30 | 1996-05-28 | Boehringer Ingelheim International, Gmbh | Conjugates for introducing nucleic acid into higher eucaryotic cells |
US5599797A (en) * | 1991-10-15 | 1997-02-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5661134A (en) * | 1991-10-15 | 1997-08-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides for modulating Ha-ras or Ki-ras having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5607923A (en) * | 1991-10-15 | 1997-03-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides for modulating cytomegalovirus having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
DE59208572D1 (de) * | 1991-10-17 | 1997-07-10 | Ciba Geigy Ag | Bicyclische Nukleoside, Oligonukleotide, Verfahren zu deren Herstellung und Zwischenprodukte |
US6335434B1 (en) * | 1998-06-16 | 2002-01-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc., | Nucleosidic and non-nucleosidic folate conjugates |
US5594121A (en) * | 1991-11-07 | 1997-01-14 | Gilead Sciences, Inc. | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified purines |
US5484908A (en) * | 1991-11-26 | 1996-01-16 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotides containing 5-propynyl pyrimidines |
US20060270624A1 (en) * | 1991-12-24 | 2006-11-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Gapped 2' modified oligonucleotides |
FR2686097B1 (fr) * | 1992-01-14 | 1994-12-30 | Rhone Merieux | Preparation d'antigenes et de vaccins de virus de la mystery disease, antigenes et vaccins obtenus pour la prevention de cette maladie. |
US5595726A (en) * | 1992-01-21 | 1997-01-21 | Pharmacyclics, Inc. | Chromophore probe for detection of nucleic acid |
KR950700408A (ko) * | 1992-02-04 | 1995-01-16 | 토루페터슨 | 인접한 촉진제 올리고누클레오티드에 의한 리보자임 촉매활성의 증강(enhancement of ribozyme catalytic activity by a neighboring facilitator oligonucleotide) |
FR2687679B1 (fr) * | 1992-02-05 | 1994-10-28 | Centre Nat Rech Scient | Oligothionucleotides. |
EP0635023B1 (en) * | 1992-03-05 | 2002-02-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Covalently cross-linked oligonucleotides |
US5633360A (en) * | 1992-04-14 | 1997-05-27 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs capable of passive cell membrane permeation |
NL9300058A (nl) * | 1992-06-18 | 1994-01-17 | Stichting Rega V Z W | 1,5-anhydrohexitol nucleoside analoga en farmaceutisch gebruik daarvan. |
EP0577558A2 (de) * | 1992-07-01 | 1994-01-05 | Ciba-Geigy Ag | Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte |
US6172208B1 (en) * | 1992-07-06 | 2001-01-09 | Genzyme Corporation | Oligonucleotides modified with conjugate groups |
US6346614B1 (en) * | 1992-07-23 | 2002-02-12 | Hybridon, Inc. | Hybrid oligonucleotide phosphorothioates |
US5652355A (en) * | 1992-07-23 | 1997-07-29 | Worcester Foundation For Experimental Biology | Hybrid oligonucleotide phosphorothioates |
US5617704A (en) * | 1992-09-15 | 1997-04-08 | Ferag Ag | Method of forming a tubular pack of printed products with a transparent foil cover |
US5891684A (en) * | 1992-10-15 | 1999-04-06 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Base-modified enzymatic nucleic acid |
US5395619A (en) * | 1993-03-03 | 1995-03-07 | Liposome Technology, Inc. | Lipid-polymer conjugates and liposomes |
GB9304620D0 (en) * | 1993-03-06 | 1993-04-21 | Ciba Geigy Ag | Compounds |
FR2705099B1 (fr) * | 1993-05-12 | 1995-08-04 | Centre Nat Rech Scient | Oligonucléotides phosphorothioates triesters et procédé de préparation. |
JP2905358B2 (ja) * | 1993-05-18 | 1999-06-14 | 富士通株式会社 | 通信サービス方式及び通信サービスを実施するための交換システム |
US6015886A (en) * | 1993-05-24 | 2000-01-18 | Chemgenes Corporation | Oligonucleotide phosphate esters |
US5532130A (en) * | 1993-07-20 | 1996-07-02 | Dyad Pharmaceutical Corporation | Methods and compositions for sequence-specific hybridization of RNA by 2'-5' oligonucleotides |
US5614621A (en) * | 1993-07-29 | 1997-03-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Process for preparing oligonucleotides using silyl-containing diamino phosphorous reagents |
US5417978A (en) * | 1993-07-29 | 1995-05-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Liposomal antisense methyl phosphonate oligonucleotides and methods for their preparation and use |
JPH09502092A (ja) * | 1993-09-02 | 1997-03-04 | リボザイム・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 非ヌクレオチドを含有する酵素性核酸 |
AU679566B2 (en) * | 1993-09-03 | 1997-07-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Amine-derivatized nucleosides and oligonucleosides |
US5502177A (en) * | 1993-09-17 | 1996-03-26 | Gilead Sciences, Inc. | Pyrimidine derivatives for labeled binding partners |
US6060456A (en) * | 1993-11-16 | 2000-05-09 | Genta Incorporated | Chimeric oligonucleoside compounds |
KR960705837A (ko) * | 1993-11-16 | 1996-11-08 | 라이오넬 엔. 사이몬 | 비포스포네이트 뉴클레오시드간 연결기와 혼합된 비대칭적으로 순수한 포스포네이트 뉴클레오시드간 연결기를 갖는 합성 올리고머(Synthetic Oligomers Having Chirally Pure Phosphonate Internucleosidyl Linkages Mixed with Non-Phosphonate Internucleosidyl Linkages) |
US5595756A (en) * | 1993-12-22 | 1997-01-21 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Liposomal compositions for enhanced retention of bioactive agents |
US5519134A (en) * | 1994-01-11 | 1996-05-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolidine-containing monomers and oligomers |
US5539083A (en) * | 1994-02-23 | 1996-07-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Peptide nucleic acid combinatorial libraries and improved methods of synthesis |
US5639647A (en) * | 1994-03-29 | 1997-06-17 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | 2'-deoxy-2'alkylnucleotide containing nucleic acid |
ZA951877B (en) * | 1994-03-07 | 1996-09-09 | Dow Chemical Co | Bioactive and/or targeted dendrimer conjugates |
DE4408531A1 (de) * | 1994-03-14 | 1995-09-28 | Hoechst Ag | PNA-Synthese unter Verwendung einer gegen schwache Säuren labilen Amino-Schutzgruppe |
US5596091A (en) * | 1994-03-18 | 1997-01-21 | The Regents Of The University Of California | Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides |
US5726297A (en) * | 1994-03-18 | 1998-03-10 | Lynx Therapeutics, Inc. | Oligodeoxyribonucleotide N3' P5' phosphoramidates |
US5627053A (en) * | 1994-03-29 | 1997-05-06 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid |
US5625050A (en) * | 1994-03-31 | 1997-04-29 | Amgen Inc. | Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics |
US5631148A (en) * | 1994-04-22 | 1997-05-20 | Chiron Corporation | Ribozymes with product ejection by strand displacement |
US5525711A (en) * | 1994-05-18 | 1996-06-11 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Pteridine nucleotide analogs as fluorescent DNA probes |
US5696253A (en) * | 1994-06-30 | 1997-12-09 | The Regents Of The University Of California | Polynucleoside chain with 3'→5' guanidyl linkages |
US6207646B1 (en) * | 1994-07-15 | 2001-03-27 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules |
US5597696A (en) * | 1994-07-18 | 1997-01-28 | Becton Dickinson And Company | Covalent cyanine dye oligonucleotide conjugates |
US5580731A (en) * | 1994-08-25 | 1996-12-03 | Chiron Corporation | N-4 modified pyrimidine deoxynucleotides and oligonucleotide probes synthesized therewith |
US5597909A (en) * | 1994-08-25 | 1997-01-28 | Chiron Corporation | Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use |
US6380169B1 (en) * | 1994-08-31 | 2002-04-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Metal complex containing oligonucleoside cleavage compounds and therapies |
US5591721A (en) * | 1994-10-25 | 1997-01-07 | Hybridon, Inc. | Method of down-regulating gene expression |
US5512295A (en) * | 1994-11-10 | 1996-04-30 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Synthetic liposomes for enhanced uptake and delivery |
US5789576A (en) * | 1994-12-09 | 1998-08-04 | Genta Incorporated | Methylphosphonate dimer synthesis |
US5716824A (en) * | 1995-04-20 | 1998-02-10 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | 2'-O-alkylthioalkyl and 2-C-alkylthioalkyl-containing enzymatic nucleic acids (ribozymes) |
JPH10512894A (ja) * | 1995-03-06 | 1998-12-08 | アイシス・ファーマシューティカルス・インコーポレーテッド | 2’−o−置換ピリミジンおよびそのオリゴマー化合物の合成の改良法 |
US6166197A (en) * | 1995-03-06 | 2000-12-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds having pyrimidine nucleotide (S) with 2'and 5 substitutions |
EP0739898B1 (de) * | 1995-03-13 | 2001-09-26 | Aventis Pharma Deutschland GmbH | Phosphonomonoesternnukleinsäuren, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung |
IT1274571B (it) * | 1995-05-25 | 1997-07-17 | Fabbrica Italiana Sintetici Spa | Procedimento per la preparazione di ¬r-(r*,r*)|-5-(3-clorofenil)-3- ¬2-(3,4-dimetossifenil)-1-metil-etil|-ossazolidin-2-one |
US20020081577A1 (en) * | 1995-06-06 | 2002-06-27 | Robert L. Kilkuskie | Oligonucleotides speciific for hepatitis c virus |
US5639837A (en) * | 1996-06-04 | 1997-06-17 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Process for making fluoropolymers |
US5672662A (en) * | 1995-07-07 | 1997-09-30 | Shearwater Polymers, Inc. | Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications |
US5652356A (en) * | 1995-08-17 | 1997-07-29 | Hybridon, Inc. | Inverted chimeric and hybrid oligonucleotides |
US5936080A (en) * | 1996-05-24 | 1999-08-10 | Genta Incorporated | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives |
WO1997014709A1 (en) * | 1995-10-13 | 1997-04-24 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Antisense oligomers |
US5734041A (en) * | 1995-10-20 | 1998-03-31 | Mcgill University | Preparation of chiral phosphorothioate oligomers |
US5705621A (en) * | 1995-11-17 | 1998-01-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric phosphite, phosphodiester, Phosphorothioate and phosphorodithioate compounds and intermediates for preparing same |
US6013782A (en) * | 1995-12-21 | 2000-01-11 | Sunnybrook Health Sciences Center | Integrin-linked kinase and its uses |
US6344436B1 (en) * | 1996-01-08 | 2002-02-05 | Baylor College Of Medicine | Lipophilic peptides for macromolecule delivery |
US5602046A (en) * | 1996-04-12 | 1997-02-11 | National Semiconductor Corporation | Integrated zener diode protection structures and fabrication methods for DMOS power devices |
CA2253823A1 (en) * | 1996-05-06 | 1997-11-13 | Brigham And Women's Hospital | 5-lipoxygenase gene polymorphisms and their use in classifying patients |
US5634488A (en) * | 1996-05-20 | 1997-06-03 | C.P. Test Services-Valvco, Inc. | Modular valve service box |
ATE267247T1 (de) * | 1996-05-24 | 2004-06-15 | Aventis Pharma Gmbh | Reagenz und verfahren zur inhibierung der n-ras expression |
US7875733B2 (en) * | 2003-09-18 | 2011-01-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds comprising 4′-thionucleosides for use in gene modulation |
US5898031A (en) * | 1996-06-06 | 1999-04-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligoribonucleotides for cleaving RNA |
ES2192672T3 (es) * | 1996-11-18 | 2003-10-16 | Takeshi Imanishi | Nuevos analogos de nucleotidos. |
US6172209B1 (en) * | 1997-02-14 | 2001-01-09 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Aminooxy-modified oligonucleotides and methods for making same |
US5760209A (en) * | 1997-03-03 | 1998-06-02 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Protecting group for synthesizing oligonucleotide analogs |
US6227982B1 (en) * | 1997-03-03 | 2001-05-08 | Lazereyes Golf, Llc | Dual ended laser swing aid |
US5770716A (en) * | 1997-04-10 | 1998-06-23 | The Perkin-Elmer Corporation | Substituted propargylethoxyamido nucleosides, oligonucleotides and methods for using same |
US6194149B1 (en) * | 1998-03-03 | 2001-02-27 | Third Wave Technologies, Inc. | Target-dependent reactions using structure-bridging oligonucleotides |
AU731909B2 (en) * | 1997-07-01 | 2001-04-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for the delivery of oligonucleotides via the alimentary canal |
DE69827260T2 (de) * | 1997-07-24 | 2006-02-16 | PerSeptive Biosystems, Inc., Framingham | Konjugate von transportpeptiden und nukleinsäureanaloga und deren verwendung |
US6133246A (en) * | 1997-08-13 | 2000-10-17 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense oligonucleotide compositions and methods for the modulation of JNK proteins |
US6794499B2 (en) * | 1997-09-12 | 2004-09-21 | Exiqon A/S | Oligonucleotide analogues |
US6028183A (en) * | 1997-11-07 | 2000-02-22 | Gilead Sciences, Inc. | Pyrimidine derivatives and oligonucleotides containing same |
US6407218B1 (en) * | 1997-11-10 | 2002-06-18 | Cytimmune Sciences, Inc. | Method and compositions for enhancing immune response and for the production of in vitro mabs |
US20040146867A1 (en) * | 2003-01-24 | 2004-07-29 | Slattum Paul M | Compounds and processes for single-pot attachment of a label to siRNA |
US6506559B1 (en) * | 1997-12-23 | 2003-01-14 | Carnegie Institute Of Washington | Genetic inhibition by double-stranded RNA |
US6020475A (en) * | 1998-02-10 | 2000-02-01 | Isis Pharmeuticals, Inc. | Process for the synthesis of oligomeric compounds |
JP2003525017A (ja) * | 1998-04-20 | 2003-08-26 | リボザイム・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド | 遺伝子発現を調節しうる新規な化学組成を有する核酸分子 |
US6300319B1 (en) * | 1998-06-16 | 2001-10-09 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Targeted oligonucleotide conjugates |
US6043352A (en) * | 1998-08-07 | 2000-03-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-O-Dimethylaminoethyloxyethyl-modified oligonucleotides |
US20040009938A1 (en) * | 1998-08-07 | 2004-01-15 | Muthiah Manoharan | Methods of enhancing renal uptake of oligonucleotides |
US6335432B1 (en) * | 1998-08-07 | 2002-01-01 | Bio-Red Laboratories, Inc. | Structural analogs of amine bases and nucleosides |
US6335437B1 (en) * | 1998-09-07 | 2002-01-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for the preparation of conjugated oligomers |
US6365379B1 (en) * | 1998-10-06 | 2002-04-02 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Zinc finger peptide cleavage of nucleic acids |
US6210892B1 (en) * | 1998-10-07 | 2001-04-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Alteration of cellular behavior by antisense modulation of mRNA processing |
US6172216B1 (en) * | 1998-10-07 | 2001-01-09 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense modulation of BCL-X expression |
US6169177B1 (en) * | 1998-11-06 | 2001-01-02 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Processes for the synthesis of oligomeric compounds |
EP1156812A4 (en) * | 1999-02-23 | 2004-09-29 | Isis Pharmaceuticals Inc | MULTIPARTICULAR FORMULATION |
US6220025B1 (en) * | 1999-03-08 | 2001-04-24 | Daimlerchrysler Corporation | Stator for torque converter |
US20020049173A1 (en) * | 1999-03-26 | 2002-04-25 | Bennett C. Frank | Alteration of cellular behavior by antisense modulation of mRNA processing |
US6593466B1 (en) * | 1999-07-07 | 2003-07-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Guanidinium functionalized nucleotides and precursors thereof |
US6033910A (en) * | 1999-07-19 | 2000-03-07 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense inhibition of MAP kinase kinase 6 expression |
US6617442B1 (en) * | 1999-09-30 | 2003-09-09 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Human Rnase H1 and oligonucleotide compositions thereof |
US20020102267A1 (en) * | 1999-10-21 | 2002-08-01 | Lu Peter S. | CLASP-5 transmembrane protein |
US6395437B1 (en) * | 1999-10-29 | 2002-05-28 | Advanced Micro Devices, Inc. | Junction profiling using a scanning voltage micrograph |
DE10100586C1 (de) * | 2001-01-09 | 2002-04-11 | Ribopharma Ag | Verfahren zur Hemmung der Expression eines Ziegens |
WO2003070918A2 (en) * | 2002-02-20 | 2003-08-28 | Ribozyme Pharmaceuticals, Incorporated | Rna interference by modified short interfering nucleic acid |
US20050020525A1 (en) * | 2002-02-20 | 2005-01-27 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (siNA) |
CA2403397A1 (en) * | 2000-03-16 | 2001-09-20 | Genetica, Inc. | Methods and compositions for rna interference |
US6559279B1 (en) * | 2000-09-08 | 2003-05-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Process for preparing peptide derivatized oligomeric compounds |
US20020081736A1 (en) * | 2000-11-03 | 2002-06-27 | Conroy Susan E. | Nucleic acid delivery |
EP1386004A4 (en) * | 2001-04-05 | 2005-02-16 | Ribozyme Pharm Inc | MODULATION OF GENE EXPRESSION ASSOCIATED WITH INFLAMMATORY PROLIFERATION AND GROWTH OF NEURITIES BY METHODS INVOLVING NUCLEIC ACID |
WO2002094250A2 (en) * | 2001-05-18 | 2002-11-28 | Cureon A/S | Therapeutic uses of lna-modified oligonucleotides in infectious diseases |
WO2003070884A2 (en) * | 2002-02-20 | 2003-08-28 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA INTERFERENCE MEDIATED INHIBITION OF MDR P-GLYCOPROTEIN GENE EXPRESSION USING SHORT INTERFERING NUCLEIC ACID (siNA) |
US20030158403A1 (en) * | 2001-07-03 | 2003-08-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Nuclease resistant chimeric oligonucleotides |
DE10133858A1 (de) * | 2001-07-12 | 2003-02-06 | Aventis Pharma Gmbh | Synthetische doppelsträngige Oligonucleotide zur gezielten Hemmung der Genexpression |
ATE416183T1 (de) * | 2002-02-01 | 2008-12-15 | Univ Mcgill | Oligonukleotide mit alternierenden segmenten und deren verwendungen |
US20040014957A1 (en) * | 2002-05-24 | 2004-01-22 | Anne Eldrup | Oligonucleotides having modified nucleoside units |
US20040029275A1 (en) * | 2002-08-10 | 2004-02-12 | David Brown | Methods and compositions for reducing target gene expression using cocktails of siRNAs or constructs expressing siRNAs |
US20050020521A1 (en) * | 2002-09-25 | 2005-01-27 | University Of Massachusetts | In vivo gene silencing by chemically modified and stable siRNA |
US20040083430A1 (en) * | 2002-10-29 | 2004-04-29 | Boonen Paul J. J. | Method and apparatus to process portable document format data containing transparency |
US9150605B2 (en) * | 2002-11-05 | 2015-10-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions comprising alternating 2′-modified nucleosides for use in gene modulation |
JP2006507841A (ja) * | 2002-11-14 | 2006-03-09 | ダーマコン, インコーポレイテッド | 機能的siRNAおよび超機能的siRNA |
ES2864206T3 (es) * | 2003-06-02 | 2021-10-13 | Univ Massachusetts | Métodos y composiciones para mejorar la eficacia y la especificidad del ARNi |
EP1636342A4 (en) * | 2003-06-20 | 2008-10-08 | Isis Pharmaceuticals Inc | OLIGOMERIC COMPOUNDS FOR GENE MODULATION |
CA2533701A1 (en) * | 2003-07-31 | 2005-02-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds and compositions for use in modulation of small non-coding rnas |
US20050164209A1 (en) * | 2004-01-23 | 2005-07-28 | Bennett C. F. | Hepatocyte free uptake assays |
KR101147147B1 (ko) * | 2004-04-01 | 2012-05-25 | 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 | Rna 간섭의 오프 타겟 효과 감소를 위한 변형된폴리뉴클레오타이드 |
AU2004320622B2 (en) * | 2004-06-03 | 2012-06-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Chimeric gapped oligomeric compositions |
US7291886B2 (en) * | 2004-06-21 | 2007-11-06 | International Business Machines Corporation | Hybrid substrate technology for high-mobility planar and multiple-gate MOSFETs |
US8601104B2 (en) * | 2006-09-19 | 2013-12-03 | The Invention Science Fund I, Llc | Using network access port linkages for data structure update decisions |
-
2005
- 2005-06-02 AU AU2005252662A patent/AU2005252662B2/en not_active Ceased
- 2005-06-02 WO PCT/US2005/019220 patent/WO2005121372A2/en active Application Filing
- 2005-06-02 JP JP2007515522A patent/JP2008501694A/ja active Pending
- 2005-06-02 WO PCT/US2005/019217 patent/WO2005121370A2/en active Application Filing
- 2005-06-02 EP EP05757632A patent/EP1765416A4/en not_active Withdrawn
- 2005-06-02 AU AU2005252663A patent/AU2005252663B2/en not_active Ceased
- 2005-06-02 CA CA002568735A patent/CA2568735A1/en not_active Abandoned
- 2005-06-02 WO PCT/US2005/019219 patent/WO2005121371A2/en active Application Filing
- 2005-06-02 US US11/569,931 patent/US20080119427A1/en not_active Abandoned
- 2005-06-02 EP EP05757763A patent/EP1766071A4/en not_active Withdrawn
- 2005-06-02 JP JP2007515521A patent/JP2008501693A/ja active Pending
- 2005-06-02 EP EP05756325A patent/EP1765415A4/en not_active Withdrawn
- 2005-06-02 CA CA002569419A patent/CA2569419A1/en not_active Abandoned
-
2006
- 2006-12-01 US US11/565,770 patent/US20070166734A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,781 patent/US20070185046A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,816 patent/US20070179107A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,833 patent/US20070172948A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,799 patent/US20070179106A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,858 patent/US20070167392A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,817 patent/US20070167390A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,785 patent/US20070185047A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,841 patent/US20070167391A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,839 patent/US20070179109A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,823 patent/US20070179108A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,794 patent/US20070173474A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,804 patent/US20070173475A1/en not_active Abandoned
- 2006-12-01 US US11/565,773 patent/US20070123484A1/en not_active Abandoned
-
2015
- 2015-07-21 US US14/804,743 patent/US20160017328A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004015107A2 (en) * | 2002-08-05 | 2004-02-19 | Atugen Ag | Further novel forms of interfering rna molecules |
WO2004044133A2 (en) * | 2002-11-05 | 2004-05-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modified oligonucleotides for use in rna interference |
WO2004044136A2 (en) * | 2002-11-05 | 2004-05-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions comprising alternating 2’-modified nucleosides for use in gene modulation |
WO2004044138A2 (en) * | 2002-11-05 | 2004-05-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation |
JP2008501694A (ja) * | 2004-06-03 | 2008-01-24 | アイシス ファーマシューティカルズ、インク. | 遺伝子調節の使用のために個別に修飾された鎖を有する二本鎖組成物 |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008501694A (ja) * | 2004-06-03 | 2008-01-24 | アイシス ファーマシューティカルズ、インク. | 遺伝子調節の使用のために個別に修飾された鎖を有する二本鎖組成物 |
JP2012510816A (ja) * | 2008-12-04 | 2012-05-17 | オーピーケーオー・クルナ・エルエルシー | Vegfに対する天然アンチセンス転写物の抑制による血管内皮増殖因子(vegf)関連疾患の治療 |
JP2013514761A (ja) * | 2009-12-09 | 2013-05-02 | 日東電工株式会社 | Hsp47発現の調節 |
JP2015109851A (ja) * | 2009-12-09 | 2015-06-18 | 日東電工株式会社 | Hsp47発現の調節 |
US9206424B2 (en) | 2009-12-09 | 2015-12-08 | Nitto Denko Corporation | Modulation of HSP47 expression |
JP2016127853A (ja) * | 2009-12-09 | 2016-07-14 | 日東電工株式会社 | Hsp47発現の調節 |
US10093923B2 (en) | 2009-12-09 | 2018-10-09 | Nitto Denko Corporation | Modulation of HSP47 expression |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2005252662B2 (en) | Double strand compositions comprising differentially modified strands for use in gene modulation | |
EP2173358B1 (en) | Double strand compositions comprising differentially modified strands for use in gene modulation | |
AU2003287502B2 (en) | Compositions comprising alternating 2'-modified nucleosides for use in gene modulation | |
US20090306178A1 (en) | Conjugated double strand compositions for use in gene modulation | |
US9150606B2 (en) | Compositions comprising alternating 2'-modified nucleosides for use in gene modulation | |
JP2008501335A (ja) | キメラギャップ化オリゴマー組成物 | |
US20070275921A1 (en) | Oligomeric Compounds That Facilitate Risc Loading | |
US20090048192A1 (en) | Double Strand Compositions Comprising Differentially Modified Strands for Use in Gene Modulation | |
AU2011250765A1 (en) | Double strand compositions comprising differentially modified strands for use in gene modulation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20080531 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20080708 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110802 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20111029 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20111108 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120202 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20121030 |