JP2003171292A

JP2003171292A - 歯周病の予防または治療剤

Info

Publication number: JP2003171292A
Application number: JP2001365278A
Authority: JP
Inventors: Masahiro Kawada; 真裕川田; Yasushi Ono; 裕史大野; Eiko Matsumura; 瑛子松村; Tatsuya Imai; 龍弥今井
Original assignee: Biofermin Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Biofermin Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2001-11-29
Filing date: 2001-11-29
Publication date: 2003-06-17
Anticipated expiration: 2021-11-29
Also published as: JP4528472B2

Abstract

(57)【要約】【課題】本発明は安価で、簡便に実施でき、しか
も従来より効果の高い歯周病の予防または治療剤、口臭
予防剤または虫歯予防剤を提供することを目的とする。【解決手段】ビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌に属
する菌と、これらの菌が資化しうる糖類を含有すること
を特徴とする歯周病の予防または治療剤、口臭予防剤ま
たは虫歯予防剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、歯周病の予防また
は治療剤、さらには口臭予防剤または虫歯予防剤に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】歯周病は、歯肉炎、歯周炎または歯槽膿
漏等の歯のまわりの歯周組織に発症する炎症である。従
来、歯周病の有力な治療方法としては、例えばアムホテ
リシンＢ等の抗生物質を使用する方法が挙げられるが、
アムホテリシンＢは医師の処方が必要な薬で、一般人が
簡単に入手できるものではない。また、感染症の治療に
抗生物質等の化学療法剤が使用されると、これらは強力
な効き目がある反面、多用すると耐性菌を出現させた
り、服用によって、腸内細菌のバランスが崩れ、種々の
消化器疾患を誘発する可能性がある。

【０００３】歯周病は、医院に時間をかけて通院して
も、治療が困難であることが知られている。そして、放
置すると歯が全部抜け落ちて、食生活に深刻な支障を招
くことになる。さらには、口臭発生の原因となり、他人
に不快感を与えることになる。

【０００４】従って、歯周病の簡便な予防、治療剤の出
現が望まれ、乳酸菌歯みがきが提案されている。（例え
ば、平成１２年９月１３日、今井龍弥著、マキノ出版発
行の「歯周病が３日でよくなる驚異の乳酸菌歯みが
き」。）

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】かかる事情に鑑みて、
本発明は安価で、簡便に実施でき、しかも従来より効果
の高い歯周病の予防または治療剤、口臭予防剤または虫
歯予防剤を提供することを目的とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、種々検討
した結果、ビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌に属する
菌と、これらの菌が資化しうる糖類を含有する歯周病の
予防または治療剤が、上記の問題点を一挙に解決するこ
とを知見した。さらに、本発明者らは、上記糖類が存在
する場合と存在しない場合とを対比した結果、予想外に
も糖類が存在する方が歯周病原因菌の駆除率が有意に良
いことを知見した。

【０００７】また、本発明者らは、上記の予防または治
療剤に、さらに炭酸カルシウム、特に沈降炭酸カルシウ
ムを含有させると、ビフィズス菌、乳酸菌、酪酸菌を安
定化する効果があり、さらに歯周病の要因となる歯垢の
除去に効果があることを確認した。また、本発明者ら
は、上記の予防または治療剤に、アスコルビン酸（ビタ
ミンＣ）を含有させると、歯周病の予防または治療に好
ましいことを知見した。またさらに、本発明に使用され
るビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌として、シングル
ミクロンの菌体乾燥物を使用すると、歯周病の予防また
は治療の効果が上昇することを知見した。さらに、上述
したような歯周病の予防または治療剤は、口臭予防剤ま
たは虫歯予防剤としても効果を発揮することをも知見し
た。このような種々の新知見を得た上に、さらに検討を
加えて、本発明を完成するに至った。

【０００８】すなわち、本発明は、（１）ビフィズス
菌、乳酸菌または酪酸菌に属する菌と、これらの菌が資
化しうる糖類を含有することを特徴とする歯周病の予防
または治療剤、（２）糖類が、乳糖、ブドウ糖、ショ
糖、トレハロース、エリスリトール、マルチトール、キ
シリトールまたはオリゴ糖であることを特徴とする前記
（１）に記載の歯周病の予防または治療剤、（３）さら
に炭酸カルシウムまたは／およびアスコルビン酸を含有
することを特徴とする前記（１）または（２）に記載の
歯周病の予防または治療剤、（４）菌がシングルミクロ
ンの菌体乾燥物であることを特徴とする前記（１）〜
（３）のいずれかに記載の歯周病の予防または治療剤、
（５）生菌数が、製剤全体に対して、１０^６〜１０^１２
ＣＦＵ／ｇであることを特徴とする前記（１）〜（４）
のいずれかに記載の歯周病の予防または治療剤、（６）
ビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌に属する菌と、これ
らの菌が資化しうる糖類を含有することを特徴とする歯
周病原因菌のプロテアーゼ産生抑制または活性抑制剤、
（７）ビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌に属する菌
と、これらの菌が資化しうる糖類を含有することを特徴
とする口臭予防剤、（８）ビフィズス菌、乳酸菌または
酪酸菌に属する菌と、これらの菌が資化しうる糖類を含
有することを特徴とする虫歯予防剤、（９）ミュータン
ス菌の増殖を抑制する、または非水溶性グルカンの生成
を抑制することを特徴とする前記（８）に記載の虫歯予
防剤、（１０）剤型が、錠剤、散剤、顆粒剤、ペースト
剤、丸剤、チュアブル剤、含嗽剤、トローチ剤またはパ
ッチ剤であることを特徴とする前記（１）〜（９）のい
ずれかに記載の予防または治療剤、（１１）かんだり、
なめたりまたはうがいして服用することを特徴とする前
記（１）〜（１０）に記載の予防または治療剤、（１
２）ビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌とこれら菌が資
化しうる糖類とを歯周病原因菌に接触させることを特徴
とする歯周病原因菌の駆除方法、に関する。

【０００９】

【発明の実施の形態】本発明の歯周病の予防または治療
剤は、ビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌に属する菌
と、これらの菌が資化しうる糖類を含有することを特徴
としている。さらに、本発明の製剤は、口臭予防剤また
は虫歯予防剤としても効果を発揮する。また、本発明の
歯周病原因菌のプロテアーゼ活性抑制剤は、ビフィズス
菌、乳酸菌または酪酸菌に属する菌と、これらの菌が資
化しうる糖類を含有しており、歯周病原因菌が、gingip
ain−Ｒ（以下ＲＧＰと略す）、gingipain−Ｋ（以下Ｋ
ＧＰと略す）等のプロテアーゼ産生または活性を抑制す
る。以下、好ましい態様について説明する。

【００１０】本発明に使用される菌は、ビフィズス菌、
乳酸菌または酪酸菌に属する有用菌であって、具体的に
は例えば、Bifidobacterium bifidum、B. longum、 B.
breve、B. adolescentis、B. infantis、B.pseudolongu
m、B.thermophilum等のビフィズス菌；例えば、Lactoba
cillus acidophilus、L. casei、L. gasseri、L. plant
arum、L. delbrueckii subsp bulgaricus、L. delbruec
kii subsp lactis等の乳酸桿菌；例えば、Leuconostoc
mesenteroides、Streptococcus(Enterococcus) faecali
s、Streptococcus(Enterococcus) faecium、 Streptoco
ccus(Enterococcus) hirae、Lactococcus lactis、Str
eptococcus thermophilus等の乳酸球菌；例えば、Bacil
lus coagulans等の有胞子性乳酸菌； Bacillus toyo
i、B．licheniformis、Clostridium butyricum等の酪
酸菌；その他の有用菌が挙げられる。

【００１１】上記菌体は、公知の条件またはそれに準じ
る条件で培養することにより得ることができる。例え
ば、乳酸菌類の場合、グルコ−ス、酵母エキス、および
ペプトン等を含む液体培地で前記乳酸菌類の１種または
２種以上を通常約２５〜４５℃程度で約４〜２４時間程
度培養し、培養液から菌体を集菌し、洗浄し、湿菌体を
得る。

【００１２】一方、駆除対象となる歯周病原因菌として
は、具体的には例えば、Porphyromonas gingivalis（Ｐ
Ｇ菌）、Prevotella intermedia（ＰＩ菌）、Actinobac
illus actinomycetemcomitans（ＡＡ菌）、カンジダ菌
またはミュータンス菌等が挙げられる。

【００１３】本発明で使用される上記有用菌が資化しう
る糖類は、菌種により異なるため一概にはいえないが、
通常、例えばグルコース、乳糖、ショ糖、マルトース、
トレハロース等の単または二糖類、エリスリトール、キ
シリトール、マンニトール、マルチトール等の糖アルコ
ール類、例えばラクトシュークロースなどのオリゴ糖
類、シクロデキストリン、デキストリン等の多糖類が挙
げられる。これら糖類の使用量は、予防または治療剤１
００重量部に対して、通常、約５〜９９重量部、好まし
くは約１０〜９９重量部である。

【００１４】本発明で使用される予防または治療剤は、
さらに炭酸カルシウム（好ましくは沈降炭酸カルシウ
ム）または／およびアスコルビン酸を含有していてもよ
い。炭酸カルシウムの使用量は、予防または治療剤１０
０重量に対して、通常、約３〜５０重量部、好ましくは
約１０〜３０重量部である。さらに、アスコルビン酸の
使用量は、予防または治療剤１００重量に対して、通
常、約１〜７５重量部、好ましくは約１０〜４０重量部
である。

【００１５】本発明において使用される菌は、シングル
ミクロンの菌体乾燥物であってもよい。菌体乾燥物と
は、通常は乾燥された個々の菌体または乾燥された菌体
の集合物をいう。また、シングルミクロンとは、小数第
１位を四捨五入して１〜１０μｍをいう。

【００１６】菌体乾燥物の好ましい製造方法について説
明する。上記菌体を溶媒に分散して菌体液とする。溶媒
は、当業界で用いられる公知の溶媒を用いてよいが、水
が好ましい。また、所望によりエタノールを加えてよ
い。エタノールを加えることによって、最初にエタノー
ルが気化し、ついで水が気化するから、段階的な乾燥が
可能となる。さらに、菌体液は、懸濁液であってもよ
い。溶媒は上記で示したものと同じでよい。また、懸濁
させる際、懸濁剤、例えばアルギン酸ナトリウム等を使
用してもよい。また、上記菌体液には、さらに保護剤、
賦形剤、結合剤、崩壊剤、もしくは静電気防止剤など当
業界で一般に用いられている添加剤を通常の配合割合で
添加してもよい。

【００１７】上記菌体液を、菌体乾燥物を製造するため
に噴霧乾燥装置による乾燥操作に付する。噴霧乾燥装置
は、シングルミクロンの噴霧液滴を形成できる微粒化装
置を備えた噴霧乾燥装置が好ましい。非常に粒径の小さ
な噴霧液滴にすると、噴霧液滴の単位重量あたりの表面
積が大きくなり、乾燥温風との接触が効率よく行われる
ため、生産性が向上する。ここでシングルミクロンの液
滴とは、噴霧液滴の粒径が小数第１位を四捨五入して１
〜１０μｍであるものをいう。

【００１８】噴霧乾燥装置には、微粒化装置が、例えば
ロータリーアトマイザー（回転円盤）、加圧ノズル、ま
たは圧縮気体の力を利用した２流体ノズルや４流体ノズ
ルである噴霧乾燥装置が挙げられる。本発明において
は、シングルミクロンの噴霧液滴を形成できるものであ
れば、上記形式のいずれの噴霧乾燥装置であってもよい
が、４流体ノズルを有する噴霧乾燥装置を使用するのが
好ましい。

【００１９】４流体ノズルを有する噴霧乾燥装置では、
４流体ノズルの構造としては、気体流路と液体流路とを
１系統として、これを２系統ノズルエッジにおいて対称
に設けたもので、ノズルエッジに流体流動面となる斜面
を構成している。また、ノズルエッジの先端の衝突焦点
に向かって、両サイドから圧縮気体と液体を一点に集合
させる外部混合方式の装置がよい。この方式であれば、
ノズル詰まりがなく長時間噴霧することが可能となる。

【００２０】４流路ノズルを有する噴霧乾燥装置につい
て図１を用いてさらに詳しく説明する。４流路ノズルの
ノズルエッジにおいて、液体流路３または４から湧き出
るように出た菌体液が、気体流路１または２から出た高
速気体流により流体流動面５で薄く引き伸ばされ、引き
伸ばされた液体はノズルエッジ先端の衝突焦点６で発生
する衝撃波で微粒化させることにより、シングルミクロ
ンの噴霧液滴７を形成する。

【００２１】圧縮気体としては、例えば、空気、炭酸ガ
ス、窒素ガスまたはアルゴンガス等の不活性ガス等を用
いることができる。とくに、酸化されやすいもの等を噴
霧乾燥させる場合は、炭酸ガス、窒素ガスまたはアルゴ
ンガス等の不活性ガスを用いるのが好ましい。圧縮気体
の圧力としては、約１〜１５ｋｇ重／ｃｍ^２程度、好ま
しくは約３〜８ｋｇ重／ｃｍ^２程度である。ノズルにお
ける気体量は、ノズルエッジ１ｍｍあたり、約１〜１０
０Ｌ／分程度、好ましくは約１０〜２０Ｌ／分程度であ
る。

【００２２】その後、乾燥室において、その噴霧液滴に
乾燥温風を接触させることで水分を蒸発させ菌体乾燥物
を得る。乾燥室の入り口温度は、約２〜４００℃程度、
好ましくは約５〜２５０℃程度、より好ましくは約５〜
１５０℃程度である。入り口温度が約２００〜４００℃
程度の高温であっても、水分の蒸発による気化熱により
乾燥室内の温度はそれほど高くならず、また、乾燥室内
の滞留時間を短くすることにより、生菌の死滅や損傷を
ある程度抑えることができる。出口温度は、約０〜１２
０℃程度、好ましくは約５〜９０℃程度、より好ましく
は約５〜７０℃程度である。

【００２３】４流路ノズルを有する噴霧乾燥装置では、
液体流路が２流路あるので、異なった２種の菌体液また
は菌体液と他の溶液もしくは懸濁液をそれぞれの液体流
路から、同時に噴霧することにより、これらが混合され
た菌体乾燥物を製造できる。例えば、異なった２種類の
菌体の菌体液を同時に噴霧することにより、該２種の菌
体を含有する菌体乾燥物が得られる。

【００２４】上記のように菌体乾燥物の粒径を小さくす
ることにより、生菌率が上がり、生菌率の多い歯周病の
予防または治療剤を提供できるという利点がある。すな
わち、シングルミクロンの菌体乾燥物を得るためにはシ
ングルミクロンの噴霧液滴を噴霧するのが好ましい。噴
霧液滴の粒径を小さくすると、噴霧液滴の単位重量あた
りの表面積が大きくなるので、乾燥温風との接触が効率
よく行われ、乾燥温風の熱による菌体の死滅または損傷
を極力抑えることができる。その結果として、生菌率が
上がり生菌数の多い菌体乾燥物が得られる。

【００２５】本発明において、シングルミクロンの菌体
乾燥物を含む製剤中の生菌数は、製剤全体の重量に対し
て、１０^６〜１０^１２ＣＦＵ／ｇ程度、好ましくは約
１．０×１０^１１〜２．０×１０^１２ＣＦＵ／ｇ程度で
ある。ここで、製剤中の生菌数の測定は菌体によって異
なるが、例えば日本薬局方外医薬品規格に記載のされた
それぞれの菌体の定量方法により容易に測定できる。

【００２６】本発明の予防または治療剤は上記成分を混
合することにより容易に製造される。本発明にかかる歯
周病の予防または治療剤、口臭予防剤または虫歯予防剤
は、どのような形態をとっていてもよい。例えば、錠
剤、散剤、顆粒剤、ペースト剤、丸剤、チュアブル剤、
含嗽剤、トローチ剤もしくはパッチ剤、またはヨーグル
ト等が挙げられる。歯周病の予防または治療剤として、
中でも、錠剤、散剤、顆粒剤、ペースト剤、チュアブル
剤、含嗽剤、トローチ剤またはパッチ剤が好ましく用い
られる。

【００２７】本発明にかかる歯周病の予防または治療
剤、口臭予防剤または虫歯予防剤は、上述したように錠
剤、散剤、顆粒剤、ペースト剤、丸剤、チュアブル剤、
含嗽剤、トローチ剤またはパッチ剤等の薬剤の形態に加
工されてもよい。かかる薬剤の加工方法は、公知の製剤
方法に従ってよい。例えば、錠剤を製造する場合は、公
知の打錠機を用いるとよい。該打錠機としては、例えば
単発式打錠機またはロータリー型打錠機等が挙げられ
る。また、賦形剤（例えば、乳糖、デンプン、結晶セル
ロースもしくはリン酸ナトリウム等）、結合剤（例え
ば、デンプン、ゼラチン、カルメロースナトリウム、メ
チルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロー
ス、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリ
ドン等）、崩壊剤（例えばデンプン、カルメロースナト
リウム等）、滑沢剤（例えばタルク、ステアリン酸マグ
ネシウム、ステアリン酸カルシウム、マクロゴール、シ
ョ糖脂肪酸エステル等）等、当業界で使用される公知の
添加剤等を含有していてもよい。

【００２８】また、例えば、散剤または顆粒剤の製造方
法としては、公知の方法に従ってよく、例えば上記菌体
乾燥物をそのまま使用してもよい。さらに、例えばペー
スト剤は、公知の方法に従って製造されてよく、例えば
上記菌体乾燥物と該菌体が資化しうる糖類のほかに、唾
液を考慮して疎水性軟膏基剤（ワセリンまたはプラスチ
ベースなど）に粘着性物質（カルボキシメチルセルロー
スナトリウムまたはポリアクリル酸ナトリウムなど）を
加えて製造される。

【００２９】また、本発明にかかる歯周病の予防または
治療剤、口臭予防剤または虫歯予防剤は、丸剤、チュア
ブル剤またはトローチ剤であってもよく、これら２つの
薬剤の製造方法は、公知の方法に従って行われてよく、
例えば錠剤を製造するのと同じ手段で作ることができ
る。

【００３０】本発明にかかる歯周病の予防または治療
剤、口臭予防剤または虫歯予防剤は、含嗽剤であっても
よく、該薬剤の製造方法は、公知の方法に従って行われ
てよい。例えば、本発明にかかるビフィズス菌等の善玉
菌と、善玉菌を資化しうる糖類とを溶剤、例えばアクリ
ノールやオキシドール等に溶解することによって製造で
きる。

【００３１】さらに、本発明にかかる歯周病の予防また
は治療剤、口臭予防剤または虫歯予防剤は、パッチ剤で
あってもよい。該パッチ剤は、公知の方法に従って製造
されてよく、例えば上記ペースト剤を、口腔内に粘着す
ることができる物質に貼り付ける、または混合して、口
腔内の患部に貼り付けられるようにすることが好まし
い。

【００３２】本発明の歯周病原因菌の駆除方法は、ビフ
ィズス菌、乳酸菌または酪酸菌とこれら菌が資化しうる
糖類とを歯周病原因菌に接触させることを特長とする。
このような要件を満たしていれば、どのような態様によ
って行われてもよい。かかる駆除方法の１つとして、本
発明にかかる歯周病の予防または治療剤を、歯みがきに
使用する方法が挙げられる。

【００３３】上述の歯磨きは、以下に示すような方法で
行うことが好ましい。第一段階は、一般に市販されてい
る通常の歯みがき粉と歯ブラシを使って、歯周部分を清
浄にする。

【００３４】第二段階は、以下のように行われる。歯ブ
ラシに、本発明にかかる歯周病の予防または治療剤をつ
ける。このとき、歯周病の予防または治療剤は、粉末で
あることが好ましく、該歯周病の予防または治療剤が顆
粒剤または散剤である場合は、そのまま使用してもよい
し、すり鉢等ですり微粉末にしてから使用してもよい。
また錠剤または丸剤を使用するときは、すり鉢または乳
鉢、またはミキサー等ですりつぶして粉末状にして使用
するのがよい。かかる場合、例えばまず錠剤を突きつい
たうえで、粉末にするとよい。さらに、ペースト剤やヨ
ーグルトを使用してもよく、かかる場合は、そのまま使
用するのが好ましい。

【００３５】歯ブラシにつける本発明にかかる歯周病の
予防または治療剤の量は、小さじ１杯程度を歯ブラシに
つけることが好ましい。本発明の歯周病の予防または治
療剤をつけた歯ブラシを、歯軸に対して、約４５〜５０
°程度の角度に傾け、歯茎を中心に小刻みに歯ブラシを
動かすバス法で磨くとよいが、特にブラッシング方法は
限定されない。また歯茎は、上の歯も下の歯も全部丁寧
に磨くとより好ましい。本発明の歯周病の予防または治
療剤で歯を磨き終わったら、口をすすがずに、該乳酸菌
歯磨き粉を飲み込むことが好ましい。口をすすぐと、歯
と歯茎の間の溝に接種された乳酸菌が洗い流されて、効
果が弱まるおそれがある。このようにして、外部から本
発明にかかる有用菌を供給することで、ごく短時間で口
の中で、善玉菌であるビフィズス菌、乳酸菌または酪酸
菌が優位になり、悪玉菌である歯周病菌、虫歯または口
臭原因菌が駆逐される。

【００３６】上記した本発明の好ましい一態様である歯
みがきを行う回数は、特に限定されず、各人の歯周病の
症状によって異なるため、一概にはいえない。好ましい
例としては、具体的に例えば、治療開始当日は、朝起床
時、朝食後、昼食後、夕食後、就寝時の計５回、本発明
にかかる乳酸菌歯磨きを行うことが好ましい。乳酸菌歯
磨きを行って、何らかの改善または効果が現れた場合
は、上記例にあげた５回から、徐々に歯みがきの回数を
減らしていってもかまわない。また、７日間実施して
も、効果が見られない場合は、他の乳酸菌を含む製品
で、同様に７日間試してみてもよい。

【００３７】本発明にかかる歯周病原因菌の駆除方法の
他の好ましい態様としては、本発明にかかる歯周病の予
防または治療剤を患部に貼付してもよい。この場合好適
に使用されるのは、上記したペースト剤およびパッチ剤
であるが、錠剤や散剤を粉末状にし、水等を加えて練り
合わせたものでもよい。かかる場合、患部に集中的に薬
剤が届くため、効果が高まる可能性がある。

【００３８】さらに、歯みがき等ができない場合は、例
えば上記したトローチ剤やチュアブル剤等を口に含み、
口中でかみくだく、なめる、または溶かす等の手段によ
って、歯周病の予防または治療を行ってもよい。かかる
方法によっても、歯みがきしたのと同様の効果が得られ
る。また、別の態様としては、例えば含嗽剤を使用し
て、うがいをする方法が挙げられる。かかる方法によっ
ても、歯みがきを行ったのと同様の効果が得られるとと
もに、短時間で行えるという利点を有する。

【００３９】本発明にかかる口臭予防剤を使用した口臭
予防方法は、上記した歯みがきを行う方法、口中でかみ
くだく、なめる、またはうがいする方法等が挙げられ
る。これにより口臭原因菌を駆除でき、口臭が緩和され
る。

【００４０】本発明にかかる虫歯予防剤を使用した虫歯
予防方法は、上記した歯みがきを行う方法、口中でかみ
くだく、なめる、またはうがいする方法等が挙げられ
る。これによりミュータンス菌の増殖を抑制する、また
は非水溶性グルカンの生成を抑制する効果があり、虫歯
予防の効果が期待される。

【００４１】

【実施例】以下に実施例をあげて、本発明を詳細に説明
する。しかし、本発明がこれに限定されないことはいう
までもない。

【００４２】〔実施例１〕ＧＡＭ液体培地（日水製薬
製）に歯周病菌であるPorphyromonas gingivalis（以
下、ＰＧ菌と略す）（培養開始時の菌数；約１×１０^８
ＣＦＵ／ｍＬ）および３種類の乳酸菌（Streptococcus
faecalis 129BIO3B, Lactobacillus acidophilus KS13,
Bifidobacterium bifidum G9-1；以下、それぞれ３
Ｂ、ＬＡ、ＢＳと略す）をそれぞれ約５×１０^６ＣＦＵ
／ｍＬとなるように混合接種し、３７℃で２４時間嫌気
培養した。コントロールとして、ＰＧ菌のみを同様の培
地に接種し、上記と同様の条件で培養した。それぞれに
ついて、各時間におけるＰＧ菌数を測定した結果、乳酸
菌を混合培養することにより、ＰＧ菌の増殖が抑制され
ることがわかった。結果を図２に示した。

【００４３】〔実施例２〕ＧＡＭ液体培地（日水製薬
製）に最終濃度１重量％となるようにグルコースを添加
した。この培地にＰＧ菌（培養開始時の菌数；約１×１
０^８ＣＦＵ／ｍＬ）と３種類の乳酸菌（３Ｂ、ＬＡおよ
びＢＳ菌、培養開始時における各菌数；約５×１０^６Ｃ
ＦＵ／ｍＬ）を混合接種したもの、ＰＧ菌と３Ｂ菌を混
合接種したもの、ＰＧ菌とＬＡ菌を混合接種したもの、
ＰＧ菌とＢＳ菌を混合接種したものを用意した。さらに
コントロールとしてＰＧ菌のみを接種したものも用意
し、これらについて３７℃で嫌気培養し、各時間におけ
るＰＧ菌数を測定した。その結果、３ＢおよびＬＡ菌を
混合培養した系では、１２時間以内で、ＢＳ菌を混合培
養した系では、２４時間以内で、ＰＧ菌に対して、増殖
を抑制するだけでなく、殺菌的な作用を発揮することが
確認された。さらに、３種乳酸菌を併用した系では、各
菌単独の系と比較して、殺菌作用が高いことも確認され
た。また、結果を図３に示した。

【００４４】〔実施例３〕ＧＡＭ培地（日水製薬製）
に、グルコース、乳糖およびショ糖をそれぞれ０．３重
量％添加した培地３種類に、歯周病菌であるＰＧ菌（培
養開始時の菌数；約１×１０^８ＣＦＵ／ｍＬ）と３種類
の乳酸菌（培養開始時の各菌数；３Ｂ；約１×１０^７Ｃ
ＦＵ／ｍＬ、ＬＡ；約５×１０^６ＣＦＵ／ｍＬ、ＢＳ；
約５×１０^６ＣＦＵ／ｍＬ）を混合接種して３７℃で嫌
気培養し、各時間におけるＰＧ菌数を測定した。コント
ロールとして上記の培地に歯周病菌であるＰＧ菌のみを
接種して同様に培養した。その結果、グルコース、乳糖
およびショ糖のいずれの糖を添加した場合でも、培養開
始から１２時間後にＰＧ菌の数は、検出限界以下とな
り、歯周病菌が乳酸菌によって駆除されるなかで、糖が
有用な役割を果たしていることが確認された。また、糖
の違いによる顕著な効果の差は認められなかった。結果
を図４に示した。

【００４５】〔実施例４〕ＧＡＭ液体培地（日水製薬
製）に最終濃度１重量％となるようにグルコースを添加
した。この培地にＰＧ菌（培養開始時の菌数；約１×１
０^８ＣＦＵ／ｍＬ）と３種類の乳酸菌（３Ｂ、ＬＡおよ
びＢＳ菌、培養開始時の各菌数；約５×１０ ^６ＣＦＵ／
ｍＬ）を混合接種したものと、コントロールとしてＰＧ
菌のみを接種したものについて３７℃で嫌気培養した。
培養開始から１２時間および２４時間後に培養液を回収
し、その培養上清を酵素溶液として以下に記載する酵素
活性測定に用いた。なお酵素活性測定法は、文献(J.Bio
chem.,123,305-312(1998)およびOral.Microbiol.Immuno
l.,2,77-81(1987))を参考にした。（ＲＧＰ酵素活性測定法）緩衝液（０．１Ｍトリス−塩
酸（ｐＨ８．０）／１５ｍＭＬ−システイン塩酸塩／
１．５ｍＭ塩化カルシウム）０．９ｍＬに０．５ｍＬ
の基質溶液（１ｍｇ／ｍＬＢＡＰＮＡ）、および０．
１ｍＬの酵素溶液を添加して、３７℃で１５分間インキ
ュベートした。０．５ｍＬの２０％酢酸を添加して反応
を停止させ、４０５ｎｍの吸光度を測定し、生成したｐ
−ニトロアニリンの量（基準物質ｐ−ニトロアニリンで
検量線を作成し、生成量を算出）から酵素量を算出し
た。（ＫＧＰ酵素活性測定法）緩衝液（２０ｍＭリン酸ナト
リウムバッファー（ｐＨ７．５）／５ｍＭＬ−システ
イン）０．８ｍＬに、０．１ｍＬの基質溶液（１００μ
Ｍ Boc-Val-Leu-Lys-MCA）および酵素溶液（培養上清
を緩衝液で１０倍に希釈した液）０．１ｍＬを添加し、
４０℃で１０分間インキュベートした。１ｍＬのヨード
アセトアミド（ｐＨ５．０）を添加して反応を停止さ
せ、４６０ｎｍの吸光度を測定（３８０ｎｍで励起）
し、生成したＡＭＣの量（基準物質ＡＭＣで検量線を作
成し、生成量を算出）から酵素量を算出した。これらの
酵素活性測定の結果、乳酸菌を培養した場合にＰＧ菌か
らの酵素の分泌を著しく抑えていることがわかった。結
果を図５および６に示した。

【００４６】〔実施例５〕ＧＡＭ液体培地（日水製薬
製）に、グルコースを最終濃度１重量％となるように添
加した培地と、この培地にさらにアスコルビン酸を０．
５重量％添加した培地、合計２種類の培地を調製し、そ
れぞれの培地について、コントロールとしてＰＧ菌（培
養開始時の菌数；約１×１０^８ＣＦＵ／ｍＬ）のみを接
種したもの、およびＰＧ菌と３種乳酸菌（３Ｂ、ＬＡ、
ＢＳの培養開始時の各菌数；約５×１０^６ＣＦＵ／ｍ
Ｌ）を混合接種したものを、３７℃で嫌気培養し、各時
間におけるＰＧ菌数を測定した。その結果、アスコルビ
ン酸のみでも、ＰＧ菌に対して若干の殺菌的効果がみら
れたが、アスコルビン酸と３種乳酸菌を併用することに
よって、ＰＧ菌に対してより短時間で作用を示すことが
確認できた。結果を、図７に示した。

【００４７】〔実施例６〕ＧＡＭ液体培地（日水製薬
製）に、グルコースを最終濃度１重量％になるように添
加し、これにミュータンス菌（培養開始時の菌数；約８
×１０^５ＣＦＵ／ｍＬ）と３種乳酸菌（３Ｂ、ＬＡ、Ｂ
Ｓの培養開始時の各菌数；約５×１０^５ＣＦＵ／ｍＬ）
を混合接種したものと、コントロールとしてミュータン
ス菌のみを接種したものについて、３７℃で静置培養
し、各時間におけるミュータンス菌数を測定した。その
結果、乳酸菌を混合することによって、ミュータンス菌
の増殖を抑制する効果があることがわかった。結果を図
８に示す。

【００４８】〔実施例７〕糖を含まないトリプティック
ソイブロス培地（Ｄｉｆｃｏ製）に最終濃度２重量％と
なるようにショ糖を添加し、これにミュータンス菌（培
養開始時の菌数；約８×１０^５ＣＦＵ／ｍＬ）と３種乳
酸菌（３Ｂ、ＬＡ、ＢＳの培養開始時の各菌数；約５×
１０^５ＣＦＵ／ｍＬ）を混合接種したものと、コントロ
ールとしてミュータンス菌のみを接種したものについ
て、３７℃で２４時間静置培養した。培養液を遠心分離
し、沈渣を洗浄後、０．５Ｍの水酸化ナトリウム水溶液
で非水溶性グルカンを抽出した。定量法として、Anal.C
hem.,28, 350-356(1956)に記載のフェノール硫酸法を採
用し、グルコース換算量として表したものを非水溶性グ
ルカン量とした。その結果、３種乳酸菌を添加した場合
では、非水溶性グルカンの生成量が大幅に抑制されてい
ることがわかった。結果を図９に示す。

【００４９】〔実施例８〕被験者Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄの計４
人に歯みがき後、沈降炭酸カルシウム；１５重量％、乳
糖；２０重量％、アスコルビン酸；１重量％、コーンス
ターチ３０重量％、および３種乳酸菌（３Ｂ、ＬＡ、Ｂ
Ｓ乾燥菌体の等量混合物）；３重量％を用い、常法に従
って製造した錠剤３錠を口に含み、口内で転がすか噛み
砕いて服用させた。これを１日３回、２週間継続して行
った。服用期間の前後で歯科ドック検査を実施し、プラ
ーク量、口臭およびミュータンス菌数の各項目について
測定した。その結果、プラーク量については全体的に低
下する傾向にあり、口臭については、試験前に高い数値
を示した被験者に対して効果が見られた。さらにミュー
タンス菌数についても、試験前に高い数値を示した被験
者に対して効果が見られた。結果を表１に示した。

【００５０】

【表１】

【００５１】〔実施例９〕一日当たり２回の通常の歯み
がき習慣を有する年齢６０歳の男性が、右下奥歯の歯茎
が腫れ、食事時に堅いものを噛むと圧痛を覚えたので、
夕食後、通常の歯みがきの後、実施例８に記載の錠剤１
錠をかみくだき、歯みがきして、水による口すすぎをせ
ず、かみくだいた錠剤を飲み下した。３日後には歯茎の
腫れがひき、圧痛が消失した。

【００５２】

【発明の効果】本発明によれば、誰にでも簡単に実施で
き、かつ安価である歯周病の予防または治療剤、口臭予
防剤または虫歯予防剤を提供することができる。これら
の製剤は有用であるから、本発明は食品産業や医薬産業
に貢献できる。

【図面の簡単な説明】

【図１】４流路ノズルを有する噴霧乾燥装置におけるノ
ズルエッジ部分の内部構造を示す。

【図２】ＰＧ菌の増殖に対する乳酸菌の効果を示す。

【図３】ＰＧ菌の増殖に対する各種乳酸菌および３種乳
酸菌の効果を示す。

【図４】乳酸菌のＰＧ菌抑制効果に対する種々の糖の効
果を示す。（ａ）はグルコースを添加した場合の効果、
（ｂ）は乳糖を添加した場合の効果、（ｃ）はショ糖を
添加した場合の効果を示す。

【図５】ＲＧＰ酵素活性に対する３種乳酸菌の効果を示
す。

【図６】ＫＧＰ酵素活性に対する３種乳酸菌の効果を示
す。

【図７】３種乳酸菌のＰＧ菌抑制効果に対するアスコル
ビン酸の作用を示す。

【図８】ミュータンス菌に対する３種乳酸菌の効果を示
す。

【図９】非水溶性グルカンの生成に対する３種乳酸菌の
効果を示す。

【符号の説明】１、２圧縮気体が供給される気体流路３、４被乾燥体を含む液体が供給される液体流路５流体流動面６衝突焦点７噴霧液滴

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 9/16 Ａ６１Ｋ 9/16 9/20 9/20 9/70 ４０１ 9/70 ４０１ 47/26 47/26 47/42 47/42 Ａ６１Ｐ 1/02 Ａ６１Ｐ 1/02 (72)発明者松村瑛子兵庫県芦屋市朝日ヶ丘町15−10−839 (72)発明者今井龍弥愛知県名古屋市中区平和１−５−25 Ｆターム(参考） 4C076 AA12 AA16 AA30 AA31 AA36 AA72 BB22 BB23 CC09 DD67 EE30 4C083 AA031 AA032 AB322 AC131 AD201 AD202 AD221 AD242 AD642 CC41 DD12 DD15 DD16 DD17 DD22 DD23 EE32 EE33 EE34 4C087 BC56 BC57 BC60 CA09 MA16 MA28 MA32 MA35 MA41 MA43 MA57 NA14 ZA67

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌に属
する菌と、これらの菌が資化しうる糖類を含有すること
を特徴とする歯周病の予防または治療剤。
【請求項２】糖類が、乳糖、ブドウ糖、ショ糖、トレ
ハロース、エリスリトール、マルチトール、キシリトー
ルまたはオリゴ糖であることを特徴とする請求項１に記
載の歯周病の予防または治療剤。
【請求項３】さらに炭酸カルシウムまたは／およびア
スコルビン酸を含有することを特徴とする請求項１また
は２に記載の歯周病の予防または治療剤。
【請求項４】菌がシングルミクロンの菌体乾燥物であ
ることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の歯
周病の予防または治療剤。
【請求項５】生菌数が、製剤全体に対して、１０^６〜
１０^１２ＣＦＵ／ｇであることを特徴とする請求項１〜
４のいずれかに記載の歯周病の予防または治療剤。
【請求項６】ビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌に属
する菌と、これらの菌が資化しうる糖類を含有すること
を特徴とする歯周病原因菌のプロテアーゼ産生抑制また
は活性抑制剤。
【請求項７】ビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌に属
する菌と、これらの菌が資化しうる糖類を含有すること
を特徴とする口臭予防剤。
【請求項８】ビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌に属
する菌と、これらの菌が資化しうる糖類を含有すること
を特徴とする虫歯予防剤。
【請求項９】ミュータンス菌の増殖を抑制する、また
は非水溶性グルカンの生成を抑制することを特徴とする
請求項８に記載の虫歯予防剤。
【請求項１０】剤型が、錠剤、散剤、顆粒剤、ペース
ト剤、丸剤、チュアブル剤、含嗽剤、トローチ剤または
パッチ剤であることを特徴とする請求項１〜９のいずれ
かに記載の予防または治療剤。
【請求項１１】かんだり、なめたりまたはうがいして
服用することを特徴とする請求項１〜１０に記載の予防
または治療剤。
【請求項１２】ビフィズス菌、乳酸菌または酪酸菌と
これら菌が資化しうる糖類とを歯周病原因菌に接触させ
ることを特徴とする歯周病原因菌の駆除方法。