WO2016194692A1 - 抗う蝕剤及び抗う蝕用組成物 - Google Patents

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WO2016194692A1
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cariogenic
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periodontal disease
bifidobacteria
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正樹 寺原
高橋　毅
伊藤　裕之
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株式会社明治
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    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Definitions

  • the present invention relates to an anti-cariogenic agent and an anti-cariogenic composition containing bifidobacteria.
  • Caries are caused by caries-causing bacteria living in the oral cavity, such as Streptococcus mutans, by ingesting cariogenic carbohydrates such as sucrose, fructose, and glucose contained in food and drink.
  • the acid that is produced develops by dissolving the enamel and dentin on the tooth surface.
  • tooth surface enamel and dentin are hydroxyapatite and fluoroapatite. These substances are decomposed by the action of acid produced by the above caries-causing bacteria, and phosphate ions and calcium ions are eluted. (Decalcification).
  • Patent Document 1 mentions palatinit as a non-cariogenic oligosaccharide that is not assimilated by mutans bacteria.
  • Patent Document 2 discloses one or more sugar alcohols selected from xylitol, mannitol, galactitol, and inositol, and describes that they have anti-cariogenic activity.
  • an object of the present invention is to provide a new anti-cariogenic agent having no side effect so that an anti-cariogenic effect can be obtained even in humans who are highly sensitive to oligosaccharides and sugar alcohols.
  • Another object of the present invention is to provide a periodontal disease preventive agent or a periodontal disease therapeutic agent that has a preventive or therapeutic effect on periodontal disease and has no side effects.
  • Bifidobacterium (Bifidobacteria) as a candidate for a new anti-cariogenic agent.
  • Bifidobacterium has so far improved diarrhea, constipation, prevention and treatment of opportunistic bacteria and pathogenic microorganisms, inhibition of the growth of harmful bacteria in the intestines, production of B vitamins, digestion and absorption by lactose degradation From the promotion, it was known that it is a useful bacterium in the gut both nutritionally and bacteriologically.
  • bifidobacteria have an action on the host intestinal tract immune system and an allergy improving action.
  • bifidobacteria have an anti-cariogenic effect alone, and have reached the present invention.
  • the present inventors have also found that bifidobacteria alone has a preventive or therapeutic effect on periodontal disease.
  • the present invention is as follows. 1. Anti-caries agent containing bifidobacteria. 2. 2. The anti-cariogenic agent according to 1 above, wherein the Bifidobacterium is Bifidobacterium bifidum. 3. 3. The anti-cariogenic agent according to 1 or 2, wherein the Bifidobacterium is Bifidobacterium bifidum OLB6378 strain (Bifidobacterium bifidum OLB6378, accession number: NITE BP-31). 4). 4. The anti-cariogenic agent according to any one of 1 to 3, wherein the bifidobacteria are heat-treated cells. 5. 5. 5.
  • An anti-cariogenic composition comprising the anti-cariogenic agent according to any one of 1 to 5 above. 7). Furthermore, the composition for anti-caries of said 6 containing a dispersing agent. 8). 8. The anti-cariogenic composition according to 7 above, wherein the dispersant is dextrin. 9.
  • An oral preparation comprising the anti-cariogenic composition described in 10 above.
  • 12 11.
  • a package comprising the anti-cariogenic composition according to any one of 6 to 10 and a packaging material, wherein the anti-cariogenic composition is packaged in the packaging material.
  • 13 Periodontal disease preventive agent or periodontal disease therapeutic agent containing bifidobacteria.
  • Heat-treated Bifidobacterium bifidum OLB6378 strain (Bifidobacterium bifidum OLB6378, accession number: NITE BP-31).
  • the present invention it is possible to provide a new anti-cariogenic agent or anti-cariogenic composition having no side effects, including bifidobacteria, by finding that it has an anti-cariogenic effect on bifidobacteria.
  • bifidobacteria have a preventive or therapeutic effect on periodontal disease
  • a new periodontal disease preventive agent or periodontal disease therapeutic agent having no side effects, or a composition for preventing periodontal disease, including bifidobacteria Or a composition for treating periodontal disease can be provided.
  • the present invention relates to an anti-cariogenic agent or anti-cariogenic composition containing bifidobacteria. Moreover, this invention relates to the periodontal disease preventive agent or periodontal disease therapeutic agent containing Bifidobacterium, or the composition for periodontal disease prevention, or the composition for periodontal disease treatment.
  • the anti-cariogenic agent, periodontal disease preventive agent and periodontal disease therapeutic agent are collectively referred to as “the agent of the present invention”.
  • the composition for preventing disease and the composition for treating periodontal disease are collectively referred to as “the composition of the present invention”.
  • the bifidobacteria used in the present invention is a bacterium belonging to the genus Bifidobacterium, and there is no restriction on the type or origin thereof. Specifically, for example, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum (Bifidobacterium longum), Bifidobacterium breve (B. breve), Bifidobacterium adrecentis (B Adolescentis), B. infantitis, B. pseudolongum, B. lactis, Bifidobacterium thermos Examples thereof include bifidobacteria such as a film (B. thermophilum).
  • Bifidobacterium bifidum examples include Bifidobacterium bifidum OLB6378 strain (Bifidobacterium bifidum OLB6378, accession number: NITE BP-31).
  • Bifidobacterium longum for example, Bifidobacterium longum No. 7 strains (Bifidobacterium longum No. 7, accession number: FERM BP-11242), Bifidobacterium longum OLB6290 strain (Bifidobacterium longum OLB6290, accession number: NITE P-75) and the like. By using these strains, the agent of the present invention can be provided.
  • the present applicant deposited the Bifidobacterium bifidum OLB6378 strain (Bifidobacterium bifidum OLB6378) under the following conditions.
  • Phone number 0438-20-5580 (3) Accession number: NITE BP-31 (4) Display for identification: Bifidobacterium bifidum OLB6378 (5) Date of original deposit: October 26, 2004 (6) Date of transfer to deposit under the Budapest Treaty: January 18, 2006
  • Bifidobacterium longum OLB6290 strain (Bifidobacterium longum OLB6290) under the following conditions.
  • Phone number 0438-20-5580 (3) Accession number: NITE P-75 (4) Display for identification: Bifidobacterium longum OLB6290 (5) Deposit date: February 3, 2005
  • Bifidobacterium bifidum OLB6378 strain Bifidobacterium longum no. Seven strains and Bifidobacterium longum OLB6290 strain have the following mycological properties.
  • Bifidobacterium bifidum OLB6378 is a Gram-positive obligate anaerobic bacterium derived from human infant feces. When this strain is coated on a BL agar medium (Eiken Chemical Co., Ltd.) and cultured at 37 ° C for 48 hours under anaerobic conditions using AnaeroPack Kenki (Mitsubishi Gas Chemical), it has an opaque circular hemispherical luster. Form a colony.
  • Bifidobacterium bifidum specific primer (intestinal flora symposium 8, molecular ecological detection / identification of intestinal flora, Tomohiro Mitsuoka, Takahiro Matsuki), specifically, a 16S rRNA region species-specific primer, PCR products are observed by PCR using BiBIF-1: CCA CAT GAT CGC ATG TGA TT (SEQ ID NO: 1) and BiBIF-2: CCG AAG GCT TGC TCC CAA A (SEQ ID NO: 2). Moreover, it has fermentability with respect to galactose, glucose, fructose, lactose, and gentiobiose.
  • this bacterium is applied on a plate of BL agar medium (Eiken Chemical Co., Ltd.) and cultured at 37 ° C. for 48 hours by the steel wool method, colonies having an opaque circular hemispherical gloss are formed.
  • Bifidobacterium longum OLB6290 strain is a Gram-positive obligate anaerobic bacterium derived from human infant feces and has no spore formation.
  • PCR was performed with BiLON-1: TTC CAG TTG ATC GCA TGG TC (SEQ ID NO: 3) and BiLON-2: GGG AAG CCG TAT CTC TAC GA (SEQ ID NO: 4), which are species-specific primers of the 16S rRNA region. The PCR product is confirmed.
  • a medium usually used for a bifidobacteria medium can be used. That is, the medium that can be used in the present invention is not particularly limited, and any medium can be used as long as it contains a nitrogen source, an inorganic substance, and other nutrients in a predetermined range in addition to the main carbon source.
  • lactose glucose, sucrose, fructose, starch hydrolyzate, waste molasses, etc.
  • nitrogen source organic nitrogen-containing substances such as casein hydrolyzate, whey protein hydrolyzate, and soy protein hydrolyzate can be used.
  • meat extract, fish extract, yeast extract and the like are used as growth promoters.
  • Cultivation is preferably performed under anaerobic conditions, and a known method such as a method of culturing while aeration of carbon gas can be applied, but microaerobic conditions such as liquid stationary culture that are usually used, or batch It can also be cultured using other techniques such as culture conditions.
  • the culture temperature is preferably 25 to 50 ° C., and particularly preferably 35 to 42 ° C.
  • the present invention is not limited to this, and other temperature conditions may be used as long as the bacteria can grow.
  • the pH of the culture medium during the culture is preferably maintained at 6.0 to 7.0, but may be other pH conditions as long as the bacteria can grow.
  • the culture time is preferably 3 to 48 hours, more preferably 8 to 24 hours, and particularly preferably 10 to 20 hours. However, any other culture time may be used as long as the bacteria can grow.
  • the agent of the present invention anticariogenic agent, periodontal disease preventive agent and periodontal disease therapeutic agent
  • composition anticariogenic composition, periodontal disease preventive composition and periodontal disease therapeutic composition
  • Bifidobacteria is an active ingredient that exhibits the effects of anti-caries, prevention of periodontal disease and treatment of periodontal disease, that is, an active ingredient.
  • the obtained microbial cells can be contained in the agent or composition of the present invention as a Bifidobacterium-treated product subjected to the following treatment.
  • the treated bifidobacteria the culture after completion of the culture, the culture subjected to centrifugation or filtration after the completion of the culture, the concentrate thereof, further processed into a paste, and dried by various methods ( Spray-dried products, freeze-dried products, vacuum-dried products, drum-dried products, etc.), liquids dispersed in media, dilutions with diluents, heat-treated foods (heat-treated cells), ultraviolet rays and / or radiation Treated with light (treated with light irradiation), treated with medicine (bactericidal agent, antibacterial agent, bacteriostatic agent), crushed material obtained by crushing dried product with a mill , Etc. are included.
  • Centrifugation, filtration, concentration, crushing, and the like are performed by commonly used techniques. Drying can be performed by, for example, vacuum drying, spray drying, freeze drying, drum drying, or the like.
  • the medium, diluent, drug (bactericidal agent, antibacterial agent, bacteriostatic agent) and the like can be appropriately selected from conventionally known ones. In the present specification, these may be abbreviated as “processed bifidobacteria” or “processed product”.
  • the treated product containing the microbial cells of the present invention is not limited to living microbial cells, but is also treated by heat treatment (for example, from a suspension (dispersion) solution of heat-treated bifidobacteria).
  • the bifidobacteria and / or processed product obtained by the above method is used as it is as a live or heat-treated bacterium, and then as a crushed or unground product, as a single product or as a mixture of a plurality of types. It can be contained in the agent.
  • Live bacteria can be expected to grow in the body (intestines) after ingestion.
  • 0.1 ml is sampled from the heat-treated cells (for example, suspension (dispersion) of the heat-treated bifidobacteria), and this is smeared on a petri dish containing a medium in which bifidobacteria can grow, and is subjected to anaerobic conditions. If the colony of the bifidobacteria is not formed even if it is cultured, it is not necessary to consider the characteristics of the bifidobacteria that it is difficult to survive in the presence of oxygen. This is preferable because it expands.
  • the bifidobacteria are particularly preferably heat-treated cells that have been heat-treated to form dead cells. It is presumed that the heat treatment of bifidobacteria changes the cell structure of bifidobacteria, making it easier to expose substances that cause anti-caries, periodontal disease prevention and periodontal disease treatment effects. .
  • the heating temperature is usually 60 to 300 ° C., preferably 60 ° C. to 200 ° C., more preferably 60 to 150 ° C., further preferably 60 to 140 ° C., further preferably 60 to 130 ° C. More preferably, it is 60 to 120 ° C., more preferably 60 to 110 ° C., further preferably 60 to 100 ° C., more preferably 70 to 100 ° C., further preferably 80 to 100 ° C., and particularly preferably 85 to 95 ° C.
  • the temperature of the heat treatment is 60 ° C. or higher because viable bacteria of Bifidobacteria are sterilized.
  • the heat treatment is performed at 300 ° C. or lower because the bifidobacteria remain without being carbonized.
  • the heat treatment time is usually 0.01 to 120 minutes, preferably 0.015 to 60 minutes, more preferably 0.02 to 40 minutes, still more preferably 0.025 to 30 minutes, still more preferably 0.00. It is 03 to 25 minutes, particularly preferably 0.03 to 20 minutes.
  • the heat treatment time it is preferable to set the heat treatment time to 0.01 minutes or more, since the vegetative cells of Bifidobacterium are sterilized. In addition, it is preferable that the heat treatment time is 120 minutes or less because heat denaturation can be suppressed and vegetative cells can be sterilized efficiently.
  • the optimum heat treatment time is, for example, 0.2 to 120 minutes, preferably 0.2 to 60 minutes, more preferably 0.2 to 40 minutes in the heat treatment at a low temperature range (60 to 100 ° C.). More preferably, it can be 0.2 to 30 minutes, more preferably 0.2 to 25 minutes, and particularly preferably 0.2 to 20 minutes.
  • the heat treatment at a high temperature range for example, 0.01 to 0.5 minutes, preferably 0.015 to 0.5 minutes, more preferably It is 0.02 to 0.5 minutes, more preferably 0.025 to 0.5 minutes, and particularly preferably 0.03 to 0.5 minutes.
  • the heat treatment of bifidobacteria is preferably performed at 90 ° C. for 15 minutes.
  • the heat treatment method is not particularly limited.
  • the obtained microbial cells can be heated under predetermined conditions using a heat sterilizer such as a plate sterilizer, a tubular sterilizer, a direct heating sterilizer, a jacketed tank, or the like.
  • the amount of Bifidobacteria to be ingested is, for example, preferably 10 8 or more per day, 10 8 to 10 12 , 5 in order of preference.
  • ⁇ 10 8 to 5 ⁇ 10 11 units, 10 9 to 10 11 units, 5 ⁇ 10 9 to 5 ⁇ 10 10 units, 6 ⁇ 10 9 to 4 ⁇ 10 10 units, 7 ⁇ 10 9 to 3 ⁇ 10 10 units is there. More preferably, it is 8 ⁇ 10 9 to 2 ⁇ 10 10 , and even more preferably 9 ⁇ 10 9 to 2 ⁇ 10 10 .
  • the agent of the present invention is an ingredient having an effect of anti-caries, periodontal disease prevention and periodontal disease treatment, that is, an active ingredient. As long as it has been found and the effect can be exhibited, there is no limitation on the purpose of use.
  • the agent of the present invention since the agent of the present invention has few side effects, it can be taken continuously.
  • the ingestion period of the bifidobacteria of the present invention is, for example, 2 to 10 weeks, 2 to 8 weeks, 3 to 7 weeks. 5 to 6.5 weeks, 4 to 6 weeks. Preferably, it is 3.5 to 6.5 weeks, more preferably 4 to 6 weeks.
  • an anti-cariogenic effect, a periodontal disease preventive effect, and a periodontal disease therapeutic effect are easily and actually exhibited.
  • the agent of the present invention can be used alone, or mixed with other ingredients to be used as an anticaries composition, a periodontal disease-preventing composition or a periodontal disease-treating composition. You can also.
  • the compounding amount of the agent of the present invention in the composition can be arbitrarily determined according to its purpose, application, form, dosage form, symptom, body weight and the like.
  • the content of the agent of the present invention is 0.01 to 99% (w / w), preferably 0.1 to 90% (w / w) based on the total amount of the composition. ), More preferably 0.1 to 50% (w / w). It is because it becomes easy to ingest (administer) by being in the said range.
  • the agent or composition of the present invention can be administered either orally or parenterally (intramuscular, subcutaneous, intravenous, suppository, transdermal, etc.).
  • the agent or composition of the present invention can be ingested by adults, but may be infants or elderly people.
  • the agent or composition of the present invention can be administered without being affected by such sensitivity, even for humans who are highly sensitive to oligosaccharides or sugar alcohols.
  • the agent or composition of the present invention improves diarrhea, improves constipation, prevents and treats opportunistic bacteria and pathogenic microorganisms, suppresses the growth of harmful bacteria in the intestine, produces vitamin B group, decomposes lactose
  • it also has anti-cariogenic effect, periodontal disease prevention effect and periodontal disease treatment effect.
  • the composition of the present invention can be used in the form of any medicine or food or drink.
  • a pharmaceutical product or when taken directly as a special-purpose food or nutritional food such as food for specified health use, an anti-cariogenic effect, a periodontal disease-preventing effect, and a periodontal disease-treating effect may be exhibited.
  • special-purpose foods and nutritional foods include prepared milk powder, liquid foods, foods for the sick, foods such as infant milk powder, foods such as infant milk powder, supplements, and nutrition-enriched foods.
  • examples of the form include oral administration by preparations such as tablets, coated tablets, capsules, granules, powders, solutions, syrups, and emulsions. These various preparations are applied to the cells and / or processed products of the present invention which are the main agents in accordance with conventional methods, and include dispersants, excipients, binders, disintegrants, lubricants, coloring agents, flavoring agents, and solubilizing aids.
  • Can be made into an oral preparation containing an anti-cariogenic pharmaceutical composition by formulating with known adjuvants that can be usually used in the pharmaceutical formulation technical field such as pharmaceuticals, suspensions, and coating agents. .
  • oral preparations containing these pharmaceutical compositions contain the agent of the present invention to improve diarrhea, constipation, prevention and treatment of opportunistic bacteria and pathogenic microorganisms, and harmful intestinal Suppresses bacterial growth, promotes production of vitamin B group, promotes digestion and absorption by lactose decomposition, improves host intestinal immunity system, improves allergy, and at the same time has anti-carious effect, teeth Because it has a periodontal disease prevention effect and a periodontal disease treatment effect, it is an effective preparation for various diseases such as diarrhea, constipation, opportunistic bacteria and pathogenic microorganism infections, and diseases caused by proliferation of harmful bacteria in the intestines, It is an effective preparation for caries and periodontal diseases.
  • the agent of the present invention is preferably used as a composition mixed with a dispersant.
  • the dispersant include milk protein such as casein, soy protein, peptide, amino acid, starch, dextrin, xylan, oligosaccharide, saccharide (glucose, lactose, sucrose, galactose, maltose), sugar alcohol (trehalose, xylitol, erythritol, Palatinose, trehalulose, xylose) and the like.
  • dextrin is particularly preferable. This is because by using dextrin as a dispersing agent, the powder can be granulated, handling such as dispersion and dissolution is easy, and long-term storage is possible.
  • the shape of the dispersant, particularly dextrin is preferably a granule. This is because the granule is not only highly soluble but also has high filling performance, and can be packaged in a small amount. Moreover, it is because it has the manufacturing advantage of enabling accurate packaging with no variation in mass distribution simply by dropping and packaging the packaging material.
  • the mass ratio of the agent of the present invention to the dispersant is preferably 1: 100 to 1: 2, more preferably 1: 100 to 1:10, and still more preferably 1: 100. ⁇ 1: 20. It is because the agent of the present invention can be efficiently dispersed by setting the mass ratio of the agent of the present invention to the dispersant within the above range.
  • the composition of the present invention containing the agent of the present invention and a dispersant (particularly dextrin) is orally administered
  • the composition of the present invention is subdivided into predetermined amounts and packaged in a packaging material.
  • Can then be administered That is, the composition can be administered after a predetermined amount of the composition of the present invention and a packaging material, and the composition is packaged in a package.
  • agent and composition of the present invention are added to an anti-cariogenic food composition having no side effects, various foods and beverages (milk, soft drinks, fermented milk, yogurt, cheese, bread, biscuits, crackers, pizza crust, preparation Powdered milk, liquid food, food for the sick, food such as infant milk powder, food such as milk powder for nursing women, nutritional food, etc.)
  • the agent and composition of the present invention can be used as they are, or can be used according to a conventional method for ordinary food compositions such as mixing with other foods or food ingredients.
  • the properties may be in the state of foods and drinks that are usually used, for example, solid (powder, granule, etc.), paste, liquid or suspension.
  • solid (powder, granule, etc.) paste, liquid or suspension.
  • agent and composition of the present invention may be used as a composition in which water, protein, carbohydrates, lipids, vitamins, minerals, organic acids, organic bases, fruit juices, flavors and the like are mixed without causing side effects. it can.
  • proteins include whole milk powder, skim milk powder, partially skimmed milk powder, casein, whey powder, whey protein, whey protein concentrate, whey protein isolate, ⁇ -casein, ⁇ -casein, ⁇ -casein, ⁇ -lactoglobulin , ⁇ -lactalbumin, lactoferrin, soy protein, chicken egg protein, meat protein and other animal and plant proteins, hydrolysates thereof; butter, milk minerals, cream, whey, non-protein nitrogen, sialic acid, phospholipid, lactose, etc. And various milk-derived components. Proteins without side effects and various milk-derived components that have been used as pharmaceuticals and foods and drinks are all applicable. Moreover, these components can be used in combination of 2 or more types.
  • saccharide examples include saccharides, processed starch (in addition to dextrin, soluble starch, British starch, oxidized starch, starch ester, starch ether, etc.), dietary fiber, and the like.
  • lipid examples include animal oils such as lard, fish oil, etc., fractionated oils, hydrogenated oil, transesterified oil, etc .; palm oil, safflower oil, corn oil, rapeseed oil, coconut oil, fractionated oils thereof, Examples include vegetable oils such as hydrogenated oils and transesterified oils.
  • vitamins examples include vitamin A, carotene, vitamin B group, vitamin C, vitamin D group, vitamin E, vitamin K group, vitamin P, vitamin Q, niacin, nicotinic acid, pantothenic acid, biotin, inositol, choline. And folic acid.
  • minerals include calcium, potassium, magnesium, sodium, copper, iron, manganese, zinc, selenium and the like.
  • organic acid examples include malic acid, citric acid, lactic acid, and tartaric acid. All drugs that have been used as pharmaceuticals and foods and have no side effects are applicable. Moreover, these components can be used in combination of 2 or more types.
  • the production method can be performed by methods well known to those skilled in the art. If it is an expert, the process which mixes the bifidobacteria or processed material of this invention with another component, a shaping
  • the agent of the present invention can be applied to health functional foods and sick foods.
  • the health functional food system was established not only for regular foods but also for foods in the form of tablets, capsules, etc., based on domestic and foreign trends and consistency with the conventional food system for specified health use. It consists of two types of food for specified health use (individual permission type) and functional food for nutrition (standard type). It is expected to exert an anti-cariogenic effect when taken directly as a special-purpose food such as a food for specified health use or a nutritional functional food containing the agent or composition of the present invention.
  • Example 1 (Preparation of bifidobacteria) Bifidobacterium bifidum OLB 6378 (accession number: NITE BP-31) was cultured overnight at 37 ° C. in an anaerobic EG medium prepared with the composition shown in Table 1.
  • Example 2 (Preparation of the agent of the present invention) a) Preparation of freeze-dried powder of OLB6378 strain subjected to heat treatment: Raw material obtained by adjusting 180 g of the original bacterial powder (live cell count, 3.9 ⁇ 10 11 cfu / g) of OLB6378 strain obtained in Example 1 to 45 ° C. Suspended completely in 2800 ml of water with stirring. Then, it heated with stirring, hold
  • Test Example 1 In Test Example 1, the group of subjects who took the agent of Example 2 was referred to as “the agent-taking group of the present invention”, and the group of subjects who took the placebo of Comparative Example 1 was referred to as the “placebo-taking group”. A group of 30 subjects was selected for both groups according to the criteria for selecting and excluding subjects to be described later. Of these, 15 were taken as the group taking the agent of the present invention and 15 were taken as the placebo. Both groups took the agent of Example 2 or the placebo of Comparative Example 1 twice a day. The intake period is 5 weeks. Both groups were evaluated according to the evaluation items described later.
  • Exclusion criteria for subjects corresponded to at least one of the following a) to j). a) A person who was determined to have caries (C3 or higher) or severe periodontal disease at the time of screening test b) suffers from diabetes, chronic kidney disease, gastrointestinal disorder, lung disease, malignant tumor, etc.
  • the number of mutans and streptococci in the saliva was measured by a culture method.
  • the caries bacteria ratio was calculated respectively.
  • the caries bacteria ratio was calculated on the intake start date, 4 weeks and 5 weeks after the start of intake.
  • the number of streptococci is on Mitis-Salivarius agar medium (MS medium)
  • the number of mutans is on an agar medium (MSB medium) obtained by adding Bacitracin (SIGMA) to Mitis-Salivarius agar medium.
  • SIGMA Bacitracin
  • Gingivitis index is an index as to whether or not the agent of the present invention has a periodontal disease preventive effect and a periodontal disease treatment effect. J., Acta Odontologica Scandinavica 1963 21: 533-51). Specifically, a total of 24 tooth surfaces on the lingual side, lip side / cheek side, mesial side, and distal side of six teeth at predetermined locations were visually confirmed and measured by the following evaluation criteria and evaluation method.
  • the six teeth at the predetermined locations are the maxillary right first molar, maxillary left central incisor, maxillary left first premolar, mandibular left first premolar, mandibular right central incisor, mandibular right first premolar. Of 6 teeth.
  • plaque index is an index as to whether or not the agent of the present invention has a periodontal disease preventive effect and a periodontal disease treatment effect, and is described in Non-Patent Document 2 (Comparative cleaning of manual and power brushing. Quigley H). , Hein JN., J Am Dent Ass 1962 65:26). Specifically, a total of 24 tooth surfaces on the lingual side, lip side / cheek side, mesial side, and distal side of six teeth at predetermined locations were visually confirmed and measured by the following evaluation criteria and evaluation method.
  • the six teeth at the predetermined locations are the maxillary right first molar, maxillary left central incisor, maxillary left first premolar, mandibular left first premolar, mandibular right central incisor, mandibular right first premolar. Of 6 teeth.
  • plaque index (total plaque evaluation of each tooth) / (number of teeth to be examined)
  • Gingivitis index In the group taking the agent of the present invention, the average gingivitis index on the day of ingestion was 0.13, whereas the average gingivitis index after 5 weeks was significantly reduced to 0.04. On the other hand, in the placebo ingestion group, the average gingivitis index on the day of ingestion was 0.21, whereas the average gingivitis index after 5 weeks was not significantly decreased to 0.505.
  • statistical analysis compare between both groups is a Wilcoxon rank sum test, comparison between each group before and after the intake period is a Wilcoxon signed rank test. As a result, the p value on the screening day was 0.378, and the p value after 5 weeks was 0.065.
  • the agent of the present invention since the significant reduction in the caries ratio was observed only in the group taking the present invention and not in the placebo group, the agent of the present invention has an anti-cariogenic effect. I understood. In addition, since the significant decrease in the gingivitis index and the prevention of the deterioration of the plaque index were observed only in the group taking the agent of the present invention and not in the group taking the placebo, the agent of the present invention was effective in preventing periodontal disease and It was found to have a therapeutic effect on peri-disease.
  • a new anti-cariogenic agent or anti-cariogenic composition having no side effects including bifidobacteria.
  • a new periodontal disease preventive agent or periodontal disease therapeutic agent containing bifidobacteria or a composition for periodontal disease prevention or a composition for periodontal disease treatment that has no side effects.
  • Bifidobacteria can reduce the caries ratio in the oral cavity, and as a result, can prevent and treat caries.
  • bifidobacteria can reduce the symptom of gingivitis and can reduce the adhesion of plaque to the teeth. As a result, periodontal disease can be prevented and treated.

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Abstract

本発明は、オリゴ糖や糖アルコールの感受性が強いヒトであっても、抗う蝕効果が得られるよう、副作用のない新しい抗う蝕剤を提供する。また、歯周病の予防効果又は治療効果が得られ、かつ副作用のない歯周病予防剤又は歯周病治療剤を提供する。本発明は、ビフィズス菌を含む抗う蝕剤及び抗う蝕組成物、ビフィズス菌を含む歯周病予防剤及び組成物、ビフィズス菌を含む歯周病治療剤及び組成物に関する。

Description

抗う蝕剤及び抗う蝕用組成物
　本発明は、ビフィズス菌を含む抗う蝕剤及び抗う蝕用組成物に関する。
　う蝕は、ストレプトコッカス・ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｍｕｔａｎｓ）などの口腔内に棲息するう蝕原因菌が、飲食物に含まれるう蝕性糖質、例えば、ショ糖、果糖、ブドウ糖などを摂取することにより産生する酸が、歯牙表面のエナメル質、象牙質を溶解することによって発症する。
　歯牙表面のエナメル質、象牙質の主成分はハイドロキシアパタイト、フルオロアパタイトであって、これらの物質は上記のう蝕原因菌の産生する酸の作用によって分解し、リン酸イオンやカルシウムイオンが溶出する（脱灰）。
　一方、口腔中の唾液中のカルシウムイオン及びリン酸イオンがエナメル表層下に取り込まれ、脱灰していた部分が再び結晶化する（再石灰化）。
　口腔中では食事の度に脱灰と再石灰化が繰り返し行なわれており、通常は平衡状態にあるが、このバランスが壊れた時にう蝕になる。
　う蝕を予防するための手段として、抗う蝕作用を有するオリゴ糖や糖アルコール等の利用が知られている。特許文献１には、ミュータンス菌により資化されない非う蝕のオリゴ糖として、パラチニットが挙げられている。特許文献２には、キシリトール、マンニトール、ガラクチトール及びイノシトールから選ばれる１種又は２種以上の糖アルコールが開示されており、それらが抗う蝕能を有していることが記載されている。
日本国特開２０００－２８１５５０号公報 日本国特開平１１－１２１４３号公報
　しかしながら、上記オリゴ糖や糖アルコールは、ヒトの個体差により腸内での感受性から下痢や脱水症状などを起こす傾向があり、このようなヒトに対してはオリゴ糖や糖アルコールは提供できないという問題点がある。
　従って、本発明の課題は、オリゴ糖や糖アルコールの感受性が強いヒトであっても、抗う蝕効果が得られるよう、副作用のない新しい抗う蝕剤を提供することにある。
　また、歯周病の予防効果又は治療効果が得られ、かつ副作用のない歯周病予防剤又は歯周病治療剤を提供することにある。
　本発明者らは、新しい抗う蝕剤の候補として、ビフィドバクテリウム属細菌（ビフィズス菌）に着目した。ビフィズス菌は、これまで、下痢症の改善、便秘症の改善、日和見菌や病原微生物感染の予防や治療、腸内の有害細菌の増殖抑制、ビタミンＢ群の産生、乳糖の分解による消化吸収の促進などから、栄養学的にも細菌学的にも腸内の有用細菌であることなどが知られていた。また、ビフィズス菌は、これまで、宿主腸管免疫系への作用、アレルギー改善作用を有することなどが知られていた。
　本発明者らは、鋭意検討した結果、ビフィズス菌が単独で抗う蝕効果を有することを見出し、本発明に到達した。また、本発明者らは、ビフィズス菌は単独で歯周病の予防又は治療効果を有することを見出した。
　従って、本発明は以下の通りである。
１．ビフィズス菌を含む抗う蝕剤。
２．前記ビフィズス菌がビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ）である前記１に記載の抗う蝕剤。
３．前記ビフィズス菌がビフィドバクテリウム・ビフィダムＯＬＢ６３７８菌株（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ　ＯＬＢ６３７８、受託番号：ＮＩＴＥ　ＢＰ－３１）である前記１又は２に記載の抗う蝕剤。
４．前記ビフィズス菌が加熱処理された菌体である、前記１～３のいずれか１に記載の抗う蝕剤。
５．一日当たり１０８個以上の菌数の前記ビフィズス菌を４週間以上連続して適用される前記１～４のいずれか１に記載の抗う蝕剤。
６．前記１～５のいずれか１項に記載の抗う蝕剤を含有する抗う蝕用組成物。
７．さらに分散剤を含有する、前記６に記載の抗う蝕用組成物。
８．前記分散剤がデキストリンである、前記７に記載の抗う蝕用組成物。
９．前記抗う蝕用組成物が抗う蝕用食品組成物である前記６～８のいずれか１に記載の抗う蝕用組成物。
１０．前記抗う蝕用組成物が抗う蝕用医薬組成物である前記６～８のいずれか１に記載の抗う蝕用組成物。
１１．前記１０に記載の抗う蝕用組成物を含有する経口用製剤。
１２．前記６～１０のいずれか１に記載の抗う蝕用組成物と包材を含み、該抗う蝕用組成物が包材内に包装される、包装体。
１３．ビフィズス菌を含む歯周病予防剤又は歯周病治療剤。
１４．ビフィズス菌を含む抗う蝕剤、歯周病予防剤又は歯周病治療剤。
１５．加熱処理されたビフィドバクテリウム・ビフィダムＯＬＢ６３７８菌株（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ　ＯＬＢ６３７８、受託番号：ＮＩＴＥ　ＢＰ－３１）。
　本発明によれば、ビフィズス菌に抗う蝕効果を有することを見出したことにより、ビフィズス菌を含む、副作用のない新しい抗う蝕剤又は抗う蝕用組成物を提供することが可能となる。
　また、ビフィズス菌が歯周病の予防又は治療効果を有することを見出したことにより、ビフィズス菌を含む、副作用のない新しい歯周病予防剤又は歯周病治療剤、又は歯周病予防用組成物もしくは歯周病治療用組成物を提供することが可能となる。
　以下、本発明について詳細に説明する。
　本発明は、ビフィズス菌を含む抗う蝕剤又は抗う蝕用組成物に関する。
　また、本発明は、ビフィズス菌を含む歯周病予防剤もしくは歯周病治療剤、又は歯周病予防用組成物もしくは歯周病治療用組成物に関する。
　本明細書においては、特に断りのない限り、上記抗う蝕剤、歯周病予防剤及び歯周病治療剤をまとめて、「本発明の剤」といい、上記抗う蝕用組成物、歯周病予防用組成物及び歯周病治療用組成物をまとめて「本発明の組成物」という。
　＜ビフィズス菌＞
　本発明に使用されるビフィズス菌は、ビフィドバクテリウム属に属する細菌であり、その種類や由来に制限がない。具体的には、例えば、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂ．ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Ｂ．ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・インファンティス（Ｂ．ｉｎｆａｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム（Ｂ．ｐｓｅｕｄｏｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ラクティス（Ｂ．ｌａｃｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・サーモフィルム（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ）等のビフィズス菌が挙げられる。
　具体的には、ビフィドバクテリウム・ビフィダムとしては、例えば、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＯＬＢ６３７８菌株（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ　ＯＬＢ６３７８、受託番号：ＮＩＴＥ　ＢＰ－３１）が挙げられる。ビフィドバクテリウム・ロンガムとしては、例えば、ビフィドバクテリウム・ロンガムＮｏ．７株（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ　Ｎｏ．７、受託番号：ＦＥＲＭ　ＢＰ－１１２４２）、ビフィドバクテリウム・ロンガムＯＬＢ６２９０株（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ　ＯＬＢ６２９０、受託番号：ＮＩＴＥ　Ｐ－７５）等が挙げられる。これらの菌株を使用することにより、本発明の剤を提供することが可能となった。
　本出願人は、これらの菌株を独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センター又は独立行政法人産業技術総合研究所（現：国立研究開発法人産業技術総合研究所）特許生物寄託センターに寄託した。以下に寄託を特定する内容を記載する。
　本出願人は、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＯＬＢ６３７８菌株（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ　ＯＬＢ６３７８）を下記の条件で寄託した。
（１）寄託機関名：独立行政法人製品評価技術基盤機構　特許微生物寄託センター
（２）連絡先：〒２９２－０８１８　千葉県木更津市かずさ鎌足２－５－８（現：千葉県木更津市かずさ鎌足２－５－８　１２２号室）
　　　　　　　電話番号０４３８－２０－５５８０
（３）受託番号：ＮＩＴＥ　ＢＰ－３１
（４）識別のための表示：Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ　ＯＬＢ６３７８
（５）原寄託日：２００４年１０月２６日
（６）ブダペスト条約に基づく寄託への移管日：２００６年１月１８日
　本出願人は、ビフィドバクテリウム・ロンガムＮｏ．７菌株（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ　Ｎｏ．７）を下記の条件で寄託した。
（１）寄託機関名：独立行政法人産業技術総合研究所（現：国立研究開発法人産業技術総合研究所）　特許生物寄託センター
　　（現寄託機関名：独立行政法人製品評価技術基盤機構　特許生物寄託センター）
（２）連絡先：〒３０５－８５６６　茨城県つくば市東１－１－１　中央第６
　　　　　　　電話番号０２９－８６１－６０２９
　　（現連絡先：〒２９２－０８１８　千葉県木更津市かずさ鎌足２－５－８　１２０号室
　　　　　　　電話番号０４３８－２０－５９１０）

（３）受託番号：ＦＥＲＭ　ＢＰ－１１２４２
（４）識別のための表示：Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ　Ｎｏ．７
（５）原寄託日：平成５年４月２０日
（６）ブダペスト条約に基づく寄託への移管日：２０１０年３月２日
　本出願人は、ビフィドバクテリウム・ロンガムＯＬＢ６２９０菌株（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ　ＯＬＢ６２９０）を下記の条件で寄託した。
（１）寄託機関名：独立行政法人製品評価技術基盤機構　特許微生物寄託センター
（２）連絡先：〒２９２－０８１８　千葉県木更津市かずさ鎌足２－５－８（現：千葉県木更津市かずさ鎌足２－５－８　１２２号室）
　　　　　　　電話番号０４３８－２０－５５８０
（３）受託番号：ＮＩＴＥ　Ｐ－７５
（４）識別のための表示：Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ　ＯＬＢ６２９０
（５）寄託日：平成１７年２月３日
　ビフィドバクテリウム・ビフィダムＯＬＢ６３７８菌株、ビフィドバクテリウム・ロンガムＮｏ．７菌株、及びビフィドバクテリウム・ロンガムＯＬＢ６２９０菌株は以下の菌学的性質を有するものである。
　ビフィドバクテリウム・ビフィダムＯＬＢ６３７８株は、ヒト乳幼児糞便由来のグラム陽性偏性嫌気性桿菌である。ＢＬ寒天培地（栄研化学株式会社）平板上に本菌を塗布し、ＡｎａｅｒｏＰａｃｋ・ケンキ（三菱ガス化学製）使用による嫌気状態にて３７℃４８時間培養すると、不透明な円形半球状の光沢を有するコロニーを形成する。
　また、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍの特異的プライマー（腸内フローラシンポジウム８、腸内フローラの分子生態学的検出・同定、光岡知足、松木隆広）、具体的には、１６Ｓ　ｒＲＮＡ領域の種特異的プライマーである、ＢｉＢＩＦ－１：ＣＣＡ　ＣＡＴ　ＧＡＴ　ＣＧＣ　ＡＴＧ　ＴＧＡ　ＴＴ（配列番号１）、及びＢｉＢＩＦ－２：ＣＣＧ　ＡＡＧ　ＧＣＴ　ＴＧＣ　ＴＣＣ　ＣＡＡ　Ａ（配列番号２）を用いたＰＣＲでＰＣＲ産物が認められる。また、ガラクトース、グルコース、フルクトース、ラクトース、ゲンチオビオースに対する発酵性を有する。
　ビフィドバクテリウム・ロンガムＮｏ．７菌株は、ヒト成人糞便由来のグラム陽性偏性嫌気性菌であり、菌形状は桿菌又は分岐状の多形であり、芽胞の形成、運動性はない。ＢＬ寒天培地（栄研化学株式会社）平板上で本菌を塗布し、スチールウール法にて３７℃４８時間培養すると、不透明な円形半球状の光沢を有するコロニーを形成する。アラビノース、キシロース、リボース、グルコース、フラクトース、ガラクトース、シュークロース、マルトース、ラクトース、メリビオース、ラフィノース、メレチトースに対する発酵性を有する。
　ビフィドバクテリウム・ロンガムＯＬＢ６２９０菌株は、ヒト乳幼児糞便由来のグラム陽性偏性嫌気性桿菌であり、芽胞の形成はない。１６Ｓ　ｒＲＮＡ領域の種特異的プライマーである、ＢｉＬＯＮ－１：ＴＴＣ　ＣＡＧ　ＴＴＧ　ＡＴＣ　ＧＣＡ　ＴＧＧ　ＴＣ（配列番号３）及びＢｉＬＯＮ－２：ＧＧＧ　ＡＡＧ　ＣＣＧ　ＴＡＴ　ＣＴＣ　ＴＡＣ　ＧＡ（配列番号４）にてＰＣＲを行い、ＰＣＲ産物を確認している。アラビノース、キシロース、リボース、グルコース、マンノース、フラクトース、ガラクトース、シュークロース、マルトース、ラクトース、メリビオース、ラフィノース、メレチトースに対する発酵性を有する。
　本発明の菌株を培養するための培地としてはビフィズス菌の培地に通常用いられる培地を用いることができる。すなわち本発明に利用できる培地は特に限定されず、主炭素源のほか窒素源、無機物その他の栄養素を所定範囲の量で含有する培地であれば、いずれの培地も使用可能である。
　炭素源としてはラクトース、グルコース、スクロース、フラクトース、澱粉加水分解物、廃糖蜜などが使用菌の資化性に応じて使用できる。窒素源としてはカゼインの加水分解物、ホエイタンパク質加水分解物、大豆タンパク質加水分解物等の有機窒素含有物が使用できる。ほかに増殖促進剤として肉エキス、魚肉エキス、酵母エキス等が用いられる。
　培養は嫌気条件下で行うことが好ましく、炭素ガスを通気しながら培養する方法などの公知の手法を適用することができるが、通常用いられる液体静置培養などによる微好気条件や、あるいはバッチ培養条件下など他の手法を用いて培養することもできる。培養温度は２５～５０℃、特に３５～４２℃が好ましいが、本発明はこれに限定されず、菌が生育できる温度であれば他の温度条件でもよい。
　培養中の培地のｐＨは、６．０～７．０に維持することが好ましいが、菌が生育することができるｐＨであれば他のｐＨ条件であってもよい。培養時間は好ましくは３～４８時間、さらに好ましくは８～２４時間、特に好ましくは１０～２０時間であるが、菌が生育することができる時間であれば他の培養時間であってもよい。
　本発明の剤（抗う蝕剤、歯周病予防剤及び歯周病治療剤）又は組成物（抗う蝕用組成物、歯周病予防用組成物及び歯周病治療用組成物）はビフィズス菌を含有するものであり、ビフィズス菌は抗う蝕、歯周病の予防及び歯周病の治療の効果を奏する成分、すなわち有効成分であることを見出した。
　得られた菌体は、以下のような処理を行ったビフィズス菌処理物として本発明の剤又は組成物に含有させることができる。ビフィズス菌処理物としては、培養終了後のままの培養物、培養終了後に遠心分離又は濾別等を行った培養物、それらの濃縮物、さらにペースト状に加工したもの、各種方法による乾燥物（噴霧乾燥物、凍結乾燥物、真空乾燥物、ドラム乾燥物など）、媒体に分散させた液状物、希釈剤による希釈物、加熱処理した加熱処理物（加熱処理菌体）、紫外線及び／又は放射線により処理した光照射処理物（光照射処理菌体）、薬剤（殺菌剤、抗菌剤、静菌剤）により処理した薬剤処理物（薬剤処理菌体）、乾燥物をミルなどで破砕した破砕物、などが含まれる。
　遠心分離、濾別、濃縮、破砕等は、通常用いられている手法で行う。また、乾燥は、例えば真空乾燥、噴霧乾燥、凍結乾燥、ドラム乾燥等により行うことができる。また、上記媒体、希釈剤、薬剤（殺菌剤、抗菌剤、静菌剤）等は、従来公知のものを適宜選択して用いることができる。
　本明細書ではこれらを、「ビフィズス菌処理物」又は「処理物」と略記することがある。
　本発明においては、実施例において後述するように、ビフィズス菌に対し、例えば、９０℃で１５分間加熱処理を行って不活性化した菌体でも抗う蝕効果、歯周病予防効果及び歯周病治療効果があることが分かった。従って、本発明の菌体を含む処理物は、その中の菌体が生菌体のみならず、加熱処理した菌体（例えば、加熱処理済みのビフィズス菌の懸濁（分散）液より０．１ｍｌサンプリングし、これをビフィズス菌の生育できる培地を含むシャーレに塗沫し、嫌気条件下で培養してもビフィズス菌の集落（コロニー）が形成されない形態のもの）であっても有用である。
　上記の方法で得られたビフィズス菌及び／又はその処理物は、そのまま、生菌、又は加熱処理菌とした後、破砕あるいは未粉砕した処理物として、単独又は複数種の混合物として、本発明の剤に含有させることができる。
　生菌であれば、摂取後に体内（腸内）で増殖する等の効果が期待できる。また、加熱処理した菌体（例えば、加熱処理済みのビフィズス菌の懸濁（分散）液より０．１ｍｌサンプリングし、これをビフィズス菌の生育できる培地を含むシャーレに塗沫し、嫌気条件下で培養してもビフィズス菌の集落（コロニー）が形成されない形態のもの）であれば、酸素の存在下で生存しづらいというビフィズス菌の特性を考慮する必要がなく、本発明の剤として応用範囲が拡がるため、好ましい。
　なかでもビフィズス菌は、加熱処理し、死菌体とした加熱処理菌体であることが特に好ましい。ビフィズス菌を加熱処理することによって、ビフィズス菌の細胞の構造等が変化し、抗う蝕効果、歯周病予防効果及び歯周病治療効果の原因となる物質が露出しやすくなることが推認される。
　加熱処理の条件としては、例えば、加熱温度は通常６０～３００℃、好ましくは６０℃～２００℃、より好ましくは６０～１５０℃、さらに好ましくは６０～１４０℃、さらに好ましくは６０～１３０℃、さらに好ましくは６０～１２０℃、さらに好ましくは６０～１１０℃、さらに好ましくは６０～１００℃、さらに好ましくは７０～１００℃、さらに好ましくは８０～１００℃、特に好ましくは８５～９５℃である。
　加熱処理の条件として６０℃以上とすることで、ビフィズス菌の生菌が殺菌されるため、好ましい。また、加熱処理の条件として３００℃以下とすることで、ビフィズス菌が炭化せずに残存するため、好ましい。
　また、加熱処理の時間は、通常０．０１～１２０分間、好ましくは０．０１５～６０分間、より好ましくは０．０２～４０分間、さらに好ましくは０．０２５～３０分間、さらに好ましくは０．０３～２５分間、特に好ましくは０．０３～２０分間である。
　加熱処理の時間を０．０１分間以上とすることで、ビフィズス菌の栄養細胞が殺菌されるため、好ましい。また、加熱処理の時間を１２０分間以下とすることで、熱変性を抑えて栄養細胞の殺菌が効率よく行える点から好ましい。
　最適な加熱処理の時間を、低温域（６０～１００℃）での加熱処理においては、例えば、０．２～１２０分間、好ましくは０．２～６０分間、より好ましくは０．２～４０分間、さらに好ましくは０．２～３０分間、さらに好ましくは０．２～２５分間、特に好ましくは０．２～２０分間とすることができる。
　また、最適な加熱処理の時間を、高温域（１００～３００℃）での加熱処理においては、例えば、０．０１～０．５分間、好ましくは０．０１５～０．５分間、より好ましくは０．０２～０．５分間、さらに好ましくは０．０２５～０．５分間、特に好ましくは０．０３～０．５分間である。
　例えば、ビフィズス菌の加熱処理は、好ましくは９０℃で１５分間の条件で行う。
　加熱処理方法は、特に限定されない。例えば得られた菌体をプレート式殺菌機、チューブラー式殺菌機、直接加熱式殺菌機、ジャケット付きタンク等の加熱殺菌装置を用いて、所定の条件で加熱することができる。
　抗う蝕効果、歯周病予防効果及び歯周病治療効果を発揮するために、ビフィズス菌を摂取すべき量は、例えば、好ましい順に、一日当たり１０８個以上、１０８～１０１２個、５×１０８～５×１０１１個、１０９～１０１１個、５×１０９～５×１０１０個、６×１０９～４×１０１０個、７×１０９～３×１０１０個である。より好ましくは、８×１０９～２×１０１０個、さらに好ましくは９×１０９～２×１０１０個である。
　前記範囲であることによって、容易かつ実際に抗う蝕効果、歯周病予防効果及び歯周病治療効果が奏される。なお、本発明の剤（抗う蝕剤、歯周病予防剤及び歯周病治療剤）は、抗う蝕、歯周病の予防及び歯周病の治療の効果を奏する成分、すなわち有効成分であることを見出しており、その効果を発揮できる形態であれば、その使用目的に制限は無い。
　また、本発明の剤は副作用が少ないため、連続して摂取することができる。抗う蝕効果、歯周病予防効果及び歯周病治療効果を発揮するために、本発明のビフィズス菌の摂取期間は、例えば、２～１０週間、２～８週間、３～７週間、３．５～６．５週間、４～６週間である。好ましくは、３．５～６．５週間、さらに好ましくは４～６週間である。
　ビフィズス菌の摂取期間が前記範囲であることによって、容易かつ実際に、抗う蝕効果、歯周病予防効果及び歯周病治療効果が奏される。特に、一日当たり１０８以上の菌数のビフィズス菌を４週間以上連続して適用することが好ましく、一日当たり１０１０以上の菌数のビフィズス菌を４週間以上連続して適用することがより好ましい。
　本発明の剤は、剤単独での使用が可能であり、また、他の成分と混合して抗う蝕用組成物、歯周病予防用組成物又は歯周病治療用組成物として使用することもできる。本発明の剤の上記組成物への配合量は、その目的、用途、形態、剤型、症状、体重などに応じて任意に定めることができる。
　本発明はこれに限定されないが、本発明の剤の含量としては、組成物全体量に対して、０．０１～９９％（ｗ／ｗ）、好ましくは０．１～９０％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは０．１～５０％（ｗ／ｗ）の含量で配合することができる。前記範囲であることによって摂取（投与）しやすくなるからである。
　本発明の剤又は組成物は、経口投与又は非経口投与（筋肉内、皮下、静脈内、坐薬、経皮等）のいずれでも投与できる。本発明の剤又は組成物を摂取できるのは、成年であってもよいが、乳幼児や老人であっても構わない。また、本発明の剤又は組成物は、オリゴ糖や糖アルコールの感受性が強いヒトであっても、このような感受性に影響されることなく、投与することができる。
　さらに、本発明の剤又は組成物は、下痢症の改善、便秘症の改善、日和見菌や病原微生物感染の予防や治療、腸内の有害細菌の増殖抑制、ビタミンＢ群の産生、乳糖の分解による消化吸収の促進、宿主腸管免疫系の改善、アレルギー改善などの既に知られていた効果を奏しつつ、同時に、抗う蝕効果、歯周病予防効果及び歯周病治療効果も奏する。
　具体的に本発明の組成物は、医薬品又は飲食品いずれの形態でも利用することができる。例えば、医薬品として直接投与することにより、又は特定保健用食品等の特別用途食品や栄養食品として直接摂取することにより、抗う蝕効果、歯周病予防効果及び歯周病治療効果を発揮することが期待される。また、特別用途食品や栄養食品の例として、調製粉乳、流動食、病者用食品、幼児用粉乳等食品、授乳婦用粉乳等食品、サプリメント、栄養強化食品などである。
　本発明の剤を医薬品として使用する場合は、形態としては、例えば錠剤、被覆錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、溶液、シロップ剤、乳液等の製剤による経口投与をあげることができる。これらの各種製剤は、常法に従って主薬である本発明の菌体及び／又は処理物に、分散剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤等の医薬の製剤技術分野において通常使用しうる既知の補助剤を用いて製剤化することによって、抗う蝕用医薬組成物を含有する経口用製剤とすることができる。
　すなわち、これらの医薬組成物を含有する経口用製剤は、本発明の剤を含有することにより、下痢症の改善、便秘症の改善、日和見菌や病原微生物感染の予防や治療、腸内の有害細菌の増殖抑制、ビタミンＢ群の産生、乳糖の分解による消化吸収の促進、宿主腸管免疫系の改善、アレルギー改善の効果などの既に知られていた効果を奏しつつ、同時に、抗う蝕効果、歯周病予防効果及び歯周病治療効果を有するため、下痢症、便秘症、日和見菌や病原微生物感染症、及び腸内の有害細菌の増殖による疾患等の各種疾患に有効な製剤であるとともに、う蝕及び歯周疾患等に有効な製剤である。
　中でも、本発明の剤は分散剤と混合した組成物として使用することが好ましい。分散剤としては、例えばカゼイン等の乳タンパク質、大豆タンパク質、ペプチド、アミノ酸、デンプン、デキストリン、キシラン、オリゴ糖、糖類（グルコース、ラクトース、スクロース、ガラクトース、マルトース）、糖アルコール（トレハロース、キシリトール、エリスリトール、パラチノース、トレハルロース、キシロース）等が挙げられる。分散剤の中でも特にデキストリンが好ましい。分散剤としてデキストリンを用いることによって、粉末を造粒することができ、分散溶解等の取扱いが容易で、かつ、長期保存も可能であるからである。
　分散剤、特にデキストリンの形状は顆粒であることが好ましい。顆粒であることにより、溶解性が高いだけでなく、充填性能が高いため、少量での分包が可能となるからである。また、包装材料に落下させて分包するだけで質量分布にばらつきがなく正確な分包を可能にするという製造上の利点も有するからである。
　本発明の組成物中、本発明の剤と分散剤との質量比は、１：１００～１：２であることが好ましく、より好ましくは１：１００～１：１０、さらに好ましくは１：１００～１：２０である。本発明の剤と分散剤との質量比を前記範囲にすることによって、本発明の剤が効率よく分散できるからである。
　例えば、本発明の剤と分散剤（特にデキストリン）とを含有する、本発明の組成物を経口投与する場合、本発明の組成物を所定量ずつ小分けにして、包材内に包装し包装体としてから、投与することができる。すなわち、所定量の本発明の組成物と包材を含み、当該組成物が包装内に包装される、包装体としてから、投与することができる。本発明において、１回使用量ずつ包装すること、及び複数個で１回使用量となるように包装することが好ましく、１回使用量を包装することが特に好ましい。
　本発明の剤及び組成物を副作用のない抗う蝕用食品組成物に添加する場合には、各種飲食品（牛乳、清涼飲料、発酵乳、ヨーグルト、チーズ、パン、ビスケット、クラッカー、ピッツァクラスト、調製粉乳、流動食、病者用食品、幼児用粉乳等食品、授乳婦用粉乳等食品、栄養食品等）に添加し、これを摂取してもよい。本発明の剤及び組成物をそのまま使用したり、他の食品ないし食品成分と混合したりするなど、通常の食品組成物における常法に従って使用できる。
　また、その性状についても、通常用いられる飲食品の状態、例えば、固体状（粉末、顆粒状その他）、ペースト状、液状ないし懸濁状のいずれでもよい。このような形態をとることで、本発明の剤を心理的な障害を感じることなく摂取することができる。
　また、本発明の剤及び組成物を、副作用のない水、タンパク質、糖質、脂質、ビタミン類、ミネラル類、有機酸、有機塩基、果汁、フレーバー類等を混合した組成物として使用することもできる。
　タンパク質としては、例えば全脂粉乳、脱脂粉乳、部分脱脂粉乳、カゼイン、ホエイ粉、ホエイタンパク質、ホエイタンパク質濃縮物、ホエイタンパク質分離物、α―カゼイン、β―カゼイン、κ－カゼイン、β―ラクトグロブリン、α―ラクトアルブミン、ラクトフェリン、大豆タンパク質、鶏卵タンパク質、肉タンパク質等の動植物性タンパク質、これら加水分解物；バター、乳性ミネラル、クリーム、ホエイ、非タンパク態窒素、シアル酸、リン脂質、乳糖等の各種乳由来成分などが挙げられる。医薬品や飲食品として使用実績のある副作用のないタンパク質や各種乳由来成分は全て適用可能である。また、これらの成分は、２種以上を組み合わせて使用することができる。
　糖質としては、例えば、糖類、加工澱粉（デキストリンのほか、可溶性澱粉、ブリティッシュスターチ、酸化澱粉、澱粉エステル、澱粉エーテル等）、食物繊維などが挙げられる。
　脂質としては、例えば、ラード、魚油等、これらの分別油、水素添加油、エステル交換油等の動物性油脂；パーム油、サフラワー油、コーン油、ナタネ油、ヤシ油、これらの分別油、水素添加油、エステル交換油等の植物性油脂などが挙げられる。
　ビタミン類としては、例えば、ビタミンＡ、カロチン類、ビタミンＢ群、ビタミンＣ、ビタミンＤ群、ビタミンＥ、ビタミンＫ群、ビタミンＰ、ビタミンＱ、ナイアシン、ニコチン酸、パントテン酸、ビオチン、イノシトール、コリン、葉酸などが挙げられる。
　ミネラル類としては、例えば、カルシウム、カリウム、マグネシウム、ナトリウム、銅、鉄、マンガン、亜鉛、セレンなどが挙げられる。
　有機酸としては、例えば、リンゴ酸、クエン酸、乳酸、酒石酸などが挙げられる。医薬品や飲食品として使用実績のある副作用のないものは全て適用可能である。また、これらの成分は、２種以上を組み合わせて使用することができる。
　本発明の剤を食品や薬剤として提供する場合、製造方法は当業者に周知の方法によって行うことができる。当業者であれば、本発明のビフィズス菌又は処理物を他の成分と混合する工程、成形工程、殺菌工程、発酵工程、焼成工程、乾燥工程、冷却工程、造粒工程、包装工程等を適宜組み合わせ、所望の食品や薬剤を製造することが可能である。
　さらに本発明の剤は、保健機能食品や病者用食品にも適用することができる。保健機能食品制度は、内外の動向、従来からの特定保健用食品制度との整合性を踏まえて、通常の食品のみならず錠剤、カプセル等の形状をした食品を対象として設けられたもので、特定保健用食品（個別許可型）と栄養機能食品（規格基準型）の２種類の類型からなる。本発明の剤又は組成物を含有する特定保健用食品等の特別用途食品や栄養機能食品として直接摂取することにより、抗う蝕効果を発揮することが期待される。
［実施例１］（ビフィズス菌の調製）
　Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ　ＯＬＢ　６３７８株（受託番号：ＮＩＴＥ　ＢＰ－３１）を、表１に示す組成で調製した嫌気ＥＧ培地で３７℃にて一夜培養した。
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　培養後に遠心分離により集菌し、培地成分の残りを滅菌水にて洗浄した後に、凍結乾燥をした。ここで得られたものをＯＬＢ６３７８株の原菌末とした。
［実施例２］（本発明の剤の調製）
ａ）加熱処理したＯＬＢ６３７８株の凍結乾燥粉末の調製
　実施例１で得られたＯＬＢ６３７８株の原菌末（生菌数、３．９×１０１１ｃｆｕ／ｇ）１８０ｇを、４５℃に調整した原料水２８００ｍｌに撹拌しながら完全に懸濁させた。その後、撹拌しながら加温して、９０℃１５分間保持し、冷却した。得られた加熱菌体の懸濁液を凍結乾燥し、加熱処理したＯＬＢ６３７８株の凍結乾燥粉末１５６ｇを得た。なお、加熱処理したＯＬＢ６３７８株にはＭＲＳ寒天平板培地上でビフィズス菌の生菌は見られなかった。また、得られたＯＬＢ６３７８株の凍結乾燥粉末１５６ｇ中には、概算して、７．０２×１０１３個の菌数のビフィズス菌が存在する（３．９×１０１１（ｃｆｕ／ｇ）×１８０（ｇ）＝７．０２×１０１３ｃｆｕ）。熱処理された菌体数は、生菌数（ｃｆｕ）に換算して示されている。
ｂ）本発明の剤の調製
　加熱処理したＯＬＢ６３７８株の凍結乾燥粉末１２０ｇと顆粒デキストリン（松谷化学社）２８８０ｇを均一に混合し、各１ｇずつ分包し、本発明の剤とした。この本発明の剤には、概算して、１．８×１０１０個の菌数のビフィズス菌が存在する（７．０２×１０１３（ｃｆｕ）／１５６（ｇ）×１２０／３０００（ｇ）＝１．８×１０１０ｃｆｕ）。熱処理された菌体数は、生菌数（ｃｆｕ）に換算して示されている。
［比較例１］（プラセボの調製）
　実施例２の剤の代わりに、顆粒デキストリン（松谷化学社）３０００ｇを、各１ｇずつ分包し、比較例１のプラセボとした。
［試験例１］
　試験例１では、実施例２の剤を摂取した被験者群を「本発明の剤摂取群」とし、比較例１のプラセボを摂取した被験者群を「プラセボ摂取群」とした。被験者群は、後述する被験者の選択基準及び除外基準に従い、両群あわせて３０名選定した。このうち、本発明の剤摂取群を１５名、プラセボ摂取群を１５名とした。両群はいずれも一日二回、実施例２の剤又は比較例１のプラセボを摂取した。摂取期間は５週間である。両群の評価は、後述する評価項目に従って行った。
＜被験者の選択基準＞
　被験者の選択基準は、以下のＡ）～Ｅ）のすべてに該当するものとした。
Ａ）２０歳以上４０歳以下の女性
Ｂ）通常１日に３回食事を摂取する者
Ｃ）ＦＤＩ歯コード１６（上顎右側第１大臼歯）、２１（上顎左側中切歯）、２４（上顎左側第１小臼歯）、３６（下顎左側第１大臼歯）、４１（下顎右側中切歯）、４４（下顎右側第１小臼歯）の６歯の唇側・頬側面のうち、４歯以上が測定可能な者。前記の６代表歯の代替としてＦＤＩ歯コード１７，１５，１１，２２，２５，３７，３５，３１，４２，４５が存在する者
Ｄ）スクリーニング検査時に、う蝕及び歯周疾患の治療を受けておらず、歯が２０本以上存在する者
Ｅ）試験の目的・内容について十分な説明を受け、同意能力があり、よく理解した上で自発的に参加を志願し、書面で試験参加に同意した者
＜被験者の除外基準＞
　被験者の除外基準は、以下のａ）～ｊ）の少なくとも１に該当するものとした。
ａ）スクリーニング検査時に、う蝕（Ｃ３以上）又は重度の歯周疾患と判断された者
ｂ）糖尿病、慢性腎臓病、胃腸障害、肺疾患、悪性腫瘍等に罹患し、薬剤を服用している者
ｃ）他の医薬品や食品の試験等に現在参加中の者、参加の意志のある者
ｄ）５分間の刺激唾液量が３．０ｍｌ以下の者
ｅ）刺激唾液のｐＨが６．２以下の者
ｆ）可撤性義歯を装着している者
ｇ）スクリーニング検査前１ヶ月以内に、洗口剤、抗生物質、抗菌剤を使用した者、及び歯科を受診した者
ｈ）食物アレルギーを有する者
ｉ）妊娠している者、試験期間中に妊娠の意思がある者、授乳中の者
ｊ）その他、試験責任歯科医師が被験者として不適当と判断した者
＜評価項目＞
１．う蝕菌比率
　う蝕菌比率は、本発明の剤が抗う蝕効果を有するか否かの指標となるもので、唾液中のレンサ球菌に占めるミュータンス菌数の割合を示す。すなわち、う蝕菌比率は以下の式で表される。
　う蝕菌比率＝（ミュータンス菌数／レンサ球菌数）×１００
　本発明の剤摂取群及びプラセボ摂取群それぞれの被験者の刺激唾液（ガムを噛んで出る唾液）を５分間採取した後、培養法にて、唾液中のミュータンス菌数、レンサ球菌数を計測し、上記のう蝕菌比率をそれぞれ算出した。う蝕菌比率の算出は、摂取開始日、摂取開始から４週間後及び５週間後に行った。なお、レンサ球菌数は、Ｍｉｔｉｓ－Ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ寒天培地（ＭＳ培地）上に、及び、ミュータンス菌数は、Ｍｉｔｉｓ－Ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ寒天培地にＢａｃｉｔｒａｃｉｎ（ＳＩＧＭＡ社）を添加した寒天培地（ＭＳＢ培地）上に、それぞれ適宜希釈した唾液を一定量塗沫し、３７℃嫌気条件下で４８時間培養し、コロニーを形成した数を計測して評価した。
２．歯肉炎指数
　歯肉炎指数は、本発明の剤が歯周病予防効果及び歯周病治療効果を有するか否かの指標となるもので、非特許文献１（Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｉｎ　ｐｒｅｇｎａｎｃｙ．　Ｌｅｅ　Ｈ，Ｓｉｌｎｅｓｓ　Ｊ．，Ａｃｔａ　Ｏｄｏｎｔｏｌｏｇｉｃａ　Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉｃａ　１９６３　２１：５３３－５１）に記載の方法に沿って測定を行った。具体的には、所定箇所の６歯の舌側、唇側・頬側、近心側、遠心側の合計２４歯面を目視により確認し、下記の評価基準及び評価方法で測定した。なお、上記所定箇所の６歯とは、上顎右側第１大臼歯、上顎左側中切歯、上顎左側第１小臼歯、下顎左側第１大臼歯、下顎右側中切歯、下顎右側第１小臼歯の６歯を指す。
［評価基準］
０：臨床的に正常な歯肉。
１：軽度の炎症、歯肉のわずかな色調変化があるもので、プローブによる歯肉辺縁内縁部の擦過により出血が認められない。
２：中等度の炎症、歯肉に発赤を伴う浮腫と光沢があり、歯肉辺縁内縁部の擦過により出血が認められる。
３：高度の炎症、著しい発赤、浮腫があり、自然出血、潰瘍形成がある。
［評価方法］
　被験者らの刺激唾液（ガムを噛んで出る唾液）を５分間採取した後、歯科医師による問診と口腔診断を行った記録から、歯肉炎指数を算出した。歯肉炎指数は、下記の式により算出し、スクリーニング日（摂取開始日の１ヶ月前）及び摂取開始から５週間後に行った。
（歯肉炎指数）＝（各歯の歯肉炎評価の合計）／（被検歯面数）
３．プラーク指数
　プラーク指数は、本発明の剤が歯周病予防効果及び歯周病治療効果を有するか否かの指標となるもので、非特許文献２（Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｃｌｅａｎｉｎｇ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｏｆ　ｍａｎｕａｌ　ａｎｄ　ｐｏｗｅｒ　ｂｒｕｓｈｉｎｇ．Ｑｕｉｇｌｅｙ　Ｈ，Ｈｅｉｎ　ＪＮ．，Ｊ　Ａｍ　Ｄｅｎｔ　Ａｓｓ　１９６２　６５：２６）に記載の方法に沿って測定を行った。具体的には、所定箇所の６歯の舌側、唇側・頬側、近心側、遠心側の合計２４歯面を目視により確認し、下記の評価基準及び評価方法で測定した。なお、上記所定箇所の６歯とは、上顎右側第１大臼歯、上顎左側中切歯、上顎左側第１小臼歯、下顎左側第１大臼歯、下顎右側中切歯、下顎右側第１小臼歯の６歯を指す。
［評価基準］
０：プラークの付着が認められない。
１：歯肉縁に沿ってプラークが点状に存在。
２：歯肉縁に沿ってプラークが線状に存在。
３：歯面の歯肉側３分の１以内にプラークが存在。
４：歯面の歯肉側３分の２以内にプラークが存在。
５：歯面の歯肉側３分の２以上にプラークが存在。
［評価方法］
　被験者の刺激唾液（ガムを噛んで出る唾液）を５分間採取した後、歯科医師による問診と口腔診断を行った記録から、プラーク指数を算出した。プラーク指数は、下記の式により算出し、スクリーニング日（摂取開始日の１ヶ月前）及び摂取開始から５週間後に行った。
（プラーク指数）＝（各歯のプラーク評価の合計）／（被検歯面数）
［結果及び考察］
１．う蝕菌比率
　本発明の剤摂取群では、摂取開始日のう蝕菌比率の平均が０．５であったのに対し、４週間後のう蝕菌比率の平均は０．２と有意に低下した。一方、プラセボ摂取群では、摂取開始日のう蝕菌比率の平均が０．２であったのに対し、４週間後のう蝕菌比率の平均は０．２と有意な変化はなかった。
　なお、本発明の剤摂取群とプラセボ摂取群の両群間の比較として、統計解析（両群間の比較はＷｉｌｃｏｘｏｎ順位和検定、各群の摂取期間前後の比較はＷｉｌｃｏｘｏｎ符号付順位検定）を行ったところ、摂取開始日のｐ値は０．２１８、４週間後のｐ値は０．９７３であった。
２．歯肉炎指数
　本発明の剤摂取群では、摂取開始日の歯肉炎指数の平均が０．１３であったのに対し、５週間後の歯肉炎指数の平均は０．０４と有意に低下した。一方、プラセボ摂取群では、摂取開始日の歯肉炎指数の平均が０．２１であったのに対し、５週間後の歯肉炎指数の平均は０．５０５と有意な低下は見られなかった。
　なお、本発明の剤摂取群とプラセボ摂取群の両群間の比較として、統計解析（両群間の比較はＷｉｌｃｏｘｏｎ順位和検定、各群の摂取期間前後の比較はＷｉｌｃｏｘｏｎ符号付順位検定）を行ったところ、スクリーニング日のｐ値は０．３７８であり、５週間後のｐ値は０．０６５であった。
３．プラーク指数
　本発明の剤摂取群では、摂取開始日のプラーク指数の平均が０．１７であったのに対し、５週間後のプラーク指数の平均は０．１７と有意な上昇は見られなかった。一方、プラセボ摂取群では、摂取開始日のプラーク指数の平均が０．１７であったのに対し、５週間後のプラーク指数の平均は０．３３と有意な高い値となった。
　なお、本発明の剤摂取群とプラセボ摂取群の両群間の比較として、統計解析（両群間の比較はＷｉｌｃｏｘｏｎ順位和検定、各群の摂取期間前後の比較はＷｉｌｃｏｘｏｎ符号付順位検定）を行ったところ、スクリーニング日のｐ値は０．８４９であり、５週間後のｐ値は０．０４３であった。
　以上の結果では、う蝕菌比率の有意な低下が、本発明の剤摂取群のみで認められプラセボ摂取群では認められなかったことから、本発明の剤は抗う蝕効果を有していることが分かった。
　また、歯肉炎指数の有意な低下とプラーク指数の悪化防止が、本発明の剤摂取群のみで認められプラセボ摂取群では認められなかったことから、本発明の剤は歯周病予防効果及び歯周病治療効果を有していることが分かった。
　本発明を特定の態様を用いて詳細に説明したが、本発明の意図と範囲を離れることなく様々な変更及び変形が可能であることは、当業者にとって明らかである。なお本出願は、２０１５年５月２９日付で出願された日本特許出願（特願２０１５－１１０７４３）に基づいており、その全体が引用により援用される。
　本発明により、ビフィズス菌を含む、副作用のない新しい抗う蝕剤又は抗う蝕用組成物を提供することが可能となる。また、ビフィズス菌を含む、副作用のない新しい歯周病予防剤又は歯周病治療剤、又は歯周病予防用組成物もしくは歯周病治療用組成物を提供することが可能となる。ビフィズス菌は口腔内におけるう蝕菌比率を低下させることができ、その結果、う蝕を予防、治療することができる。また、ビフィズス菌は、歯肉炎の症状を軽減し、また歯へのプラークの付着を軽減でき、その結果、歯周病を予防、治療することができる。

Claims (12)

  1. 　ビフィズス菌を含む抗う蝕剤。
  2. 　前記ビフィズス菌がビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ）である請求項１に記載の抗う蝕剤。
  3. 　前記ビフィズス菌がビフィドバクテリウム・ビフィダムＯＬＢ６３７８菌株（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ　ＯＬＢ６３７８、受託番号：ＮＩＴＥ　ＢＰ－３１）である請求項１又は２に記載の抗う蝕剤。
  4. 　前記ビフィズス菌が加熱処理された菌体である、請求項１～３のいずれか１項に記載の抗う蝕剤。
  5. 　一日当たり１０８個以上の菌数の前記ビフィズス菌を４週間以上連続して適用される請求項１～４のいずれか１項に記載の抗う蝕剤。
  6. 　請求項１～５のいずれか１項に記載の抗う蝕剤を含有する抗う蝕用組成物。
  7. 　さらに分散剤を含有する、請求項６に記載の抗う蝕用組成物。
  8. 　前記分散剤がデキストリンである、請求項７に記載の抗う蝕用組成物。
  9. 　請求項６～８のいずれか１項に記載の抗う蝕用組成物と包材を含み、該抗う蝕用組成物が包材内に包装される、包装体。
  10. 　ビフィズス菌を含む歯周病予防剤又は歯周病治療剤。
  11. 　ビフィズス菌を含む抗う蝕剤、歯周病予防剤又は歯周病治療剤。
  12. 　加熱処理されたビフィドバクテリウム・ビフィダムＯＬＢ６３７８菌株（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｉｆｉｄｕｍ　ＯＬＢ６３７８、受託番号：ＮＩＴＥ　ＢＰ－３１）。
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