JP2001503736A - 疾病の治療のためのインドリノンのコンビナトリアルライブラリーおよび関連する生成物および方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、プロテインキナーゼの情報伝達を調整、調節、および／または阻害する有機分子に関する。そのような化合物は、癌、アテローム性動脈硬化症、関節炎、および再狭窄のような細胞増殖性疾患、および糖尿病のような代謝性疾患を含む、プロテインキナーゼの情報伝達が調節されないことに関する疾病の治療に有用である。本発明は、プロテインキナーゼを阻害する可能性のあるインドリノン化合物および関連する生成物と方法を特徴とする。ＦＬＫプロテインキナーゼに特異的な阻害剤は、３−［（インドール−３−イル）メチレン］−２−インドリノンの、特にインドール環の１’位に、化学置換基を添加することによって得ることができる。ＦＬＫおよび血小板由来増殖因子プロテインキナーゼを特異的に阻害するインドリノン化合物は、テトラヒドロインドールまたはシクロペンタノ−ｂ−ピロール部分を擁することができる。特にオキシインドール環の５位が、置換基で修飾されたインドリノン化合物はプロテインキナーゼの活性化に効果的である。また本発明は、チロシンキナーゼ阻害剤である新規の水溶性インドリノン化合物および関連する生成物と方法を特徴とする。

Description

【発明の詳細な説明】 疾病の治療のためのインドリノンのコンビナトリアルライブラリー および関連する生成物および方法 緒言 本発明は、プロテインキナーゼの情報伝達を調整、調節、および／または阻害 する新規の化合物に関する。本発明はまた、細胞増殖性疾患および代謝異常を含 む、プロテインキナーゼの情報伝達が調節されないことに関する疾病の予防およ び／または治療のための、レセプターまたは非レセプター型のプロテインキナー ゼの調節、調整、または阻害の方法にも関する。発明の背景 本発明の理解を促すために、以下に発明の背景について記載するが、これは本 発明であること、または本発明より以前の技術を記載することを認めるものでは ない。 プロテインキナーゼおよびプロテインホスファターゼは、情報伝達経路に関与 することにより、代謝、細胞増殖、細胞分化、および細胞生存を含む種々の細胞 過程を調節する。プロテインキナーゼまたはプロテインホスファターゼの細胞機 能の変化は、生体において種々の疾病状態を引き起こしうる。例えば、多くの型 の癌腫瘍は特定のプロテインキナーゼの活性の上昇に関係する。また、細胞およ び組織の変性は、特定のプロテインキナーゼの活性の低下に関連しうる。 細胞の情報伝達は、細胞外の刺激を細胞内に中継する基本機構である。情報伝 達の基本的な生化学的機構の一つに、タンパク質の可逆的なリン酸化がある。ア ミノ酸のリン酸化により、それらの構造および機能が変化することによって、成 熟タンパク質の活性が調節される。 リン酸は、タンパク質中のアミノ酸、セリン、スレオニン、またはチロシンの 水酸基に、最も高頻度で存在する。細胞作用因子のリン酸化に介在する酵素は２ 種類に分けられる。プロテインホスファターゼはリン酸化されたタンパク質基質 からリン酸部分を加水分解し、プロテインキナーゼはアデノシン三リン酸からタ ンパク質基質ヘリン酸部分を転移する。逆の機能を持つプロテインキナーゼとプ ロテインホスファターゼは平衡を保ち、情報伝達過程におけるシグナルの流れを 調節する。 プロテインキナーゼは二つの群、すなわちレセプターおよび非レセプター型の タンパク質に分けられる。レセプタープロテインキナーゼは細胞外領域、膜貫通 領域、および細胞内領域からなる。レセプタープロテインキナーゼの細胞内領域 の部分は触媒ドメインを擁する。非レセプタープロテインキナーゼは細胞外また は膜貫通領域を擁していないが、それに相当するレセプター型の細胞内領域と同 様の領域を有する。 プロテインキナーゼは、それらが作用するアミノ酸によって更に３種類に分け られる。あるものはセリンまたはスレオニンにのみリン酸を結合させ、あるもの はチロシンにのみリン酸を結合させ、またあるものはセリン、スレオニン、およ びチロシンにリン酸を結合させる。 疾病の新しい治療法を発見する試みの中で、生物医学の研究者および化学者た ちはプロテインキナーゼの機能を阻害する分子を設計、合成、および試験してき た。いくつかの小型の有機分子が、プロテインキナーゼの機能を調整する種類の 化合物をなしている。 細胞膜を通過し、酸加水分解に耐性のある化合物は、患者に経口投与した後の 生物学的利用能が高いため、治療学的に有利でありうる。しかしながら、これら のプロテインキナーゼ阻害剤の多くは、プロテインキナーゼの機能をわずかしか 阻害しない。更に、その多くは種々のプロテインキナーゼを阻害するため、疾病 の治療の際、多くの副作用を引き起こしうる。 しかしながら、いくつかのインドリノン化合物は耐酸性および膜透過性の有機 分子の型の一つであり、特定のプロテインキナーゼのみを阻害する。インドリノ ンの合成、インドリノンの生物活性の試験法、およびインドリノン誘導体の阻害 様式については、国際特許公開ＷＯ96/40116号,1996年12月19日公開,Tangら，“ 疾病の治療のためのベンジリデン−Ｚ−インドリノン化合物(Benzylidene-Z-Ind olinone Compounds for the Treatment of Disease)”(Lyon ＆ Lyon明細書No.2 23/298)、および、国際特許公開ＷＯ96/22976号，1996年８月１日公開,Ballinar iら、に記載されており、これらは 共に、図も含めて、全て参照によりここに組み込まれる。 医薬に基づくインドリノンの開発はかなりの進歩を遂げてきたにもかかわらず 、特定のプロテインキナーゼおよび他の特定の生物活性を阻害する原因となる特 有の構造および置換様式を同定する必要が残されたままである。発明の概要 本発明は、プロテインキナーゼの情報伝達を調整、調節、および／または阻害 する有機分子に関する。そのような化合物は、癌、アテローム性動脈硬化症、関 節炎、および再狭窄のような細胞増殖性疾患、および糖尿病のような代謝性疾患 を含む、プロテインキナーゼの情報伝達が調節されないことに関する疾病の治療 に有用である。効果のあるプロテインキナーゼには、Ｆｌｋ、ＦＧＦＲ、ＰＤＧ ＦＲ、およびｒａｆがあるが、それらに限定されるものではない。 本発明は、プロテインキナーゼを阻害するインドリノン化合物および関連する 生成物と方法を特徴とする。ＦＬＫプロテインキナーゼに特異的な阻害剤は、３ −［（インドール−３−イル）メチレン］−２−インドリノンの、特にインドー ル環の１’位に、化学置換基を添加することによって得ることができる。ＦＬＫ および血小板由来増殖因子プロテインキナーゼを特異的に阻害するインドリノン 化合物は、テトラヒドロインドールまたはシクロペンタノ−ｂ−ピロール部分を 擁することができる。特にオキシインドール環の５位が、置換基で修飾されたイ ンドリノン化合物はプロテインキナーゼの活性化に効果的である。また本発明は 、チロシンキナーゼ阻害剤である新規の水溶性インドリノン化合物および関連す る生成物と方法を特徴とする。 本発明の化合物により、一またはそれ以上の非機能性プロテインキナーゼを原 因とする疾病に有望な治療法が新たに得られる。変性神経疾患はこの種の疾患に 属し、パーキンソン病およびアルツハイマー病を含むが、それらに限定されるも のではない。化合物を修飾し、その標的に対して特異的として副作用をわずかに することにより、有望な癌の治療法を新たに得ることができる。これらの特性は 、複数の副作用を引き起こして患者を衰弱させる、現在利用されている癌治療法 より、かなり改善されたものである。 本発明の化合物は、ＦＬＫプロテインキナーゼの活性を特異的に阻害すること により、固形腫瘍を極小化して消失させるか、または少なくとも腫瘍の増殖およ び／または転移を調整または阻害すると考えられる。ＦＬＫプロテインキナーゼ は、血管新生の際の血管の増殖を調節する。癌腫瘍は増殖の際、酸化された血液 によって栄養を供給されなければならないため、血管新生の速度の増加は細胞の 癌腫瘍の増殖を伴う。従って、ＦＬＫプロテインキナーゼの阻害およびそれに伴 う血管新生の減少により、腫瘍の栄養が欠乏し、おそらくは腫瘍は消失する。 本発明を実践するためには、化合物がＰＴＫ（例えば線維芽細胞増殖因予受容 体１［ＦＧＦＲ１］）を阻害する機構を正確に理解する必要はないが、化合物は ＰＴＫの触媒領域のアミノ酸と相互作用すると考えられる。ＰＴＫは一般に二葉 の構造を有し、ＡＴＰは二葉間の裂溝の、ＰＴＫの間でアミノ酸が保存されてい る領域に結合すると考えられる；ＰＴＫの阻害剤は、ＡＴＰがＰＴＫに結合する のと同じ一般的な領域で、水素結合、ファンデルワールス相互作用、およびイオ ン結合のような非共有性相互作用を介してＰＴＫに結合すると考えられる。更に 具体的には、本発明の化合物のオキシインドール部分がＡＴＰのアデノシン環が 占有するのと同じ一般的な領域に結合すると考えられる。特定のＰＴＫに対する ＰＴＫ阻害剤であるインドリノンの特異性は、個々のＰＴＫに特異的なアミノ酸 ドメインを有するオキシインドールコアの周辺の成分間の相互作用によるもので ありうる。従って、インドリノン置換基の相違は特定のＰＴＫとの選択的な結合 に寄与しうる。異なるＡＴＰまたは他のヌクレオチドの結合部位に活性のある化 合物を選択できるので、それらの化合物はそのような部位で、いずれのタンパク 質をも（すなわち、プロテインチロシンキナーゼだけでなくセリン／スレオニン キナーゼおよびプロテインホスファターゼも）標的とするのに有用である。従っ て、そのような化合物は、そのようなタンパク質のin vitroでのアッセイ、およ び、そのようなタンパク質によるin vivoでの治療効果に有用である。 ある観点では、本発明はインドリノン化合物のコンビナトリアルライブラリー を特徴とする。ライブラリーは、オキシインドール化合物をアルデヒドと反応さ せることによって生成できる一連のインドリノンを少なくとも１０個（好ましく は少なくとも５０〜１００個、より好ましくは１００〜５００個、そして最も好 ましくは５００〜５，０００個）含む。好ましい態様では、ライブラリー中のイ ンドリノンはＡ型のオキシインドールをＢ型のアルデヒドと反応させることによ って生成できる。Ａ型オキシインドールおよびＢ型アルデヒドを、それぞれ図− １および２（そしてそれぞれ表−１１および１２）に示し、以下に詳細を記載す る。見ての通り、図中、オキシインドールは０１、０２、０３、．．．．と表示 し、アルデヒドはＡ１、Ａ２、Ａ３．．．．と示す。従って、コンビナトリアル ライブラリーが、０１とＡ１、０１とＡ２、０１とＡ３、０２とＡ１、０２とＡ ２、０２とＡ３、０３とＡ１、０３とＡ２、０３とＡ３などから生成されるイン ドリノンを含む、オキシインドールとアルデヒドの組み合わせのいずれか、また は全てを含むことは、容易に認識される。同様に、ライブラリー中のインドリノ ンは表−１１中のオキシインドールと、図−２または表−１２に示すアルデヒド との、いずれの組合せでも生成できる。最後に、もちろんインドリノンは、表− １２に示すアルデヒドと、図−１または表−１１のオキシインドールのいずれの 組合せによるものでもよい。 “コンビナトリアルライブラリー”とは一連の化合物をいう。この場合、コン ビナトリアルライブラリーは、オキシインドールとアルデヒドを反応させること によって生成できる一連のインドリノン化合物を含有する。インドリノンのライ ブラリーの作成には、種々のオキシインドールおよびアルデヒドを使用してもよ い。 “インドリノン”という用語は、当該分野で一般に理解されるように使用され 、以下に示す化合物のように、アルデヒド部分とオキシインドール部分から合成 することができる、置換された、または置換されていない多くのサブクラスの化 合物を含む。 “Ａ型オキシインドール”とは、図−１および表−１１に示すオキシインドー ルのいずれか、および全てを含むものである。ここで使用されるところのオキシ インドールは一般に以下に示す構造を有する：式中、 （ａ）Ａ₁、Ａ₂、Ａ₃、およびＡ₄は、独立して、炭素または窒素であり； （ｂ）Ｒ₁は水素またはアルキルであり； （ｃ）Ｒ₂は酸素または硫黄であり； （ｄ）Ｒ₃は水素であり； （ｅ）Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、およびＲ₇は、（ｉ）それぞれ独立して、水素、アルキ ル、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アルカリール、アルカリールオキ シ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｓ（Ｏ）Ｒ，ＳＯ₂ＮＲＲ’、ＳＯ₃Ｒ、ＳＲ、 ＮＯ₂、ＮＲＲ’、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ，ＯＣ（Ｏ）Ｒ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ、 （ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｒ、およびＣＯＮＲＲ’からなる群から選択されるか、または 、（ii）Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、およびＲ₇のうちの隣接するいずれかの２個が、インド リノンのオキシインドールに基づく部分のアリール部と縮合環を形成する。 Ａ₁、Ａ₂、Ａ₃、およびＡ₄が窒素または硫黄の場合、対応するＲ₄、Ｒ₅、Ｒ₆ 、およびＲ₇はなく、構造Ｉに示す、対応する結合は存在しないことは、理解さ れるべきところである。 そのような（上記（ｅ）の（ii）に記載するような）縮合環を有するオキシイ ンドールの例を図−１に示す；化合物044、045、047、048、050、051、052、053 、055、056、058、059、061、062、064、066、067、069、070、および073。 他の好適な縮合環の例には以下がある： 上記の６員環も、構造II、III、およびIVのＡ環として可能な例である。 “Ｂ型アルデヒド”とは、図−２および表−１１に示すいずれか、および全て のアルデヒドを含む。“アルデヒド”という用語は当該分野で一般に理解される ように使用され、構造Ｒ_dＣＨＯ（Ｒ_dはアルキルおよびアリールのような、種々 の置換された、または置換されていない基である）の、置換された、または置換 されていないアルデヒドを含む。 更に別の観点から、本発明は、Ａ型オキシインドールとＢ型アルデヒドとの反 応によるインドリノンの合成方法を提供する。本発明のインドリノンの生成方法 は、上記のような化合物のコンビナトリアルライブラリーの作成を含んでもよく 、ここに記載するようなバイオアッセイでそれぞれの化合物を試験し、一または それ以上の好適な化合物を選択し、そして選択した化合物を合成する。 また、式IIまたはIIIを有するインドリノン化合物も特徴とする：式中： （ａ）Ａ₁、Ａ₂、Ａ₃、およびＡ₄は、独立して、炭素または窒素であり； （ｂ）Ｒ₁は水素またはアルキルであり； （ｃ）Ｒ₂は酸素または硫黄であり； （ｄ）Ｒ₃は水素であり； （ｅ）Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、およびＲ₇は、（ｉ）それぞれ独立して、水素、アルキ ル、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アルカリール、アルカリールオキ シ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｓ（Ｏ）Ｒ、ＳＯ₂ＮＲＲ’、ＳＯ₃Ｒ、ＳＲ、 ＮＯ₂、ＮＲＲ’、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ，ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ、 （ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｒ、およびＣＯＮＲＲ’からなる群から選択されるか、または 、（ii）Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、およびＲ₇のうちの隣接するいずれかの２個が、インド リノンのオキシインドールに基づく部分のアリール環と縮合環を形成し； （ｆ）Ｒ₂’、Ｒ₃’、Ｒ₄’、Ｒ₅’、およびＲ₆’は、それぞれ独立して、水 素、アルキル、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アルカリール、アルカ リールオキシ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｓ（Ｏ）Ｒ、ＳＯ₂ＮＲＲ’、ＳＯ₃ Ｒ、ＳＲ、ＮＯ₂、ＮＲＲ’、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ、ＮＨＣ （Ｏ）Ｒ、（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｒ、およびＣＯＮＲＲ’からなる群から選択され； （ｇ）ｎは０、１、２、または３であり； （ｈ）Ｒは水素、アルキル、またはアリールであり； （ｉ）Ｒ’は水素、アルキル、またはアリールであり；そして、 （ｊ）Ａは、必要により一またはそれ以上の位置がアルキル、アルコキシ、ア リール、アリールオキシ、アルカリール、アルカリールオキシ、ハロゲン、トリ ハロメチル、Ｓ（Ｏ）Ｒ、ＳＯ₂ＮＲＲ’、ＳＯ₃Ｒ、ＳＲ、ＮＯ₂、ＮＲＲ’、 ＯＨ、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ、（ＣＨ₂）_nＣＯ₂Ｒ 、またはＣＯＮＲＲ’で置換された、チオフェン、ピロール、ピラゾール、イミ ダゾール，１，２，３−トリアゾール、１，２，４−トリアゾール、オキサゾー ル、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、２−スルフォニルフラン 、４−アルキルフラン、１，２，３−オキサジアゾール、１，２，４−オキサジ アゾール、１，２，５−オキサジアゾール、１，３，４−オキサジアゾール、１ ，２，３，４−オキサトリアゾール、１，２，３，５−オキサトリアゾール、１ ，２，３−チアジアゾール、１，２，４−チアジアゾール、１，２，５−チアジ アゾール、１，３，４−チアジアゾール、１，２，３，４−チアトリアゾール、 １，２，３，５−チアトリアゾール、およびテトラゾールからなる群から選択さ れるヘテロアリール５員環である。 ここで使用するように、“化合物”という用語は、塩基化合物の薬剤的に許容 しうる塩、エステル、アミド、プロドラッグ、異性体、および代謝物を含むこと を意図する。 構造IIIの好ましい態様では、置換基Ａは以下に示すような式IVのヘテロ５員 環 であってもよい： 式中、Ｄ、Ｅ、Ｆ、およびＧは窒素、炭素、または硫黄原子である。Ｄ〜Ｇ基の 特定の近位は、上記の縮合環のような当化学分野で知られるヘテロ環基の例に限 定され、それらは全て、必要により上記（ｊ）の段落に記載したように置換され ていてもよい。 好ましい態様では、インドリノンのオキシインドール由来部分のアリール環（ “Ａ環”、すなわち構造IIおよびIIIでＡ₁、Ａ₂、Ａ₃、およびＡ₄で示した環） は４、５、６、および７位の炭素原子（それぞれ、構造ＶおよびVIの置換基Ｒ₄ 、Ｒ₅、Ｒ₆、およびＲ₇と同一である）に極性置換基、好ましくはＮＨ₂、ＣＯＯ Ｈ、ＳＯ₃Ｈ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、Ｆ、ＣＯＣＨ₂ＣＨ₂ＣＯＯＨ、ＣＯＣＨ₂Ｃｌ、 ピペラジン、およびＣＨ₂ＣＨ₂ＮＨ₂からなる群から選択される置換基、最も好 ましくはＮＨ₂、ＣＯＯＨ、ＳＯ₃、ＣＯＣＨ₂ＣＨ₂ＣＯＯＨ、ピペラジン、およ びＣＨ₂ＣＨ₂ＮＨ₂のような親水基を有する。 ＦＧＦＲ（パイファー腺熱、ジャクソンヴァイス病（Jackson-Weiss）、およ びクルーゾン症候群（Cruzon syndrom）；形成異常症および低軟骨形成症；小人 症；骨形成異常；および発育障害のような、種々の疾患に関連するプロテインキ ナーゼ受容体）の標的阻害剤を選択する方法の一つは、ＡＴＰの三リン酸の擬態 であることによりＦＧＦＲの活性部位への標的化合物の親和性が向上された、Ａ 環に置換基を有する標的化合物を選択することである。親水基は、ＡＴＰの三リ ン酸部分に擬態させ、最終的な阻害剤の溶解度を向上するように作用しうる。い ずれの説にも拘束されることなく、ＦＧＦＲ阻害剤には一般にトランス型のイン ドリノンがより好ましいと考えられる。 構造IIおよびIIIのＡ環の４、５、および６位のアミンをベースとする置換基 は好ましい種類の置換基であり、特に好ましい種類の置換基は以下の構造のアミ ン である： 式中、Ｒ_aはＣＯ（ＣＨ₂）₂ＣＯＯＨ、アリール、アルキルであるか、またはＣ ＯＯＨ、ＯＨ、もしくはＮＨ₂を含有する。この種の基は立体障害により異性体 をトランスコンフォメーションにするが、これはＦＧＦＲの阻害には好ましい特 性であり、親水基へのリンカーとして作用しうる。 構造IIおよびIIIのアリール環の別の好ましい種類の置換基には、以下の構造 のピペラジン型の置換基がある： 式中、Ｒ_bは好ましくは、負に荷電したアルキルまたはアシルのような、負荷電 基である。 構造IIおよびIIIのアリール環の更に別の好ましい種類の置換基は、以下の式 のＣ−ＣＯＲ基である： 式中、Ｒ_cは、好ましくは構造IIおよびIIIのＡ環の５および／または６位にある 、アミド、エステル、ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＯＯＨ、ＣＨ₂Ｃｌ、またはピペラジンのよ うな親水基または負荷電基である。Ｒ_cはまた、アリール環のｓｐ３炭素に結合 するか、またはＲ_cＯ₃Ｓ−として結合してもよい。 更に別の好ましいアリール環の置換基はヘテロ縮合環であり、これはアリール アミンのアシル化に次いでヘテロ環系をアルキル化することにより合成できる。 そのような化合物の例は図−１に記載する化合物044、045、047、048、050、051 、052、053、055、056、058、059、061、062、064、066、067、069、070、およ び073である。 別の観点では、本発明は、インドール環の１’位に置換基を有する３−［（イ ンドール−３−イル）メチレン］−２−インドリノン化合物を特徴とする。イン ドール環の１’位の置換基は、 （ａ）必要により環が一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル基で 置換された、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０員環で 必要により置換されたアルキル； （ｂ）必要により環が一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル基で 置換された、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０員環； （ｃ）式−ＣＯ−Ｒ₁₂のアルデヒドまたはケトン（式中、Ｒ₁₂は水素、アルキ ル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｄ）式−（Ｒ₁₃）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸、または式−（Ｒ₁₄）_m−ＣＯＯ −Ｒ₁₅のエステル（式中、Ｒ₁₃、Ｒ₁₄、およびＲ₁₅は、独立して、アルキルおよ びヘテロな５または６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立して０ま たは１である）； （ｅ）式−（ＳＯ₂）−Ｒ₁₆のスルホン（式中、Ｒ₁₆は、アルキルおよび必要 により環がアルキル基で置換されたヘテロな５または６員環からなる群から選択 される）； （ｆ）式−（Ｒ₁₇）_n−（インドール−１−イル）または−（Ｒ₁₈）_m−ＣＨＯ Ｈ−（Ｒ₁₉）_p−（インドール−１−イル）（式中、インドール基は必要により 置換され、Ｒ₁₇、Ｒ₁₈、およびＲ₁₉はアルキルであり、そしてｍ、ｎ、およびｐ は独立して０または１である）；そして、 （ｇ）インドール環の２’置換基と共にヘテロな５または６員環を形成する； からなる群から選択される。 “アルキル”とは、直鎖、分枝、または環状の飽和脂肪族炭化水素をいう。ア ルキル基は好ましくは１〜１０炭素、より好ましくは１〜７炭素の低級アルキル 、そして最も好ましくは１〜４炭素である。代表的なアルキル基には、メチル、 エ チル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第三級ブチル、ペンチル 、ヘキシルなどがある。アルキル基は置換されていてもよく、代表的なアルキル の置換基には、水酸基、シアノ、アルコキシ、酸素、硫黄、ニトロキシ、ハロゲ ン、−Ｎ（ＣＨ₃）₂、アミノ、および−ＳＨがある。 “メチル”とは１炭素の飽和アルキル基をいう。“エチル”とは２炭素の飽和 アルキル基をいう。“プロピル”とは３炭素の飽和アルキル基をいう。“ブチル ”とは４炭素の飽和アルキル基をいう。“ペンチル”とは５炭素の飽和アルキル 基をいう。 “アリール”とは、共役ｐｉ電子系を有する環を少なくとも１個有する芳香族 基をいい、炭素環アリール（例えばフェニル）およびヘテロ環アリール基（例え ばピリジン）の両方を含む。アリール基には単環式、二環式、および三環式の基 があり、それぞれの環は好ましくは５または６員環である。アリール基は置換さ れていてもよく、代表的なアリール置換基にはハロゲン、トリハロメチル、水酸 基、−ＳＨ、−ＯＨ、−ＮＯ₂、アミン、チオエーテル、シアノ、アルコキシ、 アルキル、およびアミノがある。 “ヘテロ環”または“ヘテロ環の”とは、環を形成し、４個までのヘテロ原子 を含み、環を形成する残りの原子は炭素である化合物をいう。従って、例えば構 造中の環はそれぞれ、０、１、２、３、または４個の窒素、酸素、または硫黄を 環内に含有できる。環は、好ましくは水素原子で飽和し、より好ましくは一また はそれ以上の不飽和を有し、そして最も好ましくは共役ｐｉ電子系のアリールを 含有する。環は、好ましくは１１、１２、１３、または１４員環であり、より好 ましくは８、９、または１０員環であり、そして最も好ましくは５または６員環 である。そのような環の例は、フリル、チエニル、ピロール、イミダゾリル、イ ンドリル、ピリジニル、チアジアゾリル、チアゾリル、ピペラジニル、ジベンズ フラニル、ジベンズチエニルである。本発明のヘテロ環は、必要により一または それ以上の、例えば水酸基、ブロモ、フルオロ、クロロ、ヨード、メルカプトま たはチオ、シアノ、シアノアミド、アルキルチオ、ヘテロ環、アリール、ヘテロ アリール、カルボキシル、オキソ、アルコキシカルボニル、アルキル、アルケニ ル、ニトロ、アミノ、アルコキシル、アミドなどのような、そのような環に一般 的に結合しているような官能基で置換されていてもよい。好ましいヘテロ環の構 造のいくつかは上記のような縮合環である。 “アルデヒド”とは、式−（Ｒ）_n−ＣＨＯ（式中、Ｒはアルキルまたはアリ ールからなる群から選択され、ｎは０または１である）の化学基をいう。 “ケトン”とは、式−（Ｒ）_n−ＣＯ−Ｒ’（式中、ＲおよびＲ’はアルキル またはアリールからなる群から選択され、ｎは０または１である）の化学基をい う。 “カルボン酸”とは、式−（Ｒ）_n−ＣＯＯＨ（式中、Ｒはアルキルまたはア リールからなる群から選択され、ｎは０または１である）の化学基をいう。 “エステル”とは、式−（Ｒ）_n−ＣＯＯＲ’（式中、ＲおよびＲ’は、独立 して、アルキルまたはアリールからなる群から選択され、ｎは０または１である ）の化学基をいう。 “スルホン”とは、式−ＳＯ₂−Ｒ（式中、Ｒはアルキルまたはアリールから なる群から選択される）の化学基をいう。 “薬剤的に許容しうる塩”とは、生体に有意な刺激を引き起こさず、化合物の 生物学的活性および性質を損っていない、化合物の製剤（formulation）をいう 。薬剤的な塩は、本発明の化合物を塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メ タンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸など のような無機酸と反応させることによって得られる。 “プロドラッグ”とは、in vivoで親薬剤（parent drug）に変換する物質をい う。ある条件では、プロドラッグのほうが親薬剤より投与が容易でありうる。例 えば、生体に親化合物を経口投与できない場合にプロドラッグを経口投与しても よく、または、プロドラッグの溶解度を向上して静脈内投与できるようにしても よい。 本発明の好ましい態様は、以下の式の化合物に関する：式中、 （ａ）Ｒ₁は上記でインドール環の１’位の置換基として記載したものであり ； （ｂ）Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、およびＲ₆は、独立して、 （ｉ）水素； （ii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル 基で置換された単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０員環 で、必要により置換されたアルキル； （iii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチ ル基で置換された、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０ 員環； （iv）式−ＣＯ−Ｒ₂₀のケトン（式中、Ｒ₂₀は水素、アルキル、またはヘ テロな５もしくは６員環からなる群から選択される）； （ｖ）式−（Ｒ₂₁）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸、または式−（Ｒ₂₂）−Ｃ ＯＯ−Ｒ₂₃のエステル（式中、Ｒ₂₁、Ｒ₂₂、およびＲ₂₃は、独立して、アルキル またはヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立 して０または１である）； （vi）ハロゲン； （vii）式（Ｒ₂₄）_m−ＯＨのアルコール、または式−（Ｒ₂₄）_n−Ｏ−Ｒ_{2 5} のエーテル（式中、Ｒ₂₄およびＲ₂₅は、独立して、アルキルおよびヘテロな５ もしくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立して０または１であ る）； （viii）−ＮＲ₂₆Ｒ₂₇（式中、Ｒ₂₆およびＲ₂₇は、独立して、水素、酸素 、アルキル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ix）−ＮＨＣＯＲ₂₈（式中、Ｒ₂₈は水酸基、アルキル、および、必要に より環がアルキル、ハロゲン、カルボキシラート、またはエステルで置換された ヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｘ）−ＳＯ₂ＮＲ₂₉Ｒ₃₀（式中、Ｒ₂₉およびＲ₃₀は水素、酸素、アルキ ル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｘｉ）Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、またはＲ₆のうちのいずれか２個がインドールの ６員環と縮合した二環式または三環式の部分を形成し、複環式部分のそれぞれの 環がヘテロな５または６員環である； からなる群から選択され； （ｃ）Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、およびＲ₁₀は、独立して、 （ｉ）水素； （ii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲン、アルデヒド、または トリハロメチル基で置換された単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、 または１０員環で、必要により置換されたアルキル； （iii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチ ル基で置換された、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０ 員環； （iv）式−ＣＯ−Ｒ₃₁のアルデヒドまたはケトン（式中、Ｒ₃₁は水素、ア ルキル、またはヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択される）； （ｖ）式−（Ｒ₃₂）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸、または式−（Ｒ₃₃）_m−Ｃ ＯＯ−Ｒ₃₄のエステル（式中、Ｒ₃₂、Ｒ₃₃、およびＲ₃₄は、独立して、アルキ ルまたはヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択され、ｎおよびｍは独立 して０または１である）； （vi）ハロゲン； （vii）式（Ｒ₃₅）_m−ＯＨのアルコール、または式−（Ｒ₃₅）_n−Ｏ−Ｒ_{3 6} のエーテル（式中、Ｒ₃₅およびＲ₃₆は、独立して、アルキルまたはヘテロな５ もしくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立して０または１であ る）； （viii）−ＮＲ₃₇Ｒ₃₈（式中、Ｒ₃₇およびＲ₃₈は、独立して、水素、酸素 、アルキル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ix）−ＮＨＣＯＲ₃₉（式中、Ｒ₃₉は水酸基、アルキル、および、必要に より環がアルキル、ハロゲン、カルボキシラート、またはエステルで置換された ヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｘ）−ＳＯ₂ＮＲ₄₀Ｒ₄₁（式中、Ｒ₄₀およびＲ₄₁は水素、酸素、アルキ ル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｘｉ）Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、またはＲ₁₀のうちのいずれか２個がインドール の６員環と縮合したヘテロな二環式または三環式の部分を形成し、複環式部分の それぞれの環がヘテロな５または６員環である； からなる群から選択され；そして、 （ｄ）Ｒ₁₁は水素またはアルキルであり； Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、またはＲ₁₀の少なくとも１個 はアルキルであるか、またはＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、 またはＲ₁₀の少なくとも４個は水素ではない。 上記の構造Ｖに示す本発明の好ましい態様では、好ましくはＲ₁は分枝または 不分枝の（より好ましくは不分枝の）低級アルキルであり（例えばエチル、プロ ピル、イソプロピル、ブチル、第３級ブチル、ペンチル）、最も好ましいのはメ チル基である。 他の好ましい態様では、構造ＶのＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈、 Ｒ₉、およびＲ₁₀のうちの一またはそれ以上はヘテロ環である。好ましくはヘテ ロ環は、アリールまたは非アリールの５、６、８、９、１０、１１、１２、１３ 、 および１４員環からなる群から選択される。ヘテロ環は、フリル、チエニル、ピ ロール、イミダゾリル、インドリル、ピリジニル、チアジアゾリル、チアゾリル 、ピペラジニル、ジベンズフラニル、ジベンズチエニル、２−アミノチアゾール −４−イル、２−アミノ−５−クロロチアゾール−４−イル、２−アミノ−チア ジアゾール−４−イル、２，３−ジオキソピペラジニル、４−アルキルピペラジ ニル、２−インド−３−ジベンズフラニル、および３−ヒドロキシ−４−ジベン ズチエニルであることができる。Ｒ₂は好ましくは低級アルキルであり、より好 ましくは、メチルまたは、好ましくはハロゲンの一置換体であるフェニルもしく はビフェニルである。好ましくはＲ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、およびモノ−Ｒ₆は、水素、置 換されていない低級アルキル、ハロゲン、メトキシ、カルボン酸（carboncyclic ）、およびエーテルからなる群から選択される。Ｒ₁₁は好ましくは水素である。 構造Ｖの特に好ましい態様では、Ｒ₁がメチルでＲ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇ 、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、およびＲ₁₁が水素であるか、または、Ｒ₁およびＲ₇がメチ ルでＲ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₆、Ｒ₉、Ｒ₁₀、およびＲ₁₁が水素である。他の特に好ま しい化合物を、ここに記載する表および実施例に記載する。 別の観点では、本発明は、以下の段階： （ａ）式VIのアルデヒドを式VIIのオキシインドールと反応させ； 式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、およびＲ₁₁はこ こに記載するものである；そして、 （ｂ）アルデヒドおよびオキシインドール反応物からインドリノン化合物を分 別する； からなる、インドリノン化合物の合成法を特徴とする。 “合成”とは、制御された環境における、複数の化合物の結合および／または 化合物の化学的修飾の方法と定義する。制御された環境は、好ましくは、ガラス 容器、撹拌棒、加熱または冷却源、および特定の有機溶媒を含む。 “反応”とは、制御された環境において二つの化合物を混合することをいう。 混合および反応される化合物を“反応物”という。 “分別”とは、化合物を一またはそれ以上の他の化合物から分離する方法をい う。化合物は当該分野で知られる技術によって分別することができ、そのような 技術にはカラムクロマトグラフィー法および溶媒相分離法があるが、それらに限 定されるものではない。 別の観点では、本発明は、必要により置換された３−［（テトラヒドロインド ール−２−イル）メチレン］−２−インドリノンおよび３−［（シクロペンタノ −ｂ−ピロール−２−イル）メチレン］−２−インドリノン化合物を特徴とする 。 “必要により置換された”とは、例えば、特定の位置に水素を有するか、また は必要によりその位置に別の置換基を有するかのベンゼン環をいう。“必要によ り置換された”とはベンゼン環に加え、他の分子も指す。例えば、環構造はＮ− 置換またはＣ−置換されていてもよい。 “Ｎ−置換された”とは、インドリノンの環の窒素原子に結合する化学基を有 する化合物をいう。 “Ｃ−置換された”とは、インドリノンの炭素原子に結合する化学基を有する 化合物をいう。 “独立して選択される”とは、一群の置換基から選択された一個の置換基を有 する分子をいう。 本発明の好ましい態様は、以下の式のインドリノン化合物に関する： 式中、 （ａ）Ｒ₁は、 （ｉ）水素； （ii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル 基で置換された単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０員環 で、必要により置換されたアルキル； （iii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチ ル基で置換された、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０ 員環； （iv）式−ＣＯ−Ｒ₁₁のケトン（式中、Ｒ₁₁は水素、アルキル、またはヘ テロな５もしくは６員環からなる群から選択される）； （ｖ）式−（Ｒ₁₂）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸、または式−（Ｒ₁₃）_m−Ｃ ＯＯ−Ｒ₁₄のエステル（式中、Ｒ₁₂、Ｒ₁₃、およびＲ₁₄は、独立して、アルキル またはヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択され、ｎおよびｍは独立し て０または１である）； （vi）式−（ＳＯ₂）−Ｒ₁₅のスルホン（式中、Ｒ₁₅はアルキル、または 、必要により環がアルキル基で置換されたヘテロな５もしくは６員環からなる群 から選択される）； （vii）−（Ｒ₁₆）_n−（インドール−１−イル）または−（Ｒ₁₇）_m−Ｃ ＨＯＨ−（Ｒ₁₈）_p−（インドール−１−イル）（式中、インドール基は必要に よりアルデヒドで置換されていてもよく、Ｒ₁₆、Ｒ₁₇、およびＲ₁₈はアルキルで あり、ｎ、ｍ、およびｐは独立して０または１である）； （viii）インドール環の２’置換基と共に三環式の部分を形成し、三環式 部分のそれぞれの環がヘテロな５または６員環である； からなる群から選択され； （ｂ）Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ_3'、Ｒ₄、Ｒ_4'、Ｒ₅、Ｒ_5'、Ｒ₆、およびＲ_6'は、独立し て、 （ｉ）水素； （ii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲン、アルデヒド、または トリハロメチル基で置換された単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、 または１０員環で、必要により置換されたアルキル； （iii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチ ル基で置換された、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０ 員環； （iv）式−ＣＯ−Ｒ₂₀のケトン（式中、Ｒ₂₀は水素、アルキル、またはヘ テロな５もしくは６員環からなる群から選択される）； （ｖ）式−（Ｒ₂₁）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸、または式−（Ｒ₂₂）−Ｃ ＯＯ−Ｒ₂₃のエステル（式中、Ｒ₂₁、Ｒ₂₂、およびＲ₂₃は、独立して、アルキル またはヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立し て０または１である）； （vi）ハロゲン； （vii）式（Ｒ₂₄）_m−ＯＨのアルコール、または式−（Ｒ₂₄）_n−Ｏ−Ｒ_{2 5} のエーテル（式中、Ｒ₂₄およびＲ₂₅は、独立して、アルキルおよびヘテロな５ もしくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立して０または１であ る）； （viii）−ＮＲ₂₆Ｒ₂₇（式中、Ｒ₂₆およびＲ₂₇は、独立して、水素、酸素 、アルキル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ix）−ＮＨＣＯＲ₂₈（式中、Ｒ₂₈は水酸基、アルキル、および、必要に より環がアルキル、ハロゲン、カルボキシラート、またはエステルで置換された ヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｘ）−ＳＯ₂ＮＲ₂₉Ｒ₃₀（式中、Ｒ₂₉およびＲ₃₀は水素、酸素、アルキ ル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｘｉ）Ｒ₃、Ｒ_3'、Ｒ₄、Ｒ_4'、Ｒ₅、Ｒ_5'、Ｒ₆、またはＲ_6'のうちのい ずれか２個がインドールの６員環と縮合した二環式または三環式の部分を形成し 、複環式部分のそれぞれの環がヘテロな５または６員環である； からなる群から選択され； （ｃ）Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、およびＲ₁₀は、独立して、 （ｉ）水素； （ii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメテル 基で置換された単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０員環 で、必要により置換されたアルキル； （iii）環が必要によりーまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチ ル基で置換された、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０ 員環； （iv）式−ＣＯ−Ｒ₃₁のケトン（式中、Ｒ₃₁は水素、アルキル、またはヘ テロな５もしくは６員環からなる群から選択される）； （ｖ）式−（Ｒ₃₂）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸、または式−（Ｒ₃₃）_m−Ｃ ＯＯ−Ｒ₃₄のエステル（式中、Ｒ₃₂、Ｒ₃₃、およびＲ₃₄は、独立して、アルキル またはヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択され、ｎおよびｍは独立し て０または１である）； （vi）ハロゲン； （vii）式（Ｒ₃₅）_m−ＯＨのアルコール、または式−（Ｒ₃₅）_n−Ｏ−Ｒ_{3 6} のエーテル（式中、Ｒ₃₅およびＲ₃₆は、独立して、アルキルまたはヘテロな５ もしくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立して０または１であ る）； （viii）−ＮＲ₃₇Ｒ₃₈（式中、Ｒ₃₇およびＲ₃₈は、独立して、水素、酸素 、アルキル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ix）−ＮＨＣＯＲ₃₉（式中、Ｒ₃₉は水酸基、アルキル、および、必要に より環がアルキル、ハロゲン、カルボキシラート、またはエステルで置換された ヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｘ）−ＳＯ₂ＮＲ₄₀Ｒ₄₁（式中、Ｒ₄₀およびＲ₄₁は水素、酸素、アルキ ル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｘｉ）Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、またはＲ₁₀のうちのいずれか２個がインドール の６員環と縮合したヘテロな二環式または三環式の部分を形成し、複環式部分の それぞれの環がヘテロな５または６員環である； からなる群から選択され；そして、 （ｄ）Ｒ₁₁は水素またはアルキルである。 本発明の別の好ましい態様は、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ_3'、Ｒ₄、Ｒ_4'、Ｒ₅、Ｒ_5' 、Ｒ₆、Ｒ_6'、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、およびＲ₁₁が水素である、構造VIIIおよび IXのインドリノン化合物に関する。 別の好ましい態様では、本発明は、Ｒ₈が臭素、塩素、またはＮＨ₂でＲ₁、Ｒ₂ 、Ｒ₃、Ｒ_3'、Ｒ₄、Ｒ_4'、Ｒ₅、Ｒ_5'、Ｒ₆、Ｒ_6'、Ｒ₇、Ｒ₉、Ｒ₁₀、およびＲ₁₁ が水素である、構造VIIIおよびIXのオキシインドリノン化合物に関する。 更に別の好ましい態様では、本発明は、Ｒ₇がメチルでＲ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ_3'、 Ｒ₄、Ｒ_4'、Ｒ₅、Ｒ_5'、Ｒ₆、Ｒ_6'、Ｒ₇、Ｒ₉、Ｒ₁₀、およびＲ₁₁が水素である 、構造VIIIおよびIXのインドリノン化合物に関する。 別の観点では、本発明は、以下の段階： （ａ）式ＸまたはＸＩのアルデヒドを式ＸＩＩのオキシインドールと反応させ ； 式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ_3'、Ｒ₄、Ｒ_4'、Ｒ₅、Ｒ_5'、Ｒ₆、Ｒ_6'、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉ 、Ｒ₁₀、およびＲ₁₁はここに記載するものである；そして、 （ｂ）アルデヒドおよびオキシインドール反応物からインドリノン化合物を分 別する； からなる、インドリノン化合物の合成法を特徴とする。 別の観点では、本発明は、オキシインドール環の５位に置換基を有するインド リノン化合物に特徴があり、オキシインドール環の５位の置換基は： （ａ）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル基で 置換された単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０員環で、 必要により置換されたアルキル； （ｂ）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル基で 置換された、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０員環； （ｃ）式−ＣＯ−Ｒ₁₀のケトン（式中、Ｒ₁₀は水素、アルキル、またはヘテロ な５もしくは６員環からなる群から選択される）； （ｄ）式−（Ｒ₁₁）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸、または式−（Ｒ₁₂）−ＣＯＯ −Ｒ₁₃のエステル（式中、Ｒ₁₁、Ｒ₁₂、およびＲ₁₃は、独立して、アルキルまた はヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立して０ または１である）； （ｅ）ハロゲン； （ｆ）式（Ｒ₁₄）_m−ＯＨのアルコール、または式−（Ｒ₁₄）_n−Ｏ−Ｒ₁₅のエ ーテル（式中、Ｒ₁₄およびＲ₁₅は、独立して、アルキルおよびヘテロな５もしく は６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立して０または１である）； （ｇ）−ＮＲ₁₆Ｒ₁₇（式中、Ｒ₁₆およびＲ₁₇は、独立して、水素、アルキル、 およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｈ）−ＮＨＣＯＲ₁₈（式中、Ｒ₁₈はアルキル、および、必要により環がアル キル、ハロゲン、カルボキシラート、またはエステルで置換されたヘテロな５ま たは６員環からなる群から選択される）； （ｉ）−ＳＯ₂ＮＲ₁₉Ｒ₂₀（式中、Ｒ₁₉およびＲ₂₀は水素、アルキル、および ヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｊ）Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、またはＲ₇のうちのいずれか２個がインドールの６員環 と縮合したヘテロな二環式または三環式の部分を形成し、複環式部分のそれぞれ の環がヘテロな５または６員環である； からなる群から選択される。 本発明の好ましい態様は、以下の式の化合物に関する： 式中、 （ａ）Ｒ₅は、 （ｉ）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル基 で置換された単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０員環で 、必要により置換されたアルキル； （ii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル基 で置換された、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０員環 ； （iii）式−ＣＯ−Ｒ₁₀のケトン（式中、Ｒ₁₀は水素、アルキル、またはヘ テロな５もしくは６員環からなる群から選択される）； （iv）式−（Ｒ₁₁）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸、または式−（Ｒ₁₂）−ＣＯ Ｏ−Ｒ₁₃のエステル（式中、Ｒ₁₁、Ｒ₁₂、およびＲ₁₃は、独立して、アルキルま たはヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立して ０または１である）； （ｖ）ハロゲン； （vi）式（Ｒ₁₄）_m−ＯＨのアルコール、または式−（Ｒ₁₄）_n−Ｏ−Ｒ₁₅の エーテル（式中、Ｒ₁₄およびＲ₁₅は、独立して、アルキルおよびヘテロな５もし くは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立して０または１である） ； （vii）−ＮＲ₁₆Ｒ₁₇（式中、Ｒ₁₆およびＲ₁₇は、独立して、水素、アルキ ル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （viii）−ＮＨＣＯＲ₁₈（式中、Ｒ₁₈はアルキル、および、必要により環が アルキル、ハロゲン、カルボキシラート、またはエステルで置換されたヘテロな ５または６員環からなる群から選択される）； （ix）−ＳＯ₂ＮＲ₁₉Ｒ₂₀（式中、Ｒ₁₉およびＲ₂₀は水素、アルキル、およ びヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （ｘ）Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、またはＲ₇のうちのいずれか２個がオキシインドール の６員環と縮合したヘテロな二環式または三環式の部分を形成し、複環式部分の それぞれの環がヘテロな５または６員環である； からなる群から選択され； （ｂ）Ｒ₁は、 （ｉ）水素、および、環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたは トリハロメチル基で置換された単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、 または１０員環で、必要により置換されたアルキル； （ii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル 基で置換された、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０員 環； （iii）式−ＣＯ−Ｒ₂₁のケトン（式中、Ｒ₂₁は水素、アルキル、または ヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択される）； （iv）式−（Ｒ₂₂）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸、または式−（Ｒ₂₃）−Ｃ ＯＯ−Ｒ₂₄のエステル（式中、Ｒ₂₂、Ｒ₂₃、およびＲ₂₄は、独立して、アルキル またはヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立し て０または１である）； （ｖ）ハロゲン； （vi）式（Ｒ₂₅）_m−ＯＨのアルコール、または式−（Ｒ₂₅）_n−Ｏ−Ｒ₂₆ のエーテル（式中、Ｒ₂₅およびＲ₂₆は、独立して、アルキルおよびヘテロな５も しくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立して０または１である ）； （vii）−ＮＲ₂₇Ｒ₂₈（式中、Ｒ₂₇およびＲ₂₈は、独立して、水素、アル キル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （viii）−ＮＨＣＯＲ₂₉（式中、Ｒ₂₉はアルキル、および、必要により環 がアルキル、ハロゲン、カルボキシラート、またはエステルで置換されたヘテロ な５または６員環からなる群から選択される）； （ix）−ＳＯ₂ＮＲ₃₀Ｒ₃₁（式中、Ｒ₃₀およびＲ₃₁は水素、アルキル、お よびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； からなる群から選択された一またはそれ以上の置換基で環が必要により置換され た、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、および１０員環からなる群 から選択され： （ｃ）Ｒ₄、Ｒ₆、およびＲ₇は、独立して、 （ｉ）水素、および、環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたは トリハロメチル基で置換された単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、 または１０員環で、必要により置換されたアルキル； （ii）環が必要により一またはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル 基で置換された、単環式または二環式のヘテロな５、６、８、９、または１０員 環； （iii）式−ＣＯ−Ｒ₃₂のケトン（式中、Ｒ₃₂は水素、アルキル、または ヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択される）； （iv）式−（Ｒ₃₃）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸、または式−（Ｒ₃₄）−Ｃ ＯＯ−Ｒ₃₅のエステル（式中、Ｒ₃₃、Ｒ₃₄、およびＲ₃₅は、独立して、アルキル またはヘテロな５もしくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立し て０または１である）； （ｖ）ハロゲン； （vi）式（Ｒ₃₆）_m−ＯＨのアルコール、または式−（Ｒ₃₆）_n−Ｏ−Ｒ₃₇ のエーテル（式中、Ｒ₃₆およびＲ₃₇は、独立して、アルキルおよびヘテロな５も しくは６員環からなる群から選択され、ｍおよびｎは独立して０または１である ）； （vii）−ＮＲ₃₈Ｒ₃₉（式中、Ｒ₃₈およびＲ₃₉は、独立して、水素、アル キル、およびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； （viii）−ＮＨＣＯＲ₄₀（式中、Ｒ₄₀はアルキル、および、必要により環 がアルキル、ハロゲン、カルボキシラート、またはエステルで置換されたヘテロ な５または６員環からなる群から選択される）； （ix）−ＳＯ₂ＮＲ₄₁Ｒ₄₂（式中、Ｒ₄₁およびＲ₄₂は水素、アルキル、お よびヘテロな５または６員環からなる群から選択される）； からなる群から選択され；そして、 （ｄ）Ｒ₂は水素またはアルキルである。 上記の構造ＸＩＩＩに示す本発明の好ましい態様では、一またはそれ以上のＲ₁ 、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、またはＲ₇はヘテロ環である。本発明の好ましいヘテロ環は ここに記載するものである。 上記の構造ＸＩＩＩに示す本発明の別の好ましい態様は、Ｒ₁が（３，５−ジ メチルピロール）−２−イルであり、Ｒ₅が−ＣＯＯＨであり、Ｒ₂、Ｒ₄、Ｒ₆、 およびＲ₇が水素であるインドリノン化合物である。 上記の構造ＸＩＩＩに示す本発明の別の好ましい態様は、Ｒ₁が（３，５−ジ エチルピロール）−２−イルであり、Ｒ₅が−ＣＯＯＨであり、Ｒ₂、Ｒ₄、Ｒ₆、 およびＲ₇が水素であるインドリノン化合物である。 上記の構造ＸＩＩＩに示す本発明の別の好ましい態様は、Ｒ₁が（３，５−ジ イソプロピルピロール）−２−イルであり、Ｒ₅が−ＣＯＯＨであり、Ｒ₂、Ｒ₄ 、Ｒ₆、およびＲ₇が水素であるインドリノン化合物である。 上記の構造ＸＩＩＩに示す本発明の別の好ましい態様は、Ｒ₁が（３，５−ジ メチルピロール）−２−イルであり、Ｒ₅が−（ＣＨ₂）₂ＣＯＯＨであり、Ｒ₂、 Ｒ₄、Ｒ₆、およびＲ₇が水素であるインドリノン化合物である。 上記の構造ＸＩＩＩに示す本発明の別の好ましい態様は、Ｒ₁が（５−メチル チオフェン）−２−イルであり、Ｒ₅が−ＣＯＯＨであり、Ｒ₂、Ｒ₄、Ｒ₆、およ びＲ₇が水素であるインドリノン化合物である。 別の観点では、本発明は、以下の段階： （ａ）式ＸＩＶのアルデヒドを式ＸＶのオキシインドールと反応させ； 式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、およびＲ₁₁はこ こに記載するものである；そして、 （ｂ）アルデヒドおよびオキシインドール反応物からインドリノン化合物を分 別する； からなる、インドリノン化合物の合成法を特徴とする。 別の観点では、本発明は、オキシインドール環の３位に置換基を有するインド リノン化合物に特徴があり、オキシインドール環の３位の置換基は、ヘテロな５ または６員環からなる群から選択される。以下に示すように、オキシインドール を水溶性を向上する置換基で更に置換する。 本発明の好ましい態様は、以下の式の化合物に関する：式中、 （ａ）Ａは、チオフェン、ピロール、ピラゾール、イミダゾール、１，２，３ −トリアゾール、１，２，４−トリアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール 、チアゾール、イソチアゾール、フラン、１，２，３−オキサジアゾール、１， ２，４−オキサジアゾール、１，２，５−オキサジアゾール、１，３，４−オキ サジアゾール、１，２，３，４−オキサトリアゾール、１，２，３，５−オキサ トリアゾール、１，２，３−チアジアゾール、１，２，４−チアジアゾール、１ ，２，５−チアジアゾール、１，３，４−チアジアゾール、１，２，３，４−チ アトリアゾール、１，２，３，５−チアトリアゾール、およびテトラゾールから なる群から選択されるヘテロな５員環であり； （ｂ）ｍは０、１、または２であり； （ｃ）Ｒ₁は水素、Ｃ₁−Ｃ₆のアルキル、またはＣ₂−Ｃ₆のアルカノイルであ り； （ｄ）Ｒ₂およびＲ₃は、独立して、一方が水素であり、他方が、 （１）１、２、または３個の水酸基で置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキル基； （２）ＳＯ₃Ｒ₄（式中、Ｒ₄は水素、あるいは、置換されていない、または １、２、もしくは３個の水酸基で置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキルである）； （３）ＳＯ₂ＮＨＲ₅（式中、Ｒ₅は上に定義したＲ₄、またはｎが２または３ である−（ＣＨ₂）_n−Ｎ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）₂である）； （４）ＣＯＯＲ₆（式中、Ｒ₆は、置換されていないＣ₁−Ｃ₆のアルキル、フ ェニルまたは１、２、もしくは３個の水酸基で置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキル、 あるいはフェニルである）； （５）ＣＯＮＨＲ₇（式中、Ｒ₇は水素、フェニル、あるいは１、２、もしく は３個の水酸基またはフェニルで置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキルである）； （６）ＮＨＳＯ₂Ｒ₈（式中、Ｒ₈はＣ₁−Ｃ₆のアルキル、あるいは置換され ていない、またはハロゲンもしくはＣ₁−Ｃ₄のアルキルで置換されたフェニルで ある）； （７）Ｎ（Ｒ₉）₂、ＮＨＲ₉、またはＯＲ₉（式中、Ｒ₉は１、２、または３ 個の水酸基で置換されたＣ₂−Ｃ₆のアルキルである）； （８）ＮＨＣＯＲ₁₀、ＯＯＣＲ₁₀、またはＣＨ₂ＯＯＣＲ₁₀（式中、Ｒ₁₀は １、２、または３個の水酸基で置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキルである）； （９）ＮＨＣＯＮＨ₂ ； ＮＨ−Ｃ（ＮＨ₂）＝ＮＨ ； Ｃ（ＮＨ₂）＝ ＮＨ ； ＣＨ₂ＮＨＣ（ＮＨ₂）＝ＮＨ ； ＣＨ₂ＮＨ₂ ； ＯＰＯ（ＯＨ）₂ ； ＣＨ₂ＯＰＯ（ＯＨ）₂ ； ＰＯ（ＯＨ）₂ ； または以下の基： 式中、ＸはＣＨ₂、ＳＯ₂、ＣＯ、またはＮＨＣＯ（ＣＨ₂）_p（ｐは１、２、また は３）からなる群から選択され、ＺはＣＨ₂、Ｏ、またはＮ−Ｒ₁₁（Ｒ₁₁は水素 、または上に定義したＲ₉）である； から選択される置換基である。 “アルカノイル”とは式−（Ｒ）_n−ＣＯ−Ｒ’（式中、ＲおよびＲ’はアル キルまたはアリールからなる群から選択され、ｎは０または１である）を有する 化学基をいう。 プロテインキナーゼの触媒活性の阻害剤は当該分野で知られている。小型分子 の阻害剤は一般に、プロテインキナーゼの活性部位と強く相互作用することによ り、基質の結合を遮断する。例えば、インドリノン化合物は、阻害定数がおよそ １０^-6Ｍであることからわかるように、プロテインキナーゼの活性部位に結合し て分子を効果的に阻害することができる。 本発明の好ましい態様は、ＦＬＫプロテインキナーゼの触媒活性を阻害する水 溶性インドリノン化合物に関する。好ましくは、インドリノンは５０μＭ未満の ＩＣ₅₀でＦＬＫプロテインキナーゼの触媒活性を阻害し、より好ましくは５μＭ 未満のＩＣ₅₀、最も好ましくは０．５μＭ未満のＩＣ₅₀である。 別の観点では、本発明は、以下の段階： （ａ）式ＸＶＩのアルデヒドを式XVIIのオキシインドールと反応させ； 式中、 （ａ）Ａは酸素、炭素、硫黄、および窒素からなる群から選択される原子か らなる５または６員環であり； （ｂ）ｍは０、１、または２であり； （ｃ）Ｒ₁は水素、Ｃ₁−Ｃ₆のアルキル、またはＣ₂−Ｃ₆のアルカノイルで あり； （ｄ）Ｒ₂およびＲ₃は、独立して、一方が水素であり、他方が、 （１）１、２、または３個の水酸基で置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキル基 ； （２）ＳＯ₃Ｒ₄（式中、Ｒ₄は水素、あるいは、置換されていない、ま たは１、２、もしくは３個の水酸基で置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキル基である） ； （３）ＳＯ₂ＮＨＲ₅（式中、Ｒ₅は上に定義したＲ₄、またはｎが２また は３である−（ＣＨ₂）_n−Ｎ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）₂である）； （４）ＣＯＯＲ₆（式中、Ｒ₆は、置換されていないＣ₁−Ｃ₆のアルキル 、フェニルまたは１、２、もしくは３個の水酸基で置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキ ル、あるいはフェニルである）； （５）ＣＯＮＨＲ₇（式中、Ｒ₇は水素、フェニル、あるいは１、２、も しくは３個の水酸基またはフェニルで置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキルである）； （６）ＮＨＳＯ₂Ｒ₈（式中、Ｒ₈はＣ₁−Ｃ₆のアルキル、あるいは置換 されていない、またはハロゲンもしくはＣ₁−Ｃ₄のアルキルで置換されたフェニ ルである）； （７）Ｎ（Ｒ₉）₂、ＮＨＲ₉、またはＯＲ₉（式中、Ｒ₉は１、２、また は３個の水酸基で置換されたＣ₂−Ｃ₆のアルキルである）； （８）ＮＨＣＯＲ₁₀、ＯＯＣＲ₁₀、またはＣＨ₂ＯＯＣＲ₁₀（式中、Ｒ_{1 0} は１、２、または３個の水酸基で置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキルである）； （９）ＮＨＣＯＮＨ₂ ； ＮＨ−Ｃ（ＮＨ₂）＝ＮＨ ； Ｃ（ＮＨ） ＝Ｎ₂Ｈ ； ＣＨ₂ＮＨＣ（ＮＨ₂）＝ＮＨ ； ＣＨ₂ＮＨ₂ ； ＯＰＯ（Ｏ Ｈ）₂ ； ＣＨ₂ＯＰＯ（ＯＨ）₂ ； ＰＯ（ＯＨ）₂ ； または以下の基： 式中、ＸはＣＨ₂、ＳＯ₂、ＣＯ、またはＮＨＣＯ（ＣＨ₂）_p（ｐは１、２、また は３）からなる群から選択され、ＺはＣＨ₂、Ｏ、またはＮ−Ｒ₁₁（Ｒ₁₁は水素 、または上に定義したＲ₉）である； から選択される置換基であり；そして、 （ｂ）アルデヒドおよびオキシインドール反応物からインドリノン化合物を分 別する； からなる、水溶性インドリノン化合物の合成法を特徴とする。 本発明の別の観点は、本発明のオキシインドリノン化合物および生理学的に許 容しうる担体または希釈剤を含有する薬剤組成物を特徴とする。 以下に記載する態様では、ＦＬＫに対して活性を有する化合物の好ましいサブ クラスを示す。従って、ある態様では、本発明は以下の式を有する化合物を提供 する： 式中、 Ｒ₁は水素またはアルキル（好ましくは低級アルキル、より好ましくはメチル ）であり； Ｒ₂は酸素または硫黄であり； Ｒ₃は水素またはメチルであり； Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、およびＲ₇はそれぞれ独立して、水素（好ましくはＲ₄、Ｒ₅、 Ｒ₆、およびＲ₇の少なくとも２または３個が水素である）、アルキル（好ましく は低級アルキル、より好ましくはメチル）、ハロゲン、ＮＯ₂、およびＮＲＲ’ からなる群から選択され； Ｒ_2'、Ｒ_3'、Ｒ_4'、Ｒ_5'、およびＲ_6'はそれぞれ独立して、水素、アルキル、 ハロゲン、ＮＯ₂、ＮＲＲ’（ＮＲＲ’は合わせて、必要によりＣＯＨで置換さ れた非芳香族ヘテロ５または６員環を形成してもよい）、ＯＨ、ＯＲＮＲＲ’、 およびＯＲからなる群から選択され； Ｒは水素、アルキル、またはアリールであり；そして、 Ｒ’は水素、アルキル、またはアリールである。 別の態様では、本発明は以下の式を有する化合物を提供する：式中、 Ｒ₁は水素またはアルキル（好ましくは低級アルキル、より好ましくはメチル ）であり； Ｒ₂は酸素または硫黄であり； Ｒ₃は水素またはメチルであり； Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、およびＲ₇はそれぞれ独立して、水素、アルキル（好ましくは 低級アルキル、より好ましくはメチル）、ハロゲン、およびＮＲＲ’からなる群 から選択され； Ｒ_2'、Ｒ_3'、Ｒ_4'、およびＲ_5'はそれぞれ独立して、水素、アルキル、ハロゲ ン、および（アルキル）_nＣＯ₂Ｒからなる群から選択され； Ｒは水素、アルキル、またはアリールであり；そして、 Ｒ’は水素、アルキル、またはアリールである。 別の態様では、本発明は以下の式を有する化合物を提供する： 式中、 Ｒ₁、Ｒ₂、およびＲ₃はそれぞれ独立して、水素、アルキル、ハロゲン、およ び（アルキル）_nＣＯ₂Ｒからなる群から選択され； Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、およびＲ₇はそれぞれ独立して、水素、アルキル（好ましくは 低級アルキル、より好ましくはメチル）、ハロゲン、およびＮＲＲ’からなる群 から選択され； Ｒ₈およびＲ₉は独立して水素またはアルキルであり； Ｒは水素、アルキル、またはアリールであり；そして、 Ｒ’は水素、アルキル、またはアリールである。 別の態様では、本発明は以下の式を有する化合物を提供する： 式中、 Ｒ_1'、Ｒ_2'、Ｒ_3'、Ｒ_4'、およびＲ₇はそれぞれ独立して、水素、アルキル（ 好ましくは低級アルキル、より好ましくはメチル）、ハロゲン、およびＮＲＲ’ からなる群から選択され； Ｒ₈およびＲ₉は独立して水素またはアルキルであり； Ｒは水素、アルキル、またはアリールであり；そして、 Ｒ’は水素、アルキル、またはアリールである。 別の観点では、本発明は、以下の段階： （ａ）好適なアルデヒドを好適なオキシインドールと反応させ； （ｂ）アルデヒドおよびオキシインドール反応物からインドリノン化合物を分 別する； からなる、インドリノン化合物の合成法を特徴とする。 別の態様において、本発明はプロテインキナーゼの触媒活性を調節するインド リノン化合物、塩、エステル、アミド、前駆薬、異性体またはそれらの代謝物を 特色としている。 用語”調節する”とはプロテインキナーゼの触媒活性を変化させる化合物の能 力を意味している。活性調節因子は好適にはプロテインキナーゼの触媒活性を活 性化し、より好適にはプロテインキナーゼに暴露された化合物の濃度に依存して プロテインキナーゼの触媒活性を活性化または阻害し、最も好適にはプロテイン キナーゼの触媒活性を阻害する。 用語”プロテインキナーゼ”は種々の細胞機能を制御するタンパク質の群と定 義される。プロテインキナーゼはタンパク質基質を可逆的にリン酸化し、それに より基質タンパク質のコンホメーションを変化させることにより細胞の機能を制 御している。コンホメーションの変化は基質の触媒活性または他の相手と相互作 用するその能力を調節する。 本明細書の文脈において、用語”触媒活性”とはプロテインキナーゼが基質を リン酸化する速度と定義される。触媒活性は、例えば、生成物へ変換された基質 の量を時間の関数として決定することにより測定できる。基質のリン酸化はプロ テインキナーゼの活性部位で起こる。活性部位は通常空洞状になっており、そこ で基質がプロテインキナーゼと結合し、リン酸化される。 本発明の好適な態様はＦＬＫプロテインキナーゼの触媒活性を阻害するインド リノン化合物に関している。インドリノンは好適には５０μＭ未満のＩＣ₅₀で、 より好適には５μＭ未満のＩＣ₅₀で、最も好適には０．５μＭ未満のＩＣ₅₀でＦ ＬＫプロテインキナーゼの触媒活性を阻害する。 用語”ＦＬＫ”とはタンパク質基質のチロシン残基をリン酸化するプロテイン キナーゼを意味している。ＦＬＫプロテインキナーゼはＶＥＧＦ増殖因子に応答 して細胞機能を制御している。これらの細胞機能には、細胞増殖および特に組織 における血管増殖が含まれるが、これらに制限されるわけではない。 本明細書の文脈において、用語”ＩＣ₅₀”とはＦＬＫプロテインキナーゼ触媒 活性の５０％を阻害するのに必要とされる特定のインドリノン濃度を記述するパ ラメーターを意味している。ＩＣ₅₀パラメーターは本明細書に記載したアッセイ を用い、特定のインドリノン化合物濃度を変化させることにより測定できる。 本発明の別の態様は、本発明のインドリノン化合物、塩、エステル、アミド、 プロドラッグ、異性体またはそれらの代謝物および生理学的に受容可能な担体ま たは希釈剤を含む、から本質的に成る、またはから成る医薬組成物を特色として いる。 用語”医薬組成物”とは本発明のインドリノン化合物と希釈剤または担体のよ うな他の化学成分の混合物を意味している。医薬組成物は、化合物の生物体への 投与を容易にする。本分野では化合物を投与する多くの技術が存在しており、経 口、注射、エアロゾル、非経口および局所投与などが含まれるが、これらに制限 されるわけではない。医薬組成物はまた化合物を塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸 、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サ リチル酸などのような無機酸と反応させることによっても得ることができる。 用語”生理学的に受容可能”とは、担体または希釈剤が生物体に有意な刺激を 起こさず、および化合物の生物学的活性および特性を消失させないことと定義さ れる。 用語”担体”とは、化合物の細胞または組織内への取り込みを容易にする化学 化合物と定義される。例えば、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は多くの有機 化合物の生物体細胞または組織内への取り込みを容易にするので普通に担体とし て利用される。 用語”希釈剤”とは、問題とする化合物を溶解し、並びに化合物の生物学的活 性形を安定化させるであろう、水に希釈された化学化合物と定義される。緩衝化 溶液に溶解された塩が本分野では希釈剤として利用される。一つの普通に使用さ れる緩衝化溶液はリン酸緩衝化塩溶液であり、なぜなら、それはヒト血液の塩濃 度と同じであるからである。緩衝液塩は低濃度で溶液のｐＨを調節できるので、 緩衝化希釈液は化合物の生物学的活性をほとんど変化させない。 本発明の別の態様は生物体の異常な状態を防止または処置する方法を特色とし ている。異常な状態はプロテインキナーゼおよび天然の結合相手間の相互作用に より特徴づけられるシグナル伝達経路における異常に関連している。本方法は以 下の工程を含んでいる：（ａ）生物体へ本発明の化合物を投与し；（ｂ）異常な 相互作用を促進または破壊する。 用語”防止”とは生物体が異常な状態を獲得することを妨げる方法を意味して いる。 用語”処置”とは生物体における異常な状態を緩和または消失させる方法を意 味している。 用語”生物体”とは少なくとも一つの細胞から成る生きている実体に関してい る。生物体は一つの真核細胞のように単純であっても、または哺乳類のように複 雑であってもよい。 用語”異常な状態”とは生物体の細胞または組織中の機能がその生物における それらの正常な機能から逸脱していることを意味している。異常な状態は細胞増 殖、細胞分化または細胞生存に関連することができる。 異常な細胞増殖状態には、線維症およびメサンギウムの障害のような癌、異常 な血管新生および脈管形成、創傷治癒、乾癖、糖尿病および炎症が含まれる。 異常な分化状態には、神経変性障害、遅い創傷治癒速度および組織移植技術が 含まれるが、それらに制限されるわけではない。 異常な細胞生存状態は、プログラム化された細胞死（アポトーシス）経路が活 性化または消失した状態に関連している。多くのプロテインキナーゼはアポトー シス経路に関連している。一つのプロテインキナーゼの機能異常で細胞不死化ま たは早熟細胞死を導くことができる。 細胞増殖、分化および生存は本分野の方法で簡単に測定できる現象である。こ れらの方法には、時間（日数）に関して顕微鏡下で細胞数または細胞の様子を観 察することが含まれるであろう。 用語”投与”とは生物体の細胞または組織内へ化合物を取り込ませる方法に関 している。異常な状態は、生物体の細胞または組織が生物体内または外部に存在 している場合に防止または処置できる。生物体外部に存在する細胞は細胞培養皿 で維持または増殖できる。生物体内に存在している細胞に対しては、経口、非経 口、経皮、注射およびエアロゾル投与を含む（これらに制限されない）、化合物 を投与するための多数の技術が本分野には存在している。生物体外の細胞に対し ては、細胞マイクロインジェクション技術、形質転換技術および担体技術を含む （これらに制限されない）、化合物を投与するための多数の技術が本分野には存 在している。 異常状態はまた、シグナル伝達過程に異常を持つ細胞群を生物体に投与するこ とによっても防止または処置できる。生物体機能に対する化合物投与の影響が続 いてモニターできる。本分野には、多数の生物体へ細胞を導入する方法ならびに 生物体へ化合物を投与する方法が存在する。生物体とは好適にはカエル、より好 適にはマウス、ラット、ウサギ、モルモット、ブタまたはヤギ、最も好適にはサ ルまたは類人猿である。 用語”シグナル伝達経路”とは細胞膜を通って細胞内シグナルとなる、細胞外 シグナルを伝える分子を意味している。このシグナルは続いて細胞応答を刺激で きる。シグナル伝達経路に含まれているポリペプチド分子は、典型的にはレセプ ターおよび非レセプタープロテインキナーゼ、レセプターおよび非レセプターホ スファターゼ、ヌクレオチド交換因子および転写因子である。 シグナル伝達経路に関連した用語”異常”とは生物体で過剰または過少発現さ れた、その触媒活性が野生型プロテインキナーゼ活性よりも低いまたは高いよう に改変された、天然の結合相手ともはや相互作用しないように改変された、他の プロテインキナーゼまたはプロテインホスファターゼによりもはや修飾されない 、または天然の結合相手とはもはや結合しないプロテインキナーゼに関している 。 用語”天然の結合相手”とは通常は細胞内でプロテインキナーゼの細胞内領域 と結合するポリペプチドを意味している。これらの天然の結合相手はプロテイン キナーゼシグナル伝達経路におけるシグナルの伝搬の役割を持っている。天然の 結合相手はプロテインキナーゼ細胞内領域に高い親和性で結合することができる 。高い親和性とは１０^-6Ｍまたはそれ未満程度の平衡結合定数を意味している。 しかしながら、天然の結合相手はまた過渡的にプロテインキナーゼ細胞内領域と 相互作用でき、それを化学的に修飾する。プロテインキナーゼ天然の結合相手は ｓｒｃホモロジー２（ＳＨ２）または３（ＳＨ３）ドメイン、他のホスホリルチ ロシン結合（ＰＴＢ）ドメインおよび他のプロテインキナーゼまたはプロテイン ホスファターゼから成る群（これらの制限されない）より選ばれる。 用語”異常相互作用の促進または破壊”とは生物体の細胞または組織へ本発明 の化合物を投与することにより達成できる方法に関している。化合物は、複合体 境界面で多数のアミノ酸と好ましい相互作用を行うことによりプロテインキナー ゼおよび天然の結合相手間の相互作用を促進できる。もしくは、化合物は複合体 境界面で多数のアミノ酸と好ましい相互作用を危うくすることによりプロテイン キナーゼおよび天然の結合相手間の相互作用を阻害できる。 本発明の好適な態様は生物体（ここで生物体とは哺乳類である）の異常状態を 処置する方法に関している。 用語”咄乳類”とは好適にはマウス、ラット、ウサギ、モルモット、ブタまた はヤギ、より好適にはサルまたは類人猿、および最も好適にはヒトを意味してい る。 本発明の別の好適な態様はＦＬＫプロテインキナーゼに関連する異常状態を処 置または防止する方法に関している。 本発明の別の好適な態様は血小板由来増殖因子プロテインキナーゼの触媒活性 を阻害するインドリノン化合物に関している。インドリノンは好適には５０μＭ 未満のＩＣ₅₀、好適には５μＭ未満のＩＣ₅₀、および最も好適には０．５μＭ未 満のＩＣ₅₀で血小板由来増殖因子プロテインキナーゼの触媒活性を阻害する。 用語”血小板由来増殖因子”とは基質のチロシン残基をリン酸化するプロテイ ンキナーゼを意味している。血小板由来増殖因子プロテインキナーゼはＰＤＧＦ 増殖因子に応答して細胞機能を制御している。これらの機能には細胞増殖が含ま れるが、これに制限されるわけではない。 本明細書に関した化学構造式は互変異性または構造異性の現象を示すであろう 。例えば、本明細書に記載した化合物はインドリノン３−置換基をインドリノン 環に結合している二重結合に関してシスまたはトランスのコンホメーションをと ることができるし、シスおよびトランス異性体の混合物であってもよい。本明細 書に描かれた式は一つの可能な互変異性または構造異性形のみを表すことができ るが、本発明チロシンキナーゼシグナル伝達または細胞増殖を制御、阻害および ／または調節する能力を持つ任意の互変異性または構造異性形を包含しており、 式で利用されている一つの互変異性または構造異性形に制限されないことを理解 するべきである。 上記の化合物に加えて、本発明は（当てはまる場合）さらに、細胞増殖を制御 および／または調節する能力を持っている化合物の溶媒和ならびに非溶媒和形（ 例えば、水和形）にも関している。 本明細書に記載された化合物は、化学的に関連した化合物の製造に利用可能で あることが知られている方法により製造されるであろう。適した方法は実施例に 例示されている。必要な出発物質は有機化学の標準法により得ることができるで あろう。 レセプターチロシンキナーゼ媒介シグナル伝達に影響する試剤として個々の化 合物の関連する活性および有効性は、利用可能な技術を用いて決定されるであろ う。好適には、化合物は細胞増殖を調節、制御および／または阻害する化合物の 能力を決定する一連のスクリーニングにかけられる。これらのスクリーニングは 、それらが実施される順に、生化学的アッセイ、細胞増殖アッセイおよびインビ ボ実験を含んでいる。 上記の本発明の要約は、以下の発明の詳細な説明から、および請求の範囲から 明らかになるであろう本発明の他の特色および利点を制限するものではない。図および表の簡単な説明 図１はタイプＡオキシインドールを図示している。 図２はタイプＢアルデヒドを図示している。 表１は本発明の化合物の例を図示している。本表は各々のインドリノンの分子 構造、化合物の分子量および化合物の化学式を示している。 表２は本発明の選択された化合物の生物学的活性を示している。掲げられてい るのは化合物の化学構造とＦＬＫ−１生物学的阻害アッセイで測定されたＩＣ₅₀ 値である。 表３には本発明で使用できる好適なインドールに基づいたアルデヒドが示され ている。 表４は本発明で使用できる好適なオキシインドールを示している。 表５は本発明の化合物の例を図示している。本表は各々のインドリノンの分子 構造、化合物の分子量および化合物の化学式を示している。 表６および７は本発明の選択された化合物の生物学的活性を示している。掲げ られているのは化合物の化学構造とＦＬＫ−１および血小板由来増殖因子プロテ インキナーゼ（ＰＤＧＦＲ）生物学的阻害アッセイで測定されたＩＣ₅₀値である 。 表８は本発明の化合物の例を図示している。本表はインドリノン例の分子構造 および本発明の選択された化合物の生物学的活性を示している。掲げられている のは化合物の化学構造とＦＬＫ−１生物学的阻害アッセイで測定されたＩＣ₅₀値 である。 表９は本発明の例示化合物を掲げている。 表１０は本発明の例示化合物のＦＬＫ活性データを示している。 表１１はタイプＡオキシインドールを示している。 表１２はタイプＢアルデヒドを示している。 表１３は本発明のいくつかのインドリノン化合物の名称を示している。 表１４は本明細書に説明されたアッセイを用いて決定された、表１３に掲げら れた化合物のキナーゼデータを示している。発明の詳細な説明 本発明は一部、腫瘍の生命維持源を切断することにより腫瘍を消してしまうプ ロテインキナーゼ阻害剤の設計に関している。本阻害剤は、腫瘍に生命維持物を 供給する血管系で過剰発現されるプロテインキナーゼに特異的に結合するように 設計される。一つのそのようなプロテインキナーゼ標的は、成長している腫瘍の 増殖内皮細胞で過剰発現されるが、周囲の静止性内皮細胞では過剰発現されてい ないＦＬＫ−１である。Ｐｌａｔｅ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｎａｔｕｒｅ ３５９：８４５−８４８。 ＦＬＫ−１は内皮細胞増殖ならびに正常および病的血管新生の強力な調節物で あるＶＥＧＦの結合により活性化される。Ｋｌａｇｓｂｕｒｎ ａｎｄ Ｓｏｋ ｅｒ，１９９３，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｊｏｌｏｇｙ ３：６９９−７０２。従っ て、ＦＬＫプロテインキナーゼを特異的に阻害する化合物は、腫瘍を養う血管を 減少させるので抗癌剤である可能性がある。これらの化合物は固形腫瘍を小さく するおよびさらには消してしまうこともありそうである。加えて、ＦＬＫを特異 的に阻害する化合物は、ほとんど副作用を示さないようであるので、新世代の癌 治療法となる可能性があるであろう。これらの可能性のある特性は、多くの副作 用を持ち、患者を有害作用で弱める現在利用されている癌治療に対して歓迎され る改良点である。インドリノン化合物の合成 本発明のインドリノン化合物は本明細書で提供された実施例に示されたように 、アルデヒドとオキシインドールを反応させることにより合成された。インドリ ノン化合物を合成するための方法の説明は本明細書に記載された実施例に提供さ れている。実施例は溶媒、温度、分離技術および本発明で利用された他の条件を 十分に説明している。１９９６年８月１日に公開されたＢａｌｌｉｎａｒｉらに よる国際特許出願第ＷＯ９６／２２９７６号、および１９９６年１２月１９日に 公開されたＴａｎｇらによる第ＷＯ９６／４０１１６号に説明されているような 他の合成技術もまた本発明の化合物を作製するために当業者により使用または適 用されるであろう。インドリノン化合物の特異的合成に使用された方法の説明が 本明細書に開示されている。インドリノン化合物の生物学的活性 本発明のインドリノン化合物はプロテインキナーゼを活性化または阻害するそ れらの能力が生物学的アッセイにおいて試験できる。プロテインキナーゼ機能の インドリノン調節を測定するために使用された方法が本明細書に開示されている 。本発明のインドリノン化合物は、ＦＬＫプロテインキナーゼを阻害する能力で 試験された。生物学的アッセイおよびこれらの阻害研究の結果が本明細書に報告 されている。イントリノン化合物により処置されるべき標的疾患 プロテインキナーゼは種々の細胞機能を制御する必須制御分子である。このた め、プロテインキナーゼの変化は生物体に異常な状態を起こすことができる。プ ロテインキナーゼにより制御されている多くの機能の一つは細胞増殖である。 通常細胞増殖を制御しているプロテインキナーゼ機能の変化は、ある種の疾患 における細胞増殖の促進または減少を導くことができる。異常な細胞増殖状態に は、線維症およびメサンギウムの障害のような癌、異常な血管新生および脈管形 成、創傷治癒、乾癬、再狭窄、糖尿病および炎症が含まれる。 線維症障害およびメサンギウム細胞増殖障害は１９９６年１２月１９日に公開 されたＴａｎｇらによる国際特許出願第ＷＯ９６／４０１１６号に記載されてい る。 血管新生および脈管形成障害は血管の過剰増殖により生じる。血管増殖は、胎 児発育、黄体形成、創傷治癒および器官再生のような種々の正常な生理学的過程 で必要である。しかしながら、血管増殖はまた癌腫瘍発育に必須のものでもある 。血管増殖性障害の他の例としては、新生毛細血管が関節に侵襲して軟骨を破壊 する関節炎が挙げられる。加えて、血管増殖性障害には網膜中の新生毛細血管が 硝子体を侵襲し、出血して失明を起こす糖尿病性網膜症のような眼球障害が含ま れる。逆に、再狭窄のような血管の収縮、狭窄または閉鎖に関連する障害もまた 、ＲＰＫまたはＲＰＰによる逆の制御が示唆されている。 さらに、脈管形成および血管新生は悪性固形腫瘍の増殖および転移に付随して いる。激しく増殖している癌腫瘍は、その増殖を続けるために栄養および酸素が 豊富な血液を必要とする。その結果、異常に多くの毛細血管が腫瘍に協調して成 長し、腫瘍への供給ラインとして働いている。腫瘍へ栄養を供給することに加え 、脛瘍を取り巻く新生血管は、腫瘍細胞が循環系へ入る、および生物体の離れた 部位へ転移するための入り口を提供する。Ｆｏｌｋｍａｎ，１９９０，Ｊ．Ｎａ ｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．８２：４−６。 血管新生および脈管形成障害はＦＬＫプロテインキナーゼと密接に結びついて いる。ＦＬＫ−１は、上皮細胞増殖ならびに正常および病的血管新生の強力な制 御剤であるＶＥＧＦの結合により活性化される。Ｋｌａｇｓｂｕｒｎ ａｎｄ Ｓｏｋｅｒ，１９９３，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｌｏｇｙ ３：６９９−７０２ 。従って、ＦＬＫプロテインキナーゼを特異的に阻害する化合物は、腫瘍を養っ ている血管系を減少させるので、強力な抗癌剤である。これらの阻害剤が固形腫 瘍を最少化しおよびさらには消し去ることはありそうである。加えて、ＦＬＫを 特異的に阻害する化合物は、ほとんど副作用を示さないようであるので、新世代 の癌治療法となる可能性があるであろう。これらの可能性のある特性は、多くの 副作用を持ち、患者を有害作用で弱める現在利用されている癌治療に対して歓迎 される改良点である。 細胞増殖に加え、いくつかのＲＰＫおよびＲＰＰは次の細胞機能、細胞生存お よび細胞死を制御している。例えば、グリア由来増殖因子（ＧＤＮＦ）は多ｃ− ｒｅｔレセプターを密接させて一緒に結合し、細胞内領域の交差リン酸化を促進 することによりｃ−ｒｅｔを活性化する。これらのホスホリル基の結果として( ｇｒｂ−１、ｓｏｓ，ｒａｓおよびｒａｆのような）、ｃ−ｒｅｔと複合体を形 成するシグナル伝達分子が細胞中にシグナルを伝搬し、神経生存を促進する。従 って、ｃ−ｒｅｔのこれらの刺激性分子の相互作用を助長する化合物はｃ−ｒｅ ｔの活性を促進するであろう。もしくは、ＧＤＮＦに応答してｃ−ｒｅｔの細胞 内領域上に位置しているホスホリル基をプロテインホスフアターゼは除去でき、 ｃ−ｒｅｔのシグナル伝達特性を阻害できる。従って、ｃ−ｒｅｔのホスファタ ーゼを阻害する化合物はｃ−ｒｅｔのシグナル伝達力を促進するであろう。本発 明の状況において、特にオキシインドール環の５位が置換基で修飾されているイ ンドリノン化合物によりｃ−ｒｅｔプロテインキナーゼが活性化できた。 ｃ−ｒｅｔはＧＤＮＦの刺激による腸、シナプスおよび感覚ニューロンおよび 腎系のニューロンの発育に関係している。例えば、ｃ−ｒｅｔ突然変異による機 能不足はヒルシュスブルング病へ導き、患者における腸管神経支配の低下として 現れる。従って、ｃ−ｒｅｔを活性化する化合物はヒルシュスブルング病、パー キンソン病、アルツハイマー病および筋萎縮性側索硬化症を含む（これらに制限 されるわけではない）神経変性性障害処置のための見込みのある治療薬である。 甲状腺癌のような癌において細胞のｒｅｔの過剰発現が関係があるとされている ので、ｃ−ｒｅｔ機能を阻害する化合物は見込みのある抗癌剤である。医薬組成物およびインドリノン化合物の投与 化合物の医薬製剤の製造法、患者に投与されるべき化合物量の決定法、および 生物体への化合物の投与様式は１９９６年８月１日に公開されたＢａｌｌｉｎａ ｒｉらによる国際特許出願第ＷＯ９６／２２９７６号（図面を含み全文が本明細 書において援用される）に開示されている。当業者はそのような記述が本発明に 利用可能であり、容易に適用できること理解するであろう。そのような作用の機 構およびそのような化合物の可能な使用は１９９６年１２月１９日に公開された Ｔａｎｇらによる国際特許出願第ＷＯ９６／４０１１６号に記載されている。 本明細書で記載した化合物はヒト患者へそれ自体で、または適した担体または 賦形剤と混合された医薬組成物として投与できる。本出願の化合物の処方および 投与のための技術は、”Ｒｅｍｉｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ ，ＰＡ，最新版、または１９９６年１２月１９日に公開されたＴａｎｇらによる 国際特許出願第ＷＯ９６／４０１１６号にみることができるであろう。有効用量 本発明での使用に適した医薬組成物には、活性成分がその意図された目的を達 成するために有効な量で含有されている組成物が含まれる。特に、治療的に有効 な量とは、疾患徴候を防止、軽減または回復する、または処置されている患者の 生存を延長するために有効である化合物の量を意味している。治療的に有効な量 の決定は当業者の手腕にまかされているが、特に本明細書に提供されている詳細 な開示および１９９６年１２月１９日に公開されたＴａｎｇらによる国際特許出 願第ＷＯ９６／４０１１６号を考慮されたい。包装 本組成物は、必要に応じ、１９９６年１２月１９日に公開されたＴａｎｇらに よる国際特許出願第ＷＯ９６／４０１１６号に提供されている説明に従った、活 性成分を含有している一つまたはそれ以上の単一剤形を含む、パックまたは調剤 デバイス中に存在しているであろう。実施例 以下の実施例は制限のためではなく、単に本発明の種々の態様および特色を例 示しているものである。実施例は本発明のインドリノン化合物の合成法を示して いる。実施例はまた、これらの化合物が細胞中のプロテインキナーゼ機能を阻害 する特異性ならびに能力も示している。実施例１：化合物合成 本発明の化合物は１９９６年１２月１９日に公開されたＴａｎｇらによる国際 特許出願第ＷＯ９６／４０１１６号に記載されているような既知の技術に従って 合成されるであろう。以下に特許請求された本発明の化合物を合成するための好 適な方法が示されている。 （ａ）４−メチル−２−オキシインドールの製造。２０ｍＬの乾燥エーテル に溶解したジエチルオキザレート（３０ｍＬ）を５０ｍＬの乾燥エーテルに懸濁 した１９ｇのカリウムエトキシドに撹拌しながら加えた。混合物を氷浴で冷却し 、３−ニトロ−ｏ−キシレン（２０ｍＬ）の乾燥エーテル（２０ｍＬ）溶液を徐 々に加えた。粘稠な暗赤色混合物は０．５時間加熱還流した後、暗赤色固形物に なるまで濃縮し、ほとんどすべての固形物が溶解するまで１０％水酸化ナトリウ ムで処理した。暗赤色混合物は、暗赤色が黄色に変化するまで３０％過酸化水素 で処理した。混合物はもしくは、暗赤色がなくなるまで１０％水酸化ナトリウム および３０％過酸化水素で処理した。固形物を濾過し、濾液を６Ｎ塩酸で酸性と した。生じた沈澱を減圧濾過により集め、水で洗浄し、真空下で乾燥させると９ ．８ｇ（収率４５％）の１−メチル−６−ニトロフェニル酢酸が灰色がかった固 形物として得られた。固形物をメタノール中、１０％パラジウム−炭素を用いて 水素化すると９．０４ｇの表題化合物が白色固形物として得られた。 （ｂ）５−ニトロ−２−オキシインドールの製造。 ２−オキシインドール（ ６．５ｇ）を２５ｍＬの濃硫酸に溶解し、混合物を−１０から−１５℃に保ちな がら２．１ｍＬの発煙硝酸を滴加した。硝酸添加後、反応混合物は０℃で０．５ 時間撹拌して氷水に注いだ。濾過により沈澱を集め、水で洗浄して５０％酢酸か ら結晶化した。結晶は続いて濾過し、水で洗浄して真空下で乾燥すると６．３ｇ （７０％）の５−ニトロ−２−オキシインドールが得られた。 （ｃ）５−アミノ−２−オキシインドールの製造。 ５−ニトロ−２−オキシ インドール（６．３ｇ）をメタノール中、１０％パラジウム−炭素を用いて水素 化すると３．０ｇ（収率６０％）の表題化合物が白色固形物として得られた。 （ｄ）５−フルオロ−２−オキシインドールの製造。 ５−フルオロイサチン （８．２ｇ）を５０ｍＬのヒドラジン水和物に溶解し、１時間還流した。反応混 合物は次に氷水に注いだ。濾過により沈澱を集め、水で洗浄して真空オーブンで 乾燥すると６．０ｇの５−フルオロ−２−オキシインドールが得られた（収率７ ９％）。 （ｅ）５−ブロモ−２−オキシインドールの製造。 ２−オキシインドール（ １．３ｇ）のアセトニトリル（２０ｍＬ）溶液を−１０℃に冷却し、撹拌しなが ら２．０ｇのＮ−ブロモスクシンイミドを徐々に加えた。反応液は−１０℃で１ 時間、 ０℃で２時間撹拌した。沈澱を集め、水で洗浄して乾燥させると１．９ｇ（収率 ９０％）の表題化合物が得られた。 （ｆ）５−カルボキシ−２−オキシインドールの製造 工程１． ５−メトキシカルボニル−２−オキシインドールの製造。５−ヨ ード−２−オキシインドール（１７ｇ）を２ｇの二酢酸パラジウム、１８．１５ ｇのトリエチルアミン、１５０ｍＬのメタノール、１５ｍＬのジメチルスルホキ シドおよび２．６ｇのＤＰＰＰと一酸化炭素飽和雰囲気下で還流した。２４時間 後、反応液を濾過して触媒を除き、濾液を濃縮した。濃縮液は３０％の酢酸エチ ルを含むヘキサンで溶出するシリカゲルでのクロマトグラフィーを行った。生成 物を含む分画は濃縮して放置した。沈澱した生成物を減圧濾過により集めると、 ０．８ｇ（７％）の表題化合物が灰色がかった白色固形物として得られた。 工程２． ５−カルボキシ−２−オキシインドールの合成。 ５−メトキシ カルボニル−２−オキシインドール（１ｇ）および１ｇの水酸化ナトリウムのメ タノール（２０ｍＬ）溶液を３時間還流した。反応混合物は冷却し、濃縮乾固さ せた。残渣は水に溶解し、酢酸エチルで２回抽出した。水層を６Ｎ塩酸で酸性と し、沈澱した固形物を集めて水で洗浄し、乾燥させると０．７ｇ（７８％）の表 題化合物が灰色がかった白色固形物として得られた。 （ｇ）５−カルボキシエチル−２−オキシインドールの製造 工程１：５−クロロアセチル−２−オキシインドールの合成。 塩化アルミ ニウム（３０．８ｇ）および２−オキシインドール（５．０ｇ）を室温で２００ ｍｌの二硫化炭素に加え、混合物を撹拌した。塩化クロロアセチル（３．８ｍＬ ）を加え、撹拌を１時間続けた。次に混合物は３時間加熱還流し、冷却して溶媒 をデカントした。残渣は水水中で固形物が懸濁するまで撹拌した。固形物を減圧 濾過して集め、水で洗浄し、乾燥させると７．０ｇ（収率９０％）の表題化合物 が得られた。 工程２：５−クロロエチル−２−オキシインドールの合成。 ５−クロロア セチル−２−オキシインドール（７．０ｇ）を２５ｍＬのトリフルオロ酢酸に加 え、混合物は撹拌しながら氷浴中で冷却した。トリエチルシラン（１２．３ｍＬ ）を２分以上かけて滴加した。反応液は次に室温で４時間撹拌した後、氷水中に 注 いだ。ヘキサンを加え、混合物を激しく撹拌し、固形物を減圧濾過により集めて ヘキサンで洗浄すると、５．９ｇ（収率９１％）の生成物が白色固形物として得 られた。 工程３：５−シアノエチル−２−オキシインドールの合成。 シアン化カリ ウム（２．０２ｇ）を１５ｍＬのジメチルスルホキシドに加え、９０℃に加熱し た。５ｍＬのジメチルスルホキシドに溶解した５−クロロエチル−２−オキシイ ンドール（３．０ｇ）を撹拌しながら徐々に加え、反応液を１５０℃で２時間加 熱した。混合物を冷却して氷水中に注ぎ、沈澱を減圧濾過により集め、水で洗浄 して乾燥させると粗生成物が得られた。粗生成物は５％のメタノールを含むクロ ロホルムで溶出するシリカゲルでのクロマトグラフィーで精製すると、１．２ｇ （収率４２％）の表題化合物が得られた。 工程４：５−カルボキシエチル−２−オキシインドールの合成。 ５−シア ノエチル−２−オキシインドール（４．０２ｇ）を１０ｍＬの水および２５ｍＬ の濃塩酸に加え、４時間還流した。混合物を冷却して水を加え、生じる固形物を 減圧濾過により集め、水で洗浄して乾燥させると１．９ｇ（収率４４％）の表題 化合物が黄色固形物として得られた。 （ｈ）３，５−ジメチルピロール−２−カルボキシアルデヒドの製造 ５−シアノエチル−２−オキシインドール（４．０２ｇ）を１０ｍＬの水およ び２５ｍＬの濃塩酸に加え、４時間還流した。混合物を冷却して水を加え、生じ る固形物を減圧濾過により集め、水で洗浄して乾燥させると１.９ｇ（収率４４ ％）の表題化合物が黄色固形物として得られた。 （ｉ）３，５−ジメチルピロール−２−カルボキシアルデヒドの製造 ジメチルホルムアミド（８０．４ｇ）および１Ｌのジクロロメタン溶液に０℃ でオキシ塩化リン（１５３．３ｇ）を数分以上かけて加え、反応液は０℃で１− ２時間攪拌した。上記の溶液に、５℃以下の温度で２，４−ジメチルピロール（ １１４．６ｇ）を滴加した。滴加完了後、反応液を加熱して水層を分離し、保存 した。有機層は再び３００ｍＬの水で抽出し、二つの水層を併せた。水相は２０ ０ｍＬのジクロロメタンで抽出し、有機層は廃棄した。水相を１０℃に冷却し、 １０％水酸化ナトリウムでｐＨ１０に調整した。混合物は１０℃で２時間攪拌し た。 減圧濾過により黄色固形物を集め、十分に水で洗浄した。固形物を真空下、室温 で乾燥させると１１０．８ｇ（収率９０％）の２，４−ジメチル−５−ホルミル ピロールが得られた。 （ｊ）３，５−ジエチルピロール−２−カルボキシアルデヒドの製造： ２５．０ｇの３，５−ヘプタンジオンおよび４２．３ｇのアミノマロン酸ジエ チルの酢酸（２００ｍＬ）溶液を９５−１００℃で１．２５時間加熱した。酢酸 ナトリウムを加えて反応混合物を５．３５時間攪拌し、４時間冷ました。塩を濾 過し、酢酸で洗浄した。酢酸溶液は次に濃縮し、残渣を８００ｍＬの水に注いだ 。黄色固形物を濾過し、真空オーブン中で一夜乾燥すると３６．０ｇのエチル３ ，５−ジエチルピロール−２−カルボキサラートをオレンジ色の液体として得た （収率９２％）。 加水分解によるエチル ３，５−ジエチルピロール−２−カルボキサラートの 脱炭酸は２，４−ジエチルピロールを与えた。表題化合物は３，５−ジメチルピ ロール−２−カルボキシアルデヒドの製造に使用された条件と同一条件を用い、 ２，４−ジエチルピロールのビルスマイヤー処方により合成された。 （ｋ）３，５−ジイソプロピルピロール−２−カルボキシアルデヒドの製造： 方法は２，６−ジメチル−３，５−ヘプタンジオンから出発することを除き、 ３，５−ジエチルピロール−２−カルボキシアルデヒド製造のためのものと同じ である。実施例２：本発明のインドリノン化合物によるＦＬＫ阻害 ＦＬＫ−１レセプターの触媒活性を、特にＦＬＫ−１レセプターの触媒活性に 対するインドリノン化合物の阻害または活性化を測定するため酵素結合免疫吸着 アッセイ（ＥＬＩＳＡ）が実施された。特に、ＦＬＫ−１／ＮＩＨ３Ｔ３細胞に おけるＦＬＫ−１レセプターの触媒活性を測定するために以下のアッセイが実施 された。 ＦＬＫ−１ ＥＬＩＳＡアッセイのための材料およびプロトコールは１９９６ 年１２月１９日に公開されたＴａｎｇらによる国際特許出願第ＷＯ９６／４０１ １６号に記載されているものである。 選抜された化合物がＦＬＫ−１ ＥＬＩＳＡアッセイで試験された。ＩＣ₅₀測 定は表に報告されている。１’位にメチル置換基を持つ３−［（インドール−３ −イル）メチレン］−２−インドリノン化合物の誘導体がアッセイで試験された 化合物群で最も強力な阻害剤であることが証明された。実施例３：インビトロＲＴＫアッセイ 以下のインビトロアッセイは、一つまたはそれ以上のＲＴＫ活性レベルおよび それに対する本発明の異なった化合物の影響を決定するために使用される。本分 野でよく知られている技術を用い、チロシンキナーゼのための同一のラインに沿 って同一のアッセイが設計できる。 （ａ）酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ） 酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）はチロシンキナーゼ活性の存在を検 出および測定するために使用できる。ＥＬＩＳＡは、例えば、Ｖｏｌｌｅｒ，ｅ ｔ．ａｌ．，１９８０，”酵素結合免疫吸着アッセイ”:Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，第２版，ＲｏｓｅおよびＦｒｉｅｄ ｍａｎ編，ｐｐ３５９−３７１ Ａｍ．Ｓｏｃ．ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇ ｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．に記載されているような既知のプロトコー ルに従って実施されるであろう。 開示されたプロトコールは特異的ＲＴＫに関する活性を決定するために適用さ れるであろう。例えば、特異的ＲＴＫのＥＬＩＳＡ実験を実施するための好適な プロトコールが以下に提供される。ＲＴＫファミリーの他のメンバー、ならびに 他のレセプターおよび非レセプターチロシンキナーゼに対する化合物の活性を決 定するためのこれらのプロトコールの適用は本分野の範囲内である。 （ｉ）ＦＬＫ−１ ＥＬＩＳＡ ＥＬＩＳＡアッセイは、ＦＬＫ−１レセプターのキナーゼ活性、特にＦＬＫ− １レセプターに対するプロテインチロシンキナーゼの阻害または活性化を測定す るために実施された。特に、ＦＬＫ−１／ＮＩＨ３Ｔ３細胞におけるＦＬＫ−１ レセプターのキナーゼ活性を測定するために以下のアッセイが実施された。材料および方法 材料 以下の試薬および器具が使用された： ａ． Ｃｏｒｎｉｎｇ ９６ウェル ＥＬＩＳＡプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇカ タログ番号２５８０５−９６）； ｂ． Ｃａｐｐｅｌヤギ抗ウサギＩｇＧ（カタログ番号５５６４１）； ｃ． ＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏカタログ番号４５０−１３００ＥＢ）； ｄ． ＴＢＳＷ緩衝液（５０ｍＭトリス（ｐＨ７．２）、１５０ｍＭ ＮａＣ ｌおよび０．１％トウィーン−２０）； ｅ． エタノールアミン貯蔵液（１０％エタノールアミン（ｐＨ７．０）、４ ℃で保存）； ｆ． ＨＮＴＧ緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．５）、１５０ ｍＭ ＮａＣｌ、０．２％トリトンＸ−１００および１０％グリセロール）； ｇ． ＥＤＴＡ（１００Ｘ貯蔵液として０．５Ｍ（ｐＨ７．０））； ｈ． オルトバナジン酸ナトリウム（１００Ｘ貯蔵液として０．５Ｍ）； ｉ． ピロリン酸ナトリウム（１００Ｘ貯蔵液として０．２Ｍ）； ｊ． ＮＵＮＣ ９６ウェル Ｖ底ポリプロピレンプレート（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ カタログ番号ＡＳ−７２０９２）； ｋ． ＮＩＨ３Ｔ３ Ｃ７＃３細胞（ＦＬＫ−１発現細胞）； ｌ． ＩＸ高グルコースＬ−グルタミンを含むＤＭＥＭ（カタログ番号１１９ ６５−０５０）； ｍ． ＦＢＳ、Ｇｉｂｃｏ（カタログ番号１６０００−０２８）； ｎ． Ｌ−グルタミン、Ｇｉｂｃｏ（カタログ番号２５０３０−０１６）； ｏ． ＶＥＧＦ、ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｎｃ．（カタログ番号１００−２０ ）（Ｍｉｌｌｉ−Ｑ ｄＨ₂Ｏ中１μｇ／１００μｌ貯蔵液として保ち、−２０ ℃で保存）； ｐ． 以下のようにして得るまたは精製することができるアフィニティー精製 抗ＦＬＫ−１抗血清： ．１００ｍＭの炭酸水素ナトリウム（ｐＨ９．６）中、１０ｍｌのト レシル活性化アガロースおよび２０ｍｇの精製ＧＳＴ−ＦＬＫ−１−Ｄ融合タン パク質を４℃で一夜インキュベートすることによりトレシル活性化アガロース／ ＦＬＫ−１−Ｄカラムを調製。 ．ＰＢＳで１度カラムを洗浄。 ．２Ｍグリシンにより４℃で２時間、カラム上の過剰な部位をブロック。 ４．ＰＢＳで１度カラムを洗浄。 ５．カラムをウサギ抗ＦＬＫ−ＩＤと４℃で２時間インキュベート。 ６．ＰＢＳでカラムを洗浄。 ７．１００ｍＭクエン酸（ｐＨ３．０）で抗血清を溶出し、直ちに２Ｍトリス（ ｐＨ９．０）で溶出液を中和。 ８．溶出液をＰＢＳに対して４℃で一夜透析、緩衝液は３回交換（試料と緩衝液 の比は１：１００である）。 ９．透析した抗血清を５％グリセロール液とし、少量に分けて−８０℃で保存。 ｑ． ホスホチロシンに特異的なＵＢ４０モノクローナル抗体（Ｆｅｎｄｌｙ ｅｔ．ａｌ．，１９９０，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５０：１５５０ −１５５８を参照されたい）； ｒ． ＥＩＡ用ヤギ抗マウスＩｇＧ−ＰＯＤ（ＢｉｏＲａｄカタログ番号１７ ２−１０１１）； ｓ． ２，２−アジノービス（３−エチルベンズ−チアゾリン−６−スルホン 酸（ＡＢＴＳ）溶液（１００ｍＭクエン酸（無水）、２５０ｍＭＮａ₂ＨＰＯ₄（ ｐＨ４．０）、０．５ｍｇ／ｍｌ ＡＢＴＳ（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ａ−１８ ８８））、溶液は使用するまで４℃、暗所で保存しなければならない； ｔ． Ｈ₂Ｏ₂（３０％溶液）（Ｆｉｓｈｅｒカタログ番号Ｈ３２５）； ｕ． ＡＢＴＳ／Ｈ₂Ｏ₂（１５ｍｌ ＡＢＴＳ溶液、２μｌ Ｈ₂Ｏ₂）、使用 ５分前に調製して室温で放置； ｖ． ０．２Ｍ ＨＣｌ Ｈ₂Ｏ貯蔵液 ｗ． ジメチルスルホキシド（１００％）（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｄ−８４ １８）；および ｘ． トリプシン−ＥＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬカタログ番号２５２００− ０４９）。 プロトコール アッセイを実施するために以下のプロトコールが使用された： １． ウェル当たり１．０μｇの０．１Ｍ Ｎａ₂ＣＯ₃ ｐＨ９．６に溶解し たＣａｐｐｅｌヤギ抗ウサギＩｇＧでＣｏｒｎｉｎｇ ９６ウェル ＥＬＩＳＡ プレートをコーティングする。ウェル当たり１５０μｌの最終容量とする。プレ ートは４℃で一夜コーティングする。４℃で保存した場合、プレートは２週間ま では使用できる。 ２． 適した培養皿を用い、増殖培地（２．０ｍＭ Ｌ−グルタミンを補給し たＤＭＥＭ）中でコンフルエントになるまで３７℃、５％ＣＯ₂で細胞を増殖さ せる。 ３． トリプシン処理により細胞を採取し、Ｃｏｒｎｉｎｇ２５８５０ポリス チレン９６ウェル丸底細胞プレートに、２００μｌの増殖培地を含むウェル当た り２５，０００の細胞で播種する。 ４． ３７℃、５％ＣＯ₂で少なくとも１日、細胞を増殖させる。 ５． 細胞をＤ−ＰＢＳ １Ｘで洗浄する。 ６． ２００μｌ／ウェルの飢餓培地（ＤＭＥＭ、２．０ｍＭ Ｌ−グルタミ ン、０．１％ＦＢＳ）を加える。３７℃、５％ＣＯ₂で一夜インキュベートする 。 ７． ポリプロピレン９６ウェルプレート中、飢餓培地を用いて化合物／抽出 物を１：２０に希釈する。対照ウェルで使用するためジメチルスルホキシドを１ ：２０に希釈する。 ８． ９６ウェル細胞培養プレートから飢餓培地を除去し、各々のウェルに１ ６２μｌの新鮮な飢餓培地を加える。 ９． 細胞剌激後の最終希釈が１：２００になるように、各々のウェルに１８ μｌの１：２０に希釈した化合物／抽出物希釈液（工程７から）および対照ウェ ル（＋／−ＶＥＧＦ）に１：２０ジメチルスルホキシド希釈液を加える。最終ジ メチルスルホキシドは０．５％である。３７℃、５％ＣＯ₂で２時間プレートを インキュベートする。 １０．液体を除去するためにプレートを逆さにし、ＥＬＩＳＡプレートから非 結合抗体を除去する。ＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミン（ｐＨ７．０）で３ 回洗浄する。ペーパータオル上でプレートを軽くたたいて余分な液体および泡を 除去する。 １１．ウェル当たり１５０μｌのＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミン（ｐＨ ７．０）でプレートをブロックする。マイクロタイタープレート振盪機上で振盪 しながらプレートを３０分間インキュベートする。 １２．工程１０で説明したようにプレートを３回洗浄する。 １３．０．５μｇ／ウェルのアフィニティー精製抗ＦＬＫ−１ポリクローナル ウサギ抗血清を加える。ＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミン（ｐＨ７．０）で １５０μｌ／ウェルの最終容量とする。振盪しながら３０分間プレートをインキ ュベートする。 １４．細胞に１８０μｌの飢餓培地を加え、２０μｌ／ウェルの１０．０ｍＭ オルト バナジン酸ナトリウムおよび５００ｎｇ／ｍｌのＶＥＧＦ（各々の最終 濃度はウェル当たり１．０ｍＭのオルトバナジン酸ナトリウムおよび５０ｎｇ／ ｍｌのＶＥＧＦとなる）、３７℃、５％ＣＯ₂で８分間細胞を刺激する。陰性対 照ウェルには飢餓培地のみを加える。 １５．８分後、培地は細胞から除去されなければならず、２００μｌ／ウェル のＰＢＳで１度洗浄する。 １６．室温で振盪しながら５分間、１５０μｌ／ウェルＨＮＴＧ中で細胞を溶 解する。ＨＮＴＧ処方には、オルトバナジン酸ナトリウム、ピロリン酸ナトリウ ムおよびＥＤＴＡが含まれている。 １７．工程１０で説明したようにＥＬＩＳＡプレートを３回洗浄する。 １８．細胞プレートからＥＬＩＳＡプレートへ細胞溶解液を移し、振盪しなが ら２時間インキュベートする。細胞溶解液を移すためには、ウェルをこすりなが らピペットの吸引および排出を繰り返す。 １９．工程１０で説明したようにプレートを３回洗浄する。 ２０．０．０２μｇ／ウェルを含むＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミンでＥ ＬＩＳＡプレートをインキュベートする。最終容量を１５０μｌ／ウェルとする 。振盪しながら３０分間インキュベートする。 ２１．工程１０で説明したようにプレートを３回洗浄する。 ２２．１：１０，０００希釈ＥＩＡ用ヤギ抗マウスＩｇＧ結合西洋ワサビペル オキシダーゼのＴＢＳＷ＋０．５％エタノールアミン（ｐＨ７．０）溶液でＥＬ ＩＳＡプレートをインキュベートする。最終容量を１５０μｌ／ウェルとする。 振盪しながら３０分間インキュベートする。 ２３．工程１０で説明したようにプレートを洗浄する。 ２４．ウェルに１００μｌのＡＢＴＳ／Ｈ₂Ｏ₂溶液を加える。振盪しながら１ ０分間インキュベートする。 ２５．発色反応を停止させるため、０．１Ｍ ＨＣｌとなるように１００μｌ の０．２Ｍ ＨＣｌを加える。室温で１分間振盪する。ゆっくりと通気して泡を 除去し、ＥＬＩＳＡプレートリーダー中、４１０ｎｍでＥＬＩＳＡプレートを読 みとる。 （ｉｉ）ＨＥＲ−２ ＥＬＩＳＡ ＨＥＲ−２ ＥＬＩＳＡアッセイは１９９６年１２月１９日に公開されたＴａ ｎｇらによる国際特許出願第ＷＯ９６／４０１１６号に記載されている。 （ｉｉｉ）ＰＤＧＦ−Ｒ ＥＬＩＳＡ ＰＤＧＦ−Ｒ ＥＬＩＳＡアッセイは１９９６年１２月１９日に公開されたＴ ａｎｇらによる国際特許出願第ＷＯ９６／４０１１６号に記載されている。 （ｉｖ） ＩＧＦ−Ｉ ＥＬＩＳＡ １９９６年１２月１９日に公開されたＴａｎｇらによる国際特許出願第ＷＯ９ ６／４０１１６号に記載されているＩＧＦ−Ｉ ＥＬＩＳＡプロトコールが、Ｉ ＧＦ−Ｉレセプターチロシンキナーゼ活性を示すＩＧＦ−Ｉレセプター上のホス ホチロシン レベルを測定するために使用された。 （ｖ）ＥＧＦレセプターＥＬＩＳＡ 全細胞のＥＧＦレセプターキナーゼ活性（ＥＧＦＲ−ＮＩＨ３Ｔ３アッセイ） が１９９６年１２月１９日に公開されたＴａｎｇらによる国際特許出願第ＷＯ９ ６／４０１１６号に記載されているように測定された。 （ｖｉ）細胞インシュリンレセプターＥＬＩＳＡ １９９６年１２月１９日に公開されたＴａｎｇらによる国際特許出願第ＷＯ９ ６／４０１１６号に記載されているプロトコールが本発明の化合物がインシュリ ンレセプターチロシンキナーゼ活性を持っているかどうかを決定するために使用 された。 （ｖｉｉ）ＥＧＦＲ ＥＬＩＳＡアッセイ 目的 酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）でＥＧＦＲのインビトロキナーゼ活 性を測定するための首尾一貫した方法を提供するためである。 範囲 以下のプロトコールは、ＥＬＩＳＡでＥＧＦＲ上のプロテインチロシンキナー ゼ活性を分析するために使用される方法を説明している。本方法はまた、プロテ インチロシンキナーゼ活性の阻害または活性化に対する薬剤の最初のスクリーニ ングのためのプロトコールを説明している。 試薬および器具 １． Ｃｏｒｎｉｎｇ ９６ウェル ＥＬＩＳＡプレート Ｃｏｒｎｉｎｇカタログ番号２５８０５−９６ ２． ０５−１０１モノクローナル抗ＥＧＦＲ抗体（ＵＢ１から市販品として 入手可能） ３． ＰＢＳ（ダルベッコ リン酸緩衝化塩溶液） Ｇｉｂｃｏカタログ番号４５０−１３００ＥＢ 処方：２．７ｍＭ ＫＣｌ １．１ｍＭ ＫＨ₂ＰＯ₄ ０．５ｍＭ ＭｇＣｌ₂（無水） １３８ｍＭ ＮａＣｌ ８．１ｍＭ Ｎａ₂ＨＰＯ₄ ４． ＴＢＳＴ緩衝液 処方： ５０ｍＭ トリス ｐＨ７．２ １５０ｍＭ ＮａＣｌ ０．１％ トリトンＸ−１００ ５． ブロッキング緩衝液 処方：５％ＣａｒｎａｔｉｏｎインスタントミルクＰＢＳ溶液 ６． Ａ４３１細胞溶解液 Ａ４３１細胞は種々の販売元から入手可能であり、当業者には既知の通 常の方法を用いてまたは本明細書に記載されているＥＧＦ細胞アッセイで３Ｔ３ の溶解のために説明したように溶解して使用されるであろう。−８０℃、１ｍｌ づつ。 ７． ＴＢＳ緩衝液 処方： ５０ｍＭ トリス ｐＨ７．２ １５０ｍＭ ＮａＣｌ ８． ＴＢＳ＋１０％ＤＭＳＯ 処方： １０％ＤＭＳＯを含むＴＢＳ緩衝液 （ＤＭＳＯはＳｉｇｍａから、カタログ番号Ｄ−２６５０） ９． ＡＴＰ／ＭｎＣｌ₂リン酸化混合物 処方： ０．０３ｍＭ ＡＴＰ （アデノシン−５’−三リン酸、Ｓｉｇｍａカタログ番号Ａ−５ ３９４） ５０ｍＭ ＭｎＣｌ₂ 使用直前にオートクレーブしたＭｉｌｌｉ−Ｑ Ｈ₂Ｏで作製 使用まで氷上で保存 １０．ＮＵＮＣ ９６ウェル Ｖ底ポリプロピレンプレート （Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号ＡＳ−７２０９ ２） １１．ＥＤＴＡ 処方： ２００ｍＭ ＥＤＴＡ ｐＨ８．０ １２．ウサギポリクローナル 抗ホスホチロシン血清またはホスホチロシンま たはＵＢＩ ｍａｂ ４６１０に特異的なＵＢ４０モノクローナル抗体、Ｕｐｓ ｔａｔｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｌａｋｅ Ｐｌａｃｉｄ，Ｎｅｗ Ｙ ｏｒｋ、カタログ番号０５−３２１ １ｍｌづつ、−８０℃ １ｍｌバイアルを融解し、より少ない容量に分けて−８０℃で保存。 抗血清は、融解し４℃で保存すると数週間は安定である １３．ヤギ抗ウサギＩｇＧペルオキシダーゼ複合体 Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ カタログ番号ＡＬ１０４０４ １４．ＡＢＴＳ溶液 処方： １００ｍＭクエン酸（無水） ２５０ｍＭＮａ₂ＨＰＯ₄ｐＨ４．０ ０．５ｍｇ／ｍｌ ＡＢＴＳ （２，２−アジノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン−６−スルホン 酸）） （Ｓｉｇｍａカタログ番号Ａ−１８８８） 溶液は使用するまで４℃、暗所で保存。 １５．過酸化水素３０％溶液 Ｆｉｓｈｅｒカタログ番号Ｈ３２５ 使用するまで４℃、暗所で保存 １６．ＡＢＴＳ／Ｈ₂Ｏ₂ 処方： １５ｍｌ ＡＢＴＳ溶液 ２μｌ Ｈ₂Ｏ₂ 使用５分前に調製して室温で放置 １７．０．２Ｍ ＨＣｌ Ｈ₂Ｏ貯蔵液 方法 １． ウェル当たり０．５μｇの０５−１０１抗体でＣｏｒｎｉｎｇ ９６ウ ェル ＥＬＩＳＡプレートをコーティング。 ＰＢＳでウェル当たり１００μｌの最終容量とする。 ４℃で一夜コーテイングする。 ２． 液体を除去するためにプレートを逆さにし、ウェルから非結合０５−１ ０１を除去する。 ウェルに蒸留水を満たすことにより１回洗浄する。 ペーパータオル上でプレートを軽くたたいて余分な液体を除去する。 ３． ５％ミルクを含むＰＢＳでプレートをブロックする。 ウェル当たり１５０μｌ。 ４． 脱イオン水で３回、次にＴＢＳＴで１回プレートを洗浄する。 ５． ウェル当たり７μｇのＡ４３１細胞溶解物（ＥＧＦＲ源）を加える。 ウェル当たり１００μｌの最終容量となるまでＰＢＳを加える。 振盪しながら３０分間インキュベートする。 ６． 工程４で説明したように洗浄する。 ７． この時点で、薬剤または抽出物をウェルに加える。 ９６ウェルポリプロピレンプレート中、ＴＢＳ＋１０％ＤＭＳＯで薬剤 ／抽出物を１：１００（特に指定しない限り）に希釈する。 捕捉されたＥＧＦＲを含んでいるＥＬＩＳＡプレートに１２０μｌのＴ ＢＳを加える。 ＥＬＩＳＡプレートへ１３．５μｇの希釈された薬剤／抽出物を加える 。 対照ウェル（薬剤を加えていないウェル）へは１３５μｌのＴＢＳを加 える。 ＋１％ＤＭＳＯ。 振盪しながら３０分間インキュベートする。 ８． ＡＴＰ／ＭｎＣｌ₂を加えない陰性対照を除いてすべてのウェルに直接 １５μｌの０．０３ｍＭ ＡＴＰ＋５０ｍＭ ＭｎＣｌ₂リン酸化混合物を加え る（ダイアグラム参照）。 激しく振盪しながら５分間インキュベートする。 ^*注：ＡＴＰ／ＭｎＣｌ₂による５分間のみのレセプターのリン酸化は厳 密に行う。反応を正確に５分後にＥＤＴＡで停止できるように、ＡＴＰ／ＭｎＣ ｌ₂を１２チャンネルピペッターで１列同時に、各々の列を２０秒間隔で加える のが最良である(このことは一度にリン酸化されるプレートの数に依存している) 。各々の添加の間に振盪する。 ９． ５分後、反応を停止させるため、ウェルでの最終濃度を２０ｍＭにする ように１６．５μｌの２００ｍＭ ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）を加え、各々の添加 の間は連続的に振盪する。このことは上記と同じタイミング法を使用して行われ る。最後の列にＥＤＴＡを加えた後、さらに１分間プレートを振盪する。 １０．脱イオン水で４回、ＴＢＳＴで２回洗浄する。 １１．ウサギポリクローナル抗ホスホチロシン血清を加える。 ＴＢＳＴで１：３０００に希釈。 各ウェルに１００μｌ添加。 振盪しながら３０−４５分間インキュベート。 １２．工程４で説明したように洗浄する。 １３．Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ抗ウサギペルオキシダーゼ複合体抗体を加える。 ＴＢＳＴで１：２０００に希釈。 各ウェルに１００μｌ添加。 振盪しながら３０分間インキュベート。 １４．工程４で説明したように洗浄する。 １５．ウェルに１００μｌのＡＢＴＳ／Ｈ₂Ｏ₂溶液を加える。 振盪しながら５から１０分間インキュベート。 泡を除去。 １６．必要に応じ、各ウェルに１００μｌの０．２Ｎ ＨＣｌを添加して反応 を停止させる。 １７．Ｄｙｎａｔｅｃｈ ＭＲ７０００ ＥＬＩＳＡリーダーでアッセイ値を 読みとる。 試験フィルター：４１０ｎｍ 対照フィルター：６３０ｎｍ （ｂ）細胞増殖アッセイ １９９６年１２月１９日に公開されたＴａｎｇらによる国際特許出願第ＷＯ９ ６／４０１１６号に記載されている細胞増殖アッセイが、特許請求された化合物 と一つまたはそれ以上のＲＴＫの相互作用の結果としての細胞増殖に対する化合 物の影響を測定するために実施されるであろう。 （ｖｉ）Ｒａｆのリン酸化機能を測定するアッセイ 以下のアッセイは、標的タンパク質ＭＥＫならびにＭＥＫが標的とするＭＡＰ ＫのＲＡＦ−触媒リン酸化の量を報告している。ＲＡＦ遺伝子配列はＢｏｎｎｅ ｒ ｅｔ ａｌ．，１９８５，Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５：１４００ −１４０７、に記載されており、集合的遺伝子配列データバンクで容易に利用可 能である。本発明のこの部分で利用される核酸ベクターの構築および細胞株はＭ ｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓ ｃｉ．ＵＳＡ ８５：８８５５−８８５９、に十分に説明されている。材料および試薬 １． Ｓｆ９（スポドプテラ フルギペルダ）細胞；ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ，Ｇ ａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ。 ２． ＲＩＰＡ緩衝液：２０ｍＭトリス／ＨＣｌ ｐＨ７．４、１３７ｍＭ ＮａＣｌ、１０％グリセロール、１ｍＭ ＰＭＳＦ、５ｍｇ／Ｌ アプロテニン 、０．５％トリトンＸ−１００； ３． チオレドキシン−ＭＥＫ融合タンパク質（Ｔ−ＭＥＫ）：Ｔ−ＭＥＫ発 現およびアフィニティー クロマトグラフィーは製造元が指示する方法に従って 実施された。カタログ番号 Ｋ３５０−０１およびＲ３５０−４０、Ｉｎｖｉｔ ｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ。 ４．Ｈｉｓ−ＭＡＰＫ（ＥＲＫ２）；Ｈｉｓ−タグ化ＭＡＰＫは、Ｈｉｓ−Ｍ ＡＰＫをコードしているｐＵＣ１８ベクターで形質転換したＸＬＩブルー細胞で 発現された。Ｈｉｓ−ＭＡＰＫはＮｉ−アフィニティークロマトグラフィーによ り精製された。カタログ番号２７−４９４９−０１、Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ａｌ ａｍｅｄａ，ＣＡ。 ５． ヒツジ抗マウスＩｇＧ：Ｊａｃｋｓｏｎ ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ， Ｗｅｓｔ Ｇｒｏｖｅ，ＰＡ、カタログ番号５１５−００６−００８、ロット番 号２８５６３。 ６． ＲＡＦ−１プロテインキナーゼ特異的抗体：ＵＢＩからのＵＲＰ２６５ ３。 ７． コーティング緩衝液：ＰＢＳ；リン酸緩衝化塩溶液、ＧＩＢＣＯ−ＢＲ Ｌ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ。 ８． 洗浄緩衝液：ＴＢＳＴ − ５０ｍＭトリス／ＨＣｌ ｐＨ７．２、１ ５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．１％トリトンＸ−１００。 ９． ブロック緩衝液：ＴＢＳＴ、０．１％エタノールアミン ｐＨ７．４。 １０．ＤＭＳＯ、Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ。 １１．キナーゼ緩衝液（ＫＢ）：２０ｍＭ ヘペス／ＨＣｌ ｐＨ７．２、１ ５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．１％トリトンＸ−１００、１ｍＭ ＰＭＳＦ、５ｍｇ ／Ｌアプロテニン、７５μＭオルトバナジン酸ナトリウム、０．５ｍＭ ＤＴＴ および１０ｍＭ ＭｇＣｌ₂。 １２．ＡＴＰ混合物：１００ｍＭ ＭｇＣｌ₂、３００μＭ ＡＴＰ、１０μ Ｃｉ γ−³²Ｐ ＡＴＰ（Ｄｕｐｏｎｔ−ＮＥＮ）／ｍＬ。 １３．停止溶液：１％リン酸；Ｆｉｓｈｅｒ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ。 １４．Ｗａｌｌａｃセルロースリン酸フィルターマット；Ｗａｌｌａｃ，Ｔｕ ｒｋｕ，Ｆｉｎｌａｎｄ。 １５．フィルター洗浄溶液：１％リン酸；Ｆｉｓｈｅｒ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇ ｈ，ＰＡ。 １６．Ｔｏｍｔｅｃプレートハーベスター、Ｗａｌｌａｃ，Ｔｕｒｋｕ，Ｆｉ ｎｌａｎｄ。 １７．Ｗａｌｌａｃベータプレートリーダー ＃１２０５、Ｗａｌｌａｃ，Ｔ ｕｒｋｕ，Ｆｉｎｌａｎｄ。 １８．化合物のためのＮＵＮＣ ９６ウェルＶ底ポリプロピレンプレート、Ａ ｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ カタログ番号ＡＳ−７２０９２。方法 特に指示しない限り、以下のすべての工程は室温で実施される。 １． ＥＬＩＳＡプレートコーティング：ＥＬＩＳＡウェルは１００μＬのヒ ツジ抗マウスアフィニティー精製抗血清（１μｇ／１００μＬコーティング緩衝 液）により４℃で一夜コーティングされた。 ２． 液体を除くためにプレートを逆さにする。１００μＬのブロッキング溶 液を加え、３０分間インキュベートする。 ３． ブロッキング溶液を除き、洗浄緩衝液で４回洗浄する。ペーパータオル 上でプレートを軽くたたいて余分の液体を除去する。 ４． 各々のウェルに１μｇの精製Ｓｕｍｏ２２を加え、１時間インキュベー トする。工程３に説明したように洗浄する。 ５． ＲＡＳ／ＲＡＦ感染Ｓｆ９細胞からの細胞溶解液を融解し、ＴＢＳＴで １０μｇ／１００μＬに希釈する。ウェルに１０μｇの希釈溶解液を加えて１時 間インキュベートする。インキュベーションの間、プレートを振盪する。陰性対 照には溶解液を添加しない。ＲＡＳ／ＲＡＦ感染Ｓｆ９昆虫細胞からの細胞溶解 液は、細胞を組換え体バキュロウイルス（各々のウイルスに対し５のＭＯＩで） で感染させ、４８時間後に採取して調製される。細胞はＰＢＳで一度洗浄し、Ｒ ＩＰＡ緩衝液中で溶解する。不溶性物質は遠心分離により除去する（１００００ ｘｇで５分）。細胞溶解液を小分けし、ドライアイス／エタノールで凍結し、使 用するまで−８０℃で保存する。 ６． 非結合物質を除去し、前（工程３）に説明したように洗浄する。 ７． 各ウェルに２μｇのＴ−ＭＥＫおよび２μｇのＨｉｓ−ＭＡＰＫを加え 、キナーゼ緩衝液で４０μＬに容量を調節する。 ８． 化合物（貯蔵液１０ｍｇ／ｍＬ ＤＭＳＯ）または抽出物を１％ＤＭＳ Ｏを加えたＴＢＳＴで２０倍に前もって希釈する。工程６で説明したウェルに５ μＬの前もって希釈した化合物／抽出物を加える。２０分インキュベート。対照 には薬剤を添加しない。 ９． ５μＬのＡＴＰ混合物を加えることによりキナーゼ反応を開始させる； インキュベーションの間、ＥＬＩＳＡプレート振盪機上でプレートを振盪する。 １０．６０分後、各々のウェルに３０μＬの停止溶液を添加することによりキ ナーゼ反応を停止させる。 １１．ホスホセルロースマットおよびＥＬＩＳＡプレートをＴｏｍｔｅｃプレ ートハーベスターに置く。使用説明書に従って採取し、フィルターをフィルター 洗浄溶液で洗浄する。フィルターマットを乾燥する。フィルターマットを封じ、 それらをホルダーに入れる。ホルダーを放射活性検出装置内へ挿入し、フィルタ ーマット上の放射活性リンを定量する。 もしくは、アッセイプレートの個々のウェルからの４０μＬをホスホセルロー スフィルターマットの対応する位置へ移すことができる。フィルターを風乾後、 フィルターをトレー内へ入れる。トレーを穏やかに揺り動かし、１時間の間１５ 分間隔で洗浄溶液を交換する。フィルターを風乾する。フィルターマットを封じ 、それらを試料中の放射活性リンの測定に適したホルダーに入れる。ホルダーを 検出装置内へ挿入し、フィルターマット上の放射活性リンを定量する。 （ｃ）毒性および動物モデル 細胞毒性およびインビボ動物モデルは、１９９６年１２月１９日に公開された Ｔａｎｇらによる国際特許出願第ＷＯ９６／４０１１６号に記載されている。 （ｄ）ＭＥＴ生化学的キナーゼアッセイ ＭＥＴ生化学的キナーゼアッセイは、一般的に上に他のキナーゼのために説明 されたように、ただし、それを他のキナーゼに置換することによりＭＥＴで実施 されるであろう。特に、ＥＬＩＳＡプレートは、ヒトＭＥＴの細胞質ドメインに 対する、市販品として入手可能な（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏ ｌｏｇｙから）ウサギポリクローナル抗体の捕捉に使用されるヤギ抗ウサギＦｃ 抗体で被覆される。細胞溶解物は、ＥＧＦｒの細胞外ドメインおよびＭＥＴレセ プターのトランスメンブランおよび細胞質ドメインからなるキメラレセプターで 過渡的にトランスフェクトされている２９３Ｔ細胞から、または高内在性レベル のＭＥＴを発現するＮＣＩ−Ｈ４４１細胞（ヒト肺腺癌腫細胞株）から作製され る。これらの細胞溶解液からのキメラレセプター、またはＭＥＴ、は抗体被覆プ レートに捕捉される。無関係なタンパク質を洗い流した後、試験化合物を加え、 適当なキナーゼ緩衝液（ＡＴＰ、二価金属イオンなどを含んでいる）の添加によ りインビトロキナーゼアッセイを実施する。捕捉されたレセプター内へのリン酸 の取り込みは、比色検出のための基質としてＴＭＢを用い、西洋ワサビペルオキ シダーゼと結合された抗ホスホチロシン抗体で検出される。 本発明は例示した実施態様による範囲に制限されるものではなく、それらは本 発明の一つの態様を例示することが意図されたものである。実際、ここに説明し た態様に加えて本発明の種々の変形が、これまでの説明および付随する図面から 当業者には明らかになるであろう。そのような変形は付随する特許請求の範囲内 に含まれることが意図されている。 本明細書で引用したすべての参照文献は全文が本明細書において援用される。 その他の態様は以下の請求の範囲に含まれている。 表９ ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−スルホニル−２−インドリ ノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−スルホニ ル−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−スルポニル−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−スルホニル−２− インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−スルホニル−２− インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−スルホニル−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−アミノスルホニル−２−イ ンドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−アミノス ルホニル−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−アミノスルホニル−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−アミノスルホニル −２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−アミノスルホニル −２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−アミノスルホニル−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−メトキシカルボニル−２− イ ンドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−メトキシ カルボニル−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−メトキシカルボニル−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−メトキシカルボニ ル−２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−メトキシカルボニ ル−２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−メトキシカルボニル−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−ジエタノールアミノ−２− インドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−ジエタノ ールアミノ−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−ジエタノールアミノ−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−ジエタノールアミ ノ−２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−ジエタノールアミ ノ−２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−ジエタノールアミノ−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−（２，３−ジヒドロキシプ ロピルアミノ）−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−（２，３ −ジヒドロキシプロピルアミノ）−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−（２，３−ジヒドロキシプロピルアミノ）−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−（２，３−ジヒド ロキシプロピルアミノ）−２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−（２，３−ジヒド ロキシプロピルアミノ）−２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−（２，３−ジヒドロキシプロピルアミノ）−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−ウレイド−２−インドリノ ン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−ウレイド −２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−ウレイド−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−ウレイド−２−イ ンドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−ウレイド−２−イ ンドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−ウレイド−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−グアニジノ−２−インドリ ノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−グアニジ ノ−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−グアニジノ−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−グアニジノ−２− インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−グアニジノ−２− インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−グアニジノ−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−グリセロイルアミド−２− インドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−グリセロ イルアミド−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−グリセロイルアミド−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−グリセロイルアミ ド−２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−グリセロイルアミ ド−２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−グリセロイルアミド−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−［（３−ピペリジニル）プ ロパノイルアミノ］−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−［（３− ピペリジニル）プロパノイルアミノ］−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−［（３−ピペリジニル）プロパノイルアミノ］−２−インドリ ノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−［（３−ピペリジ ニル）プロパノイルアミノ］−２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−［（３−ピペリジ ニル）プロパノイルアミノ］−２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ − ５−［（３−ピペリジニル）プロパノイルアミノ］−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−メシルアミノ−２−インド リノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−メシルア ミノ−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−メシルアミノ−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−メシルアミノ−２ −インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−メシルアミノ−２ −インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−メシルアミノ−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−グリコロイルオキシ−２− インドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−グリコロ イルオキシ−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−グリコロイルオキシ−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−グリコロイルオキ シ−２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−グリコロイルオキ シ−２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−グリコロイルオキシ−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−（２，３−ジヒドロキシプ ロ ポキシ）−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−（２，３ −ジヒドロキシプロポキシ）−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−（２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−（２，３−ジヒド ロキシプロポキシ）−２−インドリノン ３−［（３−メチルヂエン−２−イル）メチリデニル］−５−（２，３−ジヒド ロキシプロポキシ）−２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−（２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−アミノメチル−２−インド リノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−アミノメ チル−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−アミノメチル−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−アミノメチル−２ −インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−アミノメチル−２ −インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−アミノメチル−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−アミジノ−２−インドリノ ン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−アミジノ −２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リ デニル］−５−アミジノ−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−アミジノ−２−イ ンドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−アミジノ−２−イ ンドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−アミジノ−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−ヒドロキシメチル−２−イ ンドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−ヒドロキ シメチル−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−ヒドロキシメチル−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−ヒドロキシメチル −２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−ヒドロキシメチル −２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−ヒドロキシメチル−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−ホスホノオキシ−２−イン ドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−ホスホノ オキシ−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−ホスホノオキシ−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−ホスホノオキシ− ２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−ホスホノオキシ− ２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−ホスホノオキシ−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−エトキシカルボニル−２− インドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−エトキシ カルボニル−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−エトキシカルボニル−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−エトキシカルボニ ル−２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−エトキシカルボニ ル−２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−エトキシカルボニル−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−ベンジルオキシカルボニル −２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−ベンジル オキシカルボニル−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−ベンジルオキシカルボニル−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−ベンジルオキシカ ルボニル−２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−ベンジルオキシカ ルボニル−２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ − ５−ベンジルオキシカルボニル−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−フェニルアミノカルボニル −２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−フェニル アミノカルボニル−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−フェニルアミノカルボニル−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−フェニルアミノカ ルボニル−２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−フェニルアミノカ ルボニル−２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−フェニルアミノカルボニル−２−インドリノン ３−［（ピロール−２−イル）メチリデニル］−５−ベンジルアミノカルボニル −２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチリデニル］−５−ベンジル アミノカルボニル−２−インドリノン ３−［（２，４−ジメチル−３−エトキシカルボニルピロール−５−イル）メチ リデニル］−５−ベンジルアミノカルボニル−２−インドリノン ３−［（２−メチルチエン−５−イル）メチリデニル］−５−ベンジルアミノカ ルボニル−２−インドリノン ３−［（３−メチルチエン−２−イル）メチリデニル］−５−ベンジルアミノカ ルボニル−２−インドリノン ３−［（４，５，６，７−テトラヒドロインドール−３−イル）メチリデニル］ −５−ベンジルアミノカルボニル−２−インドリノン

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項 【提出日】平成１０年３月２０日（１９９８．３．２０） 【補正内容】 【図１】 【図１】【図１】【図１】【図１】【図１】【図１】【図１】【図１】【図１】【図２】【図２】【図２】【図２】【図２】【図２】【図２】【図２】【図２】【図２】【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項 【提出日】平成１０年９月２９日（１９９８．９．２９） 【補正内容】 式中、 （ａ）Ａは、酸素、炭素、硫黄および窒素からなる群より選択される原子を含 有する５または６員環であり； 好ましくは、Ａは、チオフェン、ピロール、ピラゾール、イミダゾール、１，２ ，３−トリアゾール、１，２，４−トリアゾール、オキサゾール、イソオキサゾ ール、チアゾール、イソチアゾール、フラン、１，２，３−オキサジアゾール、 １，２，４−オキサジアゾール、１，２，５−オキサジアゾール、１，３，４− オキサジアゾール、１，２，３，４−オキサトリアゾール、１，２，３，５−オ キサドリアゾール、１，２，３−チアジアゾール、１，２，４−チアジアゾール 、１，２，５−チアジアゾール、１，３，４−チアジアゾール、１，２，３，４ −チアトリアゾール、１，２，３，５−チアトリアゾール、およびテトラゾール からなる群から選択されるヘテロ環式５員環であり； （ｂ）ｍは０、１、または２であり； （ｃ）Ｒ₁は水素、Ｃ₁−Ｃ₆のアルキル、またはＣ₂−Ｃ₆のアルカノイルであ り； （ｄ）Ｒ₂およびＲ₃は、独立して、一方が水素であり、他方が、 （１）１、２、または３個の水酸基で置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキル基； （２）ＳＯ₃Ｒ₄（式中、Ｒ₄は水素、あるいは、置換されていない、または １、２、もしくは３個の水酸基で置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキルである）； （３）ＳＯ₂ＮＨＲ₅（式中、Ｒ₅は上に定義したＲ₄、またはｎが２または３ である−（ＣＨ₂）_n−Ｎ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）₂である）； （４）ＣＯＯＲ₆（式中、Ｒ₆は、置換されていないＣ₁−Ｃ₆のアルキル、フ ェニルまたは１、２、もしくは３個の水酸基で置換されたＣ₁−Ｃ₆のアルキル、 あるいはフェニルである）； 請求の範囲 １． インドリノンのコンビナトリアルライブラリであって、オキシインドー ルをアルデヒドと反応させることにより形成しうる一連の少なくとも１０種類の インドリノンを含み、かつ、前記インドリノンは、式ＩＩ、またはＩＩＩ：（ａ） Ａ₁、Ａ₂、Ａ₃およびＡ₄は、独立して、炭素、または窒素であり、ただ し、Ａ₁、Ａ₂、Ａ₃およびＡ₄の１つまたはそれ以上が窒素であるとき、対応する Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、またはＲ₇は存在せず； （ｂ） Ｒ₁は水素、またはアルキルであり； （ｃ） Ｒ₂は酸素、またはイオウであり； （ｄ） Ｒ₃は水素であり； （ｅ） Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆およびＲ₇は任意に存在し、それぞれ独立して、 （ｉ）水素、アルキル、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アルカリール 、アルカリールオキシ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｓ（Ｏ）Ｒ、ＳＯ₂ＮＲＲ ’、ＳＯ₃Ｒ、ＳＲ、ＮＯ₂、ＮＲＲ’、ＯＨ、ＣＮ，Ｃ（Ｏ）Ｒ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ 、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ、（ＣＨ₂）ｎＣＯ₂Ｒ、およびＣＯＮＲＲ’からなる群より選 択されるか、または （ｉｉ）任意の２つの隣接するＲ₄、Ｒ₅、Ｒ₆およびＲ₇は、インドリノンのオキ シインドール系部分のアリール環と一緒になって縮合環を形成し、； （ｆ） Ｒ₂’、Ｒ₃’、Ｒ₄’、Ｒ₅’、およびＲ₆’は、それぞれ独立して、水 素、アルキル、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アルカリール、アルカ リールオキシ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｓ（Ｏ）Ｒ、ＳＯ₂ＮＲＲ’、ＳＯ₃ Ｒ、ＳＲ、ＮＯ₂，ＮＲＲ’、ＯＨ，ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ、ＮＨＣ （Ｏ）Ｒ、（ＣＨ₂）ｎＣＯ₂Ｒ、およびＣＯＮＲＲ’からなる群より選択され； （ｇ） ｎは、０、１、２、または３であり； （ｈ） Ｒは、水素、アルキル、またはアリールであり； （ｉ） Ｒ’は、水素、アルキル、またはアリールであり；および （ｊ） Ａは、チオフェン、ピロール、ピラゾール、イミダゾール、１，２，３ −トリアゾール、１，２，４−トリアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール 、チアゾール、イソチアゾール、２−スルホニルフラン、４−アルキルフラン、 １，２，３−オキサジアゾール、１，２，４−オキサジアゾール、１，２，５− オキサジアゾール、１，３，４−オキサジアゾール、１，２，３，４−オキサト リアゾール、１，２，３，５−オキサトリアゾール、１，２，３−チアジアゾー ル、１，２，４−チアジアゾール、１，２，５−チアジアゾール、１，３，４− チアジアゾール、１，２，３，４−チアトリアゾール、１，２，３，５−チアト リアゾール、およびテトラゾールからなる群より選択される５員のヘテロアリー ル環であり、任意に１つまたはそれ以上の位置において、アルキル、アルコキシ 、アリール、アリールオキシ、アルカリール、アルカリールオキシ、ハロゲン、 トリハロメチル、Ｓ（Ｏ）Ｒ，ＳＯ₂ＮＲＲ’、ＳＯ₃Ｒ、ＳＲ、ＮＯ₂、ＮＲＲ ’、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ、（ＣＨ₂）ｎＣ Ｏ₂Ｒ、 およびＣＯＮＲＲ’で置換されていてもよい。 を有するか、またはその薬学的に許容しうる塩であることを特徴とするライブラ リ。 ２． 前記オキシインドールが、図１および表１１に記載されるオキシインド ールから選択される、請求項１記載のコンビナトリアルライブラリ。 ３． 前記アルデヒドが、図２および表１２に記載されるアルデヒドから選択 される、請求項１記載のコンビナトリアルライブラリ。 ４． 前記ライブラリが少なくとも１００個のインドリノンを含む、請求項１ 記載のコンビナトリアルライブラリ。 ５． 前記ライブラリが少なくとも５００個のインドリノンを含む、請求項１ 記載のコンビナトリアルライブラリ。 ６． チロシンキナーゼ媒介性シグナル伝達に影響を及ぼす活性を有する化合 物をスクリーニングする方法であって、 （ａ） オキシインドールをアルデヒドと反応させることにより形成しうる、少 なくとも１０個のインドリノンのコンビナトリアルライブラリを作成し、ここで 、前記インドリノンは、式ＩＩ、またはＩＩＩ： ［式中、 （ａ）Ａ₁、Ａ₂、Ａ₃、およびＡ₄は、独立して、炭素、または窒素であり、ただ し、Ａ₁、Ａ₂、Ａ₃、およびＡ₄の１つまたはそれ以上が窒素であるとき、対応す るＲ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、またはＲ₇は存在せず； （ｂ） Ｒ₁は、水素、またはアルキルであり； （ｃ） Ｒ₂は、酸素、またはイオウであり； （ｄ） Ｒ₃は、水素であり； （ｅ） Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、およびＲ₇は、任意に存在し、それぞれ独立して、 （ｉ） 水素、アルキル、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アルカリー ル、アルカリールオキシ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｓ（Ｏ）Ｒ、ＳＯ₂ＮＲ Ｒ’、ＳＯ₃Ｒ、ＳＲ、ＮＯ₂，ＮＲＲ’、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、ＯＣ（Ｏ） Ｒ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ、（ＣＨ₂）ｎＣＯ₂Ｒ、およびＣＯＮＲＲ’からなる群より 選択されるか、または （ｉｉ）任意の２つの隣接するＲ₄、Ｒ₅、Ｒ₆およびＲ₇は、一緒になって、イン ドリノンのオキシインドール系部分のアリール環とともに縮合環を形成し； （ｆ） Ｒ₂’、Ｒ₃’、Ｒ₄’、Ｒ₅’、およびＲ₆’は、それぞれ独立して、水 素、アルキル、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アルカリール、アルカ リールオキシ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｓ（Ｏ）Ｒ、ＳＯ₂ＮＲＲ’、ＳＯ₃ Ｒ、ＳＲ、ＮＯ₂，ＮＲＲ’、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ、ＮＨＣ （Ｏ）Ｒ、（ＣＨ₂）ｎＣＯ₂Ｒ、およびＣＯＮＲＲ’からなる群より選択され； （ｇ） ｎは、０、１，２，、または３であり； （ｈ） Ｒは、水素、アルキル、またはアリールであり； （ｉ） Ｒ’は、水素、アルキル、またはアリールであり；および （ｊ） Ａは、チオフェン、ピロール、ピラゾール、イミダゾール、１，２，３ −トリアゾール、１，２，４−トリアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール 、チアゾール、イソチアゾール、２−スルホニルフラン、４−アルキルフラン、 １，２，３−オキサジアゾール、１，２，４−オキサジアゾール、１，２，５− オキサジアゾール、１，３，４−オキサジアゾール、１，２，３，４−オキサト リアゾール、１，２，３，５−オキサトリアゾール、１，２，３−チアジアゾー ル、１，２，４−チアジアゾール、１，２，５−チアジアゾール、１，３，４− チアジアゾール、１，２，３，４−チアトリアゾール、１，２，３，５−チアト リアゾール、およびテトラゾールからなる群より選択される５員のヘテロアリー ル環であり、任意に１つまたはそれ以上の位置において、アルキル、アルコキシ 、アリール、アリールオキシ、アルカリール、アルカリールオキシ、ハロゲン、 トリハロメチル、Ｓ（Ｏ）Ｒ、ＳＯ₂ＮＲＲ’、ＳＯ₃Ｒ、ＳＲ、ＮＯ₂，ＮＲＲ ’、ＯＨ、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）Ｒ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ、（ＣＨ₂）ｎＣ Ｏ₂Ｒ、およびＣＯＮＲＲ’で置換されていてもよい］ を有するかまたはその薬学的に許容しうる塩であり、 （ｂ） コンビナトリアルライブラリのインドリノンを一連のスクリーニングに 供して、チロシンキナーゼ媒介性シグナル伝達を調節、制御および／または阻 害するインドリノンの能力を決定し、そして （ｃ） チロシンキナーゼ媒介性シグナル伝達を調節、制御および／または阻害 しうる１つまたはそれ以上インドリノンを選択する、 の各工程を含む方法。 ７． 前記コンビナトリアルライブラリが、少なくとも１００個のインドリノ ンを含む、請求項６記載の方法。 ８． 前記コンビナトリアルライブラリが、少なくとも５００個のインドリノ ンを含む、請求項７記載の方法。 ９． 前記オキシーインドールが、図１および表１１に記載されるオキシイン ドールから選択される、請求項６記載の方法。 １０． 前記アルデヒドが、図２および表１２に記載されるアルデヒドから選択 される、請求項６記載の方法。 １１． 前記チロシンキナーゼシグナル伝達に、ＰＤＧＦ、ＦＬＫ−１，ＥＧＦ Ｒ、ＨＥＲ−２およびＩＧＦ−１からなる群より選択される少なくとも１つのレ セプターが関与する、請求項６記載の方法。 １２． 前記レセプターがＦＬＫ−１である、請求項１１記載の方法。 【図１】【図１】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 31/4375 Ａ６１Ｋ 31/4375 31/4439 31/4439 31/4545 31/4545 31/4709 31/4709 31/496 31/496 31/513 31/513 31/5377 31/5377 31/661 31/661 Ａ６１Ｐ 3/10 Ａ６１Ｐ 3/10 9/10 9/10 35/00 35/00 43/00 43/00 Ｃ０７Ｄ 209/86 Ｃ０７Ｄ 209/86 401/06 401/06 403/06 403/06 405/06 405/06 409/06 409/06 471/04 １１２ 471/04 １１２Ｚ 495/04 １０１ 495/04 １０１ Ｃ０７Ｆ 9/6558 Ｃ０７Ｆ 9/6558 (31)優先権主張番号 ６０／０３１，５８６ (32)優先日 平成８年12月５日(1996．12．5) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号 ６０／０３１，５８８ (32)優先日 平成８年12月５日(1996．12．5) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号 ６０／０３２，５４６ (32)優先日 平成８年12月５日(1996．12．5) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号 ６０／０３２，５４７ (32)優先日 平成８年12月５日(1996．12．5) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号 ６０／０４５，５６５ (32)優先日 平成９年５月５日(1997．5．5) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号 ６０／０４５，５６６ (32)優先日 平成９年５月５日(1997．5．5) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号 ６０／０４５，７１４ (32)優先日 平成９年５月５日(1997．5．5) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号 ６０／０４５，７１５ (32)優先日 平成９年５月５日(1997．5．5) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (31)優先権主張番号 ６０／０４６，８４３ (32)優先日 平成９年５月５日(1997．5．5) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ， ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，Ｆ Ｉ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ， ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，Ｍ Ｘ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ， ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 マクマホン，ジェラルド アメリカ合衆国カリフォルニア州95452, ケンウッド，シュルツ・ロード 1800 (72)発明者 ハース，クラウス・ピーター アメリカ合衆国カリフォルニア州94114, サンフランシスコ，コリングウッド・スト リート 334 (72)発明者 ショーヴァー，ローラ・ケイ アメリカ合衆国カリフォルニア州94112, サンフランシスコ，コッター・ストリート 216

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． オキシインドールとアルデヒドを反応させることにより形成しうる少な くとも１０のインドリノンを含む、インドリノン化合物のコンビナトリアルライ ブラリー。 ２． 該オキシインドールがタイプＡオキシインドールである請求項第１項に 記載のコンビナトリアルライブラリー。 ３． 該アルデヒドがタイプＢアルデヒドである請求項第１項に記載のコンビ ナトリアルライブラリー。 ４． （ａ）一連のオキシインドールと一連のアルデヒドを反応させることに よりインドリノンのコンビナトリアルライブラリーを作製し、 （ｂ）生物学的アッセイにおいて該インドリノンを試験し、 （ｃ）望ましい活性を有する一つまたはそれ以上のインドリノンを選択 し、そして （ｄ）工程（ｃ）で選択された一つまたはそれ以上の該インドリノンを 合成する の各工程を含む、インドリノンの製造方法。 ５． インドールの１’位に置換基を有する３−［（インドール−３−イル） メチレン］−２−インドリノン化合物であって、ここで１’位の置換基は以下の 群： （ａ）単環式または二環式の５、６、８、９または１０員ヘテロ環式環で 随意に置換されていてもよいアルキル、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲ ン、アルデヒドまたはトリハロメチル置換基で随意に置換されていてもよい； （ｂ）５、６、８、９または１０員の単環式または二環式のヘテロ環式環 、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で随意 に置換されていてもよい； （ｃ）式−ＣＯ−Ｒ₁₂のアルデヒドまたはケトン［式中、Ｒ₁₂は水素、ア ルキルおよび５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｄ）式−（Ｒ₁₃）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸または式−（Ｒ₁₄）_m−ＣＯ Ｏ−Ｒ₁₅のエステル［式中、Ｒ₁₃、Ｒ₁₄およびＲ₁₅はアルキルおよび５または６ 員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立し て０または１である］； （ｅ）式−（ＳＯ₂）−Ｒ₁₆のスルホン［式中、Ｒ₁₆はアルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より選択され、ここで環はアルキル基で随 意に置換されていてもよい］； （ｆ）−（Ｒ₁₇）_n−（インドール−１−イル）または−（Ｒ₁₈）_m−ＣＨ ＯＨ−（Ｒ₁₉）_p−（インドール−１−イル）［式中、インドール残基はアルデ ヒドで随意に置換されていてもよく、およびＲ₁₇、Ｒ₁₈およびＲ₁₉はアルキルで あり、およびｍ、ｎおよびｐは独立して０または１である］；および （ｇ）インドール環の２’置換基と一緒になり三環式残基を形成し、ここ で三環式残基の各々の環は５または６員のヘテロ環式環である］ から選択されることを特徴とする化合物。 ６． 該化合物が式： ［式中、 （ａ）Ｒ₁は以下の各項から成る群より選択され、 （ｉ）単環式または二環式の５、６、８、９または１０員ヘテロ環式環で 随意に置換されていてもよいアルキル、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲ ン、アルデヒドまたはトリハロメチル置換基で随意に置換されていてもよい； （ｉｉ）５、６、８、９または１０員の単環式または二環式のヘテロ環式 環、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で随 意に置換されていてもよい； （ｉｉｉ）式−ＣＯ−Ｒ₁₂のアルデヒドまたはケトン［式中、Ｒ₁₂は水素 、アルキルおよび５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｉｖ）式−（Ｒ₁₃）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸または式−（Ｒ₁₄）_m−Ｃ ＯＯ−Ｒ₁₅のエステル［式中、Ｒ₁₃、Ｒ₁₄およびＲ₁₅はアルキルおよび５または ６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｎおよびｍは独立 して０または１である］； （ｖ）式−（ＳＯ₂）−Ｒ₁₆のスルホン［式中、Ｒ₁₆はアルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より選択され、ここで環はアルキル残基で 随意に置換されていてもよい］； （ｖｉ）−（Ｒ₁₇）_n−（インドール−１−イル）または−（Ｒ₁₈）_m−Ｃ ＨＯＨ−（Ｒ₁₉）_p−（インドール−１−イル）［式中、インドール残基はアル デヒドで随意に置換されていてもよく、およびＲ₁₇、Ｒ₁₈およびＲ₁₉はアルキル であり、およびｎ、ｍおよびｐは独立して０または１である］；および （ｖｉｉ）インドール環の２’置換基と一緒になり三環式残基を形成し、 ここで三環式残基の各々の環は５または６員のヘテロ環式環である； （ｂ）Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅およびＲ₆は以下の各項からなる群より選択され、 （ｉ）水素、または単環式または二環式の５、６、８、９または１０員ヘ テロ環式環で随意に置換されていてもよいアルキル、ここで環は一つまたはそれ 以上のハロゲン、アルデヒドまたはトリハロメチル置換基で随意に置換されてい てもよい； （ｉｉ）５、６、８、９または１０員の単環式または二環式のヘテロ環式 環、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で随 意に置換されていてもよい； （ｉｉｉ）式−ＣＯ−Ｒ₂₀のアルデヒドまたはケトン［式中、Ｒ₂₀は水素 、アルキルおよび５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｉｖ）式−（Ｒ₂₁）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸または式−（Ｒ₂₂）_m−Ｃ ＯＯ−Ｒ₂₃のエステル［式中、Ｒ₂₁、Ｒ₂₂およびＲ₂₃はアルキルおよび５または ６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立 して０または１である］； （ｖ）ハロゲンまたは式（Ｒ₂₄）_m−ＯＨのアルコールまたは式−（Ｒ₂₄ ）_n−Ｏ−Ｒ₂₅のエーテル［式中、Ｒ₂₄およびＲ₂₅はアルキルおよび５または６ 員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立し て０または１である］； （ｖｉ）−ＮＲ₂₆Ｒ₂₇［式中、Ｒ₂₆およびＲ₂₇は水素、酸素、アルキルお よび５または６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択される］；または −ＮＨＣＯＲ₂₈［式中、Ｒ₂₈はヒドロキシル、アルキルおよび５または６員のヘ テロ環式環からなる群より選択され、ここで環はアルキル、ハロゲン、カルボキ シレートまたはエステルで随意に置換されていてもよい］； （ｖｉｉ）−ＳＯ₂ＮＲ₂₉Ｒ₃₀［式中、Ｒ₂₉およびＲ₃₀は水素、酸素、ア ルキルおよび５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｖｉｉｉ）Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅またはＲ₆の任意の二つが一緒になりイ ンドールの６員環へ融合した二環式または三環式残基を形成し、ここで多環式残 基の各々の環は５または６員のヘテロ環式環である； （ｃ）Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉およびＲ₁₀は以下の各項からなる群より独立して選択さ れ、 （ｉ）水素、または単環式または二環式の５、６、８、９または１０員ヘ テロ環式環で随意に置換されていてもよいアルキル、ここで環は一つまたはそれ 以上のハロゲン、アルデヒドまたはトリハロメチル置換基で随意に置換されてい てもよい； （ｉｉ）５、６、８、９または１０員の単環式または二環式のヘテロ環式 環、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で随 意に置換されていてもよい； （ｉｉｉ）式−ＣＯ−Ｒ₃₁のアルデヒドまたはケトン［式中、Ｒ₃₁は水素 、アルキルおよび５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｉｖ）式−（Ｒ₃₂）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸または式−（Ｒ₃₃）_m−Ｃ ＯＯ−Ｒ₃₄のエステル［式中、Ｒ₃₂、Ｒ₃₃およびＲ₃₄はアルキルおよび５または ６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｎおよびｍは独立 して０または１である］； （ｖ）ハロゲンまたは式−（Ｒ₃₅）_m−ＯＨのアルコールまたは式−（Ｒ_{3 5} ）_n−Ｏ−Ｒ₃₆のエーテル［式中、Ｒ₃₅およびＲ₃₆はアルキルおよび５または６ 員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立し て０または１である］； （ｖｉ）−ＮＲ₃₇Ｒ₃₈［式中、Ｒ₃₇およびＲ₃₈は水素、酸素、アルキルお よび５または６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択される］；または −ＮＨＣＯＲ₃₉［式中、Ｒ₃₉はヒドロキシル、アルキルおよび５または６員のヘ テロ環式環からなる群より選択され、ここで環はアルキル、ハロゲン、カルボキ シレートまたはエステルで随意に置換されていてもよい］； （ｖｉｉ）−ＳＯ₂ＮＲ₄₀Ｒ₄₁［式中、Ｒ₄₀およびＲ₄₁は水素、酸素、ア ルキルおよび５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｖｉｉｉ）Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉またはＲ₁₀の任意の二つが一緒になりインド ールの６員環へ融合した二環式または三環式残基を形成し、ここで多環式残基の 各々の環は５または６員のヘテロ環式環である；および （ｄ）Ｒ₁₁は水素またはアルキルである； ただし、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉またはＲ₁₀の少なくと も一つはアルキルであり、または、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅またはＲ₆の少なく とも４つは水素ではない］ を有する、請求項５に記載の化合物、塩、異性体、代謝物、エステル、アミドま たはプロドラッグ。 ７． 随意に置換された３−［（テトラヒドロインドール−２−イル）メチレ ン］−２−インドリノンまたは３−［（シクロペンタノ−ｂ−ピロール−２−イ ル）メチレン］−２−インドリノン化合物。 ８． 式ＸＩＸまたはＸＸ：［式中、 （ａ）Ｒ₁は以下の各項から成る群より選択され、 （ｉ）単環式または二環式の５、６、８、９または１０員ヘテロ環式環で 随意に置換されていてもよいアルキル、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲ ンまたはトリハロメチル置換基で随意に置換されていてもよい； （ｉｉ）５、６、８、９または１０員の単環式または二環式のヘテロ環式 環、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で随 意に置換されていてもよい； （ｉｉｉ）式−ＣＯ−Ｒ₁₂のケトン［式中、Ｒ₁₂は水素、アルキルまたは ５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｉｖ）式−（Ｒ₁₃）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸または式−(Ｒ₁₄)_m−ＣＯ Ｏ−Ｒ₁₅のエステル［式中、Ｒ₁₃、Ｒ₁₄およびＲ₁₅はアルキルまたは５また は６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｎおよびｍは独 立して０または１である］； （ｖ）式−（ＳＯ₂）−Ｒ₁₆のスルホン［式中、Ｒ₁₆はアルキルまたは５ または６員のヘテロ環式環からなる群より選択され、ここで環はアルキル基で随 意に置換されていてもよい］； （ｖｉ）−（Ｒ₁₇）_n−（インドール−１−イル）または−（Ｒ₁₈）_m−Ｃ ＨＯＨ−（Ｒ₁₉）_p−（インドール−１−イル）［式中、インドール残基はアル デヒドで随意に置換されていてもよく、およびＲ₁₇、Ｒ₁₈およびＲ₁₉はアルキル であり、およびｎ、ｍおよびｐは独立して０または１である］； （ｖｉｉ）インドール環の２’置換基と一緒になり三環式残基を形成し、 ここで三環式残基の各々の環は５または６員のヘテロ環式環である； （ｂ）Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₃’、Ｒ₄、Ｒ₄’、Ｒ₅、Ｒ₅’、Ｒ₆およびＲ₆’は以下の 各項からなる群より選択され、 （ｉ）水素； （ｉｉ）単環式または二環式の５、６、８、９または１０員ヘテロ環式環 で随意に置換されていてもよいアルキル、ここで環は一つまたはそれ以上のハロ ゲンまたはトリハロメチル置換基で随意に置換されていてもよい； （ｉｉｉ）５、６、８、９または１０員の単環式または二環式のヘテロ環 式環、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で 随意に置換されていてもよい； （ｉｖ）式−ＣＯ−Ｒ₂₀のケトン［式中、Ｒ₂₀は水素、アルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｖ）式−（Ｒ₂₁）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸または式−（Ｒ₂₂）_m−ＣＯ Ｏ−Ｒ₂₃のエステル［式中、Ｒ₂₁、Ｒ₂₂およびＲ₂₃はアルキルおよび５または６ 員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立し て０または１である］； （ｖｉ）ハロゲン； （ｖｉｉ）式（Ｒ₂₄）_m−ＯＨのアルコールまたは式−（Ｒ₂₄）_n−Ｏ−Ｒ₂₅ のエーテル［式中、Ｒ₂₄およびＲ₂₅はアルキルおよび５または６員のヘテロ環 式環からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立して０または１ である］； （ｖｉｉｉ）−ＮＲ₂₆Ｒ₂₇［式中、Ｒ₂₆およびＲ₂₇は水素、酸素、アルキ ルおよび５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｉｘ）−ＮＨＣＯＲ₂₈［式中、Ｒ₂₈はヒドロキシル、アルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、ここで環はアルキ ル、ハロゲン、カルボキシレートまたはエステルで随意に置換されていてもよい ］； （ｘ）−ＳＯ₂ＮＲ₂₉Ｒ₃₀［式中、Ｒ₂₉およびＲ₃₀は水素、酸素、アルキ ルおよび５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｘｉ）Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₃’、Ｒ₄、Ｒ₄’、Ｒ₅、Ｒ₅’、Ｒ₆またはＲ₆’の 任意の二つが一緒になりインドールの６員環へ融合した二環式または三環式残基 を形成し、ここで多環式残基の各々の環は５または６員のヘテロ環式環である； （ｃ）Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉およびＲ₁₀は以下の各項からなる群より独立して選択さ れ、 （ｉ）水素； （ｉｉ）単環式または二環式の５、６、８、９または１０員ヘテロ環式環 で随意に置換されていてもよいアルキル、ここで環は一つまたはそれ以上のハロ ゲンまたはトリハロメチル置換基で随意に置換されていてもよい； （ｉｉｉ）５、６、８、９または１０員の単環式または二環式のヘテロ環 式環、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で 随意に置換されていてもよい； （ｉｖ）式−ＣＯ−Ｒ₃₁のケトン［式中、Ｒ₃₁は水素、アルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｖ）式−（Ｒ₃₂）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸または式−（Ｒ₃₃）_m−ＣＯ Ｏ−Ｒ₃₄のエステル［式中、Ｒ₃₂、Ｒ₃₃およびＲ₃₄はアルキルおよび５または６ 員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｎおよびｍは独立し て０または１である］； （ｖｉ）ハロゲン； （ｖｉｉ）式−（Ｒ₃₅）_m−ＯＨのアルコールまたは式−（Ｒ₃₅）_n−Ｏ− Ｒ₃₆のエーテル［式中、Ｒ₃₅およびＲ₃₆はアルキルおよび５または６員のヘテロ 環式環からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立して０または １である］； （ｖｉｉｉ）−ＮＲ₃₇Ｒ₃₈［式中、Ｒ₃₇およびＲ₃₈は水素、酸素、アルキ ルおよび５または６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択される］； （ｉｘ）−ＮＨＣＯＲ₃₉［式中、Ｒ₃₉はヒドロキシル、アルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より選択され、ここで環はアルキル、ハロ ゲン、カルボキシレートまたはエステルで随意に置換されていてもよい］； （ｘ）−ＳＯ₂ＮＲ₄₀Ｒ₄₁［式中、Ｒ₄₀およびＲ₄₁は水素、酸素、アルキ ルおよび５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｘｉ）Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉またはＲ₁₀の任意の二つが一緒になりインドール の６員環へ融合した二環式または三環式残基を形成し、ここで多環式残基の各々 の環は５または６員のヘテロ環式環である；および （ｄ）Ｒ₁₁は水素またはアルキルである］ の請求項第７項に記載のインドリノン化合物、またはその医薬として受容可能な 塩、異性体、代謝物、エステル、アミドまたはプロドラッグ。 ９． オキシインドール環の５位に置換基を有するインドリノン化合物であっ て、ここでオキシインドール環の５位の置換基は以下の各項から成る群： （ａ）単環式または二環式の５、６、８、９または１０員ヘテロ環式環で随意 に置換されていてもよいアルキル、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲンま たはトリハロメチル置換基で随意に置換されていてもよい； （ｂ）５、６、８、９または１０員の単環式または二環式のヘテロ環式環、こ こで環は一つまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で随意に置 換されていてもよい； （ｃ）式−ＣＯ−Ｒ₁₀のケトン［式中、Ｒ₁₀は水素、アルキルおよび５または ６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｄ）式−（Ｒ₁₁）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸または式−（Ｒ₁₂）_m−ＣＯＯ− Ｒ₁₃のエステル［式中、Ｒ₁₁、Ｒ₁₂およびＲ₁₃はアルキルおよび５または６員の ヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立して０ または１である］； （ｅ）ハロゲン； （ｆ）式（Ｒ₁₄）_m−ＯＨのアルコールまたは式−（Ｒ₁₄）_n−Ｏ−Ｒ₁₅のエー テル［式中、Ｒ₁₄およびＲ₁₅はアルキルおよび５または６員のヘテロ環式環から なる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立して０または１である］ ； （ｇ）−ＮＲ₁₆Ｒ₁₇［式中、Ｒ₁₆およびＲ₁₇は水素、アルキルおよび５または ６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択される］； （ｈ）−ＮＨＣＯＲ₁₈［式中、Ｒ₁₈はアルキルおよび５または６員のヘテロ環 式環からなる群より選択され、ここで環はアルキル、ハロゲン、カルボキシレー トまたはエステルで随意に置換されていてもよい］； （ｉ）−ＳＯ₂ＮＲ₁₉Ｒ₂₀［式中、Ｒ₁₉およびＲ₂₀は水素、アルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｊ）Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆またはＲ₇の任意の二つが一緒になりオキシインドールの ６員環へ融合した二環式または三環式残基を形成し、ここで多環式残基の各々の 環は５または６員のヘテロ環式環である； より選択されることを特徴とする化合物。 １０．下記の式： ［式中、 （ａ）Ｒ₅は以下の各項から成る群より選択され、 （ｉ）単環式または二環式の５、６、８、９または１０員ヘテロ環式環で随 意に置換されていてもよいアルキル、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲン またはトリハロメチル置換基で随意に置換されていてもよい； （ｉｉ）５、６、８、９または１０員の単環式または二環式のヘテロ環式環 、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で随意 に置換されていてもよい； （ｉｉｉ）式−ＣＯ−Ｒ₁₀のケトン［式中、Ｒ₁₀は水素、アルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｉｖ）式−（Ｒ₁₁）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸または式−（Ｒ₁₂）_m−ＣＯ Ｏ−Ｒ₁₃のエステル［式中、Ｒ₁₁、Ｒ₁₂およびＲ₁₃はアルキルおよび５または６ 員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立し て０または１である］； （ｖ）ハロゲン； （ｖｉ）式（Ｒ₁₄）_m−ＯＨのアルコールまたは式−（Ｒ₁₄）_n−Ｏ−Ｒ₁₅の エーテル［式中、Ｒ₁₄およびＲ₁₅はアルキルおよび５または６員のヘテロ環式環 からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立して０または１であ る］； （ｖｉｉ）−ＮＲ₁₆Ｒ₁₇［式中、Ｒ₁₆およびＲ₁₇は水素、アルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択される］； （ｖｉｉｉ）−ＮＨＣＯＲ₁₈［式中、Ｒ₁₈はアルキルおよび５または６員の ヘテロ環式環からなる群より選択され、ここで環はアルキル、ハロゲン、カルボ キシレートまたはエステルで随意に置換されていてもよい］； （ｉｘ）−ＳＯ₂ＮＲ₁₉Ｒ₂₀［式中、Ｒ₁₉およびＲ₂₀は水素、アルキルおよ び５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｘ）Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆またはＲ₇の任意の二つが一緒になりオキシインドール の６員環へ融合した二環式または三環式残基を形成し、ここで多環式残基の各々 の環は５または６員のヘテロ環式環である； （ｂ）Ｒ₁は５、６、８、９および１０員の単環式または二環式ヘテロ環式環 から成る群より選択され、ここで環は以下の各項から成る群より選択される一つ またはそれ以上の置換基で随意に置換されていてもよい、 （ｉ）水素、および単環式または二環式の５、６、８、９または１０員ヘテ ロ環式環で随意に置換されていてもよいアルキル、ここで環は一つまたはそれ以 上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で随意に置換されていてもよい； （ｉｉ）５、６、８、９または１０員の単環式または二環式のヘテロ環式環 、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で随意 に置換されていてもよい； （ｉｉｉ）式−ＣＯ−Ｒ₂₁のケトン［式中、Ｒ₂₁は水素、アルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｉｖ）式−（Ｒ₂₂）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸または式−（Ｒ₂₃）_m−ＣＯ Ｏ−Ｒ₂₄のエステル［式中、Ｒ₂₂、Ｒ₂₃およびＲ₂₄はアルキルおよび５または６ 員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立し て０または１である］； （ｖ）ハロゲン； （ｖｉ）式（Ｒ₂₅）_m−ＯＨのアルコールまたは式−（Ｒ₂₅）_n−Ｏ−Ｒ₂₆の エーテル［式中、Ｒ₂₅およびＲ₂₆はアルキルおよび５または６員のヘテロ環式環 からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立して０または１であ る］； （ｖｉｉ）−ＮＲ₂₇Ｒ₂₈［式中、Ｒ₂₇およびＲ₂₈は水素、アルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択される］； （ｖｉｉｉ）−ＮＨＣＯＲ₂₉［式中、Ｒ₂₉はアルキルおよび５または６員の ヘテロ環式環からなる群より選択され、ここで環はアルキル、ハロゲン、カルボ キシレートまたはエステルで随意に置換されていてもよい］； （ｉｘ）−ＳＯ₂ＮＲ₃₀Ｒ₃₁［式中、Ｒ₃₀およびＲ₃₁は水素、アルキルおよ び５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｃ）Ｒ₄、Ｒ₆およびＲ₇は以下の各項から成る群より独立して選択され、 （ｉ）水素および単環式または二環式の５、６、８、９または１０員ヘテロ 環式環で随意に置換されていてもよいアルキル、ここで環は一つまたはそれ以上 のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で随意に置換されていてもよい； （ｉｉ）５、６、８、９または１０員の単環式または二環式のヘテロ環式環 、ここで環は一つまたはそれ以上のハロゲンまたはトリハロメチル置換基で随意 に置換されていてもよい； （ｉｉｉ）式−ＣＯ−Ｒ₃₂のケトン［式中、Ｒ₃₂は水素、アルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］； （ｉｖ）式−（Ｒ₃₃）_n−ＣＯＯＨのカルボン酸または式−（Ｒ₃₄）_m−ＣＯ Ｏ−Ｒ₃₅のエステル［式中、Ｒ₃₃、Ｒ₃₄およびＲ₃₅はアルキルおよび５または６ 員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立し て０または１である］； （ｖ）ハロゲン； （ｖｉ）式（Ｒ₃₆）_m−ＯＨのアルコールまたは式−（Ｒ₃₆）_n−Ｏ−Ｒ₃₇の エーテル［式中、Ｒ₃₆およびＲ₃₇はアルキルおよび５または６員のヘテロ環式環 からなる群より独立して選択され、およびｍおよびｎは独立して０または１であ る］； （ｖｉｉ）−ＮＲ₃₈Ｒ₃₉［式中、Ｒ₃₈およびＲ₃₉は水素、アルキルおよび５ または６員のヘテロ環式環からなる群より独立して選択される］； （ｖｉｉｉ）−ＮＨＣＯＲ₄₀［式中、Ｒ₄₀はアルキルおよび５または６員の ヘテロ環式環からなる群より選択され、ここで環はアルキル、ハロゲン、カルボ キシレートまたはエステルで随意に置換されていてもよい］； （ｉｘ）−ＳＯ₂ＮＲ₄₁Ｒ₄₂［式中、Ｒ₄₁およびＲ₄₂は水素、アルキルおよ び５または６員のヘテロ環式環からなる群より選択される］；および （ｄ）Ｒ₂は水素またはアルキルである］ の請求項第９項に記載の化合物。 １１．式ＸＸＩ：［式中： （ａ）Ａは酸素、炭素、硫黄および窒素から成る群より選択される原子を含む ５または６員環であり； （ｂ）ｍは０、１または２であり； （ｃ）Ｒ₁は水素、Ｃ₁−Ｃ₆アルキルまたはＣ₂−Ｃ₆アルカノイルであり； （ｄ）Ｒ₂およびＲ₃の一つは独立して水素であり、他方は以下の各項から選択 される置換基である： （１）１、２または３個のヒドロキシ基で置換されたＣ₁−Ｃ₆アルキル基 ； （２）ＳＯ₃Ｒ₄［式中、Ｒ₄は水素、または無置換または１、２または３ 個のヒドロキシ基で置換されたＣ₁−Ｃ₆アルキル基である］； （３）ＳＯ₂ＮＨＲ₅［式中、Ｒ₅は上記Ｒ₄で定義した通り、または−（Ｃ Ｈ₂）_n−Ｎ（Ｃ₁−Ｃ₆アルキル）₂基（式中、ｎは２または３である）である］ ； （４）ＣＯＯＲ₆［式中、Ｒ₆は無置換または、フェニルまたは１、２また は３個のヒドロキシ基で置換されたＣ₁−Ｃ₆アルキル、またはフェニルである］ ； （５）ＣＯＮＨＲ₇［式中、Ｒ₇は水素、フェニルまたは１、２または３個 のヒドロキシル基またはフェニルで置換されたＣ₁−Ｃ₆アルキルである］； （６）ＮＨＳＯ₂Ｒ₈［式中、Ｒ₈はＣ₁−Ｃ₆アルキルまたは、無置換また はハロゲンまたはＣ₁−Ｃ₄アルキルで置換されたフェニルである］； （７）Ｎ（Ｒ₉）₂、ＮＨＲ₉またはＯＲ₉［式中、Ｒ₉は１、２または３個 のヒドロキシ基で置換されたＣ₂−Ｃ₆アルキルである］； （８）ＮＨＣＯＲ₁₀、ＯＯＣＲ₁₀またはＣＨ₂ＯＯＣＲ₁₀［式中、Ｒ₁₀は １、２または３個のヒドロキシ基で置換されたＣ₁−Ｃ₆アルキル基である］； （９）ＮＨＣＯＮＨ₂；ＮＨ−Ｃ（ＮＨ₂）＝ＮＨ；Ｃ（ＣＨ₂）＝ＮＨ； ＣＨ₂ＮＨＣ（ＮＨ₂）＝ＮＨ；ＣＨ₂ＮＨ₂；ＯＰＯ（ＯＨ）₂；ＣＨ₂ＯＰＯ（Ｏ Ｈ）₂；ＰＯ（ＯＨ）₂；または ［式中、ＸはＣＨ₂、ＳＯ₂、ＣＯまたはＮＨＣＯ（ＣＨ₂）_p（式中、ｐは１，２ または３である）から選択され、およびＺはＣＨ₂、ＯまたはＮ−Ｒ₁₁（式中、 Ｒ₁₁は水素または上記Ｒ₉で定義したとおり）である］である］ を有する化合物。 １２．適当なアルデヒドおよびオキシインドールを反応さぜ、アルデヒドおよ びオキシインドール反応体からインドリノンを分離する工程を含む、請求項５− １１のいずれかに記載のインドリノン化合物を製造する方法。 １３．（ｉ）医薬として受容可能な担体または賦形剤、および （ｉｉ）請求項５−１１のいずれかに記載の化合物、 を含む医薬組成物。 １４．制御されないチロシンキナーゼシグナル伝達に関係した疾患を処置する ための方法であって、それらを必要としている患者に請求項５−１１のいずれか に記載の化合物の治療的有効量を投与する工程を含む方法。 １５．請求項５−１１のいずれかに記載の化合物の治療的有効量を患者に投与 することを含む、チロシンキナーゼシグナル伝達を制御するための方法。 １６．生物体の異常状態を防止または処置する方法であって、ここで異常状態 は、プロテインキナーゼと天然の結合相手間の相互作用により特徴付けられるシ グナル伝達経路の異常に関連しており、該方法は、以下の工程： （ａ）請求項５−１１のいずれかに記載の化合物を生物体に投与し；および （ｂ）異常な相互作用を促進または破壊する、 を含むことを特徴とする方法。 １７．生物体の異常状態を防止または処置する方法であって、ここで異常状態 は、プロテインキナーゼと天然の結合相手間の相互作用により特徴付けられるシ グナル伝達経路の異常に関連しており、該方法は、以下の工程： （ａ）請求項５−１１のいずれかに記載の化合物を生物体に投与し；および （ｂ）異常な相互作用を促進または破壊する、 を含むことを特徴とする方法。