HU229368B1 - Novel vaccine composition - Google Patents

Novel vaccine composition Download PDF

Info

Publication number
HU229368B1
HU229368B1 HU0400445A HUP0400445A HU229368B1 HU 229368 B1 HU229368 B1 HU 229368B1 HU 0400445 A HU0400445 A HU 0400445A HU P0400445 A HUP0400445 A HU P0400445A HU 229368 B1 HU229368 B1 HU 229368B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
vaccine
preparation
influenza
virus
antigen
Prior art date
Application number
HU0400445A
Other languages
English (en)
Inventor
Uwe Eichhorn
Original Assignee
Saechsisches Serumwerk
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GB0113083A external-priority patent/GB0113083D0/en
Priority claimed from GB0204116A external-priority patent/GB0204116D0/en
Application filed by Saechsisches Serumwerk filed Critical Saechsisches Serumwerk
Publication of HUP0400445A2 publication Critical patent/HUP0400445A2/hu
Publication of HUP0400445A3 publication Critical patent/HUP0400445A3/hu
Publication of HU229368B1 publication Critical patent/HU229368B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • C12N7/04—Inactivation or attenuation; Producing viral sub-units
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55577—Saponins; Quil A; QS21; ISCOMS
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16161—Methods of inactivation or attenuation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
    • C12N2760/16234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Description

í';.l VAKCíNAKÉSZÍTMÉNVEK
A találmány tárgyát képezik új vtrusaniiaén-prsparáíamok, az elöálhíúsnkra szolgáló eljárások, és megelőzésben és terápiában való alkalmazásuk. Közelebbről a találmány tárgyát képezik ioáktlvált Muenzavakciaák, amelyek teljes vírust tartalmazó vakcina .helyett lebontott vírust tartómazó vakcinák, és amelyek stabilak szerves· higanyvegyület tartósítők -nélkül. A, vakcina beadható bármely, az ilyen vakcinák beadására alkalmas módon, mint például intramuszkuiárisan, szabkutás módon, íntradermálisan. vagy mukózálls úton, például intranazálisan..
Az influenzavírus a Földön az egyik legelterjedtebb vírus, amely az embereket és a haszonállatokat Is érinü, Az influenza gazdasági hatása Is jelentős.
Az inSuenzavínts. burokkal körülvett RNS-v-írus, a részecske átmérője körülbelül 125 a®. Alapvetően belső nukleofcapszídhől vagy ts-ukleoproteinne! asszociált ribonnkletmavbó-l (RNS-bőh áll, amelyet llpüdkettösréteg-szetkezetbőí és külső ghkoprefeinhö! álló vlrosborok vesz körül. A virasburok belső rétege alapvetően tnátrixíehérjékből, a külső réteg tőképp- gazdaeredetó Ispldanyaghól áll. A felszíni gííkoprotelaek, & nemwtódáz (NA) és a bemagglötlnín (HÁ) a részecskék felszínén íÖ«120 » hosszá tüskék formájában vannak jelen. Az íÍven felszín 1 fehérjék, közelebbről a bemagglutinin az, ami meghatározza az influenza-altípusok antigéa-specifitásáf.
A jelenleg hozzáférhető mfiusnzavakcmk feaktivák vagy akár élő, gyengített. (atteiitíáü) -infineKzavakcinák. Az inaktivált iaSaenzavakeinák az .ímtigén-preparátumok három lehetséges formáiból állnak: teljes, inaktiívált vírus, sznbvírionok, ahol a tisztított yírustészeeskéket detergenssel vagy más reagenssel felbontjuk. a hpídboxiték szoluhiliaálása céljából (ón. „hasított” vakcina), vagy tisztított HA és NA (alegységvakctóa), Ezeket az Inakéivák vakcinákat mtramuszfedárisan (ÍM) vagy intranazálísan (INs adják be, Nincs kereskedelmi forgalom bán élő, gyengített vakcina.
Mindegyik fajtájú influenza vakcina rendszerint tóvalens. Ezek rendszerint taríainrasnak kőt xnflnénza-Aíörzsből és egy Inriuenza-B-törzsből származó antigéneket. A legtöbb -esetben Θ.5 ml-es, standard- dózis 15 gg hemagglutinin-ímtlgénékmnponenrt tartalmaz minden törzsből, egy szeri, radiális tmmundíffózíőval (SRD) meghatározva [Wood, J.M. és .mtsai,., An improved slnglc radia! immonodiflusÍiou technique fór the assay of influenza haemmaglotímn antigén: adaptatiőn fór poteney detemnoatíon of inactivated whole vírus and sabutntvaeeines. J, Síol. Stand. 5: 237-247 (1977); Wood, ,l..M,. és tnisai., lutematíenal collaboratíve study of síngle radiaí diffosion and immunoelectropboreais tschuiques fór the assay of hemaggíutmin antigén of influenza vírus. J. Bioi..Stand. 9: 317-330 (1981)1.
Minden idényben a World Health Orgamsatión (Egészségügyi Világszervezet) a nemzeti egészségügyi hatóságokkal és a vakéi nagyítótokkal együttműködve határozza meg azt, hogy melyik mfluenzavfms-törzseí. kell az inflüeazavakcinába beépített!.
A tipikus inOueazafárváayok a tüdógyulladásos és alsó légáti megbetegedések gyakoriságát megnő vetik, amint azt a kórházi esetek vagy a mortalitási arány növekedése mutatja. Az idősebbek vagy krónikus betegségben szenvedők kapnak a legnagyobb valószínűséggel ilyen szövődményeket,.azonban a fiatal csecsemők szintén komolyan megbetegedhetnek. Ezért különösen .az ilyen csoportokba tartozók védelemre szorulnak.
Az évenkénti Influenzajárványokkal Összefüggő morbiditás és monslbás: kontrolljára irányuló jelenlegi erőfeszítések az immmwszkotárisan beadott, laakrivált infíaeuzavakcmák alkalmazásán alapulnak. .Az ilyen
99772-3072A/SG vakcinák»^, a légúti betegségek- és az .inflaenzaszövődtnény-ek megelőzésében mutatod hatékonysága az egészséges felnőttek esetében 75%, az idősebbek esetében kevesebb, mint 50%.
Nemzetközi standardokat alkalmasnak -az iaftueuzavakeinák hatékottyságának mérésére. Az Európai Űoiő hatékony i«fluettzavate«má.vsl szemben támasztott hivatalos követelményeit az. .alábbi táblázatban foglaltok össze. Elméletileg az Európai Unió követelményeinek megfelel az fofiuensavakcina, tea.a táblázatba foglalt egyik követelménynek megfelel, a vakcinába beépítést minden influenza-törzs esetében. A .gyakorlatban azonban minden törzs esetében mindhárom kővetelményndc teljesülnie kell, különösen üj vakcina cselében, mint például egy eltérő módon beadandó, áj vakcina esetében. Bizonyos körülöfenyek között két követelmény elegendő tehet. Például elfogadható, ha mindegyik tótzs esetében két követelmény teljesül, míg a harmadik követelménynek bizonyos -törzsek, de nem mindéi· törzs (pl. a három törzsből kettő) megfelel. A követelmények eltérőek a felnőtt populáció (18-60 év) és az- idősebb populáció (öö -évnél' idősebb) esetében.
Ifoóő év >60 év
szetokonverziós arány* >40% >50%
konverziós táktor** >2.5 >2.0
vedömny** * >70% >60%
* A. szerokonvemót az olyan vakcinák százalékos arányával definiáljak, amelyek esetében, a szérum hemagglatmía-gátlása (Hl) legalább 4-szereséfe növekszik a vakeinázás után, mindegyik: vakcinatörzs esetében..
** A konverziós faktort azzal a fokíormi definiáljuk, amellyel a szérum Hi-értékének geometriai átlágtteuí; (OMT-k) a vakcínázás után megaövekedaek, mindegyik vakeínatörzs esetében.
'***A védŐ&rányt az olyan vakcinák strányával definiáljuk, amelyek esetében a llkszéranteifer 1:40-κέ1 nagyobb vagy azzal egyenlő (mindegyik vakcinatörzs esetében) és normális körülmények közölt elfogadják a védöhatás jelölésére.
Kereskedelmi forgalomban alkalmazható, új -iaflúenzavakcina szükségképpen megfelel az fenti standardoknak, azonban a gyakorlatban az is szükséges, hogy legalább olyan hatékony legyen, mint a jelenleg hozzáférhető, injektálható vakcinák. Szükséges az is, hogy kereskedelmileg versenyképes legyen az -antigén mennyiségété» a beadások (adagolások) szárnál tekintve.
A jelenleg kereskedelmi forgalomban kapható isflúeazava&cinák injektálható, hasított vagy alegységvakeiaák. 'Ezeket a vakcinákat a vlrusrészecske szétbontásával, általában szerves oldószerrel vagy detergeassel történő szétbontásával és a vírusfehérjék különböző mértékű tisztításával állítják elő. Hasított vakcinákat fertőző vagy akár inaktívált, teljes influenzavírus szoiubilizáló koncentrációban alkalmazott szerves oldószerekkel vagy delergeusékkeí történő foagmentá&áva) és a szolubillzálő hatóanyag és- a vírus lípídanyaga bizonyos mennyiségének vagy nagyobb részének ezt követő eltávolításával állítanak elő. A hasított vakcinák általában tartalmaznak szennyező máídxftbérfét, rttekleoproteint és időnként kpidet, valamint a membránőoriték fehérjéit is. A hasitoít vakcinák rendszerint tartalmazzák a vírus strutórfehétjéi nagy részét vagy egészét, azonban nem feltétlenül azzal azonos arányban, ahogy a teljes vírusban előfordulnak. Másfoszt az alegységvakcínák alapvetően nagymértékben megtisztítod felszíni vúusfehérjékbóí, bemagglutiniaből és nenmmi ni házból állnak, amelyek felelősek a kívánt vlrusneufealrzálö antitestek termelése kiváltásáért a vakcínázás során.
99772-3 072.A/SÖ * * * φ
♦ *« « « ♦♦♦ ♦
Sok, jelenleg hozzáférhető vakelrsához kortzerválószerre van. szükség a romlás megelőzése céljából.. Gyakran -dkahnazotí konzerválószer a tómmal, amely egv hig&nyisrtahaá vegyület. A. btganytarsainrú vegyűletek hatásaival kapcsolatban a nyilvánosság előtt bizonyos aggodalmakat fogalmaztak meg. Nincs megfelelő felügyeleti rendszer a hí.gaoytaríaknf· szerves vegyületek alacsony vagy mérsékelt dózisának a fejlődő Idegrendszerre gyakorolt hatása detektálására, és néhány évig tart az olyan, gyermekek vizsgálatának befejezése, akik szerves higasyvegyületek nagy dózisát: kapták. Egyes kommentátorok hangsúlyozták, hogy a /«fommfo'tartalmá vakcinák potenciális veszélyeit sem szabad eltúlozni [Ofot, P.Á., JAMA. 2.016)1, MinthtzoíAiíal előnyös lenne vakcinák előáll kására szolgáló alternatív eljárást találni, a thówwíö/ gyártást eljárásban történő alkalmazásának helyettesítésére. Így szükség van Áfotfíemoí-mentes vakcinák kifejlesztésére, különösen az olyast vakcinákra, rnittt az influenzavakcina, amelyeket évenkénti alkalmazásban ajánlanak, legalábbis a populáció bizonyos csoportjaiban.
Jelenleg standard eljárás kcatzerválószer alkalmazása a kereskedelmi forgalomban kapható, ínaktivált infiuenzavakcináknál, az előállítási - tisztítás! eljárás során, és/vagy a végső vakcinában. A konzervál őszeire szükség van a mikroorganizmusok elszaporodásának megakadályozására a tisztítás különböző lépései során. A. tojáseredelü infloeozavakeinák esetében tipikusan /htowwJ-í adnak a nyers dlimfoiszfolyaáékhoz, és ez adható egy mástxiik időpontban, a vírus kidolgozása során. így a folyamat végén dboíscmőf-maratlék lesz jelen, és ez ráadásai beállítható egy kiváat koazerválöszer-koncenlrácíóra a végső vakcinában, például körülbelül IŐO ug/ml koncentrációra,
A /ásöwnW konzsrválöszerként történő alkalmazásának egyik mellékhatása a stabilizáló hatás. A kereskedelmi forgalomban kapható mílaenzavakcmában a dáőmcmö/ a vakcina HA-kompooense, különösen, de nem. kizárólag a B-mílnenzatőrzs HA-komponense stabilizálásában fejti ki hatását. Bizonyos törzsekből származó hemagghitimnek, például a H3, ssmtéa stabilizálást igényelnek. Ezáltal kívánatos a thrownW-tíak a végső snílnenzttvakcinákból tőrtésfo eltávolításának megfontolása, azonban megoldandó problémakén; merői- fel az, hogy a HA, nem lesz megfelelő mértében stabil.
Felismertük, .hogy inttkőváii inllaenzapreparátumokban lehetséges HA stabilizálására olyan, alternatív reagensek alkalmazása, amelyek nem tartalmaznak szerves hsgaayvegyüHeket A HA stabilizált állapotban marad úgy, hogy bizonyos időn át detektálható standard kvantitatív eljárásokkal, különösen SRD-vel, szag detektálható xtagyobfe mértekben, mint az azonos eljárással, stabilizáló exeipiens alkalmazása nélkül előállított, nem stabilizált antigén-preparátum. Az SRD-eljárást az itt Ismertetésre kerülő módon halijuk végre. Nagy a jelentősege annak, hogy a HA stabilizált maradjon 12 hónapig, ez standard követelmény a végső inífoenzavákeina esetébe».
A találmány egyik első szempontja szerint & tárgyat képezi makdváli ínfotenzavirtis-preparátanr, amely tartalmaz ráfomemm nélkül vagy ráfomersöf alacsony szintjeinél stabilizált hemsggfottnin-aötígént, ahol a bemagglutöun SRD-méréssel detektálható, és ahol a készítmény a-iokoforol-szukeinátot tastaltnaz elegendő nxomyiségben ahhoz, hogy stabilizálja a HA-t.
A tówssl alacsony .szirtijei az olyan szintek, almi az ínfluenza-B-ből szártnazó HA stabilitása csökkentett ügy, hogy stabilizáló exeipsens szükséges a stabilizált HA céljára. A íáiememof alacsony szitatje általában 5 ug/ml vagy kevesebb.
Általában a stabilizált HA alatt olyan HA-t értünk, amely detektálható bizonyos időn kérésziül kvantitatív srandatd eljárások, közelebbről SRD alkalmazásával, és nagyobb mértékben detektálható, mini az azonos
99772-3072A/SG eljárással, azonban stabilizáló excipiens alkalmazása nélkül előállított antigén-preparátum.
A HA. stabilizálása előnyösen fenntartja a HA aktivitását, alapvetően állandóan (áüandö értékes), egy éven át.. Előnyösen a stabilizálás lehetővé teszi a HA-tartafanú vakcina .elfogadható mértékű védelmét 6 hónapos tárolási időszak utót-, előnyösebben egy eves Időszak vsán.
Alkalmas- -módon a stabilizálást stabilizáló exeipiens alkalmazásával hajtjuk végre, előnyösen mkellamódosító excipíens alkalmazásával. Afeeiiamódosííó excipiens általában az olyan excipfens, amely a HAmembráafehéqe szoktbilizálásártm alkalmazott vagy tara alkalmazható detergeas, mint például a TWws-öő, a Aírtm-A-fŐö és a dezoxü-kolót detergessek (önmagákban vagy kombinálva alkalmazva) által kialakított mfeelláha beépülhet.
Feltételezzük (anélkül, hogy bármelyik elméiét mellett elköteleznénk magunkat), hogy az excipierts -a végső preparátumban a lípídekkel, detergensekkei és/vagy a fehérjékkel kölcsönhatásba lépve fejő ki HAstabilizáló hatását, Xialakithaíésk az: excipíens. által lipiddel és fehérjével alkotott keveri m-meHák, mist például a Tw» és a dezoxi-koláí, maradék lipldekkei és/vagy Zirío«-X-/dD~®ai alkotott miceílát. Feltételezzük, hogy a felszíni fehérjéket -az ilyen komplex micellák tartják szolubilis állapotban. Előnyösen, a fehésjeaggregáelöt a megfelelő excsptensefeet tartalmazó micellák tőkésen alapuló taszítása korlátozza, például a negatívan töltött áetergeosekei tartalmazó micellák esetében.
Az alkalmas- micefemódositó excipiensekre példák többek közöt·:: a pozitív, negatív vagy ikerionos töltésű. am «patikus molekulák, mint például az alkíbszulfeíok vagy az aikil-aril-sxulíátok, a mm kssos amfipatikns molekulák, mint például az alkil-gkkozidok vagy ezek származékai, mint példán! a Ma&faazre·® (hozzáférhető a /feíító Á'éféíd-tól) vagy alkil-alkohol polialkjlén-éterek vagy ezek. származékai, mist aLösmA-9.
Előnyös exdplens az. α-tokoferol vagy származékai, sünt például az a-tokoferol-szukemát, Más, a találmány szerinti megoldásba»: alkalmazható előnyös íokoferol-származékokra példák többek között a D-atokoferoí, D-S-tokoférol, a D-y-tokofetol és a öt-a-tokoferol Megfelelő, a találmány szerinti megoklásban alkalmazható tekoferol-származékok többek között az acetátok, szukcinátok, fesztorsav-észtérek,. fonttiátok, propionátök, butifáiok, szulfátok és giukosátok Az o-tokoferor-szukcisátot alkalmazzuk a találmány szermti megoldásban. Az o-tokoferol vagy .származéka olyan mennyiségben vau jelen, amely stabilizálja a hemagglutinint.
Más, alkalmas exdpfens azonosítható a technika állása szerinti eljárásokkal és tesztelhető- példán! az SRD-eljárás- alkalmazásával, a leírásban megadott módom
A találmány egy előnyös szempontja szerint a találmány tárgyát képezi Intlnenzavírns-antigenpreparáftsn, amely tartalmaz legalább egy stabil hrliaeozö-ö-íöEzs hontaggintinin-antigéut.
A találmány egy további szempontja szerint a találmány tárgyát képez! stabil hemagglutinin-antigén előállítására szolgáló eljárás, amely tartalmazza az antigénnek «.-tokoferol-szukelnát jelenlétében történő előállításának lépését,
A találmány tárgyát képezik továbbá vakcinák, amelyek tartalmazzák az iti leirt antigén-preparátumokat, valamint: a találmány tárgyát, képezi, ezek alkalmazása intiuenzafertőzés vagy betegség emberben történő megelőzésben, ahol az eljárás tartalmazza a találmány tárgyát képező vakcina embernek történő beadását.
A vakcina beadható -bármely, -alkalmas beadási módost, mint például ínfeadermáksan, ninkózálisatt, például ínlranazáiisan, orálisan, iatramuszfculárisan vagy szubkután módon, A beadás más módjai a technika állása szerim ismertek.
99772-3072A/SG ό <
Előnyős az intradermális beadás;. Bármely alkalmas- eszköz alkalmazható az Intradsrmális beadásra, például a rövid tővel felszerelt eszközök,, mint amelyek leírása megtalálható a következő közleményekben: a. 4886499. sz„ az 5190521. sz., a. 5328483. sz.. az 5527288. sz., a 4270537. sz., az 5015235. sz., az 5141476. az., 54: 7062. sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi iratok. Az mtraderarihs vakcinák beadhatók olyan eszközökkel is. amelyek korlátozzak a tőnek a bőrbe történő hatékony behatolásának hosszát, -mint példánl azok, amelyek leírása a Wö 99/141496. sz.· nemzetközi közzétételi iratban és az EP 109244. sz, európai közzétételi iratban megtalálható, vagy azokkal ímtkcíímálissn egyenértékű eszközökkel. Alkalmasak a /el injekciós eszközök is, amelyek a felyadékv&ketót g dermsszhez jfer íöiyadékinjekiorral vagy olyan tővel juttatják, amely átszűrje a .síívíöí'K! roménza-ot ia szarurétegeí) és a dermiszt elérti fólyaáéksugam hoz létra. Jer mjókciós készülékek leírása megtalálható példáéi a kővetkező- közleményekben: az US 5480381. sz,, US 5599302. sz., US 5334144. sz„ US 5993412. sz... US 5649912. sz., US 5569189. sz., US 5704911. sz,., US 538385t sz., US 5893397. sz„ US 5466220. sz., US 5339163. sz., US 5312335. sz., US 5303627. Sz„ US 5064413, sz., US 5520639. sz., US 4596556. sz., US 4790824. sz. és az US 4940460. sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi iratok és a WO 97/37705. sz. és a WO 97.· 13537. sz. -nemzetközt közzétételi iratok. Alkalmasak a. ballisztikus- por- vagy részeeskebejőítaíó eszközök, amelyek sőrttett gázt alkalmaznak a -porformájá vakcina feigyörs:tására, a bőr külső rétegeiből a drivtó-be való bejuttatásához. Ráadásul alkalmazhatók hagyományos fecskendők a klasszikus, jmmtoax-eljárássaí történő intrsdertrtálls bejuttatásban. A hagyományos fecskendők alkalmazása képzett személyzetet igényel, év így előnyösek a képzett alkalmazó ííélkül pontos bejuttatásra alkalmas eszközök.
így a találmány tárgyét képezi inlluenzafertőzés vagy megbetegedés .betegben (személyben) történő megelőzésére szolgáló eljárás, amely tartalmazza a találmány tárgyát képező inflaenzavnkcína személynek (betegnek) ístradérmálisan történő beadását.
A találmány tárgyát képezik továbbá mtedermáiis beadásra szolgáló eszközök a találmány tárgyát képező vakcinával kombinálva, különösen olyan eszközökkel, amelyek feltárása megtalálható például a WO 99/34350. sz. nemzetközi közzétételi Iratban vagy az EP 1092444. sz. európai közzétételi iratban.
A találmány tárgyát képezi sMeAdérol-szakéinál .alkalmazása bemagg'iutmin-stabüizálökéttt influenzavakcina gyártásában.
A találmány közelebbről, de nem kizárólagosan az influetíza-g^ötzsdtemagglutmm stabilizálására vonatkozik.
Előnyősért a találmány tárgyát képező stabilizált KA 6 hónapig, előnyösebben 12 hónapig stabil.
Az o-tofeoferol szukcinái formájában van.
Az α-tfökoférol vagy származékainak előnyös koncentrációi 1 pgúnl - 10 mg/ml közöttiek,, előnyösebben 1Ö p,g/ml - .5(8) ugónl közöttiek,
A találmány szerinti vakcina általában A- és S-törzsbe tartozó antigéneket egyaránt tartalmaz, tipikusan kát A-törzs és egy R-tőrzs trivalens készítményében, Divalens és monovafens vakcinák azonban nincsenek kizárva. Monov&lens vakcinák előnyösek lehetnek járvány esetében, amikor fontos- a lehető- legtöbb vakcina előállítása és beadása, a lehető leggyorsabban.
A találmány szerinti alkalmazásban a nem élő loflnenzaantsgéo-pmpafátansok lehetnek hasított .antigénpreparátumok, alegység-antigének (rekombínáns módon expresszált vagy akár teljes vírusból előállított) vagy maktivált teljes vírus, amely lehet inakíiválva kémiailag, például formaldehiddel, p-ptopiolafetennal vagy más
99772-3O72A/SG *♦« X módos inakdválva, például UV- vagy hőísaktíváíással. Előnyösen az antigén-prepará-ta-m teljes, vírusból, előnyösen a felszíni antigén tisztítását követő hasítási eljárással előállítod, htisítoö virttsprepsrátusn vagy akár aíegységantígén.
Előnyösen .a hemagglútin in-antigén feosceatráeiőja az inflaenzavínrs-preparátambsz vagy az iaöuenzavíras-preparátera minden törzse esetére S-1QOS pgőnl, előnyösebben 3-300 yg/snl és a legelőny ösebben körülbelül 30 ug/mt SRD-météssel mérve,.
A találmány tárgyát képező vakcina ráadásul tartalmazhat aápmmt vagy ínnmmaiimuiánst, mint példánk de nem kizárólag a bármely eredetű, detoxifíkált lipicl-A és a lipid-A. nem toxikus származékai, szaporátok és más, TH1-válaszreakció stírnulálására alkalmas reagensek.
Hosszá. ideje ismert, hogy azentetobaktertáiis lipo-poliszacbarid (LPS) sz femrunrendszer hatásos «Urnalátója, azonban alkalmazása korlátozott toxikus hatásai miatt As EPS egyik nem toxikus szánmazékát, a monofószfonl-iipld-A-t (MPL), amelyet a mag szénhidiátcsoportja és a redukáld végű glö&ózamin fosztátesoportja. eltávolításával állítanak elő, Riói és munkatársai [Ribi és rntsai.,. Imraunolegy and immunophatmacoiogy of feacterial endotoxis, Remim .Pabl. Cotp,,. NY, 407-419 (1986)1, és szerkezeiét a kővetkezőkben bemutatjuk:
Az MFL egy további, detoxifikált változatát kaphapuk eredményül, ha az diszaehnridváz 3, pozíciójából az acilesoportoi eltávolítjuk, és így ezt a változatot 3-O-dezaciIált monoibszfótíl-lipid-Á-nak (3D-MP.L) nevezik, Tisztítható és clóállllható-űB 2122204. sz., egyesüli királyságbeli szabadalmi irat kitaniiását képező eljárások. szénát, amely szinté» a diroszferií-lipiá-A és: ennek 3-O-deza.cilált változatai előállítását tárja lel,
A 3D-MPL előnyös formája emulzió, amely részecskemérete 0.2 am-nél kisebb, és ennek, gyártási eljárását a Wö 94/21292. sz. nemzetközi közzétételi irat tárja fék Monoibszforíl-lípid-A-t es felületaktív anyagot tartalmazó készítmény leírását találjuk mega WO98/43670Á2. sz. nemzetközi közzétételi iratban.
9O772-3072A/SG
A találmány szerinti készítményben formuíázandó·, bakteriális lípo-poiíszacharidbél szárntazó sdjuváxis tisztítható és feldolgozható bakteriális. forrásokból, vagy ezek alternatív módon lehetnek szintetikus eredetitek. Például tisztított, monofoszforil-lipíd-A leírása megtalálható Sibi és munkatársai (fent) közfemésyébou, és &/om«;?/fo-iaíokból -származó tisztított, 3-O-dezscilslí monofoszforil-ltptd-A leírása a QB 22202 11. sz. egyesült királyságbeli .szabadalmi iratban és az US 4912094. sz, amerikai egyesült államokbeli szabadalmi iratban található taeg. Más, tisztított és szintetikus ligo-políszaclutedokaí imák le; Hiígers és munkatársai, int. Arcb. Alíergy immunoi. 79(4): 392-6 (1986); Hilgers és munkatársai, immunology 6Q(l): 141-6 (1987) és az EP 0549074, Bí. sz. európai közzétételi iratban. Különösen előnyős bakteriális lipopoliszaeharíd adjuváns a 3DMPL.
Ennek megfelelően a találmány szerinti megoldásban alkalmazható LPS-szánaazékok az olyan immtutstímuíánsok, amelyek szerkezete az LPS, az MPL vagy a 3D-MPL szerkezetéhez hasonló. A tafelruóuy egy másik szempontja szerint az LPS-száonazék lehet scilált -monoszacabrid, amely a fenti szerkezetű MEL-nek egy kisebb részeA szaponinokról Laeaüle és munkatársai közleményében találunk kitanítást [Lacailfc-Dobois, M. és Wagner, f!., A revfew ©í te hiologfeal and phnnnacofogics.1 activííies of sapoains. Pbytomedicíne 2: 363-3S6 (1996)]. A szapotí-mok sztereód vagy triterpén ghkoztáok, amelyek a növények és tengeri, állatok, között széles körben elterjedtek. A szaponlnok jellemző tulajdonsága, hogy kolloid: oldatot: képeznek vízben, -amely rázáskor habzik, valamint a koleszterinnel csapadékot képez. Ha szaponinok .sejtmembránok közelébe kerülnek, pórasszerű szerkezeteket képeznek a membránban, amely a membrán szétrepedesébez: vezet. A vörösvértestsk hemolíztse egy példa az ilyen jelenségre, amely egyes szaponlnokra igaz, de nem mindegyik szapoain tulajdonsága.
A szaporának ismertek adyuvánsfcéttt szisztémás beadásra szolgáló vakcinákban. Az egyedi szapeninok adjuváns és hemolttikas aktivitását alaposan vizsgáltak a technika állása szerint [Incaille-Düfeors és Wagner, fent), Például a (9nrfo4 fond a dél-amerikai Öteifo/a >%ϊρο?κ<πα Afo/ton kérgéből származik) és frakciói, amelynek leírását a követező közleményekben találjak meg: az US 5ÖS7540. sz. amerikai egyesük államokbeli szabadalmi irat; Keltsd, C.R., „Szapouins as· vakcina sdjuvantsfe Crit Rév Tber Drug Caxríer Syst., 12(1-2): 1-55 (1996), ás az Eö 03622798 1. sz. európai közzétételi irat. A Quii'-A ifakcióit tartalmazó, immunsíinmlátss komplexeknek (ISCQMS) nevezett szemcsés szerkezetek heasolítíkasak, és ezeket alkalmazzak vakcinák gyártásában (Merem, B., EP 010994281; WO 96/1171 í; WO 94/33739). Á (9527 és (93/7 hexnelitíkus szaporáitokat (a Öíd/-A tisztított frakciói) hatásos szisztémás adjovánshém íriák le, és .az előállításukra szolgáló eljárást az US 5057540. sz, szabadalmi iratban és az EP Ö362279B1. sz. európai közzétételi iratban tátják fel. Más, szisztémás vakcinázást vizsgalatokban alkalmazott szapoaiaok többek között a más növényfajokból, mist a ÍAtosoptefo-ból és a 5<<p<?«í-'Aö-böi származó szaporának [Bomford és misar., Vaccine 111(9); 572-577 (1992)).
Egy továbbié) fesztért rendszer magában foglal nem toxikus- lipid-A-származék©t és szapotttezármazékot, különösen a (932/ és; Ιβ-ΜΡΧ koiabbtedőbau, amint. az a WO 94/00153. sz. nemzetközi közzétételi iratban van fellárva, vagy kevésbé reakcióképes; készítményt, ahol a QS2J koleszterinnel van „kioltva” („qpeached’'), amint az a WO 96/33739, sz. nemzetközi közzétételt imten van feltárva.
Különösen hatásos, a- (932/-et és áö-Aöfe-t olaj-a-vízben emulzióban- tartalmazó adluvánsksszífméuyt Imák le a WO 95/17210, sz. nemzetközi közzétételi iratban, amely előnyös adjuv-ánákészítmény.
A találmány egyik megvalósítási módja szerint a találmány tárgyát képezi vakcina, amely tartalmazza-a
99772-3072A/SG
.. 8 .
* 4 4 »4« * 44
A találmány szerinti íaílueszoatrgén-prspasálöffiol'és adiuvárískóar detoxrfikált iipsd-A~t vagy nem toxikus lipidA-sz&rnmzékíte előnyősében sdjuvánsként ttiönofoszforil-lipid-A-t vagy annak származékát.
Előnyösen a vakcina ráadásul tartalmaz szuponint, előnyöse bbem,2-72 7-etElőnyösen a készteény ráadásai tartalmaz olaj-a-vizben emulziót. A találmány tárgyát képezi vakcinakészííraéay előállítására szolgáló eljárás is, altot a találmány tárgyát képező -aníigén-preparát-nnot gyógyászatitag elfogadott exclpienssel, mint például 2£foWEŐ-iel keverjük.
A találmány tárgyát képező vakcinák ráadásul tartalmazhatnak legalább egy félületáktlv anyagot, amely közelebbről tehet nem ionos felöletakdv anyag. Alkalmas, nem ionos felületaktív anyagok az oköl- vagy nonilfenoxi-pelieíKoolok (például a kereskedelmi forgalomban kapható fr/roo^sorözatok), a poiioxietliénszorbitás-észíerek (7 w^sorozatok) és polioxíehléti-éterek vagy észterek, az (I) általános képlet szerint:
ti) HO(CHjCH2OVA-R ahol a 1-50, A kötés vagy -€(O)-. R C:..So-a&il vagy-fenik C.;.,50-atkik és két vagy több ilyen kombinációja.
Az előnyös felületaktív agyagok, amelyeket, az í. képlet ír le, olyan molekulák, amelyekben a 4-24, előnyösebben 6-12, és a legelőnyösebbe» 9; az H.~kompo»e»s Cj-jg-,. előnyösebben C^>o-aikil, és a legelőnyösebbe» í- i.5;;-x:íkí
Qtótfenoxi-polfoxí-elanoiokat és poliorieíilén-szorbiíán-észíereket leírása megtalálható például a kővetkező közleményben: „Soríáetarü Systems5'’, szerk.. Atíwoed és Fioreuce (kiad.: Chapman és Hali, 1983). Oktilfenoxi-poiloxi-etanolískat (az oktoxinolokat), többek között a í-okíilte-roxí-poheíoxi-etanol (Tmm-JÓ /döiMk amelyeket a á&wá Ántex 6858, címszónál ír le (1162, old., 12. kiadás, kiad., Merc & Co. Inc., Whiteboose Stábon, Μ Y., USA; ISBN 0911910-12-3), A rmlloxi-eiiién-szorbitán-észiereket, többek között a polioxi-etiién-szorbitán-monooleáíot (Avemí-őíA^), a Merek Uks 7742. címszónál ír le (1368. old., 12. kiadás, kiad.. hferc & Co. Inc., AVbítdsoase Staíion, N. Y., USA;: ISBN Ő911910-12-3). Mindkettő előállítható az itt leírt ellátásokkal, vagy beszerezhető kereskedelmi forrásokból, mim például a AR7AÓ4 foc-től.
Különösen előnyös, nem Ionos tellitetakttv anyagok többek között a Trikon-dkAl a t-olctílfénoxlpolsetoxi-etsnol (ζηίοηΆ-Ιόό), a 7rite?Í-A-/ö2, a a 2)-κο«-Λ7/ό0, a 7>iío»~A-2ö7, a Jrúrio-A·áöő, a feóos-A-ő/, a Jmra-AA/P/, a fe-fom-AMaÖ. a öreö-dő, a polioxi-etitén-9-íauhi-éter ftamá 9) és a polioxi.-etilén-9-sztearil-éter (xteozető-á). Különösen előnyös a. Dóron-AMŐd és a .'οκ,ο??/; 9, Szitáén különösen előnyős a poiioxl-eíilen-szorbitán-észter, a poíioxí-ehlén-szodótánmionooleáí (7boen-<íö'iM).
Áz 1, általános képlettel leírható, további alkalmas polioxietilén-éterek: a poiioxs-etilén-S-smeaíil-éter, vagy a polioxi~eíiién-4~iauríl-éter, a polioxl-edlén-SS-latmi-éter, vagy a polioxi-eíllén-2:3-lauríl-éter,
A polioxi-eíiléíi-lauril-éter alternatív elnevezéseit a OtY-tegyzék tárja (el. A poíioxi-etiléí5-9-lauril-éter Czíő-jegyzék szerinti szánta; 9002-92-0. Polloxíetilén-éterekst, mint például a poiioxi-etilén-lauril-étefo a Aferek-index (12, kiadás, 7717. címszó. Mérv & Co. Inc... Whitehouse Stábon, N. Y,, USA; ISBN 0911910-123) ír te. A as eőtén-oxid és a dodeeil-alkohol reakciója által keletkezik, ás átlagosan 9 eblénoxldegységet tartalmaz.
Kát vagy több, nem kínos, a különböző, lent felüleíakslvanyag-csoportba tartozó felületaktív anyag teltei jelen az itt leírt, vakeinökészhménybeo. Közelebbről előnyös a polioxi-etlten-sziítfeitán-észíer, mini például a polioxi-fiidén-szorbitán-mooooleáí (Envím-őO™) és egy oktoxinol, mini: például s i-oktilfenoxí-poltetoxl-etasol (7teif?n-A-./ŐÖ™> kombinációja. Egy másik, különösen előnyös, nem ionos felületaktív anyagok kombináeióia tartalmaz fonrten- 9-et és polioxi-eblén-szorbitás-észtert vagy ökíoxinolt, vagy mindkettőt.
99772-3Ö?2AzSG
«... ,
A nem ionos felületaktív anyagok, mini a fent isiueríetotíek. előnyős koncentrációi a végső vakcmakésziönénybett: a polioxi-etiléa-szorbitán-észtértíkben, mint a Jkw«-dü'tM esetében: 0.01-1%, a legelőnyösebben körülbelül Θ. 1% (w/vg az oktil- vagy ntmüfenoxs-poboxi-etanolok, mist a %·ίίοη-Λ-/00™, vagy a Trifensorozat más detergensei esetében: Ö.0Ö1-0.1%, a legelőnyösebben 0.05-0.02% (fov); az 1. áhalá:sos képletnek megfelelő políoxí-etílén-életnk, mint például a íí«;«fo?-9 esetében: 0,1-20%, előnyösen 0.1-10%, és a legelőnyösebbe»· 0.1-1%, vagy körülbelül 0,5% (udv).
Bizonyos vakcinakészíbnénsuk esetében a készítmény' tartalmazhat más vakcinakoö^xwimket A. találmány szerinti készltmsay, ntíat olyan, tartalmazhat epesavat vagy származékát, különösen sóformáiában. .Ezek. magukban foglalják a kölsavat és sóit, .knlönö-seo a kolsav vagy kélsavszánnazékok nátríamsóít. A. kóisavakta és származékaim példa többek között a kélsav, a dezoxi-kó&av, a cáw-dézoxí-kóísav, & lítokólsav, az urao-dezoxi-kólsav, a hiodezoxi-kólsav és ezek származékai, mint például a fenti epesavak gliko-, íauro-, atmdopropiM-propánszté-fon-. 8mídopropil-24ódroxi-l-ptopánszülíb«rszá«nazékal, vagy N,Pi-bisz(3Dglukone-anridopropilbífozoxikólanbti. Rülösösen előnyös példa a eáíraan-dezixo-kolát (NaDOC), amely jelen lehet» végső vakemadózisbas,
Szintén a -találmány tárgyát képezik gyógyászati reagenskészietek, amelyek tartalmazzák a találmány tárgyat képező vakcinával töltött,. vakcinabeadásra. szolgáló eszközt, ilyen beadásra szolgáló- eszköz többek között, de nem kizárólag a tövei felszerelt eszközök, a folyadek-fet-eszközők, a por beadására szolgáló eszközök és a spray beadására szolgáló eszközök (iairasazális alkalmazásra).
A -találmány szerinti iEiliueuzavirus-anfigén-prepaíülumijk származhatok hagyományos, embriónál!· tojást alkalmazó eljárásból, vagy származhatok bármely új előállítási eljárásból, amely sarán szövetevészeset alkalmaznak a vírus szaporítására vagy az áifíaenzavÉrus felszíni antigénjei expresszáláxára. A. vírus szaporítására alkalmas sejtszubsztrátok többek között példán! a kuíyavesesejfe.k, mint például a MDCK-sejtek, vagy MDCK. kiónjából származó sejtek, MDCK-szerS. sejtek, majomvesesofték, mint az AGK'M-sejtefc, többek között a lövo-söjtek alkalmas sertéssejtvonalak, vagy bármely, más omlőseredetö sejttípus, amely alkalmas vakcina célokat szolgáló inflnenzavlrns előállítására. Alkalmas- sejtsznfeszírátck többek között a .barnán eredetű sejtek, például az MRC-5-sejíek. Az alkalmas sej&zabsztrátok sütésének sejtvonalakra korlátozva; .alkalmazhatók például elsődleges sejtek, m int például -a cxitkemhrió-fihrofel&szíok,.
Az is?fluenzav!ms-sntsgen-prepas-áínmok elöálhlhatőak a kereskedelmi szempontból alkalmazható számos eljárás bármelyike- alkalmazásával, például a DD 300833. sz. és a DD 211444, sz. szabadalmi iratban leirt, hasított iAenzavak-cina előállítására szolgáló eljárással. Hagyományosan a hasított inflnenzavakeioát oldószerrel és detérgen-ssel történő kezeléssel állították elő, mint példán! Irba-butii-feszíattal vagy dletiléfer és 7W<?«™ kombinálásával {,Jwe«-éíer-hastíás%, és ezt az eljárást még alkalmazzák bizonyos gyártóhelyeken. Más, jelenleg alkalmazott hasílóanyagek többek között detergensek vagy prptenhftkns őszinték vagy epesavsők, például a nátrium-dezoxi-tolát, -amint az a DD 155875, sz. szabadalmi iratban van leírva. Hasítóanyagkésl alkalmazható detergsnsek többek között a kationé* detergensek, például a cetll~nimetíl-amm«Sm-im-ferom-id (CTAB). más ionos detergensek, például a laüril-szulíat, a íanre-dezoxi-kolát, vagy nem ionos detergensek, mint például a fent issnertetettek, többek között a rriton-A-óŐR pl. a Irina és munkatársai által leirt eljárásban [Irina és mtsai., Bioíegieals 28; 95-103 (2000.ll és a Tritoft-W-W, vagy bármelyik, két vagy több dstergens kombinációja.
A hasított vakcina előállítására szolgáló előállítási eljárás tartalmaz számos, különböző szűrés: és/vagy
99772-3072A/SG »-»♦«· φ más, elválasztási lépést, nmet például az ulü-aceotrifegálási, altrafiltrálási, zőnaeenirí&fgálásj és líromatográriás (pl. ioncserélő kromatográfiai lépéseket számos kombinációban, és adott esetben ínaktivációs lépést például bővet formaldehiddel vagy ^propioiáktotutal vagy UV'-sugárzással történő- Inaktiválást, amely végrehajtható a hasítás előtt vagy után. A. hasítási eljárás végrehajtható óo/eA, folyamatos vagy félfolyaosatós eljárásban.
A találmány szerint, előnyös, hasított iaíiaenzavakcma-antigén-pr^mátömok tanahsaznak egy maradék mennyiségű,. az előállítási -eljárásból maradó ?W<?H-A0-at és/vagy 7nto«-A’-/íAAaí, azonban ezek hozzáadhatok vagy fconceníráctójuk beállíthatók a hasított antigén előállítása mán. Előnyösen a 2We«-df? és a közűi mindkettő jelen van.. Az ilyen, nem- lenes lelttietaklív anyagok végső keneentráclójának -előnyős tartományai a vakcmadórishan::
TWeH-t?#: 0.01-1%, előnyösebben körülbelül 0.1% (v/v)
Ö.Ö01-őJ%(w,-'v), előnyösebben Ö.ÖÜ5~Ö.Ö2% (w/v).
Alternatív módon a találmány tárgyát képező influen2avirus-<aotógétt-ptopamtumok származhatnak az élő influenzavírustól eltörő, más forrásból, például a henrngglutmm-antigén előállítható rekombináns- öten.
A találmány további leírását adjak meg a kővetkező, nem korlátozó, jellege példákkal, £Ét»ÁK
Ejtötóa 'Mónoválens, hasított vakcinát állítunk elő a következe eljárással.
Az embriónál! tojás- beoltása napján friss hsofenhunot· állítunk elő a beoltásra szánt mennyiség Ö.5 sngfrnl gestamíciH-szalfátoi és 25 gg/sni hidrökortízont (virastőrzsföggö módon) tartalmazó, foszfáttól pufeolt sóoldattal. A. virÍisinekulumoí: 2-8°C-en tartjuk.
Azgm!brtonáh.tojás.bepltása
9-11 napos, embriónál! tojásokat alkalmaztunk a várasszaporitas céljára. A héjakat megtisztítottuk, A tojásokat 0.2 mi vímslsókuhnnmal beoltottuk. A beoltott tojásokat az alkalmas hőmérsékleten (víntstórzsfüggö nródoo) inkübáltok 48-96 órán át Az inkubálási időszak végén áz embriókat hűtéssel elöltök, es a tojásokat '12őö órán át tárotok 2-8Χ-Ο».
AjdroaöSkgegviiitöse
A. lehűtött, embriónak tolás aU&atobzíőlyadékát összegyűjtöttük. Rendszerint 8-10 sd nyers allamoiszfolyadékot gyűjtöttünk össze tojásonkéttt.
Kfrtoisztkás
Az összegyűjtött aliantolszíolyaáékot mérsékelt fordulatszátnmal eentrifogálásnak vetettük alá (400014000g).
A tisztított virusprepatáramhoz CaHTOrgól előállítása céljából 0.5 mol/l NaHPO'r és Ó-.5 mol/1 C'aCLoldatot adtunk, l.5-3.5 g Cai-lPOyl (a virustörzstöl függően) végső fceneesíráeió· eléréséig.
Legalább 8 órán át tartó ülepítés «tán a felfríúszót eltávolítottak és az influenzavírust tartalmazó üledéket
99772-3072A/SG
-· ·♦
XX » χ * ♦:«·*« reszolubilizáltuk Ö.25 mol/1 N^-EDTA-oldst hozzáadásával. az alkalmazott CaHkOb kottcentraciőjátói tuggo3. Szűrés
A reszuszpendált üledéket 6 unt -e szürömembrónon szültük.
Az inSucKzavfrast izopiknikas eeuttsiugálássai fcoueeatráltok 100 (tgáttl thi&mersefa. tartslrttaző, lineáris sűrüséggríídleusben (0,55% (w’V)). Az áramlási sebesség 8-15 Vára.
A cenfrtfbgálás végén a rotor tartalmát 4 kölö&höxö. frakcióban nyertük ki (a szacharózt refraktométerbe® mértük}:
1. frakció: 55-52% szacharóz
2. ó-akció: megközelítőleg 52-35% szmkaróz
3. frakció: 38-20% szacharóz*
4. frakció: 20-0% szacharóz * vfrustörzsíüggö inöóöti a 3. frakció 15%-ra csökkenthető
A további vakesnaeiőáílkás. céljára csak a 2, és 3. frakciókat alkalmaztak,
A 3. frakciói íbszíátpufrerrel történő diafrltrálássai mostuk a ő%-nál kisebb szacharózísríalom. elérése céljából. Az ilyen, hígított frakcióban jelen levő mflueszsvlróst kicsaptuk az oldható szennyezőik eltávolítása céljából.
A?. üledéket mszuszpextdáhtik és· alaposan elkevertük homogén szuszpenzíó előállítása céljából, A 2. frakciót és a 3. frakció reszuszpendálf üledékét összegyűjtöttük, és főszíátpufet aátanfc körülbelül 40 literes térfogat eléréséig. Ez a tértnek a monevalens viruskoneentrábnn.
A tsonövalens, teljes Múeozavíras-kíKJcenötátnmoí p7VAAfryk-2Z ultracentrifugába tettük.
A K.3-rotor lineáris szacharözgradjenst tartalmaz (0.55% w?v)j, amelyre ráadásul ttátrnim-dezöxikolátgradtextst Is réfegeztaak. Amas-őö vas jelen a hasítás 0.1 % (w/v) konctmsracióban, és íoköíéred-szukeínátoi adunk a S-lörzsbe totósé virasokhoz 0.5 mM-ig. A maximális uáíriura-dezoxikolát-koncentráció 0,7-1.5% (w'v)« és a vfrnstórzsíől függ. .Az áramlási sebesség S-l 51/őra.
A cemrifrígálás végén: a rofor tartalmát három különböző frakcióban nyertük ki fa szacharózt refraktométerben nróríűk). A 2. frakciót alkalmaztak a további feldolgozáshoz. A frakció sztrcbarózíartalom-kortátjat (4718%) a törzsektől függően változik és a kiértékelés után szabjuk meg.
fobisnferórés
A hasított vírasfr&kciós szürömembránokott szűrjük, az utolsó metnbrán 0.2 uík-cs. Hígításra 0,025% (w/v)· 7Wtm-bÓ-as. (B-vírnstórzsek esetében) és 0.5 mhí tokoferol-szodnátot tartahnazé foszfatpöfrért alkalmaztunk. A szűrt frakció végső tértógata az eredeti frakclótérfpgst 2-5-szöröse.
7, laaktís'álás
A szűrt, mofiövatens anyagot 22 ± 2vC~on inkubákuk legfeljebb 84 órán át (a vírusiőrzstői függően ez az inkahálás lerövidíthető). 0,025% (w/v) rwes-M-at tartalmazó rósztatpuffert adtunk ezután a teljes féhóg’ekoscentráció csökkentésére (más.. 250 gg/ntl), 8-vfrustörzsek esetében 0.025% íw/v) .Aveea-SŐ-at és 0.25 isM rakoieroí-sznkcraáio; tartalmazó, lősz tártai ptsfrerelt sóoldatt&l itlgsloftrtnk a teljes febériekosceníracíó 250 pgónhre való csökkentése céljából. 50 pg/mi végső koncentrációban formaldehidet adtunk és az inaktiválást 20
99772-3072&/SG » x ♦♦ >
.. 12 #0 + 2öC-on hajtottuk végre, legalább 72 órán át
Az inafctivált, hasitoö sdrusanyaget legalább 2-szeresre koaeentráljuk eellulóz-acetát-membráaokkal (20 kDa MWCO) fölszerelt akraszüró egységben. Az assyagot ezután 0.02556 (w/v) Jföees-Aíbst tartalmazó fösxfáipufforel mostuk, majd 0.01% <Wv) Tüwka tartalmazó, foszfáttal pufiéról! sóoldattal mostuk, Bvfrustórzs esetében 0.0138 (w-v) Twen-éfoat és 0.1 mM tokoferof-szukcruátoí tartalmazó, foszfáttal p&fforolí & Végső.stgrliszfö;gs
Az ultrsszürés után az anyagot szűrömembrásokon szűrsük, az utolsó membrán 0.2 pm~es. A szőremembránokat öblítettük, és -az anyagot szükség esetés 0.0156 (>/v) Iwcm-ŐO-at (B-víruatörzs esetében) és 0.1 mM kíkelercil-szukeinááü tartalmazó, foszfáttal püffedt söoldattal hígítottuk ágy, hogy a iehéqeköuceíürádó se haladja meg az 500 pgórrl-t.
ifoJárofe
A végső, monevaiens terméket 2 ~ 8 e€-on tároltuk, legföljebb 18 hónapig..
Stabilitás
L..lábjázaí
Törzs Stabiiízálósxer Előállítás után 4 há t 30T-on 6 hónap 2-8%:-on 12 hónap 2-8'%-on
B/Yamaaashi.'* 166/98 tekoforol-szukcinát (maradék higany: 3 pg/ml) 169 139 (8358) 172 (>100%) ND
B/Yamarsashí/1 őb/98 Thíoatersal (108 pgónl) 102 1 60 (8356) 186 (97%) 178 (93%)
B/ Yamamshi/ 166/98 nincs (maradék higany: 3 pg/mi) 191 122 (60%) 175 (9293) 154 (8158)
.WJohasnesbmg/5/99 tokeferul-szukcfoát (maradék higany:. 4 ug/ml) 166 M3 (>10058) 158 (959%: 179 (>100%)
B/JohaKOSsburg.d/99 tokcförol-szukcmát (maradék higany: 4 gg/ml) lő 179 (>1005% 158 (9556) 178 (>10056)
B/lohannesburg/S/OO tokoferol-said®inát (maradék higany: 3 gg/ml) 144 151 (>10053) 130 (90%) '145 00005%
B/Zchannesburg/5/99 * ihíomerstd 159 ND 172 (>100%) 154 (97%)
BÁJ ohannesburg/3/99* * nincs 169 107 (6353) 153 (90%) F
* az engedélyezett fotíMAZTí3«-nek megfelelően előállítva, **' az 1. példa szerint, tekofonl-szukdnát nélkül előállítva, F: folyamaiban, ND: nincs meghatározva.
99772-3072AZS% *« Φ Φ : ««* φφ
Három törzs, az ddVéu·· Co/e^wh/^&W <HIM) /íTŐ-ffő, az·4/Pit/w»«Z2-öő7/99· (H3N2) &esvtr-f? és a &yóm«?m.$őértóő/ÓÓ mcmovalens, végső termékét állOottak elő sz 1, példában leírt eljárás szerint
Az alkalmas mmnyiségü, végső termékeket s következő koncentrációkban. összekevertük: 30 gg/mí HAkoncentráció az d/Aw £a&do»ía2W (HLV/j /kS-f/jk az A^o«wöt2ííóZ4?9 (A3A2) .&ov;r-77 ésb39 gg/ml a ^/FűmíímsáóVőó^Ő esetében. A TWen-áÓ és a 7káton-,Y-/0í.! koncmtráciőját 580- ggáaí-re és 90 gg/ml-re állítottuk be. A végső térfogatot 3 1-re állítottak be, foszfáttal pufferöli sóöldaöal. A trivalem/wo/-t 0.8 usn-os ceilKÍőzacetát-m«ml>rárío« szűrtük' a végső, tóvalens tennék előállítása céljából. A végső, trivalens terméket fecskendőkbe töltöt-ők, mindegyikbe legalább Ö.5 tnl-t.
2. táblázat
.....végső.....teuaékekbga_SRI)-vel... méri.....IfeViartajmánsk
Vakcina&nnala Törzs öhónap 2 hónap 4 hónap 6 hónap
xnfíue nzavakcina stabilizáló nélkül /izTKWíW 33 (32-34 32 (31.-33) 36 (34-38) 31 (30-32)
J/Pa}í/2&)7/99 29 (27-31) 31 (23-34) 34 (32-36) 32 (31-33)
3Ó (34-38) 33 (32-34) 32 (30-34) 3t (29-33)
«-íokoferol-sznkcsnáioi tartalmazó influcmzavakehra A/NCeÍ/2®99 31 •(30-3-2) 32 (31-33) 36 (34-38) 32 (31-33)
A/Pan/2ffi7/W £ <-> -7 m ó 33 (30-36) 36 (35-37) 33 (31-35)
&Gám/,W78 37 (35-39) 36 (34-38) 38 (35-41) 36 (33-39)
A.Béíáa
Üveglemezeket (12.4-10.0) horkoltunk infisarza-HA-elieni sréransoi tartalmazó agarózgóilel, az A7&$€ utasításai szerint A gél megkötése után 72 mlataüreget (3 mm átmérővel) lukasztottak az agarózban, lö gi, alkalmasan hígított referenciát és mintát töltöttünk az üregekbe. A lemezeket 24 órán át szobahőmérsékleten (2ö-25°C~os) ínkuháliuk párakamrában. Ezután· a lemezekor egy éjszakán át NaCI-oldatban áztattuk, enaj-d röviden mostuk .desztillált vízzel. A gélt ezután préseltük és szárítottuk. Teljes .száradás «tán a lemezeket Ccí&mmsín /Hí/tai ,3/.«e oldattal lö percig lesiettük, majd a festékei metanol és eeetsav ke verőkében távolítottak el, míg az aniigénüregeket körülvevő, jól megbatározott, .festett zónák jó irányban, megfelelő szögekben láthatóvá váltak.
99772-3072A/SG ., * ♦·.
» „»* * » „ . «,»
A lemezek szárítása alán az. Oígésilreggkef körülvevő festett zónák átmérőjét a megfelelő szögekben, két irányban megménűk. A. felszín mérésére más, alternatív felszerelés atateazható. Az astigés-hígítást a felszínnel szemben ábrázoltak, és az eredményeket standard. meredekség - arány mérési eljárással meghatároztak [Firmey, 1).7., Statísticaí Metbods is BRdegteal Assay. kiad.; Grtrfeí. London; idézve; VVood, IMI és mtsai,, J, Siók Standard. 5:237-247 (1977)].
A 2. példásás leírtak szerint kapott fecskendőket alkalmaztak a klinikai tesztelésben. «3Ν2:4/PűS<waz2Pö7/W teyir-77 34 5193: A/kw Qii<?doíWöZ29/9k JkS~.i 76 8: ,&%maBöshí//6d/W
3. táblázat
felnőtt 18-60 év
l&f»- csökkentett ÍŰiíí” plusz
H3V2 HÍM 8 H3A2 ϊπ5ίϊ 8
vsskc, előtt GMT 47 41 ni 55 37 102
Titer<1.0(%) 10.373 13.0%: 5.784 5.384 32.384 8.8%
Titer>40 SPR (%} éó.3% : 55,23¾ 75,9% 70.284 52.6% 75.4%
vaké, után Szerokonverziös aráav ................1%).................’ 10.384 13.853 1.793 5.383 12.3% O%
antítest-öísr jelentős mértékű növekedése (%) 58.6% 74.133 58.6% 63.284 73,7% 52.653
S zerokonverzí.ós 1%) 58,6% 74.1% 58,684 63.2% 73,7% 52.693
GMT 328 525 766 324 359 588
GMT-szetes 7.3 13.0 6.9 5.9 9,8 5.9
Tiíer>4ö SPR. (%) 100.093 100.093 180% i 100,954 100.084 100.0%
99772-3072ASG
n.d. - CJ, .a p~tt/N aránynál nincs definiálva, síivel p*(l-p)*N<9 az a/N - reagálók (válaszreakciót adók), a populáció (alpcpaláció) ÍN) alanyai számának részeként azaz a szerokonvetzié vagy szignifikáns nővekfidés. lásd még: CPMAB/B WP/2Í4/96 1997, március 12., 17. old.
QMT ~ geometriai átlagúiéi·, reciprok 95% C,I - 95% femfídencia-iníesvalbm
SPR - Szeroproíefcciós· arány: az: olyan alanyok aránya, akiknél a pretektlv titer a vakcirsázás előtt vagy «ián >40 fiter ~ anútesúiier szerokosverziós arány; - az olyan alanyok aránya, akiknél az srdí'iesíhter a vafccinázás előtti <iO-röl vakcinázás után >4Ő-re -nőtt
GMT-szeres: A GMT-növekedés aránya jelentős mértékű növekedés ~ az olyan alanyok aránya, akiknél .az antitesttster a vakcinázás előtti <lö-rői vakcinázás utáa négyszeresére nőtt (a éter két foka) reg. - EU-kővetefasésy szerokooverzíök «· neg. póz, arány 4~szenes (áég; titerdö, póz. titer>4Ö) - .az olyan alanyok aránya, akik szerokonverziója (r<f 0-röl >40-re változott), vagy jelentősen megnőtt
Az eredmények azt mutatják hogy a vakéra s tkiomersal-t koazervalöszerkést tartalmazó vakcinákkal ekvivalens védelmet nyújt.
5a példa
......_ygfó._nlkalmazásáyiih átöStribú/rineutes.yafccinaeéljaia
Monovaless, hasított vakcinát állítottunk elő a kővetkező eljárás alkalmazásával.
Viri^iiwkuIiiöielóáHjt^a
Az embriónál!: tojás- beoltása napján friss inokuiumot állítunk elő a beoltásra szánt mennyiség 8,5 mg/ml gentamioin-szulfiH-ot és 25 pg/nii hidrokorúzont (vírustőrzskiggő módon) tartalmazó, foszfáttal pufiénak sóoídatkiL A vlrusinokdloníot 2-8C~óh tartjuk
Az.etobrionsk tojás beoijásg
9-11 napos, embriónak tojásokat .alkalmaztok a virusszaporítás céljára, A béiskat megtisztítottuk. A tojásokat 0,2 mi vírusínotolronmal. beoltottuk, A beoltott tojásokat az alkalmas hőmérsékleten (virustőrzsföggö módon) íakebáituk 48-96 órán át. Az iskabálási időszak végén az embriókat hűtéssel elöltük, és a tojásokat 126ő órán át tároltuk 2-8Τ-οη.
A lehűtött, emfcnossált tojás alfentöiszfolyadékát összegyűjtöttük. Rendszerint S~lö ml nyers altetoíszfolyadékot gyűjtötíűsk össze tojásonként.
Lrifótriztifág
Az összegyűjtött ailantoíszfolyaáékot mérsékelt forduistszámmal centtífugálásnak vetettük alá (403014000 g).
99772-3Ö72A/SO
*♦« ajgfijgg feliteít asunóalurs-szulOt-oldatot adtunk az előtisztításnak alávetett vims-wo/-hos, 0.5 mólö-es végső ammómam-ssndí&t-konceatrácló eléréséig. Legalább I órás ülepűés után a csapadékot eltávolítottak méiyszürókön (deptb fittet) történő szűréssel (dplknsaá Ó.2 pm)t
Szűrés
Az előtiszdfásuak alávetett,, nyers vírusterméket. szőrőmmbránökon szűrtök, az utolsó szűrő igazoltan steril membrán (fr.2 pt).
Uifraszürés
A steril, szőrt, nyers, monovalens, teljes vímstetméker íÖO kDa-os AHküt? ^/ÖML^-metoferdtok&aí felszereli kazettákon legalább ó-saorosra koncenráltak. A visszamaradt anyagot: foszfáttal puffenslt sóoldattal legalább 1 .b-szor mostak.
Szadwózgfadlens-cmttifogálás
Az, influenzavírust izooikalkus centri&gálássai konceotrálmk 100 pg/mt lineáris sűrűséggradiensbsn (0,55% tw/vt). Az áramlási sebesség 8-15 kora.
A eentrifugálás végén a rotor tartalmát 4 különböző frakcióban ayertűk ki fa szacharózt refraktométerben mértük):
í. frakció-: 55-52% szacharóz
2. frakció: megközelítőleg. 52.-34% szacharóz
3. frakció: 3 8-20% szacharóz*
4. frakció: 2ö-ö% szacharóz * virsst&rzsíöggó módon a 3. frakció 15%-ra csökkenthető
A további vakcinaelöállítás céljára csak a 2. frakciót, vagy a 2. frakciót és a tovább tisztított 3. frakciót együtt alkalmaztuk.
A 3. frakciót foszfátpuífernel történő dlafiMással mostuk a ő%-aát kisebb szacharóztartalom elérése céljából. .Adóit esetbe® ez a lépés elhagyható. Az ilyen, tágított frakcióban, jelen levő suüaenzavirus: kicsaptok az oldható szennyezők eltávolítása céljából.
Az üledéket reszuszpendáituk és alaposan elkevertük homogén szaszpenzió előállítása céljából. A 2. frakciót és a 3. frakció reszoszpetsdálí: üledékét összegyűjtöttük, és íőszfelpuffert: adtunk körülbelül 4Ö literes térfogat eléréséig. Ez a termék a mosovaferts, teljes vhuskonceottátum.
A monovalcns, teljes illoenzavlms-komcmráínxnet xAAá&ifA-// altmeenírifogába tettük,
A K3-rotor lineáris szisebarózgradfesst tartalmaz: 10.55% w/v)}, amelyre ráadásul ríátrlam-dezoxikolátgradle.nsí is rétégeztűnk. van jelen a hasítás 0.1% (w/v) koncenteícióban, és íökoíérol-szukchiátot adunk a B-iőrzsbe tartozó vírusokhoz 0.5 mM-ig. .A .maximális náíriam-dezoxikolát-konce’ttráelo 0.7-1.5% •(w/v), és a vlrastörzstől függ. Az áramlási sebesség 8-15 kora,
A centrifugáim; végén a rotor tartalmát három különböző frakcióban nyertük ki (a szacharózt refraktométerben mértük). A 2, frakciót alkalmaztak a további feldolgozáshoz. A frakció szacharóztaBalötK-korlásjaí {4718%) a törzsektől függően változik és a kiértékelés után szabjak meg.
Ssrüszörés
A hasított vírus-frakciót szűrőmemhránokon szűrjük, az: utolsó membrán (1.2 gm-es. Hígításra Ö.ő25%
99772-3072A/SO **»* « (w/v) 7We»-£d-at (B-vtostőrzsek esetében) és0.5 nfeí tokofei-ol-sKucitátot tartalmazó foszfotpnffeít alkalmaztok. A. szőrt frakció végső térfogata sz ereded «akciótérfogat 2-5-szőröse.
.hiakhyálás
A szűrt, mouovaíeus anyagot 22 χ S^'-on fofofoáltuk legfeljebb 34 órán át (a vírustörzstől függően ez az ínfcufeálás lerövidíthető). 9.925% (w/v) Tweft-óYAat, tartalmazó foszShpuflért attoak ezután a teljes íehérjekooeeotráeió csökkentésére (txtsx.. 250 pg/ml). B-vtrustÖrzsek esetében 0.025% (vrtv) .Twea-ÖÖ-at és 0,25 mM tokoferol-sztdcciaátot tartalmazó, foszfáttal partcroít sőolösrtfe hígítottunk a teljes febérjökoneeoítáciö 450 pg/ml-re való csökkentése céljából. 100 ugfort végső koncentrációban Ibrmaldehidet adtunk és az inaktiválást 20 ± 2°C~en hajtotok végre, legalább 72 órán ái.
Ifetoszhrés
Az iuaktiváit, hasított vtosanyagot legalább 2-szeresre koncenífáijak cehnlóz-aeeut-mefebránokkaí (20 kDa. MWCO) felszerelt ahraszaro egységben, Az anyagot ezután 9.925% (wá) 2ws?-5ó-aí tartalmazó feszfetpufeérel mostuk, majd 0.01% (Άν) Awen-í tartulutazö, foszfáttal partéiéit sóeláaftal mostok. Bvirusiőrzs esetében 0.01% íw/v) Fsr«en-<?tMt és 0.1 síM íokoferoi-szukcirtafot tartalmazó, foszfáttal pufferolt séolástoí alkalmaztunk mosáshoz.
Végsőrtgrilszűrés
Az tikrasztíres irtást az anyagot szöfetuembráisokon szűrjük, az utolsó membrán 9.2 gtn-es. A szűrőmembránokat öblítettük, és az anyagot szükség esetén hígítottak 0.01% (wfv) Tto'cn-M-at ( és B-víwsferzs esetében) és 9.1 mM toköiéroi-szakcinátot tartalmazó, .foszfáttal pufferelt sóoldattal hígítotok úgy, hogy a febérjekoncentrácié ne haladja meg az 590 ggóní-t.
Tárolás
A végső, tnottövíüeos terméket 2 -8 °C~on tároltuk, legfeljebb '18 hónapig:.
Stabilitás ártáblázat
Törzs Stabilizáló Előállítás után 4 hét 39®C-oa 6 hónap 3-8ftC-on
tokoferol-szukcirait 214 196(92%) 206 (96%)
A%oáö«MÉa.ö«t:g/5/99* * sincs 169 107 (63%) 153(90%)
** az 1. pélila szerint előállítva, tokofemhszakeinát nélkül mestes vakcina.céliám
Az 5a. példában leírt eljárás előnyős változata:
A teljes vírus összegyűjtése -után kicsapási lépés (aimtortoro-szuíiirt-ihesapás! következik. Ezt követi az eSőtisztitási lépés, ahol a folyadékot mérsékelt sebességű centri'fugálássai (4900-14909 g) tisztítjuk- így a kiess99722-3072A/SG
.. pás é az előtisztítás soreesdjét az 5a. példához viszonyítva megfordítjuk.
A sterilszűres, okraszürés és ahraeentrifogálás (szacbarózgradiens-cenírifogálás) lépései az Sa, példa szériái következnek. Nincs szükség azonban az uhracentrifogálásl lépés utáni frakciók újrafeldolgozására.
A visszamaradó anyagot az 5a. példánál leírt módon. dolgozzuk fel. így az eljárás összefoglalva:
Az anyag összegyűjtése Kicsapás (ammósirmt-szuliát}
Sterilszörés
l.foraceairi&gálás
Hasítás (e ISnySsen nátrium.- áezoxi-kolát} .Sterílszürés inaktiválás Ukraszürés Végső sterílszürés
Az 5a. példa egy további, előnyös változata magéban foglal az első sterílszürés előtt egy előszűrés! lépést. Ebben olyan membránt alkalmazunk, amely nem sterilre szőr, azonban lehetővé teszi szennyezők, példán! albumln eltávolítását a sterilszűrés előtt. Ez jobb kitermelést eredményezhet. Előszűrésre alkalmas membrán pérasmérete ö. S 1 ,S -um, például 1.2 μτη. Az előszűrést lépés alkalmazható az 5a. vagy az 5 b. szerintt összeállításban..
l8fiú^g^^$jaolŐá|llte..a-ta^fem|,§m^l^^émvaió-aM^^áygL.jtájOMersd-me.nt^s vakcina céljaira
Három törzs, a A/AW Ca'(edonm/20W(HÍA7; ZFR-/M,az 4ZPö/mm«/20Ö?zW fŐBVZs Sesvir-i?,.és a &/Yamamsáó(MŐ?W monovslens, végső termékeit állítottuk elő az 5. példánál leld eljárásnak megfelelően.
Az .alkalmas mennyiségű, végső termékeket a következő koncentrációkban Összekevertük: .30 ggfod HAkoacentrác-íő-az A/Afov <fo&do«foX2<A99 (Η1ΑΊ) IFR-7 76, az (KJA2.I Ae*v;?'--/7és 36 pg/rnl a F/Tö/Viíítosái-v ddfod esetében. A Twes-őlÚ és a Jkkos-W-Zöö koncentrációját 580 ughnl-re és 90 pg/rnl-re állítottuk be. A végső térfogatot 3 l-re állítottuk be, foszfáttal palTeroit sőoldaítal, A trívalens pooA 0.8 pm-os cellulózacetát-membránon szűrtük a végső, trívalens tennék előállítása céljából, A végső·, trívalens terméket fecskendőkbe tököüük, mindegyikbe legalább 0.5 ml~t.
fofohlázat
Ajriyafevé^tonékekbeg.SRDrv<mén.HA7f^
Vakciasforauda Törzs 0 hónap 4 két 30öC-o« ő hónap 2-8!’C-on j
influenzav&kcma stabilizáló nélkül AAOiGGW 31 32 30
J/Aő«z'2Ő0W 31 34 33
................................................. TS/Tőá/W* 35 25 3t
99772-3072A/SG
ö-fekofeí'ol-szukeináiöi tartalmazó inSscnaa- vakcína A/A^WíW 34 35 34
/íAAnfozÖíb’BP 33 33 34
Weh/iW** 29 25 ?.
% fomrulázást 39 pgóni eéíkoneeníráclőt alapul véve hajtottuk végre ** a forttndázásí 54 gg/aá célkosoentrációt alapul véve hajtottak, végre stablhzálóként való alkalmazásával,
8¾¾¾¾¾¾
A >9oö^aft^a^lig§:aixfetü m ono vatens,, felles vlruskoncenti-áttmiof . az i. pé Idánál le írjak szertmáh iöot&Lsl&
• A menovaleus, teljes iilueszsvirtss-kon.ceníráínKtoi.£A7-J/arAvfí'alöa«eBöifugába tettük.
A KJ-rotor lineáris szacharózgradienst faftalutaz (0.55%· w/v)), amelyre ráadásai náííiiun-dezoxikolátgradienst is rétegeztünk. fwon-ód van jelen & hasítás 0.1% fw/v) koncentrációban, és íofcoféroi-sznkcinátoi sdusk a B-törzsfee tartozó vírusokhoz Ό.5 mM-tg. A maximális uáfriw-deaoxjkofet-koeeeatráöió 6.7-1.5% (w/v), és a YÍrustörzstÖi foga. Az. áramlási sebesség Só i 5 hóra,
A centrifugálás végét· a rotor tartalmát 'bárom különböző frakcióban nyertük. ki (a szacharózt refraktométerben mértük).. A 2, frakciót alkalmaztuk a további foldolgozáshos, A. .frakció szachas-óziartaiom-kotiátsai (4718%) a törzsektől függően változik és a kiértékelés után szabjuk meg.
Sterihkfeás
A hasított virusfratóót szüromembránokon szilijük, az utolsó membrán 0.2 gm-es. Hígításra 0.0-25% (w/v) ZWemŐfoat (S-virustörzsek.esetében) és 0.5 utM tokcferol-szuchátot tartalmazó foszfoípuffort alkalmaztunk, A szőrt frakció végsó. térfogata, az eredeti Irakefotérfogat 2-5-szőröse.
Inaktiválás
A szűri, munovaieus anyagot 22 + 2°Oo» inkubáhuk legfeljebb 84 órán át (a vfrustörzstói függőért ez az ioknbálás lerövidíthető). 0.025% (w/v) Arem-W-at és 0,5 ®M nátrium-laurii-szulfátot tartalmazó foszíáípuffert adtunk ezután a teljes féhériekoncentráciö csökkentésére (max. 250 gg/srtj, B-virustorzsck esetében 0.025% (név) Zivecít-Óö- at és 0,25 usM tokoferol-szukcinátot tartalmazó, foszfáttal pufrémli sóoloatfcál hígítotok a teljes íéiiétjekoneenfrácíó 250 ug/mi-re való csökkentése céljából. 50 pgrtnl végsó koncentrációban fmsatoehidet adtat ás az inaktiválást 20 ± 2°C-oa hajtottak végre, legalább 72 órán át.
wmfeés·
Az inaktívált. hasított vírusanyagot legalább 2-szeresre koncentráljuk cellulóz~;metát-metnbránokkal (20 kDa MWCO) felszerelt ultraszörö egységben. Az anyagoi ezután 0.025% (w/'v) Arcen-AO-aí tartalmazó foszíStputíérel mostuk, majd O.ÖÍ% (w/v) Tasm tartalmazó, foszfáttal pufforoit sóoldattol mostok Bvírustőrzs esetében 0.0 {.% (Wv) Aveen-Sii-íít és 6.5 siM nátrinm-lsuríl-szulfátöt tartalmazó. foszfáttal pufferolt sóoldatot alknhnnztenk: mosáshoz.
99772-3Ö72A/SG »· »»
Végső sterjfegűrés
Az ukraszürés uíárs az anyagot szíhömembráuokon szűrjük, az utolsó membrán 0.2 gm-es. A szürőmembránokat öblítettük, és az anyagot szükség esetés 0.01% (w/v) 2w»ee»-SAaf (ö-vírus'töfzs esetében) és 0.1 i»M nátnam-teríi-ssuifáíoí tartalmazó, ibszíőtel pntáéroh sóoldaftal hígítottuk ágy, hogy a febétjekoncentnV eió ne haladja meg az. 500 ug/ml-t.
Tárolás
A végső. ísonovalens terméket 2 - 8 °C-on tároltuk, legfeljebb 18 hónapig.
7. táblázat
Stabilizáló Termelés után 4 hét, 3íAC-on
3//<?tassííwg&W rtincs* 182 139(77%)
^/ífo/mmerÓJurgA/W Na-iaurií-szulibt 288 364(92%)
*Á 7 Példánál leírtak szerint Sllitehuk e.16, Na-lsuril-szalgit hozzáadása nélkül
8. példa íöüukekk
Pragmeniálás
A monovaless, teljes isüueazavíms^koncmttálninot 1.000 pg>W-es fehétjekoncestrácsóra hígítottak fószátal pufterolt sáotdattal (pH 7.4). Planiaca/v^-^öÖ-Ul^í vagy akár £ö»reí^9-et adtunk 0% (w/v) végsó koseentráeíőíg. Az anyagot enyhén kevertük 38 percig. Az anyagot ezután egy esőben 15%-os (w/v) szacharózpárnára lélegeztük. &ec&wn - fele kilendülő SíF-ÍÓ-rotöíbaa cenöí&gáttaak 2 órán át, .25000 rpm foráuiaiszámmal, 2öA2-on, stgdlsAteks
A felülászóvíd dolgoztunk tovább. A hasított vírnsírakeiát sziWmembsánökon szűrjük, az utolsó membrán 0.2 nra-es.
Inaktiválás
Foszfáttal pufferoh sóoldatot adtunk szükség esetén, a teljes fehérjetartalom. maximum 0,5 jig/ml-re való csökkentése céljából.. Formaldehidet adtunk í0ö ggünl végső koncentrációig, és az, inaktiválást legalább 6 napig, 20 + 2eC-on hajtottuk végre.
L/braszürés
Az inaktívak anyagban 0.15% Fwern-##- és 0.02% ??Ροη-Α% dekoncentrációi állítottunk be. Az iuaktiváíi, hasított virusanyagot legalább 2-szeresre koncentráljuk cellnlöz-acetáí-membránokkal (20 kDa MWCO) felszerelt uífraszürö egységben. Az anyagot ezután 4 tértbgsínyi iőszfáíial pufíéroit sóoidattaí mostuk.
Tárolás
A {noaovaleus. végső anyagot 2-8°C-os tároltuk.
99772-3072Á/SG
*·♦·♦' * « ΦΦ •X -f « A ......
··· ,
8. táblázat
A végső, n tonovalens termékí ík SSD-vri rt tori H, torarfalma id őfegéstoíekősszehggoslitoSa
i Stabilizáló | Termelés után ΐ 4 hét, 3ö°C-on
fr/73íma«osátoi9toŐí s i nincs ! 143 i 97(ÖS%>
5
A/rikoKoniísktol LtoA l 476 j 477(1 ÖQ%)
2?/Kawtms&//99Aí i i LosreA-k J 468 | 494(>1OO%)
'^gto&téb^üa^IMrfeeadtoí
Monovalens, hasított vakcinái állítottunk elő a következő eljárás szerint
Az etnhrioaáít tojás beoltása napján friss moknlnmot állitnnk elő a beoltásra szánt mennyiség Ö..5 mg/tní gentamicin-sznlfátot és 25 gg/mf hiárokortizont Tvirastőrzsíüggó módors) tartalmazó, foszfáttal pafferoít: sóoldaitol. A vuusiaokalumot z-fóC-on tartjuk.
9-11 napos, embriónál!. tojásokat alkalmaztunk. a vfresszsporitás céljára. A héjakat niegtísziitottsk. A tojásokat 0.2 ml vírasinokulumjnsi beoltottuk. A beoltott tojásokat az alkalmas hőmérsékleten (vírustörzsttiggö módon) ínkubáltok 48-96 órán át. Az inkohálási időszak végén az embriókat hűtéssel elöltük, és a tojásokat 1260 őráts át tároltuk 2-8eC-on.
A lehűtött, embriónak tojás alimjtolsxiölyadákát összegyőjtöttűk.. Rendszerint 8-1® ml nyers afajtoíszfolyadékot gyűjtöttünk össze tojásonként.
Az összegyűjtött aítatoiszfoíysdékoí mérsékelt lorduíatszámmal mtófogálásnak vetettük alá. (400014001) g).
A tisztított vtrusprépatárurnfeoz CaHPCL-gél előállítása céljából 0.3 raol/l NaHPO.r és 0.5 mcl/l CaCkoldatot adtunk, 1.5-3.S g üaHPQAl fa virostörzsíol függően) végső koncentráció eléréséig.
Legalább 8 órán át tartó űlsprtés alán a lélüfeszóí olíávolife;ttak és az influenzavírust tartalmazó üledéket reszolübiiizákuk 0.2b rabbi Naj-EDTA-oldat hozzáadásával, az alkalmazott CaBPCo konceotoáoiójától függően.
X-Ss&gs .A reszusspeadált üledéket 6 usn -es szürőmembránon szőttük.
Az Í3iöueazavírust izopíknikus ceniri&gálással koncentráltok 1 00 gg/ral íátommoí-i tartalmazó, lineáris sürőséggradlersshen {0.55% (Wv)). Az áramlási sebesség 8-15 hóra.
99772-3072A/SG
A eentriíhgálás végén: a rotor tartalmát 4· különböző frakcióban nyertük ki (a szacharózt refraktométerben mértük):
1. frakció: 55-52% szacharóz
2. frakció: megközelítőleg 52-38% szacharóz
3. frakció: 38-2ó% .szacharóz*
4. frakció: 20-0% szacharóz * vfrasíörzsfnggó módon a 3. frakció 15%-ra csökkenthető
A további vskekraelöábitás céliára csak a 2. és 3, frakciókat alkalmazóik.
A 3, frakciót foszfátpufféírel történő díaftltrálással mostuk a 6%-mti kisebb szaeharóztartalom elérése -céljából. Az ilyen, higstott frakcióban jelen levő ihflumzavírusí kicsaptak az oldható szennyezők eltávolítása céljából.
Az üledéket reszuszpend'átatk és alaposan elkevertük homogén szusxpenzió előállliása céljából, A 2, frakciót ás a 3. frakció reszuszpendált üledékét összegyűjtöttük, és foszfátpafíert adtunk körülbelül 40 literes térfogat eléréséig. Ez a termék a nmuovaleus viruskoneemráttm!,
A monovaless, teljes ifruenzavsres-ksisceutrátumoí £A7-M»rá-// sltracentriibgába tettük.
A K3-rotor lineáris szscharózgradieest tartalmaz (0,55% w/v)), amelyre ráadásul nátrium-dezoxikolátgradieast is rétegeztónk. ftm-SÍ? van jeles a hasítás során 0,1% (w/v) kcneeati'ác lóban, és fokofcroiszukcinátoi adunk a S-törzsbe tartozó vírusokhoz: 0.5 niM-ig, A maximális aátrim-dezoxíkolát-koncertóctó 0.7-1,5% (w/v), és a virustorzstöl függ. Az áramlási sebesség 8-15 bóra.
A ceotrifagátás végén a rotor tartalmát három különböző frakcióban nyertük ki <a szacharózt refraktométerben mórmk). A 2. frakciót alkalmaztuk a további feldolgozáshoz. A frakció szacharóztartalom-korlátjai (4718%) a törzsektől luggoen változik és a kiértékelés után szabjak meg.
^Steriteurés
A hasított virusfrakciöt szürőmembíármkon szögök, az utolsó membrán 0.2 um-es, Hígításra 8.025% (w/v) 7wcs-Óő-at (B-vímstörzsek esetében) és 0.5 mM tekoferol-szucinátot tartalmazó foszfátpufrert alkalmaztunk. A szőrt frakció végső térfogata az eredeti feakcióférfegat 2-5-szörőse.
ZJESlSiváiás
A szőrt, monovatetts anyagot 22 ± 2A2-on mkubáimk legfeljebb 84 érán át (a virustörzstoi függően ez az mfcubálás lerövidíthető). -0-.025%. (w/'v) Twe?e«-$?-at tartalmazó foszfátpaSért adteuk ezután a teljes fehég'ekoncentráció csökkentésére (más, 250 ug/ml). Β-vfrtnáőrzsek esetében 0.025% (wá) Amm-éö-at és 0.25 ®M toköferel-szukcinátot tartalmazó, foszfáttal pufíerolt sóoldattal higitottnnk a teljes fehér)ekonceuttáctö 250 pgmd-re való csökkentése céljából. 50 ugz'ml végső koncentrációban formaldehidet adtunk és az inaktiválást 20 ± 2''C-os hajtottuk végre, legalább 72 órán át
Az inaktív-ált, iiasitett virusanyagot legalább 2-szeresre koncentráljuk celhdőz-acesát-membrátjokka! (20 kDa MWCÖ). felszerelt ulíraszőró egységben. Az anyagot ezután 0.025% (w/vj 7we??-Ó(9-ai tartalmazó foszfetpufrerel mostuk, majd 0.01% (w/v) Ikert tartalmazó, foszfáttal pufíbrolt sóoidaltal jnostuk. Bvfrustorzs esetében 0.01% (w/vj Zwe«-<5#~at és 0,1 mM tokoísroi-szukcmátöt tartalmazó, foszfáttal gufférolt sóóldatot alkalmaztunk mosáshoz.
99772-3072A/SG » «♦ ♦ ♦ « ♦ ♦ ♦
« » *
AVéssö^terjlszto^
Az ultraszűrés után az anyagot szSrőmembránskon szűrjük, az utolsó membrán 022 pra-ss, A szüromembránokat öblítettük, és az anyagot szükség esetén ö.öl% (w/v) TkwWö^af (ö-vírustőrzs esetebes} és 0. I jbM tokoferol-szakcísátot tartalmazó, foszfáttal pufferolt sóoldatíal hígítóitok úgy, hogy a febérjekoncennőciÓ ne haladja meg sz 1000 gg/tnl-t, de a hemaggfetmm-konceatfáció meghaladja a 10b pg/tnl-t
11M
A -végső, monoysíens terméket 2 - 8 X-os táróitok, legfeljebb 1§ hónapig.
Három törzs, -az ,4/lVew CaWöafeZMW (HfArj /1-117-7/6, az/áZPönöí»ő/2őö'7/^9 (7EEV2} Ács vb-/7 és a 8/jőMnwsó«<g/J/W monovatens, végső termékét állítottuk elő az A, pontban leirt eljárás szerért.
Az alkalmas- mennyiség», végső termékeket a következő koncentrációkban összekevertük: 60 ^g/rsá HÁkoncenöúciő azA/New Ca/ed&nüi^9/99 (HíiVÍ) /KR-//Ö, az .á/Arttö,^0,-2992-99 (//JA2) tovir-/ 7 és 68 gg/ml a &</(zfo-.oíHesbí,'í-g/5'/99 esetében, A 7we?t-ö9, a THton-A'-JOű és a totóemi-szökcinát koncentrációját 1Ö0Ö ug/ toi-re, 1.IÖ pg/ml-re és Iböö pgóni-re állítottuk be. A végső térfogatot 3 1-re állítottuk 'be, foszfortaj pufforoít sóoldattal. A in valess pooí-t 0.8 pss-os cellulózaeefet-membíáooa szűrtük a végső, trivíslens tennék előáll Sása céljából. A végső, trivalens -terméket fecskendőkbe- tököltök, míndegy-Stbe legalább 0.165 ml-'k
Vfeisaheadás
A vakcinát elére töltött fecskendőkben tettök 'hozzáférhetővé, és itoraderraálisan adtok be a deltoid régióba. Az intradertnális (1D) :ü, -amint az EP 1092444. sz. -earópai közzétételi iratbim van leírva, börpenetrámös határolóval van felszerelve a hatékony intradertnális injektálás biztosítása céljából. Mivel „gőte” ί/αψ!(ία) kialakulásai az injekció helyén az- ID-beadáis jó .minőségét matatja, 30 perccel a -vakcina beadását kővetően megmértük apapu/n pontos méretét
Egy dózis < 100 pl) a következő komponenseket tartalmazta:
H-etnaggtamin. három infiaenzatörzsből
zkAfetv CőWöwZ?ö/W 6.0 ág
.Á-''/kMín?.ví92997,99 6.0 μκ
6.0 pg
7¾ tam /-konzen-'álószer 0,4 - 0.8 p:g
.8 A fenti vakcinákat Ssszchasonlítoöuk a /· bra:5* standard, hasított ínfluenzavakemávai. A .Ffearccva&cina előre töltött fecskendőkben áll rendelkezésre, és intramnszknlásrtsan, a deltoid izomba adtak be, Legalább2.5 ct-n / lsed hosszúságú (23 «ringd tüt aíkatenaztaak' a hatékony, Intramuszkatám injektálás biztosítására.
Egy dózis (9.5 ml) a következe komponenseket tartalmazta:
rtetnaggltoítttn három infíuer/a2 Ό1
A/Aw Gr/edöttfo/z-hW 15.0 pg
A99tnto??ö/299W 15.0 ug
9/A>ás?oíc.«toí>y3/99 IS.Öpg
r&MwerW-konservátöszer 50,0 pg
99772-3Q72A/SG
Λ :4
A kísértei -személyek átlagéletkora a vakcina beadáskor 70.4 χ 6.2 és <SD, standard deváció), a nő - fétfí-arány 0.7 : l volt
Imtsa-negemtási eredmények: A származtatott imnmnogemtád változói vizsgálata;
Változó Ftered ffi (hí---65) Fluam™ JM (N==ó5)
<are GMT U, UL GMT 1,1. UL
előtt 99.5 76.9 128.7 90,0 70,1 115.7
után 165.1 129.2 211.0 174.3 133.3 227.9
ÁátenafHö előtt '75.5 54.7 104.2 69.2 51.9 92.4
után 128,6 99.1 166,8 164,3 126.0 214.1
föáfo.te??«<teKí?'g előtt 236.9 187.7 296,8 222.6 176.9 280.2
után 341.2 276.0 421.7 402.4 312.1 518.9
Szerokenvemés arány % LL UL % IX- UL
XAtev őfötefcnfo 15.4 7.6 26.5 18.5 9.9 30.0
AAPanania 20.0 11.1 31.8 29,2 18.6 41.8
g/JakamTesbut’g 9.2 3,5 1.9.0 16,9 8.8 28.3
konverziós faktor Gőte IX UL GMft UL Bt.
ztAVte Caiedema 1.7 1.4 2.0 1.9 1,6 2.3
A/Pantisexa 1,7 1,4 2.1 2.4 1,9 3.0
B/Jehennesburg 1.4 1.2 1,7 1,8 1.5 2.1
szeroprotekciós arány % LL CL % LJ, UI,
A'Afov CöíWorífo előtt 87.7 i 77,2 94,5 90.8 81.0 96.5
után 92.5 83.Ö 97.5 96.9 89.3 99.6
A/Parsama előtt: 75,4 63.1 85.2 81.5 70.0 90 1
után. 90,8 81.0 96.5 93,3 85.0 98.3
P/Joharmesbíst-g előtt. 98.5 91.7 100,0 96,9 89,3 99.6
után 100.0 94,5 100.0 98.5 91.7 100.0
N; a kísértet személyek száma, hozzáférhető -eredményekkel, % az adod paramétereken belöli eredményeket mutató személyek száma, LS.7BL: a 9554-os Cl alsó és· fölső határa, előtt: a vakcínabeadás idején, után: a vakeínadózis beadása után 21. nappal
A va&eiaásett személyek 15.4%~a (lő a 65-ből) által jelzett injekciósfeely-ftjdalom aJ%®ú'BÍ beadását kővetően az egyik legáltalánosabb tönet. Az ID-esopörtbae a vafeinázett személyek 4.6%-a (3 a 65~bőt) jelzett fájdalmat. A különbség, statisztikailag jelentős (szignifikáns) <ρ:::Ο.038, egzakt /teáer-teszt). Emsek megfelelően előnyős a r&mme?w/-tamlínábaa csökkentett termék.
A föfo-esökkersteíí müaenzavakctna idősebb populációnak történő IO- és JM-beaáása is 10086-os szeroprotekciót nyújthat
A geometriát átlagtiterek, a szeroprotekoiós arányok, a szerokonverziös arányok és konverziós faktorok
99772-3Ö72A/SG
-»*-♦-♦ » * φ szempontjából összehttsönlitmitő válaszreakciót tapasztattunk az ΪΜ- és ID-vakcínázott személyek esetében, ahol az ID-csoport 2..5-szsr kevesebb auílgent kapott. Nets vbft észrevehető különbség a vakcinával összefüggő, előidézett 111. nem előidézett, szisztémás tünetek általános előfordulása szempontjából a két kezelési csoportba».
A 9, példánál leirt módon előállított (azzal az eltéréssel, hogy a poo/íng-ot független módos hajtottuk végre, és a vakeisát nem töltöttük fecskendőkbe), ?'á«?wrs«r/-taatateö>®i csökkenten, hasított iortítonzavafccma hmnsoogemtását tengerirnalacokoál vizsgáltuk, .standard tu alkalmazásával,
Ot állatból álló csoportban mindegyik egyed® íntranazálisan. teljes, inaktivált, trívalens (mindegyik HAbőt 5 pg, 2Ö0 μ! teljes térfogaiban) iafiuenzaviots hatásának tettük ki (prímótg), A kezelés után 21 nappal az állatokat mtradermffisan vagy akár itdramuszkttiátissrí vakcmáztok. Az iatrabérmálls dózist, ami Ö.I, Ö.3 vagy 1,0: pg oávaier.s, thimnoíSöAtartalmábart csökkentett, hasított mSuenza-vakctót tartalmazott 0.1 ml-ben, a tengcrlmalac hátába adtuk, standard te alkalmazásával. Az mtramuszksláris dózist, asm 1,(1 pg írtvalens, thtomersni-tartoimábí® csökkentett, hasított indtietiza-vakciaát tartalmazott, a isngeríntalac hátsó lábába adtak, 0,1 mi-ben. A. csoportok:
1, csoport: 0.1 pg:trivslens, táíomtzW-Grtalmábaocsökkentett, hasított ínfeicsza-vakcina ID
2, csoport: 0,3 pg trlvslens, tkíemeíooAíarialmáb&a csökkentett, hasított míloenza-vákcina ID
3, csoport: 1,0 pg trívalens, í/tfownvrf-tettakeábaa csökkentett, hasított inSoenza-vakcina ID
4, csoport: 1.0 pg trívalens, íátonttzW-tarialaiában csökkealetí, hasított tsfinenza-va&esaa IM
A vakcinázás után 14 nappal az állatokat elvéreztettük, és ti vakclnázás állal indukált ;ml:ttesí-litere:ket meghatároztuk standard, henmgghslioáeió-gáüási mérési eljárással (Hl). Az eredményeket az 1. ábrán matatjuk be, A vakemázás- mindhárom törzzsel -szemben erős f-fl-válaszreakciót váltott kí, Ne.® kaptunk világos dózisválaszt, amely arra utalna, hogy nagyon- alacsony, táíemer.vű/-tarfalmáfea» csökkentett amigéndózis nagyon hatásos Hl-antltestválaszt indukálna ID-beadáss&l. Nem volt szignifikáns különbség az: ID- vagy IM-vakeinázássai indukált· Hl-ttterek között. így a tengerimaiacok esetében kapott eredmények tstegerösilették, hogy a torna/tartalmában csökketstetí, hasított influenza-antigének hasonló Hl-asiitest-szisteket Indukálnak állatokban, 1Dbeadás esetében az IM-beadással összehasonlítva.
Teogerimalacokat tettünk ki & 0. napon 5 pg trívalens, teljes, inaktivált mtluenzavh-us (200 pl) hatásának iníranazálísan.
Vakcinázás a 28, napon;· a törzsenként 0.1 pg HA-t tartalmazó, trívalens, hasított i-nfinenzasdnés-anítgéní a 9, példánál leírtak szerint állítottak elő (azzal az eltéréssel, hogy apooösg-lépés minden antigén esetében l.O pg/trd-t eredményezett,. 1ÖÖ pl-bem 0.1 pg dózist eredntényezve, szentben a 9. példánál leírt 60 ug/ml-reb. A végső, trívalens készítményt inttaöermáíísan adtuk be tuberkuimíeeskendök alkalmazásával, adjutáns alkalmazásával vagyané&űi, 100 pl-ben.
Elvéreztetés a 42, sápon.
Az adiuváns alkalmtízásámík hatását vizsgáltuk az sntiiest-vslaszreakeiö mérésével, Hí-tnérésí eljárással
99772-3Ö72A/SG (Ο, 28. és 42, nap).
Minden l.D-kísérleleí standard tü alkalmazásával hajtottunk végre,
Etsdméuyek
A G1-G5 5 tengerímalac-csopertet jelest, csoportonként 5 állattal,
G1: Hasított, tótomemi/-tnrtalmten csökkentett, Ö.l gg
G2: Hasított, trívalens, iátömensűktartahaában csökkentett, 0. 1 pg + 3D-MPL 50 pg
G3: Hasított, trivaless, íá&wmöZ-íaítatosában csökkentett, 0. 1 pg + 3D-MPL 10 pg
G4: Hasított, trívalens, /AimermMartelmáha» csökkentet·, 0,1 pg 30-M.PI.ík 50 gg v QS21 50 pg <15: Hasított, írívafa®, íÁtowrw-tartalmában csökkentett, Ö.l ug 30-MPLin 50 pg + QS21 lö pg
A 3D-.MPLIn * QS21 olyan sdjuvám-késrifcaényt jelez, amely keleszterit tartatomé andsmelláris vezikulumból álí, amely dioíeoíl-lbszíatidií-kolinbőí álló lipid-keífösrétegeí tartalmaz, ahol a QS21 és a 3DMPL a hpíd-keitösréteggeí van asszociálva, vagy abban van beágyazva. ilyen adjnvánskdsztonényeket imák le az EP 082283I. sz. európai közzétételi iratban.
Hí-tiierek az asti-G/AGr ŐZí&dntnaGdAP esetében
\c Immunizálás előtt Erősítés előtt Erősítés után
G1 5 10 92
G2 5 10 70
G3 5 11 121
G4 7 9 368
G5 5 10 243
Hl-títerek az aatí-zí/Pooraratí.Í;í?ÓZ/99 esetében
P Immunizálás előtt Erősítés előtt Erősítés után
Gi 5 485 7760
G2 5 279 7760
G3 5 485 8914
G4 7 405 47051
G5 5 320 17829
Hí-iherek: az asitSáfoh<H??Kw6íugG/99 esetében
J Immunizálás Hóit Erősítés előtt Erősítés után
Gi 5 23 184
G2 5 11 121
G3 5 íl 70
G4 6 15 557
G.5 5 13 320
Így a fáwwmW-tanalmábaa csökkentett, kovalens, hasított infiuenzs-anugén hatásos nnmanogén, függetlenül. attól, hogy adjováiissal kiegésziteítök-e, és képes erős Hl-válaszreafcció kiváltására, ÍD- vagy IMbeadás esetében.. Ezek a válaszreakciók legalább olyan hatásosak, tnint a standard Hwrór-prep&ráíum által
99772-3072A/SG »* *** indukál! válaszreakciók.
bÉrafe^0§Mh^feÍU^^£^Ei§í^Há^MííS»^^-^e^.5«kg.w.á§^§^MlSá§a^^§kbes.
A hasított, ÍD-beadoít iaflimzavakciaa (táíömcrw/-lsl vagy anélkül) mmruncgersitá^t vizsgálata céljából a vírus hatásának már kitett (pntectí)· sertés modelljét alkalmaztuk. Mivel a populáció nagyobb többsége legalább egy inflaenzafértőzésen átesett, szükséges:, hogy egy intíncnsavskcioa egy megtevő ítnöurnválssz felerősítésére alkalmas legyen. Érákat állatokat tettünk ki influenzavírus hatásának (prwe) az emberre vonatkozó szituáció legjobb sritunlálása céljából
Ebben a kísérletben 4 hetes sertéseket íntrauazálisan influenzavírus itatásának tettünk ki (prímed). Hat csoportot (egyenként 5 állattal) kezeltünk a következőképpen:
L csoport; trivalens, teljes, ittaktivált vírussal (50 ug mindegyik HA) két kezelés, a 8. és 14. napon, 2, csoport; trivalens, teljes, inaktivált vírussal (58 ag mindegyik HA) két kezelés, a 0. és 14. napos, 3. csoport: trivalens, teljes, inaktívált vírussal (58 pg mindegyik HA) egy kezelés a Ö. napon, 4. csoport: trivalens, teljes, inaktívált vírussal (25 μ,§ mindegyik HA) két kezdés, a 8. és 14. napost, 5. csoport; trivalens, teljes, irsaküváíí vírussal (25 pg mindegyik HA) egy kezelés a 8. napon, 6. csoport: trivalens. teljes,, inaktivált vírussal (12.5 pg mindegyik HA) két kezelés.
Az utolsó kezelés után 28 nappal az állatokat mindegyik, hasított, trivalens HA-antsgéme vonatkozóan.3 gg, HA-val (-örzsek: ri/iVem CWetíosíö A7A7, á/Pítnamx H3N2 és R/Í?öáö«aesőurg) 188 pl-ben, ID-headással. Az l. csoport tagjainak .btíomer.<ö;..konzert.'áiószert. tartalmazó, standard .F&rtréri^-si adtunk be vakcinaantigénként. Mindegyik másik csoportnak konsers-álőszer-ínentes amigént adtunk be.
A kísérletben kapott HJ-eredményekst a 2. ábrán mulatjuk be (különböző aníigéndőzisokkal előkezelt és 3 mikrograxntn trivalens influenza-antigénnel és riiíomomöMal vagy anélkül, mtradermá&san vakemázotí sertésekben indukált, influenza-ellent hemagglntinário-gátlási literek).
Viszonylag alacsony Hl-hiereket indukált a ö-tőrzs ebben a kísérletben, és: az rt/rAlAAtötzzsel szemben a háttér magas, A vakemázásra adott válaszreakció szempontjából előnyös hatást figyeltünk meg akkor, ha az előkezelési (prfoiing) dózist csökkentettük. Szinte mindegyik esetben az mrdgóa-koncentráclő vagy az előkezelések számának csökkentése (a. két, egyenként SÖ ng-os előkezelésnél) a vakolsázásní adott válaszreakció növekedését eredményezte, Míg az: 1. és 2. csoportba tartozó állatok esetében, amelyeket kétszeres, 50 pg-os előkezelésnek vetettünk alá, a vakcinázás oem volt nyilvánvaló, azonban a tatzerválőszer-meates aatígén (2. csoport) legalább olyan jól működött, mint a AhmrikiS{ í i. csoport) ugyanilyen körülmények között. Az alternatív módon előkezelt éltetők (3-6. csoport) esetében a konzervá-löszer-tnentes, ID-beadott, trivalens influenzaantígénnel történő vakéit·ázásra adott, erős vábszreskeiő világos, és ez más a B-töxzs esetében is látható, azonban a Hl-titetek alacsonyak maradtak.

Claims (17)

  1. Szabadadon igénypontok
    1, inakiiváli inriuenzavírus-preparárum, amely táiomerW nélkül vagy 5 pgrinl vagy annál alacsonyabb szintű /ái'fiííserső/ jelenlétében stabilizált feemagghtónmt (HA) tartalmaz, ahol a betnagglutinm detekíáthaíő SRD-mérési eljárással, és ahol a preparátum HA-stafeilizáiására elegendő mennyiségű tr-tokolertd-szukcínátot tartalmaz.
    99772-3072A/SG * X
    -♦*'*' Φ ♦ *« ♦ ♦ » X
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti ihakíiváltmfluenz&virös-píepmátnns, ahol az-ö-tokofarobszakcínát l pg/ml és 10 mg/mí közötti ktmcentrácíóbaa vau jelen.
  3. 3, A 2. igénypont szerinti inakíivált míluenzavhus-preparátum, ahol az «-tokoíérol-szukcinát 10 és 500 ag/nti közötti koncmöácsőhíta vau jeles.
  4. 4, Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti, írsáktiváh in-SuenKavitus-prqíatátum, ahol az údhtenzavínmntígén-prqxarátam hasított virtisantigéu-preparátum vagy aiegyuég-auÍrgés, vagy kémiailag vagy más ssódon inaktivált teljes vírus,
  5. 5. A 4. igénypont szerinti ínafctiváít iufluenzavírus-preparátum, ahol az influenzamstigén-preparátom hasitett vírusán t i gén-preparál» m.
    S. Az 1-5. igényposiok bármelyike szedőt! inaktivált ioflueuzas'írus-prepsrátum, amely egyaránt tartalmaz. A- és .8 -törzsbe tartozó- hemagglutinmi.
  6. 7'.. A. 6. igénypont szerinti inaktívak innuenzavíras-preparátam, amely trivaleas isSueazavtrasproparátum.
  7. 8. Az 1-7, igénypontok bármelyike szerinti influenzavíms-prepsrátias, amely tartalmaz stabilizált, Btötzsbe tartozó mfloenzs-KArt.
  8. 9. Az 1-8, igénypontok bármelyike szerinti inflhenzavírus-preparáíumet tartalmazó mfluenzavakcína.
  9. 10. A 9, igénypont szerinti Inílnonzavakcsna, ahol a hentaggbímio-amigéH-koncenPáció minden mSuenzatörzsre vonatkozóan 1-1008 pg/ml/SRO-méréri eljárássá mérve.
  10. 11. A 9. vagy 19. igénypont szerinti influenzavakcina, amely „olaj a vízben” típusé emulziót is tartalmaz.
  11. 12. A 9. vagy 10. igénypont szerinti iaflaenzavakcma, amely adjuvásst is tartalmaz.
  12. 13. A 12. igénypont szerinti influ&nzavgkeínn, amelyben az adjuváns a következők alkotó csoportból választott; lípid-A nem toxikus származéka, szaporán vagy származéka, lípic-A nem toxikus származéka és szaponin vagy származéka kombinációja „olaj a vízben típusú emulzióban.
  13. 14. A 13. igénypont szerinti mfluenzaváfccina, amelyben a Iíptd-Α sem toxikus származéka 3D-MFL.
    1.5. A 14.. igénypont szerinti Maenzavakcim, amelyben a 3D-M.PL kis, átmérőjüket tekintve 9,2 pm-nől kisebb részecskeméretü emulzió formájában van jelen.
    lö. Eljárás stabil hemaggiuriuio-antigéu előállítására, azzei/ /ütemezve, hogy az antigént tisztítjuk iokoferoi vagy -származéka, például «-tokoíetol-szukcinát jelenlétében,
  14. 17. Inaktiváít influenzavirus-preparátaxn alkuinsazAsa a 9-15. igénypontok bármelyike szerinti, személyben in'fluenzafertőzés vagy megbetegedés .megelőzésére szolgáló vakcina előállítására.
  15. 18. A. 17. igénypont szerinti alkalmazás,nüo/ a vakcina intóderaaáüs, íntstmazálís, itttramuszkul.áris,.-orális vagy szubkutún módon történő 'beadásra- szolgál.
  16. 19. ö-tokolérol: szakéinál alkalmazása hetuagglutiuiu-stabllizálókés-t influen-zavakcina előállításában,
  17. 20. A 9-13, igénypont szerinti, inönenzavakcina, gyógyászatban való alkalmazásra.
HU0400445A 2001-05-30 2002-05-29 Novel vaccine composition HU229368B1 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB0113083A GB0113083D0 (en) 2001-05-30 2001-05-30 Novel compounds
GB0204116A GB0204116D0 (en) 2002-02-21 2002-02-21 Novel vaccine composition
PCT/EP2002/005883 WO2002097072A2 (en) 2001-05-30 2002-05-29 Influenza vaccine composition

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP0400445A2 HUP0400445A2 (hu) 2004-07-28
HUP0400445A3 HUP0400445A3 (en) 2011-06-28
HU229368B1 true HU229368B1 (en) 2013-11-28

Family

ID=30445235

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0400445A HU229368B1 (en) 2001-05-30 2002-05-29 Novel vaccine composition

Country Status (30)

Country Link
US (2) US7316813B2 (hu)
EP (3) EP2495314A1 (hu)
JP (1) JP4074582B2 (hu)
KR (1) KR100871021B1 (hu)
CN (2) CN101069744B (hu)
AR (1) AR036039A1 (hu)
AT (1) ATE420159T1 (hu)
AU (2) AU2006200742C9 (hu)
BR (1) BRPI0210076B8 (hu)
CA (1) CA2448208C (hu)
CO (1) CO5540349A2 (hu)
CY (1) CY1108930T1 (hu)
CZ (1) CZ298697B6 (hu)
DE (1) DE60230760D1 (hu)
DK (1) DK1407008T3 (hu)
ES (1) ES2318020T3 (hu)
FR (1) FR13C0072I1 (hu)
HK (1) HK1067891A1 (hu)
HU (1) HU229368B1 (hu)
IL (2) IL158931A (hu)
MX (1) MXPA03010944A (hu)
MY (1) MY134424A (hu)
NO (1) NO335212B1 (hu)
NZ (1) NZ529755A (hu)
PL (1) PL206435B1 (hu)
PT (1) PT1407008E (hu)
SI (1) SI1407008T1 (hu)
TW (1) TWI228420B (hu)
WO (1) WO2002097072A2 (hu)
ZA (1) ZA200309250B (hu)

Families Citing this family (112)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2293923T3 (es) * 1999-09-24 2008-04-01 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Vacuna intranasal contra el virus influenza.
GB9923176D0 (en) 1999-09-30 1999-12-01 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
MY134424A (en) * 2001-05-30 2007-12-31 Saechsisches Serumwerk Stable influenza virus preparations with low or no amount of thiomersal
US20100221284A1 (en) * 2001-05-30 2010-09-02 Saech-Sisches Serumwerk Dresden Novel vaccine composition
US20060110406A1 (en) 2003-02-25 2006-05-25 Medimmune Vaccines, Inc. Refrigerator-temperature stable influenza vaccine compositions
KR101251902B1 (ko) 2003-02-25 2013-04-08 메디뮨 엘엘씨 인플루엔자 백신 조성물의 제조 방법
PT2179744E (pt) 2004-09-09 2011-03-09 Novartis Vaccines & Diagnostic Redução de riscos iatrogénicos pontenciais associados às vacinas contra a gripe
CA2583698C (en) * 2004-10-06 2014-12-02 Medimmune Vaccines, Inc. Refrigerator-temperature stable influenza vaccine compositions
US20090004222A1 (en) 2004-11-03 2009-01-01 O'hagan Derek Influenza Vaccination
US9161905B2 (en) * 2005-01-12 2015-10-20 Ocular Research Of Boston, Inc. Dry eye treatment
AU2006226543B2 (en) * 2005-03-23 2011-10-06 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Use of an influenza virus an oil-in-water emulsion adjuvant to induce CD4 T-cell and/or improved B-memory cell response
AP2745A (en) * 2005-08-02 2013-09-30 Novartis Vaccines & Diagnostic Reducing interference between oil-containing adjuvants and surfactant-containing antigens
ES2359214T5 (es) 2005-11-01 2014-10-08 Novartis Vaccines And Diagnostics Gmbh Vacunas virales derivadas de células con niveles reducidos de ADN celular residual por tratamiento con beta-propiolactona
US11707520B2 (en) 2005-11-03 2023-07-25 Seqirus UK Limited Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
NZ567979A (en) 2005-11-04 2012-02-24 Novartis Vaccines & Diagnostic Adjuvanted influenza vaccines including a cytokine-inducing agents which is an agonist of Toll-Like Receptor 7
PT2368572T (pt) 2005-11-04 2020-06-16 Seqirus Uk Ltd Vacinas com adjuvante dotadas de antigénios não-virião preparados a partir de vírus da gripe cultivado em cultura celular
BRPI0618254A2 (pt) * 2005-11-04 2011-08-23 Novartis Vaccines & Diagnostic emulsões com agente tensoativo de fase aquosa livre para fornecer adjuvante às vacinas contra influenza dividido
ES2377884T3 (es) 2005-11-04 2012-04-02 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Vacunas contra la gripe que incluyen combinaciones de adyuvantes particulados e inmunopotenciadores
NZ567978A (en) * 2005-11-04 2011-09-30 Novartis Vaccines & Diagnostic Influenza vaccine with reduced amount of oil-in-water emulsion as adjuvant
TWI457133B (zh) 2005-12-13 2014-10-21 Glaxosmithkline Biolog Sa 新穎組合物
ES2796603T3 (es) 2006-01-27 2020-11-27 Seqirus Uk Ltd Vacunas contra la gripe que contienen hemaglutinina y proteínas de la matriz
EP2004226A1 (en) * 2006-03-24 2008-12-24 Novartis Vaccines and Diagnostics GmbH & Co. KG Storage of influenza vaccines without refrigeration
PT2054431E (pt) 2006-06-09 2011-11-03 Novartis Ag Confórmeros de adesinas bacterianas
PL2043682T3 (pl) 2006-07-17 2014-09-30 Glaxosmithkline Biologicals Sa Szczepionka przeciw grypie
ES2525572T3 (es) 2006-07-17 2014-12-26 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Vacuna antigripal
GB0614460D0 (en) 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
EP2497495B3 (en) 2006-09-11 2021-02-17 Seqirus UK Limited Making influenza virus vaccines without using eggs
US8097419B2 (en) 2006-09-12 2012-01-17 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Compositions and method for rapid, real-time detection of influenza A virus (H1N1) swine 2009
US9481912B2 (en) 2006-09-12 2016-11-01 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences in biological samples
US8080645B2 (en) 2007-10-01 2011-12-20 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Biological specimen collection/transport compositions and methods
US8652782B2 (en) 2006-09-12 2014-02-18 Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting, identifying and quantitating mycobacterial-specific nucleic acids
SI2086582T1 (sl) 2006-10-12 2013-02-28 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Cepivo, ki obsega emulzijo olja v vodi kot adjuvans
ES2480491T3 (es) 2006-12-06 2014-07-28 Novartis Ag Vacunas incluyendo antígeno de cuatro cepas de virus de la gripe
PE20090146A1 (es) 2007-04-20 2009-03-23 Glaxosmithkline Biolog Sa Composicion inmunogenica contra el virus influenza
EP2185191B1 (en) 2007-06-27 2012-09-12 Novartis AG Low-additive influenza vaccines
US9683256B2 (en) 2007-10-01 2017-06-20 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Biological specimen collection and transport system
US11041215B2 (en) 2007-08-24 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc PCR ready compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences
US10004799B2 (en) 2007-08-27 2018-06-26 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Composite antigenic sequences and vaccines
RU2468034C2 (ru) 2007-08-27 2012-11-27 ЛОНГХОРН ВЭКСИНС ЭНД ДИАГНОСТИКС ЭлЭлСи Иммуногенные композиции и способы
ES2459166T3 (es) * 2007-08-28 2014-05-08 Baxter International Inc. Procedimiento para la producción de vacunas víricas
US11041216B2 (en) 2007-10-01 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and quantifying nucleic acid sequences in blood samples
WO2009085355A2 (en) 2007-10-01 2009-07-09 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Biological specimen collection and transport system and methods of use
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
GB0818453D0 (en) 2008-10-08 2008-11-12 Novartis Ag Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom
AU2008339631B2 (en) * 2007-12-24 2014-07-24 Novartis Ag Assays for adsorbed influenza vaccines
US8506966B2 (en) 2008-02-22 2013-08-13 Novartis Ag Adjuvanted influenza vaccines for pediatric use
WO2009115917A2 (en) 2008-03-18 2009-09-24 Novartis Ag Improvements in preparation of influenza virus vaccine antigens
CN102099052A (zh) 2008-04-16 2011-06-15 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 疫苗
US20110217330A1 (en) 2008-11-05 2011-09-08 Bruno Rene Andre Novel method
EP2396030B1 (en) 2009-02-10 2015-08-12 Novartis AG Influenza vaccine regimens for pandemic-associated strains
EA023662B1 (ru) 2009-02-10 2016-06-30 Новартис Аг Вакцины против гриппа со сниженным количеством сквалена
JP2012517416A (ja) * 2009-02-10 2012-08-02 ノバルティス アーゲー 増加した量のｈ３抗原を含むインフルエンザワクチン
BE1019643A3 (fr) 2009-04-27 2012-09-04 Novartis Ag Vaccins de protection contre la grippe.
US9072702B2 (en) 2009-05-21 2015-07-07 Novartis Ag Reverse genetics using non-endogenous pol I promoters
MX2012000372A (es) 2009-07-06 2012-02-28 Variation Biotechnologies Inc Metodos para preparar vesiculas y formulaciones producidas a partir de las mismas.
US9907746B2 (en) 2009-07-06 2018-03-06 Variation Biotechnologies, Inc. Methods for preparing vesicles and formulations produced therefrom
EP2459722B1 (en) 2009-07-31 2017-09-06 Seqirus UK Limited Reverse genetics systems
JP2013504556A (ja) 2009-09-10 2013-02-07 ノバルティス アーゲー 気道疾患に対する組み合わせワクチン
CN102741399A (zh) 2009-10-20 2012-10-17 诺华有限公司 用于病毒拯救的改良反向遗传方法
GB0918830D0 (en) * 2009-10-27 2009-12-09 Glaxosmithkline Biolog Niederl Process
GB0919117D0 (en) 2009-10-30 2009-12-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Process
DE102009056884B4 (de) 2009-12-03 2021-03-18 Novartis Ag Impfstoff-Adjuvantien und verbesserte Verfahren zur Herstellung derselben
DE102009056871A1 (de) 2009-12-03 2011-06-22 Novartis AG, 4056 Impfstoff-Adjuvantien und verbesserte Verfahren zur Herstellung derselben
DE102009056883B4 (de) 2009-12-03 2012-08-16 Novartis Ag Impfstoff-Adjuvantien und verbesserte Verfahren zur Herstellung derselben
SI2356983T1 (sl) 2009-12-03 2013-05-31 Novartis Ag KroĹľenje komponent med homogenizacijo emulzij
ES2393182T5 (es) 2009-12-03 2020-04-27 Novartis Ag Fabricación de una emulsión bajo una disposición de cámara de interacción y contrapresión para microfluidización
ES2558056T3 (es) 2009-12-03 2016-02-01 Novartis Ag Filtración hidrófila durante la fabricación de adyuvantes para vacunas
CA2792369A1 (en) 2010-03-11 2011-09-15 Immune Design Corp. Vaccines for influenza
EA201291179A1 (ru) 2010-05-06 2013-04-30 Новартис Аг Органические пероксидные соединения для инактивации микроорганизмов
PT3489211T (pt) 2010-05-12 2020-09-22 Novartis Ag Métodos aperfeiçoados para preparar esqualeno
US8945904B2 (en) 2010-05-21 2015-02-03 Novartis Ag Influenza virus reassortment
CA2801149A1 (en) 2010-06-01 2011-12-08 Novartis Ag Concentration of vaccine antigens without lyophilization
EP2575873B1 (en) 2010-06-01 2015-12-30 Novartis AG Concentration and lyophilization of influenza vaccine antigens
WO2011154976A2 (en) 2010-06-08 2011-12-15 Panacea Biotec Limited Improved influenza vaccine
EP2590674B1 (en) 2010-07-06 2017-02-22 Variation Biotechnologies Inc. Compositions and methods for treating influenza
US9517205B2 (en) 2010-08-20 2016-12-13 Seqirus UK Limited Soluble needle arrays for delivery of influenza vaccines
WO2012032482A1 (en) 2010-09-07 2012-03-15 Novartis Ag Generic assays for detection of mammalian reovirus
US9161975B2 (en) 2010-10-27 2015-10-20 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Immunogenic composition
WO2012097346A1 (en) 2011-01-13 2012-07-19 Variation Biotechnologies, Inc. Compositions and methods for treating viral infections
US20130323280A1 (en) 2011-01-13 2013-12-05 Variation Biotechnologies, Inc. Methods for preparing vesicles and formulations produced therefrom
JP5798356B2 (ja) * 2011-04-06 2015-10-21 一般財団法人化学及血清療法研究所 新規インフルエンザワクチン安定化剤
GB201216121D0 (en) 2012-09-10 2012-10-24 Novartis Ag Sample quantification by disc centrifugation
CA2852857A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Novartis Ag Adjuvanted influenza b virus vaccines for pediatric priming
EP2780350B1 (en) 2011-11-18 2019-03-06 Variation Biotechnologies Inc. Synthetic derivatives of mpl and uses thereof
CN104302323A (zh) 2012-01-12 2015-01-21 变异生物技术公司 用于治疗病毒感染的组合物和方法
EP3494989A1 (en) 2012-01-26 2019-06-12 Longhorn Vaccines and Diagnostics, LLC Composite antigenic sequences and vaccines
RU2698906C2 (ru) 2012-01-27 2019-09-02 Вэриэйшн Биотекнолоджиз, Инк. Способы и композиции для терапевтических агентов
CN103608453B (zh) 2012-03-02 2018-07-24 思齐乐 流感病毒重配
GB201205189D0 (en) 2012-03-23 2012-05-09 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel medical use
US20130315955A1 (en) * 2012-04-13 2013-11-28 Protein Sciences Corporation Stability and potency of hemagglutinin
EP2855701A1 (en) 2012-06-04 2015-04-08 Novartis AG Improved safety testing
GB201218195D0 (en) 2012-10-10 2012-11-21 Istituto Zooprofilattico Sperimentale Delle Venezie Composition
CA2893429A1 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Synthetic Genomics Vaccines, Inc. Influenza virus reassortment
RU2015132962A (ru) 2013-01-10 2017-02-14 Новартис Аг Иммуногенные композиции на основе вируса гриппа и их применение
EP2968512A2 (en) 2013-03-13 2016-01-20 Novartis AG Influenza b virus reassortment
CN105828835A (zh) 2013-05-10 2016-08-03 诺华股份有限公司 避免流感疫苗中的发作性嗜睡病风险
DE202013005100U1 (de) 2013-06-05 2013-08-26 Novartis Ag Influenza Virus Reassortierung
DE202013005130U1 (de) 2013-06-05 2013-09-10 Novartis Ag Influenza Virus Reassortierung
MX2015016755A (es) 2013-06-06 2016-04-13 Novartis Ag Reagrupamiento del virus de influenza.
CN104436157A (zh) 2013-09-23 2015-03-25 恩金生物有限公司 流感疫苗和治疗
EP3075393A4 (en) 2013-11-29 2017-08-16 Terumo Kabushiki Kaisha Adjuvant composition, vaccine composition comprising same, and method for producing same
US10238739B2 (en) 2014-12-02 2019-03-26 Novartis Ag Manufacture of surfactant-containing compositions with enhanced stability
US9976136B2 (en) 2015-05-14 2018-05-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Rapid methods for the extraction of nucleic acids from biological samples
BR112017028011A2 (pt) 2015-06-26 2018-08-28 Seqirus Uk Ltd vacinas de gripe correspondentes antigenicamente
EP3764098B1 (en) 2015-07-07 2022-11-16 Seqirus UK Limited Influenza potency assays
WO2017167768A1 (en) 2016-03-28 2017-10-05 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Novel vaccine composition
GB201614799D0 (en) * 2016-09-01 2016-10-19 Glaxosmithkline Biologicals Sa Compositions
EP3917567A1 (en) 2019-01-30 2021-12-08 GlaxoSmithKline Biologicals SA Oil/surfactant mixtures for self-emulsification
JP2023502650A (ja) 2019-11-18 2023-01-25 セキラス ピーティーワイ リミテッド 遺伝子再集合インフルエンザウイルスを産生するための方法
RU2754398C1 (ru) * 2020-06-25 2021-09-01 Общество с ограниченной ответственностью «ФОРТ» Способ получения четырехвалентной вакцины для профилактики гриппа
WO2022003560A1 (en) 2020-06-30 2022-01-06 Seqirus UK Limited Cold filtration of oil-in-water emulsion adjuvants
WO2025019631A1 (en) 2023-07-19 2025-01-23 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Immunogenic compositions containing inactivated influenza a virus and cpg oligonucleotide adjuvant and uses thereof

Family Cites Families (71)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5520A (en) 1848-04-18 Oegan-pipb
US639A (en) 1838-03-17 of boston
US4270537A (en) 1979-11-19 1981-06-02 Romaine Richard A Automatic hypodermic syringe
DD155875A1 (de) 1980-12-31 1982-07-14 Willy Nordheim Verfahren zur herstellung eines ballaststoffarmen inaktivierten influenzaimpfstoffes
US4436727A (en) 1982-05-26 1984-03-13 Ribi Immunochem Research, Inc. Refined detoxified endotoxin product
DD211444A3 (de) 1982-08-19 1984-07-11 Saechsisches Serumwerk Verfahren zur herstellung von influenza-impfstoffen
SE8205892D0 (sv) 1982-10-18 1982-10-18 Bror Morein Immunogent membranproteinkomplex, sett for framstellning och anvendning derav som immunstimulerande medel och sasom vaccin
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
DD300833A7 (de) 1985-10-28 1992-08-13 Saechsische Landesgewerbefoerd Verfahren zur herstellung von inaktivierten influenza-vollvirusimpfstoffen
CA1283827C (en) 1986-12-18 1991-05-07 Giorgio Cirelli Appliance for injection of liquid formulations
GB8704027D0 (en) 1987-02-20 1987-03-25 Owen Mumford Ltd Syringe needle combination
US5057540A (en) 1987-05-29 1991-10-15 Cambridge Biotech Corporation Saponin adjuvant
CA1331443C (en) 1987-05-29 1994-08-16 Charlotte A. Kensil Saponin adjuvant
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
US4940460A (en) 1987-06-19 1990-07-10 Bioject, Inc. Patient-fillable and non-invasive hypodermic injection device assembly
US5339163A (en) 1988-03-16 1994-08-16 Canon Kabushiki Kaisha Automatic exposure control device using plural image plane detection areas
US4912094B1 (en) 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
FR2638359A1 (fr) 1988-11-03 1990-05-04 Tino Dalto Guide de seringue avec reglage de la profondeur de penetration de l'aiguille dans la peau
AU626049B2 (en) 1989-05-29 1992-07-23 Lion Corporation Method for preparing vaccine for dental caries and vaccinal compositions for dental caries used as nasal drop
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5190521A (en) 1990-08-22 1993-03-02 Tecnol Medical Products, Inc. Apparatus and method for raising a skin wheal and anesthetizing skin
US5527288A (en) 1990-12-13 1996-06-18 Elan Medical Technologies Limited Intradermal drug delivery device and method for intradermal delivery of drugs
GB9118204D0 (en) 1991-08-23 1991-10-09 Weston Terence E Needle-less injector
SE9102652D0 (sv) 1991-09-13 1991-09-13 Kabi Pharmacia Ab Injection needle arrangement
JP3723231B2 (ja) 1991-12-23 2005-12-07 ディミナコ アクチェンゲゼルシャフト アジュバント
IL101007A (en) * 1992-02-18 1997-08-14 Pharmos Ltd Dry stable compositions prepared by lyophilization
US5328483A (en) 1992-02-27 1994-07-12 Jacoby Richard M Intradermal injection device with medication and needle guard
US5750110A (en) 1992-06-25 1998-05-12 Smithkline Beecham Biologicals, S.A Vaccine composition containing adjuvants
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5569189A (en) 1992-09-28 1996-10-29 Equidyne Systems, Inc. hypodermic jet injector
US5334144A (en) 1992-10-30 1994-08-02 Becton, Dickinson And Company Single use disposable needleless injector
PL178578B1 (pl) 1993-03-23 2000-05-31 Smithkline Beecham Biolog Zawiesina cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A i sposób jej wytwarzania oraz kompozycja szczepionki zawierającej antygen w połączeniu z 3-0-deacylowanym monofosforylolipidem A i sposób jej wytwarzania
WO1995011700A1 (en) * 1993-10-29 1995-05-04 Pharmos Corp. Submicron emulsions as vaccine adjuvants
GB9326253D0 (en) 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
WO1995024176A1 (en) 1994-03-07 1995-09-14 Bioject, Inc. Ampule filling device
US5466220A (en) 1994-03-08 1995-11-14 Bioject, Inc. Drug vial mixing and transfer device
US5616487A (en) 1994-09-15 1997-04-01 Aastrom Biosciences, Inc. Stabilized retrovirus compositions
AUPM873294A0 (en) 1994-10-12 1994-11-03 Csl Limited Saponin preparations and use thereof in iscoms
US5599302A (en) 1995-01-09 1997-02-04 Medi-Ject Corporation Medical injection system and method, gas spring thereof and launching device using gas spring
UA56132C2 (uk) 1995-04-25 2003-05-15 Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини
US5730723A (en) 1995-10-10 1998-03-24 Visionary Medical Products Corporation, Inc. Gas pressured needle-less injection device and method
SI0750907T1 (en) * 1995-06-30 2002-08-31 American Cyanamid Company Stable macrolide and macrolide vaccine compositions
US20020165168A1 (en) 1995-12-16 2002-11-07 Joachim Bunger Use of sugar derivatives as antimicrobial, antimycotic and/or antiviral active substances
US5893397A (en) 1996-01-12 1999-04-13 Bioject Inc. Medication vial/syringe liquid-transfer apparatus
GB9607549D0 (en) 1996-04-11 1996-06-12 Weston Medical Ltd Spring-powered dispensing device
US5919480A (en) * 1996-06-24 1999-07-06 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Liposomal influenza vaccine composition and method
US6403098B1 (en) 1996-09-26 2002-06-11 Merck & Co., Inc. Rotavirus vaccine formulations
DE19649895A1 (de) 1996-12-02 1998-06-04 Henkel Kgaa Schäumende Körperreinigungsmittel
DE69841217D1 (de) * 1997-01-13 2009-11-19 Univ Emory Glutathion zur behandlung von influenzainfektionen
GB9705740D0 (en) * 1997-03-20 1997-05-07 Medeva Europ Ltd A method of preservation
CA2284586C (en) 1997-04-01 2011-02-08 Ribi Immunochem Research, Inc. Aqueous immunologic adjuvant compositions of monophosphoryl lipid a
US5993412A (en) 1997-05-19 1999-11-30 Bioject, Inc. Injection apparatus
GB9711990D0 (en) * 1997-06-11 1997-08-06 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
DE69815692T2 (de) * 1997-09-05 2004-04-29 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Öl in wasser emulsionen mit saponinen
IT1298087B1 (it) 1998-01-08 1999-12-20 Fiderm S R L Dispositivo per il controllo della profondita' di penetrazione di un ago, in particolare applicabile ad una siringa per iniezioni
CN1296416A (zh) * 1998-04-09 2001-05-23 史密丝克莱恩比彻姆生物有限公司 佐剂组合物
FR2780278B1 (fr) 1998-06-24 2001-01-19 Oreal Composition conditionnante et detergente et utilisation
DE19841796A1 (de) * 1998-09-12 2000-03-16 Beiersdorf Ag Kombinationen von Antiadhäsiva (Kohlenhydrate) und Mikrobiziden
TR200103018T2 (tr) * 1999-04-19 2002-02-21 Beecham Biologicals S.A. Smithkline İmmünostimülatör oligonükleotid ve saponin içeren katkı bileşikleri.
AUPQ233799A0 (en) 1999-08-19 1999-09-09 Minister For Agriculture, Minister For Land And Water Conservation For And On Behalf Of The State Of New South Wales Recombinant sub-unit vaccine
ES2293923T3 (es) * 1999-09-24 2008-04-01 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Vacuna intranasal contra el virus influenza.
CN1391483A (zh) * 1999-09-24 2003-01-15 史密丝克莱恩比彻姆生物有限公司 作为佐剂的聚氧乙烯脱水山梨醇酯和辛苯昔醇组合及其在疫苗中的应用
BR0014285A (pt) * 1999-09-24 2002-05-21 Smithkline Beecham Biolog Adjuvantes compreendendo um éster ou éter de alquila de polioxietileno e pelo menos um tensoativo não-iÈnico
US6494865B1 (en) 1999-10-14 2002-12-17 Becton Dickinson And Company Intradermal delivery device including a needle assembly
CN1379667A (zh) * 1999-10-19 2002-11-13 宝洁公司 预防和治疗感冒和流感样症状的组合物和它们的使用方法
HUP0302636A3 (en) 2000-10-02 2008-03-28 Glaxosmithkline Biolog Sa Split enveloped virus preparation
CA2438960A1 (en) * 2001-02-23 2002-09-06 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Influenza vaccine formulations for intradermal delivery
MY134424A (en) * 2001-05-30 2007-12-31 Saechsisches Serumwerk Stable influenza virus preparations with low or no amount of thiomersal
US9856414B2 (en) 2013-06-10 2018-01-02 Dober Chemical Corp. Compositions, systems and methods of making coated additive components

Also Published As

Publication number Publication date
PL366990A1 (en) 2005-02-07
HUP0400445A3 (en) 2011-06-28
CZ20033253A3 (cs) 2004-04-14
CO5540349A2 (es) 2005-07-29
CZ298697B6 (cs) 2007-12-27
ZA200309250B (en) 2005-05-25
BRPI0210076B8 (pt) 2021-05-25
FR13C0072I1 (fr) 2014-01-31
MXPA03010944A (es) 2005-04-08
WO2002097072A8 (en) 2004-02-19
EP2495314A1 (en) 2012-09-05
AU2002344182C1 (en) 2014-11-06
CA2448208A1 (en) 2002-12-05
CN101069744A (zh) 2007-11-14
DE60230760D1 (de) 2009-02-26
IL158931A (en) 2008-04-13
AR036039A1 (es) 2004-08-04
IL188834A (en) 2011-01-31
CN1279165C (zh) 2006-10-11
EP2039761A1 (en) 2009-03-25
WO2002097072A3 (en) 2003-04-24
JP2004527264A (ja) 2004-09-09
CY1108930T1 (el) 2014-07-02
AU2006200742A1 (en) 2006-03-16
EP1407008B1 (en) 2009-01-07
HUP0400445A2 (hu) 2004-07-28
ES2318020T3 (es) 2009-05-01
US20080181914A1 (en) 2008-07-31
CN1533434A (zh) 2004-09-29
AU2006200742B2 (en) 2010-05-27
SI1407008T1 (sl) 2009-06-30
NZ529755A (en) 2005-11-25
ATE420159T1 (de) 2009-01-15
KR20040025682A (ko) 2004-03-24
WO2002097072A2 (en) 2002-12-05
HK1067891A1 (en) 2005-04-22
AU2006200742C1 (en) 2014-10-16
DK1407008T3 (da) 2009-04-27
BR0210076A (pt) 2004-06-22
CN101069744B (zh) 2012-04-25
KR100871021B1 (ko) 2008-11-27
NO335212B1 (no) 2014-10-20
AU2002344182B2 (en) 2006-01-05
US20040241187A1 (en) 2004-12-02
BRPI0210076A8 (pt) 2017-05-23
EP1407008A2 (en) 2004-04-14
BRPI0210076B1 (pt) 2020-01-07
PT1407008E (pt) 2009-02-26
MY134424A (en) 2007-12-31
CA2448208C (en) 2011-11-29
JP4074582B2 (ja) 2008-04-09
AU2006200742C9 (en) 2015-03-26
PL206435B1 (pl) 2010-08-31
US7316813B2 (en) 2008-01-08
NO20035208D0 (no) 2003-11-24
TWI228420B (en) 2005-03-01
IL188834A0 (en) 2009-02-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU229368B1 (en) Novel vaccine composition
US10806782B2 (en) Hand, foot, and mouth vaccines and methods of manufacture and use thereof
AU2016291836A1 (en) Vaccine compositions
EA014353B1 (ru) Вакцинные композиции, содержащие сапониновый адъювант
JP2007031452A (ja) Ｒｓｖサブユニット成分およびインフルエンザウイルス調製物を含む多価免疫原性組成物
JP2014205726A (ja) 新規組成物
AU2002344182A1 (en) Influenza vaccine composition
JPH11513372A (ja) パラインフルエンザウイルスの糖タンパクおよびワクチン
JP2021505648A (ja) ジカワクチン及び免疫原性組成物、ならびにその使用方法
JP2018500878A (ja) ワクチンおよび診断開発のための組換えデングウイルスについての方法および組成物
CN102131522A (zh) Hiv联合疫苗与初免加强方法
KR101654023B1 (ko) 돼지유행성설사병바이러스 약독화주 및 불활화백신 조성물과 이를 이용한 경구 투여용 백신 조성물
JP5813645B2 (ja) インフルエンザに対する新規ワクチン組成物
KR20170109652A (ko) 돼지 유행성 설사 바이러스 감염에 대한 백신
CN109078179A (zh) Hendra和Nipah病毒G糖蛋白免疫原性组合物
AU2019200943B2 (en) Vaccine against Bovine Viral Diarrhea Virus
KR102320271B1 (ko) 부유세포 배양에 적응된 A/ASIA/Sea-97 유전형 구제역 바이러스 백신주 및 이를 포함하는 구제역 바이러스 백신 조성물
NZ750583B2 (en) Vaccine against bovine viral diarrhea virus
DE10339966A1 (de) Induktion antiviraler neutralisierender Antikörper beim Menschen und beim Tier