HU219454B - Purin-nukleozid-származékok, ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények és eljárás ezek előállítására - Google Patents

Purin-nukleozid-származékok, ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények és eljárás ezek előállítására Download PDF

Info

Publication number
HU219454B
HU219454B HU407/90A HU840790A HU219454B HU 219454 B HU219454 B HU 219454B HU 407/90 A HU407/90 A HU 407/90A HU 840790 A HU840790 A HU 840790A HU 219454 B HU219454 B HU 219454B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
formula
methanol
amino
compound
preparation
Prior art date
Application number
HU407/90A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9008407D0 (en
Inventor
Susan Mary Daluge
Original Assignee
Wellcome Foundation Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US07/455,201 external-priority patent/US5034394A/en
Application filed by Wellcome Foundation Ltd. filed Critical Wellcome Foundation Ltd.
Priority to HU9902538A priority Critical patent/HU220668B1/hu
Priority to HU9902543A priority patent/HU220630B1/hu
Priority to HU9902539A priority patent/HU220067B/hu
Publication of HU9008407D0 publication Critical patent/HU9008407D0/hu
Publication of HU219454B publication Critical patent/HU219454B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/42—One nitrogen atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C215/00—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C215/42—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having amino groups or hydroxy groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/47—One nitrogen atom and one oxygen or sulfur atom, e.g. cytosine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/48—Two nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/50—Three nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
    • C07F9/65616—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings containing the ring system having three or more than three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members, e.g. purine or analogs
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/06—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring
    • C07C2601/10—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring the ring being unsaturated

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

A találmány tárgyát az (I) általános képletű enantiomer vegyületek,sóik, foszfát-észtereik vagy ezen észterek sói és ezeket tartalmazógyógyászati készítmények, valamint az ezek előállítására szolgálóeljárások képezik. Az (I) általános képletben R jelentése ciklopropil-amino- vagy N-ciklopropil-N-metil-amino-csoport, és A jelentése(1S,4R)- vagy (1R,4S)-konfigurációjú 2-ciklopentén-1-metanol-4-il-csoport – amely vegyületek lényegében mentesek a másik enantiomertől.A találmány szerinti vegyületek, illetve gyógyászati készítményekkülönösen alkalmasak vírusfertőzések kezelésére. ŕ

Description

A találmány tárgya a cukoregység helyén telítetlen szénhidrogéngyűrűt tartalmazó (I) általános képletű enantiomer purin-nukleozid-származékok és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények, valamint eljárás ezek előállítására. Ezek a vegyületek különösen alkalmasak vírusfertőzések kezelésére.
Az AIDS (szerzett immunhiány-szindróma) olyan, az immunrendszer gyengülésével vagy károsodásával járó betegség, amely hajlamossá teszi az ebben szenvedő beteget végzetes opportunista fertőzésekre. Jellemzően az AIDS a T-sejtek, különösen az OKT4 felületi markert hordozó segítő-indukáló alcsoport súlyosbodó fogyásával jár együtt.
A humán immunhiányvírust (HÍV) reprodukálhatóan izolálták AIDS-ben szenvedő vagy az AIDS-t gyakorta megelőző tüneteket mutató betegekből. A HÍV citopatikus, úgy tűnik, hogy különösen az OKT4 markért hordozó T-sejteket fertőzi és pusztítja, és már általánossá vált az a felismerés, hogy a HÍV az AIDS kóroki tényezője.
Amióta felismerték azt, hogy a HÍV az AIDS kóroki tényezője, számos anti-HIV kemoterápiás szert javasoltak, amelyek hatékonyak lehetnek az AIDS-ben szenvedők kezelésére. így például a 4 724 232 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalomban 3’-azido-3’-dezoxitimidint (amely a zidovudine nevet kapta) és gyógyászati célra alkalmas származékait, valamint ezek humán retrovírus-fertőzések, köztük az AIDS és ezzel kapcsolatos klinikai állapotok kezelésére való alkalmazását ismertetik. Vince és munkatársai [Antiviral Research, 9 (1/2), 120 (1988)] bizonyos széngyűrűs nukleozid-analógokat, valamint ezek HÍV elleni alkalmazását ismertetik. Ismertették még a (±)-9-[cisz-4-(hidroxi-metil)-2ciklopentenilj-guanint (NSC-614 846), amely karbovir néven is ismert [Second International Conference on Antiviral Research, Williamsburg, VA, 1988. április
10-14.].
Egy másik olyan patogén vírus, amely világszerte jelentős következményekkel járó hatást fejt ki, a hepatitis B vírus (HBV). Ennek előfordulása igen gyakori az ázsiai országokban, és elterjedt Afrikának a Szaharától délre fekvő vidékein. A vírus kóroktanilag a primer hepatocelluláris karcinómával kapcsolatos.
Az Amerikai Egyesült Államokban jelenleg becslések szerint mintegy 500 000-1 000 000 fertőzéshordozó személy van. A fertőzéshordozóknak mintegy 25%ában fejlődik ki a krónikus aktív hepatitis, és a betegség gyakran cirrózisig fejlődik. Becslések szerint az Amerikai Egyesült Államokban évente mintegy 5000 ember hal meg HBV-vel kapcsolatos cirrózis következtében, és feltehetőleg 1000 ember HBV-vel kapcsolatos májrák folytán. Még akkor is szükséges lesz HBV ellen hatékony vegyületek alkalmazása, ha a HBV ellen hatásos univerzális vakcina fog rendelkezésre állni. A fertőzött hordozók folyamatos nagy utánpótlását a világon mintegy 220 000 000 főre becsülik, ezek számára a vakcinálás nem jelent segítséget, továbbra is ki vannak téve a HBV által kiváltott májkórok nagy kockázatának. Ez a hordozónépesség szolgál forrásul az érzékeny egyének fertőzésének forrásául, fenntartja a betegség előfordulását különösen a járványos területeken vagy a nagy rizikófaktorú csoportokban, például a kábítószereket intravénásán alkalmazók és a homoszexuálisok körében. Igen nagy szükség van hatásos vírusellenes szerekre, olyanokra, amelyek mind a krónikus fertőzések ellen hatásosak, mind a kórnak a hepatocelluláris karcinóma irányába való haladását csökkentik.
A HBV-fertőzés klinikai tünetei közé tartoznak a fejfájás, láz, rossz közérzet, émelygés, hányás, étvágytalanság és hasi fájdalmak. A vírusreplikációt általában az immunválasz szabályozza, az ember felgyógyulása hetekig vagy hónapokig tart, de a fertőzés esetenként ennél súlyosabb lehet, állandó krónikus májmegbetegedéshez vezethet, amint azt az előzőekben vázoltuk.
A 349 242 számú európai szabadalmi bejelentésben 6-helyettesített purin-karbociklusos nukleozidokat ismertetnek, valamint ezek alkalmazását gyógyászati kezelésben, különösen HÍV és HBV-fertőzések kezelésében. Ezek között a vegyületek között található a (±)cisz-4-[2-amino-6-(ciklopropil-amino)-9-purin-9-il]-2ciklopentén-1-metanol és a (±)-cisz-4-[2-amino-6-(ciklopropil-metil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1 metanol, azaz mindkettő enantiomeijeinek racém elegye formájában.
Arra a felismerésre jutottunk, hogy a fenti két vegyület egyedi, elkülönített enantiomeijei és ezek gyógyászati célra alkalmas származékai előnyös vírusellenes aktivitással bíró szerek, különösen hatásosak HÍV és HBV-fertőzések esetén, citotoxikus hatásuk alacsony és/vagy a fenti aktivitással bíró más vegyületek előállításának hasznos köztitermékei.
A találmány tárgya az (I) általános képletű enantiomer vegyületek és eljárás ezek előállítására - a képletben R jelentése ciklopropil-amino- vagy N-ciklopropil-N-metil-amino-csoport, és A jelentése a 2-ciklopentén-l-metanol-4-il-csoport (1S,4R)- vagy (lR,4S)-konfigurációja -, valamint ezen vegyületek foszfát-észterei, sói és előbbi észtereinek sói, és ezek előállítása. Ezek a vegyületek és előbbi származékaik egy enantiomer formájában vannak jelen lényegében mentesen a másik enantiomertől (például 10 tömeg% alatti, előnyösen 5 tömeg% alatti mennyiséget tartalmaznak belőle).
Az (I) általános képletű vegyületek az (IA) és (IB) konfigurációnak megfelelőek lehetnek - a képletben R jelentése az előzőekben megadott.
Az (I) általános képletű vegyületek enantiomer formái, amelyek a másik enantiomertől lényegében mentesek, a következők :
1. (lS,4R)-cisz-4-[2-amino-6-(ciklopropil-amino)9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1 -metanol,
2. (lR,4S)-cisz-4-[2-amino-6-(ciklopropil-amino)9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol,
3. (lS,4R)-cisz-4-[2-amino-6-(N-ciklopropil-N-metilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol,
4. (lR,4S)-cisz-4-[2-amino-6-(N-ciklopropil-N-metilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1 -metanol.
A továbbiakban az 1,- és 3.-vegyületeket (1S,4R)enantiomer (I) általános képletű vegyületekként jelöljük, optikai forgatóképességük negatív (-), ezek a ve2
HU 219 454 Β gyületek különösen hatásosak HÍV és HBV-fertőzésekkel szemben, ezek a vegyületek és gyógyászati szempontból elfogadható származékaik képviselik a találmány szerinti előnyös vegyületeket. Ezen vegyületek további előnye az, hogy beadáskor képesek arra, hogy áthatoljanak a vér-agy határon, és így a vegyület vagy aktív metabolitjainak magas szintjét biztosítsák a központi idegrendszerben, ahol a HIV-fertőzések manifesztálódása különösen gyengítő hatású. A fenti 1. vegyületek különösen előnyösek HÍV és HBV-fertőzésekkel szembeni kivételesen nagy aktivitásuk folytán. A vegyület jelentősen alacsonyabb toxicitásúnak bizonyult csontvelőőssejtekkel szemben, mint a 3’-azido-3’-dezoxitimidin (zidovudine), amelyet az előzőekben említettünk.
Azt találtuk továbbá, hogy a fenti 2. és 4. vegyületek foszfátszármazékai, amelyeket a továbbiakban (lR,4S)-enantiomer (I) általános képletű vegyületekként jelölünk, és amelyeknek optikai forgatóképessége pozitív (+), vírusfertőzésekkel, például az előzőekben említettekkel szemben aktívak. Ezek a foszfátszármazékok tehát a találmány szerint előállított vegyületek egy további előnyös körét jelentik.
Az (lR,4S)-enantiomer (I) általános képletű vegyületek „foszfát-észterei” megjelölés olyan származékokat jelöl, amelyekben a foszfátcsoport az (I) általános képletű vegyület 1-metanolcsoportjához kapcsolódik, és ezen a megjelölésen mono-, di- és trifoszfátokat is értünk.
Az (I) általános képletű (lR,4S)-enantiomer-alapvegyületek és nem foszfát származékaik hasznos köztitermékek a fenti foszfátszármazékok előállításában.
A fenti (I) általános képletű (lS,4R)-enantiomervegyületeket, gyógyászati célra alkalmas foszfát-észtereiket, sóikat, előbbi észtereik és az (I) általános képletű vegyületek (1R,4S)- enantlomerjének foszfát-észtereit a továbbiakban a találmány szerinti, illetve a találmány szerint előállított vírusellenes vegyületeknek nevezzük.
A találmány szerinti vírusellenes vegyületek retrovírus-fertőzések vagy hepatitis B vírusfertőzések kezelésére vagy megelőzésére alkalmazhatók, a kezelendő emlőst, például embert a találmány szerint előállított vírusellenes hatású vegyület terápiásán hatékony dózisával kezeljük.
A találmány tárgyát képezik a fenti hatóanyagokat tartalmazó gyógyászati készítmények és előállításuk is.
A találmány szerinti vegyületekkel kezelhető vagy megelőzhető retrovírus-fertőzések közé tartoznak humán retrovírus-fertőzések, például humán immunhiányvírus (HÍV), HIV-1, HIV-2 és humán T-sejt limfotrop vírus (HLTV), például HTLV-I vagy HTLV-II okozta fertőzések. A találmány szerinti vírusellenes hatású vegyületek különösen hasznosak AIDS és klinikailag rokon állapotok, például AIDS-szel kapcsolatos komplex (ARC), előrehaladott általános limfadenopátia (PGL), AIDS-szel kapcsolatos neurológiai állapotok, például szklerózis multiplex vagy trópusi paraparézis (részleges bénulás) és anti-HIV-antitest-pozitív és HIV-pozitív állapotok, például tünetmentes betegek, valamint trombocitopénia purpura kezelésére. A találmány szerint vegyületek használhatók pszoriázis kezelésére és megelőzésére is.
Az (I) általános képletű, (IS,4R)-enantiomer-vegyületekkel kapcsolatosan „gyógyászati célra alkalmas származék” megjelölésen e vegyület bármely gyógyászati célra alkalmas sóját, foszfát-észterét vagy észterének sóját értjük.
Az (I) általános képletű foszfát-észterek továbbá észterezettek lehetnek 1-18 szénatomos alkohollal vagy egy 2,3-di(6-24 szénatomos acil)-glicerinnel, például 2,3-bisz(hexanoil-oxi)-propil-hidrogén-foszfáttal és 2,3-bisz(hexadekanil-oxl)-propil-hidrogén-foszfátszármazékok.
Az (I) általános képletű (lS,4R)-enantiomerek gyógyászati célra alkalmas savaddíciós sói közé tartoznak a megfelelő savakkal alkotott mono- vagy dibázisos sók, alkalmas savak például a szerves karbonsavak, így az ecetsav, tejsav, borkősav, almasav, izetionsav, laktobionsav és borostyánkősav; szerves szulfonsavak, például metánszulfonsav, etánszulfonsav, benzolszulfonsav és p-toluolszulfonsav, továbbá szervetlen savak, így hidrogén-klorid, kénsav, foszforsav, szulfát, metánszulfonát és szulfaminsav. Különösen előnyösek a hidrogén-klorid-sók, azaz a mono- és di(hidrogén-klorid)-sók.
A találmány szerint előállított vírusellenes hatású vegyületek alkalmazhatók terápiás szerként a fenti állapotok kezelésére más terápiás szerekkel kombinálva is. Ilyen további terápiás szerek lehetnek vírusfertőzések és ezzel kapcsolatos állapotok kezelésére hatásos terápiás szerek, például a 3’-azido-3’-dezoxitimidin (zidovudine), a 2’,3’-didezoxinukleozidok, így a 2’,3’-didezoxicitidin, a 2’,3’-didezoxiadenozin és a 2’,3’-didezoxiinozin, aciklusos nukleozidok (például az aciklovir), interferonok, például az α-interferon, vesekiválasztást gátló hatóanyagok, például probenicid, nukleozidtranszport-inhibitorok, például dipiridamol, dilazep, mio-, lido- vagy szoluflazin vagy hexobendin, immunmodulátorok, például az interleukin II és granulocita makrofágtelepet stimuláló faktorok, oldható CD4 vagy ennek géntechnológiai úton nyert származékai és foszfonohangyasav. Az ilyen kombinált terápia összetevő hatóanyagai adagolhatok egyidejűleg, elkülönített vagy kombinált készítmény formájában, vagy különböző időpontokban, például egymást követően úgy, hogy a kombinált hatást eléijük.
A találmány szerint előállított vírusellenes vegyületek, amelyekre a továbbiakban hatóanyagként hivatkozunk, terápiás célra bármely alkalmas adagolási úton beadhatók, például orálisan, rektálisan, nazálisán, helyileg (közte szájüregi és szublingvális úton), vaginálisan és parenterálisan (közte szubkután, intramuszkulárisan, intravénásán és intradermálisan). Megjegyezzük, hogy az előnyös adagolási mód a beteg állapotától és korától, a fertőzés természetétől és a kiválasztott hatóanyagtól függő.
Az előzőekben említett állapotok (például AIDS) kezelésére általában 3,0-120 mg/testtömeg-kg/nap hatóanyagot alkalmazunk, előnyösen 6-90 mg/testtömeg-kg/nap, még előnyösebben 15-60 mg/testtömeg3
HU 219 454 Β kg/nap a megfelelő dózis. A kívánt dózist két, három, négy, öt, hat vagy több aldózis formájában megfelelő időközökben a nap során elosztva adjuk be. Az aldózisokat adagolhatjuk egységdózis formájában, például 10-1500 mg, előnyösen 20-1000 mg, még előnyösebben 50-700 mg hatóanyag/egységdózis formájában.
Ideális esetben a hatóanyagot úgy adagoljuk, hogy a hatóanyag csúcs-plazmakoncentrációja mintegy 1-75 pmol/l, előnyösen 2-50 pmol/l, még előnyösebben 3-30 pmol/l koncentrációt étjén el. Ez elérhető például a hatóanyagnak 0,1-5%-os oldatát, adott esetben sóoldatban készült oldatát intravénásán beinjektálva, vagy 1-100 mg/kg hatóanyagot tartalmazó nagy pirula beadásával. A kívánt vérszint fenntartható 0,01-5,0 mg hatóanyag/kg/óra folyamatos infúzió vagy 0,4-15 mg hatóanyag/kg szakaszos infúzió formájában való beadásával.
Bár a hatóanyag önmagában is beadható, előnyösen gyógyászati készítmény formájában adagoljuk. A találmány szerint előállított gyógyászati készítmények legalább egy, az előzőekben meghatározott hatóanyagot és legalább egy gyógyászati célra alkalmas hordozóés/vagy egyéb segédanyagot tartalmaznak. A készítmények lehetnek orális, rektális, nazális, helyi (ezen belül szájüregi és nyelv alatti), vaginális, parenterális (ezen belül szubkután, intramuszkuláris, intravénás és intradermális) adagolásúak. A készítményeket célszerűen egységdózis formájában állítjuk elő a gyógyszerkészítésben ismert bármely eljárással. Az ilyen eljárások olyan műveleteket foglalnak magukban, mint a hatóanyagnak a hordozóanyaggal, amely egy vagy több segédanyagból áll, való érintkezésbe hozása, általában a készítményeket úgy állítjuk elő, hogy a hatóanyagot a folyékony vagy finom eloszlású szilárd hordozóanyaggal vagy mindkettővel alaposan, egyenletes eloszlásúra elegyítjük, majd kívánt esetben a terméket formáljuk.
Az orális adagolásra szolgáló készítményeket elkülönült egységek formájában állítjuk elő, például kapszulák vagy tabletták alakjában, amelyek mindegyike előre meghatározott mennyiségű hatóanyagot tartalmaz, továbbá készíthetünk porokat vagy granulumokat, vizes vagy nemvizes oldószerben készült oldatokat vagy szuszpenziókat, „olaj a vízben” típusú vagy „víz az olajban” típusú folyékony emulziókat. A hatóanyagot formálhatjuk nagy pirulává, elektuáriummá vagy péppé.
A tabletták készíthetők préseléssel vagy öntéssel, adott esetben egy vagy több segédanyag felhasználásával. A préselt tablettákat a szabadon folyó, például por vagy granulum formájú hatóanyagnak adott esetben kötőanyaggal (például povidonnal, zselatinnal, hidroxipropil-metil-cellulózzal), csúszást elősegítő anyaggal, inért hígítóanyaggal, tartósítószerrel, szétesést elősegítő szerrel (például nátrium-keményítő-glikoláttal, keresztkötéses povidonnal, keresztkötéses nátrium-karboxi-metil-cellulózzal), felületaktív szerrel vagy diszpergálószerrel alkotott elegye formájában megfelelő berendezésen préseljük.
Az öntött tabletták előállíthatok a hatóanyag és egy inért folyékony hígítóanyag elegyének megfelelő berendezésben való öntésével. A tabletták adott esetben bevonattal ellátottak vagy rovátkoltak lehetnek, és formálhatók oly módon, hogy a hatóanyag lassú vagy szabályozott felszabadulását biztosítsák, például különböző arányban tartalmazhatnak hidroxi-propil-metil-cellulózt a kívánt felszabadulási profil biztosítására. A tabletták kívánt esetben bélben oldódó bevonattal is elláthatók, hogy a hatóanyag ne a gyomorban, hanem a bélrendszerben váljon szabaddá.
A szájban való helyi adagolásra szolgáló készítmények közé tartoznak a gyógycukorkák, amelyek a hatóanyagot ízesített alapanyagban, szokásosan szacharózban és akácmézgában vagy tragantgyantában tartalmazzák, a pasztillák, amelyek a hatóanyagot inért alapanyagban, például zselatinban és glicerinben vagy szacharózban és akácmézgában tartalmazzák, valamint a szájvizek, amelyek a hatóanyagot megfelelő folyékony hordozóanyagban tartalmazzák.
A rektális adagolásra szolgáló készítmények elkészíthetők megfelelő alapanyagú, például kakaóvajat vagy szalicilátot tartalmazó kúpok formájában.
A hüvelyi alkalmazásra szolgáló készítmények előállíthatok pesszáriumok, tamponok, krémek, gélek, pépek, habok vagy permetek formájában, amelyek a hatóanyagon kívül az ilyen típusú készítmények előállításánál szokásosan alkalmazott hordozóanyagokat tartalmazzák.
A parenterális adagolásra szolgáló készítmények közé tartoznak a vizes és nemvizes izotóniás steril injekciós oldatok, amelyek tartalmazhatnak még antioxidáns anyagot, pufferolóanyagot, bakteriosztatikumot és más oldott anyagokat, amelyek a készítményt a kezelendő lény vérével izotóniássá teszik; vizes és nemvizes steril szuszpenziók, amelyek tartalmazhatnak szuszpendálóés sűrítőszereket is. A készítmények előállíthatok egységdózis formájában vagy több dózist tartalmazó lezárt tartályban, például ampullák és fiolák formájában, továbbá tárolhatók fagyasztva szárított (liofilizált) állapotban, ebben az esetben közvetlenül felhasználás előtt steril folyékony hordozóanyagot kell adagolni, erre alkalmas például az injekciós minőségű víz. Közvetlenül a felhasználás előtt injekciós oldatok és szuszpenziók készíthetők steril porokból, granulumokból és tablettákból az előzőekben leírt módon.
Előnyösek azok az egységdózis-készítmények, amelyek hatóanyag-tartalma a napi dózisnak vagy aldózisnak - ahogy azt az előzőekben ismertettük - megfelelő vagy annak egy alkalmas töredéke.
A találmány szerint előállított készítmények az előzőekben említett összetevőkön kívül tartalmazhatnak más, szokásosan az ilyen készítményekben alkalmazott összetevőket is, például orális adagolásra szánt készítményekben ilyen további összetevők lehetnek az édesítőszerek, sűrítő- és ízesítőanyagok.
A következőkben ismertetjük az (I) általános képletű enantiomer vegyületek és származékaik találmány szerinti előállítását. Az ezek előállításához alkalmazott enantiomer kiindulási anyagok és prekurzoraik mindegyike lényegében a másik enantiomertől mentes enantiomer formájában van jelen [az enantiomertől mentes
HU 219 454 Β megjelölésen az előzőekben az (I) általános képletű vegyületekre leírt mértéket értjük].
A találmány szerint úgy járunk el, hogy
a) egy (II) általános képletű enantiomer vegyületet
- a képletben A jelentése (1S,4R)- vagy (lR,4S)-konfígurációjú 2-ciklopentén-l-metanol-4-il-csoport, Z jelentése kilépőcsoport, ciklopropil-aminnal vagy N-ciklopropil-N-metil-aminnal reagáltatunk; vagy
b) egy (IV) általános képletű enantiomer vegyületről - a képletben A jelentése a fent megadott, R jelentése ciklopropil-amino- vagy N-ciklopropil-N-metil-amino-csoport, R3 jelentése amino-védőcsoport - az R3 amino-védőcsoportot savas reagenssel végzett reagáltatással eltávolítjuk vagy
c) egy racém (I) általános képletű vegyület racém foszfát-észterét rezolváljuk, és kívánt esetben a következő átalakítási műveletek bármelyikét elvégezzük:
i) egy kapott (I) általános képletű vegyületet sóvá, foszfát-észterré vagy az előbbi észter sójává alakítunk, vagy ii) egy fenti só, észter vagy észter sója formájában kapott (I) általános képletű vegyületet az (I) általános képletű vegyületté vagy annak más fenti származékává alakítunk.
Az a) eljárást bármely ismert módon végrehajthatjuk, például egy olyan (II) általános képletű vegyületet, amelyben Z jelentése például halogénatom, így klóratom
- egy megfelelő aminnal, például ciklopropil-aminnal vagy N-ciklopropil-N-metil-aminnal reagáltatunk előnyösen az amin feleslegét alkalmazva, előnyösen visszafolyató hűtő alatt végzett forralás mellett vagy 50 °C-ot meghaladó hőmérsékleten, előnyösen szerves oldószer, például metanol vagy etanol jelenlétében, így az előzőekben megadott R aminocsoportot visszük be a vegyületbe.
A b) eljárás végrehajtható a (IV) általános képletű enantiomer vegyületnek savas reagenssel, például vizes hidrogén-kloriddal való reagáltatásával.
Az a) eljárásban kiindulási anyagként alkalmazott (II) általános képletű vegyületek előállítbatók például az 1. eljárásban alább leírtakkal analóg módon, azaz a megfelelő (V) általános képletű enantiomer vegyületnek - a képletben A, Z, R2 és R3 jelentése az előzőekben megadott - vagy reakcióképes származékának hangyasavval vagy reakcióképes származékával való reagáltatásával, majd az R3 amino-védőcsoport eltávolításával. A reagáltatást azon reagensek és reakciókörülmények alkalmazásával hajthatjuk végre, amelyeket az
1. eljárás kapcsán az alábbiakban ismertetünk.
Az 1. eljárásban egy (III) általános képletű vegyületet hangyasavval vagy reakcióképes származékával, például trietil-ortoformiáttal vagy dietoxi-metil-acetáttal reagáltatunk, adott esetben segédoldószer, például dimetil-acetamid vagy dimetil-formamid jelenlétében emelt hőmérsékleten, előnyösen 75-90 °C hőmérsékleten. Ezt a reakciót célszerűen egy erős vízmentes sav az ekvivalensnyi mennyiséget enyhén meghaladó mennyiségének adagolásával, például 1,1 ekvivalens etánszulfonsav/1 ekvivalens (III) általános képletű vegyület, hajtjuk végre, ebben az esetben alacsonyabb hőmérsékletet, például 25 °C hőmérsékletet alkalmazunk.
Az 1. eljárásban kiindulási anyagként alkalmazott (III) általános képletű vegyületek előállíthatok például a fenti (V) általános képletű enantiomer vegyületnek ciklopropil-aminnal vagy N-ciklopropil-N-metil-aminnal történő reagáltatásával. A reagáltatást az a) eljárásban leírtakkal analóg módon végezzük.
Az előzőekben ismertetett (IV) általános képletű vegyületek előállíthatok például egy (VI) általános képletű enantiomer vegyület - a képletben A, Z és R3 jelentése az előzőekben megadott - ciklopropil-aminnal vagy N-ciklopropil-N-metil-aminnal való reagáltatásával, azaz a reagáltatást az a) eljárásban leírtakkal analóg módon végezzük.
A (VI) általános képletű vegyületek előállítbatók például egy (V) általános képletű enantiomemek olyan reagenssel való reagáltatásával, amely a (VI) általános képletű vegyület kívánt imidazolgyűrűjét kialakítja, például hangyasavval vagy annak reakcióképes származékával való reagáltatással az 1. eljárásnál leírt módon.
A (II), (III), (IV), (V) és (VI) általános képletű enantiomer vegyületek újak, különösen jelentősek azok, amelyekben R2 jelentése formilcsoport és/vagy R3 jelentése 1-6 szénatomos alkanoilcsoport, különösen acetil- vagy izobutirilcsoport, és/vagy Z jelentése halogénatom, például klóratom.
Az (1 S,4R)-cisz-4-[(2-amino-6-ciklopropil-amino)9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1 -metanol előállításának, azaz az előzőekben 1. jelölésű előnyös vegyület előállításának különösen előnyös köztitermékei a következők:
a) (lR,4S)-cisz-N-[6-(ciklopropil-amino)-9-[4-(hidroxi-metil)-2-ciklopentén-1 -il)-9H-purin-2-il]-izobutiramid;
b) (lR,4S)-cisz-N-{4-klór-5-formamido-6-[/4(hidroxi-metil)-2-ciklopentén-1 -il/-amino]-2-pirimidinilj-izobutiramid;
c) (lR,4S)-cisz-N- {4-klór-5-formamido-6-[/4-(hidroxi-metil)-2-ciklopentén-1 -il/-amino]-2-pirimidinil}-acetamid;
d) (lS,4R)-cisz(2-amino-6-klór-9H-purin-9-il)-2-ciklopentén-1 -metanol;
e) (lR,4S)-cisz-N-[6-klór-9-/4-(hidroxi-metil)-2-ciklopentén-l-il/-9H-purin-2-il]-izobutiramid.
A kiindulási anyagként alkalmazott (V) általános képletű enantiomer vegyületek előállíthatók például egy (VII) általános képletű vegyületnek - a képletben Z, R2 és R3 jelentése az előzőekben megadott, R4 jelentése kilépőcsoport, például halogénatom, így klóratom - vagy reakcióképes származékának egy (VIIIA) vagy (VIIIB) általános képletű enantiomer vegyülettel való reagáltatásával.
Az utolsóként említett reakciót előnyösen bázis, például tercier amin, így trietil-amin vagy trimetil-amin jelenlétében, előnyösen szerves oldószerben, például dimetoxi-etánban vagy etanolban hajtjuk végre.
A megfelelő enantiomerkonfigurációjú (VIIIA) vagy (VIIIB) általános képletű vegyületet a megfelelő racém vegyület, például (±)-4-amino-2-ciklopentén-lmetanolnak optikailag aktív karbonsavval, például dibenzoil-D-borkősavval való komplexszé alakításával,
HU 219 454 Β majd a kapott diasztereomer sók frakcionált kristályosításával állítjuk elő. Más eljárás szerint alkalmazhatunk enzimes rezolválást, például a J. Med. Chem. 30, 746 (1987) és a J. Med. Chem. 28, 1385 (1985) szakirodalmi helyeken leírt módon.
Ugyancsak újak a (VIIIA) és (VIIIB) általános képletű enantiomer vegyületek és származékaik, különösen jelentősek optikailag aktív karbonsavakkal, például dibenzoil-D-borkősavval alkotott sóik és előállításuk, például az (lS,4R)-4-amino-2-ciklopentén-l-metanol és dibenzoil-D-tartarátjának előállítása.
A kiindulási anyagként alkalmazott (VII) általános képletű vegyületek ismert módon állíthatók elő, például egy (IX) általános képletű vegyület - a képletben Z, R3 és R4 jelentése az előzőekben megadott - redukálásával, amelynek során a nitrocsoport aminocsoporttá alakul, és adott esetben a kapott aminocsoportnak formamidocsoporttá való alakításával, amelyet például hangyasav/ecetsavanhidrid reagens alkalmazásával végzünk.
A (IX) általános képletű vegyületek ismert módon állíthatók elő. Azok a vegyületek, amelyekben Z jelentése halogénatom, például klóratom, halogénezéssel állíthatók elő, például egy (X) általános képletű vegyület - a képletben R3 és R4 jelentése az előzőekben megadott - foszfor-oxi-kloriddal való reagáltatásával nyerhetők.
A (X) általános képletű vegyületek ugyancsak ismert módon állíthatók elő, például egy (XI) általános képletű vegyületnek - a képletben R4 jelentése az előzőekben megadott - az amino-védőcsoport bevitelére alkalmas reagenssel való reagáltatásával, például egy megfelelő karbonsavval vagy annak funkciós származékával, például izovajsavanhidriddel való reagáltatással. A (XI) általános képletű vegyületek a megfelelő (XII) általános képletű vegyület - a képletben R4 jelentése az előzőekben megadott - nitrálásával állíthatók elő.
A találmány szerinti eljárás köztitermékei közül a (VII), (IX), (X) és (XI) általános képletű vegyületek újak, különösen kiemeljük azokat, amelyekben Z jelentése halogénatom, például klóratom és/vagy R3 jelentése 1-6 szénatomos alkanoilcsoport, különösen acetilvagy izobutirilcsoport, és/vagy R4 jelentése halogénatom, például klóratom.
A (VII), (IX) és (X) általános képletű vegyületek közül különösen előnyösek a következők:
N-(4,6-diklór-5-formamido-2-pirimidinil)-izobutiramid;
N-(4,6-diklór-5-nitro-2-pirimidinil)-izobutiramid; és
N-(4-klór-l,6-dihidro-5-nitro-6-oxo-2-pirimidinil)izobutiramid.
Az (I) általános képletű vegyületek megfelelő észterezőszerrel, például egy sav-halogeniddel vagy savanhidriddel reagáltatva észterré alakíthatók. Az (I) általános képletű vegyületek - beleértve az előzőkben megnevezett észtereiket is - szokásos módon, például a megfelelő savval reagáltatva - sóvá alakíthatók. Az (I) általános képletű vegyület fenti észtere vagy sója az alapvegyületté alakítható például hidrolízissel.
így például egy (I) általános képletű vegyület Omonofoszfátja előállítható az alapvegyületből megfelelő foszforilezőszerrel, például foszfor-oxi-kloriddal való reagáltatás révén, amint az az M. Yoshikawa, T. Kató és T. Takewishi, Bulletin Chem. Soc. Japan, 42, 3505 (1969) szakirodalmi helyen szerepel. A megfelelő O-di- és O-trifoszfátok a „Nucleotide Analogs”,
K. H. Sheit, John Wiley and Sons, New York 1980, 211-215. és a D. E. Hoard és D. G. Ott, J. Amer. Chem. Soc. 87, 1785 (1965) szakirodalmi helyeken leírt módon állíthatók elő, például a megfelelő 0-monofoszfát imidazolátszármazékának előállításával, és ezt követően ennek a származéknak foszfáttal való reagáltatásával az O-difoszfát előállítására vagy pirofoszfáttal való reagáltatásával az O-trifoszfát előállítására. Az előzőekben ismertetett észterezett foszfátszármazékok előállítására az (I) általános képletű alapvegyület reagáltatható a megfelelő dialkanoil-foszfatidil-kolinszármazékkal megfelelő foszfolipáz, például foszfolipáz D jelenlétében, az S. Shuto és munkatársai által a Nucleic Acid Research, 20, 35 (1988) szakirodalmi helyen leírt módon, vagy egy (I) általános képletű vegyületnek a megfelelő foszforilezőszerrel, például foszforoxi-kloriddal való reagáltatásával, majd a megfelelő alkohollal való feldolgozással, amint az az A. Rosowsky & S. Kim, Nucleic Acid Chemistry, Part 3, kiadók:
L. B. Townsend & R. S. Tipsoin; John Wiley & Sons, New York, 1986, 255. szakirodalmi helyen szerepel.
Az (I) általános képletű enantiomerek szokásos módon rezolválhatók vagy izolálhatok, például a ciklopentenilegység hidroxilcsoportjának megfelelő optikailag aktív karbonsavszármazékkal, például naproxennel való acilezésével előállított diasztereomer észterek kromatográfiás elválasztásával [J. Org. Chem., 51, 1287 (1986)].
A következőkben a találmányt nem korlátozó példákban mutatjuk be. A példákban az optikai forgatóképességet a nátrium D vonalára (589 nm) vonatkoztatva 20 °C hőmérsékleten adjuk meg. Az A)-G) példákban szereplő „hatóanyag” megjelölésen a találmány szerinti, illetve találmány szerint előállított vegyületeket, különösen az 1. vegyületet értjük.
1. példa (±)-cisz-4-[(2-Amino-4-klór-6-pirimidinil)-amino]2-ciklopentén-l-metanol előállítása
14,88 g, 0,073 mól, a 4 268 672 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalomban leírt módon előállított cisz-4-acetamido-ciklopent-2-én-metil-acetát, 46,19 g, 0,146 mól bárium-hidroxid-oktahidrát és 300 ml víz elegyét nitrogéngáz-atmoszférában 18 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. A kapott oldatot szén-dioxiddal semlegesítjük. A csapadékot vízzel, majd etanollal mossuk. A szűrletet a mosóoldattal egyesítjük, és sziruppá pároljuk be, a kapott 11,16 g szirupot 23,91 g, 0,146 mól 2-amino-4,6-diklór-pirimidinnel és 30,5 ml, 0,219 mól trietil-aminnal 100 ml forrásban lévő 1-butanollal 1,5 órán át kondenzáljuk. Az elegyhez 73 ml 1 n nátrium-hidroxidot adunk, majd szárazra pároljuk, és a visszamaradó szilárd anyagot 200 ml kloroformban vesszük fel. A reagálatlan 2-amino-4,6-diklór-pirimidint kiszűrjük és 100 ml kloroformmal mos6
HU 219 454 Β suk. A kloroformos szűrlet-mosófolyadék elegyet bepároljuk, és a visszamaradó anyagot szilikagéloszlopon kromatografáljuk. További pirimidin kiindulási anyagot eluálunk 2,5%-os metanol-kloroform eleggyel. A cím szerinti vegyületet 3,5%-os metanol-kloroform eleggyel eluáljuk piszkosfehér, szilárd hab formájában. A 91%-os hozammal 15,90 g terméket nyerünk. Ή-NMR (Me^O-dJ: δ 1,15-1,28 és 2,26-2,41 (2m, 2, CH2); 2,60-2,71 (m, 1, l’-H); 3,4 (m, átlapoló H2O, C772OH); 4,625 (t, J=5,3, 1, CH2OH); 4,95 (széles s, 1, CH-N); 5,67-5,87 (m, 2, CH=CH); 6,38 (széles s, 1, NH2); 7,12 (széles s, 1, NH);
MS (Cl) M+l, 241,243.
Elemzési eredmények a C10H13N4OC10,2 H2O képlet alapján:
számított: C%=48,99, H%=5,55, N%=22,85,
Cl%=14,46;
talált: C%=49,10 H%=5,57, N%=22,81,
Cl%=14,40.
2. példa (±)-cisz-4- {[2-Amino-6-klór-5-/(4-klór-fenil)-azo/4-pirimidinil]-amino}-2-ciklopentén-l-metanol előállítása
11,58 g, 48,1 mmol, az 1. példa szerint előállított (± )-cisz-4- [(2-amino-4-klór-6-pirimidinil)-amino]-2ciklopentén-1-metanolt és 97 g nátrium-acetát-trihidrátot 225 ml jégecetben és 225 ml vízben oldunk. 6,74 g,
52,8 mól 4-klór-anilinből, 14,7 ml tömény hidrogénkloridból, 52 ml vízből és 4,01 g, 58,2 mmol nátriumnitritből előállított 4-klór-benzol-diazónium-kloridból 47 ml vízben hideg, 0-5 °C hőmérsékletű oldatot készítünk. Ezt a hideg oldatot 5 perc alatt hozzáadjuk az elsőként elkészített oldathoz. A kapott sárga csapadékot 18 óra állás után kiszűijük, vízzel mossuk, majd etanollal extraháljuk. így 69%-os hozammal 12,56 g cím szerinti vegyületet nyerünk sötétsárga por formájában. A kapott tennék olvadáspontja 218-220 °C (bomlik). •H-NMR (Me2SO-dJ: δ 10,25 (d, 1, NH); 7,69 és 7,54 (mindkettő d, J=8,9, C6H4) átlapoló 7,6 (széles, 6, NH2); 5,80-5,95 (m, 2, CH=CH); 5,24 (m, 1, CHN); 4,75 (t, 1, CH2O77); 3,41 (t, 2, Ctf2OH); 2,75 (m, 1, CH); 2,41 (m, 1, CH); 1,44-1,53 (m, 1, CH).
Elemzési eredmények a C16H16N6C12O képlet alapján: számított: C%=50,67, H%=4,25, N%=22,16,
Cl%=18,70;
talált: C%=50,59, H%=4,29, N%=22,10,
Cl%=18,66.
3. példa (±)-cisz-4-[(2,5-Diamino-4-klór-6-pirimidinil)amino]-2-ciklopentén-l-metanol előállítása A 2. példa cím szerinti vegyületéből 11,67 g-ot
235 ml etanollal, 30 ml jégecettel és 235 ml vízzel szuszpendálunk. Az elegyet visszafolyató hűtő alatt, nitrogéngáz-atmoszférában forraljuk. Kis részletekben 30 perc alatt 13,5 g cinkport adunk hozzá, ez idő alatt a vegyület feloldódik. A reakcióelegyet további 20 percig melegítjük, majd a forró oldatból a feleslegben lévő cinket kiszűijük, és etanollal mossuk. A szűrleteket bepároljuk, a visszamaradó anyagot szilikagéloszlopon kromatografáljuk, eluensként 1 1 kloroformot és 1,8 1 4:1 arányú kloroform:metanol elegyet alkalmazunk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. így 100%-ot meghaladó hozammal 11,2 g cím szerinti vegyületet nyerünk vörösesnarancs olaj formájában. Másik, kis mennyiségű anyag felhasználásával végzett reakcióban tiszta terméket nyerünk halványsárga, szilárd anyag formájában, a hozam 76%.
•H-NMR (Me2SO-d6): δ 1,29 és 2,39 (m, 2, CH2); 2,69 (t, 1, l’-H); 3,37 (d, 2, CH2OH); 3,91 (széles, 2, NH2); 4,60 (széles, 1, CH2OH); 5,02 (m, 1, CHNH); 5,56 (széles s, 2, NH2); 5,74 (m, 1, =CH); 5,86 (m, 1, =CH); 6,36 (d, 1, CHNH).
4. példa (±)-cisz-4-(2-Amino-6-klór-9H-purin-9-il)-2-ciklopentén-1 -metanol előállítása A 3. példa cím szerinti vegyületéből 9,7 g-ot 100 g dietoxi-metil-acetátban feloldunk, és az oldatot visszafolyató hűtő alatt 2 napig forraljuk. Ezután az oldószert nagyvákuumban 50 °C hőmérsékleten eltávolítjuk, és a visszamaradó anyaghoz 40 ml dioxánt és 60 ml 0,5 n hidrogén-kloridot adunk. Az elegyet szobahőmérsékleten 1,25 órán át kevetjük, majd lehűtjük. A reakcióelegyet ezután hideg 5 n nátrium-hidroxiddal pH=7-re semlegesítjük, majd kloroform és metanol 3:1 arányú elegyével néhányszor extraháljuk. A szerves fázisokat egyesítjük, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, majd bepároljuk. A visszamaradó anyagot szilikagéloszlopon kromatografáljuk, eluensként 2%-os metanolkloroform elegyet alkalmazunk. így 46%-os hozammal
3,7 g cím szerinti vegyületet nyerünk. A kapott termék olvadáspontja 138 -139 °C.
•H-NMR (Me2SO-d6): δ 1,63 és 2,61 (m, 2, CH2); 2,87 (m, 1, l’-H); 3,44 (d, 2, CH2OH); 5,44 (m, 1, CH-N); 5,89 (m, 1, =CH); 6,14 (m, 1, =CH); 6,82 (széles s, 2, NH2); 8,02 (s, 1, 8-H); [(CH2OH) nem látható a H20 csúcs alatt], UV: pH 1 Xmax 315 ζ7370); 218 (26 200); yváll 239,5 (5650). pH 7,4 Xmax 307 (ζ8000); 245,5 (4600); 223 (26 400).
MS (El) 265 267 (m) (Cl) 266 268 (m+l).
Elemzési eredmények a CnH12N5ClO-2 H2O képlet alapján:
számított: C%=43,79, H%=5,35, N%=23,21,
Cl%= 11,75;
talált: C%=43,67, H%=5,29, N%=23,05,
Cl%=ll,70.
5. példa (±)-cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-9Hpurin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol előállítása A 4. példa cím szerinti vegyületéből 0,50 g-ot 40 ml etanolban feloldunk, és 0,65 ml, 5 ekvivalens ciklopropil-amint adunk az oldathoz. Az elegyet visszafolyató hűtő alatt, nitrogéngáz-atmoszférában 6 órán át forraljuk. Ezután további 0,65 ml ciklopropil-amint adunk hozzá, és további 5,5 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Az elegyről az oldószert lepároljuk, a visszama7
HU 219 454 Β radó anyaghoz 25 ml kloroformot és 5 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot adunk. A vizes fázist kloroformmal néhányszor extraháljuk, majd a kapott nyersterméket szilikagéloszlopon kromatografáljuk. Eluensként 3%-os metanol-etil-acetát elegyet alkalmazunk, így 80%-os hozammal 0,43 g (±)-cisz-4-[2amino-6-(ciklopropil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1-metanolt nyerünk. Ezt a terméket acetonitrilből átkristályosítva 0,30 g fehér port kapunk. A kapott termék 93-130 °C között összeesik, 165 °C hőmérsékleten olvad.
•H-NMR (Me2SO-d6): δ 0,56 és 0,63 (2m, 4, 2-ciklopropil CH2); 1,56 és 2,60 (2m, 2, ciklopentenil-CH2); 2,85 (m, 1, l’-H); 3,02 (m, 1, ciklopropil CH-NH); 3,43 (m, 2, CH2OH); 4,71 (t, 1, CH2OH); 5,40 (m, 1, 4’-H); 5,77 (s, 2, NH2), átlapoló 5,84 (m, 1, =CH2); 6,09 (m, 1 ,=CH); 7,23 (d, 1, NH-CH); 7,58 (s, 1, pulin 8-H); MS (Cl) 287 (m+l). UV: pH 1: Xmax 296 (ζ14000), 255 (10 700); pH 7,0: Xmax 284 (15 900); 259 (9200); pH 13 Xmax 284 (15 800), 259 (9100). Elemzési eredmények a C14H18N6O0,25 H2O képlet alapján:
számított: C%=57,82, H%=6,41, N%=28,90;
talált: C%=57,84, H%=6,45, N%=28,86.
6. példa (±)-cisz-4-[2-Amino-6-(N-ciklopropil-N-metilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol előállítása
0,53 g, 2 mmol, a 4. példa szerint előállított (±)cisz-4-(2-amino-6-klór-9H-purin-9-il)-2-ciklopentén1-metanolt, 0,8477 g, 12 mmol N-metil-N-ciklopropilamint (Kari Industries, Aurora, OH) és 20 ml metanolt Parr bombába helyezünk és 5 órán át 62 °C hőmérsékleten tartunk. Ezután az oldatot bepároljuk, majd etanollal meghígítjuk, ezután 1,0 n nátrium-hidroxid adagolásával pH=12-re állítjuk be. Ezt az oldatot bepároljuk, és a visszamaradó anyagot szilikagéloszlopon kromatografáljuk, eluensként 3%-os metanol-kloroform elegyet alkalmazunk. 91,2%-os hozammal 0,547 g cím szerinti terméket nyerünk. A termék egy mintáját vizes etanolból átkristályosítva fehér port nyerünk, amelynek olvadáspontja 130-131 °C.
•H-NMR (Me2SO-d6): δ 7,61 (s, IH, purin H-8), 6,10 (m, IH, CH=), 5,84 (m, IH, CH=), 5,7 (széles s, 2H, NH2); 5,40 (m, IH, CHN), 4,70 (széles t, IH, OH), 3,43 (m, 2H, CH2OH), 3,24 (széles s, 4H, CH3, NCH ciklopropil), 2,85 (m, IH, CH), 2,66-2,57 és 1,61-1,51 (m, 2, ciklopentenil CH2), 0,90-0,65 (m, 4H, 2CH2 a ciklopropilból).
Elemzési eredmények a C15H20N6O 0,5 H2O képlet alapján:
számított: C%=58,24, H%=6,84, N%=27,16; talált: C%=58,15, H%=6,86, N%=27,14.
7. példa (-)-cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-9Hpurin-9-il]-2-ciklopentén-1-metanol előállítása Az 5. példa cím szerinti vegyületéból 0,600 g,
2,00 mmol mennyiséget 12 ml 1,3-dimetil-3,4,5,6tetrahidro-2-(lH)-pirimidinonban (Aldrich) feloldunk. A -10 °C hőmérsékletre hűtött oldathoz keverés közben 0,76 ml, 8,0 mmol foszforil-kloridot adunk. Az elegyhez 3 perc múlva 100 ml hideg vizet adunk, és a kapott oldatot 3 mol/l-es ammónium-hidroxiddal semlegesítjük. A semlegesített oldatot vízzel 1 1-re hígítjuk, és 2,5x20 cm-es DEAE Sephadex A25 (Pharmacia) oszlopra visszük, amely oszlopot előzetesen 50 mmol/l-es ammónium-hidrogén-karbonát-oldattal egyensúlyba hoztunk. Az oszlopot először 4 1 50 mmol/l-es ammónium-hidrogén-karbonáttal mossuk. Ezután a (±)-cisz-4-[2-amino-6-(ciklopropil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol-O-monofoszfátot eluáljuk ammónium-hidrogén-karbonát 50 és 300 mmol/1 között növekvő koncentrációjú gradiensével, az eluens össztérfogata 2 1. A nukleotidot, azaz a fenti O-monofoszfátot tartalmazó frakciókat az ammónium-hidrogén-karbonát eltávolítására bepároljuk. Fehér port nyerünk. A hozam UV-elnyelés szerint 71%-os, a termék nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálattal (HPLC) egy csúcsot ad (lásd az alábbiakban). 1,4 mmol nukleotidot 20 ml vízben feloldunk, és 1000 N. E. Crotalus atrox (Sigma) eredetű kígyóméreg 5’-nukleotidázt (EC 3.1.3.5) adunk hozzá. Az oldatot 37 °C hőmérsékleten 22 órán át inkubáljuk, majd további 1000 N. E. enzimet adunk hozzá. Az inkubálást további 3 napon át folytatjuk. HPLC-elemzést végzünk 0,4x10 cm-es Whatman Partisii 10 erős anioncserélő oszlopon, eluensként ammónium-foszfát 20 mmol/1 és 1 mol/1 között növekvő gradiensű, pH=5,5, 5% metanolt tartalmazó oldatát használjuk, UV-detektálást végzünk 284 nm-nél. A vizsgálat szerint a kiindulási nukleotldnak 50%-a defoszforileződött az alapnukleoziddá. Az elegyet ismét az előzőekben ismertetett típusú DEAE Sephadex oszlopra visszük. Eluensként 4 1 50 mmol/l-es ammónium-hidrogén-karbonát-oldatot alkalmazunk, így cím szerinti vegyületet tartalmazó frakciókat nyerünk. Az eluátumból a megmaradt vizet lepárolva fehér port kapunk. Ezt az anyagot szilikagélen kromatográfiás eljárással tovább tisztítjuk, eluensként metanol és kloroform 1:9 arányú elegyét alkalmazzuk, így színtelen, üvegszerű anyagot kapunk. Ezt az anyagot acetonitrilben megszilárdítva (-)-cisz-4-[2-amino6-(ciklopropil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1 metanolt nyerünk fehér, gumiszerű szilárd anyag formájában, amelyet 68 °C hőmérsékleten 66,6 Pa nyomáson szilárd habbá szárítunk. így a racemátból számított 86%-os hozammal 260 mg terméket nyerünk; a termék •H-NMR (DMSO-dg)- és tömegspektrumadatai azonosak a racemátéval (az 5. példa cím szerinti vegyülete); [a]j? -59,7°, [α]2θ6 -127,8°, [α]& -218,1°, (c=0,15, metanol).
Elemzési eredmények a C14HlgN6O0,8 H2O képlet alapján:
számított: C%=55,91, H%=6,57, N%=27,94; talált: C%=56,05, H%=6,65, N%=27,88.
Az előzőekben említett Sephadex oszlop eluálását 50 és 300 mmol/1 közötti ammónium-hidrogén-karbonát-koncentrációgradiensű oldat 2 1-ével folytatva az O-monofoszfátot nyeljük [a cím szerinti vegyület (+)8
HU 219 454 Β enantiomerjének megfelelőt], amely 5’-nukleotidázzal szemben stabil; ennek a monofoszfátnak az előállítását a 9. példában ismertetjük részletesebben.
8. példa (-)-cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-9Hpurin-9-il]-2-cikiopentén-l-metanol-O-monofoszfát előállítása
A 7. példa cím szerinti vegyületéből 0,35 g,
1,2 mmol mennyiséget 5 ml l,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2-(lH)-pirimidinonban (Aldrich) feloldunk. Az oldatot -10 °C hőmérsékletre hűtjük, és keverés közben 0,43 ml, 4,6 mmol foszforil-kloridot (Aldrich) adunk hozzá. 3 perc elteltével az elegyhez 20 ml hideg vizet adunk, majd 3 mol/l-es ammónium-hidroxiddal semlegesítjük.
A 7. példában leírt módon ioncserélő kromatográfiás eljárást végzünk, így a víz lepárlása után a nukleotid diammónium-sóját nyerjük fehér por formájában (az UV-elemzéssel meghatározott hozam 95%). A 7. példában leírt módon elvégzett HPLC-elemzés egy csúcs jelenlétét mutatja; UV Xmax nM (0,1 mol/1 HCl): 254, 297; (pH 7 foszfátpuffer): 259, 284; (0,1 mol/1 NaOH): 259, 284. A bázis/foszfát arány 1,0/1,3 B. Ames eljárásával meghatározva [Methods in Enzymology 8, 115 (1966)]. [a]$ -69,9°, [a]2078 -73,0°, [a]2046 -84,0° (c=0,52, MeOH: H2O/4:1).
9. példa (+)-cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-9Hpurin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol-O-monofoszfát előállítása
A 7. példában leírt DEAE Sephadex oszlopot 5’-nukleotidázzal történő inkubálás után 2 1 50 és 300 mmol/1 közötti koncentrációgradiensű ammóniumhidrogén-karbonáttal eluálva nukleotidtartalmú frakciókat nyerünk, amelyekből a vizet lepároljuk. így az 5. példa cím szerinti vegyületére vonatkoztatva 56%-os hozammal nyerjük a cím szerinti diammóniumsót fehér por formájában. A 7. példában ismertetett HPLC-elemzéssel egyetlen csúcsot nyerünk. UV Xmax nM (0,1 mol/1 HCl): 254, 297; (pH 7 foszfátpuffer): 259, 284; (0,1 mol/1 NaOH): 259, 284. A bázis/foszfát arány 1,0/0,98. [a]2De +62,0°, [a]25% + 65,2°, [α]2θ6+75,0°, (c=0,54, MeOH: H2O/4:1).
10. példa (+)-cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-9Hpurin-9-il]-2-ciklopentén-1 -metanol előállítása A 9. példa cím szerinti vegyületéből 0,67 mmol-t ml vízben oldunk, és 3000 Ν. E. botjúbélből származó lúgos foszfatázt (EC 3.1.3.1, Boehringer Mannheim) adunk hozzá. Az oldatot 37 °C hőmérsékleten 19 órán át inkubáljuk, majd elvégezzük a 7. példában leírt HPLC-elemzést, amely azt mutatja, hogy a nukleotid teljes egészében defoszforileződött. Az oldatot szárazra pároljuk, a visszamaradó szilárd anyagot 100 ml etanollal visszafolyató hűtő alatt forralva extraháljuk. Az etanolban oldható anyagokat szilikagélen adszorbeáljuk, és szilikagéloszlopra visszük. A cím szerinti vegyületet metanol és kloroform 1:9 arányú elegyével eluáljuk. Egy acetonitriles-etanolos oldat bepárlásával 79%-os hozammal 164 mg fehér, szilárd habot nyerünk. A termék Ή-NMR (DMSO-d6)- és tömegspektrumadatai azonosak a racemátéval (az 5. példa cím szerinti vegyülte). [a]$ +58,7°, [a]2»6 +126,2°, [a]2»s +217,5°, (c=0,10, metanol).
Elemzési eredmények a C14HlgN60 0,60 H2O 0,15 EtOH képlet alapján:
számított: C%=56,49, H%=6,66, N%=27,64;
talált: C%=56,60, H%=6,63, N%=27,55.
11. példa (-)-cisz-4-[2-Amino-6-(N-ciklopropil-N-metilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol előállítása
A 6. példa cím szerinti vegyületéből 2,00 g, 6,50 mmol mennyiséget 20 ml l,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(lH)-pirimidinonban (Aldrich) oldunk. Az oldatot -10 °C hőmérsékletre hűtjük, és keverés közben 2,28 ml, 24,0 mmol foszforil-kloridot adunk hozzá. 3 perc múlva az oldathoz 80 ml hideg vizet adunk, majd 3x80 ml kloroformmal extraháljuk. A vizes fázist 400 ml etanollal meghígítjuk, és pH-ját telített vizes nátrium-hidroxiddal 6-ra állítjuk. A kicsapódott szervetlen sókat kiszűijük. A szűrletet etanollal tovább hígítjuk 1 liter térfogatra, majd pH-ját további nátriumhidroxid adagolásával 8-ra állítjuk. A kapott csapadékot kiszűrjük és szárítjuk, így 62%-os hozammal 4,0 mmol (±)-cisz-4-[2-amino-6-(ciklopropil-metilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1 -metanol-O-monofoszfátot nyerünk fehér por formájában (a mennyiségi meghatározást az UV-elnyelés alapján végezzük); a 7. példában leírt módon végzett HPLC-elemzés szerint egy csúcs jelentkezik. Ezt a racém O-monofoszfátot 200 ml vízben oldjuk, és az oldathoz 5000 Ν. E. Crotalus atrox eredetű kígyóméreg 5’-nukleotidázt (EC 3.1.3.5, Sigma) adunk. Az elegyet 37 °C hőmérsékleten 10 napon át inkubáljuk, majd a 7. példában leírt módon HPLC-elemzéssel vizsgáljuk. A vizsgálat szerint a kiindulási nukleotid 50%-a defoszforileződött nukleoziddá. A kiindulási anyagot és a terméket 5x14 cm-es, előzetesen 50 mmol/l-es ammónium-hidrogén-karbonáttal egyensúlyba hozott DEAE Sephadex A25 (Pharmacia) oszlopon elválasztjuk. A cím szerinti vegyületet 2 liter 50 mmol/l-es ammónium-hidrogén-karbonátoldattal eluáljuk. Az eluátumról a vizet lepároljuk, a kapott fehér port metanolban oldjuk, szilikagélen adszorbeáljuk, és szilikagéloszlopra visszük. A cím szerinti vegyületet metanol és kloroform 1:9 arányú elegyével eluáljuk, és színtelen üveg formájában nyeljük. A termék acetonitriles oldatát bepárolva fehér, szilárd habot nyerünk, amelyet foszfor-pentoxidon 40 Pa nyomáson szárítunk. így a racemátra vonatkoztatott 72%-os hozammal 649 mg terméket nyerünk. A termék Ή-NMR (DMSO-d6)- és tömegspektrumadatai azonosak a racemátéval (a 6. példa cím szerinti vegyülete). [a]|? -48,0°, [a]2«6 -97,1°, [α]2θ65 -149°. (c=0,14, metanol).
HU 219 454 Β
Elemzési eredmények a Ci5H20N6O0,10 CH3CN képlet alapján:
számított: C%=59,96, H%=6,72, N%=28,06; talált: C%=59,93, H%=6,76, N%=28,03.
A Sephadex oszlopot 2 liter 100 mmol/l-es ammónium-hidrogén-karbonáttal, majd 2 liter 200 mmol/l-es ammónium-hidrogén-karbonáttal tovább eluálva nyerjük a cím szerinti vegyületnek megfelelő (+)-enantiomer O-monofoszfátját, amely 5’-nukleotidázzal szemben stabil.
12. példa (+)-cisz-4-[2-Amino-6-(N-ciklopropil-N-metilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol előállítása
All. példában leírt Sephadex oszlopról eluált (+)enantiomer-O-monofoszfátot tartalmazó frakciókat egyesítjük, és az oldathoz 4800 N. E., botjúbél eredetű lúgos foszfatázt (EC 3.1,3.1, Boehringer Mannheim) adunk. Az oldatot 25 °C hőmérsékleten 18 órán át inkubáljuk, majd HPLC-elemzést végzünk, amely szerint a nukleotid teljes mennyisége defoszforileződött. Az oldatot szárazra pároljuk, a visszamaradó szilárd anyagot 100 ml etanollal visszafolyató hűtő alatt forralva extraháljuk. Az etanolban oldható anyagokat szilikagélen adszorbeáljuk, majd szilikagéloszlopra visszük. A cím szerinti vegyületet az oszlopról metanol és kloroform 1:9 arányú elegyével eluáljuk, színtelen, üvegszerú anyagot nyerünk. Az anyag acetonitriles oldatát bepárolva fehér, szilárd habot nyerünk, amelyet foszfor-pentoxidon 40 Pa nyomáson szárítunk. így a racemátra számított 73%-os hozammal 659 mg terméket nyerünk. A termék *H-NMR (DMSO-d6)- és tömegspektrumadatai azonosak a racemátéval (a 6. példa cím szerinti vegyülete). [a]2D° +47,0°, [a]^6 +93,0°, [a]^5 + 141,3°, (c=0,ll, metanol).
Elemzési eredmények a Ci5H20N6O 0,1 CH3CN képlet alapján:
számított: C%=59,95, H%=6,72, N%=28,06;
talált: C%=59,92, H%=6,80, N%=27,96.
13. példa (lS,4R)-4-Amino-2-ciklopentén-l-metanoldibenzoil-D-tartarát előállítása
14,88 g, 0,073 mól, a 4 268 672 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom szerint előállított (±)-cisz-4-acetamido-ciklopent-2-én-metil-acetát, 46,19 g, 0,146 mól bárium-hidroxid-oktahidrát és 300 ml víz elegyét nitrogéngáz-atmoszférában visszafolyató hűtő alatt 18 órán át forraljuk. A kapott oldatot szén-dioxiddal semlegesítjük. A csapadékot vízzel, majd etanollal mossuk. Az egyesített mosófolyadékszúrleteket sziruppá pároljuk be [(±)-4-amino-2-ciklopentén-1-metanol ecetsavas só], majd a kapott anyagot feleslegben lévő Amberlite IRA-400 (OH ) gyantával vízben keverve szabad aminná alakítjuk. A gyantát kiszűrjük, vízzel mossuk, a mosófolyadék szúrleteit bepárolva halványsárga szirupot nyerünk, amelyet részletekben hozzáadott etanol lepárlásával szárítunk. 2,26 g, 20,0 mmol ilyen aminmintát és 3,62 g,
10,0 mmol 99%-os dibenzoil-D-borkősavat (Aldrich) 35 ml meleg abszolút etanolban oldunk. Az oldathoz mintegy 150 ml forrásban lévő acetonitrilt adunk a zavarosodási pontig, majd az oldatot hagyjuk lassan szobahőmérsékletre hűlni. A képződő fehér tűket azonos oldószer-kombinációból háromszor átkristályosítjuk, így 37%-os hozammal 1,07 g cím szerinti vegyületet nyerünk fehér lemezek formájában. A termék olvadáspontja 160-162 °C, [a]2D° +66,9°, [a]2% +165°. [α]3θ3 +325°, (c=0,28, metanol). A kapott só röntgensugár- krisztallográfíás vizsgálatával lehetővé vált a kation abszolút konfigurációjának a D-dibenzoil-borkősav-dianion konfigurációjának ismeretében való rögzítése. Ez a só a C2 téralakzatban kristályosodik egy C6H12NO-kationnal, és 1/2 C18H14O8-dianionnal aszimmetriás egységként.
Elemzési eredmények a C6HnNO · 1/2 (C18H14O8) képlet alapján:
számított: C%=61,63, H%=6,21, N%=4,79;
talált: C%=61,56, H%=6,24, N%=4,74.
14. példa (lR,4S)-4-Amino-2-ciklopentén-l-metanoldibenzoil-L-tartarát előállítása A cím szerinti sót a 13. példában leírt módon állítjuk elő és kristályosítjuk, azzal az eltéréssel, hogy dibenzoil-L-borkősavat alkalmazunk. Etanol és acetonitril elegyéből végzett háromszori átkristályosítás után 34%-os hozammal 1,00 g cím szerinti vegyületet nyerünk fehér lemezek formájában. Olvadáspont: 160-162 °C; [a]2D« -682°, [α]2θ6 -169°, [α]2°5 -333°, (c=0,24, metanol).
Elemzési eredmények a C6HnNO · 1/2 (C18H14O8) képlet alapján:
számított: C%=61,63, H%=6,21, N%=4,79;
talált: C%=61,59, H%=6,21, N%=4,76.
15. példa (±)-cisz-N-[4-Klór-5-formamido-6-[[4-(hidroximetil)-2-ciklopentén-l-il]-amino]-2-pirimidinil] acetamid előállítása
N-(5-Amino-4,6-diklór-pirimidin-2-il)-acetamidot [J. Org. Chem. 40, 3141 (1975)] formilezünk oly módon, hogy 0,75 g, 3,4 mmol fenti vegyület 20 ml ecetsavanhidridben készült oldatához 20 ml 96%-os hangyasavat adunk. A kapott oldatot 25 °C hőmérsékleten 1 órán át keverjük, majd bepároljuk. így 91%-os hozammal 0,77 g N-(4,6-diklór-5-formamido-2-pirimidinil)acetamidot nyerünk cserszínű por formájában. Az anyag szerkezetét •H-NMR- és tömegspektrumadatai alapján erősítjük meg. 840 mg, 3,37 mmol kapott cserszínű port, 940 mg, 8,2 mmol (±)-cisz-4-amino-2ciklopentén-1-metanolt és 0,80 g, 8,0 mmol trietilamint 50 ml etanolban olajfürdőn, nitrogéngáz-atmoszférában 70-80 °C hőmérsékleten tartunk 50 percen át, majd bepároljuk. A kapott sötét színű olajat szilikagélen kromatografáljuk. A cím szerinti vegyületet 5%-os metanol-kloroform eleggyel eluáljuk, 840 mg őszibarackszínű, szilárd habot nyerünk. Ezt az anyagot metanolból kristályosítva 52%-os hozammal 575 mg fe10
HU 219 454 Β hér, szemcsés terméket kapunk, amelynek olvadáspontja 189-193 °C.
Ή-NMR (DMSO-dé): δ 10,23 (széles, 1,0, NHAc),
9.3 (széles, 1,0, NHCHO), 8,15 és 7,90 (mindkettő s, összesen 1,0, HC=O két konformerből, a csúcsok 60 °C-on egybeolvadnak), 7,42 és 7,22 (mindkettő d, J=8,3, összesen 1,0, CH-NH két konformerből, a csúcsok 60 °C-on egybeolvadnak), 5,9 és 5,7 (mindkettő m, 2,0, CH=CH), 5,05 (m, 1, CH-N), 4,73 (m, 1, OH), 3,39 (m, 2, CH2OH); 2,72 (m, 1, CH), 2,40 (m, 1, 1/2 CH2), 1,36 (m, 1,1/2 CH2).
Elemzési eredmények a C13H16N5O3C1 képlet alapján:
számított: C%=47,93, H%=4,95, N%=21,50,
Cl%=10,88;
talált: C%=47,99, H%=4,96, N%=21,42,
Cl%=10,96.
16. példa (±)-cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-9Hpurin-9-il]-2-ciklopentén-1 -metanol előállítása A 15. példa cím szerinti vegyületéből 0,91 g,
2,79 mmol mennyiséget 1 ml száraz DMF-ben oldunk. Az oldathoz 10 ml trietil-ortoformiátot és 0,29 ml,
3.4 mmol etánszulfonsavat adunk, majd 24 órán át 65 °C hőmérsékleten tartjuk. Ezután az oldatot sziruppá pároljuk be, a szirupot 15 ml 1 n hidrogén-kloridban oldjuk, és 3 órán át keverjük. Az elegy pH-ját 5 n nátrium-hidroxiddal 7-re állítjuk, majd a kapott elegyet (olaj képződik) izopropanol és kloroform 1:3 arányú elegyének 3x100 ml-ével extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnézium-szulfáton szárítjuk, majd bepároljuk. így 0,93 g vörös, üvegszerű anyagot nyerünk. A kapott üvegszerű anyagot 20 ml metanolban feloldjuk, és 2 ml ciklopropil-aminnal Parr bombában 18 órán át 70 °C hőmérsékleten tartjuk. A kapott oldatot bepároljuk, és a nyert sötét, üvegszerű anyagot szilikagélen adszorbeáljuk. Eluensként 7%-os metanol-etil-acetát elegyet alkalmazunk. így 19%-os hozammal 148 mg cím szerinti vegyületet nyerünk fehér por formájában, amelyet acetonitrillel eldörzsölünk. A kapott termék Ή-NMR (DMSO-d6)-adatai az 5. példa cím szerinti vegyületének adataival azonosak.
17. példa (+)-(lR,4S)-cisz-N-[4-Klór-5-formamido-6-{[4(hidroxi-metil)-2-ciklopentén-l-il]-amino}-2-pirimidinilj-acetamid előállítása
2,76 g, 9,02 mmol, a 13. példa szerint előállított (lS,4R)-4-amino-2-ciklopentén-l-metanol-dibenzoil-D-tartarátot 20 ml vízben oldunk, és 65 ml hidroxid formájú Amberlite IA-400 anioncserélő gyantával töltött oszlopra visszük. Az oszlopot vízzel mossuk. A lúgos frakciókat egyesítjük, és olajjá pároljuk be, az olajat a hozzáadott abszolút etanol lepárlásával, majd
66,7 Pa nyomáson szárítjuk. így 1,2 g (lS,4R)-4amino-2-ciklopentén-l-metanolt nyerünk halványsárga olaj formájában, amely levegőn gyorsan sötétedik. Az anyagot azonnal felhasználjuk. Az olajat 5 ml etanolban oldjuk, és hozzáadjuk 2,07 g, 8,31 mmol, a 15. példa szerint előállított N-(4,6-diklór-5-formamido-2pirimidinil)-acetamidot és 2,50 g, 24,8 mmol trietilamint tartalmazó oldathoz. A kapott sötét színű oldatot nitrogéngáz-atmoszféra alatt olajfürdőben 50 percig 75-80 °C hőmérsékleten tartjuk. Ezután az oldatot sziruppá pároljuk be, majd a szirupot szilikagéloszlopra visszük. A cím szerinti vegyületet 3-5%-os metanolkloroform eleggyel eluáljuk. így 54%-os hozammal 1,59 g halványsárga, szilárd habot nyerünk, amelynek Ή-NMR-adatai azonosak a kristályosított mintáéval. Ilyen mintát etanolból kristályosítunk, fehér granulumokat nyerünk, amelyeknek olvadáspontja 194-195 °C, Ή-NMR (DMSO-d6)-adatai azonosak a 15. példa cím szerinti vegyületének hasonló adataival; [a]j? +2,7°, [a]$8 +3,6°, [<x]& +2,9°, [«]& -2,5°, [α]2θ65 -41,2° (c=0,238, metanol).
18. példa (-)-(lS,4R)-cisz-(2-Amino-6-klör-9H-purin-9-il)2-ciklopentén-1-metanol előállítása
A 17. példa cím szerinti vegyületéből 1,15 g, 3,53 mmol mennyiséget 45 ml dietoxi-metil-acetátban, nitrogéngáz-atmoszféra alatt 3,5 órán át visszafolyató hűtő alatt enyhén forralunk. A kapott halványsárga oldatot 66,7 Pa nyomáson sárga sziruppá pároljuk be. A szirupot 50 ml 1 n hidrogén-kloriddal 1 órán át keverjük. Az oldatot nátrium-hidrogén-karbonáttal semlegesítjük, és szárazra pároljuk. A visszamaradó szilárd anyagot metanollal extraháljuk, és a metanolban oldható anyagot szilikagéloszlopra visszük. Az oszlopról 10%-os metanol-etil-acetát eleggyel eluáljuk a cím szerinti vegyületet. 78%-os hozammal 730 mg halványsárga, szilárd habot nyerünk. A termék 'H-NMR (DMSO-d6)-adatai azonosak a racemátéval (a 4. példa cím szerinti vegyülete); [a]2D° -114,9° (c=0,26, MeOH).
19. példa (-)-(lS,4R)-cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol előállítása
A 18. példa cím szerinti vegyületéből 560 mg, 2,11 mmol mennyiséget 12 ml metanolban 2,4 ml ciklopropil-aminnal Parr bombában 17 órán át 78 °C hőmérsékleten tartunk. Ezután az elegyról az oldószert lepároljuk, és a visszamaradó anyagot szilikagélen kromatografáljuk. A cím szerinti vegyületet 5-7%-os metanol-etil-acetát eleggyel eluáljuk. 59%-os hozammal 367 mg színtelen, szilárd habot nyerünk. A termék Ή-NMR (DMSO-d6)-adatai azonosak a 7. példa termékével; [a]2D° -59,0° (c=0,28, MeOH), amely megerősíti a 7. példa cím szerinti vegyületének abszolút konfigurációját.
20. példa (lS,4R)-(4-Amino)-2-ciklopentén-l-metanoldibenzoil-D-tartarát előállítása
44,0 g, 0,400 mól 2-azabiciklo[2.2.1]hept-5-én3-ont [Daluge és Vince, J. Org. Chem. 43, 2311 (1978) és a 4 268 672 számú amerikai egyesült álla11
HU 219 454 Β mokbeli szabadalom] 0,5 1 2 n metanolos hidrogénkloridban keverünk 25 °C hőmérsékleten 1,5 órán át. Az elegyról az illékony anyagot lepároljuk, így 71,1 g ( ± )-cisz-metil-(4-amino)-2-ciklopentén-1 -karboxiláthidrogén-kloridot nyerünk piszkosfehér por formájában.
A kapott porból vett mintát dietil-éterrel eldörzsölve fehér port nyerünk, amelynek olvadáspontja 92,5-95 °C. [J. Org. Chem. 46, 3271 (1981), olvadáspont: 82-83 °C]; Ή-NMR (DMSO-d6): δ 8,25 (széles s, 3, NH3+), 6,1 és 5,9 (mindkettő m, 2, CH=CH), 3,64 (s) átlapoló 3,75-3,6 (m, összesen 4, OMe és CH), 2,65-2,45 és 2,05-1,85 (mindkettő m, 2, CH2). Elemzési eredmények a C7HhNO2HC1 képlet alapján:
számított: C%=47,33, H%=6,81, N%=7,89,
Cl%=19,96;
talált: C%=47,41, H%=6,84, N%=7,85,
Cl%=19,89.
17,7 g, 0,100 mól (±)-cisz-metil-(4-amino)-2-ciklopentén-l-karboxilát-hidrogén-kloridot és 0,500 mól diizobutil-alumínium-hidridet 1 mol/l-es hexános oldat formájában 200 ml hexánban visszafolyató hűtő alatt 6 órán át forralunk. A kapott oldatot lehűtjük, és 10 ml 1 mol/l-es vizes ammónium-kloridot, majd 200 ml metanolt adunk hozzá. Az elegyet 30 percig visszafolyató hűtő alatt forraljuk, majd 10 g magnézium-szulfátot adunk hozzá. A szilárd anyagokat az elegyből kiszűrjük, és további metanollal mossuk. A szűrlet és mosófolyadék egyesítésével kapott oldatot bepároljuk, így 15,5 g sötétszínű olajat nyerünk; az olaj 'H-NMR (DMSO-d6)-adatai azonosak a 13. példa szerint előállított (±)-4-amino-2-ciklopentén-l-metanol adataival. Egy ilyen mintát szilikagélen kromatográfiás eljárással tisztítunk (EtOH :CHC13:NH4OH/10:90:1), majd dibenzoil-D-borkősawal kristályosítva nyeljük a cím szerinti vegyületet.
21. példa (±)-[cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-9Hpurin-9-il]-2-ciklopentén-l-il]-metil-R-2,3-bisz(hexadekanoil-oxi)-propil-hidrogén-foszfát előállítása
150 mg, 0,2 mmol L-a-dipalmitoil-foszfatidil-kolin (Sigma) 6 ml kloroformban készült oldatát 300 mg, 1,03 mmol (±)-cisz-4-[2-amino-6-(ciklopropil-amino)9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanolt, 1,0 mg 185 egység/mg fajlagos aktivitású, VII típusú, Streptomyces eredetű foszfolipáz D-t (Sigma), és 1,5 ml pH=4,5-es puffért (250 mmol/1 CaCl2, 200 mmol/1 NaOAc, 0,1 n hidrogén-kloriddal pH=4,5-re állítva) tartalmazó lombikba adjuk. A kapott kétfázisú elegyet 45 °C hőmérsékleten (olajfürdőben) 1 órán át keveijük. A fázisokat elválasztjuk, a vizes fázist 3 χ 6 ml kloroformmal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat 1 n hidrogén-kloriddal mossuk, szárítjuk, majd bepároljuk. Egy kapott mintát szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítunk, eluensként 12%-os metanol-kloroform elegyet alkalmazunk, így 47%-os hozammal 120 mg cím szerinti vegyületet nyerünk. Ez az anyag etil-acetát és acetonitril elegyének alkalmazásával megszilárdulva halványsárga port képez. A kapott termék olvadáspontja 155-157 °C.
•H-NMR (CD3CD-CDC13): δ 7,78 (s, átlapoló oldószer, purin H-8), 6,12 és 5,88 (m, 2, HC=CH), 5,53 (m, 1, CHN ciklopentén), 5,22 (m, 1, CO2CH), 4,37 (dd, J = 3, 12; 1, 0,5 POCH2 glicerin), 4,12 (m, 1, 0,5 POCH2 glicerin), 3,42 (m, 4, OCH2 glicerin, OCH2), 3,11 (széles m, 1, CH), 2,90 (m, 1, NCH), 2,78 (m, 1, 0,5 CH2 ciklopentén), 2,27 (m, 4, 2 CH2CO2), 1,70 (m, 1, 0,5 CH2 ciklopentén), 1,56 (széles m, 4, 2 CH2CH2CO2), 1,27 (széles m, 38, 24 CH2), 0,88 (m, 6, 2 CH3), 0,83 (m, 2, CH2 ciklopropil), 0,60 (m, 2, CH2 ciklopropil).
Elemzési eredmények a C49H85N6O8P-2,4 H2O képlet alapján:
számított: C%=61,28, H%=9,42, N%=8,75,
P%=3,22;
talált: C%=60,97, H%=9,12, N%=8,78,
P%=2,96.
22. példa (±)-[cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-il]-metil-R-2,3-bisz(hexanoil-oxi)-propil-hidrogén-foszfát előállítása 300 mg, 0,66 mmol L-a-dikaproil-foszfatidil-kolin (Sigma) 15 ml kloroformban készült oldatát 378 mg, 1,32 mmol (±)-cisz-4-[(2-amino)-6-(ciklopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanolt, 1,04 mg, 185 egység/mg fajlagos aktivitású, Streptomyces eredetű, VII típusú foszfolipáz D-t (Sigma) és
4,5 ml pH=4,5-es puffért (250 mmol/1 CaCl2 és 200 mmol/1 NaOAc-tartalmú, hidrogén-kloriddal pH=4,5-re állítva), továbbá 3 ml kloroformot tartalmazó lombikba adjuk. A kapott kétfázisú elegyet 45 °C hőmérsékleten (olajfiirdőben) 4 órán át keveijük. Ezután a fázisokat szétválasztjuk, a szerves fázist 2x4 ml 1 n hidrogén-kloriddal mossuk. Az egyesített vizes fázisokat 10 ml kloroformmal mossuk. Az egyesített szerves fázisokat magnézium-szulfáton szárítjuk, majd bepároljuk. A visszamaradó anyagot szilikagéloszlopra visszük, az oszlopról a cím szerinti vegyületet 16%-os metanol-kloroform eleggyel eluáljuk, az eluátumot bepárolva finom, sárga port nyerünk. Ezt az anyagot 3 χ 50 ml etanolban oldjuk és bepároljuk, majd nagyvákuumban szárítjuk. így 21%-os hozammal 103 mg halványsárga port nyerünk, a por olvadáspontja 182-185 °C.
•H-NMR (DMSO-d6): δ 7,61 (s, 1, purin H8), 7,22 (széles s, 1, NH), 6,09 (m, 1, 0,5 CH=CH), 5,89 (m, átlapoló széles s, 5,83-nál, 3, 0,5 CH=CH, NH2), 5,41 (széles m, 1, CHN), 5,09 (széles m, 1, CO2CH), 4,30 (dd, J=2,7,12; 1, 0,5 POCH2, glicerin), 4,08 (m, 1,0,5 POCH2, glicerin), 3,80 (széles m, átlapoló széles m 3,75-nál, 4, OCH2 glicerin, OCH2), 3,02 (széles m, 2, CH, NCH ciklopropil), 2,65 (m, 1, 0,5 CH2, ciklopentén), 2,23 (+, J=7,5, 4, 2 CH2CO2), 1,48 (széles m, 5, 2 CH2CH2CO2, 0,5 CH2 ciklopentén), 1,23 [széles m, 8, 2 (CH2)2], 0,84 (m, 6, 2 CH3), 0,67 és 0,58 (m, 4, 2 CH2 ciklopropil).
HU 219 454 Β
Elemzési eredmények a C29H45N6O8P-3,9 H2O0,2
CHC13 O,O5 EtOH képlet alapján:
számított: C%=48,00, H%=7,33, N%=11,46,
Cl%=2,9;
talált: C%=48,65, H%=6,61, N%=10,81,
Cl%=2,5.
A fenti példa szerinti eljárás Satoshi Shuto és munkatársai [Tetrahedron Letters, 28, (2) 199-202 (1987)] eljárásának adaptációja.
23. példa
N-(4-Klór-l,6-dihidro-5-nitro-6-oxo-2-pirimidinil)-izobutiramid előállítása 6-Klór-5-nitro-izocitozint [J. Chem. Soc. 5041 (1960); J. Org. Chem., 40, 3141 (1975)] védőcsoporttal látunk el oly módon, hogy a 14,88 g, 78,09 mmol fenti sárga, szilárd anyagot 250 ml izobutánsavanhidrid és 3-4 csepp tömény kénsav jelenlétében 1 órán át 100 °C hőmérsékleten tartunk. A kapott oldathoz 100 ml vízmentes metanolt adunk, az elegyet 50 °C hőmérsékleten fél órán át keverjük, majd eredeti térfogatának harmadára pároljuk be. A cím szerinti vegyületet az elegyből kiszűijük. így 74%-os hozammal 14,97 g halványsárga, kristályos anyagot nyerünk. A termék olvadáspontja 196-199 °C (bomlik).
Ή-NMR (DMSO-d6): δ 1,12 [d, J=6,9 Hz, 6H, (CH3)2CH], 2,75 [m, J = 6,9 Hz, 1H, (CH3)2CH], 12,41 (széles s, 1H).
Elemzési eredmények a C8H9N4O4C1 képlet alapján: számított: C%=36,87, H%=3,48, N%=21,50,
Cl%=13,60;
talált: C%=36,94, H%=3,48, N%=21,44,
Cl%=13,53.
24. példa
N-(4,6-Diklór-5-nitro-2-pirimidinil)-izobutiramid előállítása
A 23. példa cím szerinti vegyületéből 10,0 g, 38,37 mmol mennyiséget 200 ml foszfor-oxi-kloridban, 3-4 csepp Ν,Ν-dietil-anilin jelenlétében, nitrogéngáz-atmoszférában 5 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Az oldatot ezután szobahőmérsékletre hűtjük, szárazra pároljuk, és a visszamaradó szirupot 200 ml hideg, mintegy -10 °C hőmérsékletű metilénkloridban oldjuk. A szerves fázist 100 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal erőteljes keverés mellett reagáltatjuk, és az elegy hőmérsékletét 5 °C hőmérséklet alatt tartva részletekben szilárd nátriumhidrogén-karbonátot adagolunk a pH 5 és 7 közötti értékre való beállítására. A fázisokat szétválasztjuk, a vizes fázist metilén-kloriddal extraháljuk, az egyesített szerves fázisokat fázisszeparáló papíron szűrjük, bepároljuk, majd vákuumban szárazra pároljuk. így 72%-os hozammal 7,71 g cím szerinti vegyületet nyerünk sárgásfehér szilárd anyag formájában, a tennék kellően tiszta ahhoz, hogy ebben az állapotában alkalmazzuk a következő lépésben. Hexán és metilén-klorid elegyéből való átkristályosítással készítünk analitikai mintát. Az átkristályosított termékjellemzői: Olvadáspont: 166-169 °C.
Ή-NMR (DMSO-d6): δ 1,09 [d, J=6,9 Hz, 6H, (CH3)2CH], 2,79 [m, J = 6,9 Hz, 1H, (CH3)2CH], 11,61 (s, 1H).
Elemzési eredmények a C8H8N4O3C12 képlet alapján: számított: C%=34,43, H%=2,89, N%=20,08,
Cl%=25,41;
talált: C%=34,53, H%=2,89, N%=20,02,
Cl%=25,40.
25. példa
N-(4,6-Diklór-5-formamido-2-pirimidinil)-izobutiramid előállítása
220 ml abszolút etanolt és 10,0 g (nedvestömeg), előzetesen 27,6 kPa hidrogéngáznyomáson 10 percig rázott Raney-nikkel katalizátort tartalmazó Parr lombikba a 24. példa cím szerinti vegyületéből 6,77 g, 24,26 mmol mennyiséget mérünk. Az elegyet 1 órán át 27,6 kPa hidrogéngáznyomáson rázzuk, majd Celite-en szűrjük, és a szűrletet bepároljuk. A kapott sárgásfehér, szilárd anyagot vákuumban éjszakán át szárítjuk. Ezt a szilárd anyagot 0 °C hőmérsékleten 250 ml 1,2-diklóretánnal keverjük össze. Az elegyhez 30 ml ecetsavanhidridet, majd 30 ml hangyasavat adunk cseppenként, nitrogéngáz-atmoszférában. A kapott elegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keveijük, majd eredeti térfogatának felére bepároljuk, és toluollal való azeotrop desztillálás révén eltávolítjuk a visszamaradó hangyasav/ecetsavat. A nyersterméket metanollal eldörzsölve 73%-os hozammal 4,92 g cím szerinti vegyületet nyerünk piszkosfehér, szilárd anyag formájában.
Olvadáspont: 206-209 °C (bomlik); 'H-NMR (DMSO-d6): δ 1,08 [d, J=6,8 Hz, 6,0 (CH3)2CH], 2,74 [m, J=6,8 Hz, 1,0 (CH3)2CH], 8,18 (d, J=10,3 Hz) és 10,26 (széles s) [összesen 1,0, NHCHO két konformerből], 11,17 (széles s, 1,0).
Elemzési eredmények a C9H10N4O2Cl képlet alapján: számított: C%=39,01, H%=3,64, N%=20,22,
Cl%=25,59;
talált: C%=39,13, H%=3,68, N%=20,12,
Cl%=25,67.
26. példa (+)-(lR,4S)-cisz-N-[4-Klór-5-formamido-6-{[4(hidroxi-metil)-2-ciklopentén-l-il]-amino}-2pirimidinilj-izobutiramid előállítása
2,44 g, 8,15 mmol, a 13. példa szerint előállított (lS,4R)-4-amino-2-ciklopentén-l-metanol-dibenzoil-D-tartarátot 20 ml 90%-os etanolban oldunk, és az oldatot 30 ml hidroxil formájú Amberlite IRA-400 gyantával töltött, azonos oldószerrel előmosott oszlopra visszük. A 90%-os etanollal való eluáláskor kapott bázikus frakciók bepárlásával és a toluol-etanol lepárlása után 1,4 g (lS,4R)-4-amino-2-ciklopentén-l-metanol marad vissza halványsárga olaj formájában. Ezt az olajat azonnal kondenzáljuk 2,26 g, 8,15 mmol, a
25. példa szerint előállított N-(4,6-diklór-5-formamido2-pirimidinil)-izobutiramiddal, a reagáltatást 100 ml 1,2-dimetoxi-etánban, 2,3 ml, 16,3 mmol trietil-aminnal 95-110 °C hőmérsékleten 1,5 órán át végezzük. A kapott oldatot sötétsárga sziruppá pároljuk be,
HU 219 454 Β amelyet szilikagélen kromatografálunk. Az eluálást
5-7,5%-os metanol-kloroform eleggyel végezzük, így 84%-os hozammal 2,45 g halványsárga, szilárd anyagot nyerünk. Az anyagból egy mintát acetonitrilben kristályosítunk, így a cím szerinti vegyületet finom, fehér kristályok formájában nyeljük. A termék olvadáspontja 194,5-195,5 °C.
Ή-NMR (DMSO-d6): δ 10,21 (s, 1, NHCOCHMe2), 9,29 (s, 1, NHCHO), 8,12 (s, 1, CHO), 7,18 (d, J=7,9, 1, CHNH), 5,8 és 5,7 (mindkettő m, 2, CH=CH), 5,08 (m, 1, CHN), 4,71 (t, J=5,06, 1, OH), 3,37 (m, 2, CH2OH), 2,9-2,6 (m, 2, CHMe2 és CH), 2,40 (mm, 1, 0,5 CHJ, 1,33 (m, 1, 0,5 CHJ; [α]20°+4,4° [α]2θ5 -20,7° (c=0,237, MeOH).
Elemzési eredmények a C15H20N5ClO3 képlet alapján: számított: C%=50,92, H%=5,70, N%=19,79,
Cl%=10,02;
talált: C%=50,67, H%=5,78, N%=19,62,
Cl%=9,92.
27. példa (-)-(lR, 4S)-cisz-N-[6-(ciklopropil-amino)-9-(4(hidroxi-metil)-2-ciklopentén-l-il)-9H-purin-2-il]izobutiramid előállítása
1,949 g, 5,44 mmol, a 26. példa szerint előállított (+)-(1 R,4S)-cisz-N-[4-klór-5-formamido-6- {[4-(hidroxi-metil)-2-ciklopentén-l-il]-amino}-2-pirimidinil]izobutiramidot 30 ml trietil-ortoformiáttal jegesvíz-fürdőbe hűtve keverünk, és eközben 2 perc alatt cseppenként hozzáadunk 2,0 ml tömény hidrogén-kloridot. A kapott tiszta oldatot szobahőmérsékleten éjszakán át keverjük. Az oldatról az illékony anyagokat vákuumban eltávolítjuk, és a visszamaradó szirupot, amely az (1R,4S)cisz-N-[6-klór-9-(4-(hidroxi-metil)-2-ciklopentén-l-il)9H-purin-2-il]-izobutiramid-ortoészter-konjugátot tartalmazza, 30 ml etanolban 10 g ciklopropil-aminnal
2,5 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Az elegyet ezután bepároljuk, és a visszamaradó szirupot 200 ml 10 %-os izopropanol-klorofoim elegyben oldjuk. Az oldatot 25 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonátoldattal erőteljesen összekeveijük. A szerves fázist elkülönítjük, a vizes fázist további 10%-os izopropanol-kloroform eleggyel mossuk. Az egyesített szerves fázisokat magnézium-szulfáton szárítjuk. Az oldatot bepároljuk, így 2,4 g halványsárga, üvegszerű anyagot nyerünk, amelyet szilikagélen kromatografálunk. Eluensként 2-3%os metanol-etil-acetát elegyet alkalmazunk, így 53%-os hozammal 1,02 g cím szerinti vegyületet nyerünk fehér, szilárd anyag formájában. A kapott anyagból vett mintát metanol és acetonitril elegyéből átkristályosítva a cím szerinti vegyületet fehér tűk formájában nyeqük. A kapott termék olvadáspontja 197,5-198,5 °C.
Ή-NMR (DMSO-dJ: δ 9,75 (s, 1, NHCO), 7,93 (s, 1, purin H-8), 7,82 (széles s, 1, NH-ciklopropil), 6,12 és 5,92 (mindkettő m, 2, CH=CH), 5,50 (m, 1, CH-N), 4,73 (t, J=5,3, 1, OH), 3,46 (m, 2, CH2-O), 3,25-3,00 (m, 2, CHMe2 és CH), 2,91 (m, 1, CH), 2,75-2,6 (m, 1, 0,5 CHJ, 1,7-1,6 (m, 1, 0,5 CHJ, 1,07 (d, J=6,8, 6, CHMeJ, 0,75-0,6 (m, 4, 2 ciklopropil, CHJ; [a]2? -70,7°; [α]2θ6 -159,0° (¢=1,02, MeOH).
Elemzési eredmények a C18H24N6O2 képlet alapján:
számított: C%=60,66, H%=6,79, N%=23,58;
talált: C%=60,62, H%=6,83, N%=23,51.
Az oszlop eluálását 5%-os metanol-etil-acetát eleggyel folytatva további 928 mg cím szerinti vegyületet nyerünk halványsárga, szilárd hab formájában, ez a termék mintegy 10 (-)-(lS,4R)-cisz-4-[2-amino-6-(ciklopropil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1 -metanolt tartalmaz szennyezésként.
28. példa (-)-(lS,4R)-cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol előállítása
1,33 g, 3,73 mmol, a 27. példa szerint előállított (-)-(lR,4S)-cisz-N-[6-(ciklopropil-amino)-9-(4-(hidroxi-metil)-2-ciklopentén-1 -il)-9H-purin-2-il)-izobutiramidot 40 ml 1 n hidrogén-kloriddal 2 napig szobahőmérsékleten keverünk. Az elegy pH-ját ezután nátriumhidroxiddal 7,0-re állítjuk, és az elegyet szárazra pároljuk. A visszamaradó szilárd anyagot 3 χ 25 ml fonó etanollal eldörzsöljük. Az etanolt lepároljuk, és a visszamaradó sárga, üvegszerű anyagot szilikagélen kromatografáljuk. A cím szerinti vegyületet 3%-os metanoletil-acetát eleggyel eluáljuk. így 80%-os hozammal 857 mg cím szerinti vegyületet nyerünk színtelen, szilárd hab formájában. A termék •H-NMR- és [ajjj-adatai azonosak a 19. példa cím szerinti vegyületének megfelelő adataival.
29. példa (-)-(lS,4R)-cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanolhidrogén-klorid előállítása
1,90 g, mintegy 6,3 mmol (Ή-NMR alapján) (-)(lS,4R)-cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-9Hpurin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanolt 7,0 ml 1 n hidrogén-kloridban és etanolban oldunk. Az oldatot szárazra pároljuk, és a visszamaradó anyagot 15 ml etanolban ismét oldjuk. Az elegyhez lassan, 80 ml össztérfogat eléréséig etil-acetátot adunk. A képződő piszkosfehér színű port kiszűqük és vákuumban szárítjuk. így 97%-os hozammal 2,07 g cím szerinti vegyületet kapunk. A kapott termék 125-130 °C-on összeesik, 138 °C fölött bomlik.
[a]^9 -27,1°, [α]2«6 -52,3° (c=0,199, MeOH). Elemzési eredmények a C14HlgN6O HC10,8 H2O képlet alapján:
számított: C%=49,87, H%=6,16, N%=24,92, Cl%=10,51;
talált: C%=49,91, H%=6,16, N%=24,96,
Cl%=10,52.
30. példa (-)-(lS,4R)-cisz-4-[2-Amino-6-(ciklopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanoldihidrogén-klorid előállítása
857 mg, 3,00 mmol (-)-(lS,4R)-cisz-4-[2-Amino6-(ciklopropil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1 metanolt etanol és etil-acetát elegyében oldunk, és
HU 219 454 Β ml 1 n éteres hidrogén-kloridot adunk hozzá. A képződő finom, fehér csapadékot kiszűrjük, etil-acetáttal mossuk, és vákuumban szárazra pároljuk. így 75%-os hozammal 642 mg cím szerinti vegyületet nyerünk. A termék olvadáspontja 176-180 °C (bomlik).
Elemzési eredmények a C14HlgN6O-2 HC1 képlet alapján:
számított: C%=46,81, H%=5,61, N%=23,39,
Cl%=19,74;
talált: C%=46,82, H%=5,64, N%=23,33,
Cl%=19,67.
31. példa (+)-(1 R, 4S)-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol-O-difoszfát előállítása
A 9. példa szerint előállított (+)-(lR,4S)-4-[2amino-6-(ciklopropil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol-O-monofoszfátot trietil-ammóniumsóvá alakítunk oly módon, hogy 0,5 mmol monofoszfátot ammóniumsója formájában 10 ml 0,5 mol/l-es trietil-ammónium-hidrogén-karbonáttal elegyítünk, az elegyet vákuumban beszárítjuk, majd újabb 10 ml 0,5 mol/l-es trietil-ammónium-hidrogén-karbonátot adunk hozzá, és szárítjuk. A visszamaradó anyaghoz 10 ml acetonitrilt adunk, és beszárítjuk. A műveletet még kétszer megismételjük. Ezután a visszamaradó anyaghoz 10 ml l,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(lH)pirimidinont (Aldrich), majd 0,43 g, 2,6 mmol 1,1’karbonil-diimidazolt (Aldrich) adunk, és az elegyet 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután az elegyhez 0,18 ml, 4,5 mmol metanolt adunk, és 30 percig keveijük. Az elegyhez 1,2 g, 2,6 mmol tributilammónium-pirofoszfátot (Sigma) adunk, 18 órán át szobahőmérsékleten keveijük, majd további 2,2 mmol tributil-ammónium-pirofoszfátot adunk hozzá, és 8 órán át 40 °C hőmérsékleten keverjük, majd 50 ml vizet adunk az elegyhez. Ily módon mind O-difoszfát, mind O-trifoszfát keletkezik, mivel a tributil-ammóniumpirofoszfát ortofoszfát szennyeződést tartalmaz.
A reakcióelegyet DEAE Sephadex ioncserélőn kromatografálva elválasztjuk, előzetesen 50 mmol/l-es ammónium-hidrogén-karbonáttal egyensúlyba hozott
2,5 χ 18 cm-es, DEAE Sephadex A25 (Pharmacia) töltetű oszlopon. Az oszlopot 1 liter 50 mmol/l-es ammónium-hidrogén-karbonáttal mossuk, majd 2 1 50 és 800 mmol/1 közötti lineáris koncentrációgradiensű ammónium-hidrogén-karbonát-oldattal eluáljuk. A cím szerinti vegyületet, majd a trifoszfátot nyeljük, amint azt részletesebben a 32. példában ismertetjük. A difoszfátot tartalmazó frakciókat egyesítjük, vákuumban szárítjuk, vízben ismét feloldjuk, majd ismét szárítjuk. így 15%-os hozammal 0,077 mmol cím szerinti vegyületet nyerünk ammóniumsója formájában. UV: 0,1 mol/l-es HCl-ban Xmax=254 és 298 nm; pH 7-nél Xmax=259 és 284 nm: 0,1 mol/l-es NaOH-ban kmax=259 és 284 nm.
A kapott difoszfát egy alikvot mennyiségét boqúbél eredetű lúgos foszfatázzal (Boehringer Mannheim) kezeljük, időszakonként az elegyből mintát veszünk, és vékonyréteg-kromatográfiás eljárással vizsgáljuk (PEIcellulóz, Brinkman, 1 mol/l-es LiCl/1 mol/l-es hangyasav 1:1 arányú elegye). A difoszfátnak monofoszfáttá, majd nukleoziddá való fokozatos átalakulását észleljük. A felszabadult foszfát végső mennyiségét Bencini eljárásával határozzuk meg [Bencini, D. A., Wild, J. R. és O’Donovan, G. A.; Analytical Biochemistry 132, 254-258 (1983)], a bázis/foszfát arányt 1,0/11,5 értékűnek találjuk, ami szervetlen foszfát jelenlétét jelzi. Analitikai nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárást alkalmazva (HPLC) az UV-tisztaság 99,8% (a HPLCeljárást erős anioncserélő gyantával töltött oszlopon végezzük, eluensként 10 mmol/1 és 1 mol/1 között növekvő koncentrációgradiensű, pH=5,5 ammónium-foszfátot alkalmazunk).
32. példa (+)-(lR, 4S)-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol-O-trifoszfát előállítása
A 31. példában ismertetett oszlop eluálását tovább folytatva és az eluátumot bepárolva a cím szerinti vegyület ammóniumsóját nyerjük. Ezt a sót 20 ml nátrium formájú Dowex AG 50W-X8 (Bio-Rad) gyantával töltött oszlopon átengedve nátriumsóvá alakítjuk. A nukleotidot tartalmazó frakciókat vákuumban bepárolva 61%-os hozammal 0,31 mmol terméket nyerünk. UV: 0,1 mol/l-es HCl-ban Xmax=254 és 299 nm; pH
7-nél Xmax=259 és 284 nm: 0,1 mol/l-es NaOH-ban Xmax=259 és 284 nm. Optikai forgatóképesség vízben 3,83 g/100 ml koncentrációban: [α]2θ=+43,2° 589 nm-nél. Analitikai HPLC mellett az UV-tisztaság 99,1% (erős anioncserélő gyantával töltött oszlop, eluens: 10 mmol/1 és 1 mol/1 között növekvő gradiensű, pH=5,5-es ammónium-foszfát), a termék mellett 0,9% difoszfát is jelen van. A trifoszfát egy alikvot részét borjúbél eredetű lúgos foszfatázzal (Boehringer Mannheim) kezeljük, időszakonként mintát veszünk, és azt vékonyréteg-kromatográfiás eljárással vizsgáljuk (PEI-cellulóz, Brinkman), 1 mol/l-es LiCl/L mol/l-es hangyasav 1:1 arányú elegye. A trifoszfátnak difoszfáttá, majd monofoszfáttá, végül nukleoziddá való fokozatos átalakulását észleljük. A felszabadult foszfát végső mennyiségét Bencini eljárásával határozzuk meg [Bencini, D. A., Wild, J. R. és O’Donovan, G. A., Analytical Biochemistry 132, 254-258 (1983)], a mért bázis/foszfát arány 1,0:2,7.
33. példa (lS,4R)-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-9Hpurin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol-O-difoszfát előállítása
A 8. példa szerint előállított (—)-(lS,4R)-4-[2amino-6-(ciklopropil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1 -metanol-O-monofoszfátot trietil-ammóniumsóvá alakítjuk oly módon, hogy 0,49 mmol monofoszfát-ammóniumsó oldatához 5 ml 0,5 mol/l-es trietilammónium-hidrogén-karbonátot adunk, az elegyet vákuumban szárítjuk, majd újabb 5 ml 0,5 mol/l-es trietilammónium-hidrogén-karbonátot adunk hozzá és szárít15
HU 219 454 Β juk, a műveletet kétszer megismételjük. Ezután a visszamaradó anyagot 5 ml acetonitrilben felvesszük, és vákuumban szárítjuk, ezt a műveletet összesen háromszor ismételjük meg. A visszamaradó anyagot 7 ml 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(lH)-pirimidinonban (Aldrich) oldjuk, majd 0,39 g, 2,4 mmol 1,1’-karbonil-diimidazolt (Aldrich) adunk hozzá, és az elegyet 30 percig szobahőmérsékleten keverjük. Ezután az elegyhez 0,16 ml, 4,0 mmol metanolt adunk, és 30 percig keverjük. Az elegyhez 2,4 mmol tributil-ammónium-pirofoszfátot adunk (amelyet úgy készítünk, hogy tetranátrium-pirofoszfát nátriumionját ioncserélő kromatográfiás eljárással hidrogénre cseréljük, majd ezt tributilaminnal semlegesítjük és szárítjuk), az elegyet 18 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 50 ml vizet adunk hozzá. Mind O-difoszfát, mind O-trifoszfát képződik, mivel a tributil-ammónium-pirofoszfát ortofoszfát szennyeződést tartalmaz.
A reakcióterméket DEAE Sephadex ioncserélő kromatográfiás eljárással különítjük el, előzetesen 50 mmol/l-es ammónium-hidrogén-karbonát-oldattal egyensúlyba hozott 2,5 χ 18 cm-es DEAE Sephadex A25 (Pharmacia) oszlopon. Az oszlopot 1 1 100 mmol/l-es ammónium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, majd 21 100 mmol/1 és 800 mmol/1 közötti koncentrációgradiensű ammónium-hidrogén-karbonát-oldattal eluáljuk. A cím szerinti vegyület, majd ezt követően a trifoszfát eluálódik, ezt részletesebben a 34. példában ismertetjük. A difoszfátot tartalmazó frakciókat egyesítjük, vákuumban szárítjuk, vízben ismételten feloldjuk, majd szárítjuk, ezt a műveletet kétszer ismételjük. így 6%-os hozammal 0,032 mmol cím szerinti vegyületet nyerünk ammóniumsó formájában. UV 0,1 mol/l-es HCl-ban Xmax=254 és 298 nm; pH 7-nél Xmax=259 és 284 nm: 0,1 mol/l-es NaOH-ban Xmax=258 és 284 nm.
A difoszfátból vett alikvot mintát botjúbél eredetű lúgos foszfatázzal (Boehringer Mannheim) kezeljük, időnként mintát veszünk belőle, és ezt vékonyréteg-kromatográfiás eljárással vizsgáljuk (PEI-cellulóz, Brinkman, 1 mol/l-es LiCl/1 mol/l-es hangyasav 1:1 arányú elegye). A difoszfátnak monofoszfáttá, majd nukleoziddá való fokozatos átalakulását észleljük. A felszabadult foszfát végső mennyiségét Bencini eljárásával határozzuk meg [Bencini, D. A., Wild, J. R. és O’Donovan, G. A.; Analytical Biochemistry 132, 254-258 (1983)], a mért bázis/foszfát arányt 1,0:4,7 értékűnek találjuk, ami szervetlen foszfát jelenlétét jelzi. Analitikai nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárás (HPLC) alkalmazásával az UV-tisztaság 97% (erős anioncserélő gyantával töltött oszlopot alkalmazunk, és eluensként 10 mmol/1 és 1 mol/1 között növekvő koncentrációgradiensű, pH=5,5es ammónium-foszfát-oldatot alkalmazunk).
34. példa (lS,4R)-4-[2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-9Hpurin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol-O-trifoszfát előállítása
A 33. példában ismertetett oszlop eluálását folytatva és az eluátumot bepárolva a cím szerinti vegyületet ammóniumsója formájában nyerjük. Ezt a sót 20 ml nátrium formájú Dowex AG 50W-X8 (Bio-Rad) gyantával töltött oszlopon átengedve nátriumsóvá alakítjuk. A nukleotidot tartalmazó frakciókat vákuumban bepároljuk, így 81%-os hozammal 0,4 mmol terméket nyerünk. UV: 0,1 mol/l-es HCl-ban Xmax=254 és 299 nm; pH 7-nél Xmax=259 és 284 nm: 0,1 mol/l-es NaOH-ban Xmax=259 és 284 nm. Optikai forgatóképesség vízben 6,14 g/100 ml koncentrációban: [a]20=-47,l° 589 nm-nél. Analitikai nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárás alkalmazásával az UVtisztaság 99,5% (erős anioncserélő gyantával töltött oszlopot alkalmazunk, eluensként 10 mmol/1 és 1 mol/1 között növekvő koncentrációgradiensű, pH=5,5-es ammónium-foszfát-oldatot alkalmazunk), a termék mellett 0,5% difoszfát is jelen van. A trifoszfát egy alikvot részét borjúbél eredetű lúgos foszfatázzal (Boehringer Mannheim) kezeljük, az elegyből időnként mintát veszünk, és vékonyréteg-kromatográfiás eljárással vizsgáljuk (PEI-cellulóz, Brinkman; 1 mol/l-es LiCl/1 mol/l-es hangyasav 1:1 arányú elegyét alkalmazzuk). A trifoszfátnak difoszfáttá, monofoszfáttá, majd nukleoziddá való fokozatos átalakulását észleljük. A felszabadult foszfát végső mennyiségét Bencini eljárásával határozzuk meg [Bencini, D. A., Wild, J. R. és O’Donovan, G. A.; Analytical Biochemistry 132, 254-258 (1983)], a bázis/foszfát arány 1,0:2,8.
35. példa (18,4R)-4-[2-Amino-6-(N-ciklopropil-N-metilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol előállítása
274 mg, 1,00 mmol (lS,4R)-4-(2-amino-6-klór-9Hpurin-9-il)-2-ciklopentén-l-metanolt, 0,71 g, 10 mmol N-ciklopropil-N-metil-amint és 6 ml abszolút etanolt reagáltatunk, majd a reakcióelegyet bepároljuk. A visszamaradó anyagot szilikagélen kromatografáljuk. A cím szerinti vegyületet 10%-os metanol-kloroform eleggyel eluáljuk, színtelen, üvegszerű anyagot nyerünk. Az anyagot etanolban feloldjuk, foszforpentoxid jelenlétében 26,7 Pa nyomáson szárítjuk. így 98%-os hozammal 293 mg cím szerinti vegyületet nyerünk fehér, szilárd hab formájában. Az 'H-NMR- és [a]^9-adatok azonosak all. példa cím szerinti vegyületének megfelelő adataival.
A) példa
Tabletták készítése
A következő A, B és C készítményeket az összetevőknek povidonoldattal való nedvesgranulálásával, majd magnézium-sztearát hozzáadásával és préseléssel állítjuk elő.
A készítmény mg/tabletta mg/tabletta
(a) Hatóanyag 250 250
(b) Laktóz B.P. 210 26
(c) Povidon B.P. 15 9
(d) Nátrium-keményítő-
glikolát 20 12
(e) Magnézium-sztearát 5 3
500 300
HU 219 454 Β
B készítmény mg/tabletta mg/tabletta
(a) Hatóanyag 250 250
(b) Laktóz B.P. 150 -
(c) Avicel PH 101 60 26
(d) Povidon B.P. (d) Nátrium-keményító- 15 9
glikolát (e) Magnézium- 20 12
sztearát 5 3
C készítmény 500 mg/tabletta 300
Hatóanyag 100
Laktóz 200
Keményítő 50
Povidon 5
Magnézium-sztearát 4 359
A következő D és E készítményeket az egymással elegyített összetevők közvetlen préselésével állítjuk elő. Az E készítményben alkalmazott laktóz közvetlen préselésre alkalmas típus (Dairy erest - „Zeparox”).
D készítmény
mg/tabletta
Hatóanyag 250
Előzselatinizált keményítő 150
NF15 E készítmény 400 mg/tabletta
Hatóanyag 250
Laktóz 150
Avicel 100 500
F készítmény (szabályozottan felszabaduló)
A készítményt az alábbi összetevők povidonoldattal való nedvesgranulálásával, majd magnézium-sztearát hozzáadásával és préseléssel készítjük.
mg/tabletta (a) Hatóanyag 500 (b) Hidroxi-propil-metilcellulóz (Methocel K4M Prémium) 112 (c) Laktóz B.P. 53 (d) Povidon B.P. 28 (e) Magnézium-sztearát 7
700
A hatóanyag felszabadulása mintegy 6-8 óra alatt történik, 12 óra elteltével válik teljessé.
B) példa
Kapszulák készítése
A készítmény
A kapszulakészítményt úgy állítjuk elő, hogy az előbbi A) példában szereplő D készítmény összetevőit elegyítjük egymással, és kétrészes keményzselatin kapszulákba töltjük. Az alábbi B készítményt hasonló módon állítjuk elő.
B készítmény mg/kapszula
(a) Hatóanyag 250
(b) Laktóz B.P. (c) Nátrium-keményítő- 143
glikolát 25
(d) Magnézium-sztearát C készítmény 2 420 mg/kapszula
(a) Hatóanyag 250
(b) Macrogol 4000 B.P. 350 600
A C készítmény kapszuláit úgy állítjuk elő, hogy a Macrogol 4000 B.P.-t megolvasztjuk, az olvadékban a hatóanyagot diszpergáljuk, és az olvadékot kétrészes keményzselatin kapszulákba töltjük.
D készítmény mg/kapszula
Hatóanyag 250
Lecitin 100
Földimogyoró-olaj 100
450
A D készítmény kapszuláit úgy készítjük, hogy a hatóanyagot a lecitinben és a földimogyoró-olajban diszpergáljuk, majd a diszperziót lágy, rugalmas zselatinkapszulákba töltjük.
E készítmény (szabályozottan felszabaduló, kapszula)
Az alábbi kapszulákat, amelyekből a hatóanyag szabályozottan szabadul fel, úgy készítjük, hogy az a, b és c összetevőket extruder alkalmazásával extrudáljuk, az exrudátumot gömbökké alakítjuk és szárítjuk. A szárított pelleteket ezután a szabaddá válást szabályozó membránnal (d) vonjuk be, majd kétrészes keményzselatin kapszulákat töltjük.
mg/kapszula (a) Hatóanyag 250 (b) Mikrokristályos cellulóz 125 (c) Laktóz B.P. 125 (d) Etil-cellulóz 13
513
C) példa
Injektálható készítmények
A készítmény
Hatóanyag 0,200 g
0,1 mol/l-es hidrogén-klorid-oldat vagy 0,1 mol/l-es nátrium-hidroxid-oldat pH 4,0-7,0-re
Steril víz kiegészítésül 10 ml-re
A hatóanyagot a 35-40 °C hőmérsékletű víz zömében feloldjuk, az oldat pH-ját 4,0 és 7,0 közé állítjuk a hidrogén-klorid vagy a nátrium-hidroxid szükség szerinti alkalmazásával. Az elegyet ezután vízzel a kívánt térfogatra töltjük fel, és steril micropore szűrőn steril 10 ml-es borostyánszínű üvegfiolákba (1 típus) szűrjük, sterilen lezárjuk és kupakoljuk.
B készítmény
Hatóanyag 0,125 g
Steril, pirogénmentes, pH 7 foszfátpuffer kiegészítésül 25 ml-re
HU 219 454 Β
D) példa
Intramuszkuláris injekció Hatóanyag 0,20 g
Benzil-alkohol 0,10 g
Glikofurol 75 1,45 g
Injekciós minőségű víz kiegészítésül 3,00 ml-re
A hatóanyagot a glikofurolban oldjuk. Ezután az oldathoz hozzáadjuk a benzil-alkoholt, és oldjuk abban, majd a térfogatot vízzel a kívánt értékre állítjuk be. Az elegyet ezután steril micropore szűrőn szűrjük, és steril 3 ml-es, borostyánszínű üvegfiolákba (1 típus) zárjuk.
E) példa Szirup
Hatóanyag 0,25 g
Szorbitoldat 1,50 g
Glicerin 2,00 g
Nátrium-benzoát 0,005 g
Őszibarack-aroma 17.42.3169 0,0125 ml
Tisztított víz kiegészítésül 5,00 ml-re
A hatóanyagot a glicerin és a tisztított víz zömének elegyében oldjuk. A nátrium-benzoát vizes oldatát hozzáadjuk a fenti oldathoz, majd az elegyhez a szorbit oldatát, végül az aromaanyagot adjuk. Az elegyet vízzel a kívánt térfogatra egészítjük ki és jól összekeverjük.
F) példa
Kúp mg/kúp
Hatóanyag 250
Keményzsír,
BP (Witepsol Η15 - Dynamit Nobel) 1770 2020
A Witepsol H15 1/5 részét gázköpenyes edényben legfeljebb 45 °C hőmérsékleten megolvasztjuk. A hatóanyagot 200 pm-es szitán átszitáljuk, és belekeveijük az olvadt alapanyagba, ezt vágófejjel ellátott Silversonnal végezzük, a keverést sima diszperzió eléréséiig folytatjuk. Az elegy hőmérsékletét 45 °C-on tartva a szuszpenzióhoz hozzáadjuk a maradék Witepsol H 15-öt, és homogén eleggyé keverjük. A teljes szuszpenziót 250 pm-es rozsdamentes acél szitán engedjük át állandó keverés mellett, és hagyjuk 40 °C hőmérsékletre hűlni. Amikor a szuszpenzió a 38-40 °C hőmérsékletet eléri, 2,02 g-onként megfelelő 2 ml-es műanyag öntőformába töltjük. A kúpokat hagyjuk szobahőmérsékletre hűlni.
G) példa
Pesszáriumok mg/pesszárium
Hatóanyag 250
Dextróz-anhidrát 380
Burgonyakeményítő 363
Magnézium-sztearát 7
1000
A fenti összetevőket közvetlenül elegyítjük, és az elegy közvetlen préselésével pesszáriumokat készítünk.
A vírusellenes aktivitás vizsgálata
a) Anti-HIV-aktivitás (lS,4R)-cisz-4-[2-amino-6-(ciklopropil-amino)9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanol anti-HIV-aktivitását vizsgáljuk MT4 sejtekben Averett D. R. [J. Virol. Methods, 23, 263-276 (1989)] eljárásával. Tíz meghatározás átlagából az IC50-értéket 4,0±l,4 mol/1nek találjuk.
b) Anti-HBV-aktivitás
A Sells és munkatársai által leírt HepG2, 2.2.15 humán HBV-termelő sejtvonal [PNAS 84, 1005 (1987) és J. Virol. 62, 2836 (1988)] számos jellemzőjében hasonlónak mutatkozik a HBV-vel krónikusan fertőzött hepatocitához. Annak alapján, hogy csimpánzok megfertőzésére képes, fertőzőnek bizonyul.
A vegyületek anti-HBV-aktivitásnak vizsgálatára egyrétegű tenyészeteket kezelünk a vizsgálandó vegyületek 50-200 mol/1 koncentrációjával 10 napon át.
Az extracelluláris virion DNS-t (Dane-részecskék) tartalmazó felülúszó tápközeget a 3., 6. és 10. napon összegyűjtjük, 1 mg/ml proteináz K-val és 1% nátriumdodecil-szulfáttal kezeljük, és 50 °C hőmérsékleten 1 órán át inkubáljuk. A DNS-t azonos térfogatú fenollal, majd kloroformmal extraháljuk, majd ammóniumacetáttal és propanollal kicsapjuk. A DNS-csapadékot Schleicher és Schuell eljárásával [S&S, 10 Optical Ave., Keene, NH 03431, Publication #700 (1987)] feloldjuk, nitro-cellulózon gyűjtjük és Southern eljárásával [J. Mól. Biok, 98, 503 (1975)] kezeljük. A sejteket összegyűjtjük, az intracelluláris DNS-t a sejtek guanidin-izotiocianátal végzett lízisét követően kinyeqük. Az intracelluláris DNS-t az extracelluláris DNS-nél leírttal azonos módon kezeljük. Az ammónium-acetáttal és propanollal végzett kicsapást követően az intracelluláris DNS-csapadékot oldjuk, Hind III restrikciós endonukleázzal hasítjuk, agarózgélre visszük, és Southern eljárásával kezeljük, hogy meghatározzuk a replikatív intermedier formák mennyiségét. A hatóanyag vírusellenes aktivitását a tápközegbe kijutó Dane-részecskék legalább 100-szoros csökkenésének mérésekor állapítjuk meg, hasonló csökkenést kívánunk meg az intracelluláris replikatív intermedierek esetén.
Az (1 S,4R)-cisz-4-[2-amino-6-(N-ciklopropil-Nmetil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanolt a fenti eljárással megvizsgáltuk és 100 mol/1 koncentrációban hatásos anti-HBV-aktivitásúnak találtuk.

Claims (12)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás (I) általános képletű enantiomer vegyületek, sóik és foszfát-észtereik vagy ezen észterek sói előállítására - a képletben R jelentése ciklopropil-aminovagy N-ciklopropil-N-metil-amino-csoport, és A jelentése (1S,4R)- vagy (lR,4S)-konfigurációjú 2-ciklopentén-l-metanol-4-il-csoport - amely vegyületek lényegében mentesek a másik enantiomertől, azzal jellemezve, hogy
    a) egy (II) általános képletű enantiomer vegyületet - a képletben A jelentése a tárgyi körben megadott, Z
    HU 219 454 Β jelentése kilépőcsoport, ciklopropil-aminnal vagy Nciklopropil-N-metil-aminnal reagáltatunk; vagy
    b) egy (IV) általános képletű enantiomer vegyületről - a képletben A és R jelentése a tárgyi körben megadott, R3 jelentése amino-védőcsoport - az R3 aminovédőcsoportot savas reagenssel végzett reagáltatással eltávolítjuk, vagy
    c) egy (I) általános képletű vegyület racém foszfátészterét rezolváljuk, és kívánt esetben a következő átalakítási műveletek bármelyikét elvégezzük:
    i) egy kapott (I) általános képletű vegyületet sóvá, foszfát-észterré vagy az észter sójává alakítunk, vagy ii) egy fenti só, észter vagy észter sója formájában kapott (I) általános képletű vegyületet az (I) általános képletű vegyületté vagy annak más fenti származékává alakítunk.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás az (lS,4R)-cisz-4[2-amino-6-(ciklopropil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1-metanolnak a megfelelő (lR,4S)-enantiomertől lényegében mentes formában való előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelő reagenseket alkalmazzuk.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás az (lS,4R)-cisz4-[2-amino-6-(N-ciklopropil-N-metil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanolnak a megfelelő (lR,4S)-enantiomertól lényegében mentes formában való előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelő reagenseket alkalmazzuk.
  4. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás az (I) általános képletű (lS,4R)-enantiomer-vegyületek gyógyászati célra alkalmas sóinak, az 1. igénypontban megjelölt észtereinek, és észterei sóinak előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelő reagenseket alkalmazzuk.
  5. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás az (I) általános képletű (lR,4S)-enantiomer-vegyületek foszfátésztereinek vagy ezen észterek sóinak előállítására, azzal jellemezve, hogy a megfelelő reagenseket alkalmazzuk.
  6. 6. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy legalább egy, az 1. igénypont szerint előállított (I) általános képletű vegyületet vagy gyógyászati célra alkalmas sóját, foszfát-észterét vagy ezen észter sóját - a képletben a helyettesítők jelentése az 1. igénypontban megadott - gyógyászati célra alkalmas hordozó- és/vagy egyéb segédanyagokkal összekevetjük és készítménnyé alakítjuk.
  7. 7. Az (I) általános képletű enantiomer vegyületek, sóik és foszfát-észtereik vagy ezen észterek sói - a képletben R jelentése ciklopropil-amino- vagy N-ciklopropil-N-metil-amino-csoport, és A jelentése (1S,4R)vagy (lR,4S)-konfigurációjú 2-ciklopentén-l-metanol4-il-csoport - amely enantiomerek és fenti származékaik lényegében mentesek a másik enantiomertől.
  8. 8. A 7. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyületek körébe tartozó (lS,4R)-cisz-4-[2-amino-6-(ciklopropil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-l-metanolnak a megfelelő (lR,4S)-enantiomertől lényegében mentes formája.
  9. 9. A 7. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyületek körébe tartozó (lS,4R)-cisz-4-[2-amino-6-(Nciklopropil-N-metil-amino)-9H-purin-9-il]-2-ciklopentén-1-metanolnak a megfelelő (lR,4S)-enantiomertől lényegében mentes formája.
  10. 10. A 7. igénypont szerinti (I) általános képletű (lS,4R)-enantiomer-vegyületek gyógyászati célra alkalmas sói, foszfát-észterei és ezen észtereinek sói.
  11. 11. A 7. igénypont szerinti (I) általános képletű (lR,4S)-enantiomer-vegyületek foszfát-észterei vagy ezen észterek sói,
  12. 12. Gyógyászati készítmények, azzal jellemezve, hogy legalább egy, a 7. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyületet - a képletben a helyettesítők jelentése a 7. igénypontban megadott -, gyógyászati célra alkalmas sóját, foszfát-észterét vagy ezen észter sóját és gyógyászati célra alkalmas hordozó- és/vagy egyéb segédanyagot tartalmaznak.
HU407/90A 1989-12-22 1990-12-21 Purin-nukleozid-származékok, ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények és eljárás ezek előállítására HU219454B (hu)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU9902538A HU220668B1 (hu) 1989-12-22 1990-12-21 Enantiomer purinszármazékok és előállításuk
HU9902543A HU220630B1 (hu) 1989-12-22 1990-12-21 Új pirimidinilszármazékok és előállításuk
HU9902539A HU220067B (hu) 1989-12-22 1990-12-21 Enantiomer 4-amino-2-ciklopentén-1-metanol dibenzoil-tartarát sók

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/455,201 US5034394A (en) 1988-06-27 1989-12-22 Therapeutic nucleosides

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9008407D0 HU9008407D0 (en) 1991-07-29
HU219454B true HU219454B (hu) 2001-04-28

Family

ID=23807819

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU407/90A HU219454B (hu) 1989-12-22 1990-12-21 Purin-nukleozid-származékok, ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények és eljárás ezek előállítására
HU9902539A HU220067B (hu) 1989-12-22 1990-12-21 Enantiomer 4-amino-2-ciklopentén-1-metanol dibenzoil-tartarát sók
HU9902543A HU220630B1 (hu) 1989-12-22 1990-12-21 Új pirimidinilszármazékok és előállításuk

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9902539A HU220067B (hu) 1989-12-22 1990-12-21 Enantiomer 4-amino-2-ciklopentén-1-metanol dibenzoil-tartarát sók
HU9902543A HU220630B1 (hu) 1989-12-22 1990-12-21 Új pirimidinilszármazékok és előállításuk

Country Status (30)

Country Link
EP (3) EP0921114A1 (hu)
JP (2) JPH11158160A (hu)
CN (1) CN1028106C (hu)
AP (1) AP196A (hu)
AT (1) ATE181917T1 (hu)
AU (1) AU633672B2 (hu)
CA (1) CA2033044C (hu)
CY (1) CY2145B1 (hu)
CZ (1) CZ283481B6 (hu)
DE (2) DE69033197T2 (hu)
DK (1) DK0434450T3 (hu)
ES (1) ES2133138T3 (hu)
FI (2) FI106461B (hu)
GR (1) GR3031100T3 (hu)
HK (1) HK1009600A1 (hu)
HU (3) HU219454B (hu)
IE (3) IE904652A1 (hu)
IL (1) IL96748A (hu)
LU (1) LU90426I2 (hu)
MX (1) MX9203215A (hu)
MY (1) MY104575A (hu)
NL (1) NL990028I2 (hu)
NZ (1) NZ236593A (hu)
PL (1) PL167097B1 (hu)
PT (1) PT96321B (hu)
RU (2) RU2068849C1 (hu)
SG (1) SG49685A1 (hu)
SK (2) SK280216B6 (hu)
TW (2) TW473466B (hu)
ZA (1) ZA9010365B (hu)

Families Citing this family (57)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NO169123C (no) * 1988-01-20 1992-05-13 Univ Minnesota Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive karbocykliske 2',3'-dideoksy-2',3'-didehydropurinnukleosidanaloger
CA2001401A1 (en) * 1988-10-25 1990-04-25 Claude Piantadosi Quaternary amine containing ether or ester lipid derivatives and therapeutic compositions
GB9108376D0 (en) * 1991-04-19 1991-06-05 Enzymatix Ltd Cyclopentenes
GB9204015D0 (en) 1992-02-25 1992-04-08 Wellcome Found Therapeutic nucleosides
GB9205071D0 (en) * 1992-03-09 1992-04-22 Wellcome Found Therapeutic nucleosides
DE69431596D1 (de) * 1993-06-10 2002-11-28 Wake Forest University Winston (phospho)lipide zum bekämpfen einer hepatitis b-infektion
GB9402161D0 (en) * 1994-02-04 1994-03-30 Wellcome Found Chloropyrimidine intermediates
GB9417249D0 (en) * 1994-08-26 1994-10-19 Wellcome Found A novel salt
ATE395922T1 (de) * 1994-08-29 2008-06-15 Univ Wake Forest Lipid-analoge zur behandlung von viralen infektionen
US7135584B2 (en) 1995-08-07 2006-11-14 Wake Forest University Lipid analogs for treating viral infections
US5977061A (en) * 1995-04-21 1999-11-02 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic N6 - substituted nucleotide analagues and their use
GB9600142D0 (en) * 1996-01-05 1996-03-06 Wellcome Found Chemical compounds
PL330747A1 (en) * 1996-06-25 1999-05-24 Glaxo Group Ltd Vx478, zidovudin, ftc and/or 3tc containing combinations for use in treating hiv infections
IL127350A0 (en) * 1996-06-25 1999-10-28 Glaxo Group Ltd Combinations comprising VX478 zidovudine and/or 1592U89 for use in the treatment of HIV
SK285229B6 (sk) * 1997-05-13 2006-09-07 Lonza Ag Spôsob výroby derivátov (1R,4S)- alebo (1S,4R)-1-amino-4- (hydroxymetyl)-2-cyklopenténu a enantioméru (1R,4S)-N-butyryl-1- amino-4-(hydroxymetyl)-2-cyklopenténu
GB9709945D0 (en) * 1997-05-17 1997-07-09 Glaxo Group Ltd A novel salt
AU769660B2 (en) * 1997-05-17 2004-01-29 Glaxo Group Limited Carbocyclic nucleoside hemisulfate and its use in treating viral infections
GB9721780D0 (en) * 1997-10-14 1997-12-10 Glaxo Group Ltd Process for the synthesis of chloropurine intermediates
AU2702899A (en) * 1997-10-24 1999-05-17 Glaxo Group Limited Process for preparing a chiral nucleoside analogue
WO1999024431A1 (en) * 1997-11-12 1999-05-20 Glaxo Group Limited Process for preparing a chiral nucleoside analogue
CZ298144B6 (cs) * 1997-11-27 2007-07-04 Lonza Ag Zpusob výroby (1S,4R)- nebo (1R,4S)-4-(2-amino-6-chlor-9-H-purin-9-yl)-2-cyklopenten-1-methanolu
YU44900A (sh) 1998-01-31 2003-01-31 Glaxo Group Limited Derivati 2-(purin-9-il)tetrahidrofuran-3,4-diola
GB9802472D0 (en) * 1998-02-06 1998-04-01 Glaxo Group Ltd Pharmaceutical compositions
GB9820417D0 (en) * 1998-09-18 1998-11-11 Glaxo Group Ltd Antiviral combinations
GB9821058D0 (en) * 1998-09-28 1998-11-18 Univ Cardiff Chemical compound
US6433170B1 (en) 1998-10-30 2002-08-13 Lonza Group Method for producing 4-[2',5'-diamino-6'-halopyrimidine-4'-yl)amino]- cyclopent-2-enylmethanols
CN1115338C (zh) * 1998-10-30 2003-07-23 隆萨股份公司 4－[(2′,5′－二氨基－6′－卤代嘧啶－4′－基)氨基]－环戊－2－烯基甲醇的制备方法
GB9903091D0 (en) * 1999-02-12 1999-03-31 Glaxo Group Ltd Therapeutic nucleoside compound
US7026469B2 (en) 2000-10-19 2006-04-11 Wake Forest University School Of Medicine Compositions and methods of double-targeting virus infections and cancer cells
EP1235834A1 (en) * 1999-12-10 2002-09-04 Glaxo Group Limited (1r,cis)-4-(4-amino-7h-pyrr0l0[2,3- i(d)]pyrimidine-7-yl)-2-cyclopentene-1-methanol derivatives as antiviral
PE20010915A1 (es) * 1999-12-10 2001-09-29 Glaxo Group Ltd Analogos de (1s, cis)-4-(2-amino-9h-purin-9-il)-2-ciclopenten-1-metanol para uso en el tratamiento de infecciones virales
DE10042655A1 (de) 2000-08-31 2002-03-14 Aventis Pharma Gmbh Verfahren zur Herstellung von Inhibitoren der Zell-Adhäsion
US7309696B2 (en) 2000-10-19 2007-12-18 Wake Forest University Compositions and methods for targeting cancer cells
KR100891366B1 (ko) 2001-06-29 2009-04-02 인스티튜트 오브 오르가닉 케미스트리 앤드 바이오케미스트리, 어케더미 오브 사이언시스 오브 더 체크 리퍼블릭 항 바이러스 활성을 갖는 6-'2-(포스포노메톡시)알콕시 피리미딘 유도체
MY169670A (en) 2003-09-03 2019-05-08 Tibotec Pharm Ltd Combinations of a pyrimidine containing nnrti with rt inhibitors
ES2425115T3 (es) * 2001-08-21 2013-10-11 Viiv Healthcare Uk Limited Método de cribado para la reacción de hipersensibilidad a un fármaco
US7550261B2 (en) 2001-08-21 2009-06-23 Smithkline Beecham Corporation Method of screening for drug hypersensitivity reaction
CN100469131C (zh) 2001-08-31 2009-03-11 汤姆森许可公司 实现条件存取系统和传输、接收及处理内容的方法和设备
US6780635B2 (en) 2001-12-27 2004-08-24 Council Of Scientific And Industrial Research Process for the preparation of optically active azabicyclo heptanone derivatives
US20060084627A1 (en) * 2002-06-27 2006-04-20 Medivir Ab Synergistic interaction of abacavir and alovudine
DK1644389T3 (da) 2003-06-16 2011-05-09 Acad Of Science Czech Republic Pyrinidinforbindelser med phosphonatgrupper som antivirale nukleotidanaloger
GB0320738D0 (en) 2003-09-04 2003-10-08 Glaxo Group Ltd Novel process
EP1857458A1 (en) * 2006-05-05 2007-11-21 SOLMAG S.p.A. Process for the preparation of abacavir
JP5334852B2 (ja) * 2006-09-28 2013-11-06 エステヴェ キミカ， エス．エー． アバカビルの製造方法
EP1905772A1 (en) * 2006-09-28 2008-04-02 Esteve Quimica, S.A. Process for the preparation of abacavir
EP1939196A1 (en) * 2006-12-21 2008-07-02 Esteve Quimica, S.A. Process for the preparation of abacavir
US8236797B2 (en) 2007-06-18 2012-08-07 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Bromo-phenyl substituted thiazolyl dihydropyrimidines
EP2085397A1 (en) 2008-01-21 2009-08-05 Esteve Quimica, S.A. Crystalline form of abacavir
TWI444384B (zh) 2008-02-20 2014-07-11 Gilead Sciences Inc 核苷酸類似物及其在治療惡性腫瘤上的用途
CN102149716A (zh) * 2008-09-09 2011-08-10 阿斯利康(瑞典)有限公司 制备[1S-[1α,2α,3β(1S*，2R*),5β]]-3-[7-[2-(3,4-二氟苯基)-环丙氨基]-5-(丙硫基)-3H-1,2,3-三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羟乙氧基)环戊烷-1,2-二醇的方法及其中间体
AU2012363635B2 (en) * 2012-01-03 2015-07-23 Cellceutix Corporation Carbocyclic nucleosides and their pharmaceutical use and compositions
EP2962693B1 (en) 2013-02-27 2019-01-09 Kyoto University Pharmaceutical composition comprising abacavir for the treatment of cancer
IN2013MU03145A (hu) 2013-10-03 2015-07-03 Lupin Ltd
CN104558035B (zh) * 2013-10-22 2017-12-19 连云港恒运药业有限公司 一种替诺福韦前药的纯化方法
CN104788451A (zh) * 2014-01-21 2015-07-22 浙江九洲药业股份有限公司 一种阿巴卡韦的制备方法
CN109239253B (zh) * 2018-09-21 2021-07-09 江苏威奇达药业有限公司 一种阿巴卡韦的杂质的高效液相检测方法
WO2021209563A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Som Innovation Biotech, S.A. Compounds for use in the treatment of viral infections by respiratory syndrome-related coronavirus

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT86377B (pt) * 1986-12-24 1990-11-20 Lilly Co Eli Processo para a preparacao de conjugados de imunoglobulinas com um difluoronucleosideo acilado
NO169123C (no) * 1988-01-20 1992-05-13 Univ Minnesota Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive karbocykliske 2',3'-dideoksy-2',3'-didehydropurinnukleosidanaloger
GB8815265D0 (en) * 1988-06-27 1988-08-03 Wellcome Found Therapeutic nucleosides
EP0366385B1 (en) * 1988-10-24 1993-06-09 The Wellcome Foundation Limited Guanine derivatives having antiviral activity and their pharmaceutically acceptable salts
NZ233197A (en) * 1989-04-13 1991-11-26 Richard Thomas Walker Aromatically substituted nucleotide derivatives, intermediates therefor and pharmaceutical compositions
US4939252A (en) * 1989-04-20 1990-07-03 Hoffmann-La Roche Inc. Novel intermediates for the preparation of Carbovir

Also Published As

Publication number Publication date
MY104575A (en) 1994-04-30
TW371660B (en) 1999-10-11
DE69033197D1 (de) 1999-08-12
FI20001175A (fi) 2000-05-16
HU9902539D0 (en) 1999-10-28
HU9902543D0 (en) 1999-10-28
LU90426I2 (fr) 1999-10-06
PL167097B1 (pl) 1995-07-31
NL990028I2 (nl) 2000-02-01
PT96321A (pt) 1991-09-30
SK658390A3 (en) 1999-10-08
NL990028I1 (nl) 1999-11-01
IE904652A1 (en) 1991-07-17
FI906367A (fi) 1991-06-23
ATE181917T1 (de) 1999-07-15
IE990826A1 (en) 2000-12-13
EP0921121A1 (en) 1999-06-09
HU220630B1 (hu) 2002-03-28
JPH11158160A (ja) 1999-06-15
NZ236593A (en) 1994-01-26
SG49685A1 (en) 1998-06-15
HK1009600A1 (en) 1999-06-04
AU633672B2 (en) 1993-02-04
GR3031100T3 (en) 1999-12-31
CN1028106C (zh) 1995-04-05
SK280216B6 (sk) 1999-10-08
SK280000B6 (sk) 1999-06-11
JPH11343292A (ja) 1999-12-14
TW473466B (en) 2002-01-21
DK0434450T3 (da) 2000-01-31
RU2091386C1 (ru) 1997-09-27
FI906367A0 (fi) 1990-12-21
ZA9010365B (en) 1992-08-26
CA2033044A1 (en) 1991-06-23
PT96321B (pt) 1998-06-30
IL96748A (en) 1995-07-31
EP0434450A3 (en) 1992-07-08
AU6841990A (en) 1991-06-27
AP9000234A0 (en) 1991-01-31
CZ283481B6 (cs) 1998-04-15
CA2033044C (en) 1999-07-13
CZ658390A3 (en) 1997-11-12
IE990825A1 (en) 2000-12-13
FI106461B (fi) 2001-02-15
HU9008407D0 (en) 1991-07-29
EP0434450A2 (en) 1991-06-26
MX9203215A (es) 1992-07-01
CN1054981A (zh) 1991-10-02
EP0921114A1 (en) 1999-06-09
HU220067B (hu) 2001-10-28
DE69033197T2 (de) 1999-10-28
PL288403A1 (en) 1992-06-26
ES2133138T3 (es) 1999-09-01
DE19975058I1 (de) 2007-01-25
EP0434450B1 (en) 1999-07-07
CY2145B1 (en) 2002-06-21
AP196A (en) 1992-06-30
RU2068849C1 (ru) 1996-11-10
IL96748A0 (en) 1991-09-16
SK247092A3 (en) 1999-06-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU219454B (hu) Purin-nukleozid-származékok, ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények és eljárás ezek előállítására
US5206435A (en) 4-amino-2-cyclopentene-1-methanol
FI93546B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten dideoksikarbosyklisten nukleosidianalogien valmistamiseksi
EP0361831B1 (en) Antiviral nucleoside combination
EP0366385B1 (en) Guanine derivatives having antiviral activity and their pharmaceutically acceptable salts
JP3164361B2 (ja) 治療用ヌクレオシド
KR100192994B1 (ko) 치료용 뉴클레오시드
FI105813B (fi) Enantiomeerisia välituotteita
HU211577A9 (hu) Terápiás nukleozidok Az átmeneti oltalom az 1 -20. igénypontokra vonatkozik.
HU220668B1 (hu) Enantiomer purinszármazékok és előállításuk
WO2007059330A2 (en) Cubane nucleoside analogs