FR2519253A1 - Procede pour isoler des composes a effet laxatif du sene medicinal, ces composes et leurs utilisations therapeutiques - Google Patents

Abstract

POUR ISOLER DES COMPOSES A EFFET LAXATIF DU SENE MEDICINAL, ON EXTRAIT LE SENE DANS UNE PERCOLATION A CONTRE-COURANT, PAR LE METHANOL AQUEUX ET ON ELIMINE COMPLETEMENT LE METHANOL A UNE TEMPERATURE 50C, ON PURIFIE L'EXTRAIT PAR EXTRACTION CONTINUE LIQUIDE-LIQUIDE AVEC UN SOLVANT ORGANIQUE, ON ACIDIFIE LE PRODUIT RAFFINE SOUS AGITATION A PH 1,5 A 2,0, ON FAIT CRISTALLISER PAR ENSEMENCEMENT ET ON SEPARE LES SENNOSIDES BRUTS CRISTALLISES QU'ON RECRISTALLISE SI ON LE DESIRE. LA FIGURE 1 REPRESENTE SCHEMATIQUEMENT L'ETAPE D'EXTRACTION.

Description

Procédé pour isoler des composés à effet laxatif du séné

médicinal, ces composés et leurs utilisations thérapeutiques.

La présente invention concerne un procédé pour isoler des composés possédant un effet laxatif à partir du séné médicinal, les composés tels qu'ainsi obtenus et des compositions pharmaceutiques contenant ces composés en tant

que substances actives.

Le séné médicinal consiste en feuilles et follicules

séchés du séné, par exemple du séné indien (Cassia augusti-

folia) et du séné égyption (Cassia acutifolia) L'action laxative du séné médicinal est due à deux classes de composés chimiques, à savoir 1) les sennosides et 2) les substances autres que les sennosides possédant une action laxative (en

abrégé ci-après NSLAS).

Les substances à action laxative contenues dans le séné médicinal sont des glucosides bimoléculaires dérivés des deux composés anthracéniques rhéine et aloe-émodine Les plus

importants sont les sennosides A, B, A 1, C et D Les sennosi-

des A, B et A 1 sont des bis-glucosylrhéinanthrones et les

sennosides C et D sont des glucosylrhéine-gltcosylaloe-

émodine-dianthrones. En plus des sennosides, le médicament brut contient également des aglucones (sennidines) et vautres produits de décomposition et dérivés des sennosides; Certains d'entre eux peuvent avoir un effet laxatif mais ils peuvent également

être toxiques et provoquer des effets secondaires indésirable.

Parmi les effets secondaires typiques des compositions à base de séné, on citera les nausées, les vomissements, les

flatulences, les coliques et les diarrhées.

On a déjà décrit divers procédés pour extraire les

substances à action laxative du séné médicinal Les glucosi-

des à action laxative qui sont les plus importants, c'est-à-

dire les sennosides A et B, ont été isolés du séné médicinal pour la première fois par Stoll et collaborateurs (voir Helv. Chia Acta, XXXII, Fasciculus VI ( 1949), 1892) Par la suite, on a publié de nombreux brevets décrivant des procédés de

préparation de concentrés de sennosides.

Jusqu'à maintenant, l'extrait de séné était en général préparé en deux stades opératoires Dans le premier stade, on élimine les pigments végétaux, les matières grasses et autres impuretés à l'aide d'un solvant approprié, par exemple le chloroforme, l'éther (voir brevet US n O 3 089 814)

ou le méthanol à 90 % (voir DE 1 617 667) Après cette extrac-

tion préliminaire, les glucosides actifs sont extraits du produit en deux stades opératoires par le méthanol, le

méthanol aqueux, l'éthanol aqueux ou simplement par l'eau.

Pour faciliter l'extraction, on peut alcaliniser le méthanol mis en oeuvre par addition de bases organiques (voir brevet DE 23 397) Les bases organiques forment avec les sennosides des sels solubles dans le méthanol qui peuvent être extraits facilement Toutefois, un inconvénient de ce

procédé réside en ce que l'extrait contient de fortes quanti-

tés d'impuretés.

On a également proposé d'utiliser des solvants d'extraction acidifiés par l'acide citrique (voir brevet FRGN 6611 ( 1969)) ou par l'acide oxalique (voir brevet GB 832 017) Dans ce dernier cas, on a utilisé comme solvant l'éthanol à 70 % Lorsqu'on utilise pour l'extraction du méthanol acide ou du méthanol aqueux acide, l'extrait contient moins d'impuretés que lorsqu'on extrait par des solvants basiques ou par l'eau seule Toutefois, ce procédé présente l'inconvénient que les sennosides, qui sont des composés acides, ne sont que peu solubles à l'état d'acides libres dans les solvants mis en oeuvre Par conséquent, la quantité de solvant nécessaire pour l'extraction est très grande et

peut atteindre 15 à 20 fois le poids de séné mis en oeuvre.

On sait également qu'on peut utiliser pour

l'extraction du médicament des mélanges méthanol-tétrahydro-

furanne, méthanol-dioxanne et tétrahydrofuranne-dioxanne acififiés par l'acide phosphorique (voir Hung Teljes, 6006 ( 1973)) et l'acide phosphorique aqueux (voir brevet DE 1 617 667) en tant que solvants Toutefois, ces solvants activent l'enzyme glucosidase au point qu'une partie du

glucoside actif est hydrolysée, spécialement lorsqu'on utili-

se des solutions faiblement acides dont le p H correspond à celui de la matière végétale d'origine Il en résulte une diminution de la quantité de matière active contenue dans

l'extrait (voir également brevet DE 2 915 063).

D'après la technique antérieure, le concentré de sennosides est obtenu à partir des extraits par des moyens variés.

On obtient un extrait solide contenant les sennosi-

des par séchage ménagé de l'extrait (brevet DE 1 617 667).

Le produit contient alors toutes les substances présentes dans l'extrait, et sa teneur en sennosides est d'environ

17 à 18 %.

Toutefois, les sennosides peuvent être séparés plus sélectivement si on les précipite de leurs solutions aqueuses par addition de solvants organiques Le produit obtenu contient moins de matières inertes et il a une teneur en sennosides de 60 à 70 % La précipitation peut être réalisée par addition d'éther éthylique (brevet FR M 611; Magyar G.

et collaborateurs, Hung Teljes, 6006 ( 1973)), l'alcool iso-

propylique, après traitement par une résine échangeuse d'ions fortement acide (voir brevet GB 832 017) ou l'éthanol (voir brevet FI 41 588) Les sennosides en solution peuvent le cas échéant être convertis en sels de calcium (voir brevet US 3 089 814 et brevet FI 41 588) puis précipités par addition de solvants organiques: les glucosides actifs sont alors obtenus à l'état de sels de calcium La teneur en sennosides dans le produit précipité représente alors

d'environ 60 à 70 e%.

Pour obtenir les sennosides purs à l'état d'acides libres, on les isole à l'état de sels de calcium puis on décompose ces sels par l'acide oxalique (voir Stoll et collaborateurs, Helv Chim Acta, XXXII, Fasciculus VI

( 1949 >, 1892).

Ainsi donc, par ces procédés connus, on peut obte-

nir à partir du séné médicinal des extraits et des types

variés de concentrés contenant des substances à effet laxatif.

La quantité des substances à effet laxatif dans les concen-

trés dépend de la teneur de ces substances dans la matière première d'origine et du procédé de préparation mis en

oeuvre L'une des difficultés rencontrées dans la normalisa-

tion des compositions à base de séné réside dans la détermi-

nation des glucosides du séné Le médicament contient des

composés variés qui sont dosés en même temps que les glucosi-

des du séné Toutefois, l'action physiologique de ces composés individuels n'est pas la même Du fait que les

méthodes classiques d'analyse ne permettent pas de différen-

cier les glucosides du séné des autres composés possédant des

actions physiologiques différentes et provoquant éventuelle-

ment des réactions secondaires, il est difficile d'obtenir, à partir-desextraits classiques de séné, des préparations qui, pour une même dose, donnent toujours, de manière

reproductible, la même action.

La présente invention vise précisément à un procédé pour obtenir des composés laxatifs à partir du séné médicinal, procédé qui permet d'obtenir les substances à action laxative avec un rendement amélioré sous la forme la plus concentrée

possible et aussi exempte que possible des composants possé-

dant des effets secondaires indésirables.

Le procédé selon l'invention pour obtenir des composés à effet laxatif à partir du séné médicinal se caractérise en ce que a) on extrait le séné médicinal par du méthanol aqueux dans une percolation à contre-courant et on concentre l'extrait à une température égale ou inférieure à 500 C jusqu'à élimination complète du méthanol contenu dans l'extrait; b) on purifie l'extrait obtenu par extraction continue liquide-liquide à l'aide d'un solvant organique c) on transfère la matière raffinée (raffinat) obtenue dans un appareil de cristallisation, on acidifie, sous agitation, à un p H d'environ 1,5 à 2,0, on ensemence par des cristaux de sennosides, on laisse cristalliser sous agitation et on sépare les sennosides bruts cristallisés obtenus; d) puis, si on le désire, on recristallise les sennosides bruts, et facultativement e) on mélange sous agitation 10 parties en poids des liqueurs-mères du stade o) ci-dessus avec 2 parties en poids de chlorure de sodium, on décante la masse semi-solide qui a coagulé en surface, on la lave et, facultativement, on l'extrait par le méthanol à 95 %, on concentre la fraction

méthanolique et on sèche le résidu.

Pour la mise en oeuvre du procédé selon l'inven-

tion, on utilise des mélanges de méthanol et d'eau dans

lesquels les sennosides sont solubles On utilise de préfé-

rence le méthanol à 70 %o car la solubilité maximale des sen-

nosides se situe à une concentration en méthanol de 60 à 70 %.

L' extraction e S t effectuée p a r portion et d e préférence à température légèrement sup éri e ure à la température ambiante mais au maximum à une température de

solvant de + 350 C Jusqu'à maintenant, on évitait les tempéra-

tures élevées en raison du risque de décomposition des sennosi-

des Or la demanderesse a constaté avec surprise que les senno-

sides ne se décomposaient pas à une température légèrement supérieure à la température ambiante lorsqu'on utilisait le

méthanol comme solvant.

L'extraction du séné médicinal est réalisée dans une installation de percolation à contre-courant En général, on utilise de 2 à 4 percolateurs Si l'on doit réchauffer le

solvant d'extraction, on le fait circuler au travers d'un échan-

geur de chaleur extérieur dans lequel il est réchauffé à la

température voulue mais au maximum à 350 C Plus il y a de perco-

lateurs et moins il est nécessaire de réchauffer le solvant.

L'extrait obtenu contient alors moins d'impuretés gênantes et

les sennosides cristallisent entièrement à partir des liqueurs-

mères. Avant l'extraction, il est préférable de faire gonfler le séné médicinal sec dans un solvant, et il y a avantage à

utiliser à cet effet le "post-percolat" d'un extrait préalable.

Ainsi, on place le séné médicinal sec dans un percolateur, on le recouvre d'une plaque perforée pesant environ 0,7 kg/dm 2 et

on fait passer le solvant ou le post-percolat dans le percola-

tqur Le poids de solvant nécessaire représente environ 3 fois le poids du séné médicinal sec On laisse de préférence au repos pendant une nuit et on commence l'extraction le jour suivant. L'extraction est réalisée en 16 à 20 heures durant lesquelles on fait passer au travers de la masse sèche la quantité nécessaire de méthanol à 70 %D Du fait qu'il est préférable d'utiliser plusieurs percolateurs, en effectuant l'extraction, on fait d'abord passer le solvant dans le percolateur de la série de percolateurs qui contient la matière première la moins concentrée, c'est-à-dire celle qui a déjà été le plus fortement extraite et qui sera la prochaine à être évacuée De ce percolateur, le solvant passe au suivant et ainsi de suite L'extrait principal est retiré du percolateur qui a été le dernier à être garni Après évacuation d'une quan-

tité appropriée de l'extrait, on obtient en plus un post-

percolat qui peut être utilisé pour gonfler une nouvelle quan-

tité de séné médicinal sec A cet effet, on vide le percolateur contenant la matière première la plus épuisée, on le garnit d'une certaine quantité de séné, on fait passer dans l'appareil

le post-percolat et on procède à l'extraction le jour suivant.

Conformément au procédé selon l'invention, on peut extraire une partie de la drogue sèche par 4 parties seulement de solvant d'extraction Lorsqu'on utilise le méthanol à 70 eo à la température ambiante, la quantité résiduelle de substance contenue dans la drogue est d'environ 41 % par percolateur de la série de percolateurs Avec deux percolateurs, le rendement

d'extraction est de ( 1 0,412) x 100 = 83 %o et avec trois perco-

lateurs en série il est de ( 1 0,413) x 100 = 93 %.

Après l'extraction, on élimine le méthanol pratique-

ment de façon quantitative du percolat; le volume du résidu obtenu représente environ le 1/5 du volume du percolat On élimine le méthanol dans un appareil de distillation sous vide équipé d'une colonne de fractionnement En raison du risque d'hydrolyse des sennosides, la température ne doit pas dépasser

+ 50 DC.

Le concentré obtenu contient, en plus des sennosides, tous les produits extractibles de la matière végétale d'origine par le méthanol De préférence, on mélange le concentré avec 5 % environ de butane-2-ol qui maintient les matières grasses du concentre en émulsion et agit également en tant que préservateur,

empêchant une prolifération des microorganismes et une putré-

faction de la solution sous l'action de ces derniers.

Après distillation du méthanol, on purifie le concen-

tré par extraction liquide-liquide à l'aide d'un solvant organique Le solvant utilisé peut consister en un alcool ou une cétone soluble en partie dans l'eau, par exemple le butanol, la méthyléthylcétone ou la méthylisopropylcétone; le solvant préféré est le butane-2-ol L'extraction liquide-liquide est effectuée en continu dans un appareil de partage avec un effet de séparation d'environ 10 étages théoriques Le p H de la solution concentrée d'alimentation est d'environ 5,4 à 5; 6 car à à ce p H les sels des aglucones présents dans le séné médicinal sont hydrolysés au point qu'il y a élimination pratiquement

quantitative des aglucones du raffinat.

Avant l'utilisation, le butane-2-ol utilisé pour l'extraction est de préférence saturé d'eau Le concentré d'alimentation; soumis à l'extraction, est une solution très

concentrée, à une teneur en matières sèches d'environ 20 à 30 %.

Il contient des sels, des sucres, des aminoacides et d'autres

composés hydrosolubles provenant de la masse végétale.

l'extraction est de préférence effectuée de manière que le

rapport butane-2-ol/raffinat en cours d'opération soit d'envi-

ron 0,7 à 0,8:1.

Cette extraction liquide-liquide provoque l'élimina-

tion de la solution des matières grasses, des pigments végétaux gênants, des chlorophylles et des caroténoldes, des acides gras libres, des stéroldes, des dérivés anthracéniques d'aglucones, des glucosides neutres, des cires végétales et alcools de cire, des flavones et autres phénols, etc Ainsi donc, le raffinat obtenu est débarrassé d'impuretés gênantes au point qu'on peut

faire cristalliser la plus grande partie des sennosides direc-

tement à partir de la phase raffinat en acidifiant par un acide minéral jusqu'à un p H d'environ 1,2 à 2,0; l'acide minéral utilisé est de préférence l'acide chlorhydrique ou l'acide sulfurique. Pour faire cristalliser les sennosides de la phase raffinat, on place celle-ci dans un récipient et on introduit l'acide sous agitation jusqu'à ce que la solution présente un p H d'environ 1,5 à 2,0 La solution'est alors ensemencée à l'aide de cristaux de sennosides et abandonnée à la cristalli-

sation pendant une semaine, sous agitation.

Cependant, on peut également effectuer la cristalli-

sation dans un appareil de cristallisation opérant en continu.

Dans ce cas, la phase raffinat reste pendans une semaine envi-

ron dans l'appareil de cristallisation dans lequel elle est répartie dans deux compartiments ou plus reliés en série qui déchargent dans un décanteur Les récipients de cristallisation sont soumis en permanence à une agitation modérée et pour l'acidification, on introduit une solution de l'acide minéral

sous agitation dans le premier récipient La vitesse d'écoule-

ment laminaire vertical dans les récipients est d'environ 0,3 à 0,4 mm/mn Cette vitesse d'écoulement permet une sédimentation satisfaisante On filtre le produit cristallisé, on le lave-à l'eau et au méthanol ou à l'acétone et on le sèche Si on le

désire, on recristallise ce produit brut comme décrit ci-après.

Le séné médicinal contient une fraction importante du point de vue des effets biologiques; il s'agit de la fraction qui contient les substances à action laxative autres que les sennosides (NSLAS) Cette fraction se retrouve en proportions

variées dans les drogues brutes, les extraits et les prépara-

tions à base de séné En outre, ces substances se forment au cours de l'extraction de la drogue L'activité laxative de la

fraction NSLAS brute représente environ 60 % de l'activité laxa-

tive du mélange des sennosides purs Toutefois, la toxicité intraveineuse de la fraction de NSLAS brute représente environ fois celle du mélange des sennosides purs Les propriétés chimiques de la fraction de NSLAS, sa solubilité dans les divers solvants, les propriétés de partage et le comportement dans le cas de la formation de sels sont voisins des propriétés

correspondantes des sennosides.

La fraction de NSLAS contient les résidus des sennosi-

des restant dans les liqueurs-mères dans le cas o on fait cristalliser la phase raffinat après la purification par

extraction à l'aide du solvant organique La teneur en sennosi-

des de la fraction de NSLAS brute représente de 5 à 10 % Cette fraction contient de 5 à 10 % de rhéine-8-glucoside et de 80 à

% de composés dont la structure chimique et les effets physio-

logiques sont encore inconnus La fraction de NSLAS brute peut être séparée en deux fractions à peu près égales par lixiviation

à l'aide du méthanol à 95 % La fraction insoluble dans le métha-

nol à 95 % est une poudre brune A la chromatographie sur gel, ce produit de nature encore inconnue se comporte comme un composé homogène et a un volume de rétention correspondant à un poids moléculaire de 1 000 à 10 000 la partie de la fraction de NSTAS qui est soluble dans le méthanol à 95 % consiste en composés à bas poids moléculaire Cette fraction contient environ 20 % de sennosides sides La majeure partie de cette fraction consiste en composés

qui n'ont pas été identifiés antérieurement dans le séné médici-

nal ou qui sont entièrement inconnus.

La fraction de NSLAS brute peut être séparée facilement en mélangeant les liqueurs-mères des sennosides avec un sel, par exemple le chlorure de sodium A cet effet, après filtration des sennosides, on ajoute peu à peu deux parties en poids de chlorure de sodium solide, sous agitation continue, à 10 parties des

liqueurs-mères et on poursuit l'agitation pendant 1 à 2 heures.

On décante ensuite de la solution la masse semi-solide qui a coagulé à la surface de la matière solide, on lave en remettant en suspension dans l'eau, on agite la suspension pendant une nuit, on laisse le précipité sédimenter le jour suivant et on élimi;ne la plus grande partie de la solution de lavage par décantation On filtre le précipité sur un filtre sous vide ou par filtration centrifuge, on lave à l'eau puis au méthanol

anhydre et on sèche dans un courant d'air à température ambian-

te Lorsque la matière première utilisée consiste en follicules de séné, le rendement en la fraction de NISLAS brute représente environ 1,5 à 1,6 % du poids de la matière première mise en oeuvre La précipitation par relargage peut également 9 tre

réalisée sur une solution diluée.

Si on le désire, on peut recristalliser les sennosi-

des bruts obtenus après la cristallisation A cet effet, on met les sennosides bruts en suspension dans un mélange d'acétone et d'eau ( 50:50) de manière à former une suspension à environ %, on provoque la dissolution par addition d'hydroxyde de sodium jusqu'à p H 7,5 à 9 environ, avec formation de sels de sodium, et on reprécipite les sennosides en réglant la solution à un p H d'environ 1,5 à 2 par l'acide chlorhydrique, on sépare,

on lave à l'acétone aqueuse et on sèche.

Conformément à l'invention, les composés à effet laxatif contenus dans le séné médicinal peuvent être séparés en deux fractions, à savoir une fraction de sennosides et une fraction NSLAS Cette dernière fraction peut être elle-m 9 me séparée en deux autres frabtions, à savoir une "résine" et une fraction à bas poids moléculaire L'activité laxative de toutes les fractions représente environ 90 % de l'activité laxative totale du séné médicinal On trouvera dans le tableau ci-dessous les valeurs obtenues pour l'activité laxative et la toxicité

intraveineuse des fractions dans des essais sur des souris.

Tableau

Propriété Fraction de Fraction de NSLAS brute sennosides Fraction soluble Fraction dans le méthanol "résine"

à -955

action laxative 400 100 < 10 DL 50 i v mg/kg 4100 4100 130 Ainsi donc, le procédé selon l'invention permet d'obtenir, à partir de la drogue brute, les sennosides à une pureté de presque 100 %o En outre, à partir des liqueurs-mères des sennosides, on peut isoler la fraction brute de NSIAS à l'état concentré De plus, dans le procédé selon l'invention

pour isoler des substances à activité laxative à partir du séné-

médicinal, il n'est plus nécessaire de procéder à une extrac-

tion préliminaire du séné, contrairement à ce qui était le cas

dans les procédés connus de la technique antérieure.

Du fait que les sennosides obtenus par le procédé selon l'invention sont parfaitement caractérisés du point de vue chimique et pharmacologique, on peut les utiliser pour la préparation de compositions médicinales possédant des propriétés galéniques déterminées Par contre, avec les procédés de la technique antérieure, on ne pouvait obtenir que des extraits

galéniques plus ou moins bien définis.

L'invention a donc également pour objets des composi-

tions pharmaceutiques laxatives qui se caractérisent en ce qu'elles contiennent en tant que substance active au moins un composé obtenu par le procédé selon l'invention, en mélange

avec un diluant ou véhicule pharmaceutique solide ou liquide.

Les exemples qui suivent illustrent l'invention sans

toutefois en limiter la portée; dans ces exemples, les indica-

tions de parties et de % s'entendent en poids, sauf mention

contraire.

Exemple 1 -

On place 40 kg de séné médicinal dans deux percolateurs d'un volume de 250 litres reliés en série et recouverts de plaques d'acier perforées Le solvant utilisé pour l'extraction est le méthanol à 70 % qu'on envoie sur le séné médicinal dans le premier percolateur Au pied du percolateur se trouve une plaque de fond recouverte d'un tissu filtrant Au moyen d'un robinet de vidange disposé au-dessous de cette plaque, on fait

passer la solution sur le séné contenu dans le second percola-

teur; le solvant s'écoule librement au travers du premier percolateur Le débit du solvant est réglé au moyen du robinet de vidange du premier percolateur Le débit sur le second percolateur est réglé de manière que le niveau du solvant,

dans ce second percolateur, soit suffisamment haut pour recou-

vrir la plaqued'acier perforée qui pèse 0,7 kg/dm 2.

Pour extraire 40 kg de séné médicinal, on utilise au total 160 litres de solvant Lorsqu'on a fait passer cette quantité de méthanol à 70 % 5 sur les deux percolateurs et qu'on a recueilli une quantité appropriée de percolat, on relie le

robinet de vidange du percolateur à un récipient de post-

percolat et-on fait encore passer 60 litres de méthanol à 7 e%

sur les percolateurs On fait ensuite passer le solvant rési-

duel libre du premier percolateur dans la partie supérieure du second percolateur, et on recueille le post-percolat jusqu'à ce qu'on ait obtenu au total 120 litres On vidange ensuite le premier percolateur, on le garnit à nouveau de 40 kg de séné médicinal et on refoule par une pompe le post-percolat sur le séné: 120 litres de post-percolat suffisent pour recouvrir le séné médicinal contenu dans le percolateur On relie ensuite par des conduits l'écoulement à une pompe et un échangeur de chaleur et celui-ci au couvercle du percolateur et on fait circuler la solution jusqu'à ce que sa température atteigne

+ 300 C On abandonne alors au repos pendant une nuit.

Le jour suivant, on relie ce percolateur à celui qui a été extrait auparavant et on procède à l'extraction comme

décrit ci-dessus.

Pour chaque lot de 40 kg de séné médicinal, on recueil-

le 160 litres de percolat d'o l'on élimine le méthanol à l'évaporateur rotatif sous vide équipé d'une colonne à corps de garnissage On obtient environ 30 litres de culot qu'on extrait dans un appareil "mélangeurdécanteurt' (à 10 étages) par litres de butane-2-ol saturé d'eau On obtient environ 38 à 40 litres de raffinat aqueux et environ 30 à 32 litres d'extrait dans le butane-2-ol On acidifie le raffinat aqueux par l'acide sulfurique à 93 % sous agitation en 20 heures; on utilise à cet effet 1,6 % en volume d'acide sulfurique à 93 % par rapport au volume de liquide à acidifier La solution aci difiée a un p H de 1,5 à 2,0 Après agitation pendant encore 6 jours, on laisse le précipité sédimenter pendant la nuit, on filtre, on lave à l'eau jusqu'à ce que les eaux de lavage soient incolores, on lave au méthanol et on sèche dans un courant d'air à température ambiante Le rendement, pour 40 kg de matière première, est de 760 à 790 g (en matières sèches) contenant 90 à 94 % de sennosides Ainsi donc, le rendement représente environ 70 %o de la quantité de sennosides présente

dans la matière première.

On met en suspension 0,5 kg du produit brut dans litres d'un mélange acétone/eau à volumes égaux, on ajoute de la lessive de soude à 48 % sous agitation jusqu'à ce que la

solution présente un p H de 8,5 à 9 On filtre le résidu inso-

luble et on ajoute de l'acide chlorhydrique à 35 % au filtrat jusqu'à ce que le p H de la solution soit de 1,5 à 2 On poursuit l'agitation jusqu'à ce que la cristallisation commence et on laisse ensuite la solution cristalliser pendant au moins 3 heures On filtre le précipité, on lave sur filtre par 0,5 litre d'eau et 0,5 litre d'acétone et on sèche à température ambiante dans un courant d'air On peut mélanger le 1/5 des liqueurs-mères avec l'eau de lavage et l'acétone de lavage et utiliser cette solution comme solvant de cristallisation pour la quantité suivante égale de produit brut Le rendement pour 0,5 kg de produit brut est de 0, 460 kg (matières sèches) à une

teneur en sennosides de 98 à 99 %.

Exemple 2 -

On suit le mode opératoire de l'exemple 1 mais on utilise trois percolateurs en série et on ne réchauffe pas le méthanol à 70 % Les autres conditions sont les mêmes que dans l'exemple 1, et on utilise 160 litres de solvant pour 40 kg de séné médicinal A partir de 40 kg de séné médicinal, on obtient 0,890 kg de produit brut contenant 92 % de sennosides (matières

sèches) Le produit brut peut être recristallisé comme décrit -

dans l'exemple 1.

Exemple 3 -

L'extraction, l'élimination du méthanol de l'extrait et l'extraction liquide-liquide sont effectuées comme décrit dans l'exemple 1 Aprèstraitement par le butane-2-ol, on fait cristalliser le mélange de sennosid es du raffinat dans un appareil de cristallisation en continu Pour la cristallisation, on utilise deux récipients reliés entre eux et un troisième récipient qui sert de décanteur et qui est relié en série avec les autres On laisse sédimenter le mélange des sennosides dans

le dernier récipient, ce qui permet de séparer des liqueurs-

mères la plus grande partie du précipité A cet effet, on fait passer la phase raffinat obtenue après purification par le butane-2-ol à un débit d'environ 2 litres/h dans le premier récipient On pompe simultanément dans ce récipient de l'acide

sulfurique à 93 % en proportions de 1,6 % du volume du raffinat.

Pour empocher une sédimentation dans ce récipient, on agite le liquide en continu La suspension du premier récipient est ensuite envoyée par un conduit de débordement libre dans le second récipient également équipé d'un agitateur d'o, par un conduit de débordement libre, elle passe dans le troisième récipient dans lequel on laisse le précipité sédimenter, les liqueurs-mères débordant librement par un conduit de trop-plein libre dans un récipient de solvant usé On évacue le précipité

du troisième décanteur par un robinet disposé au fond de celui-

ci sous forme d'une suspension épaisse qu'on filtre sous vide, qu'on lave à l'eau puis au méthanol et qu'on sèche dans un courant d'air à température ambiante Le rendement pour 40 kg de matière première mise en oeuvre est de 790 g et la teneur

en sennosides de 91 %.

Exemple 4 -

On traite les liqueurs-mères obtenues dans l'exemple

1 après cristallisation du raffinat aqueux, par le chlorure de-

sodium A cet effet, on mélange peu à peu 40 litres des liqueurs-

mères (correspondant à 40 kg de la matière première mise en oeuvre à l'origine) sous agitation avec 8 kg de chlorure de

sodium On obtient un précipité semi-solide brunâtre On pour-

suit l'agitation pendant 2 heures et on laisse le précipité macérer dans la solution jusqu'au jour suivant On sépare alors les liqueurs-mères du précipité par décantation, on met le précipité en suspension dans 40 litres d'eau, on agite cette

suspension pendant 20 heures et on laisse le précipité sédimen-

ter On filtre ensuite le précipité sur un filtre sous vide, on lave avec de l'eau en abondance, on sèche à température ambiante dans un courant d'air et on fait passer la substance séchée sur un tamis à ouverture de maille de 0,5 mm Le rendement s'élève

à 0,60 kg.

L'analyse par chromatographie de liquide sous haute pression (HPIC) montre que le précipité contient environ 5 % de sennosides et également 5 % de rhéine-8-glucoside L'activité laxative de cette matière représente environ 58 % de l'activité

laxative des sennosides La toxicité déterminée par administra-

tion intraveineuse est DL 50 = 430 mg/kg (souris) Ainsi donc, cette fraction contient des composés inconnus qui, d'une part,

ont une activité laxative mais, d'autre part, ont une toxicité.

supérieure à celle des sennosides L'activité laxative de cette fraction ne contenant pas de sennosides représente environ 40 % de l'activité laxative totale du séné d'origine et de l'extrait brut.

On soumet 48 g de la fraction NSLAS brute à lixivia-

tion à 12 reprises par des quantités de 500 ml de méthanol à 95 %.

% A cet effet, on agite la poudre broyée dans chacune des

portions de méthanol à 95 % pendant au moins 2 heures On combi-

ne les fractions de méthanol de lavage et on évapore à sec.

On obtient un résidu de 22 g Son activité laxative est la même que celle des sennosides purs et sa toxicité est DL, i v = 4100 mg/kg (souris) On sèche la portion résineuse insoluble dans le méthanol à 95 %; on en obtient 20,8 g Son activité laxative est inférieure à 10 %P de celle des sennosides et sa toxicité est DI 50 i v _ 150 mg/kg Ainsi, la fraction NSLAS isolée des liqueurs-mères des sennosides par relargage contient des composés non toxiques à activité laxative de structure chimique inconnue qui sont solubles dans le méthanol à 95 %, et une portion résineuse très toxique qui n'a qu'une faible activité laxative et dont la structure chimique est également inconnue.

Exemple 5 -

L'extraction, l'extraction liquide-liquide et la recristallisation décrites ci-après sont illustrées de façon

schématique dans les figures 1, 2 et 3 des dessins annexés.

La drogue est extraite à température ambiante dans une installation de percolation à contre-courant à 4 étages A cet effet, on introduit tous les jours 40 kg de follicules de séné dans l'un des quatre récipients coniques et on surcharge

avec une plaque perforée.

On fait passer du méthanol à 70 %o à contre-courant dans la batterie de 4 percolateurs en quantité telle que les follicules fra chement introduits soient entièrement recouverts de liquide Après une durée de macération d'au moins 12 heures, on poursuit la percolation jusqu'à ce qu'on ait fait passer au

total environ 160 litres de méthanol à 705 o Du récipient recou-

vert de solvant frais, on fait passer tout le liquide d'extrac-

tion dans le récipient suivant relié en série et on sèche le résidu d'extraction afin de récupérer le solvant Le récipient est alors prêt à recevoir le lot suivant de 40 kg de séné, et

on le fait passer à la dernière place de la batterie.

L'efficacité de l'extraction est d'environ 60 % par étage de percolation Pour chaque chargement de 40 kg de follicules de sén 4, on obtient environ 120 litres d'extrait primaire qu'on concentre à un volume final d'environ 30 litres sous vide à

l'évaporateur rotatif équipé d'une colonne de fractionnement.

La température dans le récipient de produit ne doit pas dépas-

ser 500 C dans cette opération.

Pour éviter tout incident à l'extraction liquide-

liquide effectuée à-la suite, il faut éliminer complètement le méthanol Après avoir vérifié par chromatographie en phase gazeuse que le concentré est débarrassé du méthanol, on le mélange ensuite avec environ 2 % de butane-2-ol Le p H de cet

extrait est d'environ 5,8 (figure 1).

Pour l'extraction liquide-liquide effectuée à la suite (figure 2) on fait passer le concentré dans une batterie de mélangeurs-décanteurs à 10 étages (environ 5 litres par étage)

sans filtration préalable, à contre-courant du butane-2-ol.

A un-rapport butane-2-ol/extrait concentré de 1,5:1 à l'entrée,.

* le rapport extrait dans le outane-2-ol/raffinat extrait est de 0,7 à 0, 8:1 La durée de passage moyenne à chaque étage est

d'environ 20 mn.

Le raffinat extrait est ensuite réglé à p H 2 par

l'acide sulfurique à 94 % et envoyé dans un appareil de cristal-

lisation à trois étages.

Pour déclencher la cristallisation, on ensemence et

on laisse cristalliser à température ambiante pendant 5 jours.

La bouillie cristalline obtenue est évacuée du pied du

troisième récipient de cristallisation Cette bouillie cristal-

Une est filtrée sous vide et les liqueurs-mères renvoyées à l'appareil de cristallisation Les cristaux sont ensuite lavés par l'eau puis par le méthanol et séchés sous vide à 40 O C.

On obtient des sennosides bruts à environ 90 % O de pureté.

Pour récupérer le butane-2-ol, on évapore complètement l'extrait dans ce solvant; on obtient un résidu brun sombre à noir On utilise à nouveau le distillat pour l'extraction liquide-liquide. Les sennosides bruts obtenus sont ensuite mis en suspension dans un mélange acétone/eau, 50:50 (schéma 3) sous forme d'une suspension à 10 % puis entièrement dissous par addition d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium jusqu'à

réglage à p H 7,5 environ, avec formation des sels de sodium.

Les sennosides sont ensuite reprécipités par réglage du p H de la solution à 2 à l'aide de l'acide chlorhydrique On sépare le produit qui a précipité, on le lave rapidement avec de l'acétone aqueuse et on le sèche On obtient ainsi environ 2 %

(par rapport aux follicules de séné mis en oeuvre) de sennosi-

des purs (A et B).

Claims (10)

REVENDICATIONS

1 Procédé pour obtenir des composés à effet laxatif à partir du séné médicinal, caractérisé en ce que: a) on extrait le séné médicinal par du méthanol aqueux dans une percolation à contre-courant et on concentre l'extrait à une température égale ou inférieure à 500 C jusqu'à élimination complète du méthanol de l'extrait; b) on purifie l'extrait obtenu par extraction continue liquide-liquide à l'aide d'un solvant organique; c) on transfère la matière raffinée obtenue (raffinat) dans un appareil de cristallisation, on acidifie sous agitation

à un p H de 1,5 à 2,0, on ensemence par des cristaux de sennosi-

des, on laisse cristalliser sous agitation et on sépare les sennosides bruts cristallisés; d) si on le désire, on recristallise les sennosides bruts, et facultativement e) on mélange 10 parties en poids des liqueursmères obtenues en c) ci-dessus sous agitation, avec 2 parties en poids de chlorure de sodium et on décante la masse semi-solide

coagulée en surface, on la lave et, facultativement, on l'ex-

trait par le méthanol à 95 %, on concentre la fraction méthanoli-

que et on sèche le résidu.

2- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on utilise en tant que solvant d'extraction au stade

a) le méthanol à 70 %.

3 Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'extraction du stade a) est effectuée à température

supérieure à la température ambiante mais de 3500 au maximum.

4 Procédé selon l'une des revendications 1 à 3,

caractérisé en ce que la percolation à contre-courant est effectuée dans une batterie de 2 à 4 percolateurs reliés en série.

Procédé selon l'une des revendications 1 à 4,

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caractérisé en ceque, avant la percolation, on fait gonfler

le séné médicinal dans un post-percolat.

6 Procédé selon l'une des revendications 1 à 5,

caractérisé en ce que l'on mélange le concentré obtenu au stade a) avec environ 5 % de butane-2-ol.

7 Procédé selon l'une des revendications 1 à 6,

caractérisé en ce que le solvant organique utilisé au stade

b) est le butanol, la méthyléthylcétone ou la méthylisopropyl-

cétone.

8 Procédé selon l'une des revendications 1 à 6,

caractérisé en ce que le solvant organique utilisé est le

butane-2-ol saturé d'eau.

9 Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que le rapport butane-2-ol/raffinat à la sortie est de 0,7

à 0,8:1.

Procédé selon l'une des revendications I à 9,

caractérisé en ce que l'acidification du stade c) est effec-

tuée à l'aide d'acide chlorhydrique ou d'acide sulfurique.

11 Procédé selon l'une des revendications 1 à 10,

caractérisé en ce que les sennosides bruts obtenus au stade c)

sont mis en suspension pour recristallisation dans un mélan-

geur acétone/eau, 50:50, à une teneur d'environ 10 %, entière-

ment redissous par addition d'hydroxyde de sodium jusqu'à p H 7,5 à 9 avec formation de sels de sodium, puis reprécipités par réglage de la solution à p H 1,5 à 2 environ par l'acide

chlorhydrique, séparés, lavés par l'acétone aqueuse et séchés.

12 Composés à effet laxatif tels qu'obtenus à partir du séné médicinal par le procédé selon l'une quelconque

des revendications 1 à 11.

13 Compositions laxatives, caractérisées en ce qu'elles contiennent en tant que substance active au moins un composé à effet laxatif selon la revendication 12, en mélange

avec un diluant ou véhicule pharmaceutique solide ou liquide.