FR2491473A1 - Procede pour l'extraction de silymarine a partir des plantes, silymarine ainsi obtenue et son utilisation en therapeutique - Google Patents

Abstract

POUR OBTENIR LA SILYMARINE (SILYMARINES I-IV) A PARTIR DES FRUITS DE SILYBUM MARIANUM, APRES EXTRACTION PAR PRESSION A FROID D'UNE GRANDE PARTIE DE L'HUILE GRASSE, ON EXTRAIT LE RESIDU BROYE AVEC DE L'ACETATE D'ETHYLE ANHYDRE, ON EVAPORE LES EXTRAITS OBTENUS ET ON TRAITE LE RESIDU D'EVAPORATION A L'ETHER DE PETROLE ET AU METHANOL, PUIS ON TRAITE LA PHASE METHANOLIQUE PAR UN ALCANE INFERIEUR CHLOROSUBSTITUE ET DE L'EAU ET ENFIN ON RECUPERE LA SILYMARINE A PARTIR DE LA PHASE HYDROMETHANOLIQUE.

Description

Procédé rour l'extraction de silvmarine à tartir des plantes, silymarine ainsi obtenue et son utilisation en théraDeutiaue.

L'invention concerne un procédé pour l'obtention de silymarine pure par extraction des fruits du chardon de
Notre-Dame (Silybum marianum Gaertn.).

Par l'expression silymarine on entend selon l'état de la technique le groupe de la silymarine,.c'est-à-dire les polyhydroxyphénylc,romanones (silymarine I à silymarine IV) qui peuvent déjà être isolées à partir des fruits du chardon de Notre-Dame avec une pureté de 70 à 80% selon la drogue (DE-AS 1 923 082).

Les silymarines I à III sont des isomères de formule brute C25H2201o et ont été caractérisées dans la littérature comme étant, du point de vue de la chimie structurale, la silybine, la silydianine et la silychristine (DE-AS 1 923 082; PELTER,A. et HANSEL, R., Tetrahedron Letters,
London 25, 2911, 1968; WAGNER, H., HÖRHAMMER, L., SELIG
MANN, O. et FARNSWORTH, N.R., Tetrahedron Letters No. 31, pages 2675 - 2678, 1970; WAGNER, H., SELIGMANN, O., HÖR-
HAMMER, L. et SEITZ, M., Tetrahedron Letters No. 22, pages 1895 - 1899, 1971). La silymarine IV est la taxifoline (DE
AS 1 923 082).

La silymarine est un précieux médicament du foie et le mélange des différentes silymarines a, en raison d'un synergisme, une activité supérieure à la somme des activités des différents isomères (DE-AS 1 923 082).

Grâce à la DE-AS 1 923 082 on connait un procédé pour l'extraction de la silymarine (silymarines I-IV), selon lequel les fruits séchés de Silybum marianum Gaertn. sont pressés mécaniquement pour leur enlever la plus grande partie des huiles grasses. Par extraction complète (épuisement) du résidu de pressage avec de l'acétate d'éthyle, évaporation de la solution d'acétate d'éthyle, reprise du résidu sec dans du méthanol aqueux, dégraissage par partage similaire multiple à contre-courant et évaporation sous vide jusqu'à siccité de la solution méthanolique dégraissée, on ob- tient un mélange à 70 - 80% de polyhydroxyphdnylchromanones (silyx^ines I-IV). La Proportion de silymarines I-III est environ de 3:1:1 ; la teneur en silymarine IV, la taxifoline, est environ 2 à 3% de la propor tion totale de silymarine.

En tant qu'état de la technique supplémentaire on peut encore citer la DE-OS 2 020 407. Le procédé de cette DE-OS concerne l'isolement de la silymarine sans dégraissage préalable, par extraction globale directe au moyen d'un "mélange de solvants constitué d'alcool-eau-esters d'acides gras inférieurs ou hydrocarbures"et séparation des constituants gras "par distillation subséquente de 10-40% du volume de la solution d'extraction obtenue, repos subséquent et élimination des graisses déposées au-dessus de la solution". Ce procédé ne conduit, selon la demande, qu'à un extrait à 40% de silymarine ; de plus la demande de brevet recommande une recristallisation avec le méthanol, sans autre indication en ce qui concerne d'éventuelles mesures à prendre pour mettre en oeuvre le procédé.Lors d'une tentative de mise en oeuvre, ce procédé n'a pas été reproductible et dans le produit final il restait environ 13% des graisses d'origine.

Un autre procédé est connu par la DE-OS 2 017 789. Les produits finals de ce procédé devraient contenir 40 à 70% de silymarine et le rendement en produit final est de 0,8 à 2,4% au maximum (pour de la silymarine à 40%), Un essai de mise en oeuvre a montré que ce procédé également n'était pas reproductible.

De plus il existe dans l'état de la technique le brevet
FR 72 14042 qui concerne la préparation d'un extrait à partir de silybum marianum,sans dégraissage préalable. Il est précisé que le produit final contient environ 82% de polyhydroxyphénylchromones ; 50% de ces 82% doivent représenter de la silymarine. On doit à ce propos remarquer que la silymarine appartient à une autre classe de composés, à savoir les polyhydroxyphénylcbromanones, mais non les polyhydroxyphénylchromones. Ce procédé également n'est pas reproductible.

Jl7squ'à présent on na pas réussi à améliorer considérablement le procédé de la DE-AS 1 93 082, D'une part on rencontre des difficultés dans la séparation des substances actives à partir de la drogue en préservant le mélange-de silymarine présent et d'autre part dans la séparation de celui-ci d'environ 30% d'huiles grasses et des impuretés difficiles à éliminer. Ces difficultés n'ont été que partiellement surmontées selon la DE-AS 1 923 082.

Comme la silymarine est un précieux médicament pour le foie, il existe un besoin d'avoir la possibilité de disposer de silmuarine à une forte concentration, supérieure à la concentration connue jusqu'à présent par l'état de la technique.

La présente invention a pour but de mettre au point un nouveau procédé pour l'extraction de silymarine pure (silymarines I-IV) qui soit dans une large mesure exempte d'impuretés et qui contienne tous les isomères naturels. Grâce à ce procédé, on pourra, de façon simple, obtenir un produit particulièrement pur et des rendements élevés.

On a trouvé de façon surprenante un procédé qui évite les inconvénients des méthodes connues et qui conduit par une voie économique à de la Filymarine pure (silymarines I-IV) (pureté de 90-96%).

Le procédé selon l'invention pour l'obtention de silymarine (silymarines I-IV) selon lequel on débarrasse les
fruits de Silybum marianum d'une grande partie de l'huile
grasse par extraction par pression à froid, on broie la masse extraite par pression, on extrait le résidu d'ex
traction par pression avec de l'acétate d'éthyle, on éva
pore l'extrait d'acétate d'éthyle et on traite, est carac
térisé en ce que
a) on extrait le résidu d'extraction par pression
plusieurs fois avec de l'acétate d'éthyle anhydre et on sé
pare les extraits du résidu,
b) ou bien l'on dégraisse le résidu d'évaporation a)
des extraits à l'acétate d'éthyle combinés par extraction
solide-liquide répétée à l'éther de pétrole, ou
b') on dissout le résidu d'évaporation a) dans le mé
thanol et on dégraisse la solution.par extraction liquide
liquide répétée à l'éther de pétrole,
c) ou bien on dissout largement le résidu dégraissé b) dans le méthanol et on sépare la solution des constituants insolubles, ou
c') on sépare la solution méthanolique dégraissée b') de l'éther de pétrole,
d) on ajoute à la solution méthanolique c) ou c') un alcane inférieur chlorosubstitué en tant que solvant et de l'eau, on extrait, cn sépare la solution hydrométhanolique et on la conserve,
e) on mélange intimement la phase du solvant chloré plusieurs fois avec du méthanol et de l'eau sous agitation et l'on sépare par décantation,
f) on évapore les phases hydrométhanoliques combinées,
g) on met le résidu d'évaporation en suspension dans un peu de méthanol, on introduit ensuite la suspension dans de l'eau en agitant et on lave plusieurs fois le précipité à l'eau après centrifugation, et
h) on sèche le précipité sous vide, on le broie et on le sèche de nouveau sous vide.

Un mode préféré de mise en oeuvre du procédé selon l'in- vention est caractérisé en ce que
a) on extrait le résidu d'extraction par pression sous agitation puissante, dans une proportion de 1:8 à 1:12, de préférence 1:10, à une température de 65 à 760C, de préférence de 750C, 2 à 4 fois, de préférence 3 fois, pendant à chaque fois 1/2 heure à 1 heure 1/2, de préférence 1 heure,avec de l'acétate d'éthyle anhydre et on sépare la drogue extraite,
b) ou bien on évapore les extraits à l'acétate d'éthyle réunis à 40 - 550C, de préférence SOOC,sous vide à 15 'tibar, on dégraisse le résidu d'évaporation a) par extraction solideliquide à l'éther de pétrole 60/700 dans une proportionde 1:15 à 1:25, de préférence 1::20, répétée trois fois pendant 10 à 20 minutes, de préférence 15 minutes, ou
b') on dissout le résidu d'évaporation a) dans 6 à 10 fois, de préférence 8 fois, son poids de méthanol, on sépare les constituants restant non dissous, on dégraisse par extraction liquide-liquide à l'éther de pétrole (domaine d'ébullition 60/700C) dans une proportion de 1:1,5 à 1:2,5, de préférence 1::2, répétée trois fois pendant 10 à 20 minutes, de préférence 15 minutes,
c) ou bien on dissout le résidu dégraissé b) dans 6 à 10 fois, de préférence 8 fois, son poids de méthanol et on sépare les constituants restant non dissous, ou
c') on sépare la solution méthanolique dégraissée b') de l'éther de pétrole,
d) on ajoute le meme volume de chloroforme et le même volume d'eau à la solution méthanolique c) ou c') et on agite puissamment le mélange pendant environ 15 minutes et on sépare par décantation,
e) on mélange 5 fois sous agitation puissante la phase chloroformique avec du méthanol et de l'eau dans les proportons en volume de 1:1::1, à chaque fois pendant 15 minutes et on sépare ensuite la phase chloroformique,
f) on évapore à 30 - 500C, de préférence 400C, sous vide à 15 mbar les phases hydrométhanoliques combinées,
g) on met le résidu d'évaporation en suspension dans du méthanol dans une proportion de 1:4 à 1:6, de préférence 1:5, et on introduit la suspension en agitant dans 8 à 12 fois, de préférence 10 fois son volume d'eau, de même que l'on lave plusieurs fois à l'eau le résidu après centrifugation,
h) on sèche le précipité 20 à 30, de préférence 24 heures, à une température de 30 à 500C, de préférence 400C, sous vide à 10 mbar, ensuite on broie et on sèche de nouveau le produit broyé sous vide à 10 mbar, également à une température de 30 à 500C, de préférence 400C.

Les produits isolés en procédant ainsi ont une teneur en silymarine (silymaring I-IV) de 90 - 96% calculée sur la base de la substance anhydre.

En ce qui concerne la technologie de mise en oeuvre, les différentes étapes et les mesures spécifiques sont choisies de manière à ce que le mélange de substances actives présent dans la drogue soit pratiquement isolé en totalité. Si l'on s'écartait de ces étapes de procédure, l'un ou l'autre des composés serait totalement ou en partie perdu. Cette difficulté croit avec le degré d'enri chissement de ce mélange de substances actives, en particulier dans les étapes avancées-du procédé, étant donné que les substances actives recherchées ont tendance à être perdues en partie sous forme de composés isolés ou de mélange global avec les impuretés à éliminer.

Le procédé selon l'invention prend ce point en considération de sorte qu'il conduit à:un produit pur avec un rendement optimal en obtenant dans une large mesure la proportion d'isomères qui se trouve dans la drogue.

De manière surprenante on ne parvient au produit avantageux recherché que grâce à la combinaison de mesures particulières de mise en oeuvre du procédé, de solvants ou respectivement systèmes de solvants et de conditions physiques ou respectivement chimiques choisie.

Grace à l'extraction par pression à froid des fruits de Silybum marianum, on empeche la dégradation chimique ou la polymérisation de la silymrine et on évite l'émul- sification intime de la silymarine et des impuretés dans l'huile grasse ce qui serait nuisible pour la séparation subséquente. La drogue est en partie dégraissée par l'ex- traction sous pression. Environ 25 - 30% de l'huile sont extraits par pression.

L'étape de broyage fin permet une extraction subséquente plus rapide car l'agent d'extraction peut pénétrer plus facilement dans les particules de drogue.

I1 est dans ce procédé décisif que l'extraction à l'acétate d'éthyle soit effectuée avec de l'acétate d'éthyle anhydre. La teneur en eau peut être au maximum de 0,5%.

Si la teneur en eau dépasse 0,5% on ne peut plus, dans les étapes suivantes du procédé, séparer les impuretés. Cet effet surprenant est, en combinaison avec les autres mesures particulières du procédé,décisif pour le succès du procédé, à savoir l'obtention de silymarine pure.

La proportion drogue/solvant dans l'extraction à l'acétate d'éthyle de 1:8 à 1:12, de préférence 1:10, est choisie de telle sorte qu'elle garantisse, sans excès inutiles, la dissolution de la silymarine de façon spécifique et avec ménagement. L'extraction répétée 2à 4 fois, de préférence 3 fois, permet l'extraction complète de la silymarine à partir de la drogue. La température de 60 - 800C, de préférence 750C, est favorable à une bonne dissolution des substances actives et ne conduit pas simultanément à des phénomènes de décomposition des produits chimiques alors présents.

L'agitation poussée avec un agitateur intensif entrai- ne un "ameublissement" mécanique de la drogue, ce qui favorise l'extraction. La faible durée choisie lors de chacune des nombreuses extractions, de 1/2 heure à 1 heure 1/2, de préférence 1 heure, permet cependant d'effectuer une extraction avec épuisement.

Les extraits à l'acétate d'éthyle combinés sont évaporés sous vide, à des températures basses, de manière ménagée.

Le dégraissage solide-liquide subséquent, répété plusieurs fois, du résidu à l'éther de pétrole avec une proportion relativement élevée de résidu par rapport à l'é- ther de pétrole, de par exemple environ 1:20, présente l'avantage de permettre de séparer complètement l'huile grasse dans un temps court et sans grande dépense en ce qui concerne l'appareillage. Facultativement on peut dissoudre le résidu d'évaporation dans environ 8 fois son poids de méthanol, séparer les constituants non dissous et effectuer ensuite une extraction liquide-liquide répétée avec de l'éther de pétrole, dans une proportion d'environ 1:2. Les résultats sont pratiquement les memes.

Le méthanol, en tant que solvant relativement peu coûteux, convient particulièrement bien, en raison de sa grande capacité de solvatation, à la dissolution du résidu dégraissé. La silymarine (silymarines I-IV) s'y dissout relativement bien. La proportion élevée résidu/solvant est avantageuse pour extraire complètement la silymarine (silymarines I-IV). Dans le résidu il n'y a plus de silymarine.

Il est nouveau et particulièrement inventif d'utiliser des solvants organiques chlorés, en particulier des alcanes inférieurs chlorosubstitués comme le chloroforme, le chlorure de méthylène, le 1,2-dichloroéthane, de préférence le chloroforme, pour éliminer les impuretés restant encore de la silymarine (silymarines I-IV) sans que la silymarine dans son ensemble ne subisse une perte et également sans qu'aucun isomère ne disparaisse. Grâce à cela, la séparation d'autres impuretés lipophiles, qui n'avaient pas été éliminées dans l'étape de dégraissage avec l'huile et lé- ther de pétrole, de meme que d'autres impuretés moins polaires qui certes avaient d'abord été dissoutes dans le méthanol mais qui se comportaient de façon correspondante dans un système de phases de partition.L'équilibre en solution diagramme de phase - du système de solvants choisi - tant en ce qui concerne sa nature que sa quantité -, dans ce cas méthanol-eau-chloroforme-1:1:l, est en présence de la silymarine (silymarines I-IV) et d'éventuelles impuretés encore présentes, particulièrement approprié car avec ce système de solvants on obtient de bonnes séparations en deux phases.

La zone de dissociation du diagramme de phase comprend les proportions de solvants indiquées.

Le coëfficient de partition de la silymarine (silymarines I-IV) entre les deux phases est très élevé. Après avoir effectué six extractions dans le système méthanol/ chloroforme/eau 1/1/1 (v/v/v) on obtient une proportion de silymarine dans les phases hydrométhanoliques combinées par rapport à la silymarine restant dans la phase chloroformique de 13:1. Ce grâce à quoi on peut extraire pratiquement toute la silymarine (silymaring I-IV) de la phase méthanolique.

Selon l'invention on a pu, de manière surprenante, obtenir que les silymarines I à IV restent également dans la phase hydrométhanolique sous forme de composés individuels, dans les memes proportions, de sorte que la proportion des isomères soit maintenue.

La phase hydramethanclique est évaporée jusqu'à siccité, de fa çon ménagée, à une température basse et sous vide et le résidu est mis en suspension plusieurs fois dans l'eau pour etre lavé complètement.

Cette étape de lavage s'est révélée avantageuse pour remédier aux occlusions dues à des impuretés dans le produit qui se produisent lors des filtrations normales.

Par rapport aux procédés de l'état de la technique, le procédé selon l'invention présente l'avantage de conduire de façon simple à une silymarine (silymarines I-IV) pure à 90 - 96% avec un rendement d'environ 1,7%. Seule la combinaison selon l'invention des mesures opératoires choi- sies avec utilisation d'acétate d'éthyle anhydre et d'un alcane substitué par le chlore, comme le chloroforme, conduit de façon surprenante à l'obtention de silymarine très pure à partir des fruits de silybum marianum.

L'effet de l'extraction de la drogue à l'acétate d'éthyle anhydre est à signaler comme particulièrement inventif par rapport à l'état de la technique. Grâce à cette extraction les substances hydrophiles de la drogue restent dans le résidu. Lors des étapes subséquentes comme la partition dans les solvants, il n'est normalement plus nécessaire de séparer dans une large mesure ces impuretés hydrophiles de la silymarine.

De plus est particulièrement surprenante l'activité de partition des solvants d'un alcane inférieur chlorosubstitué, en particulier le chloroforme, dans la deuxième phase du procédé en raison de la sélectivité spécifique, pratiquement toutes les impuretés présentes lors de cette étape de ,mise en oeuvre du procédé étant alors éliminées, de sorte que la silymarine reste largement pure dans la solution méthanolique.

Exemples d'extraction de la silvmarine (silvmarines 1-1V)
Exemple 1 300 kg de fruits de chardon de Notre-Dame extraits par
pression à froid et finement broyés sont addition
nés de 3000 1 d'acétate d'éthyle anhydre et chauffés à 750C. A
cette température, on agite énergiquement le mé
lange avec un agitateur intensif pendant une
heure. Ensuite on filtre et on extrait le résidu de drogue encore deux fois, comme décrit, avec de l'acétate d'éthyle.

Les solutions d'acétate d'éthyleclarifiées et combinées sont évaporées à siccité à 500C sous vide à 15mbar. Pour dégraisser, on agite bien le résidu à la température ambiante trois fois avec des portions de 300 1 d'éther de pétrole 60/700, 15 minutes et on chasse ensuite le solvant sous vide. Le produit brut-ainsi obtenu est repris dans une quantité quadruple de méthanol, la matière solide ne passant pas en solution est alors séparée par centrifugation, lave deux fois avec des portions de méthanol égales à la moitié des quantités mentionnées et enfin - comme elle r.econtient pratiquement pas de silymarine séparée.

Les solutions méthanoliques combinées sont ensuite additionnées de chloroforme, puis d'eau dans une proportion volumétrique de 1:1:1 et transférées dans un récipient de décantation.

Après agitation puissant-e du mélange pendant 15 minutes et séparation des phases, on élimine la phase inférieure (phase chloroformique) et on extrait encore cinq fois, pendant 15 minutes, également dans une proportion volumétrique de 1:1:1 avec du méthanol-eau. Ensuite on sépare la phase chloroformique.

Les phases hydrométhanoliques combinées sont é- vaporées à 500C sous vide à 15 mbar et le résidu est mis en suspension dans cinq fois la meme quantité de méthanol. La suspension est ajoutée, sous forme d'un jet fin, à dix fois le même volume d'eau puis agitée puissamment pendant 15 minutes. Ensuite on centrifuge et on lave le produit de centrifugation,en suspension, plusieurs fois avec de l'eau. Le produit est séché à l'étuve sous vide pendant 24 heures à 400C, broyé et séché encore pendant 48 heures supplémentaires
à 400C.

On obtient une poudre colorée en beige clair avec
une teneur en silymarine de 90 - 96% (déterminée
selon la méthode à la dinitrophénylhydrazine
(méthode à la DNPH) en procédant de façon ana
logue à la détermination de la silymarine dans
les fruits du chardon de Notre-Dame, DAB VII é
dition 1968, second supplément 1975, page 198,
ainsi que selon l'interprétation quantitative des
courbes de réflexion ou "courbe de rémission").

L'identification a été effectuée par chromatogra
phie en couches minces.

La proportion relative des différents isomères a
été déterminée par interprétation quantitative des
courbes de réflexion (voir figure unique).

Le rendement est de 4,9 kgy 1,74: par rapport à la
drogue sèche.

Exemnle 2 300 kg de fruits de chardon de Notre-Dame extraits par
pression à froid et finement pulvérisés sont ad
ditionnés de 3000 1 d'acétate d'éthyle anhydre et chauffés à 750C. A
cette température on agite puissamment, pendant
une heure, le mélange avec un agitateur intensif.

Ensuite on filtre et on extrait encore deux fois
à l'acétate d'éthyle le résidu de drogue,comme
décrit.

Les solutions d'acétate d'éthyle clarifiées et
combinées sont évaporées jusqu'à siccité à 5O0C
sous vide à 15 mbar,
Le résidu d'évaporation est dissous avec 120 1 de
méthanol et les substances solides qui ne passent
pas alors en solution sont éliminées par centrifu
gation. La solution méthanolique est soumise
3 fois pendant 15 minutes à une extraction li
quide-liquide avec des portions de 135 1 d'éther
de pétrole.

La solution méthanolique est d'abord additionnée
de chloroforme, ensuite d'eau dans une proportion
volumétrique de 1:1:1 et transférée dans un réci
pient de décantation.

Après avoir agité puissamment le mélange pendant
15 minutes et obtention d'une séparation des phases,
on sépare la phase inférieure (phase chlorofor
mique) et on extrait encore 5 fois, pendant 15
minutes avec du méthanol et de l'eau, également
dans une proportion volumétrique de 1:1:1. On sé
pare ensuite la phase chloroformique.

Les phases hydrométhanoliques combinées sont éva
porées à 500C sous vide à 15 mbar et le résidu
est mis en suspension dans 5 fois la meme quan
tité de méthanol. La suspension est introduite
sous agitation, sous forme d'un jet fin, dans 10
fois son volume d'eau et agitée puissamment en
suite pendant 15 minutes. Ensuite on centrifuge
et on lave le produit de centrifugation, en sus
pension, plusieurs fois avec de l'eau. Le pro
duit est séché à l'étuve sous vide pendant 24
heures à 400C, broyé et séché encore pendant 48
heures à 4O0C.

Le procédé conduit à une silymarine à 90 - 96S
de la même qualité que dans l'exemple 1.

Exemple 3
Les me mes caractéristiques de mise en oeuvre du procédé en utilisant du chlorure de méthylène à la place du chloroforme conduisent à une silymarine à 90 - 94%.

Le rendement est de 1,7S.

Exemnle 4
Les mêmes caractéristiques de mise en oeuvre du procédé avec utilisation de 1,2-dichloroéthane au lieu de chloroforme conduisent à une silymarine à 90 - 932.

Le rendement est de 1,8%.

Pour tous les exemples
Le degré de pureté et les petites variations dans le rendement dépendent de la drogue.

Claims (4)

REVENDICATIONS

1. Procédé pour l'obtention de silymarine (silymarines I-IV) selon lequel on débarrasse les fruits de Silybum marianum d'une grande partie de l'huile grasse par extraction par pression à froid, on broie la masse extraite par pression, on extrait le résidu d'extraction par pression avec de l'acétate d'éthyle, on évapore l'extrait d'acétate d'éthyle et on traite , caractérisé en ce que

a) on extrait le résidu d'extraction par pression plusieurs fois avec de l'acétate d'éthyle anhydre et on sépare les extraits du résidu,

b) ou bien l'on dégraisse le résidu d'évaporation a) des extraits à l'acétate d'éthyle combinés par extraction solide-liquide répétée à l'éther de pétrole, ou

b') on dissout le résidu d'évaporation a) dans le méthanol et on dégraisse la solution par extraction liquideliquide répétée à l'éther de pétrole,

c) ou bien on dissout largement le résidu dégraissé b) dans le méthanol et on sépare la solution des constituants insolubles, ou

c') on sépare la solution méthanolique dégraissée b') de l'éther de pétrole,

d) on ajoute à la solution méthanolique c) ou c') un alcane inférieur chlorosubstitué en tant que solvant et de l'eau, on extrait, on sépare la solution hydrométhanolique et on la conserve,

e)on mélange intimement la phase du solvant chloré plusieurs fois avec du méthanol et de l'eau sous agitation et l'on sépare par décantation,

f) on évapore les phases hydrométhanoliques combinées,

g) on met le résidu d'évaporation en suspension dans un peu de méthanol, on introduit ensuite la suspension dans de l'eau en agitant et on lave plusieurs fois le précipité à l'eau après centrifugation, et

h) on sèche le précipité sous vide, on le broie et on le sèche de nouveau sous vide.

2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que

a) on extrait le résidu d'extraction par pression sous agitation puissante, dans une proportion de 1:8 à 1:12, de préférence 1:10, à une température de 65 à 760C, de préférence de 750C, 2 à 4 fois, de préférence 3 fois, pendant à chaque fois 1/2 heure à 1 heure 1/2, de préférence 1 heure, avec de l'acétate d'éthyle anhydre et on sépare la drogue extraite,

b) ou bien on évapore les extraits à l'acétate d'éthyle réunis à 40 - 55 CC, de préférence 500C, sous vide à 15 mbar, on dégraisse le résidu d'évaporation a) par extraction solide-liquide à l'éther de pétrole 60/70 dans une proportion de 1:15 à 1:25, de préférence 1::20, répétée trois fois pendant 10 à 20 minutes, de préférence 15 minutes, ou

b') on dissout le résidu d'évaporation a) dans 6 à 10 fois, de préférence 8 fois, son poids de méthanol, on sépare les constituants restant non dissous, on dégraisse par extraction liquide-liquide à l'éther de pétrole (domaine d'ébullition 60/700C) dans une proportion de 1:1,5 à 1:2,5, de préférence 1::2, répétée trois fois pendant 10 à 20 minutes, de préférence 15 minutes,

c) ou bien on dissout le résidu dégraissé b) dans 6 à 10 fois, de préférence 8 fois, son poids de méthanol et on sépare les constituants restant non dissous, ou

c') on sépare la solution méthanolique dégraissée b') de l'éther de pétrole,

d) on ajoute le meme volume de chloroforme et le meme volume d'eau à la solution méthanolique c) ou c') et on agite puissamment le mélange pendant environ 15 minutes et on sépare par décantation,

e) on mélange 5 fois sous agitation puissante la phase chloroformique avec du méthanol et de l'eau dans les proportions en volume de 1:1::1, à chaque fois pendant 15 minutes et on sépare ensuite la phase chloroformique,

f) on évapore à 30 - 500C, de préférence 400C, sous vide à 15 mbar les phases hydrométhanoliques combinées,

g) on met le résidu d'évaporation en suspension dans du méthanol dans une proportion de 1:4 à 1:6, de préférence 1:5, et on introduit la suspension en agitant dans 8 à 12 fois, de préférence 10 fois son volume d'eau, de meme que l'on lave plusieurs fois à l'eau le résidu après centrifugation,

h) on sèche le précipité 20 à 30, de préférence 24 heures, à une température de 30 à 500C, de préférence 400C, sous vide à 10 mbar, ensuite on broie et on sèche de nouveau le produit broyé sous vide à 10 mbar, également à une température de 30 à 500C, de préférence 400C.

3. Silymarine (silymarines I-IV) avec une pureté d'au moins 90%, telle qu'elle peut etre obtenue selon le procédé de la revendication 1 ou 2.

4. Médicament, notamment pour le foie, caractérisé en ce qu'il comprend, dans sa substance active, de la silymarine selon la revendication 3.