FI91421C - Menetelmä ihmisen kasvainkuoliotekijän (TNF) kanssa reagoivan monoklonaalisen vasta-aineen valmistamiseksi ja vasta-ainetta tuottava hybridisolulinja - Google Patents
Menetelmä ihmisen kasvainkuoliotekijän (TNF) kanssa reagoivan monoklonaalisen vasta-aineen valmistamiseksi ja vasta-ainetta tuottava hybridisolulinja Download PDFInfo
- Publication number
- FI91421C FI91421C FI873948A FI873948A FI91421C FI 91421 C FI91421 C FI 91421C FI 873948 A FI873948 A FI 873948A FI 873948 A FI873948 A FI 873948A FI 91421 C FI91421 C FI 91421C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- tnf
- antibody
- antibodies
- producing
- cells
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
i 91421
Menetelma ihmisen kasvainkuoliotekijan (TNF) kanssa rea-goivian monoklonaalisen vasta-aineen valmistamiseksi ja vasta-ainetta tuottava hybridisolulinja 5 Keksintb koskee erittain spesifista monoklonaalista vasta-ainetta (mAK) TNF:aa vastaan syntetisoivaa hybridoo-masolulinjaa, sekS menetelmaa TNF:n vastaisen monoklonaalisen vasta-aineen valmistamiseksi. Kuvataan myOs menetelma mainitun hybridoomasolulinjan valmistamiseksi.
10 Hiiren myeloomasolujen fuusio immunisoitujen hiiri- en pernasoluihin [Kdhler ja Milstein, Nature 256 (1975) 495 - 497] oli ensimmainen osoitus mahdollisuudesta saada jatkuvia solulinjoja, jotka tuottavat yhdenlaatuisia (ns. monoklonaalisia) vasta-aineita. Sittemmin on suoritettu 15 lukuisia yrityksia valmistaa erilaisia hybridisoluja (ns. hybridoomeja) ja kayttaa niiden muodostamia vasta-aineita erilaisiin tieteellisiin tutkimuksiin (vrt. Current Topics in Microbiology and Immunology, Vol. 81: Lymphocyte Hybri-domas, Springer Verlag, 1978).
20 Biologisten ominaisuuksiensa ansiosta vaikuttaa TNF
kiinnostavalta ja lupaavalta aineelta kaytettavaksi kas-vainsairauksien hoidossa. Yksityiskohtaiset tutkimukset kariutuivat aluksi TNF:n aarimmaisen pieneen pitoisuuteen luonnollisissa soluissa. Vasta geeniteknologian kehityksen 25 ja mahdollisuuden kloonata ihmisesta peraisin olevia pro-teiineja alemmissa organismeissa mydta tuli mahdolliseksi ilmentaa myOs TNF mikro-organismeissa. Hyvin puhtaassa muodossa tallå rekombinantti-TNF:lia (rTNF) on samat vai-kutukset kuin luonnollisella TNF:lia (nTNF).
30 Tieteellisten tutkimusten kuten myiis hoidollisen kaytbn mydta syntyy tarve maarittaa ei ainoastaan TNFrn aktiivisuus vaan itse TNF-proteiini. Biologisen aktiivi-suuden maaritys on kuitenkin vaivalloinen ja tybias suo-rittaa.
35 Keksintd koskee menetelmaa luonnon kasvainkuoliote- kijén, TNF:n, kanssa reagoivan vasta-aineen valmistamisek- 2 si, jolloin menetelmaile on tunnusomaista, etta viljeliaan solulinjaa ECACC 87 050 801 in vitro tai in vivo ja vasta-aine eristetaan puhdistamalla soluviljelman in vitro -su-pernatanteista. KeksintO koskee myOs vasta-ainetta tuotta-5 vaa hybridisolulinjaa ECACC 87 050 801.
KeksinnOn mukainen menetelma monoklonaalisten vas-ta-aineiden valmistamiseksi on sinansa tunnettu (Monoclonal Antibodies, Kennet et al.. Plenum Press, s. 363 -419).
10 BALB/c-hiiria immunosoitiin ruiskuttamalla niihin toistuvasti pieni maara puhdasta, E. colissa tuotettua re-kombinantti-TNF:aa. Heti kun seerumista oli osoitettavissa riittavasti vasta-aineita, fuusioitiin naiden eiainten pernasolut myeloomasoluihin ja viljeltiin saatuja hybride-15 ja.
Yksittaisista viljelmista maaritettiin niiden si-saitamien TNF:lie spesifisten vasta-aineiden pitoisuutta valikointitestin avulla.
Soveltuvista hybridoomista tuotettiin rajaavan lai-20 mennoksen menetelmaa kloonauksessa kayttaen yksittaisso-luista muodostuneita pesakkeita. TS11S tavalla saatiin nelja hybridisolulinjaa, jotka erittivat eri ominaisuuk-silla varustettuja monoklonaalisia vasta-aineita, nimit-tain hybridisolulinjat AM-1, AM-114, AM-195 ja AM-199.
25 NAma solulinjat on talletettu talletuslaitokseen European
Collection of Animal Cell Cultures, ECACC, PHLS Centre for Applied Microbiology and Research, Porton Down, Salisbury SP4 0J6, Englanti, numeroilla 87 050 801, 87 050 802, 87 050 803 ja 87 050 804.
30 Naita hybridisoluja tuotettiin viljelemaiia niita seka in vitro etta in vivo. Korkea lisaantymisnopeus in vivo teki tasta viljelytavasta erityisen edullisen. Tata silmaiia pitaen ruiskutettiin Pristan®;Ha esikasiteltyi-hin BALB/c-hiiriin vatsaontelonsisaisesti yksittaisia hyb-35 ridikantoja. Muodostunut askiittikasvain poistettiin noin 8-10 paivan kuluttua.
91421 3 TNF:n vastaisten monoklonaalisten vasta-aineiden eristys suoritettiin joko in vitro soluviljelmien superna-tantteja tai askiittinestetta puhdistamalla. Puhdistus suoritettiin Bruchin et al. [J. Immunol. Methods 53 (1982) 5 313 - 319] menetelnrån mukaan.
Vasta-aineiden molekyyliominaisuuksia luonnehdit-tiin seuraavasti:
Puhdistettujen vasta-aineiden molekyylipaino oli 150 000 daltonia tai enemman (maaritys polyakryyliamidi-10 geelielektroforeesilla).
Vasta-aineet AM-1, AM-114 ja AM-199 ovat tyyppia IgGl, jolloin raskas ketju on gamma-1. Vasta-aine AM-195 on tyyppia IgG3, jolloin sen raskas ketju on gamma-3.
Kaikilla vasta-aineilla kevyt ketju on kappa (maaritys 15 ELISArlla alatyyppispesifisia vasta-aineita kayttaen).
Monoklonaalisilla vasta-aineilla on suuruusluokkaa yli 109 1/mol oleva korkea affiniteettivakio TNFraa vas-taan, eika niilia ilmene ristikkaisreaktiota lymfotoksii-nin kanssa.
20 Yksittaisten vasta-aineiden sitoutumiskohtien kes- kinaista sijaintia TNF-molekyylissa tutkittiin vasta-aineiden kilpailevalla sitoutumisella.
TNF immobilisoitiin mikrotiitterilevylle. Biotii-nilla leimattua vasta-ainetta inkuboitiin muiden, leimaa-25 mattomien vasta-aineiden kanssa. Tutkittiin, mind yhdis-telmana vasta-aineet kilpailevat keskenaan samoista sitou-tumispaikoista TNF-molekyylissa. Vasta-aine AM-195 sitou-tuu toiseen epitooppiin kuin AM-1 ja AM-199. AM-114:n suh-teen oli havaittavissa lievaa kilpailua.
30 TNF:n aktiivisuus maaritettiin tavanomaisella syto- toksisuusmaaritykselia. Rekombinantti-TNF:aa tai luonnol-lista TNFraa ja vasta-aineylimaaraa inkuboitiin. Vasta-aine AM-195 neutraloi kummankin TNF-valmisteen sytotoksi-sen aktiivisuuden. AM-114:n kohdalla havaittiin kymmenen 35 kertaa heikompi neutraloiva vaikutus. Tama havainto selit-tyy silia olettamuksella, etta antigeeni kasittaa eri alu- 4 eita, jotka reagoivat eri tavalla eri vasta-aineiden kans-sa: vain monoklonaalinen vasta-aine AM-195 reagoi biolo-gista aktiivisuutta sisaltavan alueen kanssa.
Vasta-aineiden sitoutumista ja TNF:n neutraloitu-5 mista koskevista koetuloksista voidaan vetaa se johtopaa-tdis, etta nailia monoklonaalisilla vasta-aineilla voidaan tunnistaa ja maaritelia vahintaan kolme eri TNF:n epitoop-pia.
Kaytettaessa vasta-aineita tietyn antigeenin osoit-10 tamiseen voidaan periaatteessa kayttaa kahta eri maaritys-menetelmaa. Ellei antigeeni sisaiia luonnollista leimaa, on kumpaakin menettelya kaytettaessa jompi kumpi komponen-teista leimattava. Leimataan joko antigeeni, esimerkiksi radioaktiivisella leimausisotoopilla, jolloin kaytetaan 15 yleensa kilpailevan sitoutumisen mååritysmenetelmaa, kuten hyvin tunnettua radioimmuunianalyysia (RIA), tai vasta-aine, jolloin edullinen maaritysmenetelma on immuuniradio-metrinen maaritys (IRMA), entsyymikytketty immuunisorptio-analyysi (ELISA) tai kemiluminesenssimaaritys. Naiden eri 20 maaritysmenetelmien ja menetelmamuunnosten yksityiskohdat ovat alan ammattimiehille tuttuja.
Toinen mahdollisuus on liittaa vasta-aineisiin pie-nimolekyylisia hapteeneja, jotka puolestaan voidaan osoit-taa spesifisesti toisella reaktiolla. Esimerkiksi strepta-25 vidiinin kanssa reagoiva biotiini on kayttOkelpoinen. Taman vuoksi kaikki edelia mainitut vasta-aineet leimattiin pitkaketjuisella biotiinilla ja tehtiin jatkovaiheessa nakyviksistreptavidiini-piparjuuriperoksidaasikompleksil-la.
30 Seuraavassa kuvattu maaritys havainnollistaa kiin- teafaasi-sandwich-ELISA:aa. Leimaamaton vasta-aine (AM-1 tai AM-199) adsorboitiin passiivisesti jollekin pinnalle, esim. mikrotiitterilevyn kuoppapinnoille, sidottiin kova-lenttisesti ja pinta salvattiin epaspesifisilta sitoutumi-35 silta tunnetulla tavalla. TNF:aa sisaitavat naytteet ja biotiinilla leimattu vasta-aine (AM-195) pipetoitiin kuop- 91421 5 piin ja levyja inkuboitiin. Voitiin todeta, etta TNF on osoitettavissa naytteista erotuskynnyksen ollessa 10 pg/ml. rTNF:n spesifinen aktiivisuus on hiiri-L929-ko-keen mukaan 8,0 x 106 U/mg, joten taiia ELISA:11a saatlln 5 osoitetuksi pitolsuus 0,1 yksikkoa TNF:aa/ml. Western blot -maaritykselia voitiin osoittaa, ettei vasta-aineilla ole ristikkaisreaktioita minkaan ihmisseerumin aineosan kans-sa. Taten keksinnOn mukaisesti valmistettua vasta-ainetta voidaan kayttaa TNF:n maaritykseen TNF:lia hoidettujen 10 potilaiden seerumista. Se soveltuu edelleen ajankohtaisiin diagnostisiin kayttOtarkoituksiin, esimerkiksi seerumin ja plasman TNF-peilien tutkimiseen.
Koska keksinnOn mukaisesti valmistettu vasta-aine inaktivoi TNF:aa (vrt. esimerkki 6), sitå voidaan kayttaa 15 sellaisten sairauksien hoidossa, joissa veren TNF-pitoi-suus on kohonnut kuten esimerkiksi verenmyrkytyssokki. Edelleen voi olla perusteltua kayttaa TNF-vasta-aineita seuraavien sairauksien hoidossa: elimensiirron yhteydessa ilmeneva hylkiminen, allergiat, autoimmuunisairaudet, reu-20 maattiset sairaudet, sokkikeuhko, tulehdukselliset luu-sairaudet, veren hyytymishairiOt, palovammat. Néihin kayt-tOihin soveltuvat erityisesti sellaiset vasta-aineet, jot-ka neutraloivat TNF:n sytotoksisen aktiivisuuden, kuten keksinnOn mukaisesti saatava vasta-aine.
25 Immuuniaffiniteettikromatografian avulla voidaan myOs eristaa TNF:aa sita sisåltåvasta biologisesta mate-riaalista. Tata vårten vasta-aineet sidotaan tunnetuilla menetelmilia geelimatriisiin, johon lisåtaan TNF:n sisai-tåvå liuos.
30 Seuraavien esimerkkien on tarkoitus selittaa kek- sintoa lahemmin:
Esimerkki 1
Monoklonaalisten vasta-aineiden valmistus a) BALB/c-hiirien immunisointi 35 Naaraspuolisia BALB/c-hiiria immunisoitiin ruiskut- tamalla niihin vatsaontelon sisMisesti (ip) 30 pg rTNF:aa 6 0,5 ml:ssa taydellista Freundin adjuvanttia. 14 palvan kuluttua rulskutettlln eiaimiln uudelleen vatsaontelon sisalsesti 30 pg antigeenia epataydelllsessa Freundin ad-juvantissa. Edelleen 14 paivdn vaieln suoritettiin kaksl 5 Immunisointia vatsaontelonsisaisestl kulloinkin 30 pg:lla antigeenia. Kolmen palvan kuluttua viimeisesta antigeeni-annoksesta poistettiin kahdelta eiaimelta perna.
b) Pernasolususpension valmistus
Poistetuista pernoista valmistettiin solususpensio 10 puristamalla elimet ruostumattomasta teraksesta valmiste-tun seulan (silmakoko 100 pm) lapi. Solut suspendoitiin Dulbeccon minimivaatimuskasvualustaan (DMEM), johon oli lisatty 4,5 g/1 glukoosia, 10 mM glutamiinia, 1 000 yksik-ktia/ml penisilliinia, 100 pg/ml streptomysiinia ja 15 % 15 vasikansikidseerumia. Solut pestiin kolmeen kertaan kasvu- alustalla ja suspendoitiin sitten uudelleen halutuksi pi-toisuudeksi samaan kasvualustaan. Enimmakseen saatlin yh-desta pernasta noin 5 - 10 x 107 solua.
c) Myeloomasolujen viljely 20 Fuusiopartnerina kaytettiin myeloomasoluja
Spl/0-Agl4 (ATCC nro CRL 8287). Solut ovat vastustuskykyi-sia 20 pg:n/ml 8-atsaguaniinipitoisuuden suhteen eivatka kykene kasvamaan hypoksantiinia, aminopteriiniS ja tymi-diinia sisaitavassa kasvualustassa (HAT). Niita viljeltiin 25 DMEM-kasvualustassa, johon oli lisatty 4,5 g/1 glukoosia, 10 mM glutamiinia, 1 000 yksikkda/ml penisilliinia, 100 pg/ml streptomysiinia ja 15 %. vasikansikidseerumia (tdy-dellinen kasvualusta). Fuusioon kaytettiin logaritmisessa kasvuvaiheessa olevia soluja.
30 d) Solujen fuusiointi
Pernasolususpensio sekoitettiin myeloomasoluihin suhteessa 5:1 ja seos pestiin seerumivapaalla DMEM:lia. Pestyt solut suspendoitiin uudelleen 30 ml:aan seerumiva-paata DMEM:aa ja suspensiota sentrifugoitiin 50 ml:n poly-35 propyleenikartioputkessa 800 kierr./min 5 minuutin ajan.
91421 7
Supernatantti kokonaisuudessaan imettiin pois. Pelletille kaadettiin hyvin varovaisesti 0,5 ml 50-%:ista polyetylee-niglykoliliuosta (PEG, Boehringen), jossa PEG:n molekyyli-palno oli 2 000, solupellettl sekoitettiin kevyesti naput-5 tamalla PEG:hen ja seosta sentrifugoitiin sltten 1 000 kierr./min kolmen mlnuutln ajan. Sen jalkeen lisattiin 10 ml DMEM:aa, solupellettl suspendoltlln slihen varovaisesti ja sentrifugoitiin sitten 2 000 kierr./min kolmen minuutin ajan. Solupellettl suspendoitiin uudelleen HAT-kasvualus-10 taan pitoisuudeksi 2 x 106 solua/ml ja jaettiin 0,2 ml:n tilavuuksina mikrotiitterilevyille. Kuoppiin oli edellise-na påivånå siirrostettu noin 50 000 yksitumaista vatsakal-vosolua, edullisesti makrofageja, sydttdsoluiksi.
e) Hybridoomien valikointi ja viljely 15 Solujen fuusioiduttua niita viljeltiin Littlefiel- din [Science 145 (1964) 709 - 712] menetelmén mukaan HAT-kasvualustassa 37 °C:ssa kosteutetussa 5 %:n C02-ilmakehås-sa. Viljelmia ravittiin korvaamalla kahdesti viikossa puo-let kasvualustasta tuoreella HAT-kasvualustalla. Muutamien 20 viikkojen kuluttua testattiin hybridoomasoluviljelmien viljelmasupernatantteja ihmisen kasvainkuoliotekijan vas-taisen aktiivisuuden suhteen. Valikointitestissa positii-visen tuloksen antaneet hybridoomat valittiin kloonatta-vaksi. Tåsså hybridoomeihin sovellettiin rajaavan laimen-25 tamisen menetelmaa, jossa mikrotiitterilevyn 96 kuoppaan siirrostettiin keskimaarin 0,5 solua/kuoppa ja annettiin 105 hiiren kateenkorvasolua syOttdsoluiksi. Talla kloonaus-menettelylia valittuja vasta-aineita tuottavia soluja viljeltiin, minka jaikeen ne pakastettiin sitten ja sailytet-30 tiin nestetypessa taydellisessa kasvualustassa, joka sisalsi 10 % vasikansikidseerumia seka 10 % dime tyylisul fok-sidia.
f) Spesifisten TNF-vasta-aineiden seulontatesti rTNF laimennettiin pitoisuuteen 3 pg/ml PBS:lia 35 (fosfaatilla puskuroitu keittosuolaliuos, jossa on 0,8 % 8
NaCl:a 0,02 molaarisessa natriumfosfaatissa pH:n ollessa saadetty 7,4: aan HC1:lia tai NaOHrlla). Mikrotiitterilevy-jen® kuoppiin asetettiin kuhunkin 0,1 ml tata liuosta. Kahden tunnin huoneen lampdtilassa inkuboinnin jaikeen 5 supernatantti imettiin pois, ja kuoppia kasiteltiin vahin-taan 30 minuutin ajan 0,3 ml:11a l-%:ista naudanseerumi-albumiinia (Sigma, RIA-laatu). Sitten supernatantti pois-tettiin. Lisattiin hybridoomasolulinjoja, jotka olivat kasvaneet yhteneviksi noin 20 - 30-prosenttisesti, super-10 natanttia tai immunisoitujen hiirien seerumilaimennosta ja inkuboitiin huoneen lampOtilasssa vahintaan kaksi tuntia. Kuopat pestiin useaan kertaan 0,3 ml:11a PBS:aa. Sitten niihin lisattiin 0,1 ml hiiren immunoglobuliinin vasta-aineita (Miles) sopivana pitoisuutena ja inkuboitiin kah-15 den tunnin ajan huoneen lampOtilassa. Naihin vasta-ainei-siin oli sidottu entsyymimerkki, peroksidaasi. Positiivi-sen peroksidaasireaktion antoivat kaytetylle antigeenille spesifisia vasta-aineita sisaitavat kuopat.
Solukasvua oli 80 %:ssa alunperin kaytetysta 360 20 kuopasta. Naista 12 antoi positiivisen tuloksen TNF-seu- lontatestissS. Naista 11 maaritettiin toistettavasti posi-tiivisiksi. Keksinnttn kayttOOn otettiin nelja eri mono-klonaalista hybridoomaa: AM-1, AM-195, AM-114 ja AM-199.
g) Hybridoomasoluviljelmien kasvatus 25 Kasvatus soluviljelmana (in vitro):
Noin 2 x 107 solua siirrostettiin soluviljely-erlen-meyereihin, joiden kasvatuspinta oli noin 175 cm2. Solu-vapaa supernatantti sisalsi kolmen paivSn kuluttua solu-jen erittamia monoklonaalisia vasta-aineita noin 10 - 20 30 pg/ml.
Kasvatus askiitteina hiirissa (in vivo): BALB/c-hiirille annettiin ip vatsakalvojen esikå-sittelyna 0,5 ml Pristan-®;a. Seuraavien 1-2 viikon ai-kana annettiin esikasitellyille eiaimille ip suspensiona 35 PBS:ssa 5 - 10 x 106 hybridoomaa eiainta kohden. 8-10 91421 9 pSivSn kuluttua vatsakalvo puhkaistiin kanyylilla ja solu-pitoinen askiittineste ker&ttiin.
Saadusta askiittinesteesta erotettiin solut ja nii-den palaset sentrifugoimalla (5 000 kierr./min, 5 minuut-5 tia). Monoklonaaliset vasta-aineet sisaitSvS supernatantti * jaettiin m&&råtilavuuksiin ja pakastettiin -70 °C:ssa tai puhdistettiin kromatografisesti vShintaan 90 %:n puhtaus-asteen omaavaksi, jolloin puhdistuminen todettiin natrium-dodesyylisulfaatti-polyakryyliamidigeelielektroforeesilla 10 (DE-OS 3 330 160).
h) Monoklonaalisten vasta-aineiden tyypitys Monoklonaalisia vasta-aineita luonnehdittiin lahem-min ELISA-maarityksilia. Mikrotiitterilevyn kuopat paai-lystettiin rTNFtlia (5 pg/ml). Nain esikasiteltyja levyja 15 ja soluviljelmasta eristettyja, puhdistettuja monoklonaa lisia vasta-aineita inkuboitiin 2 tunnin ajan huoneen lam-pOtitilassa, minka jaikeen seurasi toinen inkubointi (2 tuntia huoneen lampotilassa) eri luokkia ja alaluokkia edustavilla hiirivastaisilla immunoglobuliineilla, jotka 20 sisaisivat niin ikåån kevyempia ja raskaampia immunoglobu-liiniketjuja (Miles). Seuraavassa vaiheessa lisattiin peroksidaasilla leimattu vuohen kaninvastainen (Miles) im-munoglobuliini. Inkuboinnin kestettya tunnin entsyymireak-tio kaynnistettiin lisaamaiia varisubstraatti, tetrametyy-25 libentsidi (Miles) ja vetyperoksidi. Tulokset on koottu taulukkoon 1.
Taulukko 1 _ketiu 30 vasta-aine_luokka_raskas_kewt AM-1 igG gamma 1 kappa AM-114 IgG gamma 1 kappa AM-195 IgG gamma 3 kappa 35 AM-199 IgG gamma 1 kappa 10 1) Monoklonaalisten vasta-aineiden lelmaus NHS-LC-blotiinia (Pierce) liuotettiin PBS:aan ja pitoisuus sSSdettiin 1 mg:aan/ml. 0,1 ml tata liuosta se-koitettiin 0,1 ml:aan puhdistettua monoklonaalista vasta-5 ainetta (0,5 mg/ml PBS) ja seosta inkuboitiin kaksi tuntia huoneen l&mpbtilassa. Reaktion paatyttya liuokseen lisat-tiin 1 ml PBS:aa ja dialysoitiin PBS:aa vastaan 4 °C:ssa. Dialysaatti, jolla tassa tarkoitetaan pussin sisaan jaavaa nestetta, sailytettiin sen kayttddJn asti 4 °C:ssa.
10 Esimerkki 2
Monoklonaalisten vasta-aineiden affiniteetti TNF:n suhteen
Affiniteettivakiot maaritettiin ELISA-analyysitu-losten perusteella. Tassa titrattiin puhdistettuja vasta-15 aineita vakiomaaraiia TNF:aa, ja vasta-aineiden sitoutumi-nen osoitettiin peroksidaasilla leimatun kanin hiirenvas-taisen immunoglobuliinin sitoutumisen avulla. Sitoutumis-lukemista laskettiin affiniteettivakiot erityisohjelman avulla.
20
Taulukko 2
Monoklonaalisten vasta-aineiden affiniteettivakiot 9 -1 vasta-aine K x 10 11 x mol a 25 AM-1 1,5 + 30 % AM-114 1,4 ± 30 % AM-195 3,5 ± 30 % AM-199 2,0 ± 30 % 30 Esitetyt assosiaatiovakiot K& osoittavat TNF:n vas- ta-aineilla olevan korkea affiniteetti TNF:n suhteen. Esimerkki 3 TNF:n sytotoksisen aktiivisuuden neutralointi TNF:n biologinen aktiivisuus mSSritettiin in vitro 35 hiirisolulinjan L929 (ATCC nro CCL1) lyysin perusteella, 91421 11 kuten ovat kuvanneet Aggarwal et al. (J. Biol. Chem. 260 (1985) 2 345 - 2 354). Tutklttaessa monoklonaalisten vas-ta-alneiden neutralolvaa valkutusta TNF:n sytotokslseen aktilvlsuuteen kaytettiin TNF-pitoisuutta, jolla vahintaan 5 90 %:ssa soluista tapahtui lyysi. Vasta-alneet laimennet- tiin taydelliseen kasvualustaan l:2:n laimennosvåleja kayttaen mikrotiitterilevyille. Kuhunkin vasta-ainelaimen-nokseen (0,1 ml) lisattiin 0,05 ml rekombinantti-TNFraa tal luonnolllsta TNF:aa (1,3 ng/ml) ja inkuboitlin huoneen 10 lampdtilassa kahden tunnin ajan. Sltten lisattiin 50 000 L929-solua 0,05 ml:ssa kasvualustaa ja Inkuboitlin inku-baattorissa 20 - 24 tuntia, minka jaikeen solut kiinnitet-tiin ja varjattiin kristallivioletilla.
TNF:n sytotoksisen vaikutuksen johdosta soluissa 15 tapahtuu lyysi, jolloin ne liuenneina eivat varjayksessa varjaanny. Mikali kuitenkin on lasna riittavasti vasta-aineita neutraloimaan TNFrn sytotoksinen aktiivisuus, var-jaytyvat ehjina sailyneet solut.
20 Taulukko 3 TNF:n sytotoksisen aktiivisuuden neutraloituminen mAK neutraloituminen 25 AM-1 AM-114 + AM-195 ++ AM-199 30 Kuten taulukosta 3 ilmenee, todettiin neutraloitu- mistestissa kolme eri vasta-aineluokkaa. Monoklonaalinen vasta-aine AM-195 neutraloi TNFrn 0,2 pg:n/ml pitoisuutena ja AM-114 2 pg:n/ml pitoisuutena, kun taas AM-l:lia ja AM-199 :lia ei saatu aikaan taydellista neutraloitumista 20 35 pg:n/ml pitoisuudellakaan.
12
Esimerkissa 2 suorltettu assosiaatiovakioiden maa-ritys osoitti, etta vasta-aineet sitovat TNF: aa suunn.il-leen yhta hyvin. Jakautuminen voimakkaasti tai heikosti neutraloiviin seka ei laisinkaan neutraloiviin vasta-ai-5 neisiin osoittaa TNF-molekyylien sisaitavan eri epitooppe-ja ja tarjoaa tietoa niiden erottamiseksi. Vasta-aineiden sitoutumista ja TNF:n neutraloitumista koskevien maaritys-ten tuloksista voidaan paatelia naiden monoklonaalisten vasta-aineiden kykenevat tunnistamaan ja maarittelemaan 10 ainakin kolme eri TNF-epitooppia.
Esimerkkl 4 TNF:n maaritys a) Sopivan monoklonaalisen vasta-aineparin valinta
Kahden vasta-aineen kilpailevan sitoutumisen samaan 15 epitooppiin erottamiseksi kumuloituvasta sitoutumisesta eri epitooppeihin tutkittiin vasta-aineiden seka vasta-aineparien kaikkina kyseeseen tulevina yhdistelmina sitoutumista immobilisoituun TNFraan. TNF sidottiin, kuten esimerkissa 1 on kuvattu. Puhdistettuja vasta-aineita lai-20 mennettiin l:4:n laimennusvålein alkaen pitoisuudesta 24 000 ng/ml. Sitten lisattiin biotiinilla leimattu vasta-aine AM-195 ja inkuboitiin 90 minuutin ajan. Kuopat pes-tiin PBSrlia, joka sisaisi 0,05 % Tween® 20:ta, niihin lisattiin streptavidiini-peroksidaasikompleksi (BRL) ja 25 inkuboitiin 30 minuuttia. Pesun jaikeen kuoppiin lisattiin kuoppaa kohden 0,1 ml peroksidaasisubstraattia (katso esi-merkki 4b). Mikaii kyseessa on kilpaileva sitoutuminen, se johtaa signaalin sammumiseen. Kuten taulukosta 4 ilmenee, sitoutuu monoklonaalinen vasta-aine AM-195 eri TNF-epi-30 tooppiin kuin AM-1 tai AM-199. AM-114:n suhteen on havait-tavissa lievaa kilpailua. Taiia perusteella suoritetaan jatkokokeet kayttaen immobilisoitua AM-1- tai AM-199-vas-ta-ainetta seka biotiinilla leimattua AM-195:ta.
91421 13
Taulukko 4
Biotiinilla leimatun AM-195:n sitoutumisen vaikutus mulden monoklonaallsten vasta-aineiden sitoutumiseen TNF:aan 5 Sitoutuminen, % uo mAK:ta/ml_195_114_199_1_ 24 000 3 33 100 100 6 000 4 85 100 100 10 1 500 16 100 100 100 375 63 100 100 100 62 95 100 100 100 0 100 100 100 100 15 b) Entsyymi-immuunitestikoej ar j estelmSn rakenta- minen
Vasta-aine AM-1 tal AM-199 immobilisoitiin passii-visella adsorptiolla tai kovalenttisella sldoksella kanto-alneeseen (lasihelmet, sintteri, polystyrolista taipolyvi-20 nyyllkloridista valmistettu mikrotiitterilevy, suodatinpa-perl tal muu materlaall). Monoklonaallsten vasta-aineiden spesiflsyys sallii vain spesifisen antlgeenin, tassa TNF:n, sitoutumisen sen molekyylin yhden yksittaisen si-toutumiskeskuksen muodostamalla immuunisidoksella. Sitou-25 tumiskelpoisen TNF:η maara on verrannollinen antlgeenin pitoisuuteen ja maaraan liuoksessa. Antigeeni tunnistetaan vasta-aineen ΆΜ-195 sitoutumisesta immuunisidoksella anti-geenimolekyylin muuhun sitoutumiskeskukseen. Vasta-aine AM-195 sisaitaa signaalin. Immobilisoituneen signaalin 30 maara on tailOin suoraan verrannollinen immobilisoituneen antlgeenin maaraan ja taten myOs tutkittavan liuoksen sisal tamaan antigeenipitoisuuteen.
Kokeiden suoritus 1. Paailystys 35 Puhdistettu vasta-aine AM-1 tai AM-199 laimennet- tiin kiinnityspuskuriin (natriumbikarbonaattipuskuri, 14 pH 9,5, 4,2 g/1 = 0,05 M) pitoisuudeksi 5 pg/ml. Mikro-tiitterilevyn kuoppia inkuboitiin 0,1 ml:11a tata lluosta 16 - 20 tuntia 4 °C:ssa.
2. Salpaaminen 5 Kohdan 1 lluos imettiin pols ja kuopat pestlin kah- desti PBS:lia (2 g/1 NaCl, 0,2 g/1 KC1, 1,44 g/1 Na2HP04 x 2H20, 0,2 g/1 KH2P04, pH 7,0). Sitten suoritettiin kuoppien salpaus inkuboimalla 30 minuuttia huoneen lampOtilassa l-%risella naudanseerumialbumiiniliuoksella (Sigma, RIA-10 laatu).
Kohdan 2 liuos imettiin pols ja kuopat pestiin kah-desti PBSrlia. rTMFraa laimennettiin puskurilla I (1 litraan PBS:aa lisattiin 1 g naudanseerumialbumiinia, Sigma, RIA-laatu) alkupitoisuuteen 2,5 ng/ml ja tehtiin laimen-15 nossarja l:2:n laimennosvaiein. 0,1 ml kutakin laimennosta pipetoitiin kuoppiin ja inkuboitiin 2-4 tuntia huoneen lampdtilassa. Pestiin puskurilla (pesupuskuri: PBS + 0,1 % Tween® 20:ta) kolmasti seka lisattiin 0,1 ml biotiinilla laimettua vasta-ainetta AM-195. Esimerkin 1 h) mukaan val-20 mistettu konjugaatti laimennettiin 1:400 puskurilla I ja inkuboitiin 2 tuntia huoneen lampdtilassa tai 16 - 20 tuntia 4-10 °C:ssa.
4. Tehostinj arj estelma
Kuopat pestiin kolmasti pesupuskurilla, lisattiin 25 sitten 0,1 ml streptavidiini-peroksidaasikompleksia (BRL, laimennettuna 1:2 000 PBS/BSA-puskuriin) ja inkuboitiin huoneen lampOtilassa 30 min.
5. Kehitys
Kuopat pestiin kolmasti pesupuskurilla, niihin pi-30 petoitiin 0,1 ml peroksidaasisubstraattia kuoppaa kohden ja inkuboitiin huoneen lampOtilassa 30 minuuttia. Reaktio pysaytettiin lisaamaiia 0,1 ml 2 M H2S04:a kuoppaa kohden. Absorbanssit luettiin mikrotiitterilevylta tunnin kulues-sa 450 nm:n aallonpituudella. .Tyypillinen ominaiskayra on 35 esitetty kuviossa 1. TNF:n erotuskynnys on noin 10 pg/ml.
91421 15
Peroksidaasisubstraatti: TMB-liuos: 42 mM TMB (3,3',5,'-tetrametyylibentsidiini,
Miles) DMSO:ssa - substraattipuskuri: 50 g natriumasetaattia lluotetaan 5 1 l:aan vetta ja pH saadetaan 4,9:aan 1 g:11a sitruunahap- poa 0,1 ml TMB-liuosta llsStaan hitaasti ja ravistaen 10 ml:-aan substraattipuskurla, minka jaikeen lisataan 1,47 μΐ 30-%:ista H202:ta (puhdlstettu laatu, Merck).
10 c) TNF:n maaritys ihmisseerumista
Rekombinaatti-TNF:aa ja/tai luonnollista TNFraa liuotettiin puskuriin I (esimerkki 4b) tal ihmisseerumiin alkupitoisuudeksi 2,5 ng/ml ja laimennettiin samalla liuoksella 1:2 laimennusvalein. Kutakin laimennosta pipe-15 toitiin kuoppaa kohden 0,1 ml kuoppiin, jotka oli edelta-kasin paailystetty vasta-aineella AM-199 tal AM-1, kuten esimerkissa 4b) on kuvattu. Jatkovaiheet suoritetaan, kuten esimerkissa 4 b) on kuvattu.
Kuten kuviosta 1 ilmenee, eivat mitkaan ihmissee-20 rumin ainesosat hairitse TNFtn maaritysta monoklonaalisil-la vasta-aineilla.
d) Vasta-aineiden ja lymfotoksiinin ristikkaisreak-tio
Vasta-aineiden mahdollista ristikkaisreaktiota lym-25 fotoksiinin kanssa tutkittiin esimerkin 1 e) mukaisesti, jolloin mikrotiitterilevyn kuoppapinnat oli paailystetty puhdistetulla rekombinanttilymfotoksiinilla. Vasta-aineilla AM-1, AM-114, AM-195 ja AM-199 ei todettu sitoutumista lymfotoksiiniin.
30 Esimerkki 5 TNF:n osoittaminen seerumista monoklonaalisilla vasta-aineilla kayttaen Western blot -maaritysta.
Ihmisseeruminaytteita, joihin oli lisatty vaihtele-via TNF-maaria, erotettiin geelielektroforeesilla Laemmlin 35 [J. Mol. Biol. 80 (1973) 575 - 599] mukaan kayttaen 12,5- 16 %:ista geelia. Western blot -maaritys suoritettiin Burnet-tin, W.N. [Anal. Biochem. 112 (1981) 195 - 203] ja Reine-sin, D. et al. [J. Biol. Chem. 260 (1985) 1 133 - 1 139] kuvaaman menetelman mukaan. Geelln protellneja sllrrettlln 5 yOn yll nltroselluloosakalvoon (Schleicher ja Schiill). Nltroselluloosakalvoa inkuboltlln huoneen 1ampOtilassa kolmen tunnin ajan l-%risella gelatilnilluoksella (Bio-Rad, 1 lraan PBS:aa liuotettiin 10 g gelatiinia). Sltten nltroselluloosakalvoa Inkuboltlln huoneen lampbtilassa 10 kahden tunnin ajan 20 ml:11a vasta-aineliuosta, joka oli laimennettu pitoisuudeksi 1 pg/ml puskuriin (0,1 % gelatiinia PBSrssa). Supernatantti dekantoitiin pols ja kalvot pestiin useaan kertaan. Kayttamaiia peroksidaasilla lei-mattua hiirenvastaista immunoglobuliinia saatiin TNF naky-15 viin nitroselluloosakalvolla. Erotuskynnys on noin 30 ng TNF:aa. Kuten kuviosta 2 ilmenee, ei monoklonaalinen vas-ta-aine AM-195 reagoi ihmisseerumin minkaån aineosan kans-sa ja sita voidaan taten pitaa TNF:n suhteen spes!fisena. Vasta-aineille AM-1, AM-114 ja AM-199 saatiin samankaltai-20 set tulokset.
Esimerkki 6 TNF:n neutralointi
Monoklonaalisten vasta-aineiden TNF:ta suojaavaa vaikutusta tutkittiin in vivo -olosuhteissa kayttaen uros-25 puolisia Balb/c-hiiria (kokeet 1,2,4) ja C3H/HeN-hiiri8 (koe 3).4-6 viikon ikaiset hiiret valittiin ja jaettiin satunnaisvalinnalla 3 tal 5 eiaimen ryhmiin. Yhdisteet ruiskutettiin laskimon sisaisesti hannan sivulaskimoon (annostilavuus 10 ml/kg. Ennen ruiskutusta TNF liuotet-30 tiin puskuriin A (150 mM NaCl, 0,18 % naudanseerumialbu-miinia, Sigma, RIA-laatu) ja liuosta varastoitiin 6 tun-tia 4-10 °C:ssa. Taman ajan kuluttua TNF:n myrkyllisyys oli suurimmillaan. TNF ruiskutettiin ensin ja sitten mAK 15 - 30 minuutin kuluttua. Menehtymisluvut maaritettiin 24 35 tunnin kuluttua. Saadut tulokset ilmenevat taulukosta 5 91421 17 (lukema 3/5 tarkoittaa, etta kolme viidesta eiaimesta kuo-li).
Taulukko 5 5 annettu yhdiste/ koenumero annetut yhdlsteet _1 2 3 4
Puskurl A 0/3 0/5 0/5 0/5 10 mAK 10 mg/kg 0/3 0/5 0/5 0/5 mAK 5 mg/kg 0/3 0/5 0/5 0/5 TNF 1 mg/kg 3/3 0/5 4/5 4/5 TNF 1 mg/kg + mAK 1 mg/kg 1/3 2/5 1/5 3/5 TNF 1 mg/kg + mAK 5 mg/kg 0/3 0/5 0/5 0/5 15 TNF 2 mg/kg 3/3 5/5 1/5 4/5 TNF 2 mg/kg + mAK 2 mg/kg 3/3 4/5 2/5 5/5 TNF 2 mg/kg + mAK 10 mo/kg 0/3 0/0 0/5 0/5
Kuten taulukosta 5 on paateltavissa, kykenee neut-20 raloiva vasta-aine AM-195 neutraloimaan hiirelle kuoletta-van TNF-annoksen. ElSinten eloonjaantiluvut riippuvat vas-ta-alneen ja TNF:n keskinaisesta palnosuhteesta. TNF:n toksisuuden taydellinen haviaminen havaitaan kåytettaessa palnosuhdetta 5:1. Olettaen etta TNF esiintyy trimeerinaan 25 [FEBS-Lett. 211 (1987) 179], vastaa tama vasta-aineen ja TNF:n keskinaista moolisuhdetta 1,6:1.
TNF ei neutraloidu hiiressa, mikali kéytetaan ei-neutraloivia vasta-aineita.
Claims (2)
1. Hybridicellinje ECACC 87 050 801.
1. Hybridisolulinj a ECACC 87 050 801.
2. Menetelma luonnon kasvainkuoliotekijan, TNF:n, 5 kanssa reagolvan vasta-alneen valmistamiseksi, tunnettu siita, etta viljeliaan solulinjaa ECACC 87 050 801 in vitro tai in vivo ja vasta-aine eristetaan puhdistamalla soluviljelman in vitro -supernatanteista. 10
2. Fbrfarande fttr framstailning av en antikropp som reagerar med den naturliga tumOrnekrosfaktoren, TNF, kannetecknat darav, att man odlar cellinjen ECACC 87 050 801 in vitro eller in vivo och isolerar anti-kroppen genom att rena den ur in vitro -supernatanten av 20 cellkulturen.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE3631229 | 1986-09-13 | ||
DE19863631229 DE3631229A1 (de) | 1986-09-13 | 1986-09-13 | Monoklonale antikoerper gegen humanen tumornekrosefaktor (tnf) und deren verwendung |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI873948A0 FI873948A0 (fi) | 1987-09-11 |
FI873948A FI873948A (fi) | 1988-03-14 |
FI91421B FI91421B (fi) | 1994-03-15 |
FI91421C true FI91421C (fi) | 1994-06-27 |
Family
ID=6309540
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI873948A FI91421C (fi) | 1986-09-13 | 1987-09-11 | Menetelmä ihmisen kasvainkuoliotekijän (TNF) kanssa reagoivan monoklonaalisen vasta-aineen valmistamiseksi ja vasta-ainetta tuottava hybridisolulinja |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5231024A (fi) |
EP (1) | EP0260610B1 (fi) |
JP (2) | JP2837160B2 (fi) |
BG (1) | BG62229B2 (fi) |
BR (1) | BR1100843A (fi) |
CA (1) | CA1337717C (fi) |
DE (2) | DE3631229A1 (fi) |
DK (1) | DK473887A (fi) |
ES (1) | ES2058083T3 (fi) |
FI (1) | FI91421C (fi) |
ZA (1) | ZA876807B (fi) |
Families Citing this family (174)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6419927B1 (en) | 1981-09-08 | 2002-07-16 | Anthony Cerami | Method for reducing adverse effects of a human 70kDa mediator which results from endotoxin stimulation of macrophages |
US5700466A (en) * | 1981-09-08 | 1997-12-23 | The Rockefeller University | Method of ameliorating or preventing septic shock using a monoclonal antibody specific to cachectin/tumor necrosis factor |
US6309640B1 (en) | 1981-09-08 | 2001-10-30 | The Rockefeller University | Lipoprotein lipase suppression by endotoxin-induced mediator (shock assay) |
GB2233559B (en) * | 1988-03-11 | 1992-03-04 | Celltech Ltd | Antibodies for use in antilymphocyte antibody therapy |
DE3823804A1 (de) * | 1988-07-14 | 1990-01-18 | Basf Ag | Neutralisation der in vitro und in vivo toxischen eigenschaften von tnf-(alpha) durch monoklonale antikoerper und den davon abgeleiteten fragmenten |
JP2638652B2 (ja) * | 1988-07-18 | 1997-08-06 | カイロン・コーポレーション | カケクチンと反応するモノクロナール抗体 |
EP0355067A1 (en) * | 1988-08-19 | 1990-02-21 | Celltech Limited | Pharmaceutical products for anti-neoplastic therapy |
US20030225254A1 (en) * | 1989-08-07 | 2003-12-04 | Rathjen Deborah Ann | Tumour necrosis factor binding ligands |
US5959087A (en) * | 1989-08-07 | 1999-09-28 | Peptide Technology, Ltd. | Tumour necrosis factor binding ligands |
EP0486526B2 (en) | 1989-08-07 | 2001-03-07 | Peptech Limited | Tumour necrosis factor binding ligands |
WO1991002756A1 (en) * | 1989-08-16 | 1991-03-07 | Cetus Corporation | Prohormone cleavage site blocking antibody |
US5843693A (en) * | 1989-08-16 | 1998-12-01 | Chiron Corporation | Assay method for screening for inhibitors of proTNF conversion |
US6586222B1 (en) | 1989-08-16 | 2003-07-01 | Chiron Corporation | Recombinant PR-3 and compositions thereof |
US5998378A (en) * | 1989-08-16 | 1999-12-07 | Chiron Corporation | Compositions for the inhibition of TNF hormone formation and uses thereof |
GB8921123D0 (en) * | 1989-09-19 | 1989-11-08 | Millar Ann B | Treatment of ards |
US6713610B1 (en) * | 1990-01-12 | 2004-03-30 | Raju Kucherlapati | Human antibodies derived from immunized xenomice |
WO1992016553A1 (en) * | 1991-03-18 | 1992-10-01 | New York University | Monoclonal and chimeric antibodies specific for human tumor necrosis factor |
US6284471B1 (en) | 1991-03-18 | 2001-09-04 | New York University Medical Center | Anti-TNFa antibodies and assays employing anti-TNFa antibodies |
US7192584B2 (en) * | 1991-03-18 | 2007-03-20 | Centocor, Inc. | Methods of treating psoriasis with anti-TNF antibodies |
US5919452A (en) * | 1991-03-18 | 1999-07-06 | New York University | Methods of treating TNFα-mediated disease using chimeric anti-TNF antibodies |
US20040120952A1 (en) * | 2000-08-07 | 2004-06-24 | Centocor, Inc | Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor |
US6277969B1 (en) * | 1991-03-18 | 2001-08-21 | New York University | Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor |
EP0585705B1 (en) * | 1992-08-28 | 1998-11-04 | Bayer Corporation | Use of monoclonal antibodies to TNF to treat bacterial meningitis |
US20050260201A1 (en) * | 1993-01-29 | 2005-11-24 | Centocor, Inc. | Methods of treating rheumatoid arthritis using anti-TNF receptor fusion proteins |
US5888511A (en) * | 1993-02-26 | 1999-03-30 | Advanced Biotherapy Concepts, Inc. | Treatment of autoimmune diseases, including AIDS |
US5626843A (en) * | 1993-02-26 | 1997-05-06 | Advanced Biotherapy Concepts, Inc. | Treatment of autoimmune diseases, including AIDS, by removel of interferons, TNFs and receptors therefor |
DE4409513C1 (de) * | 1994-02-07 | 1995-10-19 | Knoll Ag | Verwendung von anti-TNF-Antikörpern als Arzneimittel zur Behandlung von Erkrankungen mit einem erhöhten Interleukin-6 Serumspiegel |
NZ278607A (en) * | 1994-02-07 | 1999-05-28 | Knoll Ag | Use of tnf antagonists for treating disorders involving elevated serum levels of il-6 wherein the serum levels are 500pg/ml or above |
JPH10504441A (ja) | 1994-03-07 | 1998-05-06 | カイロン コーポレイション | Tnf形成阻害のための組成物およびその使用 |
US6090382A (en) | 1996-02-09 | 2000-07-18 | Basf Aktiengesellschaft | Human antibodies that bind human TNFα |
NZ512006A (en) * | 1996-02-09 | 2005-05-27 | Abbott Biotech Ltd | Medical treatment with human TNF-alpha antibodies |
US7608262B2 (en) * | 1996-02-16 | 2009-10-27 | The Kennedy Institute Of Rheumatology | Methods of preventing or treating thrombosis with tumor necrosis factor antagonists |
EP2305027B1 (en) * | 1996-12-03 | 2014-07-02 | Amgen Fremont Inc. | Transgenic mammals having human Ig loci including plural VH and Vkappa regions and antibodies produced therefrom |
US20020031513A1 (en) * | 1997-11-24 | 2002-03-14 | Shamir Leibovitz | Method and pharmaceutical composition for inhibiting premature rapture of fetal membranes, ripening of uterine cervix and preterm labor in mammals |
JP2002538170A (ja) * | 1999-03-02 | 2002-11-12 | セントコール, インコーポレイテッド | 喘息の治療における抗−TNFα抗体 |
CZ20013338A3 (cs) * | 1999-03-18 | 2002-03-13 | Celgene Corporation | Substituované 1-oxo-a l,3-dioxoisoindoliny a jejich pouľití ve farmaceutických prostředcích pro sníľení koncentrací zánětlivých cytokinů |
WO2001024827A2 (en) * | 1999-10-06 | 2001-04-12 | Basf Aktiengesellschaft | INHIBITORS OF THE ENDOTHELIN SIGNALLING PATHWAY AND αVβ3 INTEGRIN RECEPTOR ANTAGONISTS FOR COMBINATION THERAPY |
US20090081234A1 (en) * | 2000-08-07 | 2009-03-26 | George Heavner | Anti-tnf antibodies, compositions, methods and uses for treatment of depression and related conditions |
UA81743C2 (uk) | 2000-08-07 | 2008-02-11 | Центокор, Инк. | МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ЛЮДИНИ, ЩО СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З ФАКТОРОМ НЕКРОЗУ ПУХЛИН АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, ЩО ЙОГО МІСТИТЬ, ТА СПОСІБ ЛІКУВАННЯ РЕВМАТОЇДНОГО АРТРИТУ |
US20050249735A1 (en) * | 2000-08-07 | 2005-11-10 | Centocor, Inc. | Methods of treating ankylosing spondylitis using anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor |
US7288390B2 (en) | 2000-08-07 | 2007-10-30 | Centocor, Inc. | Anti-dual integrin antibodies, compositions, methods and uses |
US20060018907A1 (en) * | 2000-08-07 | 2006-01-26 | Centocor, Inc. | Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor |
US6902734B2 (en) | 2000-08-07 | 2005-06-07 | Centocor, Inc. | Anti-IL-12 antibodies and compositions thereof |
US20110195063A1 (en) * | 2000-08-07 | 2011-08-11 | Centocor, Inc. | Methods of Treating Ankylosing Spondylitis Using Anti-TNF Antibodies and Peptides of Human Tumor Necrosis Factor |
AU2002306651B2 (en) * | 2001-03-02 | 2007-12-13 | Medimmune, Llc | Methods of preventing or treating inflammatory or autoimmune disorders by administering integrin alphav Beta3 antagonists |
CA2868614A1 (en) | 2001-06-08 | 2002-12-08 | Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. | Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies |
TWI334439B (en) | 2001-08-01 | 2010-12-11 | Centocor Inc | Anti-tnf antibodies, compositions, methods and uses |
AU2003226065B2 (en) | 2002-04-12 | 2009-02-26 | Ludwig Institute For Cancer Research, Ltd | Recombinant anti-interleukin-9 antibodies |
US20030206898A1 (en) | 2002-04-26 | 2003-11-06 | Steven Fischkoff | Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug |
US20040009172A1 (en) * | 2002-04-26 | 2004-01-15 | Steven Fischkoff | Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug |
EP1545608A4 (en) | 2002-06-28 | 2006-09-13 | Centocor Inc | CH1-DELETED MAMMED MUICETIC BODIES, COMPOSITIONS, METHODS AND APPLICATIONS |
US8715664B2 (en) | 2005-05-16 | 2014-05-06 | Abbvie Biotechnology Ltd. | Use of human TNFα antibodies for treatment of erosive polyarthritis |
US20070202104A1 (en) | 2002-07-19 | 2007-08-30 | Abbott Laboratories S.A. | Treatment of spondyloarthropathies using TNFalpha inhibitors |
US20040033228A1 (en) | 2002-08-16 | 2004-02-19 | Hans-Juergen Krause | Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders |
MY150740A (en) * | 2002-10-24 | 2014-02-28 | Abbvie Biotechnology Ltd | Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental |
US7285269B2 (en) | 2002-12-02 | 2007-10-23 | Amgen Fremont, Inc. | Antibodies directed to tumor necrosis factor |
US7101978B2 (en) * | 2003-01-08 | 2006-09-05 | Applied Molecular Evolution | TNF-α binding molecules |
AU2004229501B2 (en) | 2003-04-11 | 2011-08-18 | Medimmune, Llc | Recombinant IL-9 antibodies and uses thereof |
US8273347B2 (en) | 2003-05-13 | 2012-09-25 | Depuy Spine, Inc. | Autologous treatment of degenerated disc with cells |
US7553827B2 (en) * | 2003-08-13 | 2009-06-30 | Depuy Spine, Inc. | Transdiscal administration of cycline compounds |
US20040229878A1 (en) * | 2003-05-13 | 2004-11-18 | Depuy Spine, Inc. | Transdiscal administration of specific inhibitors of P38 kinase |
US7344716B2 (en) * | 2003-05-13 | 2008-03-18 | Depuy Spine, Inc. | Transdiscal administration of specific inhibitors of pro-inflammatory cytokines |
US7429378B2 (en) * | 2003-05-13 | 2008-09-30 | Depuy Spine, Inc. | Transdiscal administration of high affinity anti-MMP inhibitors |
EP1631266B1 (en) | 2003-05-13 | 2011-03-16 | DePuy Spine, Inc. | A method of treating degenerative disc disease |
US8361467B2 (en) * | 2003-07-30 | 2013-01-29 | Depuy Spine, Inc. | Trans-capsular administration of high specificity cytokine inhibitors into orthopedic joints |
UA89481C2 (uk) | 2003-09-30 | 2010-02-10 | Центокор, Инк. | Еритропоетинові міметичні шарнірно-серцевинні міметитіла людини, композиції, способи та застосування |
US8895540B2 (en) | 2003-11-26 | 2014-11-25 | DePuy Synthes Products, LLC | Local intraosseous administration of bone forming agents and anti-resorptive agents, and devices therefor |
US7435799B2 (en) * | 2004-01-08 | 2008-10-14 | Applied Molecular Evolution | TNF-α binding molecules |
BRPI0509528A (pt) * | 2004-03-31 | 2007-08-07 | Centocor Inc | corpos imitação de glp-1 humana, composições, processos e usos |
TWI439284B (zh) | 2004-04-09 | 2014-06-01 | Abbvie Biotechnology Ltd | 用於治療TNFα相關失調症之多重可變劑量療法 |
US7351739B2 (en) * | 2004-04-30 | 2008-04-01 | Wellgen, Inc. | Bioactive compounds and methods of uses thereof |
GB0414054D0 (en) | 2004-06-23 | 2004-07-28 | Owen Mumford Ltd | Improvements relating to automatic injection devices |
US7393662B2 (en) * | 2004-09-03 | 2008-07-01 | Centocor, Inc. | Human EPO mimetic hinge core mimetibodies, compositions, methods and uses |
EP1807111A4 (en) * | 2004-10-08 | 2009-05-27 | Abbott Biotech Ltd | SYNCYTIAL RESPIRATORY VIRUS INFECTION (RSV) |
AU2005299355A1 (en) | 2004-10-27 | 2006-05-04 | Medimmune, Llc | Modulation of antibody specificity by tailoring the affinity to cognate antigens |
PA8672101A1 (es) | 2005-04-29 | 2006-12-07 | Centocor Inc | Anticuerpos anti-il-6, composiciones, métodos y usos |
PL2452694T3 (pl) | 2005-06-30 | 2019-06-28 | Janssen Biotech, Inc | Przeciwciała anty-IL-23, kompozycje, sposoby i zastosowania |
CN109187944A (zh) * | 2005-08-02 | 2019-01-11 | 埃克斯生物科技公司 | 使用IL-1α自身抗体诊断、治疗和预防血管疾病 |
US20070041905A1 (en) * | 2005-08-19 | 2007-02-22 | Hoffman Rebecca S | Method of treating depression using a TNF-alpha antibody |
EP3181141A1 (en) | 2005-08-30 | 2017-06-21 | Intrexon Actobiotics NV | Anti-tnf alpha producing lactic acid bacteria for the treatment of inflammatory bowel disease |
SG169361A1 (en) | 2005-11-01 | 2011-03-30 | Abbott Biotech Ltd | Methods and compositions for diagnosing ankylosing spondylitis using biomarkers |
DK1971366T3 (da) | 2005-12-29 | 2014-10-13 | Janssen Biotech Inc | Humane anti-IL-23-antistoffer, sammensætninger, fremgangsmåder og anvendelser |
CA2647029A1 (en) | 2006-04-05 | 2007-10-18 | Abbott Biotechnology Ltd. | Antibody purification |
US20090317399A1 (en) * | 2006-04-10 | 2009-12-24 | Pollack Paul F | Uses and compositions for treatment of CROHN'S disease |
US20080118496A1 (en) * | 2006-04-10 | 2008-05-22 | Medich John R | Uses and compositions for treatment of juvenile rheumatoid arthritis |
EP2010214A4 (en) * | 2006-04-10 | 2010-06-16 | Abbott Biotech Ltd | USES AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF RHEUMATOID ARTHRITIS |
US9605064B2 (en) | 2006-04-10 | 2017-03-28 | Abbvie Biotechnology Ltd | Methods and compositions for treatment of skin disorders |
WO2008063213A2 (en) | 2006-04-10 | 2008-05-29 | Abbott Biotechnology Ltd. | Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis |
EP2666478A3 (en) | 2006-04-10 | 2014-10-22 | AbbVie Biotechnology Ltd | Uses and compositions for treatment of psoriasis |
US20080131374A1 (en) * | 2006-04-19 | 2008-06-05 | Medich John R | Uses and compositions for treatment of rheumatoid arthritis |
US20110008282A1 (en) * | 2006-05-15 | 2011-01-13 | Xbiotech, Inc. | IL-1alpha immunization induces autoantibodies protective against atherosclerosis |
CN102580086A (zh) * | 2006-05-22 | 2012-07-18 | 埃克斯生物科技公司 | 使用抗IL-1α抗体治疗癌症 |
WO2008005315A2 (en) | 2006-06-30 | 2008-01-10 | Abbott Biotechnology Ltd. | Automatic injection device |
US8637469B2 (en) | 2006-07-11 | 2014-01-28 | Roy C. Levitt | Rhinosinusitis prevention and therapy with proinflammatory cytokine inhibitors |
US20080014285A1 (en) * | 2006-07-13 | 2008-01-17 | Di Mauro Thomas M | Method of treating neurodegenerative brain disease with a composite comprising superparamagnetic nanoparticles and a therapeutic compound |
LT2068889T (lt) | 2006-08-10 | 2020-02-10 | Roy C. Levitt | Anakinra, naudojama bronchiolito obliteranso sindromo gydymui |
EP2684895A1 (en) | 2006-10-27 | 2014-01-15 | AbbVie Biotechnology Ltd | Crystalline anti-hTNFalpha antibodies |
BRPI0809209A2 (pt) | 2007-03-29 | 2014-09-02 | Abbott Lab | Anticorpos il-12 anti-humanos cristalinos |
WO2008137915A2 (en) | 2007-05-07 | 2008-11-13 | Medimmune, Llc | Anti-icos antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease |
EP2171451A4 (en) | 2007-06-11 | 2011-12-07 | Abbott Biotech Ltd | METHOD FOR TREATING JUVENILIAN IDIOPATHIC ARTHRITIS |
SG183709A1 (en) * | 2007-08-08 | 2012-09-27 | Abbott Lab | Compositions and methods for crystallizing antibodies |
US20090038182A1 (en) * | 2007-08-09 | 2009-02-12 | Lans Maris J | Footwear with built-in scale |
US8986696B2 (en) * | 2007-12-21 | 2015-03-24 | Depuy Mitek, Inc. | Trans-capsular administration of p38 map kinase inhibitors into orthopedic joints |
US20090162351A1 (en) * | 2007-12-21 | 2009-06-25 | Depuy Spine, Inc. | Transdiscal administration of inhibitors of p38 MAP kinase |
CA2710779C (en) * | 2007-12-31 | 2017-06-20 | Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft | Antibodies to tnf.alpha. |
SG187473A1 (en) * | 2008-01-15 | 2013-02-28 | Abbott Gmbh & Co Kg | Powdered protein compositions and methods of making same |
PT2285409T (pt) * | 2008-05-30 | 2016-07-11 | Xbiotech Inc | Anticorpos de interleucina-1 alfa e métodos de utilização |
CN102209557A (zh) * | 2008-09-12 | 2011-10-05 | 埃克斯生物科技公司 | 靶向病原性单核细胞 |
US8415291B2 (en) | 2008-10-31 | 2013-04-09 | Centocor Ortho Biotech Inc. | Anti-TNF alpha fibronectin type III domain based scaffold compositions, methods and uses |
JP5933975B2 (ja) | 2008-11-12 | 2016-06-15 | メディミューン,エルエルシー | 抗体製剤 |
CN102458517B (zh) | 2009-04-29 | 2014-07-23 | 阿布维生物技术有限公司 | 自动注射装置 |
BR112012009855A2 (pt) | 2009-10-26 | 2018-06-26 | Prometheus Laboratoires Inc | métodos para determinar uma quantidade eficaz de uma droga, para otimizar a terapia e/ou reduzir as toxicidade a uma droga, para determinar a presença ou nível de uma droga, para otimizar a quantidade terapêutica de uma droga e para determinar a presença ou nível de um autoanticorpo para uma droga, e, kit |
CA2782042A1 (en) | 2009-12-15 | 2011-06-23 | Abbott Biotechnology Ltd. | Improved firing button for automatic injection device |
CA2787755A1 (en) | 2010-01-20 | 2011-07-28 | Tolerx, Inc. | Immunoregulation by anti-ilt5 antibodies and ilt5-binding antibody fragments |
US9023997B2 (en) | 2010-01-20 | 2015-05-05 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Anti-ILT5 antibodies and ILT5-binding antibody fragments |
KR20180086297A (ko) | 2010-06-18 | 2018-07-30 | 엑스바이오테크, 인크. | 관절염 치료 |
KR20130108305A (ko) | 2010-08-23 | 2013-10-02 | 엑스바이오테크, 인크. | 종양성 질병들에 대한 치료 |
AU2011317149B2 (en) | 2010-10-18 | 2015-05-07 | Société des Produits Nestlé S.A. | Methods for determining anti-drug antibody isotypes |
AR084210A1 (es) * | 2010-12-08 | 2013-05-02 | Abbott Lab | PROTEINAS DE UNION AL TNF-a |
MX350384B (es) | 2011-01-24 | 2017-09-04 | Abbvie Biotechnology Ltd | Separación de protectores de aguja de jeringas y dispositivos de inyección automáticos. |
EP2749305B1 (en) | 2011-01-24 | 2017-11-01 | AbbVie Biotechnology Ltd | Automatic injection devices having overmolded gripping surfaces |
EP2676137B1 (en) | 2011-02-17 | 2014-12-31 | Nestec S.A. | Assays for detecting autoantibodies to anti-tnf drugs |
US8658171B2 (en) | 2011-02-28 | 2014-02-25 | Livzon Mabpharm Inc. | Humanized anti-TNFα antibodies |
CN102675460B (zh) | 2011-02-28 | 2015-08-19 | 珠海市丽珠单抗生物技术有限公司 | 抗肿瘤坏死因子α的人源化抗体 |
US9724409B2 (en) | 2011-04-01 | 2017-08-08 | Xbiotech, Inc. | Treatment of inflammatory skin disease |
WO2012149197A2 (en) | 2011-04-27 | 2012-11-01 | Abbott Laboratories | Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins |
SG10201605516YA (en) | 2011-07-06 | 2016-08-30 | Nestec Sa | Assays for detecting neutralizing autoantibodies to biologic therapy with tnf alpha |
WO2013043973A2 (en) | 2011-09-23 | 2013-03-28 | Xbiotech, Inc. | Cachexia treatment |
KR20140084253A (ko) | 2011-10-24 | 2014-07-04 | 애브비 인코포레이티드 | Tnf에 대한 면역결합제 |
SG11201401796SA (en) * | 2011-10-24 | 2014-10-30 | Abbvie Inc | Bispecific immunobinders directed against tnf and il-17 |
US9334319B2 (en) | 2012-04-20 | 2016-05-10 | Abbvie Inc. | Low acidic species compositions |
WO2013158273A1 (en) | 2012-04-20 | 2013-10-24 | Abbvie Inc. | Methods to modulate c-terminal lysine variant distribution |
US9067990B2 (en) | 2013-03-14 | 2015-06-30 | Abbvie, Inc. | Protein purification using displacement chromatography |
US9249182B2 (en) | 2012-05-24 | 2016-02-02 | Abbvie, Inc. | Purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography |
US9512214B2 (en) | 2012-09-02 | 2016-12-06 | Abbvie, Inc. | Methods to control protein heterogeneity |
EP2890782A1 (en) | 2012-09-02 | 2015-07-08 | AbbVie Inc. | Methods to control protein heterogeneity |
US9545441B2 (en) | 2012-09-18 | 2017-01-17 | Xbiotech, Inc. | Treatment of diabetes |
CA2905010A1 (en) | 2013-03-12 | 2014-09-18 | Abbvie Inc. | Human antibodies that bind human tnf-alpha and methods of preparing the same |
WO2014159579A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Abbvie Inc. | MUTATED ANTI-TNFα ANTIBODIES AND METHODS OF THEIR USE |
US9017687B1 (en) | 2013-10-18 | 2015-04-28 | Abbvie, Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography |
US9499614B2 (en) | 2013-03-14 | 2016-11-22 | Abbvie Inc. | Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosaccharides |
US20140271633A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-18 | Abbvie Inc. | Mammalian cell culture performance through surfactant supplementation of feed media |
BR112015017307A2 (pt) | 2013-03-14 | 2017-11-21 | Abbvie Inc | composições de espécies com baixa acidez e métodos para produção e uso das mesmas |
CA2899449A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Abbvie Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing the same using displacement chromatography |
PL2970980T3 (pl) | 2013-03-15 | 2019-01-31 | Janssen Biotech, Inc | Sposoby wytwarzania kontrolujące zawartość C-końcowej lizyny, galaktozy i kwasu sjalowego w rekombinowanych białkach |
EP3052640A2 (en) | 2013-10-04 | 2016-08-10 | AbbVie Inc. | Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins |
US9085618B2 (en) | 2013-10-18 | 2015-07-21 | Abbvie, Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing and using the same |
US8946395B1 (en) | 2013-10-18 | 2015-02-03 | Abbvie Inc. | Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography |
US9181337B2 (en) | 2013-10-18 | 2015-11-10 | Abbvie, Inc. | Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same |
WO2015073884A2 (en) | 2013-11-15 | 2015-05-21 | Abbvie, Inc. | Glycoengineered binding protein compositions |
EP3145951A1 (en) | 2014-06-24 | 2017-03-29 | InSight Biopharmaceuticals Ltd. | Methods of purifying antibodies |
WO2016004197A1 (en) | 2014-07-03 | 2016-01-07 | Abbvie Inc. | Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using cobalt |
US20160185848A1 (en) | 2014-07-09 | 2016-06-30 | Abbvie Inc. | Methods for modulating the glycosylation profile of recombinant proteins using sugars |
CA2969609C (en) | 2014-12-05 | 2023-02-28 | Nestec S.A. | Indirect homogeneous mobility shift assays for the detection of biologics in patient samples |
EP3078675A1 (en) | 2015-04-10 | 2016-10-12 | Ares Trading S.A. | Induction dosing regimen for the treatment of tnf alpha mediated disorders |
US10465003B2 (en) | 2016-02-05 | 2019-11-05 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-TNF antibodies, compositions, methods and use for the treatment or prevention of type 1 diabetes |
JOP20190162A1 (ar) | 2016-12-30 | 2019-06-27 | Biocad Joint Stock Co | تركيبة صيدلانية مائية من جسم مضاد لـ tnf? أحادي النسيلة معاود الارتباط الجيني |
EP3573658A4 (en) | 2017-01-30 | 2021-07-21 | Janssen Biotech, Inc. | ANTI-TNF ANTIBODIES, COMPOSITIONS, AND METHODS FOR TREATMENT OF ACTIVE PSORIATIC ARTHRITIS |
MX2019009377A (es) | 2017-02-07 | 2019-12-11 | Janssen Biotech Inc | Anticuerpos anti-tnf, composiciones y metodos para el tratamiento de la espondilitis anquilosante activa. |
KR20190117579A (ko) | 2017-02-16 | 2019-10-16 | 엑스바이오테크, 인크. | 화농성 한선염의 치료 |
KR20210116540A (ko) | 2019-01-15 | 2021-09-27 | 얀센 바이오테크 인코포레이티드 | 소아 특발성 관절염의 치료를 위한 항-tnf 항체 조성물 및 방법 |
US20220064278A1 (en) | 2019-01-23 | 2022-03-03 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-TNF Antibody Compositions for Use in Methods for the Treatment of Psoriatic Arthritis |
WO2020183270A1 (en) | 2019-03-14 | 2020-09-17 | Janssen Biotech, Inc. | Methods for producing anti-tnf antibody compositions |
KR20210141998A (ko) | 2019-03-14 | 2021-11-23 | 얀센 바이오테크 인코포레이티드 | 항-tnf 항체 조성물의 제조 방법 |
US20220153830A1 (en) | 2019-03-14 | 2022-05-19 | Janssen Biotech, Inc. | Manufacturing Methods for Producing Anti-TNF Antibody Compositions |
EP3972690A4 (en) | 2019-05-23 | 2023-07-05 | Janssen Biotech, Inc. | METHOD OF TREATMENT OF INFLAMMATORY BOWEL DISEASE USING COMBINATION THERAPY OF ANTIBODIES TO IL-23 AND TNF-ALPHA |
MX2021014882A (es) | 2019-06-03 | 2022-03-25 | Janssen Biotech Inc | Anticuerpos anti-tnf, composiciones y métodos para el tratamiento de la espondilitis anquilosante activa. |
BR112021024425A2 (pt) | 2019-06-03 | 2022-01-18 | Janssen Biotech Inc | Composições de anticorpo anti-tnf e métodos para o tratamento de artrite psoriática |
JP2022540764A (ja) | 2019-06-25 | 2022-09-20 | プロサイセデクス インコーポレイティド | 抗TNFα生物製剤および抗薬剤抗体の検出 |
WO2021028752A1 (en) | 2019-08-15 | 2021-02-18 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-tfn antibodies for treating type i diabetes |
EP4252243A2 (en) | 2020-11-30 | 2023-10-04 | Enigma Biointelligence, Inc. | Non-invasive assessment of alzheimer's disease |
US20240270859A1 (en) | 2020-12-09 | 2024-08-15 | Hk Inno.N Corporation | ANTI-OX40L ANTIBODY, ANTI-OX40L/ANTI-TNFa BISPECIFIC ANTIBODY, AND USES THEREOF |
KR20240034218A (ko) | 2021-07-09 | 2024-03-13 | 얀센 바이오테크 인코포레이티드 | 항-tnf 항체 조성물을 생산하기 위한 제조 방법 |
US20230042465A1 (en) | 2021-07-09 | 2023-02-09 | Janssen Biotech, Inc. | Manufacturing Methods for Producing Anti-TNF Antibody Compositions |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0780914B2 (ja) * | 1984-04-02 | 1995-08-30 | 旭化成工業株式会社 | ヒト腫瘍壊死因子に対する抗体 |
JPS60209528A (ja) * | 1984-04-03 | 1985-10-22 | Asahi Chem Ind Co Ltd | ヒト腫瘍壊死因子の精製方法 |
JPS6163698A (ja) * | 1984-09-05 | 1986-04-01 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 生理活性物質に対するモノクロ−ナル抗体とそれを用いる生理活性物質の精製方法 |
IL73883A (en) * | 1984-12-20 | 1990-12-23 | Yeda Res & Dev | Monoclonal antibodies against tnf-alpha,hybridomas producing them and method for the purification of tnf-alpha |
US4870163A (en) * | 1985-08-29 | 1989-09-26 | New York Blood Center, Inc. | Preparation of pure human tumor necrosis factor and hybridomas producing monoclonal antibodies to human tumor necrosis factor |
-
1986
- 1986-09-13 DE DE19863631229 patent/DE3631229A1/de not_active Withdrawn
-
1987
- 1987-09-08 US US07/094,289 patent/US5231024A/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-09-11 EP EP87113278A patent/EP0260610B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-09-11 FI FI873948A patent/FI91421C/fi not_active IP Right Cessation
- 1987-09-11 JP JP62226755A patent/JP2837160B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1987-09-11 ES ES87113278T patent/ES2058083T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1987-09-11 CA CA000546724A patent/CA1337717C/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-09-11 DK DK473887A patent/DK473887A/da not_active Application Discontinuation
- 1987-09-11 ZA ZA876807A patent/ZA876807B/xx unknown
- 1987-09-11 DE DE87113278T patent/DE3787241D1/de not_active Expired - Fee Related
-
1994
- 1994-02-28 BG BG098602A patent/BG62229B2/bg unknown
-
1996
- 1996-12-27 JP JP8349507A patent/JP2758394B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-05-12 BR BR1100843-1A patent/BR1100843A/pt active IP Right Grant
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS63157977A (ja) | 1988-06-30 |
DE3631229A1 (de) | 1988-03-24 |
EP0260610A2 (de) | 1988-03-23 |
DE3787241D1 (de) | 1993-10-07 |
EP0260610B1 (de) | 1993-09-01 |
ZA876807B (en) | 1989-05-30 |
FI91421B (fi) | 1994-03-15 |
US5231024A (en) | 1993-07-27 |
JPH09294584A (ja) | 1997-11-18 |
JP2837160B2 (ja) | 1998-12-14 |
BR1100843A (pt) | 2000-04-18 |
JP2758394B2 (ja) | 1998-05-28 |
FI873948A (fi) | 1988-03-14 |
ES2058083T3 (es) | 1994-11-01 |
BG62229B2 (bg) | 1999-05-31 |
DK473887D0 (da) | 1987-09-11 |
FI873948A0 (fi) | 1987-09-11 |
DK473887A (da) | 1988-03-11 |
EP0260610A3 (en) | 1989-01-11 |
CA1337717C (en) | 1995-12-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI91421C (fi) | Menetelmä ihmisen kasvainkuoliotekijän (TNF) kanssa reagoivan monoklonaalisen vasta-aineen valmistamiseksi ja vasta-ainetta tuottava hybridisolulinja | |
FI75363C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av en monoklonal antikropp mot maenniskans hjaelpar-t-celler, medelst en ny hybridcellinje. | |
EP0014519B1 (en) | Cell lines, process for preparing them and process for producing antibodies | |
US5036003A (en) | Antibodies to VPF | |
EP0232921B1 (en) | Monoclonal antibodies against hepatitis b virus | |
EP0156578A2 (en) | A process for preparing hybridoma cells which produce tumour specific monoclonal antibodies | |
US5003048A (en) | Method for the purification of lymphokine LK 2 | |
EP0259807B1 (en) | Complement-dependent cytolytic anti-trichomonas vaginalis monoclonal antibody and use thereof in therapy and in diagnosis | |
EP0428485B1 (en) | Novel antiidiotypic monoclonal antibodies | |
US4803167A (en) | Monoclonal antidigoxtin antibodies | |
EP0211368B1 (en) | Monoclonal anti-asialo GM1 antibody | |
RU2105062C1 (ru) | Конъюгат на основе анти-jgm-антитела (варианты) и способ снижения секреции jgm антитела лимфоцитами (варианты) | |
US5576182A (en) | Anti-mucus glycoprotein monoclonal antibody | |
US4746612A (en) | Aotus interspecies hybridomas and monoclonal receptors produced thereby | |
SU1631074A1 (ru) | Штамм культивируемых гибридных клеток животных MUS мUSсULUS L. - продуцент моноклональных антител против альфа-фетопротеина человека | |
SU1631075A1 (ru) | Штамм культивируемых гибридных клеток животных MUS мUSсULUS L. - продуцент моноклональных антител против альфа-фетопротеина человека | |
SU1527260A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS, используемый дл получени моноклональных антител к @ - тимозину | |
RU2003682C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS MUSCULUS L. - продуцент моноклональных антител к @ -легким цеп м иммуноглобулинов человека | |
RU2002803C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS MUSCULUS L., используемый дл получени моноклональных антител к JGG 1, 3, 4 человека | |
EP0278160A2 (en) | Human monoclonal anti cancer antibodies, hybridoma cell lines producing them and their uses | |
EP0392976A1 (en) | Monoclonal antibodies to tetracyclic compounds, processes for their production, and applications | |
EP0439117A1 (en) | Monoclonal antibodies which bind (E)-5-(2-bromovinyl)-arabinofuranosyluracil and diagnostic methods based thereon | |
JPH0459879B2 (fi) | ||
JPH02163079A (ja) | ヒトアポリポ蛋白質b48に対する単クローン性抗体を産生するハイブリドーマ | |
JPH02167073A (ja) | 単クローン性抗ヒトアポリポ蛋白質b100抗体を産生するハイブリドーマ |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
BB | Publication of examined application | ||
FG | Patent granted |
Owner name: BASF AKTIENGESELLSCHAFT |
|
MA | Patent expired |