FI91262C - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten LL-E33288 kompleksi-disulfidianalogien valmistamiseksi - Google Patents
Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten LL-E33288 kompleksi-disulfidianalogien valmistamiseksi Download PDFInfo
- Publication number
- FI91262C FI91262C FI884983A FI884983A FI91262C FI 91262 C FI91262 C FI 91262C FI 884983 A FI884983 A FI 884983A FI 884983 A FI884983 A FI 884983A FI 91262 C FI91262 C FI 91262C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- och
- divalent
- radical
- carboxyl
- radicals
- Prior art date
Links
- 0 CC*[N+](C(*C*(*)*)[C@@](C)*)[O-] Chemical compound CC*[N+](C(*C*(*)*)[C@@](C)*)[O-] 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
- A61K47/6807—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug or compound being a sugar, nucleoside, nucleotide, nucleic acid, e.g. RNA antisense
- A61K47/6809—Antibiotics, e.g. antitumor antibiotics anthracyclins, adriamycin, doxorubicin or daunomycin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
i 91262
Menetelma terapeuttisesti kåyttttkelpoisten LL-E33288 kompleksi-disulfidianalogien valmistamiseksi
Tama keksintO koskee menetelmaa, jolla valmiste-5 taan seuraavien antibioottien substituoituja disulfidi-analogeja: LL-E33288a1-Br, -a^I, -a2-Br, -a2I, -a3-Br, -a3-I, -a4-Br, -B1-Br, -Bj-I, -82-I, -Yi-Br, -δ^Ι, BBm-1675, FR-900405, FR-900406, PD 114759, PD 115028, CL-1577A, CL-1577B, CL-1577D, CL-1577E tai CL-1724, joil-10 la on kaava Q-Sp-SS-W, jossa W on
Rj n0'"'/ / ° 15 nis^^x 0 ^ \-^0ν OH, 1 \ 0CH> oh ""^v0" ^ ORj 20 Rx on C Hi o
yyV
25 OCH, R2 on o a tai H-
Rj OCHj 2 R3 on R»0 __ cHj^^-ο^Λ 5 I tai H, 0 R4 on 10 %Ayv 0CH· Ih 15 R5 on CH3 C2H5 tai
(CH3)2CH
20 R2 on “Vr-$ 25 C^0-\^\n^h ta.
O^y^OCH, C«, R7 on 30
i'VyH
I tai H
35 O^^V^OCHj C Hj 91262 3 ja X on jodi tai bromi; Sp on suora- tai haaraketjuinen kahdenarvoinen (C1.18)-radikaali; kahdenarvoinen aryyli-tai heteroaryyliradikaali, kahdenarvoinen (C^eJ-sykloal-kyyli- tai heterosykloalkyyliradikaali, kahdenarvoinen 5 (C1.18)-aryylialkyyli- tai heteroaryylialkyyliradikaali, kahdenarvoinen (Cj.jgJ-sykloalkyylialkyyli- tai heterosyk-loalkyylialkyyliradikaali tai kahdenarvoinen (C2_18)-tyy-dyttymatOn alkyyliradikaali; Q on vety, halogeeni, amino, alkyyliamino, dialkyyliamino, piperidino, pyrrolidino, 10 piperatsino, karboksyyli, karboksialdehydi; alempi alkyy- lidikarboksyyli, -C0NHNH2, -NHC0NHNH2, -CSNHNH2, -NHCSNHNH2 tai -0NH2; silia edellytyksellå, etta kun Sp on etylidiini, Q ei vox olla vety. NSma disulfidianalogit ovat tehokkaita sybpaiaakeaineita.
15 Kuviossa I on LL-E33288y2-I:n ultraviolettispekt- ri.
Kuvio II esittaa LL-E33288y2-1 :n protonimagneetti-resonanssispektria.
Kuvio III esittaa LL-E33288Y2-1 :n infrapunaspekt- 20 ria.
Kuvio IV on LL-E33288y2-1 :n massaspektri.
Kuviossa V on LL-E33288YJ-I :n protonimagneettire-sonanssispektri.
Kuviossa VI on LL-33288Y1-I:n massaspektri.
25 Taustana mainittakoon, etta antibakteeristen ja syOpaiaakeaineiden, jotka tunnetaan yhteisesti nimelia LL-E33288 -kompleksi, sukua selostetaan ja esitetaan US-patenttihakemuksessa 009 321 ja joka on jatetty 30.1.1987, ja mainittuja aineita kaytetaan valmistet-30 taessa keksinnOn mukaisia, kaksi rikkia sisaltavia sybpa- laakeaineita. Hakemuksessa kuvataan LL-E33288 -komplek-sia, sen komponentteja, jotka ovat LL-E33288a1-Br, LL-E33288a1-I, LL-E33288a2-Br, LL-E33288a2-I, LL-E33288a3-Br, LL-E33288a3-I, LL-E33288a4-Br, 35 LL-E33288B1-Br, LL-E33288B!-!, LL-E33288B2-Br, 4 LL-E33288B2-I, LL-E33288Y^Br, LL-E33288YX-I ja LL-E3328886J-I, seka menetelmiå niiden valmistamiseksi aerobisella fermentoinnilla, kåyttaen hyvSksi uutta Mic-romonosopra echinospora ssp calichensis -kantaa tai sen 5 luonnollisia tai johdettuja mutantteja.
Taulukko 1
Ehdotetut rakenteet CH3-SSS-W:Ile (jossa W on CH3-SSS-osaan kiinnittynyt substituentti) 10 ?· πα-,,/ν0 /.u NH n CH,»siY y 15 °R* CH, o CHi°sv/»W^CO-^ *"' VtV Λγ’ ' c*«ΛΑ»," oJ^OCH,
OCH, I
20 CH* s/W' R#0 «/W* "·· "'''chJ&a "· «» OCH, -ή 0CH,^h 0
Λ/V
25
Merkitseminen Rt Rj R3 R4 Rj Rg r^ χ LL-E332B8a2l R R CjHj i
LL-E33288a3> A*t Η H R^. I
LL-E3328BP,1 Art R2· H R4· <CH312CH I
LL>E33288ti( Ari R2· H R4* C2H5 »
LL-E3328861I A^ R2· H R4· CH3 I
30 LL-E33288p1Br Ar, Rr H R4* (CH3)2CH Br LL*E33288y1 br Rr R R4. CjHs Br LL-E33288a2Br Art R2· H H C2M5 Br LL-E33288a3B r Ar, H H R4· Br
Esperamisllni A( CHj Rj, Rj. (CHj)jCH H Ar^
Esperamisiini CHj Rj. Rj. (CHjJjCH ATj H
Esperamisllni Alb CHj Rj. Rj. CHjCHj M ^ Af2 35 91262 5
Keksinn0n mukaisia, kaksi rikkia sisåltavia analo-geja valmistetaan myds tietyista muista antibiooteista, joita ovat: 1) Esperamisiini BBM-1675, potentiaalisten syopa- 5 laakeaineiden uusi luokka. I. Fysikaalis-kemialliset tie-dot ja osittainen rakenne. M. Konishi, et al., J. Antibiotics, 38, 1 605 (1985). Uusi syopalaake-antibiootti-kompleksi. M. Konishi, et al., GB-patenttihakemus 2 141 425A, 15.5.1984.
10 2) Uudet sydpSlåakeantibiootit, FR-900405 ja FR- 900406.1. Tuottavan kannan luokitus. M. Iwami, et al., J. antibiotics 38, 835 (1985). Uudet syopålåakeantibioo-tit FR-900405 ja FR-900406.il. Tuotto, eristys, tunnis-taminen ja sySpalaHkevaikutus. S. Kioto, et al., J. Anti- 15 biotics, 38, 340 (1985).
3) PD 114759 ja PD 115028, uudet syopalaakeanti-biootit, jotka ovat ilmidmaisen potentiaalisia. I. Erista-minen ja tunnistaminen. R. H. Bunge, et al., J. Antibiotics, 37, 1 566 (1984). Uusien syopalaakeaineantibioot- 20 tien, PD 114 759 ja vastaavien johdannaisten biologiset ja biokemialliset vaikutukset. D.W. Fry et al., Investigational New Drugs, 4, 3 (1986).
4) Uudet antibioottikompleksit, CL-1577A, CL-1577B, joita tuottaa Streptomyces sp. ATCC 39363. EP-patentti- 25 hakemus 0 132 082, A2.
5) CL-1577D ja CL-1577E -antibioottiset syopSlåake-aineyhdisteet, niiden tuotto ja kaytto. US-patentti 4 539 203.
6) CL-1724 -antibioottiyhdisteet, niiden tuotto ja 30 kaytto. US-patentti 4 554 162.
Kaikki tiedot, jotka koskevat antibiootteja BBM-1675, FR-900405, FR-900406, PD 114 759, PD 115028, CL-1577A, CL-1577B, CL-1577E ja CL-1724, jotka sisaltyvåt edella oleviin lainauksiin, liitetaan tahan viitteena.
35 Kuten taulukossa 1 esille tuoduista rakenteista voidaan nahda LL-E33288-kompleksin oc^-, 06 -, <*3-» Q6j-, , 6 β2-, Yj- ja δ-komponentit, kuin my0s BBM-1675-, FR-900405-, FR-900406-, PD-114759-, PD-115028-, CL-1577A-, CL-1577B-, CL-1577D-, CL-1577E- ja CL1724-an-tibiootit sisåltavat kukin rakenteissaan allyylisen tri-5 sulfidiryhman.
Nyt on havaittu, etta saatettaessa mika tahansa edelia vastaanesitetyistå antibiooteista reagoimaan subs-tituoimattoman tai substituoidun alkyyli- tai aryylimer-kaptaanin kanssa, tapahtuu korvautumisreaktio, jossa me-10 tyylipertiolaattianioni korvautuu trisulfidiosassa, jol- loin muodostuu stabiili disuflidianalogi (kaavio I), al ia.
ch3-sss-w 15
Q-Sp-SH Kaavio I
v
Q-Sp-SS-W
20 Keksinndn mukaiselle menetelmSlle on tunnusomais- ta, etta jokin edelia mainituista alkyylitrisulfidianti-biooteista saatetaan reagoimaan sopivan substituoidun merkaptaanin kanssa asetonitriilissa, lampOtilassa, joka on -10 - -30°C, 1-48 tunnin ajan.
25 Esimerkkina annettakoon reaktio, jossa LL-E33288Y1-I:n reagoidessa metyylimerkaptaanin kanssa asetonitriilissa, muodostuu LL-E33288Y2-I, uusi sydpaiaa-keyhdiste, jota tuotetaan myOs aerobisilla fermentoin-neilla, joita selostetaan edelia vastaanesitetyissa pa-30 tenttihakemuksissa.
Edelia oleva reaktio ei rajoitu LL-E33288Y-anti-bioottien jodijohdannaisiin. Jos kaytetaan esimerkiksi LL-E33288Y1-Br:a, tuotteena saadaan LL-E33288Y2-Br:a, ja itseasiassa kaikki E33288-bromi -antibioottien alkyylidi-35 sulfidibromianalogit tuotetaan samanlaisissa olosuhteis- sa.
91262 7
Kahden edellå mainitun antibiootin ehdotetut ra-kenteet, sen jålkeen kun ne ovat reagoineet metyylimer-kaptaanin kanssa, annetaan alia.
5
CHr«S>[7 />< T
TT CH. o«'fv\ 0CK’ t'T'oc"· i« m cH^o-y ocm· *} B0^i CHjCHi OCH, 15 R = CH3, X = I = LL33288Y2* R = CH3/ X = Br = LL33288Y2Br
Muuttuminen kaksl rikkiå sisåltåvåksi analogiksi ei rajoitu reaktioihin, joissa taulukossa I luetellut yh-20 disteet reagoivat metyyllmerkaptaanin kanssa, vaan muut-tumista voidaan kåyttåå monien erilaisten tioli-ryhman sisaltavien orgaanisten molekyylien tapauksissa, jolloin saadaan uusia sydpaiaake- ja antibakteerisia aineita. En-nen kaikkea reakiosta saataville tuotteille on ominaista, 25 etta niiden juuri muodostuneessa sivuketjussa tapahtuu lisamuutoksia, jolloin muodostuu yha uudempia yhdisteita, joilla on biologisia vaikutuksia.
KeksinnOn mukaiset yhdisteet ovat sen lisaksi, etta niita kaytetaan syOpaiaake- seka antibakteerisina 30 aineina, kåyttbkelpoisia arvioitaessa solutasolla sy6-paiaakevaikutuksen uusia muotoja. Luonnollisesti johde-tut antibiootit, joita on kuvattu edelia mainituissa ha-kemuksissa ja patenteissa, eivat sisaiia riittavan voi-makkaita kromofoorisia yksikkOja, jotta niiden sijainti 35 solun sisållå voitaisiin riittavasti hahmottaa. Run al-kuperåiset tritiometyylijohdannaiset saatetaan reagoi- 8 maan tioli-ryhmSn sisaitavien molekyylien kanssa, jotka lisaksi sisåltSvSt kromofoorisen yksikttn, joka absorboi tai emittoi valoa elektromagneettispektrialueilla, joihin solukromofoorit eivat aiheuta hairidta, voidaan kehit-5 taa kayttdkelpoisia biokemiallisia tyOvaiineita, joilla voidaan tutkia DNA-kaksoisjuostetta ja tailaisen yhdis-teluokan sijainti solun sisalla. Samalla tavoin radio-aktiivinen merkitseminen tamSn reaktion avulla kuuluu esillS olevan keksinniin suojapiiriin. Siten esimerkiksi, 10 kun E33288Y!-! saatetaan reagoimaan 7-(2-tioetyyliamino)- 4-metyylikumariinin kanssa, saadaan johdannainen, joka fluoresoi voimakkaasti ulraviolettivalossa, ja taman avulla yhdiste voidaan paikallistaa solussa.
Esilia olevan keksinndn tassa suoritusmuodossa 15 taulukon I mukaiset yhdisteet muutetaan tioli-ryhman si-saitavien orgaanisten molekyylien avulla kaavion I mu-kaisesti, jolloin muodostuu uusia koostumuksia, jotka ovat lisaksi kayttdkelpoisia molekyyliluotaimina, ja joissa W, Rjl, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R2, R3/ R4, Arlf 20 Ar2 ja X ovat kuten edelia taulukossa 1 maaritettiin,
Sp on suora- tai haaraketjuinen kahdenarvoinen (C^^)-radikaali, kahdenarvoinen aryyli- tai heteroaryyliradi-kaali, kahdenarvoinen (C3.18)sykloalkyyli- tai hetero-aryylialkyyli(C1.ie)radikaali, kahdenarvoinen sykloalkyy-25 li- tai heterosykloalkyylifCj.jgJradikaali ja kahdenarvoi nen (C2.18)-tyydyttamat<Jn alkyyliradikaali; Q on substi-tuoimaton fluoresoiva dibentso-oksatsiinin, rodamiinin, karbostyriilin, kumariinin, fluoreseiinin tai akridiinin ydin, tai sen substituentti, jossa on 3H, 14C, 35S tai 32P-30 radioaktiivisesti merkitty osa rakenteessaan.
Esilia olevan keksinndn mukaiset yhdisteet ovat aktiivisia antibakteerisina aineina. Niiden antibakteeri-nen vaikutus in vitro maaritettiin gram-positiivisten ja gram-negatiivisten bakteerien spektria vastaan standardi-35 agar-laimennusmenetelmaiia. Mueller-Hintonin agaria, joka sisalsi antibioottien konsentraatiota, ja kukin konsent- 91262 9 raatio oli kaksi kertaa pienempi kuin edellinen konsent-raatio, kaadettiin petrimaljoihin. Agarien pinnoille is-tutettiin 1 - 5 x 104 kokoinen bakteerirykelmS Steersin replikointilaitteen avulla. Alhaisin yhdisteen konsent-5 raatio, joka inhiboi bakteerisuvun kasvun noin 18 inhi-bitiokonsentraationa (MIC) taile suvulle. Yhteenveto tu-loksista esitetSSn taulukossa II.
10
Taulukko II
Antibakteerinen vaikutus in vitro 5 Organismi Minimi-inhibitiokonsentraatio (mikrog/ml) LL-E33288Y2-I LL-E33288T2~ I:n £-nitro-fenyyliesteri
Escherichia coli CMC 84-11 0,25 0,5 10 Escherichia coli No. 311 0,25 0,5
Escherichia coli ATCC 25922 0,12 0,5
Klebsiella pneumoniae CMC 84-5 0,25 1
Klebsiella pneumoniae AD (MP) 0-,12 0,25
Enterobacter cloacae CMC 84-4 0,5 2 15 Enterobacter aerooenes 10 83-44 0,5 1
Serratia marcescens CMC 83-27 0,25 1
Serratia marcescens F-35 (MP) 0,25 1
Moraanella moraanii IO 83-18 0,5 2
Providencia Stuartii CMC 83-82 1 2 20
Citrobacter diversus K 82-24 0,5 1
Citrobacter freundii 10 83-13 0,5 0,5
Acinetobacter sp. CMC 83-89 0,25 0,5
Acinetobacter sp. IO 83-49 0,25 1
Pseudomonas aeruginosa 12-4-4 (MP) 0,25 1 25
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 0,12 0,5
Staphylococcus aureus Smith 0,001 0,002
Staphylococcus aureus SSC 82-21 0,0005 0,004
Staphylococcus aureus ATCC 25923 0,0005 0,004
Staphylococcus aureus ATCC 29213 0,001 0,004 30
Staphylococcus aureus SSC 82-23 0,001 0,002
Staphylococcus aureus VGH 84-41 0,001 0,002
Staphylococcus aureus VGH 84-47 0,001 0.004 91262 11
Taulukko II (jatkoa)
Antibakteerinen vaikutus in vitro 5 Organismi Minimi-inhibitiokonsentraatio (mikrog/ml) LL-E33288Y 2~I LL-E33288Y2- I:n £-nitro-fenyyliesteri
Staphylococcus 10 eoidermidis CMC 83-133 0,001 0,002
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 0,001 0,004
Streptococcus faecalis ATCC 29212 0,002 0,004
Streptococcus faecalis VGH 84-65 0,004 0,004
Streptococcus faecalis CMC 83-53 0,004 0,004
Streptococcus 20 faecalis UCI 85-20 0,002 0,004
Streptococcus faecalis 10 83-28 0,004 0,004
EdellS kuvatut kaksi rikkia sisaltavat analogit 25 ovat tehokkaita syopålaSkeaineita.
Kansainvalisessa SySpainstituutissa on kehitelty tiettyja in vivo -koemenetelmia ja poytakirjoja, joiden avulla mååritetaan testattavien yhdisteiden sopivuus kasvaintenvastaisina aineina. Nama on selostettu jul-30 kaisussa "Cancer Chemotherapy Reports", osa III, Vol.
3, no. 2 (1972), et al. Naissa poytSkirjoissa on jul-kaistu standardoituja seulontakokeita, joita seurataan yleisesti testattaessa sydpalaakeaineita. NcLista mene-telmista lymfosyyttinen leukemia P388, melanoottinen 35 melanooma B16, L1210 leukemia ja paksusuoli-26-ade'no-karsinooma ovat erityisesti merkittavia esilla olevalle 12 keksinnolle. Naita kasvaimia kåytetaan hyvåksi, kun nii-tå testataan hiirissa siirrånnåisinå istutettavina tuu-moreina. Tavallisesti merkittavå syopalååkevaikutus, joka on esitetty nSissa pdytåkirjoissa kasiteltyjen elainten 5 (T) selviytymisaikojen keskiarvon prosentuaalisena kasvu- na verrattuna seurantaelaimiin (C), viittaa samanlaisiin tuloksiin, kuin mita on saatu ihmisen leukemioissa ja kiinteiden tuumoreiden tapauksessa.
Lymfosyyttinen leukemia P388 -koe 10 Kaytetyt elaimet olivat BDF^ -naarashiiria. Kussa- kin koeryhmassa oli 5 tai kuusi hiirta. Tuumorisiirran-nainen istutettiin nollantena paivana vatsakalvon sisa-puolelle annettavalla ruiskeella, jossa oli 0,5 ml lai-meaa vesivatsanestetta, joka sisalsi 1 x 10° lymfosyyt-15 tisen leukemian P388 soluja. Koeyhdisteet annettiin vatsakalvon sisapuolelle tilavuutena, joka oli 0,5 ml, steriilissS, pyrogeenittomassS suolaliuoksessa paivina 1, 5 ja 9 (verrannollisia tuumori-istutukseen) osoitet-tuina annoksina. Hiiret punnittiin ja hengissa selviy-20 tyneet hiiret merkittiin muistiin 30 paivan ajalta. Sel-viytymisajan mediaani ja selviytymisajan suhde kasitel-lyille (T)/seurantaelSimille (C) laskettiin. Tulokset il-menevat taulukosta III.
91262 13
Taulukko III
Lymfosyyttinen leukemia P388 -koe
5 Annos HengissM selviy- T/CxlOO
Yhdiste tyneiden mediaani (mg/kg) (pSivaa) %
LL-E33288V2-I
(LL-E33288Y1-I:n 0,02 19,5 177 metyylisulfidiana- 0,0125 21 191 10 logi) 0,01 19 173 0,0063 26 236 0,005 21 191 0,003 20,5 178 0,0025 18,5 168 0,0015 17 154 0,00125 15,5 141 15 Seuranta - 11,0 LL-E33288Yi-I:n 0,01 27,5 250 propyylisuifidi- 0,005 21,5 195 analogi 0,0025 16 145 0,00125 14,5 131 20 Seuranta - 11,0
Melanoottinen melanooma Bl6 -koe Kåytetyt elåimet olivat BDFl-naarashiiria. Kussa-25 kin ryhmasså oli 5 tai 6 hiirta. Yksi gramma melanoot-tista melanooma B16 -tuumoria homogenisoitiin 10 ml:ssa kylmaa tasapainoitettua suolaliuosta, ja 0,5 ml homoge-naattia istutettiin kerrallaan vatsakalvon sisapuolelle kuhunkin koehiireen. Koeyhdisteet annettiin vatsakalvon 30 sisapuolelle paivina 1-9 (suhteessa tuumori-istutuk-seen) osoitettuina annoksina. Hiiret punnittiin ja hen-kiinjaaneet hiiret merkittiin muistiin 60 paivalta. Sel-viytymisajan mediaani ja selviytymisajan suhde kSsitel-lyille (T)/seurantaelaimille (C) laskettiin. Tulokset 35 ilmenevat taulukosta IV.
14
Taulukko IV
Melanoottinen Melanoom B16 -koe
5 Annos Hengisså selviy- T/CxlOO
Yhdiste tyneiden mediaani (mg/kg) (påivåå) % LL-E33288Y2“I 0,005 34 162 (LL-E33288Yi-I:n 0,0025 38 181 1n metyylisulfidi- 0,00125 33,5 160 analogi) 0,0006 28,5 136 0,0003 26 124
Seuranta 21 15
Keksintoå selostetaan lisåå seuraavien esimerk-kien yhteydesså.
Esimerkki 1 LL-E33288Y^-I:n metyylisulfidianalogi 20 (LL-E33288Y2-I)
Tiolireagenssi valmistettiin antamalla metyylimer-kaptaanikaasun kuplia 10 ml:an asetonitriiliå niin kauan, ettå tåmå oli paåasiallisesti kyllåstetty. 108 g:n osa LL-E33288Y^-1:a lisåttiin tiolireagenssiin, syntynyttå 25 suspensiota pyorråtettiin, jolloin muodostui liuos, joka laitettiin -20 °C:n pakastimeen ydksi, ja sitten liuotin haihdutettiin. Jaånnos otettiin talteen pieneen mååråån etyyliasetaattia ja tåmå liuos tiputettiin 25 ml:an se-koitettua heksaania, jolloin saatiin harmahtavan valkoi-30 nen saostuma, joka kuivattiin, ja nåin saatiin 82 mg osittain puhdistettua LL-E33288Y2~I:a.
Edellå mainittua 82 mg:a kåsiteltiin 0,1 ml:lla metanolia ja sitten lisåttiin lml metyleenikloridia. Tåmå liuos ajettiin pienen kolonnin låpi, jossa oli 18 g 35 silikageeliå. Kåytetty eluentti oli 5 % metanoli mety-leenikloridissa. Fraktioita seurattiin ohutkerroskroma- 91262 15 tografialla silikageelilla, kåyttaen systeemia, joka kasitti 10 % isopropanolia etyyliasetaatissa, joka oli kyllastetty fosfaattipuskurilla. Fraktiot 4-11, jotka sisålsivåt LL-E33288Y2-1:å, yhdistettiin ja haihdutettiin.
5 Jaannos otettiin talteen 0,5 ml:an etyyliasetaattia, ja se tiputettiin 20 ml:an sekoitettua heksaania. Saostuma otettiin talteen ja kuivattiin, jolloin saatiin 37 mg LL-E33288Y2~I:3/ jolla oli kuviossa I esitetty ultra-violettispektri, kuviossa II esitetty protonimagneetti-10 resonanssispektri, kuviossa III esitetty infrapunaspekt-ri sekS kuviossa IV esitetty massaspektri.
Esimerkki 2 LL-E33288Y-I:n etyylidisulfidianalogi
Esimerkissa 1 kuvattu reaktio toistettiin, kayt-15 tåen tiolireagenssia, joka koostuu asetonitriilissa ole-vasta etyylimerkaptaanista, ja nain saatiin haluttu LL-E33288Tj-I:n disulfidianalogi.
Esimerkki 3 LL-E33288Y^-I:n propyylidisulfidianalogi 20 60 mg:n osa LL-E33288Y^-1:a liuotettiin 6 ml:an asetonitriiliS ja lisatiin 5 ml 1 pmol/ml liuosta, jossa oli propyylimerkaptaania asetonitriilissa. Kolmen tunnin kuluttua reaktio oli paaasiallisesti paattynyt, ja liuotin haihdutettiin. Jaannos otettiin talteen 3 ml:an etyyliase-25 taattia, suodatettiin ja suodos tiputettiin 40 ml:an sekoitettua heksaania. Saostuma otettiin talteen ja kuivattiin, jolloin saatiin 39 mg LL-E33288Y^-I:n propyylidisulf idianalogi , jolla oli kuviossa V esitetty protonimag-neettiresonanssispektri ja kuviossa VI esitetty massa-30 spektri.
Esimerkki 4 LL-E33288Y2-I:n 1-metyyli-l-propyylidisulfidianalogi
Liuosta, jossa oli 150 pg LL-E33288Y^-I: a 1 ml:ssa 35 asetonitriiliS, kasiteltiin 50 pi:11a 1 pmol/ml liuosta, jossa oli 1-metyyli-l-propyylimerkaptaania. Kahden tun- 16 nin kuluttua reaktio oli pååttynyt, ja nain saatiin halut-tu LL-E33288Y^-I:n 1-metyyli-l-propyylianalogi.
Esimerkki 5 LL-E33288Yj-I:n t-butyylidisulfidianalogi 5 150 Mg:n osaa LL-E33288Y1-I:a, joka oli 1 ml:ssa asetonitriilia, kasiteltiin 50 plrlla 1 μιηοΐ/ιηΐ liuoksel-la, jossa oli t-butyylimerkaptaania asetonitriilissa.
2 1/4 tunnin kuluttua reaktio oli paattynyt, ja nain saatiin LL-E33288Y^-I:n t-butyylidisulfidianalogi.
10 Esimerkki 6 LL-E33288Y^-I:n t-butoksikarbonyyli-t-butyylikys- teinyylidisulfidianalogi t-Butoksikarbonyyli-kysteiini-t-butyyliesteri liuotettiin asetonitriiliin konsentraationa, joka oli 10 15 mg/ml. 230 pg:n osaa LL-E33288Y^-I:a, joka oli asetonitriilissa, kasiteltiin 100 pg:lla aminohapporeagenssia. Tunnin kuluttua reaktio oli paattynyt, ja nSin saatiin haluttu LL-E33288Y^-I:n disulfidianalogi.
Esimerkki 7 20 LL-E33288Y1-I:n 3-merkaptopropionihappodisulfidi analogi
Liuokseen, jossa oli 90 mg LL-E33288Y^-I: a 90 ml:ssa asetonitriilia, lisattiin 10,6 mg 3-merkaptopro-pionihappoa, joka oli 1 mlrssa asetonitriilia. Liuosta 25 pyoritettiin ja sitten se laitettiin -20 °C:seen kuudek-si paivaksi. Liuotin poistettiin tyhjdssa ja jaannos kromatografioitiin 10 ml:11a silikageelia metyleeniklo-ridissa. Kolonnia kehitettiin 50 ml:11a metyleeniklori-dia, 50 ml:11a 4 % metanolia, joka oli metyleeniklori-30 dissa, ja lopuksi 100 ml:11a 8 % metanolia, joka oli me-tyleenikloridissa. Haihduttamalla tåma viimeinen fraktio, saatiin jaannds, joka otettiin talteen etyyliasetaattiin, auttaen pienelia maaralla asetonia, ja se lisattiin ti-poittain ylimSSraSn heksaania. Saostuma otettiin talteen 35 ja kuivattiin, jolloin saatiin 39 mg haluttua tuotetta (FABMS, M+H 1394).
91262 17
Esimerkki 8
Reaktio, jossa LL-E33288V^-i reagio 3-merkapto- propionihapon p-nitrofenyyliesterin kanssa (A) 3-merkaptopropionihapon p-nitrofenyyliesterin 5 valmistus
Kaupallista 3-merkaptopropionihappoa, joka oli me-tyleenikloridissa, joka sisalsi katalyyttisen mSårån va-kevaa rikkihappoa, kSsiteltiin isobutyleenillS 20 minuut-tia. Liuos uutettiin sitten 1 N natriumbikarbonaattiliuok-10 sella, minka jalkeen metyleenikloridiliuos kuivattiin, kayttaen vedetontS magnesiumsulfaattia. Liuos haihdutet-tiin sitten varittSmSksi liikkuvaksi nesteeksi, jonka NMR- ja massaspektritiedot osoittivat, etta kysymyksessS oli 3-t-butyylimerkaptopropionihappo, t-butyyliesteri.
15 Tasamaaraa tMta esteria kuumennettiin palautus- jaahdytyslampotilassa 6 N suolahapon kanssa, joka oli dioksaanissa, 2,5 tuntia. Liuotin haihdutettiin, lisat-tiin etyyliasetaattia, ja t3ma liuos uutettiin natrium-karbonaatilla. Natriumkarbonaattiuutetta kasiteltiin 6 N 20 suolahapolla, kunnes suspension pH oli 2,0. Suspensio uutettiin sitten etyyliasetaatilla, uute kuivattin ve-dettdmalla magnesiumsulfaatilla, ja liuotin haihdutettiin varittSmSksi nesteeksi, jonka XH NMR- ja massaspekt-ri osoittivat, etta kysymyksessa oli 3-t-butyylimerkapto-25 propionihappo.
TSmM yhdiste muutettiin £-nitrofenoliesteriksi, kasittelemSllS yhdistetta ekvimolaarisella maarSlla £-nitrofenolia ja disykloheksyylikarbodi-imidia tetrahyd-rofuraanissa 4 tunnin ajan. Disykloheksyyliurea-sivutuo-30 te poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin 61-jyksi, joka puhdistettiin sitten ajamalla se neutraalin silikageelin yli ja kayttåen liuotinsysteemina heksaa-ni:metyleenikloridia (50:50). Puhdas £-nitrofenyylies-terijohdannainen oli haalean keltaista, liikkuvaa oljya.
35 Vapaalle merkaptaanille suoritettiin naamioinnin poisto seuraavalla menetelmallS. 3-t-butyylimerkaptopro- 18 pionihappo-£-nitrofenyyliesteri liuotettiin trifluorietik-kahappoon, ja pieni ylimaara (10 %) elohopea-asetaattia lisattiin. Seosta sekoitettiin 30 minuuttia, sitten tri-fluorietikkahappo haihdutettiin pois ja jåMnnos otettiin 5 talteen dimetyyliformamidiin. Liuosta kasiteltiin vetysul-fidikaasulla 15 minuutin ajan, sitten musta elohopeasul-faatti suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin redusoi-dussa paineessa, jolloin poistettiin aina 99 % dimetyyli-formamidista. Syntynyt heikosti ruskehtava liikkuva nes-10 te puhdistettiin neutraalilla silikageelilla, kayttaen heksaania:metyleenikloridia (50:50). Paakomponentti sisalsi NMR:n mukaan pienen mSarMn t-butyylimerkaptojoh-dannaista. Analyyttinen HPLC, joka suoritettiin kahdella Perkin-Elmer Pecosphere C^g-perakkSisella kolonnilla 15 /4,6 x 33 mm ja 4,6 x 83 mm7, kayttaen gradienttisystee- miS, joissa oli 37,5/62,5 x 47,5/52,5 asetonitriilia ja 0,1 M ammoniumasetaattipuskuria pH:ssa 6,5 (etikkahappo) 12 minuutin ajan, osoitti, etta tuote oli 88 % 3-merkap-topropionihapon £-nitrofenyyliesteria ja 10 % vahemman po-20 laarista 3-t-butyylimerkaptopropionihappo-£-nitrofenyyli-esteria. Mukana oli myds pieni maara vapaata £-nitrofe-nolia.
(B) Reaktio, jossa 3-merkaptopropionihapon p-nit-rofenyyliesteri reagoi LL-E33288V^-I:n kanssa 25 100 mg:n osa LL-E33288>^-I:a liuotettiin 50 ml:an asetonitriilia. TahMn lisattiin liuos, jossa oli 25,7 mg 3-merkaptopropionihapon £-nitrofenyyliesteria 1 ml:ssa asetonitriilia. Reaktio jatettiin -20 °C:seen 48 tunnik-si. HPLC osoitti, etta reaktio oli paattynyt. Liuos haih-30 dutettiin kuiviin ja jaannds otettiin talteen 4 - 5 ml:an etyyliasetaattia, kayttaen sonikointia liuoksen tehos-tamiseksi. Seos suodatettiin ja suodos tiputettiin 45 ml:an sekoitettua heksaania. Syntynyt haalean keltainen kiintea aine otettiin talteen ja kuivattiin redusoidussa 35 paineessa, jolloin saatiin 93 mg LL-E33288'V_-I:n propio-
^ I
nihappojohdannaisen £-nitrofenyyliesteri, kuten H NMR:sta 91262 19 ilmeni. FABMS:n mukaan /M+H7-ioni ilmeni arvolla M/Z = 1 515.
Esimerkki 9 LL-E33288Y^-I: n 7- (2-merkaptometyyliami.no) -4-me-5 tyylikumariinidisulfidianalogi 10 mg:an 70 %:sti puhdasta LL-E33288Y^-I:a, joka oli 9 ml:ssa asetonitriiliS, lisSttiin 1,2 mg 7-(2-tio-etyyliamino)-4-kumariinia, joka oli 1 ml:ssa asetonitrii-liå. Kun oli sekoitettu 36 tuntia 0 °C:ssa, liuotin pois-10 tettiin ja tuote kromatografioitiin silikageelilla, kSyt-taen 5 % metanolia, joka oli kloroformissa, ja nain saa-tiin 5 mg haluttua tuotetta. Retentioaika C-18 -kSSnteis-faasi-HPLC-kolonnilla: 5,4 min. 56 % asetonitriilillS, 10,1 M ammoniumkloridin vesiliuoksella. (LL-E332886^-I:n 15 retentioaika samassa systeemissa on 5,5 min.).
Esimerkki 10 LL-E33288Y^:n 3-merkaptopropionyylihydratsiini-disulfidianalogi 5,4 ml:an (3 ekv) vedetdnta hydratsiinia, joka oli 20 100 ml:ssa palautusjaahdytyslampotilassa ja argonatmos- faarissa olevaa tetrahydrofuraania, lisSttiin tipoittain 9,2 ml (83 mmol) metyyli-3-merkaptopropionaattia, joka oli 50 ml:ssa tetrahydrofuraania, ja lisays suoritettiin 2 tunnin aikana. Liuosta kuumennettiin palautusjSShdytys-25 lampotilassa viela 2 tuntia, se haihdutettiin ja laimen- nettiin sitten ja haihdutettiin kahdesti 300 ml:sta tolu-eenia. Tuote laitettiin silikageeli-tSytteeseen, jossa oli 5 % etyyliasetaatti/kloroformia, ja eluoitiin 20 % metanoli/kloroformilla. Syntynyt 3-merkaptopropionyyli-30 hydratsiini oli haalean vaaleanpunaista dljyS, joka kiin-teytyi jaahtyessaan, mutta suli huoneenlampdtilassa.
50 mg:an LL-E33288:a, joka oli 50 ml:ssa aseto-nitriilia, lisattiin -15 °C:ssa 6,6 mg 3-merkaptopropio-nyylihydratsiinia, joka oli 1 mlrssa tetrahydrofuraania.
35 Yksi ekvivalentti trietyyliamiinia ja/tai 1 ekvivalentti etikkahappoa lisattiin katalyytiksi. Reaktion annettiin 20 sekoittua 0 °C:ssa tunti, ja liuotin haihdutettiin. Jaan-nos kromatografioitiin silikageelilla ja 10 - 15 % kloro-formissa olevalla metanoligradientilla, ja nain saatiin 26 mg haluttua tuotetta. Retentioaika kaanteisfaasi-C^g-5 HPLC: 5,0 min. 41 % asetonitriilissa/O,1 M ammoniumklori-din vesiliuoksessa.
Esimerkki 11 LL-E33288V^1:n N-/774-metyylikumarin-7-yyli)ami-no7asetyyli7kysteiinihydratsiinidisulfidianalogi 10 Seosta, jossa oli 1,0 g (5,7 mmol) 4-metyyli-7- aminokumariinia, 3,0 ml etyylibromiasetaattia (5 ekv), 90 mg (0,1 ekv) natriumjodidia ja 30 ml dimetyyliform-amidia, kuumennettiin argonatmosfaSrissci 80 °C:ssa 5 tun-tia. Seos jååhdytettiin, laimennettiin etyylieetterilla, 15 pestiin kolme kertaa 50 % suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Kasittele-matSn tuote liuotettiin kloroformiin, joka sisalsi 1 % etyyliasetaattia, ja se suodatettiin silikageelitaytteen lapi. UudelleenkiteyttamallS dietyylieetterista, joka 20 sisalsi hyvin pienen maaran kloroformia, saatiin puhdas-ta etyyli-N-/T4-metyylikumarin-7-yyli)amino7asetaattia.
1,96 g:an (7,5 mmol) edella olevaa esteria, joka oli 15 mlrssa metanolia ja 15 ml:ssa tetrahydrofuraania, lisattiin 10 ml 1 N natriumhydroksidin vesiliuosta. 30 25 minuutin kuluttua lisattiin 4 ml 10 % suolahapon vesiliuosta. Orgaaniset liuottimet haihdutettiin ja syntynyt kiteinen tuote suodatettiin ja pestiin kylmallS etanolil-la ja sitten eetterillS. Tama aine liuotettiin 20 ml:an tetrahydrofuraania ja 4 ml:an dimetyyliformamidia. Disyk-30 loheksyylikarbonyylidi-imidatsolia (1,3 g, 2,2 ekv) lisattiin ja reaktion annettiin sekoittua 15 minuuttia. Sitten lisattiin kysteiinietyyliesterihydrokloridia (1,6 g, 2,5 ekv) ja trietyyliamiinia (1,2 ml). Kolmen tunnin kuluttua tasta reaktio laimennettiin etyylieetterilla, jo-35 ka sisalsi 5 % metyleenikloridia, pestiin kerran 10 % suolahapon vesiliuoksella ja kahdesti suolaliuoksella. Kun 91262 21 oli kuivattu magnesiumsulfaatilla ja liuottimet oli haih-dutettu, kasittelemåtdn tuote kiteytettiin liuottamalla se kloroformiin, joka sisalsi erittain pienen maSran eta-nolia ja johon lisSttiin sitten ylimaSra eetteriM. Kiteet 5 suodatettiin ja kuivattiin, jolloin saatiin puhdasta N- /774-metyylikumarin-7-yyli)amino7asetyyli7kysteiinietyyli-esteria.
Seosta, jossa oli 5 ml kloroformia, 20 ml metano-lia ja 0,4 ml hydratsiinihydraattia, kuumennettiin palau-10 tusjåahdytyslSmpdtilaan argonin lasnaollessa. TShan lisSttiin 550 mg N-//74-metyylikumarin-7-yyli)amino7asetyy-lijkysteiinietyyliesteria. Kun seosta oli kuumennettu 9 tuntia, se jaahdytettiin ja kiintea tuote suodatettiin ja pestiin kloroformilla ja sitten etyylieetterilla. Ka-15 sittelematon tuote (joka sisSlsi tiolia ja disulfidia) liuotettiin dimetyyliformamidiin, joka sisalsi ditiotrei-tolia ja trietyyliamiinia. 30 minuutin kuluttua tuote saostettiin ylimSarallS etyylieetteria ja otettiin tal-teen suodattamalla. Tama aine puhdistettiin uudelleenki-20 teyttSmallS se asetonitriilistS, joka sisalsi ditiotreito-lia ja erittain pienen maarSn trietyyliamiinia ja josta oli poistettu kaasu, ja nain saatiin puhdasta N-//74-me-tyylikumarin-7-yyli)amino7asetyyli7kysteiinihydratsidia.
12 mg:an 70 %:sti puhdasta LL-E33288V^1:a, joka 25 oli 12 ml:ssa asetonitriilia, lisSttii 0 °C:ssa 4 mg N- //74-metyylikumarin-7-yyli)amino7asetyyli7kysteiinihydrat-sidia, joka oli 1,2 ml:ssa dimetyyliformamidia. Kun oli sekoitettu yon yli, lisattiin vielS 2 mg N-//74-metyyli-kumarin-7-yyli)amino7kysteiinihydratsidia, joka oli 0,6 30 ml:ssa dimetyyliformamidia. Reaktiota sekoitettiin kolme paivSS 0 °C:ssa ja suodatettiin. Asetonitriili haihdutet-tiin ja syntynyt dimetyyliformamidiliuos laimennettiin heksaani/eetterillS 1:1, jota oli ylimaSrin. Tuote eris-tettiin suodattamalla ja se puhdistettiin edelleen kro-35 matografialla silikageelilla 15 - 20 % gradientilla,. jossa oli metanolia kloroformissa, ja nain saatiin 3 mg 22 haluttua tuotetta. Retentioaika kåånteisfaasi-C^g-HPLCtlla: 3,5 minuuttia, kayttaen 45 % asetonitriili/ 0,1 M ammoniumkloridin vesiliuosta.
Esimerkki 12 5 LL-E33288C&21 :n 3-merkaptopropionyylihydratsidi- sulfidianalogi 10 mg:an LL-E33288ftgI:a, joka oli 1 ml:ssa asetonitriilia, lisattiin -15 °C:ssa 6,6 mg 3-merkaptopropio-nyylihydratsidia, joka oli 1 ml:ssa asetonitriilia. Ka-10 talyytiksi lisattiin yksi ekvivalentti trietyyliamiinia ja/tai 1 ekvivalentti etikkahappoa. Reaktion annettiin sekoittua 0 °C:ssa yksi tunti ja liuotin haihdutettiin sitten pois. Jaannos kromatografioitiin silikageelilla 10 - 15 % metanoli-kloroformigradientilla, ja nain saatiin 15 haluttu tuote. Retentioaika kaanteisfaasi-C^g-HPLC:11a: 3,5 min. systeemilla 45 % asetonitriilia, 10,1 M ammoniumkloridin vesiliuosta.
Claims (6)
- 91262 Patenttivaatimus MenetelmS, jolla valmistetaan seuraavien anti-bioottien substituoituja disulfidianalogeja:
- 5 LL-E33288ax-Br, -axI, -a2-Br, -a2I, -a3-Br, -a3-I, -a4-Br, -Bi-Br, I, -S2-I, -Yx-Br, -Υ,-Ι, -δ,-Ι, BBm-1675, FR-900405, FR-900406, PD 114759, PD 115028, CL-1577A, CL-1577B, CL-1577D, CL-1577E tai CL-1724, joil-la on kaava Q-Sp-SS-W, jossa W on 10 I3 H0"'y^//S0 >. 'rT\^ ORj Ri on 20 CHt o 25 °CHl R2 on ^ΛΛ/' 30 Η —4 tai H, Rj OCH, R3 on Ri°_ _ 5. tai H, 0 v/V'V' R4 on 10 y/\r\r ΟΗ,-Τ^Ο·"/ Η°οοηΓ^η tai H'
- 15 R5 on CH3 C2H5 tai (CH3)2CH 20 R2 on ΎΗ 25 tai H, O^y^OCH, CHj R7 on 30 c H J o—I C H30'^S,si^\N-H j tai H 35 qsS^y'oc^3 CH, 91262 ja X on jodi tai bromi; Sp on suora- tai haaraketjuinen kahdenarvoinen (C^gJ-radikaali; kahdenarvoinen aryyli-tai heteroaryyliradikaali, kahdenarvoinen (Cj.^J-sykloal-kyyli-tai heterosykloalkyyliradikaali, kahdenarvoinen 5 (Ci.^J-aryylialkyyli- tai heteroaryylialkyyliradikaali, kahdenarvoinen (C1.18)-sykloalkyylialkyyli- tai heterosyk-loalkyylialkyyliradikaali tai kahdenarvoinen (C2_18)-tyy-dyttymatOn alkyyliradikaali; Q on vety, halogeeni, amino, alkyyliamino, dialkyyliamino, piperidino, pyrrolidino, 10 piperatsino, karboksyyli, karboksialdehydi; alempi alkyy- lidikarboksyyli, -C0NHNH2, -NHCONHNH2, -CSNHNH2, -NHCSNHNH2 tai -ONH2; silia edellytykselia, etta kun Sp on etylidiini, Q ei vox olla vety; tunnettu sii-ta, etta saatetaan jokin edelia mainituista alkyylitri-15 sulfidiantibiooteista reagoimaan sopivan substituoidun merkaptaanin kanssa asetonitriilissa, lampdtilassa, joka on -10 - -30 °C, 1 - 48 tunnin ajan. FOrfarande, varmed framstailes f61jånde substituerede disulfidianaloger av antibiotika: LL-E33288a1-Br, 5 -axI, -a2-Br, -a2I, -a3-Br, -a3-I, -a4-Br, -61-Br, -Bx-I, -β2-Ι, -Yx-Br, -Yx-I, -6X-I, BBm-1675, FR-900405, FR-900406, PD 114759, PD 115028, CL-1577A, CL-1577B, CL-1577D, CL-1577E eller CL-1724, med formeln Q-Sp-SS-W, vari W Sr 10 Rj / °
- 15 CH, OR, Ri ar 20 CH, o r.o^N^och, eller ch3, OCH, 25 r2 ar 30 eller «, Rj OCH, 91262 R3 ar R,0 5. eller H, 0 r4 ar 10 ssuys' CHa'T^^O'y H°'och i eller H' 0CHj OH
- 15 R5 ar CH3 C2H5 eller (CH3)2CH 20 R2 ar ‘"ΎγΉ 25 eller H, 0¾ R7 år 30 'Yy^ i eller H 35 o^\^OCHj CHj och X år jod eller brom; Sp år en rakkedjad eller fOrgre-nad tvåvård (C^g)-radikal; en tvåvård aryl- eller hete-roarylradikal, en tvåvård (C^gJ-cykloalkyl- eller hete-rocykloalkylradikal, en tvåvård (C^g)-arylalkyl- eller 5 heteroarylalkylradikal, en tvåvård (C^g )-cykloalkylal-kyl- eller heterocykloalkylalkylradikal eller en tvåvård (C2.18)-omattad alkylradikal; Q år våte, halogen, amino, alkylamino, dialkylamino, piperidino, pyrrolidino, pipe-razino, karboxyl, karboxaldehyd; lågre alkyldikarboxyl,
- 10 -C0NHNH2, -NHC0NHNH2, -CSNHNH2, -NHCSNHNH2 eller -0NH2; fbrutsatt att, då Sp år en etylidin, kan Q ej vara våte; kånnetecknat dårav, att något av de ovan nåmnda alkyltrisulfidantibiotika bringas att reagera med en låmpligt substituerad merkaptan i acetonitril, vid en 15 temperatur på -10 - -30 °C, under en tidsrymd på 1 - 48 timmar.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US11494087A | 1987-10-30 | 1987-10-30 | |
| US11494087 | 1987-10-30 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI884983A0 FI884983A0 (fi) | 1988-10-28 |
| FI884983A FI884983A (fi) | 1989-05-01 |
| FI91262B FI91262B (fi) | 1994-02-28 |
| FI91262C true FI91262C (fi) | 1994-06-10 |
Family
ID=22358378
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI884984A FI95204C (fi) | 1987-10-30 | 1988-10-28 | Menetelmä metyylitritioyhdisteiden kohdennettujen johdannaisten valmistamiseksi |
| FI884983A FI91262C (fi) | 1987-10-30 | 1988-10-28 | Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten LL-E33288 kompleksi-disulfidianalogien valmistamiseksi |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI884984A FI95204C (fi) | 1987-10-30 | 1988-10-28 | Menetelmä metyylitritioyhdisteiden kohdennettujen johdannaisten valmistamiseksi |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP0313874B1 (fi) |
| JP (2) | JP2820256B2 (fi) |
| KR (2) | KR0133130B1 (fi) |
| AR (1) | AR246083A1 (fi) |
| AT (2) | ATE112172T1 (fi) |
| AU (2) | AU612714B2 (fi) |
| BR (1) | BR1100939A (fi) |
| CA (1) | CA1321582C (fi) |
| DE (2) | DE3889063T2 (fi) |
| DK (2) | DK602488A (fi) |
| ES (2) | ES2061586T3 (fi) |
| FI (2) | FI95204C (fi) |
| HK (2) | HK131897A (fi) |
| IE (2) | IE65053B1 (fi) |
| IL (2) | IL87947A (fi) |
| NO (2) | NO176480C (fi) |
| NZ (2) | NZ226727A (fi) |
| PT (2) | PT88882B (fi) |
| ZA (2) | ZA888123B (fi) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5079233A (en) * | 1987-01-30 | 1992-01-07 | American Cyanamid Company | N-acyl derivatives of the LL-E33288 antitumor antibiotics, composition and methods for using the same |
| US5606040A (en) * | 1987-10-30 | 1997-02-25 | American Cyanamid Company | Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group |
| IL115770A (en) * | 1989-04-14 | 1999-03-12 | American Cyanamid Co | Substituted disulfides of formula q-sp-ss-w their preparation and use for inhibiting the growth of tumours and for treating bacterial infections |
| GB9007384D0 (en) * | 1990-04-02 | 1990-05-30 | Duncan Ruth | Coupling between polymers and other organic molecular entities utilising thiol-specific reactive groups |
| US5712374A (en) * | 1995-06-07 | 1998-01-27 | American Cyanamid Company | Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates |
| US5714586A (en) * | 1995-06-07 | 1998-02-03 | American Cyanamid Company | Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates |
| US20040009535A1 (en) | 1998-11-27 | 2004-01-15 | Celltech R&D, Inc. | Compositions and methods for increasing bone mineralization |
| PT2261335T (pt) | 1998-11-27 | 2017-09-08 | Ucb Pharma Sa | Composições e métodos para aumentar a mineralização óssea |
| NZ511705A (en) * | 2001-05-14 | 2004-03-26 | Horticulture & Food Res Inst | Methods and rapid immunoassay device for detecting progesterone and other steroids |
| MEP2808A (xx) | 2003-06-16 | 2010-02-10 | Celltech R & D Inc | Antitijela specifična za sklerositin i metode za povećanje mineralizacije kostiju |
| US8841092B2 (en) * | 2006-08-30 | 2014-09-23 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Reversible natural product glycosyltransferase-catalyzed reactions, compounds and related methods |
| KR100979928B1 (ko) * | 2008-07-16 | 2010-09-03 | 한주학 | 수직축형 부력풍차 |
| SI3066074T1 (sl) * | 2013-11-04 | 2020-03-31 | Pfizer Inc. | Intermediati in postopki za sintetizacijo derivatov kaliheamicina |
| EP3573995A1 (en) * | 2017-01-24 | 2019-12-04 | Pfizer Inc. | Calicheamicin derivatives and antibody drug conjugates thereof |
| EP3924387A2 (en) * | 2019-02-15 | 2021-12-22 | University Of Southern California | Lym-1 and lym-2 antibody compositions and improved car constructs |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2430943A1 (fr) * | 1978-07-13 | 1980-02-08 | Toyo Jozo Kk | Nouveaux derives disulfures |
| DE3175151D1 (en) * | 1980-05-21 | 1986-09-25 | Teijin Ltd | Reactive polymer and process for the preparation thereof |
| US4530835A (en) * | 1983-07-08 | 1985-07-23 | Warner-Lambert Company | CL-1577 Antibiotic compounds and their production |
| CA1314245C (en) * | 1984-05-23 | 1993-03-09 | Franz Jansen | Process for the preparation of conjugates in which a monovalent carboxylic ionophore is associated by means of a covalent bond with a macromolecule, which are useful as immunotoxin potentiators |
| DE3588213T2 (de) * | 1984-11-16 | 1999-09-30 | American Cyanamid Co | Antitumorale Antibiotika (Komplex LL-E-33288) |
| EP0330874A3 (en) * | 1988-02-29 | 1989-10-18 | American Cyanamid Company | Antibacterial and antitumor agents LL-E33288 epsilon-I and LL-E33288-epsilonBr, with processes and intermediates for producing said agents |
| EP0342341A3 (en) * | 1988-05-17 | 1991-07-24 | American Cyanamid Company | Process for producing antitumor antibiotic ll-e33288gamma2 |
-
1988
- 1988-10-03 DE DE3889063T patent/DE3889063T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-03 EP EP88116339A patent/EP0313874B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-03 ES ES88116339T patent/ES2061586T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-03 ES ES88116338T patent/ES2059464T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-03 EP EP88116338A patent/EP0313873B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-03 AT AT88116338T patent/ATE112172T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-10-03 AT AT88116339T patent/ATE104309T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-10-03 DE DE3851682T patent/DE3851682T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-06 IL IL8794788A patent/IL87947A/en active Protection Beyond IP Right Term
- 1988-10-06 IL IL8794688A patent/IL87946A/en active Protection Beyond IP Right Term
- 1988-10-26 NZ NZ226727A patent/NZ226727A/en unknown
- 1988-10-26 NZ NZ226726A patent/NZ226726A/xx unknown
- 1988-10-27 AR AR88312321A patent/AR246083A1/es active
- 1988-10-28 DK DK602488A patent/DK602488A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-10-28 IE IE326188A patent/IE65053B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-10-28 CA CA000581590A patent/CA1321582C/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-28 NO NO884833A patent/NO176480C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-10-28 FI FI884984A patent/FI95204C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-10-28 AU AU24494/88A patent/AU612714B2/en not_active Expired
- 1988-10-28 PT PT88882A patent/PT88882B/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-10-28 ZA ZA888123A patent/ZA888123B/xx unknown
- 1988-10-28 FI FI884983A patent/FI91262C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-10-28 DK DK198806025A patent/DK174739B1/da not_active IP Right Cessation
- 1988-10-28 IE IE326288A patent/IE65989B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-10-28 PT PT88881A patent/PT88881B/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-10-28 AU AU24489/88A patent/AU618763B2/en not_active Expired
- 1988-10-28 NO NO884834A patent/NO173506C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-10-28 ZA ZA888127A patent/ZA888127B/xx unknown
- 1988-10-29 JP JP63272007A patent/JP2820256B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-29 JP JP63272006A patent/JP2720933B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-30 KR KR1019880014246A patent/KR0133130B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-10-30 KR KR1019880014245A patent/KR970011385B1/ko not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-05-14 BR BR1100939-0A patent/BR1100939A/pt active IP Right Grant
- 1997-06-26 HK HK131897A patent/HK131897A/xx not_active IP Right Cessation
- 1997-06-26 HK HK131997A patent/HK131997A/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5606040A (en) | Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group | |
| FI91262C (fi) | Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten LL-E33288 kompleksi-disulfidianalogien valmistamiseksi | |
| US4960790A (en) | Derivatives of taxol, pharmaceutical compositions thereof and methods for the preparation thereof | |
| FI97889C (fi) | Uusi menetelmä bakteerien ja kasvainten vastaisten LL-E33288-antibioottien N-asyylijohdannaisten ja N-asyylidihydrojohdannaisten valmistamiseksi | |
| US5519155A (en) | Platinum complexes | |
| US4866180A (en) | Amino disulfide thiol exchange products | |
| EP0009882B1 (en) | 2'-deoxy-5-fluorouridine derivatives, a process for producing the same and antitumor agents comprising the same | |
| SU1586521A3 (ru) | Способ получени производных гликопептидов | |
| US4882447A (en) | Novel organic platinum complex and process for the preparation thereof | |
| Iyengar et al. | Preparation and antitumor activity of 7-substituted 1, 2-aziridinomitosenes | |
| CA1285567C (en) | Disulfide derivatives of pyrroloindole | |
| Zhang et al. | Antitumor Agents. 148. Synthesis and Biological Evaluation of Novel 4. beta.-Amino Derivatives of Etoposide with Better Pharmacological Profiles | |
| FI100105B (fi) | Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten kantaja-lääkeainekonjugaatt ien valmistamiseksi, jotka käsittävät antibioottiosan ja monoklonaalis en vasta-aineen | |
| KR910009329B1 (ko) | 아실아미노 미토산의 제조방법 | |
| CA1291293C (en) | Substituted 7-oxomitosanes | |
| Sengupta et al. | N2-and C-7-Substituted actinomycin D analogs: synthesis, DNA-binding affinity, and biochemical and biological properties. Structure-activity relationship | |
| US4514330A (en) | Carbon-7-substituted atinomycin D analogue | |
| US4691023A (en) | Amino disulfides | |
| SE442117B (sv) | Cytostatiska foreningar innefattande derivat av vinblastin och leurosidin, sett for deras framstellning och farmaceutiska beredningar innehallande dessa foreningar | |
| US5374739A (en) | Mitomycin analogs | |
| Sehgal et al. | Synthesis and biological properties of actinomycin D chromophoric analogs substituted at carbon 7 with aziridine and cyclopropyl functions | |
| CA2014486C (en) | Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyltrithio group | |
| US4576945A (en) | Hexaalkylmelamine-amino-oxy compounds | |
| KR0169357B1 (ko) | 신규한 2-이미다졸론유도체 및 그의 제조방법 | |
| EP0214303A1 (en) | Disulfide compounds and antineoplastic agents |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| FG | Patent granted |
Owner name: WYETH HOLDINGS CORPORATION |
|
| MA | Patent expired |