FI88855C - Foerfarande foer framstaellning av en livsmedelskomposition som innehaoller inositoltrifosfat - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av en livsmedelskomposition som innehaoller inositoltrifosfat Download PDF

Info

Publication number
FI88855C
FI88855C FI854128A FI854128A FI88855C FI 88855 C FI88855 C FI 88855C FI 854128 A FI854128 A FI 854128A FI 854128 A FI854128 A FI 854128A FI 88855 C FI88855 C FI 88855C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
composition
inositol
triphosphate
cadmium
per
Prior art date
Application number
FI854128A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI854128A0 (fi
FI854128L (fi
FI88855B (fi
Inventor
Matti Siren
Original Assignee
Perstorp Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Perstorp Ab filed Critical Perstorp Ab
Publication of FI854128A0 publication Critical patent/FI854128A0/fi
Publication of FI854128L publication Critical patent/FI854128L/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI88855B publication Critical patent/FI88855B/fi
Publication of FI88855C publication Critical patent/FI88855C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C07F9/117—Esters of phosphoric acids with cycloaliphatic alcohols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A21—BAKING; EDIBLE DOUGHS
    • A21D—TREATMENT, e.g. PRESERVATION, OF FLOUR OR DOUGH, e.g. BY ADDITION OF MATERIALS; BAKING; BAKERY PRODUCTS; PRESERVATION THEREOF
    • A21D2/00—Treatment of flour or dough by adding materials thereto before or during baking
    • A21D2/08—Treatment of flour or dough by adding materials thereto before or during baking by adding organic substances
    • A21D2/30—Organic phosphorus compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23B—PRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
    • A23B7/00—Preservation or chemical ripening of fruit or vegetables
    • A23B7/14—Preserving or ripening with chemicals not covered by groups A23B7/08 or A23B7/10
    • A23B7/153—Preserving or ripening with chemicals not covered by groups A23B7/08 or A23B7/10 in the form of liquids or solids
    • A23B7/154—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/03—Organic compounds
    • A23L29/05—Organic compounds containing phosphorus as heteroatom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
    • A23L3/34—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals
    • A23L3/3454—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
    • A23L3/3463—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • A23L3/3553—Organic compounds containing phosphorus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/02—Antidotes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P9/00—Preparation of organic compounds containing a metal or atom other than H, N, C, O, S or halogen

Description

Menetelmä inositolitrifosfaattia sisältävän elintarvike- koostumuksen valmistamiseksi 1 88855 Tämä keksintö koskee menetelmää elintarvikekoostu-5 muksen valmistamiseksi, joka elintarvike alunperin sisältää vähemmän kuin 3 mg inositolitrifosfaattia (IP3) 100 g:aa kohden koostumusta.
On olemassa kasvava tarve ehkäistä sivilisaation kaikenlainen haitallinen vaikutus, esimerkiksi vaarallis-10 ten aineiden, kuten raskasmetallien käytön ja säteilyn aiheuttamat ympäristövaarat.
On myös olemassa tarve ehkäistä tupakoinnin ja muiden huonojen tottumusten vaarat kehittämällä terveellistä ruokavaliota ja terveellisiä ravintoaineita.
15 Jo niin varhain kuin vuonna 1900 eri tutkijat tie dottivat orgaanisen fosfaattiyhdisteen, fytiinihapon, so. 1,2,3,4,5,6-heksakis(divetyfosfaatti)myoinositolin (jota joskus kutsutaan inositoliheksafosforihapoksi), löytämisestä kasveista. Eri kasvien fytiinihapposisältö vaihtelee 20 huomattavasti. Jyvissä pitoisuus on tavallisesti noin 0,5 - 2 %, määrätyin poikkeuksin. Kiillotetussa riisissä taso ‘·. on vain 0,1 %, kun taas intiaaniriisi sisältää niinkin paljon kuin 2,2 % fytiinihappoa. Pavut sisältävät noin 0,4 - - 2 %, öljykasvit noin 2 - 5 % ja siitepöly 0,3 - 2 % fy- 25 tiinihappoa. Fytiinihappopitoisuus vaihtelee kasveissa kasvukauden aikana. Pitoisuuteen vaikuttaa myös mm. ilmasto.
Kirjallisuudessa on selostuksia inositolipentafos-faatin (IP5) ja inositolitetrafosfaatin (IP4) esiintymises-'' 30 tä muutamissa kasveissa. Lisäksi tiedetään, että IP6:tta :’· alempia fosfaattijohdannaisia muodostuu jyvien idätykses- . sä. Lopputuotteita idätyksessä ovat esimerkiksi inositoli ja fosfaatti. IP6:n käyttöä on kuvattu useissa tieteellisissä julkaisuissa. Useimmat näiden artikkelien kirjoitta- 35 jista ovat havainneet useita negatiivisia vaikutuksia ih- 2 88855 misissä ja eläimissä IP6:tta tai aineita, jotka sisältävät lP6:tta, nautittaessa. Koirien ruokkiminen liian suurella IP6-määrällä aiheuttaa esimerkiksi riisitautia. Ihmisissä on havaittu sinkin puutetta ja sen seurauksena lasten hi-5 taampaa kasvua. Anemiaa on havaittu pääasiassa naisilla. Edellä mainittujen, ihmisten ja eläinten mineraalitasapai-noon kohdistuvien negatiivisten vaikutusten vuoksi on toistaiseksi pyritty vähentämään IP6:n ja sen johdannaisten nauttiminen minimiin.
10 Myös kadmium on todettu vahingolliseksi ihmisen terveydelle. Vaikka tätä metallia esiintyykin ympäristössämme yleensä vähän, se kadmiummäärä, jolle me joudumme alttiiksi, riippuu monista seikoista. Kadmiumin esiintyminen maaperässä, samoin kuin sen saatavuus siitä, vaihtelee 15 eri alueiden kesken, siirtymisen kasveihin ollessa suhteellisen suurta sellaisten kasvien tapauksessa, jotka kasvavat alueilla, joilla maaperän pH on suhteellisen alhainen. Teollisen toiminnan, pääasiassa metallien käsittelyn tuloksena kadmiumia voi päästä ilmaan, maaperään ja 20 veteen. Kasvit absorboivat maaperässä olevaa kadmiumia ja näin kadmiumia voi joutua ihmisten ja eläinten ravintoon. Tärkeimmät tavat, joilla kadmiumille joudutaan alttiiksi, ovat tupakoinnin kautta, ravinnon kautta ja jossakin määrin juomaveden kautta.
25 Kadmium absorboituu pääasiassa suolistossa ja keuh kojen kautta, vaikkakin ainoastaan pieni osa ravinnon sisältämästä kadmiumista absorboituu. Keskimääräisen, ravinnon kautta tapahtuvan kadmiumin saannin arvioidaan olevan noin 50 pg vuorokaudessa useimmissa maissa, mutta eri 30 maantieteellisten alueiden ja eri yksilöiden kesken esiintyy suurta vaihtelua. Tupakoitsijoista saadut tiedot osoittavat, että jopa 50 % sisäänhengitetystä kadmiumista voi absorboitua. Useat tutkimukset osoittavat tupakoitsijoilla esiintyvän kaksinkertaisia kadmiumpitoisuuksia ve-' 35 ressä ja elimissä verrattuna tupakoimattomiin. Kadmiumin 3 88855 erittyminen ihmisruumiista on hidasta ja puoliintumisajaksi on ilmoitettu 10 - 30 vuotta. Tämä merkitsee sitä, että kadmium akkumuloituu kehoon. Pääosa, 80 - 90 % akkumuloi-tuneesta kadmiumista sitoutuu metallotioneiiniproteiiniin 5 pääasiassa maksassa ja munuaisissa. Metallotioneiinin muodostumisen saavat aikaan metallit, pääasiassa sinkki ja kadmium. Kadmiumin sitoutuminen metallotioneiiniin on hyvin luja ja johtaa kadmiumin myrkyllisyyden häviämiseen. Loppuosa kadmiumista, so. metallotioneiiniin sitoutumaton 10 kadmium, on jakautunut kehossa muiden elimien kesken; suhteellisen korkeita pitoisuuksia esiintyy suolistossa, keuhkoissa (erityisesti tupakoitsijoilla), verenkiertoelimissä (sydämessä, valtimoiden seinämissä, pernassa) ja rauhasissa, kuten haimassa ja eturauhasessa.
15 Mitä haitallisiin vaikutuksiin tulee, tiedetään, että kadmium voi vaikuttaa haitallisesti kehon elastiini-elastaasijärjestelmään. On myös tunnettua, että kadmium voi vaikuttaa haitallisesti useisiin eri entsyymeihin kehossa, joista entsyymeistä ovat esimerkkejä Na*, K* (Mg2*)-20 ATP-aasi ja Ca2*, Mg2*-ATP-aasi, jotka ovat tärkeitä ioni-kuljetusjärjestelmissä. Lisäesimerkkejä ovat sytokromi-P450-entsyymit, jotka hydrolysoivat steroideja, rasvahappoja, aromaattisia yhdisteitä ja toksisia yhdisteitä. Muita tärkeitä entsyymejä, joita kadmium inhiboi, ovat gluta-25 tioniperoksidaasi ja peroksididismutaasi, jotka suojaavat peroksidaatiolta. Kadmium inhiboi myös sinkkiriippuvaisia entsyymejä, kuten leusiiniaminopeptidaasia.
Suurella määrällä eläinkokeita monien vuosien aikana saadut tulokset osoittavat negatiivisia vaikutuksia '30 esiintyvän jopa hyvin alhaisilla kadmiumtasoilla. Tämä merkitsisi sitä, että suuri osa väestöstä kärsii haitallisista vaikutuksista, ja ennen kaikkea tämä pätee tupakoitsijoihin. Epidemiologiset tutkimukset osoittavat yhteyden syövän, korkean verenpaineen ja kardiovaskulaaristen sai-35 rauksien (esimerkiksi arterioskleroosin, sydäninfarktin ja 4 88855 sydämestä aiheutuvan äkillisen kuoleman) esiintymisen ja kadmiumin ympäristössä esiintymisen välillä. Kadmiumille alttiiksi joutuminen tuntuu myös olevan yksi vanhemman iän sokeritaudin riskiä lisäävä tekijä.
5 On myös olemassa tutkimuksia, jotka osoittavat, että kadmiumilla voi olla haitallisia vaikutuksia munuaisiin, keuhkoihin (fibroosi, emfyseema, syöpä), verisuonien seinämiin (rasvan kerrostuminen, arterioskleroosi, suonten seinämien kontraktio, kimmoisuus, endoteelille aiheutuvat 10 vauriot), prostasykliinin tuotantoon, eturauhaseen, sydämeen (johtumisjärjestelmään, supistumisvoimaan), istukkaan, kiveksiin ja keskushermostoon. Kadmium voi myös saada aikaan vapaiden radikaalien muodostumista ja aiheuttaa siten lipidien peroksidaatiota, joka voi olla merkittävää 15 muiden sairauksien, kuten reuman synnyssä. Allergioita ja bronkiitti voidaan myös yhdistää kadmiumille alttiina-oloon. Tiedot kadmiumin haitallisesta vaikutuksesta ihmisiin ja eläimiin ovat lisääntyneet huomattavasti viime vuosikymmeninä.
20 Jo monta vuotta on tehty hyvin intensiivistä tut kimustyötä pyrkimyksenä ehkäistä edellä mainitut raskasmetallien, kuten kadmiumin haitalliset vaikutukset sekä eri tavoin, esimerkiksi metallien, kuten raudan, alumiinin ja kadmiumin ja säteilyn vaikutuksesta muodostuvien vapaiden 25 radikaalien haitalliset vaikutukset. Luonnollisesti myös tupakoinnin vaaroja on tutkittu pitkään.
Tämän keksinnön mukaisesti on mahdollista välttää edellä mainitut, ihmisissä ja eläimissä havaitut haitalliset vaikutukset tai ainakin lievittää niitä nauttimalla 30 tiettyä inositolifosfaattia, IP3:a. Keksintö koskee siis menetelmää elintarvikekoostumuksen valmistamiseksi. Menetelmälle on tunnusomaista, että koostumukseen lisätään sellainen määrä IP3:a, joka riittää antamaan lopulliseksi pitoisuudeksi vähintään 5 mg IP3:a 100 g:aa kohden koostu-35 musta. Yleensä on edullista käyttää suolamuodossa olevaa 5 88855 IP3:a. Sitä voidaan kuitenkin haluttaessa käyttää myös hap-pomuodossa.
Tämän keksinnön mukaisesti on saatu aikaan elintar-vikekoostumus, joka sisältää vähintään 5 mg IP3:a 100 g:aa 5 kohden koostumusta. Hyvin usein IP3-sisältö on vähintään 20 mg 100 g:aa kohden koostumusta. IP3-sisällön tulisi edullisesti olla välillä 5 - 500 mg, edullisemmin 20 - 500 mg ja vielä edullisemmin 50 - 500 mg, 100 - 500 mg tai 150 - 500 mg IP,:a 100 g:aa kohden elintarvikekoostumusta.
10 Koostumusta voidaan käyttää lisäaineena tai väli- tuotekonsentraattina muiden elintarviketuotteiden IP3-si-sällön kohottamiseksi. Mainitun välituotekonsentraatin IP3-sisällön tulisi silloin olla vähintään 20 mg 100 g:aa kohden konsentraattia. Tavallisesti konsentraatin IP3-sisältö 15 on kuitenkin paljon korkeampi, edullisesti 50 mg - 100 g ja vielä edullisemmin 75 mg - 80 g, 100 mg - 80 g, 150 mg - 60 g, 200 mg - 60 g, 250 mg - 50 g tai 300 mg - 50 g, vastaavasti, 100 g:aa kohden konsentraattia. Konsentraatin IP3-sisällön tulisi edullisesti olla mahdollisimman suuri. 20 Välituotekonsentraattia voidaan käyttää monissa eri muodoissa, kuten jauheena, tabletteina, kapseleina ja ra-keina. Sitä on kuitenkin mahdollista käyttää myös neste-muodossa, kuten esimerkiksi vesiliuoksena.
IP3 on edullisesti D-myoinositoli-1,2,6-trifosfaat-25 ti, D-myoinositoli-1,2,5-trifosfaatti, moyinositoli-1,2,3-trifosfaatti, L-myoinositoli-1,3,4-trifosfaatti tai D-myo-inositoli-1,4,5-trifosfaatti tai niiden seos. Näistä isomeereistä D-myoinositoli-1,2,6-trifosfaatti on edullinen.
D-myoinositoli-1,2,6-trifosfaatti muodostaa usein 30 20 - 100 paino-%, edullisesti 40 - 100 paino-% IP3-sisäl- löstä.
. Eräässä IP3:n tuottamiseen soveltuvassa menetelmässä IP6 :a sisältävä materiaali hajotetaan entsymaattisesti fy-;· taasientsyymillä. IP6 voidaan järjestää joko puhtaana ai- 35 neena tai IP6-lähteen, kuten vehnän leseiden muodossa. Fy- 6 88855 taasientsyymiä voidaan saada esimerkiksi kasveista, siemenistä ja mikro-organismeista.
Käsiteltäessä IP6:tta entsymaattisesti, tapahtuu hydrolyysi, joka johtaa erilaisten alempien inositolifos-5 faattien, so. inositolipentafosfaatin (IP5), inositolitet-rafosfaatin (IP4), inositolitrifosfaatin (IP3), inositoli-difosfaatin (IP2) ja inositolimonofosfaatin (IP^ seokseen.
Hydrolyysi toteutetaan tavallisesti 20 - 70 °C:n lämpötilassa pH:n ollessa 4-8. Hydrolyysi on edullista 10 lopettaa, kun on saavutettu vaihe, jolloin noin 30 - 60 % koko esterifosforimäärästä on vapautettu. Mainitussa vaiheessa halutun IP3-isomeerin osuus IP6-pitoisen materiaalin hydrolyysissä muodostuneista isomeereistä on korkea.
Saatu inositolifosfaattien seos voidaan tämän jäl-15 keen jakaa fraktioihin kromatografisesti IP3:a sisältävän jakeen eristämiseksi. Tämä suoritetaan edullisesti pylväässä. Mikäli IP3-jae sisältää useampaa kuin yhtä isomeeriä, nämä isomeerit erotetaan seuraavassa uudessa kromatografisessa erotusvaiheessa.
20 IP3 voidaan saada suolana tai sitä vastaavana hap pona. Suolamuoto on edullinen, koska sitä on helpompi tuottaa puhtaassa ja konsentroidussa muodossa kuin happoa.
IP3-isomeerin suolamuoto on helposti saatavissa hap-pomuodosta tavanomaisia menettelytapoja käyttäen. Niinpä 25 voidaan valmistaa sellaisia suoloja, kuten alkalimetalli- ja maa-alkalimetallisuolat esimerkkeinä litium-, natrium-, kalium-, kalsium- ja magnesiumsuolat. Sinkkisuolat, samoin kuin NH4*-suolat ja orgaanisten amiinien muodostamat suolat ovat kuitenkin myös erittäin käyttökelpoisia. Esimerkki-30 amiineja ovat trietanoliamiini, dietanoliamiini, tri-iso- propanoliamiini, N,N-dimetyyli-2-amino-2-metyyli-l-propan-oli, Ν,Ν-dimetyylietanoliamiini, tetrabutyyliamiini ja sykloheksyyliamiini. Muitakin suoloja voi olla mahdollista käyttää. Erityisen edullisia suoloja ovat fysiologisesti 35 hyväksyttävät suolat.
7 88855
Eri inositolifosfaattien pitoisuutta kuvaavassa jakautumakäyrässä on edullisesti huippu IP3:n kohdalla, joka huippu on edullisesti käyrän ainoa huippu, mikä merkitsee sitä, että IP3-pitoisuus on suurempi kuin IP2- ja/-5 tai IP4-pitoisuus. Tavallisesti IP3:n osuus on vähintään 10 % inositolifosfaattien kokonaismäärästä.
Joskus koostumus sisältää IP3:n lisäksi IP4:ää ja/-tai inositolidifosfaattia (IP2). Silloin edullisesti yli 40 paino-% koostumuksen sisältämien inositolifosfaattien ko-10 konaismäärästä koostuu IP3:sta, kun taas IP2 ja IP4 muodostavat 30 - 85 paino-% muista inositolifosfaateista. Sellaisessa koostumuksessa voi pääosan IP3:sta muodostaa D-myoinositoli-1,2,6-trifosfaatti . Sellaisessa elintarviketuotteessa voidaan kuitenkin käyttää myös muita lP3-iso-15 meerejä, erityisesti edellä mainittuja isomeerejä.
Esimerkiksi koostumuksen muodosta riippuen IP3 voi olla suola- tai happomuodossa. Happomuotoa käytetään tavallisesti nestemuodossa, edullisesti vesiliuoksena. Suo-lamuodossaan IP3:a voidaan käyttää kuivan tuotteen tai 20 vaihtoehtoisesti nesteen, edullisesti vesiliuoksen muodossa.
IP3:n ollessa suolana, mainittu suola on yleensä joku edellä mainituista.
____ Keksintö tarjoaa menetelmän elintarvikekoostumuksen 25 valmistamiseksi, joka elintarvike on alunperin suurin piirtein vapaa IP3:sta. Menetelmässä koostumukseen lisätään sellainen määrä IP3:n lähdettä, joka riittää antamaan lopulliseksi pitoisuudeksi vähintään 5 mg IP3:a 100 g:aa kohden koostumusta.
30 Ilmaisulla "alunperin suurin piirtein vapaa IP3:sta" tarkoitetaan sitä, että tavanomaisella tavalla tuotettu .·’ elintarvikekoostumus ei sisällä mitään merkittävää määrää IP3:a. IP3-sisältö on siis pienempi kuin 3 mg, normaalisti alle 2 mg ja useimmiten alle 1 mg 100 g:aa kohden koostu-·' V 35 musta.
8 88855
Menetelmä IP3:n ja sen Isomeerien tuottamiseksi sellaisenaan esitetään saman hakijan patenttihakemuksessa, joka on jätetty samana päivänä kuin tämä hakemus ja jolle on myönnetty FI-patentti 82 474.
5 Tämä keksintö tarjoaa menetelmän elintarvikekoos- tumuksen valmistamiseksi, jossa menetelmässä koostumus sisältää alunperin alle 10 mg IP3:a 100 g:aa kohden koostumusta ja jossa IP3-sisältö nostetaan vähintään 320 mg:aan 100 g:aa kohden koostumusta lisäämällä IP3:a. Sellaisessa 10 menetelmässä koostumuksen valmistamiseksi mainittu koostumus voi edullisesti olla viljapohjäinen materiaali, esimerkkeinä aamiaishiutaleet, kakut, keksit ja leipä. Koostumuksena tulevat kysymykseen myös makeiset, suklaat ja purukumit. Usein, ja varsin edullisesti, koostumus on myös 15 vihannes, hedelmä, virvoitusjuoma, keitto tai maitopohjai nen tuote, esimerkiksi jogurtti.
Eräässä toisessa tämän keksinnön toteutusmuodossa, jossa koostumus alunperin sisältää alle 20 mg lP3:a 100 g:aa kohden koostumusta, IP3-sisältö nostetaan vähintään 20 50 mg:aan 100 g:aa kohden koostumusta samalla tavalla.
Vielä eräässä keksinnön toteutusmuodossa, jossa koostumus alunperin sisältää vähemmän kuin noin 50 mg IP3:a 100 g:aa kohden koostumusta, IP3-sisältö nostetaan vähintään 100 mg:aan 100 g:aa kohden koostumusta samalla taval-25 la.
Koostumuksen IP3-sisältö voi vaihdella laajoissa rajoissa. On edullista, jos IP3-pitoisuus on 20 - 500 mg, kuten esimerkiksi 50 - 500 mg, 100 - 500 mg tai 150 - 500 mg IP3:a 100 g:aa kohden koostumusta. Leipomotuotteiden 30 tapauksessa vaihteluväli on edullisesti 20 - 500 mg, vielä edullisemmin 100 - 500 mg ja edullisimmin 150 - 500 tai 200 - 500 mg lP3:a 100 g:aa (kuivapaino) kohden leipomotuotetta. IP3:n päivittäinen saanti on vähintään 10 mg, edullisesti vähintään 50 mg.
g 88855
Myös tämän keksinnön mukaisen nestemäisen koostumuksen tuotannossa IP3-sisältöä voidaan vaihdella suuresti. Yleensä IP3-pitoisuus on 5 - 500 mg, esimerkiksi 10 - 500 mg, 20 - 500 mg tai 5 - 300 mg IP3:a 100 g:aa kohden koos-5 tumusta. Nestemäinen koostumus voi olla virvoitusjuoma tai keitto.
Tämän keksinnön mukaisesti voidaan saada aikaan elintarvikekoostumus, jonka IP3-sisältö on vähintään 20 mg 100 g:aa kohden kuivaa koostumusta.
10 Keksinnön puitteissa erityisen edullisia ovat lei pomotuotteet. Niinpä saadaan aikaan leipomotuotekoostumus, jossa IP3-pitoisuus on vähintään 20 mg 100 g:aa kohden kuivaa koostumusta ja luonnostaan koostumukseen sisältyvän IP6:n hydrolysoitumisaste on 20 - 90 %, edullisesti 40 -15 70 %. Epäorgaanisen fosforin osuus fosforin kokonaismää rästä on siten vähintään 20 %, edullisesti vähintään 40 %. Tietyissä leipomotuotekoostumuksissa IP3:n alkupitoisuus on alle 150 mg 100 g:aa kohden koostumusta ja IP6:n alkuaine-pitoisuus alle 200 mg 100 g:aa kohden koostumusta. Lopul-20 lisen koostumuksen IP3-sisältöä nostetaan silloin hajottamalla IP6.
Edellä mainituilla IP3-isomeereillä on seuraavat kaavat: D-myoinositoli-1,2,6-trifosfaatilla on kaava . . 25 f OPoj"^ 1 . ° ’ X ; ; 30 \ GPQ3 3 / jossa X on vety, ainakin yksi-, kaksi- tai moniarvoinen kationi tai niiden seos, n on ionien lukumäärä ja z on kunkin eri ionin varaus; ίο 88855 D-myoinositoli-1,2,5-trifosfaatilla on kaava 5 f2- 0P0' )
\ Of»2, J
10 jossa Xtllä, n:llä ja z:lla on edellä mainittu merkitys; myoinositoli-1,2,3-trifosfaatilla on kaava
/ , ΟΡαϊ~ I
jossa X:llä, n;llä ja z:lla on edellä mainittu merkitys; 20 L-myoinositoli-1,3,4-trifosfaatilla on kaava / 2- 0H \
0H^\ °PQ) I
1 0K^ ^ -7* Π . X
25 V OPO^^^v^OPOj2' jossa X:llä, n:llä ja z:lla on edellä mainittu merkitys; ja 30 D-myoinositoli-1,4,5-trifosfaatilla on kaava (2 „0H fH \ \ 1- I " · x 35 \ OH ^-^OPOj / 11 88855 jossa X:llä, n:llö ja z:lla on edellä mainittu merkitys.
Kussakin edellä esitetyistä kaavoista n vaihtelee kuudesta yhteen ja z yhdestä kuuteen. Edullisesti n on 3 - 6 ja z on 3, 2 tai 1.
5 Keksinnön mukaisesti valmistetulla koostumuksella on monella tavalla edullinen vaikutus elimistöön. Se on kuitenkin pääasiallisesti tarkoitettu raskasmetallien, erityisesti kadmiumin aiheuttamisen, indusoimien tai edis-tämien tilojen tai raskasmetalleihin liittyvien sairauk-10 sien ehkäisyyn tai lievittämiseen.
Koostumus on myös tarkoitettu vaikuttamaan edullisesti tupakoitsijoihin.
Esimerkkeinä tiloista, joita tämän keksinnön mukaisen koostumuksen on tarkoitus ehkäistä tai lievittää, voi-15 daan mainita seuraavat: korkea verenpaine, kardiovaskulaa-rinen sairaus, emfyseema ja lisääntynyt verihiutaleiden aggregaatio. Koostumuksella on kuitenkin edullinen vaikutus myös moniin muihin tiloihin.
Keksintöä selitetään lisää jäljempänä suoritusesi-20 merkkien yhteydessä, joista esimerkit 1 ja 2 liittyvät vertailutestiin, jossa analysoidaan eräiden kaupan olevien leipien ja aamiaishiutaleiden sisältämät inositolifosfaa-tit. Esimerkki 3 liittyy vehnäjauhoista leivotun kakun ____ valmistamiseen inositolifosfaattien kalsiumsuolaa lisäten.
25 Esimerkki 4 kuvaa aamiaishiutaleiden valmistusta inositolifosfaattien natriumsuolan lisäämisen jälkeen. Esimerkki 5 valaisee pöytäsuolan valmistamista natrium-D-myoinosito-li-1,2,6-trifosfaattia lisäten. Esimerkki 6 valaisee virvoitusjuomien valmistusta inositolitrifosfaattien natrium-. 30 suolaa lisäten. Esimerkki 7 liittyy hunajan tuottamiseen natrium-D-myoinositoli-1,2,6-trifosfaattia lisäten. Esimerkki 8 valaisee suklaan valmistamista inositolifosfaat-’ tien natriumsuolaa lisäten. Esimerkki 9 osoittaa, että kadmiuminjektion aiheuttama verihiutaleiden aggregoitumi-; 35 nen kaniinien veressä voidaan estää antamalla eläimille 12 88 855 IP3-pitoista ravintoa. Esimerkki 10 osoittaa IP3:n vaikutuksen hiirten, jotka olivat saaneet kadmiumruiskeen, eri elinten kadmiumpitoisuuteen. Esimerkki 11 osoittaa, että IP3 estää tupakoinnin aiheuttaman verihiutaleiden aggregaa-5 tion lisääntymisen. Esimerkit 12 ja 13 osoittavat, että IP3 estää vapaiden radikaalien muodostumisen tai vähentää sitä. Esimerkit 14 - 20 kuvaavat IP3:n tuotantoa ja sen erottamista eri isomeereiksi.
Esimerkki 1 10 Inositolifosfaattien analysointi eräistä kaupan olevista leivistä
Kolmesta kaupan olevasta leivästä, yhdestä vehnäleivästä ja kahdesta näkkileivästä, analysoitiin inosito-lifosfaattisisältö HPLCrn avulla. Toinen näkkileivistä oli 15 leivottu kokojyväruisjauhoista ja toinen kokojyvävehnäjauhoista .
20 g:n pala leivistä jauhettiin ja sitä uutettiin l-%:isella suolahapolla kaksi tuntia samalla ravistaen. Suspensio sentrifugoitiin ja supernatantti otettiin tal-20 teen.
Supernatantti analysoitiin tarkasti määriteltyjen inositolifosfaattien avulla ja tulokset ilmoitettiin mg roina inositolifosfaatteja 100 g:aa kohden kiintoainetta.
25
Leipä tyyppi IP2 IP3 IP4 IP5 IP6 (mg/100 g ki intoainetta)
Vehnäleipä 33 2 3 2 2 Näkkileipä/kokojyvä- 30 vehnäjauho 37 6 14 71 515 Näkkileipä/kokojyvä- ruisjauho 27 10 13 25 26
Tulokset osoittavat, että inositolitrifosfaattien . 35 määrä kaupan olevissa leivissä on alhainen.
13 88855
Esimerkki 2
Inositolifosfaattien analysointi aamiaishiutaleista
Kaupan olevista Corn Flaked® (Kellog’s) -hiutaleista analysoitiin inositolifosfaattisisältö HPLCrn avulla. Uut-5 tomenettely ja analyysi olivat samat kuin esimerkissä 1.
Löydettiin 19 mg IP2:ta ja 2 mg IP3:a 100 g:aa kohden kiintoainetta. IP4:ää, IP5:ttä ja IP6:tta ei kyetty toteamaan. Raaka-aineen sisältämä IP6 oli hajonnut lähes täydellisesti ja IP3:n määrä oli hyvin alhainen.
10 Esimerkki 3
Vehnäjauhoista inositolifosfaattien kalsiumsuolaa lisäten leivotun kakun IP3-sisältö
Leivottiin kakku vehnäjauhoista (IP6-pitoisuus 0,2 %). Taikinan koostumus oli: 60,1 % vehnäjauhoja, 35,7 % 15 vettä, 0,6 % suolaa (NaCl) ja 3,6 % hiivaa.
Aineosien sekoittamisen jälkeen taikinan annettiin nousta. 100 g:aa kohden taikinaa lisättiin 0,2 g inositolifosfaattien, joista 30 paino-% oli IP3:a, kalsiumsuolaa 10 ml:ssa vettä ennen kakun leipomista. Lisänostatusjakson 20 jälkeen kakku paistettiin uunissa. Yhteenlaskettu nosta-tusaika oli 75 minuuttia ja paistolämpötila oli 225 °C.
Kakku jauhettiin, uutettiin ja analysoitiin esimer-: kin 1 mukaisesti. IP3:n määrä oli 60 mg 100 g:aa kohden ____ kuivaa kakkua.
25 Esimerkki 4 IPj-sisältö aamiaishiutaleissa inositolifosfaattien natriumsuolan lisäyksen jälkeen 1 000 g kaupan olevia Corn Flaked® (Kellog's) -hiutaleita suihkutettiin 10 ml:11a lämmintä vesiliuosta, joka ’.· 30 sisälsi 50 % sakkaroosia ja 10 % inositolifosfaattien, joista 30 % oli IP3:a, natriumsuolaa. Kuivauksen jälkeen aamiaishiutaleet jauhettiin, uutettiin ja analysoitiin • - esimerkin 1 mukaisesti. IP3-sisältö oli 30 mg 100 g:aa koh- "* den kuivaa materiaalia.
14 o 8 8 5 b
Esimerkki 5 Pöytäsuola, johon on lisätty natriuminositolitri- fosfaattia Pöytäsuolaan sekoitettiin natrium-D-myoinositoli-5 1,2,6-trifosfaattia siten, että lopulliseksi lP3-pitoisuu- deksi saatiin 200 ppm.
Esimerkki 6
Juomia, joihin on lisätty inositolifosfaattien nat- riumsuolaa 10 5 litraan kutakin kaupan olevista juomista, Coca-
Col^®, Seven Up®· ja appelsiinituoremehu, lisättiin 20 ml inositolifosfaattien, joista 40 % oli IP3:a, natriumsuolan 15-%:ista vesiliuosta. Juomien lopulliseksi IP3-pitoisuu-deksi todettiin HPLCrllä 190 mg/ml.
15 Esimerkki 7
Hunaja, johon on lisätty natriuminositolitrifos- faattia 50 kg:aan kaupan olevaa hunajaa lisättiin 5 ml nat-rium-D-myoinositoli-1,2,6-trifosfaatin 20-%:ista vesi-20 liuosta. Lopulliseksi inositolitrifosfaattipitoisuudeksi määritettiin HPLCrllä 20 mg/kg.
Esimerkki 8
Suklaa, johon on lisätty IP3:a 1 500 g:aan suklaata lisättiin 6 ml inositolifos-25 faattien, joista 30 % oli IP3:a, natriumsuolan 10-%:ista vesiliuosta, ennen kuin lämpötilaa alennettiin ja lopullinen suklaatuote muodostettiin. Suklaan IP3-sisältö oli HPLCrn avulla määriteltynä 100 mg/kg suklaata.
Esimerkki 9 30 Käytettiin kaniineja (valkoisia, urospuolisia Uu- den-Seelannin kaneja), jotka painoivat 2-2,5 kg. Niitä ruokittiin inositolifosfaatteja sisältämättömällä ravinnolla 10 vuorokautta ennen koetta.
Kaksi tuntia ennen kokeen alkua 5 g:aan 18 eläimen 35 ryhmälle tarkoitettua ravintoa sekoitettiin 50 mg natrium- is β 8 8 5 δ myoinositolΐ-1,2,6-trifosfaattia. Toinen ryhmä, joka käsitti 12 eläintä, ei saanut inositolitrifosfaattilisäystä.
Aika: Käsittely: 5 0 min: Otettiin verinäyte 1 (9 ml + 1 ml 3,8-%lista natriumsitraattia) 1 min: Laskimonsisäisenä ruiskeena annettiin 4 pg kadmiu mia CdCl2:na 0,5 ml:ssa fysiologista suolaliuosta tai 0,5 ml fysiologista suolaliuosta kullekin 10 eläimelle erikseen 4 min: Otettiin verinäyte 2 (9 ml + 1 ml 3,8-%:ista natriumsitraattia) Näytteiden käsittely 15 Molempia kustakin eläimestä otettuja verinäytteitä sentrifugoitiin nopeudella 1 200 kierrosta/min 10 minuuttia, jolloin saatiin verihiutaleita sisältävä plasma.
Molemmista näytteistä saatu plasma verihiutaleineen analysoitiin Born'in [J. Physiol. 67 (1968)] mukaisesti 20 aggregometrillä (Chronopar Corp Mod 440) ADP:n (adenosii-nidifosfaatin) lisäykseen reagoinnin selvittämiseksi. Molemmat näytteet analysoitiin samanaikaisesti samaa ADP-pitoisuutta (1 - 20 μΜ) käyttäen laitteen kahdessa kanavassa.
25 Tämän testin periaate on se, että verihiutaleita sisältävä plasma on samea ja sen valonläpäisevyys on alhainen. ADP:tä lisättäessä vesihiutaleet aggregoituvat ja muodostavat kokkareita. Tämä johtaa läpäisevyyden lisääntymiseen, jonka suuruus määritetään laitteella. Reagointi 30 ADP:hen mitataan mittasuhdeyksikköinä, 80 mittasuhdeyksi-kön vastatessa suurinta mahdollista aggregaatiota. Jotta menetelmä olisi mahdollisimman herkkä toteamaan muutokset . verihiutaleiden reaktiivisuudessa, ADP-annoksen tulisi saada aikaan noin 5-30 mittasuhdeyksikköä vastaava rea-35 gointi. Tämä saavutetaan normaalisti 5 μΜ ADP:llä, mutta ie ^ 8 8 5 b joidenkin eläinten tapauksissa vaaditaan pienempää tai suurempaa annosta (1 - 20 μΜ).
Tämän testin tulos ilmoitetaan muodossa: maksimi-aggregoituminen näytteessä 2 (mittasuhdeyksikköinä) miinus 5 maksimiaggregoituminen näytteessä 1. Saavutettiin seuraa-vat tulokset:
Aggregaatiomuutos näytteestä 1 näytteeseen 2
Oraalinen anto Injektio Lukuni. (mittasuhdeyksikköinä) 10 ei lisäystä ravintoon Cd 12 +2,3 IP3-lisäys ravintoon Cd 18 - 0,2 15 Tässä kokeessa käytettynä annoksena IP3 esti Cd:n vaikutuksen verihiutaleiden aggregoitumiseen.
Verihiutaleiden aggregoitumisen lisääntymistä pidetään yhtenä tärkeimmistä kardiovaskulaarisia sairauksia, esimerkiksi arterioskleroosia aiheuttavista tekijöistä, ja 20 lP3:n kyky estää kadmiumin aiheuttamaa aggregoitumista osoittaa, että IP3 on erittäin käyttökelpoinen sellaisen sairauden ehkäisyssä tai lievittämisessä.
Esimerkki 10 Käytettiin hiiriä, jotka kokeen alussa painoivat 18 25 - 20 g. Kokeen aikana ja vähintään seitsemän vuorokauden ajan ennen kokeen alkua hiiriä ruokittiin inositolifos-faatteja sisältämättömällä puolisynteettisellä ravinnolla. Hiiret jaettiin kahteen ryhmään. Toinen ryhmä sai päivittäin yhdeksän vuorokauden ajan intraperitoneaalisina ruis-30 keina fysiologista suolaliuosta ja toinen ryhmä vastaavasti inositolitrifosfaattia (IP,). ΙΡ,-annos oli 5,0 mg/vuo-rokausi; injektiomäärä oli 0,2 ml.
Kokeen 2. päivänä kaikki hiiret saivat 5-10 minuutin kuluttua toisesta intraperitoneaalisesta ruiskeesta 35 laskimonsisäisenä ruiskeena 2,5 pCi 109Cd:tä kadmiumklori- 17 3 8 8 5 5 dina 50 pl:ssa fysiologista suolaliuosta. Viimeisen intra-peri toneaalisen ruiskeen jälkeen hiiret tapettiin ja useat elimet irrotettiin ja punnittiin.
Eri elinten radioaktiivisuus mitattiin gammalasku-5 rilla. IP3-käsiteltyjen eläinten elinten radioaktiivisuutta verrattiin vertailueläinten, joita oli käsitelty sama ajanjakso fysiologisella suolaliuoksella, elinten radioaktiivisuuteen. Tuloksissa IP3-käsiteltyjen eläinten elinten radioaktiivisuus ilmoitetaan prosentteina vertailueläimis-10 sä todetusta radioaktiivisuudesta. Tulokset olivat seuraa-vat:
Kadmiumilla ja IP3:lla käsiteltyjen hiirien elinten radioaktiivisuustasot prosentteina vertailutasoista (ver-tailutasot = 100). 15 hiirtä kussakin ryhmässä. Vertailu-15 ryhmää oli käsitelty fysiologisella suolaliuoksella ja kadmiumilla, kuten on mainittu.
Elin IP3
Keuhko 80
Sydän 77 20 Aortta 89
Perna 81
Sylkirauhanen 82
Maksa 100
Munuainen 102 25
Tulokset osoittavat, että IP3 alensi kadmiumtasoja kaikissa elimissä maksaa ja munuaista lukuunottamatta, joissa viimeksi mainituissa elimissä kadmiumin arvellaan olevan suhteellisen vaaratonta.
30 Esimerkki 11
Tutkittiin IP3:n vaikutusta verihiutaleiden aggre-goitumiseen tupakoinnin jälkeen ihmisissä
Neljä nuorta tervettä miespuolista tupakoimatonta henkilöä sai kahdessa tapauksessa kapselin, joka sisälsi 35 50 mg IP,:a ja kahdessa tapauksessa kapselin, joka sisälsi ie S 8 8 5 5 50 mg plaseboa. Käytetty IP3 oli kalsium-D-myoinositoli-1,2,6-trifosfaatti. Ei kohde eikä tutkija tiennyt, saiko kohde IP3:a vai plaseboa.
Kahden tunnin kuluttua kapselin nielemisestä otet-5 tiin verinäyte. Sen jälkeen kohde poltti nopeasti peräkkäin kaksi savuketta. Savukkeiden polton jälkeen otettiin toinen verinäyte. Kummastakin näytteestä määritettiin verihiutaleiden aggregaatioreagointi ADPrhen ja kollageeniin käyttäen jokseenkin samaa menetelmää kuin esimerkissä 9. 10 Tulokset ilmoitetaan aggregoitumisen muutoksena tupakointia edeltäneestä näytteestä tupakoinnin jälkeiseen näytteeseen. Plus-merkki merkitsee sitä, että aggregoituminen oli voimakkaampaa savukkeiden polton jälkeen.
15 Aggregaatiota Aggregaatiota IP3:n ja pla aiheuttava aiheuttavan IP3 sebon väliaine_aineen pitoisuus Plasebo nen pitoisuus ADP 0,5 mmol +1,5 +7,25 5,85 -"- 1 mmol - 1,5 +0,25 1,75 20 -"- 2,5 mmol -1,5 0 1,5 -"- 5 mmol - 2,5 - 0,75 1,75
Kollageeni 0,5 mg + 5,75 + 12,25 6,5 -"- 1 mg - 8,25 + 1,75 10,0 -"- 2,5 mg - 3,75 0 3,75 25 -"- 5 mg - 1,5 - 0,25 1,25
Plaseboryhmässä tupakointi aiheutti aggregaation lisääntymisen, joka oli merkittävintä alhaisilla aggregaatiota aiheuttavan aineen pitoisuuksilla. Kaikissa tapauk-30 sissa IP3 esti tätä vaikutusta. IP3 estää siis verihiutaleiden aggregaation tupakoinnista aiheutuvaa lisääntymistä .
Esimerkki 12
Reaktioseosta, joka sisälsi 48 mmol KH2P04:a, 2 mmol 35 Na-askorbaattia, 0,1 mmol H202:a, 0,5 ml Fe:a ja 1,7 mmol 19 2 8 8 55 deoksitriboosia, inkuboitiln 37 °C:ssa yhden tunnin ajan. Samanlaisia reaktioseoksia, jotka sisälsivät 1 mmol EDTA:a tai 1 mmol inositolitrifosfaattia (IP3), inkuboitiin samalla tavalla. Käytetty IP3 oli D-myoinositoli-1,2,6-trifos-5 faatti. Inkuboinnin jälkeen 2 ml:aan reaktioseosta lisättiin 1,65 ml tiobarbituurihappoa 50 mmol:ssa NaOH:a ja 1,65 ml 2,8-%:ista trikloorietikkahappoa. Seos kuumennettiin 100 °C:seen 20 minuutiksi ja absorbanssi mitattiin aallonpituudella 532 nm käyttäen nollakokeena vettä.
10 Kokeet suoritettiin Fe2,-muodossa [Fe(NH4)S04] ja
Fe3*-muodossa (FeCl3) olevalla raudalla. Tulokset olivat seuraavat:
Fe2,:n ja Fe3’:n katalysoima vapaiden radikaalien muodostuminen lP3:n ja EDTA:n läsnäollessa ilmoitettuna 15 absorbanssina aallonpituudella 532 nm.
Ryhmä Fe2< Fe3*
Vertailu 0,76 0,79 EDTA 2,2 1,86 IP3 0,46 0,43 20 Nämä tulokset osoittavat, että vapaiden radikaalien muodostuminen reaktioseoksessa väheni 40 % IP3:n lisäämisen jälkeen. EDTA:n lisäämisellä oli päinvastainen vaikutus. Se lisäsi voimakkaasti vapaiden radikaalien muodostumista.
25 IP3:n osoitettiin siis alentavan raudasta riippuvaista vapaiden radikaalien muodostumista.
Esimerkki 13
Tutkittiin lipidien peroksidaatiota lipidimisel- leissä 30 Seuraavaa reaktioseosta inkuboitiin kaksi tuntia 37 °C: ssa: 0,4 ml Clark-Lubs-puskuria; pH 5,5 0,2 ml fosfolipidiliposomeja 0,1 ml 0,5 - 5 mM IP3 tai 0,1 ml H20 35 0,1 ml 1 mM Fe2* tai 0,1 ml H20 0,1 ml 4 mM AI3* tai 0,1 ml H20 0, 1 ml H20 20 -"'8855 IP3oli D-myoinositoli-l,2,6-trifosfaatti. Inkuboin-nin jälkeen lisättiin 0,5 ml tiobarbituurihappoa sekä 0,5 ml 25-%:ista HCl:a ja seosta kuumennettiin 100 °C:ssa 15 minuuttia. Lisättiin 1 ml l-%:ista Lubrol PX:ää (Sigma) ja 5 lipidien peroksidaatio määritettiin mittaamalla absorbans-si aallonpituudella 532 nm. Tulokset olivat seuraavat:
Pitoisuus, mM
Koe Fe2* Ai3* IP3 Absorbanssi 10 _532 nm 1 0,1 0 0 0,367 2 0 0,4 0 0,128 3 0,1 0,4 0 0,896 4 0,1 0,4 0,5 0,367 15 5 0,1 0 0,5 0,303 6 0,1 0 0,4 0,260 7 0,1 0 0,2 0,297 8 0,1 0 0,1 0,283 9 0,1 0 0,05 0,271 20 10 0 0 0 0,133
Fe2* saa aikaan lipidien peroksidaatiota (koe 1 versus koe 10). AI3* itsessään ei aiheuttanut peroksidaatiota (2 versus 10), mutta sen sijaan yhdistelmä Fe2* + AI3* sai 25 aikaan paljon voimakkaamman peroksidaation kuin Fe2* yksinään (1 versus 3). IP3:n lisääminen esti täysin Fe2*:n ja Ai3*:n keskinäisen vuorovaikutuksen (3 versus 4). Vain Fe2*:aa sisältävissä systeemeissä IP3 sai aikaan radikaalien muodostumisen huomattavan vähenemisen (1 versus 5 - 9).
30 Esimerkki 14
Natriumfytaatin hydrolyysi vehnän fytaasin avulla ja inositolifosfaattien seoksen fraktiointi 1,6 g natriumfytaattia (peräisin maissista; Sigma Chemical Co.) liuotettiin 650 ml:aan natriumasetaattipus-35 kuria (pH 5,1). Liuokseen lisättiin 2,7 g vehnän fytaasia 2ΐ ·° 8 8 5 h (EC 3.1.3.26, 0,015 yksikköä/mg; Sigma Chemical Co.:lta) ja seosta inkuboitiin 38 °C:ssa.
Defosforylaatiota seurasi vapautuneen epäorgaanisen fosforin määritys. Kolmen tunnin kuluttua, jolloin 50 % 5 epäorgaanista fosforia oli vapautunut, reaktio pysäytettiin lisäämällä 30 ml ammoniakkia, jolloin pH nousi arvoon 12. Saatiin nestemäinen, inositolifosfaatteja sisältävä seos. 350 ml seosta johdettiin ioninvaihtopylvään (Dowex 1, kloridimuoto, 25 x 250 mm) läpi ja eluoitiin lineaaris-10 ta suolahappogradienttia (0 - 0,7 N HC1) käyttäen. Tasa-osat eluoituneista fraktioista hydrolysoitiin täydellisesti fosfori- ja inositolisisällön määrittämiseksi. Huiput vastaavat eri inositolifosfaatteja, ts. huipun, jossa fosforin suhde inositoliin on 3:1, muodostaa inositolitrifos-15 faatti, jne. Saatiin kaksi fraktiota, joissa fosforin suhde inositoliin oli 3:1.
Esimerkki 15
Inositolitrifosfaattien fraktiointi 100 ml ensimmäistä esimerkissä 14 saatua jaetta, 20 jossa fosforin suhde inositoliin oli 3:1, neutraloitiin ja saostettiin bariumsuolana lisäämällä 10 %:n ylimäärin 0,1 M bariumasetaattiliuosta. 600 mg saostunutta suolaa liuotettiin 50 ml:aan 0,18 M suolahappoa. Liuos jaettiin ioninvaihtopylväässä (Dowex 1, kloridimuoto, 25 x 2 500 25 mm) käyttäen eluenttina laimeaa suolahappoa. Tasaosat eluoituneista fraktioista analysoitiin fosforin suhteen. Kolme inositolitrifosfaatti-isomeereistä koostuvaa huippua voitiin havaita.
Esimerkki 16 30 Inositolitrifosfaatti-isomeerin rakenteen määritys NMR:n avulla
Kolme esimerkissä 15 saatua huippua analysoitiin H-NMR:n avulla. Tulokset osoittavat, että huiput koostuvat myoinositoli-1,2,6-trifosfaatista, myoinositoli-1,2,3-tri-35 fosfaatista ja myoinositoli-1,3,4-trifosfaatista, tässä järjestyksessä.
22 "8855
Toinen, esimerkissä 14 saatu jae, jossa fosforin suhde inositoliin oli 3:1, analysoitiin H-NMR:n avulla. Tulokset osoittavat, että jae koostuu myoinositoli-1,2,5-trifosfaatista.
5 Esimerkki 17
Inositolitrifosfaattien optisten isomeerien määritys 20 mg yhdisteitä, jotka oli esimerkin 16 mukaisesti NMR:n avulla määritetty myoinositoli-1,2,6-trifosfaatiksi 10 ja myoinositoli-1,3,4-trifosfaatiksi, käsiteltiin edelleen kromatografisesti asetyloituun selluloosaan pohjautuvassa kiraalisessa pylväässä (20 x 300 mm; Merck) käyttäen elu-enttina etanolin ja veden seosta. Jakeet analysoitiin po-larimetrillä. Kuten voidaan havaita, kumpikin yhdiste 15 koostuu yhdestä isomeeristä, D-myoinositoli-1,2,6-trifos-faatista ja L-myoinositoli-1,3,4-trifosfaatista, vastaavasti .
Esimerkki 18
Natriumfytaatin hydrolyysi leivinhiivan avulla ja 20 inositolifosfaattien seoksen fraktiointi 0,7 g natriumfytaattia (peräisin maissista; Sigma Chemical Co. ) liuotettiin 600 ml:aan natriumasetaattipus-kuria (pH 4,6). Liuokseen lisättiin 50 g leivinhiivaa (valmistaja Jästbolaget, Ruotsi; kuiva-ainepitoisuus 28 %, 25 typpipitoisuus 2 %, fosforipitoisuus 0,4 %) sekoittaen samalla ja inkubointia jatkettiin 45 °C:ssa. Defosforylaatio-ta seurasi vapautuneen epäorgaanisen fosforin määritys. Seitsemän tunnin kuluttua, jolloin 50 % epäorgaanista fosforia oli vapautunut, hydrolyysi pysäytettiin lisäämällä 30 30 ml ammoniakkia, jolloin pH nousi arvoon 12. Suspensio sentrifugoitiin ja supernatantti otettiin talteen. 400 ml supernatanttia laskettiin ioninvaihtopylvään (Dowex 1, kloridimuoto, 25 x 250 mm) läpi ja eluoitiin lineaarista suolahappogradienttia (0 - 0,7 N HC1) käyttäen. Tasaosat 35 eluoituneista fraktioista hydrolysoitiin täydellisesti 23 —8853 fosfori- ja inositolisisällön määrittämiseksi. Huiput vastaavat eri inositolifosfaatteja, ts. huippu, jossa fosforin suhde inositoliin on 3:1, koostuu inositolitrifosfaa-teista, jne.
5 Esimerkki 19
Inositolifosfaatti-isomeerien rakenteen määritys
Esimerkissä 18 saatu jae, jossa fosforin suhde inositoliin on 3:1, neutraloitiin ja haihdutettiin ennen H-NMR-analyysiä. Tulokset osoittavat, että huippu koostuu 10 myoinositoli-1,2,6-trifosfaatista.
Esimerkki 20
Moyinositolitrifosfaatin optisten isomeerien määritys Käytettiin samaa menetelmää kuin esimerkissä 17, 15 sillä erolla, että analysoitiin 10 mg yhdistettä, joka oli identifioitu NMR:n avulla esimerkin 19 mukaisesti. Kuten voidaan havaita, yhdiste koostuu yhdestä optisesta isomeeristä, D-myoinositoli-1,2,6-trifosfaatista.
Paremman käsityksen saamiseksi keksinnöstä esite-20 tään jäljempänä eräiden keksinnön mukaisten IP3-isomeerien kaavat. Kaavoja esitetään myös IP6:lle, IP5:lle, IP4:lle ja IP2:lie.
Myoinositolin alemmat fosfaattiesterit nimetään sen mukaan, missä kohdassa inositolirengasta fosforihapporyh-25 mät sijaitsevat, ja niin, että numerointi antaa tulokseksi mahdollisimman alhaiset sijaintinumerot. L ja D vastaavat myötäpäiväistä ja vastapäiväistä laskentaa, tässä järjestyksessä, ja niitä käytetään sen mukaan, kumpi johtaa pienempään sijaintinumeroiden summaan. Hiiliatomilla, johon 30 on liittynyt aksiaalinen fosforihapporyhmä, on sijaintinu-mero 2. Alla olevat rakennekaavat on yksinkertaistettu happomuotoon.
' H OH ^ (υϊ\
: \$ys) \DjJ
myoinositoli; C^Hg (OH) g 24 $8855 (pj _ C^y 1 /2/3,4,5,6-heksakis((livetyin P ^ ~~~T' f osf aatti) myoinositoli , vaih- (?) toehtoisesti myoinositolihek- sakis(fosfaatti) eli IP, 6 OH 0H (p) qh s' -J D-myoinositoli-1 , 2,6-trifos- f aatti, vaihtoehtoisesti VJ 'ϋ D-1,2,6-IP3 (pj D-myoinositoli-1 ,2,5-tr if os- V λ / f aatti, vaihtoehtoisesti 0H D-1 , 2,5-IP,
( P ) J
oh , fp\ (p) myoinositoli-1,2,3-trifosfaat- ^^ J ti, vaihtoehtoisesti 1,2,3-lP^ p = o-po}h2
,u (Ύ) OH
\J I L-myoinositol.i-1 , 3,4-trifos- OH \ —-4 f aatti, vaihtoehtoisesti © L-l , 3,4-IP3 e» (7) Θ qh L-myoinositoli-1 ,2-difosf aat-
Off , ^cii ti, vaihtoehtoisesti L-I^-IP^ M OH N-^ D-myoinositoli-1,2,5,6-tetra- y A fosfaatti eli D-1,2,5,6-IP^ /^\ M*j L-myoinositoli-1,2,3,4,5-pen-(^) tafosfaatti eli L-1 ,2,3,4,5-IP^ μ - »Q-POjHj

Claims (11)

25 ^8 855
1. Menetelmä elintarvikekoostumuksen valmistamiseksi, joka elintarvike alunperin sisältää vähemmän kuin 3 mg 5 inositolitrifosfaattia (IP3) 100 g:aa kohden koostumusta, tunnettu siitä, että koostumukseen lisätään sellainen määrä IP3, joka riittää antamaan lopulliseksi pitoisuudeksi vähintään 5 mg IP3 100 g:aa kohden koostumusta.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 10 tunnettu siitä, että lisätään vähintään yhtä seu-raavista lP3-isomeereistä: D-myoinositoli-1,2,6-trifosfaat-ti, D-myoinositoli-1,2,5-trifosfaatti, myoinositoli-1,2,3-trifosfaatti, L-myoinositoli-1,3,4-trifosfaatti ja D-myoinositoli-1, 4,5-trifosfaatti.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että koostumus on kiinteä ja siihen lisätään sellainen määrä IP3, joka riittää antamaan lopulliseksi pitoisuudeksi vähintään 20 mg 100:aa kohden kuivaa koostumusta.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että koostumus on viljapohjäinen materiaali.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että koostumus on jokin seuraavis- 25 ta: aamiaishiutaleet, kakut ja keksit.
6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että koostumus on jokin seuraavis-ta: makeiset, suklaat ja purukumit.
7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 30 tunnettu siitä, että koostumus on vihannes tai hedelmä.
8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että koostumus on juoma tai keitto. 26 8 8 855
9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lisätään sellainen määrä IP3, joka riittää antamaan lopulliseksi pitoisuudeksi 20 - 500 mg 100 g:aa kohden kuivaa koostumusta.
10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että koostumus on nestemäisessä muodossa ja siihen lisätään sellainen määrä IP3, joka riittää antamaan lopulliseksi pitoisuudeksi 5 - 200 mg 100 g:aa kohden nestemäistä koostumusta.
11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että IP3-pitoisuus nostetaan vähintään 30 mg:aan, edullisesti 50 - 500 mg:aan, 100 g:aa kohden koostumusta. 27 8 8 8 55
FI854128A 1984-10-23 1985-10-22 Foerfarande foer framstaellning av en livsmedelskomposition som innehaoller inositoltrifosfat FI88855C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE8405295A SE465951B (sv) 1984-10-23 1984-10-23 Isomer av inositoltrifosfat foeretraedesvis i saltform foer anvaendning som terapeutiskt eller profylaktiskt medel samt kompositioner daerav
SE8405295 1984-10-23

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI854128A0 FI854128A0 (fi) 1985-10-22
FI854128L FI854128L (fi) 1986-04-24
FI88855B FI88855B (fi) 1993-04-15
FI88855C true FI88855C (fi) 1993-07-26

Family

ID=20357457

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI854128A FI88855C (fi) 1984-10-23 1985-10-22 Foerfarande foer framstaellning av en livsmedelskomposition som innehaoller inositoltrifosfat
FI854126A FI85490C (fi) 1984-10-23 1985-10-22 Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara inositoltrifosfat.
FI854127A FI82474C (fi) 1984-10-23 1985-10-22 Inositoltrifosfat och foerfarande foer dess produktion.

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI854126A FI85490C (fi) 1984-10-23 1985-10-22 Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara inositoltrifosfat.
FI854127A FI82474C (fi) 1984-10-23 1985-10-22 Inositoltrifosfat och foerfarande foer dess produktion.

Country Status (19)

Country Link
US (7) US4735936A (fi)
EP (3) EP0179440B1 (fi)
JP (4) JPS61171422A (fi)
AT (3) ATE37788T1 (fi)
AU (3) AU596080B2 (fi)
BE (2) BE903498A (fi)
CH (2) CH666812A5 (fi)
DE (6) DE3569188D1 (fi)
DK (2) DK172857B1 (fi)
FI (3) FI88855C (fi)
FR (2) FR2571967B1 (fi)
GB (3) GB2167283B (fi)
HU (1) HU196077B (fi)
IL (1) IL76777A (fi)
IT (2) IT1190402B (fi)
NO (3) NO854211L (fi)
NZ (1) NZ213855A (fi)
SE (6) SE465951B (fi)
ZA (4) ZA858106B (fi)

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5095035A (en) * 1981-07-31 1992-03-10 Eby Iii George A Flavor stable zinc acetate compositions for oral absorption
US5330979A (en) * 1984-10-23 1994-07-19 Perstorp Ab Method of treating renal disorders with inositoltriphosphate
SE465305B (sv) * 1986-04-16 1991-08-26 Perstorp Ab Anvaendning av inositolfosfat foer framstaellning av ett laekemedel
US5407924A (en) * 1984-10-23 1995-04-18 Perstorp Ab Method of treating pain using inositol triphosphate
US5128332A (en) * 1984-10-23 1992-07-07 Perstorp Ab Method of treating cardiovascular diseases using inositoltrisphosphate
SE465951B (sv) 1984-10-23 1991-11-25 Perstorp Ab Isomer av inositoltrifosfat foeretraedesvis i saltform foer anvaendning som terapeutiskt eller profylaktiskt medel samt kompositioner daerav
US4735902A (en) * 1984-10-23 1988-04-05 Matti Siren Stabilized composition containing inositoltriphosphate
EP0262227B1 (en) * 1986-03-11 1993-01-20 MITSUI TOATSU CHEMICALS, Inc. Process for the preparation of myoinositol derivatives
JPS63198642A (ja) * 1986-03-11 1988-08-17 Mitsui Toatsu Chem Inc ミオイノシトール誘導体の製造方法
US5057507A (en) * 1986-04-16 1991-10-15 Perstorp Ab Method of alleviating bone damage with inositoltriphosphate
WO1988003365A1 (en) * 1986-11-05 1988-05-19 George Weston Foods Limited Novel improvers for flour and yeast raised baked goods
SE8605063D0 (sv) * 1986-11-26 1986-11-26 Matti Siren Derivatives of cyclohexane
US5274161A (en) * 1986-11-26 1993-12-28 Perstorp Ab Derivatives of cyclohexane
GB8705811D0 (en) * 1987-03-11 1987-04-15 Research Corp Ltd Inositol derivatives
JP2597618B2 (ja) * 1987-12-28 1997-04-09 三井東圧化学 株式会社 光学分割方法
JPH01287035A (ja) * 1988-05-13 1989-11-17 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co Ltd 薬物並びにアルコール性中毒の予防剤とその治療剤
JPH01294631A (ja) * 1988-05-19 1989-11-28 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co Ltd 糖尿性疾患治療予防剤及び飲食、し好物
SE464059C (sv) * 1988-09-15 1996-12-04 Perstorp Ab Användning av inositoltrifosfat för framställning av läkemedel
US5316770A (en) * 1989-02-16 1994-05-31 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Vitamin D derivative feed compositions and methods of use
US5366736A (en) * 1989-02-16 1994-11-22 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Vitamin D derivative feed compositions and methods of use
US5750348A (en) * 1989-03-08 1998-05-12 The University Of Virginia Patents Foundation Method for detecting insulin resistance
US5427956A (en) * 1989-03-08 1995-06-27 The University Of Virginia Patent Foundation Quantitative analysis for diabetic condition predictor
EP0465508B1 (en) * 1989-03-08 2000-05-31 The University Of Virginia Patent Foundation Pharmaceutical composition for insulin-resistant diabetics
US5428066A (en) * 1989-03-08 1995-06-27 Larner; Joseph Method of reducing elevated blood sugar in humans
SE8902766D0 (sv) * 1989-08-17 1989-08-17 Siren Matti Saett att oeka den farmaceutiska effekten av inositolfosfat samt en beredning med foerbaettrad farmaceutisk effekt
SE8904355D0 (sv) * 1989-12-21 1989-12-21 Perstorp Ab Medicament
US5543576A (en) * 1990-03-23 1996-08-06 Mogen International Production of enzymes in seeds and their use
US5593963A (en) * 1990-09-21 1997-01-14 Mogen International Expression of phytase in plants
KR100225087B1 (ko) * 1990-03-23 1999-10-15 한스 발터라벤 피타아제의 식물내 발현
US7033627B2 (en) 1990-03-23 2006-04-25 Syngenta Mogen B.V. Production of enzymes in seeds and their use
SE9002278L (sv) * 1990-06-28 1991-12-29 Perstorp Ab Anvaendning av inositoltrisfosfat foer framstaellning av ett laekemedel
US6007809A (en) * 1990-08-29 1999-12-28 Chaykin; Sterling Method and product for eliminating undesirable side effects of eating vegetables such as onion or garlic
JP3266249B2 (ja) * 1990-08-29 2002-03-18 スターリング チェイキン タマネギ又はニンニクのような野菜を食べることによる望ましくない副作用の除去方法及び生成物
US5514398A (en) * 1990-11-05 1996-05-07 Amano Pharmaceutical Co., Ltd. Food additive and use thereof
SE9102068L (sv) * 1991-07-03 1993-01-04 Perstorp Ab Derivat av inositol, kompositioner innehaallande dessa samt anvaendning daerav
SE9200547L (sv) * 1992-02-25 1993-06-14 Perstorp Ab En farmaceutisk komposition med foerbaettrad biotillgaenglighet avseende inositolfosfat
US5292537A (en) * 1992-11-12 1994-03-08 Bran Tec, Inc. Method for stabilizing rice bran and rice bran products
JP2696057B2 (ja) * 1993-05-11 1998-01-14 ニチモウ株式会社 穀類を原料とした生成物の製造方法
WO1995005830A1 (en) * 1993-08-20 1995-03-02 The Regents Of The University Of California Polyanion anti-inflammatory agents
SE503122C2 (sv) * 1993-11-22 1996-03-25 Perstorp Ab Användning av en inositoltrisfosfatester för behandling av inflammatoriska tillstånd
SE502989C2 (sv) * 1993-11-22 1996-03-04 Perstorp Ab Användning av en inositoltrisfosfatester för beredning av läkemedel
US5466465A (en) * 1993-12-30 1995-11-14 Harrogate Holdings, Limited Transdermal drug delivery system
SE502574C2 (sv) * 1994-01-25 1995-11-13 Perstorp Ab En farmaceutisk komposition med förbättrad biotillgänglighet hos inositolfosfat
US6451572B1 (en) 1998-06-25 2002-09-17 Cornell Research Foundation, Inc. Overexpression of phytase genes in yeast systems
CA2365418C (en) * 1999-03-31 2009-05-26 Cornell Research Foundation, Inc. Phosphatases with improved phytase activity
US6841370B1 (en) 1999-11-18 2005-01-11 Cornell Research Foundation, Inc. Site-directed mutagenesis of Escherichia coli phytase
WO2001050125A1 (en) * 1999-12-30 2001-07-12 Wake Forest University Cadmium is a risk factor for human pancreatic cancer
US20020193379A1 (en) * 2001-06-05 2002-12-19 Insmed Incorporated Compositions and methods for decreasing the risk of or preventing neural tube disorders in mammals
FR2828206B1 (fr) * 2001-08-03 2004-09-24 Centre Nat Rech Scient Utilisation d'inhibiteurs des lysyl oxydases pour la culture cellulaire et le genie tissulaire
AU2002356880A1 (en) 2001-10-31 2003-05-12 Phytex, Llc Phytase-containing animal food and method
US20050108780A1 (en) * 2002-01-24 2005-05-19 Erasmus University Intracellular antibodies for a retrovirus protein
US7084115B2 (en) 2002-04-29 2006-08-01 Oxyplus, Inc. Inositol pyrophosphates, and methods of use thereof
CA2498017C (en) * 2002-09-13 2016-06-14 Cornell Research Foundation, Inc. Using mutations to improve aspergillus phytases
CA2413240A1 (en) * 2002-11-29 2004-05-29 Mcn Bioproducts Inc. Purification of inositol from plant materials
US20050123644A1 (en) * 2003-01-24 2005-06-09 Cargill, Incorporated Phosphate-containing fertilizer derived from steepwater
US7521481B2 (en) 2003-02-27 2009-04-21 Mclaurin Joanne Methods of preventing, treating and diagnosing disorders of protein aggregation
US20050048165A1 (en) * 2003-03-31 2005-03-03 Sadanandan Bindu Process for the preparation of Chapathi dough with reduced phytic acid level
US7745423B2 (en) * 2004-07-06 2010-06-29 NormOxys, Inc Calcium/sodium salt of inositol tripyrophosphate as an allosteric effector of hemoglobin
US20060258626A1 (en) * 2004-07-06 2006-11-16 Claude Nicolau Use of inositol-tripyrophosphate in treating tumors and diseases
US20060106000A1 (en) * 2004-07-06 2006-05-18 Claude Nicolau Use of inositol-tripyrophosphate in treating tumors and diseases
US20070135389A1 (en) * 2004-07-06 2007-06-14 Claude Nicolau Tumor eradication by inositol-tripyrophosphate
ES2532591T3 (es) * 2005-03-18 2015-03-30 Normoxys, Inc. Sal de calcio y de sodio de mio-inositol 1,6:2,3:4,5 tripirofosfato para el tratamiento del cáncer
US7919297B2 (en) 2006-02-21 2011-04-05 Cornell Research Foundation, Inc. Mutants of Aspergillus niger PhyA phytase and Aspergillus fumigatus phytase
US20070212449A1 (en) * 2006-03-02 2007-09-13 Shamsuddin Abulkalam M Reduction of the titratable acidity and the prevention of tooth and other bone degeneration
US8540984B2 (en) * 2006-08-03 2013-09-24 Cornell Research Foundation, Inc. Phytases with improved thermal stability
US20090214474A1 (en) * 2006-11-01 2009-08-27 Barbara Brooke Jennings Compounds, methods, and treatments for abnormal signaling pathways for prenatal and postnatal development
US20080103116A1 (en) * 2006-11-01 2008-05-01 Jennings-Spring Barbara L Method of treatment and compositions of D-chiro inositol and phosphates thereof
US20110218176A1 (en) 2006-11-01 2011-09-08 Barbara Brooke Jennings-Spring Compounds, methods, and treatments for abnormal signaling pathways for prenatal and postnatal development
AU2008246061A1 (en) * 2007-05-01 2008-11-06 Normoxys, Inc. Erythropoietin complementation or replacement
US8192734B2 (en) 2007-07-09 2012-06-05 Cornell University Compositions and methods for bone strengthening
CN101951921A (zh) * 2007-09-17 2011-01-19 比奥尼里斯有限责任公司 用于治疗恶病质的方法和手段
CN102971415B (zh) * 2011-07-01 2016-06-01 株式会社资生堂 血小板源性生长因子-bb产生增强剂、以及包含该增强剂的间充质系干细胞产生促进剂、干细胞稳定剂和真皮再生剂
FR3017134B1 (fr) * 2014-02-06 2018-04-20 Lesaffre Et Compagnie Levure biologique, procede d'obtention et utilisations

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2723938A (en) * 1952-12-05 1955-11-15 Bristol Lab Inc Aqueous penicillin suspensions comprising inositol phosphoric acids and their salts
US3591665A (en) * 1967-09-08 1971-07-06 Mitsui Toatsu Chemicals Process for producing phytic acid
FI51469C (fi) * 1968-01-10 1977-01-10 Morinaga Milk Industry Co Ltd Menetelmä radioaktiivisen strontium 90 saasteen poistamiseksi nestemäi sistä elintarvikkeista tai vedestä.
JPS50111246A (fi) * 1974-02-14 1975-09-01
US4154824A (en) * 1976-07-20 1979-05-15 Interx Research Corporation Nonbitter tasting potassium product for oral administration to warm-blooded animals and method for preparing same
JPS53124636A (en) * 1977-04-04 1978-10-31 Kisaku Mori Method of increasing meranine contained in animal and plant
DE2740053A1 (de) * 1977-09-06 1979-05-03 Klaus Prof Dr Med Gersonde Verwendung von allosterischen effektoren mit hilfe von lipidvesikeln ueber eine irreversible inkorporierung zwecks verbesserter o tief 2 -entladung des haemoglobins in erythrozyten
JPS5486666A (en) * 1977-12-22 1979-07-10 Ajinomoto Kk Cola beverage
JPS5798292A (en) * 1980-12-09 1982-06-18 Jiyaade:Kk Powdery phytic acid and its preparation
JPS58198254A (ja) * 1982-05-14 1983-11-18 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 加工食品の品質改良法
SE450325B (sv) * 1983-02-23 1987-06-22 Tricum Ab Kostfiberprodukt baserad pa skaldelar fran froet hos ceralier
US4735902A (en) * 1984-10-23 1988-04-05 Matti Siren Stabilized composition containing inositoltriphosphate
SE465951B (sv) * 1984-10-23 1991-11-25 Perstorp Ab Isomer av inositoltrifosfat foeretraedesvis i saltform foer anvaendning som terapeutiskt eller profylaktiskt medel samt kompositioner daerav
EP1276854A2 (en) 2000-04-13 2003-01-22 Novozymes A/S Extracellular expression of pectate lyase using bacillus or escherichia coli

Also Published As

Publication number Publication date
FR2571967B1 (fr) 1988-02-05
AU4893185A (en) 1986-05-01
US4794014A (en) 1988-12-27
JPS61171422A (ja) 1986-08-02
US4777134A (en) 1988-10-11
JPS61171789A (ja) 1986-08-02
SE8503165D0 (sv) 1985-06-26
GB8526079D0 (en) 1985-11-27
ATE41853T1 (de) 1989-04-15
DE3569188D1 (en) 1989-05-11
IL76777A (en) 1990-09-17
JPH0515719B2 (fi) 1993-03-02
FI854128A0 (fi) 1985-10-22
FR2571967A1 (fr) 1986-04-25
GB2167283B (en) 1989-05-24
EP0179441B1 (en) 1989-04-05
GB2169602A (en) 1986-07-16
NO168227B (no) 1991-10-21
FI82474C (fi) 1991-03-11
NO854211L (no) 1986-04-24
ZA858107B (en) 1986-06-25
US4851560A (en) 1989-07-25
DE3537569A1 (de) 1986-05-22
GB8526080D0 (en) 1985-11-27
EP0179439B1 (en) 1988-10-12
HU196077B (en) 1988-09-28
GB2169602B (en) 1988-10-19
NO169010B (no) 1992-01-20
NO169010C (no) 1992-04-29
CH668597A5 (fr) 1989-01-13
DK483285D0 (da) 1985-10-22
SE8504969D0 (sv) 1985-10-22
ZA858106B (en) 1986-06-25
AU4893085A (en) 1986-05-01
AU596080B2 (en) 1990-04-26
JPH037233B2 (fi) 1991-02-01
JPH0354924B2 (fi) 1991-08-21
FR2573080B1 (fr) 1988-11-10
DK483385A (da) 1986-04-24
SE8503164L (sv) 1986-04-24
FI854128L (fi) 1986-04-24
NO168227C (no) 1992-01-29
DE3577851D1 (de) 1990-06-28
SE8504967D0 (sv) 1985-10-22
IT8522574A0 (it) 1985-10-22
EP0179440B1 (en) 1990-05-23
HUT40674A (en) 1987-01-28
DK172852B1 (da) 1999-08-16
GB8526078D0 (en) 1985-11-27
NO854212L (no) 1986-04-24
FI88855B (fi) 1993-04-15
SE8504968D0 (sv) 1985-10-22
GB2167283A (en) 1986-05-29
SE8405295L (sv) 1986-04-24
NZ213855A (en) 1989-05-29
FI854126L (fi) 1986-04-24
IT1190402B (it) 1988-02-16
DE3537550A1 (de) 1986-05-15
JPS61181347A (ja) 1986-08-14
SE8504968L (sv) 1986-04-24
EP0179441A2 (en) 1986-04-30
SE8504969L (sv) 1986-04-24
US4735936A (en) 1988-04-05
SE465951B (sv) 1991-11-25
FR2573080A1 (fr) 1986-05-16
JPS61171491A (ja) 1986-08-02
US5003098A (en) 1991-03-26
FI85490C (fi) 1992-04-27
SE8504967L (sv) 1986-04-24
BE903497A (fr) 1986-02-17
SE8503164D0 (sv) 1985-06-26
AU4893285A (en) 1986-05-01
IT8522573A0 (it) 1985-10-22
IL76777A0 (en) 1986-02-28
EP0179440A1 (en) 1986-04-30
DK172857B1 (da) 1999-08-16
AU589378B2 (en) 1989-10-12
FI854127A0 (fi) 1985-10-22
SE8503165L (sv) 1986-04-24
EP0179441A3 (en) 1988-03-16
FI854126A0 (fi) 1985-10-22
GB2167298A (en) 1986-05-29
BE903498A (fr) 1986-02-17
JPH0338824B2 (fi) 1991-06-11
US4797390A (en) 1989-01-10
AU582594B2 (en) 1989-04-06
GB2167298B (en) 1988-11-02
DK483285A (da) 1986-04-24
ATE53038T1 (de) 1990-06-15
SE8405295D0 (sv) 1984-10-23
FI854127L (fi) 1986-04-24
US4734283A (en) 1988-03-29
ATE37788T1 (de) 1988-10-15
FI85490B (fi) 1992-01-15
DE3565464D1 (en) 1988-11-17
DK483385D0 (da) 1985-10-22
CH666812A5 (fr) 1988-08-31
EP0179439A1 (en) 1986-04-30
FI82474B (fi) 1990-11-30
IT1190403B (it) 1988-02-16
ZA858105B (en) 1986-06-25
ZA858108B (en) 1986-06-25
SE465164B (sv) 1991-08-05
DE3537542A1 (de) 1986-05-15
NO854213L (no) 1986-04-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI88855B (fi) Foerfarande foer framstaellning av en livsmedelskomposition som innehaoller inositoltrifosfat
CA1337338C (en) Inositoltriphosphate
Graf et al. Antioxidant functions of phytic acid
US5019566A (en) Method of treating inflammation with inositol triphosphate
US5023248A (en) Method of treating diabetes with inositol triphosphate
US5135923A (en) Method of treating cardiovascular diseases
Bibby et al. Enamel dissolution by streptococcal fermentation of breakfast cereals

Legal Events

Date Code Title Description
BB Publication of examined application
MM Patent lapsed

Owner name: PERSTORP AB