FI82940C

FI82940C - Foerfarande foer framstaellning av som laekemedel anvaendbara komplex av en eller flera flavanolignaner med en eller flera fosfolipider.

Info

Publication number: FI82940C
Application number: FI862850A
Authority: FI
Inventors: Giorgio Pifferi; Ezio Bombardelli; Bruno Gabetta
Original assignee: Idb Holding Spa
Priority date: 1985-07-17
Filing date: 1986-07-04
Publication date: 1991-05-10
Also published as: HU197332B; EP0209038B1; FI82940B; HUT44567A; JPH0692399B2; EP0209038A1; FI862850A; DE3665717D1; PT82988B; EP0209038B2; KR890002430B1; GR861825B; PT82988A; DK170804B1; DK339086A; CS257289B2; US4764508A; CA1259324A; MX3173A; YU128086A

Description

82940 ^ Menetelmä yhden tai useamman flavanolignaanln ja yhden tai useamman fosfolipidin välisten lääkeaineina käytettävien kompleksien valmistamiseksi Förfarande för framställning av som läkemedel användbara 5 komplex av en eller flera flavanolignaner med en eller flera fosfolipider 10 Tämä keksintö kohdistuu uusiin, fosfolipidlen ja silymariinin pääasiallisten komponenttien välisiin komplekseihin, joka silymariini on Silybum marianum-kasvin siemenistä saatu, tunnettu standardoitu uute, ja jota käytetään alkuperältään erilaisten maksasairauksien hoitamiseen. Sily-15 mariini sisältää kolme pääasiallista komponenttia: silybiiniä, silidia-niinia ja silikristiiniä, joiden arvellaan saavan aikaan uutteen lääkinnällinen, maksaa suojaava aktiivisuus. Pääasiallisin komponentti on silybiini, joka on kahden diasteroisomeerin seos (Chem. Commun. 696, 1979) suurin piirtein suhteessa 1:1, ja tähän seokseen, erityisesti ve-20 teen liukenevana hemimeripihkahapon diesterinä, liittyvää farmako-toksi-kologista ja kliinistä kirjallisuutta on olemassa erittäin paljon.

Silybiinin ja silymariinin muiden komponenttien aktiivisuus, erityisesti annettaessa niitä injektoimalla, kohdistuu maksasoluun, missä nämä flava-25 nolignaalit vaikuttavat prosessissa maksasolun kalvon stabiloimiseksi ja suojaamiseksi haitallisia aineita vastaan, joista haitallisista aineista mainittakoon hiilitetrakloridi, falloidiini, aminitiini, eräät raskasmetallit, galaktosamlini sekä erilaiset antibiootit, jotka häiritsevät solukalvon toimintaa entsyymejä vapauttamalla, mikä johtaa solun kuole-30 maan. Eräät näistä haitallisista aineista saavat aikaan samanlaista vahinkoa kuin maksatulehduksen (hepatitis) yleisiä muotoja ihimisessä aiheuttavat virukset, ja näin ollen tämän kaltaiset antihepatotoksiset molekyylit ovat lääkinnällisesti tärkeitä. Kuten kirjallisuudessa esitetyt tiedot osoittavat, paras suoja edellä mainittuja haitallisia aineita 35 vastaan saadaan aikaan eläimessä, kun näitä yhdisteitä annetaan vatsaontelon sisäisesti tai suonen sisäisesti, jolloin vereen ja kohde-elimeen saadaan nopeasti yhdisteen suuria pitoisuuksia. Silybiinin suun kautta 2 82940 1 tapahtuvaan absorptioon liittyvissä, kirjallisuudessa silloin tällöin esitetyistä raporteista (Arzneim. Forsch. 23, 1322, 1973; Arzneim. Forsch. 25, 902, 1975; Planta Medica 4i>, 216, 1982), huolimatta asiaan liittyviä farmakologisia tutkimuksia on suoritettu erittäin vähän ja niiden toista-5 mlnen on vaikeata. Tämä osoittaa, ettei lääkeaineen biologinen saatavuus ole todella suuri tai riittävä tällä menetelmällä annettaessa.

Tämä keksintö kohdistuu uusien yhdisteiden valmistamiseen, joita yhdisteitä saadaan antamalla yhden tai useamman fosfolipidin ja yhden tai 10 useamman edellä mainitun flavanolignaanln vaikuttaa toisiinsa kemiallisesti.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet ovat tunnettuja yleisestä kaavasta 1: 15 -

CH -O-R | J

o© XXX <«

/ ητ ]f OH

nu „ „ OH O

20 2 il\ N\ © o o-r2w missä sekä R että Rp jotka voivat olla sama tai eri ryhmä, tarkoittaa 25 palmitiini- tai steariini- tai oleiini- tai linoleiini- tai linoleiini-hapon asyyliradikaalia; R2 ®tarkoittaa yhtä radikaaleista 0 Θ 0 -CH2-CH2-N(CH3)3, -CH2CH2-NH3, -CH2CH(COOH)-NH3 30 3 ja R tarkoittaa yhtä radikaaleista a,b tai c: i 35 3 82940 1 2

Ö Λ. CH OH

5 , 2 HO (b) io oh (c) flavanolignaanien ja fosfolipidien moolisuhteen vaihdellessa alueella 1:0,3 - 1:2.

15 Näissä valmistuksessa käytettävät fosfollpidlt voivat olla luonnollisia tai synteettisiä. Mieluiten käytetään kasvikunnasta saatuja luonnollisia (Rl fosfolipldejä (soijan fosfolipldejä), kuten esim. tuotetta Lipoid S 100v ' (Lipoid KG, Ludvigshafen, Länsi-Saksa), joissa fosfatldyylikollinin 20 pitoisuus on vähintään 90 Z, ja jotka sisältävät keskimäärin 63 % lino-leiinihappoa, 16 Z palmitiinlhappoa, 3,5 Z steariinlhappoa ja 11 Z olelinlhappoa kalkista rasvahapoistaan; tai luonnollista maksasta eristettyä fosfolipidiä.

25 Tämän keksinnön mukaisilla komplekseilla on ominaisuutena selvää lipo-filllsyyttä, joka parantaa odottamattomastl kompleksina olevan flavano-lignaanin absorptiota suun kautta annettaessa, ja näin ollen näiden kompleksien spesifinen aktiivisuus on parantunut erilaisissa farmakologisissa kokeissa, jotka on toteutettu kirjallisuudessa jo kuvattujen, 30 perusyhdisteisiin liittyvien koemenetelmien mukaisesti.

Tämän keksinnön mukaisesti nämä uudet kompleksit valmistetaan antamalla luonnollisen tai synteettisen fosfollpidin, joka voi olla fosfatidyyli-koliinia, fosfatldyylietanollamlinia tai fosfatidyyllseriiniä, ja jota 35 käytetään 0,3-2 moolia, mieluiten 1 mooli, reagoida silybiinin, silidi-anlinin tai silikristlinln, jota käytetään 1 mooli, ja jota käytetään yksin tai luonnollisena seoksena (silymarlini), aproottisessa liuotti- * 82940 1 tcessa, kuten dioksaanlssa tai asetonissa, josta kompleksi voidaan eristää seostamalla kompleksia liuottentattamalla aineella, kuten alifaattl-silla hiilivedyillä tai lyofilisoimalla tai sumutuskuivaamalla.

5 Tunnetuissa, kuvatuissa menetelmissä llposomaalisten lääkealnekompleksien saamiseksi käytetään vettä tai puskuroitua liuosta. Tätä vastoin tässä keksinnössä käytetään pelkästään liuottimia, joiden dielektrisyysvakio on pieni. Vaikka lähtömolekyylit (silybiini, silidianiini, jne.) ovatkin liukenemattomia kloroformiin, etyylieetteriin tai bentseeniin, niin ne 10 muuttuvat kuitenkin näihin liuottimiin erittäin liukoisiksi sen jälkeen, kun ne ovat muodostaneet kompleksit fosfolipldln kanssa. Tämä kemiallisten ja fysikaalisten ominaisuuksien muuttuminen johtuu todellisen stabiilin kompleksin muodostumisesta, mikä todetaan komponenttien 1R-, 1 13 H-NMR- ja C-NMR-spektreissä tapahtuneista muutoksista kompleksin 15 muodostumisen jälkeen.

Kompleksin spektroskooppiset ominaisuudet eroavat selvästi yksittäisten komponenttien erikseen tarkastelluista, vastaavista ominaisuuksista, minkä perusteella voidaan olettaa, että flavanolignaanin ja fosfolipldln 20 polaaristen päiden välinen vuorovaikutus on voimakasta. Esimerkiksi fosfatidyylikolilnin (erityisesti dipalmitoyyli-fosfatidyylikoliinin) IR-spektrissä, kohdalla 1250 cm *, nähdään ryhmästä P«0 johtuva vyöhyke; tämä vyöhyke katoaa silybllnin kanssa 1:1 muodostuneessa kompleksissa, kun taas se on läsnä näiden kahden komponentin mekaanisessa seoksessa.

25

Kompleksin muodostuminen nähdään myös NMR-spektrelssä sekä kompleksin muodostavien yhdisteiden välisten sidosten muodostumiseen liittyvien vety- ja hiiliatomien relaksaatloajolsea. Erityisemmin, protonispekt-rissä nähdään flavanolignaanien hydroksyylisistä protoneista, aromaatti-30 sista protoneista ja metoksiryhmästä, sekä lipidin NMe^-ryhmästä saatujen signaalien olennainen leveneminen. Toisaalta fosfatidyyllkoliinin ja silybllnin kompleksin muodoetamattomasta seoksesta saatu ^H-NMR-spektrl on yksinkertaisesti summa näiden kahden komponentin erillisistä spektreistä.

35 13 C-spektrlssä kompleksin muodostumiseen läheisimmin liittyvien ydinten relaksaatioaika on lyhentynyt riittävästi johtaakseen kaikkien flavano- 5 82940 1 lignaanlsta ja koliiniradikaallsta sekä fosfolipidin glyseriiniradikaa-lleta peräisin olevien signaalien katoamiseen.

Näin ollen oletetaan, tämän keksinnön tavoitteiden kuitenkaan millään 5 tavalla rajoittumatta tähän tulkintaan, että sllyblinl sitoutuu fosfo-lipidiin polaarisen päänsä välityksellä niin voimakkaasti, että sisäinen tai molekyylin sisäinen, pyöriminen estyy. Toisaalta lipidin polaariton osa, joka el liity sidosten muodostumiseen, on vapaa liikkumaan, joten kompleksi on erittäin rasvaliukoinen.

10

Silidianllnin ja silikristiinin fysikaaliset ja kemialliset ominaisuudet ovat samankaltaiset kuin silybiinillä: sama pätee silymarlinlln, joka sisältää nämä kolme aktiivista yhdistettä keskenään sekoitettuna. On selvää, että edellä esitetyt kemialliset ja fysikaaliset havainnot päte-15 vät myöskin niihin flavanolignaanin ja fosfolipidin välisiin kompleksei-hin, joissa moollsuhde on muu kuin 1:1, tosin eräin kvantitatiivisin eroin.

Kuten edellä mainittiin, biologisesti tarkastellen, näiden flavanolignaa-20 nin ja fosfolipidin välisten kompleksien biologinen saatavuus suun kautta annettaessa on odottamattomasi suurentunut, jolloin moniin fenolisiin aineisiin, erityisesti silymarlinlln liittyviltä, tunnetuilta absorptio-vaikeuksilta vältytään. Tämän seurauksena uusien yhdisteiden farmakologinen aktiivisuus on ilmeisempää ja se on osoitettavissa jopa suun kautta 25 annettaessakln.

Kuten taulukossa 1 esitetään (taulukon 1 liittyessä silybiiniin ja sen sekä soijan fosfolipidelstä saadun fosfatidyyllkoliinln väliseen 1:1 kompleksiin), absorptio rotassa on selvästi parempaa kompleksin tapauk-30 sesea. Silymariinin muut komponentit käyttäytyvät kuten silybiini kompleksina annettaessa.

Taulukossa 2 esitetään saman, silybiinin ja soijan fosfolipidelstä saadun fosfatidyyllkoliinln välisen 1:1 kompleksin aktiivisuus tavanomai-35 seesa kokeessa, jossa maksaa myrkytetään hillitetraklorldilla. Kompleksi johtaa suun kautta annettuna glutaamioksaalietlkka-transaminaasin (GOT) ja glutaaml-palorypäle-transamlnaasin (GPT) pitoisuuden merkittävään alen- 6 82940 1 tumiseen, kun taas silybiinin yhtä suuret molaarlset annokset indusoivat pelkästään näiden entsyymien pitoisuuksien vähäistä pienenemistä. Samankaltaisia tuloksia esitetään taulukossa 3, liittyen sllymariinln ja soijan fosfolipideistä saadun fosfatldyylikolllnin väliseen 1:1 kompleksiin.

5

Ihmisessä voidaan samoin todeta erittäin merkittävät farmakokineettiset erot sen jälkeen, kun silybiiniä ja sen sekä soijan fosfolipideistä saadun fosfatidyyllkoliinln välistä 1:1 kompleksia oli annettu suun kautta yhtä suurina molaarislna annoksina; katso taulukko 4.

10 15 20 25 30 35 7 82940 ja +1 o o o o o o

M A A II

00 O O

•B +1 +1

O ui O O

o o o o

« M « ft I

VO O O O

*> 43+|+| u

M O rH CM O

OT O «—* O O

M · · « » | co sr o o o

Cd 44__ fH (0 O n 43 +| +| B cd

•H O O 00 On 1Λ O

> C ti O ro O O O

44 <U tl ·> - - - -

Oltu O ro o o o o 44 e___

Π OT <U

•HRO cu cd iH J3 +| +|

n n n OT E

44 tl tl ^ o OOv uOO

CU C to C 60 O O O OO

•H 41 OTSO · « * -

O.® Z 44 β cn CN O O O

6 -H ___

o B

44 CO 43+1+1 tl —i G O O r·» -h cni ••co o vo oo -h o ,—4 A * a * * <0 ^ ^ o o o

C u CO

Φ cM »H

«S 43+1+1 OT

•H CO OI

OT 44 O Sv id vO ·—· fH

OT uo vO ui O O O

pj A ·» A A * JJ

s o en o o o o.

O B S____ <0

44 «H CO ' fH

44 B 43+1+1 CO

3 -H

H *H Cd ΙΛ CN Ον Γ·· ot rH

3 OT M CN ·—i UO O O B

CO O CO * ft «I KA

fH 44 -H O sr ·Η O O 00 •H 44 -------— g

•H O

>t M uo

to OT O

OT 3 B H

•H fH 0) OT O

tl -H 44 OT

co co β B sr sr B

Ή tl -H 3 CO

co M OT 44 ·*η O «I fH 3 co

<H > W OT OT H

•H

cd B--B cd f-) Q) H 44

CM OT M

BOT O 43 O

OT 44 cd β >»44

B 44 44 β OT

OT 01 44 CO OT · OT β» 3 M to OT B Cd 3 -K 44

to OT 4444 OO OOH

OT 44 4400 (NO 44 0) OT O β CU 44 eri CN "s 44

n 44 3 e —· 00 OT

cd s fi oo B u (OS co cd B ot

f) H O OT

Cd--O B

BOT CN

OT to OTOT OT

Β B ot en e co oi

OT 4) (U 44 OT CO

OT 44 H 01 OT HD

4 10 H OT JO CO

tn O OT o. tn Cd O

»HB m Bot t> o

OT C »0 O OT

Crt Cd t^__Z_(Λ_ * o β 82940 1 Taulukko 2

Silybiinin ja silybiinin ja fosfatidyylikoliinin välisen 1:1 kompleksin antihepatotoksinen aktiivisuus rotissa hiilitetrakloridilla myrkyttämisen 5 jälkeen

Käsittely Suun kautta Eläinten GFT GOT

annettu annos, lukumäärä U/L U/L

10 mg/kg ryhmää kohden

Normaalit - 10 22,40°° + 88,50°° + vertailut 1,93 3,20 15 Myrkytetyt - 10 145,40 + 339,40 + vertailut 31,43 59,07

Silybiini 25 10 94,30 + 252,60 + 21,87 48,04 20 (-35,2 Z) (-25,6 Z)

Silybiini 250 10 94,90 + 200,00* + 31,64 33,01 (-34,8 Z) (-41,1 Z) 25

Kompleksi 65,8 10 65,90 + 181,80 + 20,49 52,65 (-54,7 %) (-46,4 Z) 30 Kompleksi 658* * 10 46,90°°+ 148,10°° + 9,61 16,96 (-67,8 Z) (-56,4 %) 35 · p < os * Vastaa 25 mg silybiiniä °° p < .01 * * Vastaa 250 mg silybiiniä.

i 9 82940 1 Taulukko 3

Sllymariinin sekä sllymariinin ja fosfatidyylikoliinin välisen 1:1 kompleksin antihepatotoksinen aktiivisuus rotissa hlllitetrakloridllla myr-5 kyttämisen jälkeen

Käsittely Suun kautta Eläinten GPT GOT

annettu annos, lukumäärä U/L U/L

10 mg/kg ryhmää kohden

Normaalit - 10 26.33**+ 2.26 105.44**+4.98 vertailut 15

Myrkytetyt - 10 146.50+45.10 358.64+64.15 vertailut

Silymariini 25 10 125.30+32.20 290.15+38.52 20 (-14.5) (-19.1)

Silymariini 250 10 82.44+21.90 190.701+28.85 (-43.7) (-46.8) 25 Kompleksi 65® 10 110.22+18.75 247.50+26.52 (-24.8) (-31.0)

Kompleksi 650b 10 50.481+8.52 201.381+23.64 (-55.0) (-43.8) 30 _ , 35 p < 0.05 ** p < 0.01 a) Vastaa 25 mg silymariini b) Vastaa 250 mg silymariinla.

10 82940

JS

o o o o «4· o •I * oo o o o o

O m O

#1 «k

vO O

O CM O

O O

• iH · sr o Λ O 00 o o o o * «“H Λ CO o e *

Ή O^O

00 o O

^ * «t 0) CM o

«H

0 cd x: J4 Ή

• V> O 00 O

—' :cfl C O r~ O

••CO 3 « » -h co « ή o

OI

Π (S «

01 ·Η VI

co a cd .c H JS 1-1

•H -H 4 O Ό O

Λ o in sr o >3 vi rS VI O O ^s

sr C -h o -H

•h co c a O C VI 0) ~~~ M Ή Vl 0> JS 00 M "H 41 VI i—I 3

3 Ή > VI a m O O

<HO >1 \ CN o o m 3 MC OT 00 ·> * co cd Ή 01 SS d O O O s— h r-ι a--- >s «H Cd ►> VI Ή •α VI C r-i •H OI 4) KO 01

VI 01 OM >H

cd d -h Kd o Ή rl cd :cd 3 co M h a sr sr a O o ·η 3 cd lvi M VI M i—l «03 «

« p Pi H

n w C

«--:-- Oi 3 *vi Ό •H CO Os G ä O Os

•H 41 Cd G M

H VI VI B M

ja co vi « Vi ►. O 3 0)

·—1 C «3 O O JS

•H G JO vi O rs

10 CO VI IS. cm G

CO» :«

Kd d 3 c a

Ji 01 3 G Ή o» vi co « o)

(0 CO---VI

Tl 01 a u e

Ή cd >> ·Η tI OI

α « ή n d X

H i—l OI Ji Tl

τΙ O VI 01 Tl II

JO S VI ι—I ψΩ

ϊ*ι τι Tl PV >s O

»H > <0 a f—l O

Tl it ad O Tl

• co oi 04__^_co_ O

11 82940 1 Tämän keksinnön mukaisia tuotteita voidaan käyttää akuuttien tai kroonisten, alkuperältään toksisten, aineenvaihdunnallisten ja/tai infektiosta johtuvien maksasairauksien ja kudosmuutoksista johtuvien maksasairauksien hoitoon, sekä pyrittäessä ehkäisemään edeltäkäsin maksan vaurioitu-5 minen lääkeaineiden ja/tai makealle haitallisten ylellisyystuotteiden käytön seurauksena. Näitä aineita voidaan käyttää tavanomaisissa, suun kautta annettavissa farmaseuttisissa muodoissa, kuten puristeina, pinnoitettuina tabletteina, kapseleina tai paketteina, sekä nestemäisessä muodossa suspensiona.

10

Sllybiinin ja soijasta saadun fosfatidyylikolilnin välisen 1:1 kompleksin suositeltava vuorokautinen annos aikuiselle on 130-1300 mg, mikä vastaa 50-500 milligrammaa sllybllniä.

15 Seuraavat esimerkit havainnollistavat keksintöä sitä kuitenkaan rajoittamatta.

Esimerkki 1 20 Sllybiinin ja dipalmitoyyll-fosfatidyylikoliinln välinen 1:1 kompleksi (I, missä R palmltoyyli; ^ g ° (a)) 4,82 g (0,010 moolia) silybilnlä liuotettiin 150 millllltraan kiehuvaa asetonia, ja sitä käsiteltiin 8,06 grammalla (0,011 moolia) dipalmitoyyli-25 foefatidyyllkoliinia. Tuloksena olevaa liuosta palautusjäähdytettiln tunnin ajan, jonka jälkeen se haihdutettiin vakuumlssa 30 mlllilitran tilavuuteen. Tämä väkevölty liuos kaadettiin sekoittaen 350 millilitraan n-heksaania, ja sen jälkeen, kun seos oli seisonut yön yli huoneen lämpötilassa, kiinteä saostuma otettiin talteen suodattamalla, pestiin 30 n-heksaanllla ja kuivattiin vakuumlssa 40°C:n lämpötilassa. Tuotteena oli 11,6 g kompleksia (saanto 95 X) kellertävän valkoisena jauheena.

- 175,8 aallonpituudella 288 nm (CH^OH) 35 Analyysi yhdisteelle ^55^102^18^ (m°1-ekyyl*-Pa*no mP “ 1216,48):

Laskettu, X C - 64,18; H « 8,45; N - 1,15; P - 2,55; i2 82940 1 Todettu, I C - 63,97; H - 8,47; N - 1,11; P - 2,51.

Esimerkki 2 5 Sllikristllnin ja dlpalmitoyyli-fosfatldyylietanollamllnln välinen 1:1 kompleksi (I, missä R - -palmitoyyli; ^- (b))

Suspensiota, joka sisälsi 4,82 g (0,010 moolia) sillkrletliniä 100 milli-litrassa dioksaania, käsiteltiin huoneen lämpötliassa sekoittaen liuok-10 sella, joka sisälsi 6,91 g (0,010 moolia) dipalmitoyyli-fosfatidyyli-etanollamlinla 200 mlllilitrassa dioksaania. Seoksen annettiin reagoida 5 tuntia, ja sitten se pakastekuivattlin. Tuotteena saatiin 11,7 g kompleksia kellertävän valkoisena jauheena.

15 = 174,6 aallonpituudella 288 nm (CH^OH)

Analyysi yhdisteelle ^g2H96^18P (mo^e*cyy^^Pa^no mP “ 1174,49)

Laskettu, Z C - 63,41; H - 8,24; N - 1,19; P - 2,63; 20 Todettu, % C - 63,27; H - 8,26; N - 1,17; P - 2,59.

Esimerkki 3

Silydianiinin ja dlstearoyyli-fosfatldyyllkolilnin välinen 1:1 kompleksi 25 (I, missä R -8 stearoyyli; R,, ® - (c))

Suspensiota, joka sisälsi 4,82 g (0,010 moolia) silidianiinla 150 milli-litrassa asetonia, palautusjäähdytettiin sekoittaen distearoyyli-foefatldyylikoliinin 8,68 gramman (0,011 moolia) kanssa noin tunnin ajan. 30 Reaktioseoe haihdutettiin vakuumissa 35 millilitran tilavuuteen, ja se laimennettiin 400 millilitralla n-heksaania. Sen jälkeen, kun seos oli seisonut huoneen lmpötilaesa yön yli, kiinteä saostuma otettiin talteen suodattamalla, se pestiin n-heksaanilla ja kuivattiin vakuumissa 40°C:n lämpötilassa. Tuotteena saatiin 11,1 g kellertävän valkoista kompleksia 35 (saanto 87,4 Z).

Ejj * 148,8 aallonpituudella 288 nm (CH^OH).

i i3 82940 1 Analyysi yhdisteelle C69HuqNOi8P (“Metyylipä*110 mP · 1272,59)

Laskettu, X C - 65,12; H - 8,71; H - 1,10; P - 2,43;

Todettu, X C - 64,98; H - 8,73; N - 1,12; P - 2,48.

5

Esimerkki 4

Silybilnin ja soijasta saadun fosfatidyylikolilnln välinen 1:1 kompleksi 10 Suspensiota, joka sisälsi 4,82 g (0,010 moolia) sllyblinlä 150 milli-litrassa asetonia, käsiteltiin huoneen lämpötilassa sekoittaen 9,2 grammalla (0,012 moolia) tuotetta "Lipoid S 100 " (keskimääräinen molekyylipalno 770). Reaktioseos muuttui kirkkaaksi noin 3 tunnin kuluttua, ja se haihdutettiin vakuumlssa 30 millilltran tilavuuteen. Seos 15 laimennettiin 300 millilitralla n-heksaania, jonka jälkeen komponentti saostui ja se otettiin talteen suodattamalla yhden yOn kuluttua, ja kuivattiin vakuumlssa 40°C:n lämpötilassa. Saantona oli 11,9 g (94 %) tuotetta, joka oli kellertävän valkoista jauhetta.

20 Ej^ - 172,8 aallonpituudella 288 nm (CH^OH).

Analyysi: (mp * 1252)

Laskettu, Z N 1,12; P - 2,48; 25 Todettu, X N 1,15; P - 2,55.

Esimerkki 5

Sllymariinln ja soijasta saadun fosfatidyylikollinin välinen 1:1 30 kompleksi

Liuosta, joka sisälsi 5 g silymariinia 100 mlllilitrassa asetonia, käsiteltiin huoneen lämpötilassa sekoittaen 8 grammalla tuotetta "Lipoid (R) S 100 /". Täydellisen liukenemisen jälkeen seos haihdutettiin vakuumlssa 35 30 mlllilitraksi, ja kaadettiin sekoittaen 300 millilitraan petrooli- eetteriä. Saostuma, jonka annettiin laskeutua yOn yli, otettiin talteen suodattamalla, pestiin petroolieetterillä ja kuivattiin vakuumlssa 40°C:n 14 82940 1 lämpötilassa. Tuotteena saatiin 11,1 g kompleksia.

- 170,2 aallonpituudella 288 nm (CH^OH).

5 Analyysi: todettu Z N *= 1,12; P - 2,50.

Esimerkki 6

Silybilnin ja soijasta saadun fosfatldyylikoliinin välinen 1:2 kompleksi 10

Suspensiota, joka sisälsi 4,82 g (0,010 moolia) sllybilniä 75 milli- litrassa dioksaania, käsiteltiin sekoittaen liuoksella, joka sisälsi (Rl 15,4 g (0,020 moolia) tuotetta "Lipoid S 100' ". Reaktioseoe muuttui kirkkaaksi 4 tunnin kuluttua, ja se pakaetekulvattiln, jolloin saatiin 15 29 g vaaleankeltaista kompleksia.

E^g - 160 aallonpituudella 288 nm (CH^OH).

Analyysi: (mp 2022) 20

Laskettu, Z N * 1,38; P 3,07;

Todettu, Z N - 1,35; P - 3,11.

Esimerkki 7 25

Silybilnin ja soijasta saadun fosfatldyylikoliinin välinen 1:0,3 kompleksi

Liuosta, joka sisälsi 2,41 g (0,005 moolia) sllybilniä ja 100 ml di- 30 oksaania, käsiteltiin 60°C:n lämpötilassa tunnin ajan 0,770 grammalla (Rl (0,001 moolia) tuotetta "Lipoid S 100 ". Reaktloseos haihdutettiin kuiviin vakuumissa, ja jäännös liuotettiin 100 mlllilitraan kloroformia.

Astian pohjalla oleva, kompleksia muodostamaton silybiinl poistettiin 35 suodattamalla ja kompleksin sisältävät emäliuokset haihdutettiin vakuumissa kuiviin. Jäännöksenä, joka kuivattiin vakuumissa 30°C:n lämpötilassa, saatiin 2,3 g kompleksia kellertävän valkoisena jauheena.

is 82940 1 Ejj - 300 aallonpituudella 288 nm (CH^OK)

Analyysi: (mp 713) 5 Laskettu, Z N - 0,59; P - 1,30;

Todettu, Z N 0,56; P - 1,34.

Esimerkki 8 10 Tabletit, jotka sisältävät sllyblinin ja soijasta saadun fosfatldyyll-kolllnln välistä kompleksia

Kukin 1,2 gramman painoinen tabletti sisältää: 15 Kompleksia (vastaa 200 mg silyblinlä) 520 mg

Rakeista selluloosaa 390 mg

Laktoosia 100 mg Tärkkelystä 100 mg PVP 10 mg 20 Karboksimetyyliselluloosaa 60 mg

Magnesiumstearaattia 20 mg

Esimerkki 9 25 Kapselit, jotka sisältävät sllyblinin ja soijasta saadun fosfatldyyli-koliinln välistä 1:1 kompleksia

Kukin 0,275 gramman painoinen kapseli sisältää: 30 Kompleksia (vastaa 100 mg silybiiniä) 260 mg

Sillkajauhetta 10 mg PVP 2,5 mg

Magnesiumstearaattia 2,5 mg 35 16 82940 1 Esimerkki 10

Rakeet, jotka suspendoidaan veteen, ,1a jotka sisältävät silybiinin ja soijasta saadun fosfatidyylikoliinin välistä 1:1 kompleksia 5

Kukin 3 gramman suuruinen pakkaus sisältää:

Kompleksia (vastaa 200 mg silybiiniä) 520 mg

Laktoosia 2000 mg 10 Mannitolia 238 mg

Ammoniumglysyrrltsinaattia 10 mg

Natriumsakkariinia 2 mg

Kuivattua appelsiinimehua 200 mg

Aromiaineita 30 mg 15

Esimerkki 11

Kapselit, jotka sisältävät silymariinin ja soijasta saadun fosfatidyylikoliinin välistä 1:1 kompleksia 20

Kukin kapseli oli identtinen esimerkin 9 mukaisen kapselin kanssa, mutta sisälsi 260 mg silymariin ja fosfatidyylikoliinin välistä 1:1 kompleksia (vastaa 100 mg silymariinia) eikä silybiinin kanssa muodostunutta kompleksia .

25

Esimerkki 12

Rakeet, jotka suspendoidaan veteen, ja jotka sisältävät silymariinin ja fosfatidyylikoliinin välistä 1:1 kompleksia 30

Kukin 3 gramman suuruinen paketti oli identtinen esimerkin 10 mukaisen paketin kanssa, mutta sisältää 520 mg silymariinin ja fosfatidyylikoliinin välistä 1:1 kompleksia (vastaa 200 mg silymariinia) eikä silybiinin kanssa muodostunutta kompleksia.

35

Claims

1. Menetelmä yhden tai useamman flavanolignaanin ja yhden tai useamman fosfolipidin välisten lääkeaineina käytettävien kompleksien valmistamisek-g si, joilla komplekseilla on kaava I ch2-o-r I HO\ .O - R, CH-O-R^ Il 10 Θ O ^OH / OH O CH -O-P „© O °"R2 15 missä sekä R että R,, jotka ovat sama tai eri ryhmä, tarkoittaa palmi-tiini-, steariini-, oleiini-, linoleiini- tai linoleiinihapon asyyli- 20 ♦ jäännöstä; Rj+ tarkoittaa yhtä seuraavista jäännöksistä -CH^CH^NCCHj),, + ♦ -CHjCHj-NHj tai -CH2CH(C00H)-NH,; ja R3 tarkoittaa yhtä seuraavista radikaaleista a,b tai c:

25 H.° CH OH ^ OH 2 (a) 30 (b) 11 \—'OH 35 (c, 18 82940 j flavanolignaanien ja fosfolipidien välisen moolisuhteen vaihdellessa alueella 1:0,3 - 1:2, tunne t tu siitä, että yhden tai useamman luonnollisen tai synteettisen fosfolipidin, jolla on kaava II, annetaan reagoida aproottisissa liuottimissa yhden tai useamman kaavan III mukai-g sen flavanolignaanin kanssa CH.-O-R I 2 /Rj CH-O-R I II I 10 0Θ III0" OH O CH.-Ö-P Λ Νο·«® 6 2 (III) 15 (ID (missä R, R,, Rj ja Rj ovat edellä esitettyjen määritelmien mukaiset) flavanolignaanin ja fosfolipidin välisen moolisuhteen vaihdellessa alueella 1:0,3-1:2,ja tuloksena olevat kompleksit otetaan talteen kompleksia 2q liuottamattomalla liuottimelle seostamalla, pakastekuivaamalla tai sumu-. . tuskuivaamalla.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu aproottinen liuotin valitaan ryhmästä, joka käsittää dioksaanin

25 Ja asetonin, ja kompleksia liuottamaton liuotin valitaan ryhmästä, joka käsittää alifaattiset hiilivedyt ja niiden seokset.

3. Patenttivaatimusten 1-2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että flavanolignaani (III) on silybiini ja fosfolipidi (II) on fosfati- 30 dyylikoliini.

4. Patenttivaatimusten 1-2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että flavanolignaani (III) on silikristiini ja fosfolipidi (II) on dipal-mitoyyli-fosfatidyylietanoliamiini. 35

5. Patenttivaatimusten 1-2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että flavanolignaani (III) on silidianiini ja fosfolipidi (II) on di- i i9 82940 ^ 8tearoyyli-fosfatidyylikoliini.

6. Patenttivaatimusten 1-5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että flavanollgnaania (III) ja fosfolipidiä (II) on läsnä moolisuhteena 5 1:1.

7. Patenttivaatimusten 1-2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että Ilavanolignaani (III) on silymariini ja fosfolipidi (II) on soijasta saatua fosfatidyylikoliinla. 10

8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että silymariinia ja soijasta saatua fosfatidyylikoliinia on läsnä moolisuhteena, joka vaihtelee arvojen 1:0,3, 1:1 ja 1:2 välillä. 15 20 25 30 35 20 82940 j Patentkrav