FI78700C - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara mitosanderivat. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara mitosanderivat. Download PDFInfo
- Publication number
- FI78700C FI78700C FI831972A FI831972A FI78700C FI 78700 C FI78700 C FI 78700C FI 831972 A FI831972 A FI 831972A FI 831972 A FI831972 A FI 831972A FI 78700 C FI78700 C FI 78700C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- mitomycin
- compound
- formula
- methanol
- methyl
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 35
- -1 amide acetal Chemical class 0.000 claims description 13
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 9
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 claims description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012430 organic reaction media Substances 0.000 claims description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 1
- 125000004573 morpholin-4-yl group Chemical group N1(CCOCC1)* 0.000 claims 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 96
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 68
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical class C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 57
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 30
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 22
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 9
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 9
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 8
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical class CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 6
- HYFMSAFINFJTFH-UHFFFAOYSA-N Mitomycin-A Natural products O=C1C(OC)=C(C)C(=O)C2=C1C(COC(N)=O)C1(OC)N2CC2NC21 HYFMSAFINFJTFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- HYFMSAFINFJTFH-NGSRAFSJSA-N mitomycin A Chemical compound O=C1C(OC)=C(C)C(=O)C2=C1[C@@H](COC(N)=O)[C@]1(OC)N2C[C@@H]2N[C@@H]21 HYFMSAFINFJTFH-NGSRAFSJSA-N 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 150000004645 aluminates Chemical class 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- HRHKSTOGXBBQCB-UHFFFAOYSA-N Porfiromycine Chemical compound O=C1C(N)=C(C)C(=O)C2=C1C(COC(N)=O)C1(OC)C3N(C)C3CN12 HRHKSTOGXBBQCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IWVFFVBJTCPIIG-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethoxy-1-methylpyrrolidine Chemical compound COC1(OC)CCCN1C IWVFFVBJTCPIIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- AGJSNMGHAVDLRQ-IWFBPKFRSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-amino-3-sulfanylpropanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxy-2,3-dimethylphenyl)propanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)CC1=CC=C(O)C(C)=C1C AGJSNMGHAVDLRQ-IWFBPKFRSA-N 0.000 description 2
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 2
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 2
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-RALIUCGRSA-N pyridine-d5 Chemical compound [2H]C1=NC([2H])=C([2H])C([2H])=C1[2H] JUJWROOIHBZHMG-RALIUCGRSA-N 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 2
- FBZVZUSVGKOWHG-UHFFFAOYSA-N 1,1-dimethoxy-n,n-dimethylethanamine Chemical compound COC(C)(OC)N(C)C FBZVZUSVGKOWHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SBFJSZPNSCJDKI-UHFFFAOYSA-N 1-(diethoxymethyl)piperidine Chemical compound CCOC(OCC)N1CCCCC1 SBFJSZPNSCJDKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SCNPZYFBDOEUPZ-UHFFFAOYSA-N 4-(diethoxymethyl)morpholine Chemical compound CCOC(OCC)N1CCOCC1 SCNPZYFBDOEUPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100005765 Arabidopsis thaliana CDF1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100007579 Arabidopsis thaliana CPP1 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N Cyanamide Chemical compound NC#N XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N Diazomethane Chemical compound C=[N+]=[N-] YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030453 Drug-Related Side Effects and Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010071541 Metastatic lymphoma Diseases 0.000 description 1
- UZUUQCBCWDBYCG-UHFFFAOYSA-N Mitomycin B Natural products O=C1C(OC)=C(C)C(=O)C2=C1C(COC(N)=O)C1(O)N2CC2C1N2C UZUUQCBCWDBYCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZSXGLVDWWRXATF-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide dimethyl acetal Chemical compound COC(OC)N(C)C ZSXGLVDWWRXATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KTIWMJUWJIFMRO-UHFFFAOYSA-N N1C=CC2=CC=CC=C12.N1C=CC=C1.N1C=C1 Chemical compound N1C=CC2=CC=CC=C12.N1C=CC=C1.N1C=C1 KTIWMJUWJIFMRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FIWILGQIZHDAQG-UHFFFAOYSA-N NC1=C(C(=O)NCC2=CC=C(C=C2)OCC(F)(F)F)C=C(C(=N1)N)N1N=C(N=C1)C1(CC1)C(F)(F)F Chemical compound NC1=C(C(=O)NCC2=CC=C(C=C2)OCC(F)(F)F)C=C(C(=N1)N)N1N=C(N=C1)C1(CC1)C(F)(F)F FIWILGQIZHDAQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 125000004045 azirinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 235000019365 chlortetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002038 ethyl acetate fraction Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- AGJSNMGHAVDLRQ-HUUJSLGLSA-N methyl (2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-amino-3-sulfanylpropanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxy-2,3-dimethylphenyl)propanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)CC1=CC=C(O)C(C)=C1C AGJSNMGHAVDLRQ-HUUJSLGLSA-N 0.000 description 1
- HRHKSTOGXBBQCB-VFWICMBZSA-N methylmitomycin Chemical compound O=C1C(N)=C(C)C(=O)C2=C1[C@@H](COC(N)=O)[C@@]1(OC)[C@H]3N(C)[C@H]3CN12 HRHKSTOGXBBQCB-VFWICMBZSA-N 0.000 description 1
- UZUUQCBCWDBYCG-DQRAMIIBSA-N mitomycin B Chemical compound O=C1C(OC)=C(C)C(=O)C2=C1[C@H](COC(N)=O)[C@]1(O)N2C[C@H]2[C@@H]1N2C UZUUQCBCWDBYCG-DQRAMIIBSA-N 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- SDAPXWCCSPMSKC-UHFFFAOYSA-N n-(diethoxymethyl)-n-propan-2-ylpropan-2-amine Chemical compound CCOC(OCC)N(C(C)C)C(C)C SDAPXWCCSPMSKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000002638 palliative care Methods 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000005292 vacuum distillation Methods 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D487/14—Ortho-condensed systems
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
! 78700
Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten mitosaani-johdannaisten valmistamiseksi
Keksintö koskee menetelmää uusien mitosaanijohdan-5 naisten valmistamiseksi, joiden kaava on
r2 O
. i o | R4R3N-C=N.JL ^ch2oc-b 1» T 1 Is00*3 15 jossa R2 on vety tai alempi alkyyli ja R3 ja R4 tarkoittavat alempaa alkyyliä tai ne muodostavat yhdessä typpiatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, piperidiini- tai morfo-liinirenkaan, tai R3 tai R4 ja R2 muodostavat yhdessä ryh- R2 I 3 4 .
20 män -(CH2)3“, B on amino tai -N=C-NRJR* tarkoittavat samaa kuin edellä, ja R1 on vety, metyyli tai formyyli. Nämä yhdisteet ovat mitomysiini C:n johdannaisia ja niillä on kas-vaintenvastainen vaikutus.
Systemaattinen Chemical Abstractin nimi mitosyyni 25 C: lie on £laR- (la*, 8β, 8a#, 8bft)L7-6-amino-8-£l( (aminokarbo-nyyli)oksi)metyyli7“l*la,2,8,8a,8b-heksahydro-8a-metoksi- 5-metyyli-atsiriini£2*, 3 *, 3,47“Pyrroli£l, 2-g[7indoli-4,7-dioni, jolloin atsiriinipyrroli-indolin rengassysteemi on numeroitu seuraavasti: 30 7 -18 e: 18a 4 3I |jra 35 d—iir1 2 78700
Mitomysiinikirjallisuudessa yleisesti käytössä olevan triviaalinimistön mukaan edellä mainittua rengassysteemiä, joka sisältää useita mitomysiinille luonteenomaisia substi-tuentteja, kutsutaan mitosaaniksi.
5
i? 10 I
9^,CH2OCNH2
aXK
10 e |_j>H
3 2
Mitosaani
Seuraavassa atsiriinirenkaan typpiatomi on merkitty 15 symbolilla Nla ja karbamyylin typpiatomi on merkitty symbolilla mitosaaninimitystä käytettäessä. Keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet vastaavat stereokemialli-selta konfiguraatioltaan mitomysiini C:tä.
Mitomysiini C on antibiootti, joka valmistetaan fer-20 mentaatiolla, ja sitä käytetään vatsan ja haiman hajapesäk-keisen imukudossyövän hoidossa toisten hyväksyttyjen kemo-terapeuttisten aineiden kanssa ja lievittävänä hoitona kun muut modaliteetit ovat osoittautuneet riittämättömiksi (Mu-tamycin® Bristol Laboratories, Syracuse, New York 13201, 25 Physicians'Desk Reference 35th Edition, 1981, ss. 717 ja 718). Mitomysiini C ja sen valmistus fermentaatiolla on kuvattu US-patentissa 3 660 578.
Mitomysiinien A, B ja C ja porfiromysiinin rakenteet ovat ensimmäisenä julkaisseet J. S. Webb et ai., Lederle 30 Laboratories Division American Cyanamid Company, J. Amer. Chem. Soc. j)4, 3185-3187 (1962) . Yksi tässä rakennetutkimuksessa käytetty kemiallinen muutos mitomysiinin A:n ja mitomysiini C:n yhdistämiseksi oli aikaisemman, 7-9Ä-di-metoksimitosaanin muuttaminen reaktiolla ammoniakin kanssa 35 jälkimmäiseksi, 7-amino-9Ä-metoksimitosaaniksi. Mitomysiini A:n 7-metoksiryhmän syrjäyttäminen on osoittautunut 3 78700 erittäin mielenkiintoiseksi reaktioksi mitomysiini C:n kasvaimia hävittävien aktiivisten johdannaisten valmistuksessa. Seuraavat artikkelit ja patentit käsittelevät kaikki mitomysiini A:n muuttamista 7-substituoiduksi aminomitomy-5 siini C:n johdannaiseksi, jolla on kasvaimia hävittävää aktiivisuutta.
Matsui et ai. "The Journal of Antibiotics", XXI, 189-198 (1968).
Kinosnita et ai. "J. Med. Chem." IA, 103-109 (1971).
10 Iyengar et ai., "J. Ghem. 2A 975-981 (1981).
Iyengar, Sami Renters, and Bradner, Abstracts of Papers Annual Meeting of the American Chemical Society,
Las Vegas, Nevada, March 1982, Abstract No. MEDI 72.
Seuraavat patentit käsittelevät 7-substituoidun ami-15 nomitosaanin johdannaisten valmistamiseksi mitomysiini A:n, mitomysiini B:n tai sen N*a-substituoidun johdannaisen reaktiolla primäärisen tai sekundäärisen amiinin kanssa: US 3 332 944, US 3 420 846, US 3 450 705, US 3 514 452, US 4 231 936 ja US 4 268 676.
20 Mitomysiini C:n johdannaisia, joilla on substituoitu aminosubstituentti 7-asemassa, on myös valmistettu suoralla biosynteesillä, siis täydentämällä fermentaatioliemiä sarjalla primäärisiä amiineja ja suorittamalla tavanomainen mitomysiinin fermentaatio (C. A. Claridge et ai. Abst.
25 of the Annual Meeting of Amer. Soc. for Microbiology 1982. Abs. 028).
Mitomysiini C on fermentaatiolla valmistettu perus-mitomysiini ja on kaupallisesti saatava muoto. Nykyinen teknologia mitomysiini C:n muuttamiseksi mitomysiini A:ksi 30 käytettäväksi puolisynteettisten mitomysiini C:n kaltaisten aminoyhdisteiden valmistukseen edellä mainittuihin julkaisuihin viitaten käsittää mitomysiini C:n hydrolyysin vastaavaksi 7-hydroksimitosaaniksi, erittäin pysymättömäksi yhdisteeksi, ja sen jälkeen tämän aineen metyloinnin diat-35 sometaanilla, joka on erittäin vaarallinen aine käsitellä. Eräs yritys välttää diatsometaanin käyttö metyloitaessa 4 78700 4 7-0-deraetyylimitomysiini A:ta, joka on valmistettu mitomy-siini C:n hydrolyysilla, on 7-asyylioksimitosaanien käyttö (Kyowa Hakko Kogyo KK JP-patentti J5 6073-085, Farmdoc No. 56227 D/31).
5 Nyt on havaittu, että kaavan I mukaisilla mitosaani- johdannaisilla on voimakas kasvaintenvastainen vaikutus.
Kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa siten, että mitomysiini C, jonka kaava on
10 O
^H2OCONH2 T 1 i'0™3 15 I Ä tai sen N -substituoitu johdannainen saatetaan reagoimaan amidiasetaalin kanssa, jonka kaava on 20 R3 R2 \ I o ^N - C - ORö
I O
R4 OR8 25 jossa R2, R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edellä ja R8 on alempi alkyyli, vedettömässä nestemäisessä, orgaanisessa reaktioväliaineessa lämpötilassa 40-65°C; ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste, jossa R^· on vety, muutetaan kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R* 30 on metyyli tai formyyli.
Reaktio suoritetaan edullisesti nestemäisessä vedettömässä reaktioväliaineessa, jossa laimennusaineena on neste, joka on reaktio-olosuhteiden kanssa yhteensopiva. Edullisesti, jälkimmäinen on alempi halogenoitu alifaattinen ; 35 hiilivety tai alempi alkanoli tai erityisesti näiden kah den seos. Kloroformi ja metanoli ja niiden seokset ovat κ 78700 aivan sopivia. Reaktio suoritetaan 40°-65°C:n lämpötilassa riittävän pitkän ajan, jotta reaktio menee loppuun asti.
Kun käytetään suurta ylimäärää (noin 60-kertaista) asetaalia, vallitseva tuote, joka muodostuu, on bis-amidii-5 nituote. N^a-formyylijohdannainen muodostuu joskus sivutuotteena. Kuitenkin käytettäessä rajoitettua (noin 10-ker-taista) määrää asetaalia additiossa bis-amidiinituotteeseen muodostuu myös mono-amidiinituote. Edellä mainittujen reaktiotuotteiden seokset erotetaan helposti kromatografiällä. 10 Sopivia menetelmässä käytettäviä amidiatsetaaleja on kuvattu julkaisussa Tetrahedron, voi. 35 (1979), s. 1685.
Kaavan I mukaisten uusien mitosaanijohdannaisten kas-vaintenvastaiset ominaisuudet ilmenevät seuraavasta.
Taulukossa I on esitetty tulokset laboratoriokokeista 15 CDF^-naarashiirillä, joille oli istutettu vatsakalvon sisään kasvainsiirrännäinen, jossa oli 10^ P-388 hiirileuke-mian vesivatsasaolua ja hoidettu erilaisilla annoksilla joko kaavan I mukaista koe-yhdistettä tai mitomysiini C:tä. Yhdisteet annettiin ruiskeena vatsakalvon sisään. Kuuden 20 hiiren ryhmiä käytettiin jokaisella annostustasolla ja niitä hoidettiin yhdellä ainoalla annoksella yhdistettä vain ensimmäisenä päivänä. Jokaiseen koesarjaan sisältyi ryhmä, jossa oli kymmenen suolaliuoksella hoidettua vertailuhiir-tä. Mitomysiini C:llä hoidettuja ryhmiä otettiin mukaan 25 positiivisena vertailuna. Käytettiin 30-päiväistä pöytäkirjaa, jotta eloonjäämisaikojen keskiarvo päivissä tulisi määrätyksi jokaiselle hiiriryhmälle ja eloonjääneiden lukumäärä 30 päivän kuluttua tulisi merkityksi. Hiiret punnittiin ennen hoitoa ja jälleen kuudentena päivänä. Painon-30 muutosta pidettiin lääkkeen myrkyllisyyden mittana. Käytettiin hiiriä, jotka painoivat 20 grammaa jokainen ja korkeintaan noin 2 gramman painonmenetystä ei pidetty liiallisena. Tulokset määrättiin % T/C:na, joka on hoidetun ryhmän eloonjäämisaikojen keskiarvon suhde suolaliuoksella hoide-35 tun vertailuryhmän eloonjäämisaikojen keskiarvoon kertaa 100. Suolaliuoksella hoidetut vertailueläimet kuolivat ta- 6 78700 vallisesti yhdeksän päivän sisällä. "Maksimiteho" seuraa-vassa taulukossa on ilmaistu % T/C:na ja sen vaikutuksen antanut annos on ilmoitettu. Suluissa olevat arvot ovat arvoja, jotka on havaittu mitomysiini C:llä positiivisena 5 vertailuna samassa kokeessa. Näin voidaan arvioida näiden aineiden suhteellisen aktiivisuuden mitta mitomysiini C:hen verrattuna. Minimitehon % T/C:na harkittiin olevan 125. Mi-nimitehoiseksi annokseksi ilmoitettiin seuraavassa taulukossa se annos, joka antoi % T/C:lle suunnilleen arvon 125. 10 Kaksi arvoa, jotka on annettu jokaisessa tapauksessa sarakkeessa "keskimääräinen painonmuutos" ovat tässä järjestyksessä keskimääräinen painonmuutos hiirtä kohden maksimi-tehoisella annoksella ja minimitehoisella annoksella.
Taulukko I
15 P-388 muriinileukemian ehkäisy
Yhdiste Maksimiteho Minimite- Keskimääräi- „ . „ m/_ 1 hoinen nen painon no_annos muutos2 V (1) 311 (244) 6,4 (3,2) <0,2 -1,9, -0,2 183 (272) 6,4 (3,2) 0,1 -1,0, +0,3 on VI (1) 233 (244) 6,4 (3,2) <0,2 -0,1, +0,1 VII (2) 141 (224) 25,6 (3,2) 0,8 -1,2, +0,2 IX (4) 165 (224) 12,8 (3,2) 0,2 -0,7, +0,8 X (5) 300 (224) 12,8 (3,2) 0,2 -2,1, ei yh tään 25 XIV (3) 233 (272) 12,8 (3,2) 0,2 -3,8, +0,7 XV (3) 144 (272) 25,6 (3,2) 6,4 -1,4, +0,2 XXI (6) 189 (183) 1,6 (3,2) 0,025 -0,5, -0,1 XXIII (7) 194 (319) 12,6 (3,2) 0,2 -1,2, +0,2 XXV (8) 188 (331) 25,6 (4,8) 0,4 -2,2, +0,1 30 * mg/kg ruumiinpainosta ^ grammaa per hiiri, päivät 1-6, maksimi- ja minimitehoisella annoksella 7 78700
Kaavan I mukaiset bis-amidiiniyhdisteet muodostavat erityisen mielenkiintoisen kasvaintenvastaisten yhdisteiden ryhmän, kuten edellä esitetyt yhdisteiden V, VI, VII, IX, X ja XIV osoittavat.
5 Taulukossa II on esitetty tulokset kokeista, joissa käytettiin hiirissä kasvanutta Bl6-melanoomaa. BDF^-hiiriin istutettiin vatsakalvon sisään kasvainsiirrännäinen. Käytettiin 60-päiväistä pöytäkirjaa. Kymmenen hiiren ryhmää käytettiin jokaiselle testatulle annostusmäärälle ja eloon-10 jäämisaikojen keskiarvo jokaiselle ryhmälle määrättiin.
Vertailueläimet, joille oli suoritettu istutus samoin kuin testieläimille ja hoidettu ruiskevälineillä ilman lääkettä, osoittivat eloonjäämisaikojen keskiarvon olevan 21 päivää. Eloonjäämisajan suhdetta vertailtavien vastaavaan aikaan 15 (% T/C) käytettiin tehokkuuden määränä, ja maksimitehoinen annos ja minimitehoinen annos jokaiselle koeyhdisteelle määrättiin. Minimitehoinen annos määriteltiin sellaiseksi annokseksi, joka antaa % T/C:lie arvon 125. Jokaista an-nostustasoa varten koe-eläimet hoidettiin koeyhdisteellä 20 päivinä 1, 5 ja 9 vatsakalvon sisäkautta. Keskimääräistä painonmuutosta osoitettuna päivänä maksimitehoisella annoksella ja minimitehoisella annoksella käytettiin myrkyllisyyden määränä. 2 gramman painonmenetys 20 g:n hiirellä ei ollut liiallinen.
8 78700
Taulukko II
Bl6-melanooman ehkäisy
Yhdiste Maksimiteho Minimite- Keskimäärä!- 5 Esimerkki hoinen nen painon- no_% T/C_annos_annos_muutos (päivä) V (1) >298 (256)* 0,8 (3,2)* <0,2 +0,5, -0,2 (5) X (5) >295 (198) 2,0 (3,0) <2,0 -0,4, -0,4 (6) XXI (6) >295 (198) 0,4 (3,0) <0,2 -0,2, -1,8 (6) 10 * arvot suluissa ovat mitomysiini C-vertailuarvot
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä. Sulamispisteet rekisteröitiin Thomas-Hooverin kapil-15 laarisella sulamispisteiden mittauslaitteella ja ovat korjaamattomia. Lämpötilat ilmoitetaan Celsius-asteina. Proto-niydinmagneettiset resonanssi (NMR) -spektrit rekisteröitiin Varian XL100 spektrometrillä pyridiini-dg:ssä ellei toisin mainita. Infrapuna (IR)-spektrit mitattiin Beckman 20 4240-spektrofotometrillä ja näyte puristettiin pelletiksi kaliumbromidin kanssa. IR-luvut ovat Vmax cm“*:ssä. Näkyvän UV-valon spektrit rekisteröitiin Varian-Cary 219-spektrofotometrillä.
Ohutkerroskromatografia (tie) suoritettiin 0,25 mm:n 25 esipäällystetyillä silikageelilevyillä käyttäen UV-valoa näkyväksi tekevänä keinona. Välähdyskromatografia suoritettiin käyttäen Silica Voelmia (32-63 yura). Liuottimet haihdutettiin alipaineessa ja 50°C:een alapuolella.
9 73700
Esimerkki 1
Yhdiste V
7-/7Dimetyyliamino)metyleeni7amino-N^ (dimetyyli-amino)-metyleeni-9a-metoksimitosaani Yhdiste VI
5 7-i/7Dimetyyliamino)metyleeni7amino-N^ (dimetyyli-amino)-metyleeni-N^a-formyyli-9a-metoksimitosaani o ° NH2VA>_T.^CQJH2 - XXir3 [f |_J^NH (CH30)2CBN(C3I3)2
Mitomysiini C
15 Oi? (CH3) 2NCH=N il CH.OQJ-CHN (CH,), ° |_L»8
V
20 o (CH3)2NCH=N^5 CH2OCN=CHN(CH ) O L**=*> 25 -
VI
Suspensioon, jossa oli 500 mg (1,50 mM) mitomysiini C:tä 25 ml:ssa kloroformia lisättiin kaiken kaikkiaan 9,6 ml (2,4 mlsn erissä 0, 18, 21 ja 23 tunnin kuluttua) 3C Ν,Ν-dimetyyliformamididimetyyliasetaalia ja suspensiota sekoitettiin noin 50°C:ssa 41 tuntia. Haihduttaessa liuotinta ja reagenssiylimäärää alipaineessa, havaittiin tummanvihreä jäännös; tie (metyleenikloridi/metanoli 20:1) ilmaisi mitomysiini C:n puuttumisen ja kahden uuden 35 vihreän komponentin läsnäolon (Rf = 0,16 ja 0,22. Pää- komponentti (Rf = 0,16) eristettiin välähdyskromatografi-alla; käyttäen metyleenikloridi/metanoli 20:1 -seosta ίο 78 700 eluenttina, vihreänä kiinteänä aineena (340 mg 51,5 %), joka liuotettaessa dietyylieetteriin ja heksaania lisättäessä tuotti yhdisteen V tummanvihreänä amorfisena pulverina.
5 NMR (pyridiini d, 6) ; 2,18 (s, 3H) , 2,70 (bs, 1H) , 2,76 (s, 3H), 2,82 (s, 3H, 2,86 (s, 6H), 3,22 (s, 3H, 3,30 (bs, 1H), 3,60 (d, J=12Hz), 4,12 (dd, 1H, J=10, 4Hz), 4,43 (d, 1H, J=12Hz), 4,90 (bs, 1H), 5,10 (t, 1H, J=10 Hz), 5,52 (dd, 1H, J=10, 4Hz), 7,85 (s, 1H), 8,64 10 (s, 1H).
IR(KBr)V___, cm"1: 3300, 2930, 1675, 1620, 1545, ΙΠαΧ 1230, 1060.
UV(H~0)/k , nm: 390 ja 244
Z ula A
Analyysi:
Laskettu Co1HoqN,0c:lle: C, 56,71; H, 6,08; N, 18,90 15 z 1 zö b 5 Löydetty: C, 56,20; H, 6,28, N, 17,88.
Sivukomponentti (Rf = 0,22), eristetty (180 mg, 25,35 %) amorfisena kiinteänä aineena saostuksessa dietyy- lieetteristä ja heksaanista, tunnistettiin yhdisteeksi VI. t n NMR (pyridiini d5, <S) : 2,20 (s, 3H, 2,60-3,00 (3 singlettiä, 12H), 3,2 (s, 3H), 3,65 (m, 2H), 4,04 (d, 1H, J=4Hz), 4,16 (dd), 1H, J=12, 4Hz), 4,60 (d, 1H, J=13Hz), 4,86 (t, 1H, J = 12Hz), 4,90 (s, 1H), 5,48 (dd, 1H, J=12, 4Hz), 7,90 (s, 1H), 8,64 (s, 1H), 9,06 25 (s, 1H.
IR(KBr)^ , cm"1; 2490, 2860, 1698, 1630, 1600,
IQdX
1540, 1250, 1060.
UV(H?0) , Amax» n®: 390 3a 244 Analyysi: ^ Laskettu ^22^8^6^6 51-1-6 5 55,89; H, 5,93; N, 17,78
Löydetty: C, 55,41; H, 5,96; N, 16,99. Yhdisteiden V ja VI liuoksista joko etyyliasetaatissa tai Ν,Ν-dimetyyliformamididimetyyliasetaalissa todettiin niiden seistyä huoneenlämmössä yli 10 tuntia tlc:llä, 35 että yhdiste VI (Rf = 0,22) oli muuttunut yhdisteeksi V
(Rf = 0,16) tuottaen liuoksen, joka oli erittäin rikastunut jälkimmäisen suhteen.
u 78700
Esimerkit 2-5 suoritettiin esimerkin 1 menetelmän mukaan käyttäen alla esitettyjä muunnoksia, jotta saataisiin tämän keksinnön erilaisia additioyhdisteitä.
Esimerkki 2
5 Yhdiste VII
— “10
7-/(Di-isopropyyliamino)metyleeni/amino-N
(di-isopropyyliamino)-metyleeni-9a-metoksimitosaani
Suspensiota, joka sisälsi mitomysiini C:tä (200 mg, 0,06 mM) N,N-di-isopropyyliformamididietyyliasetaalissa 10 (3 ml) kuumennettiin sekoittaen 53°C:ssa 15 tuntia.
Reaktioseos kaadettiin 50 ml:aan vettä ja uutettiin etyyliasetaalilla (3 x 3 ml). Yhdistetty orgaaninen uute kuivattiin (NajSO^) ja haihdutettiin, jotta saatiin tummanvihreä siirappi, tie (metyleenikloridi/metanoli 15 10:1) paljasti vihreän pääkomponentin, jonka Rf = 0,43 sekä nopeammin liikkuvia (Rf = 0,45-0,50) epäpuhtauksia.
Pääkompomentti VII eristettiin tummanvihreänä kiinteänä aineena (156 mg, 46,8 %) kahdella välähdyskromatografia- käsittelyllä käyttäen metyleenikloridi/metanolia 20:1 20 -seosta eluointiliuoksena.
NMR (CDC13,&): 1,10-1,50 (5 singlettiä, 24H), 1,94 (s, 3H), 2,78 (dd, 1H, J=4 2Hz), 3,05 (d, 1H, J=4Hz), 3,22 (s, 3H), 3,60 (m, 5H), 3,75 (dd, 1H, J=10, 4Hz) , 4,24 (d, 1H, J=12 Hz), 4,56 (t, 1H, J=10 Hz), 25 4,88 (dd, 1H, J=10, 4Hz), 7,83 (s, 1H), 8,67 (s, 1H).
IR(KBr) ,Y , cm-1 : 3320, 2990, 2940, 1680, 1630,
IuclX
1600, 1550, 1235, 1060.
UV(MeOH) Amax, nm: 246 ja 393.
Analyysi: 30 Laskettu C29H44N6°5: c' 62,55; H, 7,91; N, 15,10 Löydetty: C, 62,03; H, 7,80; N, 16,60.
i2 78700
Esimerkki 3
Yhdiste XIV
- - 10 7-/(Dimetyyliamino)metyleeni/amino-N -(dimetyyli- “ 1a amino)-metyleeni-9a-metoksi-N -metyylimitosaani 5 Tässä esimerkissä porfiromysiini (N^a-metyylimito- mysiini C), 130 mg, (0,37 mM) substituoitiin lähtöaineena reaktiossa 0,8 ml:n (1,5 mM) kanssa N,N-dimetyyli-formamididimetyyliasetaalia käyttäen 10 ml kloroformia ja 2 ml metanolia reaktioliuottimena ja 50 minuutin 10 reaktioaikaa 50°C:ssa. Yhdiste XIV havaittiin siirappina reaktioliuottimen haihdutuksen jälkeen; puhdistettiin välähdyskromatografiällä käyttäen 20 g silikageeliä ja metyleenikloridi/metanoli (20:1)-seosta eluointiliuotti-mena: 15 NMR(pyridiini d5,<i) ; 2,22 (bs, 4H) , 2,28 (s, 3H) , 2,70 (d, 1H, J=4Hz) 2,80 (s, 3H), 2,84 (s, 3H), 2,90 (s, 6H), 3,20 (s, 3H), 3,52 (dd, 1H, J=2, 12Hz) 4,10 (dd, 1H, J=4, 11Hz), 4,38 (d, 1H, J=12Hz), 4,92 (t, 1H, J=11Hz) 4,96 (bs, 1H), 5,46 (dd, 1H, J=4, 11Hz), 20 7,86 (s, 1 H) , 8,70 (s, 1H).
Rf = 0,53 ohutkerrosklromatografiässä 9:1 mety-leenikloridi/metanolissa.
IR (KBr) y , cm“1: 2930, 1680, 1620, 1545, 1230,
lllaX
: 1115.
25 UV(MeOH) A , nm: 386 ja 243, • max
Analyysi:
Laskettu ^22^30^0^:He: C, 57,60; H, 6,55; N, 18,33 Löydetty: C, 57,11; H, 6,11, N, 17,99.
Tämä menetelmä tuotti yhdisteen XV, 7-amino-N^- 1a 30 dimetyyliaminometyleeni-9a-roetoksi-N -metyylimitosaa-nin sivutuotteena 30 %:n saannolla, tie Rf = 0,40 (metyleenikloridi/metanoli 9:1).
MMR(pyridiini d,., ): 2,02 (s, 3H, 2,16 (dd, 1H, J=2, 5Hz); 2,25 (s, 3H, 2,66 (d, 1H, J=5z), 2,76 (s, 35 3H), 2,86 (s, 3H), 3,18 (s, 3H), 3,51 (dd, 1H, J=2, 12Hz), 4,08 (dd, 1H, J=4, 10Hz), 4,50 (d, 1H, J=10Hz), 78700 13 4.90 (t, 1H, J=10Hz), 5,05 (bs), 5,43 (dd, 1H, J=4, 10 Hz), 8,70 (s, 1H).
IR (KBr)V , cm-1: 3430, 3330, 3270, 2940, 2960, mdx 1690, 1625, 1553, 1330, 1125.
5 UV(MeOH)A , nm: 358, 244 ja 216.
max
Analyysi:
Lasketttu 9H25N5O5:lie: C, 56,53; H, 6,20; N, 17,38 Löydetty; C, 54,68; H, 6,13; N, 16,59.
Esimerkki 4
10 Yhdiste IX
- - 10 9a-Metoksi-7-/ 1-piperidinyylimetyleeni/amino-N - (1-piperidinyylimetyleeni)mitosaani N-(Dietoksimetyyli)piperidiinin, 3 ml, ja mito- mysiini C:n, 200 mg, annettiin reagoida 60°C:ssa 2,5 15 tuntia kloroformiliuoksessa (3 ml). Tuotetta havaittiin 27,6 %:n saanto, tic Rf = 0,20 (metyleenikloridi/ metanoli 20:1).
NMR(pyridiini d^,6): 1,38 (bs, 12H), 2,20 (s, 3H), 2,80 (bs, 1H), 3,24 (s, 3H), 3,00-3,40 (m, 5H) , 3,40-3,80 20 (m, 5H), 4,13 (dd, 1H, J=10, 4Hz), 4,45 (d, 1H, J=12Hz), 4.90 (bs, 2H), 5,12 (t, 1H, J=Hz), 5,56 (dd, 1H, J=10 4Hz), 7,87 (s, 1H), 8,70 (s, 1H).
IR(KBr)V , cm-1; 3300, 2950, 2870, 1680, 1630,
luaX
1610, 1550, 1200, 1070.
25 UV(Ho0)A . nm; 394 ja 246.
2 max
Analyysi:
Laskettu :lle; C, 61,79; H, 6,87; N, 16,02 Löydetty: C, 61,01; H, 6,85; N, 15,34. N1a-formyylijohdannainen edellä mainitusta ainees- 1 η m 30 ta, yhdiste VIII:sta, N -formyyli-9a-metoksi-7-/ 1-piperi- 10 ” dinyylimetyleeni/amino-N -(1-piperidinyylimetyleeni)-mitosaani havaittiin pääkomponenttina 43 %:n saannolla, tie Rf = 0,25 (metyleenikloridi/metanoli 20:1).
NMR (pyridiini d^,^): 1,38 (bs 12H), 2,23 (s, 3H) , 35 3,00-3,40 (m, 4H), 3,23 (s, 3H), 3,40-3,90 (m, 6H), 4,07 (d, 1H, J=4Hz), 4,18 (dd, 1H, J=11, 4Hz), 4,63 (d, 1H), i4 78700 4,90 (t, 1H, J=11Hz), 4,94 (bs, 1H), 5,54 (dd, 1H, J-11, 4Hz), 7,94 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 9,08 (s, 1H).
IR(KBr)tf , cm'1: 2490, 2860, 1698, 1630, 1600,
IClctX
1540, 1250, 1060.
5 UV(H„0)A . nm: 394 ja 247.
a ΓΠαΧ
Analyysi:
Laskettu : He: C, 60,08; H, 6,52; N, 15,21 Löydetty: C, 59,99; H, 6,17; N, 15,07. Esimerkki 5
10 Yhdiste X
9a-Metoksi-7/Tl-morfoliini)metyleeni7amino-N1^-(1-morfOliini)-metyleenimitosaani
Sekoitettu suspensio, joka sisälsi mitomysiin C:tä (200 mg, 0,6 mM) kloroformissa (10 ml) ja N-dietoksimetyy-15 limorfoliinia (4 ml), kuumennettiin noin 53°C:ssa 42 tuntia. Reaktioseos konsentroitiin siirapiksi korkeassa paineessa. Karkea välähdyskromatografiaerotus (metyleeni-kloridi/metanoli 25:1) suoritettiin vihreiden komponenttien eristämiseksi reagenssiylimäärästä. Yhdistetyt vih-20 reät komponentit liuotettiin 20 ml:aan etyyliasetaattia, ja pestiin vedellä (3 x 20 ml). Yhdistetyt pesuliuokset uutettiin uudelleen etyyliasetaatilla (3 x 15 ml). Kaikki etyyliasetaattifraktiot yhdistettiin, kuivattiin (Na2SO^) ja haihdutettiin tummanvihreäksi siirapiksi, jonka tie 25 (metyleenikloridi/metanoli 10:1) ilmaisi selvästi erotet tavan vihreän komponentin Rf = 0,33:ssa sekä useita vihreitä epäpuhtauksia (Rf 0,35-0,40). Välähdyskromatografi-assa komponentti Rf 0,33:sta eristettiin (130 mg, 56,8 %) tummanvihreänä kiinteänä aineena, joka luonnehdittiin 30 yhdiste X:ksi.
NMR (CDC13,6): 1,91 (s, 3H) , 2,80 (bs, 1H) , 3,13 (d, 1H, J=2Hz), 3,22 (s, 3H), 3,30-3,94 (m, 18H), 4,20 (d, 1H, J=12Hz), 4,40 (bs, 1H), 4,54 (t, 1H, J=10Hz), 4,88 (dd, 1H, J=10 Hz), 7,74 (s, 1H), 8,51 (s, 1H).
35 IR(KBr)y , cm""1 : 3300, 2970, 2920, 1680, 1625 , max 1550, 1235, 1070.
15 73700 UV(MeOH)^max, nm: 386 ja 244.
Analyysi:
Laskettu ^25032^^75 ^e: C 56,78; H 6,06; N 15,90 Löydetty: C 53,07; H 6,03; N 15,37.
5 Esimerkki 6
Yhdiste XXI
9a-metoksi-7-(1-morfoliinimetyleeni)aminomitosaani O OCONH2
O I_L^H
15
Mitomysiini C:hen (600 mg, 1,8 mmol) suspendoituna kloroformiin (30 ml) lisättiin 4-dietoksimetyylimorfoliinia (12,5 ml) ja syntyvää suspensiota kuumennetaan 58°C:ssa 20 48 tuntia. Kun 48 tuntia oli kulunut TLC (20 % MeOH
CH2Cl2:ssa) ilmaisi että reaktio oli epätäydellinen. Liuos konsentroitiin alipaineessa ja saatuun siirappiin lisättiin vettä (100 ml). 20 minuutin sekoittamisen jälkeen tummanvihreä liuos uutettiin metyleenikloridilla (5 x 50 ml), ja 25 yhdistetty uute kuivattiin ja konsentroitiin siirapiksi. Tähän siirappiin, metanolissa (20 ml), lisättiin aminodi-fenyylimetäänia (6,5 ml), ja syntyvää liuosta sekoitettiin 30-35°C:ssa 18 tuntia. Ohutkerroskromatografia (20 % MeOH C^C^sssa) paljasti yhden vihreän päävyöhykkeen sekä hi-30 taamman purppuranpunaisen sivuvyöhykkeen. Liuos konsentroitiin alipaineessa, ja saatu siirappi puhdistettiin tavallisella välähdyskromatografiamenetelmällä, jolloin havaittiin otsikon yhdiste tummanvihreänä amorfisen kiinteänä aineena (75 mg, 10 %). Analyysinäyte saatiin saostamalla 35 se metyleenikloridiliuoksesta n-heksaanilla.
78700 16 NMR (pyridiini d58): 2,16 (s, 3H), 2,76 (dd, 1H, J=5 ja 1Hz), 3,16 (d, 1H, J=5Hz), 3,24 (s, 3H), 3,28-3,80 (m, 10H), 4,02 (dd, 1H, J=10 ja 4Hz), 4,40 (d, 1H, J=12Hz), 5,06 (5, 1H, J=10Hz), 5,46 (dd, 1H, J=10 ja 4Hz), 7,90 (s, 5 1H) .
IR (KBr)ymax, cm"1: 3360, 3280, 2960, 2920, 1720, 1600, 1520, 1230, 1050.
UV(MeOH)^max, nm: 384 ja 234.
Analyysi: 10 Laskettu Cjo^NgOg:lie: C 55,64; H 5,80; N 16,23 Löydetty: C 55,07; H 5,55; N 15,88.
Esimerkki 7
Yhdiste XXIII
Ί-Cl- (dimetyyliamino) etylideeniJamino-N1®-^- (dimetyyli-15 amono)etylideeni7-9a-metoksimitosaani X 73 20 CE3^__ O J N(CH3)2 "Οζος 25
Mitomysiini C:n suspensio 600 mg (1,79 mM) 2 ml:ssa metanolia valmistettiin ja käsiteltiin 3 ml:11a N,N-dime-tyyliasetamididimetyyliasetaalia. Suspensiota kuumennettiin 30 75-80°C:ssa sekoittaen 2 tuntia. Tässä vaiheessa TLC
(CH2Cl2/metanoli 10:1) ilmaisi, että lähes kaikki mitomysiini C oli kulunut reaktioon. Tuote ilmestyi vihreänä vyöhykkeenä. Liuotin ja haihtuvat aineet poistettiin konsentroimalla reaktioseos kuivaksi alipaineessa, jolloin 35 saatiin siirappi, joka liuotettiin metyleenikloridiin ja ladattiin silikageelipylvääseen (40 g silikageeliä), ja 17 78700 pylväs kehitettiin 1 % metanolilla metyleenikloridissa (200 ml), 2 % metanolilla metyleenikloridissa (200 ml), ja 5 % metanolilla metyleenikloridissa (400 ml). Fraktiot, jotka sisälsivät tuotetta edustavaa vihreätä vyöhykettä, 5 yhdistettiin ja konsnetroitiin amorfiseksi kiinteäksi aineeksi, joka painoi 110 mg (13 %:n saanto). Tämä aine liuotettiin 2 ml:aan asetonia ja saostettiin liuoksesta heksaa-nilisäyksellä. Tuote kerättiin suodattamalla.
Analyysi: 10 Laskettu C23**32^6^5:'^e: C 58,46; H 6,83; N 17,79 Löydetty: C 58,89; H 6,89; N 17,64. UV(MeOH)amax, nm: 235, 364 IR (KBr)vmax# cm-1: 3440, 3295, 2925, 1770, 1660, 1620, 1580, 1550, 1300, 1055.
15 *H NMR-spektri pyridiini d5:ssä on yhdenmukainen ot sikon yhdisteen rakenteen kanssa.
Esimerkki 8
Yhdiste XXV
7-£K l-metyyli-2-pyrrolidinylideeni) amino7-N^®-Z~(l“metyyli-20 2-pyrrolidinylideeni) amino7”9a“nietoksimitosaani
„ O- 'kA_=AAA
'·· XJOc· CH3 T _ 30 2,2-dimetoksi-l-metyylipyrrolidiini (H. Eilingsfeld et ai. Angew. Chem. J72, 836 (1960)), 1,5 g (10,3 mM) ja 280 mg mitomysiini C:tä (0,34 mM) 20 ml:ssa metanolia kuumennettiin 55°C:ssa viisi tuntia. Reaktioseosta tutkittiin ohutkerroskromatografialla aluminaattilevyllä käyttäen me-35 tyleenikloridi/metanoli 97:3 -seosta liuottimena. TLC paljasti vihreän päätäplän, joka edusti tuotetta ja sinisen 78700 18 sivutäplän, joka edusti raitomysiini C-lähtöainetta. Liuotin poistettiin vakuumitislaamalla 40°C:ssa ja jäännös liuotettiin metyleenikloridiin ja ladattiin 4,5 cm:n pylvääseen, joka sisälsi 150 g aluminaattia. Eluutio tapahtui 50 ml:11a 5 metyleenikloridia, jonka jälkeen 600 ml:11a 1 % metanolia metyleenikloridissä. Karkeat epäpuhtaudet poistettiin, mutta puhtaita fraktioita ei eristetty. Yhdistetty eluaatti konsentroitiin tislaamalla 20°C:ssa öljymäiseksi jäännökseksi, joka ilmeissti sisälsi hiukan 2,2-dimetoksi-l-metyy-10 lipyrrolidiiniä. Tämä aine käsiteltiin jälleen kromatogra-fiällä aluminaattipylväässä (25 g aluminaattia) käyttäen 200 ml metyleenikloridia, ja sen jälkeen 100 ml:11a 1 % metanolia metyleenikloridissä. Tämä johti 2,2-dimetoksi-l-metyylipyrrolidiinin lohkeamiseen, ja syntyi joukko frak-15 tioita, jotka sisälsivät pieniä epäpuhtauksia ja useita puhtaita fraktioita, jotka todettiin TLC:llä (yksi vihreä täplä) halutuksi tuotteeksi, saanto 53 mg.
Claims (4)
- 25 O H2Nv CH2OCONH2 T X L'001*3 aa\^Ci> 30 tai sen N*a-substituoitu johdannainen saatetaan reagoimaan amidiasetaalin kanssa, jonka kaava on R3 R2
- 35. C - OR8 R4 OR8 78700 20 jossa R^, ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä ja R® on alempi alkyyli, vedettömässä nestemäisessä, orgaanisessa reaktioväliaineessa lämpötilassa 40-65°C; ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste, jossa R1 on 5 vety, muutetaan kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa on metyyli tai formyyli. 2i 78700 Förfarande för framställning av terapeutiskt använd-bara mitosanderivat med formeln 5 R2 O f O II r4r3n-c=n^X^ ^ch2oc-b T\ \ där R2 är väte eller lägre alkyl och R3 on R4 betecknar 15 lägre alkyl eller de bildar tillsammans med kväveatomen, tili vilken de är bundna, en piperidin- eller morfolinring, eller R3 eller R4 och R2 bildar tillsammans gruppen R2 -(CH2)3- B är amino eller -N=C-NR3R4, där R2, R3 och R4 20 betecknar samma som ovan, och R^ är väte, metyl eller formyl, kännetecknat därav, att mitomysin C med formeln O
- 25 H2N^^^ ^CH2OCONH2 T ϊ ί'™3 CH3V^Nl_]>h 30 eller ett N*a-substituerat derivat därav, omsätts med en amidacetal med formeln R3 R2 N. I 8
- 35. C - 0R° R4 OR8
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI854884A FI854884A7 (fi) | 1982-06-04 | 1983-06-01 | Menetelmä mitosaanijohdannaisten valmistamiseksi. |
| FI854882A FI854882A0 (fi) | 1982-06-04 | 1985-12-11 | Foerfarande foer framstaellning av 7-(substituerad amino)-9a-metoksimitosanderivat. |
| FI854883A FI854883A7 (fi) | 1982-06-04 | 1985-12-11 | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara mitosanderivat. |
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US38514982A | 1982-06-04 | 1982-06-04 | |
| US38514982 | 1982-06-04 | ||
| US06/492,903 US4487769A (en) | 1982-06-04 | 1983-05-09 | Amidines |
| US49290383 | 1983-05-09 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI831972A0 FI831972A0 (fi) | 1983-06-01 |
| FI831972L FI831972L (fi) | 1983-12-05 |
| FI78700B FI78700B (fi) | 1989-05-31 |
| FI78700C true FI78700C (fi) | 1989-09-11 |
Family
ID=27010906
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI831972A FI78700C (fi) | 1982-06-04 | 1983-06-01 | Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara mitosanderivat. |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4487769A (fi) |
| KR (1) | KR870000932B1 (fi) |
| AR (1) | AR241438A1 (fi) |
| AT (1) | AT394853B (fi) |
| AU (1) | AU571179B2 (fi) |
| CA (1) | CA1230333A (fi) |
| CH (1) | CH657856A5 (fi) |
| DD (1) | DD210275A5 (fi) |
| DE (1) | DE3319992A1 (fi) |
| DK (2) | DK161023C (fi) |
| ES (3) | ES8407493A1 (fi) |
| FI (1) | FI78700C (fi) |
| FR (1) | FR2528048B1 (fi) |
| GB (1) | GB2121796B (fi) |
| GR (1) | GR78277B (fi) |
| HU (1) | HU198936B (fi) |
| IE (1) | IE56107B1 (fi) |
| IL (1) | IL68852A0 (fi) |
| IT (1) | IT1206452B (fi) |
| LU (1) | LU84843A1 (fi) |
| NL (1) | NL8301949A (fi) |
| NO (1) | NO161676C (fi) |
| NZ (1) | NZ204352A (fi) |
| OA (1) | OA07452A (fi) |
| PT (1) | PT76810B (fi) |
| SE (1) | SE455504B (fi) |
| YU (2) | YU42866B (fi) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ206932A (en) * | 1983-02-07 | 1987-08-31 | University Patents Inc | Certain 6-(heterocyclyl or amino) mitosanes and pharmaceutical compositions |
| US4803212A (en) * | 1983-04-11 | 1989-02-07 | Bristol-Myers Company | Amino disulfides |
| US4579737A (en) * | 1983-05-09 | 1986-04-01 | Bristol-Myers Company | Bis-amidines |
| US4642352A (en) * | 1983-12-23 | 1987-02-10 | Bristol-Myers Company | Acylamino mitosanes |
| US4814445A (en) * | 1984-09-04 | 1989-03-21 | Bristol-Myers Company | Process for preparing mitomycin analogs |
| AU581673B2 (en) * | 1984-09-04 | 1989-03-02 | Bristol-Myers Company | Substituted 7-oxomitosanes |
| JPS61176590A (ja) * | 1985-01-31 | 1986-08-08 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | ７−ｎ−アミノメチレンマイトマイシン誘導体、製造法及び抗腫瘍剤 |
| AT396688B (de) * | 1985-02-21 | 1993-11-25 | Bristol Myers Squibb Co | Verfahren zur herstellung von kristallinem |
| US4639528A (en) * | 1985-02-21 | 1987-01-27 | Bristol-Myers Company | Crystalline form of 7-(dimethylaminomethylene-amino-9a-methoxymitosane |
| ZA86308B (en) * | 1985-02-25 | 1986-11-26 | Bristol Myers Co | In-vial deposition of 7-(dimethylaminomethylene)amino-9a-methoxy-mitosane |
| US4652644A (en) * | 1985-04-29 | 1987-03-24 | Bristol-Myers Company | Process for preparation of N7 -amidino substituted mitomycin C derivatives |
| JPH066592B2 (ja) * | 1986-04-18 | 1994-01-26 | 協和醗酵工業株式会社 | マイトマイシン誘導体 |
| US4791113A (en) * | 1986-05-14 | 1988-12-13 | Kyowa Hakko Kogyo Kabushiki Kaisha | Mitomycin derivatives as antileukemia agents |
| JPS6354380A (ja) * | 1986-08-26 | 1988-03-08 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | マイトマイシン誘導体 |
| JPS63150282A (ja) * | 1986-12-13 | 1988-06-22 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | マイトマイシン誘導体 |
| IL86665A0 (en) * | 1987-06-12 | 1988-11-30 | Bristol Myers Co | Mitomycin analogs |
| IL89203A0 (en) * | 1988-02-11 | 1989-09-10 | Univ Houston | 7-substituted hydrazine mitomycin analogs and pharmaceutical compositions containing them |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3660578A (en) * | 1957-04-06 | 1972-05-02 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Mitomycin c |
| US3121084A (en) * | 1962-09-17 | 1964-02-11 | Du Pont | Selected n, n, n'-trisubstituted amidines and their preparation by reaction of compounds with-nh2 groups with amide acetals |
| NL129868C (fi) * | 1963-06-07 | |||
| DE1570029A1 (de) * | 1964-07-09 | 1970-04-09 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Verfahren zur Herstellung von Mitosanverbindungen |
| US3420846A (en) * | 1964-08-25 | 1969-01-07 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | 7-substituted mitomycin a |
| US3332944A (en) * | 1964-11-02 | 1967-07-25 | American Cyanamid Co | Antibiotic derivatives of mitomycins a, b, c and porfiromycin |
| JPS5439098A (en) * | 1977-08-31 | 1979-03-24 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | Mitomycin c derivatives |
| US4268676A (en) * | 1979-12-05 | 1981-05-19 | University Patents, Inc. | Mitomycin analogs |
| NZ206932A (en) * | 1983-02-07 | 1987-08-31 | University Patents Inc | Certain 6-(heterocyclyl or amino) mitosanes and pharmaceutical compositions |
| US4803212A (en) * | 1983-04-11 | 1989-02-07 | Bristol-Myers Company | Amino disulfides |
| JPS6073085A (ja) * | 1983-09-28 | 1985-04-25 | Matsushita Refrig Co | ロ−タリ−コンプレツサ |
| US4642352A (en) * | 1983-12-23 | 1987-02-10 | Bristol-Myers Company | Acylamino mitosanes |
-
1983
- 1983-05-09 US US06/492,903 patent/US4487769A/en not_active Expired - Fee Related
- 1983-05-25 NZ NZ204352A patent/NZ204352A/en unknown
- 1983-05-26 AU AU15014/83A patent/AU571179B2/en not_active Ceased
- 1983-05-27 FR FR8308807A patent/FR2528048B1/fr not_active Expired
- 1983-06-01 DE DE19833319992 patent/DE3319992A1/de active Granted
- 1983-06-01 IL IL68852A patent/IL68852A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1983-06-01 FI FI831972A patent/FI78700C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-06-01 NL NL8301949A patent/NL8301949A/nl not_active Application Discontinuation
- 1983-06-02 GB GB08315205A patent/GB2121796B/en not_active Expired
- 1983-06-03 CA CA000429642A patent/CA1230333A/en not_active Expired
- 1983-06-03 IT IT8321461A patent/IT1206452B/it active
- 1983-06-03 IE IE1320/83A patent/IE56107B1/en not_active IP Right Cessation
- 1983-06-03 PT PT76810A patent/PT76810B/pt not_active IP Right Cessation
- 1983-06-03 DD DD83251741A patent/DD210275A5/de not_active IP Right Cessation
- 1983-06-03 LU LU84843A patent/LU84843A1/fr unknown
- 1983-06-03 ES ES522948A patent/ES8407493A1/es not_active Expired
- 1983-06-03 GR GR71552A patent/GR78277B/el unknown
- 1983-06-03 YU YU1241/83A patent/YU42866B/xx unknown
- 1983-06-03 SE SE8303160A patent/SE455504B/sv not_active IP Right Cessation
- 1983-06-03 NO NO832022A patent/NO161676C/no unknown
- 1983-06-03 OA OA58018A patent/OA07452A/xx unknown
- 1983-06-03 DK DK253083A patent/DK161023C/da not_active IP Right Cessation
- 1983-06-03 HU HU834817A patent/HU198936B/hu unknown
- 1983-06-04 KR KR1019830002499A patent/KR870000932B1/ko not_active Expired
- 1983-06-06 AT AT0206483A patent/AT394853B/de not_active IP Right Cessation
- 1983-06-10 CH CH3099/83A patent/CH657856A5/de not_active IP Right Cessation
-
1984
- 1984-02-09 ES ES529584A patent/ES8504198A1/es not_active Expired
- 1984-02-09 ES ES529585A patent/ES529585A0/es active Granted
-
1985
- 1985-08-16 AR AR85301300A patent/AR241438A1/es active
-
1986
- 1986-02-05 YU YU164/86A patent/YU43427B/xx unknown
-
1990
- 1990-11-27 DK DK281490A patent/DK162167C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI78700C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara mitosanderivat. | |
| AU716656B2 (en) | Selected derivatives of K-252a | |
| KR940006629B1 (ko) | 아미노 디설파이드 티올 교환생성물의 제조방법 | |
| Struck et al. | Isolation, synthesis and antitumor evaluation of spirohydantoin aziridine, a mutagenic metabolite of spirohydantoin mustard | |
| US4803212A (en) | Amino disulfides | |
| FI81099B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva mitomycinanaloger. | |
| He et al. | Synthesis of biologically active phosphorus heterocycles via cyclization reactions of Lawesson's reagent | |
| Wu et al. | Synthesis and insecticidal activity of optically active 2-methoxy-5-phenyl-1, 3, 2-oxazaphospholidine 2-sulfide | |
| US4567256A (en) | Amidine process | |
| JP2991348B2 (ja) | ７−（ジフェニルメチル）オキシ−９ａ−メトキシマイトサン並びにその製造及び使用 | |
| Holý et al. | 9-(Aminoalkyl)-8-hydroxyadenines: Preparation, mechanism of formation and use in affinity chromatography of S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase | |
| EP0294828B1 (en) | Mitomycin analogs, a process for preparing them and pharmaceutical compositions | |
| US4691023A (en) | Amino disulfides | |
| JPH0472838B2 (fi) | ||
| AU595183B2 (en) | Crystalline form of 7-(dimethylaminomethylene) amino-9a- methoxymitosane | |
| Stuchlík et al. | Non-cyclol (lactame) ergot alkaloids | |
| Hájíček et al. | Stereospecific total synthesis of (+)-18-methylenevincadifformine | |
| US4590074A (en) | Bis-amidines | |
| NO163368B (no) | Mitosanderivater. | |
| US5098926A (en) | 6-substituted mitomycin analogs | |
| Kamioka et al. | Synthesis of chiral polyazamacrocycles of variable ring size | |
| Akiba et al. | REACTION OF BENZOQUJNONES WITH CYCLIC AMINES;'H-AND 13C-NMR SPECTRA OF AMINE-ADDUmS | |
| AT397092B (de) | Verfahren zur herstellung von neuen mitosan-derivaten | |
| NO881204L (no) | Mitosanderivater. | |
| Tanaka | THE SPIROBICHROMAN-DIHYDROXYSPIROBIINDANE REARRANGEMENT |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: BRISTOL-MYERS CO |