FI66121C - Foerfarande foer framstaellning av en stabil vattenloesning v cisplatin - Google Patents

Description

RaF^l W ai)ICUULUTUS|ULKAISU ΑΑΛηΛ lJ 1 ' utlAggningsskiuft ooi 21 C Patentti nyerineLty 10 C9 1934 W Patent coddelat ^ ^ (51) KvJu/lM.a3 A 61 K 33/24 SUOMI—FINLAND (21) 79040^ pq~-----,— jinrir-tnpfn 07.02.79 (Fl) (23) AtoKhs-o»Ww*E 07.02.79 (41) TaitotHHUmW —MMt0Kmt»g 01.12.79

Peteittl- js rekfatarihallltMi /4A . _____ P*t*nt- och fgtatrrtyKl—n ' ’ Min«3^α* 31.05.84 (32)(33)(31) PyHttr folfc— lt«rd prtortwt 30.05.78 USA(US) 9IO325 ToteennSytetty-Styrkt (71) Bristol-Myers Company, 345 Park Avenue, New York, N.Y. 10022, USA(US) (72) Edmund S. Granatek, Syracuse, New York, Gerald M. Ziemba, Bridgeport,

New York, Frederick L. Grab, Fayetteville, New York, USA(US) (74) Oy Kolster Ab (54) Menetelmä cisplatiinin pysyvän vesiliuoksen valmistamiseksi - Förfarande för framstälIning av en stabil vattenlösning av cisplatin

Keksintö koskee menetelmää cisplatiinin pysyvän, steriilin, vesiliuoksen valmistamiseksi. Liuosta käytetään syövän kemoterapiassa.

Antineoplastisten aineiden ryhmässä muodostavat platinayhdis-teet oman erityisen ryhmänsä. Rosenberg et ai. havaitsivat vuonna 1965 niillä olevan antibioottivaikutusta sekä myöhemmin niiden olevan voimakkaita kasvainten vastaisia aineita eläimillä. Rosenberg, B., Van-Camp, L. and Krigas, T., Inhibition of cell division in Escherichia coli by electrolysis products from a platinum electrode. Nature (London) 205: 698-699, 1965, ja Rosenberg, B., VanCamp, L., Trosko, J.E. and Mansour, V.H., Platinum compounds: A new class of potent antitumor agents. Nature (London) 222: 385-386, 1969.

Rakenteellisesti ne ovat komplekseja, joissa keskellä olevaan platina-atomiin on liittynyt ympärille eri tavoin klooriatomeja tai ammoniakkiryhmiä tason suhteen joko cis- tai trans-asemaan.

Kaksi yleisimmin tutkittua platinayhdistettä voidaan kuvata seuraavasti: 2 66121

Cl NH3

Z///pt//// Z\ - ' [1*H

Cl NH3 cis-paltina(II)diammiini- cis-platina(IV)diammiini- dikloridi tetrakloridi

National Cancer Institute*n kliinisiin kokeisiin valitsemassa platinayhdisteessä, cis-platina(II)diammiinidikloridissa kloridi- ja aminoryhmät ovat kaikki samassa vaakatasossa. Diammiinidikloridin cis-muoto on syntetisoitu seuraavalla reaktiolla, Kauffman, G.B. in J. Kleinberg (Ed.), Inorganic Synthesis, McGraw-Hill Book Co., Inc.,

New York, 1963: nh4ci K2^l>tCl4.7 + 2NH3 -cis-/Pt (NH3) 2C12^ + 2KC1

The National Cancer Institute'issa on suoritettu kliinisiä kerao-terapetuttisia kokeita kemikaalilla, jonka (United States Adopted Name) USAN-nimeksi on annettu cisplatiini. Sen kemiasta ja farmaseuttisista koostumuksista on tietoja julkaisussa Clinical Brochure, CIS-PLATINUM(II) DIAMMINEDICHLORIDE (NSC-119875), H. Handelman et ai., Investigational Drug Branch, Cancer Therapy Evaluation Program, Division of Cander Treatment, National Cancer Institute (elok. 1974), sivuilla 1-5 ja 31-32. Handelman'in et ai. sivut 31-32 koskevat cispla-tiini-koostumusta, jota N.C.I jakaa ilmaiseski lääkäreille kliinistä syövän kemoterapian tutkimusta varten ja näillä sivuilla esitetään seuraavaa: NSC-119875 cis-diammiinidiklooriplatina (II)

Annoskoostumus 10 mg/lääkepullo: Kussakin 20 ml:n piilasipullossa on lähes valkea lyofilisoitu kakku. Kukin lääkepullo sisältää 10 mg NSC-119875, 90 mg natriumkloridia, 100mg mannitolia ja kloorivetyhappoa pH:n säätämiseksi .

66121

Liuoksen valmistus: 10 mg lääkepullo: Rekonstituoituna 10 ml :11a steriiliä, injektiotar-koituksiin sopivaa vettä (USP) on saadussa liuoksessa ml:aa kohti 1 mg NSC-119875, 10 mg mannitolia ja 9 mg natriumkloridia, ja liuoksen pH on 3,5-4,5.

Säilytys: Kuivat, avaamattomat lääkepullot tulisi säilyttää jääkaappi-lämpötilassa (4-8°C).

Pysyvyys: Avaamattomilla lääkepulloilla on toistaiseksi katsottu olevan vuoden pysyvyys, kun niitä säilytetään jääkaappilämpötilassa (4-8°C). Pysyvyyssuosituksia saatetaan muuttaa kaksivuotisen varas-tointiaikakokeilun päätyttyä. Rekonstatuoimalla suositellulla tavalla saadaan vaalea, keltainen liuos, joka on pysyvä korkeintaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa (22°C) normaalissa huonevalaistuksessa ja korkeintaan 8 tuntia huoneen lämpötilassa (22°C) suojattuna valolta. Rekonstituoituun liuokseen saattaa muodostua sakka tunnin säilytyksen jälkeen jääkaappilämpötilassa (4-8°C).

Varoitus: Lyofilisoidut annoskoostumukset eivät sisällä säilöntäaineita ja sen vuoksi on suositeltavaa hyljätä liuokset 8 tunnin kuluttua rekonstituoimisesta.

Elokuussa, 1974

Clinical Drug Distribution Section Drug Development Branch Tämä koostumus ja lisätietoja sen kliinisestä käytöstä on esi-merkiski julkaisussa Cancer Chemotherapy Reports, Osa 1, voi. 57, no 4, sivut 465-471 (1973).

Julkaisussa Cancer 30: 1451-1456 (1972) on viitaten cisplatii-niin esitetty seuraavaa: "Tässä tutkimuksessa käytetty lääkeaineen valmistaja oli Ben Venue Laboratories Inc., Bedforf, Ohio. Sen toimitti Cancer Therapy Evaluation Branch of the National Cancer Institute lääkepulloina, jotka sisälsivät 10 mg cis-diammiinidiklooriplatinaa, 10 mg kuivaa mannitolia, 9 mg kuivaa NaCl. Kellertävän valkea jauhe liukeni hyvin 8-10 ml:aan steriiliä vettä ja liuos injektoitiin välittömästi valmistuksen jälkeen".

Julkaisussa Annals of International Med. 86: 803-812 (1977) on cisplatiinista, josta käytetään nimitystä DDP, esitetty seuraavaa: 4 66121 "Lääkeainetta DDP saavat laitoksesta Investigational Drug Branch of the Cancer Therapy Evaluation Program, National Cancer Institute ainoastaan koulutetut spesialistit tutkimustarkoituksiin. Tuote on valkeata lyofilisoitua jauhetta lääkepulloissa, jotka sisältävät 10 mg DDP, 90 mg natriumkloridia, 100 mg mannitolia (U.S.P.) ja kloorivetyhappoa pH:n säätmiseksi. Rekonstituoituna 10 ml:11a injek-tiotarkoituksiin sopivaa steriiliä vettä (U.S.P.) saadun liuoksen kukin ml sisältää 1 mg DDP, 10 mg mannitolia ja 9 mg NaCl. Saadun liuoksen pH on 3,4 - 4,5. 22°C:ssa rekonstituoitu liuos on pysyvä vähintään 8 tuntia".

Edellä kuvattujen lääkepulloissa kiinteinä olevien koostumusten ilmoitetaan siten tarvitsevan jääkaappilämpötilan (4-8°C) (so. ennen rekonstituointia), ne ovat vaikeita rekonstituoida ja niiden käyttöikä rekonstituoinnin jälkeen on huoneen lämpötilassa (22°C) ainoastaan noin 20 tuntia. Itse rekonstituointi saattaa väärin suoritettuna aiheuttaa ongelmia ja sitä olisi paras välttää. Lisäksi, koska cis-platiinin liukoisuus veteen on vain noin 1 mg/ml, niin yli 25 mg/lää-kepullo annosmuotojen valmistaminen lyofilisoimalla tulee liian kalliiksi.

Nyt on saatu aikaan pysyvä, terapeuttisesti hyväksyttävä, suonensisäisesti injektoitava cisplatiinin annosmuoto, jota ei tarvitse lyofilisoida ja rekonstituoida, jota ei tarvitse kuljetuksen ja säilytyksen aikana pitää jääkaappilämpötilassa, ja jolla saadaan yli 50 mg:n annoksia.

Keksintö koskee menetelmää cisplatiinin pysyvän, steriilin, edullisesti suonensisäisesti annettavan vesiliuoksen valmistamiseksi, joka liuos sisältää 0,1 - 1 mg/ml, edullisesti 1,0 mg/ml cis-platina- (II)-diammiinidikloridia ja mahdollisesti ei-toksista, farmaseuttisesti hyväksyttävää kloridi-ionilähdettä, jonka pitoisuus vastaa nat-riumkloridipitoisuutta 1-20 mg/ml, edullisesti noin 9 mg/ml, sekä muita lisäaineita, kuten mannitolia, jonka pitoisuus on edullisesti 2 - 150 mg/ml, erityisesti 10 mg/ml, jolloin pH säädetään happamalle alueelle lisäämällä ei-toksista, terapeuttisesti hyväksyttävää happoa, edullisesti kloorivetyhappoa. Menetelmälle on tunnusomaista, että pH säädetään arvoon 2,0 - 3,0.

Cis-platina(II) diammiinidikloridi (NSC 119875) on epäorgaaninen yhdiste, jonka ensin havaittiin estävän E. coli bakteerin repii- 5 66121 kaatiota ja sen jälkeen havaittiin olevan kasvainten vastaisesti aktiiivinen. Lääkkeen vaikutus tapahtuu häiritsemällä DNA-synteesiä aiheuttamalla DNA:n komplementtisäikeiden verkkoutumista. Yhdisteellä on aktiviteettia erilaisiin kasvainsysteemeihin, joita ovat esim. L1210, Darcoma 180, Walker 256 karsinosarkooma, DMBAsn indusoima rintasyöpä ja askiittinen B16 melanosarkooma. Yhdiste on erityisen mielenkiintoinen, koska sillä on synergismia useiden nykyisin käytettyjen kemoterapeuttisten aineiden kanssa. Laajoissa eläimillä suoritetuissa myrkyllisyyskokeissa havaittiin munuaisputkien kuolioita, suolitulehdusta, luuytimen vajaakasvua ja imukudosten surkastumista. Vaiheesta I tehdyt tutkimukset osoittivat seuraavia myrkkyvaikutuksia: selkäytimen toimintahäiriöt, munuaisten vajaatoiminta, korkeafrekvens-sikorvavauriot ja Gl-intoleranssi. Nykyisin käytetyt annokset, joilla on kohtuullinen myrkyllisyys, ovat 60-100 mg/m suonensisäisesti annettuna yhtenä annoksena tai jaettuina annoksina 3-5 vrk aikana, joka annostus toistetaan 4 viikon väliajoin. Ensimmäisissä kliinisissä tutkimuksissa on voitu havaita lääkkeen vaiktuttavan jonkin verran suku-solukasvaimiin, imukudoskasvaimiin, tukikudossyöpään, rinta-, pää- ja kaulakarsinoomaan.

2

Annos 60 mg/m on suunnilleen sama kuin 1,5 mg/kg, joka taas vastaa suunnilleen annosta 105 mg/potilas, jonka paino on 70 kg.

Keksinnön mukaisesti valmistettuja liuoksia käytetään samalla tavalla ja samaan tarkoitukseen kuin edellä on selvitetty ja asiaa koskevat muut julkaisut ja laaja lääketieteellinen kirjallisuus esittävät. Kuten kirjallisuudessa on esitetty, yhdistettä käytetään usein parhaiden tulosten saavuttamiseksi yhdessä muiden kemoterapeuttien kanssa. Haluttaessa voidaan keksinnön mukaisesti valmistettuja liuoksia lisätä välittömästi ennen käyttöä steriiliin, farmaseuttisesi hyväksyttävään veispitoiseen laimentimeen, kuten glukoosi- tai suolaliuokseen. Lääkeanto tapahtuu joko suorana injektiona suoneen tai suonensisäisenä infuusiona.

Esimerkki 1

Cisplatiinia 1 mg/ml sisältävä Injektioliuos (1 mg cis-diammiinidiklooriplatinaa(II) 1 ml:ssa liuosta) 6 661 21

Koostumus

ml taa kohti litraa kohti A A

cis-diammiinidiklooriplatina(II) 0,0010 g 1,000 g natriumkloridi, U.S.P. 0,0090 g 9,000 g

Mannitoli, U.S.P. 0,0100 g 10,000 g Väkevä kloorivetyhappo. U.S.P. q.s. pH:n säätmiseksi q.s. pH:n säätämiseksi

B B

2,0-3,0:ksi 2,0-3,0:ksi

Injektiotarkoituksiin sopiva vesi U.S.P. 1,0 ml:ksi 1000 mlrksi

Huom.

A. Laksettu 100-%:sena. Cisplatiinia lisätään analyysiin perustuen sellainen määrä, että saadaan 1,0 g 100-%:sta cis-diaramiinidikloori-platinaa(II) litraa kohti.

B. 37-%:sta kloorivetyhappoa tarvitaan grammaa kohti natriumkloridia noin 0,035-0,050 ml pH:n säätämiseen noin 2,5:ksi.

Varotoimia

Cis-diammiinidiklooriplatina(II) on myrkyllinen aine, joka on mainittu myrkkyrekisterin "Registry of Toxic Effects of Chemical Substances" vuoden 1976 painoksen sivulla 942. OSHA-standardin ajasta 3 riippuva keksiarvo (Time Weighted Average, TWA) on 2 mcg/m . On syytä tutustua edellä lueteltuihin kirjallisuusviitteisiin, voimassa oleviin paikallisiin ilmoituksiin ja määräyksiin sekä julkaisuihin: the National Cancer Institute Safety Standards for Research Involving Chemical Carcinogens ja the National Institute of Health Specifications for a Class II type 1 Safety Cabinet. Cis-diammiinidiklooripla-tinan(II) punnitus, valmistusastioiden pinnan käsittely, liuoksen täyttö, lääkeastioiden sulkeminen on suoritettava käyttäen suojalaitteita.

Henkilökunnan, joka joutuu tekemisiin tuotteen valmistuksen kanssa, on käytettävä täyttä nailonista pää/kasvosuojainta, suojapukuja, kumihansikkaita ja hengityssuojaimia, jotka vastaavat MSA-Ultra Filter Respirator suojaimia, joita on määrätty käytettäviksi olosuhteissa, joissa epäpuhtautena oleva pöly, höyryt ja sumut kohoavat 3 määriin, joiden TWA-arvo on alle 50 pg/m . Nesteen steriilitäytön i 66121 aikana hengityssuojain voidaan korvata steriilillä pää/kasvosuojaimel-la, kirurgin hengityssuojaimella ja suojalaisella. Suojapuvut, joille on läikkynyt suurempia määriä tuotetta, on säilytettävä suljetuissa metallisäiliöissä ja sitten poltettava.

Tämän tuotteen käsittelyyn, valmistukseen ja kokeiluun osallistuvan henkilökunnan suojaamisen tärkeyttä edellä olevan mukaisesti ei voida liikaa korostaa.

Cis-diammiinidiklooriplatinasta(II) valmistettu perusliuos on suojattava valolta. Seuraavassa kuvattu valmistus ja lääkepullojen täyttö suoritetaan puolihämärässä päivänvalossa tai fluoresoivassa valossa.

Laitteisto

Valmistusastia

Valmistusastia oli lasilla vuorattu, sekoittimella varustettu paineastia. Sekoittimen materiaaliksi sopii ruostumaton teräs 316 SS. Valmistuserän suuruuden tulee vastata työskentelytilavuutta. Tilavuuden määrittämiseen tarvitaan mittatikku ja tankin kalibrointikäyrä.

Millipore-membraanisuodatinpitimet 316 SS. Suodatinpinta ja tarpeelliset esisuodattimet sekä lopulliseen suodatukseen 0,22 ^im:n steriilisuodatin.

Silrtoletkut

Teflonia tai tygonia

Kaikkien ruostumattomasta teräksestä olevien kosketuskohtien tulisi olla laatua 316 SS. Laitteiston muun osan tulisi olla sopiva steriilin, pyrogeenivapaan ja hiukkasvapaan tuotteen tuottamiseen.

Valmistusohjeet A. Nämä ohjeet koskevat 8 tunnin aikana suoritettavan erän valmistus- ja täyttövaihetta. Tuotteen varastointia ennen täyttöä ei tämän ohjeen antamisen ajankohtana oltu tutkittu.

B. Koko valmistus- ja suodatusvaiheiden aikana lämpötila pidetään 27°C:ssa + 2°C.

1. Sopivaan astiaan pannaan 80 % valmistuserään tarvittavasta injektiotarkoituksiin sopivasta vedestä, U.S.P.

2. Natriumkloridi lisätään samalla sekoittaen. Sekoitusta jatketaan 10 minuuttia, tai kunnes suola on liuennut.

3. Koko ajan hyvin sekoittaen natriumkloridiliuoksen pH säädetään väkevällä kloorivetyhapolla varovasti arvoon 2,0-3,0 (edullisesti 66121 8 2,5). Arvioitu määrä on koostumusohjeen kohdassa B. Viimeisen lisäyksen jälkeen sekoitetaan 10 minuuttia. Sitten pH tarkistetaan.

4. Lisätään mannitoli hyvin sekoittaen, ja sekoitusta jatketaan 10 minuuttia, tai kunnes mannitoli on liuennut.

5. Lisätään cis-diammiinidiklooriplatina(II) hyvin sekoittaen ja erityisesti varoen, ettei se pölyn muodossa tai muuten pääse vaikuttamaan työntekijään. Sen astia huuhdotaan riittävästi sopivalla vesimäärällä (injektiotarkoituksiin) ja lisätään valmistuserään.

6. Sekoitetaan, kunnes kaikki on liuennut. Täydelliseen liukenemiseen tarvitaan aikaa noin 60-90 minuuttia. pH mitataan ja liuokseen lisätään tarvittaessa väkevää kloorivetyhappoa pH:n pysyttämiseksi arvossa 2,0 - 3,0 (edullisesti 2,5).

7. Liuos johdetaan puhtaan, steriilin 0,22 /im:n Milliporesuodat-timen lävitse steriiliin täyttölinjaan.

9. Eri tuotteiden täyttö suoritetaan seuraavasti: 10 mg/lääkepullo

Steriili, tyyppiä I oleva, ruskea, 15 ml:n lääkepullo, jonka täyttötilavuus on 10 ml. Tulppa: punainen, 20 mm teflonpintainen tulppa, kapseli: alumiinikapseli. Tuotteet, joilla on numerot K93, 100 ja 107 suojataan typellä, tuotteet K94, 101 ja 108 ovat ilman typpisuoja-kaasua.

25 mg/lääkepullo

Steriili, tyyppiä I oleva, ruskea 50 ml:n lääkepullo, jonka täyttötilavuus on 25 ml. Tulppa: punainen 20 mm teflonpintainen tulppa; kapseli: alumiinikapseli. Tuotteet, joilla on numerot K95, 102 ja 109 suojataan typellä, tuotteet K96, 103 ja 110 ovat ilman typpi-suojakaasua.

50 mg/lääkepullo

Steriili, tyyppiä I oleva 50 ml:n lääkepullo, jonka täyttötilavuus on 50 ml. Tulppa: punainen 20 mm teflonpintainen tulppa; kapseli: alumiinikapseli. Tuotteet, joilla on numerot K97, 104 ja 111 suojataan typpikaasulla, tuotteet K98, 105 ja 112 ovat ilman typpisuojakaa-sua.

Näitä koostumuksia valmistettiin viisi ryhmää (lopullinen pH on ilmoitettu suluissa) seuraavasti: 9 66121 K93-96 (pH 2,4) K97-98 (pH 2,5) K100-103 (pH 2,3) K104-105 (pH 2,4) K107-110 (pH 2,3) K111-112 (pH 2,4)

Alkupitoisuudet HPLC-analyysin mukaan olivat 0,99 - 1,00 mg/ml. Pitoisuuden prosentuaaliset alenemiset 1 tai 2 kuukauden säilytyksen jälkeen ilmoitetussa lämpötilassa HPLC:llä määritettyinä olivat seuraavat:

56°C_45°C

1 kk 2 kk 1 kk K93 4,0 K94 2,0 4,0 K95 0,0 -1,01 K96 1,0 4,0 0,0 K97 3,0 K98 4,0 2,0 K100 3,0 K101 3,0 5,0 K102 3,0 K103 5,0 4,0 K104 0,0 -1,01 K105 0,0 5,0 0,0 K107 1,0 0,0 K108 2,0 5,0 1,0 K109 3,0 K110 3,0

Kili 7,0 K112 7,0

Miinusmerkki osoittaa, että pitoisuus kohosi 1,0 %.

ίο 66121

Edellä kuvatuissa liuoksissa tapahtui siis typpikaasulla suojattuna tai ilman suojakaasua säilytettäessä 56°C:ssa ja 45°C:ssa korkeintaan 7 %:n vaikuttavana aineen häviö, ja pääosalla häviö oli korkeintaan 3 %. Liuosten pH pysyi arvossa 2,4 - 2,7.

Kuukauden säilytyksen jälkeen 56°C:ssa ei liuoksissa havaittu fysikaalisia muutoksia. Liuokset pysyivät kirkkaina ja värittöminä. Kokeen alussa keskimääräiset Klett-lukemat olivat 8-12, kuukauden kuluttua 56°C:ssa ja 45°C:ssa keskimääräiset lukemat olivat 6-15.

Typpisuojakaasussa olevien näytteiden ja suojaamattomien näytteiden välillä ei havaittu muutoksia tai eroja.

Kaikista tuotteista otettiin yksi näyte kumpaankin lämpötilaan kokeeseen teflonpäällystetyn tulpan vaikutuksen toteamiseksi.

Näytepullot sekä typpisuojakaasua sisältävät että ilman suoja-kaasua olevat pantiin nurinpäin 56°C:seen kuukauden ajaksi. Kuukauden säilytys 56°C:ssa ei vaikuttanut pysyvyyteen, vaikuttavan aineen häviö oli vain 1-2 %.

Cis-diammiinidiklooriplatinan(II) kiteytymistä tutkittiin säilyttämällä näytteitä 4°C:ssa. Kuukauden kuluessa ei havaittu kiteytymistä. Havainnot tehtiin vain umpimähkäisesti valituista näytteistä eikä kaikista näytteistä. Yhdessä erässä 10 mg/lääkepullo ja 25 mg/ lääkepullo havaittiin umpimähkäisesti tarkastelluissa näytteissä joitakin kiteitä muodostuneen 4°C:ssa. Kaikissa 50 mg/lääkepullo sisältävissä valmistuserissä havaittiin kiteytymistä, mutta kiteitä ei ollut kaikissa näytteissä. Yhdessä 4°C:ssa säilytetyssä näytteessä kiteitä ei saatu liukenemaan lämmitettäessä ja sekoitettaessa 37°C:ssa. Tulos ei siten ollut täysin tyydyttävä. Näyttää siltä, että näitä tuotteita ei voida säilyttää jääkaappiolosuhteissa, koska kiteiden uudelleen liuottaminenkin tuottaa vaikeuksia.

Cis-diammiinidiklooriplatinan määrittäminen suuren erotuskyvyn nestekromatografiällä (HPLC)_

Menetelmä

Cis-diammiinidiklooriplatina kromatografoidaan Water'in yu-Bonda-pak-NH2“kolonnilla käyttäen silmukkainjektiotekniikkaa. Tulokset saadaan monitorista UV-absorbanssilla 313 nm ja kavantitointi suoritetaan mittaamalla piikin korkeus ja vertaamalla kalibrointikäyrään.

Tätä menetelmää voidaan käyttää raaka-ainejauheiden ja NaCl- ja man-nitolipitoisten kiinteiden annoskoostumusten mittauksiin. Menetelmällä 11 66121 pystytään erottamaan cis- ja trans-isomeerit ja ilmeiset hajoamistuotteet (kosteuden, happojen, emästen, lämmön ja valon vaikutus).

NH_ ^^Cl Cl nh3'^" Cl NH3'^^ ^^Cl

cis-(NH3)2 Cl2 Pt II trans-(NH3)9 Cl2 Pt II

HPLC-koeolosuhteet

Kolonni - Water’in Micro-Bondapak-NH2 (300 mm x 4,0 mm sisälä-pimitta) 027386 tai vastaava.

Liikkuva faasi - etyyliasetaatti/metanoli/dimetyyliformamidi/ tislattu vesi (25/16/5/5). Käytetään Burdick & Jackson’in lasissa tislattuja spektrografilaatua olevia reagensseja. Vedestä poistetaan kaasut ennen käyttöä ja liuoksesta sekoituksen jälkeen.

Detektori - Water’s Model 440 Abdorbance Detector.

Aaltopituus - 313 nm (UV).

Herkkyys - 0,1 AUFS.

Injektori - 20 μΐ silmukkainjektori,

Silmukkainjektori - Valco 7000 psi ruostumatonta terästä oleva venttiili (CV-6-UHPa-C2 0).

Injektiotilavuus - 20 μΐ.

Liuottimen annostuslaite - Water’s Model 6000A pumppu.

Virtaus - 2,0 ml/min.

Kesto - 2,8 min (noin).

Piirturi - Heath Model SR -255B.

Paperin nopeus - 12,5 mm/min.

Alue - 10 mV.

HPLC-analyysi

Edellä olevissa olosuhteissa määritetään kaksoiskokeina kromato-grammit standardinäytteestä ja valmisteista.

Cis-diammiinidiklooriplatinan (DDP) vertailustandardi:

Erä no 78F7 (Matthey Bishop Lot No AM7702). Ilmoitettu puhtaus = 99,8 %.

Liuottimet - Burdick & Jackson (tislattu lasilaitteissa) spektrografi-laatu.

12 661 21

Standardi - punnitaan tarkalleen 25 mg cis-diammiinidiklooriplatinaa (DDP) 25 ml:n mittapulloon. DDP liuotetaan dimetyyliformamidiin ja laimennetaan samalla liuottimena 25 ml:ksi.

Lyofilisoitu injektiovalmiste - Lääkepullon sisältö liuotetaan 10 ml:aan dimetyyliformamidia ravistelemalla pulloa 5 minuuttia (vaihtoehtoisesti voidaan käyttää 2 minuutin ultraäänikäsittelyä). Näyteliuosta suodatetaan 5,0 ml (Millipore Filter Kit tai vastaava), jolloin ensimmäinen ml hyljätään.

Sisällön tasalaatuisuus - kokeita varten valmistetaan 10 lääkepullol-lista edellä kuvatulla tavalla.

Laskusuoritukset

Standardikerroin (SF) = mg standardia/ml_ keskimääräinen standardin piikin korkeus mg DDP/g = SF x näytteen keskimääräinen piikin korkeus x 25 näytteen paino (g) mg DDP/lääkepullo = SF x näytteen keskimääräinen piikin korkeus x 10.

Kokeeseen käytettiin sisällön tasalaatuisuus-kokeesta 10 lääke-pulloa keskiarvotuloksen saamiseksi.

Menetelmä

Edellä kuvattua koemenetelmää käytettiin cisplatiinin vesiliuoksille (annoskoostumuksille), jotka sisälsivät NaCl ja mannitolia, seuraavassa esitettyjen muutosten jälkeen.

HPLC-koeolosuhteet

Liikkuva faasi - asetonitriili/tislattu vesi (75/25, tilav./tilav.). Käytetään Burdick & Jackson'in lasissa tislattuja spetrografilaatua olevia reagensseja. Vedestä poistetaan kaasut ennen käyttöä ja liuoksesta sekoituksen jälkeen,

Injektori - 100 pl silmukkainjektori.

Injektiotilavuus - 100 pl.

Kesto - 2,0 min (noin).

HPLC-analyysi

Standardi - punnitaan tarkasti 25 mg cis-diammiinidiklooriplatinaa (DDP), 225 mg natriumkloridia ja 250 mg mannitolia 25 ml:n mittapulloon. Aineet liuotetaan tislattuun veteen ja liuos laimennetaan tislatulla vedellä 25 ml:ksi. Saatua liuosta pipetoidaan 5,0 ml 25 ml:n

Claims (3)

13 661 21 mittapulloon, lisätään 2,0 ml tislattua vettä ja liuos laimennetaan asetonitriilillä 25 mlsksi. Näyte (1 mg/ml) - Pipetoidaan 5 ml näytettä 25 ml:n mittapulloon, lisätään 2,0 ml tislattua vettä ja liuos laimennetaan asetonitriilillä 25 mltksi. Laskusuorltukset Standardikerroin (SF) = mg standardia/ml_ keskimääräinen standardin piikin korkeus mg DDP/ml = SF x näytteen keskimääräinen piikin korkeus x 25.

1. Menetelmä cisplatiinin pysyvän, steriilin, edullisesti suonensisäisesti annettavan vesiliuoksen valmistamiseksi, joka liuos sisältää 0,1 - 1 mg/ml, edullisesti 1,0 mg/ml cis-platina(II)-diammiinidi-kloridia ja mahdollisesti ei-toksista, farmaseuttisesti hyväksyttävää kloridi-ionilähdettä, jonka pitoisuus vastaa natriumkloridipitoisuut-ta 1-20 mg/ml, edullisesti noin 9 mg/ml, sekä muita lisäaineita, kuten mannitolia, jonka pitoisuus on edullisesti 2-150 mg/ml, erityisesti 10 mg/ml, jolloin pH säädetään happamalle alueelle lisäämällä ei-toksista, terapeuttisesti hyväksyttävää happoa, edullisesti kloorivety-happoa, tunnettu siitä, että pH säädetään arvoon 2,0 - 3,0.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että pH säädetään 2,3 - 2,7.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että pH säädetään arvoon noin 2,5.