ES2675917T3 - Uso médico de anticuerpos humanos de alta afinidad dirigidos contra el receptor humano de IL-4 - Google Patents

Uso médico de anticuerpos humanos de alta afinidad dirigidos contra el receptor humano de IL-4 Download PDF

Info

Publication number
ES2675917T3
ES2675917T3 ES16161244.5T ES16161244T ES2675917T3 ES 2675917 T3 ES2675917 T3 ES 2675917T3 ES 16161244 T ES16161244 T ES 16161244T ES 2675917 T3 ES2675917 T3 ES 2675917T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
gly
ser
leu
thr
val
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES16161244.5T
Other languages
English (en)
Inventor
Nicholas J Papadopoulos
Jeanette L Fairhurst
Tammy T Huang
Joel H Martin
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Regeneron Pharmaceuticals Inc
Original Assignee
Regeneron Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41600767&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2675917(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Regeneron Pharmaceuticals Inc filed Critical Regeneron Pharmaceuticals Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES2675917T3 publication Critical patent/ES2675917T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Abstract

Uso de un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, que se une específicamente al receptor humano de interleucina-4 (hIL-4R) (SEQ ID NO:274) en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o un trastorno en el que la enfermedad o el trastorno se selecciona del grupo que consiste en trastornos pulmonares, trastornos inflamatorios y reacciones alérgicas, en el que el anticuerpo, o fragmento del mismo, comprende una región variable de cadena pesada (HCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO:162 y una región variable de cadena ligera (LCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO:164.

Description

5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
DESCRIPCION
Uso médico de anticuerpos humanos de alta afinidad dirigidos contra el receptor humano de IL-4 Antecedentes
La interleucina-4 (IL-4, conocida también como factor estimulante de células B o BSF-1) se caracterizó originalmente por su capacidad para estimular la proliferación de células B en respuesta a bajas concentraciones de anticuerpos dirigidos contra inmunoglobulinas de superficie. Se ha demostrado que la iL-4 posee un amplio espectro de actividades biológicas, incluyendo estimulación del crecimiento de células T, mastocitos, granulocitos, megacariocitos y eritrocitos. La IL-4 induce la expresión de moléculas del complejo mayor de histocompatibilidad de clase II en células B en reposo, y potencia la secreción de los isotipos IgE e IgG1 por células B estimuladas.
Las actividades biológicas de la IL-4 están mediadas por receptores de la superficie celular específicos de IL-4. Por ejemplo, en las patentes de Estados Unidos No. 5.599.905, 5.767.065 y 5.840.869, se describe el receptor alfa humano de IL-4 (hIL-4R) (SEQ ID NO: 274). En las patentes de Estados Unidos No 5.717.072 y 7.186.809 se describen anticuerpos dirigidos contra el hIL-4R.
Para producir anticuerpos útiles como agentes terapéuticos en seres humanos los procedimientos incluyen generar anticuerpos quiméricos y anticuerpos humanizados (véase, por ejemplo, el documento US 6.949.245). Véanse, por ejemplo, los documentos WO 94/02602 y US 6.596.541, que describen procedimientos de generación de ratones transgénicos no humanos capaces de producir anticuerpos humanos.
En las patentes de Estados Unidos No 5.714.146; 5.985.280; y 6.716.587 se describen procedimientos para el uso de anticuerpos dirigidos contra el hIL-4R. El documento WO 2008/054606 desvela anticuerpos específicos para IL- 4R humano y usos médicos de los mismos.
Breve sumario de la invención
La invención se define mediante las reivindicaciones adjuntas. En un primer aspecto la divulgación proporciona anticuerpos humanos, preferentemente anticuerpos humanos recombinantes, que se unen específicamente al receptor humano de interleucina-4 (hIL-4R). Los anticuerpos humanos se caracterizan por unirse al hIL-4R con una alta afinidad y por la capacidad para neutralizar la actividad de la hIL-4. En realizaciones específicas, los anticuerpos humanos pueden bloquear el complejo hIL-13/hIL-13R1 uniéndose al hIL-4R, y por tanto inhiben la señalización por la hIL-13. Los anticuerpos pueden ser de longitud completa (por ejemplo, un anticuerpo IgG1 o IgG4) o pueden comprender sólo una parte de unión a antígeno (por ejemplo, un fragmento Fab, F(ab')2 o scFv), y pueden modificarse para efectuar funcionalidades, por ejemplo, eliminar funciones efectoras residuales (Reddy et al. (2000) J. Immunol. 164:1925-1933).
En una realización general, la divulgación proporciona un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente al hIL-4R (SEQ ID NO: 274) con una Kd de aproximadamente 300 pM o menor, medida por resonancia de plasmón superficial en un ensayo monomérico o dimérico. En una realización más específica, el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo presenta una Kd de aproximadamente 200 pM o menor, aproximadamente 150 o menor, aproximadamente 100 pM o menor, o aproximadamente 50 pM. En diversas realizaciones, el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno bloquea la actividad de la hIL-4 con una CI50 de aproximadamente 100 pM o menor, medida por bioensayo con luciferasa. En realizaciones más específicas, el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno presenta una CI50 de aproximadamente 50 pM o menor, aproximadamente 30 pM o menor, o aproximadamente 25 pM o menor, medida por bioensayo con STAT6 luciferasa. En diversas realizaciones, el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno bloquea la actividad de la hIL-13 con una CI50 de aproximadamente 100 pM o menor, aproximadamente 90 pM o menor, aproximadamente 50 pM o menor, o aproximadamente 20 pM o menor, medida por bioensayo con STAT6 luciferasa.
En un segundo aspecto, el anticuerpo de la divulgación comprende una secuencia de la región variable de la cadena pesada (HCVR) seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 2, 18, 22, 26, 42, 46, 50, 66, 70 , 74, 90, 94, 98, 114, 118, 122, 138, 142, 146, 162, 166, 170, 186, 190, 194, 210, 214, 218, 234, 238, 242, 258 y 262, o en una secuencia sustancialmente similar de las mismas.
En un tercer aspecto, el anticuerpo de la divulgación comprende una secuencia de la región variable de la cadena ligera (LCVR) seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 10, 20, 24, 34, 44, 48, 58, 68, 72 , 82, 92, 96, 106, 116, 120, 130, 140, 144, 154, 164, 168, 178, 188, 192, 202, 212, 216, 226, 236, 240, 250, 260 y 264, o en una secuencia sustancialmente similar de las mismas.
En una realización, el anticuerpo, o fragmento de anticuerpo, de la divulgación comprende los pares de secuencias HCVR y LCVR (HCVR/LCVR) seleccionados del grupo que consiste en SEQ ID NO: 2/10, 18/20, 22/24, 26/34, 42/44, 46/48, 50/58, 66/68, 70/72, 74/82, 90/92, 94/96, 98/106, 114/116, 118/120, 122/130, 138/140, 142/144, 146/154, 162/164, 166/168, 170/178, 186/188, 190/192, 194/202, 210/212, 214/216, 218/226, 234/236, 238/240,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
242/250, 258/260 y 262/264. En una realización preferida, el anticuerpo o fragmento de anticuerpo, comprende los pares de secuencias HCVR/LCVR SEQ ID NO: 162/164, 210/212 o 18/20; los anticuerpos ejemplares que tienen estos pares de pares de secuencias HCVR/LCVR incluyen los anticuerpos denominados H4H098P (SEQ ID NOs: 162/164), H4H083P (SEQ ID NOs: 210/212) y H4H095P (SEQ ID NOs: 18/20)
En un cuarto aspecto, la divulgación proporciona moléculas de ácido nucleico que codifican una HCVR, en el que la molécula de ácido nucleico es una secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 1, 17, 21, 25, 41, 45, 49, 65, 69, 73, 89, 93, 97, 113, 117, 121, 137, 141, 145, 161, 165, 169, 185, 189, 193, 209, 213, 217, 233, 237, 241, 257 y 261, o una secuencia sustancialmente idéntica que tiene al menos un 95 % de homología con las mismas.
En un quinto aspecto, la divulgación proporciona moléculas de ácido nucleico que codifican una LCVR, en el que la molécula de ácido nucleico es una secuencia seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 9, 19, 23, 33, 43, 47, 57, 67, 71, 81, 91, 95, 105, 115, 119, 129, 139, 143, 153, 163, 167, 177, 187, 191, 201, 211, 215, 225, 235, 239, 249, 259 y 263, o una secuencia sustancialmente idéntica que tiene al menos un 95 % de homología con las mismas.
En una realización, el anticuerpo de la divulgación comprende una HCVR y una LCVR codificadas por un par de secuencias de nucleótidos seleccionadas del grupo que consiste en SEQ ID NO: 1/9, 17/19, 21/22, 25/33, 41 / 43, 45/47, 49/57, 65/67, 69/71, 73/81, 89/91, 93/95, 97/105, 113/115, 117/119, 121/129, 137/139 , 141/143, 145/153, 161/163, 165/167, 169/177, 185/187, 189/191, 193/201, 209/211, 213/215, 217/225, 233/235, 237 / 239, 241/249, 257/259 y 261/263. En una realización preferida, el anticuerpo, o fragmento de anticuerpo, comprende secuencias de HCVR/LCVR codificadas por secuencias de ácido nucleico seleccionadas de SEQ ID NO: 161/163, 209/211 y 17/19. En una realización aún más preferida, el anticuerpo, o fragmento de anticuerpo, comprende secuencias de HCVR/LCVR codificadas por las secuencias de ácido nucleico SEQ ID NO: 161/163.
En un sexto aspecto, la divulgación proporciona un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, que comprende una HCDR3 y una LCDR3, en el que el dominio de HCDR3 se selecciona del grupo que consiste en SEQ ID NO: 8, 32, 56, 80, 104, 128, 152, 176, 200, 224 y 248; y el dominio de LCDR3 se selecciona del grupo que consiste en SEQ ID NO: 16, 40, 64, 88, 112, 136, 160, 184, 208, 232 y 256. En una realización preferida, las secuencias HCDR3/LCDR3 son SEQ ID NO: 152/160, 8/16 o 200/208. En una realización aún más preferida, las secuencias HCDR3 y LCDR3 son SEQ ID NO: 152 y 160.
En una realización adicional, el anticuerpo, o fragmento de anticuerpo, comprende además una secuencia HCDR1 seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 4, 28, 52, 76, 100, 124, 148, 172, 196, 220 y 244, o una secuencia sustancialmente similar de las mismas; una secuencia HCDR2 seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 6, 30, 54, 78, 102, 126, 150, 174, 198, 222 y 246, o una secuencia sustancialmente similar de las mismas; una secuencia HCDR3 seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 8, 32, 56, 80, 104, 128, 152, 176, 200, 224 y 248, o una secuencia sustancialmente similar de las mismas; una secuencia LCDR1 seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 12, 36, 60, 84, 108, 132, 156, 180, 204, 228 y 252, o una secuencia sustancialmente similar de las mismas; una secuencia LCDR2 seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 14, 38, 62, 86, 110, 134, 158, 182, 206, 230 y 252, o una secuencia sustancialmente similar de las mismas; y una secuencia LCDR3 seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 16, 40, 64, 88, 112, 136, 160, 184, 208, 232 y 256 o una secuencia sustancialmente similar de las mismas. En una realización preferida, el anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, comprende las secuencias HCDR SEQ ID NO: 148, 150 y 152 y las secuencias LCDR SEQ ID NO: 156, 158 y 160; las secuencias HCDR SEQ ID NO: 4, 6 y 8 y las secuencias LCDR SEQ ID NO: 12, 14 y 16; y las secuencias HCDR SEQ ID NO: 196, 198 y 200 y las secuencias LCDR SEQ ID NO: 204, 206 y 208.
De acuerdo con determinadas realizaciones, la presente divulgación proporciona anticuerpos anti-hIL-4R, o fragmentos de unión a antígeno de los mismos, que tienen las secuencias HCDR1/HCDR2/HCDR3/LCDR1/LCDR2/LCDR3 seleccionadas del grupo que consiste en las SEQ ID NOs: 148/150/152/156/158/160; 4/6/8/12/14/16 y 196/198/200/204/206/208. Los anticuerpos ejemplares que tienen estas secuencias HCDR1/HCDR2/HCDR3/LCDR1/LCDR2/LCDR3 incluyen los anticuerpos denominados H4H098P (SEQ ID NOs: 148/150/152/156/158/160), H4H083 (SEQ ID NOs: 196/198/200/204/206/208) y H4H095P (SEQ ID NOs: 4/6/8/12/14/16).
En un séptimo aspecto, la divulgación presenta un anticuerpo humano, o fragmento de anticuerpo, que comprende una HCDR3 y una LCDR3, en la que la HCDR3 está codificada por una secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 7, 31, 55, 79, 103, 127, 151, 175, 199, 223 y 247, o una secuencia sustancialmente idéntica que tiene al menos un 95 % de homología de las mismas; y la LCDR3 está codificada por una secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 15, 39, 63, 87, 111, 135, 159, 183, 207, 231 y 255, o una secuencia sustancialmente idéntica que tiene al menos 95 % de homología de las mismas.
En una realización adicional, la divulgación presenta un anticuerpo humano, o fragmento de anticuerpo, que
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
comprende un dominio HCDR1 codificado por una secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 3, 27, 51, 75, 99, 123, 147, 171, 195, 219 y 243, o una secuencia sustancialmente idéntica que tiene al menos un 95% de homología de las mismas; un dominio HCDR2 codificado por una secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 5, 29, 53, 77, 101, 125, 149, 173, 197, 221 y 245, o una secuencia sustancialmente idéntica que tiene al menos 95% homología de las mismas; un dominio HCDR3 codificado por una secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 7, 31, 55, 79, 103, 127, 151, 175, 199, 223 y 247, o una secuencia sustancialmente similar que tiene al menos 95% homología de las mismas; un dominio LCDR1 codificado por una secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 11, 35, 59, 83, 107, 131, 155, 179, 203, 227 y 251, o una secuencia sustancialmente similar que tiene al menos 95% homología de las mismas; un dominio LCDR2 codificado por una secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 13, 37, 61, 85, 109, 133, 157, 181, 205, 229 y 253, o una secuencia sustancialmente similar que tiene al menos 95% homología de las mismas; y dominio LCDR3 codificado por una secuencia de nucleótidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 15, 39, 63, 87, 111, 135, 159, 183, 207, 231 y 255, o una secuencia sustancialmente similar que tiene al menos 95% homología de las mismas. En una realización preferida, el anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, comprende secuencias HCDR y LCDR codificadas por las secuencias de nucleótidos SEQ ID NO: 147, 149, 151, 155, 157 y 159; 195, 197, 199, 203, 205 y 207; y 3, 5, 7, 11, 13 y 15.
En una realización específica, el anticuerpo anti-hIL-4R o fragmento de unión a antígeno de la divulgación comprende la HCVR que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO: 162 y la LCVR que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO: 164, y se caracteriza por una Kd de aproximadamente 100 pM o menor (sustrato monomérico) o 70 pM o menor (sustrato dimérico); una Kd de aproximadamente 160 pM o menor (sustrato monomérico) o 40 pM o menor (sustrato dimérico) a 25 °C y 37 °C, respectivamente; y una CI50 de aproximadamente 10 pM o menor (sustrato dimérico 25 pM) o de aproximadamente 100 pM o menor (sustrato monomérico 200 pM), que puede bloquear la actividad tanto de la hIL-4 como de la hIL-13 con una CI50 de aproximadamente 30 pM o menor (medida por bioensayo) y reacciona en cruzado con IL- 4R de mono.
En una realización específica, el anticuerpo anti-hIL-4R o fragmento de unión a antígeno de la divulgación comprende la HCVR que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO: 18 y la LCVR que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO: 20, y se caracteriza por una Kd de aproximadamente 450 pM o menor (sustrato monomérico o dimérico); y una CI50 de aproximadamente 40 pM o menor (sustrato dímero 25 pM) o de aproximadamente 100 pM o menor (sustrato monomérico 200 pM), que puede bloquear la actividad tanto de la hIL-4 como de la hIL-13 con una CI50 de aproximadamente 100 pM o menor (medida por bioensayo).
En una realización específica, el anticuerpo anti-hIL-4R o fragmento de unión a antígeno de la divulgación comprende la HCVR que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO: 210 y la LCVR que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO: 212, y se caracteriza por una Kd de aproximadamente 50 pM o menor (sustrato monomérico) o 30 pM o menor (sustrato dimérico); una Kd de aproximadamente 200 pM o menor (sustrato monomérico) o 40 pM o menor (sustrato dimérico) a 25 °C y 37 °C, respectivamente; y una CI50 de aproximadamente 10 pM o menor (sustrato dimérico 25 pM) o de aproximadamente 90 pM o menor (sustrato monomérico 200 pM), que puede bloquear la actividad tanto de la hIL-4 como de la hIL-13 con una CI50 de aproximadamente 25 pM o menor (medida por bioensayo) y no reacciona en cruzado con IL-4R de mono.
En un octavo aspecto, la divulgación presenta un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo que se une específicamente a hIL-4R, que comprende tres regiones determinantes de la complementariedad de cadena pesada y tres de cadena ligera (HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2, LCDR3), en el que la HCDR1 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 (SEQ ID No: 265), en la que X1 = Gly; X2 = Phe; X3 = Thr; X4 = Phe; X5 = Asp o Arg; X6 = Asp o Ser; X7 = Tyr; y X8 = Ala o Gly; la HCDR2 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 (SEQ ID NO: 266), en la que X1 = Ile o Leu, X2 = Ser, X3 = Gly, Tyr o Arg, X4 = Ser, Asp o Thr, X5 = Gly o Ser, X6 = Gly, Ser o Val, X7 = Ser o Asn y X8 = Thr, Lys o Ile; la HCDR3 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 - X9 - X10 - X11 - X12 - X13 - X14 - X15 - X16 - X17 - X18 (SEQ ID NO: 267) en la que X1 = Ala, X2 = Lys, X3 = Asp, Glu o Trp, X4 = Gly o Arg, X5 = Leu, Thr o Arg, X6 = Gly, Arg o Ser, X7 = Ile o Gly, X8 = Thr, Phe o Tyr, X9 = Ile, Asp o Phe, X = Arg, Tyr o Asp, X = Pro, Tyr o está ausente, X = Arg o está ausente, X = Tyr o está ausente, X14 = Tyr o está ausente, X15 = Gly o está ausente, X16 = Leu o está ausente, X17 = Asp o está ausente y X = Val o está ausente; la LCDR1 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X - X - X - X- X - X6 - X7 - X8 - X9 - X10 - X11 (SEQ ID NO: 268) en la que X1 = Gln, X2 = Asp, Ser o Val , X3 = Ile o Leu, X4 = Ser, Leu o Asn, X5 = Asn, Tyr o Ile, X6 = Trp, Ser o Tyr; X7 = Ile o está ausente; X8 = Gly o está ausente; X9 = Tyr o está ausente; X10 = Asn o está ausente y X11 = Tyr o está ausente; la LCDR2 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 (SEQ ID NO: 269) en la que X1 = Leu, Ala o Val, X2 = Ala o Gly y X3 = Ser; y la LCDR3 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 - X9 (SEQ ID NO: 270) en la que X1 = Gln o Met, X2 = Gln, X3 = Ala o Tyr, X4 = Leu o Asn, X5 = Gln o Ser, X6 = Thr, Phe o His, X7 = Pro, X8 = Tyr, Ile o Trp y X9 = Thr.En una realización más específica, la HCDR1 comprende una secuencia de aminoácidos
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 (SEQ ID NO: 265), en la que X1 = Gly; X2 = Phe; X3 = Thr; X4 = Phe; X5 = Arg; X6 = Asp o Ser; X7 = Tyr y X8 = Ala o Gly; la HCDR2 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 (SEQ ID NO: 266), en la que X1 = Ile, X2 = Ser, X3 = Gly o Tyr, X4 = Ser o Thr, X5 = Gly, X6 = Gly o Ser, X7 = Asn y X8 = Thr o Lys; la HCDR3 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 - X9 - X10 - X11 - X12 - X13 - X14 - X15 - X16 - X17 - X18 (SEQ ID NO: 267) en la que X1 = Ala, X2 = Lys, X3 = Asp o Glu, X4 = Gly o Arg, X5 = Leu o Arg, X6 = Gly o Ser, X7 = Ile o Gly, X8 = Thr o Phe,
X = Ile o Asp, X = Arg o Tyr, X = Pro o está ausente, X = Arg o está ausente, X = Tyr o está ausente, X =
__ 1 *1 c ^ ^ A ~7 J
Tyr o está ausente, X = Gly o está ausente, X = Leu o está ausente, X = Asp o está ausente y X = Val o está ausente; la LCDR1 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 - X9
- X10 - X11 (SEQ ID NO: 268) en la que X1 = Gln, X2 = Ser o Val, X3 = Ile o Leu, X4 = Leu o Asn, X5 = Asn o Tyr, X6 = Ser o Tyr, X7 = Ile o está ausente; X8 = Gly o está ausente; X9 = Tyr o está ausente; X10 = Asn o está ausente y X11 = Tyr o está ausente; la LCDR2 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 (SEQ ID NO: 269) en la que X1 = Leu o Ala, X2 = Ala o Gly y X3 = Ser; y la LCDR3 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 - X9 (SEQ ID NO: 270) en la que X1 = Gln o Met, X2 = Gln, X3 = Ala o Tyr, X4 = Leu o Asn, X5 = Gln o Ser, X6 = Thr o His, X7 = Pro, X8 = Tyr o Trp y X9 = Thr.
En otra realización más específica, la HCDR1 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 (SEQ ID NO: 265), en la que X1 = Gly; X2= Phe; X3= Thr; X4= Phe; X5 = Asp o Arg, X6= Asp, X7= Tyr y X8= Ala; la HCDR2 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7
- X8 (SEQ ID NO: 266), en la que X1= Ile o Leu, X2 = Ser, X3 = Gly o Arg, X4 = Ser o Thr, X5 = Gly o Ser, X6 = Gly o Val, X7 = Ser o Asn y X8 = Thr o Ile; la HCDR3 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 - X9 - X10 - X11 - X12 - X13 - X14 - X15 - X16 - X17 - X18 (SEQ ID NO: 267) en la que X1 = Ala, X2 = Lys, X3 = Asp o Trp, X4 = Gly o Arg, X5 = Leu o Thr, X6 = Arg o Ser, X7 = Ile o Gly, X8 = Thr o Tyr, X9 = Ile o Phe, X10 = Arg o Asp, X11 = Pro, Tyr o está ausente, X12= Arg o está ausente, X13 = Tyr o está ausente, X14 = Tyr o está ausente, X15 = Gly o está ausente, X16 = Leu o está ausente, X17 = Asp o está ausente y X18 = Val o está ausente; la LCDR1 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 - X9 - X10 - X11 (SEQ ID NO: 268) en la que X1 = Gln, X2 = Asp o Ser, X3 = Ile o Leu, X4 = Ser o Leu, X5 = Tyr o Ile, X6 = Trp o Ser; X7 = Ile o está ausente; X8 = Gly o está ausente; X9 = Tyr o está ausente; X10 = Asn o está ausente y X11 = Tyr o está ausente; la LCDR2 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2 - X3 (SEQ ID NO: 269) en la que
XI = Leu o Val, X2 = Ala o Gly y X3 = Ser; y la LCDR3 comprende una secuencia de aminoácidos de fórmula X1 - X2
- X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 - X9 (SEQ ID NO: 270) en la que X1 = Gln o Met, X2 = Gln, X3 = Ala, X4 = Leu o Asn, X5 = Gln o Ser, X6 = Thr o Phe, X7 = Pro, X8 = Tyr o Ile y X9 = Thr.
En un noveno aspecto, la divulgación proporciona un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, que comprende secuencias de HCDR1 / HCDR2 / HCDR3 / LCDR1 / LCDR2 / LCDR3 de un par de HCVR y LCVR, en el que las secuencias de HCVR / LCVR se seleccionan del grupo que consiste en SEQ ID NO: 162/164, 210/212 y 18/20. En una realización más específica, las secuencias de CDR de cadena pesada y ligera son las contenidas en la HCVR SEQ ID NO: 162 y en la LCVR SEQ ID NO: 164. En otra realización más específica, las secuencias de CDR de cadena pesada y ligera son las contenidas en la HCVR SEQ ID NO: 18 y en la LCVR SEQ ID NO: 20. En otra realización adicional específica, las secuencias de CDR de cadena pesada y ligera son las contenidas en la HCVR SEQ ID NO: 210 y en la LCVR SEQ ID NO: 212.
La divulgación incluye anticuerpos anti-hIL-4R que tienen un modelo de glucosilación modificado. En algunas aplicaciones, para eliminar sitios de glucosilación no deseables puede ser útil la modificación, o un anticuerpo que carezca de un resto de fucosa presente en la cadena del oligosacárido, por ejemplo, para aumentar la función de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo (ADCC) (véase, Shield et al. (2002) JBC 277:26733). En otras aplicaciones, para modificar la citotoxicidad dependiente de complemento (CDC) puede realizarse la modificación de una galactosilación.
En un décimo aspecto, la divulgación proporciona vectores de expresión recombinante portadores de moléculas de ácido nucleico de la divulgación, y células hospedadoras en las que se han incluido dichos vectores, como procedimientos para preparar los anticuerpos o fragmentos de unión a antígeno de la divulgación, obtenidos cultivando las células hospedadoras de la divulgación. La célula hospedadora puede ser una célula procariota o eucariota, preferentemente la célula hospedadora es una célula de E. coli o una célula de mamífero, tal como una célula CHO.
En un undécimo aspecto, la divulgación presenta una composición que comprende un anticuerpo humano recombinante que se une específicamente al hIL-4R y un vehículo aceptable.
En un duodécimo aspecto, la divulgación proporciona presenta procedimientos para inhibir la actividad de la hIL-4 usando un anticuerpo, o una parte de unión a antígeno del mismo, de la divulgación. En realizaciones específicas, los anticuerpos de la divulgación también bloquean el complejo hIL-13/hIL-13R1 uniéndose a hIL-4R. En una realización, el procedimiento comprende poner en contacto el hIL-4R con el anticuerpo de la divulgación, o parte de antígeno del mismo, de tal manera que la actividad de la hIL-4 o hIL-4/hIL-13 se inhibe. En otra realización, el procedimiento comprende administrar, a un ser humano que padece un trastorno que se mejora inhibiendo la actividad de la hIL-4 o hIL-4/hIL-13, un anticuerpo de la divulgación, o parte de unión a antígeno del mismo. El
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
trastorno tratado es cualquier enfermedad o afección que se alivie, se mejore, se inhiba o se impida por eliminación, inhibición o reducción de la actividad de la hIL-4 o hIL-4/hIL-13.
Los trastornos relacionados con la IL-4 que tratan los anticuerpos, o fragmentos de anticuerpo de la divulgación, incluyen, por ejemplo, artritis (incluyendo artritis séptica), dermatitis herpetiformis, urticaria idiopática crónica, esclerodermia, cicatrización hipertrófica, enfermedad de Whipple, hiperplasia prostática benigna, trastornos pulmonares, tales como asma leve, moderada o grave, trastornos inflamatorios tales como enfermedad intestinal inflamatoria, reacciones alérgicas, enfermedad de Kawasaki, enfermedad de células falciformes, síndrome de Churg- Strauss, enfermedad de Grave, pre-eclampsia, síndrome de Sjogren, síndrome linfoproliferativo autoinmune, anemia hemolítica autoinmune, esófago de Barrett, uveítis autoinmune, tuberculosis y nefrosis.
Otros objetos y ventajas se pondrán de manifiesto a partir de una revisión de la siguiente descripción detallada. Descripción detallada
Antes de describir los procedimientos de la presente invención, debe entenderse que la misma no está limitada a procedimientos particulares, y que las condiciones experimentales descritas, tales como los procedimientos y las condiciones, pueden variar. También debe entenderse que la terminología utilizada en el presente documento tiene la únicamente la finalidad de describir realizaciones particulares y no pretende ser limitante, dado que el alcance de la presente invención solo estará limitado por las reivindicaciones adjuntas.
A menos que se defina de otra manera, todos los términos técnicos y científicos utilizados en el presente documento tienen el mismo significado al normalmente entendido por un experto habitual en la técnica a la cual pertenece la presente invención. Aunque en la realización práctica o ensayo de la presente invención pueden usarse muchos procedimientos y materiales similares o equivalentes a los descritos en el presente documento, los procedimientos y materiales preferidos se describen a continuación.
Definiciones
La expresión “IL4R humano” (hIL-4R), como se usa en el presente documento, pretende referirse al IL-4Ra (SEQ ID NO: 274), un receptor humano de citocina que se une específicamente a interleucina-4 (IL-4). La expresión “interleucina-13 humana” (hIL-13) se refiere a una citocina que se une específicamente al receptor de la IL-13, y “complejo hIL-13/hIL-13R1” se refiere al complejo formado por la unión de la hIL-13 al complejo hIL-13R1, cuyo complejo une el receptor de hIL-4 para iniciar la actividad biológica.
La expresión “anticuerpo”, como se usa en el presente documento, pretende referirse a moléculas de inmunoglobulina que comprenden cuatro cadenas polipeptídicas, dos cadenas pesadas (H, heavy) y dos cadenas ligeras (L, light) interconectadas por enlaces disulfuro. Cada cadena pesada comprende una región variable de cadena pesada (HCVR o VH) y una región constante de cadena pesada. La región constante de cadena pesada comprende tres dominios, CH1, CH2 y CH3. Cada cadena ligera comprende una región variable de cadena ligera (LCVR o VL) y una región constante de cadena ligera. La región constante de la cadena ligera comprende un dominio (CL1). Adicionalmente, las regiones VH y VL pueden subdividirse en regiones de hipervariabilidad, denominadas regiones determinantes de la complementariedad (CDR), intercaladas con regiones que están más conservadas, denominadas regiones marco conservadas (FR, framework regions). Cada VH y VL se compone de tres CDR y cuatro FR, dispuestas desde el extremo amino al extremo carboxilo en el siguiente orden: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
La expresión “parte de unión a antígeno” de un anticuerpo (o simplemente “parte de anticuerpo” o “fragmento de anticuerpo”), como se usa en el presente documento, se refiere a uno o más fragmentos de un anticuerpo que conservan la capacidad de unirse específicamente a un antígeno (por ejemplo, hIL-4R). Se ha demostrado que la función de unión a antígeno de un anticuerpo puede realizarla fragmentos de un anticuerpo de longitud completa. Como ejemplos de fragmentos de unión incluidos dentro de la expresión “parte de unión a antígeno” de un anticuerpo se incluyen (i) un fragmento Fab, un fragmento monovalente que consiste en los dominios VL, VH, CL1 y CH1; (ii) un fragmento F(ab')2, un fragmento bivalente que comprende dos 'fragmentos F(ab)' unidos por un puente disulfuro en la región bisagra: (iii) un fragmento Fd que consiste en los dominios VH y CH1; (iv) un fragmento Fv que consiste en los dominios VL y VH de un solo brazo de un anticuerpo; (v) un fragmento dAb (Ward et al. (1989) Nature 241:544-546), que consiste en un dominio VH; y (vi) una CDR. Adicionalmente, aunque los dos dominios VL y VH, del fragmento Fv, están codificados por genes distintos, estos pueden unirse, usando procedimientos recombinantes, mediante un engarce sintético que los permite constituirse como una sola cadena contigua en la que el par de regiones VL y VH forman moléculas monovalentes (lo que se conoce como Fv monocatenario (scFv, single chain Fv); véase, por ejemplo, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; y Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 85:5879-5883. Dichos anticuerpos monocatenarios también pretenden incluirse dentro de la expresión “parte de unión a antígeno” de un anticuerpo. También se incluyen otras formas de anticuerpos monocatenarios, tales como diacuerpos (véase, por ejemplo, Holliger et al. (1993) Proc. Natl. Acad Sci. USA. 90:6444-6448).
Como se usa en el presente documento, un anticuerpo “neutralizante” o “bloqueante” pretende referirse a un
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
anticuerpo cuya unión al hIL-4R da como resultado la inhibición de la actividad biológica de hIL-4 y/o hIL-13. Esta inhibición de la actividad biológica de hIL-4 y/o hIL-13 puede evaluarse midiendo uno o más indicadores de la actividad biológica de hIL-4 y/o hIL-13 conocidos en la técnica, tales como activación celular inducida por hIL-4 y/o IL-13 y unión de la hIL-4 al hIL-4R (véanse los ejemplos más adelante).
Una “CDR”, o región determinante de la complementariedad, es una región de hipervariabilidad intercalada dentro de regiones que están más conservadas, denominadas “regiones marco conservadas” (FR). En diferentes realizaciones del anticuerpo anti-hIL-4R o fragmento de la divulgación, las FR pueden ser idénticas a las secuencias de la línea germinal humana o pueden modificarse natural o artificialmente.
La expresión “resonancia de plasmón superficial”, como se usa en el presente documento, se refiere a un fenómeno óptico que permite analizar interacciones en tiempo real detectando alteraciones en las concentraciones de las proteínas con una matriz biodetectora, por ejemplo, usando el sistema BIACORE™ (Pharmacia Biosensor AB).
El término “epítopo” se refiere a un determinante antigénico que interacciona con un sitio de unión a antígeno específico en la región variable de una molécula de anticuerpo conocido como paratopo. Un solo antígeno puede tener más de un epítopo. Los epítopos pueden ser conformacionales o lineales. Un epítopo conformacional se produce yuxtaponiendo espacialmente aminoácidos de diferentes segmentos de la cadena polipeptídica lineal. Un epítopo lineal es uno producido por residuos de aminoácidos adyacentes en una cadena polipeptídica. En algunas circunstancias, un epítopo puede incluir fracciones de sacáridos, grupos fosforilo, o grupos sulfonilo en el antígeno.
La expresión “identidad sustancial” o “sustancialmente idéntico”, cuando se hace referencia a un ácido nucleico o a un fragmento del mismo, indica que, cuando se alinea óptimamente con inserciones o deleciones de nucleótidos apropiadas con otro ácido nucleico (o su cadena complementaria), existe una identidad de secuencia de nucleótidos de al menos aproximadamente un 95%, y más preferentemente al menos una identidad de secuencia de aproximadamente un 96%, 97%, 98% o 99% de las bases de nucleótidos, medida por cualquier algoritmo de identidad de secuencias bien conocido, tal como FASTA, BLAST o Gap, como se analiza más adelante.
Aplicada a polipéptidos, la expresión “similitud sustancial” o “sustancialmente similar” significa que, cuando dos secuencias peptídicas se alinean óptimamente, tal como mediante los programas GAP o BESTFIT usando pesos de hueco por defecto, comparten al menos una identidad de secuencia del 95%, incluso más preferentemente al menos una identidad de secuencia de al menos un 98% o 99%. Preferentemente, posiciones de residuos no idénticas difieren por sustituciones conservativas de aminoácidos. Una “sustitución conservativa de aminoácidos” es una en la que un residuo de aminoácido se sustituye por otro residuo de aminoácido que tiene una cadena lateral (grupo R) con propiedades químicas similares (por ejemplo, carga o hidrofobicidad). En general, una sustitución conservativa de aminoácidos no cambiará sustancialmente las propiedades funcionales de una proteína. En los casos en los que dos o más secuencias de aminoácidos difieran entre sí por sustituciones conservativas, el porcentaje de identidad de secuencia, o grado de similitud, puede ajustarse al alza para corregir la naturaleza de la sustitución conservativa. Los expertos en la técnica conocen bien medios para realizar este ajuste. Véase, por ejemplo, Pearson (1994) Methods Mol. Biol. 24: 307-331. Como ejemplos de grupos de aminoácidos que tienen cadenas laterales con propiedades químicas similares se incluyen (1) cadenas laterales alifáticas: glicina, alanina, valina, leucina e isoleucina; (2) cadenas laterales hidroxilo alifáticas: serina y treonina, (3) cadenas laterales que contienen amida: asparagina y glutamina; (4) cadenas laterales aromáticas: fenilalanina, tirosina y triptófano; (5) cadenas laterales básicas: lisina, arginina e histidina; (6) cadenas laterales ácidas: aspartato y glutamato y (7) cadenas laterales que contienen azufre son cisteína y metionina. Los grupos de aminoácidos de sustitución conservativa preferidos son: valina-leucina-isoleucina, fenilalanina-tirosina, lisina-arginina, alanina-valina, glutamato-aspartato, y asparagina- glutamina. Como alternativa, un reemplazo conservativo es cualquier cambio que tenga un valor positivo en la matriz PAM250 de probabilidades logarítmicas desvelada en Gonnet et al. (1992) Science 256: 1443-1445. Un reemplazo “moderadamente conservativo” es cualquier cambio que tenga un valor no negativo en la matriz PAM250 de probabilidades logarítmicas.
Para polipéptidos, similitud de secuencia, denominada también identidad de secuencia, se mide típicamente utilizando programas informáticos de análisis de secuencia. Los programas informáticos análisis de proteínas emparejan secuencias similares usando mediciones de similitud asignadas a diversas sustituciones, deleciones y otras modificaciones, incluyendo sustituciones conservativas de aminoácidos. Por ejemplo, el programa informático GCG contiene programas tales como Gap y Bestfit que pueden usarse con parámetros por defecto para determinar la homología de secuencia o identidad de secuencia entre polipéptidos estrechamente relacionados, tales como polipéptidos homólogos de diferentes especies de organismos o entre una proteína de tipo silvestre y una muteína de la misma. Véase, por ejemplo, la Versión 6,1 de GCG. Las secuencias polipeptídicas también pueden compararse usando FASTA que utiliza parámetros por defecto o recomendados, un programa en GCG Versión 6,1. FASTA (por ejemplo, FASTA2 y FASTA3) proporciona alineaciones y porcentajes de identidad de secuencia de las regiones del mejor solapamiento entre la secuencia problema y la secuencia buscada (Pearson (2000), citado anteriormente). Otro algoritmo preferido cuando se compara una secuencia de la divulgación con una base de datos que contiene un gran número de secuencias de diferentes organismos en el programa informático BLAST, especialmente BLASTP o TBLASTN, que utiliza parámetros por defecto. Véase, por ejemplo, Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol.. 215:403-410 y Altschul et al. (1997) Nucleic Acids Res. 25:3389-402.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Preparación de anticuerpos humanos
Como procedimientos para generar anticuerpos humanos se incluyen, por ejemplo, los descritos en los documentos US 6.596.541, Green et al. (1994) Nature Genetics 7:13-21), US 5.545.807, US 6.787.637.
Los roedores pueden inmunizarse mediante cualquier procedimiento conocido en la técnica (véase, por ejemplo, Harlow y Lane (1988) Antibodies: A Laboratory Manual 1988 Cold Spring Harbor Laboratory; Malik y Lillehoj (1994) Antibodiy Techniques, Academic Press, CA). Preferentemente, los anticuerpos de la divulgación se preparan utilizando la tecnología VELOCIMMUNE™ (documento US 6.596.541). Un ratón transgénico en el que las regiones variables de cadena pesada y ligera de inmunoglobulina endógena se han reemplazado por las regiones variables humanas correspondientes se expone al antígeno de interés, y se recuperan células linfáticas (tales como células B) de los ratones que expresan los anticuerpos. Las células linfáticas pueden fusionarse con una línea celular de mieloma para preparar líneas celulares inmortales de hibridoma y dichas líneas celulares de hibridoma se exploran y se seleccionan para identificar líneas celulares de hibridoma que produzcan anticuerpos específicos dirigidos contra el antígeno de interés. El ADN que codifica las regiones variables de la cadena pesada y de la cadena ligera puede aislarse y unirse a regiones constantes isotípicas deseables de la cadena pesada y cadena ligera. Dicha proteína de anticuerpo puede producirse en una célula, tal como una célula CHO. Como alternativa, el ADN que codifica los anticuerpos quiméricos específicos de antígeno o las regiones variables de las cadenas ligera y pesada puede aislarse directamente de linfocitos específicos de antígeno.
El ADN que codifica las regiones variables de las cadenas pesada y ligera del anticuerpo se aísla y se une operativamente al ADN que codifica las regiones constantes de la cadena pesada y ligera humana. Después, el ADN se expresa en una célula que pueda expresar el anticuerpo totalmente humano. En una realización específica, la célula es una célula CHO.
Los anticuerpos pueden ser terapéuticamente útiles bloqueando una interacción ligando-receptor o inhibiendo la interacción receptor-componente, en lugar de destruyendo células a través de la fijación del complemento (citotoxicidad dependiente del complemento) (CDC) y la participación de citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos (ADCC). La región constante de un anticuerpo es importante en cuanto a la capacidad del anticuerpo para fijar el complemento y mediar la citotoxicidad dependiente de células. Por tanto, el isotipo de un anticuerpo puede seleccionarse en base a si es deseable para que el anticuerpo medie la citotoxicidad.
Las inmunoglobulinas humanas pueden existir en dos formas que están asociadas con la heterogeneidad de la región bisagra. En una forma, una molécula de inmunoglobulina comprende una construcción estable de cuatro cadenas de aproximadamente 150-160 kDa en la que los dímeros se sujetan entre sí mediante un enlace disulfuro de cadena pesada intercatenario. En una segunda forma, los dímeros no están unidos mediante enlaces disulfuro intercatenarios y se forma una molécula de aproximadamente 75-80 kDa compuesta por una cadena ligera y pesada covalentemente acopladas (medio anticuerpo). Estas formas son extremadamente difíciles de separar, incluso después de purificación por afinidad. La frecuencia de aparición de la segunda forma en diversos isotipos de IgG intactos se debe, pero sin limitación, a diferencias estructurales asociadas con el isotipo de la región bisagra del anticuerpo. De hecho, una sola sustitución de aminoácidos en la región bisagra de la bisagra de la IgG4 humana puede reducir significativamente la aparición de la segunda forma (Angal et al. (1993) Molecular Immunology 30:105) a niveles típicamente observados usando una bisagra de la IgG1 humana. La presente divulgación incluye anticuerpos que tienen una o más mutaciones en la región bisagra, CH2 o CH3, que pueden ser deseables, por ejemplo, en la producción, para mejorar el rendimiento de la forma del anticuerpo deseado.
Inicialmente, se aíslan anticuerpos quiméricos de alta afinidad que tienen una región variable humana y una región constante de ratón. Como se describe más adelante, los anticuerpos se caracterizan y se seleccionan por sus características deseables, incluyendo la afinidad de unión al hIL-4R, capacidad para bloquear la unión de la hIL-4 al hIL-4R y/o selectividad por la proteína humana. Las regiones constantes de ratón se reemplazan por regiones constantes humanas deseadas para generar los anticuerpos completamente humanos descritos en la divulgación, por ejemplo, IgG4 o IgG1 de tipo silvestre o modificada (por ejemplo, SEQ ID NO: 271, 272, 273). Aunque la región constante seleccionada puede variar de acuerdo con el uso específico, las características de unión al antígeno de alta afinidad y especificidad hacia la diana residen en la región variable.
Mapeo epitópico y tecnologías relacionadas
Para explorar anticuerpos que se unen a un epítopo particular, puede realizarse un ensayo de bloqueo cruzado rutinario tal y como se describe en Harlow y Lane, citado anteriormente. Otros procedimientos incluyen análisis de mutantes mediante alanina, transferencias con péptidos (Reineke (2004) Methods Mol Biol. 248:443-63), o escisión peptídica. Además, pueden emplearse procedimientos tales como escisión epitópica, extracción epitópica y modificación química de antígenos (Tomer (2000) Protein Science: 9:487-496).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
El Perfilado Asistido con Modificación (MAP), también conocido como Perfilado de Anticuerpos basado en Estructuras de Antígenos (ASAP) es un procedimiento que categoriza grandes cantidades de anticuerpos monoclonales (mAb) dirigidos contra el mismo antígeno de acuerdo con las similitudes del perfil de unión de cada anticuerpo con superficies de antígeno químicamente o enzimáticamente modificadas (publicación de Solicitud de Patente de Estados Unidos No. 2004/0101920). Cada categoría puede reflejar un solo epítopo claramente diferente de, o solapando parcialmente con, un epítopo representado por otra categoría. Esta tecnología permite una filtración rápida de anticuerpos genéticamente idénticos, de tal manera que la caracterización puede centrarse en anticuerpos genéticamente distintos. Cuando se aplica a la exploración de hibridomas, el MAP puede facilitar la identificación de clones de hibridoma extraños con características deseadas. El MAP puede usarse para separar los anticuerpos hIL- 4R de la divulgación en grupos de anticuerpos que se unen a diferentes epítopos.
Las enzimas, tales como, por ejemplo, enzimas proteolíticas y agentes químicos, son agentes útiles para alterar la estructura del antígeno inmovilizado. La proteína antigénica puede inmovilizarse en superficies de microplacas biodetectoras o en perlas de poliestireno. Las últimas pueden procesarse, por ejemplo, con un ensayo, tal como un ensayo de detección múltiple LUMINEX™ (Luminex Corp., TX). Debido a la capacidad de LUMINEX ™ para manejar análisis múltiples hasta con 100 tipos de perlas diferentes, LUMINEX™ proporciona superficies antigénicas casi ilimitadas con diversas modificaciones, dando como resultado una resolución mejorada en el perfilado epitópico de los anticuerpos sobre un ensayo biodetector.
Biespecíficos
Los anticuerpos de la presente divulgación pueden ser monoespecíficos, biespecíficos, o multiespecíficos. Los anticuerpos multiespecíficos pueden ser específicos para diferentes epítopos de un polipéptido diana o pueden contener dominios de unión a antígeno específico para más de un polipéptido diana. Véase, por ejemplo, Tutt et al. (1991) J. Immunol. 147:60-69. Los anticuerpos anti-IL-4R humano pueden unirse a, o co-expresarse con, otra molécula funcional, por ejemplo, otro péptido o proteína. Por ejemplo, un anticuerpo o fragmento del mismo puede unirse funcionalmente (por ejemplo, por acoplamiento químico, fusión genética, asociación no covalente o de otra manera) a una o más entidades moleculares distintas, tales como otro anticuerpo o fragmento de anticuerpo, para producir un anticuerpo biespecífico o un anticuerpo multiespecífico con una segunda especificidad de unión.
Administración y formulaciones terapéuticas
La divulgación proporciona composiciones terapéuticas que comprenden los anticuerpos anti-IL-4R o fragmentos de unión a antígeno de los mismos de la presente divulgación. La administración de las composiciones terapéuticas de acuerdo con la divulgación se administrará con vehículos, excipientes, y otros agentes adecuados que se incorporan en las formulaciones para proporcionar una mejor transferencia, administración, tolerancia y similares. En el formulario conocido por todos los químicos farmacéuticos puede encontrarse una multitud de formulaciones apropiadas: Remington Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Estas formulaciones incluyen, por ejemplo, polvos, pastas, pomadas, gelatinas, ceras, aceites, lípidos, vesículas que contienen lípidos (catiónicos o no catiónicos) (tales como, LIPOFECTINA), conjugados de ADN, pastas de absorción anhidra, emulsiones de aceite en agua y de agua en aceite, emulsiones carbowax (polietilenglicoles de diversos pesos moleculares), geles semisólidos, y mezclas semisólidas que contienen carbowax. Véase también Powell et al ”Compendium of excipients for parenteral formulations” PDA (1998) J Pharm Sci Technol 52:238-311.
La dosis puede variar dependiendo de la edad y de la talla del sujeto al cual se le va a administrar, de la enfermedad diana, afecciones, vía de administración y similares. Cuando el anticuerpo de la presente divulgación se usa para el tratamiento de diversas afecciones y enfermedades asociadas con el IL-4R, en un paciente adulto, es ventajoso administrar por vía intravenosa el anticuerpo de la presente divulgación normalmente a una sola dosis de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 20 mg/kg de peso corporal, más preferentemente de aproximadamente 0,02 a aproximadamente 7, de aproximadamente 0,03 a aproximadamente 5, o de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 3 mg/kg de peso corporal. Dependiendo de la gravedad de la afección, pueden ajustarse la frecuencia y la duración del tratamiento.
Se conocen diversos sistemas de administración y pueden usarse para administrar la composición farmacéutica de la divulgación, por ejemplo, encapsulación en liposomas, micropartículas, microcápsulas, células recombinantes que pueden expresar los virus mutantes, endocitosis mediada por receptores (véase, por ejemplo, Wu et al. (1987) J. Biol. Chem. 262:4429-4432). Los procedimientos de introducción incluyen, pero sin limitación, las vías intradérmica, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, subcutánea, intranasal, epidural y oral. La composición puede administrarse mediante cualquier vía conveniente, por ejemplo por infusión o inyección en embolada, por absorción a través de los revestimientos epiteliales o mucocutáneos (por ejemplo, mucosa oral, mucosa rectal e intestinal, etc.) y puede administrarse junto con otros agentes biológicamente activos. La administración puede ser sistémica o local.
Las composiciones farmacéuticas también pueden administrarse en una vesícula, en particular un liposoma (véase Langer (1990) Science 249:1527-1533; Treat et al. (1989) in Liposomes in the Therapy of Infectious Disease and Cancer, Lopez Berestein y Fidler (eds.), Liss, Nueva York, páginas 353-365; Lopez-Berestein, citado anteriormente, páginas, 317-327; véase anteriormente en líneas generales.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
En determinadas situaciones, la composición farmacéutica puede administrarse en un sistema de liberación controlado. En una realización, puede usarse una bomba (véase Langer, citado anteriormente; Sefton (1987) CRC Crit. Ref. Biomed. Ing. 14:201). En otra realización, pueden usarse materiales poliméricos (véase Medical Applications of Controlled Release, Langer y Wise (eds.), Pres CRC., Boca Ratón, Florida (1974). En otra realización más, puede colocarse un sistema de liberación controlado cerca de la diana de la composición, necesitando de esta manera solo una fracción de la dosis sistémica (véase, por ejemplo, Goodson, in Medical Applications of Controlled Release, citado anteriormente, vol. 2, páginas 115-138, 1984). Otros sistemas de liberación controlada se analizan en la revisión de Langer (1990) Science 249:1527-1533.
Las preparaciones inyectables pueden incluir formas de dosificación para inyecciones intravenosas, subcutáneas, intracutáneas e intramusculares, infusiones por goteo, etc. Estas preparaciones inyectables pueden prepararse mediante procedimientos públicamente conocidos. Por ejemplo, las preparaciones inyectables pueden prepararse, por ejemplo, disolviendo, suspendiendo o emulsionando el anticuerpo o su sal, descrito anteriormente, en un medio acuoso estéril o en un medio oleaginoso convencionalmente usado para inyecciones. Como un medio acuoso para inyección, se encuentra, por ejemplo, la solución salina fisiológica, una solución isotónica que contiene glucosa y otros agentes auxiliares, etc., que puede usarse en combinación con un agente solubilizante apropiado tal como un alcohol (por ejemplo, etanol), un polialcohol (por ejemplo, propilenglicol, polietilenglicol), un tensioactivo no iónico [por ejemplo, polisorbato 80, HCO-50 (aducto de polioxietileno (50 mol) de aceite de ricino hidrogenado)], etc. Como medio oleaginoso, se emplea, por ejemplo, aceite de sésamo, aceite de semilla de soja, etc., que puede usarse en combinación con un agente solubilizante tal como benzoato de bencilo, alcohol bencílico, etc. La inyección preparada de esta manera se carga preferentemente en una ampolla apropiada.
Ventajosamente, las composiciones farmacéuticas para uso oral o parenteral descritas anteriormente se preparan en formas de dosificación en una dosis unitaria adecuada para ajustar una dosis de los ingredientes activos. Dichas formas de dosificación en una dosis unitaria incluyen, por ejemplo, comprimidos, píldoras, cápsulas, inyecciones (ampollas), supositorios, etc. La cantidad del anticuerpo anteriormente mencionado, contenida en una dosis unitaria, es generalmente de aproximadamente 5 a 500 mg por forma de dosificación; especialmente en forma de inyección, se prefiere que la cantidad contenida del anticuerpo anteriormente mencionado sea de aproximadamente 5 a 100 mg y de aproximadamente 10 a 250 mg para las otras formas de dosificación.
Terapias sencillas y de combinación. Los anticuerpos y fragmentos de anticuerpo de la divulgación son útiles para el tratamiento de enfermedades y trastornos que se alivian, inhiben o mejoran reduciendo la actividad de la IL-4. Estos trastornos incluyen los caracterizados por una expresión anómala o excesiva de IL-4, o por una respuesta anómala del hospedador a la producción de IL-4. Los trastornos relacionados con la IL-4 que tratan los anticuerpos o fragmentos de anticuerpo de la invención incluyen, por ejemplo, artritis (incluyendo artritis séptica), dermatitis herpetiformis, urticaria crónica idiopática, esclerodermia, cicatrización hipertrófica, enfermedad de Whipple, hiperplasia prostática benigna, trastornos pulmonares tales como asma (leve, moderado o grave), trastornos inflamatorios tales como enfermedad intestinal inflamatoria, reacciones alérgicas, enfermedad de Kawasaki, enfermedad de las células falciformes, síndrome de Churg-Strauss, enfermedad de Grave, pre-eclampsia, síndrome de Sjogren, síndrome linfoproliferativo autoinmune, anemia hemolítica autoinmune, esófago de Barrett, uveítis autoinmune, tuberculosis, dermatitis atópica, colitis ulcerosa, fibrosis, y nefrosis (véase el documento US 7.186.809).
La divulgación incluye terapias de combinación en las que el anticuerpo anti-IL-4R o fragmentos del mismo se administran en combinación con un segundo agente terapéutico. La coadministración y la terapia de combinación no se limitan a la administración simultánea, sino que incluyen regímenes de tratamiento en los que un anticuerpo anti- IL-4R o fragmentos de anticuerpo se administran al menos una vez durante un tramo del tratamiento que implica administrar al paciente al menos un agente terapéutico distinto. Un segundo agente terapéutico puede ser otro antagonista de IL-4, tal como otro anticuerpo/fragmento de anticuerpo, o un receptor de citocina soluble, un antagonista de IgE, una medicación contra el asma (corticosteroides, agentes no esteroideos, beta agonistas, antagonistas de leucotrieno, xantinas, fluticasona, salmeterol, albuterol) que puede administrarse por inhalación u otros medios apropiados. En una realización específica, el anticuerpo anti-IL-4R o fragmento del mismo de la divulgación puede administrarse con un antagonista de IL-1, tal como rilonacept, o un antagonista de IL-13. El segundo agente puede incluir uno o más antagonistas de receptores de leucotrieno para tratar trastornos tales como enfermedades inflamatorias alérgicas, por ejemplo, asma y alergias. Como ejemplos de antagonistas de receptores de leucotrieno se incluyen, pero sin limitación, montelukast, pranlukast y zafirlukast. El segundo agente puede incluir un inhibidor de citocina, tal como uno o más de un TNF (etanercept, ENBREL™), un antagonista de IL-9, IL-5 o IL- 17.
La presente divulgación también incluye el uso de cualquier anticuerpo anti-IL-4R o fragmento de unión a antígeno descrito en el presente documento en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o trastorno, en el que la enfermedad o trastorno se alivia, se mejora o se inhibe retirando, inhibiendo, reduciendo la actividad de la interleucina-4 humana (hIL-4). Como ejemplos de dichas enfermedades o trastornos se incluyen, por ejemplo, artritis, dermatitis herpetiformis, urticaria idiopática crónica, esclerodermia, cicatrización hipertrófica, enfermedad de Whipple, hiperplasia prostática benigna, trastornos pulmonares, tales como asma, trastornos inflamatorios, reacciones alérgicas, enfermedad de Kawasaki, enfermedad de células falciformes, síndrome de Churg-Strauss, enfermedad de Grave, pre-eclampsia, síndrome de Sjogren, síndrome linfoproliferativo autoinmune,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
anemia hemolítica autoinmune, esófago de Barrett, uveítis autoinmune, tuberculosis, nefrosis, dermatitis atópica y asma.
Ejemplos
Se plantean los siguientes ejemplos para ofrecer a los expertos en la técnica una presentación y una descripción completa de cómo realizar y usar los procedimientos y las composiciones de la invención, y no pretenden limitar el alcance de lo que los inventores consideran como su invención. Se han realizado esfuerzos para garantizar precisión con respecto a los números utilizados (por ejemplo, cantidades, temperatura, etc.) pero deben tenerse en cuenta algunos errores y desviaciones experimentales. A menos que se indique de otra manera, las partes son partes en peso, el peso molecular es el peso molecular medio, la temperatura es en grados centígrados y la presión es, o es casi, la atmosférica.
Ejemplo 1. Generación de anticuerpos humanos contra el receptor humano de la IL-4.
Se inmunizaron ratones VELOCIMMUNE™ (Regeneron Pharmaceuticals, Inc; US 6.596.541) con el receptor humano de la IL-4 (hIL-4R, SEQ ID NO: 274) o con una combinación de hIL-4R y proteína o ADN de IL-4R de mono (Macaca fascicularis) (mfIL-4R, SEQ ID NO: 275). Para obtener una respuesta inmunitaria óptima, a los animales se les administró posteriormente un refuerzo cada 3-4 semanas y se extrajo sangre 10 días después de cada refuerzo para evaluar la progresión de la respuesta anti-antígeno.
Cuando los ratones alcanzaron una respuesta inmunitaria máxima, se recogieron células B que expresaban el anticuerpo y se fusionan con células de mieloma de ratón para formar hibridomas. Como alternativa, se aislaron anticuerpos específicos de antígeno directamente de las células B sin fusionar con células de mieloma, como se describe en la publicación de patente de Estados Unidos 2007/0280945A1. A partir de los recombinantes apropiados aislados, se establecieron líneas de células CHO que expresaban el anticuerpo recombinante estable. Se seleccionaron anticuerpos monoclonales funcionalmente deseables mediante exploración de los medios acondicionados de los hibridomas o células transfectadas con respecto a la especificidad, afinidad de unión a antígeno y fuerza en el bloqueo de la unión de hIL-4 al hIL-4R (descrito más adelante).
Mediante los procedimientos anteriores, se obtuvieron diversos anticuerpos anti-hIL-4R que incluían los anticuerpos ejemplares denominados H4H083P, H4H094P y H4H095P, H4H098P y H4H099P. En los siguientes ejemplos, estos anticuerpos anti-hIL-4R ejemplares y sus propiedades biológicas, se describen con mayor detalle.
Ejemplo 2. Determinación de la afinidad de unión al antígeno.
La afinidad de unión (Kd) de los anticuerpos seleccionados con respecto al hIL-4R a 25°C o 37°C se determinó usando un ensayo de resonancia de plasmón superficial biodetector en tiempo real (BIACORE™ 2000). En resumen, el anticuerpo se capturó sobre una superficie de anticuerpo policlonal anti-hFc de cabra creada mediante acoplamiento directo con una microplaca BIACORE™ para formar una superficie de anticuerpo capturado. Se inyectaron diversas concentraciones (que variaban de 50 nM a 12,5 nM) de hIL-4R monomérico (R&D Systems) o hIL-4R-mFc dimérico sobre la superficie del anticuerpo capturado a 10 pl/min durante 2,5 min a 25°C o a 37°C. La unión del antígeno al anticuerpo y la disociación del complejo unido, se controlaron en tiempo real. Las constantes de disociación de equilibrio (Kd) y las constantes de velocidad de disociación se averiguaron realizando análisis cinético usando el programa informático de evaluación BIA. El programa informático de evaluación BIA también se usó para calcular la semivida (T1/2) de la disociación del complejo antígeno/anticuerpo. En la Tabla 1 se muestran los resultados. NB (No Binding): En condiciones experimentales, no se observó unión de antígeno- anticuerpo. Control: anticuerpo anti-IL-4R completamente humano (patente de Estados Unidos N° 7.186, 809; SEQ ID NOs: 10 y 12).
Tabla 1
Anticuerpo
25°C 37°C
Monomérico
Dimérico Monomérico Dimérico
Kd (pM)
T1/2 (min) Kd (pM) T 1/2 (min) Kd (pM) T 1/2 (min) Kd (pM) T1/2 (min)
Control
1100 18 94 186 3970 4 114 158
H4H083P
48 361 28 245 183 87 38,1 163
H4H094P
NB - NB - NB - NB -
H4H095P
274 131 302 156 437 49 314 116
H4H098P
94,1 243 67,6 237 157 129 38,8 158
H4H099P
NB - NB - NB - NB -
5
10
15
20
25
30
35
40
También se determinó la afinidad de unión (Kd) de los anticuerpos seleccionados con respecto al IL-4R de mono (Macaca fascicularis) (mfIL-4R) a 25°C o a 37°C usando un ensayo de resonancia de plasmón superficial biodetector en tiempo real descrito anteriormente con diversas concentraciones (que variaban de 100 nM a 25 nM) de mfIL-4R-myc-myc-his monomérico (mfIL-4R-mmh) o mfIL-4R-mFc dimérico. Sólo el anticuerpo H4H098P pudo unirse al mfIL-4R tanto monomérico como dimérico a 25°C con una Kd de 552 nM y 9,08 nM, respectivamente. Además, el anticuerpo H4H098P también se unió al mflL-4R dimérico a 37°C con una Kd de 24,3 nM. La unión de H4H083P al mfIL-4R dimérico fue muy débil.
También se evaluó la afinidad de unión antígeno-anticuerpo usando un ensayo de competencia en solución basado en ELISA. En resumen, en primer lugar se revistió una placa MAXISORP™ de 96 pocillos con 5 pg/ml de avidina durante una noche seguido de BSA bloqueante durante 1 hora. Después, durante 2 horas, la placa revestida con avidina se incubó con 250 ng/ml de hIL4-biotina. La placa se usó para medir el hIL-4R-mFc (hIL-4R dimérico) libre o el hIL-4R-myc-myc-his (hIL4R-mmh, hIL4R monomérico) libre en las soluciones de muestra de titulación del anticuerpo. Para preparar la muestra de titulación de anticuerpo, previamente se mezcló una cantidad constante de 25 pM de hIL-4R-mFc o 200 pM de hIL-4R-mmh con diversas cantidades de anticuerpo, que variaban de 0 a aproximadamente 10 nM en diluciones en serie, seguido por una incubación de 1 h a temperatura ambiente para permitir que la unión antígeno-anticuerpo alcanzase el equilibrio. Las soluciones de muestra equilibrada se transfirieron después a las placas revestidas con hIL-4 para medir tanto el hIL-4R-mFc libre como el hIL-4R-mmh libre. Después de 1 hora de unión, la placa se lavó y el hIL-4R-mFc unido se detectó usando un anticuerpo policlonal anti-mFc de ratón conjugado con HRP o un anticuerpo anti-myc policlonal de cabra conjugado con HRP. Los valores CI50 se determinaron (Tabla 2).
Tabla 2
Anticuerpo
CI50 (pM)
hIL-4R-mFc 25 pM
hIL-4R-mmh 200 pM
Control
8,2 87
H4H083P
9,6 80
H4H094P
> 10, 000 > 10.000
H4H095P
40 90
H4H098P
8,8 74
H4H099P
> 10, 000 > 10, 000
El ensayo de competencia en solución basado en ELISA también se usó para determinar la reactividad cruzada de los anticuerpos contra el IL-4R de mono. El anticuerpo H4H098P presentó una CI50 para mfIL-4R-mFc de 300 pM y una CI50 para mfIL-4R-mmh de 20 nM.
Ejemplo 3. Neutralización del efecto biológico de hIL-4 y hIL-13 in vitro
Para determinar la capacidad de los anticuerpos anti-hIL-4R purificados de neutralizar la función celular mediada por hIL-4R in vitro, se desarrolló un bioensayo usando una línea celular HK293 modificada por ingeniería genética que contenía STAT6 humano y un indicador STAT6 luciferasa. La inhibición de la actividad luciferasa inducible por hIL- 4R se determinó de la siguiente manera: las células se sembraron en placas de 96 pocillos en medios a una densidad de 1 x 104 células/pocillo y se incubaron durante una noche a 37°C, con CO2 al 5%. Las proteínas de anticuerpo que variaban de 0 a 20 nM se añadieron en diluciones en serie a las células junto con hIL-4 10 pM o hIL- 13 40 pM. Después las células se incubaron a 37°C, con CO2 al 5% durante 6 horas. El grado de respuesta celular se midió en un ensayo con luciferasa (Promega Biotech). Los resultados se muestran en la Tabla 3. NB: En las condiciones experimentales descritas anteriormente, la actividad luciferasa no se bloqueó. Además, H4H098P pudo bloquear la función celular mediada por mfIL-4R- en presencia de 360 fM de mfIL con una CI50 de 150 nM.
Tabla 3
CI 50 (pM)
hIL-4 10 pM hIL-13 40 pM
Control
47 38
H4H083P
25 19
H4H094P
NB NB
H4H095P
98 86
H4H098P
27 25
5
10
15
20
25
30
35
40
Anticuerpo
CI 50 (pM)
hIL-4 10 pM
hIL-13 40 pM
H4H099P
NB 11,000
LISTADO DE SECUENCIAS
<110> Regeneron Pharmaceuticals, Inc.
<120> Uso médico de anticuerpos humanos de alta afinidad dirigidos contra el receptor humano de IL-4
<130> N113477E
<140> A asignar <141>
<150> EP12175412.1 <151>
<160> 275
<170> FastSEQ para Windows Versión 4.0
<210> 1 <211> 351 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 1 caggtgcagc tcctgtgcag ccaggcaagg atagactccg ctgcaaatga agggggggat
tggtggagtc
cctctggatt
ggctggagtg
tgaagggccg
acagcctgag
ttgactactg
tgggggaggc
caccttccgc
ggtggcggtc
attcaccatc
acttgaggac
gggccaggga
gtggtccagc
tcttatggca
atatcatatg
tccagagaca
acggctgtat
atcccggtca
ctgggaggtc cctgagactc 60 tgcactgggt ccgccaggct 120 atggaagtaa taaatattat 180 attccaagaa cacgctgaat 240 attactgtgc gaaagagggg 300 ccgtctcctc a 351
<210>2 <211> 117 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 2
Gln 1
Val Gln Leu Val 5 Glu Ser Gly
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala
Gly
Met His 35 Trp Val Arg Gln Ala 40
Ala
Val 50 lie Ser Tyr Asp Gly 55 Ser
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70 Ser Arg
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg
Leu
Ala Val
Lys Thr Glu Val 115 Gly 100 Ser Arg Ser Gly Gly Phe
Gly
Gly 10 Val Val Gln Pro Gly 15 Arg
Ser 25
Gly Phe Thr Phe Arg 30 Ser Tyr
Pro
Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val
Asn
Lys Tyr Tyr 60 lie Asp Ser Val
Asp
Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Asn 80
Glu
Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys
Asp 105
Tyr Trp Gly Gln Gly 110 lie Pro
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
<210>3
<211> 24 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400>3
ggattcacct tccgctctta tggc
<210>4 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400>4
Gly Phe Thr Phe Arg Ser Tyr Gly 1 5
<210>5 <211> 24 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400>5
atatcatatg atggaagtaa taaa
<210>6 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400>6
lie Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys 1 5
<210>7 <211> 30 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400>7
gcgaaagagg ggaggggggg atttgactac
<210>8 <211> 10 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
24
24
5
10
15
20
25
30
35
40
45
<400>8
Ala Lys Glu Gly Arg Gly Gly Phe Asp Tyr 15 10
<210>9 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400>9
gacatccaga tgacccagtc tccatcctca ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgtc gggcgagtca ggtcataaac aattatttag cctggtttca gcagaaacca 120 gggaaagtcc ctaagtccct gatccatgct gcatccagtt tacaaagtgg ggtcccatca 180 aagttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagattttg caacttatta ctgccaacag tataatagtc acccgtggac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acga 324
<210> 10 <211>108 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 10
Asp
lie Gln Met
1
Asp
Arg Val Thr 20
Leu
Ala Trp 35 Phe
His
Ala 50 Ala Ser
Ser
Gly Ser Gly
65
Glu
Asp Phe Ala
Thr
Phe Gly Gln 100
Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 5 10 15
lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Val lie Asn Asn Tyr
Gln Gln Lys
25
Pro Gly Lys Val 40
Ser Gly Val Pro
30
Thr Leu Thr lie 75
Pro Lys Ser Leu lie 45
Ser Lys Phe Ser Gly 60
Ser Ser Leu Gln Pro 80
Ser Leu Gln 55
Thr Asp Phe 70
Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser His Pro Trp 85
Gly Thr Lys Val Glu 105
90
lie Lys Arg
95
<210> 11 <211> 18 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 11
caggtcataa acaattat
<210> 12 <211>6 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 12
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Gln Val lie Asn Asn Tyr 1 5
<210> 13 <211>9 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
9
<210> 14 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 14 Ala Ala Ser 1
<210> 15 <211> 27 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 13 gctgcatcc
<400> 15
caacagtata atagtcaccc gtggacg 27
<210> 16 <211>9 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 16
Gln Gln Tyr Asn Ser His Pro Trp Thr 1 5
<210> 17 <211> 351 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 17

caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttccgc tcttatggca tgcactgggt ccgccaggct 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcggtc atatcatatg atggaagtaa taaatattat 180

atagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgaat 240

ctgcaaatga acagcctgag acttgaggac acggctgtat attactgtgc gaaagagggg 300

agggggggat ttgactactg gggccaggga accctggtca ccgtctcctc a 351
5
10
15
20
25
30
<210> 18 <211> 117 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 18

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Tyr 20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Val lie Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr lie Asp Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Asn

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Leu Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Glu Gly Arg Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110
Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 19 <211> 321 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 19
gacatccaga
atcacttgtc
gggaaagtcc
aagttcagcg
gaagattttg
gggaccaagg

tgacccagtc tccatcctca ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

gggcgagtca ggtcataaac aattatttag cctggtttca gcagaaacca 120

ctaagtccct gatccatgct gcatccagtt tacaaagtgg ggtcccatca 180

gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

caacttatta ctgccaacag tataatagtc acccgtggac gttcggccaa 300

tggaaatcaa a 321
<210> 20 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 20
5
10
15
20
25
30
Asp
He Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1
5 10 15
Asp
Arg val Thr He Thr Cys Arg Ala Ser Gln val He Asn Asn Tyr
20 25 30
Leu
Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys val Pro Lys Ser Leu lie
35 40 45
His
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Lys Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gln Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser His Pro Trp
85 90 95
Thr
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu He Lys
100 105
<210>21 <211> 351 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 21
caggtgcagc tggtggagtc tcctgtgcag cctctggatt ccaggcaagg ggctggagtg gcagactccg tgaagggccg ctgcaaatga acagcctgag agggggggat ttgactactg
tgggggaggc gtggtccagc caccttccgc tcttatggca ggtggcagtt atatcatatg attcaccatc tccagagaca agctgaggac acggctgtgt gggccaggga accctggtca
ctgggaggtc cctgagactc 60 tgcactgggt ccgccaggct 120 atggaagtaa taaatactat 180 attccaagaa cacgctgtat 240 attactgtgc gaaagagggg 300 ccgtctcctc a 351
<210> 22 <211> 117 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 22
Gln 1
val Gln Leu Val 5 Glu Ser Gly Gly Gly 10 Val Val Gln Pro Gly 15 Arg
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Arg 30 Ser Tyr
Gly
Met His 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val
Ala
Val 50 lie Ser Tyr Asp Gly 55 Ser Asn Lys Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Lys 65
Gly Arg Phe Thr He 70 Ser Arg Asp Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Tyr 80
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys
Ala Val
Lys Thr Glu Val 115 Gly 100 Ser Arg Ser Gly Gly Phe Asp 105 Tyr Trp Gly Gln Gly 110 Thr Leu
<210> 23 <211> 322 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
5
10
15
20
25
30
35
<223> Sintética
<400> 23
gacatccaga
atcacttgtc
gggaaagccc
aggttcagcg
gaagattttg
gggaccaagg
tgacccagtc
gggcgagtca
ctaagtccct
gcagtggatc
caacttatta
tggaaatcaa
tccatcctca
ggtcataaac
gatctatgct
tgggacagat
ctgccaacag
ac
ctgtctgcat
aattatttag
gcatccagtt
ttcactctca
tataatagtc
ctgtaggaga
cctggtttca
tgcaaagtgg
ccatcagcag
acccgtggac
cagagtcacc 60 gcagaaacca 120 ggtcccatca 180 cctgcagcct 240 gttcggccaa 300 322
<210> 24 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 24
Asp 1
lie Gln Met Thr 5 Gln Ser Pro
Asp
Arg Val Thr 20 lie Thr Cys Arg
Leu
Ala Trp 35 Phe Gln Gln Lys Pro 40
Tyr
Ala 50 Ala Ser Ser Leu Gln 55 Ser
Ser 65
Gly Ser Gly Thr Asp 70 Phe Thr
Glu
Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys
Thr
Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val
<210> 25 <211> 351 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
Ser
Ser
Leu Ser Ala Ser Val Gly
10 15
Ala
Ser Gln Val lie Asn Asn Tyr
25
30
Gly
Lys Ala Pro Lys Ser Leu He
45
Gly
val Pro Ser Arg Phe Ser
Gly
60
Leu
Thr He Ser Ser Leu Gln Pro
75 80
Gln
Gln
Tyr Asn Ser His Pro Trp
90 95
Glu
lie Lys
105
<220>
<223> Sintética <400> 25
caggtgcagc tggtggagtc tcctgtgcag cctctggatt ccaggcaagg ggctggagtg gcagactccg tgaagggccg ctgcaaatga acagcctgat aggggggggt ttgactactg
<210> 26 <211> 117 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
tgggggaggc gtggtccagc caccttcaga agctatggca ggtggcagtt atatcatatg attcaccatc tccagagaca aactgaggac acggctgtgt gggccaggga accacggtca
ctgggaggtc cctgagactc 60 tacactgggt ccgccaggct 120 atggaagtaa taaatactat 180 attccaagaa cacactgtat 240 attattgtgt gaaagagggg 300 ccgtctcctc a 351
<220>
<223> Sintética
<400> 26
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
5
10
15
20
25
30
35
40
45

15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Tyr 20 25 30

Gly lie His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala Val lie Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu lie Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Lys Glu Gly Arg Gly Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110
Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 27 <211> 24 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
24
<210> 28 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 27
ggattcacct tcagaagcta tggc
<400> 28
Gly Phe Thr Phe Arg Ser Tyr Gly 1 5
<210> 29 <211> 24 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
24
<210> 30 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 30
lie Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys 1 5
<400> 29
atatcatatg atggaagtaa taaa
5
10
15
20
25
30
35
40
45
<212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 31
gtgaaagagg ggaggggggg gtttgactac 30
<210> 32 <211> 10 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 32
Val Lys Glu Gly Arg Gly Gly Phe Asp Tyr 15 10
<210> 33 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 33
gacatccaga
atcacttgtc
gggaaagtcc
aagttcagcg
gaagattttg
gggaccaagg
tgacccagtc
gggcgagtca
ctaagtccct
gcagtggatc
caacttatta
tggaaatcaa
tccatcctca
ggtcattaat
gatccatgct
tgggacagat
ctgccaacaa
acga
ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 aattatttag cctggtttca gcagaaacca 120 gcatccagtt tgcaaagagg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcaacag cctgcagcct 240 tataatagtt acccgtggac gttcggccaa 300
324
<210> 34 <211> 108 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 34
Asp 1
lie Gln Met Thr 5 Gln Ser Pro Ser Ser 10 Leu Ser
Asp
Arg Val Thr 20 lie Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln Val
Leu
Ala Trp 35 Phe Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Val Pro
His
Ala 50 Ala Ser Ser Leu Gln 55 Arg Gly Val Pro Ser 60
Ser 65
Gly Ser Gly Thr Asp 70 Phe Thr Leu Thr lie 75 Asn
Glu
Asp Phe Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Gln 90 Tyr Asn
Thr
Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Val Glu 105 lie Lys Arg
Ala
Ser Val 15 Gly
lie
Asn 30 Asn Tyr
Lys 45
Ser Leu lie
Lys
Phe Ser Gly
Ser
Leu Gln Pro 80
Ser
Tyr Pro 95 Trp
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
<212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 35
caggtcatta ataabtat
<210> 36 <211>6 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 36
Gln Val lie Asn Asn Tyr 1 5
<210> 37 <211>9 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 37 gctgcatcc
<210> 38 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 38 Ala Ala Ser 1
<210> 39 <211> 27 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 39
caacaatata atagttaccc gtggacg
<210> 40 <211>9 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 40
18
9
5
10
15
20
25
30
35
Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Trp Thr 1 5
<210>41 <211> 351 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 41

caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcaga agctatggca tacactgggt ccgccaggct 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactat 180

gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacactgtat 240

ctgcaaatga acagcctgat aactgaggac acggctgtgt attattgtgt gaaagagggg 300

aggggggggt ttgactactg gggccaggga accctggtca ccgtctcctc a 351
<210> 42 <211> 117 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 42
Gln 1
Val Gln Leu Val 5 Glu Ser Gly Gly Gly 10 Val Val Gln Pro Gly 15 Arg
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Arg 30 Ser Tyr
Gly
lie His 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val
Ala
Val 50 lie Ser Tyr Asp Gly 55 Ser Asn Lys Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70 Ser Arg Asp Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Tyr 80
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu lie Thr Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys
Val Val
Lys Thr Glu Val 115 Gly 100 Ser Arg Ser Gly Gly Phe Asp 105 Tyr Trp Gly Gln Gly 110 Thr Leu
<210> 43 <211> 321 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 43
gacatccaga
atcacttgtc
gggaaagtcc
aagttcagcg
gaagattttg
gggaccaagg
tgacccagtc tccatcctca gggcgagtca ggtcattaat ctaagtccct gatccatgct gcagtggatc tgggacagat caacttatta ctgccaacaa tggaaatcaa a
ctgtctgcat
aattatttag
gcatccagtt
ttcactctca
tataatagtt
ctgtaggaga
cctggtttca
tgcaaagagg
ccatcaacag
acccgtggac
cagagtcacc 60 gcagaaacca 120 ggtcccatca 180 cctgcagcct 240 gttcggccaa 300 321
5
10
15
20
25
30
<212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 44
Asp
lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1
5 10 15
Asp
Arg val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Val lie Asn Asn Tyr
20 25 30
Leu
Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Ser Leu lie
35 40 45
His
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Arg Gly Val Pro Ser Lys Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Asn Ser Leu Gln Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu lie Lys
100 105
<210> 45 <211> 351 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 45

caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcaga agctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactat 180

gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggctgtgt attactgtgt gaaagagggg 300

aggggggggt ttgactactg gggccaggga accctggtca ccgtctcctc a 351
<210> 46 <211> 117 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 46
Gln 1
val Gln Leu Val 5 Glu Ser Gly Gly Gly 10 val val Gln Pro Gly 15 Arg
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Arg 30 Ser Tyr
Gly
Met His 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val
Ala
Val 50 lie Ser Tyr Asp Gly 55 Ser Asn Lys Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70 Ser Arg Asp Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Tyr 80
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys
Val Val
Lys Thr Glu Val 115 Gly 100 Ser Arg Ser Gly Gly Phe Asp 105 Tyr Trp Gly Gln Gly 110 Thr Leu
5
10
15
20
25
30
35
40
<210> 47 <211> 322 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 47 gacatccaga atcacttgtc gggaaagccc aggttcagcg gaagattttg gggaccaagg
tgacccagtc
gggcgagtca
ctaagtccct
gcagtggatc
caacttatta
tggaaatcaa
tccatcctca
ggtcattaat
gatctatgct
tgggacagat
ctgccaacaa
ac
ctgtctgcat
aattatttag
gcatccagtt
ttcactctca
tataatagtt
ctgtaggaga cagagtcacc 60 cctggtttca gcagaaacca 120 tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ccatcagcag cctgcagcct 240 acccgtggac gttcggccaa 300
322
<210> 48 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 48
Asp
lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1
5 10 15
Asp
Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Val lie Asn Asn Tyr
20 25 30
Leu
Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu lie
35 40 45
Tyr
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gln Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu lie Lys
100 105
<210> 49 <211> 375 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética <400> 49
caggtgcagc tggtggagtc tcctgtgcag gctctggatt ccagggaagg ggctggagtg gcagactccg tgaagggccg ctgcaaatga acagcctgag ctctctataa caattcgccc gtcaccgtct cctca
<210> 50 <211> 125 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
tgggggaggc ttggaacagc cacgtttaga gactatgcca ggtcgcatcg attagtggtt gttcaccatc tccagagaca agccgaggac acggccgtat acgctattat ggtttggacg
cgggggggtc cttgagactc 60 tgacctgggt ccgccaggct 120 ccggtggtaa cacatacttc 180 attccaagaa cacgctgtat 240 attactgtgc gaaagatcga 300 tctggggcca agggtccacg 360
375
<220>
<223> Sintética
5
10
15
20
25
30
35
40
45
<400> 50
Gln 1
Val Gln Leu Val 5 Glu
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys
Ala
Met Thr 35 Trp Val Arg
Ala
Ser 50 lie Ser Gly Ser
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70
Leu
Gln Met Asn Ser 85
Leu
Ala
Lys Asp Arg 100 Leu Ser
Asp
val Trp 115 Gly Gln Gly

Ser Gly Gly Gly Leu Glu Gln Pro Gly Gly 10 15

Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr 25 30

Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 45

Gly Gly Asn Thr Tyr Phe Ala Asp Ser Val 55 60

Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 75 80

Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 90 95

lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu 105 110

Ser Thr Val Thr Val Ser Ser 120 125
<210> 51 <211> 24 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 51
ggattcacgt ttagagacta tgcc
24
<210> 52 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 52
Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr Ala 1 5
<210> 53 <211> 24 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 53
attagtggtt ccggtggtaa caca
24
<210> 54 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 54
lie Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr 1 5
<210> 55
5
10
15
20
25
30
35
40
<211> 54 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 55
gcgaaagatc gactctctat aacaattcgc ccacgctatt atggtttgga cgtc 54
<210> 56 <211> 18 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 56
Ala Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly l*eu 15 10 15
Asp Val
<210> 57 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 57
gacatccaga
atcacttgtc
gggaaagccc
aagttcagcg
gaagattttg
gggaccaagg
tgacccagtc
gggcgagtca
ctaagtccct
gcagtggatc
caacttatta
tggaaatcaa
tccatcctca
ggccattaac
gatctttgct
tgggacagac
ctgccaacag
acga
ctgtctgcat ctgttggaga cagagtcacc 60 aatcatttag cctggtttca gcagaaacca 120 gtatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 tataatagtt acccgtggac gttcggccaa 300
324
<210> 58 <211> 108 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 58
Asp
lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1
5 10 15
Asp
Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ala lie Asn Asn His
20 25 30
Leu
Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu lie
35 40 45
Phe
Ala Val Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Lys Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gln Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg
100 105
<210> 59
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
<211> 18 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 59
caggccatta acaatcat
<210> 60 <211>6 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 60
Gln Ala lie Asn Asn His 1 5
<210> 61 <211>9 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 61 gctgtatcc
<210> 62 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 62 Ala Val Ser 1
<210> 63 <211> 27 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 63
caacagtata atagttaccc gtggacg
<210> 64 <211>9 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 64
18
9
5
10
15
20
25
30
35
Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Trp Thr 1 5
<210> 65 <211>372 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 65
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggaacagc cgggggggtc cttgagactc 60 tcctgtgcag gctctggatt cacgtttaga gactatgcca tgacctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcgcatcg attagtggtt ccggtggtaa cacatacttc 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagatcga 300 ctctctataa caattcgccc acgctattat ggtttggacg tctggggcca agggaccacg 360 gtcaccgtct cc 372
<210> 66 <211> 124 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 66
Glu
val Gln Leu val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Glu Gln Pro Gly Gly
1
5 10 15
Ser
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr
20 25 30
Ala
Met Thr Trp val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala
Ser He Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr Tyr Phe Ala Asp Ser val
50 55 60
Lys
Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65
70 75 80
Leu
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala
Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu
100 105 110
Asp
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
11 r i en
<210> 67 <211> 321 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 67
gacatccaga tgacccagtc tccatcctca ctgtctgcat ctgttggaga cagagtcacc 60 atcacttgtc gggcgagtca ggccattaac aatcatttag cctggtttca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagtccct gatctttgct gtatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 aagttcagcg gcagtggatc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagattttg caacttatta ctgccaacag tataatagtt acccgtggac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 68 <211> 107
5
10
15
20
25
<212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 68
Asp
lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1
5 10 15
ASp
Arg val Thr He Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ala He Asn Asn His
20 25 30
Leu
Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu He
35 40 45
Phe
Ala Val Ser Ser Leu Gln Ser Gly val Pro Ser Lys Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gln Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu lie Lys
100 105
<210> 69 <211> 373 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 69
gaggtgcagc
tcctgtgcag
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
ctctctataa
gtcaccgtct
tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 cctctggatt cacgtttaga gactatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ggctggagtg ggtctcagct attagtggtt ccggtggtaa cacatactac 180 tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagatcga 300 caattcgccc acgctattat ggtttggacg tctggggcca agggaccacg 360 cct 373
<210> 70 <211> 124 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 70
5
10
15
20
25
30
Glu 1
val Gln Leu val 5 Glu Ser Gly
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala
Ala
Met Ser 35 Trp Val Arg Gln Ala 40
Ser
Ala 50 lie Ser Gly Ser Gly 55 Gly
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70 Ser Arg
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala
Ala
Lys Asp Arg 100 Leu Ser He Thr
Asp
Val Trp 115 Gly Gln Gly Thr Thr 120
<210> 71 <211> 322 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
Gly
Gly 10 Leu val Gln Pro Gly 15
Gly
Ser 25
Gly Phe Thr Phe Arg 30 Asp Tyr
Pro
Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val
Asn
Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Asp
Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Tyr 80
Glu
Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys
He 105 val
Arg Thr Pro Val Arg Ser Tyr Tyr 110 Gly Leu
<400> 71
gacatccaga
atcacttgtc
gggaaagccc
aggttcagcg
gaagattttg
gggaccaagg
tgacccagtc
gggcgagtca
ctaagtccct
gcagtggatc
caacttatta
tggaaatcaa
tccatcctca
ggccattaac
gatctatgct
tgggacagat
ctgccaacag
ac
ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 aatcatttag cctggtttca gcagaaacca 120 gtatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 tataatagtt acccgtggac gttcggccaa 300
322
<210> 72 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 72
Asp
He Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser val Gly
1
5 10 15
Asp
Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ala lie Asn Asn His
20 25 30
Leu
Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu lie
35 40 45
Tyr
Ala Val Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Gln Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu He Lys
100 105
<210> 73 <211>375 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
5
10
15
20
25
30
35
40
<223> Sintética <400> 73
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggaacagc cgggggggtc cttgagactc 60 tcctgtgcag gctctggatt cacgtttaga gactatgcca tgacctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcgcatcg attagtggtt ccggtggtaa cacatacttc 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagatcga 300 ctctctataa caattcgccc acgctattat ggtttggacg tctggggcca agggtccacg 360 gtcaccgtct cctca 375
<210> 74 <211> 125 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 74
Gln
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Glu Gln Pro Gly Gly
1
5 10 15
Ser
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr
20 25 30
Ala
Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala
Ser lie Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr Tyr Phe Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys
Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65
70 75 80
Leu
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala
Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu
100 105 110
Asp
Val Trp Gly Gln Gly Ser Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 75 <211> 24 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 75
ggattcacgt ttagagacta tgcc 24
<210> 76 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 76
Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr Ala 1 5
<210> 77 <211> 24 <212> ADN
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 77
attagtggtt ccggtggtaa caca 24
<210> 78 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 78
lie Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr 1 5
<210> 79 <211> 54 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 79
gcgaaagatc gactctctat aacaattcgc ccacgctatt atggtttgga cgtc 54
<210> 80 <211> 18 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 80
Ala Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu 15 10 15
Asp Val
<210> 81 <211> 339 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 81 gaaatagtgt atctcctgca tacctgcaga tccggggtcc agcagagtgg tacacttttg
<210> 82 <211> 113 <212> PRT
<213> Secuencia artificial

tgacgcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60

ggtctagtca gagcctcctg tatagtattg gatacaacta tttggattgg 120

agtcagggca gtctccacag ctccttatct atttgggttc taatcgggcc 180

ctgacaggtt cagtggcagt ggatcaggca cagattttac actgaaaatc 240

aggctgagga tgttgggttt tattactgca tgcaagctct acaaactccg 300

gcccggggac caagctggag atcaaacga 339
5
10
15
20
25
30
35
40
45
<220>
<223> Sintética <400> 82
Glu 1
lie Val Leu Thr 5 Gln Ser Pro
Glu
Pro Ala Ser 20 lie Ser Cys Arg
He
Gly Tyr 35 Asn Tyr Leu Asp Trp 40
Pro
Gln 50 Leu Leu lie Tyr Leu 55 Gly
Asp 65
Arg Phe Ser Gly Ser 70 Gly Ser
Ser
Arg Val Glu Ala 85 Glu Asp Val
Leu Arg
Gln Thr Pro 100 Tyr Thr Phe Gly
<210> 83 <211> 33 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 10 15
Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 25 30
Tyr Leu Gln Lys Ser Gly Gln Ser 45
Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro 60

Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 75 80

Gly Phe Tyr Tyr Cys Met Gln Ala 90 95

Pro Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys 105 110
<400> 83
cagagcctcc tgtatagtat tggatacaac tat 33
<210> 84 <211> 11 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 84
Gln Ser Leu Leu Tyr Ser lie Gly Tyr Asn Tyr 15 10
<210> 85 <211>9 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 85
ttgggttct 9
<210> 86 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 86
5
10
15
20
25
30
35
40
Leu Gly Ser 1
<210> 87 <211> 27 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 87
atgcaagctc tacaaactcc gtacact 27
<210> 88 <211>9 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 88
Met Gln Ala Leu Gln Thr Pro Tyr Thr 1 5
<210> 89 <211> 372 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 89
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggaacagc cgggggggtc cttgagactc 60 tcctgtgcag gctctggatt cacgtttaga gactatgcca tgacctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcgcatcg attagtggtt ccggtggtaa cacatacttc 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagatcga 300 ctctctataa caattcgccc acgctattat ggtttggacg tctggggcca agggaccacg 360 gtcaccgtct cc 372
<210> 90 <211> 124 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética <400> 90
5
10
15
20
25
30
Glu 1
val Gln Leu val 5 Glu Ser Gly
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Gly
Ala
Met Thr 35 Trp Val Arg Gln Ala 40
Ala
Ser 50 lie Ser Gly Ser Gly 55 Gly
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70 Ser Arg
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala
Ala
Lys Asp Arg 100 Leu Ser lie Thr
Asp
Val Trp 115 Gly Gln Gly Thr Thr 120
Gly
Gly 10 Leu Glu Gln Pro Gly 15
Gly
Ser 25
Gly Phe Thr Phe Arg 30 Asp Tyr
Pro
Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val
Asn
Thr Tyr Phe 60 Ala Asp Ser Val
Asp
Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Tyr 80
Glu
Asp 90 Thr Ala val Tyr Tyr 95 Cys
lie 105 Val
Arg Thr Pro Val Arg Ser Tyr Tyr 110 Gly Leu
<210>91 <211> 336 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 91
gatattgtga
atctcctgca
tacctgcaga
tccggggtcc
agcagagtgg
tacacttttg
tgactcagtc
ggtctagtca
agtcagggca
ctgacaggtt
aggctgagga
gcccggggac
tccactctcc
gagcctcctg
gtctccacag
cagtggcagt
tgttgggttt
caagctggag
ctgcccgtca
tatagtattg
ctccttatct
ggatcaggca
tattactgca
atcaaa
cccctggaga
gatacaacta
atttgggttc
cagattttac
tgcaagctct
gccggcctcc 60 tttggattgg 120 taatcgggcc 180 actgaaaatc 240 acaaactccg 300 336
<210> 92 <211> 112 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 92
Asp 1
He val Met Thr 5 Gln Ser Pro
Glu
Pro Ala Ser 20 He Ser Cys Arg
lie
Gly Tyr 35 Asn Tyr Leu Asp Trp 40
Pro
Gln 50 Leu Leu lie Tyr Leu 55 Gly
Asp 65
Arg Phe Ser Gly Ser 70 Gly Ser
Ser
Arg val Glu Ala 85 Glu Asp val
Leu
Gln Thr Pro 100 Tyr Thr Phe Gly
<210> 93 <211> 373 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
Leu
Ser 10 Leu Pro val Thr Pro 15 Gly
Ser 25
Ser Gln Ser Leu Leu 30 Tyr Ser
Tyr
Leu Gln Lys Ser 45 Gly Gln Ser
Ser
Asn Arg Ala 60 Ser Gly Val Pro
Gly
Thr Asp 75 Phe Thr Leu Lys lie 80
Gly
Phe 90 Tyr Tyr Cys Met Gln 95 Ala
Pro 105
Gly Thr Lys Leu Glu 110 He Lys
5
10
15
20
25
30
35
<223> Sintética
<400> 93
gaggtgcagc
tcctgtgcag
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
ctctctataa
gtcaccgtct
tggtggagtc
cctctggatt
ggctggagtg
tgaagggccg
acagcctgag
caattcgccc
cct
tgggggaggc
cacgtttaga
ggtctcagct
gttcaccatc
agccgaggac
acgctattat
ttggtacagc
gactatgcca
attagtggtt
tccagagaca
acggccgtat
ggtttggacg
ctggggggtc
tgagctgggt
ccggtggtaa
attccaagaa
attactgtgc
tctggggcca
cctgagactc 60 ccgccaggct 120 cacatactac 180 cacgctgtat 240 gaaagatcga 300 agggaccacg 360 373
<210> 94 <211> 124 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 94
Glu
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1
5 10 15
Ser
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr
20 25 30
Ala
Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser
Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys
Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65
70 75 80
Leu
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala
Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu
100 105 110
Asp
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
115 120
<210> 95 <211>337 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 95
gatattgtga
atctcctgca
tacctgcaga
tccggggtcc
agcagagtgg
tacacttttg
tgactcagtc
ggtctagtca
agccagggca
ctgacaggtt
aggctgagga
gccaggggac
tccactctcc
gagcctcctg
gtctccacag
cagtggcagt
tgttggggtt
caagctggag
ctgcccgtca
tatagtattg
ctcctgatct
ggatcaggca
tattactgca
atcaaac
cccctggaga
gatacaacta
atttgggttc
cagattttac
tgcaagctct
gccggcctcc 60 tttggattgg 120 taatcgggcc 180 actgaaaatc 240 acaaactccg 300 337
<210> 96 <211> 112 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética <400> 96
5
10
15
20
25
Asp
lie Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1
5 10 15
Glu
Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser
20 25 30
lie
Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro
Gln Leu Leu lie Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val
Pro
50 55 60
Asp
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie
65
70 75 80
Ser
Arg val Glu Ala Glu Asp val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala
85 90 95
Leu
Gln Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys
100 105 110
<210> 97 <211>375 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 97
caggtgcagc tggtggagtc tcctgtgcag cctctggatt ccagggaagg ggctggagtg gcagactccg tgaagggccg ctgcgaatga acagcctgag ctctctataa caattcgccc gtcaccgtct cctca
tgagggactc ttggaacagc caactttaga gactttgcca ggtctcatct attagtggta gttcaccatc tccagagaca agccgaagac acggccgtgt acgctattac ggtctggacg
ctggggggtc cctgagactc 60 tgacctgggt ccgccaggct 120 gtggtagtaa tacatactac 180 attccaacca cacgctgtat 240 attactgtgc gaaagatcga 300 tctggggcca agggtccacg 360
375
<210> 98 <211> 125 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 98
Gln 1
Val Gln Leu Val 5 Glu Ser Glu
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala
Ala
Met Thr 35 Trp Val Arg Gln Ala 40
Ser
Ser 50 lie Ser Gly Ser Gly 55
Ser
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70 Ser Arg
Leu
Arg Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala
Ala
Lys Asp Arg 100 Leu Ser lie Thr
Asp
Val Trp 115 Gly Gln Gly Ser Thr 120
<210> 99 <211> 24 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
Gly
Leu 10 Leu Glu Gln Pro Gly 15
Gly
Ser 25
Gly Phe Asn Phe Arg 30 Asp Phe
Pro
Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val
Asn
Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Asp
Asn Ser 75 Asn His Thr Leu Tyr 80
Glu
Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys
lie 105 Val
Arg Thr Pro Val Arg Ser Tyr Ser 125 Tyr 110 Gly Leu
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
<220>
<223> Sintética
24
<400> 99
ggattcaact ttagagactt tgcc
<210> 100 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 100
Gly Phe Asn Phe Arg Asp Phe Ala 1 5
<210> 101 <211> 24 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 101
attagtggta gtggtagtaa taca 24
<210> 102 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 102
lie Ser Gly Ser Gly Ser Asn Thr 1 5
<210> 103 <211> 54 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 103
gcgaaagatc gactctctat aacaattcgc ccacgctatt acggtctgga cgtc 54
<210> 104 <211> 18 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 104
Ala Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu 15 10 15
Asp Val
5
10
15
20
25
30
35
40
45
<210> 105 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 105
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat atcacttgcc gggcgagtca ggacattagc aattattttg gggaaagttc ctaagctcct gatctttgct gcatccactt cggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca gaagatgttg caacttatta ctgtcaaaaa tatgacagtg gggaccaagg tggaaatcaa acga
<210> 106 <211> 108 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 106
Asp lie Gln Met 1
Asp Arg Val Thr 20
Phe Ala Trp Tyr 35
Phe Ala Ala Ser 50
Ser Gly Ser Gly 65
Glu Asp Val Ala
Thr Phe Gly Gln 100
<210> 107 <211> 18 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 107
caggacatta gcaattat
<210> 108 <211>6 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 108
Gln Asp lie Ser Asn Tyr 1 5
Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu 5 10
lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln 25
Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val 40
Thr Leu His Pro Gly Val Pro 55
Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie 70 75
Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr 85 90
Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 105
ctgtaggaga cagagtcacc 60 cctggtatca gcagaagcca 120 tgcatccagg ggtcccatct 180 ccattcgcag cctgcagcct 240 ccccgtacac ttttggccag 300
324
Ser Ala Ser Val Gly 15
Asp lie Ser Asn Tyr 30
Pro Lys Leu Leu lie 45
Ser Arg Phe Ser 60
Arg
Asp
Arg
Ser Leu Gln
Ser Ala Pro 95
Gly
Pro
30
Tyr
18
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
<210> 109 <211>9 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 109
gctgcatcc 9
<210> 110 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 110 Ala Ala Ser 1
<210> 111 <211> 27 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 111
caaaaatatg acagtgcccc gtacact 27
<210> 112 <211>9 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 112
Gln Lys Tyr Asp Ser Ala Pro Tyr Thr 1 5
<210> 113 <211> 372 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 113
gaggtgcagc tggtggagtc tcctgtgcag cctctggatt ccagggaagg ggctggagtg gcagactccg tgaagggccg ctgcgaatga acagcctgag ctctctataa caattcgccc gtcaccgtct cc
tgagggactc ttggaacagc ctggggggtc cctgagactc 60 caactttaga gactttgcca tgacctgggt ccgccaggct 120 ggtctcatct attagtggta gtggtagtaa tacatactac 180 gttcaccatc tccagagaca attccaacca cacgctgtat 240 agccgaagac acggccgtgt attactgtgc gaaagatcga 300 acgctattac ggtctggacg tctggggcca agggaccacg 360
5
10
15
20
25
30
<210> 114 <211> 124 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 114
Glu
Val Gln Leu Val Glu Ser Glu Gly Leu Leu Glu Gln Pro Gly Gly
1
5 10 15
Ser
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Phe Arg Asp Phe
20 25 30
Ala
Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser
Ser
lie Ser Gly Ser Gly Ser Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys
Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Asn His Thr Leu Tyr
65
70 75 80
Leu
Arg Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala
Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu
100 105 110
Asp
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
115 120
<210> 115 <211> 321 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 115
gacatccaga
atcacttgcc
gggaaagttc
cggttcagtg
gaagatgttg
gggaccaagc
tgacccagtc
gggcgagtca
ctaagctcct
gcagtggatc
caacttatta
tggagatcaa
tccatcctcc
ggacattagc
gatctttgct
tgggacagat
ctgtcaaaaa
a
ctgtctgcat
aattattttg
gcatccactt
ttcactctca
tatgacagtg
ctgtaggaga cagagtcacc 60 cctggtatca gcagaagcca 120 tgcatccagg ggtcccatct 180 ccattcgcag cctgcagcct 240 ccccgtacac ttttggccag 300
321
<210> 116 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 116
5
10
15
20
25
Asp
lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1
5 10 15
Asp
Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp lie Ser Asn Tyr
20 25 30
Phe
Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu lie
35 40 45
Phe
Ala Ala Ser Thr Leu His Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr He Arg Ser Leu Gln Pro
65
70 75 80
Glu
Asp val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asp Ser Ala Pro Tyr
85 90 95
Thr
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys
100 105
<210> 117 <211> 373 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 117
gaggtgcagc
tcctgtgcag
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
ctctctataa
gtcaccgtct
tggtggagtc
cctctggatt
ggctggagtg
tgaagggccg
acagcctgag
caattcgccc
cct
tgggggaggc
caactttaga
ggtctcagct
gttcaccatc
agccgaggac
acgctattac
ttggtacagc
gactttgcca
attagtggta
tccagagaca
acggccgtat
ggtctggacg
ctggggggtc cctgagactc 60 tgagctgggt ccgccaggct 120 gtggtagtaa tacatactac 180 attccaagaa cacgctgtat 240 attactgtgc gaaagatcga 300 tctggggcca agggaccacg 360
373
<210> 118 <211> 124 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 118
Glu
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1
5 10 15
Ser
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Phe Arg Asp Phe
20 25 30
Ala
Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser
Ala lie Ser Gly Ser Gly Ser Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys
Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65
70 75 80
Leu
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala
Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu
100 105 110
Asp
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
115 120
<210> 119 <211> 322 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
5
10
15
20
25
30
35
<220>
<223> Sintética <400> 119
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcgagtca ggacattagc aattatttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagttc ctaagctcct gatctatgct gcatccactt tgcaatcagg ggtcccatct 180 cggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcaaaaa tatgacagtg ccccgtacac ttttggccag 300 gggaccaagc tggagatcaa ac 322
<210> 120 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 120
Asp 1
lie Gln Met Thr 5 Gln Ser Pro Ser Ser 10 Leu
Asp
Arg Val Thr 20 lie Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln
Leu
Ala Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Val
Tyr
Ala 50 Ala Ser Thr Leu Gln 55 Ser Gly Val Pro
Ser 65
Gly Ser Gly Thr Asp 70 Phe Thr Leu Thr lie 75
Glu
Asp Val Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Lys 90 Tyr
Thr
Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Leu Glu 105 lie Lys
Ser
Ala Ser Val 15 Gly
Asp
lie Ser 30 Asn Tyr
Pro
Lys 45 Leu Leu lie
Ser 60
Arg Phe Ser Gly
Ser
Ser
Leu Gln Pro 80
Asp
Ser Ala Pro Tyr
95
<210> 121 <211> 357 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 121
caggtgcagc
tcctgtgtag
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
tataactgga
tggtggagtc
cttctggatt
gactggagtg
tgaagggccg
acagcctgag
acccctttga
tgggggaggc
cacccttaac
ggtctctttt
gttcaccatc
agccgacgac
ctattggggc
ttggtacagc
aactttgtca
attagtgcta
tccagagaca
acggccgtct
cagggaacca
ctggggggtc
tgaactgggt
gtggtggtag
cttccaagaa
attactgtgc
cggtcaccgt
cctgagactc 60 ccgccaggtt 120 tatatactac 180 cacattatat 240 gaaatccccg 300 ctcctca 357
<210> 122 <211> 119 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 122
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Gln 1
Val Gln Leu Val 5 Glu
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys
Val
Met Asn 35 Trp Val Arg
Ser
Phe 50 lie Ser Ala
Ser
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70
Leu
Gln Met Asn Ser 85
Leu
Ala
Lys Ser Pro 100 Tyr Asn
Thr
Thr
Val 115 Thr Val Ser

Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 10 15

Val Ala Ser Gly Phe Thr Leu Asn Asn Phe 25 30

Gln Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 45

Gly Gly Ser lie Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 55 60

Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 75 80

Arg Ala Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 90 95

Trp Asn Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 105 110
Ser
<210> 123 <211> 24 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 123
ggattcaccc ttaacaactt tgtc
24
<210> 124 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 124
Gly Phe Thr Leu Asn Asn Phe Val 1 5
<210> 125 <211> 24 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 125
attagtgcta gtggtggtag tata
24
<210> 126 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 126
lie Ser Ala Ser Gly Gly Ser lie 1 5
<210> 127
5
10
15
20
25
30
35
40
45
<211> 36 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
36
<210> 128 <211> 12 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 127
gcgaaatece cgtataactg gaaccccttt gactat
<400> 128
Ala Lys Ser Pro Tyr Asn Trp Asn Pro Phe Asp Tyr 15 10
<210> 129 <211> 327 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 129

gacatccagt tgacccagtc tccagccacc ctgtctgtgt ctccagggga acgagccacc 60

ctctcctgca gggccagtct gagtgttagc agcaaattag cctggtacca gcagacacct 120

ggccaggctc ccagactcct catctatagt gcctccaccc gggccactgg tatcccagtc 180

aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240

gaagattttg cggtttatta ctgtcagcag tataatcatt ggcctccgta cacttttggc 300

caggggacca aggtggagat caaacga 327
<210> 130 <211> 109 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 130
Asp
lie Gln Leu
1
Glu
Arg Ala Thr 20
Leu
Ala Trp 35 Tyr
Tyr
Ser 50 Ala Ser
Ser
Gly Ser Gly
65
Glu
Asp Phe Ala
Tyr
Thr Phe Gly 100
Thr
Gln Ser Pro
5
Leu
Ser Cys Arg
Gln
Gln
Thr Pro 40
Thr
Arg Ala 55
Thr
Thr
Glu 70 Phe
Thr
Val
Tyr Tyr Cys
85
Gln
Gly Thr Lys
Ala
Thr 10 Leu Ser
Ala 25
Ser Leu Ser
Gly
Gln Ala Pro
Gly
lie Pro Val 60
Leu
Thr lie 75 Ser
Gln
Gln 90 Tyr Asn
Val 105
Glu lie Lys
Val
Ser Pro 15 Gly
Val
Ser 30 Ser Lys
Arg 45
Leu Leu lie
Arg
Phe Ser Gly
Ser
Leu Gln Ser 80
His Arg
Trp Pro 95 Pro
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
<210> 131 <211> 18 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 131
ctgagtgtta gcagcaaa
<210> 132 <211>6 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 132
Leu Ser Val Ser Ser Lys 1 5
<210> 133 <211>9 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 133 agtgcctcc
<210> 134 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 134 Ser Ala Ser 1
<210> 135 <211> 30 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 135
cagcagtata atcattggcc tccgtacact
<210> 136 <211> 10 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
18
9
5
10
15
20
25
30
35
<400> 136
Gln Gln Tyr Asn His Trp Pro Pro Tyr Thr 15 10
<210> 137 <211>357 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 137
gaggtgcagc
tcctgtgtag
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
tataactgga
tggtggagtc
cttctggatt
gactggagtg
tgaagggccg
acagcctgag
acccctttga
tgggggaggc
cacccttaac
ggtctctttt
gttcaccatc
agccgacgac
ctattggggc
ttggtacagc
aactttgtca
attagtgcta
tccagagaca
acggccgtct
cagggaaccc
ctggggggtc
tgaactgggt
gtggtggtag
cttccaagaa
attactgtgc
tggtcaccgt
cctgagactc 60 ccgccaggtt 120 tatatactac 180 cacattatat 240 gaaatccccg 300 ctcctca 357
<210> 138 <211> 119 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 138
Glu
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1
5 10 15
Ser
Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Val
Met Asn Trp Val Arg Gln Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
Val
35 40 45
Ser
Phe He Ser Ala Ser Gly Gly Ser He Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys
Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65
70 75 80
Leu
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala
Lys Ser Pro Tyr Asn Trp Asn Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 139 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética <400> 139
gaaatagtga tgacgcagtc ctctcctgca gggccagtct ggccaggctc ccagactcct aggttcagtg gcagtgggtc gaagattttg cggtttatta caggggacca agctggagat
tccagccacc ctgtctgtgt gagtgttagc agcaaattag catctatagt gcctccaccc tgggacagag ttcactctca ctgtcagcag tataatcatt caaa
ctccagggga acgagccacc 60 cctggtacca gcagacacct 120 gggccactgg tatcccagtc 180 ccatcagcag cctgcagtct 240 ggcctccgta cacttttggc 300
324
5
10
15
20
25
30
<210> 140 <211> 108 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 140
Glu
lie Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1
5 10 15
Glu
Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Leu Ser Val Ser Ser Lys
20 25 30
Leu
Ala Trp Tyr Gln Gln Thr Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu He
35 40 45
Tyr
Ser Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly He Pro Val Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Gln
Ser
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn His Trp Pro Pro
85 90 95
Tyr
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys
100 105
<210> 141 <211>357 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 141
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc tcctgtgcag cctctggatt cacccttaac aactttgtca ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtgcta gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat tataactgga acccctttga ctattggggc cagggaaccc
ctggggggtc cctgagactc 60 tgagctgggt ccgccaggct 120 gtggtggtag tatatactac 180 attccaagaa cacgctgtat 240 attactgtgc gaaatccccg 300 tggtcaccgt ctcctca 357
<210> 142 <211> 119 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 142
5
10
15
20
25
30
Glu 1
Val Gln Leu Val 5 Glu Ser Gly Gly Gly 10 Leu Val Gln Pro Gly 15 Gly
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Leu Asn 30 Asn Phe
Val
Met Ser 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp
Val
Ser
Ala 50 lie Ser Ala Ser Gly 55 Gly Ser lie Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70 Ser Arg Asp Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Tyr 80
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys
Ala Thr
Lys Leu Ser Val 115 Pro 100 Thr Tyr Val Asn Ser Trp Ser Asn Pro 105 Phe Asp Tyr Trp Gly 110 Gln Gly
<210> 143 <211> 325 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 143

gaaatagtga tgacgcagtc tccagccacc ctgtctgtgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgca gggccagtct gagtgttagc agcaaattag cctggtacca gcagaaacct 120

ggccaggctc ccaggctcct catctatagt gcctccacca gggccactgg tatcccagcc 180

aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240

gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag tataatcatt ggcctccgta cacttttggc 300

caggggacca agctggagat caaac 325
<210> 144 <211> 108 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 144
Glu
lie Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1
5 10 15
Glu
Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Leu Ser Val Ser Ser Lys
20 25 30
Leu
Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu lie
35 40 45
Tyr
Ser Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly lie Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gln
Ser
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn His Trp Pro Pro
85 90 95
Tyr
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys
100 105
<210> 145 <211> 375 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
5
10
15
20
25
30
35
40
<400> 145
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc tcctgtgcag gctctggatt cacctttaga ccagggaagg gactggagtg ggtctcatct gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac ctctctataa caattcgccc acgctattat gtcaccgtct cctca
ttggaacagc cgggggggtc cctgagactc 60 gactatgcca tgacctgggt ccgccaggct 120 attagtggtt ccggtggtaa cacatactac 180 tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 acggccgtat attactgtgc gaaagatcga 300 ggtttggacg tctggggcca agggtccacg 360
375
<210> 146 <211> 125 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 146
Gln 1
val Gln Leu Val 5 Glu
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys
Ala
Met Thr 35 Trp Val Arg
Ser
Ser 50 lie Ser Gly
Ser
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70
Leu
Gln Met Asn Ser 85
Leu
Ala
Lys Asp Arg 100 Leu Ser
Asp
Val Trp 115 Gly Gln Gly
Ser Gly Gly Gly Leu 10
Ala Gly Ser Gly Phe 25
Gln Ala Pro Gly Lys 40
Gly Gly Asn Thr Tyr 55
Ser Arg Asp Asn Ser 75
Arg Ala Glu Asp Thr 90
lie Thr lie Arg Pro 105
Ser Thr Val Thr Val 120
Glu
Gln Pro Gly 15 Gly
Thr
Phe Arg 30 Asp Tyr
Gly
Leu 45 Glu Trp Val
Tyr 60
Ala Asp Ser Val
Lys
Asn Thr Leu Tyr 80
Ala
Val Tyr Tyr 95 Cys
Arg Ser
Tyr Ser 125 Tyr 110 Gly Leu
<210> 147 <211> 24 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 147
ggattcacct ttagagacta tgcc
24
<210> 148 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 148
Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr Ala 1 5
<210> 149 <211> 24 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
<220>
<223> Sintética <400> 149
attagtggtt ccggtggtaa caca 24
<210> 150 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 150
lie Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr 1 5
<210> 151 <211> 54 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 151
gcgaaagatc gactctctat aacaattcgc ccacgctatt atggtttgga cgtc 54
<210> 152 <211> 18 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 152
Ala Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu 15 10 15
Asp Val
<210> 153 <211>339 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 153 gacatcgtgt atctcctgca tacctgcaga tccggggtcc agcagagtgg tacacttttg
<210> 154 <211> 113 <212> PRT
<213> Secuencia artificial

tgacccagtc tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60

ggtctagtca gagcctcctg tatagtattg gatacaacta tttggattgg 120

agtcagggca gtctccacag ctccttatct atttgggttc taatcgggcc 180

ctgacaggtt cagtggcagt ggatcaggca cagattttac actgaaaatc 240

aggctgagga tgttgggttt tattactgca tgcaagctct acaaactccg 300

gccaggggac caagctggag atcaaacga 339
5
10
15
20
25
30
35
40
45
<220>
<223> Sintética
<400> 154
Asp 1
lie Val Leu Thr 5 Gln Ser Pro
Glu
Pro Ala Ser 20 lie Ser Cys Arg
lie
Gly Tyr 35 Asn Tyr Leu Asp Trp 40
Pro
Gln 50 Leu Leu lie Tyr Leu 55 Gly
Asp 65
Arg Phe Ser Gly Ser 70 Gly Ser
Ser
Arg Val Glu Ala 85 Glu Asp Val
Leu Arg
Gln Thr Pro 100 Tyr Thr Phe Gly
Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 10 15
Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 25 30
Tyr Leu Gln Lys Ser Gly Gln Ser 45
Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro 60

Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys lie 75 80

Gly Phe Tyr Tyr Cys Met Gln Ala 90 95

Gln Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys 105 110
<210> 155 <211> 33 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 155
cagagcctcc tgtatagtat tggatacaac tat 33
<210> 156 <211> 11 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 156
Gln Ser Leu Leu Tyr Ser lie Gly Tyr Asn Tyr 15 10
<210> 157 <211>9 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
9
<210> 158 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 157 ttgggttct
<400> 158
5
10
15
20
25
30
35
40
Leu Gly Ser 1
<210> 159 <211> 27 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 159
atgcaagctc tacaaactcc gtacact 27
<210> 160 <211>9 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 160
Met Gln Ala Leu Gln Thr Pro Tyr Thr 1 5
<210> 161 <211> 372 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 161

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggaacagc cgggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag gctctggatt cacctttaga gactatgcca tgacctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg gactggagtg ggtctcatct attagtggtt ccggtggtaa cacatactac 180

gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagatcga 300

ctctctataa caattcgccc acgctattat ggtttggacg tctggggcca agggaccacg 360

gtcaccgtct cc 372
<210> 162 <211> 124 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 162
5
10
15
20
25
30
Glu 1
Val Gln Leu Val 5 Glu Ser Gly
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Gly
Ala
Met Thr 35 Trp Val Arg Gln Ala 40
Ser
Ser 50 lie Ser Gly Ser Gly 55 Gly
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70 Ser Arg
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala
Ala
Lys Asp Arg 100 Leu Ser lie Thr
Asp
Val Trp 115 Gly Gln Gly Thr Thr 120
<210> 163 <211> 336 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
Gly
Gly 10 Leu Glu Gln Pro Gly 15
Gly
Ser 25
Gly Phe Thr Phe Arg Asp 30 Tyr
Pro
Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val
Asn
Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Asp
Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Tyr 80
Glu
Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys
lie 105 Val
Arg Thr Pro Val Arg Ser Tyr Tyr 110 Gly Leu
<400> 163
gacatcgtga
atctcctgca
tacctgcaga
tccggggtcc
agcagagtgg
tacacttttg
tgacccagtc
ggtctagtca
agtcagggca
ctgacaggtt
aggctgagga
gccaggggac
tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc gagcctcctg tatagtattg gatacaacta tttggattgg gtctccacag ctccttatct atttgggttc taatcgggcc cagtggcagt ggatcaggca cagattttac actgaaaatc tgttgggttt tattactgca tgcaagctct acaaactccg caagctggag atcaaa
60
120
180
240
300
336
<210> 164 <211> 112 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 164
Asp 1
lie Val Met Thr 5 Gln Ser Pro Leu Ser 10 Leu Pro Val Thr Pro 15 Gly
Glu
Pro Ala Ser 20 lie Ser Cys Arg Ser 25 Ser Gln Ser Leu Leu 30 Tyr Ser
lie
Gly Tyr 35 Asn Tyr Leu Asp Trp 40 Tyr Leu Gln Lys Ser 45 Gly Gln Ser
Pro
Gln 50 Leu Leu lie Tyr Leu 55 Gly Ser Asn Arg Ala 60 Ser Gly Val
Pro
Asp 65
Arg Phe Ser Gly Ser 70 Gly Ser Gly Thr Asp 75 Phe Thr Leu Lys lie 80
Ser
Arg Val Glu Ala 85 Glu Asp Val Gly Phe 90 Tyr Tyr Cys Met Gln 95 Ala
Leu
Gln Thr Pro 100 Tyr Thr Phe Gly Gln 105 Gly Thr Lys Leu Glu 110 lie Lys
<210> 165 <211> 373 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
5
10
15
20
25
30
35
<223> Sintética <400> 165
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttaga gactatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggtt ccggtggtaa cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagatcga 300 ctctctataa caattcgccc acgctattat ggtttggacg tctggggcca agggaccacg 360 gtcaccgtct cct 373
<210> 166 <211> 124 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 166
Glu
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1
5 10 15
Ser
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr
20 25 30
Ala
Met Ser Trp val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser
Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys
Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65
70 75 80
Leu
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala
Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu
100 105 110
Asp
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
115 120
<210> 167 <211>337 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 167
gatattgtga tgactcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca gagcctcctg tatagtattg gatacaacta tttggattgg 120 tacctgcaga agccagggca gtctccacag ctcctgatct atttgggttc taatcgggcc 180 tccggggtcc ctgacaggtt cagtggcagt ggatcaggca cagattttac actgaaaatc 240 agcagagtgg aggctgagga tgttggggtt tattactgca tgcaagctct acaaactccg 300 tacacttttg gccaggggac caagctggag atcaaac 337
<210> 168 <211> 112 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 168
5
10
15
20
25
Asp 1
He Val Met Thr 5 Gln Ser Pro Leu Ser 10 Leu Pro Val Thr Pro 15 Gly
Glu
Pro Ala Ser 20 He Ser Cys Arg Ser 25 Ser Gln Ser Leu Leu 30 Tyr Ser
lie
Gly Tyr 35 Asn Tyr Leu Asp Trp 40 Tyr Leu Gln Lys Pro 45 Gly Gln Ser
Pro
Gln 50 Leu Leu lie Tyr Leu 55 Gly Ser Asn Arg Ala 60 Ser Gly Val
Pro
Asp 65
Arg Phe Ser Gly Ser 70 Gly Ser Gly Thr Asp 75 Phe Thr Leu Lys lie 80
Ser
Arg Val Glu Ala 85 Glu Asp Val Gly Val 90 Tyr Tyr Cys Met Gln 95 Ala
Leu
Gln Thr Pro 100 Tyr Thr Phe Gly Gln 105 Gly Thr Lys Leu Glu 110 lie Lys
<210> 169 <211> 375 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 169 caggtgcagc tcctgtacag ccagggaagg gcagactccg ctgcaaatga ctctccataa gtcaccgtct
tggtggagtc
cctctggatt
ggctggagtg
tgaggggccg
acagcctgag
caattcgccc
cctca
tgggggagtc
cacctttaga
ggtctcatct
gttcaccatc
agccgaagac
acgctattac
ttggagcagc
gactatgcca
attagtggta
tccagagaca
acggccgtat
ggtttggacg
ctggggggtc cctgagactc 60 tgacctgggt ccgccaggct 120 gtggtggtaa tacatactac 180 actccaacca cacgctgtat 240 attactgtgc gaaagatcga 300 tctggggcca agggtccacg 360
375
<210> 170 <211> 125 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 170
Gln 1
val Gln Leu Val 5 Glu Ser Gly
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Thr Ala
Ala
Met Thr 35 Trp Val Arg Gln Ala 40
Ser
Ser 50 lie Ser Gly Ser Gly 55 Gly
Arg 65
Gly Arg Phe Thr lie 70 Ser Arg
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala
Ala
Lys Asp Arg 100 Leu Ser lie Thr
Asp
Val Trp 115 Gly Gln Gly Ser Thr 120
<210> 171 <211> 24 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
Gly
val 10 Leu Glu Gln Pro Gly 15
Gly
Ser 25
Gly Phe Thr Phe Arg 30 Asp Tyr
Pro
Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp val
Asn
Thr Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Asp
Asn Ser 75 Asn His Thr Leu Tyr 80
Glu
Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys
lie 105 val
Arg Thr Pro val Arg Ser Tyr Ser 125 Tyr 110 Gly Leu
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
<220>
<223> Sintética <400> 171
ggattcacct ttagagacta tgcc 24
<210> 172 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 172
Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr Ala 1 5
<210> 173 <211> 24 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 173
attagtggta gtggtggtaa taca 24
<210> 174 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 174
lie Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr 1 5
<210> 175 <211> 54 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 175
gcgaaagatc gactctccat aacaattcgc ccacgctatt acggtttgga cgtc 54
<210> 176 <211> 18 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 176
Ala Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu 15 10 15
Asp Val
5
10
15
20
25
30
35
40
45
<210> 177 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 177

gatattgtga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

attacttgcc gggcgagtca ggacattagc aattattttg cctggtatca gcagaagcca 120

gggaaagttc ctaaactcct gatctttgct gcatccactt tgcatccagg ggtcccatct 180

cggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccattagtag cctgcagcct 240

gaagatgttg caacttatta ctgtcaaaag tataacagtg ccccgtacac ttttggccag 300

gggaccaagg tggaaatcaa acga 324
<210> 178 <211> 108 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 178 _
Asp lie Val Met Thr Gln
Asp Arg Val Thr
Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 5 10 15
lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp lie Ser Asn Tyr
20
Phe
Ala Trp 35 Tyr
Phe
Ala 50 Ala Ser
Ser 65
Gly Ser Gly
Glu
Asp Val Ala
Thr
Phe Gly Gln 100
Gln Gln Lys
Thr Leu His 55
Thr Asp Phe
70
Pro
40
Pro
25
Gly Lys Val Gly Val Pro
Thr Leu Thr lie 75
Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asn 85 90
Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg 105
30
Pro Lys Leu Leu lie 45
Ser Arg Phe Ser Gly 60
Ser Ser Leu Gln Pro 80
Ser Ala Pro Tyr 95
<210> 179 <211> 18 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 179
caggacatta gcaattat
<210> 180 <211>6 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
18
<400> 180
Gln Asp lie Ser Asn Tyr 1 5
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
<210> 181 <211>9 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 181
gctgcatcc 9
<210> 182 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 182 Ala Ala Ser 1
<210> 183 <211> 27 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 183
caaaagtata acagtgcccc gtacact 27
<210> 184 <211>9 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 184
Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Thr 1 5
<210> 185 <211> 372 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 185
gaggtgcagc
tcctgtacag
ccagggaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
ctctccataa
gtcaccgtct
tggtggagtc
cctctggatt
ggctggagtg
tgaggggccg
acagcctgag
caattcgccc
cc
tgggggagtc ttggagcagc ctggggggtc cctgagactc 60 cacctttaga gactatgcca tgacctgggt ccgccaggct 120 ggtctcatct attagtggta gtggtggtaa tacatactac 180 gttcaccatc tccagagaca actccaacca cacgctgtat 240 agccgaagac acggccgtat attactgtgc gaaagatcga 300 acgctattac ggtttggacg tctggggcca agggaccacg 360
372
5
10
15
20
25
30
<210> 186 <211> 124 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 186
Glu
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Val Leu Glu Gln Pro Gly Gly
1
5 10 15
Ser
Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr
20 25 30
Ala
Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser
Ser
lie Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg
Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Asn His Thr Leu Tyr
65
70 75 80
Leu
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala
Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu
100 105 110
Asp
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
115
120
<210> 187 <211> 321 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 187

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

attacttgcc gggcgagtca ggacattagc aattattttg cctggtatca gcagaagcca 120

gggaaagttc ctaaactcct gatctttgct gcatccactt tgcatccagg ggtcccatct 180

cggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccattagtag cctgcagcct 240

gaagatgttg caacttatta ctgtcaaaag tataacagtg ccccgtacac ttttggccag 300

gggaccaagc tggagatcaa a 321
<210> 188 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 188
5
10
15
20
25
0. » <-l <
He Gln Met Thr 5 Gln Ser Pro Ser Ser 10 Leu
Asp
Arg Val Thr 20 lie Thr Cys Arg Ala 25 Ser Gln
Phe
Ala Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40 Gly Lys Val
Phe
Ala 50 Ala Ser Thr Leu His 55 Pro Gly Val Pro
Ser 65
Gly Ser Gly Thr Asp 70 Phe Thr Leu Thr He 75
Glu
Asp val Ala Thr 85 Tyr Tyr Cys Gln Lys 90 Tyr
Thr
Phe Gly Gln 100 Gly Thr Lys Leu Glu 105 He Lys
<210> 189 <211> 373 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 189
gaggtgcagc tggtggagtc tcctgtgcag cctctggatt ccagggaagg ggctggagtg gcagactccg tgaagggccg ctgcaaatga acagcctgag ctctccataa caattcgccc gtcaccgtct cct
<210> 190 <211> 124 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
tgggggaggc ttggtacagc cacctttaga gactatgcca ggtctcagct attagtggta gttcaccatc tccagagaca agccgaggac acggccgtat acgctattac ggtttggacg
Ser
Ala Ser val 15 Gly
Asp
lie Ser 30 Asn Tyr
Pro
Lys 45 Leu Leu lie
Ser 60
Arg Phe Ser Gly
Ser
Ser
Leu Gln Pro 80
Asn
Ser Ala Pro 95 Tyr
ctggggggtc cctgagactc 60 tgagctgggt ccgccaggct 120 gtggtggtaa tacatactac 180 attccaagaa cacgctgtat 240 attactgtgc gaaagatcga 300 tctggggcca agggaccacg 360
373
<400> 190
Glu
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1
5 10 15
Ser
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr
20 25 30
Ala
Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser
Ala lie Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys
Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65
70 75 80
Leu
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala
Lys Asp Arg Leu Ser lie Thr lie Arg Pro Arg Tyr Tyr Gly Leu
100 105 110
Asp
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
115 120
<210> 191 <211> 322 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
5
10
15
20
25
30
35
<220>
<223> Sintética
<400> 191
gacatccaga tgacccagtc atcacttgcc gggcgagtca gggaaagttc ctaagctcct cggttcagtg gcagtggatc gaagatgttg caacttatta gggaccaagc tggagatcaa
<210> 192 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
tccatcctcc ctgtctgcat ggacattagc aattatttag gatctatgct gcatccactt tgggacagat ttcactctca ctgtcaaaag tataacagtg ac
ctgtaggaga cagagtcacc 60 cctggtatca gcagaaacca 120 tgcaatcagg ggtcccatct 180 ccatcagcag cctgcagcct 240 ccccgtacac ttttggccag 300
322
<400> 192
Asp
lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1
5 10 15
Asp
Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp lie Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu
Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu lie
35 40 45
Tyr
Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gln Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr
85 90 95
Thr
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys
100 105
<210> 193 <211>355 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 193
gaagtgcacc
tcctgtgagg
ccggggaagg
gcggactctg
ttggaaatga
acccgggggt
tggtggaatc
cctctggatt
gcctggaatg
tgaagggccg
acagtctgag
attttgacta
tgggggaggc
cacctttgat
ggtctcaggt
attcaccatc
acctgaggac
ctggggccag
ttggtacagc
gattatgcca
cttagtcgga
tccagagaca
acggccttat
ggaaccctgg
ctggcaggtc
tgcactgggt
caagtgtcag
acgccaagaa
attactgtgc
tcaccgtctc
cctgagactc 60 ccggcaagct 120 tataggctat 180 ctccctttat 240 aaaatggggg 300 ctcag 355
<210> 194 <211> 118 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 194
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Glu 1
Val His Leu Val 5 Glu
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys
Ala
Met His 35 Trp Val Arg
Ser
Gly 50 Leu Ser Arg Thr
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70
Leu
Glu Met Asn Ser 85
Leu
Ala
Lys Trp Gly 100 Thr Arg
Leu
Val Thr 115 Val Ser Ser

Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 10 15

Glu Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 25 30

Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 45

Ser Val Ser lie Gly Tyr Ala Asp Ser Val 55 60

Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 75 80

Arg Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 90 95

Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 105 110
<210> 195 <211> 24 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 195
ggattcacct ttgatgatta tgcc
24
<210> 196 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 196
Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr Ala 1 5
<210> 197 <211> 24 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 197
cttagtcgga caagtgtcag tata
24
<210> 198 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 198
Leu Ser Arg Thr Ser Val Ser lie 1 5
5
10
15
20
25
30
35
40
<210> 199 <211> 33 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 199
gcaaaatggg ggacccgggg gtattttgac tac 33
<210> 200 <211> 11 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 200
Ala Lys Trp Gly Thr Arg Gly Tyr Phe Asp Tyr 15 10
<210> 201 <211> 322 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 201

gacatccaga tgacccagtc tccatcttcc gtgtctgcat ctgtgggaga cagagtcacc 60

atcacttgtc gggcgagtca ggatattagt atttggttag cctggtatca gcagagtcca 120

gggaaagccc ctaaactcct gatcaatgtt gcatcccgtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcaacag tctgcagcct 240

gaagattttg taacttacta ttgtcaacag gctaacagtt tcccgatcac cttcggccaa 300

gggacacgac tggcgaccaa ac 322
<210> 202 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 202
Asp
lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1
5 10 15
Asp
Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp lie Ser lie Trp
20 25 30
Leu
Ala Trp Tyr Gln Gln Ser Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie
35 40 45
Asn
Val Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Asn Ser Leu Gln Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Val Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro lie
85 90 95
Thr
Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Ala Thr Lys
100 105
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
<210> 203 <211> 18 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 203
caggatatta gtatttgg
<210> 204 <211>6 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 204
Gln Asp lie Ser lie Trp 1 5
<210> 205 <211>9 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 205 gttgcatcc
<210> 206 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 206 Val Ala Ser 1
<210> 207 <211> 27 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 207
caacaggcta acagtttccc gatcacc
<210> 208 <211>9 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
9
5
10
15
20
25
30
35
<400> 208
Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro lie Thr 1 5
<210> 209 <211> 355 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 209
gaggtgcagc
tcctgtgagg
ccggggaagg
gcggactctg
ttggaaatga
acccgggggt
tggtggagtc
cctctggatt
gcctggaatg
tgaagggccg
acagtctgag
attttgacta
tgggggaggc
cacctttgat
ggtctcaggt
attcaccatc
acctgaggac
ctggggccag
ttggtacagc
gattatgcca
cttagtcgga
tccagagaca
acggccttat
ggaaccctgg
ctggcaggtc cctgagactc 60 tgcactgggt ccggcaagct 120 caagtgtcag tataggctat 180 acgccaagaa ctccctttat 240 attactgtgc aaaatggggg 300 tcaccgtctc ctcag 355
<210> 210 <211> 118 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 210
Glu
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly
1
5
Ser
Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala
20
Ala
Met His Trp Val Arg Gln
Ala
35 40
Ser
Gly Leu Ser Arg Thr Ser Val
50 55
Lys
Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg
65
70
Leu
Glu Met Asn Ser Leu Arg Pro
85
Ala
Lys Trp Gly Thr Arg Gly Tyr
100
Leu
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 211 <211> 322 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
Gly
Gly 10 Leu Val Gln Pro Gly 15 Arg
Ser 25
Gly Phe Thr Phe Asp 30 Asp Tyr
Pro
Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val
Ser
lie Gly Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Asp
Asn Ala 75 Lys Asn Ser Leu Tyr 80
Glu
Asp 90 Thr Ala Leu Tyr Tyr 95 Cys
Phe 105
Asp Tyr Trp Gly Gln 110 Gly Thr
<220>
<223> Sintética
<400> 211
gacatccaga
atcacttgtc
gggaaagccc
aggttcagcg
gaagattttg
gggacacgac
tgacccagtc
gggcgagtca
ctaaactcct
gcagtggatc
taacttacta
tggagattaa
tccatcttcc
ggatattagt
gatcaatgtt
tgggacagat
ttgtcaacag
ac
gtgtctgcat
atttggttag
gcatcccgtt
ttcactctca
gctaacagtt
ctgtgggaga
cctggtatca
tgcaaagtgg
ccatcaacag
tcccgatcac
cagagtcacc 60 gcagagtcca 120 ggtcccatca 180 tctgcagcct 240 cttcggccaa 300 322
<210> 212 <211>107
5
10
15
20
25
30
<212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 212
Asp
lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1
5 10 15
Asp
Arg val Thr He Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp He Ser He Trp
20 25 30
Leu
Ala Trp Tyr Gln Gln Ser Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu He
35 40 45
Asn
val Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Asn Ser Leu Gln Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Val Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro lie
85 90 95
Thr
Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu lie Lys
100 105
<210> 213 <211> 355 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 213

gaagtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggcaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacctttgat gattatgcca tgcactgggt ccggcaagct 120

ccagggaagg gcctggagtg ggtctcaggt cttagtcgga caagtgtcag tataggctat 180

gcggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctccctgtat 240

ctgcaaatga acagtctgag agctgaggac acggccttgt attactgtgc aaaatggggg 300

acccgggggt attttgacta ctggggccaa ggaaccctgg tcaccgtctc ctcag 355
<210> 214 <211> 118 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 214
Glu 1
Val Gln Leu Val 5 Glu Ser Gly Gly Gly 10 Leu Val Gln Pro Gly 15 Arg
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala Ser 25 Gly Phe Thr Phe Asp 30 Asp Tyr
Ala
Met His 35 Trp Val Arg Gln Ala 40 Pro Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val
Ser
Gly 50 Leu Ser Arg Thr Ser 55 Val Ser lie Gly Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70 Ser Arg Asp Asn Ala 75 Lys Asn Ser Leu Tyr 80
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala Glu Asp 90 Thr Ala Leu Tyr Tyr 95 Cys
Ala Leu
Lys Val Trp Thr 115 Gly 100 Val Thr Ser Arg Ser Gly Tyr Phe 105 Asp Tyr Trp Gly Gln 110 Gly Thr
5
10
15
20
25
30
35
40
<210> 215 <211>322 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética <400> 215
gacatccaga tgacccagtc tccatcttcc gtgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgtc gggcgagtca ggatattagt atttggttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctatgtt gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagattttg caacttacta ttgtcaacag gctaacagtt tcccgatcac cttcggccaa 300 gggacacgac tggagattaa ac 322
<210> 216 <211>107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 216
Asp
lie Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1
5 10 15
Asp
Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp lie Ser lie Trp
20 25 30
Leu
Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie
35 40 45
Tyr
Val Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gln Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro lie
85 90 95
Thr
Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu lie Lys
100 105
<210> 217 <211>363 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 217
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctctggaat cacctttagc ccagggaggg ggctggagtg ggtctcagct gcagactccg tgaagggccg gttcaccagc ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac gcagctcgtc ctcactggaa cttcgatctc tea
<210> 218 <211> 121 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
ttgctacagc cgggggggtc cctgagactc 60 acctatgcca tgagctgggt ccgtcaggct 120 attagtggta gtggtgatag cacatcctac 180 tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 acggccgtat attactgtgc gaaagtcata 300 tggggccgtg gcaccctggt cactgtctcc 360
363
<220>
<223> Sintética
5
10
15
20
25
30
35
40
45
<400> 218

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Leu Gln Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cy$ Ala Ala Ser Gly lie Thr Phe Ser Thr Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala lie Ser Gly Ser Gly Asp Ser Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ser Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Val lie Ala Ala Arg Pro His Trp Asn Phe Asp Leu Trp Gly 100 105 110

Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 219 <211> 24 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
24
<210> 220 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 219
ggaatcacct ttagcaccta tgcc
<400> 220
Gly lie Thr Phe Ser Thr Tyr Ala 1 5
<210> 221 <211> 24 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
24
<210> 222 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 221
attagtggta gtggtgatag caca
<400> 222
lie Ser Gly Ser Gly Asp Ser Thr 1 5
5
10
15
20
25
30
35
40
45
<210> 223 <211> 42 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
42
<210> 224 <211> 14 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 223
gcgaaagtca tagcagctcg tcctcactgg aacttcgatc te
<400> 224
Ala Lys Val lie Ala Ala Arg Pro His Trp Asn Phe Asp Leu 15 10
<210> 225 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 225
gaaattgtgt
ctctcctgca
ggccaggctc
aggttcagtg
gaagattttg
gggaccaagg
tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt gggccagtca gagtgttagt agatatttag ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca gagtttatta ctgtcagcag cgtagtgact tggagatcaa acgg
ctccagggga aagagccacc 60 cctggtatca acagaaacct 120 gggccactgg catcccagcc 180 ccatcagcag cctagagcct 240 ggccgctcac tttcggcgga 300
324
<210> 226 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 226
Glu
lie val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1
5 10 15
Glu
Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr
20 25 30
Leu
Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu lie
35 40 45
Tyr
Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly lie Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asp Trp Pro Leu
85 90 95
Thr
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys
100 105
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
<210> 227 <211> 18 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 227
cagagtgtta gtagatat
<210> 228 <211>6 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 228
Gln Ser Val Ser Arg Tyr 1 5
<210> 229 <211>9 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 229 gatgcatcc
<210> 230 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 230 Asp Ala Ser 1
<210> 231 <211> 27 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 231
cagcagcgta gtgactggcc gctcact
<210> 232 <211>9 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
9
5
10
15
20
25
30
35
<400> 232
Gln Gln Arg Ser Asp Trp Pro Leu Thr 1 5
<210> 233 <211> 363 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 233
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc tcctgtgcag cctctggaat cacctttagc ccagggaggg ggctggagtg ggtctcagct gcagactccg tgaagggccg gttcaccagc ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac gcagctcgtc ctcactggaa cttcgatctc tea
<210> 234 <211> 121 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
ttgctacagc cgggggggtc cctgagactc 60 acctatgcca tgagctgggt ccgtcaggct 120 attagtggta gtggtgatag cacatcctac 180 tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 acggccgtat attactgtgc gaaagtcata 300 tggggccgtg gcaccctggt cactgtctcc 360
363
<220>
<223> Sintética
<400> 234
Glu 1
Val Gln Leu Leu 5 Glu Ser Gly
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala
Ala
Met Ser 35 Trp Val Arg Gln Ala 40
Ser
Ala 50 lie Ser Gly Ser Gly 55 Asp
Lys 65
Gly Arg Phe Thr Ser 70 Ser Arg
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala
ti i—1 <
Lys Val lie 100 Ala Ala Arg Pro
Arg
Gly Thr 115 Leu Val Thr Val Ser 120
Gly
Gly 10 Leu Leu Gln Pro Gly 15
Gly
Ser 25
Gly lie Thr Phe Ser 30 Thr Tyr
Pro
Gly Arg Gly Leu 45 Glu Trp Val
Ser
Thr Ser Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Asp
Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Tyr 80
Glu
Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys
His 105 Ser
Trp Asn Phe Asp Leu 110 Trp Gly
<210> 235 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 235
gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gagtgttagt agatatttag cctggtatca acagaaacct 120 ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180 aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240 gaagattttg gagtttatta ctgtcagcag cgtagtgact ggccgctcac tttcggcgga 300 gggaccaagg tggagatcaa acgg 324
5
10
15
20
25
30
<210> 236 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética <400> 236
Glu 1
lie Val Leu Thr 5 Gln Ser Pro
Glu
Arg Ala Thr 20 Leu Ser Cys Arg
Leu
Ala Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40
Tyr
Asp 50 Ala Ser Asn Arg Ala 55 Thr
Ser 65
Gly Ser Gly Thr Asp 70 Phe Thr
Glu
Asp Phe Gly Val 85 Tyr Tyr Cys
Thr
Phe Gly Gly 100 Gly Thr Lys Val
<210> 237 <211> 363 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
Ala
Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
10 15
Ala
Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr
25
30
Gly
Gln Ala Pro Arg Leu Leu lie
45
Gly
lie Pro Ala Arg Phe Ser
Gly
60
Leu
Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro
75 80
Gln
Gln
Arg Ser Asp Trp Pro Leu
90 95
Glu
lie Lys
105
<400> 237
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggaat cacctttagc acctatgcca tgagctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtgatag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagtcata 300 gcagctcgtc ctcactggaa cttcgatctc tggggccgtg gcaccctggt cactgtctcc 360 tea 363
<210> 238 <211> 121 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 238
5
10
15
20
25
30
Glu
Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1
5 10 15
Ser
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly lie Thr Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Ala
Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser
Ala lie Ser Gly Ser Gly Asp Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys
Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65
70 75 80
Leu
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala
Lys Val lie Ala Ala Arg Pro His Trp Asn Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Arg
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 239 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 239

gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttagt agatatttag cctggtatca acagaaacct 120

ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180

aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240

gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag cgtagtgact ggccgctcac tttcggcgga 300

gggaccaagg tggagatcaa acgg 324
<210> 240 <211> 108 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 240
Glu
lie Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1
5 10 15
Glu
Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr
20 25 30
Leu
Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu lie
35 40 45
Tyr
Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly lie Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro
65
70 75 80
Glu
Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asp Trp Pro Leu
85 90 95
Thr
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg
100 105
<210> 241 <211> 366 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
5
10
15
20
25
30
35
40
<400> 241
caggtgcagc
acctgtgcag
ccaggcaagg
gcagactccg
ctggaaatga
tctataagtg
tcctca
tggtggagtc
cctctggatt
ggctggagtg
tgaagggccg
acagcctgag
gaacttacaa
tgggggaggc
caccttcagt
ggtggcaatt
attcaccatc
agctgaggac
ctggttcgat
gtggtccagc
agtaatggca
atatcatatg
tccagagaca
acggctgtgt
tcctggggcc
ctgggaggtc
tgcactgggt
atggaaataa
attccaagca
attactgtac
agggaaccct
<210> 242 <211> 122 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética <400> 242

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro 15 10

Ser Leu Arg Leu Thr Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser 20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45

Ala lie lie Ser Tyr Asp Gly Asn Asn Gln Tyr Tyr Ala Asp 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys His Thr 65 70 75

Leu Glu Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90

Thr Lys Ala lie Ser lie Ser Gly Thr Tyr Asn Trp Phe Asp 100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 243 <211> 24 <212>ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 243
ggattcacct tcagtagtaa tggc
<210> 244 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 244
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Asn Gly 1 5
<210> 245 <211> 24 <212> ADN
cctgagactc 60 ccgccaggct 120 tcaatactat 180 cacgctgtat 240 aaaagccatc 300 ggtcaccgtc 360 366
Gly Arg 15
Ser Asn
Trp Val
Ser Val
Leu Tyr 80
Tyr Cys 95
Ser Trp
24
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
<400> 245
atatcatatg atggaaataa tcaa
<210> 246 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 246
lie Ser Tyr Asp Gly Asn Asn Gln 1 5
<210> 247 <211> 45 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 247
acaaaagcca tctctataag tggaacttac aactggttcg attcc
45
<210> 248 <211> 15 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 248
Thr Lys Ala lie Ser lie Ser Gly Thr Tyr Asn Trp Phe Asp Ser 15 10 15
<210> 249 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 249 gaaattgtat ctctcctgca ggccaggctc aggttcagtg gaagattttg gggaccaagg
tgacacagtc
gggccagtca
ccaggctcct
gcagtgggtc
cagtttatta
tggagatcaa
tccagccatc
gagtgttagc
catctatgat
tgggacagac
ctgtcaacag
acgg
ctgtctttgt
aggtacttag
gcatccaaca
ttcactctca
cgtagcaact
ctccagggga
cctggtacca
gggccactgg
ccatcagcag
ggccgctcac
aagagccacc 60 acagaaacct 120 catcccagcc 180 cctagagcct 240 tttcggcgga 300 324
<210> 250 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
<400> 250

Glu lie Val Leu Thr Gln Ser1 Pro Ala lie Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr 20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu lie 35 40 45
Tyr
Asp 50 Ala Ser
Ser 65
Gly Ser Gly
Glu
Asp Phe Ala
Thr
Phe Gly Gly 100
Asn Arg Ala Thr Gly
55
Thr Asp Phe Thr Leu 70
Val Tyr Tyr Cys Gln 85
Gly Thr Lys Val Glu 105
lie
Pro Ala 60 Arg (0 Ser Gly
Thr
lie 75 Ser Ser Leu Glu Pro 80
Gln 90 lie
Arg Lys Ser Asn Trp Pro 95 Leu
<210> 251 <211> 18 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 251
cagagtgtta gcaggtac
18
<210> 252 <211>6 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 252
Gln Ser Val Ser Arg Tyr
1 5
<210> 253 <211>9 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 253 gatgcatcc
<210> 254 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 254
5
10
15
20
25
30
35
40
Asp Ala Ser
1
<210> 255 <211> 27 <212>ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 255
caacagcgta gcaactggcc gctcact 27
<210> 256 <211>9 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 256
Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu Thr 1 5
<210> 257 <211>366 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
ctgggaggtc cctgagactc 60 tgcactgggt ccgccaggct 120 atggaaataa tcaatactat 180 attccaagca cacgctgtat 240 attactgtac aaaagccatc 300 agggaaccct ggtcaccgtc 360
366
<210> 258 <211> 122 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 258
<400> 257
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc acctgtgcag cctctggatt caccttcagt agtaatggca ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcaatt atatcatatg gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca ctggaaatga acagcctgag agctgaggac acggctgtgt tctataagtg gaacttacaa ctggttcgat tcctggggcc tcctca
5
10
15
20
25
30
Gln
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1
5 10 15
Ser
Leu Arg Leu Thr Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Asn
20 25 30
Gly
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala
lie lie Ser Tyr Asp Gly Asn Asn Gln Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys
Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys His Thr Leu Tyr
65
70 75 80
Leu
Glu Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr
Lys Ala lie Ser lie Ser Gly Thr Tyr Asn Trp Phe Asp Ser Trp
100 105 110
Gly
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 259 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
<400> 259
gaaattgtat tgacacagtc ctctcctgca gggccagtca ggccaggctc ccaggctcct aggttcagtg gcagtgggtc gaagattttg cagtttatta gggaccaagg tggagatcaa
<210> 260 <211> 107 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
tccagccatc ctgtctttgt gagtgttagc aggtacttag catctatgat gcatccaaca tgggacagac ttcactctca ctgtcaacag cgtagcaact acgg
ctccagggga aagagccacc 60 cctggtacca acagaaacct 120 gggccactgg catcccagcc 180 ccatcagcag cctagagcct 240 ggccgctcac tttcggcgga 300
324
<400> 260
Glu 1
lie val Leu Thr 5 Gln Ser Pro
Glu
Arg Ala Thr 20 Leu Ser Cys Arg
Leu
Ala Trp 35 Tyr Gln Gln Lys Pro 40
Tyr
Asp 50 Ala Ser Asn Arg Ala 55 Thr
Ser 65
Gly Ser Gly Thr Asp 70 Phe Thr
Glu
Asp Phe Ala Val 85 Tyr Tyr Cys
Thr
Phe Gly Gly 100 Gly Thr Lys Val
<210> 261 <211> 366 <212> ADN
<213> Secuencia artificial
Ala
lie Leu Ser Leu Ser Pro Gly
10 15
Ala
Ser Gln Ser val Ser Arg Tyr
25
30
Gly
Gln Ala Pro Arg Leu Leu lie
45
Gly
lie Pro Ala Arg Phe Ser
Gly
60
Leu
Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro
75 80
Gln
Gln
Arg Ser Asn Trp Pro Leu
90 95
Glu
lie Lys
105
5
10
15
20
25
30
35
<400> 261
caggtgcagc
tcctgtgcag
ccaggcaagg
gcagactccg
ctgcaaatga
tctataagtg
tcctca
tggtggagtc
cctctggatt
ggctggagtg
tgaagggccg
acagcctgag
gaacttacaa
tgggggaggc
caccttcagt
ggtggcagtt
attcaccatc
agctgaggac
ctggttcgat
gtggtccagc agtaatggca atatcatatg tccagagaca acggctgtgt tcctggggcc
ctgggaggtc
tgcactgggt
atggaaataa
attccaagaa
attactgtac
agggaaccct
cctgagactc 6 0 ccgccaggct 120 tcaatactat 180 cacgctgtat 240 aaaagccatc 300 ggtcaccgtc 360 366
<210> 262 <211> 122 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética <400> 262
Gln 1
Val Gln Leu Val 5 Glu Ser Gly
Ser
Leu Arg Leu 20 Ser Cys Ala Ala
Gly
Met His 35 Trp Val Arg Gln Ala 40
Ala
val 50 He Ser Tyr Asp Gly 55 Asn
Lys 65
Gly Arg Phe Thr lie 70 Ser Arg
Leu
Gln Met Asn Ser 85 Leu Arg Ala
Thr
Lys Ala lie 100 Ser lie Ser Gly
Gly
Gln Gly 115 Thr Leu Val Thr val 120
<210> 263 <211> 324 <212> ADN
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética
Gly
Gly 10 Val Val Gln Pro Gly 15 Arg
Ser 25
Gly Phe Thr Phe Ser 30 Ser Asn
Pro
Gly Lys Gly Leu 45 Glu Trp Val
Asn
Gln Tyr Tyr 60 Ala Asp Ser Val
Asp
Asn Ser 75 Lys Asn Thr Leu Tyr 80
Glu
Asp 90 Thr Ala Val Tyr Tyr 95 Cys
Thr 105 Ser
Tyr Ser Asn Trp Phe Asp 110 Ser Trp
<400> 263
gaaattgtat
ctctcctgca
ggccaggctc
aggttcagtg
gaagattttg
gggaccaagg
tgacacagtc
gggccagtca
ccaggctcct
gcagtgggtc
cagtttatta
tggagatcaa
tccagccacc
gagtgttagc
catctatgat
tgggacagac
ctgtcaacag
acgg
ctgtctttgt
aggtacttag
gcatccaaca
ttcactctca
cgtagcaact
ctccagggga aagagccacc 60 cctggtacca acagaaacct 120 gggccactgg catcccagcc 180 ccatcagcag cctagagcct 240 ggccgctcac tttcggcgga 300
324
<210> 264 <211> 108 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
<220>
<223> Sintética
5
10
15
20
25
30
35
40
45
<400> 264 _

Glu lie Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr 20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu lie 35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly lie Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu lie Lys Arg 100 105
<210> 265 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <220>
<221> VARIANTE <222> (1)...(8)
<223> Xaa = Cualquier aminoácido <400> 265
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5
<210> 266 <211>8 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <220>
<221> VARIANTE <222> (1)...(8)
<223> Xaa = Cualquier aminoácido <400> 266
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5
<210> 267 <211> 18 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <220>
<221> VARIANTE <222> (1).. .(18)
<223> Xaa = Cualquier aminoácido <400> 267
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 15 10 15
Xaa Xaa
<210> 268 <211> 11 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <220>
<221> VARIANTE <222> (1)...(11)
<223> Xaa = Cualquier aminoácido <400> 268
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 15 10
<210> 269 <211>3 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <220>
<221> VARIANTE <222> (1)...(3)
<223> Xaa = Cualquier aminoácido
<400> 269 Xaa Xaa Xaa 1
<210> 270 <211>9 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <220>
<221> VARIANT <222> (1)...(9)
<223> Xaa = Cualquier aminoácido <400> 270
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5
<210> 271 <211> 330 <212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
<223> Sintética <400> 271
Ala 1
Ser Thr Lys Gly 5 Pro Ser Val Phe Pro 10 Leu Ala Pro Ser Ser 15 Lys
Ser
Thr Ser Gly 20 Gly Thr Ala Ala Leu 25 Gly Cys Leu Val Lys 30 Asp Tyr
Phe
Pro Glu 35 Pro Val Thr Val Ser 40 Trp Asn Ser Gly Ala 45 Leu Thr Ser
Gly
Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu
Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65
70 75 80
Tyr
lie Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys
Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
Pro
Pro
115 120 125
Lys
Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val
Val
Val
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145
150 155 160
Tyr
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu
Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys
Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225
230 235 240
Leu
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro
Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn
Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305
310 315 320
Gln
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
5 <210> 272
<211> 327 <212> PRT
<213> Secuencia artificial
10 <220>
<223> Sintética
<400> 272
Ala
Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1
5 10 15
Ser
Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe
Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly
Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu
Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65
70 75 80
Tyr
Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg
Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu
Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp
Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp
Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val
Asp
145
150 155 160
Gly
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro
Ser Ser lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225
230 235 240
Asn
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
lie
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr
Thr
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Arg
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305
310 315 320
Leu
Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 273 5 <211> 327
<212> PRT
<213> Secuencia artificial <220>
10 <223> Sintética
<400> 273
Ala 1
Ser Thr Lys
Ser
Thr Ser Glu 20
Phe
Pro Glu 35 Pro
Gly
Val 50 His Thr
Leu 65
Ser Ser Val
Tyr
Thr Cys Asn
Arg
Val Glu Ser 100
Glu
Phe Leu 115 Gly
Asp
Thr 130 Leu Met
Asp 145
Val Ser Gln
Gly
Val Glu Val
Asn
Ser Thr Tyr 180
Trp
Leu Asn 195 Gly
Pro
Ser Ser lie
210
Glu 225
Pro Gln Val
Asn
Gln Val Ser
lie
Ala Val Glu 260
Thr
Thr
Pro 275 Pro
Arg
Leu 290 Thr Val
Cys 305
Ser Val Met
Leu
Ser Leu Ser
5 <210> 274
<211>207 <212> PRT <213> Homo sapiens
10 <400> 274
Gly 5
Pro Ser Val Phe Pro 10
Ser
Thr Ala Ala Leu 25 Gly
Val
Thr Val Ser 40 Trp Asn
Phe
Pro Ala 55 Val Leu Gln
Val
Thr 70 Val Pro Ser Ser
Val 85
Asp His Lys Pro Ser 90
Lys
Tyr Gly Pro Pro 105 Cys
Gly
Pro Ser Val 120 Phe Leu
lie
Ser Arg 135 Thr Pro Glu
Glu
Asp 150 Pro Glu Val Gln
His 165
Asn Ala Lys Thr Lys 170
Arg
Val Val Ser Val 185 Leu
Lys
Glu Tyr Lys 200 Cys
Lys
Glu
Lys Thr lie Ser Lys
215
Tyr
Thr 230 Leu Pro Pro Ser
Leu 245
Thr Cys Leu Val Lys 250
Trp
Glu Ser Asn Gly 265 Gln
Val
Leu Asp Ser 280 Asp Gly
Asp
Lys Ser 295 Arg Trp Gln
His Leu 325
Glu 310 Gly Ala Lys Leu His Asn
Leu
Ala Pro Cys Ser Arg
Cys
Leu Val Lys 15 Asp Tyr
Ser
Gly Ala 30 Leu Thr
Ser
Ser
Ser
45 Gly Leu Tyr
Ser
Ser
60 Leu Gly Thr Lys Thr
75 Asn
Thr Lys Val Asp 80 Lys
Pro
Pro
Cys Pro 95 Ala
Pro
Phe
Pro Pro 110 Lys Pro Lys
Val
Thr 125 Cys
Val
Val
Val
Phe
140 Asn Trp Tyr Val Asp
155 Pro
Arg Glu Glu Gln 160 Phe
Thr
Val Leu His 175 Gln Asp
Val
Ser Asn 190 Lys Gly Leu
Ala
Lys 205 Gly Gln Pro Arg
220
Gln 235
Glu Glu Met Thr Lys 240
Gly
Phe Tyr Pro Ser 255 Asp
Pro
Glu Asn Asn 270 Tyr Lys
Ser
Phe Phe 285 Leu Tyr
Ser
Glu
Gly 300 Asn Val Phe Ser
His 315
Tyr Thr Gln Lys Ser 320
Met 1
Lys Val Leu
Ser
Thr Cys Glu 20
Leu
Arg Leu 35
Leu
Cys
lie 50 Pro Glu
Met 65
Asp Asp Val
Gly
Gln Gln Leu
Lys
Pro Arg Ala 100
Thr
Leu Leu 115 Leu
Tyr
Asn 130 His Leu
Ala 145
Asp Phe Arg
He
Ala Ala Ser
Arg
Ala Trp Ala 180
Ser
Thr Lys 195 Trp
Gln Glu Pro Thr Cys Val 5 10
Trp Lys Met Asn Gly Pro 25
Tyr Gln Leu Val Phe Leu 40
Asn Asn Gly Gly Ala Gly 55
Val Ser Ala Asp Asn Tyr
70
Leu Trp Lys Gly Ser Phe 85 90
Pro Gly Asn Leu Thr Val 105
Thr Trp Ser Asn Pro Tyr 120
Thr Tyr Ala Val Asn lie 135
lie Tyr Asn Val Thr Tyr 150
Thr Leu Lys Ser Gly lie 165 170
Gln Cys Tyr Asn Thr Thr 185
His Asn Ser Tyr Arg Glu 200
Ser
Asp Tyr Met Ser 15 He
Thr
Asn Cys Ser 30 Thr Glu
Leu
Ser Glu 45 Ala His Thr
Cys
Val 60 Cys His Leu Leu
Thr 75
Leu Asp Leu Trp Ala 80
Lys
Pro Ser Glu His 95 val
His
Thr Asn Val 110 Ser Asp
Pro
Pro
Asp 125 Asn Tyr Leu
Trp
Ser 140 Glu Asn Asp Pro
Leu 155
Glu Pro Ser Leu Arg 160
Ser
Tyr Arg Ala Arg 175 Val
Trp
Ser Glu Trp 190 Ser Pro
Pro
Phe Glu 205 Gln His
<210> 275 <211> 231 <212> PRT
<213> Macaca fasicularis
<400> 275

Met Gly Trp Leu Cys Ser Gly Leu Leu Phe 15 10

Leu Leu Gln Val Ala Ser Ser Gly Ser Met 20 25

Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met Ser lie Ser 35 40
Pro
Val Ser Cys Leu 15 Val
Lys
Val Leu Gln 30 Glu Pro
Thr
Cys Glu 45 Trp Lys Met
5

Claims (10)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    60
    REIVINDICACIONES
    1. Uso de un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, que se une específicamente al receptor humano de interleucina-4 (hIL-4R) (SEQ ID NO:274) en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o un trastorno,
    en el que la enfermedad o el trastorno se selecciona del grupo que consiste en trastornos pulmonares, trastornos inflamatorios y reacciones alérgicas,
    en el que el anticuerpo, o fragmento del mismo, comprende una región variable de cadena pesada (HCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO:162 y una región variable de cadena ligera (LCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO:164.
  2. 2. Uso de un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, que se une específicamente al receptor humano de interleucina-4 (hIL-4R) (SEQ ID NO:274) en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o un trastorno,
    en el que la enfermedad o el trastorno se selecciona del grupo que consiste en trastornos pulmonares, trastornos inflamatorios y reacciones alérgicas,
    en el que el anticuerpo, o fragmento del mismo, comprende tres secuencias de la región determinante de la complementariedad de cadena pesada (HCDR) que comprenden las SEQ ID NOs:148, 150 y 152, respectivamente, y tres secuencias de la región determinante de la complementariedad de cadena ligera (LCDR) que comprenden las SEQ ID NOs:156, 158 y 160, respectivamente.
  3. 3. Uso de un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, según la reivindicación 2, en el que el anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno del mismo, comprende una región variable de cadena pesada (HCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO:162.
  4. 4. Uso de un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, según la reivindicación 2, en el que el anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno del mismo, comprende una región variable de cadena ligera (LCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO:164.
  5. 5. Uso de un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el anticuerpo, o fragmento del mismo, se administra en combinación con un segundo agente terapéutico seleccionado de montelukast, pranlukast, zafirlukast y rilonacept.
  6. 6. Un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente al receptor humano de interleucina-4 (hIL-4R) (SEQ ID NO:274) para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad o un trastorno,
    en el que la enfermedad o el trastorno se selecciona del grupo que consiste en trastornos pulmonares, trastornos inflamatorios y reacciones alérgicas,
    en el que el anticuerpo, o fragmento del mismo, comprende una región variable de cadena pesada (HCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO:162 y una región variable de cadena ligera (LCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO:164.
  7. 7. Un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente al receptor humano de interleucina-4 (hIL-4R) (SEQ ID NO:274) para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad o un trastorno,
    en el que la enfermedad o el trastorno se selecciona del grupo que consiste en trastornos pulmonares, trastornos inflamatorios y reacciones alérgicas,
    en el que el anticuerpo, o fragmento del mismo, comprende tres secuencias de la región determinante de la complementariedad de cadena pesada (HCDR) que comprenden las SEQ ID NOs:148, 150 y 152, respectivamente, y tres secuencias de la región determinante de la complementariedad de cadena ligera (LCDR) que comprenden las SEQ ID NOs:156, 158 y 160, respectivamente.
  8. 8. Un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, para su uso en el método según la reivindicación 7, en el que el anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno del mismo, comprende una región variable de cadena pesada (HCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID nO:162.
  9. 9. Un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, para su uso en el método según la reivindicación 7, en el que el anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno del mismo, comprende una región variable de cadena ligera (LCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO:164.
  10. 10. Un anticuerpo, o fragmento de unión a antígeno, para su uso en el método según una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, en el que el anticuerpo, o fragmento del mismo, se administra en combinación con un segundo agente terapéutico seleccionado de montelukast, pranlukast, zafirlukast y rilonacept.
ES16161244.5T 2008-10-29 2009-10-27 Uso médico de anticuerpos humanos de alta afinidad dirigidos contra el receptor humano de IL-4 Active ES2675917T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US12/260,307 US7608693B2 (en) 2006-10-02 2008-10-29 High affinity human antibodies to human IL-4 receptor
US260307 2008-10-29

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2675917T3 true ES2675917T3 (es) 2018-07-13

Family

ID=41600767

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES18158965T Active ES2802241T3 (es) 2008-10-29 2009-10-27 Uso médico de anticuerpos humanos de alta afinidad dirigidos contra el receptor humano de IL-4
ES16161244.5T Active ES2675917T3 (es) 2008-10-29 2009-10-27 Uso médico de anticuerpos humanos de alta afinidad dirigidos contra el receptor humano de IL-4
ES09744292T Active ES2404206T3 (es) 2008-10-29 2009-10-27 Anticuerpos humanos de alta afinidad dirigidos contra el receptor humano de IL-4

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES18158965T Active ES2802241T3 (es) 2008-10-29 2009-10-27 Uso médico de anticuerpos humanos de alta afinidad dirigidos contra el receptor humano de IL-4

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES09744292T Active ES2404206T3 (es) 2008-10-29 2009-10-27 Anticuerpos humanos de alta afinidad dirigidos contra el receptor humano de IL-4

Country Status (48)

Country Link
US (7) US7608693B2 (es)
EP (7) EP3715372B1 (es)
JP (8) JP5291802B2 (es)
KR (1) KR101599706B1 (es)
CN (3) CN102197052B (es)
AR (1) AR073978A1 (es)
AU (1) AU2009311496B9 (es)
BR (1) BRPI0919853B8 (es)
CA (1) CA2737044C (es)
CL (1) CL2009002004A1 (es)
CO (1) CO6362024A2 (es)
CR (1) CR20110148A (es)
CY (3) CY1114123T1 (es)
DK (3) DK2356151T3 (es)
EC (1) ECSP11011010A (es)
ES (3) ES2802241T3 (es)
FI (1) FI3715372T3 (es)
FR (1) FR18C1011I2 (es)
HK (2) HK1159136A1 (es)
HN (1) HN2011001210A (es)
HR (2) HRP20130467T1 (es)
HU (2) HUS1800014I1 (es)
IL (1) IL211726A (es)
JO (1) JO2865B1 (es)
LT (3) LT3715372T (es)
LU (1) LUC00059I2 (es)
MA (1) MA32802B1 (es)
MX (2) MX2011003346A (es)
MY (1) MY152448A (es)
NI (1) NI201100064A (es)
NL (1) NL300922I2 (es)
NO (2) NO2018009I2 (es)
NZ (2) NZ596093A (es)
PA (1) PA8847001A1 (es)
PE (1) PE20100738A1 (es)
PH (1) PH12014500462A1 (es)
PL (3) PL2356151T3 (es)
PT (4) PT3715372T (es)
RS (2) RS57522B1 (es)
RU (2) RU2539774C3 (es)
SI (2) SI3064511T1 (es)
SM (1) SMT201300074B (es)
SV (1) SV2011003880A (es)
TW (3) TWI658833B (es)
UA (1) UA102122C2 (es)
UY (1) UY32213A (es)
WO (1) WO2010053751A1 (es)
ZA (1) ZA201101867B (es)

Families Citing this family (125)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7763249B2 (en) * 2004-04-27 2010-07-27 Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute Human anti-amyloid β peptide antibody and fragment of said antibody
US7608693B2 (en) * 2006-10-02 2009-10-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. High affinity human antibodies to human IL-4 receptor
MY149079A (en) 2006-10-02 2013-07-15 Regeneron Pharma High affinity human antibodies to human il-4 receptor
JO3672B1 (ar) 2008-12-15 2020-08-27 Regeneron Pharma أجسام مضادة بشرية عالية التفاعل الكيماوي بالنسبة لإنزيم سبتيليسين كنفرتيز بروبروتين / كيكسين نوع 9 (pcsk9).
US20130064834A1 (en) 2008-12-15 2013-03-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating hypercholesterolemia using antibodies to pcsk9
US20120021409A1 (en) * 2010-02-08 2012-01-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Common Light Chain Mouse
US20130045492A1 (en) 2010-02-08 2013-02-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods For Making Fully Human Bispecific Antibodies Using A Common Light Chain
ME02646B (me) 2010-02-08 2017-06-20 Regeneron Pharma Miš sa zajedničkim lakim lancem
US9796788B2 (en) 2010-02-08 2017-10-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mice expressing a limited immunoglobulin light chain repertoire
UA111731C2 (uk) * 2010-10-06 2016-06-10 Рідженерон Фармасьютікалз, Інк. Стабілізована композиція, яка містить антитіло до рецептора інтерлейкіну-4 (іl-4r), варіанти
PL2624865T3 (pl) 2010-10-06 2018-11-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stabilizowane preparaty zawierające przeciwciała przeciwko receptorowi interleukiny-4 (IL-4R)
RU2721279C2 (ru) 2011-01-28 2020-05-18 Санофи Байотекнолоджи Антитела человека к pcsk9 для применения в способах лечения конкретных групп индивидуумов
AR087305A1 (es) 2011-07-28 2014-03-12 Regeneron Pharma Formulaciones estabilizadas que contienen anticuerpos anti-pcsk9, metodo de preparacion y kit
EP3865581A1 (en) 2011-08-05 2021-08-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Humanized universal light chain mice
EP4252857A3 (en) 2011-09-16 2023-12-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for reducing lipoprotein(a) levels by administering an inhibitor of proprotein convertase subtilisin kexin-9 (pcsk9)
EA029290B1 (ru) * 2011-12-22 2018-03-30 Астеллас Фарма Инк. Новое антитело против ctgf человека
MY172730A (en) 2012-03-16 2019-12-11 Regeneron Pharma Histidine engineered light chain antibodies and genetically modified non-human animals for generating the same
US9801362B2 (en) 2012-03-16 2017-10-31 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals expressing pH-sensitive immunoglobulin sequences
AR092177A1 (es) 2012-08-21 2015-03-25 Sanofi Sa Metodos para tratar o prevenir asma administrando un antagonista de il-4r
TWI721272B (zh) * 2012-08-21 2021-03-11 法商賽諾菲生物技術公司 投與il-4r拮抗劑以治療或預防氣喘之方法
PT2892927T (pt) * 2012-09-07 2018-08-02 Regeneron Pharma Métodos para tratamento da dermatite atópica por administração de um antagonista de il-4r
ES2675779T3 (es) 2012-09-07 2018-07-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Métodos para el tratamiento de la dermatitis atópica administrando un antagonista de IL-4R
AR095196A1 (es) 2013-03-15 2015-09-30 Regeneron Pharma Medio de cultivo celular libre de suero
US10111953B2 (en) 2013-05-30 2018-10-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for reducing remnant cholesterol and other lipoprotein fractions by administering an inhibitor of proprotein convertase subtilisin kexin-9 (PCSK9)
TWI755763B (zh) 2013-06-04 2022-02-21 美商再生元醫藥公司 藉由投與il-4r抑制劑以治療過敏及增強過敏原-特異之免疫療法的方法
KR20230066127A (ko) 2013-06-21 2023-05-12 사노피 바이오테크놀로지 Il-4r 길항제를 투여함에 의한 비용종증의 치료 방법
SG10201912898XA (en) * 2013-06-21 2020-02-27 Sanofi Biotechnology Methods for treating nasal polyposis by administering an il-4r antagonist
TWI634900B (zh) 2013-07-11 2018-09-11 再生元醫藥公司 藉由投與ｉｌ－４ｒ抑制劑治療嗜酸性食道炎的方法
US10428157B2 (en) 2013-11-12 2019-10-01 Sanofi Biotechnology Dosing regimens for use with PCSK9 inhibitors
US8980273B1 (en) 2014-07-15 2015-03-17 Kymab Limited Method of treating atopic dermatitis or asthma using antibody to IL4RA
DE112014005975T5 (de) * 2013-12-17 2016-09-15 Kymab Limited Menschliche Ziele
US8986691B1 (en) 2014-07-15 2015-03-24 Kymab Limited Method of treating atopic dermatitis or asthma using antibody to IL4RA
EP3094644B1 (en) * 2014-01-16 2019-07-24 Mondelli, Mario Umberto Franceso Neutralizing human monoclonal antibodies against hepatitis b virus surface antigen
IL247290B (en) * 2014-02-21 2021-06-30 Sanofi Biotechnology Methods of treating or preventing asthma by adding an il-4r antagonist
KR20220029765A (ko) 2014-02-21 2022-03-08 사노피 바이오테크놀로지 Ｉｌ-4ｒ 길항제의 투여에 의한 천식의 치료 또는 예방 방법
MX2016011132A (es) * 2014-02-28 2016-12-08 Regeneron Pharma Métodos para tratar una infección cutánea mediante la administración de un antagonista de il-4r.
MX2016012274A (es) 2014-03-21 2017-05-23 Regeneron Pharma Animales no humanos que producen proteinas de union de dominio simple.
WO2016011256A1 (en) 2014-07-16 2016-01-21 Sanofi Biotechnology METHODS FOR TREATING PATIENTS WITH HETEROZYGOUS FAMILIAL HYPERCHOLESTEROLEMIA (heFH)
KR20230158131A (ko) 2014-11-14 2023-11-17 사노피 바이오테크놀로지 Ｉｌ-4ｒ 길항제의 투여에 의한, 비용종을 동반한 만성 부비동염의 치료 방법
CA2979702A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals that select for light chain variable regions that bind antigen
JP6938383B2 (ja) * 2015-04-02 2021-09-22 インターベット インターナショナル ベー． フェー． イヌインターロイキン４受容体アルファに対する抗体
TW202330904A (zh) 2015-08-04 2023-08-01 美商再生元醫藥公司 補充牛磺酸之細胞培養基及用法
MX2018002000A (es) 2015-08-18 2018-06-19 Regeneron Pharma Anticuerpos inhibidores de anti-pcsk9 para el tratamiento de pacientes con hiperlipidemia que se someten aferesis de lipoproteina.
CN109069625A (zh) 2016-02-19 2018-12-21 瑞泽恩制药公司 通过施用il-4r拮抗剂来增强疫苗功效的方法
CN113372446A (zh) * 2016-06-08 2021-09-10 苏州康乃德生物医药有限公司 用于结合白细胞介素4受体的抗体
WO2018039499A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Host cell protein modification
KR102462039B1 (ko) 2016-09-01 2022-11-02 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. Il-4r 길항제를 투여함에 의해 알레르기를 예방하거나 치료하기 위한 방법
WO2018057776A1 (en) 2016-09-22 2018-03-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating severe atopic dermatitis by administering an il-4r inhibitor
AU2017332732B2 (en) 2016-09-22 2024-03-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating severe atopic dermatitis by administering an IL-4R inhibitor
US10925971B2 (en) 2016-11-29 2021-02-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating PRLR positive breast cancer
TW202332696A (zh) 2016-12-01 2023-08-16 美商再生元醫藥公司 治療發炎症狀的方法
SG11201909457XA (en) 2017-04-13 2019-11-28 Regeneron Pharma Treatment and inhibition of inflammatory lung diseases in patients having risk alleles in the genes encoding il33 and il1rl1
BR112020000127A2 (pt) 2017-07-06 2020-07-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. método para selecionar um hidrolisado de soja, e, glicoproteína
US11053309B2 (en) 2017-08-04 2021-07-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating active eosinophilic esophagitis
MX2020004467A (es) 2017-10-30 2020-10-22 Sanofi Biotechnology Metodos para el tratamiento o la prevencion del asma mediante la administracion de antagonista de il-4r.
CN115925882A (zh) 2017-12-22 2023-04-07 瑞泽恩制药公司 用于表征药物产品杂质的系统和方法
BR112020013336A2 (pt) 2018-01-31 2020-12-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. produto farmacêutico proteico, métodos para caracterizar as impurezas do produto farmacêutico proteico de alto peso molecular intermediário, para produção de um anticorpo, e para caracterizar as impurezas de fármaco com variação de carga, anticorpo, e, sistema para caracterizar impurezas de fármaco de alto peso molecular intermediário.
CN110105451B (zh) * 2018-02-01 2020-12-18 北京凯因科技股份有限公司 IL-4Rα抗体及其用途
KR102652133B1 (ko) * 2018-02-01 2024-03-29 베이징 카윈 테크놀로지 쉐어-홀딩 컴퍼니 리미티드 IL-4Rα 항체 및 그 용도
TW202311746A (zh) 2018-02-02 2023-03-16 美商再生元醫藥公司 用於表徵蛋白質二聚合之系統及方法
AU2019227531A1 (en) 2018-02-28 2020-10-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Systems and methods for identifying viral contaminants
US11054389B2 (en) 2018-03-19 2021-07-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Microchip capillary electrophoresis assays and reagents
US11332524B2 (en) 2018-03-22 2022-05-17 Surface Oncology, Inc. Anti-IL-27 antibodies and uses thereof
CN108373505B (zh) * 2018-04-20 2019-08-20 北京智仁美博生物科技有限公司 抗il-4r抗体及其用途
TW202016125A (zh) 2018-05-10 2020-05-01 美商再生元醫藥公司 用於定量及調節蛋白質黏度之系統與方法
MX2020012064A (es) 2018-05-13 2021-04-13 Regeneron Pharma Metodos para tratar la dermatitis atopica administrando un inhibidor de il-4r.
CN110540590B (zh) * 2018-05-29 2023-08-18 康诺亚生物医药科技（成都）有限公司 一种自免疫抑制物的开发和应用
EA202190228A1 (ru) * 2018-07-10 2021-04-14 Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. Модификация связывающих молекул для минимизации уже существующих взаимодействий
BR112021002989A2 (pt) * 2018-08-24 2021-05-11 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. anticorpo para ligação de il-4r de humano, fragmento para ligação de antígeno e uso médico do mesmo
SG11202011970TA (en) 2018-08-27 2020-12-30 Regeneron Pharma Use of raman spectroscopy in downstream purification
TW202024639A (zh) 2018-08-30 2020-07-01 美商再生元醫藥公司 用於將蛋白質複合物定特徵之方法
CN110872349A (zh) 2018-09-04 2020-03-10 三生国健药业（上海）股份有限公司 结合人il-4r的抗体、其制备方法和用途
CN113166259A (zh) * 2018-11-09 2021-07-23 亚洲大学校产学协力团 对人IL-4受体α具有高亲和力的人抗体及其用途
US11312778B2 (en) 2018-11-21 2022-04-26 Brian C. Machler Method for treating allergic contact dermatitis
CN111518211B (zh) * 2018-12-25 2022-06-21 江苏荃信生物医药股份有限公司 抗人白介素4受体α单克隆抗体的制药用途
AU2020208396A1 (en) 2019-01-16 2021-05-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for identifying free thiols in proteins
CN113677707A (zh) 2019-03-06 2021-11-19 瑞泽恩制药公司 用于在治疗癌症中增强效力的il-4/il-13途径抑制剂
EP3941589A1 (en) 2019-03-21 2022-01-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of il-4/il-13 pathway inhibitors and plasma cell ablation for treating allergy
WO2020231992A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Improved competitive ligand binding assays
CN112010977B (zh) * 2019-05-29 2022-04-26 山东博安生物技术股份有限公司 抗白介素4受体(il-4r)的抗体及其应用
CN110343666B (zh) * 2019-07-10 2023-05-30 通化东宝药业股份有限公司 一种cho细胞培养的补料培养基及其制备方法和应用
BR112022000581A2 (pt) 2019-08-05 2022-03-03 Regeneron Pharma Métodos para tratamento de alergia e intensificação de imunoterapia específica dos alergénos através da administração de um antagonista de il-4r
SG11202113310UA (en) 2019-08-05 2021-12-30 Regeneron Pharma Methods for treating atopic dermatitis by administering an il-4r antagonist
CA3150234C (en) 2019-09-24 2023-12-12 Robert Stairs Systems and methods for chromatography use and regeneration
CN111825766B (zh) * 2019-10-31 2021-05-11 上海洛启生物医药技术有限公司 抗il-4r单域抗体及其应用
EP4065086A1 (en) 2019-11-25 2022-10-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Sustained release formulations using non-aqueous emulsions
EP3992974A1 (en) 2020-11-02 2022-05-04 Sanofi Biotechnology Methods for treating digitally-identified il-4/il-13 related disorders
BR112022011098A2 (pt) 2019-12-09 2022-09-20 Sanofi Biotechnology Métodos para tratamento de distúrbios relacionados a il-4/il-13 digitalmente identificados
MX2022008973A (es) 2020-01-21 2022-08-11 Regeneron Pharma Metodos de desglicosilacion para electroforesis de proteinas glicosiladas.
MX2022010217A (es) 2020-02-21 2022-09-19 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co Ltd Composicion farmaceutica que contiene anticuerpo anti-il-4r y uso de la misma.
US20230105029A1 (en) * 2020-02-27 2023-04-06 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd. Antibodies binding il4r and uses thereof
CN115427450A (zh) 2020-03-27 2022-12-02 瑞泽恩制药公司 通过施用il-4r拮抗剂治疗特应性皮炎的方法
BR112022022235A2 (pt) 2020-05-22 2023-03-28 Regeneron Pharma Métodos para tratamento de esofagite eosinofílica através da administração de inibidor de il-4r
WO2022047108A1 (en) 2020-08-31 2022-03-03 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Asparagine feed strategies to improve cell culture performance and mitigate asparagine sequence variants
MX2023003942A (es) 2020-10-05 2023-06-02 Sanofi Biotechnology Metodos para el tratamiento del asma en sujetos pediatricos mediante la administracion de un antagonista del il-4r.
JP2023551446A (ja) 2020-11-25 2023-12-08 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 非水膜乳化を使用した持続放出製剤
EP4262757A1 (en) 2020-12-17 2023-10-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Fabrication of protein-encapsulating microgels
EP4269447A1 (en) 2020-12-22 2023-11-01 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. Complex of anti-il-4r antibody or antigen-binding fragment thereof and medical use thereof
EP4274609A1 (en) 2021-01-08 2023-11-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating peanut allergy and enhancing peanut allergen-specific immunotherapy by administering an il-4r antagonist
KR20230134117A (ko) 2021-01-20 2023-09-20 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 세포 배양물에서 단백질 역가를 개선시키는 방법
KR20230150300A (ko) 2021-03-03 2023-10-30 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 단백질 점도를 정량화하고 변경시키기 위한 시스템 및 방법
BR112023018665A2 (pt) 2021-03-26 2023-10-03 Regeneron Pharma Métodos e sistemas para desenvolvimento de protocolos de mistura
AU2022286340A1 (en) 2021-06-01 2024-01-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Microchip capillary electrophoresis assays and reagents
AU2022316939A1 (en) 2021-07-26 2024-03-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating chronic spontaneous urticaria by administering an il-4r antagonist
AR126749A1 (es) 2021-08-10 2023-11-08 Kymab Ltd Tratamiento de la dermatitis atópica
US20230167171A1 (en) 2021-08-23 2023-06-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating atopic dermatitis by administering an il-4r antagonist
IL310427A (en) * 2021-08-26 2024-03-01 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co Ltd Pharmaceutical preparation of anti-R4IL antibody and use thereof
AR127006A1 (es) 2021-09-08 2023-12-06 Regeneron Pharma UN MÉTODO BASADO EN ESPECTROMETRÍA DE MASAS Y DE ALTO RENDIMIENTO PARA CUANTIFICAR ANTICUERPOS Y OTRAS PROTEÍNAS QUE CONTIENEN Fc
AU2022348521A1 (en) 2021-09-20 2024-04-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of controlling antibody heterogeneity
US20230151426A1 (en) 2021-09-30 2023-05-18 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Reticulocalbin-3 (RCN3) Variants And Treatment Of Asthma With Interleukin-4 Receptor Alpha (IL4R) Antagonists
AU2022359898A1 (en) 2021-10-07 2024-03-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Ph meter calibration and correction
TW202323817A (zh) 2021-10-07 2023-06-16 美商再生元醫藥公司 Ｐｈ建模及控制之系統及方法
WO2023069976A1 (en) 2021-10-20 2023-04-27 Sanofi Biotechnology Methods for treating prurigo nodularis by administering an il-4r antagonist
US20230129265A1 (en) 2021-10-26 2023-04-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Systems and methods for generating laboratory water and distributing laboratory water at different temperatures
WO2023085978A1 (en) * 2021-11-11 2023-05-19 Joint Stock Company «Biocad» Monoclonal antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to il-4ra, and use thereof
WO2023086887A1 (en) 2021-11-11 2023-05-19 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment of lung disease based upon stratification of polygenic risk score for interleukin 33 (il-33)
WO2023091614A2 (en) * 2021-11-18 2023-05-25 Twist Bioscience Corporation Dickkopf-1 variant antibodies and methods of use
US20230272062A1 (en) 2021-11-30 2023-08-31 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment Of Lung Disease Based Upon Stratification Of Polygenic Score Relating To Response To A Therapeutic Agent
WO2023130010A1 (en) 2021-12-30 2023-07-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for attenuating atopic march by administering an il-4/il-13 antagonist
WO2023167871A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Manufacturing process for high titer antibody
WO2023177836A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods and systems for analyzing polypeptide variants
WO2023191665A1 (en) * 2022-03-31 2023-10-05 Milaboratory, Limited Liability Company ANTIBODIES TO HUMAN IL-4Rα HAVING REDUCED IMMUNOGENICITY AND APPLICATION THEREOF
WO2024011251A1 (en) 2022-07-08 2024-01-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating eosinophilic esophagitis in pediatric by administering an il-4r antagonist
WO2024047021A1 (en) 2022-08-29 2024-03-07 Sanofi Methods for treating chronic inducible cold urticaria by administering an il-4r antagonist
KR20240038841A (ko) 2022-09-16 2024-03-26 연세대학교 산학협력단 신규한 인간 인터류킨-4 수용체 결합 나노바디 및 이의 용도

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5041381A (en) * 1986-07-03 1991-08-20 Schering Corporation Monoclonal antibodies against human interleukin-4 and hybridomas producing the same
GB8808015D0 (en) * 1988-04-06 1988-05-05 Ritter M A Chemical compounds
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
WO1990005183A1 (en) 1988-10-31 1990-05-17 Immunex Corporation Interleukin-4 receptors
CA2108886A1 (en) * 1991-05-03 1992-11-04 Thasia G. Woodworth Interleukin receptor targeted molecules for treatment of inflammatory arthritis
SG52215A1 (en) * 1992-02-19 1998-09-28 Schering Corp Cloning and expresssion of humanized monoclonal antibodies against human interleukin-4
ATE381614T1 (de) 1992-07-24 2008-01-15 Amgen Fremont Inc Bildung von xenogenen antikörpern
US5714146A (en) * 1992-08-26 1998-02-03 Board Of Regents Of The University Of Washington IL-4 bone therapy
EP0604693A1 (en) 1992-12-29 1994-07-06 Schering-Plough Monoclonal antibodies against the human interleukin-4 receptor and hybridomas producing the same
RU2162711C2 (ru) * 1993-09-07 2001-02-10 Смитклайн Бичам Корпорейшн Рекомбинантные il4-антитела, используемые для лечения нарушений, связанных с действием il4
US6387632B2 (en) * 1998-06-11 2002-05-14 Hitachi, Ltd. Polynucleotide separation method and apparatus therefor
US6787637B1 (en) 1999-05-28 2004-09-07 Neuralab Limited N-Terminal amyloid-β antibodies
US6949245B1 (en) 1999-06-25 2005-09-27 Genentech, Inc. Humanized anti-ErbB2 antibodies and treatment with anti-ErbB2 antibodies
ES2614260T3 (es) 2000-05-26 2017-05-30 Immunex Corporation Uso de anticuerpos contra el receptor de interleuquina-4 y composiciones de los mismos
US7879328B2 (en) 2000-06-16 2011-02-01 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies that immunospecifically bind to B lymphocyte stimulator
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
US20040101920A1 (en) 2002-11-01 2004-05-27 Czeslaw Radziejewski Modification assisted profiling (MAP) methodology
BRPI0416603A (pt) 2003-11-07 2007-01-30 Immunex Corp anticorpo que se liga ao receptor interleucina-4 (il-4) humano
EP1699825A2 (en) * 2003-12-22 2006-09-13 Amgen, Inc. Methods for identifying functional antibodies
JP2008504806A (ja) 2004-02-27 2008-02-21 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド Ｉｌ−４／ｉｌ−１３特異的ポリペプチドおよびその治療上の使用
US20090098142A1 (en) 2004-06-09 2009-04-16 Kasaian Marion T Methods and compositions for treating and monitoring treatment of IL-13-associated disorders
AR049390A1 (es) * 2004-06-09 2006-07-26 Wyeth Corp Anticuerpos contra la interleuquina-13 humana y usos de los mismos
AR050044A1 (es) * 2004-08-03 2006-09-20 Novartis Ag Anticuerpo especifico de il-4
TWI306862B (en) 2005-01-03 2009-03-01 Hoffmann La Roche Antibodies against il-13 receptor alpha 1 and uses thereof
PT2374818E (pt) 2006-06-02 2013-02-13 Regeneron Pharma Anticorpos com elevada afinidade para o receptor il-6 humano
MY149079A (en) 2006-10-02 2013-07-15 Regeneron Pharma High affinity human antibodies to human il-4 receptor
US7608693B2 (en) * 2006-10-02 2009-10-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. High affinity human antibodies to human IL-4 receptor
PL2624865T3 (pl) * 2010-10-06 2018-11-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stabilizowane preparaty zawierające przeciwciała przeciwko receptorowi interleukiny-4 (IL-4R)
AR092177A1 (es) * 2012-08-21 2015-03-25 Sanofi Sa Metodos para tratar o prevenir asma administrando un antagonista de il-4r
TWI755763B (zh) * 2013-06-04 2022-02-21 美商再生元醫藥公司 藉由投與il-4r抑制劑以治療過敏及增強過敏原-特異之免疫療法的方法
KR20230066127A (ko) * 2013-06-21 2023-05-12 사노피 바이오테크놀로지 Il-4r 길항제를 투여함에 의한 비용종증의 치료 방법
KR20220029765A (ko) * 2014-02-21 2022-03-08 사노피 바이오테크놀로지 Ｉｌ-4ｒ 길항제의 투여에 의한 천식의 치료 또는 예방 방법
KR20230158131A (ko) * 2014-11-14 2023-11-17 사노피 바이오테크놀로지 Ｉｌ-4ｒ 길항제의 투여에 의한, 비용종을 동반한 만성 부비동염의 치료 방법

Also Published As

Publication number Publication date
IL211726A0 (en) 2011-06-30
EP2636685A1 (en) 2013-09-11
EP3715372B1 (en) 2024-01-24
PL3064511T3 (pl) 2018-09-28
FI3715372T3 (fi) 2024-03-18
US8337839B2 (en) 2012-12-25
JP2016041069A (ja) 2016-03-31
EP3351560A1 (en) 2018-07-25
RS52782B (en) 2013-10-31
TW201615216A (zh) 2016-05-01
FR18C1011I1 (es) 2018-04-27
CY1122092T1 (el) 2020-07-31
EP2356151B1 (en) 2013-04-10
JP2020007378A (ja) 2020-01-16
US20120052072A1 (en) 2012-03-01
BRPI0919853A2 (pt) 2016-03-15
JP5844772B2 (ja) 2016-01-20
TW201029664A (en) 2010-08-16
RU2539774C2 (ru) 2015-01-27
CN102197052A (zh) 2011-09-21
HN2011001210A (es) 2013-10-22
PT3351560T (pt) 2020-05-11
ES2404206T3 (es) 2013-05-24
JP2012507294A (ja) 2012-03-29
EP3064511A1 (en) 2016-09-07
EP2511300A3 (en) 2012-11-07
HUE039212T2 (hu) 2018-12-28
JP6608505B2 (ja) 2019-11-20
CN106267190B (zh) 2021-01-26
CY1114123T1 (el) 2016-07-27
CN102197052B (zh) 2014-02-12
US8075887B2 (en) 2011-12-13
EP3351560B1 (en) 2020-04-22
ECSP11011010A (es) 2011-06-30
RU2014147773A (ru) 2016-06-20
EP2511300A2 (en) 2012-10-17
ES2802241T3 (es) 2021-01-18
EP3064511B1 (en) 2018-04-18
LTPA2018002I1 (lt) 2018-02-12
CY2018003I1 (el) 2018-09-05
DK2356151T3 (da) 2013-06-17
RU2663106C2 (ru) 2018-08-01
JP6843208B2 (ja) 2021-03-17
RU2011120194A (ru) 2012-12-10
LT3064511T (lt) 2018-07-10
PT3064511T (pt) 2018-07-17
UA102122C2 (ru) 2013-06-10
CN103739711A (zh) 2014-04-23
JP7442581B2 (ja) 2024-03-04
FR18C1011I2 (fr) 2020-03-06
LT3715372T (lt) 2024-03-25
MX356882B (es) 2018-06-19
MA32802B1 (fr) 2011-11-01
AU2009311496B9 (en) 2014-10-30
PL2356151T3 (pl) 2013-08-30
EP2356151A1 (en) 2011-08-17
CA2737044A1 (en) 2010-05-14
RU2539774C3 (ru) 2020-11-06
LUC00059I2 (es) 2018-03-28
LUC00059I1 (es) 2018-01-03
TWI538686B (zh) 2016-06-21
UY32213A (es) 2010-05-31
JO2865B1 (en) 2015-03-15
US20130078675A1 (en) 2013-03-28
US8735095B2 (en) 2014-05-27
HK1159136A1 (en) 2012-07-27
CL2009002004A1 (es) 2010-03-05
US7608693B2 (en) 2009-10-27
DK3064511T3 (en) 2018-07-16
CO6362024A2 (es) 2012-01-20
SV2011003880A (es) 2011-08-15
JP6449125B2 (ja) 2019-01-09
LTC2356151I2 (lt) 2019-04-10
SMT201300074B (it) 2013-09-06
NI201100064A (es) 2011-11-02
US20140271681A1 (en) 2014-09-18
JP2013223495A (ja) 2013-10-31
IL211726A (en) 2015-10-29
TWI658833B (zh) 2019-05-11
PH12014500462A1 (en) 2015-06-01
DK3715372T3 (da) 2024-03-11
JP2024040526A (ja) 2024-03-25
CN103739711B (zh) 2016-09-14
EP3715372A1 (en) 2020-09-30
PT2356151E (pt) 2013-05-07
NO2023019I1 (no) 2023-05-02
NO2018009I2 (no) 2019-01-30
JP2021087440A (ja) 2021-06-10
NL300922I2 (nl) 2019-01-15
WO2010053751A1 (en) 2010-05-14
EP4345111A2 (en) 2024-04-03
JP7100731B2 (ja) 2022-07-13
BRPI0919853B1 (pt) 2020-10-27
US20090074793A1 (en) 2009-03-19
HRP20130467T1 (en) 2013-06-30
PT3715372T (pt) 2024-03-14
SI3064511T1 (en) 2018-08-31
HUS1800014I1 (hu) 2018-03-28
BRPI0919853B8 (pt) 2021-05-25
NO2018009I1 (no) 2018-03-06
HK1250733A1 (zh) 2019-01-11
KR20110074980A (ko) 2011-07-05
PA8847001A1 (es) 2010-05-26
CN106267190A (zh) 2017-01-04
AR073978A1 (es) 2010-12-15
US20180179288A1 (en) 2018-06-28
ZA201101867B (en) 2012-08-29
JP2022160404A (ja) 2022-10-19
AU2009311496B2 (en) 2014-05-29
NZ591922A (en) 2012-03-30
KR101599706B1 (ko) 2016-03-04
JP2019055963A (ja) 2019-04-11
US20210163611A1 (en) 2021-06-03
CA2737044C (en) 2017-02-28
MY152448A (en) 2014-09-30
MX2011003346A (es) 2011-04-21
AU2009311496A1 (en) 2010-05-14
RS57522B1 (sr) 2018-10-31
US20100047254A1 (en) 2010-02-25
PL3351560T3 (pl) 2020-09-21
SI2356151T1 (sl) 2013-07-31
TW201919700A (zh) 2019-06-01
CR20110148A (es) 2011-04-27
CY2018003I2 (el) 2018-09-05
NZ596093A (en) 2012-11-30
HRP20181148T1 (hr) 2018-09-21
PE20100738A1 (es) 2010-11-03
JP5291802B2 (ja) 2013-09-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2675917T3 (es) Uso médico de anticuerpos humanos de alta afinidad dirigidos contra el receptor humano de IL-4
KR101474227B1 (ko) 사람 ｉｌ-4 수용체에 대한 고친화성 사람 항체
KR102185516B1 (ko) Fel d1에 대한 사람 항체 및 그것의 사용방법
DK2187964T3 (en) HIGH AFFINE HUMAN ANTIBODIES FOR HUMAN NERVOUS FACTOR
KR101464502B1 (ko) 사람 ｉｌ-6 수용체에 대한 고 친화성 항체
KR20130132842A (ko) 인간 tnf-유사 리간드 1a(tl1a)에 대한 인간 항체
KR20120059611A (ko) 인간 프로테아제-활성화된 수용체-2에 대한 고친화도 인간 항체들
AU2022200272A1 (en) Human antibodies to Bet v 1 and methods of use thereof