ES2564464T3 - Evento PV-ZMGT32 (nk603) en maíz y composiciones y procedimientos para la detección del mismo - Google Patents

Evento PV-ZMGT32 (nk603) en maíz y composiciones y procedimientos para la detección del mismo Download PDF

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Abstract

Una planta, célula, semilla de maíz o progenie de la misma tolerante a glifosato, que comprende: un constructo de ADN que comprende: un primer y un segundo casete de expresión, en el que dicho primer casete de expresión comprende, en una unión operativa, (i) un promotor de actina 1 de arroz; (ii) un intrón de actina 1 de arroz; (iii) una molécula de ADN que codifica un péptido de tránsito a cloroplasto; (iv) una molécula de ADN que codifica EPSPS tolerante a glifosato; y (v) una molécula de ADN terminadora de transcripción; y en el que dicho segundo casete de expresión comprende, en una unión operativa, (a) un promotor 35S CaMV; (b) un intrón Hsp70; (c) una molécula de ADN que codifica un péptido de tránsito a cloroplasto; (d) una molécula de ADN que codifica EPSPS resistente a glifosato; (e) una molécula de ADN terminadora de transcripción, en la que la secuencia de superposición de la unión entre el ADN genómico de maíz y el flanco 5' del constructo comprende la SEQ ID Nº: 9 y la unión de solapamiento entre el ADN genómico de maíz y el flanco 3' del constructo comprende la SEQ ID Nº: 11, y en el que el constructo de ADN está presente en el evento de maíz ZMGT32 (nk603) depositado en la American Type Culture Collection (ATCC) Nº de Acceso PTA-2478.

Description

DESCRIPCIÓN
Evento PV-ZMGT32 (nk603) en maíz y composiciones y procedimientos para la detección del mismo.
Campo de la invención
La presente invención se refiere al campo de la biología molecular vegetal, específicamente la invención se refiere a una planta de maíz tolerante a glifosato, PV-ZMGT32 (nk603). 5
Antecedentes de la invención
La presente invención se refiere a una planta de maíz (Zea mays) PV-ZMGT32 (nk603) tolerante al herbicida glifosato y al constructo de expresión de ADN vegetal de la planta de maíz PV-ZMGT32 (nk603) y a la detección de la región de inserción transgén/genómica en PV-ZMGT32 (nk603) de maíz y su progenie.
El maíz es un cultivo importante y constituye una fuente de alimento primaria en muchas zonas del mundo. Se han 10 aplicado procedimientos de biotecnología para mejorar las características agronómicas del maíz y la calidad del producto. Una de dichas características agronómicas es la tolerancia a herbicidas, en particular, la tolerancia al herbicida glifosato. Esta característica del maíz ha sido conferida por la expresión de un transgén en plantas de maíz (patente US N° 6.040.497).
Se conoce que la expresión de genes extraños en plantas está influenciada por su posición cromosómica, tal vez 15 debido a la estructura de la cromatina (por ejemplo la heterocromatina) o la proximidad de los elementos reguladores de la transcripción (por ejemplo, potenciadores) cerca del sitio de integración (Weising et al., Ann. Rev. Genet 22: 421-477, 1988). Por esta razón, frecuentemente es necesario examinar un gran número de eventos con el fin de identificar un evento caracterizado por una expresión óptima de un gen de interés introducido. Por ejemplo, se ha observado en plantas y otros organismos que puede existir una gran variación en los niveles de expresión de los genes introducidos 20 entre eventos. También pueden existir diferencias en los patrones espaciales o temporales de expresión, por ejemplo, diferencias en la expresión relativa de un transgén en diversos tejidos vegetales, que es posible que no se correspondan con los patrones esperados de los elementos reguladores de la transcripción presentes en el constructo genético introducido. Por esta razón, es habitual producir de cientos a miles de eventos diferentes y examinar dichos eventos buscando un único evento que tenga los niveles y los patrones de expresión del transgén deseados para 25 propósitos comerciales. Un evento que tiene los niveles o patrones de expresión transgénica deseados es útil para introducir el transgén en otros ambientes genéticos mediante cruzamiento sexual usando procedimientos de cultivo convencionales. La progenie de dichos cruzamientos conserva las características de expresión transgénica del transformante original. Esta estrategia se utiliza para asegurar una expresión genética fiable en una serie de variedades que están bien adaptadas a las condiciones de crecimiento locales. 30
Sería ventajoso poder detectar la presencia de un evento particular con el fin de determinar si la progenie de un cruzamiento sexual contiene un transgén de interés. Además, un procedimiento para detectar un evento particular ayudaría a cumplir con las reglamentaciones que requieren la aprobación previa a la salida al mercado y un etiquetado de los alimentos derivados de plantas de cultivo recombinantes. Es posible detectar la presencia de un transgén mediante cualquier procedimiento de detección de ácidos nucleicos bien conocido, tal como la reacción en cadena de 35 la polimerasa (PCR) o la hibridación de ADN usando sondas de ácido nucleico. Estos procedimientos de detección se centran en general en elementos genéticos usados con gran frecuencia, tales como promotores, terminadores, genes marcadores, etc. Como resultado de ello, dichos procedimientos pueden no ser útiles para discriminar entre diferentes eventos, en particular aquellos producidos usando el mismo constructo de ADN, a menos que se conozca la secuencia de ADN cromosómico adyacente al ADN insertado ("ADN flanqueador"). Un ensayo de PCR específico de evento ha 40 sido descrito, por ejemplo, por Windels et al. (Med. Fac. Landbouww, Univ. Gent 64/5b: 459-462, 1999), quienes identificaron el evento 40-3-2 de tolerancia a glifosato en soja mediante PCR usando un juego de cebadores que abarcaba la unión entre el inserto y el ADN flanqueador, específicamente un cebador que incluía la secuencia del inserto y un segundo cebador que incluía la secuencia del ADN flanqueador.
Sumario de la invención 45
Según un aspecto de la invención, se proporciona una planta, célula, semilla de maíz o progenie del mismo tolerante a glifosato, que comprende:
un constructo de ADN que comprende: un primer casete de expresión y un segundo casete de expresión, en el que dicho primer casete de expresión comprende, en una unión operativa, (i) un promotor de actina 1 de arroz; (ii) un intrón de actina 1 de arroz; (iii) una molécula de ADN que codifica un péptido de tránsito a cloroplasto; (iv) una 50 molécula de ADN que codifica EPSPS tolerante a glifosato; y (v) una molécula de ADN que comprende un terminador de transcripción;
en la que el segundo casete de expresión comprende, en una unión operativa, (a) un promotor 35S CaMV; (b) un
intrón Hsp70; (c) una molécula de ADN que codifica un péptido de tránsito a cloroplasto; (d) una molécula de ADN que codifica EPSPS resistente a glifosato; (e) una molécula de ADN que comprende un terminador de transcripción,
en la que la secuencia de superposición de la unión entre el ADN genómico de maíz y el flanco 5' del constructo comprende la SEQ ID Nº: 9 y la unión de solapamiento entre el constructo y el flanco 3' del constructo comprende 5 la SEQ ID Nº: 11, y en el que el constructo de ADN está presente en el evento de maíz ZMGT32 (nk603) depositado en la American Type Culture Collection (ATCC) Nº de Acceso PTA-2478. En particular, el primer casete de expresión comprende una molécula de ADN de un promotor de actina 1 de arroz (Oryzae sativa) y un intrón de actina 1 de arroz unido operativamente a una molécula de ADN que codifica una secuencia de un péptido de tránsito a cloroplasto, conectado operativamente a una molécula de ADN que codifica 5-enol-10 piruvilshiquimato-3-fosfato sintetasa (EPSPS) resistente a glifosato, conectado operativamente a una molécula de ADN que comprende un terminador de transcripción 3'. El segundo casete de expresión transgénica del constructo de ADN comprende una molécula de ADN del promotor 35S del virus en mosaico de la coliflor (CaMV), conectado operativamente a una molécula de ADN que comprende un intrón Hsp70, conectado operativamente a una molécula de ADN que codifica un péptido de tránsito a cloroplasto, conectado operativamente a una molécula 15 de ADN que codifica 5-enol-piruvilshiquimato-3-fosfato sintetasa (EPSPS) resistente a glifosato, conectado operativamente a una molécula de ADN que comprende un terminador de transcripción 3'.
Se divulgan además procedimientos para producir y seleccionar una planta de maíz tolerante a glifosato. El constructo de ADN consiste en dos casetes de expresión transgénica. El primer casete de expresión consiste en una molécula de ADN de un promotor de actina 1 de arroz (Oryzae sativa) y un intrón de actina 1 de arroz unido operativamente a una 20 molécula de ADN que codifica una secuencia de un péptido de tránsito a cloroplasto EPSPS de Arabidopsis, conectada operativamente a una molécula de ADN que codifica 5-enol-piruvilshiquimato-3-fosfato sintetasa (EPSPS) resistente a glifosato aislada de Agrobacterium tumefaciens sp, cepa CP4, conectada operativamente a una molécula de ADN que consiste en un terminador de transcripción de nopalina sintetasa. El segundo casete de expresión transgénica consiste en una molécula de ADN del promotor 35S del virus de mosaico de la coliflor (CaMV) que contiene una duplicación en 25 tándem de la región potenciadora, conectada operativamente a una molécula de ADN que consiste en un intrón Hsp70 de Zea mays, conectado operativamente a una molécula de ADN que codifica una secuencia de un péptido de tránsito a cloroplasto EPSPS de Arabidopsis, conectada operativamente a una molécula de ADN que codifica una 5-enol-piruvilshiquimato-3-fosfato sintetasa (EPSPS) resistente a glifosato aislada de Agrobacterium tumefaciens sp., cepa CP4, conectada operativamente a una molécula de ADN que consiste en un terminador de transcripción de nopalina 30 sintetasa.
Es preferente que la planta, célula o semilla de maíz o progenie del mismo tolerante a glifosato comprenda incorporada en el genoma de las células de la planta la secuencia de unión de PV-ZMGT32 (nk603) seleccionada de entre 5’ TGTAGCGGCCCACGCGTGG3’ (SEQ ID Nº.9), 5’ TACCACGCGACACACTTC 3’ (SEQ ID Nº:10) y 5’ TGCTGTTCTGCTGACTTT 3’ (SEQ ID Nº:11) y complementos de las mismas. La planta de maíz que tolera la 35 aplicación de glifosato puede obtenerse mediante un procedimiento que comprenden las etapas de: (a) cruzar sexualmente una primera línea de maíz progenitora que comprende los casetes de expresión de la presente invención, que confieren tolerancia a la aplicación de glifosato, y una segunda línea de maíz progenitora que carece de tolerancia a glifosato, produciendo de esta manera una pluralidad de plantas de la progenie; y (b) seleccionar una planta de la progenie que tolera la aplicación de glifosato y comprende las moléculas de ácido nucleico marcadoras de las SEQ ID 40 Nº:9, SEQ ID Nº:10, SEQ ID Nº:11 o SEQ ID Nº:12.
La presente invención proporciona además un procedimiento de cultivo de una planta de maíz que tolera la aplicación del herbicida glifosato que comprende:
(a) plantar al menos una semilla de maíz tal como se ha definido anteriormente;
(b) permitir que una planta de maíz crezca a partir de dicha semilla de maíz; 45
(c) pulverizar dicha planta de maíz con el herbicida glifosato de manera que dicha planta de maíz tenga una lesión vegetativa y una reducción del rendimiento reducidas en comparación con otras plantas de maíz que no comprenden las SEQ ID Nº: 9, SEQ ID Nº: 10, SEQ ID Nº: 11 y SEQ ID Nº: 12.
Descripción detallada de las realizaciones preferidas
Las definiciones y los procedimientos siguientes se proporcionan para definir mejor la presente invención y para guiar a 50 las personas con conocimientos ordinarios en la materia en la práctica de la misma. A menos que se indique lo contrario, los términos deben entenderse según el uso convencional por parte de las personas con conocimientos ordinarios en la materia relevante. Las definiciones de los términos comunes de biología molecular pueden consultarse también en Rigger et al., Glossary Genetics: Classical and Molecular, 5ª edición, Springer-Verlag; Nueva York, 1991; y Lewin, Genes V, Oxford University Press; Nueva York, 1994. Se usa la nomenclatura de las bases de ADN según la 55
norma 37 CFR § 1.822.
Tal como se usa en la presente memoria, el término "maíz' significa Zea mays o maíz e incluye todas las variedades vegetales que puedan cultivarse con maíz, incluyendo especies de maíz salvaje.
Tal como se usa en la presente memoria, la expresión "que comprende" significa "que incluye pero que no se limita a".
El término "glifosato" se refiere a N-fosfonometilglicina y sus sales. El glifosato es el ingrediente activo del herbicida 5 Roundup® (Monsanto Co.). Los tratamientos con el "herbidda glifosato" se refieren a tratamientos con el herbicida Roundup®, Roundup Ultra®, Roundup UltraMax® o cualquier otra formulación herbicida que contenga glifosato. La selección de las dosis de aplicación para una formulación con glifosato, que constituya una dosis biológicamente efectiva está dentro de la capacidad de un técnico especialista en agronomía.
El constructo de ADN es un conjunto de moléculas de ADN unidas entre sí que proporcionan uno o varios casetes de 10 expresión. El constructo de ADN es preferentemente un plásmido capaz de autorreplicarse en una célula bacteriana y contiene diversos sitios de restricción de enzimas endonudeasas que son útiles para introducir moléculas de ADN que proporcionan elementos genéticos funcionales, es decir, promotores, intrones, líderes, secuencias de codificación, regiones de terminación 3', entre otros. Los casetes de expresión contenidos dentro del constructo de ADN comprenden los elementos genéticos necesarios para proporcionar la transcripción de un ARN mensajero. Los casetes 15 de expresión pueden diseñarse para su expresión en células procariotas o células eucariotas. Los casetes de expresión de la presente invención están diseñados para una expresión preferencial en células vegetales. La combinación de casetes de expresión en plantas transgénicas puede conducir a fenotipos inesperados. En la presente invención, la combinación del casete del promotor de actina 1 de arroz y el casete del promotor 35S CaMV provistos en un constructo de ADN (pMON25496) mejoró la tolerancia al herbicida glifosato de las plantas de maíz transgénicas en 20 comparación con los casetes individuales y con el estándar comercial GA21 que contiene tres copias de un casete del promotor de actina 1 de arroz.
Un "evento" transgénico se produce mediante la transformación de las células vegetales con el constructo de ADN heterólogo, que incluye un casete de expresión de ácido nucleico que comprende un transgén de interés, la regeneración de una población de plantas resultantes de la inserción del transgén en el genoma de la planta y la 25 selección de una planta particular caracterizada por la inserción en una ubicación genómica particular. El término "evento" se refiere al transformante original y a la progenie del transformante que contiene el ADN heterólogo. El término "evento" también se refiere a la progenie producida por cruzamiento sexual entre el transformante y otra variedad que incluye el ADN heterólogo. Incluso después de repetidos cruzamientos con un progenitor recurrente, el ADN insertado y el ADN flanqueador del progenitor transformado están presentes en la progenie del cruzamiento en la 30 misma ubicación cromosómica. El término "evento" se refiere también al ADN del transformante original que comprende el ADN insertado y la secuencia genómica flanqueadora inmediatamente adyacente al ADN insertado, que se esperaría que fuera transferido a la progenie que recibe al ADN insertado, incluyendo el transgén de interés, como resultado del cruzamiento sexual de una línea progenitora que incluye el ADN insertado (por ejemplo, el transformante original y la progenie resultante de un auto-cruzamiento) y una línea progenitora que no contiene el ADN insertado. Una 35 planta de maíz PV-ZMGT32 (nk603) tolerante a glifosato puede ser generada mediante un primer cruzamiento sexual de una primera planta de maíz progenitora que consiste en una planta de maíz cultivada a partir de la planta de maíz PV- ZMGT32 (nk603) transgénica, con el N° Acceso ATCC: PTA-2478, y la progenie de la misma derivada de la transformación con los casetes de expresión de la presente invención que tolera la aplicación del herbicida glifosato, y una segunda planta de maíz progenitora que carece de tolerancia al herbicida glifosato, produciendo de esta manera 40 una pluralidad de plantas de la primera progenie; y a continuación seleccionando una planta de la primera progenie que es tolerante a la aplicación del herbicida glifosato; y auto-cruzando dicha planta de la primera progenie, produciendo de esta manera una pluralidad de plantas de la segunda progenie, y a continuación seleccionando de entre las plantas de la segunda progenie una planta que sea tolerante al herbicida glifosato. Estas etapas pueden incluir además el retro-cruzamiento de la planta de la primera progenie tolerante a glifosato o la planta de la segunda progenie tolerante a 45 glifosato con la segunda planta de maíz progenitora o con una tercera planta de maíz progenitora, produciendo de esta manera una planta de maíz que tolera la aplicación del herbicida glifosato.
Debe entenderse también que dos plantas transgénicas diferentes pueden ser apareadas para producir una descendencia que contenga dos genes exógenos añadidos de segregación independiente. El auto-cruzamiento de la progenie apropiada permite obtener plantas que son homocigotas para ambos genes exógenos añadidos. También se 50 contempla el retro-cruzamiento con una planta progenitora y el cruzamiento con una planta no transgénica, así como la propagación vegetativa. Las descripciones de otros procedimientos de cultivo usados habitualmente para diferentes características y cultivos pueden consultarse en una de entre diversas referencias, por ejemplo, Fehr, en Breeding Methods for Cultivar Development, Wilcox J. ed., American Society of Agronomy, Madison WI (1987).
Una "sonda" es un ácido nucleico aislado al cual se une una marca o una molécula informante detectable 55 convencional, por ejemplo, un isótopo radioactivo, un ligando, un agente quimioluminescente o una enzima. Dicha sonda es complementaria de una hebra del ácido nucleico de interés, en el caso de la presente invención, de una
hebra de ADN genómico del evento PV-ZMGT32 (nk603) de maíz, bien de una planta de maíz o bien de una muestra que incluye el ADN del evento. Las sondas según la presente invención no sólo incluyen ácido desoxirribonucleico o ribonucleico sino también poliamidas y otros materiales de sonda que se unen específicamente a una secuencia de ADN diana y que pueden ser usados para detectar la presencia de esa secuencia de ADN diana.
Los "cebadores" son ácidos nucleicos aislados que se alinean con una cadena de ADN diana complementaria 5 mediante hibridación de ácido nucleico para formar un híbrido entre el cebador y la cadena de ADN diana, a continuación se extienden a lo largo de la cadena de ADN diana por acción de una polimerasa, por ejemplo, una ADN polimerasa. Los pares de cebadores de la presente invención están destinados a la amplificación de una secuencia de ácido nucleico de interés, por ejemplo, mediante una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) u otros procedimientos convencionales de amplificación de ácidos nucleicos. 10
Las sondas y los cebadores son de suficiente longitud de nucleótidos como para unirse específicamente a la secuencia de ADN diana en las condiciones de hibridación o las condiciones de reacción determinadas por el operador. Esta longitud puede ser cualquier longitud que sea suficiente para ser útil en el procedimiento de detección elegido. En general, se usan 11 nucleótidos o más de longitud, preferentemente 18 nucleótidos o más, más preferentemente 24 nucleótidos o más y más preferentemente 30 nucleótidos o más. Dichas sondas y cebadores se hibridizan 15 específicamente con una secuencia diana bajo condiciones de hibridación de alta exigencia. Preferentemente, las sondas y los cebadores según la presente invención presentan una similitud de secuencia de ADN completa de nucleótidos contiguos con la secuencia diana, aunque es posible diseñar sondas que difieran de la secuencia de ADN diana y que retengan la capacidad de hibridizarse con dicha secuencia de ADN diana mediante procedimientos convencionales. 20
Los procedimientos para preparar y usar sondas y cebadores se describen, por ejemplo, en Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2ª ed., vol. 1-3, ed. Sambrook et al., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989 (en adelante, "Sambrook et al., 1989"); Current Protocols in Molecular Biology, ed, Ausubel et al., Greene Publishing y Wiley-Interscience, Nueva York, 1992 (con actualizaciones periódicas) (en adelante. "Ausubel et al., 1992"); e Innis et al., PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications, Academic Press; San Diego, 1990. Los 25 pares de cebadores para PCR pueden derivarse de una secuencia conocida, por ejemplo, usando programas de ordenador destinados a tal fin, tal como Primer (Versión 0.5, © 1991, Whitehead Institute for Biomedical Research, Cambridge, MA).
Los cebadores y las sondas basados en el ADN flanqueador y las secuencias insertadas divulgados en la presente memoria pueden ser usados para confirmar (y, si es necesario, para corregir) las secuencias divulgadas mediante 30 procedimientos convencionales, por ejemplo, mediante re-clonación y secuenciación de dichas secuencias.
Las sondas y los cebadores de ácidos nucleicos se hibridizan bajo condiciones estrictas a una secuencia de ADN diana. Puede usarse cualquier procedimiento de hibridación o amplificación de ácidos nucleicos convencional para identificar la presencia de ADN de un evento transgénico en una muestra. Las moléculas de ácido nucleico o los fragmentos de las mismas tienen la capacidad de hibridizarse específicamente con otras moléculas de ácido nucleico 35 bajo ciertas circunstancias. Tal como se usa en la presente memoria, se dice que dos moléculas de ácidos nucleicos tienen la capacidad de hibridizarse específicamente entre sí, si las dos moléculas pueden formar una estructura de ácido nucleico de cadena doble, antiparalela. Se dice que una molécula de ácido nucleico es "complementaria" de otra molécula de ácido nucleico si presentan complementariedad completa. Tal como se usa en la presente memoria, se considera que unas moléculas presentan "complementariedad completa" cuando cada nucleótido de una de las 40 moléculas es complementario de un nucleótido de la otra. Se dice que dos moléculas son "mínimamente complementarias" si se pueden hibridizarse entre sí con suficiente estabilidad como para permanecer alineadas entre sí al menos bajo condiciones de "severidad baja" convencionales. De manera similar, se considera que las moléculas son "complementarias" si se hibridizan entre sí con suficiente estabilidad como para permanecer alineadas entre sí bajo condiciones de "severidad alta" convencionales. Las condiciones de severidad convencionales se describen en 45 Sambrook et al., 1989, y en Haymes et al., E: Nucleic Acid Hybridization, A Practical Approach, IRL Press, Washington, DC (1985). Por lo tanto, las desviaciones de la complementariedad completa son permisibles, siempre que dichas desviaciones no impidan completamente la capacidad de las moléculas para formar una estructura de -cadena doble. Para que una molécula de ácido nucleico sirva como cebador o sonda solo es necesario que sea suficientemente complementaria en la secuencia como para formar una estructura de cadena doble estable bajo las concentraciones 50 particulares de solvente y sales empleadas.
Tal como se usa en la presente memoria, una secuencia substancialmente homóloga es una molécula de ácido nucleico que se hibridizará específicamente con el complemento de la molécula de ácido nucleico con la que está siendo comparada bajo condiciones de severidad alta. Las condiciones de severidad apropiadas que promueven la hibridación del ADN, por ejemplo, 6,0 x cloruro de sodio/citrato de sodio (SSC) a aproximadamente 45°C, seguido de 55 un lavado de 2,0 x SSC a 50°C, son conocidas para las personas con conocimientos ordinarios en la materia o pueden consultarse en Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989). 6.3.1-6.3.6. Por ejemplo, la
concentración de sales en la etapa de lavado puede seleccionarse entre una severidad baja de aproximadamente 2,0 x SSC a 50°C y una severidad alta de aproximadamente 0,2 x SSC a 50°C. Además, la temperatura en la etapa de lavado puede ser incrementada desde condiciones de severidad baja a temperatura ambiente, aproximadamente 22°C, hasta condiciones de severidad alta a aproximadamente 65°C. Pueden variarse tanto la temperatura como las sales, o puede mantenerse constante una de entre la temperatura o la concentración de sales mientras se cambia la otra 5 variable. En una realización preferente, un ácido nucleico de la presente invención se hibridizará específicamente con una o varias de las moléculas de ácido nucleico mostradas en las SEQ ID N°: 9, 10, 11 y 12, o sus complementos o fragmentos, bajo condiciones moderadamente estrictas, por ejemplo a aproximadamente 2,0 x SSC y aproximadamente 65°C. En una realización particularmente preferente, un ácido nucleico de la presente invención se hibridizará específicamente con una o varias de las moléculas de ácido nucleico mostradas en las SEQ ID N°: 9 a SEQ 10 ID N°: 12, o sus complementos o fragmentos, bajo condiciones de severidad alta. En un aspecto de la presente invención, una molécula de ácido nucleico marcadora preferente de la presente invención presenta la secuencia de ácidos nucleicos mostrada en las SEQ ID N°: 9 a SEQ ID N°: 12, o sus complementos o fragmentos. En otro aspecto de la presente invención, la molécula de ácido nucleico marcadora preferente de la presente invención comparte entre el 80% y el 100% o entre el 90% y el 100% de identidad de secuencia con la secuencia de ácido nucleico mostrada en 15 las SEQ ID N°: 9 a SEQ ID N°: 12, o sus complementos o fragmentos. En un aspecto adicional de la presente invención, una molécula de ácido nucleico marcadora preferente de la presente invención comparte entre el 95% y el 100% de identidad de secuencia con la secuencia mostrada en las SEQ ID N°: 9 a SEQ ID N°: 12, o sus complementos o fragmentos. Las SEQ ID N°: 9 a SEQ EN NO: 12 pueden ser usadas como marcadores en procedimientos de cultivo de plantas para identificar la progenie de los cruzamientos genéticos de manera similar a los procedimientos descritos 20 para el análisis de marcadores de ADN de repeticiones de secuencia simple, en "DNA markers: Protocols, applications and overviews”; (1997) 171-185, Cregan, et al, eds., Wiley-Liss NY; todos los cuales se incorporan a la presente memoria en su totalidad, por referencia. La hibridación de la sonda a la molécula de ADN diana puede ser detectada mediante cualquier procedimiento conocido por las personas con conocimientos ordinarios en la materia, entre los que se incluyen, pero no se limitan a, marcas fluorescentes, marcas radioactivas, marcas basadas en anticuerpos y marcas 25 quimioluminiscentes.
Con relación a la amplificación de la secuencia del ácido nucleico diana (por ejemplo mediante PCR) usando un par de cebadores de amplificación particulares, las "condiciones estrictas" son condiciones que permiten que el par de cebadores se hibriden solo con la secuencia de ácido nucleico diana a la que se uniría un cebador que tiene la secuencia de tipo salvaje correspondiente (o su complementaria) y para producir preferentemente un producto 30 amplificación único, el amplicón, en una reacción de amplificación térmica de ADN.
La expresión "específico para (una secuencia diana)" indica que una sonda o un cebador se hibrida bajo condiciones de hibridación estrictas solo con la secuencia diana en una muestra que comprende la secuencia diana.
Tal como se usa en la presente memoria, el "ADN amplificado" o "amplicón" se refiere al producto de la amplificación del ácido nucleico de una secuencia de ácido nucleico diana que es parte de una plantilla de ácido nucleico. Por 35 ejemplo, para determinar si la planta de maíz que resultante de un cruzamiento sexual contiene o no el ADN genómico del evento de transgénico de la planta de maíz de la presente invención, el ADN extraído de una muestra de tejido de la planta de maíz puede ser sometida a un procedimiento de amplificación de ácido nucleico usando un par de cebadores de ADN que incluye un primer cebador derivado de la secuencia flanqueadora en el genoma de la planta adyacente al sitio de inserción del ADN insertado heterólogo, y un segundo cebador derivado del ADN heterólogo insertado para 40 producir un amplicón que es diagnóstico de la presencia del ADN del evento. El amplicón tiene una longitud y una secuencia que son también diagnósticos del evento. La longitud del amplicón puede variar en un intervalo comprendido entre la longitud combinada de los pares de cebadores más un par de bases nucleotídicas, preferentemente más aproximadamente cincuenta pares de bases nudeotídicas, más preferentemente más aproximadamente doscientos cincuenta pares de bases nudeotídicas y más preferentemente más aproximadamente cuatrocientos cincuenta pares 45 de bases nucleotídicas. De manera alternativa, el par de cebadores puede ser derivado de las secuencias flanqueadoras a ambos lados del ADN insertado para producir un amplicón que incluya toda la secuencia de nucleótidos del inserto (por ejemplo, el fragmento de ADN Mlul del constructo de expresión pMON25496, Figura 1, de aproximadamente 6706 pares de bases nucleotídicas). Un miembro del par de cebadores derivado de la secuencia genómica de la planta puede estar situado a una distancia de la secuencia de ADN insertada, esta distancia puede 50 variar desde un par de bases nucleotídicas hasta los límites de la reacción de amplificación o aproximadamente veinte mil pares de bases nucleotídicas. El uso del término "amplicón" excluye específicamente los dímeros de cebadores que pueden formarse en la reacción de amplificación térmica de ADN.
La amplificación de ácido nucleico puede llevarse a cabo mediante cualquiera de los diversos procedimientos de amplificación de ácidos nucleicos conocidos en el arte, incluyendo la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Se 55 conocen una gran variedad de procedimientos de amplificación en la técnica y se describen, entre otros, en las patentes US N°: 4.683.195 y 4.683.202 y en PCR Protocols. A Guide to Methods and Applications, ed. Innis et al. Academic Press, San Diego, 1990. Se han desarrollado procedimientos de amplificación mediante PCR para amplificar hasta 22 kb de ADN genómico y hasta 42 kb de ADN de bacteriófagos (Cheng et al., Proc. Nati. Acid. Sci. EE.UU. 91:
5695-5699, 1994). Estos procedimientos, así como otros procedimientos conocidos en la técnica de amplificación de ADN, pueden ser empleados en la práctica de la presente invención. La secuencia del inserto de ADN heterólogo o la secuencia del ADN flanqueador del evento PV-ZMGT32 (nk603) de maíz pueden ser verificadas (y corregidas si es necesario) mediante amplificación de dichas secuencias a partir del ADN extraído de las semillas o plantas del depósito ATCC, N° Acceso PTA-2478, usando los cebadores de ADN derivados a partir de las secuencias provistas en la 5 presente memoria, seguido de secuenciación de ADN estándar del amplicón de PCR a del ADN clonado.
El amplicón producido mediante estos procedimientos puede ser detectado mediante una pluralidad de técnicas. Uno de dichos procedimientos es el Análisis de Bits Genéticos (Nikiforov, et al., Nucleic Acid Res. 22: 4167-4175, 1994) en el que se diseña un oligonudeótido de ADN que se superpone tanto a la secuencia de ADN genómico flanqueador adyacente como a la secuencia de ADN insertada. El oligonudeótido es inmovilizado en los pocillos de una placa de 10 micropocillos. Después de la PCR de la región de interés (usando un cebador en la secuencia insertada y uno en la secuencia genómica flanqueadora adyacente), puede hibridarse un producto de PCR de cadena simple al oligonucleótido inmovilizado y puede servir como una plantilla para una reacción de extensión de una sola base usando una ADN polimerasa y ddNTPs marcados específicos para la siguiente base esperada. La lectura puede estar basada en fluorescencia o en ELISA. Una señal indica la presencia de la secuencia del inserto/flanqueadora debida a una 15 amplificación, hibridación y extensión de una sola base exitosas.
Otro procedimiento es la técnica de pirosecuenciación descrita por Winge (Innov. Phrma. Tech. 00: 18-24, 2000). En este procedimiento, se diseña un oligonucleótido que se superpone a la unión del ADN genómico adyacente y del ADN del inserto. El oligonudeótido se hibridiza con un producto de PCR de cadena simple de la región de interés (un cebador en la secuencia insertada y uno en la secuencia genómica flanqueadora) y se incuba en presencia de una 20 ADN polimerasa, ATP, sulfurilasa, luciferasa, apirasa, adenosina 5’ fosfosulfato y luciferina. Los dNTPs se añaden individualmente y la incorporación resulta en una señal luminosa que es medida. La señal luminosa indica la presencia de la secuencia del inserto transgénico/flanqueadora debido a una amplificación, hibridación y extensión de bases únicas o múltiples existosas.
La polarización de fluorescencia descrita por Chen, et al. (Genome Res. 9: 492-498, 1999) es un procedimiento que 25 puede ser usado para detectar el amplicón de la presente invención. En el uso de este procedimiento se diseña un oligonucleótido que se superpone a la unión del ADN genómico flanqueador y del ADN insertado. El oligonucleótido se hibrida con un producto de PCR de cadena simple de la región de interés (un cebador en la secuencia del ADN insertado y uno en la secuencia del ADN genómico flanqueador) y se incuba en presencia de una ADN polimerasa y un ddNTP marcado con fluorescencia. La extensión de una sola base resulta en la incorporación del ddNTP. La 30 incorporación puede ser medida como un cambio en la polarización usando un fluorómetro. Un cambio en la polarizadón indica la presencia de la secuencia del inserto transgénico/flanqueadora debido a una amplificación, hibridación y extensión de una sola base exitosas.
Taqman® (PE Applied Biosystems, Foster City, CA) se describe como un procedimiento para detectar y cuantificar la presencia de una secuencia de ADN y se comprende completamente en las instrucciones proporcionadas por el 35 proveedor. Brevemente, se diseña una sonda de oligonudeótidos FRET que se superpone a la unión del ADN genómico flanqueador y del inserto. La sonda FRET y los cebadores para PCR (un cebadar en la secuencia del ADN insertado y uno en la secuencia genómica flanqueadora) se ciclan en presencia de una ADN polimerasa termoestable y los dNTPs. La hibridación de la sonda FRET resulta en el clivaje y la liberación de la fracción fluorescente desde la fracción neutralizante sobre la sonda FRET. Una señal fluorescente indica la presencia de la secuencia 40 flanqueadora/inserto transgénico debido a una amplificación e hibridación exitosas.
Se han descrito marcadores moleculares para su uso en la detección de secuencias tal como se describe en Tyangi, et al. (Nature Biotech. 14: 303-109, 1996). Brevemente, se diseña una sonda de oligonucleótidos FRET que se superpone a la unión del ADN genómico flanqueador y del inserto. La estructura única de la sonda FRET resulta en que contiene una estructura secundaria que conserva las fracciones fluorescente y neutralizante en estrecha proximidad. La sonda 45 FRET y los cebadores para PCR (un cebador en la secuencia de ADN del inserto y el otro en la secuencia genómica flanqueadora) se ciclan en presencia de una polimerasa termoestable y los dNTPs. Después de una amplificación mediante PCR exitosa, la hibridación de la sonda FRET con la secuencia diana resulta en la eliminación de la estructura secundaria de la sonda y la separación espacial de las fracciones fluorescente y neutralizante. Se obtiene una señal fluorescente. Una señal fluorescente indica la presencia de la secuencia flanqueadora/inserto transgénico 50 debida a una amplificación e hibridación exitosas.
Los ejemplos siguientes se incluyen para demostrar los ejemplos de ciertas realizaciones preferidas de la invención. Las personas con conocimientos en la materia deberían tener en cuenta que las técnicas divulgadas en los ejemplos siguientes representan enfoques que los inventores han encontrado que funcionan bien con la práctica de la invención y, de esta manera, puede considerarse que constituyen ejemplos de los modos preferentes para la práctica de la 55 misma.
Ejemplos
Ejemplo 1
El evento transgénico de maíz PV-ZMGT32 (nk603) (en adelante denominado nk603) se generó mediante bombardeo con microproyectiles de embriones de maíz (Songstad et al., In Vitro Cell Plant 62: 179-183, 1996) usando un fragmento de ADN Mlul lineal derivado de pMON25406 (Figura 1). Este fragmento de ADN contiene dos casetes de 5 expresión transgénicos que colectivamente confieren tolerancia a glifosato a la planta de maíz. El primer casete está compuesto de promotor de actina 1 y el intrón de arroz (P-Os.Act1 e I-Os.Act1, patente US N°: 3.641.876), conectados operativamente a un péptido de tránsito a cloroplasto EPSPS de Arabidopsis (TS-At.EPSPS:CTP2, Klee el al., Mol. Gen. Genet. 210: 47-442, 1987), conectado operativamente a una 5-enol-piruvilshiquimato-3-fosfato sintetasa (EPSPS) tolerante a glifosato de Agrobacterium sp. cepa CP4 (AGRTU.aroA:CP4, patente US N°: 5.633.435) y conectada 10 operativamente a un terminador de transcripción de nopalina sintetasa (T-AGRTU.nos, Fraley et al. Proc. Nati. Acad. ScL. EE.UU. 80: 4803-4807, 1983). El segundo casete de expresión transgénico consiste en el promotor 35S del virus de mosaico de la coliflor que contiene una duplicación en tándem de la región potenciadora (P-CaMV.35S, Kay el al. Science 236: 1299-1302, 1987; patente US N°: 5.164.316), conectado operativamente al intrón Hsp70 de Zea mays (I-ZM.Hsp70, patente US N°: 5.362.865), conectado operativamente a un péptido de tránsito a cloroplasto EPSPS de 15 Arabidopsis (TSAt.EPSPS:CTP2, Klee et al., Mol. Gen. Genet. 310: 47-442, 1987), conectado operativamente a una 5-enol-piruvilshiquimato-3-fosfato sintetasa (EPSPS) tolerante a glifosato de Agrobacterium sp, cepa CP4 (AGRTU.aroA:CP4, patente US N°: 5.633.435) y conectada operativamente a un terminador de transcripción de nopalina sintetasa (T-AGRTU.nos, Fraley et al. Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU. 80: 4803-4807, 1983). Después del bombardeo, se seleccionaron callos transgénicos tolerantes a glifosato sobre un medio que contenía glifosato 3 mM y a 20 continuación se regeneraron las plantas. Se produjeron trescientas cuatro plantas a partir de 91 eventos transgénicos independientes, nk603 se seleccionó de esta población en base a una combinación superior de características, incluyendo tolerancia a glifosato, rendimiento agronómico e inserción transgénica única. Las evaluaciones en invernadero y en campo del evento nk603 y de la progenie derivada del mismo indicaron que esta inserción transgénica confiere una tolerancia que supera las especificaciones comerciales de tolerancia vegetativa y reproductora total a 340 25 g de glifosato/acre (840 g de glifosato/hectárea; 32 onzas Roundup Ultra/acre) cuando se aplica en las etapas de hojas V4 y V8.
Ejemplo 2
El evento nk603 de maíz tolerante a glifosato se comparó con el estándar comercial actual, GA21 (patente US N°: 6.040.497), con relación a la tolerancia por lesiones vegetativas y efecto del glifosato sobre el rendimiento. GA21 30 contiene al menos 3 casetes de expresión transgénicos dispuestos en tándem en el genoma del maíz del evento GA21 (SCP/GMO/232-Final European Commission Health & Consumer Protection Directorate-General). El casete transgénico de GA21 consiste en un promotor de actina 1 y un intrón de arroz conectados a un péptido de tránsito a cloroplasto ribulosa 1,5-bisfosfato carboxilasa, conectado a una EPSPS modificada de maíz resistente a glifosato y una región de terminación de transcripción 3' nopalina sintetasa. Las plantas nk603 y GA21 se plantaron en filas de lotes 35 replicados. Los tratamientos fueron 1) sin rociar, 2) rociado con una dosis de 4,48 kg/hectárea (64 onzas/acre)) de Roundup Ultra® en la etapa de hojas V4 y de nuevo con 4,48 kg/hectárea (64 onzas/acre)) de Roundup Ultra® en la etapa de hojas V8; 3) rociado con una dosis de 6,72 kg/hectárea (96 onzas/acre)) de Roundup Ultra® en la etapa de hojas V4 y de nuevo con 6,72 kg/hectárea (96 onzas/acre)) de Roundup Ultra® en la etapa de hojas V8. La tolerancia vegetativa se midió como un porcentaje de daños vegetativos determinados por la cantidad de malformación en las 40 hojas observada 10 días después del tratamiento con el herbicida en la etapa de hojas VB. El rendimiento de cada lote se midió en toneladas/hectárea (fanegas/acre) y se determinó el porcentaje de reducción del rendimiento para cada tratamiento con el herbicida con relación al tratamiento sin rociado. Los resultados mostrados en la Tabla 1 ilustran que nk603 presenta un menor porcentaje de nivel de daños vegetativos que las plantas GA21 y el porcentaje de reducción del rendimiento observado es también menor para el evento nk603. Se observó una baja incidencia de daños 45 vegetativos en los lotes no rociados, esta observación es atribuible a diversos factores ambientales distintos de la exposición al herbicida glifosato. El casete de expresión doble de pMON25496 en nk603 se comparó con los daños vegetativos y la calificación de fertilidad de 3 eventos de maíz independientes obtenidos solo a partir de la expresión del gen de tolerancia a glifosato (AGRTU.aroA:CP4) dirigida por el promotor CaMV 35S. Se observó el casete de expresión doble confería un nivel más alto de tolerancia vegetativa y de tolerancia reproductiva que los tres eventos de maíz 50 Independientes (ev. 1, ev. 2 y ev. 3) que contenían solo el casete de expresión en el que la expresión del gen de tolerancia a glifosato era dirigido por el promotor CaMV.35S. Se observó un nivel más alto de tolerancia vegetativa a daños por el herbicida glifosato para nk603 más 3 eventos adicionales de maíz derivados de pMON25496 en comparación con el daño promedio de 6 eventos de maíz derivados de un constructo en el que la expresión del gen de tolerancia a glifosato era dirigida solamente por el promotor de actina y el intrón de arroz (P-Os.Act1/I-Os.Act1). Las 55 plantas transformadas con el casete de expresión doble poseían un nivel más alto de tolerancia a daños vegetativos y de fertilidad debido al glifosato que las plantas derivadas de una transformación con los casetes de expresión individuales, esto resultó en una resistencia mejorada a la pérdida de rendimiento debida a la aplicación del herbicida glifosato. El constructo pMON25496 proporciona dos casetes de expresión vegetales en una única ubicación en nk603
que confiere un nivel más alto de tolerancia a glifosato que la inserción triple en tándem en el estándar comercial, GA-21.
Tabla 1. Tolerancia a glifosato de nk603 - Daños vegetativos, rendimiento y calificación de fertilidad
Evento
Tratamiento % daño vegetativo* Rendimiento t/ha (fanegas/acre) % red. rendimiento
GA21
Sin rociado 0,3 8,92 (142,2)
1,81 kg (64 onzas) de RoundUp Ultra® en V4 seguido de 1,81kg (64 onzas) en V8 5,3 8,42 (134,1) 5,7
2,72 kg (96 onzas) de RoundUp Ultra® en V4 seguido de 2,72 kg (96 onzas) en V8 8,3 8,10 (129,1) 9,2
nk603
Sin rociado 0,9 9,14 (145,6)
1,81 kg (64 onzas) de RoundUp Ultra® en V4 seguido de 1,81 kg (64 onzas) en V8 2,9 8,69 (138,5) 4,9
2,72 kg (96 onzas) de RoundUp Ultra® en V4 seguido de 2,72 kg (96 onzas) en V8 4,7 8,79 (140,1) 3,8
Tratamiento Calificación de fertilidad**
nk603
1,81 kg (64 onzas) de RoundUp Ultra® en V8 4,5
CaMV.35S ev. 1
1,81 kg (64 onzas) de RoundUp Ultra® en V8 2,0
CaMV.35S ev. 2
1,81 kg (64 onzas) de RoundUp Ultra® en V8 2,2
CaMV.35S ev. 3
1,81 kg (64 onzas) de RoundUp Ultra® en V8 2,4
5
Tratamiento % promedio de daño vegetativo*
nk603 más 3 eventos pMON25496 adicionales
3,63 kg (128 onzas) de RoundUp Ultra® en V4 seguido de 128 onzas a V8 22,9
Seis eventos de casete P.Os.Act1 individuales
3,63 kg (128 onzas) de RoundUp Ultra® a V4 seguido de 128 onzas en V8 28,9
* Los daños vegetativos observados 10 días después del tratamiento en V8 son una medición tomada para evaluar los daños vegetativos como respuesta al tratamiento con glifosato. ** Calificación de fertilidad macho: 4-5 = completamente fértil; 3 = liberación de polen significativamente reducida; 0-3 = completamente estéril - altamente estéril, no adecuado para uso comercial. 10
Ejemplo 3
La correspondiente molécula de ADN flanqueador de nk603 se clonó usando adaptadores ligados y PCR anidado como se describe en el kit Genome Walker™ (N° catálogo K1807-1, CloneTech Laboratories, Inc, Palo Alto, CA). Primero, se purificó el ADN genómico del evento nk603 mediante el procedimiento de purificación CTAB (Rogers et al., Plant Mol. Biol. 5: 69-76. 1985). Se prepararon bibliotecas de ADN genómico para la amplificación según las 15 instrucciones del proveedor (Genome Walker®, CloneTech Laboratories. Inc. Palo Alto. CA). En reacciones separadas,
se digirió el ADN genómico durante la noche a 37°C con las siguientes endonucleasas de restricción para extremos cohesivos: EcoRV, Seal, Drawl, Pvull y Stul (CloneTech Laboratories, Inc. Palo Alto, CA). Las mezclas de reacción se extrajeron con fenol:cloroformo, el ADN se precipitó mediante la adición de etanol a la fase acuosa, se peleteó mediante centrifugación, a continuación se resuspendió en tampón Tris-EDTA (Tris-HCI 10 mM, pH 8,0, EDTA 1 mM). Los fragmentos de ADN genómico de extremos cohesivos purificados se ligaron con los adaptadores Genome 5 Walker™ según el protocolo del proveedor. Después de la ligación, cada reacción se trató con calor (70°C durante 5 min) para terminar la reacción y a continuación se diluyó 10 veces con tampón Tris-EDTA. A continuación, un μl de cada ligación respectiva se amplificó en una reacción de 50 μl que incluía 1 μl de la respectiva biblioteca ligada al adaptador, 1 μl de cebador adaptador Genome Walker™ 10 μM AP1 (5’GTATATCGACTCACTATAGGGC 3’, SEQ ID N°: 1), 1 μl de oligonudeótido específico del transgén nk603 10 μM 10
(5’ TGACGTATCAAAGTACCGACAAAAACATCC 3' SEQ ID N°: 2), 1 μl de desoxirribonucleótidos 10 mM, 2,5 μl de dimetilsulfóxido, 5 μl de tampón para PCR 10X que contenía MgCl2, 0,5 μl (2,5 unidades) de ADN polimerasa termoestable Amplitaq (PE Applied Biosystems, Foster City, CA) y H2O hasta completar 50 μl. Las reacciones se llevaron a cabo en un termociclador usando control de temperatura calculada y las siguientes condiciones de ciclado: 1 ciclo de 95°C durante 9 minutos; 7 ciclos de 94°C durante 2 segundos, 70°C durante 3 minutos; 36 ciclos de 94°C 15 durante 2 segundos, 65°C durante 3 minutos; 1 ciclo de 65°C durante 4 minutos. Un μl de cada reacción primaria se diluyó 50 veces con agua y se amplificó en una reacción secundaria (1 μl de la reacción primaria diluida respectiva, 1 μl del cebador adaptador anidado Genome Walkern™ AP2 10 mM (5’ACTATAGGGCACGCGTGGT 3', SEQ ID N°: 3, suministrado por el proveedor), 1 μl de oligonudeótido anidado específico del transgén nk603 10 mM
(5’ CTTTGTTTTATTTTGGACTATCCCGACTC 3', SEQ ID N°: 4), 1 μl de desoxirribonucleótidos 10 mM, 2,5 μl de 20 dimetilsulfóxido, 5 μl de tampón para PCR 10X que contenía MgCl2, 0,5 μl (2,5 unidades) de ADN polimerasa termoestable Amplitaq (PE Applied Biosystems, Foster City, CA) y H2O hasta completar 50 μl con las siguientes condiciones de ciclado: 1 ciclo de 95°C durante 9 minutos; 5 ciclos de 94°C durante 2 segundos, 70°C durante 3 minutos; 24 ciclos de 94°C durante 2 segundos, 65°C durante 3 minutos; 1 ciclo de 65°C durante 4 minutos.
Los productos de la PCR, que representan las regiones 5' que abarcan la unión entre la inserción transgénica nk603 y 25 el ADN vecino flanqueador de maíz se purificaron mediante electroforesis sobre gel de agarosa, seguido de purificación a partir de matriz de agarosa con el kit de extracción de gel QlAquick (N° catálogo 28704, Qiagen Inc., Valencia, CA) y clonación directa en el vector pGEM-T Easy (N° catálogo A1360, Promega, Madison, WI). La identidad de los productos clonados de la PCR y la relación con el fragmento Mlu I de pMON25496 se confirmó mediante análisis de secuencia de ADN (ABI Prism™ 377, PE Biosystems, Foster City, CA y el software para análisis de secuencia DNASTAR, DNASTAR 30 Inc., Madison, WI).
De manera similar, la secuencia de ADN flanqueadora 3' del nk603 de maíz se amplificó y clonó usando cebadores anidados específicos de gen, tales como la SEQ ID Nº:5 (5’ AGATTGAATCCTGTTGCCGGTCTTGC 3’) y la SEQ ID Nº:6 (5’ GCGGTGTCATCTATGTTACTAGATCGGG 3’) que se alinean con el terminador de transcripción T-AGRTU.nos. Hay dos terminadores de transcripción T-AGRTU.nos presentes en la inserción transgénica/genómica 35 nk603, uno Interno en el constructo y uno en el extremo 3' del constructo adyacente al ADN genómico de maíz. Los productos de PCR producidos en esta reacción se secuenciaron y la secuencia de ADN que abarca la unión entre el transgén y la secuencia flanqueadora se distinguió de los productos del T-AGRTU.nos interno mediante comparación con las secuencias de los elementos genéticos conocidos del constructo pMON25496 descrito anteriormente.
Se determinó la secuencia del ADN de maíz que flanquea ambos lados de la inserción transgénica para nk603 40 mediante secuenciación de los productos de amplificación derivados de Genome Walker™ y alineación con una secuencia transgénica conocida. En el extremo 5' de la inserción transgénica, se determinó la secuencia de un segmento de 498 pb alrededor de la unión de la inserción (SEQ ID N°: 7). Este segmento consistía en 304 pares de base (pb) de la secuencia de ADN genómico flanqueador de maíz (nudeótidos 1-304 de la SEQ ID N°: 7), 45 pb de la secuencia de ADN del constructo pMON25496 (nucleótidos 305-349 de la SEQ ID N°: 7) y 149 pb de secuencia de 45 ADN del extremo 5' de P-Os.Act1 (nucleótidos 350-498 de la SEQ ID N°: 7).
Se determinó la secuencia de ADN de un segmento de 1.183 pb alrededor de la unión de la inserción en 3' (SEQ ID N°: 8), que comienza con 164 pb del terrninador de transcripción T-AGRTU.nos (nucleótidos 1-164 de la SEQ ID N°: 8), 217 pb de la secuencia de ADN del constructo pMON25496 (nucleótidos 165-381 de la SEQ ID N°: 8), 305 pb de los genes de plástidos de maíz, rps11 y rpoA (segmentos parciales de cada gen correspondientes a las bases 63-363 de 50 Genbank, N° Acceso X07810, correspondientes a las bases 382-686 de la SEQ ID N°: 8) y la secuencia de ADN restante consistía en la secuencia de ADN genómico de maíz que flanqueaba el sitio de integración (correspondiente a las bases 687-1.183 de la SEQ ID N°: 8).
Las moléculas de ADN de la unión, SEQ ID N°: 9, SEQ ID N°: 10, SEQ ID N°: 11 y SEQ ID N°: 12 son moléculas de ADN nuevas en nk603 y son diagnósticos de las plantas de maíz nk603 y su progenie. Las moléculas de la unión en 55 las SEQ ID N°: 9, SEQ ID N°: 10 y SEQ ID N°: 11 representan aproximadamente 9 nucleótidos a cada lado del sitio de inserción del fragmento de ADN transgénico y del ADN genómico de maíz. La SEQ ID N°: 9 se encuentra en las
posiciones de nucleótidos 296-314 de la SEQ ID N°: 7. Las secuencias de unión de las SEQ ID Nº: 10 y 11 están ubicadas en las posiciones de nucleótidos 373-390 y 678-695, respectivamente, de la SEQ ID N°: 8 y representan una molécula de ADN de unión de la secuencia de ADN del constructo con la secuencia de ADN de plástido de maíz (SEQ ID N°: 10) y de la secuencia del constructo con la secuencia de ADN genómico de maíz (SEQ ID N°: 11). La SEQ ID N°: 12 está ubicada en las posiciones de nucleótidos 156-173 de la SEQ ID N°: 8 y representa una molécula de ADN 5 nueva en nk603 ya que es una fusión de la secuencia del terminador T-AGRTU.nos con un fragmento invertido de la secuencia de ADN del promotor de actina de arroz.
Ejemplo 4
Se usan los pares de cebadores del evento de ADN para producir un amplicón diagnóstico de nk603. Estos pares de cebadores del evento incluyen, pero no se limitan a, las SEQ ID N°: 13 y SEQ ID N°: 14 para la molécula de ADN del 10 amplicón en 5' y las SEQ ID N°: 15 y SEQ ID N°: 16 para la molécula de ADN del amplicón en 3'. Además de estos pares de cebadores, cualquier par de cebadores derivado de las SEQ ID N°: 7 y SEQ ID N°: 8 que, cuando se usa en una reacción de amplificación de ADN, produce un amplicón de ADN diagnóstico para nk603, constituye un aspecto de la presente invención. Las condiciones de amplificación para este análisis se ilustran en la Tabla 2 y en la Tabla 3 para la región de unión del inserto transgénico/genómica en 5'. Se aplica el mismo procedimiento para la amplificación de la 15 molécula de ADN del amplicón en 3' usando moléculas de ADN cebadoras de las SEQ ID N°: 15 y SEQ ID N°: 16, sin embargo, la persona con conocimientos en la materia puede efectuar cualquier modificación de estos procedimientos que use moléculas de ADN, o complementos de las mismas, para producir una molécula de ADN amplicón de diagnóstico para nk603. Además, se incluye un par de cebadores de control (SEQ ID N°: 17 y 18) para la amplificación de un gen endógeno de maíz como estándar interno en las condiciones de reacción. El análisis de una muestra de 20 extracto de ADN del tejido de una planta nk603 debería incluir un extracto de ADN de tejido de control positivo de nk603, un extracto de ADN de tejido de control negativo de una planta de maíz que no es nk603 y un control negativo que no contiene ningún extracto de ADN de maíz plantilla. Las personas con conocimientos en la materia de los procedimientos de amplificación de ADN pueden seleccionar moléculas de ADN cebadoras adicionales, de longitud suficiente, de entre las SEQ ID N°: 7 y SEQ ID N°: 8 y las condiciones optimizadas para la producción de un amplicón 25 que pueden diferir de los procedimientos mostrados en la Tabla 2 y Tabla 3 pero que resultan en un amplicón diagnóstico de nk603. El uso de estas secuencias de ADN cebadoras con las modificaciones de los procedimientos de la Tabla 2 y 3 se encuentra dentro del alcance de la invención. Un amplicón en el que al menos una molécula de ADN cebadora de longitud suficiente derivada de las SEQ ID N°: 7 y SEQ ID N°: 8 que sea diagnóstico para nk603 constituye un aspecto de la invención. Un amplicón en el cual por lo menos un ADN cebador de longitud suficiente 30 derivado de cualquiera de los elementos genéticos de pMON25496 que sea diagnóstico para nk603 constituye un aspecto de la invención. El ensayo para el amplicón nk603 puede llevarse a cabo usando un equipo termociclador Stratagene Robocycler, MJ Engine, Perkin-Elmer 9700, o Eppendorf Mastercycler Gradient, tal como se muestra en la Tabla 3, o mediante procedimientos y aparatos conocidos por las personas con conocimientos en la materia.
Tabla 2. Procedimiento de PCR y mezcla de reacción para la confirmación de la región de unión del inserto 35 transgénico/genómico en 5' del nk603.
Etapa
Reactivo Cantidad Comentarios
1
Agua libre de nucleasas añadir a un volumen final de 20 μl -
2
10x Tampón de reacción (con MgCl2) 2,0 μl Concentración final 1x de tampón, concentración final de MgCl2 1,5 mM
3
Solución 10 mM de dATP, dCTP, dGTP y dTTP 0,4 μl Concentración final de cada dNTP 200 μM
4
Cebador de evento (SEQ ID Nº:13) (resuspendido en 1x tampón TE o agua libre de nucleasas a una concentración de 10 μM) 0,4 μl Concentración final 0,2 μM
5
Cebador de evento (SEQ ID Nº:14) (resuspendido en 1x tampón TE o agua libre de nucleasas a una concentración de 10 μM) 0,4 μl Concentración final 0,2 μM
(Cont.)
6
Cebador de evento (SEQ ID Nº:17) (resuspendido en 1x tampón TE o agua libre de nucleasas a una concentración de 10 μM) 0,2 μl Concentración final 0,1 μM
7
Cebador de evento (SEQ ID Nº:18) (resuspendido en 1x tampón TE o agua libre de nucleasas a una concentración de 10 μM) 0,2 μl Concentración final 0,1 μM
8
Libre de RNasa, DNasa (500 ng/μl) 0,1 μl 50 ng/reacción
9
ADN polimerasa REDTaq (1 unidad/μl) 1,0 μl (se recomienda cambiar las pipetas antes de la etapa siguiente) 1 unidad/reacción
10
ADN extraído (plantilla): • Muestras a analizar -
*hojas individuales • 10-200 ng de ADN genómico
*hojas agrupadas (máx. 50 hojas/grupo) • 200 ng de ADN genómico
• Control negativo • 50 ng de ADN genómico de maíz (no nk603)
• Control negativo • sin plantilla ADN
• Control positivo • 50 ng de ADN genómico nk603
Tabla 3. Parámetros sugeridos para la PCR con diferentes termocicladores
Mezclar suavemente y, si es necesario (en ausencia de la tapa termostatizada sobre el termociclador), añadir 1-2 gotas de aceite mineral sobre cada reacción. Continuar con la PCR en un termociclador Stratagene Robocycler, MJ Engine, Perkin-Elmer 9700 o Eppendorf Mastercycler Gradient usando los siguientes parámetros de ciclado. Nota: El termociclador MJ Engine o Eppendorf Mastercycler Gradient debería ejecutarse en el modo calculado. El termociclador Perkin-Elmer 9700 se debe ejecutar con la velocidad de rampa establecida al máximo.
Nº de ciclo
Ajustes: Stratagene Robocycler
1
94ºC 3 minutos
38
94ºC 1 minuto 60ºC 1 minuto 72ºC 1 minuto y 30 segundos
1
72ºC 10 minutos

Claims (12)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Una planta, célula, semilla de maíz o progenie de la misma tolerante a glifosato, que comprende:
    un constructo de ADN que comprende: un primer y un segundo casete de expresión, en el que dicho primer casete de expresión comprende, en una unión operativa, (i) un promotor de actina 1 de arroz; (ii) un intrón de actina 1 de arroz; (iii) una molécula de ADN que codifica un péptido de tránsito a cloroplasto; (iv) una molécula de 5 ADN que codifica EPSPS tolerante a glifosato; y (v) una molécula de ADN terminadora de transcripción; y en el que dicho segundo casete de expresión comprende, en una unión operativa, (a) un promotor 35S CaMV; (b) un intrón Hsp70; (c) una molécula de ADN que codifica un péptido de tránsito a cloroplasto; (d) una molécula de ADN que codifica EPSPS resistente a glifosato; (e) una molécula de ADN terminadora de transcripción,
    en la que la secuencia de superposición de la unión entre el ADN genómico de maíz y el flanco 5' del constructo 10 comprende la SEQ ID Nº: 9 y la unión de solapamiento entre el ADN genómico de maíz y el flanco 3' del constructo comprende la SEQ ID Nº: 11, y en el que el constructo de ADN está presente en el evento de maíz ZMGT32 (nk603) depositado en la American Type Culture Collection (ATCC) Nº de Acceso PTA-2478.
  2. 2. Planta, célula, semilla de maíz o progenie de la misma tolerante a glifosato, que comprende incorporado en el genoma de la célula vegetal el constructo de ADN según la reivindicación 1 y ADN que tienen secuencias de 15 nucleótidos de las SEQ ID Nº: 9, SEQ ID Nº: 10, SEQ ID Nº: 11 y SEQ ID Nº: 12.
  3. 3. Célula de planta de maíz tolerante a glifosato según la reivindicación 1 o 2, que es capaz de producir un amplicón de diagnóstico de evento ZMGT32 (nk603).
  4. 4. Célula de planta de maíz tolerante a glifosato según la reivindicación 3, en la que dicho amplicón de diagnóstico se hibrida bajo condiciones rigurosas con las SEQ ID Nº: 9, SEQ ID Nº: 10, SEQ ID Nº: 11 o SEQ ID Nº: 12. 20
  5. 5. Semilla de maíz tolerante a glifosato según la reivindicación 1 o 2, que es capaz de producir un amplicón de diagnóstico de evento ZMGT32 (nk603).
  6. 6. Semilla de maíz tolerante a glifosato según la reivindicación 5, en la que dicho amplicón de diagnóstico se hibrida bajo condiciones rigurosas con las SEQ ID Nº: 8, SEQ ID Nº: 9, SEQ ID Nº: 10, SEQ ID Nº: 11 o SEQ ID Nº: 12.
  7. 7. Semilla de maíz tolerante a glifosato según la reivindicación 5, que comprende la célula de la planta de maíz según 25 la reivindicación 3 o 4.
  8. 8. Planta de maíz tolerante a glifosato según la reivindicación 1 o 2, que es capaz de producir un amplicón de diagnóstico de evento ZMGT32 (nk603).
  9. 9. Planta de maíz tolerante a glifosato según la reivindicación 8, en la que dicho amplicón de diagnóstico se hibrida bajo condiciones rigurosas con las SEQ ID Nº: 8, SEQ ID Nº: 9, SEQ ID Nº: 10, SEQ ID Nº: 11, o SEQ ID Nº: 12. 30
  10. 10. Planta de maíz tolerante a glifosato según la reivindicación 8, que comprende la célula de planta según la reivindicación 3 o 4.
  11. 11. Planta de maíz tolerante a glifosato según la reivindicación 1, que puede obtenerse mediante un procedimiento que comprende:
    (a) cruzar una planta de maíz resistente al glifosato según la reivindicación 2 con otra planta de maíz; 35
    (b) obtener al menos una planta progenie derivada del cruzamiento de (a); y
    (c) seleccionar la progenie que es tolerante a glifosato y que comprende las regiones de unión de las SEQ ID Nº: 9, SEQ ID Nº: 10, SEQ ID Nº: 11 y SEQ ID Nº: 12.
  12. 12. Un procedimiento de cultivo de una planta de maíz que tolera la aplicación del herbicida glifosato que comprende:
    (a) plantar al menos una semilla de maíz según la reivindicación 2; 40
    (b) permitir que una planta de maíz crezca a partir de dicha semilla de maíz;
    (c) pulverizar dicha planta de maíz con herbicida glifosato, de manera que dicha planta de maíz tenga un daño vegetativo y una reducción del rendimiento reducidos en comparación con otras plantas de maíz que no comprenden las SEQ ID Nº: 9, SEQ ID Nº. 10, SEQ ID Nº: 11 y SEQ ID Nº: 12.
    45
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Families Citing this family (402)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR122013026754B1 (pt) * 2000-06-22 2018-02-27 Monsanto Company Molécula de dna e processos para produzir uma planta de milho tolerante à aplicação do herbicida glifosato
CA2420406C (en) 2000-09-29 2014-12-09 Monsanto Technology Llc Glyphosate tolerant wheat plant 33391 and compositions and methods for detection thereof
AU2002218413A1 (en) 2000-11-30 2002-06-11 Ses Europe N.V. Glyphosate resistant transgenic sugar beet characterised by a specific transgene insertion (t227-1), methods and primers for the detection of said insertion
AU2003299579B2 (en) * 2002-12-05 2008-09-04 Monsanto Technology Llc Bentgrass event ASR-368 and compositions and methods for detection thereof
WO2004070020A2 (en) 2003-01-31 2004-08-19 Monsanto Technology Llc Glyphosate tolerant alfalfa events and methods for detection thereof
AU2004236718C1 (en) * 2003-05-02 2010-06-10 Corteva Agriscience Llc Corn event TC1507 and methods for detection thereof
US7157281B2 (en) * 2003-12-11 2007-01-02 Monsanto Technology Llc High lysine maize compositions and event LY038 maize plants
RS54170B1 (sr) 2003-12-15 2015-12-31 Monsanto Technology, Llc Biljka kukuruza mon88017 i kompozicije i postupci za detekciju
US7855323B2 (en) 2004-02-10 2010-12-21 Monsanto Technology Llc Recombinant DNA for gene suppression
AR047598A1 (es) * 2004-02-10 2006-01-25 Monsanto Technology Llc Semilla de maiz transgenica con mayor contenido de aminoacidos
US7683237B2 (en) * 2004-02-10 2010-03-23 Monsanto Technology Llc Maize seed with synergistically enhanced lysine content
KR101268897B1 (ko) * 2004-03-25 2013-05-30 신젠타 파티서페이션즈 아게 옥수수 이벤트 ｍｉｒ604
US20070197474A1 (en) * 2004-03-30 2007-08-23 Clinton William P Methods for controlling plants pathogens using N-phosphonomethylglycine
NZ550322A (en) 2004-03-30 2012-02-24 Monsanto Technology Llc Methods for controlling plant pathogens using glyphosate
CN1984558B (zh) 2004-04-30 2011-01-12 美国陶氏益农公司 新除草剂抗性基因
AU2005292090B2 (en) * 2004-09-29 2011-02-03 Corteva Agriscience Llc Corn event DAS-59122-7 and methods for detection thereof
AP2693A (en) 2005-05-27 2013-07-16 Monsanto Technology Llc Soybean event MON89788 and methods for detection thereof
EP1910547A2 (en) 2005-07-29 2008-04-16 Monsanto Technology, LLC Development of novel germplasm using segregates from transgenic crosses
EP1931791B1 (en) * 2005-08-24 2012-02-08 Pioneer-Hi-Bred International, Inc. Methods and compositions for the expression of a polynucleotide of interest
ATE542912T1 (de) * 2005-10-03 2012-02-15 Monsanto Technology Llc Transgene pflanzensamen mit erhöhtem lysin
WO2007047016A2 (en) 2005-10-13 2007-04-26 Monsanto Technology, Llc Methods for producing hybrid seed
DK1947926T3 (en) 2005-10-28 2015-01-26 Dow Agrosciences Llc new herbicide resistant genes
US7906709B2 (en) * 2006-01-23 2011-03-15 Board Of Trustees Of Michigan State University Methods for breeding glyphosate resistant plants and compositions thereof
EP2059601A2 (en) * 2006-10-03 2009-05-20 Monsanto Technology, LLC Methods for hybrid corn seed production and compositions produced therefrom
TWM318228U (en) * 2006-11-02 2007-09-01 Datafab Sys Inc Structure for protecting terminal of memory card adapter
BRPI0820373B1 (pt) * 2007-11-15 2024-01-02 Monsanto Technology Llc Método de produção de uma planta de soja resistente a inseto, composições derivadas de células de tal planta, método para proteção de uma planta de soja de infestação de inseto, moléculas de dna, métodos de detectar a presença de tais moléculas e de determinar a zigozidade de tais plantas e kit de detecção de dna
CN104651355A (zh) 2008-02-15 2015-05-27 孟山都技术公司 对应于转基因事件mon87769的大豆植物和种子及其检测方法
AP2967A (en) 2008-02-29 2014-09-30 Monsanto Technology Llc Zea mays plant event MON87460 and compositions andmethods for detection thereof
EP2113172A1 (de) * 2008-04-28 2009-11-04 Bayer CropScience AG Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
WO2010024976A1 (en) 2008-08-29 2010-03-04 Monsanto Technology Llc Soybean plant and seed corresponding to transgenic event mon87754 and methods for detection thereof
JP5767585B2 (ja) 2008-09-29 2015-08-19 モンサント テクノロジー エルエルシー 大豆遺伝子組換え事象ｍｏｎ８７７０５およびその検出方法
AR075126A1 (es) * 2009-01-29 2011-03-09 Bayer Cropscience Ag Metodo para el mejor uso del potencial de produccion de plantas transgenicas
WO2010135324A1 (en) 2009-05-18 2010-11-25 Monsanto Technology Llc Use of glyphosate for disease suppression and yield enhancement in soybean
US8618358B2 (en) * 2009-11-23 2013-12-31 Monsanto Technology Llc Transgenic maize event MON 87427 and the relative development scale
NZ601341A (en) 2010-01-22 2014-02-28 Bayer Ip Gmbh Acaricide and/or insecticide active substance combinations
CN101812527B (zh) * 2010-04-20 2014-09-17 北京农业职业学院 一种快速检测6种转基因玉米的方法
EA033088B1 (ru) 2010-06-04 2019-08-30 Монсанто Текнолоджи Ллс Трансгенное событие mon 88302 у вида brassica и способы его применения
CN103209993B (zh) * 2010-09-15 2014-12-10 陶氏益农公司 针对赋予对2,4-二氯苯氧乙酸的抗性的酶的单克隆抗体和检测方法
CA2814532C (en) 2010-10-12 2021-07-27 Monsanto Technology Llc Soybean plant and seed corresponding to transgenic event mon87712 and methods for detection thereof
WO2012065944A1 (en) 2010-11-15 2012-05-24 Bayer Cropscience Ag N-aryl pyrazole(thio)carboxamides
JP2014503503A (ja) 2010-11-29 2014-02-13 バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー α，β−不飽和イミン類
CN103281900A (zh) 2010-12-01 2013-09-04 拜耳知识产权有限责任公司 氟吡菌酰胺用于防治作物中的线虫以及提高产量的用途
EP2460407A1 (de) 2010-12-01 2012-06-06 Bayer CropScience AG Wirkstoffkombinationen umfassend Pyridylethylbenzamide und weitere Wirkstoffe
EP2683239A1 (en) 2011-03-10 2014-01-15 Bayer Intellectual Property GmbH Use of lipochito-oligosaccharide compounds for safeguarding seed safety of treated seeds
HUE038497T2 (hu) 2011-03-23 2018-10-29 Bayer Ip Gmbh Hatóanyag-kombinációk
EP2694494A1 (en) 2011-04-08 2014-02-12 Bayer Intellectual Property GmbH Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
HRP20160061T1 (hr) 2011-04-22 2016-02-12 Bayer Intellectual Property Gmbh Kombinacije aktivnih spojeva koje sadrže derivat karboksamida i fungicidni spoj
EP2720543B1 (en) 2011-06-14 2018-08-22 Bayer CropScience AG Use of an enaminocarbonyl compound in combination with a biological control agent
CN103635483B (zh) 2011-07-01 2016-11-09 孟山都技术公司 用于选择性调控蛋白质表达的方法和组合物
PH12014500208A1 (en) 2011-07-28 2014-03-03 Genective Glyphosate tolerant corn event vco-ã˜1981-5 and kit and method for detecting the same
AU2012293636B2 (en) 2011-08-10 2015-12-03 Bayer Intellectual Property Gmbh Active compound combinations comprising specific tetramic acid derivatives
CN107287234A (zh) 2011-08-22 2017-10-24 拜尔作物科学公司 修饰植物基因组的方法和手段
EP2561759A1 (en) 2011-08-26 2013-02-27 Bayer Cropscience AG Fluoroalkyl-substituted 2-amidobenzimidazoles and their effect on plant growth
CN102952861B (zh) * 2011-08-26 2014-12-31 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 转基因玉米多重pcr-dhplc检测引物及检测方法
MX347562B (es) 2011-09-12 2017-05-03 Bayer Ip Gmbh Derivados fungicidas de 3-fenil[(heterociclilmetoxi)imino]metil}-1 ,2,4-oxadiazol-5(4h)-ona sustituidos en 4.
CA2848622A1 (en) 2011-09-16 2013-03-21 Bayer Intellectual Property Gmbh Use of 5-phenyl- or 5-benzyl-2-isoxazoline-3-carboxylates for improving plant yield
IN2014CN01860A (es) 2011-09-16 2015-05-29 Bayer Ip Gmbh
US10301257B2 (en) 2011-09-16 2019-05-28 Bayer Intellectual Property Gmbh Use of acylsulfonamides for improving plant yield
US20150082495A1 (en) 2011-10-04 2015-03-19 Bayer Intellectual Property Gmbh RNAi FOR THE CONTROL OF FUNGI AND OOMYCETES BY INHIBITING SACCHAROPINE DEHYDROGENASE GENE
AR088363A1 (es) 2011-10-18 2014-05-28 Dow Agrosciences Llc MATERIALES Y METODOS PARA LA DETECCION DEL EVENTO pDAB4472-1606 QUE CONTIENE EL GEN ARILOXIALCANOATO DIOXIGENASA (AAD-12) EN PLANTAS
CN102409094B (zh) * 2011-11-17 2013-06-26 四川省农业科学院分析测试中心 转基因玉米nk603品系特异定量pcr精准检测方法
CN102409092B (zh) * 2011-11-17 2013-06-26 四川省农业科学院分析测试中心 转基因玉米nk603结构特异定量pcr精准检测方法
MX2014005976A (es) 2011-11-21 2014-08-27 Bayer Ip Gmbh Derivados de n-[(silil trisustituido)metil]-carboxamida fungicidas.
CA2857438A1 (en) 2011-11-30 2013-06-06 Bayer Intellectual Property Gmbh Fungicidal n-bicycloalkyl and n-tricycloalkyl (thio)carboxamide derivatives
CA2859467C (en) 2011-12-19 2019-10-01 Bayer Cropscience Ag Use of anthranilic acid diamide derivatives for pest control in transgenic crops
MX343818B (es) 2011-12-29 2016-11-24 Bayer Ip Gmbh Derivados de 3-[(1,3-tiazol-4-ilmetoxiimino)(fenil)metil]-2-sustit uido-1,2,4-oxadiazol-5(2h)-ona fungicidas.
MX343871B (es) 2011-12-29 2016-11-25 Bayer Ip Gmbh Derivados de 3-[(piridin-2-ilmetoxiimino)(fenil)metil]-2-sustituid o-1,2,4-oxadiazol-5(2h)-ona fungicidas.
EP2806739A1 (en) 2012-01-25 2014-12-03 Bayer Intellectual Property GmbH Active compound combinations containing fluopyram and biological control agent
US9433214B2 (en) 2012-01-25 2016-09-06 Bayer Intellectual Property Gmbh Active compounds combination containing fluopyram Bacillus and biologically control agent
US8975469B1 (en) 2012-02-21 2015-03-10 Pioneer Hi Bred International Inc Maize hybrid X13C704HR
US8952229B1 (en) 2012-02-21 2015-02-10 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH1K0H1
PE20190342A1 (es) 2012-02-27 2019-03-07 Bayer Ip Gmbh Combinaciones de compuestos activos
WO2013139949A1 (en) 2012-03-23 2013-09-26 Bayer Intellectual Property Gmbh Compositions comprising a strigolactame compound for enhanced plant growth and yield
WO2013153143A1 (en) 2012-04-12 2013-10-17 Bayer Cropscience Ag N-acyl- 2 - (cyclo) alkylpyrrolidines and piperidines useful as fungicides
EP2838363A1 (en) 2012-04-20 2015-02-25 Bayer Cropscience AG N-cycloalkyl-n-[(trisubstitutedsilylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
CN104428294B (zh) 2012-04-20 2017-07-14 拜尔农科股份公司 N‑环烷基‑n‑[(杂环基苯基)亚甲基]‑(硫代)羧酰胺衍生物
ES2903185T3 (es) 2012-05-08 2022-03-31 Monsanto Technology Llc Evento de maíz MON 87411
EP2662360A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole indanyl carboxamides
EP2662370A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole benzofuranyl carboxamides
EP2662363A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole biphenylcarboxamides
EP2662364A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole tetrahydronaphthyl carboxamides
US9375005B2 (en) 2012-05-09 2016-06-28 Bayer Cropscience Ag 5-halogenopyrazole indanyl carboxamides
EP2847170B1 (en) 2012-05-09 2017-11-08 Bayer CropScience AG Pyrazole indanyl carboxamides
EP2662362A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole indanyl carboxamides
EP2662361A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazol indanyl carboxamides
AR091104A1 (es) 2012-05-22 2015-01-14 Bayer Cropscience Ag Combinaciones de compuestos activos que comprenden un derivado lipo-quitooligosacarido y un compuesto nematicida, insecticida o fungicida
KR20150021537A (ko) 2012-05-30 2015-03-02 바이엘 크롭사이언스 아게 생물학적 방제제, 및 복합체 i 또는 ii에서의 호흡 연쇄의 억제제로 이루어진 군으로부터의 살진균제를 포함하는 조성물
US9907312B2 (en) 2012-05-30 2018-03-06 Bayer Cropscience Ag Compositions comprising a biological control agent and an insecticide
EP2854548B1 (en) 2012-05-30 2018-08-01 Bayer Cropscience AG Composition comprising a biological control agent and a fungicide selected from metalaxyl and metalaxyl-m
WO2013178662A1 (en) 2012-05-30 2013-12-05 Bayer Cropscience Ag Compositions comprising a biological control agent and an insecticide
CN104507316B (zh) 2012-05-30 2018-03-06 拜尔农作物科学股份公司 包含生物防治剂和杀真菌剂的组合物
PT2854549T (pt) 2012-05-30 2018-11-28 Bayer Cropscience Ag Composição que compreende um agente de controlo biológico e fluopicolida
HUE044560T2 (hu) 2012-05-30 2019-11-28 Bayer Cropscience Ag Biológiai kontroll szert és aminosav- vagy fehérje- bioszintézis inhibitorok, ATP elõállítás inhibitorok és sejtfal szintézis inhibitorok körébõl választott gombaölõ szert tartalmazó kompozíció
PT2854547T (pt) 2012-05-30 2018-11-16 Bayer Cropscience Ag Composição que compreende um agente de controlo biológico e trifloxistrobina
WO2014019983A1 (en) 2012-07-31 2014-02-06 Bayer Cropscience Ag Compositions comprising a pesticidal terpene mixture and an insecticide
EP2895601A1 (en) 2012-09-14 2015-07-22 Bayer Cropscience LP Hppd variants and methods of use
EP2719280A1 (en) 2012-10-11 2014-04-16 Bayer CropScience AG Use of N-phenylethylpyrazole carboxamide derivatives or salts thereof for resistance management of phytopathogenic fungi
CA2888556C (en) 2012-10-19 2020-07-07 Bayer Cropscience Ag Method of plant growth promotion using carboxamide derivatives
PT2908641T (pt) 2012-10-19 2018-04-16 Bayer Cropscience Ag Método para o tratamento de plantas contra fungos resistentes a fungicidas utilizando derivados de carboxamida ou tiocarboxamida
EP2908639A1 (en) 2012-10-19 2015-08-26 Bayer Cropscience AG Active compound combinations comprising carboxamide derivatives
CN104735985B (zh) 2012-10-19 2018-10-16 拜尔农科股份公司 使用羧酰胺或硫代羧酰胺衍生物增强植物中对非生物胁迫的耐受性的方法
EP2735231A1 (en) 2012-11-23 2014-05-28 Bayer CropScience AG Active compound combinations
CA2892701A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropscience Ag Binary pesticidal and fungicidal mixtures
US9775351B2 (en) 2012-11-30 2017-10-03 Bayer Cropscience Ag Ternary fungicidal and pesticidal mixtures
MX2015006328A (es) 2012-11-30 2015-09-07 Bayer Cropscience Ag Mezcla fungicida o pesticida binaria.
CA3105365A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropscience Ag Binary fungicidal mixtures
MX382421B (es) 2012-11-30 2025-03-13 Bayer Cropscience Ag Mezclas fungicidas ternarias.
CA2893027A1 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising biological control agents
US20150289518A1 (en) 2012-12-03 2015-10-15 Bayer Cropscience Ag Composition comprising a biological control agent and an insecticide
JP2015535532A (ja) 2012-12-03 2015-12-14 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト 生物農薬および殺菌剤を含む組成物
CA2893083A1 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising a biological control agent and an insecticide
WO2014086753A2 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising biological control agents
WO2014086758A2 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising a biological control agent and an insecticide
ES2770775T3 (es) 2012-12-03 2020-07-03 Bayer Cropscience Ag Procedimiento para el control de plagas aplicando una combinación de Paecilomyces lilacinus y Fluopyram
WO2014086747A2 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising a biological control agent and a fungicide
WO2014090765A1 (en) 2012-12-12 2014-06-19 Bayer Cropscience Ag Use of 1-[2-fluoro-4-methyl-5-(2,2,2-trifluoroethylsulfinyl)phenyl]-5-amino-3-trifluoromethyl)-1 h-1,2,4 tfia zole for controlling nematodes in nematode-resistant crops
AR093996A1 (es) 2012-12-18 2015-07-01 Bayer Cropscience Ag Combinaciones bactericidas y fungicidas binarias
CN104995174A (zh) 2012-12-19 2015-10-21 拜耳作物科学股份公司 二氟甲基-烟酰-四氢萘基胺
WO2014124361A1 (en) 2013-02-11 2014-08-14 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising a streptomyces-based biological control agent and another biological control agent
KR20150119032A (ko) 2013-02-11 2015-10-23 바이엘 크롭사이언스 엘피 스트렙토미세스-기반 생물학적 방제제 및 살진균제를 포함하는 조성물
CA2898725A1 (en) 2013-02-11 2014-08-14 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising a streptomyces-based biological control agent and an insecticide
US8907159B1 (en) 2013-02-13 2014-12-09 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH24DM
US8916744B1 (en) 2013-02-13 2014-12-23 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH24DV
US8921672B1 (en) 2013-02-13 2014-12-30 Pioneer Hi Bred International Inc Maize inbred PH24DS
US10221429B2 (en) 2013-03-07 2019-03-05 Bayer Cropscience Lp Toxin genes and methods for their use
US9554573B2 (en) 2013-04-19 2017-01-31 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Binary insecticidal or pesticidal mixture
MX358633B (es) 2013-04-19 2018-08-28 Bayer Cropscience Ag Metodo de uso mejorado del potencial de produccion de plantas transgenicas.
TW201507722A (zh) 2013-04-30 2015-03-01 Bayer Cropscience Ag 做為殺線蟲劑及殺體內寄生蟲劑的ｎ－（２－鹵素－２－苯乙基）－羧醯胺類
WO2014177514A1 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Bayer Cropscience Ag Nematicidal n-substituted phenethylcarboxamides
BR112015031235A2 (pt) 2013-06-26 2017-07-25 Bayer Cropscience Ag derivados de n-cicloalquil-n-[(biciclil-fenil)metileno]-(tio)carboxamida
EP3054764B1 (en) 2013-10-09 2018-12-05 Monsanto Technology LLC Transgenic corn event mon87403 and methods for detection thereof
AR097995A1 (es) 2013-10-14 2016-04-27 Syngenta Participations Ag Método para sembrar filas de cultivos
JP6507165B2 (ja) 2013-12-05 2019-04-24 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト Ｎ−シクロアルキル−ｎ−｛［２−（１−置換シクロアルキル）フェニル］メチレン｝−（チオ）カルボキサミド誘導体
US10071967B2 (en) 2013-12-05 2018-09-11 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft N-cycloalkyl-N-{[2-(1-substitutedcycloalkyl)phenyl]methylene}-(thio)carboxamide derivatives
EP2885970A1 (en) 2013-12-21 2015-06-24 Bayer CropScience AG Fungicide compositions comprising compound I, at least one succinate dehydrogenase (SDH) inhibitor and at least one triazole fungicide
BR112016020889B1 (pt) 2014-03-11 2022-10-04 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Molécula de ácido nucleico recombinante, célula hospedeira bacteriana, proteína hppd recombinante, uso do ácido nucleico recombinante e produto de base
WO2015160619A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and a fungicide
WO2015160620A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and an insecticide
WO2015160618A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and a biological control agent
US10023874B2 (en) 2014-10-15 2018-07-17 Monsanto Technology Llc Herbicide tolerance genes and methods of use thereof
WO2016075325A1 (en) 2014-11-14 2016-05-19 Basf Plant Science Company Gmbh Modification of plant lipids containing pufas
CN104745708A (zh) * 2015-04-02 2015-07-01 湖南省食品安全生产工程技术研究中心 一种转基因玉米nk603品系的lamp检测试剂盒及检测方法
WO2016166077A1 (en) 2015-04-13 2016-10-20 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft N-cycloalkyl-n-(biheterocyclyethylene)-(thio)carboxamide derivatives
CN104846084B (zh) * 2015-04-30 2019-02-01 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测玉米植物dbn9927的核酸序列及其检测方法
CN104878090B (zh) * 2015-04-30 2019-01-15 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9877的核酸序列及其检测方法
CN104878096B (zh) * 2015-04-30 2019-01-15 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9868的核酸序列及其检测方法
CN104830846B (zh) * 2015-04-30 2018-10-30 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9898的核酸序列及其检测方法
CN104878094B (zh) * 2015-04-30 2019-01-15 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9888的核酸序列及其检测方法
CN104830847B (zh) * 2015-04-30 2019-01-11 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测玉米植物dbn9936的核酸序列及其检测方法
CN104878095B (zh) * 2015-04-30 2018-10-26 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9858的核酸序列及其检测方法
CN104830845B (zh) * 2015-04-30 2018-10-30 北京大北农科技集团股份有限公司 用于检测除草剂耐受性玉米植物dbn9878的核酸序列及其检测方法
EP3097782A1 (en) 2015-05-29 2016-11-30 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Methods for controlling phytopathogenic nematodes by combination of fluopyram and biological control agents
US10829779B2 (en) 2015-07-15 2020-11-10 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Use of elongator genes to improve plant disease resistance
BR112018004779A8 (pt) 2015-09-11 2022-08-09 Bayer Cropscience Lp Variantes de hppd e métodos de uso
CN105331725B (zh) * 2015-11-30 2018-04-24 中国农业大学 转maroACC基因抗除草剂玉米CC-2的侧翼序列及其应用
CN109688816A (zh) 2016-07-29 2019-04-26 拜耳作物科学股份公司 活性化合物结合物和保护植物的繁殖材料的方法
CA3043493A1 (en) 2016-11-23 2018-05-31 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Axmi669 and axmi991 toxin genes and methods for their use
US20190322631A1 (en) 2016-12-19 2019-10-24 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
US11279946B2 (en) 2017-01-18 2022-03-22 Basf Argicultural Solutions Seed Us Llc BP005 toxin gene and methods for its use
UY37570A (es) 2017-01-18 2018-08-31 Bayer Cropscience Lp Uso de bp005 para el control de patógenos de planta
WO2018153730A1 (en) 2017-02-21 2018-08-30 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
BR112019018056A2 (pt) 2017-03-07 2020-08-11 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC molécula de ácido nucleico recombinante, cassete de expressão, célula hospedeira, plantas, sementes transgênicas, polipeptídeo recombinante, métodos para conferir tolerância e para controlar ervas daninhas, produto de utilidade e uso da sequência de nucleotídeos
EP3606912A1 (en) 2017-04-07 2020-02-12 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2018188962A1 (en) 2017-04-11 2018-10-18 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
BR112019021938A2 (pt) 2017-04-21 2020-05-05 Bayer Cropscience Lp método de melhoria de segurança de cultivos
WO2018202491A1 (en) 2017-05-04 2018-11-08 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
CN110621669A (zh) 2017-05-04 2019-12-27 巴斯夫欧洲公司 防除植物病原性真菌的取代5-卤代烷基-5-羟基异噁唑类
WO2018219797A1 (en) 2017-06-02 2018-12-06 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
US20200190043A1 (en) 2017-06-19 2020-06-18 Basf Se 2-[[5-(trifluoromethyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]aryloxy](thio)acetamides for combating phytopathogenic fungi
WO2019025250A1 (en) 2017-08-04 2019-02-07 Basf Se SUBSTITUTED TRIFLUOROMETHYLOXADIAZOLES FOR COMBATING PHYTOPATHOGENIC FUNGI
WO2019038042A1 (en) 2017-08-21 2019-02-28 Basf Se SUBSTITUTED TRIFLUOROMETHYLOXADIAZOLES FOR THE CONTROL OF PHYTOPATHOGENIC FUNGI
EP3684761A1 (en) 2017-09-18 2020-07-29 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2019068811A1 (en) 2017-10-06 2019-04-11 Bayer Aktiengesellschaft COMPOSITIONS COMPRISING FLUOPYRAM AND TIOXAZAFENE
US11279944B2 (en) 2017-10-24 2022-03-22 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Of herbicide tolerance to 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase (HPPD) inhibitors by down-regulation of HPPD expression in soybean
US20210032651A1 (en) 2017-10-24 2021-02-04 Basf Se Improvement of herbicide tolerance to hppd inhibitors by down-regulation of putative 4-hydroxyphenylpyruvate reductases in soybean
WO2019101511A1 (en) 2017-11-23 2019-05-31 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2019121143A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Basf Se Substituted cyclopropyl derivatives
WO2019137995A1 (en) 2018-01-11 2019-07-18 Basf Se Novel pyridazine compounds for controlling invertebrate pests
WO2019145221A1 (en) 2018-01-29 2019-08-01 BASF Agro B.V. New agrochemical formulations
BR112020014817A2 (pt) 2018-02-07 2020-12-08 Basf Se Uso dos compostos de fórmula i, compostos de fórmula i, composição, uso de um composto de fórmula i, método para o combate de fungos fitopatogênicos e semente
WO2019154665A1 (en) 2018-02-07 2019-08-15 Basf Se New pyridine carboxamides
EP3758493A1 (en) 2018-03-01 2021-01-06 BASF Agro B.V. Fungicidal compositions of mefentrifluconazole
WO2019219464A1 (en) 2018-05-15 2019-11-21 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2019224092A1 (en) 2018-05-22 2019-11-28 Basf Se Pesticidally active c15-derivatives of ginkgolides
WO2019226938A1 (en) 2018-05-23 2019-11-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Fruit-specific promoters
EP3802521A1 (de) 2018-06-04 2021-04-14 Bayer Aktiengesellschaft Herbizid wirksame bizyklische benzoylpyrazole
EP3613736A1 (en) 2018-08-22 2020-02-26 Basf Se Substituted glutarimide derivatives
EP3628158A1 (en) 2018-09-28 2020-04-01 Basf Se Pesticidal mixture comprising a mesoionic compound and a biopesticide
EP3870581B1 (en) 2018-10-23 2023-06-14 Basf Se Tricyclic pesticidal compounds
EP3643705A1 (en) 2018-10-24 2020-04-29 Basf Se Pesticidal compounds
EP3670501A1 (en) 2018-12-17 2020-06-24 Basf Se Substituted [1,2,4]triazole compounds as fungicides
CN113272296A (zh) 2019-01-11 2021-08-17 巴斯夫欧洲公司 1-(1,2-二甲基丙基)-n-乙基-5-甲基-n-哒嗪-4-基-吡唑-4-甲酰胺的结晶形式
EP3696177A1 (en) 2019-02-12 2020-08-19 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
US12439919B2 (en) 2019-05-10 2025-10-14 Bayer Cropscience Lp Active compound combinations
US20220202017A1 (en) 2019-05-29 2022-06-30 Basf Se Mesoionic imidazolium compounds and derivatives for combating animal pests
EP3769623A1 (en) 2019-07-22 2021-01-27 Basf Se Mesoionic imidazolium compounds and derivatives for combating animal pests
WO2020244970A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Basf Se New carbocyclic pyridine carboxamides
WO2020244969A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Basf Se Pyridine derivatives and their use as fungicides
JP2022536081A (ja) 2019-06-06 2022-08-12 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 殺菌ｎ－（ピリド－３－イル）カルボキサミド
EP3766879A1 (en) 2019-07-19 2021-01-20 Basf Se Pesticidal pyrazole derivatives
UY38795A (es) 2019-07-22 2021-02-26 Bayer Ag 5-amino pirazoles y triazoles como plaguicidas
EP4003973B1 (en) 2019-07-23 2024-11-20 Bayer Aktiengesellschaft Novel heteroaryl-triazole compounds as pesticides
PH12022550179A1 (en) 2019-07-23 2022-11-14 Bayer Ag Novel heteroaryl-triazole compounds as pesticides
WO2021022069A1 (en) 2019-08-01 2021-02-04 Bayer Cropscience Lp Method of improving cold stress tolerance and crop safety
EP3701796A1 (en) 2019-08-08 2020-09-02 Bayer AG Active compound combinations
US20220403410A1 (en) 2019-09-26 2022-12-22 Bayer Aktiengesellschaft Rnai-mediated pest control
WO2021063735A1 (en) 2019-10-02 2021-04-08 Basf Se New bicyclic pyridine derivatives
JP2022550564A (ja) 2019-10-02 2022-12-02 バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト 脂肪酸を含んでいる活性化合物組み合わせ
WO2021063736A1 (en) 2019-10-02 2021-04-08 Basf Se Bicyclic pyridine derivatives
BR112022006791A2 (pt) 2019-10-09 2022-06-28 Bayer Ag Novos compostos heteroaril-triazol como pesticidas
MX2022004366A (es) 2019-10-09 2022-05-06 Bayer Ag Nuevos compuestos de heteroarilo-triazol como pesticidas.
AU2020367523A1 (en) 2019-10-14 2022-04-28 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Novel insect resistant genes and methods of use
CN114641467A (zh) 2019-11-07 2022-06-17 拜耳公司 用于防治动物有害物的取代的磺酰胺
WO2021097162A1 (en) 2019-11-13 2021-05-20 Bayer Cropscience Lp Beneficial combinations with paenibacillus
TW202134226A (zh) 2019-11-18 2021-09-16 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物
US12507693B2 (en) 2019-11-18 2025-12-30 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations comprising fatty acids
TW202136248A (zh) 2019-11-25 2021-10-01 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物
AR121242A1 (es) 2020-01-31 2022-05-04 Pairwise Plants Services Inc Supresión de la respuesta de escape a la sombra en plantas
CN115551839B (zh) 2020-02-18 2024-06-04 拜耳公司 作为农药的杂芳基-三唑化合物
EP3708565A1 (en) 2020-03-04 2020-09-16 Bayer AG Pyrimidinyloxyphenylamidines and the use thereof as fungicides
CA3180157A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for controlling meristem size for crop improvement
WO2021209490A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Bayer Aktiengesellschaft Cyclaminephenylaminoquinolines as fungicides
KR20230007398A (ko) 2020-04-21 2023-01-12 바이엘 악티엔게젤샤프트 해충 방제제로서 2-(헤트)아릴-치환된 축합 헤테로시클릭 유도체
EP4143167B1 (en) 2020-04-28 2024-05-15 Basf Se Pesticidal compounds
EP3903583A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors iii
EP3903584A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors iv
EP3903581A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors i
EP3903582A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors ii
TWI891782B (zh) 2020-05-06 2025-08-01 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基三唑化合物
US12552748B2 (en) 2020-05-06 2026-02-17 Bayer Aktiengesellschaft Pyridine (thio)amides as fungicidal compounds
JP2023525349A (ja) 2020-05-12 2023-06-15 バイエル、アクチエンゲゼルシャフト 殺真菌性化合物としてのトリアジンおよびピリミジン（チオ）アミド化合物
EP3909950A1 (en) 2020-05-13 2021-11-17 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
US20230192617A1 (en) 2020-05-19 2023-06-22 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Azabicyclic(thio)amides as fungicidal compounds
BR112022024489A2 (pt) 2020-06-02 2023-01-31 Pairwise Plants Services Inc Métodos para o controle do tamanho do meristema para melhora da cultura agrícola
JP2023528891A (ja) 2020-06-04 2023-07-06 バイエル、アクチエンゲゼルシャフト 新規殺真菌剤としてのヘテロシクリルピリミジンおよびトリアジン
WO2021249800A1 (en) 2020-06-10 2021-12-16 Basf Se Substituted [1,2,4]triazole compounds as fungicides
WO2021249995A1 (en) 2020-06-10 2021-12-16 Bayer Aktiengesellschaft Azabicyclyl-substituted heterocycles as fungicides
EP3945089A1 (en) 2020-07-31 2022-02-02 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors v
WO2021257775A1 (en) 2020-06-17 2021-12-23 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for controlling meristem size for crop improvement
KR20230026388A (ko) 2020-06-18 2023-02-24 바이엘 악티엔게젤샤프트 작물 보호를 위한 살진균제로서의 3-(피리다진-4-일)-5,6-디히드로-4h-1,2,4-옥사디아진 유도체
WO2021255118A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
WO2021255089A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,3,4-oxadiazole pyrimidines and 1,3,4-oxadiazole pyridines as fungicides
WO2021255091A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,3,4-oxadiazoles and their derivatives as fungicides
UY39276A (es) 2020-06-19 2022-01-31 Bayer Ag Uso de compuestos de 1,3,4–oxadiazol–2–ilpirimidina para controlar microorganismos fitopatógenos, métodos de uso y composiciones.
UY39275A (es) 2020-06-19 2022-01-31 Bayer Ag 1,3,4-oxadiazol pirimidinas como fungicidas, procesos e intermediarios para su preparación, métodos de uso y usos de los mismos
EP3929189A1 (en) 2020-06-25 2021-12-29 Bayer Animal Health GmbH Novel heteroaryl-substituted pyrazine derivatives as pesticides
JP2023532548A (ja) 2020-07-02 2023-07-28 バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト 有害生物防除剤としてのヘテロサイクレン誘導体
CN111826387A (zh) * 2020-07-07 2020-10-27 黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所 一种转基因玉米品系鉴定阳性质粒分子
EP3960727A1 (en) 2020-08-28 2022-03-02 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors vi
EP3939961A1 (en) 2020-07-16 2022-01-19 Basf Se Strobilurin type compounds and their use for combating phytopathogenic fungi
WO2022017836A1 (en) 2020-07-20 2022-01-27 BASF Agro B.V. Fungicidal compositions comprising (r)-2-[4-(4-chlorophenoxy)-2-(trifluoromethyl)phenyl]-1- (1,2,4-triazol-1-yl)propan-2-ol
US20230313221A1 (en) * 2020-07-31 2023-10-05 Inari Agriculture Technology, Inc. Expedited breeding of transgenic crop plants by genome editing
US12529062B2 (en) 2020-07-31 2026-01-20 Inari Agriculture Technology, Inc. INIR12 transgenic maize
EP3970494A1 (en) 2020-09-21 2022-03-23 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors viii
WO2022033991A1 (de) 2020-08-13 2022-02-17 Bayer Aktiengesellschaft 5-amino substituierte triazole als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2022053453A1 (de) 2020-09-09 2022-03-17 Bayer Aktiengesellschaft Azolcarboxamide als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2022058327A1 (en) 2020-09-15 2022-03-24 Bayer Aktiengesellschaft Substituted ureas and derivatives as new antifungal agents
EP3974414A1 (de) 2020-09-25 2022-03-30 Bayer AG 5-amino substituierte pyrazole und triazole als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2022089969A1 (en) 2020-10-27 2022-05-05 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
CN112266419B (zh) * 2020-10-29 2023-02-03 中国科学院微生物研究所 一种人工合成的抗除草剂蛋白
WO2022090069A1 (en) 2020-11-02 2022-05-05 Basf Se Compositions comprising mefenpyr-diethyl
WO2022090071A1 (en) 2020-11-02 2022-05-05 Basf Se Use of mefenpyr-diethyl for controlling phytopathogenic fungi
WO2022106304A1 (en) 2020-11-23 2022-05-27 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
CA3201212A1 (en) 2020-12-14 2022-06-23 Rizwan Shabbir SHAIKH Sulfoximine pesticides
EP3915971A1 (en) 2020-12-16 2021-12-01 Bayer Aktiengesellschaft Phenyl-s(o)n-phenylamidines and the use thereof as fungicides
KR20230121792A (ko) 2020-12-18 2023-08-21 바이엘 악티엔게젤샤프트 작물에서 저항성 식물병원성 진균을 방제하기 위한dhodh 억제제의 용도
WO2022129190A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft (hetero)aryl substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides
WO2022129188A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,2,4-oxadiazol-3-yl pyrimidines as fungicides
WO2022129196A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft Heterobicycle substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides
EP4036083A1 (de) 2021-02-02 2022-08-03 Bayer Aktiengesellschaft 5-oxy substituierte hetereozyklen, als schädlingsbekämpfungsmittel
EP4043444A1 (en) 2021-02-11 2022-08-17 Basf Se Substituted isoxazoline derivatives
MX2023009468A (es) 2021-02-11 2024-01-31 Pairwise Plants Services Inc Metodos y composiciones para modificar niveles de citoquinina oxidasa en plantas.
EP4298118A1 (en) 2021-02-25 2024-01-03 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying root architecture in plants
BR112023019788A2 (pt) 2021-03-30 2023-11-07 Bayer Ag 3-(hetero)aril-5-clorodifluorometil-1,2,4-oxadiazol como fungicida
BR112023019400A2 (pt) 2021-03-30 2023-12-05 Bayer Ag 3-(hetero)aril-5-clorodifluorometil-1,2,4-oxadiazol como fungicida
IL308130A (en) 2021-05-03 2023-12-01 Basf Se Additives to improve the effectiveness of pesticides of exterminating microorganisms
WO2022233777A1 (en) 2021-05-06 2022-11-10 Bayer Aktiengesellschaft Alkylamide substituted, annulated imidazoles and use thereof as insecticides
EP4337661A1 (de) 2021-05-12 2024-03-20 Bayer Aktiengesellschaft 2-(het)aryl-substituierte kondensierte heterocyclen-derivate als schädlingsbekämpfungsmittel
EP4091451A1 (en) 2021-05-17 2022-11-23 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
US20240270728A1 (en) 2021-05-18 2024-08-15 Basf Se New substituted quinolines as fungicides
BR112023024005A2 (pt) 2021-05-18 2024-01-30 Basf Se Compostos, composição e processo para preparar compostos de fórmula i
IL308534A (en) 2021-05-18 2024-01-01 Basf Se New converted pyridines as fungicides
UY39822A (es) 2021-06-17 2022-12-30 Pairwise Plants Services Inc Modificación de factores de transcripción de la familia de factores reguladores del crecimiento en s
UY39827A (es) 2021-06-24 2023-01-31 Pairwise Plants Services Inc Modificación de genes de ubiquitina ligasa e3 hect para mejorar los rasgos de rendimiento
WO2023278651A1 (en) 2021-07-01 2023-01-05 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for enhancing root system development
EP4119547A1 (en) 2021-07-12 2023-01-18 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
EP4380927A1 (en) 2021-08-02 2024-06-12 Basf Se (3-pirydyl)-quinazoline
IL310497A (en) 2021-08-02 2024-03-01 Basf Se (3-quinolyl)-quinazoline
WO2023019188A1 (en) 2021-08-12 2023-02-16 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of brassinosteroid receptor genes to improve yield traits
AU2022326207A1 (en) 2021-08-13 2024-02-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations and fungicide compositions comprising those
PY2270221A (es) 2021-08-17 2023-03-20 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar genes de histidina quinasa receptores de citoquinina en plantas
EP4140986A1 (en) 2021-08-23 2023-03-01 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
AU2022335669A1 (en) 2021-08-25 2024-02-01 Bayer Aktiengesellschaft Novel pyrazinyl-triazole compounds as pesticides
EP4140995A1 (en) 2021-08-27 2023-03-01 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
US12359215B2 (en) 2021-08-30 2025-07-15 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of ubiquitin binding peptidase genes in plants for yield trait improvement
AR126938A1 (es) 2021-09-02 2023-11-29 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar la arquitectura de las plantas y los rasgos de rendimiento
EP4144739A1 (de) 2021-09-02 2023-03-08 Bayer Aktiengesellschaft Anellierte pyrazole als schädlingsbekämpfungsmittel
EP4151631A1 (en) 2021-09-20 2023-03-22 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
CN118382634A (zh) 2021-09-21 2024-07-23 成对植物服务股份有限公司 用于减少油菜荚果开裂的方法和组合物
US20230108968A1 (en) 2021-10-04 2023-04-06 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for improving floret fertility and seed yield
CA3234455A1 (en) 2021-10-07 2023-04-13 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for improving floret fertility and seed yield
WO2023072670A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors x
WO2023072671A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors ix
WO2023078915A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Bayer Aktiengesellschaft Bis(hetero)aryl thioether (thio)amides as fungicidal compounds
US20250042886A1 (en) 2021-11-30 2025-02-06 Bayer Aktiengesellschaft Bis(hetero)aryl thioether oxadiazines as fungicidal compounds
EP4194453A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
UY40060A (es) 2021-12-09 2023-07-14 Pairwise Plants Services Inc Métodos para mejorar la fertilidad de floretes y el rendimiento de semillas
EP4198033A1 (en) 2021-12-14 2023-06-21 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
EP4198023A1 (en) 2021-12-16 2023-06-21 Basf Se Pesticidally active thiosemicarbazone compounds
UY40132A (es) 2022-01-31 2023-08-31 Pairwise Plants Services Inc Supresión de la respuesta de evitación de la sombra en las plantas
WO2023148030A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 Globachem Nv Methods and compositions for controlling pests in corn
WO2023148028A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 Globachem Nv Methods and compositions for controlling pests
US20250197358A1 (en) 2022-02-17 2025-06-19 Basf Se Pesticidally active thiosemicarbazone compounds
UY40171A (es) 2022-03-02 2023-09-29 Pairwise Plants Services Inc Modificación de genes del receptor de brasinoesteroides para mejorar rasgos de rendimiento
EP4238971A1 (en) 2022-03-02 2023-09-06 Basf Se Substituted isoxazoline derivatives
WO2023192838A1 (en) 2022-03-31 2023-10-05 Pairwise Plants Services, Inc. Early flowering rosaceae plants with improved characteristics
AU2023251095A1 (en) 2022-04-07 2024-10-17 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for improving resistance to fusarium head blight
CN119278208A (zh) 2022-04-21 2025-01-07 成对植物服务股份有限公司 用于改善产量性状的方法和组合物
UY40250A (es) 2022-05-02 2023-11-15 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar el rendimiento y la resistencia a enfermedades
US20250304566A1 (en) 2022-05-03 2025-10-02 Bayer Aktiengesellschaft Crystalline forms of (5s)-3-[3-(3-chloro-2-fluorophenoxy)-6-methylpyridazin-4-yl]-5-(2-chloro-4-methylbenzyl)-5,6-dihydro-4h-1,2,4-oxadiazine
WO2023213626A1 (en) 2022-05-03 2023-11-09 Bayer Aktiengesellschaft Use of (5s)-3-[3-(3-chloro-2-fluorophenoxy)-6-methylpyridazin-4-yl]-5-(2-chloro-4-methylbenzyl)-5,6-dihydro-4h-1,2,4-oxadiazine for controlling unwanted microorganisms
UY40255A (es) 2022-05-05 2023-11-15 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar la arquitectur radicular y/o mejorar los rangos de rendimient
UY40326A (es) 2022-06-27 2023-12-29 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar el escape a la sombra en plantas
UY40337A (es) 2022-06-29 2023-12-29 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para controlar el tamaño del meristemo para el mejoramiento de cultivos
UY40336A (es) 2022-06-29 2023-12-29 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para controlar el tamaño del meristemo para el mejoramiento de cultivos
AU2023317620A1 (en) 2022-08-02 2025-02-13 Basf Se Pyrazolo pesticidal compounds
CN119768514A (zh) 2022-08-04 2025-04-04 成对植物服务股份有限公司 用于改善产量性状的方法和组合物
UY40388A (es) 2022-08-11 2024-03-15 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para controlar el tamaño del meristema para la mejora de los cultivos
UY40418A (es) 2022-09-08 2024-04-02 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar características de rendimiento en plantas
EP4342885A1 (en) 2022-09-20 2024-03-27 Basf Se N-(3-(aminomethyl)-phenyl)-5-(4-phenyl)-5-(trifluoromethyl)-4,5-dihydroisoxazol-3-amine derivatives and similar compounds as pesticides
EP4295688A1 (en) 2022-09-28 2023-12-27 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combination
WO2024068518A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-heteroaryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068517A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068519A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068520A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
EP4361126A1 (en) 2022-10-24 2024-05-01 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors xv
EP4619399A1 (en) 2022-11-16 2025-09-24 Basf Se New substituted tetrahydrobenzoxazepine
WO2024104815A1 (en) 2022-11-16 2024-05-23 Basf Se Substituted benzodiazepines as fungicides
WO2024104822A1 (en) 2022-11-16 2024-05-23 Basf Se Substituted tetrahydrobenzodiazepine as fungicides
EP4619393A1 (en) 2022-11-16 2025-09-24 Basf Se Substituted benzodiazepines as fungicides
EP4385326A1 (en) 2022-12-15 2024-06-19 Kimitec Biogorup Biopesticide composition and method for controlling and treating broad spectrum of pests and diseases in plants
AR131409A1 (es) 2022-12-19 2025-03-19 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Genes de toxina de insecto y métodos de uso de estos
EP4389210A1 (en) 2022-12-21 2024-06-26 Basf Se Heteroaryl compounds for the control of invertebrate pests
EP4662210A1 (en) 2023-02-08 2025-12-17 Basf Se New substituted quinoline compounds for combatitng phytopathogenic fungi
WO2024173622A1 (en) 2023-02-16 2024-08-22 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying shade avoidance in plants
UY40661A (es) 2023-03-02 2024-10-15 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar la evitación de la sombra en plantas
UY40664A (es) 2023-03-09 2024-10-15 Pairwise Plants Services Inc Modificación de genes de la vía de señalización de brasinoesteroide para mejorar rasgos de rendimien
CN120957986A (zh) 2023-03-17 2025-11-14 巴斯夫欧洲公司 用于对抗植物病原性真菌的取代的吡啶基/吡嗪基二氢苯并硫氮杂䓬化合物
EP4455137A1 (en) 2023-04-24 2024-10-30 Basf Se Pyrimidine compounds for the control of invertebrate pests
EP4702006A1 (en) 2023-04-26 2026-03-04 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors xvi
UY40746A (es) 2023-05-18 2024-12-13 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar las características de rendimiento de las plantas
EP4467535A1 (en) 2023-05-25 2024-11-27 Basf Se Lactam pesticidal compounds
CN121399131A (zh) 2023-07-05 2026-01-23 巴斯夫欧洲公司 用于对抗植物病原性真菌的取代的吡啶基/吡嗪基二氢吡咯并三嗪化合物
WO2025008447A1 (en) 2023-07-05 2025-01-09 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
WO2025008446A1 (en) 2023-07-05 2025-01-09 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
CN121464139A (zh) 2023-07-05 2026-02-03 巴斯夫欧洲公司 用于对抗植物病原性真菌的取代的喹啉基/喹喔啉基二氢吡咯并三嗪化合物
EP4488270A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
EP4488269A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
EP4488273A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
PY2455894A (es) 2023-07-18 2025-03-28 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar la arquitectura radicular en plantas
PY2461802A (es) 2023-07-27 2025-05-19 Monsanto Tech Llc Métodos y composiciones para modificar rasgos de rendimiento de las plantas
WO2025026738A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Bayer Aktiengesellschaft 6-[5-(ethylsulfonyl)-1-methyl-1h-imidazol-4-yl]-7-methyl-3-(pentafluoroethyl)-7h-imidazo[4,5-c]pyridazine derivatives as pesticides
AU2024316993A1 (en) 2023-08-01 2026-01-22 Globachem Nv Insecticidal mixtures
EP4501112A1 (en) 2023-08-01 2025-02-05 Globachem NV Plant defense elicitors
CN121646590A (zh) 2023-08-09 2026-03-10 巴斯夫欧洲公司 用于对抗植物病原性真菌的新型取代的苯并氧氮杂䓬吡啶甲腈化合物
WO2025031843A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 Basf Se New substituted benzoxazine picolinonitrile compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2025032038A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 Bayer Aktiengesellschaft Pyridazin-4-yloxadiazines as novel fungicides
CN121693504A (zh) 2023-08-09 2026-03-17 拜耳公司 作为新杀真菌剂的氮杂联芳基取代的4,5-二氢-1h-2,4,5-噁二嗪
AR133901A1 (es) 2023-09-21 2025-11-12 Pairwise Plants Services Inc Plantas de frambuesa negra de floración temprana con características mejoradas
WO2025068226A2 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Basf Se Methods for protecting plants using mixtures comprising sulfur and selected terpenes
WO2025078181A1 (en) 2023-10-09 2025-04-17 Basf Se Fungicidal mixture comprising substituted pyridines
WO2025078183A1 (en) 2023-10-09 2025-04-17 Basf Se Fungicidal mixture comprising substituted quinazolyl quinolines
WO2025078128A1 (en) 2023-10-11 2025-04-17 Bayer Aktiengesellschaft Pyridazin-3-one-4-yloxadiazines as novel fungicides
WO2025080600A1 (en) 2023-10-11 2025-04-17 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving crop yield traits
WO2025098876A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025098875A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025098874A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having fungicidal/insecticidal/acaricidal properties
WO2025131902A1 (en) 2023-12-21 2025-06-26 Basf Se Methods for protecting plants using mixtures comprising sulfur, selected terpenes and phosphites.
EP4574819A1 (en) 2023-12-22 2025-06-25 Basf Se Diazinone compounds for the control of invertebrate pests
WO2025168620A1 (en) 2024-02-07 2025-08-14 Bayer Aktiengesellschaft Heteroaryl-substituted 4,5-dihydro-1h-2,4,5-oxadiazines as novel fungicides
US20250270578A1 (en) 2024-02-22 2025-08-28 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield characteristics in plants
WO2025180964A1 (en) 2024-03-01 2025-09-04 Basf Se New substituted benzoxazepine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2025186065A1 (en) 2024-03-05 2025-09-12 Bayer Aktiengesellschaft Heteroaryl-substituted (aza)quinoxaline derivatives as pesticides
WO2025190927A1 (en) 2024-03-14 2025-09-18 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025211272A1 (en) 2024-04-04 2025-10-09 Nihon Nohyaku Co., Ltd. Pesticidal mixtures comprising an ethylsulfone compound
EP4640052A1 (en) 2024-04-24 2025-10-29 Basf Se Mixtures of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors with at least one further pesticide i
WO2025223904A1 (en) 2024-04-24 2025-10-30 Basf Se Mixtures of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors with at least one further pesticide i
EP4652842A1 (en) 2024-05-21 2025-11-26 Kimitec Biogroup S.L Biopesticide composition, procedure of obtain thereof, and method for controlling and treating broad spectrum of pests, diseases and weeds in plants
EP4652843A1 (en) 2024-05-21 2025-11-26 Kimitec Biogroup S.L Biopesticide composition, procedure of obtain thereof, and method for controlling and treating broad spectrum of pests in plants
WO2025257121A1 (en) 2024-06-12 2025-12-18 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025257122A1 (en) 2024-06-12 2025-12-18 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2026002763A1 (en) 2024-06-26 2026-01-02 Basf Se Pesticidal mixtures and applications of beauveria bassiana and dimpropyridaz
WO2026012814A1 (en) 2024-07-10 2026-01-15 Basf Se Compositions and methods to enhance crop yield and plant health
WO2026021910A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026021912A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026021909A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026021911A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Basf Se New substituted benzothiazine pyridine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2026027375A1 (de) 2024-07-29 2026-02-05 Bayer Aktiengesellschaft Hydroxy-dihydropyridinon carboxamide als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2026027723A1 (en) 2024-08-01 2026-02-05 Syngenta Crop Protection Ag Herbicide resistant plants
WO2026037853A1 (en) 2024-08-14 2026-02-19 Basf Se Benzoxazole derivatives as pesticidal compounds
WO2026041702A1 (en) 2024-08-21 2026-02-26 Basf Se Benzoxazole derivatives as pesticidal compounds
EP4710766A1 (en) 2024-09-11 2026-03-18 Basf Se Mixtures of ambruticin with at least one further pesticide

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US5164316A (en) 1987-01-13 1992-11-17 The University Of British Columbia DNA construct for enhancing the efficiency of transcription
US5641876A (en) 1990-01-05 1997-06-24 Cornell Research Foundation, Inc. Rice actin gene and promoter
US5633435A (en) 1990-08-31 1997-05-27 Monsanto Company Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthases
US5593874A (en) 1992-03-19 1997-01-14 Monsanto Company Enhanced expression in plants
US5362865A (en) 1993-09-02 1994-11-08 Monsanto Company Enhanced expression in plants using non-translated leader sequences
US5853973A (en) * 1995-04-20 1998-12-29 American Cyanamid Company Structure based designed herbicide resistant products
US6040497A (en) * 1997-04-03 2000-03-21 Dekalb Genetics Corporation Glyphosate resistant maize lines
ATE364705T1 (de) * 1997-04-03 2007-07-15 Dekalb Genetics Corp Verwendung von glyphosat-resistente maislinien
US5948956A (en) * 1997-10-16 1999-09-07 Oms Investments, Inc. Transgenic plants and method for node segment transformation
DE69941009D1 (de) 1998-11-17 2009-07-30 Monsanto Technology Llc Phosphonat metabolisierende pflanzen
BR122013026754B1 (pt) * 2000-06-22 2018-02-27 Monsanto Company Molécula de dna e processos para produzir uma planta de milho tolerante à aplicação do herbicida glifosato
CA2420406C (en) * 2000-09-29 2014-12-09 Monsanto Technology Llc Glyphosate tolerant wheat plant 33391 and compositions and methods for detection thereof
AU2003299579B2 (en) * 2002-12-05 2008-09-04 Monsanto Technology Llc Bentgrass event ASR-368 and compositions and methods for detection thereof

Also Published As

Publication number Publication date
CN101186918A (zh) 2008-05-28
CY1106109T1 (el) 2011-06-08
DE60118660D1 (de) 2006-05-24
EP1582592A1 (en) 2005-10-05
EP2210951A3 (en) 2011-01-05
PL348225A1 (en) 2002-01-02
PT1167531E (pt) 2006-07-31
BR0100752A (pt) 2002-02-13
AR031665A1 (es) 2003-10-01
AR053231A2 (es) 2007-04-25
PT1582592E (pt) 2010-06-16
CY1110083T1 (el) 2015-01-14
BRPI0100752B1 (pt) 2015-10-13
US20120329654A1 (en) 2012-12-27
EP1167531A1 (en) 2002-01-02
US9701980B2 (en) 2017-07-11
US20070292854A1 (en) 2007-12-20
US8722969B2 (en) 2014-05-13
US20140304849A1 (en) 2014-10-09
CN100350043C (zh) 2007-11-21
DE60142092D1 (de) 2010-06-17
HUP0102569A2 (hu) 2003-08-28
BR122013026754B1 (pt) 2018-02-27
ATE323168T1 (de) 2006-04-15
SI2210951T1 (sl) 2016-04-29
CN1332246A (zh) 2002-01-23
EP1582592B1 (en) 2010-05-05
ID30575A (id) 2001-12-27
CZ299722B6 (cs) 2008-10-29
US20100017902A1 (en) 2010-01-21
UY26788A1 (es) 2001-10-25
BG65315B1 (bg) 2008-01-31
US20170327838A1 (en) 2017-11-16
YU43701A (sh) 2003-12-31
HU226193B1 (en) 2008-06-30
HU0800015D0 (en) 2008-03-28
HU230814B1 (hu) 2018-06-28
CZ305949B6 (cs) 2016-05-18
SI1582592T1 (sl) 2010-08-31
AR065690A2 (es) 2009-06-24
DK2210951T3 (en) 2016-03-21
ATE466945T1 (de) 2010-05-15
DE60118660T2 (de) 2007-03-29
CZ20012203A3 (cs) 2002-02-13
EP1167531B1 (en) 2006-04-12
CA2349841A1 (en) 2001-12-22
EP2210951A2 (en) 2010-07-28
CA2349841C (en) 2012-12-11
US8273959B2 (en) 2012-09-25
ES2261330T3 (es) 2006-11-16
US20040139493A1 (en) 2004-07-15
PL199928B1 (pl) 2008-11-28
HU0102569D0 (en) 2001-08-28
RS49990B (sr) 2008-09-29
AR066163A2 (es) 2009-07-29
DK1167531T3 (da) 2006-08-14
DK1582592T3 (da) 2010-08-16
US7582434B2 (en) 2009-09-01
EP2210951B1 (en) 2016-01-06
MXPA01006407A (es) 2004-05-11
ES2343252T3 (es) 2010-07-27
SI1167531T1 (sl) 2006-10-31
US6825400B2 (en) 2004-11-30
US20070056056A1 (en) 2007-03-08
BG105637A (en) 2002-04-30
US7193071B2 (en) 2007-03-20
US20020013960A1 (en) 2002-01-31

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