EA032899B1 - Применение галогенированных салициланилидов в качестве антибактериальных средств - Google Patents

Применение галогенированных салициланилидов в качестве антибактериальных средств Download PDF

Info

Publication number
EA032899B1
EA032899B1 EA201790345A EA201790345A EA032899B1 EA 032899 B1 EA032899 B1 EA 032899B1 EA 201790345 A EA201790345 A EA 201790345A EA 201790345 A EA201790345 A EA 201790345A EA 032899 B1 EA032899 B1 EA 032899B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
disease
niclosamide
mrsa
gram
skin
Prior art date
Application number
EA201790345A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201790345A1 (ru
Inventor
Эмилия Флора Аврора Делавенн
Дэниэл Жан Жак Симон
Мортен Отто Александр Соммер
Расмус Вендлер Тофт-Кехлер
Original Assignee
Юнион Терапьютикс А/С
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Юнион Терапьютикс А/С filed Critical Юнион Терапьютикс А/С
Publication of EA201790345A1 publication Critical patent/EA201790345A1/ru
Publication of EA032899B1 publication Critical patent/EA032899B1/ru

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/60Salicylic acid; Derivatives thereof
    • A61K31/609Amides, e.g. salicylamide
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0043Nose
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

Данное изобретение относится к применению галогенированного салициланилида, выбранного из группы, состоящей из клозантела, оксиклозанида и никлозамида или его соли, гидрата или сложного эфира, для топического предупреждения или лечения заболевания кожи или слизистой оболочки у субъекта, вызванных грамположительными бактериями, такими как Staphylococcus, в частности Staphylococcus aureus, и Streptococcus, в частности Streptococcus pyogenes. В популяции грамположительных бактерий, обработанной галогенированными салициланилидами, наблюдается очень низкая частота возникновения устойчивых мутантов по сравнению с широко используемыми топическими антибиотиками.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Данное изобретение относится к галогенированным салициланилидам клозантелу, рафоксаниду, оксиклозаниду или никлозамиду и их производным, включая соли, гидраты, сложные эфиры, для топического (местного) лечения или предупреждения заболеваний, вызванных грамположительными бактериями, например, такими как Staphylococcus, в частности Staphylococcus aureus и Streptococcus, в частности Streptococcus pyogenes. Частота встречаемости устойчивых мутантов при использовании галогенированных салициланилидов по сравнению с обычно применяемыми топическими антибиотиками является удивительной низкой. Также предусматриваются топические лекарственные формы, содержащие галогенированный салициланилид.
Сведения о предшествующем уровне техники
В настоящее время врачам-терапевтам доступны многие классы антибиотиков. Однако у бактерий, для борьбы с которыми созданы эти антибиотики, быстро развивается устойчивость к лекарственным средствам всех классов. К сожалению, большие фармацевтические компании ограничили свои исследования по поиску новых антибиотиков. В последние годы некоторые бактерии стали особенно заметны и привлекли большое внимание прессы, в особенности устойчивые к метициллину Staphylococcus aureus (MRSA, метициллин-резистентный золотистый стафилококк) и Streptococcus pyogenes (пиогенный стрептококк). MRSA инфекции кожи и дыхательных путей являются обычными в больничных условиях, и широкая лекарственная устойчивость бактерий почти ко всем классам антибиотиков (например, к метициллину, фузидиевой кислоте и мупироцину) очень затрудняет борьбу с ними. MRSA инфекции у больных после недавнего пребывания в больнице (так называемые внебольничные MRSA инфекции) становятся всё более частыми.
Проблема устойчивости к антибиотикам является всё более серьёзной, но подлинно всестороннее решение этой проблемы ещё предстоит найти. Г лавной проблемой в борьбе против устойчивости к антибиотикам является отсутствие новых антибиотиков для замены тех антибиотиков, которые больше не могут эффективно лечить организмы вследствие развития устойчивости. Для решения проблемы лекарственной устойчивости экстренно требуются новые лекарственные средства.
Фузидиевая кислота представляет собой антибиотик, выделяемый из гриба Fusidium coccineum, который в течение 35 лет применялся для лечения инфекций Staphylococcus aureus. В частности, фузидиевую кислоту назначают для лечения кожных инфекций, вызываемых Staphylococcus aureus. Такие инфекции включают импетиго, ангулярный хейлит (ангулит, ангулярный стоматит, инфекция в уголках рта) и инфекционный дерматит. Фузидиевая кислота действует, останавливая рост бактерий, вызывающих инфекцию.
Отбор по устойчивости к фузидиевой кислоте у S. Aureus, который можно легко осуществлять посредством in vitro экспозиции с антибиотиком, позволил рекомендовать фузидиевую кислоту для системной терапии только в комбинации с другим агентом. Более спорным является топическое применение фузидиевой кислоты при лечении кожных инфекций и инфекций мягких тканей.
Возрастающая устойчивость к фузидиевой кислоте у Staphylococcus aureus может быть важна по трём причинам. Во-первых, она может означать, что фузидиевая кислота больше не может использоваться для системного применения в ситуациях, в которых она применяется по клиническим показаниям. Вовторых, результат топического лечения может быть неудачным, в особенности в условиях первичной медицинской помощи, где лечение часто является эмпирическим. Третье, устойчивость к фузидиевой кислоте может быть связана с устойчивостью к другим антибиотикам, тем самым способствуя распространению бактерий Staphylococcus aureus с множественной устойчивостью к антибиотикам, таких как MRSA (метициллин-резистентный S aureus).
Мупироцин представляет собой топический антибиотик для лечения поверхностных кожных инфекций и для контроля за распространением метициллин-резистентного Staphylococcus aureus (MRSA). Устойчивость к мупироцину наблюдали вскоре после того, как он стал доступным. Распространённость устойчивости к мупироцину среди изолятов MRSA была описана главным образом у госпитализированных взрослых и пожилых пациентов, с широкой вариабельностью в диапазоне от 0 до 65% изолятов. Было показано, что процент устойчивости коррелирует с более широким применением в изолированных стационарных условиях. В настоящее время рекомендуется ограниченное применение мупироцина для местного лечения.
Импетиго представляет собой острозаразную бактериальную инфекцию поверхностных слоев эпидермиса. Импетиго является одним из самых распространённых заболеваний среди детей, приходящихся примерно на 10% кожных заболеваний в педиатрических клиниках США. Обычно полагают, что ответственными за это бактериями являются Staphylococcus aureus и Streptococcus pyogenes, а часто комбинация этих двух видов бактерий. Импетиго обычно передаётся при непосредственном контакте, но важную роль играют также фомиты. Всё чаще обнаруживается, что метициллин-резистентные Staphylococcus aureus (MRSA) являются бактериями, вызывающими импетиго. Имеется три распространённых клинических разновидности импетиго: контагиозное импетиго (обычное импетиго), буллёзное импетиго и эктима. Однако у любого отдельного пациента могут одновременно иметься признаки всех трёх типов импетиго.
- 1 032899
Известен целый ряд топических композиций для лечения импетиго, содержащих фармацевтически активные ингредиенты. Топический мупироцин 2% (Бактробан, мазь и крем) является вариантом лечения, как и более старые лекарственные средства, например, такие как топический генциановый фиолетовый и виоформ. Для многих пациентов мупироцин является реальным вариантом лечения от MRSA, однако имеется много сообщений об устойчивости бактерий к мупироцину.
Топическая фузидиевая кислоты 2% (Фуцидин крем) применяется для лечения импетиго, и полагают, что она так же эффективна, как и мупироцин. Однако полезность фузидиевой кислоты для лечения импетиго ограничивается развитием устойчивости, как указывается выше.
Было обнаружено, что устойчивые к фузидиевой кислоте бактерии Staphylococcus aureus (FRSA) являются причиной эпидемий импетиго, и их возникновение обусловлено увеличивающимся применением топической фузидиевой кислоты. Соответственно, полезность фузидиевой кислоты как агента первой линии терапии импетиго является проблематичной ввиду имеющегося уровня резистентности у целевых бактерий. Ретапамулин 1% (Алтабакс мазь), недавно утверждённый FDA, является препаратом нового класса антибиотиков из группы плевромутилинов для топического лечения импетиго, вызванного бактериями Staphylococcus aureus (только метициллин-чувствительными) или Streptococcus pyogene.
Рана представляет собой повреждение тела (в результате физического насилия, несчастного случая или хирургического вмешательства), которое обычно включает глубокий порез или разрыв мембраны (кожи) и, обычно, поражение подлежащих тканей (Merriam Webster Dictionary). Часто наблюдается колонизация ожогов и повреждений микробиологическими патогенами, включая грамположительные бактерии, например, такие как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes; и грамотрицательные бактерии, например Pseudomonas aeruginosa.
Несмотря на очень широкое распространение кожных инфекций, очень ограниченное число топических антибиотиков утверждено для лечения ран и, в частности, инфицированных ран. Мупироцин (Бактробан) представляет собой антибиотик, разработанный компанией GSK. Возникшая устойчивость к мупироцину становится проблемой, требующей решения. В коагулаза-негативных изолятах стафилококков доля устойчивых к мупироцину бактерий выше и составляет от 12.7% в Европе до 38.8% в Соединённых Штатах. Ретапамулин (Алтабакс, GSK) представляет собой другой топический антибиотик, используемый для лечения ран. Фуцидин (LEO Pharma) также эффективен при первичных и вторичных кожных инфекциях, вызванных чувствительными штаммами бактерий Staphylococcus aureus, Streptococcus species и Corynebacterium minutissimum.
Бактериальные инфекции являются основной причиной смерти во всём мире, а бактериальная резистентность значительно уменьшает имеющиеся варианты лечения. Следовательно, потребность в новых антибиотиках, развитие устойчивости к которым не так часто встречается у целевых бактерий, для предупреждения и лечения местных инфекций, которые вызывают или которым способствуют грамположительные бактерии, например, такие как Staphylococcus aureus и Streptococcus pyogenes, совершенно оправданна.
Г алогенированные салициланилиды представляют собой целый ряд соединений, обычно применяемых в качестве антигельминтных агентов. Одним из таких агентов является никлозамид (5-хлор-Ы-(2хлор-4-нитрофенил)-2-гидроксибензамид; также известный как 2',5-дихлор-4'-нитросалициланилид, 2гидрокси-5-хлор-Ы-(2-хлор-4-нитрофенил)бензамид, 5-хлор-2'-хлор-4'-нитросалициланилид или 5-хлорЫ-(2-хлор-4-нитрофенил)салициламид)
Cl CI
он
Никлозамид
Острая токсичность никлозамида:
LD50, мыши, п.о., >5000 мг/кг
LD50, крысы, п.о., 5000 мг/кг
LD50, кролики, дермально, 2000 мг/кг
LD50, кролики, п.о., 5000 мг/кг
LD50, кошки, п.о., >1000 мг/кг
Никлозамид представляет собой известный теницид (=вещество, убивающее ленточных червей), активный против некоторых паразитических ленточных червей домашнего скота и домашних животных (например, Taenia spp, Moniezia spp), а также против рубцового сосальщика (Paramphistomum spp) и шистосомы (Schistosoma spp), в отличие от большинства других салициланилидов, которые обычно проявляют активность в качестве флукицидов, но не в качестве теницидов.
В настоящее время никлозамид применяется на людях в качестве антигельминтного лекарственного средства для лечения инфекций желудочно-кишечного тракта и проявляет низкую общую токсичность, он слабо растворим в воде, плохо всасывается в кишечнике и, попав в кровоток, он быстро выводится через мочевыводящие пути или посредством ферментативных реакций метаболизма в печени. Он применяется в терапии против ленточных гельминтов у людей.
- 2 032899
Также было показано, что никлозамид предупреждает проникновение Schistosoma mansoni через кожу человека. Он также применяется в качестве противоракового препарата, в качестве пестицида и в качестве средства против трипаносомоза. Фактически все применения и предлагаемые применения никлозамида нацелены на эукариоты.
Также было показано, что никлозамид ингибирует репликацию вирусов в человеческих клетках. Полагают, однако, что механизм заключается скорее в воздействии на человеческую клетку-хозяина для обеспечения условий, в которых прекращается жизнь вируса, нежели в специфическом воздействии на вирус. Соответственно, применение никлозамида против вирусов является следствием его способности воздействовать на процесс у эукариот.
Никлозамид выпускается в виде целого ряда препаратов, включая, но без ограничения Bayer73®, Bayer2353®, Bayer25648®, байлусцид (Bayluscid®), байлуцид (Baylucide®), цестоцид (Cestocid®), клонитралид (Clonitralid), дихлосал (Dichlosale®), фенасал (Fenasal®), HL 2447®, йомесан (Iomesan®), йомезан (Iomezan®), манозил (Manosil®), наземо (Nasemo®), никлозамид®, фенасал (Phenasal®), тредемин (Tredemine®), сулкви (Sulqui®), вермитид (Vermitid®), вермитин (Vermitin®) и йомесан (Yomesan®).
Другими галогенированными производными салициланилидов являются Клозантел, (№[5-хлор-4[(4-хлорфенил)цианометил]-2-метилфенил]-2-гидрокси-3,5-дииодбензамид), применяется в качестве ветеринарного антигельминтного средства:
он н3с
Клозантел
Острая токсичность клозантела:
LD50, крысы, п.о., 262-342 мг/кг (в зависимости от исследования), медианное значение 302 мг/кг
LD50, крысы, подкожно, 67 мг/кг
LD50, мыши, п.о., 331 мг/кг
LD50, мыши, в.м., 57 мг/кг
Рафоксанид (3'-хлор-4'-(п-хлорфенокси)-3,5-дииодсалициланилид) известен и применяется в ветеринарии как в качестве фасциолицида, так и в качестве антигельминтного препарата.
Острая токсичность рафоксанида:
LD50, крысы, п.о., 980>2000 мг/кг (в зависимости от исследования), медианное значение >1490 мг/кг
LD50, мыши, п.о., 232-300 мг/кг (в зависимости от исследования), медианное значение 266 мг/кг LD50, кролики, п.о., 3200 мг/кг
Оксиклозанид (3,3',5,5',6-пентахлор-2'-гидроксисалициланилид), известен и применяется в ветеринарии в качестве средства против гельминтов, главным образом, против трематод.
LD50, крысы, п.о., 980-3519 мг/кг (в зависимости от исследования), медианное значение 2250 мг/кг
LD50, мыши, п.о., 300 мг/кг
LD50, кролики, п.о., 3200 мг/кг
Малая широта терапевтического действия после перорального введения
Способ действия салициланилидов, включая никлозамид, на молекулярном уровне не совсем изучен. Все они являются разобщающими агентами окислительного фосфорилирования в митохондриях клеток, которое нарушает продуцирование АТР (АТФ). Это нарушает подвижность паразитов и, возможно, также другие процессы. Также никлозамид действует на ленточных червей, ингибируя всасывание глюкозы.
Никлозамид был предложен в качестве возможного препарата для системного лечения хронических лёгочных инфекций, вызываемых протеобактерией Pseudo-monas aeruginosa (синегнойная палочка) и актинобактерией Mycoplasmum tuberculosis (палочка Коха). Было показано, что никлозамид ослабляет реакцию quorum sensing (QS), а также продуцирование quorum sensing метаболитов в P. aeruginosa. Так как quorum sensing считается важным процессом для патогенности при хронических лёгочных инфекциях, вызываемых бактериями, это привело к предположению, что никлозамид можно было бы использовать в качестве адъювантной терапии при этих инфекциях. Никлозамид не влияет на рост P. aeruginosa и, следовательно, не обладает непосредственной антибактериальной активностью. Концентрация, необходимая для оптимальной активности, составляла 20 мкМ, однако определённая активность обнаружива
- 3 032899 лась при концентрации 1 мкМ. (F. Imperi et al., Antimicrobial, Agents and Chemotherapy, 557(2), 996- 1005 (2013)).
Ghazi et al. (Zentralbl. Mikrobiol. 141 (1986), 225-232) тестировали антибактериальное действие и токсичность синтезированных производных салициланилидов по отношению к
Escherichia coli, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus, но нигде не упоминают о скорости развития устойчивости.
J. Vinsova et al. описывают антибактериальную активность салициланилидов (Molecules, vol. 12, no. 1, pp. 1-12, 2007; Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, vol. 19, no. 2, pp. 348-351, 2009; European Journal of Medicinal Chemistry, vol. 45, no. 12, pp. 6106-6113, 2010), но нигде не упоминают проблему развития лекарственной устойчивости.
М. J. Macielag et al. тестировали антибактериальную активность клозантела и родственных производных по отношению к организмам с лекарственной устойчивостью, метициллин-резистентным бактериям Staphylococcus aureus (MRSA) и ванкомицин-резистентным бактериям Enterococcus faecium (VREF) (J. Med. Chem., 41(16), 2939-45 (1998)), но нигде не упоминали проблему развития лекарственной устойчивости.
D.J. Hlasta et al. обнаружили, что клозантел обладает антибактериальной активностью по отношению к лекарственно устойчивым бактериям S. aureus и Е. faecium (Bioorg. Med. Chem. Letters, 8(14), 1923-28 (1998)), но нигде не упоминали проблему развития лекарственной устойчивости.
R. Rajamuthiah et al. определяли клозантел как большое достижение для жидкостных методов высокопроизводительного скрининга и обнаружили противострептококковую активность клозантела по отношению к ванкомицин-резистентным изолятам S. aureus и других грамположительных бактерий. Упоминание о проблеме развития лекарственной устойчивости, отсутствует (PloS One, 2014, 9(2): е89189).
В Международной заявке WO 2008/155535 описывается применение галогенированных салициланилидов для лечения акне, причём бактериями, вызывающими акне, являются пропионовокислые бактерии. Упоминание о проблеме развития лекарственной устойчивости, отсутствует.
Сущность изобретения
Многие бактерии являются устойчивыми, или у них быстро развивается устойчивость, к антибиотикам, и поэтому нежелательно или неэффективно лечить антибиотиками млекопитающее, страдающее бактериальным заболеванием местного характера или инфекцией, вызванной бактериями, устойчивыми к антибиотикам. В данной заявке описывается топическое применение галогенированного салициланилида для лечения инфекции, вызываемой грамположительными бактериями. При топическом применении галогенированных салициланилидов по изобретению наблюдается значительно меньшая частота устойчивых спонтанных мутантов по сравнению с более широко используемыми топическими антибиотиками.
В первом аспекте настоящего изобретения предусматривается галогенированный салициланилид, выбранный из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая соли, гидраты и сложные эфиры, для топического применения с целью предупреждения или лечения инфекции или заболевания, вызванных грамположительными бактериями, при этом грамположительные бактерии не являются пропионовокислыми бактериями. Таким образом, изобретение включает способ лечения заболевания или инфекции, вызванных грамположительными бактериями у субъекта, включающий топическое введение субъекту эффективного количества галогенированного салициланилида, выбранного из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая соли, гидраты и сложные эфиры; при этом грамположительные бактерии не являются пропионовокислыми бактериями.
Во втором аспекте изобретения предусматривается галогенированный салициланилид, выбранный из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая соли, гидраты и сложные эфиры, для топического применения с целью предупреждения или лечения инфекции или заболевания, вызванных грамположительными бактериями, которые устойчивы к лекарственному средству, выбранному из фузидиевой кислоты, мупироцина и ретапамулина. Таким образом, изобретение включает способ лечения заболевания или инфекции, вызванных грамположительными бактериями у субъекта, включающий топическое введение субъекту эффективного количества галогенированного салициланилида, выбранного из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая соли, гидраты и сложные эфиры; при этом грамположительные бактерии устойчивы к лекарственному средству, выбранному из фузидиевой кислоты, мупироцина и ретапамулина.
В третьем аспекте изобретения предусматривается галогенированный салициланилид, выбранный из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая соли, гидраты и сложные эфиры, для топического применения с целью предупреждения или лечения инфекции или заболевания, для которого использование фузидиевой кислоты, мупироцина или ретапамулина в Европе было одобрено 12 сентября 2014 г.; при этом заболевание или инфекция вызваны грамположительными бактериями. Аналогично в изобретении может предусматриваться способ лечения или предупреждения заболевания или инфекции, вызванных грамположительными бактериями у субъек
- 4 032899 та, включающий топическое введение субъекту эффективного количества галогенированного салициланилида, выбранного из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая соли, гидраты и сложные эфиры; причём инфекция или заболевание представляет собой инфекцию или заболевание, для которых использование фузидиевой кислоты, мупироцина или ретапамулина в США было одобрено 12 сентября 2014 г.; а заболевание или инфекция вызваны грамположительными бактериями.
Заявители нашли, что галогенированные салициланилиды клозантел, рафоксанид, оксиклозанид или никлозамид или их фармацевтически приемлемые производные являются высокоэффективными средствами против грамположительных бактерий, например, таких как Staphylococcus aureus и Streptococcus pyogenes, и, неожиданно, также очень эффективно подавляют развитие устойчивости бактерий, например таких, как указанные выше. Предполагается, что эти соединения являются очень полезными топическими агентами для применения с целью предупреждения и/или лечения заболеваний или инфекций. Один специфический галогенированный салициланилид представляет собой никлозамид. Примеры заболеваний, которые можно лечить посредством топического введения галогенированного салициланилида, включают импетиго, бактериальный конъюнктивит, инфекции, родственные атопическому дерматиту, интраназальное носительство инфекции с помощью эрадикации, сикоз обыкновенный, поверхностный фолликулит, паронихию, эритразму, вторичные инфекционные дерматозы, карбункулы, фурункулёз (эктиму, целлюлит, рожу, некротический фасциит, вторичные раневые инфекции кожных покровов, дерматит, чесотку, диабетические язвы и т.п.).
Согласно одному варианту активный ингредиент представляет собой никлозамид или его производное или в виде его гидрата, например, никлозамида моногидрата, или в виде его соли, например, его соли этаноламина, или его соли пиперазина, или других подходящих солей или гидратов этих солей.
Никлозамид представляет собой бактериостатик для S. aureus (См. фиг. 1), т.е. он предупреждает рост бактерии, но не убивает её. Неожиданно было обнаружено, что никлозамид оказывает такое же действие на штаммы S. aureus, устойчивые к метациллину, фузидиевой кислоте и мупироцину, как и на неустойчивые штаммы (См. фиг. 2). Биологические испытания (наряду с прочим) также неожиданно показали, что галогенированные салициланилиды, и в частности никлозамид, имеют более низкую частоту мутаций против MRSA 01, чем такие соединения, как фузидиевая кислота, мупироцин и ретапамулин (см. таблицу 4).
Не связывая себя какой-либо конкретной теорией, полагают, что целый ряд аналогов никлозамида может вести себя аналогично никлозамиду. Иллюстративные аналоги никлозамида включают, но без ограничения, клозантел (CAS #: 57808-65-8), оксиклозанид (CAS #: 2277-92-1), рафоксанид (CAS #: 22662-39-1), клиоксанид (CAS #: 14437-41-3). Другие пригодные аналоги никлозамида включают бротианид (CAS #: 23233-88-7), 4'-хлор-3-нитросалициланилид, 4'-хлор-5-нитросалициланилид, 2'-хлор-5'метокси-3 -нитросалициланилид, 2'-метокси-3,4'-динитросалициланилид, 2',4'-диметил-3 -нитросалициланилид, 2'-хлор-3,4'-динитросалициланилид, 2'-этил-3-нитросалициланилид, 2'-бром-3-нитросалициланилид и т.п. (ЕР 2049137). Следует отметить, предполагается, что эти аналоги никлозамида приводятся в качестве иллюстративных, но не в качестве ограничивающих примеров. Способы получения аналогов никлозамида хорошо известны специалистам в данной области техники (см., например, Международную заявку WO 2004/006906, которая включена в настоящее изобретение в виде отсылки во всех отношениях).
Галогенированный салициланилид может быть выбран из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида, никлозамида, клиоксанида, бротианида, 4'-хлор-3-нитросалициланилида, 4'-хлор-5-нитросалициланилида, 2'-хлор-5'-метокси-3-нитросалициланилида, 2'-метокси-3,4'-динитросалициланилида, 2',4'диметил-3-нитросалициланилида, 2'-хлор-3,4'-динитросалициланилида 2'-этил-3-нитросалициланилида, 2'-бром-3-нитросалициланилида или их фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Галогенированный салициланилид может быть выбран из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида или их фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Галогенированный салициланилид может быть выбран из клозантела, рафоксанида, и оксиклозанида или их фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Галогенированный салициланилид может представлять собой никлозамид или его фармацевтически приемлемую соль или сольват. Галогенированный салициланилид может представлять собой никлозамид в виде свободного основания. Галогенированный салициланилид может представлять собой фармацевтически приемлемую соль никлозамида.
В четвёртом аспекте изобретения предусматривается фармацевтическая композиция для топического введения, содержащая галогенированный салициланилид, выбранный из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая соли, гидраты и сложные эфиры, причём компоненты композиции выбраны таким образом, чтобы они обеспечивали локальное значение рН ниже 6 в очаге инфекции.
Авторы изобретения обнаружили, что антибактериальная активность галогенированных салициланилидов, например, никлозамида, выше при низком значении рН, чем при нейтральном или щелочном рН. Композиция может не содержать буфер или модификатор рН. Это может означать, что композиция
- 5 032899 не вызывает заметного изменения природного низкого рН кожи в очаге инфекции.
Галогенированный салициланилид, например, никлозамид, может не быть в виде свободного основания. Обычно галогенированные салициланилиды имеют слабокислую реакцию, поскольку они фактически содержат фенольные группы. Обычно галогенированные салициланилиды образуют соли с аминами (например, с этаноламином), которые могут вызывать повышение локального рН.
Бактериальная деколонизация может являться эффективной стратегией для снижения частоты нозокомиальных (госпитальных) инфекций, в частности, связанных с MRSA. Многие люди являются носителями MRSA без симптомов. Деколонизация таких пациентов может быть эффективной для предупреждения передачи MRSA в больничных условиях или для снижения степени риска обнаружения инфекции у пациента после хирургической операции или медицинской процедуры в больнице.
В пятом аспекте изобретения предусматривается способ лечения, предупреждения или устранения бактериальной колонизации грамположительными бактериями у субъекта, который включает топическое введение субъекту эффективного количества галогенированного салициланилида, выбранного из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая их соли, гидраты и сложные эфиры. Соответственно, в изобретении может предусматриваться галогенированный салициланилид, выбранный из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая их соли, гидраты и сложные эфиры, для применения с целью лечения, предупреждения или устранения бактериальной колонизации грамположительными бактериями у субъекта посредством топического введения.
Галогенированный салициланилид можно вводить субъекту топическим методом перед проведением хирургической операции. Галогенированный салициланилид вводят субъекту через нос либо интраназально, либо наносят на нос снаружи. Галогенированный салициланилид можно вводить топическим методом через нос субъекта с помощью хирургической операции в области носа или на лице субъекта.
У грамположительных бактерий могут появляться спонтанные мутанты, которые сообщают устойчивость к галогенированному салициланилиду, с частотой менее 10-6 при минимальной ингибирующей концентрации (MIC, МИК) галогенированного салициланилида по отношению к грамположительным бактериям. У грамположительных бактерий могут появляться спонтанные мутанты, которые сообщают устойчивость к галогенированному салициланилиду, с частотой менее 10-7 при минимальной ингибирующей концентрации (MIC) галогенированного салициланилида по отношению к грамположительным бактериям. У грамположительных бактерий могут появляться спонтанные мутанты, которые сообщают устойчивость к галогенированному салициланилиду, с частотой менее 10-8 при минимальной ингибирующей концентрации (MIC,) галогенированного салициланилида по отношению к грамположительным бактериям. Так, у грамположительных бактерий могут появляться спонтанные мутанты, которые сообщают устойчивость к галогенированному салициланилиду, с частотой менее 4 х 10-9 при минимальной ингибирующей концентрации (MIC, МИК) галогенированного салициланилида по отношению к грамположительным бактериям.
Грамположительные бактерии могут не представлять собой пропионовокислые бактерии. Грамположительные бактерии могут быть выбраны из Staphylococcus aureus или Streptococcus pyogenes. Бактерии могут быть устойчивы к лекарственному средству, выбранному из фузидиевой кислоты, мупироцина и ретапамулина. Бактерии могут представлять собой метициллин-резистентный золотистый стафилококк Staphylococcus aureus (MRSA).
Инфекция или заболевание может быть выбрана(о) из группы, состоящей из импетиго, бактериального конъюнктивита, атопического дерматита и родственных инфекций, микробной (инфекционной) экземы, розовых угрей (розацеа), интраназального носительства инфекции (с помощью эрадикации), сикоза обыкновенного, поверхностного фолликулита, паронихии, эритразмы, вторичных инфекционных дерматозов, карбункулов, фурункулёза, эктимы, целлюлита, рожи, некротического фасциита, вторичных раневых инфекций кожных покровов, дерматита, чесотки и диабетических язв. Так, инфекция или заболевание может быть выбрана(о) из группы, состоящей из импетиго, бактериального конъюнктивита и атопического дерматита. Инфекция или заболевание может быть выбрана(о) из группы, состоящей из импетиго, бактериального конъюнктивита, инфекций, родственных атопическому дерматиту, интраназального носительства инфекции (с помощью эрадикации), сикоза обыкновенного, поверхностного фолликулита, паронихии, эритразмы, вторичных инфекционных дерматозов, карбункулов и фурункулёза (эктимы, целлюлита, рожи, некротического фасциита, вторичных раневых инфекций кожных покровов, дерматита, чесотки, диабетических язв и т.п.).
Инфекция или заболевание может не представлять собой обыкновенные угри (acne vulgaris). Лекарственное средство может вводиться топическим методом в течение 2 недель или менее. Галогенированный салициланилид может содержаться в композиции, компоненты которой выбраны таким образом, что композиция обеспечивает локальное значение рН в очаге инфекции ниже 6. Заявители нашли, что антибактериальная активность галогенированных салициланилидов, например, никлозамида, выше при низком значении рН, чем при нейтральном или щелочном значении рН. По этой причине композиция может не содержать буфер или рН модификатор. При этом галогенированный салициланилид, например никлозамид, может быть в виде свободного основания. Компоненты композиции мо
- 6 032899 гут быть выбраны таким образом, чтобы композиция обеспечивала локальное значение рН в очаге инфекции выше 4.5 (например, выше 5). Указание на локальное значение рН означает указание на значение рН в таком месте, где наносится композиция, например, рН на поверхности кожи, после нанесения композиции, содержащей галогенированный салициланилид.
Галогенированный салициланилид может быть выбран из рафоксанида, оксиклозанида, клозантела и никлозамида и их производных, включая соли, гидраты и сложные эфиры. Галогенированный салициланилид может быть выбран из рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая соли, гидраты и сложные эфиры. Так, галогенированный салициланилид может представлять собой никлозамид или его соль или гидрат.
Галогенированный салициланилид (например, рафоксанид, оксиклозанид, клозантел или никлозамид) может быть в виде свободного основания. Галогенированный салициланилид (например, рафоксанид, оксиклозанид, клозантел или никлозамид) может быть не в виде гидрата. Когда галогенированный салициланилид представляет собой никлозамид, он может быть не в виде моногидрата.
Грамположительные бактерии могут представлять собой бактерии штамма, неустойчивого к антибиотикам. Или же грамположительные бактерии могут представлять собой бактерии штамма, устойчивого к антибиотикам.
Инфекция или заболевание может означать инфекцию или заболевание у человека или животного, например, инфекция может быть у человека.
Согласно некоторым вариантам популяция грамположительных бактерий включает грамположительные бактерии, устойчивые к антибиотикам.
Грамположительные бактерии могут представлять собой не пропионовокислые бактерии, например, они могут представлять собой бактерии, не относящиеся к виду Propionibacterium acnes.
Согласно некоторым вариантам популяция грамположительных бактерий включает кокковые формы грамположительных бактерий. Согласно некоторым вариантам грамположительные бактерии являются бактериями рода Streptococcus или Staphylococcus.
Согласно некоторым вариантам грамположительные бактерии являются бактериями рода Streptococcus. Грамположительные бактерии могут представлять собой бактерии рода Streptococcus, выбранные из Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus suis, Streptococcus agalactiae или Streptococcus viridans.
Согласно некоторым вариантам грамположительные бактерии являются бактериями Streptococcus pyogenes.
Согласно некоторым вариантам грамположительные бактерии являются бактериями рода Staphylococcus. Грамположительные бактерии могут представлять собой бактерии рода Staphylococcus, выбранные из Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophyticus или Staphylococcus lugdunensis. Согласно некоторым вариантам кокковые грамположительные бактерии являются бактериями Staphylococcus aureus (например, метициллин-резистентными бактериями Staphylococcus aureus).
Грамположительные бактерии по настоящему описанию могут быть устойчивы к другому антибиотику. Например, бактерии могут быть устойчивы к другому антибиотику, отличному от галогенированного салициланилида, выбранного из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и/или никлозамида или их производного. Бактерии могут быть устойчивы к лекарственному средству, выбранному из фузидиевой кислоты, мупироцина и ретапамулина.
Также предусматриваются способы лечения субъекта с грамположительной бактериальной инфекцией, которые включают топическое введение субъекту с грамположительной бактериальной инфекцией одного из галогенированных салициланилидов, выбранного из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида или никлозамида или их производного, в количестве, достаточном для уменьшения популяции грамположительных бактерий у субъекта. Изобретение может характеризоваться скоростью развития спонтанной устойчивости этих бактерий менее 10-6, например, менее 10-7 или 10-8, например, менее 4 х 10-9. Одним из примеров, который представляет особый интерес, является никлозамид.
В настоящем изобретении также предусматривается способ лечения субъекта с инфекцией, связанной с или вызванной грамположительными бактериями, описанными выше, причём указанный способ включает стадию топического введения эффективного количества галогенированного салициланилида, выбранного из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида или никлозамида или их производного. Изобретение может характеризоваться скоростью развития спонтанной устойчивости этих бактерий менее 10-6, например менее 10-7 или 10-8, например менее 4 х 10-9. Одним из примеров, который представляет особый интерес, является никлозамид, который может характеризоваться скоростью развития спонтанной устойчивости этих бактерий менее 10-8, например менее 4 х 10-9.
В настоящем изобретении может предусматриваться применение фармацевтически эффективного количества галогенированного салициланилида, выбранного из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида или никлозамида или их производного, для приготовления лекарственного средства для топического предупреждения и/или лечения инфекции, вызванной грамположительными бактериями, например, такими как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes, которые колонизируют или инфицируют
- 7 032899 кожу, поражённую дерматологическим заболеванием, выбранным из группы, состоящей из импетиго, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с различными заболеваниями кожи, например, такими как экзема или псориаз. Изобретение может характеризоваться скоростью развития спонтанной устойчивости этих бактерий менее 10-6, например, менее 10-7 или 10-8, например, менее 4 х 10-9. Одним из примеров, который представляет особый интерес, является никлозамид.
В настоящем изобретении может предусматриваться способ топического предупреждения и/или лечения инфекций, вызванных грамположительными бактериями, например, такими как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes, которые колонизируют или инфицируют кожу, поражённую дерматологическим заболеванием, выбранным из группы, состоящей из импетиго, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с различными заболеваниями кожи, например, такими как экзема или псориаз, причём этот способ включает введение субъекту фармацевтически эффективного количества галогенированного салициланилида, выбранного из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида или никлозамида или его гидрата или соли или гидрата такой соли. Изобретение может характеризоваться скоростью развития спонтанной устойчивости этих бактерий менее 10-6, например, менее 10-7 или 10-8, например, менее 4 х 10-9. Одним из примеров, который представляет особый интерес, является никлозамид.
В настоящем изобретении может предусматриваться способ топического лечения устойчивых к антибиотикам грамположительных бактериальных инфекций, включающий введение субъекту, инфицированному устойчивыми к антибиотикам грамположительными бактериями, выбранными из группы, состоящей из устойчивых к антибиотикам Staphylococcus aureus and/or Streptococcus pyogenes, фармацевтически эффективного количества галогенированного салициланилида, выбранного из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида или никлозамида или его гидрата или соли или гидрата такой соли. Одним из примеров, который представляет особый интерес, является никлозамид.
В настоящем изобретении может предусматриваться способ предупреждения и/или лечения конъюнктивита и кератита, вызванного грамположительными бактериями, например, такими как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes, включающий введение субъекту топическим методом фармацевтически эффективного количества галогенированного салициланилида, выбранного из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида или никлозамида или его гидрата или соли или гидрата такой соли. Одним из примеров, который представляет особый интерес, является никлозамид.
В настоящем изобретении может предусматриваться фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически эффективное количество галогенированного салициланилида, выбранного из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида или его производного, для введения с целью местного предупреждения и/или лечения инфекций, вызванных грамположительными бактериями, такими как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes, которые колонизируют или инфицируют кожу, поражённую дерматологическим заболеванием, выбранным из группы, состоящей из импетиго, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с различными заболеваниями кожи, например, такими как экзема или псориаз, и характеризуются скоростью развития спонтанной устойчивости этих бактерий менее 10-6, например менее 10-7 или 10-8, например, менее 4 х 10-9. Одним из примеров, который представляет особый интерес, является никлозамид.
В настоящем изобретении может предусматриваться фармацевтическая композиция, содержащая никлозамид в качестве активного ингредиента, для введения с целью местного предупреждения и/или лечения инфекций, вызванных грамположительными бактериями, такими как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes, которые колонизируют или инфицируют кожу, поражённую дерматологическим заболеванием, выбранным из группы, состоящей из импетиго, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с различными заболеваниями кожи, например, такими как экзема или псориаз, и характеризуются скоростью развития спонтанной устойчивости этих бактерий менее 10-6, например, менее 10-7 или 10-8, например, менее 4 х 10-9.
Примеры заболеваний, которые можно топически лечить с применением галогенированного салициланилида, включают импетиго, бактериальный конъюнктивит, инфекции, родственные атопическому дерматиту, интраназальное носительство инфекции с помощью эрадикации, сикоз обыкновенный, поверхностный фолликулит, паронихию, эритразму, вторичные инфекционные дерматозы, карбункулы, фурункулёз (эктиму, целлюлит, рожу, некротический фасциит, вторичные раневые инфекции кожных покровов, дерматит, чесотку, диабетические язвы и т.п.).
Инфекция или заболевание, которые лечат топическим (местным) методом, может представлять собой кожную инфекцию, инфекционный дерматит или инфекционный дерматоз, например любую из кожных инфекций по данному описанию. Кожная инфекция может быть выбрана, например, из импетиго (включая контагиозное импетиго (обычное импетиго), буллёзное импетиго и эктиму), инфекционного дерматита (например, инфекционного атопического дерматита), инфекционной (микробной) экземы, инфицированных кожных ран, инфицированных ожогов и инфицированных язв (например, диабетических язв).
Инфекция или заболевание, которые лечат топически с использованием галогенированного салициланилида, может представлять собой дерматоз, осложнённый вторичной инфекцией, вызванной грампо
- 8 032899 ложительными бактериями, например вторичной кожной инфекцией. Вторичные инфекции, вызванные грамположительными бактериями, являются обычными осложнениями первичных дерматозов, первичных небактериальных кожных инфекций, травматических повреждений, язв, кожных инвазий, и других кожных заболеваний. Следовательно, галогенированный салициланилид может применяться для топического лечения осложнённых вторичной инфекцией состояний, выбранных из экземы, педикулёза, чесотки, укусов насекомых (например, папулёзной детской крапивницы), пемфигуса (пузырчатки), псориаза, кожных наружных язв, трихофитии и вирусной инфекции кожи (например, простого герпеса или ветрянки).
Галогенированный салициланилид может применяться для деколонизации субъекта, являющегося носителем грамположительных бактерий (включая любые грамположительные бактерии по данному описанию, например, MRSA), при этом галогенированный салициланилид наносится субъекту местно (топически). Такая деколонизация может эффективно применяться для предупреждения или уменьшения передачи инфекции другим субъектам, в частности, в условиях стационара. Деколонизация может также предупредить или уменьшить риск инфекции в области хирургического вмешательства в результате проводимых хирургических или медицинских процедур, или в месте введения медицинских устройств, например, таких как катетеры, или IV капельницы, или канюли. Так, галогенированный салициланилид может применяться для деколонизации субъекта перед проведением субъекту хирургической операции, при этом галогенированный салициланилид наносится субъекту топически. Такие хирургические операции включают, например, рекомендуемые хирургические операции, такие как замена тазобедренного или коленного сустава. Деколонизацию можно осуществлять посредством топического (местного) нанесения галогенированного салициланилида субъекту на области колонизации грамположительными бактериями. Известно, что обычно местом бактериальной колонизации, например, MRSA является нос. Поэтому галогенированный салициланилид можно наносить местно на нос. В частности, галогенированный салициланилид можно наносить на ноздри (на внутреннюю поверхность ноздрей).
Инфекции и деколонизацию, описанные в предыдущих абзацах данного описания, можно лечить топически любым из галогенированных салициланилидов по данному описанию, выбранных из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида или никлозамида или их производных. В частности, галогенированный салициланилид может представлять собой никлозамид.
В настоящем изобретении может предусматриваться фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически эффективное количество одного из галогенированных салициланилидов, выбранных из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида или никлозамида или их производных, для введения с целью местного предупреждения и/или лечения инфекции, вызванной грамположительными бактериями, такими как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes, которые колонизируют или инфицируют кожу, поражённую дерматологическим заболеванием, выбранным из группы, состоящей из импетиго, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с различными заболеваниями кожи, например, такими как экзема или псориаз, характеризующаяся скоростью развития частоты спонтанных мутантов с устойчивостью менее 10-6, например, менее 10-7 или 10-8, например, менее 4 х 10-9, в отношении MRSA 01, MRSA 15 и MRSA 16 в концентрации MIC х 1 при количественном определении методом частоты мутаций, описанным в экспериментальном разделе. Было найдено, что никлозамид является наилучшим по отношению к S. aureus и S. pyogenes (как в мкМ, так и в мкг/мл).
В другом аспекте изобретения также предусматривается галогенированный салициланилид, выбранный из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая соли, гидраты и сложные эфиры, для применения с целью местного предупреждения или лечения инфекции, вызванной грамположительными бактериями, который с высокой эффективностью ингибирует рост грамположительных бактерий, таких как Staphylococcus, в частности, Staphylococcus aureus, и Streptococcus, в частности, Streptococcus pyogenes, характеризующийся скоростью развития частоты спонтанных устойчивых мутантов менее 10-6, например, менее 10-7 или 10-8, например, менее 4 х 10-9. Одним из примеров, который представляет особый интерес, является никлозамид.
В другом аспекте изобретения также предусматривается способ получения лекарственного вещества для применения с целью местного предупреждения или лечения инфекции, вызванной грамположительными бактериями, причём лекарственное вещество представляет собой никлозамид и его производные, включая соли, гидраты и сложные эфиры, а применение галогенированного салициланилида с высокой эффективностью ингибирует рост грамположительных бактерий, таких как Staphylococcus, в частности, Staphylococcus aureus, и Streptococcus, в частности, Streptococcus pyogenes, характеризующийся скоростью развития частоты спонтанных устойчивых мутантов менее 10-6, например менее 10-7 или 10-8, например менее 4 х 10-9.
Топическое применение галогенированных салициланилидов, таких как никлозамид, позволяет лечить человека, страдающего инфекцией, вызванной бактериями, например, такими как Staphylococcus aureus или Streptococcus pyogenes, при пониженной скорости развития частоты спонтанных мутантов с устойчивостью против этого агента.
Другие преимущества и цели настоящего изобретения будут описаны более подробно, наряду со
- 9 032899 ссылками на прилагаемые фигуры.
Краткое описание фигур и таблиц
На фиг. 1 представлены микробиологические показатели никлозамида по отношению к штаммам MRSA, MSSA и S. pyogenes. A. MIC (минимальная ингибирующая концентрация, мкг/мл) отношению ко всем целевым штаммам. MIC никлозамида < 0.4 мкг/мл по отношению к штаммам S. aureus, включая штаммы, устойчивые к фузидиевой кислоте (*), и штаммы, устойчивые к мупироцину (^), и < 3.2 мкг/мл по отношению к штаммам Streptococcus pyogenes. Кривые зависимости доза-эффект штаммов, выделенных жёлтым цветом, представлены в В. На фиг. 2 представлена кривая зависимости киллинга бактерий от времени для MRSA 01, инкубированного с никлозамидом (MIC х 10). Никлозамид проявлял бактериостатический эффект по отношению к MRSA 01 (штамм, используемый в эксперименте на животных) в условиях испытаний (первичный инокулум: 7 log10 КОЕ/мл; никлозамид: 4 мкг/мл [MIC х 10]).
На фиг. 3 показаны КОЕ в повреждениях кожи после трёх дней обработки
Образец 5. Образец - контроль соответствует образцу без никлозамида *: P<0.05, непарный t-критерий;
**: P<0.005, непарный t-критерий;
х: Р<0.001, непарный t- критерий; ns: незначимый.
На фиг. 4 показаны кривые доза-эффект для никлозамида, фузидиевой кислоты и мупироцина по отношению к S. aureus с метициллин-резистентными штаммами (А), штаммом, устойчивым к фузидиевой кислоте (В) и мупироцин-резистентным штаммом (С).
На фиг. 5 показан рост S. aureus при различных рН в зависимости от концентрации никлозамида (среднее из 3 параллельных анализов, повторностей). Заслуживает сравнения рост S. aureus без никлозамида (0 мкг/мл) с рН 7.4 до рН 6.0. Рост без никлозамида немного ингибируется при рН 5.5 и полностью ингибируется при значении рН равном или ниже 5.0.
Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения Определения
В контексте настоящей заявки и настоящего изобретения употребляются следующие определения:
Термин Staphylococcus aureus или S. aureus в данном контексте, коротко говоря, относится к любому штамму грамположительных бактерий, классифицируемых как Staphylococcus aureus и ассоциированных с целым рядом инфекций, включая пневмонию, остеомиелит, артрит, эндокардит, сепсис и синдром токсического шока, а также вызывающих менее тяжёлые инфекции кожи и мягких тканей.
Термин метициллин-резистентный Staphylococcus aureus или MRSA, употребляемый в данном описании, включает штаммы Staphylococcus aureus, устойчивые к метициллину, и в широком смысле относятся к штаммам грамположительных бактерий (например, к бактериям, продуцирующим беталактамазы), устойчивым к антибиотикам, которые по классификации антибиотиков относятся к антибиотикам пенициллинового ряда. Метициллин - это международное непатентованное название для (2S,5R,6R)-6-[(2,6-диметоксибензоил)amino]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло [3.2.0]гептан-2карбоновой кислоты, которая представляет собой бета-лактамный антибиотик, который применялся для лечения инфекций, вызванных чувствительными грамположительными бактериями (включая, например, Staphylococcus aureus).
Термин производное относится, но без ограничения, к метаболитам, пролекарствам (превращающимся в активные лекарства), сложным эфирам, гидратам или к фармацевтически приемлемым солям и/или гидратам таких солей галогенированных салициланилидов по настоящему изобретению. Термин производные также охватывает кристаллические формы соединений и сокристаллы, образуемые совместно галогенированным салициланилидом и коформером(ами). Специалист в данной области техники, хорошо знаком с различными химическими методами и методиками превращения химического соединения в производное, которое сохраняет основную химическую структуру соединения, такими как методы присоединения, отщепления (элиминирования) или замещения группы или функциональной группы, и, следовательно, легко получит соединение, подобное никлозамиду, которое вызывает тот же эффект, что и исходное соединение.
Термин фармацевтически приемлемая соль относится к солям (например, солям этаноламина или пиперазина), которые сохраняют биологическую активность и свойства соединений по данному описанию и которые не являются нежелательными с биологической или иной точки зрения. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны специалистам в данной области техники. Соответственно, в данном контексте ссылка на соль галогенированного салициланилида может относиться к фармацевтически приемлемой соли галогенированного салициланилида.
В данном контексте термин сольват относится к комплексу растворённого вещества, например, такого как соединение или соль соединения, и растворителя. Если растворителем является вода, сольват может называться гидратом, например, моногидратом, дигидратом, тригидратом и т.д., в зависимости от числа молекул воды, приходящихся на молекулу субстрата.
Термин лечение в данном контексте означает (i) предупреждение заболевания, вызываемого бактериями, например, такими как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes; (ii) торможение (уг
- 10 032899 нетение) заболевания, вызываемого бактериями, например, такими как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes; и (iii) облегчение заболевания, вызываемого бактериями, например, такими как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes; iv) эрадикацию несимптоматической колонизации бактериями Staphylococcus aureus на области тела, (v) эрадикацию симптоматической инфекции, вызванной грамположительными бактериями, например, такими как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes, (vi) эрадикацию грамположительных бактерий, таких как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes, с области тела, поражённой другим заболеванием, что позволило бы легче установить инфекцию, чем на области, поражённой заболеванием, вызванным не болезнетворными бактериями, например, на области кожи, поражённой экземой или атопическим дерматитом, (vii) подавление заболевания, вызванного грамположительными бактериями, например, такими как Staphylococcus aureus и/или Streptococcus pyogenes; на области тела, поражённой другим, неинфекционным, заболеванием, что позволило бы легче установить инфекцию, чем на области, поражённой заболеванием, вызванным не болезнетворными бактериями, - например, на области кожи, поражённой экземой или атопическим дерматитом.
Таким образом, в контексте настоящего изобретения лечение заболевания охватывает как терапевтическое, так и профилактическое лечение либо инфекционного, либо неинфекционного заболевания у млекопитающего, например такого как человек или животное, но особенно у человека. Лечение может включать полную или частичную эрадикацию заболевания, устранение или облегчение связанных с ним симптомов, подавление дальнейшего прогрессирования заболевания и/или предупреждение или уменьшение риска последующего возникновения заболевания. Бактериальный штамм может характеризоваться скоростью развития частоты устойчивых спонтанных мутантов менее 10-6, например менее 10-7 или 10-8, например менее 4 х 10-9. Обычно лечение включает применение галогенированных салициланилидов клозантела, рафоксанида, оксиклозанида или никлозамида или их производных против грамположительных бактерий, таких как Staphylococcus aureus и Streptococcus pyogenes. Одним из примеров, который представляет особый интерес, является никлозамид.
Инфекция или заболевание, которые надлежит лечить, может быть у животного, например у млекопитающего. В частности, галогенированный салициланилид можно применять для лечения промысловых животных, таких как сельскохозяйственные животные (например, коровы, овцы, куры, свиньи, гуси, утки, козы и т.д.). Или же соединения по настоящему изобретению можно применять для лечения домашних животных, таких как кошки, собаки, лошади и т.д.
Препарат для местного применения означает препарат, который наносят на поверхность тела, например, на кожу или слизистые оболочки, для лечения заболеваний во множестве форм, включая, но без ограничения, кремы, пены, гели, капли, лосьоны и мази. Препараты для местного применения отличаются от многих других типов лекарственных средств, так как неправильное обращение с ними может привести к определённым осложнениям у пациента или у лица, ответственного за обращение с этим препаратом. Многие препараты для местного применения являются накожными, это означает, что они наносятся непосредственно на кожу. Препараты для местного применения также могут быть ингаляционными, например, такими как противоастматические препараты, или могут наноситься на поверхность тканей, отличных от кожи, например, глазные капли, которые наносятся на конъюнктиву, или ушные капли, которые капают в ухо, или препараты, которые наносятся на поверхность зубов.
При местном (топическом) применении соответствующую фармацевтическую композицию, например, крем, лосьон, гель, мазь, пасту, капли и т.п., можно намазать на поражённую поверхность и осторожно втереть Раствор можно наносить таким же образом, но чаще его наносят пипеткой, тампоном и т.п. и осторожно распределяют на области поражения.
Топическое применение галогенированного салициланилида по настоящему изобретению способствует селективной доставке галогенированного салициланилида в конкретную область и позволяет избежать вариативности между разными пациентами и индивидуальной вариативности, которая может ассоциироваться с альтернативными путями введения лекарств.
Топические (местные) фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно применять для лечения различных поражений кожи или слизистых оболочек, таких как инфекции кожи или слизистых оболочек (например, инфекции слизистых оболочек носа, подмышечной ямки, паха, промежности, прямой кишки, поражённой дерматитом кожи, кожных язв и мест введения медицинского устройства, например игл для i.v. (внутривенных) инъекций, катетеров и трахеостомических трубок и зондов), любыми из описанных выше бактерий (например, любыми из Staphylococci, Streptococci, например, S. aureus (например, метициллин-резистентными S. aureus (MRSA)). Конкретные бактериальные заболевания, которые можно лечить с помощью фармацевтических композиций для топического применения по настоящему изобретению, включают также заболевания кожи и слизистых оболочек, описанные выше в данной заявке, а также розацеа, розовые угри (включая эритематозно-телеангиэктатическую розацеа, папуло-пустулёзную розацеа, фиматозную розацеа и глазную розацеа; рожу; эритразму; эктиму; гангренозную эктиму; импетиго; паронихию; целлюлит; фолликулит (включая псевдомонадный фолликулит); фурункулёз; карбункулёз; стафилококковый синдром обожжённой кожи; хирургическую лихорадку; перианальное заболевание стрептококковой природы; стрептококковый синдром токсического шока; кера
- 11 032899 толиз мелкоточечный; подмышечный трихомикоз; пиодермию; инфекции наружного слухового прохода; синдром зелёных ногтей (онихию псевдомонадную); спирохетоз; некротический фасциит; кожные микобактериальные инфекции (такие как волчанка обыкновенная, туберкулёз кожи, бородавчатый туберкулёз кожи, туберкулид, узловатую эритему, индуративную эритему, кожные проявления туберкулоидной лепры и лепроматозной лепры, узловатую лепрозную эритему, кожные инфекции М. kansasii, M. malmoense, M. szulgai, M. simiae, M. gordonae, M. haemophilum, M. avium, M. intracellular, M. chelonae (включая М. abscessus) или М. fortuitum, гранулёму пловцов (или аквариумную гранулёму), лимфаденит и язву Бурули (язву Бернсдейла (Bairnsdale), язву Сирлса (Searles'), язву Какерифу (Kakerifu) или язву Торо (Toro)); а также инфицированные экзему, ожоги, ссадины и раны на коже. Конкретные грибковые заболевания, которые можно лечить с помощью фармацевтических композиций для топического применения по настоящему изобретению, включают также заболевания, связанные с кожей и слизистыми оболочками, описанные выше, а также: кандидоз; споротрихоз; дерматомикоз (например, дерматомикоз стоп, паховый дерматомикоз, дерматомикоз волосистой части головы и бороды, дерматофитный омихомикоз или дерматомикоз гладкой кожи туловища); разноцветный лишай; и инфекции, вызванные грибами родов Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton или Pityrosporum ovale.
Согласно некоторым вариантам изобретения фармацевтические композиции для топического применения по настоящему изобретению не применяются для лечения грибковой инфекции, например композиция не применяется для лечения таких заболеваний, как кандидоз; споротрихоз; дерматомикоз (например, дерматомикоз стоп, паховый дерматомикоз, дерматомикоз волосистой части головы и бороды, дерматофитный омихомикоз или дерматомикоз гладкой кожи туловища); разноцветный лишай; и инфекций, вызванных грибами родов Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton или Pityrosporum ovale.
Схема применения зависит от целого ряда факторов, которые можно легко определить, таких как тяжесть патологического состояния и его восприимчивость к стартовой терапии, но обычно включает одно или более нанесений в день регулярно. Эффективная доза фармацевтической композиции по настоящему изобретению варьируется в зависимости от лекарственной формы, способа введения, возраста, веса (массы) тела и пола животного или человека, страдающего заболеванием, вызванным Staphylococcus aureus, тяжести заболевания, диеты, частоты и пути введения, от выведения и восприимчивости.
Обычно количество галогенированного салициланилида или его производного для топического введения находится в диапазоне 0,01-10000 мг/см2, предпочтительно в диапазоне 0,1-1000 мг/см2, и ещё более предпочтительно в диапазоне 1-100 мг/см2 при использовании фармацевтической композиции, содержащей 1-20%, предпочтительно 2-10%, более предпочтительно 3-8% и ещё более предпочтительно 46% активного ингредиента (везде указаны весовые проценты).
В микробиологии минимальная ингибирующая (подавляющая) концентрация (MIC) означает самую низкую концентрацию антибактериального средства, которая ингибирует видимый рост микроорганизмов после инкубации в течение ночи. Минимальная ингибирующая концентрация играет в важную роль в диагностических лабораториях для подтверждения устойчивости микроорганизмов к антимикробному агенту, а также для контроля активности новых антимикробных агентов. MIC обычно считается самой основной лабораторной оценкой активности антимикробного агента по отношению к организму.
В токсикологии медианная летальная доза, LD50 (сокращение для летальной дозы, 50%) токсина, радиации или патогенного микроорганизма или фактора означает дозу, необходимую для того, чтобы убить половину особей тестируемой популяции через определённое время. Показатели LD50 часто используют в качестве общего показателя острой токсичности вещества.
Терапевтический индекс определяется как отношение количества терапевтического средства, вызывающего терапевтический эффект, количественно определяемый как MIC, к количеству этого терапевтического средства, которое вызывает гибель в исследованиях на животных, измеряемому как LD50. Некоторые антибиотики, которые следует контролировать, чтобы обеспечить оптимальное соотношение эффективности с минимизацией нежелательных побочных явлений, включают: гентамицин, ванкомицин, амфотерицин В (прозванный по этой самой причине ampho-terrible, ужасный амфо) и полимиксин В. Можно также использовать другие значения MIC.
Частоту появления (развития) устойчивости количественно определяют как частоту спонтанных мутантов в популяции бактерий, которые способны противостоять антибиотику в данной концентрации. Например, скорость развития устойчивости может составлять 10-9, если в среднем 1 клетка из 109 клеток способна выжить при концентрации антибиотика, соответствующей 1 х MIC.
В микробиологии колониеобразующая единица (CFU, КОЕ) означает по приблизительному подсчёту число жизнеспособных клеток бактерий или грибов в образце. Жизнеспособность определяют как способность размножаться простым делением в контролируемых условиях.
Также раскрываются следующие перечисленные пункты формулы изобретения
1) Галогенированные салициланилиды, выбранные из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их производных, включая соли, гидраты и сложные эфиры, для применения с целью местного предупреждения или лечения инфекции или заболевания, вызванных грамположительными бактериями, характеризующиеся скоростью развития частоты спонтанных мутаций менее 10-6
- 12 032899
2. Галогенированные салициланилиды по п.1, характеризующиеся скоростью развития частоты спонтанных мутаций менее 10-7 или 10-8.
3. Галогенированные салициланилиды по п.2, характеризующиеся скоростью развития частоты спонтанных мутаций менее 4 х 10-9.
4. Галогенированные салициланилиды по любому из пп.1-3, выбранные из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида и их солей, для применения с целью местного предупреждения или лечения инфекции или заболевания, вызванных грамположительными бактериями, характеризующиеся скоростью развития частоты спонтанных мутаций менее 10-6, или менее 10-7, или 10-8, или менее 4 х 10-9.
5. Галогенированные салициланилиды по любому из пп.1-4, выбранные из группы, состоящей из клозантела, рафоксанида, оксиклозанида и никлозамида, для применения с целью местного предупреждения или лечения инфекции или заболевания, вызванных грамположительными бактериями, характеризующиеся скоростью развития частоты спонтанных мутаций менее 10-6, или менее 10-7, или 10-8, или менее 4 х 10-9.
6. Галогенированные салициланилиды по любому из пп.1-5, которые представляют собой никлозамид и его производные, включая соли, гидраты и сложные эфиры, для применения с целью местного предупреждения или лечения инфекции или заболевания, вызванных грамположительными бактериями, характеризующиеся скоростью развития частоты спонтанных мутаций менее 10-6, или менее 10-7, или 10-8, или менее 4 х 10-9.
7. Галогенированные салициланилиды по любому из пп.1-6, которые представляют собой никлозамид и его гидраты и соли или гидраты таких солей, для применения с целью местного предупреждения или лечения инфекции или заболевания, вызванных грамположительными бактериями, характеризующиеся скоростью развития частоты спонтанных мутаций менее 10-8 или менее 4 х 10-9.
8. Галогенированные салициланилиды по любому из пп.1-7, причём инфекция или заболевание выбраны из группы, состоящей из импетиго, бактериального конъюнктивита, атопического дерматита и родственных инфекций, интраназального носительства инфекции (эрадикация), сикоза обыкновенного, поверхностного фолликулита, паронихии, эритразмы, вторичных инфекционных дерматозов, карбункулов, фурункулёза, эктимы, целлюлита, рожи, некротического фасциита, вторичных раневых инфекций кожных покровов, дерматита, чесотки и диабетических язв.
9. Галогенированные салициланилиды по п.8, причём инфекция или заболевание выбраны из группы, состоящей из импетиго, бактериального конъюнктивита, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с различными кожными заболеваниями.
10. Галогенированные салициланилиды по любому из пп.1-9, причём бактерии представляют собой Staphylococcus aureus или Streptococcus pyogenes.
11. Способ получения лекарственного средства для применения с целью местного предупреждения или лечения инфекции, вызванной бактериями, причём лекарственное средство представляет собой никлозамид и его производные, включая соли, гидраты и сложные эфиры, и характеризуется скоростью развития частоты спонтанных мутаций менее 10-6 или менее 10-7 или 10-8 или менее 4 х 10-9.
12. Способ получения лекарственного средства по п.11 для применения с целью местного предупреждения или лечения инфекции, вызванной бактериями, в котором лекарственное средство представляет собой никлозамид и его гидраты и соли или гидраты таких солей, для применения с целью местного предупреждения или лечения инфекции или заболевания, вызванных грамположительными бактериями, и характеризуется скоростью развития частоты спонтанных мутаций менее 10-8 или менее 4 х 10-9.
13. Фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного ингредиента никлозамид и его производные, включая соли, гидраты, сложные эфиры и гидраты таких солей, которая уменьшает или устраняет развитие устойчивости у бактерий Staphylococcus aureus или Streptococcus pyogenes по отношению к никлозамиду за счёт скорости развития частоты спонтанных мутаций менее 10-8 или менее 4 х 10-9.
Целью нижеприведённых примеров является проиллюстрировать, но не ограничить изобретение любым образом или в любой форме, либо прямо, либо косвенно.
Примеры
Пример 1.
Экспериментальные исследования проводили с целью определить антибактериальную активность и частоту мутации, сообщающей устойчивость к галогенированным салициланилидам и контрольным препаратам.
Микроорганизмы
В качестве первичного микроорганизма в испытании использовали метициллин-резистентный штамм S. aureus (MRSA) 01 ввиду его релевантности в отношении бактериальных инфекций кожных покровов. Этот штамм является клиническим изолятом внебольничного штамма MRSA USA типа 300 из кожного абсцесса.
Другие двадцать один MRSA и метициллин-чувствительные штаммы S. aureus и 4 штамма Strepto
- 13 032899 coccus pyogenes также были включены в исследование (табл. 1). Они включали штаммы, устойчивые к фузидиевой кислоте, и метициллин-резистентные штаммы, причём эти два типа резистентности являются клинически значимыми.
Штаммы хранили в бульоне Лурия-Бертани (LB) (S. aureus) или в бульоне с сердечно-мозговым экстрактом (BHI) (S. pyogenes) с добавкой глицерина 15% (об.) при -80°С, и восстанавливали, высевая на LB (S. aureus) или BHI (S. pyogenes) чашки с агаром. Штаммы культивировали в бульоне МюллераХинтона (МН) со стандартизованным содержанием катионов (S. aureus) с добавкой лизированной лошадиной крови 2.5% (об.) (S. pyogenes). Все штаммы культивировали при 37°С, в аэробных условиях для штаммов S. aureus.
Таблица 1. Список штаммов и сведения о штаммах
Ген устойчи-
Вид Штаммы вости к мупироцину и USA тип MLSTSCC Тип Источник
фузидиевой mec spa
кислоте
& aureus Newman
MRSA 01 USA 300 ST8- IV Ю08 SSI
MRSA 02 ST30-IV t019 SSI
MRSA 03* ND USA 400 STI-IV tl27 SSI
MRSA 04 ST772-V t657 SSI
MRSA 05 ST130-XI t843 SSI
MRSA 06 CC97 - 5C2 (V) SSI
MRSA 07 ST398 KU
MRSA 08 * ND USA 300 ST8 KU
MRSA 09 USA600 ST45 KU
MRSA 10 ST22- IV KU
MRSA 11 ST36 - II KU
EEFIC 01 * CC123 tl71 SSI
EEFIC 02 * CC123 tl71 SSI
MRSA 12 * fusB CC80 Ю44 SSI
MRSA 13 * fusB CC80 Ю44 SSI
MSSA01 * fusC CC1 tl27 SSI
MSSA 02 * fusC CC1 tl27 SSI
MRSA 14 * fusA CC22 t2006 SSI
MRSA 15 * fusA CC30 tl66 SSI
MRSA 16* mupA CC30 t019 SSI
MRSA 17* mupB CC509 t375 SSI
S. 01 SSI
pyogenes CCUG 25571 ATCC 19615
ATCC 12385
Все штаммы Staphylococcus aureus, кроме одного (MRSA 07), представляют собой человеческие клинические изоляты; MRSA 07 представляет собой штамм MRSA сельскохозяйственных животных; MRSA 02 и MRS 04 являются внебольничными (бытовыми) штаммами MRSA; *: штаммы, устойчивые к фузидиевой кислоте; Ψ штаммы, устойчивые к мупироцину; ND: Не определяли; EEFIC: Устойчивый к фузидиевой кислоте эпидемический европейский клон больных импетиго; MLST: мультилокусное сиквенсное титрование; SSCmec: стафилококковая хромосомная кассета тес; spa: S. aureus белок А; KU: Копенгагенский университет (Copenhagen University); SSI: Национальная Референс Лаборатория по изучению стафилококка, Государственный институт сывороток, Копенгаген, Дания (Statens Serum Institut, Copenhagen, Denmark).
Антибактериальная активность
Нижеприведённые испытания проводили для оценки антибактериальной активности in vitro (фиг. 1):
1. Определение минимальной ингибирующей концентрации (MIC, МИК)
MIC определяли, используя 96-луночные планшеты и серийные двукратные разведения никлозамида (от компании Sigma) (от 51.2 до 0.025 мкг/мл) в вышеуказанной среде, по 150 мкл на лунку. Рост бактерий в культуре прекращали в экспоненциальной фазе и клетки инокулировали в планшеты при плотности примерно 103 клеток на лунку. Планшеты инкубировали при 37°С в течение 18 ч (S. aureus) или 24 ч (S. pyogenes). По окончании инкубации определяли оптическую плотность при длине волны 600 нм. Ингибирование рассчитывали по уравнению (Ингибирование=1 - OD тест/(.)1) контроль), a значения MIC определяли как минимальную концентрацию, дающую степень ингибирования 100%. Биологические экспе
- 14 032899 рименты проводили по меньшей мере в трёхкратной повторности для всех штаммов.
Ингибирование обусловлено либо бактерицидной, либо бактериостатической активностью, из данного эксперимента неясно, какой именно активностью. Поэтому проводили следующий анализ, чтобы определить, вызывает ли никлозамид гибель бактерий S. aureus или ингибирует их рост.
2. Анализ зависимости киллинга бактерий от времени
Анализ проводили в 20 мл среды. Он включал отрицательный контроль (среду без бактерий), положительный контроль (бактерии, выращенные без никлозамида) и аналитический образец (бактерии, выращенные в присутствии никлозамида). Никлозамид проверяли в концентрации, в 10 превышающей его MIC, определённую как описано в предыдущем эксперименте. Этот эксперимент проводили с указанными выше первичными тестируемыми микроорганизмами.
Останавливали рост ночной культуры и определяли OD600. Затем культуру разводили в указанной среде до достижения значения OD600 0.25, чтобы содержание бактерий составляло 5х108 КОЕ/мл. Затем двести мкл этой разведённой культуры добавляли во все образцы за исключением отрицательного контроля. Начальная концентрация бактерий составляла примерно 5х106 КОЕ/мл. Пробирки инкубировали в аэробных условиях при 37°С в течение 24 ч.
Бактерии подсчитывали перед инкубацией, через 30 мин, через 1, 2, 4, 8 и 24 ч после начала инкубации, делая серийные разведения в 0.9% NaCl и нанося на LB агар, по 2 чашки на разведение. Чашки инкубировали при 37°С и через 24 ч подсчитывали колонии.
Считали, что соединение обладает бактерицидными свойствами, если уменьшение величины бактериального инокулума было выше или равно 3 log10 КОЕ/мл, а бактериостатическими свойствами, если уменьшение было ниже 3 log10 КОЕ/мл.
3. Определение частоты мутаций
Частоту спонтанных пошаговых мутаций определяли на 3 различных штаммах (MRSA, устойчивых к фузидиевой кислоте и устойчивых к мупироцину), как описано в публикации Drago et al. (2005) (Drago, L., De Vecchi, E., Nicola, L., Tocalli, L., & Gismondo, M. R. (2005). In vitro selection of resistance in Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter spp. by levofloxacin and ciprofloxacin alone and in combination with betalactams and amikacin. The Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 56(2), 353-359). Сто мкл начального инокулума с концентрацией 109 КОЕ/мл из ночной культуры наносили на чашки с LB агаром, добавляя тестируемое соединение (0х, 1х, 2х, 4х и 10х MIC). Адекватные разведения наносили на чашки без добавления соединения.
Рост жизнеспособных клеток определяли подсчётом после 48 ч инкубации при 37°С.
Для каждого штамма проводили десять параллельных анализов (повторностей) и для штамма MRSA 01 в контрольных образцах использовали фузидиевую кислоту, мупироцин и ретапамулин.
Определение числа колониеобразующих единиц (КОБ) в повреждениях кожи
Проводили три исследования на животных для сравнения никлозамида и фузидиевой кислоты в разных композициях и дозах.
В каждом эксперименте самкам мышей Balb/c на кожу наносили повреждение на площади примерно 1 см2 и делали контрольное заражение посредством топического введения 1.5х108 КОЕ MRSA 01. Через 24 ч после образования раны и инфицирования мышей начали лечить посредством топического введения 0.05 мл дважды в день в течение трёх дней. Мышей умерщвляли на 4 день, повреждённые кожные' покровы иссекали и определяли число КОЕ. В качестве контроля использовали мазь фуцидин (2% от компании Leo Pharma).
Опыт 1.
Образец 5.
Никлозамид (N) 5% крем на модифицированной основе с повышенным содержанием липидов
Липокрем - согласно описанию в Danske Laegemiddelsstandarder (DLS) (Датские лекарственные стандарты).
2.25 г никлозамида смешивали с 47.75 г крема, приготовленного согласно Danske Laegemiddelsstandarder (DLS) (см. фиг. 3).
Масляная фаза: Полисорбат 80 10 г
Цетилстеариловый спирт ЮО g
Жидкий парафин ЮО g
Глицерина моностеарат 40-50 120 г
Водная фаза: Метил парабензоат 1 г
Глицерин 85% 40 г
Сорбит 70 г
Вода типа качества Milli-Q 724 г
- 15 032899
Результаты и выводы
Результаты микробиологических испытаний: кривые MIC и киллинга - фиг. 1 и 2 и табл. 2 и 3
Таблица 2: in-vitro чувствительность клинических изолятов S. aureus и эталонного (референс) штамма & aureus ATCC 29213.
MIC (мкг/мл)
Штаммы Λ. aureus Newman0.2
MRSA010,4
MRSA 020,2
MRS A 03*0,4
MRSA 040,4
MRSA 050,2
MRSA 060,4
MRSA 070,2
MRSA 08*0,4
MRSA 090,2
MRSA 100,4
MRSA 110,1
EEFIC 01*0,4
EEFIC 02*0,2
MRSA 12*0,4
MRSA 13*0,4
MSSA01*0,4
MSSA 02*0,4
MRSA 14*0,4
MRSA 15*0,2
MRSA 16*0,2
MRSA 17*0,2
Штаммы 5'. pyogenes 013.2
CCUG 255713,2
ATCC 196153,2
ATCC 123851,6
Таблица 3. Терапевтические индексы галогенированных салициланилидов, рассчитанные с использованием их MIC (МИК) по отношению к штаммам S. aureus и S. pyogenes и их летальной дозы 50 (LD50), на крысах и мышах.
Соединение МИК юо LDso крысы, п.о. LDso МЫШИ п.о. Терапевт, индекс
S. aureus & pyogenes (ЬП5о,крысы/М1Сюо, S. aureus)
мкг/мл мкМ мкг/мл мкМ (мг/кг) (мг/кг)
Никлозамид <0.4 < 1.25 <3 <3 5000 >1500 12,500,000
Клозантел <1.7 <2.5 12.8* 19* 300 331 176,000
Оксиклозанид 1.6* 4* 6.4* 15.9* 980 - 3500 300 612,000 - 2187,000
Рафоксанид 0.8* 1.25* 6.4* 10* 1500 270 1,875,000
* Тестировали против одного штамма: MRSA 01 ψ Тестировали против одного штамма: S. pyogenes 01
Результаты показывают, что галогенированные салициланилиды, такие как клозантел, оксиклозанид, рафоксанид и в особенности никлозамид, являются очень высокоактивными по отношению к грамположительным штаммам, таким как S. aureus и S. pyogenes. Примечательно, что эффект не зависит от профиля резистентности изолятов по отношению к другим современным антибиотикам против этих микроорганизмов в виде топического средства, включая фузидиевую кислоту и мупироцин. Следовательно, галогенированные салициланилиды в целом и никлозамид в частности особенно пригодны в качестве возможного лекарственного средства как против чувствительных, так и против устойчивых штаммов грамположительных бактерий.
Развитие (лекарственной) устойчивости микроорганизмов - таблица 4
Спонтанные мутации, придающие устойчивость к галогенированным салициланилидам, происхо
- 16 032899 дили с очень низкой частотой (частота мутаций = 5х10-9, 2х10-8 и 1 х 10-7 при MIC х 1 для рафоксанида, клозантела и оксиклозанида, соответственно), а для никлозамида с чрезвычайно низкой частотой (0 < частота мутаций < 4х10-10 при MIC х 1), по сравнению с применяемыми в настоящее время антибиотиками, например, такими как фузидиевая кислота, ретапамулин и мупироцин (частота мутаций: > 4 х 10-5 при MIC х 1) (см. табл. 4).
Таблица 4. Частота мутаций, придающих устойчивость к галогенированным салициланилидам
Соединение Частота мутаций устойчивости при MIC х 1
Никлозамид <4 х 10’91
Клозантел = 2 х ΙΟ’8*
Оксиклозанид = 1 х10‘7*
Рафоксанид = 5 х ΙΟ’9*
Фузидиевая >4 х ПУ5*
кислота
Мупироцин >4 х ПУ5*
Ретапамулин >4 х ПУ5*
1. Частота мутаций, придающих устойчивость по отношению к MRSA 01, MRSA 15 (устойчивому к фузидиевой кислоте) и MRSA 16 (устойчивому к мупироцину) * Тестировали против одного штамма: MRSA 01
А. Данные о частоте мутаций показывают частоту устойчивых мутантов данной популяции. Частота мутаций ниже 10-9 означает, что на популяцию из 109 клеток приходится менее одного устойчивого мутанта.
Неожиданно оказалось, что развитие устойчивости к галогенированным салициланилидам в целом и никлозамиду в частности происходит значительно медленнее, чем развитие устойчивости к таким лекарственным средствам, как имеющиеся в продаже фузидиевая кислота, мупироцин и ретапамулин.
Сочетание высокой активности с обеспечением низкой скорости развития устойчивости делает никлозамид особенно пригодным для лечения, в особенности топического лечения, инфекций, вызванных грамположительными организмами.
На основании неожиданных результатов микробиологического исследования, а именно, что никлозамид обладает весьма уникальными свойствами, которые делают его идеальным вариантом в качестве топического противоинфекционного средства, были проведены эксперименты на животных для изучения действия никлозамида in vivo.
Результаты, приведённые в настоящей заявке, показывают, что никлозамид снижает колонизацию бактериями S. aureus на животной модели, используемой для испытаний.
В Опыте 1 (фиг. 3) применение никлозамида в испытуемых препаратах в виде мази и крема привело к значительному снижению бактериальной нагрузки по сравнению с контрольными носителями.
В заключение можно сказать, что результаты испытаний in vivo показывают, что никлозамид особенно пригоден в качестве антибиотика для топического лечения инфекций, вызванных грамположительными бактериями.
Пример 2.
Дополнительный расширенный скрининг клинических изолятов, проведённый с помощью никлозамида.
Методы Микроорганизмы
В качестве первичного микроорганизма в испытании использовали метициллин-резистентный штамм S. aureus (MRSA) 01 ввиду его релевантности по отношению к бактериальным инфекциям кожных покровов. Этот штамм является клиническим изолятом внебольничного штамма MRSA USA типа 300 из кожного абсцесса.
Другие двести двадцать четыре MRSA и метициллин-чувствительные штамма S. aureus strains и 4 штамма Streptococcus pyogenes также были включены в исследование (табл. 1). Они включали штаммы, устойчивые к фузидиевой кислоте и метициллин-резистентные штаммы, причём эти два типа резистентности являются клинически значимыми.
Штаммы хранили в бульоне Лурия-Бертани (LB) (S. aureus) или в бульоне с сердечно-мозговым экстрактом (BHI) (S. pyogenes) с добавкой глицерина 15% (об.) при -80°С, и восстанавливали, высевая на LB (S. aureus) или BHI (S. pyogenes) чашки с агаром. Штаммы культивировали в бульоне МюллераХинтона со стандартизованным содержанием катионов (S. aureus) или BHI (S. pyogenes). Все штаммы культивировали при 37°С, в аэробных условиях (в микроаэробных (микроаэрофильных) условиях для штаммов S. aureus).
Антибактериальная активность
1. Определение минимальной ингибирующей концентрации (MIC)
- 17 032899
Минимальные ингибирующие концентрации (MIC, МИК) никлозамида, фузидиевой кислоты и мупироцина определяли согласно критериям CLSI в двукратных разведениях в интервале концентраций (с 16 до 0.008 мкг/мл) в бульоне Мюллера-Хинтона со стандартизованным содержанием катионов (Fluka Analytical 90922), используя 96-луночные планшеты, для 205 различных штаммов S. aureus. Штамм S. aureus ATCC 29213 был включён в качестве контрольного референс-штамма, а клиндамицин и ванкомицин были включены в качестве контрольных антибиотиков.
Рост бактерий в культуре прекращали в экспоненциальной фазе и клетки инокулировали в планшеты при плотности примерно 5х105 клеток на лунку. Планшеты инкубировали при 37°С в течение 18 ч (S. aureus) или 24 ч (S. pyogenes). По окончании инкубации определяли оптическую плотность при длине волны 600 нм. Ингибирование рассчитывали по уравнению (Ингибирование=1 - OD тест/О1) контроль), a значения MIC определяли как минимальную концентрацию, дающую степень ингибирования 100%.
Вследствие взаимодействия с кровью (MIC повышается до 16 при добавлении 5% лизированной лошадиной крови) определение значения MIC по отношению к штаммам S. pyogenes проводили в BHI.
Результаты и обсуждение In vitro определение MIC и широта терапевтического действия
Значение MIC никлозамида было < 0.5 мкг/мл в отношении всех целевых штаммов S. aureus и S. pyogenes, включая штаммы, устойчивые к фузидиевой кислоте, мупироцину, клиндамицину и ретапамулину (табл. 5, 6, 7 и фиг. 4). Кривые доза-эффект для никлозамида, фузидиевой кислоты и мупироцина по отношению к S. aureus с различными профилями резистентности представлены на фиг. X.
Таблица 5. In-vitro чувствительность клинических изолятов S. aureus и контрольного штамма S. aureus ATCC 29213.
Резистентность показана жирным шрифтом. ND: не определено.
MIC (мкг/мл)
Никлозамид Фузидиевая кислота Мупироцин Ретапамулин Клиндамицин Ванкомицин
АТСС 29213 0.5 0.06 0.125 0.03 0.125 1
Newman 0.25 0.25 0.25 0.03 0.125 2
MRSA 01 0.25 0.125 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 02 0.25 0.5 0.25 0.06 0.25 2
MRS А 03 0.25 16 0.25 0.03 0.125 1
MRSA 04 0.25 ' 0.25 0.25 0.06 0.125 2
MRSA 05 0.25 0.125 0.125 0.03 0.125 1
MRSA 06 0.25 0.125 0.25 0.03 0.125 2
MRSA 07 0.125 ' 0.25 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 08 0.25 0.125 > 16 0.03 > 16 1
MRSA 09 0.125 0.25 0.25 0.06 0.25 2
MRSA 10 0.25 1 0.25 0.06 0.25 1
MRSA 11 0.25 1 0.5 0.06 > 16 1
EEFIC 01 0.25 4 0.125 0.03 0.125 1
EEFIC 02 0.25 ' 4 0.125 0.03 0.125 1
MRSA 12 0.5 4 0.125 0.03 ND ND
MRSA 13 0.25 ' 4 0.25 0.06 0.125 1
MSSAOI 0.5 4 0.125 0.03 0.125 1
MSSA02 ’ 0.25 ' 4 0.125 0.03 0.125 1
MRSA 14 0.25 > 16 0.125 0.03 > 16 1
MRSA 15 0.25 > 16 0.25 0.06 0.125 2
MRSA 16 0.25 0.25 > 16 0.06 0.25 1
MRSA 17 0.25 ' 4 > 16 0.03 > 16 2
MRSA 18 0.25 ' 0.25 0.125 0.06 0.125 1
MRSA 19 0.25 0.125 0.25 0.03 0.125 1
MRSA 20 0.25 0.125 0.25 0.06 0.06 1
MRSA21 0.25 0.125 0.125 0.125 0.03 1
MRSA 22 0.25 > 16 0.25 0.06 0.06 0.5
MRSA23 0.25 ' 0.25 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 24 0.25 ' 0.25 0.25 0.06 0.125 2
MRSA 25 0.25 16 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 26 0.5 0.5 0.5 0.06 > 16 1
- 18 032899
MRSA 27 0.5 0.25 0.25 0.06 0.125 1
MRSA28 0.25 0.06 0.5 0.03 0.06 1
MRSA 29 0.5 4 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 30 0.25 0.125 0.125 0.03 0.06 1
MRSA 31 0.25 0.25 0.25 16 > 16 1
MRSA 32 0.25 0.5 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 33 0.25 0.5 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 34 0.25 ' 0.25 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 35 0.25 16 0.5 0.03 > 16 1
MRSA 36 0.25 8 0.25 0.06 0.06 1
MRSA 37 0.25 0.5 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 38 0.25 8 0.125 0.06 0.125 1
MRSA 39 0.25 8 0.25 0.06 0.06 1
MRSA 40 0.25 0.125 0.25 0.03 0.06 1
MRSA 41 0.25 > 16 0.125 0.02 0.06 1
MRSA 42 0.25 0.25 0.25 0.06 > 16 1
MRSA 43 0.25 0.125 0.25 0.06 0.06 1
MRSA 44 0.25 4 0.25 0.02 0.03 1
MRSA 45 0.25 0.06 0.13 0.02 0.06 1
MRSA 46 0.25 0.06 0.13 0.02 0.03 1
MRSA 47 0.25 0.06 0.25 0.02 > 16 0.5
MRSA 48 0.25 2 0.13 0.02 0.03 0.5
MRSA 49 0.25 0.25 0.25 0.02 0.03 2
MRSA 50 0.25 0.03 0.25 0.02 0.02 1
MRSA 51 0.125 0.13 0.25 0.03 0.06 1
MRSA 52 0.25 0.06 0.25 0.02 0.03 1
MRSA 53 0.25 0.25 0.25 0.03 0.06 1
MRSA 54 0.25 0.125 0.25 0.03 0.06 2
- 19 032899
MRSA 55 0.25 4 0.25 0.02 0.03 0.5
MRSA 56 0.25 0.06 0.25 <0.01 0.03 1
MRSA 57 0.25 0.125 0.125 0.02 0.03 1
MRSA 58 0.25 4 0.125 0.02 0.06 1
MRSA 59 0.25 0.06 0.125 0.02 0.03 1
MRSA 60 0.25 8 0.25 0.02 0.06 0.5
MRSA 61 0.25 0.06 0.25 0.02 0.03 2
MRSA 62 0.25 0.06 0.25 0.02 0.06 2
MRSA 63 0.25 0.125 0.125 0.02 0.06 1
MRSA 64 0.25 0.25 0.25 0.02 0.06 1
MRSA 65 0.25 0.06 0.25 0.02 0.03 1
MRSA 66 0.25 0.06 0.25 0.02 0.03 1
MRSA 67 0.25 0.25 0.125 0.02 0.03 1
MRSA 68 0.25 0.125 0.25 0.02 0.03 1
MRSA 69 0.25 4 0.125 <0.01 0.03 1
MRSA 70 0.125 8 0.25 0.02 0.06 1
MRSA 71 0.25 0.06 0.125 <0.01 0.02 1
MRSA 72 0.25 16 0.25 0.03 0.06 1
MRSA 73 0.5 ' 0.25 0.25 0.03 0.125 1
MRSA 74 0.25 0.25 0.25 0.03 0.125 2
MRSA 75 0.5 0.5 0.5 0.03 0.125 1
MRSA 76 0.25 0.25 0.25 0.03 0.125 1
MRSA 77 0.25 16 0.25 0.03 0.125 2
MRSA 78 0.5 0.125 0.25 0.03 0.06 1
MRSA 79 0.25 0.5 0.25 <0.01 0.03 1
MRSA 80 0.5 0.125 0.25 0.02 0.06 1
MRSA 81 0.5 ' 0.25 0.25 0.03 0.125 1
MRSA 82 0.25 8 0.25 0.03 0.125 2
- 20 032899
MRSA 83 0.5 0.06 0.25 0.03 0.06 1
MRSA 27b 0.25 8 0.25 0.02 0.06 1
MRSA 84 0.25 8 0.25 0.03 0.125 2
MRSA 85 0.5 4 0.25 0.03 0.125 1
MRSA 86 0.25 > 16 0.25 0.03 0.06 2
MRSA 87 0.25 0.125 0.25 0.02 0.06 1
MRSA 88 0.25 0.06 0.25 0.03 0.06 1
MRSA 89 0.5 0.06 0.25 0.02 > 16 1
MRSA 90 0.5 16 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 91 0.25 0.25 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 92 0.25 8 0.25 0.06 0.06 1
MRSA 93 0.25 0.02 0.25 0.02 0.03 2
MRSA 94 0.25 0.125 0.25 0.03 0.125 2
MRSA 95 0.25 8 0.25 0.03 0.125 2
MRSA 96 0.25 0.125 0.125 0.03 > 16 1
MRSA 97 0.25 8 0.25 0.03 0.06 1
MRSA 98 0.5 0.06 0.5 0.03 > 16 1
MRSA 99 0.25 0.125 0.5 0.03 0.125 1
MRSA 100 0.25 0.125 0.5 1 0.25 1
MRSA 101 0.5 8 0.25 0.03 0.06 1
MRSA 102 0.25 0.06 0.25 0.03 0.06 2
MRSA 103 0.25 8 0.25 0.03 0.125 1
MRSA 104 0.5 0.25 0.25 0.03 0.125 1
MRSA 105 0.25 0.125 0.25 0.03 0.125 1
MRSA 106 0.25 0.125 0.25 0.06 0.125 1
MRSA 107 0.25 0.25 0.25 0.06 0.125 2
MRSA 108 0.25 4 0.25 0.03 0.125 1
MRSA 109 0.25 0.25 0.25 0.03 0.125 1
- 21 032899
MRSA ПО 0.25 0.06 0.125 0.03 0.125 1
MRSA 111 0.5 8 0.25 0.03 0.125 1
MRSA 112 0.25 0.06 0.25 0.03 0.06 1
MRSA 113 0.25 0.125 0.25 0.03 0.06 1
K000796 0.25 8 0.5 0.03 0.125 1
K115688 0.25 0.125 0.25 0.03 0.125 2
K000866 0.25 8 0.5 0.03 0.125 1
K000864 0.25 ' 0.25 0.25 0.03 0.125 1
K000863 0.25 1 0.5 0.03 0.125 1
K115689 0.25 0.125 0.25 0.03 0.125 2
K000772 0.25 > 16 0.125 0.06 0.125 1
KI 15498 0.25 0.125 0.5 0.03 0.125 2
R000024 0.25 16 0.5 0.06 0.125 1
R000020 0.5 0.125 0.5 0.03 0.125 1
R000019 0.5 0.125 0.5 0.06 0.125 2
U115579 0.25 ' 0.25 0.5 0.06 0.125 1
1 15370U 0.25 0.5 0.125 0.06 0.125 1
114660U 0.25 ' 0.25 0.25 0.06 0.125 1
115584D 0.25 ' 0.25 0.5 0.06 0.125 2
115740E 0.5 ' 0.25 0.25 0.06 0.125 1
11581OE 0.25 ' 0.25 0.25 0.06 0.125 1
II5628T 0.25 8 0.25 0.03 0.06 2
000274T 0.25 0.5 0.5 0.06 0.125 1
115691T 0.5 0.25 0.25 0.03 0.125 1
115903T 0.5 8 0.5 0.03 0.125 1
116122T 0.25 0.125 0.5 0.03 0.125 1
115O15T 0.5 0.25 0.5 0.06 0.125 2
II5273C 0.5 0.25 0.25 0.03 0.125 1
- 22 032899
000040С 0.5 0.25 0.25 0.03 0.125 1
1 15690С 0.25 8 0.125 0.25 0.5 2
115561С 0.25 0.125 0.5 0.03 0.125 1
115445С 0.5 0.25 0.25 0.03 0.125 1
115263С 0.25 0.125 0.25 0.03 0.06 2
115303С 0.5 0.25 0.25 0.03 > 16 1
115268С 0.5 0.25 0.5 0.03 0.125 1
115295С ' 0.25 0.125 0.25 0.03 0.125 1
115242С 0.5 8 0.25 0.03 0.06 1
115427С 0.25 0.125 0.25 0.03 0.06 1
000041С 0.25 0.25 0.25 0.03 0.06 1
Е5-1048654 0.25 0.5 0.25 0.06 0.125 1
9-2955245 0.25 0.25 0.25 0.06 0.125 1
Е5-1046019 ' 0.25 ' 0.25 0.25 0.03 0.125 1
Е5-1046020 0.5 0.25 0.25 0.06 0.125 1
Е5-1047585 ' 0.25 ' 0.25 0.25 0.03 0.125 1
Е5-1038294 0.5 ' 0.25 0.25 0.03 0.125 1
Е5-1035779 0.5 0.125 0.5 0.03 0.125 1
9-1862936 0.5 0.125 0.25 0.03 0.125 1
Е5-1033091 0.5 0.03 0.25 0.02 0.06 1
9-26422166 0.5 8 0.25 0.03 0.125 1
9-2642158 0.25 0.25 0.25 0.06 0.125 1
Е5-1035775 0.5 > 16 0.25 0.06 0.125 1
Е5-1029558 0.25 16 0.5 0.03 0.125 1
Е5-1038279 0.5 ' 4 0.25 0.03 0.125 1
Е5-1039697 0.25 0.5 0.25 0.06 0.125 1
Е5-1041979 0.5 ' 0.25 0.5 0.03 0.125 1
Е5-1035284 0.25 0.25 0.25 0.03 0.125 1
- 23 032899
Е5 1030469 0.25 0.125 0.25 0.03 0.125 2
Е5 1030472 0.5 0.25 0.5 0.06 0.125 1
Е5 1041977 0.5 16 0.5 0.03 0.125 2
Е5 1041987 0.5 16 0.25 0.03 0.125 1
Е5 1039684 0.5 16 0.25 0.06 0.125 1
Е5 1041980 0.25 0.25 0.25 0.03 0.125 1
Е5 1033088 0.25 ' 0.25 0.25 0.03 0.125 1
Е5 1035277 0.5 16 0.5 0.03 0.125 1
Е5 1046096 0.5 0.5 0.5 0.06 0.125 1
Е5 1046085 0.5 8 0.5 0.06 0.125 2
9-2625962 0.5 0.25 0.5 0.03 0.125 1
Е5 1043668 0.25 1 0.25 0.06 0.25 1
Е5 1048428 0.25 0.5 0.25 0.06 0.25 1
Е5 1047924 0.5 0.25 0.5 0.03 0.125 1
Е5 1047606 0.5 8 0.5 0.03 0.125 1
Е5 1046070 0.25 0.25 0.5 0.03 0.125 1
Е5 1046298 0.25 0.125 0.25 0.03 0.125 1
Е5 1046296 0.5 0.125 1 0.03 0.125 1
Е5 1046297 0.5 0.125 0.25 0.06 0.125 1
Е5 1043184 0.5 16 0.5 0.03 0.125 1
Е5 1038286 0.25 0.25 0.5 0.06 0.125 1
Е5 1037958 0.5 16 0.5 0.06 0.125 1
Е5 1037971 0.25 0.25 0.25 0.03 0.125 1
Е5 1033076 0.5 ' 0.25 0.25 0.03 0.125 1
Е5 1033076 0.5 ' 0.25 0.25 0.03 0.125 1
Е5 1029252 0.25 0.25 0.5 0.03 0.125 1
Е5 1030440 0.25 ' 0.25 0.25 0.06 0.06 1
Е5 1030482 0.125 16 0.25 0.02 0.06 1
Е5 1046074 0.25 0.125 0.25 0.06 0.125 1
Е5 1048204 0.25 ' 0.25 0.25 0.03 0.06 2
Е5 1048670 0.125 0.5 0.5 0.06 0.125 2
Е5 1046039 0.25 ' 0.25 0.25 0.06 0.125 1
Е5 1045179 0.25 0.25 0.25 0.06 0.125 1
Е5 1046723 0.25 0.5 0.25 0.06 0.125 2
Таблица 6. Распределение MIC никлозамида по отношению к штаммам Staphylococcus aureus и
Streptococcus pyogenes (проценты и соотношение)
MIC (мкг/мл) 0.0625 0.125 0.25 0.5
Штаммы Staphylococcus aureus (6/205 3% ) 70 (144/205 % ) 27 (55/205 % )
Штаммы Streptococcus pyogenes 25 % (1/4) 25 % (1/4) 25 % (1/4) 25 % (1/4)
Таблица 7. MIC90, MIC50 и интервалы MIC никлозамида для штаммов Staphylococcus aureus
MIC90 MIC50 Диапазон значений
0.5 мкг/мл 0.25 мкг/мл 0.125-0.5 мкг/мл
Никлозамид действовал как ингибитор при концентрации, равной или ниже 0.5 мкг/мл, в отношении всех целевых штаммов S. aureus и S. pyogenes, включая штаммы, устойчивые к фузидиевой кислоте и устойчивые к мупироцину.
Пример 3.
Следующее исследование проводили с целью определить частоту спонтанной мутации, придающей устойчивость к никлозамиду, в 3 метициллин-резистентных штаммах Staphylococcus aureus, включая штаммы, устойчивые к фузидиевой кислоте и к мупироцину. Эту частоту сравнивали с частотой спонтанной мутации, придающей устойчивость к фузидиевой кислоте, мупироцину и ретапамулину, в одном
- 24 032899
MRSA штамме.
Методы
Микроорганизмы
Клинические изоляты трёх метициллин-резистентных штаммов Staphylococcus aureus (MRSA) с различными профилями резистентности (MRSA 01, MRSA15 [штамм, устойчивый к фузидиевой кислоте] и MRSA 16 [штамм, устойчивый к мупироцину]) были выбраны ввиду их релевантности по отношению к бактериальным инфекциям кожных покровов. Штамм MRSA 01 был выбран в качестве первичного испытуемого микроорганизма. Этот штамм является клиническим изолятом внебольничного штамма MRSA USA типа 300 из кожного абсцесса.
Штаммы хранили в бульоне Лурия-Бертани (LB) с добавкой глицерина 15% (об.) при -80°С и восстанавливали, высевая на LB чашки с агаром. Штаммы культивировали в бульоне Мюллера-Хинтона (МН) со стандартизованным содержанием катионов при 37°С в аэробных условиях.
Определение частоты мутаций
Частоту спонтанных пошаговых мутаций определяли на 3 различных штаммах, как описано в публикациях Drago et al. (2005) и Pannu et al. (2011). Сто мкл начального инокулума с концентрацией 109 КОЕ/мл из ночной культуры наносили на чашки с LB агаром, добавляя тестируемое соединение (0х, 1х, 2х, 4х и 10х MIC). Адекватные разведения наносили на чашки без добавления соединения.
Рост жизнеспособных клеток определяли подсчётом после 48 ч инкубации при 37°С.
Частоту спонтанной устойчивости для каждой комбинации изолят-лекарственное средство рассчитывали, исходя из числа колоний, которые выросли на чашках, содержащих лекарственное средство, по сравнению с числом колоний, выросших на агаре без лекарственного средства.
Для каждого штамма проводили десять параллельных анализов (повторностей) и для штамма MRSA 01 в контрольных образцах использовали фузидиевую кислоту, мупироцин и ретапамулин.
Результаты и обсуждение
Частота спонтанных мутаций, сообщающих устойчивость к никлозамиду, была чрезвычайно низкой (ниже предела обнаружения) (0 < частота мутаций < 4.10-9 при MIC х 1) для всех тестированных штаммов (MRSA 01, MRSA 15 (устойчивый к фузидиевой кислоте) и MRSA 16 (устойчивый к мупироцину)) по сравнению с фузидиевой кислотой (частота мутаций: 3.10-7 при MIC х 10 и > 4.10-5 при MIC х 1) и с мупироцином и ретапамулином. Результаты для штамма MRSA 01 представлены в табл. 8.
Таблица 8. Частота спонтанных мутаций, сообщающих устойчивость к никлозамиду, фузидиевой кислоте и ретапамулину, для штамма MRSA 01. Среднее из 10 параллельных анализов (повторностей).
Никлозамид Фузидиевая кислота Мупироцин Ретапамулин
Концентрация MIC х 1 <4х10-9* >4.10-5 >4.10’5 >4.10’5
MIC х 2 <4х10’9* 2.10-5 8.10’8 3.10-7
MIC х 4 <4χ10-9* 1.10-6 1.10-8 2.10’8
MIC х 10 <4х10-9* 3.10-7 <4.10’9 <4.10’9*
*: Ниже предела обнаружения (нет колонии на чашках)
Как и в случае штамма MRSA 01, на чашках со штаммами MRSA 15 и MRSA 16 в присутствии никлозамида не выросло ни одной колонии. В результате частота мутаций составляет < 3х10-8 для MRSA 15 и < 1х10-7 для MRSA 16 при MIC х 1 (0.25 мкг/мл), эта разница пределов обнаружения обусловлена разницей концентрации бактерий в ночных культурах.
Выводы
Частота спонтанных мутаций, сообщающих бактериям Staphylococcus aureus устойчивость к никлозамиду, была значительно ниже, чем частота спонтанных мутаций, сообщающих бактериям Staphylococcus aureus устойчивость к фузидиевой кислоте, мупироцину и ретапамулину. Это подтверждает применимость никлозамида для лечения носителей с целью удаления колоний (деколонизации) S. aureus с кожных покровов.
Пример 4.
Проводили исследование по изучению влияния рН на антибактериальную активность никлозамида по отношению к Staphylococcus aureus с целью определить, является ли никлозамид по-прежнему активным по отношению к S. aureus при значениях рН, близких к рН кожных покровов.
Методы
Микроорганизмы
В исследовании использовали метициллин-резистентный штамм S. aureus (MRSA) 01 ввиду его релевантности в отношении бактериальных инфекций кожных покровов. Этот штамм является клиническим изолятом внебольничного штамма MRSA USA типа 300 из кожного абсцесса.
Этот штамм хранили в бульоне Лурия-Бертани (LB) с добавкой глицерина 15% (об.) при -80°С и восстанавливали, высевая на LB чашки с агаром. Его культивировали в бульоне Мюллера-Хинтона (МН) со стандартизованным содержанием катионов при 37°С в аэробных условиях.
- 25 032899
Определение влияния рН на антибактериальную активность никлозамида рН бульона Мюллера-Хинтона со стандартизованным содержанием катионов с помощью HCl 2М доводили до значения 7, 6.5, 6, 5.5, 5, 4.5 и 5. Готовили по десять мл среды с каждым из значений рН. Значение рН нескорректированного по рН бульона МНВП было равно 7.4.
Перед применением для анализа по определению MIC каждый из скорректированных по рН образцов фильтровали через фильтры 0.2 мкм. Для каждого рН определяли минимальную ингибирующую концентрацию (MICs) никлозамида согласно критериям CLSI в двукратных разведениях в интервале концентраций (с 16 до 0.008 мкг/мл).
Рост бактерий в культуре прекращали в экспоненциальной фазе и клетки инокулировали в планшеты при плотности примерно 5х105 клеток на лунку. Планшеты инкубировали при 37°С в течение 18 ч (S. aureus). По окончании инкубации определяли оптическую плотность при длине волны 600 нм. Ингибирование рассчитывали по уравнению (Ингибирование=1 - OD ,λ-./OD контрОль), а значения MIC определяли как минимальную концентрацию, дающую степень ингибирования 100%.
Эксперимент проводили в трёх биологических повторностях.
Результаты и обсуждение рН различных скорректированных по рН сред проверяли после добавления никлозамида, чтобы убедиться, что добавление никлозамида не оказало никакого влияния на рН. Анализ показал, что добавление никлозамида (16 мкг/мл) в скорректированную по рН среду не оказал никакого влияния на рН (табл. 9).
Показатели для MRSA 01 выросли примерно одинаково при значениях от рН 6 до рН 7.4 (OD600 « 0.2 в среднем в лунках с положительным контролем) и немного меньше при рН 5.5 (OD600 « 0.1 в среднем в лунках с положительным контролем). Однако штамм ингибировался при самом низком значении рН (от рН 4 до рН 5) (фиг. 5).
Результаты определения MIC показали, что ингибирующая активность никлозамида по отношению к MRSA 01 повышалась при снижении значения рН при более низких значениях MIC (табл. 9).
Таблица 9. Значения рН и соответствующие значения MIC никлозамида по отношению к MRSA 01 по результатам 3 различных параллельных анализов (повторностей)
Повторность 1 Повторность 2 Повторность 3
фактич. pH pH после добавления никлозамида MIC (мкг/мл) фактич. pH MIC (мкг/мл) фактич. pH MIC (мкг/мл)
Некоррелированный pH 7.4 7.4 0.5 7.4 0.25 7.4 0.5
pH 7.0 6.921 6.938 0.25 7.071 0.125 7.025 0.125
pH 6.5 6.512 6.543 0.125 6.566 0.06 6.540 0.03
pH 6.0 5.893 5.954 0.06 5.955 0.06 5.980 0.016
pH 5.5 5.569 5.616 < 0.03 5.547 < 0.008 5.530 < 0.008
pH 5.0 5.070 5.095 Нет роста в положите льном контроле. Штамм ингибируется при кислом pH 5.068 Нет роста в положите льном контроле. Штамм ингибируется при кислом pH 5.008 Нет роста в положительном контроле. Штамм ингибируется при кислом pH
pH 4.5 4.569 4.589 4.568 4.550
pH 4.0 4.076 4.105 4.044 4.023
Начальная концентрация бактерий 2.Е+05 КОЕ/мл 2.Е+05 КОЕ/мл З.Е+05 КОЕ/мл
Выводы
Максимальное ингибирующее действие никлозамида наблюдали при значении рН 5.5, которое близко рН кожных покровов.

Claims (58)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Применение галогенированного салициланилида, выбранного из группы, состоящей из клозантела, оксиклозанида и никлозамида или его соли, гидрата или сложного эфира, для топического предупреждения или лечения заболевания кожи или слизистой оболочки у субъекта, вызванных грамположительными бактериями, при этом грамположительные бактерии не являются пропионовокислыми бактериями.
  2. 2. Применение галогенированного салициланилида по п.1, причем заболевание не представляет собой обыкновенные угри (acne vulgaris).
  3. 3. Применение по п.1 или 2, при этом заболевание выбрано из группы, состоящей из импетиго, бактериального конъюнктивита, атопического дерматита и родственных инфекций, интраназального носительства инфекции, сикоза обыкновенного, поверхностного фолликулита, паронихии, эритразмы, вторичных инфекционных дерматозов, карбункулов, фурункулёза, эктимы, целлюлита, рожи, некротического фасциита, вторичных раневых инфекций кожных покровов, дерматита, чесотки и диабетических язв.
  4. 4. Применение по п.1 или 2, при этом заболевание выбрано из группы, состоящей из розацеа, рожи,
    - 26 032899 эритразмы, эктимы, гангренозной эктимы, импетиго, паронихии, целлюлита, фолликулита, фурункулёза, карбункулёза, стафилококкового синдрома обожжённой кожи, хирургической лихорадки, перианального заболевания стрептококковой природы, стрептококкового синдрома токсического шока, кератолиза мелкоточечного, подмышечного трихомикоза, пиодермии, инфекции наружного слухового прохода, некротического фасциита, кожной микобактериальной инфекции, а также инфицированных экземы, ожогов, ссадин и ран на коже.
  5. 5. Применение по п.1 или 2, при этом заболевание выбрано из группы, состоящей из импетиго, бактериального конъюнктивита, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с различными заболеваниями кожи.
  6. 6. Применение по п.5, при этом заболевание выбрано из группы, состоящей из импетиго, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с различными заболеваниями кожи, такими как экзема или псориаз.
  7. 7. Применение по п. 1 или 2, при этом заболевание представляет собой атопический дерматит.
  8. 8. Применение по п. 1 или 2, при этом заболевание представляет собой импетиго.
  9. 9. Применение по п.1 или 2, при этом заболевание представляет собой бактериальный конъюнктивит.
  10. 10. Применение по п.1 или 2, при этом заболевание представляет собой розовые угри (розацеа).
  11. 11. Применение по п.1 или 2, при этом заболевание представляет собой пиодермию, в частности заболевание представляет собой пиодермию у животного, в частности у домашнего животного.
  12. 12. Применение галогенированного салициланилида, выбранного из никлозамида, его соли или гидрата для топического предупреждения или лечения заболеваний, вызванных грамположительными бактериями, при этом грамположительные бактерии не являются пропионовокислыми бактериями; и при этом инфекция или заболевание выбрано из группы, состоящей из импетиго, бактериального конъюнктивита, атопического дерматита и родственных инфекций, интраназального носительства инфекции, сикоза обыкновенного, поверхностного фолликулита, паронихии, эритразмы, вторичных инфекционных дерматозов, карбункулов, фурункулёза, эктимы, целлюлита, рожи, некротического фасциита, вторичных раневых инфекций кожных покровов, дерматита, чесотки и диабетических язв.
  13. 13. Применение по п.12, при этом инфекция или заболевание представляет собой атопический дерматит.
  14. 14. Применение по п.12, при этом инфекция или заболевание представляет собой импетиго.
  15. 15. Применение по п.12, при этом инфекция или заболевание представляет собой бактериальный конъюнктивит.
  16. 16. Применение галогенированного салициланилида, выбранного из клозантела, оксиклозанида и никлозамида, или его гидрата или соли, или гидрата его соли, для топического предупреждения и/или лечения бактериальной колонизации или инфицирования грамположительными бактериями кожи у субъекта, ассоциированных с заболеваниями кожи, выбранными из группы, состоящей из импетиго, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с экземой или псориазом.
  17. 17. Применение по п.16, при этом заболевание кожи представляет собой атопический дерматит.
  18. 18. Применение по п.16, при этом заболевание кожи представляет собой импетиго.
  19. 19. Применение по любому из пп.1-18, при этом грамположительная бактерия представляет собой Staphylococcus spp. или Streptococcus spp. (такие как, Staphylococcus aureus или Streptococcus pyogenes).
  20. 20. Применение галогенированного салициланилида, выбранного из группы, состоящей из клозантела, оксиклозанида и никлозамида, или его соли, гидрата или сложного эфира для топической эрадикации несимптоматической колонизации Staphylococcus aureus области тела субъекта.
  21. 21. Применение по любому из пп.1-20, при этом грамположительная бактерия не представляет собой штамм, устойчивый к антибиотикам.
  22. 22. Применение по любому из пп.1-20, при этом грамположительная бактерия представляет собой штамм, устойчивый к антибиотикам.
  23. 23. Применение по п.22, при этом бактерия является устойчивой к лекарственному средству, выбранному из фузидиевой кислоты, мупироцина и ретапамулина.
  24. 24. Применение по п.22, при этом бактерия является устойчивой к метициллину Staphylococcus aureus.
  25. 25. Применение по любому из пп.1-24, при этом галогенированный салициланилид представляет собой никлозамид или его соль, например никлозамид в виде свободного основания.
  26. 26. Применение по любому из пп.1-24, при этом салициланилид представляет собой оксиклозанид или его соль, например оксиклозанид в виде свободного основания.
  27. 27. Применение по любому из пп.1-26, при этом субъект представляет собой человека.
  28. 28. Применение по любому из пп.1-26, при этом субъект представляет собой животное, например домашнее животное, такое как кошка и собака.
  29. 29. Применение по любому из пп.1-28, при этом галогенированный салициланилид топически вводится субъекту в виде крема, пены, геля, капель, лосьона или мази.
  30. 30. Способ лечения или предупреждения заболевания кожи или слизистой оболочки, вызванного
    - 27 032899 грамположительной бактерией у субъекта, при этом способ включает топическое введение субъекту галогенированного салициланилида, выбранного из группы, состоящей из клозантела, оксиклозанида и никлозамида или его соли, гидрата или сложного эфира;
    при этом грамположительные бактерии не являются пропионовокислыми бактериями.
  31. 31. Способ по п.30, причем заболевание не представляет собой обыкновенные угри.
  32. 32. Способ по п.30 или 31, при этом заболевание выбрано из группы, состоящей из импетиго, бактериального конъюнктивита, атопического дерматита и родственных инфекций, интраназального носительства инфекции, сикоза обыкновенного, поверхностного фолликулита, паронихии, эритразмы, вторичных инфекционных дерматозов, карбункулов, фурункулёза, эктимы, целлюлита, рожи, некротического фасциита, вторичных раневых инфекций кожных покровов, дерматита, чесотки и диабетических язв.
  33. 33. Способ по п.30 или 31, при этом заболевание выбрано из группы, состоящей из розацеа; рожи, эритразмы, эктимы, гангренозной эктимы, импетиго, паронихии, целлюлита, фолликулита, фурункулёза, карбункулёза, стафилококкового синдрома обожжённой кожи, хирургической лихорадки, перианального заболевания стрептококковой природы, стрептококкового синдрома токсического шока, кератолиза мелкоточечного, подмышечного трихомикоза, пиодермии, инфекции наружного слухового прохода, некротического фасциита, кожной микобактериальной инфекции, а также инфицированных экземы, ожогов, ссадин и ран на коже.
  34. 34. Способ по п.30 или 31, при этом заболевание выбрано из группы, состоящей из импетиго, бактериального конъюнктивита, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с различными заболеваниями кожи.
  35. 35. Способ по п.30 или 31, при этом заболевание выбрано из группы, состоящей из импетиго, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с различными заболеваниями кожи, такими как экзема или псориаз.
  36. 36. Способ по п.30 или 31, при этом заболевание представляет собой атопический дерматит.
  37. 37. Способ по п.30 или 31, при этом заболевание представляет собой импетиго.
  38. 38. Способ по п.30 или 31, при этом заболевание представляет собой бактериальный конъюнктивит.
  39. 39. Способ по п.30 или 31, при этом заболевание представляет собой розовые угри (розацеа).
  40. 40. Способ по п.30 или 31, при этом заболевание представляет собой пиодермию, в частности заболевание представляет собой пиодермию у животного, в частности у домашнего животного.
  41. 41. Способ лечения или предупреждения инфекции или заболевания, вызванного грамположительной бактерией у субъекта, при этом способ включает топическое введение субъекту галогенированного салициланилида, выбранного из никлозамида, или его соли или гидрата;
    при этом грамположительные бактерии не являются пропионовокислыми бактериями и при этом инфекция или заболевание выбрано из группы, состоящей из импетиго, бактериального конъюнктивита, атопического дерматита и родственных инфекций, интраназального носительства инфекции, сикоза обыкновенного, поверхностного фолликулита, паронихии, эритразмы, вторичных инфекционных дерматозов, карбункулов, фурункулёза, эктимы, целлюлита, рожи, некротического фасциита, вторичных раневых инфекций кожных покровов, дерматита, чесотки и диабетических язв.
  42. 42. Способ по п.41, при этом инфекция или заболевание представляет собой атопический дерматит.
  43. 43. Способ по п.41, при этом инфекция или заболевание представляет собой импетиго.
  44. 44. Способ по п.41, при этом инфекция или заболевание представляет собой бактериальный конъюнктивит.
  45. 45. Способ топического предупреждения или лечения бактериальной колонизации или инфицирования грамположительными бактериями кожи у субъекта, ассоциированных с заболеваниями кожи, при этом способ включает топическое введение субъекту галогенированного салициланилида, выбранного из клозантела, оксиклозанида и никлозамида, или его гидрата, или соли, или гидрата его соли;
    при этом заболевание кожи выбрано из группы, состоящей из импетиго, атопического дерматита и инфекций, ассоциированных с экземой или псориазом.
  46. 46. Способ по п.45, при этом заболевание кожи представляет собой атопический дерматит.
  47. 47. Способ по п.45, при этом заболевание кожи представляет собой импетиго.
  48. 48. Способ по любому из пп.30-47, при этом грамположительная бактерия представляет собой Staphylococcus spp. или Streptococcus spp. (такие как Staphylococcus aureus или Streptococcus pyogenes).
  49. 49. Способ эрадикации несимптоматической колонизации Staphylococcus aureus области тела субъекта, при этом способ включает топическое введение субъекту галогенированного салициланилида, выбранного из клозантела, оксиклозанида и никлозамида, или его соли, гидрата или сложного эфира.
  50. 50. Способ по любому из пп.30-49, при этом грамположительная бактерия не представляет собой штамм, устойчивый к антибиотикам.
  51. 51. Способ по любому из пп.30-49, при этом грамположительная бактерия представляет собой штамм, устойчивый к антибиотикам.
  52. 52. Способ по п.51, при этом бактерия является устойчивой к лекарственному средству, выбранному из фузидиевой кислоты, мупироцина и ретапамулина.
  53. 53. Способ по п.51, при этом бактерия является устойчивой к метициллину Staphylococcus aureus.
    - 28 032899
  54. 54. Способ по любому из пп.30-53, при этом галогенированный салициланилид представляет собой никлозамид или его соль, например никлозамид в виде свободного основания.
  55. 55. Способ по любому из пп.30-53, при этом галогенированный салициланилид представляет собой оксиклозанид или его соль, например оксиклозанид в виде свободного основания.
  56. 56. Способ по любому из пп.30-55, при этом субъект представляет собой человека.
  57. 57. Способ по любому из пп.30-55, при этом субъект представляет собой животное например домашнее животное, такое как кошка и собака.
  58. 58. Способ по любому из пп.30-57, при этом галогенированный салициланилид топически вводится субъекту в виде крема, пены, геля, капель, лосьона или мази.
EA201790345A 2014-09-12 2015-09-08 Применение галогенированных салициланилидов в качестве антибактериальных средств EA032899B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE1451054 2014-09-12
PCT/EP2015/070495 WO2016038035A1 (en) 2014-09-12 2015-09-08 Antibacterial use of halogenated salicylanilides

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201790345A1 EA201790345A1 (ru) 2017-07-31
EA032899B1 true EA032899B1 (ru) 2019-07-31

Family

ID=54072831

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201790345A EA032899B1 (ru) 2014-09-12 2015-09-08 Применение галогенированных салициланилидов в качестве антибактериальных средств

Country Status (19)

Country Link
US (6) US20170258816A1 (ru)
EP (3) EP3338783B1 (ru)
JP (3) JP2017529393A (ru)
KR (1) KR20170078600A (ru)
CN (1) CN106999505A (ru)
AU (1) AU2015314287B2 (ru)
BR (1) BR112017004889A2 (ru)
CA (1) CA2960331A1 (ru)
DK (1) DK3010511T3 (ru)
EA (1) EA032899B1 (ru)
ES (2) ES2970434T3 (ru)
HK (1) HK1223277A1 (ru)
IL (1) IL250988A0 (ru)
MX (1) MX2017003251A (ru)
PH (1) PH12017500463A1 (ru)
PL (1) PL3010511T3 (ru)
SG (1) SG11201701928RA (ru)
TR (1) TR201802762T4 (ru)
WO (1) WO2016038035A1 (ru)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3338783B1 (en) 2014-09-12 2024-01-24 UNION therapeutics A/S Antibacterial use of halogenated salicylanilides
GB201509326D0 (en) 2015-05-29 2015-07-15 Antibio Tx Aps Novel use
EP3484481B1 (en) 2016-07-15 2021-01-20 The Scripps Research Institute Methods for use in the treatment of clostridium difficile
GB201615693D0 (en) 2016-09-15 2016-11-02 Combinatorx Infection Ltd Combinations
WO2018173069A1 (en) * 2017-03-21 2018-09-27 Novalead Pharma Inc. Therapeutic agent for phosphodiesterase inhibition and its related disorders
EP3403652A1 (en) 2017-05-18 2018-11-21 Veterinärmedizinische Universität Wien Prevention and treatment of fibroblast growth factor 23 (fgf23)-associated disorders including chronic kidney disease (ckd)
GB201713653D0 (en) * 2017-08-24 2017-10-11 Antibiotx As Dosage regimen
CA3075662A1 (en) * 2017-09-15 2019-03-21 Ceva Sante Animale Antimicrobial composition
GB201805453D0 (en) * 2018-04-03 2018-05-16 Antibiotx As Novel use
EP3793539A4 (en) * 2018-05-15 2022-03-02 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. COMPOUNDS FOR THE TREATMENT OF DENGUE VIRUS INFECTIONS AND OTHER INFECTIONS
GB201813876D0 (en) * 2018-08-24 2018-10-10 Antibiotx As Treatment
AU2019351731A1 (en) 2018-10-02 2021-05-20 The United States Government As Represented By The Department Of Veterans Affairs Spak kinase inhibitors as neuroprotective agents
WO2020089470A1 (en) 2018-11-02 2020-05-07 UNION therapeutics A/S Halogenated salicylanilides for treating the symptoms of dermatitis
WO2020089467A1 (en) 2018-11-02 2020-05-07 UNION therapeutics A/S Dosage regimen
CN109331025A (zh) * 2018-11-22 2019-02-15 华中农业大学 羟氯扎胺在制备抗猪链球菌的药物中的应用
US11419834B2 (en) 2019-02-25 2022-08-23 Rhode Island Hospital Methods for treating diseases or infections caused by or associated with H. pylori using a halogenated salicylanilide
WO2020176067A1 (en) 2019-02-25 2020-09-03 Rhode Island Hospital Methods for treating diseases or infections caused by or associated with h. pylori using a halogenated salicylanilide
CN111150725A (zh) * 2019-10-31 2020-05-15 天津国际生物医药联合研究院 氯氰碘柳胺钠在抗分枝杆菌感染中的潜在应用
WO2021168295A1 (en) * 2020-02-21 2021-08-26 Yourchoice Therapeutics, Inc. Use of nicolsamide formulations for antiviral therapy
BR112022019521A2 (pt) 2020-04-01 2022-11-16 Union Therapeutics As Formulação
EP4125804A1 (en) 2020-04-01 2023-02-08 UNION therapeutics A/S Treatment
US11045434B1 (en) 2020-04-01 2021-06-29 UNION therapeutics A/S Niclosamide formulations for treating disease
WO2022076565A1 (en) 2020-10-07 2022-04-14 Sorrento Therapeutics, Inc. Salicylanilide analogs for use in the treatment of coronavirus
GB202102488D0 (en) 2021-02-22 2021-04-07 Union Therapeutics As Treatment
WO2022204519A1 (en) 2021-03-26 2022-09-29 The United States Government As Represented By The Department Of Veterans Affairs Use of zt-1a and analogs thereof to prevent and/or treat neurodegenerative and neurocognitive disorders
CN117105809B (zh) * 2023-10-20 2024-05-03 中国农业大学 一种苯甲酰苯胺化合物及其制备方法和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3914418A (en) * 1971-09-02 1975-10-21 Merck & Co Inc Methods of controlling liver fluke infections
WO2008155535A1 (en) * 2007-06-21 2008-12-24 Syntopix Limited Use of halogenated salicylanilides for the treatment of acne

Family Cites Families (134)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2731386A (en) 1951-09-06 1956-01-17 Wallace & Tiernan Company Inc Antifungal composition
US3152039A (en) 1960-11-23 1964-10-06 Dow Chemical Co Germicidal compositions
FR1340175A (fr) 1962-03-06 1963-10-18 Procter & Gamble Nouvelles compositions bactéricides
DE1527638C3 (de) 1966-06-15 1974-01-31 Gesellschaft Zur Foerderung Der Eisenhuettentechnik Mbh, 4000 Duesseldorf Vorrichtung zum Kanten und Verschieben von Walzgut (Blöcken, Brammen u.dgl.) auf Rollgängen in Walzwerken
US3674850A (en) * 1969-12-07 1972-07-04 Lever Brothers Ltd Substituted salicylanilides
GB1421589A (en) 1972-03-07 1976-01-21 Janssen Pharmaceutica Nv Salicylanilide derivatives
DE2557615C2 (de) 1975-12-20 1985-08-14 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Neue Niclosamid-Suspensionsformulierungen
SU597671A1 (ru) 1976-10-07 1978-03-15 Предприятие П/Я М-5400 Способ очистки 3,4,5-трибромсалициланилида
JPS55129256A (en) 1979-02-28 1980-10-06 Isao Ozawa Antifungal compound
US4287191A (en) 1980-04-14 1981-09-01 The Research Foundation Of State University Of New York Novel salicylanilides and microbiocidal compositions and uses thereof
US4358443A (en) 1980-04-14 1982-11-09 The Research Foundation Of State University Of New York Method and composition for controlling the growth of microorganisms
US4560549A (en) 1983-08-24 1985-12-24 Lever Brothers Company Method of relieving pain and inflammatory conditions employing substituted salicylamides
US4742083A (en) 1983-08-24 1988-05-03 Lever Brothers Company Method of relieving pain and inflammatory conditions employing substituted salicylamides
EP0185490B1 (en) 1984-12-12 1991-09-25 Euroceltique S.A. Antibacterial cream
US4939132A (en) 1985-04-15 1990-07-03 The Research Foundation Of State University Of New York Novel 5-alkylsulfonylsalicylanilides and microbiocidal compositions for controlling the growth of microorganisms
US4883660A (en) 1988-10-17 1989-11-28 Thames Pharmacal Co., Inc. Gel bases for pharmaceutical compositions
ES2084753T3 (es) 1990-11-26 1996-05-16 Bayer Ag Niclosamida en locion topica.
AU4399296A (en) 1994-12-19 1996-07-10 Lauteral Limited A combination product comprising nitazoxanide and an anti-ulcer agent
EP1174439B1 (en) 1996-08-21 2008-10-08 Migenix Inc. Compositions and methods for treating infections using analogues of indolicidin
US5958911A (en) 1996-11-05 1999-09-28 The Research Foundation Of State University Of New York Method of relieving inflammation by using 5-alkylsulfonylsalicylanilides
EP0984783A1 (en) 1997-06-11 2000-03-15 Bayer Ag Anthelmintic compositions
US6117859A (en) 1997-11-04 2000-09-12 The Research Foundation Of State University Of New York Method of relieving chronic inflammation by using 5-alkylsulfonylsalicylanilides
DE19843222A1 (de) 1998-09-22 2000-03-30 Hassan Jomaa Verwendung von phosphororganischen Verbindungen zur therapeutischen und prophylaktischen Behandlung von Infektionen
US6680308B1 (en) 1998-04-14 2004-01-20 Jomaa Hassan Use of organophosphorus compounds for the therapeutic and prophylactic treatment of infections
DE19843223A1 (de) 1998-09-22 2000-03-30 Hassan Jomaa Phosphororganische Verbindungen und ihre Verwendung
DE19828097A1 (de) 1998-06-24 1999-12-30 Hassan Jomaa Kombinationspräparat von Aminohydrocarbylphosphonsäurederivaten und Hemmern des Fettstoffwechsels
SK283038B6 (sk) 1998-05-18 2003-02-04 Pharmacia And Upjohn Company Použitie oxazolidinónových antibakteriálnych látok, derivátov arginínu a farmaceutická kompozícia
US6399629B1 (en) 1998-06-01 2002-06-04 Microcide Pharmaceuticals, Inc. Efflux pump inhibitors
HUP0102782A3 (en) 1998-06-19 2002-12-28 Smithkline Beecham Corp Salycilanilide as inhibitors of transcription factor nf-kb
DE19843360A1 (de) 1998-09-22 2000-03-30 Hassan Jomaa Phosphororganische Verbindungen und ihre Verwendung
EP1095050A1 (de) 1998-07-15 2001-05-02 Hassan Jomaa Phosphororganische verbindungen und ihre verwendung
US6753324B2 (en) 1998-07-15 2004-06-22 Hassan Jomaa Phosphorous organic compounds and their use
DE19843334A1 (de) 1998-09-22 2000-03-30 Hassan Jomaa Schwefelorganische Verbindungen und ihre Verwendung
DE19843383A1 (de) 1998-09-22 2000-03-30 Hassan Jomaa Phosphororganische Verbindungen und ihre Verwendung
DE19854403A1 (de) 1998-11-25 2000-05-31 Hassan Jomaa Phosphororganische Verbindungen und ihre Verwendung
DE19859426A1 (de) 1998-12-22 2000-07-06 Hassan Jomaa Verwendung von phosphororganischen Verbindungen zur therapeutischen und prophylaktischen Behandlung von Infektionen
DE19902924A1 (de) 1999-01-26 2000-08-03 Hassan Jomaa Verwendung von phosphororganischen Verbindungen zur prophylaktischen und therapeutischen Behandlung von Infektionen
DE19903398A1 (de) 1999-01-29 2000-08-10 Hassan Jomaa Verwendung von Thiadiazolderivaten zur prophylaktischen und therapeutischen Behandlung von Infektionen
CH693625A5 (it) 1999-02-18 2003-11-28 Inpharma Sa Composizioni farmaceutiche contenenti composti ad attività promotrice di assorbimento di principi attivi.
WO2001060157A2 (en) 2000-02-18 2001-08-23 The Procter & Gamble Company Antibacterial agents and compositions
JP2004508283A (ja) 2000-02-18 2004-03-18 ヨマー、ファルマカ、ゲゼルシャフト、ミット、ベシュレンクテル、ハフツング 有機リン化合物およびその使用
WO2001093872A1 (de) 2000-06-08 2001-12-13 Jomaa Pharmaka Gmbh Verwendung von phosphororganischen hydroxamsäurederivaten zur herstellung von arzneimitteln
KR100855199B1 (ko) 2000-07-19 2008-09-01 유니티카 가부시끼가이샤 스핑고당지질을 함유하는 기능성 식품 및 이의 제조방법
US6774100B2 (en) 2000-12-06 2004-08-10 Imaginative Research Associates, Inc. Anhydrous creams, lotions and gels
US8263657B2 (en) 2000-12-18 2012-09-11 Institute Of Medicinal Molecular Design, Inc. Inhibitors against the production and release of inflammatory cytokines
US6830758B2 (en) 2001-04-02 2004-12-14 Lectec Corporation Psoriasis patch
US20020192273A1 (en) 2001-06-15 2002-12-19 Teri Buseman Therapeutic patch useful for the treatment of hemorrhoids
US20040071757A1 (en) 2001-11-20 2004-04-15 David Rolf Inhalation antiviral patch
GB2386066A (en) 2002-02-28 2003-09-10 Norbrook Lab Ltd Long-acting parasiticidal composition with improved bioavailability comprising a salicylanilide, a further anti-parasitic compound & a polymeric species
RU2227025C2 (ru) 2002-05-21 2004-04-20 ЗАО "Агроветсервис" Антипаразитарный препарат широкого спектра действия
EP1514544A4 (en) 2002-06-06 2009-01-07 Inst Med Molecular Design Inc HYPO-ALLERGENIC
WO2004006906A2 (en) 2002-07-15 2004-01-22 Combinatorx, Incorporated Methods for the treatment of neoplasms
AU2003260818A1 (en) 2002-11-28 2004-06-18 Moore, Bronwyn Treatment of immune system dysfunction
WO2004062600A2 (en) 2003-01-08 2004-07-29 Lectec Corporation Antiviral patch
JP4446678B2 (ja) * 2003-05-08 2010-04-07 株式会社ノエビア 抗菌剤
KR20070097291A (ko) * 2003-09-16 2007-10-04 아스텔라스세이야쿠 가부시키가이샤 프로피오니박테리움 아크네스에 대한 항균제
US20070059351A1 (en) 2003-10-17 2007-03-15 Murrell George A C Transdermal patches containing a nitric oxide-donor and a second active agent and associated methods
US7666444B2 (en) 2004-02-02 2010-02-23 Wyeth Antiparasitic composition
US8198326B2 (en) * 2004-09-07 2012-06-12 3M Innovative Properties Company Phenolic antiseptic compositions and methods of use
US20060222692A1 (en) 2005-03-31 2006-10-05 Fairfield Clinical Trials Llc Method and compositions for transdermal administration of antimicrobial medications
BRPI0611134A2 (pt) 2005-06-03 2010-08-17 Acrux Dds Pty Ltd método e composição para liberação transdérmica de fármaco
JP4920206B2 (ja) 2005-06-30 2012-04-18 ライオン株式会社 外用剤組成物及び貼付剤、並びに薬物の経皮吸収組成物
GB0525093D0 (en) 2005-12-09 2006-01-18 Norbrook Lab Ltd Veterinary composition
US7727513B2 (en) * 2005-12-15 2010-06-01 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Method for screening for bacterial conjunctivitis
US20070254036A1 (en) 2006-04-13 2007-11-01 Besins Healthcare Sa Treatment of menopause associated symptoms
CA2656451C (en) 2006-07-13 2015-01-27 Galderma Research & Development Composition comprising a retinoid and benzoyl peroxide
WO2008021088A2 (en) 2006-08-08 2008-02-21 The Regents Of The University Of Californina Salicylanilides enhance oral delivery of therapeutic peptides
US20090016990A1 (en) 2007-01-24 2009-01-15 Alberte Randall S Antimicrobial Compositions
WO2008133982A2 (en) 2007-04-27 2008-11-06 Lectec Corporation Adhesive patch with aversive agent
JP2010528098A (ja) * 2007-05-31 2010-08-19 シントピックス グループ パブリック リミティド カンパニー ジアルキル・スルホスクシナート及びカルバニリド抗菌剤を含んでなる抗菌製剤
ES2324192B1 (es) * 2008-01-30 2010-06-17 PUIG BEAUTY &amp; FASHION GROUP, S.L. Derivados peptidicos utiles en el tratamiento, cuidado o limpieza de la piel, mucosa, cuero cabelludo o uñas.
US20110105976A1 (en) 2008-03-07 2011-05-05 Judd Berlin Hand sanitizing patch
WO2009140215A2 (en) 2008-05-11 2009-11-19 Geraghty, Erin Method for treating drug-resistant bacterial and other infections with clioquinol, phanquinone, and related compounds
US20100029781A1 (en) 2008-06-04 2010-02-04 Morris Jerome A Methods for preparation of anti-acne formulation and compositions prepared thereby
EP2143421A1 (en) 2008-07-07 2010-01-13 Almirall Hermal GmbH Topical composition for the treatment of actinic keratosis
WO2010005836A2 (en) 2008-07-07 2010-01-14 Activbiotics Pharma, Llc Use of rifalazil to treat colonic disorders
US8846646B2 (en) 2008-10-03 2014-09-30 Winlind Skincare, Llc Topical treatment of skin infection
EP2177208A1 (en) * 2008-10-17 2010-04-21 Ferrer Internacional, S.A. Pharmaceutical topical compositions
US20110229544A1 (en) 2008-11-26 2011-09-22 Viroblock S.A. Methods for Inhibiting Gram-Postive Bacteria Using Non-Phospholipid Lipid Vesicules
GB2465633A (en) 2008-12-01 2010-06-02 Syntopix Ltd Anti-acne formulation
GB2456376A (en) * 2008-12-22 2009-07-15 Syntopix Ltd Antibacterial/anti-acne formulations comprising a halogenated salicylanilide in combination with one or more anti-acne agents
US20100286101A1 (en) 2009-05-07 2010-11-11 Jason Carbol Pharmaceutical composition including a corticosteroid and a vitamin d analog having improved stability
AR077033A1 (es) 2009-06-11 2011-07-27 Hoffmann La Roche Compuestos inhibidores de las quinasas de janus y su uso en el tratamiento de enfermedades inmunologicas
WO2011035321A1 (en) 2009-09-21 2011-03-24 Duke University Treatment of wnt/frizzled-related diseases
GB2477914B (en) 2010-02-12 2012-01-04 Univ Newcastle Compounds and methods for biofilm disruption and prevention
BRPI1002601E2 (pt) 2010-06-01 2020-06-30 Embrapa Pesquisa Agropecuaria composição nanoestruturada de uso veterinário para administração de fármacos
FR2961810B1 (fr) * 2010-06-29 2012-07-06 Galderma Res & Dev Esters de metronidazole pour traiter la rosacee
JP5518595B2 (ja) * 2010-06-30 2014-06-11 日本エンバイロケミカルズ株式会社 工業用防腐・防汚組成物
GB201015079D0 (en) * 2010-09-10 2010-10-27 Helperby Therapeutics Ltd Novel use
DE102010054149A1 (de) 2010-12-10 2012-06-14 Merck Patent Gmbh 2-Pyrone
ES2647072T3 (es) 2011-04-18 2017-12-19 Max-Delbrück-Centrum Für Molekulare Medizin In Der Helmholtz-Gemeinschaft Niclosamida para el tratamiento de la metástasis en el cáncer
WO2012154944A2 (en) 2011-05-10 2012-11-15 Stc.Unm Methods of treating autophagy-associated disorders and related pharmaceutical compositions, diagnostics, screening techniques and kits
US9034812B2 (en) 2011-08-26 2015-05-19 Ohio University Compositions and methods for treating biofilms
FR2991173B1 (fr) 2012-06-04 2015-11-06 Virbac Composition veterinaire a administration cutanee a base d'oxyclozanide
EP2902479A4 (en) * 2012-09-26 2016-06-08 Toyo Seikan Group Holdings Ltd CULTURE MEDIUM FOR FOOD-BILLING BACTERIA AND PROCEDURE FOR DETECTING FOOD-SPOKING BACTERIA
WO2014062621A1 (en) 2012-10-15 2014-04-24 Stc.Unm Treatment of autophagy-based disorders and related pharmaceutical compositions, diagnostic and screening assays and kits
US9446131B2 (en) 2013-01-31 2016-09-20 Merz Pharmaceuticals, Llc Topical compositions and methods for making and using same
JP2016507532A (ja) 2013-02-08 2016-03-10 ルオダ ファーマ ピーティーワイ リミテッド 局所微生物感染を処置する方法
CN105143176B (zh) 2013-02-15 2018-02-13 柏林工业大学 白纹黄单胞菌毒素衍生物、其用途以及合成
AU2014262127B2 (en) 2013-05-01 2019-05-02 Neoculi Pty Ltd Methods for treating bacterial infections
WO2014200705A1 (en) 2013-06-14 2014-12-18 Stc.Unm Treatment of autophagy-related disorders
EP2839828A1 (en) 2013-08-23 2015-02-25 Nitto Denko Corporation Compunds and formulations for the treatment of wounds
US10059752B2 (en) 2013-10-14 2018-08-28 University Of Houston System Esculentin 1a derivatives and uses thereof
ZA201408333B (en) 2013-11-14 2015-12-23 Cipla Ltd Pharmaceutical compositions
WO2015143654A1 (en) 2014-03-26 2015-10-01 Merck Sharp & Dohme Corp. TrkA KINASE INHIBITORS,COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF
US10112962B2 (en) 2014-07-02 2018-10-30 Xavier University Boron-based prodrug strategy for increased bioavailability and lower-dosage requirements for drug molecules containing at least one phenol (or aromatic hydroxyl) group
WO2016036839A1 (en) 2014-09-02 2016-03-10 The Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Compositions and methods for treating gonorrhea
EP3338783B1 (en) 2014-09-12 2024-01-24 UNION therapeutics A/S Antibacterial use of halogenated salicylanilides
JP2018500387A (ja) 2014-11-17 2018-01-11 ヴィクトリア・リンク・リミティド 抗菌化合物
EP3020398A1 (en) 2014-11-17 2016-05-18 Nitto Denko Corporation Compounds and formulations for reducing scarring
US10213478B2 (en) 2014-11-24 2019-02-26 The Translational Genomics Research Institute Compositions and methods for the treatment of fungal infections
CN104430338B (zh) 2014-12-08 2016-08-31 江苏艾津农化有限责任公司 氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂及其制备方法和应用
WO2016138286A1 (en) 2015-02-26 2016-09-01 Stc.Unm Irgm and precision autophagy controls for antimicrobial and inflammatory disease states and methods of detection of autophagy
WO2016144979A1 (en) 2015-03-09 2016-09-15 The Children's Mercy Hospital Dermatophytosis prophylaxis and treatment
JP2018509412A (ja) 2015-03-10 2018-04-05 イーエルシー マネージメント エルエルシー 炎症を収束させるよう皮膚を処置するための方法および組成物ならびに炎症収束経路を刺激する活性物質のスクリーニング
GB2542873A (en) 2015-04-16 2017-04-05 Elc Man Llc Unit dose packages, compositions, and treatment regimens to deliver pro-resolution pathway stimulators to keratin surfaces
GB201509326D0 (en) 2015-05-29 2015-07-15 Antibio Tx Aps Novel use
WO2016210289A1 (en) 2015-06-24 2016-12-29 Duke University Chemical modulators of signaling pathways and therapeutic use
US20190070154A1 (en) 2015-06-24 2019-03-07 Duke University New methods of use for an anti-diarrhea agent
JP6955648B2 (ja) 2015-09-01 2021-10-27 ファースト ウェーブ バイオ インコーポレイテッド 異常炎症反応に関連する状態を処置するための方法および組成物
GB201604484D0 (en) 2016-03-16 2016-04-27 Antibiotx Aps And Københavns Uni University Of Copenhagen Topical antibacterial compositions
GB201615693D0 (en) 2016-09-15 2016-11-02 Combinatorx Infection Ltd Combinations
WO2018141063A1 (en) 2017-02-02 2018-08-09 Mcmaster University Bicarbonate as a potentiator for antimicrobial agents
US11709169B2 (en) 2017-02-07 2023-07-25 National Jewish Health Lipid abnormalities and association with atopic allergic diseases
WO2018173069A1 (en) 2017-03-21 2018-09-27 Novalead Pharma Inc. Therapeutic agent for phosphodiesterase inhibition and its related disorders
GB201713653D0 (en) 2017-08-24 2017-10-11 Antibiotx As Dosage regimen
GB201805453D0 (en) 2018-04-03 2018-05-16 Antibiotx As Novel use
GB201813876D0 (en) 2018-08-24 2018-10-10 Antibiotx As Treatment
US20210369650A1 (en) 2018-11-02 2021-12-02 UNION therapeutics A/S Treatment of inflammatory conditions
WO2020176067A1 (en) 2019-02-25 2020-09-03 Rhode Island Hospital Methods for treating diseases or infections caused by or associated with h. pylori using a halogenated salicylanilide
US11419834B2 (en) 2019-02-25 2022-08-23 Rhode Island Hospital Methods for treating diseases or infections caused by or associated with H. pylori using a halogenated salicylanilide
US20210114973A1 (en) 2019-10-18 2021-04-22 First Wave Bio, Inc. Pharmaceutical formulations
US11045434B1 (en) 2020-04-01 2021-06-29 UNION therapeutics A/S Niclosamide formulations for treating disease
BR112022019521A2 (pt) 2020-04-01 2022-11-16 Union Therapeutics As Formulação

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3914418A (en) * 1971-09-02 1975-10-21 Merck & Co Inc Methods of controlling liver fluke infections
WO2008155535A1 (en) * 2007-06-21 2008-12-24 Syntopix Limited Use of halogenated salicylanilides for the treatment of acne

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHEMICAL ABSTRACTS, 1 January 2012, Columbus, Ohio, US; ZHAO KAI , LU HUOXIANG: "In vitro antimicrobial activity of closantel to staphylococcus aureus" XP002746794 *
HLASTA, D.J. DEMERS, J.P. FOLENO, B.D. FRAGA-SPANO, S.A. GUAN, J. HILLIARD, J.J. MACIELAG, M.J. OHEMENG, K.A. SHEPPARD, C.M. SUI, : "Novel inhibitors of bacterial two-component systems with gram positive antibacterial activity: pharmacophore identification based on the screening hit closantel", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, PERGAMON, AMSTERDAM, NL, vol. 8, no. 14, 21 July 1998 (1998-07-21), AMSTERDAM, NL, pages 1923 - 1928, XP004137157, ISSN: 0960-894X, DOI: 10.1016/S0960-894X(98)00326-6 *
RAJMOHAN RAJAMUTHIAH, BETH BURGWYN FUCHS, ANNIE L. CONERY, WOOSEONG KIM, ELAMPARITHI JAYAMANI, BUMSUP KWON, FREDERICK M. AUSUBEL, : "Repurposing Salicylanilide Anthelmintic Drugs to Combat Drug Resistant Staphylococcus aureus", PLOS ONE, vol. 10, no. 4, pages e0124595, XP055221148, DOI: 10.1371/journal.pone.0124595 *

Also Published As

Publication number Publication date
TR201802762T4 (tr) 2018-03-21
US9949988B2 (en) 2018-04-24
EP3338783B1 (en) 2024-01-24
JP2021075567A (ja) 2021-05-20
US20200306271A1 (en) 2020-10-01
US10758553B2 (en) 2020-09-01
US11331327B2 (en) 2022-05-17
JP2017529393A (ja) 2017-10-05
ES2661000T3 (es) 2018-03-27
EP3010511B1 (en) 2018-02-14
CN106999505A (zh) 2017-08-01
EP3967312A1 (en) 2022-03-16
CA2960331A1 (en) 2016-03-17
PH12017500463B1 (en) 2017-07-31
DK3010511T3 (en) 2018-03-05
US20170326160A1 (en) 2017-11-16
KR20170078600A (ko) 2017-07-07
PH12017500463A1 (en) 2017-07-31
AU2015314287A1 (en) 2017-03-30
HK1223277A1 (zh) 2017-07-28
US20190099433A1 (en) 2019-04-04
IL250988A0 (en) 2017-04-30
WO2016038035A1 (en) 2016-03-17
US20170258816A1 (en) 2017-09-14
US20200306269A1 (en) 2020-10-01
MX2017003251A (es) 2017-12-20
EP3338783C0 (en) 2024-01-24
EP3338783A1 (en) 2018-06-27
US20200306270A1 (en) 2020-10-01
EP3010511A1 (en) 2016-04-27
BR112017004889A2 (pt) 2017-12-05
EA201790345A1 (ru) 2017-07-31
ES2970434T3 (es) 2024-05-28
SG11201701928RA (en) 2017-04-27
AU2015314287B2 (en) 2019-04-18
JP2023040096A (ja) 2023-03-22
PL3010511T3 (pl) 2018-07-31
US11285164B2 (en) 2022-03-29
US11324761B2 (en) 2022-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11324761B2 (en) Antibacterial use of halogenated salicylanilides
CN108883309B (zh) 包含卤代水杨酰苯胺的非水性局部组合物
US10034842B2 (en) Antimicrobials and methods of use thereof for wound healing
JP2008535814A (ja) 抗微生物剤
KR20150119007A (ko) 국소 미생물 감염의 치료방법
JP6783476B2 (ja) ムピロシン及びネオマイシンを含む抗菌組成物
JP2017200911A (ja) 抗菌剤

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM