CN111150725A - 氯氰碘柳胺钠在抗分枝杆菌感染中的潜在应用 - Google Patents

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刘祥
王泽方
陈成
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黄珍珍
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Abstract

氯氰碘柳胺钠在抗分枝杆菌感染中的潜在应用，本发明提供了一种针对分枝杆菌(Mycobacterium，分枝杆菌)中存在的，对分枝杆菌生长极其重要的酶，既邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶(anthranilate phosphoribosyl transferase，AnPRT)的抑制剂，该抑制剂的名称为氯氰碘柳胺钠，对分枝杆菌中的邻氨基苯甲酸磷酸核糖的转移具有显著的抑制活性，因此本发明提供的抑制剂能够用来制备针对分枝杆菌中邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶的小分子抑制剂，有望成为抗分枝杆菌感染的潜在药物。

Description

氯氰碘柳胺钠在抗分枝杆菌感染中的潜在应用
技术领域
本发明涉及药学的技术领域，具体说是氯氰碘柳胺钠在抗分枝杆菌感染中的应用。
背景技术
分枝杆菌(Mycobacterium，分枝杆菌)目前归为放线菌，一般呈弯曲长杆状，有时出现分枝状或丝状。分枝杆菌种类较多，包括非结核分枝杆菌，结核分枝杆菌等。其中，结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，结核分枝杆菌)是结核病的主要致病菌，并且通过肺部途径作为气溶胶传播，仅需要很少的杆菌来建立感染。感染后，Mtb可以在肺部形成的肉芽肿中长期存活[1]。化疗可用于治疗结核病，但在最佳情况下，需要至少6个月的多药治疗方案才能成功治疗感染。在许多情况下，长期治疗会导致患者不依从，并导致多药耐药性Mtb(MDR)和广泛耐药性Mtb(XDR)菌株的出现[2]。2017年，估计有1000万人患有结核病(TB)，其中457560人患有多重耐药结核病(MDR-TB)[3]。所以，我们迫切的需要寻找分枝杆菌中的新型靶点，进而针对这些靶点开发新型的抗结核分枝杆菌的药物。
色氨酸对于人类是一种必需氨基酸，人类不能自身合成，需要从外界获取。研究表明，色氨酸营养缺陷型的分枝杆菌菌株失去了毒性。所以，分枝杆菌中的色氨酸合成相关酶可以作为潜在的药物靶标。邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶(AnPRT)对分枝杆菌(分枝杆菌)中色氨酸的生物合成至关重要[4,5]。色氨酸生物合成的第二步为5'-磷酸核糖-1'-焦磷酸(PRPP)和邻氨基苯甲酸之间的Mg2+依赖性反应[6]，该反应需要AnPRT的催化。因此，邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶也成为一个关键的抗分枝杆菌的药物靶标，所以针对邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶进行抑制剂筛选对分枝杆菌感染的相关的药物研发具有很大的意义。
氯氰碘柳胺钠，英文名是Closantel Sodium，是一种抗革兰氏阳性菌的抑制剂。同时，它对多种线虫类、节肢动物的幼虫、吸虫类均有良好疗效，可作为广谱驱虫药。但至今，氯氰碘柳胺钠在抗分枝杆菌感染中的应用未见报道。
发明内容
针对相关技术中的问题，本发明提供氯氰碘柳胺钠在抗分枝杆菌感染中的应用。
本发明还提供了针对分枝杆菌中邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移的抑制剂。
本发明所涉及氯氰碘柳胺钠CAS号为61438-64-0，购买于Selleck.cn公司。在分子水平上，通过设立阴性对照，发现氯氰碘柳胺钠对分枝杆菌中的邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶有很好的抑制活性，因此该化合物有望作为抑制分枝杆菌感染的潜在药物。
本发明提供一种用于预防或治疗分枝杆菌中的邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶(AnPRT)感染的药物，其活性成分为氯氰碘柳胺钠，该药物包含上述含有氯氰碘柳胺钠以及一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、增效剂。该药物可制成注射剂、片剂、丸剂、胶囊、悬浮剂或乳剂的形式使用。其给药途径可为口服、经皮、静脉或肌肉注射。
本发明具有的优点和积极效果是：
本发明的针对分枝杆菌中的邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶(AnPRT)的抑制剂，这种抑制剂为氯氰碘柳胺钠。氯氰碘柳胺钠对分枝杆菌中的邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶活性具有显著的抑制效果。
附图说明
图1是氯氰碘柳胺钠对分枝杆菌中的邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶的抑制作用示意图
图2是刃天青微孔板法测定化合物对H37Ra菌株最小抑菌浓度的示意图
图3是氯氰碘柳胺钠的IC50示意图
具体实施方式：
为了更好地说明本发明，在下面将详述本发明的具体实施方式。
1.分枝杆菌中邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶(AnPRT)的表达与纯化
(1)将含有编码AnPRT基因的重组质粒转化入Escherichia coli BL21(DE3)中。
(2)在平板上挑取阳性克隆，培养过夜后扩大表达。
(3)收集细胞后高压破菌；收集上清液。
(4)将上清液加入Ni-NTA亲和层析柱中，用Ni-NTA亲和层析获得较均一的蛋白。
(5)用凝胶过滤层析进行纯化来进一步获得具有电荷均一性的目的蛋白。
2.AnPRT的活性测定
采用纯度大于95％的邻氨基苯甲酸钠作为底物；用荧光法测定动力学曲线。
配置AnPRT，加入待测化合物,室温放置5min,迅速加入底物邻氨基苯甲酸钠。每10s记录一次荧光读数，共测定250s。阴性对照不加备选样品，其它实验条件均相同。
用酶标仪测定酶动力学曲线，分析初速率。计算出每个化合物的剩余活性和抑制率。
对于剩余活性<15％的化合物进行复筛，排除操作失误造成假阳性的可能。
3.化合物氯氰碘柳胺钠MIC的测定
(1)养菌
(2)稀释化合物：梯度稀释利福平，浓度分别为64μg/mL、32μg/mL、16μg/mL、8μg/mL、4μg/mL、2μg/mL、1μg mL、0.5μg/mL、0.25μg/mL、0.125μg/mL。氯氰碘柳胺钠的浓度分别为256μg/mL、128μg/mL、64μg/mL、32μg/mL、16μg/mL、8μg/mL、4μg/mL、2μg/mL、1μg/mL、0.5μg/mL。
(3)MIC的测定：分别取上述菌液40μL，7H9培养基40μL，化合物2μL加入96孔板中，48小时后观察结果，在超净台中加入8uL过滤除菌0.02％(w/v)的刃天青,继续孵育4小时,于倒置放大镜上观察细菌生长情况,呈粉红色为有菌，呈蓝色则为无菌。
4.氯氰碘柳胺钠IC50的测定
如上述测定AnPRT活性的方法操作，分别加入不同浓度的氯氰碘柳胺钠作为待测化合物，用软件做出IC50示意图。
本发明涉及药学的技术领域，具体说是氯氰碘柳胺钠在抗分枝杆菌感染中的应用，氯氰碘柳胺钠在抑制分枝杆菌中邻氨基苯甲酸磷酸核糖酶转移时候Ir>95％以上,在制备抗分枝杆菌中邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移酶的小分子抑制剂方面有很大应用潜力，有成为抗分枝杆菌感染的潜在药物的希望。
以上所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域常用的方法。
以上仅为本发明的具体实施方式，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【参考文献】
[1].R.Singh,U.Manjunatha,H.I.Boshoff,Y.H.Ha,P.Nyomrattanakit,R.Ledwidge,C.S.Dowd,I.Y.Lee,P.Kim,L.Zhang,S.Kang,T.H.Keller,J.Jiricek,C.E.Barry.PA-824 kills nonreplicating Mycobacterium tuberculosis byintracellular NO release.Science 2008；322(5906):1392-1395.
[2].D.Yee,C.Valiquette,M.Pelletier,I.Parisien,I.Rocher,D.Menzies.Incidence of serious side effects from first-line antituberculosisdrugs among patients treated for active tuberculosis.Am J RespirCrit CareMed2003；167(11):1472-1476.
[3].World Health Organization.Global Tuberculosis Report 2018.WHO；2017.
[4].Hondalus,M.K.,Bardarov,S.,Russell,R.,Chan,J.,Jacobs,W.R.&Bloom,B.R.Attenuation ofand protection induced by a leucine auxotrophofMycobacterium tuberculosis.InfectImmun 2000；68:2888–2898.
[5].Smith,D.A.,Parish,T.,Stoker,N.G.&Bancroft,G.J.Characterization ofauxotrophic mutants ofMycobacterium tuberculosis and their potentialasvaccine candidates.Infect Immun2001；69:1142–1150.
[6].Clare E.Lee,Catherine Goodfellow,Farah Javid-Majd Edward N.Bakerand J.Shaun Lott.The Crystal Structure of TrpD,a Metabolic Enzyme Essentialfor Lung Colonization by Mycobacterium tuberculosis,in Complex with itsSubstrate Phosphoribosylpyrophosphate.Journal of Molecular Biology 2006；355:784-797.

Claims (5)

1.氯氰碘柳胺钠在治疗分枝杆菌感染中的应用。
2.氯氰碘柳胺钠是分枝杆菌中邻氨基苯甲酸磷酸核糖转移的小分子抑制剂。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其中，氯氰碘柳胺钠的结构式为：
Figure FDA0002256755390000011
。
4.一种治疗分枝杆菌感染的药物，其特征在于它包含权利要求1或2所述的氯氰碘柳胺钠以及一种或多种药学上可接受的载体；所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、增效剂。
5.根据权利要求4所述的治疗分枝杆菌感染的药物，其特征是它是含有所述药物的注射剂、片剂、丸剂、胶囊、悬浮剂或乳剂。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106999505A (zh) * 2014-09-12 2017-08-01 安蒂比奥特克斯有限公司 卤代水杨酰苯胺的抗菌用途
CN107898784A (zh) * 2017-11-01 2018-04-13 天津国际生物医药联合研究院 艾曲波帕乙醇胺在抗结核分枝杆菌感染中的应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106999505A (zh) * 2014-09-12 2017-08-01 安蒂比奥特克斯有限公司 卤代水杨酰苯胺的抗菌用途
CN107898784A (zh) * 2017-11-01 2018-04-13 天津国际生物医药联合研究院 艾曲波帕乙醇胺在抗结核分枝杆菌感染中的应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALINA CASTELL等: "The Substrate Capture Mechanism of Mycobacterium tuberculosis Anthranilate Phosphoribosyltransferase Provides a Mode for Inhibition", 《BIOCHEMISTRY》 *
CHRISTINE HARVEY等: "Trehalose-6-Phosphate Phosphatase Structure and Inhibitor Design", 《THE FASEB JOURNAL》 *
HONGXIA NIU等: "Identification of drug candidates that enhance pyrazinamide activity from a clinical compound library", 《EMERGING MICROBES & INFECTIONS》 *
KATHRYN E.A. LOUGHEED等: "New anti-tuberculosis agents amongst known drugs", 《TUBERCULOSIS》 *
袁宗辉: "《动物用药指南》", 28 February 1998 *

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