EA024801B1 - Селективные модуляторы рецептора сфингозин-1-фосфата - Google Patents

Селективные модуляторы рецептора сфингозин-1-фосфата Download PDF

Info

Publication number
EA024801B1
EA024801B1 EA201290323A EA201290323A EA024801B1 EA 024801 B1 EA024801 B1 EA 024801B1 EA 201290323 A EA201290323 A EA 201290323A EA 201290323 A EA201290323 A EA 201290323A EA 024801 B1 EA024801 B1 EA 024801B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
dihydro
inden
cyano
oxadiazol
mmol
Prior art date
Application number
EA201290323A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201290323A1 (ru
Inventor
Эстер Мартинборуг
Маркус Эф Боэм
Адам Ричард Йегер
Юнко Тамийя
Лиминг Хуанг
Ингурути Брэнчмэри
Маниша Мурджани
Грэгг Алан Тимони
Джэнифер Эл Брукс
Роберт Пич
Фиона Лоррэйн Скот
Майкл Ален Хансон
Original Assignee
Рецептос Ллк
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=43992106&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA024801(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Рецептос Ллк filed Critical Рецептос Ллк
Publication of EA201290323A1 publication Critical patent/EA201290323A1/ru
Publication of EA024801B1 publication Critical patent/EA024801B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D271/06—1,2,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,2,4-oxadiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/72—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with nitrogen atoms and oxygen or sulfur atoms as ring hetero atoms
    • A01N43/74—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with nitrogen atoms and oxygen or sulfur atoms as ring hetero atoms five-membered rings with one nitrogen atom and either one oxygen atom or one sulfur atom in positions 1,3
    • A01N43/78—1,3-Thiazoles; Hydrogenated 1,3-thiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4245—Oxadiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C245/00—Compounds containing chains of at least two nitrogen atoms with at least one nitrogen-to-nitrogen multiple bond
    • C07C245/12—Diazo compounds, i.e. compounds having the free valencies of >N2 groups attached to the same carbon atom
    • C07C245/14—Diazo compounds, i.e. compounds having the free valencies of >N2 groups attached to the same carbon atom having diazo groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/49—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C255/58—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton containing cyano groups and singly-bound nitrogen atoms, not being further bound to other hetero atoms, bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/12—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton containing rings
    • C07C311/13—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton containing rings the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Описаны соединения структурной формулы I-R или I-Sили их фармацевтически приемлемая соль, где X представляет собой NH, NHC(=O)CHили NHCHCOOH и Y представляет собой CN. Указанные композиции являются агонистом рецептора сфингозин-1-фосфата, включая соединение по любому из пп.1-4, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем. Также описан способ лечения воспалительного заболевания кишечника (IBD), включая неспецифический язвенный колит и болезнь Крона у пациента, включающий введение пациенту в эффективном количестве соединений структурной формулы I-R или I-S или их фармацевтически приемлемой соли с частотой и длительностью, достаточными для обеспечения благоприятного воздействия на пациента.

Description

изобретение относится к соединениям, которые являются агонистами рецептора сфингозин-1-фосфата подтипа 1.
Уровень техники
Рецептор S1P1/EDG1 представляет собой G-белоксвязанный рецептор (GPCR) и является членом семейства рецепторов гена дифференциации эндотелиальных клеток (ЭДГ). Эндогенные лиганды рецепторов ЭДГ включают лизофосфолипиды, такие как сфингозин-1-фосфат (S1P). Как и все GPCR, лигирование рецептора вызывает сигналы вторичного мессенджера через активацию G-белков (альфа, бета и гамма).
Разработка низкомолекулярных агонистов и антагонистов S1P1 дала представление о некоторых физиологических ролях системы передачи сигнала рецептора S1P1/S1P. Агонизм рецептора S1P1 нарушает движение лимфоцитов, изолируя их в лимфатических узлах и других вторичных лимфоидных тканях. Это приводит к быстрой и обратимой лимфопении, и, вероятно, обусловлено лигированием рецептора как в лимфатических эндотелиальных клетках, так и в самих лимфоцитах (Rosen и др., Immunol. Rev., 2003, 195, c. 160-177). Клинически ценным следствием секвестрирования лимфоцитов является исключение их из проявлений воспалительных и/или аутоиммунных реакций в периферических тканях.
Сообщалось также, что агонизм S1P1 способствует выживанию предшественников олигодендроцитов (Miron и др., Ann. Neurol., 2008, 63, c. 61-71). Эта активность, в сочетании с секвестрированием лимфоцитов, может быть полезна при лечении воспалительных и аутоиммунных заболеваний центральной нервной системы.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к гетероциклическим соединениям, подходящим для воздействия в качестве агонистов S1P рецептора подтипа 1, S1P1; способам получения и способам применения, таким как лечение злокачественностей, опосредованных активацией S1P1, или при медицинском показании активации S1P1.
Некоторые варианты осуществления настоящего изобретения включают соединение структурной формулы I-R или Ι-S или его фармацевтически приемлемую соль
где X представляет собой NH2, NHC(=O)CH3 или NHCH2COOH;
Y представляет собой CN.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NH2.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHC(=O)CH3.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHCH2COOH.
В некоторых вариантах осуществления изобретение представляет собой композицию, являющуюся агонистом рецептора сфингозин-1-фосфата, включающую любое упомянутое выше соединение, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем.
Некоторые варианты осуществления изобретения представляют собой выделенный оптический изомер структурной формулы I-R или его фармацевтически приемлемую соль
- 1 024801
где X представляет собой NH2, -NHC(=O)CH3 или -NHCH2COOH;
Y представляет собой CN.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NH2.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHC(=O)CH3.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHCH2COOH.
В некоторых вариантах осуществления изобретение представляет собой композицию, являющуюся
агонистом рецептора сфингозин-1-фосфата, включающую любой упомянутый выше изомер, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем.
Некоторые варианты осуществления изобретения представляют собой выделенный оптический изомер структурной формулы I-R или его фармацевтически приемлемая соль
где X представляет собой NH2, NHC(=O)CH3 или NHCH2COOH;
Y представляет собой CN.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NH2.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHC(=O)CH3.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHCH2COOH.
В некоторых вариантах осуществления изобретение представляет собой композицию, являющуюся агонистом рецептора сфингозин-1-фосфата, включающую любой упомянутый выше изомер, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем.
В некоторых вариантах осуществления изобретение представляет собой способ лечения воспалительного заболевания кишечника (IBD) у пациента, включающий введение пациенту в эффективном количестве соединений структурной формулы I-R или I-S или их фармацевтически приемлемой соли с частотой и длительностью, достаточными для обеспечения благоприятного воздействия на пациента
где X представляет собой NH2, -NHCH2CH2OH, -NHC(=O)CH3 или -NHCH2COOH;
Y представляет собой CN.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NH2.
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHCH2CH2OH. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHC(=O)CH3. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHCH2COOH.
В некоторых вариантах осуществления способа IBD представляет собой неспецифический язвенный колит.
В некоторых вариантах осуществленияспособа IBD представляет собой болезнь Крона.
- 2 024801
Подробное описание изобретения
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, которые имеют терапевтический индекс по крайней мере 5, измеренный на крысах через 5 или 14 дней введения крысам соединения, где терапевтический индекс рассчитывают как соотношение (i) наиболее высокой дозы такого соединения, которая вызывает равное десяти процентам или менее повышение отношения веса легких к туловищу в конце 5 или 14 дней введения, к (ii) дозе такого соединения, вызывающей 50% лимфопении у крыс. В некоторых вариантах осуществления, такой терапевтический индекс составляет по крайней мере 10, и в некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс составляет по крайней мере 20. В некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс для соединения по крайней мере в пять раз больше, чем терапевтический индекс энантиомера такого соединения.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, которые имеют терапевтический индекс по крайней мере 5, измеренный на крысах через 5 или 14 дней введения крысам соединения, где терапевтический индекс рассчитывают как соотношение (i) наиболее высокой дозы такого соединения, которая вызывает равное десяти процентам или менее повышение отношения веса легких к туловищу в конце 5 или 14 дней введения, к (ii) дозе такого соединения, вызывающей 50% лимфопении у крыс. В некоторых вариантах осуществления, такой терапевтический индекс составляет по крайней мере 10, и в некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс составляет по крайней мере 20. В некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс для соединения больше, чем терапевтический индекс энантиомера такого соединения. В некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс для соединения составляет по крайней мере 150% терапевтического индекса энантиомера такого соединения.
В некоторых таких вариантах осуществления изобретение относится к соединению, выбранному из соединений 49, 50, 85, 86, 90, 91, 138, 139, 163, 164, 186, 187, 211, 234, 235 и 241 или любой его фармацевтически приемлемой соли.
В некоторых таких вариантах осуществления изобретение относится к соединению 50, 86 или 139 или любой его фармацевтически приемлемой соли.
В некоторых таких вариантах осуществления изобретение относится к соединению 163 или 186 или любой его фармацевтически приемлемой соли.
В некоторых таких вариантах осуществления изобретение относится к соединению 211, 234 или 241 или любой фармацевтически приемлемой соли.
В некоторых вариантах осуществления описаны способы применения соединения по изобретению для изготовления лекарственного средства, подходящего для лечения нарушения или злокачественности, в которых медицински показана активация или ингибирование рецептора сфингозин-1-фосфата подтипа 1.
Как используется в описании и формуле изобретения, формы единственного числа включают множественные формы, если из контекста ясно не предполагается иное.
Как используется здесь, "пациент" (в отношении лечения) означает млекопитающих и немлекопитающих. Млекопитающие включают, например, людей; нечеловекообразных приматов, например приматов и обезьян; крупный рогатый скот; лошадей; овец и коз. Немлекопитающие включают, например, рыб и птиц.
Используемый здесь термин "S1P1" относится к подтипу 1 рецептора сфингозин-1-фосфата, в то время как другие подтипы рецептора сфингозин-1-фосфата обозначены соответствующим образом, например, рецептор сфингозин-1-фосфата подтипа 3 обозначен как "S1P3".
"Рецептор", как хорошо известно в данной области, представляет собой биомолекулярную группу, обычно содержащую белок, который специфически связывает структурный класс лигандов или единичный нативный лиганд в живом организме, связывание с которыми заставляет рецептор преобразовывать связывающий сигнал в другой вид биологического действия, такой как сигнализация клетки, в которой произошло связывание, которой заставляет клетки изменять свою функцию в некоторой степени. Примером трансдукции является рецепторное связывание лиганда, вызывающее изменение активности "Gбелка" в цитоплазме живой клетки. Любая молекула, естественным или нет, что связывает рецептор и активирует его для передачи сигнала, называется "состязания" или "активатор". Любая молекула, природная или нет, которая связывается с рецептором, но не вызывает передачи сигнала, и которая может блокировать связывание агонистов и их последующую передачу сигнала, называется "антагонистом".
"Соединение S1P1", или "агонист S1P1", или "активатор S1P1", или "ингибитор S1P1", или "антагонист S1P1" являются терминами, используемыми здесь для описанных соединений, которые взаимодействуют в некотором роде с рецептором S1P подтипа 1. Они могут быть агонистами или активаторами, или они могут быть антагонистами или ингибиторами. "Соединение S1P1" по изобретению может обладать селективным действием на подтип 1 S1P рецепторного семейства, например соединение по изобретению может работать при более низкой концентрации в отношении подтипа 1 S1P рецепторного семейства по сравнению с другими подтипами S1P рецепторного семейства, в частности, "соединение S1P1" по изобретению может селективно воздействовать на подтип 1 рецепторов по сравнению с их действием на подтип 3 или рецепторы "S1P3".
- 3 024801
В некоторых вариантах осуществления соединения по изобретению являются ортостатическими агонистами. В некоторых других вариантах осуществления соединения по изобретению являются аллостерическими агонистами. Агонисты рецептора могут быть классифицированы как ортостерические или аллостерические. Ортостерические агонисты связываются с сайтом рецептора, что существенно перекрывается со связыванием природного лиганда и повторяет ключевые взаимодействия рецептора с природным лигандом. Ортостерические агонисты активируют рецептор с помощью молекулярного механизма, похожего на природный лиганд, и будут конкурировать с природным лигандом, и будут конкурентно антагонизироваться фармакологическими средствами, которые являются конкурентными антагонистами для природного лиганда. Аллостерические агонисты связываются с сайтом рецептора, что вызывает некоторые существенные взаимодействия, которые не перекрываются частично или полностью естественным лигандом. Аллостерические агонисты являются истинными агонистами и не являются аллостерическими усилителями. Следовательно, они активируют сигнализацию рецептора отдельно и без необходимости субмаксимальной концентрации природного лиганда. Аллостерические агонисты могут быть идентифицированы, когда известно, что антагонист является конкурентоспособными относительно ортостерического лиганда, показывающего неконкурентный антагонизм. Сайт аллостерического агониста может отражаться на рецепторном мутагенезе. Введение точечных мутаций в рецепторы, которые сохраняют рецепторную активацию аллостерическим агонистом, тогда как ослабление или отмена передачи сигнала, индуцированного ортостерическим агонистом или наоборот, обеспечивает формальные доказательства различия во взаимодействиях связывания. Ортостерические агонисты могут дестабилизировать структуры и конформации GPCR, в то время как аллостерические агонистов могут стабилизировать или дестабилизировать структуры и конформации GPCR. Аллостерические агонисты, в силу их различных взаимодействий с рецептором, могут быть фармацевтически полезны, поскольку аллостерический сайт может предоставлять дополнительные возможности для активности агониста и селективности в соответствующем семействе подтипов рецептора, которые разделяют аналогичный ортостерический лиганд. Кроме того, аллостерический сайт может потребовать различные физико-химические свойства агонистов по сравнению с ортостерическим лигандом. Эти химико-физические свойства, в том числе гидрофобность, ароматичность, распределение заряда и растворимость, могут также обеспечивать преимущества при производстве агонистов различных профилей фармакокинетики, биодоступности, распределения и метаболизма, которые способствуют разработке эффективных фармацевтических веществ.
Термин "по существу", как здесь используется, означает полностью или почти полностью, например, композиция, которая является "по существу, свободной" от компонента, не содержит ни одного компонента или содержит такое следовое количество, что любое соответствующее функциональное свойство композиции не зависит от присутствия следового количества, или если соединение является "по существу, чистым", то присутствуют лишь незначительные следы примесей.
"Лечение" или "лечить" здесь относится к облегчению симптомов, связанных с расстройствами или заболеваниями, или ингибирование дальнейшего прогрессирования или ухудшения этих симптомов, или предупреждение или профилактику заболевания или расстройства.
Выражение "эффективное количество", когда используется для описания применения соединения по изобретению для обеспечения лечения пациентов, страдающих расстройствами или злокачественностями, опосредованными рецептором сфингозин-1-фосфата подтипа 1, относится к количеству соединения по изобретению, которое является эффективным для связывания в качестве агонистов или антагонистов рецептора S1P1 в тканях человека, где S1P1 участвует в нарушении, при котором такое связывание происходит на уровне, необходимом для обеспечения полезного терапевтического воздействия на пациента. Аналогично, как здесь используется, "эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" соединения по изобретению относится к количеству соединения, которое облегчает, в целом или в части, симптомы, связанные с нарушением или состоянием, или останавливает или замедляет дальнейшее прогрессирование или ухудшение этих симптомов, или препятствует или обеспечивает профилактику нарушения или состояния. В частности, "терапевтически эффективное количество" относится к количеству, эффективному, при дозах и в течение определенного необходимого времени, для достижения желаемого терапевтического результата, действуя как агонист активности рецептора сфингозин-1фосфата подтипа 1 (S1P1). Терапевтически эффективное количество является также тем, при котором токсичные или вредные эффекты соединения по изобретению превышают терапевтически благоприятные эффекты. Например, в контексте лечения злокачественности, опосредованной активацией S1P1, терапевтически эффективное количество агониста S1P1 по изобретению представляет собой количество, достаточное для контроля злокачественностью, чтобы смягчить ход злокачественности, или для облегчения симптомов злокачественности. Примеры злокачественностей, которые могут быть излечены, включают рассеянный склероз, отторжение трансплантата, взрослый респираторный дистресс-синдром.
Подразумеваются все хиральные, диастереомерные, рацемические формы структур, если специально не указана конкретная стереохимия или изомерная форма. Соединения, используемые в настоящем изобретении, могут включать обогащенные или разделенные оптические изомеры при любых или всех асимметричных атомах, как указано в изображении, в любой степени обогащения. Рацемическая и диастереомерная смеси, а также индивидуальные оптические изомеры могут быть синтезированы так, чтобы
- 4 024801
быть, по существу, свободными от их энантиомерных или диастереомерных партнеров, и все это включено в объем конкретных вариантов осуществления изобретения.
Изомеры, полученные при наличии хирального центра, включают пары неналагаемых изомеров, которые называют "энантиомеры". Отдельные энантиомеры чистого соединения являются оптически активными, то есть они способны вращать плоскость поляризованного света. Отдельные энантиомеры обозначены в соответствии с системой Кана-Ингольда-Прелога. После определения приоритета в четырех группах, молекулы ориентируют так, что группа с самой низкой степенью важности отворачивается от зрителя. Затем, если убывание степени важности других групп происходит по часовой стрелке, то молекулу обозначают (R), и если убывание степени важности других групп происходит против часовой стрелки, то молекулу обозначают (S). В примерах степень важности Кана-Ингольда-Прелога представлена как A>B>C>D. Атом с самой низкой степенью важности D ориентирован от зрителя.
"Выделенный оптический изомер" обозначает соединение, которое было, по существу, очищено от соответствующего оптического изомера (изомеров) той же формулы. Предпочтительно выделенные изомеры имеют чистоту по крайней мере около 80%, более предпочтительно по крайней мере 90%, еще более предпочтительно по крайней мере 98%, наиболее предпочтительно по крайней мере около 99%, по весу.
Поворотная изомерия.
Понятно, что вследствие химических свойств (например, резонансное придание некоторого характера двойной связи C-N) ограниченного вращения вокруг амидной связи (как показано ниже), можно наблюдать отдельные виды ротамера, и даже, при определенных обстоятельствах, выделить такие виды, пример показан ниже. Далее ясно, что определенные структурные элементы, включая пространственные или объемные заместители на атоме азота амида, могут повысить стабильность ротамера до такой степени, что соединение может быть выделено, и существовать независимо, как отдельный стабильный ротамер. Настоящее изобретение, следовательно, включает любые возможные стабильные ротамеры соединений по изобретению, которые являются биологически активными при лечении заболевания, нарушения или состояния, при котором соединение по изобретению может быть эффективно, как здесь описано.
Региоизомерия.
Предпочтительные соединения настоящего изобретения имеют особое пространственное расположение заместителей в ароматических кольцах, что связано с взаимосвязью структуры и активности, демонстрируемой классом соединения. Часто такой механизм замещения обозначается системой нумерации, однако система нумерации часто не согласуется с различными циклическими системами. В шестичленных ароматических системах пространственные расположения определяются общей номенклатурой
"пара" для 1,4-замещения, "мета" для 1,3-замещения и "орто" для 1,2-замещения, как показано ниже.
Все структуры, входящие в объем формулы изобретения, являются "химически осуществимыми", это подразумевает, что структуры, приведенные в любых комбинациях или субкомбинациях необязательных заместителей, перечисленных в формуле изобретения, физически способны существовать по крайней мере с некоторой стабильностью, что может быть определено законами структурной химии и экспериментами. Структуры, которые являются химически неприемлемыми, не входят в объем заявляемых соединений.
Термины "включающий", "включая", "имеющий", "состоящий из" являются открытыми терминами, используемыми в настоящем документе, и не исключают наличия дополнительных элементов или компонентов. В заявленном элементе использование формы "включающий", "включая", "имеющий", "состоящий из" означает, что из какого бы элемента ни был он составлен, имеет, включает или состоит, он необязательно представляет собой единственный элемент, охватываемый заявленным термином, который содержит это слово.
"Соль", как хорошо известно в данной области техники, включает органическое соединение, такое
- 5 024801
как карбоновая кислота, сульфокислота, или амин, в ионной форме, в комбинации с противоионом. Например, кислоты в анионной форме могут образовывать соли с катионами, такими как катионы металла, например натрия, калия и им подобных; с солями аммония, такими как NH4 + или катионы различных аминов, в том числе тетраалкильные соли аммония, такие как тетраметиламмониевые и алкиламмониевые соли, такие как соли трометамина, или другие катионы, такие как триметилсульфоний и им подобные. "Фармацевтически приемлемая" или "фармакологически приемлемая" соль представляет собой соль, полученную из иона, который был одобрен для использования человеком, и, как правило, нетоксичную, такую как хлорид или натриевая соль. "Цвиттерион" является внутренней солью, такой, которая может быть получена в молекуле, которая имеет по крайней мере две ионизируемых группы, одну - образующую анион, а другую - катион, которые служат для уравновешивают друг друга. Например, аминокислоты, такие как глицин, могут существовать в цвиттерионной форме. "Цвиттерион" является солью в приведенном значении. Соединения настоящего изобретения могут присутствовать в форме солей. Термин "соли" включает дополнительные соли свободных кислот или свободных оснований, которые являются соединениями по изобретению. Соли могут быть "фармацевтически приемлемыми солями". Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям, которые обладают токсичностью в пределах, которые обеспечивают применимость для фармацевтического применения. Фармацевтически неприемлемые соли тем не менее могут обладать такими свойствами, как высокая кристалличность, которые находят применение при осуществлении настоящего изобретения, таких как, например удобство в процессе синтеза, очистки или получения состава из соединений по изобретению.
Подходящие фармацевтически приемлемые соли кислот могут быть получены из неорганических кислот или из органических кислот. Примерами неорганических кислот являются соляная, бромистоводородная, иодисто-водородная, азотная, угольная, серная и фосфорная кислоты. Соответствующие органические кислоты могут быть выбраны из алифатических, циклоалифатических, ароматических, аралифатических, гетероциклических, карбоновых и сульфоновых классов органических кислот, примерами которых являются муравьиная, уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, глюконовая, молочная, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, глюкуроновая, малеиновая, фумаровая, пировиноградная, аспарагиновая, глутаминовая, бензойная, антраниловая, 4-гидроксибензойная, фенилуксусная, миндальная, эмбоновая (памовая), метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, пантотеновая, трифторметансульфокислота, 2-гидроксиэтансульфоновая, п-толуолсульфокислота, сульфаниловая, циклогексиламиносульфоновая, стеариновая, альгиновая, β-гидроксибутановая, салициловая, галактаровая и галактуроновая кислота. Примеры фармацевтически неприемлемых кислотных аддитивных солей включают, например перхлораты и тетрафторбораты.
Подходящие фармацевтически приемлемые основные аддитивные соли соединений по изобретению включают, например, соли с металлом, в том числе щелочным металлом, щелочноземельным металлом и соли переходных металлов, такие как, например, соли кальция, магния, калия, натрия и цинка. Фармацевтически приемлемые основные аддитивные соли также включают органические соли, полученные из основных аминов, таких как, например, N.N'-дибензилэтилендиамин. хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этилендиамин, меглумин (N-метилглюкамин) и новокаин. Примеры фармацевтически неприемлемых основных аддитивных солей включают соли лития и цианаты. Хотя фармацевтически неприемлемые соли обычно не являются полезными в качестве лекарственных средств, такие соли могут быть полезны, например, в качестве промежуточных соединении в синтезе соединении, например для их очистки перекристаллизацией. Все эти соли могут быть получены с помощью традиционных средств из соответствующего соединения реакцией, например, соответствующей кислоты или основания с соединением. Термин "фармацевтически приемлемые соли" относится к нетоксичным неорганическим или органическим кислотным и/или основным солям, см., например, статью Lit и др., Salt Selection for Basic Drugs, 1986, Int J. Pharm., 33, c. 201-217, приведенную в качестве ссылки.
Неограничивающие примеры возможных солей по изобретению включают, но не ограничиваются ими, гидрохлорид, цитрат, гликолат, фумарат, малат, тартрат, мезилат, эзилат, циннамат, изетионат, сульфат, фосфат, дифосфат, нитрат, гидробромид, гидроиодид, сукцинат, формиат, ацетат, дихлорацетат, лактат, п-толуолсульфонат, памитат, пидолат, памоат, салицилат, 4-аминосалицилат, бензоат, 4ацетамидобензоат, глутамат, аспартат, гликолат, адипат, альгинат, аскорбат, безилат, камфорат, камфорсульфонат, камсилат, капрат, капроат, цикламат, лаурилсульфат, эдисилат, гентисат, галактарат, глуцептат, глюконат, глюкуронат, оксоглутарат, гиппурат, лактобионат, малонат, малеат, миндалат, напсилат, нападисилат, оксалат, олеат, себакат, стеарат, сукцинат, тиоцианат, ундециленат и ксинафоат.
Некоторые соединения по изобретению и их соли могут существовать в более чем одной кристаллической форме, и настоящее изобретение включает каждую кристаллическую форму и их смеси. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут существовать в несольватированной, а также сольватированной формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, образуя гидраты или аддукты со спиртами, такими как С|-4спирты и им подобные. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут быть выделены в смеси с молекулами растворителя путем кристаллизации при выпаривании соответствующего растворителя. Такие растворители включают, но не ограничиваются ими, толуол, тетрагидрофуран, диоксан, диметилформамид, ацетонитрил, ацетат, такой как метилацетат, этил- 6 024801
ацетат, бутилацетат, изобутилацетат, пропил- и изопропилацетат, простые эфиры, такие как диэтиловый эфир и этиловый эфир, спирты, такие как метанол, этанол, 1- или 2-бутанол, 1- или 2-пропанол, пентанол, диметилсульфоксид. Обычно, изображение соединения структурой или наименованием подразумевает включение соединения в любой форме (например, само по себе, в виде гидрата, сольвата или в иной смеси).
Кроме того, когда особенности или аспекты изобретения описаны в терминах групп Маркуша, специалистам в данной области понятно, что изобретение также описывается терминами отдельных членов или подгрупп членов группы Маркуша. Например, если X описывается как выбранный из группы, состоящей из брома, хлора и йода, притязания распространяются на X, представляющий собой бром, и на X, представляющий собой хлор и бром. Кроме того, когда особенности или аспекты изобретения описаны в терминах группы Маркуша, специалистам в данной области понятно, что изобретение также описывается в терминах любой комбинации отдельных членов или подгруппы членов группы Маркуша. Таким образом, например, если X описывается как выбранный из группы, состоящей из брома, хлора и йода, Y выбран из группы, состоящей из метила, этила и пропила, подробно описаны притязания, где X представляет собой бром и Y представляет собой метил.
Композиции и комбинации для лечения.
Соединения S1P1, их фармацевтически приемлемые соли или гидролизуемые сложные эфиры настоящего изобретения могут объединяться с фармацевтически приемлемым носителем для получения фармацевтических композиций, полезных для лечения описанных здесь биологических состояний или нарушений у млекопитающего, и более предпочтительно, человека. Конкретный носитель, используемый в этих фармацевтических композициях, может изменяться в зависимости от типа нужного введения (например, внутривенного, перорального, местного, суппозиторного или парентерального).
При получении композиций в пероральных жидких лекарственных формам (например, суспензии, эликсиры и растворы) могут использоваться обычные фармацевтические средства, такие как вода, гликоли, масла, спирты, ароматизаторы, консерванты, красители и им подобное. Кроме того, при получении пероральных твердых лекарственных форм (например, порошки, таблетки и капсулы), могут использоваться носители, такие как крахмалы, сахара, разбавители, гранулирующие агенты, смазывающие вещества, связующие, разрыхлители и им подобные.
Другой аспект варианта осуществления по изобретению относится к композициям соединений по изобретению, отдельно или в комбинации с другим ингибитором S1P1 или терапевтическим агентом другого типа, или ими обоими. Как указано в настоящем документе, соединения по изобретению включают стереоизомеры, таутомеры, сольваты, гидраты, соли, в том числе фармацевтически приемлемые соли, и их смеси. Композиции, содержащие соединение по изобретению, могут быть получены обычными методами, например, как описано в книге The Science and Practice of Pharmacy, 19-oe издание, 1995, включенной в качестве ссылки. Композиции могут присутствовать в обычных формах, например капсулах, таблетках, аэрозолях, растворах, суспензиях или составах местного применения.
Типичные композиции включают соединение по изобретению и фармацевтически приемлемый эксципиент, которым может быть носитель или разбавитель. Например, активное соединение, как правило, смешивают с носителем, или разбавляют носителем, или заключают в носитель, который может присутствовать в виде ампул, капсул, саше, бумаги или других контейнеров. Когда активное соединение смешивают с носителем, или когда носитель выступает разбавителем, он может быть твердым, полутвердым или жидким материалом, который выступает в качестве носителя, эксципиента или среды для активного соединения. Активное соединение может быть адсорбировано на гранулированном твердом носителе, например, содержащемся в саше. Некоторыми примерами подходящих носителей являются вода, растворы солей, спирты, полиэтиленгликоль, полигидроксиэтоксилированное касторовое масло, арахисовое масло, оливковое масло, желатин, лактоза, терра альба, сахароза, декстрин, карбонат магния, сахар, циклодекстрин, амилоза, стеарат магния, тальк, желатин, агар, пектин, камедь, стеариновая кислота или низшие алкильные эфиры целлюлозы, кремниевая кислота, жирные кислоты, амины жирных кислот, моноглицериды и диглицериды жирных кислот, пентаэритритовые эфиры жирных кислот, полиоксиэтилен, гидроксиметилцеллюлоза и поливинилпирролидон. Кроме того, носитель или разбавитель может включать любой материал замедленного высвобождения, известный в данной области, такой как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, отдельно или в смеси с воском.
Составы могут быть смешаны с добавками, которые не реагируют с активными соединениями. Такие добавки могут включать увлажняющие агенты, эмульгаторы и суспендирующие агенты, соль для регулирования осмотического давления, буферы и/или красители, консерванты, подсластители или ароматизаторы. При желании композиции можно стерилизовать.
Способом введения может быть любой способ, который эффективно транспортирует активное соединение по изобретению, которое ингибирует активность фермента киназы фокальной адгезии, в соответствующий нужный сайт действия, такой как пероральный, назальный, легочный, буккальный, подкожный, внутрикожный, трансдермальный или парентеральный, например, ректальный, жировой, подкожный, внутривенный, внутриуретральный, внутримышечный, интраназальный, глазной раствор или мазь, причем пероральный путь является предпочтительным.
- 7 024801
Для парентерального введения носитель, как правило, включает стерильную воду, хотя также могут быть включены другие ингредиенты, которые облегчают растворимость или выступают в качестве консервантов. Кроме того, также могут быть получены инъекционные суспензии, и в этом случае могут использоваться соответствующие жидкие носители, суспендирующие агенты и тому подобные.
Для местного введения соединения настоящего изобретения могут быть составлены с помощью мягких увлажняющих основ, таких как мази или кремы.
Если для перорального введения используется твердый носитель, препарат может быть таблетирован, помещен в твердую желатиновую капсулу в виде порошка или гранул, или он может присутствовать в форме пастилок или таблеток. Если используется жидкий носитель, препарат может присутствовать в виде сиропа, эмульсии, мягких желатиновых капсул или стерильной инъекционной жидкости, такой как водная или неводная жидкая суспензия или раствор.
Инъекционные дозированные формы, как правило, включают водные суспензии или масляные суспензии, которые могут быть получены с использованием подходящего диспергирующего или увлажняющего агента и суспендирующего агента. Инъекционные формы могут присутствовать в растворенной фазе или в форме суспензии, которую получают с растворителем или разбавителем. Приемлемые растворители или носители включают стерилизованную воду, раствор Рингера или изотонический водный солевой раствор. Альтернативно, стерильные масла могут использоваться в качестве растворителей или суспендирующих агентов. Предпочтительно масло или жирная кислота является нелетучей, включая природные или синтетические масла, жирные кислоты, моно-, ди- или триглицериды.
Для инъекций состав также может представлять собой порошок, подходящий для восстановления соответствующим раствором, как описано выше. Примеры их включают, но не ограничиваются ими, порошки, высушенные замораживанием-сушкой, роторной сушкой или сушкой спреем, аморфные порошки, гранулы, осадки или твердые частицы. Для инъекций составы необязательно могут содержать стабилизаторы, модификаторы pH, поверхностно-активные вещества, модификаторы биодоступности и их комбинации. Соединения могут быть составлены для парентерального введения путем инъекции, такой как болюсная инъекция или инфузия. Единичной дозированной формой для инъекций могут быть ампулы или многодозовые контейнеры.
Составы по изобретению могут быть разработаны с получением быстрого, длительного или отсроченного высвобождения активного ингредиента после введения пациенту, используя методики, хорошо известные в данной области техники. Таким образом, составы можно получать для контролируемого высвобождения или для медленного высвобождения.
Композиции, предусмотренные настоящим изобретением, могут включать, например, мицеллы или липосомы или другие инкапсулированные формы, или могут вводиться в форме длительного высвобождения для обеспечения длительного хранения и/или эффективной доставки. Следовательно, составы могут быть спрессованы в шарики или цилиндры и имплантированы подкожно или внутримышечно в качестве депонируемых инъекций. Такие имплантаты могут включать известные инертные материалы, такие как силиконы и биоразлагаемые полимеры, например, полилактид-полигликолиды. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды).
Для назального введения препарат может содержать соединение по изобретению, который ингибирует активность киназы фокальной адгезии, растворенный или суспендированный в жидком носителе, предпочтительно водном носителе, для аэрозольного применения. Носитель может содержать добавки, такие как солюбилизирующие агенты, например пропиленгликоль, поверхностно-активные вещества, усилители абсорбции, такие как лецитин (фосфатидилхолин) или циклодекстрин, или консерванты, такие как парабены.
Для парентерального применения особенно подходят инъекционные растворы или суспензии, предпочтительно водные растворы с активным соединением, растворенным в полигидроксилированном касторовом масле.
Дозированные формы могут вводиться один раз в день или более одного раза в день, например дважды или трижды в день. Альтернативно, лекарственные формы могут вводиться реже, чем один раз в день, например на любой другой день или один раз в неделю, если установлено, что это целесообразно по назначению врача.
Соединения по изобретению могут использоваться терапевтически в комбинации с i) одним или несколькими другими ингибиторами S1P1 и/или ii) одним или несколькими другими типами ингибиторов протеинкиназы и/или одним или несколькими другими типами терапевтических агентов, которые могут вводиться перорально в той же дозированной форме, в отдельной пероральной лекарственной форме (например, последовательно или непоследовательно) или в виде инъекции вместе или раздельно (например, последовательно или непоследовательно).
Соответственно, в другом варианте осуществления изобретение относится к комбинациям, включающим:
a) соединение по изобретению, как описано выше, и b) одно или несколько соединений, включающих: i) другие соединения настоящего изобретения,
- 8 024801
ii) другие лекарственные средства, пригодные для лечения злокачественности, для которых медицински показана активация S1P1, например рассеянного склероза, отторжения трансплантата или зрелого респираторного дистресс-синдрома.
Дозы и составы для других используемых агентов, где возможно, приведены в последнем выпуске Physicians' Desk Reference, включенном в качестве ссылки.
Способы лечения.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает перорально биодоступные соединения, которые специфично агонизируют S1P1 без связывания (S1P2, S1P3 и S1P4), или имеют существенную специфичность по отношению к (S1P5), другим рецепторам EDG. Селективный агонист S1P1 может использоваться для лечения заболеваний с аутоиммунным компонентом, компонентом гиперактивного иммунного ответа, ангиогенеза или воспалительного компонента, но не ограничиваются такими состояниями. Селективные агонисты S1P1 имеют преимущества по сравнению с обычными терапиями благодаря повышенному терапевтическому окну благодаря пониженной токсичности вследствие привлечения других рецепторов EDG.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает соединения, которые связываются с высоким сродством и специфичностью с рецептором S1P1 в качестве агониста. После лигирования рецептора S1P1 агонистом, передача сигнала происходит через Gm, ингибируя выработку цАМФ аденилатциклазой.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу активации или агонизма (то есть проявления агонизирующего действия, действию в качестве агонистов) подтипа рецептора сфингозин-1-фосфата, такого как S1P1, соединением по изобретению. Способ включает контактирование рецептора с соединением по изобретению в соответствующей концентрации, чтобы вызвать активацию рецептора. Контактирование может происходить in vitro, например при проведении анализа, чтобы определить активность в отношении активации рецептора S1P соединением по изобретению, проходящим эксперименты, связанные с представлением официального одобрения.
В некоторых вариантах осуществления способ активации рецептора S1P, такого как S1P1, может также осуществляться in vivo, то есть в живом организме млекопитающего, такого как человек или тестируемое животное. Соединение по изобретению может вводиться в живой организм одним из способов, описанных выше, например, перорально, или может вводиться локально в ткань организма, например в виде инъекции в опухоль организма. В присутствии соединения по изобретению имеет место активация рецептора, и может быть изучена его эффективность.
Вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения злокачественности у пациентов, для которых медицински показана активация рецептора S1P, такого как S1P1, в котором пациенту вводят соединение по изобретению в дозе, с частотой и длительностью, достаточными для обеспечения благоприятного воздействия на пациента. Соединение по изобретению может вводиться любыми подходящими средствами, примеры которых описаны выше.
Осуществление некоторых вариантов.
Реагенты: (i) Zn(CN)2, Pd(PPh3)4, NMP; (ii) (S)-(-)-2-метил-CBS-оксазаборолидин, BH3-DMS, толуол; (iii) NH2OH-HCl, Na2CO3 или ТЭА, EtOH; (iv) HOBt, EDC, замещенная бензойная кислота, DMF.
^)-энантиомер получали аналогично методике, приведенной на схеме 1, используя (И)-(+)-2-метилCBS-оксазаборолидин на стадии (ii). Рацемический материал может быть получен аналогично методике, приведенной на схеме 1, используя NaBH4 на стадии (ii).
- 9 024801
Реагенты: (i) пиридин, R'"-COCl, ДХМ.
(8)-энантиомер и рацемический материал может быть получен аналогично методике, приведенной на схеме 2, используя соответствующие исходные материалы.
Реагенты: (i) (a) MsCl, пиридин; (b) TsCl, пиридин; (с) NsCl, пиридин; (d) SOCl2, ДХМ; (е) SOCl2, пиридин, ДХМ; (f) NaN3, PPh3, CBr4; (ii) (a) DIEA, DMA, HNR'R"; (b) DIEA, NaBr или NaI, DMA, HNR'R".
Энантиомерно обогащенный материал может быть получен аналогично методике, приведенной на схеме 3, используя (R)- или (Ъ)-инданолы.
Схема 4
Реагенты: (i) Zn(CN)2, Pd(PPh3)4, NMP; (ii) ^)-2-метилпропан-2-сульфинамид, Ti(OEt)4, толуол; (iii) NaBH4, ТГФ; (iv) 4 M HCl в диоксане, MeOH; (v) Boc2O, ТЭА, ДХМ; (vi) NH2OH HCl, ТЭА, EtOH; (vii) HOBt, EDC, замещенная бензойная кислота, DMF; (viii) 4 M HCl в диоксане; (ix) (a) R'-LG или
- 10 024801
R"-LG, где LG представляет собой уходящую группу, K2CO3, CH3CN; (b) R1-CO2H или R2-CO2H, HOBt, EDC, DMF или R1-COCl или R2-COCl, ТЭА, ДХМ; (c) R1-SO2Cl или R3-SO2Cl, ТЭА, ДХМ; (d) R2-CHO, HOAc, NaBH4 или NaCNBH3 или Na(OAc)3BH, MeOH; (e) R1-OCOCl или R2-OCOCl, DIEA, DMF;
(f) HN(R5R5), CDI, ТЭА, ДХМ; (g) H2NSO2NH2, Δ, диоксан; (h) диметилоксиран, Δ, EtOH; (x) (а) если R' или R"=H, затем могут осуществляться реакции (ix)(a-d); (b) если R' или R" содержит сложный эфир, затем может осуществляться (i) гидролиз NaOH, EtOH или (ii) восстановление NaBH4, MeOH; (с) если R' или R" содержит кислоту, затем могут осуществляться конденсации HN(R5R5), HOBt, EDC, DMF; (d) если R' или R" содержит подходящий активированный алкен, затем могут осуществляться реакции Михаэлиса HN(R5R5), DMF.
(Ъ)-энантиомер получали аналогично методике, приведенной на схеме 4, используя (S)-2метилпропан-2-сульфинамид на стадии (ii).
Реагенты: (i) NaH, DMF и R''-галогенид; (ii) NH2OH-HCl или Na2CO3, ТЭА, EtOH; (iii) HOBt, EDC, замещенная бензойная кислота, DMF; (iv) 4 M HCl в диоксане; (v) (a) R'-LG, ТЭА, ДХМ; (b) R1-SO2Cl или R3-SO2Cl, ТЭА, ДХМ; (c) R1-COCl или R2-COCl, ТЭА, ДХМ или R1-CO2H или R2-CO2H, HOBt, EDC, DMF или R1-COCl или R2-COCl, ТЭА, ДХМ; (d) R2-CHO, HOAc, NaBH4 или NaCNBH3 или Na(OAc)3BH, MeOH; (а) если R' или R" содержит сложный эфир, затем может осуществляться (i) гидролиз NaOH, EtOH или (ii) восстановление NaBH4, MeOH; (b) если R' или R" содержит кислоту, затем могут осуществляться конденсации H(R5R5), HOBt, EDC, DMF; (с) если R' или R" содержит подходящим образом активированный алкен, затем может осуществляться реакция Михаэлиса HN(R5R5)DMF.
(Ъ)-энантиомер получали аналогично методике, приведенной на схеме 5, из (Ъ)-трет-бутил 4-циано2,3 -дигидро -1H -инден-1 -илкарбамат.
Примеры
Общие способы.
1H ЯМР (400 МГц) и 13C ЯМР (100 МГц) получали в растворе дейтериохлороформа (CDCl3), дейтериометанола (CD3OD) или диметилсульфоксида - D6 (ДМСО). ЯМР-спектры обрабатывали с помощью Mestrec 5,3,0 и 6,0,1. Пики 13C ЯМР, которые помещены в скобки, представляют собой два ротамера одного углерода. Масс-спектры (LCMS) получали с помощью Agilent 1100/6110 ВЭЖХ системы, оснащенной Thompson ODS-A, 100A, 5 мкм (50x4,6 мм) колонка, используя воду с 0,1% муравьиной кислоты в качестве подвижной фазы А, и ацетонитрил с 0,1% муравьиной кислоты в качестве подвижной фазы В. Градиент составлял 20-100% подвижной фазы В в течение 2,5 мин, затем при 100% в течение 2,5 мин. Скорость потока составляла 1 мл/мин. Если не указано иное, данные LCMS приведены с помощью этого способа. Для более гидрофобных соединений использовали следующий градиент, обозначенный как способ 1: 40-95% в течение 0,5 мин, выдерживали при 95% в течение 8,5 мин, затем возвращали до 40% в течение 2 мин, со скоростью потока 1 мл/мин. Конечные соединения проверяли на чистоту с помощью способа 2: 5% в течение 1 мин, 5-95% в течение 9 мин, затем выдерживали при 95% в течение 5 мин, со скоростью потока 1 мл/мин. Энантиомерный избыток определяли объединением пиков, которые разделяли на колонке Chiralpak AD-H, 250x4,6 мм, размер частиц 5 мкм. Скорость потока 1 мл/мин и изократная подвижная фаза. Если не указано иное, хиральные данные приведены с помощью этого способа. Альтернативно, хиральные разделения осуществляли в следующих условиях, обозначенных как хиральный способ 1: колонка Chiralpak AY-H, 250x4,6 мм, размер частиц 5 мкм. Скорость потока 1 мл/мин и изократная подвижная фаза. Хиральный способ 2: колонка Chiralcel OZ-3, 150x4,6 мм, размер частиц 3 мкм, со скоростью потока 0,75 мл/мин. Пиридин, дихлорметан (ДХМ), тетрагидрофуран (ТГФ) и толуол использовали в методиках от Aldrich в надежно закрытых бутылках, хранящихся в атмосфере азота (N2).
- 11 024801
Все реакционные смеси перемешивали магнитной мешалкой, и температурами являются внешние температуры реакции. Хроматографии осуществляли с помощью Combiflash Rf ускоренной системы очистки (Teledyne Isco), оснащенной Redisep (Teledyne Isco), на колонках с силикагелем (SiO2). Препаративные ВЭЖХ очистки осуществляли в системе Varian Pro Star/Prep Star, используя воду, содержащую 0,05% трифторуксусной кислоты в качестве подвижной фазы А, и ацетонитрил с 0,05% трифторуксусной кислотой в качестве подвижной фазы В. Градиент составлял 10-80% с подвижной фазой В в течение 12 мин, выдерживали при 80% в течение 2 мин, и затем восстанавливали до 10% в течение 2 мин, со скоростью потока 22 мл/мин. Могут использоваться другие методы, аналогичные описанному. Фракции собирали с помощью коллектора фракций Varian Prostar, и упаривали с помощью вакуумного насоса Savant SpeedVac Plus. Соединения с солеобразующими центрами являлись солями с трифторуксусной кислотой (ТФУК). Микроволновое облучение осуществляли с помощью микроволнового реактора Biotage Initiator, оснащенного сосудами для микроволнового излучения Biotage. Использовали следующие сокращения: этилацетат (EA), триэтиламин (ТЭА), диэтиламин (DEA), гидроксибензотриазол (HOBt), гидрохлорид 1этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (EDC), изопропанол (IPA), диметилформамид (DMF), диметилацетамид (DMA). Норит представляет собой активированный уголь.
Экспериментальные методики.
1 -Оксо -2,3 -дигидро -1 Н-инден-4 -карбо нитрил (INT -1)
К перемешиваемому раствору 4-бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-она (100,0 г, 0,48 моль) в 150 мл 1метил-2-пирролидин (NMP) добавляли цианид цинка (111,8 г, 0,95 моль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий [Pd(PPh3)4] (2,75 г, 0,024 моль). Раствор дегазировали N2 и реакционную смесь нагревали при 95°C в течение 7 ч. После охлаждения реакционную смесь выливали в ледяную воду (3,5 л). Соединение и неорганические соли Zn осаждались. Твердое вещество собирали и разделяли между ДХМ (3x100 мл) и водой. Органические слои отфильтровывали для удаления солей Zn и фильтрат концентрировали и перекристаллизовывали из смеси 4:1 EtOH и МеОН (400 мл) с получением 45,5 г (60%) 1-оксо-2,3-дигидро-1Н-инден-4-карбонитрила INT-1 в виде светло-желтого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H7NO: 157,2; обнаруж. 158,1 [M+H]+, tR=2,67 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,00-7,90 (m, 1H), 7,86 (dd, J=7,5, 1,1, 1H), 7,50 (t, J=7,6, 1H), 3,40-3,19 (m, 2H), 2,90-2,61 (m, 2H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 204,70, 157,90, 138,38, 137,88, 128,44, 128,28, 116,31, 111,70, 36,01, 25,49.
(8)-1-Гидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-карбонитрил (INT-2)
В 3-горлую колбу, оснащенную внутренним термометром и капельной воронкой, добавляли раствор (К)-(+)-2-метил-ОБ8-оксазаборолидина в толуоле (3,0 мл) и боран-диметилсульфид (300 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, затем разбавляли ДХМ (25 мл). Добавляли боран-диметилсульфид (6,0 мл) и после перемешивания в течение 5 мин реакционную смесь охлаждали до -20°C. Добавляли по каплям 1-оксо-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбонитрил INT-1 (4,7 г, 30 ммоль) в ДХМ (25 мл) через капельную воронку в течение 20 мин, поддерживая температуру реакции при -20±5°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, затем гасили добавлением по каплям МеОН (20 мл). После прекращения выделения водорода добавляли МеОН (30 мл) и удаляли нагреванием при атмосферном давлении. Добавляли МеОН (50 мл) два раза, и дважды удаляли нагреванием. Весь растворитель упаривали с получением твердого вещества, которое перекристаллизовывали из EA (9 мл) и гексана (22 мл). Соединение отфильтровывали и промывали смесью 5:1 гексан/EA (30 мл) с получением 3,73 г (78%) ^-Ьгидрокси^З-дигидро-Ш-инден^-карбонитрила INT-2 в виде белого порошка. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H9NO: 159,1; обнаруж. 160,1 [M+H]+, tR=2,39 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,62 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,53 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,32 (t, J=7,6 Гц, 1H), 5,28 (d, J=4,1 Гц, 1H), 3,23 (ddd, J=17,0, 8,7, 4,4 Гц, 1H), 3,04-2,90 (m, 1H), 2,64-2,51 (m, 1H), 2,00 (dddd, J=13,4, 8,7, 7,1, 5,7 Гц, 1H), 1,91 (d, J=5,4 Гц, 1H).
Хиральная ВЭЖХ. ^-Вгидрокси^З-дигидро-Ш-инден^-карбонитрил элюировали 20% IPA в гексане: >99,9% ее, tR=7,42 мин. (И)-энантиомер получали аналогичным образом, используя (S)-(-)-2метил-CBS-оксазаборолидин. tR для (И)-энантиомера=б,79 мин.
- 12 024801
(+/-) 1 -Гидрокси-2,3 -дигидро- 1Н-инден-4-карбонитрил
К перемешиваемой суспензии 1-оксо-2,3-дигидро-1Н-инден-4-карбонитрила (1,2 г, 7,64 ммоль) и силикагеля (каталитическое количество) в EtOH при 0°C добавляли NaBH4 (237,2 мг, 7,64 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении и продукт очищали хроматографией (50% EA/гексан) с получением 1,02 г (82,3%) 1-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-карбонитрила в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H9NO; 159,18; обнаруж. 160,1 [M+H]+, tR=2,39 мин.
(S)-N, 1-Дигидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-карбоксимидамид (INT-3)
К гидрохлориду гидроксиламина (0,87 г, 12,5 ммоль) и карбонату натрия (1,32 г, 12,5 ммоль) в EtOH (20 мл) добавляли ^)-1-гидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден-4-карбонитрил INT-2 (1,59 г, 10 ммоль) одной порцией и раствор нагревали при кипении с обратным холодильником. Через 16 ч реакционную смесь охлаждали и отфильтровывали для удаления твердых веществ. EtOH удаляли и соединение очищали хроматографией (МеОН/ДХМ) с получением 1,74 г (90%) ^)-^1-дигидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден4-карбоксимидамида INT-3 в виде белой пены. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H12N2O2: 192,1; обнаруж.: 193,1 [M+H]+, tR=0,56 мин.
1H ЯМР (400 МГц, MeOD) δ 10,30 (s, 1H), 9,97 (s, 1H), 7,72-7,58 (m, 1H), 7,46-7,37 (m, 2H), 5,22 (t, J=6,5, 1H), 3,17-3,03 (m, 1H), 2,99-2,83 (m, 1H), 2,49 (dddd, J=11,4, 8,0, 7,0, 4,4, 1H), 2,02-1,88 (m, 1H).
^)-^1-Дигидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден-4-карбоксимидамид получали аналогичным образом из ^)-1-гидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден-4-карбонитрила.
Общая методика 1.
Получение инданолов.
К бензойной кислоте (1 экв.) в DMF (0,15 М) добавляли HOBt (1,5 экв.) и EDC (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2-16 ч до полной активации кислоты. (R)- или ^)-^1-дигидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден-4-карбоксимидамид добавляли одной порцией и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч до полного образования предварительно циклизованного промежуточного соединения. Реакционную смесь затем нагревали при 85°C в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду, смесь оставляли выдерживаться. Полученный осадок отфильтровывали. Материал очищали хроматографией (EA/гексан) или перекристаллизовывали с получением 5-(3-(1-гидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)1,2,4-оксадиазол-5-ил)бензолов в виде белого твердого вещества.
Соединения 1-12 получали, используя общую методику 1.
^)-5-(3-(1-Гидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонигрил (соединение 6)
Получали, используя общую методику 1. К 3-циано-4-изопропоксибензойной кислоте (93,2 мг, 0,45 ммоль) в DMF (3 мл) добавляли HOBt (104,3 мг, 0,68 ммоль) и EDC (130,6 мг, 0,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч до полной активации кислоты. (S)-N,1дигидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден-4-карбоксимидамид INT-2 (97 мг, 0,5 ммоль) добавляли одной порцией и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Сырой материал нагревали при 85°C в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (15 мл), смесь оставляли выдерживаться и темно-коричневый осадок отфильтровывали. Осадок очищали хроматографией на силикагеле (EA/гексан) с получением 73 мг (40%) ^)-5-(3-(1-гидрокси-2,3дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 6 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C21H19N3O3: 361,1; обнаруж. 362,1 [M+H]+, tR=3,63 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,46 (d, J=2,1, 1Н), 8,36 (dd, J=8,9, 2,2, 1H), 8,16 (dd, J=7,7, 0,5, 1H), 7,63 (d, J=7,5, 1H), 7,46 (t, J=7,6, 1H), 7,15 (d, J=9,0, 1H), 5,36 (dd, J=12,6, 6,8, 1H), 4,82 (hept, J=6,1, 1H), 3,54 (ddd,J=17,5, 8,7, 4,6, 1H), 3,31-3,18 (m, 1H), 2,63 (dddd,J=13,2, 8,4, 7,1, 4,7, 1H), 2,07 (dddd, J=14,1, 8,7, 6,6, 5,5, 1H), 1,84 (d, J=7,1, 1H), 1,50 (d, J=6,1, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 173,07, 168,30, 162,46, 148,27, 142,29, 134,57, 133,77, 127,53, 127,28, 127,05, 122,26, 116,00, 115,25, 114,87, 102,43, 74,05, 72,49, 35,03, 30,80, 21,46.
- 13 024801
Хиральная ВЭЖХ. (8)-5-(3-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрил элюировали 20% IPA в гексане: >99,9% ее, tR=25,07 мин. (И)-5-(3-(1-гидрокси2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил 5 и рацемический материал получали аналогичным образом из ^)-1-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-карбонитрила и рацемического 1-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-карбонитрила соответственно, используя общую методику 1. tR для ^)-энантиомера=17,60 мин.
^)-4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил ацетат (соединение 13)
В колбу, содержащую ^)-5-(3-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрил 5 (36 мг, 0,10 ммоль) в ДХМ (1 мл), добавляли пиридин (24 мкл, 0,3 ммоль) и ацетилхлорид (21 мкл, 0,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 суток. Сырую реакционную смесь промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили сульфатом магния и очищали хроматографией (EA/гексан) с получением 37 мг (92%) (R)-4-(5-(3циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил ацетата 13 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H21N3G4: 403,2; обнаруж. 426,1 [M+Na]+, tR=4,19 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,37 (d, J=2,1, 1Н), 8,27 (dd, J=8,9, 2,2, 1Н), 8,10 (dd, J=7,7, 0,9, 1Н), 7,53 (d, J=7,4, 1H), 7,35 (t, J=7,7, 1H), 7,06 (d, J=9,0, 1H), 6,21 (dd, J=7,2, 3,7, 1H), 4,73 (hept, J=6,1, 1H), 3,44 (ddd, J=17,5, 8,3, 6,3, 1H), 3,26 (ddd, J=17,6, 8,7, 4,8, 1H), 2,52 (tdd, J=14,9, 7,9, 6,3, 1H), 2,21-2,06 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,41 (d, J=6,1, 6H).
^)-4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ила пивалат (соединение 14)
В колбу, содержащую ^)-5-(3-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрил 5 (36 мг, 0,10 ммоль) в ДХМ (1 мл), добавляли пиридин (24 мкл, 0,3 ммоль) и пивалоилхлорид (37 мкл, 0,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 суток. Сырую реакционную смесь промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили сульфатом магния и очищали хроматографией (EA/гексан) с получением 23 мг (52%) (R)-4-(5-(3циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-илпивалата 14 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H27N3G4: 445,2, tR=4,7 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,37 (d, J=2,2, 1Н), 8,28 (dd, J=8,9, 2,2, 1Н), 8,12-8,05 (m, 1Н), 7,46 (d, J=7,4, 1H), 7,34 (t, J=7,6, 1H), 7,06 (d, J=9,0, 1H), 6,19 (dd, J=7,3, 4,6, 1H), 4,73 (hept, J=6,1, 1H), 3,44 (ddd, J=17,5, 8,7, 5,4, 1H), 3,24 (ddd, J=17,5, 8,6, 5,7, 1H), 2,56 (tdd, J=8,6, 7,4, 5,4, 1H), 2,12-1,99 (m, 1H), 1,41 (d, J=6,1, 6H), 1,14 (s, 9H).
Общая методика 2. Получение инданаминов из инданолов.
В колбу, содержащую рацемический 5-(3-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил (1экв.) в ДХМ (0,14 М), при 0°C добавляли SGCl2 (2 экв.). После перемешивания в течение 30 мин реакционную смесь концентрировали в вакууме и помещали в высокий вакуум на 2 ч. Полученный сырой хлорид растворяли в DMA (0,02 М). Добавляли амин (3 экв.), DIEA (3 экв.), в некоторых случаях NaBr (3 экв.), и полученные реакционные смеси перемешивали при 55-60°C в течение ночи и очищали препаративной ВЭЖХ или колоночной хроматографией. Если амин содержал простой эфир, материал может далее подвергаться гидролизу NaGH с получением кислоты. Диамины, защищенные Boc группами, могут быть разблокированы с помощью ТФУК.
Соединения 15-48 получали, используя общую методику 2.
- 14 024801
5-(3-(1-((1-Гидрокси-2-метилпропан-2-ил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение 15)
Получали, используя общую методику 2, из 2-амино-2-метилпропан-1-ола. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H28N4O3: 432,5; обнаруж. 433,2 [M+H]+, tR=6,58 мин (способ 2).
5-(3-(1-(4-Гидроксипиперидин-1-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрил (соединение 16)
Получали, используя общую методику 2, из пиперидин-4-ола. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H28N4O3: 444,5; обнаруж. 445,2 [M+H]+, tR=6,42 мин (способ 2).
5-(3-(1-((1,3-Дигидроксипропан-2-ил)амино)-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрил (соединение 17)
Получали, используя общую методику 2, из 2-аминопропан-1,3-диола. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H26N4O4: 434,5; обнаруж. 435,2 [M+H]+, tR=6,24 мин (способ 2).
Метил 1-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1ил)азетидин-3 -карбоксилат
Получали, используя общую методику 2, из метилазетидин-3-карбоксилата. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H26N4O4: 458,4; обнаруж. 459,2 [M+H]+, tR=2,64 мин.
1-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)азетидин-3-карбоновая кислота (соединение 18)
К раствору метил 1-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Hинден-1-ил)азетидин-3-карбоксилата (6,8 мг, 0,02 ммоль) добавляли 5N NaOH (20 мкл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, растворяли в 250 мкл смеси 1:1 ДМСО:МеОН и очищали препаративной ВЭЖХ. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H24N4O4: 444,5; обнаруж. 445,1 [M+H]+, tR=6,52 мин (способ 2).
- 15 024801
трет-Бутил 4-((4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1ил)амино)пиперидин-1 -карбоксилат
Получали, используя общую методику 2, из трет-бутил 4-аминопиперидин-1-карбоксилата. LCMSESI (m/z) рассчит. для C31H37N5G4: 543,7; обнаруж. 544,3 [М+Н]+, tR=2,82 мин.
2-Изопропокси-5-(3-(1-(пиперидин-4-иламино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5ил)бензонигрил (соединение 19)
Раствор трет-бутил 4-((4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Нинден-1-ил)амино)пиперидин-1-карбоксилата (15,7 мг, 0,03 ммоль) в чистом ТФУК (1 мл) перемешивали в течение 30 мин и концентрировали с получением 12 мг (99%) 2-изопропокси-5-(3-(1-(пиперидин-4иламино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)бензонитрила. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H29N5G2: 443,5; обнаруж. 444,2 [M+H]+, tR=5,31 мин (способ 2).
2-((4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)амино)N-метилэтансульфонамид (соединение 45)
Получали, используя общую методику 2. 5-(3-(1-Хлор-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил (152 мг, 0,4 ммоль) растворяли в DMA (2 мл) и обрабатывали гидрохлоридом 2-амино-Ы-метилэтансульфамида (209 мг, 1,2 ммоль), бромидом натрия (123 мг, 1,2 ммоль) и диизопропилэтиламином (210 мкл, 1,2 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 24 ч. Сырую реакционную смесь выливали в воду (30 мл) и полученный осадок собирали и очищали хроматографией (EA/гексан, затем МеОН/ДХМ) с получением 30 мг (16%) 2-((4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)амино)-Ыметилэтансульфонамида 45 в виде коричневого масла. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для С24Н2^5О^: 481,2; обнаруж. 482,1 [М+Н]+, tR=2,56 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,40 (d, J=2,2 Гц, 1Н), 8,31 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1Н), 8,06 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 7,46 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 7,37 (t, J=7,6 Гц, 1Н), 7,10 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 4,77 (hept, J=12,1, 6,1 Гц, 1Н), 4,32 (t, J=6,6 Гц, 1Н), 3,43 (ddd, J=17,4 8,6, 4,9 Гц, 1Н), 3,32-3,11 (m, 5Н), 2,77 (s, 3Н), 2,52-2,42 (m, 1Н), 1,98-1,83 (m, 1Н), 1,45 (d, J=6,1 Гц, 6Н).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 173,22, 169,08, 162,93, 146,06, 143,70, 134,27, 134,09, 128,46, 127,25, 126,91, 123,50, 116,98, 115,49, 113,75, 104,03, 72,93, 63,12, 50,70, 41,86, 33,05, 32,02, 29,43, 21,91.
(R)-N-(4-U,HaHO-2,3 -дигидро- 1Н-инден-1 -илиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид (INT-4)
К 1-оксо-2,3-дигидро-1Н-инден-4-карбонитрилу INT-1 (42,5 г, 0,27 моль) и (Е)-2-метилпропан-2сульфинамиду (36,0 г, 0,30 моль) в толуоле (530 мл) добавляли тетраэтоксид титана (84,1 мл, 92,5 г, 0,40 моль) и реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 12 ч в атмосфере N2. Сырой ^)-Ы-(4-циано2,3-дигидро-1Н-инден-1-илиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид INT-4 использовали непосредственно на
- 16 024801
следующей стадии эксперимента. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C14H16N2OS: 260,3; обнаруж. 261,1 [M+H]+, tR=3,19 мин.
(К)-Ы-((К)-4-Циано-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамид (INT-5)
В колбу, содержащую сырую суспензию (К)-Ы-(4-циано-2,3-дигидро-1Н-инден-1-илиден)-2метилпропан-2-сульфинамида INT-4 в атмосфере N2, добавляли ТГФ (1,0 л) и реакционную смесь охлаждали до -78°C. Добавляли боргидрид натрия (40,9 г, 1,08 моль) порциями в течение 30 мин. (Внутренняя температура не повышалась в ходе добавления). Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин, наполовину вынув из бани в течение 30 мин, затем нагревали при 0°C в течение 1 ч. Реакционную смесь 0°C помещали в ледяную баню и гасили насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл), затем насыщенным раствором тартрата натрия калия (420 мл), соли Ti осаждались. Реакционную смесь разбавляли EA (1,5 л) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Органические слои декантировали и промывали последовательно насыщенным раствором NH4Cl, водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили MgSO4 и отфильтровывали через слой MgSO4. Фильтрат концентрировали с получением 52,9 г сырого (К)-^((К)-4-циано-2,3-дигидро-Шинден-1-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамида INT-5 в виде коричневого масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C14H18N2OS: 262,3; обнаруж. 263,1 [M+H]+, tR=2,99 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,89 (d, J=7,7, 1H), 7,56 (t, J=6,8, 1H), 7,36 (t, J=7,7, 1H), 4,97 (q, J=7,5, 1H), 3,50 (d, J=7,6, 1H), 3,22 (ddd, J=16,9, 8,8, 3,9, 1H), 3,01 (dt, J=22,4, 6,9, 1H), 2,70-2,53 (m, 1H), 2,151,95 (m, 1H), 1,33-1,20 (m, 9H).
(R)-1 -Амино-2,3 -дигидро- 1Н-инден-1 -ил)-4-карбонитрил (INT-6)
К сырому (^-^((К^-циано^З-дигидро-Ш-инден-Вил^-метилпропан^-сульфинамиду INT-5 (52,9 г, 0,20 моль) в МеОН (200 мл) добавляли 4N HCl в диоксане (152,0 мл, 0,60 моль), полученную желтую суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Сырую реакционную смесь разбавляли МеОН (500 мл) и отфильтровывали для удаления некоторого количества Ti-побочных продуктов. Фильтрат концентрировали и полученное твердое вещество кипятили с обратным холодильником в ацетонитриле (500 мл). Полученное белое твердое вещество собирали с получением 13,0 г (31% с 3 стадий) соли HCl (И)-1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-4-карбонитрила INT-6. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для Ci0H!0N2: 158,2; обнаруж. 142,0 [M-NH2]+, tR=0,84 мин.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 8,61 (s, 3H), 7,96 (d, J=7,7, 1H), 7,83 (d, J=7,5, 1H), 7,52 (t, J=7,7, 1H), 4,80 (s, 1H), 3,23 (ddd, J=16,6, 8,7, 5,2, 1H), 3,05 (ddd, J=16,6, 8,6, 6,3, 1H), 2,62-2,51 (m, 1H), 2,15-2,01 (m, 1H).
13C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 148,09, 141,15, 132,48, 130,32, 127,89, 117,27, 108,05, 54,36, 39,08, 29,64. Свободное основание может быть получено экстракцией 1N NaHCO3 и ДХМ. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H10N2: 158,2; обнаруж. 142,0 [M-NH2]+, tR=0,83 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,52-7,38 (m, 2H), 7,23 (dd, J=17,4,9,8, 1H), 4,35 (t, J=7,6, 1H), 3,11 (ddd, J=16,8, 8,7, 3,2, 1H), 2,89 (dt, J=16,9, 8,5, 1H), 2,53 (dddd,J=12,8, 8,1, 7,3, 3,2, 1H), 1,70 (dtd,J=12,8, 8,8, 8,0, 1H).
13C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 150,16, 146,67, 130,19, 128,74, 127,38, 117,77, 107,42, 56,86, 38,86, 29,14.
Хиральная ВЭЖХ. (К)-1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-4-карбонитрил элюировали, используя 5% EtOH в гексане, плюс 0,05% ТЭА: 95% ее, tR=23,02 мин. (Ъ)-энантиомер INT-7 получали аналогичным образом, используя ^)-2-метилпропан-2-сульфинамид. tR для (Ъ)-энантиомера=20.17 мин.
(R)-трет-Бутил 4-циано-2,3-дигидро-1Н-инден-1-илкарбамат (INT-8)
К (КХЬамино^З-дигидро-Ш-инден-Ьил^-карбонитрилу HCl INT-6 (11,6 г, 59,6 ммоль) в ДХМ (100 мл) при 0°C добавляли ТЭА (12,0 мл, 131,0 ммоль). К полученному раствору добавляли раствор
- 17 024801
Вос-ангидрида (14,3 г, 65,6 ммоль) в ДХМ (30 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Реакционную смесь промывали насыщенным раствором хлорида натрия, и органические слои сушили MgSO4 и отфильтровывали. Дополнительно добавляли ДХМ до общего объема 250 мл и добавляли норит (4,5 г). Продукт кипятили с обратным холодильником в течение 15 мин, и горячую смесь отфильтровывали через слой целита/силикагеля. Фильтрат концентрировали и перекристаллизовывали из EA (50 мл) и гексана (150 мл) с получением 12,93 г (84%) (И)-трет-бутил 4-циано-2,3дигидро-1Н-инден-1-илкарбамата INT-8 в виде беловатого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C15H18N2O2: 258,3; обнаруж. 281,1 [M+Na]+, tR=3,45 мин. Элементный анализ для C15H18N2O2; С рассчит.=69,74%; обнаруж.=69,98%. Н рассчит.=7,02%; обнаруж.=7,14%. N рассчит.=10,84%; обнаруж.=10,89%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,64-7,49 (m, 2Н), 7,34 (dt, J=7,7, 3,8, 1Н), 5,36-5,20 (m, 1Н), 4,78 (d, J=6,8, 1Н), 3,20 (ddd, J=16,9, 8,9, 3,3, 1Н), 3,02 (dt, J=25,4, 8,4, 1Н), 2,82-2,53 (m, 1Н), 1,88 (dq, J=13,2, 8,6, 1Н), 1,55-1,44 (m, 9Н).
13C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 155,52, 146,68, 146,32, 130,89, 128,70, 127,63, 117,51, 107,76, 77,98, 55,09, 31,88, 29,11, 28,19.
Хиральная ВЭЖХ. (К)-трет-бутил-4-циано-2,3-дигидро-Ш-инден-1-илкарбамат элюировали, используя 2,5% EtOH в гексане: >99,9% ее, tR=19,36 мин. ^(-Энантиомер INT-9 получали аналогичным образом, используя ^)-1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-4-карбонитрил HCl. tR для (S)энантиомера=28,98 мин.
Общая методика 3.
Получение инданамидоксимов.
К (R)- или ^)-трет-бутил 4-циано-2,3-дигидро-1Н-инден-1-илкарбамату (1 экв.) в EtOH (0,56 М) добавляли гидрохлорид гидроксиламина (3 экв.) и ТЭА (3 экв.), и реакционную смесь нагревали при 85°C в течение 1-2 ч. Органические растворенные амидоксимы выделяли удалением растворителя и разделением между водой и ДХМ. Водорастворимые амидоксимы хроматографировали или использовали непосредственно в циклизации. Чистые амидоксимы могут быть получены перекристаллизацией из спиртовых растворителей.
(R)-трет-Бутил 4-(Ы-гидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро-1 Н-инден-1-илкарбамат (INT-10)
Получали, используя общую методику 3. К (В)-трет-бутил 4-циано-2,3-дигидро-1Н-инден-1илкарбамату INT-8 (15,0 г, 58,2 ммоль) в EtOH (100 мл) добавляли гидрохлорид гидроксиламина (12,1 г, 174,2 ммоль) и ТЭА (17,6 мл, 174,2 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 85°C в течение 2 ч. Растворители удаляли и полученное белое твердое вещество разделяли между водой и ДХМ. Органические слои сушили Na2SO4, концентрировали и перекристаллизовывали из изопропанола (50 мл) с получением 14,4 г (85%) (R)-трет-бутил 4-^-гидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-илкарбамата INT-10 в виде белого кристаллического твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C15H21N3O3: 291,4; обнаруж. 292,1 [М+Н]+, tR=2,04 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,53 (s, 1Н), 7,38-7,32 (m, 1Н), 7,32-7,12 (m, 3Н), 5,68 (s, 2Н), 4,97 (q, J=8,5, 1Н), 3,07 (ddd, J=16,6, 8,7, 2,6, 1Н), 2,86 (dt, J=16,8, 8,4, 1Н), 2,30 (ddd, J=12,6, 7,6, 3,6, 1Н), 1,75 (dq, J=12,3, 9,0, 1Н), 1,44 (s, 9Н).
Общая методика 4.
Циклизация с инданоксадиазоламинами.
Раствор подходящей кислоты (1 экв.), HOBt (1,3 экв.) и EDC (1,3 экв.) в DMF (0,08 М в кислоте) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2. После окончания образования комплекса НОВПкислота (1-3 ч) к смеси добавляли (R)- или ^)-амидоксим (1,1 экв.). После окончания образования конденсированного промежуточного соединения (около 0,5-2 ч) смесь нагревали при 75-95°C до окончания циклизации (8-12 ч). Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NaHCOз и экстрагировали EA. Объединенные органические экстракты сушили, концентрировали и очищали хроматографией (EA/гексан) или использовали непосредственно. Оксадиазол обрабатывали НС1 (5N в диоксане, 5 экв.) при 50-60°С в течение 0,5-6 ч. Реакционную смесь можно экстрагировать (ДХМ/№1НСО3,). или полученную соль НС1 концентрировали, суспендировали в Et2O и собирали. Чистые инданамины могут быть получены перекристаллизацией из спиртовых растворителей или хроматографией.
- 18 024801
(К)-трет-Бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1илкарбамат (INT-12)
Получали, используя общую методику 4. К раствору 3-циано-4-изопропоксибензойной кислоты (7,74 г, 37,7 ммоль) в DMF (50 мл) добавляли HOBt (6,02 г, 44,6 ммоль) и EDC (8,53 г, 44,6 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч до окончания образования комплекса HOBt-кислота. Добавляли (И)-трет-бутил 4-(N-гидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро-1Hинден-1-илкарбамат INT-10 (10,0 г, 34,3 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч до образования INT-11, (И)-трет-бутил 4-(Ы-(3-циано-4изопропоксибензоилокси)карбамимидоил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-илкарбамата. Смесь разделяли между EA и NaHCO3, органический слой собирали и сушили MgSO4. Соединение INT-11 (16,3 г, 34,0 ммоль) повторно растворяли в DMF (50 мл) и смесь нагревали при 95°C в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли NaHCO3 (200 мл) и экстрагировали EA (3x50 мл). Органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении с получением 12,8 г (81%) (И)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамата INT-12 в виде светлокоричневого твердого вещества, и использовали без дополнительной очистки на следующей стадии. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H28N4O4: 460,5; обнаруж. 483,2 [M+Na]+, tR=4,25 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,43 (d, J=2,1, 1H), 8,34 (dd, J=8,9, 2,2, 1H), 8,09 (d, J=7,6, 1H), 7,51 (d, J=7,5, 1H), 7,39 (t, J=7,6, 1H), 7,12 (d, J=9,0, 1H), 5,28 (d, J=8,2, 1H), 4,80 (hept, J=6,0, 1H), 3,47 (ddd, J=17,4, 8,9, 3,5, 1H), 3,27-3,03 (m, 1H), 2,68 (d, J=8,7, 1H), 1,87 (td, J=16,7, 8,5, 1H), 1,53-1,43 (m, 15H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 173,00, 168,82, 162,70, 155,68, 145,31, 142,96, 134,05, 133,83, 128,25, 127,21, 126,79, 123,09, 116,78, 115,24, 113,52, 103,87, 79,52, 72,70, 55,72, 33,86, 31,47, 28,39, 21,70.
Хиральная ВЭЖХ. (И)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3дигидро-Ш-инден-1-илкарбамат элюировали, используя 20% изо-PrOH в гексане: >99,9% ее, tR=13,33 мин. (Ъ)-энантиомер INT-13 получали аналогичным образом, используя (Ъ)-трет-бутил 4-циано-2,3дигидро-Ш-инден-1-илкарбамат, используя общие методики 3 и 4 (tR для (Ъ)-энантиомера=16.31 мин).
Гидрохлорид ^)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонигрила (соединение 49)
O-N O-N *НС1
К (И)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден1-илкарбамату (12,8 г, 27,8 ммоль) в диоксане (200 мл) добавляли 4N HCl в диоксане (69 мл). Раствор нагревали при 55°C в течение 1 ч и продукт осаждался. Диоксан удаляли и полученное твердое вещество суспендировали в диэтиловом эфире и собирали. Материал перекристаллизовывали из МеОН (200 мл) с получением 8,11 г (81%) ^)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрила 49 в виде соли HCl. LCMS-ESI (m/z): рассчит. для: C21H20N4O2: 360,4; обнаруж. 383,2 [M+Na]+, tR=2,49 мин. Элементный анализ и ЯМР спектр определены для C21H21N4O2Cl-0,5 H2O; С рассчит.=62,14%; обнаруж.=62,25%. Н рассчит.=5,46%; обнаруж.=5,30%. N рассчит.=13,80%; обнаруж.=13,84%. Cl рассчит.=8,73%; обнаруж.=8,34%.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 8,71 (s, 3H), 8,49 (d, J=2,3, 1H), 8,39 (dd, J=9,0, 2,3, 1H), 8,11 (d, J=7,6, 1H), 7,91 (d, J=7,6, 1H), 7,55 (t, J=8,5, 2Н), 4,97 (hept, J=6,1, 1H), 4,80 (s, 1H), 3,47 (ddd, J=17,4, 8,7, 5,3, 1H), 3,23 (ddd, J=17,4, 8,6, 6,4, 1H), 2,55 (ddd, J=13,7, 8,3, 3,2, 1H), 2,22-1,97 (m, 1H), 1,38 (d, J=6,0, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 173,28, 167,98, 162,53, 143,69, 141,29, 134,59, 133,80, 128,93, 128,11, 127,55, 122,72, 115,87, 115,24, 114,91, 102,46, 72,54, 54,38, 31,51, 29,91, 21,47.
Хиральная ВЭЖХ свободного основания: ^)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил элюировали, используя 15% изо-PrOH в гексане плюс 0,3% DEA: > 99,9% ее, tR=30,80 мин. (S)-5-(3-(1-Амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрил 50 получали аналогичным образом из (Ъ)-трет-бутил 4-циано-2,3-дигидро-Шинден-1-илкарбамата: >99,9% ее, tR для (Ъ)-энантиомера=28.58 мин.
Общая методика 5.
Алкилирование инданаминов.
К 0,2 М раствору (R)- или (Ъ)-инданамина в CH3CN (0,15 М) добавляли K2CO3 (2 экв.) и подходящий алкилгалогенид или мезилат (1,1 экв.). В некоторых случаях также добавляли ТЭА (1,1 экв.). Смесь
- 19 024801
нагревали при конвекции или микроволновом излучении при 80-160°C с 30-минутными интервалами до исчезновения исходного материала или протекания диалкилирования амина. При необходимости, добавляли дополнительный алкилгалогенид или мезилат для управления реакцией. Реакционную смесь концентрировали, повторно суспендировали в EA и промывали водой. Органический слой сушили и концентрировали, затем очищали хроматографией (МеОН/ДХМ) с получением целевого продукта.
Соединения 51-56, 58, 118, 124, 140-142 и 144 получали, используя общую методику 5.
(И)-Метил 2-((метилсульфонил)окси)пропаноат
О
'Ύ^ΌΜθ
он
о
OMs
Перемешиваемый раствор (И)-метил 2-гидроксипропаноата (1,0 г, 9,61 ммоль) в толуоле (15 мл) охлаждали до 0°C. По каплям добавляли метансульфонилхлорид (0,82 мл, 10,6 ммоль). Через 2 ч раствор нагревали до комнатной температуры и далее перемешивали в течение 45 мин. Полученный тяжелый белый осадок удаляли вакуумной фильтрацией и прозрачный раствор концентрировали с получением 1,75 г (99%) (И)-метил 2-((метилсульфонил)окси)пропаноата в виде бесцветного масла.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5,14 (q, J=7,0 Гц, 1H), 3,81 (d, J=4,5 Гц, 3H), 3,16 (d, J=4,5 Гц, 3H), 1,62 (d, J=7,0 Гц, 3H).
(8)-Метил 2-((метилсульфонил)окси)пропаноат получали аналогичным образом, используя (S)метил 2-гидроксипропаноат.
^)-Метил 2-((^)-4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Шинден-1 -ил)амино)пропаноат
Получали, используя общую методику 5. К раствору ^)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1И-инден-4-ил)1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 50 (75,0 мг, 0,21 моль) в CH3CN (290 мл) добавляли (И)-метил 2-((метилсульфонил)окси)пропаноат (75,8 мг, 0,42 ммоль) и K2CO3 (57 мг, 0,42 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 150°C, используя микроволновое излучение, в течение 1,5 ч. Дополнительно добавляли (И)-метил 2-((метилсульфонил)окси)пропаноат (36 мг, 0,21 ммоль) и смесь нагревали в течение дополнительно 0,5 ч при 150°C. Реакционную смесь концентрировали, повторно растворяли в ДХМ и хроматографировали (EA/гексан) с получением 33 мг (35%) ^)-метил 2-((^)-4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1И-инден-1-ил)амино)пропаноата в виде белого порошка. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 446,5; обнаруж. 447,2 [M+H]+, tR=2,61 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,46-8,40 (m, 1H), 8,37-8,30 (m, 1H), 8,11-8,03 (m, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,427,34 (m, 1H), 7,16-7,07 (m, 1H), 4,88-4,71 (m, 1H), 4,34-4,20 (m, 1H), 3,65-3,54 (s, 3H), 3,55-3,35 (m, 1H), 3,27-3,03 (m, 2H), 2,52-2,35 (m, 1H), 1,95-1,76 (m, 1H), 1,48 (d, J=6,1 Гц, 6H), l,36 (d, J=6,9 Гц, 3H).
(И)-Метил 2-((^)-4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Ыинден-1-ил)амино)пропаноат.
Получали, используя общую методику 5. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 446,5; обнаруж. 447,2 [M+H]+, tR=2,61 мин.
(И)-Метил 2-(((К)-4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Иинден-1 -ил)амино)пропаноат
- 20 024801
Получали, используя общую методику 5. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 446,5; обнаруж.
447,1 [M+H]+, tR=2,61 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,42 (d, J=2,1 Гц, 1H), 8,33 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,06 (d, J=7,6 Гц, 1H),
7,53 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,38 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,12 (d, J=9,0 Гц, 1H), 4,87-4,72 (m, 1H), 4,26 (s, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,63-3,52 (m, 1H), 3,53-3,36 (m, 1H), 3,11 (s, 1H), 2,52-2,26 (m, 1H), 2,11-1,78 (m, 1H), 1,47 (d, J=5,5 Гц, 6H), 1,35 (t, J=6,3 Гц, 3H).
(S)-MeTna 2-(((К)-4-(5-(3-циано-4-изоироиоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Нинден-1 -ил)амино)пропаноат
Получали, используя общую методику 5. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 446,5; обнаруж.
447,1 [M+H]+, tR=2,65 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,42 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,33 (dd, J=8,9, 2,0 Гц, 1H), 8,07 (d, J=7,6 Гц, 1H),
7,54 (d, J=7,4 Гц, 1H), 7,38 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,12 (d, J=9,0 Гц, 1H), 4,88-4,69 (m, 1H), 4,26 (t, J=6,1 Гц, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,66-3,39 (m, 1H), 3,31-3,12 (m, 1H), 2,46-2,28 (m, 1H), 2,11-1,81 (m, 2H), 1,47 (d, J=6,0 Гц, 6H), 1,37 (d, J=7,0 Гц, 3H).
5-(3-((S)-1-(((S)-1-Гидроксипропан-2-ил)амино)-2,3-дигидро-1H-индeн-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение 53)
К раствору ^)-метил 2-(((S)-4-(5-(3-циано-4-изопропоксифeнил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3дигидро-1H-индeн-1-ил)амино)ироианоата (33 мг, 0,07 ммоль) в МеОН (2 мл) при 0°C добавляли NaBH4 (14 мг, 0,4 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной темиературы через 1 ч. Добавляли дополнительное количество NaBH4 (~10-15 мг каждого) с интервалами 1 ч до того, как LC/MS покажет >80% превращение в продукт. Реакционную смесь разбавляли 1N HCl и экстрагировали ДХМ (2х). Объединенные органические слои сушили Na2SO4 и концентрировали. Полученное сырое твердое вещество растворяли в ДХМ и хроматографировали (МеОН/ДХМ) с получением 12,1 мг (40%) 5-(3-((S)1-(((S)-1-гидроксиироиан-2-ил)амино)-2,3-дигидро-1H-индeн-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрила 53. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 418,5; обнаруж. 419,1 [M+H]+, tR=2,56 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,24 (d, J=2,2 Гц, 1H), 8,14 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 7,88 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,28 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,19 (t, J=7,6 Гц, 1H), 6,92 (d, J=9,1 Гц, 1H), 4,69-4,51 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 3,43 (m, 1H), 3,37-3,19 (m, 1H), 3,10 (m, 2H), 2,95-2,78 (m, 1H), 2,46 (dd, J=6,5, 4,6 Гц, 1H), 2,34-2,17 (m, 1H), 1,811,65 (m, 1H), 1,28 (d, J=6,1 Гц, 6H), 0,98 (d, J=6,4 Гц, 3H).
Хиральная ВЭЖХ, элюируя 10% IPA/гексан, плюс 0,3% ТЭА, tR=13,72 мин.
5-(3-((R)-1-(((S)-1-Гидроксиироиан-2-ил)амино)-2,3-дигидро-1H-индeн-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение 54)
Получали аналогично соединению 53 с получением 5-(3-(^)-1-((^)-1-гидроксипропан-2ил)амино)-2,3-дигидро-1H-индeн-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изоироиоксибeнзонитрила 54. LCMSESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 418,5; обнаруж. 419,2 [M+H]+, tR=2,52 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,41 (d, J=2,1 Гц, 1H), 8,33 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,06 (d, J=7,6 Гц, 1H),
7,55 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,37 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,12 (d, J=9,0 Гц, 1H), 4,79 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 4,33 (dd,
J=16,1, 7,4 Гц, 1H), 3,68 (ddd, J=10,0, 5,5, 4,2 Гц, 1H), 3,47 (ddd, J=17,3, 8,8, 3,7 Гц, 1H), 3,36-3,24 (m, 1H),
- 21 024801
3,26-3,02 (m, 2H), 2,99 (t, J=5,5 Гц, 1H), 2,51-2,36 (m, 1H), 1,82 (ddd, J=15,9, 12,7, 8,4 Гц, 1H), 1,46 (t, J=11,3 Гц, 6H), 1,16 (dd, J=12,3, 7,3 Гц, 3H).
Хиральная ВЭЖХ, элюируя 10% IPA/гексан, плюс 0,3% ТЭА, tR=33,15 мин. 5-(3-((8)-1-(((К)-1-Гидроксипропан-2-ил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение 55)
Получали аналогично соединению 53 с получением 5-(3-(^)-1-((^)-1-гидроксипропан-2ил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 55. LCMSESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 418,5; обнаруж. 419,2 [M+H]+, tR=2,52 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,43 (d, J=2,1 Гц, 1Н), 8,34 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1Н), 8,07 (d, J=7,6 Гц, 1Н),
7,55 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,12 (d, J=9,0 Гц, 1H), 4,87-4,71 (m, 1H), 4,39-4,29 (m, 1H), 3,73-3,66 (m, 1H), 3,49 (s, 2H), 3,34-3,24 (m, 1H), 3,24-3,01 (m, 2H), 2,73-2,57 (m, 1H), 1,90-1,75 (m, 1H), 1,48 (d, J=6,1 Гц, 6H), 1,18 (d, J=6,5 Гц, 3H).
Хиральная ВЭЖХ. 10% IPA/гексан, плюс 0,3% ТЭА, tR=29,36 мин.
5-(3-((R)-1-(((R)-1-Гидроксипропан-2-ил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение 56)
Получали аналогично соединению 53 с получением 5-(3-(^)-1-((^)-1-гидроксипропан-2ил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 56. LCMSESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 418,5; обнаруж. 419,2 [M+H]+, tR=2,52 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,43 (d, J=2,2 Гц, 1H), 8,34 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,08 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,48 (d, J=7,4 Гц, 1H), 7,39 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,12 (d, J=9,0 Гц, 1H), 4,87-4,73 (m, 1H), 4,41 (t, J=6,4 Гц, 1H), 3,64 (dd, J=10,5, 4,1 Гц, 1H), 3,49 (s, 2H), 3,30 (dd, J=10,5, 7,3 Гц, 1H), 3,26-3,12 (m, 1H), 3,07 (s, 1H), 2,522,38 (m, 1H), 2,00-1,87 (m, 1H), 1,48 (d, J=6,1 Гц, 6H), 1,18 (d, J=6,4 Гц, 3H).
Хиральная ВЭЖХ, элюируя 10% IPA/гексан, плюс 0,3% ТЭА, tR=37,38 мин.
(R)-5-(3-(1-((2-Фторэтил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрил (соединение 124)
Получали, используя общую методику 5, из ^)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 49, 2-фторэтилметансульфоната, K2CO3 и ТЭА при микроволновом излучении при 140°C в течение 2 ч. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H23FN4O2: 406,4; обнаруж.
407,1 [M+H]+, tR=6,89 мин (способ 2).
1H ЯМР (400 МГц, MeOD) δ 8,41-8,38 (m, 2H), 8,28-8,23 (m, 1H), 7,79 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,56 (t, J=7,7, 1H), 7,46-7,37 (m, 1H), 5,00-4,90 (m, 2H), 4,83 (t, J=4,0 Гц, 1H), 4,71 (t, J=4,0 Гц, 1H), 3,56-3,33 (m, 4H), 2,71-2,66 (m, 1H), 2,41-2,34 (m, 1H), 1,44 (d, J=6,1 Гц, 6H).
Общая методика 6.
Получение индановых кислот.
К раствору (R)- или ^)-инданамина (1экв.) в CH3CN (0,1 М) добавляли K2CO3 (3 экв.) и бромметиловые эфиры (1 экв.) или мезилатметиловые эфиры (1 экв.).
Реакционную смесь нагревали при 80°C в течение 30 мин или до окончания реакции. Растворитель упаривали, и остатки разделяли между EA и водой. Органический слой собирали, сушили MgSO4 и очищали хроматографией (МеОН/ДХМ с 0,025% ТЭА) с получением инданметилового эфира в виде белого твердого вещества. Инданметиловый эфир растворяли в EtOH (0,03 М), и добавляли водный раствор NaOH (11,8 М). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при 40°C. Сырой материал очищали препаративной ВЭЖХ.
- 22 024801
Соединения 61-64 и 145-148 получали, используя общую методику 6.
(К)-3-((4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1ил)амино)пропановая кислота (соединение 62)
Получали, используя общую методику 6. К раствору (К)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 49 (90,0 мг, 0,25 ммоль) и K2CO3 (103,5 мг, 0,75 ммоль) добавляли метил 3-бромпропаноат (41,8 мг, 0,25 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80°C в течение 30 мин и повторяли четыре раза при 80°C в течение 30 мин с дополнительным количеством метил 3-бромпропаноата (41,8 мг, 0,25 ммоль), которое добавляли каждый раз. Растворитель упаривали и остаток разделяли между EA и водой. Органический слой собирали, сушили MgSO4 и очищали хроматографией (МеОН/ДХМ с 0,025% ТЭА) с получением 71 мг (63%) (И)-метил 3-((4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)амино)пропаноата в виде твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 446,5; обнаруж. 447,2 [M+H]+, tR=2,61 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,40 (d, J=2,1, 1Н), 8,31 (dd, J=8,9, 2,2, 1Н), 8,04 (d, J=7,6, 1Н), 7,49 (d, J=7,5, 1H), 7,35 (t, J=7,6, 1H), 7,09 (d, J=9,0, 1H), 4,77 (dt, J=12,2, 6,1, 1H), 4,31 (t, J=6,8, 1H), 3,73-3,58 (m, 3H), 3,43 (ddd, J=17,4, 8,7, 4,6, 1H), 3,24-3,08 (m, 1H), 3,04-2,85 (m, 2H), 2,56 (t, J=6,5, 2H), 2,47 (dtd, J=12,8, 8,4, 4,7, 1H), 1,99-1,82 (m, 1H), 1,54-1,32 (m, 6H).
К ^)-метил 3-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1иламино)пропаноату (71,0 мг, 0,16 ммоль) в EtOH (5 мл) добавляли водный раствор NaOH (1,9 мл, 1 М). Раствор перемешивали при 40°C в течение 4 ч. Реакционную смесь выливали в лед (10 мл) и нейтрализовали до pH 7 с 1 М HCl. Раствор разделяли между ДХМ и H2O. Органические слой собирали, сушили в вакууме и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 29,7 мг (31%) (И)-3-((4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1 -ил)амино)пропановой кислоты 62. LCMS-ESI (m/z): рассчит. для: C24H24N4O4, 432,5; [M+H]+ обнаруж. 433,20, tR=2,51 мин.
1H ЯМР (400 МГц, MeOD) δ 8,46 (d, J=2,1, 1H), 8,45-8,40 (m, 1H), 8,29-8,23 (m, 1H), 7,82-7,73 (m, 1H), 7,60-7,52 (m, 1H), 7,45 (d, J=9,0, 1H), 5,06-4,92 (m, 2H), 3,69-3,52 (m, 1H), 3,51-3,37 (m, 1H), 3,26 (s, 2H), 2,75-2,58 (m, 1H), 2,56-2,46 (m, 2H), 2,44-2,29 (m, 1H), 1,46 (d, J=6,0, 6H).
Общая методика 7.
Получение инданамидов конденсацией кислоты.
К подходящей кислоте (1,1 экв.) в DMF (0,04 М) добавляли HOBt (1,3 экв.) и EDC (1,3 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч или до полной активации кислоты. (R)- или (Ъ)-инданамин (1 экв.) добавляли одной порцией, реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли EA и промывали NaHCO3. Полученные объединенные органические слои сушили Na2SO4, концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ или хроматографией (МеОН/ДХМ) с получением инданамидов.
Соединения 65-68, 136 и 137 получали, используя общую методику 7.
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2гидроксиацетамид (соединение 65)
Получали, используя общую методику 7. К 2-гидроксиуксусной кислоте (7 мг, 0,08 ммоль) в DMF (2 мл) добавляли HOBt (12 мг, 0,09 ммоль) и EDC (17 мг, 0,09 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч до полной активации кислоты. Добавляли ^)-5-(3-(1-амино2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил 49 (25,0 мг, 0,07 ммоль) одной порцией и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли EA и промывали NaHCO3. Объединенные водные слои снова экстрагировали EA. Полученные объединенные органические слои сушили Na2SO4 и концентрировали с получением коричневого масла, которое очищали хроматографией (МеОН/ДХМ) с получением 14 мг (48%) (R)-N-(4(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2гидроксиацетамида 65 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C22H22N4O4: 418,5; обнаруж. 419,0 [M+H]+, tR=2,47 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,39 (d, J=2,2 Гц, 1H), 8,32 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,08 (d, J=7,6 Гц, 1H),
7,45 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,38 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,12 (d, J=9,0 Гц, 1H), 6,76 (d, J=8,6 Гц, 1H), 5,61 (d, J=8,1 Гц,
- 23 024801
1H), 4,80 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 4,20 (s, 2H), 3,49 (m, 1H), 3,23 (dd, J=17,1, 8,5 Гц, 1H), 2,80-2,60 (m,1H), 1,93 (dd, J=13,0, 8,4 Гц, 1H), 1,47 (t, J=5,6 Гц, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 173,11, 171,21, 168,78, 162,78, 144,48, 143,21, 134,11, 133,88, 128,56, 127,42, 126,83, 123,29, 116,76, 115,26, 113,55, 103,90, 72,77, 62,25, 54,00, 33,52, 31,71, 21,72.
Общая методика 8А.
Получение индансульфонамидов через сульфонилхлориды.
К перемешиваемому раствору (R)- или (8)-инданамина (1 экв.) в ДХМ (0,05 М) добавляли ТЭА (2 экв.) и подходящий сульфонилхлорид (2 экв.) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель упаривали и чистый продукт выделяли после очистки препаративной ВЭЖХ.
Соединения 69, 70, 73, 76, 79-82 и 163-167 получали, используя общую методику 8А.
(S)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)метансульфонамид (соединение 69)
Получали, используя общую методику 8А. К перемешиваемому раствору (8)-5-(3-(1-амино-2,3дигидро-1И-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 50 (18 мг, 0,05 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли ТЭА (13,9 мкл, 0,1 ммоль) и метансульфонилхлорид (19 мг, 0,1 ммоль). Через 1 ч добавляли дополнительно ТЭА (13,9 мкл, 0,1 ммоль) и метансульфонилхлорид (19 мг, 0,1 ммоль). Через дополнительный 1 ч перемешивания растворитель упаривали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 9,8 мг (45%) (S)-N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Hинден-1-ил)метансульфонамида 69. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C22H22N4O4S: 438,1; обнаруж. 439,1 [M+H]+, tR=3,70 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,41 (d, J=2,2 Гц, 1H), 8,32 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,12 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,60 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,43 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,11 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,07 (dd, J=16,5, 7,8 Гц, 1H), 4,78 (hept, J=6,1 Гц, 1H), 4,48 (d, J=9,3 Гц, 1H), 3,51 (ddd, J=17,5, 8,8, 3,4 Гц, 1H), 3,29-3,12 (m, 1H), 3,09 (s, 3H), 2,74 (dtd, J=12,9, 8,0, 3,5 Гц, 1H), 2,07-1,92 (m, 1H), 1,46 (d, J=6,1 Гц, 6H).
(S)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)этенсульфонамид (INT-14)
К перемешиваемому раствору (8)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1И-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5ил)-2-изопропоксибензонитрила 50 (180 мг, 0,5 ммоль) в ДХМ (2 мл) при 0°C добавляли ТЭА (348 мкл, 2,5 ммоль) и 2-хлорэтансульфонилхлорид (245 мг, 1,5 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуре и перемешивали в течение 30 мин. Добавляли дополнительное количество ТЭА (348 мкл, 2,5 ммоль) и 2-хлорэтансульфонилхлорид (245 мг, 1,5 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Растворитель удаляли, и продукт очищали хроматографией (EA/гексан) с получением 144 мг (64%) (S)-N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)этенсульфонамида INT-14 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H22N4O4S: 450,1; обнаруж. 473,1 [M+Na]+, tR=3.84 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,32 (d, J=2,1 Гц, 1H), 8,27 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,04 (d, J=7,6 Гц, 1H),
7,55 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,37 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,09 (d, J=9,0 Гц, 1H), 6,64 (dd, J=16,5, 9,9 Гц, 1H), 6,32 (d, J=16,5 Гц, 1H), 5,97 (d, J=9,9 Гц, 1H), 4,94-4.85 (m, 1H), 4,83 (d, J=9,1 Гц, 1H), 4,75 (hept, J=6,1 Гц, 1H), 3,42 (ddd, J=17,4, 8,8, 3,3 Гц, 1H), 3,17-3,01 (m, 1H), 2,63 (dtd, J=13,0, 8,0, 3,4 Гц, 1H), 1,99-1,86 (m, 1H), 1,44 (d, J=6,1 Гц, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 173,20, 168,72, 162,89, 143,74, 142,71, 137,15, 134,16, 134,00, 128,91, 127,62, 127,15, 126,54, 123,38, 116,77, 115,38, 113,70, 103,96, 72,89, 58,59, 34,71, 31,56, 21,83.
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)этансульфонамид получали аналогично из ^)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1И-инден-4-ил)-1,2,4оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 49.
Общая методика 8В.
Получение индансульфонамидов реакцией Михаэлиса.
К перемешиваемому раствору (R)- или (8)-инданвинилсульфонамида (1 экв.) в DMF (0,1 М) добавляли подходящий амин (10 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 18 ч. Продукты очищали препаративной ВЭЖХ.
- 24 024801
Соединения 74, 75, 77, 78 и 168-181 получали, используя общую методику 8В.
(8)-Н-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-2(диметиламино)этансульфонамид (соединение 78)
Получали, используя общую методику 8В. К раствору (8)-И-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)этенсульфонамида INT-14 (22,50 мг, 0,05 ммоль) в DMF (0,5 мл) добавляли 2N метиламин в ТГФ (0,25 мл, 0,50 ммоль), и реакционную смесь нагревали при 80°C в течение 18 ч. Сырой продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 17,6 мг (58%) соли ТФУК (S)-N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2(диметиламино)этансульфонамида 78 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H29N5O4S: 495,2; обнаруж. 496,2 [M+H]+, tR=2,65 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,27-8,14 (m, 2Н), 7,93 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 7,48 (d, J=7,3 Гц, 1Н), 7,29 (t, J=7,5 Гц, 1H), 7,05 (d, J=9,9 Гц, 1H), 6,27 (s, 1H), 4,93-4,81 (m, 1H), 4,74 (hept, J=6,1 Гц, 1H), 3,70-3,57 (m, 2H), 3,57-3,43 (m, 2H), 3,43-3,23 (m, J=8,0 Гц, 1H), 3,12-2,93 (m, J=16,9, 8,3 Гц, 1H), 2,86 (s, 6H), 2,65-2,44 (m, 1H), 2,06-1,83 (m, J=11,6 Гц, 1H), 1,43 (d, J=6,0 Гц, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 172,96, 168,45, 162,75, 143,40, 142,55, 133,90, 128,76, 127,46, 126,98, 123,19, 116,53, 115,28, 113,59, 103,68, 72,82, 58,75, 52,07, 48,41, 43,38,33,89,31,39,21,72.
5-(3-((^)-1-(3-Хлор-2-гидроксипропиламино)-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)2-изо пропоксибензонитрил (INT-15)
В колбу, содержащую ^)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрил 49 (84 мг, 0,23 ммоль), добавляли 2 мл IPA. Мутную белую смесь охлаждали до 0°C и добавляли эпихлоргидрин (20,7 мкл, 0,26 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. IPA удаляли концентрированием в вакууме и добавляли воду (500 мкл) и аликвоты эпихлоргидрина (20,7 мкл, 0,26 ммоль) каждый час (всего 4 раза) при комнатной температуре до окончания превращения. Реакционную смесь концентрировали, растворяли в ДХМ и очищали хроматографией (МеОН/ДХМ) с получением 19,3 мг (18%) 5-(3-((1И)-1-(3-хлор-2гидроксипропиламино^^-дигидро-Ш-инден^-ил^^Л-оксадиазол^-ил^-изопропоксибензонитрила INT-15 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H25ClN4O3: 452,9; обнаруж.
453,1 [M+H]+, tR=2,62 мин.
Получение ^)-5-(3-(1-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5ил)-2-изопропоксибензонитрила (соединение 83)
В колбу, содержащую 5-(3-((^)-1-(3-хлор-2-гидроксипропиламино)-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил INT-15 (77,0 мг, 0,17 ммоль) в CH3CN (4 мл), добавляли ТЭА (44,5 мкл, 0,32 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 75°C в течение ночи, затем концентрировали в вакууме, растворяли в ДХМ и очищали хроматографией (МеОН/ДХМ) с получением 19 мг (27%) (R)-5-(3-(1-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрила 83 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H24N4O3: 416,5; обнаруж. 417,1 [M+H]+, tR=6,19 мин (способ 2).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,42 (d, J=2,2 Гц, 1H), 8,33 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,09 (dd, J=7,7, 0,7 Гц,
1H), 7,44 (d, J=7,4 Гц, 1H), 7,35 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,11 (d, J=9,0 Гц, 1H), 4,79 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 4,46 (р,
J=5,8 Гц, 1H), 3,99 (dd, J=7,0, 3,5 Гц, 1H), 3,70 (dt, J=19,2, 5,6 Гц, 2H), 3,47 (d, J=6,7 Гц, 1H), 3,41 (dd,
J=16,6, 8,7 Гц, 1H), 3,28 (ddd, J=17,5, 8,8, 4,2 Гц, 1H), 3,20-3,13 (m, 1H), 3,13-3,05 (m, 1H), 2,13 (dddd,
- 25 024801
J=16,9, 12,6, 8,4, 5,5 Гц, 2H), 1,47 (d, J=6,1 Гц, 6H).
(8)-5-(3-(1-(3-Гидроксиазетидин-1-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрил 84 получали аналогично из (8)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 50.
Общая методика 9.
Алкилирование цианоинданаминов.
В высушенную в печи колбу в атмосфере N2 добавляли (R)- или (8)-цианоинданамин (1 экв.) в безводном DMF (0,14 М). Реакционную смесь охлаждали до 0°C, и порциями добавляли гидрид натрия (5 экв., 60% в масле, 160,6 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение 2,75 ч добавляли алкилгалогенид. Ледяную баню удаляли через 5 мин, и реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. Через 1,5 ч реакционную смесь гасили медленным добавлением насыщ. раствора NaHCO3 при 0°C. После прекращения выделения газа реакционную смесь экстрагировали EA. Органические слои промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и концентрировали. Продукт очищали хроматографией (EA/гексан) или препаративной ВЭЖХ.
Соединения 85-91, 105, 107 и 143 получали, используя последовательно общие методики 9, 3 и 4.
(^)-трет-Бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-циано-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамат (INT-16)
Получали, используя общую методику 9. В высушенную в печи колбу в атмосфере N2 добавляли (^)-трет-бутил 4-циано-2,3-дигидро-Ш-инден-1-илкарбамат INT-8 (8,3 г, 32,1 ммоль) в безводном DMF (240 мл). Реакционную смесь охлаждали до 0°C, и порциями добавляли гидрид натрия (3,8 г, 60% в масле, 160,6 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение 2,75 ч добавляли (2-бромэтокси)(третбутил)диметилсилан (16,9 мл, 70,7 ммоль). Ледяную баню удаляли через 5 мин и реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. Через 1,5 ч реакционную смесь гасили медленным добавлением насыщ. раствора NaHCO3 при 0°C. После прекращения выделения газа реакционную смесь экстрагировали EA. Органические слои промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и концентрировали. Продукт очищали хроматографией (EA/гексан) с получением 10,76 г (80%) (^)-трет-бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-циано-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)карбамата INT-16 в виде бесцветного масла. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H36N2O3Si: 416,6; обнаруж. 317,2 [М-Вос]+ и 439,0 [M+Na]+, tR=4,04 мин (способ 1).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,46 (d, J=7,6, 1H), 7,38-7,32 (m, 1H), 7,33-7,18 (m, 1H), 5,69 (s, 0,5 H), 5,19 (s, 0,5 H), 3,70 (ddd, J=48,8, 26,6, 22,9, 1,5 H), 3,50-3,37 (m, 1H), 3,17 (ddd, J=16,7, 9,4, 2,2, 2H), 2,93 (m, 1,5 H), 2,45 (s, 1H), 2,21 (dd, J=24,5, 14,5, 1H), 1,56-1,37 (bs, 4,5H), 1,22 (bs, 4,5H), 0,87-0,74 (m, 9H), -0,04 (dd, J=26,6, 8,2, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 155,03, 146,55, 145,54, 131,16, 130,76, [128,11, 127,03], 117,58, 109,20, 79,88, [63,93, 61,88], [61,44, 60,34], [49,73, 46,76], 30,30, 29,70, 28,44, 28,12, [25,87, 25,62], -5,43.
(Ъ)-трет-Бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-циано-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамат INT-17 получали аналогично, используя INT-9.
(^)-трет-Бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил (4-^-гидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро1Н-инден-1-ил)карбамат (INT-18)
Получали, используя общую методику 3. К раствору (^)-трет-бутил 2-(третбутилдиметилсилилокси)этил(4-циано-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата INT-16 (12,0 г, 28,9 ммоль) в EtOH (120 мл) в атмосфере N2 добавляли гидроксиламин-HCl (6,0 г, 86,5 ммоль) и триэтиламин (13,4 мл, 9,7 г, 86,5 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 80°C в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали досуха и затем разбавляли ДХМ (500 мл). Органический слой промывали NaHCO3, водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Объединенные органические слои сушили MgSO4 и концентрировали с получением 11,8 г (^-третбутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил (4-^-гидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1ил)карбамата INT-18 в виде белого пенного твердого вещества, которое использовали без очистки на
- 26 024801
следующей стадии эксперимента. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H39N3O4Si: 449,7; обнаруж. 350,2 [МВос]+ и 472,2 [M+Na]+, tR=1,79 мин (способ 1).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,32 (t, J=7,3 Гц, 1H), 7,21-7,07 (m, 2H), 5,69 (s, 0,5 H), 5,19 (s, 0,5 H), 4,89 (s, 2H), 3,85-3,50 (m, 2H), 3,31 (ddd, J=12,2, 9,2, 2,5 Гц, 2H), 3,28-3,03 (m, 2H), 3,03-2,70 (m, 1H), 2,29 (t, J=23,6 Гц, 1H), 1,43 (bs, 4,5H), 1,28 (bs, 4,5H), 1,16-1,04 (m, 1H), 0,90-0,71 (m, 9H), 0,08-(-0,14) (m, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 170,99, [156,20, 155,62], 152,38, [144,53, 143,57], [141,82, 141,21], 129,61, 126,78, [126,59, 126,25], [125,02, 124,77], [79,91, 79,68], 64,04, 61,88, [61,57, 61,23], [46,03, 45,76], 30,76, 30,21, [28,53, 28,28], 25,95, [25,66, 25,29], 25,13, [18,28, 17,94], 3,72, -5,34.
(8)-трет-Бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил (4-(Ы-гидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро1Н-инден-1-ил)карбамат INT-19 получали аналогично, используя INT-17.
(И)-трет-Бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамат и (И)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-! ,2,4-оксадиазол-З -ил)-2,3 -дигидро- 1Н-инден-1 -ил) (2-гидроксиэтил)карбамат
Получали, используя общую методику 4. К раствору 3-циано-4-изопропоксибензойной кислоты (4,5 г, 21,9 ммоль) в безводном DMF (100 мл) добавляли HOBt (5,4 г, 40,0 ммоль) и EDC (5,6 г, 29,6 ммоль). Через 1 ч добавляли (И)-трет-бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил (4-(Nгидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамат INT-18 (11,8 г, 26,3 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. LCMS анализ показал окончание превращения в промежуточное соединение, (И)-трет-бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил (4-(N(3-циано-4-изопропоксибензоилокси)карбамимидоил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамат INT-20. Реакционную смесь затем нагревали при 80°C в течение 12 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли EA (250 мл). Добавляли NaHCO3 (250 мл) и воду (350 мл) до растворения всех твердых веществ. Смесь экстрагировали EA и органические слои промывали последовательно водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили MgSO4 и концентрировали с получением 15,3 г смеси (И)-трет-бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамата INT-21 и соответствующего материала без TBS-защитной группы, (И)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)(2-гидроксиэтил)карбамат INT-22. Смесь получали в виде коричневого масла, которое можно использовать непосредственно без дополнительной очистки или очищали хроматографией (EA/гексан). INT-21: LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C34H46N4O5Si: 618,8; обнаруж. 519,2 [М-Вос]+ и 641,3 [M+Na]+, tR=7,30 мин (способ 1).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,43 (d, J=2,1, 1H), 8,34 (dd, J=8,9, 2,2, 1H), 8,07 (d, J=8,1, 1H), 7,46-7,26 (m, 2H), 7,12 (d, J=9,0, 1H), 5,85 (s, 0,5H), 5,37 (s, 0,5H), 4,80 (dt, J=12,2, 6,1, 1H), 3,92-3,32 (m, 3,5 H), 3,17 (s, 2H), 2,95 (s, 0,5 H), 2,62-2,39 (m, 1H), 2,38-2,05 (m, 1H), 1,53 (s, 4,5H), 1,48 (d, J=6,1, 6H), 1,33-1,27 (m, 4,5H), 0,94-0,77 (m, 9H), 0,01 (d, J=20,9, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 173,02, 169,00, 162,75, [156,22, 155,52], [145,18, 144,12], [143,39, 142,76], 134,16, 133,89, 128,20, [128,01, 127,85], [127,04, 126,90], 126,43, 123,31, 116,93, 115,30, 113,55, 103,96, [79,95, 79,68], 72,73, 67,61, 63,42, [61,91, 61,77], 60,99, 46,11, 31,78, [30,47, 29,87], [28,55, 28,26], 25,93, 21,75, 18,30, 0,00, -5,37.
INT-22: LCMS-ESI рассчит. для C28H32N4O5: 504,6; обнаруж. 527,2 [M+Na]+, tR=2,65 мин (способ 1).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,36 (d, J=2,1, 1H), 8,27 (dd, J=8,9, 2,2, 1H), 8,03 (d, J=7,2, 1H), 7,35-7,26 (m, 2H), 7,06 (d, J=9,0, 1H), 5,44 (s, 1H), 4,73 (dt, J=12,2, 6,1, 1H), 3,64 (s, 2H), 3,44 (ddd, J=17,5, 9,5, 3,2, 2H), 3,11 (dt, J=17,4, 8,6, 3H), 2,54-2,38 (m, 1H), 2,04 (td, J=17,6, 8,8, 1H), 1,50-1,24 (m, 15H).
(Ъ)-трет-Бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамат INT-23 и (Ъ)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1 -ил)(2-гидроксиэтил)карбамат INT -24 получали аналогичным образом.
- 27 024801
(К)-5-(3-(1-(2-Гидроксиэтиламино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрил (соединение 85)
К раствору (И)-трет-бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата INT-21 и (И)-третбутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)(2гидроксиэтил)карбамата INT-22 (13,9 г, 27,5 ммоль) в диоксане (70 мл) при 0°C добавляли 4N HCl в диоксане (68,8 г, 275,4 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры, и затем нагревали при 50°C в течение 1 ч. Полученную суспензию охлаждали до комнатной температуры и добавляли Et2O (75 мл). Осадок собирали фильтрацией, промывали Et2O и сушили с получением 10,5 г беловатого твердого вещества. Соль HCl перекристаллизовывали из МеОН (165 мл) с получением 5,98 г (56% общий выход из (И)-трет-бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-циано-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)карбамата) (К)-5-(3-(1-(2-гидроксиэтиламино)-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрила 85 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H24N4O3: 404,5; обнаруж. 405,4 [M+H]+, tR=2,44 мин.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,25 (s, 2H), 8,53 (d, J=2,3, 1H), 8,42 (dd, J=9,0, 2,3, 1H), 8,17 (d, J=7,7, 1H), 7,97 (d, J=7,6, 1H), 7,63-7,50 (m, 2H), 5,28 (t, J=5,0, 1H), 4,99 (hept, J=6,1, 1H), 4,92 (s, 1H), 3,72 (q, J=5,2, 2H), 3,57-3,43 (m, 1H), 3,27 (ddd, J=17,6, 9,1, 5,0, 1H), 3,15-2,85 (m, J=24,2, 2H), 2,53 (dtd, J=9,0, 5,5, 5,3, 3,6, 1H), 2,30 (ddd, J=13,4, 8,9, 4,6, 1H), 1,39 (d, J=6,0, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 173,25, 167,86, 162,47, 144,56, 139,13, 134,53, 133,77, 129,30, 128,93, 127,45, 122,83, 115,79, 115,15, 114,84, 102,40, 72,46, 61,04, 56,51, 46,38, 31,53, 27,74, 21,37.
Элементный анализ C23H25N4O3Cl: С рассчит. для=62,65%; обнаруж.=62,73%; Н рассчит. для=5,71%; обнаруж.=5,60%; N рассчит. для=12,71%; обнаруж.=12,64%; Cl рассчит. для=8,04%; обнаруж.=8,16%. Хиральная ВЭЖХ свободного основания: (И)-5-(3-(1-(2-гидроксиэтиламино)-2,3-дигидроШ-инден^-ил^^Л-оксадиазол^-ил^-изопропоксибензонитрил элюировали, используя 10% изо-PrOH в гексане плюс 0,3% DEA: >99,9% ее, tR=37,72 мин. ^)-5-(3-(1-(2-Гидроксиэтиламино)-2,3-дигидро-Шинден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил 86 получали аналогично из (8)-третбутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамата INT-23 и (8)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)(2-гидроксиэтил)карбамата INT-24: >99,9% ее, tR для (S)энантиомера=35,86 мин.
^)-2-(трет-Бутоксикарбонил(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3дигидро-1Н-инден-1-ил)амино)уксусная кислота (INT-25)
^)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1ил)(2-гидроксиэтил)карбамат INT-22 (4,8 г, 9,5 ммоль) растворяли в CH3CN (48 мл) и 0,67 М буфере с фосфатом натрия с pH 6,7 (38 мл). К реакционной смеси добавляли TEMPO (0,10 г, 0,67 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 35°C. Одновременно по каплям добавляли хлорит натрия (1,72 г, 19 ммоль) в воде (9,5 мл) и гипохлорит натрия (0,28 мл, 0,19 ммоль) в воде (5,70 мл) из отдельных капельных воронок в течение 1 ч. После добавления реакционную смесь нагревали при 35°C в течение дополнительного часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду (80 мл), и значение pH реакционной смеси доводили до 8,5 с помощью 2,0N NaOH (12 мл). Реакцию гасили выливанием в охлажденный льдом раствор сульфита натрия (2,9 г в 50 мл воды), и температуру поддерживали
- 28 024801
ниже 20°C. После перемешивания в течение 30 мин при комнатной температуре добавляли Et2O (50 мл), органический слой отделяли и выгружали. Водный слой подкисляли 1,0N HCl (55 мл) до значения pH 3,0
и экстрагировали EA (3x100 мл). Органический слой сушили MgSO4 и отфильтровывали с получением 4,9 г (>99%) (К)-2-(трет-бутоксикарбонил(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)2,3-дигидро-1И-инден-1-ил)амино)уксусной кислоты INT-25 в виде белой пены. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C28H30N4O6: 518,2; обнаруж. 541,2 [M+Na]+, tR=3,97 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,33 (d, J=2,2 Гц, 1H), 8,24 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,08-7,94 (m, J=6,9 Гц, 1H), 7,41-7,22 (m, 2H), 7,03 (d, J=9,1 Гц, 1H), 5,85 (t, J=7,9 Гц, 0,6H), 5,51 (t, J=7,8 Гц, 0,4H), 4,70 (hept, J=6,2 Гц, 1H), 3,88 (d, J=17,1 Гц, 0,4H), 3,69 (d, J=18,0 Гц, 0,6H), 3,56 (d, J=17,2 Гц, 0,4H), 3,43 (d, J=18,0 Гц, 0,6H), 3,40-3,25 (m, 1H), 3,07 (dt, J=17,3, 8,5 Гц, 1H), 2,53-2,38 (m, 1H), 1,93-1,77 (m, 1H), 1,39 (s, 9H), 1,38 (d, J=6,1 Гц, 6H).
Общая методика 10.
Образование амида.
К Вос-защищенной (R)- или (Ъ)-инданаминокислотс (1 экв.) в DMF (2 М) добавляли HOBt (3 экв.) и EDC (3 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли амин (3 экв.), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч до окончания. Вос-защищенный продукт осаждали водой или экстрагировали (ДХМ/5% МеОН) и сушили MgSO4. Твердое вещество растворяли в 4 М HCl в диоксане, и смесь нагревали при 50°C. Через 1 ч растворитель удаляли при пониженном давлении, и твердый остаток очищали перекристаллизацией или препаративной ВЭЖХ.
Соединения 59, 60, 90, 127-135 получали, используя общую методику 10.
Гидрохлорид ^)-2-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Шинден-1-иламино)-М,]\Г-диметилацетамида (соединение 90)
Получали, используя общую методику 10. К 4,9 г (9,5 ммоль) ^)-2-(трет-бутоксикарбонил(4-(5-(3циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)амино)уксусной кислоты INT-25 в DMF (20 мл) добавляли HOBt (4,4 г, 28,5 ммоль) и EDC (5,5 г, 28,5 ммоль), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли диметиламин (2,0N в ТГФ, 14,25 мл, 28,5 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь выливали в воду (300 мл) и осадок отфильтровывали. Твердое вещество тщательно промывали водой (200 мл). Твердое вещество растворяли в ДХМ с 5% МеОН, сушили MgSO4 и отфильтровывали. Добавляли 4 М HCl в диоксане и смесь нагревали при 50°C. Через 1 ч растворитель удаляли при пониженном давлении и твердый остаток перекристаллизовывали из смеси 120 мл МеОН/120 мл Et2O/70 мл гексан/10 мл IPA с получением 3,37 г (74%) гидрохлорида ^)-2-(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1 -иламино)-^^диметилацетамида 90 в виде белого порошка. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H27N5O3: 445,5; обнаруж. 446,2 [M+H]+, tR=2,52 мин. Элементный анализ C25H28N5O3Cl-H2O: С рассчит. для=60,05%; обнаруж.=59,68%; Н рассчит. для=6,05%; обнаруж.=6,45%; N рассчит. для=14,01%; обнаруж.=13,91%; Cl рассчит. для=7,09; обнаруж.=6,98%.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,44 (s, 2H), 8,53 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,41 (dd, J=9,0, 2,3 Гц, 1H), 8,16 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,96 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,62-7,52 (m, 2H), 5,05-4,92 (m, 1H), 4,88 (dd, J=7,0, 4,2 Гц, 1H), 4,11 (d, J=16,1 Гц, 1H), 4,02 (d, J=16,0 Гц, 1H), 3,51 (ddd, J=17,2, 8,2, 6,6 Гц, 1H), 3,25 (ddd, J=17,4, 8,8, 5,0 Гц, 1H), 2,97 (s, 3H), 2,91 (s, 3H), 2,60-2,51 (m, 1H), 2,33 (dq, J=9,0, 4,9 Гц, 1H), 1,39 (d, J=6,0 Гц, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 173,33, 167,95, 164,97, 162,56, 144,68, 139,16, 134,61, 133,85, 129,43, 128,70, 127,63, 122,90, 115,87, 115,24, 114,92, 102,48, 72,54, 61,28, 44,84, 35,77, 34,98, 31,52, 27,68, 21,45.
Хиральная ВЭЖХ свободного основания: ^)-2-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-иламино)-^^диметилацетамид элюировали, используя 15% изо-PrOH в гексане плюс 0,3% DEA: 98,5% ее, tR=41,19 мин. ^)-2-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-иламино)-N,N-диметилацетамид 91 может быть получен аналогично из ^)-2-(трет-бутоксикарбонил(4-(5 -(3 -циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)амино)уксусной кислоты, tR для ^)-энантиомера=34,35 мин. Альтернативный способ описан ниже.
Соединение 91 получали из INT-9, используя последовательно общие методики 9, 3 и 4.
- 29 024801
(8)-трет-Бутил 4-циано-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)карбамат
Получали, используя общую методику 9. К раствору (8)-трет-бутил 4-циано-2,3-дигидро-1Н-инден1-илкарбамата INT-9 (3,0 г, 1,16 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли NaH (1,39 г 60% дисперсии в минеральном масле, 34,8 ммоль) при 0°C при перемешивании в течение 3 ч, затем добавляли 2-хлор-Н,Ыдиметилацетамид (2,82 г, 23,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 0,5 ч и затем нагревали до комнатной температуры в течение 1 ч. Реакционную смесь медленно гасили водой (3 мл) при 0°C. Смесь разделяли между EA (3x20 мл) и водой (50 мл). Объединенные органические слои концентрировали и очищали хроматографией (ДХМ/МеОН) с получением продукта 3,82 г (96,0%) (Б)-третбутил 4-циано-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)карбамата в виде светлокоричневого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C19H25ClN6O6; 343,4; обнаруж. 366,1 [M+Na]+, tR=3,16 мин.
(Ъ)-трет-Бутил 2-(диметиламино)-2-оксоэтил(4-^-гидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро-Ш-инден1-ил)карбамат
Получали, используя общую методику 3. К раствору (Ъ)-трет-бутил 4-циано-2,3-дигидро-Ш-инден1-ил(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)карбамата (3,8 г, 11,07 ммоль) в EtOH (20 мл) добавляли гидрохлорид гидроксиламина (1,92 г, 27,67 ммоль) и триэтиламин (2,8 г, 27,67 ммоль). Реакционный раствор нагревали при 85°C в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток разделяли между ДХМ (3x10 мл) и водой (10 мл). Объединенные органические слои сушили MgSO4 и концентрировали в вакууме с получением 4,10 г (87,7%) (Ъ)-трет-бутил 2-(диметиламино)-2-оксоэтил(4-^-гидроксикарбамимидоил)-2,3дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамата, который имел чистоту 65%, и его использовали непосредственно на следующей стадии эксперимента. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C19H28N4O4; 376,45; обнаруж. 377,2 [M+H]+, tR=1,85 мин.
(Ъ)-трет-Бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1ил(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)карбамат
Получали, используя общую методику 4. К раствору 3-циано-4-изопропоксибензойной кислоты (1,35 г, 6,6 ммоль) в DMF (15 мл) добавляли HOBt (1,34 г, 9,9 ммоль) и EDC (1,89 г, 9,9 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, затем добавляли (Ъ)-трет-бутил 2(диметиламино^-оксоэтил^-^-гидроксикарбамимидоил^^-дигидро-Ш-инден-Пил^арбамат (3,82 г, 6,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь разделяли между EA (3x10 мл) и NaHCO3 (50 мл). Органические слои объединяли, сушили MgSO4 и концентрировали с получением промежуточного соединения (Ъ)-трет-бутил 4-(№(3-циано-4изопропоксибензоилокси)карбамимидоил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил (2-(диметиламино)-2оксоэтил)карбамата. Это промежуточное соединение (3,2 г, 5,68 ммоль) растворяли в DMF (15 мл) и нагревали при 95°C в течение 8 ч. Реакционную смесь разбавляли NaHCO3 (30 моль) и экстрагировали EA (3x15 мл). Органическую фазу сушили MgSO4 и концентрировали при пониженном давлении с получением 2,36 г (78,4%) (Ъ)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3дигидро-Ш-инден-1-ил(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)карбамата в виде светло-коричневого твердого вещества, и использовали без дополнительной очистки на следующей стадии эксперимента.
(S)-2-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1иламино)-М,]\Г-диметилацетамид (соединение 91)
- 30 024801
К раствору сырого (8)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3дигидро-1Н-инден-1-ил-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)карбамата (2,36 г, 4,33 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли 4N HCl в диоксане (10 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали и затем суспендировали в Et2O. Полученное твердое вещество отфильтровывали и сушили с получением 2,3 г (78,4%) соли HCl (8)-2-(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1 -иламино)-Н,Ы-диметилацетамида 91, который имел чистоту 95%. Материал может быть далее перекристаллизован из изопропанола. LCMSESI (m/z) рассчит. для C25H27N5O3: 445,51; обнаруж. 446,2 [M+H]+, tR=2,55 мин.
1H ЯМР и 13С для C25H28N5O3Cl: (400 МГц, ДМСО) δ 9,46 (s, 2H), 8,53 (d, J=2,3, 1H), 8,42 (dd, J=9,0, 2,3, 1H), 8,17 (d, J=7,6, 1H), 7,97 (d, J=7,6, 1H), 7,67-7,51 (m, 2H), 4,99 (hept, J=6,1, 1H), 4,90 (s, 1H), 4,12 (d, J=16,0, 1H), 4,04 (d, J=16,0, 1H), 3,59-3,44 (m, 1H), 3,30-3,11 (m, 1H), 2,97 (s, 3H), 2,91 (s, 3H), 2,60-2,51 (m, 1H), 2,34 (s, 1H), 1,39 (d, J=6,0, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 173,30, 167,95, 164,93, 162,54, 144,69, 139,17, 134,61, 133,83, 129,39, 128,77, 127,58, 122,86, 115,87, 115,23, 114,92, 102,47, 72,54, 61,26, 44,73, 35,77, 34,99, 31,54, 27,61, 21,45.
Хиральная ВЭЖХ свободного основания: (8)-2-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-иламино)-N,N-диметилацетамид элюировали, используя 15% изопропанол в гексане, плюс 0,3% DEA: > 99,9% ее, tR=34,35 мин. (И)-2-(4-(5-(3-Циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1 -иламино)-Н,Ы-диметилацетамид 90 может быть получен аналогично из (И)-трет-бутил 4-циано-2,3-дигидро-Ш-инден-1-илкарбамата. tR для ^)-энантиомера=41,19 мин.
Соединения 92-101 и 252 получали, используя общую методику 4.
Метил 3-бром-5-гидроксибензоат
В колбу, содержащую 3-бром-5-гидроксибензойную кислоту (2,0 г, 9,2 ммоль) в безводном МеОН (10 мл) при 0°C в атмосфере N2 добавляли AcCl (912 мкл, 12,9 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение ночи. Смесь разбавляли EA и промывали NaHCO3. Органические слои сушили и концентрировали с получением 2,1 г (97%) метил 3-бром-5-гидроксибензоата в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C8H7BrO3: 231,04; обнаруж. 232,9 [M+H]+, tR=3,06 мин.
Метил 3-бром-5-изопропоксибензоат
В колбу, содержащую метил 3-бром-5-гидроксибензоат (2,1 г, 8,9 ммоль) в безводном DMF (10 мл), добавляли K2CO3 (2,47 г, 17,9 ммоль) и 2-йодпропан (1,07 мл, 10,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 65°C в течение ночи, затем разбавляли EA и промывали NaHCO3. Органические слои сушили и концентрировали с получением 1,81 г (75%) метил 3-бром-5-изопропоксибензоата в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C11H13BrO3: 273,12; не наблюдали m/z ион, tR=4,17 мин.
Метил 3 -циано-5 -изопропоксибензоат
Раствор метил 3-циано-5-изопропоксибензоата (1,81 г, 6,6 ммоль) в безводном NMP (15 мл) дегазировали 3 раза. Добавляли цианид цинка (1,56 г, 13,3 ммоль) и Pd(PPh3)4 (38 мг, 0,03 ммоль) и реакционную смесь дегазировали еще 4 раза. Смесь перемешивали в атмосфере N2 при 65°C в течение ночи. Дополнительно добавляли Pd(PPh3)4 (100 мг, 0,09 ммоль), и реакционную смесь дегазировали и перемешивали в течение ночи при 65°C. Реакционную смесь разбавляли EA и промывали NaHCO3. Органические слои сушили и концентрировали с получением сырого масла, которое разбавляли в ДХМ и очищали хроматографией (EA/гексан) с получением 1,19 г (82%) метил 3-циано-5-изопропоксибензоата в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C12H13NO3: 219,2; обнаруж. 220,1 [M+H]+, tR=3,60 мин.
- 31 024801
3-Циано-5-изопропоксибензойная кислота
К раствору метил 3-циано-5-изопропоксибензоата (1,19 г, 5,4 ммоль) в EtOH (4 мл) добавляли 5N NaOH (3 мл, 15 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 4 ч реакционную смесь разбавляли 1N HCl и экстрагировали EA. Объединенные органические слои сушили Na2SO4 и концентрировали с получением 920 мг (83%) 3-циано-5-изопропоксибензойной кислоты в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C11H11NO3: 205,2; обнаруж. 206,1 [M+H]+, tR=2,97 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,93 (t, J=1,4 Гц, 1H), 7,80 (dd, J=2,6, 1,4 Гц, 1H), 7,35 (dd, J=2,6, 1,4 Гц, 1H), 4,71-4,56 (m, 1H), 1,38 (dd, J=6,1, 2,2 Гц, 6H).
4-Циано-3-изопропоксибензойная кислота.
Получали аналогично 3-циано-5-изопропоксибензойной кислоте исходя из 4-бром-3гидроксибензойной кислоты. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C11H11NO3: 205,2; обнаруж. 206,1 [M+H]+, tR=2,90 мин.
5-Циано-2-изопропоксибензойная кислота.
Получали аналогично 3-циано-5-изопропоксибензойной кислоте исходя из 5-бром-2гидроксибензойной кислоты. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C11H11NO3: 205,2; обнаруж. 206,1 [M+H]+, tR=2,70 мин.
Метил 3-хлор-4-изопропоксибензоат.
Получали из метил 3-хлор-4-гидроксибензоата в соответствии с методикой, описанной для получения метил 3-бром-5-изопропоксибензоата. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C11H13ClO3: 228,7; обнаруж. 229,1 [M+H]+, tR=3,90 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,05 (d, J=2,1 Гц, 1H), 7,89 (dd, J=8,7, 2,2 Гц, 1H), 6,94 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,67 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 3,89 (s, 3H), 1,37 (dd, J=34,4, 30,1 Гц, 6H).
3-Хлор-4-изопропоксибензойная кислота.
Получали из метил 3-хлор-4-изопропоксибензоата в соответствии с методикой, описанной для получения 3-циано-5-изопропоксибензойной кислоты. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H11ClO3: 214,7; обнаруж. 215,0 [M+H]+, tR=3,22 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 12,94 (s, 1H), 7,98-7,74 (m, 2H), 7,26 (d, J=8,9 Гц, 1H), 4,80 (dt, J=12,1, 6,0 Гц, 1H), 1,33 (t, J=5,6 Гц, 6H).
Метил 3-бром-4-(циклопропилметокси)бензоат.
Получали из метил 3-бром-4-гидроксибензоата и циклопропилметилбромида в соответствии с методикой, описанной для получения метил 3-бром-5-изопропоксибензоата. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C12H13BrO3: 285,1; не наблюдали m/z, tR=3,96 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,22 (t, J=2,8 Гц, 1H), 8,02-7,88 (m, 1H), 6,91-6,81 (m, 1H), 4,02-3,91 (m, 2H), 3,88 (d, J=5,5 Гц, 3H), 1,41-1,26 (m, 1H), 0,76-0,59 (m, 2H), 0,52-0,31 (m, 2H).
Метил 3-циано-4-(циклопропилметокси)бензоат.
Получали из метил 3-бром-4-(циклопропилметокси)бензоата в соответствии с методикой, описанной для получения метил 3-циано-5-изопропоксибензоата. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C13H13NO3: 231,3; не наблюдали m/z, tR=3,97 мин.
3-Циано-4-(циклопропилметокси)бензойная кислота.
Получали из метил 3-циано-4-(циклопропилметокси)бензоата в соответствии с методикой, описанной для получения 3-циано-5-изопропоксибензойной кислоты. LCMS-ESI (m/z) рассчит. Для C12H11NO3: 217,2; не наблюдали m/z, tR=2,92 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,24-8,08 (m, 2H), 7,32 (d, J=8,9 Гц, 1H), 4,09 (d, J=7,1 Гц, 2H), 1,28 (s, 1H), 0,71-0,52 (m, 2H), 0,49-0,31 (m, 2H).
Метил 3-бром-5-(трифторметокси)бензоат.
Получали из 3-бром-5-(трифторметокси)бензойной кислоты в соответствии с методикой, описанной для получения метил 3-бром-5-гидроксибензоата. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C9H6BrF3O3: 299,0; не наблюдали m/z, tR=4,08 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,12 (dd, J=3,9, 2,4 Гц, 1H), 7,83 (dt, J=2,2, 1,2 Гц, 1H), 7,57 (ddd, J=2,4, 1,8, 0,9 Гц, 1H), 3,99-3,87 (m, 3H).
Метил 3-циано-5-(трифторметокси)бензоат.
Получали из метил 3-бром-5-(трифторметокси)бензоата в соответствии с методикой, описанной для получения метил 3-циано-5-изопропоксибензоата. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H6F3NO3: 245,2; не наблюдали m/z, tR=4,43 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,27 (t, J=1,4 Гц, 1H), 8,16-8,07 (m, 1H), 7,73-7,65 (m, 1H), 3,99 (s, 3H).
- 32 024801
3-Циано-5-(трифторметокси)бензойная кислота.
Получали из метил 3-циано-5-(трифторметокси)бензоата в соответствии с методикой, описанной для получения 3-циано-5-изопропоксибензойной кислоты. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C9H4F3NO3: 231,1; не наблюдали m/z, tR=2,38 мин.
(К)-3-(3-(1-Амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)бензонигрил (соединение 92)
Получали из 3-цианобензойной кислоты, используя общую методику 4. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C18H14N4O: 302,3; обнаруж. 286,1 [M-NH2]+, tR=0,78 мин.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 8,67-8,60 (m, 1H), 8,54-8,47 (m, 1H), 8,25-8,17 (m, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,89 (d, J=0,4 Гц, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 4,34-4,22 (m, 1H), 3,34 (s, 1H), 3,12-2,93 (m, 1H), 2,48-2,39 (m, 1H), 2,12-1,89 (m, 1H), 1,76-1,59 (m, 1H).
(К)-3-(3-(1-Амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-5(1рифторметокси)бензони1рил (соединение 93)
Получали из 3-циано-5-(трифторметокси)бензойной кислоты, используя общую методику 4. LCMSESI (m/z) рассчит. для C19H13F3N4G2: 386,3; обнаруж. 370,0 [M-NH2]+, tR=2,61 мин.
(R)-4-(5-(3-Хлор-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-амин (соединение 95)
Получали из 3-хлор-4-изопропоксибензойной кислоты, используя общую методику 4. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C20H20ClN3G2: 369,8; обнаруж. 353,1 [M-NH2]+, tR=1,70 мин.
^)-4-(5-(4-Изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-амин (соединение
96)
Получали из 4-изопропоксибензойной кислоты, используя общую методику 4. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C20H21N3G2: 335,4; обнаруж. 319,1 [M-NH2]+, tR=1,64 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,11 (d, J=9,0 Гц, 2H), 8,02-7,89 (m, 1H), 7,65-7,54 (m, 1H), 7,50-7,36 (m, 1H), 7,17 (d, J=9,0 Гц, 2H), 4,88-4,71 (m, 1H), 4,38-4,23 (m, 1H), 3,12-2,91 (m, 2H), 2,46-2,37 (m, 1H), 1,771,60 (m, 1H), 1,33 (d, J=6,0 Гц, 6H).
^)-3-(3-(1-Амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-5-изопропоксибензонитрил (соединение 97)
Получали из 3-циано-5-изопропоксибензойной кислоты, используя общую методику 4. LCMS-ESI
- 33 024801
(m/z) рассчит. для C21H20N4O2: 360,4; обнаруж. 344,1 [M-NH2]+, tR=2,59 мин.
(К)-4-(3-(1-Амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение 98)
Получали из 4-циано-3-изопропоксибензойной кислоты, используя общую методику 4. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C21H20N4O2: 360,4; обнаруж. 344,1 [M-NH2]+, tR=2,52 мин.
(R)-3-(3-(1-Амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-4-изопропоксибензонитрил (соединение 99)
Получали из 5-циано-2-изопропоксибензойной кислоты, используя общую методику 4. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C21H20N4O2: 360,4; обнаруж. 344,1 [M-NH2]+, tR=1,86 мин.
^)-5-(3-(1-Амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2(циклопропилметокси)бензонитрил (соединение 100)
Получали из 3-циано-4-(циклопропилметокси)бензойной кислоты, используя общую методику 4. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C22H20N4O2: 372,4; обнаруж. 356,1 [M-NH2]+, tR=1,61 мин.
2-Гидрокси-5-(3-(1-((2-гидроксиэтил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5ил)бензонитрил (соединение 102)
К 5-(3-(1-((2-гидроксиэтил)амино)-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрилу (15,0 мг, 0,37 ммоль) в DCE (3 мл) добавляли BCl3 (1,85 мл 1 М раствора в ДХМ). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель упаривали, и остаток очищали хроматографией (ДХМ/МеОН) с получением 900,0 мг (67%) 2-гидрокси-5-(3(Ь^-гидроксиэтил^мино^З-дигидро-Ш-инден^-ил^ЗЗ-оксадиазол^-ил^ензонитрила 102 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C20H18N4O3: 362,4; обнаруж. 363,1 [M+H]+, tR=2,13 мин. Энантиомерно чистые материалы могут быть получены аналогично из (R)- или (S)-5-(3-(1З-гидроксиэтиламино^З-дигидро-Ш-инден^-ил^ЗЗ-оксадиазол^-ил^-изопропоксибензонитрила.
Общая методика 11.
Алкилирование фенолов.
К раствору инданфенола (1 экв.) в DMA (0,75 М) добавляли подходящий алкилгалогенид (2 экв.) и карбонат калия (3 экв.). Смесь перемешивали в течение 6 ч при 75°C до исчезновения исходного фенола по данным ТСХ. Растворитель упаривали, и смесь экстрагировали EA и насыщенным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушили MgSO4, отфильтровывали и концентрировали. Конечное соединение очищали препаративной ВЭЖХ.
Соединения 103, 104, 106, 108 и 109 получали, используя общую методику 11.
- 34 024801
5-(3-(1-((2-Гидроксиэтил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изобутоксибензонитрил (соединение 103)
Получали, используя общую методику 11. К раствору 2-гидрокси-5-(3-(1-(2-гидроксиэтиламино)2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)бензонитрила 102 (15,0 мг, 0,041 ммоль) в DMA (2 мл) добавляли K2CO3 (16,9 мг, 0,12 ммоль) и 1-бром-2-метилпропан (11,3 мг, 0,08 ммоль). Смесь перемешивали в течение 6 ч при 75°C. Растворитель упаривали и смесь разделяли между EA и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили MgSO4, отфильтровывали и растворитель упаривали. Конечное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением 6,31 мг (37%) 5-(3-(1-((2гидроксиэтил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изобутоксибензонитрила 103 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H16N4O3: 418,5; обнаруж. 419,2 [M+H]+, tR=2,61 мин.
Общая методика 12.
Алкилирование, ацилирование и сульфонилирование вторичных аминов.
К перемешиваемому раствору вторичного (R)- или (Ъ)-инданамина (1 экв.) при 0°C в ДХМ (0,04 М) добавляли подходящий алкилгалогенид, хлорангидрид кислоты или сульфонилхлорид (1,5 экв.). Добавляли триэтиламин (2 экв.), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до исчезновения всего инданамина. Реакционные смеси гасили водой, концентрировали в высоком вакууме и очищали препаративной ВЭЖХ. Ацетилзащищенные производные продукты очищали после удаления ацетильной группы.
Соединения 110-117 получали, используя общую методику 12.
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-N(2-гидроксиэтил)метансульфонамид (соединение 112)
Получали, используя общую методику 12. К перемешиваемому раствору ^)-2-((4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)амино)этилацетата (20 мг, 0,04 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли метансульфонилхлорид (10,2 мг, 0,08 ммоль), затем триэтиламин (9,08 мг, 0,08 ммоль)) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакцию гасили водой (1 мл), экстрагировали ДХМ (2x1 мл) и объединенные экстракты сушили MgSO4. Органические слои концентрировали с получением 23 мг (50%) (К.)-2-^-(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1 -ил)метилсульфонамида)этилацетата, который использовали на следующей стадии без очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H28N4O6S: 524,2; обнаруж. 547,1 [M+Na]+, tR=3,82 мин.
К раствору ^)-2-(№(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Шинден-1-ил)метилсульфонамидо)этилацетата (12 мг, 0,22 ммоль) в смеси 1:1 МеОН/^O добавляли K2CO3 (9,48 мг, 0,06 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали досуха. Сырую реакционную смесь очищали препаративной ВЭЖХ с получением (R)-N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-N-(2гидроксиэтил)метансульфонамида 112. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H26N4O5S: 482,2; обнаруж. 505,1 [M+Na]+, tR=3,55 мин.
Общая методика 13.
Восстановительное аминирование инданаминов.
К раствору первичного или необязательно замещенного вторичного (R)- или ^)-инданамина (1 экв.) в МеОН (0,01 М) добавляли уксусную кислоту (0,01 экв.) и подходящий альдегид (1 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 25-50°C до окончания образования имина (2-18 ч). Добавляли боргидрид натрия или триацетоксиборгидрид натрия (10 экв.), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до окончания восстановления (2-8 ч). Растворитель упаривали, и к остатку добавляли NaHCO3, и затем экстрагировали EA. Органический слой собирали и сушили Mg2SO4. Конечный продукт очищали препаративной ВЭЖХ.
Соединения 119, 156-162 и 208-210 получали, используя общую методику 13.
- 35 024801
(8)-5-(3-(1-(((1Н-Имидазол-2-ил)метил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)2-изобутоксибензонитрил (соединение 158)
O-N
Получали, используя общую методику 13, из 1Н-имидазол-2-карбальдегида, и нагревая при 50°C в течение 2 ч, восстанавливая NaBH4 в течение 2 ч. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H26N6G2: 440,5; обнаруж. 441,2 [М+Н]+, tR=2,49 мин.
2-Изопропокси-5-(3-^)-1-(((2К^,4К)-2,3,4,5-тетрагидроксипентил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)бензонигрил (соединение 119)
Получали, используя общую методику 13. К раствору ^)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 50 (50 мг, 0,14 ммоль) в MeGH(10 мл) добавляли (2R,3S,4R)-2,3,4,5-тетрагидроксипентаналь (20,71 мг, 0,14 ммоль) и уксусную кислоту (2 капли) при перемешивании в течение 50°C в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и медленно добавляли боргидрид натрия (52,2 мг, 1,38 ммоль) при перемешивании в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором NaHCG3 (10 мл), и экстрагировали EA (3x10 мл). Органические слои промывали насыщенным раствором хлорида натрия и сушили Mg2SG4. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 8,68 мг (25%) 2-изопропокси-5(3-((S)-1-(((2S,3R,4R)-2,3,4,5-тетрагидроксипентил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол5-ил)бензонитрила 119 в виде твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H30N4G6: 494,5; обнаруж. 495,2 [M+H]+, tR=2,42 мин.
^)-2-Изопропокси-5-(3-(1-((2-(метилсульфонил)этил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4оксадиазол-5-ил)бензонигрил (соединение 125)
К раствору ^)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2изопропоксибензонитрила 49 (18 мг, 0,05 ммоль) в DMA (0,5 мл) добавляли DIEA (87 мкл, 0,5 ммоль) и метилвинилсульфон (53 мг, 0,5 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80°C в течение 24 ч. Сырую реакционную смесь очищали препаративной ВЭЖХ с получением ^)-2-изопропокси-5-(3-(1-((2(метилсульфонил)этил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)бензонитрила 125. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для С24Н26^О^: 466,2; обнаруж. 467,1 [М+Н]+, tR=2,58 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,41 (d, J=2,1 Гц, 1Н), 8,32 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1Н), 8,07 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 7,47 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 7,37 (t, J=7,6 Гц, 1Н), 7,10 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 4,77 (hept, J=6,1 Гц, 1Н), 4,33 (t, J=6,7 Гц, 1Н), 3,44 (ddd, J=17,5, 8,7, 4,8 Гц, 1Н), 3,36-3,10 (m, 5Н), 3,03 (s, 3Н), 2,57-2,43 (m, 1Н), 1,98-1,83 (m, 1Н), 1,46 (d, J=6,1 Гц, 6Н).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 173,04, 168,94, 162,76, 146,05, 143,49, 134,11, 133,92, 128,24, 127,03, 126,83, 123,28, 116,84, 115,33, 113,58, 103,88, 72,76, 63,05, 55,41, 42,42, 40,86, 32,98, 31,86, 21,75.
Соединение 126 получали аналогичным образом.
Общая методика 14.
Получение инданамидов через хлорангидриды кислот.
К перемешиваемому раствору (R)- или ^)-инданамина (1 экв.) в ДХМ (0,25 М) добавляли ТЭА (3 экв.) и подходящий хлорангидрид кислоты (1,5 экв.) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель упаривали и сырой продукт выделяли после разделения между насыщенным раствором N^Cl и ДХМ, затем насыщенным раствором NaHCGз и ДХМ. Чистый продукт может быть получен перекристаллизацией из спиртовых растворителей.
Соединения 122, 138 и 139 получали, используя общую методику 14.
- 36 024801
(8)-Н-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1ил)ацетамид (соединение 139)
Получали, используя общую методику 14. К перемешиваемому раствору гидрохлорида (S)-5-(3-(1амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 50 (500 мг, 1,26 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли ТЭА (527 мкл, 378 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°C и добавляли ацетилхлорид (135 мкл, 1,89 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток разбавляли ДХМ (100 мл) и промывали последовательно насыщенным раствором NH4Cl и NaHCO3. Органические слои сушили MgSO4, отфильтровывали и концентрировали с получением сырого продукта. Сырой продукт перекристаллизовывали из горячего этанола (75 мл) с получением 420 мг (83%) (8)^-(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)ацетамида 139 в виде белых кристаллов. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H22N4O3: 402,2; обнаруж. 403,1 [M+H]+, tR=8,77 мин (способ 2). Элементный анализ определен для C23H22N4O3; С рассчит.=68,64%; обнаруж.=68,54%. Н рассчит.=5,51%; обнаруж.=5,36%. N рассчит.=13,92%; обнаруж.=13,85%.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 8,58 (d, J=2,2 Гц, 1H), 8,47 (dd, J=9,0, 2,3 Гц, 1H), 8,39 (d, J=8,2 Гц, 1H) 8,08 (t, J=4,2 Гц, 1H), 7,62 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,57-7,47 (m, 2H), 5,45-5,39 (m, 1H), 5,20-4,97 (m, 1H), 3,513,42 (m, 1H), 3,25-3,00 (m, 1H), 2,55-2,50 (m, 1H), 1,96 (s, 3H), 1,94-1,87 (m, 1H), 1,45 (d, J=6,0 Гц, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 173,14, 169,85, 168,85, 162,79, 144,91, 143,26, 134,16, 133,89, 128,49, 127,40, 126,86, 123,29, 116,82, 115,29, 113,56, 103,97, 72,77, 54,56, 33,67, 31,70, 23,50, 21,75.
Хиральная ВЭЖХ. ^)^-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидроШ-инден-1-ил)ацетамид элюировали, используя 10% изо-PrOH в гексане плюс 0,3% DEA: > 99,9% ее, tR=15,09 мин. (R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден1-ил)ацетамид 138 получали аналогично из ^)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 49: >99,9% ее, tR для ^)-энантиомера=16,44 мин.
Общая методика 15.
Получение инданкарбаматов.
К перемешиваемому раствору (R)- или (8)-инданамина (1 экв.) в DMF (0,05 М) добавляли DIEA (3 экв.) и подходящий хлорформиат (2 экв.) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель упаривали, и чистый продукт выделяли препаративной ВЭЖХ очисткой.
Соединения 149-153 получали, используя общую методику 15.
^)-Метил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1ил)карбамат (соединение 149)
Получали, используя общую методику 15. К перемешиваемому раствору ^)-5-(3-(1-амино-2,3дигидро-Ш-инден^-ил^^^-оксадиазол^-ил^-изопропоксибензонитрила 49 (20,0 мг, 0,05 ммоль) в DMF (1 мл) добавляли DIEA (19,4 мг, 0,15 ммоль) и метилхлорформиат (9,5 мг, 0,1 ммоль) в течение 4 ч при комнатной температуре. Растворитель упаривали, и остаток растворяли в ДМСО (1 мл) и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 2,35 мг (11%) (Р)-метил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамата 149. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H22N4O4: 418,2; обнаруж. 419,1 [M+H]+, tR=3,85 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,39 (d, J=2,1 Гц, 1H), 8,32 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,07 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,54-7,44 (m, 1H), 7,38 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,12 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,43-5,18 (m, 1H), 5,03 (d, J=8,6 Гц, 1H), 4,90-4,63 (m, 1H), 3,77 (d, J=27,4 Гц, 3H), 3,59-3,35 (m, 1H), 3,27-3,01 (m, 1H), 2,68 (ddd, J=12,7, 8,2, 4,7 Гц, 1H), 2,05-1,75 (m, 1H), 1,47 (t, J=5,6 Гц, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 167,82, 163,56, 157,51, 151,63, 139,77, 137,77, 128,85, 128,63, 123,19, 122,08, 121,53, 117,97, 111,55, 110,03, 108,32, 98,67, 51,00, 46,99, 28,68, 26,28, 24,46, 16,50.
- 37 024801
(К)-2-Изопропокси-5-(3-(1-(2-оксооксазолидин-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол5-ил)бензонитрил (соединение 154)
К перемешиваемому раствору (И)-трет-бутил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)(2-гидроксиэтил)карбамата INT-22 в DMF (1 мл) добавляли NaH (6 мг, 0,15 ммоля, 60% раствор в минеральном масле). После перемешивания в течение 20 ч реакционную смесь разбавляли EA и промывали NaHCO3. Объединенные водные экстракты снова экстрагировали EA. Объединенные органические экстракты сушили Na2SO4, концентрировали и очищали колоночной хроматографией (EA/гексан) с получением 11,9 мг (29%) (И)-2-изопропокси-5-(3-(1-(2оксооксазолидин-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4- оксадиазол-5-ил)бензонитрила 154. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C22H22N4O4: 430,5; обнаруж. 431,1 [M+H]+, tR=3,72 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,43 (d, J=2,2 Гц, 1H), 8,34 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,14 (t, J=4,4 Гц, 1H), 7,42 (m, 2H), 7,13 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,72-5,57 (m, 1H), 4,80 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 4,35 (qt, J=15,7, 7,8 Гц, 2H), 3,56-3,39 (m, 2H), 3,25 (dtd, J=24,4, 8,6, 7,1 Гц, 2H), 2,65-2,48 (m, 1H), 2,10 (ddt, J=13,7, 9,0, 7,1 Гц, 1H), 1,48 (d, J=6,1 Гц, 6H). Соединение 155 получали аналогичным образом.
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2метоксиэтансульфонамид (соединение 163)
Получали, используя общую методику 8А. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H26N4O5S: 482,2; обнаруж. 505,1 [M+Na]+, tR=9,57 мин (способ 2). Элементный анализ определяли для C24H26N4O5S; С рассчит.=59,74%; обнаруж.=59,34%; Н рассчит.=5,43%; обнаруж.=5,37%; N рассчит.=11,61%; обнаруж.=11,46%.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,42 (d, J=2,1 Гц, 1H), 8,34 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,12 (d, J=1,1 Гц, 1H), 7,66 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,43 (t, J=7,7 Гц, 1H), 7,13 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,06 (q, J=7,8 Гц, 1H), 4,80 (hept, J=6,0 Гц, 1H), 4,67 (d, J=8,6 Гц, 1H), 3,97-3,78 (m, 2H), 3,50 (ddd, J=17,4 8,9, 3,4 Гц, 1H), 3,40 (t, J=5,7 Гц, 1H), 3,39 (s, 3H), 3,26-3,13 (m, 1H), 2,71 (dtd, J=12,9, 8,1, 3,5 Гц, 1H), 2,07 (ddd, J=16,4, 13,0, 8,6 Гц, 1H), 1,48 (d, J=6,1 Гц, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 172,90, 168,49, 162,70, 144,03, 142,51, 133,89, 133,84, 128,52, 127,31, 127,12, 123,02, 116,53, 115,28, 113,65, 103,61, 72,79, 66,92, 59,02, 58,70, 52,98, 34,29, 31,49, 21,72.
Хиральная ВЭЖХ. (К)^-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидроШ-инден-Пил^-метоксиэтансульфонамид элюировали, используя метанол (хиральный способ 2): >99,9% ее, tR=11,26 мин. ^)-^(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидроШ-инден-Пил^-метоксиэтансульфонамид 164 получали аналогичным образом: >99,9% ее, tR для (S)энантиомера=9,11 мин (хиральный способ 2).
Общая методика 16.
Получение индансульфонамидных эфиров.
К перемешиваемому раствору (R)- или (Ъ)-инданамина (1 экв.) в ДХМ (0,2 М) добавляли сульфонилхлорид (1 экв.) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Сырую реакционную смесь разделяли между ДХМ и насыщенным раствором NaHCO3. Органический слой сушили MgSO4, концентрировали и очищали колоночной хроматографией.
Соединения 72, 182 и 183 получали, используя общую методику 16.
^)-Метил 2-^-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден1-ил)сульфамоил)ацетат (соединение 72)
Получали, используя общую методику 16. К перемешиваемому раствору ^)-5-(3-(1-амино-2,3дигидро-Ш-инден^-ил^^^-оксадиазол^-ил^-изопропоксибензонитрила 50 (0,36 г, 1,0 ммоль) в
- 38 024801
ДХМ (5 мл) добавляли метил-2-(хлорсульфонил)ацетат (112 мг, 0,6 ммоль). Через 0,5 ч сырую реакционную смесь разделяли между ДХМ и насыщенным раствором NaHCO3. Органический слой сушили
MgSO4, концентрировали и очищали колоночной хроматографией (EA/гексан) с получением 0,21 г (42%) (S)-mcthj 2-(N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)сульфамоил)ацетата 72. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H24N4O6S: 496,1; обнаруж. 519,1 [M+Na]+, tR=3,71 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,41 (d, J=2,1 Гц, 1H), 8,32 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,13 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,66 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,43 (t, J=7,7 Гц, 1H), 7,11 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,20-5,00 (m, 2H), 4,78 (hept, J=6,2 Гц, 1H), 4,16 (d, J=14,9 Гц, 1H), 4,08 (d, J=14,9 Гц, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,51 (ddd, J=17,4, 8,9, 3,5 Гц, 1H), 3,283,11 (m, 1H), 2,71 (dtd, J=11,3, 8,1, 3,6 Гц, 1H), 2,16-2,02 (m, 1H), 1,46 (d, J=6,1 Гц, 6H).
(И)-Метил 2-(N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден1-ил)сульфамоил)ацетат получали аналогично из (К)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1И-инден-4-ил)-1,2,4оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 49.
Общая методика 17.
Получение индансульфонамидов кислот.
К перемешиваемому раствору (R)- или (Ъ)-индансульфонамидного эфира (1 экв.) в MeOH (0,2 М) добавляли 6N NaOH (2 экв.) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Сырую реакционную смесь концентрировали, затем разделяли между ДХМ/IPA и 1N HCl. Органический слой сушили MgSO4, концентрировали и выделяли после препаративной очистки ВЭЖХ.
Соединения 71, 184 и 185 получали, используя общую методику 17.
(R)-2-(N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)сульфамоил)уксусная кислота (соединение 184)
Получали, используя общую методику 17. К перемешиваемому раствору (R)-\iCTna 2-(N-(4-(5-(3циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)ацетата (0,40 г, 0,8 ммоль) в MeOH (4 мл) добавляли 6N NaOH (0,27 мл). Через 24 ч сырую реакционную смесь концентрировали, затем разделяли между ДХМ/IPA и 1N HCl. Органический слой сушили MgSO4 и концентрировали с получением 0,35 г (91%) ^)-2-^-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)сульфамоил)уксусной кислоты 184. Аналитически чистый образец получали препаративной ВЭЖХ очисткой. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H22N4O6S: 482,1; обнаруж. 505,1 [M+Na]+, tR=8,72 мин (способ 2). ^)-2-^-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)сульфамоил)уксусную кислоту получали аналогично из (S)-\icth3 2-(N(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)сульфамоил)ацетата.
Общая методика 18.
Получение индансульфонамидов спиртов.
К перемешиваемому раствору (R)- или (Ъ)-индансульфонамидного эфира (1 экв.) в ТГФ (0,06 М) добавляли боргидрид натрия (4 экв.) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали при 75°C, и по каплям добавляли метанол (1 экв.). Через 1 ч реакционную смесь охлаждали и концентрировали. Остаток разделяли между ДХМ и 0,5N HCl. Органический слой сушили MgSO4, концентрировали и очищали перекристаллизацией.
Соединения 186-188 получали, используя общую методику 18.
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифcнил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-индcн-1-ил)-2гидроксиэтансульфонамид (соединение 186)
Получали, используя общую методику 18. К перемешиваемому раствору (R)-\iCTna 2-(N-(4-(5-(3циано-4-изопропоксифcнил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-индcн-1-ил)сульфамоил)ацcтата (0,72 г, 1,5 ммоль) в ТГФ (25 мл) добавляли боргидрид натрия (0,24 г, 6,2 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали при 75°C, и по каплям добавляли метанол (0,06 мл, 1,5 ммоль). Через 1 ч реакционную смесь охлаждали и концентрировали. Остаток разделяли между ДХМ и 0,5N HCl. Органический слой сушили MgSO4, концентрировали и перекристаллизовывали из метанола с получением 0,40 г (60%) ^)-Ы-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифснил)-1,2,4-оксадиазол -3-ил)-2,3-дигидро-Ш- 39 024801
инден-1-ил)-2-гидроксиэтансульфонамида 186. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H24N4O5S: 468,2; обнаруж. 491,1 [M+Na]+, tR=8,64 мин (способ 2). Элементный анализ определяли для C23H24N4O5S; С рассчит.=58,96%; обнаруж.=58,86%; Н рассчит.=5,16%; обнаруж.=5,08%; N рассчит.=11,96%; обнаруж.=11,78%.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,38 (d, J=2,2 Гц, 1H), 8,32 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,10 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,62 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,42 (t, J=7,7 Гц, 1H), 7,12 (d, J=9,1 Гц, 1H), 5,05 (q, J=7,9 Гц, 1H), 4,94-4,69 (m, 2H),
4,30-3,91 (m, 2H), 3,49 (ddd, J=17,4, 8,8, 3,5 Гц, 1H), 3,39 (td, J=4,8, 1,6 Гц,2Н), 3,25-3,07 (m, 1H), 2,71 (dtd, J=11,5, 8,0, 3,6 Гц, 1H), 2,11-1,95 (m, 1H), 1,48 (d, J=6,1 Гц, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 173,30, 168,79, 162,95, 143,72, 142,80, 134,25, 134,04, 129,06, 127,76, 127,23, 123,52, 116,84, 115,41, 113,72, 104,06, 72,94, 59,01, 57,56, 55,84, 34,85, 31,61, 21,88.
Хиральная ВЭЖХ. (К)-Н-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидроШ-инденЧ-ил^-гидроксиэтансульфонамид элюировали метанолом (хиральный способ 2): 99,9% ее, tR=8,59 мин. (S)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)-2-гидроксиэтансульфонамид 187 получали аналогично из (8)-метил 2-(Ы-(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил) -2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)сульфамоил)ацетата: >99,9% ее, tR для (8)-энантиомера=6,62 мин (хиральный способ 2).
Общая методика 19.
Получение индансульфонамидамида.
К перемешиваемому раствору (R)- или (8)-индансульфонамида кислоты (1 экв.) в DMF (0,25 М) добавляли EDC и N-гидроксибензотриазол. Через 5 мин добавляли амин и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. Сырую реакционную смесь добавляли по каплям к воде и твердое вещество отфильтровывали. Сырой материал очищали колоночной хроматографией.
Соединения 189-201 получали, используя общую методику 19.
(S)-2-(N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)сульфамоил)-М,]\Г-диметилацетамид (соединение 195)
Получали, используя общую методику 19. К перемешиваемому раствору (8)-2-^-(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1 -ил)сульфамоил)уксусной кислоты 71 (48 мг, 0,1 ммоль) в DMF (0,4 мл) добавляли N-гидроксибензотриазол (46 мг, 0,3 ммоль) и EDC (57 мг, 0,3 ммоль). Через 5 мин добавляли диметиламин (40 вес.% раствор в воде, 34 мкл, 0,3 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь добавляли по каплям к воде (20 мл) и твердое вещество отфильтровывали. Сырой материал очищали колоночной хроматографией (MeOH/ДХМ) с получением 36 мг (70%) (8)-2-^-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)сульфамоил)-^^диметилацетамида 195. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H27N5O5S: 509,2; обнаруж. 532,2 [M+Na]+, tR=8,99 мин (способ 2). (R)-2-(N-(4-(5-(3Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)-N,Nдиметилацетамид 194 получали аналогично из ^)-2-(№(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4оксадиазол-3 -ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)сульфамоил)уксусной кислоты.
Диэтил 2,2-бис-((((трифторметил)сульфонил)окси)метил)малонат (INT-26)
К перемешиваемому раствору диэтил 2,2-бис-(гидроксиметил)малонат (330 мкл, 1,5 ммоль) в CH3CN (6 мл) при -15°C в атмосфере N2, по каплям добавляли Tf2O (324 мкл, 1,92 ммоль) в течение 20 мин. После перемешивания в течение 5 мин медленно добавляли DIEA (653 мкл, 3,75 ммоль) в течение 15 мин. Через 2 ч добавляли дополнительно DIEA (653 мкл, 3,75 ммоль). Полученный раствор диэтил 2,2-бис-((((трифторметил)сульфонил)окси)метил)малоната INT-26 использовали непосредственно на следующей стадии.
(Г)-Диэтил 1-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1ил)азетидин-3,3 -дикарбоксилат (INT-27)
К раствору ^)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2- 40 024801
изопропоксибензонитрила 49 (247 мг, 0,62 ммоль) в CH3CN (2 мл) при -10°C в атмосфере N2 добавляли диэтил 2,2-бис-((((трифторметил)сульфонил)окси)метил)малонат INT-26 (3 мл 0,25 ммольный раствор в CH3CN). Полученную смесь нагревали до комнатной температуры в течение 30 мин, затем нагревали при 70°C в течение 18 ч. Смесь концентрировали, растворяли в ДХМ и промывали водой. Органический слой
сушили Na2SO4 и концентрировали с получением 93 мг (28%) сырого (К)-диэтил 1-(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)-2,3-дигидро-1И-инден-1 -ил)азетидин-3,3-дикарбоксилата INT-27, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C30H32N4O6: 544,6; обнаруж. 545,2 [M+H]+, tR=3,03 мин.
(К)-1-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Ы-инден-1ил)азетидин-3 -карбоновая кислота (соединение 202)
К перемешиваемому раствору сырого (И)-диэтил 1-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1И-инден-1-ил)азетидин-3,3-дикарбоксилата (93 мг, 0,17 ммоль) в MeOH (2 мл) добавляли 6N раствор NaOH (5 капель). Полученный раствор нагревали при 50°C в закрытом сосуде. Через 24 ч раствор концентрировали, растворяли в воде, нейтрализовали 1N раствором HCl и нагревали при 100°C. Через 15 ч добавляли дополнительно 1N раствор HCl, и смесь перемешивали при 105°C в течение 24 ч. Смесь разбавляли водой и экстрагировали ДХМ и EA. Органические слои объединяли, сушили Na2SO4 и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 25 мг (33%) (И)-1-(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)азетидин-3-карбоновой кислоты 202. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H24N4O4: 444,5; обнаруж. 445,2 [M+H]+, tR=2,55 мин. Соединение 203 получали аналогично.
Общая методика 20.
Получение инданазетидинамида.
К раствору (R)- или ^)-инданазетидиновой кислоты в DMF (0,03 мМ) добавляли гидроксибензотриазол (1,3 экв.) и 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (1,3 экв.). Через 2 ч раствор активированной кислоты переносили в колбу, содержащую амин (2 экв.). Любые амины, используемые в виде соли, переводили в свободное основание добавлением DIEA (1,1 экв.). Через 16 ч реакционную смесь разбавляли EA и промывали NaHCO3. Органические слои сушили Na2SO4, концентрировали и очищали колоночной хроматографией (MeOH/ДХМ).
Соединения 204-207 получали, используя общую методику 20.
(S)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1ил)метансульфонамид (соединение 207)
Получали, используя общую методику 20. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C28H29N5O3: 483,6; обнаруж. 484,2 [M+H]+, tR=2,55 мин.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,42 (d, J=2,2 Гц, 1H), 8,33 (dd, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 8,08 (dd, J=7,7, 0,8 Гц, 1H), 7,44 (d, J=7,3 Гц, 1H), 7,32 (dd, J=16,8, 9,3 Гц, 1H), 7,11 (d, J=9,0 Гц, 1H), 4,85-4,70 (m, 1H), 4,05 (ddd, J=22,6, 15,0, 7,3 Гц, 4H), 3,98 (dd, J=6,8, 3,1 Гц, 1H), 3,64-3,55 (m, 1H), 3,57-3,48 (m, 2H), 3,47-3,34 (m, 2H), 3,34-3,20 (m, 2H), 2,34-2,21 (m, 2H), 2,23-2,10 (m, 1H), 2,03 (ddd, J=13,0, 7,7, 3,7 Гц, 1H), 1,51-1,42 (m, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ 172,92, 171,71, 169,02, 162,69, 144,54, 144,30, 134,12, 133,86, 128,22, 127,18, 126,66, 123,40, 116,96, 115,30, 113,51, 103,91, 72,69, 70,79, 55,05, 54,53, 49,77, 48,05, 32,13, 31,04, 28,64, 21,73, 15,34.
Общая методика 21.
Получение инданмочевин.
К перемешиваемому раствору CDI (2 экв.) и Et3N (3 экв.) в ДХМ (0,16 М) добавляли раствор (R)или ^)-инданамина (1 экв.) и Et3N (3 экв.) в ДХМ (0,01 М) в течение 1 ч, и затем этот раствор добавляли к полученному раствору амина (3 экв.) и Et3N (3 экв.) в ДХМ (0,4 М) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч до исчезновения всего исходного материала. Растворитель упаривали, и чистый продукт выделяли колоночной хроматографией на силикагеле (ДХМ/MeOH).
Соединения 120, 211-247 получали, используя общую методику 21.
- 41 024801
(К)-М-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-3гидроксиазетидин-1-карбоксамид (соединение 234)
Получали, используя общую методику 21. К перемешиваемому раствору CDI ((268,5 мг, 1,66 ммоль) и Et3N (279,0 мг, 2,76 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли раствор (И)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро1Н-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 49 (500,0 мг, 1,38 ммоль) и Et3N (279,0 мг, 2,76 ммоль) в ДХМ (10 мл) в течение 1 ч при комнатной температуре и затем этот раствор добавляли к полученному раствору гидрохлорида азетидин-3-ола (453,54 мг, 4,14 ммоль) и Et3N (418,55 мг, 4,14 ммоль) в ДХМ (10 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель упаривали и чистый продукт выделяли колоночной хроматографией на силикагеле (ДХМ/MeOH) с получением 474,32 мг (74,8%) (И)-^(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-3-гидроксиазетидин-1карбоксамида 234. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H25N5O4: 459,5; обнаруж. 460,2 [M+H]+, tR=3,20 мин. Элементный анализ: С рассчит. для=65,35%; обнаруж.=65,07%; Н рассчит. для=5,48%; обнаруж.=5,47%; N рассчит. для=15,24%; обнаруж.=15,14%.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO3) δ 8,50 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,40 (dd, J=9,0, 2,3 Гц, 1H), 8,08-7,89 (m, 1H), 7,55 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,44 (dd, J=7,0, 5,9 Гц, 2H), 6,72 (d, J=8,7 Гц, 1H), 5,57 (d, J=6,5 Гц, 1H), 5,23 (q, J=8,3 Гц, 1H), 4,98 (hept, J=6,1 Гц, 1H), 4,39 (ddd, J=11,3, 6,6, 1,9 Гц, 1H), 4,10-3,91 (m, 2H), 3,60 (dt, J=8,6, 4,3 Гц, 2H), 3,39 (ddd, J=9,4, 7,8, 2,3 Гц, 1H), 3,05 (dt, J=8,4, 5,2 Гц, 1H), 2,47-2,35 (m, 1H), 1,95-1,74 (m, 1H), 1,37 (d, J=6,0 Гц, 6H).
13C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 173,10, 168.25, 162,48, 159,59, 147,03, 142,45, 134,57, 133,78, 127,32, 127,13, 126,97, 122,25, 115,98, 115.26, 114,86, 102,45, 72,52, 59,93, 59,08, 54,48, 32,86, 31,08, 21,48.
Хиральная ВЭЖХ. (И)^-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидроШ-инден-1-ил)-3-гидроксиазетидин-1-карбоксамид 234 элюировали 15% EtOH в гексане: >99,9% ее, tR=20,30 мин (хиральный способ 1). Соединение 235 получали аналогично из 50: >99,9% ее, tR для (S)энантиомера=23,61 мин (хиральный способ 1).
Общая методика 22.
Получение индансульфамидов.
К перемешиваемому раствору инданамина (1 экв.) в диоксане добавляли сульфамид (5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 110°C в течение 18 ч. Растворитель упаривали и смесь очищали колоночной хроматографией (MeOH/ДХМ), полученный выделенный материал перекристаллизовывали из MeOH.
Соединения 248, 249 получали, используя общую методику 22.
(К)-^(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1ил)сульфамид (соединение 248)
Получали, используя общую методику 22. К перемешиваемому раствору (И)-5-(3-(1-амино-2,3дигидро-Ш-инден^-ил^^^-оксадиазол^-ил^-изопропоксибензонитрила 49 (50 мг, 0,14 ммоль) в диоксане (1,5 мл) добавляли сульфамид (66 мг, 0,69 ммоль) и смесь нагревали при 110°C. Через 14 ч перемешивания растворитель упаривали и остаток очищали колоночной хроматографией. Дополнительная очистка перекристаллизацией из MeOH приводила к получению 15,9 мг (26%) (И)-^(4-(5-(3-циано-4изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)сульфамида 248. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C21H21N5O4S: 439,5; обнаруж. 440,1 [M+H]+, tR=3,42 мин.
Ή ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,41 (d, J=2,1 Гц, 1H), 8,33 (dd, J=8,9, 2,2 Гц,Ш), 8,13 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,65 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,43 (t, J=7,7 Гц, 1H), 7,12 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,08 (dd, J=16,1, 7,9 Гц, 1H), 4,80 (dt, J=12,1, 6,1 Гц, 1H), 4,65 (s, 1H), 4,59 (d, J=8,4 Гц, 1H), 3,50 (ddd, J=17,5, 8,8, 3,7 Гц, 1H), 3,30-3,09 (m, 1H), 2,87-2,67 (m, 1H), 2,07 (dt, J=21,3, 8,2 Гц, 1H), 1,47 (t, J=6,3 Гц, 6H).
Выбранные соединения и их соответствующие аналитические данные показаны в табл. 1, где данные LCMS собирали, используя способ 2 (см. общие способы). Энантиомерную чистоту определяли для ключевых промежуточных соединений и выбранных конечных соединений и использовали для синтеза остальных соединений.
- 42 024801
Таблица 1
Структура Номер соединения LCMS, время удерживания (мин) Хиральность инданового атома углерода
0-N 1 9,23 R
p-N XX 2 9,25 S
XX ’’он 3 8,69 R
XX он 4 8,68 S
χχ "'он 5 9,12 R
'УХ? N ΌΗ 6 9,08 S
—( ΛΛ /°'Ν Χχ Ън 7 10,54 R
- 43 024801
—( ^”V/0'N θ_Κ_ F F λ/ OH 8 10,54 S
^>-СлЧ Jf N 'γ^\ Ff \f V0H 9 10,13 R
—\ Z~\ /’“N 0_\_ F F \f ΌΗ 10 10,09 S
?'W=\ ΐί'^Ύ'^Ν v/ O'% 11 8,91 R
o-n^, rpV^N^ yZ ''’''Cl'Y V-'^'OH -o'N*'o 12 8,91 S
Λ 13 10,72 R
-/ /°'N o-vv5j NZ Yj t V° H 14 11,96 R
O-N ЛСЛ70 W ^mXL-oh N H 15 6,58 Рацемическая смесь
O-N 16 6,42 Рацемическая смесь
-7 p7 4 /-°H HN—( '—OH 17 6,24 Рацемическая смесь
- 44 024801
HQ 18 6,52 Рацемическая смесь
}X UN—6 NH 19 5,31 Рацемическая смесь
V0??,., 20 5,63 Рацемическая смесь
/ ,_, P'N ? ? .... N 21 5,81 Рацемическая смесь
-/ Ь-ПАм // HN4J 22 7,36 Рацемическая смесь
П/ 23 6,65 Рацемическая смесь
//5O %н 24 6,40 Рацемическая смесь
-/ // HN—\ /-\ _NH 25 5,51 Рацемическая смесь
- 45 024801
αχ£Ιχ> ill H N 26 5,77 Рацемическая смесь
ill H N 27 5,43 Рацемическая смесь
aj/Ux ill H N 28 5,62 Рацемическая смесь
ал/Έ^ ill H N 29 5,47 Рацемическая смесь
Х^З-вХ" Д 30 6,21 Диастереомерная смесь
jX о~<уНа M 31 5,69 Диастереомерная смесь
o£ £-<УН2 M 32 5,66 Диастереомерная смесь
0£ CXnQ-0H m 33 6,39 Диастереомерная смесь
£5 a<yм 34 6,37 Диастереомерная смесь
XX . irxo z 35 6,70 Рацемический
- 46 024801
\\\ N 36 6,83 Рацемическая смесь
44? fjOo 37 6,70 Рацемическая смесь
44. ЙОД, н t>H 38 6,51 Рацемическая смесь
44¾ i UNjCox N Η 39 9,22 Рацемическая смесь
-4¾ j 4ύ^ 0 40 6,86 Рацемическая смесь
N 41 6,02 Диастереомерная смесь
4¾ W ^^ν-^4-0Η N Η ; 42 6,26 Диастереомерная смесь
-4¾ /// ^N^VOH N Η J 43 6,35 Диастереомерная смесь
4ν>4οχ -4? ν Ν'"·’--''3···'· Η 44 6,61 Рацемическая смесь
- 47 024801
—/°"N O_\_v— N λ/ ο,ρ в ;nh 45 6,66 Рацемическая смесь
/ P'N -^0_/y4 i . u ^=/ n'^AA и V-( О 46 6,47 Рацемическая смесь
/ P'N N О \_—NH 47 6,23 Рацемическая смесь
—/ °-N N О 48 6,81 Рацемическая смесь
0-N / ιΓΑ^^'Ο ^оЛг <3 III ^'NHj N 49 6,29 R
0-N i ΡΑνΑ3 <JL III '-^МНг N 50 6,42 S
O-N АХУ^АЭ A~< ί UK^rNH‘ 0 51 6,44 R
O-N АХУАЗ III ''-^''чД, N Η Y 0 52 6,33 R
—/ /°'N >,л У 53 6,42 S, S
_/ л-ъ P'N ορτΛρ^ H^C-OH 54 6,46 R, S
- 48 024801
/Г\ Л* н^'-он 55 6,30 S,R
-( /°'Ч o-^y4Nj__. н'Х-ОН 56 6,36 R,R
”/ /Л /о'м о—у 2— ΙΨ \л Г',:н 57 6,50 R
0-N A-GAnJ^0 ί nAA 0 58 6,61 Диастереомерная смесь
—( yQ;, 0-Ν о-? УЧ и ^=7 N"j0 «' -^0 н 5 59 6,58 R
—( уГЛ /°~Ν °л_/у0 ΥγΟ н 5 60 7,03 R
0-N АХУ^АЭ f пгт0*1 0 61 6,63 R
0-N ΆΟΛνΚΟ o ί АгА. 62 6,56 R
0-N Л-ОА“У5 ί 44" О 63 6,70 R,R
0-N Л-СУ0О ί 44" 0 64 6,71 R,S
- 49 024801
O-N № ^-·νΛ^οη N Η 65 8,23 R
—( /R /°'Ν *n-V-nh2 66 6,44 R
-<Q-£i Ά< 67 6,64 R
—( fO^ "' СГо v-o 68 6,71 R
—( Ζ°"Ν o-(z 7—(\ II 2=/ N HN-S— II 0 69 9,30 S
zf~\ z°'N 0 )— * i? HN-S— II 0 70 9,24 R
O-N AXAnKO 0 /1 ° 0 , ^Ал^он N HO OH 71 8,72 S
O-N ЛЛУАЭ ° T <1 » 0 iit N HO υ 72 9,51 S
—( ^O/°'N 0-\— HN-S—4 II \ 0 73 9,63 s
- 50 024801
—( Ο/°'Ν θ—С у— NZ M-^NH ° \ 74 6,75 R
—/ /θ-~Ν ο-? 7—ς и / <9 \_l о Ή-S—, Η ΰ '-ΝΗ 75 6,66 S
“λΓΛ,°'Ν 0~\ Jy—Ν^Χ^\ ΝΖ \Γ Ηδ^ 76 10,35 R
—ζ/"Λ_/θ'Ν ? 4. 77 6,96 R
0 ΝΖ ’Vj 0 HN-S—\ / aw 78 6,69 S
Ч-ρ^'ϊ йм-ьО о '— 79 10,37 R
~( Г\_Ъ 0—(7 11 7=7 "Υ'ϊι SO 9,36 R
Ο-Ν ΛΧ^νΚΟ ί ^tVq 81 10,33 R
- 51 024801
—( /ГЛ ζ°Ή °Vί /=\ HN-S—(\ Λ— NH )r0 82 9,27 R
O-N i un OH 83 6,19 R
a, OH 84 6,46 S
O-N Λ-Ο^ΎΡ 9 P" OH 85 6,30 R
O-N N s OH 86 6,41 S
-/ z°'N VN—( H 4 87 6,80 S
—С уГЛ^·0'14 ° -C— if H>N'X q. 88 6,61 R
—( _jT^k/°'N 0 —\_/— $ \T HN^ox 89 6,66 S
- 52 024801
О—N Il N Η Г ' 0 90 6,58 R
-( /Г\ /°'N r< О/ й>< 0 91 6,56 S
hi ‘Cj 'nh2 92 5,46 R
E F 'nh, 93 6,57 R
r\ ^o-^T ---/1‘’nh2 ° ii 94 8,30 R
Чуул >^3 'nHj 95 7,11 R
-{/ΥΛ *nh2 96 6,55 R
\-o / Vy ^O-N \h2 97 6,41 R
6 /z z 98 6,39 R
- 53 024801
.Η 'nHs 99 6,26 R
И? vnh2 100 6,47 R
—/ л-нк P'N н”-'-—он 101 7,06 R
HO f V4 N Ϊ " 102 5,37 Рацемическая смесь
УУр -γ-oV Ο-Ν—он 1 ill н N 103 6,80 Рацемическая смесь
№ ^Ν^ΟΗ N н 104 5,16 Диастереомерная Смесь
У%? Η 105 6,44 S
W N η 106 5,76 Рацемический
vy Й'Х 107 6,70 S
у<одУмЧ5 III N Η 108 6,56 Рацемическая смесь
- 54 024801
Ο-Ν ИО Г / J W N н 109 6,45 Рацемическая смесь
П, ΛΝ ΰ-Ο-\Χ^ ΝΖ С/ 0 ; Ν'/—ОН 110 9,08 s
Ο-Ν д γ/:ιν^Ο Г \А.,^Л>н ί ϊ 111 6,42 R
Ο-Ν /~-f <0Η » J N / -5,=0 Ο 112 8,98 R
Ο--Ν АЛУО? <он да ϊ. N Α„ 113 8,45 R
η,Ν у=ч г-ЛЧ/ Γ xQ N 114 6,64 R
_/ /4 °·Λ_/Ν4γ^ ΝΖ \! V|4'X_N / У\ О 115 6,77 R
-/ гл /Ч nz V7 '’Ν'Λ. J O'"- 116 6,92 R
Ο-Ν о '-X /1 rOH ί O=Sso ό 117 10,17 S
- 55 024801
O^N °Ύ N S OH 118 6,09 R
,. X 7—fc λ но I ij^V^N f~~y /~~S-~OH ^"o^Y As ‘oh ill H 0H N 119 6,15 S, R, S, R
-7 zr^ P-N а-ОЛ\ч n/ p Η N-/ 120 9,09 S
O-N χχΛτφ h2nA0 о 121 5,87 s
Υ4υ4γΥ_# o /Ό'γ^ H VeA-Br N 122 10,80 R
I nO N 123 7,38 s, s
O-N л xV"n^P °Ύ о, ί 124 6,89 R
—/~Л /°~н 0_\_/—Vv\ n/ (-S V Η 125 6,50 R
-( /“V/O'N °л_/ЛЛ^\ Ν оч 0 Η 126 6,67 S
rVZA IJj K A <AK-yN I н 0 N 127 5,35 R
- 56 024801
?Л/=\ 1 Г Ί Ν /0 Π ill H ° N 128 6,47 R
?'V/==\ 1 if Ί N K О Л°У fr N 129 6,48 R
y-fn 1 ίΊ N К О AAJ Ck-y·-1 ill H 0 N 130 6,95 R
I f^V yj ^NH ill H 0 N 131 5,44 R
rir\ x , ρΛ λ? О ill н 0 N 132 5,64 R
°γ_/=\ он i PrNл? ό -W Ογν-2 ill н 0 N 133 6,34 R, R
О'К—/=\ он ί Гт N /-? ό -W о ill H 0 N 134 6,32 R, S
?'W=\ I (И'-'Г N" V/ H -W ill H ° N 135 6,24 R
4-zyx / NX) 136 6,82 S
fV-гл AX <ХЛ-Х°Н N 137 8,21 s
- 57 024801
/ р-н °Л_-/ N *NH °ч 138 8,76 R
A-fW, ' Ή Η °ч 139 8,76 S
—( _>ΓΑ^θ'Μ °Λ_7νΛ>\ Υν F 140 7,01 R
°Α_/— ΝΖ \f F 141 9,83 S
—/Гр ° ~\_/—*ΝΑ .-,, iT^-F 142 7,11 S
_7 ГА /°'Ν ъ-yj—<·Ν Η 143 6,33 R
—( °'Ν 4Ν—\ Η —· 144 6,71 S
/ __ ρ-Ν ° у=/ Ν1|1 0 145 7,01 S
- 58 024801
У ,°'N N й^уон 146 6,65 S
1 4. ° у=/ N jf j N N-"\ _ {? H o- 147 7,18 Рацемическая смесь
_/ — Ο-N 0 Η ^''''Χ,-^ί D 14S Η 6,78 s
> ~ P~M "Г Фо' 149 9,74 R
, _ p-N '4’'0ΛνΚΟ i Чу H ° 150 9,75 S
, O-N ФЧ N НД Η ° 4' 151 10,14 R
, _ p-N NZ 'ΦνΛ Η Ο χ· 152 10,15 S
, Ο-Ν 4>4ρ - ЧЧ» 153 8,60 S
/ .__, p-N -4 ZV-4 Λ,^,. О-<=/ N Τ| | ί φ οΑ? 154 9,40 R
- 59 024801
/ _. p'N -< pu, oAf/ Ν ]| ) А,л 155 9,41 S
Ч-p^'j^ HN—\ ъ 156 7,39 R
—( /“V^'N °Λ_/ν\ζ\ NZ \/ HN—\ ъ 157 7,39 S
Q-N Ill N H 1 ,N HN-^ 158 5,86 S
Q-N ill N Η ι ΛHN-# 159 6,29 s
O-N A-Cr^T? » 160 7,13 s
O-N A-p^Np? Ill N H B > ~N 161 6,64 s
O-N ЛХУ^АЭ ™-ν 162 6,95 s
- 60 024801
0—У J)— / \__{ 0 ^0 HN-S—' II 0 163 9,55 R
°}—/—νΧ-Λ Ν?/ 4 ί? HN-S—' II 0 164 9,56 S
—( 0 \ /—ζ X Γ 7? /VJ ο * II / HN-S—' II Ο 165 9,95 R
./ΆΧΝ °^\_VnX^\ HN-S—<1 II ο 166 9,75 R
—/°'Ν 0-\— ΝΖ \/ HN-S—d II ^1 Ο 167 9,73 S
-/ F > , Μ?γΌ HN-S—' 0 168 6,92 R
ζΤ^Ϊ;, ,°'Ν о-? уЧ II /7 Ν γΠι N л м ν_^Ο HN-S—/ ν II Ο 169 7,05 S
VVf /—/ Ν·\--\ ΝΖ/ ν9_/-Ν0 HN-S—' II 0 170 6,96 R
- 61 024801
-7 Ч? -r Ч я ,4j HN-S—' 0 171 6,78 R,R
—/ O-ZV/°'N • 7 ~г Ч ? /44 HN—S—' 0 172 6,76 R, S
Ч /^νν°'Ν 0-С J—»„Ал / kJ он VJ о ^n J HN-S— О 173 6,91 S,R
Ч /ГЛ P'N ° |М /О он \—ζ о -Ν7 J HN—S—' О 174 6,81 S,S
Ч Ζ-. • ъЧ) HN-S—' '—' δ 175 7,12 R
Ч у-, Ο-Ζν/'Ν ЧЧр 4?Л} HN-5—r 4—< II О 176 6,94 R
4 ff~V/°'N o-C < я / N i4i N?/ 4 я 4b HN-S—' '—/ II 0 177 7,06 S
-/ 4 -, * ? 4N r~0H HN-S—Z *>—' II О 178 6,81 R
- 62 024801
—; о г- N NH HN-S—' '—1 δ 179 6,70 R
/ f N— NZ i? ^NH HN-S—' '—v о он 180 6,75 R
N // Sj-N/0H HN-S^ v II 0 181 6,80 R
“/ O\P'N /7 N jO N ^—4 i? Ή—S—ч О HcTM 0— 182 9,54 S
/ГУ>. /°"Ν 0-\-VnA^x ' N-S—, p "8^U 183 10,05 s
rV/=\ ПРО/ о о АЛ/ <J>n^Aoh Η 0 N 184 8,73 R
“/ Μ /°'N ο /—^NJl_ ' 4l-S—i 0 н он 185 8,71 S
Р /^\/°~Ν 0_\_/—м\г\ N У_/ о /—он HN-S-^' 0 186 8,58 R
- 63 024801
0—(ζ η / Ν Ι*Π) г< ο 'ν—s—>. Η Й ν0Η 187 8,62 S
Ο-*·_/=\ I Λ-V ο XJ,J Ο, Χ/----χοη ν γ Χ^’ΊΙ ill Η N 188 8,60 R
/“\/ο'Ν Ο_λ_/Ν-\^χ Ν—S—ν ζ\ Η 0 ο^ν0-οη 189 8,16 S
—( /°~Ν °-\_/— Ν \ ί ο % II Ν—S—>. . Η Q4>°H 190 8,15 R
—/~Λ /°~Ν ο “(Τ ' 'n-3-λ. /—\ Η Й,/N\J° 191 8,92 S
“/ #Λ/θ'Ν О-Л_У— % Ν—S—*> г—\ "5>Ο 192 8,92 R
ЧнГМл / n"xji й’й"^О-°н 193 8,32 S
, 0-Ν ^ο-Ο^νΚ0 «ί Cj ° ρ Ν 1 194 8,98 R
- 64 024801
—ζΓΛ/θ'Ν о-? 7"Ч Η /7 N jO N -ζ ° HN-S—ч / 6^\ 195 8,96 S
4 i? Ьн HN-S—f II О 196 8,37 S
—/~Л /°"N ° VVn^v^ Nz \f "N—S—\ H О >-NHz 0 197 8,36 R
—( °<JWNJL HN-S—v / δ/"ΝΗ 198 8,61 S
-( "н ? \_ ° 0W 199 8,60 R
—/~A/°'N 0 yv~N^v^\ NZ \J Q N—S—ч. н q-n0 200 8,90 S
—/“Λ/θ^Ν ч θ N-5—v . H Q-<> 201 8,91 R
- 65 024801
, O'N % "О ί' γ, Vой о 202 6,60 R
1 ρ-Ν NZ ^Άΐ-ι О 203 6,54 S
, p-N ΛτρΑγρ # г V 204 6,59 R
, O-N О '·,^ν Ν ίίΊ F ч. о 205 6,55 S
, p~N N N—1 о 206 6,52 s
, p~N Ap-Vp ' ^NL_7rN'V 0 207 6,52 s
N—< 7>OH 208 6,80 s
- 66 024801
4aQί P'N А К Ν ' Ί*|-* ί 209 6,42 S
hJ
А^> P'N A X Ν ' Ο 210 6,63 S
N Ή-" /
Агг ill N 0-Ν 4 X. Α^. Τ ο ΧΝΑ " Q 211 8,86 R
'VQ' г p~N A X N 212 8,84 S
\-ρ· ill N 0~Ν χ ΛN 0 V J 0 'nA И \NH 213 6,52 R
Λ-Ο ί Ο'Ν -A X Ν' о Ύ о '"ΧΑΗ \--NH 214 6,43 S
Лр Г Ο-Ν / А •Ζ^ι ο Τ ο Α·Χ' η θ-ΟΗ 215 8,40 R, S
Ар (h N Ρ'Ν X К N .-/¾¾. X? ( θ "A « Η θ-ΟΗ 216 8,41 S, S
- 67 024801
Арdf N O-N А К N О T о Н P 'j 217 8,39 R
но
лрГ O-N А JL N О 1 О Η N \ 218 8,43 S
но
А-О d N 0-N A А N О 7 о Ул н θ-ΟΗ 219 8,40 R, R
-key Г O~N Л jL N η /5¾^ и J 0 Η^'θ-ΟΗ 220 8,41 S, R
Лр' Г O-N A Αν А5^ О Ул В О.....мнг 221 6,36 R, R
АО Г O-N Л к. N 0 1 О Ад В O-NH, 222 6,28 R,S
Α-σ Г O-N Λ Jk N 0 о в\>..... 223 6,35 S,R
У& di N p'N A jL N о 7 о ΛΑ Н Q-NH, 224 6,39 s, s
- 68 024801
1 p-N Г ^иЛ н О ° 225 9,57 R
, Ο'Ν А-ЩАр a"Vu 226 9,61 S
NZ H о-~\-он 227 8,61 R
, 0~Ν 0^рл>-^, ,/. <Τ Ο " VN^ Η f J 0 <)Η 228 8,57 R
. p-N * 4ΛΛ Ы ° ^Ϊ)Η 229 8,60 S
, Ο~Ν 0-0^00 >!, <Τ ο Ν ^'ν^ν-\ Η Ν0>-ΟΗ 230 8,01 R,R
, Ο-Ν / fW*, Ν Ί0£>-οη 231 8,03 R, S
, Ρ~Ν 7 fV^- -z%, °'у=уГ ν£3 Μ L ),-0Η 232 8,01 S, R
, Ρ~Ν “ Λ>ο» 233 8,02 S, S
- 69 024801
! _ P'N хохсз r 4¼ ОН 234 7,96 R
, p~N / руЧ Х/οΧΓΝ ΪΊ " α«ν он 235 7,95 S
, Ο'Ν хрХо ΝΖ θ\Λ Η ,Ν^> °4 236 9,41 R
, Ο'Ν XX ,. <1 ο ΝΖ '—>ΝΧ " 4° 4 237 9,40 S
, Ο'Ν 5 X 238 8,45 R
, Ρ'Ν ί н 4° но 239 8,46 S
, Ο'Ν ν ^Лл Η Q он 240 8,17 R
- 70 024801
, 0-N ο-Λ J N OH 241 8,19 S
, O~N " 'йЛСК 242 6,39 R, R
, O-N °y NO 'леч 243 6,65 R,S
, _ ,O~N J rV4 K^, цд N jQ Λι>< 244 6,51 S,R
/ P~N nz z H L>< 245 6,45 s,s
1 _ P~N д°4^д5 - 4¼ <V I 246 6,34 R
1 P~N лтм Г %, N / 247 6,47 S
0-N j /y^N^Gn АД'Д C\ V 1 \>чыХ' III H nh2 N 248 8,67 R
0-N ι ΡτΛν^Ολ cX ^5° III H' nh2 N 249 8,67 S
- 71 024801
H NH2 250 6,54 S
O--N __ ij h v 251 7,61 R,R
>=0 252 5,85 R
253 R
Сравнительные примеры.
Соединения 254 (CYM5442) и 255 включали в сравнительных целях.
(+/-)-2-((4-(5-(3,4-Диэтоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)амино)этанол (соединение 254)
(+/-)-4-(5-(3,4-Диэтоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ол (соединение 255)
Биологические анализы.
Методики анализа.
Генерирование репортерного анализа 81Г1-опосредованного ингибирования цАМФ.
Экспрессионную плазмиду млекопитающих, содержащую S1P1/EDG1, клонировали в pcDNA3,1 от Missouri S&T cDNA Resource Centre. Нуклеотидная и аминокислотная последовательность человеческого S1Pi/EDG1 опубликованы в статье Hla и Maciag (J Biol Chem, 265(1990), c. 9308-9313). S1Pi/pcDNA3,1 трансфецировали в CRE-bla CHO K1 (Invitrogen) клеточную линию, и стабильные одиночные клеточные клоны отбирали с помощью стандартных методик. Экспрессию функционального рецептора S1P1/EDG1 подтверждали поверхностью клеток FACS с антителами S1P1 (R&D Systems, клон 218713) и S1Pопосредованным ингибированием индуцированного форсколином цАМФ.
S1P1 CRE-bla CHOK1 репортерный анализ - характеристика агонистов S1P1.
Клетки высевали в 384-луночные планшеты с черными стенками/прозрачным дном с плотностью 104 клеток/лунка/19,5 мкл среды для анализа (DMEM без фенола, 0,5% уголь/сыворотка без декстрана, 2 мМ глутамина, 0,1 мМ NEAA, 1 мМ Na-пирувата, 25 мМ HEPES), и выдерживали в течение 18 ч при 37°C в 5% CO2. Дозозависимые кривые (10 точек) получали в 10 мМ HEPES, 0,1% Pluronic F127, в присутствии форсколина. Клетки обрабатывали 0,5 мкл соединения в присутствии 2 мкМ форсколина в течение 4 ч при температуре 37°C. FRET-основанные β-лактамазные люминесцентные подложки (LiveBLAzer™-FRET B/G Loading Kit CC4-AM; Invitrogen) получали в соответствии с инструкцией производителя, и инкубировали с клетками в течение 2 ч при комнатной температуре. Планшеты обрабатывали на Ех:410/Em:458 и Ех:410/Em:522, и определяли соотношение отклика. Данные анализировали методом нелинейной регрессии для определения EC50 для ингибирования форсколином индуцированной цАМФ.
Специфичность по сравнению с другими рецепторами S1P.
Для оценки специфичности соединения в отношении других рецепторов S1P использовали следующие клеточные линии: S1P2 CRE-bla CHOK1, S1P3-Ga15 NFAT-bla HEK293F (Invitrogen), S1P4-bla TANGO U2OS (Invitrogen), S1P5-bla TANGO U2OS (Invitrogen). Тот же тест использовали для S1P1, но без форсколина. Анализы с S1P4 и S1P5 проводили в среде для экспрессии FreeStyle (Invitrogen). Клетки
- 72 024801
S1P5 инкубировали в течение 48 ч до обработки соединением.
Определенная активность S1P1.
Данные по активности для отдельных агонистов S1P1 представлены в табл. 2. Диапазон активности обозначен следующим образом: + + + + означает агонистическую активность <0,05 нМ; + + + означает агонистическую активность от 0,05 до 0,50 нМ, и + + означает агонистическую активность между 0,505,00 нМ, и + обозначает агонистическую активность > 5,00 нМ. N/A означает не доступны.
Таблица 2
- 73 024801
36 +++
37 +++
38 ++++
39 +++
40 +++
41 +++
42 ++
43 +++
44 +++
45 +++
46 ++
47 +++
48 +
49 +++
50 +++
51 ++++
52 +++
53 ++
54 +++
55 +++
56 +++
57 ++
58 ++
59 +++
60 ++
61 ++++
62 ++++
63 ++++
64 ++++
65 ++++
66 +++
67 +++
68 ++
69 ++++
163 +++
164 +++
165 +++
166 +++
167 +++
168 +++
169 ++
170 ++
171 +++
172 ++
173 ++
174 ++
175 ++
176 ++
177 ++
178 ++
179 ++
180 +++
181 +++
182 +++
183 ++
184 ++++
185 ++++
186 +++
187 +++
188 ++++
189 +++
190 ++++
191 +++
192 ++++
193 +++
194 ++++
195 +++
196 ++++
- 74 024801
70 +++
71 +++
72 N/A
73 ++
74 +++
75 ++
76 ++
77 +++
78 ++
79 ++
80 +
81 ++
82 +
83 +++
84 +++
85 +++
86 +++
87 ++
88 ++
89 +++
90 +++
91 +++
92 +
93 +
94 ++
95 +
96 +
97 +
98 +
99 +
100 ++
101 ++
102 +
103 ++
197 ++++
198 +++
199 ++++
200 ++++
201 ++++
202 ++++
203 +++
204 +++
205 +++
206 +++
207 +++
208 +++
209 +++
210 ++
211 +++
212 +++
213 ++
214 +++
215 ++
216 +++
217 ++
218 +++
219 ++
220 +++
221 +++
222 ++
223 ++
224 ++
225 ++
226 +++
227 +++
228 ++
229 +++
230 +++
- 75 024801
231 +++
232 +++
233 +++
234 +++
235 +++
236 +++
237 +++
238 +++
239 +++
240 ++
241 +++
242 ++
243 ++
244 ++
245 ++
246 +
247 ++
248 ++++
249 ++++
250 +++
251 +
252 ++
253 +++
254 ++
255 +++
S1P1 мутагенез.
Мутагенез с быстрой заменой с помощью ДНК-полимеразы PfuTurbo (Stratagene) проводили с использованием S1P1/pcDNA3,1 (Missouri S&T cDNA Resource Centre) в качестве шаблона. Использовали
следующие праймеры:_
Последовательность праймера
R120A/E121A Forward CCAGTGGTTTCTGGCGGCAGGGAGTATGTTTGTGGCC
R120A/E121A Reverse GGCCACAAACATACTCCCTGCCGCCAGAAACCACTGG
N101A Forward CTACACAGCTGCCCTGCTCTTGTCTGGGGC
N101A Reverse GCCCCAGACAAGAGCAGGGCAGCTGTGTAG
Условия PCR-15 циклов со следующими параметрами: 95°C в течение 30 с, 58°C в течение 30 с, 68°C в течение 60 с. Все конструкции были проверены на последовательности.
Фосфорилированные-ЕКК1/2 в клеточном вестерн-анализе.
Клетки CHOK1 трансфицировали с помощью Fugene (Roche). Стабильно экспрессирующие смешанные группы отбирали с помощью 2 мг/мл G418. Экспрессию функционального рецептора S1P1/EDG1 подтверждали клеточной поверхностью FACS с антителами S1P1 (R&D Systems, клон 218713). Стабильные группы высаживали с плотностью 40000 клеток/лунка в 96-луночный лоток с прозрачным дном, и инкубировали при 37°C в 5% CO2 в течение 18 ч. Клетки не поддерживали сывороткой в среде FreeStyle 293 (Invitrogen) в течение 4-6 ч, затем выдерживали в течение 5 мин с дозой отклика соединения, в двух экземплярах. Клетки фиксировали 4% параформальдегидом в течение 20 мин, нарушали проницаемость мембраны с помощью 0,1% Triton Х-100 в PBS (4x5 мин промывка) и блокировали в течение 1 ч в Odyssey Blocking Buffer (LI-COR). Все инкубирования проводили при комнатной температуре. Клетки инкубировали в течение 18 ч при 4°C в анти-фосфо-ERK1/2 кролика (Cell Signaling # 4377) и анти-ERK1/2 мыши (Cell Signaling # 9107), и разбавляли 1:800 в Odyssey Blocking Buffer. Планшеты промывали 0,1% Tween-20 в PBS, и затем инкубировали с Odyssey Blocking Buffer, содержащим IRDye 680-меченые антикроличьи антитела козы (# 926-32221; разбавляли 1/500) и IRDye 800С\У-меченные антимышиные антитела козы (# 926-32210; разбавляли 1/1000). Планшеты промывали 0,1% Tween-20 в PBS, все жидкости удаляли из лунок, и планшеты сканировали с помощью сканера Licor Odyssey. Сигнал фосфо-ERK1/2 нормализовали для сигнала ERK1/2. Данные анализировали с помощью нелинейной регрессии с исполь- 76 024801
зованием GraphPad Prism для определения значений связывания EC50. Результаты мутагенеза показаны в табл. 3.
Таблица 3
Кратность изменения значения EC50 по сравнению с SIP 1 дикого типа
Вариант SIPi Соединение 50 Соединение 38
R120A/E121A 2 11
N101A 32 2
Выводы для анализа мутагенеза S1P1.
В настоящее изобретение включены агонисты S1P1, которые потенциально связывается с рецептором S1P1 в разных сайтах. Например, соединения 50 и 38 оба являются агонистами S1P1, которые индуцируют фосфорилирование ERK1/2 (табл. 3). Мутация S1P1 с получением R120A/E121A S1P1 не оказывает никакого влияния на связывание соединения 50, но уменьшает связывание соединения 38. Наоборот, мутация S1P1 с получением N101A не влияет на связывание соединения 38, но уменьшает связывание соединения 50. Наконец, мутация W269L не дает связывания обоих соединений.
Анализы in vivo.
Определение абсолютной пероральной биодоступности у крыс.
Фармакокинетические исследования проводили на неголодных самках крыс Sprague-Dawely (Simonsen Laboratories или Harlan Laboratories). Крыс помещали в одобренные ALAAC условия, и исследования утверждались одобрением Institutional Animal Care и Use Committee (IACUC). Животные привыкали к лаборатории по крайней мере 48 ч до начала экспериментов.
Соединения растворяли в 5% ДМСО/5% Tween20 и 90% очищенной воды (внутривенное вливание) или 5% ДМСО/5% Tween20 и 90% 0,1N HCl (пероральный зонд). Концентрацию дозированных растворов подтверждали с помощью ВЭЖХ-УФ. Для внутривенного дозирования соединения вводили инфузионным насосом в яремную вену в течение 1 мин вручную удерживаемым животным (n=4 крысы/соединение). Пероральное дозирование осуществляли через зонд с использованием стандартной иглы для зонда из нержавеющей стали (n=2-4 крысы/соединение). Для обоих способов введения кровь собирали в восемь временных точках после приема препарата с окончательной пробой, взятой через 24 ч после введения дозы. Аликвоты образцов крови переносили в полипропиленовые 96-луночные планшеты и замораживали при -20°C до анализа.
После оттаивания образцов крови при комнатной температуре 5 мкл ДМСО добавляли в каждую лунку. Белки осаждали добавлением 150 мкл ацетонитрила, содержащего 200 нМ внутреннего стандарта (4-гидрокси-3-(альфаиминобензил)-1-метил-6-фенилпиримидин-2-(1Ы)-она) и 0,1% муравьиной кислоты. Содержимое планшет перемешивали в течение 1 мин на планшетном шейкере для облегчения осаждения белков, и затем центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 мин с белковым остатком. Супернатант переносили в чистую планшету, и центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 мин для осаждения оставшегося твердого материала до анализа LC/MS/MS. Стандартные калибровочные кривые получали введением 5 мкл соединения в ДМСО в свежесобранную кровь крысы ЭДТА. Восемь точек стандартной кривой, охватывающей диапазон от 5 до 10000 нМ, включали в каждый био-аналитический пробег. Стандарты обрабатывали идентично для фармакокинетических образцов крыс.
Концентрации в фармакокинетических образцах крыс определяли с помощью стандартизированного способа ВЭЖХ-LC/MS/MS по отношению к восьми-точечной стандартной кривой. Система содержала инжектор Leap CTC PAl, ВЭЖХ Agilent 1200 с бинарным насосом в сочетании с Applied Biosystems 3200 QTrap. Соединения хроматографировали на Phenomenex Synergy Fusion RP 20x2 мм 2 um Mercury Cartridge с Security Guard. Градиентный способ использовали с подвижной фазой А, состоящей из 0,1% муравьиной кислоты в воде, и подвижной фазы В, состоящей из 0,1% муравьиной кислоты в ацетонитриле, при скорости потока от 0,7 до 0,8 мл/мин. Ионы образовывались в режиме положительной ионизации с использованием интерфейса ионизации электроспреем (ESI). Разработано несколько способов мониторинга реакции (MRM), специфичных для каждого соединения. Нагреватель распылителя устанавливали на 325°C с током распылителя 4,8 мкА. Энергию столкновения использовали для создания дочерних ионов в диапазоне от 29 до 39 В. Соотношения площади пикой получали из MRM массовых переходов, конкретных для каждого соединения, и использовали для количественной оценки. Предел количественного определения способа, как правило, составлял 5 нМ. Данные собирали и анализировали с помощью программного обеспечения Analyst версии 1,4,2.
Данные концентрации в крови и/или в плазме в зависимости от времени анализировали с использованием неблочных методов (WinNonlin версии 5,2; модель 200 для перорального приема и модель 202 внутривенной инфузии). Абсолютную пероральную биодоступность (%) рассчитывали по следующей формуле:
- 77 024801
(пероральный ЛИСхдоза IV)/(AUC IVx пероральная доза)х 100.
Данные абсолютной пероральной биодоступности для крыс для соединения 254 получали, как описано в уровне техники (Gonzalez-Cabrera и др., 2008, Molecular Pharmacology, 74(5), c. 1308-1318). Кратко, рацемическую смесь соединений 2543 и 255 вводили в состав с 10% ДМСО/10% Tween 80 в 80% воды и вводили перорально крысам Sprague-Dawley через желудочный зонд в дозе 2 мг/кг или внутривенно в дозе 1 мг/кг. Кровь собирали с интервалами в EDTA, и концентрации соединения определяли с помощью стандартного метода ВЭЖХ-LC/MS/MS.
Лимфопения.
На мышах: самок мышей C57BL6 (Simonsen Laboratories, Gilroy CA) помещали в одобренные ALAAC условия, и исследования утверждались одобрением Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC). Животные привыкали к лаборатории по крайней мере в течение 5 дней до начала эксперимента. Мышам (п=3/соединение/временная точка) вводили пероральным зондом 1 мг/кг соединения в носителе, состоящем из 5% ДМСО/5% Tween 20 и 90% 0,1N HCl. Контрольным мышам вводили PO с носителем. Терминальные образцы цельной крови собирали у мышей с анестезией изофлураном пункцией сердца в EDTA. Цельную кровь инкубировали с антимышиным CD16/CD32 крысы (Mouse BD Fc Block, #553141), антимышиным PE-Rat CD45R/B220 (BD #553089), антимышиным APC-Cy7-Rat CD8a (BD #557654) и антимышиным Alexa Fluor647-Rat CD4 (BD #557681) в течение 30 мин на льду. Красные кровяные клетки подвергали лизису с помощью буфера BD Pharm Lyse Lysing (# 555899), и белые кровяные клетки анализировали с помощью FACS. Лимфопению выражали как % белых кровяных клеток, которые являлись CD4- или CD8-положительными T-клетками. Общий ответ лимфопении в течение 24 ч оценивали путем расчета площади под кривой действия (AUEC) с помощью метода линейных трапеций.
Оценка терапевтического индекса у крыс.
Исследования могут проводиться на неголодных самцах и самках крыс Sprague-Dawely (Simonsen Laboratories). Крыс можно поместить в одобренные ALAAC условия, и исследования утверждались одобрением Institutional Animal Care и Use Committee (IACUC). Животные должны привыкать к лаборатории, по крайней мере в течение 5 дней до начала эксперимента.
Соединения, представленные в табл. 6, составляли в виде суспензий в носителе, состоящем из 0,5% карбоксиметилцеллюлозы (Acros Organics) в очищенной воде (pH до ~2,2 соляной кислотой). Тот же состав используется в исследованиях с лимфопенией крысы и токсикологии, описанных ниже. Концентрация каждого соединения в суспензии должна составлять в пределах ±10% от целевой концентрации ВЭЖХ-УФ.
До проведения токсикологических исследований может быть определено действие от трех до пяти суточных доз каждого соединения на периферических T-клетках самок крыс (см. измерения лимфопении у крыс выше). В этих исследованиях лимфопении образцы крови собирали в ЭДТА с интервалом после дозы последнего исследования.
Время сбора не обязательно должно быть одинаковым для каждого исследования, однако, все исследования могут включать образцы, собранные через 24 ч после последней дозы. Данные лимфопении использовали в качестве биомаркеров для выбора одинаково фармакологически активных доз для последующего исследования токсикологии. Низкая доза для исследования токсикологии представляет собой дозу каждого соединения, которая приводит к 50% снижению содержания Т-клеток через 24 ч после последней дозы в исследовании лимфопении относительно крыс, обработанных носителем.
В токсикологических исследованиях трех самцов и трех самок на группу распределяли в группы дозирования, используя рандомизацию на основе веса тела. Контрольная группа в каждом исследовании получала носитель. Всем животным вводили перорально через зонд на 5 или 14 день в объеме дозы 5 мл/кг/сутки. Животных наблюдали ежедневно на любые проявления негативного воздействия. Через 24 ч после последней дозы исследования крыс анестезировали изофлураном, и образец терминальной крови отбирали пункцией сердца для гематологической и биохимической оценки (IDEXX Laboratories, Sacramento, CA). Легкие с трахеей извлекали, взвешивали, и затем готовили на гистологию перфузией с 10% нейтральным буферным раствором формалина через трахею. Внутренне фиксированные легкие затем сохраняли в 10% нейтральном буферном растворе формалина и представляли для гистологического исследования (IDEXX).
Соотношение дозы каждого соединения, приводящей к 10% повышению в легких, на терминальный вес тела может быть рассчитано для каждого соединения с помощью линейной интерполяции. Затем может оцениваться терапевтический индекс как отношение дозы, приводящей к 10% повышению веса легкого, к дозе, приводящей к 50% расщеплению T-клеток.
Описание модели колита Крона TNBS у крыс.
Самцам крыс Sprague-Dawley (180-200 г) давали привыкнуть в течение семи дней и затем помещали по 8 крыс на группу так, что каждая группа имеет примерно один и тот же средний вес. За 24 ч до инициирования заболевания крыс лишали пищи. Крыс анестезировали и взвешивали, затем 80 мг/кг раствора TNBS (50% TNBS: 50% 200 чистого этанола) вводили в толстую кишку через питательную иглу 20g, вставленную в анус. Крыс держали вниз головой до восстановления от наркоза. Суточный пероральный
- 78 024801
прием начинали через 2 ч после введения TNBS в течение шести дней. Преднизолон выступал в качестве положительного контроля, и его вводили перорально ежедневно в количестве 10 мг/кг. Вес тела контролировали ежедневно, и через 24 ч после введения последней дозы все группы умерщвляли. Толстую кишку удаляли, очищали от фекалий и исследовали на заметные изменения, в том числе стриктуры, спайки и язвы. Записывали длину толстой кишки, вес отрезка 2 см и толщину стенки. Пероральная доставка 1 мг/кг соединения 85 понижала TNBS-индуцированное сокращение толстой кишки с 31% для больных крыс до 15%.
Описание модели гриппа H1N1 у мышей.
Самцам С57В1/6 (6-8 недель) можно дать привыкнуть в течение семи дней, и затем помещать в группы по 5-8 мышей так, чтобы каждая группа имела примерно один и тот же средний вес. Мыши могут быть инфицированы 104 PFU вируса гриппа А, адаптированного для мышей (A/WSN/33) внутритрахеальным способом. Мыши затем могут быть обработаны 0,2-1,5 мг/кг соединения перорально через 1 ч после инфицирования. Через 48 ч после инфицирования мыши могут быть умерщвлены переломом шеи, и может быть собрана жидкость бронхоальвеолярного лаважа. Количественный анализ цитокинов может осуществляться с помощью иммуноферментного анализа ELISA. В некоторых экспериментах может осуществляться перфузия всего тела, и легкие могут собираться для клеточного подсчета воспалительных клеток. Исследования на долговечность могут осуществляться с помощью заражения 3-10х104 PFU вирусом гриппа А, адаптированным для мышей, в течение 14 дней. Интратрахеальная доставка 0,5 мг/кг соединения 85 через 1 ч после вирусной инфекции подавляла клеточный инфильтрат в легких на 40%.
Сравнительные данные.
Сравнительные данные активности для S1P1-S1P5 показаны в табл. 4. Агонистические значения (EC50) приведены в нМ.
Таблица 4
Сравнительные данные PK и лимфопении представлены в табл. 5. Данные для рацемического соединения 254 взяты из статьи Gonazalez-Cabrera и др., 2008, Molecular Pharmacology, T. 74, No. 5.
- 79 024801
Таблица 5
Номер соединения Крысы пероральная биодоступность, раствор Лимфопения мыши (AUEC)
254 21% 116
255 N/A 84
49 93% 1762
50 91% 1632
85 69% 1425
86 N/A 1342
90 N/A 1486
91 N/A 1408
В табл. 6 показан терапевтический индекс (TI), полученный через 5 или 14 дней токсикологических исследований на крысах для выбранных соединений. Дозу, приводящую к 10% повышению веса легких по отношению к весу тела, интерполировали из графика зависимости дозы от отношения легкого к весу тела. Отклик лимфопении измеряли через 24 ч после последней дозы 3-5-дневного режима с несколькими дозировками.
Таблица 6
Номер соединения Доза, приводящая к 10% повышению веса легких (мг/кг) Доза, приводящая к 50% лимфопении (мг/кг) TI 5 дней TI 14 дней
49 0,2 0,10 N/A 2
50 2,0 0,10 N/A 20
85 2,8 0,15 N/A 14
86 2,7 0,15 N/A 18
90 5,5 0,40 N/A 14
91 0,3 0,30 N/A 1
163 2,1 0,07 N/A 30
164 5,0 0,25 20 N/A
186 1,1 0,07 16 N/A
187 5,0 0,50 10 N/A
234 21,3 0,90 24 N/A
235 11,3 2,00 6 N/A
- 80 024801
1. Соединение структурной формулы I-R или I-S

Claims (22)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    или его фармацевтически приемлемая соль, где X представляет собой NH2, NHC(=O)CH3 или NHCH2COOH;
    Y представляет собой CN.
  2. 2. Соединение по п.1, где X представляет собой NH2.
  3. 3. Соединение по п.1, где X представляет собой NHC(=O)CH3.
  4. 4. Соединение по п.1, где X представляет собой NHCH2COOH.
  5. 5. Композиция, являющаяся агонистом рецептора сфингозин-1-фосфата, включающая соединение
    по любому из пп.1-4, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем.
  6. 6. Выделенный оптический изомер структурной формулы I-R
    I-R
    или его фармацевтически приемлемая соль, где X представляет собой NH2, -NHC(=O)CH3 или -NHCH2COOH;
    Y представляет собой CN.
  7. 7. Изомер по п.6, где X представляет собой NH2.
  8. 8. Изомер по п.6, где X представляет собой NHC(=O)CH3.
  9. 9. Изомер по п.6, где X представляет собой NHCH2COOH.
  10. 10. Композиция, являющаяся агонистом рецептора сфингозин-1-фосфата, включающая изомер по
    любому из пп.6-9, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем.
  11. 11. Выделенный оптический изомер структурной формулы I-S
    или его фармацевтически приемлемая соль, где X представляет собой NH2, NHC(=O)CH3 или NHCH2COOH;
    Y представляет собой CN.
  12. 12. Изомер по п.11, где X представляет собой NH2.
  13. 13. Изомер по п.11, где X представляет собой NHC(=O)CH3.
  14. 14. Изомер по п.11, где X представляет собой NHCH2COOH.
  15. 15. Композиция, являющаяся агонистом рецептора сфингозин-1-фосфата, включающая изомер по
    любому из пп.11-14, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем.
  16. 16. Способ лечения воспалительного заболевания кишечника (IBD) у пациента, включающий введение пациенту в эффективном количестве соединений структурной формулы I-R или I-S или их фармацевтически приемлемой соли с частотой и длительностью, достаточными для обеспечения благоприятно- 81 024801
    го воздействия на пациента
    о
    I-R
    о
    X
    I-S
    где X представляет собой NH2, -NHCH2CH2OH, -NHC(=O)CH3 или -NHCH2COOH;
    Y представляет собой CN.
  17. 17. Способ по п.16, где X представляет собой NH2.
  18. 18. Способ по п.16, где X представляет собой NHCH2CH2OH.
  19. 19. Способ по п.16, где X представляет собой NHC(=O)CH3.
  20. 20. Способ по п.16, где X представляет собой NHCH2COOH.
  21. 21. Способ по любому из пп.16-20, где IBD представляет собой неспецифический язвенный колит.
  22. 22. Способ по любому из пп.16-20, где IBD представляет собой болезнь Крона.
EA201290323A 2009-11-13 2010-11-15 Селективные модуляторы рецептора сфингозин-1-фосфата EA024801B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US26130109P 2009-11-13 2009-11-13
US26247409P 2009-11-18 2009-11-18
PCT/US2010/056760 WO2011060392A1 (en) 2009-11-13 2010-11-15 Selective sphingosine 1 phosphate receptor modulators and methods of chiral synthesis

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201290323A1 EA201290323A1 (ru) 2013-05-30
EA024801B1 true EA024801B1 (ru) 2016-10-31

Family

ID=43992106

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201290323A EA024801B1 (ru) 2009-11-13 2010-11-15 Селективные модуляторы рецептора сфингозин-1-фосфата
EA201690391A EA035768B1 (ru) 2009-11-13 2010-11-15 Способ получения соединения, содержащего индановую группу с хиральным атомом углерода в пятичленном кольце индановой группы

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201690391A EA035768B1 (ru) 2009-11-13 2010-11-15 Способ получения соединения, содержащего индановую группу с хиральным атомом углерода в пятичленном кольце индановой группы

Country Status (30)

Country Link
US (4) US8362048B2 (ru)
EP (3) EP3868377A1 (ru)
JP (3) JP5650233B2 (ru)
KR (2) KR101721716B1 (ru)
CN (2) CN102762100B (ru)
AU (1) AU2010319983B2 (ru)
BR (2) BR112012011427B8 (ru)
CA (2) CA2986521C (ru)
CY (3) CY1120338T1 (ru)
DK (2) DK3406142T3 (ru)
EA (2) EA024801B1 (ru)
ES (2) ES2673160T3 (ru)
FR (1) FR20C1059I2 (ru)
HK (2) HK1213874A1 (ru)
HR (2) HRP20180874T1 (ru)
HU (3) HUE037535T2 (ru)
IL (2) IL219691B (ru)
LT (3) LT3406142T (ru)
MX (1) MX2012005560A (ru)
MY (2) MY189750A (ru)
NO (2) NO2498610T3 (ru)
NZ (1) NZ599915A (ru)
PH (1) PH12015502708B1 (ru)
PL (2) PL3406142T3 (ru)
PT (2) PT2498610T (ru)
RS (2) RS61829B1 (ru)
SG (1) SG10201407357PA (ru)
SI (2) SI3406142T1 (ru)
TR (1) TR201807912T4 (ru)
WO (1) WO2011060392A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107857760A (zh) * 2017-11-21 2018-03-30 南京天翔医药科技有限公司 鞘氨醇‑1‑磷酸受体调节剂及其应用

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102724880B (zh) * 2009-11-13 2016-09-14 瑞塞普托斯有限责任公司 1-磷酸鞘氨醇受体调节剂及手性合成方法
PL3406142T3 (pl) 2009-11-13 2021-08-30 Receptos Llc Selektywne modulatory receptora sfingozyno-1-fosforanu i sposoby syntezy chiralnej
EP2706999B1 (en) 2011-05-13 2019-08-28 Celgene International II Sàrl Selective heterocyclic sphingosine 1 phosphate receptor modulators
NZ702974A (en) * 2012-06-21 2016-03-31 Eisai R&D Man Co Ltd Novel indanesulfamide derivative
WO2014158302A1 (en) * 2013-03-25 2014-10-02 Swenson Rolf Eric Novel sphingosine 1-phosphate receptor antagonists
US20170165236A1 (en) * 2013-11-01 2017-06-15 Celgene International Ii Sàrl Selective sphingosine 1 phosphate receptor modulators and combination therapy therewith
US20180016244A1 (en) 2015-04-06 2018-01-18 Auspex Pharmaceuticals, Inc. Deuterium-substituted oxadiazoles
US11111223B2 (en) 2016-06-14 2021-09-07 Receptos Llc Crystalline forms of ozanimod and ozanimod hydrochloride, and processes for preparation thereof
US11192886B2 (en) 2016-07-22 2021-12-07 Medshine Discovery Inc. S1P1 agonist and application thereof
WO2018033149A1 (zh) * 2016-08-19 2018-02-22 苏州科睿思制药有限公司 奥扎莫德的晶型及其制备方法
WO2018049632A1 (zh) * 2016-09-14 2018-03-22 杭州领业医药科技有限公司 奥扎莫德的晶型、其制备方法及药物组合物
CN109640982A (zh) * 2016-09-14 2019-04-16 苏州科睿思制药有限公司 奥扎莫德盐酸盐的晶型及其制备方法
WO2018064356A1 (en) 2016-09-29 2018-04-05 Celgene International Ii Sarl Compounds and methods for treating lupus
US10981900B2 (en) * 2017-02-28 2021-04-20 Medshine Discovery Inc. Spiro compound and use thereof
CN110612292A (zh) * 2017-04-07 2019-12-24 杭州领业医药科技有限公司 奥扎莫德加成盐晶型、制备方法及药物组合物和用途
CN108727291A (zh) * 2017-04-21 2018-11-02 宁波爱诺医药科技有限公司 奥扎莫德及其中间体的制备方法
CN108727292A (zh) * 2017-04-21 2018-11-02 宁波爱诺医药科技有限公司 一种奥扎莫德及其中间体的制备方法
EP3621610A1 (en) 2017-05-08 2020-03-18 Celgene International II Sàrl Sphingosine 1 phosphate receptor agonists for neuroprotection
EP3630738B1 (en) * 2017-05-22 2023-07-19 Egis Gyógyszergyár Zrt. Process for the production of ozanimod
US10278960B2 (en) 2017-06-23 2019-05-07 Enzo Biochem, Inc. Sphingosine pathway modulating compounds for the treatment of cancers
US10660879B2 (en) 2017-06-23 2020-05-26 Enzo Biochem, Inc. Sphingosine pathway modulating compounds for the treatment of cancers
CN109280035B (zh) * 2017-07-19 2023-06-09 广东东阳光药业有限公司 奥扎莫德的多晶型及其制备方法
US11117876B2 (en) 2017-08-31 2021-09-14 Receptos Llc Crystalline form of ozanimod hydrochloride, and processes for preparation thereof
WO2019058290A1 (en) * 2017-09-20 2019-03-28 Suven Life Sciences Limited IMPROVED PROCESS FOR THE PREPARATION OF AZANIMOD A-AMINO COMPOUND
WO2019094409A1 (en) 2017-11-07 2019-05-16 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Salts and solid state forms of ozanimod
EP3741755A4 (en) * 2018-01-18 2021-09-01 Shijiazhuang Sagacity New Drug Development Company, Ltd. CRYSTALLINE AND SALINE FORMS OF TRICYCLIC COMPOUNDS AND THEIR PREPARATION PROCESS
MX2020009100A (es) 2018-03-20 2020-12-03 Eisai R&D Man Co Ltd Agente de tratamiento de la epilepsia.
CN110615747A (zh) * 2018-06-20 2019-12-27 广东东阳光药业有限公司 一种二氢茚中间体的制备方法
WO2020053334A1 (en) 2018-09-12 2020-03-19 Pharmazell Gmbh A process for the preparation of ozanimod and its intermediate (s)-1-amino-2,3-dihydro-1h-indene-4-carbonitrile
AR116479A1 (es) 2018-09-25 2021-05-12 Quim Sintetica S A Intermediarios para la síntesis de ozanimod y procedimiento para la preparación del mencionado agonista del receptor de esfingosina-1-fosfato y de dichos intermediarios
US11390593B2 (en) 2018-12-07 2022-07-19 Synthon B.V. Process for preparing ozanimod
US20220194971A1 (en) * 2019-03-29 2022-06-23 Receptos Llc Sphingosine 1 phosphate receptor modulators
JP2022528001A (ja) * 2019-03-29 2022-06-07 レセプトス・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー スフィンゴシン１リン酸受容体調節因子
KR20210151067A (ko) * 2019-03-29 2021-12-13 리셉토스 엘엘씨 스핑고신 1 포스페이트 수용체 조절제
EP3959204A4 (en) * 2019-04-26 2022-12-28 Receptos Llc SPHINGOSINE-1-PHOSPHATE RECEPTOR MODULATOR
CN112062785B (zh) * 2019-06-11 2023-06-27 广东东阳光药业有限公司 奥扎莫德及其中间体的制备方法
MX2022000651A (es) 2019-07-16 2022-03-11 Synthon Bv Proceso mejorado para preparar ozanimod.
CN114599363A (zh) 2019-10-31 2022-06-07 爱杜西亚药品有限公司 Cxcr7拮抗剂与s1p1受体调节剂的组合
US20230338336A1 (en) * 2020-01-06 2023-10-26 Arena Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating conditions related to the s1p1 receptor
EP4116295A4 (en) * 2020-03-04 2023-08-02 Helioeast Pharmaceutical Co., Ltd. TRICYCLIC COMPOUNDS AND THEIR USE
WO2021175223A1 (zh) * 2020-03-04 2021-09-10 南京明德新药研发有限公司 苯并2-氮杂螺[4.4]壬烷类化合物及其应用
CA3172272A1 (en) 2020-03-17 2021-09-23 Enzo Biochem, Inc. Sphingosine pathway modulating compounds for the treatment of coronavirus infection
WO2021197852A1 (en) 2020-04-02 2021-10-07 Synthon B.V. Crystalline form of ozanimod hydrochloride
CN111620788B (zh) * 2020-04-20 2022-09-30 广东莱佛士制药技术有限公司 一种制备(2s,3s)-3-氨基-二环[2.2.2]辛烷-2-甲酸酯的方法
EP4321507A1 (en) * 2021-04-09 2024-02-14 Helioeast Pharmaceutical Co., Ltd. Oxadiazole-substituted spirocyclic compound and application thereof
EP4212156A1 (en) 2022-01-13 2023-07-19 Abivax Combination of 8-chloro-n-(4-(trifluoromethoxy)phenyl)quinolin-2-amine and its derivatives with a s1p receptor modulator
WO2023152767A1 (en) 2022-02-11 2023-08-17 Mylan Laboratories Limited Polymorphic forms of ozanimod hydrochloride

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060161005A1 (en) * 2002-12-20 2006-07-20 Doherty George A 1-(Amino)indanes and (1,2-dihydro-3-amino)-benzofurans, benzothiophenes and indoles as edg receptor agonists
WO2008035239A1 (en) * 2006-09-21 2008-03-27 Actelion Pharmaceuticals Ltd Phenyl derivatives and their use as immunomodulators
WO2008076356A1 (en) * 2006-12-15 2008-06-26 Abbott Laboratories Novel oxadiazole compounds
US20080249093A1 (en) * 2003-12-17 2008-10-09 Merck & Co., Inc. (3,4-Disubstituted)Propanoic Carboxylates as Sip (Edg) Receptor Agonists

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1479544A (en) 1974-02-07 1977-07-13 American Cyanamid Co 1,2,3,4-tetrahydro-1-naphthylurea derivatives their preparation and their use
FR2628103B1 (fr) * 1988-03-03 1991-06-14 Roussel Uclaf Nouveaux esters pyrethrinoides portant un noyau indanyle, leur procede de preparation et leur application comme pesticides
US5039802A (en) 1990-04-18 1991-08-13 Merck & Co., Inc. Arylation process for preparation of chiral catalysts for ketone reduction
WO1992018462A1 (en) 1991-04-12 1992-10-29 Schering Corporation Bicyclic amides as inhibitors of acyl-coenzyme a: cholesterol acyl transferase
GB2290790A (en) 1994-06-30 1996-01-10 Merck & Co Inc Asymmetric synthesis of 6-substituted 2-amino-1,2,3,4-tetrahydronaphthalenes
ATE249455T1 (de) * 1998-01-23 2003-09-15 Sankyo Co Spiropiperidin-derivate
US20040058894A1 (en) 2002-01-18 2004-03-25 Doherty George A. Selective S1P1/Edg1 receptor agonists
BRPI0409319B8 (pt) 2003-04-11 2021-05-25 Ptc Therapeutics Inc composto, composição farmacêutica, forma de dosagem unitária, e, uso de um composto
CA2539438A1 (en) * 2003-10-01 2005-04-14 Merck And Co., Inc. 3,5-aryl, heteroaryl or cycloalkyl substituted-1,2,4-oxadiazoles as s1p receptor agonists
US7585881B2 (en) * 2004-02-18 2009-09-08 Astrazeneca Ab Additional heteropolycyclic compounds and their use as metabotropic glutamate receptor antagonists
US20060173183A1 (en) 2004-12-31 2006-08-03 Alantos Pharmaceuticals, Inc., Multicyclic bis-amide MMP inhibitors
JP2008531546A (ja) 2005-02-22 2008-08-14 テバ ファーマシューティカル インダストリーズ リミティド エナンチオマー性インダニルアミン誘導体の合成のための改良されたプロセス
KR100667075B1 (ko) 2005-07-22 2007-01-10 삼성에스디아이 주식회사 주사 구동부 및 이를 포함하는 유기 전계발광 표시장치
EP1924546A1 (en) 2005-09-14 2008-05-28 Amgen, Inc Conformationally constrained 3- (4-hydroxy-phenyl) - substituted-propanoic acids useful for treating metabolic disorders
PE20070705A1 (es) * 2005-11-25 2007-08-23 Basf Ag Compuestos de indanil - y tetrahidronaftil-amino-azolina para combatir pestes animales
EP1963509A4 (en) 2005-12-21 2009-07-29 Joseph Gabriele CATECHOLAMINE-REGULATED PROTEIN
JP2009539762A (ja) 2006-03-13 2009-11-19 ファイザー・プロダクツ・インク Ｈ３受容体のテトラリン拮抗薬
US20080009534A1 (en) * 2006-07-07 2008-01-10 Bristol-Myers Squibb Company Substituted acid derivatives useful as antidiabetic and antiobesity agents and method
AU2007323540A1 (en) 2006-11-21 2008-05-29 University Of Virginia Patent Foundation Hydrindane analogs having sphingosine 1-phosphate receptor agonist activity
JO2701B1 (en) 2006-12-21 2013-03-03 جلاكسو جروب ليميتد Vehicles
WO2008143730A2 (en) 2007-02-28 2008-11-27 Rib-X Pharmaceuticals, Inc. Macrolide compounds and methods of making and using the same
GB0725104D0 (en) 2007-12-21 2008-01-30 Glaxo Group Ltd Compounds
WO2009131090A1 (ja) 2008-04-21 2009-10-29 旭化成ファーマ株式会社 アミノ酸化合物
EA021672B1 (ru) 2008-05-14 2015-08-31 Дзе Скриппс Рисёч Инститьют Модуляторы рецепторов сфингозин-1-фосфата и их применение
US8485794B2 (en) * 2008-06-13 2013-07-16 Doowon Technical College Reciprocating compressor with rotary valve
GB0910674D0 (en) 2009-06-19 2009-08-05 Glaxo Group Ltd Novel compounds
WO2011005290A1 (en) 2009-06-23 2011-01-13 Arena Pharmaceuticals, Inc. Disubstituted oxadiazole derivatives useful in the treatment of autoimmune and inflammatory disorders
GB0911130D0 (en) 2009-06-26 2009-08-12 Glaxo Group Ltd Novel compounds
PL3406142T3 (pl) 2009-11-13 2021-08-30 Receptos Llc Selektywne modulatory receptora sfingozyno-1-fosforanu i sposoby syntezy chiralnej
MX2012005559A (es) 2009-11-13 2012-08-23 Receptos Inc Moduladores heterociclicos selectivos del receptor de esfingosina 1 fosfato.
CN102724880B (zh) 2009-11-13 2016-09-14 瑞塞普托斯有限责任公司 1-磷酸鞘氨醇受体调节剂及手性合成方法
EP2706999B1 (en) 2011-05-13 2019-08-28 Celgene International II Sàrl Selective heterocyclic sphingosine 1 phosphate receptor modulators
WO2013055907A1 (en) 2011-10-12 2013-04-18 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Treatment of multiple sclerosis with combination of laquinimod and fingolimod

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060161005A1 (en) * 2002-12-20 2006-07-20 Doherty George A 1-(Amino)indanes and (1,2-dihydro-3-amino)-benzofurans, benzothiophenes and indoles as edg receptor agonists
US20080249093A1 (en) * 2003-12-17 2008-10-09 Merck & Co., Inc. (3,4-Disubstituted)Propanoic Carboxylates as Sip (Edg) Receptor Agonists
WO2008035239A1 (en) * 2006-09-21 2008-03-27 Actelion Pharmaceuticals Ltd Phenyl derivatives and their use as immunomodulators
WO2008076356A1 (en) * 2006-12-15 2008-06-26 Abbott Laboratories Novel oxadiazole compounds

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107857760A (zh) * 2017-11-21 2018-03-30 南京天翔医药科技有限公司 鞘氨醇‑1‑磷酸受体调节剂及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CA2780772A1 (en) 2011-05-19
KR101752124B1 (ko) 2017-06-28
KR20120102704A (ko) 2012-09-18
HK1175948A1 (en) 2013-07-19
AU2010319983B2 (en) 2015-03-12
EA035768B1 (ru) 2020-08-07
EP3868377A1 (en) 2021-08-25
MY189750A (en) 2022-03-02
CA2986521A1 (en) 2011-05-19
HUE037535T2 (hu) 2018-09-28
PL2498610T3 (pl) 2018-08-31
US8362048B2 (en) 2013-01-29
FR20C1059I1 (ru) 2020-12-25
BR112012011427B1 (pt) 2021-04-20
PT2498610T (pt) 2018-06-19
BR122018077504B8 (pt) 2021-05-25
HRP20210446T1 (hr) 2021-05-14
US20110172202A1 (en) 2011-07-14
IL267956B (en) 2021-01-31
US20130231326A1 (en) 2013-09-05
HRP20180874T1 (hr) 2018-07-13
US9388147B2 (en) 2016-07-12
CN105061350A (zh) 2015-11-18
AU2010319983A1 (en) 2012-05-31
FR20C1059I2 (fr) 2021-12-10
CY1120338T1 (el) 2019-07-10
RS57253B1 (sr) 2018-08-31
KR101721716B1 (ko) 2017-04-10
TR201807912T4 (tr) 2018-06-21
LT2498610T (lt) 2018-06-11
JP5650233B2 (ja) 2015-01-07
JP5982705B2 (ja) 2016-08-31
HUS2000045I1 (hu) 2020-12-28
MX2012005560A (es) 2012-10-05
SI2498610T1 (en) 2018-07-31
CY1124121T1 (el) 2022-05-27
DK3406142T3 (da) 2021-03-22
NZ599915A (en) 2014-07-25
SG10201407357PA (en) 2014-12-30
CN102762100B (zh) 2015-07-01
IL219691A0 (en) 2012-07-31
CA2986521C (en) 2020-06-30
PT3406142T (pt) 2021-03-26
ES2673160T3 (es) 2018-06-20
CN105061350B (zh) 2018-05-29
KR20160149317A (ko) 2016-12-27
LTC2498610I2 (lt) 2022-06-10
SI3406142T1 (sl) 2021-08-31
DK2498610T3 (en) 2018-06-14
HK1213874A1 (zh) 2016-07-15
EA201290323A1 (ru) 2013-05-30
JP2015038145A (ja) 2015-02-26
BR112012011427B8 (pt) 2021-05-25
EP2498610B1 (en) 2018-03-14
LT3406142T (lt) 2021-06-10
RS61829B1 (sr) 2021-06-30
EP3406142B8 (en) 2021-03-03
BR112012011427A2 (pt) 2015-10-06
PH12015502708A1 (en) 2016-10-17
EP3406142A1 (en) 2018-11-28
NO2498610T3 (ru) 2018-08-11
CY2020035I1 (el) 2021-03-12
EP2498610A1 (en) 2012-09-19
CN102762100A (zh) 2012-10-31
HUE054000T2 (hu) 2021-08-30
JP2013510885A (ja) 2013-03-28
ES2858337T3 (es) 2021-09-30
WO2011060392A1 (en) 2011-05-19
PL3406142T3 (pl) 2021-08-30
EP2498610A4 (en) 2013-05-22
US20170320839A1 (en) 2017-11-09
CY2020035I2 (el) 2021-03-12
NO2020039I1 (no) 2020-11-18
IL267956A (en) 2019-09-26
MY161854A (en) 2017-05-15
IL219691B (en) 2019-07-31
EA201690391A1 (ru) 2016-08-31
CA2780772C (en) 2018-01-16
LTPA2020533I1 (lt) 2020-12-10
US20150299149A1 (en) 2015-10-22
BR122018077504B1 (pt) 2021-05-11
JP2014122208A (ja) 2014-07-03
US10239846B2 (en) 2019-03-26
AU2010319983A2 (en) 2013-09-12
PH12015502708B1 (en) 2016-10-17
EP3406142B1 (en) 2020-12-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA024801B1 (ru) Селективные модуляторы рецептора сфингозин-1-фосфата
DK2498611T3 (en) SPHINGOSIN-1-PHOSPHATE RECEPTOR MODULATORS AND METHODS FOR CHIRAL SYNTHESIS
EP3062792A1 (en) Selective sphingosine 1 phosphate receptor modulators and combination therapy therewith
AU2015202660B2 (en) Selective sphingosine 1 phosphate receptor modulators and methods of chiral synthesis

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ KG MD TJ TM

PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment
PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment