EA023768B1 - ПРОИЗВОДНЫЕ ГИДАНТОИНА, ПОЛЕЗНЫЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ Kv3-КАНАЛОВ - Google Patents

ПРОИЗВОДНЫЕ ГИДАНТОИНА, ПОЛЕЗНЫЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ Kv3-КАНАЛОВ Download PDF

Info

Publication number
EA023768B1
EA023768B1 EA201390609A EA201390609A EA023768B1 EA 023768 B1 EA023768 B1 EA 023768B1 EA 201390609 A EA201390609 A EA 201390609A EA 201390609 A EA201390609 A EA 201390609A EA 023768 B1 EA023768 B1 EA 023768B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
oxy
methyl
benzofuran
dihydro
dimethyl
Prior art date
Application number
EA201390609A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201390609A1 (ru
Inventor
Джузеппе Альваро
Паоло Дамбруосо
Агостино Мараско
Симона Томмаси
Анне Декор
Чарльз Лардж
Original Assignee
Отифони Терапеутикс Лимитед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/EP2010/068946 external-priority patent/WO2011069951A1/en
Priority claimed from GBGB1020607.6A external-priority patent/GB201020607D0/en
Priority claimed from GBGB1109508.0A external-priority patent/GB201109508D0/en
Priority claimed from GBGB1113757.7A external-priority patent/GB201113757D0/en
Application filed by Отифони Терапеутикс Лимитед filed Critical Отифони Терапеутикс Лимитед
Publication of EA201390609A1 publication Critical patent/EA201390609A1/ru
Publication of EA023768B1 publication Critical patent/EA023768B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4178—1,3-Diazoles not condensed 1,3-diazoles and containing further heterocyclic rings, e.g. pilocarpine, nitrofurantoin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/94—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom spiro-condensed with carbocyclic rings or ring systems, e.g. griseofulvins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

В изобретении предложены соединения формулы (Ia)где R, R, R, R, R, А, X и Y являются такими, как определено в описании, которые являются ингибиторами Kv3-каналов, и их применения в изготовлении лекарственного средства для лечения или профилактики связанных с ними заболеваний или расстройств.

Description

Данное изобретение относится к новым соединениям, содержащим их фармацевтическим композициям и их применению в терапии, в частности в профилактике или лечении нарушений слуха, включая потерю слуха и шум в ушах, а также шизофрении, биполярного расстройства и расстройств сна.
Предшествующий уровень техники
Семейство потенциалзависимых калиевых каналов Κν3 включает четыре члена: Κν3.1, Κν3.2, Κν3.3 и Κν3.4. Гены каждого из этих подтипов могут образовывать множественные изоформы путем альтернативного сплайсинга, продуцируя варианты с различными С-концевыми доменами. На данное время было идентифицировано тринадцать изоформ у животных, однако токи, экспрессируемые этими вариантами, по-видимому, являются идентичными (Кибу аиб МсВайт 2001, Тгеибк ίη Иеигокшеисек 24, 517-526). Κν3каналы активируются деполяризацией плазматической мембраны до значений разности потенциалов выше чем -20 мВ; кроме того, эти каналы быстро деактивируются при реполяризации мембраны. Эти биофизические свойства обеспечивают открытие каналов около пика фазы деполяризации нейронального потенциала действия, инициируя реполяризацию. Быстрое окончание потенциала действия, опосредованного Κν3-каналами, дает нейронам возможность быстрее восстановиться для достижения подпороговых значений мембранных потенциалов, от которых могут запускаться следующие потенциалы действия. В результате, присутствие 1<у3-каналов в некоторых нейронах вносит вклад в их способность к возбуждению с высокой частотой (Кибу аиб МсВши, 2001, Тгеибк ίη Ыеигокск 24, 517-526). Подтипы Κν3.1-3 преобладают в ЦНС, в то время как Κν3.4-каналы, как обнаружено, преобладают в скелетных мышцах и симпатических нейронах (ХУейег е1 а1., 1994, ί. Иеигокск 14, 949-972). Подтипы 1<у3.1-3-каналов дифференцированно экспрессируются подклассами промежуточных нейронов в коре головного мозга и гиппокампе (например, С1ю\у е1 а1., 1999, I. Ыеигокск 19, 9332-9345; Майша е1 а1., 1998, I. Ыеигокск 18, 81118125; МсЭоиа1б аиб Максадш, 2006, Ыеигокск 138, 537-547, Сйаид е1 а1., 2007, I. Сотр. №иго1. 502, 953972), в таламусе (например, 1<ак1ен е1 а1., 2007, I. Рйукю1. 584, 565-582), мозжечке (например, 8ассо е1 а1., 2006, Мо1. Се11. №игокс1. 33, 170-179) и ядрах слухового нерва в стволе головного мозга (Ы е1 а1., 2001, I. Сотр. Иеиго1. 437, 196-218).
Исследование мышей, у которых были удалены один или более Юу3-подтипов, показало, что отсутствие Κν3.1 приводит к повышению двигательной активности, изменению электроэнцефалографической активности и фрагментированной структуре сна Цойо е1 а1., 1999, ί. №иторйукю1. 82, 1855-1864). Удаление Κν3.2 приводит к снижению судорожного порога и изменению электроэнцефалографической активности коры головного мозга (Баи е1 а1., 2000, I. Ыеигокск 20, 9071-9085). Удаление Κν3.3 ассоциировано с умеренным нарушением координации движений и двигательными дефектами (МсМайои е1 а1., 2004, Еиг. ί. №итокск 19, 3317-3327). Двойное удаление Κν3.1 и Κν3.3 приводит к тяжелому фенотипу, характеризующемуся спонтанными судорожными припадками, нарушением координации движений и повышенной чувствительностью к воздействию этанола (Екршока е1 а1., 2001, ί. Ыеигокск 21, 6657-6665; Екршока е1 а1., 2008, I. Меигокск 28, 5570-5581).
Известная фармакология Κν3-каналов ограничена. Было показано, что тетраэтиламмоний (ТЕА) ингибирует каналы в низких миллимолярных концентрациях (Кибу аиб МсВши, 2001, Тгеибк ίη Иеигокск 24, 517-526), и было показано, что токсины ΒΌ8 (вещества, угнетающие кроветворение) из актинии Аиетоша кн1са1а (Эюсйо!: е1 а1., 1998, I. Вю1. Сйет. 273, 6744-6749) избирательно ингибируют Κν3каналы с высокой аффинностью (Уеиид е1 а1., 2005, ί. №итокск 25, 8735-8745). Было показано, что помимо соединений, прямо действующих на 1<у3-каналы. агонисты рецепторов, которые активируют протеинкиназу А (ΡΚΑ) и протеинкиназу С (ΡΚΟ), модулируют 1<у3-опосредованные токи в специфических областях головного мозга, приводя к снижению способности нейронов к возбуждению с высокой частотой (Акоп е1 а1., 2000, Иак Иеигокск 3, 791-798; 8оид е1 а1., 2005, №4 Иеигокск 8, 1335-1342); эти исследования подтверждают, что ΡΚΑ и ΡΚС могут специфически фосфорилировать 1<\'3-каналы специфическим для нейронов образом, вызывая снижение 1<у3-опосредованных токов.
Биполярное расстройство, шизофрения, тревога и эпилепсия являются тяжелыми расстройствами центральной нервной системы, которые ассоциированы с пониженной функцией ингибиторных промежуточных нейронов и передачи сигнала гамма-аминомасляной кислоты (САВА) (Кеуио1бк е1 а1., 2004, ИеигоФх. Кек. 6, 57-61; Веиек е1 а1., 2008, РИА8, 105, 20935-20940; ВтатЬШа е1 а1., 2003, Мо1. РкусЫайу. 8, 721-37, 715; Атошабои-Аибецакка е1 а1., 2007, Атшо Ашбк 32, 305-315; Веи-Ап, 2006, Стй. Кеу. йеигоЬю1. 18, 135-144). Парвальбумин-положительные миоэпителиоциты, которые экспрессируют 1<\'3-каналы в коре головного мозга и гиппокампусе, играют ключевую роль в генерировании ингибирования по типу обратной связи в пределах локальных цепей (Магкгат е1 а1., 2004, №й. Ре\'. Иеигокск 5, 793-807). Принимая во внимание относительное преобладание возбуждающего синаптического входа над тормозящим входом для глутаматергических пирамидальных нейронов в этих цепях, быстрое возбуждение промежуточных нейронов, обеспечивающих тормозящий вход, является существенным для обеспечения сбалансированного торможения. Кроме того, точное определение времени тормозящего входа необходимо для поддержания синхронизации сети, например при генерировании колебаний потенциала поля с частотой в гамма-диапазоне, которые ассоциированы с когнитивной функцией (Икайи е1 а1., 2005, ί. Рйукю1. 562, 6572; Еиде1 е1 а1., 2001, №4. Ре\'. Иеигокск 2, 704-716). Примечательно, что уменьшение гамма-колебаний
- 1 023768 наблюдалось у пациентов с шизофренией (§реисет е! а1., 2004, ΡΝΑδ 101, 17288-17293). Следовательно, можно ожидать, что положительные модуляторы Ку3-каналов усиливают возбуждающие способности конкретных групп быстровозбуждающих нейронов в головном мозге. Эти эффекты могут быть благоприятными при расстройствах, ассоциированных с аномальной активностью этих нейрональных групп.
Кроме того, было показано, что Ку3.2-каналы экспрессируются нейронами супрахиазматического ядра (δΟΝ) главного циркадианного пейсмейкера в ЦНС (8с1ш1/ апД 81еипег. 2009, ΟΝδ Эгиде 23 8ирр1 2, 3-13).
Потеря слуха представляет собой распространенное заболевание, которое поражает приблизительно 16% населения в Европе и США (Со1Дтап апД Но1те, 2010, Эгид Э1есоуегу ТоДау 15, 253-255), причем уровень распространения оценивают как 250 млн человек по всему миру (В^Ые1Д, 2006, Еуа1иа1юп о£ еос1а1 апД есопотю сое!е о£ Неаппд шраитеп!. Керог! £ог Неаг-Ι! ΑΙδΒΚ №№№.Ьеаг-й.огд/ти111теД1а/Неаг I! Верой Ос1оЬег 2006.рД1). Поскольку средняя продолжительность жизни продолжает расти, также растет число людей, страдающих расстройствами слуха. Кроме того, полагают, что современный образ жизни может усугублять тяжесть этого состояния в равной степени у более молодого поколения. Нарушения слуха, в том числе шум в ушах, чрезвычайно сильно влияют на качество жизни, вызывая социальную изоляцию, депрессию, трудности в работе и взаимоотношениях, низкую самооценку и предрассудки. Потенциалзависимые ионные каналы семейства Κν3 экспрессируются в высоких уровнях в слуховых ядрах ствола головного мозга (Ы е! а1., 2001, 1. Сотр. №иго1. 437, 196-218), где они обеспечивают быстрое возбуждение нейронов, которые передают слуховую информацию от улитковой области в высшие отделы головного мозга. Утрата экспрессии К\'3.1-канала в центральных слуховых нейронах наблюдается у мышей с нарушениями слуха (топ НеНп е! а1., 2004, 1. №игоеск 24, 1936-1940), и снижение Κν3.1экспрессии может быть ассоциировано с потерей слуха у старых мышей (1ипд е! а1. 2005 №иго1. Кее. 27, 436-440). Кроме того, патологическая пластичность слуховых сетей ствола головного мозга, вероятно, вносит вклад в симптомы, которые испытывают многие люди, страдающие потерей слуха различного рода. Последние исследования показали, что регуляция функции и экспрессии К\'3.1-канала играет главную роль в контролировании возбудимости слуховых нейронов (Кас/тагек е! а1., 2005, Неаппд Кее. 206, 133-145), подтверждая, что этот механизм может отвечать за некоторые пластические изменения, которые приводят к шуму в ушах. Более конкретно, снижение в Ку3-подобных калиевых потоках в нейронах дорсального кохлеарного ядра наблюдалось после акустической травмы у крыс, подтверждая, что пониженная Ку3-функция может вносить вклад в патологический процесс, который запускается при шумовом повреждении (РДаД е! а1., 2011, Неаппд Кее., Док 10.1016/).йеагшдгее.2011.10.008), и подтверждая гипотезу, что положительная модуляция Ку3-каналов в слуховых ядрах ствола головного мозга может оказывать терапевтическую пользу у пациентов, страдающих вызванной шумом потерей слуха. Наконец, синдром ломкой Х-хромосомы и аутизм часто ассоциированы с гиперчувствительностью к сенсорному входу, в том числе слуховому стимулу. Последние обнаружения подтверждают, что белок, кодируемый геном РМК-Ι, мутация или отсутствие которого приводит к синдрому ломкой Х-хромосомы, может непосредственно регулировать экспрессию К\'3.1-каналов в слуховых ядрах ствола головного мозга ШПитЬое е! а1., 2010, 1. №игоес1епсе, в печати), подтверждая, что ошибочная регуляция Ку3.1-каналов может привести к гиперакузии у пациентов, страдающих синдромом ломкой Х-хромосомы или аутизмом. Следовательно, авторы изобретения предположили, что низкомолекулярные модуляторы Ку3-каналов в слуховых ядрах ствола головного мозга могут оказывать благоприятный эффект при лечении расстройств слуха, включая шум в ушах и повышенную остроту слуха, ассоциированных с синдромом ломкой Ххромосомы и аутизмом.
Краткое изложение сущности изобретения
В настоящем изобретении предложены соединения формулы (1а)
где К| представляет собой Н или С!-4алкил, галоген, галоген-С!-4алкил, ΠΝ, С!-4алкокси, галоген-С!4алкокси;
К2 представляет собой Н, Спалкил, С3-4спирокарбоцикл, галоген-С!-4алкил или галоген;
К3 представляет собой Н, Спалкил, галоген-С!-4алкил, галоген;
А представляет собой 5- или 6-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл по меньшей мере с одним атомом О, возможно конденсированный с циклопропильной группой с образованием трицикла при рассмотрении вместе с фенилом;
Х представляет собой С или Ν;
- 2 023768
Υ представляет собой С или Ν;
Кд представляет собой С^алкил;
К5 представляет собой Н, дейтерий, С1_4алкил, или
Кд и К5 могут быть конденсированы с образованием С3-4спирокарбоцикла;
где К2 и К3 могут быть присоединены к одному и тому же или разным кольцевым атомам и
К2 может быть присоединен к атому конденсированного кольца, или их фармацевтически приемлемые соли.
Предпочтительными являются соединения формулы (1а), где К1 представляет собой Н или метил. Также предпочтительными являются соединения формулы (1а), где К2 представляет собой Н, метил или С3спирогруппу. Также предпочтительными являются соединения формулы (1а), где К3 представляет собой Н или метил. Также предпочтительными являются соединения формулы (1а), где X представляет собой С и Υ представляет собой С. Также предпочтительными являются соединения формулы (1а), где X представляет собой С и Υ представляет собой Ν. Также предпочтительными являются соединения формулы (1а), где X представляет собой N и Υ представляет собой Ν. Также предпочтительными являются соединения формулы (1а), где К4 представляет собой метил или этил. Также предпочтительными являются соединения формулы (1а), где К5 представляет собой Н или метил.
Кроме того, предпочтительными являются соединения формулы (1а), выбранные из группы, состоящей из (5К)-3-[4-( 1,3-дигидро-2-бензофуран-4-илокси)фенил] -5-метил-2,4-имидазолидиндиона;
(5К)-5-метил-3-{4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-2,4-имидазолидиндиона;
(5К)-3-{4-[(3,6-диметил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-5-метил-2,4-имидазолидиндиона;
5.5- диметил-3-{4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-2,4-имидазолидиндиона;
(5К)-5-этил-3-{6-[(3-этил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4-имидазолидиндиона;
(5К)-5-этил-3-(6-{[3-(1-метилэтил)-1,2-бензизоксазол-4-ил]окси}-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3-{4-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]фенил}-5-метил-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-метил-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-этил-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3 -{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -5 -пиримидинил} -5-этил-2,4имидазолидиндиона;
7-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,7-диазаспиро[3.4]октан6,8-диона;
6-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-4,6-диазаспиро[2.4]гептан5,7-диона;
3-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,5-диметил-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3 -{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -5 -пиримидинил} -5-(1,1диметилэтил) -2,4 -имидазо лидиндиона;
(5К)-5-этил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндиона;
5.5- диметил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндиона;
(5К)-5-этил-5-метил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндиона;
(5К)-5-этил-3-(6-{[(3§/К)-3 -метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил]окси}-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерной смеси);
(5К)-5-этил-3-{6-[(3-метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомеров 1 и 2);
(5К)-5-этил-3-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерной смеси);
(5К)-5-этил-3-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомеров 1 и 2);
5.5- диметил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (рацемической смеси);
5.5- диметил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (энантиомера 1 и энантиомера 2);
5.5- диметил-3-{6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3-пиридинил}2,4-имидазолидиндиона (рацемической смеси);
5,5-диметил-3-{6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3-пиридинил}- 3 023768
2.4- имидазолидиндиона (энантиомера 1 и энантиомера 2);
(5К)-5-этил-5-метил-3-[6-(1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан]-5-илокси)-3-пиридинил]-2,4имидазолидиндиона;
3-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-5,5-диметил-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3 -{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -5 -пиримидинил} -5-( 1 -метилэтил)2.4- имидазолидиндиона;
(5К)-3-{6-[(2,2-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-этил-2,4имидазолидиндиона;
5.5- диметил-3-[6-(1Н-спиро [2-бензопиран-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3-[2-(2,3-дигидроспиро [хромен-4,1'-циклопропан] -5-илокси)-5-пиримидинил] -5-этил-5-метил2,4-имидазолидиндиона;
5.5- диметил-3-{6-[(4-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (рацемической смеси, энантиомера 1, энантиомера 2);
(5К)-5-этил-5-метил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерной смеси, диастереоизомера 1, диастереоизомера 2);
(5К)-5-этил-5-метил-3-[6-(1,1а,2,7Ъ-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-илокси)-3-пиридинил]-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерной смеси, диастереоизомера 1, диастереоизомера 2) и
3-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,5-диметил-2,4имидазолидиндиона (рацемической смеси, энантиомера 1, энантиомера 2).
В настоящем изобретении также предложено применение соединения формулы (1а) в изготовлении лекарственного средства для лечения или профилактики заболевания или расстройства, при котором требуется модулятор Κν3.1 или Κν3.2 или Κν3.1 и Κν3.2 каналов.
Также предложено применение соединения формулы (1а) в изготовлении лекарственного средства для профилактики или лечения нарушений слуха, шизофрении, биполярного расстройства или расстройств сна. Предпочтительно, когда указанное применение относится к применению в изготовлении лекарственного средства для профилактики или лечения нарушений слуха. Более предпочтительно, когда нарушение слуха выбрано из группы, состоящей из невропатии слухового нерва, расстройства слуховой обработки информации, потери слуха, которая включает внезапную потерю слуха, вызванную шумом потерю слуха, вызванную приемом веществ потерю слуха, потерю слуха у взрослых старше 60 лет (старческая тугоухость), и шума в ушах. Также предпочтительно, когда указанное применение относится к применению в изготовлении лекарственного средства для профилактики или лечения шизофрении.
Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение, выбранное из спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ола
3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ола
или его соль.
Кроме того, предложено соединение, выбранное из группы, состоящей из
- 4 023768 η2ν
или его соль.
Соединения формулы (1а) могут быть предложены в виде фармацевтически приемлемой соли. Подробное описание изобретения
В настоящем изобретении предложено соединение формулы (1а)
Р
О '5 (1а) где Κι представляет собой Н или С1-4алкил, галоген, галоген-С1-4алкил, СЫ, С1-4алкокси, галоген-СА 4алкокси;
К2 представляет собой Н, С1-4алкил, С3-4спирокарбоцикл, галоген-С1-4алкил или галоген;
К3 представляет собой Н, С1-4алкил, галоген-С1-4алкил, галоген;
А представляет собой 5- или 6-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл с по меньшей мере одним атомом О, возможно конденсированный с циклопропильной группой с образованием трицикла при рассмотрении вместе с фенилом;
X представляет собой С или Ν;
Υ представляет собой С или Ν;
К4 представляет собой С1-4алкил;
К5 представляет собой Н, дейтерий, С1-4алкил, или
К4 и К5 могут быть конденсированы с образованием С3-4спирокарбоцикла;
где К2 и К3 могут быть присоединены к одному и тому же или разным кольцевым атомам и
К2 может быть присоединен к атому конденсированного кольца, или его фармацевтически приемлемая соль.
Подходящим образом, Κ1 представляет собой Н или метил. В одном воплощении изобретения Κ1 представляет собой Н. Во втором воплощении изобретения Κ1 представляет собой С1-4алкил, в частности Κ1 представляет собой метил.
Подходящим образом, К2 представляет собой Н, Р, метил, этил, изопропил или С3спирогруппу. В одном воплощении изобретения К2 представляет собой Н. Во втором воплощении изобретения К2 представляет собой С1-4алкил, в частности в одном примере этого воплощения К2 представляет собой метил, в другом примере этого воплощения К2 представляет собой этил и в еще одном примере этого воплощения К2 представляет собой пропил (например, изопропил). В третьем воплощении изобретения К2 представляет собой С3спирогруппу. В четвертом воплощении изобретения К2 представляет собой С4спирогруппу. В пятом воплощении изобретения К2 представляет собой галоген, в частности фтор.
Подходящим образом, К3 представляет собой Н, Р, метил или этил. В одном воплощении изобретения К3 представляет собой Н. Во втором воплощении изобретения К3 представляет собой С1-4алкил, в частности в одном конкретном примере этого воплощения К3 представляет собой метил, в другом примере этого воплощения К3 представляет собой этил. В третьем воплощении изобретения К3 представляет собой галоген, в частности фтор.
- 5 023768
Специалисту в данной области техники понятно, что, в зависимости от размера, присутствия гетероатомов и степени ненасыщенности кольца, К3 может отсутствовать. Соответственно, в другом воплощении изобретения К3 отсутствует.
Подходящим образом, К3 может представлять собой Н, Р, метил или этил и К2 может представлять собой Н, Р, метил, этил, изопропил или С3-4спирокарбоцикл. В частности, К3 может представлять собой Н, Р, метил или этил и К2 может представлять собой Н, Р, метил, этил, изопропил или С3спирокарбоцикл. В некоторых воплощениях К3 представляет собой Н и К2 представляет собой Н, метил, этил, изопропил или С3-4спирокарбоцикл. В других воплощениях К3 представляет собой метил или этил и К2 представляет собой метил или этил, в одном примере этого воплощения К3 и К2 оба представляют собой метил (например, присоединены к одному и тому же кольцевому атому углерода), во втором примере этого воплощения К3 и К2 оба представляют собой этил (например, присоединены к одному и тому же кольцевому атому углерода). В другом воплощении К3 и К2 оба представляют собой фтор (например, присоединены к одному и тому же кольцевому атому углерода).
В одном воплощении изобретения А представляет собой 5-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл с по меньшей мере одним атомом О, возможно конденсированный с циклопропильной группой с образованием трицикла при рассмотрении вместе с фенилом. Во втором воплощении изобретения А представляет собой 6-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл с по меньшей мере одним атомом О, возможно конденсированный с циклопропильной группой с образованием трицикла при рассмотрении вместе с фенилом.
В некоторых воплощениях кольцо А содержит один гетероатом. В других воплощениях кольцо А содержит два гетероатома (например, два атома кислорода, альтернативно, один атом кислорода и один атом азота).
Подходящим образом, А представляет собой дигидрофуран, изоксазол, дигидропиран, 1,3диоксолан, 1,3-оксазин или дигидропиран, конденсированный с циклопропильной группой. В одном воплощении изобретения А представляет собой дигидрофуран. Во втором воплощении изобретения А представляет собой дигидропиран. В третьем воплощении изобретения А представляет собой дигидрофуран, конденсированный с циклопропильной группой. В четвертом воплощении изобретения А представляет собой дигидропиран, конденсированный с циклопропильной группой. В пятом воплощении изобретения А представляет собой дигидрофуран, изоксазол или дигидропиран. В шестом воплощении изобретения А представляет собой дигидрофуран, изоксазол или дигидропиран, конденсированный с циклопропильной группой. В седьмом воплощении изобретения А представляет собой 1,3-оксазин. В восьмом воплощении изобретения А представляет собой 1,3-диоксолан.
Когда А представляет собой 5-членный гетероцикл, содержащий один гетероатом, подходящим образом этот атом кислорода находится в мета-положении относительно фенильного кольца.
Когда А представляет собой 5-членный гетероцикл, содержащий один гетероатом, подходящим образом этот гетероцикл представляет собой дигидрофуран.
Когда А представляет собой 6-членный гетероцикл, содержащий один гетероатом, подходящим образом этот атом кислорода находится в мета-положении относительно фенильного кольца.
Когда А представляет собой 6-членный гетероцикл, содержащий один гетероатом, подходящим образом этот гетероцикл представляет собой дигидропиран.
Когда А представляет собой пятичленное кольцо, в конкретных воплощениях изобретения один из К2 и К3 представляет собой Н, а другой представляет собой метил. Альтернативно, когда А представляет собой пятичленное кольцо, К2 представляет собой С3спирогруппу, а К3 представляет собой Н.
Когда А представляет собой пятичленное кольцо, конденсированное с циклопропильной группой, подходящим образом, К2 и К3 оба представляют собой Н.
Когда А представляет собой шестичленное кольцо, в конкретных воплощениях изобретения один из К2 и К3 представляет собой метил, а другой представляет собой Н. Альтернативно, когда А представляет собой шестичленное кольцо, К2 представляет собой С3спирогруппу, а К3 представляет собой Н.
Когда А представляет собой шестичленное кольцо, конденсированное с циклопропильной группой, подходящим образом, К2 и К3 оба представляют собой Н.
В одном воплощении изобретения X представляет собой С, и Υ представляет собой С. Во втором воплощении изобретения X представляет собой Ν, и Υ представляет собой С. В третьем воплощении изобретения X представляет собой Ν, и Υ представляет собой Ν.
Подходящим образом, К4 представляет собой метил, этил, изопропил или трет-бутил. В одном воплощении изобретения К4 представляет собой метил. В другом воплощении изобретения К4 представляет собой этил. В еще одном воплощении изобретения К4 представляет собой пропил, такой как изопропил. В еще одном воплощении изобретения К4 представляет собой бутил, такой как трет-бутил.
Подходящим образом, К5 представляет собой Н или метил. В одном воплощении изобретения К5 представляет собой Н. Во втором воплощении изобретения К5 представляет собой С1-4алкил, в частности К5 представляет собой метил.
В одном воплощении изобретения К4 и К5 вместе образуют С3спирокарбоцикл. Во втором воплощении изобретения К4 и К5 вместе образуют С4спирокарбоцикл. В еще одном воплощении изобретения
- 6 023768
К4 представляет собой метил и К5 представляет собой метил. В воплощении, представляющем особый интерес, К4 представляет собой этил и К5 представляет собой метил.
Подходящим образом, Кд и К5 имеют следующее стереохимическое расположение:
о
В одном воплощении изобретения К5 представляет собой Н и заместитель Кд находится в 8конфигурации.
В одном воплощении изобретения Кд представляет собой метил, К5 представляет собой метил, X представляет собой N и Υ представляет собой С, например, когда А представляет собой дигидрофуран, в частности когда А представляет собой дигидрофуран и Κι представляет собой Н, особенно когда А представляет собой дигидрофуран, Κι представляет собой Н и К2 представляет собой С3спирогруппу.
Соединения формулы (1а) или их любое подсемейство, включающее соединения формулы (1с), могут возможно быть предложены в виде фармацевтически приемлемой соли. В одном воплощении изобретения соединение формулы (1а) предложено в виде фармацевтически приемлемой соли. Во втором воплощении изобретения соединение формулы (1а) не находится в виде соли.
Также предложено соединение формулы (1с)
где Κι представляет собой Н или С1-4алкил;
К2 представляет собой Н, С1-4алкил, С3-4спирокарбоцикл, галоген-С1-4алкил или галоген;
К3 представляет собой Н, С1-4алкил, галоген-С1-4алкил, галоген;
А представляет собой 5- или 6-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл с по меньшей мере одним атомом О, возможно конденсированный с циклопропильной группой с образованием трицикла при рассмотрении вместе с фенилом;
X представляет собой С или Ν;
Υ представляет собой С или Ν;
К4 представляет собой С1-4алкил;
К5 представляет собой Н, дейтерий, С1-4алкил, или
К4 и К5 могут быть конденсированы с образованием С3-4спирокарбоцикла;
где К2 и К3 могут быть присоединены к одному и тому же или разным кольцевым атомам и
К2 может быть присоединен к атому конденсированного кольца, или его фармацевтически приемлемая соль.
В отношении соединений формулы (1а) и (1с) рассмотрено следующее.
В одном воплощении изобретения К1 представляет собой Н.
В одном воплощении изобретения К1 представляет собой С1-4алкил. В другом воплощении изобретения К1 представляет собой метил.
В одном воплощении изобретения К2 представляет собой Н.
В одном воплощении изобретения К2 представляет собой С1-4алкил. В другом воплощении К2 представляет собой метил. В еще одном воплощении К2 представляет собой этил. В еще одном воплощении К2 представляет собой пропил.
В одном воплощении изобретения К2 представляет собой С3спирогруппу.
В одном воплощении изобретения К3 представляет собой Н.
В одном воплощении изобретения К3 представляет собой С1-4алкил. В другом воплощении изобретения К3 представляет собой метил.
В одном воплощении изобретения А представляет собой тетрагидрофуран, изоксазол или тетрагидропиран.
В одном воплощении изобретения А представляет собой тетрагидрофуран, изоксазол или тетрагидропиран, конденсированный с циклопропильной группой.
В одном воплощении изобретения X представляет собой С и Υ представляет собой С.
В одном воплощении изобретения X представляет собой N и Υ представляет собой С.
В одном воплощении изобретения X представляет собой N и Υ представляет собой Ν.
В одном воплощении изобретения Кд представляет собой метил. В другом воплощении изобретения К4 представляет собой этил. В дополнительном воплощении изобретения К4 представляет собой пропил.
- 7 023768
В еще одном воплощении изобретения К4 представляет собой бутил.
В одном воплощении изобретения К5 представляет собой Н.
В одном воплощении изобретения К5 представляет собой С'1-4алкил. В другом воплощении изобретения К5 представляет собой метил.
В одном воплощении изобретения К4 и К5 вместе образуют С3спирокарбоцикл.
В одном воплощении изобретения К4 и К5 вместе образуют С4спирокарбоцикл.
В одном воплощении изобретения К5 представляет собой Н и заместитель К4 находится в 8конфигурации.
В одном воплощении изобретения К4 представляет собой метил и К5 представляет собой метил.
В одном воплощении изобретения К4 представляет собой метил, К5 представляет собой метил, X представляет собой N и Υ представляет собой С.
В одном воплощении изобретения К4 представляет собой метил, К5 представляет собой метил, X представляет собой Ν, Υ представляет собой С и А представляет собой тетрагидрофуран.
В одном воплощении изобретения К4 представляет собой метил, К5 представляет собой метил, X представляет собой Ν, Υ представляет собой С, А представляет собой тетрагидрофуран и К! представляет собой Н.
В одном воплощении изобретения К4 представляет собой метил, К5 представляет собой метил, X представляет собой Ν, Υ представляет собой С, А представляет собой тетрагидрофуран, К! представляет собой Н и К2 представляет собой С3спирогруппу.
В одном воплощении изобретения соединение выбрано из группы, состоящей из (5К)-3-[4-(1,3-дигидро-2-бензофуран-4-илокси)фенил]-5-метил-2,4-имидазолидиндиона;
(5К)-5-метил-3-{4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-2,4-имидазолидиндиона;
(5К)-3-{4-[(3,6-диметил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-5-метил-2,4-имидазолидиндиона;
5.5- диметил-3-{4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-2,4-имидазолидиндиона;
(5К)-5-этил-3-{6-[(3-этил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4-имидазолидиндиона;
(5К)-5-этил-3-(6-{[3-(1-метилэтил)-1,2-бензизоксазол-4-ил]окси}-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3-{4-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]фенил}-5-метил-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-метил-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-этил-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-5-этил-2,4имидазолидиндиона;
7-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,7-диазаспиро[3.4]октан6,8-диона;
6-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-4,6-диазаспиро[2.4]гептан5,7-диона;
3-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,5-диметил-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-5-(1,1диметилэтил) -2,4 -имидазолидиндиона;
(5К)-5-этил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндиона;
5.5- диметил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндиона;
(5К)-5-этил-5-метил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндиона;
(5К)-5-этил-3-(6-{[(38/К)-3 -метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил]окси}-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерная смесь);
(5К)-5-этил-3-{6-[(3-метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомеры 1 и 2);
(5К)-5-этил-3-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерная смесь);
(5К)-5-этил-3-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомеры 1 и 2);
5.5- диметил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (рацематная смесь);
5.5- диметил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (энантиомер 1 и энантиомер 2);
5.5- диметил-3-{6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3 -пиридинил}- 8 023768
2.4- имидазолидиндиона;
5.5- диметил-3-{6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3-пиридинил}2.4- имидазолидиндиона (энантиомер 1 и энантиомер 2);
(5К)-5-этил-5-метил-3-[6-(1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан]-5-илокси)-3-пиридинил]-2,4имидазолидиндиона;
3-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-5,5-диметил-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси] -5-пиримидинил} -5-( 1 -метилэтил)2.4- имидазолидиндиона;
(5К)-3-{6-[(2,2-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-этил-2,4имидазолидиндиона;
5.5- диметил-3-[6-(1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан]-5-илокси)-3-пиридинил]-2,4имидазолидиндиона;
(5К)-3-[2-(2,3-дигидроспиро[хромен-4,1'-циклопропан]-5-илокси)-5-пиримидинил]-5-этил-5-метил2.4- имидазолидиндиона;
5.5- диметил-3-{6-[(4-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (рацематная смесь, энантиомер 1, энантиомер 2);
(5К)-5-этил-5-метил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерная смесь, диастереоизомер 1, диастереоизомер 2);
(5К)-5-этил-5-метил-3-[6-(1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-илокси)-3-пиридинил]-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерная смесь, диастереоизомер 1, диастереоизомер 2);
3-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,5-диметил-2,4имидазолидиндиона (рацематная смесь, энантиомер 1, энантиомер 2) или их фармацевтически приемлемых солей.
Также раскрыты следующие соединения:
(5К)-5-этил-5-метил-3-[2-(4-метилхроман-5-ил)оксипиримидин-5-ил]имидазолидин-2,4-дион (диастереоизомерная смесь, диастереоизомер 1, диастереоизомер 2);
(5К)-5 -этил-5 -метил-3 - [2-(7-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)оксипиримидин-5 ил]имидазолидин-2,4-дион;
(5К)-3-[2-(3,3-диметилизохроман-5-ил)оксипиримидин-5-ил]-5-этил-5-метил-имидазолидин-2,4дион;
(5К)-5-этил-5-метил-3-[2-(7-метилспиро [1Н-изобензофуран-3,1'-циклобутан] -4-ил)оксипиримидин5-ил]имидазолидин-2,4-дион;
(5К)-5-этил-5-метил-3-{2-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}2.4- имидазолидиндион;
(5К)-3 -{2-[(2,2-дифтор-7 -метил- 1,3-бензодиоксол-4-ил)окси] -5-пиримидинил}-5 -этил-5 -метил-2,4имидазолидиндион;
(5К)-3-{2-[(2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-5-этил-5-метил-2,4имидазолидиндион;
(5К)-5-этил-5-метил-3-{2-[(2,4,4-триметил-4Н-3,1-бензоксазин-5-ил)окси]-5-пиримидинил}-2,4имидазолидиндион;
5.5- диметил-3-[2-(7 -метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)оксипиримидин-5 ил]имидазолидин-2,4-дион;
3-[2-(3,3-диметилизохроман-5-ил)оксипиримидин-5-ил]-5,5-диметил-имидазолидин-2,4-дион;
5.5- диметил-3-[2-(7-метилспиро[1Н-изобензофуран-3,1'-циклобутан]-4-ил)оксипиримидин-5ил]имидазолидин-2,4-дион;
(5К)-5-этил-3-[2-(7 -метилспиро [2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-ил)оксипиримидин-5ил]имидазолидин-2,4-дион;
(5К)-5-этил-3-[6-(7-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-ил)окси-3 пиридил]имидазолидин-2,4-дион;
(5К)-5-этил-3-{6-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндион;
(5К)-5-этил-3-{2-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-2,4имидазолидиндион;
(5К)-5-этил-5-метил-3-[6-(7-метилспиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ил)окси-3пиридил]имидазолидин-2,4-дион;
(5К)-3-[6-(3,3-диметилизохроман-5-ил)окси-3-пиридил]-5-этил-5-метил-имидазолидин-2,4-дион;
(5К)-3-[6-[(3,3-диэтил-1Н-изобензофуран-4-ил)окси]-3-пиридил]-5-этил-5-метил-имидазолидин-2,4дион;
(5К)-5-этил-5-метил-3-[6-[(2,4,4-триметил-3,1-бензоксазин-5-ил)окси]-3-пиридил]имидазолидин2.4- дион;
(5К)-3-{6-[(3,3-диметил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-этил-5-метил-2,4- 9 023768 имидазолидиндион;
5,5-диметил-3-[6-(7 -метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)окси-3 пиридил] имидазолидин-2,4 -дион и их фармацевтически приемлемые соли.
Во избежание сомнений, воплощения любого аспекта соединений по изобретению можно объединять с любым воплощением другого аспекта соединений по изобретению для создания дополнительного воплощения.
Термин галогено или галоген, как он использован здесь, относится к атому фтора, хлора, брома или йода. Конкретные примеры галогена представляют собой фтор и хлор, особенно фтор.
Когда соединение содержит С1-4алкильную группу, отдельно или как часть большей группы, например С1-4алкокси, алкильная группа может быть прямой, разветвленной, циклической или представлять их комбинацию. Примеры С1-4алкила представляют собой метил, этил, н-пропил, изопропил, нбутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, циклопропил и циклобутил. Конкретная группа репрезентативных С1-4алкильных групп включает метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил. Пример С1-4алкокси представляет собой метокси.
Термин галоген-С1-4алкил, как он использован здесь, включает прямые, разветвленные или циклические алкильные группы, содержащие 1-4 атома углерода, замещенные одним или более чем одним атомом галогена, например фторметил, дифторметил и трифторметил. Конкретная репрезентативная группа галоген-С1-4алкила включает метильные и этильные группы, замещенные атомами галогена в количестве от одного до трех, в частности атомами фтора в количестве от одного до трех.
Термин галоген-С1-4алкокси, как он использован здесь, включает прямые, разветвленные или циклические алкоксигруппы, содержащие 1-4 атома углерода, замещенные одним или более чем одним атомом галогена, например фторметокси, дифторметокси и трифторметокси. Конкретная репрезентативная группа галоген-С1-4алкокси включает группы метокси и этокси, замещенные атомами галогена в количестве от одного до трех, в частности атомами фтора в количестве от одного до трех.
Термин 5- или 6-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл с по меньшей мере одним атомом О включает, например, фуран, оксазол, изоксазол, оксадиазол, тетрагидрофуран, пиран, тетрагидропиран, диоксолан, диоксан, морфолин и оксазолин.
Следует понимать, что для применения в медицине соли соединений формулы (1а) должны быть фармацевтически приемлемыми. Подходящие фармацевтически приемлемые соли очевидны специалистам в данной области техники. Фармацевтически приемлемые соли включают те, которые описаны Вегде, В1дЬ1еу аий МоикЬоике I. РЬагт. δοί. (1977), 66, р.1-19. Такие фармацевтически приемлемые соли включают соли присоединения кислоты, образованные с неорганическими кислотами, например соляной, бромисто-водородной, серной, азотной или фосфорной кислотой, и органическими кислотами, например янтарной, малеиновой, уксусной, фумаровой, лимонной, винной, бензойной, паратолуолсульфоновой, метансульфоновой или нафталинсульфоновой кислотой. Другие соли, например, оксалаты или формиаты, могут быть использованы, например, при выделении соединений формулы (1а) и включены в объем данного изобретения.
Некоторые соединения формулы (1а) могут образовывать соли присоединения кислоты с одним или более чем одним эквивалентом кислоты. Настоящее изобретение включает в своем объеме все возможные стехиометрические и нестехиометрические формы.
Соединения формулы (1а) могут быть получены в кристаллической или некристаллической форме и, в случае кристаллической формы, могут быть возможно сольватированы, например, в виде гидрата.
Следует понимать, что в изобретении раскрыты фармацевтически приемлемые производные соединений формулы (1а).
Фармацевтически приемлемое производное, как используют здесь, включает любые фармацевтически приемлемые сложный эфир или соль такого сложного эфира соединения формулы (1а), которые после введения реципиенту способны давать (прямо или опосредованно) соединение формулы (1а) или его активные метаболит или остаток.
Следует понимать, что настоящее изобретение охватывает все изомеры формулы (1а) и их фармацевтически приемлемые производные, включая все геометрические, таутомерные и оптические формы и их смеси (например, рацемические смеси). Когда в соединениях формулы (1а) присутствуют дополнительные хиральные центры, настоящее изобретение включает в своем объеме все возможные диастереоизомеры, в том числе их смеси. Разные изомерные формы могут быть выделены или отделены друг от друга общепринятыми способами, или любой данный изомер может быть получен общепринятыми способами синтеза либо стереоспецифическим или асимметрическим синтезом.
Изобретение также включает меченные изотопами соединения, которые идентичны описанным в формуле (1а), но фактически один или более атомов заменены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличные от атомной массы или массового числа, наиболее часто обнаруживаемых в природе. Примеры изотопов, которые могут быть введены в соединения по изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фтора, йода и хлора, такие как Н, С, С, Ρ, I или I. Еще одним изотопом, представляющим интерес, является 13С.
- 10 023768
Соединения по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений, которые содержат указанные выше изотопы и/или другие изотопы других атомов, входят в объем настоящего изобретения. Меченные изотопами соединения по настоящему изобретению, например в которые включены радиоактивные изотопы, такие как 3Н или 14С, полезны в анализах распределения лекарственного средства и/или вещества в тканях. Тритированные, т.е. 3Н, и углерод-14, т.е. 14С, изотопы являются особенно предпочтительными благодаря легкости их получения и обнаружения. Изотопы ПС и 18Р особенно полезны в РЕТ (позитронно-эмиссионной томографии).
Поскольку соединения формулы (1а) предназначены для применения в фармацевтических композициях, следует понимать, что каждое из них предложено в по существу чистой форме, например со степенью чистоты по меньшей мере 60%, более подходящим образом по меньшей мере 75% и предпочтительно по меньшей мере 85%, особенно по меньшей мере 98% (% даны по массе). Неочищенные препараты соединений могут быть использованы для получения более чистых форм, использованных в фармацевтических композициях.
Согласно дополнительному аспекту настоящего изобретения, раскрыт способ получения соединений формулы (1а) и его производных. Следующие схемы описывают подробности некоторых путей синтеза соединений по изобретению. На следующих схемах реакционноспособные группы могут быть защищены с помощью защитных групп и подвергнуты снятию защиты согласно хорошо известным методикам.
В общем, соединения формулы (1а) могут быть получены согласно методикам органического синтеза, хорошо известным специалистам в данной области техники, а также репрезентативными способами, изложенными ниже в примерах и их модификациях.
Соединения формулы (1а) и его соли и сольваты могут быть получены общими способами, изложенными ниже. В следующем описании группы Α, Κι, К2, X, Υ, К3, К и К5 имеют значения, как они определены выше для соединений формулы (1а), если не указано иное.
Стадия (2): соединения формулы (1а) могут быть получены путем циклизации соединений формулы (II) в растворителе, например дихлорметане, с карбонилирующим агентом, например трифосгеном, предпочтительно предварительно разбавленным в том же растворителе и добавленным во второй раз при 0°С в присутствии основания, например триэтиламина. В некоторых случаях этилацетат может быть использован в качестве растворителя. Возможно, каталитическое количество ИМАР может быть добавлено.
Стадия (1): соединения формулы (II) могут быть получены из соединения формулы (III) путем удаления ВОС-защитной группы в кислых условиях, например ТФУ в растворителе, например дихлорметане, при приблизительно 0°С или комнатной температуре (КТ).
Соединения формулы (Ш), где X и Υ оба представляют собой Ν, или X представляет собой С и Υ представляет собой Ν, или X представляет собой N и Υ представляет собой С, а К4 и К5 оба не представляют собой Н, могут быть получены путем нуклеофильного ароматического замещения. В данной реакции галоген-пиридильное или галоген-пиримидильное производное формулы (VII), где, как правило, Ζ представляет собой С1, и фенол формулы (IX) подвергают взаимодействию в присутствии основания, такого как карбонат калия, в подходящем растворителе, например в Ν,Ν-диметилформамиде или в ацетонитриле, при обычном нагревании или микроволновом нагревании.
- 11 023768
Стадия (3): соединения формулы (1а), где К4 и К5 оба не представляют собой Н, могут быть получены путем взаимодействия мочевины типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, и основания, такого как метилат натрия, в растворителе, таком как метанол, при температуре в диапазоне от 0 до 60°С.
Стадия (2): мочевинный продукт стадии (2), как показано выше, может быть получен путем взаимодействия анилинов формулы (IV) и аминоэфиров (гидрохлоридная соль) формулы (XII) в подходящем растворителе, например дихлорметане или этилацетате, с карбонилирующим агентом, например трифосгеном, предпочтительно предварительно разбавленным в том же растворителе при 0°С в присутствии основания, например триэтиламина или диизопропилэтиламина, при температуре в диапазоне от 0 до 60°С, возможно с добавлением каталитического или стехиометрического количества ΌΜΆΡ.
Стадия (1): аминоэфиры (гидрохлоридная соль) формулы (XII) (если не имеются в продаже) могут быть получены из имеющихся в продаже аминокислот (гидрохлоридная соль) формулы (XIII) путем взаимодействия с метанолом в присутствии каталитического или стехиометрического количества тионилхлорида при температуре в диапазоне от комнатной температуры до температуры дефлегмации.
Стадия (1): соединения формулы (II) могут быть получены из анилинов формулы (IV) и аминокислот (в виде свободного основания или гидрохлоридной соли) формулы (VI) путем амидного сочетания в присутствии агента сочетания, например Т3Р, в растворителе, таком как этилацетат, ацетонитрил или их смесь.
Стадия (2): соединения формулы (III) могут быть получены из анилинов формулы (IV) и Νзащищенных аминокислот формулы (V) путем амидного сочетания в присутствии основания, например ΌΓΡΕΑ, и агента сочетания, например НАТИ, ТВТИ, в растворителе, таком как Ν,Ν-диметилформамид.
Стадия (1): некоторые Ν-Вос-защищенные аминокислоты формулы (V) имеются в продаже, например ^{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-2-метилаланин, например от А1бпс1г N-{[(1,1диметилэтил)окси]карбонил}-Э-аланин, например от А1бпс1г (2К)-2-({[(1,1диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановая кислота, например от ВасНсш ИК Ыб, N-{[(1,1диметилэтил)окси]карбонил}-Э-изовалин, например от №ща5С & Со Ыб.
Ν-защищенные аминокислоты формулы (V) также могут быть получены из соединений формулы (VI), например с Вос-ангидридом, в присутствии основания, например водного Ν;·ιΗί'Ό3, водного гидроксида натрия, в растворителе, таком как ТНР, метанол, диоксан. Многие описания доступны из литера- 12 023768 туры (например, ТсфаНсПгоп. 2006, 62(42), 9966-9972).
Анилины формулы (IV) могут быть получены из нитросоединений (VII). Подходящие условия взаимодействия для превращения (VII) в (IV) представляют собой, например восстановление в присутствии порошка Ре и хлорида аммония в растворителе, таком как смесь ТНР/вода, например при комнатной температуре;
восстановление гидратом хлорида олова в растворителе, таком как этанол, при нагревании, например при дефлегмации.
Анилины формулы (Ша), где К2 представляет собой Н, С1-4алкил, С3-С4спирокарбоцикл и К3 представляет собой Н, С1-4алкил, и ^,Υ) не представляют собой (Ν,Ν), могут быть получены из нитросоединений (VII;·!) при условиях, описанных на схеме 3, или также при следующих условиях:
восстановление гидратом гидразина и каталитическим количеством Ρά/С в растворителе, таком как этанол, при нагревании, например при дефлегмации.
Соединения формулы (^ГЪ), где X и Υ оба представляют собой С или (X представляет собой С, Υ представляет собой Ν) или (X представляет собой Ν, Υ представляет собой С), могут быть получены путем нуклеофильного ароматического замещения. В этом взаимодействии используют нитропроизводное формулы (УШЪ), где Ζ представляет собой Р (обычно когда [X представляет собой С, Υ представляет собой С]) или Ζ представляет собой С1 (обычно когда [X представляет собой Ν, Υ представляет собой С] или [X представляет собой С, Υ представляет собой Ν]) и фенол формулы (IX) в присутствии основания, такого как карбонат калия в растворителе, например в Ν,Ν-диметилформамиде или в ацетонитриле, при обычном или микроволновом нагревании.
Соединения формулы (УПс), где X и Υ оба представляют собой Ν, могут быть получены путем нуклеофильного ароматического замещения из фенола (IX) и нитросоединения (УШс), где обычно Ζ представляет собой С1, при комнатной температуре с использованием основания, такого как карбонат калия, в растворителе, таком как Ν,Ν-диметилформамид. Еще один подходящий растворитель представляет собой ацетонитрил.
Схема 6
Стадия (3): фенол формулы (Ка), соответствующий соединению формулы (IX), где К1 представляет собой Н и А представляет собой гетероцикл, показанный на схеме 6, может быть получен путем внутримолекулярной реакции из соединений формулы (X) в присутствии каталитического количества АиС13 в ацетонитриле при комнатной температуре или каталитическом количестве Р1С12 в ацетоне при нагревании (как описано в 1оитиа1 о£ Атепсап СНет1са1 8ос1е1у 2003, 125, 5757-5766).
Стадия (2): соединение формулы (X) может быть получено из соединения формулы (XI) способом,
- 13 023768 аналогичным описанному в 1оигпа1 о£ Атепсап СЪетюа1 8ос1с1у 2003, 125, 5757-5766, путем нуклеофильного замещения в присутствии основания, такого как гидрид натрия, в растворителе, например ΌΜΡ, при добавлении во второй раз электрофила, например 3-бром-1-пропина.
Стадия (2): фенолы формулы (1ХЬ), соответствующие соединениям формулы (IX), где К1 представляет собой Н и А представляет собой гетероциклы, показанные на схеме 7 (Кб означает Ме или ΕΙ), могут быть получены с использованием соответствующих соединений формулы (XII) в присутствии кислых условий, таких как водный раствор НС1 в растворителе, таком как метанол.
Стадия (1): соединения формулы (XII) могут быть получены путем циклизации соединений формулы (XIII) с использованием основания, такого как пВиЫ, в растворителе, таком как ТНР, например при 0°С, добавления во второй раз 4-метилбензолсульфонилхлорида, например при 0°С, а затем второго эквивалента основания, такого как пВиЫ, например при температуре от 0°С до комнатной температуры, и остановки реакции добавлением разбавленной протонсодержащей кислотой, такой как НС1.
Возможно, две стадии (1) и (2) могут быть осуществлены в однореакторном процессе.
Стадия (1): соединение формулы ^Ша), где Кб представляет собой Ме1, могут быть получены непосредственно из соединения формулы (XV):
путем литиирования с использованием, например, пВиЫ, в растворителе, таком как гексан, в присутствии ΤΜΕΌΑ при температуре от комнатной температуры до 60°С;
путем добавления во второй раз ацетальдегида, например при -78°С, и нагревания этой реакционной смеси, например, до комнатной температуры.
Стадия (3): соединение формулы ^ШЪ), где Кб представляет собой ΕΙ, могут быть получены из защищенного соединения(XIV):
путем литиирования с использованием, например, пВиЫ, в растворителе, таком как гексан, при комнатной температуре;
путем добавления во второй раз пропаналя, например при 0°С, и нагревания этой реакционной смеси, например, до комнатной температуры.
Стадия (2): соединения формулы (XIV) могут быть получены из соединения формулы (XV) путем силилирования с использованием, например, хлор(1,1-диметилэтил)диметилсилан-1Н-имидазола в растворителе, таком как дихлорметан, при комнатной температуре.
Схема 8Ъ
Стадия (3): фенол типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, может быть получен из спирта типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, после обработки подходящей кислотой, такой как Н2§04 или пара-толилсульфоновая кислота, в подходящем растворителе, таком как этилацетат, метанол или этанол.
- 14 023768
Стадия (2): продукт стадии (2), как показано выше, может быть получен из защищенного соединения типа, образуемого на стадии (2), как показано выше:
путем литиирования с использованием, например пВиЫ, в растворителе, таком как гексан, при комнатной температуре (возможно с добавлением СеС13, предварительно перемешанного в безводном ТНР при комнатной температуре в атмосфере аргона или водорода);
путем добавления на второй стадии циклобутанона, например при 0°С, и нагревания реакционной смеси, например до комнатной температуры.
Стадия (1): продукт стадии (1), как показано выше, может быть получен из исходного спирта путем силилирования с использованием, например, хлор(1,1-диметилэтил)диметилсилан-1Н-имидазола в растворителе, таком как дихлорметан, при комнатной температуре.
Стадия (2): соединения формулы (XV) могут быть получены из сложных эфиров формулы (XVI) с использованием подходящего восстановителя, типично ЫЛ1Н4, в растворителе, таком как тетрагидрофуран, при температуре, такой как 0°С.
Стадия (1): соединения формулы (XVI) могут быть получены из фенолов формулы (XVII) с использованием хлор(метилокси)метана, основания, такого как ОГРЕЛ, в растворителе, таком как дихлорметан, при температуре, например, от 0°С до комнатной температуры.
Схема 9Ь
Стадия (2): продукт стадии (2), как показано выше, может быть получен из сложных эфиров типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, с использованием подходящего восстановителя, типично ЫЛ1Н4, в растворителе, таком как тетрагидрофуран, при температуре, такой как 0°С или комнатная температура.
Стадия (1): продукт стадии (1), как показано выше, может быть получен из исходного фенола с использованием хлор(метилокси)метана, основания, такого как NаН, в растворителе, таком как ΌΜΡ или ТНР, при температуре, например от 0°С до комнатной температуры.
Возможно, две стадии (1) и (2) могут быть осуществлены в однореакторном сосуде.
Стадия (3): фенолы формулы (Кс), соответствующие соединениям формулы (IX), где А представляет собой гетероцикл, показанный на схеме 10, К1 представляет собой Н или метил, К7 представляет собой метил, этил или изопропил, могут быть получены из соединения (XVIII) путем циклизации в присутствии избытка основания, такого как пиридин, при нагревании, например при дефлегмации.
Стадия (2): соединения формулы (XVIII) могут быть получены из соединений формулы (XIX) путем ацилирования, например, уксусным ангидридом при комнатной температуре.
Стадия (1): соединения формулы (XIX) могут быть получены из соединений формулы (XX) с гидрохлоридом гидроксиламина с использованием основания, такого как ацетат натрия, при нагревании, например при дефлегмации, в растворителе, таком как смесь этанол/вода, или с использованием пиридина в качестве растворителя и основания.
- 15 023768
Из числа кетонов формулы (XX), 1-(2,6-дигидроксифенил)этанон имеется в продаже, например от А1бпс1г Кетоны формулы (ХХа), соответствующие кетонам формулы (XX), где К7 представляет собой Ме, могут быть получены из соединений формулы (XXI). Соединения формулы (XXI) подвергают:
сначала бис-ацилированию с использованием, например, уксусного ангидрида в присутствии основания, например триэтиламина, в растворителе, например дихлорметане;
затем ацилированию Фриделя-Крафтса с внутримолекулярным переносом ацила в присутствии кислоты Льюиса, такой как А1С13, в растворителе, таком как хлорбензол, при нагревании, например при 90°С.
Стадия (3): кетоны формулы (Υ^), соответствующие кетонам формулы (XX), где К7 представляет собой Εΐ или гРг, и Κι представляет собой Н, могут быть получены из соединений формулы (XXII) путем удаления двух защитных групп в кислых условиях, таких как водный раствор НС1, при нагревании, например при дефлегмации, в растворителе, таком как метанол.
Стадия (2): соединения формулы (XXII) могут быть получены из соединений формулы (XXIII) путем литиирования с использованием, например, ВиЫ в растворителе, таком как тетрагидрофуран, при, например, комнатной температуре;
добавления во второй раз подходящего ангидрида или ацилхлорида, например при -78°С.
Стадия (1): соединение формулы (XXIII) может быть получено из соединения формулы (XXIа), соответствующего соединению формулы (XXI), где Κ, представляет собой Н, с использованием основания, такого как гидрид натрия, в растворителе, таком как ΌΜΡ, например при 0°С, с добавлением во второй раз хлор(метилокси)метана, например при температуре от 0°С до комнатной температуры.
Схема 13а
Стадия (3): фенол формулы (Кб), соответствующий соединению формулы (IX), где Κ! представляет собой Н и А представляет собой гетероцикл, показанный на схеме 13а, может быть получен из Ометокси-предшественника (XXIV) путем реакции деметилирования с использованием, например, ВВг3 в растворителе, таком как дихлорметан, при 0°С.
Стадия (2): соединение формулы (XXIV) может быть получено путем циклизации из соединения формулы (XXV) с использованием, например, трибутилстаннана и ΑΣΒΝ в растворителе, таком как толуол, например при дефлегмации.
Стадия (1): соединение формулы (XXV) может быть получено из соединения формулы (XXVI) в присутствии основания, такого как гидрид натрия, в растворителе, таком как ΌΜΡ, при добавлении во второй раз соединения формулы (XXVII), где Ζ представляет собой С1 или Вг, например при комнатной температуре.
- 16 023768
Схема 13Ъ
Стадия (4): фенол типа, образуемого на стадии (4), как показано выше, может быть получен из ΤίΡδ-защищенных соединений типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, путем удаления защитной групп в присутствии источника фторида, такого как фторид тетрабутиламмония, в подходящем растворителе, таком как ТНР, при комнатной температуре.
Стадия (3): соединение типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, может быть получено путем обмена металл-галоген с использованием бутиллития, или втор-бутиллития, или трет-бутиллития в подходящем растворителе, таком как ТНР, или Εΐ2Ο, или н-гексан, при температуре в диапазоне от -78°С до комнатной температуры и путем добавления на второй стадии метилирующего агента, такого как йодметан, при температуре в диапазоне от -78°С до комнатной температуры.
Стадия (2): соединение типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, может быть получено из защищенного фенола типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, путем использования бромирующего агента, такого как ΝΒ8, в подходящем растворителе, таком как ΌΜΕ, или ацетонитрил, или ТНР, при комнатной температуре.
Стадия (1): соединение типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, может быть получено из исходного фенола путем силилирования с использованием, например, хлортриизопропилсилана в присутствии основания, такого как бутиллитий, в растворителе, таком как ТНР, при температуре в диапазоне от 0°С до комнатной температуры.
Стадия (3): соединение формулы (XXVI) может быть получено из соединения формулы (XXVII) путем удаления защитной группы в кислых условиях с использованием, например, газообразного НС1 в растворителе, таком как дихлорметан.
Стадия (2): соединение формулы (XXVII) может быть получено из соединения формулы (XXVIII) путем литиирования с использованием, например, ВиЫ в растворителе, таком как тетрагидро фуран, при температуре, например, -78°С; путем добавления во второй раз раствора йода, например при -70°С, и оставления реакционной смеси при комнатной температуре.
Стадия (1): соединение формулы (XXVIII) может быть получено из соединения формулы (XXIX) путем защиты фенола с использованием основания, например гидрида натрия, в растворителе, например тетрагидрофуране, и добавления во второй раз бромметилметилового эфира, например при комнатной температуре.
Стадия (4): альтернативно, фенол формулы (IXά), соответствующий соединению формулы (IX), где К1 представляет собой Н и А представляет собой гетероцикл, показанный на схеме 15, может быть получен из соединения формулы (XXX) с использованием гидроксидного основания, например гидроксида натрия, в растворителе, таком как метанол, например, при комнатной температуре.
Стадия (3): соединение формулы (XXX) может быть получено из соединения формулы (XXXI) путем циклизации в условиях, показанных на схеме 13а на стадии (2).
Стадия (2): соединение формулы (XXXI) может быть получено из соединения формулы (XXXII) с использованием основания, такого как карбонат калия, и электрофила, такого как 3-бром-2-метил-1пропен, в растворителе, таком как ацетонитрил, например, при комнатной температуре.
Стадия (1): соединение формулы (XXXII) может быть получено из соединения формулы (XXXIII) путем ацетилирования с использованием, например, уксусного ангидрида, основания, например триэтиламина, в растворителе, например дихлорметане, например, при комнатной температуре.
- 17 023768
Схема 16
Стадия (6): фенол формулы (Ке), соответствующий соединению формулы (IX), где К! представляет собой Н или метил, и А представляет собой гетероцикл, показанный на схеме 16, может быть получен из соединения формулы (XXXIV) путем удаления МОМ-защитной группы в кислых условиях с использованием, например, водной НС1 в растворителе, таком как метанол, при нагревании, например при 50°С.
Стадия (5): соединение формулы (XXXIV) может быть получено из соединения формулы (XXXV) путем реакции Мицунобу с использованием трифенилфосфина в растворителе, таком как тетрагидрофуран, и с добавлением диизопропилазодикарбоксилата при комнатной температуре.
Стадия (4): соединение формулы (XXXV) может быть получено из соединения формулы (XXXVI) с последующим снятием защиты в кислых условиях, таких как 2н. НС1 в воде в этаноле, выпариванием растворителя и использования сильного основания, такого как NаН, в растворителе, таком как ТНР, при 0°С, добавлением М0М-С1 при 0°С, восстановлением алюмогидридом лития при 0°С.
Стадия (3): соединение формулы (XXXVI) может быть получено из соединения формулы (XXXVII) с использованием реакции циклопропанирования Кори-Чайковского, осуществляемой при комнатной температуре. Для предварительного образования метилида диметилоксосульфония может быть использован йодид триметилсульфоксония в присутствии основания, такого как NаН, в растворителе, таком как ИМ80. причем соединение формулы (XXXVII) (предварительно разбавленное в ИМ80) добавляют во второй раз.
Стадия (2): соединение формулы (XXXVII) может быть получено из соединения формулы (XXXVIII) с использованием реакции Виттига. С целью предварительного образования илида, соль фосфония, такая как бромид метилтрифенилфосфония, и сильное основание, такое как 1<НМО8, могут быть использованы в растворителе, таком как ТНР, при температуре от 0°С до комнатной температуры. Соединение формулы (XXXVIII), предварительно разбавленное в растворителе, таком как ТНР, может быть добавлено во второй раз при 0°С.
Стадия (1): соединение формулы (XXXVIII) может быть получено из соединения (XXIII) путем литиирования с использованием ВиЫ в растворителе, таком как гексан, при комнатной температуре, причем этот раствор добавляют во второй раз при -78°С к электрофилу, например этилхлор(оксо)ацетату (предварительно разбавленному, например в ТНР).
Соединения формулы (XXIII) могут быть получены способом, аналогичным показанному на схеме 12 (стадия 1).
- 18 023768
Схема 17а
Стадия (7): фенол формулы (IX!), соответствующий соединению формулы (IX), где К1 представляет собой Н, и А представляет собой гетероцикл, показанный на схеме 17а, может быть получен из соединения формулы (XXXIX) путем удаления МОМ-защитной группы в кислых условиях с использованием, например, водного НС1 в растворителе, таком как метанол, при нагревании, например при 60°С.
Стадия (6): соединение формулы (XXXIX) может быть получено путем циклизации соединений формулы ^Ь) с использованием основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как ТНР, например при 0°С, с добавлением во второй раз метансульфонилхлорида и в третий раз сильного основания, такого как 2-метил-2-пропанолат калия.
Стадия (5): соединение формулы ^Ь) может быть получено путем гидрирования смеси соединений формулы ^О) и в присутствии катализатора, такого как Ρά/С, при комнатной температуре.
Стадия (4): Смесь соединения формулы (КЫ) и ^Ь) может быть получена из соединения формулы (КЬИ) путем взаимодействия с восстановителем, таким как алюмогидрид лития, в растворителе, таком как ТНР, при 0°С.
Стадия (3): соединение формулы (X^II) может быть получено из фенола формулы (X^III) с использованием основания, такого как NаН, и хлор(метилокси)метана, в растворителе, таком как ΌΜΡ, например при температуре от 0°С до комнатной температуры. Альтернативно, используемый растворитель может представлять собой ЭСМ и с основанием, таким как ΌΣΡΕΑ или ТЕА.
Стадия (2): фенол формулы (X^III) может быть получен из соединения формулы (X^IV) путем деметилирования с использованием, например, трибромида бора в растворителе, таком как дихлорметан, при температуре от 0°С до комнатной температуры.
Стадия (1): соединение формулы (X^IV) может быть получено из соединения формулы (X^V) путем взаимодействия с пропионовым ангидридом в присутствии основания, такого как карбонат калия, при нагревании, например при 70°С, в растворителе, таком как ΌΜΡ, с последующим добавлением воды и нагреванием, например при 120°С.
Схема 17Ь
Стадия (7): фенол типа, образуемого на стадии (7), как показано выше, где К1 представляет собой Н, и А представляет собой гетероцикл, показанный на схеме 17Ь, может быть получен из соединения типа, образуемого на стадии (6), как показано выше, путем удаления МОМ-защитной группы в кислых условиях с использованием, например, водной НС1 в растворителе, таком как метанол, при нагревании, например при 60°С.
Стадия (6): соединение типа, образуемого на стадии (6), как показано выше, может быть получено путем циклизации соединения типа, образуемого на стадии (ν), как показано выше, с использованием основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как ТНР, например при 0°С, с добавлением во второй раз метансульфонилхлорида и в третий раз сильного основания, такого как 2-метил-2-пропанолат калия.
- 19 023768
Альтернативно, могут быть использованы условия Мицунобу.
Стадия (5): соединение типа, образуемого на стадии (ν), как показано выше, может быть получено путем гидрирования смеси соединения типа, образуемого на стадии (ίν), как показано выше, в присутствии катализатора, такого как РД/С, при комнатной температуре.
Стадия (4): Смесь соединений типа, образуемого на стадии (4), как показано выше, может быть получена из соединения типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, путем взаимодействия с восстановителем, таким как алюмогидрид лития, в растворителе, таком как ТНР, при 0°С.
Стадия (3): соединение типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, может быть получено из фенола типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, с использованием основания, такого как NаН, и хлор(метилокси)метана в растворителе, таком как ЭМР или ТНР, например при температуре от 0°С до комнатной температуры.
Стадия (2): фенол типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, может быть получен из соединения типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, путем деметилирования с использованием, например, трибромида бора в растворителе, таком как дихлорметан, при температуре от 0°С до температуры дефлегмации.
Стадия (1): соединение типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, может быть получено из исходного спирта путем взаимодействия с уксусным ангидридом в присутствии основания, такого как карбонат калия, при нагревании, например при 70°С, в растворителе, таком как ЭМР, с последующим добавлением воды и нагреванием, например при 120°С.
Стадия (4): фенол формулы (1Хд), соответствующий соединению формулы (IX), где К! представляет собой Н, и А представляет собой гетероцикл, показанный на схеме 18а, может быть получен из соединения (ХЬУ1) путем удаления МОМ-защитной группы, как описано выше на схеме 16 (стадия 6).
Стадия (3): соединение формулы (ХЬУ1) может быть получено из соединения формулы (ХЬУП) путем реакции Мицунобу с использованием трифенилфосфина в растворителе, таком как тетрагидрофуран, и добавления бис-(1-метилэтил)-(Е)-1,2-диазендикарбоксилата при комнатной температуре.
Стадия (2): соединение формулы (ХЬУП) может быть получено из соединения формулы (ХЬУШ) путем взаимодействия с восстановителем, таким как алюмогидрид лития, в растворителе, таком как ТНР, при 0°С.
Стадия (1): соединение формулы (ХЬУШ) может быть получено из соединения формулы (ХЬП) путем реакции циклопропанирования Кори-Чайковского, осуществляемой при комнатной температуре, как описано выше на схеме 16 (стадия (3)).
Схема 18Ь
Стадия (4): фенол типа, образуемого на стадии (ίν), как показано выше, может быть получен из соединения типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, путем удаления МОМ-защитной группы, как описано выше на схеме 16 (стадия 6).
- 20 023768
Стадия (3): соединение типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, может быть получено из соединения типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, путем реакции Мицунобу с использованием трифенилфосфина в растворителе, таком как тетрагидрофуран, и добавления бис-(1метилэтил)-(Е)-1,2-диазендикарбоксилата при комнатной температуре.
Стадия (2): соединение типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, может быть получено из соединения типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, путем взаимодействия с восстановителем, таким как алюмогидрид лития, в растворителе, таком как ТНР, при 0°С.
Стадия (1): соединение типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, может быть получено из исходного соединения путем реакции циклопропанирования Кори-Чайковского, осуществляемой при комнатной температуре, как описано выше на схеме 16 (стадия (3)).
Схема 19а
Стадия (6): фенол формулы (4X11), соответствующий соединению формулы (IX), где Κι представляет собой Н, и А представляет собой гетероцикл, показанный на схеме 19а, может быть получен из соединения (X^IX) путем удаления МОМ-защитной группы, как показано выше на схеме 16 (стадия 6).
Стадия (5): соединение формулы (X^IX) может быть получено путем циклизации соединения формулы (Ь) с использованием основания, такого как ВиЫ, в растворителе, таком как гексан, например при 0°С, добавления во второй раз 4-метилбензолсульфонилхлорида, например при 0°С, затем в третий раз второго эквивалента основания, такого как иВиЫ, например при 0°С.
Стадия (4): соединение формулы (Ь) может быть получено из соединения формулы (ЬП) последовательно путем добавления восстановителя, такого как алюмогидрид лития, в растворителе, таком как ТНР, например при 0°С, добавления, после обработки и выпаривания растворителя, десилилирующего агента, такого как ТВАР, в растворителе, таком как ТНР.
Стадия (3): соединение формулы (Ы) может быть получено из соединения формулы (ЬП) путем реакции циклопропанирования Кори-Чайковского, осуществляемой при комнатной температуре, как описано выше на схеме 16 (стадия (3)).
Стадия (2): соединение формулы (ЬП) может быть получено из соединения формулы (ЬШ) путем олефинизации, например, раствором диметилтитаноцена, в растворителе, таком как толуол (например, 9% мас./мас.), при нагревании, например при 90°С, в растворителе, таком как толуол. Раствор диметилтитаноцена в толуоле может быть получен путем взаимодействия дихлорида титаноцена с, например, раствором метиллития при -10°С.
Стадия (1): соединение формулы (ЬШ) может быть получено из соединения (XIV) путем литиирования с использованием ВиЫ в растворителе, таком как гексан, при комнатной температуре, причем этот раствор добавляли во второй раз при -78°С к электрофилу, например этилхлор(оксо)ацетату (предварительно разбавленному, например в ТНР).
- 21 023768
Стадия (4): фенол типа, образуемого на стадии (4), как показано выше, может быть получен из спирта типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, после обработки подходящей кислотой, такой как Н28О4 или пара-толилсульфоновая кислота, в подходящем растворителе, таком как этилацетат, ацетонитрил, метанол или этанол.
Стадия (3): соединение типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, может быть получено из соединений типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, путем взаимодействия с этилбромидом магния в количестве от 2 до 10 эквивалентов в подходящем растворителе, таком как ТНР, при температуре в диапазоне от -78°С до комнатной температуры.
Стадия (2): фенол типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, может быть получен из соединения типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, путем удаления МОМ-защитной группы с использованием ТРА в подходящем растворителе, таком как ЭСМ, при температуре в диапазоне от 0°С до комнатной температуры.
Стадия (1): Ссоединение типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, может быть получено из исходного соединения путем литиирования с использованием ВиЫ в растворителе, таком как гексан, при комнатной температуре, причем этот раствор добавляли во второй раз при -78°С к электрофилу, например этилхлорформиату (предварительно разбавленному, например в ТНР).
Схема 20
Стадия (4): фенол типа, образуемого на стадии (4), как показано выше, может быть получен из соединения типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, путем удаления МОМ-защитной группы, как описано выше на схеме 16 (стадия 6).
Стадия (3): соединение типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, может быть получено путем циклопропанирования (условия Симмонса-Смита) ненасыщенного соединения типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, с использованием диэтилцинка и дийодметана (возможно добавляют 2,4,6-трихлорфенол) в растворителе, таком как дихлорметан, при температуре в диапазоне от -40°С до комнатной температуры.
Стадия (2): соединение типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, может быть получено с использованием реакции типа Виттига, как показано на схеме 16 (стадия 2).
Стадия (1): соединение типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, может быть получено из исходного фенола с использованием основания, такого как ΝαΗ, и хлор(метилокси)метана в растворителе, таком как ЭМР или ТНР, например от 0°С до комнатной температуры.
- 22 023768
Схема 21
Стадия (2): фенол типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, может быть получен из лактона типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, с использованием бромида метилмагния в подходящем растворителе, таком как ТНР или диэтиловый эфир, при температуре в диапазоне от -78°С до комнатной температуры. Полученное соединение может быть обработано подходящей кислотой, такой как Н2§04 или ТбОН, в подходящем растворителе, таком как этилацетат, или ацетонитрил, или метанол, или этанол.
Стадия (1): лактон типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, может быть получен путем взаимодействия имеющегося в продаже исходного ангидрида с восстановителем, таким как К-селектрид, в растворителе, таком как ТНР, при 0°С; с последующей МОМ-защитой с использованием основания, такого как ΌΓΡΕΑ, и хлор(метилокси)метана, в растворителе, таком как ΌΤ'Μ. например при температуре от 0°С до комнатной температуры.
Стадия (3): фенол типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, может быть получен из бороновой кислоты типа, образуемой на стадии (2), как показано выше, с использованием Н2О2 и №ГОН в подходящем растворителе, таком как ТНР, или комбинации растворителей, такой как смесь вода/ТНР, при комнатной температуре.
Стадия (2): бороновая кислота типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, может быть получена из бороновой кислоты типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, путем литиирования с использованием втор-ВиЫ в растворителе, таком как ТНР, при температуре в диапазоне от -78°С до комнатной температуры, с последующим добавлением во второй раз метилирующего агента, такого как йодметан, при температуре в диапазоне от -78°С до комнатной температуры.
Стадия (1): бороновая кислота типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, может быть получена из имеющегося в продаже 2,2-дифтор-1,3-бензодиоксола путем литиирования с использованием втор-ВиЫ в растворителе, таком как ТНР, при температуре в диапазоне от -78°С до комнатной температуры, с последующим добавлением во второй раз триметилбората.
Схема 23
О
Стадия (1): фенол типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, может быть получен из имеющегося в продаже 2,2-дифтор-1,3-бензодиоксола путем литиирования с использованием втор-ВиЫ в растворителе, таком как ТНР, при температуре в диапазоне от -78°С до комнатной температуры, с последующим добавлением во второй раз триметилбората при температуре в диапазоне от -78°С до комнатной температуры и с последующим добавлением в третий раз Н2О2 и №ЮН при комнатной температуре.
Схема 24
Стадия (4): фенол типа, образуемого на стадии (4), как показано выше, может быть получен из соединения типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, путем обработки деметилирующим агентом, таким как ВВг3, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан или дихлорэтан, при температуре в диапазоне от комнатной температуры до температуры дефлегмации.
Стадия (3): соединение типа, образуемого на стадии (3), как показано выше, может быть получено из соединения типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, путем обработки подходящей кисло- 23 023768 той, такой как полифосфорная кислота, приблизительно при подходящей температуре, такой как 110°С.
Стадия (2): соединение типа, образуемого на стадии (2), как показано выше, может быть получено из аминоспирта типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, путем обработки ацилирующим агентом, таким как ацетилхлорид, в присутствии основания, такого как триэтиламин, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, при подходящей температуре, например 0°С.
Стадия (1): спирт типа, образуемого на стадии (1), как показано выше, может быть получен из имеющегося в продаже исходного кетона путем обработки бромидом метилмагния в подходящем растворителе, таком как ΤΗΡ или диэтиловый эфир, при температуре в диапазоне от 0°С до комнатной температуры.
Схема 25
гут быть получены путем сочетания анилина (IV) и предшественника (Ы№) при нагревании, например при 150°С, в растворителе, таком как толуол.
Стадия (1): соединения формулы (Όΐν) могут быть получены из Ν-защищенной аминокислоты (V) и 2,2'-дитиодипиридина (Όν) в присутствии трифенилфосфина при комнатной температуре в растворителе, таком как ΤΗΡ.
Стадия (3): соединения формулы (VIII) могут быть получены путем взаимодействия мочевины формулы (XI) и основания, такого как метилат натрия, в растворителе, таком как метанол, при температуре в диапазоне от 0 до 60°С.
Стадия (2): соединения формулы (XI) могут быть получены путем взаимодействия имеющихся в продаже анилинов формулы (Ша), где Ζ представляет собой С1, и аминоэфиров (гидрохлоридной соли) формулы (XII) в растворителе, например дихлорметане или этилацетате, с карбонилирующим агентом, например трифосгеном, предпочтительно предварительно разбавленным в том же растворителе, в присутствии основания, например триэтиламина или диизопропилэтиламина, при температуре в диапазоне от 0 до 60°С, возможно с добавлением каталитического или стехиометрического количества ΌΜΑΡ.
Стадия (1): аминоэфиры (гидрохлоридной соли) формулы (XII) могут быть получены из имеющихся в продаже аминокислот (гидрохлоридной соли) формулы (XIII) путем взаимодействия с метанолом в присутствии каталитического или стехиометрического количества тионилхлорида при температуре в диапазоне от комнатной температуры до температуры дефлегмации.
В настоящем изобретении предложены соединения формулы ^а) или их фармацевтически приемлемые соли для применения в терапии.
Соединения формулы ^а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики заболевания или расстройства, при котором требуется модулятор Κν3.1 или Κν3.2 или Κν3.1 и Κν3.2 каналов. Модулятор Κν3.1 или Κν3.2 или Κν3.1 и Κν3.2 каналов, как используют здесь, представляет собой соединение, которое изменяет свойства этих каналов, либо положительно, либо отрицательно. Измененное свойство канала может служить шкалой наблюдаемого ответа или временного поведения канала.
Соединения по изобретению могут быть тестированы в анализе биологического примера 1 для определения их модулирующих свойств.
Заболевания или состояния, которые могут быть опосредованы модуляцией Κν3.1 и/или Κν3.2 каналов, могут быть выбраны из перечня, приведенного ниже. Номера в скобках после перечисленных заболеваний ниже указывают классификационный код согласно 4-ому изданию Руководства по диагностике и статистике психических расстройств (Όίπβηοδίία апД §1аЙ8бса1 Мапиа1 о£ Меп1а1 ЭбогДеге (ΌδΜ-Γν)), опубликованного Американской психиатрической ассоциацией, и/или 10-му изданию Международной
- 24 023768 классификации болезней (МКБ-10).
Соединения формулы 0а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики депрессии и расстройств настроения, включая эпизод глубокой депрессии, маниакальный эпизод, смешанный эпизод и гипоманиакальный эпизод; депрессивных расстройств, включая большое депрессивное расстройство, дистимическое расстройство (300.4), депрессивное расстройство неуточненное (311); биполярных расстройств, включая биполярное расстройство I типа, биполярное расстройство II типа (рекуррентные эпизоды глубокой депрессии с гипоманиакальными эпизодами) (296.89), циклотимическое расстройство (301.13) и биполярное расстройство неуточненное (296.80); других расстройств настроения, включая расстройство настроения, обусловленное соматическим заболеванием (293.83), которое включает подтипы с депрессивными симптомами, с эпизодами подобно глубокой депрессии, с маниакальными симптомами и со смешанными симптомами), вызванное приемом веществ расстройство настроения (включая подтипы с депрессивными симптомами, с маниакальными симптомами и со смешанными симптомами) и расстройство настроения неуточненное (296.90); сезонного аффективного расстройства.
Соединения формулы 0а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики шизофрении, включая подтипы, такие как параноидальный тип (295.30), дезорганизованный тип (295.10), кататонический тип (295.20), недифференцированный тип (295.90) и остаточный тип (295.60); шизофреноформного расстройства (295.40); шизоаффективного расстройства (295.70), включая подтипы, такие как биполярный тип и депрессивный тип; бредового расстройства (297.1), включая подтипы, такие как эротоманический тип, тип с манией величия, ревностный тип, персекуторный тип, соматический тип, смешанный тип и неуточненный тип; кратковременного психотического расстройства (298.8); индуцированного психотического расстройства (297.3); психотического расстройства, обусловленного соматическим заболеванием, включая подтипы с бредом и с галлюцинациями; вызванного приемом веществ психотического расстройства, включая подтипы с бредом (293.81) и с галлюцинациями (293.82); и психотического расстройства неуточненного (298.9).
Соединения формулы 0а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики тревожных расстройств, включая паническую атаку; паническое расстройство, включая паническое расстройство без агорафобии (300.01) и паническое расстройство с агорафобией (300.21); агорафобию; агорафобию без панического расстройства в анамнезе (300.22), специфическую фобию (300.29, ранее простая фобия, в том числе подтипы, такие как фобия животных, фобия естественных явлений окружающего мира, фобия вида крови, инъекции и травмы, фобия определенной ситуации и другие типы), социальную фобию (социальное тревожное расстройство, 300.23), обсессивнокомпульсивное расстройство (300.3), посттравматическое стрессовое расстройство (309.81), острое стрессовое расстройство (308.3), генерализованное тревожное расстройство (300.02), тревожное расстройство, обусловленное соматическим заболеванием (293.84), вызванное приемом веществ тревожное расстройство, вызванное разлукой тревожное расстройство (309.21), нарушения адаптации с тревогой (309.24) и тревожное расстройство неуточненное (300.00).
Соединения формулы 0а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики связанных с приемом психоактивных веществ расстройств, включая вызванные приемом веществ расстройства, такие как зависимость от вещества, пристрастие к веществу и злоупотребление веществом; вызванные приемом веществ расстройства, такие как интоксикация веществом, синдром отмены вещества, вызванный приемом веществ делирий, вызванная приемом веществ персистирующая деменция, вызванное приемом веществ персистирующее амнестическое расстройство, вызванное приемом веществ психотическое расстройство, вызванное приемом веществ расстройство настроения, вызванное приемом веществ тревожное расстройство, вызванную приемом веществ сексуальную дисфункцию, вызванное приемом веществ расстройство сна и галлюциногенное персистирующее расстройство восприятия (вспышки прошлого); связанные с приемом алкоголя расстройства, такие как алкогольная зависимость (303.90), злоупотребление алкоголем (305.00), алкогольная интоксикация (303.00), алкогольная абстиненция (291.81), интоксикация алкоголем с делирием, алкогольная абстиненция с делирием, вызванная приемом алкоголя персистирующая деменция, вызванное приемом алкоголя персистирующее амнестическое расстройство, вызванное приемом алкоголя психотическое расстройство, вызванное приемом алкоголя расстройство настроения, вызванное приемом алкоголя тревожное расстройство, вызванная приемом алкоголя сексуальная дисфункция, вызванное приемом алкоголя расстройство сна и связанное с приемом алкоголя расстройство неуточненное (291.9); связанные с приемом амфетамина (или амфетаминподобных веществ) расстройства, такие как зависимость от амфетамина (304.40), злоупотребление амфетамином (305.70), интоксикация амфетамином (292.89), синдром отмены амфетамина (292.0), интоксикация амфетамином с делирием, вызванное приемом амфетамина психотическое расстройство, вызванное приемом амфетамина расстройство настроения, вызванное приемом амфетамина тревожное расстройство, вызванная приемом амфетамина сексуальная дисфункция, вызванное приемом амфетамина расстройство сна и связанное с амфетамином расстройство неуточненное (292.9); связанные с кофеином расстройства, такие как интоксикация кофеином (305.90), вызванное приемом кофеина тревожное расстройство, вызванное приемом кофеина расстройство сна и связанное с кофеином
- 25 023768 расстройство неуточненное (292.9); связанные с приемом каннабиноидов расстройства, такие как зависимость от каннабиноидов (304.30), злоупотребление каннабиноидами (305.20), интоксикация каннабиноидов (292.89), интоксикация каннабиноидами с делирием, вызванное приемом каннабиноидов психотическое расстройство, вызванное приемом каннабиноидов тревожное расстройство и связанное с каннабиноидами расстройство неуточненное (292.9); связанные с кокаином расстройства, такие как зависимость от кокаина (304.20), злоупотребление кокаином (305.60), интоксикация кокаином (292.89), синдром отмены кокаина (292.0), интоксикация кокаином с делирием, вызванное приемом кокаина психотическое расстройство, вызванное приемом кокаина расстройство настроения, вызванное приемом кокаина тревожное расстройство, вызванная приемом кокаина сексуальная дисфункция, вызванное приемом кокаина расстройство сна и связанное с кокаином расстройство неуточненное (292.9); связанные с галлюциногенами расстройства, такие как зависимость от галлюциногенов (304.50), злоупотребление галлюциногенами (305.30), интоксикация галлюциногенами (292.89), галлюциногенное персистирующее расстройство восприятия (вспышки прошлого) (292.89), интоксикация галлюциногенами с делирием, вызванное приемом галлюциногенов психотическое расстройство, вызванное приемом галлюциногенов расстройство настроения, вызванное приемом галлюциногенов тревожное расстройство и связанное с галлюциногенами расстройство неуточненное (292.9); связанные с ингалянтами расстройства, такие как зависимость от ингалянтов (304.60), злоупотребление ингалянтами (305.90), интоксикация ингалянтами (292.89) , интоксикация ингалянтами с делирием, вызванная вдыханием ингалянтов персистирующая деменция, вызванное вдыханием ингалянтов психотическое расстройство, вызванное вдыханием ингалянтов расстройство настроения, вызванное вдыханием ингалянтов тревожное расстройство и связанное с вдыханием ингалянтов расстройство неуточненное (292.9); связанные с никотином расстройства, такие как никотиновая зависимость (305.1), синдром отмены никотина (292.0) и связанное с никотином расстройство неуточненное (292.9); связанные с опиоидами расстройства, такие как опиоидная зависимость (304.00), злоупотребление опиоидами (305.50), интоксикация опиоидами (292.89), синдром отмены опиоидов (292.0), интоксикация опиоидами с делирием, вызванное приемом опиоидов психотическое расстройство, вызванное приемом опиоидов расстройство настроения, вызванная приемом опиоидов сексуальная дисфункция, вызванное приемом опиоидов расстройство сна и связанное с опиоидами расстройство неуточненное (292.9); связанные с фенциклидином (или фенциклидинподобными веществами) расстройства, такие как зависимость от фенциклидина (304.60), злоупотребление фенциклидином (305.90) , интоксикация фенциклидином (292.89), интоксикация фенциклидином с делирием, вызванное приемом фенциклидина психотическое расстройство, вызванное приемом фенциклидина расстройство настроения, вызванное приемом фенциклидина тревожное расстройство и связанное с фенциклидином расстройство неуточненное (292.9); связанные с седативными, снотворными или анксиолитическими средствами расстройства, такие как зависимость от седативных, снотворных или анксиолитических средств (304.10), злоупотребление седативными, снотворными или анксиолитическими средствами (305.40), интоксикация седативными, снотворными или анксиолитическими средствами (292.89), синдром отмены седативных, снотворных или анксиолитических средств (292.0), интоксикация седативными, снотворными или анксиолитическими средствами с делирием, синдром отмены седативных, снотворных или анксиолитических средств с делирием, вызванная приемом седативных, снотворных или анксиолитических средств персистирующая деменция, вызванное приемом седативных, снотворных или анксиолитических средств персистирующее амнестическое расстройство, вызванное приемом седативных, снотворных или анксиолитических средств психотическое расстройство, вызванное приемом седативных, снотворных или анксиолитических средств расстройство настроения, вызванное приемом седативных, снотворных или анксиолитических средств тревожное расстройство, вызванная приемом седативных, снотворных или анксиолитических средств сексуальная дисфункция, вызванное приемом седативных, снотворных или анксиолитических средств расстройство сна и связанное с седативными, снотворными или анксиолитическими средствами расстройство неуточненное (292.9); связанное с несколькими веществами расстройство, такое как зависимость от нескольких веществ (304.80); и связанные с приемом других (или неизвестных) веществ расстройства, таких как анаболические стероиды, летучие нитраты и закись азота.
Соединения формулы (Ш) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для улучшения познававтельной способности, включая лечение нарушения познавательной способности при других заболеваниях, таких как шизофрения, биполярное расстройство, депрессия, другие психиатрические расстройства и психотические состояния, ассоциированные с нарушением познавательной способности, например болезнь Альцгеймера.
Соединения формулы (Ш) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики расстройств сна, включая диссомнии, такие как первичная бессонница (307.42), первичная гиперсомния (307.44), нарколепсия (347), связанные с дыханием расстройства сна (780.59), связанное с нарушением циркадных ритмов расстройство (307.45) и диссомния неуточненная (307.47); первичные расстройства сна, такие как парасомнии, такие как расстройство в виде кошмарных сновидений (307.47), расстройство в виде ночных ужасов (307.46), снохождение (307.46) и парасомния неуточненная (307.47); расстройства сна, связанные с другим психическим заболеванием, такие как бес- 26 023768 сонница, связанная с другим психическим заболеванием (307.42), и гиперсомния, связанная с другим психическим заболеванием (307.44); расстройство сна, обусловленное соматическим заболеванием, в частности нарушения сна, ассоциированные с такими заболеваниями, как неврологические расстройства, невропатическая боль, синдром беспокойных ног, заболевания сердца и легких; и вызванное приемом веществ расстройство сна, включая подтипы, такие как типа бессонницы, типа гиперсомнии, типа парасомнии и смешанного типа; апноэ во сне и расстройство суточных биоритмов из-за смены часовых поясов.
Соединения формулы (1а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики расстройств приема пищи, таких как нервная анорексия (307.1), включая подтипы, такие как ограничительный тип и тип с приступами переедания и искусственным опрожнением кишечника; нервная булимия (307.51), включая подтипы, такие как тип с искусственным выведением пищи и тип без искусственного выведения пищи; ожирение; компульсивное расстройство приема пищи; приступы переедания; и расстройство приема пищи неуточненное (307.50).
Соединения формулы (1а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики расстройств аутического спектра, включая аутизм (299.00), синдром Аспергера (299.80), синдром Ретта (299.80), дезинтегративное расстройство детского возраста (299.10) и общее расстройство развития неуточненное (299.80, в том числе атипичный аутизм).
Соединения формулы (1а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики синдрома дефицита внимания и гиперактивности, включая подтипы, такие как синдром дефицита внимания и гиперактивности по комбинированному типу (314.01), синдром дефицита внимания и гиперактивности с преобладанием дефицита внимания (314.00), синдром дефицита внимания и гиперактивности по гиперактивно-импульсивному типу (314.01) и синдром дефицита внимания и гиперактивности неуточненный (314.9); гиперкинетического расстройства; расстройств социального поведения, таких как расстройство поведения, включая подтипы, такие как начинающийся в детском возрасте тип (321.81), начинающийся в подростковом возрасте тип (312.82) и без уточнения момента появления (312.89), вызывающее оппозиционное расстройство (313.81) и расстройство социального поведения неуточненное; и тики, такие как синдром де ла Туретта (307.23).
Соединения формулы (1а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики расстройств личности, включая подтипы, такие как параноидное расстройство личности (301.0), шизоидное расстройство личности (301.20), шизотипическое расстройство личности (301,22), антисоциальное расстройство личности (301.7), пограничное расстройство личности (301,83), истерическое расстройство личности (301.50), нарциссическое расстройство личности (301,81), уклоняющееся расстройство личности (301.82), расстройство типа зависимой личности (301.6), обсессивно-компульсивное расстройство личности (301.4) и расстройство личности неуточненное (301.9).
Соединения формулы (1а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики сексуальных дисфункций, включая расстройства сексуального влечения, такие как гипоактивное расстройство сексуального влечения (302.71) и аверсивное сексуальное расстройство (302.79); расстройства полового возбуждения, такие как расстройства полового возбуждения у женщин (302.72) и расстройство эрекции у мужчин (302.72); оргазмические расстройства, такие как женское оргазмическое расстройство (302.73), мужское оргазмическое расстройство (302.74) и преждевременная эякуляция (302.75); расстройство в виде боли при половом контакте, такое как диспареуния (302.76) и вагинизм (306.51); сексуальная дисфункция неуточненная (302.70); половые извращения, такие как эксгибиционизм (302.4), фетишизм (302.81), фроттеризм (302.89), педофилия (302.2), сексуальный мазохизм (302.83), сексуальный садизм (302.84), трансвестический фетишизм (302.3), вуайеризм (302.82) и половое извращение неуточненное (302.9); расстройства половой идентификации, такие как расстройство половой идентификации в детском возрасте (302.6) и расстройство половой идентификации в юношеском возрасте или у взрослых (302.85); и сексуальное расстройство неуточненное (302.9).
Соединения формулы (1а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики расстройства привычек и влечений, включая: интермиттирующие эксплозивное расстройство (312.34), клептоманию (312.32), патологическое влечение к азартным играм (312.31), пироманию (312.33), трихотилломанию (312.39), расстройство привычек и влечений неуточненное (312.3), компульсивное переедание, непреодолимое влечение к покупкам, сексуальное поведение навязчивого характера и патологическое накопительство.
Соединения формулы (1а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики нарушений слуха, включая невропатию слухового нерва, расстройство слуховой обработки информации, потерю слуха, которая включает внезапную потерю слуха, вызванную шумом потерю слуха, вызванную приемом веществ потерю слуха и потерю слуха у взрослых старше 60 лет (старческая тугоухость), и шум в ушах.
Соединения формулы (1а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики болезни Меньера, нарушений равновесия и заболеваний внутреннего уха.
Соединения формулы (1а) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики гиперакузии и нарушений восприятий громкости, включая синдром ломкой
- 27 023768
Х-хромосомы и аутизм.
Соединения формулы (Ш) или их фармацевтически приемлемые соли могут найти применение для лечения или профилактики эпилепсии (включая, без ограничения, локализационно-обусловленные формы эпилепсии, генерализованные формы эпилепсии, эпилепсии как с генерализованными припадками, так и с локальными припадками, и подобные им), припадков, ассоциированных с синдромом ЛенноксаГасто, припадков как осложнений заболевания или состояния (таких как припадки, ассоциированные с энцефалопатией, фенилкетонурией, ювенильной формой болезни Гоше, прогрессирующей миоклонической эпилепсией Лундборга, инсультом, травмой головы, стрессом, гормональными изменениями, использованием лекарств или синдромом отмены, употреблением алкоголя или синдромом его отмены, лишением сна, лихорадкой, инфекцией и тому подобное), эссенциального тремора, синдрома беспокойных ног, парциальных и генерализованных припадков (включая тонические, клонические, тоническиеклонические, атонические, миоклонические, малые эпилептические припадки), вторичных генерализованных припадков, височной эпилепсии, малых эпилептических форм эпилепсии (включая детскую, ювенильную, миоклоническую, фотоиндуцированную и индуцированную зрительными картинами), тяжелых эпилептических энцефалопатии (включая связанные с гипоксией и синдром Расмуссена), фебрильных судорог, эпилепсии парциальной непрерывной, прогрессирующих миоклонических эпилепсии (включая болезнь Унферрихта-Лундборга и болезнь Лафора), посттравматических припадков/эпилепсии, включая связанные с повреждением головы, простых рефлекторных эпилепсии (включая фотосенситивную, соматосенсорную и проприоцептивную, аудиогенную и вестибулярную), метаболических расстройств, часто ассоциированных с эпилепсией, таких как пиридоксин-зависимая эпилепсия, синдром курчавых волос при болезни Менкеса, болезнь Краббе, эпилепсии вследствие злоупотребления алкоголем и наркотиками (например, кокаином), кортикальных мальформаций, ассоциированных с эпилепсией (например, синдром двойной коры или субкортикальной линейной гетеротопии), хромосомных аномалий, ассоциированных с припадками или эпилепсией, например частичная моносомия (15Ц)/синдром Ангельмана), и т.п.
В одном воплощении изобретения предложено соединение формулы (Ш) или его фармацевтически приемлемая соль для лечения или профилактики депрессии и расстройств настроения, нарушений слуха, шизофрении, связанных со злоупотреблением веществ расстройств, расстройств сна или эпилепсии.
Термин лечение или лечить, как он использован здесь, включает контроль, облегчение, ослабление или модуляцию болезненного состояния или его симптомов.
Термин профилактика использован здесь для обозначения предупреждения симптомов заболевания или расстройства у субъекта или предупреждения возвращения симптомов заболевания или расстройства у пораженного субъекта и не ограничен полным предупреждением поражения.
Также раскрыт способ лечения или предупреждения заболевания или расстройства, при которых требуется модулятор Κν3, например тех заболеваний и расстройств, которые упомянуты выше, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (Ш) или его фармацевтически приемлемой соли.
Также раскрыто соединение формулы (Ш) или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении или профилактике заболевания или расстройства, при которых требуется модулятор Κν3, например тех заболеваний и расстройств, которые упомянуты выше.
В изобретении также предложено применение соединение формулы (Ш) или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для лечения или профилактики заболевания или расстройства, при которых требуется модулятор Κν3, например тех заболеваний и расстройств, которые упомянуты выше.
Также раскрыт способ лечения депрессии и расстройств настроения, шизофрении, связанных со злоупотреблением веществ расстройств, расстройств сна или эпилепсии, например тех показаний, которые упомянуты выше, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества модулятора Κν3 или его фармацевтически приемлемой соли.
Для применения в терапии соединения по изобретению обычно вводят в виде фармацевтической композиции. В изобретении также предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (Ш) или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
Соединения формулы (Ш) или их фармацевтически приемлемые соли могут быть введены любым традиционным способом, таким как пероральное, парентеральное, трансбуккальное, сублингвальное, интраназальное, ректальное или трансдермальное введение, и фармацевтические композиции адаптированы соответственно.
Соединения формулы (Ш) или их фармацевтически приемлемые соли, которые являются активными при пероральном введении, могут быть изготовлены в виде жидкостей или твердых форм, например, сиропов, суспензий, эмульсий, таблеток, капсул или лепешек.
Жидкая композиция, как правило, состоит из суспензии или раствора активного ингредиента в подходящем (их) жидком(их) носителе(ях), например водном растворителе, таком как вода, этанол или глицерин, или неводном растворителе, таком как полиэтиленгликоль или масло. Композиция также может содержать суспендирующий агент, консервант, корригент и/или краситель.
- 28 023768
Композиция в форме таблетки может быть изготовлена с использованием любого(ых) подходящего(их) фармацевтического(их) носителя(ей), обычно используемых для изготовления твердых препаратов, например, стеарата магния, крахмала, лактозы, сахарозы и целлюлозы.
Композиция в форме капсулы может быть изготовлена с использованием традиционных методик инкапсулирования, например, пилюли, содержащие активный ингредиент, могут быть получены с использованием стандартных носителей и затем заполнены в твердую желатиновую капсулу; альтернативно, дисперсия или суспензия может быть получена с использованием любого(ых) подходящего(их) фармацевтического(их) носителя(ей), например водные полимеры, целлюлозы, силикаты или масла, и этой дисперсией или суспензией затем наполняют мягкую желатиновую капсулу.
Типичные парентеральные композиции состоят из раствора или суспензии активного ингредиента в стерильном водном носителе или парентерально приемлемом масле, например, полиэтиленгликоле, поливинилпирролидоне, лецитине, арахисовом масле или кунжутном масле. Альтернативно, раствор может быть лиофилизирован и затем восстановлен подходящим растворителем непосредственно перед введением.
Композиции для интраназального введения могут удобным образом быть изготовлены в виде аэрозолей, капель, гелей и порошков. Аэрозольные препараты обычно содержат раствор или тонкую суспензию активного ингредиента в фармацевтически приемлемом водном или неводном растворителе и обычно представлены в однодозовых или многодозовых количествах в стерильной форме в герметизированном контейнере, который может принимать форму картриджа или дозаполнен для применения с распыляющим устройством. Альтернативно, герметизированный контейнер может представлять собой одноразовое распределяющее устройство, такое как однодозовый назальный ингалятор или аэрозольный диспенсер, снабженный отмеривающим клапаном. Когда дозированная форма представляет аэрозольный диспенсер, он содержит пропеллент, который может представлять собой сжатый газ, например воздух, или органический пропеллент, такой как фторхлоруглеводород или гидрофторуглерод. Аэрозольные лекарственные формы также могут принимать форму помповых распылителей.
Композиции, подходящие для трансбуккального или сублингвального введения, включают таблетки, лепешки и пастилки, в которых активный ингредиент изготовлен вместе с носителем, таким как сахар и аравийская камедь, трагакант или желатин и глицерин.
Композиции для ректального введения обычно представлены в форме суппозиториев, содержащих традиционную основу суппозиториев, такую как масло какао.
Композиции, подходящие для трансдермального введения, включают мази, гели и поастыри.
В одном воплощении композиция находится в стандартной лекарственной форме, такой как таблетка, капсула или ампула.
Композиция может содержать от 0,1 до 100% мас./мас., например от 10 до 60% мас./мас., активного вещества, в зависимости от способа введения. Композиция может содержать от 0 до 99% мас./мас., например от 40 до 90% мас./мас., носителя, в зависимости от способа введения. Композиция может содержать от 0,05 до 1000 мг, например от 1,0 до 500 мг, активного вещества, в зависимости от способа введения. Композиция может содержать от 50 до 1000 мг, например от 100 до 400 мг носителя, в зависимости от способа введения. Доза соединения, используемого в лечении вышеупомянутых расстройств, будет варьировать, как правило, в зависимости от тяжести расстройства, массы тела пациента и других подобных факторов. Однако, в качестве общего руководства, подходящие стандартные дозы могут составлять от 0,05 до 1000 мг, более подходящим образом от 1,0 до 500 мг, и такие стандартные дозы могут быть введены более одного раза в сутки, например дважды или трижды в сутки. Такая терапия может продолжаться несколько недель или месяцев.
Также раскрыта комбинация, содержащая соединение формулы (1а) или его фармацевтически приемлемое производное вместе с дополнительным терапевтическим агентом или агентами.
Также раскрыто применение соединения формулы (1а) в комбинации с дополнительным терапевтическим агентом или агентами.
Когда соединения используют в комбинации с другими терапевтическими агентами, соединения могут быть введены либо раздельно, либо одновременно любым стандартным путем.
Упомянутые выше комбинации могут быть традиционным образом представлены для применения в форме фармацевтической композиции, и таким образом, фармацевтические композиции, содержащие комбинацию, как она определена выше, вместе с фармацевтически приемлемым носителем или эксципиентом, образуют дополнительный аспект изобретения. Индивидуальные компоненты таких комбинаций могут быть введены либо раздельно, либо одновременно в раздельных или объединенных фармацевтических композициях. Индивидуальные компоненты комбинаций также могут быть введены раздельно тем же самым или другим путем.
Когда соединение формулы (1а) или его фармацевтически приемлемое производное используют в комбинации со вторым терапевтическим агентом, активным против того же самого болезненного состояния, доза каждого соединения может отличаться от той дозы, в которой это соединение используют в отдельности. Соответствующие дозы легко могут быть определены специалистами в данной области техники.
- 29 023768
Фармацевтическая композиция по изобретению, которая может быть получена путем смешивания подходящим образом при температуре окружающей среды и атмосферном давлении, обычно адаптирована для перорального, парентерального или ректального введения и, как таковая, может быть представлена в форме таблеток, капсул, пероральных жидких препаратов, порошков, гранул, лепешек, растворимых порошков, инъецируемых или инфузируемых растворов или суспензий или суппозиториев. Перорально вводимые композиции обычно являются предпочтительными.
Также раскрыты модуляторы Κν3 или их фармацевтически приемлемые соли для применения в лечении или профилактике депрессии и расстройств настроения, нарушений слуха, шизофрении, связанных со злоупотреблением веществ расстройств, расстройств сна или эпилепсии.
В частности, модуляторы Κν3 или их фармацевтически приемлемые соли могут быть особенно полезны в лечении или профилактике депрессии и расстройств настроения, включая эпизод глубокой депрессии, маниакальный эпизод, смешанный эпизод и гипоманиакальный эпизод; депрессивных расстройств, включая большое депрессивное расстройство, дистимическое расстройство (300.4), депрессивное расстройство неуточненное (311); биполярных расстройств, включая биполярное расстройство I типа, биполярное расстройство II типа (рекуррентные эпизоды глубокой депрессии с гипоманиакальными эпизодами) (296.89), циклотимическое расстройство (301.13) и биполярное расстройство неуточненное (296.80); других расстройств настроения, включая расстройство настроения, обусловленное соматическим заболеванием (293.83), которое включает подтипы с депрессивными симптомами, с эпизодами подобно глубокой депрессии, с маниакальными симптомами и со смешанными симптомами), вызванное приемом веществ расстройство настроения (включая подтипы с депрессивными симптомами, с маниакальными симптомами и со смешанными симптомами) и расстройство настроения неуточненное (296.90); сезонного аффективного расстройства.
Также раскрыт способ лечения депрессии и расстройств настроения, нарушений слуха, шизофрении, связанных со злоупотреблением веществ расстройств, расстройств сна или эпилепсии, включая, например, те расстройства, которые упомянуты выше, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества модулятора Κν3 или его фармацевтически приемлемой соли.
Также раскрыт модулятор Κν3 или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении или профилактике депрессии и расстройств настроения, нарушений слуха, шизофрении, связанных со злоупотреблением веществ расстройств, расстройств сна или эпилепсии, включая, например, те расстройства, которые упомянуты выше.
В изобретении также раскрыто применение модулятора Κν3 или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для лечения или профилактики депрессии и расстройств настроения, нарушений слуха, шизофрении, связанных со злоупотреблением веществ расстройств, расстройств сна или эпилепсии, включая, например, те расстройства, которые упомянуты выше.
Для применения в терапии модуляторы Κν3 обычно вводят в виде фармацевтической композиции, например композиции, содержащей модулятор Κν3 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель. Примеры таких композиций и способы их введения, где композиции содержат соединение формулы (Ш) или его фармацевтически приемлемую соль, описаны выше. Такие композиции и способы введения также могут быть использованы в отношении других модуляторов Κν3 или их фармацевтически приемлемых солей в лечении депрессии и расстройств настроения, нарушений слуха, шизофрении, связанных со злоупотреблением веществ расстройств, расстройств сна или эпилепсии, включая, например, те расстройства, которые упомянуты выше.
Кроме того, изобретение относится к способу получения соединений формулы (Ш), к новым промежуточным соединениям, используемым в получении соединений формулы (Ш), и к получению таких промежуточных соединений.
Конкретные промежуточные соединения, представляющие интерес, включают
3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ол (промежуточное соединение 50)
спиро[1-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ол (промежуточное соединение 85)
7-метилспиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ол (промежуточное соединение 156)
- 30 023768
3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ол (промежуточное соединение 184)
Г
Другие промежуточные соединения, представляющие интерес, представляют собой анилиды формулы (IV)
Особенный интерес представляют анилиды \л/ — о
где X представляет собой С или Ν; Υ представляет собой С или Ν; группа выбрана из
Все цитированные в данном описании публикации, включая патенты и патентные заявки, без ограничения, включены путем ссылки, как если бы каждая индивидуальная публикация была конкретно и отдельно указана ссылкой, как полностью изложенная здесь.
Краткое описание графических материалов
Настоящее изобретение проиллюстрировано только в качестве примера со ссылкой на следующие графические материалы, на которых:
на фиг. 1а показаны токи 1ιΙ<ν3.2. регистрируемые при использовании анализа, описанного в Биологическом примере 1. Показанные данные представляют собой индивидуальные токи в течение периода деполяризации потенциала до -15 мВ, регистрируемые от 4 различных клеток при двух концентрациях соединения из референсного примера КЕ1. Данные описаны с помощью единой экспоненциальной кривой (сплошные линии) при использовании метода подбора эмпирической кривой в программе Рикш, версия 5 (ОгарБраД 8оП\\аге Шс);
на фиг. 1Ь показаны токи 1ιΙ<ν3.2, регистрируемые при использовании анализа, описанного в Биологическом примере 1. Показанные данные представляют собой индивидуальные токи в течение периода деполяризации потенциала до -15 мВ, регистрируемые от 2 различных клеток при двух концентрациях соединения из референсного примера КЕ1. Данные описаны с помощью единой экспоненциальной кривой (сплошные линии) при использовании метода подбора эмпирической кривой в программе Рикш, версия 5 (ОгарБраД 8оП\\аге Шс);
на фиг. 2 показаны регистрационные записи, полученные от идентифицированных быстро возбуждающих интернейронов в соматосенсорной коре головного мозга мыши;
на фиг. 3 показаны частоты потенциалов действия, регистрируемых от парвальбумин-позитивных интернейронов в соматосенсорной коре головного мозга мыши, вызванных с помощью ступеней деполяризующего тока;
на фиг. 4 показана полуширина вызванных потенциалов действия от парвальбумин-позитивных интернейронов в соматосенсорной коре головного мозга мыши;
на фиг. 5 показаны активируемые высоким напряжением калиевые токи, регистрируемые от визу- 31 023768 ально идентифицированных нейронов ΜΝΤΒ (медиального ядра трапециевидного тела) у мыши, ш \Лго; на фиг. 6а показана экспрессия Κν3.1 мРНК в супрахиазматическом ядре мыши, умещвленной в различные циркадные моменты времени на протяжении 24-часового цикла свет-темнота; на фиг. 6Ь показана экспрессия Κν3.2 мРНК в супрахиазматическом ядре.
Экспериментальная часть
Изобретение проиллюстрировано описанными ниже соединениями. В следующих Примерах описан лабораторный синтез конкретных соединений по изобретению, которые не предназначены ограничить объем изобретения каким-либо образом в отношении соединений или способов. Следует понимать, что хотя используют конкретные реагенты, растворители, температуры и периоды времени, имеется много возможных эквивалентных альтернатив, которые могут быть использованы для получения аналогичных результатов. Подразумевается, что данное изобретение включает такие эквиваленты.
Аналитическое оборудование
Исходные материалы, реагенты и растворители получали от коммерческих поставщиков и использовали без дополнительной очистки, если не указано иное. Если не указано иное, все соединения с хиральными центрами являются рацемическими. Когда реакции описаны как осуществляемые способом, аналогичным ранее описанному, с более подробно описанными реакциями, используемые общие реакционные условия являлись по существу такими же. Используемые условия обработки являлись стандартными для уровня техники, но могли быть адаптированы от одной реакции к другой. Исходный материал не обязательно мог быть получен из партии, на которую ссылаются. Синтезированные соединения могут иметь разные степени чистоты в интервале, например, от 85 до 98%. Расчеты количества молей и выход в некоторых случаях приведены к этим значениям.
Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) записывали либо на оборудовании Уапап при 300, 400, 500 или 600 МГц, либо на оборудовании Вгикег при 400 МГц. Химические сдвиги записаны в миллионных долях (м.д.) (δ) с использованием линии остаточного растворителя как внутреннего стандарта. Картины расщепления выражены в виде е (синглет), Ьг.е (уширенный синглет), Д (дублет), ! (триплет), ς (квартет), ДД (дублет дублетов), Д! (дублет триплетов) и т (мультиплет). Спектры ЯМР регистрировали при температурах, изменяющихся в пределах от 25 до 30°С.
ВЭЖХ-анализы, указанные как ВЭЖХ (подход): г! (время удерживания)=х мин, осуществляли на оборудовании АдЛеп! 1100 еепее с использованием колонки Ьипа 3и С18(2) 100Α (50x2,0 мм, размер частиц 3 мкм) [Подвижная фаза, растворитель А: (вода + 0,05% ТРА), растворитель В: (ацетонитрил + 0,05% ТРА), Градиент: от 100% (А) до 95% (В) за 8 мин. Температура колонки равна 40°С. Скорость потока равна 1 мл/мин. Длина волны УФ-детектирования равна 220 нм]. Использование этой методологии обозначено как ВЭЖХ при аналитической характеристике желаемых соединений.
Масс-спектры при прямом вводе пробы (МС) записывали на масс-спектрометре АдЛеп! 1100 δе^^ее ГС/ΜδΌ, работающем в режиме положительной или отрицательной ионизации электрораспылением (ЭР (+) и ЭР (-)): [ЭР (+): интервал масс: 100-1000 а.е.м. Пропускаемый растворитель: вода плюс 0,1% НСО2Н/СНзСN 50/50. ЭР (-): интервал масс: 100-1000 а.е.м. Пропускаемый растворитель: вода плюс 0,05% NН4ОН/СНзСN 50/50]. Использование этой методологии обозначено как МС 1 (ИЭР) при аналитической характеристике желаемых соединений.
Альтернативно, масс-спектры (МС) записывали на масс-спектрометре, работающем в ЭР (+) и ЭР (-) режиме ионизации, соединенном с ВЭЖХ-оборудованием АдЛеп! 1100 δе^^ее [ЖХ/МС-ИЭР(+) анализ осуществляли на δире1сое^1 АВ2+Р1ие (33x4,6 мм, 3 мкм) (подвижная фаза: от 10% [СН3С№0,05%ТРА] до 90% [СН3С№0,05%ТРА] и 10% [вода] за 2,2 мин, при этих условиях за 2,8 мин. Т равна 45°С, скорость потока равна 0,9 мл/мин)]. Использование этой методологии обозначено как МС 2 (ИЭР) при аналитической характеристике желаемых соединений.
ВЭЖХ-масс-спектры (ВЭЖХ-МС) снимали на масс-спектрометре АдЛеп! 1100 δе^^ее ГС/ΜδΌ, соединенном с ВЭЖХ-оборудованием АдЛеп! 1100 δе^^ее. работающем в режиме положительной или отрицательной ионизации электрораспылением и в условиях как кислотного, так и основного градиента. Кислотный градиент: ЖХ/МС-ЭР (+ или -) анализы осуществляли на колонке δире1сое^1 АВ2 + Р1ие (33x4,6 мм, 3 мкм). Подвижная фаза: А: (вода + 0,1% НСО2Н)/В: СН3СК Градиент (стандартный метод): !=0 мин 0% (В), от 0% (В) до 95% (В) за 5 мин, продолжая в течение 1,5 мин, от 95% (В) до 0% (В) за 0,1 мин, время окончания 8,5 мин. Т колонки равна комнатной температуре (к.т.). Скорость потока равна 1 мл/мин. Использование этой методологии обозначено как ЖХ-МС А при аналитической характеристике желаемых соединений.
Основный градиент: ЖХ/МС-ЭР (+ или -) анализы осуществляли на колонке ХТегга МС С18 (30x4,6 мм, 2,5 мкм). Подвижная фаза: А: (5 мМ водн. МН4НСО3 + аммиак (рН 10))/В: СН3СК Градиент: ! = 0 мин 0% (В), от 0% (В) до 50% (В) за 0,4 мин, от 50% (В) до 95% (В) за 3,6 мин, продолжая в течение 1 мин, от 95% (В) до 0% (В) за 0,1 мин, время окончания 5,8 мин. Т колонки равна к.т. Скорость потока равна 1,5 мл/мин]. Интервал масс ЭР (+ или -): 100-1000 а.е.м. Интервал УФ-детектирования: 220-350 нм. Использование этой методологии обозначено как ЖХ-МС-В при аналитической характеристике желаемых соединений.
- 32 023768
Контроль качества: ЖХ/МС-ЭР+ в кислых условиях осуществляли на колонке ΖοΛαχ §В С18 (1,8 мкм, 3x50 мм). Подвижная фаза: А: (Н2О + 0,05% ТРА по объему)/В: (СНзСN + 0,05% ТРА по объему). Градиент: ΐ = 0 мин 0% (В), от 0 до 95% (В) за 2,5 мин, 95% (В) за 0,2 мин, от 95 до 100% (В) за 0,2 мин, 100% (В) за 0,4 мин, от 100% до 0% (В) за 0,1 мин. Время окончания 4 мин. Т колонки равна 60°С. Скорость потока: 1,5 мл/мин. Интервал масс ЭР+: (100-1000 а.е.м., Р=60). Длины волн УФ-детектирования: ИАИ 1А = 220,8, ИАИ 1В = 254,8. Использование этой методологии обозначено как ЖХ/мС: рС-3ΜΓΝ при аналитической характеристике желаемых соединений.
Ультраэффективная жидкостная хроматография с кислотным градиентом.
Суммарный ионный ток (ТГС) и ИАИ (диодно-матричный детектор)-УФ хроматографические следы вместе с МС- и УФ-спектрами, соответствующими пикам, получали на УЭЖХ/МС системе ЛссциК™, оснащенной РИА (фотодиодным матричным) детектором 2996 и соединенной с масс-спектрометром \Уа1сг5 М1сгота88 Ζρ™, работающим в режиме положительной или отрицательной ионизации электрораспылением [ЖХ/МС-ЭР (+ или -): анализы проводили с использованием колонки С18 Асцибу™ ИРЬС ВЕН (50x2,1 мм, размер частиц 1,7 мкм). Общая методика: Подвижная фаза: А: (вода + 0,1% НСО2Н)/В: (СНзСN + 0,06% НСО2Н). Градиент: ΐ = 0 мин 3% (В), ΐ = 0,05 мин 6% (В), ΐ = 0,57 мин 70% (В), ΐ = 1,06 мин 99% (В), продолжая в течение 0,389 мин, ΐ = 1,45 мин 3% (В), время окончания 1,5 мин. Т колонки равна 40°С. Скорость потока равна 1,0 мл/мин. Интервал масс: ЭР(+): 100-1000 а.е.м. ЭР(-): 100-800 а.е.м. Интервал УФ-детектирования: 210-350 нм. Использование этой методологии обозначено как УЭЖХ при аналитической характеристике желаемых соединений. Первая специализированная методика: Подвижная фаза: А: (вода + 0,1% НСО2Н)/В: (СНзСN + 0,1% НСО2Н). Градиент: ΐ = 0 мин 3% (В), ΐ = 1,06 мин 99% (В), ΐ = 1,45 мин 99% (В), ΐ = 1,46 мин 3% (В), время окончания 1,5 мин. Т колонки равна 40°С. Скорость потока равна 1,0 мл/мин. Интервал масс: ЭР(+): 100-1000 а.е.м. ЭР(-): 100-800 а.е.м. Интервал УФ-детектирования: 210-350 нм. Использование этой методологии обозначено как УЭЖХ-δ при аналитической характеристике желаемых соединений. Вторая специализированная методика: Подвижная фаза: А: (вода + 0,1% НСО2Н)/В: (СНзСN + 0,1% НСО2Н). Градиент: ΐ = 0 мин 3% (В), ΐ = 1,5 мин 100% (В), ΐ = 1,9 мин 100% (В), ΐ = 2 мин 3% (В), время окончания 2 мин. Т колонки равна 40°С. Скорость потока равна 1,0 мл/мин. Интервал масс: ЭР(+): 100-1000 а.е.м. ЭР(-): 100-800 а.е.м. Интервал УФ-детектирования: 210-350 нм. Использование этой методологии обозначено как УЭЖХ-1рцс при аналитической характеристике желаемых соединений.
Ультраэффективная жидкостная хроматография с основным градиентом.
Суммарный ионный ток (ТК’) и ИАИ УФ хроматографические следы вместе с МС- и УФспектрами, соответствующими пикам, получали на УЭЖХ/МС системе Асцибу™, оснащенной РИА детектором и соединенной с масс-спектрометром \Уа1еге δρΌ, работающим в режиме положительной или отрицательной ионизации электрораспылением (ЖХ/МС-ЭР+/-): анализы проводили с использованием колонки С18 Асцибу™ ИРЬС ВЕН (50x2,1 мм, размер частиц 1,7 мкм). Подвижная фаза: А: (10 мМ водный раствор ΝΗ.·|ΗίΌ3, (значение рН доведено до 10 аммиаком))/В: СН3СК Градиент: ΐ = 0 мин 3% (В), ΐ = 1,06 мин 99% (В), продолжая в течение 0,39 мин, ΐ = 1,46 мин 3% (В), время окончания 1,5 мин. Т колонки равна 40°С. Скорость потока равна 1,0 мл/мин. Интервал масс: ЭР(+): 100-1000 а.е.м. ЭР(-): 1001000 а.е.м. Интервал УФ-детектирования: 220-350 нм. Использование этой методологии обозначено как УЭЖХ-В при аналитической характеристике желаемых соединений.
Для реакций, включающих микроволновое излучение, использовали оптимизатор Регеоиа1 СНешЛ1гу ΕπίΓΥδ™ или инициатор Вю1аде.
В ряде получений очистку осуществляли с использованием неавтоматизированной флэшхроматографии (Флэш+) Вю1аде, автоматизированной флэш-хроматографии (Ноп/оп, §Р1 и §Р4) Вю1аде, автоматизированной флэш-хроматографии Сошрапюп СошЫР^б (ЕСО), систем Р1еδЬ-Μаδΐе^ Регеопа1 или Vас Μаδΐе^.
Флэш-хроматографию осуществляли на силикагеле 230-400 меш (поставляемом Мегск АС Иагшδίαάΐ, Сегтапу) или на силикагеле 300-400 меш (поставляемом Мпоркагш Сбешюа1 ВеадеШ Со., 6(6.), предварительно упакованных картриджах Уапап Меда Ве-δί, предварительно упакованных картриджах диоксида кремния Вю1аде (например, картридж Вю1аде δNЛΡ), предварительно упакованных флэшкартриджах КР-ΝΗ, предварительно упакованных картриджах ШОЬИТЕ ΝΗ2 или картриджах диоксида кремния ШСО Κеб^δер.
Картриджи δΡΕ-δСX представляют собой ионообменные колонки для твердофазной экстракции, поставляемые Уапап. Элюент, используемый с картриджами δΡΕ-δСX, представляет собой ИСМ и МеОН или только МеОН с последующим раствором аммиака в МеОН. Собранные фракции представляют собой те, которые элюировали раствором аммиака в МеОН, если не указано иное.
Картриджи δΡΕ-δ^ представляют собой колонки для твердофазной экстракции на основе диоксида кремния, предоставляемые компанией Уа^^аη.
В ряде получений очистку осуществляли на системе масс-направленной автопрепаративной очистки (МИАР) Ргас11оп1упх™, оборудованной детектором Vаΐе^δ 2996 РИА и соединенной с массспектрометром ΖΡ™ (Vаΐе^δ), работающим в режиме положительной и отрицательной ионизации элек- 33 023768 трораспылением ЭР+, ЭР- (интервал масс 100-1000 или 100-900).
Использовали следующий ряд градиентов для полупрепаративной хроматографии:
Способ А. Основные условия хроматографии.
Колонка: ХТегга Ргер МС С18 ОВЭ (150 ммх30 мм, размер частиц 10 мкм) при комнатной температуре.
Подвижная фаза: А: (вода + 10 мМ водный раствор бикарбоната аммония (значение рН доведено до аммиаком)), В: ацетонитрил.
Скорость потока: 40 мл/мин.
Градиент: 10% (В) за 0,5 мин, от 10% (В) до 95% (В) за 12,5 мин, от 95% (В) до 100%(В) за 3 мин. Способ В. Основные условия хроматографии.
Колонка: ХТегга Ргер МС С18 ОВЭ (150 ммх30 мм, размер частиц 10 мкм) при комнатной температуре.
Подвижная фаза: А: вода + 10 мМ водный раствор бикарбоната аммония (значение рН доведено до аммиаком), В: ацетонитрил.
Скорость потока: 40 мл/мин.
Градиент: от 20% до 25% (В) за 1 мин, от 25% (В) до 65% (В) за 12 мин, от 65% (В) до 100% (В) за
0,5 мин.
Способ С. Основные условия хроматографии.
Колонка: \Уа1егк ХЬпбде С18 ОВЭ (50 ммх19 мм, размер частиц 5 мкм) при комнатной температуре.
Подвижная фаза: А: вода +10 мМ водный раствор бикарбоната аммония (значение рН доведено до аммиаком), В: ацетонитрил.
Скорость потока: 17 мл/мин.
Градиент: от 20% (В) до 25% (В) за 1 мин, от 25% (В) до 55% (В) за 9 мин, от 55% (В) до 100% (В) за 2 мин, возвращение к 20% (В) за 0,1 мин.
Способ Ό. Кислые условия хроматографии.
Колонка: \Уа1егк ХЬпбде С18 ОВЭ (50 ммх19 мм, размер частиц 5 мкм) при комнатной температуре.
Подвижная фаза: А: (вода + 0,1% муравьиная кислота в воде); В: ацетонитрил.
Скорость потока: 17 мл/мин.
Градиент: от 20% (В) до 25% (В) за 1 мин, от 25% (В) до 55% (В) за 9 мин, от 55% (В) до 100% (В) за 2 мин, возвращение к 20% (В) через 0,1 мин.
Способ Е. Основные условия хроматографии.
Колонка: \Уа1егк ХЬпбде С18 ОВЭ (50 ммх19 мм, размер частиц 5 мкм) при комнатной температуре.
Подвижная фаза: А: (вода + 10 мМ водный раствор бикарбоната аммония (значение рН доведено до аммиаком)), В: ацетонитрил.
Скорость потока: 17 мл/мин.
Градиент: от 10% (В) до 15% (В) за 1 мин, от 15% (В) до 70% (В) за 7 мин, от 70% (В) до 100% (В) за 1 мин, 100% (В) за 2 мин, возвращение к 10% (В) через 0,1 мин.
Способ Р. Основные условия хроматографии.
Колонка: Рйеиотеиех Сет1т АХ1А С18 (50x21,2 мм, размер частиц 5 мкм).
Подвижная фаза: А: вода + 10 мМ водный раствор бикарбоната аммония (значение рН доведено до аммиаком), В: ацетонитрил.
Скорость потока: 17 мл/мин.
Градиент: от 10% (В) до 15% (В) за 1 мин, от 15% (В) до 65% (В) за 8 мин, от 65% (В) до 100% (В) за 1 мин, возвращение к 10% (В) через 1 мин.
Способ С. Основные условия хроматографии.
Колонка: Рйеиотеиех Сет1т АХ1А С18 (50x21,2 мм, размер частиц 5 мкм).
Подвижная фаза: А: вода + 10 мМ водный раствор бикарбоната аммония (значение рН доведено до аммиаком), В: ацетонитрил.
Скорость потока: 17 мл/мин.
Градиент: от 10% (В) до 15% (В) за 1 мин, от 15% (В) до 70% (В) за 7 мин, от 70% (В) до 100% (В) за 1 мин, 100% (В) в течение 2 мин, возвращение к 10% (В) через 0,1 мин.
Сокращения:
СОСЬ - дейтерированный хлороформ; сНех - циклогексан;
СУ - объем колонки;
ЭСМ - дихлорметан;
Э1РЕА - Ν,Ν-диизопропилэтиламин;
ОМАР - 4-диметиламинопиридин;
- 34 023768
ΌΜΡ - Ν,Ν-диметилформамид;
ΌΜ8Ο - диметилсульфоксид;
ΌΜ8Ο-66 - дейтерированный диметилсульфоксид;
ΕΌΕ'.ΗΟ - гидрохлорид ^(3-диметиламинопропил)-№-этилкарбодиимида;
Εΐ2Ο - диэтиловый эфир;
ЕЮАс - этилацетат;
И - часы;
Н2 - газообразный водород;
НАТИ - гексафторфосфат (О-7-азабензотриазол-1-ил)-НУ№,№-тетраметилурония;
НВТИ - гексафторфосфат О-бензотриазол-1-ил-тетраметилурония;
НСО2Н - муравьиная кислота;
НС1 - хлористый водород;
ΗΝΟ3 - азотная кислота;
ΗΟΒΐ.Η2Ο - 1-гидроксибензилтриазолгидрат;
Η28Ο4 - серная кислота;
К2СО3 - карбонат калия;
ΚΗΌΜ8 -гексаметилдисилазид калия;
КОН - гидроксид калия;
ΜеСN/СΗ3СN - ацетонитрил;
МеОН - метанол;
ΜθΟΌ - дейтерированный метанол;
ΜΌΑΡ - масс-направленная автопрепаративная очистка;
ΜΟΜ - метоксиметил;
Ν2 - газообразный азот;
ΝαΒΗ(ΟΑ^3 - триацетоксиборогидрид натрия;
Ν;·ιΗί'Ό3 - гидрокарбонат натрия;
ΝαΝΟ2 - нитрит натрия;
Ν;·ι2ί'Ό3 - карбонат натрия;
ΝαΟΗ - гидроксид натрия;
ΝΗ4ΟΗ - гидроксид аммония;
ΝΗ4ΗίΌ3Η - бикарбонат аммония;
ЯМР - ядерный магнитный резонанс;
Рб/С - палладий на углероде;
РЕ - петролейный эфир;
к.т. - комнатная температура;
8СКС - химический реагент 8шорЬагт Со., Ыб;
Т3Р - пропилфосфоновый ангидрид;
ΐΒιιΟΚ - трет-бутилат калия;
ТВТИ - тетрафторборат о-бензотриазол-1-ил-ХУ№,№-тетраметилурония;
ТЕА - триэтиламин;
ТРА - трифторуксусная кислота;
ТОТ - тетрагидрофуран;
Т8ΟΗ·Η2Ο -гидрат 4-метилбензолсульфоновой кислоты, гидрат пара-толуолсульфоновой кислоты. Промежуточное соединение 1.
2-[(2-Пропин-1 -илокси)метил] фуран
К суспензии гидрида натрия (1,570 г, 39,2 ммоль) в ΌΜΡ (46 мл), перемешиваемой под аргоном при 0°С, добавляли по каплям раствор 2-фуранилметанола (3,5 г, 35,7 ммоль) в ΌΜΡ (4 мл) в течение 20 мин. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 15 мин. 80%-ный 3-бром-1-пропин (4,24 г, 35,7 ммоль) в толуоле добавляли по каплям в течение 10 мин при 0°С, затем смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду и затем смесь 3 раза экстрагировали эфиром. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией на диоксиде кремния (оборудование Вю!аде 8Ρ1), элюируя градиентом циклогексан/этилацетат от 95/5 до 85/15. Упаривание дало указанное в заголовке соединение (1,63 г).
1Η ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-66): δ м.д. 7.66 (1Н, б), 6.41-6.49 (2Н, т), 4.46 (2Н, 5), 4.12 (2Н, б), 3.48 (1Н, ΐ);
УЭЖХ-МС: 0,66 мин.
- 35 023768
Промежуточное соединение 2, 3.
1,3-Дигидро-2-бензофуран-4-ол и 1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ол
К раствору [2-[(2-пропин-1-илокси)метил]фурана] (промежуточное соединение 1, 1,63 г) в ацетонитриле (60 мл), перемешиваемому под аргоном при комнатной температуре, добавляли неразбавленный трихлорид золота (0,182 г, 0,599 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем добавляли трихлорид золота (120 мг) и через 2 ч добавляли дополнительное количество трихлорида золота (226 мг). Через 1 ч смесь концентрировали и неочищенную смесь очищали флэш-хроматографией (Вю1аде δΡ1), элюируя смесью циклогексан/этилацетат 90/10. Упаривание двух фракций дало соответственно указанные в заголовке соединения: 1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ол (100 мг) и 1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ол (356 мг).
Промежуточное соединение 2: 1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ол:
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 9.59 (1Н, 5), 7.15-7.00 (1Н, т), 6.78-6.60 (2Н, т), 5.03-4.84 (4Н,
т);
УЭЖХ-МС: 0,41 мин, 135 [М-Н]-.
Промежуточное соединение 3: 1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ол:
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 9.36 (1Н, 5), 7.11-7.02 (1Н, т), 6.70-6.61 (2Н, т), 4.89 (4Н, т); УЭЖХ-МС: 0,42 мин, 135 [М-Н]-.
Промежуточное соединение 4.
4-[(4-Нитрофенил)окси]-1,3-дигидро-2-бензофуран
Суспензию карбоната калия (670 мг, 4,85 ммоль), 1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ола (промежуточное соединение 2, 110 мг) и 1-фтор-4-нитробензола (114 мг, 0,808 ммоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (ΌΜΡ) (5 мл) нагревали при микроволновом излучении при 100°С в течение 3x30 мин. Смесь концентрировали. Добавляли 2 мл воды и затем дихлорметан. Фазы разделяли и водную фазу дважды экстрагировали дихлорметаном. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 8.30-8.20 (2Н, т), 7.46-7.36 (1Н, т), 7.32-7.22 (т, 1Н), 7.18-7.10 (2Н, т), 7.09-7.04 (1Н, т), 5.14-4.79 (4Н, т);
УЭЖХ-МС: 0,98 мин.
Промежуточное соединение 5.
4-( 1,3-Дигидро-2-бензофуран-4-илокси)анилин
Раствор 4-[(4-нитрофенил)окси]-1,3-дигидро-2-бензофурана (промежуточное соединение 4, 208 мг), гидрата гидразина (0,051 мл, 1,618 ммоль) и РД/С (172 мг, 0,162 ммоль) в этаноле (6 мл) перемешивали под аргоном при 90°С. Через 1,5 ч смесь охлаждали до комнатной температуры и затем фильтровали через целит. Целит промывали метанолом. Органическую фазу концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (136 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 7.20 (1Н, 5), 6.96 (1Н, Д), 6.79-6.73 (2Н, т), 6.62-6.55 (3Н, т), 5.00 (4Н, 5), 4.88 (2Н, 5);
УЭЖХ-МС: 0,72 мин, 228 [М+1]+.
Промежуточное соединение 6.
1,1 -Диметилэтил-((1К)-2-{ [4-( 1,3-дигидро-2-бензофуран-4-илокси)фенил]амино}-1 -метил-2оксоэтил)карбамат
Суспензию №{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-О-аланина (97 мг, 0,515 ммоль), Ό!ΡΕΛ (0,138
- 36 023768 мл, 0,792 ммоль) и ТВТИ (191 мг, 0,594 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (3 мл) перемешивали под аргоном при комнатной температуре в течение 45 мин. Добавляли 4-(1,3-дигидро-2-бензофуран-4-илокси)анилин (промежуточное соединение 5, 90 мг) и эту смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли рассол и смесь разделяли в разделительном сосуде. Водную фазу экстрагировали дважды дихлорметаном. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией (В1о1аде 8Р1), используя в качестве элюентов градиент циклогексан/этилацетат от 100:0 до 85:15 с получением указанного в заголовке соединения (109 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 9.97 (1Н, т), 7.67-7.57 (2Н, т), 7.32-7.23 (1Н, т), 7.11-7.04 (2Н, т), 7.04-6.96 (2Н, т), 6.79-6.71 (1Н, т), 5.08-4.99 (2Н, т), 4.93-4.83 (2Н, т), 4.15-4.05 (1Н, т), 1.39 (9Н, 5), 1.29-1.22 (3Н, т);
УЭЖХ-МС: 0,85 мин, 399 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 7.
Ν1-[4-( 1,3-Дигидро-2-бензофуран-4-илокси)фенил] -Э-аланинамид
Раствор 1,1 -диметилэтил-((1К)-2-{ [4-( 1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил-окси)фенил]амино}-1-метил2-оксоэтил)карбамата (промежуточное соединение 6, 108 мг) и ТРА (1 мл) в дихлорметане (4 мл) перемешивали под аргоном при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь концентрировали и остаток очищали посредством 8СX с получением указанного в заголовке соединения (81 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д.: 7.66 (2Н, ά), 7.31-7.24 (1Н, т), 7.09-7.04 (1Н, т), 6.99 (2Н, ά), 6.71-6.77 (1Н, т), 5.03 (2Н, 5), 4.87 (2Н, 5), 3.40-3.47 (1Н, т), 1.21 (3Н, ά);
УЭЖХ-МС: 0,67 мин, 299 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 8.
1-(2,6-Дигидроксифенил)этаноноксим
Раствор гидрохлорида гидроксиламина (756 мг, 10,9 ммоль) и тригидрата ацетата натрия (1,71 г, 12,6 ммоль), растворенного в 23 мл смеси ЕЮН/Н2О (7/3) добавляли к раствору 2',6'дигидроксиацетофенона (1,5 г, 9,9 ммоль) в 12 мл смеси 7/3 Е1ОН/Н2О. После кипячения с обратным холодильником и перемешивания в атмосфере Ν2 в течение 2 ч добавляли дополнительное количество гидрохлорида гидроксиламина (340 мг, 4,9 ммоль) и тригидрата ацетата натрия (570 мг, 4,19 ммоль), растворенного в 7 мл воды, и кипячение с обратным холодильником продолжали в течение дополнительных 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры летучие вещества удаляли. Затем добавляли воду и полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили с получением 1,3 г указанного в заголовке соединения.
’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 10.99 (1Н, Ъг. 5), 9.63 (2Н, Ъг. 5), 7.01-6.81 (1Н, т), 6.44-6.19 (2Н, т), 2.11 (3Н, 5).
Промежуточное соединение 9.
1-(2,6-Дигидроксифенил)эτанон-Ο-ацеτилоксим
К 1-(2,6-дигидроксифенил)этаноноксиму (промежуточное соединение 8, 588 мг) добавляли уксусный ангидрид (1,97 мл, 20,8 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. После удаления летучих веществ добавляли воду и полученное твердое вещество отфильтровывали и сушили в глубоком вакууме с получением 437 мг указанного в заголовке соединения.
’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 9.62 (2Н, Ъг. 5), 7.07-6.96 (1Н, т), 6.37 (2Н, ά), 2.19 (6Н, 5).
- 37 023768
Промежуточное соединение 10. 3 -Метил-1,2-бензизоксазол-4-ол
К 1-(2,6-дигидроксифенил)этанон-О-ацетилоксиму (промежуточное соединение 9, 437 мг) добавляли пиридин (4,0 мл) и реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. После добавления НС1 (4,0 мл 5 М водного раствора) смесь экстрагировали 3 раза Е12О и собранные органические слои промывали НС1 (1 М водный раствор). Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и фильтровали. Упаривание дало указанное в заголовке соединение (137 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 10.67 (1Н, Ьг. 5), 7.48-7.33 (1Н, т), 7.08-6.99 (1Н, т), 6.69-6.62 (1Н, т), 2.58 (3Н, 5).
Промежуточное соединение 11.
3-Метил-4-[(4-нитрофенил)окси]-1,2-бензизоксазол
3- Метил-1,2-бензизоксазол-4-ол (промежуточное соединение 10, 137 мг) перемешивали с 1-фтор-4нитробензолом (130 мг, 0,92 ммоль) в ΌΜΕ (3,0 мл) с карбонатом калия (381 мг, 2,8 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 1 ч при микроволновом излучении. После удаления летучих веществ остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя СуНех/ЕЮАе (от 100%/0% до 0%/100%) с получением указанного в заголовке соединения (100 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 8.41-8.25 (2Н, т), 7.78-7.57 (2Н, т), 7.35-7.24 (2Н, т), 7.09-6.98 (1Н, т), 2.45 (3Н, 5);
УЭЖХ-МС: 0.83 мин, 271 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 12.
4- [(3-Метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]анилин
3-Метил-4-[(4-нитрофенил)окси]-1,2-бензизоксазол (промежуточное соединение 11, 100 мг) растворяли в атмосфере азота в 5,0 мл ЕЮН. Добавляли дигидрат хлорида олова(11) (417 мг, 1,85 ммоль). Реакционную смесь затем перемешивали при 90°С в течение 5 ч. После удаления летучих веществ добавляли воду и реакционную смесь дважды экстрагировали этилацетатом. Собранные органические слои промывали 5%-ным водным раствором №НСО3. сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученное неочищенное вещество очищали с помощью ΝΉ-колонки и элюировали ИСМ/МеОН (100/0, затем градиент от 100/0 до 90/10, затем 90/10) с получением 30 мг указанного в заголовке соединения.
УЭЖХ-МС: 0,63 мин, 241 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 13.
1,1-Диметилэтил-[(1К)-1-метил-2-((4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил)амино)-2оксоэтил] карбамат
{4-[(3-Метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}амин (промежуточное соединение 12, 982 мг) растворяли в 12,0 мл ΌΜΕ. Добавляли ΌΙΡΕΑ (1,07 мл, 6,1 ммоль) и НАТи (1865 мг, 4,9 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин добавляли Ы-{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-О-аланин (928 мг, 4,9 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 2 ч. После удаления летучих веществ остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя градиентом СуНех/ЕЮАе от 100/0% до 0/100% с получением указанного в заголовке соединения (587 мг).
УЭЖХ-МС-В: 0,89 мин, 412 [М+Н]+.
- 38 023768
Промежуточное соединение 14.
Ν1 -(4-[(3 -Метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси] фенил)ГО-аланинамид
1,1-Диметилэтил-[(1К)-1-метил-2-({4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}амино)-2оксоэтил]карбамат (промежуточное соединение 13, 587 мг) растворяли в 10,0 мл ЭСМ и затем добавляли ТРА (5,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После удаления летучих веществ остаток очищали с помощью картриджа 8СX и элюировали ОСМ/МеОН/ИНз (2,0 М раствор в МеОН). Упаривание дало 337 мг указанного в заголовке соединения.
УЭЖХ-МС-В: 0,71 мин, 312 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 15.
-Метилбензол- 1,3-диил-диацетат
5-Метил-1,3-бензолдиол (2,0 г, 16,11 ммоль) растворяли в 20,0 мл дихлорметана и добавляли ТЕА (11,23 мл, 81,0 ммоль). Затем при 0°С добавляли уксусный ангидрид (4,56 мл, 48,30 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 50 ч. После добавления воды (20,0 мл) реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч. Затем фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дихлорметаном (2 раза). Объединенные органические фазы промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (3,33 г).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 6.83 (2Н, Ьг. 5), 6.75 (1Н, Ьг. 5), 2.39 (3Н, 5), 2.31 (6Н, 5);
УЭЖХ-МС: 0,67 мин, 209 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 16.
1-(2,6 -Дигидрокси-4 -метилфенил)этано н \ ОН
он
Раствор 5-метилбензол-1,3-диилдиацетата (промежуточное соединение 15, 3,33 г) в хлорбензоле (5,0 мл) добавляли по каплям к суспензии А1С13 (6,40 г, 48,0 ммоль) в хлорбензоле (15,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и добавляли с помощью пипетки к смеси льда и 2 М водного раствора НС1 (16 мл). Добавляли этилацетат и две фазы разделяли. Органическую фазу промывали 2 раза рассолом, затем сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя градиентом Су-Нех/ЕЮАс от 100/0 до 70/30, затем изократически 70/30, еще градиентом от 70/30 до 50/50 и еще изократически 50/50 с получением указанного в заголовке соединения (940 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 11.89 (2Н, 5), 6.22 (2Н, 5), 2.63 (3Н, 5), 2.19 (3Н, 5);
УЭЖХ-МС: 0,62 мин, 167 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 17.
1-(2,6-Дигидрокси-4-метилфенил)этаноноксим
Раствор гидрохлорида гидроксиламина (470 мг, 6,76 ммоль) и тригидрата ацетата натрия (590 мг, 4,34 ммоль), растворенного в 20 мл смеси ЕЮН/Н20 (7/3), добавляли к раствору 1-(2,6-дигидрокси-4метилфенил)этанона (промежуточное соединение 16, 940 мг) в 15 мл смеси ЕЮН/Н20 (7/3). После кипячения с обратным холодильником и перемешивания в атмосфере Ν2 в течение 2 ч добавляли дополнительное количество гидрохлорида гидроксиламина (159 мг, 2,29 ммоль) и тригидрата ацетата натрия (199 мг), растворенного в 5 мл воды. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры летучие вещества удаляли. Добавляли воду и полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили с получением 829 мг указанного в заголовке соединения.
- 39 023768
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ80-ά6): δ м.д. 10.96 (1Н, 5), 9.80 (2Н, δ), 6.16 (2Н, δ), 2.13 (6Н, Ъг.в). Промежуточное соединение 18.
1-(2,6-Дигидрокси-4-метилфенил)этанон-0-ацетилоксим
К 1-(2,6-дигидрокси-4-метилфенил)этаноноксиму (промежуточное соединение 17, 829 мг) добавляли уксусный ангидрид (2,6 мл, 27,5 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После удаления летучих веществ остаток промывали водой, отфильтровывали и сушили с получением 1,0 г указанного в заголовке соединения.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ80-ά6): δ м.д. 9.58 (2Н, δ), 6.20 (2Н, δ), 2.21-2.18 (6Н, ш), 2.16 (3Н, δ); кислые условия УЭЖХ-МС: 0,58 мин, 224 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 19.
3,6-Диметил-1,2-бензизоксазол-4-ол
К 1-(2,6-дигидрокси-4-метилфенил)этанон-0-ацетилоксиму (промежуточное соединение 18, 1,0 г) добавляли пиридин (10 мл) и реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в атмосфере Ν2 в течение 2 ч. После добавления НС1 (10,0 мл 5 М водного раствора) смесь экстрагировали 3 раза Εΐ20 и объединенные органические фазы промывали НС1 (1Μ). Отделенную органическую фазу затем сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением 345 мг указанного в заголовке соединения.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ80-ά6): δ 10.55 (1Н, δ), 6.85 (1Н, Ъз), 6.47 (1Н, Ъз), 2.53 (3Н, δ), 2.35 (3Н, δ).
Промежуточное соединение 20.
3,6-Диметил-4-[(4-нитрофенил)окси]-1,2-бензизоксазол
3,6-Диметил-1,2-бензизоксазол-4-ол (промежуточное соединение 19, 345 мг) растворяли в ацетонитриле (10,0 мл) и затем добавляли 1-фтор-4-нитробензол (298 мг, 2,11 ммоль) и карбонат калия (877 мг, 6,34 ммоль). Реакционную смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После удаления летучих веществ остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя градиентом сНех/БЮАс от 100/0 до 50/50 с получением указанного в заголовке соединения (208 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ80-ά6): δ м.д. 8.36-8.26 (2Н, ш), 7.46 (1Н, δ), 7.33-7.26 (2Н, ш), 6.91 (1Н, δ), 2.47 (3Н, δ), 2.39 (3Н, δ);
УЭЖХ-МС: 0,84 мин, 285 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 21.
(4-[(3,6-Диметил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил)амин
3,6-Диметил-4-[(4-нитрофенил)окси]-1,2-бензизоксазол (промежуточное соединение 20, 208 мг) растворяли в этаноле (10,0 мл) и добавляли дигидрат хлорида олова (991 мг, 4,39 ммоль). Реакционную смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч. После удаления летучих веществ добавляли воду и реакционную смесь экстрагировали два раза этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением 260 мг указанного в заголовке соединения.
УЭЖХ-МС: 0,60 мин, 255 [М+Н]+.
- 40 023768
Промежуточное соединение 22.
1,1 -Диметилэтил-[(1К)-2-((4-[(3,6-диметил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси] фенил)амино)-1-метил-2оксоэтил] карбамат
{4-[(3,6-Диметил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}амин (промежуточное соединение 21, 260 мг) растворяли в 8,0 мл ΌΜΡ. Добавляли ЭРЕА (0,188 мл, 1,074 ммоль) и НАТИ (327 мг, 0,86 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин добавляли ^{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-Э-аланин (163 мг, 0,86 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 2 ч. После удаления летучих веществ остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя градиентом сНех/ЕЮАс от 100/0 до 0/100 с получением указанного в заголовке соединения (74 мг).
УЭЖХ-МС-В: 0,93 мин, 426 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 23.
^-{4-[(3,6-Диметил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси] фенил}-Э-аланинамид
1,1-Диметилэтил-[(1К)-2-({4-[(3,6-диметил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}амино)-1-метил-2оксоэтил]карбамат) (промежуточное соединение 22, 74 мг) растворяли в 3,0 мл дихлорметана. Добавляли ТРА (1,5 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После удаления летучих веществ остаток очищали с помощью картриджа δСX и элюировали ^СΜ/ΜеΟН/NНз (2,0 М раствор в МеОН). После выпаривания летучих веществ получили 54 мг указанного в заголовке соединения.
УЭЖХ-МС-В: 0,76 мин, 326 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 24.
1,1 -Диметилэтил[ 1,1 -диметил-2-({4-[(3 -метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси] фенил}амино)-2оксоэтил] карбамат
{4-[(3-Метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}амин (промежуточное соединение 23, 30 мг) растворяли в 5,0 мл ΌΜΡ. Добавляли ЭРЕЛ (0,033 мл, 0,19 ммоль) и НАТИ (57 мг, 0,15 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин добавляли ^{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-2-метилаланин (30,5 мг, 0,15 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 2 ч. После удаления летучих веществ остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюируя градиентом сНех/ЕЮАс (от 100/0 до 0/100) с получением указанного в заголовке соединения (34 мг).
УЭЖХ-МС-В: 0,91 мин, 426 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 25.
2-МетилА-(4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}аланинамид
1,1 -Диметилэтил-[1,1 -диметил-2-({4-[(3 -метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси] фенил}амино)-2оксоэтил]карбамат (промежуточное соединение 24, 34 мг) растворяли в 4,0 мл дихлорметана и затем добавляли ТРА (1,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. По- 41 023768 сле удаления летучих веществ остаток загружали на картридж 8СX и элюировали последовательно дихлорметаном, МеОН, ΝΗ3 (2,0 М раствор в МеОН). Упаривание дало 18 мг указанного в заголовке соединения.
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 7.84-7.70 (2Н, т), 7.60-7.49 (1Н, т), 7.45-7.36 (1Н, т), 7.21-7.13 (2Н, т), 6.61-6.51 (1Н, т), 2.60 (3Н, 5), 1.33 (6Н, 5);
основные условия УЭЖХ-МС: 0,79 мин, 326 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 26.
1,3-бис-( [(Метилокси)метил] окси)бензол
Резорцин (3,0 г, 27,2 ммоль) растворяли в ЭМР (50,0 мл) и при 0°С добавляли ЫН (4,36 г, 109 ммоль, 60 мас.%). После перемешивания при той же температуре в течение 30 мин добавляли хлорметилметиловый эфир (8,28 мл, 109 ммоль) и реакционную смесь оставляли достигать комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь гасили насыщенным водным раствором №-1НСО3 и экстрагировали этилацетатом. Собранные органические слои затем промывали рассолом, сушили, фильтровали и упаривали. Полученный остаток загружали на колонку с силикагелем и элюировали смесью циклогексан/ЕЮАс (от 100/0 до 50/50) с получением указанного в заголовке соединения (4,94 г).
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 7.26-7.15 (1Н, т), 6.71-6.65 (3Н, т), 5.18 (4Н, 5) 3.39 (6Н, 5).
Промежуточное соединение 27.
1-(2,6-бис-([(Метилокси)метил]окси}фенил)-1-пропанон
1,3-бис-{[(Метилокси)метил]окси}бензол (промежуточное соединение 26, 2,02 г) растворяли в атмосфере азота в ТНР (7,0 мл) и добавляли раствор ВиЫ (7,64 мл 1,6 М раствора в гексане, 12,2 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч и охлаждения до -78°С добавляли пропионовый ангидрид (5,23 мл, 40,8 ммоль) и смесь перемешивали при той же температуре в течение 15 мин. После гашения водой смесь экстрагировали этилацетатом. Собранные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенную фазу затем загружали на колонку с силикагелем и элюировали смесью циклогексан/ЕЮАс (от 10/0 до 9/1, затем 9/1, затем от 9/1 до 8/2, затем 8/2) с получением указанного в заголовке соединения (1,706 г).
1Н ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-а6): δ м.д. 7.32-7.23 (1Н, т), 6.81 (2Н, ά), 5.18 (4Н, 5) 3.34 (6Н, 5), 2.71 (2Н, ф, 1.06 (3Н, ΐ).
Промежуточное соединение 28.
1-(2,6-Дигидроксифенил)-1-пропанон
1-(2,6-бис-{[(Метилокси)метил]окси}фенил)-1-пропанон (промежуточное соединение 27, 1,7 г) растворяли в метаноле (50,0 мл) и добавляли водный раствор НС1 (26,7 мл, 53,5 ммоль 2 М водного раствора). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. После гашения водой реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (1,11 г).
1Н ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-а6): δ м.д. 11.59 (2Н, Ьг. 5), 7.25-7.17 (1Н, т), 6.37 (2Н, ά), 3.06 (2Н, ф, 1.07 (3Н, ΐ).
Промежуточное соединение 29.
1-(2,6-Дигидроксифенил)-1-пропаноноксим
Раствор гидрохлорида гидроксиламина (510 мг, 7,3 ммоль) и тригидрата ацетата натрия (629 мг, 4,6 ммоль), растворенного в 20 мл смеси ЕЮН/Н2О (7/3), добавляли к раствору 1-(2,6-дигидроксифенил)-1- 42 023768 пропанона (промежуточное соединение 28, 1,0 г) в 15 мл смеси ЕйОН/Н2О (7/3). После кипячения с обратным холодильником и перемешивания в атмосфере Ν2 в течение ночи добавляли дополнительное количество гидрохлорида гидроксиламина (510 мг, 7,3 ммоль) и тригидрата ацетата натрия (629 мг, 4,6 ммоль), растворенного в 4,5 мл воды. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником еще 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры летучие вещества удаляли. Затем добавляли воду и реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (1,05 г).
УЭЖХ: 0,41 мин, 182 [М+Н]+; 0,47 мин, 182 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 30.
1-(2,6-Дигидроксифенил)-1-пропанон-О-ацетилоксим
1-(2,6-Дигидроксифенил)-1-пропаноноксим (промежуточное соединение 29, 716 мг) перемешивали в уксусном ангидриде (2,24 мл, 23,7 ммоль) при комнатной температуре в течение 1 ч. После удаления летучих веществ остаток промывали водой, фильтровали и сушили. Неочищенное соединение загружали на колонку с силикагелем (система Вю1аде 8Р1) и элюировали смесью циклогексан/ЕЮАс (от 100/0 до полностью 0/100) с получением указанного в заголовке соединения (269 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 9.49 (2Н, Ьг. 5), 7.01-6.91 (1Н, т), 6.32 (2Н, ά), 2.54 (2Н, ς), 1.97 (3Н, 5), 1.02 (3Н, ΐ).
Промежуточное соединение 31.
3-Этил-1,2-бензизоксазол-4-ол и 2-этил-1,3-бензоксазол-4-ол
1-(2,6-Дигидроксифенил)-1-пропанон-О-ацетилоксим (промежуточное соединение 30, 269 мг) растворяли в пиридине (10,0 мл) и перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 суток. После добавления водного раствора НС1 (5М) реакционную смесь экстрагировали 3 раза этилацетатом и объединенные органические слои промывали водным раствором НС1 (1М). Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток загружали на колонку с силикагелем (система ВЮаде 8Р1) и элюировали смесью циклогексан/ЕЮАс (от 1/0 до 1/1, затем 1/1, затем от 1/1 до 0/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде смеси 3-этил-1,2бензизоксазол-4-ола и 2-этил-1,3-бензоксазол-4-ола (38 мг).
УЭЖХ: 0,59 мин, 164 [М+Н]+; 0,61 мин, 164 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 32.
-Этил-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси] -1,2-бензизоксазол
Смесь 3-этил-1,2-бензизоксазол-4-ола и 2-этил-1,3-бензоксазол-4-ола (промежуточное соединение 31, 38 мг) растворяли в ΌΜΡ (3,0 мл) и добавляли 2-хлор-5-нитропиридин (36,9 мг, 0,23 ммоль), а затем карбонат калия (97 мг, 0,70 ммоль). Реакционную смесь нагревали при микроволновом излучении при 110°С в течение 1 ч. После удаления летучих веществ неочищенную смесь загружали на колонку с силикагелем и элюировали смесью циклогексан/ЕЮАс (от 1/0 до 1/1) с получением указанного в заголовке соединения (9,5 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, 1)\18О-с16): δ м.д. 9.06-9.01 (1Н, т), 8.75-8.68 (1Н, т), 7.76-7.65 (2Н, т), 7.47 (1Н, ά), 7.27-7.22 (1Н, т), 2.73-2.67 (2Н, т), 1.20 (3Н, ΐ).
УЭЖХ: 0,77 мин, 286 [М+Н]+.
- 43 023768
Промежуточное соединение 33.
6-[(3 -Этил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси] -3 -пиридинамин
3-Этил-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]-1,2-бензизоксазол (промежуточное соединение 32, 9 мг) растворяли в 3,0 мл этанола. Затем добавляли дигидрат хлорида олова(П) (21,4 мг, 0,095 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 3 ч. После гашения водой и экстракции этилацетатом органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения.
УЭЖХ: 0,62 мин, 256 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 34.
1,1 -Диметилэтил-{ (1К)-1-[((6-[(3 -этил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси] -3 пиридинил)амино)карбонил] пропил} карбамат
6-[(3-Этил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]-3-пиридинамин (промежуточное соединение 33) растворяли в ИМР (0,5 мл) и добавляли к смеси (2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановой кислоты (7,7 мг, 0,038 ммоль), ИГОЕА (0,008 мл, 0,047 ммоль) и НАТИ (14,4 мг, 0,038 ммоль) в 1 мл ИМР. Реакционную смесь затем перемешивали при 50°С в течение 2 ч. После удаления ИМР добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток затем загружали на колонку с силикагелем (система Вю1адс §Р1) и элюировали смесью циклогексан/ЕЮАс (от полностью 10/0 до 7/3, затем 7/3) с получением указанного в заголовке соединения (4,4 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СИС1з):8 м.д. 8.24-8.17 (2Н, т), 7.55-7.47 (1Н, т), 7.44-7.34 (1Н, т), 7.08-7.00 (1Н, т), 6.96-6.89 (1Н, т), 5.00 (1Н, Ъг. 5), 4.21-4.10 (1Н, т), 2.94 (2Н, ф, 2.08-1.97 (1Н, т), 1.80-1.70 (1Н, т), 1.50 (9Н, 5), 1.38 (3Н, ΐ), 1.07 (3Н, ΐ).
УЭЖХ: 0,78 мин, 441 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 35.
(2К)-2-Амино-^{6-[(3-этил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]-3-пиридинил}бутанамид
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({6-[(3-этил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]-3-пиридинил}амино)карбонил]пропил}карбамат (промежуточное соединение 34, 4,4 мг) растворяли в дихлорметане (1,0 мл) и при 0°С добавляли ТРА (0,100 мл, 1,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 2 ч. После удаления летучих веществ остаток загружали на картридж §СX и элюировали смесью ИСМ/Мс0НКН3 (2,0 М в МеОН) с получением указанного в заголовке соединения.
УЭЖХ: 0,53 мин, 341 [М+Н]+.
- 44 023768
Промежуточное соединение 36.
1-(2,6-бис-{[(Метилокси)метил]окси}фенил)-2-метил-1-пропанон
1,3-бис-{[(Метилокси)метил]окси}бензол (промежуточное соединение 35, 2,2 г) растворяли в атмосфере азота в ТНР (8,0 мл) и добавляли раствор ВиЫ (8,32 мл 1,6 М раствора в гексане, 13,3 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч охлаждали до -78°С, добавляли 2метилпропаноилхлорид (4,65 мл, 44,4 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 1 ч. После гашения водой реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток затем загружали на колонку с силикагелем (система Вю1аде 8Р1) и элюировали смесью циклогексан/ЕЮАс (от полностью 10/0 до 9/1, затем 9/1, затем от 9/1 до 8/2, затем 8/2) с получением указанного в заголовке соединения (825 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Θ-ά6): δ м.д. 7.35-7.24 (1Н, т), 6.87-6.77 (2Н, т), 5.18 (4Н, 8), 3.36 (6Н, 8), 3.01-2.90 (1Н, т), 1.12-1.06 (6Н, т).
Указанное в заголовке соединение также получали следующим альтернативным путем.
1,3-бис-{[(Метилокси)метил]окси}бензол (промежуточное соединение 35, 1,099 г) растворяли в атмосфере азота в ТНР (5,0 мл) и добавляли раствор ВиЫ (4,16 мл 1,6 М раствора в гексане, 6,65 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч охлаждали при -78°С, добавляли изомасляный ангидрид (3,68 мл, 22,2 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 15 мин. После гашения водой смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток затем загружали на колонку с силикагелем и элюировали смесью циклогексан/этилацетат (от полностью 10/0 до 9/1, затем 9/1) с получением 759 мг указанного в заголовке соединения.
Промежуточное соединение 37.
1-(2,6-Дигидроксифенил)-2-метил-1-пропанон
ОН О
-- он
1-(2,6-бис-{[(Метилокси)метил]окси}фенил)-2-метил-1-пропанон (промежуточное соединение 36, 1,58 г, 5,89 ммоль) растворяли в метаноле (40,0 мл) и добавляли водный раствор НС1 (23,6 мл 2 М водного раствора, 47,1 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч. После гашения водой реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (916 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Θ-ά6): δ м.д. 11.01 (2Н, Ьг. 8), 7.15 (1Н, ί), 6.39-6.34 (2Н, т), 3.64-3.55 (1Н, т), 1.09 (6Н, ά).
Промежуточное соединение 38.
1-(2,6-Дигидроксифенил)-2-метил-1-пропаноноксим
ОН ΝΟΗ
1-(2,6-Дигидроксифенил)-2-метил-1-пропанон (промежуточное соединение 37, 416 мг) растворяли в пиридине (2,0 мл) и добавляли гидрохлорид гидроксиламина (209 мг, 3,0 ммоль). Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После ночи добавляли дополнительное количество гидрохлорида гидроксиламина (64 мг, 0,92 ммоль) и смесь нагревали при 100°С в течение 3 ч. После удаления летучих веществ неочищенный остаток обрабатывали водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (370 мг).
УЭЖХ: 0,47 мин, 196 [М+Н]+; 0,50 мин, 196 [М+Н]+.
- 45 023768
Промежуточное соединение 39.
1-(2,6-Дигидроксифенил)-2-метил-1-пропанон-О-ацетилоксим
1-(2,6-Дигидроксифенил)-2-метил-1-пропаноноксим (промежуточное соединение 38, 320 мг) перемешивали в уксусном ангидриде (0,928 мл, 9,84 ммоль) при комнатной температуре в течение 1 ч. После удаления летучих веществ неочищенный остаток промывали водой, фильтровали и сушили. Полученный остаток загружали на колонку с силикагелем (система Вю1аде §Р1) и элюировали смесью циклогексан/этилацетат (от 100/0 до 0/100) с получением указанного в заголовке соединения (127 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά6): δ м.д. 9.42 (2Н, Ьг. 5), 6.95 (1Н, ΐ), 6.31 (2Н, б), 2.91-2.77 (1Н, т), 1.97 (3Н, 5), 1.11 (6Н, б).
Промежуточное соединение 40.
3-(1 -Метилэтил)-1,2-бензизоксазол-4-ол и 2-(1 -метилэтил)-1,3-бензоксазол-4-ол
1-(2,6-Дигидроксифенил)-2-метил-1-пропанон-О-ацетилоксим (промежуточное соединение 39, 100 мг) растворяли в пиридине (4,0 мл) и перемешивали при дефлегмации в течение 5 суток. После добавления водного раствора НС1 (5Μ) реакционную смесь экстрагировали 3 раза этилацетатом и объединенные органические слои промывали водным раствором НС1 (1 Μ). Органическую фазу затем сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток загружали на колонку с силикагелем (система Вю1аде 8Р1) и элюировали смесью циклогексан/ЕЮАс (от 1/0 до 1/1, затем 1/1, затем от 1/1 до 0/1) с получением 13 мг смеси указанных в заголовке соединений 3-(1-метилэтил)-1,2-бензизоксазол-4ола и 2-(1-метилэтил)-1,3-бензоксазол-4-ола.
УЭЖХ: 0,64 мин, 178 [М+Н]+; 0,65 мин, 178 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 41.
3-(1 -Метилэтил)-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]-1,2-бензизоксазол
Смесь 3-(1-метилэтил)-1,2-бензизоксазол-4-ола и 2-(1-метилэтил)-1,3-бензоксазол-4-ола (промежуточное соединение 40, 13 мг) растворяли в ΌΜΡ (2,0 мл) и добавляли 2-хлор-5-нитропиридин (11,6 мг, 0,073 ммоль), а затем карбонат калия (30 мг, 0,22 ммоль). Реакционную смесь нагревали при микроволновом излучении при 110°С в течение 1 ч. После удаления летучих веществ полученный остаток загружали на колонку с силикагелем (система Вю1аде 8Р1) и элюировали смесью циклогексан/ЕЮАс (от 10/0 до 9/1, затем 9/1, затем от 9/1 до 8/2) с получением указанного в заголовке соединения (8,7 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ м.д. 9.08 (1Н, б), 8.64-8.58 (1Н, т), 7.65-7.57 (1Н, т), 7.55-7.48 (1Н, т), 7.23-7.19 (1Н, т), 7.08 (1Н, б), 3.24-3.13 (1Н, т), 1.40 (6Н, б);
УЭЖХ: 0,80 мин, 300 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 42.
6-([3 -(1 -Метилэтил)-1,2-бензизоксазол-4-ил]окси)-3 -пиридинамин
3-(1-Метилэтил)-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]-1,2-бензизоксазол (промежуточное соединение 41, 8,7 мг) растворяли в 3,0 мл этанола. Добавляли дигидрат хлорида олова(11) (19,7 мг, 0,087 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 3 ч. После гашения водой и экстракции этилацетатом объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения.
УЭЖХ: 0,67 мин, 270 [М+Н]+.
- 46 023768
Промежуточное соединение 43.
1,1 -Диметилэтил-((1К)-1{ [(6-{ [3 -(1 -метилэтил)-’ ,2-бензизоксазол-4-ил]окси}-3 пиридинил)амино]карбонил}пропил)карбамат
6-{[3-(1-Метилэтил)-1,2-бензизоксазол-4-ил]окси}-3-пиридинамин (промежуточное соединение 42) растворяли в ΌΜΡ (0,5 мл) и добавляли к смеси (2К)-2-({[(1,1диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановой кислоты (7,09 мг, 0,035 ммоль), ΌΓΡΕΑ (7,6 мкл, 0,044 ммоль) и НАТИ (13,26 мг, 0,035 ммоль) в 1 мл ΌΜΡ. Реакционную смесь затем перемешивали при 50°С в течение 1 ч. После удаления ΌΜΡ добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток загружали на колонку с силикагелем (система Вю!аде 8Р1) и элюировали смесью циклогексан/ЕЮАс (от 10/0 до 7/3, затем 7/3) с получением указанного в заголовке соединения (2 мг).
УЭЖХ: 0,81 мин, 455 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 44.
(2К)-2-Амино-Ы-(6-{ [3 -(1 -метилэтил)-’ ,2-бензизоксазол-4-ил]окси}-3 -пиридинил}бутанамид
1,1 -Диметилэтил-((1К)-1-{ [(6-{ [3 -(1 -метилэтил)-’ ,2-бензизоксазол-4-ил]окси}-3 пиридинил)амино]карбонил}пропил)карбамат (промежуточное соединение 43, 2,0 мг) растворяли в дихлорметане (1,0 мл) и при 0°С добавляли ТРА (0,05 мл, 0,65 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при той же температуре в течение 2 ч. После удаления летучих веществ полученный остаток загружали на картридж 8СX и элюировали смесью ^СΜ/ΜеΟН/NН3, (2,0 М в МеОН) с получением указанного в заголовке соединения.
УЭЖХ: 0,56 мин, 355 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 45.
1-(Метилокси)-3-{[(метилокси)метил]окси}бензол
О „О
К раствору 3-(метилокси)фенола (10,38 г, 84 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл, 8СКС) порциями при охлаждении на льду добавляли NаН (60 мас.%, 1,824 г, 76 ммоль, АИпсН). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем добавляли бромметилметиловый эфир (9,5 г, 76 ммоль, 8СКС). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и добавляли воду (50 мл). Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (2 раза по 50 мл, 8СКС) и объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕЮАс:РЕ; 1:100) с получением указанного в заголовке соединения (10,2 г) в виде бесцветной жидкости.
Промежуточное соединение 46.
2-Йод-1 -(метилокси)-3-{ [(метилокси)метил]окси}бензол
К раствору 1-(метилокси)-3-{[(метилокси)метил]окси}бензола (промежуточное соединение 45, 10 г, 59,5 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл, 8СКС), предварительно охлажденному до -78°С, добавляли по каплям ВиЫ (2,5 М в ТНР, 28,5 мл, 71,3 ммоль, 8СКС), поддерживая внутреннюю температуру ниже -70°С. После завершения добавления смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч и добавляли по кап- 47 023768 лям раствор йода (15,09 г, 59,5 ммоль, 8СКС) в ТНР (50 мл, 8СКС). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре и гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония (100 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3 раза по 300 мл, 8СКС) и объединенные органические слои сушили, упаривали и очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюентов ЕЮАс: РЕ (1/100) с получением указанного в заголовке соединения (16,2 г) в виде желтой жидкости.
Промежуточное соединение 47.
2-Йод-3 -(метилокси)фенол
В раствор 2-йод-1-(метилокси)-3-{[(метилокси)метил]окси}бензола (промежуточное соединение 46, 16,2 г, 55,1 ммоль) в дихлорметане (100 мл, 8СКС) барботировали НС1 (г) в течение 30 мин. ТЬС показала, что реакция завершена. Реакционную смесь вливали в водный насыщенный раствор №НС03 (200 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3x200 мл, 8СКС). Объединенные органические слои сушили, упаривали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕЮАс:РЕ, 1:50) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой жидкости (10,3 г).
Промежуточное соединение 48.
2-Йод-1-(метилокси)-3-[(2-метил-2-пропен-1-ил)окси]бензол
К раствору 2-йод-3-(метилокси)фенола (промежуточное соединение 47, 10,3 г) в ЭМР (100 мл, 8СКС) порциями добавляли КаН (60 мас.%, 1,977 г, 49,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и добавляли 3-хлор-2-метил-1-пропен (3,73 г, 41,2 ммоль, А1бпсН). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и добавляли воду (50 мл). Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (3 раза по 200 мл, 8СКС) и объединенные органические слои сушили, упаривали и очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюентов ЕЮАс/РЕ (1/30) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой жидкости (11,6 г).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д.: 7.25 (1Н, ΐ), 6.52-6.47 (2Н, т), 5.21 (1Н, 5), 5.01 (1Н, 5), 4.49 (2Н, 5), 3.89 (3Н, 5), 1.87 (3Н, 5).
Промежуточное соединение 49.
3,3-Диметил-4-(метилокси)-2,3-дигидро-1 -бензофуран
К раствору 2-йод-1-(метилокси)-3-[(2-метил-2-пропен-1-ил)окси]бензола (промежуточное соединение 48, 6,08 г) в толуоле (50 мл, 8СКС) добавляли ΑIΒN (3,61 г, 21,99 ммоль, 8СКС) и трибутилстаннан (11,60 г, 40,0 ммоль, А1бпсН). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (100 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (3 раза по 200 мл, 8СКС). Объединенные органические слои сушили, упаривали и очищали хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюентов ЕЮАс/РЕ (1/50) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой жидкости (2,7 г).
1Н ЯМР (400 МГц, ЭМ80-б6) δ м.д.: 7.05 (1Н, ΐ), 6.50 (1Н, б), 6.39 (1Н, б), 4.14 (2Н, 5), 3.77 (3Н, 5), 1.34 (6Н, 5).
Промежуточное соединение 50.
3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ол
К раствору 3,3-диметил-4-(метилокси)-2,3-дигидро-1-бензофурана (промежуточное соединение 49, 4,0 г) в дихлорметане (100 мл, 8СКС) по каплям при охлаждении на льду добавляли ВВг3 (6,37 мл, 67,3 ммоль, 8СКС). После завершения добавления реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре и затем добавляли воду (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3 раза по 100 мл, 8СКС) и объединенные органические слои сушили, упаривали и очищали хроматографи- 48 023768 ей на силикагеле с использованием ЕЮАс/РЕ в качестве элюентов (1/20) с получением указанного в заголовке соединения (2,8 г).
Ή ЯМР (400 МГц, СГОСЬ) δ м.д.: 6.98-6.94 (1Н, ΐ), 6.41-6.39 (1Н, ДД), 6.25-6.23 (1Н, ДД), 4.21 (2Н, 5),
1.45 (6Н, 5);
ΜС 2: 163 [М-Н]-.
Промежуточное соединение 51.
2-Бром-3 -гидроксифенилацетат
О
К раствору 2-бром-1,3-бензолдиола (3,028 г, 16,02 ммоль) в дихлорметане (70 мл) добавляли при перемешивании ТЕА (3,35 мл, 24,03 ммоль) и уксусный ангидрид (1,512 мл, 16,02 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 раза по 70 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде черного масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии (3,028 г).
УЭЖХ В: 0,41 мин, 229 [М-Н]-.
Промежуточное соединение 52.
2-Бром-3-[(2-метил-2-пропен-1 -ил)окси] фенилацетат
К раствору 2-бром-3-гидроксифенилацетата (промежуточное соединение 51, 3028 мг) в ацетонитриле (60 мл) добавляли карбонат калия (3623 мг, 26,2 ммоль) и 3-бром-2-метил-1-пропен (2123 мг, 15,73 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь промывали водой (3 раза по 60 мл). Органическую фазу отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле с использованием колонки 100дδΝΑΡ и смеси циклогексан/этилацетат от 100/0 до 80/20 в качестве элюента с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (2,324 г).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 7.27 (1Н, ΐ), 6.68 (1Н, ДД), 5.19 (1Н, 5), 5.04 (1Н, 5), 4.53 (2Н, 5), 2.38 (3Н, 5), 1.88 (3Н, 5);
УЭЖХ: 0,81 мин, 285 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 53.
3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-илацетат
К раствору 2-бром-3-[(2-метил-2-пропен-1-ил)окси]фенилацетата (промежуточное соединение 52, 2,324 г) в толуоле (20 мл) добавляли ΑΣΒΝ (1,606 г, 9,78 ммоль) и трибутилстаннан (4,73 г, 16,30 ммоль). Реакционную смесь перемешивали и нагревали при 100°С в течение 2 ч, затем оставляли при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь гасили водой (60 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 раза по 50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле с использованием колонки 100§-δΝΑΡ и смеси циклогексан/этилацетат от 100/0 до 70/30 в качестве элюента с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (1,290 г).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 7.13 (1Н, ΐ), 6.68 (1Н, Д), 6.59 (1Н, Д), 4.22 (2Н, 5), 2.33 (3Н, 5), 1.39 (6Н, 5).
УЭЖХ: 0,72 мин, 207 [М+Н]+.
- 49 023768
Промежуточное соединение 50.
3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ол
ОН
Данный способ является альтернативным тому, который описан выше для промежуточного соединения 50. К раствору 3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-илацетата (промежуточное соединение 53, 1,290 г) в метаноле (50 мл) добавляли раствор гидроксида натрия (0,375 г, 9,38 ммоль) в воде (25,00 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь затем подкисляли 5%-ной НС1 до рН 5 и экстрагировали этилацетатом (3 раза по 50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэшхроматографией на силикагеле с использованием колонки 25§-§NЛΡ и смеси циклогексан/этилацетат от 100/0 до 80/20 в качестве элюента с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (855 мг).
УЭЖХ-МС: 0,65 мин, 165 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 54.
3,3-Диметил-4-[(4-нитрофенил)окси] -2,3-дигидро-1-бензофуран
К раствору 3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ола (промежуточное соединение 50, 652 мг) и 1-фтор-4-нитробензола (532 мг, 3,77 ммоль) в ацетонитриле (30 мл, БСКС) добавляли карбонат калия (552 мг, 4 ммоль, БСКС). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. После охлаждения реакционную смесь фильтровали и фильтрат упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой жидкости (0,95 г), которую непосредственно использовали на следующей стадии.
Промежуточное соединение 55.
4-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]анилин
К раствору 3,3-диметил-4-[(4-нитрофенил)окси]-2,3-дигидро-1-бензофурана (промежуточное соединение 54, 0,9 г) в тетрагидрофуране (20 мл, БСКС) и воде (10 мл) добавляли хлорид аммония (1,687 г, 31,5 ммоль, БСКС) и порошок цинка (1,031 г, 15,77 ммоль, БСКС). Смесь нагревали при 40°С в течение 2 ч и затем фильтровали через набивку целита. Фильтрат распределяли между водой (20 мл) и этилацетатом (50 мл, БСКС). Органический слой сушили, упаривали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕЮАс/РЕ, от 1/50 до 1/30) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой жидкости (0,625 г, 76%).
МС-2 (ИЭР): 256 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 56.
1,1-Диметилэтил-[(1К)-2-({4-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]фенил}амино)-1метил-2 -оксоэтил] карбамат
К раствору 4-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]анилина (промежуточное соединение 55, 255 мг) и ^{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-Э-аланина (227 мг, 1,199 ммоль, БСКС) в ΌΜΡ (10 мл, БСКС) добавляли НАТИ (570 мг, 1,498 ммоль, БСКС) и ЭРЕА (0,523 мл, 3,00 ммоль, БСКС). Смесь нагревали при 100°С в микроволновой печи в течение 1 ч. К этой смеси добавляли воду (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 раза по 50 мл, БСКС). Объединенные органические слои сушили, упаривали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕЮАс/РЕ, от 1/50 до 1/20) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (328 мг).
МС-2 (ИЭР): 371 [Μ-55]+.
- 50 023768
Промежуточное соединение 57.
^-{4-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] фенил} -Э-аланинамид :Л
ΝΗ
В раствор 1,1-диметилэтил-[(1К)-2-({4-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4ил)окси]фенил}амино)-1-метил-2-оксоэтил]карбамата (промежуточное соединение 56, 325 мг) в этилацетате (20 мл, δΟΡ£) барботировали НС1 (газ) в течение 0,5 ч. Реакционную смесь нейтрализовали насыщенным водным раствором карбоната натрия с рН 7 и экстрагировали этилацетатом (3 раза по 100 мл, δΟΤΟ). Объединенные органические слои сушили и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой жидкости (215 мг).
МС-2 (ИЭР): 327 [М-Н]+.
Промежуточное соединение 58.
2-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-нитропиридин
В большом сосуде для микроволновой обработки растворяли 2-хлор-5-нитропиридин (386 мг, 2,436 ммоль) в 4 мл диметилформамида. Добавляли 3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ол (промежуточное соединение 57, 400 мг) и карбонат калия (2,02 г, 14,62 ммоль). Реакционную смесь нагревали при микроволновом излучении в течение 30 мин при 110°С (Вю!аде 1тДа!ог). Реакционную смесь фильтровали. Отфильтрованное твердое вещество промывали дихлорметаном (30 мл). Летучие вещества выпаривали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (оборудование Сотрашоп, картридж 120 д) с использованием циклогексана в качестве элюента с получением указанного в заголовке соединения (470 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ): δ м.д. 9.00 (1Н, Д), 8.59 (1Н, ДД), 6.99-7.33 (2Н, т), 6.66 (1Н, Д), 6.57 (1Н, Д), 4.20 (2Н, е), 1.17-1.35 (6Н, т);
УЭЖХ: 0,88 мин, 287 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 59.
6-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси] -3 -пиридинамин
2-{[3-(1-Метилэтил)фенил]окси}-5-нитропиридин (промежуточное соединение 58, 465 мг) растворяли в этаноле (8 мл). Добавляли моногидрат гидразина (156 мг, 3,25 ммоль, 2 экв.) и палладий на углероде (121 мг, 0,114 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником под аргоном в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали и затем фильтровали через целит. Органическую фазу упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла (300 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ): δ м.д. 7.65 (1Н, Д), 7.21 (1Н, ДД), 7.03 (1Н, !), 6.73 (1Н, Д), 6.51 (1Н, Д), 6.26 (1Н, Д), 4.21 (2Н, е), 1.40 (6Н, е);
УЭЖХ: 0,64 мин, 257 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 60.
1,1-Диметилэтил-[(1К)-2-({6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)-1-метил-2-оксоэтил]карбамат
К раствору ^{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-Э-аланина (35,4 мг, 0,156 ммоль) в безводном Ν,Ν-диметилформамиде (3 мл) добавляли Э1РЕА (0,041 мл, 0,264 ммоль) и затем НАТИ (71 мг, 0,187 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре под аргоном. Затем добавляли 6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинамин (промежуточное соединение 59, 40 мг) и реакционную смесь перемешивали 3 ч при 60°С под аргоном. Реакционную смесь упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (система Сотрашоп, картридж 2х12д=24д) с использованием градиента циклогексан/этилацетат от 100/0 до 70/30 с получением указанного в заголовке соединения (43 мг).
- 51 023768 1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ): δ м.д. 8.35 (1Н, б), 8.08 (1Н, бб), 7.11 (1Н, ΐ), 6.93 (1Н, б), 6.60 (1Н, б),
6.45 (1Н, б), 4.21 (2Н, к), 4.15-4.04 (1Н, т), 1.47-1.33 (18Н, т);
УЭЖХ: 0,78 мин, 428 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 61.
М1-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси] -3 -пиридинил} -Э-аланинамид
К раствору 1,1-диметилэтил-[(1К)-2-({6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)-1-метил-2-оксоэтил]карбамата (промежуточное соединение 60, 35 мг) в сухом дихлорметане (3 мл) медленно при 0°С добавляли ТРА (0,189 мл, 2,456 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при комнатной температуре. Растворитель и избыток ТРА выпаривали и остаток очищали с помощью картриджа 8СХ. Картридж промывали 3 СУ метанола, затем соединение адсорбировали на картридже, промывали 5 СУ метанола и десорбировали 2 СУ метанольного аммиака (1 н.). В результате получали указанное в заголовке соединение (32 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ): δ м.д. 8.41 (1Н, б), 8.14 (1Н, бб), 7.16 (1Н, ΐ), 6.97 (1Н, б), 6.64 (1Н, б), 6.48 (1Н, б), 4.24 (2Н, к), 3.62 (1Н, т), 1.50-1.38 (9Н, т);
УЭЖХ: 0,55 мин, 328 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 62.
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)карбонил]пропил}карбамат
Указанное в заголовке соединение получали способом, аналогичным способу получения Промежуточного соединения 60, заменяя М-{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-Э-аланин (2К)-2-({[(1,1диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановой кислотой (66,6 мг). В результате получали 78 мг указанного в заголовке соединения.
1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ): δ м.д. 8.37-8.32 (1Н, т), 8.07 (1Н, бб), 7.11 (1Н, ΐ), 6.93 (1Н, б), 6.60 (1Н, б), 6.44 (1Н, б), 4.21 (2Н, к), 4.12-4.05 (1Н, т), 1.91-1.78 (1Н, т), 1.74-1.64 (1Н, т), 1.50-1.39 (12Н, т), 1.37-1.30 (6Н, к);
УЭЖХ: 0,81 мин, 442 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 63.
(2К)-2-Амино-М-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}бутанамид
Указанное в заголовке соединение получали способом, аналогичным способу получения Промежуточного соединения 61, заменяя 1,1-диметилэтил-[(1К)-2-({6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4ил)окси]-3-пиридинил}амино)-1-метил-2-оксоэтил]карбамат 1,1-диметилэтил-{(1К)-1-[({6-[(3,3-диметил2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}амино)карбонил]пропил}карбаматом (промежуточное соединение 62, 74 мг). В результате получали 60 мг указанного в заголовке соединения.
1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ): δ м.д. 8.38 (1Н, б), 8.12 (1Н, бб), 7.11 (1Н, ΐ), 6.95 (1Н, б), 6.61 (1Н, б),
6.46 (1Н, б), 4.21 (2Н, к), 3.41 (1Н, т), 1.81 (1Н, т), 1.70 (1Н, т), 1.35 (6Н, к), 1.00 (3Н, ΐ);
УЭЖХ: 0,55 мин, 342 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 64.
2-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-нитропиримидин
К раствору 3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ола (промежуточное соединение 50, 724 мг) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (40 мл) добавляли карбонат калия и 2-хлор-5-нитропиримидин (774 мг, 4,85 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакцион- 52 023768 ную смесь гасили водой (40 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x40 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2x50 мл), отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 50д и циклогексан/этилацетат от 100/0 до 70/30 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (1,257 г) в виде желтого масла.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ80-ά6): δ м.д. 9.46 (2Н, δ), 7.22 (1Н, ΐ), 6.73 (2Н, άά), 4,23 (2Н, δ), 1.24 (6Н, δ); УЭЖХ: 0,75 мин, 288 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 65.
2-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинамин
К раствору 2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-нитропиримидина (промежуточное соединение 64, 1,257 г) в смеси тетрагидрофуран/вода (30 мл/15,00 мл) добавляли железо (1,222 г, 21,88 ммоль) и хлорид аммония (1,170 г, 21,88 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Катализатор отфильтровывали и фильтрат экстрагировали этилацетатом (3x50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток перекристаллизовывали из этилацетата с получением указанного в заголовке соединения (768 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ80-ά6): δ м.д. 7.97 (2Н, δ), 6.94-7.16 (1Н, ш), 6.58 (1Н, ά), 6.44 (1Н, ά), 4.18 (2Н, δ), 3.32 (2Н, Ъг. δ.), 1.25 (6Н, δ);
УЭЖХ: 0,60 мин, 258 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 66.
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинил}амино)карбонил]пропил}карбамат
К раствору (2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановой кислоты (20,14 мг, 0,099 ммоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (1,5 мл) добавляли ΌΛΕΑ (0,029 мл, 0,165 ммоль) и ТВТИ (33,9 мг, 0,106 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре, затем добавляли 2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинамин (промежуточное соединение 65, 17 мг). Реакционную смесь перемешивали в течение 48 ч при комнатной температуре. Смесь разбавляли этилацетатом (5 мл) и промывали рассолом (3x5 мл). Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя колонку Юд-δΝΑΡ и циклогексан/этилацетат от 100/0 до 40/60 в качестве элюента, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (4,4 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.78 (2Н, δ), 7.17 (1Н, ΐ), 6.71 (1Н, ά), 6.61 (1Н, ά), 4.97 (1Н, ά), 4.24 (2Н, δ), 4.18-4.11 (1Н, ш), 2.05-1.97 (1Н, ш), 1.77-1.70 (1Н, ш), 1.49 (9Н, δ), 1.37 (6Н, δ), 1.05 (3Н, ΐ);
УЭЖХ-МС: 0,78 мин, 443 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 67.
(2К)-2-Амино-Н-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}бутанамид
К раствору 1,1-диметилэтил-{(1К)-1-[({2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинил}амино)карбонил]пропил}карбамата (промежуточное соединение 66, 4,4 мг) в дихлорметане (1 мл), охлажденному до 0°С, по каплям добавляли ТРА (0,019 мл, 0,249 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч. Растворитель и ТРА выпаривали. Смесь разбавляли дихлорметаном (5 мл) и подвергали нейтрализации водным насыщенным раствором NаНС03 (5 мл). Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (3 мг), которое непосредственно использовали на следующей стадии.
УЭЖХ-МС: 0,98 мин, 343 [М+Н]+.
- 53 023768
Промежуточное соединение 68.
’-({[(’,’ -Диметилэтил)окси] карбонил}амино)циклобутанкарбоновая кислота
К раствору 1-аминоциклобутанкарбоновой кислоты (626 мг, 5,44 ммоль) в 5,6 мл 1 М водного гидроксида натрия и 4 мл метанола добавляли Вос-ангидрид (1,425 г, 6,53 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. После выпаривания большей части метанола раствор подкисляли 1 М ΗΟ до рН 2 и экстрагировали этилацетатом. Органические экстракты объединяли и промывали рассолом. В результате выпаривания растворителя получали указанное в заголовке соединение (1,09 г).
’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-66): δ м.д. 12.21 (1Н, 5), 7.44 (1Н, 5), 2.29-2.47 (2Н, т), 2.09 (2Н, ф, 1.741.94 (2Н, т), 1.36 (9Н, 5);
УЭЖХ: 0,56 мин, 216 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 69.
1,1-Диметилэтил-{1-[({6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)карбонил]циклобутил}карбамат
К раствору 1-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)циклобутанкарбоновой кислоты (промежуточное соединение 68, 20,16 мг) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (3 мл) добавляли О1РЕА (20,44 мкл, 0,117 ммоль), а затем ΗΑТυ (35,6 мг, 0,094 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре под аргоном. Затем добавляли 6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4ил)окси]-3-пиридинамин (промежуточное соединение 59, 20 мг) и реакционную смесь перемешивали при 60°С под аргоном в течение 12 ч. Реакционную смесь охлаждали и добавляли предварительно перемешанный (15 мин) раствор ΗΑТυ (1 экв.), 1-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)циклобутанкарбоновой кислоты (1 экв.) и 01РЕА (1 экв.) в 1 мл сухого ΌΜΡ. Реакционную смесь нагревали под аргоном в течение дополнительных 12 ч при 60°С. Реакционную смесь упаривали. Полученный остаток очищали на силикагеле (Сотрашоп иМгитсШ). используя циклогексан/этилацетат от 100/0 до 70/30 в качестве элюентов. В результате получали указанное в заголовке соединение (14 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, ΜβΟΌ): δ м.д. 8.29 (1Н, 5), 8.13-7.86 (1Н, т), 7.11 (1Н, ΐ), 7.04-6.76 (1Н, т), 6.60 (1Н, б), 6.45 (1Н, б), 4.21 (2Н, 5), 2.85-2.52 (2Н, т), 2.26-2.09 (2Н, т), 2.07-1.80 (2Н, т), 1.45 (6Н, 5), 1.35 (9Н, 5);
УЭЖХ: 0,95 мин, 454 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 70.
1-Амино-Х-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил} циклобутанкарбоксамид
К раствору 1,1-диметилэтил-{1-[({6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)карбонил]циклобутил}карбамата (промежуточное соединение 69, 23,5 мг) в сухом дихлорметане (3,5 мл) медленно при 0°С добавляли ТРА (159 мкл, 2,07 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Растворитель и избыток ТРА выпаривали и остаток очищали с помощью картриджа 8СХ. Картридж промывали 3 СУ метанола, затем соединение адсорбировали на картридже, промывали 5 СУ метанола и десорбировали 2 СУ метанольного аммиака (1 н.). В результате получали указанное в заголовке соединение (18 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, ΜβΟΌ): δ м.д. 8.43 (1Н, б), 8.11 (1Н, бб), 7.11 (1Н, ΐ), 6.94 (1Н, б), 6.61 (1Н, б), 6.45 (’Н, б), 4.20 (2Н, 5), 2.75-2.70 (2Н, т), 2.18-2.00 (4Н, т), 1.34 (6Н, т);
УЭЖХ: 0,82 мин, 354 [М+Н]+.
- 54 023768
Промежуточное соединение 71.
1-({[(1,1 -Диметилэтил)окси] карбонил}амино)циклопропанкарбоновая кислота
О
Указанное в заголовке соединение (998 мг) получали способом, аналогичным способу получения Промежуточного соединения 68, заменяя 1-аминоциклобутанкарбоновую кислоту 1аминоциклопропанкарбоновой кислотой (550 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-а6): δ м.д. 12.26 (1Н, 5), 7.40 (1Н, 5), 1.38 (9Н, 5), 1.26 (2Н, т), 0.96 (2Н,
т);
УЭЖХ: 0,52 мин, 202 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 72.
1,1-Диметилэтил-{1-[({6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)карбонил]циклопропил}карбамат
Указанное в заголовке соединение (14 мг) получали способом, аналогичным способу получения Промежуточного соединения 69, заменяя 1-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)циклобутанкарбоновую кислоту 1-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)циклопропанкарбоновой кислотой (промежуточное соединение 71, 18,84 мг, 0,094 ммоль).
1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ)Д м.д. 8.30 (1Н, 5), 8.08-7.93 (1Н, т), 7.11 (1Н, ΐ), 6.92 (1Н, ά), 6.60 (1Н, ά), 6.45 (1Н, ά), 4.22 (2Н, 5), 1.58-1.51 (2Н, т), 1.45 (9Н, 5), 1.35 (6Н, 5), 1.12 (2Н, т);
УЭЖХ: 0,78 мин, 440 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 73.
1-Амино-^{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-
Указанное в заголовке соединение (10 мг) получали способом, аналогичным способу получения Промежуточного соединения 70, заменяя 1,1-диметилэтил-{1-[({6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1бензофуран-4-ил)окси] -3 -пиридинил}амино)карбонил] циклобутил}карбамат 1,1 -диметилэтил-{ 1-[({6[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}амино)карбонил]циклопропил}карбаматом (промежуточное соединение 72, 13 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ): δ м.д. 8.39 (1Н, ά), 8.07 (1Н, άά), 7.10 (1Н, ΐ), 6.92 (1Н, ά), 6.59 (1Н, ά), 6.44 (1Н, ά), 4.20 (2Н, 5), 1.40-1.31 (8Н, т), 1.04-0.96 (2Н, т);
УЭЖХ: 0,51 мин, 340 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 74.
1,1 -Диметилэтил-[2-({6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси] -3 -пиридинил}амино)1,1-диметил-2-оксоэтил]карбамат
К раствору ^-{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-2-метилаланина (39,0 мг, 0,192 ммоль) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (3 мл) добавляли Э1РЕА (0,042 мл, 0,240 ммоль), а затем НАТИ (73,0 мг, 0,192 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре под аргоном. Затем добавляли 6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинамин (промежуточное соединение 59, 41 мг) и реакционную смесь перемешивали при 60°С под аргоном. Реакционную смесь оставляли в режиме нагревания в течение 4 ч и его прекращения перед завершением реакции. Реакционную смесь упаривали. Полученный остаток очищали на силикагеле (Сотратоп иЫгитеШ). используя градиент циклогексан/этилацетат от 100/0 до 70/30. В результате получали указанное в заголовке соединение (13 мг).
- 55 023768 1Н ЯМР (400 МГц, МеОН): δ м.д. 9.66 (1Н, 5), 8.28 (1Н, 5), 8.04 (1Н, 5), 7.80-7.51 (1Н, т), 7.11 (1Н, ΐ), 6.92 (1Н, а), 6.60 (1Н, а), 6.45 (1Н, а), 4.21 (2Н, 5), 1.48 (6Н, 5), 1.43 (6Н, 5), 1.35 (9Н, 5);
УЭЖХ: 0,79 мин, 442 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 75.
Ы1-{6-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -3 -пиридинил}-2-метилаланинамид
К раствору 1,1-диметилэтил-[2-({6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)-1,1-диметил-2-оксоэтил]карбамата (промежуточное соединение 74, 11 мг) в сухом дихлорметане (2 мл) медленно при 0°С добавляли ТРА (0,077 мл, 0,997 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Растворитель и избыток ТРА выпаривали и остаток очищали с помощью картриджа 8СХ. Картридж промывали 3 СУ метанола, затем соединение адсорбировали на картридже, промывали 5 СУ метанола и десорбировали 2 СУ метанольного аммиака (1 н.). В результате получали указанное в заголовке соединение (8,5 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ): δ м.д. 8.39 (1Н, а), 8.07 (1Н, аа), 7.11 (1Н, ΐ), 6.92 (1Н, а), 6.59 (1Н, а), 6.43 (1Н, а), 4.21 (2Н, 5), 1.45 (6Н, 5), 1.35 (6Н, 5);
УЭЖХ: 0,50 мин, 342 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 76.
Ν-{ [(1,1-Диметилэтил)окси]карбонил}-3-метил-Э-валин
ОН ..
К раствору 3-метил-Э-валина (900 мг, 6,86 ммоль) в 7 мл 1 М водного гидроксида натрия и 7 мл метанола добавляли Вос-ангидрид (1,797 г, 8,23 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. После выпаривания большей части метанола раствор подкисляли водным раствором НС1 (1М) до рН 2 и три раза экстрагировали этилацетатом (3x20 мл). Органические слои объединяли и промывали рассолом (2x5 мл). В результате выпаривания растворителя получали указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (1,36 г).
1Н ЯМР (400 МГц, 1)\18О-с16): δ м.д. 12.44 (1Н, 5), 6.82 (1Н, а), 3.76 (1Н, а), 1.38 (9Н, 5), 0.93 (9Н, 5);
УЭЖХ: 0,64 мин, 232 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 77.
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинил}амино)карбонил]-2,2-диметилпропил}карбамат
К раствору М-{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-3-метил-Э-валина (промежуточное соединение 76, 53,9 мг) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (1 мл) добавляли Э1РЕА (50,9 мкл, 0,292 ммоль), а затем НАТИ (102 мг, 0,268 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре под аргоном. Затем добавляли 2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинамин (промежуточное соединение 65, 30 мг) и реакционную смесь перемешивали при 60°С под аргоном в течение 12 ч. Реакционную смесь гасили рассолом (1 мл), разбавляли водой (2 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x5 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия и упаривали. Полученный остаток очищали на силикагеле (Сотратоп иМгитеШ), используя градиент циклогексан/этилацетат от 100/0 до 70/30. В результате получали указанное в заголовке соединение (17 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.74 (2Н, 5), 7.14 (1Н, ΐ), 6.67 (1Н, а), 6.57 (1Н, а), 4.53 (1Н, а), 4.20 (2Н, 5), 1.40 (6Н, 5), 1.06 (9Н, 5), 0.98 (9Н, 5);
УЭЖХ: 0,83 мин, 371 [М+Н]+.
- 56 023768
Промежуточное соединение 78.
^-{2-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -5 -пиримидинил} -3 -метил-Э-валинамид
К раствору 1,1-диметилэтил-{(1К)-1-[({2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинил}амино)карбонил]-2,2-диметилпропил}карбамата (промежуточное соединение 77, 13 мг) в сухом дихлорметане (0,5 мл), охлажденному до 0°С, по каплям добавляли ТРА (85 мкл, 1,105 ммоль) и при этой температуре в течение 3 ч перемешивали раствор. Летучие вещества выпаривали. Остаток растворяли в дихлорметане (2 мл) и добавляли водный насыщенный раствор NаНСΟз (4 мл). Слои разделяли, и водный слой дважды экстрагировали дихлорметаном. Собранные органические слои сушили над сульфатом натрия и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (10,9 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.68 (2Н, 5), 7.14 (1Н, ΐ), 6.68 (1Н, ά), 6.59 (1Н, ά), 4.21 (2Н, 5), 3.30 (1Н, 5), 1.70 (2Н, Ьг 5), 1.35 (6Н, 5), 1.07 (9Н, 5);
УЭЖХ: 0,53 мин, 377 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 79.
1,3-бис-{[(Метилокси)метил]окси}бензол
К раствору 1,3-бензолдиола (1,5 г, 13,62 ммоль) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (13,62 мл) при 0°С добавляли гидрид натрия (0,981 г, 40,9 ммоль) и при этой же температуре в течение 15 мин перемешивали реакционную смесь. Быстро добавляли МОМ-С1 (3,10 мл, 40,9 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, позволяя температуре достичь значения комнатной температуры. Реакционную смесь гасили рассолом (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x50 мл). Органический слой промывали рассолом (2x30 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, и остаток очищали флэшхроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку §NΛР 50д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 8:2 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (1,59 г, 8,02 ммоль) в виде бесцветного масла.
Ή ЯМР (400 МГц, ПМ8О-а6): δ м.д. 7.16-7.23 (1Н, ά), 6.69-6.64 (3Н, т), 5.17 (4Н, 5), 3.38 (6Н, 5).
Промежуточное соединение 80.
Этил-(2,6-бис-{[(метилокси)метил]окси}фенил)(оксо)ацетат
К раствору 1,3-бис-{[(метилокси)метил]окси}бензола (промежуточное соединение 79, 2,19 г) в сухом тетрагидрофуране (10 мл) при комнатной температуре добавляли 1,6 М ВиЫ в гексане (8,29 мл, 13,26 ммоль) и при этой же температуре в течение 30 мин перемешивали реакционную смесь. Смесь охлаждали до -78°С и добавляли (путем канюлирования) к раствору этилхлор(оксо)ацетата (2,263 г, 16,57 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (10 мл) при -78°С. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΛΡ 100д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 8:2 в качестве элюента, с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого масла (1,75 г).
Ή ЯМР (400 МГц, ПМШО-сЫ): δ м.д. 7.46 (1Н, ΐ), 6.87 (2Н, ά), 5.20 (4Н, 5), 4.29 (2Н, д), 3.34 (6Н, 5),
- 57 023768
1.27 (3Н, ΐ).
Промежуточное соединение 81.
Этил-2-(2,6-бис-{[(метилокси)метил]окси}фенил)-2-пропеноат
К суспензии бромида метилтрифенилфосфония (3,13 г, 8,75 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (30 мл) при 0°С медленно добавляли ХИМИЗ (1,745 г, 8,75 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С и в течение 45 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и медленно добавляли раствор этил-(2,6-бис-{[(метилокси)метил]окси}фенил)(оксо)ацетата (промежуточное соединение 80, 1,74 г) в сухом тетрагидрофуране (10 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°С. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (10 мл), разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией (система Βίο1аде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 100д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 8:2 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (1,37 г).
1Н ЯМР (400 МГц, ИМ80-66): δ м.д. 7.21 (1Н, ΐ), 6.78 (2Н, 6), 6.44 (1Н, 6), 5.74 (1Н, 6), 5.12 (4Н, 5), 4.12 (2Н, ф, 3.32 (6Н, 5), 1.17 (3Н, ΐ).
Промежуточное соединение 82.
Этил-1-(2,6-бис-{[(метилокси)метил]окси}фенил)циклопропанкарбоксилат
К раствору йодида триметилсульфоксония (1,805 г, 8,20 ммоль) в сухом диметилсульфоксиде (20 мл) добавляли 60%-ную дисперсию гидрида натрия в минеральном масле (0,310 г, 7,75 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Медленно добавляли раствор этил-2-(2,6-бис-{[(метилокси)метил]окси}фенил)-2-пропеноата (промежуточное соединение 81, 1,35 г) в сухом диметилсульфоксиде (10 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (10 мл), разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Органический слой промывали водой (50 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэшхроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 50д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 8:2 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (1,14 г).
1Н ЯМР (400 МГц, ИМ80-66): δ м.д. 7.15 (1Н, ΐ), 6.71 (2Н, 6), 5.18 (4Н, 5), 3.97 (2Н, ф, 3.36 (6Н, 5), 1.53-1.58 (2Н, т), 1.09-1.14 (2Н, т), 1.04 (3Н, ΐ).
Промежуточное соединение 83.
2-[1-(Гидроксиметил)циклопропил]-3-{[(метилокси)метил]окси}фенол
К раствору этил-1-(2,6-бис-{[(метилокси)метил]окси}фенил)циклопропанкарбоксилата (промежуточное соединение 82, 490 мг) в этаноле (10 мл) добавляли 2н. НС1 в воде (0,789 мл, 1,579 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. Добавляли толуол (20 мл) и объединенные растворители удаляли при пониженном давлении. Остаток ресуспендировали в толуоле (20 мл) и растворитель выпаривали. Полученный остаток растворяли в сухом тетрагидрофуране (20 мл), смесь охлаждали до 0°С, добавляли 60%-ную дисперсию NаН в минеральном масле (126 мг, 3,16 ммоль) и при этой же
- 58 023768 температуре в течение 30 мин перемешивали реакционную смесь. Затем добавляли ΜΟΜ-0 (0,120 мл, 1,579 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°С. Добавляли ЫА1Н4 (1 Μ в ТНР, 1,579 мл, 1,579 ммоль), а затем при этой же температуре в течение 1 ч перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (10 мл), разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 25д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 7:3 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (191 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, ΩΜ8Ο-ά6): δ м.д. 8.90 (1Н, Ъг.5), 6.96 (1Н, ΐ), 6.50 (1Н, ά), 6.45 (1Н, ά), 5.16 (2Н, 5), 4.93 (1Н, Ъг.5), 3.45 (2Н, 5), 3.40 (3Н, 5), 0.86-0.93 (2Н, т), 0.56-0.62 (2Н, т);
УЭЖХ: 0,59 мин, 225 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 84.
4-{ [(Метилокси)метил]окси}спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан]
К раствору 2-[1-(гидроксиметил)циклопропил]-3-{[(метилокси)метил]окси}фенола (промежуточное соединение 83, 190 мг) в сухом тетрагидрофуране (10 мл) добавляли трифенилфосфин (333 мг, 1,271 ммоль) и реакционную смесь перемешивали до полного растворения РРЪ3. Затем по каплям добавляли ΩΚΩ (0,198 мл, 1,017 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 25д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 9:1 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого масла (120 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, ΩΜ8Ο-ά6): δ м.д. 6.97 (1Н, ΐ), 6.51 (1Н, ά), 6.43 (1Н, ά), 5.12 (2Н, 5), 4.40 (2Н, 5), 3.35 (3Н, 5), 1.43-1.48 (2Н, т), 0.85-0.90 (2Н, т);
УЭЖХ-В: 0,88 мин, 207 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 85.
Спиро [ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-ол
К раствору 4-{[(метилокси)метил]окси}спиро[1-бензофуран-3,1'-циклопропана] (промежуточное соединение 84, 118 мг) в метаноле (5 мл) добавляли 2н. НС1 в воде (0,286 мл, 0,572 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. Объединенные растворители удаляли при пониженном давлении, остаток растворяли в толуоле (10 мл) и удаляли растворитель. Остаток очищали флэшхроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 10д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 7:3 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (70 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, ΩΜ8Ο-ά6): δ м.д. 9.28 (’Н, 5), 6.81 (’Н, ΐ), 6.24 (’Н, ά), 6.22 (’Н, ά), 4.34 (2Н, 5), 1.40-1.45 (2Н, т), 0.77-0.82 (2Н, т).
Промежуточное соединение 86.
5-Нитро-2-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-илокси)пиридин
К раствору спиро[1-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ола (промежуточное соединение 85, 70 мг) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (2 мл) добавляли карбонат калия (89 мг, 0,647 ммоль), а затем 2-хлор-5нитропиридин (75 мг, 0,475 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при 100°С. Реакционную смесь гасили рассолом (1 мл), разбавляли водой (2 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 10д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 9:1 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (100 мг).
- 59 023768 1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 9.05 (1Н, ά), 8.63 (1Н, άά), 7.23 (1Н, ά), 7.13 (1Н, ί), 6.73 (1Н, ά), 6.60 (1Н, ά), 4.45 (2Н, 5), 1.05-1.10 (2Н, т), 0.88-0.93 (2Н, т);
УЭЖХ: 0,79 мин, 285 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 87.
6-(Спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинамин
К раствору 5-нитро-2-(спиро[1-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-илокси)пиридина (промежуточное соединение 86, 99 мг) в тетрагидрофуране (5 мл)/воде (2,5 мл) добавляли железо (97 мг, 1,741 ммоль), а затем хлорид аммония (93 мг, 1,741 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывали и остаток разбавляли водным насыщенным раствором ЫаНСОз (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 10д и циклогексан/этилацетат 8:2 до циклогексан/этилацетат 1:1 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (85 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 7.52 (1Н, ά), 7.06 (1Н, άά), 6.97 (1Н, ί), 6.70 (1Н, ά), 6.53 (1Н, ά), 6.23 (1Н, ά), 5.08 (2Н, 5), 4.43 (2Н, 5), 1.28-1.33 (2Н, т), 0.86-0.91 (2Н, т);
УЭЖХ: 0,62 мин, 255 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 88.
1,1-Диметилэтил-[(1К)-1-({[6-(спиро[1-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-илокси)-3пиридинил] амино}карбонил)пропил] карбамат
К раствору (2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановой кислоты (94 мг, 0,462 ммоль) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (2 мл) добавляли ΌΙΡΕΑ (0,115 мл, 0,661 ммоль), а затем ТВТИ (159 мг, 0,496 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре. Добавляли 6-(спиро[1-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-илокси)-3-пиридинамин (промежуточное соединение 87, 84 мг) и при этой же температуре в течение 6 ч перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь гасили рассолом (2 мл), разбавляли водой (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл). Органический слой промывали ледяным рассолом (2x5 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 10д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 7:3 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (130 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 10.14 (1Н, Ьг.5), 8.32 (1Н, ά), 8.08 (1Н, άά), 7.02-7.09 (2Н, т), 6.96 (1Н, ά), 6.63 (1Н, ά), 6.42 (1Н, ά), 4.44 (2Н, 5), 3.93-4.01 (1Н, т), 1.52-1.75 (2Н, т), 1.39 (9Н, 5), 1.151.22 (2Н, т), 0.85-0.95 (5Н, т);
УЭЖХ: 0,80 мин, 440 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 89.
(2К)-2-Амино-Ы-[6-(спиро [1-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил]бутанамид
К раствору 1,1 -диметилэтил-[(1К)-1 -({[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-илокси)-3 - 60 023768 пиридинил]амино}карбонил)пропил]карбамата (промежуточное соединение 88, 128 мг) в сухом дихлорметане (3 мл) при 0°С медленно добавляли ТРА (0,9 мл, 11,68 ммоль) и при этой же температуре в течение 2 ч перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (10 мл) и добавляли водный насыщенный раствор №-1НС03, позволяя рН достичь значения примерно 8. Две фазы разделяли и водный слой реэкстрагировали дихлорметаном (10 мл). Органические слои объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (92 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.37 (1Н, б), 8.13 (1Н, бб), 7.05 (1Н, ΐ), 6.95 (1Н, б), 6.63 (1Н, б), 6.42 (1Н, б), 4.44 (2Н, 5), 3.24 (1Н, т), 1.61-1.72 (1Н, т), 1.44-1.55 (1Н, т), 1.16-1.21 (2Н, т), 0.91 (3Н, ΐ), 0.86-0.91 (2Н, т);
УЭЖХ-В: 0,74 мин, 340 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 90.
1,1 -Диметилэтил-( 1,1 -диметил-2-оксо-2-{ [6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 пиридинил] амино}этил)карбамат
К раствору N-{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-2-метилаланина (80 мг, 0,393 ммоль) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (1,5 мл) добавляли ЭРЕА (0,096 мл, 0,551 ммоль), а затем НАТИ (150 мг, 0,393 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре. Этот раствор добавляли к раствору 6-(спиро[1-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-илокси)-3-пиридинамина (промежуточное соединение 89, 40 мг) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (0,5 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили водой (2 мл), разбавляли рассолом (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 10д и циклогексан/этилацетат 8:2 до циклогексан/этилацетат 1:1 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (52 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 9.62 (1Н, Ьг.5), 8.24-8.42 (1Н, Ьг.т), 8.05 (1Н, б), 6.98-7.10 (2Н, т), 6.92 (1Н, б), 6.61 (1Н, б), 6.40 (1Н, б), 4.44 (2Н, 5), 1.42 (6Н, 5), 1.36 (9Н, 5), 1.15-1.21 (2Н, т), 0.85-0.91 (2Н, т);
УЭЖХ: 0,81 мин, 440 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 91.
2-Метил-Ы1 -[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил]аланинамид
К раствору 1,1 -диметилэтил-( 1,1 -диметил-2-оксо-2-{ [6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан] -4илокси)-3-пиридинил]амино}этил)карбамата (промежуточное соединение 90, 50 мг) в сухом дихлорметане (4 мл) при 0°С медленно добавляли ТРА (1 мл, 12,98 ммоль) и при этой же температуре в течение 2 ч перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (10 мл) и добавляли водный насыщенный раствор №-1НС03, позволяя рН достичь значения примерно 8. Две фазы разделяли и органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение (35 мг) в виде бесцветного масла.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.40 (1Н, б), 8.15 (1Н, бб), 7.04 (1Н, ΐ), 6.94 (1Н, б), 6.62 (1Н, б), 6.41 (1Н, б), 4.43 (2Н, 5), 1.28 (6Н, 5), 1.15-1.20 (2Н, т), 0.86-0.91 (2Н, т);
УЭЖХ: 0,56 мин, 340 [М+Н]+.
- 61 023768
Промежуточное соединение 92.
1,1 -Диметилэтил-[(1К)-1-метил-1-({ [6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-илокси)-3 пиридинил] амино}карбонил)пропил] карбамат
6-(Спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинамин (промежуточное соединение 91, 127 мг), Ы-{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-О-изовалин (Ыадаке & Со Мб. 109 мг, 0,499 ммоль), ΌΙΡΕΑ (0,131 мл, 0,749 ммоль) и НАТи (247 мг, 0,649 ммоль) растворяли в сухом Ν,Νдиметилформамиде (3 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 суток. Затем добавляли насыщенный водный раствор NаНСΟз и смесь дважды экстрагировали диэтиловым эфиром. Органическую фазу промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом с получением 300 мг неочищенного вещества. Это вещество очищали флэшхроматографией (Вю1а§е ΚΡ-δί1, колонка 8ΝΑΡ 25д, элюант: циклогексан/этилацетат от 90/10 до 20/80 за 12 СУ) с получением 106 мг указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.13-8.18 (2Н, т), 7.06 (1Н, ΐ), 6.85 (1Н, б), 6.66 (1Н, б), 6.45 (1Н, б), 4.85 (1Н, Ьг.5), 4.48 (2Н, 5), 1.90-2.11 (2Н, т), 1.53 (3Н, 5), 1.48 (9Н, 5), 1.42-1.47 (2Н, т), 0.97 (3Н, ΐ), 0.81-0.86 (2Н, т);
УЭЖХ: 1,19 мин, 454 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 93.
Л-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -Э-изовалинамид
К раствору 1,1 -диметилэтил-[(1К)-1-метил-1-({ [6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан] -4илокси)-3-пиридинил]амино}карбонил)пропил]карбамата (промежуточное соединение 92, 106 мг) в сухом дихлорметане (2 мл) при 0°С добавляли ТРА (0,360 мл, 4,67 ммоль). При этой температуре смесь перемешивали в течение 5 мин, затем оставляли нагреваться до комнатной температуры. Через 2 ч анализ методом УЭЖХ/МС показал отсутствие исходного вещества и присутствие целевого соединения: добавляли толуол (5 мл) и смесь концентрировали под вакуумом. Остаток загружали на картридж §СХ (1д), который элюировали метанолом и 1 М раствором ΝΗ3 в метаноле. Основный элюат концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого масла (68 мг), которое использовали в следующем эксперименте без дополнительной очистки.
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 9.93 (1Н, 5), 8.21-8.31 (2Н, т), 7.06 (1Н, ΐ), 6.85 (1Н, б), 6.65 (1Н, б), 6.45 (1Н, б), 4.48 (2Н, 5), 1.94-2.04 (1Н, т), 1.59-1.69 (1Н, т), 1.44-1.48 (2Н, т), 1.43 (3Н, 5), 0.95 (3Н, ΐ), 0.81-0.85 (2Н, т);
УЭЖХ: 0,71 мин, 354 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 94.
Метил-3-{[(метилокси)метил]окси}бензоат
О
Метил-3-гидроксибензоат (5 г, 32,9 ммоль) растворяли в дихлорметане (100 мл) при продувке аргоном в 500 мл круглодонной колбе с получением белой суспензии. Реакционную смесь охлаждали при 0°С. При этой температуре добавляли хлор(метилокси)метан (2,75 мл, 36,1 ммоль) и Э1РЕА (6,89 мл, 39,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи. За это время температуре реакционной смеси позволили достичь значения комнатной температуры. Затем реакционную смесь упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта в виде желтого масла, которое очищали хроматографией на силикагеле (система Вю1аде §Р1, колонка §NΑΡ 50д), используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов (от 10/0 до 3/1 за 10 СУ; затем 3/1 для 5 СУ). Собранные фракции давали указанное в заголовке
- 62 023768 соединение (5,088 г).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 7.76-7.68 (2Н, т), 7.41-7.34 (1Н, т), 7.27-7.22 (1Н, т), 5.24 (2Н, 5), 3.93 (3Н, 5), 3.51 (3Н, 5);
УЭЖХчрцс: 0,92 мин, 197 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 95.
(3-{[(Метилокси)метил]окси}фенил)метанол
Метил-3-{[(метилокси)метил]окси}бензоат (промежуточное соединение 94, 5,0875 г) растворяли в тетрагидрофуране (20 мл) при продувке аргоном в 250-мл круглодонной колбе с получением бесцветного раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С. В этих условиях по каплям добавляли раствор ЫА1Н4 в (1 М) (25,9 мл, 25,9 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0°С. Через 45 мин реакционную смесь гасили 2 М раствором соляной кислоты до рН примерно 2 и разбавляли 100 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (4,348 г).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 7.30 (1Н, ΐ), 7.10-7.05 (1Н, т), 7.04-7.00 (1Н, т), 7.00-6.95 (1Н, т), 5.20 (2Н, 5), 4.69 (2Н, Д), 3.50 (3Н, 5), 1.80-1.70 (1Н, т); УЭЖХчрцс: 0,63 мин, 151 [М-ОН]+.
Промежуточное соединение 96.
1-(2-(Гидроксиметил)-6-{[(метилокси)метил]окси}фенил)этанол
(3-{[(Метилокси)метил]окси}фенил)метанол (промежуточное соединение 95,1 г) растворяли в гексане (20 мл) при продувке аргоном в двугорлой 100 мл круглодонной колбе, снабженной дефлегматором (обработанной в течение 5 мин под вакуумом, затем 3 цикла Аг/вакуум), с получением бесцветного раствора. Добавляли ^^№,№-тетраметил-1,2-этандиамин (1,872 мл, 12,49 ммоль). К полученной реакционной смеси по каплям добавляли раствор ВиЫ (1,6 М/гексан) (7,80 мл, 12,49 ммоль). Затем реакционную смесь нагревали при 60°С и в этих условиях перемешивали. После перемешивания в таких условиях в течение 5 ч по каплям при -78°С добавляли ацетальдегид (1,090 мл, 19,30 ммоль) в 6 мл сухого гексана. Реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 1 ч, а затем нагревали до комнатной температуры. После перемешивания смеси при этой температуре в течение ночи реакционную смесь гасили водным 2 М раствором соляной кислоты и разбавляли 100 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта, который очищали хроматографией на силикагеле (система ВЮаде δΡ1, колонка с диоксидом кремния 25д-δNΑΡ), используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов (от 5/1 до 1/1 за 15 СШ; затем 1/1 для 5 СШ). Собранные фракции давали (3-{[(метилокси)метил]окси}фенил)метанол (532,4 мг, регенерируемое Промежуточное соединение 95) и указанное в заголовке соединение (184,7 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 7.20 (1Н, ΐ), 7.10 (1Н, ДД), 7.00 (1Н, ДД), 5.37 (1Н, ф, 5.26 (1Н, Д), 5.25 (1Н, Д), 4.83 (1Н, Д), 4.63 (1Н, Д), 3.51 (3Н, 5), 3.55 (1Н, Ьг. 5.), 2.66 (1Н, Ьг. 5.), 1.60 (3Н, Д);
УЭЖХчрцс: 0,60 мин, 195 [М-ОН]+.
Промежуточное соединение 97.
-Метил-7-{[(метилокси)метил]окси}-1,3-дигидро-2-бензофуран
1-(2-(Гидроксиметил)-6-{[(метилокси)метил]окси}фенил)этанол (промежуточное соединение 96, 50,3 мг) растворяли в тетрагидрофуране (1 мл) при продувке аргоном в 8 мл сосуде с получением бледно-желтого раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С. В этих условиях добавляли раствор ВиЫ (1,6 М/гексан) (0,148 мл, 0,237 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С. Через 30 мин добавляли 4-метилбензолсульфонилхлорид (45,2 мг, 0,237 ммоль) при 0°С. При этой температуре перемешивали реакционную смесь. Через 1 ч добавляли дополнительное количество раствора ВиЫ (1,6 М/гексан) (0,148 мл, 0,237 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем реакционную смесь гасили 2 мл 2 М соляной кислоты и разбавляли 5 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта, который очищали хроматографией на силикагеле (система ВюЕаде δΡ1, колонка с диоксидом кремния 10д-δNΑΡ), используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов (от 1/0 до 3/1 за 10 СШ; затем 3/1 для 5 СШ; затем от 3/1 до 1/1 за 5 СШ;
- 63 023768 затем 1/1 для 5 СУ). Собранные фракции давали указанное в заголовке соединение (25,2 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОСЕ): δ м.д. 7.25 (1Н, ΐ), 6.99 (1Н, ά), 6.88 (1Н, ά), 5.53-5.43 (1Н, т), 5.26 (1Н,
ά), 5.23 (1Н, ά), 5.20 (1Н, άά), 5.10-5.02 (1Н, т), 3.51 (3Н, к), 1.57 (3Н, ά);
УЭЖХЧрцс: 0,92 мин, 195 [М+Н]+.
А также соответствующий незащищенный фенол (промежуточное соединение 98, 11,1 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОСЕ): δ м.д. 7.17-7.11 (1Н, т), 6.79 (1Н, ά), 6.63 (1Н, ά), 5.55-5.40 (1Н, т), 5.205.14 (2Н, т), 5.04 (1Н, ά), 1.57 (3Н, ά);
УЭЖХЧрцс: 0,66 мин, 149 [М-Н]-.
Промежуточное соединение 98.
-Метил- 1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ол
1- Метил-7-{[(метилокси)метил]окси}-1,3-дигидро-2-бензофуран (промежуточное соединение 97, 25,2 мг) растворяли в метаноле (1 мл) в 8 мл сосуде с получением бесцветного раствора. Добавляли раствор НС1 (2 М/Н2О) (0,259 мл, 0,519 ммоль). Реакционную смесь встряхивали при 80°С. Через 30 мин реакционную смесь разбавляли 10 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу смешивали с фракцией, полученной ранее, и упаривали под вакуумом с получением остатка, который очищали хроматографией на силикагеле (система Вю!аде БР1, колонка с диоксидом кремния 10д-БNЛΡ). используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов (от 100/0 до 3/1 за 10 ΟΫ; затем 3/1 для 5 ΟΫ; затем от 3/1 до 1:1 за 5 ΟΫ; затем 1:1 для 5 ΟΫ). Собранные фракции давали указанное в заголовке соединение (24 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОСЕ): δ м.д. 7.14 (1Н, ΐ), 6.79 (1Н, ά), 6.64 (1Н, ά), 5.55-5.42 (1Н, т), 5.23 (1Н, к), 5.17 (1Н, άά), 5.04 (1Н, ά), 1.57 (3Н, ά);
УЭЖХЧрцс: 0,66 мин, 149 [М-Н]-.
Промежуточное соединение 99.
2- [(3 -Метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси] -5 -нитропиридин
3-Метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ол (промежуточное соединение 98,24 мг) растворяли в Ν,Νдиметилформамиде (1,5 мл) во флаконе для микроволновой обработки с получением бледно-желтого раствора. Добавляли 2-хлор-5-нитропиридин (24,07 мг, 0,152 ммоль) и карбонат калия (62,9 мг, 0,455 ммоль). Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали в микроволновом реакторе Вю!аде [ηίΐίη1ог при 110°С в течение 1 ч. После охлаждения реакционную смесь гасили 5 мл воды и разбавляли 25 мл ЕьО. Органическую фазу промывали водой (3x10 мл) и фазы разделяли. Органическую фазу пропускали через картридж фазоразделителя и упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (38,3 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОСЕ): δ м.д. 9.06 (1Н, ά), 8.53 (1Н, άά), 7.39 (1Н, ΐ), 7.18 (1Н, ά), 7.10 (1Н, ά), 7.04 (1Н, ά), 5.37-5.26 (1Н, т), 5.26-5.18 (1Н, т), 5.12 (1Н, ά), 1.41 (3Н, ά);
УЭЖХ-В: 0,84 мин, 273. [М+Н]+.
Промежуточное соединение 100.
6-[(3 -Метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси] -3 -пиридинамин
2-[(3-Метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-5-нитропиридин (промежуточное соединение 99, 38,3 мг) растворяли в этаноле (10 мл) в 50-мл круглодонной колбе с получением бледно-желтого раствора. Добавляли РД/С (14,22 мг, 0,013 ммоль) и гидрат гидразина (0,026 мл, 0,267 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 90°С. Через 45 мин реакционную смесь фильтровали и органическую фазу упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (32 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОСЕ): δ м.д. 7.70 (1Н, ά), 7.25 (1Н, ΐ), 7.09 (1Н, άά), 6.99 (1Н, ά), 6.88 (1Н, ά), 6.76 (1Н, ά), 5.28-5.39 (1Н, т), 5.18 (1Н, άά), 5.07 (1Н, ά), 3.53 (2Н, Ьг. к.), 1.47 (3Н, ά);
УЭЖХ-В: 0,64 мин, 243 [М+Н]+.
- 64 023768
Промежуточное соединение 101.
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({6-[(3-метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)карбонил]пропил)карбамат
(2К)-2-({[(1,1-Диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановую кислоту (32,2 мг, 0,158 ммоль) растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (0,5 мл) в 8 мл сосуде с получением бесцветного раствора. Добавляли Э1РЕА (0,035 мл, 0,198 ммоль) и НАТИ (60,3 мг, 0,158 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. В 1,5 мл ЭМР растворяли 6-[(3-метил-1,3-дигидро-2бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинамин (промежуточное соединение 100, 32 мг) и полученный раствор добавляли к реакционной смеси. Полученную смесь встряхивали при 60°С. Через 2 ч не произошло никакой реакции. К реакционной смеси добавляли дополнительные 0,5 мл раствора [полученного путем растворения (2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановой кислоты (32,2 мг, 0,158 ммоль в 0,5 мл ЭМР), Э1РЕА (0,035 мл, 0,198 ммоль) и НАТИ (60,3 мг, 0,158 ммоль)]. Полученную смесь встряхивали при 60°С в течение выходных. После этого были обнаружены только лишь следы указанного в заголовке соединения наряду с промежуточным соединением 100. Реакционную смесь упаривали под вакуумом с помощью Уаройес У10 с получением неочищенного продукта, который очищали хроматографией на силикагеле (система Вю1а§е 8Р1, колонка с диоксидом кремния 10§-8NАР), используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов (от 3/1 до 1/1 за 10 СУ; затем 1/1 для 10 СУ). Собранные фракции давали 4,9 мг указанного в заголовке соединения, смешанного с аминокислотой, и 61 мг смеси исходного вещества (промежуточное соединение 100) и аминокислоты.
Ее растворяли в 10 мл дихлорметана и промывали 10 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органические фазы упаривали под вакуумом с получением 64 мг такой же смеси. Эту последнюю смесь растворяли в 1,0 мл ЭМР и добавляли к перемешиваемому ЭМР раствору (0,5 мл) (2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановой кислоты (61,4 мг, 0,302 ммоль), Э1РЕА (0,066 мл, 0,378 ммоль) и ТВТИ (97 мг, 0,302 ммоль). Полученную смесь нагревали при 60°С и встряхивали. Через 1 ч 30 мин реакционную смесь упаривали под вакуумом с помощью Уаройес У10 с получением неочищенного продукта в виде желтого масла, которое растворяли в 10 мл ЕЮАс и гасили 10 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Водную фазу экстрагировали ЕЮАс (3x10 мл). Собранные органические фазы сушили с использованием гидрофобной фритты, смешивали с указанным в заголовке соединением, полученным ранее, и очищали хроматографией на силикагеле (система Вю1а§е 8Р1, колонка с диоксидом кремния 10§-8NАР), используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов (от 3/1 до 1/1 за 10 СУ; затем 1:1 для 10 СУ). Собранные фракции давали указанное в заголовке соединение в виде смеси диастереоизомеров 1:1 (62,3 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ м.д. 8.20-8.16 (1Н, т), 8.15-8.08 (1Н, т), 7.31 (1Н, ΐ), 7.06 (1Н, ά), 6.95 (1Н, ά), 6.89 (1Н, ά), 5.37-5.25 (1Н, т), 5.20 (1Н, άά), 5.15-5.02 (2Н, т), 4.23-4.08 (1Н, т), 2.03-1.81 (2Н, т), 1.47 (9Н, 5), 1.43 (3Н, ά), 1.08-0.99 (3Н, т);
УЭЖХчрдс: 1,05 мин, 428 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 102.
(2К)-2-Амино-^{6-[(3-метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3 -пиридинил}бутанамид
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({6-[(3-метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)карбонил]пропил}карбамат (промежуточное соединение 101, 62,3 мг) растворяли в дихлорметане (3 мл) в 25 мл круглодонной колбе с получением бледно-желтого раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С. При этой температуре к реакционной смеси по каплям добавляли ТРА (0,5 мл, 6,49 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С. Через 1 ч реакционную смесь упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта, который загружали на картридж 8СX 2 д. Затем его промывали 50 мл МеОН, а потом 25 мл 2 М раствора аммиака в МеОН. Аммиачный элюат упаривали под вакуумом с получением 34,4 мг желтого масла, которое представляло собой смесь указанного в заголовке соединения и незащищенной аминокислоты. Эту смесь растворяли в 20 мл Е12О и промывали на- 65 023768 сыщенным водным раствором NаНСΟз (3x10 мл). Органическую фазу сушили с использованием картриджа фазоразделителя и упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде смеси диастереоизомеров 1:1 (24,4 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ м.д. 9.58 (’Н, Ъг. 5.), 8.32-8.25 (’Н, т), 8.23 (’Н, ΐ), 7.32 (’Н, ΐ), 7.08 (’Н, ά), 6.98 (’Н, ά), 6.94 (’Н, ά), 5.40-5.29 (’Н, т), 5.22 (’Н, άά), 5.11 (’Н, ά), 3.49 (’Н, άά), 2.11-1.94 (’Н, т), 1.85-1.60 (3Н, т), 1.46 (3Н, ά), 1.12-1.01 (3Н, т);
УЭЖХЧрцс: 0,64 мин, 328 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 103.
(1,1-Диметилэтил)(диметил){[(3-{[(метилокси)метил]окси}фенил)метил]окси}силан о
I
(3-{[(Метилокси)метил]окси}фенил)метанол (промежуточное соединение 95, 3,5 г) растворяли в дихлорметане (20 мл) в 100 мл круглодонной колбе с получением бесцветного раствора. Добавляли 1Нимидазол (1,700 г, 24,97 ммоль) и хлор(1,1-диметилэтил)диметилсилан (3,64 г, 24,14 ммоль). Реакционная смесь сразу стала белой суспензией, и ее перемешивали при комнатной температуре. После перемешивания смеси в течение ночи реакция завершилась. Затем реакционную смесь гасили 10 мл воды и разбавляли 10 мл дихлорметана. Фазы разделяли с помощью делительной воронки. Органическую фазу сушили с использованием гидрофобной фритты и упаривали под вакуумом с получением 6,0082 г неочищенного продукта в виде бесцветного масла, которое очищали посредством Вю!аде 8Р1 (используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов от 1:0 до 5:1 за 10 СУ; затем 5:1 для 5 СУ; затем от 5:1 до 1:1 за 5 СV; колонка с диоксидом кремния 8NΑΡ 100д). Собирали две фракции указанного в заголовке соединения: 1,70 г бесцветного масла (чистота: 93%) и 3,70 г бесцветного масла (чистота: 98%).
’Н ЯМР (400 МГц, СПСЫ) δ м.д. 7.26 (’Н, ΐ), 7.04-7.08 (’Н, т), 6.96-7.01 (’Н, т), 6.91-6.96 (’Н, т), 5.20 (2Н, 5), 4.75 (2Н, 5), 3.50 (3Н, 5), 0.92-1.02 (9Н, т), 0.12 (6Н, 5);
УЭЖХ-МСчрцс: 1,49 мин, 281 [М-Н]-.
Промежуточное соединение 104.
1-(2-({[(1,1-Диметилэтил)(диметил)силил]окси}метил)-6-{[(метилокси)метил]окси}фенил)-1пропанол
- т
он
(1,1-Диметилэтил)(диметил){[(3-{[(метилокси)метил]окси}фенил)метил]окси}силан (промежуточное соединение 103, 0,2 г) растворяли в гексане (2 мл) при продувке аргоном в двугорлой 100 мл круглодонной колбе, снабженной дефлегматором (обработанной в течение 5 мин под вакуумом, затем 3 цикла Аг/вакуум), с получением бесцветного раствора. По каплям добавляли 1,6 М/гексан раствор ВиЫ (0,487 мл, 0,779 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. После перемешивания в таких условиях в течение 2 ч к бледно-желтой реакционной смеси добавляли пропаналь (0,061 мл, 0,850 ммоль) при 0°С. Через 1 ч 30 мин реакционную смесь гасили 2 М соляной кислотой до рН примерно 2 и разбавляли 25 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали под вакуумом, получая неочищенный продукт в виде зеленого/серого масла, которое очищали посредством Вю1аде 8Р1 (используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов от 1:0 до 5:1 за 5 СV; затем 5:1 для 5 СV; затем от 5:1 до 3:1 за 5 С¥; затем 3:1 для 5 С¥; колонка с диоксидом кремния 8NΑΡ 10д). В результате получали указанное в заголовке соединение в виде бледно-желтого масла (132,1 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, СПСЫ) δ м.д. 7.18 (’Н, ΐ), 7.02-7.12 (2Н, т), 5.26 (’Н, ά), 5.25 (’Н, ά), 4.78-4.89 (2Н, т), 4.75 (’Н, ά), 3.63 (’Н, ά), 3.51 (3Н, 5), 1.89-2.06 (’Н, т), 1.74-1.88 (’Н, т), 1.02 (3Н, ΐ), 0.94 (9Н, 5), 0.12 (3Н, 5), 0.10 (3Н, 5);
УЭЖХ-МСчрдс: 1,45 мин, 363 [Μ+№]+.
- 66 023768
Промежуточное соединение 105.
1-(2-(Гидроксиметил)-6-{[(метилокси)метил]окси}фенил)-1-пропанол θ''
1-(2-({[(1,1-Диметилэтил)(диметил)силил]окси}метил)-6-{[(метилокси)метил]окси}фенил)-1пропанол (промежуточное соединение 104, 132,1 мг) растворяли в тетрагидрофуране (2 мл) в 50-мл круглодонной колбе с получением бледно-желтого раствора. Добавляли 1Μ/ΓΗΡ раствор ТВАР (0,388 мл, 0,388 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. После перемешивания в течение ночи реакция завершилась. Реакционную смесь упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта в виде бледно-желтого масла, которое очищали посредством ВЮадс 8Ρ1 (используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов от 3:1 до 2:1 за 10 СУ; затем 2:1 для 5 СУ; затем от 2:1 до 2:1 за 5 СУ; затем 1:1 для 5 СУ; колонка с диоксидом кремния 8NΑΡ 25д). Собранные фракции давали остаток, который снова очищали в тех же самых условиях с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого масла.
’Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ м.д. 7.16-7.24 (1Н, т), 7.10 (1Н, бб), 7.02 (1Н, бб), 5.23 (2Н, бб), 5.08 (1Н, бб), 4.81 (1Н, б), 4.61 (1Н, б), 3.50 (3Н, 5), 2.41-3.05 (2Н, т), 1.91-2.07 (1Н, т), 1.82 (1Н, 5), 1.00 (3Н, ΐ);
УЭЖХ-ΜС-^р^с: 0,70 мин, 249 [Μ+№]+.
Промежуточное соединение 106.
-Этил- 1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ол
1- (2-(Гидроксиметил)-6-{[(метилокси)метил]окси}фенил)-1-пропанол (промежуточное соединение 105, 99 мг) растворяли в тетрагидрофуране (2 мл) при продувке аргоном в 8 мл сосуде с получением бледно-желтого раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С. В этих условиях добавляли раствор ВиЫ в гексане (1,6 М, 0,246 мл, 0,394 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С. Через 30 мин добавляли 4-метилбензолсульфонилхлорид (75 мг, 0,394 ммоль) при 0°С. При этой температуре перемешивали реакционную смесь. Через 1 ч добавляли дополнительное количество ВиЫ в гексане (1,6 М, 0,246 мл, 0,394 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем при комнатной температуре в течение 30 мин. После этого реакционную смесь гасили 2 мл 2 М соляной кислоты и разбавляли 5 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта в виде бледно-желтого масла, которое растворяли в метаноле (3,00 мл). К полученному раствору добавляли ΗΟ (0,788 мл, 1,575 ммоль). Полученную реакционную смесь нагревали при 80°С и встряхивали. Через 30 мин реакция завершилась. Реакционную смесь гасили 5 мл воды и разбавляли 25 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта в виде бледно-желтого масла, которое очищали посредством ВЮадс 8Ρ1 (используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов от 1:0 до 3:1 за 10 СУ; затем 3:1 для 5 СУ; затем от 3:1 до 1:1 за 5 СУ; затем 1:1 для 5 СУ; колонка с диоксидом кремния 8NΑΡ 10д). Собранные фракции давали указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (49,7 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, СОСЪ) δ м.д. 7.14 (1Н, ΐ), 6.79 (1Н, б), 6.64 (1Н, б), 5.51 (1Н, Ьг. 5.), 5.37-5.45 (1Н, т), 5.16 (1Н, бб), 5.07 (1Н, б), 1.99-2.15 (1Н, т), 1.78-1.92 (1Н, т), 0.91-1.00 (3Н, т);
УЭЖХ-ΜС-^р^с: 0,77 мин, 163 [М-Н]-.
Промежуточное соединение 107.
2- [(3 -Этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси] -5 -нитропиридин
3-Этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ол (промежуточное соединение 106, 49,7 мг) растворяли в Ν,Νдиметилформамиде (1,5 мл) в 0,5-2,0 мл флаконе для микроволновой обработки с получением бледножелтого раствора. Добавляли 2-хлор-5-нитропиридин (48,0 мг, 0,303 ммоль) и карбонат калия (125 мг, 0,908 ммоль). Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали в микроволновом реакторе Вю1адс
- 67 023768 [ηίΙίηΙΟΓ при 110°С в течение 1 ч. После охлаждения реакция завершилась. Затем реакционную смесь гасили 5 мл воды и разбавляли 25 мл Εΐ20. Водную фазу экстрагировали 3x10 мл Εΐ20. Собранные органические фазы пропускали через картридж фазоразделителя и упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого масла (97,6 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СИСЩ δ м.д. 9.05 (1Н, 6), 8.51 (1Н, 66), 7.37 (1Н, ΐ), 7.16 (1Н, 6), 7.06 (1Н, 6), 7.02 (1Н, 6), 5.16-5.25 (2Н, т), 5.13 (1Н, 6), 1.77-1.90 (1Н, т), 1.60-1.72 (1Н, т), 0.82-0.91 (3Н, т);
УЭЖХ-В: 0,90 мин, 287 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 108.
6-[(3-Этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3 -пиридинамин
2-[(3-Этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-5-нитропиридин (промежуточное соединение 107, 97,6 мг) растворяли в этаноле (10 мл) в 50-мл круглодонной колбе с получением бледно-желтого раствора. Добавляли Р6/С (26,1 мг, 0,245 ммоль) и гидрат гидразина (12,29 мг, 0,245 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 90°С. Через 45 мин реакция завершилась. Реакционную смесь фильтровали и органическую фазу упаривали под вакуумом, получая неочищенный продукт, который загружали на картридж δСX 2д. Затем его промывали 15 мл метанола, а потом 15 мл 2 М раствора аммиака в метаноле. Аммиачный элюат упаривали под вакуумом, ничего не получая.
Затем под вакуумом упаривали метанольный элюат с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла.
1Н ЯМР (400 МГц, СБС^) δ м.д. 7.70 (1Н, 6), 7.24 (1Н, ΐ), 7.09 (1Н, 66), 6.99 (1Н, 6), 6.87 (1Н, 6), 6.75 (1Н, 6), 5.21-5.29 (1Н, т), 5.17 (1Н, 66), 5.09 (1Н, 6), 3.57 (2Н, Ъг. 5.), 1.88-2.04 (1Н, т), 1.68-1.82 (1Н, т), 0.89 (3Н, ΐ);
УЭЖХ-В: 0,71 мин, 257 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 109.
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)карбонил]пропил}карбамат
6-[(3-Этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинамин (промежуточное соединение 108, 10 мг) растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (1 мл) в 8 мл сосуде с получением бесцветного раствора. Добавляли ΌΣΡΕΑ (10,22 мкл, 0,059 ммоль), (2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановую кислоту (9,52 мг, 0,047 ммоль) и, в конце, ТВТИ (15,03 мг, 0,047 ммоль). Реакционную смесь встряхивали при 60°С. После встряхивания в течение ночи реакция завершилась. Реакционную смесь упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта в виде желтого масла, который очищали посредством Вю1а§е 8Р1 (используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов от 2:1 до 1:1 за 10 СУ; затем 2:1 для 5 С¥; колонка с диоксидом кремния δNΑΡ 10д). Собранные фракции давали указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (12,7 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, С1)С13) δ м.д. 8.40 (1Н, Ъг. 5.), 8.15-8.18 (1Н, т), 8.08-8.14 (1Н, т), 7.30 (1Н, ΐ), 7.05 (1Н, 6), 6.95 (1Н, 6), 6.88 (1Н, 6), 5.20-5.26 (1Н, т), 5.17 (1Н, 66), 5.10 (1Н, 6), 4.99 (1Н, Ъг. 5.), 4.054.19 (1Н, т), 1.82-2.08 (2Н, т), 1.64-1.79 (2Н, т), 1.47 (9Н, 5), 1.03 (3Н, ΐ), 0.88 (3Н, ΐ);
УЭЖХ-В: 0,91 мин, 442 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 110.
(2К)-2-Амино-^{6-[(3 -этил-1,3 -дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси] -3 -пиридинил}бутанамид
- 68 023768
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)карбонил]пропил}карбамат (промежуточное соединение 109, 12,7 мг) растворяли в дихлорметане (3 мл) в 50-мл круглодонной колбе с получением бесцветного раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С. При этой температуре добавляли ТРА (1,5 мл, 19,47 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С. Через 1 ч реакция завершилась. Реакционную смесь упаривали под вакуумом, получая неочищенный продукт, который загружали на картридж δСX 2д. Затем его промывали 15 мл МеОН, а потом 15 мл раствора аммиака в МеОН (2М). Аммиачный элюат упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (9,0 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ м.д. 9.59 (1Н, Ьг. е.), 8.18-8.28 (2Н, т), 7.30 (1Н, !), 7.05 (1Н, Д), 6.95 (1Н, Д), 6.90 (1Н, Д), 5.21-5.26 (1Н, т), 5.18 (1Н, ДД), 5.10 (1Н, Д), 3.50 (1Н, ДД), 1.79-2.07 (4Н, т), 1.62-1.78 (2Н, т), 1.04 (3Н, !), 0.88 (3Н, !);
УЭЖХ-В: 0,72 мин, 342 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 111.
3-метил-5-(метилокси)-2Н-хромен-2-он θ
К раствору 2-гидрокси-6-(метилокси)бензальдегида (3 г, 19,72 ммоль) в сухом Ν,Νдиметилформамиде (30 мл) добавляли пропановый ангидрид (12,98 мл, 101 ммоль) и К2СО3 (3,00 г, 21,69 ммоль), и реакционную смесь нагревали до 70°С. При этой температуре добавляли воду (0,036 мл, 1,972 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 120°С и перемешивали в течение ночи под азотом. Затем реакционную смесь гасили 60 мл воды. Образовывался осадок, неочищенный материал фильтровали, твердое вещество растворяли в ЭСМ/воде и две фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали под вакуумом, получая указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (3,25 г, 85%-ный выход).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ м.д. 7.91 (1Н, е), 7.37 (1Н, !), 6.92 (1Н, Д), 6.71 (1Н, Д), 3.94 (3Н, е), 2.22 (3Н, е);
УЭЖХлрцс: 0,95 мин, 191 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 112.
-Г идрокси-3 -метил-2Н-хромен-2-он
ОН
К раствору 3-метил-5-(метилокси)-2Н-хромен-2-она (промежуточное соединение 111, 2,5 г) в сухом дихлорметане (45 мл), охлажденному до 0°С, добавляли ВВг3 (39,4 мл, 39,4 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи под азотом. Затем реакционную смесь охлаждали до 0°С и гасили льдом. Полученную смесь разбавляли диэтиловым эфиром и две полученные фазы разделяли с помощью делительной воронки. Водную фазу обратно экстрагировали диэтиловым эфиром. Собиранные органические фазы сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-коричневого твердого вещества (2,225 г).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ м.д. 7.92 (1Н, е), 7.30 (1Н, !), 6.93 (1Н, Д), 6.67 (1Н, Д), 5.54 (1Н, е), 2.26 (3Н, е);
УЭЖХлрцс: 0,70 мин, 177 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 113.
3-Метил-5-{[(метилокси)метил]окси}-2Н-хромен-2-он όλο
К раствору 5-гидрокси-3-метил-2Н-хромен-2-она (промежуточное соединение 112, 2,225 г) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (60 мл), охлажденному до 0°С, добавляли гидрид натрия (60%, 0,532 г, 13,89 ммоль) с последующим добавлением хлор(метилокси)метана (1,919 мл, 25,3 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 мин под азотом. Затем ее гасили путем добавления насыщенного раствора МН4С1, продукт экстрагировали диэтиловым эфиром, промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (система ВШаде, с градиентом от чистого циклогексана до циклогексан/этилацетат 5/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого
- 69 023768 вещества (2,15 г).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 7.94 (1Н, к), 7.38 (1Н, ΐ), 6.93-7.05 (2Н, т), 5.33 (2Н, к), 3.55 (3Н, к), 2.26 (3Н, к);
УЭЖХчрцс: 0,94 мин, 221 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 114.
Смесь 2-[3-гидрокси-2-метил-1-пропен-1-ил]-3-{[(метилокси)метил]окси}фенола и 2-(3-гидрокси-2метилпропил)-3-{ [(метилокси)метил]окси}фенола 3: 1
3-Метил-5-{[(метилокси)метил]окси}-2Н-хромен-2-он (промежуточное соединение 113, 461,1 мг) растворяли в тетрагидрофуране (3 мл) в 50-мл круглодонной колбе с получением бесцветного раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С. Затем по каплям добавляли раствор ЫА1Н4 (1М/ТНР, 4,19 мл, 4,19 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С. Через 30 мин реакционную смесь гасили 5 мл соляной кислоты (2М) и разбавляли 10 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали под вакуумом с получением смеси 2-[3-гидрокси-2-метил-1-пропен1 -ил] -3-{ [(метилокси)метил]окси}фенола и 2-(3 -гидрокси-2-метилпропил)-3 -{[(метилокси)метил]окси}фенола 3: 1 (548 мг) в виде бледно-желтого масла.
’Н ЯМР (400 МГц, СГОСЬ) компонент, составляющий большую часть смеси: δ м.д. 7.11 (1Н, ΐ), 6.67 (1Н, б), 6.63 (1Н, б), 6.08-6.16 (1Н, т), 5.81 (1Н, Ьг. к.), 5.15 (2Н, к), 4.74 (1Н, Ьг. к.), 4.00 (2Н, к), 3.47 (3Н, к), 2.08 (3Н, б);
’Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) компонент, составляющий меньшую часть смеси: δ м.д. 7.05 (1Н, ΐ), 6.97 (1Н, Ьг. к.), 6.66 (1Н, б), 6.58 (1Н, б), 5.19 (2Н, к), 3.51-3.59 (1Н, т), 3.49 (3Н, к), 3.41-3.49 (1Н, т), 2.78 (1Н, бб), 2.66 (1Н, бб), 2.13 (1Н, Ьг. к.), 1.94-2.07 (1Н, т), 1.09 (3Н, б);
УЭЖХ-МС’чрцс: компонент, составляющий большую часть смеси: 0,70 мин, 223 [М-Н]-; компонент, составляющий меньшую часть смеси: 0,78 мин, 225 [М-Н]-.
Промежуточное соединение 115.
2-(3-Гидрокси-2-метилпропил)-3-{[(метилокси)метил]окси}фенол
О ' 'О''
Смесь 3:1 2-[3-гидрокси-2-метил-1-пропен-1-ил]-3-{[(метилокси)метил]окси}фенола и 2-(3гидрокси-2-метилпропил)-3-{[(метилокси)метил]окси}фенола (промежуточное соединение 114, 548 мг) растворяли в метаноле (10 мл) в 100 мл круглодонной колбе с получением бесцветного раствора. Проводили три цикла вакуум/Ж· затем к реакционной смеси добавляли Рб/С (129 мг, 0,122 ммоль). Снова проводили три цикла вакуум/Ж, а затем три цикла вакуум/Н2. В конце реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в атмосфере Н2 (без давления). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. Через 1 ч 30 мин реакция завершилась. Реакционную смесь фильтровали через набивку целита. Фильтрат упаривали под вакуумом, получая неочищенный продукт, который очищали на системе Вю1аде 8Р1, используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов от 1:0 до 5:1 за 10 СУ; затем 5:1 для 5 СУ; затем от 5:1 до 3:1 за 5 СУ; затем 3:1 для 5 СУ; затем от 3:1 до 1:1 за 5 СУ; затем 1: 1 для 5 СУ (колонка с диоксидом кремния 8ЬАР 25д). Собранные фракции давали указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла.
’Н ЯМР (400 МГц, СГОСЬ) δ м.д. 7.05 (1Н, ΐ), 6.97 (1Н, Ьг. к.), 6.66 (1Н, б), 6.58 (1Н, б), 5.19 (2Н, к), 3.51-3.59 (1Н, т), 3.49 (3Н, к), 3.41-3.49 (1Н, т), 2.78 (1Н, бб), 2.66 (1Н, бб), 2.13 (1Н, Ьг. к.), 1.94-2.07 (1Н, т), 1.09 (3Н, б);
УЭ'ЖХ-МС’чрцс: 0,79 мин, 225 [М-Н]-.
Промежуточное соединение 116.
3-Метил-5-{[(метилокси)метил]окси}-3,4-дигидро-2Н-хромен
О'^'О
Ό
2-(3-Гидрокси-2-метилпропил)-3-{[(метилокси)метил]окси}фенол (промежуточное соединение 115, 377,9 мг) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) в 50-мл круглодонной колбе под аргоном с получением бесцветного раствора. Добавляли ТЕА (0,409 мл, 2,93 ммоль) и реакционную смесь охлаждали при 0°С.
- 70 023768
При этой температуре добавляли метансульфонилхлорид (0,124 мл, 1,591 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С. Через 45 мин добавляли дополнительное количество метансульфонилхлорида (0,124 мл, 1,591 ммоль). Через 45 дополнительных минут добавляли 2-метил-2-пропанолят калия (422 мг, 3,76 ммоль). Через 15 мин после этого последнего добавления добавляли дополнительное количество 2метил-2-пропанолята калия (422 мг, 3,76 ммоль). Через 15 мин реакция завершилась. Затем реакционную смесь гасили 10 мл насыщенного водного раствора МН4С1, подкисляли до рН примерно 2 2 М соляной кислотой и разбавляли 25 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 7.04 (1Н, ΐ), 6.63 (1Н, б), 6.53 (1Н, б), 5.21 (2Н, 5), 4.13-4.19 (1Н, т), 3.60-3.71 (1Н, т), 3.50 (3Н, 5), 2.84-2.95 (1Н, т), 2.19-2.30 (1Н, т), 2.04-2.18 (1Н, т), 1.08 (3Н, б);
УЭЖХ-МСчрцс: 1,16 мин, 209 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 117.
-Метил-3,4 -дигидро -2Н-хромен-5 -ол
ОН
3-Метил-5-{[(метилокси)метил]окси}-3,4-дигидро-2Н-хромен (промежуточное соединение 116, 103,6 мг) растворяли в метаноле (3 мл) в 8 мл сосуде с получением бесцветного раствора. Добавляли 2М/Н2О раствор НС1 (0,224 мл, 0,448 ммоль). Реакционную смесь встряхивали при 60°С. Через 2 ч 30 мин реакционную смесь разбавляли 10 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта, который очищали посредством Вю1аде 8Р1 (используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов от 1:0 до 5:1 за 10 СУ; затем 5:1 для 5 СУ; затем от 5:1 до 3:1 за 5 СУ; колонка с диоксидом кремния
8NΑΡ 10д). Собранные фракции давали указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (53,0 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 6.96 (1Н, ΐ), 6.46 (1Н, б), 6.35 (1Н, бб), 4.79 (1Н, 5), 4.10-4.22 (1Н, т), 3.61-3.73 (1Н, т), 2.78-2.90 (1Н, т), 2.19-2.30 (1Н, т), 2.16 (1Н, б), 1.09 (3Н, б);
УЭЖХ-МСчрцс: 0,90 мин, 165 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 118.
2-[(3-Метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-5-нитропиридин
3-Метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ол (промежуточное соединение 117, 53 мг), карбонат калия (134 мг, 0,968 ммоль) и 2-хлор-5-нитропиридин (51,2 мг, 0,323 ммоль) растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (2 мл) во флаконе для микроволновой обработки с получением светло-коричневого раствора. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали в Вю1аде [ηίΙίαΙΟΓ при 110°С в течение 1 ч. После охлаждения реакционную смесь гасили 5 мл воды и разбавляли 10 мл Е120. Фазы разделяли с помощью делительной воронки. Водную фазу экстрагировали 3x10 мл Еь0. Собранную органическую фазу сушили с использованием гидрофобной фритты и упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого масла (181 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 9.06 (1Н, б), 8.48 (1Н, бб), 7.17 (1Н, ΐ), 7.02 (1Н, б), 6.80 (1Н, б), 6.66 (1Н, бб), 4.16-4.24 (1Н, т), 3.63-3.75 (1Н, т), 2.62-2.74 (1Н, т), 2.04-2.18 (2Н, т), 1.00 (3Н, б);
УЭЖХ-В: 0,95 мин, 287 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 119.
6-[(3 -Метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси] -3 -пиридинамин
2-[(3-Метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-5-нитропиридин (промежуточное соединение 118, 181 мг) растворяли в этаноле (10 мл) в 50-мл круглодонной колбе с получением бледно-желтого раствора. Добавляли Рб/С (33,0 мг, 0,031 ммоль) и гидрат гидразина (0,030 мл, 0,310 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 90°С. Через 1 ч реакционную смесь фильтровали и упаривали под вакуумом с
- 71 023768 получением указанного в заголовке соединения (131,4 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС1;) δ м.д. 7.72 (1Н, ά), 7.02-7.13 (2Н, т), 6.72 (1Н, ά), 6.65 (1Н, ά), 6.51 (1Н, άά), 4.11-4.20 (1Н, т), 3.67 (1Н, 5), 3.52 (2Н, Ьг. 5.), 2.81-2.89 (1Н, т), 2.16-2.25 (1Н, т), 2.05-2.16 (1Н, т), 1.02 (3Н, ά);
УЭЖХ-В: 0,75 мин, 257 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 120.
1,1 -Диметилэтил-[1,1 -диметил-2-({6-[(3 -метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5 -ил)окси] -3 пиридинил}амино)-2-оксоэтил]карбамат
6-[(3-Метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинамин (промежуточное соединение 119, 131,4 мг) растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (2 мл) в 8 мл сосуде с получением бледно-желтого раствора. Добавляли ОГРЕА (0,215 мл, 1,230 ммоль), №{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-2-метилаланин (188 мг, 0,923 ммоль) и НАТИ (351 мг, 0,923 ммоль). Реакционную смесь встряхивали при 60°С. Через 3 ч реакционную смесь упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта, который очищали посредством Вю1аде 8Р1 (используя циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов от 3:1 до 1:2 за 15 СУ; затем 1:2 для 5 СУ; колонка с диоксидом кремния §NΛР 25д). Собранные фракции давали указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (104,0 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, ЭМБО^) δ м.д. 9.58 (1Н, Ьг. 5.), 8.29 (1Н, Ьг. 5.), 7.97-8.13 (1Н, т), 7.08 (1Н, ΐ), 7.00 (1Н, Ьг. 5.), 6.93 (1Н, ά), 6.63 (1Н, άά), 6.53 (1Н, άά), 4.08-4.17 (1Н, т), 3.62 (1Н, άά), 2.58-2.71 (1Н, т), 1.92-2.13 (2Н, т), 1.36 (15Н, Ьг. 5.), 0.93 (3Н, ά);
УЭЖХ-В: 0,91 мин, 442 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 121.
2-Метил-Ы1 -{6-[(3 -метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5 -ил)окси] -3 -пиридинил}аланинамид
1,1 -Диметилэтил-[1,1 -диметил-2-({6-[(3 -метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5 -ил)окси] -3 пиридинил}амино)-2-оксоэтил]карбамат (промежуточное соединение 120, 104,0 мг) растворяли в дихлорметане (6 мл) в 50-мл круглодонной колбе с получением бледно-желтого раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С и добавляли ТРА (2 мл, 26,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С. Через 2 ч 30 мин смесь упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта, который загружали на картридж 8СХ 5 д. Затем его промывали 40 мл метанола, а потом 40 мл 2 М раствора аммиака в метаноле. Аммиачный элюат упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (72,6 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, СОСЬ) δ м.д. 9.90 (1Н, Ьг. 5.), 8.17-8.26 (2Н, т), 7.10 (1Н, ΐ), 6.84 (1Н, ά), 6.70 (1Н, ά), 6.56-6.62 (1Н, т), 4.12-4.22 (1Н, т), 3.67 (1Н, ΐ), 2.70-2.85 (1Н, т), 2.13 (2Н, 5), 1.47 (6Н, 5), 1.00 (3Н, ά), ΝΉ2 пропущен. УЭЖХ-В: 0,78 мин, 342 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 122.
1а-Метил-7-{[(метилокси)метил]окси}-1а,7Ь-дигидроциклопропа[с]хромен-2(1Н)-он
К раствору йодида триметилсульфоксония (4,52 г, 20,55 ммоль) в сухом диметилсульфоксиде (50 мл), перемешиваемому под азотом при комнатной температуре, добавляли чистый гидрид натрия (60%, 0,822 г, 20,55 ммоль).
Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего добавляли
- 72 023768
3-метил-5-{[(метилокси)метил]окси}-2Н-хромен-2-он (промежуточное соединение 113, 1,81 г), растворенный в 15 мл ΌΜ80. Реакционная смесь становилась желтой, и ее нагревали и перемешивали при 100°С в течение 4 ч. Затем реакционную смесь обрабатывали путем добавления насыщенного раствора ΝΚ-ιΟ и экстрагировали диэтиловым эфиром, промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (система В|о1аде. с градиентом от чистого циклогексана до циклогексан/этилацетат 5/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (360 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 7.10 (1Н, ΐ), 6.88 (1Н, ά), 6.67 (1Н, ά), 5.26 (2Н, δ), 3.53 (3Н, δ), 2.71 (1Н, άά), 1.58 (1Н, άά), 1.44 (3Н, δ), 1.08 (1Н, ΐ);
УЭЖХлрдс: 0,96 мин, 235 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 123.
2-[2-(Гидроксиметил)-2-метилциклопропил]-3-{[(метилокси)метил]окси}фенол
К раствору 1а-метил-7-{ [(метилокси)метил]окси}-1а,7Ъ-дигидроциклопропа[с]хромен-2(1Н)-она (промежуточное соединение 122, 360 мг) в сухом тетрагидрофуране (15 мл), перемешиваемому под азотом при 0°С, добавляли раствор алюмогидрида лития (1,0 М в ТНР, 1,537 мл, 1,537 ммоль) и при этой температуре в течение 20 мин перемешивали реакционную смесь. Затем реакционную смесь разбавляли ТНР (20 мл) и гасили путем добавления Nа2δ04.10Н20 (10 экв.), оставляя смесь на 30 мин при перемешивании. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, сушили над №2804, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (система Сошратоп, с градиентом от циклогексан/этилацетат 5/1 до циклогексан/этилацетат 1/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (307 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 7.40 (1Н, Ъг. δ.), 7.06 (1Н, ΐ), 6.67 (1Н, ά), 6.59 (1Н, ά), 5.12-5.27 (2Н, ш), 3.57-3.68 (1Н, ш), 3.53 (3Н, δ), 3.42-3.51 (1Н, ш), 2.98 (1Н, ά), 1.54 (1Н, άά), 1.41 (3Н, δ), 1.05 (1Н, άά), 0.86 (1Н, άά);
УЭЖХлрдс: 0,73 мин, 237 [Μ-Н]*.
Промежуточное соединение 124.
1а-Метил-7-{[(метилокси)метил]окси}-1,1а,2,7Ъ-тетрагидроциклопропа[с]хромен
К раствору 2-[2-(гидроксиметил)-2-метилциклопропил]-3-{[(метилокси)метил]окси}фенола (промежуточное соединение 123, 307 мг) в сухом тетрагидрофуране (10 мл) добавляли трифенилфосфин (338 мг, 1,288 ммоль) и бис-(1-метилэтил)-(Е)-1,2-диазендикарбоксилат (261 мг, 1,288 ммоль). Реакционная смесь становилась желтой и ее перемешивали в течение 20 мин при комнатной температуре под азотом. Затем под вакуумом выпаривали растворитель, получая неочищенный продукт в виде бледно-желтого масла. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (система Сошратоп, с градиентом от чистого циклогексана до циклогексан/этилацетат 10/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (280 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 6.97 (1Н, ΐ), 6.73 (1Н, ά), 6.53 (1Н, ά), 5.15-5.30 (2Н, ш), 4.17 (1Н, ά), 3.67 (1Н, ά), 3.54 (3Н, δ), 2.15 (1Н, άά), 1.27 (3Н, δ), 1.20 (1Н, ΐ), 0.94 (1Н, άά);
УЭЖХлрдс: 1,15 мин, 221 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 125.
1а-Метил-1,1а,2,7Ъ-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ол
ОН
К раствору 1а-метил-7-{[(метилокси)метил]окси}-1,1а,2,7Ъ-тетрагидроциклопропа[с]хромена (промежуточное соединение 124, 280 мг) в метаноле (16 мл) добавляли 2 М водный раствор НС1 (1,271 мл, 2,54 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 2 ч, а затем при комнатной температуре в течение ночи, после чего в реакционной смеси все еще присутствовало некоторое количество непрореагировавшего исходного вещества, поэтому добавляли дополнительное количество 2 М НС1 (2 экв.) и перемешивание продолжали при 50°С в течение 2 ч. Затем реакционную смесь гасили водой и разбавляли и экстрагировали дихлорметаном, промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (сис- 73 023768 тема Сошрапюп, с градиентом от чистого циклогексана до циклогексан/этилацетат 5/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (192 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 6.91 (1Н, ΐ), 6.40-6.53 (2Н, ш), 5.00 (1Н, δ), 4.18 (1Н, б), 3.72 (1Н, б), 2.00 (1Н, бб), 1.29 (3Н, δ), 1.20 (1Н, ΐ), 0.98 (1Н, бб);
УЭЖХбрцс: 0,91 мин, 177 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 126.
2-[(1а-Метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-5-нитропиридин
К раствору 1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ола (промежуточное соединение 125, 190 мг) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (10 мл) добавляли К2СО3 (447 мг, 3,23 ммоль) и 2-хлор-5нитропиридин (171 мг, 1,078 ммоль) с получением светло-коричневого раствора. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 1 ч и затем гасили водой, экстрагировали этилацетатом, промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (система Сошрапюп, с градиентом от чистого циклогексана до циклогексан/этилацетат 5/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде светлокоричневого твердого вещества (250 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 9.12 (1Н, б), 8.51 (1Н, бб), 7.12 (1Н, ΐ), 7.04 (1Н, б), 6.81 (1Н, б), 6.75 (1Н, бб), 4.22 (1Н, б), 3.74 (1Н, б), 1.73 (1Н, бб), 1.23 (1Н, ΐ), 1.21 (3Н, δ), 0.85 (1Н, бб);
УЭЖХбрцс: 1,21 мин, 299 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 127.
6-[(1а-Метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7 -ил)окси] -3 -пиридинамин
К раствору 2-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-5-нитропиридина (промежуточное соединение 126, 250мг) в тетрагидрофуране (6 мл)/воде (3 мл) добавляли железо (234 мг, 4,19 ммоль) и хлорид аммония (224 мг, 4,19 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, после чего анализ методом УЭЖХ показал частичное образование целевого соединения с некоторым количеством гидроксиламина в качестве промежуточного соединения; поэтому добавляли дополнительные 3 эквивалента хлорида аммония и железа и реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение еще 5 ч. Затем через набивку целита отфильтровывали железо и раствор разбавляли водным насыщенным раствором NаΗСО3 (100 мл) и этилацетатом (200 мл). Две фазы разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом. Органические слои объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (система Сошрапюп, с градиентом от циклогексан/этилацетат 8:2 до циклогексан/этилацетат 1:1) с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-коричневого твердого вещества (150 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 7.75 (1Н, б), 7.08 (1Н, бб), 6.99 (1Н, ΐ), 6.73 (1Н, б), 6.64 (1Н, б), 6.59 (1Н, б), 4.17 (1Н, б), 3.70 (1Н, б), 3.50 (2Н, Ьг. δ.), 2.00 (1Н, бб), 1.17-1.23 (4Н, ш), 0.85 (1Н, бб);
УЭЖХбрцс: 0,88 мин, 269 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 128.
1,1-Диметилэтил-[1,1-диметил-2-({6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7ил)окси]-3-пиридинил}амино)-2-оксоэтил]карбамат
К раствору 6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3-пиридинамина (промежуточное соединение 127, 150 мг) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (10 мл) добавляли ОГРЕА (0,352 мл, 2,013 ммоль), ^{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-2-метилаланин (307 мг, 1,509 ммоль) и НАТИ (574 мг, 1,509 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 2,5 ч. Органическую фазу промывали насыщенным рассолом, экстрагировали диэтиловым эфиром, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (система Сошрапюп, с градиентом от циклогексан/этилацетат 8:2 до циклогексан/этилацетат 1:1) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (135 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.17 (1Н, б), 8.13 (1Н, бб), 7.03 (1Н, ΐ), 6.86 (1Н, б), 6.69 (2Н, ΐ),
- 74 023768
5.86 (1Н, Ьг. 5.), 4.89 (1Н, Ьг. 5.), 4.18 (1Н, а), 3.71 (1Н, а), 1.90 (1Н, аа), 1.60 (6Н, 5), 1.45 (9Н, 5), 1.15-1.23 (4Н, т), 0.84 (1Н, аа);
УЭЖХлрдс: 1,18 мин, 454 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 129.
2-Метил-М1-{6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3пиридинил}аланинамид
К раствору 1,1-диметилэтил-[1,1-диметил-2-({6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3-пиридинил}амино)-2-оксоэтил]карбамата (промежуточное соединение 128, 135 мг, 0,298 ммоль) в сухом дихлорметане (10 мл) при 0°С медленно добавляли ТРА (5 мл, 64,9 ммоль) и при этой же температуре в течение 2 ч перемешивали реакционную смесь. Растворитель и избыток ТРА выпаривали и остаток растворяли в дихлорметане и медленно добавляли насыщенный раствор МаНСО3, позволяя рН достичь значения 8. Две фазы разделяли и органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла, используемого как оно было без какой-либо дополнительной очистки (105 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 9.94 (1Н, Ьг. 5.), 8.19-8.30 (2Н, т), 7.03 (1Н, ΐ), 6.85 (1Н, а), 6.70 (1Н, а), 6.67 (1Н, а), 4.18 (1Н, а), 3.71 (1Н, а), 1.91 (1Н, аа), 1.72 (2Н, ьг. 5.), 1.48 (6Н, 5), 1.15-1.23 (4Н, т), 0.84 (1Н, аа);
УЭЖХлрдс: 0,76 мин, 354 [М+1]+.
Промежуточное соединение 130.
Этил-(2-({[(1,1-диметилэтил)(диметил)силил]окси}метил)-6-{[(метилокси)метил]окси}фенил)(оксо)ацетат
К раствору (1,1-диметилэтил)(диметил){[(3-{[(метилокси)метил]окси}фенил)метил]окси}силана (промежуточное соединение 103, 3 г) в сухом н-гексане (30 мл) добавляли раствор ВиЫ в гексане (1,6 М, 7,63 мл, 12,21 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до -78°С и добавляли (путем канюлирования) к раствору этилхлор(оксо)ацетата (1,780 мл, 15,93 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (20 мл) при -78°С. Реакционную смесь гасили водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8МАР 100д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 8:2 в качестве элюентов. В результате получали указанное в заголовке соединение в виде бледно-желтого масла (2,67 г).
1Н ЯМР (400 МГц, 1)\18О-с16): δ м.д. 7.53 (1Н, ΐ), 7.20 (1Н, а), 7.15 (1Н, а), 5.21 (2Н, 5), 4.76 (2Н, 5), 4.27 (2Н, ф, 3.34 (3Н, 5), 1.27 (3Н, ΐ), 0.86 (9Н, 5), 0.05 (6Н, 5).
Промежуточное соединение 131.
Диметилтитаноцен
К суспензии дихлортитаноцена (8,3 г, 33,3 ммоль) в сухом толуоле (100 мл) при -10°С медленно добавляли (20 мин) раствор метиллития в ЕьО (1,6 М, 47,3 мл, 76 ммоль) и при этой же температуре в течение 45 мин перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь добавляли (путем канюлирования) к раствору хлорида аммония (1,2 г) в воде (24 мл), охлажденному до -10°С. Две фазы разделяли и органический слой промывали холодной водой (3x20 мл) и рассолом (1x20 мл), сушили над сульфатом натрия фильтровали и концентрировали при пониженном давлении до 60 мл, содержащих 9% (мас./мас.)
- 75 023768 диметилтитаноцена (5,04 г, 24 ммоль) в толуоле.
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 6.10 (10Н, 5), -0.11 (6Н, 5).
Промежуточное соединение 132.
Этил-2-(2-({ [(1,1-диметилэтил)(диметил)силил]окси}метил)-6-{ [(метилокси)метил]окси}фенил)-2пропеноат
К раствору этил-(2-({ [(1,1-диметилэтил)(диметил)силил]окси}метил)-6-{ [(метилокси)метил]окси}фенил)(оксо)ацетата (промежуточное соединение 130, 1,4 г) в сухом толуоле (8 мл) добавляли 9% (мас./мас.) диметилтитаноцена в толуоле (промежуточное соединение 131, 30 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при 90°С. После охлаждения реакционную смесь разбавляли водой (20 мл) и этилацетатом (30 мл). Две фазы разделяли и органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 100д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 9:1 в качестве элюентов. В результате получали указанное в заголовке соединение в виде бледно-желтого масла (865 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 7.30 (1Н, ί), 7.12 (1Н, ά), 7.02 (1Н, ά), 6.46 (1Н, ά), 5.74 (1Н, ά), 5.12 (2Н, 5), 4.54 (2Н, 5), 4.12 (2Н, ς), 3.32 (3Н, 5), 1.16 (3Н, ί), 0.88 (9Н, 5), 0.04 (6Н, 5);
УЭЖХ-1РфС: 1,54 мин, 381 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 133.
Этил-1-(2-({ [(1,1-диметилэтил)(диметил)силил]окси}метил)-6-{ [(метилокси)метил]окси}фенил)циклопропанкарбоксилат
К раствору йодида триметилсульфоксония (816 мг, 3,71 ммоль) в сухом диметилсульфоксиде (10 мл) добавляли 60%-ную дисперсию КаН в минеральном масле (140 мг, 3,49 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Добавляли раствор этил-2-(2-({[(1,1диметилэтил)(диметил)силил]окси}метил)-6-{[(метилокси)метил]окси}фенил)-2-пропеноата (промежуточное соединение 132, 830 мг) в сухом диметилсульфоксиде (5 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили льдом, разбавляли рассолом (10 мл) и водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой промывали водой (3x15 мл) и рассолом (1x20 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система В1о1аде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 50д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 7:3 в качестве элюента. В результате получали указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (780 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6, 65°С): δ м.д. 7.25 (1Н, ί), 7.12 (1Н, ά), 6.98 (1Н, ά), 5.19 (2Н, 5), 4.78 (2Н, Ьг.5), 4.01 (2Н, ς), 3.41 (3Н, 5), 1.55-1.65 (2Н, т), 1.13-1.21 (2Н, т), 1.08 (3Н, ί), 0.94 (9Н, 5), 0.11 (6Н, 5);
УЭЖХ-ШфС: 1,57 мин, 395 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 134.
(2-[1-(Гидроксиметил)циклопропил]-3-{[(метилокси)метил]окси}фенил)метанол
К раствору этил-1-(2-({ [(1,1-диметилэтил)(диметил)силил]окси}метил)-6-{ [(метилокси)метил]- 76 023768 окси}фенил)циклопропанкарбоксилата (промежуточное соединение 133, 780 мг) в сухом тетрагидрофуране (20 мл) при 0°С медленно добавляли раствор ЫА1Н4 в ТНР (1Μ, 2,076 мл, 2,076 ммоль) и при этой же температуре в течение 2 ч перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь гасили водой (10 мл) и рассолом (10 мл) и разбавляли этилацетатом (30 мл). Твердое вещество отфильтровывали и две фазы разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (30 мл) и объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением спиртового промежуточного соединения в виде бесцветного масла. Его растворяли в сухом тетрагидрофуране (20,00 мл) и медленно при 0°С добавляли 1 М раствор ТВАР в ТНР (2,076 мл, 2,076 ммоль). При этой же температуре в течение 1 ч перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь гасили водой (10 мл) и рассолом (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1а§е) на силикагеле, используя колонку §NΑΡ 50д и циклогексан/этилацетат от 7:3 до 3:7 в качестве элюентов. В результате получали указанное в заголовке соединение (450 мг) в виде белого кристаллического твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ^): δ м.д. 7.16 (1Н, ΐ), 7.07 (1Н, б), 6.92 (1Н, б), 5.17-5.24 (2Н, т), 5.00 (1Н, ΐ), 4.67-4.74 (3Н, т), 3.65-3.76 (1Н, т), 3.41 (3Н, 5), 3.11-3.21 (1Н, т), 0.83-0.94 (2Н, т), 0.65-0.77 (1Н, т), 0.51-0.61 (1Н, т).
Промежуточное соединение 135.
5-{[(Метилокси)метил]окси}-1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан]
К раствору (2-[1-(гидроксиметил)циклопропил]-3-{[(метилокси)метил]окси}фенил)метанола (промежуточное соединение 134, 450 мг) в сухом тетрагидрофуране (10 мл) при 0°С, медленно добавляли раствор ВиЫ в гексане (1,6 М, 1,180 мл, 1,889 ммоль) и при этой же температуре в течение 15 мин перемешивали реакционную смесь. Медленно добавляли раствор тозилхлорида (360 мг, 1,889 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (5 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С. Добавляли второй эквивалент раствора ВиЫ в гексане (1,6 М, 1,180 мл, 1,889 ммоль) и при такой же температуре в течение 30 мин перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором №-1НСО3, (10 мл), разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэшхроматографией (система Вю1а§е) на силикагеле, используя колонку §NΑΡ 25д и циклогексан/этилацетат от 100:0 до 8:2 в качестве элюентов. В результате получали указанное в заголовке соединение, представляющее собой 5-{[(метилокси)метил]окси}-1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан], в виде бесцветного масла (385 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-66): δ м.д. 7.04 (1Н, ΐ), 6.83 (1Н, б), 6.68 (1Н, б), 5.11 (2Н, 5), 4.75 (2Н, 5), 3.49 (2Н, 5), 3.37 (3Н, 5), 1.64-1.70 (2Н, т), 0.56-0.61 (2Н, т).
Промежуточное соединение 136.
1Н-Спиро [2-бензопиран-4,1 '-циклопропан] -5-ол
К раствору 5-{[(метилокси)метил]окси}-1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропана] (промежуточное соединение 135, 380 мг) в метаноле (10 мл) добавляли 10% НС1 в воде (1,048 мл, 3,45 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. Объединенные растворители выпаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку §NΑΡ 25д и циклогексан/этилацетат от 100:0 до 8:2 в качестве элюентов. В результате получали указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (260 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-66): δ м.д. 9.18 (1Н, 5), 6.88 (1Н, ΐ), 6.56 (1Н, б), 6.47 (1Н, б), 4.71 (2Н, 5), 3.47 (2Н, 5), 1.69-1.74 (2Н, т), 0.47-0.52 (2Н, т).
- 77 023768
Промежуточное соединение 137.
5-Нитро-2-(1Н-спиро [2-бензопиран-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)пиридин
К раствору 1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан]-5-ола (промежуточное соединение 136, 150 мг) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (4 мл) добавляли карбонат калия (176 мг, 1,277 ммоль), а затем 2хлор-5-нитропиридин (148 мг, 0,936 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 110°С. После охлаждения реакционную смесь гасили рассолом (1 мл), разбавляли водой (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x15 мл). Органический слой промывали ледяным рассолом (2x10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 25д и циклогексан/этилацетат от 100:0 до 7:3 в качестве элюентов. В результате получали указанное в заголовке соединение в виде бесцветной смолы (240 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 9.05 (1Н, б), 8.64 (1Н, бб), 7.24 (1Н, б), 7.20 (1Н, ΐ), 7.01 (1Н, б), 6.88 (1Н, б), 4.86 (2Н, 5), 3.53 (2Н, 5), 1.23-1.27 (2Н, т), 0.63-0.68 (2Н, т);
УЭЖХАРОС: 1,08 мин, 299 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 138.
6-(1Н-Спиро [2-бензопиран-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)-3 -пиридинамин
К раствору 5-нитро-2-(1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан]-5-илокси)пиридина (промежуточное соединение 137, 238 мг) в тетрагидрофуране (10 мл)/воде (5 мл) добавляли железо (223 мг, 3,99 ммоль), а затем хлорид аммония (213 мг, 3,99 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывали и раствор разбавляли водным насыщенным раствором NаНС03 и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 25д и циклогексан/этилацетат от 7:3 до 3:7 в качестве элюентов. В результате получали указанное в заголовке соединение (180 мг) в виде светло-желтого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 7.51 (1Н, б), 7.07 (1Н, бб), 7.04 (1Н, ΐ), 6.80 (1Н, б), 6.69 (1Н, б), 6.53 (1Н, б), 5.06 (2Н, Ьг.5), 4.81 (2Н, 5), 3.53 (2Н, 5), 1.49-1.53 (2Н, т), 0.58-0.62 (2Н, т).
Промежуточное соединение 139.
5-2-Пиридинил-(2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)-2-метилбутантиоат
К раствору Х-{|(1,1-диметилэтил)окси|карбонил!-О-изовалина (100 мг, 0,460 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (ТНР) (10 мл) добавляли 2,2'-дитиодипиридин (254 мг, 1,151 ммоль) и трифенилфосфин (302 мг, 1,151 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. ТНР выпаривали под вакуумом. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя 25д указанное в заголовке соединение (78 мг, 0,251 ммоль) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, 0М80-б6)<5 м.д. 8.59 (1Н, б), 7.87 (1Н, ΐ), 7.70 (1Н, Ьг.5.), 7.51 (1Н, б), 7.41 (ΐ, 1Н), 2.02-1.84 (1Н, т), 1.74-1.60 (1Н, т), 1.43 (9Н, 5), 1.33 (3Н, 5), 0.81 (3Н, ΐ).
УЭЖХ-!РОС: 1,01 мин, 311 [М+Н]+.
- 78 023768
Промежуточное соединение 140.
1,1-Диметилэтил-[(1К)-1-метил-1-({[6-(1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан]-5-илокси)-3пиридинил] амино}карбонил)пропил] карбамат
К раствору 6-(1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан]-5-илокси)-3-пиридинамина (промежуточное соединение 138, мг, 0,242 ммоль) в сухом толуоле (4 мл) добавляли δ-2-пиридинил-(2Κ)-2-({[(1,1диметилэтил)окси]карбонил}амино)-2-метилбутантиоат (промежуточное соединение 139, 75 мг, 0,242 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при 150°С. После охлаждения растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали флэш-хроматографией (система ВюЕаде) на силикагеле, используя колонку δNΑΡ 10д и циклогексан/этилацетат 9:1 до циклогексан/этилацетат 1:1 в качестве элюента, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (64 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 9.63 (1Н, Ьг.5), 8.30 (1Н, Ьг.5), 8.01-8.16 (1Н, т), 7.11 (1Н, ΐ), 6.87-6.95 (3Н, т), 6.69 (1Н, Д), 4.83 (2Н, 5), 3.53 (2Н, 5), 1.70-1.90 (2Н, т), 1.26-1.47 (14Н, т), 0.78 (3Н, ΐ), 0.58-0.65 (2Н, т);
УЭЖХ-П’ОС: 1,14 мин, 468 [М+Н]+.
Промежуточное соединение 141.
^-[6-(1Н-спиро [2-бензопиран-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)-3 -пиридинил] -Ό-изовалинамид
К раствору 1,1 -диметилэтил-[(1К)-1-метил-1-({ [6-(1Н-спиро [2-бензопиран-4,1 '-циклопропан] -5илокси)-3-пиридинил]амино}карбонил)пропил]карбамата (промежуточное соединение 140, 62 мг) в сухом дихлорметане (6 мл) при 0°С медленно добавляли ТРА (2 мл, 26,0 ммоль) и при этой же температуре в течение 3 ч перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (15 мл) и добавляли водный насыщенный раствор NаΗСΟз, позволяя рН достичь значения примерно 8. Две фазы разделяли и органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку δNΑΡ 10д и дихлорметан/метанол от 99:1 до 95:5 в качестве элюентов. В результате получали указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (42 мг, 86%-ный выход).
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 8.40 (1Н, Д), 8.16 (1Н, ДД), 7.11 (1Н, 1),.94 (1Н, Д), 6.90 (1Н, Д), 6.69 (1Н, Д), 4.84 (2Н, 5), 3.53 (2Н, 5), 1.66-1.78 (1Н, т), 1.46-1.58 (1Н, т), 1.37-1.42 (2Н, т), 1.24 (3Н, 5), 0.83 (3Н, ΐ), 0.59-0.64 (2Н, т);
УЭЖХ-П’ОС: 0,69 мин, 368 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 142.
1,1-Диметилэтил-[2-({2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинил}амино)-1,1-диметил-2-оксоэтил]карбамат
К раствору №{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-2-метилаланина (59,2 мг, 0,292 ммоль) добавляли ОРЕА (0,068 мл, 0,389 ммоль), а затем НАТИ (111 мг, 0,292 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при к.т. Затем добавляли 2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинамин (промежуточное соединение 65, 50 мг, 0,194 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при 50°С. Реакционную смесь гасили рассолом (1 мл), разбавляли водой (2 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x5 мл). Органический слой сушили (№2δΟ4), фильтровали и упаривали и
- 79 023768 остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю!аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 25д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 7:3 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (31 мг) в виде белого твердого вещества.
УЭЖХ: 0,75 мин, 443 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 143.
У-{2-[(3,3-диметил-213-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-2-метилаланинамид
К раствору 1,1-диметилэтил-[2-({2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинил}амино)-1,1-диметил-2-оксоэтил]карбамата (промежуточное соединение 142, 30 мг, 0,068 ммоль) в сухом дихлорметане (ΩΕ'Μ) (1,6 мл) медленно при 0°С добавляли ТРА (0,4 мл, 5,19 ммоль) и при этой же температуре в течение 1 ч перемешивали реакционную смесь. Растворитель и избыток ТРА выпаривали и остаток растворяли в ЭСМ (5 мл) и добавляли водный насыщенный раствор ΝΗΜΠΟβ, позволяя рН достичь значения примерно 8-9. Две фазы разделяли и органический слой сушили (№28Ο4), фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение (20 мг) в виде белого твердого вещества.
УЭЖХ: 0,51 мин, 343 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 144.
1,1 -Диметилэтил{ (1К)-1-[({2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -5пиримидинил}амино)карбонил]-2-метилпропил}карбамат
К раствору Вос-Э-валина (63,3 мг, 0,292 ммоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (ΩΜΕ) (2 мл) добавляли ^IΡΕΑ (0,068 мл, 0,389 ммоль), а затем НАТИ (111 мг, 0,292 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при к.т. Затем добавляли 2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинамин (промежуточное соединение 65, 50 мг, 0,194 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч при 50°С. Реакционную смесь гасили рассолом (1 мл), разбавляли водой (2 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x5 мл). Органический слой сушили (Nа28Ο4), фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 25д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 7:3 в качестве элюента, с получением указанного в заголовке соединения, представляющего собой 1,1-диметилэтил{(1К)-1-[({2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}амино)карбонил]-2-этилпропил}карбамат (55 мг, 0,20 ммоль, 62,0%-ный выход), в виде белого твердого вещества.
Референсное промежуточное соединение 145.
(2К)-2-Амино-Н-[2-[(3.3-диметил-2Н-бензофуран-4-ил)окси]пиримидин-5-ил]-3-метилбутанамид
К раствору 1,1-диметилэтил-{(1К)-1-[({2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинил}амино)карбонил]-2-метилпропил}карбамата (промежуточное соединение 144, 52 мг, 0,114 ммоль) в сухом дихлорметане (ΩΕ'Μ) (2 мл) при 0°С медленно добавляли ТРА (0,5 мл, 6,49 ммоль) и при этой же температуре в течение 1 ч перемешивали реакционную смесь. Растворитель и избыток ТРА выпаривали и остаток растворяли в ΩΕ'Μ (5 мл) и добавляли водный насыщенный раствор NаНСΟз, позволяя рН достичь значения примерно 8-9. Две фазы разделяли и органический слой сушили (Nа28Ο4), фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение (40 мг) в виде белого твердого вещества.
УЭЖХ: 0,53 мин, 357 [М+Н]+.
- 80 023768
Референсное промежуточное соединение 146.
трет-Бутил-^[(1К)-1 -метил-1-[[6-(3 -метилхроман-5-ил)окси-3 -пиридил]карбамоил] пропил] карбамат
В 8 мл 6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинамин (промежуточное соединение 119, 82,4 мг, 0,0305 ммоль), (2К)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-2-метилбутановую кислоту (59,7 мг, 0,275 ммоль) и ЭРЕА (0,080 мл, 0,458 ммоль) растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (ЭМР) (2 мл) с получением бледно-желтого раствора. Добавляли НАТИ (151 мг, 0,397 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение выходных. Реакционную смесь упаривали в вакууме и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя колонку §NЛΡ 25д и циклогексан/этилацетат от 3:1 до 1:2 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (55,8 мг) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 8.08-8.16 (2Н, т), 7.10 (1Н, ΐ), 6.84 (1Н, 6), 6.70 (1Н, 6), 6.59 (1Н, 6), 6.13 (1Н, Ъг. 5.), 4.90 (1Н, Ъг. 5.), 4.12-4.22 (1Н, т), 3.59-3.75 (1Н, т), 2.59-2.92 (1Н, т), 1.85-2.25 (3Н, т), 1.69-1.84 (1Н, т), 1.51 (3Н, 5), 1.45 (9Н, 5), 0.91-1.05 (6Н, т);
УЭЖХчрдс: 1,22 мин, 456 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 147.
(2К)-2-Амино-2-метил-^[6-(3-метилхроман-5-ил)окси-3-пиридил]бутанамид
трет-Бутил-^[(1К)-1 -метил-1-[[6-(3 -метилхроман-5-ил)окси-3 -пиридил]карбамоил] пропил] карбамат (промежуточное соединение 146, 55,8 мг, 0,104 ммоль) растворяли в дихлорметане (3 мл) в 50мл круглодонной колбе с получением бледно-желтого раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С и добавляли ТРА (2 мл, 26,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта в виде желтого масла. Образец загружали на картридж §СX 2 д Затем его промывали 36 мл МеОН, а потом 25 мл 2 М раствора аммиака в МеОН. Аммиачный элюат упаривали в вакууме, получая указанное в заголовке соединение (32,9 мг) в виде бледно-желтого масла.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 9.88 (1Н, Ъг. 5.), 8.14-8.28 (2Н, т), 7.10 (1Н, ΐ), 6.83 (1Н, 6), 6.70 (1Н, 66), 6.59 (1Н, 66), 4.12-4.21 (1Н, т), 3.61-3.72 (1Н, т), 2.72-2.84 (1Н, т), 2.04-2.24 (2Н, т), 1.92-2.04 (1Н, т), 1.52-1.84 (6Н, т), 1.00 (3Н, 6), 0.94 (3Н, ΐ);
УЭЖХчрдс: 0,76 мин, 356 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 148.
1,1-Диметилэтил-[2-({6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}амино)-1,1диметил-2-оксоэтил]карбамат
6-[(3-Этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинамин (промежуточное соединение 108, 55 мг, 0,215 ммоль) растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (2 мл) в 8 мл сосуде с получением бесцветного раствора. Добавляли ОГОЕА (0,056 мл, 0,322 ммоль), ^{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-2метилаланин (52,3 мг, 0,258 ммоль) и ТВТИ (83 мг, 0,258 ммоль). Реакционную смесь встряхивали при 60°С в течение ночи. Добавляли дополнительные количества ОГРЕА (0,1 мл), Ν-{[(1,1- 81 023768 диметилэтил)окси]карбонил}-2-метилаланина (’05 мг) и ТВТИ (’70 мг). Реакционную смесь встряхивали при 60°С в течение дополнительных ’0 ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 25д и циклогексан/этилацетат от 2:’ до ’:’ в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (36,5 мг) в виде бесцветного маслянистого твердого вещества.
’Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ м.д. 8.12-8.17 (2Н, т), 7.30 (’Н, ΐ), 7.05 (’Н, б), 6.95 (’Н, б), 6.89 (’Н, б), 6.16 (’Н, Ьг. 5.), 5.20-5.27 (’Н, т), 5.17 (’Н, бб), 5.10 (’Н, б), 4.92 (’Н, Ьг. 5.), 1.84-1.97 (’Н, т), 1.66-1.78 (’Н, т), 1.63 (6Н, 5), 1.45 (9Н, 5), 0.88 (3Н, ΐ);
УЭЖХ-В: 0,89 мин, 442 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение ’49.
^-{6-[(3-этил-’,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2-метилаланинамид
’,’-Диметилэтил-[2-({6-[(3-этил-’,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}амино)-’,’диметил-2-оксоэтил]карбамат (промежуточное соединение ’48, 36,5 мг, 0,066 ммоль) растворяли в дихлорметане (3 мл) в 50-мл круглодонной колбе с получением бесцветного раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С и при этой температуре добавляли ТРА (’,5 мл, 19,47 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение ’,5 ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме, и остаток загружали на картридж 8СХ 2д. Затем его промывали ’5 мл МеОН, а потом ’5 мл 2 М раствора аммиака в МеОН. Аммиачный элюат упаривали в вакууме, получая указанное в заголовке соединение (17,2 мг) в виде бесцветного масла.
’Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ м.д. 9.9’ (’Н, Ьг. 5.), 8.26 (’Н, бб), 8.20 (’Н, б), 7.30 (’Н, ΐ), 7.05 (’Н, б), 6.94 (’Н, б), 6.90 (’Н, б), 5.21-5.27 (’Н, т), 5.17 (’Н, бб), 5.10 (’Н, б), 1.83-1.98 (’Н, т), 1.68-1.79 (’Н, т), 1.47 (6Н, 5), 0.88 (3Н, ΐ);
УЭЖХ-В: 0,74 мин, 342 [М+Н]+.
Ресреренсное промежуточное соединение 150.
2,4-бис-(Метоксиметокси)-’-метилбензол
К раствору 4-метилбензол-’,3-диола (4 г, 32,26 ммоль) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (30 мл) при 0°С добавляли гидрид натрия (60%-ную дисперсию в минеральном масле) (3,87 г, 96,78 ммоль) и при этой же температуре в течение ’5 мин перемешивали реакционную смесь. Быстро добавляли ΜΟΜ-ί'Ί (7,35 мл, 96,78 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ’ ч, позволяя температуре достичь значения комнатной температуры. Реакционную смесь гасили рассолом (40 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x80 мл). Органический слой промывали ледяным рассолом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1а§е) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ ’00д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 8:2 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (6,1 г) в виде бесцветного масла.
ЖХ/МС: ОС-3-ΜΣΝ: Κΐ = 1,8’1 мин; 213 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение ’5’.
К раствору 2,4-бис-(метоксиметокси)-1-метилбензола (промежуточное соединение 150, 5,5 г, 25,94 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (50 мл) при комнатной температуре добавляли ’,6 М ВиЫ в гексане
- 82 023768 (19,45 мл, 31,13 ммоль) и при этой же температуре в течение 30 мин перемешивали реакционную смесь. Смесь охлаждали до -78°С и добавляли (путем канюлирования) к раствору этилхлороксоацетата (4,35 мл, 38,9 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (30 мл) при -78°С. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин. Реакционную смесь гасили водой (20 мл), разбавляли рассолом (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку §NЛΡ 100д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 8:2 в качестве элюента, с получением указанного в заголовке соединения (4,65 г) в виде светло-желтого масла.
ЖХ/МС: фС-3-ΜΠΝ К = 1,865 мин.
Референсное промежуточное соединение 152. Этил-2-[2,6-бис-(метоксиметокси)-3-метилфенил]проп-2-еноат
К суспензии бромида метилтрифенилфосфония (8,78 г, 24,6 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (50 мл) при 0°С медленно добавляли 0,5 М раствор ΚΉΜΌδ в толуоле (44,22 мл, 22,11 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С и в течение 45 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и медленно добавляли к раствору этил-2-[2,6-бис-(метоксиметокси)3-метилфенил]-2-оксо-ацетата (промежуточное соединение 151, 4,6 г, 14,74 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (25 мл) при 0°С и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°С. Реакционную смесь гасили водой (50 мл), разбавляли рассолом (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2х 100 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэшхроматографией (система Вю!аде) на силикагеле, используя колонку δNЛΡ 100д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 8:2 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (3,8 г) в виде бесцветного масла. ЖХ/МС: рС-3-ΜΣΝ: К = 1,930 мин.
Референсное промежуточное соединение 153.
Этил- 1-[2,6-бис-(метоксиметокси)-3 -метилфенил] циклопропан-карбоксилат
К раствору йодида триметилсульфоксония (4,4 г, 20 ммоль) в сухом диметилсульфоксиде (30 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ную дисперсию в минеральном масле) (0,720 г, 18 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Медленно добавляли раствор этил-2-[2,6бис-(метоксиметокси)-3-метилфенил]проп-2-еноата (промежуточное соединение 152, 3,5 г, 11,29 ммоль) в сухом диметилсульфоксиде (15 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (10 мл), разбавляли водой (40 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Органический слой промывали водой (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэшхроматографией (система Вю!аде) на силикагеле, используя колонку δNЛΡ 100д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 8:2 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (3,1 г) в виде бесцветного масла.
ЖХ/МС: рС-3-ΜΕΝ: К = 2,028 мин.
- 83 023768
Референсное промежуточное соединение 154.
2-[1 -(Г идроксиметил)циклопропил] -3 -(метоксиметокси)-6-метилфенол
К раствору этил-1-[2,6-бис-(метоксиметокси)-3-метилфенил]циклопропанкарбоксилата (промежуточное соединение 153, 300 мг, 0,93 ммоль) в этаноле (10 мл) добавляли 6н. НС1 в воде (0,4 мл, 2,4 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. Объединенные растворители удаляли при пониженном давлении. Остаток суспендировали в сухом толуоле (10 мл) и растворитель выпаривали. Полученный остаток растворяли в сухом тетрагидрофуране (10 мл), смесь охлаждали до 0°С и добавляли NаН (60%-ную дисперсию в минеральном масле) (80 мг, 2 ммоль) и при этой же температуре в течение 30 мин перемешивали реакционную смесь. Затем добавляли МОМ-С1 (0,083 мл, 1,1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°С. Добавляли ЫА1Н4 (1 М в ТНР, 1,2 мл, 1,2 ммоль), а затем при этой же температуре в течение 1 ч перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (10 мл), разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система ВШаде) на силикагеле, используя колонку δNΑΡ 25д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 7:3 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (70 мг) в виде белого твердого вещества.
ЖХ/МС: 0С-3-МЩ: К! = 1,690 мин; 239 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 155.
4-(Метоксиметокси)-7 -метил-спиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан]
К раствору 2-[1-(гидроксиметил)циклопропил]-3-(метоксиметокси)-6-метилфенола (промежуточное соединение 154, 65 мг, 0,27 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (5 мл) добавляли трифенилфосфин (84 мг, 0,32 ммоль) и реакционную смесь перемешивали до полного растворения РР13. Затем по каплям добавляли Э1АЭ (0,056 мл, 0,285 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю!аде) на силикагеле, используя колонку δNΑΡ 10д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 8:2 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (40 мг) в виде светло-желтого масла.
ЖХ/МС: 0С-3-МЩ: К! = 2,024 мин; 221 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 156.
7-Метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ол
К раствору 4-(метоксиметокси)-7-метил-спиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропана] (промежуточное соединение 155, 38 мг, 0,17 ммоль) в этаноле (5 мл) добавляли 6н. НС1 в воде (0,1 мл, 0,6 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 4 суток при комнатной температуре. Объединенные растворители удаляли при пониженном давлении и остаток очищали флэш-хроматографией (система ВШаде) на силикагеле, используя колонку δNΑΡ 10д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 7:3 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (24 мг) в виде светло-оранжевого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ^ΜδО-Д6) δ м.д.: 9.02 (1Н, е), 6.65 (1Н, Д), 6.06 (1Н, Д), 4.36 (2Н, е), 2.02 (3Н, е), 1.40-1.44 (2Н, т), 0.77-0.82 (2Н, т).
^ΕδΥ (400 МГц, ^ΜδО-Д6): NОЕ (ядерный эффект (Эверхаузера)-корреляция между протоном при 6,65 м.д. и протонами (СН3) при 2,02 м.д., NОΕ-корреляция между протоном при 9,02 м.д. и прото- 84 023768 ном при 6,06 м.д.ЖХ/МС: ЦС-3-М1№ Κΐ = 1,647 мин; 177[М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 157.
2-(7 -Метилспиро [2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-ил)окси-5-нитропиридин
К раствору 7-метилспиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ола (промежуточное соединение 156, 176 мг, 1 ммоль) в сухом ЭМР (4 мл) добавляли карбонат калия (207 мг, 1,5 ммоль), а затем 2-хлор-5нитропиридин (158 мг, 1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 80°С. После охлаждения реакционную смесь гасили водой (2 мл), разбавляли рассолом (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение (270 мг) в виде оранжевого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии в виде неочищенного вещества без дополнительной очистки.
ЖХ/МС: ЦС-3-МГ№ Κΐ = 2,138 мин; 299 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 158.
6-(7 -Метилспиро [2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-ил)оксипиридин-3 -амин
К раствору 2-(7-метилспиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ил)окси-5-нитропиридина (промежуточное соединение 157, 265 мг) в тетрагидрофуране (5 мл)/воде (2,5 мл) добавляли железо (245 мг, 4,45 ммоль), а затем хлорид аммония (238 мг, 4,45 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывали и остаток разбавляли водным насыщенным раствором NаНСΟз (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вюΐаде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΛΡ 10д и циклогексан/этилацетат 8:2 до циклогексан/этилацетат 1:1 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (203 мг) в виде светло-желтого твердого вещества.
ЖХ/МС: ЦС-3-МГ№ Κΐ = 1,740 мин; 269 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 159.
трет-Бутил-^[(1К)-1-[[6-(7-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)окси-3 пиридил] карбамоил] пропил] карбамат
К раствору (2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановой кислоты (36 мг, 0,18 ммоль) в сухом ЭМР (1 мл) добавляли ЭГРЕА (52 мкл, 0,3 ммоль), а затем НАТИ (65 мг, 0,17 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при к.т. Затем добавляли 6-(7-метилспиро[2Нбензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ил)оксипиридин-3-амин (промежуточное соединение 158, 40 мг, 0,15 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили водой (2 мл), разбавляли рассолом (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл). Органический слой сушили (№28О4), фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю!аде) на силикагеле, используя колонку 8NΛР 10д и циклогексан/этилацетат 90:10 до циклогексан/этилацетат 60:40 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (57 мг) в виде белого твердого вещества.
ЖХ/МС: ЦС-3-МГ№ Κΐ = 2,190 мин; 454 [М+Н]+.
- 85 023768
Референсное промежуточное соединение 160.
(2К)-2-Амино-Ы-[6-(7-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)окси-3 пиридил] бутанамид
К раствору трет-бутил-Ы-[( 1К)-1-[[6-(7-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-ил)окси-3 пиридил]карбамоил]пропил]карбамата (промежуточное соединение 159, 55 мг) в сухом ЭСМ (3 мл) при 0°С медленно добавляли ТРА (1 мл) и при этой же температуре в течение 3 ч перемешивали реакционную смесь. Растворитель и избыток ТРА удаляли при пониженном давлении и остаток разбавляли ЭСМ (10 мл) и добавляли водный насыщенный раствор NаНСΟз, позволяя рН достичь значения примерно 8. Две фазы разделяли и органический слой сушили (№28О4), фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение (41 мг) в виде белого твердого вещества.
ЖХ/МС: 0С-3-МШ: Κΐ = 1,792 мин; 354 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 161.
2-(7 -Метилспиро [2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-ил)окси-5-нитропиримидин
К раствору 7-метилспиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ола (промежуточное соединение 156, 176 мг, 1 ммоль) в сухом ацетонитриле (4 мл) добавляли карбонат калия (207 мг, 1,5 ммоль), а затем 2хлор-5-нитропиримидин (159 мг, 1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч при 80°С. После охлаждения реакционную смесь гасили водой (2 мл), разбавляли рассолом (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение (258 мг) в виде оранжевого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии в виде неочищенного вещества без дополнительной очистки.
ЖХ/МС: рС-3-МГ№ Κΐ = 2,007 мин; 300 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 162.
2-(7 -Метилспиро [2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-ил)оксипиримидин-5-амин
К раствору 2-(7-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)окси-5-нитропиримидина (промежуточное соединение 161, 255 мг) в тетрагидрофуране (5 мл)/воде (2,5 мл) добавляли железо (234 мг, 4,25 ммоль), а затем хлорид аммония (227 мг, 4,25 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 48 ч при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывали и остаток разбавляли водным насыщенным раствором NаНСΟз (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку §NΛР 10д и циклогексан/этилацетат 8:2 до циклогексан/этилацетат 4:6 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (52 мг) в виде светло-оранжевого твердого вещества.
ЖХ/МС: 0С-3-МШ: Κΐ = 1,746 мин; 270 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 163.
трет-Бутил-Ы-[(1К)-1-[[2-(7-метилспиро [2Н-бензосруран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)оксипиримидин-5ил] карбамоил] пропил] карбамат
- 86 023768
К раствору (2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановой кислоты (45 мг, 0,222 ммоль) в сухом ΌΜΡ (1 мл) добавляли ΌΙΡΕΑ (87 мкл, 0,5 ммоль), а затем НАТИ (80 мг, 0,21 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при к.т. Затем добавляли 2-(7-метилспиро[2Нбензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ил)оксипиримидин-5-амин (промежуточное соединение 162, 50 мг, 0,185 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили водой (2 мл), разбавляли рассолом (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл). Органический слой сушили (Ν;·ι28Ο.·ι). фильтровали и упаривали и остаток очищали флэшхроматографией (система В1о1аде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 10д и циклогексан/этилацетат 90:10 до циклогексан/этилацетат 60:40 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (45 мг) в виде белого твердого вещества.
ЖХ/МС: фС-3-ΜΙΝ: Κί = 2,109 мин; 455 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 164.
(2К)-2-Амино-Ы-[2-(7 -метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)оксипиримидин-5ил]бутанамид
К раствору трет-бутил-Н-[(1К)-1-[[2-(7-метилспиро[2Н-бензофуран-3,Г-циклопропан]-4ил)оксипиримидин-5-ил]карбамоил]пропил]карбамата (промежуточное соединение 163, 42 мг) в сухом Όί'Μ (3 мл) при 0°С медленно добавляли ТРА (1 мл) и при этой же температуре в течение 3 ч перемешивали реакционную смесь. Растворитель и избыток ТРА удаляли при пониженном давлении, остаток разбавляли Όί'Μ (10 мл) и добавляли водный насыщенный раствор Να4ΡΟ3, позволяя рН достичь значения примерно 8. Две фазы разделяли и органический слой сушили (Να28Ο.4), фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение (25 мг) в виде светло-желтой смолы.
ЖХ/МС: фС-3-ΜΙΝ: Κί = 1,688 мин; 355 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 165.
(5К)-3-(2-Хлорпиримидин-5-ил)-5-этил-5-метил-имидазолидин-2,4-дион
К раствору трифосгена (1,38 г, 4,65 ммоль) в этилацетате (20 мл) при 0°С медленно (20 мин) добавляли раствор 2-хлор-5-аминопиримидина (1 г, 7,75 ммолЛЮШЕА (8 мл, 4,65 ммоль) в этилацетате (40 мл) и при этой же температуре в течение 15 мин перемешивали реакционную смесь. Для удаления избытка фосгена использовали вакуум (10 мин), поддерживая температуру реакционной смеси 0°С. Добавляли раствор ΌΜΛΡ (0,945 г, 7,75 ммоль) в этилацетате/дихлорметане (1:1, 8 мл) и при этой же температуре в течение 5 мин перемешивали реакционную смесь. Медленно (15 мин) при 0°С добавляли раствор гидрохлорида метил-(К)-2-амино-2-метил-бутирата (2,59 г, 15,5 ммоль) в этилацетате (30 мл) и при этой же температуре в течение 30 мин перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь гасили водным буфером (рН 3), позволяя рН достичь значения примерно 5-6, и две фазы разделяли. Органический слой промывали водным буфером (рН 3) (2x20 мл), а затем рассолом (20 мл), сушили (Να28Ο.1), фильтровали и упаривали, получая мочевину в качестве промежуточного соединения в виде оранжевой пены.
Мочевину растворяли в МеОН (20 мл), добавляли NаΟΜе (0,41 г, 7,75 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при к.т. Смесь гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (25 мл) и разбавляли этилацетатом (50 мл). Две фазы разделяли и органический слой промывали рассолом (2x20 мл), сушили (Ν;·ι28Ο2) фильтровали и упаривали. Остаток растирали с Εί2Ο (10 мл) и собирали твердое вещество, получая указанное в заголовке соединение (1,22 г) в виде бежевого твердого вещества.
ЖХ/МС: фС-3-ΜΙΝ: Κί = 1,341 мин; 255 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 166.
3-(2 -Хлорпиримидин-5 -ил)-5,5 -диметил-имидазо лидин-2,4-дион
К раствору трифосгена (1,38 г, 4,65 ммоль) в этилацетате (20 мл) при 0°С медленно (20 мин) добав- 87 023768 ляли раствор 2-хлор-5-аминопиримидина (1 г, 7,75 ммоль)/^IΡΕΑ (8 мл, 4,65 ммоль) в этилацетате (40 мл) и при этой же температуре в течение 15 мин перемешивали реакционную смесь. Для удаления избытка фосгена использовали вакуум (10 мин), поддерживая температуру реакционной смеси 0°С. Добавляли раствор ΌΜΑΡ (0,945 г, 7,75 ммоль) в этилацетате/дихлорметане (1:1, 8 мл) и при этой же температуре в течение 5 мин перемешивали реакционную смесь. Медленно (15 мин) при 0°С добавляли гидрохлорид метилового эфира 2,2-диметилглицина (2,37 г, 15,5 ммоль) в этилацетате (30 мл) и при этой же температуре в течение 30 мин перемешивали реакционную смесь. Реакционную смесь гасили водным буфером (рН 3), позволяя рН достичь значения примерно 5-6, и две фазы разделяли. Органический слой промывали водным буфером (рН 3) (2x20 мл), а затем рассолом (20 мл), сушили (№2804), фильтровали и упаривали, получая мочевину в качестве промежуточного соединения в виде оранжевой пены.
Мочевину растворяли в МеОН (20 мл), добавляли Nа0Μе (0,41 г, 7,75 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при к.т. Смесь гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (25 мл) и разбавляли этилацетатом (50 мл). Две фазы разделяли и органический слой промывали рассолом (2x20 мл), сушили (№2804), фильтровали и упаривали. Остаток растирали с Εΐ20 (10 мл) и собирали твердое вещество, получая указанное в заголовке соединение (1,08 г) в виде оранжевого твердого вещества.
ЖХ/МС: рС-3-ΜΓΝ: Κΐ = 1,062 мин; 241 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 167.
Метил-3-(2-метилаллилокси)бензоат
Метил-3-гидроксибензоат (1 г, 6,57 ммоль) растворяли в ΏΜΕ (10 мл) с получением бесцветного раствора. К раствору добавляли карбонат калия (1,089 г, 7,88 ммоль) и 3-бром-2-метилпропен (0,729 мл, 7,23 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 90°С и перемешивали в течение 1 ч. После охлаждения реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали водой, сушили над Ν;·ι2δ04 и упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (1,180 мг).
ЖХ/МС: рС-3-ΜΓΝ: Κΐ = 2,073 мин; 207 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 168.
Метил-3-гидрокси-2-(2-метилаллил)бензоат
Метил-3-(2-метилаллилокси)бензоат (промежуточное соединение 167, 1,100 г, 5,3 ммоль) растворяли в 1-метил-2-пирролидиноне (12 мл) и нагревали до 200°С. При этой же температуре в течение 30 ч перемешивали раствор. После охлаждения смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу сушили над Ν;·ι2δ04 и упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали посредством Вю1аде 8Ρ1, используя циклогексан/ΕΐΟΑс в качестве элюентов (от 10/0 до 7/3 для 12 СХ колонка с диоксидом кремния 8ΝΑΡ 50д). Фракции собирали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (507 мг).
ЖХ/МС: рС-3-ΜΓΝ: Κΐ = 1,772 мин; 207 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 169.
-(Г идроксиметил)-2-(2-метилаллил)фенол
Метил-3-гидрокси-2-(2-метилаллил)бензоат (промежуточное соединение 168, 410 мг, 1,99 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл) с получением бесцветного раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С. По каплям добавляли 2 М раствор иЛ1Н4 в ТНР (1,09 мл, 2,19 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин. После этого реакционную смесь выливали на лед и разбавляли 60 мл этилацетата. Фазы разделяли, органическую фазу сушили над №2804 и упаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (360 мг) в виде бесцветного масла.
ЖХ/МС: рС-3-ΜΓΝ: Κΐ = 1,192 мин.
- 88 023768
Референсное промежуточное соединение 170.
3,3-Диметилизохроман-5 -ол
3-(Гидроксиметил)-2-(2-метилаллил)фенол (промежуточное соединение 169, 360 мг, 2 ммоль) растворяли в этилацетате (20 мл), две капли серной кислоты добавляли к раствору, который перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре. После этого реакционную смесь разбавляли водой (40 мл) и этилацетатом (40 мл). Фазы разделяли и органический слой сушили над №28О4 и упаривали в вакууме с получением бесцветного масла. Масло растирали с циклогексаном с получением белого твердого вещества, которое фильтровали, промывали циклогексаном (20 мл) и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (130 мг).
ЖХ/МС: ЦС-3-ΜΙΝ: Κΐ = 1,441 мин.
Референсное промежуточное соединение171.
2-(3,3 -Диметилизохроман-5 -ил)окси-5 -нитропиридин
К раствору 3,3-диметилизохроман-5-ола (промежуточное соединение 170, 65 мг, 0,36 ммоль) в сухом ΌΜΡ (3 мл) добавляли карбонат калия (207 мг, 1,5 ммоль), а затем 2-хлор-5-нитропиридин (50,8 мг, 0,32 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 80°С. После охлаждения реакционную смесь гасили водой (2 мл), разбавляли рассолом (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение (80 мг) в виде оранжевого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии в виде неочищенного вещества без дополнительной очистки.
ЖХ/МС: ЦС-3-ΜΙΝ: Κΐ = 2,027 мин; 301 [Μ+Н]*.
Референсное промежуточное соединение 172.
6-(3,3 - Диметилизохроман-5 -ил)оксипиридин-3 -амин
К раствору 2-(3,3-диметилизохроман-5-ил)окси-5-нитропиридина (промежуточное соединение 171, 80 мг) в тетрагидрофуране (5 мл)/воде (2,5 мл) добавляли железо (70 мг, 1,3 ммоль), а затем хлорид аммония (70 мг, 1,3 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывали и остаток разбавляли водным насыщенным раствором NаНСΟз (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку §NΑΡ 10д и циклогексан/этилацетат 8:2 до циклогексан/этилацетат 4:6 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (25 мг) в виде белого твердого вещества.
ЖХ/МС: ЦС-3-ΜΙΝ: Κΐ = 1,586 мин; 271 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 173.
[5-(Метоксиметокси)-2-метилфенил]метанол
5-Гидрокси-2-метилбензойную кислоту (2 г, 13,3 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (40 мл). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и порциями добавляли гидрид натрия (60%-ную дисперсию в минеральном масле) (1,8 г, 39,5 ммоль). Добавляли хлор(метилокси)метан (4 мл, 52 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°С. Смесь выливали на лед и экстрагировали этилацетатом, две фазы разделяли и органический слой сушили над №28О4 и упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта в виде желтого масла. К этому материалу, растворенному в ТНР (20 мл), охлажденному при 0°С, по каплям добавляли 1 М ЫА1Н4 в ТНР (15 мл, 15 ммоль) и реакционную смесь пере- 89 023768 мешивали при 0°С в течение 30 мин. После этого реакционную смесь выливали на лед и разбавляли 60 мл этилацетата. Фазы разделяли, органическую фазу сушили над №28О4 и упаривали под вакуумом с получением бесцветного масла, которое очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку §NЛΡ 100д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 75:25 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (1,9 г) в виде бесцветного масла.
ЖХ/МС: рС-3-МР№ Κΐ = 1,351 мин.
Референсное промежуточное соединение 174.
трет-Бутил- [ [5 -(метоксиметокси)-2 -метилфенил] метокси]диметилсилан
[5-(Метоксиметокси)-2-метилфенил]метанол (промежуточное соединение 173, 1,9 г, 10 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл) с получением бесцветного раствора. Добавляли 1Н-имидазол (1,137 г, 16,7 ммоль) и хлор(1,1-диметилэтил)диметилсилан (2,095 г, 13,9 ммоль). Реакционная смесь сразу стала белой суспензией, и ее перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь гасили 10 мл воды и разбавляли 10 мл дихлорметана. Две фазы разделяли с помощью делительной воронки. Органическую фазу сушили над №28О4 и упаривали под вакуумом и остаток очищали флэшхроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку §NЛΡ 100д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 50:50 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (2,9 г) в виде бесцветного масла.
ЖХ/МС: рС-3-МР№ Κΐ = 2,437 мин.
Референсное промежуточное соединение 175.
1-[2-[[трет-Бутил(диметил)силил]оксиметил]-6-(метоксиметокси)-3-метилфенил]циклобутанол
К раствору трет-бутил-[[5-(метоксиметокси)-2-метилфенил]метокси]диметилсилана (промежуточное соединение 174, 0,3 г, 1 ммоль) в гексане (5 мл) добавляли ВиЫ (1,6М в гексане, 0,9 мл, 1,4 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, а затем по каплям при 30°С добавляли к суспензии СеС13 (0,37 г, 1,5 ммоль) в сухом ТНР (5 мл), которую предварительно перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Через 45 мин при -30°С добавляли циклобутанон (0,07 г, 1 ммоль), растворенный в ТНР (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при этой же температуре, а затем гасили хлоридом аммония (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Объединенные органические слои сушили над №28О4 и упаривали под вакуумом с получением бесцветного масла, которое очищали флэш-хроматографией (система В1о1аде) на силикагеле, используя колонку §NЛΡ 25д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 75:25 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (0,05 г) в виде бесцветного масла.
ЖХ/МС: рС-3-МР№ Κΐ = 2,437 мин.
Референсное промежуточное соединение 176.
-Метилспиро [1Н-изобензо фуран-3,1'-циклобутан] -4 -ол
К раствору 1-[2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-6-(метоксиметокси)-3-метилфенил]циклобутанола (промежуточное соединение 175, 0,05 г, 0,136 ммоль) в этилацетате (5 мл) добавляли серную кислоту (96%, 2 капли) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Добавляли этилацетат (20 мл) и органическую фазу промывали рассолом (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку §NЛΡ 10д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 7:3 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (0,02 г) в виде бесцветного масла.
ЖХ/МС: ОСЫ-МЫ: Κΐ = 1,720 мин.
- 90 023768
Референсное промежуточное соединение 177.
Этил-2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-6-(метоксиметокси)бензоат
(1,1-Диметилэтил)(диметил){[(3-{[(метилокси)метил]окси}фенил)метил]окси}силан (промежуточное соединение 103, 1,5 г, 5,31 ммоль) растворяли в гексане (20 мл) при продувке азотом в двугорлой 100 мл круглодонной колбе, снабженной дефлегматором (обработанной в течение 5 мин под вакуумом, затем 3 цикла М2/вакуум), с получением бесцветного раствора. По каплям добавляли бутиллитий 1,6н. в гексане (4,31 мл, 6,9 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. После перемешивания в таких условиях в течение 2 ч бледно-желтую реакционную смесь добавляли к раствору этилхлорформиата (1,015 мл, 10,62 ммоль) в тетрагидрофуране при -78°С. Через 30 мин реакционную смесь гасили 2 М водным раствором соляной кислоты, позволяя рН достичь значения примерно 2, и разбавляли 10 мл этилацетата. Две фазы разделяли и органический слой сушили над №28О4 и упаривали под вакуумом, получая неочищенный продукт в виде желтоватого масла, которое очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя циклогексан до циклогексан/этилацетат 8:2 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (1,396 г) в виде бледно-желтого масла.
ЖХ/МС: ЦС-3-М1№ К1 = 2,413 мин; 355 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 178.
Этил-2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-6-гидроксибензоат
Этил-2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-6-(метоксиметокси)бензоат (промежуточное соединение 177, 950 мг, 2,68 ммоль) растворяли в дихлорметане (30 мл), раствор охлаждали до 0°С и добавляли трифторуксусную кислоту (2 мл). После перемешивания в течение 3 ч при 0°С добавляли воду (20 мл) при 0°С и две фазы разделяли. Органический слой сушили над №28О4 и упаривали в вакууме с получением бесцветного масла, которое очищали флэш-хроматографией (система ВЮаде) на силикагеле, используя циклогексан до циклогексан/этилацетат 7:3 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (0,345 г) в виде бесцветного масла.
ЖХ/МС: 0С-3-МШ: К1 = 2,463 мин; 311 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 179.
3,3-Диэтил-1Н-изобензофуран-4-ол
К 1 М раствору в ТНР этилмагнийбромида (10 мл, 5 ммоль) в сухом ТНР (5 мл) при 0°С добавляли раствор этил-2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-6-гидроксибензоата (промежуточное соединение 178, 0,31 г, 1 ммоль) в ЕьО (10 мл) в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при этой же температуре, а затем в течение дополнительных 2 ч, позволяя температуре достичь значения комнатной температуры. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (40 мл) и экстрагировали этилацетатом (3х80 мл). Органический слой промывали рассолом (2х50 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в ТНР (5 мл), добавляли фторид тетрабутиламмония (1 М в ТНР, 1,5 мл, 1,5 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин. Добавляли этилацетат (50 мл) и объединенные органические слои промывали хлоридом аммония (2x50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали. Полученное желтое твердое вещество растирали с этилацетатом и пентаном (1:1, 5 мл) с получением белого твердого вещества.
Твердое вещество растворяли в этилацетате (5 мл) и при комнатной температуре добавляли серную кислоту (96%, 4 капли). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, затем добавляли этилацетат (20 мл) и органическую фазу промывали рассолом (2х50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8ЬАР 10д и циклогексан до циклогексан/этилацетат 7:3 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (0,05 г) в виде бесцветного масла.
- 91 023768
ЖХ/МС: 0С-3-МШ: К = 1,683 мин.
Референсное промежуточное соединение 180.
6-[(3,3-Диэтил-1Н-изобензофуран-4-ил)окси]пиридин-3-амин
К раствору 3,3-диэтил-1Н-изобензофуран-4-ола (промежуточное соединение 179, 0,03 г, 0,15 ммоль) в сухом ЭМР (3 мл) добавляли карбонат калия (0,08 г, 0,6 ммоль), а затем 2-хлор-5-нитропиридин (0,026 г, 0,17 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 80°С. После охлаждения реакционную смесь гасили водой (1 мл), разбавляли рассолом (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток растворяли в тетрагидрофуране (5 мл)/воде (2,5 мл), добавляли железо (0,04 г, 0,75 ммоль), а затем хлорид аммония (0,4 г, 0,75 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывали и остаток разбавляли водным насыщенным раствором NаНС03 (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 10д и циклогексан/этилацетат 8:2 до циклогексан/этилацетат 1:1 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (0,025 г) в виде светло-желтого твердого вещества.
ЖХ/МС: 0С-3-МШ: К 1,735 мин, 285 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 181.
[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси] [трис-( 1 -метилэтил)]силан
3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ол (промежуточное соединение 50, 3,6 г, 21,91 ммоль) растворяли в безводном ТНР (20,0 мл) и бесцветный раствор при перемешивании под азотом охлаждали до 0°С. По каплям добавляли 2 М раствор н-ВиЫ в циклогексане (13,2 мл, 26,4 ммоль) и полученный желтый раствор перемешивали при 0°С в течение 10 мин. По каплям добавляли триизопропилсилилтрифлат (7,7 мл, 28,5 ммоль): раствор почти полностью обесцветился. Его оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Добавляли воду (1,0 мл) и летучие вещества выпаривали при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате и промывали рассолом три раза. Органический слой сушили над безводным Να2804 и упаривали досуха с получением желтого масла, которое перерастворяли в ТВМЕ и дважды промывали водой. Органический раствор сушили над Να280.4 и упаривали досуха с получением указанного в заголовке соединения (7,4 г) в виде желтого масла.
1Н ЯМР (400 МГц, ЭМ80-б6) δ м.д. 6.94 (1Н, ΐ), 6.31-6.36 (1Н, т), 6.29 (1Н, б), 4.14 (2Н, 5), 1.28-1.40 (9Н, т), 1.09 (18Н, б).
Референсное промежуточное соединение 182.
[(7 -Бром-3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси] [трис-( 1 -метилэтил)]силан
[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси] [трис-( 1 -метилэтил)]силан (промежуточное соединение 181, 7,4 г, 23,19 ммоль) растворяли в ТНР (70,0 мл). Добавляли Ν-бромсукцинимид (4,2 г, 23,88 ммоль), растворяющийся за несколько минут. Эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли дополнительное количество NΒ8 (0,64 г, 3,48 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение дополнительного часа. К реакционной смеси добавляли СС14 (50 мл) и раствор упаривали досуха. Остаток ресуспендировали в СС14 и перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Белое твердое вещество удаляли фильтрованием и влажный осадок на фильтре промывали дополнительным количеством СС14. СС14 заменяли этилацетатом и органический раствор промывали три раза 2,5%-ным мас./мас., водным NаНС03 и окончательно водой. Органический раствор сушили над безводным Ν;·ι2802 и упаривали досуха с получением указанного в заголовке соединения (8,6 г) в виде коричневого масла.
- 92 023768 1Н ЯМР (400 МГц, ПМ8О-с16) δ м.д. 7.14 (1Н, а), 6.29 (1Н, а), 4.24 (2Н, 5), 1.27-1.41 (9Н, т), 1.08 (18Н, а).
Референсное промежуточное соединение 183.
трис-( 1 -Метилэтил) [(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси]силан дд
Ло
[(7 -Бром-3,3-диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] [трис-( 1 -метилэтил)]силан (промежуточное соединение 182, 7,1 г, 17,72 ммоль) растворяли в безводном ТНР (72 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли тетраметилэтилендиамин (8,0 мл, 53,16 ммоль) и желтый раствор перемешивали при 0°С в течение 10 мин. По каплям в течение 10 мин добавляли 1,6 М раствор бутиллития в гексане (22,5 мл, 35,4 ммоль) и затем перемешивали при 0°С в течение 15 мин. По каплям в течение 6 мин добавляли метилйодид (11 мл, 177,2 ммоль). Белое твердое вещество удаляли фильтрованием и влажный осадок на фильтре промывали ТНР. Объединенные органические слои упаривали досуха. Остаток растворяли в этилацетате и промывали дважды водным №-1НСО3 и один раз водой. Органический раствор сушили над безводным №-ь8О.-| и упаривали досуха с получением коричневого масла. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя циклогексан до циклогексан/этилацетат 1:1 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (3,6 г) в виде коричневого масла.
1Н ЯМР (400 МГц, ПМ8О-а6) δ м.д. 6.76 (1Н, а), 6.20 (1Н, а), 4.14 (2Н, 5), 2.02 (3Н, 5), 1.28-1.39 (9Н, т), 1.09 (18Н, а).
Референсное промежуточное соединение 184.
3,3,7-Триметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ол
Трис(1 -метилэтил) [(3,3,7 -триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]силан (промежуточное соединение 183, 3,6 г, 10,84 ммоль) растворяли в ТНР (36 мл) с получением темно-желтого раствора. Добавляли ТВАР (8,5 г, 32,5 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате и промывали водным НС1, затем водным №-1НСО3 и окончательно рассолом. Органический раствор сушили над №-ь8О4 и упаривали досуха и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя циклогексан до циклогексан/этилацетат 95:5 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (1,69 г) в виде бесцветного масла.
1Н ЯМР (400 МГц, 1)\18О-с1..) δ м.д. 9.06 (1Н, 5), 6.65-6.69 (1Н, т), 6.19 (1Н, а), 4.11 (2Н, 5), 1.99 (3Н, 5), 1.33 (6Н, 5).
Референсное промежуточное соединение 185.
5-Нитро-2-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидрс-1 -бензофуран-4-ил)окси] пиридин
3,3,7-Триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ол (промежуточное соединение 184, 0,9 г, 5,0 ммоль) растворяли в ί'.Ή3ί'.'Ν (5 мл) в присутствии 2-хлор-5-нитропиридина (790 мг, 5,0 ммоль) и К2СО3 (1,72 г, 12,5 ммоль) и полученную суспензию нагревали до 60°С в течение 1,5 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой и этилацетатом. Две фазы разделяли и органический слой промывали рассолом, затем сушили над №-ь8О4 и упаривали досуха, Остаток очищали флэшхроматографией на силикагеле, используя циклогексан до циклогексан/этилацетат 90:10 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (0,92 г) в виде желтоватого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, 1)\18О-с1..): δ м.д. 9.04 (1Н, а), 8.61 (1Н, аа), 7.24 (1Н, а), 7.02 (1Н, а), 6.54 (1Н, а), 4.21 (2Н, 5), 2.14 (3Н, 5), 1.21 (6Н, 5). 13С ЯМР (200 МГц, ПМ8О-а6): δ м.д. 166.6, 158.7, 147.2, 144.8, 140.4, 135.8, 130.2, 126.1, 116.7, 114.5, 111.0, 83.6, 42.2, 26.0, 14.4.
Референсное промежуточное соединение 186.
6-[(3,3,7-Триметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -3 -пиридинамин
- 93 023768
5-Нитро-2-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси]пиридин (промежуточное соединение 185, 920 мг, 3,0 ммоль) растворяли в ЕЮН (13,5 мл) и перемешивали в атмосфере водорода (2 бар) в присутствии РД/С 10% масс./масс. (46 мг, 5% мас./мас.) при комнатной температуре в течение 30 мин. Катализатор отфильтровывали, промывали ТНР и полученный раствор упаривали досуха с получением оранжевого твердого вещества. Неочищенный продукт подвергали кристаллизации из МеОН до указанного в заголовке соединения (565 мг) в виде бежевого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά6): δ м.д. 7.51 (1Н, ά), 7.05 (1Н, άά), 6.85 (1Н, ά), 6.69 (1Н, ά), 6.21 (1Н, ά), 5.04 (2Н, Ьг.к), 4.19 (2Н, к), 2.08 (3Н, к), 1.30 (6Н, к). 13С ЯМР (200 МГц, ΌΜδΟ-ά6): δ м.д. 158.3, 154.2, 150.7, 141.5, 132.2, 129.6, 125.3, 124.7, 113.9, 112.2, 111.8, 83.7, 42.2, 26.0, 14.4.
Референсное промежуточное соединение 187.
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({6-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)карбонил]пропил}карбамат
6-{[3,3,7-Триметил-6-(трифторметокси)-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил]окси}пиридин-3 -амин (промежуточное соединение 186, 405 мг, 1,27 ммоль) суспендировали в этилацетате (4 мл). Добавляли триэтиламин (0,44 мл, 3,175 ммоль), а затем (2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановую кислоту (258 мг, 1,27 ммоль). Полученную суспензию охлаждали до 0°С и по каплям добавляли 50%-ный (мас./мас.) раствор Т3Р в этилацетате (1,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение дополнительного часа. Добавляли водный насыщенный раствор №-ьСО3, и смесь перемешивали в течение 10 мин. Две фазы разделяли и органический слой промывали водой и рассолом, сушили над Ν;·ι3δΟ.·ι и упаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя циклогексан/этилацетат 80:20 до циклогексан/этилацетат 70:30 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (0,50 г) в виде белой пены.
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά6): δ м.д. 10.08 и 10.03 (1Н,Ьг.к), 8.30 (1Н, ά), 8.03 (1Н, άά), 7.00 (1Н, ά), 6.95-6.90 (2Н, т), 6.36 (1Н, ά), 4.17 (2Н, к), 3.98-3.92 (1Н, т), 2.10 (3Н, к), 1.73-1.52 (2Н, т), 1.36 и 1.29 (9Н, Ьг.к), 1.23 (6Н, к), 0.88 (3Н, ΐ).
13С ЯМР (200 МГц, ΌΜδΟ-ά6): δ м.д. 171.4, 159.0, 158.5, 155.5, 148.9, 138.1, 131.4, 129.8, 125.8, 115.1, 113.9, 110.7, 83.6, 78.0, 56.3, 42.2, 28.9, 26.0, 25.0, 20.7, 14.4, 14.1, 10.5.
Референсное промежуточное соединение 188.
(2К)-2-Амино-^{6-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}бутанамид
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({6-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}амино)карбонил]пропил}карбамат (промежуточное соединение 187, 480 мг, 1,05 ммоль) растворяли в изопропилацетате (5 мл) и добавляли 5-6н. НС1 в изопропиловом спирте (1 мл, 5,25 ммоль). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем нагревали до примерно 50-55°С до полного превращения. Смесь охлаждали до комнатной температуры и обрабатывали водным насыщенным раствором NаНСΟз. Две фазы разделяли и органический слой промывали рассолом, сушили над №2δΟ4 и упаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя дихлорметан/метанол 95:5 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (0,31 г) в виде желтоватой пены.
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά6): δ м.д. 8.36 (1Н, ά), 8.11 (1Н, άά), 6.96-6.92 (2Н, т), 6.38 (1Н, ά), 4.19 (2Н, к), 3.23 (1Н, άά), 2.11 (3Н, к), 1.72-1.61 (1Н, т), 1.53-1.43 (1Н, т), 1.25 (6Н, к), 0.90 (3Н, ΐ).
13С ЯМР (200 МГц, ΌΜδΟ-ά6): δ м.д. 174.5, 159.0, 158.5, 148.9, 138.2, 131.5, 131.4, 129.8, 125.7, 115.1, 113.9, 110.6, 83.6, 56.7, 42.2, 28.0, 26.0, 14.4, 10.2.
- 94 023768
Референсное промежуточное соединение 189.
5-Нитро-2-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси]пиримидин
3,3,7-Триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ол (промежуточное соединение 184, 178 мг, 1,0 ммоль) и 2-хлор-5-нитропиримидин (191,5 мг, 1,2 ммоль) растворяли в Ο^ΟΝ (3,0 мл) и добавляли Κ2ί'Ό3, (345,5 мг, 2,5 ммоль). Полученную суспензию нагревали до 40°С и перемешивали в течение 1 ч. Затем реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и этилацетатом (50 мл). Органическую фазу собирали, промывали рассолом (50 мл) и сушили над №28Ο4. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя циклогексан/этилацетат 97:3 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (243 мг).
Референсное промежуточное соединение 190.
2-[(3,3,7 -Триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси] -5-пиримидинамин
5-Нитро-2-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси]пиримидин (промежуточное соединение 189, 243 мг, 0,81 ммоль) растворяли в ТНР (4 мл) и добавляли палладий на древесном угле (5% (мольн.), 85 мг). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода (3 бар) в течение 1 ч при комнатной температуре. Катализатор фильтровали через набивку целита, промывали ТНР и полученный раствор концентрировали под вакуумом. Остаток разбавляли этилацетатом и водой, органическую фазу собирали, сушили над Νη28Ο4 и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (220 мг) в виде бесцветного масла. Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
МС-2 (ИЭР): 272 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 191.
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({2-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинил}амино)карбонил]пропил)карбамат
2-[(3,3,7 -Триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси] -5-пиримидинамин (промежуточное соединение 190, 220 мг, 0,81 ммоль) растворяли в этилацетате (10 мл) и добавляли (2К)-2-({[(1,1диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановую кислоту (181,1 мг, 0,89 ммоль), а затем ΕΐзN (0,35 мл, 2,02 ммоль). Полученный раствор охлаждали до 5°С и по каплям в течение 15 мин добавляли 50%-ный (мас./мас.) раствор Т3Р в этилацетате (0,53 мл, 0,89 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при 5°С. Реакционную смесь гасили водой (50 мл) и этилацетатом (50 мл), две фазы разделяли и органический слой сушили над Nа28Ο4 и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали флэшхроматографией на силикагеле, используя циклогексан/этилацетат 60:40 в качестве элюента, с получением указанного в заголовке соединения (213 мг).
МС-2 (ИЭР): 457 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 192.
7-(Метоксиметокси)-3Н-изобензофуран-1-он
4-Гидрокси-1,3-дигидро-2-бензофуран-1,3-дион (685 мг, 4 ммоль) растворяли в сухом ТНР (30 мл) при -78°С. По каплям в течение 20 мин добавляли 1 М раствор К-селектрида (К-8е1есΐ^^άе) в ТНР (13 мл, 13 ммоль), затем смесь нагревали от -78°С до -30°С в течение 3 ч. Конечную смесь вливали в этилацетат (100 мл), рассол (25 мл) и 3 М раствор соляной кислоты (25 мл). Органический слой собирали, промывали рассолом и упаривали досуха. Полученное соединение растворяли в МеОН (20 мл) и при перемеши- 95 023768 вании обрабатывали 3 М раствором соляной кислоты (10 мл). Затем смесь разбавляли этилацетатом (100 мл) и рассолом (25 мл), органический слой собирали и упаривали под вакуумом. Остаток очищали флэшхроматографией на силикагеле, используя дихлорметан в качестве элюента, с получением фенольного промежуточного соединения (430 мг).
Фенольное промежуточное соединение (430 мг, 2,9 ммоль) растворяли в сухом дихлорметане (20 мл) при 0°С, добавляли ЭРЕА (5 мл, 5,5 ммоль) с последующим добавлением по каплям хлорметилметилового эфира (0,44 мл, 5,7 ммоль) в течение 10 мин. Полученный раствор перемешивали при 0°С в течение 30 мин, затем при комнатной температуре в течение 15 мин. Дихлорметан частично выпаривали и полученную суспензию растворяли в этилацетате (20 мл), промывали смесью воды и рассола 50/50 (2х 10 мл), сушили над Ν;·ι28Ο2 и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (549 мг) в виде бледно-желтого твердого вещества.
’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-66): δ м.д. 7.68 (1Н, т), 7.20 (2Н, т), 5.36 (2Н, 5), 5.31 (2Η, 5), 3.41 (3Н, 5).
Референсное промежуточное соединение 193.
3,3-Диметил-1Н-изобензофуран-4-ол
7-(Метоксиметокси)-3Н-изобензофуран-1-он (промежуточное соединение 192, 550 мг, 2,8 ммоль) растворяли при -70°С в сухом ТОТ (150 мл). По каплям в течение 30 мин добавляли 3 М раствор метилмагнийбромида в диэтиловом эфире (5,6 мл, 16,8 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 30 мин при -70°С, а затем 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь вливали в этилацетат (100 мл) и водный насыщенный раствор хлорида аммония (50 мл) при 0°С. Органический слой собирали, промывали водным насыщенным раствором хлорида аммония (50 мл), рассолом (50 мл) и упаривали с получением желтого масла, которое растворяли в ацетонитриле (15 мл) и обрабатывали серной кислотой (0,15 мл). Ацетонитрил заменяли метиловым спиртом (15 мл) и полученный раствор обрабатывали птолуолсульфоновой кислотой (100 мг). Раствор нагревали до 60°С и перемешивали в течение 2 ч. Растворигель выпаривали и остаток растворяли в этилацетате (30 мл), промывали дважды водным насыщенным раствором бикарбонат натрия (10 мл), а затем водным разбавленным раствором соляной кислоты, сушили над Ν;·ι28Ο2 и упаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя циклогексан/этилацетат 90:10 в качестве элюента, с получением указанного в заголовке соединения (210 мг) в виде белого твердого вещества.
’Н ЯМР (ΌΜ8Ο-66, 400 МГц): δ м.д. 9.51 (1Н, 5), 7.00-7.10 (1Н, т), 6.60-6.70 (2Н, т), 4.89 (2Н, 5), 1.45 (6Н, 5).
Референсное промежуточное соединение 194.
(5К)-3-(6-Хлор-3-пиридинил)-5-этил-5-метил-2,4-имидазолидиндион
6-Хлорпиридин-3-амин (3,0 г, 23,3 ммоль) растворяли в смеси СΗзСN/этилацетат 3:1 об./об. (20 мл) и добавляли гидрохлорид (2К)-2-амино-2-метилбутановой кислоты (3,97 г, 25,63 ммоль), а затем 50%ный (мас./мас.) этилацетатный раствор Т3Р (15,3 мл, 25,63). Смесь нагревали до 60°С в течение 2 ч, затем гасили 3н. ΝαΟΗ до рН примерно 10, а потом разбавляли этилацетатом (100 мл). Органическую фазу собирали, сушили над Ν;·ι28Ο2 и концентрировали под вакуумом до конечного объема примерно 15 мл. Раствор охлаждали до 0-5°С и добавляли ΕΐзN (11,4 мл, 81,9 ммоль). По каплям в течение 15 мин добавляли раствор трифосгена (2,76 г, 6,96 ммоль) в 10 мл этилацетате, поддерживая внутреннюю температуру ниже 5°С. Смесь перемешивали при 5°С в течение 30 мин, затем гасили водой (100 мл) и окончательно разбавляли дополнительным количеством этилацетата (100 мл). Две фазы разделяли и органический слой промывали водой и рассолом, сушили над Ν;·ι28Ο2 и концентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт суспендировали в 15 мл этилацетата с последующим добавлением по каплям 65 мл н-гептана. Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, фильтровали и осадок на фильтре промывали смесью этилацетат/н-гептан 2:8 об./об. (2х 10 мл), а затем сушили при 40°С в течение 18 ч, получая указанное в заголовке соединение (3,5 г) в виде белого твердого вещества.
’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-66): δ м.д. 8.68 (1Н, 5), 8.47 (1Н, б), 7.95-7.89 (т, 1Н), 7.68-7.63 (1Н, т), 1.83-1.58 (2Н, т), 1.38 (3Н, 5), 0.85 (3Н, ΐ).
- 96 023768
Референсное промежуточное соединение 195. (2,2-Дифтор-1,3-бензодиоксол-4-ил)бороновая кислота
2,2-Дифтор-1,3-бензодиоксол (960 мг, 6,1 ммоль) растворяли в ТНР (8 мл) и циклогексане (4 мл) и полученный раствор охлаждали -78°С. По каплям добавляли 1,4 М раствор втор-ВиЫ в циклогексане (4,3 мл, 6,1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при -78°С. Добавляли триметилборат (694 мг, 6,75 ммоль) и смесь оставляли медленно нагреваться до -30°С. Реакционную смесь гасили 2н. раствором НС1 и разбавляли этилацетатом. Две фазы разделяли и органический слой промывали дважды рассолом, сушили над №2804 и упаривали досуха, получая указанное в заголовке соединение в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
1Н ЯМР (400 МГц, ЭМ80-66 + Ό20): δ м.д. 7.39 (1Н, 66), 7.34 (1Н, 66), 7.14 (ΐ, 1Н, 1=7,90 Гц).
19Р ЯМР (376 МГц, ЭМ80-66 + Ό20): δ м.д. -48.92.
13С ЯМР (200 МГц, ЭМ80-66 + Ό20): δ м.д. 147.3, 142.8, 131.6 (ΐ, 1=250,7 Гц), 130.1, 124.3, 112.0.
Референсное промежуточное соединение 196.
(2,2-Дифтор-7 -метил-1,3 -бензодиоксол-4 -ил)бороновая кислота
(2,2-Дифтор-1,3-бензодиоксол-4-ил)бороновую кислоту (промежуточное соединение 195, неочищенное вещество) растворяли в ТНР (20 мл) и полученный раствор охлаждали до -78°С. По каплям добавляли 1,4 М раствор втор-ВиЫ в циклогексане (17,4 мл, 24,36 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при -78°С. Затем добавляли метилйодид (4,6 мл, 73 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, позволяя температуре достичь значения комнатной температуры. Реакционную смесь гасили путем добавления водного 2н. раствора НС1 и разбавляли этилацетатом. Органический слой собирали и затем промывали дважды рассолом, сушили над №2804 и упаривали досуха. В результате кристаллизации из н-гептана получали указанное в заголовке соединение (150 мг) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ЭМ80-66 + Ό20): δ м.д. 7.30 (1Н, 6), 6.68 (1Н, 6), 2.25 (5, 3Н).
19Р ЯМР (376 МГц, ЭМ80-66 + Ό20): δ м.д. -48.55.
13С ЯМР (200 МГц, ЭМ80-66 + Ό20): δ м.д. 152.5, 147.1, 141.5, 131.6 (ΐ, 1=250,0 Гц), 129.9, 125.8, 122.7, 110.1, 14.6.
Референсное промежуточное соединение 197.
2,2-Дифтор-7-метил-1,3-бензодиоксол-4-ол
(2,2-Дифтор-7-метил-1,3-бензодиоксол-4-ил)бороновую кислоту (промежуточное соединение 196, 150 мг, 1,28 ммоль) растворяли в ТНР (1,5 мл) и добавляли 30%-ный (мас./мас.) водный раствор Н2О2 (2,56 ммоль) и №ГОН (51 мг, 1,28 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 суток при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили 2н. водным раствором НС1 и разбавляли этилацетатом. Две фазы разделяли и органический слой промывали дважды рассолом, сушили над №2804 и упаривали досуха, получая указанное в заголовке соединение (140 мг) в виде желтого масла.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ80-66): δ м.д. 10.31 (1Н, 5), 6.83 (1Н, 6), 6.63 (1Н, 6), 2.17 (3Н, 5).
19Р ЯМР (376 МГц, ОМ80-66): δ м.д. -48.68.
13С ЯМР (200 МГц, ОМ80-66): δ м.д. 142.3, 139.1, 131.4 (ΐ, 1=251,9 Гц), 129.9, 125.6, 112.8, 110.0,
13.2.
Референсное промежуточное соединение 198.
2,2-Дифтор- 1,3-бензодиоксол-4-ол
2,2-Дифтор-1,3-бензодиоксол (320 мг, 2,05 ммоль) растворяли в ТНР (2,5 мл) и циклогексане (1,2
- 97 023768 мл) и полученный раствор охлаждали до -78°С. По каплям добавляли 2 М раствор втор-ВиЫ в циклогексане (1,025 мл, 2,05 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при -78°С. Добавляли триметилборат (230 мг, 2,25 ммоль) и смесь оставляли медленно нагреваться до комнатной температуры. Добавляли 30%-ный (мас./мас.) водный раствор Н2О2 (4,1 ммоль) и Ν;·ιΟΗ (82 мг, 2,05 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили 2н. водным раствором НС1 и разбавляли этилацетатом. Две фазы разделяли и органический слой промывали дважды рассолом, сушили над №2δΟ4 и упаривали досуха, получая указанное в заголовке соединение (340 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 6.93 (1Н, ΐ), 6.69 (1Н, Д), 6.65 (1Н, Д).
19Р ЯМР (376 МГц, СОС13)^ м.д. -49.86.
13С ЯМР (200 МГц, СОС13): δ м.д. 144.8, 139.6, 131.5 (ΐ, 1=255,1 Гц), 131.2, 123.9, 112.7, 101.8. Референсное промежуточное соединение 199.
2-[2-Амино-6-(метилокси)фенил]-2-пропанол
1-(2-Амино-6-метоксифенил)этанон (500 мг, 3,03 ммоль) растворяли в ТНР (7,5 мл) и охлаждали до 0°С. По каплям, поддерживая температуру ниже 10°С, добавляли 3 М раствор метилмагнийбромида в Еΐ2Ο (2,2 мл, 6,36 ммоль). Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором ΝΗ4Ο (7,5 мл), поддерживая температуру ниже 15°С. Смесь разбавляли водой и этилацетатом, две фазы разделяли и органический слой промывали дважды рассолом, сушили над №2δΟ4 и упаривали досуха, получая указанное в заголовке соединение (500 мг) в виде светло-оранжевого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 6.79 (1Н, ΐ), 6.19 (1Н, ДД), 6.14 (1Н, ДД), 5.76 (2Н, Ьг.5), 5.26 (1Н, Ьг.5), 3.64 (3Н, 5), 1.55 (6Н, 5). 13С ЯМР (200 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 157.4, 148.5, 126.8, 118.1, 110.5, 100.2,
74.2, 55.3, 30.7.
Референсное промежуточное соединение 200.
Ν-[2-(1Τ идрокси-1 -метилэтил)-3 -(метилокси)фенил]ацетамид
2-(2-Амино-6-метоксифенил)пропан-2-ол (промежуточное соединение 199, 500 мг, 2,76 ммоль) растворяли в ΌΟΜ (10 мл) и добавляли триэтиламин (0,770 мл, 5,52 ммоль). Раствор охлаждали до 0°С и обрабатывали ацетилхлоридом (0,2 мл, 2,76 ммоль), добавляемым по каплям. В конце процесса добавления было достигнуто полное превращение. Смесь обрабатывали водным насыщенным раствором ΝΗ.·|Ο. две фазы разделяли и органический слой промывали водным насыщенным раствором NаΗСΟ3 и рассолом, затем сушили над №2δΟ4 и упаривали досуха. Неочищенный очищали путем ресуспендирования в трет-бутил-метиловом эфире с выделением 490 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 11.53 (1Н, Ьг.5), 7.91 (1Н, Д), 7.11 (1Н, ΐ), 6.71 (1Н, Д), 6.25 (1Н, Ьг.5), 3.74 (3Н, 5), 2.50 (1Н, Ьг.5), 2.00 (3Н, 5), 1.61 (6Н, 5).
13С ЯМР (200 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 167.0, 156.6, 138.5, 127.0, 123.1, 114.3, 107.6, 75.2, 55.7, 30.8,
25.2.
Референсное промежуточное соединение 201.
2,4,4-Триметил-5-(метилокси)-4Н-3,1-бензоксазин
№[2-(2-Гидроксипропан-2-ил)-3-метоксифенил]ацетамид (промежуточное соединение 200, 470 мг, 2,10 ммоль) добавляли к горячей полифосфорной кислоте и нагревали при 110°С в течение 1 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили водой. Добавляли твердый №ΉΟ3, позволяя рН достичь значения примерно 8-9. Добавляли воду и ΌΡΜ и две фазы разделяли. Объединенные органические слои промывали дважды рассолом, сушили над №2δΟ4 и упаривали досуха с получением указанного в заголовке соединения (342 мг) в виде масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительных очисток.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 7.17 (1Н, ΐ), 6.83 (1Н, ДД), 6.63 (1Н, ДД), 3.78 (3Н, 5), 1.98 (3Н, 5), 1.60 (6Н, 5).
- 98 023768 13С ЯМР (200 МГц, ^Μ8Ο-а6): δ м.д. 158.4, 154.7, 139.0, 128.6, 117.0 (2С), 109.7, 77.8, 55.7, 28.5,
21.3.
Референсное промежуточное соединение 202.
2,4,4-Триметил-4Н-3,1-бензоксазин-5-ол
5-Метокси-2,4,4-триметил-4Н-3,1-бензоксазин (промежуточное соединение 201, 342 мг, 1,67 ммоль) растворяли в ЭСМ (7 мл) и добавляли 1 М раствор ВВг3 в ЭСМ (1,67 мл, 1,67 ммоль). Через 1,5 ч при комнатной температуре смесь нагревали до образования флегмы, а через 6 ч при кипячении с обратным холодильником добавляли дополнительное количество 1 М раствора ВВг3 в ЭСМ (1,67 мл, 1,67 ммоль), оставляя смесь кипятиться с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором NаНСΟ3, позволяя рН стать основным. Две фазы разделяли и органический слой промывали рассолом, сушили над №28О4 и упаривали досуха с получением указанного в заголовке соединения (330 мг) в виде пены.
Ή ЯМР (400 МГц, ^Μ8Ο-а6): δ м.д. 9.62 (1, 5), 6.98 (1Н, ΐ), 6.62 (1Н, άά), 6.46 (1Н, άά), 1.96 (3Н, 5), 1.62 (6Н, 5).
13С ЯМР (200 МГц, ^Μ8Ο-а6): δ м.д. 157.9, 152.6, 139.2, 128.2, 115.4, 115.3, 113.9, 77.8, 28.3, 21.3.
Референсное промежуточное соединение 203.
2,4,4-Триметил-5-[(5-нитро-2-пиридил)окси]-3,1-бензоксазин
К суспензии 2,4,4-триметил-4Н-3,1-бензоксазин-5-ола (промежуточное соединение 202, 500 мг, 2,61 ммоль) и 2-хлор-5-нитропиридина (410 мг, 2,58 ммоль) в сухом ЭМР (4 мл) добавляли карбонат калия (400 мг, 2,89 ммоль) и полученную смесь нагревали в М\У (микроволновом) приборе при 70°С в течение 40 мин. Смесь разбавляли водой и этилацетатом, фазы разделяли и водную фазу обратно экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2x20 мл), сушили над №28О4, фильтровали и концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя циклогексан/этилацетат от 70:30 до 50:50 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (225 мг) в виде желтой пены.
Ή ЯМР (400 МГц, ^Μ8Ο-а6): δ м.д. 9.05 (1Н, ά), 8.63 (1Н, άά), 7.21-7.40 (2Н, т), 6.84-7.02 (2Н, т), 2.01 (3Н, 5), 1.50 (6Н, 5).
Референсное промежуточное соединение 204.
6-[(2,4,4-Триметил-3,1-бензоксазин-5-ил)окси]пиридин-3-амин
К раствору 2,4,4-триметил-5-[(5-нитро-2-пиридил)окси]-3,1-бензоксазина (промежуточное соединение 203, 220 мг, 0,70 ммоль) в ЕЮН (3 мл) добавляли палладий на углероде (10% (мас./мас.), 25 мг) и полученную смесь перемешивали в течение 40 мин в атмосфере водорода (2 бар) при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывали и промывали ЕЮН (3x10 мл). Фильтрат концентрировали до указанного в заголовке соединения (185 мг) в виде зеленоватого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ПМ8О-с16): δ м.д. 7.51 (1Н, ά), 7.12 (1Н, ΐ), 7.05 (1Н, άά), 6.75 (2Н, ά), 6.55 (1Н, ά), 5.07 (2Н, 5), 1.99 (3Н, 5), 1.58 (6Н, 5).
Референсное промежуточное соединение 205.
(2К)-2-Амино-2-метил-^[6-[(2,4,4-триметил-3,1-бензоксазин-5-ил)окси]-3 -пиридил]бутанамид
К суспензии 6-[(2,4,4-триметил-3,1-бензоксазин-5-ил)окси]пиридин-3-амина (промежуточное соединение 204, 185 мг, 0,65 ммоль) и гидрохлорида (К)-2-амино-2-метилбутановой кислоты (100 мг, 0,67 ммоль) в этилацетате/ΜеСN (2 мл, смесь 1:3 об./об.) по каплям при 0°С добавляли 50%-ный (мас./мас.) раствор Т3Р в этилацетате (0,43 мл). Затем смесь нагревали при 60°С в течение 3 ч и при 80°С в течение 4,5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (5 мл) и этилацетатом (10 мл), две фазы разделяли и водную фазу обрабатывали насыщенным раствором NаНСΟ3 (рН 8) и обратно экстра- 99 023768 гировали этилацетатом (2x10 мл). Объединенные органические слои сушили над №ь80+ фильтровали и концентрировали и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя циклогексан/этилацетат 20:80 в качестве элюента, с получением указанного в заголовке соединения (143 мг) в виде желтой пены.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.39 (1Н, б), 8.17 (1Н, бб), 7.20 (1Н, ΐ), 7.01 (1Н, б), 6.84 (1Н, б), 6.73 (1Н, б), 2.00 (3Н, 5), 1.69 (1Н, т), 1.43-1.57 (7Н, т), 1.21 (3Н, 5), 0.80 (3Н, ΐ).
Референсное промежуточное соединение 206.
2-[(2,2-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-нитропиридин
2-Хлор-5-нитропиридин (97 мг, 0,609 ммоль) растворяли в 3 мл диметилформамида во флаконе для микроволновой обработки. Добавляли 2,2-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ол (100 мг, 0,609 ммоль) и карбонат калия (253 мг, 1,827 ммоль). Реакционную смесь нагревали при микроволновом излучении в течение 1 ч при 110°С. Реакционную смесь фильтровали. Отфильтрованное твердое вещество промывали дихлорметаном (5 мл). Летучие вещества выпаривали под вакуумом. Неочищенное соединение растворяли в дихлорметане (8 мл) и добавляли рассол (8 мл). Соединение экстрагировали 2 раза дихлорметаном (2x8 мл) и 2 раза этилацетатом (2x8 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и упаривали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (система Сотратоп, картридж 8ί 12д), используя циклогексан/этилацетат от 100:0 до 80:20 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (120 мг).
УЭЖХчрцс: 1,20 мин, 287 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 207.
6-[(2,2-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинамин
°УК раствору 2-[(2,2-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-нитропиридина (промежуточное соединение 206, 115 мг, 0,402 ммоль) в смеси ТНР/вода (9 мл/3 мл) добавляли порошок Ре (112 мг, 2,009 ммоль) с последующим добавлением хлорида аммония (107 мг 2,009 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывали и раствор разбавляли насыщенным водным раствором NаНС03 (10 мл) и этилацетатом (15 мл). Две фазы разделяли и водный слой дважды экстрагировали этилацетатом (2x15 мл). Объединенные органические слои сушили над №2804, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией (система Сотратоп, силикагелевый картридж 12д), используя циклогексан/этилацетат от 80:20 до 50:50 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (95 мг).
УЭЖХчрцс: 0,87 мин, 257 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 208.
трет-Бутил-Н-[(1К)-1-[[6-[(2,2-диметил-3Н-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридил]карбамоил]пропил] карбамат
К раствору (2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановой кислоты (17,84 мг, 0,088 ммоль) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (ЭМЕ) (1 мл) добавляли Э1РЕА (25,6 мкл, 0,146 ммоль), а затем НАТИ (37,8 мг, 0,099 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре под аргоном. Затем добавляли 6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинамин (промежуточное соединение 207, 15 мг, 0,059 ммоль) и реакционную смесь оставляли на ночь при перемешивании при 35°С под аргоном. Реакционную смесь упаривали. Добавляли рассол (4 мл) и 3 раза экстрагировали этилацетатом (3x5 мл). Объединенные органические слои сушили над №ь80+ фильтровали и упаривали и остаток очищали флэш-хроматографией (система Сотратоп, картридж с диоксидом кремния 12д), используя циклогексан/этилацетат от 100:0 до 70:30 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (18 мг).
УЭЖХчрцс: 1,21 мин, 442 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 209.
((2К)-2-амино-Ы-{6-[(2,2-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}бутанамид)
- 100 023768
К раствору трет-бутил-Ы-[(1К)-1-[[6-[(2,2-диметил-3Н-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридил]карбамоил]пропил]карбамата (промежуточное соединение 208, 14 мг, 0,032 ммоль) в сухом дихлорметане (1 мл) при 0°С медленно добавляли ТРА (98 мкл, 1,268 ммоль) и при этой же температуре в течение 4 ч перемешивали реакционную смесь. К реакционной смеси добавляли дополнительное количество дихлорметана (4 мл). Затем добавляли насыщенный водный раствор NаНСОз, позволяя рН достичь значения примерно 8. Две фазы разделяли и затем водную фазу экстрагировали ЭСМ (3x3 мл). Объединенные органические слои сушили над №^О4, фильтровали и упаривали, получая указанное в заголовке соединение (10 мг).
УЭЖХчрцс: 0,73 мин, 342 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 210.
5-(Метоксиметокси)-4-метилхроман
2-(3-Гидрокси-1-метилпропил)-3-(метоксиметокси)фенол (56,3 мг, 0,249 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (ТНР) в 50-мл круглодонной колбе с получением бесцветного раствора. Добавляли трифенилфосфин (59,4 мг, 0,226 ммоль) и реакционную смесь перемешивали до полного растворения трифенилфосфина. Добавляли Э1АО (45,8 мг, 0,226 ммоль) и перемешивали реакционную смесь. Добавляли дополнительные количества трифенилфосфина (59,4 мг, 0,226 ммоль) и Э1АО (45,8 мг, 0,226 ммоль). Реакционную смесь упаривали в вакууме и остаток очищали флэш-хроматографией (Вю!аде δΡ1) на силикагеле, используя картридж с диоксидом кремния δNΑΡ 10 д в качестве колонки и циклогексан/этилацетат 10:1 в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения (50,3 мг) в виде бесцветного масла.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ м.д. 7.03 (1Н, !), 6.63 (1Н, Д), 6.52 (1Н, Д), 5.22 (2Н, ДД), 4.20-4.28 (1Н, т), 4.09-4.19 (1Н, т), 3.51 (3Н, е), 3.09-3.23 (1Н, т), 1.96-2.17 (1Н, т), 1.61-1.74 (1Н, т), 1.31 (3Н, Д).
Референсное промежуточное соединение 211.
4-Метилхроман-5 -ол
5-(Метоксиметокси)-4-метилхроман (промежуточное соединение 210, 50,3 мг, 0,229 ммоль) растворяли в метаноле (4 мл) в 50-мл круглодонной колбе с получением бледно-желтого раствора. Добавляли 2 М водный раствор НС1 (0,100 мл, 0,200 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°С. Последующее добавление 2 М/Н2О раствора НС1 (0,100 мл, 0,200 ммоль) проводили до завершения реакции. Реакционную смесь гасили 10 мл воды и разбавляли 25 мл ЭСМ. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органический слой упаривали в вакууме, получая указанное в заголовке соединение (38,7 мг) в виде оранжевого масла.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ м.д. 6.95 (1Н, !), 6.44 (1Н, Д), 6.32 (1Н, ДД), 4.87 (1Н, Ьг. е.), 4.20-4.31 (1Н, т), 4.07-4.19 (1Н, т), 3.05-3.15 (1Н, т), 2.02-2.19 (1Н, т), 1.66-1.74 (1Н, т), 1.32 (3Н, Д).
Референсное промежуточное соединение 212.
2-(4-Метилхроман-5-ил)окси-5-нитропиридин
II о
4-Метилхроман-5-ол (промежуточное соединение 211, 38,7 мг, 0,212 ммоль), К2СО3 (88 мг, 0,636 ммоль) и 2-хлор-5-нитропиридин (33,6 мг, 0,212 ммоль) растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (ЭМР) (2 мл) в 0,5-2 мл флаконе для микроволновой обработки с получением светло-коричневого раствора. Реакционный сосуд герметично закрывали и нагревали при микроволновом излучении при 110°С в течение 1 ч. После охлаждения реакционную смесь гасили 5 мл воды и разбавляли 10 мл этилацетата. Фазы разделяли с помощью делительной воронки. Водную фазу экстрагировали 3x10 мл этилацетата. Собранный
- 101 023768 органический слой сушили с использованием гидрофобной фритты и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (22,9 мг) в виде бесцветного масла.
УЭЖХ-В: 0,94 мин, 287 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 213.
6-(4-Метилхроман-5-ил)оксипиридин-3-амин
В 50-мл круглодонной колбе 2-(4-метилхроман-5-ил)окси-5-нитропиридин (промежуточное соединение 212, 22,9 мг, 0,08 ммоль) растворяли в этаноле (10 мл) с получением бледно-желтого раствора. Добавляли Рб/С (17,88 мг, 0,017 ммоль) и гидрат гидразина (0,4 мл, 4,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 90°С. Реакционную смесь фильтровали и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (22,9 мг) в виде бледно-желтого масла.
УЭЖХ-В: 0,65 мин, 257 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 214.
трет-Бутил-Ы-[1,1-диметил-2-[[6-(4-метилхроман-5-ил)окси-3-пиридил]амино]-2-оксоэтил]карбамат
В 8-мл сосуде 6-(4-метилхроман-5-ил)оксипиридин-3-амин (промежуточное соединение 213, 22,9 мг, 0,089 ммоль) растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (3 мл) с получением бледно-желтого раствора. Добавляли Э1РЕА (0,069 мл, 0,394 ммоль), ^{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-2-метилаланин (60,0 мг, 0,295 ммоль) и НАТИ (112 мг, 0,295 ммоль). Реакционную смесь встряхивали при 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме и остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле, используя колонку §NΑΡ 25д и градиент циклогексан/этилацетат от 3:1 до 1:2 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (63,3 мг) в виде бесцветного масла.
УЭЖХ-В: 0,91 мин, 442 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 215.
2-Амино-2-метил-Ы-[6-(4-метилхроман-5-ил)окси-3-пиридил]пропан-амид
А'
В 50-мл круглодонной колбе трет-бутил-Ы-[1,1-диметил-2-[[6-(4-метилхроман-5-ил)окси-3пиридил]амино]-2-оксо-этил]карбамат (промежуточ ное соединение 214, 63,3 мг, 0,093 ммоль) растворяли в дихлорметане (Όί'Μ) (3 мл) с получением бледно-желтого раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С и добавляли ТРА (3 мл, 38,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта в виде бледно-желтого масла. Остаток загружали на картридж 8СХ 2 д. Его затем промывали 40 мл МеОН, а затем 40 мл 2 М раствора аммиака в МеОН. Аммиачный элюат упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (22,9 мг) в виде бесцветного масла.
УЭЖХ-В: 0,77 мин, 342 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 216.
2-(4-Метилхроман-5-ил)окси-5-нитропиримидин
о
4-Метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ол (промежуточное соединение 211, 111 мг, 0,676 ммоль) растворяли в 5,0 мл ΌΜΡ. Добавляли К2СО3 (140 мг, 1,01 ммоль) и 2-хлор-5-нитропиримидин (162 мг, 1,01 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. ΌΜΡ затем выпаривали в глубоком вакууме и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, используя градиент
- 102 023768 циклогексан/этилацетат от 1:0 до 7:3 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (192 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, СЭСЕ) δ м.д. 9.36 (2Н, 5), 7.21 (1Н, ΐ), 6.85 (1Н, ά), 6.68 (1Н, ά), 4.15-4.35 (2Н, т), 2.90-3.02 (1Н, т), 2.08-2.20 (1Н, т), 1.65-1.75 (1Н, т), 1.29 (3Н, ά).
Референсное промежуточное соединение 217. 2-[(4-Метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-5-пиримидинамин
2-[(4-Метил-3,4-дигидро-2Нхромен-5-ил)окси]-5-нитропиримидин (промежуточное соединение 216, 192 мг, 0,668 ммоль) растворяли в 9,0 мл раствора 2/1 ТНР/вода. Добавляли железо (187 мг, 3,34 ммоль) и хлорид аммония (179 мг, 3,34 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч при комнатной температуре. Органическую фазу после разбавления АсΟЕΐ и фильтрования через набивку целита (промывая АсОЕ1) промывали (два раза) водным насыщенным раствором NаНСΟз. Органический слой сушили над №-ь8О.-|. фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле, используя градиент циклогексан/этилацетат от 1:0 до 0:1 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (144 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, СОСЕ) δ м.д. 8.11 (2Н, 5), 7.13 (1Н, ΐ), 6.73 (1Н, ά), 6.60 (1Н, ά), 4.12-4.30 (2Н, т), 3.52 (1Н, Ьг.5), 3.05-3.45 (1Н, т), 2.08-2.18 (1Н, т), 1.63-1.73 (1Н, т), 1.31 (3Н, ά).
Референсное промежуточное соединение 218.
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-метил-1-[({2-[(4-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-5пиримидинил}амино)карбонил]пропил}карбамат
2-[(4-Метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-5-пиримидинамин (промежуточное соединение 217, 144 мг, 0,56 ммоль) растворяли в толуоле (8,0 мл) и добавляли 3-2-пиридинил-(2К)-2-({[(1,1диметилэтил)окси]карбонил}амино)-2-метилбутантиоат (промежуточное соединение 139, 86 мг, 0,28 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 140°С в течение 20 мин. Добавляли дополнительное количество 3-2-пиридинил-(2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)-2-метилбутантиоата (промежуточное соединение 139, 134 мг, 0,43 ммоль) и смесь перемешивали при 140°С в течение 15 мин. Добавляли дополнительное количество 3-2-пиридинил-(2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)2-метилбутан-тиоата (промежуточное соединение 139, 100 мг, 0,32 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи и при 80°С в течение 4 ч. Добавляли дополнительное количество 3-2пиридинил-(2К)-2-({ [(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)-2-метилбутантиоата (промежуточное соединение 139, 100 мг, 0,32 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 20 ч. Добавляли дополнительное количество 8-2-пиридинил-(2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)-2метилбутан-тиоата (промежуточное соединение 139, 50 мг, 0,16 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 30 ч при 80°С. После охлаждения летучие вещества удаляли и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (ВЮаде 8Р1) на силикагеле, используя картридж δNΛР 10 д с диоксидом кремния в качестве колонки и градиент циклогексан/этилацетат от 10:0 до 1:1 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (100 мг).
УЭЖХ-В: 1,13 мин, 457 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 219.
^-{2-[(4-Метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-5-пиримидинил}-О-изовалинамид
К раствору 1,1 -диметилэтил-{(1К)-1 -метил- 1-[({2-[(4-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5 -ил)окси] -5пиримидинил}амино)карбонил]пропил}карбамата (промежуточное соединение 218, 100 мг, 0,219 ммоль) в сухом дихлорметане (5 мл), охлажденному до 0°С, по каплям добавляли ТРА (1 мл, 12,98 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 3 ч, затем ее оставляли достигать комнат- 103 023768 ной температуры и перемешивали при этой температуре в течение 2 ч. Летучие вещества выпаривали и остаток разбавляли ΌΡΜ (10 мл) и промывали водным насыщенным раствором NаНСΟ3 (10 мл). Органический слой отделяли, сушили (Να28Ο.4), фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (78 мг) в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
УЭЖХ-В: 0,68 мин, 357 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 220.
5-{[(Метилокси)метил]окси}-2,3-дигидроспиро[хромен-4,1'-циклопропан]
К раствору 2,4,6-трихлорфенола (307 мг, 1,557 ммоль) в 12,0 мл ЭСЫ при -40°С добавляли 1 М раствор диэтилцинка в гексане (1,557 мл, 1,557 ммоль). После перемешивания при этой температуре в течение 15 мин добавляли Ο42Ι2 (0,126 мл, 1,557 ммоль). После перемешивания в течение дополнительных 15 мин добавляли 4-метилиден-5-{[(метилокси)метил]окси}-3,4-дигидро-2Н-хромен (169 мг, 0,819 ммоль), растворенный в 3,0 мл ЭСЫ. Охлаждающую баню удаляли и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь разбавляли ^СΜ, промывали 2 раза 10%-ным водным раствором НС1, затем 2 раза водным насыщенным раствором ΝαΜΠΟ^ 2 раза водным насыщенным раствором Να28Ο3 и рассолом (2 раза). Органический слой затем сушили над Ν;·ι28Ο+ фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (Вю1аде 8Ρ1) на силикагеле, используя градиент циклогексан/этилацетат от 100:0 до 95:5. Собранный остаток растворяли в ЭСЫ и промывали (два раза) КОН (30%-ный водн. раствор). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (145 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 6.96 (1Н, ί), 6.52-6.62 (2Н, т), 5.05-5.15 (2Н, т), 4.22 (2Н, άά), 3.47 (3Н, 5), 1.80-1.86 (2Н, т), 1.72-1.80 (2Н, т), 0.51-0.61 (2Н, т).
Референсное промежуточное соединение 221.
2,3-Дигидроспиро [хромен-4,1 '-циклопропан] -5 -ол
5-{[(Метилокси)метил]окси}-2,3-дигидроспиро[хромен-4,1'-циклопропан] (промежуточное соединение 220, 145 мг, 0,658 ммоль) растворяли в МеОН (6,0 мл) и добавляли 2н. водный раствор НС1 (0,494 мл, 0,99 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После добавления воды МеОН удаляли под вакуумом и водную фазу экстрагировали этилацетатом (три раза). Объединенные органические слои сушили над Ν;·ι28Ο+ фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством флэшхроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя градиент от циклогексана до циклогексан/этилацетат 9:1 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (64 мг).
УЭЖХ-В: 0,93 мин, 177 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 222.
2-(2,3-Дигидроспиро [хромен-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)-5 -нитропиримидин
К раствору 2,3-дигидроспиро[хромен-4,1'-циклопропан]-5-ола (промежуточное соединение 221, 63 мг, 0,358 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл) добавляли Κ2СΟ3 (74,1 мг, 0,536 ммоль) и 2-хлор-5-нитропиримидин (86,0 мг, 0,536 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. ΌΜΡ затем выпаривали в глубоком вакууме, добавляли воду и реакционную смесь экстрагировали ΑсΟΕί (три раза). Собранные органические слои сушили над Ν;·ι28Ο+ фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством флэшхроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя градиент от циклогексана до циклогексан/этилацетат 9:1 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (91 мг).
УЭЖХ-В: 1,10 мин, 300 [М+Н]+.
- 104 023768
Референсное промежуточное соединение 223.
2-(2,3-Дигидроспиро [хромен-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)-5 -пиримидинамин
2-(2,3-Дигидроспиро [хромен-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)-5 -нитропиримидин (промежуточное соединение 222, 91 мг, 0,304 ммоль) растворяли в 9,0 мл раствора 2/1 ТНР/вода. Затем добавляли железо (85 мг, 1,52 ммоль) и хлорид аммония (81 мг, 1,52 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 ч. Органическую фазу после разбавления ΑсОЕΐ и фильтрования через набивку целита (промывая АсОЕ1) промывали (два раза) водным насыщенным раствором №НСО3. Органический слой сушили над №28О4, фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством флэшхроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя градиент от циклогексана до циклогексан/этилацетат 1:1 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (52 мг);
УЭЖХ-В: 0,82 мин, 270 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 224.
1,1 -Диметилэтил-[(1К)-1-([2-(2,3-дигидроспиро [хромен-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)-5пиримидинил] минокарбонил)-’ -метилпропил] карбамат
К раствору (2К)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-2-метилбутановой кислоты (105 мг, 0,483 ммоль) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (2 мл) добавляли Э1РЕА (0,101 мл, 0,579 ммоль) и НАТИ (184 мг, 0,483 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 15 мин, затем ее добавляли к раствору 2(2,3-дигидроспиро[хромен-4,1'-циклопропан]-5-илокси)-5-пиримидинамина (промежуточное соединение 223, 52 мг, 0,193 ммоль) в сухом ЭМЕ (0,5 мл). Смесь нагревали при 40°С в течение ночи, затем ее нагревали до 60°С и перемешивали при этой температуре в течение 4 ч. После охлаждения реакционную смесь гасили водой (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3х5 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (3х5 мл), сушили (№28О4), фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 25д и градиент от толуола до толуол/этилацетат 60:40 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (10 мг) в виде белого твердого вещества.
УЭЖХ-В: 1,15 мин, 469 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 225.
N’-[2-(2,3-Дигидроспиро [хромен-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)-5-пиримидинил] -Э-изовалинамид
К раствору 1,1-диметилэтил-[(1К)-1-({ [2-(2,3-дигидроспиро[хромен-4,1'-циклопропан]-5-илокси)-5пиримидинил]амино}карбонил)-1-метилпропил]карбамата (промежуточное соединение 224, 5 мг, 10,67 мкмоль) в сухом дихлорметане (1 мл), охлажденному до 0°С, по каплям добавляли ТРА (0,822 мкл, 10,67 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при той же самой температуре. Реакционную смесь оставляли достигать комнатной температуры, затем летучие вещества выпаривали. Остаток разбавляли ЭСМ (2 мл) и промывали насыщ. раствором NаНСОз (7 мл). Органический слой сушили (№28О4), фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (4 мг) в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
УЭЖХ-В: 0,71 мин, 369 [М+Н]+.
- 105 023768
Референсное промежуточное соединение 226.
6-(1,1а,2,7Ъ-Т етрагидроциклопропа[с]хромен-7-илокси)-3 -пиридинамин
В 8-мл сосуде 5-нитро-2-(1,1а,2,7Ъ-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-илокси)пиридин (94,6 мг, 0,300 ммоль) растворяли в тетрагидрофура не (ТНР) (3 мл) с получением бледно-желтого раствора. Добавляли железо (84 мг, 1,498 ммоль) и хлорид аммония (80 мг, 1,498 ммоль), затем воду (1,500 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли дополнительное количество железа (44 мг, 0,75 ммоль) и хлорида аммония (40 мг, 0,75 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Реакционную смесь гасили 10 мл водного насыщенного раствора бикарбоната натрия и разбавляли 25 мл Εΐ0Α^ Реакционную смесь фильтровали через набивку целлита. Фазы разделяли с помощью делительной воронки. Водную фазу экстрагировали ЭСМ (3x10 мл). Объединенные органические слои упаривали и остаток очищали посредством флэшхроматографии на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 25д и градиент циклогексан/этилацетат от 3:1 до 1:1 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (82,9 мг) в виде бесцветного масла.
1Н ЯМР (400 МГц, СЖЪ) δ м.д. 7.76 (1Н, ά), 7.09 (1Н, άά), 7.02 (1Н, ΐ), 6.75 (1Н, ά), 6.66 (1Н, άά), 6.62 (1Н, άά), 4.32 (1Н, άά), 3.97 (1Н, άά), 3.55 (2Н, Ъг. δ.), 2.16-2.27 (1Н, ш), 1.61-1.76 (1Н, ш), 0.98-1.07 (2Н, ш);
УЭЖХ-В: 0,78 мин, 255 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 227.
трет-Бутил-N-[(1Κ)-1-[[6-(1,1а,2,7Ъ-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-илокси)-3пиридил] карбамоил] -1 -метилпропил] карбамат
В 8-мл пробирке 6-(1,1а,2,7Ъ-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-илокси)-3-пиридинамин (промежуточное соединение 226, 84 мг, 0,0305 ммоль), ^Ю^Дтрет-бутоксикарбониламино^-метилбутановую кислоту (59,7 мг, 0,275 ммоль) и ΌΛΕΑ (0,080 мл, 0,458 ммоль) растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (ΌΜΕ) (2 мл) с получением бледно-желтого раствора. Добавляли НΑΤυ (151 мг, 0,397 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение выходных. Реакционную смесь упаривали в вакууме и остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 25д и градиент циклогексан/этилацетат от 3:1 до 1:2 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (74 мг) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, СЖЪ) δ м.д. 8.14-8.18 (1Н, ш), 8.09-8.14 (1Н, ш), 7.04 (1Н, ΐ), 6.85 (1Н, ά), 6.646.72 (2Н, ш), 6.30 (1Н, Ъг. δ.), 4.91 (1Н, Ъг. δ.), 4.31 (1Н, άά), 3.94 (1Н, άά), 1.83-2.17 (3Н, ш), 1.70- 1.83 (1Н, ш), 1.51 (3Н, δ), 1.45 (9Н, δ), 0.91-1.05 (5Н, ш);
УЭЖХлрдс: 1,17 мин, 454 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение 228.
(2Κ)-N-[6-(1,1а,2,7Ъ-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-илокси)-3-пиридил]-2-амино-2метилбутанамид
В 50-мл круглодонной колбе трет-бутил-N-[(1Κ)-1-[[6-(1,1а,2,7Ъ-теΊрагидроциклопропа[с]хромен-7илокси)-3-пиридил]карбамоил]-1-метилпропил]карбамат (промежуточное соединение 227, 74 мг, 0,139 ммоль) растворяли в дихлорметане (3 мл) с получением бледно-желтого раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С и добавляли ΤРΑ (2 мл, 26,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта в виде желтого масла. Образец загружали на картридж §СX 2 д Его затем промывали 36 мл МеОН, затем 25 мл 2 М раствора аммиака в МеОН. Аммиачный элюат упаривали в вакууме, получая указанное в заголовке со- 106 023768 единение (46,2 мг) в виде бледно-желтого масла.
’Н ЯМР (400 МГц, СПСЫ) δ м.д. 9.89 (’Н, Ъг. 5.), 8.17-8.28 (2Н, т), 7.04 (’Н, ΐ), 6.81-6.88 (’Н, т), 6.65-6.71 (2Н, т), 4.31 (’Н, άά), 3.95 (’Н, άά), 2.06-2.14 (’Н, т), 1.91-2.05 (’Н, т), 1.53-1.77 (7Н, гл), 0.94 (3Н, ΐ), 0.90-1.05 (2Н, т);
ЖХ-МС УЭЖХ/МС (метод: 1РОС2): и = 0,72 мин, МН+ = 354. УЭЖХлрцс: 0,72 мин, 354 [М+Н]+.
Примеры, помеченные звездочкой (*), являются референсными примерами.
Пример 1.
(5К)-3-[4-(1,3-Дигидро-2-бензофуран-4-илокси)фенил]-5-метил-2,4-имидазолидиндион
Раствор У-[4-(1,3-дигидро-2-бензофуран-4-илокси)фенил]-Э-аланин-амида (промежуточное соединение 7, 80 мг) и ТЕА (0,187 мл, 1,341 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали под аргоном при 0°С. Добавляли трифосген (39,8 мг, 0,134 ммоль) в дихлорметане (4 мл) и смесь оставляли при перемешивании при 0°С на 45 мин. Затем добавляли водный насыщенный раствор NаНСΟз. Фазы разделяли и водную фазу 3 раза экстрагировали дихлорметаном. Собранные органические фазы сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Неочищенный остаток очищали посредством флэшхроматографии (Т1а511Ма51егРег5опа1), используя в качестве элюентов градиент циклогексан/этилацетат от 100:0 до 40:60. В результате получали указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (58,5 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 8.49-8.44 (’Н, т), 7.39-7.32 (3Н, т), 7.18-7.13 (’Н, т), 7.11-7.06 (2Н, т), 6.91-6.87 (’Н, т), 5.09-5.03 (2Н, т), 4.91-4.87 (2Н, т), 4.29-4.22 (’Н, т), 1.36 (3Н, ά);
УЭЖХ-МС: 0,69 мин, 325[М+1]+.
Пример 2.
(5К)-5-Метил-3-{4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-2,4-имидазолидиндион
Ν’-{4-[(3 -Метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси] фенил} -Ό-аланинамид (промежуточное соединение 14, 337 мг) растворяли в 8,0 мл этилацетата. Добавляли триэтиламин (0,33 мл, 2,38 ммоль), а затем раствор трифосгена (161 мг, 0,54 ммоль) в 2,0 мл этилацетата. После 5 мин перемешивания добавляли ИМАР (66 мг, 0,54 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. После гашения насыщенным водным раствором NаНСΟз реакционную смесь два раза экстрагировали этилацетатом. Собранные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле, элюируя градиентом Су-Нех/ЕЮАс от 100/0% до 0/100%. В результате получали указанное в заголовке соединение (160 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-ά6): δ м.д. 8.49 (’Н, Ъг. 5), 7.64-7.58 (’Н, т), 7.50-7.40 (3Н, т), 7.34-7.25 (2Н, т), 6.76 (’Н, ά), 4.34-4.18 (’Н, т), 2.58 (3Н, 5), 1.38 (3Н, ά);
УЭЖХ-МС-В: 0,73 мин, 338 [М+Н]+.
Пример 3.
(5К)-3-(4-[(3,6-Диметил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-5-метил-2,4-имидазолидиндион
^-{4-[(3,6-Диметил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси] фенил}-Э-аланинамид (промежуточное соединение 23, 54 мг) растворяли в 7,0 мл этилацетата. Затем добавляли триэтиламин (0,051 мл, 0,37 ммоль), а затем раствор трифосгена (24,6 мг, 0,083 ммоль) в 2,0 мл этилацетата. После перемешивания в течение 5 мин добавляли ИМАР (10,1 мг, 0,083 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. После гашения водным раствором NаНСΟз смесь два раза экстрагировали этилацетатом и собранные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле, элюируя градиентом с-Нех/ЕЮАс от 100/0 до 0/100, с получением указанного в заголовке соединения (11 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, С1ЫС)1Ы: δ м.д. 7.50-7.45 (2Н, т), 7.26-7.16 (3Н, т), 6.63-6.57 (’Н, т), 4.36-4.26 (’Н, т), 2.57 (3Н, 5), 2.45 (3Н, 5), 1.52 (3Н, ά);
- 107 023768
УЭЖХ-МС-В: 0,78 мин, 352 [М+Н]+.
Пример 4.
5,5-Диметил-3-(4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-2,4-имидазолидиндион
2-Метил-Н1-{4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}аланинамид (промежуточное соединение 25, 18 мг) растворяли в 4 мл этилацетата. Затем добавляли триэтиламин (0,017 мл, 0,12 ммоль), а затем раствор трифосгена (8,21 мг, 0,028 ммоль) в 1,0 мл этилацетата. После перемешивания в течение 5 мин добавляли ОМАР (3,4 мг, 0,028 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. После гашения насыщенным водным раствором NаΗСОз смесь два раза экстрагировали этилацетатом и собранные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество загружали на силикагелевую колонку и элюировали градиентом сНех/ЕЮАс в качестве элюентов (от 100:0 до 0:100). В результате получали 10 мг указанного в заголовке соединения.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.57 (1Н, Ьг. δ), 7.66-7.57 (1Н, ш), 7.51-7.43 (3Н, ш), 7.27 (2Н, б), 6.76 (1Н, б), 2.57 (3Н, δ), 1.43 (6Н, δ);
УЭЖХ-МС: 0,72 мин, 352 [М+Н]+.
Пример 5.
(5Κ)-5-Этил-3-{6-[(3-этил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4-имидазолидиндион
(2Κ)-2-Амино-N-{6-[(3-этил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]-3-пиридинил}бутанамид (промежуточное соединение 35) растворяли в дихлорметане (1,0 мл) и добавляли ТЕА (0,004 мл, 0,03 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли трифосген (1,3 мг, 4,49 мкмоль), растворенный в 0,1 мл дихлорметана. Реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 30 мин. Смесь гасили 0,5 мл воды и воду удаляли посредством добавления сульфата натрия. Органическую фазу отбирали посредством пипетки и упаривали, а полученное неочищенное вещество загружали на силикагелевую колонку (система Вю1аде 8Р1) и элюировали градиентом циклогексан/ЕЮАу (от 1/0 до 7/3, затем 7/3, затем от 7/3 до 1/1, 1/1, затем от 1/1 до 0/1) с получением указанного в заголовке соединения (1,3 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.35-8.31 (1Н, ш), 7.92-7.87 (1Н, ш), 7.60-7.52 (1Н, ш), 7.46-7.41 (1Н, ш), 7.19-7.13 (1Н, ш), 7.05-7.00 (1Н, ш), 5.57 (1Н, Ьг. δ), 4.29-4.23 (1Н, ш), 2.94 (2Н, ц), 2.12-1.91 (2Н, ш), 1.39 (3Н, ΐ), 1.11 (3Н, ΐ);
УЭЖХ: 0,68 мин, 367 [М+Н]+.
Пример 6.
(5Κ)-5-Этил-3-(6-{[3-(1-метилэтил)-1,2-бензизоксазол-4-ил]окси}-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндион
^ЮЛ-Амино-Ы-ЛД [3 -(1 -метилэтил)-1,2-бензизоксазол-4-ил]окси}-3 -пиридинил)бутанамид (промежуточное соединение 44) растворяли в дихлорметане (1,0 мл) и добавляли ТЕА (3 мкл, 0,022 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли трифосген (0,6 мг, 1,98 мкмоль) и смесь перемешивали при этой температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь гасили водой и воду удаляли посредством добавления сульфата натрия. Органическую фазу отбирали с помощью пипетки и упаривали, а полученный остаток загружали на силикагелевую колонку (система Вю1аде 8Р1) и элюировали градиентом циклогексан/ЕЮАс (от 1/0 до 7/3, затем 7/3, затем от 7/3 до 1/1, затем 1/1, затем 0/1) с получением указанного в заголовке соединения (1 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.39-8.34 (1Н, ш), 7.93-7.87 (1Н, ш), 7.59-7.51 (1Н, ш), 7.46-7.38 (1Н, ш), 7.20-7.14 (1Н, ш), 7.06-6.97 (1Н, ш), 5.50 (1Н, Ьг. δ), 4.31-4.23 (1Н, ш), 3.42-3.32 (1Н, ш), 2.08-1.91
- 108 023768 (2Н, т), 1.45 (6Н, ά), 1.11 (3Н, ΐ);
УЭЖХ: 0,72 мин, 381 [М+Н]+.
Пример 7.
(5К)-3-{4-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]фенил}-5-метил-2,4имидазолидиндион
К раствору А{4-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]фенил}-О-аланинамида (промежуточное соединение 57, 66 мг) в дихлорметане (20 мл, БСКС) добавляли триэтиламин (0,085 мл, 0,607 ммоль, БСКС). По каплям при 0°С добавляли трифосген (24,00 мг, 0,081 ммоль, БСКС) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч. Смесь гасили водой (20 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3 раза по 50 мл, БСКС). Объединенные органические слои сушили, упаривали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле с градиентом ЕΐАс/ΡЕ (1/30) в качестве элюентов с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (40 мг).
1Н ЯМР (СОС13): δ м.д. 7.36-7.34 (2Н, т), 7.09-7.03 (3Н, т), 6.60-6.58 (1Н, ά), 6.41-6.39 (1Н, ά), 5.60 (1Н, к), 4.27-4.25 (3Н, т), 1.58-1.51 (3Н, ά), 1.42 (6Н, к);
МС-2 (ИЭР): 353 [М+Н]+.
Пример 8.
(5К)-3-{6-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил)-5-метил-2,4имидазолидиндион
^-{6-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-Э-аланинамид (промежуточное соединение 61, 28 мг) растворяли в сухом дихлорметане (3 мл). Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане. Добавляли триэтиламин (71,5 мкл, 0,513 ммоль). Затем по каплям добавляли раствор трифосгена в сухом дихлорметане (11,42 мг, 0,038 ммоль, растворенного в 1 мл дихлорметана). Реакционную смесь перемешивали при 0°С под аргоном в течение 15 мин. Добавляли насыщенный водный раствор NаНСΟз (4 мл) и водный слой 4 раза экстрагировали дихлорметаном (4x5 мл). После высушивания над сульфатом натрия растворители удаляли под вакуумом. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (система Сотратоп, картриджи 2x4 д с диоксидом кремния) с градиентом циклогексан/этилацетат от 100/0 до 50/50. В результате получали указанное в заголовке соединение в виде пленки (17,5 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;): δ м.д. 8.31 (1Н, ά), 7.77 (1Н, άά), 7.13 (1Н, ΐ), 7.00 (1Н, ά), 6.66 (1Н, ά), 6.56 (1Н, ά), 5.81 (1Н, Ьг.к), 4.29 (1Н, άά), 4.23 (2Н, к), 1.58 (3Н, ά), 1.37 (6Н, к);
УЭЖХ-В: 0,76 мин, 354 [М+Н]+.
Пример 9.
(5К)-3-{6-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-этил-2,4имидазолидиндион
Указанное в заголовке соединение получали аналогично получению из примера 8, заменяя Ν1-{6[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-О-аланинамид (промежуточное соединение 61) (2К)-2-амино^-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}бутанамидом (промежуточное соединение 63, 57 мг). В результате получали указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (40 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;): δ м.д. 8.30 (1Н, ά), 7.77 (1Н, άά), 7.13 (1Н, ΐ), 7.01 (1Н, ά), 6.67 (1Н, ά), 6.57 (1Н, ά), 5.96 (1Н, Ьг.к), 4.23 (2Н, к), 4.20 (1Н, т), 2.03-1.97 (1Н, т), 1.93-1.87 (1Н, т), 1.38 (6Н, к), 1.06 (3Н, ΐ);
УЭЖХ: 0,73 мин, 368 [М+Н]+.
- 109 023768
Пример 10.
(5К)-3-{2-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензосруран-4-ил)окси]-5-пиримидинил)-5-этил-2,4имидазолидиндион
К раствору (2К)-2-амино-Ы-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинил}бутанамида (промежуточное соединение 67, 3 мг) в сухом дихлорметане (0,5 мл) добавляли ТЕА (6,11 мкл, 0,044 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Затем по каплям добавляли раствор трифосгена (1,170 мг, 3,94 мкмоль) в сухом дихлорметане (0,125 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин. Реакционную смесь гасили водой (3 мл) и органическую фазу отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством флэшхроматографии на силикагеле, используя колонку 15о1и1е (1 д) и градиент дихлорметан/метанол от 99,5:0,5 до 9:10 в качестве элюента, с получением указанного в заголовке соединения (0,7 мг) в виде белого твердого вещества.
’Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.73 (2Н, 5), 7.18 (1Н, ΐ), 6.72 (1Н, б), 6.63 (1Н, б), 5.58 (1Н, Ьв), 4.28-4.23 (1Н, т), 4.24 (2Н, 5), 2.09-1.89 (2Н, т), 1.37 (6Н, 5), 1.09 (3Н, ΐ).
Пример 11.
7-{6-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,7-диазаспиро[3,4]октан6,8-дион
1-Амино-Ы-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}циклобутанкарбоксамид (промежуточное соединение 70, 17 мг) растворяли в сухом дихлорметане (1,8 мл). Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане. При 0°С добавляли триэтиламин (39,48 мкл, 0,283 ммоль). Затем по каплям добавляли 0,89 мл раствора трифосгена в сухом дихлорметане (0,0135 мг, 4,00 мг). Реакционную смесь перемешивали под аргоном в течение 10 мин при 0°С, затем в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем при 0°С добавляли дополнительно 0,25 эквивалента трифосгена в дихлорметане (0,26 М раствор) и реакционную смесь перемешивали под аргоном в течение дополнительных 30 мин при комнатной температуре. Растворители удаляли под вакуумом. Полученный остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле (система Сотрашоп, картридж 4д с диоксидом кремния) с градиентом циклогексан/этилацетат от 100/0 до 55/45 в качестве элюентов. В результате получали указанное в заголовке соединение (12 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.31 (1Н, б), 7.76 (1Н, бб), 7.13 (1Н, ΐ), 7.11 (1Н, б), 6.67 (1Н, б), 6.65 (1Н, б), 5.70 (1Н, 5), 2.50 (2Η, 5), 4.74 (2Н, т), 2.43 (2Н, т), 2.24 (1Η, т), 1.94 (1Н, т), 1.38 (6Н, т);
УЭЖХ: 0,72 мин, 380 [М+Н]+.
Пример 12.
6-(6-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -3 -пиридинил} -4,6-диазаспиро [2,4]гептан5,7-дион
Указанное в заголовке соединение (5 мг, 49%-ный выход) получали аналогично получению соединения из примера 11, заменяя 1-амино-Ы-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}циклобутанкарбокс-амид (промежуточное соединение 70) 1-амино-Ы-{6-[(3,3-диметил-2,3дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}циклопропанкарбоксамидом (промежуточное соединение 73, 9 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, ΜΠΌΙ)): δ м.д. 8.24 (1Н, т), 7.93 (1Н, т), 7.14 (1Н, ΐ), 7.07 (1Н, б), 6.64 (1Н, б), 6.54 (1Н, б), 4.22 (2Η, 5), 1.51 (2Н, т), 1.42 (2Н, т), 1.35 (6Н, 5);
УЭЖХ: 0,78 мин, 366 [М+Н]+.
- 110 023768
Пример 13.
3-{6-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,5-диметил-2,4имидазолидиндион
М'-{6-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2-метилаланинамид (промежуточное соединение 75, 7,5 мг) растворяли в сухом дихлорметане (1 мл). Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане. При 0°С добавляли триэтиламин (18,37 мкл, 0,132 ммоль). Затем по каплям добавляли 0,5 мл раствора трифосгена в сухом дихлорметане (0,012 ммоль). Раствор получали путем растворения 7,18 мг трифосгена в 1 мл дихлорметана. Реакционную смесь перемешивали под аргоном в течение 10 мин при 0°С, затем в течение 30 мин при комнатной температуре. Добавляли насыщенный водный раствор №-1НСО3 и водный слой экстрагировали 4 раза дихлорметаном. После высушивания над сульфатом натрия растворители удаляли под вакуумом. Полученный остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле (система Сотратоп, картридж 4д с диоксидом кремния) с градиентом циклогексан/этилацетат от 100/0 до 55/45. В результате получали указанное в заголовке соединение (4,5 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.31 (1Н, а), 7.77 (1Н, аа), 7.12 (1Н, ΐ), 6.99 (1Н, а), 6.66 (1Н, а),
6.56 (1Н, а), 5.47 (1Н, Ьг 5), 4.22 (2Н, 5), 1.56 (6Н, 5), 1.36 (6Н, 5);
УЭЖХ: 0,70 мин, 368 [М+Н]+.
Пример 14.
(5К)-3 -(2-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -5 -пиримидинил)-5-( 1,1диметилэтил) -2,4 -имидазо лидиндион
М'-{2-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -5 -пиримиди-нил} -3 -метил-Э-валинамид (промежуточное соединение 78, 9,9 мг) растворяли в сухом дихлорметане (1 мл). Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане. Добавляли триэтиламин (22,35 мкл, 0,160 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°С. Затем по каплям добавляли 0,5 мл раствора трифосгена в сухом дихлорметане (0,015 ммоль). Реакционную смесь перемешивали под аргоном в течение 20 мин при 0°С. Добавляли некоторое количество воды (2 мл) и водный слой экстрагировали 4 раза дихлорметаном. После высушивания над сульфатом натрия растворители удаляли под вакуумом. Полученный остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле (система Сотратоп, картридж 4д с диоксидом кремния) с градиентом циклогексан/этилацетат от 100/0 до 60/40 в качестве элюентов. В результате получали указанное в заголовке соединение (7,7 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.68 (2Н, 5), 7.17 (1Н, ΐ), 6.71 (1Н, а), 6.62 (1Н, а), 6.19 (1Н, 5), 4.23 (2Н, 5) 3.92 (1Н, 5) 1.36 (6Н, 5) 1.12 (9Н, 5);
УЭЖХ: 0,75 мин, 397 [М+Н]+.
Пример 15.
(5К)-5-Этил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндион
К раствору (2К)-2-амино-М-[6-(спиро[1-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-илокси)-3пиридинил]бутанамида (промежуточное соединение 89, 90 мг) в сухом дихлорметане (15 мл) добавляли ТЕА (0,185 мл, 1,326 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Медленно добавляли раствор трифосгена (35,4 мг, 0,119 ммоль) в сухом дихлорметане (5 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при той же температуре. Реакционную смесь гасили водой (10 мл) и две фазы разделяли. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система В1о1аде) на силикагеле, используя колонку 8МАР 10д и градиент от
- 111 023768 циклогексан/этилацетат 8:2 до циклогексан/этилацетат 1:1 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (65 мг, 0,178 ммоль) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.63 (1Н, 5), 8.14 (1Н, б), 7.85 (1Н, бб), 7.11 (1Н, 5), 7.09 (1Н, ΐ), 6.68 (1Н, бб), 6.52 (1Н, бб), 4.45 (2Н, 5), 4.18-1.24 (1Н, т), 1.76-1.88 (1Н, т), 1.64-1.76 (1Н, т), 1.13-1.18 (2Н, т), 0.96 (3Н, ΐ), 0.89-0.94 (2Н, т);
УЭЖХ-В: 0,78 мин, 366 [М+Н]+.
Пример 16.
5,5-Диметил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндион
К раствору 2-метил-Н’-[6-(спиро[ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-илокси)-3-пиридинил]аланинамида (промежуточное соединение 91, 34 мг) в сухом дихлорметане (6 мл) добавляли ТЕА (0,070 мл, 0,501 ммоль) и смесь охлаждали до 0°С. Медленно добавляли раствор трифосгена (13,38 мг, 0,045 ммоль) в сухом дихлорметане (2 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при той же температуре. Реакционную смесь гасили водой (3 мл) и две фазы разделяли. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 10д 8NΑΡ и градиент от циклогексан/этилацетат 7:3 до циклогексан/этилацетат 3:7 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (23 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.63 (1Н, 5), 8.17 (1Н, б), 7.88 (1Н, б), 7.06-7.12 (2Н, т), 6.67 (1Н, б), 6.51 (1Н, б), 4.45 (2Н, 5), 1.41 (6Н, 5), 1.12-1.17 (2Н, т), 0.88-0.93 (2Н, т);
УЭЖХ: 0,73 мин, 366 [М+Н]+.
Пример 17.
(5К)-5-Этил-5-метил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндион
К раствору N1-[6-(спиро[1-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-илокси)-3-пиридинил]-^изовалинамида (промежуточное соединение 93, 68 мг) и ТЕА (0,134 мл, 0,962 ммоль) в сухом дихлорметане (11 мл) при 0°С по каплям добавляли раствор трифосгена (25,7 мг, 0,087 ммоль) в сухом дихлорметане (3,14 мл) и полученную таким образом смесь перемешивали при той же температуре. Спустя 1 ч добавляли раствор трифосгена (25,7 мг, 0,087 ммоль) в сухом дихлорметане (3,14 мл). Через 3 ч УЭЖХ/МС показала отсутствие исходного материала и наличие целевого соединения. Затем добавляли воду, органическую фазу отделяли, а водную снова экстрагировали дихлорметаном. Органическую фазу промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом с получением 87 мг неочищенного соединения. Его очищали посредством флэш-хроматографии (колонка Вю1аде КР-8П 8NΑΡ 10д, элюент циклогексан/этилацетат от 88/12 до 0/100 в 10 ΟΥ) с получением 47 мг указанного в заголовке соединения в виде белой пены.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.59 (1Н, 5), 8.14 (1Н, б), 7.85 (1Н, бб), 7.08 (2Н, ΐ), 6.66 (1Н, б), 6.50 (1Н, б), 4.44 (2Н, 5), 1.70-1.84 (1Н, т), 1.57-1.70 (1Н, т), 1.38 (3Н, 5), 1.08-1.19 (2Н, т), 0.89-0.95 (2Н, т), 0.85 (3Н, ΐ);
УЭЖХ: 1,04 мин, 380 [М+Н]+.
- 112 023768
Пример 18.
(5К)-5-Этил-3 -(6-{ [(3 8/К)-3 -метил- 1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил]окси)-3 -пиридинил)-2,4имидазолидиндион (диастереоизомерная смесь)
о диастереоизомера
В 50-мл круглодонной колбе (2К)-2-амино-^{6-[(3-метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}бутанамид (промежуточное соединение 102, 24,4 мг) растворяли в дихлорметане (3 мл) с получением бледно-желтого раствора, который охлаждали при 0°С. Добавляли ТЕА (0,049 мл, 0,354 ммоль). По каплям к реакционной смеси при 0°С добавляли раствор трифосгена (9,46 мг, 0,032 ммоль) в 0,7 мл дихлорметана. Спустя 20 мин реакционную смесь гасили 5 мл воды и разбавляли 5 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта, который очищали посредством хроматографии на силикагеле (система ВЮаде 8Р1, колонка §NЛΡ 10д с диоксидом кремния) с градиентом циклогексан/ЕЮАс в качестве элюентов (от 2/1 до 1/2 в 15 С¥; затем от 1/2 для 10 С¥). Собранные фракции давали указанное в заголовке соединение в виде смеси диастереоизомеров 1:1 (20,2 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.27 (1Н, 6), 7.78 (1Н, 66), 7.33 (1Н, ΐ), 7.09 (1Н, 6), 7.06-6.96 (2Н, т), 5.91 (1Н, Ъг. 5.), 5.40-5.29 (1Н, т), 5.20 (1Н, 66), 5.09 (1Н, 6), 4.25-4.18 (1Н, т), 2.08-1.84 (2Н, т), 1.45 (3Н, 6), 1.07 (3Н, ΐ);
УЭЖХчрдс: 0,87 мин, 354 [М+Н]+.
Пример 19 и пример 20.
(5К)-5-Этил-3-{6-[(3-метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндион (диастереоизомеры 1 и 2)
Оба диастереоизомера из примера 18 разделяли посредством препаративной хиральной хроматографии.
Условия хиральной препаративной НРЬС были следующими: колонка: СШга1рак А8-Н (25x2 см), 5 мкм; подвижная фаза: н-гексан/этанол 70:30% об./об.; скорость потока: 15 мл/мин; УФ: 220 нм; приготовление образца: 20 мг растворяли в 1 мл смеси гексан/этанол 1:1 об./об.; концентрация образца: 20 мг/мл; инъецируемый объем: 1000 мкл.
Условия хиральной аналитической хроматографии были следующими: колонка: СШга1рак А8-Н (25x0,46 см); подвижная фаза: н-гексан/этанол 70:30% об./об.; скорость потока: 0,8 мл/мин; ОАЭ: 210340 нм; СО: 240 нм.
С помощью этой хиральной препаративной ВЭЖХ получали:
соединение из примера 19, которое представляло собой диастереоизомер 1 (5К)-5-этил-3-{6-[(3метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4-имидазолидиндиона (7,1 мг);
1Н ЯМР (400 МГц, СОСЪ) δ м.д. 8.27 (6, 1Н), 7.78 (66, 1Н), 7.33 (ΐ, 1Н), 7.09 (6, 1Н), 6.96-7.06 (т, 2Н), 5.91 (Ъг. 5., 1Н), 5.29-5.40 (т, 1Н), 5.20 (66, 1Н), 5.09 (6, 1Н), 4.18-4.25 (т, 1Н), 1.84-2.08 (т, 2Н), 1.45 (6, 3Н), 1.07 (ΐ, 3Н);
УЭЖХ-МСчрдс: 0,87 мин, 354 [М+1]+.
Хиральная аналитическая хроматография ВЭЖХ: Γ.ΐ. = 12,327 мин, 100% 6.е. (диастереоизомерный избыток);
соединение из примера 20, которое представляло собой диастереоизомер 2 (5К)-5-этил-3-{6-[(3метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4-имидазолидиндиона (8,0 мг);
1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;) δ м.д. 8.27 (6, 1Н), 7.78 (66, 1Н), 7.33 (ΐ, 1Н), 7.09 (6, 1Н), 6.96-7.06 (т, 2Н), 5.91 (Ъг. 5., 1Н), 5.29-5.40 (т, 1Н), 5.20 (66, 1Н), 5.09 (6, 1Н), 4.18-4.25 (т, 1Н), 1.84-2.08 (т, 2Н), 1.45 (6, 3Н), 1.07 (ΐ, 3Н);
УЭЖХ-МСчрдс: 0,87 мин, 354 [М+1]+.
Хиральная аналитическая хроматография ВЭЖХ: Γ.ΐ. = 16,579 мин, 100% 6.е.
- 113 023768
Пример 21.
(5К)-5-Этил-3-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндион (смесь диастереоизомеров)
В 50-мл круглодонной колбе (2К)-2-амино-^{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3пиридинил}бутанамид (промежуточное соединение 110, 9 мг) растворяли в дихлорметане (2 мл) с получением бледно-желтого раствора, который охлаждали при 0°С. Добавляли ТЕА (0,017 мл, 0,119 ммоль). К реакционной смеси по каплям при 0°С добавляли 0,5 мл раствора трифосгена (14 мг в 2 мл дихлорметана). Реакционную смесь перемешивали при 0°С. Реакция завершалась через 20 мин. Реакционную смесь упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта в виде бледно-желтого масла, которое очищали с помощью Вю1аде 8Р1 (используя в качестве элюентов градиенты циклогексан/ЕЮАс от 2:1 до 1:2 в 15 СУ, затем 1:2 в 10 СУ; колонка 8NΛР 10д с диоксидом кремния). Собранные фракции давали указанное в заголовке соединение, (5К)-5-этил-3-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]3-пиридинил}-2,4-имидазолидиндион (6,9 мг), в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ м.д. 8.29 (1Н, ά), 7.80 (1Н, άά), 7.35 (1Н, ΐ), 7.11 (1Н, ά), 6.99-7.07 (2Н, т), 5.91 (1Н, Ьг. 5.), 5.25-5.33 (1Н, т), 5.21 (1Н, άά), 5.14 (1Н, ά), 4.21-4.26 (1Н, т), 1.82-2.13 (3Н, т), 1.691.81 (1Н, т), 1.09 (3Н, ΐ), 0.93 (3Н, ΐ);
УЭЖХ-В: 0,78 мин, 368 [М+Н]+.
Пример 22 и пример 23.
(5К)-5-Этил-3-{6-[(3 -этил- 1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси] -3 -пиридинил)-2,4имидазолидиндион (диастереоизомеры 1 и 2)
Оба диастереоизомера из примера 21 разделяли посредством препаративной хиральной хроматографии, получая две фракции.
Условия хиральной препаративной ВЭЖХ были следующими: колонка СЫга1рак АЭ-Н (25x2 см) 5 мкм; подвижная фаза н-гексан/2-пропанол 85:15% об./об.; скорость потока (мл/мин) 15; УФдетектирование 220 нм; приготовление образца: 4 мг растворяли в 2 мл смеси метанол/этанол 50:50% об./об.; концентрация образца 2 мг/мл; инъецируемый объем 2000 мкл (эквивалентно 4 мг).
Условия хиральной аналитической хроматографии были следующими: колонка: СЫга1рак АЭ-Н (25x0,46 см); подвижная фаза: н-гексан/2-пропанол 85:15% об./об.; скорость потока: 0,8 мл/мин; ЭАЭ: 210-340 нм; СП: -.
С помощью этой хиральной препаративной ВЭЖХ получали:
соединение из примера 22, которое представляло собой диастереоизомер 1 (5К)-5-этил-3-{6-[(3этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4-имидазолидиндиона (2,3 мг). 1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ м.д. 8.17 (1Н, ά), 7.89 (1Н, άά), 7.37 (1Н, ΐ), 7.17 (1Н, ά), 7.10 (1Н, ά), 7.01 (1Н, ά), 5.13-5.23 (2Н, т), 5.08 (1Н, ά), 4.25 (1Н, άά), 1.78-2.01 (3Н, т), 1.64-1.78 (1Н, т), 1.05 (3Н, ΐ), 0.81-0.89 (3Н, т).
ΝΉ отсутствовал. УЭЖХ-В: 0,76 мин, 368 [М+1]+.
Хиральная аналитическая хроматография ВЭЖХ: 14,93 мин, 98,6% ά^.
Соединение из примера 23, которое представляло собой диастереоизомер 2 (5К)-5-этил-3-{6-[(3этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4-имидазолидиндиона (2,6 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, МеОЭ) δ м.д. 8.18 (1Н, ά), 7.89 (1Н, άά), 7.38 (1Н, ΐ), 7.17 (1Н, ά), 7.10 (1Н, ά), 7.02 (1Н, ά), 5.13-5.24 (2Н, т), 5.09 (1Н, ά), 4.25 (1Н, άά), 1.79-2.05 (3Н, т), 1.65-1.78 (1Н, т), 1.06 (3Н, ΐ), 0.85 (3Н, ΐ).
Ν4 отсутствовал. УЭЖХ-В: 0,76 мин, 368 [М+1]+.
Хиральная аналитическая хроматография ВЭЖХ: 17,51 мин, 100% ά^.
Пример 24.
5,5-Диметил-3-(6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндион (рацемическая смесь)
- 114 023768
В 50-мл круглодонной колбе
2-метил-Н1 -{6-[(3 -метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5 -ил)окси] -3 пиридинил}аланинамид (промежуточное соединение 121, 72,6 мг) растворяли в дихлорметане (5 мл) с получением бледно-желтого раствора. Добавляли ТЕА (0,142 мл, 1,021 ммоль) и реакционную смесь охлаждали при 0°С. К реакционной смеси, которую перемешивали при 0°С, добавляли раствор трифосгена (27,3 мг, 0,092 ммоль) в 1 мл дихлорметана. Спустя 15 мин к реакционной смеси добавляли дополнительное количество раствора трифосгена (27,3 мг, 0,092 ммоль) в 1 мл дихлорметана. Через 15 мин реакционную смесь упаривали под вакуумом с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью Вю!аде δΡ1 (используя в качестве элюентов градиент циклогексан/Е!ОАс от 3:1 до 1:2 в 10 СУ, затем 1:2 в 5 СУ; колонка δNΑΡ 10д с диоксидом кремния). Собранные фракции давали указанное в заголовке соединение, 5,5-диметил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндион, в виде бесцветного масла (41,6 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ м.д. 8.28 (1Н, Д), 7.75 (1Н, ДД), 7.13 (1Н, !), 6.95 (1Н, Д), 6.74 (1Н, ДД),
6.65 (1Н, ДД), 5.76 (1Н, Ьг. е.), 4.15-4.20 (1Н, т), 3.63-3.74 (1Н, т), 2.72-2.82 (1Н, т), 2.06-2.23 (2Н, т),
1.57 (6Н, е), 1.02 (3Н, Д);
УЭЖХ-В: 0,80 мин, 368 [М+Н]+.
Пример 25 и пример 26.
5,5-Диметил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндион (энантиомер 1 и энантиомер 2)
Оба энантиомера из примера 24 разделяли посредством препаративной хиральной хроматографии.
Условия хиральной препаративной ВЭЖХ были следующими: колонка: СЫга1рак АЭ-Н (25x2 см), 5 мкм; подвижная фаза: н-гексан/этанол 40/60 об./об.; скорость потока: 15 мл/мин; УФ: 220 нм; приготовление образца: 50 мг растворяли в 2 мл этанола, добавляли 1 мл н-гексана; концентрация образца: 16,7 мг/мл; инъецируемый объем: 1000 мкл.
Условия хиральной аналитической хроматографии были следующими: колонка: СЫга1рак АЭ-Н (25x0,46 см); подвижная фаза: н-гексан/этанол 40:60% об./об.; скорость потока: 0,8 мл/мин; ЭАЭ: 210340 нм.
С помощью этой препаративной хиральной хроматографии получали:
соединение из примера 25, которое представляло собой энантиомер 1 5,5-диметил-3-{6-[(3-метил3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси] -3 -пиридинил} -2,4-имидазолидиндиона (16,6 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ м.д. 8.28 (1Н, Д), 7.75 (1Н, ДД), 7.13 (1Н, !), 6.95 (1Н, Д), 6.74 (1Н, ДД),
6.65 (1Н, ДД), 5.76 (1Н, Ьг. е.), 4.15-4.20 (1Н, т), 3.63-3.74 (1Н, т), 2.72-2.82 (1Н, т), 2.06-2.23 (2Н, т),
1.57 (6Н, е), 1.02 (3Н, Д);
УЭЖХ-В: 0,81 мин, 368 [М+Н]+.
Хиральная аналитическая хроматография ВЭЖХ: 12,48 мин, 100,0% е.е. (энантиомерный избыток); соединение из примера 26, которое представляло собой энантиомер 2 5,5-диметил-3-{6-[(3-метил3.4- дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси] -3 -пиридинил} -2,4-имидазолидиндиона (17,0 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ м.д. 8.28 (1Н, Д), 7.75 (1Н, ДД), 7.13 (1Н, !), 6.95 (1Н, Д), 6.74 (1Н, ДД),
6.65 (1Н, ДД), 5.76 (1Н, Ьг. е.), 4.15-4.20 (1Н, т), 3.63-3.74 (1Н, т), 2.72-2.82 (1Н, т), 2.06-2.23 (2Н, т),
1.57 (6Н, е), 1.02 (3Н, Д);
УЭЖХ-В: 0,81 мин, 368 [М+Н]+.
Хиральная аналитическая хроматография ВЭЖХ: 14,68 мин, 98,4% е.е.
Пример 27.
5,5-Диметил-3-{6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3-пиридинил}2.4- имидазолидиндион (рацемическая смесь)
К раствору 2-метил-Н1-{6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3- 115 023768 пиридинил}аланинамида (промежуточное соеди нение 129, 100 мг) в сухом дихлорметане (10 мл) добавляли ТЕА (0,177 мл, 1,273 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. В этот момент медленно добавляли (в течение 30 мин) раствор трифосгена (37,8 мг, 0,127 ммоль) в сухом дихлорметане (2,5 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при той же температуре. Реакционную смесь затем гасили водой и две фазы разделяли. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (система Сотратоп, с градиентом от циклогексан/этилацетат 8:2 до циклогексан/этилацетат 1:1) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (40 мг, 0,103 ммоль).
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.33 (1Н, Д), 7.77 (1Н, ДД), 7.07 (1Н, ΐ), 6.97 (1Н, Д), 6.74 (2Н, ДД),
5.60 (1Н, Ьг. 5.), 4.19 (1Н, Д), 3.72 (1Н, Д), 1.88 (1Н, ДД), 1.59 (6Н, 5), 1.18-1.26 (4Н, т), 0.87 (1Н, ДД);
УЭЖХлрцс: 1,03 мин, 380 [М+Н]+.
Пример 28 и пример 29.
5,5-Диметил-3-{6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3-пиридинил}2,4-имидазолидиндион (энантиомер 1 и энантиомер 2)
Оба энантиомера из примера 27 разделяли с помощью полупрепаративной хиральной δΡС хроматографии. Условия хиральной δΡС были следующими: колонка: СЫга1рак Ю (25x2,1 см); подвижная фаза: этанол +0,1% 1-пропиламин 20%; скорость потока: 45 мл/мин; давление: 120 бар; УФ: 220 нм.
В результате этой полупрепаративной хиральной δΡС хроматографии на 30 мг соединения из примера 27 получали соединение из примера 28, которое представляло собой энантиомер 1 5,5-диметил-3-{6-[(1а-метил1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси] -3 -пиридинил)-2,4-имидазолидиндиона (12 мг)
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13) δ мд 8.33 (1Н, Д), 7.77 (1Н, ДД), 7.07 (1Н, ΐ), 6.97 (1Н, Д), 6.74 (2Н, ДД), 5.81 (1Н, 5), 4.19 (1Н, Д), 3.72 (1Н, Д), 1.88 (1Н, ДД), 1.60 (6Н, 5), 1.16-1.24 (4Н, т), 0.87 (1Н, ДД);
хиральная аналитическая δΡС хроматография 7,51 мин, 100,0% ее;
и соединение из примера 29, которое представляло собой энантиомер 2 5,5-диметил-3-(6-[(1аметил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4-имидазолидиндиона (14 мг)
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13) δ мд 8.33 (1Н, Д), 7.77 (1Н, ДД), 7.07 (1Н, ΐ), 6.97 (1Н, Д), 6.74 (2Н, ДД), 5.87 (1Н, 5), 4.19 (1Н, Д), 3.72 (1Н, Д), 1.88 (1Н, ДД), 1.59 (6Н, 5), 1.19-1.23 (4Н, т), 0.87 (1Н, ДД);
хиральная аналитическая δΡС хроматография 9,40 мин, 100,0% ее.
Пример 30.
(5К)-5-Этил-5-метил-3-[6-(1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан]-5-илокси)-3-пиридинил]-2,4имидазолидиндион
К раствору Ν1 -[6-(1Н-спиро [2-бензопиран-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)-3 -пиридинил] -Όизовалинамида (промежуточное соединение 141, 40 мг) в сухом дихлорметане (8 мл) добавляли ТЕА (0,076 мл, 0,544 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Медленно добавляли раствор трифосгена (14,54 мг, 0,049 ммоль) в сухом дихлорметане (4 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при той же температуре. Реакционную смесь гасили водой (10 мл) и две фазы разделяли. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэшхроматографии (система ВюЕаде) на силикагеле, используя колонку δNΑΡ 10 д и градиент циклогексан/этилацетат от 73 до 37 в качестве элюента.
В результате получали указанное в заголовке соединение (25 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 8.60 (1Н, 5), 8.15 (1Н, Д), 7.87 (1Н, ДД), 7.15 (1Н, ΐ), 7.10 (1Н, Д), 6.95 (1Н, Д), 6.79 (1Н, Д), 4.85 (2Н, 5), 3.54 (2Н, 5), 1.72-1.84 (1Н, т), 1.60-1.72 (1Н, т), 1.39 (3Н, 5), 1.331.38 (2Н, т), 0.87 (3Н, ΐ), 0.62-0.67 (2Н, т);
УЭЖХ-П’ОС: 0,97 мин, 394 [М+Н]+.
- 116 023768
Пример 31.
3-(2-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил)-5,5-диметил-2,4имидазолидиндион
К раствору N’-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-2метилаланинамида (промежуточное соединение 143, 18 мг, 0,053 ммоль) в сухом дихлорметане (ЭСМ) (3 мл) добавляли ТЕА (0,037 мл, 0,263 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Медленно добавляли раствор трифосгена (7,02 мг, 0,024 ммоль) в сухом дихлорметане (1 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч до тех пор, пока температура не достигала к.т. Реакционную смесь гасили водой (3 мл) и две фазы разделяли. Органический слой сушили (№28О4) фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 10д и градиент циклогексан/этилацетат от 8:2 до 1:1 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (13 мг) в виде белого твердого вещества.
’Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.72-8.77 (3Н, т), 7.17 (1Н, ΐ), 6.65-6.75 (2Н, т), 4.23 (2Н, к), 1.43 (6Н, к), 1.25 (6Н, к);
УЭЖХ: 0,67 мин, 369 [М+Н]+.
Пример 32.
(5К)-3 -(2-[(3,3-Диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -5 -пиримидинил)-5-( 1 -метилэтил)-2,4имидазолидиндион
К раствору N’-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-^валинамида (промежуточное соединение 145, 38 мг, 0,107 ммоль) в сухом дихлорметане (ЭСМ) (5 мл) добавляли ТЕА (0,074 мл, 0,533 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Медленно добавляли раствор трифосгена (14,24 мг, 0,048 ммоль) в сухом дихлорметане (ЭСМ) (1 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при той же температуре. Реакционную смесь гасили водой (3 мл) и две фазы разделяли. Органический слой сушили (№28О4), фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 25д и градиент циклогексан/этилацетат от 8:2 до 1:1 в качестве элюента, получая указанное в заголовке соединение (15 мг) в виде белого твердого вещества.
’Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.77 (1Н, Ьг.к), 8.62 (2Н, к), 7.18 (1Н, ΐ), 6.65-6.75 (2Н, т), 4.22 (2Н, к), 4.15-4.20 (1Н, т), 2.10-2.20 (1Н, т), 1.25 (6Н, к), 1.03 (3Н, б), 0.90 (3Н, б);
УЭЖХ: 0,71 мин, 383 [М+Н]+.
Пример 33.
(5К)-3-{6-[(2,2-Диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-этил-2,4имидазолидиндион
((2К)-2-амино-Н-{6-[(2,2-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}бутанамид) (промежуточное соединение 209, 10 мг, 0,029 ммоль) растворяли в сухом дихлорметане (1 мл). Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане. При 0°С добавляли триэтиламин (0,024 мл, 0,176 ммоль). Затем по каплям добавляли 0,5 мл раствора трифосгена в сухом дихлорметане (4,78 мг, 0,016 ммоль в 0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали под аргоном в течение 20 мин при 0°С. Добавляли насыщенный водный раствор NаНСОз (3 мл). Водный слой 4 раза экстрагировали дихлорметаном (4х4 мл). Объединенные органические слои сушили над №ь8О4 и упаривали. Остаток очищали посредством флэшхроматографии (система Сотратои) на силикагеле, используя картридж 4д с диоксидом кремния и градиент циклогексан/этилацетат от 100:0 до 60:40 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (7 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.29 (1Н, б), 7.74 (1Н, бб), 7.14 (1Н, б), 7.00 (1Н, б), 6.61 (1Н, бб), 6.55 (1Н, б), 5.91 (1Н, Ьг.к), 4.20-4.25 (1Н, т), 3.02 (2Н, к), 1.85-2.10 (2Н, т), 1.51 (6Н, к), 1.08 (3Н, ΐ);
- 117 023768
УЭЖХ-В: 1,02 мин, 368 [М+Н]+.
Пример 34.
5,5-Диметил-3-[6-(1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан]-5-илокси)-3-пиридинил]-2,4имидазолидиндион
К раствору 2-метил-Ы1 -[6-(1Н-спиро [2-бензопиран-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)-3 пиридинил]аланинамида (34 мг, 0,096 ммоль) в сухом дихлорметане (Όί'Μ) (5 мл) добавляли ТЕА (0,067 мл, 0,481 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Медленно добавляли раствор трифосгена (12,85 мг, 0,043 ммоль) в сухом дихлорметане (Όί'Μ) (2 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при той же температуре. Реакционную смесь гасили водой (5 мл) и две фазы разделяли. Органический слой сушили (№28О4), фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэшроматографии (система В1о1аде) на силикагеле, используя колонку §NΑΡ 10д и градиент от дихлорметан/метанол 99:1 до дихлорметан/метанол 95:5 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (35 мг) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ^^): δ м.д. 8.63 (1Н, 5), 8.18 (1Н, б), 7.90 (1Н, бб), 7.16 (1Н, ΐ), 7.10 (1Н, б), 6.96 (1Н, бб), 6.80 (1Н, бб), 4.86 (2Н, 5), 3.55 (2Н, 5), 1.43 (6Н, 5), 1.34-1.39 (2Н, т), 0.63-0.68 (2Н, т);
УЭЖХ-В: 0,92 мин, 380 [М+Н]+.
Пример 35.
(5К)-3-[2-(2,3-Дигидроспиро [хромен-4,1'-циклопропан] -5-илокси)-5-пиримидинил] -5-этил-5-метил2,4-имидазолидиндион
К раствору Ν1 -[2-(2,3-дигидроспиро [хромен-4,1'-циклопропан] -5-илокси)-5-пиримидинил] -Όизовалинамида (промежуточное соединение 225, 4 мг, 10,86 мкмоль) в сухом дихлорметане (1 мл) добавляли ТЕА (3,78 мкл, 0,027 ммоль). Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане, затем один раз добавляли раствор трифосгена (1,450 мг, 4,89 мкмоль) в сухом дихлорметане (0,250 мл), затем еще два раза с промежутком в 10 мин. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 40 мин, затем ее гасили водой (5 мл), выдерживая реакционную смесь на ледяной бане. Органический слой отделяли, сушили (№28О4), фильтровали и упаривали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле, используя колонку 15о1и1е 2 д и градиент от циклогексана до циклогексан/этилацетат 1:1 в качестве элюента, получая указанное в заголовке соединение (3 мг) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ м.д. 8.73 (2Н, 5), 7.07 (1Н, ΐ), 6.78 (1Н, бб), 6.52 (1Н, бб), 5.69 (1Н, Ьг.5),
4.25-4.33 (2Н, т), 1.95-2.05 (1Н, т), 1.74-1.86 (3Н, т), 1.54-1.62 (5Н, 5), 1.00 (3Н, ΐ), 0.60-0.67 (2Н, т).
Примеры 36, пример 37 и пример 38.
5,5-Диметил-3-{6-[(4-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндион (рацемическая смесь, энантиомер 1, энантиомер 2)
В 50-мл круглодонной колбе 2-амино-2-метил-Н-[6-(4-метилхроман-5-ил)окси-3пиридил]пропанамид (промежуточное соединение 215, 22,9 мг, 0,064 ммоль) растворяли в дихлорметане (3 мл) с получением бесцветного раствора. Добавляли ТЕА (0,051 мл, 0,369 ммоль) и полученную смесь охлаждали при 0°С. Трифосген (21,87 мг, 0,074 ммоль) растворяли в 1 мл ΩΟΜ и полученный раствор добавляли к реакционной смеси. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 15 мин. К реакционной смеси при 0°С добавляли дополнительное количество ТЕА (0,051 мл, 0,369 ммоль) и трифосгена
- 118 023768 (21,87 мг, 0,074 ммоль), растворенного в 1 мл ΌΓΜ, и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин. Реакционную смесь гасили 5 мл насыщенного раствора бикарбоната натрия и разбавляли 10 мл ΌΟΜ. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органическую фазу упаривали в вакууме и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 10д и градиент циклогексан/этилацетат от 2:1 до 1:2 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение из примера 36 (19,1 мг) в виде бесцветного масла.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 8.30 (1Н, ά), 7.76 (1Н, άά), 7.12 (1Н, ί), 6.97 (1Н, ά), 6.72 (1Н, άά),
6.61 (1Н, άά), 5.74 (1Н, Ьг. 5.), 4.23-4.32 (1Н, т), 4.15-4.22 (1Н, т), 2.97-3.11 (1Н, т), 2.07-2.16 (1Н, т),
1.62-1.70 (1Н, т), 1.57 (6Н, 5), 1.28 (3Н, ά).
Два энантиомера из примера 36 разделяли посредством препаративной хиральной хроматографии.
Условия хиральной препаративной ОТЬС были следующими: колонка: СЫга1сеЮП-Н (25x2 см), 5 мкм; подвижная фаза: н-гексан/2-пропанол 85:15% об./об.; скорость потока: 18 мл/мин; УФ: 220 нм; приготовление образца: 18 мг растворяли в 1,2 мл этанола. Концентрация образца: 15 мг/мл; инъецируемый объем: 600 мкл.
В результате этой препаративной хиральной хроматографии получали: соединение из примера 37: 7,1 мг белого твердого вещества (энантиомер 1); Κί (хиральная препаративная ВЭЖХ) = 21,018 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 8.30 (1Н, ά), 7.76 (1Н, άά), 7.12 (1Н, ί), 6.97 (1Н, ά), 6.72 (1Н, άά),
6.61 (1Н, άά), 5.74 (1Н, Ьг. 5.), 4.23-4.32 (1Н, т), 4.15-4.22 (1Н, т), 2.97-3.11 (1Н, т), 2.07-2.16 (1Н, т),
1.62-1.70 (1Н, т), 1.57 (6Н, 5), 1.28 (3Н, ά).
Соединение из примера 38: 6,9 мг белого твердого вещества (энантиомер 2); Κί (хиральная препаративная ВЭЖХ) = 25,752 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, С1Х'13) δ м.д. 8.30 (1Н, ά), 7.76 (1Н, άά), 7.12 (1Н, ί), 6.97 (1Н, ά), 6.72 (1Н^),
6.61 (1Н^), 5.74 (1Н, Ьг. 5.), 4.23-4.32 (1Н, т), 4.15-4.22 (1Н, т), 2.97-3.11 (1Н, т), 2.07-2.16 (1Н, т),
1.62-1.70 (1Н, т), 1.57 (6Н, 5), 1.28 (3Н, ά).
Примеры 39, 40 и 41.
(5К)-5-Этил-5-метил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндион (диастереоизомерная смесь, диастереоизомер 1, диастереоизомер 2)
В 25-мл круглодонной колбе (2К)-2-амино-2-метил-Н-[6-(3-метилхроман-5-ил)окси-3пиридил]бутанамид (промежуточное соединение 147, 33 мг, 0,088 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл) с получением бесцветного раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С. Добавляли ТЕА (0,061 мл, 0,441 ммоль) и трифосген (26,2 мг, 0,088 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 15 мин. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором бикарбоната натрия (5 мл) и разбавляли 10 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органический слой упаривали в вакууме и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΑΡ 10д и градиент циклогексан/этилацетат от 3:1 до 1:2 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение из примера 39 (26,8 мг) в виде бледно-желтого масла.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 8.26 (1Н, ά), 7.73 (1Н, άά), 7.13 (1Н, ί), 6.95 (1Н, άά), 6.74 (1Н, άά),
6.64 (1Н, άά), 5.95 (1Н, Ьг. 5.), 4.15-4.21 (1Н, т), 3.57-3.75 (1Н, т), 2.70-2.84 (1Н, т), 2.17 (2Н, ά), 1.91-2.04 (1Н, т), 1.70-1.82 (1Н, т), 1.54 (3Н, 5), 1.01 (3Н, ά), 0.97 (3Н, ί).
Два диастереоизомера из примера 39 разделяли с помощью полупрепаративной хиральной 8РС.
Условия полупрепаративной хиральной 8РС были следующими: колонка: СЫгафаскАЭ-Н (25x3 см), 5 мкм; модификатор (метанол + 0,1% изопропиламина) 20%; скорость потока 50 мл/мин; давление 120 бар; температура 38°С; УФ-детектирование 220 нм; петля 750 мкл; инъецирование 13 мг (в метаноле).
В результате этой препаративной хиральной хроматографии получали:
соединение из примера 40: 5,9 мг (диастереоизомер 1); К1 (полупрепаративная хиральная 8РС) = 13,48 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 8.26 (1Н, ά), 7.73 (1Н, άά), 7.13 (1Н, ί), 6.95 (1Н, άά), 6.74 (1Н, άά),
6.64 (1Н, άά), 5.95 (1Н, Ьг. 5.), 4.15- 4.21 (1Н, т), 3.57-3.75 (1Н, т), 2.70-2.84 (1Н, т), 2.17 (2Н, ά), 1.912.04 (1Н, т), 1.70-1.82 (1Н, т), 1.54 (3Н, 5), 1.01 (3Н, ά), 0.97 (3Н, ί).
Соединение из примера 41: 6,6 мг (диастереоизомер 1); К (полупрепаративная хиральная 8РС) = 15,23 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 8.26 (1Н, ά), 7.73 (1Н, άά), 7.13 (1Н, ί), 6.95 (1Н, άά), 6.74 (1Н, άά),
- 119 023768
6.64 (1Н, бб), 5.95 (1Н, Ьг. 5.), 4.15- 4.21 (1Н, т), 3.57-3.75 (1Н, т), 2.70-2.84 (1Н, т), 2.17 (2Н, б), 1.912.04 (1Н, т), 1.70-1.82 (1Н, т), 1.54 (3Н, 5), 1.01 (3Н, б), 0.97 (3Н, ΐ).
Пример 42, пример 43 и пример 44.
(5К)-5-Этил-5-метил-3-[6-( 1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклоргора[с]хромен-7 -илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндион (диастереоизомерная смесь, диастереоизомер 1, диастереоизомер 2)
В 25-мл круглодонной колбе (2К)-Ы-[6-(1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-илокси)-3пиридил]-2-амино-2-метилбутанамид (промежу точное соединение 228, 33 мг, 0,088 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл) с получением бесцветного раствора. Реакционную смесь охлаждали при 0°С. Добавляли ТЕА (0,091 мл, 0,66 ммоль) и трифосген (39 мг, 0,131 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 15 мин. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором бикарбоната натрия (5 мл) и разбавляли 10 мл дихлорметана. Фазы разделяли через картридж фазоразделителя. Органический слой упаривали в вакууме и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 10д и градиент циклогексан/этилацетат от 3:1 до 1:2 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение из примера 42 (42,6 мг) в виде бледножелтого масла.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 8.29 (1Н, б), 7.73 (1Н, бб), 7.07 (1Н, ΐ), 6.97 (1Н, б), 6.72 (2Н, б), 5.77 (1Н, Ьг. 5.), 4.31 (1Н, бб), 3.95 (1Н, бб), 1.92-2.11 (2Н, т), 1.72-1.83 (1Н, т), 1.64-1.73 (1Н, т), 1.54 (3Н, 5), 0.97 (3Н, ΐ), 0.93-1.06 (2Н, т).
Два диастереоизомера из примера 42 разделяли посредством препаративной хиральной хроматографии.
Условия препаративной ВЭЖХ хиральной хроматографии были следующими: колонка: СЫга1раскАЭ-Н (25x3 см), 5 мкм; подвижная фаза: н-гексан/2-пропанол 90/10% об./об.; скорость потока: 40 мл/мин; УФ: 220 нм; приготовление образца: 41 мг растворяли в 4 мл этанола. Концентрация образца: 10,3 мг/мл; инъецируемый объем: 2000 мкл.
В результате этой препаративной хиральной хроматографии получали:
соединение из примера 43: 14,1 мг в виде белого твердого вещества (диастереоизомер 1); К (хиральная препаративная ВЭЖХ) = 17,95 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 8.29 (1Н, б), 7.74 (1Н, бб), 7.07 (1Н, ΐ), 6.97 (1Н, б), 6.72 (2Н, б), 5.51 (1Н, Ьг. 5.), 4.32 (1Н, бб), 3.96 (1Н, бб), 2.01-2.09 (1Н, т), 1.92-2.02 (1Н, т), 1.72-1.82 (1Н, т), 1.641.73 (1Н, т), 1.55 (3Н, 5), 0.99-1.05 (2Н, т), 0.95-1.01 (3Н, т).
Соединение из примера 44: 15 мг в виде белого твердого вещества (диастереоизомер 2); К (хиральная препаративная ВЭЖХ) = 21,99 мин.
1Н ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 8.29 (1Н, б), 7.74 (1Н, бб), 7.07 (1Н, ΐ), 6.97 (1Н, б), 6.72 (2Н, б), 5.51 (1Н, Ьг. 5.), 4.32 (1Н, бб), 3.96 (1Н, бб), 2.01-2.09 (1Н, т), 1.92-2.02 (1Н, т), 1.72-1.82 (1Н, т), 1.641.73 (1Н, т), 1.55 (3Н, 5), 0.99-1.05 (2Н, т), 0.95-1.01 (3Н, т).
Пример 45, пример 46 и пример 47.
3-{6-[(3-Этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,5-диметил-2,4имидазолидиндион (рацемическая смесь, энантиомер 1, энантиомер 2) рацемическая смесь
энантиомер 1
энантиомер 2
В 50-мл круглодонной колбе N1-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2метилаланинамид (промежуточное соединение 149, 17,2 мг, 0,050 ммоль) растворяли в дихлорметане (3 мл) с получением бледно-желтого раствора, который охлаждали при 0°С. Добавляли ТЕА (0,035 мл, 0,252 ммоль) с последующим добавлением по каплям раствора трифосгена (6,43 мг, 0,023 ммоль) в дихлорметане (0,5 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 20 мин. Реакционную смесь упаривали в вакууме и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система ВЮаде) на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 10д и градиент циклогексан/этилацетат от 2:1 до 1:2 в качестве элюентов,
- 120 023768 получая указанное в заголовке соединение из примера 45 (15,3 мг) в виде белого твердого вещества.
’Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ м.д. 8.29 (’Н, ά), 7.80 (’Н, άά), 7.33 (’Н, ΐ), 7.09 (’Н, ά), 6.97- 7.04 (2Н,
т), 5.70 (’Н, Ъг. 5.), 5.23-5.30 (’Н, т), 5.19 (’Н, άά), 5.12 (’Н, ά), 1.85-1.98 (’Н, т), 1.67-1.80 (’Н, т), 1.57 (6Н, 5), 0.86-0.92 (3Н, т).
Два энантиомера из примера 45 разделяли посредством препаративной хиральной хроматографии. Условия хиральной препаративной ВЭЖХ были следующими: колонка: СЫга1раск АО-Н (25x2 см), мкм; подвижная фаза: н-гексан/2-пропанол 85:15% об./об.; скорость потока: 18 мл/мин; УФ: 220 нм; приготовление образца: 15 мг растворяли в 1,0 мл этанола (образец требовал нескольких капель метанола для полной солюбилизации). Концентрация образца: 15 мг/мл; инъецируемый объем: 1000 мкл.
В результате этой препаративной хиральной хроматографии получали:
соединение из примера 46: 5,6 мг (энантиомер 1); (хиральная препаративная ВЭЖХ) = 9,877 мин; ’Н ЯМР (400 МГц, МеС)1)) δ м.д. 8.20 (’Н, ά), 7.92 (’Н, άά), 7.38 (’Н, ΐ), 7.18 (’Н, ά), 7.10 (’Н, ά),
7.02 (’Н, ά), 5.14-5.24 (2Н, т), 5.09 (’Н, ά), 1.81-1.96 (’Н, т), 1.65-1.79 (’Н, т), 1.52 (6Н, 5), 0.86 (3Н, 5); соединение из примера 47: 5,5 мг (энантиомер 2); К (хиральная препаративная ВЭЖХ) = 13,203 мин;
’Н ЯМР (400 МГц, МеС)1)) δ м.д. 8.20 (’Н, ά), 7.92 (’Н, άά), 7.38 (’Н, ΐ), 7.18 (’Н, ά), 7.10 (’Н, ά), 7.02 (’Н, ά), 5.14-5.24 (2Н, т), 5.09 (’Н, ά), 1.81-1.96 (’Н, т), 1.65-1.79 (’Н, т), 1.52 (6Н, 5), 0.86 (3Н, 5).
Пример 48*, пример 49* и пример 50*.
(5К)-5-Этил-5-метил-3-[2-(4-метилхроман-5-ил)оксипиримидин-5-ил]имидазолидин-2,4-дион (диастереоизомерная смесь, диастереоизомер 1, диастереоизомер 2)
К раствору ^-{2-[(4-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-5-пиримидинил}диизовалинамида (промежуточное соединение 219, 78 мг, 0,219 ммоль) в сухом дихлорметане (4 мл) добавляли ТЕА (0,076 мл, 0,547 ммоль). Смесь охлаждали до 0°С, затем по каплям добавляли раствор трифосгена (29,2 мг, 0,098 ммоль) в сухом дихлорметане (1,0 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин при 0°С, затем ее выдерживали на ледяной бане и гасили водой (10 мл). Органический слой собирали и водную фазу экстрагировали ОСМ (2x5 мл). Объединенные органические слои сушили (№28Ο4), фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 25д и градиент циклогексан/этилацетат от 8:2 до 1:1 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (66 мг) в виде белого твердого вещества.
УЭЖХ-1РЦС: 0,99 мин, 383 [М+Н]+.
Два диастереоизомера из примера 48 разделяли с помощью полупрепаративной хиральной 8РС.
Условия полупрепаративной хиральной 8РС были следующими: колонка: СШга1раскАО-Н (25x0,46 см), 5 мкм; модификатор (этанол + 0,1% изопропиламина) 20%; скорость потока 2,5 мл/мин; давление 120 бар; температура 38°С; УФ-детектирование 210-340 нм.
В результате этой препаративной хиральной хроматографии получали:
соединение из примера 49: 24 мг в виде белого твердого вещества (диастереоизомер 1); К (хиральная препаративная 8РС) = 7,583 мин;
’Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ м.д. 8.72 (2Н, 5), 7.17 (’Н, ΐ), 6.79 (’Н, ά), 6.68 (’Н, ά), 5.36 (’Н, Ъг.5),
4.25- 4.35 (’Н, т), 4.14-4.25 (’Н, т), 2.98-3.09 (’Н, т), 2.06-2.20 (’Н, т), 1.95-2.06 (’Н, т), 1.74-1.87 (’Н, т), 1.70 (’Н, ά), 1.59 (3Н, 5), 1.31 (3Н, 5), 1.01 (3Н, ΐ);
соединение из примера 50: 25 мг в виде белого твердого вещества (диастереоизомер 2); К (хиральная препаративная 8РС) = 10,156 мин;
’Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ м.д. 8.72 (2Н, 5), 7.17 (’Н, ΐ), 6.78 (’Н, ά), 6.68 (’Н, ά), 5.38 (’Н, Ъг.5),
4.25- 4.36 (’Н, т), 4.12-4.25 (’Н, т), 2.94-3.12 (’Н, т), 2.05-2.20 (’Н, т), 1.95-2.05 (’Н, т), 1.75-1.87 (’Н, т), 1.63-1.74 (’Н, т), 1.58 (3Н, 5), 1.31 (3Н, 5), 1.01 (3Н, ΐ).
Пример 51*.
(5К)-5-Этил-5-метил-3-[2-(7-метилспиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ил)оксипиримидин-5ил] имидазолидин-2,4 -дион
- 121 023768
К раствору 7-метилспиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ола (промежуточное соединение 156, 18 мг, 0,1 ммоль) в сухом ЭМР (1 мл) добавляли карбонат калия (27,6 мг, 0,2 ммоль) и затем (5Κ)-3-(2хлорпиримидин-5-ил)-5-этил-5-метил-имидазолидин-2,4-дион (промежуточное соединение 165, 20 мг, 0,08 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 80°С. После охлаждения реакционную смесь гасили водой (1 мл), разбавляли рассолом (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку §NΛР 10д и градиент от циклогексан/этилацетат 7:3 до циклогексан/этилацетат 3:7 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (21 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, δ м.д.: 8.69-8.74 (3Н, т), 6.94 (1Н, ά), 6.52 (1Н, ά), 4.44 (2Н, 5), 2.15 (3Н, 5), 1.73-1.83 (1Н, т), 1.63-1.73 (1Н, т), 1.40 (3Н, 5), 1.02-1.06 (2Н, т), 0.85-0.92 (5Н, т).
ЖХ/МС: 0С-3-МШ: Κΐ = 2,007 мин; 395 [М+Н]+.
Следующие соединения получали, используя вышеописанную матодологию, заменяя 7метилспиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ол (промежуточное соединение 152) соответствующим фенолом. Конечные продукты очищали посредством флэш-хроматографии (картридж с диоксидом кремния; смесь циклогексан/ЕЮАс или другая подходящая система растворителей).
При- мер Структура Название Фенол ’Н-ЯМР ЖХ-МС
52* о- >'Х а <5К)-3-Г2-(3,3- диметил изо- хроман-5- ил)оксилири- мидин-5-ил!-5- этил-5-метил- имидазолидин -2.4-дион 3,3-ди- метилизо- хроман-5- ол (Промежуточное соединение 170) ’Н-ЯМР (400 МГц, ϋΜ3Ο-φ) δ м.д.: 8.70-8.75 (ЗН, т), 727 (1Н, 1), 7.06 (2Н, СЮ), 4.75 (2Н, з), 2.42 (2Н, 3),1.631.75 (2Н, т), 1.41 (ЗН, з), 1.18 (6Н, з), 0.88 (ЗН, «) ЖХ/МС: ос_з_ ΜΙΝ: Р?( = 1,894 мин; 397 [М+Н]+.
53* γχχγΥ- (5Ш-5-ЭТИЛ-5- метил -3-)2-(7- метилспи- роИН-изо- бензофуран- З.Т-иикло- бутан)-4-ил)- оксипирими- дин-5-ил1ими- дазолидин- 2,4-дион 7-метилспиро[1 Низобензофуран3,Тциклобутан)-4ол (Промежуточное соединение 176) ’Н-ЯМР (400 МГц, ϋΜδΟ-φ) δ м.д.: 8.77-8.73 (ЗН, т), 7.16 (1Н, ф, 7.07 (1Н, б), 4.98 (2Н, з), 2.49-2.28 (4Н, т), 2.21 (ЗН, з), 1.89-1.62(4Н, т), 1.41 (ЗН, з), 0.93-0.86 (ЗН, т). ЖХ/МС: С!С_3_ ΜΙΝ: = 1,997 мин 409 [Μ+ΗΙ+.
54’ (5Ю-5-ЭТИЛ-5- метил-3 42- [(3,3,7-три- метил-2,3- дигидро-1- бензофуран-4- ил)окси|-5- пиримиди- нил 1-2,4- имидазо- лидиндион 3,3,7-три- метил- 2,3-дигид- ро-1- бензо- фуран-4- ол (Промежуточное соединение 184) ’Н ЯМР (400 МГц, ϋΜδΟ-φ) δ м.д.: 8,70 <1Н, Ьг.з), 8.69 (2Н, з), 6.98 (1Н, ф, 6.55 (1Н, ф, 4.19 (2Н, з), 2.12 (ЗН, з), 1.90-1.50 (1Н, т), 1.38 (ЗН, з), 1.21 (6Н, з), 0.86 (ЗН, 1), УЭЖХ: 1,06 мин, 397 [М+Н]+
55* (5К)-3-(2-Г(2.2- дифтор-7- метил-1,3бензодиоксол- 4-ил)окси1-5- пиримидинил) -5-ЭТИЛ-5- метил-2.4- имидазолидин ДИОН 2.2- дифтор-7метил- 1.3- бензодиоксол4-ол (Промежуточное соединение 197) ’Н-ЯМР (400 МГц, ϋΜ5Ο-φ): δ м.д. 8.78 (2Н, з), 8.74 (1Н, Ьг.з), 7,18-7.13 (2Н, т), 2.33 (ЗН, з). 1.84-1.75 (1Н, т), 1.711.62 (1Н, т), 1.40 (ЗН, з), 0.88 (ЗН, (. УЭЖХ: 1,11 мин, 407 [М+Н)+,
- 122 023768
1 56* (5К)-3-{2-[(2,2- дифтор-1.3' бензодиоксол- 4-ил)окси1-5- пиримиди- нил)-5-этил-5- метил-2,4- имидазоли- диндион 2,2- дифтор- 1,3- бензоди- оксол-4- ол (Промежуточное соединение 198) ХЙ-ЯМР (400 МГц, ϋΜ5Ο-66): б м.д. 8.80 (2Н, 5), 8.75 (1Н, ε), 7.39 (1Н, ф, 7.31 (1Н, 1), 7.27 <1Н, ф, 1.84-1.75 (1Н, т), 1.72-1.62 (ЗН, т), 0.88 (ЗН, 1). УЭЖХ: 1,04 мин, 393 [М+Н]+
57* (5КЕ5-ЭТИЛ-5- метил-3-{2- 1(2,4,4- триметил-4Н- 3,1-бензоксазин-5- ил)окси1-5- ПИРИМИДИ- нил}-2,4- имидазо- лидиндион 2,4,4триметил4(7-3,1бензоксазин-5-ол (Промежуточное соединение 202) ΎΪ ЯМР (400 МГц, СМ8О-6-): δ м.д. 8.73 (2Н, 8), 8.71 (1Н, 5), 7.30-7.25 (1Н, т), 6.96 (2Н, ббб), 2.01 (ЗН, 8), 1,82-1.58 (2Н, т), 1.51 (6Н, 8), 1.38 (ЗН, 8), 0,85 (ЗН, 1).
Пример 58*.
5,5-Диметил-3 - [2-(7-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)оксипиримидин-5 ил] имидазолидин-2,4 -дион
К раствору 7-метилспиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ола (промежуточное соединение 156, 18 мг, 0,1 ммоль) в сухом ΏΜΕ (1 мл) добавляли карбонат калия (27,6 мг, 0,2 ммоль) и затем 3-(2хлорпиримидин-5-ил)-5,5-диметил-имидазолидин-2,4-дион (промежуточное соединение 166, 20 мг, 0,083 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 80°С. После охлаждения реакционную смесь гасили водой (1 мл), разбавляли рассолом (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система В1о1аде) на силикагеле, сипользуя колонку 8ΝΑΡ 10д и градиент от циклогексан/этилацетат 7:3 до циклогексан/этилацетат 3:7 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (18 мг) в виде светло-бежевого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ80-ά6) δ м.д.: 8.74 (1Н, δ), 8.70 (2Н, δ), 6.94 (1Н, ά), 6.52 (1Н, ά), 4.44 (2Н, δ), 2.14 (3Н, δ), 1.42 (6Н, δ), 1.01-1.06 (2Н, ш), 0.87-0.92 (2Н, ш).
ЖХ/МС: рС-3-ΜΕΝ: Κΐ = 1,946 мин; 380 [М+Н]+.
Следующие соединения получали, используя вышеописанную методологию, заменяя 7метилспиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4-ол (промежуточное соединение 152) соответствующим фенолом. Конечные продукты очищали посредством флэш-хроматографии (картридж с диоксидом кремния; смесь циклогексан/ΕΐΟΑс или другая подходящая система растворителей)._
59* Ц 3-Г2-(3,3-ди- метилизохро- ман-5-ил (окси- пиримидин-5ил1-5,5диметилимидазол идин2,4-дион 3,3-ди- метилизо- хроман-5- ол (Промежуточное соединение 170} ’Н-ЯМР (400 МГц, ЭМЗОб6) δ м.д.: 8.75 (1Н, 8), 8.71 (1Н, 8), 7.28 (1Н, 1), 7.06 (1Н, бф, 4.75 (2Н, а), 2.41 (2Н, 8), 1.44 <6Н, 8), 1.18 (6Н, з). ЖХ/МС: ОС 3 ΜΙΝ: Р1 = 1,822 мин; 383 [М+Н]+.
60* 5,5-диметил-З- Г2-(7-метил- спиро[1Н-изо- бензофуран- З.Г-ЦИКПО- бУтан1-4-ил(- ОКСИПИРИМИДИН -5-ил1имидазо- ЛИДИН-2.4-ДИОН 7-метил- спиро[1Н- изобен- зофуран- 3,Г- цикло- бутан]-4- ол (Проме- жуточное соедине- ние176) 1Н-ЯМР (400 МГц, ОМ5Об6) δ м.д.: 8.79-8 73 (ЗН, т), 7.17 (1Н, ф, 7.07 (1Н, б), 4.98 (2Н, 8), 2.49-2.28 (4Н, т), 2.21 (ЗН, 8), 1.891.67 (2Н, т), 1.43 (6Н, 8). ЖХ/МС: ОС 3 ΜΙΝ: Р( = 1,936 мин 395 [М+Н]+.
- 123 023768
Пример 61*.
(5Ю-5-Этил-3-[2-(7-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)оксипиримидин-5 ил] имидазолидин-2,4 -дион
К раствору (2Κ)-2-амино-N-[2-(7-метилспиро[2Н-бензофуран-3,1'-циклопропан]-4ил)оксипиримидин-5-ил]бутанамида (промежуточное соедине ние 164, 24 мг, 0,068 ммоль) в сухом ЭСМ (3 мл) добавляли ТЕА (0,028 мл, 0,2 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Медленно добавляли раствор трифосгена (15 мг, 0,05 ммоль) в сухом ЭСМ (1,5 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при той же температуре. Реакционную смесь гасили водой (10 мл) и две фазы разделяли. Органический слой сушили (№28О4), фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэшхроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку §NΛΡ 10д и градиент от циклогексан/этилацетат 75:25 до циклогексан/этилацетат 25:75 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (11 мг) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ЭМ5О-б6) δ м.д.: 8.75 (1Н, δ), 8.68 (2Н, δ), 6.94 (1Н, б), 6.52 (1Н, б), 4.44 (2Н, δ), 4.20-4.25 (1Н, ш), 2.15 (3Н, δ), 1.77-1.88 (1Н, ш), 1.66-1.76 (1Н, ш), 1.02-1.06 (2Н, ш), 0.96 (3Н, ΐ), 0.87-0.92 (2Н, ш).
ЖХ/МС: рС-3-МР№ Κΐ= 1,955 мин; 381 [М+Н]+.
Пример 62*.
^ЮЛ-ЭтилЛ-Л-р-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)окси-3 пиридил] имидазолидин-2,4 -дион
К раствору (2Κ)-2-амино-N-[6-(7-метилспиро[2Н-бензофуран-3,1-циклопропан]-4-ил)окси-3пиридил]бутанамида (промежуточное соединение 160, 40 мг, 0,11 ммоль) в сухом ЭСМ (5 мл) добавляли ТЕА (0,042 мл, 0,3 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Медленно добавляли раствор трифосгена (23,7 мг, 0,08 ммоль) в сухом ЭСМ (3 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при той же температуре. Реакционную смесь гасили водой (10 мл) и две фазы разделяли. Органический слой сушили (№28О4), фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя колонку §NΛΡ 10д и градиент от циклогексан/этилацетат 75:25 до циклогексан/этилацетат 25:75 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (22 мг) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ЭМ5О-б6) δ м.д.: 8.63 (1Н, δ), 8.13 (1Н, б), 7.84 (1Н, бб), 7.07 (1Н, б), 6.94 (1Н, б), 6.44 (1Н, б), 4.46 (2Н, δ), 4.19-4.24 (1Н, ш), 2.15 (3Н, δ), 1.77-1.88 (1Н, ш), 1.65-1.75 (1Н, ш), 1.10-1.14 (2Н, ш), 0.96 (3Н, ΐ), 0.87-0.92 (2Н, ш).
ЖХ/МС: рС-3-М1№ Κΐ = 2,025 мин; 380 [М+Н]+.
Пример 63*.
(5Κ)-5-этил-3-{6[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндион
(2Κ)-2-Амино-N-{6-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}бутанамид (промежуточное соединение 188, 300 мг, 0,84 ммоль) растворяли в этилацетате (6 мл). Добавляли триэтиламин (0,47 мл, 3,36 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Медленно добавляли раствор трифосгена (100 мг, 0,34 ммоль) в этилацетате (6 мл). В конце добавления смесь обрабатывали водным насыщенным раствором NаΗСОз и две фазы разделяли. Органический слой промывали рассолом, сушили над №28О4 и упаривали досуха с получением воскообразного твердого вещества. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле, используя градиент от циклогексан/этилацетат 70:30 до циклогексан/этилацетат 50:50 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (166 мг) в виде белой пены.
- 124 023768 ’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-66): δ м.д.8.61 (1Н, Ьг.5), 8.12 (1Н, б), 7.82 (1Н, бб), 7.10 (1Н, б), 6.98 (1Н, б), 6.47 (1Н, б), 4.21 (2Н, 5), 4.18 (1Н, Ьг.5), 2.13 (3Н, 5), 1.86-176 (1Н, т), 1.75-1.64 (1Н, т), 1.25 (6Н, 5), 0.95 (3Н, ΐ).
’3С ЯМР (200 МГц, ΌΜ8Ο-66): δ м.д. 173.2, 162.5, 158.6, 155.4, 148.2, 145.2, 138.5, 130.0, 126.1, 124.3, 115.7, 114.4, 110.6, 83.6, 57.5, 42.2, 26.0, 24.4, 14.4, 8.8.
Пример 64*.
(5К)-5-Этил-3-{2-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-2,4имидазолидиндион
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({2-[(3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5пиримидинил}амино)карбонил]пропил}карбамат (промежуточное соединение 191, 213 мг, 0,47 ммоль) растворяли в ΗΟ 5-6н. в изопропаноле (1 мл) и полученный раствор нагревали до 35°С в течение 30 мин. Реакционную смесь затем концентрировали под вакуумом, остаток разбавляли этилацетатом (50 мл) и водным 5%-ным раствором Κ2ίΌ3, (30 мл). Две фазы разделяли и органический слой промывали водным насыщенным раствором хлорида аммония (30 мл), сушили над Nа28Ο4 и концентрировали под вакуумом. Полученный неочищенный продукт растворяли в этилацетате (10 мл) и добавляли триэтиламин (0,23 мл, 1,64 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0-5°С и по каплям в течение 10 мин добавляли раствор трифосгена (55 мг, 0,185 ммоль) в этилацетате (5 мл). Реакционную смесь гасили водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 мл). Органический слой промывали рассолом, сушили над Νη28Ο2 и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле, используя смесь циклогексан/этилацетат 50:50 в качестве элюента, получая указанное в заголовке соединение (161 мг) в виде белого твердого вещества.
’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-66): δ м.д. 8.72 (1Н, 5), 8.66 (2Н, 5), 7.03-6.93 (1Н, т), 6.55 (1Н, б), 4.18 (2Н, 5), 2.12 (3Н, 5), 1.87-1.61 (2Н, т), 1.2 (6Н, 5), 1.15 (1Н, ΐ), 0.94 (3Н, ΐ).
МС-2 (ИЭР): 383 [М+Н].
Пример 65*.
(5К)-5-Этил-5-метил-3-[6-(7-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)окси-3 пиридил] имидазолидин-2,4 -дион
К раствору трифосгена (30 мг, 0,1 ммоль) в сухом Όί’Μ (1 мл) при 0°С в атмосфере азота добавляли ИГГЕА (0,175 мл, 1,0 ммоль) с последующим добавлением (добавляли медленно) раствора 6-(7метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)оксипиридин-3 -амина (промежуточное соединение 158, 27 мг, 0,1 ммоль) в сухом Όί'Μ (2 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при той же температуре. После этого добавляли раствор гидрохлорида метил-(К)-2-амино-2-метил-бутирата (33 мг, 0,2 ммоль) в сухом Όί'Μ (2 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°С. Реакционную смесь гасили 1 М водным раствором ΗΟ (5 мл), разбавляли ΌΟΜ (10 мл) и две фазы разделяли. Органический слой промывали рассолом (10 мл), сушили (Nа28Ο4), фильтровали и упаривали, получая мочевинное промежуточное соединение в виде желтой пены.
Мочевину растворяли в МеОН (5 мл), добавляли NаΟΜе (10 мг) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (20 мл) и разбавляли этилацетатом (40 мл). Две фазы разделяли и органический слой сушили (Nа28Ο4), фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система В1о1аде) на силикагеле, используя колонку 8ΝΆΡ 10д и градиент от циклогексан/этилацетат 75:25 до циклогексан/этилацетат 25:75 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (29 мг) в виде белого твердого вещества.
’Н ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Ο-66) δ м.д.: 8.60 (1Н, 5), 8.15 (1Н, б), 7.85 (1Н, бб), 7.06 (1Н, б), 6.94 (1Н, б), 6.44 (1Н, б), 4.46 (2Н, 5), 2.15 (3Н, 5), 1.73-1.83 (1Н, т), 1.62-1.72 (1Н, т), 1.40 (3Н, 5), 1.10-1.14 (2Н, т), 0.84-0.92 (5Н, т).
ЖХ/МС: ОС-3-ΜΙΝ: Κΐ = 2,076 мин; 394 [М+Н]+.
Следующие соединения получали, используя вышеописанную методологию, заменяя 6-(7метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)оксипиридин-3 -амин (промежуточное соединение 154) соответствующим анилином. Конечные продукты очищали посредством флэш-хроматографии (кар- 125 023768 тридж с диоксидом кремния; смесь циклогексан/ЕЮАс или другая подходящая система растворителей).
66* /А ч (5Ю-3-Г6- (3,3-ди- метилизо- хро ман-5- ил)окси-3- пиридил]-5- этил-5-ме- тил и мида- ЗОЛ ИДИН* 2,4-дион 6-(3,3-диметилизохроман-5ил)оксипиридин3-амин (Промежуточное соединение 172) 1 Н-ЯМР (400 МГц, ϋΜ3Ο-ά6) δ м.д.: 8.11 (1Н, ά), 7,86 (1Н, бб), 7.25 (1Н, 1), 7.13 (1Н, ά), 7.00 (2Н, άά), 4.75 (2Н, з), 2.44 (2Н, з), 1.61-1.84 (2Н, т), 1.40 (ЗН, з), 1.18 (6Н, з) 0.87 (ЗН, 1). ЖХ/МС: ОС 3 ΜΙΝ: Р1 = 1,962 мин; 396 [М+Н]+.
67’ ΰ-,χτν- (5Ю-3-Г6- НЗ.З-ДИ- этил-1 Низобензо- {Ьуран-4- ил)окси1-3- пиридил!-5- этил-5-ме- тилимида- ЗОЛ ИДИН* 2,4-дион 6-[(3,3-диэтил-1 Низобензофуран4-ил)окси]пиридин-3амин (Промежуточное соединение 180) ’Н-ЯМР (400 МГц, ϋΜ3Ο-ά6) δ м.д.: 8.61 (1Н, з), 8.16 (1Н, ά), 7.89-7.87 (1Н, άά), 7.35 (1Н, 1), 7.18 (1Н, ά), 7.14 (1Н, ά), 7.10 (1Н, ά), 5.08 (2Н, з), 1.85-1.61 (6Н. т), 1.40 (ЗН, з), 0.88 (ЗН, 1), 0.67 _ ЖХ/МС: ОС 3 ΜΙΝ; Р1 2,067 мин, 410 [М+Н1+.
Пример 68*.
(5К)-5-Этил-5-метил-3-[6-[(2,4,4-триметил-3,1-бензоксазин-5-ил)окси]-3-пиридил]имидазолидин2,4-дион
К раствору (2К)-2-амино-2-метил-Щ6-[(2,4,4-триметил-3,1-бензоксазин-5-ил)окси]-3пиридил]бутанамида (промежуточное соединение 205, 143 мг, 0,37 ммоль) и ТЕА (0,21 мл) в этилацетате (2,5 мл) при 0°С по каплям в течение 10 мин добавляли трифосген (44 мг, 0,15 ммоль), растворенный в этилацетате (2,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 40 мин. Реакционную смесь разбавляли водой (5 мл) и этилацетатом (10 мл). Фазы разделяли и водную фазу реэкстрагировали этилацетатом (2x10 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (15 мл), сушили над Ν32δΟ4, фильтровали и концентрировали и остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле, используя этилацетат в качестве элюента, получая указанное в заголовке соединение (115 мг) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά6): δ м.д.8.58 (1Н, к), 8.15 (1Н, ά), 7.87 (1Н, άά), 7.24 (1Н, ΐ), 7.17 (1Н, ά), 6.89 (1Н, ά), 6.84 (1Н, ά), 2.01 (3Н, к), 1.81-1.70 (1Н, т), 1.69-1.59 (1Н, т), 1.54 (6Н, к), 1.37 (3Н, к), 0.84 (3Н, ΐ).
Пример 69*.
(5К)-3-{6-[(3,3-Диметил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-этил-5-метил-2,4имидазолидиндион
3,3-Диметил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ол (промежуточное соединение 193, 68 мг, 0,4 ммоль) и (5К)-3-(6-хлорпиридин-3-ил)-5-этил-5-метилимидазолидин-2,4-дион (промежуточное соединение 194, 126 мг, 0,48 ммоль) растворяли в ΌΜΕ (1,0 мл) и добавляли ЮСЮз (143 мг, 1,03 ммоль). Полученную суспензию нагревали до 130°С посредством микроволнового облучения в течение 40 мин. Реакционную смесь разбавляли водой (25 мл) и этилацетатом (25 мл) и затем две фазы разделяли. Органический слой промывали водой и рассолом, сушили над №2δΟ4 и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (система Вю1аде) на силикагеле, используя смесь циклогексан/этилацетат 50:50 в качестве элюента, получая указанное в заголовке соединение (70 мг) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά6): δ м.д. 8.57 (1Н, к), 8.12 (1Н, ά), 7.86 (1Н, άά), 7.30 (1Н, ΐ), 7.22-7.03 (2Н, т), 6.96 (1Н, ά), 4.99 (2Н, к), 1.80-1.57 (2Н, т), 1.37 (6Н, к), 1.36 (3Н, к), 0.84 (3Н, к).
МС-2 (ИЭР): 382 [М+Н]+.
Пример 70*.
- 126 023768
5,5-диметил-3-[6-(7-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)окси-3 пиридил] имидазолидин-2,4 -дион
К раствору трифосгена (30 мг, 0,1 ммоль) в сухом ЭСМ (1 мл) при 0°С в атмосфере азота добавляли Э1РЕА (0,175 мл, 1,0 ммоль) с последующим добавлением (добавляли медленно) раствора 6-(7метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ил)оксипиридин-3 -амина (промежуточное соединение 158, 27 мг, 0,1 ммоль) в сухом ЭСМ (2 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при той же температуре. После этого добавляли раствор гидрохлорида метил-2-амино-2-метилпропаноата (30 мг, 0,2 ммоль) в сухом ЭСМ (2 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°С. Реакционную смесь гасили 1 М водным раствором НС1 (5 мл), разбавляли ЭСМ (10 мл) и две фазы разделяли. Органический слой промывали рассолом (10 мл), сушили (№28О4), фильтровали и упаривали, получая мочевинное промежуточное соединение в виде желтой пены.
Мочевину растворяли в МеОН (5 мл), добавляли №ОМе (10 мг, 0,19 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили водным насыщенным раствором хлорида аммония (20 мл) и разбавляли этилацетатом (40 мл). Две фазы разделяли и органический слой сушили (№28О4), фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэшхроматографии (система Вю!аде) на силикагеле, используя колонку 8МАР 10д и градиент от циклогексан/этилацетат 75:25 до циклогексан/этилацетат 25:75 в качестве элюентов, получая указанное в заголовке соединение (23 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ПМ8О-а6) δ м.д.: 8.62 (1Н, 5), 8.14 (1Н, а), 7.86 (1Н, аа), 7.05 (1Н, а), 6.92 (1Н, а), 6.43 (1Н, а), 4.44 (2Н, 5), 2.14 (3Н, 5), 1.40 (6Н, 5), 1.08-1.13 (2Н, т), 0.96 (3Н, ΐ), 0.85-0.90 (2Н, т).
ЖХ/МС: ЦС-3-М1№ Κΐ = 2,016 мин; 380 [М+Н]+.
Следующие референсные промежуточные соединения и примеры описывают получение соединений для использования в анализах.
Референсное промежуточное соединение Κ1.
4-Метил-3 -(метилокси)анилин
О
К раствору 1-метил-2-(метилокси)-4-нитробензола (2,5 г, 14,96 ммоль) в метаноле (50 мл) добавляли никель Рэнея (Νί-Капеу) (приблизительно 2 г) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре в атмосфере Н2 (1 атм (101,325 КПа)). Катализатор отфильтровывали и остаток очищали с помощью 8СХ картриджа (50 д) с получением указанного в заголовке соединения (1,86 г) в виде бесцветного масла.
Ή ЯМР (400 МГц, ПМ8О-а6) δ м.д.: 6.73 (1Н, а), 6.19 (1Н, а), 6.05 (1Н, аа), 4.85 (2Н, 5), 3.68 (3Н, 5), 1.97 (3Н, 5);
УЭЖХ-В: 0,62 мин, 138 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение Κ2.
4-Метил-3 -(метилокси)фенол он
К суспензии 4-метил-3-(метилокси)анилина (референсное промежуточное соединение Κ1, 1,86 г) в смеси вода (100 мл)/Н28О4 (30 мл, 563 ммоль) при 0°С медленно добавляли раствор нитрита натрия (1,029 г, 14,91 ммоль) в воде (10 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°С. Реакционную смесь медленно добавляли к раствору 98%-ной Н28О4 (20 мл) в воде (80 мл), предварительно нагретому до 90°С и перемешивали при этой температуре в течение 1 ч. После охлаждения смесь экстрагировали ЕьО (2x200 мл), органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения (1,86 г) в виде красного/коричневого масла.
Ή ЯМР (400 МГц, ПМ8О-а6) δ м.д.: 9.14 (1Н, Ьг.5), 6.87 (1Н, а), 6.35 (1Н, а), 6.24 (1Н, аа), 3.71 (3Н, 5), 2.01 (3Н, 5);
УЭЖХ-В: 0,63 мин, 137 [М-Н].
- 127 023768
Референсное промежуточное соединение Κ3.
2-{[4-метил-3-(метилокси)фенил]окси}-5-нитропиридин
К раствору 4-метил-3-(метилокси)фенола (Референсное промежуточное соединение Κ2, 400 мг) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (15 мл) добавляли карбонат калия (1200 мг, 8,69 ммоль) и затем 2-хлор-5нитропиридин (551 мг, 3,47 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 115°С. Реакционную смесь гасили водой (10 мл), разбавляли рассолом (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 раза по 30 мл). Органический слой промывали охлажденным на льду рассолом (2 раза по 30 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (система Вю1аде, колонка 8NΛР 100 д) с градиентом циклогексан/этилацетат от 10/0 до 8/2. В результате упаривания получали указанное в заголовке соединение в виде светло-желтого масла (570 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, ПМ8О-с16) δ м.д.: 2.16 (3Н, 5), 3.76 (3Н, 5), 6.68-6.73 (1Н, т), 6.83-6.86 (1Н, т), 7.24-7.18 (2Н, т), 8.64-8.58 (1Н, т), 9.08-9.02 (1Н, т);
УЭЖХ-В: 0,93 мин, 261 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение Κ4.
6-{ [4-Метил-3 -(метилокси)фенил]окси} -3 -пиридинамин
К раствору 2-{[4-метил-3-(метилокси)фенил]окси}-5-нитропиридина (Референсное промежуточное соединение К3, 568 мг) в тетрагидрофуране (25 мл)/вода (12,50 мл) добавляли железо (609 мг, 10,91 ммоль) и затем хлорид аммония (584 мг, 10,91 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 8 ч при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывали и раствор разбавляли водным насыщенным раствором №-ьСО3, (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (2 раза по 40 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (система Вю1аде с колонкой 8NΛР 50д), используя в качестве элюента градиент циклогексан/этилацетат от 8/2 до 1/1. В результате упаривания получали указанное в заголовке соединение в виде светло-желтого масла (465 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, ПМ8О-с16) δ м.д.: 7.54 (1Н, ά), 7.06 (2Н, άάά), 6.72 (1Н, ά), 6.59 (1Н, ά), 6.38 (1Н, άά), 5.07 (2Н, 5), 3.73 (3Н, 5), 2.10 (3Н, 5);
УЭЖХ-В: 0,72 мин, 231 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение Κ5.
1,1 -диметилэтил((1К)-1-{ [(6-{ [4-метил-3 -(метилокси)фенил]окси} -3 -пиридинил)амино]карбонил}пропил)карбамат
К раствору (2К)-2-({[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановой кислоты (106 мг, 0,521 ммоль) в сухом Ν,Ν-диметилформамиде (2 мл) добавляли Э1РЕА (0,152 мл, 0,869 ммоль) и затем ТВТИ (181 мг, 0,565 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре. Затем добавляли 6-{[4-метил-3-(метилокси)фенил]окси}-3-пиридинамин (Референсное промежуточное соединение Κ4, 100 мг) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при той же температуре. Реакционную смесь гасили водой (1 мл), разбавляли рассолом (1 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 раза по 5 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (система Вю1аде, колонка 8NΛР 10д), используя в качестве элюента градиент циклогексан/этилацетат от 100/0 до 70/30, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (180 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, 1)\18О-с16) δ м.д.: 10.13 (1Н, Ьг. 5), 8.31-8.37 (1Н, т), 8.02-8.10 (1Н, т), 7.09-7.16 (1Н, т), 7.01-7.08 (1Н, т), 6.96 (1Н, ά), 6.70 (1Н, ά), 6.51-6.58 (1Н, т), 3.91-4.03 (1Н, т), 3.75 (3Н, 5), 2.13 (3Н, 5), 1.50-1.76 (2Н, т), 1.39 (9Н, 5), 0.90 (3Н, ΐ);
УЭЖХ-В: 0,91 мин, 416 [М+Н]+.
- 128 023768
Референсное промежуточное соединение К6.
(2К)-2-Амино-^(6-{[4-метил-3 -(метилокси)фенил]окси}-3-пиридинил)бутанамид
К раствору 1,1-диметилэтил-((1К)-1-{ [(6-{ [4-метил-3-(метилокси)фенил]окси}-3-пиридинил)амино]карбонил}пропил)карбамата (Референсное Промежу точное соединение К5, 175 мг) в сухом дихлорметане (ЭСМ) (6 мл) медленно добавляли ТРА (2 мл, 26,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Растворитель и избыток ТРА выпаривали и остаток очищали с помощью картриджа 8СХ (5 д) с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества (122 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ЭМ80-66) δ м.д.: 8.36-8.42 (1Н, т), 8.11 (1Н, 66), 7.12 (1Н, 6), 6.95 (1Н, 6), 6.676.73 (1Н, т), 6.54 (1Н, 66), 3.75 (3Н, 5), 3.24 (1Н, т), 2.13 (3Н, 5), 1.59-1.73 (1Н, т), 1.42-1.56 (1Н, т), 0.90 (3Н, ΐ);
УЭЖХ-В: 0,74 мин, 316[М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение К7.
1,1 -Диметилэтил((1К)-1-метил-1-{ [(6-{ [4-метил-3 -(метилокси)фенил]окси}-3 -пиридинил)амино] карбонил} пропил)карбамат
К раствору ^{[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}-О-изовалина (94 мг, 0,434 ммоль) в сухом Ν,Νдиметилформамиде (1 мл) добавляли ЭРЕА (0,114 мл, 0,651 ммоль) и НАТИ (165 мг, 0,434 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Затем добавляли 6-{[4метил-3-(метилокси)фенил]окси}-3-пиридинамин (Референсное промежуточное соединение К4, 50 мг). После 1 ч перемешивания при комнатной температуре смесь нагревали до 50°С и перемешивали при этой температуре в течение 4 ч, затем ее охлаждали снова до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи при этой температуре. Смесь гасили рассолом (2 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x2 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле, используя колонку 8NΑΡ 10д и градиент циклогексан/этилацетат от 100/0 до 60/40 в качестве элюентов (система В|о1аде), с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (65 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ80-66): δ м.д. 9.60 (1Н, Ъг 5), 9.10 (1Н, Ъг 5), 8.31 (1Н, Ъг. 5.), 8.03 (1Н, Ъг 5), 7.12 (1Н, 6), 6.93 (1Н, 6), 6.69 (1Н, 6), 6.53 (1Н, 66), 3.74 (3Н, 5), 2.11 (3Н, 5), 1.72-1.86 (1Н, т), 1.60-1.72 (1Н, т), 1.41 (9Н, 5), 1.33 (3Н, 5), 0.78 (3Н, ΐ);
УЭЖХ: 0,87 мин, 430 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение К8.
Х-(6-{[4-Метил-3-(метилокси)фенил]окси}-3-пиридинил)-О-изовалинамид
К раствору 1,1 -диметилэтил-((1К)-1-метил-1-{[(6-{ [4-метил-3 -(метилокси)фенил]окси}-3 пиридинил)амино]карбонил}пропил)карбамата (Референсное промежуточное соединение К7, 65 мг) в сухом дихлорметане (3 мл), охлажденному до 0°С, по каплям добавляли ТРА (0,700 мл, 9,08 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором NаНС03 (20 мл), добавлявшимся при 0°С, и экстрагировали дихлорметаном (3x7 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (44 мг).
- 129 023768
Референсное промежуточное соединение К9.
3-(1,1 -Диметилэтил)-4-гидроксибензальдегид
2- (1,1-Диметилэтил)фенол (10 г, 66,67 ммоль) растворяли в 40 мл МеОН и по каплям добавляли №ЮН (40 г, 1 моль), растворенный в 40 мл воды. Затем при 60°С добавляли 40 мл СНС13 (в течение 1 ч). Реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 3 ч. После ее охлаждения до к.т., смесь охлаждали до 0°С и добавляли 4 М НС1 до тех пор, пока раствор не достигал рН 5-6. Смесь экстрагировали ЭСМ (три раза) и собранную органическую фазу сушили над №-ь80+ фильтровали и упаривали. Неочищенный продукт загружали на силикагелевую колонку и элюировали градиентом циклогексан/ЕЮАс (от 100:0 до 80:20 циклогексан/ЕЮАс, затем плато при 80:20), получая 766 мг указанного в заголовке соединения.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 10.62 (1Н, 5), 9.79 (1Н, 5), 7.73 (1Н, Ьг. 5), 7.67-7.57 (1Н, т), 7.01-6.90 (1Н, т), 1.38 (9Н, 5);
УЭЖХчрцс: 0,97 мин, 177 [М-Н]-.
Референсное промежуточное соединение К10.
3- (1,1 -Диметилэтил)-4-гидроксибензонитрил
3- (1,1-Диметилэтил)-4-гидроксибензальдегид (референсное промежуточное соединение К9, 550 мг) и гидрохлорид гидроксиламина (322 мг, 4,63 ммоль) в течение 1 ч перемешивали в 8,0 мл уксусной кислоты при кипячении с обратным холодильником. После охлаждения до 0°С смесь вливали в Еь0 и промывали один раз водой и один раз №ЮН (5%-ный водный раствор). Собранные водные фазы экстрагировали ЕьО (два раза) и объединенные органические фазы сушили над №-ь80+ фильтровали, упаривали и растирали с пентаном, получая 540 мг указанного в заголовке соединения.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 10.92 (1Н, Ьг. 5), 7.53-7.45 (2Н, т), 6.92 (1Н, б), 1.34 (9Н, 5);
УЭЖХчрцс: 1,03 мин, 174 [М-Н]-.
Референсное промежуточное соединение К11.
4- Г идрокси-2-йодбензонитрил
К раствору 2-фтор-4-йодбензонитрила (5,0 г, 20,24 ммоль) в сухом ацетонитриле (100 мл) добавляли триметилсиланолат калия (1,18 г) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток растворяли в этилацетате (100 мл) и добавляли водный буферный раствор с рН 3 до рН приблизительно 5. Две фазы разделяли и органический слой сушили (№2804), фильтровали и упаривали с получением указанного в заголовке соединениея (4,90 г) в виде коричневого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 10.92 (1Н, 5), 7.65 (1Н, б), 7.39 (1Н, б), 6.93 (1Н, бб);
УЭЖХчрцс: 0,81 мин, 244 [М-Н]-.
Референсное промежуточное соединение К12.
4-Гидрокси-2-[(трифторметил)окси]бензонитрил
Параллельно проводили две реакции (А и В) и затем две реакционные смеси объединяли для последующей обработки и очистки.
Реакция А: к раствору 4-метокси-2-(трифторметокси)бензонитрила (50 мг, 0,23 ммоль) в 1,2дихлорэтане (1 мл) по каплям добавляли 1 М раствор ВВг3 в ЭСМ (0,69 мл, 0,69 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали под микроволновым облучением пять раз (установочные параметры:
- 130 023768
Т= 100°С, ! = 1 ч), добавляя дополнительно каждый раз 1 М раствор ВВг3 в ЭСМ (1 мл). Общее количество использованного 1 М раствора ВВг3 в ЭСМ составляло 4,69 мл.
Реакция В: во флакон по каплям добавляли 4-метокси-2-(трифторметокси)бензонитрил (750 мг, 3,45 ммоль), 1,2-дихлорэтан (5 мл) и затем 1 М раствор ВВг3 в ЭСМ (10,36 мл, 10,36 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали под микроволновым облучением в течение 1 ч (установочная Т=100°С). К реакционной смеси добавляли дополнительно 1 М раствор ВВг3 в ЭСМ (1 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали под микроволновым облучением три раза (установочные параметры: Т=100°С, ! = 1,5 ч), каждый раз добавляя дополнительно 1 М раствор ВВг3 в ЭСМ (0,8 мл). Общее количество использованного 1 М раствора ВВг3 в ЭСМ составляло 13,76 мл.
Две реакционные смеси А и В добавляли по каплям к насыщенному водному раствору NаНСО3 и рН доводили до 7 путем добавления твердого КаНСО3. Две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали ЭСМ (1х) и Е!ОАс (2х). Объединенные органические фазы сушили и упаривали досуха с получением указанного в заголовке соединения в смеси с непрореагировавшим исходным материалом (1,48 г) в виде черного масла. Эту смесь использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
1Н ЯМР (400 МГц, Ι)\1δί)-ί16): δ м.д. 11.35 (1Н, е), 7.82 (1Н, Д), 6.91-6.98 (2Н, т);
УЭЖХчрцс: 0,88 мин, 204 [М+Н]+, 202 [М-Н].
Референсное промежуточное соединение К13.
4-[(5-Нитро-2-пиридинил)окси]-3 -(трифторметил)бензонитрил
Смесь 2-хлор-5-нитропиридина (70 мг, 0,44 ммоль), 4-гидрокси-3-(трифторметил)бензонитрила (91 мг, 0,49 ммоль), К2СО3 (92 мг, 0,66 ммоль) в ЭМР (2 мл) перемешивали при 50°С в течение ночи. Добавляли воду (4 мл) и образовывался осадок. Твердое вещество отфильтровывали и его растирали с МеОН с получением указанного в заголовке соединения (85 мг) в виде коричневого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ м.д. 8.99 (1Н, Д), 8.60 (1Н, ДД), 8.07 (1Н, е), 7.95 (1Н, Д), 7.48 (1Н, Д), 7.19-7.32 (1Н, т);
УЭЖХчрцс: 1,1 мин, 310 [М+Н]+.
Следующие соединения получали, используя вышеописанную методологию, подвергая взаимодействию соответствующий галогеннитроарил, такой как 2-хлор-5-нитропиридин, 2-хлор-5нитропиримидин, 1-фтор-4-нитробензол и тому подобное, с соответствующим образом замещенным фенолом при подходящей температуре, возможно под микроволновым облучением. Ряд конечных продуктов очищали посредством флэш-хроматографии (диоксид кремния; смесь циклогексан/Е!ОАс или другая подходящая система растворителей).
К14 Вг З-бром-4- Г(5-итро· 2-пири- динил)- окси1бен- зонитрил 2-хлор5-нитр οπή ридин З-бром-4гидроксибензонитрил 1 Н-ЯМР (400 МГц, СОСЬ): δ м.д. 9.01 (1 Н, Ьг. з), 8.65 8.56 (1 Н, т), 8.02 (1Н, 5), 7.75 (1 Н, Д), 7.38 (1Н, Д), 7.25 (1Н,Д) 1,08 мин, 320 [М]+, Вг обра- зец
К15 МСО^Х0, З-ИЛ-ди- метил эти лН-Н5- нитро-2- пириди- нил)ок- си1бензо- нитрил 2-хлор- 5-нитро- пиридин 3-(1,1-ди- метил- этил)-4- гидрокси- бензо- нитрил (Рефе- ренсное Промежу- точное соединение В10) Ή ЯМР (400 МГц, ϋΜ5Οф): δ м.д. 9.09 - 9.04 (1Н, т), 8.74 - 8.64 (1Н, гл), 7.87 (1Н, Ьг. 3), 7.83 7.77 (1Н, т), 7.44 (1Н, Д), 7.33 (1Н, Д), 1.32 (9Н, з) 1,23 мин, 298 [М+Н]*
- 131 023768
К16 хо. \ ' “О, 2-ЙОД-4- Г(5-нит- ро-2- пириди- нил)ок- си!бен- зонитрил 2-хлор- 5-нитро- пиридин 4-гидрок- си-2-йод- бензо- нитрил (Рефе- ренсное Промежу- точное соединение 11) ’Н ЯМР (400 мгц, омзоб6): δ м.д. 9.08 (1Н, б), 8.70 (1Н, бб), 8.03 (1Н, б), 7.98 (1Н, б), 7.52 (1Н, бб), 7.41 (1Н,б) 1,10 мин
К17 р 4-Г(5-нит- ρο-2-пи- 2-хлор- 5-нитро- пиридин 4-гидрок- си-2- [(трифтор метил)ок- си]бензо- нитрил (Рефере- нсное Промежу- точное соединение 12) ’Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д, 9.02 - 9.11 (1Н, т), 8.55 8.65 (1Н, т), 7.82 (1 Н, б), 7.25 - 7.35 (2 Н, т), 7.20 (1 Н, б) 1,14 мин, 326 [М+Н1+
ридинил) окси1-2- [(три- фторме- тил)ок- си1бензо- нитрил
Референсное промежуточное соединение К18.
2-Циклопропил-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]бензонитрил
Приготовление раствора органометаллического соединения: к раствору 0,5 М ΖπΟ2 в ТНР (9 мл) медленно при к.т. добавляли раствор 0,5 М циклопропилбромида магния в ТНР (9 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин при к.т.
К раствору 2-йод-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]бензонитрила (референсное промежуточное соединение К16, 550 мг) и Рб(1Ви3Р)2 (76 мг, 0,15 ммоль), нагретому до 60°С, добавляли 6 мл предварительно приготовленного раствора органометаллического соединения и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 60°С. Добавляли еще 6 мл раствора органометаллического соединения и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительного 1 ч при 60°С. Добавляли еще 6 мл раствора органометаллического соединения и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительного 1 ч при 60°С. После охлаждения реакционную смесь гасили водой (1 мл), разбавляли водным насыщенным раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2х50 мл). Органический слой промывали рассолом (2х20 мл), сушили (№28О4), фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле (8NΑΡ 50 д), элюируя градиентом н-гексан/этилацетат от 100:0 до 80:20, получая указанное в заголовке соединение (400 мг) в виде белого твердого вещества.
’Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 9.06 (1Н, б), 8.67 (1Н, бб), 7.88 (1Н, б), 7.35 (1Н, б), 7.23 (1Н, бб), 7.01 (1Н, бб), 2.17-2.27 (1Н, т), 1.10-1.19 (2Н, т), 0.82-0.90 (2Н, т);
УЭЖХ-1рцс: 1,13 мин, 282 [М+Н]+.
Следующие соединения получали, используя вышеописанную методологию, заменяя циклопропилбромид магния соответствующим реагентом Гриньяра (Опдиагб), с образованием цинкорганического реагента.
К19 эхо. -<Х <' - МС' Ν ) 2-этил-4-И5нитро-2-пири- динил)окси1- бензонитрил этил- бромид магния ’Н-ЯМР (400 МГц, СЭСЬ): δ м.д. 9Ό6 (1Н, б) 8.56 (1Н, бб) 7.72 (1Н, б) 7.18 (1Н, б) 7.10 7.17 (2Н, т) 2,95 (2Н, ц) 1.35 (ЗН, 1) 1,12 мин, 270 [М+Н]+
Референсное промежуточное соединение К20.
-Циклопропил-4-[(5 -нитро -2-пиридинил)окси] бензонитрил
Во флаконе 3-бром-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]бензонитрил (референсное промежуточное соединение К14, 800 мг) растворяли в 16,0 мл толуола. Добавляли циклопропилбороновую кислоту (1073,8 мг, 12,5 ммоль), затем Рб(ОАс)2 (56,1 мг, 0,25 ммоль) и (Су)3Р (70,0 мг 0,25 ммоль). Затем добавляли
- 132 023768 водный раствор (8,0 мл воды) К3РО4 (1855,0 мг, 8,75 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение ночи. После охлаждения до к.т. смесь распределяли между рассолом и ЕЮАс и отделенную водную фазу экстрагировали ЕЮАс (три раза). Собранную органичекую фазу сушили над №2δΟ4, фильтровали и упаривали. Полученный неочищенный продукт загружали на силикагелевую колонку и элюировали градиентом циклогексан/ЕЮАс (от 100.0 до 80:20 циклогексан/ЕЮАс), получая 634 мг указанного в заголовке соединения.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 9.04 (1Н, Ьг. 5), 8.69 (1Н, ДД), 7.75 (1Н, Д), 7.58 (1Н, 5), 7.41 (2Н, ΐ), 1.90-1.80 (1Н, т), 0.90-0.73 (4Н, т);
УЭЖХчрцс: 1,12 мин, 282 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение К21. 2-(1-Метилэтенил)-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]бензонитрил
К раствору 2-йод-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]бензонитрила (референсное промежуточное соединение К16, 5,0 г) в ΌΜΡ (50 мл) добавляли К3РО4 (5,77 г, 27,24 ммоль), ΡД(ίΒи3)2 (696 мг, 1,36 ммоль) и 4,4,5,5-тетраметил-2-(1-метилэтенил)-1,3,2-диоксаборолан (3,84 мл, 20,43 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при 110°С. После охлаждения реакционную смесь разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x100 мл). Органический слой промывали охлажденным на льду рассолом (3x50 мл), сушили (№2δΟ4), фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэшхроматографии на силикагеле (δNΑΡ 100 д), элюируя градиентом от 100:0 до 80:20 циклогексан/этилацетат, с получением указанного в заголовке соединения (1,8 г) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ДД: δ м.д. 9.08 (1Н, Д), 8.69 (1Н, ДД), 7.97 (1Н, Д), 7.47 (1Н, Д), 7.40 (2Н, Д), 5.46 (1Н, 5), 5.32 (1Н, 5), 2.16 (3Н, 5);
УЭЖХчрцс: 1,14 мин, 282 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение К22.
2-[(1-Метилэтил)окси]-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]бензонитрил
Во флаконе 2,4-дигидроксибензонитрил (300 мг, 2,2 ммоль), 2-хлор-5-нитропиридин (351,96 мг, 2,22 ммоль) и Κ20Ό3 (920 мг, 6,62 ммоль) растворяли в ΌΜΡ (5 мл). Реакционную смесь нагревали в течение 1 ч под микроволновым облучением (установочная температура: 110°С). Реакционную смесь разбавляли ΞρΟ и водой, подкисляли водной 1н. НС1 до рН 2, фазы разделяли и органическую фазу сушили над №2δΟ4. Твердое вещество отфильтровывали и растворитель удаляли, получая неочищенный 2гидрокси-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]бензонитрил (664 мг) в виде коричневого твердого вещества. К раствору этого неочищенного продукта в сухом ΌΜΡ (5 мл) добавляли карбонат калия (460 мг, 3,33 ммоль) и изопропилбромид (313 мкл, 3,33 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. Реакционную смесь разбавляли рассолом (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Органический слой сушили (№2δΟ4), фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством флэшхроматографии на силикагеле (δNΑΡ 25 д), элюируя градиентом от 100:0 до 75:25 циклогексан/этилацетат, получая указанное в заголовке соединение (260 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 9.06 (1Н, Д), 8.56 (1Н, ДД), 7.61-7.67 (1Н, т), 7.15 (1Н, Д), 6.76-6.84 (2Н, т), 4.56-4.68 (1Н, т), 1.44 (6Н, Д).
Референсное промежуточное соединение К23.
4-[(5-Амино-2-пиридинил)окси]-3-(трифторметил)бензонитрил
К раствору 4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]-3-(трифторметил)бензонитрила (референсное промежуточное соединение К13, 83 мг) в смеси ТНР (3 мл)/вода (1,5 мл) при комнатной температуре добавляли железо (75 мг, 1,34 ммоль) и МН4С1 (72 мг, 1,34 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Смесь фильтровали через небольшую набивку целита, промывая ЕЮАс и водой. К профильтрованной смеси добавляли водный насыщенный раствор NаΗСΟ3 и две фазы разделяли. Водную фазу экстрагировали ЕЮАс и объединенные органические фазы сушили и упаривали досуха. Неочищенный продукт очищали посредством флэш-хроматографии (система Сотратоп, картридж 2x12 д δί, гра- 133 023768 диент от 100:0 до 70:30 циклогексан/ЕЮАс) с получением указанного в заголовке соединения (72 мг).
’Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;): δ м.д. 7.97 (’Н, 5), 7.69-7.79 (2Н, т), 7.23 (’Н, ά), 7.16 (’Н, άά), 6.93 (’Н, ά);
УЭЖХчрцс: 0,91 мин, 280 [М+Н]+.
Следующие соединения получали, используя вышеописанную методологию, заменяя 4-[(5-нитро-2пиридинил)окси]-3-(трифторметил)бензонитрил (референсное промежуточное соединение К13) соответствующим нитро-производным. Ряд конечных продуктов очищали посредством флэш-хроматографии (диоксид кремния или ΝΉ картридж; циклогексан/ЕЮАс или другая подходящая система растворителей). В ряде случаев перед обычной флэш-хроматографией проводили очистку посредством 8СХ (МеОН и затем 2 М раствор аммиака в МеОН).
Р24 4-[(5-ами- но-2-пири- динил)окс и1-3-цик- лопропил- бензо- нитрил 3- циклопропил- 4- [(5-нитро-2пиридинил)окси]бензонитрил (Референсное Промежуточное соединение Р20) Ή ЯМР (400 МГц, ОМЗО-66): δ м.д. 7.61 - 7.52 (2Н, т), 7.42 (1Н, 8), 7.16 - 7.09 (1Н, т), 6.89 (2Н, 1), 5.19 (2Н, Ьг. з), 2.14 - 2.04 (1Н, т), 0.97 - 0.89 (2Н, т), 0.82 0.75 (2Н, т) 0,86 мин, 252 [М+Н]+
Р25 „чух, 4-Г(5-ами- но-2-пиои- динил)ок- си!-3-(1,1- ди метил- этил Шензонитрил 3-(1,1 -диметилэтил )-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]бензонитрил (Референсное Промежуточное соединение Р15) ’Н ЯМР (400 МГц, ОМЗО-сЦ: б м.д. 7.72 (1Н, Ьг. 5), 7.65 - 7.57 (2Н, т), 7.16 - 7.08 (1Н, т), 6.89 6.78 (2Н, т), 5.28 - 5.19 (2Н, т), 1.39 (9Н, 5) 1,02 мин, 268 [М+Н]*
Р26 ,σΐχ Т ми. 4-Г(5-ами- но-2-пири- динил)ок- СИ1-241- метил- этенил)- бензонит- рил 2-(1 -метил этенил)-4-[(5-нитро-2-пиридинил)окси]бензонитрил (Референсное Промежуточное соединение Р21) ’Н-ЯМР (400 МГц, ϋΜδΟ-φ): б м.д. 7.79 (1Н, б), 7.62 (1Н, б), 7.12 (1Н, бб), 7.05 (1Н, б), 6.98 (1Н, бб), 6.89 (1Н, б), 5.40 (1Н, з), 5.28 (2Н, Ьг. 8.), 5.23 (1Н, з), 2.12 (ЗН, 8) 0,90 мин, 252 [М+Н]+
Р27 ,ох 4-Г(5-ами- но-2-пиои- динил)ок- си1-2-этил- бензонит- рил 2-этил-4-[(5нитро-2-пиридинил)окси]бензонитрил (Референсное Промежуточное соединение К19) ’Н-ЯМР (400 МГц, СОС13): б м.д. 7.77 (1Н, б) 7.58 (1Н, б) 7.15 (1Н, бб) 7.00 (1Н, б) 6.92 (1Н, бб) 6.86 (1Н, б) 3 62 (2Н, Ьг. з.) 2.86 (2Н, ф 1.29 (ЗН, 1) 0,86 мин, 240 [М+Н)+
Р28 [| У ч ) •Ж. „У Ν, X·, X т Υ 4-[(5-ами- но-2-пири- динил)ок- СИ1-2-Ц1- метил- 2-[(1-метилэтил )окси]-4[(5-нитро-2пиридинил)окси]бензонитрил ’Н-ЯМР (400 МГц, ϋΜδΟ-бб): б м д 7.63 (1Н, ф, 7.61 (1Н, ф, 7.12 (1Н, бф, 6.88 (1Н, б), 0,89 мин, 270 [М+Н]+
этил)окси1 бензо- нитрил (Референсное Промежуточное соединение Р22) 6.84 (1Н, ф, 6 51 (1Н, бб), 5.29 (2Н, Ьг. з ), 4.66 - 4.77 (1Н, т), 1.29 (6Н, Ф
К29 Χ'Τ'°'γΧ ..<< V *·-· ΝΗ, Ν - Ρ 1 ? 4° ρ 4-Г(5-ами- но-2-пири- динил)ок- си!-2-Г(три- Фторме- тил)окси1- бензонит- рил 4-[(5-нитро-2пиридинил)окси]-2-[(трифторметил)окси]бензонитрил (Референсное Промежуточное соединение Р16) ’Н ЯМР (400 МГц, СОС!3): δ м.д. 7.77 (1Н, ф, 7.66 (1Н, б), 7.17 (1 Н, бб), 7.11 (1 Н, з), 7.06 (1 Н, бб), 6.89 (1 Н, б) 0,94 мин, 296 [М+Н]+
- 134 023768
Референсное промежуточное соединение Κ30.
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({6-[(4-циано-2-циклопропилфенил)окси]-3-пиридинил}амино)карбонил]пропил}карбамат
(2К)-2-({[(1,1-Диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановую кислоту (121,4 мг, 0,60 ммоль) растворяли в Ν,Ν-диметилформамиде (1 мл). Добавляли Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,126 мл, 0,72 ммоль) и гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)-Ы,^№,№-тетраметилурония (227,2 мг, 0,60 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 30 мин. 4-[(5-Амино-2-пиридинил)окси]-3циклопропилбензонитрил (референсное промежуточное соединение Κ24, 100 мг) растворяли в 1,0 мл ΌΜΡ и полученный раствор добавляли к реакционной смеси. Реакционную смесь перемешивали и нагревали при 60°С в течение 2 ч. После охлаждения до к.т. реакционную смесь упаривали под вакуумом и полученный неочищенный продукт загружали на силикагелевую колонку и элюировали градиентом циклогексан/ЕЮАс (от 100:0 до 50:50 циклогексан/ЕЮАс, затем плато при 50:50), получая 133 мг указанного в заголовке соединения.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 8.42 (1Н, Ьг. 5), 8.20-8.10 (2Н, т), 7.51-7.44 (1Н, т), 7.32-7.23 (1Н, т), 7.08 (1Н, б), 7.03-6.95 (1Н, т), 4.95 (1Н, Ьг. 5), 4.16-4.05 (1Н, т), 2.07-1.95 (2Н, т), 1.77-1.68 (1Н, т), 1.47 (9Н, 5), 1.04 (3Н, ΐ), 0.95-0.88 (2Н, т), 0.71-0.64 (2Н, т);
УЭ'ЖХчрцс: 1,14 мин, 437 [М+Н]+.
Следующие соединения получали, используя вышеописанную методологию, заменяя (2Κ)-2-({[(1,1диметилэтил)окси]карбонил}амино)бутановую кислоту соответствующей аминокислотой, а 4-[(5-амино2-пиридинил)окси]-3-циклопропилбензонитрил (промежуточное соединение 165) соответствующим анилином. Реакционную смесь выдерживали при подходящей температуре в диапазоне от к.т. до высокой температуры. Конечные продукты очищали посредством флэш-хроматографии (диоксид кремния; смесь циклогексан/ЕЮАс или другая подходящая система растворителей).
- 135 023768
Е21 /=4 Н } 0 0¥- 0 п N0 1.1-диме- тилэтил* «1К)-1-Д(6- СГ4-циаио-2- ΙϋδϋΜθ; тилэтил)- Фенил1ок- си)-3-пири- динил)- аминсйкар- бон ил)пропил)- карбамат (2К)-2- ({[(1,1-ди- метил- этил)ок- си]карбо- нил]ами- но)бута- новая кислота 4-[(5-амино-2-пиридинил)окси)-3-(1,1диметилэтил)-бензонитрил (Референсное Промежуточное сое- динение К25> Ή ЯМР (400 МГц, ОМЗО-аУ 5 м д 10 20 (1Н, Ьг з), 8 38 (1Н, Ьг з), 8 20 - 8 11 <1Н, гл), 7 77 (1Н, Ьг з), 7 70 - 7 64 (1Н, т), 7 15 (1Н, Й), 7 05 (2Н, Й), 4 04 - 3 91 (1Н, т), 1 77 - 1 55 (2Н, т), 1 41 - 1 34 (18Н, т), 0 93 - 0 87 (ЗН, т) 1,25 мин, 453 [М+Н]*
К32 РГ'С N хЧ „.ХЖуОА- 0 1 1.1-диме- ТИЛЭТИЛ «1Κ)-1-{[(6- П4-циано-3- (1-метил- этенил)- Фенил1ок- си)-3-пири- динил)- амино)- карбонил)п рол ил)карбамат (2К)-2- ({[(1.1- диметил- этил)ок- си]карбо- нил}ами- но)бута- новая кислота 4-[(5-амино-2-пиридинил)окси]2-(1-метилэтенил)бензонитрил (Референсное Промежуточное соединение Р26) Ή-ЯМР (400 МГц, ϋΜ3Ο-φ) δ мд 1021 (1 Н, Ьг з), 8 39 - 8 47 (1 Н, т), 8 17 (1 Н, йй), 7 86 (1 Н, й), 7 24 (1 Н, й), 7 17 (2 Н, й), 7 01 - 7 10 (1 Н, т), 5 43 (1 Н, з), 5 27 (1 Н, з), 3 95 - 405 (1 Н, т), 2 14 (3 Н, 3), 1 57 - 1,16 мин, 437 [М+Н)+
- 136 023768
1 79 (2 Н, т), 1 40 (9 Н. 5), 0 92 (3 Н, 1)
кзз у’а. Лук 0 1,1-диме- тил-этил «1К)-1-П{6- П4-циано-3- этилфенилУ окси1-3- пиридинил! аминоУкар- бонилУпро- лилУкарба- мат (2К)-2«[(1,1-диметилэтил)окси]карбонил}аминоубутановая кислота 4-[(5-амино2-пиридинил)окси]-2этилбензонитрил (Референсное Промежуточное соединение Р27) “’Н-ЯМР (400 МГц, βΜ5Ο-φ) δ м д 10 25 (1Н, а) 8 43 <1Н, ф 8 16 (1Н, άά) 7 80 (1Н, ά) 7 20 (1Н, ά) 7 15 (1Н, ά) 7 05 - 7 11 (2Н, т) 3 94 - 4 02 (1Н, т) 2 79 (2Н, Д) 1 53 - 1 76 (2Н, т) 1 39 (9Н, 5) 1 21 (ЗН, 1) 0 91 (ЗН, 0
Р34 Ж-А, Υ °лГчтЭ 1,1-диме- ТИЛ-ЭТИЛ Н1Ю-1-Ш6- «4-циано-З- Г(1-метилэтилУоксиУ- ФенилУок- сиУ-З-пири- ДИ-НИЛ1- аминоУкар- бонилУ- ПРОПИлГ карбамат (2Р)-2- ({[(1,1-ДИ- метил- этил)окси]- карбонил}- амино)- бутановая кислота 4-[(5-амино2-пиридинил)окси]-2[(1-метилэтил )окси]бензонитрил (Референсное Промежуточное соединение Р.28) ’Н-ЯМР (400 МГц, ϋΜ8Ο-ά6) 6 м д 10 24 <1Н, Ьг в), 842 <1Н, ά), 8 16 (1Н. άά), 7 70 (1Н, ά), 7 15 (1Н, ά), 7 09 (1Н, ά), 7 02 (1Н, ά), 6 72 (1Н, άά), 4 70 481 <1Н, т), 3 94 4 02 (1Н, т), 1 54 1 77 (2Н, т), 1 39 (9Н, 5), 1 30 (6Н, ά), 0 91 (ЗН, () 1,15 мин, 455 [М+Н]+
К35 ✓кА ,' Э' ίί ф ,Уу <: чн Ν'·^ Ρ 1 , р-у° гГ:-·^-· Ρ ΗΝ^0 У 1.1-диме- ТИЛ-ЭТИЛ- П1ЯУ-1-НГ6- «4-цнано-З- Птрифтор- метилУоксиУ ФенилУок- сиУ-З-пири- динил1ами- ноУ карбо- нилУпро- пил1карба- мат (2Р)-2({[(1.1димет илэтил уокси]карбонил} аминоубутановая кислота 4-[(5-амино2-пиридинил)окси]-2[(трифторметил)окси] бензонитрил (Референсное Промежуточное соединение Р29) Ή ЯМР (400 МГц, сосы δ мд 8 64 (1Н, Ьг 5 ), 8 26 (1Н, ά), 8 15 8 23 (1Н, т), 7 70 (1Н, ά), 7 20 (1Н, ®), 7 12 718 (1Н, т), 7 02 (1Н, ά), 4 93 - 5 06 (1Н, пп), 410 - 4 21 (1Н, т), 1 93 - 2 12 (1Н, т), 1 67 - 1 83 (1Н, т), 1 49 (9Н, 5), 1 06 (ЗН, 1) 1,18 мин, 481 [М+Н]+ 479 [ΜΗ]-
- 137 023768
Референсное промежуточное соединение К36.
1,1 - Диметилэтил ((1К)-1-{ [(6-{ [4-циано-3 -(1 -метилэтил)фенил]окси}-3 -пиридинил)амино] карбонил} пропил)карбамат
К раствору 1,1-диметилэтил((1К)-1-{ [(6-{ [4-циано-3-(1-метилэтенил)фенил]окси}-3-пиридинил)амино]карбонил}пропил)карбамата (референсное промежуточное соединение К32, 73 мг) в МеОН (10 мл) добавляли Рб 10% мас./мас. на активированном углероде (14 мг) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин в атмосфере Н2 (Р=1 атм (101,325 кПа)). Катализатор отфильтровывали и растворитель удаляли при пониженном давлении Остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле (8NΑР 10 д), элюируя градиентом от 75:25 до 40:60 циклогексан/этилацетат, получая указанное в заголовке соединение (62 мг) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 10.24 (1Н, Ьг. 5.), 8.42 (1Н, б), 8.16 (1Н, бб), 7.78 (1Н, б), 7.24 (1Н, б), 7.15 (1Н, б), 7.07-7.11 (1Н, т), 7.05 (1Н, бб), 3.95-4.02 (1Н, т), 3.19-3.27 (1Н, т), 1.57-1.76 (2Н, т), 1.39 (9Н, 5), 1.26 (6Н, б), 0.91 (3Н, ΐ);
УЭЖХчрцс: 1,20 мин, 439 [М+Н]+.
Референсное промежуточное соединение К37.
(2К)-2-Амино-Л-{6-[(4-циано-2-циклопропилфенил)окси]-3-пиридинил}бутанамид
1,1-Диметилэтил-{(1К)-1-[({6-[(4-циано-2-циклопропилфенил)окси]-3-пиридинил}амино)карбонил]пропил}карбамат (Референсное промежуточное соединение К30, 133 мг) растворяли в ЭСМ (6 мл) и при 0°С медленно добавляли ТРА (3,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 2 ч. После удаления летучих веществ полученный неочищенный продукт загружали на картридж 8СХ и элюировали МеОН и затем 2 М ΝΉ3 в МеОН, получая 102 мг указанного в заголовке соединения.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 9.68 (1Н, Ьг. 5), 8.32-8.18 (2Н, т), 7.51-7.43 (1Н, т), 7.25-7.31 (1Н, т), 7.08 (1Н, б), 6.99 (1Н, б), 3.59-3.51 (1Н, т), 2.06-1.95 (2Н, т), 1.73-1.63 (1Н, т), 1.03 (3Н, ΐ), 0.95-0.89 (2Н, т), 0.74-0.63 (2Н, т);
УЭЖХчрцс: 0,68 мин, 337 [М+Н]+.
Следующие соединения получали, используя вышеописанную методологию, заменяя 1,1диметилэтил-{ (1К)-1-[({6-[(4-циано-2-циклопропилфенил)окси] -3 -пиридинил}амино)карбонил] пропил}карбамат (референсное промежуточное соединение К30) соответствующим Ν-ВОС-защищенным амином. Конечные продукты очищали посредством 8СХ (МеОН и затем 2 М раствор аммиака в МеОН) и фракции, элюировавшиеся аммиаком, содержавшие продукт, концентрировали с получением свободного основания. Альтернативно, после удаления летучих веществ неочищенный продукт переносили в соответствующий органический растворитель, добавляли насыщенный водный раствор NаНС03, две фазы разделяли и органический слой сушили, фильтровали и упаривали, получая конечное соединение в виде свободного основания.
- 138 023768
Р38 “η гуй· ^ЛоЛУ 0 <2/?)-2-ами- ΗΟ-ΛΗ6-Π4- циано-2- П.Ч-ди- метилэтил) Фенил1ок- сиУ-З-пири- динил)бу- танамид 1,1-диметил- этил-((1Р)-1{[(6-{[4-циано2-(1,1-диметилэтил)фенил]окси}-3пиридинил)амино]карбонил}пропил)карбамат (Референсное Промежуточное соединение Я31) Ή ЯМР (400 МГц, ОМЗО-ф): δ м.д. 8.43 (1Η, Ьг. 5), 8.25 - 8.15 (1Н, т), 7.78 (1Н, Ьг. з), 7.70 - 7.65 (1Н, т), 7.14 (1Н, б), 7.05 (1Н, б), 3.20 - 3.15 (1Η, т), 1.74 - 1.61 (1Н, т), 1.57 1.45 (1Н, т), 1.36 (9Н, 5), 0.93 (ЗН, () 0,79 мин, 353 [м+нг
К39 1/ ίΑ Ν Λ (2К)-2-ами- ΗΟ-Ν464Γ4- циано-341- метилэтил) Фенил1ок- сиУ-З-пири- динил)бу- танамид 1,1 -диметилЭтил-((1Р)-1{[(6-{[4-циано3-(1-метилэтил)фенил]окси}-3-пиридинип)амино]карбонил}пропил (карбамат (Референсное Промежуточное соединение Р36) 1 Н-ЯМР (400 МГц, ϋΜ5Ο-66): δ м.д. 8.48 (1Н, б) 8.22 (1Н, бб) 7.79 (1Н, б) 7.24 (1Н, б) 7.15 <1Н, б) 7.05 (1Н, бб) 3.19 - 3.30 (2Н, т) 1.61 - 1.74 (1Н, т) 1.45 1.56 (1Н, т( 1.26 (6Н, б) 0.91 (ЗН, Б 0,76 мин, 339 [М+Н]+
Н40 ьу 'ЬУ УУ ν·-··ν Ν У (2К)-2-ами- ΗΟ-Ν46-Π4- циано-3- этилФе- нил)окси1- 3-пири- динилУбу- танамид 1,1-диметилэтил {(1Р)-1[({6-[(4-циано3-этилфенил)окси]-3пиридинил}амино)карбонил]пропип}карбамат (Референсное Промежуточное соединение РЗЗ) 1Н-ЯМР (400 МГц, ЭМЗО-ф): δ м.д. 8.48 (1Н, б) 8.22 (1Н, бб) 7.80 (1Н, б) 7.19 (1Н, б) 7.15 (1Н, б) 7,07 (1Н, бб) 3.22 - 3.29 (1Н, т) 2.79 (2Н, д) 1.60 - 1.74 (1Н, т) 1.44 - 1.56 (1Н, т) 1.21 (ЗН, () 0.91 (ЗН, ()
Р41 ЬуУу χΥ ΜΛ -γ© θ'®..'1,. (2К)-2-ами- 1,1 -диметилэтил-[(1Р)-1({[6-({4-циано3-[(1-метилэтил )окси]фенил)окси)-3пиридинил]амино}карбонил)пропил]карбамат (Референсное Промежуточное соединение Р34) 1Н-ЯМР (400 МГц, СОС13): δ м.д. 9.70 (1Н, Ьг. 5.), 8.26 - 8.38 (2Н, т), 7.54 (1Н, б), 7.01 (1Н, б), 6.74 (1Н, б), 6.68 (1Н, бб), 4.52 4.66 (1Н, т), 3.45 - 3.54 (1Н, т), 1.97 - 2.10 (1Н, т), 1.65 1.76 (1Н, т), 1.41 (6Н, б), 1.06 (ЗН, 1)
Η0-Ν-Γ6-ίί4- циано-3-Г(1 - метилэтил) окси1Фе- нилУокси)-
3-пириди- нилУбутан-
амид
ί 542 |Ι ι 11 ι Ν- ^ί-4 ·, Τ ' Γ •'Λ-0 — Ρ мн; (2К)-2-ами- ηο-Ν464{4- циано-3- Птрифтор- метил)окси 1ФенилУок- си)-3-пири- динилУбу- танамид 1,1 -диметилэтил-[(1Я)-1({[6-({4-циано3-[(трифторметил(окси]фенил}окси)-3пиридинил]амино}карбонил)пропил]карбамат (Референсное Промежуточное соединение Р35) Ή ЯМР {400 МГц, СОС13): δ м.д. 9.76 (1Н, 5), 8.25 - 8.43 (2Н, т), 7.70 <1Н, б), 7.20 (1Н, з), 7.16 (1Н, бб), 7.06 (1Н, б), 3.44 3.59 (1Н, т), 1.53 - 2.12 (2Η, т), 1.07(ЗН,1) 0,72 мин, 381 [Μ+ΗΓ 379 [М-Н]·.
- 139 023768
Референсный пример ВЕ1.
(5Κ)-5-Этил-3-(6-{[4-метил-3-(метилокси)фенил]окси}-3-пиридинил)-2,4-имидазолидиндион
Способ А.
К раствору (2Κ)-2-амино-N-(6-{[4-метил-3-(метилокси)фенил]окси}-3-пиридинил}бутанамида (Референсное промежуточное соединение Κ6, 120 мг) в сухом дихлорметане (8 мл) добавляли ТЕА (0,265 мл, 1,903 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Медленно добавляли раствор трифосгена (50,8 мг, 0,171 ммоль) в сухом дихлорметане (ЭСМ) (2 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при той же температуре. Реакционную смесь гасили водой (2 мл) и две фазы разделяли. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали и остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (система Вю1аде, колонка §NΛΡ 10д) с градиентом от циклогексан/этилацетат 80/20 до циклогексан/этилацетат 50/50 в качестве элюента с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (108 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.61 (1Н, δ), 8.12 (1Н, б), 7.82 (1Н, бб), 7.17 (1Н, б), 7.08 (1Н, б), 6.79 (1Н, б), 6.63 (1Н, бб), 4.25-4.18 (1Н, ш), 3.77 (3Н, δ), 2.15 (3Н, δ), 1.89-1.62 (2Н, ш), 0.95 (3Н, ΐ);
УЭЖХ-В: 0,79 мин, 342 [М+Н]+.
Референсное соединение ВЕ2.
(5Κ)-5-Этил-5-метил-3-(6-{[4-метил-3-(метилокси)фенил]окси}-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндион
К раствору Х|-(6-{|4-метил-3-(метилокси)фенил|окси!-3-пиридинил)-О-и’!овалинамида (Референсное промежуточное соединение Κ8, 42 мг) в сухом дихлорметане (6 мл) добавляли ТЕА (0,089 мл, 0,638 ммоль). Смесь охлаждали до 0°С и по каплям добавляли раствор трифосгена (17,03 мг, 0,057 ммоль) в сухом дихлорметане (1,500 мл). Смесь перемешивали при этой температуре в течение 1 ч, затем снова по каплям добавляли раствор трифосгена (17,03 мг, 0,057 ммоль) в сухом дихлорметане (ЭСМ) (1,500 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин, выдерживали на ледяной бане и гасили водой (10 мл). Смесь оставляли достигать комнатной температуры, затем ее экстрагировали дихлорметаном (3x7 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали посредством флэш-хроматографии на силикагеле, используя колонку §NΛΡ 10д и градиент циклогексан/этилацетат от 80/20 до 50/50 в качестве элюентов (система Вю(аде). В результате получали указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (24 мг).
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.57 (1Н, δ), 8.13 (1Н, б), 7.83 (1Н, бб), 7.17 (1Н, б), 7.07 (1Н, б), 6.79 (1Н, б), 6.62 (1Н, бб), 3.76 (3Н, δ), 2.14 (3Н, δ), 1.57-1.86 (2Н, ш), 1.39 (3Н, δ), 0.86 (3Н, ΐ);
УЭЖХ-В: 0,83 мин, 354 [М-Н]+.
Способ для референсных примеров с ВЕ3 по ВЕ8.
4-{[4-(4,4-Диметил-2,5-диоксо-1-имидазолидинил)фенил]окси}-2-(метилокси)бензонитрил
N1-(4-{[4-Циано-3-(метилокси)фенил]окси}фенил)-2-метилаланинамид (77,0 мг) растворяли в ОСМ (10 мл). Добавляли триэтиламин (0,218 мл, 1,57 ммоль) и полученную смесь охлаждали при 0°С. Бис(трихлорметил)карбонат (68,1 мг, 0,22 ммоль) растворяли в 5 мл ЭСМ и полученный раствор добавляли по каплям к реакционной смеси. Реакционную смесь перемешивали при 0°С. Спустя 15 мин реакционную смесь упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали посредством хроматографии на силикагеле (от 100:0 до 50:50 циклогексан/ЕЮАс в 10 СV; затем 50:50 циклогексан/ЕЮАс в 10 ΟΥ) с получением 65,1 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6): δ м.д. 8.56 (1Н, Ьг. δ.), 7.72 (1Н, б), 7.42-7.49 (2Н, ш), 7.19-7.29 (2Н, ш), 6.97 (1Н, б), 6.57 (1Н, бб), 3.89 (3Н, δ), 1.41 (6Н, δ);
УЭЖХлрцс: 0,93 мин, 352 [М+Н]+.
Следующие соединения получали, используя вышеописанную методологию, заменяя Ν1-(4-{[4- 140 023768 циано-3-(метилокси)фенил]окси}фенил)-2-метилаланинамид соответствующим амином. Конечные продукты очищали посредством флэш-хроматографии (картридж диоксида кремния; смесь циклогексан/ЕЮАс или другая соответствующая система растворителей).
КЕЗ Ο,χΉ' 341.1 ДИ метилэтил)- 4-({5-Г(4Д)-4- этил-2,5- диоксо-1 имидазоли- динил1-2- пиридинил) окси)бензо- НИТРИЛ (2Д)-2-амино-Л/(6-{[4-циано-2(1,1-диметилэтил )фенил]окси}-3-пиридинил)-бутанамид (Референсное Промежуточное соединение Р38) ΊΗ ЯМР (400 МГц, ОМЗО-66): б м.д. 8.64 (1Н, Ьг. з), 8.19 (1Н, Ьг. з), 7.96 - 7.90 (1Н, т), 7.82 (1Н, Ьг. з), 7.767.68 (1Н, т), 7.30 (1Н, ά), 7.19 (1Н, ф, 4.25 4.17 (1Н, т), 1.86 - 1.77 (1Н, т), 1.76 - 1.66 <1Н, т), 1.35 <9Н, з), 0.95 (ЗН, 0
РЕ4 О Λ Ζγ τ ,« ''' о' / 4-Н5-П4Ю-4- (2К)-2-амино-Ы- (6-{[4-циано-3-(1- метилэтил)фенил ]окси}-3-пири- динил)бутанамид (Референсное Промежуточное соединение Р39) ’Н-ЯМР (400 МГц, ОМЗО-66): δ м.д. 8.66 (1Н, з) 8.19 (1Н, 6) 7.93 (1Н, 66) 7.84 (1Н, 6) 7.36 (1Н. 6) 7.28 (1Н, 6) 7.18 (1Н, 66) 4.19 - 4.25 (1Н, т) 3.21 - 3 30 (1Н, т) 1,77 1.87 (1Н, т) 1.65 - 1.76 (1Н, т) 1.27 (6Н, 6) 0.96 1,03 мин, 365 [М+Н]+
этил-2.5- диоксо-1-
имидазоли-
динил1-2-
пиридинил}
окси)-241- метилэтил)-
бензонит-
рил
- 141 023768
(ЗН, 1)
РЕ5 3-цикло- пропил-4- ({5-К4Ю-4- этил-2.5- диоксо-1- имидазоли- динил1-2- пиридинил! окси)бензо- нитрил (2Г?)-2-амино-Л/- {6-[(4-циано-2- циклопропил- фенил)окси]-3- пиридинил}бу- танамид (Референсное Промежуточное соединение Р37) ДА ЯМР (400 МГц, ϋΜδΟ-с/б): δ м.д. 8.64 (1Н, Ьг. з), 8.14-8.11 (1Н, т), 7.96 7.84 (1Н, т), 7.71 - 7.66 (1Н, т), 7.52 (1Н, Ьг. з), 7.29 (2Н, б), 4.24 - 4.18 (1Н, т), 1.97 - 1.89 (1Н, т), 1.86 1.78 (1Н, т), 1.75 - 1.67 (1Н, т), 0.95 (ЗН, 1), 0.91 - 0.85 (2Н, т), 0.81 - 0.75 (2Н, т) 0,98 мин, 363 [М+Н]*.
КЕ6 ΑΑ νΑ'-,,-Χ О / 4-И5-И4К)-4- (2Н)-2-амино-1Ч- {б-[(4-Циано-3- этилфенил)окси]- 3-пириди- нил}бутанамид (Референсное Промежуточное соединение Р40) Н-ЯМР (400 МГц, 0М8О-бе): δ м.д. 8.66 (1Н, з) 8.19 (1Н, бб) 7.93 (1Н, бб) 7.85 (1Н, б) 7.32 (1Н, б) 7.28 (1Н, бб) 7.19 (1Н, бб) 4.19 - 4.25 (1Н, т) 2.82 (2Н, ς) 1.77 - 1.88 (1Н, т) 1.65 - 1.77 (1Н, т) 1.23 (ЗН, 1) 0.96 (ЗН, 1) 0,98 мин, 351 [М+Н]+
этил-2,5- диоксо-1- имидазоли- Динил1:2_- пиридинил!
окси!-2-(1- метилэтил)- бензонит- рил
КЕ7 Г 4-({5-Г(4К)-4- (2Р)-2-амино-М- [6-({4-циано-3- [(трифторметил)- окси]фенил}- окси)-3-пириди- нил]бутанамид (Референсное Промежуточное соединение Р42) 1Н ЯМР (400 МГц, ΟΜδΟ-бб); δ м.д. 8.67 (1Н, з), 8.19 - 8.26 (1Н, т), 8.14 (1Н, б), 7.94 8.02 (1Н, т), 7.66 (1Н, 3),7.43 - 7.51 (1Н, т), 7.36 (1Н, б), 4.18 - 4.27 (1Н, т), 1.63 - 1.91 (2Н, т), 0.96 (ЗН, 1) 1,02 мин, 407 [М+Н]+, 405 [М-Н]-
этил-2,5- диоксо-1-
имидазоли- динил1-2-
пиридинил!
окси)-2- Птрифтор-
метил )ок-
си!бензо- нитрил
ГСЕ8 γ А 4-({5-[(4Р)-4- этил-2,5- диоксо-1- имидазоли- динил1-2- пиридинил! окси)-2-Г(1- метилэтил)- окси!бензо- нитрил (2Н)-2-амино-1Ч- [6-({4-циано-3-[(1- метилэтил)окси] фенил}окси)-3- пиридинил]- бутанамид (Референсное Промежуточное соединение Р41) ’Н-ЯМР (400 МГц, ϋΜδΟ-66): б м.д. 8.65 (1Н, з), 8.20 (1Н, б), 7.93 <1Н, бб), 7.76 (1Н, 6),7.27 (1Н, б), 7.16 (1Н, б), 6.84 (1Н, бб), 4.74 - 4.85 (1Н, т), 4.17 - 4.26 (1Н, т), 1.76 1.89 (1Н, т), 1.65 - 1.76 (1Н, т), 1.31 (6Н, б), 0.96 (ЗН, 1) 1,00 мин, 381 [М+Н]+,
Биологический пример 1.
Способность соединений по изобретению модулировать подтипы Κν3.2/3.1 потенциалзависимых калиевых каналов может быть определена при использовании следующего анализа.
Биология клетки.
Чтобы оценить влияние соединений на человеческие каналы Κν3.2 (ΗΚν3.2) каналы, создавали стабильную клеточную линию, экспрессирующую ΗΚν3.2. посредством трансфекции клеток яичника китайского хомячка (СНО)-^ вектором рС1Н5-ЬЮу3.2. Клетки культивировали в среде ΟΜΙίΜ (среда Игла, модифицированная по способу Дульбекко)/Р12 с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки,
- 142 023768
1ж заменимых аминокислот (ПкЦгодеп) и 500 мкг/мл гигромицина Б (Пкйгодеп). Клетки выращивали и поддерживали при 37°С во влажной среде, содержащей 5% СО2 в воздухе.
Чтобы оценить влияние соединений на человеческие каналы Κν3.1 (ЬКу3.1), СНО/Оат/Е1Аклон22, иначе называемые клетки СОЕ22, трансдуцировали при использовании реагента 1ιΚν3.1 ВасМат. Эту клеточную линию конструировали для усовершенствования клеток-хозяев на основе СНОК1 для усиления экспрессии рекомбинантного белка по сравнению с СНО-К1дикого типа. Клеточную линию генерировали после трансдукции СНО-К1 клеток ВасМат вирусом, экспрессирующим белок аденовируса Оат1, и селекции с помощью генетицина 0418 для генерирования стабильной клеточной линии СНО/0ат-А3. Клетки СНО/0ат-А3 трансфицировали рСОМА3-Е1А-Нудго с последующей селекцией гигромицином Б и РАС8 сортировкой (флуоресцентная сортировка клеток) с получением одноклеточных клонов. Затем вирусы ВасМат-Ьис1Гега5е (люцифераза) и ВасМат-ОРР (зеленый флуоресцентный белок) использовали в исследованиях временной трансдукции для селекции клона на основании самой высокой трансдукции ВасМат и экспрессии рекомбинантного белка. Клетки С0Е22 культивировали на той же среде, которую использовали для стабильной клеточной линии 1ιΚν3.2 СНО-К1, с добавлением 300 мкг/мл гигромицина Б и 300 мкг/мл 0418. Все другие условия были идентичны условиям для клеток 1ιΚν3.2 СНО-К1. За сутки до эксперимента 10 миллионов клеток СОЕ22 засевали в колбы для культур Т175 и добавляли реагент 1ιΙ<ν3.1 ВасМат (рРВМ/человеческие Χν3.1) (МО1 (множественность заражения) 50). Трансдуцированные клетки использовали через 24 ч.
Приготовление клеток для экспериментов 1оиАогк5 Оиайго™.
В день эксперимента клетки извлекали из инкубатора и культуральную среду удаляли. Клетки промывали 5 мл забуференного фосфатом физиологического раствора Дульбекко (ОРВ8), не содержащего кальций и магний, и отделяли посредством добавления 3 мл Уег5епе (Iиν^ΐ^одеи, Иа1у) с последующим коротким инкубированием при 37°С в течение 5 мин. Колбу встряхивали для разделения клеток и добавляли 10 мл 0РВ8, содержащего кальций и магний, для приготовления суспензии клеток. Суспензию клеток затем помещали в центрифужную пробирку на 15 мл и центрифугировали в течение 2 мин при 1200 об./мин. После центрифугирования супернатант удаляли и клеточный осадок ресуспендировали в 4 мл 0РВ8, содержащего кальций и магний, при использовании пипетки на 5 мл для разведения осадка. Затем объем суспензии клеток корректировали с получением клеточной концентрации для анализа приблизительно 3 миллиона клеток на мл.
Все растворы, добавляемые к клеткам, предварительно нагревали до 37°С.
Электрофизиология.
Эксперименты проводили при комнатной температуре при использовании электрофизиологической технологии на плоской матрице 1опАог1<5 Оиайго™ (Мо1еси1аг Эе\зсе5 Согр.) с помощью Рай№1ай™ РРС. Протоколы стимуляции и сбор данных проводили при использовании микрокомпьютера (Эе11 РепΙίιιιη 4). Межэлектродное сопротивление плоских электродов (Кр) определяли посредством подачи скачков разности потенциалов 10 мВ через каждую ячейку. Эти измерения проводили перед добавлением клеток. После добавления клеток и создания изоляции проверку изоляции проводили посредством приложения скачка разности потенциалов от -80 мВ до -70 мВ в течение 160 мс. После этого добавляли раствор амфотерицина В к стороне электрода внутри клетки для получения доступа к внутреннему содержимому клетки. Клетки выдерживали при -70 мВ. Вычитание утечки проводили во всех экспериментах посредством применения 50 мс гиперполяризующих (10 мВ) опережающих импульсов, чтобы вызвать токи утечки, с последующим 20 мс периодом при потенциале покоя перед контрольными импульсами. От потенциала покоя -70 мВ первый контрольный импульс до -15 мВ применяли в течение 100 мс и затем еще 100 мс при -70 мВ, второй импульс до 40 мВ применяли в течение 50 мс. Клетки затем выдерживали в течение еще 100 мс при -100 мВ и затем применяли линейное изменение разности потенциалов от -100 мВ до 40 мВ в течение 200 мс. Во всех экспериментах протокол тестовых импульсов осуществляли в отсутствие (до считывания) и в присутствии (после считывания) исследуемого соединения. Считывания до и после разделяли посредством добавления соединения с последующим 3-минутным инкубированием.
Растворы и лекарственные средства.
Внутриклеточный раствор содержал следующее (в мМ): глюконат К 100; КС1 54; МдС12 3,2; НЕРЕ8 (М-2-гидроксиэтилпиперазин-Ы-2-этансульфоновую кислоту) 5; при значении рН, доведенном до 7,3 с помощью КОН. Раствор амфотерицина В готовили в виде исходного раствора 50 мг/мл в ОМ8О и разбавляли до конечной рабочей концентрации 0,1 мг/мл во внутриклеточном растворе. Внешний раствор представлял собой забуференный фосфатом физиологический раствор Дульбекко (ЭРВ8) и содержал следующее (в мМ): СаС12 0,90; КС1 2,67; КН2РО4 1,47; МдС1-6Н2О 0,493; №С1 136,9; \а;РО4 8,06; со значением рН 7,4.
Соединения по изобретению (или референсные соединения, такие как М-циклогексил-Ы-[(7,8диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3-хинолинил)метил]-№-фенилмочевина) растворяли в диметилсульфоксиде (ОМ8О) в исходной концентрации 10 мМ. Эти растворы дополнительно разбавляли ОМ8О при использовании Вютек РХ (Весктап СоиЙег) в планшете на 384 соединения.
- 143 023768
Каждое разведение (1 мкл) переносили в другой планшет для соединений и добавляли внешний раствор, содержащий 0,05% плюроновой кислоты (66 мкл). Добавляли 3,5 мкл из каждого планшета, содержащего соединение по изобретению, и инкубировали с клетками в течение 1оп\Уог1<5 ЦиаИго™ эксперимента. Конечное анализируемое разведение составило 200, и конечные концентрации соединений находились в пределах от 50 мкМ до 50 нМ.
Анализ данных.
Показания приборов анализировали и отбирали, используя как сопротивление изоляции (более 20 МОм), так и максимальную амплитуду тока (более 500 пА при скачке разности потенциалов 40 мВ) при отсутствии соединения, чтобы исключить неподходящие клетки из дальнейшего анализа. Опосредованные Κν3 каналами внешние токи определяли, измеряя среднюю амплитуду тока в течение заключительных 10 мс импульса напряжения -15 мВ минус средний базовый ток при -70 мВ в течение периода 10 мс сразу перед стадией -15 мВ. Эти токи Κν3 каналов после добавления тестируемого соединения затем сравнивали с токами, зарегистрированными до добавления соединения. Данные нормализовали по максимальному эффекту референсного соединения (50 мкМ N-циклогексил-N-[(7,8-диметил-2-оксо-1,2дигидро-3-хинолинил)метил]-№-фенилмочевины) и по эффекту носителя-контроля (0,5% ЭМ80). Нормализованные данные анализировали при использовании программного обеспечения Асй\ЦуВа5е. Концентрацию соединения, требуемую для того, чтобы увеличить токи на 50% от максимального увеличения, обеспечиваемого референсным соединением (рЕС50), определяли посредством подбора данных концентрация-ответ при использовании четырехпараметрической логистической функции.
N-Циклогексил-N-[(7,8-диметил-2-оксо-1,2-дигидро-3 -хинолинил)метил] -Ν'-фенилмочевину получали от А8ШЕХ (регистрационный номер: 552311-06-5).
Все соединения из примеров исследовали в вышеприведенном анализе, и они продемонстрировали потенциацию Κν3.1, или Κν3.2, или Κν3.1 и Κν 3.2 (здесь Κν3.1 и/или Κν3.2) цельноклеточных токов в среднем по меньшей мере на 20% от наблюдаемой с 50 мкМ N-циклогексил-N-[(7,8-диметил-2-оксо-1,2дигидро-3-хинолинил)метил]-№-фенилмочевины. Таким образом, в анализах рекомбинантных клеток из биологического примера 1 все соединения из примеров действуют как положительные модуляторы. Использованный здесь термин положительный модулятор Κν3.1 и/или Κν3.2 представляет собой соединение, которое, как было показано, вызывает по меньшей мере 20%-ную потенциацию цельноклеточных токов, опосредованных человеческими Κν3.1 и/или человеческими Κν3.2 каналами, рекомбинантно экспрессированными в клетках млекопитающих, как определено при использовании анализов, описанных в биологическом примере 1 (биологические анализы).
Вторичный анализ данных тестов, описанных в биологическом примере 1, исследует влияние соединений на скорость нарастания тока от начала деполяризующих импульсов напряжения. Величина влияния соединения может быть определена из постоянной времени (Тауакт), полученной из нелинейного подбора, при использовании уравнения, приведенного ниже, нарастания токов Κν3.1 или Κν3.2 после начала деполяризующего импульса напряжения -15 мВ.
Υ = (Υ0 - Υιιπγχ) ж ехр(-1< ж X) + Υтаx, где Υ0 представляет собой значение тока в начале деполяризующего импульса напряжения;
Υтаx представляет собой ток при достижении плато;
Κ представляет собой постоянную скорости;
Тауакт представляет собой постоянную времени активации, которая является величиной, обратной Κ.
Также аналогично может быть исследовано влияние соединений на время затухания токов Κν3.1 и Κν3.2 при закрытии каналов в конце деполяризующих импульсов напряжения -15 мВ. В этом последнем случае величина влияния соединения на закрытие каналов может быть определена из постоянной времени (Таудеакт) нелинейного подбора затухания тока (следовой ток) непосредственно по окончании деполяризующего импульса напряжения.
Постоянная времени активации (Тауакт) была определена для нескольких соединений из примеров. На фиг. 1 показаны данные для двух соединений по изобретению. В табл. 1 представлены данные Тауакт для всех соединений из примеров, проанализированных таким образом.
На фиг. 1а показаны токи ΗΚν3.2, регистрируемые при использовании анализа, описанного в Биологическом примере 1. Показанные данные представляют собой индивидуальные токи за период деполяризующего скачка потенциала до -15 мВ, регистрируемые от 4 различных клеток при двух концентрациях соединения (соединение из референсного примера КЕ1).
Данные описаны с помощью единой экспоненциальной кривой (сплошные линии) при использовании метода подбора эмпирической кривой в программе Рп5т, версия 5 (Сгарйраб 8оП\\аге 1пс).
На фиг. 1Ь показаны токи ΗΚν3.2, регистрируемые при использовании анализа, описанного в Биологическом примере 1. Показанные данные представляют собой индивидуальные токи за период деполяризующего скачка потенциала до -15 мВ, регистрируемые от 2 различных клеток при двух концентрациях соединения из референсного примера КЕ3. Данные описаны с помощью единой экспоненциальной кривой (сплошные линии) при использовании метода подбора эмпирической кривой в программе Рп5т,
- 144 023768 версия 5 (ОгарЬраД δοΠ\γа^е 1пс).
Таблица 1
Сводные данные 1ιΚν3.2 по анализу времени активации (Тауакт). Чтобы сделать возможным сравнение между соединениями, выбранная концентрация соединений была такой, которая вызывала сходный ток (примерно 0,3 нА) по окончании импульса напряжения, за исключением носителя, где максимальные токи составляли менее 0,1 нА
Пример Концентрация (мкМ) Тау ай среднее (мс) Стандартное отклонение Число экспериментов
Носитель - 7,1 1,7 6 (клетки)
РЕ1 6,25 9,9 2,2 5
РЕ2 12,5 7,3 1,8 4
Пример 15 0.2 50,1 7,5 5
Пример 16 0,4 19,3 1,0 4
Пример 25 6,25 7,87 3,24 4
РЕЗ 0,2 23,0 6,2 4
РЕ4 0,8 9,2 2,3 2
РЕ5 3,1 13,0 2,3 2
РЕ6 3,1 8,2 2,0 2
РЕ7 3,1 10,4 2,8 2
РЕ8 3,1 9,7 1,0 2
Пример 65* 0,8 24,0 3,6 2
Пример 62* 0,4 34,8 4,9 2
Пример 61* 0,8 31,5 4,0 2
Пример 51* 1,6 21,3 0,1 2
Пример 54* 1,6 14,8 1,9 2
Пример 63* 0,4 28,0 0,4 2
Пример 64* 1,6 25,0 2,1 2
* Референсные примеры.
Как можно видеть из табл. 1, в отсутствие соединения и в присутствии носителя Тауас1; составляло 7,1±1,7 мс. Диапазон значений Тауас1; (7,3-50,1 мс) наблюдали в присутствии тестируемых соединений, когда каждое из них тестировали в концентрации, которая увеличивала Κν3.2 ток до аналогичного уровня (приблизительно 0,3 нА).
Каналы Κν3.1 и Κν3.2 должны активироваться и дезактивироваться очень быстро, чтобы дать возможность нейронам возбуждать потенциалы действия с высокой частотой (КиДу и [ЛсВат, 2001, ТгепД5 ш №иго5с1епсе5 24, 517-526). Замедление активации будет, по-видимому, задерживать наступление реполяризации потенциала действия; замедление дезактивации может привести к гиперполяризующим токам, что снижает возбудимость нейрона и задерживает время до того, как нейрон может возбуждать дальнейший потенциал действия. Вместе эти два замедляющих эффекта в отношении активации и дезактивации каналов скорее всего приведут к снижению, а не к содействию способности нейронов возбуждаться при высоких частотах. Таким образом, соединения, которые обладают этим эффектом замедления на каналы Κν3.1 и/или Κν3.2, могут замедлять нейрональное возбуждение. Это замедление нейронального возбуждения соединением по изобретению, в частности соединением из примера 15, которое заметно увеличивает Тауас1; до 50,1±7,5 мс (табл. 1), можно наблюдать на записях, снятых с быстровозбуждающих интернейронов в коре головного мозга крыс, используя электрофизиологические методики, ш νίΙΐΌ. Как можно видеть на фиг. 2, добавление соединения из примера 15 снижает способность нейронов возбуждаться в ответ на серии деполяризующих импульсов с частотой 300 Гц.
На фиг. 2 показаны регистрационные записи, полученные от идентифицированных быстровозбуждающих интернейронов в соматосенсорной коре головного мозга мыши. Нейроны приводят в возбуждение при высоких частотах посредством серии импульсов деполяризующего тока высокой частоты при 100, 200 и 300 Гц. Определяют способность нейрона возбуждать потенциал действия на каждый импульс. Вероятность пика, равная 1, по оси Υ на графике показывает, что потенциал действия генерируется нейроном на каждый из импульсов деполяризующего тока. В отсутствие лекарственного средства (заштрихованные кружки, п равно 9) нейроны сохраняли вероятность пика, равную 1, вплоть до 300 Гц. Однако, в присутствии соединения из примера 15 (1 мкМ; незаштрихованные кружки, п равно 6) нейроны не были способны поддерживать серии при самой высокой частоте. * р менее 0,05, ΑNΟVΑ (дисперсионный анализ) для повторных измерений.
Поэтому, хотя все установленные здесь соединения из примеров действуют как положительные модуляторы в анализе рекомбинантных клеток согласно Биологическому примеру 1, те соединения, которые заметно увеличивают значение Тауакт, например соединение из примера 15, могут уменьшать способность нейронов в нативных тканях возбуждаться при высокой частоте.
В одном аспекте согласно изобретению предложено соединение, потенцирующее каналы Κν3, что связанно со средним значением тау, которое не более чем на 2 стандартных отклонения больше, чем среднее значение, полученное в присутствии носителя (0,5% ΌΜδΟ), для применения в лечении расстройств, при которых полезна положительная модуляция функции каналов Κν3.1 и/или Κν3.2, включая шизофрению, биполярное расстройство, нарушения слуха, расстройства сна, расстройства, связанные с
- 145 023768 веществами, и эпилепсию.
В одном аспекте согласно изобретению предложено соединение, потенцирующее каналы Κν3, что связанно со средним значением тау, которое более чем на 2 стандартных отклонения больше, чем среднее значение, полученное в присутствии носителя (0,5% ЭМЗО), для применения в лечении расстройств, при которых полезно ингибирование функции каналов Κν3.1 и/или Κν3.2, включая гиперакузию, синдром ломкой Х-хромосомы и аутизм.
Доклинические эксперименты.
Все исследования ίπ νί\Ό проводили в соответствии с Проектной лицензией, полученной согласно итальянскому законодательству (параграф 7, законодательный акт № 116, 27 января 1992), которая подтверждала Европейскую директиву 86/609/ЕЕС, и в соответствии с политикой компании С1ахо5пШ111<1те по уходу и использованию лабораторных животных и соответствующими нормами практики,
В следующих исследованиях соединение 48 представляет собой соединение из референского примера ГЕ1.
Биологический пример 2.
Оценка влияния соединений на возбуждение интернейронов в соматосенсорной коре головного мозга мыши ш \а1го
Животные.
Трансгенных мышей [СВ6-Тд (Саб1-ЕСРР) С42Ζ^Ь/^] закупали у ,1ас1^оп ЬаЬогаЛгу (Маше, И8А). Эти мыши селективно экспрессировали усиленный зеленый флуоресцентный белок (ЕСРР) в подклассе корзинчатых интернейронов, экспрессирующем кальций-связывающий белок парвальбумин (Ру). Не сообщается об экспрессии ЕСРР в других классах интернейронов, позитивных в отношении соматостатина (8ОМ), холецистокинина (ССК), калретинина (СИ) и ΎΛ (вазоактивный интестинальный пептид). Поэтому эти мыши полезны для идентификации Ру-экспрессирующей субпопуляции СЛВА-ергических нейронов, которые экспрессируют каналы Κν3.1 и Κν3.2 и способны к возбуждению при высокой частоте.
Приготовление срезов.
Эксперименты проводили на срезах головного мозга толщиной 250 мкм, содержащих соматосенсорную кору. Кратко, головной мозг удаляли у глубоко анестезированных (изофлюран) мышей Саб1ЕСРР в возрасте 25-35 дней. Срезы нарезали при использовании микротома ЭТИ 1000 (Ό8Κ, 1арап) в следующем растворе (в мМ): 1<С1 (2,5), СаС12 (0,1), NаΗ2ΡО4 (1,2), МдС12 (5), NаΗСОз (26), сахароза (189) и глюкоза (10), сохраняемом при 2-6°С и насыщенном газовой смесью 95% О2-5% СО2. После нарезания срезы оставляли для восстановления физиологических функций в камере регенерации в течение по меньшей мере 1 ч в искусственной цереброспинальной жидкости (АС8Р), содержащей (в мМ): №С1 (120), 1<С1 (2,5), СаС12 (2), NаΗ2ΡО4 (2,5), МдС12 (1,5), NаΗСОз (26) и глюкозу (10), при комнатной температуре и насыщенной смесью 95% О2-5% СО2.
Регистрация электрофизиологических параметров.
Для регистрации электрофизиологических параметров срез переносили в погружную камеру, установленную на предметном столике прямого микроскопа (Ах^кор, Саг1 Ζе^δδ. Сегшапу) и обливали оксигенированной АС8Р. Визуализацию нейронов в срезах проводили с помощью 40x объектива при использовании инфракрасной дифференциальной интерференционной контрастной ΟΚ-ΟΚ.') видеомикроскопии (Ηаташаΐδи С5985, Ηашашаΐδи С1(у, 1арап). Парвальбумин-позитивные интернейроны идентифицировали посредством освещения препарата флюоресцентной лампой с СРР-фильтром и переключения между флуоресценцией и IΚ-^IС видеомикроскопией. Регистрировали только СРР-позитивные нейроны. Регистрацию параметров всей клетки проводили при использовании пэтч-пипеток из боросиликатного стекла, вытянутых при использовании пуллера для электродов 5и11ег Р-97 и заполненных внутренним раствором, содержащим (в мМ): глюконат К (125), ЕСТА (этиленгликольтетрауксусную кислоту) (10), НЕРЕ8 (10), МдС12 (1), 1<С1 (10) и Мд-АТР (2); при значении рН, доведенном до 7,3 с помощью ΚОΗ. При заполнении этим внутренним раствором пэтч-электроды имели сопротивление на острие 4-7 МОм. Регистрацию параметров проводили при комнатной температуре (20-22°С) при использовании усилителя МиШс1ашр 700В (Ахоп ПЩгшпепК Рοδΐе^ С1(у, СА, И8А). Протоколы текущих команд (указанные ниже) и сбор данных осуществляли при использовании программного обеспечения рС1ашр 10.0 и интерфейса 01д1ба1а 1320А (Ахоп ПЩгшпепК Рοδΐе^ С1(у, СА, И8А). Нейтрализовали изменения емкости, и последовательное сопротивление контролировали постоянно на всем протяжении эксперимента. Если оно изменялось более чем на 20%, клетку отбраковывали. Данные были отфильтрованы при 3 кГц, и пробы отбирали при 10 кГц. Лекарственные средства
Соединения по изобретению растворяли в ЭМ5О (100%), тетраэтиламмоний (ТЕА) и тетродотоксин (ТТХ) (оба предоставлены §1дша, Иа1у) растворяли в дистиллированной воде и хранили при -20°С до использования. Лекарственные средства разбавляли до конечной концентрации в день эксперимента. Самая высокая конечная концентрация используемого ЭМ5О составляла 0,1%. Методика эксперимента
Возбуждающую активность регистрируемых интернейронов оценивали посредством применения продолжительных скачков тока с различной силой тока. Таким образом, после образования гигаомного
- 146 023768 контакта (д1да-5еа1), усилитель переключали в режим фиксированного тока, давая возможность нейрону достичь мембранного потенциала покоя. Затем отрицательный ток подавали в клетку для получения потенциала покоя близкого к -80 мВ. Начиная с этого состояния, применяли подачу скачков тока (50 пА приращения, 600 мс), чтобы вызвать потенциалы действия. Этот протокол повторяли по меньшей мере 2 раза для каждой клетки.
Проводили текущую компенсацию ухода моста от состояния равновесия и величину Кт контролировали постоянно на всем протяжении эксперимента.
Введение лекарственных средств.
Срезы инкубировали в камере регенерации в течение по меньшей мере 1 ч в присутствии либо носителя (0,1% ЭМ80), ТЕА (0,5 мМ) плюс 0,1% ОМ8О, либо ТЕА (0,5 мМ) плюс соединение из референсного примера КЕ1 (1 или 10 мкМ). После переноса среза в регистрационную камеру, такой же лекарственный режим поддерживали посредством сеперфузии соответствующих лекарственных средств в циркулирующую АС8Р.
Сбор данных и анализ.
Предварительные данные получали при использовании С1атрех 10.0 (Мо1еси1аг Оеу1се5, И8А). Данные анализировали при использовании программного обеспечения С1атрй1 10.0 (Мо1еси1аг Ое\асе5, И8А). Частоту возбуждения потенциала действия (выраженную в Гц) в ответ на подачу скачков тока подсчитывали по числу потенциалов действия, регистрируемых в течение скачка тока 600 мс. Значения полученной частоты для каждого скачка тока в одинаковых условиях эксперимента и в одной и той же клетке усредняли. Поскольку порог возникновения потенциалов действия изменяется от одной клетки к другой, силу скачка тока выражали в пА от порогового значения силы тока, необходимого для возникновения потенциала действия, а не в абсолютных величинах.
Полуширину потенциала действия подсчитывали для каждого потенциала действия при использовании С1атрйТ Величины со 2 по 5 или последних десяти потенциалов действия, вызванных скачком ненасыщающего тока (типично 100-150 пА от порогового значения), усредняли для каждого условия эксперимента в каждой анализируемой клетке.
Статистический анализ.
Статистические различия между влиянием обработок на частоту возбуждения оценивали при использовании двухфакторного дисперсионного анализа ΑN0VΑ для повторных измерений и, при необходимости, апостериорных плановых сравнений (различия считали значимыми, когда р составляла менее 0,05). Влияние обработки лекарственными средствами на полуширину потенциала действия и на амплитуду первой производной оценивали с использованием ΑN0VΑ. Все статистические анализы проводили с использованием программного обеспечения 81аЙ5Йса (8ΐаΐ8ой, версия 8). Когда это целесообразно, результаты предоставляли в виде среднего значения ± 8ЕМ (стандартная ошибка среднего).
Критерии включения/исключения данных.
Критерии, используемые для включения или исключения клетки из анализа, основывались на точных условиях фиксации тока и стабильности регистрации параметров на протяжении всего эксперимента. Текущая оценка давала возможность исключить клетку, когда значения К, и/или Кт изменялись более чем на 20%.
Результаты.
Интернейроны, регистрируемые в срезах, инкубируемых с 0,5 мМ ТЕА, возбуждались при более низкой максимальной частоте в ответ на скачки тока по сравнению с нейронами, регистрируемыми в контрольных срезах (фиг. 3). Этот эффект был в значительной степени противоположным в срезах, инкубированных с ТЕА (0,5 мМ) плюс 1 мкМ или 10 мкМ соединения из референсного примера КЕ1 (однофакторный ΑN0VΑ для повторных измерений, * р менее 0,05 относительно одного ТЕА).
Фиг. 3. Частота потенциалов действия, регистрируемых от парвальбумин-позитивных интернейронов в соматосенсорной коре головного мозга мыши, вызванных скачками деполяризующего тока (длительность 600 мс и Δ-приращение 50 пА), после по меньшей мере 1 ч либо с носителем (0,1% ЭМ80; заштрихованные кружки, η равно 6), либо с ТЕА (0,5 мМ) плюс 0,1% ЭМ80 (незаштрихованные кружки, η равно 7), либо с ТЕА (0,5 мМ) плюс соединение из референсного примера КЕ1 (1 мкМ; заштрихованные треугольники, п равно 9), либо с ТЕА (0,5 мМ) плюс соединение из референсного примера КЕ1 (10 мкМ; незаштрихованные треугольники, η равно 5). * р менее 0,05; однофакторный ΑN0VΑ для повторных измерений.
Кроме того, полуширина потенциала действия значительно увеличивалась в клетках, регистрируемых в срезах, инкубируемых с ТЕА (0,5 мМ), по сравнению с контрольными срезами (0,1% ЭМ80) (фиг. 4). В срезах, инкубируемых с ТЕА (0,5 мМ) плюс 1 мкМ или 10 мкМ соединения из референсного примера КЕ1, среднее значение полуширины потенциала действия значительно уменьшалось на 24 и 36% соответственно по сравнению со срезами, инкубируемыми только с ТЕА (0,5 мМ) (ΑN0VΑ и критерий Дуннетта, * р менее 0,05, η равно 9; ** р менее 0,01, η равно 5 соответственно).
Фиг. 4. Полуширина вызванных потенциалов действия от парвальбумин-позитивных интернейронов в соматосенсорной коре головного мозга мыши. Перед регистрацией параметров, срезы инкубирова- 147 023768 ли в течение по меньшей мере 1 ч либо с носителем (контроль; 0,1% ΌΜδΟ, п равно 6), либо с ТЕА (0,5 мМ) плюс 0,1% ΌΜδΟ (п равно 7), либо с ТЭА (0,5 мМ) плюс соединение из референсного примера КЕ1 (1 мкМ; п равно 9), либо с ТЕА (0,5 мМ) плюс соединение из референсного примера КЕ1 (10 мкМ; п равно 5). * р менее 0,05; ** р менее 0,01; *** р менее 0,001, ЛNΟVА с последующим критерием Дуннетта.
Эти результаты показывают способность соединений, которые обладают активностью в анализах из биологического примера 1, модулировать работу быстро возбуждающих интернейронов в головном мозге мыши таким образом, который сопоставим с положительной модуляцией каналов Κν3.1 и/или Κν3.2. Способность усиливать функцию Κν3 каналов в кортикальных отделах головного мозга также указывает на возможность применения этих соединений для лечения ряда расстройств центральной нервной системы, включая шизофрению, биполярное расстройство и эпилепсию.
Биологический пример 3.
Оценка влияния соединений на калиевые токи, регистрируемые от нейронов в медиальном ядре трапециевидного тела у мышей, ш νίΙΐΌ
Животные.
В этих экспериментах использовали самцов мышей линии СВА/Са (в возрасте 12-16 дней) (в соответствии с Актом о научных процедурах на животных, Великобритания, 1986). Срезы головного мозга, содержащие медиальное ядро трапециевидного тела (ΜΝΊΈ) готовили, как описано выше (Вгете и РогкуШе, 2005).
Лекарственные средства.
Химические соединения и реагенты закупали у δίβΐηη (Роо1е, ϋΚ), если не оговорено особо. Соединение из референсного примера КЕ1 растворяли в ΌΜδΟ и разбавляли в АБСР до требуемой концентрации.
Регистрация электрофизиологических параметров
Регистрацию параметров от идентифицированных нейронов ΜNТВ проводили, как описано ранее (Вгете и РогкуШе, 2005). Срезы помещали в сеперфузионную камеру на предметном столике инвертированного микроскопа и непрерывно перфузировали насыщенной газовой смесью (95% О2-5% СО2) АБСР со скоростью 1 мл-мин-1 при комнатной температуре. Проводили регистрацию параметров целой клетки у визуально идентифицированных нейронов ΜNТВ при использовании усилителя Ахора&Б 700В ^о1еси1аг Оеуюек, Итоп СПу, СА, ИБА). Раствор для пэтч-электродов содержал (в мМ): глюконат калия (97,5), 1<С1 (32,5), НЕРЕБ (40), БОТА (5), Μ§Ο2 (1), №2 фосфокреатин (5), при значении рН, доведенном до 7,2 с помощью ΚΟΌ. Пипетки имели величины сопротивления 3-5 МОм, и величины последовательного сопротивления составляли 6-10 МОм (компенсированное на 70%, запаздывание 10 мкс). Часто контролировали подводимое сопротивление, и регистрируемый параметр отбрасывали, если возрастания составляли более чем 2 МОм.
После того как конфигурация целая клетка была достигнута, клетки выдерживали при -60 мВ перед применением протоколов изменения разности потенциалов, как изложено ниже: в клетках ступенчато изменяли напряжение от потенциала покоя до -90 мВ в течение 700 мс и ступенчато до -40 мВ в течение 25 мс и затем прикладывали импульсы напряжения в пределах разностей потенциалов от -100 до +40 мВ (приращения 10 мВ) в течение 220 мс перед возвратом к потенциалу покоя. После завершения этого протокола добавляли ТЕА (1 мМ) в суперфузионную среду. Через 5 мин проводили вторую серию регистрации при использовании того же протокола изменения разности потенциалов. После этого добавляли в АБСР соединение из референсного примера КЕ1 (10 мкМ) при постоянном присутствии ТЕА (1 мМ) и еще через 5 мин проводили конечную серию регистрации с этим протоколом изменения разности потенциалов.
Статистический анализ.
Токи, вызываемые скачком напряжения до +40 мВ, сравнивали при различной обработке лекарственными средствами для каждой клетки при использовании непарного ΐ-критерия Стьюдента.
Результаты.
ТЕА (1 мМ) значительно снижал амплитуду выходящих, активируемых высоким напряжением калиевых токов, вызываемых скачками напряжения до +40 мВ (фиг. 5). Этот эффект был обратим при последующем применении соединения из референсного примера КЕ1 (10 мкМ).
Фиг. 5. Активируемые высоким напряжением калиевые токи, регистрируемые от визуально идентифицированных нейронов ΜNТВ у мыши, ш νίΙΐΌ. Показанные данные представляют собой среднее значение (+/- к.Д. (стандартное отклонение)) амплитуды тока, вызываемого скачками напряжения до +40 мВ в различных условиях применения лекарственных средств: ТЕА (1 мМ), ТЕА (1 мМ) плюс соединение из референсного примера КЕ1 (10 мМ). Статистический анализ проводили при использовании непарного ΐ-критерия Стьюдента.
Эти данные показывают, что соединения, которые обладают активностью в анализах из биологического примера 1, могут модулировать активируемые высоким напряжением калиевые токи (как полагают, опосредованные каналами Κν3.1; Вгете и РогкуЗНе, 2005) в нейронах ΜNТВ, участка ствола головного мозга, который обрабатывает слуховую информацию. Этот результат подтверждает возможность применения соединений по изобретению для лечения нарушений слуха.
- 148 023768
Биологический пример 4.
Модель судорог под дейсвием электрошока у крыс.
Подготовка эксперимента.
Самцов крыс линии СЭ (85-130 г) получали от С1аг1ее Ккег, 1!а1у. Животных содержали группами со свободным доступом к корму (стандартный корм для грызунов) и воде при 12-часовом цикле свет/темнота (включение света в 6 ч утра). Во всех случаях был предоставлен период по меньшей мере 5 суток между поступлением в исследовательский центр ΟδΚ и исследованием.
Протокол эксперимента.
Животным вводили исследуемое соединение в соответствующей дозе, соответствующим путем и в соответствующее время до обработки и возвращали в клетку для содержания. Тестирование проходило в комнате, отдельной от комнаты, используемой для содержания. Тестирование включало определение порога тонических судорог разгибательных мышц задних конечностей при использовании стимулятора Нидо δ;κ1^ Е1ес!готк, который вырабатывает постоянный ток длительностью 0,3 секунды, частотой 50 Гц, синусоидальной формы, с полной регулировкой от 1 до 300 мА. Стимулы прикладывали через корнеальные электроды (Ь1еап Т.О., А1кте А.К., НеШЬгеДег С.А., Ошпп Ь.Р., ТгаП В.К., Ир!оп Ν. (2005), Вг ί. Ркагтасок 144(5):628-35). Судорожный порог определяли при использовании метода вверх и вниз в модификации К1тЬа11 е! а1. (1957) (К1тЬа11 А.'ЭД'., Вите!! \УТ ίτ, ЭокеДу Ό.Ο. (1957), КаД1а! Кее. 7(1):112). Первое тестируемое животное в каждой группе стимулировали током, который, как можно было предположить, был близок к порогу индуцирования судороги. Если тоническая судорога не индуцировалась, тогда следующее животное в группе получало стимул на 5 мА выше. Если тоническая судорога индуцировалась, тогда следующее животное в группе получало стимул на 5 мА ниже. Это повторяли для всех животных в контрольной (получающей носитель) группе. В случае групп, получавших исследуемое соединение, использовали шаги от 5 до 10 мА. В конце исследования брали образцы крови для анализа концентраций лекарственного средства в этой ячейке (п равно 4/группа).
Лекарственные средства и вещества.
Все дозы высчитывали как основу. Вальпроат натрия суспендировали в 1% (мас./об.) Ме!1осе11 (эфир метилцеллюлозы) и вводили перорально (р.о.) в дозе 5 мл/кг за 1 ч до исследования. Соединение из референсного примера КЕ1 растворяли в ^ΜδО и затем суспендировали в 1% (мас./об.) Ме!1осе11 до конечной концентрации ^ΜδО 5% (об./об.). Соединение из референсного примера КЕ1 затем вводили р.о. в дозе 5 мл/кг за 2 ч до исследования.
Анализ данных.
Индуцирование судороги измеряли в виде эффекта все или ничего, подсчитываемого либо как наличие (+), либо как отсутствие (0) для каждого животного. Данные для каждой группы, получавшей соединения, регистрировали в виде количества + и 0 при каждом применяемом уровне тока, и эту информацию затем использовали для подсчета величины СС50 (ток, вызывающий судорожные реакции у 50% животных) плюс стандартная ошибка среднего согласно методу К1тЬа11 е! а1. (1957). Эффекты лекарственных средств подсчитывали в виде % изменения в СС50. Значимые различия между животными, получавшими лекарственные средства, и группами, получавшими соответствующий носитель, оценивали согласно методу Литчфилда и Вилкоксона (1949).
Результаты.
Предварительное введение соединения из референсного примера КЕ1 сопутствует значительному увеличению судорожного порога в обеих исследуемых дозах: в дозе 30 мг/кг р.о. соединение из референсного примера КЕ1 вызывало увеличение судорожного порога 91%, тогда как в дозе 60 мг/кг р.о., увеличение судорожного порога составило +218%. Увеличение, вызываемое более высокой дозой соединения из референсного примера КЕ1, было сходным с увеличением, вызываемым положительным контролем, вальпроатом натрия в дозе 300 мг/кг р.о. (+ 258%).
Концентрации соединения из референсного примера КЕ1 в крови, измеренные у включенных в анализ животных через 2 ч после введения, составляли 5,3 и 9,1 мкг/мл после доз 30 и 60 мг/кг р.о., соответственно. Эти концентрации эквивалентны свободным концентрациям в крови 1,3 и 2,2 мкМ, соответственно, и, таким образом, находятся в соответствии с концентрациями соединения из референсного примера КЕ1, которые создают значимое усиление Ку3-опосредованных токов, наблюдаемых в ш νίΙΐΌ электрофизиологическом анализе рекомбинантных человеческих каналов Ку3, описанном выше. Выводы
Эти результаты означают, что соединение из референсного примера КЕ1 обладает противосудорожной эффективностью, и что этот эффект, вероятно, опосредован положительной модуляцией калиевых каналов Ку3. Соответственно, соединения, которые обладают активностью в анализах из биологического примера 1, могут обладать противосудорожной эффективностью.
Биологический пример 5.
Гиперактивность у мышей, индуцированная психостимуляторами.
Подготовка эксперимента.
Самцов мышей линии СЭ-1 (25-35 г) получали от С1аг1ее Кгуег, 1!а1у. Животных содержали группами со свободным доступом к корму (стандартный корм для грызунов) и воде при 12-часовом цикле свет/темнота (включение света в 6 ч утра). Во всех случаях был предоставлен период по меньшей мере 5
- 149 023768 суток между поступлением в исследовательский центр 08К и исследованием.
Протокол эксперимента.
Животным вводили исследуемое соединение в соответствующей дозе, соответствующим путем и в соответствующее время до обработки и затем возвращали в клетку для содержания. Тестирование проходило в комнате, отделенной от комнаты, используемой для содержания. Мышам перорально (р.о.) вводили исследуемое соединение и помещали по отдельности в бокс из плексигласа Рег5рех (длина 20,5 см, ширина 20,5 см, высота 34 см), покрытый перфорированной крышкой. Инфракрасные контролирующие сенсоры располагали по периметру вдоль стен (горизонтальные сенсоры). Два дополнительных сенсора располагали на 2,5 см выше уровня пола на противоположных сторонах (вертикальные сенсоры). Собирали данные и анализировали их при помощи системы Уег5аМах (Ассшсап ПЫгитепЬ 1пс., Со1итЬи5, ОН), которая в свою очередь переносила информацию на компьютер. После 30 мин привыкания мышам вводили амфетамин интраперитонеально (+р.) в дозе 2 мг/кг при 10 мл/кг, и последующую локомоторную активность на площадке для тестирования оценивали в течение дальнейших 60 мин. Локомоторную активность определяли как общее расстояние (см), пройденное каждой мышью на площадке для тестирования в течение периода тестирования 60 мин.
Лекарственные средства и вещества.
Все дозы высчитывали как основу. Клозапин растворяли в дистиллированной воде и вводили в дозе 3 мг/кг интраперитонеально (1.р.) при 10 мл/кг. Соединение из референсного примера КЕ1 (10, 30 или 60 мг/кг) или носитель (НРМС (гидроксипропилметилцеллюлоза) 0,5% мас./об., Т\уееп 80 (полисорбат 80) 0,1% об./об. в воде) вводили р.о. при 10 мл/кг. И клозапин, и соединение из референсного примера КЕ1 вводили непосредственно перед помещением животного на площадку для тестирования (за 30 мин до введения амфетамина).
Результаты.
Взятый отдельно амфетамин вызывал большое и значимое увеличение общего пройденного расстояния. Доза 30 мг/кг р.о. соединения из референсного примера КЕ1 значительно снижала увеличение общего пройденного расстояния, вызванное амфетамином. Более высокая доза 60 мг/кг р.о. соединения из референсного примера КЕ1 дополнительно снижала увеличение локомоторной активности, вызванное амфетамином, аналогично положительному контролю, клозапину (3 мг/кг 1.р.). Данные суммированы в табл. 2.
Таблица 2
Влияние соединения из референсного примера КЕ1 на индуцированную амфетамином гиперлокомоцию у мыши. Соединение из референсного примера КЕ1 вводили р.о. за 30 мин до амфетамина (2 мг/кг 1.р.).
Клозапин вводили 1.р. за 30 мин до амфетамина (2 мг/кг 1.р.). Общее расстояние оценивали в течение 60 мин, начиная непосредственно после введения амфетамина. Данные выражали в виде среднего значения ± 8ЕМ. Данные подвергали однофакторному дисперсионному анализу (АИОУА) с последующим критерием Дуннетта (** р менее 0,01 по сравнению с введением только амфетамина)
Вводимые соединения Общее пройденное расстояние (см)
Носитель 1049 + 522
2,0 мг/кг амфетамина (АМРН) 16304 ± 3309
2 мг/кг АМРН плюс 10 мг/кг соединения из Референсного примера КЕ1 15267 + 3166
2 мг/кг АМРН плюс 30 мг/кг соединения из Референсного примера РЕ1 5790 ± 1436
2 мг/кг АМРН плюс 60 мг/кг соединения из Референсного примера КЕ1 1494 ± 378
2 мг/кг АМРН плюс 3 мг/кг клозапина 932 ± 362
Выводы.
Эти результаты показывают, что соединение из референсного примера КЕ1 в дозах, аналогичных дозам, при которых демонстрируется противосудорожная эффективность, способно предупреждать гиперактивность, индуцированную психостимулятором амфетамином. Таким образом, соединение из референсного примера КЕ1 и другие соединения, которые положительно модулируют каналы 1<ν3.1 и/или Кл'3.2, как это можно видеть из анализа, описанного в Биологической примере 1, могут быть полезны в лечении расстройств, связанных с гиперактивностью, таких как биполярная мания или нарушение функций допаминовой системы, такое, которое может встречаться при лекарственной зависимости, синдроме дефицита внимания с гиперактивностью (АИНИ) или шизофрении.
- 150 023768
Биологический пример 6.
Фармако-электроэнцефалография (Ф-ЭЭГ) обыкновенной игрунки.
Животные и хирургическое вмешательство.
В этом исследовании использовали выведенных в лаборатории самцов (вазэктомированных) и самок обыкновенной игрунки (СаПпНп.х ]асс1ш5) старше 2 лет с массой тела 250-500 г. Животных содержали в клетках парами в виварии при поддержании температуры 25±1°С, влажности 60% и 12-часового цикла свет/темнота (включение света в 6 ч утра, с 30-минутным имитированием рассвета и сумерек). Животные получали стандартную диету и питьевую воду неограниченно. Только одно животное из каждой пары включали в исследование, которое проводили с животным, находящимся в клетке, в которой оно содержалось.
Действие соединений по изобретению оценивали при использовании телеметрической регистрации кортикальной ЭЭГ (ЭКоГ). Многоканальный телеметрический передатчик (Ό8Ι модель ТЫ1М2-Р40ЕЕТ) имплантировали интраперитонеально при использовании стандартных хирургических методов анестезированным игрункам. Отводящие электроды вживляли с помощью зубного цемента в череп непосредственно в контакте с твердой мозговой оболочкой через два высверленных отверстия в лобнотеменной области. После хирургического вмешательства животных помещали парами (один с имплантом, один неоперированный партнер) в клетку для содержания с неограниченным доступом к корму и воде. Животные демонстрировали нормальный поведенческий репертуар сразу же после восстановления после хирургического вмешательства; однако, Ф-ЭЭГ оценивали по меньшей мере 3 недели спустя. Все исследования ίη νί\Ό проводили в соответствии с итальянским законодательством и согласно этическим стандартам компании О1ахо8шйЬк1ше.
Методика эксперимента.
Животных помещали в дуплянки в их комнатных вольерах, и записи ЭЭГ регистрировали при использовании программного обеспечения Оа1ас|ие51 АКТ в течение 5-минутного периода для каждого момента времени и анализировали при использовании программного обеспечения 8р1ке2 (СЕЭ, υΚ). Спектральную мощность в каждом диапазоне частот определяли для каждого периода времени длительностью 2 с в течение периода до введения веществ и усредняли; аналогично спектральную мощность в каждом диапазоне частот определяли для последовательных периодов времени длительностью 2 с каждого
5-минутного периода регистрации после введения носителя или лекарственного средства. Изменение в абсолютной спектральной мощности для каждого различного диапазона частот (дельта, тета, альфа и бета) подсчитывали в автономном (ойГше) режиме.
Введение лекарственных средств устанавливали согласно полному перекрестному исследованию: все введения были в произвольном порядке распределены между животными, в отдельных сеансах эксперимента, каждое животное получало носитель и каждую дозу лекарственного средства после соответствующего периода вымывания.
Шести животным перорально вводили соединение из референсного примера КЕ2 в дозах 0,3, 1 и 3 мг/кг (1 мл/кг), и записи ЭЭГ регистрировали на 15, 30, 60, 90, 120 и 180 минах после введения. Соединение из референсного примера КЕ2 суспендировали в 12,5%-ном (мас./об.) водном сульфобутиловом эфире бета-циклодекстрина (СарЙ5о1), содержащем 0,1% (мас./об.) Т\уеен 80 и 0,5% (мас./об.) НРМС.
Анализ данных.
Учитывали четыре различных диапазона частот: дельта (1,50-6,00 Гц), тета (6,00-8,00 Гц), альфа (8,00-12,00 Гц) и бета (12,00-30,00 Гц). Значения спектральной мощности в каждом диапазоне в каждый момент времени сначала логарифмически преобразовывали и затем анализировали с помощью модели со смешанными эффектами со временем в качестве фиксированного эффекта, исходным уровнем в качестве коварианты и животным в качестве случайного параметра. Данные суммировали в виде среднего значения относительных изменений от исходного уровня и стандартной ошибки.
Результаты.
Изменения фармако-ЭЭГ, наблюдаемые в этих исследованиях, показывают, что по сравнению с носителем соединение из референсного примера КЕ2 в самой высокой дозе (3 мг/кг) вызывало статистически значимое увеличение абсолютной мощности в дельта диапазоне между 30 и 120 мин (р менее 0,05) и статистически значимое увеличение в тета диапазоне мощности в 60 мин (р менее 0,05). В промежуточной дозе (1 мг/кг) соединение из референсного примера КЕ2 вызывало минимально значимое (р менее 0,10) увеличение абсолютной мощности в дельта диапазоне в 30 мин и сопутствующее значимое уменьшение в бета диапазоне (р менее 0,05). Не наблюдали значимых эффектов в альфа диапазоне при любой дозе соединения из референсного примера КЕ2.
Эти результаты означают, что соединения, которые обладают активностью в анализах из биологического примера 1, могут модифицировать ЭЭГ находящихся в сознании приматов. Увеличения в дельта диапазоне ЭЭГ активности ранее наблюдали для антипсихотических соединений у людей.
Биологический пример 7.
Циркадный тип экспрессии Κν3.1 и Κν3.2 каналов в супрахиазматическом ядре мыши.
Материалы и методы.
Тридцать взрослых самцов мышей С57ВБ/61 (возраст: 4-5 недель по прибытии; С1аг1е5 Кгуег РК)
- 151 023768 содержали в шести разных клетках (по 5 мышей на клетку) и выдерживали в течение 4 недель в специальной комнате в условиях 12 ч свет-12 ч темнота (включение освещения в 06:00 обозначали как циркадное время [СТ] 6; выключение освещения в 18:00 обозначали как СТ 18). Температуру в комнате поддерживали равной 21±2°С; корм и вода были в свободном доступе.
После завершения этого периода мышей умерщвляли посредством сворачивания шеи в различные моменты времени на протяжении 24-часового периода; по 5 мышей в каждую временную точку. Животных переносили из комнаты для содержания в хирургическое помещение и затем немедленно умерщвляли. Во время фазы темноты все эти действиявыполняли при тусклом красном освещении.
Мозг извлекали из черепа и немедленно погружали в изопентан, содержавшийся приблизительно при -30°С и затем хранили при -70°С до ш к11и гибридизационного анализа.
Все мозги разрезали посредством криостата и несколько коронарных срезов толщиной 14 мкм собирали на уровне, на котором присутствет супрахиазматическое ядро, приблизительно между -0,22 и -0,82 мм от Вгедта (Рахшок и РгаикПи, Мойке Ьгат ш к1егео1ах1с соогбта1ек). Срезы затем хранили при -80°С до использования. Для каждой временной точки (СТ12, 16, 20, 24, 4 и 8), отбирали по пять мышей и отбирали по два непоследовательных среза для каждой мыши и оставляли сохнуть при комнатной температуре, затем немедленно подвергали процедуре ш к11и гибридизации, как описано в предыдущих экспериментах.
Результаты.
Однофакторный АЫОУА не выявил значимого эффекта времени в отношении экспресиии Κν3.1 мРНК в супрахиазматическом ядре мышей (фиг. 6а). Напротив, однофакторный ΑNОУΑ показал, что имеет место высоко значимый эффект времени в отношении экспрессии Κν3.2 мРНК в супрахиазматическом ядре мышей (р менее 0,001), со значительным пиком экспрессии в ΖТ 10, временной точке, соответствующей 2 часам до перехода от световой фазы к темновой фазе, которая является активной фазой мышей (фиг. 6Ь).
Фиг. 6: (а) экспрессия Κν3.1 мРНК в супрахиазматическом ядре мыши, умещвленной в различные циркадные моменты времени на протяжении 24-часового цикла свет-темнота. Экспрессия Ку3.Ь1 мРНК выражается в нКи/г в виде среднее ± 8.Е.М. от и = 5 мышей на временную точку; (Ь) экспрессия Κν3.2 мРНК в супрахиазматическом ядре. Экспрессия Κν3.2 мРНК выражается как среднее ± 8.Е.М. от и = 5 мышей на временную точку. *** р менее 0,001: экспрессия Κν3.2 мРНК в СТ 16 значительно отличается от всех других временных точек. * р менее 0,05: экспрессия Κν3.2 мРНК в СТ 20 значительно отличается от экспрессии, измеренной в СТ 24 и 4.
Эти результаты свидетельствуют о том, что экспрессия Κν3.2 канала в супрахиазматическом ядре варьирует на протяжении 24-часового циркадного цикла. Таким образом, учитывая центральную роль супрахиазматического ядра в установках циркадных часов у млекопитающих, Κν3.2 каналы, повидимому, важны для функционирования этих часов. Соответственно, соединения, которые модулируют Κν3.2 каналы, могут иметь потенциал в лечении расстройств, ассоциированных с дисфункцией циркадного цикла, включая нарушения сна и биполярные расстройства.
Биологический пример 8.
Оценка физиологического сна у крысы.
Методы.
Взрослым самцам СО крыс (С. Кгуег, 11а1у) имплантировали телемерические зонды и содержали их индивидуально в контролируемых условиях (температура 18-20°С; относительная влажность 45-50%; 12часовой цикл свет-темнота, освещение включали в 3 ч после полудня, обозначено как циркадное время (СТ) 0) со свободным доступом к корму и воде.
Соединение из референсного примера КЕ1 готовили в виде препарата в Т^ееи (0,1% об./об.) и НРМС (0,5% об./об.) и вводили перорально в дозах 10, 30 и 60 мг/кг (об. 2 мл/кг) в СТ18 (за 6 ч перед включением света). Непрерывно снимали электроэнцефалограмму (ЭЭГ) и электромиограмму (ЭМГ), начиная сразу после введения, используя телеметрический прибор (Ό8Ι баЮсщек!® А.И.Т. кук1ет). Записи ЭЭГ и ЭМГ анализировали для установления типов сна, используя к1еер81ди® (1<1кке1 Сотΐес Со.). Статистические анализы (1-факторный Αиоνа с последующим критерием Дуннетта) выполняли, используя программное обеспечение 81аИкйса-8.
Результаты.
Соединение из референсного примера КЕ1 в дозе 60 мг/кг значительно увеличивало общее время сна (р менее 0,05, и=8) и время, проводимое в не-КЕМ сне (медленный сон) (р менее 0,05, и=8) в течение периода времени 5 ч немедленно после введения дозы, но не влияло на время, проводимое в КЕМ сне (быстрое движение глаз).
Эти результаты свидетельствуют о том, что соединения по изобретению могут усиливать физиологический сон у животных, свидетельствуя о том, что они могут быть полезными в лечении расстройств сна у людей.
- 152 023768

Claims (19)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы (1а) где Κ1 представляет собой Н или С1-4алкил, галоген, галоген-С1-4алкил, СИ, С1-4алкокси, галоген-С1 4алкокси;
    Κ2 представляет собой Н, С1-4алкил, С3-4спирокарбоцикл, галоген-С1-4алкил или галоген;
    Κ3 представляет собой Н, С1-4алкил, галоген-С1-4алкил, галоген;
    А представляет собой 5- или 6-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл, содержащий один гетероатом кислорода, или два гетероатома кислорода, или один гетероатом кислорода и один гетероатом азота, возможно конденсированный с циклопропильной группой с образованием трицикла при рассмотрении вместе с фенилом;
    X представляет собой С или Ν;
    Υ представляет собой С или Ν;
    Κ4 представляет собой С1-4алкил;
    Κ5 представляет собой Н, дейтерий, С1-4алкил, или
    Κ4 и Κ5 могут быть конденсированы с образованием С3-4спирокарбоцикла;
    где Κ2 и Κ3 могут быть присоединены к одному и тому же или разным кольцевым атомам и
    Κ2 может быть присоединен к атому конденсированного кольца, или его фармацевтически приемлемая соль.
  2. 2. Соединение по п.1, где Κι представляет собой Н или метил.
  3. 3. Соединение по п.1 или 2, где Κ2 представляет собой Н, метил или С3спирогруппу.
  4. 4. Соединение по любому из пп.1-3, где Κ3 представляет собой Н или метил.
  5. 5. Соединение по любому из пп.1-4, где X представляет собой С и Υ представляет собой С.
  6. 6. Соединение по любому из пп.1-4, где X представляет собой С и Υ представляет собой Ν.
  7. 7. Соединение по любому из пп.1-4, где X представляет собой Ν и Υ представляет собой Ν.
  8. 8. Соединение по любому из пп.1-7, где Κ4 представляет собой метил или этил.
  9. 9. Соединение по любому из пп.1-8, где Κ5 представляет собой Н или метил.
  10. 10. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из (5Κ)-3-[4-(1,3-дигидро-2-бензофуран-4-илокси)фенил]-5-метил-2,4-имидазолидиндиона;
    (5Κ)-5-метил-3-{4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-2,4-имидазолидиндиона;
    (5Κ)-3-{4-[(3,6-диметил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-5-метил-2,4-имидазолидиндиона;
    5.5- диметил-3-{4-[(3-метил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]фенил}-2,4-имидазолидиндиона;
    (5Κ)-5-этил-3-{6-[(3-этил-1,2-бензизоксазол-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4-имидазолидиндиона;
    (5Κ)-5-этил-3-(6-{[3-(1-метилэтил)-1,2-бензизоксазол-4-ил]окси}-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндиона;
    (5Κ)-3-{4-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]фенил}-5-метил-2,4имидазолидиндиона;
    (5Κ)-3-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-метил-2,4имидазолидиндиона;
    (5Κ)-3-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-этил-2,4имидазолидиндиона;
    (5Κ)-3-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-5-этил-2,4имидазолидиндиона;
    7-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,7-диазаспиро[3.4]октан6,8-диона;
    6-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-4,6-диазаспиро[2.4]гептан5,7-диона;
    3-{6-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,5-диметил-2,4имидазолидиндиона;
    (5Κ)-3-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси] -5 -пиримидинил} -5-(1,1диметилэтил) -2,4 -имидазолидиндиона;
    (5Κ)-5-этил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1'-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндиона;
    5.5- диметил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4- 153 023768 имидазолидиндиона;
    (5К)-5-этил-5-метил-3-[6-(спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндиона;
    (5К)-5-этил-3-(6-{[(3Б/К)-3 -метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил]окси}-3-пиридинил)-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерной смеси);
    (5К)-5-этил-3-{6-[(3-метил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомеров 1 и 2);
    (5К)-5-этил-3-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерной смеси);
    (5К)-5-этил-3-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомеров 1 и 2);
    5,5-диметил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (рацемической смеси);
    5.5- диметил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (энантиомера 1 и энантиомера 2);
    5.5- диметил-3-{6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3-пиридинил}2,4-имидазолидиндиона (рацемической смеси);
    5.5- диметил-3-{6-[(1а-метил-1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-ил)окси]-3-пиридинил}2.4- имидазолидиндиона (энантиомера 1 и энантиомера 2);
    (5К)-5-этил-5-метил-3-[6-(1Н-спиро[2-бензопиран-4,1'-циклопропан]-5-илокси)-3-пиридинил]-2,4имидазолидиндиона;
    3-{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-5-пиримидинил}-5,5-диметил-2,4имидазолидиндиона;
    (5К)-3 -{2-[(3,3-диметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ил)окси] -5 -пиримидинил} -5-( 1 -метилэтил)2.4- имидазолидиндиона;
    (5К)-3-{6-[(2,2-диметил-2,3-дигидро-1-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5-этил-2,4имидазолидиндиона;
    5.5- диметил-3-[6-(1Н-спиро [2-бензопиран-4,1 '-циклопропан] -5-илокси)-3 -пиридинил] -2,4имидазолидиндиона;
    (5К)-3-[2-(2,3-дигидроспиро [хромен-4,1'-циклопропан] -5-илокси)-5-пиримидинил] -5-этил-5-метил2,4-имидазолидиндиона;
    5.5- диметил-3-{6-[(4-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (рацемической смеси, энантиомера 1, энантиомера 2);
    (5К)-5-этил-5-метил-3-{6-[(3-метил-3,4-дигидро-2Н-хромен-5-ил)окси]-3-пиридинил}-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерной смеси, диастереоизомера 1, диастереоизомера 2);
    (5К)-5-этил-5-метил-3-[6-(1,1а,2,7Ь-тетрагидроциклопропа[с]хромен-7-илокси)-3-пиридинил]-2,4имидазолидиндиона (диастереоизомерной смеси, диастереоизомера 1, диастереоизомера 2) и
    3-{6-[(3-этил-1,3-дигидро-2-бензофуран-4-ил)окси]-3-пиридинил}-5,5-диметил-2,4имидазолидиндиона (рацемической смеси, энантиомера 1, энантиомера 2).
  11. 11. Применение соединения по любому из пп.1-10 в изготовлении лекарственного средства для лечения или профилактики заболевания или расстройства, при котором требуется модулятор Κν3.1 или Κν3.2 или Κν3.1 и Κν3.2 каналов.
  12. 12. Применение соединения по любому из пп.1-10 в изготовлении лекарственного средства для профилактики или лечения нарушений слуха, шизофрении, биполярного расстройства или расстройств сна.
  13. 13. Применение по п.12 в изготовлении лекарственного средства для профилактики нарушений слуха, шизофрении, биполярного расстройства или расстройств сна.
  14. 14. Применение по п.12 в изготовлении лекарственного средства для лечения нарушений слуха, шизофрении, биполярного расстройства или расстройств сна.
  15. 15. Применение по п.12 в изготовлении лекарственного средства для профилактики или лечения нарушений слуха.
  16. 16. Применение по п.15, где нарушение слуха выбрано из группы, состоящей из невропатии слухового нерва, расстройства слуховой обработки информации, потери слуха, которая включает внезапную потерю слуха, вызванную шумом потерю слуха, вызванную приемом веществ потерю слуха, потерю слуха у взрослых старше 60 лет (старческая тугоухость) и шума в ушах.
  17. 17. Применение по п.12 в изготовлении лекарственного средства для профилактики или лечения шизофрении.
  18. 18. Соединение, выбранное из спиро [ 1 -бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ола
    - 154 023768
    7-метилспиро [2Н-бензофуран-3,1 '-циклопропан] -4-ола и
    3,3,7-триметил-2,3-дигидро-1 -бензофуран-4-ола или его соль.
  19. 19. Соединение, выбранное из группы, состоящей из или его соль.
    Токи ЬКу3.2, регистрируемые при использовании анализа, описанного в биологическом примере 1, при двух концентрациях соединения из референсного примера КЕ1
    - 155 023768
    Токи ΗΚν3.2, регистрируемые при использовании анализа, описанного в биологическом примере 1, при двух концентрациях соединения из референсного примера КЕ3
EA201390609A 2010-12-06 2011-12-06 ПРОИЗВОДНЫЕ ГИДАНТОИНА, ПОЛЕЗНЫЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ Kv3-КАНАЛОВ EA023768B1 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/EP2010/068946 WO2011069951A1 (en) 2009-12-11 2010-12-06 Imidazolidinedione derivatives
GBGB1020607.6A GB201020607D0 (en) 2010-12-06 2010-12-06 Novel compounds
GBGB1109508.0A GB201109508D0 (en) 2011-06-07 2011-06-07 Novel compounds
GBGB1113757.7A GB201113757D0 (en) 2011-08-10 2011-08-10 Novel compounds
PCT/GB2011/052414 WO2012076877A1 (en) 2010-12-06 2011-12-06 Hydantoin derivatives useful as kv3 inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201390609A1 EA201390609A1 (ru) 2014-01-30
EA023768B1 true EA023768B1 (ru) 2016-07-29

Family

ID=45464001

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201390609A EA023768B1 (ru) 2010-12-06 2011-12-06 ПРОИЗВОДНЫЕ ГИДАНТОИНА, ПОЛЕЗНЫЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ Kv3-КАНАЛОВ
EA201490922A EA027532B1 (ru) 2010-12-06 2012-12-06 Производные гидантоина, полезные в качестве ингибиторов kv3-каналов

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201490922A EA027532B1 (ru) 2010-12-06 2012-12-06 Производные гидантоина, полезные в качестве ингибиторов kv3-каналов

Country Status (18)

Country Link
US (13) US9346790B2 (ru)
EP (1) EP2649066B1 (ru)
JP (2) JP5913357B2 (ru)
KR (1) KR101862375B1 (ru)
CN (1) CN103328467B (ru)
AU (1) AU2011340258C1 (ru)
BR (1) BR112013013914B1 (ru)
CA (1) CA2817205C (ru)
DK (1) DK2649066T3 (ru)
EA (2) EA023768B1 (ru)
ES (1) ES2560304T3 (ru)
HK (1) HK1190395A1 (ru)
IL (3) IL226256A0 (ru)
MX (1) MX338489B (ru)
PL (1) PL2649066T3 (ru)
SG (2) SG190203A1 (ru)
WO (1) WO2012076877A1 (ru)
ZA (1) ZA201403529B (ru)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2575215T3 (es) * 2009-12-11 2016-06-27 Autifony Therapeutics Limited Derivados de imidazolidindiona
BR112013013914B1 (pt) 2010-12-06 2021-10-26 Autifony Therapeutics Limited Compostos derivados de hidantoína úteis como inibidores de kv3, usos dos referidos compostos e composição farmacêutica compreendendo os mesmos
WO2012168710A1 (en) * 2011-06-07 2012-12-13 Autifony Therapeutics Limited Hydantoin derivates as kv3 inhibitors
GB201209986D0 (en) 2012-06-06 2012-07-18 Autifony Therapeutics Ltd Novel compounds
CN103974944B (zh) * 2011-12-06 2016-11-02 奥蒂福尼疗法有限公司 用作kv3抑制剂的乙内酰脲衍生物
BR112014028991A2 (pt) 2012-05-22 2017-06-27 Autifony Therapeutics Ltd triazóis como inibidores de kv3
US9669030B2 (en) 2012-05-22 2017-06-06 Autifony Therapeutics Limited Hydantoin derivatives as Kv3 inhibitors
WO2013182851A1 (en) * 2012-06-06 2013-12-12 Autifony Therapeutics Limited Prophylaxis or treatment of diseases where a modulator of kv3.3 channels is required
WO2015094670A1 (en) 2013-12-20 2015-06-25 Gilead Sciences, Inc. Fused heterocyclic compounds as ion channel modulators
EP3094631B1 (en) 2014-01-16 2019-01-09 FMC Corporation Pyrimidinyloxy benzene derivatives as herbicides
ES2707506T3 (es) * 2014-03-21 2019-04-03 Biotage Ab Procedimiento y aparato para el equilibrado de una columna de cromatografía empaquetada
CN103980205B (zh) * 2014-06-05 2016-01-20 武汉格罗宁根医药科技有限公司 N-3-取代磺酰胺乙基-5-环丙烷螺环乙内酰脲衍生物及其制备方法和应用
TW202400564A (zh) 2015-06-05 2024-01-01 美商艾佛艾姆希公司 作為除草劑之嘧啶氧基苯衍生物
GB201521751D0 (en) * 2015-12-10 2016-01-27 Autifony Therapeutics Ltd Novel uses
GB201522179D0 (en) * 2015-12-16 2016-01-27 Autifony Therapeutics Ltd Novel compounds
GB201613163D0 (en) 2016-07-29 2016-09-14 Autifony Therapeutics Ltd Novel compounds
EP3555073A1 (en) 2016-12-16 2019-10-23 Autifony Therapeutics Limited Hydantoin modulators of kv3 channels
AU2018262478B2 (en) * 2017-05-02 2022-03-03 Fmc Corporation Pyrimidinyloxy benzo-fused compounds as herbicides
WO2018220762A1 (ja) 2017-05-31 2018-12-06 大塚製薬株式会社 ピリミジン化合物
CN107556262B (zh) * 2017-08-14 2020-05-22 四川大学 一种2-取代基芳并噁唑的制备方法
DE112018007799T5 (de) 2018-07-03 2021-03-25 Cummins Emission Solutions Inc. Zersetzungsreaktor mit körpermischung
US20210276985A1 (en) * 2018-10-16 2021-09-09 Autifony Therapeutics Limited Novel compounds
MX2021004386A (es) * 2018-10-16 2021-06-04 Autifony Therapeutics Ltd Compuestos novedosos.
GB201821066D0 (en) * 2018-12-21 2019-02-06 Univ Oxford Innovation Ltd Sleep modulation
US20220112176A1 (en) * 2019-03-25 2022-04-14 Bionomics Limited Substituted-n-heteroaryl compounds and uses thereof
JP7522203B2 (ja) 2020-02-06 2024-07-24 アウトイフオンイ トヘラペウトイクス リミテッド Ｋｖ３モジュレーター
US11638606B2 (en) 2020-04-15 2023-05-02 Bard Peripheral Vascular, Inc. Bipolar electrosurgical pleura sealing device, system, and method of operating same
EP3901152A1 (en) * 2020-04-23 2021-10-27 F. Hoffmann-La Roche AG Kv3 enhancers for the treatment of cognitive disorders
CN112213428A (zh) * 2020-10-13 2021-01-12 辽宁科技大学 一种超临界co2中进行非催化乙酰基化反应及其在线检测方法
WO2023017263A1 (en) 2021-08-10 2023-02-16 Autifony Therapeutics Limited Potassium channel modulators
WO2023101418A1 (ko) * 2021-12-03 2023-06-08 (주)인비보텍 난청 또는 이명의 예방 또는 치료용 조성물
WO2024121552A1 (en) 2022-12-06 2024-06-13 Autifony Therapeutics Limited Compounds for the treatment of centra nervous system disorders

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010072598A1 (en) * 2008-12-22 2010-07-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral compounds
WO2011069951A1 (en) * 2009-12-11 2011-06-16 Glaxo Group Limited Imidazolidinedione derivatives
WO2011073114A1 (en) * 2009-12-14 2011-06-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral compounds

Family Cites Families (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3474170A (en) * 1964-01-23 1969-10-21 Fmc Corp Pesticidal carbamates of dihydrobenzofuranols
US4143055A (en) * 1978-03-27 1979-03-06 Gruppo Lepetit S.P.A. 2,4,6-trisubstituted-2,3-dihydro-benzofuran derivatives
DE3015090A1 (de) 1980-04-19 1981-10-22 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen ]-(trihalogenmethyl-sulfenyl)-4-aryl-1,2,4-triazolidin-5-one, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende fungizide und verfahren zur bekaempfung von pilzen mit diesen verbindungen
DE3133405A1 (de) 1981-08-24 1983-03-10 Basf Ag, 6700 Ludwigshafen 1-(trihalogenmethyl-sulfenyl)-4-aryl-1,2,4-triazolidin-5-one und diese enthaltende fungizide
US4675403A (en) 1985-10-16 1987-06-23 American Home Products Corporation 3-Aminoalkyl derivatives of 5,5-disubstituted hydantoins with psychotropic activity
JP2514945B2 (ja) * 1987-02-05 1996-07-10 三井石油化学工業株式会社 芳香族アミン誘導体
DE3810848A1 (de) 1988-03-30 1989-10-19 Boehringer Ingelheim Kg Neue 2,3,4-substituierte imidazole und 3,4,5-substituierte 1,2,4-triazole, ihre herstellung und verwendung
DE3836175A1 (de) 1988-10-24 1990-05-03 Bayer Ag Fluor enthaltende phenole
CA2007830A1 (en) * 1989-01-18 1990-07-18 Shuji Ozawa 2,3-dihydro-3, 3-dimethyl-5-trifluoromethanesulfonyloxy-benzofurans, process for producing them and herbicides containing them
WO1991004027A1 (en) 1989-09-15 1991-04-04 Pfizer Inc. New n-aryl and n-heteroarylamide and urea derivatives as inhibitors of acyl coenzyme a: cholesterol acyl transferase (acat)
JPH03153606A (ja) * 1989-11-10 1991-07-01 Mitsui Petrochem Ind Ltd 除草剤組成物
US5362878A (en) 1991-03-21 1994-11-08 Pfizer Inc. Intermediates for making N-aryl and N-heteroarylamide and urea derivatives as inhibitors of acyl coenzyme A: cholesterol acyl transferase (ACAT)
DK123493D0 (da) 1993-11-01 1993-11-01 Lundbeck & Co As H Compounds
WO1996036633A1 (en) 1995-05-17 1996-11-21 E.I. Du Pont De Nemours And Company Fungicidal cyclic amides
WO1996036229A1 (en) 1995-05-17 1996-11-21 E.I. Du Pont De Nemours And Company Fungicidal cyclic amides
CZ394097A3 (cs) 1995-06-20 1998-09-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Artropodicidní a fungicidní amidy
JP2000516583A (ja) 1996-08-01 2000-12-12 イー・アイ・デユポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー 殺節足動物性および殺菌・殺カビ性の環状アミド類
WO1998023156A1 (en) 1996-11-26 1998-06-04 E.I. Du Pont De Nemours And Company Methyl substituted fungicides and arthropodicides
WO1998023155A1 (en) 1996-11-26 1998-06-04 E.I. Du Pont De Nemours And Company Arthropodicidal and fungicidal cyclic amides
WO1998033382A1 (en) 1997-01-30 1998-08-06 E.I. Du Pont De Nemours And Company Fungicidal compositions
JP4171549B2 (ja) 1998-01-28 2008-10-22 大正製薬株式会社 含フッ素アミノ酸誘導体
JP4194715B2 (ja) 1998-08-31 2008-12-10 大正製薬株式会社 ６−フルオロビシクロ［３．１．０］ヘキサン誘導体
JP2000072731A (ja) 1998-08-31 2000-03-07 Taisho Pharmaceut Co Ltd ４−置換−２−アミノビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２，６−ジカルボン酸誘導体及び製薬用組成物
AU763976B2 (en) 1999-07-23 2003-08-07 Shionogi & Co., Ltd. Th2 differentiation inhibitors
CN1431896A (zh) 2000-04-04 2003-07-23 盐野义制药株式会社 含有高脂溶性药物的油性组合物
AU2001244610A1 (en) 2000-04-05 2001-10-23 Shionogi And Co., Ltd. Oil-in-water microemulsions containing tricyclic compounds or preconcentrates thereof
FR2812633A1 (fr) 2000-08-04 2002-02-08 Aventis Cropscience Sa Derives de phenyl(thio)urees et phenyl(thio)carbamates fongicides
AU2002354410A1 (en) 2001-12-05 2003-06-17 Japan Tobacco Inc. Triazole compound and medicinal use thereof
WO2003066050A1 (en) 2002-02-07 2003-08-14 The Curators Of The University Of Missouri Opioid receptor active 4-(3-hydroxyphenyl) or 4-(3-alkoxyphenyl)-1,2,4-triazole compounds
FI20030030A0 (fi) * 2003-01-09 2003-01-09 Orion Corp Uusia yhdisteitä
EP1618094B1 (en) 2003-04-30 2007-09-05 The Institutes for Pharmaceutical Discovery, LLC Substituted heteroaryls as inhibitors of protein tyrosine phosphatases
WO2005000309A2 (en) 2003-06-27 2005-01-06 Ionix Pharmaceuticals Limited Chemical compounds
GB0325175D0 (en) 2003-10-28 2003-12-03 Novartis Ag Organic compounds
US7256208B2 (en) 2003-11-13 2007-08-14 Bristol-Myers Squibb Company Monocyclic N-Aryl hydantoin modulators of androgen receptor function
US20060211697A1 (en) 2004-12-08 2006-09-21 Liren Huang 2-(2 Or 4-substituted aryloxy)-phenol derivatives as antibacterial agents
NZ591119A (en) 2005-05-13 2012-08-31 Univ California Use of diarylhydantoin compounds for treating specific cancers
US7709517B2 (en) 2005-05-13 2010-05-04 The Regents Of The University Of California Diarylhydantoin compounds
PT3412290T (pt) 2006-03-27 2021-04-19 Univ California Modulador do recetor de androgénios para o tratamento de cancro da próstata e doenças associadas ao recetor de androgénios
JP5350217B2 (ja) 2006-03-29 2013-11-27 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア ジアリールチオヒダントイン化合物
RU2009108280A (ru) 2006-08-08 2010-09-20 Санофи-Авентис (Fr) Ариламиноарилалкилзамещенные имидазолидин-2,4-дионы, способы их получения, содержащие эти соединения лекарственные средства и их применение
EP2146716A4 (en) 2007-04-20 2010-08-11 Deciphera Pharmaceuticals Llc KINASE INHIBITORS USEFUL FOR THE TREATMENT OF MYELOPROLIFERATIVE SYNDROME AND OTHER PROLIFERATIVE DISEASES
EP2252592A1 (de) 2008-02-07 2010-11-24 Sanofi-Aventis Arylchalcogeno-arylalkyl-substituierte imidazolidin-2,4-dione, verfahren zu ihrer herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und ihre verwendung
EP2342178B1 (en) * 2008-09-02 2016-09-28 Sanofi Substituted aminoindanes and analogs thereof, and the pharmaceutical use thereof
BR112013013914B1 (pt) * 2010-12-06 2021-10-26 Autifony Therapeutics Limited Compostos derivados de hidantoína úteis como inibidores de kv3, usos dos referidos compostos e composição farmacêutica compreendendo os mesmos
WO2012168710A1 (en) 2011-06-07 2012-12-13 Autifony Therapeutics Limited Hydantoin derivates as kv3 inhibitors
US10668025B2 (en) 2015-10-30 2020-06-02 The Johns Hopkins University Mucus penetrating particles with high molecular weight and dense coatings

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010072598A1 (en) * 2008-12-22 2010-07-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral compounds
WO2011069951A1 (en) * 2009-12-11 2011-06-16 Glaxo Group Limited Imidazolidinedione derivatives
WO2011073114A1 (en) * 2009-12-14 2011-06-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral compounds

Also Published As

Publication number Publication date
US20160317537A1 (en) 2016-11-03
EP2649066A1 (en) 2013-10-16
US11541052B2 (en) 2023-01-03
US10265316B2 (en) 2019-04-23
AU2011340258C1 (en) 2016-10-20
CA2817205C (en) 2020-04-07
MX2013006343A (es) 2013-09-13
US10555945B2 (en) 2020-02-11
US20200360379A1 (en) 2020-11-19
BR112013013914A2 (pt) 2016-09-13
PL2649066T3 (pl) 2017-04-28
KR20130138815A (ko) 2013-12-19
BR112013013914B1 (pt) 2021-10-26
US20160251340A1 (en) 2016-09-01
US10835534B2 (en) 2020-11-17
EA201490922A1 (ru) 2015-03-31
MX338489B (es) 2016-04-18
US11197859B2 (en) 2021-12-14
CN103328467A (zh) 2013-09-25
DK2649066T3 (en) 2016-01-11
US20200179385A1 (en) 2020-06-11
ES2560304T3 (es) 2016-02-18
EA201390609A1 (ru) 2014-01-30
CA2817205A1 (en) 2012-06-14
AU2011340258A1 (en) 2013-05-30
CN103328467B (zh) 2016-08-10
US20190192516A1 (en) 2019-06-27
SG190203A1 (en) 2013-06-28
IL253102A0 (en) 2017-08-31
US20140323508A1 (en) 2014-10-30
IL253102B (en) 2018-04-30
JP2016145215A (ja) 2016-08-12
JP5913357B2 (ja) 2016-04-27
US20130267510A1 (en) 2013-10-10
AU2011340258B2 (en) 2016-05-19
IL226256A0 (en) 2013-07-31
WO2012076877A1 (en) 2012-06-14
JP6118927B2 (ja) 2017-04-19
KR101862375B1 (ko) 2018-05-29
EA027532B1 (ru) 2017-08-31
US20150336936A1 (en) 2015-11-26
ZA201403529B (en) 2020-03-25
US11583527B2 (en) 2023-02-21
US20220054490A1 (en) 2022-02-24
US20190000849A1 (en) 2019-01-03
JP2013544873A (ja) 2013-12-19
US9133175B2 (en) 2015-09-15
US20170273981A1 (en) 2017-09-28
HK1190395A1 (en) 2014-07-04
US10098881B2 (en) 2018-10-16
US9833452B2 (en) 2017-12-05
SG11201402529RA (en) 2014-06-27
US9422272B2 (en) 2016-08-23
US20180036308A1 (en) 2018-02-08
US20210023084A1 (en) 2021-01-28
IL253104A0 (en) 2017-08-31
EP2649066B1 (en) 2015-10-21
US9346790B2 (en) 2016-05-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11197859B2 (en) Hydantoin derivatives useful as Kv3 inhibitors
EP2509961B1 (en) Imidazolidinedione derivatives
JP5985651B2 (ja) Ｋｖ３阻害剤として有用なヒダントイン誘導体
BR112014013400B1 (pt) Compostos derivados de hidantoína úteis como inibidores de kv3 e seus usos na profilaxia ou tratamento de distúrbios auditivos e esquizofrenia ou no tratamento de síndrome do x frágil

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM KG MD TJ TM