BR112014013400B1 - Compostos derivados de hidantoína úteis como inibidores de kv3 e seus usos na profilaxia ou tratamento de distúrbios auditivos e esquizofrenia ou no tratamento de síndrome do x frágil - Google Patents

Compostos derivados de hidantoína úteis como inibidores de kv3 e seus usos na profilaxia ou tratamento de distúrbios auditivos e esquizofrenia ou no tratamento de síndrome do x frágil Download PDF

Info

Publication number
BR112014013400B1
BR112014013400B1 BR112014013400-6A BR112014013400A BR112014013400B1 BR 112014013400 B1 BR112014013400 B1 BR 112014013400B1 BR 112014013400 A BR112014013400 A BR 112014013400A BR 112014013400 B1 BR112014013400 B1 BR 112014013400B1
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
benzofuran
oxy
mmol
disorder
cyclopropane
Prior art date
Application number
BR112014013400-6A
Other languages
English (en)
Other versions
BR112014013400A2 (pt
BR112014013400A8 (pt
Inventor
Giuseppe Alvaro
Agostino Marasco
Original Assignee
Autifony Therapeutics Limited
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/GB2011/052414 external-priority patent/WO2012076877A1/en
Application filed by Autifony Therapeutics Limited filed Critical Autifony Therapeutics Limited
Priority claimed from PCT/GB2012/053045 external-priority patent/WO2013083994A1/en
Publication of BR112014013400A2 publication Critical patent/BR112014013400A2/pt
Publication of BR112014013400A8 publication Critical patent/BR112014013400A8/pt
Publication of BR112014013400B1 publication Critical patent/BR112014013400B1/pt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4178—1,3-Diazoles not condensed 1,3-diazoles and containing further heterocyclic rings, e.g. pilocarpine, nitrofurantoin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/94—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom spiro-condensed with carbocyclic rings or ring systems, e.g. griseofulvins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

DERIVADOS DE HIDANTOÍNA ÚTEIS COMO INIBIDORES DE KV3 E USO DESTES. A presente invenção refere- se a compostos de fórmula (I): ou um sal farmaceuticamente aceitável e/ou solvato do mesmo os ditos compostos sendo moduladores de canais KV3 e de uso na profilaxia ou tratamento de distúrbios relacionados.

Description

Campo Técnico
[001] A presente invenção refere-se a novos compostos, composições farmacêuticas que os contêm e seu uso na terapia, em particular na profilaxia ou tratamento de distúrbios de audição, incluindo a perda de audição e zumbidos, assim como esquizofrenia, distúrbio bipolar, epilepsia e distúrbios do sono.
Antecedentes da Invenção
[002] A família de canais de potássio dependentes de voltagem Kv3 inclui quatro membros, Kv3.1, Kv3.2, Kv3.3 e Kv3.4. Os genes para cada um desses subtipos podem gerar múltiplas isoformas pela junção alternativa, produzindo versões com domínios C terminais diferentes. Treze isoformas foram identificadas em mamíferos até agora, mas as correntes expressas por essas variantes parecem similares (Rudy e McBain, 2001, Trends in Neurosciences 24, 517-526). Os canais Kv3 são ativados pela despolarização da membrana plasmática para voltagens mais positivas do que -20 mV; além disso, os canais se desativam rapidamente depois da repolarização da membrana. Essas propriedades biofísicas garantem que os canais se abram frente ao pico da fase de despolarização do potencial de ação do neurônio para iniciar a repolarização. A terminação rápida do potencial de ação mediado pelos canais Kv3 permite que o neurônio se recupere mais rapidamente para atingir potenciais de membrana sublimiares, a partir dos quais potenciais de ação posteriores podem ser desencadeados. Como resultado, a presença de canais Kv3 em certos neurônios contribui para sua habilidade de disparar em altas frequências (Rudy e McBain, 2001, Trends in Neurosciences 24, 517-526). Os subtipos Kv3.1-3 são predominantes no CNS, enquanto que os canais Kv3.4 são encontrados predominantemente no músculo esquelético e neurônios simpáticos (Weiser e outros, 1994, J. Neurosci. 14, 949-972). Os subtipos de canal Kv3.1-3 são expressos diferencialmente pelas subclasses de interneurônios nas áreas cerebrais cortical e hipocampo (por exemplo, Chow e outros, 1999, J.Neurosci. 19, 9332-9345; Martina e outros, 1998, J.Neurosci. 18, 8111-8125; McDonald e Mascagni, 2006, Neu- rosci. 138, 537-547, Chang e outros, 2007, J. Comp. Neurol. 502, 953972), no tálamo (por exemplo, Kasten e outros, 2007, J.Physiol. 584, 565-582), cerebelo (por exemplo, Sacco e outros, 2006, Mol. Cell. Neurosci. 33, 170-179) e núcleos auditivos do tronco cerebral (Li e outros, 2001, J. Comp. Neurol. 437, 196-218).
[003] A caracterização de camundongos nos quais um ou mais subtipos de Kv3 foram deletados mostra que a ausência de Kv3.1 dá origem à atividade locomotora aumentada, atividade eletroencefalográ- fica alterada e padrão de sono fragmentado (Joho e outros, 1999, J.Neurophysiol. 82, 1855-1864). A deleção de Kv3.2 leva à redução no limiar convulsivo e atividade eletroencefalográfica cortical alterada (Lau e outros, 2000, J.Neurosci. 20, 9071-9085). A deleção de Kv3.3 está associada com ataxia leve e déficits motores (McMahon e outros, 2004, Eur. J.Neurosci. 19, 3317-3327). Ainda, redução de mutações de função de canais Kv3.3 em seres humanos foi associada com ataxia espinocerebelar tipo 13 (Waters e outros, 2006, Nat. Genet. 38, 447-451). A dupla deleção de Kv3.1 e Kv3.3 dá origem a um fenótipo severo caracterizado por convulsões espontâneas, ataxia e uma sen-sibilidade aumentada aos efeitos do etanol (Espinosa e outros, 2001, J.Neurosci. 21, 6657-6665; Espinosa e outros, 2008, J.Neurosci. 28, 5570-5581).
[004] A farmacologia conhecida de canais Kv3 é limitada. A tetra- etilamônia foi demonstrada inibir os canais em baixas concentrações milimolares (Rudy e McBain, 2001, Trends in Neurosciences 24, 517526) e a substância depressora sanguínea (BDS), toxinas da anêmona do mar, Anemonia sulcata (Diochot e outros, 1998, J. Biol. Chem. 273, 6744-6749), foi mostrada inibir seletivamente os canais Kv3 com alta afinidade (Yeung e outros, 2005, J.Neurosci. 25, 8735-8745). Em adição aos compostos que atuam diretamente sobre os canais Kv3, ago- nistas de receptores que ativam a proteína cinase A (PKA) e a proteína cinase C (PKC) foram mostrados modular as correntes mediadas por Kv3 em áreas específicas do cérebro, levando a uma redução da habilidade dos neurônios em disparar em alta frequência (Atzori e outros, 2000, Nat. Neurosci. 3, 791-798; Song e outros, 2005, Nat. Neu- rosci. 8, 1335-1342); esses estudos sugerem que PKA e PKC podem fosforilar especificamente os canais Kv3 de uma maneira específica para o neurônio, causando uma redução nas correntes mediadas por Kv3.
[005] Distúrbio bipolar, esquizofrenia, ansiedade e epilepsia são distúrbios sérios do sistema nervoso central que têm sido associados com a função reduzida de interneurônios inibitórios e a transmissão de ácido gama-amino butírico (GABA) (Reynolds e outros, 2004, Neuro- tox. Res. 6, 57-61; Benes e outros, 2008, PNAS, 105, 20935-20940; Brambilla e outros, 2003, Mol. Psychiatry. 8, 721-37, 715; Aroniadou- Anderjaska e outros, 2007, Amino Acids 32, 305-315; Ben-Ari, 2006, Crit. Rev. Neurobiol. 18, 135-144). Células em cesta positivas para parvalbumina que expressam canais Kv3 no córtex e no hipocampo desempenham um papel-chave na geração da inibição da retroalimentação dentro de circuitos locais (Markram e outros, 2004, Nat.Rev.Neurosci. 5, 793-807). Dada a dominância relativa de impulso sináptico excitatório sobre o impulso inibitório para neurônios piramidais glutamatérgicos nesses circuitos, o disparo rápido de interneurô- nios que suprem o impulso inibitório é essencial para assegurar a inibição balanceada. Além disso, a cronometragem exata do impulso inibitório é necessária para manter a sincronização da rede, por exemplo, na geração de oscilações de potencial do campo de frequência gama que foram associadas com a função cognitiva (Fisahn e outros, 2005, J.Physiol 562, 65-72; Engel e outros, 2001, Nat.Rev.Neurosci. 2, 704716). Notavelmente, uma redução nas oscilações gama foi observada em pacientes com esquizofrenia (Spencer e outros, 2004, PNAS 101, 17288-17293). Consequentemente, moduladores positivos dos canais Kv3 poderiam ser esperados intensificar as capacidades de disparo de grupos específicos de neurônios de disparo rápido no cérebro. Esses efeitos podem ser benéficos em distúrbios associados com a atividade anormal desses grupos de neurônios.
[006] Adicionalmente, os canais Kv3.2 foram mostrados ser expressos pelos neurônios do núcleo supraquiasmático (SCN) (Super- chiasmatic Nucleus), o marca passo circadiano principal no CNS (Schulz and Steimer, 2009, CNS Drugs 23 Suppl 2, 3-13).
[007] A perda de audição representa uma epidemia que afeta aproximadamente 16% da população na Europa e nos Estados Unidos (Goldman e Holme, 2010, Drug Discovery Today 15, 253-255), com uma prevalência estimada em 250 milhões de pessoas em todo o mundo (B.Shield, 2006, Evaluation of the social and economic costs of hearing impairment. A report for Hear-It AISBL: www.hear- it.org/multimedia/Hear It Report October 2006.pdf). Como a expectativa de vida continua a aumentar, assim também aumentará o número de pessoas que sofrem de distúrbios auditivos. Adicionalmente, é considerado que estilos de vida modernos podem exacerbar esse ônus em gerações mais jovens. Condições auditivas, incluindo o zumbido, têm um profundo efeito sobre a qualidade de vida, causando isolamento social, depressão, dificuldades de relacionamento no trabalho e so cial, baixa autoestima e preconceito. Os canais de íon ativados pela voltagem da família de Kv3 são expressos em altos níveis nos núcleos auditivos do tronco cerebral (Li e outros, 2001, J. Comp. Neurol. 437, 196-218), onde eles permitem o disparo rápido dos neurônios que transmitem a informação auditiva a partir da cóclea para as regiões cerebrais superiores. A perda da expressão do canal Kv3.1 nos neurônios auditivos centrais é observada em camundongos com audição prejudicada (von Hehn e outros, 2004, J. Neurosci. 24, 1936-1940), ainda, um declínio na expressão de Kv3.1 pode estar associado com a perda de audição em camundongos velhos (Jung e outros 2005 Neurol. Res. 27, 436-440), e perda de função do canal Kv3 pode também seguir perda de audição induzida por trauma por ruído (Pilati e outros, Hear Res. Jan de 2012, 283(1-2):98-106). Além disso, a plasticidade patológica das redes no tronco cerebral auditivo provavelmente contribui para os sintomas que são experimentados por várias pessoas que sofrem de perda de audição de diferentes tipos. Estudos recentes mostraram que a regulação da função e da expressão do canal Kv3.1 têm um papel principal no controle da excitabilidade do neurônio auditivo (Kaczmarek e outros, 2005, Hearing Res. 206, 133-145), sugerindo que esse mecanismo poderia ser responsável por algumas alterações plásticas que dão origem ao zumbido. Esses dados apoiam a hipótese que modulação positiva dos canais Kv3 nos núcleos do tronco cerebral auditivo poderia ter um benefício terapêutico em pacientes que sofrem de perda de audição. Finalmente, a síndrome do X Frágil e o autismo são frequentemente associados com hipersensibilidade do impulso sensorial, incluindo estímulos auditivos. Constatações recentes sugerem que a proteína codificada pelo gene FMR-I, cuja mutação ou ausência dá origem à síndrome do X Frágil, pode regular diretamente a expressão dos canais Kv3.1 nos núcleos do tronco cerebral auditivo (Strumbos e outros, 2010, J. Neurosciences, no prelo), suge- rindo que a má regulação dos canais Kv3.1 poderia dar origem à hipe- racusia em pacientes que sofrem de X Frágil ou autismo. Consequentemente, a requerente propôs que moduladores dos canais Kv3 nos núcleos auditivos do tronco cerebral poderiam ter um benefício no tratamento de distúrbios da audição, incluindo zumbido e hiperacuidade auditiva associada com síndrome do X Frágil e autismo.
[008] Ataxia espinocerebelar tipo 13 (SCA13) (Spinocerebellar ataxia type 13) é uma doença dominante autossomal causada por mutações no gene KCN3 que codifica o canal Kv3.3. Essas mutações foram mostradas causar uma redução em função dos canais (Waters e outros, 2006, Nat. Genet. 38, 447-451; Minassian e outros, 2012, J. Physiol. 590.7, 1599-1614). Coexpressão de Kv3.1 e Kv3.3 em muitas áreas do cérebro, incluindo o cerebelo, sugere alguma redundância ou a habilidade de um subtipo em compensar a ausência do outro, na verdade o fenótipo dos camundongos duplamente inativados em Kv3.1/Kv3.3 é notadamente mais severo do que qualquer uma das duas inativações sozinhas (por exemplo, Espinosa e outros, 2008, J. Neurosci. 28, 5570-5581). Ainda, é possível que proteínas Kv3.1 e Kv3.3 se reúnam para formar canais heteroméricos em alguns neurônios. A habilidade de Kv3.1 em compensar uma perda de função de Kv3.3 pode explicar porque certas mutações no último estão apenas associadas com um início de ataxia espinocerebelar mais tarde na vida adulta, ao invés de a partir do nascimento (Minassian e outros, 2012, J. Physiol. 590.7, 1599-1614). Consequentemente, moduladores de molécula pequena ou de Kv3.3 ou Kv3.1 seriam benéficos no tratamento de ataxia espinocerebelar, em particular SCA13.
[009] Os pedidos de patente WO2011/069951 e WO2012/076877 divulgam compostos que são moduladores de Kv3.1 e Kv3.2. Ainda, o valor de tais compostos é demonstrado em modelos animais de epilepsia, hiperatividade, distúrbios do sono, psicose, déficit cognitivo, dis- túrbio bipolar e distúrbios de audição.
[0010] Permanece a necessidade de identificação de moduladores alternativos de Kv3.1 e Kv3.2, em particular moduladores Kv3.1 e Kv3.2, que possam demonstrar potência in vivo aumentada, certos perfis de seletividade de canal ou parâmetros farmacocinético desejáveis que reduzem a dose requerida para efeito terapêutico in vivo. Para certas indicações terapêuticas, há também uma necessidade de identificar compostos com um efeito modulador diferente sobre canais Kv3, por exemplo, compostos que alterem a cinética de dependência de canal ou inativação de canal, e que possam se comportar in vivo como moduladores negativos dos canais.
Sumário da invenção
[0011] A presente invenção provê um composto de fórmula (I):
Figure img0001
em que:
[0012] W é CRaRb ou O;
[0013] quando W é CRaRb então Z é CH2;
[0014] quando W é O então Z é CF2;
[0015] Ra e Rb são CH3 ou juntos formam uma C3 espiro cicloal- quila;
[0016] em que, quando W é CRaRb, Z é CH2 e Ra e Rb são CH3;
[0017] o Anel A é
Figure img0002
e o Anel B é:
Figure img0003
[0018] o Anel A é
Figure img0004
e o Anel B é:
Figure img0005
[0019] em que, quando W é CRaRb, Z é CH2 e Ra e Rb juntos for- mam uma C3 espiro cicloalquila:
[0020] o Anel A é:
Figure img0006
[0021] o Anel B é:
Figure img0007
[0022] em que, quando W é O e Z é CF2:
[0023] o Anel A é:
Figure img0008
e o Anel B é:
Figure img0009
[0024] Um composto de fórmula (I) pode ser fornecido na forma de um sal farmaceuticamente aceitável e/ou solvato. Em uma modalidade da invenção, um composto de fórmula (I) é fornecido na forma de um sal farmaceuticamente aceitável.
[0025] Os compostos de fórmula (I) podem ser usados como me-dicamentos, em particular para a profilaxia ou tratamento de distúrbios auditivos, incluindo a perda auditiva e o zumbido, assim como esquizo-frenia, distúrbio bipolar, epilepsia e distúrbios do sono. Os compostos de fórmula (I) podem ser também usados como medicamentos para a profilaxia ou tratamento de prejuízos cognitivos ou ataxia.
[0026] Adicionalmente, é fornecido um método para a profilaxia ou tratamento de distúrbios auditivos, incluindo perda auditiva e zumbido, assim como esquizofrenia, distúrbio bipolar, epilepsia e distúrbios do sono pela administração a um indivíduo de um composto de fórmula (I). É também provido um método para a profilaxia ou tratamento de prejuízo cognitivo ou ataxia através da administração a um indivíduo de um composto de fórmula (I).
[0027] Os compostos de fórmula (I) podem ser usados na fabri cação de um medicamento para a profilaxia ou tratamento de distúrbios auditivos, incluindo perda auditiva e zumbido, assim como a es-quizofrenia, distúrbio bipolar, epilepsia e distúrbios do sono. Os com-postos de fórmula (I) podem também ser usados na fabricação de um medicamento para a profilaxia ou tratamento de prejuízo cognitivo ou ataxia.
[0028] Também são fornecidas composições farmacêuticas que contêm um composto de fórmula (I) e um veículo ou excipiente farma- ceuticamente aceitável.
Descrição detalhada da invenção
[0029] A presente invenção provê compostos de fórmula (I):
Figure img0010
em que:
[0030] W é CRaRb ou O;
[0031] quando W é CRaRb então Z é CH2;
[0032] quando W é O então Z é CF2;
[0033] Ra e Rb são CH3 ou juntos formam uma C3 espiro cicloalquila;
[0034] em que, quando W é CRaRb, Z é CH2 e Ra e Rb são CH3;
[0035] o Anel A é:
Figure img0011
e o Anel B é:
Figure img0012
[0036] ou
[0037] o Anel A é:
Figure img0013
X o Anel B é:
Figure img0014
[0038] em que, quando W é CRaRb, Z é CH2 e Ra e Rb juntos for- mam uma C3 espiro cicloalquila:
[0039] o Anel A é:
Figure img0015
[0040] o Anel B é:
Figure img0016
[0041] em que, quando W é O e Z é CF2:
[0042] o Anel A é:
Figure img0017
e o Anel B é:
Figure img0018
[0043] ou um sal farmaceuticamente aceitável e/ou solvato do mesmo.
[0044] Os composto de fórmula (I) podem ser opcionalmente fornecidos na forma de um sal farmaceuticamente aceitável e/ou solvato. Em uma modalidade da invenção um composto de fórmula (I) é provido na forma de um sal farmaceuticamente aceitável. Em uma segunda modalidade da invenção, um composto de fórmula (I) é provido na forma de um solvato farmaceuticamente aceitável. Em uma terceira modalidade da invenção um composto de fórmula (I) não está na forma de um sal ou solvato.
[0045] Em outra modalidade da invenção, o composto é selecionado do grupo que consiste em:
[0046] (5R)-5-etil-5-metil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidino-2,4-diona;
[0047] (5R)-5-etil-5-metil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1- benzofuran-4-il)oxi]-5-pirimidinil}-2,4-imidazolidinodiona;
[0048] (5R)-3-{2-[(2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-il)oxi]-5- pirimidinil}-5-etil-5-metil-2,4-imidazolidinodiona;
[0049] 5,5-dimetil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidino-2,4-diona;
[0050] (5R)-5-etil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidino-2,4-diona;
[0051] (5R)-5-etil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidino-2,4-diona;
[0052] (5R)-5-etil-3-{6-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4- il)oxi]-3-piridinil}-2,4-imidazolidinodiona;
[0053] (5R)-5-etil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4- il)oxi]-5-pirimidinil}-2,4-imidazolidinodiona;
[0054] (5R)-5-etil-5-metil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidino-2,4-diona;
[0055] 5,5-dimetil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidino-2,4-diona; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0056] Para evitar dúvidas, as modalidades de qualquer um dos aspectos dos compostos da invenção podem ser combinadas com qualquer modalidade de outro aspecto dos compostos da invenção para criar uma modalidade adicional.
[0057] Será compreendido que para uso em medicina, os sais dos compostos de fórmula (I) devem ser farmaceuticamente aceitáveis. Sais farmaceuticamente aceitáveis adequados serão aparentes àqueles versados na técnica. Sais farmaceuticamente aceitáveis incluem aqueles descritos por Berge, Bighley e Monkhouse, J.Pharm.Sci. (1977) 66, pp 1-19. Tais sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de adição ácidos formados com ácidos inorgânicos, por exemplo, ácido hidroclórico, hidrobrômico, sulfúrico, nítrico ou fosfórico e ácidos orgânicos, por exemplo, ácido succínico, maleico, acético, fumárico, cítrico, tartárico, benzoico, p-toluenossulfônico, metanossulfônico ou naftalenossulfônico. Outros sais, por exemplo, oxalatos e formatos, podem ser usados, por exemplo, no isolamento dos compostos de fórmula (I) e estão incluídos no escopo da presente invenção.
[0058] Certos compostos de fórmula (I) podem formar sais de adição ácidos com um ou mais equivalentes do ácido. A presente invenção inclui em seu escopo todas as formas estequiométricas e não es- tequiométricas possíveis.
[0059] Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados na forma cristalina ou não cristalina e, se cristalinos, podem ser opcionalmente solvatados, por exemplo, como o hidrato. A presente invenção inclui em seu escopo solvatos estequiométricos (por exemplo, hidra- tos) assim como compostos que contenham quantidades variáveis de solvente (por exemplo, água).
[0060] Será compreendido que a invenção inclui derivados farma- ceuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula (I) e que esses estão incluídos no escopo da invenção.
[0061] Como usado aqui, "derivado farmaceuticamente aceitável" inclui qualquer éster ou sal farmaceuticamente aceitável de tal éster de um composto de fórmula (I) que, depois da administração ao recipiente, é capaz de fornecer (diretamente ou indiretamente) um composto de fórmula (I) ou um metabolito ativo ou um resíduo do mesmo.
[0062] Adequadamente, um pró-fármaco farmaceuticamente aceitável é formado através da funcionalização do nitrogênio secundário da hidantoína, por exemplo, com um grupo "L" conforme ilustrado abaixo (em que R representa dimetila, metila e etila ou etila - vide fórmula (I)):
Figure img0019
[0063] Em uma modalidade da invenção, um composto de fórmula (I) é funcionalizado via o nitrogênio secundário da hidantoína com um grupo L, em que L é selecionado de:
[0064] -PO(OH)O- •M+, em que M+ é m contraíon monovalente farmaceuticamente aceitável,
[0065] -PO(O-)2 •2M+,
[0066] -PO(O-)2 •D2+, em que D2+ é um contraíons divalente farma- ceuticamente aceitável,
[0067] -CH(RX)-PO(OH)O- •M+, em que RX é hidrogênio ou C1-3 alquila,
[0068] -CH(RX)-PO(O-)2 •2M+,
[0069] -CH(RX)-PO(O-)2 •D2+
[0070] -SO^M+,
[0071] -CH(RX)-SO^M+, e
[0072] -CO-CH2CH2-CO2^M+.
[0073] Deve ser compreendido que a presente invenção abrange todos os isômeros de fórmula (I) e seus derivados farmaceuticamente aceitáveis, incluindo todas as formas geométricas, tautoméricas e ópticas e misturas dos mesmos (por exemplo, misturas racêmicas). Onde centros quirais adicionais estão presentes nos compostos de fórmula (I), a presente invenção inclui em seu escopo todos os diastere- oisômeros possíveis, incluindo misturas dos mesmos. As formas iso- méricas diferentes podem ser separadas uma da outra por métodos convencionais ou qualquer dado isômero pode ser obtidos pelos métodos sintéticos convencionais ou pelas sínteses estereoespecíficas ou assimétricas.
[0074] A presente invenção também inclui compostos isotopica- mente marcados que são idênticos aqueles citados na fórmula (I), exceto pelo fato que um ou mais átomos são substituídos por um átomo que possui uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa mais comumente encontrados na natureza. O versado na técnica compreenderá que em muitas circuns- tâncias a proporção de um átomo tendo uma massa atômica ou número de massa encontrado com menos frequência na natureza pode também ser aumentada (referido como "enriquecimento isotópico"). Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos da invenção incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, flúor, iodo e cloro, tais como 3H, 11C, 14C, 18F, 123I ou 125I. Outro isótopo de interesse é 13C. Outro isótopo de interesse é 2H (deutério).
[0075] Os compostos da presente invenção e sais farmaceutica- mente aceitáveis dos ditos compostos que contenham os isótopos acima mencionados e/ou outros isótopos de outros átomos estão dentro do escopo da presente invenção. Os compostos isotopicamente marcados da presente invenção, por exemplo, aqueles nos quais isótopos radioativos tais como 3H ou 14C foram incorporados, são úteis em ensaios de distribuição tecidual de fármaco e/ou substrato. Isótopos tritiados, isto é, 3H, e com carbono 14, isto é, 14C, são particularmente preferidos pela sua facilidade de preparação e de detecção. Isótopos 11C e 18F são particularmente úteis em PET (tomografia com emissão de pósitron).
[0076] Como os compostos da fórmula (I) são pretendidos para uso nas composições farmacêuticas, será facilmente compreendido que eles são preferivelmente fornecidos em forma substancialmente pura, por exemplo, pelo menos 60% puro, mais adequadamente pelo menos 75% puro e preferivelmente pelo menos 85%, especialmente pelo menos 98% puro (% estão em uma base peso para peso). Preparações impuras dos compostos podem ser usadas para preparar as formas mais puras usadas nas composições farmacêuticas.
[0077] Em geral, os compostos de fórmula (I) podem ser feitos de acordo com técnicas de síntese orgânica conhecidas por aqueles versados nesse campo, assim como pelos métodos representativos descritos abaixo, aqueles dos Exemplos e modificações dos mesmos.
[0078] Os compostos de fórmula (I), sais e solvatos desses, podem ser preparados através dos métodos gerais mostrados no WO2012/076877.
[0079] A presente invenção provê compostos de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável desses para uso em terapia.
[0080] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou a profilaxia de uma doença ou distúrbio onde um modulador dos canais Kv3.1 ou Kv3.2 ou Kv3.1 e Kv3.2 é necessário. Como usado aqui, um modula- dor de Kv3.1 ou Kv3.2 ou Kv3.1 e Kv3.2 é um composto que altera as propriedades desses canais, positivamente ou negativamente.
[0081] Os compostos da invenção podem ser testados no ensaio do Exemplo Biológico 1 para determinar suas propriedades modula- doras.
[0082] Em certos distúrbios pode ser benéfico utilizar um modula- dor de Kv3.1 ou Kv3.2 que demonstra um perfil de seletividade particular entre os dois canais. Por exemplo, um composto pode ser seletivo para modulação de canais Kv3.1 com relação à modulação de canais Kv3.2 demonstrando, por exemplo, atividade de pelo menos 2 vezes, 5 vezes ou 10 vezes para canais Kv3.1 do que para canais Kv3.2. Alternativamente, um composto pode ser seletivo para modulação de canais de KV3.2 com relação à modulação de canais Kv3.1 demonstrando, por exemplo, atividade de pelo menos 2 vezes, 5 vezes ou 10 vezes para canais Kv3.2 do que para canais Kv3.1. Em outros casos um composto pode demonstrar atividade comparável entre modulação de canais Kv3.1 e Kv3.2, por exemplo, a atividade de cada canal é menos do que 2 vezes aquela para o outro canal, tal como menos de 1,5 vez ou menos do que 1,2 vez. A atividade de um composto é adequadamente quantificada pela sua potência conforme indicado por um valor de EC50.
[0083] As doenças ou condições que podem ser mediadas pela modulação dos canais Kv3.1 e/ou Kv3.2 podem ser selecionadas da lista abaixo. Os números entre parênteses depois das doenças listadas abaixo referem-se aos código de classificação no Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4th Edição, publicado pela American Psychiatric Association (DSM-IV) e/ou International Classification of Diseases , 10a edição (CID-10).
[0084] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou a profilaxia de depressão e distúrbios do humor incluindo Episódio Depressivo Maior, Episódio Maníaco, Episódio Misto e Episódio Hipomaníaco; Transtornos Depressivos incluindo Transtorno Depressivo Maior, Transtorno Distímico (300.4), Transtorno Depressivo Não Especificado de Outra Maneira (311); Transtornos Bipolares incluindo Transtorno Bipolar I, Transtorno Bipolar II (Episódios Depressivos Maiores Recorrentes com Episódio Hipomaníacos) (296.89), Transtorno Ciclotímicos (301.13) e Transtorno Bipolar Não especificado de Outra Maneira (296.80); Outros Transtornos do Humor incluindo Transtorno do Humor Devido a uma Condição Médica Geral (293.83) que inclui os subtipos com Ca-racterísticas Depressivas, Com um Episódio Semelhante ao Depressivo Maior, Com Características Maníacas e Com Características Mistas), Transtornos do Humor Induzidos por Substâncias (incluindo os subtipos Com Características Depressivas, Com Características Maníacas e Com Características Mistas) e Transtornos do Humor Não Especificados de Outra Maneira (296.90); Transtorno afetivo sazonal.
[0085] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou a profilaxia de esquizofrenia, incluindo os subtipos Tipo Paranoide (295.30), Tipo De-sorganizado (295.10), Tipo Catatônico (295.20), Tipo Não-diferenciado (295.90) e Tipo Residual (295.60); Transtorno Esquizofreniforme (295.40); Transtorno Esquizoafetivo (295.70) incluindo os subtipos Tipo Bipolar e Tipo Depressivo; Transtorno Ilusório (297.1) incluindo os subtipos Tipo Erotomaniaco, Tipo de Grandeza, Tipo Ciumento, Tipo de Perseguição, Tipo Somático, Tipo Misto e Tipo Não Especificado; Transtorno Psicótico Rápido (298.8); Transtorno Psicótico Compartilhado (297.3); Transtorno Psicótico Devido a Uma Condição Médica Geral incluindo os subtipos Com Ilusões e Com Alucinações; Transtorno Psicótico Induzido por Substância incluindo os subtipos Com Ilusões (293.81) e Com Alucinações (293.82); e Transtorno Psicótico Não Especificado de Outra Maneira (298.9).
[0086] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou a profilaxia de distúrbios de ansiedade incluindo Ataque de Pânico; Síndrome do Pânico incluindo Síndrome do Pânico sem Agorafobia (300.01) e Síndro- me do Pânico com Agorafobia (300.21); Agorafobia; Agorafobia Sem História de Síndrome do Pânico (300.22), Fobia Específica (300.29, anteriormente Fobia Simples) incluindo os subtipos do Tipo de Animal, do Tipo Ambiente Natural, do Tipo de Sangue-Injeção-Lesão, Tipo Si- tuacional e Outro Tipo), Fobia Social (Transtorno de Ansiedade Social, 300.23), Transtorno Obsessivo-Compulsivo (300.3), Distúrbio de Estresse Pós-traumático (309.81), Distúrbio de Estresse Agudo (308.3), Distúrbio de Ansiedade Generalizada (300.02), Distúrbio de Ansiedade Devido a Uma Condição Médica Geral (293.84), Distúrbio de Ansiedade Induzido por Substância, Distúrbio de Ansiedade de Separação (309.21), Distúrbios de Comportamento com Ansiedade (309.24) e Distúrbio de Ansiedade Não Especificado de Outra Maneira (300.00).
[0087] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia de distúrbios relacionados à substância, incluindo Distúrbios Pelo Uso de Substância tais como Dependência da Substância, Compulsão pela Substância e Abuso da Substância; Distúrbios Induzidos por Substância tais como Intoxicação pela Substância, Retirada da Substância, Delírio Induzido pela Substância, Demência Persistente Induzida pela Substância, Transtorno de Amnésia Persistente Induzido pela Subs-tância, Distúrbio Psicótico Induzido pela Substância, Distúrbio do Humor Induzido pela Substância, Distúrbio de Ansiedade Induzido pela Substância, Distúrbio de Disfunção Sexual Induzido pela Substância, Distúrbio do Sono e Distúrbio de Percepção Persistente Alucinógeno Induzidos pela Substância (Flashbacks); Distúrbios Relacionados ao Álcool tais como Dependência de Álcool (303.90), Abuso de Álcool (305.00), Intoxicação pelo Álcool (303.00), Abstinência de Álcool (291.81), Delírio por Intoxicação pelo Álcool, Delírio por Abstinência de Álcool, Demência Persistente Induzida pelo Álcool, Transtorno de Am-nésia Persistente Induzido pelo Álcool, Distúrbio Psicótico Induzido pelo Álcool, Distúrbio do Humor Induzido pelo Álcool, Distúrbio de Ansiedade Induzido pelo Álcool, Disfunção Sexual Induzida pelo Álcool, Distúrbio do Sono Induzido pelo Álcool e Doenças Relacionadas com o Álcool Não Especificadas de Outra Maneira (291.9); Distúrbios Relacionados à Anfetamina (ou semelhante à Anfetamina), tais como Dependência de Anfetamina (304.40), Abuso de Anfetamina (305.70), Intoxicação por Anfetamina (292.89), Abstinência de Anfetamina (292.0), Delírio por Intoxicação com Anfetamina, Distúrbio Psicótico Induzido por Anfetamina, Distúrbio do Humor Induzido por Anfetamina, Distúrbio de Ansiedade Induzido por Anfetamina, Disfunção Sexual Induzida por Anfetamina, Distúrbio do Sono Induzido por Anfetamina e Distúrbio Relacionado com Anfetamina Não Especificado de Outra Maneira (292.9); Distúrbios Relacionados com Cafeína, tais como Intoxicação pela Cafeína (305.90), Distúrbio de Ansiedade Induzido por Cafeína, Distúrbio do Sono Induzido por Cafeína e Distúrbio Relacionado com Cafeína Não Especificado de Outra Maneira (292.9); Distúr- bios Relacionados com Maconha (Cannabis), tais como Dependência de Cannabis (304.30), Abuso de Cannabis (305.20), Intoxicação por Cannabis (292.89), Delírio por Intoxicação com Cannabis, Distúrbio Psicótico Induzido por Cannabis, Distúrbio de Ansiedade Induzido por Cannabis e Distúrbios Relacionadas com Cannabis Não Especificados de Outra Maneira (292.9); Distúrbios Relacionados com Cocaína, tais como Dependência de Cocaína (304.20), Abuso de Cocaína (305.60), Intoxicação por Cocaína (292.89), Abstinência de Cocaína (292.0), Delírio por Intoxicação com Cocaína, Distúrbio Psicótico Induzido por Cocaína, Distúrbio do Humor Induzido por Cocaína, Distúrbio de Ansiedade Induzido por Cocaína, Disfunção Sexual Induzida por Cocaína, Distúrbio do Sono Induzido por Cocaína e Distúrbio Relacionada com Cocaína Não Especificado de Outra Maneira (292.9); Distúrbios Relacionados com Alucinógenos, tais como Dependência de Alucinógeno (304.50), Abuso de Alucinógeno (305.30), Intoxicação por Alucinógeno (292.89), Distúrbio Persistente de Percepção por Alucinógeno (Flashbacks) (292.89), Delírio por Intoxicação com Alucinógeno, Distúrbio Psicótico Induzido por Alucinógeno, Distúrbio do Humor Induzido por Alucinógeno, Distúrbio de Ansiedade Induzido por Alucinógeno e Distúrbio Relacionado com Alucinógenos Não Especificado de Outra Maneira (292.9); Distúrbios Relacionados com Inalantes, tais como Dependência de Inalante (304.60), Abuso de Inalante (305.90), Intoxicação por Inalante (292.89), Delírio por Intoxicação com Inalante, Demência Persistente Induzida por Inalante, Distúrbio Psicótico Induzido por Inalante, Distúrbio do Humor Induzido por Inalante, Distúrbio de Ansiedade Induzido por Inalante e Distúrbio Relacionado com Inalante Não Especificado de Outra Maneira (292.9); Distúrbios Relacionados com Nicotina, tais como Dependência de Nicotina (305.1), Abstinência de Nicotina (292.0) e Distúrbios Relacionados com Nicotina Não Especificados de Outra Maneira (292.9); Distúrbios Relacionados com Opi- oides, tais como Dependência de Opioide (304.00), Abuso de Opioide (305.50), Intoxicação por Opioide (292.89), Abstinência de Opioide (292.0), Delírio por Intoxicação com Opioide, Distúrbio Psicótico Induzido por Opioide, Distúrbio do Humor Induzido por Opioide, Disfunção Sexual Induzida por Opioide, Distúrbio do Sono Induzido por opioide e Distúrbio Relacionado com Opioide Não Especificado de Outra Maneira (292.9); Distúrbios Relacionados com Fenciclidina (ou semelhante à Fenciclidina) tais como Dependência de Fenciclidina (304.60), Abuso de Fenciclidina (305.90), Intoxicação por Fenciclidina (292.89), Delírio por Intoxicação com Fenciclidina, Distúrbio Psicótico Induzido por Fen- ciclidina, Distúrbio do Humor Induzido por Fenciclidina, Distúrbio de Ansiedade Induzida por Fenciclidina e Distúrbio Relacionado com Fenciclidina Não Especificado de Outra Maneira (292.9); Distúrbios Relacionados com Sedativos, Hipnóticos ou Ansiolíticos, tais como Dependência de Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico (304.10), Abuso de Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico (305.40), Intoxicação por Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico (292.89), Abstinência de Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico (292.0), Delírio por Intoxicação com Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico, Delírio por Abstinência de Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico, Demência Persistente por Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico, Distúrbio de Amnésia Persistente por Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico, Distúrbio Psicótico Induzido por Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico, Distúrbio do Humor Induzido por Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico, Distúrbio de Ansiedade Induzido por Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico, Disfunção Sexual Induzida por Sedativo Hipnótico e Ansiolítico, Distúrbio do Sono Induzido por Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico e Distúrbio Relacionados com Sedativo, Hipnótico e Ansiolítico Não Especificado de Outra Maneira (292.9); Distúrbio Relacionado com Polissubstância tal como Dependência de Polissubstâncias (304.80); e Outros Distúrbios Relacionados a Substâncias (ou Desconhecidos) tais como Esteroides Anabo- lizantes, Inalantes de Nitrato e Óxido Nitroso.
[0088] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para intensificar a cognição incluindo o tratamento de prejuízo cognitivo em outras doenças tais como a es-quizofrenia, transtorno bipolar, depressão, outros distúrbios psiquiátricos e condições psicóticas associadas com déficit cognitivo, por exemplo, doença de Alzheimer. Alternativamente, os compostos de fórmula (I) ou seus sais e/ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser úteis para a profilaxia de prejuízo cognitivo, que pode estar associado com doenças tais como esquizofrenia, distúrbio bipolar, depressão, outros distúrbios psiquiátricos e condições psicóticas associadas com prejuízo cognitivo, por exemplo, doença de Alzheimer.
[0089] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia de distúrbios do sono, incluindo distúrbios do sono primários tais como as Dissonias tal como Insônia Primária (307.42), Hipersonia Primária (307.44), Narcolepsia (347), Distúrbios do Sono Relacionados à Respiração (780.59), Distúrbios do Sono Relacionados ao Ritmo Circadiano (307.45) e Dissonia Não Especificada de Outra Maneira (307.47); distúrbios do sono primários tais como as Parassonias tais como Distúrbios de Pesadelos (307.47), Distúrbio do Terror Noturno (307.46), Distúrbio de Sonambulismo (307.46) e Parasonia Não Especificada de Outra Maneira (307.47); Distúrbios do Sono Relacionados a Outro Transtorno Mental tal como Insônia Relacionada a Outro Distúrbio Mental (307.42) e Hiperssonia Relacionada a Outro Distúrbio Mental (307.44); Distúrbio do Sono Devido a uma Condição Médica Geral, em particular perturbações do sono associadas com doenças tais como distúrbios neurológicos, dor neuropática, síndrome das pernas inquietas, doenças do coração e pulmões; e Distúrbio do Sono Induzido por Substâncias incluindo os subtipos do Tipo da Insônia, Tipo da Hipers- sonia, Tipo da Parassonia e Tipo Misto; apneia do sono e síndrome do jet-lag.
[0090] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia de distúrbios da alimentação tais como Anorexia Nervosa (307.1) incluindo os subtipos do Tipo Restritivo e do Tipo Compulsão alimen- tar/Purgação; Bulimia Nervosa (307.51) incluindo os subtipos do Tipo com Purgação e do Tipo Sem Purgação; Obesidade; Distúrbio de Compulsão Alimentar; e Distúrbios da Alimentação Não Especificados de Outra Maneira (307.50).
[0091] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia de distúrbios do Espectro do Autismo incluindo Distúrbio de Autismo (299.00), Transtorno de Asperger (299.80), Transtorno de Rett (299.80), Distúrbio de Desintegração da Infância (299.10) e Transtorno Abrangente Não Especificado de Outra Maneira (299.80, incluindo o Autismo Típico).
[0092] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia de Distúrbio de Déficit de Atenção/Hiperatividade incluindo os subtipos do Tipo Distúrbio Combinado de Déficit de Atenção/Hiperatividade (314.01), Tipo Distúrbio de Déficit de Atenção/Hiperatividade Com Predominância de Desatenção (314.00), Tipo Distúrbio de Déficit de Atenção/Hiperatividade com Impulso Hiperativo (314.01) e Tipo Distúrbio de Déficit de Atenção/Hiperatividade Não Especificado de Outra Maneira (314.9); Distúrbio Hipercinético; Distúrbios de Comportamento Disruptivo tal como Distúrbio de Conduta incluindo os tipos com início na infância (321.81), Tipo de Início na Adolescência (312.82) e De Início Não especificado (312.89), Transtorno Desafiador de Oposição (313.81) e Distúrbios de Comportamento Disruptivo Não Especificado de Outra Maneira; e Transtornos com Tique tal como a Síndrome de Tourette (307.23).
[0093] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia de Distúrbios da Personalidade incluindo os subtipos Distúrbio Paranoide da Personalidade (301.0), Distúrbio Esquizoide da Personalidade (301.20), Distúrbio Esquizotípico da Personalidade (301.22), Distúrbio da Personalidade Antissocial (301.7), Distúrbio da Personalidade Limítrofe (301,83), Distúrbio da Personalidade Histriônica (301.50), Distúrbio da Personalidade Narcisista (301,81), Distúrbio da Personalidade Esquiva (301.82), Distúrbio da Personalidade Dependente (301.6), Distúrbio da Personalidade Obssessiva-Compulsiva (301.4) e Distúrbio da Personalidade Não Especificado de Outra Maneira (301.9).
[0094] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceuticamen- te aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia de disfunções sexuais incluindo Distúrbio do Desejo Sexual Hipoativo (302.71), e Distúrbio de Aversão Sexual (302.79); distúrbios da excitação sexual tais como Distúrbio da Excitação Sexual Feminina (302.72) e Disfunção Erétil Masculina (302.72); distúrbios do orgasmo tais como Distúrbio Orgásmico Feminino (302.73), Distúrbio Orgásmico Masculino (302.74) e Ejaculação Precoce (302.75); distúrbio sexual doloroso tais como Dis- pareunia (302.76) e Vaginismo (306.51); Disfunção Sexual Não Especi-ficada de Outra Maneira (302.70); parafilias tais como Exibicionismo (302.4), Fetichismo (302.81), Frotteurismo (302.89), Pedofilia (302.2), Masoquismo Sexual (302.83), Sadismo Sexual (302.84), Fetichismo Travestismo (302.3), Voyeurismo (302.82) e Parafilia Não Especificada de Outra Maneira (302.9); distúrbios de identidade sexual tais como Dis-túrbio de Identidade Sexual em Crianças (302.6) e Distúrbio de Identidade Sexual em Adolescentes ou Adultos (302.85); e Distúrbio Sexual Não Especificados de Outra Maneira (302.9).
[0095] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia de distúrbio do controle do impulso incluindo: Distúrbio Explosivo Intermitente (312.34), Cleptomania (312.32), Jogo Patológico (312.31), Piro- mania (312.33), Tricotilomania (312.39), Distúrbios do Controle do Impulso Não Especificados de Outra Maneira (312.3), Compulsão Alimentar, Comprador Compulsivo, Comportamento Sexual Compulsivo e Acumulação Compulsiva.
[0096] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia de distúrbios da audição incluindo neuropatia auditiva, distúrbio do processamento auditivo, perda da audição que inclui perda súbita da audição, perda da audição induzida pelo ruído, perda da audição induzida por uma substância e perda da audição em adultos acima de 60 anos (presbiacusia) e zumbido.
[0097] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia da doença de Méniere, distúrbios do equilíbrio e distúrbios do ouvido interno.
[0098] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia de hiperacusia e distúrbios da percepção da intensidade, incluindo a sín- drome do X Frágil e o autismo.
[0099] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser úteis para o tratamento ou profilaxia de Epilepsia (incluindo, mas não limitado a, epilepsias relacionadas com localização, epilepsias generalizadas, epilepsias com ambas as convulsões generalizadas e locais e similar), convulsões associadas com a síndrome de Lennox-Gastaut, convulsões como uma complicação de uma doença ou condição (tais como convulsões associadas com ence- falopatia, fenilcetonúria, doença de Gaucher juvenil, epilepsia mioclô- nica progressiva de Lundborg, acidente vascular cerebral, traumatismo craniano, estresse, alterações hormonais, uso ou abstinência de drogas, uso ou abstinência de álcool, privação de sono, febre, infecção e similares), tremor essencial, síndrome das pernas inquietas, convulsões parciais ou generalizadas (incluindo convulsões tônicas, clônicas, tônico-clônicas, atônicas, mioclônicas, ausência), convulsões secundárias generalizadas, epilepsia de lobo temporal, convulsões de ausência (incluindo da infância, juvenil, mioclônica, induzida pela luz ou padrão), encefalopatias epilépticas severas (incluindo relacionada à hipóxia e síndrome de Rasmussen), convulsões febris, epilepsia parcial contínua, epilepsias mioclônicas progressivas (incluindo a doença de Un- verricht-Lundborg e a doença de Lafora), convulsões/epilepsia pós- traumáticas incluindo aquelas relacionadas a trauma cefálico, epilepsias reflexas simples (incluindo fotossensíveis, somatossensoriais e proprioceptivas, audiogênicas e vestibulares), distúrbios metabólicos comumente associados com epilepsia tal como epilepsia dependente de piridoxina, doença do cabelo crespo de Menke, doença de Krabbe, epilepsia devida a abuso de álcool e drogas (por exemplo, cocaína), malformações corticais associadas com a epilepsia (por exemplo, sín- drome do córtex duplo ou heterotopia de banda cortical), anomalias cromossômicas associadas com convulsões ou epilepsia tal como Mo- nossomia Parcial (15Q)/Síndrome de Angelman.
[00100] Em uma modalidade da invenção, é fornecido um composto de fórmula (I) ou seu sal farmaceuticamente aceitável para o tratamento ou profilaxia de depressão e distúrbios do humor, distúrbios da audição, esquizofrenia, distúrbios de abuso de substâncias, distúrbios do sono ou epilepsia.
[00101] Em uma modalidade da invenção, é fornecido um composto de fórmula (I) ou seu sal farmaceuticamente aceitável para o tratamen- to ou profilaxia de distúrbio bipolar ou mania.
[00102] Em uma modalidade da invenção, é provido um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável e/ou solvato do mesmo para o tratamento ou profilaxia de ataxia, tal como ataxia espi- nocerebelar.
[00103] Em uma modalidade da invenção, é provido um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável e/ou solvato do mesmo para o tratamento ou profilaxia de prejuízo cognitivo.
[00104] A expressão "tratamento" ou "tratar" como usado aqui inclui controlar, diminuir, reduzir ou modular o estado de doença ou seus sin-tomas.
[00105] A expressão "profilaxia" como usado aqui significa prevenir os sintomas de uma doença ou distúrbio em um indivíduo ou prevenir a recorrência de sintomas de uma doença ou distúrbio em um indivíduo afetado e não é limitada à prevenção completa de uma condição.
[00106] A invenção também provê um método para tratar ou prevenir uma doença ou distúrbio, onde um modulador de Kv3 é necessário, por exemplo, aquelas doenças e distúrbios mencionados acima, que compreende administrar a um indivíduo necessitado uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I) ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00107] A invenção também provê um composto de fórmula (I) ou seu sal farmaceuticamente aceitável para uso no tratamento ou profilaxia de uma doença ou distúrbio onde um modulador de Kv3 é necessário, por exemplo, aquelas doenças ou distúrbios mencionados acima.
[00108] A invenção também provê o uso um composto de fórmula (I) ou seu sal farmaceuticamente aceitável para a fabricação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de uma doença ou distúrbio onde um modulador de Kv3 é necessário, por exemplo, aquelas doenças ou distúrbios mencionados acima.
[00109] A invenção também provê um método para tratar depressão ou distúrbios do humor, esquizofrenia, distúrbios por abuso de substancias, distúrbios do sono ou epilepsia, por exemplo, aquelas indicações mencionadas acima, que compreende administrar a um indivíduo necessitado uma quantidade eficaz de um modulador de Kv3 ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00110] Para uso na terapia, os compostos da invenção são geralmente administrados como uma composição farmacêutica. A invenção também provê uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I) ou seu sal farmaceuticamente aceitável e um veículo farmaceuticamente aceitável.
[00111] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis podem ser administrados por qualquer método convencional, por exemplo, por administração oral, parenteral, bucal, sublingual, nasal, retal ou transdérmica e as composições farmacêuticas adaptadas de acordo. Outras vias de administração possíveis incluem intratimpânica e intracoclear.
[00112] Os compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceutica- mente aceitáveis que são ativos quando dados oralmente podem ser formulados como líquidos ou sólidos, por exemplo, como xaropes, suspensões, emulsões, comprimidos, cápsulas ou pastilhas.
[00113] Uma formulação líquida geralmente consistirá em uma sus-pensão ou solução do ingrediente ativo em um veículo(s) líquido ade-quado, por exemplo, um solvente aquoso tal como água, etanol ou gli-cerina ou um solvente não aquoso, tal como polietileno glicol ou um óleo. A formulação também pode conter um agente de suspensão, conservante, agente flavorizante e/ou corante.
[00114] Uma composição na forma de um comprimido pode ser preparada usando qualquer veículo(s) farmaceuticamente aceitável rotineiramente usado para preparação de formulações sólidas, tais como estearato de magnésio, amido, lactose, sacarose e celulose.
[00115] Uma composição na forma de um cápsula pode ser preparada usando procedimentos de encapsulação de rotina, por exemplo, peletes que contêm o ingrediente ativo podem ser preparados usando veículos padrão e depois cheios em cápsulas de gelatina dura; alternativamente, uma dispersão ou suspensão pode ser preparada usando qualquer veículo(s) farmacêutico adequado, por exemplo, gomas aquosas, celuloses, silicatos ou óleos e a dispersão ou suspensão é cheia em uma cápsula de gelatina macia.
[00116] Composições parenterais típicas consistem em uma solução ou suspensão do ingrediente ativo em um veículo aquoso estéril ou óleo parenteralmente aceitável, por exemplo, polietileno glicol, poli- vinipirrolidona, lecitina, óleo de amendoim ou óleo de gergelim. Alter-nativamente, a solução pode ser liofilizada e depois reconstituída com um solvente adequado um pouco antes da administração.
[00117] Composições para administração nasal podem ser formuladas convenientemente como aerossóis, gotas, géis e pós. As formulações em aerossol compreendem uma solução ou suspensão fina do ingrediente ativo em um solvente farmaceuticamente aceitável aquoso ou não aquoso e são geralmente apresentadas em quantidades de dose única ou múltiplas doses na forma estéril em um recipiente vedado que pode ter a forma de um cartucho ou refil para uso com um dispositivo atomizador. Alternativamente, o recipiente vedado pode ser um dispositivo de liberação descartável tal como inalador nasal de dose única ou um aplicador aerossol ajustado com uma válvula dosado- ra. Onde a forma de dosagem compreende um aplicador aerossol, ele conterá um propelente que pode ser um gás comprimido, por exemplo, ar ou um propelente orgânico tal como fluorcloroidrocarboneto ou hi- drofluorcarbono. As formas de dosagem em aerossol também podem ter a forma de bombas atomizadoras.
[00118] As composições adequadas para administração bucal ou sublingual incluem comprimidos, drágeas e pastilhas onde o ingrediente ativo é formulado com um veículo tal açúcar e acácia, tragacanto ou gelatina e glicerina.
[00119] Composições para administração retal estão convenientemente na forma de supositórios que contêm uma base para supositório convencional tal como manteiga de cacau.
[00120] Composições adequadas para administração transdérmica incluem unguentos, géis e emplastros.
[00121] Em uma modalidade, a composição está na forma de dose unitária tal como um comprimido, cápsula ou ampola.
[00122] A composição pode conter de 0,1% a 100% em peso, por exemplo, de 10 a 60% em peso do material ativo, dependendo do método de administração. A composição pode conter entre 0% a 99% em peso, por exemplo, 40% a 90% em peso, do veículo, dependendo do método de administração. A composição pode conter entre 0,05 mg a 1000 mg, por exemplo, entre 1,0 mg a 500 mg do material ativo, dependendo do método de administração. A composição pode conter de 50 mg a 1000 mg, por exemplo, de 100 mg a 400 mg do veículo, dependo do método de administração. A dose do composto usado no tratamento dos distúrbios acima mencionados variará da maneira usual com a seriedade dos distúrbios, o peso do paciente e outros fatores similares. Entretanto, como um guia geral, doses unitárias adequadas podem ser de 0,05 a 1000 mg, mais adequadamente 1,0 a 500 mg e tais doses unitárias podem ser administradas mais do que uma vez por dia, por exemplo, duas a três por dia. Tal terapia pode se estender por várias semanas ou meses.
[00123] A invenção provê, em um aspecto adicional, uma combinação que compreende um composto de fórmula (I) ou um derivado far- maceuticamente aceitável do mesmo junto com um agente ou agentes terapêuticos adicionais.
[00124] A invenção provê um composto de fórmula (I) para uso em combinação com um agente ou agentes terapêuticos adicionais.
[00125] Quando os compostos são usados em combinação com outros agentes terapêuticos, os compostos podem ser administrados ou sequencialmente ou simultaneamente por qualquer via convencional.
[00126] As combinações referidas acima podem ser convenientemente apresentadas para uso na forma de uma formulação farmacêutica e assim as formulações farmacêuticas que compreendem uma combinação como definido acima com um veículo ou excipiente far- maceuticamente aceitável compreendem um aspecto adicional da invenção. Os componentes individuais de tais combinações podem ser administrados ou sequencialmente ou simultaneamente em formulações farmacêuticas separadas ou combinadas. Os componentes individuais das combinações também podem ser administrados separadamente, através da mesma ou de vias diferentes.
[00127] Quando um composto de fórmula (I) ou um derivado farma- ceuticamente aceitável do mesmo é usado em combinação com um segundo agente terapêutico ativo contra o mesmo estado de doença, a dose de cada composto pode diferir daquela quando o composto é usado sozinho. As doses apropriadas serão prontamente compreendidas por aqueles versados na técnica.
[00128] Uma composição farmacêutica da invenção que pode ser preparada pela mistura, adequadamente em temperatura ambiente e pressão atmosférica, é geralmente adaptada para administração oral, parenteral ou retal e, como tal, pode estar na forma de comprimidos, cápsulas, preparações líquidas orais, pós, grânulos, pastilhas, pós re- constituíveis, soluções ou suspensões injetáveis ou para infusão ou supositórios. As composições oralmente administráveis são geralmente preferidas.
[00129] Adicionalmente, a invenção refere-se a um método para a fabricação de compostos de fórmula (I), a novos intermediários de uso na fabricação de compostos de fórmula (I) e à fabricação de tais inter-mediários.
[00130] Intermediários particulares de interesse incluem: 7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-ol (Intermediário 13)
Figure img0020
3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-ol (Intermediário 27)
Figure img0021
2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-ol (Intermediário 37)
Figure img0022
[00131] Outros intermediário de interesse são anilidas: 6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipiridin-3- amina (Intermediário 15)
Figure img0023
; e 2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5- amina (Intermediário 19)
Figure img0024
; e 6-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-3-piridinamina (In- termediário 29)
Figure img0025
2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-5-pirimidinamina (Intermediário 33)
Figure img0026
[00132] Todas as publicações incluindo, mas não limitado a, patentes e pedidos de patente citados nesse pedido são incorporadas aqui a título de referência, como se cada publicação individual estivesse es-pecificamente e individualmente indicada estar incorporada a título re-ferência como se aqui descrita na íntegra.
Breve descrição das figuras
[00133] A presente invenção é ilustrada, por meio de um exemplo somente, com referência às seguintes figuras em que:
[00134] A Figura 1a - Correntes de hKv3.2 registradas usando o ensaio descrito no Exemplo Biológico 1. Os dados mostrados são as correntes individuais durante o período da etapa de voltagem de despolarização para -15 mV registrada em 4 células diferentes em duas concentrações do composto do Exemplo de Referência RE1. Os dados são ajustados por uma única curva exponencial (linhas sólidas) usando o procedimento de ajuste em Prism versão 5 (Graphpad Software Inc).
[00135] A Figura 1b - Correntes de hKv3.2 registradas usando o ensaio descrito no Exemplo Biológico 1. Os dados mostrados são as correntes individuais durante o período da etapa de voltagem de despolarização para -15 mV registrada em 2 células diferentes em duas concentrações do composto do Exemplo de Referência RE3. Os dados são ajustados por uma única curva exponencial (linhas sólidas) usando o procedimento de ajuste em Prism versão 5 (Graphpad Software Inc).
[00136] A Figura 2 - Registros feitos a partir de interneurônios de "disparo rápido" identificados no córtex somatossensorial do camun-dongo.
Experimental
[00137] A invenção é ilustrada pelos compostos descritos abaixo. Os exemplos a seguir descrevem a síntese laboratorial de compostos específicos da invenção e não são pretendidos limitar o escopo da in-venção de qualquer maneira com relação aos compostos ou processos. Entende-se que, apesar de reagentes, solventes, temperaturas e períodos de tempo específicos serem usados, existem várias alternativas equivalentes possíveis que podem ser usadas para produzir resultados similares. A presente invenção pretende incluir tais equivalentes. Equipamento Analítico
[00138] Os materiais de partida, reagentes e solventes foram obtidos de fornecedores comerciais e usados sem purificação adicional a menos que determinado de outra maneira. A menos que determinado de outra maneira, todos os compostos com centros quirais são racê- micos. Onde as reações são descritas como tendo sido realizadas de uma maneira similar a reações mais completamente descritas, anteriores, as condições gerais de reação usadas foram essencialmente as mesmas. As condições de processamento usadas foram do tipo padronizado na técnica, mas tiveram que ser adaptadas de uma reação para outra. O material de partida pode não ter sido necessariamente preparado a partir do lote referido. Os compostos sintetizados podem ter várias purezas que variam, por exemplo, de 85% a 98%. O cálculo do número de moles e o rendimento são, em alguns casos, ajustados para isso.
[00139] Os espectros de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) (1H; 13C e 19F) foram registrados em instrumentos Varian a 300, 400, 500 ou 600 Hz ou em instrumentos Bruker a 400 MHz. As alterações químicas são relatadas em ppm (δ) usando a linha de solvente residual como padrão interno. Padrões de divisão são designados como s (singleto), br. s (singleto amplo), d (dubleto), t (tripleto), q (quarteto), dd (dubleto de dubletos), dt (dubleto de tripletos) e m (multipleto). Os es-pectros de RMN foram registrados em temperaturas que variam de 25 a 30°C.
[00140] Espectros de massa (MS) de infusão direta foram realizados em um espectrômetro de massa, que opera em modos de ionização ES (+) e ES(-) acoplado com um instrumento de HPLC Agilent série 1100 [As análises LC/MS-ESI(+) foram realizadas em uma Supel- cosil ABZ+Plus (33x4,6 mm, 3 μm) (fase móvel: de 10%[CH3CN+TFA0,05%] para 90 %[CH3CN+TFA0,05%] e 10% [água] em 2,2 min, sob essas condições por 2,8 min. T= 45oC, fluxo = 0,9 mL/min)]. O uso dessa metodologia está indicado por "MS_2 (ESI)" na caracterização analítica dos compostos descritos.
[00141] Controle de Qualidade: LC/MS-ES+ sob condições ácidas foi realizada em uma coluna Zorbax SB C18 (1,8 μm 3 x 50 mm). Fase móvel: A: (H2O + TFA 0,05% por vol.) / B: (CH3CN + TFA 0,05% por vol). Gradiente: t = 0 min 0% (B), de 0 a 95% (B) em 2,5 min, 95% (B) por 0,2 min, de 95 a 100% (B) em 0,2 min, 100% (B) por 0,4 min, de 100% a 0% (B) em 0,1 min. Tempo de parada 4 min. T da coluna = 60°C. Taxa de fluxo: 1,5 ml/min. Faixa de massa ES+: (100-1000 amu, F=60). Comprimentos de onda de detecção UV: DAD 1A = 220,8, DAD 1B = 254,8. O uso dessa metodologia está indicado por "LC/MS: QC_3_MIN" na caracterização analítica dos compostos descritos. Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência com um gradiente ácido:
[00142] Corrente iônica total (TIC) (Total Ion Current) e traçados cromatográficos UV DAD junto com os espectros de MS e UV associ- ados com os picos foram obtidos em um sistema UPLC/MS Acquity® equipado com um detector PDA 2996 e acoplado com um espectrô- metro de massa Waters Micromass ZQTM que opera no modo de io-nização por eletropulverização positiva ou negativa [LC/MS - ES (+ ou -): as análises foram realizadas usando uma coluna AcquityTM UPLC BEH C18 (50 x 2,1 mm, tamanho da partícula 1,7 μm). Método geral: Fase móvel: A: (água + HCO2H 0,1%) / B: (CH3CN + HCO2H 0,06%). Gradiente : t = 0 min 3% (B), t = 0,05 min 6% (B), t = 0,57 min 70% (B), t = 1,06 min 99% (B) permanecendo por 0,389 min, t = 1,45 min 3% (B), tempo de parada 1,5 min. T da coluna = 40 °C. Taxa de fluxo = 1,0 mL/min. Faixa de massa: ES (+): 100-1000 amu. ES (-): 100-800 amu. Faixa de detecção UV: 210-350 nm. O uso dessa metodologia está indicado por "UPLC" na caracterização analítica dos compostos descritos. Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência com um gradiente básico:
[00143] Corrente iônica total (TIC) e traçados cromatográficos UV DAD junto com os espectros de MS e UV associados com os picos foram obtidos em um sistema UPLC/MS Acquity® equipado com um detector PDA 2996 e acoplado com um espectrômetro de massa Waters SQD que opera no modo de ionização por eletropulverização positiva ou negativa alternada [LC/MS - ES+/-: as análises foram realizadas usando uma coluna AcquityTM UPLC BEH C18 (50 x 2,1 mm, tamanho da partícula de 1,7 μm). Fase Móvel: A: (solução aquosa de NH4HCO3 10 mM (ajustada para pH 10 com amônia)) / B: CH3CN. Gradiente: t = 0 min 3% (B), t = 1,06 min 99% (B) durando 0,39 min, t = 1,46 min 3% (B), tempo de parada 1,5 min. T da coluna = 40 °C. Taxa de fluxo= 1,0 mL/min. Faixa de massa: ES (+): 100-1000 amu. ES (-): 100-1000 amu. Faixa de detecção UV: 220-350 nm. O uso dessa metodologia está indicado por "UPLC_B" na caracterização analítica dos compostos descritos.
[00144] Em várias preparações, purificação foi realizada usando cromatografia flash automática Biotage (SP1 e SP4) ou sistemas Flash Master Personal.
[00145] As cromatografias flash foram realizadas em sílica gel 230400 mesh (fornecida pela Merck AG Darmstadt, Alemanha) ou em sílica gel 300-400 mesh (fornecida pela Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.), Cartuchos pré-empacotados Varian Mega Be-Si, cartuchos de sílica Biotage pré-empacotados (por exemplo, cartucho SNAP Biotage). Abreviações AlBN azobisisobutironitrila BuLi butillítio CDCl3 clorofórmio deuterado CCl4 tetracloreto de carbono D2O água deuterada DCM diclorometano DIAD azodicarboxilato de di-isopropila DIPEA N,N-di-isopropiletilamina DMAP 4-dimetilaminopiridina DMF N,N-dimetilformamida DMSO dimetilssulfóxido DMSO-d6 dimetilssulfóxido deuterado Et2O éter dietílico EtOAc acetato de etila EtOH etanol h horas H2O2 Peróxido de hidrogênio HATU hexafluorfosfato de (O-7-azabenzotriazol-1-il)- N,N,N',N'-tetrametilurônio) HCO2H ácido fórmico HCl cloreto de hidrogênio K2CO3 carbonato de potássio KHDMS hexametildissilazida de potássio KOH hidróxido de potássio LiAlH4 Hidreto de lítio alumínio MeCN /CH3CN acetonitrila MeOH metanol MDAP autopurificação direcionada para a massa MOM metoximetila MOM-Cl metil éter de clorometila NaH hidreto de sódio Na2SO4 sulfato de sódio NBS N-Bromossuccinimida Na2CO3 carbonato de sódio NaOH hidróxido de sódio NaOMe metóxido de sódio NH4OH hidróxido de amônia NH4 HCO3H bicarbonato de amônia RMN Ressonância Magnética Nuclear Pd/C paládio sobre carvão PE éter de petróleo t.a. temperatura ambiente sec-BuLi sec-Butillítio SCRC Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd T3P anidrido propilfosfônico TBAF fluoreto de tetrabutilamônio TBME terc-Butil metil éter TEA trietilamina TFA ácido trifluoracético THF tetra-hidrofurano Intermediário 1 1-(metiloxi)-3-{[(metiloxi)metil]oxi}benzeno
Figure img0027
[00146] A uma solução de 3-(metiloxi)fenol (10,38 g, 84 mmoles) em tetra-hidrofurano (100 ml, SCRC) foi adicionado NaH (60% em peso, 1,824 g, 76 mmoles, Aldrich) em porções sob resfriamento com gelo. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora e éter bromometil metílico (9,5 g, 76 mmoles, SCRC) foi então adicionado. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas e água (50 ml) foi adicionada. A mistura de reação foi extraída com acetato de etila (2 vezes 50 ml, SCRC) e as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio, evaporadas. O resíduo foi purificada por cromatografia de coluna em sílica-gel (EtOAc: PE = 1: 100) para fornecer o composto do título (10,2 g) como um líquido incolor. Intermediário 2 2-iodo-1-(metiloxi)-3-{[(metiloxi)metil]oxi}benzeno
Figure img0028
[00147] A uma solução de 1-(metiloxi)-3-{[(metiloxi)metil]oxi}ben- zeno (Intermediário 1, 10 g, 59,5 mmoles) em tetra-hidrofurano (100 ml, SCRC) pré-resfriada para -78 °C foi adicionado BuLi por goteja- mento (2,5 M em THF, 28,5 ml, 71,3 mmoles, SCRC), mantendo a temperatura interna menor do que -70 °C. Depois que a adição estava completa, a mistura foi agitada a -70 °C por 2 horas e uma solução de iodo (15,09 g, 59,5 mmoles, SCRC) em THF (50 ml, SCRC) foi adicionada por gotejamento. A mistura resultante foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente e extinta com uma solução aquosa saturada de cloreto de amônia (100 ml). A mistura foi extraída com acetato de etila (3 vezes 300 ml, SCRC) e as camadas orgânicas combinadas foram secas, evaporadas e purificadas por cromatografia em sílica-gel com os eluentes EtOAc: PE (1/ 100) para fornecer o composto do título (16,2 g) como um líquido amarelo. Intermediário 3
Figure img0029
[00148] Uma solução de 2-iodo-1-(metiloxi)-3-{[(metiloxi)metil]oxi} benzeno (Intermediário 2, 16,2 g, 55,1 mmoles) em diclorometano (100 ml, SCRC) foi borbulhada com HCl (g) por 30 min. TLC mostrou que a reação estava completa. A mistura de reação foi vertida em uma solução saturada aquosa de NaHCO3 (200 ml) e extraída com diclorome- tano (3 x 200 ml, SCRC). As camadas orgânicas combinadas foram secas, evaporadas e purificadas por cromatografia em sílica-gel (EtO- Ac: PE = 1:50) para fornecer o composto do título como um líquido amarelo (10,3 g). Intermediário 4 2-iodo-1-(metiloxi)-3-[(2-metil-2-propen-1-il)oxi]benzeno
Figure img0030
[00149] A uma solução de 2-iodo-3-(metiloxi)fenol (Intermediário 3, 10,3 g) em DMF (100 ml, SCRC) foi adicionado NaH (60% em peso, 1,977 g, 49,4 mmoles) em porções. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora e 3-cloro-2-metil-1-propeno (3,73 g, 41,2 mmoles, Aldrich) foi adicionado. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas e água (50 ml) foi adicionada. A mistura de reação foi extraída com acetato de etila (3 vezes 200 ml, SCRC) e as camadas orgânicas combinadas foram secas, evaporadas e purificadas por cromatografia em sílica-gel com os eluentes EtOAc/ PE (1/30) para fornecer o composto do título como um líquido amarelo (11,6 g)
[00150] 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 7,25 (1H, t), 6,52 - 6,47 (2H, m), 5,21 (1H, s), 5,01 (1H, s), 4,49 (2H, s), 3,89 (3H, s), 1,87 (3H, s). Intermediário 5 3,3-dimetil-4-(metiloxi)-2,3-di-hidro-1-benzofurano
Figure img0031
[00151] A uma solução de 2-iodo-1-(metiloxi)-3-[(2-metil-2-propen- 1-il)oxi]benzeno (Intermediário 4, 6,08 g) em tolueno (50 ml, SCRC) foram adicionados AIBN (3,61 g, 21,99 mmoles, SCRC) e tributilesta- nana (11,60 g, 40,0 mmoles, Aldrich). A mistura de reação foi aquecida em refluxo por 3 horas e depois resfriada para temperatura ambiente. Água (100 ml) foi adicionada e a mistura foi extraída com acetato de etila (3 vezes 200 ml, SCRC). As camadas orgânicas combinadas foram secas, evaporadas e purificadas por cromatografia em sílica-gel com os eluentes EtOAc/PE (1/50) para fornecer o composto do título como um líquido amarelo (2,7 g).
[00152] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 7,05 (1H, t), 6,50 (1H, d), 6,39 (1H, d), 4,14 (2H, s), 3,77 (3H, s), 1,34 (6H, s). Intermediário 6 3,3-dimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-ol
Figure img0032
[00153] A uma solução de 3,3-dimetil-4-(metiloxi)-2,3-di-hidro-1- benzofurano (Intermediário 5, 4,0 g) em diclorometano (100 ml, SCRC) foi adicionado BBr3 (6,37 ml, 67,3 mmoles, SCRC) por gotejamento sob resfriamento com gelo. Depois que a adição estava completa, a mistura de reação foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente e depois água (20 ml) foi adicionada. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 vezes 100 ml, SCRC) e as camadas orgânicas combinadas foram secas, evaporadas e purificadas por cromatografia em sílica-gel com EtOAc/PE como eluentes(1/20) para fornecer o composto do título (2,8 g).
[00154] 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 6,98 - 6,94 (1H, t), 6,41 - 6,39 (1H, dd), 6,25 - 6,23 (1H, dd), 4,21 (2H, s), 1,45 (6H, s); MS_2: 163 [M-H]-. Intermediário 7 2,4-bis(metoximetoxi)-1-metil-benzeno
Figure img0033
[00155] A uma solução de 4-metilbenzeno-1,3-diol (4 g, 32,26 mmoles) em N,N-dimetilformamida seca (30 ml) a 0°C, hidreto de sódio (dispersão 60% em óleo mineral) (3,87 g, 96,78 mmoles) foi adicionada e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos na mesma temperatura. MOM-Cl (7,35 ml, 96,78 mmoles) foi rapidamente adicionado e a mistura de reação foi agitada por 1 hora enquanto a temperatura foi deixada atingir a temperatura ambiente. A reação foi extinta com salmoura (40 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 80 ml). A camada orgânica foi lavada com salmoura gelada (2 x 50 ml), seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada e o resíduo foi purificado por cromato- grafia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 100 g e ciclo-hexano para ciclo-hexano/acetato de etila 8:2 como eluentes fornecendo o composto do título (6,1 g) como um óleo incolor.
[00156] LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,811 min; 213 [M+H]+. Intermediário 8 2-[2,6-bis(metoximetoxi)-3-metil-fenil]-2-oxo-acetato de etila
Figure img0034
[00157] A uma solução de 2,4-bis(metoximetoxi)-1-metil-benzeno (Intermediário 7, 5,5 g, 25,94 mmoles) em tetra-hidrofurano seco (50 ml) em temperatura ambiente, BuLi 1,6 M em hexano (19,45 ml, 31,13 mmoles) foi adicionada e a mistura de reação foi agitada por 30 minutos na mesma temperatura. A mistura foi resfriada para -78 °C e ela foi adicionada (através de canulação) a uma solução de clorooxoacetato de etila (4,35 ml, 38,9 mmoles) em tetra-hidrofurano seco (30 ml) a -78 °C. A mistura de reação foi agitada a -78°C por 30 minutos. A reação foi extinta com água (20 ml), diluída com salmoura (50 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 100 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 100 g e ciclo-hexano para ciclo- hexano/acetato de etila 8:2 como eluente fornecendo o composto do título (4,65 g) como um óleo amarelo claro.
[00158] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 1,865 min. Intermediário 9 2-[2,6-bis(metoximetoxi)-3-metil-fenil]prop-2-enoato de etila
Figure img0035
[00159] A uma suspensão de brometo de metiltrifenilfosfônio (8,78 g, 24,6 mmoles) em tetra-hidrofurano seco (50 ml) a 0°C, uma solução de KHMDS 0,5 M em tolueno (44,22 ml, 22,11 mmoles) foi lentamente adicionada e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos a 0°C e por 45 minutos em temperatura ambiente. A mistura de reação foi resfriada para 0°C e ela foi lentamente adicionada a uma solução de 2- [2,6-bis(metoximetoxi)-3-metil-fenil]-2-oxo-acetato de etila (Intermediário 151, 4,6 g, 14,74 mmoles ) em tetra-hidrofurano seco (25 mL) a 0°C e a mistura de reação foi agitada por 2 horas a 0°C. A reação foi extinta com água (50 ml), diluída com salmoura (50 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 100 ml). A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 100 g e ciclo-hexano para ciclo-hexano/acetato de etila 8:2 como eluentes fornecendo o composto do título (3,8 g) como um óleo incolor.
[00160] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 1,930 min. Intermediário 10 1 -[2,6-bis(metoximetoxi)-3-metil-fenil]ciclopropanocarboxilato de etila
Figure img0036
[00161] A uma solução de Iodeto de Trimetilssulfoxônio (4,4 g, 20 mmoles) em sulfóxido de dimetila seco (30 mL), hidreto de sódio (dis-persão 60% em óleo mineral) (0,720 g, 18 mmoles) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 1 hora em temperatura ambiente. Uma solução de 2-[2,6-bis(metoximetoxi)-3-metil-fenil]prop-2-enoato de etila (Intermediário 152, 3,5 g, 11,29 mmoles) em sulfóxido de di- metila seco (15 mL) foi lentamente adicionada e a mistura de reação foi agitada por 1 hora em temperatura ambiente. A reação foi extinta com uma solução aquosa saturada de cloreto de amônia (10 ml), diluída com água (40 ml) e extraída com acetato de etila (2 x100 ml). A camada orgânica foi lavada com água (2 x 50 ml), seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 100 g e ciclo-hexano para ciclo-hexano/acetato de etila 8:2 como eluentes fornecendo o composto do título (3,1g) como um óleo incolor.
[00162] LC/MS: QC_3_MIN: Tr= 2,028 min. Intermediário 11 2-[1-(hidroximetil)ciclopropil]-3-(metoximetoxi)-6-metil-fenol
Figure img0037
[00163] A uma solução de 1-[2,6-bis(metoximetoxi)-3-metil- fenil]ciclopropanocarboxilato de etila (Intermediário 10, 300 mg, 0,93 mmol) em etanol (10 ml), HCl 6N em água (0,4 mL, 2,4 mmoles) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por uma noite a 50°C. Os solventes combinados foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi suspenso em tolueno seco (10 mL) e o solvente evaporado. O resíduo obtido foi dissolvido em tetra-hidrofurano seco (10 ml), a mistura foi resfriada para 0°C e NaH (dispersão 60% em óleo mineral) (80 mg, 2 mmoles) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 30 minutos na mesma temperatura. MOM-Cl (0,083 mL, 1,1 mmol) foi então adicionado e a mistura de reação foi agitada por 1 hora a 0°C. Li- AlH4 (1M em THF, 1,2 ml, 1,2 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi adicionalmente agitada por 1 hora na mesma temperatura. A reação foi extinta com uma solução aquosa saturada de cloreto de amônia (10 ml), diluída com água (20 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e evaporadas e o resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 25 g e ciclo-hexano para ciclo-hexano/acetato de etila 7:3 como eluentes fornecendo o composto do título (70 mg) como um sólido branco.
[00164] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 1,690 min; 239 [M+H]+. Intermediário 12 4-(metoximetoxi)-7-metil-espiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]
Figure img0038
[00165] A uma solução de 2-[1-(hidroximetil)ciclopropil]-3- (metoximetoxi)-6-metil-fenol (Intermediário 11, 65 mg, 0,27 mmol) em tetra-hidrofurano seco (5 ml), trifenilfosfina (84 mg, 0,32 mmol) foi adi-cionada e a mistura de reação foi agitada até a sua dissolução completa. DIAD (0,056 ml, 0,285 mmol) foi então adicionado por gotejamento e a mistura de reação foi agitada por 30 minutos em temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo-hexano para ciclo- hexano/acetato de etila 8:2 como eluentes fornecendo o composto do título (40 mg) como um óleo amarelo claro.
[00166] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 2,024 min; 221 [M+H]+. Intermediário 13 7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1 '-ciclopropano]-4-ol
Figure img0039
[00167] A uma solução de 4-(metoximetoxi)-7-metil-espiro[2H- benzofuran-3,1'-ciclopropano] (Intermediário 12, 38 mg, 0,17 mmol) em etanol (5 ml), HCl 6N em água (0,1 mL, 0,6 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 4 dias em temperatura ambiente. Os solventes combinados foram removidos sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo-hexano para ciclo- hexano/acetato de etila 7:3 como eluentes fornecendo o composto do título (24 mg) como um sólido laranja claro.
[00168] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 9,02 (1H, s), 6,65 (1H, d), 6,06 (1H, d), 4,36 (2H, s), 2,02 (3H, s), 1,40-1,44 (2H, m), 0,77-0,82 (2H, m). ROESI (400 MHz, DMSO-d6): correlação NOE entre próton a 6,65 ppm e prótons (CH3) a 2,02 ppm, correlação NOE entre próton a 9,02 ppm e próton a 6,06 ppm. LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 1,647 min; 177 [M+H]+. Intermediário 14 2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-5-nitro- piridina
Figure img0040
[00169] A uma solução de 7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-ol (Intermediário 13, 176 mg, 1 mmol) em DMF seco (4 ml), carbonato de potássio (207 mg, 1,5 mmoles) e depois 2-cloro-5- nitropiridina (158 mg, 1 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada por 2 horas a 80°C. Depois de resfriar, a mistura de reação foi extinta com água (2 ml), diluída com salmoura (10 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 20 ml). A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada fornecendo o composto do título (270 mg) como um sólido laranja que foi usado na próxima etapa como material bruto sem purificação adicional.
[00170] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 2,138 min; 299 [M+H]+. Intermediário 15 6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipiridin-3- amina
Figure img0041
[00171] A uma solução de 2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclo- propano]-4-il)oxi-5-nitro-piridina (Intermediário 14, 265 mg) em tetra- hidrofurano (5 ml)/ água (2,5 ml), ferro (245 mg, 4,45 mmoles) e depois cloreto de amônia (238 mg, 4,45 mmoles) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada por uma noite em temperatura ambiente. O catalisador foi filtrado e o resíduo foi diluído com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 ml) e extraído com acetato de etila (3 x10 ml). A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo-hexano/acetato de etila 8:2 para ciclo-hexano/acetato de etila 1:1 como eluentes fornecendo o composto título (203 mg) como um sólido amarelo claro.
[00172] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 1,740 min; 269 [M+H]+. Intermediário 16 N-[(1 R)-1-[[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1 '-ciclopropano]-4-il)oxi-3- piridil]carbamoil]propil]carbamato de terc-butila
Figure img0042
[00173] A uma solução de ácido (2R)-2-({[(1,1- dimetiletil)oxi]carbonil} amino)butanoico (36 mg, 0,18 mmol) em DMF seco (1 ml) DIPEA (52 μl, 0,3mmol) e depois HATU (65 mg, 0,17 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos em t.a. 6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipiridin-3- amina (Intermediário 15, 40 mg, 0,15 mmol) foi então adicionada e a mistura de reação foi agitada por 4 horas em temperatura ambiente. A reação foi extinta com água (2 ml) diluída com salmoura (5 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca (Na2SO4), filtrada e evaporada e o resíduo foi purificado por cromato- grafia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo-hexano/acetato de etila 90:10 para ciclo- hexano/acetato de etila 60:40 como eluentes fornecendo o composto do título (57 mg) como um sólido branco.
[00174] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 2,190 min; 454 [M+H]+. Intermediário 17 (2R)-2-amino-N-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4- il)oxi-3-piridil]butanamida
Figure img0043
[00175] A uma solução de N-[(1R)-1-[[6-(7-metilespiro[2H- benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3- piridil]carbamoil]propil]carbamato de terc-butila (Intermediário 16, 55 mg) em DCM seco (3 ml) a 0°C, TFA (1 ml) foi lentamente adicionado e a mistura de reação foi agitada por 3 horas na mesma temperatura. O solvente e o excesso de TFA foram removidos sob pressão reduzida e o resíduo foi diluído com DCM (10 ml) e uma solução aquosa saturada de NaHCO3 foi adicionada enquanto o pH era deixado atingir ~8. Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi seca (Na2SO4), filtrada e evaporada fornecendo o composto do título (41 mg) como um sólido branco.
[00176] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 1,792 min; 354 [M+H]+. Intermediário 18 2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-5-nitro- pirimidina
Figure img0044
[00177] A uma solução de 7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-ol (Intermediário 13, 176 mg, 1 mmol) em Acetonitrila seca (4ml), carbonato de potássio (207 mg, 1,5 mmoles) e depois 2- cloro-5-nitropirimidina (159 mg, 1 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada por 24 horas a 80°C. Depois de resfriar, a mistura de reação foi extinta com água (2 ml), diluída com salmoura (10 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 20 ml). A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada fornecendo o composto do título (258 mg) como um sólido laranja que foi usado na próxima etapa como material bruto sem purificação adicional.
[00178] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 2,007 min; 300 [M+H]+. Intermediário 19 2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5- amina
Figure img0045
[00179] A uma solução de 2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-il)oxi-5-nitro-pirimidina (Intermediário 18, 255 mg) em tetra-hidrofurano (5 ml)/ água (2,5 ml), ferro (234 mg, 4,25 mmoles) e depois cloreto de amônia (227 mg, 4,25 mmoles) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada por 48 horas em temperatura ambien- te. O catalisador foi filtrado e o resíduo foi diluído com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 10 ml). A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo- hexano/acetato de etila 8:2 para ciclo-hexano/acetato de etila 4:6 como eluentes fornecendo o composto do título (52 mg) como um sólido laranja claro.
[00180] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 1,746 min; 270 [M+H]+. Intermediário 20 N-[(1 R)-1-[[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1 '-ciclopropano]-4- il)oxipirimidin-5-il]carbamoil]propil]carbamato de terc-butila
Figure img0046
[00181] A uma solução de ácido (2R)-2-({[(1,1- dimetiletil)oxi]carbonil}amino)butanoico (45 mg, 0,222 mmol) em DMF seco (1ml), DIPEA (87 μl, 0,5 mmol) e depois HATU (80 mg, 0,21mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos em t.a. 2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4- il)oxipirimidin-5-amina (Intermediário 19, 50 mg, 0,185 mmol) foi então adicionada e a mistura de reação foi agitada por 6 horas em temperatura ambiente. A reação foi extinta com água (2 ml), diluída com salmoura (5 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca (Na2SO4), filtrada e evaporada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo-hexano/acetato de etila 90:10 para ciclo- hexano/acetato de etila 60:40 como eluentes fornecendo o composto do título (45 mg) como um sólido branco.
[00182] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 2,109 min; 455 [M+H]+. Intermediário 21 (2R)-2-amino-N-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4- il)oxipirimidin-5-il]butanamida
Figure img0047
[00183] A uma solução de N-[(1R)-1-[[2-(7-metilespiro[2H- benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5- il]carbamoil]propil]carbamato de terc-butila (Intermediário 20, 42 mg) em DCM seco (3 ml) a 0°C, TFA (1 ml) foi lentamente adicionado e a mistura de reação foi agitada por 3 horas na mesma temperatura. O solvente e o excesso de TFA foram removidos sob pressão reduzida e o resíduo foi diluído com DCM (10 ml) e uma solução aquosa saturada de NaHCO3 foi adicionada enquanto o pH era deixado atingir ~8. Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi seca (Na2SO4), filtrada e evaporada fornecendo o composto do título (25 mg) como uma goma amarela clara.
[00184] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 1,688 min; 355 [M+H]+. Intermediário 22 (5R)-3-(2-cloropirimidin-5-il)-5-etil-5-metil-imidazolidino-2,4-diona
Figure img0048
[00185] A uma solução de trifosgênio (1,38 g, 4,65 mmoles) em Acetato de etila (20 ml) a 0°C, uma solução de 2-cloro-5- aminopirimidina (1 g, 7,75 mmoles)/DIPEA (8 ml, 4,65 mmoles) em acetato de etila (40 ml) foi lentamente adicionada (20 minutos) e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos na mesma temperatura. Mantendo a mistura de reação a 0°C, foi aplicado vácuo (10 minutos) para remover o excesso de fosgênio. Uma solução de DMAP (0,945 g, 7,75 mmoles) em acetato de etila/diclorometano 1:1 (8 ml) foi adicionada e a mistura de reação foi agitada por 5 minutos na mesma temperatura. Uma solução de cloridrato de de (R)-2-amino-2-metil-butirato de metila (2,59 g, 15,5 mmoles) em acetato de etila (30 ml) foi lentamente adicionada (15 minutos) a 0°C e a mistura de reação foi agitada por 30 minutos na mesma temperatura. A reação foi extinta com tampão aquoso (pH 3) enquanto o pH era deixado atingir ~5-6 e duas fases foram separadas. A camada orgânica foi lavada com tampão aquoso (pH3) (2x20 ml) e depois salmoura (20 ml), seca (Na2SO4), filtrada e evaporada fornecendo intermediário de ureia como uma espuma laranja.
[00186] A ureia foi dissolvida em MeOH (20 ml), NaOMe (0,41 g, 7,75 mmoles) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos em t.a.. A mistura foi extinta com uma solução aquosa saturada de cloreto de amônia(25 ml) e diluída com acetato de etila (50 ml). Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura (2x20 ml), seca (Na2SO4), filtrada e evaporada. O resíduo foi triturado com Et2O (10 ml) e o sólido coletado, fornecendo o composto do título (1,22 g) como um sólido bege.
[00187] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 1,341 min; 255 [M+H]+. Intermediário 23 3-(2-cloropirimidin-5-il)-5,5-dimetil-imidazolidino-2,4-diona
Figure img0049
[00188] A uma solução de trifosgênio (1,38 g, 4,65 mmoles) em Acetato de etila (20 ml) a 0°C, uma solução de 2-cloro-5- aminopirimidina (1 g, 7,75 mmoles)/DIPEA (8 ml, 4,65 mmoles) em acetato de etila (40 ml) foi lentamente adicionada (20 minutos) e a mis- tura de reação foi agitada por 15 minutos na mesma temperatura. Mantendo a mistura de reação a 0°C, foi aplicado vácuo (10 minutos) para remover o excesso de fosgênio. Uma solução de DMAP (0,945 g, 7,75 mmoles) em acetato de etila/diclorometano 1:1 (8 ml) foi adicionada e a mistura de reação foi agitada por 5 minutos na mesma temperatura. Cloridrato de éster metílico de 2,2-Dimetilglicina (2,37 g, 15,5 mmoles) em acetato de etila (30 ml) foi lentamente adicionado (15 minutos) a 0°C e a mistura de reação foi agitada por 30 minutos na mesma temperatura. A reação foi extinta com tampão aquoso (pH 3) enquanto o pH era deixado atingir ~5-6 e duas fases foram separadas. A camada orgânica foi lavada com tampão aquoso (pH 3) (2 x 20 ml) e depois salmoura (20 ml), seca (Na2SO4), filtrada e evaporada fornecendo o intermediário de ureia como uma espuma laranja.
[00189] A ureia foi dissolvida em MeOH (20 ml), NaOMe (0,41 g, 7,75 mmoles) foi adicionada e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos em t.a. A mistura foi extinta com uma solução aquosa saturada de cloreto de amônia (25 ml) e diluída com acetato de etila (50 ml). Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura (2x20 ml), seca (Na2SO4), filtrada e evaporada. O resíduo foi triturado com Et2O (10 ml) e o sólido coletado fornecendo o composto do título (1,08 g) como um sólido laranja.
[00190] LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 1,062 min; 241 [M+H]+. Intermediário 24 [(3,3-dimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi][tris( 1 -metiletil)]silano
Figure img0050
[00191] 3,3-Dimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-ol (Intermediário 6, 3,6 g, 21,91 mmoles) foi dissolvido em THF anidro (20,0 mL) e a solução incolor foi resfriada para 0°C agitando sob nitrogênio. Uma solu- ção 2M de n-BuLi em ciclo-hexano (13,2 mL, 26,4 mmoles) foi adicionada por gotejamento e a solução amarela resultante foi agitada a 0°C por 10 min. Triisopropilsisliltriflato (7,7 mL, 28,5 mmoles) foi adicionado por gotejamento: a solução descoloriu quase completamente. Essa foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada por uma noite. Água (1,0 mL) foi adicionada e os voláteis evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila e lavado com salmoura três vezes. A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro e evaporada até secar para dar um óleo amarelo que foi re-dissolvido em TBME e lavado duas vezes com água. A solução orgânica foi seca em Na2SO4 e evaporada até secar para dar o composto do título (7,4 g) como um óleo amarelo.
[00192] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 6,94 (1H, t), 6,31-6,36 (1H, m), 6,29 (1H, d), 4,14 (2H, s), 1,28-1,40 (9H, m), 1,09 (18 H, d). Intermediário 25 [(7-bromo-3,3-dimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi][tris( 1 - metiletil)]silano
Figure img0051
[00193] [(3,3-dimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi][tris(1- metiletil)]silano (Intermediário 24, 7,4 g, 23,19 mmoles) foi dissolvido em THF (70,0 mL). N-Bromossuccinimida (4,2 g, 23,88 mmoles) foi adicionada dissolvendo em poucos minutos. Essa mistura foi agitada em temperatura ambiente por 3 h. Mais NBS (0,64 g, 3,48 mmoles) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por mais uma hora. CCl4 (50 mL) foi adicionado à mistura de reação e a solução foi evaporada até secar. O resíduo foi re-suspenso em CCl4 e agitado em temperatura ambiente por 15 min. O sólido branco foi removido por filtração e a torta úmida foi lavada com mais CCl4. O CCl4 foi trocado por acetato de etila e a solução orgânica foi lavada três vezes com 2,5% peso/peso com NaHCO3 aquoso e finalmente com água. A solução orgânica foi seca em Na2SO4 anidro e evaporada até secar para dar o composto do título(8,6 g) como um óleo marrom.
[00194] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,14 (1 H, d), 6,29 (1H, d), 4,24 (2H, s), 1,27-1,41 (9H, m), 1,08 (18H, d). Intermediário 26 tris(1-metiletil)[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]silano
Figure img0052
[00195] [(7-bromo-3,3-dimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4- il)oxi][tris(1-metiletil)]silano (Intermediário 25, 7,1 g, 17,72 mmoles) foi dissolvido em THF anidro (72 mL) e resfriado para 0°C. Tetrametileti- lenodiamina (8,0 mL, 53,16 mmoles) foi adicionado e a solução amarela foi agitada a 0°C por 10 min. Uma solução de butilítio 1,6 M em hexano (22,5 mL, 35,4 mmoles) foi adicionada por gotejamento durante 10 minutos e depois agitada a 0°C por 15 min. Iodeto de metila (11 mL, 177,2 mmoles) foi adicionado por gotejamento durante 6 min. O sólido branco foi removido por filtração e a torta úmida lavada com THF. As camadas orgânicas combinadas foram evaporadas até secar. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila e lavado duas vezes com NaHCO3 aquoso e uma vez com água. A solução orgânica foi seca em Na2SO4 anidro e evaporada até secar para dar um óleo marrom. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel usando ciclo- hexano para ciclo-hexano/acetato de etila 1:1 como eluentes fornecendo o composto do título (3,6 g) como um óleo marrom.
[00196] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 6,76 (1H, d), 6,20 (1H, d), 4,14 (2H, s), 2,02 (3H, s), 1,28-1,39 (9H, m), 1,09 (18H, d). Intermediário 27 3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-ol
Figure img0053
[00197] Tris(1-metiletil)[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4- il)oxi]silano (Intermediário 26, 3,6 g, 10,84 mmoles) foi dissolvido em THF (36 mL) para obter uma solução amarelo escuro. TBAF (8,5 g, 32,5 mmoles) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por uma noite em temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila e lavado com HCl aquoso, depois NaHCO3 aquoso e finalmente salmoura. A solução orgânica foi seca em Na2SO4 e evaporada até secar e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel usando ciclo-hexano para ciclo-hexano/acetato de etila 95:5 como eluentes fornecendo o composto do título (1,69 g) como um óleo incolor.
[00198] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,06 (1H, s), 6,65 6,69 (1H, m), 6,19 (1H, d), 4,11 (2H, s), 1,99 (3H, s), 1,33 (6H, s). Intermediário 28 5-nitro-2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]piridina
Figure img0054
[00199] 3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-ol (Intermediário 27, 0,9 g, 5,0 mmoles) foi dissolvido em CH3CN (5 mL) na presença de 2- cloro-5-nitropiridina (790 mg, 5,0 mmoles) e K2CO3 (1,72 g, 12,5 mmoles) e a suspensão resultante foi aquecida a 60°C por 1,5 h. A mistura foi então resfriada para temperatura ambiente e diluída com água e acetato de etila. Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura, depois seca em Na2SO4 e evaporada até secar. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel usando ciclo-hexano para ciclo-hexano/acetato de etila 90:10 como eluentes fornecendo o compos-to do título (0,92 g) como um sólido amarelado.
[00200] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9,04 (1H, d), 8,61 (1H, dd), 7,24 (1H, d), 7,02 (1H, d), 6,54 (1H, d), 4,21 (2H, s), 2,14 (3H, s), 1,21 (6H, s). 13C-RMN (200 MHz, DMSO-d6): δ ppm 166,6, 158,7, 147,2, 144,8, 140,4, 135,8, 130,2, 126,1, 116,7, 114,5, 111,0, 83,6, 42,2, 26,0, 14,4. Intermediário 29 6-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-3-piridinamina
Figure img0055
[00201] 5-Nitro-2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4- il)oxi]piridina (Intermediário 28, 920 mg, 3,0 mmoles) foi dissolvida em EtOH (13,5 mL) e agitada sob atmosfera de hidrogênio (0,2 MPa (2 bar)) na presença de Pd/C 10% peso/peso (46 mg, 5% peso/peso) em temperatura ambiente por 30 minutos. O catalisador foi filtrado, lavado com THF e a solução resultante evaporada até secar para fornecer um sólido laranja. O produto bruto foi cristalizado em MeOH para fornecer o composto do título (565 mg) como um sólido bege.
[00202] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7,51 (1H, d), 7,05 (1H, dd), 6,85 (1H, d), 6,69 (1H, d), 6,21 (1H, d), 5,04 (2H, s amplo), 4,19 (2H, s), 2,08 (3H, s), 1,30 (6H, s). 13C-RMN (200 MHz, DMSO-d6): δ ppm 158,3, 154,2, 150,7, 141,5, 132,2, 129,6, 125,3, 124,7, 113,9, 112,2, 111,8, 83,7, 42,2, 26,0, 14,4. Intermediário 30 1,1-dimetiletil {(1R)-1-[({6-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4- il)oxi]-3-piridinil}amino)carbonil]propil}carbamato
Figure img0056
[00203] 6-{[3,3,7-Trimetil-6-(trifluormetoxi)-2,3-di-hidro-1- benzofuran-4-il]oxi}piridin-3-amina (Intermediário 29, 405 mg, 1,27 mmoles) foi suspensa em acetato de etila (4 mL). Trietilamina (0,44 ml, 3,175 mmoles) foi adicionado seguido pela adição de ácido (2R)-2- ({[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil} amino)butanoico (258 mg, 1,27 mmol). A suspensão resultante foi resfriada para 0°C e uma solução de T3P 50 % peso/peso em acetato de etila (1,4 mmoles) foi adicionada por gote- jamento. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 1 hora e depois aquecida para a temperatura ambiente e agitada por mais uma hora. Uma solução aquosa saturada de Na2CO3 foi adicionada e a mistura agitada por 10 min. Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi lavada com água e salmoura, seca em Na2SO4 e evaporada até secar. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel usando ciclo-hexano/acetato de etila 80:20 para ciclo-hexano/acetato de etila 70:30 como eluentes fornecendo o composto do título (0,50 g) como uma espuma branca.
[00204] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10,08 e 10,03 (1H, s amplo), 8,30 (1H, d), 8,03 (1H, dd), 7,00 (1H, d), 6,95-6,90 (2H, m), 6,36 (1H, d), 4,17 (2H, s), 3,98-3,92 (1H, m), 2,10 (3H, s), 1,73-1,52 (2H, m), 1,36 e 1,29 (9H, s amplo), 1,23 (6H, s), 0,88 (3H, t). 13C-RMN (200 MHz, DMSO-d6): δ ppm 171,4, 159,0, 158,5, 155,5, 148,9, 138,1, 131,4, 129,8, 125,8, 115,1, 113,9, 110,7, 83,6, 78,0, 56,3, 42,2, 28,9, 26,0, 25,0, 20,7, 14,4, 14,1, 10,5. Intermediário 31 (2R)-2-amino-N-{6-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-3- piridinil}butanamida
Figure img0057
[00205] O {(1R)-1-[({6-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4- il)oxi]-3-piridinil}amino)carbonil]propil}carbamato de 1,1-dimetiletila (In-termediário 30, 480 mg, 1,05 mmoles) foi dissolvido em acetato de iso- propila (5 mL) e HCl 5-6N em isopropanol (1 ml, 5,25 mmoles) foi adi-cionado. A solução foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora e depois aquecida ~ 50-55°C até a conversão completa. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente e tratada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3. Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura, seca em Na2SO4 e evaporada até secar. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel usando diclorometano/metanol 95:5 como eluentes fornecendo o composto do título (0,31 g) como um espuma amarelada.
[00206] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8,36 (1H, d), 8,11 (1H, dd), 6,96-6,92 (2H, m), 6,38 (1H, d), 4,19 (2H, s), 3,23 (1H, dd), 2,11 (3H, s), 1,72-1,61 (1H, m), 1,53-1,43 (1H, m), 1,25 (6H, s), 0,90 (3H, t). 13C-RMN (200 MHz, DMSO-d6): δ ppm 174,5, 159,0, 158,5, 148,9, 138,2, 131,5, 131,4, 129,8, 125,7, 115,1, 113,9, 110,6, 83,6, 56,7, 42,2, 28,0, 26,0, 14,4, 10,2. Intermediário 32 5-nitro-2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]pirimidina
Figure img0058
[00207] 3,3,7-Trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-ol (Intermediário 27, 178 mg, 1,0 mmol) e 2-cloro-5-nitropirimidina (191,5 mg, 1,2 mmoles) foram dissolvidos em CH3CN (3,0 mL) e K2CO3 (345,5 mg, 2,5 mmoles) foi adicionado. A suspensão resultante foi aquecida para 40°C e agitada por 1 hora. A mistura de reação foi então diluída com água (50 mL) e acetato de etila (50 mL). A fase orgânica foi coletada, lavada com salmoura (50 mL) e seca em Na2SO4. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel usando ciclo-hexano/ acetato de etila 97:3 como eluentes fornecendo o composto do título (243 mg). Intermediário 33 2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-5-pirimidinamina
Figure img0059
[00208] 5-Nitro-2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4- il)oxi]pirimidina (Intermediário 32, 243 mg, 0,81 mmol) foi dissolvida em THF (4 mL) e Paládio sobre carvão (5 mol %, 85 mg) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada sob atmosfera de hidrogênio (0,3 MPa (3 bar)) por 1 hora em temperatura ambiente. O catalisador foi filtrado em uma almofada de celite, lavado com THF e a solução resultante foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com acetato de etila e água, a fase orgânica coletada, seca em Na2SO4 e evaporada para fornecer o composto do título (220 mg) como um óleo incolor. O produto bruto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[00209] MS_2 (ESI): 272 [M+H]+ Intermediário 34 1,1-dimetiletil {(1R)-1-[({2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4- il)oxi]-5-pirimidinil}amino)carbonil]propil}carbamato
Figure img0060
[00210] 2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-5- pirimidinamina (Intermediário 33, 220 mg, 0,81 mmol) foi dissolvido em acetato de etila (10 mL) e ácido (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}ami- no) butanoico (181,1 mg, 0,89 mmol) foi adicionado seguido pela adição de Et3N (0,35 mL, 2,02 mmoles). A solução resultante foi resfriada para 5°C e uma solução de T3P 50% peso/peso em acetato de etila (0,53 mL, 0,89 mmol) foi adicionada por gotejamento em 15 min. A mistura de rea- ção foi agitada por 30 min a 5°C. A reação foi extinta com água (50 mL) e acetato de etila (50 mL), duas fases foram separadas e a camada orgâ-nica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purifi-cado por cromatografia flash em sílica-gel usando ciclo-hexano/acetato de etila 60:40 como eluente fornecendo o composto do título (213 mg).
[00211] MS_2 (ESI):457 [M+H]+. Intermediário 35 ácido (2,2-difluoro-1,3-benzodioxol-4-il)borônico
Figure img0061
[00212] 2,2-Difluoro-1,3-benzodioxol (960 mg, 6,1 mmoles) foi dissolvido em THF (8 mL) e ciclo-hexano (4 mL) e a solução resultante resfriada para -78 °C. Uma solução de sec-BuLi 1,4 M em ciclo-hexano (4,3 mL, 6,1 mmoles) foi adicionada por gotejamento e a mistura de reação agitada por 1,5 hora a -78°C. Trimetilborato (694 mg, 6,75 mmoles) foi adicionado e a mistura foi deixada aquecer lentamente para -30 °C. A mistura de reação foi extinta com uma solução de HCl 2N e diluída com acetato de etila. Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, seca em Na2SO4 e evaporada até secar fornecendo o composto do título como um óleo amarelo que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[00213] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6 + D2O): δ ppm 7,39 (1H, dd), 7,34 (1H, dd), 7,14 (t, 1H, J=7,90 Hz). 19F-RMN (376 MHz, DMSO-d6 + D2O): δ ppm -48,92. 13C-RMN (200 MHz, DMSO-d6 + D2O): δ ppm 147,3, 142,8, 131,6 (t, J=250,7 Hz), 130,1, 124,3, 112,0. Intermediário 36 ácido (2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-il)boronico
Figure img0062
[00214] Ácido (2,2-difluoro-1,3-benzodioxol-4-il)borônico (Intermediário 35, material bruto) foi dissolvido em THF (20 mL) e a solução resultante resfriada para -78°C. Uma solução de sec-BuLi 1,4 M em ci- clo-hexano (17,4 ml, 24,36 mmoles) foi adicionada por gotejamento e a mistura de reação foi agitada por 1,5 hora a -78°C. Iodeto de metila (4,6 ml, 73 mmoles) foi então adicionado e a mistura de reação foi agitada por 2 horas enquanto a temperatura foi deixada atingir a temperatura ambiente. A reação foi extinta pela adição de uma solução aquosa de HCl 2N e diluída com acetato de etila. A camada orgânica foi coletada e depois lavada duas vezes com salmoura, seca em Na2SO4 e evaporada até secar. Cristalização a partir de n-heptano forneceu o composto título (150 mg) como um sólido branco.
[00215] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6 + D2O): δ ppm 7,30 (1H, d), 6,68 (1H, d), 2,25 (s, 3H). 19F-RMN (376 MHz, DMSO-d6 + D2O): δ ppm -48,55. 13C-RMN (200 MHz, DMSO-d6 + D2O): δ ppm 152,5, 147,1, 141,5, 131,6 (t, J=250,0 Hz), 129,9, 125,8, 122,7, 110,1, 14,6. Intermediário 37 2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-ol
Figure img0063
[00216] Ácido (2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-il)borônico (In-termediário 36, 150 mg, 1,28 mmoles) foi dissolvido em THF (1,5 mL) e uma solução aquosa 30 % peso/peso de H2O2 (2,56 mmoles) e Na- OH (51 mg, 1,28 mmoles) foi adicionada e a mistura de reação agitada por 2 dias em temperatura ambiente. A reação foi extinta com uma solução aquosa de HCl 2N e diluída com acetato de etila. Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, seca em Na2SO4 e evaporada até secar, fornecendo o composto do título (140 mg) como um óleo amarelo.
[00217] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10,31 (1H, s), 6,83 (1H, d), 6,63 (1H, d), 2,17 (3H, s). 19F-RMN (376 MHz, DMSO-d6): δ ppm -48,68. 13C-RMN (200 MHz, DMSO-d6): δ ppm 142,3, 139,1, 131,4 (t, J=251,9 Hz), 129,9, 125,6, 112,8, 110,0, 13,2. Intermediário 38 Acetato de 2-bromo-3-hidroxifenila
Figure img0064
[00218] A uma solução de 2-bromo-1,3-benzenodiol (3,028 g, 16,02 mmol) em diclorometano (70 ml), TEA (3,35 ml, 24,03 mmol) e anidrido acético (1,512 ml, 16,02 mmol) foram adicionados sob agitação. A mis-tura de reação foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A reação foi extinta com uma solução saturada de cloreto de amônio (100 ml) e extraída com acetato de etila (3 vezes 70 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, fil-tradas e evaporadas para fornecer o composto título como um óleo preto que foi usado diretamente na etapa seguinte (3,028 g).
[00219] UPLC_B: 0,41 min, 229 [M-H]-. Intermediário 39 acetato de 2-bromo-3-[(2-metil-2-propen-1-il)oxi]fenila
Figure img0065
[00220] A uma solução de acetato de 2-bromo-3-hidroxifeila (Inter-mediário 38, 3028 mg) em acetonitrila (60 ml), carbonato de potássio (3623 mg, 26,2 mmol) e 3-bromo-2-meitl-1-propeno (2123 mg, 15,73 mmol) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada em tempera-tura ambiente de um dia para o outro. A mistura foi lavada com água (3 vezes 60 ml). A fase orgânica foi separada, seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado através de cromato- grafia flash em sílica gel usando uma coluna SNAP 100 g e ciclo- hexano/acetato de etila de 100/0 a 80/20 como eluente para fornecer o composto título como um óleo incolor (2,324 g).
[00221] 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 7,27 (1H, t), 6,68 (1H, dd), 5,19 (1H, s), 5,04 (1H, s), 4,53 (2H, s), 2,38 (3H, s), 1,88 (3H, s); UPLC: 0,81 min, 285 [M+H]+ Intermediário 40 acetato de 3,3-dimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-ila
Figure img0066
[00222] A uma solução de acetato de 2-bromo-3-[(2-metil-2-propen- 1-il)oxi]fenila (Intermediário 39, 2,324 g) em tolueno (20 ml) AIBN (1,606 g, 9,78 mmol) e tributilestanana (4,73 g, 16,30 mmol) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada e aquecida a 100° C por 2 horas, então foi deixada em temperatura ambiente por 4 horas. A reação foi extinta com água (60 ml) e extraída com acetato de etila (3 vezes 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado através de cromatografia flash em sílica gel usando uma coluna SNAP 100 g e ciclo-hexano/acetato de etila de 100/0 a 70/30 como eluente para fornecer o composto título como um óleo incolor (1,290 g).
[00223] 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 7,13 (1H, t), 6,68 (1H, d), 6,59 (1H, d), 4,22 (2H, s), 2,33 (3H, s), 1,39 (6H, s). UPLC: 0,72 min, 207 [M+H]+ Intermediário 6 3,3-dimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-ol
Figure img0067
[00224] Esta é uma via sintética alternativa para uma descrita ante-riormente para o Intermediário 6.
[00225] A uma solução de acetato de 3,3-dimetil-2,3-di-hidro-1- benzofuran-4-ila (Intermediário 40, 1,290 g) em metanol (50 ml) uma solução de hidróxido de sódio (0,375 g, 9,38 mmol) em água (25,00 ml) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos. A mistura foi então acidificada com HCl 5% até pH=5 e extraída com acetato de etila (3 vezes 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado através de cromatografia flash em sílica gel usando uma coluna SNAP 25 g e ciclo-hexano/acetato de etila de 100/0 a 80/20 como eluente para fornecer o composto título como um sólido branco (855 mg).
[00226] UPLC: 0,65 min, 165 [M+H]+. Exemplo 1 (5R)-5-etil-5-metil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1 '- ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0068
[00227] A uma solução de 7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-ol (Intermediário 13, 18 mg, 0,1 mmol) em DMF seco (1ml), carbonato de potássio (27,6 mg, 0,2 mmol) e depois (5R)-3-(2- cloropirimidin-5-il)-5-etil-5-metil-imidazolidino-2,4-diona (Intermediário 22, 20 mg, 0,08 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada por 2 horas a 80°C. Depois de resfriar, a mistura de reação foi extinta com água (1ml), diluída com salmoura (5 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo-hexano/acetato de etila 7:3 para ciclo-hexano/acetato de etila 3:7 como eluentes fornecendo o composto do título (21 mg) como um sólido branco.
[00228] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 8,69-8,74 (3H, m), 6,94 (1H, d), 6,52 (1H, d), 4,44 (2H, s), 2,15 (3H, s), 1,73-1,83 (1H, m), 1,63-1,73 (1H, m), 1,40 (3H, s), 1,02-1,06 (2H, m), 0,85-0,92 (5H, m), LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,007 min; 395 [M+H]+.
[00229] Os compostos a seguir foram preparados usando a metodologia precedente, substituindo 7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-ol (Intermediário 13) pelo fenol apropriado. Os produtos finais foram purificados por cromatografia flash (Cartucho de sílica; Ciclo-hexano/EtOAc ou outro sistema de solvente apropriado).
Figure img0069
Exemplo 4 5,5-dimetil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4- il)oxipirimidin-5-il]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0070
[00230] A uma solução de 7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopro- pano]-4-ol (Intermediário 13, 18 mg, 0,1 mmol) em DMF seco (1 ml), car-bonato de potássio (27,6 mg, 0,2 mmol) e depois 3-(2-cloropirimidin-5-il)- 5,5-dimetil-imidazolidino-2,4-diona (Intermediário 23, 20 mg, 0,083 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada por 2 horas a 80°C. Depois de resfriar, a mistura de reação foi extinta com água (1 ml), diluí-da com salmoura (5 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica- gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo-hexano/acetato de etila 7:3 para ciclo-hexano/acetato de etila 3:7 como eluentes fornecendo o composto do título (18 mg) como um sólido bege claro.
[00231] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 8,74 (1H, s), 8,70 (2H, s), 6,94 (1H, d), 6,52 (1H, d), 4,44 (2H, s), 2,14 (3H, s), 1,42 (6H, s), 1,01-1,06 (2H, m), 0,87-0,92 (2H, m). LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,946 min; 380 [M+H]+. Exemplo 5 (5R)-5-etil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4- il)oxipirimidin-5-il]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0071
[00232] A uma solução de (2R)-2-amino-N-[2-(7-metilespiro[2H- benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]butanamida (Inter-mediário 21, 24 mg, 0,068 mmol) em DCM seco (3 ml), TEA (0,028 ml, 0,2 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi resfriada para 0°C. Uma solução de trifosgênio (15 mg, 0,05 mmol) em DCM seco (1,5 ml) foi adicionada lentamente e a mistura de reação foi agitada por 15 mi-nutos na mesma temperatura. A reação foi extinta com água (10 ml) e duas fases foram separadas. A camada orgânica foi seca (Na2SO4), filtrada e evaporada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo-hexano/acetato de etila 75:25 para ciclo-hexano/acetato de etila 25:75 como eluentes fornecendo o composto do título (11 mg) como um sólido branco.
[00233] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 8,75 (1H, s), 8,68 (2H, s), 6,94 (1H, d), 6,52 (1H, d), 4,44 (2H, s), 4,20-4,25 (1H, m), 2,15 (3H, s), 1,77-1,88 (1H, m), 1,66-1,76 (1H, m), 1,02-1,06 (2H, m), 0,96 (3H, t), 0,87-0,92 (2H, m), LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,955 min; 381 [M+H]+. Exemplo 6 (5R)-5-etil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi- 3-piridil]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0072
[00234] A uma solução de (2R)-2-amino-N-[6-(7-metilespiro[2H- benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]butanamida (Intermediário 17, 40 mg, 0,11 mmol) em DCM seco (5 ml), TEA (0,042 ml, 0,3 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi resfriada para 0°C. Uma solução de trifosgênio (23,7 mg, 0,08 mmol) em DCM seco (3 ml) foi adicionada lentamente e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos na mesma temperatura. A reação foi extinta com água (10 ml) e duas fases foram separadas. A camada orgânica foi seca (Na2SO4), filtrada e evaporada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo-hexano/acetato de etila 75:25 para ciclo-hexano/acetato de etila 25:75 como eluentes fornecendo o composto do título (22 mg) como um sólido branco.
[00235] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 8,63 (1H, s), 8,13 (1H, d), 7,84 (1H, dd), 7,07 (1H, d), 6,94 (1H, d), 6,44 (1H, d), 4,46 (2H, s), 4,19-4,24 (1H, m), 2,15 (3H, s), 1,77-1,88 (1H, m), 1,65-1,75 (1H, m), 1,10-1,14 (2H, m), 0,96 (3H, t), 0,87-0,92 (2H, m). LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,025 min; 380 [M+H]+. Exemplo 7 (5R)-5-etil-3-{6-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-3- piridinil}-2,4-imidazolidinodiona
Figure img0073
[00236] (2R)-2-amino-N-{6-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran- 4-il)oxi]-3-piridinil}butanamida (Intermediário 31, 300 mg, 0,84 mmol) foi dissolvida em acetato de etila (6 mL). Trietilamina (0,47 ml, 3,36 mmoles) foi adicionada e a mistura de reação foi resfriada para 0°C. Uma solução de trifosgênio (100 mg, 0,34 mmol) em acetato de etila (6 mL) foi adicionada lentamente. No final da adição, a mistura foi tratada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 e duas fases foram separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca em Na2SO4 e evaporada até secar para obter um sólido ceroso. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel usando ciclo- hexano/acetato de etila 70:30 para ciclo-hexano/acetato de etila 50:50 como eluentes fornecendo o composto do título (166 mg) como uma espuma branca.
[00237] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8,61 (1H, s amplo), 8,12 (1H, d), 7,82 (1H, dd), 7,10 (1H, d), 6,98 (1H, d), 6,47 (1H, d), 4,21 (2H, s), 4,18 (1H, s amplo), 2,13 (3H, s), 1,86-176 (1H, m), 1,751,64 (1H, m), 1,25 (6H, s), 0,95 (3H, t). 13C-RMN (200 MHz, DMSO-d6): δ ppm 173,2, 162,5, 158,6, 155,4, 148,2, 145,2, 138,5, 130,0, 126,1, 124,3, 115,7, 114,4, 110,6, 83,6, 57,5, 42,2, 26,0, 24,4, 14,4, 8,8. Exemplo 8 (5R)-5-etil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-5- pirimidinil}-2,4-imidazolidinodiona
Figure img0074
[00238] {(1R)-1-[({2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4- il)oxi]-5-pirimidinil}amino)carbonil]propil}carbamato de 1,1-dimetiletila (Intermediário 34, 213 mg, 0,47 mmol) foi dissolvido em HCl 5-6 N em isopropanol (1 mL) e a solução resultante foi aquecida a 35°C por 30 minutos. A mistura de reação foi então concentrada sob vácuo, o resíduo diluído com acetato de etila (50 mL) e uma solução aquosa 5% de K2CO3 (30 mL). Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de cloreto de amônia (30 mL), seca em Na2SO4 e concentrada a vácuo. O produto bruto resultante foi dissolvido em acetato de etila (10 mL) e trietilamina foi adicionada (0,23 mL, 1,64 mmol). The mistura de reação foi resfriada para 05 °C e Uma solução de trifosgênio (55 mg, 0,185 mmol) em acetato de etila (5 mL) foi adicionada por gotejamento em 10 minutos. A reação foi extinta com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura seca em Na2SO4 e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em síli- ca-gel usando ciclo-hexano/acetato de etila 50:50 como eluente forne-cendo o composto título (161 mg) como um sólido branco.
[00239] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8,72 (1H, s), 8,66 (2H, s), 7,03-6,93 (1H, m), 6,55 (1H, d), 4,18 (2H, s), 2,12 (3H, s), 1,87-1,61 (2H, m), 1,2 (6H, s), 1,15 (1H, t), 0,94 (3H, t). MS_2 (ESI): 383 [M+H]. Exemplo 9 (5R)-5-etil-5-metil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1 '- ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0075
[00240] A uma solução de trifosgênio (30 mg, 0,1 mmol) em DCM seco (1 ml) a 0°C, sob atmosfera de nitrogênio, DIPEA (0,175 ml, 1,0 mmol) foi adicionado seguido pela adição (lentamente adicionada) de uma solução de 6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4- il)oxipiridin-3-amina (Intermediário 15, 27 mg, 0,1 mmol) em DCM seco (2 ml) e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos na mesma temperatura. Depois disso, uma solução de cloridrato de (R)-2-amino- 2-metil-butirato de metila (33 mg, 0,2 mmol) em DCM seco (2 ml) foi adicionada e a mistura de reação foi agitada por 30 minutos a 0°C. A reação foi extinta com uma solução aquosa de HCl 1M (5 ml), diluída com DCM (10ml) e duas fases foram separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura (10 ml), seca (Na2SO4), filtrada e evaporada fornecendo o intermediário de ureia como uma espuma amarela.
[00241] A ureia foi dissolvida em MeOH (5 ml), NaOMe (10 mg) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos em tem-peratura ambiente. A reação foi extinta com uma solução aquosa satu-rada de cloreto de amônia (20 ml) e diluída com acetato de etila (40 ml). Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi seca (Na2SO4), filtrada e evaporada e o resíduo foi purificado por cromato- grafia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo-hexano/acetato de etila 75:25 para ciclo- hexano/acetato de etila 25:75 como eluentes fornecendo o composto do título (29 mg) como um sólido branco.
[00242] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 8,60 (1H, s), 8,15 (1H, d), 7,85 (1H, dd), 7,06 (1H, d), 6,94 (1H, d), 6,44 (1H, d), 4,46 (2H, s), 2,15 (3H, s), 1,73-1,83 (1H, m), 1,62-1,72 (1H, m), 1,40 (3H, s), 1,10-1,14 (2H, m), 0,84-0,92 (5H, m), LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 2,076 min; 394 [M+H]+. Exemplo 10 5,5-dimetil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4- il)oxi-3-piridil]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0076
[00243] A uma solução de trifosgênio (30 mg, 0,1 mmol) em DCM seco (1 ml) a 0°C, sob atmosfera de nitrogênio, DIPEA (0,175 ml, 1,0 mmol) foi adicionado seguido pela adição (lentamente adicionada) de uma solução de 6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4- il)oxipiridin-3-amina (Intermediário 15, 27 mg, 0,1 mmol) em DCM seco (2 ml) e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos na mesma temperatura. Depois disso, uma solução de cloridrato de 2-amino-2- metilpropanoato de metila (30 mg, 0,2 mmol) em DCM seco (2 ml) foi adicionada e a mistura de reação foi agitada por 30 minutos a 0°C. A reação foi extinta com uma solução aquosa de HCl 1M (5 ml), diluída com DCM (10 ml) e duas fases foram separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura (10 ml), seca (Na2SO4), filtrada e evaporada fornecendo o intermediário de ureia como uma espuma amarela.
[00244] A ureia foi dissolvida em MeOH (5 ml), NaOMe (10 mg, 0,19 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 15 minutos em temperatura ambiente. A reação foi extinta com uma solução aquosa saturada de cloreto de amônia (20 ml) e diluída com acetato de etila (40 ml). Duas fases foram separadas e a camada orgânica foi seca (Na2SO4), filtrada e evaporada e o resíduo foi purificado por cro- matografia flash (Sistema Biotage) em sílica-gel usando uma coluna SNAP de 10 g e ciclo-hexano/acetato de etila 75:25 para ciclo- hexano/acetato de etila 25:75 como eluentes fornecendo o composto do título (23 mg) como um sólido branco.
[00245] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 8,62 (1H, s), 8,14 (1H, d), 7,86 (1H, dd), 7,05 (1H, d), 6,92 (1H, d), 6,43 (1H, d), 4,44 (2H, s), 2,14 (3H, s), 1,40 (6H, s), 1,08-1,13 (2H, m), 0,96 (3H, t), 0,850,90 (2H, m). LC/MS: QC_3_MIN: Tr = 2,016 min; 380 [M+H]+.
[00246] Os Exemplos de Referência que seguem foram preparados conforme descrito no WO2012/076877: Exemplo de Referência RE1 (5 R )-5-etil-3-(6-{[4-metil-3-(metiloxi)fenil]oxi}-3-piridinil)-2,4- imidazolidinodiona
Figure img0077
Exemplo de Referência RE2 (5 R )-5-etil-5-metil-3-(6-{[4-metil-3-(metiloxi)fenil]oxi}-3-piridinil)-2,4- imidazolidinodiona
Figure img0078
Exemplo de Referência RE3 3-(1,1 -dimetiletil)-4-({5-[(4 R )-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2- piridinil}oxi)benzonitrila
Figure img0079
Exemplo de Referência RE4 4-({5-[(4R)-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2-piridinil}oxi)-2-( 1 - metiletil)benzonitrila
Figure img0080
Exemplo de Referência RE5 3-ciclopropil-4-({5-[(4 R )-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2- piridinil}oxi)benzonitrila
Figure img0081
Exemplo de Referência RE6 4-({5-[(4R)-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2-piridinil}oxi)-2-( 1 - metiletil)benzonitrila
Figure img0082
Exemplo de Referência RE7 4-({5-[(4R)-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2-piridinil}oxi)-2- [(trifluorometil)oxi]benzonitrila
Figure img0083
Exemplo de Referência RE8 4-({5-[(4R)-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2-piridinil}oxi)-2-[(1 - metiletil)oxi]benzonitrila
Figure img0084
Exemplo de Referência RE9 (5 R )-5-etil-3-[6-(espiro[ 1 -benzofuran-3,1 '-ciclopropan]-4-iloxi)-3- piridinil]-2,4-imidazolidinodiona
Figure img0085
Exemplo de Referência RE10 5,5-dimetil-3-[6-(espiro[ 1 -benzofuran-3,1 '-ciclopropan]-4-iloxi)-3- piridinil]-2,4-imidazolidinodiona
Figure img0086
Exemplo Biológico 1
[00247] A habilidade dos compostos da invenção em modular os subtipos de canal de potássio dependentes de voltagem Kv3.2 ou Kv3.1 pode ser determinada usando o ensaio que segue. Métodos análogos podem ser usados para investigar a habilidade dos compostos da invenção em modular outros subtipos de canal, incluindo Kv3.3 e Kv3.4. Biologia celular
[00248] Para avaliar os efeitos do composto sobre os canais Kv3.2 humanos (hKv3.2), uma linhagem celular estável que expressa hKv3.2 foi criada pela transfecção de células K1 de Ovário de Hamster Chinês (CHO) com um vetor pCIH5-hKv3.2. As células foram cultivadas em meio DMEM/F12 suplementado com Soro Fetal Bovino 10%, 1 x ami- noácidos não essenciais (Invitrogen) e 500 ug/ml de Higromocina-B (invitrogen). As células foram cultivadas e mantidas a 37°C em um ambiente umidificado contendo CO2 5% em ar.
[00249] Para avaliar os efeitos do composto sobre os canais Kv3.1 humanos (hKv3.1), células CHO/Gam/E1A-clone 22, ou seja CGE22, foram transduzidas usando um reagente BacMam para hKv3.1. Essa linhagem celular foi projetada para ser um hospedeiro aperfeiçoado baseado em CHO-K1 para expressão de proteína recombinante inten-sificada quando comparado com CHO-K1 do tipo selvagem. A linhagem celular foi gerada depois da transdução de células CHO-K1 com um vírus BacMam que expressa a proteína Gam1 de Adenovírus e seleção com Geneticina-G418, para gerar uma linhagem celular estável, CHO/Gam-A3. As células CHO/Gam-A3 foram transfectadas com pCDNA3-E1A-Higro, seguido pela seleção com higromicina-B e classificação por FACS para obter clones de célula única. Os vírus Bac- Mam-Luciferase e BacMam-GFP foram então usados nos estudos de transdução para selecionar o clone com base na maior transdução de BacMam e expressão de proteína recombinante. As células CGE22 foram cultivadas no meio mesmo meio usado para a linhagem de célula estável CHO-K1 de hKv3.2 com a adição de 300 ug/ml de higromici- na B e 300 ug/ml de G418. Todas as outras condições eram idênticas àquelas para as células CHO-K1 de hKv3.2. No dia anterior a um experimento 10 milhões de células CGE22 foram plaqueadas em um frasco de cultura T175 e o reagente BacMam para hKv3.1 (pFBM/Kv3.1 humano) foi adicionado (MOI de 50). As células transdu- zidas foram usadas 24 horas mais tarde. Preparação celular para experimentos lonWorks Quattro®
[00250] No dia do experimento, as células foram removidas da in- cubadora e o meio de cultura removido. As células foram lavadas com 5 ml de PBS da Dulbecco (DPBS) sem cálcio e magnésio e separadas pela adição de 3 ml de Versene (Invitrogen, Itália) seguido por uma breve incubação a 37°C por 5 minutos. O frasco foi agitado para desalojar as células e 10 ml de DPBS com cálcio e magnésio foram adicionados para preparar um suspensão celular. A suspensão celular foi então colocada em um tubo de centrífuga de 15 ml e centrifugada por 2 min a 1200 rpm. Depois da centrifugação, o sobrenadante foi removido e o pelete celular foi ressuspenso em 4 ml de DPBS contendo cálcio e magnésio usando uma pipeta de 5 ml para quebrar o pelete. O volume da suspensão celular foi então corrigido para dar uma concentração celular para o ensaio de aproximadamente 3 milhões de células por ml.
[00251] Todas as soluções adicionadas às células foram preaque- cidas a 37°C. Eletrofisiologia
[00252] Os experimentos foram conduzidos em temperatura ambiente usando a tecnologia de eletrofisiologia de arranjo planar IonWorks Quattro® (Molecular Devices Corp.) com PatchPlate® PPC. Os protocolos de estimulação e de aquisição de dados foram realizados usando um microcomputador (Dell Pentium 4). As resistências de orifício de eletrodo planar (Rp) foram determinadas pela aplicação de uma etapa de voltagem de 10 mV em cada cavidade. Essas medições foram realizadas antes da adição de célula. Depois da adição de célula e da formação de vedação, um teste de vedação foi realizado pela aplicação de uma etapa de voltagem de -80 mV a -70 mV por 160 ms. Depois disso, uma solução de anfotericina B foi adicionada à face intracelular do eletrodo para obter acesso intracelular. As células foram mantidas a -70 mV. A subtração de fuga foi conduzido em todos os experimentos pela aplicação de 50 ms de pré-pulsos hiperpolarizantes (10 mV) para evocar correntes de fuga seguido por um período de 20 ms no potencial de manutenção antes dos pulsos de teste. A partir do potencial de manutenção de -70 mV, um primeiro pulso de teste para -15 mV foi aplicado por 100 ms e acompanhando 100 ms adicionais a -70 mV, um segundo pulso para 40 mV foi aplicado por 50 ms. As células foram então mantidas por 100 ms adicionais a -100 mV e depois um aumento de voltagem de -100 mV para 40 mV foi aplicado durante 200 ms. Protocolo de pulsos de teste pode ser realizado na ausência (pré- leitura) e presença (pós-leitura) do composto de teste. Pré- e pós- leituras podem ser separadas pela adição de composto seguido por uma incubação de 3 minutos. Soluções e fármacos
[00253] A solução intracelular continha o seguinte (em mM): glico- nato de K 100, KCl 54, MgCl2 3,2, HEPES 5, ajustada para pH 7,3 com KOH. A solução de anfotericina B foi preparada como uma solução concentrada de 50mg/ml em DMSO e diluída para uma concentração de trabalho final de 0,1 mg/ml em solução intracelular. A solução externa era Solução Salina Tamponada com Fosfato da Dulbecco (DPBS) e continha o seguinte (em mM): CaCl2 0,90, KCl 2,67, KH2PO4 1,47, MgCl.6H2O 0,493, NaCl 136,9, Na3PO4 8,06, com um pH de 7,4.
[00254] Os compostos da invenção (ou compostos de referência tais como N-ciclo-hexil-N-[(7,8-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro-3- quinolinil)metil]-N'-fenilureia) foram dissolvidos em dimetilssulfóxido (DMSO) em uma concentração de estoque de 10 mM. Essas soluções foram adicionalmente diluídas com DMSO usando um Biomek FX (Beckman Coulter) em uma placa de composto de 384 cavidades. Cada diluição (1 μL) foi transferida para outra placa de composto e uma solução externa contendo ácido Pluronic 0,05% (66 μL) foi adicionada. 3,5 μL de cada placa contendo um composto da invenção foram adici-onados e incubados com as células durante o experimento IonWorks Quattro®. A diluição final do ensaio era de 200 e as concentrações finais de composto estavam na faixa de 50 μM a 50 nM. Análise de dados
[00255] Os registros foram analisados e filtrados usando ambas a resistência de vedação (>20 MQ) e amplitude de corrente de pico (>500 pA na etapa de voltagem de 40 mV) na ausência de composto para eliminar células inadequadas da análise posterior. Comparações em par entre pré- e pós-adições de fármaco medidas para a etapa de voltagem de 15 mV foram usadas para determinar o efeito de modulação positiva de cada composto. As correntes externas mediadas pelo canal Kv3 foram medidas determinadas a partir da amplitude média da corrente ao longo dos 10 ms finais do pulso de voltagem de -15 mV menos a corrente basal média a -70 mV durante um período de 10 ms logo antes da etapa de -15mV. Essas correntes de canal Kv3 seguindo a adição do composto de teste foram então comparadas com as correntes registradas antes da adição do composto. Os dados foram normalizados para o efeito máximo do composto de referência (50 microM de N-cicloexil-N-[(7,8-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro-3-quinolinil)metil]-N'- fenilureia) e para o efeito de um controle veículo (DMSO 0,5%). Os dados normalizados foram analisados usando o software ActivityBase ou Excel. A concentração do composto necessária para aumentar as correntes em 50% do aumento máximo produzido pelo composto de referência (EC50) foi determinada pelo ajuste dos dados de concentração-resposta usando uma função logística de quatro parâmetros com software ActivityBase ou XL-fit.
[00256] N-ciclo-hexil-N-[(7,8-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro-3- quinolinil)metil]-N'-fenilureia foi obtida de ASINEX (Número de Registro: 552311-06-5).
[00257] Todos os compostos de Exemplo foram testados no ensaio acima medindo a potenciação de Kv3.1 ou Kv3.2 ou Kv3.1 e Kv3.2 (daqui por diante "Kv3.1 e/ou Kv3.2"). Moduladores positivos para Kv3.1 e/ou Kv3.2 produzem no ensaio acima um aumento de correntes de célula integral de, em média, pelo menos 20% daquele observado como 50 microM de N-ciclo-hexil-N-[(7,8-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro-3- quinolinil)metil]-N'-fenilureia. Portanto, nos ensaios de célula recombi- nante do Exemplo Biológico 1, todos os compostos do Exemplo atuam como moduladores positivos de canais Kv3.1 e Kv3.2. Como usado aqui, um modulador positivo de Kv3.1 e/ou Kv3.2 é um composto que foi mostrado produzir pelo menos 20% de potenciação de correntes de célula integral mediadas pelos canais Kv3.1 humano e/ou Kv3.2 humano expressos recombinantemente em células de mamífero, como determinado usando os ensaios descritos no Exemplo Biológico 1 (En-saios Biológicos).
[00258] Uma análise secundária dos dados dos ensaios descritos no Exemplo Biológico 1 pode ser usada para investigar o efeito dos compostos sobre a taxa de aumento da corrente a partir do início dos pulsos de voltagem de despolarização. A magnitude do efeito de um composto pode ser determinada a partir da constante de tempo (Tauact) obtida a partir de um ajuste não linear, usando a equação dada abaixo, do aumento nas correntes de Kv3.1 ou Kv3.2 depois do início do pulso de voltagem despolarizante de -15 mV. Y = (Y0 - Ymax) * exp(-K*X) + Ymax em que:
[00259] Y0 é o valor da corrente no início do pulso de voltagem de despolarização;
[00260] Ymax é o platô da corrente;
[00261] K é a constante da taxa e Tauact é a constante de tempo de ativação, que é a recíproca de K.
[00262] Similarmente, o efeito dos compostos sobre o tempo levado pelas correntes de Kv3.1 e Kv3.2 para decair no fechamento dos ca- nais no final dos pulsos de voltagem de despolarização de -15 mV também pode ser investigado. No último caso, a magnitude do efeito de um composto sobre o fechamento do canal pode ser determinada a partir da constante de tempo (Taudeact) de um ajuste não linear da queda da corrente ("corrente de cauda") imediatamente depois do fim do pulso de voltagem despolarizante.
[00263] A constante de tempo para a ativação (Tauact) foi determinada para todos os compostos dos Exemplos. A Figura 1 mostra os dados para dois compostos. A Tabela 1 fornece os dados de Tauact para todos os Exemplos analisados dessa maneira.
[00264] A Figura 1a mostra as correntes de hkV3.2 registradas usando o ensaio descrito no Exemplo Biológico 1. Os dados mostrados são as correntes individuais durante o período da etapa de voltagem despolarizante para -15 mV registrados de 4 células diferentes em duas concentrações do composto (Exemplo de Referência RE1). Os dados são ajustados por uma única curva exponencial (linhas sólidas) usando um procedimento de ajuste em Prism versão 5 (Graphpad Software Inc.).
[00265] A Figura 1b mostra correntes de hKv3.2 registradas usando o ensaio descrito no Exemplo Biológico 1. Os dados mostrados são as correntes individuais durante o período da etapa de voltagem despolarizante para -15 mV registrados em 2 células diferentes em duas concentrações do composto do Exemplo de Referência RE3. Os dados são ajustados por uma única curva exponencial (linhas sólidas) usando um procedimento de ajuste em Prism versão 5 (Graphpad Software Inc.). Tabela 1: Sumário dos dados de hKv3.2 a partir da análise do tempo de ativação (Tauact). Para permitir a comparação entre os compostos, a concentração de composto escolhida foi aquela que foi produziu uma corrente similar (~0,3 nA) no final do pulso de voltagem, com exceção do veículo, em que as correntes máximas eram <0,1 nA.
Figure img0087
[00266] Como pode ser visto na Tabela 1, na ausência do composto e presença de veículo, o Tauact foi de 7,1±1,7 mseg. Uma faixa de valores de Tauact (7,3 - 50,1 mseg.) foi observada na presença dos compostos de teste quando cada um foi testado em uma concentração que aumentou a corrente de Kv3.2 para um nível similar (~ 0,3nA).
[00267] Os canais Kv3.1 e Kv3.2 devem ativar e desativar muito rapidamente a fim de permitir que os neurônios disparem potenciais de ação em alta frequência (Rudy e McBain, 2001, Trends in Neurosciences 24, 517-526). Deixar a ativação mais lenta é provavelmente retardar o início da repolarização do potencial de ação; deixar mais lenta a desativação poderia levar a correntes hiperpolarizantes que reduzem a excitabilidade do neurônio e retardam o tempo antes que o neurônio possa disparar um potencial de ação adicional. Juntos esses efeitos retardantes sobre a ativação e a desativação do canal são passíveis de levar mais a uma redução do que a facilitação da habilidade dos neurônios em disparar em altas frequências. Portanto, os compostos que têm esse efeito retardante sobre os canais Kv3.1 e/ou Kv3.2 podem retardar o disparo neuronal. Esse retardo do disparo neuronal por um composto, tal como o Exemplo de Referência 9 que aumenta acen- tuadamente o Tauact para 50,1±7,5 mseg (Tabela 1), pode ser observado a partir de registros feitos a partir de interneurônios "disparo rápido" no córtex do cérebro de rato, usando técnicas eletrofisiológicas, in vitro. Como pode ser observado na Figura 2, a adição do Exemplo de Referência 9 reduz a habilidade dos neurônios em disparar em resposta a trens de pulso de despolarização a 300 Hz.
[00268] A Figura 2 mostra registros feitos a partir de interneurônios de "disparo rápidos" no córtex somatossensorial do camundongo. Os neurônios são induzidos a disparar em altas frequências por trens de pulsos de corrente despolarizante de alta frequência a 100, 200 e 300 Hz. A habilidade do neurônio em disparar um potencial de ação em cada pulso é determinada. Uma probabilidade de pico de 1 sobre o eixo de y do gráfico indica que um potencial de ação é gerado pelo neurônio sobre cada um dos pulsos de corrente despolarizante. Na ausência de fármaco (círculos fechados, n=9), os neurônios mantiveram uma probabilidade de pico de 1 até 300 Hz. Entretanto, na pre- sença do Exemplo de Referência 9 (1 microM; círculos abertos, n=6), os neurônios foram incapazes de acompanhar trens na frequência mais alta. * p<0,05, ANOVA para medidas repetidas.
[00269] Portanto, embora todos os Exemplos aqui identificados atuem como moduladores positivos no ensaio de célula recombinante do Exemplo Biológico 1, aqueles compostos que aumentam acentuada- mente o valor de Tauact podem reduzir a habilidade dos neurônios em tecidos nativos de disparar em alta frequência. Exemplo Biológico 2 Hiperatividade induzida por psicoestimulante em camundongos Preparação Experimental
[00270] Camundongos machos CD-1 (25 a 35 g) foram fornecidos por Charles River, Itália. Os animais foram abrigados em grupos com acesso livre a alimento (ração padronizada para roedores) e água sob um ciclo de 12 h de claro/escuro (luzes acesas a 06:00 h). Foi deixado um período de pelo menos 5 dias entre a chegada e o estudo em todos os casos. Protocolo experimental
[00271] Os animais foram tratados com o composto de teste na dose, via e tempo de pré-tratamento apropriados e recolocados em suas gaiolas. O teste ocorreu em uma sala separada daquela usada para acomodação. Os camundongos foram tratados com o composto de teste e colocados individualmente em uma caixa Perspex (20,5 cm de comprimento, 20,5 cm de largura, 34 cm de altura) coberta com uma tampa perfurada. Sensores de monitoração infravermelhos foram localizados em volta das paredes do perímetro (sensores horizontais). Dois sensores adicionais foram localizados 2,5 cm acima do piso em lados opostos (sensores verticais). Os dados foram coletados e analisados usando um VersaMax System (Accuscan Instruments Inc., Columbus, OH) que por sua vez transferiu informação para um computador. De- pois de 30 minutos de habituação à arena de teste, os camundongos foram tratados com anfetamina (2mg/kg) dosada intraperitonealmente (i.p.) a 10 mg/kg e a atividade locomotora subsequente na arena de teste foi avaliada por mais 60 minutos. A atividade locomotora no plano horizontal foi determinada a partir do número de interrupções dos sensores horizontais por cada camundongo na arena de teste durante o período de teste de 60 minutos. Fármacos e Materiais
[00272] Todas as doses foram calculadas como base. A clozapina foi diluída em água destilada e administrada a 3 mg/kg por via intrape-ritoneal (i.p.) a 10 mL/kg. O Exemplo 4 (3, 10 ou 30 mg/kg) ou veículo (Captisol 20% + Tween 80 0,1% e HPMC 0,5% em água estéril) foi administrado i.p. a 10 mL/kg. Ambos clozapina e o Exemplo 4 foram administrados imediatamente antes da colocação do animal na arena de teste (30 minutos antes da administração de anfetamina). Análise de níveis de sangue do Exemplo 4
[00273] Amostras de sangue foram coletadas de um subconjunto de camundongos de estudo (n=3) no final da medição comportamen- tal (90 minutos pós-dose de fármaco de teste), e ensaiadas usando um método com base na precipitação de proteína com acetonitrila seguido por análise de HPLC-MS/MS com um método analítico otimizado. Uma vez que a estabilidade do analito em sangue e cérebro era desconhecida, amostras de padrões de calibragem (CS) (Calibration Standard) e controle de qualidade (QC) (Quality Control) foram preparadas no dia de dosagem e armazenadas junto com as amostras de estudo. Amostras de estudo, CS, QC e vazias foram pulverizadas com rolipram como padrão interno (IS) (Internal Standard). Amostras de estudo foram analisadas em bateladas diferentes junto com CS, QC e amostras vazias. Resultados
[00274] A anfetamina sozinha produziu um aumento grande e significativo em atividade locomotora total. Uma dose de 10 mg/kg i.p. do Exemplo 4 reduziu significantemente o aumento em atividade locomo- tora total produzida pela anfetamina. Uma dose maior de 30 mg/kg i.p. do Exemplo 4 reduziu mais o aumento em atividade locomotora induzida por anfetamina de uma maneira similar ao controle positivo, clo- zapina (3 mg/kg i.p.). Os dados são sumarizados na Tabela 1. Tabela 1: Efeitos do Exemplo 4 sobre hiperlocomoção induzida por anfetamina no camundongo. O Exemplo 4 foi administrado i.p. 30 minutos antes da anfetamina (2 mg/kg i.p.). Clozapina foi administrada i.p. 30 minutos antes da anfetamina (2 mg/kg i.p.). A atividade locomo- tora foi avaliada durante 60 minutos começando imediatamente após a administração da anfetamina. Os dados são expressos como média ± sem. Os dados foram submetidos à análise de variância de uma via (ANOVA) seguido por teste de Dunnett (**p<0,001, *p<0,05 vs tratamento com anfetamina sozinha). As concentrações no sangue foram determinadas a partir de um subconjunto de 3 camundongos no final do experimento, 90 minutos após a administração do fármaco de teste. Os dados mostrados são as concentrações e faixa sanguíneas médias. (n.d. = não determinado).
Figure img0088
Figure img0089
Conclusões
[00275] Esses resultados mostram que o Exemplo 4 é capaz de prevenir a hiperatividade induzida pelo psicoestimulante, anfetamina. Portanto, o Exemplo 4 e outros compostos que modulam positivamente os canais Kv3.1 e/ou Kv3.2, na ausência de efeitos sobre cinética de fechamento de canais, como pode ser observado a partir do ensaio descrito no Exemplo Biológico 1, podem ser úteis no tratamento de distúrbios associados com a hiperatividade, tal como a mania bipolar ou ruptura do sistema da dopamina, tal como pode ocorrer na dependência química, distúrbio de hiperatividade e déficit de atenção (ADHD) ou esquizofrenia.
[00276] Ilustrações adicionais da utilidade potencial de compostos da presente invenção são providas, por exemplo, no WO2012/076877 que associa o uso de moduladores de canal de Kv3.1 e/ou Kv3.2 com vários distúrbios.

Claims (27)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula (I): em que:
Figure img0090
W é CRaRbou O; quando W é CRaRb então Z é CH-; quando W é O então Z é CF-; Ra e Rb são CH3 ou juntos formam uma C3 espiro cicloal- quila; em que, quando W é CRaRb, Z é CH— e Ra e Rb são CH3; o Anel A é:
Figure img0091
o Anel B é:
Figure img0092
ou o Anel A é:
Figure img0093
o Anel B é:
Figure img0094
ou em que, quando W é CRaRb, Z é CH— e Ra e Rb juntos formam uma C3 espiro cicloalquila: o Anel A é:
Figure img0095
o Anel B é:
Figure img0096
ou em que, quando W o Anel A é:
Figure img0097
o Anel B é:
Figure img0098
ou um sal farmaceuticamente aceitável e/ou solvato do mesmo.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é um sal farmaceuticamente aceitável de (5R)-5- etil-5-metil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il) oxipirimidin-5-il]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0099
3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é: (5R)-5-etil-5-metil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0100
4. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é: (5R)-5-etil-5-metil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1- benzofuran-4-il)oxi]-5-pirimidinil}-2,4-imidazolidinodiona
Figure img0101
5. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é um sal farmaceuticamente aceitável de (5R) -5- etil-5-metil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il) oxi]-5- pirimidinil}-2,4-imidazolidinediona
Figure img0102
6. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é um sal farmaceuticamente aceitável de 5,5- dimetil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4- il)oxipirimidin-5-il] imidazolidino-2,4-diona
Figure img0103
7. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é: 5,5-dimetil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0104
8. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é um sal farmaceuticamente aceitável de (5R)-5- etil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1 '-ciclopropano]-4- il)oxipirimidin-5-il]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0105
9. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteriza do pelo fato de que é: (5R)-5-etil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1 '- ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0106
10. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que é um sal farmaceuticamente aceitável de (5R)-5- etil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3- piridil]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0107
11. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que é: (5R)-5-etil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0108
12. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que é um sal farmaceuticamente aceitável de (5R)-5- etil-3-{6-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-ilo) oxi]-3-piridinil}- 2,4-imidazolidinediona
Figure img0109
13. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que é: (5R)-5-etil-3-{6-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro1-benzofuran-4- il)oxi]-3-piridinil}-2,4-imidazolidinodiona
Figure img0110
14. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que é um sal farmaceuticamente aceitável de (5R)-5- etil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-ilo) oxi]-5-pirimidinil} -2,4-imidazolidinediona
Figure img0111
15. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que é: (5R)-5-etil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4- il)oxi]-5-pirimidinil}-2,4-imidazolidinodiona
Figure img0112
16. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que é um sal farmaceuticamente aceitável de (5R)-5- etil-5-metil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4- il)oxi-3-piridil]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0113
17. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que é: (5R)-5-etil-5-metil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1 '- ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0114
18. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que é um sal farmaceuticamente aceitável de 5,5- dimetil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3- piridil] imidazolidino-2,4-diona
Figure img0115
19. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que é: 5,5-dimetil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'- ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidino-2,4-diona
Figure img0116
20. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 19, caracterizado pelo fato de que é para uso como um medi-camento.
21. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 19, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de um medicamento para a profilaxia ou tratamento de distúrbios auditivos, esquizofrenia ou para o tratamento de Síndrome do X frágil.
22. Uso de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que é para a profilaxia ou tratamento de distúrbios auditivos.
23. Uso de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que o distúrbio de audição é perda de audição em adultos com mais de 60 (presbiacusia) ou zumbido.
24. Uso de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que é para a profilaxia ou tratamento de esquizofrenia.
25. Uso de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que é para o tratamento de Síndrome do X frágil.
26. Composto, caracterizado pelo fato de que é selecionado de: 7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1 '-ciclopropano]-4-ol (Inter-mediário 13)
Figure img0117
3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-ol (Intermediário 27)
Figure img0118
ou um sal do mesmo.
27. Composto, caracterizado pelo fato de que é selecionado de: 6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1 '-ciclopropano]-4- il)oxipiridin-3-amina (Intermediário 15)
Figure img0119
2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1 '-ciclopropano]-4- il)oxipirimidin-5-amina (Intermediário 19)
Figure img0120
6-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-3- piridinamina (Intermediário 29)
Figure img0121
2-[(3,3,7-trimetil-2,3-di-hidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-5- pirimidinamina (Intermediário 33)
Figure img0122
ou um sal do mesmo.
BR112014013400-6A 2010-12-06 2012-12-06 Compostos derivados de hidantoína úteis como inibidores de kv3 e seus usos na profilaxia ou tratamento de distúrbios auditivos e esquizofrenia ou no tratamento de síndrome do x frágil BR112014013400B1 (pt)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB1020607.6A GB201020607D0 (en) 2010-12-06 2010-12-06 Novel compounds
GBPCT/GB2011/052414 2011-12-06
PCT/GB2011/052414 WO2012076877A1 (en) 2010-12-06 2011-12-06 Hydantoin derivatives useful as kv3 inhibitors
PCT/GB2012/053045 WO2013083994A1 (en) 2011-12-06 2012-12-06 Hydantoin derivatives useful as kv3 inhibitors

Publications (3)

Publication Number Publication Date
BR112014013400A2 BR112014013400A2 (pt) 2017-06-13
BR112014013400A8 BR112014013400A8 (pt) 2021-03-02
BR112014013400B1 true BR112014013400B1 (pt) 2022-04-12

Family

ID=43531502

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112014013400-6A BR112014013400B1 (pt) 2010-12-06 2012-12-06 Compostos derivados de hidantoína úteis como inibidores de kv3 e seus usos na profilaxia ou tratamento de distúrbios auditivos e esquizofrenia ou no tratamento de síndrome do x frágil

Country Status (2)

Country Link
BR (1) BR112014013400B1 (pt)
GB (1) GB201020607D0 (pt)

Also Published As

Publication number Publication date
GB201020607D0 (en) 2011-01-19
BR112014013400A2 (pt) 2017-06-13
BR112014013400A8 (pt) 2021-03-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11541052B2 (en) Compounds
AU2012349847B2 (en) Hydantoin derivatives useful as Kv3 inhibitors
ES2575215T3 (es) Derivados de imidazolidindiona
TWI827706B (zh) 新穎化合物
JP7522203B2 (ja) Ｋｖ３モジュレーター
BR112014013400B1 (pt) Compostos derivados de hidantoína úteis como inibidores de kv3 e seus usos na profilaxia ou tratamento de distúrbios auditivos e esquizofrenia ou no tratamento de síndrome do x frágil

Legal Events

Date Code Title Description
B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]

Free format text: NOTIFICACAO DE ANUENCIA RELACIONADA COM O ART 229 DA LPI

B06U Preliminary requirement: requests with searches performed by other patent offices: procedure suspended [chapter 6.21 patent gazette]
B350 Update of information on the portal [chapter 15.35 patent gazette]
B06A Patent application procedure suspended [chapter 6.1 patent gazette]
B09A Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 06/12/2012, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS.