EA004700B1 - Фармацевтические композиции, содержащие белок плазмы - Google Patents

Фармацевтические композиции, содержащие белок плазмы Download PDF

Info

Publication number
EA004700B1
EA004700B1 EA200000331A EA200000331A EA004700B1 EA 004700 B1 EA004700 B1 EA 004700B1 EA 200000331 A EA200000331 A EA 200000331A EA 200000331 A EA200000331 A EA 200000331A EA 004700 B1 EA004700 B1 EA 004700B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
serum albumin
protein fraction
active compound
active substance
water
Prior art date
Application number
EA200000331A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200000331A1 (ru
Inventor
Лайош Хегедюш
Кристина Кремпельш
Кристина Пааль
Габор Петё
Original Assignee
Хьюман Рт
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Хьюман Рт filed Critical Хьюман Рт
Publication of EA200000331A1 publication Critical patent/EA200000331A1/ru
Publication of EA004700B1 publication Critical patent/EA004700B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A61K31/5513—1,4-Benzodiazepines, e.g. diazepam or clozapine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
    • A61K38/13—Cyclosporins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/20—Interleukins [IL]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Изобретение касается водорастворимых препаратов и фармацевтических композиций в твердой или жидкой форме, в основном для парентерального применения. Они состоят или в их состав входят терапевтически активное соединение (имеющее низкую растворимость в воде и существенное сродство связывания с белками плазмы) и белковая фракция плазмы в контролируемом агрегационном состоянии, вследствие чего указанное активное соединение и указанная белковая фракция связаны друг с другом нековалентными связями. Оно также охватывает способы получения препарата и фармацевтической композиции.

Description

Настоящее изобретение касается нового метода, препаратов и композиций, применяющихся в терапии для введения терапевтически активных соединений, обладающих плохой растворимостью в воде и существенным сродством связывания с белками плазмы, и способов получения таких препаратов и композиций.
Более конкретно, предметами изобретения в первую очередь являются препараты и фармацевтические композиции в твердой или жидкой форме, в основном для парентерального применения, состоящие из или содержащие
a) терапевтически активное соединение, имеющее низкую растворимость в воде и существенное сродство связывания с белками плазмы (в дальнейшем именуемое активным соединением) и
b) белковую фракцию плазмы в контролируемом агрегационном состоянии, вследствие чего указанное активное соединение и указанная белковая фракция связаны друг с другом нековалентными связями,
c) а также, но необязательно, и другие фармацевтически приемлемые и, в основном, применяющиеся парентерально композиционные добавки - такие как вода, стабилизаторы, средства, подавляющие агрегацию белка.
Гомогенные препараты, полученные по этому изобретению в твердом состоянии и состоящие из указанного белка и указанного соединения, растворимы в воде, а их водные растворы могут применяться парентерально или могут использоваться для получения парентеральных фармацевтических препаратов.
Из предшествующего уровня техники известно, что биологически активные соединения обладают сильной терапевтической активностью, но их полезные свойства не могут проявиться вследствие плохой растворимости в жидких средах. Некоторые из них никогда не разрабатывались в качестве препаратов, тогда как небольшое число достигало лишь стадии фазы I при клинической разработке. Некоторые из них входят в состав плохо биосовместимых композиций, обладающих относительно высокой токсичностью, вызванной материалами, использованными для композиции. Типичный пример этого представляют препараты из группы таксонов, а конкретно - паклитаксел, являющийся сильным цитостатиком, применение которого, однако, ограничено вследствие токсичности его известной композиции в Клюцеле:твине 80 или в Клюцеле и растворителе 12, являющемся смесью 1:1 Кремафора ЕЬ: этанола. [Сапсег СЬетоШетару аиб Рйаттасо1оду (1994) 34: 465-471; 1оитпа1 о£ 1Не №1бопа1 Сапсег Ιηκΐί1и1е (1990) 1247-1259]. Кремафор ЕЬ (полиоксиэтилированное касторовое масло) обладает токсическими свойствами, вызывающими вазодиляцию, летаргию, гипотензию и т.д. Для снижения токсических побочных эффектов растворителя и адъюванта предлагались специальные методы: введение очень маленьких доз в течение длительного периода времени, премедикация перед введением и др. (И8Р 5665761; И8Р 5621001; И8Р 5670537 и др.) Дальнейшее предложение состояло в сочетании активного соединения с диспергирующим средством, содержащимся в оболочке с белковыми стенками (И8Р 5 560 933), образованными путем реакции белка с маслом типа соевого масла - такие композиции предлагались для паклитакселя и амфотерицина. Однако, даже в новейшей литературе содержатся предостережения насчет курса применения паклитакселя (напр., см. Ошбаисе £от 1иби81гу, изданное Департаментом Здравоохранения и Службы Человека СОЕК, сентябрь 1997, ΟΟΌЬ-8), в котором - вследствие реакции гиперчувствительности - всем пациентам, получающим паклитаксел, следует назначать премедикацию кортикостероидами, дифенгидрамином и Н2антагонистами.
В дальнейшем было предложено получение парентеральных композиций определенных нерастворимых в воде дигидропиридинов путем растворения их в органическом растворителе или в смеси органического растворителя с водой и добавления водного раствора сывороточных белков человека к указанному раствору, чтобы свести к минимуму кристаллизацию нерастворимого активного соединения (венгерский патент № 198381; ΌΕ Арр1. 3702105). Однако полученная жидкость все-таки не была прозрачным раствором и содержала органический растворитель.
Согласно публикации 1Р, документ № 58216126 (см. ЕРО Ра1еи1 АЬйтасй о£ 1араи), некоторые производные карбоксикислот, несущие сильно защищенную ароматическую функциональную группу и растворимые в воде примерно до 0,1 мг/мл, растворялись при внесении их в разбавленные водные растворы сывороточного альбумина человека.
Известно также, что оральные фармацевтические композиции были получены путем перемешивания активного ингредиента с яичным альбумином при высокой скорости от 5000 до 40000 об/мин в водном растворе и последующей возгонки растворителя (ЕРА 326618). В результате получили водную суспензию для орального применения, причем устранялись некоторые побочные эффекты активного ингредиента.
Также известно, что некоторые нерастворимые в воде активные соединения обладают значительным сродством к белкам или сывороточным белкам. Приводим некоторые ссылки для паклитакселя [Сапсег СЬет. апб РЬагт. (1994) 34: 465-471], миконазола, флуконазола, амфотерицина В [Шёсбоп, 23(5) 292-297 (1995) Сент.], карбамазепина [1. СЬготаЮдг. В Вютеб. Арр1. 669(2): 281-288 (21 июля 1995)], азатиоприна [Апп. Ν.Υ. Асаб. 8οΐ. 685 (1993): 175-192], пропофола [1. СЬготаЮдг. 8сь (1992): 164-166].
Согласно новой литературе [Тйе Ьапсе! νοί. 352 (1998): 540-542] препарат Таксол® вызывал слипание эритроцитов в столбики, такой же эффект вызывало полиоксиэтилированное касторовое масло, служащее растворителем указанного препарата. Некоторые нерастворимые в воде лекарства были составлены с использованием токсичного Кремафора (циклоспорин, тенипозид, паклитаксел, амфотерицин В). Насколько нам известно, целый ряд высокоактивных, но нерастворимых в воде лекарств до сих пор отсутствует в продаже в лекарственных формах для парентерального и внутривенного применения, напр., ритонавит, карбамазепин, камфотетин, азатиопин, миконазол, флуконазол и др.
Таким образом, существует потребность в разрешении проблемы, чтобы терапевтически ценные нерастворимые в воде вещества можно было вводить в водорастворимом виде, преимущественно парентерально, пациентам, требующим лечения указанными активными ингредиентами.
Целью настоящего изобретения является удовлетворение этой потребности в отношении практически нерастворимых в воде активных ингредиентов, обладающих значительным сродством связывания с белками плазмы.
Настоящее изобретение основано на понимании того, что связывание активных соединений с надлежащими белками посредством нековалентных связей перед введением представляет собой новую систему доставки с широкими возможностями для введения активных ингредиентов, плохо растворимых в воде. Согласно изобретению, образуются гомогенные твердые препараты, которые затем растворяют в воде и при этом получают биосовместимые, прозрачные водные растворы, пригодные для парентерального введения. Таким образом, изобретение представляет собой способ введения требуемых нерастворимых в воде активных ингредиентов без привлечения токсических элементов и в некоторых случаях в значительно более эффективной дозе, чем ранее.
Термины, применяемые в настоящей заявке, которые в дальнейшем употребляются без расшифровки:
К1: означает третичный амид бутилоксикарбоксикислоты или амид бензоила.
К2: означает водородную или любую ацильную группу, преимущественно ацетил.
Низкая растворимость в воде означает, что растворимость в воде при комнатной температуре <1х10-4 М.
Существенное сродство связывания с белками плазмы означает, что >90% вещества связывается с белками в водной среде при спонтанном равновесии при комнатной температуре.
ЧСА: сывороточный альбумин человека.
ВДИ: вода для инъекций.
Один из предметов изобретения - это водорастворимая фармацевтическая композиция для человека, в основном для парентерального применения, содержащая терапевтически активное соединение с низкой растворимостью в воде и существенным сродством связывания с белками плазмы или белковой фракцией плазмы человека в контролируемом агрегационном состоянии.
Другими предметами изобретения являются водорастворимые ветеринарные фармацевтические композиции, в основном для парентерального применения, содержащие терапевтически активное соединение с низкой растворимостью в воде и существенным сродством связывания с белками плазмы животного в контролируемом агрегационном состоянии.
Плазма человека или животных, которая может присутствовать в препаратах и фармацевтических композициях согласно изобретению, и соответственно применяться в методах получения препаратов и композиций, может быть представлена любым из естественно присутствующих в плазме белков или фракций плазмы, таких как сывороточный альбумин, иммуноглобулин, гликопротеин, интерферон и/или интерлейкин, а также их рекомбинантными аналогами. В соединениях и композициях, предназначенных для лечения человека, отдается предпочтение натуральной сыворотке человека и рекомбинантным сывороточным белкам человека.
Практически нерастворимые в воде активные ингредиенты, согласно изобретению, включают широкий спектр соединений, причем единственным ограничением является то, что они должны иметь существенное сродство к белку плазмы, выбранному для применения. Примеры таких активных ингредиентов включают следующие группы лекарственных средств цитостатики типа таксоноида, антибиотики, витамины, противовоспалительные средства, анальгетики, антиконвульсанты, иммуносупрессоры, антиэпилептические средства, анксиолитики, снотворные, противогрибковые средства, антикоагулянты, ингибиторы пероксидации липидов, коронарные вазодиляторы, антиаритмические средства, кардиотонические, мочегонные, антитромботические средства, стероидные гормоны (прогестерон, андроген, тестоген) и/или фотосенсибилизаторы. Можно одновременно использовать несколько активных ингредиентов после тщательного анализа и адаптации терапевтических доз с учетом сродства связывания к выбранным белкам, которые должны соответствовать пересмотренным требованиям.
Для практического применения изобретения предложены препараты и фармацевтические композиции, содержащие, согласно вышесказанному, как минимум одно из следующих активных соединений: амфотерицин В, аналог адриамицина, апазон, азатиоприн, бромазепам, камптотецин, карбамазепин, клоназепам, циклоспорин А, диазепам, дикумарол, дигитоксин, дипиридамол, дизопирамид, флунитразепам, гемфиброзил, кетохлорин, кетоконазол, миконазол, нифлумовая кислота, оксазепам, фенобарбитал, фенитоин, прогестерон, пропофол, ритонавир, сульфинпиразон, супрофен, такролимус, тамоксифен, таксоноид, тестостерон, тирилазад, триоксален, вальпроевая кислота и/или варфарин.
Практическое применение изобретения составляют преимущественно препараты или композиции, подобные вышеописанным и содержащие таксоноиды, описываемые общей формулой I.
Другое практическое применение, согласно изобретению, составляют паклитаксел и сывороточный альбумин человека, иммуноглобулин, гликопротеин, интерферон и/или интерлейкин или некоторые другие белковые фракции плазмы человека.
Следующими особенно важными предметами изобретения являются гомогенные, твердые, водорастворимые препараты, содержащие как минимум одно активное соединение из группы: амфотерицин В, аналог адриамицина, апазон, азатиоприн, бромазепам, камптотецин, карбамазепин, клоназепам, циклоспорин А, диазепам, дикумарол, дигитоксин, дипиримадол, дизопирамид, флунитразепам, гемфиброзил, кетохлорин, кетоконазол, миконазол, нифлумовая кислота, оксазепам, фенобарбитал, фенитоин, прогестерон, пропофол, ритонавир, сульфинпиразон, супрофен, такролимус, тамоксифен, таксоноид, тестостерон, тирилазад, триоксален, вальпроевая кислота и/или варфарин, и также содержащие как минимум один белок из группы: сывороточный альбумин человека, иммуноглобулин, гликопротеин, интерферон и/или интерлейкин или другую природную или рекомбинантную фракцию белков плазмы человека, в которых указанное активное соединение и указанная белковая фракция связаны друг с другом нековалентными связями, и в которых молярное соотношение указанного активного соединения и указанной белковой фракции находится в пределах от 1:0,05 до 1:100, предпочтительно от 1:0,1 до 1:50.
Лучшими представителями вышеописанных являются следующие гомогенные, твердые, водорастворимые препараты, состоящие из следующих пар активных соединений и белков:
таксоноиды общей формулы I - в этой формуле В1 означает третичный амид бутилоксикарбоксиловой кислоты или амид бензоила, а К2 означает водородную или ацильную группу, преимущественно ацетил- и белковая фракция плазмы;
паклитаксел и сывороточный альбумин человека, рекомбинантный альбумин плазмы человека и/или γ-глобулин;
амфотерицин В и сывороточный альбумин человека, рекомбинантный альбумин плазмы человека и/или γ-глобулин;
камптотецин и сывороточный альбумин человека, рекомбинантный альбумин плазмы человека и/или γ-глобулин;
карбамазепин и сывороточный альбумин человека, рекомбинантный альбумин плазмы человека и/или γ-глобулин;
циклоспорин А и сывороточный альбумин человека, рекомбинантный альбумин плазмы человека и/или γ-глобулин;
пропофол и сывороточный альбумин человека, рекомбинантный альбумин плазмы человека и/или γ-глобулин.
Из предыдущих объяснений ясно, что изобретение охватывает фармацевтические композиции, подобные вышеописанным, как в твердом состоянии, так и в виде водных растворов.
По своей природной структуре - более конкретно, по химическому составу - молекулы белка имеют тенденцию к агрегации через свои специфические участки связывания. Степень агрегации зависит от параметров (температура, состав, относительная и абсолютная концентрация компонентов, затем рН, ионная сила) раствора, в котором присутствует белок.
При использовании белков плазмы в соответствии с изобретением они, главным образом, находились в стабилизированном состоянии или состоянии контролируемой агрегации. Цель состоит в том, чтобы избежать такой агрегации белков, которая может ингибировать оптимальное связывание используемого на практике активного ингредиента. Нежелательную агрегацию белков можно контролировать присутствием других молекул, способных занимать некоторые или все участки связывания на макромолекулах, участвующих в агрегации, и тем самым избежать множественных связей белок-белок. Некоторые белки имеются в продаже в контролируемом агрегационном состоянии: они содержат стабилизаторы для предупреждения агрегации. Такое состояние, однако, не всегда является оптимальным для связывания с активным соединением, которое мы намерены использовать в соответствии с изобретением.
Согласно изобретению термин контролируемое агрегационное состояние представляет собой наилучшее состояние связывания, когда белок способен связывать активное соединение точно таким образом, который желателен для намеченной задачи. Это не обязательно то состояние, когда максимальное количество молекул активного соединения связывается с белком, но есть случаи, когда желательна наибольшая степень связывания.
Это означает, что в некоторых случаях необходимо удалить другие наполнители, напр., из коммерчески доступной фракции сывороточного альбумина, такие как стабилизаторы, ионΊ ные компоненты и т.д. Это может быть необходимой начальной стадией процесса, в котором применяется метод согласно изобретению. Требуемые условия для установления надлежащего состояния агрегации строго зависят от конкретного активного соединения и соответствующей белковой фракции.
Примеры, приведенные ниже, показывают (напр., паклитаксел и циклоспорин А), что они проявляют более сильное связывание с белковой фракцией плазмы в отсутствие других наполнителей (таких, как стабилизаторы, ионные компоненты, соли и др). Однако есть и такие активные соединения (напр., амфотерицин В и пропофол), связыванию которых не мешают, напр., стабилизаторы.
Таким образом, следует определить надлежащее состояние агрегации используемого белка для каждой пары активного соединения/белка, применяемой согласно настоящему изобретению.
При использовании пары паклитаксел и ЧСА важно устранить все стабилизаторы, входящие в состав коммерческих препаратов ЧСА, такие как Ν-ацетил-О.Р-триптофан. каприлаты щелочных металлов, которые использовались для стабилизации белка во время пастеризации при 60°С. Амфотерицин В или пропофол может связываться с ЧСА также в присутствии этих стабилизаторов. В определенных случаях, когда желаемого состояния агрегации можно достичь с помощью воды, другие компоненты нужно удалить, напр., согласно процедуре, изложенной ниже в одном из примеров.
Следует учитывать следующие аспекты для оптимального сочетания конкретных соединений с конкретными белковыми фракциями плазмы согласно изобретению:
a) характеристики участка связывания, занимаемого соединением на белке;
b) возможное присутствие в растворе других компонентов, занимающих тот же участок связывание или конкурирующих за него;
c) физико-химические условия для конформации данного участка связывания и последствия связывания;
б) известные терапевтические аспекты, напр.,
ί) паклитаксел на ЧСА имеет уникальные транспортные характеристики, ίί) паклитаксел на интерлейкинах с известной терапевтической активностью переносчика;
ϊϊΐ) циклоспорин А на гаммаиммуноглобулине с известной терапевтической активностью переносчика;
ίν) ритонавир на гамма-иммуноглобулине с известной терапевтической активностью переносчика;
стабильность композиции.
Одним из простейших средств контроля агрегации является вода. Используя надлежащее количество воды, можно подавить нежелательную агрегацию и подготовить белок для применения согласно изобретению - он перейдет в контролируемое агрегационное состояние.
При практическом применении изобретения композиции и соединения могут содержать в качестве добавок средства контроля агрегации белков и/или вспомогательные добавки, стабилизирующие раствор. Примерами таких добавок являются: вода, хлористый натрий, буфер, полиспирт типа глицерина, водорастворимые производные сахаров, главным образом, маннитол, сорбитол и/или дульцитол и другие.
Следующим предметом настоящего изобретения является способ получения новых препаратов и фармацевтических композиций в соответствии с изобретением. Этот способ состоит из следующих стадий:
a) растворение терапевтически активного соединения, имеющего низкую растворимость в воде и существенное сродство связывания с белками плазмы (активного соединения), в водорастворимом, фармацевтически приемлемом органическом растворителе,
b) объединение этого раствора с водным раствором белковой фракции плазмы в контролируемом агрегационном состоянии,
c) а также, но необязательно, с другим фармацевтически приемлемым вспомогательным компонентом - таким как средство контроля агрегации белка и/или стабилизатор - в результате чего получается настоящий раствор, содержащий указанное активное соединение и указанную белковую фракцию, связанные посредством нековалентных связей;
б) удаление органического растворителя, предпочтительно путем ультрафильтрации, диализа, диафильтрации или лиофилизации раствора или его концентрата, или сочетанием этих обработок, в результате чего получается гомогенный водорастворимый жидкий или твердый препарат или фармацевтическая композиция, содержащая активное соединение и белковую фракцию плазмы;
е) а также, но необязательно, растворение или разбавление твердого вещества или жидкости водой, в результате чего получается прозрачная, жидкая композицию, пригодная для терапевтического введения,
ί) а также, но необязательно, получение конечного препарата в виде парентеральной композиции (дозовой формы) для непосредственного применения.
При получении новых гомогенных твердых препаратов, состоящих из активных соединений и белков, связанных нековалентными связями в соответствии с изобретением, предпочтительно применять процесс, состоящий из следующих шагов согласно изобретению:
а) растворение терапевтически активного соединения в водорастворимом, фармацевтически приемлемом органическом растворителе;
b) смешивание указанного раствора с водным раствором выбранной белковой фракции плазмы в контролируемом агрегационном состоянии, в результате чего получается настоящий раствор, содержащий указанное активное соединение и указанную белковую фракцию, связанные вместе нековалентными связями;
c) удаление органического растворителя и лиофилизация раствора или его концентрата.
Надлежащий способ наилучшего удаления органического растворителя зависит от активного соединения и соответственного белка. Из природы активного продукта (пары, состоящей из активного соединения и белка) следует, что применяемые методы должны обеспечивать мягкие условия. Лиофилизация приводит к получению гомогенных, твердых, водорастворимых препаратов, которые после растворения в воде можно вводить внутрибрюшинно. Может оказаться выгодным комбинирование вышеуказанных стадий, напр., процесс станет более экономичным, если вначале приготовить концентрат пары активное соединение/белок, а затем подвергнуть указанный концентрат лиофилизации. Некоторые пары активных соединений/белков (напр., пара амфотерицин В/сывороточный альбумин) можно успешно сконцентрировать путем ультрафильтрации или диализа. Некоторые другие пары (напр., паклитаксел/ЧСА) предпочтительнее обрабатывать посредством лиофилизации. Некоторые пары следует сначала подвергнуть ультрафильтрации и полученный концентрат затем подвергнуть лиофилизации.
Специалисту в этой области понятно, что в ходе получения парентеральных фармацевтических средств разбавление водой включает и разбавление такими водными растворами, которые содержат другие добавки, пригодные для парентерального введения, напр., хлористый натрий.
Надлежащий растворитель, применяемый согласно изобретению для растворения активного ингредиента на вышеуказанной стадии а), должен иметь следующие свойства:
он должен обладать способностью к полному растворению активного ингредиента в его смеси с водой и его смесь с более 50% воды не должна денатурировать используемый белок.
Перед началом проведения процесса согласно изобретению, используя активный ингредиент и выбранный белок, нужно определить адекватный растворитель на основе вышесказанного. Для этого подходят растворители, смеси которых, содержащие >50% воды, все еще способны растворять активный ингредиент.
Предпочтительными растворителями, которые можно использовать на стадии а) вышеназванного процесса, например, могут быть любые представители группы, в которую входят алифатические С(2-4) моноспирты или полиоли,
70-100% этанол, диметилформамид, метилформамид.
При получении раствора, содержащего белок, можно добавлять средства контроля агрегации и/или стабилизаторы раствора. Подобные добавки включают дополнительное или оптимальное количество воды. Они также включают средства, способные частично заполнять некоторые из участков связывания белка для избежания агрегации, напр., любое из следующих средств: хлористый натрий, буфер, поли-спирт типа глицерина и/или водорастворимые производные сахаров, предпочтительно маннитол, сорбитол, дульцитол.
При выборе оптимальных условий в случае любого активного ингредиента необходимо предварительно определить оптимальное сродство связывания и соответствующие агрегационные свойства. В нижеследующих примерах мы раскрываем полный метод подобных определений.
Согласно предложенному практическому применению изобретения на стадии а) используются соединения: паклитаксел и компонент натуральной плазмы, такой как сывороточный альбумин, иммуноглобулин, гликопротеин, интерферон и/или интерлейкин или их рекомбинантные формы. Другие практические применения изобретения включают применение в качестве активных соединений нерастворимых в воде цитостатиков типа таксоноида, антибиотики, витамины, противовоспалительные, анальгетики, антиконвульсанты, иммуносупрессоры, антилептические средства, анксиолитики, снотворные, противогрибковые средства, антикоагулянты, ингибиторы пероксидации липидов, коронарные вазодиляторы, антиаритмические средства, кардиотонические, мочегонные, антитромботические средства, стероидные гормоны (прогестоген, андроген, тестоген) и/или фотосенсибилизаторы. Предпочтительно применение следующих активных соединений для процесса согласно изобретению: амфотерицин В, аналог адриамицина, апазон, азатиоприн, бромазепам, камптотецин, карбамазепин, клоназепам, циклоспорин А, диазепам, дикумарол, дигитоксин, дипиридамол, дизопирамид, флунитразепам, гемфиброзил, кетохлорин, кетоконазол, миконазол, нифлумовая кислота, оксазепам, фенобарбитал, фенитоин, прогестерон, пропофол, ритонавир, сульфинпиразон, супрофен, такролимус, тамоксифен, таксоноид, тестостерон, тирилазад, триоксален, вальпроевая кислота и/или варфарин.
Предложенное практическое применение изобретения заключается в получении гомогенного, твердого, водорастворимого препарата, состоящего из паклитакселя и сывороточного альбумина человека, в котором активный ингредиент и белковая фракция плазмы могут образовывать нековалентные связи. Другое предложенное практическое применение изобрете ния заключается в получении гомогенного, твердого, водорастворимого препарата, состоящего из таксоноида основной формулы I и белковой фракции плазмы, в котором активный ингредиент и белковая фракция плазмы образуют нековалентные связи.
Из предыдущего объяснения ясно, что настоящее изобретение не ограничивается только активными соединениями или белками, перечисленными выше.
Следующий предмет изобретения заключается в методе использования препаратов и композиций в соответствии с изобретением для лечения больных людей или животных. Метод состоит во ведении нуждающемуся в активном ингредиенте пациенту эффективной дозы композиции, полученной согласно изобретению. Вводимые дозы зависят как от активного ингредиента, так и от используемого белка. Можно вводить дозы, обеспечивающие, по крайней мере, те же уровни в крови, которые известны как эффективные при применении конкретных активных соединений при других способах введения.
Представляем предложенный метод парентерального лечения больных людей и животных нерастворимыми в воде терапевтически активными соединениями, обладающими значительным сродством для связывания с белками плазмы, путем парентерального введения пациентам, нуждающимся в лечении указанным активным ингредиентом, эффективной дозы следующих препаратов, предпочтительно в следующих дозовых диапазонах (в пересчете на активное соединение), соответственно: паклитаксел/альбумин: 70-280 мг/прием; пропофол/альбумин: 6-10 мг/кг/ч; камптотецин/альбумин, гемфиброзил/альбумин, циклоспорин А/альбумин: 3-5 мг/кг/день; амфотерицин В/альбумин до 1,5 мг/кг/день, причем применяются те же дозовые диапазоны для соединений, содержащих соответствующие рекомбинантные белки.
Соединения, композиции и методы данного изобретения дают следующие преимущества:
становится возможным избежать использования биологически несовместимых растворителей, уменьшить или полностью избежать побочных эффектов, ограничивающих дозу, связанных с такими компонентами, как токсические растворители, поверхностно-активные средства, эмульсификаторы и т.п.
применение белковых фракций плазмы при растворении медикаментов не оказывает дополнительных токсических эффектов - наоборот, они могут улучшить переносимость у пациентов, напр., в случае химиотерапии;
в требуемых случаях можно повышать вводимую дозу по сравнению с препаратами, производимыми в настоящее время, тем самым давая возможность улучшить общий исход терапии.
Настоящее изобретение более подробно иллюстрируют следующие примеры, которыми оно не ограничивается.
Примеры
I. Препаративные методы, анализы.
Применялись следующие методы для определения связывания конкретного активного ингредиента (соединения) с белком:
a) Ультрафильтрация.
Образец в 1 мл прозрачного раствора, образованного смешиванием водного раствора, содержащего белок в контролируемом агрегационном состоянии, и раствора активного ингредиента в подходящем растворителе, фильтруют через ультрафильтрационную мембрану (предел исключения >30000 Да) и определяют активный ингредиент в ультрафильтрационной фракции. При измерении концентрации активного ингредиента в неотфильтрованном растворе общее количество (>90%) обнаруживается в неизмененном виде.
b) Лиофилизация.
мл вышеуказанного раствора лиофилизируют. После лиофилизации твердый остаток растворяют примерно в 1,00 мл дистиллированной воды, получая прозрачный раствор. При измерении концентрации активного ингредиента в этом растворе активный ингредиент не обнаруживается в водной фазе, но 100% его обнаруживается в белковой фракции.
c) Анализ активного ингредиента.
Количественное определение активного ингредиента проводится методом НРЬС с УФдетекцией.
Анализ методом НРЬС можно проводить, напр., в системе НРЬС \Уа1сгк МШешиш (\Уа1сг8. МА, И8А). Она состоит из следующих компонентов: насос \Уа1ег8 616; контроллер ^а1ет5 6008; автоматический инжектор проб ^а1ет5 717 р1ик, термостатируемый при +5°С; диодный детектор УФ/ВИЗ ^а1егк 996. Эта система управляется и сбор данных осуществляется программой ^а1ет5 МШешиш ν.2.02.0, работающей с персонального компьютера Όίβίΐηΐ Р486/166 (Όίβίΐηΐ Едшртейк, Ιτνίη, ИК). Условия необходимо оптимизировать индивидуально для каждого соединения, как показано в нижеследующих примерах для некоторых препаратов.
6) Доказательство химической структуры.
Применяется метод ЙС/М8 для подтверждения того, что химическая структура выделенного из связанной фракции соединения осталась неизменной. Измерения ЙС/М8 проводились на масс-спектрометре Ршпфап №1\щаЮг (Шпшдап, Мапсйе51ет, ИК) для одноквадрупольной ЙС/М8, используя режим ионизации Е8 или АРС1, с помощью системы обработки данных МаккЬаЬ ν.2.0, работающей с персонального компьютера Όίβίΐηΐ УеШштк ЕХ/166 (Όίβίΐηΐ ЕдшртеШк, Ιτνίη, ИК). Рабочие параметры необходимо оптимизировать индивиду13 ально для каждого конкретного соединения с помощью стандартов, как показано на следующих примерах.
е) Подготовка образцов.
Представлен следующий типичный метод подготовки образцов, который применяется для определения общей концентрации/количества соединения в образце методом НРЬС и/или Ь8/М8.
Твердое содержимое лиофилизационного флакона реконституируют водой, раствор смешивают с абсолютным этанолом при соотношении объемов 1:1, при этом осаждаются белки плазмы, а вещество растворяется. После короткого центрифугирования раствор пригоден для НРЬС и/или Ь8/М8. При Ь8/М8 его анализируют путем прямого введения образца, а при НРЬС - путем отделения компонентов друг от друга. Оба метода дают ценную информацию о химической структуре родительского соединения и/или о возможных продуктах распада, что проиллюстрировано более подробно ниже для некоторых препаратов.
Хроматографические и массспектроскопические данные из анализов НРЬС и Ь8/М8 могут подтвердить химическую эквивалентность между известным биологически активным соединением, использованным в ка честве исходного материала, и соединением, выделенным после связывания с белковой фракцией согласно изобретению.
1) Использованные материалы.
Все использованные активные соединения по чистоте соответствовали И8Р XXIII. В экспериментах использовали следующие белковые фракции плазмы (*=чистота по Евр. Фарм.):
Альбумин человека, 20% р-р Рекомбумин™, 25%
Альбумин человека, 20%*
Альбумеон, И8Р
Альбумин человека, 20%, Вейпид* Гамма-глобулин чел 16%
НИМАИ В1.
С6Й6116. Нипдагу ИЕЬТА Βίοι. ЬТИ, Иойтдйат, ИК Вю1е81 Рй., Иге1е1сй, Оетшапу
СепЮоп В1о-8ету1се5, Ьййе Воск, АВ, И8А СеШеоп Рй. ОшЬН, ©1еп, АиЧпа :, НИМАИ В1., Обйб11б, Нипдагу
II. Получение, химические и физические анализы.
В следующих примерах соотношения белок плазмы: субстрат для связывания в среднем попадают в интервал между 1:0,1-100. Пропорции соединение:ЧСА для связывания расчитывали, принимая мол. вес ЧСА=66 500, и мол. вес гамма-глобулина человека=150000 [см. 11 8с1епсе, уо1. 244, р. 1195-1198, 1989, Уох 8апд., 70: р. 203-209, 1996].
Пример П.1.
20% раствор (3,08х10-3 М) сывороточного альбумина человека в контролируемом агрега ционном состоянии и раствор паклитакселя 1 мг/мл (1,17х10-3 М) в абсолютном этаноле смешивают в пропорции 4:1 и перемешивают до получения прозрачного раствора.
Раствор лиофилизируют, твердый остаток снова растворяют в количестве воды, достаточном для получения прозрачного раствора с концентрацией 20% сывороточного альбумина человека. Связывание определяют по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 99% паклитакселя связано с сывороточным альбумином человека. Это соответствует отношению сывороточного альбумина человека к паклитакселю, равному 1.0,1.
Пример П.2.
4,44% раствор (6,67х10-4 М) сывороточного альбумина человека в контролируемом агрегационном состоянии и раствор паклитакселя 2,0 мг/мл (2,34х10-3 М) (м.в. 853,92) в абсолютном этаноле смешивают в пропорции 9:1 и перемешивают до получения прозрачного раствора. Раствор далее обрабатывают так, как описано в примере П.1.
Связывание определяют по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 99% паклитакселя связано с сывороточным альбумином человека. Это соответствует отношению сывороточного альбумина человека к паклитакселю, равному 1:0,39.
Пример П.3.
4,44% раствор (6,67х10-4 М) рекомбинантного сывороточного альбумина человека в контролируемом агрегационном состоянии и раствор паклитакселя 2,0 мг/мл (1,40х10-3 М) в абсолютном этаноле смешивают в пропорции 9:1 и перемешивают до получения прозрачного раствора.
Раствор лиофилизируют, твердый остаток снова растворяют в количестве воды, достаточном для получения прозрачного раствора с концентрацией 20% рекомбинантного сывороточного альбумина человека. Связывание определяют по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 99% паклитакселя связано с рекомбинантным сывороточным альбумином человека. Это соответствует отношению рекомбинантного сывороточного альбумина человека к паклитакселю, равному 1:0,24.
Пример П.4.
2,25% раствор (1,5х10-4 М) гаммаглобулина человека, в контролируемом агрегационном состоянии и раствор паклитакселя 0,1 мг/мл (1,171х10-4 М) в абсолютном этаноле смешивают в пропорции 9:1 и перемешивают до получения прозрачного раствора.
Раствор лиофилизируют, твердый остаток снова растворяют в количестве воды, достаточном для получения концентрации 16% гаммаглобулина человека в прозрачном растворе.
Связывание определяют по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 98% паклитакселя связано с гам15 ма-глобулином человека. Это соответствует отношению гамма-глобулина человека к паклитакселю, равному 1:0,71.
В приведенных выше примерах со II. 1 по ΙΙ.3 количество паклитакселя измеряли с помощью НРЬС следующим методом:
Колонка ΜΝ Νιιοίοοδίΐ С18
Подвижная фаза цм 250х2 мм
Ацетонитрил:вода=
73:27
Скорость протока
Температура
Обнаружение
Типичное время удержания
0,30 мл/мин Комнатная При 273 нм
5,9 мин; к'=2,93
При определении по ЬС/М8 соединение обнаружено в неизмененном виде [см. Кар1б СотшишсаИоик ίη Ма§8 8рес1тоте1гу νοί. 11: р. 1025-1032, 1997 и КарИ СошшишсаНопк ίη Ма§8 8рес1тоше1ту νο1. 9: р. 495-502, 1995]. Сравнительные результаты представлены на фиг. 6: на фиг. 6А показан масс-спектр стандарта, а на фиг. 6В приведена кривая перерастворенного образца. На фиг. 6С показана фрагментация паклитакселя.
Параметры ЬС/М8: ионизация:
АРС1+интерфейс; скорость подачи газообразного азота: 300 л/ч; растворитель: ацетонитрил:буфер=60:40, где буфером служит 10 мМ формиат аммония, доведенный до рН 5,0 с помощью 10% муравьиной кислоты; скорость протока: 0,300 мл/мин.
Количественный анализ паклитакселя
Применяли метод НРЬС с обращением фаз на С-18 для количественного определения паклитакселя из различных растворов в примерах со II. 1 по II.27. Образцы вносили в систему НРЬС через инжектор в >50% растворе этанола, что предотвращает выпадение осадка соединения.
Связывание
Связывание соединения с белками плазмы определяют после уравновешивания 15 мин при 8±2°С.
Распределение соединения измеряют после ультрафильтрации через соответствующую мембрану (предел исключения должен быть >мол.веса белка), определяя концентрацию соединения во фракции ультрафильтрата (соответствует несвязанной) и в профильтрованном растворе, высвобождая связанную его часть путем денатурации белка (соответствует общей фракции). Для денатурации белка и высвобождения связанной фракции используется предварительно охлажденный (8±2°С) абсолютный этанол в пропорции 1:1. Точные значения концентрации и количества рассчитывают с учетом фактора разбавления.
Примеры с П.5 по П.21.
Раствор сывороточного альбумина человека в диапазоне концентраций от 20% (3,08х10-3
М) до 0,02% (3,08х10-6 М) смешивают с раствором паклитакселя в абсолютном этаноле в диапазоне концентраций от 20 мг/мл (2,34х10-2 М) до 0,01 мг/мл (1,17х10-5 М), всегда получая прозрачные растворы. Подробности приведены в табл.1. Все измерения проводят по 3 раза и вычисляют среднее значение.
Таблица 1
Пример [Т]т, мМ [ЧСА], мМ пОВУпЩСА) п(Тв)/п(Тт)х100%
П.5 0,2342 2,410 0,093 97,4
П.6 0,2342 1,205 0,177 93,2
П.7 0,2342 0,602 0,346 91,0
П.8 0,2342 0,301 0,648 85,2
П.9 0,2342 0,121 1,545 81,2
П.10 0,2342 0,0602 3,125 82,1
П.11 0,2342 0,0241 5,662 59,5
П.12 0,2342 0,0121 4,948 26,0
П.13 0,2342 0,00602 5,823 15,3
П.14 0,2342 0,00241 10,419 11,0
П.15 0,2342 0,00121 14,367 7,6
П.16 0,2342 0,000602 12,370 3,3
П.17 4,6843 0,121 4,135 10,9
П.18 2,3421 0,121 8,401 44,2
П.19 1,1711 0,121 4,585 48,2
П.20 0,4648 0,121 2,864 75,3
П.21 0,1171 0,121 0,765 80,4
Обозначения:
[Т]т - общая концентрация паклитакселя после добавления к сывороточному альбумину человека [ЧСА] - концентрация сывороточного альбумина человека п(Тв)/п(ЧСА) - число молей связанного паклитакселя на 1 моль сывороточного альбумина человека п(Тв)/п(Тт)х100% - процент связанного паклитакселя
Изменения концентрации паклитакселя (при 0,08% ЧСА, 10% этанола, 0,002 мг/мл паклитакселя) показаны на фиг. 7; изменения концентрации альбумина (при 0,004-16,0% ЧСА, 20% этанола, 0,2 мг/мл паклитакселя) показаны на фиг. 8. Изменения связывания паклитакселя с ЧСА (при 0,8% ЧСА, 10% этанола, от 0,1 до 2,0 мг/мл паклитакселя) в зависимости от рН при значениях рН от 4,0 до 8,5 показаны на фиг. 9. Символы на графике соответствуют следующим примерам:
Пример П.18-♦-♦Пример П.19 -о-оПример П.20 -х-хПример П.15 -◊-◊Пример П.21 -▲-▲Пример П.22.
Методы, подобные описанным в примерах со П.2 по П.21, используются для сывороточного альбумина животных, иммуноглобулина, гликопротеидов, интерферонов и интерлейкинов.
Пример П.23.
Обработка коммерчески доступного сывороточного альбумина человека или рекомбинантного сывороточного альбумина человека (в дальнейшем - альбумина) для достижения кон17 тролируемого агрегационного состояния с наилучшими условиями связывания молекул включает удаление стабилизаторов, таких как каприлат натрия, Ы-ацетил-О,Ь-триптофан и другие ионные компоненты и соли.
a) Метод ультрафильтрации.
Доводят раствор, содержащий 10% альбумин, до рН 3,0 с помощью хлорной кислоты и разводят до 5% по содержанию белка бидистиллированной водой. Концентрируют раствор до 10% по содержанию белка с помощью ультрафильтрации (предел исключения мембраны 30000 кД).
Разводят раствор опять до 5% по содержанию белка в 1,0 мМ соляной кислоте. Концентрируют раствор до 10% по содержанию белка с помощью ультрафильтрации (предел исключения мембраны 30000 кД).
Повторяют процедуру 12 раз, затем доводят до рН 6,9 с помощью 2,0 М водного раствора гидроокиси натрия и разбавляют раствор бидистиллированной водой до концентрации 5% по белку. Опять концентрируют раствор до 10% по содержанию белка с помощью ультрафильтрации (предел исключения мембраны 30 000 кД).
Раствор снова разбавляют бидистиллированной водой до 5% по содержанию белка. Концентрируют раствор до 10% по содержанию белка с помощью ультрафильтрации (предел исключения мембраны 30 000 кД). Повторив процедуру 10 раз, получают чистую белковую фракцию, достаточно свободную от других наполнителей. К этому времени проводимость ультрафильтрата приближается к таковой бидистиллированной воды, использованной для разбавления. Этот белок пригоден к употреблению для связывания, напр., паклитакселя или циклоспорина.
b) Использование диализа вместо ультрафильтрации дает сходные результаты. Обработка занимает примерно 48 ч.
Пример 11.24.
0,8% раствор (1,203х10-4 М) ЧСА и раствор 4,0 мг/мл амфотерицина В (4,33х10-3 М) (м.в. 924,09) в ΌΜΡ смешивали в пропорции 9:1 и перемешивали до получения прозрачного раствора.
Раствор лиофилизировали, твердый остаток снова растворяли в количестве воды, достаточном для обеспечения концентрации 20% ЧСА, получая прозрачный раствор. Связывание определяли по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающем, что 99,7% амфотерицина В связано с ЧСА. Это соответствует отношению ЧСА:амфотерицин В, равному 1:4.
Пример П.25.
0,8% раствор (1,203х10-4 М) рекомбинантного сывороточного альбумина человека и раствор 40,0 мг/мл амфотерицина В (4,33х10-2 М) в ИМЕ+НС1 смешивают в пропорции 9:1 и перемешивают до получения прозрачного раствора.
Раствор лиофилизуют, твердый остаток снова растворяют в количестве воды, достаточ ном для обеспечения конечной концентрации 20% рекомбинантного ЧСА, получая прозрачный раствор. Связывание определяют по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 99,5% амфотерицина В связано с ЧСА. Это соответствует отношению рекомбинантного ЧСА к амфотерицину В, равному 1:40.
Амфотерицин В измеряли с помощью
НРЬС следующим методом:
Колонка ΜΝ ЫискоШ С18 5 цм 250х2 мм
Подвижная фаза Ацетонитрил: буфер= 1:1 (буфер: 0,2% муравьиная кислота, доведенная до рН 4,0 триэтиламином)
Скорость протока 0,30 мл/мин
Температура Комнатная
Обнаружение При 365 нм
Типичное время удержания 5,3 мин; к'=1,41
При определении по ЬС/М8 соединение обнаружено в неизмененном виде. Сравнительные результаты представлены на фиг. 2: на фиг. 2А показан масс-спектр стандарта, на фиг. 2В приведена кривая вновь растворенного образца. Фиг. 2С показывает фрагментацию амфотерицина В.
Параметры ЬС/М8: ионизация:
ΕδΙ+интерфейс; скорость подачи газообразного азота: 300 л/ч; растворитель: 20 мМ формиат аммония, доведенный до рН 4,0 10% муравьиной кислотой; скорость протока 0,300 мл/мин.
Пример ΙΙ.26.
0,4% раствор (6,015х10-5 М) ЧСА в контролируемом агрегационном состоянии и раствор камптотецина 0,14 мг/мл (4,02х10-4 М) (м.в.=348,36) в абс. этаноле смешивали в пропорции 4:1 и перемешивали до получения прозрачного раствора. Раствор лиофилизировали, твердый остаток снова растворяли в количестве воды, достаточном для обеспечения конечной концентрации 20% ЧСА, получая прозрачный раствор. Связывание определяли по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 98% камптотецина связано с ЧСА. Это соответствует отношению ЧСА:камптотецин В, равному 1:5,34.
Пример ΙΙ.27.
0,4% раствор (6,015х10-5 М) рекомбинантного ЧСА в контролируемом агрегационном состоянии и раствор камптотецина 0,14 мг/мл (4,02х10-4 М) в абс. этаноле смешивали в пропорции 4:1 и перемешивали до получения прозрачного раствора.
Раствор лиофилизировали, твердый остаток снова растворяли в количестве воды, достаточном для обеспечения конечной концентрации 20% рекомбинантного ЧСА, получая прозрачный раствор. Связывание определяли по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 98% камптотецина связано с ЧСА. Это соответствует отношению рекомбинантного ЧСА к камптотецину, равному 1:5,34.
Мы измеряли камптотецин с помощью
НРЬС следующим образом: Колонка
Подвижная фаза
Скорость протока
Температура
Обнаружение
Типичное время удержания
ΜΝ №с1еоШ С18 5 цм 250x2 мм
Ацетонитрил:буфер=
33:67
0,33 мл/мин
Комнатная
При 356 нм
6,9 мин; к'=2,45
При определении по ЬС/Μδ соединение обнаружено в неизмененном виде [Сапсег КекеагсЬ, νο1. 56: р.3689-3694, 1996].
Пример 11.29.
0,4% раствор (6,015х10-5 М) рекомбинантного ЧСА в контролируемом агрегационном состоянии и раствор карбамазепина 8,0 мг/мл (3,39х10-2 М) (м.в. 236,27) в абс.этаноле смешивали в пропорции 19:1 и перемешивали до получения прозрачного раствора. Раствор лиофилизировали, твердый остаток снова растворяли в количестве воды, достаточном для обеспечения конечной концентрации 20% ЧСА, получая прозрачный раствор. Связывание определяли по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 98% карбамазепина связано с ЧСА. Это соответствует отношению ЧСА:карбамазепин, равному 1:2,8.
Мы измеряли карбамазепин с помощью НРЬС следующим образом:
Колонка ΜΝ М.1с1ео511 С18 мкм 250х2 мм
Подвижная фаза
Скорость протока Температура Обнаружение
Ацетонитрил:буфер=
1:1 (буфер: 0,2% муравьиная кислота, доведенная до рН 7,0 триэтиламином) 0,25 мл/мин Комнатная
При 285 нм
Типичное время удержания 5,3 мин; к'=2,45
При определении по ЬС/Μδ соединение обнаружено в неизмененном виде [Еиг 1. Сйп. СЬет. СИп. ВюсЬет, νο1. 35(10): р.755-759, 1997]. Сравнительные результаты представлены на фиг. 3: на фиг. 3А показан масс-спектр стандарта, на фиг. 3В приведена кривая вновь растворенного образца. Фиг. 3С показывает фрагментацию карбамазепина.
Параметры ЬС/Μδ: ионизация:
Е81+интерфейс; скорость подачи газообразного азота: 300 л/ч; растворитель: 2 мМ формиат аммония, доведенный 10% муравьиной кислотой до рН 4,0; скорость протока: 0,250 мл/мин.
Пример 11.30.
4,0% раствор (6,015х10-4 М) ЧСА в контролируемом агрегационном состоянии и рас твор циклоспорина А 1,0 мг/мл (8,33х10-4 М) в абс.этаноле смешивали в пропорции 9:1 и перемешивали до получения прозрачного раствора.
Раствор лиофилизировали, твердый остаток снова растворяли в количестве воды, достаточном для обеспечения концентрации 20% ЧСА, получая прозрачный раствор. Связывание определяли по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 97% циклоспорина А связано с ЧСА. Это соответствует отношению ЧСА:циклоспорин А, равному 1:0,14.
Пример 11.31.
2,0% раствор (3,008х10-4 М) рекомбинантного ЧСА в контролируемом агрегационном состоянии и раствор циклоспорина А 1,0 мг/мл (8,33х10-4 М) в абсолютном этаноле смешивали в пропорции 9:1 и перемешивали до получения прозрачного раствора.
Раствор лиофилизировали, твердый остаток снова растворяли в количестве воды, достаточном для обеспечения концентрации 20% рекомбинантного ЧСА, получая прозрачный раствор. Связывание определяли по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 98% циклоспорина А связано с ЧСА. Это соответствует отношению рекомбинантного ЧСА к циклоспорину А, равному 1:0,29.
Пример 11.32.
2,25% раствор (1,50х10-4 Μ) раствора гамма-глобулина человека в контролируемом агрегационном состоянии и раствор циклоспорина А 8,0 мг/мл (3,39х10-2 Μ) в абсолютном этаноле смешивали в пропорции 9:1 и перемешивали до получения прозрачного раствора.
Раствор лиофилизировали, твердый оста ток снова растворяли в количестве воды, достаточном для обеспечения конечной концентрации 16% гамма-глобулина человека, получая при этом прозрачный раствор. Связывание определяли по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 98% циклоспорина А связано с гамма-глобулином человека. Это соответствует отношению рекомбинантного гамма-глобулина человека к циклоспорину А, равному 1:0,56.
Циклоспорин А измеряли с помощью НРЬС следующим методом:
Колонка ΜΝ №с1еоШ С18
Подвижная фаза
Скорость протока
Температура
Обнаружение
Типичное время уд цм 250х2 мм
Ацетонитрил: вода: метанол: фосфорная кислота=700:260:40:0,05
0,25 мл/мин
80°С термостат
При 205 нм
7,5 мин; к'=2,95
При определении по ЬС/Μδ соединение обнаружено в неизмененном виде [1]. Сравнительные результаты представлены на фиг. 4: на фиг. 4А показан масс-спектр стандарта, на фиг. 4В приведена кривая вновь растворенного образца. Фиг. 4С показывает фрагментацию циклоспорина А.
Параметры БС/М8: ионизация: Е81+интерфейс; скорость подачи газообразного азота: 300 л/ч; растворитель: ацетонитрил/вода=60/40; скорость протока растворителя: 0,350 мл/мин.
Пример 11.33.
0,4% раствор (6,015х10-5 М) ЧСА и раствор пропофола 2,0 мг/мл (1,12х10-2 М) (м.в. 178,27) в абсолютном этаноле смешивали в пропорции 9:1 и перемешивали до получения прозрачного раствора.
Раствор лиофилизировали, твердый остаток снова растворяли в количестве воды, достаточном для обеспечения концентрации 20% ЧСА, получая прозрачный раствор. Связывание определяли по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 99% пропофола связано с ЧСА. Это соответствует отношению ЧСА:пропофол, равному 1:18,3.
Пример П.34.
0,4% раствор (6,015х10-5 М) рекомбинантного ЧСА и раствор пропофола 2,0 мг/мл (1,12х10-2 М) в абсолютном этаноле смешивали в пропорции 9:1 и перемешивали до получения прозрачного раствора.
Раствор лиофилизировали, твердый остаток снова растворяли в количестве воды, достаточном для обеспечения конечной концентрации 20% рекомбинантного ЧСА, получая прозрачный раствор. Связывание определяли по фракциям ультрафильтрата и осадка на фильтре, показывающим, что 99% пропофола связано с рекомбинантным ЧСА. Это соответствует отношению рекомбинантного ЧСА к пропофолу, равному 1:18,3.
Пропофол измеряли с помощью НРЬС следующим образом:
Колонка ΜΝ Ыис1ео811 С18 5 цм 250х2 мм
Подвижная фаза Ацетонитрил:вода= 73:27
Скорость протока 0,30 мл/мин
Температура Комнатная
Обнаружение При 273 нм
Типичное время удержания 6,1 мин; к'=1,77
При определении по БС/М8 соединение обнаружено в неизмененном виде [1. ок СйтошаФдгарйу В, 669: р. 358-365, 1995]. Сравнительные результаты представлены на фиг. 5: на фиг. 5А показан масс-спектр стандарта, на фиг. 5В приведена кривая вновь растворенного образца. Фиг. 5С показывает фрагментацию пропофола.
Параметры БС/М8: ионизация
АРС1+интерфейс; скорость подачи азота: 300 л/ч, растворитель ацетонитрил/вода=73/23, скорость протока: 0,300 мл/мин.
Пример 11.35.
Смешивали 9,0 мл 0,8% раствора (1,213х10-4 М) ЧСА и 1,0 мл раствора амфотерицина В 4,0 мг/мл (4,33х10-3 М) в диметилформамиде до получения прозрачного раствора. Этот раствор диализировали против 2,0 л воды (ВДИ) при 4°С в течение 20 ч, защищая от света.
Используя метод определения в примере 11.24, нашли, что связывание составляет 99,6%, соответствуя отношению ЧСА: амфотерицин В, равному 1:3,5.
При повторении процедуры диализа 5 раз концентрация ΌΜΕ в растворе снижалась ниже предела определения (2х10-9 М).
III. Дозировочные формы.
Примеры с Ш.1 по Ш.6.
Следуя способу получения с помощью лиофилизации, как описано выше, получают надлежащую фармацевтическую композицию. Вновь растворяя твердое вещество в соответствующем объеме ВДИ с тем, чтобы получить концентрацию 20% ЧСА, раствор доводят до концентрации, пригодной для терапевтического применения, как суммировано ниже для некоторых активных соединений.
Пример Название Конц., мг/мл
Ш.1 Амфотерицин В 11,09
Ш.2 Камптотецин 6,8
Ш.3 Карбамазепин 1,98
Ш.4 Циклоспорин 0,50
Ш.5 Паклитаксел 1,0
Ш.6 Пропофол 10,0
Вышеуказанные дозировочные формы можно затем довести до конечной формы во флаконах для инъекций и инфузий.
IV. Биологические примеры.
Исследования по биологической эквивалентности Биологическую эквивалентность определяли, сравнивая новые композиции, полученные по изобретению, с известными композициями, применяющимися при лечении и содержащими то же самое активное соединение с низкой растворимостью в воде. Такие известные композиции готовили в полиоксиэтилированном касторовом масле (Кремофор ЕЬ) и абсолютном этаноле.
Использованные материалы
Паклитаксел, растворенный в смеси полиоксиэтилированного касторового масла (Кремофор ЕЬ) с абсолютным этанолом в пропорции 1:1, сравнивали с водным раствором паклитаксел/ЧСА, полученным по изобретению согласно примеру П.2.
Пример Γν.1. Исследования ίη νίίτο.
Проведены сравнительные исследования ίη νίίτο для определения антипролиферативной и цитотоксической активности на клеточных линиях опухоли человека. Композиции паклитакселя в Кремофоре ЕЬ/абсолютном этаноле и в
ЧСА сравнивали на клеточных линиях миело23 идной лейкемии человека К562, карциномы молочной железы МСЕ-7 и ΜΌΑ-231 и яичников ОУСАВ-5 [Лийсаисег Кекеагсй, νοί. 16: р. 24692478, 1996].
Метод
Оценка ингибирования роста колоний. Монослойные культуры клеточных линий обрабатывали препаратом в двух вышеуказанных композициях при восьми различных концентрациях, а также в ДМСО/солевом растворе в качестве контроля. Культуры инкубировали 24, 48, 72, 96 и 120 ч, соотв. Колонии окрашивали кристалл-виолетом и рассчитывали выживание обработанных клеток в виде процента от колоний, образованных необработанными клетками. В табл. с 2А по 4В представлены результаты, полученные на различных клеточных линиях. В каждом исследовании показано выживание обработанных клеток, рассчитанное как процент от колоний, образованных необработанными клетками. Все значения являются средними из трех экспериментов.
Таблица 2 А Клеточная линия: карцинома молочной железы МСР7
Композиция: паклитаксел/Кремофор ЕЬ+абсолютный этанол
Пткс, [μΜ] \ ί, час 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч
0,005 92* 86 76 42 30
0,01 90 81 72 33 26
0,02 86 71 67 29 23
0,025 84 64 60 24 18
0,05 82 60 52 23 16
0,1 80 57 38 18 15
1,0 68 46 28 15 6,5
10,0 62 33 21 10 4,6
Таблица 3А
Клеточная линия: карцинома молочной железы ΜΌΑ-231
Композиция: паклитаксел/Кремофор ЕЬ+абсолютный этанол
Пткс, [μΜ] \ 1, час 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч
0,005 97 89 80 47 34
0,01 94 87 75 41 30
0,02 89 82 69 37 28
0,025 86 76 65 34 23
0,05 84 72 59 29 21
0,1 83 66 53 26 18
1,0 73 49 34 21 9,5
10,0 65 37 24 14 8,2
Таблица 3В
Клеточная линия: карцинома молочной железы ΜΌΑ-231
Композиция: паклитаксел/ЧСА
Пткс, [μΜ] \ 1, час 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч
0,005 92 78 51 30 10
0,01 86 65 38 24 8,3
0,02 75 51 33 22 7,0
0,025 64 47 28 19 6,4
0,05 60 42 26 18 5,3
0,1 55 36 24 16 4,0
1,0 49 33 22 15 3,2
10,0 45 26 20 10 2.6
Таблица 4А
Клеточная линия: миелоидная лейкемия человека
К 562
Таблица 2В
Клеточная линия: карцинома молочной железы МСЕ7
Композиция: паклитаксел/ЧСА
Композиция: паклитаксел/Кремофор ЕЬ+абсолютный этанол
Пткс, [μΜ] \ ΐ, час 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 120 ч
0,005 88 59 30 21 10
0,01 79 40 21 15 8,7
0,02 66 31 19 12 7,2
0,025 62 29 17 10 6,0
0,05 56 25 14 9,4 5,4
0,1 51 23 12 7,7 4,6
1,0 47 20 Ю,5 6,0 3,0
10,0 39 16 9,5 4,2 2,0
Таблица 4В Клеточная линия: миелоидная лейкемия человека К 562
Образец: паклитаксел/ЧСА
Пример ΐν.2. Фармакокинетический тест ίη νίνο.
С терапевтической точки зрения, биоэквивалентность можно установить, демонстрируя эквивалентность таких фармакокинетических характеристик, как АИС (площадь под кривой), константы элиминации, период полужизни в плазме после введения одинаковой дозы тем же самым видам. Такой эксперимент был проведен на крысах для двух композиций, как в примере IV. 1 [8етт. Опсо1., νοί. 21 (8ирр1. 8): р. 53-62, 1994].
АИС означает площадь под кривой на графике концентрации в плазме от времени. Ее можно получить, измеряя концентрацию введенного соединения в плазме в различные периоды времени.
Фармакокинетическое исследование на крысах
Метод. Вводили болусом дозу паклитакселя 2,5 мг/кг в объеме 1,0 мл внутривенно крысам СЯ (VI) ВЯ (вес тела от 380 до 420 г), и отбирали образцы крови 1,0 мл в гепаринизованные пробирки от трех животных в каждый период времени, как указано ниже:
Фракцию плазмы отделяли кратким центрифугированием при +5°С и хранили замороженной при -70°С до проведения аналитических измерений.
Подготовка образцов. Замороженные образцы плазмы нагревали до +8°С, центрифугировали 5 мин при 5 000 об./мин. Отбирали 0,300-0,500 мл прозрачного раствора плазмы и наносили на экстракционный картридж Оа818 НЬВ 1 сс 8РЕ (твердая фаза). Перед нанесением образца плазмы картридж промывали 1 мл метанола, затем 1 мл воды для прекондиционирования. Содержащийся в образце паклитаксел абсорбировался в картридже 8РЕ, тогда как остальные компоненты вымывались 1 мл воды и 1 мл 30% раствора ацетонитрил/вода. Картридж высушивали продуванием воздуха. Паклитаксел элюировали из картриджа 8РЕ с помощью 1 мл абсолютного этанола. Образец упаривали досуха азотом, хранили при -20°С до анализа. Остаток растворяли в 0,200 мл абсолютного этанола и вводили через инжектор для анализа НРЬС.
Условия НРЬС были те же, что применялись для идентификации вещества.
Результаты
Полученные точки являлись средними из трех измерений образцов от трех индивидуальных животных. Вследствие этого различия между двумя кривыми, полученными в результате фармакокинетического исследования равных доз из двух различных композиций, оказались в пределах отклонения для индивидуальных образцов. Такая же форма кривой получается при нанесении на график всех индивидуальных данных, что указывает на отсутствие различий или минимальные различия фармакокинетических характеристик двух композиций.
Пример ΐν.3.
Исследования по оценке антипролиферативной и цитостатической активности ίη νίνο показывают, что новые композиции оказывают положительное действие против раковых ксенотрансплантантов человека СН1 и СН11ах у голых мышей.
Пример ΐν.4. Тесты на гиперчувствительность.
Примерно у 45% больных, получавших паклитаксел, проявлялись реакции гиперчувствительности. Было доказано, что эти побочные эффекты связаны с одной добавкой в композиции, Кремофором ЕЬ, и наблюдались также с другими фармацевтическими препаратами, содержащими этот компонент. Эта реакция гиперчувствительности определяется как анафилактическая токсичность, проявляющаяся вследствие выброса гистамина, вызванного Кремофором ЕЬ.
Наше исследование проводилось на самцах крыс СЯЬ (VI) ВЯ весом 130-150 г [14]. Вводимая доза паклитакселя была рассчитана примерно в 7,0 мг/кг, при внутривенном введении в общем объеме 1,0 мл. Для каждой временной точки и дозы была группа из 5 животных. Образцы крови собирали в содержащие гепарин пробирки через 2, 5 и 10 мин после введения. Плазму отделяли кратким центрифугированием. Образцы хранили при -70°С.
Гистамин, содержащийся в образце, подвергали С14-метилированию специфическим ферментом гистамин-И-метил-трансферазой.
Уровень гистамина в образцах плазмы опреде27 ___ /·Ί4 ляли путем измерения радиоактивности С в образцах.
Полученные данные показали, что Кремофор ЕЬ и содержащая его композиция вызывали значительный выброс гистамина, тогда как ЧСА и содержащая его композиция и сам паклитаксел не проявляли подобного эффекта.
Пример 1У.5.
Такое же явление, как в примере 1У.4, было обнаружено у человека в экспериментах ίη νίΐτο на образцах крови человека при количественной оценке активации хроматина лимфоцитов крови [Метод: Апа1уйса1 апб ОнапШаГО'е Су1о1оду апб НМо1оду. νο1. 8: р.1, 1986].

Claims (20)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Растворимый в воде фармацевтический препарат в твердом состоянии или в виде истинного водного раствора, содержащий
    a) терапевтически активное соединение, обладающее низкой растворимостью в воде, менее 1х10-4 М/л, и существенным сродством связывания с белками плазмы (в дальнейшем активное соединение), означающим, что более чем 90% активного соединения связано с белком плазмы в водной среде при спонтанном равновесии и при комнатной температуре;
    b) белковую фракцию плазмы в контролируемом агрегационном состоянии, исключающем нежелательную агрегацию белка,
    c) причем активное соединение и белковая фракция связаны друг с другом нековалентными связями, и
    б) где упомянутый водный раствор не включает какого-либо органического растворителя, и
    е) в котором молярное соотношение активного соединения и белковой фракции находится в диапазоне от 1:0,05 до 1:100 и где концентрация указанного активного соединения в водном растворе соответствует терапевтически эффективной дозе.
  2. 2. Препарат по п.1, где белковая фракция плазмы представляет собой сывороточный альбумин человека, сывороточный альбумин животного, рекомбинантный сывороточный альбумин человека, рекомбинантный сывороточный альбумин животного, γ-глобулин и рекомбинантный γ-глобулин.
  3. 3. Препарат по п.1 или 2, где активным соединением является цитостатик, антибиотик, витамин, противовоспалительное, анальгетик, антивирусное средство, противосудорожное средство, иммуносупрессор, антиэпилептическое, анксиолитик, снотворное, противогрибковое средство, антикоагулянт, липидный ингибитор пероксидаз, коронарный вазодилятор, антиаритмическое средство, кардиотоническое, мочегонное, антитромботическое средство, стероидный гормон (прогестерон, андроген, тестоген) и фотосенсибилизатор, и где концентрация ука занного активного соединения в водном растворе соответствует терапевтически эффективной дозе.
  4. 4. Препарат по любому из пп.1-3, где по меньшей мере одно или более одного активное соединение выбрано из группы, содержащей амфотерицин В, аналог адриамицина, апазон, азатиоприн, бромазепам, кампототецин, карбамазепин, клоназепам, циклоспорин А, диазепам, дикумарол, дигитоксин, дипиридамол, дизопирамид, флунитразепам, гемфиброзил, кетохлорин, кетоконазол, миконазол, нифлумовая кислота, оксазепам, фенобарбитал, фенитоин, прогестерон, пропофол, ритонавир, сульфинпиразон, супрофен, такролимус, тамоксифен, таксоноид, тестостерон, тирилазад, триоксален, вальпроевая кислота, варфарин и где белковая фракция выбрана из группы, состоящей из сывороточного альбумина человека, сывороточного альбумина животного, рекомбинантного сывороточного альбумина человека, рекомбинантного сывороточного альбумина животного, γглобулина и рекомбинантного γ-глобулина, в котором молярное соотношение активного соединения и белковой фракции находится в диапазоне от 1:0,05 до 1:100 и где концентрация заявленного активного соединения в водном растворе соответствует терапевтически эффективной дозе.
  5. 5. Препарат по любому из пп.1-4, содержащий в качестве терапевтически активного вещества таксоноид общей формулы где В1 означает третичный амид бутилоксикарбоксикислоты или амид бензоила,
    В2 означает водород, ацил или ацетильную группу, предпочтительно паклитаксел, и где белковая фракция выбрана из группы, состоящей из сывороточного альбумина человека, сывороточного альбумина животного, рекомбинантного сывороточного альбумина человека, рекомбинантного сывороточного альбумина животного, γ-глобулина и рекомбинантного γглобулина, в которых молярное соотношение активного соединения и белковой фракции находится в диапазоне от 1:0,05 до 1:100 и где концентрация терапевтически активного соединения в водном растворе соответствует терапевтически эффективной дозе.
  6. 6. Гомогенный, твердый препарат, состоящий преимущественно по меньшей мере из одного терапевтически активного соединения, имеющего низкую растворимость в воде, менее
    1х10-4 М/л, выбранного из группы, содержащей амфотерицин В, аналог адриамицина, апазон, азатиоприн, бромазепам, кампототецин, карбамазепин, клоназепам, циклоспорин А, диазепам, дикумарол, дигитоксин, дипиридамол, дизопирамид, флунитразепам, гемфиброзил, кетохлорин, кетоконазол, миконазол, нифлумовую кислоту, оксазепам, фенобарбитал, фенитоин, прогестерон, пропофол, ритонавир, сульфинпиразон, супрофен, такролимус, тамоксифен, таксоноид, тестостерон, тирилазад, триоксален, вальпроевую кислоту, варфарин, и по меньшей мере одной белковой фракции, выбранной из группы, состоящей из сывороточного альбумина, γ-глобулина, рекомбинантного сывороточного альбумина, рекомбинантного γ-глобулина, и где указанное терапевтически активное соединение и указанная белковая фракция связаны друг с другом нековалентными связями и где молярное соотношение заявленного терапевтически активного соединения и белковой фракции находятся в диапазоне от 1:0,05 до 1:100, а растворимость в воде препарата достаточна для обеспечения концентрации, соответствующей терапевтически эффективной дозе активного соединения.
  7. 7. Гомогенный твердый препарат, состоящий преимущественно по меньшей мере из одного терапевтически активного соединения с растворимостью в воде менее чем 1х10-4 М/л, выбранного из группы, содержащей амфотерицин В, аналог адриамицина, апазон, азатиоприн, бромазепам, кампототецин, карбамазепин, клоназепам, циклоспорин А, диазепам, дикумарол, дигитоксин, дипиридамол, дизопирамид, флунитразепам, гемфиброзил, кетохлорин, кетоконазол, миконазол, нифлумовую кислоту, оксазепам, фенобарбитал, фенитоин, прогестерон, пропофол, ритонавир, сульфинпиразон, супрофен, такролимус, тамоксифен, таксоноид, тестостерон, тирилазад, триоксален, вальпроевую кислоту, варфарин, и белковой фракции, выбранной из группы, состоящей из гликопротеина, интерферона, интерлейкина и рекомбинантного гликопротеина, интерферона, интерлейкина, где терапевтически активные соединения и указанная белковая фракция связаны друг с другом нековалентными связями и где молярное соотношение терапевтически активного соединения и указанной белковой фракции находится в диапазоне от 1:0,05 до 1:100, а растворимость в воде препарата достаточна для обеспечения концентрации, соответствующей терапевтически эффективной дозе активного соединения.
  8. 8. Гомогенный, твердый, водорастворимый препарат по п.6 или 7, в котором молярное соотношение терапевтически активного соединения и указанной белковой фракции находится в диапазоне от 1,0:0,1 до 1:50.
  9. 9. Гомогенный, твердый, водорастворимый препарат по любому из пп.6-8, в котором ука занное терапевтически активное соединение представляет собой таксоноид формулы н2—о о о где К1 означает третичный амид бутилоксикарбоксикислоты или амид бензоила,
    К2 означает водород, ацил или ацетильную группу, предпочтительно паклитаксел, и где белковая фракция выбрана из группы, состоящей из сывороточного альбумина человека, сывороточного альбумина животного, рекомбинантного сывороточного альбумина человека, рекомбинантного сывороточного альбумина животного, γ-глобулина и рекомбинантного γглобулина, причем молярное соотношение активного соединения и белковой фракции находится в диапазоне от 1:0,05 до 1:100 и концентрация активного соединения в водном растворе соответствует терапевтически эффективной дозе.
  10. 10. Препарат по любому из пп.1-9, в котором молярное соотношение терапевтически активного соединения и белковой фракции находится в диапазоне от 1:0,1 до 1:50.
  11. 11. Способ получения водорастворимого препарата в твердом состоянии, как указано в любом из пп.1-10, растворимость в воде которого достаточна для обеспечения концентрации соответствующей терапевтически эффективной дозе активного соединения, включающий
    a) полное растворение терапевтически активного соединения в смешивающемся с водой фармацевтически приемлемом органическом растворителе,
    b) объединение указанного раствора в органическом растворителе с водным раствором фракции белков плазмы в контролируемом агрегационном состоянии, с получением истинного раствора, содержащего заявленное активное соединение и указанную белковую фракцию, связанные вместе нековалентными связями,
    c) удаление органического растворителя и лиофилизацию раствора или его концентрата.
  12. 12. Способ получения истинных водных растворов без примеси органических растворителей препарата по любому из пп.1-10, содержащих водонерастворимое терапевтически активное соединение, включающий
    a) полное растворение терапевтически активного соединения в смешивающемся с водой фармацевтически приемлемым органическом растворителе,
    b) объединение указанного раствора в органическом растворителе с водным раствором фракции белков плазмы в контролируемом агрегационном состоянии, с получением истинного раствора, содержащего заявленное активное соединение и указанную белковую фракцию, связанные вместе нековалентными связями,
    с) удаление органического растворителя и лиофилизацию раствора или его концентрата,
    б) растворение полученного в твердом состоянии препарата в воде, не содержащей органического растворителя, с получением истинного водного раствора, свободного от органических растворителей, в котором концентрация заявленного активного соединения соответствует терапевтически эффективной дозе, годной для терапевтического введения.
  13. 13. Способ по п.12, включающий доведение раствора до конечного препарата в виде дозированной формы для парентерального введения.
  14. 14. Способ по любому из пп.11-13, в котором на стадии а) используют органический растворитель, имеющий следующие свойства:
    a) в смеси с водой он способен полностью растворять активное соединение и
    b) в смеси с водой, где вода составляет менее 50%, он не денатурирует белок.
  15. 15. Способ по п.14, в котором органический растворитель выбирают из группы, состоящей из алифатического С(2-4) моноспирта или полиспирта, 70-100% этанола, диметилформамида, метилформамида.
  16. 16. Способ по любому из пп.11-15, в котором на стадии Ь) в качестве белков плазмы используют белки, выбранные из группы, включающей сывороточный альбумин, иммуноглобулин, гликопротеин, интерферон, интерлейкин, рекомбинантный гликопротеин, рекомбинантный интерферон и рекомбинантный интерлейкин.
  17. 17. Способ по любому из пп.11-16, в котором на стадии а) используют по меньшей мере одно или более одного терапевтически активное соединение, выбранное из группы, включающей амфотерицин В, аналог адриамицина, апазон, азатиоприн, бромазепам, кампототецин, карбамазепин, клоназепам, циклоспорин А, диазепам, дикумарол, дигитоксин, дипиридамол, дизопирамид, флунитразепам, гемфиброзил, кетохлорин, кетоконазол, миконазол, нифлумовую кислоту, оксазепам, фенобарбитал, фенитоин, прогестерон, пропофол, ритонавир, сульфинпиразон, супрофен, такролимус, тамоксифен, таксоноид, тестостерон, тирилазад, триоксален, вальпроевую кислоту, варфарин.
  18. 18. Способ по любому из пп.11-17, в котором на стадии а) в качестве терапевтически активного соединения используют паклитаксел.
  19. 19. Способ лечения людей или ветеринарных пациентов терапевтически активным соединением, имеющим низкую растворимость в воде, менее 1х10-4 М/л, и обладающим сущест венным сродством к белкам плазмы, включающий введение пациенту, нуждающемуся в лечении указанным активным соединением, водных растворов препарата по любому из пп.1-10, при следующем диапазоне доз (в пересчете на активное соединение): паклитаксел/альбумин - 70280 мг/введение, пропофол/альбумин - 6-10 мг/кг/ч, камптотецин/альбумин, гемфиброзил/альбумин, циклоспорин А/альбумин - по 3-5 мг/кг/день, амфотерицин В/альбумин - до 1,5 мг/кг/день, причем те же самые диапазоны доз применяются для соединений, содержащих соответствующие рекомбинантные белки.
  20. 20. Способ лечения людей или ветеринарных пациентов по п.19, включающий парентеральное введение указанных водных растворов.
EA200000331A 1997-09-18 1998-09-17 Фармацевтические композиции, содержащие белок плазмы EA004700B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU9701554A HUP9701554D0 (en) 1997-09-18 1997-09-18 Pharmaceutical composition containing plazma proteins
PCT/HU1998/000086 WO1999013914A1 (en) 1997-09-18 1998-09-17 Pharmaceutical compositions containing plasma protein

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200000331A1 EA200000331A1 (ru) 2000-10-30
EA004700B1 true EA004700B1 (ru) 2004-06-24

Family

ID=90014222

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200000331A EA004700B1 (ru) 1997-09-18 1998-09-17 Фармацевтические композиции, содержащие белок плазмы

Country Status (33)

Country Link
US (5) US6743826B1 (ru)
EP (1) EP0981375B1 (ru)
JP (1) JP2001508806A (ru)
KR (1) KR100587962B1 (ru)
CN (1) CN1189216C (ru)
AR (1) AR017120A1 (ru)
AT (1) ATE230611T1 (ru)
AU (1) AU734695B2 (ru)
BG (1) BG64749B1 (ru)
BR (1) BR9812469A (ru)
CA (1) CA2269923C (ru)
CZ (1) CZ301326B6 (ru)
DE (1) DE69810612T2 (ru)
DK (1) DK0981375T3 (ru)
EA (1) EA004700B1 (ru)
ES (1) ES2187062T3 (ru)
HR (1) HRP980499A2 (ru)
HU (1) HUP9701554D0 (ru)
IL (1) IL135055A (ru)
LT (1) LT4736B (ru)
LV (1) LV12493B (ru)
NO (1) NO325294B1 (ru)
NZ (1) NZ503302A (ru)
PL (1) PL193067B1 (ru)
PT (1) PT981375E (ru)
RO (1) RO118695B1 (ru)
RS (1) RS50102B (ru)
SI (1) SI20189B (ru)
SK (1) SK284683B6 (ru)
TR (1) TR200001545T2 (ru)
TW (1) TWI222365B (ru)
WO (1) WO1999013914A1 (ru)
ZA (1) ZA988585B (ru)

Families Citing this family (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5439686A (en) * 1993-02-22 1995-08-08 Vivorx Pharmaceuticals, Inc. Methods for in vivo delivery of substantially water insoluble pharmacologically active agents and compositions useful therefor
US8137684B2 (en) * 1996-10-01 2012-03-20 Abraxis Bioscience, Llc Formulations of pharmacological agents, methods for the preparation thereof and methods for the use thereof
US8853260B2 (en) 1997-06-27 2014-10-07 Abraxis Bioscience, Llc Formulations of pharmacological agents, methods for the preparation thereof and methods for the use thereof
HUP9701554D0 (en) * 1997-09-18 1997-11-28 Human Oltoanyagtermeloe Gyogys Pharmaceutical composition containing plazma proteins
WO2000047187A1 (en) * 1999-02-11 2000-08-17 Kinetana Inc. Serum albumin-based parenteral formulations of polyene macrolides
ATE306942T1 (de) 1999-09-16 2005-11-15 Novo Nordisk As Zusammensetzung zur in-vitro befruchtung
MXPA02009984A (es) * 2000-04-10 2004-09-10 Teva Pharma Metodo y composicion para el tratamiento del cancer mediante la administracion de agentes quimioterapeuticos que inducen la apoptosis.
WO2001076559A1 (en) * 2000-04-10 2001-10-18 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Method 0f administration of paclitaxel-plasma protein formulation
EP1387676A2 (en) * 2001-05-01 2004-02-11 Angiotech Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising an anti-microtubule agent and a polypeptide or a polysaccharide and the use thereof for the preparation of a medicament for the treatment of inflammatory conditions
ES2500918T3 (es) 2001-12-21 2014-10-01 Human Genome Sciences, Inc. Proteínas de fusión de albúmina e interferón beta
EA200500210A1 (ru) 2002-07-16 2005-06-30 Медексис С. А. Конъюгаты стероидов, их получение и их применение
GR1004274B (el) 2002-07-16 2003-06-23 Medexis ���� Συμπλοκα στεροειδων ορμονων με πρωτεινες: νεες ουσιες για την ειδικη ανιχνευση και καταστροφη καρκινικων κυτταρων προερχομενων απο στερεους ογκους και αιματολογικες κακοηθειες
JPWO2004024188A1 (ja) * 2002-09-12 2006-01-05 日本メジフィジックス株式会社 薬物の血漿蛋白質結合を制御するための製剤
CN104587479A (zh) 2002-12-09 2015-05-06 阿布拉西斯生物科学有限责任公司 组合物和传递药剂的方法
WO2004101620A2 (en) * 2003-05-01 2004-11-25 Compound Therapeutics, Inc. Serum albumin scaffold-based proteins and uses thereof
US20040225022A1 (en) * 2003-05-09 2004-11-11 Desai Neil P. Propofol formulation containing reduced oil and surfactants
US7659310B2 (en) 2004-04-27 2010-02-09 Formatech, Inc. Methods of enhancing solubility of agents
US7345093B2 (en) 2004-04-27 2008-03-18 Formatech, Inc. Methods of enhancing solubility of compounds
US20050277584A1 (en) * 2004-06-09 2005-12-15 Allergan, Inc. Pharmaceutical compositions comprising cyclosporins
US8391959B2 (en) * 2004-09-29 2013-03-05 Tel Hashomer Medical Research Infrastructure And Services Ltd. Composition for improving efficiency of drug delivery
US20060198891A1 (en) * 2004-11-29 2006-09-07 Francois Ravenelle Solid formulations of liquid biologically active agents
US7507842B2 (en) 2005-08-12 2009-03-24 Radiorx, Inc. Cyclic nitro compounds, pharmaceutical compositions thereof and uses thereof
WO2008122967A2 (en) 2007-04-04 2008-10-16 Sigmoid Pharma Limited An oral pharmaceutical composition
WO2008132707A1 (en) 2007-04-26 2008-11-06 Sigmoid Pharma Limited Manufacture of multiple minicapsules
US20110009497A1 (en) * 2008-03-21 2011-01-13 Fujifilm Corporation Drug-containing composition
CN101658516B (zh) * 2008-08-26 2011-10-05 齐鲁制药有限公司 紫杉醇类药物组合物及其制备方法
US9278070B2 (en) 2009-05-18 2016-03-08 Sigmoid Pharma Limited Composition comprising oil drops
EP2464341B1 (en) 2009-08-12 2022-07-06 Sublimity Therapeutics Limited Immunomodulatory compositions comprising a polymer matrix and an oil phase
US10143652B2 (en) 2009-09-23 2018-12-04 Curirx Inc. Methods for the preparation of liposomes
WO2011038068A1 (en) 2009-09-23 2011-03-31 Formatech, Inc. Methods for the preparation of liposomes
BR112012014962A2 (pt) 2009-12-18 2016-04-05 Exodos Life Sciences Ltd Partnership métodos e composições para formulações líquidas e estáveis de fármacos
ES2702400T3 (es) * 2010-02-03 2019-02-28 Oncbiomune Inc Composiciones que contienen un taxano o un taxoide y una proteína
AR093275A1 (es) 2010-03-17 2015-05-27 Centro De Excelencia En Productos Y Procesos De Cordoba (Ceprocor) Una composicion farmaceutica soluble en agua que comprende al menos una sustancia terapeuticamente activa de caracteristicas hidrofobicas y al menos un compuesto seleccionado entre los sialoglicoesfingolipidos, los glicoesfingolipidos o una mezcla de sialoglicoesfingolipidos y glicoesfingolipidos
GB201020032D0 (en) 2010-11-25 2011-01-12 Sigmoid Pharma Ltd Composition
GB201212010D0 (en) 2012-07-05 2012-08-22 Sigmoid Pharma Ltd Formulations
GB201319791D0 (en) 2013-11-08 2013-12-25 Sigmoid Pharma Ltd Formulations
KR102387044B1 (ko) * 2014-03-18 2022-04-14 이준 파마슈티컬스 코퍼레이션 단백질-결합된 칸나비노이드 조성물
EA036036B1 (ru) 2014-11-07 2020-09-16 Сигмойд Фарма Лимитед Композиции, содержащие циклоспорин
AR100034A1 (es) 2015-01-30 2016-09-07 Consejo Nac De Investig Científicas Y Técnicas (Conicet) Una composición farmacéutica soluble en agua que comprende, al menos, una sustancia terapéuticamente activa y, al menos, una sustancia con capacidad para formar micelas
US10071141B2 (en) 2015-05-08 2018-09-11 Spectral Platforms, Inc. Albumin-based non-covalent complexes and methods of use thereof
US10500285B2 (en) 2015-05-15 2019-12-10 Zhuhai Beihai Biotech Co., Ltd. Docetaxel and human serum albumin complexes
KR20180014790A (ko) * 2015-06-18 2018-02-09 마티나스 바이오파마 나노테크놀로지스, 인코포레이티드 염증성 질환 또는 병태를 치료하기 위한 조성물 및 방법
WO2017083397A1 (en) * 2015-11-09 2017-05-18 Cayo Max A Cardiac glycosides for the treatment of hypercholesterolemia
CN109789154B (zh) * 2016-08-03 2021-05-14 珠海贝海生物技术有限公司 福沙吡坦和阿瑞吡坦的制剂
CN110062622B (zh) 2016-10-27 2022-10-14 珠海贝海生物技术有限公司 多西他赛和人血清白蛋白的中性pH组合物
KR20190122256A (ko) 2017-03-09 2019-10-29 이준 파마슈티컬스 코퍼레이션 안정화된 단백질-결합 칸나비노이드 조성물
WO2018175346A1 (en) 2017-03-20 2018-09-27 Spectral Platforms, Inc. Spectroscopic methods to detect and characterize microorganisms
BR112020000196A2 (pt) 2017-07-07 2020-07-07 Epicentrx, Inc. composições para administração parenteral de agentes terapêuticos
BR112020017988A2 (pt) * 2018-03-09 2020-12-22 Panoptes Pharma Ges.M.B.H. Composição oftálmica
EP3811982A1 (en) * 2019-10-25 2021-04-28 Université de Strasbourg Protein-based biomaterial with viscoelastic behaviour, process for obtaining it and uses thereof
CN111529506B (zh) * 2020-05-18 2021-09-03 同济大学 一种两性霉素b白蛋白纳米制剂及其制备方法和应用
US11739166B2 (en) 2020-07-02 2023-08-29 Davol Inc. Reactive polysaccharide-based hemostatic agent
KR102435211B1 (ko) * 2021-06-29 2022-08-23 (주)진셀바이오텍 알부민을 고효율로 생산하는 식물 세포주 및 이의 용도
CN114544926A (zh) * 2021-12-02 2022-05-27 浙江鑫科医疗科技有限公司 一种血清蛋白稳定剂
CN115236216B (zh) * 2022-06-07 2024-03-01 合肥和合医疗科技有限公司 高效液相色谱串联质谱检测全血中免疫抑制剂的试剂盒，其制备方法和检测方法

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS4833013A (ru) * 1971-08-30 1973-05-07
DE2653534C2 (de) * 1975-12-22 1986-08-28 Baxter Travenol Laboratories, Inc., Deerfield, Ill. Feste Antihämophilen-Faktor-Präparation und Verfahren zu ihrer Herstellung
JPS58216126A (ja) * 1982-06-11 1983-12-15 Ono Pharmaceut Co Ltd 可容化製剤
DE3702105A1 (de) 1987-01-24 1988-08-04 Bayer Ag Parenterale loesung
US5051406A (en) * 1987-03-04 1991-09-24 Nippon Hypox Laboratories Incorporated Pharmaceutical composition using albumin as a carrier and process for producing the same
JPS63215640A (ja) * 1987-03-04 1988-09-08 Nippon Hai Potsukusu:Kk 易吸収性抗炎症剤及びその製造方法
CA2086874E (en) 1992-08-03 2000-01-04 Renzo Mauro Canetta Methods for administration of taxol
US5356927A (en) * 1992-12-02 1994-10-18 Thomas Jefferson University Methods of treating plasmodium and babesia parasitic infections
US5439686A (en) 1993-02-22 1995-08-08 Vivorx Pharmaceuticals, Inc. Methods for in vivo delivery of substantially water insoluble pharmacologically active agents and compositions useful therefor
US5916596A (en) * 1993-02-22 1999-06-29 Vivorx Pharmaceuticals, Inc. Protein stabilized pharmacologically active agents, methods for the preparation thereof and methods for the use thereof
GB9510716D0 (en) * 1995-05-26 1995-07-19 Pharmacia Spa Substituted camptothecin derivatives and process for their preparation
TR199600775A2 (tr) 1996-09-27 1997-09-21 Tureks Turunc Madencilik Ic Ve Taslara eskitilmis görüntü kazandirilmasi icin bir yöntem.
US5776912A (en) * 1996-12-20 1998-07-07 Schering Corporation Lipophilic oligosaccharide antibiotic compositions
HUP9701554D0 (en) * 1997-09-18 1997-11-28 Human Oltoanyagtermeloe Gyogys Pharmaceutical composition containing plazma proteins
ITMI20001107A1 (it) * 2000-05-18 2001-11-18 Acs Dobfar Spa Metodo per il trattamento di tumori solici mediante microparticelle di albumina incorporanti paclitaxel

Also Published As

Publication number Publication date
HUP9701554D0 (en) 1997-11-28
YU16600A (sh) 2003-08-29
EP0981375A1 (en) 2000-03-01
ES2187062T3 (es) 2003-05-16
RO118695B1 (ro) 2003-09-30
PT981375E (pt) 2003-04-30
SK3292000A3 (en) 2000-08-14
EP0981375B1 (en) 2003-01-08
CZ301326B6 (cs) 2010-01-20
US20050064028A1 (en) 2005-03-24
NO325294B1 (no) 2008-03-17
RS50102B (sr) 2009-01-22
IL135055A0 (en) 2001-05-20
IL135055A (en) 2004-09-27
SK284683B6 (sk) 2005-09-08
AR017120A1 (es) 2001-08-22
ATE230611T1 (de) 2003-01-15
US7119124B2 (en) 2006-10-10
WO1999013914A1 (en) 1999-03-25
US8946167B2 (en) 2015-02-03
CA2269923A1 (en) 1999-03-25
LT2000018A (en) 2000-08-25
DE69810612T2 (de) 2003-10-02
JP2001508806A (ja) 2001-07-03
CN1270529A (zh) 2000-10-18
LV12493B (en) 2001-01-20
CA2269923C (en) 2003-07-22
BR9812469A (pt) 2002-02-05
PL339369A1 (en) 2000-12-18
PL193067B1 (pl) 2007-01-31
HRP980499A2 (en) 1999-12-31
KR20010052072A (ko) 2001-06-25
BG104245A (en) 2000-11-30
US6743826B1 (en) 2004-06-01
DE69810612D1 (de) 2003-02-13
LV12493A (en) 2000-06-20
ZA988585B (en) 2000-03-13
NZ503302A (en) 2001-08-31
US20100076008A1 (en) 2010-03-25
US20070232536A1 (en) 2007-10-04
TR200001545T2 (tr) 2000-10-23
SI20189A (sl) 2000-10-31
AU734695B2 (en) 2001-06-21
KR100587962B1 (ko) 2006-06-13
BG64749B1 (bg) 2006-02-28
NO20001371D0 (no) 2000-03-16
CN1189216C (zh) 2005-02-16
US20040014655A1 (en) 2004-01-22
DK0981375T3 (da) 2003-05-05
US7501455B2 (en) 2009-03-10
LT4736B (lt) 2000-12-27
NO20001371L (no) 2000-05-18
TWI222365B (en) 2004-10-21
AU9362398A (en) 1999-04-05
CZ2000952A3 (cs) 2000-09-13
EA200000331A1 (ru) 2000-10-30
SI20189B (sl) 2007-10-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA004700B1 (ru) Фармацевтические композиции, содержащие белок плазмы
US20220023424A1 (en) Peroxide removal from drug delivery vehicle
US5078997A (en) Pharmaceutical composition for interleukin-2 containing physiologically compatible stabilizers
JPH03503764A (ja) ヒト成長ホルモン製剤
IE903475A1 (en) Stabilized aqueous formulations of small peptides
JP2004536129A (ja) セツキシマブおよびポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルを含む液体製剤
US5140010A (en) Stabilized aqueous formulations of thymopentin
CN114392352A (zh) 一种稳定的抗pd-1抗体的药物制剂
JPH0296535A (ja) 骨髄機能障害性貧血治療剤
MXPA00002561A (en) Pharmaceutical compositions containing plasma protein
CN107028898B (zh) 一种伊立替康药冻干制剂、其制备方法及用途
EP0554634A1 (fr) Composition pharmaceutique stabilisée d&#39;IL2 humaine recombinante non glycosylée sous forme réduite et son procédé de préparation
HU223974B1 (hu) Plazma protein tartalmú gyógyszerkészítmények és eljárás előállításukra

Legal Events

Date Code Title Description
FA9A Withdrawal of a eurasian application
NF9A Restoration of lapsed right to a eurasian application

Designated state(s): AM AZ KG MD TJ

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AZ KG MD TJ TM

PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): KZ

MK4A Patent expired

Designated state(s): AM BY RU