EA003695B1

EA003695B1 - Применение glp-1 или его аналогов в лечении инфаркта миокарда

Info

Publication number: EA003695B1
Application number: EA199900168A
Authority: EA
Inventors: Сьюад Эфендик
Original assignee: Эли Лилли Энд Компани
Priority date: 1996-08-30
Filing date: 1997-08-26
Publication date: 2003-08-28
Also published as: DE69738615T2; CN1235553A; EP0964692A4; RS49918B; NZ334269A; HUP0003173A3; PL331986A1; YU10699A; HK1024186A1; HUP0003173A2; CN100374153C; KR20000035835A; AU715295B2; US20040162241A1; DE69738615D1; NO990916D0; IL128741A; NO322898B1; EP0964692B1; EA199900168A1

Abstract

Настоящее изобретение предоставляет способ снижения смертности и заболеваемости после инфаркта миокарда. GLP-1, GLP-1 аналог либо GLP-1 производное вводится в дозе, обеспечивающей эффективную нормализацию уровня содержания глюкозы в крови.

Description

Предпосылки создания изобретения Область, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к способу снижения смертности и заболеваемости пациентов-диабетиков после инфаркта миокарда.

Вспомогательная информация

Заболеваемость и смертность от сердечнососудистых болезней выше у пациентов с проявляющимся диабетом либо нарушенной толерантностью к глюкозе, по сравнению с пациентами, не имеющими подобных расстройств. Диабетики составляют до 24% от общего числа пациентов, поступающих в отделения интенсивной терапии для больных с острой коронарной недостаточностью по подозрению на инфаркт, в то время, как они составляют лишь около 5% от общего числа пациентов [Мальмберг (Ма1тЬегд) и Райден (Кубеи); Фаллер Дж.Г. (Рц11ег ЕН.), 01аЬе1. Ме1аЬ. 19:96-99 (1993)]. Больничная смертность пациентовдиабетиков с инфарктом миокарда в 2 раза превышает соответствующие показатели для недиабетиков [Хемстен А. (Натйеп А.) и другие, 1. Ιηΐ. Меб. 736:1-3 (1994), Приложение 236; Мальмберг К. и Райден Л., Еиг. НеаП Е 9:256264 (1988)]. Диабетики чаще заболевают и чаще умирают на этапе выздоровления после острого приступа болезни, главным образом, вследствие смертельного повторного инфаркта и застойной сердечной недостаточности [Мальмберг и Райден; Стоун П. (81опе Р.) и другие, 1. Ат. Со11. СагбюЕ 14:49-57 (1989); Карлсон Б.В. (Кагкоп

B. У.) и другие, Э|аЬе1. Меб. 10 (5):449-54 (1993); Барбаш Г.И. (ВагЬакй С.1.) и другие, 1. Ат. Со11. СагбюЕ 22:707-713 (1993)]. Различие в уровне смертности и заболеваемости между диабетиками и недиабетиками после инфаркта миокарда сохраняется, несмотря на снижение количества случаев заболеваемости и смертности после острого инфаркта миокарда [Грейнджер К.Б. (Сгапдег С.В.) и другие, 1. Ат. Со11. СагбюЕ, 21 (4):920-5 (1993); Грайнс К. (Сппек

C. ) и другие, N. Еп§1. 1. Меб. 328:673-679 (1993)].

Факторы, обусловливающие неблагоприятный прогноз среди пациентов-диабетиков с острым инфарктом миокарда, могут действовать перед, во время и после острого приступа. К ним относится рассеянный атеросклероз коронарных сосудов, с более запущенной и обширной болезнью коронарной артерии, которая, вместе с возможной диабетической кардиомиопатией, может способствовать высокому преобладанию застойной сердечной недостаточности. Значение может иметь также и автономная невропатия с нарушенным восприятием боли и повышенными колебаниями частоты сердечных сокращений в покое. Коронарный тромб является неотъемлемой частью развивающегося инфаркта и, что примечательно, у пациентовдиабетиков было обнаружено нарушение актив ности тромбоцитов, коагуляции и фибринолитических функций. [Деви Г. (Ό;·ινί С.) и другие, 4е\\ Епд1апб 1. Меб., 322:1769-1774 (1990)].

Важную роль у диабетиков могут играть усиленные нарушения обмена веществ. Следствием инфаркта миокарда является снижение уровня инсулина в системе кровообращения, весьма существенное снижение адренергического тонуса и выделение стрессовых гормонов, например, кортизона, катехоламинов и глюкагона, которые вместе усиливают гипергликемию и стимулируют липолиз. Выделенные свободные жирные кислоты через посредство нескольких механизмов дополнительно повреждают сердечную мышцу, в то время, как избыточное окисление свободных жирных кислот, возможно, может вызывать повреждение не пораженных ишемией частей сердечной мышцы [Родригес Б. (Кобпдцек В.) и другие. Сагбюуакси1аг Кекеагсй, 26 (10):913-922 (1992)].

Необходимы паллиативные меры по нормализации уровня глюкозы в крови и контролированию метаболического каскада, который обостряет у диабетиков поражения, вызванные диабетом. В недавнем исследовании, улучшенная коррекция метаболических нарушений у пациентов-диабетиков при остром инфаркте миокарда, включая тщательно контролируемое вливание инсулина и глюкозы, а также жесткое регулирование уровней глюкозы в крови после острого приступа посредством подкожного многоразового введения инсулина, позволила снизить смертность в течение года после инфаркта миокарда на 30%, по сравнению с контрольной группой диабетиков, которым инсулин вводился лишь в случае необходимости по клиническим показаниям [Мальмберг К. и другие, 1. Ат. Со11еде Сагбю1о§у, 26:57-65 (1995)].

Вливание инсулина, однако, создает потенциальную возможность возникновения гипогликемии, которая определяется как уровень глюкозы в крови ниже 0,3 мМ. Гипогликемия повышает опасность желудочковых экстрасистолий и представляет собой опасное последствие вливания инсулина. С целью предотвращения гипогликемии был разработан алгоритм вливания инсулина для диабетиков [Хендра Т.Дж. (Непбга Т.1.) и другие, П1аЬе1ек Кек. С1т РгасЕ, 16:213-220 (1992)]. Однако, в случае применения упомянутого алгоритма, гипогликемия развилась у 21% пациентов. В другом исследовании, посвященном контролированию уровня глюкозы после инфаркта миокарда, гипогликемия развилась у 18% пациентов в случае вливания инсулина и глюкозы [Мальмберг К. А. (Ма1тЬегд К.А.) и другие, 0|аЬе1ек Саге, 17:1007-1014 (1994)].

При вливании инсулина также часто требуется контролирование уровней глюкозы в крови для того, чтобы можно было обнаружить появление признаков гипогликемии и снять их как можно быстрее. У пациентов, которым в ходе осуществления вышеупомянутого исследования [Мальмберг, 1994] производили вливание инсулина, уровни глюкозы в крови измеряли, как минимум, через каждый час и, в соответствии с этим, корректировали скорость вливания. Таким образом, безопасность и эффективность способа лечения пациентов с инфарктом миокарда посредством вливания инсулина и глюкозы зависит от простоты и скорости доступа к данным, касающимся уровня глюкозы в крови. Подобная настоятельная потребность контролирования уровня глюкозы в крови возлагает тяжелое бремя на медицинский персонал, а также повышает неудобства и стоимость лечения. Как следствие, отделения для больных сердечно-сосудистыми заболеваниями часто не выделяют ресурсов для оптимизации уровней содержания глюкозы в крови у диабетиков с острым инфарктом миокарда, что могло бы обеспечиваться посредством внутривенного введения инсулина. Учитывая опасность и нагрузки, характерные для вливания инсулина, необходим альтернативный подход к регулированию уровня глюкозы в крови во время острого инфаркта миокарда у диабетиков.

Г ормон инкретин, глюкагоноподобный пептид 1, сокращенно обозначаемый, как СЬР1, образуется из проглюкагона в желудочнокишечном тракте и усиливает выделение инсулина, индуцируемое питательными веществами [Крциманн Б. (Кгсутапп В.) и другие, Ьапсе! 2:1300-1303 (1987)]. Известно, что различные процессированные формы СЬР-1 стимулируют секретирование инсулина (инсулинотропное действие) и образование цАМФ [см., например, Мойсов С. (Μο]8θν 8.), Ιηΐ. 1. Рерйбе Рто1еш Яекеатсй, 40:333-343 (1992)]. Была установлена взаимосвязь между результатами различных лабораторных экспериментов ίη νίίτο и инсулинотропными реакциями млекопитающих, особенно людей, на экзогенное введение СЬР-1, СЬР-1(7-36) амида и СЬР-1 (7-3 7) кислоты [см., например, Наук М.А. (Иаиск М.А.) и другие, П1аЬе1о1од1а, 36:741-744 (1993); Гутняк М. (Си1шак М.) и другие. Иете Епд1апб 1. о£ Мебюше. 326 (20):1316-1322 (1992); Наук М.А. и другие, 1. С1ш. Г^ек!., 91:301-307 (1993); и Торенс Б. (Тйотепк В.) и другие, И1аЬе1е5, 42:1219-1225 (1993)]. СЬР-1(7-36) амид оказывает явно выраженное антидиабетогенное воздействие на инсулинозависимых диабетиков посредством стимулирования чувствительности к инсулину и повышения выделения инсулина, индуцированного глюкозой, в физиологических концентрациях [Гутняк М. и другие, Иете Епд1апб 1. Меб. 326:1316-1322 (1992)]. СЬР-1(7-36) амид, в случае введения инсулинонезависимым диабетикам, стимулирует выделение инсулина, снижает секретирование глюкагона, замедляет опорожнение желудка и усиливает использование глюкозы [Наук, 1993; Гутняк, 1992; Наук, 1993].

Помехой для использования молекул типа СЬР-1 для длительного лечения является то, что период полувыведения таких пептидов из системы кровообращения является весьма непродолжительным. Например, период полувыведения СЬР-1 (7-37) из системы кровообращения составляет всего лишь от 3 до 5 мин. Период полувыведения СЬР-1(7-36) амида, в случае его подкожного введения, составляет приблизительно 50 мин. Таким образом, для достижения продолжительного воздействия упомянутые молекулы СЬР должны вводиться посредством непрерывного вливания [Гутняк М. и другие, И1аЬе1е5 Саге 17:1039-1044 (1994)]. Непродолжительный период полувыведения и последующая необходимость в постоянном введении СЬР-1 не являются недостатком в данном изобретении, поскольку пациент, как правило, прикован к постели в отделении для больных сердечно-сосудистыми заболеваниями, где жидкости постоянно вводятся парентеральным путем.

Краткое изложение сущности изобретения

Настоящее изобретение предоставляет способ снижения смертности и заболеваемости после инфаркта миокарда, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения из группы, в состав которой входят СЬР-1, СЬР-1 аналоги, СЬР-1 производные и их фармацевтически приемлемые соли, в дозе, эффективной для нормализации уровня глюкозы в крови.

Настоящее изобретение обеспечивает преимущества снижения смертности и заболеваемости после инфаркта миокарда, наблюдаемые при комбинированном лечении глюкозой и инсулином у диабетиков при остром инфаркте миокарда, но без неудобной и дорогостоящей потребности в частом контролировании уровня содержания глюкозы в крови, истолкования результатов определения уровня содержания глюкозы в крови и корректирования скорости введения инсулина, а также без постоянно присутствующей опасности гипогликемии, которой сопровождается вливание инсулина.

Краткое описание рисунков

Фиг. 1 - кривая, демонстрирующая влияние непрерывного вливания СЬР-1(7-36) амида на среднюю концентрацию глюкозы в крови (мМ) (——) у пяти инсулинонезависимых пациентов, больных сахарным диабетом (ИТОИМ), в течение ночи. Упомянутая кривая также показывает влияние непрерывного вливания инсулина на среднюю концентрацию глюкозы в крови (- -О- -) у _Тех же самых пяти инсулинонезависимых пациентов-диабетиков, но в течение другой ночи.

Фиг. 2 - кривая, показывающая влияние вливания СЬР-1(7-36) амида на среднюю концентрацию глюкозы в крови (мМ) (——) у пяти инсулинонезависимых пациентов-диабетиков, при вливании его в течение дня в продолжение трех часов, начиная с момента начала каждого приема пищи во время завтрака, обеда и ужина. Упомянутая кривая показывает также влияние подкожного введения инсулина на среднюю концентрацию глюкозы в крови (*у тех же самых пяти инсулинонезависимых пациентовдиабетиков, но в течение другого дня, и с впрыскиванием незадолго до начала каждого приема пищи.

Подробное описание изобретения

СЬР-1 означает СЬР-1 (7-3 7). По традиции, принятой в данной области, аминоконечная область СЬР-1(7-37) обозначается номером 7, в то время, как карбоксиконечная - номером 37. Аминокислотная последовательность СЬР-1 (737) хорошо известна в данной области, однако, она приведена далее для удобства читателя:

ИН2-Н18⁷-А1а-61и-е1у¹⁰ТЬг-РНе-ТНг-8ег-Авр¹⁵-7а1-8ег-8ег-Туг-Ьеи²⁰О1и -С1у-С1п- А1а-А1а²⁵-Ьув-В1и-РЬе-11е-А1а³⁰Тгр - Ьеи - Уа1 - Ьув -С1у^{3 5}- Агд -В1у^{3 7}- СООН (Последовательность № 1)

СЬР-1 аналог определяется, как молекула, имеющая одну или несколько аминокислотных замен, делеций, инверсий либо добавок, по сравнению с СЬР-1. К числу СЬР-1 аналогов, известных в данной области, относятся, например, СЬР-1(7-34) и СЬР-1(7-35), СЬР-1(7-36), С1п⁹-СЬР-1(7-37), 1)-6111-СЕР-1(7-37), ТЬг¹⁶Ьуз¹⁸-СЬР-1(7-37) и Ьуз¹⁸-СЬР-1(7-37). Предпочтительными СЬР-1 аналогами являются СЬР-1(7-34) и СЬР-1(7-35), которые раскрываются в патенте США № 5118666, включенном в настоящее описание в качестве ссылки, а также СЬР-1(7-36), которые представляют собой биологически процессированные формы СЬР-1, обладающие инсулинотропными свойствами. Другие СЬР-1 аналоги раскрываются в патенте США № 5545618, который включен в настоящее описание в качестве ссылки.

СЬР-1 производное определяется, как молекула, имеющая аминокислотную последовательность СЬР-1 либо СЬР-1 аналога, но, дополнительно, имеющая химическую модификацию одной или нескольких своих аминокислотных боковых групп, атомов α-углерода, конечной аминогруппы либо конечной карбокислотной группы. Химическая модификация включает, но, однако, этим не ограничивается, добавку химических составляющих, образование новых связей и удаление химических составляющих. Модификации аминокислотных боковых групп включают, без ограничения, ацилирование лизиновых ε-аминогрупп, Ν-алкилирование аргинина, гистидина либо лизина, алкилирование глутаминовых либо аспарагиновых карбокислотных групп и деамидирование глутамина либо аспарагина. К модификациям конечных аминогрупп относятся, без ограничения, модификации дезаминогрупп, Ν-низших алкиловых, Νди-низших алкиловых и Ν-ацильных групп. К модификациям конечных карбоксильных групп относятся, без ограничения, модификации амидных, низших алкиламидных, диалкиламидных групп и низшего алкилового эфира. Низшим алкилом является С1-С₄алкил. Более того, одна либо несколько боковых групп либо конечных групп, могут защищаться с помощью защитных групп, известных среднему химикуспециалисту по белкам. α-углерод аминокислоты может быть моно- либо диметилированным.

В состав предпочтительной группы СЬР-1 аналогов и производных, предназначенных для использования в настоящем изобретении, входят молекулы приведенной далее формулы:

Н1-Х-<31и-Н1уЮТЬг-РНе-Т11Г-8ег-А8р¹⁵-Уа1-8ег-8ег-Туг-Ьеи²⁰Υ -61у-В1п-А1а-А1а²⁵-Ьуа- Ζ -РИе-11е-А1а³⁰Тгр-Ьеи-Уа1-Ьув-С1у³⁵-Агд-На (Последовательность № 2) и их фармацевтически приемлемые соли, где К выбирают из группы, в состав которой входит Ь-гистидин, Ό-гистидин, дезаминогистидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, альфа-фторметилгистидин и альфа-метилгистидин; Х выбирают из группы, в состав которой входит А1а, С1у, Уа1, ТЬг. 11е и альфа-метил-А1а; Υ выбирают из группы, в состав которой входит С1и, С1п, А1а, ТЬг, 8ет и С1у; Ζ выбирают из группы, в состав которой входит С1и, С1п, А1а, ТЬг, 8ет и С1у; и К₂ выбирают из группы, в состав которой входит ΝΗ₂ и С1у-ОН; при условии, что упомянутое соединение имеет изоэлектрическую точку в пределах, приблизительно, от 6,0, приблизительно, до 9,0, а также, дополнительно, при условии, что когда К₁ - ΗΪ8, Х - А1а, Υ - С1и, и Ζ - С1и, К₂ должен быть ΝΗ2.

Многочисленные СЬР-1 аналоги и производные, имеющие изоэлектрическую точку в этом диапазоне, были раскрыты и включают, например

ОЬР-1 (7-36}ΝΗ2

61у⁸-6ЬР-1 (7-361ΝΗ2

В1п⁹-ВЬР-1 (7-37) П-В1п⁹-6ЬР-1 (7-37) асееу1-Ьув⁹-ВЬР-1 (7-37) ТНг⁹-НЬР-1 (7-37) Ц-ТЬг⁹-6ЬР-1 (7-37) Авп⁹-СЬР-1 (7-37) О-Авп⁹-6ЬР-1 (7-37) Зег²²-Агд^{2 3} - Агд²⁴-В1п^{2 6} -СЬР -1 (7-37) ТЬг¹⁶-Ьув¹⁸-ВЬР-1 (7-37) Ьуз¹⁸-ВЬР-1 (7-37) Агд²³-6ЬР-1 (7-37) Агд²⁴-ОЬР-1 (7-37) и т.п. [см., например, \¥О 91/11457].

Следующая предпочтительная группа активных соединений для использования в настоящем изобретении раскрывается в международной заявке XVО 91/11457 и включает, по существу, СЬР-1(7-34), СЬР-1(7-35), ОЬР-1 (7-36) либо СЬР-1(7-37), или же их амидную форму, а также их фармацевтически приемлемые соли, имеющие, как минимум, одну модификацию, выбранную из группы, включающей (a) замену лизина глицином, серином, цистеином, треонином, аспарагином, глутамином, тирозином, аланином, валином, изолейцином, лейцином, метионином, фенилаланином, аргинином либо Ό-лизином в положении 26 и/либо в положении 34; или же замену аргинина глицином, серином, цистеином, треонином, аспарагином, глутамином, тирозином, аланином, валином, изолейцином, лейцином, метионином, фенилаланином, лизином либо Ό-аргинином в положении 36;

(b) замену триптофана устойчивой к окислению аминокислотой в положении 31;

(c) замену, как минимум, одного из: валина тирозином в положении 16;

серина лизином в положении 18; глутаминовой кислоты аспарагиновой кислотой в положении 21; глицина серином в положении 22; глутамина аргинином в положении 23; аланина аргинином в положении 24; и лизина глутамином в положении 26; и (ά) замену, как минимум, одного из: аланина глицином, серином либо цистеином в положении 8; глугаминовой кислоты аспарагиновой кислотой, глицином, серином, цистеином, треонином, аспарагином, глутамином, тирозином, аланином, валином, изолейцином, лейцином, метионином либо фенилаланином в положении 9; глицина серином, цистеином, треонином, аспарагином, глутамином, тирозином, аланином, валином, изолейцином, лейцином, метионином либо фенилаланином в положении 10; и аспарагиновой кислоты глугаминовой кислотой в положении 15; и (е) замену гистидина глицином, серином, цистеином, треонином, аспарагином, глутамином, тирозином, аланином, валином, изолейцином, лейцином, метионином либо фенилаланином, или Ό- или Ν-ацилированной или алкилированной формой гистидина в положении 7; где в заменах (а), (Ь), (ά) и (е) упомянутые замещенные аминокислоты могут, факультативно, быть в Ό-форме, а аминокислоты, замещенные в положении 7, могут, факультативно, быть в Νацилированной либо Ν-алкилированной форме.

Поскольку фермент дипептидил-пептидаза IV (ΌΡΡ IV) может нести ответственность за наблюдаемую ускоренную инактивацию ίη νίνο введенного ΟΕΡ-1, [см., например, Ментлайн Р. (МепИеш К.) и другие, Еиг. 1. Вюсйет., 214:829835 (1993)], предпочтительным является введение СЬР-1 аналогов и производных, защищенных от воздействия ΌΡΡ IV, в то время как более предпочтительным является введение С1у⁸6ΕΡ-1(7-36)ΝΗ2, V αΓ-(.ι1.Ρ-1(7-37)ΘΙ [. а-метилΛ1;·ι⁸-ΟΕΡ-1(7-36)ΝΗ2 и СПу ⁸-СИ1Г-СП ,Ρ-1(737)ΟΗ либо их фармацевтически приемлемых солей.

Предпочтительным является использование в настоящем изобретении молекулы, заявленной в патенте США № 5188666, который включен в настоящее описание в качестве ссылки. Такую молекулу выбирают из группы, в состав которой входит пептид, имеющий представленную далее аминокислотную последовательность

НН2-Н1з⁷-А1а-(31и-С1у10. ТЬг-РЬе-ТЬг-Зег-Аар¹⁵-Уа1-Зег-Зег-Туг-Ьеи²⁰С1и-31у-<31п-А1а-А1а²⁵-Ьув-С1и-₽Ье-11е-А1а³⁰Тгр-Цеи-Уа1-Х (Последовательность № 3), где Х выбирают из группы, в состав которой входит Ьук и Ьу8-С1у; и производное упомянутого пептида, где упомянутый пептид выбирают из группы, в состав которой входит: фармацевтически приемлемая соль упомянутого пептида, полученная добавлением кислоты; фармацевтически приемлемая карбоксилатная соль упомянутого пептида; фармацевтически приемлемый низший алкиловый эфир упомянутого пептида; и фармацевтически приемлемый амид упомянутого пептида, выбранный из группы, в состав которой входит амид, низший алкиламид и низший диалкиламид.

В состав другой предпочтительной группы молекул, предназначенных для использования в настоящем изобретении, входят соединения, заявленные в патенте США № 5512549, который включен в настоящее описание в качестве ссылки, имеющие общую формулу

Н¹-А1а-С1и-е1уЮ_ ТНг- РНе - Т11Г- Зег-Авр¹³ -Уа1 - Зег - Зег - Туг - Ьей²⁰ О1и-С1у-а1п-А1а-А1а²⁵-Хаа-О1и-РЬе-11е-А1а30Тгр-Ьеи -Уа1 -Ьув -<31у³ 5 -дгд-нЗ

I я» (Последовательность № 4) и их фармацевтически приемлемые соли, где К¹выбирают из группы, включающей 4имидазопропионил, 4-имидазоацетил либо 4имидазо-а,а-диметилацетил; К² выбирают из группы, включающей С6-С40 неразветвленный ацил, либо он отсутствует; К³ выбирают из группы, включающей С1у-ОН либо ΝΗ2; и Хаа Ьук либо Агд.

Более предпочтительными соединениями последовательности № 4 для использования в настоящем изобретении являются соединения, где Хаа - Агд и К² - С₆-С₁₀ неразветвленный ацил.

Весьма предпочтительными соединениями последовательности № 4 для использования в настоящем изобретении являются соединения, где Хаа - Агд, К² - С₆-С1₀ неразветвленный ацил и К³ - С1у-ОН.

Более предпочтительными соединениями последовательности № 4 для использования в настоящем изобретении являются соединения, где Хаа - Агд, В² - С₆-Сю неразветвленный ацил, В³ - С1у-ОН и В¹ - 4-имидазопропионил.

Наиболее предпочтительным соединением последовательности № 4 для использования в настоящем изобретении является соединение, где Хаа - Агд, В² - С₈ неразветвленный ацил, В³ С1у-ОН и В¹ - 4-имидазопропионил.

Весьма предпочтительным является использование в настоящем изобретении молекулы, заявленной в патенте США № 5120712, который включен в настоящее описание в качестве ссылки. Такую молекулу выбирают из группы, в состав которой входит пептид, имеющий представленную далее аминокислотную последовательность

ИН₂-Н1б⁷-А1а-С1и-О1у10ТЪг-РНе-ТЬг-8ег-Авр¹⁵-'Уа1-8ег-8ег-Туг-Ьеи²⁰С1и-(31у-(31п-А1а-А1а²⁵-Ьу8-С1и-РЬе-11е-А1а³⁰Тгр-Ьеи-Уа1-Ьу8-С1у³⁵-Агд-С1у³⁷-С00Н (Последовательность № 1) и производное упомянутого пептида, где упомянутый пептид выбирают из группы, включающей: фармацевтически приемлемую соль упомянутого пептида, полученную добавлением кислоты; фармацевтически приемлемую карбоксилатную соль упомянутого пептида; фармацевтически приемлемый низший алкиловый эфир упомянутого пептида; и фармацевтически приемлемый амид упомянутого пептида, выбранный из группы, включающей амид, низший алкиламид и низший диалкиламид.

Наиболее предпочтительным является использование в настоящем изобретении СЬР-1(736) амида либо его фармацевтически приемлемой соли. Аминокислотная последовательность СЬР-1(7-36) амида выглядит следующим образом:

ЦН2-Н1в⁷-А1а-С1и-О1уЮТНг-РЬе-ТЬг-8ег-Авр¹⁵-Уа1-8ег-8ег-Туг-Ьеи²⁰<31и-В1у-В1п-А1а-А1а²⁵-Ьуз-С31и-РЬе-11е-А1а³⁰Тгр -Ьеи-Уа1-Ьув -61у^{3 5}-Агд-ЫН₂ (Последовательность № 5).

Способы получения упомянутого активного соединения, использованного в настоящем изобретении, а именно, СЬР-1, СЬР-1 аналога либо СЬР-1 производного, использованного в настоящем изобретении, хорошо известны и описаны в патентах США №№ 5118666, 5120712 и 5523549, которые включены в настоящее описание в качестве ссылки.

Аминокислотную часть упомянутого активного соединения, использованного в настоящем изобретении, либо ее предшественника, получают 1) химией твердофазного синтеза;

2) очисткой СЬР молекул из природных источников; либо 3) технологией рекомбинантных ДНК.

Твердофазный химический синтез полипептидов хорошо известен в настоящей области и его описание можно найти в учебниках по данной области, см., например, Дагес Г. (Видак

H. ) и Пенни К. (Реппеу С.), Вюогдашс СНепйк1гу. издательство 8рппдег-Уег1ад, Нью-Йорк (1981), стр. 54-92, Меррифилд Дж.М. (МеггШе1й

I. М.), Обет. 8ос., 85:2149 (1962), а также Стюарт (81е\\'аг1) и Янг (Уоипд), 8обй РЬаке Рерййе 8уп(йек1к, издательство Ргеетап, СанФранциско (1969), стр. 24-66.

Аминокислотная часть, например, может быть синтезирована по твердофазной методике с использованием синтезатора пептидов 430А (компания РЕ-Аррбей Вюкук1етк. 1пс., 850 Ьшсо1п Сеп(ег Опте. Фостер Сити, Калифорния 94404) и синтетических циклов, поставляемых компанией РЕ-Аррбей Вюкук1етк. Биохимические аминокислоты и другие реактивы коммерчески доступны от компании РЕ-Аррбей Вюкук1етк и других компаний, занимающихся химическими поставками. К исходным р-метилбензгидриламиновым смолам с целью получения С-конечных карбоксамидов применяют биохимические методы секвенирования с использованием протоколов двойных пар. Для получения С-конечных кислот используют соответствующие полиакриламидные смолы. Акп, С1п и Агд соединяют, используя предварительно полученные гидроксибензотриазоловые эфиры. Могут быть использованы приведенные далее защитные группы боковых цепей:

Агд, тозил

Акр, циклогексил

С1и, циклогексил 8ег, бензил ТЬг, бензил

Туг, 4-бромкарбобензокси

Лишение защитных свойств биохимическими методами может осуществляться с помощью трифторуксусной кислоты в метиленхлориде. После завершения синтеза, упомянутые пептиды могут лишаться защитных свойств и отщепляться от смолы с помощью безводного фтороводорода (НР), включающего 10% метакрезола. Отщепление упомянутой защитной группы (групп) боковых цепей и упомянутого пептида от смолы осуществляется при температуре от -5 до 5°С, в предпочтительном варианте, на льду, в течение 60 мин. После удаления фтороводорода, упомянутый пептид/смолу промывают эфиром, пептид экстрагируют ледяной уксусной кислотой и лиофилизируют.

Для получения активного соединения, используемого в настоящем изобретении, могут применяться способы, хорошо известные рядовому специалисту в области технологии рекомбинантных ДНК. Фактически, способам рекомбинантных ДНК может отдаваться предпочтение по причине более высокого выхода. Основными этапами получения рекомбинантной продукции являются следующие:

а) выделение естественной последовательности ДНК, кодирующей молекулу СЬР-1, либо конструирование синтетической или полусинте тической кодирующей последовательности ДНК для молекулы ОЬР-1,

b) введение упомянутой кодирующей последовательности в экспрессирующий вектор с помощью способа, пригодного для экспрессии белков либо самостоятельно, либо в виде слитых белков,

c) трансформация соответствующей эукариотической либо прокариотической клеткихозяина с помощью упомянутого экспрессирующего вектора,

б) культивирование упомянутой трансформированной клетки-хозяина в условиях, обеспечивающих возможность экспрессии молекулы ОЬР-1, и

е) выделение и очистка рекомбинантно продуцированной молекулы ОЬР-1.

Как указывалось ранее, упомянутые кодирующие последовательности могут быть полностью синтетическими либо результатом модификаций более крупной нативной ДНК, кодирующей глюкагон. Последовательность ДНК, кодирующей предпроглюкагон, представлена в работе Ланда (Ьииб) и других, Ргос. Νπΐΐ Асаб 8ск И.8.А. 79:345-349 (1982), и она может быть использована в качестве исходного материала при полусинтетическом продуцировании соединений, соответствующих настоящему изобретению, путем изменения нативной последовательности с целью достижения необходимых результатов.

Синтетические гены, следствием транскрипции и трансляции которых ίη νίίτο или ίη νίνπ является продуцирование молекулы ОЬР-1, могут конструироваться способами, хорошо известными в данной области. Опытному специалисту понятно, что, вследствие естественного вырождения упомянутого генетического кода, может быть получено значительное, но, тем не менее, определенное количество последовательностей ДНК, все из которых будут кодировать молекулу ОЬР-1.

Методика конструирования синтетического гена хорошо известна в данной области. См. Браун (Βτο^η) и другие, (1979) Мебюбк ίη Εηζνιηοίοβν. издательство Асабешк Ргекк, НьюЙорк, 68:109-151. Упомянутая последовательность ДНК программируется из необходимой аминокислотной последовательности с помощью генетического кода, который легко устанавливается рядовым биологом. После завершения программирования сама упомянутая последовательность может продуцироваться с помощью традиционного устройства для синтезирования ДНК, например, синтезаторов ДНК модели 380А либо 380В (компания РЕ-Аррбеб Βίοкук1ешк, 1пс., 850 6ίικο1η СегИег Элуе, Фостер Сити, Калифорния 94404).

Для экспрессии упомянутой аминокислотной части соединения, используемого в настоящем изобретении, последовательность синтетической ДНК, полученной методами генной ин женерии, встраивается в один из многих подходящих экспрессирующих векторов на основе рекомбинантных ДНК с помощью соответствующих рестриктаз. См., в общем, Маниатис (Машабк) и другие (1989) ΜοΚαιΕίΓ Οοηίη§; А ΕτώοηΙοίΎ Маша1, издательство Со1б δρτίη^δ НатЮт ^аЬο^аΐο^у Ргекк, Нью-Йорк, том 1-3. Сайты рестриктазного расщепления встраиваются в любой конец ДНК, кодирующей молекулу ОЬР-1, для облегчения выделения из/включения в амплифицирующие и экспрессирующие векторы, хорошо известные в данной области. Конкретные использованные эндонуклеазы будут определяться характером рестриктазного расщепления исходного использованного экспрессирующего вектора. Рестрикционные сайты выбираются для правильного ориентирования упомянутой кодирующей последовательности относительно контрольных последовательностей для обеспечения, тем самым, соответствующего внутрирамочного считывания и экспрессии необходимого белка. Упомянутая кодирующая последовательность должна позиционироваться таким образом, чтобы оказаться в соответствующей рамке считывания с промотором и сайтом связывания рибосом упомянутого экспрессирующего вектора, которые функционируют в упомянутой клетке-хозяине, в которой должен быть экспрессирован упомянутый белок.

Для обеспечения эффективной транскрипции упомянутого синтетического гена, его необходимо функционально связать с областью промотора-оператора. Таким образом, упомянутая область промотора-оператора упомянутого синтетического гена размещается с такой же самой последовательной ориентацией относительно инициирующего кодона АТС упомянутого синтетического гена.

В данной области известны различные экспрессирующие векторы, пригодные для трансформации прокариотических и эукариотических клеток. См., например, Тбе Ргошеда ΒίοΙοβίοΒΐ Кекеагсб Ргобисй Са!^^ (1992) (компания Ргошеда Согр., 2800 ^οο6κ Ηο11ο\ν Клаб, Медисон, Висконсин, 53711-5399); и Тбе БйаФдепе Οοηίη§ 8ук1ешк Саΐа1οдие (1992) (компания 81га1аде1те ^тр., 11011 Νοτί6 Τοπό\· Ршек Κο36, Ьа ίοΐΐπ, Калифорния, 92037). Кроме того, в патенте США № 4710473 описываются векторы трансформации плазмиды кольцевой ДНК, пригодные для экспрессии экзогенных генов Е. сο1^ на высоких уровнях. Эти плазмиды пригодны в качестве трансформирующих векторов в методах рекомбинантных ДНК и (a) наделяют упомянутую плазмиду способностью к автономной репликации в клеткехозяине;

(b) контролируют автономную репликацию плазмиды в зависимости от температуры, при которой поддерживаются культуры клеткихозяина;

(с) стабилизируют обеспечение жизнедеятельности упомянутой плазмиды в популяциях клетки-хозяина;

(6) направляют синтез белкового продукта, свидетельствующего о жизнедеятельности плазмиды в популяции клетки-хозяина;

(е) обеспечивают последовательные сайты распознавания рестриктаз, характерные для упомянутой плазмиды; и (1) завершают транскрипцию мРНК.

Упомянутые плазмиды кольцевой ДНК пригодны для использования в качестве векторов в методах рекомбинантных ДНК для обеспечения высоких уровней экспрессии экзогенных генов.

Следующим этапом после завершения конструирования экспрессирующего вектора для аминокислотной части соединения, используемого в настоящем изобретении, является введение упомянутого вектора в подходящую клетку и, тем самым, конструирование рекомбинантной клетки-хозяина, пригодной для экспрессирования упомянутого полипептида. Способы трансформации клеток векторами на основе рекомбинантных ДНК хорошо известны в данной области и их описание может быть найдено в таких общих справочных пособиях, как Маниатис и другие, см. ранее. Клетки-хозяева могут конструироваться как из эукариотических, так и из прокариотических клеток.

Прокариотические клетки-хозяева, в общем, продуцируют упомянутый белок с более высокой скоростью и легче культивируются. Белки, экспрессированные высокоуровневыми бактериальными экспрессирующими системами, агрегируются, что является их характерной особенностью, в виде гранул либо внутриклеточных телец, которые содержат высокие уровни сверхпродуцированного белка. Подобные белковые скопления, как правило, должны выделяться, растворяться, денатурироваться и повторно укладываться с помощью способов, хорошо известных в данной области. См. Крюгер (Кгеидег) и другие (1990) в Рго(еш Ροϊάίη^, под редакцией Гираш (С1егаксй) и Кинг (Кшд), стр. 136-142, Атепсап ΛδδοααΙίοη 1οг (Не Лбгапсетеп( οί 8с1епсе РиЬ11са(юп № 89-188, Вашингтон, округ Колумбия; и патент США № 4923967.

Изменения аминокислотной последовательности-предшественника СБР-1 либо СБР-1 аналога для получения необходимого СБР-1 аналога либо СБР-1 производного, осуществляются с помощью хорошо известных способов: химическая модификация, ферментативная модификация либо сочетание химической и ферментативной модификации предшественников СБР-1. Классические способы жидкофазного синтеза и полусинтетические способы также могут быть пригодными для получения молекул СБР-1, используемых в настоящем изобретении. Способы получения молекул СБР-1, соответст вующих настоящему изобретению, хорошо известны рядовому химику-специалисту по белкам.

Добавка ацильной группы к эпсилонт 34 аминогруппе Бук может осуществляться с помощью любого из многочисленных способов, известных в данной области. См. Вю^и^ай СНет. Сйет1са1 Μοάί&αύοηδ οί Рго(етк: НίκЮгу апб Арр11са(юпк, страницы 1, 2-12 (1990) и Хашимото (НакЫптоЮ) и другие, Р11агтасеиОса1 Век. 6 (2):171-176 (1989).

Например, к лизил-эпсилон-амину, с помощью 50% ацетонитрила в боратном буфере, может добавляться Ν-гидроксисукцинимидный эфир октановой кислоты. Упомянутый пептид может ацилироваться перед либо после добавки упомянутой имидазольной группы. Более того, если упомянутый пептид получают методами рекомбинантных ДНК, ацилирование может быть осуществлено перед ферментативным расщеплением. Кроме того, лизин в СБР-1 производном может быть ацилирован, как описано в международной заявке XVО 96-29342, которая включена в настоящее описание в качестве ссылки.

В данной области описано существование и получение множества защищенных, незащищенных и частично защищенных, естественных и искусственных функциональных аналогов и производных СБР-1 (7-36) амида и молекул СБР-1(7-37) [см., например, патенты США №№ 5120712 и 5118666, которые включены в настоящее описание в качестве ссылки, и Орсков К. (ΟτκΓον С.) и другие, 1. Βίο1. СНет., 264 (22): 12826-12829 (1989), а также νΟ 91/11457 (Бакли Д.И. (Виск1еу Ό.Ι.) и другие, опубликованный 8 августа 1991г.)].

Факультативно, могут защищаться амино и карбоксильные конечные аминокислотные остатки СБР-1 производных либо, факультативно, защищается только одна из конечных областей. Описание реакций образования и удаления таких защитных групп приведено в стандартных работах, в том числе, например, в Рго1есОте Сгоирк ш Ощашс Сйетгейу, издательство Р1епит Ргекк, Лондон и Нью-Йорк (1973); Грин Т.Г. (Сгееп Т.Н.), Рго(ес(ще Сгоирк т Огдашс 8уп(йе515, издательство ΧνίΠ\·, Нью-Йорк (1981); и ТНе Рерйбек, том I, 8сйги6ег и ЫЬке, издательство Асабепнс Ргекк, Лондон и НьюЙорк (1965). К числу репрезентативных аминозащитных групп относятся, например, формил, ацетил, изопропил, бутоксикарбонил, флуоренилметоксикарбонил, карбобензилокси и т. п. К числу репрезентативных карбоксизащитных групп относятся, например, бензиловый эфир, метиловый эфир, этиловый эфир, (-бутиловый эфир, р-нитрофениловый эфир и т.п.

Карбоксиконечные, низшие алкилоэфирные СБР-1 производные, используемые в настоящем изобретении, получают в результате реакции необходимого (С1-С4)алканола с необ ходимым полипептидом в присутствии каталитической кислоты, например хлористоводородной кислоты. Подходящими условиями для упомянутого получения алкилового эфира являются следующие: температура реакции приблизительно 50°С и продолжительность реакции от приблизительно 1 ч до приблизительно 3 ч. Подобным же образом могут быть получены алкилэфирные производные Акр и/или С1и остатков.

Получение карбоксамидного производного соединения, используемого в настоящем изобретении, осуществляется, например, как описано у Стюарта Дж.М. (81е\\'аг1 1.М.) и других. δοϊίά Рйаке Рерйбе 8уи1Ье515, издательство Р1егсе С11сш1са1 Сотрапу Ргекк, 1984.

В настоящем исследовании может использоваться фармацевтически приемлемая солевая форма СЬР-1, СЬР-1 аналога либо СЬР-1 производного. Кислотами, традиционно используемыми для получения солей, получаемых добавлением кислоты, являются неорганические кислоты, например хлористо-водородная кислота, бромисто-водородная кислота, иодистоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и т.п., и органические кислоты, например, р-толуолсульфоновая кислота, метансульфоновая кислота, щавелевая кислота, рбромфенилсульфоновая кислота, угольная кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, уксусная кислота и т.п. Примерами таких солей являются сульфат, пиросульфат, бисульфат, сульфит, бисульфит, фосфат, моногидрогенфосфат, дигидрогенфосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, иодид, ацетат, пропионат, деканоат, каприлат, акрилат, формиат, изобутират, капроат, гептаноат, пропиолат, оксалат, малонат, сукцинат, суберат, себацат, фумарат, малеат, бутин-1,4-диоат, гексин-1,6-диоат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, фталат, сульфонат, ксилолсульфонат, фенилацетат, фенилпропионат, фенилбутират, цитрат, лактат, гамма-гидроксибутират, гликолят, тартрат, метансульфонат, пропансульфонат, нафталин-1-сульфонат, нафталин-2-сульфонат, манделат и т. п. Предпочтительными солями, полученными добавлением кислоты, являются соли, полученные с помощью минеральных кислот, например хлористо-водородной кислоты и бромисто-водородной кислоты, и особенно хлористо-водородной кислоты.

К числу солей, полученных добавлением оснований, относятся соли, полученные из неорганических оснований, например аммония либо гидроксидов, карбонатов, бикарбонатов щелочных либо щелочно-земельных металлов и т.п. Таким образом, к числу таких оснований, пригодных для получения солей, соответствующих настоящему изобретению, относятся гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид аммония, карбонат калия и т.п. Особо предпочтительными являются солевые формы.

СЬР-1, СЬР-1 аналог либо СЬР-1 производное, используемые в настоящем изобретении, перед использованием в настоящем изобретении могут вводиться в состав лекарственной формы с одним или несколькими наполнителями. Например, упомянутое активное соединение, используемое в настоящем изобретении, может образовывать комплексное соединение с двухвалентным катионом металла с помощью хорошо известных способов. К подобным катионам металлов относятся, например, Ζη , Мп⁺⁺, Ре⁺⁺, Со⁺⁺, Сб . \1- и т.п.

Факультативно, упомянутое активное соединение, используемое в настоящем изобретении, может сочетаться с фармацевтически приемлемым буфером с регулированием рН для обеспечения приемлемой устойчивости и его пригодности для парентерального введения.

Факультативно, может добавляться одно или несколько фармацевтически приемлемых антимикробных средств. Предпочтительными фармацевтически приемлемыми антимикробными средствами являются метакрезол и фенол. Может добавляться одна или несколько фармацевтически приемлемых солей для регулирования ионной силы либо тоничности. Для дополнительного регулирования изотоничности упомянутой лекарственной формы может добавляться один либо несколько наполнителей. Примером наполнителя, регулирующего изотоничность, является глицерин.

Введение может осуществляться любым путем, эффективность которого известна рядовому врачу. Предпочтение отдается парентеральному введению. Под парентеральным введением в медицинской литературе традиционно понимается впрыскивание дозированной лекарственной формы в организм с помощью стерильного шприца или какого-либо иного механического приспособления, например, инфузионного насоса. Парентеральными путями введения являются внутривенный, внутримышечный, подкожный, внутрибрюшинный, интраспинальный, подоболочечный, интрацеребровентрикулярный, внутриартериальный, субарахноидальный и эпидуральный. Более предпочтительными путями введения упомянутых соединений, используемых в настоящем изобретении, являются внутривенный, внутримышечный и подкожный. Еще более предпочтительными путями введения соединений, используемых в настоящем изобретении, являются внутривенный и подкожный. Для парентерального введения, активное соединение, используемое в настоящем изобретении, в предпочтительном варианте, сочетается с дистиллированной водой с соответствующим рН.

Дополнительные фармацевтические способы могут использоваться для контролирования длительности действия. Препараты с кон17 тролируемым выделением могут быть получены посредством использования полимеров для образования комплексных соединений либо абсорбирования упомянутого активного соединения, используемого в настоящем изобретении. Продленное терапевтическое воздействие может обеспечиваться посредством выбора подходящих макромолекул, например, полиэфиров, полиаминокислот, поливинилпирролидона, этиленвинилацетата, метилцеллюлозы, карбоксиметилцеллюлозы либо протаминсульфата, а также посредством подбора концентрации макромолекул и способов включения с целью пролонгирования выделения. Другим возможным способом увеличения продолжительности действия препаратов контролируемого выделения является включение активного соединения, используемого в настоящем изобретении, в частицы полимерного материала, например, полиэфиров, полиаминокислот, гидрогелей, полимера молочной кислоты либо сополимеров этилена и винилацетата. В альтернативном варианте, вместо включения соединения в упомянутые полимерные частицы, возможно заключение соединения, используемого в настоящем изобретении, в микрокапсулы, полученные, например, коацервативными способами либо межфазной полимеризацией, например, гидроксиметилцеллюлозы, либо в желатиновые микрокапсулы, соответственно, либо в коллоидные системы доставки лекарственного препарата, например, липосомы, альбуминовые микросферы, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы, либо в макроэмульсии. Подобные способы раскрываются в Веш1пд1оп'8 Рйагтасеийса1 8с1спсс5 (1980).

Диагноз инфаркт миокарда ставится по медицинским показаниям на основании, как правило, обнаружения, как минимум, двух из представленных далее симптомов и показаний:

1) боль в грудной клетке, длящаяся, как минимум, 15 мин;

2) наличие, как минимум, двух стандартных значений содержания креатинкиназы и креатинкиназы В в сыворотке, которые имеют, как минимум, два стандартных отклонения от нормального диапазона в течение 10-16 ч после появления симптомов;

3) наличие двух или более стандартных уровней содержания лактатдегидрогеназы в сыворотке, имеющих, как минимум, два стандартных отклонения от нормального диапазона в течение 48-72 ч после появления симптомов, включая изоэнзиматическую картину, типичную для инфаркта миокарда; и

4) развитие новых зубцов О и/или увеличение исходных зубцов 8Т после инверсии зубца Т в, как минимум, двух из двенадцати стандартных отведений ЭКГ.

Острая фаза инфаркта миокарда приходится на первые 72 ч после появления симптомов либо показаний, описание которых было приве дено ранее. Способ лечения, который является предметом настоящего изобретения, применяется в течение острой фазы инфаркта миокарда, т. е. при остром инфаркте миокарда.

Пациентом, нуждающимся в соединениях, используемых в настоящем изобретении, является пациент, находящийся в острой фазе инфаркта миокарда, и который также неспособен к саморегулированию уровня содержания глюкозы в крови. Пациент неспособен к саморегулированию, если у него: 1) ранее был диагностирован инсулинозависимый диабет (ΙΌΌΜ) либо инсулинонезависимый диабет (ΝΊΌΌΜ), согласно определению Национальной группы по сбору данных, касающихся диабета |Э|аЬе1е5. 28:1039-1057 (1979)]; 2) уровень содержания глюкозы в крови превышает 11 ммоль/л, даже без предшествующего диагностирования диабета; либо 3) наблюдается аномальная толерантность к глюкозе.

Доза ОЬР-1, ОЬР-1 аналога либо ОЬР-1 производного, эффективная в отношении нормализации уровня глюкозы в крови пациента, будет зависеть от ряда факторов, к которым относятся, без ограничения, пол, масса и возраст пациента, степень неспособности регулировать уровень глюкозы в крови, первопричины любой неспособности регулировать уровень глюкозы в крови, в случае одновременного введения глюкозы либо иного источника углевода, путь введения и биодоступность, персистирование в организме, лекарственная форма и эффективность введенного соединения. В случае непрерывного введения подходящая скорость введения составляет приблизительно от 0,25 пмоль/кг массы тела/мин до 6 пмоль/кг массы тела/мин, в предпочтительном варианте приблизительно от 0,5 пмоль/кг/мин до 1,2 пмоль/кг/мин. В случае периодического введения, при определении дозы, предназначенной для введения, необходимо учитывать промежуток времени между дозами, биодоступность ОЬР-1, ОЬР-1 аналога либо ОЬР-1 производного и количество, необходимое для обеспечения нормального уровня глюкозы в крови. Определение дозы и скорости введения ОЬР-1, ОЬР-1 аналога либо ОЬР-1 производного для достижения необходимого клинического результата находится в пределах возможностей рядового врача.

Настоящее изобретение будет более понятным со ссылкой на конкретные примеры, которые приведены для иллюстрирования, а не для ограничения настоящего изобретения.

Пример 1.

ОЬР-1(7-36) амид вводили путем подкожного вливания со скоростью 1,2 пмоль/кг/ч в течение 10 ночных часов пяти пациентам, страдающим инсулинонезависимым диабетом (ΝΙΌΌΜ). В качестве контроля инсулин непрерывно вливали тем же самым пяти пациентам, однако, не в те дни, в которые производилось вливание ОЬР-1 (7-3 6) амида. Скорость влива ния инсулина корректировали каждые два часа для обеспечения оптимального контроля и во избежание гипогликемии. Как показывают данные, представленные в табл. 1 и на фиг. 1, подкожное вливание СЬР-1(7-36) амида почти нормализовало уровень глюкозы в крови, не вызвав гипогликемии ни у одного из пациентов. Контролирование обмена веществ, осуществлявшееся с помощью СЬР-1(7-3 6) амида, давало лучшие результаты, чем в случае применения инсулина, и средний уровень глюкозы в крови был ниже в случае обработки СЬР-1(7-36) амидом, по сравнению с контролем статистически значимым количеством инсулина в 23:00, 0:00 и 1:00.

Таблица 1

Средние уровни глюкозы в крови у пяти ΝΙΌΌΜ пациентов, которым в течение 10 ночных часов непрерывно вливали СЬР-1(7-36) амид. В ходе осуществления контрольного исследования с теми же самыми пациентами в другой день, путем непрерывного вливания вводили инсулин.

Часы	Вливание СЬР-1	Вливание инсулина (контроль)
Средний уровень глюкозы в крови, мМ	Стандартная погрешность, мМ	Средний уровень глюкозы в крови, мМ	Стандартная погрешность, мМ
21:00	7,5	0,45	6,9	0,68
22:00	5,4	0,76	6,6	0,55
23:00	4,1	0,16	5,9	0,98
0:00	4,4	0,23	5,6	0,90
1:00	4,4	0,29	5,1	0,58
2:00	4,8	0,34	5,2	0,58
3:00	5,2	0,41	5,4	0,30
4:00	5,4	0,41	5,7	0,25
5:00	5,8	0,41	6,0	0,30
6:00	6,0	0,45	6,1	0,38
7:00	6,2	0,45	6,1	0,33

Пример 2.

В течение дня СЬР-1(7-36) амид вливали пяти ΝΙΌΌΜ пациентам в течение 3 ч во время завтрака, обеда и ужина. Время вливания (как указано на фиг. 2): 7:30-10:30 (завтрак), 10:301:30 (обед) и 4:30-7:30 (ужин). В ходе осуществления контрольного эксперимента в другой день, тем же самым пяти ΝΙΌΌΜ пациентам подкожно вводили инсулин непосредственно перед началом приема пищи, как показано на фиг. 2. При вливании СЬР-1 исчезали колебания уровня глюкозы, возникающие после приема пищи и наблюдаемые в случае введения инсулина. Вливание СЬР-1 обеспечивало поддержание нормальных уровней содержания глюкозы в крови. Сразу же после завершения каждого вливания СЬР-1(7-36) амида, уровень содержания глюкозы в крови существенно повышался. При введении СЬР-1(7-36) амида не наблюдалось нежелательных побочных явлений. Эти данные свидетельствуют о том, что вливание СЬР-1(736) амида обеспечивает более эффективный контроль уровней глюкозы после приема пищи, чем впрыскивание инсулина, и что упомянутый контроль остается эффективным в течение периода, когда продолжается вливание СЬР-1(736) амида.

Таблица 2 Средние уровни содержания глюкозы в крови пяти ΝΙΌΌΜ пациентов, которым в течение трех часов, начиная с момента начала приема пищи, вливали СЬР-1(7-36) амид. В контрольном исследовании, проводившемся в другой день с теми же самыми пациентами, непосредственно перед каждым приемом пищи путем подкожного впрыскивания вводили инсулин. Время начала приема пищи: 7:30, 10:30 и 4:30.

Часы	Вливание СЬР-1	Подкожное впрыскивание инсулина
Средний уровень глюкозы в крови, мМ	Стандартная погрешность, мМ	Средний уровень глюкозы в крови, мМ	Стандартная погрешность, мМ
7:00	5,4	0,35	6,1	0,41
8:00	4,9	0,38	7,0	0,51
9:00	5,7	0,59	9,1	0,74
10:00	5,8	1,06	9,9	0,78
11:00	8,1	0,94	8,2	0,76
12:00	9,4	0,59	6,5	0,74
13:00	7,2	1,18	9,1	0,90
14:00	5,3	1,21	8,1	0,91
15:00	7,2	0,71	7,0	0,87
16:00	10,4	0,26	7,2	0,57
17:00	9,2	1,06	6,5	0,59
18:00	5,7	1,59	7,3	0,65
19:00	6,6	0,94	6,1	0,59
20:00	8,3	0,71	6,0	0,41
21:00	9,3	0,71	6,4	0,44

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims

1. Способ снижения смертности и заболеваемости после инфаркта миокарда, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения, которое выбирается из группы, включающей СЬР-1, СЬР-1 аналоги, СЬР-1 производные и их фармацевтически приемлемые соли, в дозе, обеспечивающей эффективную нормализацию содержания глюкозы в крови.

2. Способ по п.1, где упомянутое соединение вводится внутривенно.

3. Способ по п.1, где упомянутое соединение вводится подкожно.

4. Способ по любому из пп.1-3, где скорость введения упомянутого соединения составляет от 0,25 до 6 пмоль/кг/мин.

5. Способ по п.4, где скорость введения упомянутого соединения составляет от 0,5 до 2,4 пмоль/кг/мин.

6. Способ по п.5, где упомянутая скорость составляет приблизительно от 0,5 пмоль/кг/мин приблизительно до 1,2 пмоль/кг/мин.

7. Способ по п.1, где упомянутое соединение вводится внутривенно и, кроме того, иным парентеральным путем.

8. Способ по п.7, где иным парентеральным путем является подкожный путь.

9. Способ по п.1, где упомянутым вводимым соединением является СЬР-1 (7-3 6) амид либо его фармацевтически приемлемая соль.

10. Способ снижения смертности и заболеваемости после инфаркта миокарда, включающий введение соединения, которое проявляет инсулинотропную активность посредством взаимодействия с тем рецептором либо рецепторами, с которыми взаимодействует СЬР-1 при проявлении своей инсулинотропной активности.

11. Способ снижения заболеваемости и смертности после инфаркта миокарда, включающий введение соединения, которое усиливает чувствительность к инсулину посредством взаимодействия с тем рецептором либо рецепторами, с которыми взаимодействует СЬР-1 для усиления чувствительности к инсулину.