DK161147B

DK161147B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af oe3haa-imidazo-oe5,1-daa-1,2,3,5-tetrazin-4-onderivater

Info

Publication number: DK161147B
Application number: DK377882A
Authority: DK
Inventors: Edward Lunt; Malcolm Francis Graham Stevens; Robert Stone; Kenneth Robert Harr Wooldridge
Original assignee: May & Baker Ltd
Priority date: 1981-08-24
Filing date: 1982-08-23
Publication date: 1991-06-03
Also published as: FI73434B; SE8204817D0; BE894175A; AT380256B; NL8203286A; DK377882A; DE3231255C2; GR76863B; FI822921A0; LV5621A3; SU1447284A3; ES8400438A1; SE448543B; IT1152505B; FR2511679B1; FR2511679A1; AU8749382A; ES515176A0; IT8222938A0; FI73434C

Description

DK 161147 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte [3H]-imidazo-[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazin-4-onderivater.

Forbindelserne, fremstillet ved analogifremgangsmåden 5 ifølge den foreliggende opfindelse, er [3H]-imidazo-[5,l- d]-l,2,3,5-tetrazin-4-onderivater med den almene formel (I) R2 10 (I)

s \ I

T

. . 0 hvori 15 R1 står for et hydrogenatom eller en ligekædet eller forgrenet alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe indeholdende indtil 6 carbonatomer, idet enhver sådan gruppe er usubstitueret eller substitueret med fra 1 til 3 substituenter, som er udvalgt fra halogenatomer, ligekædede eller forgrenede alk-20 oxy-, alkylthio-, alkylsulfinyl- og alkylsulfonylgrupper indeholdende indtil 4 carbonatomer, eller R1 står for en cycloalkylgruppe indeholdende fra 3 til 8 carbonatomer eller en phenylgruppe, som er usubstitueret eller substitueret med én eller flere grupper, som er udvalgt fra ligekædede 25 og forgrenede alkoxy- og alkylgrupper hver især indeholdende op til 4 carbonatomer og nitrogrupper, og R2 står for en carbamoylgruppe, som på nitrogenatomet kan bære 1 eller 2 grupper udvalgt fra ligekædede eller forgrenede alkyl- og alkenylgrupper, der hver indeholder indtil 4 30 carbonatomer, og fra cycloalkylgrupper indeholdende fra 3-8 carbonatomer, f.eks. en methylcarbamoyl- eller dimethylcar-bamoylgruppe, eller er alkalimetalsalte deraf, når R1 betyder hydrogen.

Hvis symboltet R1 står for en alkyl-, alkenyl- eller 35 alkynylgruppe substituret med 2 eller 3 halogenatomer, kan ovennævnte halogenatomer være de samme eller forskellige.

DK 161147B

2 ί /

Hvis symbolet R1 står for en alkyl-, alkenyl- eller alkynyl- ; ! gruppe substitueret med 1, 2 eller 3 eventuelt substituerede ; phenylgrupper kan de eventuelle substituenter på phenylgrup-pen(erne) være udvalgt fra f.eks. alkoxy- og alkylgrupper 5 indeholdende indtil 4 carbonatomer, f.eks. methoxy- og/eller methylgrupper, og fra en nitrogruppe; symbolet R·^ kan f.eks. stå for en benzyl- eller p-methoxybenzylgruppe. Cycloalkyl-grupper indenfor definitionerne af symbolerne R·*- og R2 indeholder 3-8, fortrinsvis 6, carbonatomer.

10 Foretrukne tetrazinderivater med den almene formel (I) er dem, hvori R1 står for en ligekædet eller forgrenet alkylgruppe indeholdende fra 1-6 carbonatomer eventuelt substitueret med 1 eller 2 halogenatomer, fortrinvis chlor-, fluor- eller bromatomer eller med en alkoxygruppe 15 indeholdende 1-4 carbonatomer, fortrinsvis methoxy, eller med en phenylgruppe, som eventuelt er substitueret med 1 eller 2 alkoxygrupper indeholdende fra 1-4 carbonatomer, fortrinsvis methoxy; eller hvori R·*· står for en alkenylgruppe indeholdende 2-6 carbonatomer, fortrinsvis allyl, eller for 20 en cyclohexylgruppe.

Særdeles foretrukne tetrazinderivater er dem med den almene formel (I), hvori R1 står for en ligekædet eller forgrenet alkylgruppe indeholdende fra 1-6 carbonatomer, og især fra 1-3 carbonatomer, usubstitueret eller substitueret 25 med et halogenatom, fortrinsvis chlor- eller fluoratom. I

særdeleshed står R1 for en methyl- eller 2-halogenalkylgrup-pe, f.eks. en 2-fluorethylgruppe eller fortrinsvis en 2-chlorethylgruppe.

Fortrinsvis står R2 for en carbamoylgruppe eller en 30 monoalkylcarbamoylgruppe, f.eks. methylcarbamoyl, eller en monoalkenylcarbamoylgruppe.

Den foreliggende opfindelse omfatter også fremstilling af alkalimetalsalte af forbindelserne med den almene formel (I), hvori R1 står for et hydrogenatom, og R2 er som define-35 ret ovenfor, f.eks. et natriumsalt, og når som helst sammenhængen tillader det, skal henvisninger til forbindelserne

DK 161147 B

3 med den almene formel (I) i denne beskrivelse omfatte henvisning til de nævnte salte.

Analogifremgangsmåden ifølge opfindelsen er karakteriseret ved, at man 5 (A), når R1 er forskellig fra hydrogen, omsætter en forbin

delse med den almene formel II

n?©N

10 ® (II)

R2 N2 W

hvori R2 er som defineret ovenfor, med et isocyanat med den 15 almene formel (III) R3NCO (III) hvori R3 er som ovenfor defineret for R1 med undtagelse af hydrogen, eller (B) , når R1 er forskellig fra hydrogen, omsætter en forbin-20 delse med den almene formel (IV) H-fr”'! 25 (IV) o

hvori R2 er som ovenfor defineret, eller et alkalimetalsalt 30 deraf med en forbindelse med den almene formel (V

R3X (V) hvori R3 er som ovenfor defineret, og X står for en syrerest af en reaktiv ester, eller (C) , når R1 i derivatet betyder hydrogen eller et alkalime-35 talsalt deraf, omsætter en forbindelse med den almene formel (II)

DK 161147 B

4 (II) 5 ε2/\2 ® hvori R2 er som ovenfor defineret, med en forbindelse med den almene formel (VI) R4NCO (VI) 10 hvori R4 står for et alkalimetalatom eller en beskyttende gruppe, fortrinsvis en benzyl- eller p-methoxybenzylgruppe efterfulgt, hvis R4 står for en beskyttende gruppe, af ombytning af den beskyttende gruppe med et hydrogenatom i den således opnåede forbindelse med den almene formel (VII) 15 N^nvs^'Nn^ (VII) 20 II R5 i 0 hvori R2 er som ovenfor defineret, og R5 står for en beskyttende gruppe, fortrinsvis en benzyl- eller p-methoxybenzylgruppe, ved hjælp af kendte metoder.

25 Den ovenfor med (A) betegnede omsætning kan udføres i fraværelse eller nærværelse af et vandfrit organisk opløsningsmiddel, f.eks. en chloreret alkan, f.eks. dichlormethan, eller ethylacetat, acetonitril, N-methylpyrrolid-2-on eller „fortrinsvis hexamethylphosphoramid, ved en temperatur mellem 30 0 og 70°C, f.eks. ved stuetemperatur. Omsætningen kan fort sættes i indtil 30 dage. Lys bør fortrinsvis udelukkes fra reaktionsblandingen.

Hvis R3 i en forbindelse med den almene formel (V) i den ovenfor med (B) betegnede omsætning står for en halogen-35 alkyl-, halogenalkenyl- eller halogenalkylnylgruppe, udvælges syreresten af en reaktiv ester repræsenteret ved X fra dem.

DK 161147 B

5 der er kendt for ikke at være mindre reaktive end halogen-atomsubstituenten i R3. Hvis X i en forbindelse med den almene formel (V) står for et halogenatom, anvendes fortrinsvis et alkalimetalsalt af forbindelsen med den almene formel 5 (IV), og hvis X i en forbindelse med den almene formel (V) står for et halogenatom, og R3 er en halogenalkyl-, halogen-alkenyl- eller halogenalkynylgruppe, hvori halogenatomet er det samme som det, der er repræsenteret ved X, anvendes fortrinsvis en overskydende mængde af dihalogenforbindelsen 10 med den almene formel (V). Omsætningen af en forbindelse med den almene formel (IV) eller et alkalimetalsalt deraf med en forbindelse med den almene formel (V), hvori R3 og X er som defineret ovenfor, kan udføres i et egnet vandfrit, indifferent organisk opløsningsmiddel, f.eks. dichlormethan, 15 acetonitril eller N-methylpyrrolid-2-on eller blandinger deraf, ved en temperatur fra 0 til 120°C og, hvis der anvendes en forbindelse med den almene formel (IV), i nærværelse af et syrebindende middel, f.eks. et alkalimetalcarbonat eller -bicarbonat, såsom natrium- eller kaliumcarbonat 20 eller -bicarbonat.

Den ovenfor med (C) betegnede omsætning af en forbindelse med den almene formel (II) med en forbindelse med den almene formel (VI), hvori R4 står for en beskyttende gruppe, kan udføres som nævnt ovenfor for omsætningen af en forbin-25 delse med den almene formel (II) med en forbindelse med den almene formel (III). Omsætning af en forbindelse med den almene formel (II) med en forbindelse med den almene formel (VI), hvori R4 står for et alkalimetalatom, kan udføres i et egnet indifferent organisk opløsningsmiddel, f.eks.

30 ethanol, acetonitril eller N-methylpyrrolidinon, eventuelt i nærværelse af en syre, ved en temperatur fra 0 til 120°C. Gruppen R5 i forbindelser med den almene formel (VII), hvori R5 er som defineret ovenfor, kan ombyttes med et hydrogenatom ved hjælp af kendte metoder til opnåelse af en forbindelse 35 med den almene formel (IV).

DK 161147 B

6 j

Forbindelser med den almene formel (II) kan fremstilles ved anvendelse eller tilpasning af i sig selv kendte metoder, f.eks. metoder beskrevet af Y.F. Shealy, R.F.

Struck, L.B. Holum & J.A. Montgomery: J. Org. Chem. (1961), 5 26, 2396.

Forbindelser med de almene formler (III), (V) og (VI) kan fremstilles· ved anvendelse eller tilpasning af i sig selv kendte metoder.

Ved udtrykket "i sig selv kendte metoder", som det 10 anvendes i den foreliggende beskrivelse, menes metoder, som er anvendt tidligere eller beskrevet i litteraturen.

De hidtil ukendte tetrazinderivater med den almene formel (I) er i besiddelse af værdifuld antineoplastisk aktivitet overfor f.eks. carcinomer, melanomer, sarcomer, 15 lymphomer og leukaemier. De har vist sig at være særligt aktive i mus overfor TLX5(S) lymphoma ved daglige doser på mellem 0,5 og 16 mg/kg legemsvægt, indgivet intraperitonealt, ved fremgangsmåden ifølge Gescher et al.: Biochem. Pharmacol.

(1981), 89, og ADJ/PC6A og M5076 (reticulumcellesarcoma).

20 Overfor leukaemia L1210, transplanteret intraperitonealt, ’ intracerebralt og intravenøst, og P388, ifølge fremgangsmåden beskrevet i "Methods of Development of New Anticancer Drugs" (NCI Monograph 45, marts 1977, side 147-149, National Cancer Institute, Bethesda, (USA), er forbindelserne aktive både 25 intraperitonealt og oralt ved doser på mellem 2,5 og 10 mg/kg legemsvægt. Inhibering af både primær tumor og meta- ' stase opnås overfor Lewis-lungecarcinoma ved lignende doser.

Overfor B16-melanoma og C38-tumor hos mus (NCI Monograph 45, op. cit.) er forbindelserne aktive intraperitonealt ved 30 doser på mellem 6,25 og 25 mg/kg legemsvægt.

Tetrazinderivaterne er også i besiddelse af værdifulde immunmodulatoriske aktivitet og er anvendelige ved behandling af organtransplantation og hudtransplantation og ved behandlingen af immunologiske sygdomme.

35 Vigtige individuelle forbindelser med den almene formel (I) omfatter følgende: 7

DK 161147 B

O

A, 8-carbamoy1-3-methyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5--tetrazin-4-on, B, 8-carbamoyl-3-n-propyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5--tetrazin-4-on, 5 C, 8-carbamoyl-3-(2-chlorethyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]- -1,2,3,5-tetrazin-4-on, D, 3-(2-chlorethy1)-8-methylcarbamoyl-[3H]-imidazo-[5,1-d] -1,2,3,5-tetrazin>-4-Qn, E, 8-carbamoy1-3-(3-chlorpropyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]- 10 -l,2,3,5-tetrazin-4-on, F, 8-carbamoy1-3-(2,3-dichlorpropyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]--1,2,3,5-tetrazin-4-on, G, 3-allyl-8-carbamoyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5--tetrazin-4-on, 15 H, 3-(2-chlorethyl)-8-diméthylcarbamoyl-[3H]-imidazo- [5,1-d]-1,2,3,5-tetrazin-4-on, . I, 3-(2-bromethyl)-8-carbamoyl-[3H]-imidazo[5,l-d]- -1,2,3,5-tetrazin-4-on, J, 3-benzyl-8-carbamoyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5- 20 -tetrazin-4-on, K, 8-carbamoyl-3-(2-methoxyethyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]--1,2,3,5-tetrazin-4-on, L, 8-carbamoyl-3-cyclohexyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5--tetrazin-4-on, 25 m, 8-carbamoyl-3-(p-methoxybenzyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]- -1,2,3,5-tetrazin-4-on.

Forbindelserne A og D og især C er af særlig betydning.

30 Bogstaverne A til M er tildelt forbindelserne for at lette henvisning senere i beskrivelsen.

De følgende eksempler illustrerer fremstillingen af forbindelserne med den almene formel (I) ved anvendelse af fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse, og refe-35 renceeksemplerne derefter illustrerer fremstillingen af mellemprodukter .

0 8

DK 161147B

Eksempel 1 500 mg 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carboxamid suspenderes i 3,0 ml methylisocyanat og omrøres i mørke ved stuetempe- , 5 ratur i 21 dage. Derefter fortyndes reaktionsblandingen med vandfri diethylether og filtreres. Remanensen vaskes hurtigt med vandfrit methanol, derefter med vandfri diethylether og lufttørres i mørke ved stuetemperatur til opnåelse af 198 mg 8-carbamoy1-3-methyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetra-10 zin-4-on i form af et let brunt mikrokrystallinsk faststof med smp. på 210°C (skummer op og bliver mørkt ved 160-210°C). Elementæranalyse for CgH^NgC^:

Beregnet: C: 37,1%, H: 3,09%, N: 43,3%.

Fundet: C: 36,8%, H: 3,10%, N: 44,2%.

15

Eksempel 2 l2Ekindelse_B

300 mg 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carboxamid suspenderes i 10 ml vandfrit dichlormethan og behandles med en oversky-20 ; dende mængde n-propylisocyanat. Derefter omrøres reaktionsblandingen i mørke ved stuetemperatur i 30 dage. Derefter filtreres reaktionsblandingen^og remanensen vaskes hurtigt med vandfri diethylether og lufttørres i mørke ved stuetemperatur til opnåelse af 102 mg 8-carbamoyl-3-n-propyl-[3H]-25 -imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on i form af et lyserødt pulver med smp. på 167°C (opskumning).

Elementæranalyse for C8HioN6°2;

Beregnet: C: 43,2%:* H: 4,53%, N: 37,8%.

30 Fundet: C: 43,4%, H: 4,57%, N: 38,0%.

35

O

DK 161147 B

9

Eksempel 3 Forbindelse_C

300 mg 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carboxamid suspenderes i 10 ml vandfrit dichlormethan, og 1,0 ml 2-chlorethyliso-5 cyanat tilsættes. Derefter omrøres reaktionsblandingen i mørke ved stuetemperatur i 30 dage. Den således opnåede flødefarvede suspension filtreres, og remanensen vaskes hurtigt med vandfri diethylether og lufttørres i mørke til opnåelse af 483 mg 8-carbamoyl-3-(2-chlorethyl)-[3H]-imid-10 azo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on i form af et flødefarvet pulver med smp. 158°C (kraftig sønderdeling).

Elementæranalyse for C^H^ClNgC^:

Beregnet: C: 34,7%, H: 2,91%, N: 34,7%.

Fundet: C: 34,7%, H: 3,01%, N: 34,9%.

15

Gentagelse af ovennævnte fremgangsmåde har også givet 8-carbamoyl-3-(2-chlorethyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5--tetrazin-4-on i en anden polymorf form, smp.: 164-165°C (sønderdeling).

20

Eksempel 4 Forb±n^eXse_A.

En suspension af 1,37 g 4[5]-diazoimidazol-5[4]- -carboxamid i 20 ml ethylacetat behandles med 7,0 g methyl-25 isocyanat og omrøres i en lukket beholder i mørke ved stuetemperatur i 3 uger. Det resulterende faststof frafiltreres og vaskes med diethylether til opnåelse af 1,9 g 8-carbamoyl--3-methyl-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on i form af et flødefarvet faststof, smp.: 212°C (opskumning).

30 .

Dette materiale omkrystalliseres fra 3 forskellige opløsningsmiddelsystemer til opnåelse af 3 forskellige produkter, der hver især har et lidt forskelligt IR-spektrum.

De 3 produkter er sandsynligvis alle polymorfe former af 8-carbamoy1-3-methyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazin-35 -4-on.

DK 161147B

10

O

(i) Farveløse nåle opnås fra en 3:1 voluraen/vo lumen blanding af acetone og vand max 3410/ 3205, 1758, 1730 og 1678 cm \ smp.: 212°C (opskumning) .

(ii) Hvide mikrokrystaller opnås fra en 1:3 volumen/ 5 volumen blanding af acetone og vand,V 3430,3200, 1740 og 1675 cm , smp.: 210°C (opskumning).

(iii) Et granulært faststof opnås fra varmt vand, max 3450' 3380, 3200, 1742, 1688 og 1640 cm-1, smp.: 215°C

(opskumning) (bliver mørkt fra 200°C).

10

Eksempel 5

En suspension af 1,37 g 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carb-oxamid i 20 ml acetonitril behandles med 6,5 g n-propylisocyanat.

15 og omrøres i en lukket beholder i mørke ved stuetemperatur i 3 uger. Det resulterende lyserøde faststof frafiltreres, vaskes med diethylether og omkrystalliseres fra en blanding af vand og acetone (1:4 volumen/volumen) til opnåelse af 1,6 g 8-carbamoyl-3-n-propyl-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-20 -tetrazin-4-on, smp.: 170r-172°C (opskumning). Ved koncen trering af modenluden fra omkrystallisationen opnås en yderligere mængde på 0,2 g af samme produkt. ;

Eksempel 6 25 ForbindeXse__C

En suspension af 1,0 g 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carb-oxamid i 30 ml ethylacetat behandles med 3,3 ml 2-chlorethyl-isocyanatjog blandingen omrøres i mørke ved stuetemperatur i 6 dage. Derefter fortyndes reaktionsblandingen med diethyl-30 ether}og det resulterende faststof frafiltreres til opnåelse af 1,6 g 8-carbamoyl-3-(2-chlorethyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]--l,2,3,5-tetrazin-4-on i form af et farveløst faststof, smp.: 164-165°C (sønderdeling).

35

O

DK 161147 B

11

Elementæranalyse for C^H^ClNgC^:

Beregnet: C: 34,65%, H: 2,91%, N: 34,65%, Cl: 14,61%. Fundet: C: 34,5%, H: 2,88%, N: 34,5%, Cl: 14,6%.

5 Eksempel 7

En suspension af 5,0 g 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carb-oxamid i en blanding af 158 ml dichlormethan og 8,3 ml N-methylpyrrolid-2-on behandles med 16,7 ml 2-chlorethyl- 10 isocyanatjog blandingen omrøres i mørke ved stuetemperatur i 14 dage. Derefter fortyndes reaktionsblandingen med vandfri diethylether^og det resulterende faststof frafiltreres og vaskes med diethylether til opnåelse af 6,3 g 8-carbamoyl-

-3-(2-chlorethyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazin-4-^5 O

-on i form af et purpurfarvet faststof, smp.: 164-165 C

(sønderdeling).

Elementæranalyse for C^^ClNgC^:

Beregnet: C: 34,65%, H: 2,91%, N: 34,65%, Cl: 14,61%.

20 Fundet? C: 34,7%, H: 2,95%, N: 34,5%, Cl: 14,4%.

Eksempel 8 Foxbind.el.se_C

En suspension af 145 g 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carb-25 oxamid i 2175 ml ethylacetat behandles med 478,5 ml 2-chlor-ethylisocyanat og omrøres ved 30°C i 2 dage under udelukkelse af lys# Derefter filtreres blandingen til opnåelse af 250 g 8-carbamoyl-3-(2-chlorethyl)- [3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5--tetrazin-4-on i form af et ferskenfarvet faststof, smp.: 30 166°C.

35 12

DK 161147B

O

Eksempel 9

En omrørt suspension af 2,2 g 4 [5]-diazoimidazol-5[4]-carboxamid i en blanding af 70 ml dichlormethan og 5 3,5 ml N-methylpyrrolid-2-on behandles med 7,0 ml methyl- isocyanat og omrøres ved stuetemperatur i 4 uger. Blandingen fortyndes med diethylether^ og det resulterende faststof fra-filtreres til opnåelse af 2,38 g 8-carbamoyl-3-methyl-[3H]--imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on i form af et blegt 10 purpurfarvet faststof, smp.: 202-203°C (sønderdeling). Elementæranalyse for CgHgNg02:

Beregnet: C: 37,11%, H: 3,14%, N: 43,3%.

Fundet: C: 36,8%, H: 2,94%, N: 43,1%.

15

En polymorf form af 8-carbamoyl-3-methyl-[3H]-imidazo-[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on opnås ved opløsning i aceto-nitril, filtrering, koncentrering af filtratet til tørhed og triturering af den resulterende remanens med diethylether.

Dette materiale er i. form af et orangefarvet faststof, 20 o smp.: ca. 200 C (sønderdeling).

Elementæranalyse C: 37,4%, H: 3,26%, N: 43,5%.

NMR-Spektret i dimethylsulfoxid-Dg er identisk med det fra- ovennævnte svagt purpurfarvede faststof, men IR-spektret 25 (KBr-skive) viser nogle forskelle.

30 / 35

13 DK 161147 B

O

Eksempel 10 E2E^iS^®ise_D

En omrørt opløsning af 0,64 g natriumnitrit i 4,6 ml vand afkøles til 5-10°C og behandles dråbevist ved denne 5 temperatur med en opløsning af 1,00 g 5-amino-4-methylcarb-amoylimidazol i 14,3 ml (1 M) vandig eddikesyre i 5 minutter. Omrøring fortsætter ved 5-10°C i 5 minutter. Den mørkerøde opløsning ekstraheres derefter 4 gange med ethylacetat, hver gang med 35 ml og de kombinerede ekstrakter tørres 10 over magnesiumsulfat. Den resulterende opløsning indeholder råt 4[5]-diazo-5[4]-methylcarbamoylimidazol, som er ustabilt og som anvendes øjeblikkeligt til det næste trin uden yderligere rensning.

Opløsningen af 4[5]-diazo-5[4]-methylcarbamoylimid-15 azol i ethylacetat, fremstillet som beskrevet ovenfor, behandles med 4,3 ml 2-chlorethylisocyanat og får lov til at stå i mørke i 1 dag. Derefter inddampes opløsningen ved 40°C/10 mm Hg, og remanensen tritureres med petroleumsether (kogepunkt 40-60°C) til opnåelse af 4,23 g af en orangefarvet 20 gummi. Denne gummi behandles med 50 ml ethylacetat og filtreres, og filtratet inddampes ved 40°C/10 mm Hg til opnåelse af 2,94 g af en orangefarvet gummi. Denne gummi renses ved middeltryksøjlechromatografi på silicagel, elueres med en blanding af ethylacetat og acetonitril (4:1 volumen/volumen) 25 til opnåelse af 0,81 g 3-(2-chlorethyl)-8-methylcarbamoyl--[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on i form af et purpurfarvet faststof, smp.: 120-122°C (sønderdeling).

Elementæranalyse for CgHgClNg02:

Beregnet: C: 37,4%, H: 3,53%, N: 32,7%.

30

Fundet: C: 37,3%, H: 3,58%, N: 31,9%.

35

Eksempel 11

14 DK 161147 B

O

En suspension af 1,0 g 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carb-oxamid i 50 ml ethylacetat tørret over vandfrit kaliumcarb-5 onat behandles med 4,86 g 3-chlorpropylisocyanat^og blandingen omrøres ved stuetemperatur i 3 dage. Derefter fortyndes reaktionsblandingen med vandfri diethyletheryog det resulterende faststof frafiltreres og vaskes med vandfri diethylether til opnåelse af 1,05 g 8-carbamoyl-3-(3-chlorpropyl)-10 -[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on i form af et lyserødt faststdf, smp.: 153-154°C (sønderdeling). Elementæranalyse for CgH^ClNgC^:

Beregnet: C: 37,4%, H: 3,53%, N: 32,8%, Cl: 13,8%.

Fundet: C: 37,1%, H: 3,42%, N: 32,7%, Cl: 13,8%.

15

Eksempel 12

Ved at gå frem på samme måde som beskrevet ovenfor i eksempel 11, men ved at erstatte det 3-chlorpropylisocyanat, 20 der anvendes som udgangsmateriale, med den rigtige mængde 2,3-dichlorpropylisocyanat, fremstilles 8-carbamoyl-3-(2,3--dichlorpropyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on i form af et hvidligt faststof, smp.: 153-155°C (sønderdeling). Elementæranalyse for CgHgC^NgC^:

Beregnet: C: 33,0%, H: 2,77%, N: 28,9%, Cl: 24,4%.

Fundet: C: 32,7%, H: 2,51%, N: 28,7%, Cl: 24,1%.

30 35

O

15 . DK 161147 B

Eksempel 13 4,5 ml omrørt allylisocyanat, der er redestilleret umiddelbart før anvendelse, behandles med 1,0 g 4[5]-diazo-5 imidazol-5[4]-carboxamid og derefter med 20 ml hexamethyl-phosphoramid. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i mørke i 18 timer og fortyndes derefter med vandfri diethylether og filtreres. Det resulterende farveløse faststof vaskes med vandfri diethylether til opnåelse af 1,6 g 3-allyl-8-10 -carbamoyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazin-4-on i form af et farveløst faststof, smp.: 149-150°C.

'Ymax (KBr-skive) : 1730, 1675 cm-·*-.

NMR i DMS0-d6: singletter ved 8,75, 7,67 og 7,606; dobbelt dobbelt triplet ved 6,026 (J=5,5, 8, 10 Hz), 15 dobbelt duplet ved 5,356 (J=l,5, 8 Hz) og 5,206 (J=l,5, 10 Hz), og duplet ved 4,886 (J=5,5).

Eksempel 14 Forbindelse H

20

En opløsning af 1,59 g 4[5]-diazo-5[4]-dimethylcarb-amoylimidazol, fremstillet som beskrevet i det efterfølgende referenceeksempel 1, i 57 ml tørt ethylacetat behandles med 6,36 g 2-chlorethylisocyanat og omrøres ved stuetemperatur i mørke i 24 timer. Derefter inddampes opløsningen 25 o i vakuum ved 35 C, til sidst ved 0,1 mm Hg til fjernelse af den overskydende mængde 2-chlorethylisocyanat. Den resterende væske renses ved middeltryksøjlechromatografi på silicagel, elueres med en 4:1 volumen/volumen blanding af ethylacetat og acetonitril til opnåelse af 0,82 g 3-(2-chlor-30 ethyl)-8-dimethylcarbamoyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-te-trazin-4-on i form af farveløse krystaller, smp.: 114-116°C.

Elementær analyse for C^H^ClNgC^ :

Beregnet: C: 39,9%, H: 4,10%, N: 31,0%.

35 Fundet: C: 39,7%, H: 3,95%, N: 30,8%.

16

O

DK 161147 B

Eksempel 15 E2£ki24else_I

En omrørt suspension af 1,0 g 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carboxamid i 4 ml hexamethylphosphoramid behandles 5 med 4,5 ml 2-bromethylisocyanatjog blandingen omrøres i mørke ved stuetemperatur i 2 dage. Derefter fortyndes reaktionsblandingen med vandfri diethyletherjog det resulterende faststof frafiltreres, vaskes med vandfri diethylether til opnåelse af 1,17 g 3-(2-bromethyl)-8-carbamoyl-[3H]-imidazo-10 [5,1-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on i fonn af et farveløst fast stof, smp.: 156-157°C (sønderdeling).

Elementær analyse for C^E^BrNgC^:

Beregnet: C: 29,3%, H: 2,46%, N: 29,3%, Br.: 27,8%.

Fundet: C: 29,5%, H: 2,36%, N: 29,1%, Br: 27,3%.

15

Eksempel 16

Ved at gå frem på samme måde som beskrevet ovenfor ^ i eksempel 15, men erstatte det 2-bromethylisocyanat, der anvendes som udgangsmateriale, med den rigtige mængde ben-zylisocyanat fremstilles 0,83 g 3-benzyl-8-carbamoyl-[3H]--imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on i form af et brungult faststof, smp.: 176-177°c (sønderdeling).

25 Elementæranalyse for C2.2H10N6°2:

Beregnet: C: 53,3%, H: 3,73%, N: 31,1%.

Fundet: C: 53,6%, H: 3,66%, N: 31,0%.

30 35

17 DK 161147 B

O

Eksempel 17 Forbindelse_K

En suspension af 0,3 g 4[5]-diazoimidazol-5[4]- -carboxamid i 5 ml acetonitril behandles med 0,5 g 2-methc>xy-

5 ethylisocyanatj og blandingen omrøres ved mellem 45 og 47°C

i mørke i 24 timer. Det resulterende faststof frafiltreres og vaskes med diethylether til opnåelse af 0,45 g råt 8-carbamoyl-3-(2-methoxyethyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5- -tetrazin-4-on, smp.: 145-147°C (sønderdeling).

10 Produktet renses ved omkrystallisation fra vandig acetone til opnåelse af lyserøde rosetter eller fra vandigt dimethylsulfoxid til opnåelse af farveløse nåle, smp.: 164-165°C (sønderdeling).

Elementæranalyse for C8HioN6°3: 15

Beregnet: C: 40,34%, H: 4,20%, N: 35,2%.

Fundet: C: 40,4%, H: 4,20%, N: 35,2%.

Eksempel 18

Forbindelse L 20 -------------

En suspension af 0,30 g 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carboxamid i 10 ml acetonitril behandles med 1,0 g cyclohexyl-isocyanat, og blandingen omrøres ved 60°C i mørke i 3 dage.

Det resulterende faststof frafiltreres og vaskes med en blanding af ethanol og 0,880 vandig ammoniak (100:0,5 25 volumen/volumen, 20 ml) i 1 minut til opnåelse af 0,015 g 8-carbamoyl-3-cyclohexyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazin--4-on, smp.: 196°C (opskumning).

30 i 35

Eksempel 19

is DK 161147 B

O

5l2£^iSå§i§t-.i

En suspension af 0,4 g 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carbox-amid i 10 ml acetonitril behandles med 0,6 g benzylisocyanat, 5 og blandingen omrøres ved 60°C i mørke natten over. Derefter afkøles reaktionsblandingen og filtreres til opnåelse af 0,75 g 3-benzyl-8-carbamoyl-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5--tetrazin-4-on i form af et blegt lyserødt faststof, smp.: 187-188°C (opskumning).

10

Eksempel 20 E2£kiilS|else_M

En suspension af 0,1 g 4[5]-diazoimidazol-5[4]-carbox-amid og 0,4 g p-methoxybenzylisocyanat i 5 ml acetonitril 15 omrøres ved 60°C i mørke i 4 timer. Det resulterende svagt lyserøde faststof frafiltreres og vaskes separat med kold diethylether til opnåelse af 0,23 g 8-carbamoyl-3-(p-methoxy-benzyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on, smp.: 180-182°C (opskumning).

20

Eksempel 21

Ved at gå frem på samme måde som i de foregående eksempler fremstilles 8-(N-allylcarbamoyl)-3-(2-chlorethyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]-25 -1,2,3,5-tetrazin-4-on (IR: 1750 cm-1; NMR (i DMS0-d6): multipletter 3,96, 5,06 og 5,84 ppm; tripletter 4,60 og 6,2 ppm; singlet 8,78 ppm) ud fra 5-amino-4-allylcarbamoyl)--imidazol over 5-diazo-4-allylcarbamoylimidazol. 5-Amino--4-allylcarbamoylimidazol fremstilles ud fra 5-nitro-4-al-30 lylcarbamoylimidazol (smp.: 218-220°C) ved reduktion ved hjælp af titanochlorid.

35 19

O

DK 161147 B

Referenceeksempler (i) En inderlig blanding af 2,0 g 5-nitroimidazol-4--carboxylsyre og 2,67 g phosphorpentachlorid omrøres og 5 opvarmes i et oliebad ved 120°C i 1 time. Den resulterende gule opslæmning inddampes ved 60°C/0,1 mm Hg i 30 minutter til opnåelse af 1,90 g l,6-dinitro-5H,10H-diimidazo[l,5--a:l',5'-d]pyrazin-5,10-dion i form af et gult faststof, smp.: 249-251°C (sønderdeling).

10 (KBr--skive) : 1750 cm-1? m/e: 278 (M+) .

Iug12£

Windaus, Ber., 1923, 56, 684^og Gireva^Chem. Abs. 59, 16222, der anvender samme metode, benævner deres produkter "5-nitroimidazol-4-carbonylchlorid".

15 (ii) En vandig dimethylaminopløsning (25% vægt/volumen; 60 ml) afkøles til mellem 0 og 5°C og behandles portionsvis under omrøring med 6,0 g 1,6-dinitro-5H,10H-diimidazo-[l,5-a:l',5'-d]pyrazin-5,10-dion indenfor dette temperatur- 2Q område. Den resulterende dybt purpurfarvede opløsning omrøres i 2 timer. Opløsningen inddampes ved 50°C/10 mm Hg og syrnes derefter ved behandling med koncentreret saltsyre til opnåelse af en orangefarvet opløsning. Denne opløsning ekstra-heres 7 gange med ethylacetat, hver gang med 200 ml, og de 25 kombinerede ekstrakter tørres over magnesiumsulfat og inddampes til opnåelse af 6,6 g af et gult faststof. Dette faststof tritureres med 50 ml toluen og omkrystalliseres derefter fra ethylacetat til opnåelse af 2,53 g 5[4]-nitro-4[5]-dimethylcarbamoylimidazol i form af gule krystaller, smp.: 193-195°C.

Elementæranalyse for CgHgN^:

Beregnet: C: 39,1%, H: 4,38%, N: 30.4%.

Fundet: C: 38,9%, H: 4,23%, N: 30,4%.

35

DK 161147 B

20 j (iii) En opløsning af 1,62 g 5[4]-nitro-4[5]-dimeth- 1 ylcarbamoylimidazol i 32 ml tørt dimethylformamid behandles med 0,32 g platinoxid og omrystes under hydrogen ved atmosfærisk tryk og stuetemperatur. Efter 3 timer er hydrogenab- ; 5 sorptionen afsluttet (710 ml). Derefter behandles blandingen i med aktivt kul og filtreres gennem diatoméjord. Det mørke- ' brune filtrat inddampes ved 50°C/0,1 mm Hg, og den resulterende remanens tritureres med diethylether til opnåelse af 1,75 g råt 5[4]-amino-4[5]-dimethylcarbamoylimidazol i 10 form af et mørkebrunt, krystallinsk faststof, smp.: 179--181°C.

-rmax (KBr-skive): 1595 cm-1; NMR i DMSO-dg: singletter ved 3,2 og 7,0i, som stadig er forurenet med kolloidt platin, i og som anvendes på næste trin uden yderligere rensning.

15 (iv) En omrørt opløsning af 0,79 g natriumnitrit i 5,7 ml vand afkøles til mellem 5 og 10°C og behandles dråbevist indenfor dette temperaturområde med en opløsning af 1,75 g 5[4]-amino-4[5]-dimethylcarbamoylimidazol i 17,6 ml 20 (1 M) vandig eddikesyre i 5 minutter. Den resulterende op løsning ekstraheres 4 gange med ethylacetat, hver gang med 40 ml, de kombinerede ekstrakter tørres over magnesiumsulfat og inddampes ved 30°C/10 mm Hg til opnåelse af 1,59 g 4[5]-diazo-5[4]-dimethylcarbamoylimidazol i form af oran-25 gefarvede krystaller, smp.: 101-103°c (sønderdeling).

i

Elementæranalyse for C5H7N5O:

Beregnet: C: 43,6%, H: 4,27%, N: 42,4%. i

Fundet: C: 42,6%, H: 4,17%, N: 41,4%.

30 De ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfin delse fremstillede forbindelser kan anvendes i farmaceutiske præparater, der som aktiv ingrediens indeholder mindst ét tetrazinderivat med den almene formel (I) sammen med et farmaceutisk bærestof eller overtræk. I klinisk praksis indgives 35 forbindelserne med den almene formel (I) normalt oralt,

DK 161147 B

21 rectalt, vaginalt eller parenteralt, f.eks. intravenøst eller intraperitonealt.

Metoder til udformning af farmaceutisk aktive forbindelser er velkendte i teknikken, og en egnet grundmasse kan 5 bestemmes af lægen eller farmaceuten afhængigt af sådanne faktorer som den ønskede virkning, patientens størrelse, alder, køn og tilstand og den aktive forbindelses egenskaber. Præparaterne kan også indeholde sådanne materialer som faste eller flydende fortyndingsmidler, fugtemidler, konserverings-10 midler, smags- og farvestoffer, hvilket er almindeligt i teknikken.

Faste præparater til oral indgivelse omfatter sammenpressede tabletter, piller, dispergerbare pulvere og granuler. I sådanne faste præparater blandes én eller flere 15 aktive forbindelser med mindst et indifferent fortyndingsmiddel, såsom calciumcarbonat, kartoffelstivelse, alginsyre eller lactose. Præparaterne kan også indeholde yderligere stoffer, som er forskellige fra indifferente fortyndingsmidler, f.eks. smøremidler, såsom magnesiumstearat, hvilket er 20 almindeligt i praksis. Flydende præparater til oral indgivelse omfatter farmaceutisk acceptable emulsioner, opløsninger, suspensioner, sirupper og eliksirer indeholdende indifferente fortyndingsmidler, der almindeligvis anvendes i teknikken, såsom vand og flydende paraffin. Udover indifferente fortyn-25 dingsmidler kan sådanne præparater også indeholde hjælpestoffer, såsom fugtemidler og suspenderingsmidler, f.eks. poly-vinylpyrrolidon, og sødemidler, smagsstoffer, aromastoffer og konserveringsmidler. Præparater til oral indgivelse omfatter også kapsler af absorberbart materiale, såsom gelatine, 30 indeholdende ét eller flere af de aktive stoffer med eller uden tilsætning af fortyndingsmidler eller strækkemidler.

Faste præparater til vaginal indgivelse omfatter vaginalstikpiller, der er formet på i sig selv kendt måde og indeholder én eller flere af de aktive forbindelser.

DK 161147 B

22

Faste præparater til rectal indgivelse omfatter suppositorier, der er formet på i sig selv kendt måde og indeholder én eller flere af de aktive forbindelser.

Præparater til parenteral indgivelse omfatter sterile 5 vandige eller ikke-vandige opløsninger, suspensioner eller emulsioner. Eksempler på ikke-vandige opløsningsmidler eller suspenderingsmidler er polyethylenglycol, dimethylsulfoxid, vegetabilske olier, såsom olivenolie, og injicerbare organiske estere, såsom ethyloleat. Disse præparater kan også 10 indeholde hjælpestoffer, såsom konserveringsmidler, fugtemid-ler, emulgeringsmidler og dispergeringsmidler. De kan steriliseres, f.eks. ved filtrering gennem et bakterie-tilbagehol-dende filter, ved inkorporering af steriliseringsmidler i præparaterne eller ved bestråling. De kan også fremstilles 15 i form af sterile faste præparater, der kan opløses i sterilt vand eller et andet sterilt, injicerbart medium umiddelbart før anvendelse.

Den procentvise mængde af den aktive ingrediens i præparatet kan varieres, idet det er nødvendigt, at den har 20 en størrelse, der er stor nok til, at en egnet dosis til den ønskede terapeutiske virkning opnås. Tydeligvis kan adskillige enhedsdosisformer indgives på næsten samme tid. Almindeligvis indeholder præparaterne normalt mindst 0,025 vægt-% aktivt stof, hvis det skal indgives ved injicering; 25 til oral indgivelse indeholder præparatet normalt mindst 0,1 vægt-% aktivt stof. Den anvendte dosis afhænger af den ønskede terapeutiske virkning, indgiftsvejen og behandlingens varighed.

De følgende præparateksempler illustrerer farmaceuti-30 ske præparater indeholdende forbindelser fremstillet ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse.

DK 161147 B

23

Præparateksempel 1

En opløsning, der er egnet til parenteral indgivelse, fremstilles ud fra følgende ingredienser: 5 8-Carbamoyl-3-(2-chlorethyl)-[3H]- 1,0 g -imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetraz in-4-on

Dimethylsulfoxid 10 ml

Arachisolie 90 ml 10 ved at opløse 8-carbamoyl-3-(2-chlorethyl)-[3H]-imidazo- -[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on i dimethylsulfoxidet og tilsætte arachisolien. Den resulterende opløsning deles under aseptiske betingelser i ampuller i en mængde på 10 ml pr. ampul. Ampullerne forsegles til opnåelse af 10 ampuller, 15 der hver især indeholder 100 mg 8-carbamoyl-3-(2-chlorethyl)--[3H]-imidazo-[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazin-4-on.

Lignende ampuller indeholdende opløsninger, der er egnede til parenteral indgivelse, kan fremstilles ved at gå frem på samme måde, men erstatte 8-carbamoyl-3-(2-chlor-20 ethyl)-[3H]-imidazo-[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on med en anden forbindelse med den almene formel (I).

Præparateksempel 2

Kapsler, der er egnede til oral indgivelse, fremstil-25 les ved at anbringe 8-carbamoyl-3-(2-chlorethyl)-[3H]-i-midazo-[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazin-4-on i gelatineskaller af størrelse nr. 2 i en mængde på 10 mg pr. kapsel.

Lignende kapsler kan fremstilles ved at anvende en anden forbindelse med den almene formel (I) eller enhver 30 anden kapselskal af hensigtsmæssig størrelse.

Tetrazinderivaterne med den almene formel (I) er anvendelige ved behandlingen af ondartede neoplasmer, f.eks. carcinomer, melanomer, sarcomer, lymphomer og leukaemier, i 35 doser, som almindeligvis ligger mellem 0,1 og 200, fortrinsvis mellem 1 og 20, mg/kg legemsvægt pr. dag.

DK 161147B

24 I nedenstående tabel I er vist resultaterne af standardforsøg med forbindelserne Ά, I, C, D og H fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen imod lymphoma TLX 5, som er implanteret i mus.

5

Tabel I

Aktivitet hos forbindelser fremstillet ifølge DK-patentansøg-ning nr. 3778/82 imod TLX5 lymphoma, som er implanteret i mus.

10

Forbin- Optimal dosis mg/kg Overlevel- Overlevel- delse indgivet 3 dage ef- sestid, hen- sestid i 15 ter implantation ført til dage* kontroller A 160 157 % 20 I 160 137 %

Alle 5 behandlede mus 25 C 40 overlevede 60 60 dage efter implantation

Alle 5 be- 3 0 handlede mus D 40 overlevede 60 60 dage efter implantation 35 Alle 5 be handlede mus H 40 overlevede 60 60 dage efter implantation 40 * Mus, som overlevede i 60 dage, forblev levende og undersøgtes ikke yderligere. 1 45 nedenstående tabel II er vist resultater af standardforsøg med forbindelse C fremstillet ved fremgangsmåden

DK 161147 B

25 ifølge opfindelsen imod leukæmitumorer L1210 og P388, som er implanteret i mus.

Tabel II 5

Aktivitet hos forbindelse C fremstillet ifølge DK patentansøgning nr. 3778/82 imod leukæmitumorer, som er implanteret i mus.

10

Dosis Antal Overlevelsestid

Tumortype mg/kg-1 dag"1 dosisdage i dage* 15 L1210 40 1 60 20 5 60 10 5 60 25 9 60 12,5 9 60 20 P388 40 1 60 20 1 60 20 5 60 10 5 60 25 _ * Mus, som overlevede i 60 dage, forblev levende og undersøgtes ikke yderligere.

Claims

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af [3H]-imidazo-[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazin-4-onderivater med den almene formel (I) 5 2 TT »V?

2. Analogifremgangsmåde ifølge krav l, kende- 20 tegnet ved, at X står for et halogenatom eller en methoxysulfonyloxy-, methansulfonyloxy- eller p-toluensul-fonyloxygruppe.

3. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, hvori det opnåede produkt er et tetrazinderivat med den almene 25 formel (I) ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R1 står for en alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe substitueret med 1, 2, eller 3 eventuelt substituerede phenylgrupper, og hvori de eventuelle substituenter på phenylgruppen(erne) er udvalgt fra alkoxy- og alkylgrupper indeholdende indtil 4 30 carbonatomer og fra en nitrogruppe.

4. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, hvori det opnåede produkt er et tetrazinderivat med den almene formel (I) ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R1 står for en ligekædet eller forgrenet alkylgruppe indehol- 35 dende fra 1-6 carbonatomer eventuelt substitueret med 1 eller 2 halogenatomer eller med en alkoxygruppe indeholdende DK 161147 B 1-4 carbonatomer eller med en phenylgruppe, som eventuelt er substitueret med 1 eller 2 alkoxygrupper indeholdende fra 1 til 4 carbonatomer, eller R1 står for en alkenylgruppe indeholdende 2-6 carbonatomer eller en cyclohexylgruppe.

5. Analogifremgangsmåde ifølge krav 4, kende tegnet ved, at halogenatom(erne) er chlor, fluor og/-eller brom, alkoxygruppen(erne) er methoxy, og alkenylgruppen er allyl.

6. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, hvori 10 det opnåede produkt er et tetrazinderivat med den almene formel (I) ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R1 står for en ligekædet eller forgrenet alkylgruppe indeholdende fra 1-6 carbonatomer, hvilken gruppe er usubstitueret eller substitueret med et halogenatom.

7. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, hvori det opnåede produkt er et tetrazinderivat med den almene formel (I) ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R1 står for en alkylgruppe indeholdende 1-3 carbonatomer, hvilken gruppe er usubstitueret eller substitueret med et halo- 20 genatom.

8. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, hvori det opnåede produkt er et tetrazinderivat med den almene formel (I) ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R1 står for en methyl- eller 2-halogenalkylgruppe.

9. Analogifremgangsmåde ifølge krav 8, kende tegnet ved, at halogenatomet på alkylgruppen er chlor eller fluor.

10. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, hvori det opnåede produkt er et tetrazinderivat med den almene 30 formel (I) ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R1 står for en 2-fluorethyl- eller 2-chlorethylgruppe.

10 R3NC0 (III) hvori R3 er som ovenfor defineret for R1 med undtagelse af hydrogen, eller (B) , når R1 er forskellig fra hydrogen, omsætter en forbindelse med den almene formel (IV) 15 R2 V'; N I (IV) .NH Y o hvori R2 er som_ovenfor defineret, eller et alkalimetalsalt deraf med en forbindelse med den almene formel (V 25 R3X (V) hvori R3 er som ovenfor defineret, og X står for en syrerest af en reaktiv ester, eller (C) , når R1 i derivatet betyder hydrogen eller et alkalimetalsalt deraf, omsætter en forbindelse med den almene formel 30 (II) N.'pV N λ n2 ® 35 DK 161147B hvori er som ovenfor defineret, med en forbindelse med den almene formel (VI) R4NCO (VI) hvori R4 står for et alkalimetalatom eller en beskyttende 5 gruppe, fortrinsvis en benzyl- eller p-methoxybenzylgruppe efterfulgt, hvis R4 står for en beskyttende gruppe, af ombytning af den beskyttende gruppe med et hydrogenatom i den således opnåede forbindelse med den almene formel (VII) V- N. I I (VII) Yx»5 15 0 hvori R^ er som ovenfor defineret, og R5 står for en beskyttende gruppe, fortrinsvis en benzyl- eller p-methoxyben-zylgruppe, ved hjælp af kendte metoder.

10 T 0 hvori R1 står for et hydrogenatom eller en ligekædet eller forgrenet alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe indeholdende indtil 15 6 carbonatomer, idet enhver sådan gruppe er usubstitueret eller substitueret med fra 1 til 3 substituenter, som er udvalgt fra halogenatomer, ligekædede eller forgrenede alk-oxy-, alkylthio-, alkylsulfinyl- og alkylsulfonylgrupper indeholdende indtil 4 carbonatomer, eller R1 står for en 20 cycloalkylgruppe indeholdende fra 3 til 8 carbonatomer eller en phenylgruppe, som er usubstitueret eller substitueret med én eller flere grupper, som er udvalgt fra ligekædede og forgrenede alkoxy- og alkylgrupper hver især indeholdende op til 4 carbonatomer og nitrogrupper, og 25 R2 står for en carbamoylgruppe, som på nitrogenatomet kan bære 1 eller 2 grupper udvalgt fra ligekædede eller forgrenede alkyl- og alkenylgrupper, der hver indeholder indtil 4 carbonatomer, og fra cycloalkylgrupper indeholdende fra 3-8 carbonatomer, samt alkalimetalsalte deraf, når R1 betyder 30 hydrogen, kendetegnet ved, at man (A), når R1 er forskellig fra hydrogen, omsætter en forbindelse med den almene formel II DK 161147 B N,q! N R2 \ © hvori R2 er som defineret ovenfor, med et isocyanat med den almene formel (III)

11. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, hvori det opnåede produkt er et tetrazinderivat med den almene formel (I) ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R1 35 står for en benzyl- eller p-methoxybenzylgruppe. DK 161147B

12. Analogifremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 11, kendetegnet ved, at R2 i tetrazinproduktet med den almene formel (I) ifølge krav 1 står for en carbamoylgruppe, en monoalkylcarbamoylgruppe 5 indeholdende indtil 4 carbonatomer i alkylgruppen eller en monoalkenylcarbamoylgruppe indeholdende indtil 4 carbonatomer i alkenylgruppen.

13. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, hvori det opnåede produkt er et tetrazinderivat med den almene formel 10 (I) ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R1 er en ligekædet eller forgrenet alkyl-, alkenyl- eller alkynylgrup-pe indeholdende fra 1-6 carbonatomer, idet enhver sådan gruppe er usubstitueret eller substituret med fra 1 til 3 halogenatomer, og R2 står for en carbamoylgruppe.