NL8203286A

NL8203286A - 3h-imidazo-5,1-d-1,2,3,5-tetrazine-4-on derivaten, werkwijzen ter bereiding ervan en farmaceutische samenstellingen, die deze derivaten bevatten.

Info

Publication number: NL8203286A
Application number: NL8203286A
Authority: NL
Original assignee: May & Baker Ltd
Priority date: 1981-08-24
Filing date: 1982-08-23
Publication date: 1983-03-16
Also published as: GEP19960641B; FI822921A0; FI73434C; DE3231255C2; GB2104522B; CA1197247A; FR2511679A1; KR840001175A; DK377882A; LT2436B; IL66606A0; HU186107B; BE894175A; FI73434B; IE822026L; GB2104522A; LV5511A3; CH655114A5; OA07174A; AU571430B2

Description

m i.

v N.O. 31302 1 [3H]-imidazo-[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on derivaten, werkwijzen ter bereiding ervan en farmaceutische samenstellingen, die deze derivaten bevatten.

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op nieuwe [3H]~imidazo~[5,l-d]~l,2,3-tetrazine-4-on derivaten, op werkwijzen ter bereiding ervan en op farmaceutische samenstellingen, die deze derivaten bevatten.

5 De verbindingen van de onderhavige uitvinding zijn de [3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4~on derivaten met de algemene formule 1, waarin R^ een waterstofatoom of een rechte of vertakte alkyl-, alkenyl- of alkynylgroep, die 1 tot 6 koolstofatomen bevat, waarbij elke 10 dergelijke groep niet gesubstitueerd kan zijn of gesubstitueerd kan zijn met ββη tot drie substituenten gekozen uit halogeen (d.w.z. broom, jood of bij voorkeur chloor of fluor)atomen, rechte of vertakte alkoxy-, (bijvoorbeeld methoxy), alkylthio-, alkylsulfinyl en alkylsul-fonylgroepen met ten hoogste 4 koolstofatomen, en eventueel gesubstitu-15 eerde fenylgtoepen of een cycloalkyIgroep voorstelt en R^ een carbamoylgroep voorstelt, die aan het stikstofatoom een of twee groepen kan bevatten gekozen uit rechte en vertakte alkyl- en alkenylgroepen, die elk ten hoogste 4 koolstofatomen bevatten en cycloalkylgroepen, bijvoorbeeld een methylcarbamoyl- of dimethylcarbamoyIgroep.

20 Wanneer het symbool R^ een alkyl-, alkenyl- of alkynylgroep voorstelt, gesubstitueerd met twee of drie halogeenatomen, kunnen de hiervoor vermelde halogeenatomen gelijk of verschillend zijn. Wanneer het symbool een alkyl-, alkenyl- of alkynylgroep voorstelt, gesubstitueerd met §en, twee of drie eventueel gesubstitueerde fenylgroepen, 25 kunnen de eventuele substituenten aan de fenylgroep(en) gekozen warden uit bijvoorbeeld alkoxy- en alkylgroepen met ten hoogste 4 koolstofatomen (bijvoorbeeld methoxy en/of methylgroep(en)) en de nitrogroep; het symnbool R1 kan bijvoorbeeld een benzyl- of p-methoxybenzylgroep voorstellen. Cycloalkylgroepen binnen de definities van de symbolen 30 R^ en bevatten 3 tot 8, bij voorkeur 6 koolstofatomen.

Tetrazinederivaten met de algemene formule 1, die de voorkeur ver-dienen, zijn die derivaten waarin R·*· een rechte of vertakte alkyl-groep met 1 tot 6 koolstofatomen voorstelt, eventueel gesubstitueerd met S§n of twee halogeen (bij voorkeur chloor, fluor of broom)atomen of 35 met een alkoxygroep, die 1 tot 4 koolstofatomen bevat (bij voorkeur 8203286 2 < } i methoxy) of met een fenylgroep (eventueel gesubstitueerd met SSn of twee alkoxygroepen, die 1 tot 4 koolstofatomen bevat(ten), bij voorkeur methoxy), of waarin een alkenylgroep, die 2 tot 6 koolstofatomen bevat (bij voorkeur allyl) of een cyclohexylgroep voorstelt.

5 Tetrazinederivaten, die meer in het bijzonder de voorkeur verdie- nen, zijn die derivaten met de algemene formule 1, waarin R^ een rechte of vertakte alkylgroep met 1 tot 6 koolstofatomen voorstelt en meer in het bijzonder 1 tot 3 koolstofatomen, niet gesubstitueerd of gesubstitueerd met een halogeen-, bij voorkeur chloor of fluor, atoom. 10 Meer in het bijzonder stelt een methyl- of 2-halogeenalkyl-, bij-voorbeeld 2-fluorethyl- of bij voorkeur 2-chloorethyl-groep voor.

Bij voorkeur stelt R^ een carbamoylgroep of een monoalkylcarbamoyl-, bijvoorbeeld methylcarbamoyl- of monoalkenylcarbamoylgroep voor.

15 De onderhavige uitvinding heeft eveneens betrekking op zouten van de verbindingen met de algemene formule 1, waarin R^ een waterstof-atoom voorstelt en R^ zoals hiervoor gedefinieerd is, meer in het bijzonder alkalimetaalzouten, bijvoorbeeld natriumzouten, en wanneer de context het toelaat heeft verwijzing naar de verbindingen met de alge-20 mene formule 1 bij de onderhavige beschrijving eveneens betrekking op de zouten. De zouten zijn bijzonder geschikt als tussenprodukten.

Volgens een kenmerk van de onderhavige uitvinding worden de verbindingen met de algemene formule 1, waarin R^ zoals hiervoor gedefinieerd is en Rl anders is dan waterstof, bereid door de reactie van een 25 verbinding met de algemene formule 2, waarin R^ zoals hiervoor gedefinieerd is, met een isocyanaat met de algemene formule 3, waarin een alkyl-, alkenyl of alkynylgroep voorstelt, die eventueel gesubstitueerd is met een tot drie substituenten gekozen uit halogeenatomen, alkoxy-, alkylthio-, alkylsulfinyl- en alkylsulfonylgroepen en eventueel gesub-30 stitueerde fenylgroepen of een cycloalkylgroep voorstelt binnen de de-finitie van het hiervoor vermelde symbool R·*·. De reactie kan worden uitgevoerd bij afwezigheid of aanwezigheid van een watervrij organisch oplosmiddel, bijvoorbeeld een gechloreerd alkaan, bijvoorbeeld di-chloormethaan of ethylacetaat, acetonitril, N-methylpyrrolide-2-on of 35 bij voorkeur hexamethylfosforamide, bij een temperatuur tussen 0° en 70°C, bijvoorbeeld bij omgevingstemperatuur. De reactie kan tot 30 da-gen worden voortgezet. Licht dient bij voorkeur buiten het reactiemeng-sel gesloten te worden.

Volgens een ander kenmerk van de onderhavige uitvinding worden 40 verbindingen met de algemene formule 1, waarin R^ zoals hiervoor gede- 8203285 t ( 3 finieerd is en R^ anders is dan waterstof, bereid door de reactie van een verbinding (binnen de algemene formule 1) met de algemene formule 4, waarin goals hiervoor gedefinieerd is, of een alkalimetaalzout, bijvoorbeeld natriumzout ervan, met een verbinding met de algemene for— 5 mule 5, waarin R^ zoals hiervoor gedefinieerd is en X de zuurrest van een reactieve ester voorstelt, bijvoorbeeld een halogeen (bijvoorbeeld chloor) atoom of een zwavelzuur- of sulfonzuuresterrest, bijvoorbeeld een methoxysulfonyloxy-, methaansulfonyloxy- of tolueen-p-sulfonyloxy-groep. Wanneer R^ in een verbinding met de algemene formule 5 een halo-10 geenalkyl- of halogeenalkenyl- of halogeenalkynylgroep voorstelt, zal de zuurrest van een reactieve ester voorgesteld door X gekozen warden uit die waarvan bekend is dat zij niet minder reactief zijn dan de ha-logeensubstituent in R^. Wanneer X in een verbinding met de algemene formule 5 een halogeenatoom voorstelt, wordt bijvoorbeeld een alkalime-15 taalzout van de verbinding met de algemene formule 4 gebruikt en wanneer X in een verbinding met de algemene formule 5 een halogeenatoom voorstelt en R^ is een halogeenalkyl-, halogeenalkenyl- of halogeenalkynylgroep, waarin het halogeenatoom hetzelfde is als dat voorgesteld door X, wordt bij voorkeur een overmaat van de dihalogeenverbinding met 20 de algemene formule 5 gebruikt. De reactie van een verbinding met de algemene formule 4 of een alkalimetaalzout ervan met een verbinding met de algemene formule 5, waarin R^ en X zoals hiervoor gedefinieerd zijn, kan worden uitgevoerd in een geschikt watervrij inert organisch oplos-middel, bijvoorbeeld dichloormethaan, acetonitril of N-methylpyrroli-25 de-2-on of mengsels ervan, bij een temperatuur van 0°C tot 120°C, wanneer een verbinding met de algemene formule 4 wordt gebruikt, bij aan-wezigheid van een zuurbindend middel, bijvoorbeeld een alkalimetaal-, bijvoorbeeld natrium- of kalium-carbonaat of -waterstofcarbonaat.

Als een verder kenmerk van de uitvinding worden verbindingen met 30 de algemene formule 4 (d.w.z. verbindingen met de algemene formule 1, waarin R^· een waterstofatoom voorstelt en R^ zoals hiervoor gedefinieerd is) of alkalimetaalzouten ervan bereid door de reactie van een verbinding met de algemene formule 2 met een verbinding met de algemene formule 6, waarin R^ een alkalimetaalatoom (bijvoorbeeld natrium) 35 voorstelt of een beschermende groep zoals een benzyl- of p-methoxy-benzylgroep, gevolgd, wanneer R^ een beschermende groep voorstelt, door de vervanging van de beschermende groep door een waterstofatoom in de aldus verkregen verbinding met de algemene formule 7, waarin R^ zoals hiervoor gedefinieerd is en R^ een beschermende groep voorstelt, 40 zoals een benzyl- of p-methoxybenzylgroep, volgens op op zichzelf be- 820 3 286 « » 4 kende werkwijzen. Reactie van een verbinding met de algemene formule 2 met een verbinding met de algemene formule 6, waarin een bescher-mende groep voorstelt, kan worden uitgevoerd zoals hiervoor beschreven voor de reactie van een verbinding met de algemene formule 2 met een 5 verbinding met de algemene formule 3. Reactie van een verbinding met de algemene formule 2 met een verbinding met de algemene formule 6, waarin een alkalimetaalatoom voorstelt, kan in een geschikt inert orga-nisch oplosmiddel worden uitgevoerd, bijvoorbeeld ethanol, acetonitril of N-methylpyrrolidon, desgewenst bij aanwezigheid van een zuur, bij 10 een temperatuur van 0° tot 120°C. De groep R^ van verbindingen met de algemene formule 7, waarin R^ zoals hiervoor gedefinieerd is, kan vervangen worden door een waterstofatoom volgens op op zichzelf bekende werkwijzen voor het verkrijgen van een verbinding met de algemene formule 4.

15 Verbindingen met de algemene formule 2 kunnen bereid worden door toepassing of aanpassing van op op zichzelf bekende werkwijzen, bijvoorbeeld werkwijzen beschreven door Shealy Y.F., Struck R.F., Houlk L.B en Montgomery J.A., J. Org. Chem. 26, (1961) 2396.

Verbindingen met de algemene formules 3, 5 en 6 kunnen bereid wor-20 den door toepassing of aanpassing volgens op op zichzelf bekende werkwijzen.

Onder de uitdrukking ”op op zichzelf bekende werkwijzen" zoals ge-bruikt in de beschrijving worden werkwijzen verstaan, die tot dusverre zijn gebruikt of in de literatuur zijn beschreven.

25 De nieuwe tetrazinederivaten met de algemene formule 1 bezitten een waardevolle antineoplastische activiteit, bijvoorbeeld tegen carcinomen, melanomen, sarcomen, lymfomen en leukemieen. Zij zijn bij-zonder werkzaam gebleken bij muizen bij dagdoseringen tussen 0,5 en 16 mg/kg lichaamsgewicht, intraperitoneaal toegediend, tegen TLX5(S) 30 lymfoom volgens de methode van Gescher c.s., Biochem. Pharmacol. 30, (1981) 89, en ADJ/PC6A en M5076 (reticulum celsarcoom). Tegen leukemie L1210, intraperitoneaal, intracerebraal en intraveneus ge'dnt, en P388 volgens de methode beschreven in "Methods of Development of New Anticancer Drugs" (NCI Monograph 45, maart 1977, bladzijden 147-149, 35 National Cancer Institute, Bethesda, United States), waren de verbindingen zowel intraperitoneaal als oraal werkzaam bij doseringen tussen 2,5 en 10 mg/kg lichaamsgewicht. Remitting van zowel primaire tumor als metastase werd verkregen tegen het Lewis-longcarcinoom door soortgelij-ke doseringsregimes. Tegen de B16 melanomen en C38 tumor bij muizen 40 (NCI Monograph 45, op cit.) waren de verbindingen intraperitoneaal ac- 8203288 4 % » ,· 5 tief bij doseringen tussen 6,25 en 25 mg/kg lichaamsgewicht.

De tetrazinederivaten bezitten eveneens waardevolle immunomodula-tore activiteit en kunnen toegepast worden bij de behandeling van or-gaantransplantaten en huidtransplantaten en bij de behandeling van im-5 munologische ziekten.

Tot belangrijke afzonderlijke verbindingen met de algemene formule 1 behoren de volgende: 8-carbamoyl-3~methyl-[3H]-imidazo[5,1-d]- 1.2.3.5- tetrazine-4-on A, 10 8-carbamoyl-3-n-propyl-[3H]-imidazo[5,l-d]- 1.2.3.5- tetrazine-4-on B, 8-carbamoyl-3~(2-chloorfenyl)-[3H]-imidazo-[5,1-83-1,2,3,5-ίθίΓηζ1ηθ-4-οη C, 3-(2-chloorethyl)-8-methylcarbamoyl-[3H]- 15 imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on D, 8-carbamoyl~3-(3-chloorpropyl)-[3H]-imidazo-[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on E, 8-carbamoyl-3-(2,3-dichloorpropyl)-i3H]- imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on F, 20 3-allyl-8~carbamoyl-[3H]-imidazo[5,l-d]- 1.2.3.5- tetrazine-4-on G, 3-(2-chloorethyl)-8-dimethylcarbamoyl- [3H]~imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on H, 3-(2-broomethyl)-8~carbamoyl-[3H]-imidazo-25 [5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on I, 3-benzyl-8-carbamoyl-[3H]~imidazo[5,l-d]~ 1.2.3.5- tetrazine-4-on J, 8-carbamoyl-3-(2-methoxyethyl)-[3H]- imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on K, 30 8-carbamoyl-3-eyclohexyl~[3H]-imidazo[5,l-d]- 1.2.3.5- tetrazine-4-on L, en 8-carbamoy1-3-(p-methoxybenzyl)-[3H]-

imidazo[5,l-dj-l,2,3,5-tetrazine-4-on. M

35 De verbindingen A en D en in het bijzonder C zijn van bijzonder belang.

De letters A tot M zijn toegekend aan de verbindingen om later ge-makkelijk te kunnen verwijzen.

VOORBEELD I

40 Verbinding A

8203286 « * 6 4[5]-DiazoImidazool-5[4]-carboxamide (500 mg) werd in 3,0 ml methylisocyanaat gesuspendeerd en in het donker bij omgevingstempera-tuur 21 dagen geroerd. Vervolgens werd het reactiemengsel met water-vrije diSthylether verdund en gefiltreerd. Het residu werd snel met wa-5 tervrije methanol, vervolgens met watervrije diSthylether gewassen en in de lucht in het donker bij omgevingstemperatuur gedroogd, waarbij 8-carbamoyl-3-methyl-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on verkre-gen werd in de vorm van een lichtbruine microkristallijne vaste stof (198 mg), smeltpunt 210°C (met opbruising en donkerkleuring van 160° 10 tot 210°C).

[Elementairanalyse: gevonden: C 36,8; H 3,10; N 44,2%; C6H6N5O2 berekend: C 37,1; H 3,09; N 43,3%].

VOORBEELD II

15 Verbinding B

4[5]-Diazoimidazool-5[4]-carboxamide (300 mg) werd in 10 ml watervrije dichloormethaan gesuspendeerd en met een overmaat n-propylisocya-naat behandeld. Het reactiemengsel werd vervolgens in het donker bij omgevingstemperatuur 30 dagen geroerd. Vervolgens werd het reactiemeng- 20 sel gefiltreerd en werd het residu snel met watervrije diSthylether g-ewassen en in de lucht in het donker bij omgevingstemperatuur gedroogd, waarbij 8-carbamoyl-3-n-propyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazine- 4-on (102 mg) verkregen werd in de vorm van een lichtroze poeder, smeltpunt 167°C (met opbruising).

25 [Elementairanalyse: gevonden: G 43,4; H 4,57; N 38,0%; C8H10N6O2 berekend: C 43,2; H 4,53; N 37,8%].

VOORBEELD III

Verbinding C

30 4[5]-Diazolmidazool-5[4]-carboxamide (300 mg) werd in 10 ml water vrije dichloormethaan gesuspendeerd en 2~chloorethylisocyanaat (1,0 ml) werd toegevoegd. Vervolgens werd het reactiemengsel in het donker bij omgevingstemperatuur 30 dagen geroerd. De aldus verkregen crSme-kleuri-ge suspensie werd gefiltreerd en het residu werd snel met watervrije 35 diSthylether gewassen en in de lucht in het donker gedroogd, waarbij 8-carbamoyl-3-(2-chloorethyl)-[3H]-imidazo[5,1~]-1,2,3,5-tetrazine-4-on (483 mg) verkregen werd in de vorm van een crSme-kleurig poeder, smeltpunt 158°C (onder krachtige ontleding).

[Elementairanalyse: 40 gevonden: C 34,7 H 3,01; N 34,9%; C7H7CIN5O2 8203236 4 » 7 berekend: C 34,7; H 2,91; N 34,8%].

Herhaling van de hiervoor vermelde methode heeft eveneens 8-carbamoyl-3-(2-chloorethyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazine- 4-on in een andere polymorfe vorm, smeltpunt 164-165°C (onder ontle-5 ding) gegeven.

VOORBEELD IV

Verbinding A

Een suspensie van 4[5]-diazoimidazool-5[4J-carboxamide (1,37 g) in ethylacetaat (20 ml) werd met 7,0 g methylisocyanaat behandeld en in 10 een gesloten ketel in bet donker bij kamertemperatuur gedurende 3 weken geroerd. De verkregen vaste stof werd afgefiltreerd en met diSthylether gewassen, waarbij 8-carbamoyl-3~methyl-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on (1,9 g), verkregen werd in de vorm van een crSme-kleuri-ge vaste stof, smeltpunt 212eC (onder opschuiming).

15 Dit materiaal werd uit drie verschillende oplosmiddelsystemen her- kristalliseerd, waarbij drie verschillende produkten verkregen werden, waarvan elk een enigszins verschillend IR spectrum bezat. De drie produkten waren waarschijnlijk alle polymorfen van 8-carbamoyl-3-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on.

20 (i) Kleurloze naalden werden verkregen uit een 3:1 mengsel van vo- lumedelen aceton en water, 1? 3410, 3205, 1758, 1730 en max 1678 cm , smeltpunt 212°C (met opschuiming).

(ii) Witte microkristallen werden verkregen uit een 1:3 mengsel van volumedelen aceton en water, ">) 3430, 3200, 1740 en

IH3X

25 1675 , smeltpunt 210°C (met opschuiming).

(iii) Een granulaire vaste stof werd verkregen uit beet water, ^ 3450, 3380, 3200, 1742, 1688 en 1640 c, smeltpunt max 215°C (met opschuiming) (donkerkleuring vanaf 200°C).

VOORBEELD V

30 Verbinding B

Een suspensie van 4[5]-diazolmidazool-5[4]-carboxamide (1,37 g) in acetonitril (20 ml) werd behandeld met 6,5 g n-propylisocyanaat en werd in een gesloten ketel in het donker bij kamertemperatuur gedurende 3 weken geroerd. De verkregen roze vaste stof werd afgefiltreerd, met 35 di'dthylether gewassen en uit een mengsel van water en aceton (volume-verhouding 1:4) herkristalliseerd, waarbij 8-carbamoyl-3-n-propyl-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on (1,6 g) smeltpunt 170~172°C (met opschuiming) verkregen werd. Door concentratie van de moederloog van de herkristallisatie werd een verdere hoeveelheid (0,2 g) van het-40 zelfde produkt verkregen.

8203286 • ψ 8

VOORBEELD VI

Verbinding C

Een suspensie van 4[5]-diazoImidazool-5[4]-carboxamide (1,0 g) in ethylacetaat (30 ml) werd met 3,3 ml 2-chloorethylisocyanaat behandeld 5 en het mengsel werd in het donker bij omgevingstemperatuur gedurende 6 dagen geroerd. Vervolgens werd het reactiemengsel met diSthylether verdund en werd de verkregen vaste stof afgefiltreerd, waarbij 8-carbamoyl-3-(2-chloorethyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine- 4-on (1,6 g) verkregen werd in de vorm van een kleurloze vaste stof, 10 smeltpunt 164-165°C (met ontleding).

[Elementairanalyse: gevonden: C 34,5; H 2,88; N 34,5; Cl 14,6%; C7H7CIN6O2 berekend: V 34,65; N 34,65; Cl 14,61%].

VOORBEELD VII

15 Verbinding C

Een suspensie van 4[5]-diazoImidazool-5[4]~carboxamide (5,0 g) in een mengsel van dichloormethaan (158 ml) en N-methylpyrrolide-2-on (8,3 ml) werd met 16,7 ml 2-chloorethylisocyanaat behandeld en het mengsel werd in het donker bij omgevingstemperatuur gedurende 14 dagen geroerd.' 20 Vervolgens werd het reactiemengsel met watervrije diSthylether verdund en werd de verkregen vaste stof afgefiltreerd en met diSthylether gewassen, waarbij 8-carbamoyl-3-(2-chloorethyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]~ l,2,3,5-tetrazine-4-on (6,3 g), verkregen werd in de vorm van een paarsachtige vaste stof, smeltpunt 164-165°C (onder ontleding).

25 [Elementairanalyse: gevonden: C 34,7; H 2,95; N 34,5; Cl 14,4%; C7H7CIN6O2 berekend: C 34,65; H 2,91; N 34,65; Cl 14,61%].

VOORBEELD VIII

Verbinding C

30 Een suspensie van 4[5]-diazolmidazool-5[4]-carboxamide (145 g) in ethylacetaat (2175 ml) werd met 478,5 ml 2-chloorethylisocyanaat hehan-deld en bij 30°C onder uitsluiting van licht gedurende 2 dagen geroerd. Vervolgens werd het mengsel afgefiltreerd, waarbij 8-carbamoyl-3-(2-chloorethyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on (250 g) verkre-35 gen werd in de vorm van een perzikkleurige vaste stof, smeltpunt 166°C.

VOORBEELD IX

Verbinding A

Een geroerde suspensie van 4[5]-diazolmidazool-5[4]-carboxamide 40 (2,2 g) in een mengsel van dichloormethaan (70 ml) en N-methyl- 8203286 9 » % pyrrolidine-2-on (3,5 ml) werd met 7,0 ml methylisocyanaat behandeld en 4 weken bij omgevingstemperatuur geroerd. Het mengsel werd met diethyl-ether verdund en de verkregen vaste stof werd afgefiltreerd, waarbij 8-carbamoyl-3-methyl~[3Hj~imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on 5 (2,38 g), verkregen werd in de vorm van een lichtpaarse vaste stof, smeltpunt 202-203°G (onder ontleding).

[Elementairanalyse: gevonden: C 36,8; H 2,94; N 43,1%; CgH6Ng02 berekend: C 37,11; H 3,14; N 43,3%].

10 Een polymorfe vorm van 8-carbamoyl-3-methyl~[3H]-imidazo[5,l-d]- l,2,3,5-tetrazine-4-on werd verkregen door het in acetonitril op te lossen, te filtreren, het filtraat tot droog te concentreren en het verkregen residu met diSthylether te wrijven. Dit produkt was in de vorm van een oranjekleurige vaste stof, smeltpunt ongeveer 200°C (onder 15 ontleding).

[Elementairanalyse: C 37,4; H 3,26; N 43,5%].

Het NMR-spectrum ervan in dimethylsulfoxide-Dg was identiek aan dat van de hiervoor vermelde lichtpaarse vaste stof, maar het IR spectrum (KBr schijf) vertoonde enige verschillen.

20 V00RBEELD X

Verbinding D

Een geroerde oplossing van 0,64 g natriumnitriet in 4,6 ml water werd op 5-10°C gekoeld en druppelsgewijze bij die temperatuur behandeld met een oplossing van 1,00 g 5-amino-4-methylcarbamoylimidazool in 25 14,3 ml 1 molair waterig azijnzuur gedurende 5 minuten. De roerbehande- ling werd gedurende 5 minuten bij 5 tot 10°C voortgezet. Vervolgens werd de donkerrode oplossing met 4 x 35 ml ethylacetaat geextraheerd en de samengevoegde extrakten warden boven magnesiumsulfaat gedroogd. De verkregen oplossing bevatte onzuiver 4[5]-diazo-5[4]-methylcarbamoyl-30 imidazool, dat niet stabiel was en onmiddellijk gebruikt werd voor de volgende trap zonder verdere zuivering.

De oplossing van 4[5]-diazo-5[4]-methylcarbamoylimidazool in ethylacetaat, bereid zoals hiervoor beschreven, werd met 4,3 ml 2-chloorethylisocyanaat behandeld en werd 1 dag in het donker bewaard.

35 Vervolgens werd de oplossing ingedampt bij 40°C/1,3 kPa en het residu werd met petroleumether (kookpunt 40-60°C) aangewreven, waarbij 4,23 g van een oranje gom verkregen werden. Deze gom werd met 50 ml ethylacetaat behandeld en gefiltreerd en het filtraat werd bij 40°C/1,3 kPa ingedampt voor het verkrijgen van 2,94 g van een oranje gom. Deze gom 40 werd gezuiverd door kolomchromatografie bij middelmatige druk over si- 8203286 10 licagel, elutie met een mengsel van ethylacetaat en acetonitril in de volumeverhouding 4:1, waarbij 3-(2-chloorethyl)-8-methylcarbamoyl-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on (0,81 g) verkregen werd in de vorm van paarse vaste stof, smeltpunt 120-122°C (onder ont-5 leding).

[Elementairanalyse: gevonden: C 37,3; H 3,58; N 31,9%; CgHgClN^ berekend: C 37,4; H 3,53; N 32,7%].

VOORBEELD XI

10 Verbinding B

Een suspensie van 4[5]-diazolmidazool-4[4]-carboxamide (1,0 g) in ethylacetaat (50 ml gedroogd boven watervrij kaliumcarbonaat) werd met 4,86 g 3-chloorpropylisocyanaat behandeld en het mengsel werd gedurende 3 dagen bij omgevingstemperatuur geroerd. Vervolgens werd het reactie-15 mengsel met watervrije di'dthylether verdund en werd de verkregen vaste stof afgefiltreerd en met watervrije di’dthylether gewassen, waarbij 8-carbamoyl-3-(3-chloorpropyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazine- 4-on (1,05 g) verkregen werd in de vorm van een roze vaste stof, smeltpunt 153-154°C (onder ontleding).

20 [Elementairanalyse: gevonden: C 37,1; H 3,42; N 32,7; Cl 13,8% C8H8C1N602 berekend: C 37,4; H 3,53; N 32,8; Cl 13,8%].

VOORBEELD XII

Verbinding F

25 Door op een soortgelijke wijze te werk te gaan als hiervoor in voorbeeld XI beschreven, evenwel onder vervanging van het als uitgangs-produkt gebruikte 3-chloorpropylisocyanaat door de geschikte hoeveel-heid 2,3-dichloorpropylisocyanaat werd 8-carbamoyl-3-(2,3-dichloor~ propyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on bereid in de vorm 30 van een gebroken-witte vaste stof, smeltpunt 153-155°C (met ontleding) .

[Elementairanalyse: gevonden: C 32,7; H 2,51; N 28,7; Cl 24,1% C8H8C12N602 berekend: C 33,0; H 2m77; N 28,9; Cl 24,4%].

35 VOORBEELD XIII

Verbinding G

4,5 ml onmiddellijk voor gebruik opnieuw gedestilleerd geroerd, allyl-isocyanaat werd met 1,0 g 4[5]-diazoImIdazool-5[4]-carboxamide en vervolgens met 20 ml hexamethylfosforamide behandeld. Het mengsel werd 40 in het donker gedurende 18 uren bij omgevingstemperatuur geroerd en 8203286 Λ Π vervolgens werd het verdund met watervrije diSthylether en gefiltreerd.

De verkregen kleurloze vaste stof werd met watervrije diethylether gewassen, waarbij 3-allyl-8-carbamoyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazine-4-on (1,6 g) verkregen werd in de vorm van een kleurloze vas-5 te stof, smeltpunt 149-150°C.

[ l) (KBr schijf): 1730, 1675 cm"1,· NMR in MMSO-d*: singlets bij 8,75, 7,67 en 7,60(7 ; dubbel triplet bij 6,02 a (Js5,5, 8, 10Hz), dubbel doublet bij 5,35/ (J-1,5, 8 Hz) en 5,20 (f (J=l,5, 10 Hz) en doublet bij 4,88(/ (J=5,5)].

10 VQQRBEELD XIV

Verbinding H

Een oplossing van 4[5]-diazo-5[4]-dimethylcarbamoylimidazool (1,59 g zoals beschreven in referentievoorbeeld I hierna) in 57 ml droog ethylacetaat werd met 6,36 g 2-chloorethylisocyanaat behandeld en 15 in het donker gedurende 24 uren bij kamertemperatuur geroerd. Vervolgens werd de oplossing onder vacuUm bij 35eC en tenslotte bij 0,013 kPa ingedampt ter verwijdering van de overmaat 2-chloorethylisocyanaat. De overblijvende vloeistof werd door kolomchromatografie bij middelmatige druk over silicagel gezuiverd, met een mengsel van ethyl-acetaat en 20 acetonitril in de volumeverhouding 4:1 geSlueerd, waarbij 3-(2-chloor-ethyl)-8-dimethylcarbamoyl-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on (0,82 g) verkregen werd in de vorm van kleurloze kristallen met een smeltpunt van 114-116°C.

[Elementairanalyse: 25 gevonden: C 39,7j H 3,95; N 30,8%; C9HHCIN6O2 berekend: C39,9; H 4,10; N 31,0%].

VOORBEELD XV

Verbinding I

Een geroerde suspensie van 4[5]-diazoImidazool-5[4]-carboxamide 30 (1,0 g) in hexamethylfosforamide (4 ml) werd 4,5 ml 2-broomethyl- isocyanaat behandeld en het mengsel werd gedurende 2 dagen bij omge-vingstemperatuur in het donker geroerd. Vervolgens werd het reactie-mengsel verdund met watervrije diSthylether en de achterblijvende vaste stof werd afgefiltreerd en met watervrije diSthylether gewassen, 35 waarbij 3-(2-broomethyl)-8-carbamoyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazine-4-on (1,17 g) verkregen werd in de vorm van een kleurloze vaste stof met een smeltpunt van 156-157°C (onder ontleding). [Elementairanalyse: gevonden: C 29,5; N 2,36; N 29,2; Br 27,3%; C7H7BrN602 40 berekend: C 29,3; H 2,46; N 29,3; Br 27,8%].

6203286 ψ » 12

VOORBEELD XVI

Verblnding J

Door op een soortgelijke wijze te werk te gaan zoals die hiervoor beschreven in voorbeeld XV evenwel onder vervanging van het 2-broont-5 ethylisocyanaat, dat als uitgangsprodukt werd gebruikt, door de ge-schikte hoeveelheid benzylisocyanaat werd 3-benzyl-8-carbamoyl-[3H]-imidazo-[5,X—d]-1,2,3,5-tetrazine-4-on (0,83 g) bereid in de vorm van een sterk geelachtig gekleurde vaste stof met een smeltpunt van 176-177°C (met ontleding).

10 [Elementairanalyse: gevonden: C 53,6; H 3,66; N 31,0%; 0^2^10^6^2 berekend: C 53,3; H 3,73; N 31,1%].

VOORBEELD XVII

Verbinding K

15 Een suspensie van 4(5]-diazoImidazool-5[4]-carboxamide (0,3 g) in acetonitril (5 ml) werd behandeld met 0,5 g 2~methoxyethylisocyanaat en het mengsel werd in het donker gedurende 24 uren tussen 45° en 47°C geroerd. De verkregen vaste stof werd afgefiltreerd en met diSthylether gewassen, waarbij onzuiver 8-carbamoyl-3~(2~methoxyethyl)-[3H]~ 20 imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on (0,45 g), smeltpunt 145-147°C (met ontleding) verkregen werd.

Het produkt werd door herkristallisatie uit waterige aceton ge-zuiverd, waarbij roze rozetten verkregen werden, of uit waterige di-methylsulfoxide, waarbij kleurloze naalden verkregen werden, met een 25 smeltpunt van 164-165°C (met ontleding).

[Elementairanalyse: C 40,4; H 4,20; N 35,2%; GgHioN6°3 berekend: C 40,34; H 4,20; N 35,2%].

VOORBEELD XVIII

Verbinding L

30 Een suspensie van 4[5]-diazolmidazool-5[4]-carboxamide (0,30 g) in acetonitril (10 ml) werd met 1,0 g cyclohexylisocyanaat behandeld en het mengsel werd in het donker gedurende 3 dagen bij 60°C geroerd. De verkregen vaste stof werd afgefiltreerd en met een mengsel van ethanol en 0,880 waterige ammoniak (volumeverhouding 100:0,5, 20 ml) gedurende 35 een minuut gewassen, waarbij 8-carbamoyl-3-cyclohexyl-[3H]-imidazo- [5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on (0,015 g), smeltpunt 196°C (met opbruising) verkregen werd.

VOORBEELD XIX

Verbinding J

40 Een suspensie van 4[5]-diazoimidazool-5[4]-carboxamide (0,4 g) in 8203236 * i' 13 acetonitril (10 ml) werd met 0,6 g benzyllsocyanaat behandeld en het mengsel werd Sen nacht in het donker bij 60°C geroerd. Vervolgens werd het reactiemengsel gekoeld en gefiltreerd, waarbij 3-benzylcarbamoyl-[3H]-imidazo[5,lld]-l,2,3,5-tetrazine-4~on (0,75 g) verkregen werd in 5 de vorm van een lichtroze vaste stof met een smeltpunt van 187-188eC (met opbruising).

VOORBEELD XX

Verbinding M

Een suspensie van 4[5]-diazo'imidazool-5[4]-carboxamide (0,1 g) en 10 p-methoxyb enz ylisocyanaat (0,4 g) in acetonitril (5 ml) werd gedurende 4 uren in het donker bij 60°C geroerd. De verkregen lichtroze vaste stof werd afgefiltreerd en herhaaldelijk met koude di'dthylether gewas-sen, waarbij 8-carbamoyl-3-(p-methoxybenzyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]- l,2,3,5-tetrazine-4~on (0,23 g), smeltpunt 180-182°C (met opbruising) 15 verkregen werd.

VOORBEELD XXI

Door op een soortgelijke wijze te werk te gaan als bij de voor-gaande voorbeelden werd 8-(n-allylcarbamoyl)-3-(2'-chloorethyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on (IR 1750 NMR (in 20 DMSO-Dg): multiplets 3,96, 5,06 en 5,84 ppm; triplets 4,60 en 6,2 ppm: singlet 8,78 ppm, bereid uit 5-amino"-4-allylcarbamoylimidazool via 5-diazo-4-allylcarbamoylimidazool. Het 5-amino-4-allylcarbamoyl-imidazool werd bereid uit 5~nitro'-4-<allylcarbamoylimidazool (smeltpunt 218-220°C) door reduktie met titaanchloride.

25 REFERENTIEVOORBEELD

(i) Een innig mengsel van 5-nitroImidazool-4-carbonzuur (2,0 g) en fosforpentachloride (2,67 g) werd geroerd en gedurende 1 uur bij 120°C in een oliebad verhit. De verkregen gele suspensie werd gedurende 30 minuten bij 60eC/0,13 kPa ingedampt, waarbij l,6-dinitro-5H,10H- 30 diimidazolfljS-a:!’jS'-djpyrazine-SjlO-dion (1,90 g) verkregen werd in de vorm van een gele vaste stof met een smeltpunt van 249-152°C (met ontleding). [ \) (KBr schijf) 1750 cm m/e 278 ([+)]. mflx

Windaus, Ber., 56^ (1923) 684 en Givera, Chem. Abs. 59, 1622e be-schrijven onder toepassing van dezelfde methode hun produkten als 35 "5-nitroImidazool-4-carbonylchloride”.

(ii) Een waterige dimethylamine-oplossing (25 gew./vol.%, 60 ml) werd op een temperatuur tussen 0° en 5°C gekoeld en in gedeelten onder roeren behandeld met l,6--dinitro'-5H,10H-dilmidazo[l,5-a:l,,5,-d]-pyrazine-5,10-dion (6,0 g) binnen dat temperatuurtraject. De verkregen 40 donkerpaarse oplossing werd 2 uren geroerd. De oplossing werd.bij 8203286 ψ - 14 50°C/1,3 kPa ingedampt en vervolgens door behandellng met geconcen-treerd zoutzuur aangezuurd, waarbij een oranje oplossing werd verkre-gen. Deze oplossing werd met 7 x 200 ml ethylacetaat geSxtraheerd en de samengevoegde extrakten werden boven magnesiumsulfaat gedroogd en inge-5 dampt, waarbij 6,6 g van een gele vaste stof verkregen werd. Deze vaste stof werd met 50 ml tolueen aangewreven en vervolgens uit ethylacetaat herkristalliseerd, waarbij 5[4 ]-nitro-4[5]-dimethylcarbamoylimidazool (2,53 g), in de vorm van gele kristallen, smeltpunt 193-195°C verkregen werd.

10 [Elementairanalyse: gevonden: C 38,9; H 4,23; N 30,4%; C6H8N4O3 berekend: C 39,1; H 4,38; N 30,4%].

(iii) Een oplossing van 5[4]-nitro-4[5]-dimethylcarbamoylimidazool (1,62 g) in droog dimethylformamide (32 ml) werd met 0,32 g platina- 15 oxide behandeld en onder waterstof bij atmosferische druk en kamertem-peratuur geschud. Na 3 uren was de waterstofabsorptie volledig (710 ml) . Het mengsel werd met houtskool behandeld en door diatomee'dnaarde gefiltreerd. Het donkerbruine filtraat werd bij 50°C/0,013 kPa ingedampt en het verkregen residu werd met di'dthylether aangewreven, waar-20 bij onzuiver 5[4]-amino-4[5]-dimethylcarbamoylimidazool (1,75 g), in de vorm van een donkerbruine, kristallijne vaste stof met een smeltpunt van 179-181eC [ ί) (KBr schijf) 1595 cm”1; NMR in max DMSO-dg: singlets bij 3,2 en 7,0^], die nog verontreinigd was met colloldaal platina, verkregen werd en die bij de volgende trap zonder 25 verdere zuivering werd gebruikt.

(iv) Een geroerde oplossing van 0,79 g natriumnitriet in 5,7 ml water werd op een temperatuur tussen 5° en 10°C gekoeld en druppelsge-wijze binnen dit temperatuurtraject behandeld met een oplossing van 5[4]-amino-4[5]-dimethylcarbamoylimidazool (1,75 g) in waterig azijnr- 30 zuur (1 molair, 17,6 ml) gedurende 5 minuten. De verkregen oplossing werd met 4 x 40 ml ethylacetaat geSxtraheerd, de samengevoegde extrakten werden boven magnesiumsulfaat gedroogd en bij 30°C/1,3 kPa ingedampt, waarbij 4[5]-diazo-5[4]-dimethylcarbamoylimidazool (1,59 g) in de vorm van oranje kristallen, smeltpunt 101-103°C (met ontleding) ver-35 kregen werden.

[Elementairanalyse: gevonden: C 42,6; H 4,17; N 41,4; C6H7N5O berekend: C 43,6; H 4,27·; N 42,4%].

De onderhavige uitvinding heeft eveneens betrekking op farmaceuti-40 sche samenstellingen, die als werkzaam bestanddeel ten minste §§n te- 8203296 15 - * trazinederivaat met de algemene formule 1, tezamen met een farmaceuti-sche drager of bekleding bevatten. In de klinische praktijk zullen de verbindingen met de algemene formule 1 oraal, rectaal, vaginaal of pa-renteraal, bijvoorbeeld intraveneus of intraperitoneaal, worden toege-5 dlend.

Werkwijzen voor het opleveren van farmaceutisch actleve verbindingen zijn bekend en een geschikte drager kan door de arts of apothe-ker worden vastgesteld, afhankelijk van factoren zoals het beoogde effect, de grootte, de leeftijd, het geslacht en de toestand van de pa-10 tiSnt en van de eigenschappen van de actieve verbinding, De samenstel-lingen kunnen eveneens, zoals gebruikelijk, dergelijke materialen bevatten als vaste of vloeibare verdunningsmiddelen, bevochtigingsmidde-len, conserveermiddelen, smaakstoffen en kleurstoffen en dergelijke.

Tot vaste samenstellingen voor orale toediening behoren geperste 15 tabletten, pillen, dispergeerbare poeders en granules. In dergelijke vaste samenstellingen wordt of worden een of meer actieve verbindingen gemengd met ten minste een inert verdunningsmiddel zoals calciumcarbo-naat, aardappelzetmeel, alginezuur of lactose. De samenstellingen kunnen eveneens, zoals in de normale praktijk, extra stoffen bevatten an-20 ders dan inerte verdunningsmiddelen, bijvoorbeeld glijmiddelen zoals magnesiumstearaat. Vloeibare samenstellingen voor orale toediening omr vatten farmaceutisch aanvaardbare emulsies, oplossingen, suspensies, siropen en elixers, die inerte verdunningsmiddelen bevatten, zoals ge-woonlijk gebruikt worden, bijvoorbeeld water en vloeibare paraffine.

25 Naast inerte verdunningsmiddelen kunnen dergelijke samenstellingen eveneens toevoegsels bevatten, zoals bevochtigingsmiddelen en suspen-deermiddelen, bijvoorbeeld polyvinylpyrrolidon, en zoetstoffen, smaakstoffen, aroma's en conserveermiddelen. De samenstellingen volgens de uitvinding voor orale toediening omvatten eveneens capsules van absor-30 beerbaar materiaal, zoals gelatine, die §§n of meet werkzame stoffen met of zonder toevoeging van verduningsmiddelen of versnijdingsmiddelen bevatten.

Tot vaste samenstellingen voor vaginale toediening behoren pessaria, die op op zichzelf bekende wijze zijn geformuleerd en die Sen 35 of meer werkzame verbindingen bevatten.

Vaste samenstellingen voor rectale toediening omvatten supposlto-ria, die op op zichzelf bekende wijze geformuleerd zijn en een of meer werkzame verbindingen bevatten.

Tot preparaten volgens de uitvinding voor parenterale toediening 40 behoren steriele waterige of niet waterige oplossingen, suspensies of 8203286 φ 16 emulsies. Voorbeelden van niet-waterige oplosmiddelen of suspenderings-media zijn polyethyleenglycol, dimethylsulfoxide, plantaardige oli’dn, zoals olijfolie en injecteerbare organische esters zoals ethyloleaat. Deze samenstellingen kunnen ook toevoegsels bevatten zoals conserveer-5 middelen, bevochtigingsmiddelen, emulgeermiddelen en dispergeermidde-len. Zij kunnen gesteriliseerd worden, bijvoorbeeld door filtratie door een filter dat bacterieSn tegenhoudt, door opname van sterilisatiemid-delen in de samenstellingen of door bestraling. Zij kunnen eveneens be-reid worden in de vorm van steriele vaste samenstellingen, die in ste-10 riel water of een of ander steriel injecteerbaar milieu onmiddellijk voorgebruik opgelost worden.

Het percentage werkzaam bestanddeel in de samenstellingen van de uitvinding kan gevarieerd worden, waarbij het noodzakelijk is, dat het een zodanig gedeelte zal vormen, dat een geschikte dosering voor het 15 gewenste therapeutische effect verkregen zal worden. Het ligt voor de hand dat verschillende eenheidsdoseringsvormen ongeveer tegelijkertijd kunnen worden toegediend. In het algemeen zullen de preparaten gewoon-lijk ten minste 0,025 gew.% van de werkzame stof bevatten indien be-stemd voor toediening door injectie; voor orale toediening zal het pre-20 paraat gewoonlijk ten minste 0,1 gew.% werkzame stof bevatten. De toe-gepaste dosering hangt af van het gewenste therapeutische effect, de toedieningsweg en de duur van de behandeling.

De tetrazinederivaten met de algemene formule 1 zijn geschikt voor de behandeling van kwaadaardige neoplasmen, bijvoorbeeld carcinomen, 25 melanomen, sarcomen, lymfomen en leukemieen bij doseringen, die in het algemeen tussen 0,1 en 200, bij voorkeur tussen 1 en 20 mg/kg lichaams-gewicht per dag liggen.

De volgende samenstellingsvoorbeelden lichten farmaceutische samenstellingen volgens de onderhavige uitvinding toe.

30 SAMENSTELLINGSYOORBEELD 1

Een oplossing, die voor parenterale toediening geschikt is, werd uit de volgende bestanddelen bereid: 8-Carbamoyl-3-(2-chloorethyl)-[3H]- imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on 1,0 g 35 Dimethylsulfoxide 10 ml

Arachide-olie 90 ml door het 8-carbamoyl-3-(2-chloorethyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on in het dimethylsulfoxide op te lossen en de arachide-olie toe te voegen. De verkregen oplossing werd onder aseptische om-40 standigheden in ampullen verdeeld in een hoeveelheid van 10 ml per am- 8203286 17 s # pul. De ampullen werden afgedicht, waarbij 10 ampullen verkregen werden die elk 100 mg 8-carbamoyl-3-(2-chloorethyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]- 1,2,3,5-tetrazine-4-on bevatten.

Soortgelijke ampullen, die oplossingen bevatten, die geschikt zijn 5 voor parenterale toediening kunnen bereid worden door op een soortgelijke wijze te werk te gaan, maar het 8-carbamoyl-3-(2-chloorethyl)-[3H]-imidazo-[54,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on door een andere verbinding met de algemene formule I te vervangen SAMENSTELLINGSVOORBEELD 2 10 Capsules, die voor orale toediening geschikt zijn, werden bereid door 8-carbamoyl-3-(2-chloorethyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on in gelatine-mantels grootte nr 2 te brengen in een hoe-veelheid van 10 mg per capsule.

Soortgelijke capsules kunnen bereid worden onder toepassing van 15 een andere verbinding met de algemene formule 1 of alle andere capsule-mantels met geschikte grootte.

8203286

Claims

1. [3H]-imidazo[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on derivaten met de al-gemene formule 1, waarin R^· een waterstofatoom of een rechte of ver-takte alkyl-, alkenyl- of alkynylgroep, die ten hoogste 6 koolstofato- 5 men bevat, waarbij elke zodanige groep niet gesubstitueerd is of gesub-stitueerd is met §Sn tot drie substituenten gekozen uit halogeenatomen, rechte of vertakte alkoxy-, alkylthio-, alkylsulfinyl en alkylsulfonyl-groepen, die ten hoogste 4 koolstofatomen bevatten, en eventueel gesub-stitueerde fenylgroepen voorstelt, of waarin een cycloalkylgroep 10 voorstelt, die 3 tot 8 koolstofatomen bevat, en R^ een carbamoylgroep, die aan het stikstofatoom βδη of twee groepen kan bevatten gekozen uit rechte of vertakte alkyl- en alkenylgroepen, die elk ten hoogste 4 koolstofatomen bevatten en cycloalkylgroepen, die 3 tot 8 koolstofatomen bevatten, voorstelt en, wanneer R^· waterstof voorstelt, alka- 15 limetaalzouten ervan.

2. Tetrazinederivaten volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat r! een alkyl, alkenyl- of alkynylgroep voorstelt, gesubstitueerd met §en, twee of drie eventueel gesubstitueerde fenylgroepen en de eventue-le substituenten aan de fenylgroep(en) gekozen zijn uit alkoxy- en al- 20 kylgroepen, die ten hoogste 4 koolstofatomen bevatten en de nitro-groep.

3. Tetrazinederivaten volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat R-*- een rechte of vertakte alkylgroep met 1 tot 6 koolstofatomen voorstelt, eventueel gesubstitueerd met een of twee halogeenatomen of met 25 een alkoxygroep, die 1 tot 4 koolstofatomen bevat of met een fenyl-groep, die eventueel gesubstitueerd is met een of twee alkoxygroepen die 1 tot 4 koolsstofatomen bevatten, of waarin R^ een alkenylgroep, die 2 tot 6 koolstofatomen bevat of een cyclohexylgroep voorstelt.

4. Tetrazinederivaten volgens conclusie 3, met het kenmerk, dat 30 het (de) halogeenatoom (atomen) chloor, fluor en/of broom is (zijn), de alkoxygroep(en) methoxy is (zijn) en de alkenylgroep allyl is.

5. Tetrazinederivaten volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat R1 een rechte of vertakte alkylgroep met 1 tot 6 koolstofatomen voorstelt, die al of niet met een halogeenatoom gesubstitueerd is.

6. Tetrazinederivaten volgens conclusie 5, met het kenmerk, dat r! een alkylgroep voorstelt, die 1 tot 3 koolstofatomen bevat, niet gesubstitueerd of gesubstitueerd met een halogeenatoom.

7. Tetrazinederivaten volgens conclusie 1 of 5, met het kenmerk, dat R* een methyl- of 2-halogeenalkylgroep voorstelt.

8. Tetrazinederivaten volgens conclusies 5 tot 7, met het kenmerk, 8203286 dat het halogeenatoom aan de alkylgroep chloor of fluor is.

9. Tetrazinederivaten volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat R^ een 2-fluorethyl of 2-chloorethylgroep voorstelt.

10. Tetrazinederivaten volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat 5 Rl een benzyl- of p-methoxybenzylgroep voorstelt.

11. Tetrazinederivaten volgens §§n of meer van de conclusies 1 tot IQ, met het kenmerk, dat R^ een carbamoylgroep, een monoalkylcarbamoyl-groep, die ten boogste 4 koolstofatomen in de alkylgroep bevat of een monoalkehylcarbamoylgroep, die ten hoogste 4 koolstofatomen in de 10 alkenylgroep bevat, voorstelt.

12. Tetrazinederivaten volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat r! een rechte of vertakte alkyl-, alkenyl- of alkynylgroep voorstelt, die 1 tot 6 koolstofatomen bevat, waarbij een dergelijke groep niet ge-substitueerd is of gesubstitueerd is met δέη tot drie halogeenatomen en 15 de carbamoylkgroep voorstelt. 13. 8-Carbamoyl-3-methyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazine-4-on. 14. 8-Carbamoyl-3-n-propyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5,-tetrazine-4-on. 20 15. 8-Carbamoyl-3-(2-chloorethyl)-[3H]-imidazo-[5,l-d]~ 1.2.3.5- tetrazine-4-on. 16. 3-(2-Chloorethyl)-8-methylcarbamoyl-[3H]-imidazo[5,l-d]- 1.2.3.5- tetrazine-4-on. 17. 8-Carbamoyl-3-(3-chloorpropyl)-[3H]-imidazo-[5,1-d]-25 l,2,3,5-tetrazine-4-on. 18. 8-Carbamoyl-3-(2,3-dichloorpropyl)-[3H]-imidazo[5,l-d]- 1.2.3.5- tetrazine-4-on. 19. 3-Allyl-8-carbamoyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazine-4-on. 30 20. 3-(2-Chloorethyl)-8-dimethylcarbamoyl~[3H]-imidazo[5,1-d]- 1.2.3.5- tetrazine-4-on· 21. 3-(2-Broomethyl)-8-carbamoyl-3H]-imidazo-[5,l-d]-l,2,3,5-tetrazine-4-on. 22. 3-Benzyl-8-carb£imoyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-35 tetrazine-4-on. 23. 8-Carbamoyl-3-(2-methoxyethyl)-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazine-4-on. 24. 8-Garbamoyl-3-cyclohexyl-[3H]-imidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazine-4-on. 40 25. 8-Carbanoyl-3-(p-methoxybenzyl)-[3H]-imidazo[5,1,-d]- 8203286 1,2,3,5-tetrazine-4-on. 26. 8-(n-Allylcarbamoyl)-3-(2-chloorethyl)-[3H]-imidazo-[5,l-d]-1,2,3,5-tetrazine-4-on.

27. Werkwijze ter bereiding van tetrazinederivaten, met het ken-5 merk, dat men verbindingen met formule 1, waarin de symbolen de bij conclusie 1 vermelde betekenissen bezitten, evenwel onder uitsluiting van waterstof voor de definitie van R·*·, bereidt, doordat men een verbinding met de algemene formule 2, waarin R^ gedefinieerd zoals in conclusie 1, omzet met een isocyanaat met de algemene formule 3, waarin R^ 10 een alkyl-, alkenyl- of alkynylgroep, die ten hoogste 6 koolstofatomen bevat voorstelt, waarbij elke dergelijke groep niet gesubstitueerd is of gesubstitueerd is met δδη tot drie substituenten gekozen uit halo-geenatomen, alkoxy-, alkylthio-, alkylsulfinyl- en alkylsulfonylgroepen die ten hoogste 4 koolstofatomen bevatten en eventueel gesubstitueerde 15 fenylgroepen, of R^ een cycloalkylgroep voorstelt, die 3 tot 8 koolstofatomen bevat.

28. Werkwijze ter bereiding van tetrazinederivaten, met het ken-merk, dat men verbindingen met de algemene formule 1, waarin de symbolen de bij conclusie 1 vermelde betekenissen bezitten, evenwel onder 20 uitsluiting van waterstof voor de definitie van R*· bereidt, doordat men een verbinding met de algemene formule 4, waarin R^ gedefinieerd is zoals in conclusie 1, of een alkalimetaalzout daarvan omzet met een verbinding met de algemene formule 5, waarin R^ gedefinieerd is zoals in conclusie 26 en X de zuurrest van een reactieve ester voorstelt.

29. Werkwijze volgens conclusie 27, met het kenmerk, dat men ver bindingen met formule 5 toepast, waarin X een halogeenatoom, een metho-xysulfonyloxy-, methaansulfonyloxy- of tolueen-p-sulfonyl-oxygroep voorstelt.

30. Werkwijze ter bereiding van tetrazinederivaten, met het ken-30 merk, dat men verbindingen met de algemene formule 1 volgens conclusie 1, waarin R^· een waterstofatoom voorstelt en R^ gedefinieerd is zoals in conclusie 1, of een alkalimetaalzout daarvan bereidt, doordat men een verbinding met de algemene formule 2 omzet met een verbinding met de algemene formule 6, waarin R^ een alkalimetaalatoom of een be-35 schermende groep, zoals een benzyl- of p-methoxybenzylgroep voorstelt, gevolgd door, wanneer R^ een beschermende groep voorstelt, de ver-vanging van de beschermende groep door een waterstofatoom in de aldus verkregen verbinding met de algemene formule 7, waarin R^ gedefinieerd is zoals in conclusie 1 en R^ een beschermende groep voorstelt, zoals 40 een benzyl- of p-methoxybenzylgroep, volgens op op zichzelf bekende me- 8203286 : 21 thoden.

31. Werkwijze ter bereiding van een tetrazinederivaat met de alge-mene formule zoals voorgesteld in conclusie 1, waarin R* en r2 gede-finieerd zijn zoals bij conclusie 1, of wanneer R* een waterstofatoom 5 voorstelt, een alkalimetaalzout daarvan in hoofdzaak zoals hiervoor be-schreven onder verwijzing naar elk van de voorbeelden 1 tot 20.

32. Farmaceutische samenstelling, die als werkzaam bestanddeel ten minste Sen tetrazinederivaat volgens S§n of meer van de conclusies 1 tot 25 bevat tezamen met een farmaceutische drager of een bekleding.

33. Farmaceitusche samenstelling volgens conclusie 31, in hoofd zaak zoals hiervoor beschreven onder bijzondere verwijzing naar het sa-menstellingsvoorbeeld 1 of 2.

34. Tetrazinederivaten met de algemene formule volgens conclusie 1, waarin R1 en r2 gedefinieerd zijn zoals bij conclusie 1, voor toe- 15 passing bij de behandeling van kwaadaardige neoplasmen zoals carcino-men, melanomen, sarcomen, lymfomen en leukemieSn.

35. Tetrazinederivaten met de algemene formule volgens conclusie 1, waarin R·*· en R^ gedefinieerd zijn zoals bij conclusie 1, voor toepassing bij de behandeling van orgaantransplantaten en huidtransplanta- 20 ten en voor de behandeling van immunologische ziekten.

36. Werkwijze ter bereiding van farmaceutische samenstellingen, met het kenmerk, dat men 6en of meer verbindingen volgens conclusie 1, waarin de symbolen de bij conclusie 1 vermelde betekenissen bezitten, in een voor een dergelijke toepassing geschikte vorm brengt. 25 ™ 8203286