DK154539B

DK154539B - Fremgangsmaade til fremstilling af cyclosporinholdige farmaceutiske praeparater i flydende form

Info

Publication number: DK154539B
Application number: DK086079AA
Authority: DK
Inventors: Thomas Cavanak
Original assignee: Sandoz Ag
Priority date: 1978-03-07
Filing date: 1979-02-28
Publication date: 1988-11-28
Also published as: DK154539C; NL7901703A; IE48016B1; ES478295A1; IT7948152A0; CA1139667A; IE790704L; IL56790A0; FI65914C; US4388307A; IL56790A; NZ189819A; FR2419072B1; NO152635C; JPS627891B2; NO1994028I1; DK86079A; DE2907460A1; GB2015339A; PT69309A

Description

DK 154539 B

Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af cyclosporinholdige farmaceutiske præparater i flydende form.

På grund af cyclosporinernes hydrofobe og/eller lipofile karakter er deres farmaceutiske præparater med sædvanlige faste eller flydende 5 farmaceutiske bærestoffer ofte forbundet med ulemper. Således resorberes cyclosporinerne ikke tilfredsstillende fra sådanne præparater eller præparater tåles ikke godt, eller de er ikke tilstrækkelig stabile ved opbevaring, f.eks. ikke tilstrækkelig stabile mod udkrystallisation af cyclosporinet, og/eller den 10 koncentration af cyclosporinet, som uden udkrystallisering kan bringes i opløsning, er lav, f.eks. af størrelsesorden 3% eller derunder.

Problemer af denne art opstår ikke blot med flydende formuleringer, men også med sådanne, som er faste, f.eks. såkaldte faste opløs -15 ninger, der befinder sig i form af oralt administrerbare pellets, som f.eks. fremstilles ved smeltning af en fast bærer, sammenblanding med det aktive stof og afkøling af blandingen.

Selv om der kendes mange forslag til at afhjælpe de ovenfor anførte problemer, har det efter nøjagtige undersøgelser vist sig, at mange 20 af disse forslag ikke kan anvendes til cyclosporiner, der er det område, som den foreliggende opfindelse angår.

Opfindelsen angår således en fremgangsmåde til fremstilling af cyclosporinholdige farmaceutiske præparater i flydende form, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at cyclosporinet blandes med et 25 bærestof bestående af følgende komponenter: a) et ikke-ionisk omesterificeringsprodukt af et olietriglycerid med en polyalkenylglycol b) en vegetabilsk olie, og c) ethanol, 2

DK 1 54539 B

idet man til 10 vægtdele af komponent a) anvender 0,2 - 10 vægtdele cyclosporin, mens komponent b) anvendes i en vægtandel på 35 - 60 vægtprocent og komponent c) anvendes i en vægtandel på 1 - 20 vægtprocent, baseret på vægten af det totale præparat.

5 De farmaceutiske præparater der fremstilles ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, egner sig især til administration af cyclosporiner, hvorhos der foretrækkes sådanne, hvis ringskelet har følgende formel: CH m / 3 CH CH, CH, I ^ / 3

CH- CH CH CH

I 2 I 3 I I 3

CH. N-CH-CO-N—CH-C0-A--N —CH

3 I L L ,2

CH- CO I

^ I CO

^CH-CH2-CH2-Oi L I

CH. CH -N H OH

3 3 I D L i || L I

OC-CH — N — CO-CH — N CO — CH — N C — CH N-CO - CH

II i li i I

CH- H CH- CH- CH- CH CH, J ύ I L 6 / \ I 2

.CH CH- CH, CH

/ \ 3 3 / \ i ch3 ch3 CH3 CH3 hvor A betegner en divalent gruppe, der indeholder to med hinanden forbundne aminosyrer, f.eks.

CH H

N3 /

NCX

II

n 10 (cyclosporin D) / \

H

HO ΓΗ CH

V/V, 3 ca « «3 i 3 I i

- N-CH— CO—N-CH-CO

L / I·

H

eller

3 DK 154539 B

f2 H2C\ (dihydro-cyclo- qj sporinD) HO ca2 CH- CH- \R/\ \3 / 3 CH, f “k ®

I 3 I I

-N— CH— CO— N— CH—ΟΟ-

Ι, I L

H

eller

V

Λ (isocyclosporin D) H CH^

Ir

0 CH

/ \R/ \ 9¾ /0¾

/ f a3 Y

' HN— CH—CO—N CH CO-

I L IL

ch3 H

eller

CH H

5 V

(cyclosporin A) k2

HO CH

XLdf f2 fk I 3 f2 - N— CH— CO—H CH CO -

L I L

H

η H C

eller 3 v fz

(dihydrocyclo- ' ^C

sporin C) CH

Ir HO CH .

\R / \ £*3

CH f* R CH— OH

I 3 I I

-N—CH — CO— N —CH—C0-I L H

DK 154539 B

4

Cyclosporin A, dihydrocyclosporin C og isocyclosporin D er de foretrukne cyclosporiner.

De under a) anførte ikke-ionogene estere kan fremstilles på i og for sig kendt måde, f.eks. som beskrevet i U.S.A. patentskrift nr.

5 3 288 824. Esterne kan være omesterifikationsprodukter af 2 molandele af en vegetabilsk olie, såsom majsolie, mandelolie, jordnøddeolie, olivenolie og/eller palmeolie, med 1 molandel polyethylenglycol med en molekylvægt på 200 - 800. Sådanne estere forhandles under navnet "LABRAFIL" (jfr. Fiedler, Lexikon der Hilfsstoffe, side 320, 1971) og 10 fremstilles f.eks. af Lab. Gattefosse, Boulogne sur Seine, Frankrig.

Den foretrukne ester fås ud fra umættet naturlig olie; der foretrækkes f.eks. en triglyceridoleat-polyethylen-blanding, som forhandles under navnet "LABRAFIL M 1944 CS".

Når de under a) anførte komponenter befinder sig i fast tilstand, 15 skal disse udvælges således, at de smelter ved- sådanne temperaturer, ved hvilke cyclosporinet er stabilt. Sådanne komponenter er f.eks. glycerolmonostearat og glyceroldistearat.

Den foretrukne koncentration af komponent a), der er til stede i de farmaceutiske præparater, som fremstilles ved fremgangsmåden ifølge 20 opfindelsen, vil blandt andet afhænge af den i de enkelte tilfælde anvendte komponent og især dens opløselighedseffekt samt af det anvendte cyclosporin, koncentrationen af cyclosporinet i det endelige præparat og opløselighedseffekten af hver enkelt yderligere tilstedeværende farmaceutiske bærestof. Almindeligvis er det foretrukne 25 vægtforhold mellem komponent a) og cyclosporinet 10 dele af komponent a) til 0,2 - 10 dele cyclosporin, især 1-10 dele cyclosporin og fortrinsvis 1-7 dele cyclosporin.

Når komponent a) er fast ved stuetemperatur, kan der ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen anvendes temperaturer på op til ca. 70eC til 30 opnåelse af en flydende smelte, i hvilken cyclosporinet kan opløses.

Derefter afkøles præparaterne og bringes på flydende form.

De farmaceutiske præparater kan formuleres på i og for sig kendt måde, om ønsket sammen med yderligere farmaceutisk tolerable

DK 154539 B

5 tilsætninger, og kan bringes på egnede former til oral eller parenteral administration.

Eksempler på foretrukne flydende præparater er: a) Drikkeopløsninger, 5 b) drikkeemulsioner, c) inj ektionsopløsninger, d) opløsninger i kapsler.

Administrationen sker fortrinsvis intramuskulært eller subcutant eller især oralt.

10 Farmaceutiske præparater ifølge den foreliggende opfindelse fremstilles ved sammenblanding af et cyclosporin med et flydende bærestof, som omfatter komponeterne a), b) og c) som beskrevet ovenfor.

De cyclosporinholdige farmaceutiske præparater sammensættes som nævnt 15 af a) det nævnte omesterificeringsprodukt, b) den vegetabilske olie og c) ethanol, hvorunder komponenterne b) og c) tilsammen er til stede i koncentrationer på op til 60% af det samlede præparat til . opnåelse af en tilfredsstillende koncentration af cyclosporinet.

Ethanol kan anvendes som opløselighedsfremmende tilsætning eller 20 opløsningsmiddel. Vægtandelen af ethanol kan f.eks, være 2-5% for parenterale præparater og 1-20% for præparater, der skal administreres oralt, begge dele beregnet på det samlede præparat.

Den vegetabilske olie, f.eks. olivenolie eller majs olie, er til stede som farmaceutisk bærer. Vægtandelen af den vegetabilske olie 25 kan f.eks. være 35-60%, beregnet på den samlede komposition.

Egenskaberne hos det ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede præparat kan bestemmes på i og for sig kendt måde. Opløsningernes stabilitet, især mod udkrystallisation af det aktive stof, kan konstateres ved anvendelse af kendte tests. Injektionsformernes 30 tolerabilitet kan bestemmes ved iagttagelse af omfanget af blødningen

DK 154539 B

6 og betændelsen efter injektionen, f.eks. i låret hos kaniner og rhesusaber, samt ved den tid, som kræves til helbredelse af blødningen og betændelsen. Desuden kan der anvendes andre tolerabili-tetstests.

5

Absorptionen af de farmakologisk aktive cyclosporiner, især den hurtige indtræden af en tilfredsstillende koncentration af cyclo-sporinet i blodet og den høje totale absorption af cyclosporinet i løbet af 24 timer, konstateres under anvendelse af standardtests.

10 I en test administreres et ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillet farmaceutisk præparat til kaniner, rotter, hunde eller rhesusaber enten oralt, intramuskulært eller subcutant i en dosis på 2-600 mg af det aktive cyclosporin pr. kg. af dyrets vægt. Blodserum-prøver og urinprøver udtages med ensartede tidsmellemrum, f.eks. hver 15 time, og den i prøverne indeholdte cyclosporinkoncentration konstateres på i og for sig kendt måde.

Den farmakodynamiske aktivitet af cyclosporinet kan bestemmes på i og for sig kendt måde. Når der er tale om cyclosporin A, kan cyclospori-nets virkning bestemmes ved hæmningen af lymfocytproliferationen.

20 Til dette formål samles blodserum med jævne mellemrum efter administrationen af stoffet og sættes in vitro i en koncentration på 0,3-10% til en milt-cellesuspension fra mus, hvor lymfocytproliferationen udløses ved hjælp af Concanavallin A over en 72 timers dyrknings- 3 periode. H-Thymidin tilsættes derefter, og efter 24 timers forløb 25 måles thymidinindbygningen til konstatering af lymfocytprolifera-tion.

Om ønsket kan cyclosporinet administreres i radioaktiv form. F.eks.

3 kan i et eksperiment 100 mg H-mærket cyclosporin A (fremstillet ved fermentering af den kendte svampes tamme Tolypocladium inf latum Gams 30 NRRL 8044 i nærværelse af methionin, som er mærket i SCH^-gruppen med tritium), som befinder sig i et farmaceutisk præparat fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, oralt i form af en drikkeopløsning eller intramuskulært i form af en injektionsopløsning administreres til hanlige Beagle-hunde. Fra hver hund udtages der blod-35 prøver 15 minutter efter administrationen indtil 1 time efter admini-

DK 154539 B

7 strationen og derefter hver time indtil 8 timer efter administrationen. Urinen indsamles ligeledes. Bestemmelsen af radioaktiviteten i blodet og urinen angiver cyclosporinabsorptionen.

Mængden af det cyclosporin, der skal administreres i det farmaceuti-5 ske præparat, der er fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, afhænger naturligvis af administrationens art, den ønskede effekt og behandlingsbetingelseme.

Almindeligvis vil andelen af det ved hjælp af det ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede farmaceutiske præparat administrerede 10 cyclosporin være af samme størrelsesorden som af det på anden måde administrerede cyclosporin.

De cyclosporinmængder, som er nødvendige for opnåelse af en terapeutisk virkning, er kendt. Når der anvendes præparater, som er fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, skal der administreres 15 en daglig dosis på fra 3 mg/kg til 50 mg/kg cyclosporiner til behandling af kroniske betændelser og til opnåelse af en immunosup-pressiv effekt.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere ved nedenstående eksempler: 20 EKSEMPEL 1 200 mg cyclosporin A opløses direkte under omrøring i 1 ml af en blanding af "LABRAFIL M 1944 CS" og ethanol (i forholdet 40:15) ved 25eC, og efter tilsætning af 0,4 ml olivenolie eller majsolie filtreres den resulterende opløsning, som derefter fyldes i små flasker.

25 Opløsningen indeholder pr. 10 vægtdele "LABRAFIL", 3 vægtdele cyclosporin A, 3 vægtdele ethanol og 5 vægtdele oliven- eller majsolie.

DK 154539 B

8

EKSEMPLER MED SAMMENLIGNINGSTESTS

TESTPRÆPARATER

PRÆPARAT 1

Præparatet blev fremstillet i fabrikationsmålestok, under anvendelse 5 af følgende bestanddele i de angivne mængder: BESTANDDEL MÆNGDE (KG^ 1) "Labrafil M 1944 CS" 150,00 2) Ethanol (absolut) 50,00 10 ..........................................................

3a) Cyclosporin A - blanding 1 9,08 3b) Cyclosporin A - blanding 2 14,23 3c) Cyclosporin A - blanding 3 14,00 3d) Cyclosporin A * blanding 4 13,30 15 .......-.........-.......................................

4) Olivenolie ca. 212,00 sum 462,50 (Total mængde cyclosporin A (bestanddele 3a til 3d) - 50,61 kg med et 20 totalt vandindhold på 0,61 kg, som giver en cyclosporin A-tørvægt på 50,0 kg).

Samtlige bestanddele blev sat til en rørebeholder. Bestanddele 1) og 2) blev tilsat først og omrørt i 5 min. Bestanddelene 3a) - 3d) blev derefter tilsat i rækkefølge under kontinuerlig omrøring indtil 25 opløsning (ca. 40 min.). Bestanddel 4 blev derefter tilsat under omrøring i yderligere 10 min. Den opnåede klare gule, olieagtige opløsning blev filtreret gennem et Gelman Preflow filter (400 til 10 μα) ved 0,6 til 0,8 bar og derefter fyldt på en 50 ml "Rexo" flaske til et slutvolumen på 51,5 ml (-47,6 g). Flaskerne blev forseglet med 30 en gummiprop og aluminiumkapsel. Hele processen blev gennemført

DK 154539 B

9 under vandfrie betingelser ved stuetemperatur og med nitrogengasning (0,25 bar) i alle trin.

Opløsningen i flaskerne omfatter pr. ml: 1) 300 mg/ml "Labrafil M 1944 CS"; 5 2) 100 mg/ml ethanol (absolut); 3) 100 mg/ml cyclosporin A (tørvægt); og 4) ca. 425 mg/ml olivenolie.

SAMMENLIGNINGSPRÆPARATER II-V

Præparaterne blev fremstillet under anvendelse af følgende bestandde-10 le i de angivne mængder pr. ml slutvolumen:

BESTANDDEL

II III IV V

Præparat mg mg mg mg 15 1) "Labrafil M 1944 CS" 300 500 700 ca.737 2) Ethanol (absolut) ... 100 3) Cyclosporin A 100* 100* 100* 100* 4) Olivenolie ca.541 ca.346 ca.149 20 (* tørvægt)

Præparaterne II-V blev fremstillet ved fremgangsmåder svarende til de fremgangsmåder, som er beskrevet til fremstilling af præparat I, men i laboratoriemålestok og uden enten komponent 2), ethanolen (præparater II-IV) eller komponent 4), olivenolien (præparat V).

25 For hvert af præparaterne II-V var mængden af cyclosporin A til stede pr. ml identisk med præparat I, idet den nødvendige mængde til at give et tørvægtindhold på 100 mg/ml s lutvolumen blev beregnet på basis af et bestemt vandindhold i udgangsmaterialet.

Sammenligningspræparat II indeholdt den samme mængde "Labrafil M 1944 30 CS" som præparat I, idet mængden af tilstedeværende olivenolie blev

DK 154539 B

10 øget til at give det samme totale opløsningsmiddel (slutvolumen) pr.

100 mg cyclosporin A (tørvagt) som for præparat I.

I præparat III og IV blev mængden af "Labrafil M 1944 CS", som blev anvendt, øget sammenlignet med præparat I, og mængden af olivenolie 5 blev tilsvarende nedsat, ligeledes til at give det samme opløsningsmiddelslutvolumen pr. 100 mg cyclosporin A (tørvægt) som for præparat I.

Præparat V indeholdt den samme mængde ethanol som præparat I, idet mængden af "Labrafil M 1944 CS", som var til stede, blev øget til at 10 give det totale opløsningsmiddelslutvolumen.

Præparaterne II-IV blev fremstillet ved portionsvis tilsætning af bestanddel 3) til bestanddel 1), under kontinuerlig omrøring og opvarmning for at sikre fuld opløsning af cyclosporin A. Bestanddel 4) blev derefter tilsat til det ønskede slutvolumen. Præparat V blev 15 fremstillet ved opløsning af bestanddel 3) i en blanding af 2) og 1) til det ønskede slutvolumen. Præparaterne II-V blev filtreret som for præparat I.

Præparaterne blev fyldt på ampuller, og ampullerne blev forseglet.

Alle trin blev gennemført som i tilfældet med præparat I, under 20 vandfrie betingelser, ved stuetemperatur og under nitrogengassing.

Fire ampuller blev lagret for hver temperatur og hvert præparat.

TESTMETODE

En flaske indeholdende præparat I og en ampul indeholdende hvert af præparaterne II til V blev umiddelbart efter forsegling anbragt til 25 lagring ved temperaturer på 5“C, stuetemperatur (ST), 25°C og 50°C.

De lagrede præparater blev undersøgt 14 døgn efter forseglingen og derefter med månedlige mellemrum for at bestemme, om cyclosporin A havde bundfældet. Udfældning påvist ved uklarhed i opløsningen og dannelse af en afsætning ved bunden af beholderen, blev bestemt ved 30 enkel visuel inspektion. De følgende resultater blev opnået:

DK 154539B

11 * l_| Η «Η τ—4 f-H Γ-Η •ίΟ

CN

ΗΗΜ· """""" ΜΗΗ 0) · •ο * · ® 0) * I Η Η Η bp * ·Η C > β 4J Η .Λ ·Η 0) Ο g β β β c ϋ οι φ r- Η Η H r-l τ-Ι 'ίΒ-υ-Η

_____ <W tH

i —- -o (U o 0) β β Ό β Φ «Η β

0) > m ih r-ι th «HOteaJ

fi β -Η · Ό •ίο----... ο > β bo φ B a. ο β β 01 Ο) ιΗ i-I ·(!) CN H »—I i—I r-l iH O l-j β £ r-l ,ϋ cd Ό . Ο ·η Ό H r- ϋ. . _i_, _I Ο βΧ«Ηβ «0 bO 3 μ

- CU β 01 <H

h a> β <u

> ΓΟ I I β β Ό H

HI bO 01 .-Η β β ------- , a) q >-i o <u y η ϋ η ,ϋ ft »

Ό 2 Η ΓΟ ΓΟ I I ,, S' 01 S 'S

(OSH 4J Ο ^ Ο β I 8· —-----2 , §3 ! 1 Sa" 11 1 5 » S· * Η β β > ^ - __________________ ' · ·η φ ·η) φ bO β hO ρ. Η β β Ό β <β Η Η Η Η Η (ΟΗτ-ΊτΊβ ιη β æ β ω ρ» «____ - Μ Ό b-ι οι φ ΗΜ mmmmm ι—I Ό S β β > *- -« S $ Ε ^ β 2 .. —— 1 1 -.,,-,,..—— r-l Ό Η Ο Φ dl > Μ ΗΓΟ ΓΟ -§ 8 Ο (β β £ Η___ ___ ___. β ·Η β, β Η β --- W β Μ Λ Η 01 Ο Ο ΤΙ ι Η (Ν ΟΊ ΓΟ ΓΟ α, ρ-ι φ (μ| β Η β 01 Ο ,β β φ θ' ____________ _____ Φ Ο >ί β φ

G bO ιΗ U β β bO

Ό Η βΟ Ηββ Η Η ΓΟ ΓΟ ΓΟ β ^ bO ,¾ φ Η Ο· β Ο «-Ι β β β _1---——(Q β Ο β __ι _j ® β (η ω β « ^ Η η η Η Τ) Φ Λ g Φ Η ρ. η β > ο ;ε-< ------ ο ηΙ ^ ΟΙ . II II: II n -* U * -κ β Η <Ν ΓΟ τΗ '!> β 13 (0

•Η β U 0-1 U U

Εη φ Ο .00 Ο, in ai m ο Ε ro ιη ω Εη

DK 154539 B

12

KONKLUSION

Præparat I ifølge opfindelsen var stabilt ved alle testede temperaturer i en periode på op til mindst 2 år uden nogen udfældning af cyclosporin A. Nogen nedbrydning blev iagttaget ved en temperatur på 5 50°C efter 2 års lagring. Dette skyldes imidlertid oxydation af olivenoliekomponenten og ikke udfældning af cyclosporin A.

Sammenligningspræparaterne II-IV, som var fremstillet under anvendelse af en ækvivalent mængde af totalt opløsningsmiddel i forhold til cyclosporin A som for præparat I, men med udeladelse af ethanolkompo-10 nenten, var betydelig mindre, stabile ved lagring ved alle testede temperaturer. I de fleste tilfælde havde kraftig udfældning af cyclosporin A-komponenten forekommet efter bare 14 døgn, og i alle tilfælde havde kraftig udfældning forekommet efter 1 måneds lagring ved alle temperaturer. Sammenligningspræparat V, som var fremstillet 15 under anvendelse af en ækvivalent mængde totalt opløsningsmiddel i forhold til cyclosporin A som for præparat I, men med udeladelse af olivenoliekomponenten, var stabilt ved fra stuetemperatur til 50eC i en periode på op til mindst 7 måneder (ved dette tidspunkt blev testning af præparatet afbrudt). Ved lagring ved 5eC blev præparat V, 20 selv om det ikke viste nogen udfældning af cyclosporin A efter 1 måned, fundet at være ustabilt ved denne temperatur over en periode på 2 måneder. Ved undersøgelse efter 2 måneder blev der iagttaget kraftig udfældning af cyclosporin A.

Sammenligningspræparateme II-IV har således en dårlig lagrings-25 levetid ved alle testede temperaturer og ville ikke være egnet til praktisk anvendelse, det vil sige til levering til og lagring på sygehus før anvendelse.

Selv om sammenligningspræparat V har mindst en 7 måneders lagrings-levetid ved temperaturer på fra stuetemperatur til 50eC, er lagrings-30 levetiden ved 5eC begrænset til et maksimum på fra 1 til 2 måneder.

Da farmaceutiske præparater, som er velkendte på området, sædvanligvis lagres, ikke mindst på sygehus, koldt (det vil sige ved temperaturer på ca. 5°C) for at forhindre nedbrydning af selve det aktive

Claims

10 Præparat I vil med hensyn til overlegne lagringslevetidsegenskaber være langt bedre egnet til praktisk anvendelse, f.eks. til lagring på sygehus etc. som nævnt i det foregående, end nogen af præparaterne II-V.

1. Fremgangsmåde til fremstilling af cyclosporinholdige farmaceutiske præparater i flydende form, kendetegnet ved, at cyclosporinet blandes med et bærestof bestående af følgende komponenter a) et ikke-ionisk omesterificeringsprodukt af et olietriglycerid med 20 en polyalkylenglycol, b) en vegetabilsk olie, og c) ethanol, idet man til 10 vægtdele af komponent a) anvender 0,2 - 10 vægtdele cyclosporin, mens komponent b) anvendes i en vægtandel på 35 - 60 25 vægtprocent og komponent c) anvendes i en vægtandel på 1 - 20 vægtprocent, baseret på vægten af det totale præparat.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der som cyclosporin anvendes cyclosporin A og/eller dihydrocyclosporin C og/eller isocyclosporin D. DK 154539 B

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den under a) angivne komponent fremstilles ved omesterificering af 2 molandele af en vegetabilsk olie med 1 molandel polyethylenglycol med en molekylvægt 5 på 200-800.

4. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, kendetegnet ved, at komponenterne b) og c) tilsammen anvendes i en vægtandel på op til 60% baseret på vægten af det totale præparat.