DE69531709T2

DE69531709T2 - Derivate von Glycopeptid-Antibiotika

Info

Publication number: DE69531709T2
Application number: DE69531709T
Authority: DE
Inventors: Robin David Grey Indianapolis Cooper; Bret Eugene Huff; Thalia Ioanna Indianapolis Nicas; John Thomas Indianapolis Quatroche; Michael John Rodriguez; Nancy June Charlottesville Snyder; Michael Alexander Indianapolis Staszak; Richard Craig Frankfort Thompson; Stephen Charles Indianapolis Wilkie; Mark James Zweifel
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1994-01-28
Filing date: 1995-01-25
Publication date: 2004-07-15
Anticipated expiration: 2015-01-26
Also published as: PT1031576E; SG52719A1; PT1016670E; ATE266042T1; FI117095B; FI20050512A; PT667353E; DE69532013D1; MY128335A; ES2210274T3; NO950298L; EP1031576B1; PL306976A1; IL112457A; DK0667353T3; TW457248B; EP1016670B1; NZ270387A; EP1031576A3; BR9500365A

Description

Neue verbesserte Antibiotika werden kontinuierlich, insbesondere zur Behandlung von menschlichen Erkrankungen, gefordert. Bessere Wirksamkeit, ein breiteres Spektrum einer Bakterienhemmung, eine erhöhte in-vivo-Wirksamkeit und bessere pharmazeutische Eigenschaften sind einige der Ziele besserer Antibiotika.
Bei der Suche nach neuen Antibiotika wird, sofern möglich, eine strukturelle Modifizierung bekannter Antibiotika versucht. Die Glycopeptidantibiotika haben derartige komplexe Strukturen, dass sogar geringe Änderungen schwierig sind. Des weiteren ist es schwierig die Wirkung, die diese Veränderungen bei den antimikrobiellen und physiologischen Eigenschaften hervorrufen, vorherzusagen. Verfahren zur Modifikation bekannter Antibiotika und die nach derartigen Verfahren hergestellten neuen aktiven Derivate sind folglich weiterhin von großer Bedeutung.
In der Vergangenheit wurden N-Alkyl- und N-Acylderivate der Glycopeptide Vancomycin, A51568A, A51568B, M43A und M43D hergestellt ( US 4 639 433 A , US 4 643 987 A und US 4 698 327 A ). Einige dieser Verbindungen zeigten eine mikrobiologische Aktivität einschließlich einer Aktivität gegen Vancomycin-resistente Isolate (vgl. Nicas et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 33(9): 1477 bis 1481 (1989)). Darüber hinaus beschreibt die am 03. Juli 1993 offengelegte europäische Patentveröffentlichung EP 0 435 503 A bestimmte N-Alkyl- und N-Acylderivate der A82846-Glycopeptide, Faktoren A, B und C.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I sind neue Mitglieder der Glycopeptidgruppe von Antibiotika. Diese neuen Verbindungen sind Derivate von bekannten Glycopeptidantibiotika.
Enterococcen sind wichtige humane Pathogene. Durch Enterococcen verursachte Infektionen sind im Allgemeinen schwierig zu behandeln. Glycopeptide, wie Vancomycin und Teicoplanin, wurden wichtige Therapien bei der Behandlung von Infektionen infolge von Enterococcen. Jüngst wurden jedoch Stämme von Enterococcus faecium und Enterococcus faecalis isoliert, die gegen Vancomycin und Teicoplanin resistent sind (Laclercq et al., Plasmid Mediated Resistance to Vancomycin and Teicoplanin in Enterococcus faecium, The New England Journal of Medicine, 319(3): 157 bis 161 (1988), und Uttley et al., Vancomycin-Resistant Enterococci, Lancet, 1: 57 bis 58 (1988)). Die Isolate erwiesen sich als gegenüber anderen Antibiotika resistent. Eine jüngste Untersuchung fand, dass gegenwärtig 7,9% der Enterococcen in den Krankenhäusern der Vereinigten Staaten von Amerika Vancomycinresistent sind („Nosocomial Enterococci Resistant to Vancomycin", Morbidity and Mortality Weekly Report 42(30): 597 bis 598 (1993)). Neben ihrer breiten Aktivität gegen grampositive Organismen besitzen viele der erfindungsgemäßen Glycopeptidverbindungen auch eine bessere antimikrobielle Aktivität gegen Vancomycin-resistente Isolate.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel I:
worin X für Wasserstoff oder Chlor steht, R und R⁶ für 4-Epivancosaminyl stehen, R⁷ für (C₁-C₁₂ Alkyl)-R⁸ steht und an die Aminogruppe von R⁶ gebunden ist und R⁸ eine Gruppe der Formel
darstellt, wobei

– q 0 bis 4 beträgt,
– R¹² unabhängig voneinander aus der Gruppe ausgewählt ist bestehend aus
(i) Halogen,
(ii) Nitro,
(iii) (C₁-C₆)Alkyl,
(iv) (C₁-C₆)Alkoxy,
(v) Halogen-(C₁-C₆)alkyl,
(vi) Halogen-(C₁-C₆)alkoxy,
(vii) Hydroxy und
(viii) (C₁-C₆)Thioalkyl;
– r für 1 bis 5 steht, vorausgesetzt, dass die Summe von q und r nicht mehr als 5 beträgt,
– Z aus der Gruppe ausgewählt ist bestehend aus:
(i) einer einfachen Bindung,
(ii) zweiwertigem (C₁-C₆)Alkyl, das unsubstituiert oder mit Hydroxy, (C₁-C₆)Alkyl oder (C₁-C₆)Alkoxy substituiert ist,
(iii) zweiwertigem (C₂-C₆)Alkenyl,
(iv) zweiwertigem (C₂-C₆)Alkinyl und
(v) einer Gruppe der Formel -(C(R¹⁴)₂)_s-(R¹⁵)- oder -(R¹⁵)-(C(R¹⁴)₂)_s , wobei s für 0 bis 6 steht, jeder Substituent R¹⁴ unabhängig voneinander unter Wasserstoff, (C₁-C₆)Alkyl oder (C₄-C₁₀)Cycloalkyl ausgewählt ist und R¹⁵ unter -O-, -S-, -SO-, -SO₂-, -SO₂O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -NH-, -N(C₁-C₆Alkyl)-, -C(O)NH-, -NHC(C)- und -N=N- ausgewählt ist,
– R¹³ unabhängig voneinander aus der Gruppe ausgewählt ist bestehend aus
(i) (C₄-C₁₀)Heterocyclyl,
(ii) Heteroaryl,
(iii) (C₄-C₁₀)Cycloalkyl, das unsubstituiert oder mit (C₁-C₆)Alkyl substituiert ist, und
(iv) Phenyl, das unsubstituiert oder mit 1 bis 5 Substituenten substituiert ist, die unabhängig voneinander unter Halogen, Hydroxy, Nitro, (C₁-C₁₀)Alkyl, (C₁-C₁₀)Alkoxy, Halogen-(C₁-C₃)alkoxy, Halogen-(C₁-C₃)alkyl, (C₁-C₃)Alkoxyphenyl, Phenyl, Phenyl-(C₁-C₃)alkyl, (C₁-C₆)Alkoxyphenyl, Phenyl-(C₂-C₃)Alkinyl und (C₁-C₆)Alkylphenyl ausgewählt sind, oder ein Salz hiervon.

Gegenstand eines weiteren Aspekts der vorliegenden Endung sind Zusammensetzungen zur Behandlung einer suszeptiblen bakteriellen Infektion, die eine Verbindung der Formel I in Kombination mit einem akzeptablen pharmazeutischen Träger umfassen.
Die hier genannten Alkylsubstituenten bezeichnen substituierte oder nicht substituierte geradkettige oder verzweigtkettige Kohlenwasserstoffe der angegebenen Länge. Der Ausdruck „Alkenyl" bezeichnet eine substituierte oder unsubstituierte, geradkettige oder verzweigte Alkenylkette der angegebenen Länge. Der Ausdruck „Alkinyl" bezeichnet eine substituierte oder unsubstituierte, geradkettige oder verzweigte Alkinylkette der angegebenen Länge.
Die hier angegebenen Alkoxysubstituenten bedeuten eine über eine Sauerstoffbrücke gebundene Alkylgruppe.
Der Ausdruck „Heteroaryl" bezeichnet einen stabilen, gesättigten oder ungesättigten, substituierten oder unsubstituierten 4- bis 7-gliedrigen organischen monocyclischen Ring mit einem Heteroatom, das aus S, O und N ausgewählt ist, einen stabilen, gesättigten oder ungesättigten, substituierten oder unsubstituierten 9- bis 10-gliedrigen organischen kondensierten bicyclischen Ring mit 1 bis 2 Heteroatomen, die aus S, O und N ausgewählt sind, oder einen stabilen, gesättigten oder ungesättigten, substituierten oder unsubstituierten 12- bis 14-gliedrigen organischen kondensierten tricyclischen Ring mit einem Heteroatom, das aus S, O und N ausgewählt ist. Die Stickstoff- und Schwefelatome dieser Ringe sind optional oxidiert und die Stickstoffheteroatome sind optional quaternisiert. Der monocyclische Ring kann 0 bis 5 Substituenten aufweisen. Der bicyclische Ring kann 0 bis 7 Substituenten und der tricyclische Ring kann 0 bis 9 Substituenen aufweisen. Typische Heteroarylgruppen umfassen Chinolyl, Piperidyl, Thienyl, Piperonyl, Oxafluorenyl, Pyridyl und Benzothienyl und dergleichen.
Der Ausdruck „(C₄-C₁₀)Cycloalkyl" umfasst Substituenten mit 4 bis 10 Kohlenstoffatomen, wie Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl und Cycloheptyl, die unsubstituiert oder mit Substituenten, wie Alkyl und Phenyl, substituiert sein können. Dieser Ausdruck umfasst auch C₅-C₁₀Cylcloalkenylgruppen, wie Cyclopentenyl und Cyc lohexenyl. Der Ausdruck „(C₄-C₁₀)Cycloalkyl" umfasst auch bicyclische und tricyclische Cycloalkyheste, wie Bicyclopentyl, Bicyclohexyl, Bicycloheptyl und Adamantyl.
Der Ausdruck „zweiwertiges (C₁-C₆)Alkyl" bezeichnet eine unsubstituierte oder substituierte, geradkettige oder verzweigte zweiwertige Alkylkette mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen. Typische zweiwertige (C₁-C₆)Alkylgruppen umfassen Methylen, Ethylen, Propylen, Isopropylen, Butylen, Isobutylen, sec.-Butylen, tert.-Butylen, Pentylen, Neopentylen und Hexylen. Derartige zweiwertige (C₁-C₆)Alkylgruppen können mit Substituenten, wie Alkyl, Alkoxy und Hydroxy, substituiert sein.
Der Ausdruck „zweiwertiges (C₂-C₆)Alkenyl" bezeichnet eine geradkettige oder verzweigte, zweiwertige Alkenylkette mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen. Typische zweiwertige (C₂-C₆)Alkenylgruppen umfassen Ethenyl, 1-Propenyl, 2-Propenyl, 1-Butenyl, 2-Butenyl und dergleichen.
Der Ausdruck „zweiwertiges (C₂-C₆)Alkinyl" bezeichnet eine geradkettige oder verzweigtkettige zweiwertige Alkenylkette mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen. Typische zweiwertige (C₂-C₆)Alkinylgruppen umfassen Ethinylen, 1-Propinylen, 2-Propinylen, 1-Butinylen, 2-Butinylen und dergleichen.
Der Ausdruck „Halogen" bzw. „Halo" bezeichnet Chlor, Fluor, Brom oder Iod.
Der Ausdruck „Halogen-(C₁-C₆)alkyl" bzw. „Halo-(C₁-C₆)alkyl" bezeichnet eine geradkettige oder verzweigte Alkylkette mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen mit 0 bis 3 Halogenatomen, die an jeden Kohlenstoff gebunden sind. Typische Halogen-(C₁-C₆)alkylgruppen umfassen Chlormethyl, 2-Bromethyl, 1-Chlorisoproyl, 3-Fluorpropyl, 2,3-Dibrombutyl, 3-Chlorisobutyl, Iod-tert.-butyl, Trifluormethyl und dergleichen.
Der Ausdruck „Halogen-(C₁-C₆)alkoxy" bzw. „Halo-(C₁-C₆)alkoxy" bezeichnet eine geradkettige oder verzweigte Alkoxykette mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen mit 0 bis 3 Halogenatomen, die an jeden Kohlenstoff gebunden sind. Typische Halogen-(C₁-C₆)alkoxygruppen umfassen Chlormethoxy, 2-Bromethoxy, 1-Chlorisopropoxy, 3-Fluorpropoxy, 2,3-Dibrombutoxy, 3-Chlorisobutoxy, Iod-tert.-butoxy, Trifluormethoxy und dergleichen.
Der Ausdruck „Heterocyclyl" umfasst gesättigte Gruppen mit 3 bis 10 Ringatomen, wobei der heterocyclische Ring ein Heteroatom enthält, das aus Sauerstoff, Schwefel und Stickstoff ausgewählt ist. Beispiele hierfür sind Piperazinyl, Morpholino, Piperdyl, Methylpiperdyl, Azetidinyl und Azvidinyl.
Die vorliegende Erfindung umfasst Salze der Verbindungen, die durch die Formel I definiert sind. Obwohl im Allgemeinen neutral, kann eine Verbindung gemäß der vorliegenden Erfindung eine ausreichend saure, eine ausreichend basische oder beide funktionellen Gruppen besitzen und folglich mit einer beliebigen einer Reihe von anorganischen Basen und anorganischen und organischen Säuren unter Bildung eines pharmazeutisch aktzeptablen Salzes reagieren.
Der hier verwendete Ausdruck „pharmazeutisch akzeptables Salz" bezeichnet Salze der Verbindungen der obigen Formel I, die im Wesentlichen für lebende Organismen nicht toxisch sind. Typische pharmazeutisch akzeptable Salze umfassen die Salze, die durch Reaktion der erfindungsgemäßen Verbindungen mit einer pharmazeutisch akzeptablen Mineralsäure oder organischen Säure oder einer anorganischen Base hergestellt werden. Derarige Salze sind als Säureadditions- und Baseadditionssalze bekannt.
Üblicherweise zur Bildung von Säureadditionssalzen verwendete Säuren sind anorganische Säuren, wie Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Iodwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure und dergleichen, und organische Säuren, wie p-Toluolsulfonsäure, Methansulfonsäure, Oxalsäure, p-Bromphenylsulfonsäure, Kohlensäure, Bernsteinsäure, Citronensäure, Benzoesäure, Essigsäure und dergleichen. Beispiele für derartige pharmazeutisch akzeptable Salze sind die Sulfat-, Pyrosulfat, Bisulfat, Sulfit-, Bisulfit-, Phosphat-, Monohydrogenphosphat-, Dihydrogenphosphat-, Metaphosphat-, Pyrophosphat-, Chlorid-, Bromid-, Iodid-, Acetat-, Propionat-, Decanoat-, Caprylat-, Acrylat-, Formiat-, Isobutyrat-, Caproat-, Heptanoat-, Propiolat-, Oxalat-, Malonat-, Succinat-, Suberat-, Sebacat-, Fumarat-, Maleat-, Butin-1,4-dioat-, Hexin-1,6-dioat, Benzoat-, Chlorbenzoat-, Methylbenzoat-, Dinitrobenzoat-, Hydroxybenzoat-, Methoxybenzoat-, Phthalat-, Sulfonat-, Xylolsulfonat-, Phenylacetat-, Phenylpropionat-Phenylbutyrat-, Citrat-, Lactat-, gamma-Hydroxybutyrat-, Glycollat-, Tartrat-, Methansulfonat-, Propansulfonat-, Naphthalin-1-sulfonat-, Naphthalin-2-sufonat-, Mandelatsalze und dergleichen
Bevorzugte pharmazeutisch akzeptable Säureadditonssalze sind die mit Mineralsäuren, wie Salzsäure und Bromwasserstoffsäure, gebildeten und die mit organischen Säuren, wie Maleinsäure, Essigsäure und Methansulfonsäure gebildeten.
Baseadditonssalze umfassen die, die von anorganischen Basen, wie Ammonium- oder Alkali- oder Erdalkalimetallhydroxiden, -carbonaten, -bicarbonaten und dergleichen abgeleitet sind. Derartige Basen, die sich bei der Herstellung der erfindungsgemäßen Salze eignen, umfassen somit Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid, Ammoniumhydroxid, Kaliumcarbonat, Natriumcarbonat, Natriumbicarbonat, Kaliumbicarbonat, Calciumhydroxid, Calciumcarbonat und dergleichen. Die Kalium- und Natriumsalzformen sind besonders bevorzugt.
Es ist darauf hinzuweisen, dass das spezielle einen Teil eines beliebigen Salzes gemäß der vorliegenden Erfindung bildende Gegenion nicht kritisch ist, solange das Salz als ganzes pharmakologisch akzeptabel ist und solange das Gegenion nicht zu unerwünschten Eigenschaften bei dem Salz als Ganzes beiträgt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen lassen sich aus Verbindungen der folgenden Formel herstellen:
Formel II
Die Verbindungen der Formel II sind in Tabelle I definiert.
In einer bevorzugten Ausführungsform gemäß der vorliegenden Erfindung, werden die Verbindungen der Formel I aus den A82846B-Antibiotika (A82846A und A82846B) hergestellt. In einer stärker bevorzugten Ausführungsform werden die erfindungsgemäßen Verbindungen aus A82846B („A82846B-Derivate") hergestellt. A82846B lässt sich durch Verbindungen der Formel I wieder geben, worin R für 4-Epivancosaminyl steht, R¹ für Wasserstoff steht, R² für NHCH₃ steht, R³ für CH₂CH(CH₃)₂ steht, R⁴ für CH₂(CO)NH₃ steht, R³ für Wasserstoff steht, R⁶ für 4-Epivancosaminyl steht und X und Y Cl bedeuten. A82846B-Derivate gemäß der vorliegenden Erfindung mit Substituenten an der Position R⁷ der Formel I sind hier und im Folgenden in der Weise „R⁷ – A82846B" angegeben. Beispielsweise besitzt die Verbindung „Phenylbenzyl-A82846B" einen Phenylbenzylsubstituenten in der Position R⁷ der Formel I.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I umfassen die A82846B-Derivate, worin R⁷ für -(C₁-C₁₂-Alkyl)-R⁸ steht, wobei -CH₂-R⁸ stärker bevorzugt ist, und R⁸ für eine Gruppe der folgenden Formel steht:
worin q für 0 bis 4 steht, r für 1 steht, Z aus einer Einfachbindung, zweiwertigem (C₁-C₆)Alkyl, zweiwertigem (C₂-C₆)Alkenyl und -R¹⁵-(C¹⁴)₂)_s-, worin R¹⁵ aus -O-, -S-, SO₂- und -OC(O)- ausgewählt ist, jeder Substituent R¹⁴ für Wasserstoff steht und s für 0 oder 1 steht, ausgewählt ist und R¹³ aus (C₄-C₁₀)Cycloalkyl, Phenyl und durch Nitro, Halogen, (C₁-C₁₀)Alkyl, (C₁-C₁₀)Alkoxy oder Halogen-(C₁-C₃)Alkyl substituiertem Phenyl ausgewählt ist. Von dieser Gruppe sind Chlorphenylbenzyl-A82846B, Phenylbenzyl-A82846B, Benzylbenzyl-A82846B, Methylphenylbenzyl-A82846B, Pentylphenylbenzyl-A82846B, Methoxyphenylbenzyl-A82846B, Pentoxyphenylbenzyl-A82846B, Nitrophenoxybenzyl-A82846B, Fluorphenylbenzyl-A82846B, Phenylethinylbenzyl-A82846B, Phenoxybenzyl-A82846B, Benzyloxybenzyl-A82846B, Nitrophenylbenzyl-A82846B, Chlorphenoxybenzyl-A82846B, Chlorbenzyloxybenzyl-A82846B, Butylphenoxybenzyl-A82846B, Trifluormethylphenoxybenzyl-A82846B, Dichlorphenoxybenzyl-A82846B, Nitrobenzyloxybenzyl-A82846B, Benzoyloxybenzyl-A82846B, Cyclohexyloxybenzyl-A82846B, Cyclohexanoyloxybenzyl-A82846B, Thiophenylbenzyl-A82846B, Chlorphenylsulfonylbeenzyl-A82846B und Cyclohexylbenzyl-A82846B, Cyclohexylethoxybenzyl-A82846B, Chlorphenoxynitro-benzyl-A82846B, Benzylmethoxybenzyl-A82846B, Chlorphenoxyitro-benzyl-A82846B und Phenoxymethoxybenzyl-A82846B, Benzoyloxy-dimethoxybenzyl-A82846B, Cyclohexanoyloxydimethylbenzyl-A82846B, Trifluor methylphenylbenzyl-A82846B, Butylphenylthiobenzyl-A82846B und Bromphenylbenzyl-A82846B stärker bevorzugt.
Die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung werden durch Umsetzen einer Verbindung der Formel II mit einem Aldehyd unter Bildung eines Schiff'schen-Base-Zwischenprodukts, das nachfolgend mit einem Metallborhydrid unter Bildung des gewünschten N-Alkylamins reduziert wird, hergestellt.
In dem ersten Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen, nachfolgend als Verfahren A bezeichnet (beschrieben in den Beispielen 1 und 2), wird die Reaktion zur Bildung der Schiff schen Base unter einer inerten Atmosphäre, wie Stickstoff oder Argon, in einem polaren Lösemittel, wie Dimethylformamid (DMF) oder Methanol (MeOH) oder einem Gemisch von polaren Lösemitteln, wie einem Gemisch von Dimethylformamid und Methanol, bei einer Temperatur von etwa 25°C bis 100°C durchgeführt. Die Reaktion wird vorzugsweise bei einer Temperatur von etwa 60°C bis etwa 70°C während 30 min bis 2 h in einem Gemisch von Dimethylformamid und Methanol oder in Methanol durchgeführt. Das Schiff'sche-Base-Zwischenprodukt wird anschließend vorzugsweise ohne Isolieren unter Bildung des (der) entsprechenden N-Alkylderivats (N-Alkylderivate) reduziert. Die Reduktion der Schiff sehen Base kann unter Verwendung eines chemischen Reduktionsmittels, wie eines Metallborhydrids, beispielsweise Natriumborhydrid oder Natriumcyanoborhydrid durchgeführt werden. Die Reduktionsreaktion kann in einem polaren organischen Lösemittel, wie Dimethylformamid, Methanol oder einem Gemisch von polaren Lösemitteln, wie einem Gemisch von Dimethylformamid und Methanol durchgeführt werden. Die Reduktionsreaktion kann bei einer Temperatur von etwa 25°C bis etwa 100°C während 1 bis 5 h durchgeführt werden. Die Reduktionsreaktion wird vorzugsweise unter Verwendung eines Überschusses von Natriumcyanoborhydrid in einem Gemisch von Dimethylformamid und Methanol oder in Methanol bei etwa 60°C bis etwa 70°C während 1 bis 2 h durchgeführt. Das Verfahren A ist vorzugsweise für benzylische Aldehyde.
In einem zweiten Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen, nachfolgend als Verfahren B bezeichnet (beschrieben in Beispiel 3), wird die Bildung der Schiff'schen Base unter einer inerten Atmosphäre, wie Stickstoff oder Argon, in Gegenwart des Reduktionsmittels Natriumcyanoborhydrid in einem polaren Lösemittel, wie Dimethylformamid, Methanol oder einem Gemisch von polaren Lösemitteln, wie einem Gemisch von Dimethylformamid und Methanol bei einer Temperatur von etwa 25°C bis etwa 100°C während 1 bis 5 h durchgeführt. Die Reaktion wird vorzugsweise bei einer Temperatur von etwa 60°C bis etwa 70°C während 1 bis 2 h in einem Gemisch von Dimethylformamid und Methanol durchgeführt. Das Verfahren B ist bevorzugt für nicht benzylische Aldehyde.
In einem dritten Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen, nachfolgend als Verfahren C bezeichnet (beschrieben in Beispiel 4), erfolgt die Bildung der Schiff'schen Base a) unter einer Inertatmosphäre, wie Stickstoff oder Argon, b) in Gegenwart eines Reduktionsmittels, wie eines Metallborhydrids, wobei Natriumcyanoborhydrid am stärksten bevorzugt ist, oder eines homogenen oder heterogenen katalytischen Hydrierungsmittels (homogener oder heterogener katalytischer Hydrierungsmittel), wie Crabtree-Katalysator, Wilkinson-Katalysator, Palladium auf Kohle, Platin auf Kohle oder Rhodium auf Kohle, c) in einem polaren Lösemittel, wie Dimethylformamid, Methanol oder einem Gemisch von polaren Lösemitteln, wie einem Gemisch von Dimethylformamid und Methanol, und d) bei einer Temperatur von etwa 25°C bis etwa 100°C. Die Reaktion wird vorzugsweise bei einer Temperatur von etwa 60°C bis etwa 70°C in Methanol durchgeführt. Die Reaktion wird etwa 20 bis etwa 28 h fortgesetzt. Zu diesem Zeitpunkt wird das Reaktionsgemisch auf einen pH-Wert von etwa 7,5 bis etwa 10, wobei ein pH-Wert von etwa 9 bevorzugt ist, eingestellt. Die Einstellung des pH-Wertes stoppt die Reaktion. Das das Produkt marginal in polaren Lösemitteln löslich ist, kann das Lösemittel der Reaktion zu einem Alkohol, wie Ethanol, Butanol oder Isopropanol, wobei Isopropanol bevorzugt ist, umgetauscht werden, um für die Fällung des Produktes zu sorgen. Das Verfahren C ist ein bevorzugtes Verfahren gemäß der vorliegenden Erfindung im Hinblick auf eine höhere Produktausbeute, die durch dieses Verfahren erreicht wird. Ein weiterer Vorteil dieses Reaktionsschemas ist der erhöhte Anteil an bevorzugten Produkten (an der Aminogruppe des Zuckers mit der Bezeichnung R¹ in den Verbindungen der Formel II substituierte Produkte) gegenüber anderen Produkten (an den Aminogruppen der Substituenten mit der Bezeichnung R und/oder R³ in den Verbindungen der Formel II substituierte Produkte). Durch Ablaufen lassen der Reaktion während eines verlängerten Zeitraums, beispielsweise 20 bis 28 h, werden Produkte, die an den als R und R³ bezeichneten Positionen in den Verbindungen der Formel II monosubstituiert sind, in disubstituierte Formen umgewandelt, wobei die bevorzugten mottosubstituierten Derivate leichter isolierbar sind.
Die Produkte der Reaktion, die entweder nach dem Verfahren A, B oder C erhalten werden, können durch präparative Umkehrphasen-HPLC unter Verwendung von Waters C18 Nova-Pak-Säulen mit UV-Lichtdetektion (UV 235 nm oder 280 nm) gereinigt werden. Ein 30 min Gradientenlösemittelsystem aus 95% wässrigem Puffer/5% CH₃CN zum Zeitpunkt 0 min auf 20% wässriger Puffer/80% CH₃CN zu einem Zeitpunkt 30 min wird typischerweise verwendet, wobei der wässrige Puffer entweder TEAP (0,5%iges wässriges Triethylamin, eingestellt mit Phosphorsäure auf einen pH-Wert von 3) oder TFA (Gesamtkonzentration 0,1% Trifluoressigsäure) ist.
Eine HPLC-Analyse der Reaktionsgemische und gereinigten Endprodukte kann unter Verwendung einer Waters C18 MicroBonda-Pak-Säule (typischerweise 3,9 × 300 mm Stahl) oder Waters Nova-Pak C18 RCM-Säule (8 × 100 mm) mit UV-Detektion (235 nm oder 280 nm) erreicht werden. Ein 30 min Gradientenlösemittelsystem aus 95% wässrigem Puffer/5% CH₃CN zum Zeitpunkt 0 min auf 20% wässriger Puffer/80% CH₃CN zu einem Zeitpunkt 30 min wird typischerweise verwendet, wobei der wässrige Puffer entweder TEAP (0,5%iges wässriges Triethylamin, eingestellt mit Phosphorsäure auf einen pH-Wert von 3) oder TFA (Gesamtkonzentration 0,1% Trifluoressigsäure) ist.
Das Verhältnis des Aldehyds zu der Verbindung der Formel II und die Reaktionsbedingungen bestimmen die Reaktionsprodukte. Die monosubstituierten Derivate sind die Derivate, worin ein Wasserstoffatom der Aminogruppe an der Position R¹ in der Formel II durch einen der oben für die Formel I angegebenen Substituenten ersetzt ist. Bei Verwendung der oben beschriebenen Verfahren A oder B wird die Bildung monosubstituierter Derivate, die an der Aminogruppe des Aminozuckers in der Position R¹ bei den Verbindungen der Formel II substituiert sind, durch Verwendung eines geringen Überschusses an Aldehyd, eine kürzere Reaktionszeit und eine niedrigere Temperatur begünstigt. Wie oben angegeben, begünstigt das Verfahren C die Bildung des monosubstituierten Derivats. Das monosubstituierte Derivat ist bevorzugt. Ein großer Überschuss des Aldehyds begünstigt die Bildung der disubstituierten und trisubstituierten Derivate der Verbindungen der Formel II. Die disubstituierten Derivate sind die Derivate, worin ein Wasserstoffatom an zwei der aus der Aminogruppe an der Position R³ und der Aminogruppe der Aminozucker mit der Bezeichnung R oder R¹ in der Formel II ausgewählten Orte durch die reduzierte Aldehydeinheit ersetzt ist. Die trisubstituierten Derivate sind die Derivate, worin ein Wasserstoffatom an drei der aus der Aminogruppe in der Position R³ und der Aminogruppe der Aminozucker mit der Bezeichnung R oder R¹ in der Formel II ausgewählten Orte durch die reduzierte Aldehydeinheit ersetzt ist.
Beispiele für Verbindungen, die hergestellt wurden und illustrierend für Verbindungen der Formel I sind, sind in den Tabellen 2A und 2B angegeben. Tabelle 2A führt durch Umsetzen eines Aldehyds mit dem Glycopeptid A82846B hergestellte Verbindungen auf. Tabelle 2A listet die Seitenkettensubstitutionen an der Aminogruppe des 4-Epivancosaminylzuckers des 4-Epivancosaminyl-O-glycosyldisaccharids der A82846B-Verbindung auf. Alle der angegebenen Verbindungen sind monosubstituierte Derivate.
Die Tabelle 2B listet die Verbindungen auf, die durch Umsetzen eines Aldehyds mit einer Vielzahl von von A82846B verschiedenen Glycopeptidantibiotika hergestellt wurden. Die Verbindungen der Tabelle 2B sind an der Aminogruppe des Aminozuckers mit der Bezeichnung R¹ in Formel II mit der angegebenen Seitenkette monosubstituiert. Alle der angegebenen Verbindungen sind monosubstituierte Derivate.
Tabelle 2A
Tabelle 2B
Die Verbindungen der Formel I besitzen eine in vitro- und in vivo-Aktivität gegen pathogene grampositive Bakterien. Die minimalen Hemmkonzentrationen (MIC), bei denen die Verbindungen der Formel I bestimmte Bakterien hemmen, sind in Tabelle 3 angegeben. Die MIC-Werte wurden unter Verwendung eines Standardbrühemikroverdünnungsassays bestimmt.
Es hat sich ferner gezeigt, dass die Verbindungen der Formel I eine antimikrobielle in vivo-Aktivität gegen experimentell induzierte Infektionen bei Labortieren besitzen. Wenn zwei Dosen der Testverbindung an experimentell mit dem Testorganismus infizierte Mäuse verabreicht wurden, wurde die beobachtete Aktivität als ED₅₀-Wert (wirksame Dosis in mg/kg um 50% der Testtiere zu schützen: vgl. W. Wick et al., J. Bacteriol. 81, 233 bis 235 (1961)) gemessen. Für Beispielsverbindungen beobachtete ED₅₀-Werte sind in Tabelle 4 angegeben.
Tabelle 4
Ein wichtiger Aspekt der antimikrobiellen Aktivität vieler der Verbindungen der Formel I ist ihre Aktivität gegen Vancomycin resistente Entereococcen. Diese Aktivität ist in Tabelle 5 veranschaulicht, die einen Vergleich der Aktivität der Beispielverbindungen gegen repräsentative Vancomycin-resistente und Vancomycin-suszeptible Entereoccocen (Enterococcus faecium und Enterococcus faecalis, mittlerer geometrischer MIC-Wert (mcg/ml)) gemäß Bestimmung mittels des Standardbrühemikroverdünnungsassays zusammenfasst. Endpunkte wurden nach einer 24 h Inkubation abgelesen. Eine Modifikation des Aminozuckers der Disaccharideinheit liefert eine verbesserte Aktivität gegen Vancomycin-resistente Stämme gegenüber dem Elternglycopeptidantibiotikum.
Tabelle 5
Eine Reihe von Milchsäurebakterien, einschließlich allen Leuconostoci, allen Pediococci und einigen Lactobacilli ist gegenüber Vancomycin intrinsisch resistent. Bei einer erhöhten Verwendung von Vancomycin wurden Infektionen aufgrund dieser Bakterien mit steigender Frequenz bei Abwehr-geschwächten Patienten beobachtet (Handwerger et al., Reviews of Infectious Disease 12: 602 bis 610 (1990); Ruoff et al., Journal of Clinical Microbiology 26. 2064 bis 2068 (1988)). Ein wichtiger Aspekt der antimikrobiellen Aktivität der Verbindungen der Formel I ist ihre Aktivität gegen die Vancomycin-resistenten Milchsäurebakterien. Die erfindungsgemäßen Verbindungen eignen sich bei der Hemmung des Wachstums der Vancomycin-resistenten Milchsäurebakterien, wie von Leuconostoci, Pediococci und Lactobacilli, und somit bei der Bekämpfung opportunistischer Infektionen durch diese Gruppe von Bakterien. Diese Aktivität ist in Tabelle 6 veranschaulicht, die einen Vergleich der Aktivität der Beispielverbindungen gegen repräsentative Vancomycin-resistente Milchsäurebakterien (Pediococcus acidilacti, Pediococcus pentosaceus, Leuconostoc lactis, Leuconostoc mesenteroides, Leuconostoc pseudomesenteroides, Leuconostoc citreum und Lactobacillus confusus, mittlerer geometrischer MIC-Wert (mcg/ml)) gemäß Bestimmung unter Verwendung eines Standardagarverdünnungsassays auf Gehirn-Herz-Infusionsagar zusammenfasst.
Tabelle 6 In vitro Aktivität von Verbindungen der Formel I MIC (meg/ml)/Verbindung
Pharmazeutische Formulierungen der Verbindungen der Formel I sind auch Teil der vorliegenden Erfindung. Somit kann die Verbindung vorzugsweise in Form eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes für eine orale oder parenterale Verabreichung für die therapeutische oder prophylaktische Behandlung von bakteriellen Infektionen formuliert werden.
Beispielsweise kann die Verbindung mit herkömmlichen pharmazeutischen Trägern und Streckmitteln vermischt und in Form von Tabletten, Kapseln, Elixieren, Suspensionen, Sirupen, Oblaten und dergleichen verwendet werden. Die die Verbindung der Formel I umfassenden Zusammensetzungen enthalten etwa 0,1 bis etwa 90 Gew.-% der aktiven Verbindung und im Allgemeinen etwa 10 bis etwa 30%. Die Zusammensetzungen können herkömmliche Träger und Streckmittel, wie Maisstärke oder Gelatine, Lactose, Saccharose, mikrokristalline Cellulose, Kaolin, Mannit, Dicalciumphosphat, Natriumchlorid und Alginsäure, enthalten
Üblicherweise in den Formulierungen gemäß der vorliegenden Erfindung verwendete, den Zerfall fördernde Mittel umfassen Croscarmellose, mikrokristalline Cellulose, Maisstärke, Natriumstärkeglycolat und Alginsäure.
Tablettenbindemittel, die enthalten sein können, sind Akaziengummi, Methylcellulose, Natriumcarboxymethylcellulose, Polyvinylpyrrolidon (Povidon), Hydroxypropylmethylcellulose, Saccharose, Stärke und Ethylcellulose.
Gleitmittel, die verwendet werden können, umfassen Magnesimstearat oder andere metallische Stearate, Stearinsäure, Siliconfluidum, Talkum, Wachse, Öle und kolloidales Siliciumdioxid.
Geschmackstoffe, wie Pfefferminz, Wintergrünöl, Kirschgeschmackstoff oder dergleichen können auch verwendet werden.
Es kann wünschenswert sein, ein Färbemittel zuzugeben, um die Dosierungsform vom Aussehen her attraktiver zu machen oder um das Produkt identifizieren zu helfen.
Für eine intravenöse (IV) Verwendung, kann die wasserlösliche Form des Antibiotikums in einer der üblicherweise verwendeten intravenösen Flüssigkeiten gelöst und durch Infusion verabreicht werden. Derartige Flüssigkeiten, wie beispielsweise physiologische Kochsalzlösung, Ringer-Lösung oder 5%ige Dextroselösung, können verwendet werden.
Für intramuskuläre Zubereitungen kann eine sterile Formulierung einer geeigneten löslichen Salzform der Verbindung, beispielsweise des Hydrochloridsalzes, in einem pharmazeutischen Verdünnungsmittel, wie Pyrogenfreiem Wasser (destilliert), physiologischer Kochsalzlösung oder einer 5%igen Glucoselösung gelöst und verabreicht werden. Eine geeignete unlösliche Form der Verbindung kann als Suspension in einer wässrigen Base oder einer pharmazeutisch akzeptablen Ölbase, beispielsweise einem Ester einer langkettigen Fettsäure, wie Ethyloleat, hergestellt und verabreicht werden.
Für eine orale Verwendung eignet sich insbesondere eine sterile Formulierung einer geeigneten Salzform des Antibiotikums, beispielsweise des Hydrochloridsalzes, die in einem Verdünnungsmittel, wie destilliertem oder entionisiertem Wasser, formuliert ist.
Alternativ kann die Einheitsdosierungsform des Antibiotikums eine Lösung des Antibiotikums, vorzugsweise in seiner Salzform, in einem geeigneten Verdünnungsmittel in sterilen, hermetisch verschlossenen Ampullen sein. Die Konzentration des Antibiotikums in der Einheitsdosierungsform kann beispielsweise von etwa 1% bis etwa 50% in Abhängigkeit von der speziellen Form des Antibiotikums und seiner Löslichkeit und der durch den Arzt gewünschten Dosis schwanken.
In einem weiteren Aspekt liefert die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Behandlung von infektiösen Erkrankungen, insbesondere denen, die durch grampositive Mikroorganismen verursacht werden, bei Tieren. Die erfindungsgemäßen Verbindungen eignen sich insbesondere zur Behandlung von durch Methicillin-resistenten Staphyloccocen verursachten Infektionen. Ferner eignen sich die Verbindungen bei der Behandlung einer Infektion infolge von Entereococcen. Beispiele für derartige Erkrankungen sind schwere Staphylococcus-Infektionen, beispielsweise Staphylococcus endocarditis und Staphylococcus-Septikämie. Das Tier kann entweder für den Mikroorganismus suszeptibel oder damit infiziert sein. Das Verfahren umfasst eine Verabreichung einer Menge der Verbindung der Formel I, die für diesen Zweck wirksam ist, an das Tier. Im Allgemeinen liegt eine wirksame Menge der Verbindung der Formel I bei einer Dosis zwischen etwa 0,5 und etwa 100 mg/kg. Eine bevorzugte Dosis beträgt etwa 1 bis etwa 60 mg/kg der aktiven Verbindung. Eine typische tägliche Dosis für einen erwachsenen Menschen beträgt etwa 50 mg bis etwa 5 g.
Bei der praktischen Durchführung dieses Verfahrens kann das Antibiotikum in einer einzelnen täglichen Dosis oder in mehreren Dosen über den Tag hinweg verabreicht werden. Das Behandlungsmuster kann eine Verabreichung über längere Zeiträume, beispielsweise mehrere Tage oder 1 bis 6 Wochen, erfordern. Die Menge pro verabreichter Dosis oder die verabreichte Gesamtmenge hängen von Faktoren, wie der Art und Stärke der Infektion, dem Alter und dem allgemeinen Gesundheitszustand des Patienten, der Toleranz des Patienten für das Antibiotikum und dem bzw. den an der Infektion beteiligten Mikroorganismus bzw. Mikroorganismen ab.
Ein übliches Verfahren zur Praktizierung des Behandlungsverfahrens ist die Verabreichung des Antibiotikums durch intravenöse Infusion. Bei diesem Verfahren wird eine sterile Formulierung eines geeigneten löslichen Salzes des Antibiotikums in eine physiologische Flüssigkeit, wie 5%ige Dextroselösung, eingearbeitet und die erhaltene Lösung langsam iv infudiert. Alternativ kann auch das Piggy-Back-Verfahren einer iv-Infusion verwendet werden.
Um die Durchführung der vorliegenden Erfindung weiter zu veranschaulichen, sind die folgenden Beispiele angegeben, die den Umfang der vorliegenden Erfindung jedoch in keinster Weise einschränken sollen.
Beispiel 1
Verfahren A
Herstellung der Verbindung 2
Ein Gemisch des A82846B-Triacetats (2,25 g, 1,27 mmol, 1,0 Äquivalente (äq)) in DMF : Methanol = 1 : 1 (140 ml) unter einer Atmosphäre von Argon wurde mit 4-Biphenylcarboxaldehyd (331 mg, 2,12 mmol, 1,7 äq) behandelt. Das erhaltene Gemisch wurde auf 70°C erwärmt und bei dieser Temperatur während 1,75 bis 2 h gehalten. Die Lösung wurde anschließend mit Natriumcyanoborhydrid (554 mg, 8,83 mmol, 6,9 äq) behandelt. Ein Erwärmen auf 70°C wurde weitere 1,75 bis 2 h fortgesetzt, worauf das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur abgekühlt wurde, im Vakuum eingeengt wurde, mit Wasser (150 ml) verdünnt wurde und lyophilisiert wurde, um einen Feststoff zu erhalten.
Der Feststoff wurde durch präparative Umkehrphasenhochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) unter Verwendung einer Waters 3 × (40 × 100 mm) C18 Nova-Pak Patrone mit Waters C18 Nova-Pak Schutzeinsatz und unter Verwendung eines TEAP-Puffersystems gereinigt. Das analytische Verfahren für eine Analyse war: 0,2% TEA/Phosphorsäure (TEAP), pH-Wert = 3, das Gradientensystem zum Zeitpunkt 0 war 5% CH₃CN/94,8% H₂O mit 0,2% TEAP, das konstant gehalten wurde, und zum Zeitpunkt 20 min 60% CH₃CN/39,8% H₂O mit 0,2% TEAP, das konstant gehalten wurde. Die verwendete UV-Wellenlänge war 235 nm und die Strömungsrate betrug 2 ml/min. Die Analyse erfolgte unter Verwendung einer Waters Nova-Pak C18 RCM-Säule (8 × 100 mm), mit einem Nova-Pak C18 Schutzeinsatz. Es ist notwendig, das Produkt nach der Umkehrphasenreinigung zu entsalzen, wenn dieses HPLC-Verfahren verwendet wird.
Das Entsalzen erfolgt durch Zugabe des gereinigten Produkts zu 5 bis 10 ml H₂O. 1 N HCl wird tropfenweise unter Rühren zugegeben, um die Probe zu lösen. Der pH-Wert zu diesem Zeitpunkt betrug etwa 1 bis 3. Der pH-Wert der Lösung wurde anschließend mit 1 N NaOH auf 8,2 erhöht. Ein weißer Feststoff fiel aus der Lösung aus. Das Gemisch wurde gekühlt, filtriert und unter Vakuum bei Raumtemperatur 8 bis 15 h getrocknet. Man erhielt das Zwitterion (oder die neutrale Verbindung) des gewünschten Produkts, Verbindung 2 (p-Phenylbenzyl-A82846B) (1,02 g, 45%).
Beispiel 2
Herstellung der Verbindung 4
Ein Gemisch von A82846B-Triacetat (1,5 g, 0,848 mmol, 1,0 äq) in Methanol (100 ml) wurde unter einer Argonatmosphäre mit p-Phenoxybenzaldehyd (298 mg, 1,51 mmol, 1,8 äq) behandelt. Das erhaltene Gemisch wurde auf Rückflusstemperatur erwärmt und bei dieser Temperatur 2 h lang gehalten. Die Lösung wurde anschließend mit Natriumcyanoborhydrid (326 mg, 5,18 mmol, 6,1 äq) behandelt. Ein Erwärmen auf Rückflusstemperatur wurde weitere 2 h fortgesetzt, worauf das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur abgekühlt und zur Trockne im Vakuum eingedampft wurde.
Das Produkt wurde durch Umkehrphasen-HPLC mit einem TFA-Puffer gereinigt. Das analytische Verfahren für die Analyse erfolgte unter Verwendung einer Waters Nova-Pak C18 RCM-Säule (8 × 100 mm) mit einem Nova-Pak C18 Schutzeinsatz unter Eluieren mit einem 2,0 ml/min linearen Gradienten von 15% Acetonitril/0,1% TFA zum Zeitpunkt 0 auf 80% Acetonitril/0,1% TFA zum Zeitpunkt 15 min. Die die Produkte enthaltenden Fraktionen wurden durch UV-Abtasten bei 235 nm nachgewiesen. Das organische Lösemittel der gewünschten Fraktionen wurde entfernt und das Gemisch wurde zu einem weißen Feststoff lyophilisiert. Man erhielt 0,618 mg p-Phenoxybenzyl-A82846B-Verbindung, 4-Tris(trifluoracetat)salz (20% Ausbeute). Kein Entsalzen oder eine weitere Reinigung waren notwendig. Dieses Verfahren eignet sich auch insbesondere zur Herstellung der Verbindung 2, worin Phenylbenzaldehyd eines der Ausgangsmaterialien ist.
Referenzbeispiel 3
Verfahren B
Herstellung von 8-Phenyloctyl-A82846B
Ein Gemisch von A82846B-Triacetat (280 mg, 0,157 mmol, 1,0 äq in DMF : Methanol = 1 : 1 (30 ml) wurde mit 8-Phenyloctanal (59 mg, 0,29 mmol, 1,8 äq) und Natriumcyanoborhydrid (60 mg, 0,95 mmol, 6,1 äq) behandelt. Das erhaltene Gemisch wurde unter einer Stickstoffatmosphäre auf 70°C erwärmt und bei einer derartigen Temperatur 1 h gehalten. Das Reaktionsgemisch wurde anschließend auf Raumtemperatur abgekühlt und im Vakuum eingeengt. Man erhielt einen Rückstand. Ein Reinigen des Produkts erfolgte durch präparative Umkehrphasen-HPLC unter Verwendung einer Waters 2 × (40 × 100 mm) C18 Nova-Pak-Patrone mit Waters C18 Nova-Pak Schutzeinsatz. Das Eluieren erfolgte mit einem 30 min linearen Gradienten (Zeitpunkt 0 min, 95% TEAP (0,5% wässriges Triethylamin, eingestellt mit Phosphorsäure auf einen pH-Wert von 3)/5% CH₃CN auf t = 30 min, 20% TEAP/80% CH₃CN) bei einer Strömungsrate von 40 ml/min und einem UV-Nachweis bei 280 nm. Die gewünschte Fraktion wurde im Vakuum eingeengt, anschließend mit einer Waters Sep-Pak Patrone, wie nachfolgend beschrieben, entsalzt. Die Verbindung 176 erhielt man in 22%iger Ausbeute (60 mg).
Die erhaltene Verbindung wurde wie folgt entsalzt. Eine Waters Sep-Pak Patrone wurde mit Methanol (2 bis 3 Säulenvolumina) vorbenetzt und anschließend mit Wasser (2 bis 3 Säulenvolumina) konditioniert. Die in einem minimalen Volumen Wasser gelöste Probe wurde auf die Sep-Pak Säule aufgetragen, und anschließend mit Wasser (2 bis 3 Säulenvolumina) gewaschen, um die unerwünschten Salze zu entfernen. Das Produkt wurde anschließend mit einem geeigneten Lösemittelsystem, typischerweise CH₃CN : H₂O = 1 : 1, CH₃CN und/oder Methanol, eluiert. Die organische Lösemittelkomponente wurde im Vakuum entfernt und die erhaltene wässrige Lösung lyophilisiert. Man erhielt das Endprodukt.
Beispiel 4
Herstellung der Verbindung 229
Ein 3 l fassender Dreihalskolben wurde mit einem Kühler, Stichstoffeinlass und mechanischem Kopfrührgerät ausgestattet. Der Kolben wurde mit pulverisiertem A82846B-Acetatsalz (20,0 g, 1,21 × 10^–3 mol) und Methanol (1.000 ml) unter Stickstoffatmosphäre beladen. Zu diesem gerührten Gemisch wurde 4'-Chlorbiphenylcarboxaldehyd (2,88 g, 1,33 × 10^–2 mol, 1,1 äq) und anschließend Methanol (500 ml) zugegeben.
Schließlich wurde Natriumcyanoborhydrid (0,84 g, 1,33 × 10^–2 mol, 1,1 äq), gefolgt von Methanol (500 ml) zugegeben. Das erhaltene Gemisch wurde auf Rückflusstemperatur (etwa 65°C) erwärmt.
Nach 1 h bei Rückflusstemperatur erreichte das Reaktionsgemisch Homogenität. Nach 25 h bei Rückflusstemperatur wurde die Wärmequelle entfernt und das klare Reaktionsgemisch mit einem pH-Meter gemessen (6,97 bei 58,0°C). 1 N NaOH (22,8 ml) wurde tropfenweise zugegeben, um den pH-Wert auf 9,0 (bei 54,7°C) einzustellen. Der Kolben war mit einem Destillationskopf ausgestattet. Das Gemisch wurde unter Teilvakuum auf ein Gewicht von 322,3 g unter Halten der Topftemperatur zwischen 40 bis 45°C eingeengt.
Der Destillationskopf wurde durch einen Zugabetrichter, der 500 ml Isopropanol (IPA) enthielt, ersetzt. Das IPA wurde tropfenweise zu der bei Raumtemperatur befindlichen Lösung im Verlauf von 1 h zugegeben. Nachdem etwa ein Drittel des IPA zugegeben war, bildete sich ein körniger Niederschlag. Das restliche IPA wurde nach Einsetzen der Fällung schneller zugegeben. Der Kolben wurde gewogen und man fand, dass er 714,4 g der IPA/Methanol-Aufschlämmung enthielt.
Der Kolben wurde wieder mit einem Destillationskopf ausgestattet und einer Destillation unter Teilvakuum unterzogen, um das restliche Methanol zu entfernen. Die erhaltene Aufschlämmung (377,8 g) wurde über Nacht in einem Gefrierschrank abkühlen gelassen. Das Rohprodukt wurde durch einen Polypropylenpfropfen filtriert und zweimal mit 25 ml kaltem IPA gespült. Nach Trockenziehen an dem Trichter während 5 min wurde das Material in einen Vakuumofen gegeben, um es bei 40°C zu trocknen. Ein hellrosa Feststoff (22,87 g (theoretisch 22,43 g)) wurde erhalten. Eine HPLC-Analyse gegen einen Standard zeigte 68,0 Gew.% Verbindung 229 (4-[4-Chlorphenyl]benzyl-A82846B) in dem Rohfeststoff das sich in eine korrigierte Rohausbeute von 69,3% übersetzte.
Die Produkte der Reaktion wurden durch Umkehrphasen-HPLC unter Verwendung einer Zorbax SB-C18-Säule mit UV-Lichtdetektion (UV, 230 nm) analysiert. Ein 20 min Gradientenlösemittelsystem aus 95% wässrigem Puffer/5% CH₃CN zum Zeitpunkt t = 0 min auf 40% wässriger Puffer/60% CH₃CN zum Zeitpunkt t = 20 min wurde verwendet, wobei der wässrige Puffer TEAP (5 ml CH₃CN, 3 ml Phosphorsäure in 1.000 ml Wasser) war.
Beispiel 5
Tabelle 7 fasst die Herstellung und bestimmte physikalische Eigenschaften der Beispielverbindungen zusammen. Die Ausbeute des Produkts wurde unter Verwendung der Menge der Verbindung der Formel II als limitierendem Reagenz berechnet. Die folgenden Ausdrücke finden sich in Tabelle 6 und sind hier definiert. „Verfahren" bezeichnet das Syntheseverfahren gemäß Beschreibung in Beispiel 1, 2 oder 3. „Reagenzäquivalente" bezeichnet die Moläquivalente des Aldehyds und Reduktionsmittels, bezogen auf die Verbindung der Formel II. „FAB-MS (M + 3H)" bezeichnet eine Schnellatombeschussmassenspektroskopie.
Beispiel 6
Kapselformulierung
Kapseln, die 250 mg Verbindung 2 enthalten, wurden unter Verwendung der folgenden Bestandteile hergestellt:

Bestandteil Gewicht

Verbindung 2 HCl-Salz 255,4 mg

Maisstärke, fließfähiges Pulver 150 mg

Maisstärke 144,6 mg
Verbindung 2 (HCl-Salzform, 255,4 mg), Maisstärke, fließfähiges Pulver (150 mg) und Maisstärke (144,6 mg) wurden in einem geeigneten Mischer vermischt, bis ein homogenes Gemisch erhalten wurde. Das Gemisch wurde verwendet, um eine Hartgelatinekapsel auf ein Nettofülgewicht von 550 mg zu füllen.
Beispiel 7
Kapselformulierung
Kapseln, die 250 mg Verbindung 229 enthalten, wurden unter Verwendung der folgenden Bestandteile hergestellt:

Bestandteil Gewicht

Verbindung 229 HCl-Salz 255,4 mg

Maisstärke, fließfähiges Pulver 150 mg

Maisstärke 144,6 mg
Verbindung 2 (HCl-Salzform, 255,4 mg), Maisstärke, fließfähiges Pulver (150 mg) und Maisstärke (144,6 mg) wurden in einem geeigneten Mischer vermischt, bis ein homogenes Gemisch erhalten wurde. Das Gemisch wurde verwendet, um eine Hartgelatinekapsel auf ein Nettofüllgewicht von 550 mg zu Pillen.
Beispiel 8
Suspensionsformulierung
Eine sterile unlösliche Form der Verbindung 2 wurde auf eine für eine Suspension geeignete Teilchengröße vermahlen oder gesiebt. Dieses teilchenförmige Material wurde in dem folgenden Träger suspendiert:

Bestandteil Gewicht

Lecithin 1%

Natriumcitrat 2%

Propylparaben 0,015%

Destilliertes Wasser ausreichend auf das gewünschte Volumen
Beispiel 9
Suspensionsformulierung
Eine sterile unlösliche Form der Verbindung 229 wurde auf eine für eine Suspension geeignete Teilchengröße vermahlen oder gesiebt. Dieses teilchenförmige Material wurde in dem folgenden Träger suspendiert:

Bestandteil Gewicht

Lecithin 1%

Natriumcitrat 2%

Propylparaben 0,015%

Destilliertes Wasser ausreichend auf das gewünschte Volumen
Beispiel 10
Tablettenformulierung
Tabletten, die 250 mg der Verbindung 2 enthalten, wurden mit der folgenden Zusammensetzung hergestellt:

Bestandteil Gewicht

Lecithin 1%

Natriumcitrat 2%

Propylparaben 0,015%

Destilliertes Wasser ausreichend auf das gewünschte Volumen
Beispiel 11
Tablettenformulierung
Tabletten, die 250 mg der Verbindung 229 enthalten, wurden mit der folgenden Zusammensetzung hergestellt:

Bestandteil Gewicht

Lecithin 1%

Natriumcitrat 2%

Propylparaben 0,015%

Destilliertes Wasser ausreichend auf das gewünschte Volumen
Beispiel 12
Tablettenformulierung

Tabletten, die 250 mg der Verbindung 2 enthalten, wurden mit der folgenden Zusammensetzung hergestellt:

Bestandteil	Gewicht
Verbindung 2 HCl-Salz	255,4 mg
Mikrokristalline Cellulose	101,1 mg
Croscarmellosenatrium	12,0 mg
Providon	12,0 mg
Magnesiumstearat	3,0 mg
Stearinsäure	4,0 mg
Gereinigtes Wasser	0,16 ml

Beispiel 13
Tablettenformulierung

Tabletten, die 250 mg der Verbindung 229 enthalten, wurden mit der folgenden Zusammensetzung hergestellt:

Bestandteil	Gewicht
Verbindung 229 HCl-Salz	255,4 mg
Mikrokristalline Cellulose	101,1 mg
Croscarmellosenatrium	12,0 mg
Providon	12,0 mg
Magnesiumstearat	3,0 mg
Stearinsäure	4,0 mg
Gereinigtes Wasser	0,16 ml

Claims

Verbindung der Formel (1)
wobei X für Wasserstoff oder Chloro steht, R und R⁶ für 4-Epivancosaminyl stehen, R⁷ für (C₁-C₁₂-Alkyl)-R⁸ steht und an die Aminogruppe von R⁶ gebunden ist und R⁸ eine Gruppe der Formel
darstellt, wobei: – q 0 bis 4 beträgt; – R¹² unabhängig aus der Gruppe ausgewählt ist bestehend aus (i) Halo, (ii) Nitro, (iii) (C₁-C₆)-Alkyl, (iv) (C₁-C₆)-Alkoxy, (v) Halo-(C₁-C₆)-Alkyl, (vi) Halo-(C₁-C₆)-Alkoxy, (vii) Hydroxy und (viii) (C₁-C₆)-Thioalkyl; – r 1 bis 5 beträgt, vorausgesetzt, die Summe von q und r beträgt nicht mehr als 5, – Z aus der Gruppe ausgewählt ist bestehend aus: (i) einer einfachen Bindung, (ii) zweiwertigem (C₁-C₆)-Alkyl, das unsubstituiert oder mit Hydroxy, (C₁-C₆)-Alkyl oder (C₁-C₆)-Alkoxy substituiert ist, (iii) zweiwertigem (C₂-C₆)-Alkenyl, (iv) zweiwertigem (C₂-C₆)-Alkynyl und (v) einer Gruppe der Formel -(C(R¹⁴)₂)_s-(R¹⁵)- oder -(R¹⁵)-(C(R¹⁴)₂)_s-, wobei s 0–6 beträgt, jeder R¹⁴-Substituen unabhängig unter Wasserstoff, (C₁-C₆)-Alkyl oder (C₄-C₁₀)-Cycloalkyl ausgewählt ist und R¹⁵ unter -O-, -S-, -SO-, -SO₂-, -SO₂O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -NH-, -N(C₁-C₆-Alkyl), -C(O)NH-, -NHC(C)- und -N=N- ausgewählt ist, – R¹³ unabhängig aus der Gruppe ausgewählt ist bestehend aus: (i) (C₄-C₁₀)-Heterocyclyl, (ii) Heteroaryl, (iii) (C₄-C₁₀)-Cycloalkyl, das unsubstituiert oder mit (C₁-C₆)-Alkyl substituiert ist, und iv) Phenyl, das unsubstituiert oder mit 1 bis 5 Substituenten substituiert ist, die unabhängig unter: Halo, Hydroxy, Nitro, (C₁-C₁₀)-Alkyl, (C₁-C₁₀)-Alkoxy, Halo-(C₁-C₃)-alkoxy, Halo-(C₁-C₃)-alkyl, (C₁-C₃)-Alkoxyphenyl, Phenyl, Phenyl-(C₁-C₃)-alkyl, (C₁-C₆)-Alkoxyphenyl, Phenyl-(C₂-C₃)-alkynyl und (C₁-C₆)-Alkylphenyl oder einem Salz derselben ausgewählt sind.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei R⁷ für -CH₂-R⁸ steht.
Verbindung nach Anspruch 2, wobei R¹³ für Heteroaryl steht.
Verbindung nach Anspruch 3, die das 4-Thiophenylbenzyl A82846B oder ein Salz desselben ist.
Verbindung nach Anspruch 2, wobei R¹³ für Phenyl steht, das unsubstituiert oder mit 1 bis 5 Substituenten substituiert ist, die unabhängig unter: Halo, Hydroxy, Nitro, (C₁-C₁₀)-Alkyl, (C₁-C₁₀)-Alkoxy, Halo-(C₁-C₃)-alkoxy, Halo-(C₁-C₃)-alkyl, (C₁-C₃)-Alkoxyphenyl, Phenyl, Phenyl-(C₁-C₃)-alkyl, (C₁-C₆)-Alkoxyphenyl, Phenyl-(C₂-C₃)-alkynyl und (C₁-C₆)-Alkylphenyl ausgewählt sind.
Verbindung nach Anspruch 2 oder 5, wobei r 1 beträgt.
Verbindung nach Anspruch 6, wobei R⁸ für para(R¹³-Z)-Phenyl steht.
Verbindung nach Anspruch 7, wobei Z für eine einfache Bindung steht.
Verbindung nach Anspruch 8, wobei R¹³ für. Halophenyl steht.
Verbindung nach Anspruch 8, wobei R¹³ für 4-Halophenyl steht.
Verbindung nach Anspruch 8, wobei R¹³ für 4-Biphenyl steht.
Verbindung nach Anspruch 7, wobei Z für -O- und R¹³ für Phenyl steht, das unsubstituiert oder mit 1 bis 5 Substituenten substituiert ist, die unabhängig unter: Halo, Hydroxy, Nitro, (C₁-C₁₀)-Alkyl,(C₁-C₆₀)-Alkoxy, Halo-(C₁-C₃)-alkoxy, Halo-(C₁-C₃)-alkyl, (C₁-C₃)-Alkoxyphenyl, Phenyl, Phenyl-(C₁-C₃)-alkyl, (C₁-C₆)-Alkoxyphenyl, Phenyl-(C₂-C₃)-alkynyl und (C₁-C₆)-Alkylphenyl ausgewählt sind.
Verbindung nach Anspruch 7, wobei Z für -OH₂O- und R¹³ für Phenyl steht, das unsubstituiert oder mit 1 bis 5 Substituenten substituiert ist, die unabhängig unter: Halo, Hydroxy, Nitro, (C₁-C₁₀)-Alkyl; (C₁-C₁₀)-Alkoxy, Halo-(C₁-C₃)-alkoxy, Halo-(C₁-C₃)-alkyl, (C₁-C₃)-Alkoxyphenyl, Phenyl, Phenyl-(C₁-C₃)-alkyl, (C₁-C₆)-Alkoxyphenyl, Phenyl-(C₂-C₃)-alkynyl und (C₁-C₆)-Alkylphenyl ausgewählt sind.
Verbindung nach Anspruch 7, wobei Z für -sulfonyl- und R¹³ für Phenyl steht, das unsubstituiert oder mit 1 bis 5 Substituenten substituiert ist, die unabhängig unter Halo, Hydroxy, Nitro, (C₁-C₁₀)-Alkyl, (C₁-C₁₀)-Alkoxy, Halo-(C₁-C₃)-alkoxy, Halo-(C₁-C₃)-alkyl, (C₁-C₃)-Alkoxyphenyl, Phenyl, Phenyl-(C₁-C₃)-alkyl, (C₁-C₆)-Alkoxyphenyl, Phenyl-(C₂-C₃)-alkynyl und (C₁-C₆)-Alkylphenyl ausgewählt sind.
Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei R¹² für Halo steht.
Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei q 0 beträgt.
Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche und einen oder mehrere pharmazeutisch akzeptable Träger umfasst.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 16 bei der Herstellung eines Medikaments für das Behandeln einer suszeptiblen bakteriellen Infektion.
Verwendung nach Anspruch 18, wobei die bakterielle Infektion durch vancomycinresistente Enterokokken verursacht wird.
Verfahren nach Anspruch 18, wobei die bakterielle Infektion durch methicillinresistente Staphylokokken verursacht wird.
Verfahren für das Zubereiten einer Verbindung nach Anspruch 1, das Verfahren umfassend: (a) Reagieren einer Verbindung der Formel
wobei X für Wasserstoff oder Chloro steht und R und R¹ für 4-Epivancosaminyl mit einem Aldehyd stehen, das der Gruppe R⁷, wie in Anspruch 1 definiert, entspricht, in Methanol bei ca. 25°C bis ca. 100°C, (b) Fortführen der Reaktion bis zur Bildung einer Schiffschen Base und (c) Reduzieren der Schiffschen Base durch Zusetzen eines Metallborhydrids zu der Mischung bei ca. 25°C bis ca. 100°C.
Verfahren nach Anspruch 21, wobei das Aldehyd p-Phenoxybenzaldehyd ist.
Verfahren nach Anspruch 22, wobei das Aldehyd p-Phenylbenzaldehyd ist.
Verfahren für die Zubereitung einer Verbindung nach Anspruch 1, das Verfahren umfassend das Reagieren, in einem polaren Lösungsmittel bei ca. 25°C bis ca. 100°C, (i) eines Glycopeptid-Antibiotikums der Formel:
wobei X für Wasserstoff oder Chloro steht und R und R¹ für 4-Epivancosaminyl stehen, mit (ii) einem Aldehyd, das der Gruppe R⁷, wie in Anspruch 1 definiert, entspricht, in Gegenwart von (iii) einem Reduziermittel, das unter einem Metallborhydrid und einem homogenen oder heterogenen katalytischen Mittel oder Mitteln ausgewählt ist; für eine Zeitspanne, die ausreicht, um eine Verbindung nach Anspruch 1 herzustellen.
Verfahren nach Anspruch 24, wobei die Reaktion ca. 20 bis 28 Stunden bei einer Temperatur von ca. 60°C bis ca. 70°C durchgeführt wird und das Reduziermittel Natriumcyanoborhydrid ist.
Verfahren nach Anspruch 25, wobei das Giycopeptid-Antibiotikum A82846B ist.