DE68906045T2

DE68906045T2 - 3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminoanthracycline.

Info

Publication number: DE68906045T2
Application number: DE8989301283T
Authority: DE
Inventors: Alberto Bargiotti; Maria Grandi; Gabriella Pezzoni; Antonino Suarato; Pier Angelo Zini
Original assignee: Carlo Erba SpA
Current assignee: Pfizer Italia SRL
Priority date: 1988-02-10
Filing date: 1989-02-10
Publication date: 1993-08-05
Anticipated expiration: 2009-02-11
Also published as: NO890567L; GB8803076D0; CN1037904A; IL89199A0; ATE88478T1; DE68906045D1; ES2055035T3; EP0328400A3; FI890611A; DK59289D0; NZ227877A; ZA891019B; PT89662A; DK59289A; FI890611A0; JPH01294669A; EP0328400A2; US4987126A; YU31189A; EP0328400B1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft Anthracyclinantitumorglycoside, deren Herstellung, Zusammensetzungen, die diese enthalten, und die Verwendung der Glycoside.
Daunorubicin (Daunomycin), 4-Demethoxydaunorubicin und ihre hydroxylierten Seitenkettenderivate sind wohlbekannte Antitumorglycoside, und sowohl ihre Herstellung wie auch ihre Verwendung sind im Stand der Technik ausführlich beschrieben. Daunomycinon und 4-Demethoxydaunomycinon, welches die als Ausgangsmaterialien verwendeten Aglycone sind, sind ebenfalls wohlbekannt.
EP-A-0 051 280 betrifft Anthracyclinglycoside, die Daunorubicin- und Doxorubicinderivate sind, wie etwa 4'-Amino-4'-deoxy-daunorubicin, 4'-Deoxy-4'-epitrifluoracetamido-daunorubicin und 4'-Amino-4'-deoxy-doxorubicin.
Die vorliegende Erfindung stellt unter einem ihrer Aspekte eine neue Klasse von Anthracyclinglycosiden der Formel (I):
zur Verfügung, worin NH&sub2; bedeutet, dass der NH&sub2;-Substituent in einer axialen oder äquatorialen Konfiguration vorliegen kann, R&sub1; Wasserstoff oder eine Hydroxygruppe ist und R&sub2; Wasserstoff oder eine Methoxygruppe ist; und deren pharmazeutisch zulässige Additionssalze. Ein solches bevorzugtes Salz ist das Hydrochlorid. Insbesondere sind die neuen Anthracyclinglycoside:
Ia: 4-Demethoxy-3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminodaunorubicin
Ib: 3'-Deamino-4'-deoxy-4'-aminodaunorubicin
Ic: 4-Demethoxy-3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminodoxorubicin
Id: 3'-Deamino-4'-deoxy-4'-aminodoxorubicin
Ie: 4-Demethoxy-3'-deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodaunorubicin
If: 3'-Deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodaunorubicin
Ig: 4-Demethoxy-3'-deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodoxorubicin
Ih: 3'-Deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodoxorubicin
Verbindungen (Ia-h) und pharmazeutisch zulässige Salze davon werden durch ein Verfahren hergestellt, welches umfasst:
(i) Kondensation von Daunomycinon oder 4-Demethoxy-daunomycinon der Formel (II):
worin R&sub2; Wasserstoff (4-Demethoxydaunomycinon) oder Methoxy (Daunomycinon) ist, mit einer Verbindung der Formel (IIIe) oder (IIIf):
((IIIe): X H, Y = NHCOCF&sub3;; (IIIf): X = NHCOCF&sub3;, Y = H), woraus sich das N-Trifluoracetylglycosid der Formel (IVe) oder (IVf) ergibt:
worin R&sub2; H oder OCH&sub3; ist ((IVe): X = H, Y = NHCOCF&sub3;; (IVf): X = NHCOCF&sub3;, Y = H) und Entfernung der N-Trifluoracetylgruppe daraus, wodurch ein Anthracyclinglycosid der Formel (I) erhalten wird, in welchem R&sub1; Wasserstoff ist und R&sub2; wie oben definiert ist;
(ii) falls gewünscht, Umwandeln dieses Anthracyclinglycosids der Formel (I) in eines seiner pharmazeutisch zulässigen Salze;
(iii) falls gewünscht, Bromierung dieses Anthracyclinglycosids der Formel (I) oder eines seiner pharmazeutisch zulässigen Salze, und Hydrolyse des so erhaltenen 14-Bromderivates, wodurch das entsprechende Anthracyclinglycosid der Formel (I) erhalten wird, in welchem R&sub1; Hydroxy ist; und
(iv) falls gewünscht, Umwandeln dieses Glycosids der Formel (I), in welchem R&sub1; Hydroxy ist, in eines seiner pharmazeutisch zulässigen Salze.
Die neuen Aminozucker der Formel (III) können durch ein Verfahren hergestellt werden, welches umfasst:
(a) Umsetzen von Methyl-2,3,6-trideoxy-alpha-L- glycero-hexopyranosid-4-ulose der Formel (V):
mit Hydroxylamin oder eines sauren Additionssalzes davon, was eine Mischung von syn- und anti-Oximen der Formel (VII) ergibt:
(b) Hydrieren dieser Mischung, Schutz der so gebildeten Aminogruppe mit einer Trifluoracetylgruppe und Abtrennung der individuellen, so hergestellten 4-N-trifluoracetylierten Epimere der Formeln (VIIIe) und (VIIIf):
(c) Umwandeln des jeweiligen Epimers in das entsprechende 1-Hydroxyderivat der Formel (IXe) oder (IXf):
und
(d) Umwandeln des jeweiligen 1-Hydroxyderivates in das entsprechende 1-Chlorderivat (IIIe) oder (IIIf):
Die Herstellung der Aminozucker der Formel (III) wird in Schema I skizziert. SCHEMA I Raney-N&sub2;/H&sub2; chromatografische Trennung gasförmiges HCl
In Schritt (a) kann die Behandlung von Methyl-2,3,6-trideoxy-alpha-L-glycero-hexopyranosid-4-ulose (V) (siehe: J.S. Brimacombe et al, J.C.S. Perkin I, 1980, 273) mit Hydroxylaminhydrochlorid in Triethylamin (TEA) stattfinden, was die syn- und anti-Oxime (VII) ergibt.
Deren Reduktion in Schritt (b) kann durch Hydrierung in wasserfreiem Methanol und in Gegenwart von Raney-Nickel durchgeführt werden, beispielsweise bei 10 Atm während 3 Stunden. Das hydrierte Gemisch kann mit Trifluoressigsäureanhydrid umgesetzt werden, wodurch eine Mischung von N-trifluoracetylierten Derivaten erhalten wird, welche nach chromatografischer Trennung auf einer Silicagel-Säule die entsprechenden Trifluoracetamidoderivate (VIIIe) und (VIIIf) separat ergibt. Das Eluierungssystem kann Methylenchlorid-Aceton sein (95:5 V/V).
Um das jeweilige Epimer in das entsprechende 1-Hydroxyderivat in Schritt (c) umzuwandeln, kann das jeweilige Epimer (VIIIe) oder (VIIIf) mit Essigsäure erwärmt werden. Die Erwärmung kann bei 100ºC 1 Stunde lang mit 20 %-iger Essigsäure stattfinden. Schritt (d) kann duch Behandlung mit Trifluoressigsäureanhydrid und HCl bewirkt werden. Beispielsweise kann ein 1-Hydroxyepimer zunächst über Nacht bei 0ºC mit Trifluoressigsäureanhydrid behandelt werden und danach, gelöst in Diethylether, über Nacht mit gasförmigem HCl umgesetzt werden, wodurch 2,3,4,6-Tetradeoxy-3- trifluoracetamido-L-threohexopyranosylchlorid (IIIe) und 2,3,4,6-Tetradeoxy-3-trifluoracetamido-L-erythrohexopyranosylchlorid (IIIf) entstehen.
Die Herstellung der Daunorubicin- und Doxorubicinderivate der Formel (I) wird durch das folgende Reaktionsschema II erläutert: SCHEMA II R&sub2; = H (4-Demethoxydaunomycinon) R&sub2; = OCH&sub3; (Daunomycinon)
In Schema II wird 4-Demethoxydaunomycinon (R&sub2; = H) oder Daunomycinon (R&sub2; = OCH&sub3;) mit einer Verbindung der Formel (IIIe) oder (IIIf) in Anwesenheit von Silbertrifluormethansulfonat kondensiert, wodurch die N-Trifluoracetylglycoside (IVe) oder (IVf) gebildet werden, von welchen Verbindungen der Formel (Ia,b) oder (Ie,f) durch Entfernung der Amino-Schutzgruppe durch milde alkalische Hydrolyse erhalten werden.
Die Bedingungen, unter welchen die Kondensation ausgeführt werden kann, sind diejenigen, die in US-A-4 112 074 beschrieben sind. Die Verbindungen (Ia,b) und (Ie,f) können jeweils in (Ic,d) und (Ig,h) (R&sub1; = OH) durch Bromierung an der 14-Position und durch Hydrolyse des 14-Bromderivates mit wässrigem Natriumformiat umgewandelt werden. Die Bromierungs- und Hydrolysebedingungen sind typischerweise diejenigen, wie sie in US-A-4 122 076 oder GB-A-1 217 133 beschrieben sind.
Gemäss einer Ausführungsform dieses Verfahrens wird 4-Demethoxy-daunomycinon, gelöst in trockenem Methylenchlorid, bei Raumtemperatur 1 Stunde lang mit 1-Chloro-2,3,4,6-tetradeoxy-4-(N-trifluoracetamido)-L- threohexopyranosid (IIIe) in Anwesenheit von Molekularsieb und Silbertrifluormethansulfonat umgesetzt, wodurch ein N-geschütztes Glycosid (IVe) gebildet wird (R&sub2; = H, X = H, Y = NHCOCF&sub3;), welches, gelöst in Aceton, bei einer Temperatur von 0ºC und während 1 Stunde einer milden alkalischen Hydrolyse mit 0,2 N Natronlauge unterworfen wird, was die Verbindung der Formel (Ia) als freie Base ergibt, welche, durch Behandlung mit methanolischem Chlorwasserstoff, als ihr Hydrochlorid isoliert wird.
Falls gewünscht, wird (Ia) mit Brom in Chloroform umgesetzt, wodurch sein 14-Bromderivat erhalten wird, von welchem, nach Hydrolyse bei Raumtemperatur während 48 Stunden unter Stickstoff durch eine wässrige Natriumformiatlösung die Verbindung der Formel (Ic) als freie Base erhalten wird, und durch Behandlung mit wasserfreiem methanolischen Chlorwasserstoff als ihr Hydrochlorid isoliert wird.
Verbindungen (Ie) und (Ig) können auf die gleiche Weise erhalten werden, ausgehend von 1-Chlor-2,3,4,6-tetradeoxy- 4-(N-trifluoracetamido)-L-erythrohexapyranosid (IIIf). Ausgehend von Daunomycinon, können stattdessen die Verbindungen (Ib), (Id), (If) und (Ih) erhalten werden.
Die vorliegende Erfindung stellt auch eine pharmazeutische Zusammensetzung zur Verfügung, welche als aktiven Bestandteil ein Anthracyclinglycosid der Formel (I) oder eines seiner pharmazeutisch zulässigen Salze umfasst, zusammen mit einem pharmazeutisch zulässigen Träger oder Verdünnungsmittel. Eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung der Erfindung wird mit einem inerten Träger kombiniert. Herkömmliche Träger können verwendet werden, und die Zusammensetzungen können in konventioneller Weise formuliert werden.
Die Verbindungen der Erfindung sind verwendbar zu therapeutischen Behandlungsverfahren des menschlichen oder tierischen Körpers. Insbesondere sind die Verbindungen der Erfindung nützlich als Antitumormittel, indem man eine therapeutisch wirksame Menge der Verbindung an einen Patienten verabreicht.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.

BEISPIEL 1

Herstellung von Methyl-2,3,4,6-tetradeoxy-4-trifluoracetamido-alpha-L-threo-hexopyranosid (VIIIe) und Methyl- 2,3,4,6-tetradeoxy-4-trifluoracetamido-alpha-L-erythrohexopyranosid (VIIIf):
1 g Methyl-2,3,6-trideoxy-alpha-L-glycero-hexopyranosid-4- ulose (V) (6,94 mMol) wurde zu einer Lösung von 2,4 g Hydroxylaminohydrochlorid in 50 ml Methanol und 4,8 ml Triethylamin zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur 1 Stunde lang gerührt, dann mit 150 ml Methylenchlorid und 100 ml Wasser verdünnt.
Die organische Phase wurde abgedampft, mit Wasser gewaschen und unter Vakuum konzentriert, was eine Mischung der syn- und anti-Oxime (VII) in Form eines Sirups ergab.
Der Sirup wurde in 100 ml trockenem Methanol gelöst und in Anwesenheit von Raney-Nickel bei 10 Atm 3 Stunden lang hydriert.
Die filtrierte Lösung wurde unter reduziertem Druck eingedampft und der Rückstand mit 6 ml Trifluoressigsäureanhydrid in 50 ml Methylenchlorid behandelt, was nach chromatografischer Auftrennung auf einer Silicagel-Säule, die mit Methylenchlorid und 5 % Aceton eluiert wurde, 0,63 g (Ausbeute 42 %) der Verbindung (VIIIe) und 0,57 g (Ausbeute 38 %) der Verbindung (VIIIf) ergab.
Die Struktur dieser Verbindungen wurde auf Grundlage von ¹H-NMR-Untersuchungen bestimmt (200 MHz, CDCl&sub3;, delta).
¹H-NMR-Spektrum der Verbindung (VIIIe):
1,18 (d, J=6,5 Hz, 3H, &sub3;-5); 1,7-1,9 (m, 4H, &sub2;-2, &sub2;-3); 3,42 (s, &sub3;); 4,05 (m, 1H, -4); 4,35 (dq, J=1,0, 6,5 Hz, 1H, -5); 5,08 (m, 1H, -1); 6,65 (bd, J=9,0 Hz, 1H, -CO)
¹H-NMR-Spektrum der Verbindung (VIIIf):
1,20 (d, J=6,0 Hz, 3H, &sub3;-5); 1,5-2,0 (m, 4H, &sub2;-2, &sub2;&submin;&sub3;); 3,38 (s, &sub3;); 4,07 (m, 2H, -4, -5); 4,89 (m, 1H, -1); 7,26 (bd, J=8,0 Hz, 1H, -CO).

BEISPIEL 2

Herstellung von 2,3,4,6-Tetradeoxy-3-trifluoracetamido-L- threo-hexopyranosylchlorid (IIIe):
Eine Lösung von 0,46 g (2 mMol) der Verbindung (VIIIe), hergestellt wie in Beispiel 1 beschrieben, gelöst in 40 ml Essigsäure und 160 ml Wasser, wurde 1 Stunde lang auf 100ºC erwärmt.
Das Reaktionsgemisch wurde unter reduziertem Druck abgedampft, was 2,3,4,6-Tetradeoxy-4- trifluoracetamido-L-threo-hexose (IXe) in Form eines Sirups ergab, welcher in 20 ml Methylenchlorid aufgelöst wurde und bei 0ºC mit 4 ml Trifluoressigsäureanhydrid behandelt wurde.
Nach einer Nacht bei 0ºC wurde das Reaktionsgemisch eingedampft und der Rückstand, gelöst in 20 ml wasserfreiem Diethylether, wurde bei 0ºC mit Chlorwasserstoff gesättigt.
Nach Stehen über Nacht bei 0ºC wurde die Reaktionsmischung im Vakuum eingedampft, was die Titelverbindung, geeignet für eine Kupplungsreaktion ohne weitere Reinigung, ergab.

BEISPIEL 3

Herstellung von 2,3,4,6-Tetradeoxy-4-trifluoracetamido-L- erythro-hexo-pyranosylchlorid (IIIf):
Ausgehend von Methyl-2,3,4,6-tetradeoxy-4-trifluoracetamido-alpha-L-erythro-hexopyranosid (VIIIf), hergestellt wie in Beispiel 1 beschrieben, wurde die Titelverbindung hergestellt, indem man dem in Beispiel 2 beschriebenen Verfahren folgte.

BEISPIEL 4

Herstellung von 4-Demethoxy-3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminodaunorubicin (Ia):
Die Kondensation von 4-Demethoxydaunomycinon (0,48 g, 1 mMol), gelöst in 70 ml trockenem Methylenchlorid, mit 2,3,4,6-Tetradeoxy-3-trifluoracetamido-L-threo-hexo- pyranosylchlorid (IIIe) (0,37 g, 1,5 mMol) in Anwesenheit von Molekularsieb (4 Angström), wurde unter Verwendung von Silbertrifluormethansulfonat (0,38 g in 10 ml Diethylether) als Katalysator durchgeführt.
Nach 30 Minuten unter kräftigem Rühren bei Raumtemperatur wurde die Reaktionsmischung mit einer gesättigten wässrigen Natriumhydrogencarbonatlösung behandelt, und die organische Phase wurde abgetrennt und unter reduziertem Druck eingedampft, was nach chromatografischer Reinigung 4-Demethoxy-3'-deamino-4'-deoxy-4'-trifluoracetamido-daunorubicin ((IVe), R&sub2; = H), 0,42 g, Ausbeute: 70 %, ergab. Schmelzpunkt 178 bis 180ºC unter Zersetzung.
¹H-NMR, 200 MHz, CDCl&sub3;, unter anderem delta:
1,18 (d, J=6,5 Hz, 3H, &sub3;-5'); 1,7-1,9 (m, 4H, &sub2;-2', &sub2;-3'); 2,14 (dd, J=4,0, 15,0 Hz, 1H, H-8ax); 2,32 (m, 1H, -8eq); 2,42 (s, 3H, &sub3;); 2,98 (d, J=19,0 Hz, 1H, 10ax); 3,24 (dd, J=1,0, 19,0 Hz, 1H, -10e); 4,05 (m, 1H, H-4'); 4,35 (dq, J=1,0, 6,5 Hz, 1H, -5'); 4,63 (s, 1H, -9); 5,28 (m, 1H, -7); 5,44 (m, 1H, -1'); 6,65 (bd, J=9,0 Hz, 1H, CO); 7,83 (m, 2H, -1, -4); 13,28 (s, 1H, -11); 13,58 (s, 1H, -6).
0,4 g des N-Trifluoracetylderivates wurden in 70 ml 0,2 N Natronlauge gelöst und bei Raumtemperatur gerührt. Nach 1 Stunde wurde die Reaktionsmischung auf pH 3 mit wässriger Salzsäure angesäuert und dann mit Methylenchlorid extrahiert. Die wässrige Phase, eingestellt auf pH 8,1, wurde mit Methylenchlorid extrahiert, und der Extrakt wurde mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und auf ein kleines Volumen konzentriert.
Chlorwasserstoff und Diethylether wurden zugegeben, was die Titelverbindung (Ia) als Hydrochlorid ergab;
Schmelzpunkt: 155 bis 156ºC unter Zersetzung.

BEISPIEL 5

Herstellung von 3'-Deamino-4'-deoxy-4'-aminodaunorubicin (Ib):
Ausgehend von Daunomycinon und 2,3,4,6-Tetradeoxy-3- trifluoracetamido-L-threo-hexopyranosylchlorid (IIIe), hergestellt wie in Beispiel 2 beschrieben, wurde die Titelverbindung hergestellt, indem man dem in Beispiel 4 beschriebenen Verfahren folgte; Schmelzpunkt: 156 bis 157ºC unter Zersetzung.
¹H-NMR der entsprechenden Trifluoracetamidoderivate wird dargestellt.
¹H-NMR, 200 MHz, CDCl&sub3;, unter anderem delta:
1,16 (d, J=6,5 Hz, 3H, &sub3;-5'); 1,5-2,0 (m, 4H, &sub2;-2', &sub2;-3'); 2,13 (dd, J=4,0, 15,0 Hz, 1H, -8ax); 2,20 (ddd, J=2,0, 2,0, 15,0 Hz, -8e); 2,41 (s, 3H, &sub3;); 2,96 (d, J=19,0 Hz, 1H, -10ax); 3,24 (dd, J=2,0, 19,0 Hz, 1H, -10e); 4,07 (m, 1H, -4'); 4,08 (s, 3H, &sub3;); 4,34 (dq, J=1,0, 6,5 Hz, 1H, -5'); 4,62 (s, 1H, -9); 5,31 (m, 1H, -7); 5,46 (m, 1H, -1'); 6,63 (bd, J=9,5 Hz, 1H, CO); 7,39 (d, J=8,5 Hz, 1H, -3); 7,78 (t, J=8,5 Hz, 1H, -2); 8,03 (d, J=8,5 Hz, 1H, -1); 13,29 (s, 1H, -11); 14,01 (s, 1H, OH-6).

BEISPIEL 6

Herstellung von 4-Demethoxy-3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminodoxorubicin (Ic):

0,2 g 4-Demethoxy-3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminodaunorubicin (Ia) wurden in einer Mischung von wasserfreiem Methanol und Dioxan gelöst, und eine Lösung von 1 g Brom in 10 ml Methylenchlorid wurde gemäss dem in US-A-4 122 076 beschriebenen Verfahren zugegeben, um das 14-Bromderivat herzustellen, welches durch Zugabe von Diethylether ausgefällt wurde. Das Rohprodukt wurde in ein wenig Aceton aufgelöst und mit 0,3 g Natriumformiat, das in 1 ml Wasser gelöst war, behandelt. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur 30 Stunden gerührt, dann wurde Wasser zugegeben und mit Methylenchlorid extrahiert. Zu der wässrigen Phase wurden 5 ml einer 8 %-igen wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat zugegeben und wiederholt mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, filtriert und auf ein kleines Volumen unter Vakuum eingedainpft. Die resultierende rote Lösung wurde auf pH 3,5 mit methanolischem Chlorwasserstoff eingestellt, dann wurde ein Überschuss von Diethylether zugegeben, was
0,16 g, Ausbeute: 77 %, der Titelverbindung als Hydrochlorid ergab.
Schmelzpunkt: 158 bis 159ºC unter Zersetzung.
DC auf Kieselgelplatten (Merck F&sub2;&sub5;&sub4;) unter Verwendung des Lösungsmittelsystems: Methylenchlorid-Methanol- Essigsäure-Wasser (80:20:7:3 Volumenteile) Rf = 0,52.

BEISPIEL 7

Herstellung von 3'-Deamino-4'-deoxy-4'-aminodoxorubicin (Id):
Die chemische Umwandlung von 3'-Deamino-4'-deoxy-4'-aminodaunorubicin (Ib) zur Titelverbindung wurde, wie in Beispiel 6 beschrieben, erreicht (Schmelzpunkt 148 bis 149ºC unter Zersetzung).
DC auf Kieselgelplatten (Merck F&sub2;&sub5;&sub4;) unter Verwendung des Lösungsmittelsystems: Methylenchlorid-Methanol- Essigsäure-Wasser (80:20:7:3 Volumenteile) Rf = 0,48.

BEISPIEL 8

Herstellung von 4-Demethoxy-3'-deamino-4'-deoxy-4'-epi- aminodaunorubicin (Ie):
Die Kupplung von 4-Demethoxydaunomycinon mit 2,3,4,6-Tetradeoxy-3-trifluoracetamido-L-erythro-hexopyranosylchlorid (IIIf) wurde unter Befolgung des in Beispiel 4 beschriebenen Verfahrens durchgeführt.
Das ¹H-NMR-Spektrum des geschützten Trifluoracetamidoderivates wird dargestellt:
¹H-NMR, 200 MHz, CDCl&sub3;, unter anderem delta:
1,20 (d, J=6,0 Hz, 3H, &sub3;-5'); 1,5-2,0 (m, 4H, &sub2;-2', &sub2;-3'); 2,10 (dd, J=4,5, 15,0 Hz, 1H, -8ax); 2,42 (s, 3H, &sub3;); 2,66 (ddd, J=2,0, 2,0, 15,0 Hz, 1H, -8eq); 3,0 (d, J=19,0 Hz, 1H, -10eq); 4,07 (m, 2H, -4', -5'); 4,09 (s, 1H, -9); 5,20 (dd, J=4,5, 2,0 Hz, 1H, -7); 5,25 (d, J=3,5 Hz, 1H, -1'); 7,26 (bd, J=8,0 Hz, 1H, CO); 7,85 (m, 2H, -2, -3); 8,36 (m, 2H, -1, -4).

BEISPIEL 9

Herstellung von 3'-Deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodaunorubicin (If):
Kopplung von Daunomycinon mit 2,3,4,6-Tetradeoxy-3- trifluoracetamido-L-erythro-hexopyranosylchlorid (IIIf), unter Befolgung des in Beispiel 4 beschriebenen Verfahrens, ergab die Titelverbindung als ihr Hydrochlorid; Schmelzpunkt 183 bis 184ºC unter Zersetzung.
DC auf Kieselgelplatten (Merck F&sub2;&sub5;&sub4;) unter Verwendung des Lösungsmittelsystems Methylenchlorid-Methanol- Essigsäure-Wasser (80:20:7:3 Volumenteile) Rf = 0,67.

BEISPIEL 10

Herstellung vcon 4-Demethoxy-3'-deamino-4'-deoxy-4'- epi-aminodoxorubicin (Ig):
Die chemische Umwandlung der Verbindung (Ie), hergestellt wie in Beispiel 8 beschrieben, wurde durch 14-Bromierung, gefolgt von Hydrolyse, gemäss dem in Beispiel 6 beschriebenen Verfahren erreicht.
DC auf Kieselgelplatten (Merck F&sub2;&sub5;&sub4;) unter Verwendung des Lösungsmittelsystems Methylenchlorid-Methanol- Essigsäure-Wasser (80:20:7:3 Volumenteile): Rf = 0,53.

BEISPIEL 11

Herstellung von 3'-Deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodoxorubicin (Ih):
Die Titelverbindung wurde aus Verbindung (If) unter Befolgung des in Beispiel 6 beschriebenen Verfahrens erhalten.
DC auf Kieselgelplatten (Merck F&sub2;&sub5;&sub4;) unter Verwendung des Lösungsmittelsystems Methylenchlorid-Methanol- Essigsäure-Wasser (80:20:7:3 Volumenteile) Rf = 0,50.

BIOLOGISCHE AKTIVITÄT DER VERBINDUNGEN (Ia), (Ib), (Id), (Ie), (Ig):

Die antileukämische Aktivität von (Ia) und (Ie) im Vergleich zu DXR (Doxorubicin) und DNR (Daunorubicin) wurde gegen Murin P388 und Gross-Leukämie getestet. Die Ergebnisse sind in den Tabellen 2 und 3 gezeigt. Gegen P388-Leukämie zeigten beide Derivate eine vergleichbare Antitumoraktivität wie DXR und DNR. Gegenüber Gross-Leukämie wurde gefunden, dass alle getesteten Verbindungen aktiv waren, ebenso wie DXR und DNR, bei einem Anstieg der Überlebenszeit der Mäuse; (Ie) und (Ig) waren die wirksamsten Verbindungen.
Verbindungen (Ia) und (Ie) wurden ebenfalls gegenüber verschiedenen menschlichen und festen Tumoren bewertet. Die Ergebnisse werden in den Tabellen 4 bis 8 zusammengefasst. Verbindung (Ie) war potenter und wirksamer als (Ia) gegen alle getesteten festen Tumoren. Gegenüber dem DXR-resistenten Tumor (LoVo/DXR, MTV/DXR und A549) zeigte die Verbindung (Ie) einen ähnlichen Antitumoreffekt wie den von DXR.
Gegenüber LoVo-Tumor zeigte die Verbindung (Ie) dieselbe Wirksamkeit wie gegen LoVo-DXR, wohingegen Verbindung (Ia) vollständig inaktiv war. Beim Lewis-Lungenkarzinommodell, das DXR-empfindlich ist, war Verbindung (Ie) wie DXR aktiv bezüglich der Tumorwachstumsinhibierung und weniger wirksam bezüglich der Überlebenszeit der Mäuse. Verbindung (Ia) war bezüglich beider Parameter inaktiv.
Die Verbindungen wurden getestet, indem man sie als Hydrochloride in Wasser auflöste.
Die in vitro-Cytotoxizität der Verbindungen wird in Tabelle 1 dargestellt. TABELLE 1 Cytotoxische Aktivität der Verbindungen Verbindungen TABELLE 2 Wirkung gegen P388-ascitische Leukämiea Verbindung optimale Dosisb mg/kg Gifttodd a Experimente wurden in CDF&sub1;-Mäusen ausgeführt, i.v. mit 10&sup6; Leukämiezellen beimpft; b einzelne i.v. Dosis 1 Tag nach der Tumorinokulation; c mittlere Überlebenszeit der behandelten Mäuse/mittlere Überlebenszeit der Kontrolle x 100; d bewertet auf der Basis von Autopsiebefunden. TABELLE 3 Wirkung gegen Gross-Leukämie bei der Mausa Verbindung optimale Dosis mg/kg Gifttodd a Experimente wurden in C3H/He-Mäusen ausgeführt, geimpft i.v. mit 2 x 10&sup6; Leukämiezellen; b einzelne i.v.-Dosis 1 Tag nach der Tumorinokulation; c mittlere Überlebenszeit der behandelten Mäuse/mittlere Überlebenszeit der Kontrolle x 100; d ausgewertet auf der Basis von Autopsiebefunden TABELLE 4 Wirkung gegen menschliches Colon Ca. (LoVo/DXR)a Verbindung optimale Dosisb mg/kg Tumorinhibierung c % a Experiment wurde in Schweizerischen-nackten Mäusen, transplantiert s.c. mit Tumorfragmenten, durchgeführt; b Behandlung i.v. wurde einmal pro Woche 3 Wochen lang ausgeführt, beginnend vom Zeitpunkt, als der Tumor tastbar war; c Prozentsatz der Tumorwachstumsinhibierung bezüglich der Kontrolle wurde 1 Woche nach der letzten Behandlung berechnet. TABELLE 5 Wirkung gegen Mäuse-Mamma-Ca. (MTV/DXR)a Verbindung optimale Dosisb mg/kg Tumorinhibierung % a Experiment wurde in C3H/He-Mäusen, transplantiert s.c. mit Tumorfragmenten, ausgeführt; b i.v.-Behandlung wurde einmal die Wochen 3 Wochen lang ausgeführt, beginnend vom Zeitpunkt, als der Tumor tastbar war; c Prozentsatz Tumorwachstumsinhibierung bezüglich der Kontrolle wurde 1 Woche nach der letzten Behandlung berechnet. TABELLE 6 Wirkung gegen menschliches Colonadenocarcinom (LoVo)a Verbindung optimale Dosisb mg/kg Tumorinhibierung c % a Experiment wurde in schweizerischen-nackten Mäusen, transplantiert s.c. mit Tumorfragmenten, ausgeführt; b i.v.-Behandlung wurde einmal die Woche 3 Wochen lang ausgeführt, beginnend vom Zeitpunkt, als der Tumor tastbar war; c Prozentsatz Tumorwachstumsinhibierung bezüglich der Kontrolle wurde 1 Woche nach der letzten Behandlung berechnet. TABELLE 7 Wirkung gegen menschliches Lungenadenocarcinom (A549)a Verbindung optimale Dosisb mg/kg Tumorinhibierungc % a Experiment wurde in schweizerischen-nackten Mäusen, transplantiert s.c. mit Tumorfragmenten, ausgeführt; b i.v.-Behandlung wurde einmal die Woche 3 Wochen lang ausgeführt, beginnend vom Zeitpunkt, als der Tumor tastbar war; c Prozentsatz Tumorwachstumsinhibierung bezüglich der Kontrolle wurde 1 Woche nach der letzten Behandlung berechnet. TABELLE 8 Wirkung gegen Lewis-Lungen-Ca.a Verbindung optimale Dosisb mg/kg Tumorinhibierungc % a Experiment wurde in C57 B1/6-Mäusen ausgeführt, i.v. mit 10&sup5; Tumorzellen beimpft; b i.v.-Behandlung wurde einmal die Woche 3 Wochen lang ausgeführt, beginnend 1 Tag nach der Tumortransplantation; c Prozentsatz der Tumorwachstumsinhibierung bezüglich der Kontrolle wurde 1 Woche nach der letzten Behandlung gemessen; d mittlere Überlebenszeit der behandelten Mäuse/mittlere Uberlebenszeit der Kontrolle x 100.

Claims

1. Anthracyclinglycosid der allgemeinen Formel (I)

worin NH&sub2; bedeutet, dass der NH&sub2;-Substituent in einer axialen oder äquatorialen Konfiguration vorliegt, R&sub1; Wasserstoff oder eine Hydroxygruppe ist, und R&sub2; Wasserstoff oder eine Methoxygruppe ist; und dessen pharmazeutisch zulässige Säureadditionssalze.

2. Verbindung gemäss Anspruch 1, welche 4-Demethoxy-3'- deamino-4'-deoxy-4'-aminodaunorubicin oder dessen Hydrochlorid ist.

3. Verbindung gemäss Anspruch 1, welche 3'-Deamino-4'- deoxy-4'-aminodaunorubicin oder dessen Hydrochlorid ist.

4. Verbindung gemäss Anspruch 1, welche 4-Demethoxy-3'- deamino-4'-deoxy-4'-aminodoxorubicin oder dessen Hydrochlorid ist.

5. Verbindung gemäss Anspruch 1, welche 3'-Deamino-4'- deoxy-4'-aminodoxorubicin oder dessen Hydrochlorid ist.

6. Verbindung gemäss Anspruch 1, welche 4-Demethoxy-3'- deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodaunorubicin oder dessen Hydrochlorid ist.

7. Verbindung gemäss Anspruch 1, welche 3'-Deamino-4'- deoxy-4'-epi-aminodaunorubicin oder dessen Hydrochlorid ist.

8. Verbindung gemäss Anspruch 1, welche 4-Demethoxy-3'- deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodoxorubicin oder dessen Hydrochlorid ist.

9. Verbindung gemäss Anspruch 1, welche 3'-Deamino-4'- deoxy-4'-epi-aminodoxorubicin oder dessen Hydrochlorid ist.

10. Verfahren zur Herstellung eines Anthracyclinglycosids der allgemeinen Formel (I), wie in Anspruch 1 definiert, oder eines pharmazeutisch zulässigen Säureadditionssalzes davon, welches umfasst:

(i) Kondensation von Daunomycinon oder 4-Demethoxy-daunomycinon der Formel (II):

worin R&sub2; Wasserstoff oder Methoxy ist, mit einer Verbindung der Formel (III):

worin eine Gruppe von X und Y Wasserstoff darstellt und die andere eine Trifluoracetylaminogruppe darstellt, was das N-Trifluoracetyl-geschützte Glycosid der Formel (IV) ergibt:

worin R&sub2;, X und Y wie oben definiert sind, und Entfernung der N-Trifluoracetylgruppe davon, wodurch ein Anthracyclinglycosid der Formel (I) gebildet wird, worin R&sub1; Wasserstoff und R&sub2; wie oben definiert ist;

(ii) falls gewünscht, Umwandeln dieses Glycosids der Formel (I) in eines seiner pharmazeutisch zulässigen Salze;

(iii) falls gewünscht, Bromierung dieses Glycosids der Formel (I) oder eines seiner pharmazeutisch zulässigen Salze, und Hydrolyse des so erhaltenen 14-Bromderivates, wodurch das entsprechende Glycosid der Formel (I) gebildet wird, worin R&sub1; Hydroxy ist; und

(iv) falls gewünscht, Umwandeln dieses Glycosids der Formel (I), worin R&sub1; Hydroxy ist, in eines seiner pharmazeutisch zulässigen Salze.

11. Verfahren gemäss Anspruch 10, worin Schritt (i) in Anwesenheit von Silbertrifluormethansulfonat bewirkt wird.

12. Verfahren gemäss Anspruch 11, worin das Daunomycinon oder 4-Demethoxydaunomycinon in trockenem Methylenchlorid gelöst wird und die Kondensation in Anwesenheit von einem Molekularsieb als Dehydratisierungsmittel bewirkt wird.

13. Verfahren gemäss einem der Ansprüche 10 bis 12, worin die N-Trifluoracetylgruppe durch milde alkalische Hydrolyse entfernt wird.

14. Verfahren gemäss einem der Ansprüche 10 bis 13, worin das Glycosid der Formel (I), worin R&sub1; Wasserstoff ist, in Schritt (ii) als sein Hydrochlorid isoliert wird.

15. Verfahren gemäss einem der Ansprüche 10 bis 14, worin die Hydrolyse in Schritt (iii) mit Natriumformiat bewirkt wird.

16. Verfahren gemäss einem der Ansprüche 10 bis 15, worin das Glycosid der Formel (I), worin R&sub1; Hydroxy ist, in Schritt (iv) als sein Hydrochlorid isoliert wird.

17. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend ein Anthracyclinglycosid der Formel (I), wie definiert in Anspruch 1, oder eines seiner pharmazeutisch zulässigen Salze in Mischung mit einem pharmazeutisch zulässigen Verdünnungsmittel oder Träger.

18. Anthracyclinglycosid der Formel (I), wie in Anspruch 1 definiert, oder eines seiner pharmazeutisch zulässigen Salze, zur Verwendung als Antitumormittel.