DE3390212T1

DE3390212T1 - Hydroxyvitamin D↓2↓-Verbindungen und Verfahren zu deren Herstellung

Info

Publication number: DE3390212T1
Application number: DE19833390212
Authority: DE
Inventors: Hector F. LeLuca; Jacek W. Gif Sur Yvette Morzycki; Heinrich K. Madison Wis. Schnoes
Original assignee: Wisconsin Alumni Research Foundation
Current assignee: Wisconsin Alumni Research Foundation
Priority date: 1982-09-20
Filing date: 1983-09-12
Publication date: 1984-11-29
Also published as: JPH0518840B2; CA1283422C; FR2555172B1; FR2555172A1; JPH02209888A; IL69763A0; IE832203L; FR2555173A1; GB2127023B; GB8325131D0; JPH02209864A; US4448721A; JPH0610187B2; JPS59501746A; FR2540869A1; JPH0518839B2; JPH02209862A; WO1984001155A1; DE3390212C2; JPH0443916B2

Description

Hydroxyvitamin D₂~Verbindungen und

Verfahren zu deren Herstellung

Die Erfindung betrifft biologisch aktive Vitamin D-Verbindungen.

Insbesondere betrifft die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung von hydroxylierten Derivaten von Vitamin D und neue Zwischenverbindungen, die in diesem Verfahren verwendet werden.

Die Erfindung betrifft die Synthese von 25-Hydroxyvitamin D₂ und des 24-Epimers davon, bestimmte Alkyl- und Aryl-Analogverbindungen und 5,6-trans-Derivate und die Acylderivate dieser Verbindungen.

Die D-Vitamine sind sehr wichtige Mittel zur Kontrolle des Calcium- und Phosphat-Metabolismus bei Tieren und Menschen und werden seit langer Zeit als Diät-Ergänzungsmittel und in der klinischen Praxis verwendet, um ein richtiges Knochenwachstum und eine richtige Knochenentwicklung zu gewährleisten. Es ist nun bekannt, daß die Aktivität in vivo dieser Vitamine, insbesondere von Vitamin D„ und D- vom Metabolismus zu hydroxylierten Formen abhängt. So unterliegt Vitamin D₃ zwei aufeinanderfolgenden Hydroxylierungsreaktionen in vivo, die zuerst zum 25-Hydroxyvitamin D^ und sodann zum 1 ,25-Dihydroxyvitamin D., führen, wobei von

\ der letzteren Verbindung angenommen wird, daß sie für die bekannten vorteilhaften Wirkungen von Vitamin D₃ verantwortlich ist. In ähnlicher Weise unterliegt Vitamin D„, welches allgemein als ein Diät-Ergänzungsmittel verwendet wird, einer analogen Hydroxylierungsfolge zu seinen aktiven Formen, wobei es zuerst zum 25-Hydroxyvitamin D₀ (25-OH-D₀) und anschließend zum 1,25-Dihydroxyvitamin D₀ (1,25-(OH)-D-) umgewandelt wird. Diese Tatsachen sind gefestigt und dem Fachmann bekannt (vgl. beispielsweise Suda et al., Biochemistry 8^, 3515 (1969) und Jones et al., Biochemistry 14, 1250 (1975)).

Wie die Metaboliten der Vitamin D-.-Serie sind die hydroxylierten Formen von Vitamin D₂, die zuvor genannt wurden, aufgrund ihrer Wirkungsfähigkeit und anderer vorteilhafter Eigenschaften hocherwünschte Diät-Zusatzmittel oder pharmazeutische Mittel zur Heilung oder Verhinderung von Knochenerkrankungen oder verwandten Erkrankungen, und ihr Wert und ihre mögliche Verwendung wird in den Patenten, welche diese Verbindungen betreffen, beachtet (US-PS 3 585 221 und US-PS 3 880 894).

Während alle Metaboliten von Vitamin D₃ durch chemische Synthese hergestellt worden sind, wurde nur wenig Arbeit auf die Herstellung von Vitamin D₂-Metaboliten verwendet. Die bekannten Syntheseverfahren für die Metaboliten der D .,-Serie (insbesondere insoweit, als sie die Herstellung von Verbindungen betreffen, die in der Seitenkette hydroxyliert sind) sind selbstverständlich allgemein für die Herstellung der entsprechenden Vitamin D₂-Metaboliten nicht geeignet, da letztere durch eine Seitenkettenstruktur (d.h. Gegenwart einer Doppelbindung und einer zusätzlichen Methylgruppe) charakterisiert sind, welche ein unterschiedliches synthetisches Herangehen verlangt als dasjenige, welches bei den in der Seitenkette hydroxylierten Do-Verbindungen anwendbar ist.

Zwei Verbindungen, die strukturell dem 25-OH-D„ verwandt sind, wurden hergestellt, nämlich 2 2-Dehydro-25-hydroxycholecalciferol, welches als eine 24-Desmethyl-Analogverbindung von 25-OH-D₂ betrachtet werden kann (vgl. US-PS 3 786 062),und 24,25-Dihydroxyvitamin D„, die 24-Hydroxy-Analogverbindung von 25-OH-D₂ (Jones et al., Biochemistry 18, 1094 (1979)). Jedoch sind die in diesen Berichten vorgeschlagenen synthetischen Verfahren auf die Herstellung von 25-OH-D₂ selbst nicht anwendbar. In der Literatur ist keine Synthese der letzteren Verbindung erschienen und trotz der Erwähnung in der Veröffentlichung von Salmond et al. (Tetrahedron Letters, 1695-1698 (1977), vgl. Seite 1697 und Fußnote 11) über die erfolgreiche Herstellung von 25-OH-D-/ wurde keine Information über das Gesamtverfahren bis heute veröffentlicht.

Eine neue und bequeme Synthese von in 25-Stellung hydroxylierten Vitamin D~-Verbindungen ist nun entwickelt worden und wird hierin in vollem Umfang beschrieben. Diese Synthese liefert 25-Hydroxyvitamin D₂ (25-OH-D₂) und dessen 24-Epimer, 25-Hydroxy-24-epi-vitamin D„ (25-OH-24-epi D„), welche durch die nachfolgend angegebenen Strukturen charakterisiert sind (worin
len und Y eine Methylgruppe bedeutet),

und X„ Wasserstoffatome darstel

25-OH-D.

25-OH-24-epi

wie auch die entsprechenden Alkyl- oder Aryl-Analogverbindungen, welche durch die obigen Strukturen charakterisiert sind, worin Y einen Alkyl- oder Arylrest darstellt, und die hydroxylgeschützten Derivate dieser Verbindungen,

die durch die obigen Strukturen angegeben sind, worin entweder X₁ oder X~ oder X₁ und X„ Acylreste sind.

Zusätzlich schafft das erfindungsgemäße Verfahren die 5,6-trans-Isomeren der obigen Verbindungen und neue Zwischenverbindungen, die zur Herstellung der 25-OH-D~-Analogverbindungen und/oder der durch Isotope markierten Produkte geeignet sind.

Der Begriff "Acyl", wie er in der Beschreibung oder in den Ansprüchen verwendet wird, bezeichnet einen aliphatischen Acylrest mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen in allen möglichen isomeren Formen (z.B. Formyl, Acetyl, Propionyl, Butyryl, Isobutyryl, Valeryl, etc.) oder einen aromatischen Acylrest (Aroylrest), wie Benzoyl, die isomeren Methylbenzoyle, die isomeren Nitro- oder Halogen-benzoyle, etc., oder einen Dicarbonsäure-acylrest mit 2 bis 6 Atomen Kettenlänge, d.h. Acylreste der Art ROOC(CH₂)_nCO- oder ROOOCH₂-O-CH₂CO-, worin η Werte zwischen 0 und 4 aufweist und R Wasserstoff oder einen Alkylrest bedeutet, wie Oxalyl, Malonyl, Succinoyl, Glutaryl, Adipyl und Diglykolyl. Der Begriff "Alkyl" betrifft einen Niederalkylrest mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen in allen möglichen isomeren Formen, z.B. Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, sek.-Butyl, Pentyl, etc., und das Wort "Aryl" bezieht sich auf Phenyl oder einen substituierten Phenylrest, z.B. Alkylphenyl, Methoxyphenyl, etc.

Das Gesamtverfahren, welches für die Herstellung der obigen Verbindungen entwickelt wurde, kann in zwei allgemeine Phase unterteilt werden, nämlich (a) Zugabe eines Seitenkettenfragments zu einem geeigneten Steroid-Vorläufer, um ein 5,7-Diensteroid als die Zentral-Zwischenverbindung herzustellen und (b) Überführung dieses 5,7-Diens in die Vitamin D-Struktur unter, sofern dies erforderlich ist, weiterer Modifikation der Seitenkette, um die gewünschten 25-hydroxylierten Verbindungen herzustellen. Dieses all-

gemeine Schema erlaubt einige Flexibilität in der Auswahl spezieller Ausgangsmaterialien und in der genauen Reihenfolge einzelner Verfahrensstufen, zwei Merkmale, die von bemerkenswertem praktischen Vorteil und Bequemlichkeit sind.

Die Reaktionsfolge, die durch Verfahrensschema I dargestellt ist, zeigt eine Ausführungsform des Gesamtverfahrens, während Verfahrensschema II einige der Wahlmöglichkeiten zeigt, die zur Durchführung der letzten vier Stufen der Synthese offenstehen.

Ausgangsmaterialien für das erfindungsgemäße Verfahren sind steroide 22-Aldehyde, in denen die Doppelbindung(en) am Ring B in geeigneter Weise geschützt sind (ist). Wie im Verfahrensschema I gezeigt wird, sind geeignete Verbindungen beispielsweise PTAD-Dien-geschützter 22-Aldehyd (1) (worin PTAD die dargestellte Phenyltriazolin-3,5-dion-Schutzgruppe bedeutet) oder 3,5-Cyclo-22-aldehyd (4), worin die Δ -Doppelbindung über die i-Ether-Bildung geschützt ist. Diese beiden Verbindungen sind bekannte Produkte (vgl. beispielsweise Barton et al., J. Chem. Soc. (C) 1968 (1971); und Heyl et al., US-PS 2 623 052) und beide können durch die Schritte des erfindungsgemäßen Verfahrens in einer im wesentlichen analogen Art hergestellt werden.

Der erste Schritt dieses Verfahrens umfaßt die Addition eines geeigneten Seitenkettenfragments. 30

Verfahrensschema I

CNO

So liefert die Kondensation von Aldehyd (1) mit einem Sulfonyl-Seitenkettenfragment, wie es im Schema (Sulfon A, weiter unten beschrieben) in Form von dessen Anion vorhanden ist, in einem Ether oder einem Kohleriwasserstoff-Lösungsmittel die Hydroxysulfon-Zwischenverbindung (2).

Das Anion des Sulfon A-Seitenkettenfragments wird durch Behandlung des Sulfone mit einer starken Base, wie Lithiumdiethylamid, N-Butyllithium oder Ethylmagnesiumbromid (oder einem ähnlichen Grignard-Reagens) in einem Ether oder Kohlenwasserstoff-Lösungsmittel hergestellt, und zu dieser Lösung des Sulfonanions wird der Steroidaldehyd (Verbindung 1) als eine Ether- oder Kohlenwasserstoff-Lösung sodann zugesetzt. Die Reaktion kann vorteilhafterweise bei etwa Raumtemperatur durchgeführt werden und wird am besten unter einer inerten Atmosphäre bewirkt.

Die analoge Addition von Sulfon A zum Aldehyd (4) schafft die Hydroxysulfon-Zwischenverbindung, die durch Struktur (5) in Verfahrensschema I charakterisiert ist.

Der nächste Schritt umfaßt die Abtrennung der Hydroxy- und Phenylsulfonylreste in der Seitenkette unter Bildung der 22(23)-trans-Doppelbindung. So gibt die Behandlung von Verbindung (2) in Methanollösung, die mit NaHPO. gesättigt ist, mit Natriumamalgam unter einer inerten Atmosphäre die Verbindung (3), welche die gewünschte trans-22-Doppelbindung in der Seitenkette aufweist. Die analoge Behandlung der Verbindung (5) ergibt die 22-Olefinverbindung (6). Wenn es gewünscht wird, kann die 2 2-Hydroxylgruppe in den Verbindungen (2) oder (5) auch acyliert oder sulfonyliert werden (z.B. mesyliert) vor der Na/Hg-Reduktionsstufe, jedoch wird dieses nicht allgemein erfordert.

Es muß bemerkt werden, daß, wie in Verfahrensschema I dargestellt ist, die Addition des Seitenkettenfragments, Sulfon A, zu den Aldehyden (1) oder (4) nicht die Epimerisierung an dem asymetrischen Zentrum von Kohlenstoff-20 be-

wirkt, d.h. die Stereochemie an diesem Zentrum wird beibehalten, wie es erfordert ist. Gewünschtenfalls kann die Beibehaltung der Stereochemie am Kohlenstoff-20 in dieser Stufe der Synthese überprüft werden, indem die Zwischenverbindungen des Typs (3) oder (6) zu den ursprünglichen Aldehyd-Ausgangsmaterialien rücküberführt werden. Beispielsweise führt die Unterwerfung der Verbindung.(6) gegenüber einer Ozonolyse unter reduktiver Aufbereitung bei Verwendung von völlig herkömmlichen und Standard-Bedingungen zu dem entsprechenden C-22-Aldehyd, d.h. zum Aldehyd der Struktur (4). Spektroskopischer und chromatographischer Vergleich des durch Ozonolyse erhaltenen Aldehyds mit dem ursprünglichen Ausgangsmaterial bestätigt die Beibehaltu-g der C-20-Stereochemie.

Der dritte Vorgang des Verfahrens umfaßt die Umwandlung dieser Steroide mit geschütztem Ring B zu den gewünschten 5,7-Dien-Zwischenverbindungen (7). Im Falle der PTAD-Diengeschützten Verbindungen (3) wird diese Umwandlung in einem einzigen Schritt vollzogen, nämlich durch Behandlung von

(3) mit einem starken Hydrid-Reduktionsmittel (z.B. LiAlH₄) in einem Ether-Lösungsmittel bei Rückflußtemperatur, wodurch das Dien (7) erhalten wird. Dieses gleiche Material, Verbindung (7), wird aus dem i-Etherderivat (6) in einigen Stufen erzeugt, wovon alle herkömmlich und dem Fachmann bekannt sind. Der i-Ether (6) wird zuerst in Eisessig bei Rückflußtemperatur für etwa 2 Stunden solvolysiert, um das entsprechende 5-En-3-acetatderivat (6a) zu ergeben. Diese Verbindung wird in einer Kohlenwasserstoff-Lösung (z.B.

Hexan) bei Rückflußtemperatur vorzugsweise in einer Inertatmosphäre dann mit einem Bromierungsmittel (z.B. 1,3-Dibrom-5,5-dimethylhydantoin) über einen Zeitraum von etwa 20 Minuten behandelt und die erhaltene C-7-Brom-Zwischenverbindung wird direkt durch Auflösung in Xylol und Behandlung mit einer Base (z.B. S-Collidin) bei Rückflußtemperaturen unter einer Inertatmosphäre für etwa 90 Minuten dehydrobromiert. Das erhaltene Produkt, das 5,7-Dien-3-acetat

IV'

wird sodann auf dem üblichen Wege isoliert und durch Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie oder Dünnschichtchromatographie auf Silikagelplatten gereinigt. Einfache Hydrolyse des Acetats (5 % KQH in MeOH) liefert dann das 5,7-Dien (7). Dieser Hydrolyseschritt kann jedoch auch ausgelassen werden, da das 5,7-Dien-3-ol (7) oder die entsprechenden 3-0-Acylate für die anschließenden Verfahrensschritte verwendet werden können. Alle diese 3-0-Acylate sind selbstverständlich auch leicht durch Acylierung von (7) nach herkömmlichen Verfahren zugänglich.

Die überführung des 5,7-Diens (7) zu den abschließenden Vitamin D-Produkten umfaßt eine Reihenfolge von vier Schritten, wobei die genaue Abfolge nach Bequemlichkeit geändert werden kann. Die im Verfahrensschema I dargestellte Reihenfolge umfaßt zuerst die Bestrahlung einer Ether- oder Kohlenwasserstoff-Lösung des 5,7-Diens (7) mit ultravioletter Strahlung, um die Provitamin-Analogverbindung (8) zu ergeben, die durch Erwärmen (50-90⁰C) in einem geeigneten Lösungsmittel (z.B. Ethanol, Hexan) einer Isomerisierung zu der Analogverbindung von Vitamin D₂ (9) unterliegt. Der nächste Schritt, die Abspaltung der Ketal-Schutzgruppe ist ein kritischer Schritt, da die Ketal-Entfernung durch Hydrolyse zum entsprechenden Keto-Derivat

(10) ohne Isomerisierung der 22(23)-Doppelbindung zur konjugierten 23(24)-Stellung verlaufen muß. Die Isomerisierung eines ß,cf-ungesättigten Ketons zu dem konjugierten dl,ß-ungesättigten Keton kann unter Bedingungen der Ketalhydrolyse leicht auftreten, muß jedoch in diesem Falle vermieden werden, da sie dem Zweck der gesamten synthetischen Abfolge entgegenstehen würde. Im vorliegenden Verfahren wird die Ketalabtrennung durch Erhitzen des Ketals (9) in einem hydroxylgruppenhaltigen Lösungsmittel für 1 bis 2 Stunden unter Säurekatalyse bewirkt. (Es ist wünsehenswert, den Fortschritt der Reaktion durch periodische chromatographische Analyse des rohen Reaktionsgemisches zu beobachten. Die Analyse durch HPLC ist geeignet und be-

quern.) Das dadurch als Produkt erhaltene Keton (10) wird sodann in dem letzten Schritt durch ein Grignard-Reagens (ein Alkyl- oder Aryl-Magnesiumhalogenid, z.B. Methylmagnesiumbromid in diesem Falle) alkyliert, um die 25-Hydroxyvitamin D₂~Verbindung (11) zu ergeben. Die Alkylierung über ein Alkyllithium-Reagens, z.B. Methyllithium, ist ebenfalls wirksam und bequem. Wenn das Seitenkettenfragment, SuIfon A, wie es in der ersten Stufe verwendet wird, racemisch ist, d.h. in einem Gemisch von seinen (R)- und (S)-Enantiomeren vorliegt, wird die Verbindung (11) als ein Gemisch von zwei C-24-Epimeren erhalten, d.h. (24S)-Epimer (11a), welches dem natürlichen Produkt entspricht, und dem (24R)-Epimer (11b), welches das 25-OH-24-epi-D₂ ist. Diese C-24-Epimeren werden zweckmäßigerweise durch Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (HPLC) an einer wirksamen Säule mit mikrozerkleinertem Silikagel getrennt, um 25-OH-D₂ (11a) und 25-OH-24-epi-D₂ (11b) in reiner Form zu erhalten.

Es muß erwähnt werden, daß bei Verwendung von racemischem Sulfon A als Seitenketten-Ausgangsmaterial die frühen synthetischen Zwischenverbindungen, z.B. (3) /oder (6) und (6a)7/ wie auch das 5,7-Dien (7) und die nachfolgenden Zwischenverbindungen (8), (9) und (10) ebenfalls als die zwei C-24-Epimeren auftreten. Wenn es gewünscht und zweckmäßig ist, kann die Trennung der Epimeren an einer beliebigen dieser Zwischenverbindungs-Stufen durchgeführt werden und die (24R)- und (24S)-Epimeren können dann getrennt in den verbleibenden Stufen verarbeitet werden, um 25-OH-D„ (11a) oder 25-OH-24-epi-D₂ (11b) zu ergeben, wie es gewünscht wird. Es ist allgemein zweckmäßig, die Trennung in der Stufe der Endprodukte durchzuführen.

Da die Gemische von (24R)- und (24S)-Epimeren auftreten, wenn das Seitenkettenfragment, Sulfon A, wie es in dem obigen Verfahren verwendet wird, selbst eine racemische Verbindung ist, d.h. als ein enantiomeres Gemisch von (R)-

und (S)-Formen vorliegt, ist es auch möglich, falls es gewünscht wird, die Notwendigkeit der Epimertrennung durch Verwendung eines optisch aktiven SuIfons A zu umgehen. So führt die Verwendung des (R)-Epimers von Sulfon A in dem vorliegenden Verfahren spezifisch zu 25-OH-D₂ (11a), während die Verwendung des entsprechenden (S)-Epimers von Sulfon A das 25-OH-24-epi-D₂ (11b) liefert, wie auch natürlich die entsprechenden Zwischenverbindungen in den reinen (24R)- oder (24S)-Formen; die Verwendung eines derart optisch reinen SuIfon-Ausgangsmaterials erfordert keine andere Modifizierung der beschriebenen Verfahrensschritte.

Es ist auch wichtig anzumerken, daß die genaue Abfolge der Schritte zwischen dem 5,7-Dien (7) und den Endprodukten geändert werden kann. Tatsächlich gibt es drei zweckmäßige Synthesefolgen, die alle dieselben Schritte, jedoch in unterschiedlicher Abfolge, umfassen. Diese alternativen Folgen sind im Verfahrensschema II angegeben, worin X- und X₂ in den Strukturdarstellungen Wasserstoff oder eine Acylgruppe angeben, wie beispielsweise Acetyl, Propionyl, Butyryl, Benzoyl oder substituiertes Benzoyl.

Die erste Folge (durch den Buchstaben A im Verfahrenss.chema II angegeben), welche vom Dien (7A) (welches, sofern X., = H ist, dem Dien (7) des Verfahrensschemas I entspricht) zu den Zwischenverbindungen (8A), (9A) und dem Endprodukt (11) führt, gibt die Reaktionsfolge an, die zuvor erörtert wurde.

Alternativ dazu kann das Ketal im Dien (7A) zuerst hydrolysiert werden (vgl. Folge B im Verfahrensschema II), um das Dien-Keton zu ergeben, welches in dem Schema als (7B) angegeben wird, das nach der Bestrahlung das Provitamin-Keton (8B) ergibt, und die thermische Isomerisierung führt sodann zum Vitamin D₂~Keton (10), welches über eine abschließende Grignard-Reaktion das 25-OH-D»-Epimere (11) ergibt.

^n

In der dritten Reihenfolge (C) wird das 5,7-Dien-keton (7B) zuerst mit einem Grignard-Reagens umgesetzt, um die 25-Hydroxyl-Zwischenverbindung (7C) zu ergeben, die nach der Bestrahlung das entsprechende 25-OH-Provitamin D₂ (8C) ergibt, und eine abschließende thermische Isomerisierung schafft die 25-OH-D₂-Produkte (11).

So unterscheiden sich diese drei Abfolgen lediglich in der genauen Ordnung, in welcher die spezifischen Schritte durchgeführt werden, aber die experimentellen Bedingungen für die einzelnen Schritte sind den zuvor beschriebenen Verfahren analog, und entsprechen der Beschreibung, die in den Beispielen in Einzelheiten angegeben ist. Unter den drei alternativen Abfolgen ist die Folge A allgemein bevorzugt aufgrund der Verwendungsfähigkeit der Zwischenverbindungen, wie (9A) und (10) zur Herstellung von anderen Vitamin D₂~Analogverbindungen und/oder markierten Derivaten (vgl. die nachfolgende Darstellung).

Für jede dieser Abfolgen kann das 5,7-Dien (7) als die freie Hydroxylverbindung oder als ihr C-3-Acylat verwendet werden. In Abhängigkeit von der anschließenden Reaktionsfolge werden die abschließenden 25-OH-D₂~Produkte als die freien Hydroxylverbindungen erhalten oder, wenn es gewünscht wird, als die C-3- oder C-25-Acylate oder 3,25-Diacylate. So liefert die Synthese nach der Abfolge A oder B normalerweise die 25-OH-D„-Produkte als die freien Hydroxylverbindungen / da die abschließende Grignard-Reaktion, die beiden Abfolgen gemeinsam ist, alle Acylgruppen entfernt. Die Reihenfolge C kann verwendet werden, um die 25-OH-D₂-Epimeren (11) als die freien Hydroxylverbindungen oder als das 3- oder 25-Monoacylat oder 3,25-Diacylat in Abhängigkeit von der eingesetzten Zwischenverbindung herzustellen. Beispielsweise kann die 5,7-Dien-Zwischenverbindung (7C), die im Verfahrensschema II gezeigt ist, als das 3-Acyl- oder das 25-Acyl- oder das 3,25-Diacylderivat verwendet werden, die aus dem 3,25-Diol durch Umsetzung

Verfahrensschema II

Verfahrensschema III

■ulfcM A

mit Acylchlorid- oder Säureanhydrid-Reagentien nach herkömmlichen Verfahren erhältlich sind. So ergibt die Reaktion der 3,25-Diol-Zwischenverbindung (7C) mit Essigsäureanhydrid in Pyridin bei Raumtemperatur das 3-Acetat, und das entsprechende 3,25-Diacetat wird durch weitere Acylierung bei erhöhter Temperatur erhalten; das letztere kann mit verdünnter KOH/MeOH bei Raumtemperatur selektiv hydrolysiert werden, um das 25-Monoacetat zu ergeben. Weitere Umwandlung aller derartiger Acyl-Zwischenverbindungen durch die verbleibenden Schritte /"zu (8C) und (11)7 im Verfahrensschema II führt zu den 25-OH-D₂-Epimeren (11) in jeglicher gewünschten acylierten Form.

Die einzelnen 25-OH-D₂-Epimeren, 25-OH-D₂ (11a) oder 25-OH-24-epi-D₂ (11b) werden, wenn sie in den freien Hydroxylformen erhalten werden, auch zweckmäßigerweise in der C-3- oder C-25-Stellung bder in beiden Stellungen acyliert durch Umsetzung mit Säurehydriden oder Acylchloriden, wobei herkömmliche Bedingungen verwendet werden. So kann 25-OH-D~ (11a) acyliert werden, um beispielsweise das 25-OH-D~-3-acetat oder das entsprechende 3,25-Diacetat zu ergeben. Das 3-Monoacetat kann in ähnlicher Weise weiter in C-25-Stellung durch Behandlung mit einem unterschiedlichen Acylierungsmittel weiter acyliert werden oder alternativ dazu kann das 3,25-Diacetat durch eine schwache Base (KOH/MeOH) selektiv hydrolysiert werden, um das 25-Monoacetat zu ergeben, welches nach Wunsch mit einer unterschiedlichen Acylgruppe in der C-3-Stellung erneut acyliert werden kann. Zusätzlich zu Essigsäureanhydrid sind geeignete Acylierungsmittel Propionsäure-, Buttersäure-, Pentansäureoder Hexansäure-Anhydride oder die entsprechenden Säurechloride oder aromatische Acylierungsmittel, wie die Säurechloride von Benzoesäure oder substituierten Benzoesäuren oder die Anhydride von Dicarbonsäuren, wie Succinsäure-, Glutarsäure-, Adipinsäure-, Diglykolsäure-Anhydride, oder die Acylchloride dieser Dicarbonsäure-monoester.

Zusätzlich zu den Acylaten sind die 5,6-trans-Isomeren von 25-OH-D₂ und 25-OH-24-epi-D₂ Verbindungen, die aufgrund ihrer bemerkenswerten, dem Vitamin D ähnlichen Wirksamkeit potentiell bei medizinischen Verabfolgungen anwendbar sind. Diese 5,6-trans-Verbindungen werden aus den 5,6-cis-Isomeren (d.h. 11a oder 11b) durch mit Jod katalysierter Isomerisierung nach den Verfahren von Verloop et al.,Rec. Trav. Ghim. Pays Bas 78, 1004 (1969) hergestellt, und die entsprechenden 3-* und/oder 25-Acylate werden in entsprechender Weise durch analoge Isomerisierung der entsprechenden 5, ö-cis*- Acy la te oder durch Acylierung der 5,6-trans-25-OH-D-Verbindüngen erhalten.

Es ist auch festzustellen, daß die 25-Keto-Zwischenverbindung (d.h. Verbindung (10) in dem Verfahrensschema I) als ein Substrat für die bequeme Herstellung von 25-OH-D₂ oder dessen 24-Epimer in durch Isotopen markierter Form dienen können, nämlich durch Umsetzung des Ketons mit im Handel erhältlichen, durch Isotopen markierten Grignard- oder Methyllithium-Reagentien, um 25-OH-D₉-Verbindurigen

"5 Λ Α Ο

zu schaffen, die am Kohlenstoff-26 mit C, C, H oder H markiert sind.

Ferner dient die Keto-Vitamin D-Verbindung (TO) auch als eine geeignete Zwischenverbindung für die Synthese von 25-OH-D₂-Analogverbindungen der nachstehend dargestellten Formel (12)

worin X₁ und X₂ unter Wasserstoff und Acyl ausgewählt sind, und worin Y einen Alkylrest, jedoch nicht die Methylgruppe, oder einen Arylrest darstellt. Diese Verbindungen werden durch Umsetzung des Ketons (10) mit dem entspre-

chenden Alkyl- oder Aryl-Grignard- oder Alkyl- oder Aryllithium-Reagens hergestellt. Beispielsweise führt die Behandlung des Ketons (10) mit Ethylmagnesiumjodid zu dem obigen Produkt (12), worin X₁=X₃=H ist und Y=Ethyl ist; eine ähnliche Behandlung des Ketons (10) mit Isopropylmagnesiumbromid oder Phenylmagnesiumbromid ergibt die entsprechenden 25-OH-D₂-Verwandten der obigen Struktur (12), worin Y=Isopropyl bzw. Phenyl ist, und andere Alkyl-Analogverbindungen der Struktur (12), z.B. worin Y für Propyl, Butyl, sek.-Butyl, Isobutyl, Pentyl steht, werden durch analoge Reaktionen hergestellt. Die Acylierung dieser Produkte durch die oben erörterten Verfahren liefert die C-3- oder C-25-O-Acylate oder 3,25-Di-O-acylate, und die Isomerisierung der 5,6-Doppelbindung nach dem Verfahren von Verloop et al., welches zuvor zitiert wurde, ergibt die 5,6-trans-Isomeren der Verbindungen der Struktur (12) und/oder deren Acylate.

Da die Verbindungen, in denen Y ein höheres Homologes von Methyl ist, im allgemeinen mehr lipophil sind, wird erwartet, daß die Alkyl- oder Aryl-Analogverbindungen, die durch die obige Struktur (12) angegeben sind oder deren 5,6-trans-Isomere eine Anwendbarkeit bei Verabfolgungen besitzen, wo ein größeres Maß an lipophilem Charakter gewünscht ist.

Das benötigte Seitenkettenfragment, SuIfon A, wird selbst nach dem Verfahren, welches im Verfahrensschema III dargestellt ist, hergestellt. Diese Synthese geht direkt auf ihr Ziel zu und umfaßt als einen ersten Schritt die Umsetzung des im Handel erhältlichen 4-Hydroxy-3-methylbutan-2-ons mit p-Toluolsulfonylchlorid, um den entsprechenden Toluolsulfonylester zu bilden. Dieses Produkt wird sodann mit Thiophenol in Gegenwart einer Base (z.B. Kalium-tert.-butylat) behandelt, wodurch die Toluolsulfonylgruppe verdrängt wird und der entsprechende Phenylthioether gebildet wird. Im nächsten Schritt wird die Ketongruppe durch

Reaktion mit Ethylenglykol unter Säurekatalyse als das Ethylenketal geschützt, wobei herkömmliche Bedingungen eingesetzt werden, die dem Fachmann bekannt sind. Die Oxidation dieses Produkts mit einer Persäure (z.B. Perbenzoesäure oder m-Chlorperbenzoesäure) in einer Halogenkohlenwasserstoff-Lösung (z.B. CH₂Cl₂) liefert dann das gewünschte Sulfon, das markierte Sulfon A, wie im Verfahrensschema III dargestellt ist.

0 Wenn das Sulfon A in der optisch aktiven Form gewünscht ist, d.h. als das reine (R) - oder (S)-Epimer, ist es sachdienlich, optisch aktive Ausgangsmaterialien zu verwenden, wie beispielsweise das Ethylenketal von (3R)-4-Hydroxy-3-methylbutan-2-on oder das Ethylenketal von (3S)-4-Hydroxy-5 3-methylbutan-2-on. Jedes dieser Ethylenketale wird sodann über die geeigneten Stufen des Verfahrensschemas III weiter verarbeitet, nämlich a) Tpsylierung, b) Phenylsulfid-Bildung und c) Persäure-Oxidation, um aus dem (R)-Ketal-Ausgangsmaterial das (S)-Enantiomer von Sulfon A und aus dem (S)-Ketal das (R)-Enantiomer von Sulfon A zu ergeben. Die (R)- und (S)-Ketal-Ausgangsmaterialien werden selbst zweckmäßigerweise aus handelsüblich zugänglichem racemischen ,^-Methylacetoacetatethylester (Ethyl-2-methyl-3-oxobutonat) gemäß folgender Beschreibung erhalten: Der Ketoester wird in den Ethylen-Ketalester durch Umsetzung mit Ethylenglykol unter Säurekatalyse nach herkömmlichen Verfahren überführt und die Esterfunktion wird sodann reduziert (LiAlH₄ in Ether), um den racemischen Ketalalkohol (2,2-Ethylendioxy-3-methylbutan-4-ol) zu ergeben. Die Auf-

go spaltung des racemischen Gemisches wird durch Überführung in ein Gemisch von Diastereomeren (durch Umsetzung der Alkoholfunktion mit einem optisch aktiven Acylierungsmittel), die sodann getrennt werden, durchgeführt. Beispielsweise kann der Alkohol in das; entsprechende at -Methoxy-o(-

Q5 trifluormethylphenylacetylderivat (oder ein ähnliches optisch aktives Acylat) durch Umsetzung in Pyridin-Lösung mit einem Chlorid der optisch aktiven ( + )o£-Methoxy-äi-trifluormethyl-phenylessigsäure überführt werden (nach den

Verfahren von beispielsweise Dale et al., J. Org. Cheiti. 34, 2543 (1961),' Eguchi et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA 78, 6579 (1981)); dieses Gemisch von diastereomeren Acylderivaten ist nun durch HPLC oder ähnliche chromatographische Verfahren in seine beiden Komponenten aufspaltbar, nämlich das Acylat des (R)-Enantiomers und das Acylat des (S)-Enantiomers. Die Abtrennung der Acylgruppe in jeder Verbindung durch Basenhydrolyse unter Standardbedingungen liefert dann das Ethylenketal von (3R)-4-Hydroxy-3-methylbutan-2-on und das Ethylenketal von (3S)-4-Hydroxy-3-methylbutan-2-on, die dann getrennt zu dem entsprechenden Sulfon A-Enantiomer gemäß der obigen Beschreibung weiter verarbeitet werden. Wenn es gewünscht wird, können optisch aktive Hydroxybutanon-Zwischenverbindungen/ d.h. (3R) -4-Hydroxy-3-methyI-butan-2-on und (3S)-4-Hydroxy-3-methylbutan-2-on ebenfalls aus natürlich auftretenden optisch aktiven Substraten hergestellt werden. So wird durch Umsetzung der bekannten (S)-3-Hydroxy-2-methylpropanonsäure (ß-Hydroxyisobuttersäure) mit Methyllithium das (3S)-4-Hydroxy-3-methylbutan-2-on erhalten; und das entsprechende (3R)-Hydroxybutanon kann aus derselben (S)-Hydroxy-isobuttersäure durch Transposition der Funktionen, d.h. Umwandlung der Hydroxymethylgruppe zu einer Methylketonfunktion und Reduktion der Säure zum Alkohol nach offensichtlichen und herkömmlichen Verfahren hergestellt werden.

Die vorliegende Erfindung wird weiter durch die anschliessenden erläuternden Beispiele beschrieben. In diesen Beispielen verweisen die Zahlenangaben, die spezifische Produkte kennzeichnen (z.B. Verbindungen (1), (2), (3) etc. in den Beispielen 1 bis 12 oder Verbindungen (7A), (8B), (8C), etc. in den Beispielen 13 und 14) auf die so gezählten Strukturen in den Verfahrensschemata I oder II.

Beispiel 1

Der C-22-Aldehyd (1) wird durch Abbau von Ergosterolacetat (in welchem das Diensystem des Rings B durch Diels-Alder-Addition von 4-Phenyl-1,2,4-triazolin-3,5-dion geschützt wurde) nach dem Verfahren von Barton et al. (supra) erhalten. Der i-Etheraldehyd (4) wird aus Stigmasterol nach dem Verfahren gemäß US-PS 2 6 23 052 erhalten.

Beispiel 2 Synthese des Seitenkettenfragments (SuIfon A)

Eine Lösung von 4-Hydroxy-3-methylbutan-2-on (12,75 g; 0,125 Mol) in Pyridin (100 ml) wird unter Rühren mit

p-Toluolsulfonylchlorid (p-TsCl) (33,25 g, 0,175 Mol) in Portionen versetzt und nach 14-stündigem Stehen bei Raumtemperatur wird das Reaktionsgemisch in Wasser geschüttet und mit CH-Cl₂ extrahiert. Der Extrakt wird einige Male mit wässriger CuSO,-Lösung und Wasser gewaschen und an-

schließend über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Die Entfernung des Lösungsmittels unter vermindertem Druck ergibt das rohe Tosylat, welches direkt für die nächste Reaktion verwendet wird.

Thiophenol (14 g), welches in DMF (100 ml) gelöst ist, wird mit tert.-BuOK (14 g) behandelt. Diesem Reagens wird das Tosylat zugesetzt und nach 12 Stunden bei Raumtemperatur wird das Gemisch in Wasser geschüttet und mit CH-Cl₂ extrahiert. Der Extrakt wird mit wässriger Na₀CO-,-Lösunq ^{l ά}

und Wasser gewaschen und anschließend getrocknet. Die Abdampfung des Lösungsmittels ergibt einen öligen Rückstand, der durch Säulenchromatographie mit Silikagel gereinigt wird. Reines Phenylsulfid wird mit Benzol eluiert (Ausbeute 15g).

Diesem Phenylsulfid-Derivat (15 g) in Benzol (100 ml) werden Ethylenglykol (6 g) und p-TsOH (20 mg) zugesetzt und

das Reaktionsgemisch wird unter einer Dean-Stark-Falle für 3 Stunden erhitzt. Nach dem Kühlen wird es mit Na-CO Lösung und Wasser extrahiert, anschließend getrocknet und das Lösungsmittel wird verdampft. Das Produkt, das gewünschte Ketal, ist chromatographisch homogen und kann in dem nächsten Schritt ohne weitere Reinigung verwendet werden .

Das rohe Ketal in Dichlormethan (250 ml)-Lösung wird mit m-Chlorperbenzoesäure (m-CPBA) (80-85 %, 27 g, in Portionen zugesetzt) behandelt, während die Temperatur des Reaktionsgemisches unterhalb von 30⁰C gehalten wird. Nach der Zugabe des Reagens wird das Reaktionsgemisch bei Raumtemperatur unter gelegentlichem Schütteln stehengelassen. Wenn die Reaktion vollständig abgelaufen ist (etwa 1,5 Stunden) werden die aromatischen Säuren durch Extraktion mit wässrigem NHL· entfernt und die organische Schicht wird mit Wasser gewaschen und getrocknet. Die Verdampfung des Lösungsmittels ergibt das ölige Sulfon (SuIfon A) in im wesentliehen quantitativer Ausbeute (19 g). Das Produkt ist im wesentlichen rein (homogen nach TLC) und kann ohne jegliche weitere Reinigung verwendet werden; H-NMRo" 1*18 (d, J = 7 Hz, 3H, CHo-CH-), 1,19 (s, 3H, CH-.-C-) , 3,84 (m, 4H, Ketal-H), 7,3-7,6 und 7,6-7,9 (m, 3H + 2H, aromatische

Protonen); IRy^|KBr: 1305, 1147, 1082 cm"¹; Massenspektrum

IUcI X .

m/z (relative Intensität): 255 (M-Me, 21), 184 (66), 87 (92) , 43 (100) .

Beispiel 3

Kupplung von Sulfon A an Aldehyd (1); Hydroxysulfon (2) und Olefin (3)

Ein Grignard-Reagens wird aus Mg (535 mg; 22,22 mMol) und Ethylbromid in Ether (10 ml) hergestellt und die heftig gerührte Lösung wird mit Sulfon A (6 g; 2,22 mMol) in Benzol (6 ml) behandelt. Der gebildete Niederschlag wird mit einem Spatel zermahlen, das Rühren wirt fortgesetzt und

nach 15 Minuten wird der Aldehyd (1) (2,0 g) in Benzol (10 ml) zugegeben. Das Reaktionsgemisch wird bei Raumtemperatur für 24 Stunden gerührt, anschließend in wässrige (NH.)2^SO4"Lösung geschüttet und mit Benzol extrahiert.

Die organische Schicht ergibt nach dem Waschen mit Wasser,' Trocknen und Abdampfen einen öligen Rückstand, der über Silikagel chromatographxert wird. In den Benzol-Ether-Fraktionen (8:2) wird überschüssiges Sulfon rückgewonnen (4,5 g); Eluierung mit Benzol-Ether (3:1) ergibt nicht umgesetzten Aldehyd (1) (1,0 g); die Reaktionsprodukte (2) werden mit Ethylacetat eluiert.

Das rohe Gemisch der steroiden o(-Hydroxysulfone (2) wird in Methanol (200 ml), welches mit Na₂HPO. gesättigt ist, gelöst. Natriumamalgam (5,65 %, 15 g) wird zugesetzt und das Reaktionsgemisch wird für 15 Stunden bei 4⁰C gerührt.

Nach Beendigung der Na/Hg-Reduktion wird Quecksilber durch Filtrieren entfernt und Methanol wird durch Verdampfen unter vermindertem Druck entfernt, Wasser wird zugesetzt und das organische Material wird mit Benzol extrahiert. Nach dem Trocknen und Verdampfen des Lösungsmittels wird der ölige Rückstand über eine Silikagel-Säule chromatographiert. Die Eluierung mit Benzol-Ether (1:4) ergibt Verdindung (3) als einen farblosen Schaum; H-NMR <£: 0,80 (s, 18-H), 0,97 (s, 19-H), 1,22 (s, 26-H), 3,93 (m, 4H, Ketal-H), 4,44 (m, 1H, 3-H), 5,25-5,45 (m, 2H, 22-H und 23-H), 6,23 und 6,39 (Dubletts, J =8 Hz, 2 χ 1H, 7-H und 6-H), 7,25-7,45 (m, 5H₁-C₆Hj);.

IRV^CHCl3: 3603 (0-H), 1749, 1692 (C=O), 1406, 1038 cm"¹; max

Massenspektrum, m/z: 440 (M -Triazolin, 24), 87 (100).

(Um die Ausbeute zu erhöhen, kann nicht umgesetzter Aldehyd (1), der oben zurückgewonnen wurde, durch die SuIfon-Addition rückgeführt werden und die erhaltenen <y-Hydroxysulfone (2) werden dann, wie oben angegeben wurde, mit Natriumamalgam in gepuffertem Methanol behandelt, um zu-

sätzliches Olefin (3) zur Verfügung zu stellen. Die obigen Reaktionen werden vorzugsweise unter einer inerten Atmosphäre, wie Argon, durchgeführt.)

B e i s ρ i ;.,;g;.:;l. 4

Kupplung von SuIfön A an Aldehyd ;;(4) ; Hydroxysulfön (5) und Olefin (6)

Ein Grignard-Reagens wird aus Mg (75 mg, 3,1 mMol) und Ethylbromid in Ether (10 ml) hergestellt. Der Lösung von Ethylmagnesiumbromid wird unter Rühren SuIfön A (891 mg; 3,3 mMol) in Benzol (5 ml) zugesetzt. Nach 15-minütigem Rühren der erhaltenen Suspension bei Raumtemperatur wire¹ eine Lösung des Aldehyds (4) (290 mg) in Benzol (5 ml) zugesetzt. Die Reaktion wird 2,5 Stunden fortgesetzt, anschließend mit gesättigter (NH^)„SO,-Lösung (5 ml) abgeschreckt und mit Ether verdünnt. Die abgetrennte organische Schicht wird mit Wasser gewaschen, getrocknet und eingedampft. Der ölige Rückstand, der (5) enthält, wird mit Essigsäureanhydrid (2 ml) und Pyridin (2 ml) behandelt. Das Reaktionsgemisch wird 24 Stunden stehengelassen, in Wasser eingegossen und mit Benzol extrahiert. Der Benzolextrakt wird mit einer wässrigen Lösung von CuSO₄ und Wasser gewaschen, getrocknet und eingedampft. Das rohe Produkt /das Acetat von (5)7 wird in Methanol, welches mit Na^HPO₄ gesättigt ist, gelöst und Natriumamalgam (5,65 %, 8 g) wird zugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 16 Stunden bei 4⁰C gerührt. Nach der Umsetzung wird Quecksilber durch Filtrieren entfernt, Methanol wird eingedampft und Wasser und Benzol werden zugesetzt, um den Rückstand zu lösen. Die Benzolschicht wird getrocknet und eingedampft. Der ölige Rückstand wird über Silikagel chroma tographiert. Die Eluierung mit Benzol-Ether-Gemisch (93:7) liefert die Verbindung (6) (206 mg; 54 %), ¹II-NMR ei: 0,74 (s, 18-H) , 1,04 (s, 19-H), 1,25 (s, 26-H) , 2,78 (m, 1H, 6-H), 3,34 (s, 3H, -OCH₃), 3,97 (m, 4H, Ketal-H), 5,25-5,45 (m, 2H, 22-H und 23-H),

IRv>^KBr: 3470 (O-H) , 1095 cm ¹ ;
max

Massenspektrum, m/z (rel. Intensität): 456 (M , 1), 441 (M⁺-Me, 45), 87 (100).

Es soll angemerkt werden, daß der oben beschriebene Acylierungsschritt nicht wesentlich ist und gegebenenfalls ausgelassen werden kann; d.h.. das Hydroxysulfon (5) kann direkt der Na/Hg-Reduktion zugeführt werden, wie in Beispiel 3. Die obigen Reaktionen werden vorzugsweise unter einer Inertatmosphäre, z.B. Argon, durchgeführt. 10

Beispiel 5 Entfernung der PTAD-Schutzgruppe; 5,7-Dien (7)

Ein Gemisch der Verbindung (3) (1 g) und Lithiümaluminiumhydrid (1,8 g.) in THF (120 ml) wird unter Rückfluß 10 Stunden erhitzt. Nach dem Abkühlen wird überschüssiges Reagens mit einigen Wassertropfen zerstört und das Gemisch wird über wasserfreiem MgSO. getrocknet, filtriert und das Lösungsmittel wird abgedampft, um farbloses kristallines Material zu ergeben. Das rohe Dien (7) wird wiederholt aus Ethanol umkristallisiert; die ersten und zweiten Ausbeuten ergeben zusammen 415 mg von (7). Die Mutterlauge wird über eine Silikalgelsäule chromatögraphiert, um mit Benzol-Ether (7:3) zusätzliche 120 mg.(7) zu ergeben; Gesamtausbeute 535 mg (79 %) ; Schmelzpunkt.132-134 ⁰C (aus Ethanol),

¹H-NMRi: 0,63 (s, 18-H), 0,95 (s, 19-H), 1,23 (s, 26-H), 3,63 (m, 1H, 3-H)/ 3,95 (m, 4H, Ketal-H), 5,20-5,50 (m, 3H, 22-H, 23-H und 7-H), 5,57 (m, 1H, 6-H);

^IR-^S?i^{! 3430} (OrH), 1063, 1038 cm"¹ ; max

MaSsenSpektrum, m/z (rel. Intensität): 440 (M , 50), 407 (M⁺-H₂O-Me, 11), 87 (100);

ΙΏαΧ

Beispiel 6

Bestrahlung der Verbindung (7): Provitamin-Analogverbindung (8)

Eine Lösung des Diens (7) (50 mg) in 150 ml Benzol-Ether (1:4) wird auf Eis gekühlt und mit Argon für 20 Minuten von Sauerstoff befreit. Das Reaktionsgemisch wird unter Argonatmosphäre für 18 Minuten mit einer Quecksilber-Bogenlampe (Hanovia SA-1), die mit einem Vycor-Pilter ausgerüstet ist, bestrahlt. Das Lösungsmittel wird verdampft und der Rückstand wird durch HPLC chromatographiert (6,2 mm χ 25 cm mikrozerkleinertes Silikagel, 4 ml/min, 1400 psi) und mit 2 % 2-Propanol in Hexan eluiert, um 22 mg (44 %) Provitamin (8) zu ergeben;

¹H-NMRd": 0,73 (s, 18-H), 1,24 (s, 26-H), 1,64 (s, 19-H), 3,96 (m, 5H, Ketal-H und 3-H)₇ 5,35 (m, 2H, 22-H und 23-H), 5,50 (m, 1H, 9-H), 5,69 und 5,94 (Dubletts, J = 11,5 Hz, 2 χ 1H, 6-H und 7-H) ;
UV^^Et0H: 263 nm (6 = 8.900).

jllcLX

Beispiel 7 Isomerisierung von (8) zu der Vitamin-Analogverbindung (9)

Das Provitamin (8) (22 mg) wird in Ethanol (40 ml) gelöst und 150 Minuten unter Rückfluß erhitzt (Argonatmosphäre). Das Produkt wird durch HPLC gereinigt, um 18 mg (82 %) des reinen Vitamins (9) zu ergeben;

¹H-NMR^: 0,75 (s, 18-H), 1,24 (s, 26-H), 3,94 (m, 5H, Ketal-H und 3-H) , 4,81 und 5,04 (2 schmal m, 2 χ IH, 19 (Z)- und 19(E)-H), 5,33 (m, 2H, 22-H und 23-H), 6,03 (d, J = 11 Hz, 1H, 7-H), 6,22 (d, J= 11 Hz, 1H, 6-H); Massenspektrum, m/z (rel. Intensität): 440 (M , 17 ), 87 (100);

UVÄ^Et0H: 265 nm (£ = 17.000).
max

Beispiel 8 Hydrolyse des Ketals: Keto-Vitamin D^-Analogverbindung (10)

Der Lösung der Verbindung (9) (18 mg) in Ethanol (35 ml) wird p-Toluolsulfonsäure (7,5 mg) in Wasser (1 ml) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wird unter Rückfluß 90 Mi-. nuten erhitzt (der Reaktionsverlauf wird durch HPLC beobachtet) . Das Lösungsmittel wird verdampft, der Rückstand wird in Benzol gelöst und mit Wasser extrahiert. Die Benzol-Lösung wird getrocknet (wässerfreies MgSO₄) und eingedampft, um das Produkt (10) (16 mg; 99 %) zu ergeben. ¹H-NMRcT: 0,57 (s, 18-H), 1,04 (d, J = 7 Hz, 21 -H), 1,13 (d, J = 7 Hz, 28-H), 2,12 (s,3H, 26-H), 3,10 (m,1H, 24-H), 3,96 (m, 1H, 3-H), 4,82 und 5,05 (2 schmal m, 2 χ 1H, 19(Z)- und 19(E)-H), 5,2-5,5 (m, 2H, 22-H und 23-H), 6,03 (d, J = 11,5 Hz, 1H, 7-H), 6>22 (d, J = 11,5 Hz, 1H, 6-H);

IRÜ^CHC13: 3596 (0-H), 1709 cnf^Ί (C=O) ;

max +

Massenspektrum, m/z (rel. Intensität): 396 (M , 41), 363 (M⁺-H₀O-Me, 13), 271 (M⁺-Seitenkette, 16), 253 (M⁺-Seitenkette-H₂O, 23), 136 (100), 118 (95); UVA^Et°^H: 265 nm (S = 17.900).

iUclX

Beispiel 9 Reaktion des Ketons (10) mit Methylmagnesiumjodid: 25-OH-Dq (11a) und dessen Epimer (11b)

Ein Grignard-Reagens wird aus Magnesium (24 0 mg) und Methyl j odid in wasserfreiem Ether (20 ml) hergestellt. Zu einem Zehntel dieser Lösung {2 ml; 0,5 M Lösung von CH₃MgJ) wird Keton (10) (16 mg; 0,04 mMol) in Ether (2 ml) zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wird bei Raumtemperatur 2 Stunden unter einer Inertatmosphäre gerührt, sodann mit wässriger Lösung von NH₄Cl abgeschreckt, mit Benzol verdünnt und mit Wasser gewaschen. Die organische Schicht wird abgetrennt, getrocknet und eingedampft. Der rohe Produkt wird zuerst durch Säulenchromatographie mit Silikagel

(Eluierung mit 20 % Ether in Benzol) gereinigt und das Gemisch von (11a) und (11b) (16 mg; 96 %), welches dadurch erhalten wird, wird sodann wiederholt über eine HPLC-Säule unter Verwendung von 2 % 2-Propanol in Hexan als Eluationsmittel, chromatographiert, um die 24-Stereoisomeren, 24-epi-25-OH-D₂ (11b) und 25-OH-D₂ (11a) zu trennen. Chromatographie und erneute Chromatographie jedes Stereoisomers ergibt 4 mg an (11b) (gesammelt bei 68 ml), 4 mg (11a) (gesammelt bei 74 ml) und 7 mg des Gemisches von beiden Epimeren. Die Behandlung von 2 mg des Epimergemisches mit überschüssigem Essigsäureanhydrid in Pyridin-Lösung bei Raumtemperatur über Nacht und anschließender Standard-Aufarbeitung ergibt die entsprechenden 3-0-Acetate.

25-OH-D₂ (11a): Qk^⁵ + 56,8° (C = 0,2 in EtOH); ¹H-NMR^: 0,57 (s, 18-H), 1,00 (d, J = 7 Hz, 28-H), 1,04 (d, J = 7 Hz, 21-H), 1,15 und 1,17 (2 Singletts, 26-H und 27-H), 3,95 (m, 1H, 3-H), 4,82 und 5,05 (2 schmal m, 2 χ 1H, 19(Z)- und 19(E)-H), 5,23-5,43 (m, 2H, 22-H und 23-H), 6,05 und 6,22 (2 Dubletts, J = 11 Hz, 2 χ 1H, 7-H und 6-H);

Ü?i^{: 3401} (O-H) , 1645, 1631 (C=C), 971 cm"¹ (trans C=C) ;

Massenspektrum, m/z (rel. Intensität): 412 (M , 63), 394

(M⁺-H₂O, 10), 379 (M⁺-H₂O-Me, 23), 271 (M⁺-Seitenkette,

37), 253 (M⁺-Seitenkette-H₂O, 43), 136 (100), 118 (86), 59 (99) ;

max

24-epi-25-OH-D₂ (11b): Qi.^⁵ + 50,7° (C = 0,2 in EtOH); ¹H-NMR^: 0,57 (s, 18-H), 0,99 (d, J = 7 Hz, 28-H), 1,03 (d, J = 7 Hz, 21-H), 1,14 und 1,16 (2 Singletts, 26-H und 27-H), 3,94 (m, 1H, 3-H), 4,82 und 5,03 (2 schmal m, 2 χ 1H, 19(Z)- und 19(E)-H), 5,20-5,40 (m, 2H, 22-H und 23-H), 6,04 und 6,22 (2 Dubletts, J = 11 Hz, 2 χ 1Η, 7-H und 6-H);

IRv>^KBr: 3401 (OH), 1643, 1630 (C=C), 971 cm ¹ (trans C=C) ; max

Massenspektrum, m/z (rel. Intensität): 412 (M , 62),

(M⁺-H₂O; 12), 379 (M⁺-H₂O-Me, 31), 271 (M⁺-Seitenkette,

44), 253 (M⁺-Seitenkette-H₂O, 55), 136 (110), 118 (67), 59 (38);

UvA^Et0H: 265 nm (t = 17.300).
max

Es soll angemerkt werden, daß vom reinen Provitamin (7) die weitere Synthese (d.h. die Bestrahlungs-, Isomerisierungs-, Deketalisierungs- und Grignard-Reaktions-Schritte) ohne chromatographische Reinigung irgendeiner Zwischenverbindung durchgeführt werden kann. Die sorgfältige Säulenchromatographie über Silikagel vor der endgültigen Trennung durch HPLC entfernt alle Nebenprodukte.

Durch Umsetzung von 25-OH-D₂ (11a) mit jedem der folgenden Acylierungsreagentien, Essigsäureanhydrid, Propionsaureanhydrid, Benzoylchlorid und Succinsäureanhydrid unter herkömmlichen Bedingungen, werden die folgenden Ver- bindungen erhalten:
25-OH-D₂-3-Acetat
25-OH-D₂-3,25-Diacetat
25-OH-D₂-3-PrOpionat
25^-OH-P₂-3,25-Dipropionat

25-OH-D₂-3-Benzoat

25-OH-D₂-3,25-Dibenzoat
25-OH-D₂-3-Hemisuccihat.

Durch Umsetzung von 25-OH-24-epi-D₂ (11b) mit Essigsäureanhydrid oder Benzoylchlorid oder Diglykolsäureanhydrid unter milden herkömmlichen Bedingungen werden die folgenden Verbindungen erhalten:
25-OH-24-epi-D₂-3,25-Diacetat
25-OH-24-epi-D₂-3-Benzoat
25-OH-24-epi-D₂-3-Hemidiglykolat.

Beispiel 10

28/'

Durch Kupplung des Aldehyds (1) mit optisch aktivem (R) Sulfon A der Struktur
.. ι? t

Lj

und anschließender Na/Hg-Reduktion des Produkts gemäß den Bedingungen des Experiments, die in Beispiel 3 beschrieben sind, wird Verbindung (3) erhalten, welche die (24S)-Konfiguration in der Seitenkette aufweist, wie durch die Struktur

gezeigt wird und die Behandlung dieses Produkts mit LiAlH. gemäß den Bedingungen in Beispiel 5 liefert das 5,7-Dien (7), welches die (24S)-Seitenkettenkonfiguration aufweist; durch Bestrahlung dieses Produkts und anschließende thermische Isomerisierung nach den in den Beispielen 6 und 7 angegebenen Bedingungen werden nacheinander die Provitamin D-Verbindung (8) und die Vitamin D-Verbindung (9), welche die (24S)-Konfiguration aufweist, erhalten. Die Hydro-Iyse der so erhaltenen Verbindung (9) nach den Bedingungen gemäß Beispiel 8 schafft die (24S)-Ketovitamin D-Verbindung (10) und aus diesem Produkt wird durch eine Grignard-Reaktion gemäß Beispiel 9 25-OH-D₂ (Struktur (11a) im Verfahrensschema I) erhalten.

Beispiel Y\_

Unter Verwendung des optisch aktiven (S)-Sulfons A mit der Struktur
,? ■

in den in Beispiel 3 beschriebenen Reaktionen wird die Verbindung (3) erhalten, welche die (24R)-Seitenkettenstruktur gemäß nachfolgender Darstellung aufweist

ο υ

LJ

und die Reduktion dieses Produkts nach den Bedingungen des Beispiels 5 liefert das 5,7-Dien (7), welches die (24R)-Konfiguration aufweist. Die Bestrahlung von (24R)-(7) nach Beispiel 6 ergibt die Provitamin D-Analogverbindung (8) mit der (24R)-Konfiguration, und durch die nachfolgende thermische Isomerisierung nach den Bedingungen gemäß Beispiel 7 wird die Vitamin D-Verbindung (9) erhalten, welche die (24R)-Seitenkettenstruktur aufweist. Die Ketalhydrolyse nach den Bedingungen des Beispiels 8 ergibt dann das (24R)-25-Ketovitamin D (10)>und durch eine Reaktion dieses Produkts mit einem Methyl-Grignard-Reagens nach den Bedingungen des Beispiels 9 wird das 25-Hydroxy-24-epi-vitamin D₂ (Struktur 11b), im Verfahrensschema I) erhalten.

B e i s ρ i e 1 12

Herstellungen von 5,6-trans-Verbindungen 25

25-OH-D₂ (Verbindung 11a) wird in Ether, der einen Tropfen Pyridin enthält, gelöst und mit einer Lösung von Jod in Hexan (ca. 0,5 mg/ml) für 15 Minuten behandelt. Die Zugabe einer wässrigen Lösung vonNatriumthiosulfat, Abtrennung der organischen Phase und Eindampfung der Lösungsmittel ergibt einen Rückstand, aus dem das gewünschte 25-Hydroxy-5,6-trans-vitamin D₂ durch HPLC isoliert wird, wobei eine Silikagel-Säule mit mikrozerkleinertem Silikagel und 2 % 2-Propanol in Hexan als Eluationsmittel verwendet werden.

Nach dem gleichen Verfahren wird aus 25-Hydroxy-24-epi-D_ das entsprechende trans-Isomer erhalten, nämlich 2 5-Hydroxy-5,6-trans-24-epi-D₂.

Aus 25-OH-D₂-3-Acetat wird 25-OH-5,6-trans-D₂~3-Acetat erhalten, und aus 25-OH-24-epi-D₂-3-Acetat wird 25-OH-5,6-trans-24-epi-D„-3-Acetat durch Anwendung des oben beschriebenen Isomerisierungsvorganges erhalten.

Die Acylierung von 25-OH-5,6-trans-D₂ oder 25-OH-5,6-trans-24-epi-D„ unter herkömmlichen Bedingungen liefert die entsprechenden Acylate, wie beispielsweise: 25-OH-5,6-trans-D₂-3-Acetat
25-OH-5,6-trans-D₂-3,25-Diacetat
25-OH-5,6-trans-D₂~3-Benzoat
25-OH-5,6-trans-D₂-3-Acetat-25-benzoat 25-OH-5,6-trans-24-epi-D₂-3-Acetat
25-OH-5,6-trans-24-epi-D₂-3,25-Dibenzoat.

Beispiel 1J3

Die Hydrolyse von 5,7-Dien-25-ketal (Verbindung (7A), worin X₁=H) unter Einsatz der in Beispiel 8 beschriebenen Bedingungen ergibt 3ß-Hydroxy-24-methyl-27-norcholesta-5,7,22-trien-25-on (Verbindung 7B, worin X₁=H). Die Bestrahlung dieses Produkts unter Bedingungen, die denjenigen von Beispiel 6 analog sind, ergibt die 25-Keto-Provitamin D₂~Analogverbindung, die durch Struktur (8B) charakterisiert ist, worin X₁=H). Erhitzen von (8B) in einer Ethanol-Lösung gemäß den Bedingungen von Beispiel 7 liefert das 25-Keto-Vitamin D₂~Produkt (Verbindung 10, worin X₁=H).

Beispiel 1_4_

Die Umsetzung von 3ß-Hydroxy-24-methyl-27-norcholesta-5,7,22-trien-25-on (Verbindung (7B), worin X₁=H), wie es in Beispiel 13 erhalten wurde, mit Methylmagnesiumbromid gemäß den Bedingungen in Beispiel 9 ergibt 24-Methylcholesta-5,7,22-trien-3ß,25-diol (Verbindung (7C), worin X₁=X₂=H). Die Bestrahlung dieses Produkts unter den Be-

y 3Z.

dingungen nach Beispiel 6 ergibt 25-Hydroxy-Provitamin D₃-Produkt, welches durch die Struktur (8C, worin X₁=X₃=H) charakterisiert ist. Die thermische Isomerisierung dieses Provitamins unter Verwendung der Bedingungen aus Beispiel 7 liefert die 25-Hydroxyvitamin D -Verbindung (11; worin

Die Verarbeitung von 24-Methylcholesta-5,7,22-trien-3ß,25 diol-3,25-diacetat (Verbindung 7C; X₁=X₂=AcBtYl) über die se Reaktionsstufen unter Einschluß von Bestrahlung und thermischer Isomerisierung nach den Bedingungen der Beispiele 6 bzw. 7 ergibt die 25-OH-D₂~3,25-Diacetatepimeren (Verbindung (11), worin X₁=X₂

B e j s ρ ie I 15

Unter Einsatz von Bedingungen, die denjenigen nach Beispiel 9 analog sind, wird Mg mit den folgenden Halogeni den umgesetzt:
Ethyljodid, Propyljodid, Is,opropylbromid, Butylbromid, sek.-Butyljodid, Isobutyljodid, Pentyljodid und Phenyl-.

bromid,

umd die entsprechenden Grignard-Verbindungen zu erhalten.

Durch Umsetzung jeder dieser Reägentien mit Keton (10) durch Verfahren, welche denjenigen von Beispiel 9 analog sind, können die folgenden Produkte erhalten werden: Verbindung (12), worin X =X₂=H, Y=Ethyl, Verbindung (12), worin X₁=X₃=H, Y=Propyl, Verbindung (12), worin X₁=X₃=H, Y=Isopropyl, Verbindung (12), worin X₁=X₃=H, Y=Butyl, Verbindung (12), worin X₂=X₃=H, Y=sek.-Butyl, Verbindung (12), worin X₁=X₃=H, Y=Isobutyl, Verbindung (12), worin X₁=X₃=H, Y=Pentyl, Verbindung (12), worin X₁=X₃=H, Y-Phenyl.

1 Durch Umsetzung des Ketons (10) mit duch Isotope markierte

13 Methyl-Grignard-Reagentien, nämlich CH-MgJ, CH^MgJ, 2

C H-MgJ, C H₃MgJ unter Bedingungen, die denjenigen von Beispiel 9 analog sind, werden die folgenden Produkte erhal-5 ten:

Verbindung (12), worin Y=¹³CH₃, X₁=X₃=H Verbindung (12) , worin Y=¹⁴CH₃, X₁=X₃=H Verbindung (12), worin Y=C²H₃, X₁=X₃=H Verbindung (12), worin Y=C⁸H₃, X₁=X₃=H,

10 gekennzeichnet durch Isotopen-Substitution in der Methylgruppe von Kohlenstoff-26 des Moleküls.

Claims

Pa t en t a η sprue h e

J Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel

worin X₁ und X₂ jeweils unter Wasserstoff und Acyl ausgewählt sind und Y ein Alkyl- oder Arylrest ist, ^ wobei ein 5,7-Diensteroid der Formel

worin X₁ Wasserstoff oder Acyl ist, mit ultraviolettem Licht bestrahlt wird, um das entsprechende Provitamin-D-Produkt zu erhalten, die Provitamin-D-Verbindung in einem inerten Lösungsmittel bei einer Temperatur von etwa Raumtemperatur bis etwa 100⁰C für eine Zeit, die zur Erreichung des Gleichgewichts hinreichend ist, isomerisiert wird, wodurch eine Vitamin-D-Verbindung der Formel

erhalten wird,

worin X- Wasserstoff oder Acyl ist, die Vitamin-D-Verbindung einer säurekatalysierten Hydrolyse unterworfen wird, um die Ketalschutzgruppe zu entfernen, wodurch das entsprechende Keton erhalten wird, das Keton einer Alkylierung mit einem Reagens der Formel YMg-Halogenid oder YLi unterworfen wird, worin Y einen Alkyl- oder Arylrest bedeutet und das Halogenid Chlorid, Bromid oder Jodid ist, und gegebenenfalls eine oder beide freie Hydroxylgruppen acyliert werden.
2. Verfahren' nach Anspruch 1, worin X^ und X₂ Wasserstoffatome darstellen und Y eine Methylgruppe ist.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, worin der Ketal-Hydrolyseschritt dem Bestrahlungsschritt vorangeht, und worin das erhaltene 25-Keton anschließend nacheinander den Bestrahlungs-, Isomerisierungs- und Alkylierungsschritten unterworfen wird.
4. Verfahren nach Anspruch 3, worin die Alkylierungsreaktion dem Bestrahlungsschritt vorangeht, und worin das anfallende 25-Hydroxy-5,7-dien, welches sich aus der Alkylierung ergibt, nacheinander den Bestrahlungs- und Isomerisierungsreaktionen unterworfen wird.
5. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, worin das 5,7-Diensteroid die 24(R)-Konfiguration besitzt.
6. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, worin das 5,7-Diensteroid die 24(S)-Konfiguration besitzt.
7. Verfahren nach Anspruch 3 oder 4, worin das 5,7-Diensteroid die 24(R)-oder die 24(S)-Konfiguration besitzt.
8. Verbindungen der Formel

I ρ ο
J/ LJ

worin N ein Steroidkern ist, der unter

oc Hi

worin X₁ Wasserstoff oder Acyl ist, ausgewählt ist.
9. Verbindungen nach Anspruch 8, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfiguration aufweist,
10. Verbindungen nach Anspruch 8, worin das asymmetrische Zentrum am''Kohlenstoff-24 die (S)-Konfiguration aufweist,
11. Verbindungen der Formel

worin X₁ Wasserstoff oder Acyl ist, und R unter

Ί 25

worin X₂ Wasserstoff oder Acyl ist, und Y einen Alkyl- oder Arylrest bedeutet, ausgewählt ist.
12. Verbindung nach Anspruch 11, worin X. und X» Wasserstoff oder Acetyl sind und Y eine Methylgruppe bedeutet.
13. Verbindungen nach Anspruch 11 oder 12, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfiguration aufweist.
14. Verbindungen nach Anspruch 11 oder 12, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfigura-

tion aufweist.
15. Verbindungen der Formel

worin X₁ Wasserstoff oder Acyl ist und worin R unter

worin X₂ Wasserstoff oder Acyl ist und Y einen Alkyl- oder Arylrest bedeutet, ausgewählt ist.

16. Verbindungen nach Anspruch 15, worin X₁ und X„ VTasserstoff oder Acetyl sind und Y eine Methylgruppe bedeutet.

17. Verbindungen nach Anspruch 15 oder 16, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfiguration aufweist.

18. Verbindungen nach Anspruch 15 oder 16, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfiguration aufweist.

19. Verbindungen der Formel

worin N ein Steroidkern ist, der unter

OC H:

worin X₁ Wasserstoff oder Acyl ist, ausgewählt ist.

9. Verbindungen nach Anspruch 8, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfiguration aufweist,

1510. Verbindungen nach Anspruch 8, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfiguration aufweist,

11. Verbindungen der Formel

worin X₁ Wasserstoff oder Acyl ist, und R unter

O Ky

worin X₂ Wasserstoff oder Acyl ist, und Y einen Alkyl- oder Arylrest bedeutet, ausgewählt ist.

12. Verbindung nach Anspruch 11, worin X₁ und X₂ Wasserstoff oder Acetyl sind und Y eine Methylgruppe bedeutet.

13. Verbindungen nach Anspruch 11 oder 12, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfiguration aufweist.

14. Verbindungen nach Anspruch 11 oder 12, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfigura-

tion aufweist.
15. Verbindungen der Formel

worin X- Wasserstoff oder Acyl ist und worin R unter

worin X₂ Wasserstoff oder Acyl ist und Y einen Alkyl- oder Arylrest bedeutet, ausgewählt ist.

16. Verbindungen nach Anspruch 15, worin X- und X„ VTasserstoff oder Acetyl sind und Y eine Methylgruppe bedeutet.

17. Verbindungen nach Anspruch 15 oder 16, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfigura-

25 tion aufweist.

18. Verbindungen nach Anspruch 15 oder 16, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfigura· tion aufweist.

19. Verbindungen der Formel

worin N ein Steroidkern ist, der unter

OcH₃

worin X₁ Wasserstoff oder Acyl ist, ausgewählt ist.

9. Verbindungen nach Anspruch 8, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfiguration aufweist,

1510. Verbindungen nach Anspruch 8, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfiguration aufweist.

11. Verbindungen der Formel 20

worin X₁ Wasserstoff oder Acyl ist, und R unter

T.I

worin X₂ Wasserstoff oder Acyl ist, und Y einen Alkyl- oder Arylrest bedeutet, ausgewählt ist.

12. Verbindung nach Anspruch 11, worin X₁ und X~ Wasserstoff oder Acetyl sind und Y eine Methylgruppe bedeutet.

13. Verbindungen nach Anspruch 11 oder 12, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfiguration aufweist.

14. Verbindungen nach Anspruch 11 oder 12, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfiguration aufweist.
15. Verbindungen der Formel

worin X₁ Wasserstoff oder Acyl ist und worin R unter

worin X₂ Wasserstoff oder Acyl ist und Y einen Alkyl- oder Arylrest bedeutet, ausgewählt ist.

16. Verbindungen nach Anspruch 15, worin X₁ und X₂ VTasserstoff oder Acetyl sind und Y eine Methylgruppe bedeutet.

17. Verbindungen nach Anspruch 15 oder 16, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfiguration aufweist.

18. Verbindungen nach Anspruch 15 oder 16, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfiguration aufweist.

19. Verbindungen der Formel

worin X₁ Wasserstoff oder Acyl ist und worin R unter

/V

LJ

ausgewählt ist/ worin X„ Wasserstoff oder Acyl ist und Y einen Alkyl- oder Arylrest bedeutet, mit der Maßgabe, daß sofern Y für Methyl steht, X₁ und X₀ nicht beide Wasserstoff bedeuten können.

20. Verbindungen nach Anspruch 19, worin R den Rest

bedeutet und X^ Wasserstoff, Acetyl oder Benzoyl darstellt.

21. Verbindungen nach Anspruch 20, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfiguration aufweist.

22. Verbindungen nach Anspruch 20, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfiguration aufweist.

23. Verbindungen nach Anspruch 19, worin R den Rest

bedeutet und X- Wasserstoff, Acetyl oder Benzoyl ist.

24. Verbindungen nach Anspruch 23, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfiguration aufweist.

25. Verbindungen nach Anspruch 23, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfxguration aufweist.

26. Verbindungen nach Anspruch 19, worin R den Rest

bedeutet.
10

27. Verbindungen nach Anspruch 26, worin X₁ unter Acetyl,
Benzoyl, Succinyl und Diglykolyl ausgewählt ist, und
X₂ unter Wasserstoff, Acetyl, Benzoyl, Succinyl und
Diglykolyl ausgewählt ist und Y eine Methylgruppe darstellt.

28. Verbindungen nach Anspruch 26 oder 27, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfxguration aufweist.

20

29. Verbindungen nach Anspruch 26 oder 27, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfxguration aufweist.

30. Verbindungen der Formel

worin X₁ und X„, die gleich oder unterschiedlich sein
können, Wasserstoff oder Acyl sind, und Y einen Alkyl- oder Arylrest darstellt.
35

31. Verbindungen nach Anspruch 30, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (R)-Konfxguration aufweist.

32. Verbindungen nach Anspruch 30, worin das asymmetrische Zentrum am Kohlenstoff-24 die (S)-Konfiguration aufweist.

33. Verbindung nach Anspruch 31, worin X und X~ Wasserstoff atome bedeuten und Y eine Methylgruppe darstellt.

34. Verbindung nach Anspruch 32, worin X und X„ Wasserstoff atome bedeuten und Y eine Methylgruppe darstellt.

35. Verbindungen nach Anspruch 26, worin X₁ und X_? Wasserstoff atome bedeuten und Y eine durch ein Isotop markierte Methylgruppe darstellt.

36. Verbindungen _nach Anspruch 35, worin Y unter ¹³CH,, ¹⁴CH₁ 2 } 3

2 } C H₃ und CH- ausgewählt ist