FR2540869A1

FR2540869A1 - Procede pour la preparation de derives hydroxyles de la vitamine d2 et produits intermediaires utilises dans ce procede

Info

Publication number: FR2540869A1
Application number: FR8314942A
Authority: FR
Inventors: Hector F De Luca; Heinrich K Schnoes; Jacek W Morzycki
Original assignee: Wisconsin Alumni Research Foundation
Current assignee: Wisconsin Alumni Research Foundation
Priority date: 1982-09-20
Filing date: 1983-09-20
Publication date: 1984-08-17
Also published as: FR2555172A1; FR2555173B1; DE3348322C2; JPH0518839B2; JPH02209864A; FR2555172B1; JPH0518840B2; GB2142922A; IE832203L; CH671222A5; DE3390212C2; JPH02209863A; GB8417477D0; JPH02209862A; IL69763A0; FR2540869B1; JPH0435458B2; GB2142922B; JPS59501746A; IE56174B1

Abstract

PROCEDE POUR LA PREPARATION DE DERIVES HYDROXYLES DE LA VITAMINE D ET PRODUITS INTERMEDIAIRES UTILISES DANS CE PROCEDE. LE PROCEDE DECRIT DANS LA PRESENTE INVENTION EST CARACTERISE PAR LE FAIT QU'IL CONSISTE A SOUMETTRE UN 5,7-DIENE STEROIDE AYANT LA FORMULE: (CF DESSIN DANS BOPI) AUX STADES SUIVANTS: A.IRRADIATION AVEC LA LUMIERE ULTRAVIOLETTE POUR OBTENIR LA PREVITAMINE D CORRESPONDANTE; B.ISOMERISATION DE LA PREVITAMINE D DANS UN SOLVANT INERTE A UNE TEMPERATURE ALLANT D'ENVIRON LA TEMPERATURE ORDINAIRE A ENVIRON 100 C, POUR OBTENIR AINSI UN COMPOSE AYANT LA FORMULE: (CF DESSIN DANS BOPI) C.HYDROLYSE CATALYSEE PAR UN ACIDE POUR ELIMINER LE GROUPE PROTECTEUR CETAL, ET D.SOUMISSION DE LA CETONE DEBARRASSEE DU GROUPE PROTECTEUR A L'ALKYLATION AVEC UN REACTIF AYANT LA FORMULE YMG-HAL OU YLI, DANS LAQUELLE Y EST UN GROUPE ALKYLE OU ARYLE ET HAL REPRESENTE LE CHLORE, LE BROME OU L'IODE, ET EVENTUELLEMENT E.ACYLATION DE L'UN OU DES DEUX GROUPES HYDROXYLE LIBRES, CES STADES DANS UN ORDRE QUELCONQUE A CONDITION QUE LE STADE A PRECEDE LE STADE B, ET QUE LE STADE C PRECEDE LE STADE D. UTILISATION DE CES DERIVES DE LA VITAMINE D POUR LE TRAITEMENT OU LA PROPHYLAXIE DE DIVERS ETATS PATHOLOGIQUES NOTAMMENT POUR DES DESEQUILIBRES EN CALCIUM ET EN PHOSPHORE ET COMME SUBSTITUTS DE LA VITAMINE D ET DE SES METABOLITES DANS LEURS APPLICATIONS DIVERSES.

Description

Procédé pour la préparation de dérivés hydroxylés de la vitamine D2 et produits intermédiaires utilisés dans ce procédé.

La présente invention concerne un procédé pour la préparation de dérivés hydroxyles de la vitamine D2 et de nouveaux produits intermédiaires utilisés dans ce procédé, particulièrement la 25-hydroxvvitamine D2 et son épimère 24, certains de leurs analogues alkylés et arylés, les dérivés 5,6-trans et les dérivés acyles de ces composés.

Les vitamines D sont des agents très importants pour régler le métabolisme du calcium et des phosphates chez les animaux et les êtres humains, et ont été utilisées longuement comme suppléments diététiques et dans la pratique clinique pour assurer une croissance et un développement convenables des os. On sait que l'activité in vivo de ces vitamines particulièrement des vitamines D2 et D3 dépend du métabolisme en les formes hydroxylées. Ainsi, la vitamine D2 subit des réactions d'hydroxylation successives en ses formes actives, étant d'abord transformée en 25-hydroxyvitamine D2 (25-OH-D2) puis en 1,25-dihydroxyvitamine D2 (1,25-(OH)2D2).Ces formes hydroxylées de la vitamine D2 sont1 a cause de leur efficacité et d'autres propriétés avantageuses, des suppléments diététiques ou des agents pharmaceutiques fortement souhaitables pour guérir ou prévenir les maladies des os ou des maladies qui s'y rapportent.

Bien que toutes les métabolites de la vitamine D3 aient été préparées par synthèse chimique, peu de travaux ont été réalisés pour préparer les métabolites de la vitamine D2. Les procédés connus de synthèse des métabolites de la série D3,(particulièrement des composés hydroxyles sur la chaîne latérale) ne sont pasibien entendu; appropriés en général pour la préparation des métabolites de la vitamine D2 correspondantes, puisque ces dernières sont caractérisées par une structure à chaîne latérale (c'est-à-dire présence d'une double liaison et d'un groupe méthyle extérieur) aui nécessite une voie de synthèse différente à partir de celle applicable auxcomposw D3 hydroxyléssur la chaîne latérale.

Deux composés apparentés par leur structure au composé 25-OH-D2 ont été préparés, notamment le 22-déhydro25-hydroxycholécalciférol, qui peut être considéré comme un analogue 24-desméthylé de la 25-OH-D2 (voir brevet US n 3786 062), et la 24,25-dihydroxyvitamine D2, l'analogue 24-hydroxylé de la 25-OH-D2 CJones et al. Biochemistry 18, 1094 (1979)0 . Toutefois, les méthodes synthétiques proposées dans ces rapports ne sont pas applicables à la préparation de la 25-OH-D2 elle-même.

Une nouvelle synthèse appropriée des dérivés 25hydroxylés de la vitamine D2 a maintenant été mise au point selon la présente invention. Cette synthèse fournit la 25-hydroxyvitamine D2 (25-OH-D2) et son épimère 24, la 25-hydroxy-24-épwTitamine D2 (25-OH-24-épi D2)' caractérisés par les structures appliquées ci-dessous (où X1 et X2 sont de l'hydrogène et Y est le groupe méthyle),

25-OH=D2

25-OH-24-épi D2 ainsi que les composés analogues aikylés ou arylés correspondants, dans lesquels Y est un groupe alkyle ou aryle, et les dérivés de ces composés protégés-sur le groupe hydroxyle, dans lesquels au moins un des X1 et X2 est un radical acyle.

De plus, le procédé de la présente invention
fournit les isomères 5,6-trans correspondants et de nouveaux produits intermédiaires qui sont utiles pour la préparation des composés analogues de la 25-OH-D2 et/ou des produits marqués avec des isotopes.

Le terme "acyle", utilisé dans le présent mémoire, désigne un groupe acyle aliphatique ayant de 1 à, disons, 6 atomes de carbone dans toutes les formes isomères possibles
(par exemple un groupe formyle, acétyle, propionyle, butyryle, isobutyryle et valéryle) ou bien un groupe acyle aromatique
(groupe aroyle) tel qu'un groupe benzoyle, les groupes méthvl-benzoyle isomères et les groupes nitro-ou halogénobenzoyle isomères, ou bien un groupe acyledicarboxylique ayant une longueur de chaîne avec 2 à 6 atomes de carbone, c'est-à-dire des groupes acyle du type ROOC(CH2)nCO-, ROOCCH2-O-CH2 co-,n va de 2 & inclusivementret R est de l'hydrogène ou un radical alkyle, tel qu'un radical oxalyle, malonyl-e,succi- noyle, glutaryle, adipyle, diglycolyle. Le terme "alkyle" désigne un groupe alkyle inférieur ayant 1 à 6 atomes de carbone dans toutes les formes isomères possibles, par exemple un groupe méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butylè, isobutyle, sec.-butyle et pentyle, et le mot "aryle" désigne un groupe phényle ou phényle substitué, par exemple un groupe alkylphényle ou méthoxyphényle.

Le procédé global mis au point pour la préparation des composés ci-dessus peut être divisé en deux phases générales, à savoir: (a) addition d'un fragment de chaîne latérale à un précurseur stéroldal approprié pour obtenir un 5,7-diène-stéroïde comme produit intermédiaire central, et (b) conversion de ce 5,7-diène en la structure de vitamine
D avec Si nécessaire, modification ultérieure de la chaîne latérale pour obtenir les dérivés 25-hydroxylés désirés. Ce schéma général permet une certaine souplesse dans le choix de la matière de départ spécifique et dans l'ordre exact de chaque stade du procédé,deux caractéristiques qui présentent un avantage pratique considérable et une grande commodité.Selon la présente invention, il est fourni un procédé pour la préparation d'un composé ayant la formule

dans laquelle X1 et X2 sont chacun indépendamment de 1' hydrogène ou un groupe acyle, et Y est un groupe alkyle ou aryle, procédé qui est caractérisé par le fait qu'il consiste à soumettre un 5,7-diène stéroïde ayant la formule

a stades suivants:: (a) irradiation avec la lumière ultraviolette pour obtenir la prévitamine D correspondante, (b) isomérisation de la prévitamine D dans un solvant inerte à une température allant d'environ la température ordinaire à environ 1000C, pour obtenir ainsi un composé ayant la formule

(c) hydrolyse catalysée par un acide pour éliminer le groupe protecteur cétal et (d) soumission de la cétone débarrassée du groupe protecteur à l'alkylation avec un réactif ayant la fcrmule VMg-Hal ou YLi, dans laquelle Y est un groupe alkyle ou aryle et
Hal représente le chlore, le brome ou l'iode, et éventuellement (e) acylation de l'un ou des deux groupes hydroxyle libres, ces stades dans un ordre quelconque à condition que le stade (a) précede le stade (b), et que le stade (c) précède le stade (d).

Toute la suite des réactions est illustrée par le schéma I, tandis que le schéma II illustre certaines des options réalisables pour effectuer les quatre derniers stades de la synthèse.

Les matières de départ pour le présent procédé sont les 22-aldéhydesstéro1-daux dans lesquels la ou les double(s)liaison(s) du noyau B est ou sont)protégée(s) d'une façon appropriée. Comme le montre le schéma I, des composés appropriés sont par exemple le 22-aldéhyde protégé sur le diène par le PTAD (1) (ot PTAD désigne le groupe protecteur phényltriazoline-3,5-dione indiqué), ou le 3,5cyclo-22-aldéhyde (4) dans lequel la double liaison tus est protégée via la formation d'un i-éther. Deux de ces composés sont -des produits connus (voir par exemple Barton et al.

Le premier stade de ce procédé comprend l'addition d'un fragment de chaîne latérale approprié. Ainsi, la condensation de l'aldéhyde (1) avec un fragment de chaîne latérale comportant un groupe sulfonyle, comme le montre
SCHEMA I

le schéma (sulfone A , décrite plus loin), présent sous la
forme de son anion, particulibrement dans tin solvant éther
ou hydrocarbure, donne le produit intermédiaire hydroxy
sulfone (2).L'anion du fragmentde chaîne latérale,sulfone
Ajout être engendré en traitant la sulfone avec une base
forte, tel que le lithiun-diéthylamide, le n-butyl-lithium
ou le bromure d'éthyl-magnésium (ou un réactif de Grignard
similaire) dans un-solvant éther ou hydrocarbure,puis en ajoutant à cette solution le stéroïde-aldéhyde (1) sous forme d'une solution dans l'éther ou un hydrocarbure. La réaction est effectuée avantageusement aux environs de la température ordinaire et de préférence sous une atmosphère inerte.

L'addition analogue de la sulfone A à.l'aldéhyde
(4) donne le produit intermédiaire hydroxysulfone (5) sur le schéma I.

Le stade suivant comprend l'élimination des groupes hydroxyle et phénylsulfonyledans la chalne latérale avec la formation de la double liaison 22(23)-trans. Ainsi, le traitement du composé (2), dansune solution méthanolique saturée avec NaHP04, avec l'amalgame de sodium sous une atmosphère inerte, donne le composé (3) ayant pour caractère la double liaison trans- 22 désirée dans la chaîne latérale.

Le traitement analogue du composé (5) donne le composé 22oléfinique.(6). Si on le désire, le groupe 22-hydroxyle dans les composés (2) ou (5) peut être acylé ou sulfonylé
(par exemple mésylé) avant le stade de réduction par
Na/Hg, mais ceci n'est généralement. pas nécessaire.

I1 faut remarquer, comme le montre le schéma I, que l'addition du fragment de chaîne latérale,sulfone A, aux aldéhydes (1) ou (4), ne provoque pas l'épimérisation au centre d'asymétrie du carbone 20, c'est- -:dire que la stéréochimie ence centre est maintenue comme on le désire.

Si on le désire, le maintien de la stéréochimie du carbone 20 peut être contrôlé à ce stade en revenant à l'aldéhyde de départ par la conversion du produit intermédiaire -(3) ou
(6). Par exemple, en soumettant le composé (6) à l'ozo- nolyse en opérant-par voie réductrice, ltutilisation de conditions très classiques et normales donne le
C-22-aldéhyde correspondant, c' est-à-dire l'aldéhyde ayant la structure (4). La comparaison par spectroscopie et par chromatographie de l'aldéhyde obtenu par ozonolyse avec la matière de départ initiale confirme le maintien de la stéréochimie du carbone C-20.

La-troisième opération du procédé implique la conversion de ces stéroïdes protégés sur le noyau B en le produit intermédiaire 5,7-diène (7) désiré. Dans le cas du composé protégé sur le diène par le PTAD (3), cette conversion peut être réalisée en un seul stade avec un -agent réducteur hvdrure.fort (par exemple LiAlH4) dans un solvant éther la température du reflux. Le composé (7) peut être également obtenu à partir du dérivé i-éther
(6) en effectuant plusieurs stades classiques bien connus.

Le i-éther (6) peut d'abord être dissous dans l'acide acétique glacial1 au reflux1 pendant ,disons' 2 heures pour obtenir le dérivé 5-ène-3-acétate (6a) correspondant,qui en solution dans un hydrocarbure (par exemple l'hexane)r à la température du reflux, de préférence sous atmosphère inerte, est ensuite traité avec un réactif de bromation
(par exemple la 1,3-dibromo-5,5-diméthylhydantolne) pendant,par exemple ,20 minutes, et au produit intermédiaire
C-7-bromo résultant, une molécul.e d'acide bromhydrique est directement enlevée par dissolution dans le xylène et par traitement avec une base (par exemple la s-collidine) aux températures du reflux sous une atmosph.ère inerte, particulièrement pendant environ 90 minutes: Le produit résultant,le 5,7-diène-3-acétate peut ensuite être isolé de la façon classigue et purifié par chromatographie en phase liquide à haute performance ou par chromatographie en couche mince sur plaques de gel de silice. L'hydrolyse
simple de l'acétate (5% de KOH dans MeOH) donne ensuite
le 5,7-diène (7). Ce stade d'hydrolyse peut toutefois être
supprimé puisqu'aussi bien le 5,7-diène-3-ol (7) ou les 3-0-acylate correspondants peuvent être utilisés pour les stades ultérieurs du procédé. Un quelconque de ces 3-0acylate est ,naturellement,également facilement accessible en acylant simplement le composé (7) selon des procédés classiques.

La conversion du 5,7-diène (7) en les dérivés finals de la vitamine D comprend une suite de quatre stades, dont l'ordre précis peut être modifié à volonté. La suite montrée sur le schéma I implique d'abord l'irradiation d'une soluticn du 5,7-diène (7), en particulier dansl' éther ou dans un hydrocarbure,par la lumière ultraviolette pour donner le composé analogue prévitamine (8) qui par chauffage( par exemple à 50-900C) dans un solvant approprié (par exemple éthanol, hexane) subit l'isomérisation en le produit analogue de la vitamine D2 (9). Le stade suivant, l'élimination du groupe protecteur cétal, est un stade critique puisque l'élimination du groupe cétal par hydrolyse pour obtenir le dérive céto (10) correspondant, doit être effectuée sans isomériser la double liaison 22(23) en la position conjuguée 23(24).L'isomérisation drune cétone insaturée en une cétonec(,-insaturée conjuguée peut se produire facilement par hydrolyse du groupe cétal mais il faut l'éviter. L'élimination du groupe cétal peut être effectuée en chauffant le composé cétal (9) dans un solvant hydroxylé avec catalyse acide pendantjpar exemple,l à 2 heures.

(E est souhaitable de contrôler le progres de la réaction par analyse chromatographique périodique du mélange réactionnel brut. -L'analyse par chromatographie en phase liquide haute performance (CLIP) est appropriée et convient bien ).

Le produit, la cétone (10) ainsi obtenue, est ensuite alkylé dans le stade final au moyen d'un réactif de Grignard (un haloaénure d'alkyl-magnésium ou d'aryl-magnésium, par exemple le bromure de méthyl-magnésium dans ce Cas) pour donner le dérivé 25-hydroxyvitamine D2 (11). L'alkylation par un réactif alkvl-lithium, par exemple le méthyl-lithium,est également efficace et convient bien.Si le fragment de chaîne latérale, sulfone A,tel qu'utilisé dans le premier stade1 est racémique, c'est-à-dire existe sous forme d'un mélange de ces énantiomères (R) et (S), le dérivé (11) sera obtenu sous forme d'un mélange des deux C-24-épimères, c'est-à-dire le (24S)-épimère (lla) qui correspond aux produit naturel et le (24R)-épimère (llb) qui est la 25-OH-24-épi-D2. Ces C-24-épimères sont séparés convenablement par la(CLLP )sur une colonne de gel de silice microparticulaire efficace pour obtenir la 25-OH-D2(11a) et la 25-OH-24-épi-D2 (llb)à l'état pur.

I1 faut remarquer qu'avec la sulfone A racémique comme matière de départ pour la chaîne latérale, les premiers produits intermédiaires synthétiques, par exemple (3) Uou (6), et (6a)3 ainsi que le 5,7-diène (7) et les produits intermédiaires ultérieurs (8), (9) et (10) apparaissent également 'sous la forme des deux C-24-épimères. Si on le désire et pour plus de commodité, la séparation des épimères peut être effectuée à un quelconque de ces stades intermédiaires, et les épimères(24R) et (24S) peuvent être ensuite traités séparément dans les stades restants pour donner la 25-OH-D2 (lla) ou la 25-OH-24-épi-D2 (llb) comme on le désire. Généraement, il est plus commode d'effectuer la séparation des produits finals.

Puisque les mélanges des épimères (24R) et (24S) se produisent quand le fragment de chaîne latérale sulfone Alest racémique, il est également possible, si on le désire, de supprimer la nécessité de séparer les épimères en utilisant la sulfone A optiquement active. Ainsi, l'utilisation de l'épimère(R) de la sulfone A dans le procédé de la présente invention donne spécifiquement la 25-0H-D2 (lIa), tandis que l'utilisation de l'épimère (S) correspondant de la sulfone A donne la 25-OH-24-épi-D2 (llb)ainsi que naturellementtles. produits intermédiaires respectifs sous les formes (24R) ou (24S) pures; l'utilisation de cette sulfone optiquement pure comme matière de départ ne nécessite pas d'autres modifications des stades du procédé.

I1 est également important de noter que la suite exacte des stades entre le 5,7-diène (7) et les produits finals peut être modifiée. Effectivement, il existe trois
séquences synthétiques convenables, toutes impliquants les
mêmes stades,mais dans un ordre différent. Ces séquences
modifiées sont indiquées sur le schéma II, où X1 et X2
sur les forinifles structurelles désignént de l'hydrogène ou
un groupe acyle tel qu'un groupe acétyle, propionyle,
butyryle, benzoyle ou benzoyle substitué.

La première séquence (identifiée par la lettre A sur
le schéma II), conduisant au diène (7A) (qui, lorsque X1=H, correspond au diène (7) du schéma I), aux produits intermédiaires
(8A), (9A), et au produit final (11) présente l'ordre des réactions qui a été mentionné ci-dessus.

Dans une variante, le groupe cétal dans le diène (7A) peut être d'abord hydrolysé (voir séquence B) pour donnerladiène-cétone identifiée par (7B) sur le schéma, qui après irradiation, donne la prévitamine-cétone (8B) et, par isomérisation thermique, conduit ensuite ala vitamine
D2-cétone (10) qui, par une réaction finale de Grignard, donne les 25-OH-D2-épimères (11).

Dans la troisième séquence (C), la 5,7-diène- cétone (7B) est d'abord mise à réagir avec le réactif de
Grignard pour obtenir le produit intermédiaire 25-hydroxylé
(7C) qui,'après irradiation, donne la 25-OH-prévitamine D2 correspondante (aC) ,et 1' isomérisation thermique finale donne les produits 25-OH-D2 (11).

Ainsi, ces trois séquences diffèrent seulement dans l'ordre exact dans lequel les stades spécifiques sont effectués, mais les conditions expérimentales pour chaque stade sont analogues à celles du procédé décrit précédemment, et décrit en détail dans les exemples. Parmi ces trois
séquences, la séquence A est généralement préférée à cause de l'utilité des produits intermédiaires tels que
les produits (9A)et (10) pour la préparation d'autres composés analogues de la vitamine D2 et/ou des dérivés marqués (voir également ci-dessous).

Pour une quelconque de ces séquences, le- 5,7-
diène(7) peut être utilisé comme composé à hydroxyle libre ou sous forme de son C-3-acylate. Selon la séquence réaction nelle ultérieure, on obtiendra les produits 25-OH-D2 terminés sous forme de composés à hydroxy libre ou, si on le désire, sous forme de C-3 acylate ou C-25 acylate ou 3,25-diacylate. Donc, la synthèse selon la séquence A,ou la séquence Bidonnera normalement les produits 25-OH-D2 sous forme de composés à hydroxyle libre puisque la réaction finale de Grignard commune aux deux séquences élimine tout groupe acyle. La séquence C peut etre utilisée pour obtenir les 25-Og"D2- épimères (11) sous forme de composés à hydroxyle libre ou sous forme de 3- mono-acylate ou 25-mono acylate ou 3,25diacylate, selon le produit intermédiaire utilisé. Par exemple, le produit intermédiaire 5,7-diène (7C) indiqué sur le schéma :(I, peut être utilisé comme le dérivé 3-acyle ou 25-acyle ou 3,25-diacyle que l'on peut obtenir à partir du 3,25-diol par réaction avec des réactifs chlorure d'acyle ou anhydride d'acide selon les procédés classiques.

SCHEMA II

SCHEMA III

Ainsi, la réaction du produit intermédiaire 3,25-diol (7C) avec l'anhydride acétique, dans la pyridine, à la température donne le 3-acétate, et le 3,25-diacétate correspondant peut être obtent par acylation ultérieure à température élevée; ce dernier peut être hydrolysé sélec- tivement avec KOH/MeOH diluée, à la température ordinaire, pour donner le 25-mono-acétate La conversion ultérieure d'un quelconque de ces produits intermédiaires acyles dans les stades restants [en -(8C)et (11)] dans le schéma
II donne alors les 25-OH-D2-épimères (11) sous une forme acylée quelconque désirée
Chacun des 25-OH-D2-épimères, la 25-OH-D2 (11a) ou la 25-OH-24-épi-D2 (11b), quand il est obtenu sous les formes à hydroxyle libre , est également acylé convenablement sur le carbone C-3 ou le carbone C-25,ou sur les deux positions, par réaction avec des anhydrides d'acide ou des chlorures d'acyle dans des conditions classiques.

Ainsi, la 25-OH-D2 (-ila) peut être acyle pour donner, par exemple 25-OH-D2-3-acétate, ou le 3,25-diacétate correspondant. Le 3-monoacétate, de la même façon, peut être ensuite acyle sur le carbone C-25 par traitement avec un réactif d' acylation. différent ou,d'une autre façon,le 3,25-diacétate peut être hydrolysé sélectivement par une base douce (KOH/MeOH) pour donner le 25-monoacétate qui, si on le désire, peut être acylé de nouveau avec un groupe acyle différent sur le carbone C-3.En plus de l'anhydride acétique, les agents d'acylation appropriés comprennent les anhydrides propionique , butyrique , pentanoîque ou hexanoïque, ou les chlorures d'acide correspondants, ou bien des agents d'acylation aromatiques tels que le chlorure d'acide benzolque ou les chlorures des acides benzoïques substitués, ou les anhydrides des acides dicarboxyliques tels que les anhydrides su@cinique t glutarique , adipique diglycolique ou les chlorures d'acyle des mono-esters de ces acides dicarboxyliques.

En plus des acylates, les isomères 5,6-trans des 25-OH-D2 et 25-OH-24-épi-D2 sont des composés ayant une grande utilité dans les applications médicales à cause de leur activité considérable analogue à celle de la vitamine D. Ces composés 5,6-trans peuvent être préparés à partir des isomères 5,6-cis (c'est-à-dire ila ou llb)par isorldrisation catalysée par l'iode selon le procédé de Verloop et al. Rec. Trav. Chim. Pays Bas 78 1004 (1969) et les 3- et/ou 25-acylates correspondants peuvent être obtenus de même par l'isomérisation analogue des 5,6-cisacylates ou par acylation des dérives 5,6-trans-25-OH-D2.

Il faut noter également que le produit intermédiaire 25-cEto- (composé(10) sur le schéma I) peut servir comme support pour une préparation appropriez de la 25-OH-D2, ou de son 24-épimère, sous la forme marquée avec des isotopes, notamment en faisant réagir la cétone avec des réactifs de Grignard ou de méthyl-lithium,marqués avec des isotopes, disponibles dans le commerce, pour donner les dérivés de la 25-OH-D2 marqués sur le carbone 26 avec 13C, 14C1 2H ou 3H.

En outre, le dérivé céto-vitamine D (10) sert également comme produit intermédiaire approprié pour la synthèse des composés analogues de la 25-OH-D2 ou ayant la formule (12)

dans laquelle Z1 et =2 sont indépendamment de l'hydrogène
Qu des groupes acyle , et Y est un groupe alkyle autre que méthyle ou un groupe aryle. Ces composés peuvent être préparés en faisant réagir la cétone (10) avec les réactifs alkyliques ou aryliques de Grignard ou d'alkyl-lithium ou d'aryl-lithium, appropriés.Par exemple, le traitement de l'acétone (10)avec le iodure d'éthyl-magnésium donne le produit (12) dans lequel X1=X2=HB et Y=éthyle; de même, le traitement de la cétone (10) avec le bromure d'isopropyl màgnésium ou le bromure de phényl-magnésium donne les congénères 25-OH-D2 correspondants ayant la structure (12) ci-dessus, dans lesquels -Y=isopropyle ou phényle1respecti- vement, et d'autres composés analogues alkyliques ayant la structure (12), par exemple dans lesquels Y est un groupe propyle, butyle, sec.-butyle, isobutyle, pentyle, peuvent être préparés par des réactions analogues.L'acylation de ces produits par les procédés indiqués ci-dessus, donne les C-3-ou C-25-0-acylatesou 3,25-di-O-acylates, et l'isomé- rization de la double liaison 5,6 selon le procédé de verloop et colt. cité ci-dessus, donne les isomères trans5,6 des composés ayant la structure (12) et/ou de leurs acylates.

Puisque les composés,dans lesquels Y est un homologue supérieur du groupe méthyle, sont généralement plus lipo- philes, les composés analogues alkyliques-ou aryliques représentés par la structure (12) ci-dessus ou leurs isomères trans-5,6, sont attendus pour être utiles dans des application soù un plus grand degré d'affinité pour les graisses est désiré.

Le fragment de chaîne latérale, sulfone A, nécessaire peut être lui-même- préparé selon le procédé indiqué sur le schéma III. Cette synthèse directe implique,comme premier stade, la réaction de la 4-hydroxy-3-méthyl-butan-2-one disponible dans le commerce avec du chlorure de p-toluènesulfonyle pour former l'ester toluène-sulfonyle correspondant. Ce produit est ensuite traité avec le th.iophenol en présence d'une base (par exemple t-butylate de potassium) ce qui déplace le groupe toluene-sulfonyle et forme le phényl-thio-éther correspondant. Dans le stade suivant, le groupe cétone est protégé sous la forme de l'ethylene- cétal par réaction avec l'éthylèneqlycol, en catalyse acide, en utilisant des conditions classiques. L'oxydation de ce produit avec un peracide (par exemple l'acide per benzoSque ou l'acide m-chloroperbenzolque ) en solution dans un hydrocarbure (par exemple CH2C12) donne ensuite la sulfone A désirée.

Si on désire la sulfone A sous sa forme optiquement active, c'est-à-dire sous la forme de l'épimère (R) ou (S) pur , on utilise convenablement des matieres de départ optiquement actives, par exemple 1'éthylène-cétal de la (3R) -4-hydroxy-3-méthylbutan-2-one ou 1 'éthylène-cétal de la (3S)-4-hydroxy-3-méthylbutan-2-one. Chacun de ces éthylène-cétal est ensuite traité dans les stades du schéma
III pour donner en partant du cétal (R), l'énantiomère (S) de la sulfone A, et en partant du cétal (S), l'énantiomère (R) de la sulfone A.Les matières de départ cétal (R) et cétal (S) sont elles-mêmes obtenues convenablement à partir de l'cC-méthylaceto-acetate d'éthyle (2-méthyl-3-oxo butonated'éthyle) racémique disponible dans le commerce, de la façon suivante : l'ester cétonique est converti en l'ester éthylène-cétal par réaction avec l'éthylèneglycol en catalyse acide en utilisant des procédés classiques, et la fonction ester est ensuite réduite (LiAlH4 dans 1' éther) pour donner le cétal-alcool(2,2-éthylènedioxy-3méthylbutane-4-ol). La résolution du mélange racémique peut être réalisée par conversion d'un mélange de diastéréomères(par réaction de la fonction alcool avec un agent d'acylation optiquement actif)aui sont ensuite séparés.

Par exemple, l'alcool peut être converti en le dérivé α-méthoxy-α-trifluorométhylphénylacétyle correspondant (ou en acylate optiquement actif similaire) par réaction en solution dans la pyridine avec le chlorure de l'acide α-méthoxy-α-trifluorométhyl-phénylacétique optiquement actif (+) (selon le procédé par exemple de Dale et autres
J. Org. Chem 34,2543 (1961); Eguchiet autres,Proc. Natl.

Acad. Sci. USA 78, 6579 (1981)); ce mélange de dérivés acylés diastéréoisomères est alors séparable par la
HPLC ou par des méthodes chromatographiques similaires en ses deux constituants, à savoir l'acylate de l'énantio- mère (R) et l'acylate de l'énantiomère (S). L'élimination du groupe acyle dans chaque composé par l'hydrolyse avec une base dans des conditions standards, donne ensuite 1' éthylène-cétal de la (3R)-4-hydroxy-3-méthylbutan-2-one et 1' éthylène-cétal de la (3)-4-hydroxy-3-méthylbutan.2- one, qui sont ensuite traités séparément pour avoir les énantiomères respectifs de sulfoneA comme décrit ci-dessus.

Si on le désire, les produits intermédiaires hydroxybutanone optiquement actifs désirés , c'est-à-dire la (3R)-4-hydroxy-3-méthvlbutan-2-one et la (3S)-4-hydroxy3-méthylbutan-2-one peuvent également être préparées en partant de substrats optiquement actifsd'origine naturelle.Ainsi, en faisant réagir l'acide (S)-3-hydroxy2-méthylpropanolque (acide -hydroxyisobutyrique) connu avec le méthyl-lithium,on obtient la (3S)-4-hydroxy-2- méthvlbutan-2-one; et la (3R)-hydroxybutanone correspondante peut être préparée en partant du même acide (S)hydroxy-isobutyrique par transposition de fonctionnalité, c'est-à-dire en élaborant le groupe hydroxymëthyle en une fonction méthylcétone, et en réduisant la fonction acide en fonction alcool selon les procédés classiques connus.

La présente invention est illustrée par les exemples descriptifs et non limitatifs ci-après dans laquelle les numéros désignant des produits spécifiques (par exemple composés (1), (2), (3), etc. dans les exemples 1 à 12, ou composés (7A), (8B), (8C), etc. dans les exemples 13 et 14), se rapportent aux structures numérotées sur les schémas I et Il.

Exemple 1
Le C-22 aldéhyde (1) est obtenu par dégradation de l'acétate d'ergostérol (dans lequel le système diène du noyau-B a été protégé par l'addition de Diels-Alder de la 4-phényl-1,2,4-triazoline-3,5-dione) selon le procédé de
Barton et al. (voir ci-dessus). Le i-éther aldéhyde (4) est obtenu à partir du stigmastérol par la méthode du brevet US 2 623 052.

Exemple 2
Synthèse du fragment de chaîne latérale (sulfone A)
A une solution agitée de 4-hydroxy-3-méthylbutan-2one (12,75 g; 0,125 mole), est ajouté du chlorure de p toluènesulfonyle (p-TsCl) (33,25 g, 0,175 mole) par portion, et après un repos de 14 heures à la température ordinaire, le mélange réactionnel est versé dans l'eau et extrait avec CH2Cl2 .- L'extrait est lavé plusieurs fois avec une solution aqueuse de CuSO4 et de l'eau puis séche sur du sulfate de sodium anhydre. L'élimination du solvant sous pression réduite donne 1e tosylate brut -qui est utilisé directement pour la réaction suivante.

Du thiophénol (14 g) dissous dans le DMF -(100 ml) est traité avec du t-BuOR (14 g). On ajoute le tosylate à ce réactif et après 12 heures à la température ordinaire, le mélange réactionnel est versé dans l'eau et extrait avec CH2C12. L'extrait est lavé avec une solution aqueuse de
Na2C03 et de l'eau puis séché. L'évaporation du solvant donne un résidu huileux qu'on purifie par chromatographie sur une colonne de gel de silice. Le dérivé phénylsulfure est élué avec du benzène (obtenu 15 g).

A ce dérivé phénylsulfure (15 g), dans le benzène (100 ml), on ajoute de l'éthylèneglycol (6g) et du p-TsOH (20 mg) et on chauffe le mélange réactionnel dans un appareil muni d'un piège de Dean-Stark pendant 3 heures. Après refroidissement, le mélange est extrait avec une solution de Na2C03 et de l'eau puis séché et le solvant est évaporé.

Le produit, le cétal désiré, est homogène d'après l'analyse chromatographique et peut être utilisé dans le stade suivant sans purification ultérieure.

Le cétal brut en solution dans du dichlorométhane (250 ml) est traité avec l'-acide m-chloroperbenzoïque (m-CPBA) (80-85%, 27 g, ajoutés par portions) tout en maintenant la température du mélange réactionnel inférieure à 300C. Après l'addition du réactif, on lasse la réaction se dérouler à la température ordinaire .en secouant de temps à autres. Une fois la réaction terminée (enViron 1,5heure), les acides aromatiques sont éliminés par extraction avec
NH3 aqueux, et la couche organique est lavée avec de l'eau et séchée. L'évaporation du solvant donne la sulfone huileuse (sulfone A) avec un rendement essentiellement quantitatif (19 g).Le produit est sensiblement pur (il est homogène d'après la chromatographie en couche mince (TLC)) et peut être utilisé sans aucune purification ultérieure; H-RMN ;j; 1,18 (d, J = 7 Hz, 3H, CH3-CH-), 1,19 (s, 3H, CH3-C-), 3,84 (m, 4H, cétal-H), 7,3-7,6- et 7,6-7,9 (m, 3H + 2H, protons aromatiques); IR,S KBr : 1305,
-l max 1147, 1082 cm ; spectre de masse,m/z ( intensité relative): 255 (M±Me, 21), 184 (66), 87 (92), 43 (100).

Exemple 3
Couplage de la sulfone A avec l'aldéhyde (1)
hydroxysulfone (2) et oléfine (3)
réactif de Grignard est préparé à partir de Mg (535 mg; 22,22 mmoles) et de bromure d'éthyle dans l'éther (10 nl) et la solution agitée énergiquement est traitée avec la sulfone A (6 g; 2,22 mmoles) dans le benzène (6 ml).

Le précipité formé est broyé avec une spatule,l'agitation est poursuivie et après 15 minutes, l'aldéhyde (1) (2 g) est ajouté dans le benzène (10 ml). Le mélange réactionnel est agité à la température ordinaire pendant 24 heures puis versé dans une solution aqueuse de (NH4)2S04 et extrait avec du benzène. La couche organique après lavage à l'eau, séchage et évaporation, donne un résidu huileux qui est chromatographié sur gel de silice. Dans les fractions benzène-éther (8:2), on récupère la sulfone en excès (4,5 g); l'élution avec le mélange benzène-éther (3:1) donne l'aldéhyde (1)qui n'a pas réagi (1 g); les produits de réaction (2) sont élués avec l'acétate d'éthyle.

Le mélange brut d'QG-hydroxysulfones stéroldales (2) est dissous dans le méthanol (200 ml) saturé avec
Na2HP04. L'amalgame de sodium (5,65, 15 g) est ajouté et le mélange réactionnel est agité à 40C pendant 15 heures.

Une fois la réduction avec Na/Hg terminée, le mercure est séparé par filtration et le méthanol est éliminé par évaporation sous pression réduite, de l'eau est ajoutée et la matière organique est extraite avec du benzène. Après séchage et évaporation du solvant, le résidu huileux est chromatographié sur une colonne de gel de silice. L'élution
avec un mélange benzene-éther (1:4) donne le composé (3)
sous forme d'une mousse incolore; RMN-1H, : 0,80 (s, 18-H),
0,97 (s, 19-H), 1,22 (s, 26-H), 3,93 (m, 4H, cétal-H),
4,44 (m, 1H, 3 -H), 5,25-5,45 (m, 2H, 22-H et 23-H), 6,23
et 6,39 (doublets, J = 8 Hz, 2 x 1H, 7-H et 6-H), 7,25-7,45
(m, 5H, -C6H5);IR, # CHC13 : 3603 (O-H), 1749, 1692 (C=O)
1406,1038 CM-1 ; spectre de masse, m/z : 440 (M+ -triazoline,
24), 87 (100).

(Pour augmenter le rendement, l'aldéhyde (1) qui
n'a pas réagi tel que recueilli ci-dessus, peut être
recyclé tar l'addition de la sulfone et lesct-hydroxy-
sulfone (2)résultantes sont ensuite traitées comme ci-dessus
avec l'amalgame de sodium dans le méthanol tamponné pour
donner encore de l'oléfine (3). Les réactions ci-dessus
sont effectuées de préférence sous une atmosphère inerte
telle. que l'argon)-.

Exemple 4
Couplage de la sulfone A avec-l'aldéhyde (4)
Hydroxosulfone (5) et oléfine (6)
Le réactif de Grignard est préparé à partir de
Mg (75 mg, 3,1 mmole) et de bromure d'éthyle dans l'éther
(10 ml). A la solution agitée de bromure d'éthyle magnésium,
on ajoute la sulfone A (891 mg; 3,3 mmoles) dans le benzène
(5 ml). Après agitation. de la suspension résultante à la
température ordinaire pendant 15 minutes, une solution
d'aldéhyde (4) (290 mg) dans le benzène (5 ml) est ajoutée.

La réaction est poursuivie pendant 2,5 heures puis arrêtée
brutalement avec une solution saturée de (NH4)2S04 (5 ml)
et diluee avec de l'éther. La couche organique séparée
est lavée avec de l'eau, séchée et évaporée. Le résidu
huileux contenant le produit (5) est traité avec l'anhydride
acétique (2 ml) et la pyridine (2 ml). Le mélange réaction
nel est laissé au repos pendant 24 heures, versé dans de l'eau
et extrait avec du benzène. L'extrait benzénique est lavé
avec une solution aqueuse de CuSO4, de l'eau, séché et évaporé.

Le produit brut (l'acétate du produit (5) est dissous dans du méthanol saturé avec Na2HPO4 et del'amalgame de sodium (5,65%, 8 g) est ajouté. Le mélange réactionnel est agité à 40C pendant 16 heures. Après la réaction, le mercure est séparé par filtration, le méthanol est évaporé et de l'eau et du benzène sont ajoutés pour dissoudre le résidu. La couche benzénique est séchée et évaporée. Le résidu huileux est chromatographié sur du gel de silice.L'élution avec un mélange benzène-éther (98,7) donne le composé (6) (206 mg; 54%), RMN-1H, #: 0,74 (s, 18-H), 1,04 (S, 19-H), 1,25 (s, 26-H), 2,78 (m, 1H, 6 -H), 3,34 (s, 3H, -OCH3), 3,97 (m, 4H, cétal-H), 5,25-5,45 (m, 2H, 22-H et 23-H), IR, #KBr max 3470 (O-H), 1095 cm - ; spectre de masse, m/z (intensité relative) : 456 (M+,1), 441 (M±Me, 45), 87(100). I1 faut noter que le stade d'acétylation décrit ci-dessus n'est pas essentiel et peut être supprimé si on le désire; c'est-àdire que l'hydroxysulfone (5) peut être soumise directement à la réduction par Na/Hg comme dans l'exemple 3. Les réactions ci-dessus sont effectuées de préférence sous atmosphère inerte, par exemple l'argon.

Exemple 5
Elimination du groupe protecteur PTAD: -5,7-diène(7)
Un mélange du composé (3) (lg) et d'hydrure de lithium-aluminium (1,8 g) dans le THF (120 ml) est chauffé au reflux pendant 10 heures. Après refroidissement, le réactif en excès est détruit avec quelques gouttes d'eau et le mélange est seche sur MgS04 anhydre, et le solvant est évaporé pour donner une matière cristalline incolore. Le diène 7 brut est recristallisé Qbe l'éthanol, la première et la seconde récolte combinées donnent 415 mg du produit (7). La liqueur mère est chromatographiée sur une colonne de gel de silice pour donner avec un mélange benzène-éther (7:3) encore 120 mg du produit (7); rendement total 535 mg (79%); p.f. 132-1340C (recristallisé dans l'éthanol), RMN-1H, #:0,63 (s, 18-H), 0,95 (s, 19-~), 1,23 (s, 26-H), 3,63 (m, 1H, 3-H), 3,95 (m, 4H, cétal-H), 5,20-5,50 (m, 3H, 22-, 23-H et 7-H), 5,57- (m, 1H, 6-H); IR, # KBr max : 3430(0-H), #l 1063, 1038 cm ; spectre de masse, m/z (int. rel.):440 50) 407 (M±H2O-Me, 11), 87 (100); UV,#E@OH max : 282 nm 11 000).

Exemple 6
Irradiation du composé (7) :Analoque de prévitamine(8)
Une solution de diène (7) (50 mg) dans 150 ml d'un mélange bénzène-éther (1:4) est refroidie sur de la glace et désoxygénée avec de l'argon pendant 20 minutes. Le mélange réactionnel est irradie sous atmosphère d'argon pendant 18 minutes avec une lampe à arc à vapeur de mercure ("Hanovia SA-1") équipée d'un filtre "Vycor".Le solvant est évaporé et le résidu est chromatographié par HPLC [6,2 mm x 25 cm de gel de silice microparticulaire, 4 ml/min, 1400 psi[98 bars0) et élué avec 2% de 2-propanol dans l'hexane pour donner 22 mg (44%) de prévitamine (8); RMN-1H:#:0,73 (s, 18-H), 1,24 (s, 26-H), 1,64 (s, 19-H), 3,96 (m, 5H, cétal-H et 3-H), 5,35 (m, 2H, 22-H et 23-H), 5,60 (m, 1H, 9-H), 5,69 et 5,94 (doublets, J = 11,5 Hz, 2 x 1H, 6-H et 7-H); UV, # EtOH max : 263 nm (#= 8 900).

Exemple 7
Isomérisation du composé (8) en dérivé analogue
de vitamine (9)
La prévitamine 8 (22 mg) est dissoute dans l'méthanol (40 ml) et chauffée au reflux pendant 150 minutes (atmosphère d'argon). Le produit est purifié par HPLC pour donner 18 mg (82%) de la vitamine (9) pure; 0,75 (s, 18-H), 1,24 (s, 26-H), 3,94 (m, 5H, cétal-H et 3 -H), 4,81 et 5,04 (2 étroit m, 2 x 1H, 19 19(Z)- et 19(E)-H), 5,33 (m, 2H, 22-H et 23-H), 6,03 (d, J=ll Hz, 1H, 7-H), 6,22 (d, J= 11 Hz, 1H, 6-H); spectre de masse, m/z (int. rel.):440 (M+, 17), 87 (100), UV,#EtOH max : 265 nm (# = = 17 000).

Exemple e
Hydrolyse du cétal : produit analogue-de céto
vitamine D2(10)
On ajoute à la solution du composé (9) (18 mg) dans l'méthanol (35 ml), de l'acide p-toluènesulfonique (7,5 mg) dans l'eau (1 ml et le mélange réactionnel est chauffé au reflux pendant 90 minutes (le cours de la réaction est contrôlé par HPLC). Le solvant est évaporé, le résidu est dissous dans le benzène et extrait avec de l'eau.La solution benzénique est séchée (MgSO4 anhydre), et évaporée pour donner le produit (10) (16 mg; 99%). RMN-1H, : 0,57 (s, 18-H), 1,04 (d,J = 7 Ez, 21-H), 1,13 (d, J = 7 Hz, 28-H), 2,12 (s, 3H, 26-H), 3,10 (m, 1H, 24-H), 3,96 (m, 1H, 3 -H), 4,82 et 5,05 (2 étroit m, 2 x 1 H, l9(Z)- et 19 19(E) -
H), 5,2-5,5 (m, 2H, 22-H et 23-H), 6,03 (d, J = 11,5 Hz, 1H, 7-H), 6,22 (d, J = 11,5, 1H, 6-H), IR, # CHCl3 max : 3596 (O=H), 1709 cm-1 (C=O); spectre de masse, m/z (int. rel.): 396 (M+, 41), 363 (M±H2O-Me, 13), 271 (M±chaîne latérale, 16), 253 (m±chaîne latérale -H2O, 23), 136 (100), 118 (95);UV, # EtOH @@@ : 265 nm (#=(7 900)
max
Exemple 9
Réaction de la cétone (10) avec l' iodure de méthylmagnésium : 25-OH-D, (lia), et son épimère (llb).

Le réactif de Grignard est préparé à partir du magnésium (240 mg)et a 1' iodure de méthyle dans l'éther anhydre (20 ml). A un dixième de cette solution, (2 ml; solution 0,5 M de CH3MgI) la cétone (10) (16 mg; 0,04 mmole) dans l'éther (2 ml) est ajout-ée. Le mélange réactionnel est agité à la température ordinaire pendant 2 heures sous une atmosphère inerte, puis la réaction est arrêtée brutalement avec une solution aqueuse de NH4Cl, et le mélange est dilué avec du benzène et lavé avec de l'eau. La couche organique est séparée, séchée et évaporée.Le produit brut est d'abord purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice (élution avec 20% d'éther dans le benzène) et le mélange des composés (11a) et (11b) (16 mg; 96%) ainsi obtenu est ensuite chromatographié à maintes reprises sur une colonne par HPLC en utilisant 2% de 2-propanol dans l'hexane comme éluant pour séparer les stéréo-isomères-24, la 24-épi-25-OH-D2 (11b) et la 25-OH-D2 (11a). La chromatographie et la chromatographie répétée de chaque stéréoisomère donnent 4 mg de (11b) (recueilli à 68 ml) 4 mg de (11a) (recueilli à 74 ml) et 7 mg du mélange des deux épimères. Le traitement de 2 mg du mélange d'épimère avec l'anhydride acétique en.excès en solution dans la pyridine à la température ordinaire et pendant toute une nuit suivi par un travail classique donne les 3-0-acétates correspondants.

25-OH-D2 (11a): [α]25 D + 56,8 (C = 0,2 dans EtOH);
RMN-1H # : 0,57 (s, 18-H), 1,00 (d, J = 7 Hz, 28-H), 1,04 (d, J = 7 Hz, 21-H), 1,15 et 1,17 (2 singulets, 26-H et 27-H), 3,95 (m, 1H, 3 -H), 4,82 et 5,05 (2 étroit m, 2 x 1H, 19(Z)- et 19(E)-H), 5,23-5,43 (m, 2H, 22-H et 23-H), 6,05 et 6,22 (2 doublets, J= 11 Hz, 2 x 1H, 7-H et 6-H);
IR, #KRb max : 3401 (O-H), 1645, 1631 (C=C), 971 cm-1 (trans
C=C); spectre de masse m/z (int. rel.): 412 (M+, 63), 394 (M±H2O, 10), 379 (M±H2O-Me, 23), 271 (M±chaîne latérale, 37), 253 (M -chaîne latérale H20, 43), 136 (100), 118 (86), 59 (99), UV,r EtOH : 265 nm (# = 17 950).

max
24-epi-25-OH-D2 (lob) :[α] D5+ 50,7 (C = 0,2 dans
EtOH), RMN-1H, # : 0,57 (s, 18-H), 0,99 (d, J = 7 Hz, 28-H), 1,03 (d, J = 7 Hz, 21-H), 1,14 et 1,16 (2 singulets, 26-H et 27-H), 3,94 (m, 1H, 3 -H), 4,82 et 5,03 (2 étroit m, 2 x 1H, 19 (Z)-et 19(E)-H), 5,20-5,40 (m, 2-H, 22-@ et 23-H), 6,04 et 6,22 (2 doublets, J = 11 Hz, 2 x 1H, 7-H et 6-H), IR,
#KBr max : 3401 (OH), 1643, 1630 (C=C), 971 cm-1 (trans C=C); spectre de masse, m/z (int. rel.): 412 (M+, 62) 394 (M±H2O; 12), 379 (M±H2O-Me, 31), 271 (M±chaîne latérale, 44), 253 (M±chaîne latérale, H2O, 55), 136 (100), 118 (67), 59 (38); UV #EtOH max : 265 nm (# = 17 300).

I1 faut noter qu.'à partir de la provitamine (7) pure, d'autres synthèses (c'est-à-dire les stades d'irradiation, d'isomérisation, de décétalisation et de la réaction Grignard) peuvent être effectuées sans purification chromatographique d'aucun produit intermédiaire. Une chromatographie minutieuse sur colonne de gel de silice avant la séparation finale par HPLC élimine tous les sousproduits.

En faisant réagir la 25-OH-D2 (lla) avec chacun des réactifs d'acylation suivants : anhydride acétique, anhydride propionique, chlorure de benzoyle et anhydride succinique, dans les conditions classiques, on obtient respectivement
le 25-OH-D2-3-acétate
le 25-OH-D2-3-,25-diacetate
le 25-OH-D2-3-propionate
le 25-OH-D2-3,25-dipropionate
le 25-OH-D2-3-benzoate
le 25-OH-D2-3,25-dibenzoate
le 25-OH-D2-3-hémisuccinate.

En faisant réagir la 25-OH-24-épi-D2 (llb) avec respectivement l'anhydride acétique, le chlorure de benzoyle, et l'anhydride diglycolique, dans des conditions classiques, on obtient respectivement
le 25-OH-24-épi-D2-3,25-diacétate
le 25-OH-24-épi-D2-3-benzoate
le 25-OH-24-épi-D2-3-hémidiglycolate.

Exemple 10
En couplant l'aldéhyde (1) avec la sulfone A (R) optiquement active ayant la structure

puis en réduisant avec Na/Hg le produit selon les conditions de l'expérience décrite dans l'exemple 3 , on obtient un composé (3), ayant la configuration(245) dans la chaîne latérale comme le montre la structure

et en traitant ce produit aVec LiAlH4 selon les conditions de l'exemple 5, on obtient le 5.,7-diène (7) ayant la configuration (24S) dans la chaîne latérale, en irradiant ce produit puis en l'isomérisant thermiquement selon les conditions des exemples 6 et 7, on obtient successivement le composé prévitamine D (8) et le composé vitamine D (9) ayant la configuration (24S). L'hydrolyse du composé (9) ainsi obtenu selon les conditions de l'exemple 8, donne le composé (24S)-cétovitamine D (10) et à partir de ce produit par une réaction de Grignard, selon l'exemple 9, on obtient la 25-OH-D2 (structure(11a) aur le schéma I).

Exemple 11
En utilisant la sulfone A (S) optiquement active ayant la structure

dans la réaction décrite dans l'exemple 3, on obtient le composé (3), ayant la structure (2-4 R) dans la chaîne latérale comme indiqué cides?ous

et la réduction de ce produit selon les condition de l'exemple 5 donne le 5,7-diène (7) ayant la configuration (24R). L'irradiation du composé (2^4R)-(7) selon l'exemple 6 donne l'analogue de prévitamine D (8) avec la configu ration (24R) puis l'isomérisation thermique selon les conditions de l'exemple 7, donne le composé vitamine D (9) ayant une channe latérale de configuration (24R).

L'hydrolyse du cétal selon les conditions de l'exemple 8, donne la (24R)-25-cétovitaine D (10), et en faisant réagir ce produit avec un réactif méthylique de C-rignard selon la condition de l'exemple 9, on obtient la 25-hydroxy24-epi-vitamine D2 (structure llb, sur le schéma I).

Exemple 12
Préparation des omposés- trans-5,6
Le 25-OH-D2 (composé 11a) est dissout dans l'éther contenant une goutte de pyridine et traitée avec une solution d'iode dans l'hexane (environ 0,5 mg/ml) pendant 15 minutes.

L'addition d'une solution aqueuse de thiosulfate de sodium, la séparation de la phase organique et l'évaporation du solvant, donne un résidu à partir duquel la 25-hydroxy-5,6trans-vitamine D2 désirée est isolée par HPLC en utilisant une colonne de gel de silice microparticulaire et 2% de 2-propanol dans l'hexane comme éluant.

Par le même procédé, on obtient à partir de la 25-hydroxy-24-épi-D2 l'isomère trans-correspondant, à savoir la 25-hydroxy-5,6-trans-24-épi-D2.

A partir du 25-OH-D2-3-acétate, on obtient le 25-OH-5,6-trans-D2-3-acétate et à partir du 25-OH-24-épi-D2 3-acétate, on obtient le 25-OH-5,6-trans-24-épi-D2-3-acétate en appliquant le procédé d'isomérisation ci-dessus.

L'acylation de la 25-OH-5,6--trans-D2 ou de la 25-OH-5,6-trans-24-épi-D2 dans des conditions classiques donne des acylates respectifs tels que
25-OH-S, 6-trans-D2-3-acétate
25-OH-5,6-trans-D2-3,25-diacétate
25-OH-5,6-trans-D2-3-benzoate
25-OH-5,6-trans-D2-3-acétate-25-benzoate
25-OH-5,6-trans-24-épi-D2-3-acétate 25-OH-5,6-trans-24-épi-D2-3,25-dibenzoate.

Exemple 13.

L'hydrolyse du 5,7-diène-25-cétal (composé (7A), où -x1=H) en utilisant les conditions décrites dans l'exemple 8 donne la 3 A-hydroxxt-24-méthyl-27-norcholesta-5,7,22-trian- 25-one (composé 7E, où X1=H). L'irradiation de ce produit dans des conditions analogues à celles de l'exemple 6 donne l'analogue 25-céto-prévitamine D2 caractérisé par la structure (8B) où X1=H. Le chauffage du composé (8B) dans une solution éthanolique selon les conditions de l'exemple 7 donne le produit 25-céto-vitamine D2 (composé 10, où X1=H).

Exemple 14
La réaction de la 3 -hydroxy-2-4-méthyl-27-nor- cholesta-5,7,22-trièn-25-one (composé (7B) où X1=H), telle qu'obtenue dans l'exemple 13 avec le bromure de méthylmagnésium selon les conditions de l'exemple 9 donne le 24-méthylcholesta-5,7,22-triène-3 ft,25-diol (composé (7C) où X1=X2=H). L'irradiation de ce produit selon les conditions de l'exemple 6 donne le produit 25-hydroxy-prévitamine
D2 caractérisé par la structure (8C, où X1=X2=H). L'isomérisation thermique de cette prévitamine en utilisant les conditions de l'exemple 7 donne le composé 25-hydroxyvitamine
D2 (11; où X1=X2=H).

Le traitement du 24-méthylcholesta-5,7,22-triène- 3 #,25-diol-3,25-diacétate (composé 7C, Xl=X2=acétyle) dans les stades réactionnels impliquant l'irradiation et l'isomérisation thermique selon les conditions des exemples 6 et 7 respectivement, donne les épimères 25-OH-D2 - 3,25-diacétate (composé 11), où X1=X2=acétyle).

Exemple 15
En utilisant les conditions analogues à celles de l'exemple 9, Mg est mis à réagir avec les halogénures suivants
iodure d'-éthyle; iodure de propyle; bromure d'isopropyle; bromure de butyle; iodure de s-ec.-butyle; iodure d'isobutyle; iodure depentyle,et bromure de phényle,
pour obtenir les réactifs de Grignard correspondants.

En faisant réagir chacun de ces réactifs avec la cétone (10) selon des procédés analogues à ceux de l'exemple 9, on obtient respectivement les produits suivants
composé (12) où X1=X2=H, Y=éthyle
composé (12) où X1=X2=H, Y=propyle
composé (12) où X1=X2=H, Y=isopropyle
composé (-12) où X1=X2=H, Y=butyle
composé -(12) où X1=X2=H, Y=sec.-butyle
composé (12) où X1=X2=H, Y=isobutyle
composé (12) où X1=X2=H, Y=pentyle
composé (12) où X1=X2=H, Y=phényle
En faisant réagir la cétone (10) avec des réactif s méthyliques de Grignard marqués par des isotopes, à savoir
13CH3MgI, 14CH3MgI, C2H3MgI, C3H3MgI, dans des conditions analogues à celles de-l'exemple 9, on obtient respectivement les produits suivants
composé (12) où Y = 13CH3, X1=X2=H
composé (12) où Y = 14CH3, X1=X2=H
composé (12) où Y = C2H3, X1=C3=H
3
composé (12) où Y = C H3, X1=X2=H caractérisés par la substitution isotopique dans le groupe méthyle du carbone 26 de la molécule.

Claims

REVENDICATIONS

1. Procédé de préparation d'un composé ayant la formule

dans laquelle X1 et X2 sont chacun indépendamment de l'hydrogène ou un groupe acyle, et Y est un groupe alkyle ou rayle, procédé qui est caractérisé par le fait qu'il consiste à soumettre un 5,7-diène stéroïde ayant la formule

aux stades suivants (a) irradiation avec la lumière ultraviolette pour obtenir la prévitamine D correspondante, (b) isomérisation de la prévitamine D dans un solvant inerte à une température allant d'environ la température ordinaire à environ 100 C, pour obtenir ainsi un composé ayant la formule

(c) hydrolyse catalysée par un acide pour éliminer le groupe protecteur cétal, et (d) alkylation de la cétone débarrassée du groupe protecteur avec un réactif ayant la formule YXg-Hal ou YLi, dans laquelle Y est un groupe alkyle ou aryle et Hal représente le chlore, le brome ou l'iode, et éventuellement, dans un ordre quelconque à condition que le stade (a) précède le stade (b), et que le stade (c) précède le stade (d).

(e) acylation de l'un ou des deux groupes hydroxyle libres.

2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que X1 et X2 sont de l'hydrogène et

Y est un groupe méthyle.

3. Procédé selon les revendications 1 ou 2, caractérisé par le fait que le stade (c) précède le stade (a) qui est suivi du stades (b) et du stade Coca) successivement.

4. Procédé selon les revendications 1 ou 2, caractérisé par le fait que les stades (c) et (d) précèdent les stades (a) et (b).

5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé par le fait que le 5,7-diène- stéroide est un épimère simple.

6. Composé caractérisé par le fait qu'il a la formule

dans laquelle N est un noyau stéroïde ayant la formule :

ou la formule

dans laquelle

représente une simple liaison ou une double liaison, dont la ou les double liaisons sont protégées et

X1 est de l'hydrogène ou un groupe acyle.

7. Composé selon la revendication 6, caractérisé par le fait que N a la formule

8. Composé caractérisé par le fait qu'il a la formule

dans laquelle X1 est de l'hydrogène ou un groupe acyle et

R est un groupe

est un groupe alkyle ou aryle.

dans lesquels X2 est de l'hydrogène ou un groupe acyle et Y

9. Composé selon la revendication 8, caractérisé

par le fait que X1 et X2 sont de l'hydrogène ou des groupes

acétyle et Y est le groupe méthyle.

10. Composé caractérisé par le fait qu'il a la formule

dans laquelle X1 est de l'hydrogène ou un groupe acyle et

R a les définitions données dans la revendication 8.

11. Composé selon la revendication 10, caractérisé par le fait que X1 et X2 sont de l'hydrogène ou des groupes acétyle et Y est le groupe méthyle.

12. Composé caractérisé par le fait qu'il a la formule

dans laquelle X1 est de l'hydrogène ou un groupe acyle et R a la définition donnée dans la revendication 8, à condition que quand Y est un groupe méthyle, X1 et X2 ne peuvent pas être tous les deux de l'hydrogène.

13. Composé selon-la revendication 12, caractérisé par le fait que R est le groupe

et X1 est de l'hydrogène, un groupe acétyle ou benzoyle.

14. Composé selon la revendication 12, caractérisé par le fait que R est le groupe

et X1 est de l'hydrogène, un groupe acétyle ou benzoyle.

15. Composé selon la revendication 12, caractérisé par le fait que R est le groupe

16. Composé selon la revendication 15, caractérisé par le fait que X1 est un groupe acétyle, benzoyle, succinyle, ou diglycolyle, X2 est de l'hydrogène, un groupe acétyle, benzoyle, succinyle ou diglyeoyle et Y est le groupe méthyle.

17. Composé selon la revendication 16, caractérisé par le fait que X1 et X2 sont de l'hydrogène et Y est un groupe méthyle, marqué par un isotope.

18. Compose selon la revendication 17, caractérisé par le fait que Y est 13CH3, 14CH3, C2H3 et C3H3

19. Composé caractérisé par le fait qu'il a la formule

dans laquelle X1 et X2 qui peuvent etre identiques ou différents, sont de l'hydrogène on des groupes acyle et Y est un groupe alkyle ou aryle.

20. Composé selon la revendication 19, caractérisé par le fait que X1 et X2 sont de l'hydrogène et Y est le groupe méthyle.

21. Composé selon l'une quelconque des revendications 6 à 20, caractérisé par le fait que le centre asymétrique au carbone 24 a la configuration (R).

22. Composé selon l'une quelconque des revendications 6 à 20, caractérisé par le fait que le centre asymétrique au carbone 24 a la-configuration (S)..