DE2638764A1 - Verfahren zum abtrennen von proteinen - Google Patents
Verfahren zum abtrennen von proteinenInfo
- Publication number
- DE2638764A1 DE2638764A1 DE19762638764 DE2638764A DE2638764A1 DE 2638764 A1 DE2638764 A1 DE 2638764A1 DE 19762638764 DE19762638764 DE 19762638764 DE 2638764 A DE2638764 A DE 2638764A DE 2638764 A1 DE2638764 A1 DE 2638764A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- solution
- exchange resin
- proteins
- acid
- groups
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2462—Lysozyme (3.2.1.17)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
- A23C9/146—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by ion-exchange
- A23C9/1465—Chromatographic separation of protein or lactose fraction; Adsorption of protein or lactose fraction followed by elution
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/001—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from waste materials, e.g. kitchen waste
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/08—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from eggs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/16—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from waste water of starch-manufacturing plant or like wastes
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J47/00—Ion-exchange processes in general; Apparatus therefor
- B01J47/014—Ion-exchange processes in general; Apparatus therefor in which the adsorbent properties of the ion-exchanger are involved, e.g. recovery of proteins or other high-molecular compounds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J47/00—Ion-exchange processes in general; Apparatus therefor
- B01J47/016—Modification or after-treatment of ion-exchangers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
- C07K16/065—Purification, fragmentation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12H—PASTEURISATION, STERILISATION, PRESERVATION, PURIFICATION, CLARIFICATION OR AGEING OF ALCOHOLIC BEVERAGES; METHODS FOR ALTERING THE ALCOHOL CONTENT OF FERMENTED SOLUTIONS OR ALCOHOLIC BEVERAGES
- C12H1/00—Pasteurisation, sterilisation, preservation, purification, clarification, or ageing of alcoholic beverages
- C12H1/02—Pasteurisation, sterilisation, preservation, purification, clarification, or ageing of alcoholic beverages combined with removal of precipitate or added materials, e.g. adsorption material
- C12H1/04—Pasteurisation, sterilisation, preservation, purification, clarification, or ageing of alcoholic beverages combined with removal of precipitate or added materials, e.g. adsorption material with the aid of ion-exchange material or inert clarification material, e.g. adsorption material
- C12H1/0432—Pasteurisation, sterilisation, preservation, purification, clarification, or ageing of alcoholic beverages combined with removal of precipitate or added materials, e.g. adsorption material with the aid of ion-exchange material or inert clarification material, e.g. adsorption material with the aid of ion-exchange material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S526/00—Synthetic resins or natural rubbers -- part of the class 520 series
- Y10S526/936—Physiological use, e.g. pharmaceutical, veterinary, dental
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/832—Milk; colostrum
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/859—Waste, waste material, refuse or sludge, e.g. effluents, fecal matter
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T428/00—Stock material or miscellaneous articles
- Y10T428/29—Coated or structually defined flake, particle, cell, strand, strand portion, rod, filament, macroscopic fiber or mass thereof
- Y10T428/2982—Particulate matter [e.g., sphere, flake, etc.]
- Y10T428/2991—Coated
- Y10T428/2998—Coated including synthetic resin or polymer
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Filtering Materials (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
Description
Verfahren zum Abtrennen von Proteinen
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Abtrennen von Proteinen mittels Ionenaustausche
Die Abtrennung von Proteinen mittels Ionenaustausch ist bereits bekannt; man verwendet hierzu Cellulose oder Dextran
mit darauf fixierten bzw. gebundenen tert.Aminen oder quaternären Ammoniumgruppen oder Säuregruppen. Diese Ionenaustauscher
besitzen aber keine mechanische Festigkeit und können infolgedessen nicht in Säulen oder Kolonnen eingesetzt
werden; ihr Volumen unterliegt Veränderungen je nach Ionenstärke und pH des Gebrauchsmediums. Außerdem sind sie
biologisch abbaubar und können nicht sterilisiert werden.
Die erfindungsgemäß verwendeten Ionenaustauscherharze weisen diese Nachteile nicht auf: sie besitzen gute mechanische
Eigenschaften, sind unempfindlich gegenüber Ionenstärke und pH-Wert des Gebrauchsmediums; sie werden nicht biologisch
abgebaut und können sterilisiert werden. Außerdem ermöglichen
709809/1190
ORIGINAL INSPEGTBD
1A-48 300 -Z-
sie die Gewinnung von Proteinen in sehr reiner Form.
Das erfindungsgemäße Verfahren zum Abtrennen von Proteinen,
bei dem eine proteinhaltige Lösung mit einem Ionenaustauscherharz in Berührung gebracht wird, ist dadurch gekennzeichnet,
daß man als Ionenaustauscher ein poröses anorganisches Trägermaterial mit einer Korngröße von 4 7um bis 5 mm, einer
/p
spezifischen Oberfläche von 5 bis 150 m /g, einem Porendurchmesser
von 50 bis 250 nm (500 bis 2500 S) und einem Porenvolumen von 0,4 bis 2 ml/g verwendet, das mit einem
Film aus einem vernetzten Polymerisat, das entweder Anionenaustauschergruppen
wie tertiäre Amine oder quaternäre Ammoniumsalze oder Kationenaustauscher wie Säuregruppen enthält,
in einer Menge von weniger als 15 mg/m überzogen ist und eine Ionenaustauscherkapazität <=^2 mÄq./g aufweist.
Als poröses anorganisches Trägermaterial kommen Metalloxide wie Titanoxid, Tonerden und vor allem Kieselsäuren infrage.
Diese Träger besitzen einen mittleren Porendurchmesser von 50 bis 250 nm (500 bis 2500 S), vorzugsweise von 60 bis
150 nm (600 bis 1500 S), eine spezifische Oberfläche von
2 2
5 bis 150 m /g, vorzugsweise von 20 bis 50 m /ggsowie eine
Korngrößenverteilung im Bereich von 4 /um bis 5 mm, je nach
der in Betracht gezogenen Verwendung. Die feinsten Teilchen werden für analytische Zwecke und die gröberen Teilchen für
präparative Zwecke verwendet.
Die funktioneilen Gruppen - tertiäre Amine oder quaternäre Ammoniumsalze - lassen sich durch die allgemeinen Formeln
(+) . „ (~\
-CH2-N-CH2- oder -CH2-KP '-(RKX^ ' wiedergeben, in denen
-CH2-N-CH2- oder -CH2-KP '-(RKX^ ' wiedergeben, in denen
R gleich oder verschieden ist und jeweils für eine Alkylgruppe
oder Hydroxyalkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen
steht und X ein anorganisches oder organisches Anion bedeutet,
709809/1190
1A-48 300 - 3 -
wie das Chlorid-, Sulfat-, Nitrat-, Phosphat- oder Citratanion.
Die funktioneilen Säuregruppen leiten sich ab von Carbonsäuren, Sulfonsäuren oder Phosphonsäuren und entsprechen
den allgemeinen Formeln -COOH, -SO3H, -PO(OH)2.
Diese funktioneilen Gruppen sind Teil der Kette des vernetzten Polymerisats oder sind an das vernetzte Polymerisat,
das die gesamte Trägeroberfläche überzieht, gebunden bzw. fixiert.
Die vernetzten Polymerisate, die die Oberfläche des anorganischen Trägermaterials überziehen, sind an sich bekannte
Stoffe, die nach beliebig bekannten Polymerisationsverfahren erhalten werden. Sie werden hergestellt ausgehend von Monomeren,
die entweder selbst vernetzen können oder zusammen mit einem anderen Monomer, gegebenenfalls in Anwesenheit eines
Katalysators. Zu diesen Monomeren gehören: Epoxyverbindungen, die mit.Polyaminen als Katalysatoren vernetzen; Monomere,
die durch Polykondensation ohne Katalysator mit Formaldehyd vernetzen wie Harnstoff, Melamin, Polyamine, Phenole; Vinylmonomere
wie Vinylpyridin, Styrol und seine Derivate, Acrylsäure, Methacrylsäure, Vinylbenzoesäure, die mit polyfunktionellen
Monomeren vernetzen, beispielsweise mit Mono- oder Polyalkylenglykol-diacrylat oder -dimethacrylat, Divinylbenzol,
Vinyltrialkoxysilan, Vinyltrihalogensilan, bis-Methylenacrylamid,
in Gegenwart eines freie Radikale bildenden Initiators wie organische Peroxide oder Azonitrile oder
in Gegenwart von UV-Strahlen.
Zur Herstellung der Überzüge oder Beschichtungen auf anorganischem
Trägermaterial aus vernetztem Polymerisat wird das Trägermaterial mit einer Lösung des Monomeren oder Monomeren-
709809/1190 " 4 "
300
gemisches sowie gegebenenfalls des Katalysator in einem Lösungsmittel
getränkt; hierdurch wird eine gute Verteilung der Monomeren auf der gesamten Oberfläche des anorganischen
Trägermaterials erreicht; das Lösungsmittel wird dann verdampft und die Monomeren gemäß bekannter Verfahren vernetzt.
Als Lösungsmittel/kommen alle Lösungsmitteln für die Monomeren
und den Katalysator infrage, deren Siedepunkt vorzugsweise
so niedrig wie möglich ist, um das anschließende Verdampfen zu erleichtern. Hierzu gehören beispielsweise Methylenchlorid,
Diäthyläther, Benzol, Aceton und Äthylacetat.
Ein besonders geeignetes Verfahren zur Herstellung von Anionenaustauschern
durch Überziehen eines anorganischen Trägermaterials mit Epoxyverbindungen ist in einem älteren Vorschlag
(DT-OS 25 38 358) beschrieben.
Enthält das vernetzte Polymerisat auf der Oberfläche des anorganischen
Trägermaterials keine wie oben definierten funktioneilen Gruppen in seiner Kette, so muß es modifiziert
werden. Dies trifft vor allem für vernetzte Polymerisat oder Kunststoffe auf der Basis von Styrol und seinen Derivaten,
der Polymerisate (Kondensationsprodukte) aus Formaldehyd und Harnstoff, Melamin, Polyaminen und Phenolen zu.
Diese Modifikation besteht im Falle der Styrolpolymerisate oder Phenol-Formaldehydkondensationsprodukte darin, daß
auf dem Polymerisat entweder Carbonsäure-, Sulfonsäure-
oder Phosphongruppen auf beliebig bekannte Weise oder Chlormethylgruppen fixiert werden, die anschließend mit "einem
sekundären oder tertiären Amin, ebenfalls auf an sich bekannte Weise, zur Umsetzung gebracht werden.
Beim Fixieren der Chlormethylgruppen auf dem Polymerisat oder Kunststoff wird vorteilhafterweise im Falle von Styrolpolymerisaten
der mit Kunststoff überzogene anorganische Träger in der Wärme in Chlormethyläther in Gegenwart einer
709809/1190
1A-48 300
Lewissäure dispergiert. Im Falle eines Phenol-Formaldehydharzes
hingegen kann der mit Kunststoff überzogene anorganische Träger in Epichlorhydrin dispergiert und in der Wärme
damit zur Umsetzung gebracht werden.
Im Falle der Kondensationsprodukte aus Formaldehyd mit Polyaminen,
Harnstoff oder Melamin besteht die Modifizierung darin, daß man die in der Kette vorhandenen primären Amine
in an sich bekannter Weise in tertiäre Aminogruppen oder quaternäre Ammoniumsalzgruppen überführt, beispielsweise
durch Reaktion mit einem Alkylsulfat oder Alkylhalogenid.
Beim Überziehen oder Beschichten des anorganischen Trägermaterials
mit Kunststoff muß die Menge ah eingesetztem Monomeren oder Monomergemisch so bemessen sein, daß das die
Oberfläche des Trägers überziehende vernetzte Polymerisat mit funktioneilen Gruppen weniger als 15 mg/m , vorzugsweise
1 bis 3 mg/m ( ausmacht.
Die auf diese Weise erhaltenen, mit einem vernetzten, funktioneile
Gruppen aufweisenden Polymerisat überzogenen anorganischen Träger besitzen eine Austauschkapazität <
2 mÄq./g, vorzugsweise im Bereich von 0,3 bis 1,2 mÄq./g.
Das erfindungsgemäße Verfahren läßt sich auf alle in wäßrigem Medium lösliche Proteine unabhängig von ihrem isoelektrischen
Punkt anwenden. Zu diesen Proteinen gehören Polypeptide und Enzyme, beispielsweise Albumin, Lactalbumine,
Ovalbumin, Serumalbumin, Hämoglobin,oL-,ß- und <T -Globuline,
Lactoglobuline, Fibrinogen, Urease, Trypsin, Lysozym, Pepsin, Proteasen und Cytochrom.
Das erfindungsgemäße Verfahren ermöglicht eine sehr leichte
Abtrennung der Proteine aus ihren Lösungen wie Milchserum, Bier, Blut, Organextrakten und allen Industrieabwässern,
709809/1190 - 6 "
c- 1A-48 300
beispielsweise den Abwässern aus Schlachthöfen, Lebensmittelfabriken
und Stärkefabriken; es stellt somit ein ausgezeichnetes Mittel zum Reinigen derartiger Abwässer
d.h. ein Mittel zur Bekämpfung der Umweltverschmutzung(
dar.
Die Abtrennung wird bewirkt, indem die zu behandelnde Lösung bei einer Temperatur, Ionenstärke (force ionique)
und einem pH-Wert, die mit dem Protein bzw, den Proteinen verträglich sind, mit dem Ionenaustauscherharz in Berührung
gebracht wird; letzteres wird je nach den Trennbedingungen
ausgewählt» Auf dem Ionenaustauscherharz wird dann entweder
das angestrebte Protein oder das andere in der Lösung enthaltene Protein fixiert bzw. es werden die anderen in der
Lösung enthaltenen Proteine oder alle in der Lösung enthaltenen Proteine fixiert oder gebunden.
Die Trennung kann unter den gleichen Bedingungen ebenfalls
bewirkt werden, indem die zu behandelnde Lösung nacheinander mit einem oder mehreren Anionenaustauscherharzen und/
oder Kationenaustauscherharzen in Berührung gebracht wird. In diesem Falle werden die in der Lösung enthaltenen Proteine
selektiv auf jedem Harz fixiert oder gebunden.
Wird das angestrebte Protein aus einer Lösung auf dem Austauscherharz
fixiert, so wird es anschließend mit einer Lösung eluiert, deren pH-Wert und/oder Ionenstärke verschieden
sind von der zum Fixieren eingesetzten Lösung, die jedoch mit dem Protein verträglich, man bewirkt auf diese Weise
nicht nur die Abtrennung des Proteins aus der Lösung, sondern auch seine Reinigung und seine Konzentrierung* Beispielsweise
lassen sich auf diese Weise Albumin, Pepsin und die Proteine des Milchserums mit einem Anionenaustausch^ rhar ζ und Lysosym mit einem Kationenaustauscherharz
abtrennen und konzentrieren.
709809/1190
1A-48 300
Verbleibt das gesuchte oder angestrebte Protein in der erfindungsgemäß
behandelten jprot einhalt igen Lösung, werden also die anderen Proteine aus dem Gemisch fixiert, so wird
die Trennung des gesuchten Proteins von den anderen Proteinen, d.h. seine Reinigungfbewirkt. Elution der fixierten Proteine
führt zu einer selektiven Trennung des Proteins bzw. der Proteine und zu ihrer Konzentrierung. Dies trifft u.a. für
-Globulin mit einem Anionenaustauscherharz zue
Werden mehrere gesuchte oder angestrebte Proteine gleichzeitig auf einem Austauscherharz fixiert, so bewirkt die Elution
bei von der Fixierungslösung verschiedenen pH-Wert und/oder verschiedener Ionenstärke eine Abtrennung der Proteine aus
der Lösung und ihre Konzentrierung. Wird mit Lösungen mit steigendem. pH-Wert und/oder steigender Ionenstärke elulert,
so wird zusätzlich zu der selektiven Trennung die Reinigung und Konzentrierung (der Proteine) bewirkt. Dies trifft vor
allem für das Serum des Menschen zu.
Sollen die Proteine entfernt werden, so werden sie aus ihrer Lösung auf einem Austauscherharz fixiert« Man erhält ßroteinfreie,
d.h. gereinigte, Lösungen. Das Austauscherharz kann durch Eluieren der gebundenen Proteine regeneriert und darauf
wieder eingesetzt werden. Anwendungsgebiete hierfür sind vor allem die Klärung von Bier sowie die Behandlung
von Hämoglobin enthaltenden Lösungen mit Kationenaustauscherharzen·
Die Trennung kann mit identischen Ergebnissen diskontinuierlich oder kontinuierlich durchgeführt werden. Bei kontinuierlicher
Arbeitsweise ermöglichen die Austauscherharze ein leichtes Füllen der S&ule, einen großen Durchsatz und ein
leichtes Eluieren· · .
- 8 709809/1190
1A-48 300
Die erzielten Ergebnisse sind praktisch unabhängig von der
Konzentration der behandelten Lösung, hängen aber ab von der BeschafAiheit der Austauschergruppe des Harzes, vom
pH-Wert, der Ionenstärke und der Aufgabemenge bzw. des Durchsatzes sowohl der zu behandelnden Lösungen als auch
des Eluens.
Das erfindungsgemäße Verfahren läßt sich mit Vorteil in der Lebensmittelindustrie, vor allem in der Industrie für diätetische
Lebensmittel, in der pharmazeutischen Industrie und in der tierverarbeitenden Industrie anwenden.
Die nachfolgenden Beispiele dienen zur näheren Erläuterung
der Erfindung.
Herstellung des Austauscherharzes
100 g Kieselsäure mit einer Korngröße von 100 bis 200 /um, einer spezifischen Oberfläche von 24 m /g, einem mittleren
Porendurchmesser von 140 nm und einem Porenvolumen von 1 ml/g wurden unter vermindertem Druck 5 h bei 150°C getrocknet.
Die trockne Kieselsäure wurde in eine Lösung aus 250 ml Methylenchlorid, 60 ml zweifach destilliertem Styrol, 20 ml Vinyltriäthoxysilan
und 0,5 g Azobis-isobutyronitril gegeben. Das Methylenchlorid wurde bei Raumtemperatur verdampft; darauf
wurde die imprägnierte Kieselsäure 6 h auf 1200C unter einem
Druck von 3 bar erhitzt, um die Vernetzung zu bewirken. Anschließend wurde die Kieselsäure in 300 ml Xylol suspendiert
und 2 h zum Sieden erhitzt. Darauf wurde filtriert, die Kieselsäure mit Aceton gewaschen und schließlich getrocknet.
Die Analyse ergab einen Kohlenstoffgehalt von 4Gew.-#, bezogen
auf die beschichtete Kieselsäure.
■ - 9 709809/1190
1A-48 300
50 g der beschichteten Kieselsäure wurden in 180 g Chlormethyläther
suspendiert, der 6 g Zinn-IV-chlorid enthielt; das Gemisch wurde unter Ausschluß von Wasser 4 h unter
Rückfluß erhitzt.
Nach dem Abkühlenlassen wurde die Kieselsäure abgeschleudert, mit 200 ml 50:50 Gemisch aus Dioxan und Wasser, das
10 ml Chlorwasserstoffsäure enthielt, gewaschen, darauf mit
Wasser neutral gewaschen und schließlich getrocknet.
Der Kohlenstoffgehalt betrug 4,1 %t der Chlorgehalt 1,9 %·
Das erhaltene Produkt wurde in 150 ml wäßrige, 30 %ige Trimethylaminlösung
suspendiert und bei Raumtemperatur 8 Tage stehengelassen. Nach dem Abschleudern und Waschen erhielt
man ein Austauscherharz mit folgenden funktioneilen Gruppen:
und Merkmalen:
Kohlenstoffgehalt 4,8 Gew.-%
Chlorgehalt 2 Gew.-%
Stickstoffgehalt 0,9 Gew.-%
fixiertes Polymerisat · 3,3 mg/m
Austauscherkapazität 0,5 mÄq./g
Behandlung einer Albuminlösung
10 g des obigen Austauscherharzes wurden in eine 1 cm weite
Säule gegeben, komprimiert gehalten und mit einer 0,01m Phosphatpufferlösung auf pH-Wert 6,5 äquilibriert.
709809/1190 - 10 -
1A-48 300
Darauf ließ man eine 1 gew.-%ige Albuminlösung in der gleichen
Pufferlösung in einer Menge von 180 ml/h bis zur Sättigung der Säule perkolieren; dies entsprach etwa 200 ml Lösung,
Das Harz wurde dann mit 100 ml der gleichen Pufferlösung
gewaschen.
Das fixierte Albumin wurde mit einer 1m NaCl~Lösung im gleichen
Puffer eluiert; das Eluens wurde mit einer Geschwindigkeit von 180 ml/h aufgegeben« 45 ml Lösung wurden benötigt,
um das Albumin in Form einer 3,3. gew.-^igen Lösung zurückzugewinnen.
Hieraus ergab sich, daß der Ionenaustauscher eine Kapazität bezüglich Albumin von 150 mg/g hatte und daß mit seiner Hilfe die Albuminlösung konzentriert werden konnte.
Der Arbeitsgang wurde 30mal wiederholt, ohne Anzeichen von Quellen oder Altern des Austauscherharzes.
Beispiel 1 würde mit einer 0,2 gew.-%igen Albuminlösung wiederholt.
Es wurden die gleichen Ergebnisse erzielt, d.h. man erhielt die gleiche Konzentration an Albumin unabhängig von der
Konzentration der Ausgangslösung, die behandelt wurde.
Beispiel 1 wurde wiederholt, als Eluens jedoch eine 0,05m Citratpufferlösung mit pH-Wert 6,5 verwendet. Man erhielt
59 ml 2,5 gew.-#ige Albuminlösung.
Dieses Beispiel zeigt, daß die Beschaffenheit der als Eluens verwendeten Pufferlösung die Konzentration des Eluats beeinflußt.
709809/1190
- 11 -
1A-48 300 oc-JQTß/
Eine Albuminlösung wurde in gleicher Weise wie in Beispiel 1 behandelt, jedoch unter Einsatz von 41 g Austauscherharz in
einer 1 cm weiten Kolonne und mit einer Aufgabegeschwindig- ι
keit des Eluens von 80 ml/h. I
Die Albuminkonzentration in der erhaltenen Lösung (Eluat)
betrug 7 Gew.-%. Dies zeigt, daß die Konzentration im Eluat durch Erhöhen der Nutzhöhe in der Säule und durch Verringern
der Elutionsgeschwindigkeit erhöht wird.
Herstellung des Austauscherharzes ' . .
In 150 ml Methylenghlorid, das 6,5 g N,N-bis(2,3-Epoxypropyl)-äthylamin
und 3 g Triäthylentetramin gelöst enthielt, wurden 50 g Kieselsäure mit Korngröße 40 bis 100 /um, spe-
zifische Oberfläche 37 m /g, Porendurchmesser 110 nm und
Porenvolumen 1,05 ml/g gegeben. Das Methylenchlorid wurde bei Raumtemperatur verjagt, die imprägnierte Kieselsäure
60 h auf 60°C erhitzt und dann mit kochendem Wasser und mit Aceton gewaschen.
Das erhaltene Austauscherharz bestand aus Kieselsäure überzogen
mit einem vernetzten Polymerisat mit funktioneilen Gruppen -CH2-N-CH2- mit folgenden Kennzeichen:
C2H5
Kohlenstoff 8,8 %
Stickstoff 2,4 96
2 fixiertes Polymerisat 3,3 mg/m Austauscherkapazität 1 mÄq./g
709809/1190 - 12 -
1A-48 300 rynnona/
Abtrennung von T-Globulin
10 g obiges Austauscherharz wurden in eine 1 cm weite Säule gegeben, komprimiert gehalten und mit 0,1n Salzsäure und anschließend
mit 0,02m Phosphatpufferlösung von pH-Wert 6,5 äquilibriert.
Anschließend ließ man 20 ml einer 1 gew.-%igen Lösung von
von Fettstoffen befreitem und lyophilisiertem Humanserum in der gleichen Phosphatpufferlösung mit einer Geschwindigkeit
von 100 ml/h perkolieren. Dann wurde das Austauscherharz mit 50 ml der gleichen Phosphatpufferlösung gewaschen.
Die auslaufende Lösung enthielt das in der Ausgangslösung enthaltene Γ-Globulin elektrophoretisch rein.
Die anderen in der Ausgangslösung enthaltenen Proteine}oO-Globuline,
ß-Globuline und Albumin f waren an das Austauscherharz
gebunden, sie wurden mit einer 3m NaCl-Lösung im gleichen
Phosphatpuffer eluiert.
Wurden zum Eluieren Pufferlösungen mit zunehmender Ionenstärke eingesetzt durch Erhöhen der NaCl-Konzentration, so
erhielt man an<jC-Globulinen, ß-Globulinen und Albumin angereicherte
Lösungen.
Herstellung des Austauscherharzes
Es wurde wie in Beispiel 5 verfahren, Jedoch mit einer Kieselsäure
mit Korngröße 100 bis 200 /um und mit 6,5 g N1N-bis(2,3-Epoxypropyl)-butylamin
anstelle des 6,5 g N,H-bis-(2,3-Epoxypropyl)-äthylamins.
Das fertige Austauscherharz bestand aus Kieselsäure überzogen
mit einem vernetzten Polymerisat, das funktioneile
709809/1190
- 13 -
Gruppen -CH2-N-CH2- aufwies; das Austauscherharz hatte fol-
C
gende Merkmale:
gende Merkmale:
C4H9
Kohlenstoff 9,2 Gew„-%
. Stickstoff 2,9 Gew.-%
fixiertes Polymerisat 3,2 mg/m Austauscherkapazität 1,1 mÄq./g
Extraktion von Proteinen
10 g obiges Austauscherharz wurden in eine 1 cm weite Säule gegeben, darin komprimiert und mit nacheinander 0,1n Salzsäure
und 0,01m Phosphatpufferlösung von pH-Wert 7,5 äquilibriert.
30 ml einer 1 gew.-%igen Lösung aus ultrafiltriertem Milchserumpulver
enthaltend 75 Gew.-96 Proteine in der gleichen
Phosphatpufferlösung wurde mit einer Geschwindigkeit von 80 ml/h perkoliert. Anschließend wurde das Austausbherharz
mit 100 ml der gleichen Phosphatpufferlösung gewaschen.
Die auslaufenden Lösungen enthielten die in der Ausgangslösung vorhandenen Fettstoffe und die Lactose.
Die Proteine, Lactalbumine, Lactoglobuline, Serumalbumin
und ein kleiner Teil der Immunoglobuline aus der Ausgangslösung waren an das Austauscherharz gebunden und wurden mit
0,05m Mac Ilvaine Pufferlösung von pH-Wert 4 eluiert und
gereinigt.
Extraktion von Proteinen '
20 g Austauscherharz gemäß Beispiel 1, jedoch mit einer Korngrößenverteilung
von 200 bis 500 /um wurden in eine 2,5 cm
7-09809/1190 - 14 -
1A-48 300
weite Säule gegeben und komprimiert bzw. festgepackt gehalten. Das Austauscherharz wurde mit nacheinander 0,1n
Salzsäure und 0,01m Tris-HCl Pufferlösung von pH-Wert 7 äquilibriert.
600 ml einer Lösung aus 300 ml gleiche Pufferlösung und 300 ml von Fettstoffen befreites Milchserum mit 0,5 Gew.-#
löslichen Proteinen wurde mit einer Geschwindigkeit von 300 ml/h perkoliert und das Austauscherharz anschließend
mit 100ml der gleichen Pufferlösung gewaschen.
Die aus der Säule ablaufenden Lösungen enthielten die in
der Ausgangslösung vorhandene Lactose. Die Proteine, Lactalbumine,
Lactoglobuline, Serumalbumin und ein kleiner Teil der Immunoglobuline aus der Ausgangslösung war an das
Austauscherharz gebunden und*mit einer 0,1m Citrat-Natronlauge Pufferlösung von pH-Wert 7 eluiert. Das Bluat enthielt
die Gesamtmenge der vorher gebundenen Proteine in einer Konzentration von 4
Mit Hilfe dieses Arbeitsganges wurde ein Gemisch aus reinen Proteinen, frei von Lactose, als gegenüber der Ausgangslösung
wesentlich stärker konzentrierte Lösung erhalten.
Nach 30 aufeinanderfolgenden Arbeitsgängen wurde keinerlei
Altern des Austauscherharzes beobachtet.
Behandlung einer Pepsinlösung
3 g Austauscherharz gemäß Beispiel 1 wurden in eine 1 cm weite Säule gegeben und mit 100 ml destilliertem Wasser gewaschen.
Darauf wurden 150 ml einer Lösung aus. rohem Pepsin mit 20 Pepsineinheiten/ml in einer Geschwindigkeit von
100 ml/h perkoliert und das Austauscherharz anschließend mit 20 ml destilliertem Wasser gewaschen.
709809/1190
- 15 -
1A-48 300
Die aus der Kolonne ablaufende Lösung und das Waschwasser
zeigten überhaupt keine Aktivität; das gesamte Pepsin war an das Austauscherharz gebunden. Die Begleitstoffe blieben
in Lösung, wie sich durch Messungen am Feststoffextrakt
zeigte.
Das gebundene Pepsin wurde dann durch Perkolieren einer 1m NaCl-Lösung mit einer Geschwindigkeit von 100 ml/h
eluiert.
16 ml Lösung wurden benötigt, um das Pepsin als Lösung mit 170 Pepsineinheiten/ml zurückzugewinnen· Dies zeigt die
starke Konzentrierung gegenüber der Ausgangslösung·
Das Austauscherharz wurde nach Waschen mit 50 ml destilliertem Wasser erneut eingesetzt. Nach 10 aufeinanderfolgenden
Arbeitsgängen wurde keinerlei Altern festgestellt.
Herstellung des Austauscherharzes
100 g Kieselsäure mit Korngröße 100 bis 200 /um, spezifischer Oberfläche 25 m^/g» mittlerem Porendurchmesser 140 nm und
Porenvolumen 1,1 ml/g wurden mit einer Lösung aus 200 ml
Methylenchlorid, 24 g Acrylsäure, 6 g Diäthylenglykol-dimethacrylat
und 0,4 g Benzoylperoxid imprägniert. Das Methylenchlorid
wurde bei Raumtemperatur und Atmosphärendruck bis zur Gewichtskonstanz verjagt; darauf wurde die impräg_
nierte Kieselsäure 6 h auf 800C erhitzt, um die Polymerisation
zu bewirken. Darauf wurde die Kieselsäure in 300 ml Wasser suspendiert und 6 h gekocht. Nach dem Abfiltrieren
wurde die Kieselsäure mit Aceton gewaschen und unter vermindertem Druck bei 800C getrocknet.
Man erhielt ein Austauscherharz mit funktioneilen Gruppen -COOH, das folgende Merkmale aufwies:
709809/1190
- 16 -
1A-48 300
Kohlenstoff 10,55 Gew.-#
gebundenes Polymerisat 7,2 mg/m Austauscherkapazität 1,05 mÄq./g
Behandlung einer Lysozymlösung
10 g obiges Austauscherharz wurden in eine 1 cm weite Säule gegeben und komprimiert gehalten; darauf wurde das
Austauscherharz in die Ammoniumform (NH^+) gebracht durch
Perkolieren von 2 1 wäßriger 0,5m Ammoniumacetatlösung, gepuffert auf pH-Wert 8,2.
Das Harz wurde dann mit 100 ml Tris-maleinsäurepuffer 0,02m äquilibriert.
Darauf ließ man eine 1 gew,-%ige Lösung aus Lysozym in
der gleichen Pufferlösung mit einer Geschwindigkeit von 180 ml/h bis zur Sättigung der Säule perkolieren; dies
entsprach etwa 200 ml Lösung. Das Harz wurde dann mit 100 ml 0,02m Tris-maleinsäurepuffer, pH 8,2, gewaschen.
Das gebundene Lysozym wurde darauf durch Perkolieren einer 1m NaCl-Lösung in der gleichen Pufferlösung mit einer Geschwindigkeit
von 180 ml/h eluiert. 500 ml Lösung wurden benötigt, um das Lysozym in Form einer 2,5 gew.-j6igen Lösung
zurückzugewinnen.
Hieraus ergab sich, daß der Austauscher eine Kapazität für Lysozym von 125 mg/g besaß und es ermöglichte, die Lysozymlösung
zu konzentrieren.
Herstellung des Austauscherharzes
100 g Kieselsäure mit Korngröße 100 bis 200 /um, spezifischer Oberfläche 37 m2/g, mittlerem Parendurchmesser 120 nm und
- 17 -709809/1190
-JA-48 300
Porenvolumen 0,95 ml/g wurden mit einer Lösung aus 150 ml Methylenchlorid, 60 ml zweifach destilliertem Styrol,
20 ml Vinyltriäthoxysilan und 0,5 g Azobis-isobutyronitril imprägniert. Das Methylenchlorid wurde bei Raumtemperatur
und Atmosphärendruck bis zur Gewichtskonstanz verjagt; darauf wurde die imprägnierte Kieselsäure 6 h auf 1200C
erhitzt, um die Vernetzung zu bewirken.
Die Kieselsäure wurde dann in 300 ml Xylol erneut suspendiert und 6 h zum Sieden erhitzt. Nach dem Abschleudern
wurde die Kieselsäure mit Aceton gewaschen und darauf bei 800C getrocknet.
50 g dieser modifizierten Kieselsäure wurden in 500 ml
Chloroform suspendiert und die Suspension tropfenweise mit 50 g HSO3CI gelöst in 50 ml Chloroform versetzt. Dabei entwickelte
sich Chlorwasserstoff. Nach beendeter Zugabe wurde das Gemisch gerührt und 4 h auf 500C erhitzt.
Nach dem Abschleudern wurde mit Wasser neutral gewaschen, darauf mit Aceton gewaschen und im Vakuum bei 800C getrocknet;
man erhielt ein Ionenaustauscherharz mit funktionellen Gruppen -SO-,Η und folgenden Merkmalen:
Kohlenstoff 4 Gew.-96
Schwefel 1,4Gew.-%
gebundenes Polymerisat 2,8mg/m
Austaus cherkapazität 0,43 mÄq./g
Extraktion von Hämoglobin
10 g obiges Austauscherharz wurden in eine 1 cm weite Säule gegeben und mit 0,02m Phosphatpufferlösung auf pH 6,5 äquilibriert.
Darauf wurden. 500 ml einer 0,2 gew.-#igen Hämoglobinlösung
in dem gleichen Puffer mit einer Geschwindigkeit von 100 ml/h perkoliert. Das Hämoglobin wurde an dem Aus-
709809/1190 - -18-
tauscherharz adsorbiert bzw« fixiert. Die ablaufende farblose
Lösung enthielt kein Hämoglobin mehr und war somit gereinigt·
Daö adsorbierte Hämoglobin wurde mit einer 0,5m Ammoniumcarbonatlösung
eluiert und die Säule anschließend mit 300 ml 0,1n Natronlauge und mit 50 ml 1n Salzsäure gewaschen,
bevor sie erneut eingesetzt wurde,
Behandlung von Milchserum
In eine erste 2,5 cm weite Säule (Nr. 1) wurden 20 g Austauscherharz
gemäß Beispiel 1 und in eine zweite 2,5 cm weite Säule (Nr, 2) 10 g Austauscherharz gemäß Beispiel 9
gegeben· Die beiden Säulen wurden in Reihe (hintereinander) angeordnet und die Austauscherharze mit 500 ml Wasser gewaschen.
500 ml Milchserum, eingestellt auf pH 7»5 durch Zugabe von
0,1n Natronlauge, wurden filtriert, um die Feststoffe zu entfernen
und dann durch Säule Nr. 1 und Säule Nr. 2 mit einer Geschwindigkeit von 300 ml/h perkoliert. Der Test der Proteinfällung
mit TriChloressigsäure zeigte, daß das aus der
zweiten Säule ablaufende Milchserum kein Protein mehr enthielt. Die Austauscherharze in den beiden Säulen wurden mit
100 ml Wasser gewaschen.
Die in der Ausgangslösung vorhandenen Proteine: Lactalbumine,
Lactoglobuline, Serumalbumin und ein sehr kleiner Teil der Immunoglobuline f wurden vom Austauscherharz der Säule Nr. 1
fixiert und dann wie in Beispiel 7 beschrieben eluiert·
Auf dem Austauscherharz der Säule Nr. 2 wurden im wesentlichen
die vom Austauscherharz der Säule Nr. 1 nicht zurückgehaltenen Immunoglobuline fixiert. Sie wurden mit einer
709809/1 190
- 19 -
1A-48 300
1« Ammoniumcarbonatlösung eluiert. Das Eluat enthielt die
Immunoglobuline, die etwa 16 Gew.-% der gesamten in der
Ausgangslösung vorhandenen Proteine ausmachten, in einer Konzentration von etwa 3 Gew.-96.
Die beiden Säulen wurden dann mit 500 ml Wasser gewaschen und erneut eingesetzt. Nach 10 aufeinanderfolgenden Arbeitsgängen wurde keinerlei Altern der Austauscherharze beobachtet.
Extraktion, der Proteine aus Bier
60 g Austauscherharz gemäß Beispiel 9 wurden in eine 2,5 cm
weite Säule gegeben und mit 250 ml Wasser gewaschen*
3 1 nicht geklärtes Bier wurden mit einer Geschwindigkeit von 100 ml/h perkoliert. Das aus der Säule ablaufende Bier
ergab keine Fällung mehr bei Zugabe von Picrinsäure und hatte alle Merkmale eines geklärten Biers.
Die am Austauscherharz fixierten Produkte waren im wesentlichen Proteine und wurden mit 400 ml o,1n Salzsäure eluiert.
Vor erneutem Gebrauch wurde das Austauscherharz mit 250 ml
Wasser gewaschen.
709809/119 0
Claims (10)
- PatentansprücheVerfahren zum Abtrennen von Proteinen, bei dem eine Proteinlösung mit einem Ionenaustauscherharz in Berührung gebracht wird, dadurch gekennzeichnet , daß man ein.Austauscherharz verwendet, das aus einem porösen anorgarischen Trägermaterial mit Korngröße 4 /um bis 5 mm,2 ' spezifischer Oberfläche 5 bis 15Om /g, Porendurchmesser 50 bis 250 nm, Porenvolumen 0,4 bis 2 ml/g und einem Uberzug in einer Menge von weniger als 15 mg/m aus vernetztem Polymerisat mit Anionenaustauschergruppen wie tertiäre Amino- oder quaternäre Ammoniumsalzgruppen oder mit Säuregruppen als Kationenaustauschergruppen besteht und eine Austauscherkapazität ·«£ 2 mÄq./g aufweist.
- 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man einen Ionenaustauscher verwendet, der als anorganisches Trägermaterial ein Metalloxid wie Titanoxid, Tonerden und Kieselsäuren enthält.
- 3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet , daß man ein Anionenaustauscherharz mit Austauschergruppen der Formel -CH2-N-CHp- oder -CH2-n/±) (R)3X^"*^ , in der R gleich oder verschieden ist und für eine C^ bis C1^-Alkyl- oder Hydroxyalkylgruppe steht und X ein anorganisches oder organisches Anion bedeutet, verwendet.709809/1 1901A-48 300
- 4. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet , daß man ein Kationenaustauscherharz mit Carbonsäure-, Sulfonsäure- oder Phosphonsäuregruppen verwendet.
- 5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet , daß man ein Austauscherharz verwendet, das durch Polymerisieren von Epoxyverbindungen in Gegenwart von Polyaminen, Gemischen aus Formaldehyd und Harnstoff, Melamin, Polyaminen oder Phenolen, Gemischen aus Vinylmonomeren wie Vinylpyridin, Styrol und seine Derivate, Acrylsäure, Methacrylsäure, oder Vinylbenzoesäure mit polyfunktionellen Monomeren wie Mono- oder Polyalkylenglykol-dimethacrylat oder -diacrylat, Divinylbenzol, Vinyltrialkoxysilan, Vinyltrihalogensilan oder Bis-methylenacrylamid auf einem anorganischen Trägermaterial erhalten worden ist.
- 6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß man als Proteine einschließlich Polypeptide und Enzyme Albumin, Lactalbumine, Ovalbumin, Serumalbumin, Hämoglobin, cL-, Q- und ^-Globuline, Lactoglobuline, Fibrinogen, Urease, Trypsin, Lysozym, Pepsin, Proteasen und Cytochrom einsetzt.
- 7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet , daß man als Proteinlösung Milchserum, Bier, Blut, Organextrakte und beliebige Industrieabwässer einsetzt.
- 8. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 7» dadurch gekennzeichnet , daß man ein oder mehrere der angestrebten Proteine auf dem Austauscherharz fixiert und dann eluiert.- 3 -709809/11901A-48 300
- 9. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 7t dadurch gekennzeichnet , daß man das angestrebte Protein in der Lösung beläßt und die anderen Proteine der Lösung auf dem Austauscherharz fixiert.
- 10. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet , daß man alle Proteine fixiert und die Lösung reinigt.709809/1190
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR7526530A FR2321932A1 (fr) | 1975-08-28 | 1975-08-28 | Procede de separation de proteines par echange d'ions |
FR7622985A FR2359634A2 (fr) | 1976-07-28 | 1976-07-28 | Procede de separation de proteines par echange d'ions |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE2638764A1 true DE2638764A1 (de) | 1977-03-03 |
DE2638764B2 DE2638764B2 (de) | 1978-09-14 |
DE2638764C3 DE2638764C3 (de) | 1981-02-12 |
Family
ID=26219047
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE2638764A Expired DE2638764C3 (de) | 1975-08-28 | 1976-08-27 | Verwendung eines Austauscherharzes zum Auftrennen von Proteinen |
Country Status (21)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4100149A (de) |
JP (1) | JPS5257200A (de) |
AR (1) | AR209193A1 (de) |
AU (1) | AU500134B2 (de) |
BR (1) | BR7605661A (de) |
CA (1) | CA1069843A (de) |
CH (1) | CH602780A5 (de) |
DE (1) | DE2638764C3 (de) |
DK (1) | DK156577C (de) |
ES (1) | ES451047A1 (de) |
GB (1) | GB1513195A (de) |
IE (1) | IE43536B1 (de) |
IT (1) | IT1066221B (de) |
MX (1) | MX4333E (de) |
NL (1) | NL178294C (de) |
NO (1) | NO145508C (de) |
NZ (1) | NZ181884A (de) |
RO (1) | RO78229A (de) |
SE (1) | SE426911B (de) |
SU (1) | SU688124A3 (de) |
YU (1) | YU209676A (de) |
Cited By (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2396764A1 (fr) * | 1977-07-04 | 1979-02-02 | Ferrari Lorenzo | Procede de production de lysozyme |
DE2943190A1 (de) * | 1978-10-27 | 1980-04-30 | Rhone Poulenc Ind | Verfahren zur gewinnung von hochreinen nichtdenaturierten proteinen |
FR2452881A1 (fr) * | 1979-04-04 | 1980-10-31 | Bel Fromageries | Procede de preparation de proteines animales ou vegetales, particulierement de lactoproteines, et nouveaux produits ainsi obtenus |
DE3020075A1 (de) * | 1979-05-29 | 1980-12-04 | Eni Ente Naz Idrocarb | Verfahren zur koagulation von milch |
FR2470800A1 (fr) * | 1979-11-29 | 1981-06-12 | Rhone Poulenc Ind | Procede d'epuration des jus de betteraves au moyen d'echangeurs d'ions |
FR2490676A1 (fr) * | 1980-09-19 | 1982-03-26 | Rhone Poulenc Ind | Procede d'epuration des jus de canne a sucre |
EP0132178A1 (de) * | 1983-07-07 | 1985-01-23 | Institut Merieux | Verfahren zur Herstellung der wichtigsten Proteine des hämolysierten Bluts in einer nichtdenaturierten Form |
EP0143369A2 (de) * | 1983-11-25 | 1985-06-05 | Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha | Poröses Adsorptionsmittel für Lipoproteine mit geringer Dichtigkeit |
EP0180164A2 (de) * | 1984-10-26 | 1986-05-07 | Reanal Finomvegyszergyar | Verfahren zur Herstellung von Lysozym |
FR2575666A1 (fr) * | 1985-01-04 | 1986-07-11 | Centre Nat Rech Scient | Procede et dispositif pour la separation chromatographique de macromolecules biologiques |
FR2616628A1 (fr) * | 1987-06-19 | 1988-12-23 | Entremont Sa | Procede pour extraire des proteines du lactoserum par adsorption et elution |
EP0298414A2 (de) * | 1987-07-08 | 1989-01-11 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Verfahren zur Reinigung von saurer Protease |
EP0320194A1 (de) * | 1987-12-07 | 1989-06-14 | Japan Medical Supply Co., Ltd. | Absorbensmittel für ungebundenes Hämoglobin |
WO1991001808A1 (de) * | 1989-08-11 | 1991-02-21 | B. Braun Melsungen Aktiengesellschaft | Verwendung von tentakel-kationenaustauschern zur selektiven eliminierung von low-density-lipoproteinen (ldl), fibrinogen und/oder harnstoff aus flüssigkeiten |
EP0416748A1 (de) * | 1989-08-07 | 1991-03-13 | J.T. Baker Inc. | Feste Träger aus quaternisierter PEI-Kieselsäure für die Chromatographie |
Families Citing this family (45)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4259223A (en) * | 1976-03-29 | 1981-03-31 | California Institute Of Technology | Cross-linked polyvinyl pyridine coated glass particle catalyst support and aqueous composition or polyvinyl pyridine adducted microspheres |
US4326008A (en) * | 1976-08-27 | 1982-04-20 | California Institute Of Technology | Protein specific fluorescent microspheres for labelling a protein |
US4229342A (en) * | 1977-05-18 | 1980-10-21 | Rhone-Poulenc Industries | Process for extracting proteins from milk using silica and anion exchange resins |
US4171204A (en) * | 1978-09-01 | 1979-10-16 | Abbott Laboratories | Precipitation of protein |
JPS5598117A (en) * | 1979-01-17 | 1980-07-25 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | Purification of gamma-globulin derivative |
US4305870A (en) * | 1979-01-31 | 1981-12-15 | Immuno Aktiengesellschaft Fur Chemisch-Medizinische Produkte | Intravenous plasma derivatives and their production |
DE3009037A1 (de) * | 1980-03-08 | 1981-09-24 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur direkten bestimmung des lipidgehaltes der (beta) -lipoproteine des blutes |
FR2478434B1 (de) * | 1980-03-21 | 1984-06-08 | Rhone Poulenc Spec Chim | |
JPS57135356A (en) * | 1981-02-14 | 1982-08-20 | Tadao Hoshino | Analysis of hemoglobin |
FR2520235A1 (fr) * | 1982-01-27 | 1983-07-29 | Bel Fromageries | Procede de separation d'immunoglobulines a partir de colostrum |
CA1221307A (en) † | 1982-12-02 | 1987-05-05 | Nobutaka Tani | Adsorbent and process for preparing the same |
US4724207A (en) * | 1984-02-02 | 1988-02-09 | Cuno Incorporated | Modified siliceous chromatographic supports |
US4834974A (en) * | 1986-01-13 | 1989-05-30 | Protein Technologies, Inc. | Immunologically active whey fraction and recovery process |
US4816252A (en) * | 1985-04-15 | 1989-03-28 | Protein Technology, Inc. | Product and process for transferring passive immunity to newborn domestic animals using ultrafiltered whey containing immunoglobulins |
NZ216094A (en) * | 1985-05-15 | 1989-06-28 | Commw Serum Lab Commission | Method for purification of an immunoglobulin |
US4697003A (en) * | 1985-11-01 | 1987-09-29 | Miles Laboratories, Inc. | Method of preparing alpha-1-proteinase inhibitor |
US5242823A (en) * | 1986-03-07 | 1993-09-07 | International Genetic Engineering, Inc. | Cloning of the 38kd Mycoplasma hyorhinis regression-associated antigen |
JPH0662436B2 (ja) * | 1986-05-19 | 1994-08-17 | 株式会社ミドリ十字 | 静注用免疫グロブリン製剤の製造方法 |
IE61701B1 (en) * | 1986-07-17 | 1994-11-30 | Morinaga Milk Industry Co Ltd | Process for producing bovine lactoferrin in high purity |
EP0390798B1 (de) * | 1987-09-16 | 1995-07-12 | International Genetic Engineering, Inc. (Ingene) | Mit regressionsassoziierten antigenen in zusammenhangstehende methoden und verbindungen |
US5451662A (en) * | 1987-10-23 | 1995-09-19 | Schering Corporation | Method of purifying protein |
US5216127A (en) * | 1987-11-20 | 1993-06-01 | Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Adsorbent for serum amyloid protein |
DE68920126T2 (de) * | 1988-11-23 | 1995-05-11 | Cytec Tech Corp | Poröse Polymerperlen und Verfahren. |
JPH07119767B2 (ja) * | 1989-03-07 | 1995-12-20 | 積水化学工業株式会社 | 梅毒検査用試薬及びその製造法 |
US5418284A (en) * | 1989-05-08 | 1995-05-23 | Cytec Technology Corp. | Surface-modified polyacrylonitrile beads |
SE8902315D0 (sv) * | 1989-06-27 | 1989-06-27 | Pharmacia Ab | Anjonbytare |
US5439882A (en) * | 1989-12-29 | 1995-08-08 | Texas Tech University Health Sciences Center | Blood substitute |
US5510439A (en) * | 1993-11-04 | 1996-04-23 | Nalco Chemical Company | Vinyl alkoxysilane copolymer polyelectrolytes for pitch deposit control |
SE9601789D0 (sv) * | 1996-05-10 | 1996-05-10 | Pharmacia Biotech Ab | Beverage stabilization |
US6187374B1 (en) | 1998-09-02 | 2001-02-13 | Xim Products, Inc. | Coatings with increased adhesion |
SE9904197D0 (sv) * | 1999-11-22 | 1999-11-22 | Amersham Pharm Biotech Ab | A method for anion exchange adsorption on matrices carrying mixed mode ligands |
JP4433617B2 (ja) | 2001-01-24 | 2010-03-17 | 東ソー株式会社 | アニオン交換体、その製造方法及びそれを用いた用途 |
US6624205B2 (en) | 2001-01-29 | 2003-09-23 | Tosoh Corporation | Cation exchanger, process for producing same, and its use |
US6833238B2 (en) * | 2002-01-04 | 2004-12-21 | Applera Corporation | Petal-array support for use with microplates |
US20040018559A1 (en) * | 2002-07-26 | 2004-01-29 | Applera Corporation | Size-exclusion ion-exchange particles |
US20060160122A1 (en) * | 2004-02-18 | 2006-07-20 | Applera Corporation | Polyelectrolyte-coated size-exclusion ion-exchange particles |
US20050196856A1 (en) * | 2004-02-18 | 2005-09-08 | Applera Corporation | Polyelectrolyte-coated size-exclusion ion-exchange particles |
US20050181378A1 (en) * | 2004-02-18 | 2005-08-18 | Applera Corporation | Polyelectrolyte-coated size-exclusion ion-exchange particles |
EP1831344B1 (de) * | 2004-10-21 | 2011-12-28 | Diageo North America, Inc | Verfahren zur herstellung von gereinigten getränkeprodukten |
MX2010008655A (es) * | 2008-02-06 | 2010-10-06 | Biocon Ltd | Un metodo para purificar un peptido. |
IN2015DN02055A (de) | 2012-09-17 | 2015-08-14 | Grace W R & Co | |
JP6914189B2 (ja) | 2014-05-02 | 2021-08-04 | ダブリュー・アール・グレース・アンド・カンパニー−コーンW R Grace & Co−Conn | 官能化担体材料並びに官能化担体材料を作製及び使用する方法 |
KR102566292B1 (ko) | 2015-06-05 | 2023-08-10 | 더블유.알. 그레이스 앤드 캄파니-콘. | 흡착성 바이오프로세싱 정화제와 이의 제조 및 사용 방법 |
IT201800004721A1 (it) * | 2018-04-19 | 2019-10-19 | Dispositivo per la stabilizzazione del vino ed altre bevande vegetali e relativo procedimento di stabilizzazione. | |
CN112521485A (zh) * | 2020-12-17 | 2021-03-19 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种犬血白蛋白的制备方法、利用其得到的犬血白蛋白和应用 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3234199A (en) * | 1958-12-18 | 1966-02-08 | Allen F Reid | Ion exchange process for separating proteins |
US3557082A (en) * | 1969-01-24 | 1971-01-19 | Tee Pak Inc | Process for separating ionic materials from component mixtures |
DE2319581C2 (de) * | 1973-04-18 | 1975-03-27 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur chromatographischen Fraktionierung von Molke |
FR2236552B1 (de) * | 1973-07-13 | 1977-05-06 | Rhone Progil | |
JPS5426396B2 (de) * | 1974-06-04 | 1979-09-04 |
-
1976
- 1976-08-16 US US05/714,308 patent/US4100149A/en not_active Expired - Lifetime
- 1976-08-26 SE SE7609479A patent/SE426911B/xx unknown
- 1976-08-26 IT IT51043/76A patent/IT1066221B/it active
- 1976-08-26 JP JP51102167A patent/JPS5257200A/ja active Granted
- 1976-08-27 AU AU17217/76A patent/AU500134B2/en not_active Expired
- 1976-08-27 SU SU762392409A patent/SU688124A3/ru active
- 1976-08-27 MX MX764865U patent/MX4333E/es unknown
- 1976-08-27 DK DK389176A patent/DK156577C/da active
- 1976-08-27 DE DE2638764A patent/DE2638764C3/de not_active Expired
- 1976-08-27 NZ NZ181884A patent/NZ181884A/xx unknown
- 1976-08-27 NO NO762959A patent/NO145508C/no unknown
- 1976-08-27 RO RO7687387A patent/RO78229A/ro unknown
- 1976-08-27 ES ES451047A patent/ES451047A1/es not_active Expired
- 1976-08-27 CH CH1092476A patent/CH602780A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1976-08-27 IE IE1918/76A patent/IE43536B1/en not_active IP Right Cessation
- 1976-08-27 CA CA260,064A patent/CA1069843A/en not_active Expired
- 1976-08-27 BR BR7605661A patent/BR7605661A/pt unknown
- 1976-08-27 YU YU02096/76A patent/YU209676A/xx unknown
- 1976-08-27 AR AR264478A patent/AR209193A1/es active
- 1976-08-27 NL NLAANVRAGE7609562,A patent/NL178294C/xx not_active IP Right Cessation
- 1976-08-27 GB GB35774/76A patent/GB1513195A/en not_active Expired
Cited By (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2396764A1 (fr) * | 1977-07-04 | 1979-02-02 | Ferrari Lorenzo | Procede de production de lysozyme |
DE2943190A1 (de) * | 1978-10-27 | 1980-04-30 | Rhone Poulenc Ind | Verfahren zur gewinnung von hochreinen nichtdenaturierten proteinen |
FR2452881A1 (fr) * | 1979-04-04 | 1980-10-31 | Bel Fromageries | Procede de preparation de proteines animales ou vegetales, particulierement de lactoproteines, et nouveaux produits ainsi obtenus |
DE3020075A1 (de) * | 1979-05-29 | 1980-12-04 | Eni Ente Naz Idrocarb | Verfahren zur koagulation von milch |
FR2470800A1 (fr) * | 1979-11-29 | 1981-06-12 | Rhone Poulenc Ind | Procede d'epuration des jus de betteraves au moyen d'echangeurs d'ions |
FR2490676A1 (fr) * | 1980-09-19 | 1982-03-26 | Rhone Poulenc Ind | Procede d'epuration des jus de canne a sucre |
EP0132178A1 (de) * | 1983-07-07 | 1985-01-23 | Institut Merieux | Verfahren zur Herstellung der wichtigsten Proteine des hämolysierten Bluts in einer nichtdenaturierten Form |
EP0143369A2 (de) * | 1983-11-25 | 1985-06-05 | Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha | Poröses Adsorptionsmittel für Lipoproteine mit geringer Dichtigkeit |
EP0143369A3 (en) * | 1983-11-25 | 1986-03-19 | Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha | A porous adsorbent for adsorbing low density lipoproteins |
EP0180164A3 (de) * | 1984-10-26 | 1987-08-05 | Reanal Finomvegyszergyar | Verfahren zur Herstellung von Lysozym |
EP0180164A2 (de) * | 1984-10-26 | 1986-05-07 | Reanal Finomvegyszergyar | Verfahren zur Herstellung von Lysozym |
FR2575666A1 (fr) * | 1985-01-04 | 1986-07-11 | Centre Nat Rech Scient | Procede et dispositif pour la separation chromatographique de macromolecules biologiques |
EP0189611A1 (de) * | 1985-01-04 | 1986-08-06 | Etablissement Public dit: CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (CNRS) | Verfahren zur chromatographischen Trennung von biologischen Makromolekülen |
US4976865A (en) * | 1985-01-04 | 1990-12-11 | Centre National De La Recherche Scientifique | Method for the separation of biological macromolecules by chromatography |
FR2616628A1 (fr) * | 1987-06-19 | 1988-12-23 | Entremont Sa | Procede pour extraire des proteines du lactoserum par adsorption et elution |
EP0298875A1 (de) * | 1987-06-19 | 1989-01-11 | ENTREMONT S.A. Société dite: | Verfahren zur selektiven Extraktion der Metall-Proteine aus Molke durch Adsorption und Eluierung |
US4946944A (en) * | 1987-06-19 | 1990-08-07 | Entremont S.A. | Process for the selective extraction of metalloproteins from whey by adsorption and elution |
EP0298414A2 (de) * | 1987-07-08 | 1989-01-11 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Verfahren zur Reinigung von saurer Protease |
EP0298414A3 (de) * | 1987-07-08 | 1990-02-28 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Verfahren zur Reinigung von saurer Protease |
EP0320194A1 (de) * | 1987-12-07 | 1989-06-14 | Japan Medical Supply Co., Ltd. | Absorbensmittel für ungebundenes Hämoglobin |
EP0416748A1 (de) * | 1989-08-07 | 1991-03-13 | J.T. Baker Inc. | Feste Träger aus quaternisierter PEI-Kieselsäure für die Chromatographie |
WO1991001808A1 (de) * | 1989-08-11 | 1991-02-21 | B. Braun Melsungen Aktiengesellschaft | Verwendung von tentakel-kationenaustauschern zur selektiven eliminierung von low-density-lipoproteinen (ldl), fibrinogen und/oder harnstoff aus flüssigkeiten |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IE43536L (en) | 1977-02-28 |
DK389176A (da) | 1977-03-01 |
DE2638764B2 (de) | 1978-09-14 |
JPS5715840B2 (de) | 1982-04-01 |
ES451047A1 (es) | 1978-05-01 |
DK156577C (da) | 1990-01-29 |
AU500134B2 (en) | 1979-05-10 |
RO78229A (ro) | 1982-02-26 |
US4100149A (en) | 1978-07-11 |
AR209193A1 (es) | 1977-03-31 |
AU1721776A (en) | 1978-03-02 |
SE426911B (sv) | 1983-02-21 |
YU209676A (en) | 1982-10-31 |
IT1066221B (it) | 1985-03-04 |
SU688124A3 (ru) | 1979-09-25 |
IE43536B1 (en) | 1981-03-25 |
NO145508B (no) | 1981-12-28 |
NO762959L (de) | 1977-03-01 |
BR7605661A (pt) | 1978-03-21 |
SE7609479L (sv) | 1977-03-01 |
NL178294C (nl) | 1986-03-03 |
DK156577B (da) | 1989-09-11 |
NL7609562A (nl) | 1977-03-02 |
DE2638764C3 (de) | 1981-02-12 |
NZ181884A (en) | 1978-04-28 |
NO145508C (no) | 1982-04-14 |
JPS5257200A (en) | 1977-05-11 |
GB1513195A (en) | 1978-06-07 |
MX4333E (es) | 1982-03-26 |
CA1069843A (en) | 1980-01-15 |
CH602780A5 (de) | 1978-07-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE2638764A1 (de) | Verfahren zum abtrennen von proteinen | |
DE2413362C2 (de) | Gelprodukt auf Basis von Agarose sowie Verwendung desselben für hydrophobe Entsalzungsadsorption | |
US4675384A (en) | Fractionation/purification of plasma by ion exchange chromatography | |
DE2026076C3 (de) | Verfahren zum selektiven Adsorbieren von einem oder mehreren, spezifischen, nicht-viralen Proteinen aus flüssigem Plasma oder Serum | |
DE69317154T2 (de) | Verfahren zur Herstellung vernetzter Copolymere von Methacrylsäureanhydrid | |
DE2633246C2 (de) | Verwendung eines Materials aus einem porösen mineralischen Oxid zur chromatographischen Reinigung oder Trennung von biologischen Makromolekülen | |
DE3382723T2 (de) | Adsorbens und Verfahren zu dessen Herstellung. | |
DE3874527T2 (de) | Trenn- und reinigungsverfahren fuer laktoferrin von milch unter verwendung einer sulfatverbindung. | |
EP0154246B1 (de) | Phasenträger für die Verteilungschromatographie von Makromolekülen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung | |
DE2840503A1 (de) | Material zur reversiblen fixierung biologischer makromolekuele, verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung | |
DD145108A1 (de) | Cyclodextrin-polyvinylalkohol-polymere und verfahren zu deren herstellung in form von folien,fibern,perl-und blockpolymerisation | |
CH634334A5 (de) | Neues glycoprotein und verfahren zu dessen herstellung. | |
EP0424698B1 (de) | Zur Eliminierung von Biomakromolekülen insbesondere LDL und Endotoxinen, aus Vollblut in extrakorporalem Kreislauf geeignetes Adsorbens | |
DE1442443C3 (de) | Verwendung von vernetzten PoIyacrylamiden zur chromatographischen Trennung von proteoiytischen Enzymen und zur Entwässerung von Proteinlösungen | |
CH647158A5 (de) | Verfahren zur reinigung von interferon. | |
IE61993B1 (en) | "Process for the selective extraction of metalloproteins from whey by adsorption and elution" | |
DE3609021A1 (de) | Chromatographisches trennmedium fuer die schnelle analyse von kleinen proben | |
DE2552510B2 (de) | Biologisch aktive Verbindungen und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
DE69522564T2 (de) | Alkalibeständiges proteinadsorbens | |
DE2742150C2 (de) | ||
DE2723454C3 (de) | Beständiger Komplex aus Träger und Aminoacylase | |
DE68908147T2 (de) | Feine teilchen von poröser ionenaustauschercellulose, herstellungsverfahren und affinitätsträger. | |
WO1991001808A1 (de) | Verwendung von tentakel-kationenaustauschern zur selektiven eliminierung von low-density-lipoproteinen (ldl), fibrinogen und/oder harnstoff aus flüssigkeiten | |
DE3878577T2 (de) | Verwendung von funktionellen polymerharzen als stationaere phase in der affinitaetschromatographie fuer die reinigung des wachstumsfaktors und entsprechendes reinigungsverfahren. | |
DE3713705A1 (de) | Kationenaustauschermaterial und verfahren zur herstellung |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C3 | Grant after two publication steps (3rd publication) |