SU688124A3 - Способ отделени протеинов - Google Patents

Способ отделени протеинов

Info

Publication number
SU688124A3
SU688124A3 SU762392409A SU2392409A SU688124A3 SU 688124 A3 SU688124 A3 SU 688124A3 SU 762392409 A SU762392409 A SU 762392409A SU 2392409 A SU2392409 A SU 2392409A SU 688124 A3 SU688124 A3 SU 688124A3
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
solution
resin
ion exchange
proteins
column
Prior art date
Application number
SU762392409A
Other languages
English (en)
Inventor
Мейе Франсуа
Мирабель Бернар
Original Assignee
Рон-Пуленк Эндюстри (Фирма)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from FR7526530A external-priority patent/FR2321932A1/fr
Priority claimed from FR7622985A external-priority patent/FR2359634A2/fr
Application filed by Рон-Пуленк Эндюстри (Фирма) filed Critical Рон-Пуленк Эндюстри (Фирма)
Application granted granted Critical
Publication of SU688124A3 publication Critical patent/SU688124A3/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2462—Lysozyme (3.2.1.17)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
    • A23C9/146—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by ion-exchange
    • A23C9/1465—Chromatographic separation of protein or lactose fraction; Adsorption of protein or lactose fraction followed by elution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/001—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from waste materials, e.g. kitchen waste
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/08—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from eggs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/16—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from waste water of starch-manufacturing plant or like wastes
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J47/00—Ion-exchange processes in general; Apparatus therefor
    • B01J47/014—Ion-exchange processes in general; Apparatus therefor in which the adsorbent properties of the ion-exchanger are involved, e.g. recovery of proteins or other high-molecular compounds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J47/00—Ion-exchange processes in general; Apparatus therefor
    • B01J47/016—Modification or after-treatment of ion-exchangers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
    • C07K1/18—Ion-exchange chromatography
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
    • C07K16/065—Purification, fragmentation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12H—PASTEURISATION, STERILISATION, PRESERVATION, PURIFICATION, CLARIFICATION OR AGEING OF ALCOHOLIC BEVERAGES; METHODS FOR ALTERING THE ALCOHOL CONTENT OF FERMENTED SOLUTIONS OR ALCOHOLIC BEVERAGES
    • C12H1/00—Pasteurisation, sterilisation, preservation, purification, clarification, or ageing of alcoholic beverages
    • C12H1/02—Pasteurisation, sterilisation, preservation, purification, clarification, or ageing of alcoholic beverages combined with removal of precipitate or added materials, e.g. adsorption material
    • C12H1/04—Pasteurisation, sterilisation, preservation, purification, clarification, or ageing of alcoholic beverages combined with removal of precipitate or added materials, e.g. adsorption material with the aid of ion-exchange material or inert clarification material, e.g. adsorption material
    • C12H1/0432—Pasteurisation, sterilisation, preservation, purification, clarification, or ageing of alcoholic beverages combined with removal of precipitate or added materials, e.g. adsorption material with the aid of ion-exchange material or inert clarification material, e.g. adsorption material with the aid of ion-exchange material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S526/00—Synthetic resins or natural rubbers -- part of the class 520 series
    • Y10S526/936—Physiological use, e.g. pharmaceutical, veterinary, dental
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/829—Blood
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/832—Milk; colostrum
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/859—Waste, waste material, refuse or sludge, e.g. effluents, fecal matter
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T428/00—Stock material or miscellaneous articles
    • Y10T428/29—Coated or structually defined flake, particle, cell, strand, strand portion, rod, filament, macroscopic fiber or mass thereof
    • Y10T428/2982—Particulate matter [e.g., sphere, flake, etc.]
    • Y10T428/2991—Coated
    • Y10T428/2998—Coated including synthetic resin or polymer

Description

(54) СПОСОБ ОТДЕЛЕНИЯ ПРОТЕИНОВ
1
Изобретение относитс  к способу отделени  протеинов посредством ионного обмена и может найти применение в биологии, фармацевтической и пищевой промышлениости при очистке сточных вод.
В пептидной химии широко используют очистку синтетических и выделенных из природного сьфь  пептидов ионным обменом 1, (2 и 3.
В качестве ионообменникОв используют ДЕАЕ-Сефадекс А-50, СМ-Сефадекс С-50 и другие производные целлюлозы и декстрана.
Протеи ввод т в колонку, заполненную набухшим носителем в водном или буферном растворе с различными значени ми рН и ионной силы . В зависимости от сто щей задачи злюент и ионообменник могут быть подобраны таким образом , что или пептид, шш примеси сорбирукиг на колонке, а затем в случае сорбции пептида, последний вымывают, мен   ионную силу и рН элюёнта.
Недостатками нэвестных способов  вл ютс  низка  механическа  1фочность ионообмеинико, их быстрое старение, уплотнение сло  при хроматографирований , что снижает скорость прохождени  элюёнта и удшш ет процесс: изменение
ионообменника в зависимости от величины рН и ионной силы рабочей среды; способность их к биологическому разложению и отсутствие возможности их стерилизации, что исключает использование их при приготовлении фармацевтических препаратов.
Цель изобретени  - упрощение процесса отделени  проте1шов.
Это достигаетс  способом отделени  протеинов путем контактировашы протеинов в водном буфере с ионообменной смолой и последующего элюировани  -протеинов буферным водным раствором щ)и изменении ионной силы и рН буфера , заключающимс  в том, что в качестве ионообменной смолы используют пористый минеральный носитель с размером частиц от 5 мкм до 2 мм, удельной поверхностью от 5 до , .диаметром пор от 500 до 2500 А°, объемом пор от 0,4 до 2 мл/г, покрытый пленкой сшитого поперечными св з ми полимера плотностью от 1,05 до 8,9 мг/м, содержащего или несущего анионообменные грушш,представлешше формулам
(t-CH ,-N-CH,- ИЛИ -CHj-N-(R3)X
R
где R.имеет одинаковые или различные значени  и  вл етс  алкилом или гщфоксиалкилом Cj -СлX - хлорнд., сульфат, нитрат, фосфат или цит1)ат, либо катконообмешгые группы, например, карбоксильную или сульфогруплу с ионообменной способносЬю от 0,3 до 1,95 мэкв/г.
Предпочтительно использование в качестве минерального носител  окиси алюмини  или двуокиси крем1ш  и в качестве сшитого поперечными св з ми полимера - продукта полимеризации эпоксидных соединений и полиаминов; смеси виниловых мономеров; стирола и его производных акриловой кислоты, метакриловой кислоты с полифункциональными мономерами (диакрилат или диметакрилат моно- или полиалкилеетликол , ви нилтриалкоксисилана или винилтригалогенсютана)
Преимуществом способа  вл ете   ускорение процесса, так, например, при очистке альбумина и при выделении |р-глобулина из сыворотки крови скорость процесса составл ет 180 и ЮОют/час cooTBeTCTBefrao.
Кроме того, увелшпшаетс  срок службы смолы . После 10 последовахелыю проведенных операций никаких признаков старени  смолы не было обнаружено.
Предлагаемый способ позвол ет отдел ть протеины от их растворов, таких как молочна  сыворотка (лактссерум), пиво, кровь, органические экстракты и все промышленные стоки; от остаточных продуктов скотобойни, пищевого производства, крахмального производства  вл  сь , так11м образом, средством очистки укааанш 1Х сточных продуктов.
Отделение протеинов достигаетс  в результате контактировани  обрабатываемого раствора при телшературе, и таких значений ионной силы и рН, которые обеспечивают совместимость npOTeiffiOB с ионообменной смолой, Бь«бор которой определ етс  услови ми отделени  протеинов . Таким образом, на ионообмеш1ой смоле происходит фиксаци  либо требуемого протеина , либо других протеинов, содержащихс  в растворе, либо всех протеинов раствора.
В случае, когда нужно получить несколько протеинов, ИХ отделение и концентрирование может быть достигнуто контактироватшем о6 .рабатываемого раствора последовательно с несколькими катионообмешп 1ми смолами или с несколькими катионо- и анионообменными смолами . Таким образом, возможна выборочна  фиксаци  протеинов из раствора на каждой смоле.
В случае, если требуемый протеин фиксируетс  на смоле из протеинового раствора, то затем его отдел ют элюированием раствором, имеющим величину рН и ионную силу, отличные от величшш рН и ионной силы фиксируемого раствора, но совместимые с протеином.
Таким образом, достигаетс  не только отделение протеина от раствора, но и его очистка и концентрирование. Так, например, можно отдел ть и концентрировать альбумин, пепсин, протеины лактосерума посредством анионообменной смолы и лизоцим посредством катионообменной смолы.
Если же необходимо, чтобы требуемый протеин осталс  в протеиноволт;: растворе, то при этом фиксируют другие протеины смеси,происходит отделение требуемого протеина от других протеинов и, таким образом, обеспечиваетс  его очистка. Элюирование фиксированных протеинов приводит к избирательному или неизбирательному отделению протеинов и их концентривагшю .Аналогично происходит отделение | -глобулина посредством анионообменной смолы.
В случае, когда несколько требуемых протеинов фиксируетс  на смоле одновременно, то Элюирование раствором с величиной рН и ионной силой отличными от величины рН и ионной силы фиксируемого раствора приводит к разделению протеинов и их концентрированию. Элюирование растворами с повышенными значени ми рН и ионной силы приводит кроме избирательного отделени  протеинов к их очистке и концентрированию. В данном случае зтр относитс , главным образом, к сыворотке.
Если есть необходимость удалить протеины, они фиксируютс  на смоле из их раствора. Таким образом получают очище1шые от протеинов растворы. Элюировайие фиксированных протеиFiOB позвол ет повторно использовать смолу. В частности, это относитс  к осветлению пива и обработке растворов, содержащих гемоглобин, посредством катионообменных смол.
Отделение протеинов можно осуществл ть с идентичными результатами как прерывным, так и непрерывным способом.
Получен1а1е результаты 1фактически не завис т от концетграции обрабатываемого раствора, но завис т от типа иoнoc бмe шoй группы смолы , величины рН, ионной силы и расхода как обрабатываемого раствора, так и раствора элюировани .
Пример 1. Получение ионообменной смолы .
100 г двуокиси кремши с размером частиц от 100 до 200 мкм, удельной поверхностью 24 , средним диаметром пор 1400 А и объемом пор 1 мл/г сушат при 150°С при пониженном давлении п ть часов. Полученную высуше11ную двуокись кремни  ввод т в раствор, содержащий 250 мл хлористого метилена, 60 мл ,перегнашгого стирола, 20 мл винилтриэтоксисилана и 0,5 г азобис-изобутиронитрила. Хлористый метилен испар ют при температуре окружающей среды и пропитанную двуокись кремни  нагревают при 120° С шесть часов при дав лении 3 бара. .Из приготовленной двуокиси кре,л1  получают суспензию в 300 мл ксилола, нагревают ее при температуре кипени  два часа. После фильтрации двуокись кремни  промывают в ацетоне а затем высушивают. 50 г полученной двуокиси кремни  суспензируют в-180 г хлорметилового эфира, содержащего 6 г четыреххлористого олова, затем смесь нагревают с обратным холодильником в тетение четырех часов в безводной среде. Посл охлаждени  двуокись кремни  отжимают, промывают 200 мл смеси диоксан/вода (50:50), содержащей 10 мл сол ной кислоты, а затем водой до нейтральной реакции и сушат. Содержание углерода составл ет 4,1%, хлора - 1,90%. Полученный 1фодукт суспензируют в 150 мл водного раствора, содержащего 30% триметиламина , и выд)живают 8 дней при комнатной температуре. Отымают, промывают, получают ионообменную смолу, несущую функциональные группы: CH -N СНзС1 . I котора  имеет следующие характернстнкн: содержание углерода 4,8%; содержание хлора 2%; содержание азота 0,9%; количество осажденного полимера 3,3 ионообменна  способность 0,5 мэкв/г. Обработка раствора альбумина. 10 г полученной ионообменной смолы ввод т в колонку диаметром 1 см и оставл ют под давлением, после чего 0,01 М буферным раствором фосфата рН смолы довод т до 6,5. Раствор альбумина с концентрацией 1 вес.% в том же буферном растворе ввод т со скоростью 180 мл/час до насыщени  колонки, что соответствует примерно 200 мл раствора. Затем смолу промывают 100 мл буферного раствора. Фиксированный альбумин элюируют путем перк   ции раствора ШМаСб в том же буферном ра створе, расход которого составл ет 180 мл/час, 45 мл раствора обеспечивает извлечение альбумина с концентрацией 3,3 вес.%. Таким образом , смола имеет ионообменную способность с альбумином пор дка 150 мг/г, что позвол ет концентрировать раствор альбумина. После тридцати последовательных операций н обнаружено никаких признаков старени  ионооб менной смолы. Пример 2. Аналогично примеру 1, использу  раствор альбумина с конц гнтрацией 0,2 вес получали такие же хорошие результаты. Пример 3. Аналогично примеру 1, но злюирование протеина провод т 0,05 М буферным раствором цитрата (рН 6,5). Получают 59 мл раствора альбумина концентрацией 2,5 вес.%. Пример 4. .Обработку раствора альбумина провод т аналогично примеру 1, но использу  . 41 г ионообменной смолы в колонке диаметром 1 см и при расходе элюента 80 мл/час. Получают раствор альбумина с концентрацией 7 вес.%. Установлено, что увеличение высоты колонки и уменьшение скорости злюировани  приводит к увеличению концентрации получаемого раствора. Пример 5. Получение ионообменной смолы. В 150 мл хлористого метилена, содержащегос  6,5 г N, М-быс-(эпокси-2, 3-пpoпнл)-зтилaминa и 3 г тризтилентетраамкна, ввод т 50 г двуокиси кремни  с размером частиц от 40 до 100 мкм, удельной поверхностью 37 , днаметром пор 1100 А н объемом пор 1,05 мл/t. Хлористый метилен испар ют при температуре окружающей среды; пропитанную двуокись кремни  нагревают при 60° С 60 ч, и промывают кип щей водой, а затем ацетоном. Получают смолу, состо щую из двуокиси кремни , покрытую сшитым полимером, содержащую функциональные группы; -СН -Ы-СНз, С-зНз котора  имеет следующие характеристики: содержание углерода 8,8%; содержание азота 2,4%; количество осажденного полимера 3,3 мг/м; ионообменна  способность 1. мэкв/г. Отделение I -глобулина. 10 г полученной ионообменной смолы ввод т в колонку диаметром 1 см и оставл ют под давлением. Смолу подкисл ют 1 н. раствором сол ной кислоты, затем добавл ют 0,02 М буферный раствор фосфата, довод т величину рН до 6,5. Осуществл ют )ованне 20 мл лишенного лилидов и  иофилизованного 1 вес.%-ного раствора сыворотки. В том же буферном растворе фосфата. Расход раствсфа 100 мл/час. Смолу промывают 50 мп того же буферного раствора фосфата. Раствор, выход щий из колонки , содержит чистый у -глобушш. Д зугие протеины, а именно о-глобулины, /3глобулины и альбумин, которые присутствуют в исходном растворе, фиксируютс  на смоле. Их извлекают элюнрованием ЗМ раствором NaCE в том же буферном фосфатном растворе. Если проводить злюирование буферным раствором повышенной ионной силы, то с увеличением концентрации NaCE получают растворы, обогащенные о(-глобу71инами, глобулинами и альбумином. Пример 6. Получение ионообменной смолы Аналогично примеру 5, но использу  двуокись кремни  с размером частиц от 100 до 200 мкм и 6,5 г М,М-бмс-(эпокси-2,3-прогаш)-бутиламина . Получают ионообменную смолу, состо щзто КЗ двуокиси кремни , покрытой сшитым полимером , содержащую функциональные группы -CHi-N-CHj котора  имеет следз ющие характеристики: содержание углерода 9,2%; содержание азота 2,5%; количество осажденного полимера 3,2 ионообменна  способность 1,1 мзкв/г. Экстракци  протеинов. 10 г полученной ионообменной смолы ввод т в колонку диаметром 1 см и оставл ют под давлением. Смолу подкисл ют 0,1 н. раствором сол ной кислоты, а затем 0,01 М буферным раствором фосфата до рН 7,5. Провод т перкол щио в том же буферном растворе фосфата 30 мл 1 вес.%-ного раствора ультрафилырованного лактосер5а 1а, содержащего 75 вес.% протеинов, при расходе раствора 80 мл/час. Смолу промывают 100 мм того же буферного раствора фосфата.. Раствор, выход щий из колонки, содержит жировые продукты и лактозу, присутствую1цую Б исходном растворе. Протеины, лактоальбумины, лактоглобулины, сывороточный альбумин (серумальбумин) и не значительна  часть. иммуноглобулинов, присутствующих в исходном растворе, фиксируют на смоле. Путем элюировани  буферным раствором Мак Ильваина (0,05 М, рН 4) извлекают отделенные и очищенные протеины. Пример 7. Экстракци  протеинов. 20 г ионообменной смолы, аналогичной примеру 1, но с размером частиц от 200 до 500 мкм, ввод т в колонку диаметром 2,5 см и оставл  ют под давлением. Смолу подкисл ют 0,1 н раствором сол ной кислоты, затем 0,01 М буферным раствором нее до рн 7. Осуществл ют перкол цию 600 мл полученного раствора, состо щего из 300 мл буферного раствора HCI и 300 мл лактосерутла, не содqpжaщeгo лшшдов, с концентрацией растворимых протеинов 0,5%, при расходе раствора 300 мл/час. Затем смолу промывают 100 мл буферного раствора. Раствор, выход щий из колонки, содержит лактозу, присутствующую в исходном растворе Проте1шы: лактоальбумины, лактоглобулины серумальбумин и незначительна  часть иммуноглобулинов , присутствующие в исходном растворе , фиксируют на смоле. Их элюируют проп канием через колонку буферного раствора , 1 М цитратгидрата окиси натри  (рН 7). Поученный раствор содержит все фиксированные ротеины концентращ1ей 4 вес.%. Така  операци  обеспечивает получение смеи чистых протеинов, не содержащих лактозу, более концентрированном растворе, чем исодный раствор. После тридцати последовательных операций е обнаружено никаких признаков старени  онообменной смолы. Пример 8. Обработка раствора пепсина. 3 г ионообменной смолы, как в примере 1, вод т в колонку диаметром 1 см. Смолу промывают 100 мл дистиллированной воды, затем перколируют 150 мл раствора сырого пепсина, содержащего 20 ед. пепсина/мл при расходе раствора 100 мл/час. Смолу промывают 20 мл дистиллированной воды. Раствор, выход щий из колонки, и водные промывки не про вл ют активности; весь пепсин фиксируют на смоле. Загр знени  остаютс  в растворе. Фиксированный пепсин элюируют перкол цией 1 М раствором NaCE. Расход раствора 100 мл/час, 16 мл зтого раствора обеспечивает извлечение 170 ед. пепсина/мл раствора . Установлена высока  концентраци  полученного раствора. После промывки 50 мл дистиллированной воды смола может быть использована повторно. После дес ти последовательных операций не обнаружено никаких признаков старени  ионообменной смолы. Пример 9. Получение ионообменной смолы . 100 г двуокиси кремни  с размером частиц от 100 до 200 мкм, удельной поверхностью 25 , q)eдний диаметр пор 1400 А и объем пор 1,1 мл/г, пропитывают раствором 200 мл хлористого метилена, содержащего 24 г акриловой кислоты, 6 г диметакрилата дизтиленгликол  и 0,4 г перекиси бензоила. Хлористый метилен испар ют при температуре окражующей среды и атмосферном давлении до посто нного веса; затем пропитанную двуокись кремни  нагревают при 80° С в течение 6 ч. Суспензию двуокиси кремни  в 300 мл воды кип т т шесть часов. Отфильтровывают, промывают в ацетоне, сущат в вакууме при 80° С. Получают ионообменную смолу, несущую функционалып .1е группы СООП, котора  имеет следующие характеристики: содержание углерода 10,55%; количество осажденного полимера 7,2 ионообменна  способность 1,05 мэкв/г. Обработка раствора лизоцима. 10 г получешюй ионообменной смолы ввод т в колонку диаметром 1 см и оставл ют
под давлением, после чего смолу перевод т в НН4-форму провод т перкол цию двух литров водного 0,5 М раствора ацетата аммони  при рЙ 8,2. Величину рН смолы довод т до 6,5 добавлением 100 мл 0,02 М буферного раствора трис-малешювой кислоты.
Перкол цию раствора лизоцима концентрацией 1 вес.% провод т в том же буферном растворе при расходе 180 мл/час, до насыщени  коловки , что соответствует примерно 200 мл рас вора. Затем смолу промывают 100 мл 0,02 М буферного раствора трис-малеиновой кислоты с величиной рН 8,2. Фиксированный лизоцим элюирзтот перкол цией 1 М раствором NaCI в том же буферном растворе, со скоростью 180 мл/час, 50 мл раствора обеспечивает извлечение лизоцима. Полу чают раствор лизоцима с концентрацией 2,5 вес Показано, что смола имеет ионообменную способность в отношении лизоцима 125 мг/г, что позвол ет концентрировать раствор лизоцима . Пример 10. Получение ионообменной смолы . 100 г двуокиси кремни  с размером частиц от 100 до 200 мкм, удельной поверхностью 37 , средний диаметр пор 1200 А и объем пор 0,95 мл/г, пропитывают раствором 150 мл хлористого метилена, содержащим 60 мл стирола , 20 мл винилтризтоксисилана и 0,5 г азобис изобутиронитрила. Хлористый метилен испар ют при температуре окружающей среды при атмосферном давлении до достижени  посто нного веса, после чего пропитанную двуокись кремни  нагревают при 120° С в течение щести часов. Суспензцию двуокиси кремни  в 300 мл кси лола нагревают при температуре кипени  в течение щести часов. Двуокись кремни  отфильтр вывают и промывают в ацетоне, сущат при 80С 50 г модифицированной двуокиси кремни  суспензируют в 500 мл хлороформа к суспензии по капл м добавл ют раствор 50 г HSOjCt в 50 мл хлороформа. Смесь перемешивают при 50° С четыре часа, фильтруют, двуокись кремни  пром 1вают водой до нейтрального состо ни , ацетоном и сушат в вакууме при 80° С. Получают ионообменную смолу, несущую функциональные группы - ЗОэН, котора  имеет следующие характеристики: содержание углерода 4%; содержание серы 1,4%, количество осажденного полимера 2,8 ионообменна  способность 0,43 мэкв/г. Экстракци  гемоглобина. 10 г полученной ионообменной смолы ввод т в колонку диаметром 1 см, величину рН смолы довод т до 6,5 0,02 М буферным раство ром фосфата.
Осуществл ют перкол цию 500 мл раствора гемоглобина концентрацией 0,2 вес.% в том же буферном растворе, скорость пропускани  раствора через колонку 100 мл/час. Гемоглобин адсорбируетс  на ионообменной смоле. Выход щий из колонки бесцветный раствор не содержит гемоглобина.
Адсорбированный гемоглобин элюируют перкол цией 0,5 М раствором карбоната аммони . затем колонку промывают сначала 300 мл 0,1 н. гидрата окиси натри , затем 50 мл I н. HCI. Пример 11. Приготовление анионообменпой смолы. 100 г двуокиси кремни  с размером частиц от 100 до 200 мк, удельной поверхностью 24 , средний диаметр пор 1400 А и объем пор 1 мл/г, сушат 5 ч при 150° С и при пониженном давлении. . Сухую .двуокись кремни  диспергируют в растворе , содержащем 250 мл хлористого метилена , 60 мл перегнанного стирола, 20 мл винилтризтоксисилана и 0,5 г азобисизобутиронитрила. Хлористый метилен испар ют при комнатной температуре, а пропитанную двуокись кремни  6 ч выдерживают при 120° С и давлении 3 бара . Суспензию двуокиси кремни  в 300 мл ксилола выдерживают 2 ч при температуре кипени . Двуокись кремни  отфильтровывают и промывают ацетоном, сушат. Показано, что содержание углерода составл ет 4 вес.% по отношению к покрытой двуокиси кремни . 50 г полученной двуоьсиси кремни  суспен- дируют в смеси 180 г хлорметилового эфира и 6 г хлорного олова, затем смесь нагревают 4 ч с обратным холодильником. После охлаждени  двуокись кремни  отжимают , промывают 200 мл смеси равных количество диоксана и воды, содержащей 10 мл хлористоводородаой кислоты, затем водой до нейтрального значени  рН, и, наконец, сущат. Содержание углерода составл ет 4,1%, хлора - 1,90%. Полученное вещество превращают в суспензию в 150 мл 30%-ного водного раствора триметиламина и выстаивают 8 дней при комнатной температуре. Фильтруют, промывают и получают ионообменную смолу, несущую функциональные группы: It+J(-) CHg-N-CHjCl котора  имеет следующие характеристики: соержание углерода 4,8%; содержание хлора 2% содержание азота 0,9%; количество зафиксированного полимера 3,3 ионообменна  способность 0,5 мэкв/г. Обработка молочной сыворотки. 20 г анионообменной смолы помещают в колонку диаметром 2.5 см (колонка 1). 10 г смолы, полученной в примере 9 помеща ют в колонку с диаметром 2,5 см (колонка 2) Две колонки устанавливают посчедовательно, смолу промывают 500 мл воды. 500 мл Молочной сыворотки подщелачивают до рН 7,5 0,1 н. NaOH, фильтруют дл  удалени нерастворимых примесей и перколируют в колонке 1 и затем в колонке 2 со скоростью 300 мл/час. После осаждени  протеинов трихпоруксусной кислотой, показано, что выход ща  из колонки 2 молочна  сыворотка не содержит протеина. Смолу в обоих колонках промывают 100 мл воды. Проте1шы: лакталбумины, лактоглобулины, серумальбумин и очень небольша  часть иммуноглобулинов , присутствуюидае в составе , фиксируютс  на смоле в колонке 1. Их элюируют как описано в примере 7. , Протеины, зафиксирова1шые на смоле в колонке 2  вл ютс , главным образом, незафиксированными на смоле из колонки 1 иммуноглобулинами . Их элюируют п жол цией 1 М раствора карбоната аммони . Концентраил  иммуноглобулинов в полученном растворе составл ет около 3 вес.%. Иммуноглобулины составл ют около 16 вес.% всех протеинов, содержащихс  в исходном растворе. Перед повтортадм использованием колонки промывают 500 мл воды. После дес ти последовательных операций не обнаружено никаких признаков старени  ионообменной смолы. Пример 12. Извлечение протеинов из пива . 60 г ионообменной смолы, получе1шой в пр мере 9, помещают в колонку диаметром 2,5 см н промывают 250 мл воды. 3 л неосветленного пива перколируют со ск ростью 100 мл/тас. Выход щее из колонки пиво не дает осадка при добавлении пикриновой кислоты и имеет характеристики осветвле1шого пива. Зафиксированные на смоле вещества  вл ют с , главным образом, протеинами. Их злюируют перкол циеа 400 мл 0,1 н. хлористоводоро ной кислоты. Перед повторньш использованием смолу про мьгаают 250 мл вода Пример 13. Получение ионообменной смо лы. 100 г двуокиси кремни  с размером частиц т 0,5 до 2 мм, удельной поверхностью 5 , редним диаметром пор 2500 А, объемом пор ,4 мл/г, сушат при 150°С, при пониженном авлении 5 ч. Полученную сухую двуокись кремкремни  ввод т в раствор из 250 мл хлористого метилена, 60 мл стирола, 20 мл винилтрихлорсилана и 0,5 г азобис-изобутиронитрила. Хлористый метилен выпаривают при комнатной температуре, затем пропитаиную двуокись кремкк  нагревают при 120° С 6 ч и давлении Збар. Двуокись кремни  суспендируют в 300 мл ксилола и кип т т 2 ч. После фильтровани  двуокись кремни  промывают ацетоном, сушат. Содержание углерода составл ет 3,2 вес.% по отношению к покрытой двуокиси кремни . 50 г полученной двуокиси кремни  суспендируют в 180 г хлорметилового эфира, содержащего 6 г хлорного олова, затем смесь кип т т с обратш 1м холодильником 4 ч в безводной среде. После охлаждени  двуокись кремни  обезвоживают, промывают 200 мл смеси диоксана и воды (50:50), содержащей 10 мл сол ной кислоты, затем водой до нейтральной реакции и, наконец, сушат. Содержание углерода составл ет 3,8% и количество хлора 1,80%. : Полученный продукт суспендируют в 150 мл 30%-ного водного раствора трибутштамина и выдерживают 8 дней при комнатной температуре, После обезвоживагш  полученной получают ионообменную смолу несушзоо функциональные группы: -f)(-) Cl -N-Cj;iH9Cl котора  имеет следующие характеристики: содержание углерода 4,7%; содержание хлора 1,8%; содержание азота 0,5%; содержание фиксированного полимера 3,3 ионообменна  способность 0,3 мэкв/г. Обработка раствора альбумина. 10 г полученной ионообменной смолы помещают в колонку диаметром 1 см и оставл ют под давлением и 0,01 М буферным раствором фосфата рН среды довод т до 6,5. Раствор альбумина с концентрацией 1 вес.% в 0,01 М буферном растворе фосфата (рН 6,5) пропускают через колонку со скоростью 180 мл/час до насыщени , что соответствует приблизительно 200 мл раствора. Затем смолу промывают 100 мл этого же буферного раствора . Фиксированный альбумин извлекают, элюируют 1 М раствором NaCE в этом же буфере со скоростью 180 мл/час. 50 мл раствора представл ют собой раствор альбумина с концентра цией 1,8 вес.%. Показано, что ионообмеиник имеет объем альбумина 90 мг/г, он позвол ет концентрировать раствор альбумина. После 30 последовательных операций не обнаружено ник ких признаков старени  ионообменной смолы. Пример 14. Получение ионообменной смо лы. 100 г двуокиси кремни  с размером частиц от 100 до 200 мкм, удельной повер остью 50 , средний диаметр пор 650 А и объемо пор 1,05 мл/г, пропитывают раствором из 200 мл хлористого метилена, 34 г акриловой кислоты, 6 г димётакрилата диэтиленгликол  и 0,4 г перекиси бензоила. Хлористый метилен выпаривают при комнатной температуре и атмосферном давлении до посто нного веса; пропитанную двуокись крем ни  нагревают до 80° С 6 ч. Затем двуокись кремни  суспендируют в 300 мл воды и кип т т 6 ч, отфильтровывают , промывают ацетоном и сушат в вакууме при 80°С. Получают ионообменную смолу, несущую функциональные группы - СООН, котора  име ет следующие характеристики: содержание угле рода 13,2%; содержание фиксированного полимера 9,8 обменна  способность 1,95 мэкв/ Обработка раствора лизоцима. 10 г полученной обменной смолы помещают в ,колонку диаметром 1 см и оставл ют под давлением , затем смолу перевод т в форму NN4, пропуска  через нее 2 л 0,5 М раствора ацетата аммони  до рН 8,2. Затем рН смолы довод т до 6,5 при помо1ЦИ 100 мл буферного раствора 0,02 М трнмалеиновой кислоты. Раствор лизоцима с концентрацией 1 вес.% фильтрзтот в этом же буферном растворе со скоростью 180 мл/час, до насыщени  колонки, что соответствует приблизительно 200 мл раствора . Смолу промывают 100 мл 0,02 М буферного раствора трималеиноаой кислоты до рН 8,2. Фиксированный лизоцим злюирзтот 1 М раствором NaCE в таком же буфере, скорость пропускани  раствора 180 мл/час. 50 мл раство ра позвол ют рекуперировать лизоцим и получать раствор лизоцима с концентрацией 2,8 вес.% Показано, что обменник имеет объем лизоци ма 140 мг/г и что он позвол ет концентрировать раствор лизоцнма. Пример 15. Получение ионообменной смолы . 100 г Окиси алюмини  с размером частиц от 5 до 50 мкм, удельной поверхностью 150 м/г,средним диаметром пор 500 А и объем пор0,9 мл/г сушат при 150° С при пониженном давлении Полученную сухую смесь алюмини  ввод т в раствор из 250 мл хлористого метилена, 60 мл перегнанного стирола, 20 мл винилтриэтоксисилана и 0,5. г азобисизобутиронитрила. Хлористый метилен выпаривают при комнатной температуре, затем пропитанную окись алюмини  нагревают до 120° С 6 ч, при давлении 3 бар. Затем окись алюмини  суспендируют в 300 мл ксилола и суспензию кип т т 2 ч. Фильтруют, окись алюмини  промывают ацетоном, сушат. 50 г Полученной окиси алюмини  суспендируют в 180 г хлорметилового зфира, содержащего 6г хлорного олова, затем смесь кип т т обратным холодильником 4 ч в безводной среде. После охлаждени  окись алюмини  отфильтровывают , промывают 200 мл смеси диоксан вода (50:50), содержащей 10 мл сол ной киСа лоты, затем водой до нейтральной реакции и сушат. Полученный продукт суспендируют в 150 мл 30%-ного раствора триметиламина и выстаивают 8 дней при комнатной температуре. После обезвоживани  и промывки получают ионообменную смолу, несущую функциональные группы: 11+)(-) CHz-N-CHjCl , котора  имеет следук-щие характеристики; содержание углерода 8,2%; содержание хлора 3,7%; содержание азота 1,5%; содержание фиксированного полимера 1,05 обменна  способность 1,1 мэкв/г. ббработка раствора альбумина. 10 г полученной обменной смолы помещают в колонку диаметром 1 см и оставл ют под давлением, затем 0,01 М буферным раствором фосфата довод т рН среды до 6,5. Раствор альбумина с концентрацией 1 вес.% фильтруют в зтом же буферном растворе, со скоростью 60 мл/час, до насыщегам колонки, что соответствует приблизительно 140 мл раствора . Затем смолу промывают 100 мл такого же буферного раствора. Фиксированный альбумин извлекают элюированием 0,1 н. раствором HCI со скоростью 0 мл/час; 25 мл раствора позвол ют рекупеировать альбумин с концентрацией 45 вес.%. : Показано, что обмешшк имеет объем альумина 100 мг/г и Что он позвол ет конценрировать раствор альбумина. Пример 16. Аналогично примеру 15, из 00 г окиси алюмини , с размером частиц
SU762392409A 1975-08-28 1976-08-27 Способ отделени протеинов SU688124A3 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR7526530A FR2321932A1 (fr) 1975-08-28 1975-08-28 Procede de separation de proteines par echange d'ions
FR7622985A FR2359634A2 (fr) 1976-07-28 1976-07-28 Procede de separation de proteines par echange d'ions

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU688124A3 true SU688124A3 (ru) 1979-09-25

Family

ID=26219047

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU762392409A SU688124A3 (ru) 1975-08-28 1976-08-27 Способ отделени протеинов

Country Status (21)

Country Link
US (1) US4100149A (ru)
JP (1) JPS5257200A (ru)
AR (1) AR209193A1 (ru)
AU (1) AU500134B2 (ru)
BR (1) BR7605661A (ru)
CA (1) CA1069843A (ru)
CH (1) CH602780A5 (ru)
DE (1) DE2638764C3 (ru)
DK (1) DK156577C (ru)
ES (1) ES451047A1 (ru)
GB (1) GB1513195A (ru)
IE (1) IE43536B1 (ru)
IT (1) IT1066221B (ru)
MX (1) MX4333E (ru)
NL (1) NL178294C (ru)
NO (1) NO145508C (ru)
NZ (1) NZ181884A (ru)
RO (1) RO78229A (ru)
SE (1) SE426911B (ru)
SU (1) SU688124A3 (ru)
YU (1) YU209676A (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2461564C2 (ru) * 2008-02-06 2012-09-20 Байокон Лимитид Способ очистки циклического или нециклического пептида

Families Citing this family (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4259223A (en) * 1976-03-29 1981-03-31 California Institute Of Technology Cross-linked polyvinyl pyridine coated glass particle catalyst support and aqueous composition or polyvinyl pyridine adducted microspheres
US4326008A (en) * 1976-08-27 1982-04-20 California Institute Of Technology Protein specific fluorescent microspheres for labelling a protein
US4229342A (en) * 1977-05-18 1980-10-21 Rhone-Poulenc Industries Process for extracting proteins from milk using silica and anion exchange resins
GB1573684A (en) * 1977-07-04 1980-08-28 Trinchera C Process for the production of lysozyme
US4171204A (en) * 1978-09-01 1979-10-16 Abbott Laboratories Precipitation of protein
FR2439791A1 (fr) * 1978-10-27 1980-05-23 Rhone Poulenc Ind Procede de purification de proteines vegetales
JPS5598117A (en) * 1979-01-17 1980-07-25 Chemo Sero Therapeut Res Inst Purification of gamma-globulin derivative
US4305870A (en) * 1979-01-31 1981-12-15 Immuno Aktiengesellschaft Fur Chemisch-Medizinische Produkte Intravenous plasma derivatives and their production
FR2452881A1 (fr) * 1979-04-04 1980-10-31 Bel Fromageries Procede de preparation de proteines animales ou vegetales, particulierement de lactoproteines, et nouveaux produits ainsi obtenus
IT1165079B (it) * 1979-05-29 1987-04-22 Anic Spa Metodo di coagulazione del latte
FR2470800A1 (fr) * 1979-11-29 1981-06-12 Rhone Poulenc Ind Procede d'epuration des jus de betteraves au moyen d'echangeurs d'ions
DE3009037A1 (de) * 1980-03-08 1981-09-24 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur direkten bestimmung des lipidgehaltes der (beta) -lipoproteine des blutes
FR2478434B1 (ru) * 1980-03-21 1984-06-08 Rhone Poulenc Spec Chim
FR2490676B1 (fr) * 1980-09-19 1985-07-19 Rhone Poulenc Spec Chim Procede d'epuration des jus de canne a sucre
JPS57135356A (en) * 1981-02-14 1982-08-20 Tadao Hoshino Analysis of hemoglobin
FR2520235A1 (fr) * 1982-01-27 1983-07-29 Bel Fromageries Procede de separation d'immunoglobulines a partir de colostrum
CA1221307A (en) † 1982-12-02 1987-05-05 Nobutaka Tani Adsorbent and process for preparing the same
FR2548670B1 (fr) * 1983-07-07 1985-10-25 Merieux Inst Procede de preparation des principales proteines du sang hemolyse sous forme non denaturee
EP0143369B2 (en) * 1983-11-25 1997-09-24 Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha A porous adsorbent for adsorbing low density lipoproteins
US4724207A (en) * 1984-02-02 1988-02-09 Cuno Incorporated Modified siliceous chromatographic supports
HU191563B (en) * 1984-10-26 1987-03-30 Reanal Finomvegyszergyar Process for preparing lysozyme enzyme
FR2575666B1 (fr) * 1985-01-04 1989-08-18 Centre Nat Rech Scient Procede et dispositif pour la separation chromatographique de macromolecules biologiques
US4834974A (en) * 1986-01-13 1989-05-30 Protein Technologies, Inc. Immunologically active whey fraction and recovery process
US4816252A (en) * 1985-04-15 1989-03-28 Protein Technology, Inc. Product and process for transferring passive immunity to newborn domestic animals using ultrafiltered whey containing immunoglobulins
NZ216094A (en) * 1985-05-15 1989-06-28 Commw Serum Lab Commission Method for purification of an immunoglobulin
US4697003A (en) * 1985-11-01 1987-09-29 Miles Laboratories, Inc. Method of preparing alpha-1-proteinase inhibitor
US5242823A (en) * 1986-03-07 1993-09-07 International Genetic Engineering, Inc. Cloning of the 38kd Mycoplasma hyorhinis regression-associated antigen
JPH0662436B2 (ja) * 1986-05-19 1994-08-17 株式会社ミドリ十字 静注用免疫グロブリン製剤の製造方法
IE61701B1 (en) * 1986-07-17 1994-11-30 Morinaga Milk Industry Co Ltd Process for producing bovine lactoferrin in high purity
FR2616628B1 (fr) * 1987-06-19 1989-09-29 Entremont Sa Procede pour extraire des proteines du lactoserum par adsorption et elution
CN1031394A (zh) * 1987-07-08 1989-03-01 武田药品工业株式会社 酸性蛋白酶的纯化方法
EP0390798B1 (en) * 1987-09-16 1995-07-12 International Genetic Engineering, Inc. (Ingene) Method and compositions relating to regression-associated antigens
US5451662A (en) * 1987-10-23 1995-09-19 Schering Corporation Method of purifying protein
US5216127A (en) * 1987-11-20 1993-06-01 Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha Adsorbent for serum amyloid protein
JP2732252B2 (ja) * 1987-12-07 1998-03-25 株式会社ジェイ・エム・エス ヘモグロビン選択吸着剤
DE68920126T2 (de) * 1988-11-23 1995-05-11 Cytec Tech Corp Poröse Polymerperlen und Verfahren.
JPH07119767B2 (ja) * 1989-03-07 1995-12-20 積水化学工業株式会社 梅毒検査用試薬及びその製造法
US5418284A (en) * 1989-05-08 1995-05-23 Cytec Technology Corp. Surface-modified polyacrylonitrile beads
SE8902315D0 (sv) * 1989-06-27 1989-06-27 Pharmacia Ab Anjonbytare
EP0416748B1 (en) * 1989-08-07 1994-03-30 J.T. Baker Inc. Quaternised pei silica solid supports for chromatography
DE3926539A1 (de) * 1989-08-11 1991-02-14 Braun Melsungen Ag Verwendung von tentakel-kationenaustauschern zur selektiven eliminierung von low-density-lipoproteinen (ldl), fibrinogen und/oder harnstoff aus fluessigkeiten
US5439882A (en) * 1989-12-29 1995-08-08 Texas Tech University Health Sciences Center Blood substitute
US5510439A (en) * 1993-11-04 1996-04-23 Nalco Chemical Company Vinyl alkoxysilane copolymer polyelectrolytes for pitch deposit control
SE9601789D0 (sv) * 1996-05-10 1996-05-10 Pharmacia Biotech Ab Beverage stabilization
US6187374B1 (en) 1998-09-02 2001-02-13 Xim Products, Inc. Coatings with increased adhesion
SE9904197D0 (sv) * 1999-11-22 1999-11-22 Amersham Pharm Biotech Ab A method for anion exchange adsorption on matrices carrying mixed mode ligands
JP4433617B2 (ja) 2001-01-24 2010-03-17 東ソー株式会社 アニオン交換体、その製造方法及びそれを用いた用途
DE60237251D1 (de) 2001-01-29 2010-09-23 Tosoh Corp Kationenaustauscher, Verfahren zu dessen Herstellung und dessen Verwendung
US6833238B2 (en) * 2002-01-04 2004-12-21 Applera Corporation Petal-array support for use with microplates
US20040018559A1 (en) * 2002-07-26 2004-01-29 Applera Corporation Size-exclusion ion-exchange particles
US20050181378A1 (en) * 2004-02-18 2005-08-18 Applera Corporation Polyelectrolyte-coated size-exclusion ion-exchange particles
US20060160122A1 (en) * 2004-02-18 2006-07-20 Applera Corporation Polyelectrolyte-coated size-exclusion ion-exchange particles
US20050196856A1 (en) * 2004-02-18 2005-09-08 Applera Corporation Polyelectrolyte-coated size-exclusion ion-exchange particles
CN101076584B (zh) * 2004-10-21 2012-01-25 帝亚吉欧北美有限公司 纯化饮料产品及其制备工艺
MY178616A (en) 2012-09-17 2020-10-19 Grace W R & Co Chromatography media and devices
CN107847907A (zh) 2014-05-02 2018-03-27 格雷斯公司 官能化载体材料以及制备和使用官能化载体材料的方法
EP3302784B1 (en) 2015-06-05 2021-10-06 W.R. Grace & Co.-Conn. Adsorbent bioprocessing clarification agents and methods of making and using the same
IT201800004721A1 (it) * 2018-04-19 2019-10-19 Dispositivo per la stabilizzazione del vino ed altre bevande vegetali e relativo procedimento di stabilizzazione.
CN112521485A (zh) * 2020-12-17 2021-03-19 中国科学院过程工程研究所 一种犬血白蛋白的制备方法、利用其得到的犬血白蛋白和应用

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3234199A (en) * 1958-12-18 1966-02-08 Allen F Reid Ion exchange process for separating proteins
US3557082A (en) * 1969-01-24 1971-01-19 Tee Pak Inc Process for separating ionic materials from component mixtures
DE2319581C2 (de) * 1973-04-18 1975-03-27 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren zur chromatographischen Fraktionierung von Molke
FR2236552B1 (ru) * 1973-07-13 1977-05-06 Rhone Progil
JPS5426396B2 (ru) * 1974-06-04 1979-09-04

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2461564C2 (ru) * 2008-02-06 2012-09-20 Байокон Лимитид Способ очистки циклического или нециклического пептида

Also Published As

Publication number Publication date
AR209193A1 (es) 1977-03-31
NO762959L (ru) 1977-03-01
NO145508C (no) 1982-04-14
JPS5257200A (en) 1977-05-11
IE43536B1 (en) 1981-03-25
NZ181884A (en) 1978-04-28
SE426911B (sv) 1983-02-21
NL178294C (nl) 1986-03-03
DE2638764C3 (de) 1981-02-12
DK156577C (da) 1990-01-29
NO145508B (no) 1981-12-28
YU209676A (en) 1982-10-31
US4100149A (en) 1978-07-11
IE43536L (en) 1977-02-28
GB1513195A (en) 1978-06-07
AU1721776A (en) 1978-03-02
CH602780A5 (ru) 1978-07-31
NL7609562A (nl) 1977-03-02
DK156577B (da) 1989-09-11
RO78229A (ro) 1982-02-26
JPS5715840B2 (ru) 1982-04-01
ES451047A1 (es) 1978-05-01
IT1066221B (it) 1985-03-04
DE2638764A1 (de) 1977-03-03
DE2638764B2 (de) 1978-09-14
BR7605661A (pt) 1978-03-21
DK389176A (da) 1977-03-01
SE7609479L (sv) 1977-03-01
MX4333E (es) 1982-03-26
AU500134B2 (en) 1979-05-10
CA1069843A (en) 1980-01-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SU688124A3 (ru) Способ отделени протеинов
US4673734A (en) Porous mineral support coated with an aminated polysaccharide polymer
US4675384A (en) Fractionation/purification of plasma by ion exchange chromatography
US2461505A (en) Removal or replacement of electrolytes in physiologically active materials
US4667018A (en) Process for the purification of proteins using acidic polysaccharide gels
KR960004707B1 (ko) B형 간염 표면 항원의 정제 방법
US4229342A (en) Process for extracting proteins from milk using silica and anion exchange resins
US4359389A (en) Method for the purification of interferon
JPS54140707A (en) Hgi glycoprotein which stimulates proliferation of human granulocyte, preparation of hgi glycoprotein, and remedy for hypoleukocytosis containing hgi glycoprotein
US5234991A (en) Porous mineral support coated with an aminated polysaccharide polymer
ATE20700T1 (de) Verfahren zur gewinnung von hepatitissicheren, sterilen, pyrogenfreien und stromafreien haemoglobinloesungen.
US4168261A (en) Method for the purification of interferon using porous glass beads
GB2179947A (en) Process for the extraction of proteins from milk
US5250662A (en) Albumin purification
US3975344A (en) Interferon purification
US5110733A (en) Liquid-liquid extraction with particulate polymeric adsorbent
US2997425A (en) Method of purification of streptokinase
JPS59231097A (ja) 均質ヒト免疫インターフェロンサブタイプ２１ｋおよびその製造法
CA1232850A (en) Purification of superoxide dismutase
US4603010A (en) Lipoprotein fractionation
US4116948A (en) Process for removal of inorganic salts from peptide/salt-containing substances
US2770616A (en) Fractionation of proteinaceous materials in blood plasma and liver tissue
CA2022165A1 (en) Albumin purification
FI78303B (fi) Foerfarande foer avskiljande av lipoproteiner med hjaelp av derivatiserad polyhydroximetylen.
GB1563990A (en) Extraction process