DE2012190C3

DE2012190C3 - l-Methyl-e-phenyl-e-chloMH-s- triazole- [43-a] [1,4] benzodiazepine, ein Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese enthaltende Arzneimittel

Info

Publication number: DE2012190C3
Application number: DE2012190A
Authority: DE
Inventors: Jackson Boling Hester Jr
Original assignee: Upjohn Co
Current assignee: Pharmacia and Upjohn Co
Priority date: 1969-03-17
Filing date: 1970-03-14
Publication date: 1980-11-13
Also published as: NL8100081A; HK61677A; FR2034999A1; AU8550075A; DE2012190A1; NL172510B; JPS4940239B1; GB1291631A; AU8549975A; NL7003750A; ES376689A1; NL172510C; PL80541B1; YU34570A; AU491139B2; FR2034999B1; OA03446A; AU490626B2; IL33859A; NL170857C

Description

CH₃

Gegenstand der Erfindung sind l-Methyl-6-phenyl-8-chlor-4H-s-triazolo[4,3-a] [l,4]benzodiazepine der allgemeinen Formel I

0)

10

15 CH₃

Ri

worin Ri ein Fluor- oder Chloratom und R2 ein Wasserstoffatom oder Ri und R2 Fluoratome bedeuten, sowie deren pharmakologisch annehmbare Säureanlagerungssalze.

2. l-Methyl-e-io-chlorphenylJ-S-chlor^H-s-triazolo[4,3-a] [l,4]benzodiazepin.

3. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man ein lß-Dihydro-S-phenyl-Z-chlor^H-M-benzodiazepin-2-thion der allgemeinen Formel

30

(D

R:

Ri

(H)

35

R,

NH-NH-C- CH₃

(III)

Gegenstand der Erfindung ist ferner ein Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen durch Kondensation eines (l,3-Dihydro-5-phenyl)-7-chIor-2H-l,4-benzodiazepin-2-thions der allgemeinen Formel II mit Essigsäurehydrazid nach folgendem Reaktionsschema:

(ID

40

in einem organischen Lösungsmittel mit Essigsäurehydrazid kondensiert, wobei man ein Gemisch aus der gewünschten Verbindung der allgemeinen Formel I und dem 2-(2-Acetylhydrazino)-5-phenyl-7-chlor-3H-l,4-benzodiazepin der allgemeinen Formellll

Ri

50

55

+ H₂N-NH-C-CH₃

erhält und dieses Gemisch anschließend auf eine Temperatur von etwa 250⁰C erhitzt, wobei die Verbindung der allgemeinen Formel III in die gewünschte Verbindung der allgemeinen Formel I übergeht, und gegebenenfalls anschließend die erhaltene Verbindung der allgemeinen Formel I mit einer Säure in ein pharmakologisch annehmbares Säureanlagerungssalz überführt. 4. Pharmazeutische Zubereitung für die Human-

60

65

NH-NH-C-CH₃
N=I

(ΙΠ)

R,

In den vorstehenden Formeln haben Ri und R2 die bereits angegebenen Bedeutungen.

Beim erfindungsgemäßen Verfahren wird die Kondensation des l,3-Dihydro-2H-l,4-benzodiazepin-2-thions der allgemeinen Formel II in einem organischen Lösungsmittel, z. B. einem Alkanol mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, wie Methanol, Ethanol, 1- oder 2-Propanol, 1- oder 2-Butanol, oder Cyclohexanol, mit Essigsäurehydrazid bei einer Temperatur zwischen 60 und 12O⁰C, vorzugsweise bei Rückfluß temperatur der Mischung, durchgeführt Das Essigsäurehydrazid NH2—NH-COCH₃ wird in einem 2- bis 5fachen Oberschuß über die theoretisch erforderliche Menge verwendet; die Reaktion läßt sich jedoch auch mit größeren wie auch mit kleineren Mengen durchführen. Die Reaktionsdauer beträgt 1 bis 48 Stunden. Am Ende der Reaktion wird das Reaktionsgemisch eingedampft Man erhält so das entsprechende 2-(2-Acetylhydrazino)-5-phenyl-7-chIor-3H-l,4-benzodiazepin (III) and das entsprechende l-Methyl-S-cWor-ö-phenyMH-s-triazolo[4,3-a][l,4]benzodiazepin (I). Unter strengen Reaktionsbedingungen erhält man vorwiegend die Verbindung der allgemeinen Formel I.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel III, welche partielle Kondensationsprodukte darstellen, können von den Endprodukten der allgemeinen Formel I in üblicher Weise, z. B. durch Extraktion, Chromatographieren oder aufgrund ihrer unterschiedlichen Löslichkeit in organischen Lösungsmitteln, wie Methylenchlorid, Chloroform, Tetrachlorkohlenstoff und/oder Ethylacetat durch Krista''isation abgetrennt werden. Sie lassen sich in die entsprechenden Endprodukte überführen, indem man sie 1 bis 10 Minuten über den Schmelzpunkt letzterer erhitzt. Bei einer einfacheren Methode wird das rohe Gemisch aus den Verbindungen der allgemeinen Formeln III und I auf 200—275°C erhitzt, wobei die gesamte vorhandene Verbind"ng der allgemeinen Formel III in die Verbindung der allgemeinen Formel I umgewandelt wird. Die rohe Verbindung der allgemeinen Formel I wird dann in üblicher Weise, z.B. durch Chromatographieren oder Umkristallisieren aus Lösungsmitteln, wie Ethylacetat, Methylenchlorid, Chloroform, Acetonitril u. ä. gereinigt.

Die Ausgangsstoffe der allgemeinen Formel II sind

1 ,S-Dihydro-S-phenyl^-chlor^H-1,4-benzodiazepin-2-thione, die in J. Org. Chem„ Bd. 20, S. 231 (1964) und in der US-PS 34 22 091 beschrieben wurden; sie sind durch Umsetzung bekannter entsprechender 1,3-Dihydro-2H-l,4-benzodiazepin-2-one in der Wärme mit Phosphorpentasulfid in Pyridin erhältlich.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel I und ihre Säureanlagerungssalze zeigen bei Säugetieren und Vögeln eine sedative, tranquillisierende und/oder muskelentspannende Wirkung.
Im Sinne der Erfindung verwendbare Säureanlagerungssalze der Verbindungen der allgemeinen Formel I sind die Hydrochloride, Hydrobromide, Hydroiodide, Sulfate, Phosphate, Cyclohexansulfamate und Methansulfonate, die durch Umsetzung einer Verbindung der

ίο allgemeinen Formel I mit der stöchiometrisch berechneten Menge einer ausgewählten, pharmakologisch akzeptablen Säure hergestellt werden.

Die drei erfindungsgemäßen Verbindungen (nachfolgend als A, B und C bezeichnet) sowie 1-Methyl-1 ,S-dihydro-S-phenyl^-chlor^H-1,4-benzodiazepin-2-on und 2-Methylamino-5-phenyl-7-chlor-

3H-l,4-benzodiazepin-4-oxic-hydrochlorid (als D und E bezeichnnet) als Vergleichssubstanzen wurden den nachfolgend beschriebenen Tests unterworfen, um ihre pharmakologischen Wirksamkeiten zu ermitteln. Die ED50-Werte wurden nach der Methode von Spearman und Karber bestimmt (vgl. D. J. Finney, »Statistical Methods in Biological Assay«, Hafner Publishing Co., New York, N. Y, 1952). Für alle Tests wurden 18 bis 22 g wiegende, männliche Carworth-Farm-Albinomäuse (CF-I) benutzt. Falls nicht anders angegeben, wurden die zu testenden Verbindungen in O,25°/oiger wäßriger Methylceiluloselösung gelöst oder suspendiert und intraperitoneal an Gruppen von 6 Mäusen pro Dosis, bei Mehrfachdosiskonzentrationen in 0,3 log-Intervallen, verabreicht

Die benutzten Testmethoden zur Ermittlung der Wirkung der Verbindungen auf das erkennbare Verhalten [Verlust des Aufrichtungsreflexes (LRR) und fehlende Zusammenziehungsreaktion (Tr); Antagonismus der durch Nikotin hervorgerufenen tonischen Streckenmuskelkrämpfe (TE) mit darauffolgendem Tod (D); Potenzierung der durch Ethylalkohol (EtOH) und Natrium-5-Ethyl-5-(l-methylbutyl)-barbiturat (in der Tabelle als »Na-E.« bezeichnet) hervorgerufenen Narkose; Antagonismus der Thioserricarbazid- und Strichninkrämpfe und -Lethalität, Elektroschockkrämpfe, der Antagonismus der durch 6,7,8,9-Tetrahydro-5H-tetrazolo[l,5-a]-azepin hervorgerufenen Krämpfe (in der Tabelle als »T.-Kr.« bezeichnet) sowie Antagonismus der durch Elektroschock am Fuß hervorgerufenen Agression] werden im Anschluß an die nachfolgende Tabelle, welche die Versuchsergebnisse enthält, erläutert.

Wirkungsdosis ED₅₀ (mg/kg) und Toxizität LD₅₀ i. p., Maus (mg/kg)

Verbindung Nr.

LRR

Tr

Antagonismus

Nikotin

TE D

Thiosemicarbazid

Strychnin

D (Vergleich)

E (Vergleich)

>200

>25

0,4
0,6
0,1
7
23

0,009

0,013

0,018

0,28

3,1

0,009

0,014

0,02

0,28

3,1

0,01

0,028

0,01

0,7

4,0

0,18
0,23
0,22
8
13

Verbindung Nr.

Antagonismus

Elektroschock

20
50

T.-Kr.

0,03
0,03

Fußschock

0,10 0,30 Potenzierung
EtOH

Na-E.

0,13
0,63

0,45
2,0

LD50
(mg/kg)

>1000
2426

Fortsetzung

Verbindung Nr.

Antagonismus

Elektroschock

T.-Kx.

Fußschock

Potenzierung
EtOH

Na-E.

LD₅₀
(mg'kg)

16	0,022	0,39	0,13	0,56	>1000
50	0,8	1,8	0,9	5,0	—
40	1,8	—	36,0	—	620

D (Vergleich)

E (Vergleich)

Anmerkung:

Es bedeuten:

A = l-Methyl-e-fo-fluorpheny^-S-chloMH-s-triazolopt^-airi^lbenzodiazepin (erfindungsgemäß).

B = l-Methyl-e-fo-chlorphenylJ-S-chloMH-s-triazoIot^S-aJtl.flbenzodiazepin (erfindungsgemäß).

C = l-Methyl-6-(2,6-difIuorphenyl)-8-chlor-4H-s-triazo]o[4,3-a] p,4]benzodiazepin (erfindungsgemäß).

D = l-Methyl-l.S-dihydro-S-phenyl-y-chlor^H-M-benzodiazepin-S-on.

E = 2-Methylamino-5-phenyl-7-chlor-3H-l,4-benzodiazepin-4-oxid-hydrochlorid.

Die Ergebnisse zeigen, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen, insbesondere B, bei sehr geringen Toxizitäten gegenüber den Vergleichsverbindungen überragende Wirksamkeiten aufweisen.

a) Verlust des Aufrichtungsrefiexes (LRR)

Bei diesem Verfahren wird das Tier auf seinen Rücken gelegt und innerhalb von 10—15 Sekunden seine Fähigkeit, wieder seine aufrechte Lage einzunehmen, ermittelt Das Unvermögen, dies zu tun, begründet den Verlust des Aufrichtungsvermögens, welcher zur Bestimmung der ED50 dient Narkotika, wie z. B. Natrium-5-Ethyl-5-(l -methylbutyl)-barbiturat, oder Muskelrelaxantien, wie z. B. 2-Hydroxypropyl-3-(o-methoxyphenoxy)-l-carbamat, verursachen einen Verlust des Aufrichtungsvermögens.

b) Zusammenziehung (Tr)

Bei diesem, in Med. Exp., Bd. 4, S. 11 (1961) beschriebenen Test werden die Vorderfüße von Mäusen auf einen dünnen verdrillten Draht gelegt, welcher über der Oberseite des Experimentiertisches starr abgestützt ist. Eine normale Maus ergreift den Draht mit ihren Vorderpfoten und sie legt, wenn sie frei hängen gelassen wird, innerhalb von 5 Sekunden zumindest einen Hinterfuß auf den Draht. Das Unvermögen, zumindest einen Hinterfuß hochzuheben, begründet das Unvermögen einer Zusammenziehung. Dieses Unvermögen bei jeder einzelnen Maus dient zu · Ermittlung der Zusammenziehungsdosis ED50. Beruhigungsmittel, wie z. B. Phenothiazine, Muskelrelaxantien, Narkotika und Opiate verursachen alle einen Verlust dieser Reaktion.

c) Antagonismus von intravenös verabreichtem
Nikotin

In diesem Text wird die Fähigkeit einer Verbindung ermittelt, der Stimulation des Zentralnervensystems und den tonischen Streckmuskelkrämpfen, welche durch Nikotin eingeleitet werden, entgegenzuwirken. Da Nikotin periphere cholinergische Strukturen stimuliert, wird angenommen, daß der Antagonismus dieser zentralen Wirkungen des Nikotins eine zentrale anticholinergische Wirksamkeit widerspiegelt. Es wurde ferner gefunden, daß dieser Test ein empfindliches Verfahren zur Entdeckung von Mitteln ist, welche spasmogene Mittel, Thiosemicar¹- - ?■.; _, Strychnin oder einen Elektroschock blockieren; als solches kann das Verfahren auch potentielle Anticonvulsiva oder zentraldämpfende Mittel erkennen lassen. Bei diesem Test wurde das zu testende Mittel, welches in einer wäßrigen 0,25%igen Methylcelluloselösung zubereitet war, in einer Dosierung, welche 20% der LD50 gleich war, intraperitoneal vier männlichen CF-I-Mäusen (mit einem Gewicht von jeweils 18—22 g) injiziert 30 Minuten später wurde Nikotinsalicylat in einer Dosis von 2 mg/kg injiziert Die so mit Nikotin behandelten Kontrollmäuse zeigten das typische Erscheinungsbild, das aus dauernden Krämpfen bestand, auf die tonische Streckmuskelkrämpfe und sodann der Tod folgten. Testverbindungen, weiche unter diesen Bedingungen Nikotin wirksam blockieren, können nachfolgend auf ihre Fähigkeit, Thiosemicarbazon, Strychnin und dem Elektroschock entgegenzuwirken, getestet werden. Die meisten der das Zentralnervensystem dämpfenden Mittel sind gegenüber durch Nikotin hervorgerufene tonische Streckmuskelkrämpfe und dem Tod wirksam.

d) Antagonismus der durch Thiosemicarbazid
bedingten Lethalität

Einer der Tests, durch den eine Wirksamkeit auf das Zentralnervensystem entdeckt wird, ist ein solcher, bei dem die Fähigkeit von Verbindungen, die Thiosemicarbazid-Lethalität zu blockieren, ermittelt wird. Eine derartige Wirksamkeit ist für viele zentral wirkende Sedativa oder Beruhigungsmittel charakteristisch. Gruppen von sechs männlichen von CF-1-Mäusen (mit einem Gewicht von 18—22 g jeweils) wurde das zu testende Mittel intraperitoneal injiziert, welches in einer wäßrigen 0,25%igen Methylcelluloselösung zubereitet worden war; es wurden Mehrfachdosierungen, die in 0,3 log-Intervallen verteilt wurden, angewandt Unmittelbar danach wurden den Mäusen 20 mg/kg Thiosemicarbazid intraperitoneal verabreicht, und vier Stunden später wurden die Todesfälle registriert Die Kontrollmause starben in der Regel innerhalb dieses Zeitabschnitts. Arzneimittel, wie z. B. ein 1,4-Benzodiazepin-4-oxid, schützen die Mäuse gegen die Thiosemicarbazid-Sterblichkeit Die Anzahl von Mäusen, die gegenüber der Wirkung des Agonisten geschützt waren, dienten zur Berechnung der ED50, weiche unter Verwendung der Methode von Spearman und Karber [D. M. Finney, »Statistical Method in Biologica Assay«, Hafner Publ. Co., N. Y, S. 524 (1952)] berechnet wurde.

e) Antagonismus der Strychnin-Lethalität

Zentral wirkende Arzneimittel, wie z. B. Natrium-5-Ethyl-5-(l-methylbutyl)-barbiturat, wirken der durch Strychnin hervorgerufenen Lethalität entgegen. Infolgedessen stellt dies ein Mittel zur Entdeckung von Wirkstoffen dieser Art dar.

Das zu testende Mittel, welches in einer wäßrigen 0,25%igen Methylcelluloselösung zubereitet worden war, wurde Gruppen von sechs männlichen CF-I-Mäusen (mit einem Gewicht von jeweils 18—22 g) intraperitoneal injiziert. Es wurden Mehrfachdosierungen in 0,3 log-Intervallen angewandt. 30 Minuten später

wurden den Mäusen 3 mg/kg Strychnin intrapertoneal injiziert. 4 Stunden später wurden die Todesfälle registriert. Diese Strychnindosis tötet in der Regel alle Kontrollmäuse. Die Anzahl der gegenüber der Wirkung des Agonisten geschützten Mäuse diente zur Berechnung der ED50, weiche unter Anwendung der Methode von Spearman und Karber, I. c, berechnet wurde.

f) Antagonismus der Elektroschockkrämpfe'

Eine der Eigenschaften von zentral wirkenden Anticonvulsiva ist deren Fähigkeit, durch Elektroschock hervorgerufene Anfälle zu blockieren. Die Wirksamkeit der getesteten Stoffe in dieser Hinsicht ist infolgedessen zur Ermittlung ihres pharmakologischen Profils von Interesse.

g) Antagonismus von durch

6,7,8,9-Tetrahydro-5H-tetrazolo[l,5-a]azepin

hervorgerufenen Krämpfe

Mäuse, welche subkutan mit Dosen von 100 bis 200 mg/kg dieses Wirkstoffes injiziert wurden, entwickeln innerhalb von 30 Minuten eine Folge der Erregung, myoclonische Zuckungen, clonische Anfälle, ein oder mehrere tonische Streckmuskelanfälle, worauf der Tod folgt. Wirksame Mittel gegen Angstzustände heben die clonischen Anfälle auf.

Die in einer 0,25%igen Methylcellulose zubereiteten Testverbindung wurde Gruppen von vier männlichen CF-1-Mäusen mit einem Gewicht von jeweils 18—22 g intraperitoneal injiziert. Es wurden Mehrfachdosierungen angewandt, welche in 0,3 log-Intervallen abnahmen. 30 Minuten später wurde in das Genick des Halses der Mäuse 85 mg/kg ejAQ-Tetrahydro-SH-tetrazolo-[l,5-a]azepin subkutan injiziert. 15 Minuten später ließ man einen Satz Schlüssel zur Einleitung clonischer Krämpfe über dem Käfig rasseln. Die Anzahl von Mäusen, welche geschützt waren, diente zur Berechnung der ED50, zu der man die Methode von Spearman und Karber, 1. c heranzog.

h) Potenzierung der Ethanol-Narkose

Mäuse, denen subnarkotische Dosen von Ethanol verabreicht wurden, verlieren den Aufrichtungsreflex, wenn sie nachfolgend mit das Zentralnervensystem dämpfenden Mitteln vom Typ des Phenothiazins oder Reserpins behandelt werden. Andererseits haben Muskelrelaxantien und narkotische Mittel eine geringe Wirkung bei nicht-narkotischen Dosierungen. Da Ethanol in Mäusen ganz langsam umgesetzt wird, sind bei diesen Verfahren Mittel, welche den Arzneimittel-Metabolismus beeinflussen, nicht wirksam; dies steht im Gegensatz zu Ergebnissen, welche bei den Tests der Barbiturat-Potenzierung erhalten werden.

Das zu testende Mittel, welches in einer wäßrigen 0,25%igen Methylcelluloselösung zubereitet worden war, wurde Gruppen von sechs männlichen CF-l-Mäusen mit einem Gewicht von jeweils 18—22 g intraperitoneal injiziert. Es wurden Mehrfachdosierungen angewandt, welche in 0,3 log-Intervallen aufgeteilt wurden. 30 Minuten später wurden 5 ml/kg einer 50%igen wäßrigen Ethanollösung oral verabreicht Nach weiteren 30 Minuten wurden die Mäuse hinsichtlich des Verlusts der Aufrichtungsfähigkeit geprüft Die Anzahl von Mäusen pro Gruppe, welche den Aufrichtungsreflex verloren hatten, diente zur Berechnung der Werte ED50, welche nach der Methode von Spearman und Karber, 1. c berechnet wurden.

i) Potenzierung der durch

Natrium-5-Ethyl-5-(l-methylbutyl)-barbiturat

bewirkten Narkose bei Mäusen

Wenn Mäusen Natrium-5-EthyI-5-(l-methylbutyl)-barbiturat in einer Dosis von 10—25 mg/kg intravenös verabreicht wird, verlieren sie nicht ihren Aufrichtungsreflex. Hingegen tritt bei Mäusen der Verlust des Aufrichtungsreflexes nach diesen Wirkstoffdosen auf, wenn die Tiere mit dämpfenden Verbindungen in Dosierungen vorbehandelt wurden, welche zu gering sind, um bei alleiniger Verabreichung einen Verlust des Aufrichtungsvermögens herbeizuführen.
In diesem Test wurden Gruppen von sechs männliehen Mäusen vom Stamm CF-I (mit einem Gewicht von je 18—22 g) das in 0,25%iger Methylcellulose zubereitete zu testende Mittel verabreicht; es wurden intraperitoneal oder oral Dosierungen in 0,3 log-Intervallen verabreicht, und zwar 30 Minuten vor der intravenösen Injektion von Natrium-5-Ethyl-5-(l-methyI-butyl)-barbiturat (10 mg/kg oder 24 mg/kg). 15 und 30 Minuten nach der Injektion wurde die Anzahl von Tieren registriert, welche einen Verlust des Aufrichtungsreflexes zeigten, und die Wirkungsdosis ED50 der jeweiligen Verbindung wurde nach der Methode von Spearman und Karber, 1. c, berechnet.

k) Antagonismus der durch elektrischen Fußschock
hervorgerufenen Aggression

Bei diesen Tests wird die Kampfreaktion von männlichen Albinomäusen hervorgerufen [vgl. Journal Med.

Chem., Bd. 14, S. 1080, (1971)]. Der Strom von 60 Hertz war hierbei 3,5 mA, die Spannung etwa 700 Volt (abhängig von dem Widerstand, der einen Strom von 3,5 mA ermöglichte). Paare von Mäusen wurden auf einen Rost gebracht und mit einer Haube von 5 cm Höhe und einem Durchmesser von 10 cm abgedeckt. Der Fußschock wurde sodann durch den Rost mit Unterbrechungen während eines dreiminütigen Zeitraums ausgeübt oder solange, bis die Mäuse spontan kämpften oder bis eine der beiden Mäuse dominierte.

Die dominierende Maus wurde innerhalb von 48 Stunden zur Arzneimitteluntersuchung verwendet Mehrfachdosierungen der zu testenden Verbindungen wurden in 0,3 log-Intervallen intraperitoneal Gruppen von 8 dominierenden oder spontan kämpfenden Mäusen verabreicht 30 Minuten später wurden Paare von mit dem Arzneimittel behandelten Mäusen auf den Rost gebracht und in Unterbrechungen 30 Sekunden lang dem Fußschock ausgesetzt Die Anzahl von Paaren an Mäusen, welche bei jedem Dosierungsgrad kämpften, wurde aufgezeichnet, und die Wirkungsdosis ED50, d. h. diejenige Dosis, welche 50% der getesteten Tiere von Kämpfen abhielt, wurde ermittelt
Die Verbindung B, das ist l-Methyl-6-(o-chlorphenyl)-8-chlor-4H-s-triazolo[4,3-a][l,4]benzodiazepin,

wurde auch intensiv klinisch getestet Sie erwies sich hierbei, ebenso wie das analoge o-Fluor-phenylderivat als eine hochsedative Verbindung, die in der Humanmedizin in einer Dosis von 0,25 bis 0,5 mg zur Schlafeinleitung und von 1 mg nachts vor einer Operation sehr vorteilhaft angewandt werden kann, zumal sie, nicht nur in Relation zur vorgenannten therapeutischen Dosis, eine äußerst geringe Toxizität aufweist (LD50 oral, Mäuse >5000 mg/kg). Bezüglich Einzelheiten der klinischen

Tests wird ζ. Β. auf folgende Druckschriften hingewiesen:

Fed. Proa, Bd. 34, Nr. 3, S. 295 (1975);

Second International Sleep Research Congress, Edingburgh, Schottland, 30. Juni-4. Juli 1975 (15th Annual Meeting of A.P.S.S.), S. 64;

Sleep Research, Bd. 3, S. 57 (1974); sowie

Curr. Ther. Research, Bd. 16, S. 958-963 (1974).

Beispiel 1

l-Methyl-6-(2,6-difluorphenyl)-8-chlor-4H-s-triazolo[4,3-a][l,4]benzodiazepin

Eine Lösung aus 6,0 g (0,0186 Mol) 7-Chlor-5-(2,6-di-' fluorphenyl)-1 ,S-dihydro^H-1,4-benzodiazepin-2-thion und 4,14 g (0,0558 Mol) Essigsäurehydrazid in 250 ml 1-ButanoI wurde unter Rückfluß erhitzt. Während der ersten Stunde wurde ein Stickstoffstrom durch das Reaktionsgemisch geleitet, um der. gebildeter. Schwefelwasserstoff zu entfernen. Das Erwärmen wurde 18 Stunden in einer Stickstoffatmosphäre fortgesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde eingeengt, der Rückstand wurde in Wasser gegossen und mit Methylenchlorid extrahiert. Die organische Schicht wurde über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Nach Entfernung des Lösungsmittels lagen 6,8 g einer orangefarbenen festen Substanz vor, die aus Ethanol umkristallisiert wurde; man erhielt die gewünschte Verbindung in zwei Fraktionen in einer gesamten Menge von 4,5 g (Ausbeute 70%); F. 278-279,5°C.

Analyse (für Ci₇HhCIF₂N₄):

Ber.: C 59,22, H 3,22, Cl 10,28, F 11,02, N 16,26%;
gef.: C 59,41, H 3,31, Cl 10,32, F 11,06, N 16,18%.

Der benötigte Ausgangsstoff wurde folgendermaßen hergestellt:

!5

Als pharmazeutische Verabreichungsformen kommen erfindungsgemäß solche in Frage, die für die orale, parenterale und rektale Verwendung geeignet sind, z. B. Tabletten, Pulverpaketchen, Pillen, Dragees, Kapseln, Lösungen, Suspensionen, sterile injizierbare Verabreichungsformen und Suppositorien. Geeignete Verdünnungs- bzw. Streckmittel wie Kohlehydrate (Lactose), Proteine, Lipide, Calciumphosphat, Maisstärke, Stearinsäure und Methylcellulose können zum Strecken oder zum Überziehen verwendet werden. Öle, ζ. B. Kokosnußöl, Sesamöl, Saffloröl, Baumwollsamenöl oder Erdnußöl können zur Herstellung von Lösungen oder Suspensionen des Wirkstoffs verwendet werden. Süßstoffe, färbende und geschmackgebende Mittel können ebenfalls zugesetzt werden.

Für Säugetiere und Vögel kann man auch Futter-Vormischungen herstellen, indem man den Wirkstoff mit Stärke, Hafermehl, getrocknetem Fischfleisch, Fischmehl und Mehl vermischt.

Als Beruhigungsmittel können die Verbindungen der allgemeinen Formel I in Mengen von 0,01 —2,0 mg/kg in oralen und injizierbaren Präparaten zur Behebung von Spannungs- und A.ngstzuständen bei Säugetieren und Vögeln, die beispielsweise beim Transport der Tiere -auftreten, verabreicht werden.

Die nachfolgenden Beispiele dienen der näheren Erläuterung der Erfindung:

7-Chlor-5-(2,6-dif luorphenyl)-1,3-dihydro-2H-l,4-benzodiazepin-2-thion

A) 2-Acetamido-5-chlor-2',6'-difluor-benzophenon

Zu einer Lösung von 114 g (1,0 Mol) m-Difluorbenzol in 800 ml trockenem Tetrahydrofuran, die auf -5O⁰C abgekühlt war und unter einer Stickstoffatmosphäre gehalten wurde, gab man unter Rühren 320 ml einer n-Heptanlösung von n-Butyllithium, welche 1,0 Mol der letztgenannten Substanz enthielt. Die Zugabe erfolgte im Verlauf von 50 Minuten, worauf weitere 2 Stunden bei — 50⁰C gerührt wurde. Die kalte Lösung wurde dann unter Rühren im Verlauf von 50 Minuten zu einer Lösung aus 187,8 g (0.97 Mol) 6-Chlor-2-methyl-4H-3,l-benzoxazin-4-on [vgl. ]. Am. Chem. Soc. Bd. 70. S. 2423 (1948)] in 1400 ml Benzol und 1000 ml THF bei 25°C gegeben. Die entstandene Mischung wurde unter einer Stickstoffatmosphäre 20 Stunden gerührt; nach diestr Zeit wurden 1000 ml 2 η-Salzsäure zugesetzt. Die wäßrige Schicht wurde abgetrennt und verworfen. Die organische Schicht wurde filtriert, um suspendiertes festes Material abzutrennen. Das Filtrat wurde mit kalter verdünnter wäßriger Natriumhydroxidlösung gewaschen. Danach lagen drei Schichten vor, und zwar eine schwach gefärbte wäßrige Phase, eine dunkelbraune wäßrige Phase und eine organische Phase. Die organische Phase wurde nach dem Trocknen über wasserfreiem Natriumsulfat eingeengt, wobei man 101 g eines halbfesten Materials erhielt, welches anschließend mit 2100 ml eines heißen Gemisches technischer Hexane extrahiert wurde. Beim Eindampfen des Extraktes erhielt man 39,9 g eines Rohproduktes; F. 106—116°C. Das so gewonnene Material wurde aus einem Gemisch technischer Hexane umkristallisiert. Nach dem Umkristallisieren wurde die gewünschte Verbindung in reiner Form erhalten; F. 118—12O⁰C.

Analyse (für C₁₅H₁₀ClF₂NO₂):

Ber.: C 58,17, H 3,25, Cl 11,45, F 12,27, N 4,52%; gef.: C 58,11, H 3,38, Cl 11,53, F 12,24, N 4,20%. .

B) 2-Amino-5-chlor-2',6'-difluor-benzophenon

Eine Suspension von 4,2 g (0,014 Mol) der in Stufe A) erhaltenen Verbindung in 350 ml konzentrierter Salzsäure und 350 ml Wasser wurde unter Rühren in einer Stickstoffatmosphäre auf einem Dampfbad erhitzt, bis vollständige Lösung eingetreten war. Die Lösung wurde dann abgekühlt und mit 50%iger wäßriger Natriumhydroxidlösung basisch gemacht Die auf diese Weise anfallende feste Substanz wurde mit Methylenchlorid extrahiert. Der Extrakt wurde über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft Der Rückstand wurde aus Cyclohexan umkristallisiert und ergab 2,4 g der gewünschten Verbindung; F. 103-105⁰C

Analyse (für C₁₃H₁₀ClF₂NO):

Ber.: C 58,33, H 3,01, Cl 13,24, F 14,20, N 5,23%; gef.: C 58,33, H 3,29, Cl 13,31, F 14,87, N 5,14%.

C) 2-(2-Bromacetamido)-5-chlor-2',6'-difluorbenzophenon

Zu einer Lösung von 2,7 g (0,01 Mol) der in Stufe B) erhaltenen Verbindung in 100 ml Benzol, durch welche ein rascher Stickstoffstrom geleitet wurde, gab man 3,03 g (0,015 Mol) Bromacetylbromid. Kurz nach Beendigung der Zugabe bildete sich ein Niederschlag. Das

Benzol wurde abgedampft; der feste Rückstand wurde aus Cyclohexan umkristallisiert und ergab 3,4 g der gewünschten Verbindung; F. 146—147,5°C.

Analyse (für Ci₅H₉BrClF₂NO₂):

Ber.: C 46,36, H 2,33, Br 20,56, Cl 9,12, F 9,78, N 3,60%; gef.: C 46,46, H 2,48, Br 20,68, Cl 9,21, F 9,49, N 3,82%.

D) 2-(2-Aminoacetamido)-5-chlor-2',6'-difluorbenzophenon

Eine Lösung von 26 g (0,067 Mol) der in Stufe C) erhaltenen Verbindung in 350 ml Methylenchlorid wurde mit 350 ml flüssigem Ammoniak versetzt. Die Lösung wurde 5 Stunden unter Rückfluß erhitzt und anschließend noch etwa 16 Stunden gerührt, wobei das überschüssige Ammoniak verdampfte. Die Methylenchlorid-Lösung wurde filtriert, um das feste Material zu entfernen, und dann zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde aus 21 Cyclohexan umkristallisiert, auf diese Weise erhielt man 19,4 g der gewünschten Verbindung; F. 133-135°C.

Analyse (für Ci₅HuClF₂N₂O₂):

Ber.: C 55,48, H 3,42, Cl 10,92, F 11,70, N 8,63%;
gef.: C 56,69, H 3,99, Cl 11,19, F 11,06, N 8,34%.

E)7-Chlor-5-(2,6-difluorphenyl)-l,3-dihydro-2H-1,4-benzodiazepin-2-on

Eine Lösung von 21,0 g (0,065 Mol) der in Stufe D) erhaltenen Verbindung in 300 ml Pyridin wurde in einer Stickstoffatmosphäre 18 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Anschließend wurde das Pyridin abgedampft. Der Rückstand wurde nach dem Waschen umkristallisiert, und zwar zunächst aus Ethylacetat und einem Gemisch technischer Hexane und dann aus Ethylacet t allein. Man gewann eine erste Ausbeute (11,7 g; F. 248 bis 249° C) und sodann eine zweite Ausbeute (2,3 g; F. 244-246⁰C) von 7-Chlor-5-(2,6-difluorphenyl)-l,3-dihydro-2H-l,4-benzodiazepin-2-on.

Analyse (für C₁₅H₉ClF₂N₂O):

Ber.: C 58,74, H 2,96, Cl 11,56, F 12,39, N 9,14%;
gef.: C 58,89, H 2,78, Cl 11,39, F 11,72, N 8,95%.

Es zeigte sich, daß dieses Material ein Solvat mit 1,9% Ethylacetat war. Durch Umkristallisieren des solvatisierten Materials aus Ethanol erhält man die nicht solvatisierte Verbindung.

F)7-Chlor-5-(2,6-difluorphenyl)-l,3-dihydro-2H-1,4-benzodiazepin-2-thion

Eine Lösung von 7,65 g (0,025 Mol) des gemäß E) erhaltenen Benzodiazepinons in 500 ml Pyridin wurde mit 5,55 g (0,025 Mol) Phosphorpentasulfid behandelt und in einer Stickstoffatmosphäre 2 Stunden unter Rückfluß erhitzt Das Pyridin (350 ml) wurde anschließend im Vakuum entfernt, und der so gewonnene Rückstand wurde auf zerstoßenes Eis gegossen. Die wäßrige Phase wurde mit Methylenchlorid extrahiert und verworfen. Der Extrakt wurde nacheinander dreimal mit je 200 ml Wasser und 100 ml Salzlösung gewaschen und anschließend über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Bei der Entfernung des Lösungsmittels erhielt man 7,0 g einer festen Substanz, die aus Ethanol-Wasser umkri-

staliisiert wurden. Es konnten zwei Ausbeuten von insgesamt 6,8 g Rohmaterial erhalten werden. Das Rohmaterial ergab nach dem Umkristallisieren aus Ethanol-Wasser die gewünschte Verbindung; F. 222,5—224° C.

Analyse (für Ci₅H₉ClF₂N₂S):

Ber.: C 55,82, H 2,81, Cl 10,98, F 11,77, N 8,68, S 9,93%; gef.: C 56,13, H 2,68, Cl 11,13, F 11,69, N 8,40, S 9,84%.

Beispiel 2

l-Methyl-6-(o-fluorphenyl)-8-chlor-4H-s-triazolo[4,3-a][l,4]benzodiazepin

Eine Lösung von 1,52 g (0,005 Mol) 7-Chlor-5-(of luorphenyl)-1,3-dihydro-2H-1,4-benzodiazepin-2-thion und 1,11g (0,015 Mol) Essigsäurehydrazid in 50 ml 1-Butanol wurde 12 Stunden unter Rückfluß erhitzt, wobei man einen Stickstoffstrom durch das Reaktionsgemisch leitete. Das Lösungsmittel wurde dann im Vakuum abgedampft, und der Rückstand wurde mit Wasser und Methylenchlorid behandelt. Die Phasen wurden getrennt; die organische Schicht wurde über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu einem Öl eingeengt. Das rohe Öl wurde mit Ethylacetat und einem Gemisch technischer Hexane verrieben; die auf diese Weise gewonnene feste Substanz wurde abfiltriert. Man gewann so 1,32 g einer festen Substanz; F. 202—203°C. Durch Umkristallisierung aus Ethylacetat und einem Gemisch technischer Hexane wurden 1,13 g (Ausbeute:

70%) der gewünschten Verbindung erhalten; F. 203 bis 204° C.
Analyse (für C₁₇Hi₂ClFN₄):

Ber.: C 62,49, H 3,70, Cl 10,85, F 5,81, N 17,15%; gef.: C 62,39, H 3.87, Cl 10,91, F 6,03, N 17,11%.

Beispiel 3

l-Methyl-6-(o-chlorphenyl)-8-chlor-4H-s-triazoIo[4,3-a] [1,4]benzodiazepin

Eine Mischung aus 1,0 g (0,0031 Mol) 7-Chlor-5-(ochlorphenyl)-l ,3-dihydro-2H-1,4-benzodiazepin-2-thion, 0,8 g (0,0108 Mol) Essigsäurehydrazid und 40 ml 1-Butanol wurde unter Stickstoff 24 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Während der ersten 5 Stunden wurde Stickstoff langsam durch die Lösung geblasen. Nach dem Abkühlen und Entfernen des Lösungsmittels im Vakuum wurde das Produkt gut mit Wasser vermischt und auf einem Filter gesammelt. Man erhielt so 0,9 g einer orangefarbenen festen Substanz; F. 210-212⁰C. Diese Substanz wurde unter Stickstoff in einem Ölbad auf 250° C erhitzt und sodann abgekühlt. Die feste Substanz wurde aus Ethylacetat umkristallisiert; man erhielt 0,5 g einer lohfarbenen festen Substanz; F. 215—216°C (Zersetzung). Diese wurde in 25 ml 2-Propanol gelöst, abfiltriert, auf 10 ml eingeengt und abgekühlt. Die Ausbeute an lohfarbenen Kristallen der gewünschten Verbindung betrug 0,46 g (43%); F. 223-225⁰C.

Analyse (für C₁₇H₁₂Cl₂N₄):

Ber.: C 59,49, H 3,52, Cl 20,66, N 16,32%; gef.: C 59,55, H 3,78, Cl 20,72, N 16,24%.

Claims

Patentansprüche:

1. l-Methyl-e-phenyl-S-chloMH-s-triazolo-

[4,3-a] [l,4]benzodiazepine der allgemeinen Formel I oder Veterinärmedizin, enthaltend eine Verbindung gemäß Anspruch 1 als Wirkstoff und übliche Trägerstoffe.