DE1518340A1 - Verfahren zur Herstellung eledoisinwirksamer Hexa- und Heptapeptide - Google Patents

Description

SCHERING AG

Patentabteilung

Dr.WK/Na/P.6o7 Berlin, den 4. Februar I969

Verfahren zur Herstellung eledoisin-v/irksamer Hexa- und Heptapeptide

Aus Speicheldrüsen von Tintenfischen (z.B. eledone moschata) konnte als blutdrucksenkende und die glatte Muskulatur sti-' mulierende Substanz das SLEDOISIN isoliert und in seiner Struktur als Undekapeptid aufgeklärt werden (ERSPARMER und ANASTASI, Experientia 1_8, (I962) 58). Eine Bestätigung dieser Struktur erbrachte die Synthese (SANDRIN und BOISSONNAS, Experientia 1J3, (lQo2) 59)· Auf Grund pharmakologischer Untersuchungen am Menschen kommt diesem neuen Peptidwirkstoff eine klinische und therapeutische Bedeutung als hochwirksames blutdrucksenkendes, als gefäß-erweiterndes und die Atmung stimulierendes Mittel zu (SICUTERI, FANCüilLLACCI, PRANCHI und MICHELACCI, Experientia 1£, (1963) 44).

Es wurde nun gefunden, daß die bisher nicht beschriebenen Hexa- und Heptapeptide der allgemeinen Formel

R-L-Alanyl-L-phenylalanyl-L-a-aminoacyl-glycyl-L-leucyl-L-

me thioninamid,

in der R für ein Wasserstoffatom, den L-Asparaginyl-·oder L-Glutaminyl- und a-Aminoacyl für den Leucyl-, Isoleucyl- oder Valylrest steht, überraschend in Art und Stärke ihrer therapeutischen Wirksamkeit dem Eledoisin gleich oder überlegen sind. Technisch bieten die neuen Hexa- und Heptapeptide'gegenüber dem Eledoisin große Vorteile. Entsprechend dem einfacheren

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Aufbau ihrer Peptidketten aus nur 6 oder 7 Aminosäuren sind sie leichter und billiger herstellbar, zumal bei ihrer Synthese statt einiger der im iCIedoisin enthaltenen Aminosäuren einfachere und präparativ günstigere Aminosäuren verwendet werden können.

Die Synthese der neuen Verbindungen kann nach den üblichen Methoden der Peptidkupplung, wie sie beispielsweise in der Monographie von GRI£2NST3IN und WINITZ "Chemistry of the Amino Acids" I. Wiley a. Sons, New York, London (I96I) beschrieben sind, vorzugsweise nach der Anhydrid-, der Azid-, der Carbodiimid- oder der Aktivierte-Ester-Methode erfolgen. Dabei wird die Aminosäuresequenz vorteilhaft aus kleineren Peptideinheiten aufgebaut; gegebenenfalls werden die an der Kondensation nicht beteiligten funktionellen Gruppen intermediär durch z.B. reduktiv oder hydrolytisch leicht abspaltbare Reste geschützt.

Die Reaktionsschemata 1 und 2 bieten einen Überblick über die Synthesewege, die in den Ausführungsbeispielen zur Erläuterung des Verfahrens beschritten worden sind.

Folgende Abkürzungen werden verwendet:

H-L-AIa-OH » L-Alanin

H-L-Phe-OH = L-Phenylalanin

H-L-VaI-OH » L-Valin

H-GIy-OH = Glycin

H-L-Leu-OH = L-Leucin

H-L-Met-OH » L-Methionin

H-L-Ileu-OH - L-Isoleucin

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P. 667 vom 4/2/1969

NH2 H-L-GIu-OH MH	= L-Glutii.TiIn
H-L-Asp-OH	= L-Asparagin
Cbo	= Carbobemioxy
3OC	- Carbo-t-butoxy
MeOCbO	= p-Me^hoxycarbobenzoxy
PhNO2	= p-Nitrophenyl
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I?-i 7οrwendung von vJarbobunzoxy-L-loucin an Stelle- von Carbc-bu-nzoxy-L-iooleucin, sov.'io p-tfethoxycarbobor.zoxy-L-ar.parngin-p-nit.r'ophenylöster an Stelle von p-Methoxycarbobenzcxy-L-glutarnir.-p-nitrcphenylester (vgl. Reaktion^c^h-jma II) können auf analogem Wege weitere wirksame Verbindungen erhalten werden, nämlich

H-L-Ala-L-Phe-L-Leu-Gly-L-Lou-L-.'wt ->;Κ,-, Schmelzpunkt: 2>G - °j>2 "kj>° (c=O,'t> 4n HOl )

ri-L·-Asp-L-Ala-L-Phe-L-Ileu-GIy-L·-Le^-L-.·Iet-i.*H_o · SCI·"¹-, VOOIl, Schmelzpunkt 215 - 2'.0° C, /ά/ = -22,o^G (c = 0,5; Dirne thy iforr.v^rr

Schmelzpunkt 214 - 220⁰C (Zers.)> /^ = -62,6° (ο=υ,6;

"* Trii'luoressigsäure)

H-Asp-L-Ala-L-Phe-L-Leu-Gly-L-Leu-L-I'Iet-iJHp Schmelzpunkt 2^3 - 243°C (Zers.)j /a/_D = -77,2° (c=0,^:",_;

Die neuen Verbindungen, die au ah in Form ihrer SaLzo r.-.it physiologisch vertretbaren anorganischen oder organischen Säu.-j.: a..;',.iziert /.•tjrden können, 'wirken wesentlich stärker blutdrucksenkend als z.3. Acetylcholin oder das Peptid Bradykinin. Die Tabelle '.' gib;; jinc-Übersicht über die blutdrucksenkende Wirkung der neuen Verbindungen am Kaninchen, die mit 1,2 g Urethan subkutan pro kg Körpergewicht anäthetisiert waren. Die relativen Wirksamkeiten bezogen auf Brndykinin ergeben sich aus dem Vergleich der Dosen, welche die gleiche Blutdruckser..cung bewirken, z.B. bewirken 10 ng IV uni ~0 ng X Jeweils 7 a> Blutdrucksenkung, die relative Wirksamkeit von IV Lst somit 2.

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herüc.csichtigt rr.an, daß Z] _doisin t.twa vior.nal starker wirksam αϊ j Ii

Iiradykinin (J.?har:r,. and hx^rl::;. ?';erap., 3d. IQ, 3^9 (1 S>vSji *·), so ergibt sich, au2 die neuer, I-Icxa- und Heptapeptide groi3e:vord:;ungG;r.".3ig die ^leici.·- V.i.'.-.un^ v.io das EIudoi: in zeigen. Λ;.] w;r,-.a^;stcn ist die Verbir.du^^ V ::Λ'~, etwa ^-fächer Zledoisinviirkun^. ^;:. icol irrten Xeerüc.^ jrii.u.^er:: Iu ;:,; ::eice:i die neuen Verbindungen eine etwa ebenso crciie cdur größere kontrahierende Wirkung wie Sic^oisin.

Es ist ein besonderor Vorteil der Erfindung, daß r;it den neuen relativ e.r.fach zusammengesetzten Muxa- und Heptapeptiden eine Blutdrucksenkunj be-.^irkt wird, die in der gleicht.:; 3ro3er.Gr Inun^ liegt wie bei dem Undekapeptid EIeJ isin. Der präparative Vorteil, äev, das eriindur.^^o'-^^Se Verfahre:; bietet, wird deutlich, wenn man bedenkt, weiche beträchtliche Verr.'.lwderi;:".^ der Geoamt^usbeute bei jeder Verlängerung der P^; ticke*;' ·„- u:r. einen A.T.inosäurerest eintritt. Im vorliegenden 7all, wo ::■-. tr^-1in^ungc,2;o::;ä:?tn Verbindungen eine (Ieic:;t abgewandelte) Ί\ : Z. i..;uen:: aer "ergl-iichs5ubs⁴;_t.nz darstellen, ist der technische Fo.¹V.rohritt ": eoonders klar: Fr besteht in der Material-, Zeit- und Arbeitsersparnis aber bei gleich gut^r, zurr. Teil scgar erheblich b«;:serer pharrr.akologischer '.','irkun,;.

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- sf - P. 607 vom 4/2/1969

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a) BOC-L-Ala-L-Phe-OMe

9>5 G (50 m ^M°l) 300-L-Ala-OH werden mit 7 ecm (50 m Mol) Triäthylamin und 4,8 ecm (50 m-Mol) Chlorameisensäureäthyloster in üblicher Weise in Tetrahydrofuran in das Anhydrid übergeführt.und mit aus 12,9 g (oO m Mol) Hydrochlorid und ■ 8,4 ecm Triäthylamin in Dimethylformamid freigesetztem H-L-Phe-OMe gekuppelt. Nach der Aufarbeitung wird aus Essigester/Petroläther umkristallisiert.

Ausbeute 14,6 g (82 $> der Theorie)} Schmelzpunkt 88 - 89⁰C; /o/_D = +7,2° (c=lj Eisessig),
+ 26,9° (c=l; Chloroform).

b) 3OC -L-Al a-L-Phe -₂

Aus BOC-L-Ala-L-Phe-OMe wird durch 48stündige Einwirkung der 8-fachen Menge Hydrazinhydrat in Methanol bei Raumtemperatur BOC-L-Ala-L-?he-NH-NHp erhalten. Das Hydrazid kristallisiert aus, wird abgesaugt und mit Methanol und Äther gewaschen. Es kann aus Methanol umkristallisiert werden. 'Ausbeute 85 % der Theorie, Schmelzpunkt 162 - 163^QC, ■ /ü/_D = -22,o° (o=l; Eisessig).

e) Cbo-L-Val·-GIy-OMo

25,1 g (100 m Mol) Cbo-L-Val-OH werden in Tetrahydrofuran mit 14 ecm (100 m Mol) Triäthylamin und 10 ecm (100 m Mol) Chlcrarneiscnsäureäthyloster bei -2O⁰C in das gemischte Anhydrit übergeführt und mit 15,0 g (120 m Mol) H-GIy-OMe-KCl und 16,8 ecm (120 m Mol) Triäthylamin gelöst in Dimethylformamid umgesetzt. Nach der üblichen Aufarbeitung wird aus Essigester

urnkrlGtallisiert.

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-IC- P. 66? von 4/2/1969

Ausbeute 22,9 E (70 λ> der Theorie), Schmelzpunkt 151-152°C. » -20,4° (c-1; EiSeSSi₃).

d) H-L-VaI-GIy-CMe.HCl

Aus Sbo-L-Val-GIy-OMe wird durch katalytische Hydrierung mit Pd-Mohr in Methanol und der äquivalenten Menge· 1 η Salzsäure H-L-Val-Gly-OMe.HCl hergestellt. Nach Einengen der Lösung wird in Wasser aufgenommen und mit Sssigester ausgeschüttelt. Verdampfen des Wassers irr. Vakuum fuhrt zur gewünschten Verbindung, die nur als öl erhalten wird; Ausbeute cG % dor Theorie.

e) BOC-L-Ala-L-Phe-L-Val-GIy-QMe

i-7,5 S (50 m Mol) B0C-L-Ala-Phe-NHNH₂ werden in 66 ecm einer 1,5 η Lösung von Chlorwasserstoff in Tetrahydrofuran bei -20⁰C suspendiert und mit 5*6 g (61 ;n Mol) tert. -3u':ylnitrit in 30 ecm Tetrahydrofuran bei -20⁰C versetzt.. Nach einigem Schütteln geht das Hydrazid in Lösung. Das Reaktionsgemisch wird mit 500 ecm 2ssigester verdünnt und bei möglichst tiefer Temperatur mit einer Natriumhydrogencarbonatlösung ausgeschüttelt. Mach dem Trocknen über Natriumsulfat wird die AzidlÖsung mit der Amino-•komponente, die aus 15*5 3 ■ (.63 ^ Mol) H-VaI-GIy-OMe.HCl und 9*7 ecm (69 π Mol) Triethylamin in 100 ecm Dimethylformamid -erhalten wird, umgesetzt und über Nacht bei O⁰C stehengelassen.· Nach dem Abdestillieren des Lösungsmittels wird in Chloroform gelöst, mit Wasser, 10 ^-iger Citronensäurelcsung, Wasss-r, gesättigter Hydrogencarbo'natlÖsung und Wasser ausceschLI^tei;., getrocknet und eingeengt. Ausbeute nach Umkristallisieren aus Äthanol/Essigester/Petroläthei· 17,3 g (68 % der Theorie), Schmelzpunkt 207 - 209°C ,

= -55*2° (C=I₅ Eisessig). BAD ORIGINAL

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T) 5CC-L-A

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15,2 g (30 m McI) BOC-L-Ala-L-Phe-L-Val-GIy-GMe werden in 200 ecm n-3utanol gelöst und mit 6,0 ecm (120 mMol) Hydrazinhydrat 2 Stunden auf SC C erwärmt. Nach Einengen im Vakuum wird das Kydrazid aus A'thanol umkristallisiert. Ausbeute 12,2 g (80 £ der Theorie), Schmelzpunkt 218 - 219°C /Ö7_D = -25,3° (c=lj Eisessig).

g) BOC-L-Leu-L-Met-CMe ·

24,9 g (.1CO m Mol) BOC-L-Leu-CH.KgO, 13,3 ecm (100 m Mol) Triäthylamin und 10 ecm (100 m Mol) Chlorameisensäureäthylester in Tetrahydrofuran bei -20⁰C, sowie 23,9 S (120 m Mol) H-L-Met-GMe.KCl und 17,C ecm (120 m Mol) Triäthyiamin in Dimethylformamid werden in üblicher '.\eisc zum 30C-L-Leu-L-Met-CMe umgesetzt. N^rach Umkristallisieren aus Petroläther werden 32,5. g der Verbindung (86 >"' der Theorie) erhalten. Schmelzpunkt 97 - 99°C
/o7_D = -3<S,5^W (c=ij Ä'thar.cl).

h) rCC-L-Leu-L-Met -'s'K^

3,8 g BOC-L-Leu^L-Met-OMe vrerdoH in 15 ecm Methanoi gelöst und diese Lösung wird bei -5 C mit Ammoniak gesättigt. :.*ach dreitägigem Stehen bei Raumtemperatur· wird im Vakuum eingeeng und aus 70 'c-igem Methanol umkristaliisiert. Ausbeute 3/3 S (90 % der Theorie), Schmelzpunkt 154 - 155°C l^?^ = -35,1° (c=l; Dimethylformamid).

3,6 g BOC-Χ.-Leu-L-Met-XH₀ werden in 2C ecm Eisessig gelöst. Bei Raumtemperatur wird 1 Stunde Chlorwasserstoff eingeleitet. Anschließend wir-d mit A"ther gefällt und die Substanz aus Methanol/petroiäther umkristallisiert. οηοοοτ

BAD ORIGINAL

- 12 - P.667 vom 4/2/1969

Ausbeute 3,0 g (90 % der Theorie). 1518340

Schmelzpunkt I88 - 191°C

= + 10,2° (c=lj Wasser).

k) 30C-L-Aia-L-Phe-L-VaI-Gly-L-Leu-L-Met-NH ₂ . Aus 2,53g (5 m Mol) BOC-L-Ala-L-Phe-L-Val-GIy-NHNH₂ wird mit 0,6l ecm (6m Mol) tert. Butylnitrit in 6,6 ecm einer 1,5 η Lösung von Chlorwasserstoff in Tetrahydrofuran bei -20 C das Al id hergestellt. V/ie unter e) beschrieben, wird en in Essigester aufgenommen, die Lösung gewaschen und getrocknet. Aus 1,9 g ( 6 m Mol) H-L-Leu-L-Met-NHg.HCl wird mit 0,84 ecm (6 m KoI) Triäthylamin das freie Amid in Dimethylformamid hergestellt und mit der Azidlösung in üblicher V/eise umgesetzt. Zur Aufarbeitung wird der nach dem Verdampfen der Lösungsmittel erhaltene Rückstand mit Wasser, CitronensäurelÖsung, Wasser, Hydrogencarbonatlösung und V/asser gewaschen. Ausbeute 2,73 g (74 % der Theorie), Schmelzpunkt 250⁰C (Zersetzung). / = -34,7° (c=l; Eisessig).

H-L-Ala-L-?he-L-Val-Gly-L-Leu-L-Met-NH ₂ 1,48 g ( 2 m XoI) SOC-Hexapeptidarr.id werden in 3 ecm 90 #-iger Trifluoressigsäure bei O⁰C gelöst, 45 Minuten bei Raumtemperatur stehengelassen. Das Reaktionsproäukt wird dann mit Äther gefällt. Der Niederschlag wird in 50 ^-igern Kthanol gelöst, die Lösung durch Zugabe einer LiOH-Lösung auf p_u 9-10 eingestellt und das A'thanol weitgehend irr. Vakuum abdestilliert. Nach einigem Stehen bei 0 C wird der Rückstand abgesaugt und mit kaltem Wasser gewaschen;· Ausbeute 0,9 g (75 % der Theorie). Schmelzpunkt 243 - 250⁰C,

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= -49*3 (c=1j Trifluoressigsäure).

-13- BAD

P. 667 vom 4/2/1969

B e i s ρ i e 1 2:

a) Cbo-L-Ileu-Gly-OMe

Cbo-L-Ileu-Gly-OMe wird aus Cbo-L-Ileu-OH und H-GIy-OMe nach der Anhydrid-Methode erhalten und aus Essigester umkristallisiert.

Ausbeute 75 % der Theorie, Schmelzpunkt 127 - 130⁰C /cx7_D = -26,6° (c=2; Siseasig).

Lit.: Determann und Wieland, Makromolekulare Chemie, _44 (1961) 312.

b) H-L-Ileu-Gly-OMe.HCl

K-L-Ileu-GIy-OMe.HCl wird aus der Carbobenzoxyverbindung durch Hydrierung mit Pd-Mohr als Katalysator gewonnen. Nach Umkristallisieren aus Methanol/Äther beträgt die Ausbeute 87 % der Theorie Schmelzpunkt I8I - 182⁰C /o7_D m + 16,3° (c=l; Eisessig). ->

Lit. : Determann un-d Wieland, Makromolekulare Chemie ]44" ·

(I96I) 312.

c) BOC-L-AXa-L-Phe-L-Ileu-Gly-OMe

8,9 g (25 m Mol) B0C-L-Ala-L-Phe-NHNH₂ werden in 33 ecm einer 1,5 η Lösung von Chlorwasserstoff in Tetrahydrofuran bei -20⁰C suspendiert und mit 2,8 g (27 m Mol) tert.-Butylnitrit, gel8et in 15 com Tetrahydrofuran bei -20⁰C, versetzt. Naoh einigem Schütteln geht das Hydrazid in Lösung. Das Heaktionsgemisch wird mit 250 ecm Eisessig verdünnt und bei möglichst ° tiefer Temperatur mit einer Natriumhydrogencarbonatlösung ausgeschüttelt. Nach dem Trocknen über Natriumsulfat wird

^ die Azidlösung mit dem Gemisch von 7,1 g (30 m Mol) 2f H-L-Ileu-Gly-OMe und 4,2 ocm (30 m Mol) Triäthylamin in 50 ccnr

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Dimethylformamid umgesetzt und über Nacht bei OC stehengelassen. Nach dem Abdestillieren der Lösungsmittel vlrd in

BAD ORIGINAL -i4_

P. 667 vom 4/2/1969

Chlproform gelöst, mit Wasser, lOJo-iger Citronensäure, V/asser, gesättigter Hydrogencarbonatlösung und V/asser ausgeschüttelt, getrocknet, eingeengt und aus Ä'thanol/Petroläther umkristallisiertj Ausbeute 9,2 g (70 % der Theorie). Schmelzpunkt 201 - 204⁰C.

/Ö7_D =-34,5° (C=¹J Eisessig).

Die. gleiche Verbindung ist auch auf folgendem Wege zugänglich: BOC-L-Ala-L-Phe-OKe (vgl. Beispiel 1 a) wird in Äthanol rrit der äquivalenten Menge In KOH in 40 Minuten verseift, das Äthanol im Vakuum weitgehend verdampft und nach dem Ansäuern mit Essigester extrahiert. Nach dem Neutralwaschen und Trocknen wird BOC-L-Ala-L-Phe-OH als gla§ige Masse isoliert. Ausbeute 90 $, /q7_D « +5*1° (c=!; Eisessig).

3,4 g (10 m Mol) BOC-L-Ala-L-Phe-OH werden in 10 ecm Tetrahydrofuran gelöst und bei -10⁰C mit einer Lösung von H-L-Ileu-

- 1

GIy-OMe versetzt, die aus 3,5 g des Hydrochloride und 2,1 ecm Triäthylamin in 20 ecm Dimethylformamid hergestellt wird. Nach Zugabe von 2,5 g (12 m Mol) N^N'-Dlcyclohexylearbodiimid in 5 OQm Tetrahydrofuran wird 24 Stunden bei O⁰C aufbewahrt, vom ausgeschiedenen N.N'-Dicyclohexylharnetoff abgesaugt und wie oben beschrieben aufgearbeitet. Ausbeute 4,5 g ( 85 %■ d#r Theorie).

d) BOC-L^Ala-L-Phe-L-Ileu^Gly-WHNH^

7*8 g (15 m Mol) BOC-Tetrapeptld-OMe werden in 80 ecm η«-Βιή;βηο1 mit 2,3 ecm (45 m Mol) Hydrazinhydrat 4 Stunden auf 60⁰C erwärmt. Nach Abdestillieren des Lösungsmittels wird der Rückstand über konzentrierter Schwefelsäure getrocknet und aus Äthanol/Petroläther umkristallisiert. Ausbeute 7,2 g (92 % der Theorie). Schmelzpunkt 217 - 219⁰C.

-25,9° (c-0,5; Eisessig). 909883/1713

BAD ORIGINAL -15-

- 15 - P.667 νοττ. 4/2/1969

c) ncJ-L-Ala-L-Phc-L-Ile^-GIj-L-Lou-L-Xst-NHp Aus 5,2 β (10 is ΐίοΐ) BOC-Tetrapeptidhydrazid wird ir.it 1,2 g

(12 m KoI) te-rt.-Butylnitrit in "15 ecm einer 1,5 π Lösung von -.Chlorwasserstoff in. Tetrahydrofuran das Azid hergestellt. Zur vollständigen Lösung ist die Zugabo einiger Tropfen Wasser erforderlich.. Nach des Verdünnen mit 100 cc.τι Essigester wird ausgeschüttelt, getrocknet und mit einer Lösung von 4,8 g (15 m KoI) H-L-Leu-L-Iiet-NE₂.HCi.H₂O und 2,1 ecm (15 m Mol) Triethylamin in Dimethylformamid gekuppelt. Das Reaktionsgemisch wird 2 Tage bei 0⁰C aufbewahrt, dann werden die Lösungsmittel im Vakuum verdampft* Der Rückstand wird mit V/asser, 10 fj-iger Citronensäurelösung, V/asser, gesättigter Natriumhydrogencarbonatlösung sehr gründlich ausgewaschen und getrocknet. Ausbeute 5,8 g (77 # der Theorie).
Schmelzpunkt 2*8 - 250⁰C </a.7_D = -29,7° (c=l; Dimethylformamid).

f) H-L-Hla-L-

4,5 S ( 6 m XoI) BOC-Hexapeptidamid werden bei 0 C mit 15 ecm 90 ""i-iger Trifluoressigsäure versetzt und 1 Stunde bei dieser Temperatur stehengelassen, '.'ach dem Fällen mit Ä'ther wird abgesaugt-und der Filterrückstand in IC ecm 50 ^l1i-igem Äthanol gelöst Durch Zugabe einer LiOH-LSsung vrird der p^.-'vert auf 9-10 eingestellt und darauf das Ethanol weitgehend abdestilliert. Zur Vervollständigung der Ausfällung wird einige Zeit bei 0⁰C aufbewahrt. Ausbeute 2,7 g (70 'fs der Theorie), Schmelzpunkt hI - 2^4 v.

-, = -60,0° (c=C,,5; Trifluoressigsäure).

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BAD ORIGINAL

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-16 - P.66? vom 4/2/1969

ε) KeOCbo-L-Glu-L-Ala-L-Phe-L-Ileu-Gly-L-Leu-L-Met-NHg · 0,65 g (1,5 m Mol) MeGCbO-L-GIu(NH^-OPhNO₂ werden in 2 ecm Essigester gelöst und zu einer Lösung von 1,04 g (1,6 m Mol).H-L-Ala-L-Phe-L-Ileu-Gly-L-Leu-L-Met-NH₂ in Dimethylformamid gegeben. Das Reaktionsgemisch wird 4 Tage bei 40°C aufbewahrt. Nach dem Einengen im Vakuum wird mit Essigester ausgekocht und der Rückstand mit 10 ^-iger Citronensäurelösung und Wasser behandelt, Ausbeute 1,06g (75 % der Theorie), Schmelzpunkt 267 - 269°C (Zersetzung).

V^H2
h) H-L-Glu-L-Äla-L-Phe-L-Ileu-Gly-L-Leu-Ket-NH^ 892 rig (1 m Mol) MeOCbo-Heptapeptidamid werden mit 0,2 ecm Anisol und 1,3 ecm Trifluoressigsäure versetzt und 1 Stunde bei Raumtemperatur belassen. Nach dem Fällen mit Äther wird im Vakuum über Kaliumhydroxyd getrocknet. Dann wird in 50 /3-igern A'thano-1 gelöst, mit einer LiOH-LÖsung der P_x.-Wert auf 9 eingestellt und das Äthanol im Vakuum abdestilliert. Nach längerem Stehen bei 0⁰C wird abgesaugt und über Phosphorpento-xyd getrocknet. Ausbeute 540 mg (TO % der Theorie). Schmelzpunkt 2*-5 - 258⁰C (Zersetzung). 7_D = -68,5° (c=0,5; Trifluoressigsäure).

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Claims (13)

?. 657 vom 4/2/1969 '

1.S 18340

Patentansprüche

I. Verfahren zur Herstellung neuer Peptide der allgemeinen Formel

R-L-Alanyl-L-phenylalanyl-L-a-aminoacyiglycyl-L-leucyl-L-methioninamid,

in der R für ein Wasserstoffatom, den L-Asparaginyl- oder L-Glutaminyl- und L-a-Aminoacyl für den L-Leucyl-, L-Isoleucyl- oder L-Valylrest steht, dadurch gekennzeichnet, daß man nach an sich bekannten Methoden L-Alanin, L-Phenylalanin, L-Leucin bzw. L-Isoleucin bzw. L-Valin, Glycin, L-Leucin und L-Methioninamid in dieser Reihenfolge kondensiert, vorzugsweise indem man reaktionsfähige Derivate der genannten Aminosäuren, in denen die nicht an der Reaktion beteiligten funktioneilen Gruppen zweckmäßig während der Kondensation geschützt sind, zum Hexapeptid umsetzt und dieses, falls Heptapeptide als Endprodukt gewünscht werden, anschließend noch mit einem geeigneten Derivat des L-Glutamins oder des L-Asparagins umsetzt.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man reaktionsfähige Derivate der genannten Aminosäuren zunächst zu kleineren Peptideinheiten kondensiert, welche dann ihrerseits zu entsprechenden Hexa- bzw. Heptapeptiden kondensiert v/erden.

3. Verfahren gemäß Anspruch 1 zur Herstellung neuer Peptide der allgemeinen Formel

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?.-;ό7 νο,τι K/2 /1069

leucyi-L-m^thioninamid,

in der R.für ein V.'asserstoffator.', den L-Asparcr-inyl- oder L-Glutaminyl- unu L-c-Arninoacyl für den L-Leucyl-., L-Isoleucyi- oder L-Valylrest steht,, dadurch ^akenn-zeichnet, da.3 man nach an eich bekannten iueth-äen aus einem geschützten Peptid asr allgemeinen. Porrnoi

A-R'-L-alanyl-L-phenylalanyl-L-Ci-arr.inoac-yl-glycyl-

L-ieucyi-L-rnethioninarnid,

worin L-a-aminoacyl dasselbe v/i= oben, A eine Arninoaäureschutzgruppe und R^f den Rest des Asparagins oder Glutarr.ino oder eine direkte 3indung zv/ischen A und L-alanyl bedeuten, die Schutzgruppe abspaltet.

4. Verbindungen der allgemeinen Formel R-L-Alanyl-L-phenylalanyi-L-a-arr.inoacyl-glycyl-L-leucyl-

L-methioninamid,

in der R für ein 'vaoserstoffatorn, den L-Asparaginyl- oder L-Glutaminyl- und L-a-Aniinoacyl für den L-Leueyl-, L-Isoleucy.".- oder L-Valylrest steht.

5. L-Alanyl-L-phenylalanyl-L-valyl-glycyl-L-leucyl-L-

rr.e thioninamid.

6. L-Alanyl-L-phenylalanJl-L-ieucyi-glycyl-L-leucyi-L-

methioninarnid.

7. L-Alanyl-L-phenylalanyl-L-isoleucyl-glycyl-L-leucyi-L-

methioninaraid.

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909883/1718

e.iur vor. U /g/l969

8. L-Glutaniinyl-L-alan.yi-L-phur^-l-alanyl-L-isoIeucyl-sIycyl-

• L-leucyI-L-n;el.hior-in&.r.iG.

9. I- -GIu' οa:niny I -L -al any 1 -L - phenyl al u.rj 1 -L -I euoyl -gly cy 1 -L -

leucyl-L-rnethionini.^iG.

10. L-Glutarr.inyl-L-alanyl-L-phenylalanyl-L-valyl-glycyl-L-

Ieucyi-L-r.ethioninarr.id.

11. L-Asparasinyl-L-alar.yl-L-phenylalanyl-L-valyl-slycyl-L-

ieucyl-L-r.cthioni-narnic -

12. L-Asparaginyl-L-alanj^l-L-pher.yldanyl-L-isoleucyl-slycyl-

L-leucyI-L-rr.ethionina;.-,ici.

13. L-Asparaginyl-L-alanyl-L-phonylalanyl-L-ieucyl-glycyl-L-

leucyl-L-r.ethioninar.ic.

909883/1718