DE1255354B - Diagnostiziermittel zum Nachweis von Glukose in Fluessigkeiten, insbesondere Urin - Google Patents

Diagnostiziermittel zum Nachweis von Glukose in Fluessigkeiten, insbesondere Urin

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DE1255354B
DE1255354B DEM35785A DEM0035785A DE1255354B DE 1255354 B DE1255354 B DE 1255354B DE M35785 A DEM35785 A DE M35785A DE M0035785 A DEM0035785 A DE M0035785A DE 1255354 B DE1255354 B DE 1255354B
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Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND
DEUTSCHES
PATENTAMT
AUSLEGESCHRIFT
Int. Cl.:
GOIn
Deutsche Kl.: 421-3/54
Nummer: 1 255 354
Aktenzeichen: M 35785IX b/421
Anmeldetag: 31. Oktober 1957
Auslegetag: 30. November 1967
Gegenstand des Hauptpatents 1 075 869 ist ein Diagnostiziermittel zum Nachweis von Glukose in Flüssigkeiten, insbesondere Urin, das gekennzeichnet ist durch einen saugfähigen Träger, der Glukose-Oxydase und eine Verbindung enthält, die in an sich bekannter Weise in Gegenwart von Hydroperoxyd und Peroxydase eine Farbreaktion gibt. Vorzugsweise enthält der Träger 'eine Puffersubstanz, die bei Berührung mit der Flüssigkeit den ph-Wert zwischen etwa 2 und 8 hält.
Es hat sich nun als besonders zweckmäßig, insbesondere zum Nachweis von Glukose in Blut erwiesen, wenn man dem Diagnostiziermittel erfindungsgemäß Gelatine hinzufügt. Ferner empfiehlt sich, als die Farbreaktion ergebende Verbindung o-Tolidinhydrochlorid oder 2,7-Diaminofluoren-Hydrochlorid zu verwenden und/oder einen Puffer zuzumischen, der bei Berührung mit Blut einen ph-Wert im Bereich von etwa 4 bis 6 einzustellen vermag.
Die Zubereitung kann man als Suspension oder als Lösung auf das saugfähige Material, wie Papier, Wolle, Fasern 0. dgl., jeder beliebigen Größe oder Gestalt aufbringen. Nach dem Trocknen zeigt das getränkte Material einen bestimmten Farbwechsel, wenn es mit einem glukosehaltigen Stoff, z. B. Blut, in Berührung gebracht wird.
Die Zubereitung kann auch in Tablettenform gebracht werden. Zum Nachweis von Glukose bringt man dann etwa ein oder zwei Tropfen zu untersuchende Flüssigkeit, z. B. verdächtiges Blut, auf diese Tablette.
Beispiel
5 mg Peroxydase,
200 mg Glukose-Oxydase,
100 mg o-Tolidindihydrochlorid,
1 g Gelatine,
2 g feste Puffersubstanz
(32% wasserfreie Citronensäure, 68 % Natriumcitrat-Dihydrat), 20 cm3 Wasser
Diagnostiziermittel zum Nachweis von Glukose in Flüssigkeiten, insbesondere Urin
Zusatz zum Patent: 1075 869
Die Gelatine wurde in 5 ml kochendem Wasser gelöst und nach Abkühlen auf Zimmertemperatur mit 2 g fester Puffersubstanz, in 5 ml Wasser suspendiert, versetzt. Es bildet sich eine klare Lösung, zu der in 5 ml Wasser gelöstes o-Tolidindihydrochloridgegebenwurde. Sofort danach wurden 5 ml peroxydase- und glukoseoxydasehaltiges Wasser zugefügt und nach dem Vermischen Filtrierpapierstreifen (5,08 cm auf 0,64 cm) in diese Lösung eingetaucht. Diese Streifen wurden dann an der Luft oder im Vakuum getrocknet. Ein Tropfen zu untersuchendes Blut wurde auf die imprägnierte Zone dieses Streifens gegeben und nach einer
Anmelder:
Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. (V. St. A.)
Vertreter:
Dr.-Ing. F. Wuesthoff, Dipl.-Ing. G. Puls
und Dr. E. v. Pechmann, Patentanwälte,
München 90, Schweigerstr. 2
Als Erfinder benannt:
Alfred Henry Free, Elkhart, Ind. (V. St. A.)
Beanspruchte Priorität:
V. St. v. Amerika vom 7. November 1956
Minute wieder abgespült und die Farbe des Streifens beobachtet. Die Intensität der blauen Farbe ist proportional der in dem Blut vorhandenen Glukosemenge. Die nach obiger Methode hergestellten Streifen gaben bei Berührung mit glukosehaltigem Blut eine blaue Farbe.
Nachfolgend werden Jioch Abänderungen der vorgenannten Zusätze angegeben. Der Gehalt an o-Tolidindihydrochlorid kann zwischen 20 und 200 Teilen variieren, während man 1 bis 100 Teile Peroxydase für einen Ansatz verwenden kann. Da die Peroxydase eine teure Substanz ist, wird man gewöhnlich nicht mehr als etwa 5 Teile hiervon verwenden. Die obere Grenze der Gelatinemenge wird von den der Zubereitung durch die Gelatine erteilten Absorptionseigenschaften bestimmt. Zu viel Gelatine verzögert natürlich die Absorption des Blutes am Diagnostiziermittel und verlangsamt den Test. Vorzugsweise wird man 50 bis Teile Gelatine verwenden. Puffer sollte so viel verwendet werden, um den pH-Wert der Körperflüssigkeit vorzugsweise auf etwa 5 einzustellen.
709 690/226
mg Beispiel 2
5 mg Peroxydase,
200 mg Glukose-Oxydase,
100 mg o-Tolidindihydrochlorid,
200 g Gelatine,
2 cm3 feste Puffersubstanz,
20 Wasser
Die Arbeitsweise war identisch mit der von Beispiel 1. Die Teststreifen wurden bei Berührung mit glukosehaltigem Blut blau.
Beispiel 3
5 mg Peroxydase,
200 mg Glukose-Oxydase,
,. 100 mg 2,7-Diaminofluoren · HCl,
200 mg Gelatine,
2 g feste Puffersubstanz,
20 cm3 Wasser.
latine im Ansatz vorhanden war, so entwickelte der damit präparierte saugfähige Streifen bei Berührung mit glukosehaltiger Flüssigkeit eine überraschend tiefe, scharf abgegrenzte, eindeutig erkennbare Farbe überall da, wo die glukosehaltige Flüssigkeit mit den imprägnierten Streifen in Berührung kam.
Wenn auch Gelatine die bevorzugte Beimischung zum Reagens ist, um die Streifenbildung zu verhindern, so sind doch auch noch andere Stoffe, wie Glutaminsäure, Glykokoll, Algin, und andere Proteinabbauprodukte, wie Polypeptine, Proteosen, brauchbar.
o-Tolidin, gewöhnlich in Form des Dihydrochlorids, wird als bevorzugte Indikatorkomponente für die erfindungsgemäße Zubereitung verwendet. Geeignet sind aber auch andere Indikatoren, wie m-Tolidin, Gemische von Benzidin und Guajacol und 2,7-Diaminofluoren.
Die in den obigen Beispielen verwendete Glukose-Oxydase hatte die gleiche Aktivität wie bei den Beispielen des Hauptpatents.
Die Zubereitung wurde ebenso wie im Beispiel 1 hergestellt. Der Indikator wurde allerdings durch Diaminfluoren ersetzt. Die so zubereiteten Streifen ergaben bei Berührung mit glukosehaltigem Blut einen positiven Test.
Auffallend für saugfähige, mit gelatinehaltigen Zubereitungen getränkte Streifen war das Fehlen einer sogenannten Streifenbildung. In den Beispielen, in denen der saugfähige Papierstreifen mit einer von Gelatine freien Zubereitung imprägniert war, war die bei Berührung des Streifens mit glukosehaltigem Blut auftretende blaue Farbe nicht so scharf, tief oder so klar abgegrenzt wie bei den mit gelatinehaltigen Zubereitungen hergestellten Streifen. Im ersteren Fall war die Farbe in Form mehrerer Streifen aufgetreten, die ziemlich schlecht abgegrenzt waren und verschwommene Ränder von mehr oder weniger deutlicher Farbqualität, Tönung und Tiefe hatte. Wenn aber andererseits Ge

Claims (3)

Patentansprüche :
1. Diagnostiziermittel zum Nachweis von Glukose in Flüssigkeiten, insbesondere Urin, nach Hauptpatent 1075 869, dadurch gekennzeichnet, daß es insbesondere für die Bestimmung der Glukose in Blut noch Gelatine enthält.
2. Diagnostiziermittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es als Farbreaktion ergebende Verbindung o-Tolidindihydrochlorid oder 2,7-Diaminofluoren-Hydrochlorid enthält.
3. Diagnostiziermittel nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß es genügend Puffersubstanz enthält, die bei Berührung mit Blut einen pH-Wert von etwa 4 bis 6 einstellt.
In Betracht gezogene ältere Patente:
Deutsche Patente Nr. 1 121 847, 1 121 848.
709 690/226 11.67 © Bundesdruckerei Berlin
DEM35785A 1955-06-09 1957-10-31 Diagnostiziermittel zum Nachweis von Glukose in Fluessigkeiten, insbesondere Urin Pending DE1255354B (de)

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