-
Technisches Gebiet
-
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zum Analysieren eines Antigens oder Antikörpers für Blut, Serum oder Plasma als Probe oder Muster durch Verwenden einer Antigen-Antikörper-Reaktion unter Verwendung einer fluoreszierenden oder einer lumineszierenden Substanz, die an ein Antigen oder einen Antikörper gebunden ist, um das Vorhandensein oder Nichtvorhandensein der Reaktion und die Reaktionsstärke bei der Analyse von Spurensubstanzen in Blut zu bestimmen.
-
Stand der Technik
-
Bei einer Spurensubstanzuntersuchung eines Hormons, eines Tumormarkers, eines Markers eines infektiösen Pathogens, eines Antikörpers eines infektiösen Pathogens usw. für Blut, Serum, Plasma oder eine Körperflüssigkeit als Probe oder Muster wurde im Allgemeinen ein Verfahren zum qualitativen oder quantitativen Nachweis von Proteinen usw. in der Probe oder dem Muster durch eine Bindung auf der Grundlage einer Antigen-Antikörper-Bindungsreaktion an jeden Analysebestandteil von Proteinen verwendet. Der Antikörper oder das Antigen, der oder das an ein Protein als Analyseobjekt bindet, wird in diesem Fall mit einem radioaktiven Isotop, einem fluoreszierenden Farbstoff, einem lumineszierenden Farbstoff, einem Enzym, einem Seltenerdkomplex, einem Metallion usw. verbunden und als markiertes Antigen, markierter Antikörper oder Tracer bezeichnet.
-
Ähnlich wird für die Untersuchung von DNA oder RNA, beispielsweise eines Pathogens, eines Arzneimittelmetabolisierenden Markers usw. in der Probe oder dem Muster eine zur DNA oder RNA eines Analyseobjekts komplementäre DNA- oder RNA-Kette hybridisiert, um das Analyseobjekt nachzuweisen. In diesem Fall wird die komplementäre DNA- oder RNA-Kette direkt oder indirekt mit einer fluoreszierenden oder einer lumineszierenden Substanz markiert.
-
Die Immunprobe ist ein spezifisches Verfahren zum Messen einer biologischen Substanz auf der Grundlage davon, dass ein Antigen und ein daran gebundener Antikörper eine Antigen-Antikörper-Bindung bilden. Das Verfahren umfasst, abhängig vom Messprinzip, ein Lösungsausfällungsreaktionsverfahren, ein Trägeragglutinationsreaktionsverfahren und ein Markierter-Antikörper-Verfahren. Das Lösungsausfällungsreaktionsverfahren ist ein Verfahren zum optischen Messen und Bestimmen durch die Antigen-Antikörper-Bindung in einer Lösung gebildeter Agglutinate, wofür eine Immunturbidimetrie, eine Immunnephelometrie usw. bekannt sind. Das Trägeragglutinationsreaktionsverfahren ist ein Verfahren, bei dem ein Träger in der Art eines Antikörperimmobilisierten Latex und eine Probenlösung (Antigen) einer Antigen-Antikörper-Bindung unterzogen werden und die sich ergebenden Agglutinate des Trägers optisch oder bildlich gemessen und bestimmt werden. Das Trägeragglutinationsreaktionsverfahren misst den scheinbaren Teilchendurchmesser oder eine Verringerung oder Erhöhung des durchgelassenen Lichts durch Latexturbidimetrie, Latexnephelometrie, Teilchenzählen, Bildverarbeitung usw. Beim Markierter-Antikörper-Verfahren wird ein mit verschiedenen Markierungssubstanzen markierter Antikörper verwendet, um damit eine Antigen-Antikörper-Bindung vorzunehmen, und nur der mit dem markierten Antikörper reagierte Bestandteil gemessen. Die bekannten Markierter-Antikörper-Verfahren umfassen, abhängig von den Markierungssubstanzen, eine Radioimmunprobe, eine Enzym-Immunprobe, eine Fluoreszenz-Immunprobe, eine Chemolumineszenz-Immunprobe, eine Elektrolumineszenz-Immunprobe usw.
-
Die bei der Immunprobe auftretenden Probleme werden nachstehend dargelegt:
- 1. Auswirkung durch einen heterophilen Antikörper: Bei dem System, bei dem ein monoklonaler Antikörper als Antikörper verwendet wird, vernetzt er einen markierten Antikörper und einen immobilisierten Antikörper, wenn HAMA (humaner Anti-Maus-Antikörper) in der Probe vorhanden ist, was zu falsch-positiven Ergebnissen führt.
- 2. Nicht-spezifische Reaktion mit einem Blockierungsmittel usw.: Ein Blockierungsmittel oder ein Schutzprotein, das in einem Reagens enthalten ist, reagiert mit Substanzen in der Probe, was zu falsch-positiven Ergebnissen führt.
- 3. Nicht-spezifische Reaktion mit einem markierten Enzym: Wenn eine an ein markiertes Enzym bindende Substanz in der Probe vorhanden ist, nimmt der Hintergrund zu.
- 4. Prozone-Phänomen oder Hochdosis-Huck: Wenn die Konzentration eines Antigens höher als ein Messbereich ist oder wenn die Konzentration eines markierten Antikörpers den Messbereich stark übersteigt, treten falsch-positive Ergebnisse auf. In einem exzessiven Antigen-Bereich wird ein Antigen-Antikörper-Komplex löslich, so dass er manchmal einen abnorm niedrigen Wert zeigt.
- 5. Auswirkung einer Hämolyse: Wenn eine Hämolyse in der Probe intensiv ist, führt dies zu Einflüssen auf die Farbbildung, so dass die Beurteilung schwierig wird.
- 6. Wenn Fäkalien und Urin als Probe verwendet werden: Es werden frische Proben verwendet. Proben, die intensiv trüben Harnstoff oder Blutzellen enthalten, sind nicht geeignet.
- 7. Auswirkung infolge der Eigenschaft der Probe: Wenn die Viskosität der Probe, insbesondere die Proteinkonzentration (M-Protein, Kryoglobulin-positive Probe) hoch ist, ist die Reaktionsrate niedrig, und es treten falsch-negative Ergebnisse auf. Der Test wird unter Verwendung einer verdünnten Probe erneut ausgeführt. Eine nicht-spezifische Streuung tritt manchmal infolge des Vorhandenseins milchigen Serums oder Immunkomplexes auf.
- 8. Falsch-positive und falsch-negative Ergebnisse infolge einer gekreuzten Reaktion: Sie werden in einem System beobachtet, in dem ein rekombinantes Antigen verwendet wird. Ferner zeigen sich falsch-positive Ergebnisse durch eine gekreuzte Reaktion in FSH, TSH und LH.
- 9. Auswirkung verwendeter Arzneimittel (Atropin, Koffein, Acetoamidphenol, Acetylsalicylsäure, Askorbinsäure usw.): Falsch-positive Ergebnisse zeigen sich durch die Auswirkungen von Arzneimitteln in einem Urin-hCG-Messsystem.
- 10. Unterschiede der Messempfindlichkeit zwischen Reagenzien: In manchen Fällen entwickelt sich im Laufe der Zeit eine positive Reaktion, auch wenn die Reaktion während einer vorgegebenen Beurteilungszeit ein negatives Ergebnis zeigt.
-
Es ist eine lange Zeit verstrichen, seit Berson und Yalow eine Radioimmunprobe durch Markieren von Antigenen oder Antikörpern mit radioaktiven Isotopen ausgeführt haben. Diese wird noch heute wegen ihrer guten Empfindlichkeit und hohen Spezifizität als nützliches Verfahren verwendet. Inzwischen wurden eine Enzym-Immunprobe, eine Fluoreszenz-Immunprobe, eine Lumineszenz-Immunprobe usw. entwickelt und verbessert.
-
Die Enzym-Immunprobe ist ein Verfahren zum Markieren eines Antigens oder eines Antikörpers mit einem Enzym statt mit dem radioaktiven Isotop, wodurch angesichts der hohen katalytischen Aktivität des Enzyms in Bezug auf ein Substrat eine hochempfindliche Messung ermöglicht wird.
-
Bei der zeitlich aufgelösten Fluorometrie wird ein Endprodukt einer Antigen-Antikörper-Reaktion mit anregendem Licht gepulst bestrahlt, und es wird nach Ablauf einer Zeit, in der die von einem Reaktionsgefäß usw. erzeugte Fluoreszenz gequencht wird, die Fluoreszenz der Substanz gemessen. In den letzten Jahren wurden Europium-Komplexe oder Samarium-Komplexe mit einer verhältnismäßig langen Fluoreszenz-Quenchzeit oder solche, die keinen Empfindlichmacher benötigen, entwickelt, und das Verfahren ist effektiver geworden.
-
Bei der Lumineszenz-Immunprobe wird ein Verfahren zum Markieren von Isoluminol oder Acridiniumester und zum Messen des Lumineszenzbetrags bereitgestellt, und es wurden Messsysteme mit den folgenden Kombinationen entwickelt: Eine Kombination von Peroxidase und Luminol unter Verwendung eines Substrats, das zu einer Lumineszenzreaktion in der Lage ist, während ein Enzym als Markierungssubstanz verwendet wird, oder eine Kombination eines Substrats in der Art von AMPPD, welches Licht emittiert, wenn eine Phosphorsäuregruppe dissoziiert wird, und einer Alkaliphosphatase, oder eine Kombination, bei der Luciferase als Markierungssubstanz und Luciferin als Substrat verwendet wird.
-
Bei einem markierten Antigen, einem markierten Antikörper, einer markierten DNA, einer markierten RNA, einem Tracer usw. wurde, wenngleich eine einzige fluoreszierende Substanz oder eine einzige lumineszierende Substanz an ein zu markierendes Material gebunden ist, versucht, viele fluoreszierende oder lumineszierende Substanzen an ein zu markierendes Material zu binden, um die Fluoreszenz- oder Lumineszenzstärke zu erhöhen. Viele fluoreszierende oder lumineszierende Substanzen sind als ein Komplex, als ein Komplex mit Rinderserumalbumin, Streptavidin oder einem anderen proteinfremden Komplex ausgebildet oder an die Oberfläche eines feinen Teilchens gebunden, und sie sind als ein Markierungsmaterial an das zu markierende Material gebunden. Für die feinen Teilchen werden im Allgemeinen Teilchen von Gelatine, Latex oder Polystyrol mit einem Durchmesser von etwa 2 Mikrometer (μm) verwendet, welche als Träger für die fluoreszierende oder die lumineszierende Substanz dienen. In den letzten Jahren wurden auch feinere Teilchen mit einem Durchmesser von etwa 100 Nanometer (nm) entwickelt. Ferner werden für das Binden oder Immobilisieren der fluoreszierenden oder lumineszierenden Substanz an den Träger die feinen Teilchen und die fluoreszierende Substanz oder die lumineszierende Substanz häufig in einer Pufferlösung gemischt und elektrisch gebunden.
-
Die Reaktionsoberfläche als Stelle für die Antigen-Antikörper-Reaktion oder das Gennachweisverfahren umfasst im Allgemeinen eine flache Platte oder ein Teilchen eines Kunststoff- oder Glasmaterials, und es werden auch Eisenoxid aufweisende magnetische Teilchen verwendet. Ferner werden manchmal Filter, Webfasern, mehrschichtiges Papier, ein poröser Film usw. verwendet, um die Oberfläche für die Immobilisation zu vergrößern.
-
Wenn die einzelnen Körper, welche die Reaktionsoberfläche aufweisen, Teilchen sind, werden sie in ein Reaktionsgefäß gegeben und mit einer Probe oder einem Muster oder einem Reagens gemischt, und Zellen, Mikrotiterplatten usw. aus transparenten Mineralen, wie Quarz oder ein künstlicher Stein daraus, Glas oder Verbindungen in der Art von Polycarbonatmaterial, Polystyrolmaterial und Polyvinylmaterial werden als Gefäß verwendet.
-
Ein Verfahren zum Messen von Bestandteilen in einer Immunserumprobe zur klinischen Inspektion umfasst häufig ein Verfahren zum Nachweis einer Antigen-Antikörper-Reaktion unter Verwendung eines Antikörpers oder eines Antigens mit einer fluoreszierenden oder einer lumineszierenden Substanz als markierte Substanz, In diesem Fall wird die Antigen-Antikörper-Reaktion selbst dann nachgewiesen, wenn die fluoreszierende oder die lumineszierende Substanz in der Art eines Farbstoffs, eines fluoreszierenden Farbstoffs oder eines phosphoreszierenden Farbstoffs direkt an den Antikörper oder das Antigen gebunden ist. Wenn der markierte Antikörper oder das markierte Antigen jedoch durch Binden mehrerer Substanzen an einen Markierungsträger, wodurch ein Komplex einer fluoreszierenden oder einer lumineszierenden Substanz und eines Trägers gebildet wird, und Binden von diesem an ein Antigen oder einen Antikörper präpariert wird, kann die Menge der an ein Molekül des Antigens oder Antikörpers gebundenen fluoreszierenden Substanz vergrößert werden, um intensivere Signale zu erzeugen. Wenn Proteine, wie Rinderserumalbumin und Keyhole-Limpet-Hämocyanin, Kunststoffteilchen, beispielsweise aus Polystyrol und Polypropylen, Ferrit, Silika, Gelatine und andere Polymerisationsprodukte oder verkettete Kohlenstoffverbindungen, wie Polyvinylalkohol, verwendet werden, entsprechen sie dem Markierungsträger.
-
Alternativ können mehrere fluoreszierende oder lumineszierende Substanzen in Liposomen, Lipidfilmen oder hohlen Kunststoffmaterialien versiegelt werden, wodurch sie Signale verstärken können. In diesem Fall entsprechen die Liposome, Lipidfilme oder hohlen Kunststoffmaterialien dem Träger.
-
Der Träger wird als ein Komplex mit der fluoreszierenden oder der lumineszierenden Substanz gebildet und als ein Markierungsmaterial verwendet. Das Markierungsmaterial bildet manchmal während der Konservierung einen Makroagglutinatblock. Ferner wird die thermische Stabilität durch die Bildung des Komplexes erheblich verringert, und das Material neigt auch dazu, leicht an einem Reaktionsgefäß oder an dem Reaktionsmaterial zur Immobilisation adsorbiert zu werden, was zu einer Erhöhung des nicht spezifischen Hintergrunds führt. In der gleichen Weise geschieht infolge der Eigenschaft der Träger- und der Markierungssubstanz und ferner der in der Lösung enthaltenen Inhaltsstoffe eine Extinktion oder ein Quenchen, wodurch die Farbbildung, Lumineszenz oder Fluoreszenz einer Substanz verringert wird. Ferner wird die Antigen-Antikörper-Reaktion erheblich verringert, wenn das Antigen oder der Antikörper markiert wird, weil das Molekül des markierten Materials groß ist.
-
Bei der Antigen-Antikörper-Reaktion durch Fluorometrie oder Luminometrie bindet die fluoreszierende Substanz, die lumineszierende Substanz oder das Enzym, die oder das an den markierten Antikörper oder das markierte Antigen bindet, nicht in einer 1:1-Beziehung an den Antikörper oder das Antigen, sondern mehrere Moleküle der fluoreszierenden Substanz, der lumineszierenden Substanz oder des Enzyms binden im Allgemeinen an ein Molekül des Antikörpers oder des Antigens. Es wird beabsichtigt, verstärkte Signale zu entnehmen.
-
Die fluoreszierende Substanz, die lumineszierende Substanz oder das Enzym bindet zu mehreren an ein anderes Protein oder eine andere Tragsubstanz, und das Protein oder die Tragsubstanz wird als Träger für die fluoreszierende Substanz usw. verwendet. Es ist wichtig, dass der Träger die folgenden Anforderungen erfüllt.
- 1. Vorzugsweise hat der Träger eine große Oberfläche, während sein Molekulargewicht niedrig ist, und er hat ein spezifisches Gewicht, das in etwa gleich jenem eines zu verwendenden Puffers ist.
- 2. Vorzugsweise neigt der Träger dazu, die fluoreszierende Substanz usw. zu immobilisieren, und verringert nicht die Fluoreszenz oder die Lumineszenz der fluoreszierenden Substanz usw.
- 3. Vorzugsweise adsorbiert der Träger weniger an ein Reaktionsgefäß oder andere Teilchen, nachdem der Träger mit der fluoreszierenden Substanz usw, markiert wurde.
- 4. Vorzugsweise ist der Träger fein und hat eine solche Größe, dass Anregungslicht nicht optisch unterbrochen wird und er in der gleichen Weise die Erfassung der Fluoreszenz oder Lumineszenz an einem Photomultiplier oder dergleichen nicht behindert. Falls ein Objekt vorhanden ist, das kürzer als eine Wellenlänge ist, unterbricht der Träger das Licht nicht. Wenn der Träger kürzer als die Wellenlänge des zu verwendenden Lichts ist, durchläuft das Licht den Träger ohne Abschwächung. Ferner wird Licht durch den Träger nicht gestreut, und das Erzeugen von Rauschen ist minimiert.
- 5. Vorzugsweise ist der Träger farblos und transparent und behindert das Hindurchtreten des anregenden Lichts nicht. Vorzugsweise erzeugt der Träger keine nicht spezifische Fluoreszenz oder Lumineszenz infolge der Bestrahlung mit dem anregenden Licht.
- 6. Vorzugsweise hat der Träger eine hohe Hydrophilie und eine hohe Dispergierbarkeit. Ebenso behält er vorzugsweise nach dem Markieren der fluoreszierenden Substanz usw. die hohe Hydrophilie und Dispergierbarkeit leicht bei.
-
Ein homogenes Messverfahren (ein homogenes Assay) ist ein Verfahren, bei dem eine Messung stets in einem Lösungszustand ausgeführt wird. Weil eine Messung hoher Empfindlichkeit gefordert wurde, wurde jedoch im Allgemeinen ein Verfahren zum Reagieren eines Antigens und eines Antikörpers, Trennen eines freien markierten Antikörpers (oder Antigens), der nicht an der Reaktion teilnimmt, durch einen Reinigungsvorgang (B/F-Trennung) und anschließenden Messen des Antigen-Antikörper-Komplexes, d. h. ein heterogenes Messverfahren (heterogenes Assay) verwendet. Heute ist ein homogenes Assay hoher Empfindlichkeit möglich geworden, indem eine Kombination eines fluoreszierenden Farbstoffs und seines Quenchers (Quench-Farbstoffs) oder ein FRET-Verfahren zum Nachweis der Fluoreszenz einer zweiten Substanz durch Erregung durch Energieübertragung von einer ersten fluoreszierenden Substanz auf die zweite fluoreszierende Substanz, ein LOCI-Verfahren zum Anwenden eines Sauerstoff-Channeling, ein Goldteilchenverfahren zum Messen verschiedener Farbbildungen durch Annähern und Agglutination kolloidaler Goldteilchen usw. entwickelt wurden.
-
Das Patentdokument 1 zeigt ein Verfahren zum Anordnen erster und zweiter Metallteilchen auf einem Substrat in einem Abstand, in dem keine Wechselwirkung zwischen ihnen hervorgerufen wird, Zuführen der zweiten Metallteilchen mit den ersten Metallteilchen und einer ersten Substanz, die an die ersten Metallteilchen und eine zweite Substanz gebunden ist, zu dem Substrat, Binden der ersten Metallteilchen und der zweiten Metallteilchen durch Binden der ersten und der zweiten Substanz, Hervorrufen einer Wechselwirkung zwischen diesen und Beobachten des Bindens zwischen der ersten Substanz und der zweiten Substanz. Das Patentdokument 2 zeigt ein Verfahren zum quantitativen Bestimmen der Menge einer nachzuweisenden Probe durch Messen der Fluoreszenzintensität auf der Grundlage der Antigen-Antikörper-Reaktion zwischen einem nachgewiesenen Probe-Farbstoff-Komplex einer nachzuweisenden Probe (Antigen), die mit einem nicht fluoreszierenden Farbstoff gebunden ist, und einem Antikörper zu dem nachgewiesenen Probe-Farbstoff-Komplex, wodurch sowohl die nachzuweisende Probe als auch der Farbstoff als Epitope erkannt werden, und des nachgewiesenen Probe-Farbstoff--Komplexes und des Antikörpers.
-
All diese Verfahren sind weit davon entfernt, für das hochempfindliche Messen einer spezifischen Reaktion praktisch verwendet werden zu können, und es sind weitere Entwicklungen nötig, weil spezielle Metallteilchen, Substrate, Farbstoffe und Antikörper bereitgestellt werden müssen, welche zwei Epitope erkennen, und spezielle Techniken bei der Präparation des Systems notwendig sind.
-
Dokument zum Stand der Technik
-
Patentdokument
-
- Patentdokument 1: JP 2003014765 A
- Patentdokument 2: JP 2007171213 A
-
Zusammenfassung der Erfindung
-
Durch die Erfindung zu lösendes Problem
-
Es wurde ein homogenes Messverfahren (homogenes Assay) zum Verwirklichen einer hochempfindlichen Messung für das vorstehend beschriebene Verfahren aus dem Stand der Technik gefordert, um die Messung stets im Lösungszustand auszuführen. Gemäß diesem Trend ist ein homogenes Assay hoher Empfindlichkeit möglich geworden, indem eine Kombination eines fluoreszierenden Farbstoffs und seines Quenchers (Quench-Farbstoffs) oder ein FRET-Verfahren zum Nachweis der Fluoreszenz einer zweiten Substanz durch Erregung durch Energieübertragung von einer ersten fluoreszierenden Substanz auf die zweite fluoreszierende Substanz, ein LOCI-Verfahren zum Anwenden eines Sauerstoff-Channeling und ein Goldteilchenverfahren zum Messen verschiedener Farbbildungen durch Annähern und Agglutination kolloidaler Goldteilchen entwickelt wurden.
-
Faktoren, welche die Analyse auf der Grundlage der Antigen-Antikörper-Reaktion instabil machen können, sind folgende: Auswirkungen infolge eines heterophilen Antikörpers, falsch-positive Ergebnisse infolge einer nicht spezifischen Reaktion mit einem Blockierungsmittel usw., eine Erhöhung des Hintergrunds infolge der nicht spezifischen Reaktion mit einem markierten Enzym, falsch-negative Ergebnisse im Fall des Prozone-Phänomens oder bei einem Hochdosis-Huck, falsch-negative oder falsch-positive Ergebnisse infolge von Eigenschaften einer Probe, wie eine proteinreiche Probe, eine milchige Serumprobe usw., falsch-positive oder falsch-negative Ergebnisse infolge einer gekreuzten Reaktion, wenn ein rekombinanter Antikörper verwendet wird, falsch-positive Ergebnisse infolge der gekreuzten Reaktion in FSH, TSH und LH, eine Instabilität des Beurteilungsergebnisses infolge unterschiedlicher Messempfindlichkeiten zwischen Reagenzien usw.
-
Wenn die Fluoreszenz oder Lumineszenz ferner eine Interferenz aufweist, sieht es so aus, als ob bei dem Assay zu messende Objekte in der Probe vorhanden sind, obwohl die zu messenden Objekte ursprünglich nicht in der Probe enthalten waren, was möglicherweise zu einer Fehlbeurteilung führt und wodurch die minimale Nachweisgrenze der Messvorrichtung überdies erheblich verringert wird.
-
Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, ein Assay mit einer hohen Empfindlichkeit auszuführen, wenn es auf der Grundlage der Antigen-Antikörper-Reaktion einer Probe bei einem analytischen Verfahren oder in einer analytischen Vorrichtung durch Fluorometrie oder Luminometrie ausgeführt wird, während der Nachweis oder die Messung einer nicht spezifischen Fluoreszenz oder Lumineszenz in der Art von Interferenzlicht, unabhängig von den Eigenschaften der Probe oder dem Konzentrationsniveau der in der Probe enthaltenen Substanz beseitigt oder im Wesentlichen ausgeschlossen wird.
-
Ferner besteht eine Aufgabe der Erfindung darin, ein schnelles Assay auf der Grundlage der Antigen-Antikörper-Reaktion einer Probe bei einem analytischen Verfahren oder in einer analytischen Vorrichtung durch Fluorometrie oder Luminometrie auszuführen, während der Nachweis oder die Messung einer nicht spezifischen Fluoreszenz oder Lumineszenz in der Art von Interferenzlicht für das Konzentrationsniveau der in der Probe enthaltenen zu analysierenden Substanz beseitigt oder im Wesentlichen ausgeschlossen wird.
-
Ferner besteht eine Aufgabe der Erfindung darin, die Konzentration der schnell und mit hoher Empfindlichkeit zu analysierenden Substanz auf der Grundlage der Antigen-Antikörper-Reaktion einer Probe bei einem analytischen Verfahren oder in einer analytischen Vorrichtung durch Fluorometrie oder Luminometrie quantitativ zu messen, während die Eigenschaft der Probe oder das Konzentrationsniveau anderer Substanzen als der in der Probe enthaltenen analysierten Substanz wirksam geschätzt wird.
-
Mittel zum Lösen des Problems
-
Wenn das Assay auf der Grundlage der Antigen-Antikörper-Reaktion einer Probe durch Fluorometrie oder Luminometrie bei einem analytischen Verfahren oder in einer analytischen Vorrichtung ausgeführt wird, kann die Erfindung das Assay mit hoher Empfindlichkeit ausführen, während der Nachweis oder die Messung einer nicht spezifischen Fluoreszenz oder Lumineszenz in der Art von Interferenzlicht, unabhängig von der Eigenschaft der Probe oder dem Konzentrationsniveau der in der Probe enthaltenen Substanz beseitigt oder im Wesentlichen ausgeschlossen wird.
-
Wenn ein Assay auf der Grundlage der Antigen-Antikörper-Reaktion einer Probe durch Fluorometrie oder Luminometrie bei einem analytischen Verfahren oder in einer analytischen Vorrichtung ausgeführt wird, kann die Erfindung ein schnelles Assay ausführen, während der Nachweis oder die Messung einer nicht spezifischen Fluoreszenz oder Lumineszenz in der Art von Interferenzlicht für das Konzentrationsniveau der in der Probe enthaltenen Substanz, beseitigt oder im Wesentlichen ausgeschlossen wird.
-
Wenn ein Assay auf der Grundlage der Antigen-Antikörper-Reaktion einer Probe durch Fluorometrie oder Luminometrie bei einem analytischen Verfahren oder in einer analytischen Vorrichtung ausgeführt wird, kann die Erfindung ferner eine quantitative Analyse schnell und mit hoher Empfindlichkeit ausführen, während die Eigenschaft der Probe oder das Konzentrationsniveau anderer Substanzen als der in der Probe enthaltenen Substanzen auf der Grundlage der Antigen-Antikörper-Reaktion wirksam geschätzt wird.
-
Auswirkungen der Erfindung
-
- (1) Wenn gemäß der vorliegenden Erfindung ein Assay auf der Grundlage einer Antigen-Antikörper-Reaktion einer Probe durch Fluorometrie oder Luminometrie bei einem analytischen Verfahren oder in einer analytischen Vorrichtung ausgeführt wird, kann das Assay schnell ausgeführt werden, während der Nachweis oder die Messung einer nicht spezifischen Fluoreszenz oder Lumineszenz in der Art von Interferenzlicht für das Konzentrationsniveau der in der Probe enthaltenen zu analysierenden Substanz beseitigt oder im Wesentlichen ausgeschlossen wird.
- (2) Ferner kann gemäß der Erfindung, wenn ein Assay auf der Grundlage einer Antigen-Antikörper-Reaktion einer Probe durch Fluorometrie oder Luminometrie bei einem analytischen Verfahren oder in einer analytischen Vorrichtung ausgeführt wird, die Konzentration der zu analysierenden Substanz schnell und mit hoher Empfindlichkeit quantitativ bestimmt werden, während die Eigenschaft der Probe oder das Konzentrationsniveau anderer Substanzen als der in der Probe enthaltenen zu analysierenden Substanz auf der Grundlage der Antigen-Antikörper-Reaktion wirksam geschätzt wird.
-
Kurzbeschreibung der Zeichnung
-
Es zeigen:
-
1 ein Beispiel für das schematische Aussehen eines Analysators,
-
2 ein Beispiel einer Antigen-Antikörper-Reaktion,
-
3 eine schematische Ansicht des Falls, in dem eine Reaktionslösung zu einer vorgegebenen Zeit aus einem Reaktionsgefäß entnommen wird und eine Luminometrie oder Fluorometrie schrittweise ausgeführt wird,
-
4 eine schematische Referenzansicht des Falls, in dem eine Luminometrie oder Fluorometrie zu jeder vorgegebenen Zeit ohne Probenentnahme der Reaktionslösung in einem Reaktionsgefäß ausgeführt wird,
-
5 ein Beispiel einer Reaktionskurve im Laufe der Zeit (1),
-
6 ein Beispiel einer Reaktionskurve im Laufe der Zeit (2) in dem Fall, in dem eine Probe mit einem kleinen Wert verwendet wird, und
-
7 ein Beispiel einer Reaktionskurve im Laufe der Zeit (2) in dem Fall, in dem eine Probe mit einem hohen Wert verwendet wird.
-
Ausführungsformen der Erfindung
-
Beispiele der vorliegenden Erfindung werden mit Bezug auf die Zeichnung beschrieben.
-
Ausführungsform 1
-
Mit Bezug auf 1 wird ein Konfigurationsbeispiel einer Immunprobeneinheit 103 beschrieben. In 1 enthalten Reagensgefäße 201 jeweils eine Reagenslösung, welche Analysebestandteilen entspricht, die durch die Immunprobeneinheit analysiert werden können. Die Reagensgefäße 201 sind auf einer Reagensscheibe 202 angeordnet, die als eine Reagenspositioniervorrichtung drehbar ist. Eine auf einer konstanten Temperatur gehaltene Reaktionsscheibe 203 ist operativ drehbar. Entlang dem Umfang der Reaktionsscheibe 203 sind mehrere Reaktionspositionen bereitgestellt. Reaktionsgefäße 205 von einer Reaktionsgefäß-Speicherposition 219 sind an den Reaktionspositionen gespeichert. Die Reaktionsscheibe 203 bewegt das Reaktionsgefäß 205 durch den Drehvorgang von einer Reaktionsgefäß-Einstellposition 204 zu einer Probenausstoßposition 221, einer Reagenshinzufügungsposition 222 und einer Reaktionslösung-Ansaugposition 212. Eine Probenabgabe-Pipettiervorrichtung 206 kann ein Verbindungsrohr, das eine Verbindung mit einem Einweg-Abgabechip 210 herstellt, von einer Position oberhalb der Probenansaugposition 207 zu einer Position oberhalb der Probenausstoßposition 221 horizontal und überdies auch an jeweiligen Positionen vertikal bewegen. Vor dem Ansaugen einer Probe wird ein Einweg-Abgabechip 210 an der Chipverbindungsposition 218 am oberen Ende des Chipverbindungsrohrs der Probenabgabe-Pipettiervorrichtung 206 angebracht.
-
Die Reagensabgabe-Pipettiervorrichtung 208 kann sich von einer Position oberhalb einer Reagensansaugposition 209 auf der Reagensscheibe 202 zu einer Position oberhalb der Reagenshinzufügungsposition 222 und auch an jeweiligen Positionen vertikal bewegen. Eine Überführungsvorrichtung 211 kann sich zu Positionen oberhalb einer Reaktionslösung-Ansaugposition 212, oberhalb einer Pufferansaugposition 213 und oberhalb einer Reinigungslösung-Ansaugposition 214 einer Flusszelle und auch an jeweiligen Positionen vertikal bewegen. Ferner hat die Überführungsvorrichtung 211 auch eine Funktion zum Senden einer Reaktionslösung durch ein Rohr bzw. einen Schlauch zur Flusszelle in einer Detektionseinheit 215. Ein Chip- und Reaktionsgefäß-Bewegungsmechanismus 216, der in der Lage ist, einen Greifabschnitt in x-Richtung und y-Richtung zu bewegen, bewegt den Einweg-Abgabechip 210 von einer Chipspeicherposition 217 zur Chipverbindungsposition 218 und das Einweg-Reaktionsgefäß 205 von einer Reaktionsgefäß-Speicherposition 219 zur Reaktionsgefäß-Einstellposition 204. Die Reagensabgabe-Pipettiervorrichtung 208 und die Überführungsvorrichtung 211 werden jeweils an jeder der ihnen entsprechenden Reinigungspositionen mit Wasser für die Außenwand der Düse gereinigt.
-
Als nächstes wird ein Verarbeitungsablauf in der Immunprobeneinheit 103 beschrieben. Zuerst bewegt der Reaktionsgefäß-Bewegungsmechanismus 216 den Einweg-Abgabechip 210 zur Chipverbindungsposition 218 und dann das Reaktionsgefäß 205 zur Reaktionsgefäß-Einstellposition 204. Ein Ständer 107, der einen Probenbehälter 108 hält, wird auf einer Unterleitung 113 befördert, so dass der Probenbehälter 108, der eine zu analysierende Probe enthält, an der Probenansaugposition 207 positioniert wird. Gleichzeitig dreht sich die Reagensscheibe 202 so, dass der Reagensbehälter 201, der ein für die Analyse verwendetes Reagens enthält, an der Reagensansaugposition 209 positioniert wird. Gleichzeitig bewegt sich die Reagensabgabe-Pipettiervorrichtung 208 zu einer Position oberhalb der Reagensansaugposition 209. Die Reagensabgabe-Pipettiervorrichtung 208 wird an der Reagensansaugposition 209 abgesenkt und saugt das Reagens in eine Pipettendüse. Dann wird die Reagensabgabe-Pipettiervorrichtung 208 angehoben und bewegt sich zur Düsenreinigungsposition. Wenn die Pipettendüse eine Position oberhalb der Düsenreinigungsposition erreicht, wird Reinigungswasser aus einem Reinigungstank geblasen, um das obere Ende der Pipettendüse zu reinigen.
-
Andererseits bewegt die Probenabgabe-Pipettiervorrichtung 206 den Abgabechip 210 zu einer Position oberhalb der Probenansaugposition 207, und der Abgabechip 210 wird in den Probenbehälter 108 auf dem Ständer 107 abgesenkt und saugt eine vorgegebene Menge einer Probe an. Nach dem Ansaugen der Probe wird der Abgabechip angehoben und bewegt sich zur Probenausstoßposition 221. Dann wird der Abgabechip abgesenkt und stößt die angesogene und im Abgabechip gehaltene Probe in das Reaktionsgefäß 205 aus. Nach dem Ausstoßen der Probe wird der Abgabechip durch die Probenabgabe-Pipettiervorrichtung 206 angehoben und zu einer Chipentsorgungsposition 220 bewegt. An der Chipentsorgungsposition 220 entfernt die Probenabgabe-Pipettiervorrichtung 206 den Einweg-Abgabechip 210 von dem Verbindungsrohr bzw. Verbindungsschlauch und entsorgt den Einweg-Abgabechip 210.
-
Nach dem Verstreichen einer für die Reaktion benötigten vorgegebenen Zeit bewegt die Überführungsvorrichtung 211 eine Ansaugdüse zu einer Position oberhalb der Pufferansaugposition 213, senkt die Düse ab und saugt einen Puffer durch die Düse zur Flusszelle. Dann wird das obere Ende der Düse der Überführungsvorrichtung 211 an der Düsenreinigungsposition gereinigt.
-
Dann bewegt die Reaktionsscheibe 203 das Reaktionsgefäß 205 zur Reaktionslösung-Ansaugposition 212. Die Überführungsvorrichtung 211 saugt die Reaktionslösung an der Reaktionslösung-Ansaugposition 212 durch die Düse zur Flusszelle. Nach dem Ansaugen der Reaktionslösung bewegt die Überführungsvorrichtung 211 die Düse zur Pufferansaugposition 213 und saugt den Puffer an. Der angesogene Puffer und die angesogene Reaktionslösung werden durch das Rohr bzw. den Schlauch zur Flusszelle in der Detektionseinheit 215 gesendet, in der die Messung ausgeführt wird. Dann bewegt die Überführungsvorrichtung 211 die Düse zur Reinigungslösung-Ansaugposition 214, saugt die Reinigungslösung für die Flusszelle an und reinigt das Innere der Flusszelle in der Detektionseinheit 215 durch die Reinigungslösung.
-
Als nächstes wird ein Konfigurationsbeispiel einer Analyseeinheit 104 mit Bezug auf 2 beschrieben. In 2 umfasst eine biochemische Analyseeinheit 104 ein Reagenszufuhrsystem mit Reagensscheiben 301A, 301B zum Halten mehrerer Reagensbehälter 310 und Reagensabgabe-Pipettiervorrichtungen 302A, 302B, ein Probenzufuhrsystem mit einer Probenabgabe-Pipettiervorrichtung 303, eine Reaktionseinheit mit einer Reaktionsscheibe 305 zum Halten mehrerer Reaktionsgefäße 304 und ein Messsystem mit einem Mehrwellenlängen-Photometer 306 und einem Analog/Digital-Wandler 307.
-
In 2 wird der die Probenbehälter 108 haltende Ständer 107 von einer Bewegungseinheit 102 auf einer Unterleitung 115 zu einer Probenansaugposition 308 bewegt. Die Probenabgabe-Pipettiervorrichtung 303 saugt eine vorgegebene Menge einer Probe in dem Probenbehälter 108 in eine Pipettendüse 401 und stößt die Probe in ein Reaktionsgefäß 304 aus.
-
Das Reaktionsgefäß 304, in das die Probenlösung ausgestoßen und abgegeben wird, wird durch die Drehung der Reaktionsscheibe 305, deren Temperatur durch ein thermostatisches Bad 309 beibehalten wird, zu einer ersten Reagenshinzufügungsposition bewegt. In diesem Schritt bewegt sich auch die Reagensscheibe 301A, um den Reagensbehälter 310, der dem Analysebestandteil einer zur Reagenshinzufügungsposition überführten Probe entspricht, durch den Drehvorgang in der Reagensansaugpasition zu positionieren.
-
Anschließend wird ein durch die Pipettierdüse der Probenabgabe-Pipettiervorrichtung 302A angesogenes vorgegebenes erstes Reagens zu dem zur ersten Reagenshinzufügungsposition bewegten Reaktionsgefäß 304 hinzugefügt. Das Reaktionsgefäß 304 wird nach dem Hinzufügen des ersten Reagens zur Position einer Ruhrvorrichtung 311 bewegt, in der das erste Umrühren ausgeführt wird. Falls der Analysebestandteil das Hinzufügen eines zweiten Reagens erfordert, wird das zweite Reagens ferner durch die Reagensabgabepipette 302B hinzugefügt, und der Inhalt wird umgerührt.
-
Das Reaktionsgefäß 304, das eine Reaktionslösung enthält, welche die Probe und das beigemischte Reagens aufweist, wird bewegt, so dass es einen optischen Fluss von einer Lichtquelle durchquert, und das vom Reaktionsgefäß durchgelassene Licht fällt auf ein Mehrwellenlängen-Photometer 306. Dann wird die Absorption der Reaktionslösung als Anhalt des Reaktionsgefäßes 304 durch das Mehrwellenlängen-Photometer 306 erfasst. Das erfasste Absorptionssignal wird durch den Analog/Digital-(A/D)-Wandler 307 und eine Schnittstelle einem Steuerabschnitt 312 in der Art eines Computers zugeführt und in die Konzentration des Analysebestandteils als Messobjekt in der Probe umgewandelt. Das Reaktionsgefäß 304 wird nach Abschluss der Untersuchung zu einer Position bewegt, an der ein Reaktionsgefäß-Reinigungsmechanismus (nicht dargestellt) bereitgestellt ist, und nach dem Ausstoßen der Reaktionslösung in dem Reaktionsgefäß mit Wasser gereinigt, worauf die nächste Analyse folgt.
-
Ein Verfahren zum Ermöglichen einer kontinuierlichen Messung oder einer Messung zu mehreren Zeiten wird nachstehend beschrieben.
-
3 zeigt eine aufeinander folgende Probenentnahme einer Reaktionslösung aus einem Reaktionsgefäß und das Ausführen einer Messung eines Lumineszenzwerts, wobei die Proben verwendet werden. Eine Luminometrie wird ausgeführt, indem eine vorgegebene Menge einer Reaktionslösung bei jeder Messung auf den Lumineszenzbetrag untersucht wird. Die Reaktion wird für die in dem Gefäß verbleibende Reaktionslösung fortgesetzt, und die Lösung wird bis zur abschließenden Luminometrie in einem Inkubator gehalten. Eine Probe der Reaktionslösung kann entnommen werden, während das Gefäß in dem Inkubator angeordnet ist, oder eine Probe der Lösung kann entnommen werden, indem das Gefäß aus dem Inkubator herausgenommen wird. Falls die Zusammensetzung der Reaktionslösung während der Inkubation abweicht, ist es wünschenswert, eine Probe der Reaktionslösung zu entnehmen, nachdem die Lösung umgerührt und gemischt wurde.
-
4 zeigt ein Beispiel, in dem die Luminometrie im Laufe der Zeit oder zu jeder vorgegebenen Zeit ohne eine Probenentnahme der Reaktionslösung in dem Reaktionsgefäß ausgeführt wird. Das Gefäß ist mit einer Öffnung versehen, durch die eine Probe oder ein Reagens in das Gefäß abgegeben wird. Andererseits weist das Gefäß teilweise oder vollständig einen Abschnitt auf, in dem ein Antikörper, ein Antigen oder eine andere Substanz, welche ein Messobjekt einfängt, immobilisiert ist, und die Reaktion läuft in dem Abschnitt ab. Wenn Teilchen usw., die für die Immobilisation vorgesehen sind, in der Reaktionslösung vorhanden sind und die Reaktion an den Teilchen abläuft, wird der Abschnitt für die Immobilisation an dem Gefäß nicht notwendigerweise bereitgestellt. 4 zeigt, dass der Abschnitt für die Immobilisation nach der Luminometrie durch Neigen des Gefäßes von der Reaktionslösung getrennt wird und die Luminometrie an dem Abschnitt ausgeführt wird. In der Reaktionslösung kann möglicherweise eine nicht reagierte Fluoreszenz-markierte Substanz in der Art eines noch nicht reagierten mit einem fluoreszierenden Farbstoff markierten Antikörpers vorhanden sein. Wenn die Luminometrie oder Fluorometrie unter Verwendung der sie enthaltenden Lösung ausgeführt wird, nimmt der Hintergrund während der Messung durch die von der nicht reagierten markierenden Substanz erzeugte Lumineszenz oder Fluoreszenz zu. Dies kann daher möglicherweise zu Hindernissen führen, wenn die Messung bei einer höheren Empfindlichkeit ausgeführt wird und es erwünscht ist, ein Verfahren zu verwenden, bei dem der Hintergrund so weit wie möglich entfernt wird. Eine Reaktionskurve kann durch Wiederholen der Luminometrie und Fortsetzen der Reaktion durch Rückführen des Behälters in einen Ursprungszustand und Verbinden des Abschnitts zur Immobilisation mit der Reaktionslösung erhalten werden, wodurch eine schnellere und genauere Analyse zur Objektmessung als die in Beispiel 3 dargestellte ausgeführt werden kann.
-
Je größer die Häufigkeit der Luminometrie, desto besser, und eine Echtzeitmessung ist wünschenswert. Es ist verständlich, dass eine schnellere, genauere und zuverlässigere Analyse ausgeführt werden kann, wodurch es unnötig werden kann, einen erneuten Test auszuführen, wenn zusätzlich zur endgültigen Messung zumindest einmal in der Zwischenzeit ein Messwert erhalten wird, wodurch sich erhebliche Vorteile bei der Diagnose von Krankheiten ergeben.
-
5 zeigt ein Beispiel einer Signalkurve im Laufe der Zeit für eine Antigen-Antikörper-Reaktion. Wenngleich der Lumineszenzwert oder ein Signal im Allgemeinen beim Fortschreiten der Reaktion zunimmt, wird das Inkrement des Lumineszenzwerts nach Verstreichen einer vorgegebenen Zeit kleiner. Es wird bestimmt, dass die Reaktion an diesem Punkt abgeschlossen ist, der Lumineszenzwert wird gemessen, und es wird festgestellt, ob ein Antigen oder ein Antikörper in der zu erfassenden Probe enthalten ist oder nicht. Ein Referenzwert oder ein Grenzwert an diesem Punkt wird als ein Abschneidewert bezeichnet und als positiv beurteilt, wenn ein größerer Lumineszenzwert als der Referenzwert erhalten wird, und als negativ beurteilt, wenn er kleiner ist als der Referenzwert (qualitative Messung). Die Nähe zum Abschneidewert wird als eine Grauzone definiert, in der die Beurteilung als unmöglich angesehen wird und manchmal eine erneute Messung erforderlich ist. Daher wird der Lumineszenzwert manchmal mit einer Kalibrierkurve verglichen, und der Betrag des Messobjekts wird quantitativ beschrieben (quantitative Messung). In dem Beispiel aus 5 ist die Antigen-Antikörper-Reaktion zu einer Reaktionszeit von 15 Minuten abgeschlossen, der Lumineszenzwert wird gemessen, und es wird eine qualitative Messung ausgeführt, ob der Wert größer oder kleiner als der Abschneidewert ist, oder der Lumineszenzwert wird mit einer Kalibrierkurve verglichen, um einen Ablesewert für die Menge des enthaltenen Messobjekts zu erhalten. A ist nicht größer als der Abschneidewert und wird als negativ beurteilt, und B, C und D werden als positiv beurteilt. Alternativ wird ein Ablesewert auf der Grundlage einer Kalibrierkurve erhalten und dient der Diagnose.
-
Vorteile des mehrmaligen Erhaltens des Lumineszenzwerts im Laufe der Zeit werden im Vergleich mit einem existierenden Verfahren, bei dem die Reaktion bei 15 Minuten endet, oder mit einem Verfahren, bei dem die Reaktion beendet wird und der Lumineszenzwert einmal genommen wird, dargestellt. Wenn eine Messung von Lumineszenzwerten zur Anfangszeit oder nach Verstreichen von 5 Minuten ausgeführt wird, ist ersichtlich, dass die Werte der Proben C und D den Abschneidewert übersteigen, und die Proben C und D werden als positiv beurteilt. Wenngleich es andererseits bei den Proben A und B erwünscht ist, dass die Messung des Lumineszenzwerts oder die Photometrie kontinuierlich ausgeführt werden kann, nimmt der Vorteil zu, weil die Messung im Laufe der Reaktion zweimal oder öfter ausgeführt werden kann.
-
Nachfolgend werden Fälle dargestellt, in denen Lumineszenzwerte im Laufe der Zeit für negative oder leicht positive Proben erhalten werden. Es wird festgestellt, dass bei 15 Minuten E negativ ist und F und G positiv sind. G wird bei 10 Minuten auch als positiv beurteilt, und ein frühes Feststellen des Ergebnisses ist möglich, ohne 15 Minuten bis zur Endzeit zu warten. Wenngleich F bei 15 Minuten als positiv beurteilt werden kann, kann es unter gemeinsamer Berücksichtigung der Messungen bei 5 Minuten und 10 Minuten auch bei 15 Minuten als positiv eingeschätzt werden, und eine frühe Einschätzung ist möglich. Ferner kann das Ergebnis bei 15 Minuten durch das Ergebnis bei 5 Minuten und bei 10 Minuten unterstützt werden, und die endgültige Beurteilung wird zuverlässiger.
-
6 zeigt einen Fall, in dem Messobjekte von mittleren bis großen relativen Anteilen enthalten sind. H, I, G werden jeweils bei 5 Minuten als positiv beurteilt, und das Beurteilungsergebnis könnte in einem frühen Stadium nach Beginn des Tests erkannt werden. Das Ergebnis kann einem Arzt schneller mitgeteilt werden. Falls ein Patient beispielsweise an einer Herzkrankheit leidet und schnell, beispielsweise auf einen Herzinfarkt, behandelt werden muss, nimmt die Wahrscheinlichkeit, dem Tod zu entgehen, zu, wenn eine wirksame medizinische Behandlung in einem frühen Stadium eingeleitet wird.
-
Bei einer Antigen-Antikörper-Reaktion oder einem Analysator dafür kann ein Fall auftreten, dass sich ein kleiner Lumineszenzwert zeigt, und in einem Extremfall wird eine Probe als negativ beurteilt, wenngleich tatsächlich ein großer Anteil von Messobjekten in der Probe enthalten ist. Dies kann beispielsweise auftreten, wenn ein großer Anteil von Messobjekten enthalten ist, welche als Zonenphänomen, Prozone, Postzone oder Hochdosis-Huck bezeichnet werden, oder wenn ein großer Anteil der Markierungssubstanzen in der Art fluoreszierender Farbstoffe enthalten ist, und ferner, wenn das Verhältnis zwischen dem eingefangenen Antikörper und dem markierten Antikörper in der Antigen-Antikörper-Reaktion nicht gut im Gleichgewicht ist. In diesen Fällen ist eine positive Beurteilung manchmal möglich, indem der Lumineszenzwert im Anfangsstadium der Reaktion erkannt wird, und der Lumineszenzwert kann hier manchmal den Anteil des Messobjekts besser widerspiegeln als bei der endgültigen Messung. In 7 wird der gemessene Lumineszenzwert nach der abschließenden Messung bei 15 Minuten als H = J > I gelesen und auch auf der Grundlage der Kalibrierkurven als H = J > I gelesen, und die Probe H wird als eine Probe mit einem hohen Wert beurteilt, die mehr Messobjekte enthält als die Probe I. Angesichts der Lumineszenzwerte bei 5 Minuten oder 10 Minuten wird sie jedoch als J > I > H gelesen, und es wurde herausgefunden, dass die Probe J den größten Anteil der Messobjekte enthält.
-
Bezugszeichenliste
-
- 103
- Immunprobeneinheit
- 201
- Reagensbehälter
- 202
- Reagensscheibe
- 203
- Reaktionsscheibe
- 205
- Reaktionsgefäß
- 206
- Probenabgabe-Pipettiervorrichtung
- 208
- Probenabgabe-Pipettiervorrichtung
- 210
- Abgabechip
- 211
- Überführungsvorrichtung
