CZ33899A3

CZ33899A3 - 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny, způsob inhibice buněčné proliferace a farmaceutická kompozice

Info

Publication number: CZ33899A3
Application number: CZ1999338A
Authority: CZ
Inventors: Robert T. Lum; Cheri Lynn Blum; Richard Mackman; Michael M. Wick; Steven R. Schow
Original assignee: Cv Therapeutics, Inc.
Priority date: 1996-08-02
Filing date: 1997-08-01
Publication date: 2000-03-15
Also published as: CA2262454C; ES2242981T3; PL331408A1; AU731778B2; NO323775B1; NO990466D0; EP1021186A1; UA71890C2; TR199900683T2; CA2262454A1; JP2000515550A; DK1021186T3; EP1021186A4; EP1021186B1; DE69733674D1; IL128323A0; CN1231611A; HUP9902414A3; WO1998005335A1; HK1020884A1

Description

2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny, způsob inhibice buněčné proliferace a farmaceutická kompozice

Oblast techniky

Vynález se týká 2,6,9-trisubstituovaných purinových sloučenin, o nichž bylo zjištěno, že jsou selektivními inhibitory kinas buněčného cyklu a jako takové jsou sloučeninami, které inhibují buněčnou proliferaci. 2,6,9-trisubstituované puriny jsou například užitečné při léčbě autoimunitních chorob, jako je například rheumatoidní arthritis, lupus, diabetes typu I, roztroušená sklerosa apod., rakoviny, kardiovaskulárních chorob, jako je restenosa, choroby host-versus-graft, dny, polycystické choroby ledvin a jiných proliferativních chorob, jejichž patogenese zahrnuje abnormální proliferaci buněk.

Vynález se rovněž týká 2,6,9-trisubstituovaných purinových sloučenin, o nichž bylo zjištěno, že jsou účinnými a specifickými inhibitory IkappaB-alfa kinasy, která zabraňuje signálně indukované aktivaci NF-kappaB a syntéze cytokinů in vitro a in vivo. 0 takových inhibitorech se předpokládá, že inhibují syntézu cytokinů a adhesních proteinů, jejichž syntéza je trankripčně regulována NF-kappaB. K této třídě molekul náleží proinflamatorní cytokiny, jako jsou IL-1, IL-6, TNF a adhesní proteiny (například ICAM, VCAM a selekce) a byla prokázána jejich účast na patogenesi zánětlivých chorob. Účinný inhibitor IkappaB-alfa kinasy je tedy užitečný při klinickém léčení chorob, pro jejichž indukci je nutná aktivace NF-kappaB.

-;2 Dosavadní stav techniky

Pokrok v molekulární a buněčné biologii dosažený za několik posledních let přispěl k lepšímu pochopení mechanismu buněčné proliferace a specifických jevů, které se vyskytují během mitosy buněk, viz například Progress in Cell Cycle Research, sv. 1, ed. L. Meijer, S. Guidet a Η. Y. L. Tung; Plenům Press, New York, 1995. Tyto studie ukázaly, že v průběhu buněčného cyklu je vývoj kontrolován skupinou serin/threonin kinas nazývaných jako kinasy závislé na cyklinu. Tyto enzymy obsahují (a) katalytický protein, nazývaný jako kinasa závislá na cyklinu (CDK), který využívá ATP jako substrát a (b) regulační protein, zvaný cyklin. Procesy, jako je růst, replikace DNA a buněčné dělení řídí různé kombinace cyklin-CDK. Klíčovým členem skupiny enzymů CDK je CDK2. Ukázalo se, že aktivita CDK2 je nezbytná pro postup buněčného cyklu u savců na rozhraní fází Gl/S. Mikroinjekce protilátek proti CDK2 blokuje postup humánních diploidních fibroblastů do S fáze buněčného cyklu. Exprese dominantního negativního mutantu CDK2 v buňkách lidského osteosarkomu má podobný účinek. Tyto studie tedy ukázaly, že inhibice aktivity CDK2 v buňce bude zabraňovat vývoji buňky v průběhu mitotického cyklu a indukovat zastavení růstu před S fází. V souladu s tímto přístupem se při in vitro studii s olomoucinem (2-(hydroxyethylamino)-6-benzylamino-9-methylpurinem) ukázalo, že je specifickým inhibitorem CDK2 s IC₅₀přibližně 2,1 μg/ml (J. Veselý et al., Eur. J. Biochem.

224, 771 až 786 (1994), L. Meijer Chemical Inhibitors of Cyclin-Dependent Kinases, str. 351 až 356, Progress in Cell Cycle Research, sv. 1, ed. L. Meijer, S. Guidet a Η. Y. L. Tung; Plenům Press, New York, 1995. In vivo studie na kulturách savčích buněk ukázaly, že olomoucin inhibuje proliferaci buněk při koncentraci přibližně 50 μg/ml.

• ·	• · ·	• ·	• ·
• ·	• ·	•	•	*	•
• ·	• · ·	• ·	•	• ·	•
•	• ·		•		•
• t#··	• · · · · · ·	• ·		• ·

V souvislosti s tímto vynálezem bylo vyvinuto několik sloučeniny, jejichž biologická aktivita je značně vyšší než aktivita olomoucinu. In vivo studie se savčími buňkami ukazují, že některé z popsaných sloučenin inhibují proliferaci buněk při koncentracích, které jsou výrazně nižší než u olomoucinu.

Nedávno byla popsána aktivita IkappaB-alfa kinasy cytoplasmě stimulovaných buněk endothelia pupečníkové vény člověka (Bennett et al., 1996, J. Biol. Chem. 271, 19680 až 19688). Některé sloučeniny podle vynálezu byly identifiková ny jako účinné a specifické inhibitory IkappaB-alfa kinasy, která zabraňuje signálně indukované NF-kappaB aktivaci a syntéze cytokinů in vitro a in vivo. Aktivace heterodimerního transkripčního faktoru NF-kappaB je komplexní proces, nestimulovaných buňkách je NF-kappaB (p50/p65) heterodimer umístěn v cytosolu, kde tvoří komplex s inhibiční podjednot kou IkappaB-alfa. IkappaB-alfa se váže k NF-kappaB, čímž maskuje svůj jádrový lokalizační signál a zabraňuje translokaci k jádru. Při stimulaci buněk různými signály (například lipopolysacharidem) je IkappaB-alfa proteasomem rychle fosforylována, ubikvitinována a degradována. Degradace IkappaB-alfa umožní přemístění NF-kappaB k jádru, kde aktivuje transkripci řady genů zánětlivé odpovědi.

Tato pozorování svědčí o tom, že Ikappa-B kinasa j atraktivním cílem pro identifikaci inhibitorů, které mohou být užitečné při léčení zánětlivých chorob, pro jejichž indukci je nutná aktivace NF-kappaB.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou 2,6,9-trisubstituované purinové sloučeniny, které inhibují kinasu závislou na cyklinu 2.

Předmětem vynálezu jsou 2,6,9-trisubstituované purinové sloučeniny, které jsou užitečné pro inhibici buněčné proliferace.

Předmětem vynálezu je rovněž farmaceutická kompozice, která obsahuje 2,6,9-trisubstituovanou purinovou sloučeninu a farmaceuticky vhodný nosič.

Dále je předmětem vynálezu způsob inhibice buněčné proliferace, při němž se savci, který takovou inhibici potřebuje, podá účinné množství 2,6,9-trisubstituované purinové sloučeniny.

Podle jednoho aspektu jsou předmětem vynálezu 2,6,9-trisubstituované purinové sloučeniny obecného vzorce I z

X představuje skupinu -NH-, -0-, thioskupinu nebo sulfonovou skupinu;

R¹ představuje halogen nebo skupinu R-jý-X, kde X představuje skupinu -NH-, -0-, thioskupinu nebo sulfonový zbytek (X přednostně představuje skupinu -NH-);

·· ·· • · · · • · · · • ·· · ···

R_x' představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, cykloalkylskupinu, substituovanou cykloalkylskupinu, cykloheteroalkylskupinu, substituovanou cykloheteroalkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, heterocyklickou skupinu, heteroarylskupinu, substituovanou heteroarylskupinu, aralkylskupinu, substituovanou aralkylskupinu, heteroaralkylskupinu, heteroalkylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkinylskupinu, alkylcykloalkylskupinu nebo alkylcykloheteroalkylskupinu, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, trifluormethylskupiny, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, R₂₂, ^SR20' ^S(°)^R21' ^so2^R21' ^SO2^NR20^R23' ^SO2^NR20^COR21' ^SO2^NR20^CONR20^R23' ^SO2^NR20^CO2^R21' ^NR20^R23^{z NR}20^COR21' ^NR20^CO2^R21^zN^R20^CONR20^R23· ^N(^R20)^C(^NR20)^NHR23' ^NR20^SO2^R21^zO^r2o f OCONR2qR2₂ ^z OCONR2qSO2R₂₃ , OCONR2qR₂₃ , CN, CO2R₂q , CONR2qR₂₂ , CONR₂qSO2R₂ j a COR2Q 7

R₂ představuje vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, arylskupiny, substituované arylskupiny, heterocyklické skupiny, hetarylskupiny, substituované hetarylskupinu, aralkylskupiny, heteroaralkylskupiny, heteroalkylskupiny, alkylalkenylskupiny, alkylalkenylskupiny alkylalkinylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty • · » · » · • · · nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, R₂₂, ^SR20' ^s(°)^R2i' ^SO2^R21' ^SO2^NR20^R23' ^SO2^NR20^COR21' ^SO2^NR20^CONR20^R23' ^SO2^NR20^CO2^R21' ^NR20^R23' ^NR20^COR21' ^NR20^CO2^R21' MK20^CONR20^E23- H(R20)C(NR₂₀)NHR₂₃, ^nr20^SO2^R21' θ^20 ⁹ θ^*θ^^20^23 ¹ θ^θΝΚ2ο^θ2^21⁹ θ^θΝ-^20^23 ⁹ _r ^CO2^R20' ^CONR20^R23' ^CONR20^SO2^R21 ^{a COR}20^;

R, představuje halogen, hydroxylovou skupinu, thioskupinu, alkoxyskupinu, alkylthioskupinu, nižší alkylskupinu, skupinu vzorce -NR₄R₅ nebo

n představuje číslo 1 až 3, o představuje číslo 1 až 3 a

Y představuje karbony1skupinu, skupinu -NR₄R₅, hydroxylovou skupinu, thiolovou skupinu, alkoxyskupinu nebo alkylthiolovou skupinu;

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, heterocyklické skupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, acylskupiny, arylskupiny, substituované arylskupiny, hetarylskupiny, substituované hetarylskupinu, aralkylskupiny, heteroaralkylskupiny, alkylalkenylskupiny, alkylalkinylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, 1*22' ^SR20' S(O)R₂i, SO₂R₂₁, SO₂NR₂₀R₂3/ so₂nr₂₀cor₂₁, SO₂NR₂qCONR₂₀R₂₃, SO₂NR₂qCO₂R₂₁, nr₂₀r₂₃, ^NR20^COR21' ^NR20^CO2^R21' ^NR20^CONR20^R23'

N(^r20)^c(^NR20)^NHR23' ^NR20^SO2^R21' ^OR20' ^OCONR20^R23' OCONR2qSO2R2·^ , OCONR2qR23, CN, CF3, CO2R2q, CONR2qR23 , CONR2qSO2^r22. θ· *-®^R20 ' přičemž když Y představuje karbonylskupinu, Y a R₄' mohou dohromady představovat jediný atom kyslíku, R₄ a R₅ mohou dohromady představovat jediný atom kyslíku, R₄''' a R₅'' ' mohou dohromady představovat jediný atom kyslíku a přičemž když R₃ představuje 2-hydroxyethylaminoskupinu a R₂ představuje methylskupinu, R₃ ' -X nepředstavuje aminoskupinu,

3-methyl-2-butenylaminoskupinu, benzylaminoskupinu nebo m-hydroxybenzylaminoskupinu, když R₃ nepředstavuje 2-hydroxyethylamino, když R₂ představuje isopropylskupinu, R₃'-X nepředstavuje benzylaminoskupinu, m-hydroxybenzylaminoskupinu nebo 3-methylbutylaminoskupinu, když R₃ představuje 2-hydroxyethylaminoskupinu a R₂ představuje 2-hydroxyethylskupinu, Rj'-X nepředstavuje benzylaminoskupinu a když R₃ je zvolen ze souboru sestávajícího z 2-methyl-2-hydroxypropylaminoskupiny a 2-dimethylaminoethylaminoskupiny a R₂ představuje methylskupinu, potom R-jJ-X nepředstavuje benzylaminoskupinu ;

R₂₀ představuje vždy vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylskupinu a heteroarylskupinu, přičemž • · _··§* L··· alkylskupina, arylskupina a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, alkyl-, aryl- nebo heteroarylamidové skupiny, skupiny CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku a CF₃;

R₂₁ představuje vždy alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylskupinu a heteroarylskupinu, přičemž alkylskupina, arylskupina a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z ha log enu, CF₃ , CN, 0R₂ q, *^^20 N(R₂q)₂, S(O)R₂₂, ^SO2^R22' ^SO2^N^^R20^2' ^NR20^CO2^R22' ^NR20^CON^^R202' CO^R2₀, C0₂R₂₀, CON(R₂₀)₂, ^NR20^SO2^R22 ^{a OR}20'

R₂₂ představuje vždy alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, alkyl-, aryl- nebo heteroarylamidové skupiny, skupiny CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, CF₃, aryl a heteroarylskupiny; a

R₂₃ představuje R₂₁ nebo vodík.

Jako příklady vhodných významů substituentů R₃, když R₃ představuje skupinu NR₄R₅, kde R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo aralkylskupinu, která je monosubstituovaná nebo disubstituovaná hydroxyskupinou, halogenem, alkoxyskupinou, trifluormethylskupinou, kyanoskupinou, alkoxykarbonylsku-

pinou nebo jejich směsí, je možno uvést skupiny následujících vzorců

HO kde Rg představuje vodík, nižší alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo arylkylskupinu, která je nesubstítuovaná, monosubstituovaná nebo disubstituovaná hydroxyskupinou, halogenem, alkoxyskupinou, trifluormethylskupinou, kyanoskupinou, alkoxykarbonylskupinou nebo jejich směsí.

Podle jiného aspektu je předmětem vynálezu způsob inhibice buněčné proliferace u savců, při němž se savci podává terapeuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I. Tento způsob je užitečný pro léčbu chorob spojených s buněčnou proliferaci, jako je rheumatoidní arthritis, lupus, diabetes typu I, roztroušená sklerosa, rakovina, restenosa, choroba graft-versus-host a dna.

Podle ještě dalšího aspektu je předmětem vynálezu farmaceutická kompozice, která obsahuje sloučeninu obecného vzorce I ve směsi s jedním nebo více farmaceutickými excipienty.

Podle ještě dalšího aspektu je předmětem vynálezu kompozice pro léčbu fungálních infekcí u lidí, zvířat a rostlin.

Přehled obr, na výkrese

Na obr. 1 je znázorněna střední plocha neointimy karotidové artérie (mm²) u potkana ošetřená solným vehikulem a sloučeninou 3 připravenou podle příkladu 2, kde prázdný sloupec představuje neošetřenou část karotidy a plný sloupec představuje ošetřenou část karotidy.

Následuje podrobnější popis vynálezu.

Předmětem vynálezu tedy jsou 2,6,9-trisubstituované purinové sloučeniny z

X představuje skupinu -NH-, -0-, thioskupinu nebo sulfonovou skupinu;

• 0 ·· 0 00 00 00 0 00 0 000 0 0 00 0

0 0 00000 0 00 0 00 000000

0* · 0 · « 0000 0000 000 0000 00 00

- 11 R¹ představuje halogen nebo skupinu R-^-X, kde X před stavuje skupinu -NH-, -0-, thioskupinu nebo sulfonový zbytek (X přednostně představuje skupinu -NH-);

' představuje nižší alkylskupinu, substituovanou niž ší alkylskupinu, cykloalkylskupinu, substituovanou cykloalkylskupinu, cykloheteroalkylskupinu, substi tuovanou cykloheteroalkylskupinu, arylskupinu, sub stituovanou arylskupinu, heterocyklickou skupinu, heteroarylskupinu, substituovanou heteroarylskupinu, aralkylskupinu, substituovanou aralkylskupinu, heteroaralkylskupinu, heteroalkylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkinylskupinu, alkylcykloalkylskupinu nebo alkylcykloheteroalkylskupinu, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, trifluormethylskupiny, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, R₂₂/ ^SR20' ^S(°)^R21' ^SO2^R21' ^SO2^NR20^R23' ^SO2^NR20^COR21’ ^SO2^NR20^CONR20^R23' ^SO2^NR20^CO2^R21' ^NR20^R23' ^NR20^COR21' ^NR20^CO2^R21' N^R20^CONR20^R23' ^N(^R20^^C^^NR20^^NHR23' ^NR20^SO2^R21' 0^R2qz OCONR2o^R23/ OCONR2qSO2R₂^, OCONR2qR₂₂, , ^CO2^R20' ^CONR20^R23' ^CONR20^SO2^R21 ^{a COR}20^;

R₂ představuje vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, cykloheteroalkylskupiny, substi tuované cykloheteroalkylskupiny, arylskupiny, substituované arylskupiny, heterocyklické skupiny, hetarylskupiny, substituované hetarylskupinu, aral kylskupiny, heteroaralkylskupiny, heteroalkylskupi ·« 9 99 99 ·· • · · · ♦ ·<·· • · · · · 9 9 • · · · · 999999

9 9 9 9

999 999 9999 99 99 ny, alkylalkenylskupiny, alkylalkenylskupiny alkylalkinylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, R₂₂, ^SR20' ^S(°)^R21' ^SO2^R21' ^SO2^NR20^R23' ^SO2^NR20^COR21' ^SO2^NR20^CONR20^R23' S°2^NR2o^c02^R21' ^NR20^R23' ^NR20^COR21' ^NR20^CO2^R21' N^R20^CONR20^R23' ⁿ(^R20^^C^^NR20^^NHR23' ^NR20^SO2^R21' θ^20 * θ^θ^^20^23 ? θ^θΝ^20*^θ2^21⁹ OCONI^2q^23 ? CN f ^CO2^R20' ^CONR20^R23' ^CONR20^SO2^R21 ^{a COR}20^;

R' představuje halogen, hydroxylovou skupinu, thioskupinu, alkoxyskupinu, alkylthioskupinu, nižší alkylskupinu, skupinu vzorce -NR₄R₅ nebo

kde m představuje číslo 1 až 3, n představuje číslo 1 až 3, o představuje číslo 1 až 3 a

Y představuje karbonylskupinu, skupinu -NR₄R₅, hydroxylovou skupinu, thiolovou skupinu, alkoxyskupinu nebo alkylthiolovou skupinu;

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší • ·

9

- 13 alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, heterocyklické skupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, acylskupiny, arylskupiny, substituované arylskupiny, hetarylskupiny, substituované hetarylskupinu, aralkylskupiny, heteroaralkylskupiny, alkylalkenylskupiny, alkylalkinylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, 1*22' ^SR20' ^S(°)^R21' ^SO2^R21' S°2^NR2o^R23' ^SO2^NR20^COR21' ^SO2^NR20^CONR20^R23, ^SO2^NR20^CO2^R21' ^NR20^R23' ^NR20^COR21' ^NR20^CO2^R21' N^R2o^CONR20^R23' ^N(^R20)^C(^NR20)^NHR23' ^NR20^SO2^R21^řθ^20 ^f θ^θ^^20^23 ? OCONR2q*~*θ2^21^f θ^θ^^20^23 ^r f ^CO2^R20' ^CONR20^R23' ^CONR20^SO2^R21 ^{a COR}20^; přičemž když Y představuje karbonylskupinu, Y a R₄· mohou dohromady představovat jediný atom kyslíku, R₄ a R₅ mohou dohromady představovat jediný atom kyslíku, R₄ ¹'' a R₅''' mohou dohromady představovat jediný atom kyslíku a přičemž když R₃ představuje 2-hydroxyethylaminoskupinu a R₂ představuje methylskupinu, R₃'-X nepředstavuje aminoskupinu, 3-methyl-2-butenylaminoskupinu, benzylaminoskupinu nebo m-hydroxybenzylaminoskupinu, když R₃ nepředstavuje 2-hydroxyethylamino, když R₂ představuje isopropylskupinu, R-jý-X nepředstavuje benzylaminoskupinu, m-hydroxybenzylaminoskupinu nebo 3-methylbutylaminoskupinu, když R₃ představuje 2-hydroxyethylaminoskupinu a R₂ představuje 2-hydroxyethylskupinu, R-jý-X nepředstavuje benzylaminoskupinu a když R₃ je zvolen ze souboru sestávajícího z 2-methyl-2-hydroxypropylaminoskupiny a 2-dimethylaminoethylaminoskupiny a R₂ před44 ·· • 4 4 · • 4 • 44 ·· 44

4 4 4 4 ♦ · 4 • ♦ 4 4 4 4 • · 4 444 4 4 4

4 4 4

4444444 44 44

- 14 stavuje methylskupinu, potom R^ý-X nepředstavuje benzylaminoskupinu;

R₂₀ představuje vždy vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylskupinu a heteroarylskupinu, přičemž alkylskupina, arylskupina a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, alkyl-, aryl- nebo heteroarylamidové skupiny, skupiny CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku a CF₃;

R₂₁ představuje vždy alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylskupinu a heteroarylskupinu, přičemž alkylskupina, arylskupina a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, CF₃, CN, OR₂q, SR₂q, N(R₂q)₂, S(O)R₂₂, ^SO2^R22' ^SO2^N(^R20^2' ^NR20^CO2^R22' ^NR20^CON(^R202' CO^R2o< ^c°2^R20' ^CON(^R2(p2' ^NR20^SO2^R22 ^{a OR}20^;

R₂₃ představuje R₂₁ nebo vodík.

Existují určitá omezení významů Rj, Rj', R₂ a R₃.

Když R₃ představuje 2-hydroxyethylaminoskupinu a R₂ předsta• · 4 ·4 9 *4 44 • · · · · 4 4 * · · · • 4 · · · · ·

44 4 44444

4 4 4 4 4

4444 4444 444 4444 44 44

- 15 vuje methylskupinu, R-^'-Χ nemůže představovat -RjýNH, 3-methyl-2-butenylaminoskupinu, benzylaminoskupinu nebo m-hydroxybenzylaminoskupinu. Když R₃ představuje 2-hydroxyethylaminoskupinu a R₂ představuje isopropylskupinu, R^'-X nemůže představovat benzylaminoskupinu, m-hydroxybenzylaminoskupinu nebo 3-methylbutylaminoskupinu. Když R₃ představuje 2-hydroxyethylaminoskupinu a R₂ představuje 2-hydroxyethylskupinu, Rj, '-X nemůže představovat benzylaminoskupinu. Když R₃ představuje 2-methyl-2-hydroxypropylaminoskupinu nebo 2-dimethylaminoethylaminoskupinu a R₂ představuje methylskupinu, R-jý-X nemůže představovat benzylaminoskupinu.

Dále jsou definovány pojmy, jichž se používá v tomto textu.

Pod pojmem halogen, at už samotným nebo v kombinaci, se rozumí všechny halogeny, tj. chlor (Cl), fluor (F), brom (Br) a jod (I).

Pod pojmem hydroxy nebo hydroxyl se rozumí skupina vzorce -OH.

Pod pojmem thiol nebo merkapto se rozumí skupina vzorce -SH.

Pod pojmem alkyl, at už samotným nebo v kombinaci, se rozumí zbytek odvozený od alkanu, který obsahuje 1 až 20, přednostně 1 až 15 atomů uhlíku (pokud není počet uhlíkových atomů konkrétně uveden). Do rozsahu tohoto pojmu spadají alkylskupiny s přímým řetězcem, rozvětvené alkylskupiny a cykloalkylskupiny. V přednostním provedení přímá nebo rozvětvená alkylskupina obsahuje 1 až 15, výhodněji 1 až 8, ještě výhodněji 1 až 6 atomů uhlíku, ještě výhodněji 1 až 4 a nejvýhodněji 1 až 2 atomy uhlíku. Jako příklady takových alkylskupin lze uvést methyl-, ethyl-, propyl-, isopropyl-, • «

- 16 butyl-, terč.butylskupinu apod. Cykloalkylskupina je přednostně monocyklickým, bicyklickým nebo tricyklickým kruhovým systémem se 3 až 8, výhodněji 3 až 6 členy v jednom kruhu. Jako příklady takových skupin je možno uvést cyklopropyl-, cyklopentyl-, cyklohexyl-, adamantylskupinu apod. Do rozsahu pojmu alkyl také spadají alkylskupiny s přímým nebo rozvětveným řetězcem, které obsahují cykloalkylovou nebo jsou přerušeny cykloalkylovou částí. Přímá nebo rozvěvená alkylskupina je připojena v jakémkoliv dostupném místě, které umožní vznik stabilní sloučeniny. Jako neomezující příklady takových skupin lze uvést 4-(isopropyl)cyklohexylethylskupinu nebo 2-methylcyklopropylpentylskupinu. Substituovanou alkylskupinou je přímá, rozvětvená nebo cyklická alkylskupina definovaná výše, která je substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxyskupiny, alkoxyskupiny, alkylthioskupiny, alkylsulfinylskupiny, alkylsulfonylskupiny, acyloxyskupiny, aryloxyskupiny, heteroaryloxyskupiny, aminoskupiny popřípadě mono- nebo disubstituované alkylskupinou, arylskupinou nebo heteroarylskupinou, amidinoskupiny, zbytku močoviny popřípadě substituovaného alkylskupinou, arylskupinou, heteroarylskupinou nebo heterocyklylskupinou, aminosulfonylskupiny, která je popřípadě N-mono- nebo N,N-disubstituována alkylskupinou, arylskupinou nebo heteroarylskupinou, alkylsulfonylaminoskupiny, arylsulfonylaminoskupiny, heteroarylsulfonylaminoskupiny, alkylkarbonylaminoskupiny, arylkarbonylaminoskupiny, heteroarylkarbonylaminoskupiny apod.

Pod pojmem alkenyl, at už samotným nebo v kombinaci, se rozumí přímý, rozvětvený nebo cyklický uhlovodíkový zbytek, který obsahuje 2 až 20, přednostně 2 až 17, výhodněji 2 až 10, ještě výhodněji 2 až 8 a nejvýhodněji 2 až 4 atomy uhlíku a alespoň jednu, přednostně 1 až 3, výhodněji 1 až 2 a nejvýhodněji 1 dvojnou vazbu uhlík-uhlík. V případě • 0 »0 00 * 00 00 • · · 0 ··· · 0 0 · · • · · · 0 · · · • 0 0 · 00000000

0 · · · · • ••0 0000 000 0000 00 00

- 17 cykloalkylskupiny, konjugace více než jedné dvojné vazby uhlík-uhlík není taková, aby kruhu propůjčovala aromatický charakter. Dvojné vazby uhlík-uhlík mohou být obsaženy v cykloalkylové části, s výjimkou cyklopropylskupiny, nebo v části s přímým nebo rozvětveným řetězcem. Jako příklady alkenylskupin je možno uvést ethenyl-, propenyl-, isopropenyl-, butenyl-, cyklohexenyl-, cyklohexenylalkylskupinu apod. Substituovanou alkenylskupinou je přímá nebo rozvětvená alkenylskupina nebo cykloalkenylskupina definovaná výše, která je substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxyskupiny, alkoxyskupiny, alkylthioskupiny, alkylsulfinylskupiny, alkylsulfonylskupiny, acyloxyskupiny, aryloxyskupiny, heteroaryloxyskupiny, aminoskupiny popřípadě mono- nebo disubstituované alkylskupinou, arylskupinou nebo heteroarylskupinou, amidinoskupiny, zbytku močoviny popřípadě substituovaného alkylskupinou, arylskupinou, heteroarylskupinou nebo heterocyklylskupinou, aminosulfonylskupiny, která je popřípadě N-mono- nebo N,N-disubstituována alkylskupinou, arylskupinou nebo heteroarylskupinou, alkylsulfonylaminoskupiny, arylsulfonylaminoskupiny, heteroarylsulfonylaminoskupiny, alkylkarbonylaminoskupiny, arylkarbonylaminoskupiny, heteroarylkarbonylaminoskupiny, karboxyskupiny, alkoxykarbonylskupiny, aryloxykarbonylskupiny, heteroaryloxykarbonylskupiny apod., vázanými k jakémukoliv dostupnému místu, které umožní vznik stabilní sloučeniny.

Pod pojmem alkinyl, at už samotným nebo v kombinaci, se rozumí přímý nebo rozvětvený uhlovodíkový zbytek, který obsahuje 2 až 20, přednostně 2 až 17, výhodněji 2 až 10, ještě výhodněji 2 až 8 a nejvýhodněji 2 až 4 atomy uhlíku a alespoň jednu, přednostně jednu, trojnou vazbu uhlík-uhlík. Jako příklady alkinylskupin lze uvést ethinyl-, propinyl-, butinylskupinu apod. Substituovaná alkinylskupina ·

·· » «0 00 • · * 0 000 · 0 00 0 0 0 0 0 0 0 0 00 0 00000

0 0 0 0 0 0 ft 00 0000 0000000 00 00

- 18 představuje přímou alkinylskupinu nebo rozvětvenou alkinylskupinu definovanou výše, která je substituována 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxyskupiny, alkoxyskupiny, alkylthioskupiny, alkylsulfinylskupiny, alkylsulfonylskupiny, acyloxyskupiny, aryloxyskupiny, heteroaryloxyskupiny, aminoskupiny popřípadě mono- nebo disubstituované alkylskupinou, arylskupinou nebo heteroarylskupinou, amidinoskupiny, zbytku močoviny popřípadě substituovaného alkylskupinou, arylskupinou, heteroarylskupinou nebo heterocyklylskupinou, aminosulfonylskupiny, která je popřípadě N-mono- nebo N,N-disubstituována alkylskupinou, arylskupinou nebo heteroarylskupinou, alkylsulfonylaminoskupiny, arylsulfonylaminoskupiny, heteroarylsulfonylaminoskupiny, alkylkarbonylaminoskupiny, arylkarbonylaminoskupiny, heteroarylkarbonylaminoskupiny apod., které jsou vázány v kterémkoliv dostupném místě umožňujícím vznik stabilní sloučeniny.

Pod pojmem alkylalkenyl se rozumí skupina vzorce -R-CR'=CR'''R'''', kde R představuje nižší alkylskupinu nebo substituovanou nižší alkylskupinu aR', R''' aR'''' představuje každý nezávisle vodík, halogen, nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, acylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, hetarylskupinu nebo substituovanou hetarylskupinu definovanou dále.

Pod pojmem alkylalkinyl se rozumí skupina vzorce -RC=CR', kde R představuje nižší alkylskupinu nebo substituovanou nižší alkylskupinu a R' představuje vodík, nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, acylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, hetarylskupinu nebo substituovanou hetarylskupinu definovanou dále.

Pod pojmem alkoxy se rozumí skupina vzorce -OR, kde R představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší

44	44	«	• 4	4«	44
• 4	4 4	44	4 4	4 4	4 4
•	4	4	4	4 4	4 4
•	• 4	4	4	4 444	♦ ··
•	4	<	4	4	4
				44	44

- 19 alkylskupinu, acylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, aralkylakupinu, substituovanou aralkylskupinu, heteroalkylskupinu, heteroarylalkylskupinu, cykloalkylskupinu, substituovanou cykloalkylskupinu, cykloheteroalkylskupinu nebo substituovanou cykloheteroalkylskupinu, jak jsou definovány v tomto textu.

Pod pojmem alkylthio se rozumí skupinu -SR, -S(O)_n=1_₂-R, kde R představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, aralkylskupinu nebo substituovanou aralkylskupinu, jak jsou definovány v tomto textu.

Pod pojmem acyl se rozumí skupina vzorce -C(O)R, kde R představuje vodík, nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu apod., jak jsou definovány v tomto textu.

Pod pojmem aryloxy se rozumí skupina vzorce -OAr, kde Ar představuje arylskupinu, substituovanou arylskupinu, heteroarylskupinu nebo substituovanou heteroarylskupinu, jak jsou definovány v tomto textu.

Pod pojmem amino se rozumí skupina vzorce NRR', kde R a R' představuje každý nezávisle vodík, nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, hetarylskupinu nebo substituovanou hetarylskupinu, jak jsou definovány v tomto textu, nebo acylskupinu.

Pod pojmem amido se rozumí skupina vzorce -C(O)NRR', kde R a R’ představuje každý nezávisle vodík, nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, hetarylskupinu ·· · ··<

• 4 • · · ·

nebo substituovanou hetarylskupinu, jak jsou definovány v tomto textu.

Pod pojmem karboxyl se rozumí skupina vzorce -C(O)OR, kde R představuje vodík, nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, hetarylskupinu nebo substituovanou hetarylskupinu, jak jsou definovány v tomto textu.

Pod pojmem aryl, ať. už samotným nebo v kombinaci, se rozumí fenylskupina nebo naftylskupina popřípadě karbocyklicky anelovaná s cykloalkylskupinou přednostně s 5- až 7-, výhodněji 5- až 6-členným kruhem a/nebo popřípadě substituovaná 1 až 3 skupinami nebo substituenty zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxyskupiny, alkoxyskupiny, alkylthioskupiny, alkylsulfinylskupiny, alkylsulfonylskupiny, acyloxyskupiny, aryloxyskupiny, heteroaryloxyskupiny, aminoskupiny popřípadě mono- nebo disubstituované alkylskupinou, arylskupinou nebo heteroarylskupinou, amidinoskupiny, zbytku močoviny popřípadě substituovaného alkylskupinou, arylskupinou, heteroarylskupinou nebo heterocyklylskupinou, aminosulfonylskupiny, která je popřípadě N-mono- nebo Ν,Ν-disubstituována alkylskupinou, arylskupinou nebo heteroarylskupinou, alkylsulfonylaminoskupiny, arylsulfonylaminoskupiny, heteroarylsulfonylaminoskupiny, alkylkarbonylaminoskupiny, arylkarbonylaminoskupiny, heteroarylkarbonylaminoskupiny apod.

Pod pojmem substituovaný aryl se rozumí arylskupina substituovaná jednou nebo více funkčními skupinami, jako je například halogen, nižší alkylskupina, nižší alkoxyskupina, alkylthioskupina, acetylenová skupina, aminoskupina, amidoskupina, karboxyskupina, hydroxyskupina, arylskupina, aryloxyskupina, heterocyklická skupina,

hetarylskupina, substituovaná hetarylskupina, nitroskupina, kyanoskupina, thiolová skupina, sulfamidoskupina apod.

Pod pojmem heterocyklická skupina se rozumí nasycená, nenasycená nebo aromatická karbocyklická skupina s jediným kruhem (například morfolino-, pyridyl- nebo furylskupina) nebo několika anelovanými kruhy (například naftpyridyl-, chinoxalyl-, chinolyl- indolizinyl- nebo benzo[b]thienylskupina), která v obsahuje alespoň jeden kruhový heteroatom, jako dusíkový, kyslíkový nebo sírový heteroatom a je nesubstituovaná nebo substituovaná například halogenem, nižší alkylskupinou, nižší alkoxyskupinou, alkylthioskupinou, acetylenovou skupinou, aminoskupinou, amidoskupinou, karboxyskupinou, hydroxyskupinou, arylskupinou, aryloxyskupinou, heterocyklickou skupinou, hetarylskupinou, substituovanou hetarylskupinou, nitroskupinou, kyanoskupinou, thiolovou skupinou, sulfamidoskupinou apod.

Pod pojmem heteroaryl, ať už samotným nebo v kombinaci, se rozumí monocyklická aromatická kruhová struktura obsahující 5 nebo 6 kruhových atomů nebo bicyklická aromatická skupina s 8 až 10 atomy, která obsahuje jeden nebo více, přednostně 1 až 4, výhodněji 1 až 3 a ještě výhodněji 1 až 2 heteroatomy, nezávisle zvolené ze souboru sestávajícího z atomů kyslíku, síry a dusíku, a je popřípadě substituovaná 1 až 3 skupinami nebo substituenty zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, hydroxyskupiny, alkoxyskupiny, alkylthioskupiny, alkylsulfinylskupiny, alkylsulfonylskupiny, acyloxyskupiny, aryloxyskupiny, heteroaryloxyskupiny, aminoskupiny popřípadě mono- nebo disubstituované alkylskupinou, arylskupinou nebo heteroarylskupinou, amidinoskupiny, zbytku močoviny popřípadě substituovaného alkylskupinou, arylskupinou, heteroarylskupinou nebo heterocyklylskupinou, aminosulfonylskupiny, která je popřípadě N-mono- nebo Ν,Ν-disubstituována alkylskupinou, • ·

arylskupinou nebo heteroarylskupinou, alkylsulfonylaminoskupiny, arylsulfonylaminoskupiny, heteroarylsulfonylaminoskupiny, alkylkarbonylaminoskupiny, arylkarbonylaminoskupiny, heteroarylkarbonylaminoskupiny apod. Do rozsahu tohoto pojmu také spadají skupiny, které obsahují oxidovanou síru nebo dusík, ve formě sulfinylskupiny, sulfonylskupiny a N-oxidu terciárního kruhového dusíku. Uhlíkové a dusíkové atomy jsou takovým místem připojení heteroarylové kruhové struktury, aby se zachoval stabilní aromatický kruh. Jako příklady heteroarylskupin je možno uvést pyridyl-, pyridazinyl-, pyrazinyl-, chinazolinyl-, purinyl-, indolyl-, chinolyl-, pyrimidinyl-, pyrrolyl-, oxazolyl-, thiazolyl-, thienyl-, isoxazolyl-, oxathiadiazolyl-, isothiazolyl-, tetrazolyl-, imidazolyl-, triazinyl-, furyl-, benzofuryl-, indolylskupinu apod. Substituovaná heteroarylskupina obsahuje substituent připojený ke kterémukoliv dostupnému atomu uhlíku nebo dusíku, který umožní vznik stabilní sloučeniny.

Pod pojmem substituovaný heteroaryl se rozumí heterocyklická skupina popřípadě mono- nebo polysubstituovaná jednou nebo více funkčními skupinami, jako je například halogen, nižší alkylskupina, nižší alkoxyskupina, alkylthioskupina, acetylenová skupina, aminoskupina, amidoskupina, karboxyskupina, hydroxyskupina, arylskupina, aryloxyskupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina, hetarylskupina, substituovaná hetarylskupina, nitroskupina, kyanoskupina, thiolová skupina, sulfamidová skupina apod.

Pod pojmem aralkyl, at už samotným nebo v kombinaci, se rozumí zbytek, v němž je arylskupina definovaná výše připojena k alkylovému zbytku definovanému výše. Jako příklady takových skupin je možno uvést benzylskupinu,

• · · fenylpropylskupinu, naftylmethylskupinu, 4-fluorbenzylskupinu apod.

Pod pojmem heteroalkyl se rozumí skupina vzorce -R-Het, kde Het představuje heterocyklickou skupinu a R představuje nižší alkylskupinu. Heteroalkylskupiny mohou být nesubstituované nebo substituované, například halogenem, nižší alkylskupinou, nižší alkoxyskupinou, alkylthioskupinou, acetylenovou skupinou, aminoskupinou, amidoskupinou, karboxyskupinou, arylskupinou, aryloxyskupinou, heterocyklickou skupinou, substituovanou heterocyklickou skupinou, hetarylskupinou, substituovanou hetarylskupinou, nitroskupinou, kyanoskupinou, thiolovou skupinou, sulfamidoskupinou apod.

Pod pojmem heteroarylalkyl se rozumí skupina vzorce -R-HetAr, kde HetAr představuje heteroarylskupinu a R představuje nižší alkylskupinu nebo substituovanou nižší alkylskupinu. Heteroarylalkylskupiny mohou být nesubstituované nebo substituované, například halogenem, nižší alkylskupinou, substituovanou nižší alkylskupinou, alkoxyskupinou, alkylthioskupinou, acetylenovou skupinou, arylskupinou, aryloxyskupinou, heterocyklickou skupinou, substituovanou heterocyklickou skupinou, hetarylskupinou, substituovanou hetarylskupinou, nitroskupínou, kyanoskupinou, thiolovou skupinou, sulfamidoskupinou apod.

Pod pojmem cykloalkyl se rozmí dvojvazná cyklická nebo polycyklická alkylskupina obsahující 3 až 15 atomů uhlíku.

Pod pojmem substituovaný cykloalkyl se rozumí cykloalkylskupina substituovaná jedním nebo více substituenty, jako například halogenem, nižší alkylskupinou, substituovanou nižší alkylskupinou, alkoxyskupinou, • ·

- 24 alkylthioskupinou, acetylenovou skupinou, arylskupinou, aryloxyskupinou, heterocyklickou skupinou, substituovanou heterocyklickou skupinou, hetarylskupinou, substituovanou hetarylskupinou, nitroskupinou, kyanoskupinou, thiolovou skupinou, sulfamidoskupinou apod.

Pod pojmem cykloheteroalkyl se rozumí cykloalkylskupina, v níž je alespoň jeden z kruhových atomů uhlíku nahrazen heteroatomem (například atomem dusíku, kyslíku, síry nebo fosforu).

Pod pojmem substituovaný cykloheteroalkyl se rozumí cykloheteroalkylskupina definovaná výše, která obsahuje jedním nebo více substituenty, jako například halogenem, nižší alkylskupinou, nižší alkoxyskupinou, alkylthioskupinou, acetylenovou skupinou, aminoskupinou, amidoskupinou, karboxyskupinou, hydroxyskupinou, arylskupinou, aryloxyskupinou, heterocyklickou skupinou, substituovanou heterocyklickou skupinou, hetarylskupinou, substituovanou hetarylskupinou, nitroskupinou, kyanoskupinou, thiolovou skupinou, sulfamidoskupinou apod.

Pod pojmem alkylcykloalkyl se rozumí skupina vzorce -R-cykloalkyl, kde cykloalkyl představuje cykloalkylskupinu a R představuje nižší alkylskupinu nebo substituovanou nižší alkylskupinu. Cykloalkylová skupina je nesubstituovaná nebo substituovaná například halogenem, nižší alkylskupinou, nižší alkoxyskupinou, alkylthioskupinou, acetylenovou skupinou, aminoskupinou, amidoskupinou, karboxyskupinou, hydroxyskupinou, arylskupinou, aryloxyskupinou, heterocyklickou skupinou, substituovanou heterocyklickou skupinou, hetarylskupinou, substituovanou hetarylskupinou, nitroskupinou, kyanoskupinou, thiolovou skupinou, sulfamidoskupinou apod.

• · φ · • · · · φφφ φφφ φ φ

Pod pojmem alkylcykloheteroalkyl se rozumí skupina vzorce -R-cykloheteroalkyl, kde R představuje nižší alkylskupinu nebo substituovanou nižší alkylskupinu. Cykloheteroalkylskupina je nesubstituovaná nebo substituovaná například halogenem, nižší alkylskupinou, nižší alkoxyskupinou, alkylthioskupinou, acetylenovou skupinou, aminoskupinou, amidoskupinou, karboxyskupinou, hydroxyskupinou, arylskupinou, aryloxyskupinou, heterocyklickou skupinou, substituovanou heterocyklickou skupinou, hetarylskupinou, substituovanou hetarylskupinou, nitroskupinou, kyanoskupinou, thiolovou skupinou, sulfamidoskupinou apod.

Pod pojmem farmakologíčky vhodné soli se rozumějí soli připravované obvyklými postupy, které jsou odborníkům v tomto oboru dobře známy. Tyto soli zahrnují soli bazických sloučenin podle vynálezu s anorganickými a organickými kyselinami. Jako neomezující příklady takových kyselin lze uvést kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu bromovodíkovou, kyselinu sírovou, kyselinu fosforečnou, kyselinu methansulfonovou, kyselinu ethansulfonovou, kyselinu jablečnou, kyselinu octovou, kyselinu šřavelovou, kyselinu vinnou, kyselinu citrónovou, kyselinu mléčnou, kyselinu fumarovou, kyselinu jantarovou, kyselinu maleinovou, kyselinu salicylovou, kyselinu benzoovou, kyselinu fenyloctovou, kyselinu mandlovou apod. V případě, že sloučeniny obecného vzorce I až III obsahují kyselou funkční skupinu, jako karboxyskupinu, budou odborníku v tomto oboru známy vhodné kationtové protějšky karboxyskupiny. Jako příklady takových kationtů je možno uvést kationty alkalických kovů, kovů alkalických zemin, amoniové, kvaterní amoniové kationty apod. Další příklady farmakologicky vhodných solí je možno nalézt v publikace Berge et al., J. Pharm. Sci. 66,1 (1977).

V případě, že konečná 2,6,9-trisubstituovaná purinová sloučenina podle vynálezu obsahuje bázickou skupinu, je • ·

- 26 možno připravovat její adiční soli s kyselinami. Adiční soli sloučenin podle vynálezu s kyselinami se z rodičovské sloučeniny připravují standardním postupem ve vhodném rozpouštědle za použití přebytku kyseliny. Jako neomezující příklady kyselin lze uvést kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu bromovodíkovou, kyselinu sírovou, kyselinu fosforečnou, kyselinu octovou, kyselinu maleinovou, kyselinu jantarovou nebo kyselinu methansulfonovou. Zvláště užitečnou formou je hydrochloridová sůl.

Pokud konečná 2,6,9-trisubstituovaná purinová sloučenina obsahuje kyselou skupinu, je možno připravovat jejich soli s kationty. Obvykle se tyto soli připravují tak, že se kyselá rodičovská sloučenina nechá reagovat s přebytkem alkalického činidla. Jako neomezující příklady takových alkalických činidel lze uvést hydroxidy, uhličitany a alkoxidy obsahující vhodný kation, jako například sodný, draselný, vápenatý nebo amoniový kation. Některé sloučeniny tvoří vnitřní soli nebo zwitterionty, které jsou rovněž vhodné.

Sloučeniny podle vynálezu jsou užitečné při inhibici buněčné proliferace u savců, včetně lidí. 2,6,9Trisubstituované puriny jsou například užitečné při léčení autoimunitních chorob, jako je například rheumatoidní arthritis, lupus, diabetes typu I, roztroušená sklerosa atd., při léčení rakoviny, kardiovaskulárních chorob, jako restenosy, choroby host-versus-graft, dny, polycystické choroby ledvin a jiných proliferativních chorob, jejichž patogenese zahrnuje abnormální proliferaci buněk.

Způsob léčení zahrnuje parenterální a orální podávání účinného množství zvolené sloučeniny podle vynálezu, která je přednostně dispergována ve farmaceutickém nosiči. Terapeuticky užitečné množství sloučeniny podle • · ·

vynálezu bude obvykle v rozmezí od asi 0,01 do asi 100 mg/kg, avšak jak je zřejmé odborníku v tomto oboru, bude záviset na způsobu podávání, věku a stavu pacienta. Terapeuticky užitečné množství sloučeniny podle vynálezu je možno podávat jednou až desetkrát za den, nebo častěji, v případě akutní nebo chronické choroby. Budou-li sloučeniny podle vynálezu podávány v souladu s tímto popisem, nepředpokládají se žádné nepřijatelné toxikologické účinky.

Sloučeniny podle vynálezu jsou také užitečné jako protizánětlivá a antifungální činidla, Jsou jako takové užitečné pro léčbu zánětů a fungálních infekcí u lidí a zvířat a pro léčbu fungálních infekcí u rostlin.

Farmaceutické kompozice, které obsahují sloučeniny podle vynálezu a/nebo jejich deriváty, je možno připravovat ve formě roztoků nebo lyofizolovaných prášků pro parenterální podávání. Prostředek lze z prášku rekonstituovat tak, že se k němu před aplikací přidá vhodné ředidlo nebo jiný farmaceuticky vhodný nosič. Pokud se používá kompozic podle vynálezu v kapalné formě, jsou přednostně začleněny do pufrovaného isotonického vodného roztoku. Jako příklady vhodných ředidel je možno uvést normální isotonický solný roztok, standardní 5% dextronu ve vodě a tlumivý roztok octanu sodného nebo amonného. Takové kapalné prostředky jsou vhodné pro parenterální podávání, ale lze je použít rovněž pro orální podávání.

K farmaceutickým kompozicím, které obsahují sloučeniny podle tohoto vynálezu, může být žádoucí přidávat excipienty, jako polyvinylpyrrolidinon, želatinu, hydroxycelulosu, klovatinu, polyethylenglykol, mannitol, chlorid sodný, citran sodný nebo jakýkoliv jiný excipient známý odborníkům v tomto oboru. Alternativně sloučeniny podle vynálezu mohou tvořit náplň tobolek, mohou být

tabletovány nebo připravovány ve formě emulze nebo syrupu pro orální podávání. Za účelem posílení nebo stabilizace kompozice nebo usnadnění její přípravy je možno přidávat farmaceuticky vhodné pevné nebo kapalné nosiče. Jako neomezující příklady kapalných nosičů lze uvést sirup, arašídový olej, olivový olej, glycerin, solný roztok, alkoholy a vodu. Pevnými nosiči jsou například škrob, laktosa, dihydrát síranu vápenatého, teffa alba, stearan hořečnatý nebo kyselina stearová, mastek, pektin, klovatiny, agar nebo želatina. Nosič také může obsahovat látku pro přetrvávající uvolňování, jako například glycerylmonostearát nebo glyceryldistearát, samotný nebo s voskem. Množství pevného nosiče je proměnlivé, přednostně však bude ležet v rozmezí od asi 20 mg do asi 1 g na dávkovači jednotku.

Farmaceutické dávkovači formy je možno připravovat za použití obvyklých postupů, jako je například mletí, míšení, granulace a lisování, je-li to nezbytné, pro přípravu tabletových forem; nebo mletí, míšení a plnění do tvrdých želatinových tobolek. V případě, že se použije kapalného nosiče, přípravky budou mít formu sirupu, elixíru, emulze nebo vodné nebo nevodné suspenze. Takové kapalné prostředky lze podávat přímo nebo jimi plnit měkké želatinové tobolky.

Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech provedení. Tyto příklady mají výhradně ilustrativní charakter a rozsah vynálezu v žádném ohledu neomezují.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Sloučeniny podle vynálezu se připravují obvyklými postupy organické chemie. Reakční sekvence znázorněná v • ·

následujícím schématu syntézy je obecným sloučenin podle vynálezu.

Cl způsobem syntézy

Cl

-s loučenina butanol. Δ

NaH

R^-sloučenina

N-methyipyrrolidinon

R -sloučenina

ΔΓ

CT*N

Ra

2,6-Dichlorpurin se rozpustí v butanolu a k výslednému roztoku se přidá vhodný R₁-amin. Reakční směs se několik hodin zahřívá a poté ochladí, čímž se získá sloučenina vzorce 1. Ke sloučenině vzorce 1 se přidá hydrid sodný a poté R₂-sloučenina a izoluje se sloučenina vzorce 2. Ke sloučenině vzorce 2 se přidá R₃-sloučenina ve formě roztoku v N-methylpyrrolidinonu. Vzniklá směs se zahřívá po vhodné období a po následném přečištění se získá požadovaná sloučenina.

Výše popsaným postupem se připraví následující sloučenina.

Příprava 2-chlor-6-(4-methoxybenzylamino)purinu (1)

2,6-Dichlorpurin (4,06 g, 21,5 mmol) se suspenduje v n-butanolu (150 ml) a ke vzniklé suspenzi se přidá 4-methoxybenzylamin (3,4 ml, 26 mmol). Vzniklý roztok se vyjasní a o několik minut poté opět zakalí. Tento roztok se 2 hodiny zahřívá na 120°C, poté ochladí a odpaří se z něj n-butanol. Zbytek se suspenduje ve směsi vody a diethyletheru. K výsledné suspenzi se přidá roztok 2M hydroxidu

sodného (1,3 ml, 26 mmol). Vzniklý roztok se 10 minut míchá a poté přefiltruje. Odfiltrovaná sraženina se promyje vodou a malou dávkou etheru a vysuší za vakua. Matečný louh se přes noc nechá stát a následující den se shromáždí další krystaly, které se promyjí diethyletherem. Výtěžek = 71 %.

Příprava 2-chlor-6-(4-methoxybenzylamino)-9-isopropylpurinu (2)

2-Chlor-6-(4-methoxybenzylamino)purin se suspenduje v suchém dimethylformamidu (5 ml). Vzniklá suspenze se smísí s hydridem sodným (60% disperse, 82 mg, 2,06 mmol). Výsledná suspenze se 30 minut míchá. Ke vzniklému žlutozelenému roztok se během 5 minut přidá 2-jodpropan (0,280 ml, 1,7 ekv.). Takto připravený roztok se 2 dny míchá a přidá se k němu voda. Vodný roztok se extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se odpaří, čímž se získá isopropylpurinový produkt (výtěžek = 508 mg, 89 %)

Příprava 2-diethanolamino-6-(4-methoxybenzylamino)-9-isopropylpurinu (3)

Purin (1,65 g, 4,98 mmol) se rozpustí v dimethylsulfoxidu (12 ml) a diethanolaminu (4 ml). Vzniklý roztok se 2 až 3 dny zahřívá na 140°C, poté 1 den na 160°C, ochladí a přidá se k němu butanol nasycený vodou (100 ml). Výsledný roztok se promyje vodou (3 x 50 ml) a odpaří na hnědý olej. Tento zbytek se chromátografuje na silikagelu za použití ethylacetátu a poté 3% methanolu v ethylacetátu, jako elučního činidla, čímž se získá produkt (výtěžek 730 mg, 37 %) ve formě světle žlutého oleje.

NMR (CDC1₃): δ 7,29 (brs, 1H), 7,25 (d, 2H), 6,94 (brs, 1H), 6,83 (d, 2H), 5,43 (brs, <2H), 4,63 (brs, 2H), 4,53 (m, 1H), 3,86 (t, 4H), 3,76 (m, 7H), 1,47 (d, 6H) ·· ·· »· • · · « · · * · · · · • 9

4

- 31 - ......

V tabulce 1 jsou uvedeny sloučeniny podle vynálezu, které byly připraveny syntetickým postupem popsaným v tomto příkladu.

Tabulka 1

Sloučeniny připravené postupem podle příkladu 1

R-jý-X	^R2	^R3
4-methoxybenzylamino	3-kyanopropy1	Cl
4-methoxybenzylamino	3-chlorpropy1	Cl
4-methoxybenzylamino	benzyl	Cl
4-methoxybenzylamino	methyl-4-karboxy- benzyl	Cl
4-methoxybenzylamino	N-ftaloylethyl	Cl
4-methoxymethylamino	isopropyl	ethanolamin
4-methoxybenzylamino	isopropyl	diethanolamin
4-methoxyben zylamino	3-methylbuty1	Cl
4-methoxybenzylamino	2-methylbutyl	Cl
4-methoxybenzylamino	cyklopentyl	Cl
4-methoxybenzylamino	3-nitrobenzyl	Cl
4-methoxybenzylamino	4-nitrobenzyl	Cl
4-methoxybenzylamino	ethyl	Cl
4-methoxybenzylamino	propyl	Cl
4-methoxybenzylamino	3-methylbenzyl	Cl
4-methoxybenzylamino	4-methylbenzyl	Cl
heptylamin	H	Cl
N-benzylhydroxylamin	H	Cl
propylamin	H	Cl
noradamantylamin	H	Cl
cyklobutylamin	H	Cl
3-methoxypropylamin	H	Cl
2-methoxyethylamin	H	Cl
cyklopentylamin	H	Cl

• 9

2-amino-2-methyl-l-	H	Cl
-propanol
4-amino-l-benzylpiperidin	H	Cl
heptylamin	Me	Cl
N-benzylhydroxylamin	Me	Cl
propylamin	Me	Cl
noradamantylamin	Me	Cl
cyklobutylamin	Me	Cl
3-methoxypropylamin	Me	Cl
2-methoxyethylamin	Me	Cl
cyklopentylamin	Me	Cl
2-amino-2-methyl-l-	Me	Cl
propanol
4-amino-l-benzylpiperidin	Me	Cl
2,4-dimethoxybenzylamin	Me	Cl
2-methoxybenzylamin	H	Cl
2-(aminomethyl)pyridin	H	Cl
3,4-dimethoxyfenylethyl-	H	Cl
amin
3-(aminomethyl)pyridin	H	Cl
4-(aminomethyl)pyridin	H	Cl
6-amino-l-hexanol	H	Cl
fenethylamin	H	Cl
2-aminobenzothiazol	H	Cl
2,4-dimethoxybenzylamin	H	Cl
2-methoxybenzylamin	Me	Cl
2-(aminomethylpyridin)	Me	Cl
3,4-dimethoxyfenylethyl-	Me	Cl
amin
4-methoxybenzylamino	Me	Cl
3-(aminomethyl)pyridin	isopropyl	ethylendiamin
4-(aminomethyl)pyridin	H	Cl
6-amino-l-hexanol	H	Cl
fenylethylamin	H	Cl

·· ·· ·· • · · · · • · · · · • · ·· · · ··

2-aminobenzothiazol	H	Cl
4-methoxybenzylamino	H	Cl
3-fenyl-l-propylamin	isopropyl	3-pyrrolin
2-aminoindan	H	Cl
4-methoxyfenylethylamin	H	Cl
4-nitrobenzylamin	H	Cl
2,6-difluorbenzylamin	H	Cl
3-fenyl-l-propylamin	H	Cl
2-aminoindan	Me	Cl
4-methoxyfenylethylamin	Me	Cl
4-nitrobenzylamin	Me	Cl
2,6-difluorbenzylamin	Me	Cl
aminomethylcyklopropan	Me	Cl
piperonylamin	H	Cl
1-aminomethylbenzen- sulfonamid	H	Cl
aminomethylcyklohexanol	H	Cl
2-aminomethylbenzimidazol	H	Cl
cyklohexanmethanamin	H	Cl
4-methoxybenzylamino	H	Cl
4-methoxybenzylamino	isopropyl	serinol
aminomethylcyklopropan	isopropyl	1,3-diamino-2 hydroxypropan
piperonylamin 1-aminomethylbenzen-	Me	Cl
sulfonamid	Me	Cl
aminomethylcyklohexanol	Me	Cl
2-aminomethylbenzimidazol	Me	Cl
cyklohexanmethanamin	Me	Cl
3-(aminomethyl)pyridin	Me	Cl
4-(aminomethyl)pyridin	2-methylpropy1	Cl
6-amino-l-hexanol	cyklopentyl	Cl
fenethylamin	propyl	Cl
2-aminobenzothiazol	ethyl	Cl
3-fenyl-l-propylamin	isopropyl	Cl

2-aminoindan	2-methylpropyl	Cl
4-methoxyfenethylamin	cyklopentyl	Cl
4-nitrobenzylamin	propyl	Cl
2,6-difluorbenzylamin	ethyl	Cl
4-methoxybenzylamino	isopropyl	Cl
fenpropylamino	isopropyl	4-hydroxy-
2-aminoindan	H	piperidin Cl
2-(4-methoxyfenyl)ethyl-	H	Cl
amino 4-nitrobenzylamino	H	Cl
2,6-difluorbenzylamino	H	Cl
4-methoxybenzylamino	H	Cl
4-methoxybenzylamino	isopropyl	3-(benzylamino)-
fenpropylamino	isopropyl	propionitril (R/S)-leucinol
2-aminoindan	isopropyl	Cl
2-(4-methoxyfenyl)-	isopropyl	Cl
ethylamino 4-nitrobenzylamino	isopropyl	Cl
2,6-difluorbenzylamino	isopropyl	Cl
4-methoxyben zylamino	isopropyl	Cl
4-methoxyben zylamino	isopropyl	piperidin
4-methoxyben zylamino	isopropyl	3-hydroxypiperidin
fenpropylamino	isopropyl	L-histidinol
2-aminoindan	isopropyl	diethanolamin
4-methoxybenzylamino	isopropyl	diethanolamin
4-methoxyben zylamino	isopropyl	(S)-(-)-2-pyrro-
4-methoxyben zylamino	isopropyl	lidinmethanol morfolin
4-methoxybenzylamino	benzyl	diethanolamin
4-methoxyben zylamino	3-methylbutyl	diethanolamin
4-methoxyben zylamino	2-methylpropyl	diethanolamin
4-methoxybenzylamino	cyklopentyl	diethanolamin
4-methoxybenzylamino	3-nitrobenzyl	diethanolamin

4-methoxybenzylamino	4-nitrobenzyl	diethanolamin
4-methoxybenzylamino	ethyl	diethanolamin
4-methoxybenzylamino	propyl	diethanolamin
4-methoxybenzylamino	3-methylbenzyl	diethanolamin
heptylamin	4-methylbenzyl	diethanolamin
N-benzylhydroxylamin	Me	diethanolamin
propylamin	Me	diethanolamin
noradamantylamin	Me	diethanolamin
cyklobutylamin	Me	diethanolamin
3-methoxypropylamin	Me	diethanolamin
2-methoxyethylamin	Me	diethanolamin
cyklopentylamin	Me	diethanolamin
2-amino-2-methyl-l-	Me	diethanolamin
-propanol
4-amino-l-benzylpiperidin	Me	diethanolamin
4-methoxybenzylamino	Me	diethanolamin
4-methoxybenzylamino	isopropyl	2-pyrrolidinol
2,4-dimethoxybenzylamin	isopropyl	tryptamin
2-methoxybenzylamin	Me	diethanolamin
2-(aminomethyl)pyridin	Me	diethanolamin
3,4-dimethoxyfenylethyl-	Me	diethanolamin
amin
3-(aminomethyl)pyridin	Me	diethanolamin
4-(aminomethyl)pyridin	Me	diethanolamin
6-amino-l-hexanol	Me	diethanolamin
fenylethylamin	Me	diethanolamin
2-aminobenzothiazol	Me	diethanolamin
3-fenyl-l-propylamin	Me	diethanolamin
2-aminoindan	Me	diethanolamin
4-methoxyfenethylamin	Me	diethanolamin
4-nitrobenzylamin	Me	diethanolamin
2,6-difluorbenzylamin	Me	diethanolamin
aminomethylcyklopropan	Me	diethanolamin
piperonylamin	Me	diethanolamin

1-aminomethylbenzen-	Me	diethanolamin
sulfonamid aminomethylcyklohexanol	Me	diethanolamin
2-aminomethylbenzimidazol	Me	diethanolamin
cyklohexanmethanamin	Me	diethanolamin
3-(aminomethyl)pyridin	Me	diethanolamin
4-(aminomethyl)pyridin	2-methylpropyl	diethanolamin
6-amino-l-hexanol	cyklopentyl	diethanolamin
fenylethylamin	propyl	diethanolamin
2-aminobenzothiazol	ethyl	diethanolamin
3-fenyl-l-propylamin	isopropyl	diethanolamin
2-aminoindan	2-methylpropyl	diethanolamin
4-methoxyfenylethylamin	cyklopentyl	diethanolamin
4-nitrobenzylamin	propyl	diethanolamin
2,6-difluorbenzylamin	ethyl	diethanolamin
4-methoxybenzylamino	isopropyl	diethanolamin
4-methoxybenzylamino	isopropyl	1-amino-l-cyklo
4-methoxybenzylamino	isopropyl	pentaňmethano1 (+ -)-2-piperi-
cyklopropyl	isopropyl	dinmethanol (+ -)-3-amino-
piperonylamino	isopropyl	-1,2-propandiol Cl
4-sulfaminobenzylamino	isopropyl	Cl
cyklohexanolmethylamino	isopropyl	Cl
2-aminobenzimidazolo	isopropyl	Cl
cyklohexylmethylamino	isopropyl	Cl
3-fenylpropylamino	isopropyl	Cl
cyklopropylmethylamino	cyklopentyl	Cl
piperonylamino	isopropyl	diethanolamin
4-methoxyben zylamino	isopropyl	diethanolamin
4-methoxybenzylamino	isopropyl	diisopropylamin
4-methoxybenzylamino	isopropyl	trans-2-amino-
4-methoxybenzylamino	isopropyl	cyklohexanol (R)-2-amino-3-

• 4 4 4 ·*

4 · · 4 · • 4 4 9 4 • 4 444 444

4 4 • 4494 44 4T • 4 * • ·

4444 «4« ·

4-methoxybenzylamino

4-chlorbenzyloxy

4-chlorbenzylamino isopropyl isopropyl isopropyl isopropyl isopropyl isopropyl isopropyl isopropyl isopropyl isopropyl isopropyl isopropyl isopropyl

Me

H

Me trifluormethyl

-fenyl-l-propanol (4S,5S)-(+)-5-amino-2,2-dimethyl-4 1-(3-aminopropyl)imidazol

4- hydroxy-4-fenylpiperidin

5- benzyl-L-cysteinol (+ -)-epinefrin diallylamin piperazin (+ -)-(methylaminomethyl)benzylalkohol (S)-(+)-2-(anilinomethyl)pyrrolidin

4-(allylamino)-4-methyl-2-pentanol

3-(2-hydroxyethylamin)propan-l-ol

1,1'-dimethyl-1,1'-dipropyl2,2'-imidodiethanol

3,3'-iminodi-2-butanol ethanolamino

Cl

Cl • ·

4-methoxyben zylamino	trifluormethyl	Cl
4-methoxybenzylamino	benzyl	Cl
4-methoxybenzylamino	isopropyl	2-aminoethyl- amino
4-methoxybenzylamino	2-O-TBDMS-ethyl	diethanolamino
4-methoxyben zylamino	perfluorisopropyl	Cl
4-methoxybenzylamino	perfluorisopropyl	diethanolamino
4-methoxybenzylamino	2-hydroxyethyl	diethanolamino
4-methoxybenzylamino	isopropyl	1,3-diamino-2- -hydroxypropan
4-methoxybenzylamino	isopropyl	N-(4-hydroxy- piperidino)
4-methoxybenzylamino	isopropyl	N-pyrrolidino
3-fenylpropylamino	H	Cl
2-aminoindanyl 2-(4-methoxyfenyl)-	H	Cl
ethylamino	H	Cl
4-nitrobenzylamino	H	Cl
2,6-difluorbenzylamino	H	Cl
4-methoxybenzylamino	isopropyl	N-(2-kyanopropyl)-N-(3-pyridylmethyl)amino
4-methoxybenzylamino	isopropyl	2-(hydroxymethyl )-3-methyl- butan-2-amino
3-fenylpropylamino	isopropyl	Cl
2-aminoindanyl 2-(4-methoxyfenyl)-	isopropyl	Cl
ethylamino	isopropyl	Cl
4-nitrobenzylamino	isopropyl	Cl
2,6-difluorbenzylamino	isopropyl	Cl
4-methoxybenzylamino	isopropyl	2-(5-imidazolmethyl)ethanol- amino
3-fenylpropylamino	isopropyl	diethanolamino

• · · · · ·

4-methoxybenzylamino	isopropyl	N-(3-hydroxypyrrolidino)
4-methoxybenzylamino	isopropyl	2-(3-indol)- ethylamino
4-methoxybenzylamino	isopropyl	2,3-dihydroxy- propylamino
3-fenylpropylamino	cyklopentyl	Cl
4-methoxybenzylamino	isopropyl	N-benzyl-N-2- -hydroxyethyl- amino
4-methoxybenzylamino	oleyl	Cl
4-methoxybenzylamino	2-naftylmethyl	Cl
4-methoxybenzylamino	4-fenylbenzyl	C1
4-methoxybenzylamino	1-naftylmethyl	Cl
4-methoxybenzylamino	4-methylstilben	Cl
4-methoxybenzylamino	epoxymethyl	Cl
4-methoxybenzylamino	2,3-dihydroxy- propyl	diethanolamino
4-methoxybenzylamino	4-fenylbenzyl	diethanolamino
4-methoxybenzylamino	2-fenylbenzyl	diethanolamino
4-methoxybenzylamino	2-naftylmethyl	diethanolamino
4-methoxybenzylamino	1-naftylmethyl	diethanolamino
4-methoxybenzylamino	4-methylstilben	diethanolamino
4-methoxybenzylamino	oleyl	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	isopropyl	3-amino-l,2- propandiol
4-fenylbenzylamino	isopropyl	hexanolamino
4-fenylbenzylamino	isopropyl	bis(methoxyethylamino)
4-fenylbenzylamino	isopropyl	furfurylamino
4-fenylbenzylamino	isopropyl	diethylamino
4-fenylbenzylamino	isopropyl	ethanolamino
4-fenylbenzylamino	isopropyl	morfolino

• Kft· ···«

4-fenylbenzylamino	isopropyl	2,4-dimethoxy- benzylamino
4-fenylbenzylamino	isopropyl	4-trifluormetho xybenzylamino
4-fenylbenzylamino	isopropyl	diisopropanol- amino
4-fenylbenzylamino	isopropyl	2-amino-l,3- -propandiol
4-fenylbenzylamino	isopropyl	diallylamino
4-brombenzylamino	isopropyl	Cl
4-bromanilino	isopropyl	Cl
4-brombenzylamino	isopropyl	diethanolamino
4-bromanilino	isopropyl	diethanolamino
N-methyl-4-fenylbenzyl- amino	isopropyl	Cl
4-fenylanilino	isopropyl	diisopropanol- amino
N-methyl-4-fenylbenzyl- amino	isopropyl	diethanolamino
benzylamino	ethyl	ethanolamino
4-methylbenzylamino	methyl	ethanolamino
4-ethylbenzylamino	methyl	ethanolamino
4-bromanilino	isopropyl	4-bromanilino

Příklad 2

V tomto příkladu je popsán způsob výroby sloučenin podle vynálezu znázorněný v následujícím schématu.

R?X

Cl

Ethanol. Reflux

R

R₃H

NMP, 140 °C

- 41.

Příprava {2-chlorpurin-6-yl}[(4-chlorfenyl)methyllaminu

K suspenzi 15 g (0,0794 mol) 2,6-dichlorpurinu ve 250 ml absolutního ethanolu se přidá 12,7 ml (0,0873 mol) tri ethylaminu a 10,62 ml (0,0873 mol) 4-chlorbenzylaminu.

Reakční směs se 16 hodin refluxuje při 80°C (je pozorován vznik krémově bílé sraženiny). Reakční směs se ochladí. Vysrážený produkt se odfiltruje, promyje ethanolem (3 x 50 ml) a suší 24 hodin za vysokého vakua (výtěžek 15,7 g, 67,4 %). Produkt se charakterizuje ¹H NMR.

Příprava {2-chlor-9-(methylethyl)purin-6-yl}[(4-chlorfenyl)methyl]aminu

K roztoku 6 g (0,020 mol) 2-chlor-6-(4-chlorfenylJmethylaminopurinu ve 41 ml bezvodého dimethylformamidu se přidá 5,64 g (0,041 mol) bezvodého uhličitanu draselného a 3,41 ml (0,035 mol) 2-jodpropanu. Vzniklá směs se 16 hodin míchá při teplotě místnosti a přidá se k ní 500 ml vody.

Vodná směs se 1 hodinu míchá. Vyloučená sraženina se odfiltruje, promyje vodou (3 x 50 ml) a 16 hodin suší za vysokého vakua při 50°C. Získá se produkt ve formě špinavě bílé pevné látky (6,5 g, 97 %), který se charakterizuje ¹H NMR.

Příprava {2—[(2-aminoethyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl}[(4-chlorfenyl)methyllaminu

K roztoku 3,36 g (0,01 mol) {2-chlor-9-(methylethyl) purin-6-yl}[(4-chlorfenyl)methyl]aminu ve 13 ml bezvodého l-methyl-2-pyrrolidinonu se přidá 4,68 ml (0,70 mol) 2-aminoethylaminu. Vzniklá směs se 24 hodin zahřívá na 140°C. Získaný produkt se podrobí chromatografií na silikagelu s proměnlivým gradientem dichlormethan : methanol. Získá se 3,95 g produktu, který obsahuje l-methyl-2-pyrrolidinon.

- 42**·¹*

Tato směs se rozpustí v dichlormethanu a dichlormethanový roztok se extrahuje vodou (5 x 20 ml). Organická vrstva se vysuší bezvodým síranem sodným a odpaří. Získá se špinavě bílá pevná látka (2,94 g, 81,7 %). Produkt se charakterizuje H NMR a jeho čistota se stanoví pomocí RP-HPLC (sloupec YMC C-18, 50 x 4,4 mm, S-5 12 nm, 0,1% kyselina trifluoroctová-voda/0,1% kyselina trifluoroctová-acetonitril).

V tabulce 2 jsou identifikovány sloučeniny podle vynálezu, které se připraví za použití obecného syntetického postupu uvedeného výše v tomto příkladu. V tabulce 2 MS znamená hmotnostní spektrum a MH+ představuje hmotnost iontu odvozeného od rodičovské molekuly plus jeden atom vodíku.

Tabulka 2

	r₂	^R3
(4-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	diethanolamino
(4-fluorfenyl(methylamino	isopropyl	diethanolamino
(4-methoxyfenyl)methylamino	isopropyl	5-aminopentylamino
(4-trifluormethylfenyl)methylamino	isobutyl	diethanolamino
(4-trifluormethylfenyl(methylamino	isopropyl	diethanolamino
(4-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	(S)-2-amino-3-fenylpropylamino
(4-fluorfenyl(methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino
(4-fluorfenylJmethylamino	isopropyl	(D)-1-hydroxymethy1-2-methy1propylamino
(4-fluorfenyl)methylamino	isopropyl	{L)-1-hydroxymethy1-2-methy1propylamino
(4-chlorf enyl)methylamino	isopropyl	(D)-1-hydroxymethy1-2-methy1propylamino
(4-chlorfenyl)methylamino	isopropyl	(L)-1-hydroxymethy1-2-methy1propylamino

• ·

(4-chlorfenyljmethylamino	isopropyl	2-hydroxy-2-fenylethylamino
(4-chlorfenyl)methylamino	isopropyl	2-amino-Nl-(2-hydroxyethyl)ethylamino
(4-chlorfeny1)methylamino	isopropyl	2-amino-N2-(2-hydroxyethyl)ethylamino
(4-chlorfenyl)methylamino)	isopropyl	(S)-2-fenyl-1-karboxamidoethylamíno
(4-chlorfenyl)methylamino	isopropyl	2-amino-N2-(2-hydroxyethyl)-Nl-(hydroxyethyl)ethylamino
(4-sulfonamidofenyl)methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino
(4-fluorfenyl)methylamino	2-oxo-3-butyl	diethanolamino
(4-fluorfenyl)methylamino	2-oxo-3-butyl	2-aminoethylamino
(4-chlorfeny1)methylamino	2-oxo-3-butyl	diethanolamino
(4-chlorfenyl)methylamino	2-oxo-3-butyl	2-aminoethylamino
(4-methylfenyl)methylamino	isopropyl	l-hydroxymethyl-2-methyl- propylamino
(3-methylfenyl(methylamino	isopropyl	1-hydroxymethy1-2-methypropylamino
(4-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	2-(N2-dimethylamino)-Nl-benzylethylamino
(4-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	1-karboxamido-2-methylpropylamino
(4-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino
(4-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	3-aminopropy lamino
(4-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	5-aminopentylamino
(4-chlorfeny1)methylamino	isopropyl	2-amino-2-methylethylamino
(4-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	(S)-(+)-1-(hydroxymethy1)propylamino
(4-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	(R)-(-)-1-(hydroxymethyl)propylamino
(4-chlorfenyl)methylamino	isopropyl	(S)-(+)-1-(hydroxymethyl)ethylamino
(4-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	(R)- (-)-1- (hydroxymethyl)-

ethylamino • ·

(4-chlorfenyljmethylamino	isopropyl	(S)-(+)-2-hydroxypropylamino
(4-chlorfenyl)methylamino	isopropyl	(R)-(-)-2-hydroxypropylamino
(4-fluorfenyl)methylamino	isopropyl	2-aminopropylamino
(3-chlorfenyl)methylmino	isopropyl	diethanolamino
(3-chlorfenylJmethylamino	isopropyl	2-aminoethylamino
(2-tri fluormethylfeny1)methylamino	isopropyl	diethanolamino
(2-trifluormethylfenyljmethylamino	isopropyl	2-aminoethylamino
(4-chlor-3-trifluormethylfenyljmethyl- amino	isopropyl	diethanolamino
(4-chlor-3-trifluormethylfenylJmethyl- amino	isopropyl	2-aminoethylamino
(3,5-dichlorfenylJmethylamino	isopropyl	diethanolamino
(3,5-dichlorfenyl)methylamino	isopropyl	2-aminoethanolamino
(2-trifluormethylfenyl)methylamino	isopropyl	2-(N2-dimethylamino)-N1-benzylethylamino
(3-chlorfenyl)methylamino	isopropyl	diethanolamino
(3-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino
(2-trifluormethylfenyl(methylamino	isopropyl	diethanolamino
(2-trifluormethylfenylJmethylamino	isopropyl	2-aminoethylamino
(4-chlor-3-trifluormethylfenyljmethylamino	isopropyl	diethanolamino
(4-chlor-3-trifluormethylfenyl)methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino
(3,5-dichlorfenylJmethylamino	isopropyl	diethanolamino
(3,5-dichlorfenylJmethylamino	isopropyl	2-aminoethylamino
(2-trifluormethylfenylJmethylamino	isopropyl	2 - (N2-dimethylamino)-NI-benzylethylamino
(3-chlorfenylJmethylamino	isopropyl	2-(N2-dimethylamino)-Nl-benzylethylamino
(3,5-dichlorfenylJmethylamino	isopropyl	2-(N2-dimethylamino) -Nl -benzylethylamino
(4-chlor-3-trifluormethylfenyl)methylamino	isopropyl	2-(N2-dimethylamino) -Nl -benzylethylamino
(4-chlorfeny1)methylmino	isopropyl	2-amino-2-methylpropylamino

9

• » · ·« ·»·· «·· ····

- 45'

(4-flurofenyl)methylamino	isopropyl	(S)-(2-tetrahydrofuryl)methylamino
(4-flurofenyl(methylamino	isopropyl	(R)-(2-tetrahydrofuryl)methylamino
(4-methylfenyl)methylamino	isopropyl	diethanolamino
(4-fluorfenyl(methylamino	isopropyl	2-hydroxy-l-methylethylamino
(4-fluorfenyl)methylamino	isopropyl	(S)-2-hydroxy-2-methylethyl- amino
(4-fluorfenyl(methylamino	isopropyl	(R)-2-hydroxy-2-methylethyl- amino
(4-fluorfenyl(methylamino	isopropyl	1-hydroxymethylpropylamino
(4-fluorfenyl(methylamino	isopropyl	2-amino-2-methylpropylamino

RjX	r₂	^R3	MS (MH+)
(4-methylfenyl(methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino	340
(2,4-dichlorfeny1)methylamino	isopropyl	diethanolamino	439
(2,4-dichlorfenyl(methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino	394
(3-methylfenyl(methylamino	isopropyl	diethanolamino	385
(3-methylfenyl)methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino	340
(3-methylfenyl(methylamino	isopropyl	2-(N2-dimethylamino)-Nl-benzylethylámino	458
(4-trifluormethylfenyl(methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino	394
(4-trifluormethylfenyl)methylamino	isopropyl	1 -hydroxymethy 1-2 -methylpropylamino 437
(3,5-bistrifluormethylfeny1)-	isopropyl	diethanolamino	507
methylamino
(3,5-bistrifluormethylfenyl)-	isopropyl	2-aminoethylamino	462
methylamino
(3,5-bistrifluormethylfenyl)-	isopropyl	1-hydroxymethy1-2-methylpropylamino 505
methylamino
(3-chlorfenyl)methylamino	isopropyl	1-hydroxymethylethylamino	375
(2-trifluormethylfenylJmethylamino	isopropyl	1-hydroxymethylethylamino	409
(4-chlor-3-trifluormethylfenyl)-	isopropyl	1-hydroxymethylethylamino	443

methylamino /1 zr · * — 46·η» ···· ··· ····

(3-chlorfenyl)methylamino	isopropyl	2-hydroxyethylamino	361
(2-trifluormethylfenyl)methylamino	isopropyl	2-hydroxyethylamino	395
(4-chlor-3-trifluromethylfenyl)-	isopropyl	2-hydroxyethylamino	429
methylamino {3-chlorfenyl)methylamino	isopropyl	(IR,2 S)-2-hydroxy-1-methy1-2-	451
(2-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	fenylethylamino diethanolamino	450
(2,5-difluorfenyl)methylamino	isopropyl	diethanolamino	407
(1-naftyl)methylamino	isopropyl	diethanolamino	421
(2-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino	360
(2,5-difluorfeny1)methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino	362
(1-naftyl(methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino	376
(2-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	l-hydroxymethyl-2-methylethylamino	403
(2,5-difluorfenyl)methylamino	isopropyl	l-hydroxymethyl-2-methylethylamino	405
(1-naftyl(methylamino	isopropyl	l-hydroxymethyl-2-methylethylamino	419
(3-methylfenyl(methylamino	isopropyl	2-aminopropylamino	354
(2-chlorfenyl(methylamino	isopropyl	2-aminopropylamino	374
(3-chlorfenyl)methylamino	isopropyl	2-aminopropylamino	374
(2,5-difluorf enyl (methylamino	isopropyl	2-aminopropylamino	376
(1-naftyl(methylamino	isopropyl	2-aminopropylamino	390
(2-chlor-5-trifluromethylfenyl)-	isopropyl	diethanolamino	473
methylamino (3-chlorfenyl)methylamino	isopropyl	l-hydroxymethyl-2-methylpropylamino 403
(2-trifluormethylfenyl(methylamino	isopropyl	l-hydroxymethyl-2-methylpropylamino 437

Příklad 3

V tomto příkladu je popsán způsob výroby sloučenin podle vynálezu. Způsob syntézy popsaný v tomto příkladu je pouze mírně modifikovaným způsobem, jaký je popsán v příkladu 1.

• ·

I NaH

R_a-sloučenina

β 8

Výše znázorněným způsobem se připraví následující sloučenina.

Příprava 2,6-dichlor-9-isopropylpurinu (4)

K roztoku 0,67 g 2,6-dichlorpurinu v 5 ml suchého dimethylformamidu se při teplotě místnosti přidá 0,16 g (1,1 ekv.) suspenze 50% hydridu sodného v oleji. Po odeznění vývoje vodíku se k aniontovému roztoku přidá isopropyljodid ve velkém přebytku (2 ml). Reakční roztok se 3 dny míchá při teplotě okolí a poté rozloží 30 ml vody. Vodná směs se extrahuje ethylacetátem (3 x 50 ml). Organické extrakty se spojí a znovu promyjí 3 x 50 ml vody a poté 20 ml vodného roztoku chloridu sodného. Ethylacetátový roztok se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a odpaří. Sloučenina se podrobí mžikové chromatografii na silikagelu na použití variabilního gradientu hexan/ethylacetát. Získá se 0,37 g požadovaného N-9 produtu (45 %) a 0,08 g N-7 isomerů (10 %).

Příprava 2-chlor-6-anilino-9-isopropylpurinu (5)

2,6-Dichlor-9-isopropylpurin (0,019 g, 0,081 mmol) se rozpustí v butanolu (0,5 ml) a k butanolickému roztoku se ·» ·· ··.

ι 4 ♦ ♦ ♦ « • ·

- 48*’přidá anilin (0,044 ml, 0,244 mmol). Reakční směs se 10 hodin zahřívá na 120°C, ochladí a zředí ethylacetátem. Ethylacetátová směs se promyje 3 x vodou, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje na špinavě bílou pevnou látku.

Příprava 2-diethanolamino-6-(4-fenylanilino)-9-isopropylpurinu (6)

Roztok 67 mg 2,6-dichlor-N-9-isopropylpurinu a 100 mg 4-fenylanilinu v 1 ml n-oktanolu se 24 hodin zahřívá na 80°C. n-Oktanol se odstraní za sníženého tlaku a nahradí 1 ml 40% diethanolaminu v dimethylsulfoxidu. Výsledný roztok se 48 hodin zahřívá na 130°C. Reakční směs se ochladí na teplotu okolí a zředí 10 ml vody. Vodná směs se extrahuje ethylacetátem (3 x 30 ml). Organické extrakty se spojí a znovu promyjí 3 x 20 ml vody a poté 10 ml vodného roztoku chloridu sodného. Ethylacetátový roztok se vysuší bezvodým síranem hořečnatým, přefiltruje a z filtrátu se odpaří rozpouštědlo. 65 mg surového produktu se nechá vykrystalovat z roztoku tetrahydrofuranu a etheru. Získá se 28 mg čistého produktu (23 %).

V tabulce 3 jsou identifikovány sloučeniny podle vynálezu, které se připraví za použití obecného způsobu syntézy, který je popsán v tomto příkladu.

Tabulka 3

Sloučeniny připravené způsobem podle příkladu 3

R-jý-X	^R2	^R3
8-aminochinolin	isopropyl	Cl
6-aminochinolin	isopropyl	Cl
3-aminochinolin	isopropyl	Cl

φ φ » · » · φφφ — 49*·*·* *·*·

anilino	isopropyl	Cl
3,5-dinitroanilin	isopropyl	Cl
4-butylanilin	isopropyl	Cl
8-aminochinolin	isopropyl	diethanolamin
6-aminochinolin	isopropyl	diethanolamin
3-aminochinolin	isopropyl	diethanolamin
anilin	isopropyl	diethanolamin
3,5-dinitroanilin	isopropyl	diethanolamin
4-butylanilin	isopropyl	diethanolamin
2-amino-6-ethoxybenzo-	isopropyl	Cl
thiazol
4-(2-aminomethyl)morfolin	isopropyl	Cl
4-(1-aminomethyl)benzen-	isopropyl	Cl
sulfonamid
4-bromanilin	isopropyl	diethanolamin
3,4-dichloranilin	isopropyl	diethanolamin
2-(2-aminoethyl)-1-	isopropyl	diethanolamin
methylpyrrolidin
3-bromanilin	isopropyl	Cl
4-anisidin	isopropyl	diethanolamin
4-jodanilin	isopropyl	Cl
3-jodanilin	isopropyl	Cl
m-anisidin	isopropyl	Cl
1-(2-aminoethyl)piperidin	isopropyl	diethanolamin
l-(2-aminoethyl)pyrrolidin	isopropyl	diethanolamin
1-aminoindan	isopropyl	diethanolamin
2-amino-6-ethoxybenzo-	isopropyl	diethanolamin
thiazol
4-(2-aminoethylJmorfolin	isopropyl	diethanolamin
4-(1-aminomethyl)benzen-	isopropyl	diethanolamin
sulfonamid
4-bromanilin	isopropyl	diethanolamin
3,4-dichloranilin	isopropyl	diethanolamin
2-(2-aminoethyl)-1-	isopropyl	diethanolamin
-methylpyrrolidin

3-bromanilin	isopropyl	diethanolamin
4-anisidin	isopropyl	diethanolamin
4-jodanilin	isopropyl	diethanolamin
3-jodanilin	isopropyl	diethanolamin
m-anisidin	isopropyl	diethanolamin
l-( 2-aminoethyl.) piper idin	isopropyl	diethanolamin
1-(2-aminoethyl)pyrrolidin	isopropyl	diethanolamin
1-aminoindan	isopropyl	diethanolamin
3-jodanilin	isopropyl	diethanolamin
3-jodanilin	isopropyl	diethanolamin
3-fenoxyanilin	isopropyl	diethanolamin
4-jodanilin	isopropyl	diethanolamin
4-fenoxyanilin	isopropyl	diethanolamin
3-fenoxyanilin	isopropyl	diethanolamin
4-jodanilin	isopropyl	diethanolamin
2-fluorfenylamino	isopropyl	diethanolamin
1-fluorenylamino	isopropyl	diethanolamin
2-anthracenylamino	isopropyl	diethanolamin
1-anthracenylamino	isopropyl	diethanolamin
2-(6-ethoxybenzothiazol)-	isopropyl	diethanolamin
amino
2-fenylbenzylamino	isopropyl	diethanolamin
4-fenylbenzylamino	isopropyl	diethanolamin
2-naftylmethylamino	isopropyl	diethanolamin
1-naftylmethylamino	isopropyl	diethanolamin
Pří	klad 4

• · · *

- sici

NaH

R^-sloučenina

R„-sloučenina,

A? N-methy lpynolidino a nebo kopulace

Výše znázorněným postupem se připraví následující sloučenina.

Příprava 2,6-dichlor-9-isopropylpurinu (4)

2,6-Dichlorpurin (5,00 g, 26,46 mmol) se při teplo tě místnosti suspenduje v 55 ml suchého dimethylformamidu. Ke vzniklé suspenzi se po částech přidá hydrid sodný (60% disperze, 1,27 g, 31,75 mmol). Vzniklá směs se 1 hodinu míchá a přidá se k ní 2-jodpropan (4,5 ml, 44,98 mmol). Reakční směs se 2 dny míchá a poté nalije do diethyletheru. Výsledná směs se promyje jednou nasyceným roztokem hydrogen uhličitanu sodného a jednou vodou, vysuší bezvodým síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití 10% acetonu v dichlor• ·

- 52··methanu, jako elučního činidla. Získá se požadovaný N-9 alkylovaný produkt ve formě bílé pevné látky (výtěžek 47 %).

Příprava 2-chlor-6-(4-methylmerkapto)anilino-9-isopropylpurinu (5A)

2,6-Dichlor-9-isopropylpurin (0,15 g, 0,649 mmol) se rozpustí v n-butanolu (4 ml). Ke vzniklému roztoku se přidá (4-methylmerkapto)anilin (0,089 ml, 0,714 mmol) a triethylamin (0,20 ml, 1,43 mmol). Reakční směs se přes noc zahřívá na 80°C, poté ochladí a zředí ethylacetátem. Ethylacetátová směs se promyje 1 χ 1M kyselinou chlorovodíkovou, x nasyceným hydrogenuhličitanem sodným a 1 x vodným chloridem sodným, vysuší bezvodým síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití 2% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se požadovaný produkt ve formě bílé pevné látky (výtěžek 83 %)

Příprava 2-diethanolamino-6-(4-methylmerkapto)ani1ino-9-isopropylpurinu (6A)

Purin (0,18 g, 539 mmol) se rozpustí v N-methylpyrrolidinonu (3 ml) a diethanolaminu (1 ml). Reakční směs se přes noc zahřívá na 120°C, ochladí a nalije do diethyletheru. Diethyletherová směs se promyje třikrát vodou, vysuší bezvodým síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití 5% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se požadovaný produkt ve formě špinavě bílé pevné látky (výtěžek 82 %).

¹H NMR (CDC1₃): δ 8,08 (s, 1H), 7,58 (d, 2H), 7,47 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 4,95 (brs, <2H), 4,52 (m, 1H), 3,94 (m, 4H), 3,83 (m, 4H), 2,43 (s, 3H), 1,47 (d, 6H) • ·

♦ ♦ • 9 • · · « * ♦ «··«···» w - - - - - - 53 Příprava 4-(2-thienyl)benzonitrilu

Před reakcí s 2,6-dichlor-9-isopropylpurinem je nutno syntetizovat některé skupiny Rj' . Tyto skupiny lze syntetizovat za použití různých kopulačních metod a jiných syntetických postupů, které jsou známy odborníkům v oboru syntézy organických sloučenin.

Do tlakové trubky se předloží 4-brombenzonitril (0,20 g, 1,10 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) (0,127 g, 0,1 ekv.) a 2-thiofenboronová kyselina (0,211 g, 1,65 mmol). V reakční trubce se za sníženého tlaku třikrát vymění atmosféra pomocí suchého dusíku a poté se do ní přidá dimethylether ethylenglykolu (5,5 ml) a vodný roztok uhličitanu sodného (2,53 ml, 1M). Trubka se uzavře a přes noc zahřívá na 80°C. Chladná reakční směs se zředí diethyletherem, promyje dvakrát vodou, vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití 10% ethylacetátu v hexanu, jako elučního činidla. Získá se požadovaný produkt ve formě bílé pevné látky (výtěžek 84 %)

Příprava 4-(2-thienyl)benzylaminu

4-(2-thienylJbenzonitril (0,086 g, 0,464 mmol) se rozpustí v suchém tetrahydrofuranu (1,6 ml). Ke vzniklému roztoku se přikape lithiumaluminiumhydrid (0,46 ml, 0,464 mmol, 1M v tetrahydrofuranu). Reakční směs se přes noc míchá při teplotě místnosti. Chromatografie na tenké vrstvě za použití 5% methanolu v dichlormethanu ukáže, že ve směsi zůstává přítomna výchozí látka. K reakční směsi se přidá další 1 ekvivalent lithiumaluminiumhydridu. Po 1 hodině se reakční směs rozloží metodou Fieser & Fieser tak, že se k reakční směsi postupně přidá voda (17,46 μΐ), vodný roztok hydroxidu sodného (17,46 μΐ, 15% roztok) a voda (52,37 μΐ).

54’

Poté se reakční směs zředí diethyletherem a vodou a vzniklá směs se extrahuje dvakrát diethyletherem, vysuší síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se ponechá v surovém stavu a dále se nečistí. Výtěžek = 89 %

V tabulce 4 jsou identifikovány sloučeniny podle vynálezu připravené za použití obecného postupu syntézy popsaného v tomto příkladu.

Tabulka 4

Sloučeniny připravené postupem podle příkladu 4

R_T '-X	^R2	^R3
Cl	Me	Cl
ethanolamino	Me	ethanolamino
cyklopropylmethylamino	isopropyl	Cl
cyklopropylmethylamino	isopropyl	diethanolamino
3,5-dinitroanilino	isopropyl	Cl
3-fenoxyanilino	isopropyl	Cl
4-jodanilino	isopropyl	Cl
3-aminochinolino	isopropyl	Cl
3,5-dinitroanilino	isopropyl	diethanolamino
Cl	epoxymethyl	Cl
4-methoxybenzylamino	2,3-dihydroxy- propyl	diethanolamino
4-fenylanilino	isopropyl	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	isopropyl	Cl
2-naftalenylmethylamino	isopropyl	Cl
1-naftalenylmethylamino	isopropyl	Cl
2-fenylbenzylamino	isopropyl	Cl
3-chinolylamino	isopropyl	diethanolamino
5-chinolylamino	isopropyl	diethanolamino
6-chinolylamino	isopropyl	diethanolamino
8-chinolylamino	isopropyl	diethanolamino

fc ·

n-butylamino	isopropyl	Cl
4-(2-thiofenyl)benzylamino	isopropyl	diethanolamino
4-(2-thiofenyl)benzylamino	isopropyl	Cl
3-thiomethoxyani1ino	isopropyl	Cl
4-thiomethoxyanilino	isopropyl	Cl
3-thiomethoxyanilino	isopropyl	diethanolamino
4-thiomethoxyani1ino	isopropyl	diethanolamino
4-(2-pyridyl)benzylamino	isopropyl	Cl
3-methoxybenzylamino	isopropyl	Cl
3,4-dimethoxybenzylamino	isopropyl	Cl
3,4,5-trimethoxybenzyl-	isopropyl	Cl
amino
3-methoxybenzylamino	isopropyl	diethanolamino
3,4-dimethoxybenzylamino	isopropyl	diethanolamino
3,4,5-trimethoxybenzyl-	isopropyl	diethanolamino
amino
4-(3-thiofenyl)benzylamino	isopropyl	Cl
4-(4-methoxyfenyl)benzyl-	isopropyl	Cl
amino
4-(4-bromfenyl)benzylamino	isopropyl	diethanolamino
4-(3-methoxyfenyl)benzyl-	isopropyl	diethanolamino
amino
4-(4-methoxyfenyl)benzyl-	isopropyl	diethanolamino
amino
4-(3-thiofenyl)benzylamino	isopropyl	diethanolamino
4-(3-methylfenyl)benzyl-	isopropyl	Cl
amino
4-(4-methylfenyl)benzyl-	isopropyl	Cl
amino
4-(4-trifluormethylfenyl)-	isopropyl	Cl
benzylamino
3-(4-nitrilofenyl)anilino	isopropyl	Cl
3-(4-nitrolofenyl)anilino	isopropyl	diethanolamino
4-(2-pyridyl)benzylamino	isopropyl	Cl
4-(2-pyridyl)benzylamino	isopropyl	diethanolamino

• 4 44 • · *

Příklad 5

V tomto příkladu je popsán způsob výroby sloučenin podle vynálezu. Způsob syntézy popsaný v tomto příkladu je pouze mírně modifikovaným způsobem, jaký je popsán v

Výše znázorněným postupem se připraví následující sloučenina.

Příprava 2-amino-6-chlor-9-methylpurinu (7)

2-Amino-6-chlorpurin (1,08 g, 6,4 mmol) se suspenduje v suchém dimethylformamidu (75 ml). Vzniklá suspenze se smísí s hydridem sodným (60% disperze, 0,28 g, 7 mmol). Výsledná suspenze se 15 minut míchá a přidá se k ní jodmethan (0,44 ml, 7,06 mmol). Žlutý reakční roztok se míchá 1,75 hodiny, načež se z něj odfiltruje pevná látka. Filtrát se odpaří a ke zbytku se během 10 minut přidá voda. Vzniklá pevná látka se odfiltruje a suší přes noc. Získá se produkt ve formě směsi N-7 a N-9 alkylovaných produktů. Matečný louh se nechá přes noc stát a následující den se shromáždí další krystaly, které se vysuší. Výtěžek 77 %.

» 4 4 · ♦ ♦· ♦ ··

- 57** ·· ·« • 4 4 · • ·

44*· *44*

Příprava 6-chlor-2-(2-methoxyacetylamino)-9-methylpurinu (8)

Směs isomerů z předchozího stupně se rozpustí v dichlormethanu a pyridinu (2 ekv.). Vzniklý roztok se smísí s methoxyacetylchloridem (4 ekv.). Reakční směs míchá při teplotě místnosti, dokud reakce není úplná a poté odpaří. Zbytek se nechá projít přes vrstvu silikagelu za použití 2% methanolu v dichlormethanu a poté přečistí na chromatotronu za použití silikagelu a 2% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla, čímž se izoluje požadovaný produkt.

Výtěžek 31 %.

V tabulce 5 jsou identifikovány sloučeniny podle vynálezu, které se připraví za použití postupu popsaného výše v tomto příkladu.

Tabulka 5

Sloučeniny připravené způsobem podle příkladu 5 ^R1 ^r2 ^r3

Cl Me H

Cl Me 2-methoxyacetylamino

Příklad 6

• · •·*· ··<

·· ·· « » · · · · » · · ·

Ct

>

Výše znázorněným postupem se připraví následující sloučenina.

Příprava 2-chlor-6-(4-fenylbenzylamino)purinu (9)

2,6-Dichlorpurin (5,0 g, 26,45 mmol) se suspenduje v n-butanolu (50 ml) a ke vzniklé suspenzi se přidá 4-fenylbenzylamin (6,61 g, 29,1 mmol) a triethylamin (4,1 ml, 29,1 mmol). Reakční roztok se přes noc zahřívá na 120°C, ochladí a za použití přebytku n-butanolu se odfiltruje produkt. Sraženina se promyje 100 ml 1M kyseliny chlorovodíkové a 200 ml vody. Pevná látka se vysuší za vakua při 70°C, čímž se získá požadovaný produkt ve formě světle žluté pevné látky. Výtěžek = 99 %.

Příprava 2-diethanolamino-6-(4-fenylbenzylamino)purinu (10)

2-Chlor-6-(4-fenylbenzylamino)purin (2,0 g, 5,96 mmol) se smísí s diethanolaminem (11,4 ml, 119,2 mmol) a N-methylpyrrolidinonem (10 ml). Reakční směs se přes noc zahřívá na 120°C, ochladí a nalije do dichlormethanu. Dichlormethanová směs se promyje dvakrát vodou. Organická ·· • · « • · · «·· ··· «· »*

- 59 vrstva se vysuší bezvodým síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Takto získaný požadovaný produkt ve formě světle zelené pevné látky se dále 2 dny suší ve vakuové sušárně při 70°C.

Příprava 2-diethanolamino-6-(4-fenylbenzylamino)-9-methylpurinu (11)

2-Diethanolamino-6-(4-fenylbenzylamino)purin (0,050 g, 0,124 mmol) se rozpustí v suchém dimethylformamidu.

Vzniklý roztok se smísí s hydridem sodným (60% disperze, 5,5 mg, 0,136 mmol) a během 1 hodiny se přidá jodmethan (0,009 ml, 0,148 mmol). Výsledný roztok se míchá přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs se nalije do diethyletheru a diethyletherová směs se promyje dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší bezvodým síranem sodným a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se chromátografuje na silikagelu za použití 5% methanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla, čímž se získá produkt ve formě bílé pevné látky (výtěžek 63 %).

¹H NMR (CDC1₃): δ 7,55 (m, 4H), 7,41 (m, 4H), 7,35 (m, 4H), 6,41 (brs, <1H), 5,10 (brs, <2H), 4,72 (brs, 2H), 3,86 (m,

4H), 3,74 (m, 4H), 3,59 (s, 3H)

V tabulce 6 jsou identifikovány sloučeniny podle vynálezu, které se připraví za použití postupu popsaného výše v tomto příkladu.

» 4

- 60* ·♦· fc· • · · • fc

Tabulka 6

Sloučeniny připravené způsoben podle příkladu 6

Rj '-X	^R2	^R3
4-fenylbenzylamino	methyl	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	cyklopentyl	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	allyl	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	benzyl	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	3-methylbuty1	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	isobutyl	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	terč.butylacetát	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	methylacetát	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	cyklobutyí	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	ethyl	diethanolamino
4-fenylbenzylamino	propyl	diethanolamino

Příklad 7

Sloučeniny podle vynálezu se hodnotí za použití následujících zkoušek.

Zkouška CDK2

Sloučeniny podle vynálezu se zkoušejí za účelem stanovení jejich CDK2 inhibiční aktivity. Zkouškový systém (celkový objem 50 μΐ) obsahuje 50mM Tris-Cl, pH 7,4, lOmM chlorid hořečnatý, 5mM DTT, 1 μ9 histonu H1, 30μΜ ATP (1 μθΐ gamma³²P značený ATP), 10 μg BSA a 1 ng purifikované CDK2. Po 30minutové inkubaci při 30°C se reakce ukončí přídavkem 10 μΐ 10% TCA a vzorky se blotují na nitrocelulosové filtry.

Tyto filtry se důkladně promyjí v 10% TCA a zkoušejí na radioaktivitu. Slepé pokusy zahrnují žádný enzym. Za účelem zjištění účinnosti různých sloučenin podle vynálezu • ·

- 61 se tyto sloučeniny přidají k výše uvedenému zkouškovému systému v koncentracích od 100 do 0,02 μ9/πι1. Po 30minutové inkubaci se obsah zkumavek podrobí výše popsanému postupu. Při všech zkouškách se přidávají různé koncentrace olomoucinu, který slouží jako standardní pozitivní kontrola. Hodnoty IC₅₀ - enzym, uvedené v tabulce 7 jsou definovány jako koncentrace ^g/ml) potřebná pro 50% inhibici aktivity CDK2.

Příklad 8

Zkouška s proliferací buněk

Časnou pasáží buněk hladkého svalu aorty potkana (od CV Therapeutics Cell) se zaočkují 48-jamkové misky (Falcon, ml/jamka) v hustotě 20 000 buněk/ml DME obsahujícího 5% teplotně inaktivované hovězí sérum. Buňky se 48 hodin inkubují ve standardním inkubátoru pro inkubaci tkání.

Médium se odsaje a jamky se doplní 0,2 ml čerstvého média. Sloučeniny podle tohoto vynálezu se přidávají v koncentrací od 100 do 0,37 μ9^1. Po 48-hodinové inkubaci se médium odsaje a kultury se ošetří 0,2 ml solného roztoku s obsahem 0,25 μΐ roztoku methosulfátu fenozinu s obsahem MTS (Cell Titer 96Aqueous Non-radioactive Cell Proliferation Assay Kit, katalogové číslo G 5430, Promega, 2800, Woods Hollow Road, Madison, WI 53711-5399, USA). Hodnoty IC₅₀ - buňky, uvedené v tabulce 8 jsou definovány jako koncentrace ^g/ml) potřebné pro 50% inhibici proliferace buněk. Přidávaný olomoucin v různých koncentracích slouží jako standardní pozitivní kontrola.

• · ·

Tabulka 7

Biologická účinnost vybraných sloučenin podle vynálezu

Rý-X	r₂	^R3	ko- enzym	^IC50- buňky
benzylamíno	Me	ethanolamino	7	70
4-methoxybenzylamino	H	Cl	60	N
4-methoxybenzylamino	Me	Cl	6	>70
4-methoxybenzylamino	Me	ethanolamino	4	43
4-chlorbenzyloxy	H	Cl	60	N
4-chlorbenzyloxy	Me	Cl	60	N
4-chlorbenzyloxy	trifluormethyl	Cl	>60	N
4-methoxybenzylamino	isopropyl	Cl	4	77
4-methoxybenzylamíno	isopropyl	ethanolamino	4	43
4-methoxybenzylamino	Me	diethanolamino	4	48
4-methoxybenzylamino	2-methylpropyl	Cl	60	>70
ethanolamino	Me	ethanolamino	>60	>70
4-methoxybenzylamino	trifluormethyl	Cl	>60	>70
4-methoxybenzylamino	benzyl	Cl	>60	>70
ethanolamino	H	benzylamino	>60	N
4-methoxybenzylamino	isopropyl	diethanolamino	0,2	2,1
4-methoxybenzylamino	perfluorisopropyl Cl	>45	N
4-methoxybenzylamino	perfluorisopropyl diethanolamino	40	N
4-methoxybenzylamino	isopropyl	3-pyrrolin	1	12,5
4-methoxybenzylamino	hydroxyethyl	diethanolamino	0,5	62
4-methoxybenzylamino	isopropyl	serinol	0,4	15
4-methoxybenzylamino	isopropyl	l,3-diamino-2- -hydroxypropan	0,6	25
4-methoxybenzylamino	3-kyanopropyl	Cl	>60	N
4-methoxybenzylamino	3-chlorpropyl	Cl	>60	N
4-methoxybenzylamino	benzyl	Cl	>60	N
4-methoxybenzylamino	methyl-4- -karboxybenzyl	Cl	>60	N

	·· ··• :· : • · · • · ·*·· ···· - 63 -	: .·. • · ·······
4-methoxybenzylamino	naftaloylethyl	Cl	>60	N
4-chlorbenzylamino	trifluormethyl	Cl	1	N
4-methoxybenzylamíno	isopropyl	N-(2-kyanopropyl)-N-(3-pyridylmethyl)- amino	1	N
4-methoxybenzylamino	isopropyl	2-(hydroxymethyl)-3-methylbutan-2- amino	1	N
4-methoxybenzylamino	isopropyl	3-hydroxypiperidino	1	N
cyklohexylmethylamino	isopropyl	Cl	1	N
piperonylamino	isopropyl	diethanolamino	0,8	N
4-methoxybenzylamino	isoproyl	diisopropanolamino	0,8	N
anilino	isopropyl	Cl	1	N
4-methoxybenzylamino	isopropyl	N-benzyl-N-2-hydroxy- ethylamino	1	N
4-fenylanilino	isopropyl	diethanolamino	0,6	N
4-fenylbenzylamino	isopropyl	diethanolamino	0,6	N
4-fenylbenzylamino	isoproyl	3-amino-l,2-propan- diol	0,6	N
4-(2-thiofenyl)benzyl- amino	isopropyl	diethanolamino	0,5	N
4-(4-methylfenyl)ben- zylamino	isopropyl	diethanolamino	0,6	N
4-(4-trifluormethylfenyl)benzylamino	isopropyl	diethanolamino	0,6	N
4-thiomethoxyanilino	isopropyl	Cl	0,6	N
3-(4-nitrilofenyl)- anilino	isopropyl	diethanolamino	0,5	N
3-thiomethoxyanilino	isopropyl	diethanolamino	0,1	N
4-thiomethoxyanilino	isopropyl	diethanolamino	0,07	N
3-methoxybenzylamino	isopropyl	Cl	0,9	N
4-(2-pyridyl)benzyl- amino	isopropyl	diethanolamino	0,16	N
3-methoxybenzylamino	isopropyl	diethanolamino	0,5	N

• ·

R_pX R2	^R3	ko- enzym	Sy
(4-chlorfenyl(methyl- isopropyl	diethanolamino	0,12	0,3
amino
(4-fluorfenyljmethyl- isopropyl	diethanolamino	0,15	2,2

amino (4-trifluormethylfe-

nyl)methylamino	isobutyl	diethanolamino	59	N
(4-trifluormethylfenyl(methylamino	isopropyl	diethanolamino	0,56	N
(4-chlorfenyl(methyl-		(S)-2-amino-3-fenyl-
amino	isopropyl	propylamino	1,07	N
(4-fluorfenyl(methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino	0,17	1,4
(4-fluorfenyl)methyl-		(D)-l-hydroxymethyl-
amino	isopropyl	-2-methylpropylamino	0,06	2,7
(4-fluorfenyl(methyl-		(L)-l-hydroxymethyl-
amino	isopropyl	-2-methylpropylamino	0,19	N
(4-chlorfenyl)methyl-		(D)-l-hydroxymethyl-
amino	isopropyl	-2-methylpropylamino	0,19	N
(4-chlorfenyl)methyl-		(L)-1-hydroxymethy1-
amino	isopropyl	-2-methylpropylamino	0,05	N
(4-chlorfenyl)methyl-		2-hydroxy-2-fenyl-
amino	isopropyl	ethylamino	0,08	>5
(4-chlorfenyl(methyl-		2-amino-Nl-(2-hydroxy-
amino	isopropyl	ethyl (ethylamino	0,07	0,2
(4-chlorfenyl(methyl-		2-amino-N2-(2-hydroxy-
amino	isopropyl	ethyl (ethylamino	2,02	N
(4-chlorfenyl)methyl-		(S)-2-fenyl-l-karbox-
amino	isopropyl	amidoethylamino	1,07	N
(4-chlorfenyl)methyl-		2-amino-N2-(2-hydroxy-
amino	isopropyl	ethyl)-Nl-(hydroxyethyl)ethylamino	0,43	N

• · • ·

	“ 65 — ···· ····	• · • · · · ·
(4-sulfonamidofenyl)- isopropyl	2-aminoethylamino	9	N
methylanino
(4-fluorfenylJmethyl- 2-oxo-3-butyl	diethanolamino	11	N
amino
(4-chlorfenylJmethyl- 2-oxo-3-butyl	diethanolamino	37	N
amino
(4-chlorfenylJmethyl- isopropyl	2-aminoethylamino	0,35	0,1
amino
(4-chlorfenylJmethyl- isopropyl	3-aminopropylamino	1,0	N
amino
(4-chlorfenyl)methyl- isopropyl	5-aminopentylamino	31	N
amino
(4-chlorfenylJmethyl- isopropyl	2-amino-2-methyl-	0,05	0,1
amino	ethylamino
(4-chlorfenylJmethyl- isopropyl	(S)-(+)-l-(hydroxy-	0,17	N
amino	methyljpropylamino
(4-chlorfenyl)methyl- isopropyl	(R)-(-J-l-(hydroxy-	0,18	N
amino	methyljpropylamino
(4-chlorfenylJmethyl- isopropyl	(S)-(+)-l-(hydroxy-	0,26	N
amino	methyljethylamino
(4-chlorfenylJmethyl- isopropyl	(R)-(-J-l-(hydroxy-	0,35	N
amino	methyl)ethylamino
(4-chlorfenyl)methyl- isopropyl	(S)-(+)-2-hydroxy-	0,38	N
amino	propylamino
(4-chlorfenylJmethyl- isopropyl	(R)-(-)-2-hydroxy-	0,43	N
amino	propylamino
(4-fluorfenyljmethyl- isopropyl	2-aminopropylamino	0,48	N
amino
(4-fluorfenylJmethyl- isopropyl	(S)-(2-tetrahydro-	0,63	N
amino	furyl)methylamino
(4-fluorfenylJmethyl- isopropyl	(R)-(2-tetrahydro-	0,58	N
amino	furyljmethylamino
(4-fluorfenyljmethyl- isopropyl	2-hydroxy-l-methyl-	0,18	N
amino	ethylamino

	- 66 - ··*
(4-fluorfenyl)methyl- isopropyl	(S)-2-hydroxy-2-	0,22	N
amino	methylethylamino
(4-fluorfenyl)methyl- isopropyl	(R)-2-hydroxy-2-	0,23	>5
amino	methylethylamino
(4-fluorfenyl)methyl- isopropyl	1-hydroxymethyl-	0,11	2,4
amino	propylamino
Inhibiční vlastnosti sloučenin podle vynálezu
proliferaci buněk jsou	demonstrovány	jej ich	schopností

inhibovat buněčnou proliferaci při koncentraci asi 0,05 do 100 μ9/ιη1, přednostně méně než 0,5 v rozmezí od μ9/ιη1.

Provede se podobná zkouška za použití následujících buněčných linií: P388 - myšího lymfoidního neoplazmu; L1210

- myší lymfocytární leukémie; Caco2 - lidského adenokardinomu kolonu; MCF7 - lidského adenokardinomu prsu; PupVSMC

- neonatální buňky hladkého svalu aorty potkana; Ovcar

- lidského karcinomu vaječníků; Panel - lidského adenokarcinomu slinivky; a HUVEC - lidské buňky endothelia pupečníku. Inhibiční aktivita několika sloučenin podle vynálezu proti jedné nebo většímu počtu těchto buněčných linií je uvedena v následující tabulce 7A.

• ·

Tabulka 7A

RpX	^R2	^R3	P388	L1210	Caco2	MFC7
(4-methoxyfenyl)-	isopropyl	diethanolamino	1,5	2,5	4,5	8,0
methylamino
(4-fenylfenyl)amino isoproyl	diethanolamino	1,0	4,0	0,5	4,0
(4-fenylfenyl)-	isopropyl	diethanolamino	<1,0	1,0	3,5	1,0
methylamino
(4-methoxyfenyl)-	isopropyl	morfolino	>5
methylamino
3-fenoxyfenyl,	isopropyl	diethanolamino	1,5			2,0

3-benzyloxyfenyl

Příklad 9

Účinnost sloučenin podle vynálezu se hodnotí na modelu myší leukémie. Model myší leukémie je standardním modelem používaným pro hodnocení protinádorových činidel. Myším CDF1 se i.p. injekcí aplikují buňky L1210 (1 x 10³ buněk/myš). Po 24 hodinách se myši ošetří různými dávkami (i.p.) sloučeniny 3 z příkladu 1 v solném roztoku. Při zkoušce se použije dávkovacího režimu uvedeného dále v tabulce 8. Sloučenina 3 se myším podává denně nebo obden. Kontrolní myši obdrží solný roztok. Po 7 dnech se dávkování přeruší a monitoruje se doba přežití.

• · φ · · · · · · • · * · ·····

Tabulka 8

Ošetření n Medián doby Ošetření/ přežití (dny) kontrola x 100

kontrolní solný roztok		7	10	(9	až	13)	100
sloučenina 3	0,5 mg/kg bid	7	11	(10	až	15)	110
	1,0 mg/kg bid	7	13	(11	až	13)	130
	2 mg/kg bid 4 mg/kg - dny	7	12	(10	až	14)	120
	1, 3, 5, 7 8 mg/kg - dny	7	13	(10	až	15)	130
	1, 3, 5, 7	7	13	(12	až	16)	130

Výsledky ukazují, že myši, kterým byla podávána sloučenina 3 přežili déle než kontrolní skupina.

Příklad 10

Při této zkoušce se měří účinek akutní místní dodávky sloučeniny 3 z příkladu 1 na snižování tvorby neointimy po balonové angioplastice na modelu potkaní karotidové artérie. Dospělým samcům potkana (10 ve skupině, n = 10) se za použití Fogartyho katétru pro arteriální embolektomii chirurgicky poraní levá společná karotidová artérie. Ihned po poranění se společná karotidová artérie rozpůlí pomocí cévní svorky, čímž se vymezí ošetřený a neošetřený úsek. Poté se do distální poloviny společné karotidy zavede katétr pro dodávku léčiva. Po dodání léčiva se katétr vyjme a nadbytek léčiva se vymyje tak, že se cévní svorka odstraní a před uzavřením artérie se obnoví krevní oběh. Zvířata se před vyjmutím společné karotidové artérie ·

Příprava buněčného lysátu

Monovrstvy (75 cm²) buněk HUVEC se ošetřují LPS (100 ng/ml) po dobu 5 minut. Poté se buněčné médium rychle odstraní a monovrstvy se třikrát promyjí ledově chladným PBS. Vrstva buněk seškrábne do 10 ml PBS a buňky se peletizují centrifugaci (3000 min^-1, 5 min, 4’C). Buněčný lysát se připraví tak, že se buněčné pelety inkubují v 0,2 ml lysačního pufru (20mM HEPES, pH 7,3, 50mM chlorid sodný, lOmM chlorid hořečnatý, lmM EDTA, lmM EGTA, lmM orthovanadičnan sodný, lOmM β-glycerofosfát, lmM fenylmethylsulfonylfluorid, lmM dithiothreitol, 0,5% Nonidet P-40) po dobu 15 minut při 37°C za častého vortexování. Buněčné fragmenty se ze vzorku odstraní centrifugaci (10 000 g, 15 minut, 4“C). Supernatant se předčistí tak, že se k němu přidá suspenze Sepharose 4B v lysačním pufru (100 ml) a vzniklá směs se 1 hodinu při 4°C jemně míchá. Perly Sepharose 4B se odstraní mikrocentrifugací, supernatant se rozdělí na alikvoty a skladuje při 80°C.

Zkouška s IkappaB-alfa kinasou v pevné fázi μg GST-IkappaB-alfa odpovídající plné délce IkappaB-alfa lidského původu (Santa Crus Biotechnology) se 30 minut při teplotě místnosti inkubuje s 20 μΐ 50% suspenze glutation S Sepharose 4B (Pharmacia) v reakčním pufru (20mM HEPES, pH 7,3, 10mM chlorid hořečnatý, 15mM β-glycerofosfát, 0,5mM orthovanadičnan sodný, 0,5mM EGTA). Komplex

GST-IkappaB-perly se promyje třikrát 0,5 ml reakčního pufru, přičemž se vždy resuspenduje a mikrocentrifuguje a přidá se k němu 10 μ9 lysačního proteinu buněk HUVEC ve 100 μΐ reakčního pufru. Vzniklá směs se za mírného míchání inkubuje 1 hodinu při 4°C. Komplex s perlami se poté promyje třikrát reakčním pufrem obsahujícím 0,2M chlorid sodný a jednou reakčním pufrem samotným. Na závěr se komplex s perlami • · • · · to ·······» • · · · « « _ y2. — ········ ······· ·0 *· resuspenduje v 20 μΐ reakčního pufru obsahujícího 5 μθί [gamma-³²P]ATP (>5000 Ci/mmol, New England Nuclear Corp. Boston, MA, USA). Výsledná suspenze se 15 minut inkubuje při teplotě místnosti. Reakce se ukonči přídavkem 10 μΐ SDS-PAGE zkušebního pufru. Směs se 3 minuty vaří a poté rozdělí pomocí SDS-PAGE (10 až 20% gradient, Readygel, BioRad). Po elektroforéze se gel fixuje (50% methanol, 10% kyselina octová) po dobu 15 minut, třikrát promývá po dobu 5 minut, vždy destilovanou vodou a po dobu 15 minut se na něj působí 5% glycerolem. Poté se gel vysuší a exponuje na film pro autoradiografii (X-OMAT XAR-5 Kodak).

Zkouška s kinasou v gelu

Aktivita isozymů IkappaB-alfa se zkouší za použití modifikace dříve publikovaných postupů. Zkoušku je možno stručně popsat takto: Výše popsaným postupem se ve dvojím provedení připraví vzorky komplexu IkappaB s perlami glutathion sepharose 4B a rozdělí se elektroforézou na 12% gelu SDS-PAGE, který byl polymerován za přítomnosti 15 μg/ml GST-IkappaB-alfa. Po elektroforéze se gel dvakrát 30 minut opatrně promývá vždy 50mM Tris-HCl (pH 8,0), 5mM β-merkaptoethanolem, 20% isopropylalkoholem, aby se odstranil SDS. Poté se protein v gelu denaturuje 45minutovou inkubací v 100 ml 50mM Tris-HCl (pH 8,0), 5mM β-merkaptoethanolu a 0,04% Tween 40. Gel se rozřízne na poloviny, aby se oddělily duplikáty vzorků. Jedna polovina se inkubuje v 10 ml reakčního pufru samotného a druhá polovina v 10 ml reakčního pufru s obsahem 10 μg/ml 2-diethanolamino-6-(4-fenylanili- no)-9-isopropylpurinu (sloučenina 6 z příkladu 3) po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Poté se k inkubační směsi přidá 10 μϋί [gamma-³²P]ATP a v inkubaci se pokračuje další hodinu při teplotě místnosti. Gely se podrobí několikanásobnému 15minutovému promytí 100 ml vždy 5% kyseliny trichloroctové

·' ·

obsahující 1% difosforečnan sodný, dokud se radioaktivita 1 ml promývacího roztoku neblíží radioaktivitě pozadí. Poté se gely vysuší a exponují na film pro autoradiografii.

Příprava afinitní matrice Sepharose 6B s aktivovanými epoxyskupinami pro 2-diethanolamino-6-(4-fenylbenzylamino)-9-isopropylpurin

Pro kopulační reakci se zvolí lyofylizovaná Sepharose 6B s aktivovanými epoxyskupinami (Pharmacia LKB, Piscataway, NJ, USA), na základě její schopnosti tvořit etherovou vazbu mezi hydroxyskupinami ligandu a epoxyskupinami na Sepharose. Gel se nechá nabotnat podle pokynů výrobce. 100 mg sloučeniny 6 z příkladu 3 se rozpustí v 1 ml kopulačního roztoku (směs dimethylformamidu a O,1M hydroxidu sodného v objemovém poměru 1,2 : 1) a vzniklý roztok se během 72 hodin při teplotě místnosti za mírného míchání smísí s 0,5 ml nabotnalého gelu o pH 10 až 11. Nadbytek reaktivních skupin se blokuje působením 1M ethanolaminu po dobu 4 hodin při 50°C. Gelová suspenze se nalije do lml kolony s pístem. Pryskyřice se aktivuje třemi střídavými cykly vždy 20 objemů pufru pH 4,0 (0,lM acetát, 0,5M chlorid sodný) a pufru pH 8,0 (0,lM Tris-HCl, 0,5M chlorid sodný) a poté dvaceti objemy reakčního pufru (20mM HEPES, pH 7,3, lOmM chlorid hořečnatý, 15mM β-glycerofosfát, 0,5mM orthovanadičnan sodný, 0,5mM EGTA). Sloupec se uloží při 4’C v reakčním pufru obsahujícím 0,5% azid sodný a před každým použitím regeneruje za použití střídavých cyklů vysokého a nízkého pH, jak je uvedeno výše.

Aktivovaný lysát buněk HUVEC (500 μ9 proteinu v 1 ml reakčního pufru) se nechá postupně pětkrát projít přes matrici CVT-1545 Sepharose a filtrát se dá stranou (nenavázaná látka). Matrice se poté promyje třikrát 1 ml reakčního pufru (promytí 1 až 3), poté třikrát vždy • ·

reakčním pufrem obsahujícím 0,5M chlorid sodný (eluát 1 až 3). Alikvoty (20 μΐ z 1 ml) každého vzorku se zkoušejí na schopnost fosforylovat komplex GST-IkappaB-sepharosové perly a analyzují pomocí SDS-PAGE výše popsaným postupem.

Zkouška s afinitně obohacenou IkappaB-alfa kinasou

Spojené 0,5M NaCl eluáty z afinitní matrice se použijí jako zdroj enzymu pro zkoušku IkappaB-alfa kinasy na filtru. Každá reakční směs obsahuje afinitně obohacenou IkappaB-alfa kinasu (1 μ9 proteinu), 10 ng GST IkappaB-alfa kinasy a 0,5μ<3ί [gamma-³²P]ATP (>5000 Ci/mmol, New England Nuclear Corp. Boston, MA, USA) ve 20 μΐ reakčního pufru. Reakční směs se inkubuje 15 minut při teplotě místnosti, načež se přídavkem 2 μΐ 0,5M EDTA ukončí reakce. Reakční směs se blotuje na fosfocelulosové filtrační kotouče (Gibco, BRL Life Technologies, Gaithesburg, MD, USA). Filtry se za mírného třepání během 15 minut promyjí třikrát 0,15M kyselinou fosforečnou (300 ml 0,15M kyseliny fosforečné se promyje až 10 filtrů). Po třetím promytí se filtry vysuší na vzduchu, přidají do scintilační kapaliny a podrobí kapalinové scintilační spektrometrii.

Elektroforetická zkouška mobility

Za použití extrakčního postupu s koncentrovaným solným pufrem se připraví jaderné extrakty. 10 pmol dvouřetězcového NF-kappaB konvenčního oligonukleotidu (5'-AGTTGAGGGGACTTTCCCAGGC-3', Promega) se na 5' konci označí 5 μθί [gamma-³²P]ATP (>5000 Ci/mmol, New England Nuclear Corp. Boston, MA, USA) inkubací s T4 polynukleotid kinasou po dobu 1 hodiny při 37°C. Nenavázané polynukleotidy se odstraní tak, že se reakční směs nechá projít lml rotující kolonou Sephadex G-5. Vazebná zkouška se provádí po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti za použití 10 μg

• 4 · · • · 4 • « I • * · · ♦ 4 jaderného proteinového extraktu, 1 pg DNA lososího spermatu

Λ O Π a 5 x 10* (cpm) P značeného konvenčního oligonukleotidu za přítomnosti a za nepřítomnosti padesátinásobku neznačeného oligonukleotidu. Komplexy DNA-protein se rozdělí elektroforézou na 8% nedenaturovaném polyakrylamidovém gelu. Gely se vysuší na filtračním papíru a vizualizují autoradiografií.

• · ·

Tabulka 9

Aktivita enzymu za použití vybraných sloučenin podle vynálezu

R-jý-X

R.

R^IC50 enzym

4-fenylbenzylamino	isopropyl	diethanolamino	1,1
4-fenylbenzylamino	isopropyl	diethanolamino	>2,4
4-fenylbenzylamino	isopropyl	ethanolamino	2,5
4-bromanilino	isopropyl	diethanolamino	14
4-(3-methoxyfenyl)-	isopropyl	diethanolamino	>10
benzylamino
4-(4-methoxyfenyl)-	isopropyl	diethanolamino	11
benzylamino
3-(4-nitrilofenyl)-	isopropyl	diethanolamino	2,2
anilino
4-thiomethoxyanilino	isopropyl	diethanolamino	12,4
4-(2-pyridyl(benzal-	isopropyl	diethanolamino	4,5

amino • ·· ·· ·· • · · * · · · * • · · · · · • · fc fcfcfc ··« • · fc ·

R_x-X	^R2	^R3	MRC-5	PupVSMC
(4-methoxyfenyl)-	isopropyl	diethanol-	5	0,4
methylamino		amino
(4-chlorfenyl)-	isopropyl	2-amino-	1	0,1
methylamino		ethylamino
(4-chlorfenyl)-	isopropyl	2-amino-2-	1	0,1
methylamino		methylethyl-
		amino
(4-chlorfenyl)-	isopropyl	2-amino-Nl-	1	0,3
methylamino		-(2-hydroxyethyl)ethylamino
(4-chlorfenyl)-	isopropyl	diethanol-	3	0,3
methylamino		amino

MRC-5 - lidský fibroblast

PupVSMC - neonatální buňky hladkého svalu aorty potkana

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny obecného vzorce I z

Rj představuje halogen nebo skupinu R-jý-X, kde X představuje skupinu NH, 0, S, nebo s(O₂);

R^' představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, cykloalkylskupinu, substituovanou cykloalkylskupinu, cykloheteroalkylskupinu, substituovanou cykloheteroalkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, heterocyklickou skupinu, hetarylskupinu, substituovanou hetarylskupinu, aralkylskupinu, substituovanou aralkylskupinu, heteroaralkylskupinu, heteroalkylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkinylskupinu, alkylcykloalkylskupinu nebo alkylcykloheteroalkylskupinu, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, CF₃, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny,

99 99

9 · · « ·· ♦· ··

9 9 9 9 9 • 9 9 · ·

9 · · 9 · · · · • 9 · ··· ·· 99 ^R22' ^SR20' ^s(°)^R21' ^SO2^R21' ^SO2^NR20^R23' so₂nr₂₀cor₂₁, so₂nr₂₀conr₂₀r₂₃, so₂nr₂₀co₂r₂₁, ^NR20^R23· ^NR20^COR2i, ^NR20^CO2^R21'

N^r20^c°N^R20^R23’ ⁿ(^r20)^C(N^R2O)^NHR23' ^NR20^SO2^R21' ^OR20' ^OCONR20^R23' oconr₂qSo₂r₂₃, oconr₂qR₂₃, cn, co₂r₂q, conr₂qR₂₃,

CONR₂qSO₂R₂₃ a COR₂q,

R.

představuje vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího ze substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, cykloheteroalkylskupiny, substi tuované cykloheteroalkylskupiny, arylskupiny, substituované arylskupiny, heterocyklické skupiny, hetarylskupiny, substituované hetarylskupinu, aral kylskupiny, heteroaralkylskupiny, heteroalkylskupi ny, alkylalkenylskupiny, alkylalkinylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, R₂₂, ^SR20' ^S(°)^R21' ^SO2^R21' ^SO2^NR20^R23' ^s°2^NR20^COR21'

S°2^NR20^CONR20^R23' ^SO2^NR20^CO2^R21' ^NR20^R23' ^NR20^COR21' ^NR20^CO2^R21' ^NR20^CONR20^R23'

N(^R2q)^c(N^R2o)^NHR23' ^NR20^SO2^R21' ^OR20' ^OCONR20^R23' OCONR₂qSO₂R₂₃, OCONR₂qR₂₃, CN, CO₂R₂q, CONR₂qR₂₃, CONR₂qSO₂R₂-^ CO^R2q»

Rpředstavuje halogen, hydroxylovou skupinu, thioskupinu, alkoxyskupinu, alkylthioskupinu, nižší alkylskupinu, skupinu vzorce -NR₄R₅ nebo

kde m představuje číslo 1 až 3, n představuje číslo 1 až 3, o představuje číslo 1 až 3 a

Y představuje karbonylskupinu, skupinu -NR₄R₅, hydroxylovou skupinu, thiolovou skupinu, alkoxyskupinu nebo alkylthiolovou skupinu;

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, heterocyklické skupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, acylskupiny, arylskupiny, substituované arylskupiny, hetarylskupiny, substituované hetarylskupinu, aralkylskupiny, heteroaralkylskupiny, alkylalkenylskupiny, alkylalkinylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, R₂₂, ^SR20' ^S(°)^R21' ^SO2^R21'

S0₂ ^NR2o^R23' ^SO2^NR20^COR21·

SO₂NR2qCONR₂qR23/ so₂nr₂₀co₂r₂₁, ^NR20^R23' ^NR20^COR21' ^NR20^C02^R21' • · *»· + <· ^R20 ^NR20^CONR20^R23' ^N(^R20^^C^^NR20^^NHR23' ^NR20^SO2^R21'

O^R2q , OCONR2q^R23 ¹ OCONR2qSO₂R₂₃_ , OCONR₂qR₂₃ ^z CN, CO₂R₂₀, CON^r20^r23, CONR₂₀SO₂ ^r21 a CO^r20; přičemž když Y představuje karbonylskupinu, Y a R₄ ' mohou dohromady představovat jediný atom kyslíku, R₄ a R₅ mohou dohromady představovat jediný atom kyslíku, R₄''' a R₅''' mohou dohromady představovat jediný atom kyslíku a přičemž když R₃ představuje
2- hydroxyethylaminoskupinu a R₂ představuje methylskupinu, R-jý-X nepředstavuje aminoskupinu,
3- methyl-2-butenylaminoskupinu, benzylaminoskupinu nebo m-hydroxybenzylaminoskupinu, když R₃ nepředstavuje 2-hydroxyethylaminoskupinu, když R₂ představuje isopropylskupinu, R-jý-X nepředstavuje benzylaminoskupinu, m-hydroxybenzylaminoskupinu nebo 3-methylbutylaminoskupinu, když R₃ představuje 2-hydroxyethylaminoskupinu a R₂ představuje 2-hydroxyethylskupinu, R-^'-Χ nepředstavuje benzylaminoskupinu a když R₃ je zvolen ze souboru sestávajícího z 2-methyl-2-hydroxypropylaminoskupiny a 2-dimethylaminoethylaminoskupiny a když R₂představuje methylskupinu, potom R^ý-X nepředstavuje benzylaminoskupinu;

představuje vždy vodík, alkylskupinu s 1 až 15 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 15 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 15 atomy uhlíku, heterocyklylskupinu, arylskupinu a heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, alkenyl-, alkinyl, heterocyklyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, alkyl-, aryl- nebo heteroarylamidové

000 ··· ·· skupiny, skupiny CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, CFg, arylskupiny a heteroarylskupiny ;

R₂₁ představuje vždy alkylskupinu s 1 až 15 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 15 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 15 atomy uhlíku, heterocyklylskupinu, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, alkenyl-, alkinyl-, aryl-, heterocyklyl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, heterocyklylskupiny, arylskupiny, heteroarylskupiny, CF₃, CN, ^OR20' ^SR20' ^N(^R2<p2' ^s(°)^R22' ^SO2^R22' ^SO2^N^^R20^2'

S0₂N^R2oCO^r22, SO₂NR₂₀CO₂R₂₂, SO₂NR₂qCON(R₂₀)₂, ^N(^R20)2^NR20^COR22' ^NR20^CO2^R22' ^NR20^CON(^R20)2' N^R2o^c(^NR2O>^NHR23' ^COR20' ^C02^R20' ^CON(^R20>2' ^CONR20^SO2^R22' ^NR20^S02^R22' ^S02^NR20^C02^R22' ^OR20' OCONR20SO2R22, OC(O)R20, C(O)OCH2OC(O)R20 a OCON(R20)2, přičemž každý z případných heteroarylových, arylových a heterocyklylových substituentů je popřípadě substituován halogenem, alkylskupinou, skupinou CF3, aminoskupinou, mono- nebo dialkylaminoskupinou, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidoVOU skupinou, NCOR22, NR2qSO2R22, COR20, CO2R2q, con(r20)2, nr20con(r20)2, OC(O)R20, OC(O)N(R20)2z SR2oz S(O)R2 2, SO2^R2 2 z SO₂NR(^r2q)₂z CN nebo 0R₂ q z

R₂₂ představuje vždy alkylskupinu s 1 až 15 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 15 atomy uhlíku, alkinylskupinu se 2 až 15 atomy uhlíku, heterocyklylskupinu, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, alkenyl-, alkinyl-, heterocyklyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu,

00 ♦« ♦ 0 0 0 alkylskupiny, mono- a dialkyl- aminoskupiny, alkyl-, aryl- nebo heteroarylamidové skupiny, skupiny CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, CF₃, aryl a heteroarylskupiny; a

R₂₃ představuje R₂₁ nebo vodík.

2. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 1 obecného vzorce I, kde představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, cykloalkylskupinu, substituovanou cykloalkylskupinu, cykloheteroalkylskupinu, substituovanou cykloheteroalkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, heterocyklickou skupinu, hetarylskupinu, substituovanou hetarylskupinu, aralkylskupinu, substituovanou aralkylskupinu, heteroaralkylskupinu, heteroalkylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkinylskupinu, alkylcykloalkylskupinu nebo alkylcykloheteroalkylskupinu, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, CF₃, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, ^R22' ^SR20' ^s(°)^R21' ^s°2^R21' ^SO2^NR20^R o^r2o, CN, co₂r₂₀, CONR₂₀R₂₃ a cor₂₀;

^NR20^R23' ^NR20^R23' , nr₂₀so₂r₂₁, představuje vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího ze substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, arylskupiny, substituované arylskupiny, heterocyklické skupiny, ·· ·· · ·· ·« • ·« · · · · 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9

9 99 9 9 9 999 999

9 9 9 9 9 9

9999 9999 999 9999 99 99 hetarylskupiny, substituované hetarylskupinu, aralkylskupiny, heteroaralkylskupiny, heteroalkylskupiny, alkylalkenylskupiny, alkylalkenylskupiny, alkylalkinylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, 1*22' ^SR20' ^S(°)^R21' ^SO2^R21' ^SO2^NR20^R23' ^NR20^R23' ^NR20^COR21' ^NR20^CO2^R21' ^NR20^CONR20^R23' ^NR20^SO2^R21' ^OR20' ^CN' ^CO2^R20' ^CONR20^R23 ^{a COR}20^;

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, heterocyklické skupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, acylskupiny, arylskupiny, substituované arylskupiny, hetarylskupiny, substituované hetarylskupinu, aralkylskupiny, heteroaralkylskupiny, alkylalkenylskupiny, alkylalkinylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, R₂₂, ^SR20' ^S(°)^R21' ^SO2^R21' ^so2^NR20^R23' ^NR20^R23' ^NR20^COR21' ^NR20^CO2^R21' N^R2o^c°^NR2o^R23' ^NR20^SO2^R21' ^OR20' ^CN' ^CO2^R20' CONR₂0^R23 ^{a COR}20^; ^R20 představuje vždy vodík, alkylskupinu s 1 až 8

44 «4 4 44 44 ·· • 444 44 44 4444 • · 4 44444
4 44 4 44444444

4 4 4 4 4 4

4444 4444 444 4444 44 44 ^R21 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, heterocyklylskupinu se 2 až 15 atomy uhlíku, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, alkenyl-, heterocyklyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, monoa dialkylaminoskupiny, alkyl-, aryl- nebo heteroarylamidové skupiny, skupiny CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, CF₃, arylskupiny a heteroarylskupiny ;

představuje vždy alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, heterocyklylskupinu, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, alkenyl, aryl-, heterocyklyl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, heterocyklylskupiny, arylskupiny, heteroarylskupiny, cf₃, cn, or₂₀, sr₂₀, n(r₂₀)₂, s(o)r₂₂, ^SO2^R22^{z SO}2^N^^R20^2^{z SO}2^NR20^COR22' ^SO2^NR20^CO2^R22' S02N^R2o^cON(^R2o)2' ^N(^R202^NR20^COR22· ^NR20^CO2^R22' NR2qCON(R₂q)₂, ^RR20^CRR20 R^RR23 > COR₂q, CO₂R₂q, con(r₂₀)₂, conr₂₀so₂r₂₂, nr₂₀so₂r₂₂,

SO₂NR₂qCO₂R₂₂, or₂₀, oconr₂₀so₂r₂₂, oc(o)r₂₀,

C(O)OCH₂OC(0)R₂₀ a OCON(R₂₀)₂, přičemž každý z případných heteroarylových, arylových a heterocyklylových substituentů je popřípadě substituován halogenem, alkylskupinou, skupinou CF₃, aminoskupinou, mono- nebo dialkylaminoskupinou, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidovou skupinou, ncor₂₂, nr_2Oso₂r₂₂, cor₂₀, co₂r₂₀, con(r₂₀)₂, nr₂₀con(r₂₀)₂, oc(o)r₂₀, oc(o)n(r₂₀)₂, S^R2 o z S(O)R22, ®®2^R2 2 ^{z S0}2^{NR R}2 0 2 ^z č*N nebo 0R2 θ ;

·· »· • 9 9 9

9 9 9 9

999 999

9 9 999 představuje vždy alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, alkenylskupinu se 2 až 8 atomy uhlíku, heterocyklylskupinu, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, alkenyl-, heterocyklyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkyl- aminoskupiny, alkyl-, aryl- nebo heteroarylamidové skupiny, skupiny CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, CF₃, aryl a heteroarylskupiny.

3. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 1 obecného vzorce I, kde představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, cykloalkylskupinu, substituovanou cykloalkylskupinu, cykloheteroalkylskupinu, substituovanou cykloheteroalkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, heterocyklickou skupinu, hetarylskupinu, substituovanou hetarylskupinu, aralkylskupinu, substituovanou aralkylskupinu, heteroaralkylskupinu, heteroalkylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkinylskupinu, alkylcykloalkylskupinu nebo alkylcykloheteroalkylskupinu, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, CF₃, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny,

20^R23' ^NR20^R23^z ^CO2^R20' ^CONR20^R23 ^{a COR}20^; • · · · · • 4 4 4 4 • 4 ·· ··

4 »·· ·♦· • 4 • 4 44 představuje vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, arylskupiny a substituované arylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 10 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, R₂₂, ^SR20' ^r4 ^{a r}5 ^R4 ^{a R}5 představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, heterocyklické skupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, acylskupiny, arylskupiny, substituované arylskupiny, hetarylskupiny, substituované hetarylskupinu, aralkylskupiny, heteroaralkylskupiny, alkylalkenylskupiny, alkylalkinylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, heteroarylskupiny, heterocyklylskupiny, R₂₂, ^SR20' ^s(°)^R2i' ^SO2^R21' představuje vždy vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, alkyl-, aryl- nebo heteroarylamidové skupiny, skupiny CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku a CF₃;

R₂₁ představuje vždy alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě sub- stituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu,

CF3, cn, or₂₀, sr₂₀, n(r₂₀)₂, s(o)r₂₂, so₂r₂₂, so₂n(r₂₀)₂, nr₂₀co₂r₂₂, nr₂₀con(r₂₀)₂, cor₂₀, ^CO2^R20' ^CON(^R20^2' ^NR20^SO2^R22' ^{a OR}20^;

R₂₂ představuje vždy alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkyl- aminoskupiny, alkyl-, aryl- nebo heteroarylamidové skupiny, skupiny CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, CF₃, aryl a heteroarylskupiny.

4. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 1 obecného vzorce I, kde

R-l' představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, cykloalkylskupinu, substituovanou cykloalkylskupinu, cykloheteroalkylskupinu, substituovanou cykloheteroalkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, heterocyklickou skupinu, hetarylskupinu, substituovanou hetarylskupinu, aralkylskupinu, substituovanou aralkylskupinu, heteroaralkylskupinu, heteroalkylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkinylskupinu, alkylcykloalkylskupinu nebo alkylcykloheteroalkylskupinu, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, ^CF3' ^R22' ^SR20' ^s(°)^R21' ^SO2^R21' ^SO2^NR20^R23' ^NR20^R23 ^NR20^COR21' ^NR20^CO2^R21' ^NR20^SO2^R21' ^OR20' ^CN' ^CO2^R20 ^{a CONR}20^R23'

R₂ představuje vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího ze substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, arylskupiny a substituované arylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 10 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, heteroary1skupiny, heterocyklylskupiny, R₂₂, ^SR20' S(O)R₂₁, SO₂R₂i, ^s°2^NR20^R23^{/ NR}20^R23' ^NR20^COR21' N^R2o^c°2^R21' ^NR20^SO2^R21' ^OR20' ^CN' ^CO2^R20^/

C°N^R2o^R23 ^{a COR}20^;

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, heterocyklické skupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, acylskupiny, arylskupiny, substituované arylskupiny, hetarylskupiny, substituované hetarylskupinu, aralkylskupiny, heteroaralkylskupiny, alkylalkenylskupiny, alkylalkinylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, R₂₂, ^SR20' ^S(°)^R21'

SO₂ ^R2iz ^s°2^NR20^R23' ^NR20^R23' ^NR20^COR21'

N^R2o^c°2^R21' ^NR20^SO2^R21' ^OR20' ^CN' ^CO2^R20 a conr₂₀r₂₃;

R₂₀ představuje vždy vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylskupinu a heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, alkyl-, aryl- nebo heteroarylamidové skupiny, skupiny CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku a CF₃;

R₂₁ představuje vždy alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, cf₃, cn, or₂₀, sr₂₀, n(r₂₀)₂, s(o)r₂₂, so₂r₂₂, so₂n(r₂₀)₂, nr₂₀co₂r₂₂, nr₂₀con(r₂₀)₂, cor₂₀, ^CO2^R20' CON(R_2q)₂, ^NR20^SO2^R22 ^{a OR}20^;

R₂₂ představuje vždy alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkyl- aminoskupiny, alkyl-, aryl- nebo heteroarylamidové skupiny, skupiny CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, CF₃, aryl a heteroarylskupiny.

nároku 1
5. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle obecného vzorce I, kde X představuje skupinu NH.

nároku 1 obecného
6. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle obecného vzorce I, kde R₃ představuje zbytek vzorce kde m

n o

Y představuje číslo 1 až 3, představuje číslo 1 až 3, představuje číslo 1 až 3 a představuje karbonylskupinu, skupinu -NR₄R₅, hydroxylovou skupinu, thiolovou skupinu, alkoxyskupinu nebo alkylthiolovou skupinu; přičemž, když Y představuje karbonylskupinu, mohou Y a R₄ ' dohromady představovat jediný atom kyslíku, R₄ a R₅ mohou dohromady představovat jediný atom kyslíku, R₄''' a R₅''' mohou dohromady představovat jediný atom kyslíku; a

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, heterocyklické skupiny, cykloheteroalkylskupiny,

Λ · • · *

♦ · · • · ·· » substituované cykloheteroalkylskupiny, acylskupiny, arylskupiny, substituované arylskupiny, hetarylskupiny, substituované hetarylskupinu, aralkylskupiny, heteroaralkylskupiny, alkylalkenylskupiny, alkylalkinylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, R₂₂, ^SR20' ^S(°)^R21' ^SO2^R21' ^SO2^NR2O^R23' ^NR20^R23' ^NR20^COR21'

N^R2o^c°2^R21' ^NR20^SO2^R21^{z OR}20^{z CN}' ^CO2^R20 a CONR₂₀R₂₃.
7. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 3 obecného vzorce I, kde R-^' představuje aralkylskupinu nebo heteroarylalkylskupinu.
8. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 7 obecného vzorce I, kde Rj' představuje aralkylskupinu, nesubstituovanou pyridylalkylskupinu nebo substituovanou pyridylalkylskupinu a R₂ představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu nebo alkylcykloalkylskupinu.
9. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 8 obecného vzorce I, kde

R-^' představuje arylskupinu, substituovanou arylskupinu, heterocyklickou skupinu, hetarylskupinu, substituovanou hetarylskupinu, aralkylskupinu, substituovanou aralkylskupinu nebo heteroaralkylskupinu, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, CF₃, R₂₂, sR₂₀r s(o)r₂₁, so₂r₂₁, so₂nr₂₀r₂₃, nr₂₀r₂₃, ^NR20^COR21' ^NR20^CO2^R21' ^NR20^SO2^R21' ^OR20' ^CN' ^CO2^R20 ^{a CONR}20^R23^;

R₂ představuje vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího ze substituované nižší alkylskupiny, substituované alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 10 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, R₂₂, SR₂₀, S(O)R₂₁, ^SO2^R21' ^NR20^R23' ^OR20 ^{a CN;}

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, aralkylskupiny, heteroaralkylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 20 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, arylskupiny, R₂₂, SR₂₀, ^NR20^R23' ^NR20^COR21' ^NR20^CO2^R21^{/ NR}20^SO2^R21^{z 0R}'

CN, CO₂R₂₀ a CONR₂₀R₂₃ ^k20<

R₂₀ představuje vždy vodík nebo alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, přičemž alkylskupina je popřípadě substituována 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, alkylskupiny, CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku a CF₃;

R₂₁ představuje alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, která je popřípadě substituována 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, skupiny CF₃, CN, OR₂₀, SR_2Q a ^N(^R2(p2^{; a}

R₂₂ představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, alkyl nebo arylskupiny, CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku a CF₃.
10. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 3 obecného vzorce I, kde R^' představuje arylskupinu, heterocyklickou skupinu, heteroarylskupinu, substituovanou heteroarylskupinu nebo substituovanou arylskupinu.
11. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 3 obecného vzorce I, kde R₃' představuje arylskupinu, nesubstituovanou pyridylskupinu, substituovanou pyridylskupinu nebo substituovanou arylskupinu a R₂ představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu nebo alkylcykloalkylskupinu.
12. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 2 obecného vzorce I, kde R₃ představuje skupinu -NR₄R₅, kde R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík, nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, alkoxyskupinu, aminoskupinu, amidoskupinu, karboxylovou skupinu, cykloalkylskupinu, substituovanou cykloalkylskupinu, heterocyklickou skupinu, cykloheteroalkylskupinu, substituovanou cykloheteroalkylskupinu, acylskupinu, arylskupinu, substi9 9 tuovanou arylskupinu, aryloxyskupinu, hetarylskupinu, substituovanou hetarylskupinu, aralkylskupinu, heteroaralkylskupinu, alkylalkenylskupinu, alkylalkinylskupinu, alkylcykloalkylskupinu, alkylcykloheteroalkylskupinu nebo kyanoskupinu.
13. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde

R-L' představuje arylskupinu nebo substituovanou arylskupinu, z nichž každá obsahuje 6 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, CF₃, arylskupiny, R₂₂, ^NR20^R23' ^NR20^COR21' ^OR20 ^{a CN;}

R₂ představuje vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího ze substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny a substituované cykloalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 6 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce jedním substituentem nezávisle zvoleným ze souboru sestávajícího z halogenu, R₂₂, ^NR20^R23 a OR₂₀;

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 12 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ·· ·· ♦ ·» ·» ·· • · · · <··· · · ♦ * • · · ····· • ·· · ······· • · · · · · ···· ···· ··· ·»»* ·* ·· ze souboru sestávajícího z halogenu, R₂₂, ^SR20'

O^R20 ^{1 RR}20^23 ^, CN, CO₂R₂q a CONR₂qR₂₃ ;

R₂₀ představuje vždy vodík nebo alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku;

R₂₁ představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, která je popřípadě substituována 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, skupiny CF₃, CN, OR_2Q, ^SR20 ^{a n}(^R20^2^{; a}

R₂₂ představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, alkylskupiny, arylskupiny, CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku a CF₃.
14. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde

Rg’ představuje arylskupinu nebo substituovanou arylskupinu, z nichž každá obsahuje 6 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, CF₃, R₂₂, 0R_2Q a CN;

R₂ představuje isopropylskupinu;

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny,

Φ Φ · · • φ φ • · φ φφφ φφφ φ φ φ · φ · cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 12 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce jedním substituentem nezávisle zvoleným ze souboru sestávajícího z R₂₂, ^OR20 ^{a NR}20^R23'

R₂₀ představuje vždy vodík nebo alkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku;

R₂₁ představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku;

R₂₂ představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo arylskupinu, přičemž alkylskupina a arylskupina jsou popřípadě substituovány jedním substituentem nezávisle zvoleným ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, CN a CF₃; a

R₂₃ představuje R₂₁ nebo vodík.
15. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde

Rjl ’ představuje aralkylskupinu nebo substituovanou aralkylskupinu, z nichž každá obsahuje 6 až 8 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, CF₃, arylskupiny, R₂₂, ^NR20^R23' ^NR20^COR21^{z OR}20 ^{a CN;}

R₂ představuje vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího ze substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny a substituované cykloalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 6 • « ··

0· · « · atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce jedním substituentem nezávisle zvoleným ze souboru sestávajícího z halogenu, R₂₂, ^NR20^R23 a or₂₀;

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, cykloheteroalkylskupiny, substituované cykloheteroalkylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 12 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, R₂₂, ^SR2o'

0^R2ot ^RR20^R23¹ CN, CO₂R₂q a CONR₂qR₂;

R₂₀ představuje vždy vodík nebo alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku;

R₂₁ představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, která je popřípadě substituována 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, skupiny CF₃, CN, OR₂₀, SR_2Q a ^N(^R2(p2' ^a

R₂₂ představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, arylskupinu nebo heteroarylskupinu, přičemž alkyl-, aryl- a heteroarylskupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, alkyla arylskupiny, CN, O-alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku a CF₃.

« Φ· φφ φφ • φφ φ · · · φ · ♦ φ ♦ φ φ φ φφφφφ φ φφφ · · φφφ ··* * φ · « φ ·
16. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde

Rj' představuje skupinu -CH₂~fenyl, která je na fenylovém kruhu popřípadě substituována 1 nebo 2 substituenty nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, CF₃, R₂₂, OR₂₀ a CN;

R₂ představuje isopropylskupinu;

R₄ a R₅ představuje každý nezávisle vodík nebo uhlovodíkový zbytek zvolený ze souboru sestávajícího z nižší alkylskupiny, substituované nižší alkylskupiny, cykloalkylskupiny, substituované cykloalkylskupiny, alkylcykloalkylskupiny a alkylcykloheteroalkylskupiny, z nichž každá obsahuje 1 až 12 atomů uhlíku a substitucí se rozumí případná substituce jedním substituentem nezávisle zvoleným ze souboru sestávajícího z R₂₂, OR₂₀ ^{a NR}20^R23^;

R₂₀ představuje vždy vodík nebo alkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku;

R₂₁ představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku;

R₂₂ představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo arylskupinu, přičemž alkylskupina a arylskupina jsou popřípadě substituovány jedním substituentem nezávisle zvolenými ze souboru sestávajícího z halogenu, alkylskupiny, mono- a dialkylaminoskupiny, CN a CF₃; a

R₂₃ představuje R₂₁ nebo vodík.

·« *· · ·· ·· ·· • · * · · · · · ·· * « 9 · · « · * ·

9 9 · 9 9 · 99 · 99 9

9 9 9 · · ·
17. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde Rg' představuje aralkylskupinu, substituovanou pyridylalkylskupinu nebo nesubstituovanou pyridylalkylskupinu, R₂ představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, cykloalkylskupinu nebo substituovanou cykloalkylskupinu, R₄ představuje substituovanou nižší alkylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, R₅ představuje vodík, nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, cykloalkylskupinu, arylcykloalkylskupinu, heterocyklickou skupinu, substituovanou heterocyklickou skupinu, heteroarylskupinu, substituovanou heteroarylskupinu, heteroalkylskupinu, heteroaralkylskupinu a substituovanou cykloalkylskupinu.
18. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde Rg' představuje arylskupinu, substituovanou arylskupinu, pyridylskupinu nebo substituovanou pyridylskupinu, R₂ představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, cykloalkylskupinu, alkylcykloalkylskupinu nebo substituovanou cykloalkylskupinu, R₄ představuje substituovanou nižší alkylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku, R₅ představuje vodík, nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu, arylskupinu, substituovanou arylskupinu, cykloalkylskupinu, arylcykloalkylskupinu, heterocyklickou skupinu, substituovanou heterocyklickou skupinu, heteroarylskupinu, substituovanou heteroarylskupinu, heteroalkylskupinu, heteroaralkylskupinu nebo substituovanou cykloalkylskupinu.
19. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde Rg' představuje aralkylskupinu, pyridylalkylskupinu nebo substituovanou pyridylalkylskupinu, R₂ představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu nebo alkylcykloalkyl100

44 *4

4 9 9 9

9 9 • 4 ► 9 9 4 > 4 4 4 •44 44· skupinu, a R₄ a R₅ představuje každý substituovanou nižší alkylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku.
20. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde R₃' představuje skupinu CH₂-aryl nebo CH₂-substituovaný aryl, R₂ představuje nižší alkylskupinu nebo substituovanou nižší alkylskupinu a R₄ a

R₅ představuje každý skupinu -CH₂CH₂OH, -CHR'CH₂OH nebo -CH₂CHR'OH, kde R' představuje vodík nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.
21. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde R₃' představuje skupinu CH₂~aryl nebo CH₂~substituovaný aryl, R₂ představuje nižší alkylskupinu, R₄ představuje vodík a R₅ představuje skupinu -CH₂CH₂NH₂, -CHR'CH₂NH₂ nebo -CH₂CHR'NH₂, kde R' představuje vodík nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.
22. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 21 obecného vzorce I, kde R₂ představuje isopropylskupinu.
23. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde R_x' představuje skupinu CH₂-aryl nebo CH₂-substituovaný aryl, R₂ představuje nižší alkylskupinu, R₄ představuje skupinu -CH₂CH₂OH a R₅představuje skupinu -CH₂CH₂NH_2z -CHR'CH₂NH₂ nebo -CH₂CHR'NH₂, kde R' představuje vodík nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.
24. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 23 obecného vzorce I, kde R₂ představuje isopropylskupinu.

101 φ φ φφφφφ φ φ φ φφφφ φφφφ φ φ φ φ » φφφ φφφ ·ΦΦ· ·· ··
25. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 20 obecného vzorce I, kde R₂ představuje isopropylskupinu .
26. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde ' představuje arylskupinu, substituovanou arylskupinu, pyridylskupinu nebo substituovanou pyridylskupinu, R₂ představuje nižší alkylskupinu, substituovanou nižší alkylskupinu nebo alkylcykloalkylskupinu a R₄ a R₅ představuje každý substituovanou nižší alkylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku.
27. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde R-jý představuje arylskupinu nebo substituovanou arylskupinu, ^R2 představuje nižší alkylskupinu nebo substituovanou nižší alkylskupinu a ^R4 a ^R5 představuje každý skupinu CH₂CH₂OH, -HR'CH₂OH nebo

-CH₂CHR'OH, kde R' představuje vodík nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.
28. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 27 obecného vzorce I, kde R₂ představuje isopropylskupinu.
29. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde ' představuje benzylskupinu substituovanou halogenem, alkoxyskupinou, fenylskupinou, pyridylskupinou nebo nitroskupinou, R₂ představuje isopropylskupinu a R₄ a R₅ představuje každý skupinu -CH₂CH₂OH.
30. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde R^' představuje benzylskupinu substituovanou halogenem, alkoxyskupinou, fenylskupinou, pyridylskupinou nebo nitroskupinou, ^R2 představuje isopropyl102 • to ·· • · · · · • · • · · to · ·· ♦· ·· • · ···· • · · · to to · toto · ··· • · · ·>·· to· ·· skupinu, R₄ představuje vodík a R₅ představuje skupinu -ch₂ch₂nh₂.
31. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde R₃' představuje benzylskupinu substituovanou halogenem, alkoxyskupinou, fenylskupinou, pyridylskupinou nebo nitroskupinou, R₂ představuje isopropylskupinu, r₄ představuje vodík a R₅ představuje skupinu -CH₂CHR'NH₂, kde R' představuje vodík nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.
32. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde R-j_' představuje benzylskupinu substituovanou halogenem, alkoxyskupinou, fenylskupinou, pyridylskupinou nebo nitroskupinou, R₂představuje isopropylskupinu, R₄ představuje vodík a R₅představuje skupinu -CH₂CR'R'NH₂, kde R' představuje vodík nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.
33. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde R^' představuje benzylskupinu substituovanou halogenem, alkoxyskupinou, alkylskupinou s 1 až 3 atomy uhlíku, CF₃, fenylskupinou, pyridylskupinou nebo nitroskupinou, R₂ představuje isopropylskupinu, R₄ představuje vodík a R₅ představuje skupinu -CH₂CHR'NH₂, kde R' představuje vodík nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.
34. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde Rj' představuje benzylskupinu substituovanou halogenem, alkoxyskupinou, alkylskupinou s 1 až 3 atomy uhlíku, CF₃, fenylskupinou, pyridylskupinou nebo nitroskupinou, R₂ představuje isopropylskupinu, R₄ představuje vodík a R₅ představuje

103 • 4 ·

44« 44«

4 4 ♦ 4 44 skupinu -CH₂CR'R'NH₂, kde R' představuje vodík nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.
35. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 1 zvolené ze souboru sestávajícího z

2- {(2-hydroxyethyl)[9-(methylethyl)-6-({[4-(trifluormethyl)fenylJmethyllamino)purin-2-yl] amino}ethan-l-olu, {((2S)oxolan-2-ylJmethyl](6-{[(4-fluorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)aminu, {((2R)oxolan-2-yl)methyl](6-{[(4-fluorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)aminu, (2-aminoethyl)(6-{[3,5-dichlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl )purin-2-yl)aminu, (2-aminoethyl)[6-({[4-chlor-3-(trifluormethyl)fenylJmethyl} amino)-9-(methylethyl)purin-2-ylaminu, [-[(6—{[(4-chlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-y1)amino]-3-methylbutanamidu, (2-amino-2-methylpropyl)(6-{[(4-chlorfeny1)methyl]amino}-9-(methylethy1)purin-2-yl)aminu,

3- (2-[bis(2-hydroxyethyl)amino]-6-{[4-chlorfenyl)methyl]amino}purin-9-yl)butan-2-onu,

2-[(6—{[(4-chlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)amino]-3-methylbutan-l-olu,

4- [({2—[(2-aminoethyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl}amino)methyl]benzensulfonamidu,

- 104 ·· ·· • 9 9 9

9 9 ··· ···

9 9

9 9 99

2-[(2-hydroxyethyl)(6-{[(4-methoxyfenyl)methyllamino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)amino]ethan-l-olu,

2-((2-hydroxyethyl){9-(methylethyl)-6-[(4-fenylfenyl)amino]purin-2-yl}amino)ethan-l-olu, {2-[(2-amino-2-propyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl} [(4-chlorfenyl)methyl]aminu, {2-[(2-aminoethyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl}[(4-chlorfenyl)methyllaminu, {2-[(2-aminopropyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl}[(4-chlorfenyl)methyl]aminu a

2-[(2-aminoethyl)(6-{[(4-chlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)amino]ethan-l-olu.
36. Směs dvou nebo více 2,6,9-trisubstituovaných purinových sloučenin podle nároku 35.
37. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde R^' představuje fenylskupinu substituovanou halogenem, alkoxyskupinou, fenylskupinou, pyridylskupinou nebo nitroskupinou, R₂představuje isopropylskupinu, R₄ a R₅ představuje každý skupinu -CH₂CH₂OH.
38. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde R-j_' představuje bifenylmethylskupinu, R₂ představuje isopropylskupinu, R₄a R₅ představuje každý skupinu -CH₂CH₂OH.
39. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 12 obecného vzorce I, kde R₄' představuje 3-thiome44 44 • 4 4 4

4 4 4 4

444 444

4 4

44 44

105 »4 44 • 4

4 4 4 thoxyfenylskupinu, 4-thiomethoxyfenylskupinu, 4-bromfenylskupinu, 4-fenylbenzylskupinu, 4-methoxybenzylskupinu, 4-bifenylylskupinu, 3-methoxybenzylskupinu, 4-(2-thienyl)benzylskupinu, 4-(4-methyl)fenylbenzylskupinu, 4-(4-trifluormethyl)fenylbenzylskupinu, 4-(4-nitrilo)fenylbenzylskupinu, 4-(2-pyridyl)benzylskupinu, piperonylskupinu, 3-methoxybenzylskupinu, 4-chlorbenzylskupinu nebo 4-nitrobenzylskupinu, R₂ představuje isopropylskupinu a R₄ a R₅představuje každý skupinu CH₂CH₂OH.
40. 2,6,9-Trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 36 obecného vzorce I, kde Rj' představuje 4-methoxybenzylskupinu, 4-fenylbenzylskupinu, 4-methoxybenzylskupinu, 4-bifenylylskupinu, 3-methoxybenzylskupinu, 4-(2-thienyl)benzylskupinu, 4-(4-methyl)fenylbenzylskupinu, 4-(4-trifluormethyl)fenylbenzylskupinu, 4-(4-nitrilo)fenylbenzylskupinu, 4-(2-pyridyl)benzylskupinu, piperonylskupinu, 3-thiomethoxyfenylskupinu, 4-thiomethoxyfenylskupinu nebo 4-brom fenylskupinu.
41. Kationtová sůl 2,6,9-trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 1 obecného vzorce I.
42. Adiční sůl 2,6,9-trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 1 obecného vzorce I s kyselinou.
43. Způsob inhibice buněčné proliferace u savců, vyznačující se tím, že se savci podává terapeuticky účinné množství 2,6,9-trisubstituované purinové sloučeniny podle nároku 1 obecného vzorce I.
44. Způsob podle nároku 40, vyznačující se t i m , že terapeuticky účinné množství leží v rozmezí od asi 0,001 do asi 100 mg/kg hmotnosti savce.

*φ φφ φφ φ φ · φ φ φ φ φφφφ

106 ·· φφ • φ · φ φ φ
45. Způsob podle nároku 40, vyznačující se t í m , že se 2,6,9-trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I podává savci, který trpí poruchou buněčné proliferace zvolenou ze souboru sestávajícího z rheumatoidní arthritis, lupus, diabetes typu I, roztroušené sklerosy, rakoviny, restenosy, choroby host-versus-graft a dny.
46. Způsob podle nároku 42, vyznačující se t í m , že poruchou buněčné proliferace je restenosa.
47.

tím,

Způsob podle nároku 42, v y z že poruchou buněčné proliferace n a č u j í c je rakovina.

se ti choroba
48. Způsob podle nároku m , že poruchou buněčná ledvin.

42, v y z proliferace načuj ící je polycystická
49.

se tím,

Způsob podle nároku 42, že savcem je člověk.

vyznačuj ící
50. Farmaceutická kompozice, vyznačuj ící se t í m , že obsahuje 2,6,9-trisubstituovanou purinovou sloučeninu podle nároku 1 obecného vzorce I a jeden nebo více farmaceutických excipientů.
51. Antifungální prostředek užitečný pro léčbu fungál nich infekcí u lidí a zvířat, vyznačující se tím, že obsahuje 2,6,9-trisubstituovanou purinovou sloučeninu podle nároku 1 obecného vzorce I.