CN101899049A

CN101899049A - 二取代吡唑并苯并二氮杂*类

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Publication number: CN101899049A
Application number: CN2010101585349A
Authority: CN
Inventors: 刘进军; 陆建春; 贾科莫·皮佐拉托; 任毅; 克希蒂吉·查比尔波海·萨卡; 彼得·米夏埃尔·沃库利希; 张筑明
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2004-10-13
Filing date: 2005-10-04
Publication date: 2010-12-01
Also published as: MX2007004464A; EP1802625B1; AR051326A1; KR20070054243A; WO2006040036A1; US7524840B2; ES2308551T3; KR100858262B1; RU2394826C2; PL1802625T3; NZ554353A; TWI309652B; EP1802625A1; DE602005007623D1; NO20071794L; CN101039946A; US20060079511A1; ZA200702973B; AU2005293818A1; TW200628469A

Abstract

本发明涉及一种二取代吡唑并苯并二氮杂类。本发明提供下式(I)的化合物，其中R¹，R²，R³和R⁴如本文中所述。本发明还提供用于制备这种化合物的合成方法及含有这种化合物的药物组合物。本发明还提供用于抑制激酶，特别是CDK2的方法，用于抑制血管生成的方法，和用于治疗癌症，特别乳腺、结肠、前列腺和肺癌的方法。

Description

二取代吡唑并苯并二氮杂类

本申请是中国专利申请200580035121.9的分案申请。

本发明涉及抑制血管生成和/或激酶活性的二取代吡唑并苯并二氮杂

类。这些化合物可以用于治疗癌性肿瘤，特别是乳腺、结肠、肺和前列腺癌。

血管生成为新血管在组织或器官中的生成。在正常的生理条件下，人和动物仅在非常特定的、有限的情况下进行血管生成。例如，通常在伤口愈合、胎儿和胚胎发育以及黄体、子宫内膜和胎盘的形成中观察到血管生成。

毛细血管包含内皮细胞和周细胞，它们由基膜包围。血管生成始于由内皮细胞和白细胞分泌的酶对基膜的侵蚀。然后，内衬在血管内腔的内皮细胞通过基膜伸出。血管源性的刺激物诱导内皮细胞迁移通过侵蚀的基膜。迁移细胞在母体血管内皮细胞进行有丝分裂和增殖的地方之外形成“芽”。内皮芽相互合并，生成毛细血管袢，从而产生新血管。

不受控制的血管生成是癌症的标志。在1971年，Dr.Judah Folkman提出，肿瘤生长取决于血管生成。参见例如，Folkman，New England Journalof Medicine，285：1182-86(1971)。根据Dr.Folkman，在不生长另外的血管以滋养肿瘤的情况下，肿瘤仅能生长到一定的尺寸。在其最简单的表述中，该提议指出：“一旦发生了肿瘤‘成活’，肿瘤细胞群的每次增加必须由在肿瘤上会聚的新毛细管的增加来进行”。目前理解的肿瘤‘成活’是指肿瘤生长的血管前相，其中占几个立方毫米体积并且不超过几百万个细胞的肿瘤细胞群可以存活于现存的宿主微脉管上。肿瘤体积超过此相的扩大需要诱导新的毛细血管。例如，小鼠中的早期血管前相中的肺部微转移除了在组织切片上进行高倍显微术之外是不能检测的。

早在1945年，Algire，等，J.Nat.Cancer Inst.，6：73-85(1945)，表明：植入小鼠中的皮下透明腔中的肿瘤的生长速率在新血管形成前是慢而线性的，而在新血管形成后是快而接近指数的。1966年，Dr.Folkman报道：在其中血管不增殖的离体灌住器官中的肿瘤生长被限制到1-2mm³，但当它们移植入小鼠中并且成为新血管形成时，快速膨胀到此体积的＞1000倍。参见例如，Folkman，等，Anals of Surgery，164：491-502(1966)。

在无血管角膜中的肿瘤生长缓慢地并且以线性速率生长，但在新血管生长后转为指数生长。参见例如，Gimbrone，Jr.，等，J.Nat.Cancer Inst.，52：421-27(1974))。悬浮于兔眼前房的水性液体中的肿瘤保持活的、无血管的，并且尺寸被限制到＜1mm³。一旦将它们植入虹膜血管床，它们开始新血管生长并且快速生长，在两周内达到其原始体积的16,000倍。参见例如，Gimbrone，Jr.等，J.Exp.Med.，136：261-76。

当将肿瘤植入小鸡胚胎绒毛尿囊膜上时，在＞72小时的无血管相的过程中它们缓慢地生长，但是不超过0.93+0.29mm的平均直径。在新血管生长开始后的24小时内，发生快速肿瘤膨胀，并且到第7天，血管化的肿瘤达到8.0+2.5mm的平均直径。参见例如，Knighton，British，J.Cancer，35：347-56(1977))。

转移灶在兔肝中的血管管型显示转移灶尺寸的不均匀性，但对于在存在血管化时的尺寸显示相对均匀的截止点。肿瘤通常无血管最高到1mm的直径，但超过该直径被新血管化。参见例如，Lien，等，Surgery，68：334-40(1970)。

在胰腺小孔的β细胞中发育癌的转基因小鼠中，血管前增殖性小孔被限制到尺寸＜1mm。在6-7周龄，4-10％的小孔成为新血管生长，并且从这些小孔，达到超过血管前小孔体积1,000倍的大血管化肿瘤。参见例如，Folkman，等，Nature，339：58-61(1989)。

已经表明，可以通过抑制血管生成而不是抑制肿瘤细胞本身的增殖，来治疗肿瘤。例如，Kim等，Nature，362：841044(1993)表明：抗VEGF (血管内皮生长因子)的特异性抗体降低了微血管密度并且导致依赖作为它们血管生成的单一介体(在裸小鼠中)的VEGF的三种人肿瘤生长的“显著或惊人的”抑制。该抗体不抑制肿瘤细胞在体外的生长。此外，Hori，等，Cancer，Resp.51：6180-84(1991)表明：抗-bFGF单克隆抗体导致依赖于作为其血管生成的唯一介体的bFGF分泌的小鼠肿瘤生长的70％抑制。该抗体不抑制肿瘤细胞在体外的生长。还表明bFGF的腹膜内注射通过刺激毛细内皮细胞在肿瘤中的生长而增强了原始肿瘤及其转移灶的生长。缺乏bFGF受体和bFGF的肿瘤细胞本身不是对于体外的肿瘤细胞的分裂素。参见例如，Gross，等，Proc.Am.Assoc.Cancer Res.，31：79(1990)。特异的血管生成抑制剂(AGM-1470)抑制体内的肿瘤生长和转移，但比抑制在体外的肿瘤细胞增殖的活性低得多。与它抑制肿瘤细胞增殖相比，它以4logs低浓度半最大地(half-maximally)抑制血管内皮细胞增殖。参见例如，Ingber，等，Nature，48：555-57(1990)。

还有肿瘤生长与血管生成相关的间接临床证据。例如，转移到玻璃体的人视网膜母细胞瘤发育成被限制到＜1mm³的无血管螺旋样体，尽管事实在于它们是能存活的并且结合有³H-胸苷(在从摘除的眼中除去并且在体外分析时)。卵巢癌转移至腹膜作为微小的无血管白种子(1-3mm³)。这些植入物很少长得更大，直到它们中的一个或多个成为新血管生成的。在乳腺癌(参见例如，Weidner，等，New Eng.J.ofMed.，324：1-8(1991)；Weidner，等，J.Nat.Cancer Inst.，84：1875-87(1992))和在前列腺癌(Weidner，等，Am.J.Pathol.，143(2)：401-09(1993))中的新血管生成强度与未来的转移灶危险高度相关。

在新血管生长前，来自人皮肤黑素瘤的转移灶稀少。新血管生长开始导致病变厚度增大并且转移危险增加。参见例如，Srivastava，等，Am.J.Pathol.，133：419-23(1988))。在膀胱癌中，血管源性蛋白，bFGF的尿水平是比细胞学更敏感的状态和重大疾病指标。参见例如，Nguyen，等，J.Nat.Cancer，Inst.，85：241-42(1993)。

血管生成已经与大量不同类型的癌症相关，所述的癌症包括实体瘤和血液运载的肿瘤。与血管生成相关的实体瘤包括但不限于：横纹肌肉瘤，视网膜母细胞瘤，尤因肉瘤，成神经细胞瘤和骨肉瘤。血管生成与乳腺癌、前列腺癌、肺癌和结肠癌相关。血管生成还与血液运载的肿瘤相关，所述的血液运载的肿瘤如白血病，淋巴瘤，多发性骨髓瘤以及各种急性或慢性骨髓肿瘤疾病中的任何一种，其中发生白血细胞不受限制的增殖，通常伴随有贫血、削弱的血液凝固以及淋巴结、肝和脾的增大。还认为，血管生成在骨髓异常中起一定的作用，所述的异常引起白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤。

童年期最常见的血管源性疾病之一是血管瘤。血管瘤是由新形成血管构成的肿瘤。在大多数情况下，肿瘤是良性的，并且在没有干预的条件下退化。在更严酷的情况下，肿瘤发展到大海绵状和浸入的形式，并且产生临床并发症。全身形式的血管瘤，多发性血管瘤，死亡率高。抗治疗的血管瘤存在，其不能由目前使用的疗法进行治疗。

因此，清楚的是，血管生成在癌症的转移中起主要作用。如果能够抑制或消除血管源性活性，那么尽管肿瘤存在也将不生长。在疾病状态下，防止血管生成可以公开由新微血管系统的侵入而导致的损伤。针对血管源性过程的控制的疗法可能导致这些疾病的去除或减轻。

正在研究作为治疗药剂的抑制血管生成的几个类别的化合物。这些是例如沙利度胺和沙利度胺类似物(USP 6,235,756(The Children’s MedicalCenter Corporation)；6,420,414(The Children’s Medical Center Corporation)；6,476,052(Celgene Corporation))；喹啉酮类(USP 6,774,237(ChironCorporation))；丝氨酸蛋白酶和血管舒缓素(USP 6,544,947(EntreMedInc.))；VEGF类似物和拮抗剂(USP 6,783,953(Janssen Pharmaceutica N.V.)；6,777,534(Children’s Medical Center Corporation))；结合Angiostatin^TM或Endostatin^TM的肽或蛋白(USP 6,201,104(EntreMed Inc.))；组织蛋白酶V-样多肽(USP 6,783,969(Nuvelo Inc.))；其它抗血管形成肽(USP 6,774,211(Abbott Laboratories)；4-苯胺基-喹唑啉类(WO 2002/092578，WO2002/092577，WO 2002/016352，WO 2001/032651，WO 2000/047212(Astrazeneca))；酞嗪类(WO 2004/033042(Novartis)，WO 2003/022282(Novartis)，WO 2002/012227(Astrazeneca)，WO 2001/010859(Bayer)，WO98/35958(Novartis))；异噻唑类(WO 99/62890(Pfizer))；以及二氢吲哚酮类(indolinones)(WO 2001/037820，WO 2000/008202，WO 98/50356，WO96/40116(Sugen Inc.))。

几篇评论报道了血管生成抑制剂作为治疗药剂的应用。这些文章包括Mazitschek等，Current Opinion in Chemical Biology，8(4)：432-441(2004)；Underiner，等，Current Medicinal Chemistry，11(6)：731-745(2004)；Manley，等，Biochimica et Biophysica Acta，1697(1-2)：17-27(2004)；Alessi，等，Biochimica et Biophysica Acta，1654(1)：39-49(2004)；Tortora，等，Current Pharmaceutical Design，10(1)：11-26(2004)。

不受控制的细胞增殖是癌症的另一个标志。癌性肿瘤细胞典型地具有对直接或间接调节细胞分裂周期的基因的某些形式的破坏。

细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)是对于细胞周期控制关键的酶。参见例如，Coleman等，Annual Reports in Medicinal Chemistry，32：171-179(1997)。这些酶调节细胞周期不同期之间的过渡，例如G₁期至S期的进程(活性DNA合成的周期)，或G₂期至M期的进程，其中发生了主动的有丝分裂和细胞分裂。参见例如，Science，274：1643-1677(6December 1996)上关于该主题的文章。

CDKs由催化CDK亚基和调节细胞周期蛋白亚基组成。细胞周期蛋白亚基是CDK活性的关键调节物，因为每个CDK与细胞周期蛋白的特定亚型相互作用：如细胞周期蛋白A(CDK1，CDK2)。不同的激酶/细胞周期蛋白对通过细胞周期的特定时期调节进程。参见例如，Coleman，见上文。

在癌性细胞不受控制的生长过程中已涉及到细胞周期控制体系的异常。参见例如，Kamb，Trends in Genetics，11：136-140(1995)；以及Coleman，见上文。另外，在许多肿瘤中已观察到编码CDK’s或它们的调节物的基因的改变或基因的表达的改变。参见例如，Webster，Exp.Opin.Invest.Drugs，7：865-887(1998)，以及其中引用的参考文献。因此，有大量的参考文献证实抑制CDKs的化合物用作抗增殖性治疗药剂。参见例如，美国专利5,621,082；EP 0 666 270 A2；WO 97/16447；以及上文中Coleman中引用的参考文献，特别是第10篇参考文献。因此，需要鉴别CDK激酶活性的化学抑制剂。

特别需要鉴定小分子化合物来治疗一种或多种类型的肿瘤，所述小分子化合物易于合成，并且有效抑制一种或多种CDK或CDK/细胞周期蛋白复合物。

已经研究或正在研究作为治疗药剂的抑制细胞周期蛋白激酶的几个种类的化合物。有例如Flavopiridol的类似物(USP 5,733,920(Mitotix)；WO 98/1344(Bristol-Myers Squibb)；WO 97/42949(Bristol-MeyersSquibb))；嘌呤衍生物(WO 98/05335(CV Therapeutics)；WO 97/20842(CNRS))；吖啶酮类和苯并噻二嗪类(WO 98/49146A2(US Dept.ofHealthand Human Services))；以及antisense(USP 5,821,234(StanfordUniversity))。此外，在论述CNS-作用的化合物的文章中公开了一些N，N-取代的二氢吡唑并苯并二氮杂

类。参见，M.A.Berghot，Arch.Pharm.325：285-289(1992)。

仍然需要治疗一种或多种类型肿瘤、特别是通过调节血管生成和/或CDKs来治疗的易于合成的小分子化合物。

本发明涉及新型的7，8-二取代的吡唑并苯并二氮杂

类和这些化合物的药用盐。本发明的化合物是血管生成和/或激酶如细胞周期依赖性激酶(CDKs)，特别是CDK2的抑制剂。这些化合物和它们的药用盐以及所述化合物的酯是可以用于治疗或控制细胞增殖疾病，特别是癌症的抗增殖药剂。本发明还涉及含有这样化合物的药物组合物以及用于治疗和/或预防癌症的方法，特别是在治疗或控制实体瘤方面。本发明的化合物可以特别用于治疗或控制乳腺、结肠、肺和前列腺肿瘤。本发明还涉及可以用于制备7，8-二取代的吡唑并苯并二氮杂

类化合物如下面所述的式IV的那些化合物的新型中间体。

具体而言，本发明提供式IV的化合物：

其中

R¹为烷基，烷氧基，卤素，COOH，COO烷基，CN，C(O)N(R⁶)₂或(OCH₂CH₂)_nOCH₃；

R²为烷基，卤素，被卤素取代的烷基，OH，烷氧基，被卤素取代的烷氧基，苯基，N(R⁶)₂，(OCH₂CH₂)_nOCH₃，O(CH₂)_mNR⁷R⁸或

为任选被烷基或C(O)OR⁶取代的6元杂环；

或者R¹和R²一起形成5元杂环；

R³为氢或烷基；

R⁴为氢，卤素，CN，NO₂，烷基或烷氧基；

每个R⁶独立地为氢或烷基；

R⁷和R⁸各自独立地为氢，烷基或烷氧基烷基；或R⁷和R⁸与它们连接的氮原子一起形成任选被烷基取代的6元杂环；

每个n独立地为1，2或3；以及

m为2，3或4；

或其药用盐。

本发明还涉及药物组合物，其含有任何一种或多种上述的化合物或其药用盐，以及药用载体。制备这种组合物方法也是本发明的一部分。

本发明还涉及使用本发明化合物的方法。本发明的化合物是血管生成和/或激酶的抑制剂。因此，本发明涉及抑制血管生成的方法。本发明还涉及抑制激酶的方法。此外，本发明涉及治疗癌症，特别是乳腺、结肠、肺和前列腺癌的方法，该方法包括对患有癌症的患者给药治疗有效量的式IV的化合物或其药用盐。

在一个方面，本发明提供7，8-二取代-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

类化合物及含有它们的药物组合物。在第二方面，本发明提供用于合成本发明的化合物的方法以及在这种合成中使用的有价值中间体。

本发明的化合物是血管生成的抑制剂。因此，在第三方面，本发明提供抑制血管生成的方法，该方法包括给药治疗有效量的本发明化合物。本发明的化合物还是激酶如CDK2的抑制剂。因此，在第四方面，本发明提供抑制激酶活性的方法，该方法包括给药治疗有效量的本发明化合物。在第五方面，本发明提供用于治疗或控制癌症的方法，该方法包括给药治疗有效量的本发明化合物。具体而言，本发明提供用于治疗乳腺、前列腺、结肠和肺癌的方法。

如此处中所用的，下列术语具有下列定义。不管所述的术语单独或组合出现，都采用此处使用的下列定义。必须注意，如在说明书和后附权利要求书中所用的，单数形式“一个”、“一种”和“所述的”包括复数形式，除非上下文另外清楚地指明。

“烷基”是指含有1至6个，优选1至4个碳原子的直链或支链的、取代或未取代的饱和脂族烃基。典型的烷基包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、2-丁基、戊基、己基等。

“烷氧基”是指直链或支链的烃氧基，其中″烷基″部分为如上定义的烷基，并且该基团通过氧原子连接到分子上。典型的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、2-丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、正己氧基等。

“卤素”是指氟、氯、溴或碘。优选的卤素为氟和氯。

“杂原子”是指选自N，O和S中的原子。

“6元杂环”是指6元非芳族的、部分或全部饱和的烃基，其含有1至3个杂原子，杂原子中的至少一个为氮。6元杂环的实例包括哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉等。

“5元或6元杂环”是指含有1至3个杂原子的5或6元环。碳环的实例包括戊基和己基等。杂环的实例包括：二噁烷、二氧戊环、吡咯烷、咪唑烷等

“IC₅₀”是指抑制50％特定测量活性所需要的特定的吡唑并苯并二氮杂的浓度。[IC₅₀尤其可以如下面的实施例A中所述进行测量]

“IC₉₀”指抑制90％特定测量活性所需要的特定吡唑并苯并二氮杂

的浓度。

“药用”，例如药用载体，赋形剂等是指对给药具体化合物的受试者而言是药用的、并且基本上无毒的。

“药用盐”是指常规酸式加成盐或碱式加成盐，其保留了式IV的化合物的生物效力和性能，并从合适的无毒的有机或无机酸或有机或无机碱来形成。酸式加成盐的实例包括那些衍生自无机酸如盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸和硝酸的酸式加成盐，和那些衍生自有机酸例如对甲苯磺酸，水杨酸，甲磺酸，草酸，琥珀酸，柠檬酸，苹果酸，乳酸，富马酸等的酸式加成盐。碱式加成盐的实例包括那些衍生自铵、钾、钠和季铵氢氧化物的碱式加成盐，例如四甲基铵氢氧化物。

“苯基”是指这样的官能团，其为除去了一个氢的苯环。本发明的苯基可以是未取代的或取代的，例如被烷基，烷氧基，卤素，CN，N(R⁶)₂，NO₂等所取代的。

“取代的”，如取代的烷基，除非另外说明，是指取代可以发生在一个或多个位置，并且在每个取代位置的取代基独立地选自具体的选项。

“治疗有效量”表示至少一个式IV的化合物、或它的药用盐、酯或代谢物的量，其显著抑制肿瘤细胞，包括人肿瘤细胞系的增殖，或显著地抑制供应肿瘤或其转移灶的血管的血管生成。

本发明提供式IV的化合物

其中

R¹为烷基，烷氧基，卤素，COOOH，COO烷基，CN，C(O)N(R⁶)₂或(OCH₂CH₂)_nOCH₃；

为任选被烷基或C(O)OR⁶取代的6元杂环；

或者R¹和R²一起形成5元杂环；

R³为氢或烷基；

R⁴为氢，卤素，CN，NO₂，烷基或烷氧基；

每个R⁶独立地为氢或烷基；

每个n独立地为1，2或3；以及

m为2，3或4；

或其药用盐。

在一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R²为

在此实施方案内，优选的化合物包括那些其中R¹为卤素或氰基的化合物。

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R²为O(CH₂)_mNR⁷R⁸。在这样的化合物中，R⁷和R⁸可以各自独立地为氢，烷基或烷氧基烷基；或者R⁷和R⁸可以与它们连接的氮原子一起形成6元杂环。例如，NR⁷R⁸可以形成吗啉或哌嗪环。在此实施方案内，优选的化合物是那些化合物，其中R⁷和R⁸与它们连接的氮原子一起形成6元杂环，并且R¹为卤素或氰基。

这种化合物的实例包括

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

7-溴-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

以及

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-(2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

还优选的是其中R⁷和R⁸各自独立地为氢，烷基或烷氧基烷基并且R¹为卤素或氰基的化合物。这样的一种化合物的实例是

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R²为N(R⁶)₂，其中每个R⁶独立地为氢或烷基。在此实施方案内，优选其中R¹为卤素或氰基的化合物，例如，化合物5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-N，N-二甲氨基-3-甲基-吡唑并[3，4-b]苯并二氮杂

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R²为卤素，烷基或被卤素取代的烷基。在此实施方案内，优选的化合物是那些化合物，其中R¹为卤素，烷基或烷氧基。这种化合物的实例包括：

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7，8-三甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-氟-7-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-8-三氟甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

以及

8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7-二甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R²为羟基，烷氧基或被卤素取代的烷氧基。在此实施方案内的优选化合物是那些化合物，其中R¹为烷基，氰基，NH₂C(O)或O(CH₂)_nOCH₃。这样化合物的实例包括：

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-7-甲氧基乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

以及

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7-二甲基-8-甲氧基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

在此组内的其它优选化合物是那些化合物，其中R¹为卤素。这种化合物的实例包括：

7-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

7-溴-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

以及

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-(1-甲基乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

在此组内的进一步优选化合物是那些化合物，其中R¹为烷氧基。这种化合物的实例包括：

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7，8-二甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

1，2-二氢-3，7-二甲基-8-甲氧基-5-苯基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

1，2-二氢-7，8-二甲氧基-5-(2-甲氧基苯基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-8-(1-甲基乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

以及

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-7-(1-甲基乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R²为苯基。优选的化合物包括那些化合物，其中R¹为烷氧基，例如，化合物5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-8-苯基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R²为(OCH₂CH₂)_nOCH₃。在此实施方案内的优选化合物是那些化合物，其中R¹为卤素，烷氧基或氰基。这种化合物的实例包括：

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

以及

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R¹和R²一起形成二氧戊环。这样一种化合物的实例为5-(2-氯苯基)-8，10-二氢-7-甲基-1，3-二氧戊环并[4，5-h]吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R¹为卤素。在此实施方案内，优选的化合物是那些化合物，其中R²为卤素；羟基；N(R⁶)₂；O(CH₂)_mNR⁷R⁸，例如，其中NR⁷R⁸形成吗啉环；烷氧基，例如，甲氧基或乙氧基；或

其中n为1或2。

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R¹为(OCH₂CH₂)_nOCH₃。在此实施方案内，优选的化合物是那些化合物，其中R²为烷氧基。

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R¹为NH₂C(O)。在此实施方案内，优选的化合物是那些化合物，其中R²为烷氧基。

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R¹为烷基。在此实施方案内，优选的化合物是那些化合物，其中R²为烷氧基，卤素，烷基或被卤素取代的烷基。

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R¹为烷氧基。在此实施方案内，优选的化合物是那些化合物，其中R²为烷氧基；卤素，例如，氯；苯基；或(OCH₂CH₂)_nOCH₃，其中n为1或2。

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R¹为氰基。在此实施方案内，优选的化合物是那些化合物，其中R²为羟基；烷氧基；O(CH₂)_mNR⁷R⁸，特别是其中NR⁷R⁸形成吗啉环；(OCH₂CH₂)_nOCH₃；或

其中n为1或2，并且m为2。

在另一个实施方案中，本发明提供式IV的化合物，其中R³为氢，即式XXII的化合物。这种化合物的实例包括

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-7-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

以及

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氰基-8-甲氧基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

在再一个实施方案中，本发明提供如上定义的式IV的化合物，其中

R⁴为邻-氯；以及

R¹，R²和R³具有上面给出的含义。

在又一个实施方案中，本发明提供如上定义的式IV的化合物，其中

R³为甲基；

R⁴为邻-氯；以及

R¹和R²具有上面给出的含义。

R¹为卤素或-CN；

R³为甲基；

R⁴为邻-氯；以及

R²具有上面给出的含义。

本发明提供用于合成二取代的吡唑并苯并二氮杂

的方法。在实施例中提供用于合成本发明化合物的适宜方法。通常，本发明的化合物可以根据下面提供的合成方案制备。

下面的合成方案提供用于制备本发明化合物，即式IV的化合物的两种一般方法。方法A中，示于方案1和2中，将式I的苯并二氮杂转化为式IV的化合物。

方案1

在方案1的方法中，根据本领域中已知的程序(WO 2000/064900；Scheibye，S.，等，Bulletin des Societes Chimiques Belges，87：229-38(1978)；Jesberger，M.，等，Synthesis，1929-1958(2003))，将内酰胺I转化为相应的硫代内酰胺II。将硫代内酰胺II与N，N-二甲基乙酰胺的二甲基缩醛反应，优选在升高的温度如60至130℃反应，生成中间体III，其通过与肼反应，生成吡唑衍生物IV。

方案2

在作为方案1的变体的方案2的方法中，或者通过本领域中已知的方法(Walser，A.；等，Chemistry of Heterocyclic Compounds，Chichester，United Kingdom，Vol.50：431-543(1991)；Walser，A.；等，Chemistry ofHeterocyclic Compounds，Chichester，United Kingdom，vol.50：545-629(1991)；Walser，A.；等，Chemistry of Heterocyclic Compounds，Chichester，United Kingdom，vol 50：631-848(1991)；Walser，A.；等，Chemistry ofHeterocyclic Compounds，Chichester，United Kingdom，vol 50：849-946(1991)；Archer，G.A.；等，Chemical Reviews，68：747-84(1968)；Sternbach，L.H.，等，Journal ofOrganic Chemistry，27：3788-96(1962)；U.S.Patent No.3,681,341)，或者通过与磷酰氯反应，然后与甲醇钠反应，将内酰胺I转化为O-甲基醚V。醚V与N，N-二甲基乙酰胺的二甲基缩醛反应，形成中间体VI，其通过与肼反应，生成吡唑衍生物IV。

制备式I化合物的方法在苯并二氮杂

文献(Walser，A.；等，Chemistry of Heterocyclic Compounds，Chichester，United Kingdom，vol.50：431-543(1991)；Walser，A.；等，Chemistry of Heterocyclic Compounds，Chichester，United Kingdom，vol.50：545-629(1991)；Walser，A.；等，Chemistry of Heterocyclic Compounds，Chichester，United Kingdom，vol 50：631-848(1991)；Walser，A.；等，Chemistry ofHeterocyclic Compounds，Chichester，United Kingdom，vol 50：849-946(1991)；Archer，G.A.；等，Chemical Reviews，68：747-84(1968)；Sternbach，L.H.，等，Journal of OrganicChemistry，27：3788-96(1962))中是周知的。

方案3

对于其中取代模式预先没有描述的式I化合物的实例，其制备按照方案3中列出的方法，其中根据在Toyoda，T.，等，Tetrahedron Letters，21：173-6(1980)中所述的方法，在路易斯酸存在下，苯胺衍生物VII与醛VIII缩合，生成氨基醇IX。

式VIII的化合物是可商购的。式VIII的化合物是可商购的，或者可以由可商购的材料通过本领域中已知的程序制备。式VII的化合物，除VIIgg，VIIkk，VIIii和VIIjj之外，是可商购的。式VIIgg和VIIkk的化合物可以例如通过FR1573745的方法制备。化合物VIIii和VIIjj可以通过下面的方法制备，其按照VIIii进行描述。7.34g(0.0347mol)的1-甲氧基-4-硝基-2-异丙氧基苯和15g的阮内镍在80mL的四氢呋喃-乙醇(1∶1)中的混合物在50psi氢气气氛下强力摇动4小时。然后，将混合物过滤通过硅藻土，并且在减压下浓缩，得到4.57g的3-甲氧基-4-异丙氧基苯胺，将其直接用于下一步骤。可以以类似的方法，由2-甲氧基-4-硝基-1-异丙氧基苯制备VIIjj，2-甲氧基-4-硝基-1-异丙氧基苯可以由可商购的材料，使用Castello等，Tetrahedron Letters，26：2489-92(1985)的程序来制备。

由本领域中已知的方法(参见例如，上述的Walser参考资料；Sugasawa，T.；等，Journal of Heterocyclic Chemistry，16(3)：445-8(1979)；以及Leroux，F.，等，Journal ofOrganic Chemistry，68：4693-4699(2003))，可以进行IX至相应的氨基酮X的氧化。通过下面的方法用甘氨酸等价物衍生X：X与溴乙酰溴反应，接着与氨反应提供XII或与叠氮化钠反应，接着叠氮化物进行胺还原，提供XII，然后进行环化，成为内酰胺I(参见例如，上面所述的Walser参考资料)。

方案4

备选地，可以由方案4中列出的方法B，生成式IV的吡唑衍生物。中间体X与氨基-氯-吡唑衍生物XIII反应，生成中间体XIV。由Taniguchi，T.，等，Tetrahedron Letters，39：4679-4682(1998)中所述的一般方法，进行烯丙基从XIV中的去除，其中中间体XIV在氢化二异丁铝和镍催化剂存在下反应，生成吡唑衍生物IV。

由方案5和方案6中列出的方法制备氨基-氯-吡唑衍生物XIII。

方案5

方案6

方案5中，乙基-2-氰基-3-乙氧基-2-丁烯酸酯与2-丙烯基-肼反应，生成吡唑中间体XV。可以由可商购的材料，通过美国专利2,824,121中所述的方法制备乙基-2-氰基-3-乙氧基-2-丁烯酸酯。氨基酯XV通过重氮化并且在铜盐存在下与氯化物反应而转化为相应的氯衍生物XVI。该酯在碱性条件下水解，提供吡唑酸中间体XVII。酸XVII与氯甲酸甲酯反应，接着与叠氮化物反应，生成中间体羰基叠氮化物吡唑XVIII，其通过加热，接着后处理，提供氨基-氯-吡唑衍生物XIII。备选地，氨基-氯-吡唑衍生物XIII可以通过烯丙基化硝基吡唑XIX(生成XX)，接着将硝基还原为氨基来制备(方案6)。

在R¹或R²为可以进行进一步转化的官能团时，可以得到R¹和R²的另外取代。例如，在R¹和R²为氟的情况下，通过在碱存在下与醇或胺反应，可以进行单取代。这些反应示于方案7、8和9。

方案7

该反应可以用来将化合物如(2-氨基-4，5-二氟苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xmm)转化为化合物如(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xa)和(2-氨基-5-氟-4-(3-(4-吗啉基)丙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xi)。

方案8

该反应可以用来将化合物如5-(2-氯苯基)-7，8-二氟-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Imm)转化为化合物如5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ia)和5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ib)。

方案9

该反应可以用来将化合物如5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IImm)转化为化合物如5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIa)，5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIf)，5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-乙氧基-7-氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIg)，和5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-(1-甲基乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂-2-硫酮(IIh)。

在其中R2为甲氧基的实例中，可以将中间体脱甲基化为相应的羟基衍生物，然后可以将其进一步烷基化。这示于方案10中。

方案10

该反应可以用来例如将化合物如7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Id)转化为化合物如7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ij)，7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Inn)，7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ioo)，和7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ipp)。该反应还可以用来将式5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ib)的化合物转化为化合物如5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ik)，5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-((2-甲氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iv)，5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iqq)，5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(1-叔丁氧羰基-4-哌啶基)甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Irr)和8-(2-氯乙氧基)-5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iss)。

通过本领域中已知的方法，例如在美国专利6,440,959中所述的那些方法，可以将其中R¹为CN或C(O)N(R⁶)₂的式IV化合物转化为其中R¹为COOH或COO烷基的化合物。

对于其中R³为H(式XXII的化合物)的那些式IV的化合物，可以根据方案11中列出的一般方法来制备所述的化合物。

方案11

在共同拥有的美国专利6,440,959中，对于其中R²为H的实例，预先描述了该方法。硫代内酰胺II与二甲基甲酰胺二乙基乙缩醛反应，制备中间体XXI，然后其用肼处理，得到吡唑并苯并二氮杂

XXII。可以在

下面的实施例90至92中发现此反应的具体实例。

取代表

式XIV的化合物是可以用作制备式IV的化合物中的中间体的新型化合物：

其中

为任选被烷基或C(O)OR⁶取代的6元杂环；

或者R¹和R²一起形成5元杂环；

R⁴为氢，卤素，CN，NO₂，烷基或烷氧基；

每个R⁶独立地为氢或烷基；

每个n独立地为1，2或3；以及

m为2，3或4。在一个实施方案中，本发明提供式XIV的化合物。在另一个实施方案中，本发明提供式XIV的下列具体化合物：

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7，8-三甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7，8-二甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3，7-二甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

1，2-二氢-7，8-二甲氧基-5-(2-甲氧基苯基)-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-8，10-二氢-7-甲基-1，3-二氧戊环并[4，5-h]吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

7-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-氟-7-甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-8-三氟甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-8-苯基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7-二甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-8-(1-甲基乙氧基)-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-7-(1-甲基乙氧基)-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

以及

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-7-甲氧基乙氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

本发明提供药物组合物，其包含至少一种本发明的化合物，例如式IV的化合物或其药用盐，以及药用载体。

例如，可以以片剂、包衣片、锭剂、硬或软明胶胶囊、溶液、乳剂或混悬剂形式口服给药本发明的药物组合物。还可以例如以栓剂形式经直肠或例如以注射液形式非肠道给药所述的组合物。

本发明的药物组合物包含一种或多种式IV的化合物和/或其药用盐。可以按照本领域中公知的方式、例如通过常规混合、包囊、溶解、制粒、乳化、包埋、制锭或冻干工艺，制备这样的组合物。可以使用治疗上惰性的无机或有机载体配制这些药物组合物。乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸(steric acid)或其盐可以用作片剂、包衣片、锭剂和硬明胶胶囊的这类载体。合适的软明胶胶囊载体包括植物油、蜡和脂肪。根据活性物质的性质，在软明胶胶囊的情况中一般不需要载体。制备溶液和糖浆剂的适宜载体为水、多元醇类、蔗糖、转化糖和葡萄糖。注射用的适宜载体为水、醇类、多元醇类、甘油、植物油、磷脂类和表面活性剂。用于栓剂的适宜载体为天然或硬化油、蜡、脂肪和半液体多元醇类。

药物组合物还可以含有防腐剂、加溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、调味剂、用于改变渗透压的盐、缓冲剂、包衣剂或抗氧化剂。它们还可以含有其它治疗上有价值的物质，包括其它非通式IV的那些活性组分。

如上所述，式IV的化合物及它们的药用盐，以及含有这些化合物的组合物可以用于治疗或控制细胞增殖疾病，特别是肿瘤疾病。这些化合物和含有所述化合物的制剂可以特别用于治疗或控制实体瘤，诸如乳腺、前列腺、肺和结肠肿瘤。

式IV化合物的治疗有效量或剂量可以在宽限内改变，并且将被调整在每种特定的情况下的个体需要。一般来说，在对体重约为70kg的成年人进行口服给药或非肠道给药的情况下，约10mg至约10,000mg、优选约200mg至约1,000mg的每日剂量应是合适的，不过，必要时，可以超过上限。可以将每日剂量作为单剂量或分剂量给药，或对非肠道给药而言，可以将其作为连续输注给药。

下列实施例用来帮助理解本发明并且决不是用来限制其范围的。

实施例：

总则：在下面的实施例中，温度以℃表示。对于质谱数据，给出的值是MH+/Z离子形式，其是在Micromass Platform II质谱仪测量的、正模式电雾化中得到的。

在描述一个实施例是以类似于另一个实施例的方式进行的情况下，全部条件与在原始实施例中的规定的那些条件相同，不同之处在于，在一些情况下，采用不同量的材料。在提供不同量的原料的情况下，以与在原始实施例中相对于该原料的相同比例的量使用在此实施例中采用的其它成分。

制备氨基二苯甲酮中间体X(方案3)

实施例1

制备(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xa)

于-20至-30℃，将2.0g(0.0142摩尔)的4-氟-3-甲氧基-苯胺在20mL的二氯甲烷中的溶液滴加至在20mL二氯甲烷中的2.24g(0.0142摩尔)的二氯苯基硼烷中，接着加入在10mL二氯甲烷中的3.59g(0.0355摩尔)的三乙胺。将混合物搅拌30分钟；然后，加入在30mL的二氯甲烷中的2.0g(0.0142摩尔)的2-氯苯甲醛。移除冷却浴，并且将混合物于室温搅拌4小时。在快速搅拌的条件下，将100mL的冷水加入至反应混合物中，接着加入150mL的盐水。分离二氯甲烷层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。将剩余物(4.5g，为褐色油)与10mL二乙醚和30mL的2M氢氧化钠一起于室温搅拌1小时。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，并且将乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到3.6g的相应氨基醇IXa(R¹＝F，R²＝OCH₃，R⁴＝Cl)，将其直接用于下一步骤。

将在上面反应中得到的氨基醇(3.6g)溶解于60的二氯甲烷，并且与6.09g(0.071摩尔)的二氧化锰一起搅拌。在4小时后，将混合物过滤，并且在减压下浓缩，得到4.2g粗的酮(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xa)，为褐色油。将粗酮由用乙酸乙酯-己烷洗脱的硅胶色谱纯化，得到2.03g的(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xa)。MH+/Z＝280。

实施例2

制备(2-氨基-5-溴-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xd)

(2-氨基-5-溴-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xd)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.086摩尔的4-溴-3-甲氧基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝340。

实施例3

制备(2-氨基-4，5-二甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xw)

(2-氨基-4，5-二甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xw)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.123摩尔的3，4-二甲基苯胺反应而制备的。

实施例4

制备(2-氨基-4，5-二甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xx)

(2-氨基-4，5-二甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xx)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.0196摩尔的3，4-二甲氧基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝292。

实施例5

制备(2-氨基-4-氯-5-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xy)

(2-氨基-4-氯-5-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xy)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.019摩尔的3-氯-4-甲氧基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝296。

实施例6

制备(2-氨基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xz)

(2-氨基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xz)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.0226摩尔的3-甲氧基-4-甲基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝276。

实施例7

制备(2-氨基-4，5-二甲氧基苯基)-(2-甲氧基苯基)-甲酮(Xaa)

(2-氨基-4，5-二甲氧基苯基)-(2-甲氧基苯基)-甲酮(Xaa)是以类似于实施例1的方式，通过使2-甲氧基苯甲醛与0.0196摩尔的3，4-二甲氧基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝288。

实施例8

制备(6-氨基-1，3-苯并二氧戊环-5-基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xbb)

(6-氨基-1，3-苯并二氧戊环-5-基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xbb)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.020摩尔的3，4-亚甲二氧基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝276。

实施例9

制备(2-氨基-5-氯-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xcc)

(2-氨基-5-氯-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xcc)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.019摩尔的3-甲氧基-4-氯苯胺反应而制备的。MH+/Z＝296。

实施例10

制备(2-氨基-4-氟-5-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xdd)

(2-氨基-4-氟-5-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xdd)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.0223摩尔的3-氟-4-甲氧基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝280。

实施例11

制备(2-氨基-5-甲氧基-4-三氟甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xee)

(2-氨基-5-甲氧基-4-三氟甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xee)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.0263摩尔的4-甲氧基-3-三氟甲基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝330。

实施例12

制备(2-氨基-5-甲氧基-4-苯基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xff)

(2-氨基-5-甲氧基-4-苯基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xff)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.0226摩尔的4-甲氧基-3-苯基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝338。

实施例13

制备(2-氨基-5-甲氧基-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xgg)

(2-氨基-5-甲氧基-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xgg)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.0296摩尔的4-甲氧基-3-(2-甲氧基乙氧基)苯胺反应而制备的。MH+/Z＝336。

实施例14

制备(2-氨基-4-氯-5-甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xhh)

(2-氨基-4-氯-5-甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xhh)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.0318摩尔的3-氯-4-甲基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝280。

实施例15

制备(2-氨基-5-甲氧基-4-(1-甲基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xii)

(2-氨基-5-甲氧基-4-(1-甲基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xii)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.0252摩尔的3-异丙氧基-4-甲氧基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝320。

实施例16

制备(2-氨基-4-甲氧基-5-(1-甲基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xjj)

(2-氨基-4-甲氧基-5-(1-甲基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xjj)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.0267摩尔的4-异丙氧基-3-甲氧基苯胺反应而制备的。MH+/Z＝320。

实施例17

制备(2-氨基-4-甲氧基-5-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xkk)

(2-氨基-4-甲氧基-5-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xkk)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.0242摩尔的3-甲氧基-4-(2-甲氧基乙氧基)苯胺反应而制备的。MH+/Z＝336。

实施例18

制备(2-氨基-4，5-二氟苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xmm)

(2-氨基-4，5-二氟苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xmm)是以类似于实施例1的方式，通过使2-氯苯甲醛与0.30摩尔的3，4-二氟苯胺反应而制备的。MH+/Z＝268。

实施例19

由(2-氨基-4，5-二氟苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xmm)制备(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xa)

将2.01g(0.0075摩尔)的(2-氨基-4，5-二氟苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xmm)，24mL的甲醇和2.08mL的25％甲醇钠溶液的溶液在惰性气氛下加热回流80分钟。然后将混合物冷却，放入乙酸乙酯中，并且用盐水洗涤两次。将乙酸乙酯萃取物用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩，得到2.04g的氨基二苯甲酮(benzopheneone)(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xa)，为结晶黄色固体。MH+/Z＝280。

实施例20

制备(2-氨基-5-氟-4-(3-(4-吗啉基)丙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xi)

将1.4g(0.035摩尔)的60％氢化钠，25mL的二噁烷，2.68g(0.01摩尔)的(2-氨基-4，5-二氟苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xmm)和2.23g(0.016摩尔)的4-吗啉丙醇的混合物于室温搅拌4小时。将混合物通过加入50mL的水而猝灭。将混合物用乙酸乙酯萃取，并且将萃取物用水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。将剩余物与己烷一起研磨，然后从己烷-乙酸乙酯中重结晶，得到2.55g的(2-氨基-5-氟-4-(3-(4-吗啉基)丙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xi)。MH+/Z＝393。

由氨基二苯甲酮X制备内酰胺I(方案3)

实施例21

制备7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Id)

在30分钟内，将3.5mL(0.04摩尔)的溴乙酰溴在3.5mL的二氯甲烷中的溶液加入至11.8g(0.035摩尔)的(2-氨基-5-溴-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xd)、2.94mL的吡啶和350mL的二氯甲烷的冷(0℃)溶液中。将混合物于室温搅拌另外1小时，然后在水和二氯甲烷之间分配。将二氯甲烷层用饱和硫酸铜溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到16.5g的N-溴乙酰苯胺XId。

将上面得到的粗的N-溴乙酰苯胺(XId)(16.5g，0.0357摩尔)溶解于250mL的四氢呋喃和80mL的甲醇中。将混合物冷却至-78℃，并且加入35mL的蒸馏氨。将混合物搅拌1.5小时；然后，移除冷却浴，并且将混合物于室温搅拌另外的2小时，在此期间，使过量的氨汽化。将混合物减压下浓缩，并且将剩余物在乙酸乙酯和水之间分配。将乙酸乙酯层依次用水，然后用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩，提供13.6g粗的N-氨基-酰苯胺XIId。

将在上面反应中得到的粗XIId悬浮于375mL的乙醇中，回流24小时，然后冷却。通过过滤收集产物，得到9.2g的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Id)。MH+/Z＝379。

实施例22

制备5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ia)

5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ia)是以实施例21的方式，通过使0.125摩尔的(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)(2-氯苯基)-甲酮(Xa)与溴乙酰溴反应而制备的。MH+/Z＝319。

实施例23

制备5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Ii)

5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Ii)是以实施例21的方式，通过使0.0062摩尔的(2-氨基-5-氟-4-(3-(4-吗啉基)丙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xi)与溴乙酰溴反应而制备的。MH+/Z＝432。

实施例24

制备5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-7-甲基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iz)

5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-7-甲基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iz)是以实施例21的方式，通过使0.13摩尔的(2-氨基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xz)与溴乙酰溴反应而制备的。

实施例25

制备5-(2-氯苯基)-7，8-二氟-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Imm)

5-(2-氯苯基)-7，8-二氟-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Imm)是以实施例21的方式，通过使0.019摩尔的(2-氨基-4，5-二氟苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xmm)与溴乙酰溴反应而制备的。MH+/Z＝307。

内酰胺的转化(方案8)

实施例26

5-(2-氯苯基)-7，8-二氟-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Imm)转化为5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ia)

采用微波加热，在密封的反应容器中，将0.10g(0.00033摩尔)的5-(2-氯苯基)-7，8-二氟-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Imm)，2mL的甲醇和0.03g的氢化钠的混合物于100℃加热40分钟。然后将混合物冷却，用乙酸乙酯稀释，并且依次用水，然后用盐水洗涤。将混合物用无水硫酸钠干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到0.103g的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ia)，为白色晶体。MH+/Z＝319。

实施例27

5-(2-氯苯基)-7，8-二氟-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Imm)转化为5-(2-氯苯基)-8-N，N-二甲氨基-1，3-二氢-7-氟-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Il)

采用微波加热，将0.9201g(0.003摩尔)的5-(2-氯苯基)-7，8-二氟-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Imm)和二甲胺在四氢呋喃中的3mL 2.0M溶液的混合物于150℃加热30分钟。将混合物冷却，然后减压下浓缩。将剩余物与乙酸乙酯-己烷一起研磨，得到0.63g的5-(2-氯苯基)-8-N，N-二甲氨基-1，3-二氢-7-氟-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Il)，为黄色固体。MH+/Z＝332。

内酰胺的转化(方案10)

实施例28

7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Id)转化为7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ij)

将1.00g(0.0263摩尔)的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Id)在85mL的1，2-二氯乙烷中的溶液与1.053g(0.0079摩尔)的三氯化铝一起搅拌过夜。加入另外的1.00g的三氯化铝，并且将混合物搅拌过夜，此时间之后，将混合物倾倒入冰水中。将混合物用二氯甲烷-甲醇萃取，并且将有机层用水洗涤两次，然后用无水硫酸钠干燥。将溶液在减压下浓缩，提供0.700g的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ipp)(MH+/Z＝465)，其具有用于下一步骤的足够纯度。

在氩气氛下，来自上面步骤的1.8281g(0.005摩尔)的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ipp)、0.636g的碳酸钠，0.9818g(0.006摩尔)的4-(3-氯丙基)-吗啉和50mL的二甲基甲酰胺的混合物于50℃搅拌73小时。然后将混合物冷却，并且在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠之间分配。然后将水层用乙酸乙酯反萃取。将乙酸乙酯层依次用饱和碳酸氢钠，水，盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到粗的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ij)。通过用乙酸乙酯-甲醇(90∶10)洗脱的硅胶色谱，得到纯的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ij)(1.721g)。MH+/Z＝492。

实施例29

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ib)转化为5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ik)

将1.2g(0.0037摩尔)的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ib，实施例30中制备)在100mL的1，2-二氯乙烷中的溶液与2.5g(0.0187摩尔)的三氯化铝一起于42℃搅拌8小时，之后加入另外的2.5g的三氯化铝。将加热和搅拌继续另外的48小时，此时间之后，加入另外的2.5g的三氯化铝。6小时后，将混合物冷却，然后倾倒在冰水上。将该水用二氯甲烷-甲醇-四氢呋喃(80∶10∶10)萃取，并且将萃取物用水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到1.6g粗的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Iqq)。由用乙酸乙酯-甲醇(90∶10)洗脱的硅胶色谱纯化，得到1.17g的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iqq)(MH+/Z＝312)，其具有用于下一步骤足够的纯度。

在氩气氛下，将0.322g(0.00103摩尔)的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iqq)、6mL的二甲基甲酰胺，0.132g(0.00124摩尔)的碳酸钠和0.2028g(0.00124摩尔)的4-(3-氯丙基)-吗啉的混合物于50℃搅拌24小时。然后将混合物冷却，并且在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯反萃取，然后将乙酸乙酯萃取物用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。将剩余物由乙腈-甲醇(90∶10)洗脱的硅胶色谱纯化，提供0.199g的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ik)。MH+/Z＝439。

实施例30

7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Id)转化为5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Ib)

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ib)是由7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Id)，通过在钯催化剂(四(三苯膦)钯)存在下，根据与由Tschaen等，Synthetic Communications，24：887-90(1994)所述的那些条件类似的条件，与氰化锌反应而制备的。在氩气氛下，将0.9491g(0.0025摩尔)的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Id)，0.176g(0.0015摩尔)的氰化锌、4mL的二甲基甲酰胺和0.289g(0.00025摩尔)的四(三苯膦)钯的混合物于110℃加热24小时。然后将混合物冷却，放入乙酸乙酯中，并且用0.2M碳酸钠溶液洗涤。将水相用乙酸乙酯反萃取，并且将乙酸乙酯层用水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。使剩余物经过用乙酸乙酯-己烷(4∶1)洗脱的硅胶色谱，得到0.620g的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ib)。MH+/Z＝326。

实施例31

7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Inn)转化为5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Im)

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Im)是以类似于实施例30的方式，在四(三苯膦)钯存在下，通过使0.001摩尔的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Inn)与氰化锌反应而制备的。MH+/Z＝370。

实施例32

7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ioo)转化为5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(In)

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(In)是以类似于实施例30的方式，在四(三苯膦)钯存在下，通过使0.0017摩尔的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ioo)与氰化锌反应而制备的。MH+/Z＝414。

实施例33

由7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ipp)制备7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Inn)

向0.300g(0.00082摩尔)实施例28中制备的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ipp)、60mL的四氢呋喃、0.070mL的2-甲氧基乙醇和0.2586g的三苯膦的搅拌混合物中，加入0.194mL(0.00099摩尔)的偶氮二羧酸二异丙酯。将混合物搅拌过夜；然后，加入另外的0.2586g的三苯膦，0.070mL的2-甲氧基乙醇和0.194mL的偶氮二羧酸二异丙酯。将混合物搅拌另外1小时，然后减压下浓缩。使剩余物经过二氯甲烷-甲醇(98∶2)洗脱的硅胶色谱，得到0.212g的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Inn)。MH+/Z＝423。

实施例34

由7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ipp)制备7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ioo)

-2-酮(Ioo)是以类似于实施例33的方式，通过使0.00238摩尔的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ipp)与2-(2-甲氧基乙氧基)乙醇反应而制备的。MH+/Z＝467。

实施例35

由5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iqq)制备8-(2-氯乙氧基)-5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iss)

8-(2-氯乙氧基)-5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iss)是以类似于实施例33的方式，通过使0.0031摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iqq)与2-氯乙醇反应而制备的。MH+/Z＝374。

实施例36

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-((2-甲氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iv)

在氩气氛下，将1.2g(0.0032摩尔)的8-(2-氯乙氧基)-5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iss，实施例35中制备)，2.85g(0.032摩尔)的2-((2-甲氧基乙基)甲氨基)乙醇，20mL的四氢呋喃和4.8g(0.032摩尔)的碘化钠的混合物于83℃的油浴中加热20小时。将混合物冷却，然后在乙酸乙酯和0.6M碳酸氢钠溶液之间分配。将乙酸乙酯层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。使剩余物经过用乙腈-甲醇(80∶20)洗脱的硅胶色谱，得到0.233g的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-((2-甲氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iv)。MH+/Z＝427。

实施例37

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-((2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(It)

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-((2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(It)是以类似于实施例36的方式，通过使0.00414摩尔的8-(2-氯乙氧基)-5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iss)与N-甲基哌嗪反应而制备的。

由内酰胺(I)生成硫代内酰胺(II)(方案1)

实施例38

制备7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IId)

将2.0g(0.0053摩尔)的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Id)，200mL的1，2-二甲氧基乙烷和2.13g(0.0053摩尔)的Lawesson试剂(2，4-双(4-甲氧基苯基)-2，4-二硫-1，3，2，4-二噻二磷庚烷(dithiadiphosphetane))的混合物于85℃加热1小时，然后冷却，并且倾倒在冰冷却的碳酸氢钠溶液上。将混合物用乙酸乙酯-甲醇(9∶1)萃取两次，并且将有机层依次用水和盐水洗涤。将合并的萃取物用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。剩余物与乙酸乙酯一起研磨，提供1.7g的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IId)。MH+/Z＝395。

实施例39

制备5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIa)

5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIa)是以类似于实施例38的方式，通过使0.0284摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ia)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝335。

实施例40

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIb)

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIb)是以类似于实施例38的方式，通过使0.0019摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ib)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝342。

实施例41

制备5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIi)

5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂-2-硫酮(IIi)是以类似于实施例38的方式，通过使0.0053摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(内酰胺Ii)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝448。

实施例42

制备7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIj)

7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIj)是以类似于实施例38的方式，通过使0.0011摩尔的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ij)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝508。

实施例43

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIk)

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(Ik)是以类似于实施例38的方式，通过使0.00057摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ik)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝455。

实施例44

制备5-(2-氯苯基)-8-N，N-二甲氨基-1，3-二氢-7-氟-2H-1，4-苯并二氮杂-2-硫酮(IIl)

5-(2-氯苯基)-8-N，N-二甲氨基-1，3-二氢-7-氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIl)是以类似于实施例38的方式，通过使0.006摩尔的5-(2-氯苯基)-8-N，N-二甲氨基-1，3-二氢-7-氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Il)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝348。

实施例45

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIm)

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂-2-硫酮(IIm)是以类似于实施例38的方式，通过使0.00081摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Im)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝386。

实施例46

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIn)

-2-硫酮(IIn)是以类似于实施例38的方式，通过使0.00089摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(内酰胺In)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝430。

实施例47

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-((2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIt)

-2-硫酮(IIt)是以类似于实施例38的方式，通过使0.00069摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-((2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(It)与Lawesson试剂反应而制备的。

实施例48

-2-硫酮(IIv)

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-((2-甲氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIv)是以类似于实施例38的方式，通过使0.00052摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-((2-甲氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iv)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝443。

实施例49

制备5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二甲基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIw)

5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二甲基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIw)是以类似于实施例38的方式，通过使0.0006摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二甲基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iw)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝315。

实施例50

-2-硫酮(IIz)

5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-7-甲基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIz)是以类似于实施例38的方式，通过使0.0064摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-7-甲基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iz)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝331。

实施例51

制备5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IImm)

5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IImm)是以类似于实施例38的方式，通过使0.003摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二氟-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Imm)与Lawesson试剂反应而制备的。MH+/Z＝332。

硫代内酰胺的转化(方案9)

实施例52

制备5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIf)

将1.0g(0.0031摩尔)的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IImm)，0.372g的氢化钠和20mL的2-甲氧基乙醇的混合物在微波容器中于120℃加热30分钟，冷却，然后用乙酸乙酯稀释。将混合物依次用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。将剩余物与乙酸乙酯一起研磨，得到0.74g的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIf)，为白色固体，然后将其根据实施例58用来制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVf)，而没有进一步纯化。MH+/Z＝379。

实施例53

制备5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-乙氧基-7-氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIg)

将0.5g(0.00155摩尔)的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IImm)、10mL的乙醇和0.62g的60％氢化钠的混合物加热回流24小时。将混合物冷却，用乙酸乙酯稀释，并且依次用水，然后用盐水洗涤。将乙酸乙酯萃取物用无水硫酸钠干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到0.52g的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-乙氧基-7-氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIg)，为黄色固体。MH+/Z＝349。

实施例54

制备5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-(1-甲基乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIh)

-2-硫酮(IImm)，10mL的异丙醇和0.62g的60％氢化钠的混合物加热回流5小时。将混合物冷却，用乙酸乙酯稀释，并且依次用水，然后用盐水洗涤。将乙酸乙酯萃取物用无水硫酸钠干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到1.2g的剩余物，其与己烷和乙酸乙酯一起研磨，得到0.76g的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-(1-甲基乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIh)，为白色固体。MH+/Z＝363。

由硫代内酰胺II制备吡唑并苯并二氮杂

IV(方案2)

实施例55

制备7-溴-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVd)

将1.8g(0.00455摩尔)的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂-2-硫酮(IId)、2.26mL的1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺和20mL的二甲基甲酰胺的混合物于室温搅拌1.5小时，然后于110℃搅拌5小时。将混合物冷却，并且减压下浓缩。粗中间体IIId与0.713mL的无水肼，9mL的甲醇和24mL的二氯甲烷的溶液一起搅拌26小时，然后在乙酸乙酯和水之间分配。将乙酸乙酯层用水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。经过用乙酸乙酯洗脱的硅胶色谱，得到0.690g的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVd)。从二氯甲烷中重结晶，提供晶体7-溴-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVd)，mp 210-211℃。MH+/Z＝417。

实施例56

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVa)

(IVa)是以类似于实施例55的方式，通过使0.0224摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIa)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝357。

实施例57

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVb)

(IVb)是以类似于实施例55的方式，通过使0.0016摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIb)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝364。

实施例58

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVf)

(IVf)是以类似于实施例55的方式，通过使0.0026摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂-2-硫酮(IIf)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝401。

实施例59

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVg)

(IVg)是以类似于实施例55的方式，通过使0.0016摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-乙氧基-7-氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIg)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝371。

实施例60

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-(1-甲基乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVh)

(IVh)是以类似于实施例55的方式，通过使0.00198摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-(1-甲基乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIh)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝385。

实施例61

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVi)

(IVi)是以类似于实施例55的方式，通过使0.0045摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(硫代内酰胺IIi)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝470。

实施例62

制备7-溴-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVj)

(IVj)是以类似于实施例55的方式，通过使0.0011摩尔的7-溴-5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIj)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝530。

实施例63

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(IVk)

(IVk)是以类似于实施例55的方式，通过使0.00054摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(3-(4-吗啉基)丙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(硫代内酰胺IIk)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝477。

实施例64

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-N，N-二甲氨基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(IVl)

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-N，N-二甲氨基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVl)是以类似于实施例55的方式，通过使0.00187摩尔的5-(2-氯苯基)-8-N，N-二甲氨基-1，3-二氢-7-氟-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIl)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝370。

实施例65

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVm)

(IVm)是以类似于实施例55的方式，通过使0.00048摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基乙氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIm)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝408。

实施例66

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(IVn)

(IVn)是以类似于实施例55的方式，通过使0.00067摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂-2-硫酮(IIn)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝452。

实施例67

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-(2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(IVt)

(IVt)是以类似于实施例55的方式，通过使0.00062摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-((2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙氧基))-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIt)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝476。

实施例68

制备5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-(2-((2-甲氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVv)

5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，2-二氢-8-(2-((2-甲氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVv)是以类似于实施例55的方式，通过使0.0005摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-(2-((2-甲氧基乙基)甲氨基)-乙氧基)-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIv)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝465。

实施例69

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7，8-三甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(IVw)

(IVw)是以类似于实施例55的方式，通过使0.0005摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二甲基-2H-1，4-苯并二氮杂-2-硫酮(IIw)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝337。

实施例70

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7-二甲基-8-甲氧基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVz)

(IVz)是以类似于实施例55的方式，通过使0.0005摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-7-甲基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIz)与1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺反应，然后与肼反应而制备的。MH+/Z＝353。

由内酰胺I制备吡唑并苯并二氮杂

IV(方案2)

实施例71

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(IVa)

向0℃的3.0g(0.0094摩尔)的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Ia)，11.8mL的乙基二异丙胺、4.62g的1，2，4-三唑和45mL的四氢呋喃的混合物中，加入1.575mL的磷酰氯。20分钟之后，移除冷却浴，并且将混合物于室温搅拌另外60分钟。然后，将17mL4.37M甲醇钠的甲醇溶液加入至反应混合物中。搅拌2小时后，加入另外的5mL甲醇钠溶液，并且搅拌混合物过夜。然后将混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将乙酸乙酯层依次用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩，得到3.2g的5-(2-氯苯基)-7-氟-2，8-二甲氧基-3H-1，4-苯并二氮杂

(中间体Va)，其具有用于下一步骤中的足够纯度。

将3.0g上面制备的中间体Va、30mL的二甲基甲酰胺和13.2mL的1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺的混合物于110℃加热24小时，然后冷却。将混合物在减压下浓缩，得到粗的中间体VIa，将其直接用于下一步骤。将剩余物溶解于48mL的二氯甲烷和15mL的甲醇中，并且与1.41mL的无水肼反应30小时。将混合物在水和乙酸乙酯之间分配。将水相用乙酸乙酯反萃取，并且将乙酸乙酯层用水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。使剩余物经过用乙酸乙酯-己烷(8∶1)洗脱的硅胶色谱，得到2.05g的5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVa)。将该材料从己烷-二氯甲烷中结晶，得到IVa，为黄色固体，mp 217-218℃。MH+/Z＝357。

由氨基二苯甲酮X与吡唑XIII制备吡唑并苯并二氮杂

IV(方案4)。

实施例72

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7，8-三甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVw)

将3.0g(0.0116摩尔)的(2-氨基-4，5-二甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xw)、2.0g(0.0116摩尔)的4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)，2.21g(0.0116摩尔)的对甲苯磺酸一水合物和40mL的异丙醇的混合物在密封管中于170℃加热90分钟。将混合物减压下浓缩，并且将剩余物用乙酸乙酯稀释，然后用饱和碳酸氢钠溶液洗涤两次。将水相洗涤物用乙酸乙酯反萃取，并且将合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。剩余物与己烷一起研磨，得到中间体5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7，8-三甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVw)，为黄色固体。滤液由用乙酸乙酯-二氯甲烷(1∶1)洗脱的硅胶色谱纯化，提供另外的XIVw，并且与上面得到的材料合并，总产量为2.7g的XIVw，为黄色固体，将其直接用于下一步骤。

向-40℃的2.7g(0.00716摩尔)的5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7，8-三甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVw)、0.155g(0.00029摩尔)的1，3-双(二苯基膦基)丙烷氯化镍(II)和140mL的无水四氢呋喃的溶液中加入43mL 1M的氢化二异丁基铝的甲苯溶液。将混合物于0℃搅拌6小时，然后通过小心地加入冰水而猝灭。将混合物用乙酸乙酯萃取两次。将合并的乙酸乙酯萃取物用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。剩余物由用乙酸乙酯-二氯甲烷(1∶1)洗脱的硅胶色谱纯化，得到1.5g的5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7，8-三甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVw)，为橙色固体。MH+/Z＝337。

实施例73

(IVa)

(IVa)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0014摩尔的(2-氨基-5-氟-4-甲氧基苯基)(2-氯苯基)-甲酮(Xa)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVa)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝357。

实施例74

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7，8-二甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVx)

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7，8-二甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(IVx)是以类似于实施例72的方式，通过使0.00093摩尔的(2-氨基-4，5-二甲氧基苯基)(2-氯苯基)-甲酮(Xx)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7，8-二甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVx)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝369。

实施例75

制备8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVy)

(IVy)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0012摩尔的(2-氨基-4-氯-5-甲氧基苯基)(2-氯苯基)-甲酮(Xy)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVy)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝373。

实施例76

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3，7-二甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVz)

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3，7-二甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVz)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0012摩尔的(2-氨基-4-甲氧基-5-甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xz)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3，7-二甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVz)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝353。

此外，还从脱烷基化反应中分离出0.4％的1，2-二氢-3，7-二甲基-8-甲氧基-5-苯基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVe)。MH+/Z＝319。

实施例77

制备1，2-二氢-7，8-二甲氧基-5-(2-甲氧基苯基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(IVaa)

(IVaa)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0023摩尔的(2-氨基-4，5-二甲氧基苯基)-(2-甲氧基苯基)-甲酮(Xaa)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体1，2-二氢-7，8-二甲氧基-5-(2-甲氧基苯基)-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVaa)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝365。

实施例78

制备5-(2-氯苯基)-8，10-二氢-7-甲基-1，3-二氧戊环并[4，5-h]吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVbb)

(IVbb)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0023摩尔的(6-氨基-1，3-苯并二氧戊环-5-基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xbb)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体5-(2-氯苯基)-8，10-二氢-7-甲基-1，3-二氧戊环(dioxolo)-1-(2-丙烯基)-[4，5-h]吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVbb)进行脱烷基化制备的。MH+/Z＝353。

实施例79

制备7-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(IVcc)

(IVcc)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0023摩尔的(2-氨基-5-氯-4-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xcc)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体7-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVcc)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝373。

实施例80

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-氟-7-甲氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVdd)

(IVdd)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0023摩尔的(2-氨基-4-氟-5-甲氧基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xdd)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-氟-7-甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVdd)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝357。

实施例81

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-8-三氟甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVee)

(IVee)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0023摩尔的(2-氨基-5-甲氧基-4-三氟甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xee)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-8-三氟甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVee)进行脱烷基化制备的。MH+/Z＝407。

实施例82

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-8-苯基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVff)

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-8-苯基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVff)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0023摩尔的(2-氨基-5-甲氧基-4-苯基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xff)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-3-甲基-8-苯基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVff)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝415。

实施例83

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVgg)

5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(IVgg)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0023摩尔的(2-氨基-5-甲氧基-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xgg)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-8-甲氧基乙氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVgg)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝413。

实施例84

制备8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7-二甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVhh)

8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7-二甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(IVhh)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0023摩尔的(2-氨基-4-氯-5-甲基苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xhh)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体8-氯-5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-3，7-二甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(XIVhh)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝357。

实施例85

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-8-(1-甲基乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVii)

(IVii)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0023摩尔的(2-氨基-5-甲氧基-4-(1-甲基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xii)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-甲氧基-8-(1-甲基乙氧基)-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVii)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝397。

实施例86

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-7-(1-甲基乙氧基)-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVjj)

(IVjj)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0023摩尔的(2-氨基-4-甲氧基-5-(1-甲基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xjj)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-7-(1-甲基乙氧基)-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVjj)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝397。

实施例87

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-7-甲氧基乙氧基-3-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(IVkk)

(IVkk)是以类似于实施例72的方式，通过使0.0014摩尔的(2-氨基-4-甲氧基-5-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-(2-氯苯基)-甲酮(Xkk)与4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)反应，随后用氢化二异丁基铝对中间体5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-7-甲氧基乙氧基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XIVkk)进行脱烷基化而制备的。MH+/Z＝413。

实施例88

制备4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)，方法1

(方案5)

步骤1：制备5-氨基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(XV)

向10.3g(0.056摩尔)的2-氰基-3-乙氧基-2-丁烯酸乙酯在250mL甲醇中的溶液中，加入8.9g(0.0616摩尔)的烯丙基肼二盐酸盐和39mL的三乙胺。将反应混合物于80℃回流3小时，然后减压下浓缩。将剩余物由用乙酸乙酯-己烷(1∶1)洗脱的硅胶色谱纯化，得到6.7g的5-氨基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(XV)，为黄色油。

步骤2：制备5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(XVI)

向6.7g(0.032摩尔)的5-氨基-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(XV)在30mL浓盐酸中的溶液中，加入8.6g(0.064摩尔)的氯化铜(II)。将混合物冷却至0℃，并且在20分钟内，分批地加入2.65g(0.038摩尔)的亚硝酸钠。将混合物于室温搅拌1小时，然后于40℃搅拌2小时。将混合物用50mL水稀释，并且用氯仿萃取两次。将氯仿萃取物用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。将剩余物由用乙酸乙酯-己烷(1∶4)洗脱的硅胶色谱纯化，得到5.0g的5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(XVI)，为淡黄色油。

步骤3：制备5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羧酸(XVII)

向5.0g(0.0249摩尔)的5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(XVI)在40mL的四氢呋喃-水-甲醇(3∶1∶1)中的溶液中，加入5mL 10M氢氧化钠溶液。将混合物于65℃加热4小时，然后在减压下浓缩至更小的体积。通过加入盐酸，将pH调节至1-2。将产物通过过滤收集，用水洗涤，并且干燥，得到4.7g的5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羧酸(XVII)，为茶色固体。

步骤4：制备5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羰基叠氮化物(XVIII)

向-10℃的6.0g(0.030摩尔)的5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羧酸(XVII)、4.2mL(0.030摩尔)的三乙胺和100mL的丙酮的溶液中，加入2.9mL(0.030摩尔)的氯甲酸乙酯。30分钟后，加入在50mL水中的5.8g(0.090摩尔)的叠氮化钠。将混合物于室温搅拌1小时，然后减压下浓缩至约原始体积的一半。将混合物用氯仿萃取两次，并且将萃取物用无水硫酸钠干燥，过滤，并且在减压下浓缩，得到4.7g5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羰基叠氮化物(XVIII)，为白色固体。

步骤5：制备4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)

将12.3g(0.0545摩尔)的5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑-4-羰基叠氮化物(XVIII)在120mL甲苯中的溶液于100℃加热1小时。加入20mL的盐酸，并且将混合物于110℃加热2小时，然后冷却。将混合物减压下浓缩，然后与50mL的二氯甲烷和10mL的三乙胺一起于室温搅拌。将混合物过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将剩余物由用乙酸乙酯-己烷(1∶1)洗脱的硅胶色谱纯化，得到6.0g的4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)，为橙色油。MS MH+/Z 172

该材料具有用于随后反应的足够的纯度。

实施例89

制备4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)，方法2(方案6)

步骤1：制备5-氯-3-甲基-4-硝基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XX)

在氩气下，向5.0g(0.031摩尔)的5-氯-3-甲基-4-硝基-1H-吡唑在100mL的无水四氢呋喃中的溶液中，加入0.37g(0.0464摩尔)的氢化锂。将混合物于室温搅拌15分钟。然后，加入5.6g(0.0464摩尔)的烯丙基溴，并且将混合物于80℃加热10小时。将混合物冷却，倾倒在冰上，并且用乙酸乙酯萃取两次。将合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。将剩余物由用乙酸乙酯-己烷(1∶2)洗脱的硅胶色谱纯化，得到作为高极性成分的1.36g3-氯-5-甲基-4-硝基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑，为无色油，和作为低极性成分的0.5g5-氯-3-甲基-4-硝基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XX)，为无色油。

步骤2：还原XX，生成4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)

将0.5g(0.00248摩尔)的5-氯-3-甲基-4-硝基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XX)、1.6g(0.0198摩尔)的氯化铵、1.6g的锌粉、20mL的甲醇和20mL的水的混合物于室温搅拌1小时。将混合物过滤，并且将滤液用乙酸乙酯萃取。将乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。剩余物由用乙酸乙酯-己烷(1∶1)洗脱的硅胶色谱纯化，得到0.10g的4-氨基-5-氯-3-甲基-1-(2-丙烯基)-1H-吡唑(XIII)，其与在上面实施例88(方法1)中制备的材料相同。

实施例90

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XXIIa)

向0.64g(0.0019摩尔)的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7-氟-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIa)在5mL的二氯甲烷中的溶液中，加入5mL(0.029摩尔)的1，1-二乙氧基-N，N-二甲基-甲胺。将混合物于室温搅拌过夜，然后减压下浓缩。将含有中间体XXIa的剩余物与18mL的二氯甲烷、5.5mL的甲醇和0.3mL的肼的混合物一起搅拌6小时，然后在二氯甲烷和水之间分配。将二氯甲烷层用水洗涤两次，用无水硫酸钠干燥，过滤，并且减压下浓缩。将产物由用乙酸乙酯-己烷(4∶1)洗脱的硅胶色谱纯化，提供0.500g的5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氟-8-甲氧基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XXIIa)。从二氯甲烷-乙酸乙酯中重结晶，得到XXIIa，为淡红色固体，mp 242-243℃。

实施例91

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-7-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XXIIz)

(XXIIz)是以类似于实施例90的方式，通过使0.003摩尔的5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-8-甲氧基-7-甲基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIz)与1，1-二乙氧基-N，N-二甲基-甲胺反应，然后与肼反应而制备的。从乙酸乙酯-甲醇中重结晶，提供5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-8-甲氧基-7-甲基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂为淡红色固体，mp 275-276℃。

实施例92

制备5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氰基-8-甲氧基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂(XXIIb)

(XXIIb)是以类似于上面的实施例的方式，通过使0.00096摩尔的5-(2-氯苯基)-7-氰基-1，3-二氢-8-甲氧基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-硫酮(IIb)与1，1-二乙氧基-N，N-二甲基-甲胺反应，然后与肼反应而制备的。从乙酸乙酯中重结晶，提供5-(2-氯苯基)-1，2-二氢-7-氰基-8-甲氧基-吡唑并[3，4-b][1，4]苯并二氮杂

(XXIIb)，为淡红色固体，mp 288-290℃。

实施例93

片剂制剂

项组分 Mg/片

1 化合物1^* 5 25 100 250 500 750

2 无水乳糖 103 83 35 19 38 57

3 交联羧甲基 6 6 8 16 32 48

纤维素钠

4 聚乙烯吡咯 5 5 6 12 24 36

烷酮K30

5 硬脂酸镁 1 1 1 3 6 9

总重 120 120 150 300 600 900

^*化合物1表示本发明的一种化合物。

制备步骤：

在适宜的混合器中将第1、2和3项混合15分钟。

用20％聚乙烯吡咯烷酮K30溶液(第4项)对来自步骤1的粉末混合物制粒。

在50℃下干燥来自步骤2的颗粒。

使来自步骤3的颗粒通过适宜的研磨设备。

将第5项加入到研磨的制粒步骤4中并混合3分钟。

在适宜的压片机上压制来自步骤5的颗粒。

实施例94

胶囊剂

项组分 mg/胶囊

1 化合物1^* 5 25 100 250 500

2 无水乳糖 159 123 148 -- --

3 米淀粉 25 35 40 35 70

4 滑石 10 15 10 12 24

5 硬脂酸镁 1 2 2 3 6

总填充重量 200 200 300 300 600

^*化合物1表示本发明的化合物。

制备步骤：

在适宜的混合器中将第1、2和3项混合15分钟。

加入第4和5项并混合3分钟。

填充入适宜的胶囊。

实施例95

注射液/乳剂制剂

项组分 mg/mL

1 化合物1^* 1mg

2 FEG 400 10-50mg

3 卵磷脂 20-50mg

4 大豆油 1-5mg

5 甘油 8-12mg

6 水适量 1mL

^*化合物1表示本发明的化合物。

制备步骤：

溶解第1项于第2项中。

将第3、4和5项加入到第6项中并混合至分散，然后匀化。

将来自步骤1的溶液加入到来自步骤2的混合物中，并匀化至分散液变为半透明。

无菌过滤通过0.2μm滤膜并装入小瓶。

实施例96

注射液/乳剂制剂

项组分 mg/mL

1 化合物1^* 1mg

2 四氢呋喃聚乙二醇醚 10-50mg

3 卵磷脂 20-50mg

4 大豆油 1-5mg

5 甘油 8-12mg

6 水适量至1mL

^*化合物1表示本发明的化合物。

制备步骤：

溶解第1项于第2项中。

将第3、4和5项加入到第6项中并混合至分散，然后匀化。

无菌过滤通过0.2μm滤膜并装入小瓶。

如下证明本发明化合物的抗血管源性活性和抗增殖活性。这些效果表明感兴趣的化合物在抑制血管生成并且在治疗癌症，特别是实体瘤如乳腺和结肠癌方面是有用的。

实施例97

CDK2Flash Plate测定

为确定CDK2活性的抑制，将纯化的重组成视网膜细胞瘤(Rb)蛋涂布在96孔FlashPlate培养板(New England Nuclear，Boston，MA)上。Rb是由CDK2介导的磷酸化的天然底物(Herwig和Strauss Eur.Biochem.，246卷(1997)581-601页，和该文引用的参考文献)。从昆虫细胞提取物中部分纯化重组活性人细胞周期蛋白E/CDK2复合物。将活性细胞周期蛋白E/CDK2与³³P-ATP和测试化合物的稀释物一起加入到Rb涂布的FlashPlate中。室温摇动孵育该板25分钟，然后洗涤，并在Topcount闪烁计数器(Packard Instrument Co.，Downers Grove，IL)中计数。测试化合物的稀释物在每个测定中一式两份进行检测。依照下式，确定Rb磷酸化的抑制百分比，其为CDK2活性抑制的衡量标准：

其中，“实验化合物”指的是重复实验的平均数/分钟，“非特异性数”指的是当不加入细胞周期蛋白E/CDK2时的平均数/分钟，“总数”指的是当不加入化合物时的平均数/分钟。

本发明化合物的CDK2IC₅₀值低于10μM，优选低于1μM。代表性化合物的KDR IC₅₀值列于下面的表I中。

表I

CDK2的抑制

化合物号	R¹	R²	R³	R⁴	IC₅₀(μM)
						IVa	F	OCH₃	CH₃	Cl	1.330
IVb	CN	OCH₃	CH₃	Cl	0.184
						IVf	F	OCH₂CH₂OCH₃	CH₃	Cl	0.395
IVh	F	OCH(CH₃)₂	CH₃	Cl	0.247

实施例98

KDR&FGFr

为了测定对KDR和FGFR的抑制作用，使用HTRF(Homogeneous TimeResolved Fluorescence)测定法进行激酶试验。该测定法描述在A.J.Kolb等，Drug Discovery Today，1998，3(7)，p 333中。

在激酶反应前，在活化缓冲液(50mM HEPES，pH 7.4、1mM DTT、10％甘油、150mM NaCl、0.1mM EDTA、26mM MgCl₂和4mM ATP)存在下活化重组EEE-标记的KDR。将该酶在4℃温育1小时。

在96-孔聚丙烯平板(Falcon)中进行激酶活性试验，其中各孔中总体积为90μL。各孔中含有1μM KDR底物(生物素-EEEEYFELVAKKKK)、1nM活化的KDR和100μM至128pM(1∶5连续稀释)范围内的8个试验浓度之一的测试化合物。在100mM HEPES，pH 7.4、1mM DTT、0.1mMNa₂VO₄、25mM MgCl₂、50mM NaCl(来自KDR储备溶液)、1％DMSO(来自化合物)、0.3mM ATP(在K_m浓度下)和0.02％BSA存在下，进行激酶活性试验。将该反应体系在37℃下温育30分钟。为了终止KDR反应，将72μL反应混合物转入含有18μL展开缓冲液(20mM EDTA、50mMHEPES，pH 7.4、0.02％BSA、10nM Eu-标记的抗-pY抗体(终浓度2nM)和100nM链霉抗生物素(终浓度20nM))的STOP平板中。混合后，将35μL的溶液转入384-孔黑平板(Costar)的两个孔中，并用Wallac Victor 5读出器在615/665nm处读数。

如上述对KDR活性试验所述进行FGFR活性试验，但有如下区别。在室温，于下列活化缓冲液中将GST-标记的FGFR酶活化1小时：100mMHEPES，pH 7.4、50mM NaCl、20mM MgCl₂和4mM ATP。在100mMHEPES、1mM DTT、0.4mM MgCl₂、0.4mM MnCl₂、50mM NaCl、1％DMSO、10μM ATP(对FGFR而言K_m＝8.5μM)、0.1mM Na₂VO₄和0.02％BSA存在下，使用1μM底物(生物素-EEEEYFELV)、1.5nM活化的FGFR和测试化合物进行激酶活性试验，总体积为90μL。按照与KDR试验相同的方式进行试验的其余部分。

根据一式两份的数据组确定化合物的IC₅₀值，并通过使用Excel和与等式Y＝[(a-b)/{1+(X/c)^d]+b的拟合数据进行计算，其中a和b分别为在没有测试抑制剂化合物存在和有极大量测试抑制剂化合物存在下的酶活性，c为IC₅₀且d为化合物响应的希尔常数。IC₅₀值是在所述测试条件下将酶的活性降低50％的测试化合物浓度。

本发明化合物的KDR IC₅₀值低于10μM，优选低于1μM，最优选低于0.5μM，或FGFR IC₅₀值低于10μM，优选低于1μM。最优选地，本发明化合物的KDR IC₅₀值低于1μM和FGFR IC₅₀值低于1μM。代表化合物的KDR IC₅₀值列于下面的表II中，并且代表化合物的FGFR IC₅₀值列于下面的表III中。

表II

KDR的抑制

化合物号	R¹	R²	R³	R⁴	IC₅₀(μM)
						IVa	F	OCH₃	CH₃	Cl	0.010
IVc	C(O)NH₂	OCH₃	CH₃	Cl	0.022
						IVi	F	OCH₂CH₂N(CH₂CH₂)₂O	CH₃	Cl	0.031
IVkk	OCH₂CH₂	OCH₃	CH₃	Cl	0.024

表III

FGFR的抑制

化合物号	R¹	R²	R³	R⁴	IC₅₀(μM)
						IVa	F	OCH₃	CH₃	Cl	0.028
IVc	C(O)NH₂	OCH₃	CH₃	Cl	0.032

IVk	CN	OCH₂CH₂N(CH₂CH₂)₂O	CH₃	Cl	0.033
						IVw	CH₃	CH₃	CH₃	Cl	0.038

实施例99

MDA-MB-435，SW480和HCT-116

从American Type Cell Culture Collection(ATOC；Rockvilie，MD)购买雌激素受体阴性上皮乳腺癌系(MDA-MB-435)，并且在ATCC推荐的培养基中培养。为了分析测试化合物对这些细胞生长的影响，将该细胞在96孔组织培养板上以每孔2000个细胞进行铺板，然后在37℃、5％CO₂下温育过夜。第二天，将测试化合物溶解于100％二甲亚砜(DMSO)中，制成10mM储备液。将每种化合物用足够量的无菌培养基稀释至1mM，得到最终浓度120μM。然后将该化合物用1.2％DMSO在培养基中连续稀释。将四分之一最终体积的稀释化合物转移至96孔板上。重复检测该测试化合物。将DMSO加入到一排“对照细胞”中，使每孔中DMSO的终浓度达到0.3％。将没有加入细胞的孔作为“空白”。将没有加入抑制剂的孔作为“无抑制剂对照”。将该板再重新置于培养箱中，加入测试化合物后5天，如下进行分析。

将3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基-2H-四唑溴鎓(噻唑兰；MTT)加入到每孔上，得到最终浓度1mg/mL。然后将该板在37℃温育3小时。在将含MTT培养基吸出前，将该板在1000rpm下离心5分钟。然后取出含MTT培养基，将100μL 100％乙醇加入到每孔中，以溶解最终的甲

代谢物。为了保证完全溶解，将该板在室温摇动15分钟。570nm下在微量滴定板读数器(Molecular Dynamics)上读出吸光度读数，650nm下读数作为对照。通过所有孔的值减去空白孔(没有细胞)的吸光度，然后用1.00减去每个测试化合物重复测定的平均值与对照平均值的比值，计算抑制百分比。对浓度的对数值/抑制百分比曲线进行线性回归，确定抑制浓度(IC₅₀)。

本发明化合物的MDA-MB-435IC₅₀值低于20μM，优选低于2μM。对于5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二甲基-2H-1，4-苯并二氮杂

-2-酮(Iw)，在MDA-MB-435细胞基试验中抑制的IC₅₀值为0.950μM。

还从ATCC获得结肠腺癌系SW480和结肠癌系HCT-116，并且按照上述与MDA-MB-435细胞基检测相同的方案进行检测，只是进行以下修改。细胞系SW480以每孔1000细胞进行铺板，在加入测试化合物后第6天进行检测。细胞系HCT-116以每孔1000细胞进行铺板，在加入测试化合物后第4天进行分析。

本发明化合物的SW480IC₅₀值低于20μM，优选低于2μM。对于5-(2-氯苯基)-1，3-二氢-7，8-二甲基-2H-1，4-苯并二氮杂-2-酮(Iw)，在SW480(结肠)基试验中抑制的IC₅₀值为0.950μM。

本发明化合物的HCT-116IC₅₀值低于20μM，优选低于2μM。对于代表性化合物，在HCT-116(结肠)基试验中抑制的IC₅₀值列于下面的表IV中。

表IV

抗增殖活性HCT 116(结肠)试验

化合物号	R¹	R²	R³	R⁴	IC₅₀(μM)
						IVgg	OCH₃	OCH₂CH₂OCH₃	CH₃	Cl	0.197
IVkk	OCH₂CH₂OCH3	OCH₃	CH₃	Cl	0.509
						IVa	F	OCH₃	CH₃	Cl	1.040
IVf	F	OCH₂CH₂OCH₃	CH₃	Cl	0.498

实施例100

VEGF和FGF-刺激的HUVBC增殖试验

通过BrdU试验、使用BrdU试剂盒(Roche Biochemicals 1-647-229)评价本发明测试化合物在细胞基试验中的抗增殖活性。将人脐静脉内皮细胞(HUVEC，Clonetics CC-2519)在EGM-2(Clonetics CC-3162)培养基中培养，并以10000个细胞/孔在96-孔平底平板(Costar 3595)中体积为200μL的EGM-2(Clonetics CC-3162)培养基中接种过夜。在37℃和5％CO₂下培养24小时后，通过抽吸缓慢除去温育培养基，并用含有50μg/mL庆大霉素和50ng/mL两性霉素-B(Clonetics CC-4083)的300μL预温热的EBM-2(Clonetics CC-3156)洗涤各孔中的内含物。随后再次抽吸剩余的培养基，并用160μL/孔缺血清的培养基(补充了1％加热失活的FBS(CloneticsCC-4102)、50μg/mL庆大霉素和50ng/mL两性霉素-B(Clonetics CC-4083)、10个单位/mL Wyeth-Ayerst肝素(NDC0641-0391-25)和2mM L-谷氨酰胺(GIBCO 25030-081)的EBM-2)替代。在对细胞进行缺血清24小时后，将20μL在含有2.5％DMSO的缺血清培养基中10X测试浓度的测试化合物加入到适宜的孔中。对照孔含有20μL含有2.5％DMSO的缺血清培养基。将平板放回培养箱内2小时。在将细胞与测试化合物一起预温育2小时后，加入在缺血清培养基中10X稀释的测试浓度的20μL生长因子、50ng/mL的FGF或200ng/mL的VEGF(R&D systems 293-VE)。本试验中FGF的终浓度为5ng/mL，且本试验中VEGF的终浓度为20ng/mL。不含生长因子的对照孔中含有20μL/孔的缺血清培养基和与含有生长因子的孔中相同量的BSA。将平板再放回培养箱内22小时。

BrdU ELISA

在接触测试化合物24小时后，通过加入已经在缺血清培养基中稀释(1∶100)的20μL/孔的BrdU标记试剂而用BrdU(Roche Biochemicals1-647-229)标记细胞。然后将平板放回到培养箱内4小时。通过在纸巾上吸干培养基除去标记培养基。通过将200μL固定/变性溶液加入到各孔中并在室温下温育45分钟而固定细胞并使DNA变性。在纸巾上吸干固定/变性溶液并向各孔中加入100μL抗-BrdU-POD，并在室温下将各孔温育2小时。除去抗体溶液并用300μL PBS将孔各自洗涤3-4次。向各孔中加入100μLTMB底物溶液，并将各孔在室温下温育5-8分钟。然后通过加入100μL/孔的1M磷酸终止反应。在450nm处与650nm对照波长处读取平板。通过下列步骤计算各测试化合物的抑制百分比：从所有孔中扣除空白(不含细胞)孔的吸光度，然后用1减去一式两份的每次测试的平均吸光度与对照平均值的比值。随后将终产物乘以100(抑制％＝(1-一式两份测试的平均吸光度/对照平均值)100)。IC₅₀值为抑制50％BrdU标记的测试化合物浓度且为抑制细胞增殖的测定值。根据对浓度的对数与抑制百分比的曲线进行线性回归来确定IC₅₀。

本发明化合物的VEGF-刺激的HUVEC试验IC₅₀值低于10μM，优选低于1μM，或FGF-刺激的HUVEC试验IC₅₀值低于10μM，优选低于1μM。更优选地，本发明化合物的VEGF-刺激的HUVEC试验IC₅₀值低于1μM，并且FGF-刺激的HUVEC试验IC₅₀值低于1μM。代表性化合物在VEGF-刺激的HUVEC试验中的IC₅₀值提供于表V中，并且代表性化合物在FGF-刺激的HUVEC试验中的IC₅₀值提供于下面的表VI中。

表V

抗增殖活性VEGF-刺激的HUVEC试验

化合物号	R¹	R²	R³	R⁴	IC₅₀(μM)
						IVa	F	OCH₃	CH₃	Cl	0.023
IVw	CH₃	CH₃	CH₃	Cl	0.022
						IVy	OCH₃	Cl	CH₃	Cl	0.174
IVz	CH₃	OCH₃	CH₃	Cl	0.012

表VI

抗增殖活性FGF-刺激的HUVEC试验

化合物号	R¹	R²	R³	R⁴	IC₅₀(μM)
						IVa	F	OCH₃	CH₃	Cl	0.100
IVb	CN	OCH₃	CH₃	Cl	0.005
						IVc	C(O)NH₂	OCH₃	CH₃	Cl	＜0.001
IVw	CH₃	CH₃	CH₃	Cl	0.036

实施例101

H460a

从(ATOC；Rockvilie，MD)购买H460a细胞系，并且在ATCC推荐的培养基中培养。为了分析测试化合物对这些细胞生长的影响，将该细胞在96孔组织培养板上以每孔150个细胞进行铺板，然后在37℃、5％CO₂下温育过夜。第二天，将测试化合物溶解于100％二甲亚砜(DMSO)中，制成10mM储备液。将每种化合物用足够量的无菌培养基稀释至1mM，得到最终浓度120μM。然后将该化合物用1.2％DMSO在培养基中连续稀释。将四分之一最终体积的稀释化合物转移至96孔板上。重复检测该测试化合物。将DMSO加入到一排“对照细胞”中，使每孔中DMSO的终浓度达到0.3％。将没有加入细胞的孔作为“空白”。将没有加入抑制剂的孔作为“无抑制剂对照”。将该板再重新置于培养箱中，加入测试化合物后第5天，如下进行分析。

将3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基-2H-四唑鎓溴化物(噻唑兰；MTT)加入到每孔上，得到最终浓度1mg/mL。然后将该板在37℃温育3小时。在将含MTT培养基吸出前，将该板在1000rpm下离心5分钟。然后取出含MTT培养基，将100μL 100％乙醇加入到每孔中，以溶解最终的甲

代谢物。为了保证完全溶解，将该板在室温摇动15分钟。在微量滴定板读数器(Molecular Dynamics)上读出570nm波长处的吸光度，在650nm波长处读数作为对照。通过从所有孔的值减去空白孔(没有细胞)的吸光度，然后用1.00减去每个测试化合物重复测定的平均值与对照平均值的比值，得到抑制百分比。通过对浓度的对数值/抑制百分比的曲线进行线性回归，确定抑制浓度(IC₅₀)。

本发明化合物的H460a IC₅₀值低于20μM，优选低于2μM。对于代表性化合物，在H460a基试验中抑制的IC₅₀值列于表VII中。在H460a试验中，对于代表性化合物的IC₉₀值列于下面的表VII中。

表VII

抗增殖活性H460a试验

化合物号	R¹	R²	R³	R⁴	IC₉₀(μM)
						IVa	F	OCH₃	CH₃	Cl	1.570
IVb	CN	OCH₃	CH₃	Cl	0.118

如上所述，本发明化合物具有抗血管源性活性，因而可以用于抑制个体中的血管生成。血管生成与癌症相关。具体而言，肿瘤在没有新血管生长以供给和滋养它们的情况下仅可以生长到一定的尺寸。因此，通过抑制这种新血管的生长，本发明的化合物可以用于治疗癌症。因此，本发明提供一种抑制患者中血管生成的方法，该方法包括给药治疗有效量，即血管生成-抑制量的式IV的化合物。

除了它们的抗血管源性活性外，本发明的化合物还是各种激酶如CDK2、KDR和FGFr的抑制剂。这些激酶的抑制影响肿瘤细胞的增殖。因此，本发明还提供通过直接抑制激酶而抑制肿瘤生长的方法。

本发明提供用于治疗癌症的方法，该方法包括给患有癌症的患者给药治疗有效量的本发明化合物或其药用盐。具体而言，本发明提供用于治疗乳腺癌的方法，该方法包括给患有乳腺癌的患者给药治疗有效量的本发明化合物或其药用盐。本发明还提供用于治疗前列腺癌的方法，该方法包括给患有前列腺癌的患者给药治疗有效量的本发明化合物或其药用盐。本发明进一步提供用于治疗结肠癌的方法，该方法包括给患有结肠癌的患者给药治疗有效量的本发明化合物或其药用盐。本发明提供用于治疗肺癌的方法，该方法包括给患有肺癌的患者给药治疗有效量的本发明化合物或其药用盐。

尽管参照具体和优选实施方案解释了本发明，但是本领域技术人员应理解可以通过常规实验和实施本发明进行改变和修改。因此，本发明并不限于上述描述，而由后附权利要求及其等同技术方案定义。