CZ297492B6 - Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchtoproteinů - Google Patents
Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchtoproteinů Download PDFInfo
- Publication number
- CZ297492B6 CZ297492B6 CZ0105098A CZ105098A CZ297492B6 CZ 297492 B6 CZ297492 B6 CZ 297492B6 CZ 0105098 A CZ0105098 A CZ 0105098A CZ 105098 A CZ105098 A CZ 105098A CZ 297492 B6 CZ297492 B6 CZ 297492B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- proteins
- surface antigen
- influenza viruses
- cell culture
- influenza
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16051—Methods of production or purification of viral material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
- C12N2760/16234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře, který zahrnuje následující kroky, při nichž se nejprve kapalina obsahující celý virus, získaná z buněčné kultury, podrobí působení enzymu trávícího DNA, dále se přidá kationtový detergent, a následně se izolují povrchové antigenní proteiny. Dále se popisuje vakcína proti chřipce na bázi takto připravitelného povrchového antigenu, kterávykazuje obsah DNA buněk hostitele rovný nebo nižší než 25 pg na dávku.
Description
Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchto proteinů (57) Anotace:
Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře, kteiý zahrnuje následující kroky, při nichž se nejprve kapalina obsahující celý virus, získaná z buněčné kultury, podrobí působení enzymu trávícího DNA, dále se přidá kationtový detergent, a následně se izolují povrchové antigenní proteiny. Dále se popisuje vakcína proti chřipce na bázi takto připravitelného povrchového antigenů, která vykazuje obsah DNA buněk hostitele rovný nebo nižší než 25 pg na dávku.
Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchto proteinů
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká vakcín proti chřipce na bázi povrchových antigenů, které je možno získat z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře, a také se týká způsobu přípravy povrchových antigenních proteinů virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře.
Dosavadní stav techniky
Virus chřipky je velký asi 125 nm a sestává z jádra z ribonukleové kyseliny (RNA) spojené s nukleoproteinem, obklopeného obalem viru s lipidovou dvouvrstvou strukturou. Vnitřní vrstva obalu viru sestává převážně z matrixových proteinů a vnější vrstva obsahuje většinu lipidového materiálu pocházejícího od hostitele.
Takzvané „povrchové proteiny“, neuraminidáza (NA) a hemaglutinin (HA), vypadají jako špičky na povrchu viru.
Většina komerčně dostupných inaktivovaných vakcín proti chřipce jsou takzvané „split (štěpené) vakcíny“ nebo „subjednotkové vakcíny“.
„Split vakcíny“ se připravují podrobením celého viru chřipky působení rozpouštěcím koncentracím detergentů a následným odstraněním detergentu a většiny virového lipidového materiálu.
„Podjednotkové vakcíny“ proti chřipce na rozdíl od „split vakcín“ neobsahují veškeré virové proteiny. Místo toho jsou „podjednotkové vakcíny“ obohacené o povrchové proteiny zodpovědné za vyvolání požadovaných, virus neutralizujících (proto ochranných) protilátek po vakcinaci.
Většina komerčně dostupných vakcín proti chřipce je založena na viru chřipky kultivovaném na oplodněných vejcích kuřat. Je však široce známo, že příprava virů chřipky pro vakcinační účely na vejcích má několik nevýhod:
1. Tento výrobní způsob je nevyhovující z důvodu kolísající (mikro)biologické kvality vajec.
2. Tento výrobní způsob zcela postrádá flexibilitu v případě náhlé potřeby zvýšené produkce, tj. v případě vážné epidemie nebo pandemie, kvůli logistickým problémům způsobeným nedostupností velkého množství vhodných vajec.
3. Takto připravené vakcíny jsou kontraindikovány pro osoby s přecitlivělostí na drůbeží nebo/a vaječné proteiny.
Řešení těchto problémů může spočívat v přípravě viru chřipky na tkáňových kulturách. Předpokládá se, že takový způsob přípravy bude mít mnoho výhod:
1. Buněčné linie tkáňových kultur jsou dostupné z dobře definovaného systému buněčných bank a jsou prosté (mikro)biologických znečišťujících látek, přičemž je velmi zlepšena shoda mezi jednotlivými šaržemi a získá se produkt s vyšší kvalitou.
2. Zvýší se šance na získání dostatečného množství dostupné vakcíny v případě hrozby vážné hrozby epidemie nebo pandemie.
3. Vzniklý chřipkový virový materiál bude vhodnější pro alternativní způsoby podávání (orální, nazální, inhalační).
4. Z hlediska WHO technologie umožní oddálit každoroční doporučení pro složení vakcíny (z poloviny února na polovinu března), čímž se zvýší přizpůsobení vakcíny ke kmenům, které se právě vyskytují.
Přesto přetrvává významný problém také ve vztahu k tkáňové kultuře viru chřipky, protože genetický materiál z kontinuálních buněčných linií může získat přítomný ve vakcíně.
Tento problém představuje riziko, které, pokud se neodstraní, může vést regulační orgány k zamítnutí žádostí o povolení dodávání takových vakcín proti chřipce na trh z bezpečnostních důvodů. Například U.S. úřad pro potraviny a léčiva požaduje, aby biotechnologické produkty pro člověka neobsahovaly více než 100 pg DNA buněk hostitele na dávku.
Proto předkládaný vynález poskytuje způsob přípravy povrchového antigenu viru chřipky pro vakcinační účely, který je bezpečný a neobsahuje nepřijatelná množství škodlivého genetického materiálu, a splňuje požadavky stanovené regulačními orgány. Bylo však považováno za žádoucí, a překvapivě to bylo také dosažitelné, připravit vakcíny proti chřipce s obsahem DNA buněk hostitele podstatně nižším než 100 pg na dávku.
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález poskytuje způsob přípravy povrchových antigenních proteinů pro přípravu vakcíny proti chřipce s nízkým obsahem DNA z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře, který zahrnuje následující kroky:
a) podrobení kapaliny obsahující celý virus, získané z buněčné kultury, působení enzymu trávícího DNA, a
b) přidání kationtového detergentů, což následuje izolace povrchových antigenních proteinů.
Způsob podle předkládaného vynálezu může být použit při přípravě vakcín obsahujících různé kmeny virů chřipky, jako jsou viry typické pro lidskou chřipku, prasečí chřipku, koňskou chřipku a ptačí chřipku.
Živočišná buněčná kultura podle předkládaného vynálezu může obsahovat buď primární buňky, jako jsou kuřecí embryonální fibroblasty (CEF), nebo kontinuální buněčnou linii, jako jsou Medin Darby buňky psích ledvin (MDCK), buňky vaječníků křečků (CHO) a Věro buňky.
Podrobení kapaliny obsahující celý virus působení enzymu trávicího DNA se může provést přímo ve fermentoru, popřípadě již během kultivace buněk a při procesu množení buněk.
Vhodné příklady enzymů trávících DNA jsou DNáza (například zařazená pod EC 3.1.21 a EC 3.1.22) a nukleázy (například zařazená pod EC 3.1.30 a EC 3.1.31).
-2CZ 297492 B6
Vhodné kationtové detergenty podle předkládaného vynálezu převážně sestávají ze sloučeniny obecného vzorce I
X’ ve kterém
Ri, R2 a R3 jsou stejné nebo různé a každý znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, nebo Ri a R2, společně s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří pětičlenný nebo šestičlenný nasycený heterocyklický kruh, a R3 znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, nebo Ri, R2 a R3, společně s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří pětičlenný nebo šestičlenný heterocyklický kruh nenasycený na atomu dusíku,
R4 znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, a
X znamená anion.
Příklady takových kationtových detergentů jsou cetyltrimethylammoniové soli, jako je cetyltrimethylammoniumbromid (C.T.A.B.), a myristyltrimethylamoniová sůl. Vhodnými detergenty jsou také lipofektin, lipofektamin, DOTMA.
Popřípadě mohou být tyto kationtové detergenty doplněny neiontovým detergentem, jako je Tween.
Izolace povrchových antigenních proteinů, následující po zpracování detergentem, může například zahrnovat kroky:
1. Oddělení RNP částice (těla) od povrchových antigenních proteinů, například pomoci odstředění nebo ultrafiltrace, a
2. odstranění detergentů od povrchových antigenních proteinů, například pomocí hydrofobní interakce detergentů s vhodnou pryskyřicí (jako je Amberlite XAD-4) nebo/a pomocí ultra(dia)filtrace.
Způsob podle předkládaného vynálezu překvapivě poskytuje produkt, který má velmi nízký obsah DNA pocházející z živočišných buněk. Lze snadno dosáhnout tak nízkých koncentrací DNA, jako je 25 pg/dávku, a v mnoha případech dokonce až 10 pg/dávku.
Povrchové antigenní proteiny mohou být použity pro přípravu vakcíny proti chřipce, například pomocí přidání pufru (např. PBS) nebo/a pomocí smísení s antigeny z jiných serotypů virů chřipky.
Pro další přípravu vakcíny jsou potřebné volitelné koncentrace povrchového antigenu.
Dalším předmětem předkládaného vynálezu je proto vakcína proti chřipce na bázi povrchového antigenu z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře připravitelného způsobem popsaným výše, která vykazuje obsah DNA buněk hostitele rovný nebo nižší než 25 pg na dávku.
Další provedení předkládaného vynálezu poskytuje výše popsanou vakcínu, která vykazuje obsah
DNA buněk hostitele nižší než 10 pg na dávku.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
A. Multiplikace viru
1. Antigenní virus chřipky typu B/Yamagata se multiplikuje na Madin Darby buňkách psích ledvin (MDCK) (ATCC CCL34) ve fermentoru pomocí inkubace naočkovaného viru s buňkami 2 dny při 35 °C.
2. Dále se pH fermentující kapaliny zvýší na 8 pomocí přidání zředěného hydroxidu sodného a přidá se Benzon nukleáza do konečné koncentrace 1000 jednotek (1 pg) na litr.
3. Inkubace pokračuje při 35 °C další 4 hodiny.
B. Izolace viru
1. Kapalina se zfiltruje přes hluboký filtr s přibližnou velikostí pórů 0,5 mikrometru, a tak se odstraní zbytky buněk.
2. Dále se virus chřipky koncentruje a čistí pomocí ultrafiltrace za použití membrány za oddělení molekul o molární hmotnosti do 300 000.
3. Přidá se sacharóza, a tak se připraví konečná koncentrace 30 % (hmotnost/objem), potom se přidá formaldehyd do konečné koncentrace 0,015 % (hmotnost/objem). Tato směs se míchá při 2 až 8 °C 72 hodin.
4. Koncentrát viru se zředí pětkrát solankou pufrovanou fosforečnanem a přenese se na afinitní kolonu obsahující Amikon Cellufine Sulphate. Po odstranění nečistot pomocí promytí solankou pufrovanou fosforečnanem se virus eluuje roztokem l,5molámího chloridu sodného v solance pufrované fosforečnanem. Eluát se koncentruje a odsolí pomocí ultrafiltrace za použití membrány pro odstranění molekul o molární hmotnosti 300 000.
C. Izolace podjednotky
1. Přidá se neionogenní detergent Tween-80 do konečné koncentrace 300 pg/ml a cetyltrimethylamoniumbromid do konečné koncentrace 750 μg/ml. Směs se míchá při 4 °C tři hodiny, potom se pomocí odstředění z povrchového antigenního proteinu oddělí RNP část.
2. Aby se odstranil detergent, supernatant se míchá přes noc při 2 až 8 °C s Amberlitem XAD-4. Amberlit se odstraní pomocí filtrace a filtrát se postupně sterilně filtruje průchodem přes 0,22 μιη filtr.
V průběhu výše uvedeného postupu se analyzuje obsah buněk DNA hostitele pomocí platných testů, které jsou založeny na „slot-blot“ křížení za použití sondy psí DNA značené 32P.
Výsledky testu na DNA provedeného po různých krocích jsou uvedeny v následující tabulce (v této tabulce je množství DNA na IVV dávku vyjádřeno v pikogramech na 50 μg HA).
-4CZ 297492 B6
Tabulka
Vzorek | Obsah DNA | Po kroku |
Fermentovaná kapalina 48 hpi | 19 000 000 | Al |
Fermentovaná kapalina po zpracováni s nukleázou | 370 000 | A2 |
Kapalina po filtraci | 10 000 | Bl |
Koncentrát po ultrafiltraci | 4 350 | B2 |
Kapalina po deaktivaci a afinitni chromatografíí | 4 200 | B4 |
Supernatant po zpracováni s Tween/C.T.A.B. a odstředění | < 25 | Cl |
Filtrace po odstraněni detergentu | < 25 | C2 |
Příklad 2
Multiplikace, čištění deaktivace a štěpení viru se provede jako v příkladu 1.
Zpracování fermentované kapaliny benzon nukleázou v průběhu posledních hodin multiplikace viru (krok A2 a A3), použití pH multiplikačního média (krok Al) poskytne podobné výsledky ve vztahu k odstranění DNA.
DNáza I, ačkoli vyžaduje použití ve vyšší koncentraci, je stejně účinná při odstranění DNA buněk hostitele (v průběhu kroků Al až A3). Podobných výsledků je možno dosáhnout za použití dalších endonukleáz.
Příklad 3
Postup je stejný jako v příkladech 1 nebo 2 kromě toho, že odstranění zbytků buněk (krok Bl) se provádí pomocí odstředění.
Příklad 4
Postup se provádí stejně jako v příkladech 1, 2 nebo 3 kromě toho, že se virus koncentruje a čistí (krok B2) od fermentační kapaliny pomocí odstředění v kontinuální průtokové zonální odstředivce, například Electro-Nucleonics (model RK) za použití gradientu sacharózy v například solance pufrované fosforečnanem.
-5CZ 297492 B6
Příklad 5
Postup se provádí stejným způsobem jako v příkladech 1 až 4 kromě toho, že se přidání roztoku cetyltrimethylamoniumbromidu v kroku Cl nahradí přidáním roztoku cetylpyridiniumbromidu, myristyltrimethylamoniumbromidu, benzetoniumchloridu, methylbenzetoniumchloridu, dekamethoniumchloridu nebo stearyldimethylbenzylamoniumbromidu. Bylo dosaženo podobných výsledků ve vztahu k odstranění buněk DNA hostitele.
Příklad 6
Postup byl proveden stejně, jako je popsáno v příkladu 1 kromě toho, že přidání sacharózy se provede po afmitní chromatografií a formaldehyd se přidává do 0,05 % (hmotnost/objem) maximálně po dobu 120 hodin.
Příklad 7
Způsoby podle příkladů 1, 2, 3, 4 a 6 se použily pro úspěšnou přípravu vakcíny s nízkým obsahem DNA z chřipkového viru kmene B/Harbin, B/Pharma, A/Texas (H1N1), A/Taiwan (H1N1), A/Johannesburg (H3N2) a A/Wuhan (H3N2).
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (7)
1. Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře, vyznačující se tím, že zahrnuje následující kroky, při nichž se:
a) kapalina obsahující celý virus, získaná z buněčné kultury, podrobí působení enzymu trávícího DNA, a
b) přidá se kationtový detergent, a následně se izolují povrchové antigenní proteiny.
2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se podrobení působení enzymu trávícího DNA provede v průběhu rozmnožování virů chřipky na buněčné kultuře.
3. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že kationtový detergent převážně zahrnuje sloučeninu obecného vzorce 1 (I), ve kterém
Rb R2 a R3 jsou stejné nebo různé a každý znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu,
-6CZ 297492 B6 nebo Ri a R2, společně s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří pětičlenný nebo šestičlenný nasycený heterocyklický kruh, a R3 znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, nebo R], R2 a R3, společně s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří pětičlenný nebo šestičlenný heterocyklický kruh nenasycený na atomu dusíku,
R4 znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, a
X znamená anion.
4. Způsob podle nároku 1, vyznačující zahrnuje cetyltrimethylamoniumbromid.
5. Způsob podle nároku 1, vyznačující neiontovým detergentem.
6. Způsob podle nároku 1, vyznačující živočišné buněčné linii.
7. Způsob podle nároku 1, vyznačující MDCK buňkách.
se t í m , že kationtový detergent převážně se tí m , že kationtový detergent je doplněn se t í m , že se viry chřipky rozmnožují na
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP97201007 | 1997-04-09 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ105098A3 CZ105098A3 (cs) | 1998-10-14 |
CZ297492B6 true CZ297492B6 (cs) | 2007-01-03 |
Family
ID=8228174
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ0105098A CZ297492B6 (cs) | 1997-04-09 | 1998-04-06 | Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchtoproteinů |
Country Status (32)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5948410A (cs) |
EP (1) | EP0870508B1 (cs) |
JP (1) | JP5258127B2 (cs) |
KR (1) | KR100593235B1 (cs) |
CN (1) | CN1138564C (cs) |
AR (1) | AR011216A1 (cs) |
AT (1) | ATE197406T1 (cs) |
AU (1) | AU728939B2 (cs) |
BR (1) | BR9801015A (cs) |
CA (1) | CA2234208C (cs) |
CZ (1) | CZ297492B6 (cs) |
DE (2) | DE870508T1 (cs) |
DK (1) | DK0870508T3 (cs) |
DZ (1) | DZ2462A1 (cs) |
ES (1) | ES2129386T3 (cs) |
GR (2) | GR990300017T1 (cs) |
HK (1) | HK1010833A1 (cs) |
HR (1) | HRP980187B1 (cs) |
HU (1) | HUP9800802A3 (cs) |
ID (1) | ID20399A (cs) |
IL (1) | IL123961A (cs) |
NO (1) | NO323349B1 (cs) |
NZ (1) | NZ330131A (cs) |
PL (1) | PL187982B1 (cs) |
PT (1) | PT870508E (cs) |
RU (1) | RU2197264C2 (cs) |
SI (1) | SI0870508T1 (cs) |
SK (1) | SK282614B6 (cs) |
TR (1) | TR199800613A1 (cs) |
TW (1) | TW570803B (cs) |
UA (1) | UA42089C2 (cs) |
ZA (1) | ZA982915B (cs) |
Families Citing this family (99)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NZ517903A (en) * | 1999-09-24 | 2003-10-31 | Smithkline Beecham Biolog S | One dose intranasal influenza virus vaccine with split influenza viral antigens |
GB9923176D0 (en) * | 1999-09-30 | 1999-12-01 | Smithkline Beecham Biolog | Novel composition |
CN100415769C (zh) * | 2002-02-07 | 2008-09-03 | 中国科学院过程工程研究所 | 寡聚或多聚亚基蛋白质分离纯化的方法 |
AU2003229159B2 (en) | 2002-04-30 | 2008-02-21 | Oncolytics Biotech Inc. | Improved viral purification methods |
US20060110406A1 (en) | 2003-02-25 | 2006-05-25 | Medimmune Vaccines, Inc. | Refrigerator-temperature stable influenza vaccine compositions |
EP1597400B8 (en) * | 2003-02-25 | 2013-10-09 | MedImmune, LLC | Methods of producing influenza vaccine compositions |
DE602004028736D1 (de) * | 2003-06-20 | 2010-09-30 | Microbix Biosystems Inc | Verbesserungen bei der virusproduktion |
US8506967B2 (en) | 2003-07-11 | 2013-08-13 | Novavax, Inc. | Functional influenza virus like particles (VLPs) |
US8592197B2 (en) | 2003-07-11 | 2013-11-26 | Novavax, Inc. | Functional influenza virus-like particles (VLPs) |
US8992939B2 (en) | 2003-07-11 | 2015-03-31 | Novavax, Inc. | Highly efficient influenza matrix (M1) proteins |
US8080255B2 (en) | 2003-07-11 | 2011-12-20 | Novavax Inc. | Functional influenza virus like particles (VLPs) |
AU2005214090B2 (en) | 2004-02-23 | 2008-09-11 | Crucell Holland B.V. | Virus purification methods |
EP1722815A1 (en) | 2004-03-09 | 2006-11-22 | Chiron Corporation | Influenza virus vaccines |
EP2471551B1 (en) | 2004-09-09 | 2017-02-01 | Novartis AG | Decreasing potential iatrogenic risks associated with influenza vaccines |
US7901921B2 (en) | 2004-10-22 | 2011-03-08 | Oncolytics Biotech Inc. | Viral purification methods |
US20090004222A1 (en) | 2004-11-03 | 2009-01-01 | O'hagan Derek | Influenza Vaccination |
EP2368975B1 (en) | 2004-12-23 | 2014-09-17 | MedImmune, LLC | Non-tumorigenic MDCK cell line for propagating viruses |
TW200700078A (en) | 2005-03-23 | 2007-01-01 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Novel use |
CA2602944C (en) * | 2005-04-11 | 2015-08-11 | Crucell Holland B.V. | Virus purification using ultrafiltration |
ATE494906T1 (de) * | 2005-11-01 | 2011-01-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Von zellen stammende virale impfstoffe mit geringen mengen an rest-zell-dna |
US11707520B2 (en) | 2005-11-03 | 2023-07-25 | Seqirus UK Limited | Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture |
AU2006310163B2 (en) | 2005-11-04 | 2011-09-15 | Seqirus UK Limited | Influenza vaccine with reduced amount of oil-in-water emulsion as adjuvant |
PT1951299E (pt) | 2005-11-04 | 2012-02-28 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Vacinas contra a gripe que incluem combinações de adjuvantes particulados e imuno-potenciadores |
NZ568210A (en) * | 2005-11-04 | 2012-12-21 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Emulsions with free aqueous-phase surfactant as adjuvants for split influenza vaccines |
HUE051122T2 (hu) * | 2005-11-04 | 2021-03-01 | Seqirus Uk Ltd | Sejttenyészetben növesztett influenzavírusból elõállított nemvirion anti-géneket tartalmazó adjuvált vakcinák |
CN102755645A (zh) | 2005-11-04 | 2012-10-31 | 诺华疫苗和诊断有限公司 | 佐剂配制的包含细胞因子诱导剂的流感疫苗 |
EP1976559B3 (en) | 2006-01-27 | 2020-02-19 | Seqirus UK Limited | Influenza vaccines containing hemagglutinin and matrix proteins |
WO2007110776A1 (en) | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Novartis Vaccines And Diagnostics Gmbh & Co Kg | Storage of influenza vaccines without refrigeration |
WO2007126810A2 (en) | 2006-03-31 | 2007-11-08 | Warf - Wisconsin Alumni Research Foundation | High titer recombinant influenza viruses for vaccines |
PL2043682T3 (pl) | 2006-07-17 | 2014-09-30 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Szczepionka przeciw grypie |
GB0614460D0 (en) * | 2006-07-20 | 2006-08-30 | Novartis Ag | Vaccines |
WO2008032219A2 (en) | 2006-09-11 | 2008-03-20 | Novartis Ag | Making influenza virus vaccines without using eggs |
AU2007347716B2 (en) | 2006-09-15 | 2013-06-20 | Medimmune, Llc | MDCK cell lines supporting viral growth to high titers and bioreactor process using the same |
EP2532362A1 (en) | 2006-12-06 | 2012-12-12 | Novartis AG | Vaccines including antigen from four strains of influenza virus |
US8697154B2 (en) * | 2007-03-05 | 2014-04-15 | Om Pharma Sa | Bacterial extract for respiratory disorders and process for its preparation |
CA2680600A1 (en) | 2007-03-12 | 2008-09-18 | Antigen Express, Inc. | Li-rnai involved li suppression in cancer immunotherapy |
AR066405A1 (es) | 2007-04-20 | 2009-08-19 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vacuna |
US9474798B2 (en) | 2007-06-18 | 2016-10-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Influenza M2 protein mutant viruses as live influenza attenuated vaccines |
PT2185191E (pt) | 2007-06-27 | 2012-11-27 | Novartis Ag | Vacinas contra a gripe com baixo teor de aditivos |
CA2697373C (en) * | 2007-08-27 | 2019-05-21 | Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc | Immunogenic compositions and methods |
GB0810305D0 (en) | 2008-06-05 | 2008-07-09 | Novartis Ag | Influenza vaccination |
CA2718430A1 (en) | 2008-03-18 | 2009-09-24 | Novartis Ag | Improvements in preparation of influenza virus vaccine antigens |
WO2010036760A1 (en) * | 2008-09-24 | 2010-04-01 | Medimmune, Llc | Methods for cultivating cells, propagating and purifying viruses |
WO2010052214A2 (en) | 2008-11-05 | 2010-05-14 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Novel method |
EA201171032A1 (ru) | 2009-02-10 | 2012-02-28 | Новартис Аг | Схемы лечения с помощью вакцины против гриппа, связанного с пандемическими штаммами |
CA2752041A1 (en) | 2009-02-10 | 2010-08-19 | Novartis Ag | Influenza vaccines with increased amounts of h3 antigen |
EP2396032B1 (en) | 2009-02-10 | 2016-09-28 | Seqirus UK Limited | Influenza vaccines with reduced amounts of squalene |
CN102548577A (zh) | 2009-04-27 | 2012-07-04 | 诺华有限公司 | 用于抵抗流感的佐剂疫苗 |
AU2010250832B2 (en) | 2009-05-21 | 2013-10-03 | Seqirus UK Limited | Reverse genetics using non-endogenous pol I promoters |
WO2010144797A2 (en) | 2009-06-12 | 2010-12-16 | Vaccine Technologies, Incorporated | Influenza vaccines with enhanced immunogenicity and uses thereof |
CA2803282C (en) | 2009-07-06 | 2018-05-01 | David E. Anderson | Methods for preparing vesicles and formulations produced therefrom |
CN102482666B (zh) | 2009-07-06 | 2017-02-08 | 变异生物技术公司 | 制备囊泡的方法和由其产生的制剂 |
CA2769673A1 (en) | 2009-07-31 | 2011-02-03 | Novartis Ag | Reverse genetics systems |
WO2011030218A1 (en) | 2009-09-10 | 2011-03-17 | Novartis Ag | Combination vaccines against respiratory tract diseases |
CN102741399A (zh) | 2009-10-20 | 2012-10-17 | 诺华有限公司 | 用于病毒拯救的改良反向遗传方法 |
EP2493912B1 (en) | 2009-10-26 | 2020-07-29 | Wisconsin Alumni Research Foundation | High titer recombinant influenza viruses with enhanced replication in vero cells |
US10130697B2 (en) | 2010-03-23 | 2018-11-20 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Vaccines comprising mutant attenuated influenza viruses |
AU2011254204B2 (en) | 2010-05-21 | 2015-08-20 | Seqirus UK Limited | Influenza virus reassortment method |
CN103096921A (zh) | 2010-06-01 | 2013-05-08 | 诺华有限公司 | 不用冻干疫苗抗原浓缩 |
JP5976639B2 (ja) | 2010-06-01 | 2016-08-23 | ノバルティス アーゲー | インフルエンザワクチン抗原の濃縮および凍結乾燥 |
US9610248B2 (en) | 2010-07-06 | 2017-04-04 | Variation Biotechnologies, Inc. | Compositions and methods for treating influenza |
CA2808965C (en) | 2010-08-20 | 2020-01-07 | Novartis Ag | Soluble needle arrays for delivery of influenza vaccines |
CA2862871C (en) | 2011-01-13 | 2020-09-22 | Variation Biotechnologies Inc. | Methods for preparing vesicles and formulations produced therefrom |
EP2663327A4 (en) | 2011-01-13 | 2015-12-02 | Variation Biotechnologies Inc | COMPOSITIONS AND METHOD FOR THE TREATMENT OF VIRUS INFECTIONS |
US20140248320A1 (en) | 2011-10-20 | 2014-09-04 | Novartis Ag | Adjuvanted influenza b virus vaccines for pediatric priming |
US20140328876A1 (en) | 2011-11-18 | 2014-11-06 | Variation Biotechnologies Inc. | Synthetic derivatives of mpl and uses thereof |
CN104302323A (zh) | 2012-01-12 | 2015-01-21 | 变异生物技术公司 | 用于治疗病毒感染的组合物和方法 |
CA2894467A1 (en) | 2012-01-27 | 2013-08-01 | Variation Biotechnologies Inc. | Methods for preparing thermostable compositions comprising a lipid component and thermolabile therapeutic agents |
AU2013205478B9 (en) | 2012-03-02 | 2014-11-20 | Seqirus UK Limited | Influenza virus reassortment |
AU2013270793A1 (en) | 2012-06-04 | 2014-12-11 | Novartis Ag | Improved safety testing |
GB201218195D0 (en) | 2012-10-10 | 2012-11-21 | Istituto Zooprofilattico Sperimentale Delle Venezie | Composition |
EP2925356A2 (en) | 2012-12-03 | 2015-10-07 | Novartis AG | Reassortant influenza a viren |
CA2905612A1 (en) | 2013-03-13 | 2014-09-18 | Novartis Ag | Influenza virus reassortment |
CN105828835A (zh) | 2013-05-10 | 2016-08-03 | 诺华股份有限公司 | 避免流感疫苗中的发作性嗜睡病风险 |
DE202013005100U1 (de) | 2013-06-05 | 2013-08-26 | Novartis Ag | Influenza Virus Reassortierung |
DE202013005130U1 (de) | 2013-06-05 | 2013-09-10 | Novartis Ag | Influenza Virus Reassortierung |
CA2914604A1 (en) | 2013-06-06 | 2014-12-11 | Novartis Ag | Influenza virus reassortment |
WO2015009743A1 (en) | 2013-07-15 | 2015-01-22 | Wisconsin Alumni Research Foundation | High titer recombinant influenza viruses with enhanced replication in mdck or vero cells or eggs |
RU2535153C1 (ru) * | 2013-09-04 | 2014-12-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов" Федерального медико-биологического агентства России (ФГУП СПбНИИВС ФМБА России) | Способ получения высокоочищенных вирионных концентратов |
CN105745218B (zh) | 2013-11-15 | 2020-11-06 | 诺华股份有限公司 | 去除残留细胞培养杂质 |
WO2015196150A2 (en) | 2014-06-20 | 2015-12-23 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Mutations that confer genetic stability to additional genes in influenza viruses |
EP2966093A1 (en) | 2014-07-07 | 2016-01-13 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Process for the preparation of magnetic sulfated cellulose particles, magnetic sulfated cellulose particles and their use |
US10633422B2 (en) | 2015-06-01 | 2020-04-28 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Influenza virus replication by inhibiting microRNA lec7C binding to influenza viral cRNA and mRNA |
RU2614127C2 (ru) * | 2015-06-04 | 2017-03-22 | Общество с ограниченной ответственностью "НТфарма" | Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1) |
BR112017028011A2 (pt) | 2015-06-26 | 2018-08-28 | Seqirus Uk Ltd | vacinas de gripe correspondentes antigenicamente |
WO2017007839A1 (en) | 2015-07-06 | 2017-01-12 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Improved influenza virus replication for vaccine development |
BR112018000296A2 (pt) | 2015-07-07 | 2018-09-04 | Seqirus UK Limited | ensaios de potência de influenza |
CN109477074B (zh) | 2016-02-19 | 2023-01-24 | 威斯康星旧生研究基金会 | 用于疫苗开发的改进的乙型流感病毒复制 |
EP3601544A4 (en) | 2017-03-30 | 2021-01-27 | Merck Sharp & Dohme Corp. | ADDITION OF NUCLEASES DIRECTLY TO CELL CULTURE TO FACILITATE DIGESTION AND CLEARANCE OF NUCLEIC ACIDS FROM HOST CELLS |
RU2670001C1 (ru) * | 2017-12-25 | 2018-10-17 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской академии наук | Способ получения белков клеточной поверхности |
AU2019207600A1 (en) | 2018-01-09 | 2020-07-09 | Theriva Biologics, Inc. | Alkaline phosphatase agents for treatment of neurodevelopmental disorders |
WO2019183209A1 (en) | 2018-03-20 | 2019-09-26 | Synthetic Biologics, Inc. | Alkaline phosphatase agents for treatment of radiation disorders |
WO2019183208A1 (en) | 2018-03-20 | 2019-09-26 | Synthetic Biologics, Inc. | Intestinal alkaline phosphatase formulations |
WO2020167432A2 (en) | 2019-01-23 | 2020-08-20 | Yoshihiro Kawaoka | Mutations that confer genetic stability to additional genes in influenza viruses |
EP3921413A1 (en) | 2019-02-08 | 2021-12-15 | Wisconsin Alumni Research Foundation (WARF) | Humanized cell line |
WO2020223699A1 (en) | 2019-05-01 | 2020-11-05 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Improved influenza virus replication for vaccine development |
US11807872B2 (en) | 2019-08-27 | 2023-11-07 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Recombinant influenza viruses with stabilized HA for replication in eggs |
US20230000971A1 (en) | 2019-11-18 | 2023-01-05 | Seqirus Pty Ltd. | Method for producing reassortant influenza viruses |
KR102444684B1 (ko) * | 2020-04-29 | 2022-09-16 | 에스케이바이오사이언스(주) | 일회용 배양 공정 시스템을 이용한 인플루엔자 바이러스 생산 방법 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4500513A (en) * | 1979-05-15 | 1985-02-19 | Miles Laboratories, Inc. | Influenza vaccine production in liquid cell culture |
WO1996015231A2 (en) * | 1994-11-10 | 1996-05-23 | Immuno Aktiengesellschaft | Method for producing biologicals in protein-free culture |
CZ92998A3 (cs) * | 1995-09-28 | 1998-09-16 | University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education | Způsob stimulace buněčně zprostředkované imunitní odpovědi pomocí cílené imunizace genovým materiálem vázaným na částicích |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CH589453A5 (cs) * | 1974-01-14 | 1977-07-15 | Sandoz Ag | |
US4317811A (en) * | 1980-09-11 | 1982-03-02 | Merck & Co., Inc. | Herpes simplex type 1 subunit vaccine |
DE3237313A1 (de) * | 1982-10-08 | 1984-04-12 | Werner Heese | Verfahren zur gewinnung und reinigung antigenhaltiger loesungen, insbesondere fuer influenza-viren, aus antigenhaltiger allantoisfluessigkeit |
US4783411A (en) * | 1984-10-22 | 1988-11-08 | Janis Gabliks | Influenza-A virus vaccine from fish cell cultures |
US5173418A (en) * | 1985-05-10 | 1992-12-22 | Benzon Pharma, A/S | Production in Escherichia coli of extracellular Serratia spp. hydrolases |
US5006472A (en) * | 1988-06-03 | 1991-04-09 | Miles Inc. | Enzymatic purification process |
RU2080876C1 (ru) * | 1989-02-07 | 1997-06-10 | Био-Текнолоджи Дженерал Корп. | Способ получения очищенных частиц поверхностного антигена гепатита в, очищенная частица поверхностного антигена гепатита в человека и вакцина против гепатита в |
ATE132160T1 (de) * | 1989-03-29 | 1996-01-15 | Univ New York State Res Found | Verfahren zur reinigung von aussenmembran-protein von haemophilus influenza |
DZ1706A1 (fr) * | 1992-08-07 | 2002-02-17 | Merck & Co Inc | Vaccin contre le virus de l'hepatite a. |
HRP950097A2 (en) * | 1994-03-08 | 1997-06-30 | Merck & Co Inc | Hepatitis a virus culture process |
US5681746A (en) * | 1994-12-30 | 1997-10-28 | Chiron Viagene, Inc. | Retroviral delivery of full length factor VIII |
WO1997004803A1 (fr) * | 1995-08-01 | 1997-02-13 | Pasteur Merieux Serums & Vaccins | Procede de production industrielle d'un vaccin contre l'encephalite japonaise et vaccin obtenu |
-
1998
- 1998-04-01 TW TW087104913A patent/TW570803B/zh not_active IP Right Cessation
- 1998-04-02 DK DK98201056T patent/DK0870508T3/da active
- 1998-04-02 ES ES98201056T patent/ES2129386T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-02 PT PT98201056T patent/PT870508E/pt unknown
- 1998-04-02 SI SI9830010T patent/SI0870508T1/xx unknown
- 1998-04-02 DE DE0870508T patent/DE870508T1/de active Pending
- 1998-04-02 AT AT98201056T patent/ATE197406T1/de active
- 1998-04-02 EP EP98201056A patent/EP0870508B1/en not_active Revoked
- 1998-04-02 TR TR1998/00613A patent/TR199800613A1/xx unknown
- 1998-04-02 DE DE69800383T patent/DE69800383T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 CA CA002234208A patent/CA2234208C/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 DZ DZ980072A patent/DZ2462A1/xx active
- 1998-04-06 BR BR9801015-8A patent/BR9801015A/pt not_active Application Discontinuation
- 1998-04-06 HU HU9800802A patent/HUP9800802A3/hu not_active Application Discontinuation
- 1998-04-06 HR HR980187A patent/HRP980187B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1998-04-06 NO NO981557A patent/NO323349B1/no not_active IP Right Cessation
- 1998-04-06 ID IDP980519A patent/ID20399A/id unknown
- 1998-04-06 KR KR1019980012018A patent/KR100593235B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1998-04-06 IL IL12396198A patent/IL123961A/xx not_active IP Right Cessation
- 1998-04-06 CZ CZ0105098A patent/CZ297492B6/cs unknown
- 1998-04-06 AU AU60659/98A patent/AU728939B2/en not_active Expired
- 1998-04-06 US US09/055,321 patent/US5948410A/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 SK SK445-98A patent/SK282614B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1998-04-06 NZ NZ330131A patent/NZ330131A/en not_active IP Right Cessation
- 1998-04-06 CN CNB981080863A patent/CN1138564C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 PL PL98325722A patent/PL187982B1/pl unknown
- 1998-04-06 RU RU98106860/13A patent/RU2197264C2/ru active
- 1998-04-06 ZA ZA982915A patent/ZA982915B/xx unknown
- 1998-04-07 JP JP11010198A patent/JP5258127B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-08 UA UA98041787A patent/UA42089C2/uk unknown
- 1998-04-08 AR ARP980101611A patent/AR011216A1/es not_active Application Discontinuation
- 1998-11-17 HK HK98112068A patent/HK1010833A1/xx not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-01-01 GR GR990300017T patent/GR990300017T1/el unknown
-
2000
- 2000-11-09 GR GR20000402476T patent/GR3034798T3/el not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4500513A (en) * | 1979-05-15 | 1985-02-19 | Miles Laboratories, Inc. | Influenza vaccine production in liquid cell culture |
WO1996015231A2 (en) * | 1994-11-10 | 1996-05-23 | Immuno Aktiengesellschaft | Method for producing biologicals in protein-free culture |
CZ92998A3 (cs) * | 1995-09-28 | 1998-09-16 | University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education | Způsob stimulace buněčně zprostředkované imunitní odpovědi pomocí cílené imunizace genovým materiálem vázaným na částicích |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CZ297492B6 (cs) | Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchtoproteinů | |
EP2172543B1 (en) | Process for the replication of influenza viruses in cell culture, and the influenza viruses obtainable by the process | |
US6656720B2 (en) | Animal cells and processes for the replication of influenza viruses | |
CA2197683C (en) | Method for preparing an influenza virus, antigens obtained and applications thereof | |
CN102781469B (zh) | 用于生产流感疫苗的方法 | |
EA014062B1 (ru) | Вирусные вакцины, полученные из клеток с низкими уровнями остаточной клеточной днк | |
EP0480949B1 (en) | Production of virus and purification of viral envelope proteins for vaccine use | |
JP5843615B2 (ja) | 密度勾配超遠心分離によるウイルスまたはウイルス抗原の精製 | |
MXPA98002766A (en) | Vaccine against influe | |
Weigel | Development of chromatography-based purification processes for cell culture-derived influenza virus particles | |
CN116966287A (zh) | 一种用于流感病毒裂解疫苗的裂解方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic |