CZ297492B6 - Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchtoproteinů - Google Patents

Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchtoproteinů Download PDF

Info

Publication number
CZ297492B6
CZ297492B6 CZ0105098A CZ105098A CZ297492B6 CZ 297492 B6 CZ297492 B6 CZ 297492B6 CZ 0105098 A CZ0105098 A CZ 0105098A CZ 105098 A CZ105098 A CZ 105098A CZ 297492 B6 CZ297492 B6 CZ 297492B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
proteins
surface antigen
influenza viruses
cell culture
influenza
Prior art date
Application number
CZ0105098A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ105098A3 (cs
Inventor
Scharrenburg@Gustaaf J. M. Van
Brands@Rudi
Original Assignee
Duphar International Research B. V.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=8228174&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ297492(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Duphar International Research B. V. filed Critical Duphar International Research B. V.
Publication of CZ105098A3 publication Critical patent/CZ105098A3/cs
Publication of CZ297492B6 publication Critical patent/CZ297492B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16051—Methods of production or purification of viral material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
    • C12N2760/16234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře, který zahrnuje následující kroky, při nichž se nejprve kapalina obsahující celý virus, získaná z buněčné kultury, podrobí působení enzymu trávícího DNA, dále se přidá kationtový detergent, a následně se izolují povrchové antigenní proteiny. Dále se popisuje vakcína proti chřipce na bázi takto připravitelného povrchového antigenu, kterávykazuje obsah DNA buněk hostitele rovný nebo nižší než 25 pg na dávku.

Description

Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchto proteinů (57) Anotace:
Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře, kteiý zahrnuje následující kroky, při nichž se nejprve kapalina obsahující celý virus, získaná z buněčné kultury, podrobí působení enzymu trávícího DNA, dále se přidá kationtový detergent, a následně se izolují povrchové antigenní proteiny. Dále se popisuje vakcína proti chřipce na bázi takto připravitelného povrchového antigenů, která vykazuje obsah DNA buněk hostitele rovný nebo nižší než 25 pg na dávku.
Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchto proteinů
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká vakcín proti chřipce na bázi povrchových antigenů, které je možno získat z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře, a také se týká způsobu přípravy povrchových antigenních proteinů virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře.
Dosavadní stav techniky
Virus chřipky je velký asi 125 nm a sestává z jádra z ribonukleové kyseliny (RNA) spojené s nukleoproteinem, obklopeného obalem viru s lipidovou dvouvrstvou strukturou. Vnitřní vrstva obalu viru sestává převážně z matrixových proteinů a vnější vrstva obsahuje většinu lipidového materiálu pocházejícího od hostitele.
Takzvané „povrchové proteiny“, neuraminidáza (NA) a hemaglutinin (HA), vypadají jako špičky na povrchu viru.
Většina komerčně dostupných inaktivovaných vakcín proti chřipce jsou takzvané „split (štěpené) vakcíny“ nebo „subjednotkové vakcíny“.
„Split vakcíny“ se připravují podrobením celého viru chřipky působení rozpouštěcím koncentracím detergentů a následným odstraněním detergentu a většiny virového lipidového materiálu.
„Podjednotkové vakcíny“ proti chřipce na rozdíl od „split vakcín“ neobsahují veškeré virové proteiny. Místo toho jsou „podjednotkové vakcíny“ obohacené o povrchové proteiny zodpovědné za vyvolání požadovaných, virus neutralizujících (proto ochranných) protilátek po vakcinaci.
Většina komerčně dostupných vakcín proti chřipce je založena na viru chřipky kultivovaném na oplodněných vejcích kuřat. Je však široce známo, že příprava virů chřipky pro vakcinační účely na vejcích má několik nevýhod:
1. Tento výrobní způsob je nevyhovující z důvodu kolísající (mikro)biologické kvality vajec.
2. Tento výrobní způsob zcela postrádá flexibilitu v případě náhlé potřeby zvýšené produkce, tj. v případě vážné epidemie nebo pandemie, kvůli logistickým problémům způsobeným nedostupností velkého množství vhodných vajec.
3. Takto připravené vakcíny jsou kontraindikovány pro osoby s přecitlivělostí na drůbeží nebo/a vaječné proteiny.
Řešení těchto problémů může spočívat v přípravě viru chřipky na tkáňových kulturách. Předpokládá se, že takový způsob přípravy bude mít mnoho výhod:
1. Buněčné linie tkáňových kultur jsou dostupné z dobře definovaného systému buněčných bank a jsou prosté (mikro)biologických znečišťujících látek, přičemž je velmi zlepšena shoda mezi jednotlivými šaržemi a získá se produkt s vyšší kvalitou.
2. Zvýší se šance na získání dostatečného množství dostupné vakcíny v případě hrozby vážné hrozby epidemie nebo pandemie.
3. Vzniklý chřipkový virový materiál bude vhodnější pro alternativní způsoby podávání (orální, nazální, inhalační).
4. Z hlediska WHO technologie umožní oddálit každoroční doporučení pro složení vakcíny (z poloviny února na polovinu března), čímž se zvýší přizpůsobení vakcíny ke kmenům, které se právě vyskytují.
Přesto přetrvává významný problém také ve vztahu k tkáňové kultuře viru chřipky, protože genetický materiál z kontinuálních buněčných linií může získat přítomný ve vakcíně.
Tento problém představuje riziko, které, pokud se neodstraní, může vést regulační orgány k zamítnutí žádostí o povolení dodávání takových vakcín proti chřipce na trh z bezpečnostních důvodů. Například U.S. úřad pro potraviny a léčiva požaduje, aby biotechnologické produkty pro člověka neobsahovaly více než 100 pg DNA buněk hostitele na dávku.
Proto předkládaný vynález poskytuje způsob přípravy povrchového antigenu viru chřipky pro vakcinační účely, který je bezpečný a neobsahuje nepřijatelná množství škodlivého genetického materiálu, a splňuje požadavky stanovené regulačními orgány. Bylo však považováno za žádoucí, a překvapivě to bylo také dosažitelné, připravit vakcíny proti chřipce s obsahem DNA buněk hostitele podstatně nižším než 100 pg na dávku.
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález poskytuje způsob přípravy povrchových antigenních proteinů pro přípravu vakcíny proti chřipce s nízkým obsahem DNA z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře, který zahrnuje následující kroky:
a) podrobení kapaliny obsahující celý virus, získané z buněčné kultury, působení enzymu trávícího DNA, a
b) přidání kationtového detergentů, což následuje izolace povrchových antigenních proteinů.
Způsob podle předkládaného vynálezu může být použit při přípravě vakcín obsahujících různé kmeny virů chřipky, jako jsou viry typické pro lidskou chřipku, prasečí chřipku, koňskou chřipku a ptačí chřipku.
Živočišná buněčná kultura podle předkládaného vynálezu může obsahovat buď primární buňky, jako jsou kuřecí embryonální fibroblasty (CEF), nebo kontinuální buněčnou linii, jako jsou Medin Darby buňky psích ledvin (MDCK), buňky vaječníků křečků (CHO) a Věro buňky.
Podrobení kapaliny obsahující celý virus působení enzymu trávicího DNA se může provést přímo ve fermentoru, popřípadě již během kultivace buněk a při procesu množení buněk.
Vhodné příklady enzymů trávících DNA jsou DNáza (například zařazená pod EC 3.1.21 a EC 3.1.22) a nukleázy (například zařazená pod EC 3.1.30 a EC 3.1.31).
-2CZ 297492 B6
Vhodné kationtové detergenty podle předkládaného vynálezu převážně sestávají ze sloučeniny obecného vzorce I
X’ ve kterém
Ri, R2 a R3 jsou stejné nebo různé a každý znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, nebo Ri a R2, společně s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří pětičlenný nebo šestičlenný nasycený heterocyklický kruh, a R3 znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, nebo Ri, R2 a R3, společně s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří pětičlenný nebo šestičlenný heterocyklický kruh nenasycený na atomu dusíku,
R4 znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, a
X znamená anion.
Příklady takových kationtových detergentů jsou cetyltrimethylammoniové soli, jako je cetyltrimethylammoniumbromid (C.T.A.B.), a myristyltrimethylamoniová sůl. Vhodnými detergenty jsou také lipofektin, lipofektamin, DOTMA.
Popřípadě mohou být tyto kationtové detergenty doplněny neiontovým detergentem, jako je Tween.
Izolace povrchových antigenních proteinů, následující po zpracování detergentem, může například zahrnovat kroky:
1. Oddělení RNP částice (těla) od povrchových antigenních proteinů, například pomoci odstředění nebo ultrafiltrace, a
2. odstranění detergentů od povrchových antigenních proteinů, například pomocí hydrofobní interakce detergentů s vhodnou pryskyřicí (jako je Amberlite XAD-4) nebo/a pomocí ultra(dia)filtrace.
Způsob podle předkládaného vynálezu překvapivě poskytuje produkt, který má velmi nízký obsah DNA pocházející z živočišných buněk. Lze snadno dosáhnout tak nízkých koncentrací DNA, jako je 25 pg/dávku, a v mnoha případech dokonce až 10 pg/dávku.
Povrchové antigenní proteiny mohou být použity pro přípravu vakcíny proti chřipce, například pomocí přidání pufru (např. PBS) nebo/a pomocí smísení s antigeny z jiných serotypů virů chřipky.
Pro další přípravu vakcíny jsou potřebné volitelné koncentrace povrchového antigenu.
Dalším předmětem předkládaného vynálezu je proto vakcína proti chřipce na bázi povrchového antigenu z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře připravitelného způsobem popsaným výše, která vykazuje obsah DNA buněk hostitele rovný nebo nižší než 25 pg na dávku.
Další provedení předkládaného vynálezu poskytuje výše popsanou vakcínu, která vykazuje obsah
DNA buněk hostitele nižší než 10 pg na dávku.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
A. Multiplikace viru
1. Antigenní virus chřipky typu B/Yamagata se multiplikuje na Madin Darby buňkách psích ledvin (MDCK) (ATCC CCL34) ve fermentoru pomocí inkubace naočkovaného viru s buňkami 2 dny při 35 °C.
2. Dále se pH fermentující kapaliny zvýší na 8 pomocí přidání zředěného hydroxidu sodného a přidá se Benzon nukleáza do konečné koncentrace 1000 jednotek (1 pg) na litr.
3. Inkubace pokračuje při 35 °C další 4 hodiny.
B. Izolace viru
1. Kapalina se zfiltruje přes hluboký filtr s přibližnou velikostí pórů 0,5 mikrometru, a tak se odstraní zbytky buněk.
2. Dále se virus chřipky koncentruje a čistí pomocí ultrafiltrace za použití membrány za oddělení molekul o molární hmotnosti do 300 000.
3. Přidá se sacharóza, a tak se připraví konečná koncentrace 30 % (hmotnost/objem), potom se přidá formaldehyd do konečné koncentrace 0,015 % (hmotnost/objem). Tato směs se míchá při 2 až 8 °C 72 hodin.
4. Koncentrát viru se zředí pětkrát solankou pufrovanou fosforečnanem a přenese se na afinitní kolonu obsahující Amikon Cellufine Sulphate. Po odstranění nečistot pomocí promytí solankou pufrovanou fosforečnanem se virus eluuje roztokem l,5molámího chloridu sodného v solance pufrované fosforečnanem. Eluát se koncentruje a odsolí pomocí ultrafiltrace za použití membrány pro odstranění molekul o molární hmotnosti 300 000.
C. Izolace podjednotky
1. Přidá se neionogenní detergent Tween-80 do konečné koncentrace 300 pg/ml a cetyltrimethylamoniumbromid do konečné koncentrace 750 μg/ml. Směs se míchá při 4 °C tři hodiny, potom se pomocí odstředění z povrchového antigenního proteinu oddělí RNP část.
2. Aby se odstranil detergent, supernatant se míchá přes noc při 2 až 8 °C s Amberlitem XAD-4. Amberlit se odstraní pomocí filtrace a filtrát se postupně sterilně filtruje průchodem přes 0,22 μιη filtr.
V průběhu výše uvedeného postupu se analyzuje obsah buněk DNA hostitele pomocí platných testů, které jsou založeny na „slot-blot“ křížení za použití sondy psí DNA značené 32P.
Výsledky testu na DNA provedeného po různých krocích jsou uvedeny v následující tabulce (v této tabulce je množství DNA na IVV dávku vyjádřeno v pikogramech na 50 μg HA).
-4CZ 297492 B6
Tabulka
Vzorek Obsah DNA Po kroku
Fermentovaná kapalina 48 hpi 19 000 000 Al
Fermentovaná kapalina po zpracováni s nukleázou 370 000 A2
Kapalina po filtraci 10 000 Bl
Koncentrát po ultrafiltraci 4 350 B2
Kapalina po deaktivaci a afinitni chromatografíí 4 200 B4
Supernatant po zpracováni s Tween/C.T.A.B. a odstředění < 25 Cl
Filtrace po odstraněni detergentu < 25 C2
Příklad 2
Multiplikace, čištění deaktivace a štěpení viru se provede jako v příkladu 1.
Zpracování fermentované kapaliny benzon nukleázou v průběhu posledních hodin multiplikace viru (krok A2 a A3), použití pH multiplikačního média (krok Al) poskytne podobné výsledky ve vztahu k odstranění DNA.
DNáza I, ačkoli vyžaduje použití ve vyšší koncentraci, je stejně účinná při odstranění DNA buněk hostitele (v průběhu kroků Al až A3). Podobných výsledků je možno dosáhnout za použití dalších endonukleáz.
Příklad 3
Postup je stejný jako v příkladech 1 nebo 2 kromě toho, že odstranění zbytků buněk (krok Bl) se provádí pomocí odstředění.
Příklad 4
Postup se provádí stejně jako v příkladech 1, 2 nebo 3 kromě toho, že se virus koncentruje a čistí (krok B2) od fermentační kapaliny pomocí odstředění v kontinuální průtokové zonální odstředivce, například Electro-Nucleonics (model RK) za použití gradientu sacharózy v například solance pufrované fosforečnanem.
-5CZ 297492 B6
Příklad 5
Postup se provádí stejným způsobem jako v příkladech 1 až 4 kromě toho, že se přidání roztoku cetyltrimethylamoniumbromidu v kroku Cl nahradí přidáním roztoku cetylpyridiniumbromidu, myristyltrimethylamoniumbromidu, benzetoniumchloridu, methylbenzetoniumchloridu, dekamethoniumchloridu nebo stearyldimethylbenzylamoniumbromidu. Bylo dosaženo podobných výsledků ve vztahu k odstranění buněk DNA hostitele.
Příklad 6
Postup byl proveden stejně, jako je popsáno v příkladu 1 kromě toho, že přidání sacharózy se provede po afmitní chromatografií a formaldehyd se přidává do 0,05 % (hmotnost/objem) maximálně po dobu 120 hodin.
Příklad 7
Způsoby podle příkladů 1, 2, 3, 4 a 6 se použily pro úspěšnou přípravu vakcíny s nízkým obsahem DNA z chřipkového viru kmene B/Harbin, B/Pharma, A/Texas (H1N1), A/Taiwan (H1N1), A/Johannesburg (H3N2) a A/Wuhan (H3N2).
PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (7)

1. Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky rozmnožených na živočišné buněčné kultuře, vyznačující se tím, že zahrnuje následující kroky, při nichž se:
a) kapalina obsahující celý virus, získaná z buněčné kultury, podrobí působení enzymu trávícího DNA, a
b) přidá se kationtový detergent, a následně se izolují povrchové antigenní proteiny.
2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se podrobení působení enzymu trávícího DNA provede v průběhu rozmnožování virů chřipky na buněčné kultuře.
3. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že kationtový detergent převážně zahrnuje sloučeninu obecného vzorce 1 (I), ve kterém
Rb R2 a R3 jsou stejné nebo různé a každý znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu,
-6CZ 297492 B6 nebo Ri a R2, společně s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří pětičlenný nebo šestičlenný nasycený heterocyklický kruh, a R3 znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, nebo R], R2 a R3, společně s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří pětičlenný nebo šestičlenný heterocyklický kruh nenasycený na atomu dusíku,
R4 znamená alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu, a
X znamená anion.
4. Způsob podle nároku 1, vyznačující zahrnuje cetyltrimethylamoniumbromid.
5. Způsob podle nároku 1, vyznačující neiontovým detergentem.
6. Způsob podle nároku 1, vyznačující živočišné buněčné linii.
7. Způsob podle nároku 1, vyznačující MDCK buňkách.
se t í m , že kationtový detergent převážně se tí m , že kationtový detergent je doplněn se t í m , že se viry chřipky rozmnožují na
CZ0105098A 1997-04-09 1998-04-06 Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchtoproteinů CZ297492B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP97201007 1997-04-09

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ105098A3 CZ105098A3 (cs) 1998-10-14
CZ297492B6 true CZ297492B6 (cs) 2007-01-03

Family

ID=8228174

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0105098A CZ297492B6 (cs) 1997-04-09 1998-04-06 Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchtoproteinů

Country Status (32)

Country Link
US (1) US5948410A (cs)
EP (1) EP0870508B1 (cs)
JP (1) JP5258127B2 (cs)
KR (1) KR100593235B1 (cs)
CN (1) CN1138564C (cs)
AR (1) AR011216A1 (cs)
AT (1) ATE197406T1 (cs)
AU (1) AU728939B2 (cs)
BR (1) BR9801015A (cs)
CA (1) CA2234208C (cs)
CZ (1) CZ297492B6 (cs)
DE (2) DE870508T1 (cs)
DK (1) DK0870508T3 (cs)
DZ (1) DZ2462A1 (cs)
ES (1) ES2129386T3 (cs)
GR (2) GR990300017T1 (cs)
HK (1) HK1010833A1 (cs)
HR (1) HRP980187B1 (cs)
HU (1) HUP9800802A3 (cs)
ID (1) ID20399A (cs)
IL (1) IL123961A (cs)
NO (1) NO323349B1 (cs)
NZ (1) NZ330131A (cs)
PL (1) PL187982B1 (cs)
PT (1) PT870508E (cs)
RU (1) RU2197264C2 (cs)
SI (1) SI0870508T1 (cs)
SK (1) SK282614B6 (cs)
TR (1) TR199800613A1 (cs)
TW (1) TW570803B (cs)
UA (1) UA42089C2 (cs)
ZA (1) ZA982915B (cs)

Families Citing this family (99)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUP0202846A3 (en) * 1999-09-24 2003-12-29 Smithkline Beecham Biolog Intranasal influenza virus vaccine
GB9923176D0 (en) * 1999-09-30 1999-12-01 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
CN100415769C (zh) * 2002-02-07 2008-09-03 中国科学院过程工程研究所 寡聚或多聚亚基蛋白质分离纯化的方法
BR0309659A (pt) 2002-04-30 2005-02-22 Oncolytics Biotech Inc Método para produzir vìrus de uma cultura de células, composição, e, método para produzir reovìrus infeccioso
CA2517181C (en) * 2003-02-25 2013-07-16 Medimmune Vaccines, Inc. Methods of producing influenza vaccine compositions
US20060110406A1 (en) * 2003-02-25 2006-05-25 Medimmune Vaccines, Inc. Refrigerator-temperature stable influenza vaccine compositions
DE602004028736D1 (de) * 2003-06-20 2010-09-30 Microbix Biosystems Inc Verbesserungen bei der virusproduktion
US8506967B2 (en) 2003-07-11 2013-08-13 Novavax, Inc. Functional influenza virus like particles (VLPs)
US8992939B2 (en) 2003-07-11 2015-03-31 Novavax, Inc. Highly efficient influenza matrix (M1) proteins
US8592197B2 (en) 2003-07-11 2013-11-26 Novavax, Inc. Functional influenza virus-like particles (VLPs)
US8080255B2 (en) 2003-07-11 2011-12-20 Novavax Inc. Functional influenza virus like particles (VLPs)
DE602005015332D1 (de) * 2004-02-23 2009-08-20 Crucell Holland Bv Verfahren zur Reinigung von Viren
CA2559371C (en) 2004-03-09 2014-07-08 Chiron Corporation Influenza virus vaccines
WO2006027698A1 (en) 2004-09-09 2006-03-16 Novartis Vaccines And Diagnostics Gmbh & Co Kg. Decreasing potential iatrogenic risks associated with influenza vaccines
US7901921B2 (en) 2004-10-22 2011-03-08 Oncolytics Biotech Inc. Viral purification methods
EP2923711A1 (en) 2004-11-03 2015-09-30 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Influenza vaccination
KR101323459B1 (ko) * 2004-12-23 2013-10-29 메디뮨 엘엘씨 바이러스의 증식을 위한 비종양형성성 ｍｄｃｋ 세포주
CA2601022C (en) 2005-03-23 2023-03-07 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Use of an influenza virus an oil-in-water emulsion adjuvant to induce cd4 t-cell and/or improved b-memory cell response
ES2317517T5 (es) * 2005-04-11 2016-01-21 Crucell Holland B.V. Purificación de virus usando ultrafiltración
CN104474543A (zh) 2005-11-01 2015-04-01 诺华疫苗和诊断有限两合公司 经由β-丙内酯处理的残留细胞DNA水平降低的细胞衍生病毒疫苗
US11707520B2 (en) 2005-11-03 2023-07-25 Seqirus UK Limited Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
NZ592713A (en) 2005-11-04 2012-12-21 Novartis Vaccines & Diagnostic Adjuvanted influenza vaccines including a cytokine-inducing agents other than an agonist of Toll-Like Receptor 9
JP2009514850A (ja) 2005-11-04 2009-04-09 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル アジュバントとして減少した量の水中油型エマルションを有するインフルエンザワクチン
NZ568211A (en) 2005-11-04 2011-11-25 Novartis Vaccines & Diagnostic Influenza vaccines including combinations of particulate adjuvants and immunopotentiators
KR20080069232A (ko) * 2005-11-04 2008-07-25 노바티스 백신즈 앤드 다이아그노스틱스 에스.알.엘. 스플리트 인플루엔자 백신에 대한 보조제로서 유리 수성상계면활성제를 갖는 에멀젼
EP2368572B1 (en) * 2005-11-04 2020-03-04 Seqirus UK Limited Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
KR20110110853A (ko) * 2006-01-27 2011-10-07 노파르티스 파르마 아게 적혈구응집소 및 기질 단백질을 함유한 인플루엔자 백신
US20100068223A1 (en) 2006-03-24 2010-03-18 Hanno Scheffczik Storage of Influenza Vaccines Without Refrigeration
AU2007245192B2 (en) 2006-03-31 2012-04-12 Wisconsin Alumni Research Foundation High titer recombinant influenza viruses for vaccines
JP5639760B2 (ja) 2006-07-17 2014-12-10 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム インフルエンザワクチン
GB0614460D0 (en) 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
CA3016948A1 (en) 2006-09-11 2008-03-20 Seqirus UK Limited Making influenza virus vaccines without using eggs
SG174813A1 (en) 2006-09-15 2011-10-28 Medimmune Llc Mdck cell lines supporting viral growth to high titers and bioreactor process using the same
PL2121011T3 (pl) 2006-12-06 2014-10-31 Novartis Ag Szczepionki zawierające antygeny czterech szczepów wirusa grypy
WO2008109669A2 (en) * 2007-03-05 2008-09-12 Om Pharma Bacterial extract for respiratory disorders and proces for its preparation
JP2010521460A (ja) * 2007-03-12 2010-06-24 アンティジェン・エクスプレス・インコーポレーテッド 癌免疫療法におけるＩｉ−ＲＮＡｉ関与Ｉｉ抑制
TW200908994A (en) 2007-04-20 2009-03-01 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
US9474798B2 (en) 2007-06-18 2016-10-25 Wisconsin Alumni Research Foundation Influenza M2 protein mutant viruses as live influenza attenuated vaccines
EA201070066A1 (ru) 2007-06-27 2010-06-30 Новартис Аг Вакцины против гриппа с низким содержанием добавок
AU2008293504B2 (en) * 2007-08-27 2012-04-12 Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc Immunogenic compositions and methods
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
EP2268309B1 (en) 2008-03-18 2015-01-21 Novartis AG Improvements in preparation of influenza virus vaccine antigens
RU2015103990A (ru) * 2008-09-24 2015-10-27 Медиммун, Ллк Способы культивирования клеток, размножения и очистки вирусов
EP2361304A2 (en) 2008-11-05 2011-08-31 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Novel method
WO2010092477A1 (en) 2009-02-10 2010-08-19 Novartis Ag Influenza vaccines with increased amounts of h3 antigen
CA2752039A1 (en) 2009-02-10 2010-08-19 Novartis Ag Influenza vaccine regimens for pandemic-associated strains
EA201500910A1 (ru) 2009-02-10 2016-04-29 Новартис Аг Вакцины против гриппа со сниженным количеством сквалена
DE102010018462A1 (de) 2009-04-27 2011-04-07 Novartis Ag Impfstoffe zum Schutz gegen Influenza
CN102597246B (zh) 2009-05-21 2014-02-26 诺华股份有限公司 使用非内源pol I启动子的反向遗传
WO2010144797A2 (en) 2009-06-12 2010-12-16 Vaccine Technologies, Incorporated Influenza vaccines with enhanced immunogenicity and uses thereof
BR112012000826B1 (pt) 2009-07-06 2022-07-26 Variation Biotechnologies Inc Método para a preparação de vesículas
WO2011005772A1 (en) 2009-07-06 2011-01-13 Variation Biotechnologies, Inc. Methods for preparing vesicles and formulations produced therefrom
EP2459722B1 (en) 2009-07-31 2017-09-06 Seqirus UK Limited Reverse genetics systems
CN102695523A (zh) 2009-09-10 2012-09-26 诺华有限公司 针对呼吸道疾病的组合疫苗
CA2778332A1 (en) 2009-10-20 2011-04-28 Novartis Ag Improved reverse genetics methods for virus rescue
ES2813347T3 (es) 2009-10-26 2021-03-23 Wisconsin Alumni Res Found Virus recombinantes de la influenza de alto título con replicación mejorada en células Vero
US10130697B2 (en) 2010-03-23 2018-11-20 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Vaccines comprising mutant attenuated influenza viruses
CA2800150C (en) 2010-05-21 2018-09-04 Novartis Ag Influenza virus reassortment method
AU2011262312B2 (en) 2010-06-01 2015-05-28 Novartis Ag Concentration and lyophilization of influenza vaccine antigens
DK2575872T3 (da) 2010-06-01 2020-10-19 Seqirus Uk Ltd Koncentrering af influenzavaccineantigener uden frysetørring
AU2011276223C1 (en) 2010-07-06 2016-05-12 Variation Biotechnologies, Inc. Compositions and methods for treating influenza
CA2808965C (en) 2010-08-20 2020-01-07 Novartis Ag Soluble needle arrays for delivery of influenza vaccines
EP2663288B1 (en) 2011-01-13 2022-12-21 Variation Biotechnologies Inc. Methods for preparing vesicles and formulations produced therefrom
BR112013017939B1 (pt) 2011-01-13 2022-11-16 Variation Biotechnologies Inc Composição imunogênica liofilizada termoestável, uso e método para preparação da mesma
CA2852857A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Novartis Ag Adjuvanted influenza b virus vaccines for pediatric priming
EP2780350B1 (en) 2011-11-18 2019-03-06 Variation Biotechnologies Inc. Synthetic derivatives of mpl and uses thereof
EP2802353A4 (en) 2012-01-12 2015-12-02 Variation Biotechnologies Inc COMPOSITIONS AND METHOD FOR THE TREATMENT OF VIRUS INFECTIONS
US20150079077A1 (en) 2012-01-27 2015-03-19 Variation Biotechnologies, Inc. Methods and compositions for therapeutic agents
WO2013087945A2 (en) 2012-03-02 2013-06-20 Novartis Ag Influenza virus reassortment
JP2015526062A (ja) 2012-06-04 2015-09-10 ノバルティス アーゲー 改善された安全性試験
GB201218195D0 (en) 2012-10-10 2012-11-21 Istituto Zooprofilattico Sperimentale Delle Venezie Composition
WO2014086732A2 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Novartis Ag Influenza virus reassortment
MX2015011529A (es) 2013-03-13 2016-02-05 Novartis Ag Reordenamiento del virus de infuenza b.
US20140335116A1 (en) 2013-05-10 2014-11-13 Novartis Ag Avoiding narcolepsy risk in influenza vaccines
DE202013005130U1 (de) 2013-06-05 2013-09-10 Novartis Ag Influenza Virus Reassortierung
DE202013005100U1 (de) 2013-06-05 2013-08-26 Novartis Ag Influenza Virus Reassortierung
WO2014195920A2 (en) 2013-06-06 2014-12-11 Novartis Ag Influenza virus reassortment
EP3022296B1 (en) 2013-07-15 2022-12-28 Wisconsin Alumni Research Foundation High titer recombinant influenza viruses with enhanced replication in mdck or vero cells or eggs
RU2535153C1 (ru) * 2013-09-04 2014-12-10 Федеральное государственное унитарное предприятие "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов" Федерального медико-биологического агентства России (ФГУП СПбНИИВС ФМБА России) Способ получения высокоочищенных вирионных концентратов
JP6373376B2 (ja) * 2013-11-15 2018-08-15 ノバルティス アーゲー 残留細胞培養不純物の除去
WO2015196150A2 (en) 2014-06-20 2015-12-23 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Mutations that confer genetic stability to additional genes in influenza viruses
EP2966093A1 (en) 2014-07-07 2016-01-13 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Process for the preparation of magnetic sulfated cellulose particles, magnetic sulfated cellulose particles and their use
US10633422B2 (en) 2015-06-01 2020-04-28 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Influenza virus replication by inhibiting microRNA lec7C binding to influenza viral cRNA and mRNA
RU2614127C2 (ru) * 2015-06-04 2017-03-22 Общество с ограниченной ответственностью "НТфарма" Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1)
JP2018524323A (ja) 2015-06-26 2018-08-30 セキラス ユーケー リミテッド 抗原がマッチしたインフルエンザワクチン
US9890363B2 (en) 2015-07-06 2018-02-13 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Influenza virus replication for vaccine development
EP3764098B1 (en) 2015-07-07 2022-11-16 Seqirus UK Limited Influenza potency assays
EP3417056A1 (en) 2016-02-19 2018-12-26 Wisconsin Alumni Research Foundation (WARF) Improved influenza b virus replication for vaccine development
EP3601543A4 (en) 2017-03-30 2021-01-27 Merck Sharp & Dohme Corp. ADDING NUCLEASES DIRECTLY TO CELL CULTURE TO FACILITATE DIGESTION AND RELEASE OF HOST CELL NUCLEIC ACIDS
RU2670001C1 (ru) * 2017-12-25 2018-10-17 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской академии наук Способ получения белков клеточной поверхности
EP3737750B1 (en) 2018-01-09 2024-06-05 Theriva Biologics, Inc. Alkaline phosphatase agents for treatment of neurodevelopmental disorders
EP3773686B1 (en) 2018-03-20 2023-06-07 Theriva Biologics, Inc. Alkaline phosphatase agents for treatment of radiation disorders
EP3768302A4 (en) 2018-03-20 2021-12-15 Synthetic Biologics, Inc. INTESTINAL ALKALINE PHOSPHATASE FORMULATIONS
WO2020167432A2 (en) 2019-01-23 2020-08-20 Yoshihiro Kawaoka Mutations that confer genetic stability to additional genes in influenza viruses
CN113874496A (zh) 2019-02-08 2021-12-31 威斯康星校友研究基金会(Warf) 人源化细胞系
US11390649B2 (en) 2019-05-01 2022-07-19 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Influenza virus replication for vaccine development
EP4022046A2 (en) 2019-08-27 2022-07-06 Wisconsin Alumni Research Foundation (WARF) Recombinant influenza viruses with stabilized ha for replication in eggs
JP2023502650A (ja) 2019-11-18 2023-01-25 セキラス ピーティーワイ リミテッド 遺伝子再集合インフルエンザウイルスを産生するための方法
KR102444684B1 (ko) * 2020-04-29 2022-09-16 에스케이바이오사이언스(주) 일회용 배양 공정 시스템을 이용한 인플루엔자 바이러스 생산 방법

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4500513A (en) * 1979-05-15 1985-02-19 Miles Laboratories, Inc. Influenza vaccine production in liquid cell culture
WO1996015231A2 (en) * 1994-11-10 1996-05-23 Immuno Aktiengesellschaft Method for producing biologicals in protein-free culture
CZ92998A3 (cs) * 1995-09-28 1998-09-16 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Způsob stimulace buněčně zprostředkované imunitní odpovědi pomocí cílené imunizace genovým materiálem vázaným na částicích

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH589453A5 (cs) * 1974-01-14 1977-07-15 Sandoz Ag
US4317811A (en) * 1980-09-11 1982-03-02 Merck & Co., Inc. Herpes simplex type 1 subunit vaccine
DE3237313A1 (de) * 1982-10-08 1984-04-12 Werner Heese Verfahren zur gewinnung und reinigung antigenhaltiger loesungen, insbesondere fuer influenza-viren, aus antigenhaltiger allantoisfluessigkeit
US4783411A (en) * 1984-10-22 1988-11-08 Janis Gabliks Influenza-A virus vaccine from fish cell cultures
US5173418A (en) * 1985-05-10 1992-12-22 Benzon Pharma, A/S Production in Escherichia coli of extracellular Serratia spp. hydrolases
US5006472A (en) * 1988-06-03 1991-04-09 Miles Inc. Enzymatic purification process
AU632575B2 (en) * 1989-02-07 1993-01-07 Savient Pharmaceuticals, Inc. Method for production and purification of hepatitis b vaccine
EP0389925B1 (en) * 1989-03-29 1995-12-27 The Research Foundation Of State University Of New York A method for purifying an outer membrane protein of Haemophilus influenzae
DZ1706A1 (fr) * 1992-08-07 2002-02-17 Merck & Co Inc Vaccin contre le virus de l'hepatite a.
HRP950097A2 (en) * 1994-03-08 1997-06-30 Merck & Co Inc Hepatitis a virus culture process
US5681746A (en) * 1994-12-30 1997-10-28 Chiron Viagene, Inc. Retroviral delivery of full length factor VIII
EP0841942B2 (fr) * 1995-08-01 2007-12-12 Sanofi Pasteur Procede de production industrielle d'un vaccin contre l'encephalite japonaise et vaccin obtenu

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4500513A (en) * 1979-05-15 1985-02-19 Miles Laboratories, Inc. Influenza vaccine production in liquid cell culture
WO1996015231A2 (en) * 1994-11-10 1996-05-23 Immuno Aktiengesellschaft Method for producing biologicals in protein-free culture
CZ92998A3 (cs) * 1995-09-28 1998-09-16 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Způsob stimulace buněčně zprostředkované imunitní odpovědi pomocí cílené imunizace genovým materiálem vázaným na částicích

Also Published As

Publication number Publication date
ES2129386T3 (es) 2001-01-01
JPH1121253A (ja) 1999-01-26
HUP9800802A3 (en) 2003-08-28
DE69800383T2 (de) 2001-08-16
JP5258127B2 (ja) 2013-08-07
HRP980187B1 (en) 2001-04-30
IL123961A (en) 2000-07-16
RU2197264C2 (ru) 2003-01-27
SK44598A3 (en) 1998-11-04
NZ330131A (en) 1999-10-28
CN1138564C (zh) 2004-02-18
KR100593235B1 (ko) 2007-12-04
EP0870508B1 (en) 2000-11-08
CZ105098A3 (cs) 1998-10-14
DE870508T1 (de) 1999-08-19
GR3034798T3 (en) 2001-02-28
SK282614B6 (sk) 2002-10-08
NO981557D0 (no) 1998-04-06
CN1196956A (zh) 1998-10-28
BR9801015A (pt) 2000-01-11
UA42089C2 (uk) 2001-10-15
GR990300017T1 (en) 1999-06-30
DE69800383D1 (de) 2000-12-14
DZ2462A1 (fr) 2003-01-18
AR011216A1 (es) 2000-08-02
NO323349B1 (no) 2007-04-02
ES2129386T1 (es) 1999-06-16
AU728939B2 (en) 2001-01-18
ATE197406T1 (de) 2000-11-11
NO981557L (no) 1998-10-12
CA2234208C (en) 2003-06-10
HU9800802D0 (en) 1998-05-28
PL187982B1 (pl) 2004-11-30
MX9802766A (es) 1998-12-31
HK1010833A1 (en) 1999-07-02
TR199800613A1 (xx) 1998-10-21
PT870508E (pt) 2001-04-30
HUP9800802A2 (hu) 1999-04-28
ID20399A (id) 1998-12-10
CA2234208A1 (en) 1998-10-09
PL325722A1 (en) 1998-10-12
US5948410A (en) 1999-09-07
DK0870508T3 (da) 2000-11-20
TW570803B (en) 2004-01-11
EP0870508A1 (en) 1998-10-14
HRP980187A2 (en) 1999-04-30
ZA982915B (en) 1999-01-21
AU6065998A (en) 1998-10-15
KR19980081114A (ko) 1998-11-25
SI0870508T1 (en) 2001-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ297492B6 (cs) Způsob přípravy povrchových antigenních proteinů z virů chřipky a vakcína na bázi těchtoproteinů
EP2172543B1 (en) Process for the replication of influenza viruses in cell culture, and the influenza viruses obtainable by the process
US6656720B2 (en) Animal cells and processes for the replication of influenza viruses
CA2197683C (en) Method for preparing an influenza virus, antigens obtained and applications thereof
CN102781469B (zh) 用于生产流感疫苗的方法
EA014062B1 (ru) Вирусные вакцины, полученные из клеток с низкими уровнями остаточной клеточной днк
EP0480949B1 (en) Production of virus and purification of viral envelope proteins for vaccine use
JP5843615B2 (ja) 密度勾配超遠心分離によるウイルスまたはウイルス抗原の精製
CN116966287B (zh) 一种用于流感病毒裂解疫苗的裂解方法
MXPA98002766A (en) Vaccine against influe

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic