DE3237313A1 - Verfahren zur gewinnung und reinigung antigenhaltiger loesungen, insbesondere fuer influenza-viren, aus antigenhaltiger allantoisfluessigkeit - Google Patents
Verfahren zur gewinnung und reinigung antigenhaltiger loesungen, insbesondere fuer influenza-viren, aus antigenhaltiger allantoisfluessigkeitInfo
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Description
- Bezeichnung:
- "Verfahren zur Gewinnung und Reinigung antigenhaltiger Ldsungen, insbesondere für Influenza-Viren, aus antigenhaltiger AllantoisflUssigkeit 1-Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung und Reinigung antigenhaltiger Lösungen, insbesondere für rnfluenza-Viren, aus antigenhaltiger Allantoisflüssigkeit.
- Bei den bekannten Verfahren dieser Art wird aus der antigenhaltigen Allantoisflüssigkeit durch Dichtegradientenzentrifugatton ankon~zentriertes und gereinigtes Viruskonzentrat gewonnen. Das Viruskonzentrat wird mit einem Detergens (z.B. Cetyltrimethylammoniumbromid (STAB) gespalten, wobei die Oberflächenantigene abgelöst werden. Durch eine weitere Zentrifugation werden die Oberflächenantigene gewonnen.
- Dieses bekannte Verfahren arbeitet nicht nur mit großen Verlusten, sondern benötigt auch sehr viel Energie durch die Verwendung von Ultrazentrifugen. Außerdem ist es personal-und zeitaufwendig.
- Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zu schaffen, das weniger aufwendig ist und eine höhere Ausbeute erlaubt.
- Das Verfahren gemäß der Erfindung ist dadurch gekennzeichnet,' daß aus der antigenhaltigen AllantoisflUssigkeit durch Molekularfiltration alle Bestandteile, die eine Molmasse au4-weisen, welche kleiner ist als die der Viren, entfernt werden, daß in an sich bekannter Weise mit Hilfe eines Detergens die oberflächenantigene abgespalten werden und daß das so erhaltene Produkt durch nochmalige Molekularfiltration von Bestandteilen gereinigt wird, die eine Molmasse aufweisen, welche größer ist als die der größten Oberflächenantigene.
- Um Fette oder fettähnliche Produkte zu entfernen, wird vorzugsweise in Gegenwart eines fettloslichen Lösungsmittels ultrafiltriert.
- Die in an sich bekannter Weise vorbehandelte antigenhaltige Allantoisflüssigkeit wird beispielsweise durch die Molekularfiltration zunächst von Bestandteilen + 1 Mill. dalton Molmassen befreit. Man benutzt Molekularfilter mit einer Trenngrenze von 1 Mill dalton, um Verunreinigungen *1 Mill dalton zu entfernen. Da die Molekularfiltration zweckmäßigerweise in Gegenwart eines fettlöslichen Lösungsmittels durchgeführt wird, werden damit auch die Fettstoffe abgeführt. Es verbleiben somit die erheblich größeren Viruspartikel, die als Rücklauf konzentriert und gereinigt anfallen. In an sich üblicher Weise werden diese Viruspartikel nun mit Hilfe eines geeigneten Detergens gespalten, um die Oberflächenantigene abzuspalten. Durch die nochmalige Molekularfiltration mit einer Trenngrenze von 1 Mill dalton werden die Antigene als Filtrat gewonnen, da diese eine kleinere Molmasse als 1 Mill dalton aufweisen, während die Restvirenpartikel als Rücklauf entfernt werden.
- Die Trenngrenzen der Molekularfilter hängen ab vom Ausgangsmaterial (Art der Viren und Verunreinigungen). Speziell für Influenza-Viren können Molekularfilter mit Trenngrenzen von.
- 250.000 dalton bis 360 Mill dalton benutzt werden0 Versuche haben gezeigt, daß die Ausbeute mit dem erflndunggentäßen Verfahren erheblich höher ist gegenüber den bekannten Verfahren.
Claims (3)
- Pat entansprüche 1. Verfahren zur Gewinnung und Reinigung antigenhaltiger Lösungen, insbesondere für Influenza-Viren, aus antigenhaltiger Allantoisflüssigkeit, dadurch gekennzeichnet, daß aus der antigenhaltigen Allantoisfltssigkeit durch Molekularfiltration alle Bestandteile, die eine Molmasse ausweisen, welche kleiner ist als die der Viren, entfernt werden, daß in an sich bekannter Weise mit Hilfe eines Detergens die Oberflächenantigene abgespalten werden und daß das so erhaltene Produkt durch nochmalige Molekularfiltration von Bestandteilen gereinigt wird, die eine Molmasse aufweisen, welche größer ist als die der größten Oberflächenantigene.
- 2. Verfahren nach Anspruch 1,«dadurch gekennzeichnet, daB vorzugsweise für Influenza-Viren Molekularfilter mit den Trenngrenzen von 1 Mill dalton benutzt werden.
- 3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die erste und zweite Molekularfiltration in Gegenwart eines fettlöslichen Lösungsmittels durchgeführt wird.
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Applications Claiming Priority (1)
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Publications (1)
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| DE3237313A1 true DE3237313A1 (de) | 1984-04-12 |
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ID=6175259
Family Applications (1)
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| DE19823237313 Withdrawn DE3237313A1 (de) | 1982-10-08 | 1982-10-08 | Verfahren zur gewinnung und reinigung antigenhaltiger loesungen, insbesondere fuer influenza-viren, aus antigenhaltiger allantoisfluessigkeit |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DE (1) | DE3237313A1 (de) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19709186A1 (de) * | 1997-03-06 | 1998-09-17 | Medigene Ag | Filtrationsverfahren zur Trennung von Viren |
| US5948410A (en) * | 1997-04-09 | 1999-09-07 | Duphar International Research B.V. | Influenza vaccine |
-
1982
- 1982-10-08 DE DE19823237313 patent/DE3237313A1/de not_active Withdrawn
Cited By (3)
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| DE19709186A1 (de) * | 1997-03-06 | 1998-09-17 | Medigene Ag | Filtrationsverfahren zur Trennung von Viren |
| DE19709186C2 (de) * | 1997-03-06 | 1999-10-14 | Medigene Ag | Filtrationsverfahren zur Trennung von Viren |
| US5948410A (en) * | 1997-04-09 | 1999-09-07 | Duphar International Research B.V. | Influenza vaccine |
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