CZ296649B6 - Zpusob výroby stabilizovaného polypeptidového prostredku zahrnující stabilizování polypeptidu protidenaturaci organickými rozpoustedly, jeho príprava a prostredek pro regulované uvolnování polypeptidu - Google Patents
Zpusob výroby stabilizovaného polypeptidového prostredku zahrnující stabilizování polypeptidu protidenaturaci organickými rozpoustedly, jeho príprava a prostredek pro regulované uvolnování polypeptidu Download PDFInfo
- Publication number
- CZ296649B6 CZ296649B6 CZ0212795A CZ212795A CZ296649B6 CZ 296649 B6 CZ296649 B6 CZ 296649B6 CZ 0212795 A CZ0212795 A CZ 0212795A CZ 212795 A CZ212795 A CZ 212795A CZ 296649 B6 CZ296649 B6 CZ 296649B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- polypeptide
- composition
- trehalose
- controlled release
- excipient
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 151
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims abstract description 149
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 149
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 149
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 title claims abstract description 47
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 title claims abstract description 17
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 10
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 62
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims abstract description 62
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims abstract description 61
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims abstract description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 35
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims abstract description 27
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims abstract description 27
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 20
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims abstract description 8
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 216
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical group CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 63
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 claims description 63
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 claims description 63
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 claims description 63
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 45
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 45
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 32
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 17
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims description 13
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 claims description 11
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 claims description 11
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 8
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 5
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 claims description 4
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 claims description 4
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 claims description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 3
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000008362 succinate buffer Substances 0.000 claims description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims 1
- 125000000647 trehalose group Chemical group 0.000 claims 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 62
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 62
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 62
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 62
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 59
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 43
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 41
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 40
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 23
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 23
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 21
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 16
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 15
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 14
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 14
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 13
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 13
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 13
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 13
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 12
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 12
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 12
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 11
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 10
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 9
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 9
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 8
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 8
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 8
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 8
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 7
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 7
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 7
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 7
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 7
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 7
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- HMFKFHLTUCJZJO-UHFFFAOYSA-N 2-{2-[3,4-bis(2-hydroxyethoxy)oxolan-2-yl]-2-(2-hydroxyethoxy)ethoxy}ethyl dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCCOCC(OCCO)C1OCC(OCCO)C1OCCO HMFKFHLTUCJZJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 6
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 6
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 5
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 229940074404 sodium succinate Drugs 0.000 description 5
- ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L sodium succinate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 5
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 4
- 229920000570 polyether Polymers 0.000 description 4
- FZWBNHMXJMCXLU-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5-tetrahydroxy-6-[3,4,5-trihydroxy-6-[[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxymethyl]oxan-2-yl]oxyhexanal Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 229940119743 dextran 70 Drugs 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 3
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 3
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 239000013011 aqueous formulation Substances 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 2
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 239000013583 drug formulation Substances 0.000 description 2
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 2
- -1 etc. Polymers 0.000 description 2
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N leuprolide acetate Chemical compound CC(O)=O.CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 2
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XMQUEQJCYRFIQS-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-amino-5-ethoxy-5-oxopentanoic acid Chemical compound CCOC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O XMQUEQJCYRFIQS-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- XBBVURRQGJPTHH-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyacetic acid;2-hydroxypropanoic acid Chemical compound OCC(O)=O.CC(O)C(O)=O XBBVURRQGJPTHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 102000004411 Antithrombin III Human genes 0.000 description 1
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 239000004381 Choline salt Substances 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010369 HIV Protease Proteins 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 1
- 241001082241 Lythrum hyssopifolia Species 0.000 description 1
- 241001436793 Meru Species 0.000 description 1
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 1
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- WGYFACNYUJGZQO-UHFFFAOYSA-N aminomethanetriol Chemical class NC(O)(O)O WGYFACNYUJGZQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 150000001722 carbon compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 235000019417 choline salt Nutrition 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 229940009662 edetate Drugs 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- HQQADJVZYDDRJT-UHFFFAOYSA-N ethene;prop-1-ene Chemical group C=C.CC=C HQQADJVZYDDRJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000013101 initial test Methods 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229940100630 metacresol Drugs 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000003801 milling Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- WXZMFSXDPGVJKK-UHFFFAOYSA-N pentaerythritol Chemical compound OCC(CO)(CO)CO WXZMFSXDPGVJKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 229940116406 poloxamer 184 Drugs 0.000 description 1
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 1
- 229920002338 polyhydroxyethylmethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 210000004896 polypeptide structure Anatomy 0.000 description 1
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 230000029983 protein stabilization Effects 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 150000003248 quinolines Chemical class 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1682—Processes
- A61K9/1694—Processes resulting in granules or microspheres of the matrix type containing more than 5% of excipient
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Zpusob výroby stabilizovaného polypeptidového prostredku zahrnuje stabilizování polypeptidu proti denaturaci úcinkem organického rozpoustedla, pricemz pri stabilizaci se smíchá polypeptid s polyolem,jehoz molekulová hmotnost je mensí nez 70 000 a polyol je trehalóza, za vzniku smesi, a na tuto smes se nechá pusobit organické rozpoustedlo. Dále jepopsán prostredek pro regulované uvolnování polypeptidu, který obsahuje polypeptid smíchaný s excipientem, kterým je polyol s molekulovou hmotností méne nez 70 000, pricemz polypeptid smíchaný s excipientem se zpracuje s organickým rozpoustedlem a potom se pripraví ve forme tobolek v polymerní matrici.
Description
Oblast techniky
Tento vynález se týká použití excipientů pro stabilizaci jak suchého, tak vodného prostředku polypeptidů proti denaturaci organickými rozpouštědly, jeho přípravy a prostředku pro regulované uvolňování polypeptidů.
Dosavadní stav techniky
Farmaceutické prostředky polypeptidů jsou během přípravy a skladování citlivé na denaturaci a degradaci. Pro stabilizaci proteinů a dalších makromolekul ve vodných prostředcích a při sušení vzduchem nebo lyofilizaci vodných roztoků se používají polyoly.
Patent US 4 297 344 popisuje stabilizaci koagulačního faktoru II a VIII, antitrombinu III a plasminogenu vůči teplu přidáním vybraných aminokyselin, jako je glycin, alanin, hydroxyprolin, glutamín a aminomáselná kyselina, a sacharidu, jako je monosacharid, oligosacharid nebo cukerný alkohol.
Evropská patentová přihláška EP 0 303 746 popisuje stabilizaci hormonů podporujících růst polyoly sestávajícími z neredukujících cukrů, cukerných alkoholů, cukerných kyselin, pentaerythritolu, laktosy, ve vodě rozpustných dextranů a Ficollu, aminokyselin a polymerů aminokyselin s nábojem na postranní skupině při fysiologickém pH a cholinových solí.
Evropská patentová přihláška EP 0 193 917 popisuje biologicky aktivní prostředek pro pomalé uvolňování, kterým je vodný roztok komplexu mezi proteinem a sacharidem.
Australská patentová přihláška AU 30 771/89 popisuje stabilizaci růstového hormonu glycinem a mannitolem.
Patent US 5 096 885 popisuje prostředek hGH pro lyofilizaci obsahující glycin, mannitol, neiontové povrchově aktivní činidlo a pufr.
O použití polyethylenglykolů pro stabilizování proteinů je souhrnně pojednáno v Pharm. Res. 8, 285 (1991).
Příklady použití trehalózy a dalších polyolů pro stabilizaci proteinů během sušení ve vodných systémech jsou následující.
Patent US 4 891 319 popisuje ochranu citlivých proteinů a dalších makromolekul ve vodných systémech sušením za teplot místnosti a za atmosférického tlaku v přítomnosti trehalózy.
Patent US 5 149 653 popisuje způsob zachování živých virů ve vodném systému sušením ve zmrazeném stavu nebo za teploty místnosti v přítomnosti trehalózy.
Polyoly jsou používány také pro stabilizování sušených léčivých prostředků, jako například v mezinárodní přihlášce WO 89/03 671, podané 5. května 1989, která popisuje přidání stabilizátoru, jako je želatina, albumin, dextran nebo trehalóza, ke směsi jemně práškového léčiva suspendovaného v olejovém prostředí.
Uvedení polypeptidů do styku s organickým rozpouštědlem, jako je methylenchlorid, nese s sebou problém denaturace příslušného polypeptidů.
-1 CZ 296649 B6
Podstata vynálezu
Předmětem tohoto vynálezu je tedy získat způsob přípravy stabilizovaného polypeptidu ve vodných prostředcích, ktěréjsou ve styku s organickými rozpouštědly.
Jiným předmětem tohoto vynálezu je způsob stabilizování suchých polypeptidů uvedených do styku s organickými rozpouštědly.
Dalším předmětem vynálezu je získat způsob stabilizování polypeptidů uzavřených vtobolkách.
Dalším předmětem vynálezu je získat polypeptid stabilizovaný excipientem pro použití v prostředku s regulovaným uvolňováním, v němž je polypeptid uveden do kontaktu s organickým rozpouštědlem.
Jedním aspektem vynálezu je způsob výroby stabilizovaného polypeptidového prostředku zahrnující stabilizování polypeptidu proti denaturaci účinkem organického rozpouštědla, přičemž při stabilizaci se smíchá polypeptid s polyolem, jehož molekulová hmotnost je menší než 70 000 a polyol je trehalóza, přičemž vznikne směs, na kterou se nechá působit organické rozpouštědlo.
Jiným aspektem vynálezu je způsob přípravy prostředku spolypeptidem, přičemž:
a) polypeptid ve vodném roztoku se smíchá s polyolem, který má molekulovou hmotnost menší než 70 000, a polyol je trehalóza,
b) na tento polypeptid se ve vodném roztoku působí organickým rozpouštědlem.
Jiným aspektem vynálezu je způsob přípravy suchého polypeptidu ve formě prostředku pro regulované uvolňování, přičemž:
a) polypeptid se smíchá s excipientem, při čemž tímto excipientem je polyol, který má molekulovou hmotnost menší než 70 000, a
b) na produkt ze stejně a) se působí organickým rozpouštědlem.
Jiným aspektem tohoto vynálezu je prostředek pro regulované uvolňování polypeptidu obsahujícího polypeptid ve směsi s excipientem, přičemž excipientem je polyol, který má molekulovou hmotnost menší než 70 00, a polyol je trehalóza. Na tento polypeptid smíchaný s excipientem se působí organickým rozpouštědlem a produkt se uzavře do tobolek zpolymemí matrice.
V následující části tohoto spisu budou objasněny a definovány některé pojmy.
Pojem „polyol“ tak, jak se zde používá, znamená uhlovodík včetně alespoň dvou hydroxylových skupin vázaných na atomy uhlíku. Polyoly mohou obsahovat jiné funkční skupiny. Mezi příklady polyolů užitečných pro praktické použití podle vynálezu patří cukerné alkoholy, jako je mannitol a trehalóza, a polyethery.
Pojem „polyethery“ tak, jak je zde používán, znamená uhlovodík obsahující alespoň tři etherové vazby. Polyethery mohou obsahovat jiné funkční skupiny. Mezi polyethery užitečné pro praktické použití podle vynálezu patří polyethylenglykol (PEG).
Pojem „suchý polypeptid“ tak, jak se zde tento pojem používá, znamená polypeptid, který byl podroben sušícímu postupu, jako je lyofílizace, takže se odstraní alespoň 50 % hmotn. vlhkosti.
Pojem „uzavření do tobolky“ tak, jak se zde tento používá, znamená způsob přípravy farmaceutického prostředku s terapeutickým činidlem, jako je polypeptid, který je užitečný při regulaci uvolňování terapeutického činidla. Mezi příklady materiálů pro uzavření do tobolek použitelných
-2CZ 296649 B6 podle tohoto vynálezu patří polymery nebo kopolymery kyseliny mléčné a glykolové nebo směsi takových polymerů a/nebo kopolymerů, obvykle označované jako „polylaktidy.
Pojem „smíchání“ tak, jak se zde používá, znamená přidání excipientu k příslušnému polypeptidu, jako je smíchání suchých reakčních složek nebo smíchání suchého reakčního činidla s reakční složkou v roztoku nebo suspenzi, nebo smíchání vodných prostředků reakčních složek.
Pojem „excipient“ tak, jak se zde používá, znamená neterapeutické činidlo přidané k farmaceutickému prostředku pro zajištění žádané konzistence nebo stabilizace.
Pojem „organické rozpouštědlo“ tak, jak se zde tento pojem používá, znamená jakékoliv rozpouštědlo obsahující uhlíkové sloučeniny. Mezi příklady organických rozpouštědel patří methylenchlorid, ethylacetát, dimethylsulfoxid, tetrahydrofuran, dimethylformamid a ethanol.
Pojem „zpracování“ nebo „uvedení do kontaktu“ polypeptidu s organickým rozpouštědlem tak, jak se zde používá, znamená smíchání suchého polypeptidu s organickým rozpouštědlem, nebo výrobu emulze polypeptidu ve vodném prostředku s organickým rozpouštědlem, vytvoření mezifází mezi polypeptidem ve vodném prostředku s organickým rozpouštědlem, nebo extrahování polypeptidu z vodného prostředku organickým rozpouštědlem.
Pojem „polypeptid“ tak, jak je zde používán, obecně znamená peptidy a proteiny s více než 10 aminokyselinami.
V další části tohoto spisu jsou popsány obecné způsoby používané při tomto vynálezu.
Obecně se jak vodné prostředky, tak suché polypeptidy mohou smíchat s excipientem. Získá se tak stabilizující účinek před tím, než se působí organickým rozpouštědlem. Vodným roztokem polypeptidu může být polypeptid v suspenzi nebo v roztoku. Typicky se vodný prostředek excipientu přidává k vodnému prostředku polypeptidu, i když lze použít suchý excipient a naopak. Vodný prostředek polypeptidu a excipient se mohou také sušit lyofilizací nebo jinými způsoby. Tyto vysušené prostředky se mohou rozředit na vodné prostředky před tím, než se na ně působí organickým rozpouštědlem.
Excipientem použitým pro stabilizaci příslušného polypeptidu bude typicky polyol o molekulové hmotnosti menší než asi 70 000. Mezi příklady polyolů, které mohou být použity, patří trehalóza, mannitol a polyethylenglykol. Hmotnostní poměr trehalózy k polypeptidu bude typicky 100:1 až 1:100, s výhodou 1:1 až 1:10, výhodněji 1:3 až 1:4. Typické hmotnostní poměry mannitolu k polypeptidu jsou 100:1 až 1:100, s výhodou 1:1 až 1:10, výhodněji 1:1 až 1:2. Hmotnostní poměr PEG k polypeptidu je 100:1 až 1:100, výhodněji 1:1 až 1:10. Optimální poměry se vyberou podle koncentrace excipientu, která umožňuje maximální rozpustnost polypeptidu s minimální denaturací polypeptidu.
Prostředky podle tohoto vynálezu mohou obsahovat ochranná činidla, pufr nebo pufry, více excipientů, jako je polyethylenglykol vedle trehalózy nebo mannitolu, nebo neiontová povrchově aktivní činidla, jako je Tween(R). Mezi neiontová povrchově aktivní činidla patří polysorbát, jako je polysorbát 20 nebo 80, atd., a poloxamery, jako je poloxamer 184 nebo 188, polyoly Pluronic(R) a další ethylen/propylenové blokové polymery atd. Používá se množství, které je efektivní pro stabilní, vodný prostředek, obvykle v rozmezí do 0,1 % (hmotn. k obj.) do asi 30 %.
Mezi pufry patří fosforečnanový, Tris, citrátový, sukcinátový, acetátový nebo histidinový pufr. Nej výhodněji se používá 2mM až lOOmM pufr. Mezi výhodné pufry patří pufr sukcinátu sodného a fosforečnanu draselného.
Mezi ochranná činidla patří fenol, benzylalkohol, metakresol, methylparaben, propylparaben, benzalkoniumchlorid a benzethoniumchlorid. Výhodnými ochrannými činidly jsou 0,2 až 0,4%
-3 CZ 296649 B6 fenol a 0,7 až 1% (hmotn. kobj. dílům) benzylalkohol, i když typ ochranného činidla a koncentrační rozmezí nejsou rozhodující.
Prostředky podle tohoto vynálezu mohou obecně obsahovat jiné složky, aniž by se odchylovaly od přípravků stabilních forem, v množstvích vhodných pro efektivní, bezpečné farmaceutické podávání. Například část prostředků podle vynálezu mohou tvořit jiné farmaceuticky přijatelné excipienty dobře známé odborníkům. Mezi ně patří například různá zbytňovací činidla, další pufrovací činidla, chelatační činidla, antioxidační činidla, korozpouštědla a podobné. Mezi specifické příklady těchto činidel patří trihydroxymethylaminové soli („Tris“ pufr) a dvojsodná sůl ethylenaminotetraoctové kyseliny (edetát).
Mezi polypeptidy podle vynálezu patří glykosylované a neglykosylované polypeptidy, jako je růstový hormon, interferony a virové proteiny, jako je HIV proteáza a gpl20.
Stabilizovaný polypeptid podle tohoto vynálezu lze připravit pro trvalé uvolňování zvláště tehdy, jestliže trvalé vystavení působení organických rozpouštědel je obvyklým stupněm v mnoha takových přípravcích. Mezi vhodné příklady přípravků s trvalým uvolňováním patří polopropustné matrice pevných hydrofobních polymerů obsahujících polypeptid, které jsou ve formě tvarovaných předmětů, např. film nebo mikrotobolek. Mezi příklady matric s trvalým uvolňováním patří polyestery, hydrogely [např. poly(2-hydroxyethylmethakrylát) popsaný Langerem a spol.: J. Biomed. Mater. Res. 15, 167 (1981) a Langerem: Chem. Těch. 12, 98(1982), nebo poly(vinylalkohol)], polylaktidy (patent US 3 773 919, evropský patent 58 481), kopolymery L-glutamové kyseliny a gama-ethyl-L-glutamát (Sidman a spol.: Biopolymers 22, 547 (1983)), nedegradovatelný ethylenvinylacetát (Langer a spol.: viz výše), degradovatelné kopolymery kyselina mléčná-kyselina glykolová, jako je Lupron Depot™ (injektovatelné mikrokuličky složené z kopolymeru kyselina mléčná-kyselina glykolová a leuprolidacetátu) a poly-D-(-)-3hydroxymáselná kyselina (evropský patent 133 988). Zatímco polymery, jako je ethylen-vinylacetát a kyselina mléčná-kyselina glykolová, umožňují uvolňování molekul po více než 100 dnů, některé hydrogely uvolňují polypeptidy kratší dobu. Jestliže polypeptidy uzavřené do tobolek zůstávají v těle dlouhou dobu, mohou denaturovat nebo agregovat jako důsledek toho, že jsou vystaveny působení vlhkosti při 37 °C, což vede ke ztrátě biologické aktivity a možným změnám v imunogenicitě. Lze navrhnout hospodárné strategie stabilizace polypeptidů podle toho, o jaký mechanismus se jedná. Například, jestliže mechanismem agregace je tvorba intermolekulámí S-S vazby thio-disulfidovou záměnou, stabilizace lze dosáhnout modifikováním sulfohydrylových skupin, lyofílizováním z kyselých roztoků, regulováním obsahu vlhkosti, použitím příslušných přísad a vyvinutím prostředků se specifickou polymemí matricí.
Prostředky s trvalým uvolňováním analog nebo protilátek obsahují také liposomálně zachycené polypeptidy. Liposomy obsahující polypeptidy se připravují známými způsoby: SRN patent 3 218 121, Epstein a spol.: Proč. Nati. Acad. Sci. USA 82, 3688 (1985), Hwang a spol.: Proč. Nati. Acad. Sci. USA 77, 4030 (1980), evropské patenty 52 322, 36 676, 88 046, 143 949 a 142 641, japonská patentová přihláška 83-118008, patenty US 4 485 045 a 4 544 545 a evropský patent 102 324. Obvykle jsou liposomy malého (2000 až 8000 pm) umilamelámího typu, v nichž je obsah lipidů větší než 30 % mol. cholesterolu, vybraná část je upravena pro optimální terapii ligandovým analogem. Liposomy se zvýšenou dobou cirkulace jsou popsány v pat. US 5 013 566.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Stabilizace vodných prostředků
Připraví se prostředek rekombinantního lidského růstového hormonu (hGH) a rekombinantního lidského gama-interferonu (hIFN-γ) s různými excipienty pro analýzu účinků excipientu na sta
-4CZ 296649 B6 bilizaci s organickém rozpouštědle, methylenchloridu. Optimální prostředky byly obvykle ty, které poskytovaly maximální koncentraci rozpustného polypeptidů a největší výtěžek přírodního polypeptidů po působení methylenchloridu. Maximální rozpustnost hGH v každém roztoku byla stanovena kontinuálním přidáváním hGH lyofilizovaného v pufru hydrogenuhličitanu amonného na roztok. Limit rozpustnosti byl definován jako koncentrace, při které přidání polypeptidů vedlo ke srážení. Maximální rozpustnost hIFN-γ ÍOmM sukcinát sodný, pH 5) do koncentrovaných roztoků excipientu. Zřetelný limit rozpustnosti hIFN-γ nebyl pozorován za těchto podmínek u žádného prostředku, ale dlouhé skladování zásobního roztoku vedlo ke srážení jako důsledku zvýšení pH (konečný roztok měl pH 6). Oba polypeptidové prostředky byly testovány na stabilitu v methylenchloridu přidáním 100 μΐ polypeptidového roztoku k 1 ml methylenchloridu. Tato směs byla podrobena působení ultrazvuku 30 sekund, po působení ultrazvuku byl polypeptid extrahován z organické fáze zředěním do 50 ml pufru bez excipientu (50mM fosforečnanový pufr, pH 8 pro hGH, ÍOmM sukcinátový pufr, pH 5 pro hIFN-γ). Množství izolovaného rozpustného polypeptidů bylo stanoveno měřením ultrafialové absorbance. Množství monomemího polypeptidů bylo stanovováno vylučovací chromatografií podle velikosti (SEC).
Oba polypeptidy byly testovány na stabilitu s trehalózou, mannitolem, karboxymethylcelulózou (CMC), povrchově aktivním činidlem Tween(R) 20, dextranem, želatinou a polyethylenglykolem. Předchozí studie s hGH ukazovaly, že prostředky obsahující stejný poměr hmotností polypeptidů a mannitolu stabilizovaly polypeptid před denaturací a poskytovaly maximální koncentraci rozpustného polypeptidů 200 mg/ml (lOOmM fosforečnan, 200 mg/ml mannitolu, pH 8). Prostředky s trehalózou s poměry hmotností excipientu k polypeptidů 1:4 a 1:3 poskytovaly nejvyšší koncentrace rozpustného polypeptidů, 400 mg/ml a 300 mg/ml. Navíc, jestliže lyofílizovaný polypeptid v těchto prostředcích byl zpracován s methylenchloridem, bylo dosaženo úplné izolace rozpustného monomemího hGH. hGH prostředky obsahující mannitol nebo mannitol s PEG vedou k podobnému výtěžku monomemího hGH, ale poměr hmotnostní (excipient/polypeptid) potřebný pro zabránění denaturace byl větší než poměr u trehalózových prostředků (mannitol: 1:1, mannitol/PEG 1:1 nebo 1:2, trehalóza: 1:3 nebo 1:4) (tabulka I). Trehalóza tedy poskytuje vyšší rozpustnost hGH a vyšší ochranu před denaturací v methylenchloridu při nižší koncentraci hmotností. V nepřítomnosti excipientů byla rozpustnost hGH mnohem nižší (asi 106 mg/ml) a polypeptid byl mnohem citlivější na denaturací.
Tabulka I
Testování vodných hGH prostředků s methylenchloridem
| množství (mg/ml) a prostředek1 | izolovaný rozpustný monomer (mg/ml)b | maximální rozpustnost (mg/ml)c |
| 100 PEG (mol. hm. 3350) | 12,2 | 96,4 |
| 50 PEG | 34,7 | 89,6 |
| 10 PEG | 37,2 | 128,3 |
| 100 mannitol | 66,0 | 98,0 |
| 50 mannitol | 46,2 | 106 |
| 10 mannitol | 56,0 | 106 |
| 100 dextran 70 | 34,6 | 112,6 |
| 50 dextran 70 | 64,6 | 146,1 |
| 10 dextran 70 | 38,4 | 167,1 |
| 2 % CMC | 44,7 | 91,9 |
| 100 trehalóza | 113,9 | 267,3 |
| 50 trehalóza | 82,8 | 275 |
| 10 trehalóza | 92,0 | 267,3 |
| 4 PEG (mol. hmotn. 3350) + 96 mannitol | 102,6 | 243,7 |
-5CZ 296649 B6
Tabulka I pokračování
| množství (mg/ml) a prostředek“ | izolovaný rozpustný monomer (mg/ml)b | maximální rozpustnost (mg/ml)c |
| 10PEG (mol. hmotn. 3350) + | 104,0 | 184 |
| 90 mannitol | ||
| 20 PEG (mol. hmotn. 3350) + | 139,9 | 240 |
| 80 mannitol | ||
| 2 % želatina | 21,9 | 70,5 |
| 100 PEG (mol. hmotn. 1000) | 69,2 | 131,5 |
| 50 PEG | 84,3 | 246,5 |
| 10 PEG | 126,5 | 226,3 |
| 4 PEG (mol. hmotn. 1000) + | 122,3 | 230,3 |
| 96 trehalóza | ||
| 10 PEG (mol. hmotn. 1000) + | 58,4 | 218,7 |
| 90 trehalóza | ||
| 20 PEG (mol hmotn. 1000) + | 75,3 | 207,5 |
| 80 trehalóza | ||
| bez excipientu | 65,0 | 106,3 |
3 Všechny roztoky obsahují lOmM Na2PO4, pH 8.
b Polypeptid extrahovaný z methylenchloridu (frakce celku) podle stanovení absorbancí při 278 nm násobeno frakcí monomeru izolovaného z SEC-HPLC. Polypeptid zpracován při maximální rozpustnosti.
c Maximální rozpustnost byla definována jako maximální množství hGH, který není ve formě prostředku a který se rozpustí v každém pufru.
Při studiích s hIFN-γ byly nejlepšími testovanými excipienty jak mannitol tak trehalóza. Jestliže se použije mannitol v hmotnostním poměru (excipient k polypeptidů) 1:3, množství rozpustného dimeru v roztoku (podle SEC) po působení methylenchloridu bylo stejné jako množství ve výchozím materiálu. Prostředky s mannitolem však poskytovaly méně než 60 % hmotn. výtěžku z celkového rozpustného polypeptidů. Naproti tomu prostředky s trehalózou s hmotnostním poměrem 1:2,5 poskytly 80% výtěžek z celkového rozpustného polypeptidů a stejnou frakcí rozpustného dimeru (podle SEC-HPLC) jako výchozí materiál (tabulka II). Prostředky spolypeptidem bez excipientu zpracované s methylenchloridem si zachovaly 10 % hmotn. z původního množství rozpustného dimeru (podle SEC-HPLC) po zpracování s methylenchloridem a celkové množství izolovaného polypeptidů bylo menší než 60 % hmotn. Při testování SEC v 0,2M Na3PO4/0,l% SDS při pH 6,8 (označováno jako SDS SEC-HPLC) obsahovaly všechny prostředky více než 99 hmotn. monomeru před i po zpracování s methylenchloridem.
U obou polypeptidů byl zjištěn dramaticky nižší výtěžek monomerního polypeptidů po zpracování s methylenchloridem u všech prostředků, které obsahovaly povrchově aktivní činidlo Tween(R) 20. I když nebyla studována jiná povrchově aktivní činidla, je pravděpodobné, že hydrofobní molekuly, jako je povrchově aktivní činidlo Tween(R) 20, stabilizují denaturované polypeptidy, zatímco cukry, jako je mannitol a trehalóza, stabilizující přírodní polypeptid.
Tabulka II
Testování vodných hIFN-γ prostředků s methylenchloridem
| množství (mg/ml) a prostředek3 | izolovaný rozpustný polypeptid5 (%) | % neporušeného dimeruc | rozpustný dimer“ |
| 0,01 % Tweenu(R) 20* | 36,1 | 49,0 | 11,1 |
| 0,01 % Tweenu(R) 20* + | 59,0 | 69,0 | 25,6 |
| 62 mannitol | |||
| 5 mannitol | 58,3 | 72,7 | 25,6 |
| 50 mannitol | 62,9 | 83,4 | 70,3 |
-6CZ 296649 B6
Tabulka II pokračování
| množství (mg/ml) a prostředek3 | izolovaný rozpustný polypeptidb (%) | % neporušeného dimeruc | rozpustný dimerd |
| 5 trehalóza | 117 | 34,2 | 53,6 |
| 50 trehalóza | 75,6 | 61,3 | 62,1 |
| 1 % CMC | 78,2 | 62,5 | 65,5 |
| bez excipientu | 51,6 | 6,0 | 7,9 |
a Všechny roztoky s excipientem obsahujíc 134 mg/ml hIFN-γ, lOmM sukcinát sodný, pH 5; prostředek „bez excipientu“ obsahoval 256,3 mg/ml proteinu, lOmM sukcinát sodný, pH 5,0.
b Polypeptid extrahovaný z methylenchloridu (frakce celku) podle stanovení absorbance při 280 nm.
c Množství neporušeného dimeru podle měření SEC-HPLC. Všechny prostředky poskytovaly vyšší výtěžek než 99 % hmotn. monomeru při testování způsobem SEC-HPLC SDS.
d Koncentrace rozpustného dimeru (mg/ml) vztažena na množství izolovaného rozpustného polypeptidů a frakci dimeru (přírodní SEC-HPLC).
* Koncentrace polypeptidů v těchto prostředcích byla 62,8 mg/ml.
Příklad 2
Stabilizace suchých a vodných prostředků pro přípravu ve formě tobolek
Při vývoji prostředků s rekombinantním lidským růstovým hormonem s dlouhotrvajícím působením bylo studováno použití biodegradovatelné polymemí matrice pro trvalé uvolňování hGH. Polymerem, který byl použit pro tuto aplikaci, byl kopolymer kyseliny mléčné a glykolové, který je často nazýván poly(mléčná/glykolová) kyselina nebo PLGA. Pro zavedení hGH do tohoto polymeru se PLGA musí rozpustit v rozpouštědle nemísitelném s vodou. Nejobvykleji používaným rozpouštědlem pro rozpuštění PLGA je methylenchlorid, který poskytuje jak nemísitelnost s vodou tak rozpustnost PLGA.
Obecně se polypeptid při výrobě hGH-PLGA mikrokuliček přidává do roztoku methylenchloridu obsahujícího PLGA. V počátečních studiích byl polypeptid přidáván ve formě rozemletého lyofílizovaného prášku. Po přidání polypeptidů se pak methylenchloridový roztok krátce homogenizuje a tento roztok se přidá k emulzifikační lázni. Tento proces vede k extrakci methylenchloridu se současnou tvorbou PLGA mikrokuliček obsahujících hGH. Potom bylo studováno uvolňování polypeptidů z těchto mikrokuliček, aby se stanovila integrita hGH po inkorporaci do mikrokuliček. Vyhodnocení uvolněného hGH se provádí analytickou SEC-HPLC i jinými způsoby. SEC ukazuje na to, že hGH se uvolňuje z PLGA mikrokuliček ve formě přírodního monomeru, agregátů a neznámé struktury, která byla eluována mezi monomerem adimerem. Tato neznámá polypeptidová struktura byla obšírně studována a bylo ukázáno, že je konformační variantou hGH. Vedle toho lze získat stejné agregáty a konformační variantu reakcí hGH s methylenchloridem. Použití methylenchloridu v tomto postupu může tedy způsobit denaturaci a agregaci hGH.
Pro úspěšný dlouhou dobu působící prostředek je potřeba uvolňování monomerního přírodního hGH z PLGA mikrokuliček. Předcházející studie zkoumaly několik organických rozpouštědel jako alternativ k methylenchloridu. Tento výzkum ukazoval na to, že hGH je citlivý na poškození některými organickými rozpouštědly. Protože methylenchlorid poskytoval žádané rozpouštěcí vlastnosti (tj. nemísitelnost s vodou, rozpouštění PLGA atd.) při výrobě PLGA mikrokuliček a jiná rozpouštědla nezlepšovala významně stabilitu hGH, byl pro výrobu PLGA mikrokuliček vybrán methylenchlorid. Polypeptid použitý pro rozpouštědlové studie a pro postup výroby PLGA byl připraven a lyofilizován v pufru hydrogenuhličitanu amonného při pH 7. Tato studie byla tedy prováděna proto, aby byly vyvinuty prostředky, které by stabilizovaly hGH během výroby PLGA mikrokuliček.
-7 CZ 296649 B6
Způsob 1. Příprava hGH prostředků
Pro vyvinutí prostředku stabilního v methylenchloridu se hGH lyofílizovaný v hydrogenuhličitanu amonném zředí žádaným pufrem a nechá se rozpustit. Nerozpuštěný polypeptid s odstraní odstřeďováním při 13 000 otáčkách za minutu po dobu 1 minuty.
Při každé shora uvedené lyofilizaci byla koncentrace hGH 10 mg/ml. Výsledná vlhkost těchto prostředků nebyla stanovována, ale ve všech případech byl použit stejný lyofilizační cyklus.
Mletí lyofilizovaného proteinu bylo prováděno v tlakem řízeném nárazovém mlýnu. Získal se jemný prášek hGH.
Způsob 2. Methylenchloridové testování hGH prostředků
Účinek methylenchloridu na hGH stabilitu byl stanovován přidáním HGH k roztoku methylenchloridu. U pevného hGH byl poměr hmotnosti polypeptidu (mg) k objemu organického rozpouštědla (ml) 40 mg/ml. Při vodných podmínkách se 100 μΐ hGH vpufrovaném roztoku přidá k 1,0 ml methylenchloridu, aby se zjistily účinky každého pufrovacího systému na stabilizaci hGH v methylenchloridu. Po přidání polypeptidu se vzorky podrobí působení ultrazvuku po dobu 30 sekund v lázni s ultrazvukovým generátorem o 47 kHz (Cole Parmer, Model 08849-00), aby byl simulován homogenizační stupeň při procesu výroby mikrokuliček. Jestliže prostředek vtomto testu stabilizuje hGH proti denaturaci, byl dále studován homogenizováním v methylenchloridu. Po působení ultrazvuku nebo po homogenizování se polypeptid extrahuje z methylenchloridu zředěním na padesátinásobek 5mM hydrogenfosforečnanem amonným, pH 8. Množství a kvalita polypeptidu extrahovaného v tomto stupni byla stanovována měřením koncentrace polypeptidu (absorbance při 278 nm) a SEC-HPLC. Výhodný stabilní prostředek byl takový, který poskytoval maximám výtěžku monomerního polypeptidu bez tvorby konformačních variant nebo agregátů větších než dimery.
V další části tohoto příkladu budou uvedeny výsledky studií stabilizace hGH excipientem.
Počáteční studie hGH lyofilizovaného v hydrogenuhličitanu amonném zkoumaly rozpustnost polypeptidu v různých pufrech za různých pH podmínek. Z těchto studií bylo zjištěno, že hGH má maximální stabilitu a rozpustnost ve fosforečnanovém pufru (5 až lOmM) při pH 8. Další studie s hGH proto bylo prováděno v tomto pufru.
Počáteční pokus zachránit agregaci hGH používal povrchově aktivní činidlo Tween(R) 80 v pufru použitém pro tvorbu prostředku. Jak je uvedeno v tabulce III, testování těchto vodných roztoků s methylenchloridem ukázalo, že nízká koncentrace povrchově aktivního činidla Tween(R< (0,1 % povrchově aktivní činidlo Tween(R) 80) s 10 mg/ml mannitolu poskytlo dobrý výtěžek rozpustného monomerního polypeptidu. Nej lepší výsledky v tomto pokusu však byly získány pro hGH, který byl připraven v 10 mg/ml mannitolu bez povrchově aktivního činidla Tween(R) 80 (5mM NaHPO4, pH 8). Vyšší koncentrace povrchově aktivního činidla Tween(R) v pufru prostředku vedla ke zvýšené agregaci a ke sníženému výtěžku rozpustného polypeptidu. U každého případu uvedeného v tabulce III prostředky poskytovaly větší stabilizaci hGH než rozemletý polypeptid, který byl lyofilizován v hydrogenuhličitanu amonném.
-8CZ 296649 B6 rozpustný polypeptid (hmotnost v % z celku)
Tabulka III
Testování vodných hGH prostředků s methylenchloridem
| prostředek“ | % izolovaného polymeru6 | % plochy výtěžku“ | trimer | dimer | meziprodukt | monomer |
| 1 % Tweenu 80 | 85,7 | 90,0 | 0,5 | 3,4 | 1,1 | 94,9 |
| 0,1 % Tweenu 80 | 70,9 | 98,3 | 2,0 | 3,6 | 1,8 | 92,6 |
| 1 % Tweenu 80 + | 65,0 | 97,8 | 3,3 | 3,4 | 3,4 | 90,0 |
| 10 mg/ml mannitolu | ||||||
| 0,1 % Tweenu 80 + | 70,9 | 98,3 | 0,0 | 2,2 | 0,0 | 97,8 |
| 10 mg/ml | ||||||
| 10 mg/ml PEG (mol. | 97,6 | 101,1 | 0,0 | 2,6 | 0,0 | 97,4 |
| hm. 3350) | ||||||
| 10 mg/ml PEG + | 76,4 | 97,7 | 1,7 | 2,8 | 1,6 | 93,9 |
| 10 mg/ml mannitolu | ||||||
| 5mM Na3PO4, pH 8 | 55,3 | 99,4 | 0,0 | 3,2 | 0,0 | 96,8 |
| 5mM Na2PO4, pH 8 + | 91,7 | 99,8 | 0,0 | 1,8 | 0,0 | 98,2 |
mg/ml mannitolu
Všechny roztoky obsahují 5mM Na2PO4, pH 8.
Polypeptid extrahovaný z methylenchloridu (část z celku) podle stanovení absorbancí při 278 nm.
SEC-HPLC výsledky pro polypeptid extrahovaný do pufru po zpracování s methylenchloridem.
Testování pevných hGH prostředků s methylenchloridem je uvedeno v tabulce IV. Tyto výsledky ukazují, že prostředkem, který nejlépe stabilizuje protein, je 5mM K3PO4 s 2,5 mg/ml trehalózy.
Tabulka IV
Testování pevných rhGH prostředků s methylenchloridem rozpustný polypeptid (hmotnost v % z celku)
| prostředek“ | % izolovaného polymeru6 | % plochy výtěžku“ | trimer | dimer | meziprodukt | monomer |
| rozemleté pevné látky (NH4)2CO3 | 44,5 | 85,4 | 7,5 | 5,9 | 7,3 | 79,2 |
| 5mM Na3PO4, pH 8 | 85,7 | 100,0 | 0,0 | 2,1 | 0,0 | 97,8 |
| 5mM Na2PO4, pH 8 + 10 mg/ml mannitolu | 87,6 | 100,0 | 0,0 | 3,0 | 0,0 | 97,0 |
| homogenizované pevné látky“ | ||||||
| 5mM K3PO4, pH 8 + 2,5 mg/ml trehalózy | 97,3 | 100 | 0,0 | 2,2 | 0,0 | 97,8 |
| 5mM Na3PO4, pH 8 + | 96,8 | 100,0 | 0,0 | 2,0 | 0,0 | 98,0 |
| lOmg/ml mannitolu 0,3M sukcinát sodného + | 94,3 | 100,0 | 0,0 | 4,2 | 0,0 | 95,8 |
mg/ml mannitolu, pH 7
Všechny vzorky lyofilizované při 10 mg/ml rhGH pufrem a excipienty jak uvedeno.
Protein extrahovaný z methylenchloridu (část z celku) podle stanovení absorbancí při 278 nm.
SEC-HPLC výsledky pro protein extrahovaný do pufru po zpracování s methylenchloridem. Pevné lyofilizované prostředky byly homogenizovány v methylenchloridu 1 minutu při 25 000 otáčkách za minutu.
Další studie byly prováděny proto, aby se zjistilo, jestliže by povrchově aktivní činidlo mohlo stabilizovat mezifází methylenchlorid-polypeptid. Povrchově aktivní činidlo Tween se tedy přidá k methylenchloridové fázi a smíchá se s pevným hGH (K3PO4, pH 8). Přidání povrchově aktivního činidla Tween k methylenchloridové fázi nezlepšuje stabilitu pevného hGH (K3PO4, pH 8) jak je uvedeno v tabulce V. A dále, použití povrchově aktivního činidla Span(R) 80 v methylenchloridové fázi nezlepšuje stabilitu pevného hGH (K3PO4, pH 8). Další pokusy s povrchově aktivním
-9CZ 296649 B6 činidlem Tween v methylenchloridové fázi byly neúspěšně pro stabilnější pevný hGH prostředek (mannitol, K3PO4, pH 8). Tyto výsledky spolu s vodnými studiemi ukázaly, že povrchově aktivní činidlo Tween se s výhodou nepoužívá v těchto prostředcích, protože podporuje agregaci a snižuje rozpustnost hGH, na který bylo působeno methylenchloridem.
Tabulka V
Vliv povrchově aktivního činidla Tween(R) v methylenchloridové fázi na stabilitu pevného hGH
| rozpustný polypeptid (hmotnost v % z celku) | ||||||
| Tween(K) | % izolovaného | % plochy výtěžků | trimer | dimer | meziprodukt | monomer |
| v methylenchloridu | polypeptidub | |||||
| 0,1 % Tweenu 80 | 40,8 | 98,7 | 5,2 | 13,0 | 0,0 | 81,8 |
| 0,1 % Tweenu 80 | 40,8 | 102,9 | 8,0 | 14,0 | 0,0 | 77,9 |
| 1 % Tweenu 80 | 53,8 | 97,3 | 7,0 | 11,6 | 0,0 | 81,4 |
a Polypeptid extrahovaný z methylenchloridu (část z celku) podle stanovení absorbancí při 278 nm.
b SEC-HPLC výsledky pro polypeptid extrahovaný do pufru po zpracování s methylenchloridem.
Pro zvýšení množství polypeptidu, které se plní do mikrotobolek, by se mělo minimalizovat množství excipientu. Proto byly v pufru prostředky (lOmM Na2HPO4, pH 8) použity nižší koncentrace mannitolu (2 a 5 mg/ml) s 10 mg/ml hGH. Vodné roztoky byly testovány na stabilitu vůči methylenchloridu. Tyto mannitolové koncentrace poskytovaly o 20 % méně rozpustného monomeru než prostředek s 10 mg/ml mannitolu. Významná snížení koncentrace mannitolu by zničila kvalitu uvolněného polypeptidu. Byly zkoušeny také jiné excipienty při nižších koncentracích. Ve vodném prostředku (10 mg/ml hGH, lOmM Na2HPO4, pH 8) byla použita karboxymethylcelulóza (CMC) v množství 0,5, 2 a 5 mg/ml. CMC v množství 0,5 mg/ml poskytla stejnou frakci rozpustného monomeru jako prostředek s 10 mg/ml mannitolu, ale množství izolovaného polypeptidu ve vodné fázi bylo o 15 % hmotn. nižší. Byla zkoušena také směs stejných hmotnostních CMC a mannitolu (každého 1 mg/ml a 2,5 mg/ml) na stabilitu při nižších koncentracích excipientu. Použití 2,5 mg/ml každého z excipientů poskytlo srovnatelné výsledky s 10 mg/ml prostředku s mannitolem. Bylo tedy lyofílizováno 0,5 mg/ml CMC a 2,5 mg/ml CMC i manitolového prostředku, aby se zjistilo jejich použití pro použití pro přípravu mikrotobolek.
Pro posouzení prostředků, pokud jde o jejich použití ve vodné formě, se každý lyofilizovaný materiál zředí na maximální rozpustnost, která je definována jako taková koncentrace polypeptidu, při které se další polypeptid nerozpustí. Maximální koncentrace hGH v tomto pokusu se dosáhne u prostředku lyofilizovaného v 10 mg/mol mannitolu. Tento prostředek se postupně ředí 5mM Na2HPO4, pufřem, pH 8, na 200 mg/ml hGH (200 mg/ml mannitolu, lOOmK K3PO4) bez srážení polypeptidu. Prostředek bez excipientů (K3PO4, pH 8) poskytl druhou nejlepší rozpustnost 165 mg/ml hGH. Pokusy ředit CMC a CMC/mannitolové prostředky na vyšší koncentrace polypeptidu však nebyly úspěšné. V obou případech tento prostředek tvoří pastu při koncentraci vyšší než 100 mg/ml. Testování těchto past vytvořených z CMC a CMC/mannitolových prostředků s methylenchloridem ukázalo, že množství izolovaného polypeptidu bylo při srovnání s mannitolovým prostředkem významně sníženo (menší než 75 % hmotn.) výtěžku), ale rozpustná frakce obsahovala více než 95 % (hmotn.) monomeru. Jelikož prostředek podobný genu může být při tomto postupu užitečný pro stabilizování vnitřní vodné fáze, bylo zkoumáno také jiné zahušťovací činidlo, želatina. Aby byla zachována nízká koncentrace excipientu, přičemž se stále ještě získává gel pro konečný prostředek (200 mg/ml hGH), prostředek s želatinou byl testován s 0,5 mg/ml želatiny, 10 mg/ml hGH a lOnm K3PO4, pH 8. Testování tohoto prostředku s methylenchloridem poskytlo takový výtěžek rozpustného monomeru, který byl srovnatelný s prostředkem s 10 mg/ml mannitolu. Tento prostředek byl tedy také lyofílizován pro další analýzu. Zředění lyofilizovaného polypeptidu na 200 mg/ml hGH (10 mg/ml želatiny, lOOmM K3PO4, pH 8) vedlo ke tvorbě pasty, která měla podobné vlastnosti jako prostředky s CMC/mannitolem a CMC při stejných koncentracích hGH.
-10CZ 296649 B6
Příklad 3
Stabilita rhGH prostředků v ethylacetátu
Mikrotobolky proteinů v biodegradovatelných polymerech často vyžadují pro stabilizování polymeru použití organických rozpouštědel. Polymer, typicky PLGA, polylaktid (PLA) nebo polyglykolid (PGA), se nejdříve rozpustí v organickém rozpouštědle, které není zcela mísitelné s vodou. Obvyklými organickými rozpouštědly používanými v tomto postupu, jsou methylenchlorid a methylacetát. Tato dvě rozpouštědla mají velmi různé fyzikální a chemické vlastnosti. Bylo tedy nutné zjistiti stabilitu rhGH prostředků v obou těchto rozpouštědlech.
Testování rhGH prostředků na stabilitu v ethylacetátu se provádí podobným způsobem jako při methylenchloridových studiích ve shora uvedených příkladech. Roztoky rhGH o koncentraci 10 mg/ml se připravují přidáním lyofilizovaného pevného rhGH (prostředek s hydrogenuhličitanem amonným) ke každému prostředku. Jak je uvedeno v tabulce VI, tyto prostředky se připravují s 5mM K3PO4, pH 8, a obsahují různé excipienty, PEG (mol. hmotnost 3350), mannitol, trehalózu a Tween(R) 20 nebo kombinace excipientů. Každý rhGH prostředek (100 μΐ) se přidá k 1 ml ethylacetátu a podrobí se působení ultrazvuku po dobu 30 sekund. Vznikne emulze. Tato emulze se pak smíchá s 10 ml 5mM K3PO4, pH 8, což vede k celkovému lOOnásobnému zředění rhGH. rhGH extrahovaný do pufru se pak analyzuje SEC HPLC. Několik prostředků poskytlo více než 100% výtěžek rozpustného proteinu, což ukazuje na to, že množství proteinu přidaného k emulzi bylo větší než očekávané množství (0,1 ml.10 mg/ml=l mg) jako důsledek přesnosti měření objemů. A dále, výtěžek rozpustného proteinu a množství izolovaného monomeru je obecně větší než rhGH ve stejném prostředku, na který bylo působeno methylenchloridem. Celkový výtěžek rozpustného proteinu byl největší pro trehalózu (1 a 2 mg/ml), trehalózu s PEG (každého 10 mg/ml), mannitolu s PEG (každého 10 mg/ml) a mannitolu s Tweenem 20 (každého 10 mg/ml). Pouze trehalóza (1 a 2 mg/ml) a mannitol s Tweenem 20 (každého 10 mg/ml) měly také vysoký obsah monomeru (větší než 97 % hmotn.). Prostředek mannitol/Tween 20 neumožňuje odpovídající rozpustnost postupem dvojí emulze při přípravě mikrotobolek a vyžaduje, aby hmotnostní poměr excipientů k proteinu byl 4:1. Optimálním prostředkem při těchto pokusech byl tedy prostředek s 1 mg/ml trehalózy (poměr excipientů k proteinu 1:10 a vysoká rozpustnost rhGH).
Tabulka VI
Testování vodných rhGH prostředků jak je popsáno v textu s ethylacetátem prostředek3 % výtěžku % rozpustného proteinu z celku rozpustnéhob ________________________________________ velké agregáty dimer monomer
| bez excipientů | 98,9 | 2,3 | 3,2 | 94,5 |
| 10 mg/ml PEG (mol. hmotn. 3350) | 99,8 | 2,7 | 2,3 | 94,9 |
| 5 mg/ml PEG | 108,5 | 1,7 | 3,0 | 95,2 |
| 2 mg/ml PEG | 107,2 | 1,8 | 3,8 | 94,3 |
| 10 mg/ml mannitolu | 96,6 | 1,7 | 3,6 | 94,7 |
| 2 mg/ml mannitolu | 86,3 | 4,1 | 3,8 | 92,2 |
| 10 mg/ml trehalózy | 100,1 | 1,8 | 4,5 | 93,7 |
| 2 mg/ml trehalózy | 119,8 | 0,4 | 2,0 | 97,7 |
| 1 mg/ml trehalózy | 111,1 | 0,6 | 2,3 | 97,1 |
| 10 mg/ml PEG (mol. hmotn. 35000) | 115,6 | 3,8 | 2,9 | 93,3 |
| + 10 mg/ml trehalózy | ||||
| 2 mg/ml PEG (mol. hmotn. 35000) | 93,0 | 0,8 | 3,1 | 96,1 |
+ 2 mg/ml trehalózy
-11 CZ 296649 B6
Tabulka VI (pokračování)
| prostředek“ | % výtěžku rozpustného1’ | % rozpustného proteinu z celku | ||
| velké agregáty | dimer | monomer | ||
| 1 mg/ml PEG (mol. hmotn. 3350) + 1 mg/ml trehalózy | 95,8 | 4,5 | 3,3 | 92,2 |
| 10 mg/ml PEG (mol. hmotn. 3500) + 10 ml/ml mannitolu | 116,3 | 1,2 | 2,5 | 96,3 |
| 2 mg/ml PEG (mol. hmotn. 3359) + 2 mg/ml mannitolu | 106,5 | 1,7 | 2,7 | 95,6 |
| 0,1 % Tweenu 20+ 10 mg/ml mannitolu | 122,8 | 0,8 | 1,6 | 97,6 |
a Všechny počáteční testované roztoky obsahovaly 10 mg/ml rhGH a 5mM K3PO4, pH 8, vyjma tří prostředků, u nichž byla koncentrace rtGH menší než 10 mg/ml (bez excipientu: 9,39 mg/ml, 10 mg/ml mannitolu s 10 mg/ml PEG: 7,84 mg/ml, 10 mg/ml mannitolu: 9,71 mg/ml).
b Výsledky SEC-HPLC extrakce proteinu do pufru po uvedení do koncentrace s ethylacetátem. Procento výtěžku rozpustného proteinu bylo definováno jako poměr koncentrací z celkové plochy maxima vzorku k příslušné kontrole (stejný prostředek) krát 100. Kontrolní rhGH koncentrace byla stanovována absorbancí při 278 nm. Koncentrace vzorku rhGH byla vypočtena jako stonásobek zředění zásobního materiálu vztaženo na zředění použitá v celém způsobu (0,1 ml v 1 ml ethylacetátu přidaných k 10 ml pufru).
Příklad 4
Stabilita rhGH prostředků v organických rozpouštědlech vysušených rozprášením
Technika dvojí emulze (voda v oleji ve vodě) pro přípravu mikrotobolek může poskytnout pouze mírnou náplň léčiva v konečném produktu. Náplň léčívaje omezena rozpustností léčiva ve vodě a objemem vodného roztoku léčiva, který lze přidat k polymeru v organickém rozpouštědle. Objemy větší než 0,5 ml léčiva na gram polymeru typicky vedou k velkému počátečnímu úniku léčiva z mikrotobolek. Abychom se vyhnuti těmto obtížím, použije se místo vodného roztoku léčiva prostředek s pevným léčivem. Pro výrobu mikrokuliček s vysokou náplní léčiva (větší než 10 % hmotn.) s mírným počátečním únikem léčiva lze tedy použít postup pevná látka v oleji ve vodě.
Prostředek s pevným léčivem použitý pro výrobu mikrotobolek musí být stabilní v organických rozpouštědlech a musí mít malou velikost (1 až 5 pm) vzhledem k mikrokuličkám (30 až 100 pm), aby byla umožněna velká náplň a nízké unikání léčiva. U proteinových prostředků je jedním způsobem získání malých vysušených pevných částic sušení rozprašováním. Postup sušení rozprašováním rhGH prostředků byl nedávno popsán Mummenthalerem a spol.: Pharm. Res. 11(1), 12 (1994). Jelikož rhGH se snadno denaturuje povrchovými interakcemi, jako je mezifází vzduch-kapalina, sušení rozprašováním rhGH se musí provádět s přítomností povrchově aktivního činidla v rhGH prostředku. Jak však bylo shora uvedeno, přítomnost některých povrchově aktivních činidel může mít negativní vliv na stabilitu rhGH v methylenchloridu. Prostředky rhGH sušené rozprašováním s různými povrchově aktivními činidly a trehalózou, o kterých bylo zjištěno, že jsou nejlepší pro stabilizaci vodných rhGH prostředků, byly testovány na stabilitu v methylenchloridu a ethylacetátu.
rhGH sušený rozprašováním byl připraven od každého prostředku, který je uveden v tabulce VII. Tyto prostředky byly rozprašovány rychlostí 5 ml/min s teplotou na přívodu 90 °C, s průtokem vzduchu tryskou 600 1/h a s rychlostí sušicího vzduchu 36 000 1/h. rhGH vysušený rozprášením byl pak sebrán z filtru a cyklonových jednotek sušičky rozprašováním. Výsledná pevná látka měla obvykle průměr přibližně 5 pm.
-12CZ 296649 B6
Prášek rhGH vysušený rozprašováním se pak testuje na stabilitu zpracováním buď s ethylacetátem, nebo s methylenchloridem. Ekvivalent hmotnosti 10 mg rhGH prášku vysušeného rozprašováním se přidá ke 2 ml organického rozpouštědla ve 3ml skleněné zkumavce. Suspenze se pak homogenizuje 30 sekund při 10 000 otáčkách za minut s mikrojemným homogenizačním hrotem. Po míchání se pro extrakci proteinu k 980 μΐ 5mM K3PO4, pH 8, přidá 20 μΐ homogenní suspenze. Koncentrace extrahovaného proteinu se stanoví absorbancí při 278 nm. Prostředek se analyzuje také SEC. Jak je uvedeno v tabulce VII, vzorek bez povrchově aktivního činidla měl největší obsah agregace, jestliže na něj bylo působeno methylenchloridem. Tato agregace byla pravděpodobně důsledkem povrchové denaturace rhGH během procesu sušení, jak bylo shora pozorováno při sušení rozprašováním rhGH. Jestliže se k prostředku přidá buď Tween 20, nebo PEG (mol. hmotn. 3350), množství agregace se u vzorků, na něž bylo působeno methylenchloridem, sníží, ale celkový výtěžek byl ještě nízký a obsah monomeru byl mnohem nižší než 90 %. Naproti tomu, jestliže se na stejné rhGH prostředky vysušené rozprašováním obsahující povrchově aktivní činidlo působí ethylacetátem, pak je agregace zanedbatelná a dosáhne se úplné izolace monomerního rhGH. rhGH prostředky vysušené rozprašováním, které obsahují trehalózu a buď Tween 20, nebo PEG (mol. hmotn. 3350), byly tedy stabilní v ethylacetátu, ale nebránily protein před denaturací v methylenchloridu.
Tabulka VII
Stabilita pevných rhGH prostředků vysušených rozprášením vmethylenchloridu a v ethylacetátu
| prostředek | % izolovaného3 (celkem) | % izolovanéhob | rozpustný polypeptid | ||
| % velkých agregátů | % dimeru | % monomeru | |||
| testy s methylenchloridem: | |||||
| 15 mg/ml rhGH 3,75 mg/ml trehalózy | — | — | 12,3 | 8,8 | 75,4 |
| 10 mg/ml rhGH 2,5 mg/ml trehalózy | 56,5 | 65,2 | 1,9 | 13,3 | 78,1 |
| 0,2 % Tweenu 20 1 Omg/ml rhGH 2,5 mg/ml trehalózy 0,2 % PEG (mol. hmotn. 3350) | 50,7 | 56,7 | 3,9 | 12,3 | 77,7 |
| testy s ethylacetátem: | |||||
| 10 mg/ml rhGH 2,5 mg/ml trehalózy 0,2 % Tweenu 20 | 111,7 | 126,8 | 0,9 | 0,0 | 99,2 |
| 10 mg/ml rhGH 2,5 mg/ml trehalózy | 114,3 | 125,5 | 1,1 | 0,0 | 98,9 |
| 0,2 % PEG (mol. hmotn. 3350) 5,0 mg/ml rtGH 1,25 mg/ml trehalózy 0,2 % Tweenu 20 | 106,8 | 110,4 | 0,3 | 3,0 | 96,7 |
Celkové množství izolovaného proteinu je definováno jako takové množství proteinu, které se extrahuje do pufru po působení organického rozpouštědla, děleno vypouštěným množstvím proteinu přidaného k extrakčnímu pufru (0,02 ml.5 mg/ml).
Výsledky SEC-HPLC pro protein extrahovaný do pufru po působení organického rozpouštědla. Procenta izolovaného rozpustného proteinu jsou definována jako poměr koncentrací z celé plochy maxima vzorku a referenčního standardu krát 100. Koncentrace kontroly a vzorku rhGH byly stanoveny absorbancí při 278 nm.
-13CZ 296649 B6
Příklad 5
Stabilita rhGH prostředků vysušených rozprášením vymrazováním v methylenchloridu a ethylacetátu
Sušení rozprašováním za vysokých teplot může mít škodlivý vliv na protein. Vyrobí se tak částice proteinu, které jsou často dutými kuličkami (Mummenthaler a spol.: Pharm Res. 11(1), 12 (1994).). Navíc je obtížné sebrat malé částice (1 až 5 pm) potřebné pro výrobu mikrotobolek a celkový výtěžek těchto částic je obvykle velmi nízký (méně než 50 % hmotn.). Alternativou sušení rozprašováním za vysoké teploty je sušení rozprašováním vymrazováním. Sušení rozprašováním vymrazováním rhGH prostředků vede k jemným částicím (2 a 3 pm), které se snadno rozpadají na velmi malé pevné částice (menší než 1 pm). Tento typ pevného prostředkuje výhodný pro přípravu mikrotobolek v polymerní matrici, protože poskytuje vysokou náplň (množství naplnit více pevné látky do 30 až lOOpm mikrokuliček) homogenně dispergovaného pevného proteinu (snížené počáteční uvolňování díky jemné suspenzi).
Sušení rozprašováním vymrazováním rhGH bylo provedeno u prostředků, jejichž seznam je uveden v tabulce VIII. Pro stabilizování rhGH během postupu sušení bylo opět potřeba povrchově aktivní činidlo. Avšak jiné proteiny, které nedenaturují snadno povrchovými interakcemi, by možná nevyžadovaly použití povrchově aktivního činidla. rhGH vysušený rozprašováním vymrazením se připravuje tak, že se prostředek pumpuje rychlostí 5 ml/min s přívodem na vzduchové trysce 600 1/h jako při sušení rozprašováním za vysoké teploty (Mummenthaler a spol.: Pharm. Res. 11(1), 12 (1994).). Tyto roztoky byly rozprašovány do otevřené kovové misky s kapalným dusíkem. Po rozprášení se miska umístí do předem ochlazeného lyofílizátoru nastaveného na 30 °C. Kapalný dusík se nechá odpařit. Protein se pak lyofilizuje (primární sušení: -30 °C, 13,3 kPa, 52 h; sekundární sušení: 5 °C, 13,3 kPa, 18 h). Výsledný prášek se odebere z misky a před použitím se umístí do zatavených skleněných nádob.
Prášek rhGH vysušený rozprašováním vymrazením se pak testuje na stabilitu uvedením do styku s ethylacetátem a methylenchloridem. Ekvivalent rhGH prášku vysušeného rozprašováním vymrazením odpovídající 10 mh rhGH se přidá ke 2 ml organického rozpouštědla ve 3ml skleněné zkumavce. Tato suspenze se homogenizuje 30 sekund mikrojemným homogenizačním hrotem při 10 000 otáčkách za minutu. Po míchání se 20 pl homogenní suspenze přidá k 980 pl 5Nm K3PO4, pH 8, aby se extrahoval protein. Koncentrace extrahovaného proteinu se stanoví absorbancí při 278 nm. Vzorek se analyzuje také SEC. Jak je uvedeno v tabulce VIII, prostředek vysušený rozprašováním vymrazením obsahující PEG byl stabilnější v methylenchloridu než prostředek obsahující Tween 20, jak bylo shora pozorováno u vodných prostředků. Oba prostředky však neposkytovaly vysoký výtěžek monomerního rhGH. Jestliže byly stejné prostředky uvedeny do styku s ethylacetátem, u obou prostředků došlo k úplné izolaci monomerního proteinu. Trehalóza v prostředcích poskytla stabilizaci proti denaturaci organickým rozpouštědlem (ethylacetát), zatímco povrchově aktivní činidla stabilizovala protein proti denaturaci během sušení rozprašováním vymrazováním. Prostředky vysušené rozprašováním vymrazováním obsahující jak trehalózu tak povrchově aktivní činidlo poskytují úplný výtěžek rhGH z ethylacetátu.
-14CZ 296649 B6
Tabulka VIII
Stabilita pevných rhGH prostředků vysušených rozprašováním vymrazením vmethylenchloridu a v ethylacetátu
| prostředek | % izolova- | % izolované- | rozpustný polypeptid |
| néhoa (cel- | hob | % velkých % dimeru % mono- | |
| kem) | agregátů meru | ||
| testy s methylenchloridem: |
| 5 mg/ml rhGH | 37,2 | 34,0 | 6,2 | 8,3 | 85,5 |
| 1,25 mg/ml trehalózy 0,2 % Tweenu 20 5 mg/ml rhGH 1,25 mg/ml trehalózy 0,2 % PEG (mol. hmotn. 3350) | 68,8 | 66,8 | 2,3 | 15,8 | 78,8 |
| testy s ethylacetátem: | |||||
| 5 mg/ml rhGH | 94,6 | 117,7 | 0,5 | 0,9 | 98,7 |
| 1,25 mg/ml trehalózy 0,2 % Tweenu 20 5 mg/ml rhGH | 97,7 | 104,7 | 0,6 | 0,0 | 99,4 |
1,25 mg/ml trehalózy
0,2 % PEG (mol, hmotn. 3350)
Celkové množství izolovaného proteinu je definováno jako takové množství proteinu, které se extrahuje do pufru po působení organického rozpouštědla, děleno vypočteným množstvím proteinu přidaného k extrakčnímu pufru (0,02 ml.5 ml/ml).
Výsledky SEC-HPLC pro protein extrahovaný do pufru po působení organického rozpouštědla. Procenta izolovaného rozpustného proteinu jsou definována jako poměr koncentrací z celé plochy maxima vzorku a referenčního standardu krát 100. Koncentrace kontroly a vzorku rhGH byly stanoveny absorbancí při 278 nm.
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (25)
- Výsledky SEC-HPLC pro protein extrahovaný do pufru po působení organického rozpouštědla. Procenta izolovaného rozpustného proteinu jsou definována jako poměr koncentrací z celé plochy maxima vzorku a referenčního standardu krát 100. Koncentrace kontroly a vzorku rhGH byly stanoveny absorbancí při 278 nm.PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob výroby stabilizovaného polypeptidového prostředku zahrnující stabilizování polypeptidu proti denaturaci účinkem organického rozpouštědla, vyznačující se tím, že při stabilizaci se smíchá polypeptid s polyolem, jehož molekulová hmotnost je menší než 70 000 a polyol je trehalóza, za vzniku směsi a na tuto směs se nechá působit organické rozpouštědlo.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se jako polypeptid použije růstový hormon.
- 3. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, lidský růstový hormon.
- 4. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, interferon.
- 5. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, použije methylenchlorid.že se jako růstový hormon použije že se jako polypeptid použije gama že se jako organické rozpouštědlo-15CZ 296649 B6
- 6. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se jako organické rozpouštědlo použije ethylacetát.
- 7. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se jako polypeptid použije suchý polypeptid.
- 8. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že se jako polypeptid použije lyofilizovaný polypeptid.
- 9. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že hmotnostní poměr trehalózy k polypeptidu je od 100:1 do 1:100.
- 10. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se použije hmotnostní poměr trehalózy k polypeptidu od 1:1 do 1:10.
- 11. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se použije hmotnostní poměr trehalózy k polypeptidu od 1:3 do 1:4.
- 12. Způsob přípravy farmaceutického prostředku spolypeptidem, vyznačující se tím, že se:a) smíchá polypeptid ve vodném roztoku s polyolem, který má molekulovou hmotnost menší 70 000 a polyol je trehalóza, ab) zreaguje polypeptid ve vodném roztoku s organickým rozpouštědlem.
- 13. Způsob přípravy farmaceutického prostředku spolypeptidem podle nároku 12, vyznačující se tím, že produkt ze stupně a) se vysuší a zředí se na vodný prostředek.
- 14. Způsob přípravy farmaceutického prostředku s polypeptidem podle nároku 12, vyznačující se tím, že dále zahrnuje přípravu prostředku spolypeptidem pro regulované uvolňování, přičemž se polypeptid zapouzdří do polymemí matrice.
- 15. Způsob přípravy farmaceutického prostředku se suchým polypeptidem pro regulované uvolňování, vyznačující se tím, že sea) smíchá polypeptid s excipientem, kterým je polyol s molekulovou hmotností menší 70 000 a polyol je trehalóza, ab) zreaguje produkt ze stupně a) s organickým rozpouštědlem.
- 16. Způsob přípravy farmaceutického prostředku se suchým polypeptidem podle nároku 15, vyznačující se tím, že dále zahrnuje zapouzdření polypeptidu do polymemí matrice.
- 17. Farmaceutický prostředek ve formě tobolek, vyznačující se tím, že se vyrábí způsobem podle nároku 15.
- 18. Prostředek pro regulované uvolňování polypeptidu, vyznačující se tím, že obsahuje polypeptid smíchaný s excipientem, s organickým rozpouštědlem a polymemí matricí, přičemž excipient je trehalóza.
- 19. Prostředek pro regulované uvolňování polypeptidu podle nároku 18, vyznačující se tím, že polypeptid smíchaný s excipientem je ve vodném roztoku.
- 20. Prostředek pro regulované uvolňování polypeptidu podle nároku 18, vyznačující se tím, že polypeptid smíchaný s excipientem je suchý.-16CZ 296649 B6
- 21. Prostředek pro regulované uvolňování polypeptidů podle nároku 18, vyznačující se tím, že polypeptid smíchaný s excipientem je lyofilizovaný.
- 22. Prostředek pro regulované uvolňování polypeptidů podle nároku 18, vyznačující se 5 tím, že dále obsahuje pufr.
- 23. Prostředek pro regulované uvolňování polypeptidů podle nároku 22, vyznačující se tím, že obsahuje pufr, kterým je fosforečnanový pufr.ío
- 24. Prostředek pro regulované uvolňování polypeptidů podle nároku 22, v y z n a č u j í c í se tím, že obsahuje pufr, kterým je sukcinátový pufr.
- 25. Prostředek pro regulované uvolňování polypeptidů podle nároku 22, vyznačující se tím, že dále obsahuje ochranné činidlo.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US2142193A | 1993-02-23 | 1993-02-23 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ212795A3 CZ212795A3 (en) | 1996-02-14 |
| CZ296649B6 true CZ296649B6 (cs) | 2006-05-17 |
Family
ID=21804127
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ0212795A CZ296649B6 (cs) | 1993-02-23 | 1994-02-17 | Zpusob výroby stabilizovaného polypeptidového prostredku zahrnující stabilizování polypeptidu protidenaturaci organickými rozpoustedly, jeho príprava a prostredek pro regulované uvolnování polypeptidu |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US5589167A (cs) |
| EP (1) | EP0686045B1 (cs) |
| JP (1) | JP3698721B2 (cs) |
| CN (1) | CN1108823C (cs) |
| AT (1) | ATE197550T1 (cs) |
| AU (1) | AU685784B2 (cs) |
| CZ (1) | CZ296649B6 (cs) |
| DE (1) | DE69426292T2 (cs) |
| DK (1) | DK0686045T3 (cs) |
| ES (1) | ES2153418T3 (cs) |
| GR (1) | GR3035383T3 (cs) |
| IL (1) | IL108713A (cs) |
| NZ (1) | NZ262634A (cs) |
| PT (1) | PT686045E (cs) |
| RU (1) | RU2143889C1 (cs) |
| WO (1) | WO1994019020A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA941239B (cs) |
Families Citing this family (143)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE69332105T2 (de) | 1992-09-29 | 2003-03-06 | Inhale Therapeutic Systems, San Carlos | Pulmonale abgabe von aktiven fragmenten des parathormons |
| MX9603936A (es) | 1994-03-07 | 1997-05-31 | Inhale Therapeutic Syst | Metodos y composiciones para el suministro pulmonar de insulina. |
| US6290991B1 (en) | 1994-12-02 | 2001-09-18 | Quandrant Holdings Cambridge Limited | Solid dose delivery vehicle and methods of making same |
| US6586006B2 (en) | 1994-08-04 | 2003-07-01 | Elan Drug Delivery Limited | Solid delivery systems for controlled release of molecules incorporated therein and methods of making same |
| WO1996008979A1 (en) | 1994-09-22 | 1996-03-28 | Quadrant Holdings Cambridge Limited | Compositions for use in rehydration and nutrition during athletic exercise and methods of making same |
| US6964771B1 (en) | 1995-06-07 | 2005-11-15 | Elan Drug Delivery Limited | Method for stably incorporating substances within dry, foamed glass matrices |
| PT831787E (pt) * | 1995-06-07 | 2002-02-28 | Alkermes Inc | Composicao para libertacao sustentada da hormona de crescimento humano |
| US6685940B2 (en) * | 1995-07-27 | 2004-02-03 | Genentech, Inc. | Protein formulation |
| US6267958B1 (en) | 1995-07-27 | 2001-07-31 | Genentech, Inc. | Protein formulation |
| JP2014148555A (ja) * | 1995-07-27 | 2014-08-21 | Genentech Inc | タンパク質の処方 |
| NZ313503A (en) * | 1995-07-27 | 2000-01-28 | Inc Genentech | Stable isotonic lyophilized protein formulations, such as anti-IgE and anti-HER2 antibody formulations, wherein protein concentration is 2-40 times greater than protein concentration before lyophilization |
| US5762961A (en) * | 1996-02-09 | 1998-06-09 | Quadrant Holdings Cambridge Ltd. | Rapidly soluble oral solid dosage forms, methods of making same, and compositions thereof |
| US5958455A (en) * | 1996-02-09 | 1999-09-28 | Quadrant Holdings Cambridge Ltd | Oral solid dosage forms, methods of making same and compositions thereof |
| AUPN801296A0 (en) * | 1996-02-12 | 1996-03-07 | Csl Limited | Stabilised growth hormone formulation and method of preparation thereof |
| US6190702B1 (en) | 1996-03-28 | 2001-02-20 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Sustained-released material prepared by dispersing a lyophilized polypeptide in an oil phase |
| US6632648B1 (en) | 1996-05-14 | 2003-10-14 | Elan Drug Delivery Limited | Methods of terminal sterilization of fibrinogen |
| DE69722620T2 (de) * | 1996-07-03 | 2004-04-29 | Alza Corp., Palo Alto | Nicht-waessrige protische peptidzubereitungen |
| US5916582A (en) * | 1996-07-03 | 1999-06-29 | Alza Corporation | Aqueous formulations of peptides |
| US5932547A (en) | 1996-07-03 | 1999-08-03 | Alza Corporation | Non-aqueous polar aprotic peptide formulations |
| US5861174A (en) | 1996-07-12 | 1999-01-19 | University Technology Corporation | Temperature sensitive gel for sustained delivery of protein drugs |
| US5981489A (en) * | 1996-07-18 | 1999-11-09 | Alza Corporation | Non-aqueous protic peptide formulations |
| US6468782B1 (en) | 1996-12-05 | 2002-10-22 | Quadrant Healthcare (Uk) Limited | Methods of preserving prokaryotic cells and compositions obtained thereby |
| KR20000057693A (ko) | 1996-12-20 | 2000-09-25 | 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 | 지효성 제제의 제조 방법 |
| US6663899B2 (en) | 1997-06-13 | 2003-12-16 | Genentech, Inc. | Controlled release microencapsulated NGF formulation |
| US6171586B1 (en) | 1997-06-13 | 2001-01-09 | Genentech, Inc. | Antibody formulation |
| US6113947A (en) * | 1997-06-13 | 2000-09-05 | Genentech, Inc. | Controlled release microencapsulated NGF formulation |
| US6991790B1 (en) * | 1997-06-13 | 2006-01-31 | Genentech, Inc. | Antibody formulation |
| IL134084A0 (en) * | 1997-07-18 | 2001-04-30 | Infimed Inc | Biodegradable macromers for the controlled release of biologically active substances |
| US6309623B1 (en) | 1997-09-29 | 2001-10-30 | Inhale Therapeutic Systems, Inc. | Stabilized preparations for use in metered dose inhalers |
| US6565885B1 (en) | 1997-09-29 | 2003-05-20 | Inhale Therapeutic Systems, Inc. | Methods of spray drying pharmaceutical compositions |
| US20060165606A1 (en) | 1997-09-29 | 2006-07-27 | Nektar Therapeutics | Pulmonary delivery particles comprising water insoluble or crystalline active agents |
| SE512663C2 (sv) | 1997-10-23 | 2000-04-17 | Biogram Ab | Inkapslingsförfarande för aktiv substans i en bionedbrytbar polymer |
| AU2945199A (en) * | 1998-03-18 | 1999-10-11 | Ronai, Peter | Amorphous glasses for stabilising sensitive products |
| ATE367828T1 (de) * | 1998-04-03 | 2007-08-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Igf-enthaltende injizierbare formulierungen enthaltend succinate als puffermittel |
| AU760664B2 (en) * | 1998-04-17 | 2003-05-22 | Angiogenix, Inc. | Therapeutic angiogenic factors and methods for their use |
| US6284282B1 (en) * | 1998-04-29 | 2001-09-04 | Genentech, Inc. | Method of spray freeze drying proteins for pharmaceutical administration |
| US6190701B1 (en) | 1999-03-17 | 2001-02-20 | Peter M. Ronai | Composition and method for stable injectable liquids |
| GB9910975D0 (en) * | 1999-05-13 | 1999-07-14 | Univ Strathclyde | Rapid dehydration of proteins |
| US6566329B1 (en) * | 1999-06-28 | 2003-05-20 | Novo Nordisk A/S | Freeze-dried preparation of human growth hormone |
| US6102896A (en) * | 1999-09-08 | 2000-08-15 | Cambridge Biostability Limited | Disposable injector device |
| US7582311B1 (en) | 1999-10-15 | 2009-09-01 | Genentech, Inc. | Injection vehicle for polymer-based formulations |
| US7651703B2 (en) * | 1999-10-15 | 2010-01-26 | Genentech, Inc. | Injection vehicle for polymer-based formulations |
| WO2001058428A1 (en) * | 2000-02-10 | 2001-08-16 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Method of preparing a sustained release composition |
| EP1274459B1 (en) | 2000-04-19 | 2005-11-16 | Genentech, Inc. | Sustained release formulations comprising growth hormone |
| TWI290473B (en) | 2000-05-10 | 2007-12-01 | Alliance Pharma | Phospholipid-based powders for drug delivery |
| US8404217B2 (en) | 2000-05-10 | 2013-03-26 | Novartis Ag | Formulation for pulmonary administration of antifungal agents, and associated methods of manufacture and use |
| US7871598B1 (en) | 2000-05-10 | 2011-01-18 | Novartis Ag | Stable metal ion-lipid powdered pharmaceutical compositions for drug delivery and methods of use |
| US6653062B1 (en) | 2000-07-26 | 2003-11-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Preservation and storage medium for biological materials |
| CA2418960A1 (en) * | 2000-08-07 | 2002-02-14 | Inhale Therapeutic Systems, Inc. | Inhaleable spray dried 4-helix bundle protein powders having minimized aggregation |
| US6824822B2 (en) * | 2001-08-31 | 2004-11-30 | Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Ii | Residual solvent extraction method and microparticles produced thereby |
| ATE450253T1 (de) * | 2000-10-13 | 2009-12-15 | Cambridge Biostability Ltd | Pharmazeutische flüssige suspensionen |
| EP1348428B1 (en) * | 2000-11-29 | 2009-01-14 | Itoham Foods Inc. | Powdery preparations and process for producing the same |
| US20040022861A1 (en) * | 2001-01-30 | 2004-02-05 | Williams Robert O. | Process for production of nanoparticles and microparticles by spray freezing into liquid |
| US7824700B2 (en) * | 2001-02-23 | 2010-11-02 | Genentech, Inc. | Erodible polymers for injection |
| EP1397155B1 (en) | 2001-06-21 | 2015-09-30 | Genentech, Inc. | Sustained release formulation |
| GB0116074D0 (en) * | 2001-06-29 | 2001-08-22 | Univ Strathclyde | Nanoparticle structures |
| GB2404865B (en) * | 2001-09-11 | 2005-09-28 | Caretek Medical Ltd | Novel drug delivery technology |
| GB2391480B (en) | 2002-08-05 | 2007-02-28 | Caretek Medical Ltd | Drug delivery system |
| US7615234B2 (en) | 2001-09-11 | 2009-11-10 | Glide Pharmaceutical Technologies Limited | Drug delivery technology |
| MXPA04005865A (es) | 2001-12-19 | 2004-09-13 | Nektar Therapeutics | Suministro de aminoglucosidos a los pulmones. |
| AU2003221808A1 (en) * | 2002-04-05 | 2003-10-27 | Powerzyme, Inc. | Analyte sensor |
| US20050175693A1 (en) * | 2002-05-09 | 2005-08-11 | Peptron Co., Ltd | Substained release formulation of protein and preparation method thereof |
| US7045552B2 (en) * | 2002-09-27 | 2006-05-16 | Trimeris, Inc. | Pharmaceutical composition for improved administration of HIV gp41-derived peptides, and its use in therapy |
| CN100444848C (zh) * | 2002-09-27 | 2008-12-24 | 特里梅里斯公司 | HIV gp41-衍生肽的改善用药的药物组合物 |
| US7164005B2 (en) * | 2002-10-17 | 2007-01-16 | Alkermes, Inc. | Microencapsulation and sustained release of biologically active polypeptides |
| NZ554885A (en) * | 2002-12-31 | 2009-07-31 | Altus Pharmaceuticals Inc | Complexes of hgh crystals and protamine polymers |
| MXPA05007181A (es) * | 2002-12-31 | 2006-04-07 | Altus Pharmaceuticals Inc | Cristales de la hormona de crecimiento humano y metodos para prepararlos. |
| US20040197413A1 (en) * | 2003-04-04 | 2004-10-07 | Genteric, Inc. | Spray dry coacervation systems and methods |
| DE10320609A1 (de) * | 2003-05-08 | 2004-12-02 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Sprühgefriergranulate mit verbesserter Homogenität der Eigenschaftsverteilung und Verfahren zu deren Herstellung |
| US7090433B2 (en) * | 2003-10-07 | 2006-08-15 | Steve Searby | Underground cable laying apparatus |
| US20050095320A1 (en) * | 2003-10-29 | 2005-05-05 | Richard Botteri | [An Isotonic Sports Drink for Female Athletes Fortified with Iron, Calcium and Essential Vitamins for Use in Rehydration and Nutrition During Execise and Competition] |
| US20050100636A1 (en) * | 2003-11-10 | 2005-05-12 | Megan Botteri | [A Low-Calorie Sports Drink For Physically Active Women That is Fortified with Iron, Calcium and Essential Vitamins for Use in Rehydration and Replacing Electrolytes Lost During Periods of Physical Activity] |
| RU2006128593A (ru) * | 2004-01-07 | 2008-02-20 | Тримерис, Инк. (Us) | Синтетические пептиды, производные области hr2 белка gp41 вич, и их применение в терапии для ингибирования проникновения вируса иммунодефицита человека |
| US7456254B2 (en) * | 2004-04-15 | 2008-11-25 | Alkermes, Inc. | Polymer-based sustained release device |
| BRPI0418702A (pt) | 2004-04-15 | 2007-09-11 | Alkermes Inc | composição para a liberação sustentada de polipetìdeo biologicamente ativo, método para tratar um paciente sofrendo de diabetes tipo 2, processo para preparar uma composição para a liberação sustentada de um polipeptìdeo, composição para a liberação sustentada de um agente biologicamente ativo, processo para preparar uma composição para a liberação sustentada de exendina-4, composição injetável, kit para produzir uma composição injetável, composição farmaceuticamente aceitável para a liberação sustentada de um polipeptìdeo biologicamente ativo e método para tratar um paciente sofrendo de diabetes mellitus |
| JP2007277094A (ja) * | 2004-06-29 | 2007-10-25 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 改変ダニ主要アレルゲン含有医薬組成物 |
| US7133638B2 (en) * | 2004-11-18 | 2006-11-07 | Xerox Corporation | Scanning method and an image-processing device including the same |
| US11246913B2 (en) | 2005-02-03 | 2022-02-15 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Suspension formulation comprising an insulinotropic peptide |
| GB2422784A (en) * | 2005-02-07 | 2006-08-09 | Caretek Medical Ltd | Disposable assembly comprising a needle or stylet |
| JP2006249083A (ja) * | 2005-03-08 | 2006-09-21 | Pharmacia & Upjohn Co Llc | 抗ｍ−ｃｓｆ抗体組成物 |
| CN100337684C (zh) * | 2005-05-11 | 2007-09-19 | 北京双鹭药业股份有限公司 | 一种胸腺五肽的水溶液制剂、其制备方法及应用 |
| CN100342909C (zh) * | 2005-05-11 | 2007-10-17 | 北京双鹭药业股份有限公司 | 一种胸腺素α1的水溶液制剂、其制备方法及应用 |
| CN100336557C (zh) * | 2005-05-11 | 2007-09-12 | 北京双鹭药业股份有限公司 | 一种生长抑素的水溶液制剂、其制备方法及应用 |
| GB0517688D0 (en) * | 2005-08-31 | 2005-10-05 | Cambridge Biostability Ltd | Improvements in the stabilisation of biological materials |
| US9309316B2 (en) * | 2005-12-20 | 2016-04-12 | Bristol-Myers Squibb Company | Stable subcutaneous protein formulations and uses thereof |
| SG153832A1 (en) * | 2005-12-20 | 2009-07-29 | Bristol Myers Squibb Co | Stable protein formulations |
| CA2634053A1 (en) * | 2005-12-23 | 2007-07-05 | Altus Pharmaceuticals Inc. | Compositions comprising polycation-complexed protein crystals and methods of treatment using them |
| TWI341844B (en) | 2006-02-02 | 2011-05-11 | Trimeris Inc | Hiv fusion inhibitor peptides with improved biological properties |
| SI2004753T1 (sl) * | 2006-03-13 | 2010-06-30 | Becker & Co Naturinwerk | Termoplastični sestavki na osnovi kolagenskega prahu in kolagena za pripravo oblikovanih teles |
| NZ574524A (en) | 2006-08-09 | 2011-07-29 | Intarcia Therapeutics Inc | Piston assembly for positioning lumen of a reservoir for an osmotic delivery having a columnar body and a spring |
| US20100028451A1 (en) | 2006-09-26 | 2010-02-04 | Trustees Of Tufts College | Silk microspheres for encapsulation and controlled release |
| US8946200B2 (en) * | 2006-11-02 | 2015-02-03 | Southwest Research Institute | Pharmaceutically active nanosuspensions |
| AU2007234612B2 (en) * | 2006-12-14 | 2013-06-27 | Johnson & Johnson Regenerative Therapeutics, Llc | Protein stabilization formulations |
| US8071544B2 (en) * | 2006-12-18 | 2011-12-06 | Althea Technologies, Inc. | Crystallized recombinant human growth factor formulations |
| ATE516814T1 (de) * | 2007-02-02 | 2011-08-15 | Bristol Myers Squibb Co | 10fn3 domain zur behandlung von krankheiten begleitet von unerwünschter angiogenese |
| DK2148691T3 (en) | 2007-02-05 | 2015-08-17 | Apellis Pharmaceuticals Inc | Compstatinanaloger for use in the treatment of inflammatory states of the respiratory system |
| EP2139526A4 (en) * | 2007-04-03 | 2010-07-14 | Trimeris Inc | NEW FORMULATIONS TO RELEASE ANTIVIRAL PEPTIDE THERAPEUTICS |
| IL290847B2 (en) | 2007-04-23 | 2024-11-01 | Intarcia Therapeutics Inc | Suspension formulations of insulinotropic peptides and uses thereof |
| US20100144592A1 (en) * | 2007-06-01 | 2010-06-10 | Nove Nordisk A/S | Stable Non-Aqueous Pharmaceutical Compositions |
| US7678764B2 (en) | 2007-06-29 | 2010-03-16 | Johnson & Johnson Regenerative Therapeutics, Llc | Protein formulations for use at elevated temperatures |
| CN101801405A (zh) | 2007-08-07 | 2010-08-11 | 先进科技及再生医学有限责任公司 | 包含于酸性水溶液中的gdf-5的蛋白质配方 |
| KR20100080812A (ko) * | 2007-09-25 | 2010-07-12 | 트라이머리스, 인코퍼레이티드 | 치료용 항-ｈｉｖ 펩티드의 합성 방법 |
| EP2240155B1 (en) | 2008-02-13 | 2012-06-06 | Intarcia Therapeutics, Inc | Devices, formulations, and methods for delivery of multiple beneficial agents |
| US8404850B2 (en) * | 2008-03-13 | 2013-03-26 | Southwest Research Institute | Bis-quaternary pyridinium-aldoxime salts and treatment of exposure to cholinesterase inhibitors |
| KR20110004366A (ko) | 2008-03-18 | 2011-01-13 | 노보 노르디스크 에이/에스 | 프로테아제 안정화되고, 아실화된 인슐린 유사체 |
| JP5599778B2 (ja) * | 2008-04-14 | 2014-10-01 | デピュイ・シンセス・プロダクツ・エルエルシー | 液体緩衝ｇｄｆ−５製剤 |
| US8722706B2 (en) * | 2008-08-15 | 2014-05-13 | Southwest Research Institute | Two phase bioactive formulations of bis-quaternary pyridinium oxime sulfonate salts |
| US8309134B2 (en) * | 2008-10-03 | 2012-11-13 | Southwest Research Institute | Modified calcium phosphate nanoparticle formation |
| UA106606C2 (uk) * | 2009-03-16 | 2014-09-25 | Родія Оперейшнс | Стабілізована біоцидна композиція |
| US20120070427A1 (en) | 2009-06-01 | 2012-03-22 | Trustees Of Tufts College | Vortex-induced silk fibroin gelation for encapsulation and delivery |
| RU2431496C2 (ru) * | 2009-09-15 | 2011-10-20 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Герофарм" | Инъекционная лекарственная форма для лечения острого ишемического инсульта и черепно-мозговой травмы, способ ее изготовления и применение |
| RU2753280C2 (ru) | 2009-09-28 | 2021-08-12 | Интарсия Терапьютикс, Инк. | Быстрое достижение и/или прекращение существенной стабильной доставки лекарственного средства |
| US9028873B2 (en) * | 2010-02-08 | 2015-05-12 | Southwest Research Institute | Nanoparticles for drug delivery to the central nervous system |
| WO2011109452A1 (en) | 2010-03-01 | 2011-09-09 | Bayer Healthcare Llc | Optimized Monoclonal Antibodies against Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI) |
| WO2011109691A2 (en) | 2010-03-05 | 2011-09-09 | Trustees Of Tufts College | Silk-based ionomeric compositions |
| GB201004072D0 (en) | 2010-03-11 | 2010-04-28 | Turzi Antoine | Process, tube and device for the preparation of wound healant composition |
| US20120208755A1 (en) | 2011-02-16 | 2012-08-16 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Compositions, Devices and Methods of Use Thereof for the Treatment of Cancers |
| EP2771029A4 (en) | 2011-10-25 | 2015-07-01 | Onclave Therapeutics Ltd | ANTIBODY FORMULATIONS AND METHOD THEREFOR |
| WO2013096835A1 (en) * | 2011-12-23 | 2013-06-27 | Abbvie Inc. | Stable protein formulations |
| JP6195848B2 (ja) | 2012-01-27 | 2017-09-13 | ザ、リージェンツ、オブ、ザ、ユニバーシティ、オブ、カリフォルニアＴｈｅ Ｒｅｇｅｎｔｓ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｏｆ Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ | 糖ポリマーを用いた生体分子の安定化 |
| KR20150002777A (ko) | 2012-04-11 | 2015-01-07 | 노보 노르디스크 에이/에스 | 인슐린 제제 |
| WO2014035798A1 (en) | 2012-08-30 | 2014-03-06 | Sanofi | Silk lyogels for sustained release of protein therapeutics and methods of making and uses |
| US9592297B2 (en) | 2012-08-31 | 2017-03-14 | Bayer Healthcare Llc | Antibody and protein formulations |
| US8613919B1 (en) | 2012-08-31 | 2013-12-24 | Bayer Healthcare, Llc | High concentration antibody and protein formulations |
| ES2887079T3 (es) * | 2014-04-28 | 2021-12-21 | Eisai R&D Man Co Ltd | Preparación de HGF liofilizada |
| US9889085B1 (en) | 2014-09-30 | 2018-02-13 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Therapeutic methods for the treatment of diabetes and related conditions for patients with high baseline HbA1c |
| KR20240042548A (ko) | 2015-06-03 | 2024-04-02 | 인타르시아 세라퓨틱스 인코포레이티드 | 임플란트 배치 및 제거 시스템들 |
| JP2017110001A (ja) * | 2015-12-16 | 2017-06-22 | 株式会社 資生堂 | タブレット型凍結乾燥化粧料 |
| RU2747977C2 (ru) | 2016-03-17 | 2021-05-18 | Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. | Способ получения активного фактора роста гепатоцитов (hgf) |
| EP3733694A1 (en) | 2016-05-16 | 2020-11-04 | Intarcia Therapeutics, Inc | Glucagon-receptor selective polypeptides and methods of use thereof |
| USD840030S1 (en) | 2016-06-02 | 2019-02-05 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Implant placement guide |
| USD860451S1 (en) | 2016-06-02 | 2019-09-17 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Implant removal tool |
| CN109689029A (zh) * | 2016-07-18 | 2019-04-26 | 蒂舒金公司 | 用于保持生物分子的构象和结构完整性的方法和组合物 |
| SI3554534T1 (sl) | 2016-12-16 | 2021-09-30 | Novo Nordisk A/S | Farmacevtski sestavki, ki vsebujejo inzulin |
| WO2018129058A1 (en) | 2017-01-03 | 2018-07-12 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Methods comprising continuous administration of a glp-1 receptor agonist and co-adminstration of a drug |
| JP6404405B1 (ja) * | 2017-06-14 | 2018-10-10 | 株式会社 資生堂 | タブレット型凍結乾燥化粧料 |
| CN110769810B (zh) * | 2017-06-19 | 2023-08-01 | 株式会社资生堂 | 片剂型冷冻干燥化妆品 |
| TWI787186B (zh) * | 2017-06-19 | 2022-12-21 | 日商資生堂股份有限公司 | 錠型凍結乾燥化妝料 |
| CN108169499A (zh) * | 2017-11-30 | 2018-06-15 | 成都斯马特科技有限公司 | 一种基于生化试剂盘进行凝血分析的方法 |
| IL281393B2 (en) * | 2018-09-14 | 2025-02-01 | Cara Therapeutics Inc | Oral formulations of kappa opioid receptor agonists |
| WO2020154305A1 (en) | 2019-01-21 | 2020-07-30 | Eclipse Medcorp, Llc | Methods, systems and apparatus for separating components of a biological sample |
| US12007382B2 (en) | 2019-10-31 | 2024-06-11 | Crown Laboratories, Inc. | Systems, methods and apparatus for separating components of a sample |
| JP2025506375A (ja) * | 2022-02-01 | 2025-03-11 | オキュラ セラピューティクス，インコーポレイテッド | 生物製剤のための制御放出インプラントとそれに対応する治療法 |
Family Cites Families (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3664963A (en) * | 1969-10-22 | 1972-05-23 | Balchem Corp | Encapsulation process |
| IT1103817B (it) * | 1978-06-27 | 1985-10-14 | Guaber Spa | Composizione deodorante granulare per posacenere |
| DE2916711A1 (de) * | 1979-04-25 | 1980-11-06 | Behringwerke Ag | Blutgerinnungsfaktoren und verfahren zu ihrer herstellung |
| JPS60100516A (ja) * | 1983-11-04 | 1985-06-04 | Takeda Chem Ind Ltd | 徐放型マイクロカプセルの製造法 |
| EP0193917A3 (en) * | 1985-03-06 | 1987-09-23 | American Cyanamid Company | Water dispersible and water soluble carbohydrate polymer compositions for parenteral administration |
| JPH0779694B2 (ja) * | 1985-07-09 | 1995-08-30 | カドラント バイオリソ−シズ リミテツド | 蛋白質および同類品の保護 |
| GB8604983D0 (en) * | 1986-02-28 | 1986-04-09 | Biocompatibles Ltd | Protein preservation |
| US4816568A (en) * | 1986-05-16 | 1989-03-28 | International Minerals & Chemical Corp. | Stabilization of growth hormones |
| US4962091A (en) * | 1986-05-23 | 1990-10-09 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Controlled release of macromolecular polypeptides |
| JP2526589B2 (ja) * | 1986-08-08 | 1996-08-21 | 武田薬品工業株式会社 | ペプチド含有マイクロカプセルおよびその製造法 |
| US5312745A (en) * | 1987-06-18 | 1994-05-17 | Chromogenix Ab | Determination of components active in proteolysis |
| EP0303746B2 (en) * | 1987-08-21 | 1998-12-02 | Mallinckrodt Group Inc. | Stabilization of growth promoting hormones |
| WO1989003671A1 (en) * | 1987-10-29 | 1989-05-05 | Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd. | Sustained-release preparation |
| GB8801338D0 (en) * | 1988-01-21 | 1988-02-17 | Quadrant Bioresources Ltd | Preservation of viruses |
| SU1599019A1 (ru) * | 1988-02-08 | 1990-10-15 | Всесоюзный научно-исследовательский институт химии и технологии лекарственных средств | Способ получени лиофилизата |
| JP2670680B2 (ja) * | 1988-02-24 | 1997-10-29 | 株式会社ビーエムジー | 生理活性物質含有ポリ乳酸系微小球およびその製造法 |
| AT392079B (de) * | 1988-03-11 | 1991-01-25 | Voest Alpine Ind Anlagen | Verfahren zum druckvergasen von kohle fuer den betrieb eines kraftwerkes |
| US5096885A (en) * | 1988-04-15 | 1992-03-17 | Genentech, Inc. | Human growth hormone formulation |
| US5039540A (en) * | 1989-08-14 | 1991-08-13 | Neophore Technologies, Inc. | Freeze dry composition and method for oral administration of drugs, biologicals, nutrients and foodstuffs |
| US5032405A (en) * | 1989-09-27 | 1991-07-16 | Warner-Lambert Company | Oral pharmaceutical composition for acid sensitive proteinaceous agents |
| US5312705A (en) * | 1990-07-27 | 1994-05-17 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Photosensitive materials for electrophotography having a double-layer structure of a charge generation layer and a charge transport layer |
| WO1992014449A1 (en) * | 1991-02-20 | 1992-09-03 | Nova Pharmaceutical Corporation | Controlled release microparticulate delivery system for proteins |
| FR2673843B1 (fr) * | 1991-03-14 | 1995-01-13 | Centre Nat Rech Scient | Composition pharmaceutique implantable, bioresorbable a base de poly(acide lactique), destinee a mettre en óoeuvre une antibiotherapie interne locale. |
| AU8017494A (en) * | 1993-10-22 | 1995-05-08 | Genentech Inc. | Method for preparing microspheres comprising a fluidized bed drying step |
| ES2182850T3 (es) * | 1993-10-22 | 2003-03-16 | Genentech Inc | Procedimientos y composiciones para la microencapsulacion de adyuvantes. |
| DE69431404T2 (de) * | 1993-10-22 | 2003-04-30 | Genentech Inc., San Francisco | Verfahren zur mikroverkapselung von antigenen und verwendung der zusammensetzungen als impfstoffe |
-
1994
- 1994-02-17 CN CN94191235A patent/CN1108823C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-17 WO PCT/US1994/001666 patent/WO1994019020A1/en active IP Right Grant
- 1994-02-17 US US08/256,187 patent/US5589167A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-17 RU RU95118293A patent/RU2143889C1/ru active
- 1994-02-17 DK DK94909647T patent/DK0686045T3/da active
- 1994-02-17 NZ NZ262634A patent/NZ262634A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-02-17 PT PT94909647T patent/PT686045E/pt unknown
- 1994-02-17 ES ES94909647T patent/ES2153418T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-17 AU AU62412/94A patent/AU685784B2/en not_active Expired
- 1994-02-17 EP EP94909647A patent/EP0686045B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-17 JP JP51910094A patent/JP3698721B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-17 DE DE69426292T patent/DE69426292T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-17 CZ CZ0212795A patent/CZ296649B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-02-17 AT AT94909647T patent/ATE197550T1/de active
- 1994-02-20 IL IL10871394A patent/IL108713A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-02-23 ZA ZA941239A patent/ZA941239B/xx unknown
-
1995
- 1995-05-15 US US08/442,241 patent/US5753219A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-09-24 US US08/719,196 patent/US5804557A/en not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-02-07 GR GR20010400210T patent/GR3035383T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK0686045T3 (da) | 2001-03-05 |
| EP0686045B1 (en) | 2000-11-15 |
| PT686045E (pt) | 2001-04-30 |
| GR3035383T3 (en) | 2001-05-31 |
| JPH08507064A (ja) | 1996-07-30 |
| WO1994019020A1 (en) | 1994-09-01 |
| ES2153418T3 (es) | 2001-03-01 |
| CZ212795A3 (en) | 1996-02-14 |
| AU685784B2 (en) | 1998-01-29 |
| IL108713A (en) | 1999-12-22 |
| US5804557A (en) | 1998-09-08 |
| DE69426292D1 (de) | 2000-12-21 |
| JP3698721B2 (ja) | 2005-09-21 |
| CN1118143A (zh) | 1996-03-06 |
| ZA941239B (en) | 1995-08-23 |
| US5589167A (en) | 1996-12-31 |
| IL108713A0 (en) | 1994-05-30 |
| ATE197550T1 (de) | 2000-12-15 |
| CN1108823C (zh) | 2003-05-21 |
| DE69426292T2 (de) | 2001-05-17 |
| EP0686045A1 (en) | 1995-12-13 |
| US5753219A (en) | 1998-05-19 |
| NZ262634A (en) | 1997-02-24 |
| AU6241294A (en) | 1994-09-14 |
| RU2143889C1 (ru) | 2000-01-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ296649B6 (cs) | Zpusob výroby stabilizovaného polypeptidového prostredku zahrnující stabilizování polypeptidu protidenaturaci organickými rozpoustedly, jeho príprava a prostredek pro regulované uvolnování polypeptidu | |
| AU2003217367B2 (en) | Polymer-based compositions for sustained release | |
| Cleland et al. | Recombinant human growth hormone poly (lactic-co-glycolic acid) microsphere formulation development | |
| US6465425B1 (en) | Microencapsulation and sustained release of biologically active acid-stable or free sulfhydryl-containing proteins | |
| CA2264776C (en) | Stable protein and nucleic acid formulations using non-aqueous, anhydrous, aprotic, hydrophobic, non-polar vehicles with low reactivity | |
| US6080429A (en) | Method for drying microspheres | |
| CA2172508C (en) | Method for preparing microspheres comprising a fluidized bed drying step | |
| JP2010174021A6 (ja) | 徐放型生物分解性微小球およびその製造方法 | |
| JPH11513047A (ja) | ヒアルロン酸の微細粒子中に封入された薬物の徐放性組成物 | |
| JP2010174021A (ja) | 徐放型生物分解性微小球およびその製造方法 | |
| BG65976B1 (bg) | Фармацевтична форма на пептиди, методи за нейното получаване и приложение | |
| KR20050110037A (ko) | Ｆｓｈ 및 ｌｈ과 비이온성 표면활성제의 액상 약제학적제제 | |
| EP0880969A1 (en) | Pharmaceutical compositions of peptides having low solubility in physiological medium | |
| CA2154164C (en) | Excipient stabilization of polypeptides treated with organic solvents | |
| US20040071715A1 (en) | Polymer compositions that stabilize and control the release of formaldehyde-treated vaccine antigens | |
| JP2007532519A (ja) | 皮下注射処方物または筋肉注射処方物中のタンパク質有効成分のバイオアベイラビリティを改良するためのジパルミトステアリン酸グリセロールの使用 | |
| WO2003088946A1 (en) | Polymer compositions that stabilize and control the release of formaldehyde-treated vaccine antigens |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20140217 |