CZ296252B6 - D-Proliny, zpusob jejich výroby a pouzití a lécivo s jejich obsahem - Google Patents

D-Proliny, zpusob jejich výroby a pouzití a lécivo s jejich obsahem Download PDF

Info

Publication number
CZ296252B6
CZ296252B6 CZ0346398A CZ346398A CZ296252B6 CZ 296252 B6 CZ296252 B6 CZ 296252B6 CZ 0346398 A CZ0346398 A CZ 0346398A CZ 346398 A CZ346398 A CZ 346398A CZ 296252 B6 CZ296252 B6 CZ 296252B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
carboxylic acid
pyrrolidine
mmol
carboxypyrrolidin
acetyl
Prior art date
Application number
CZ0346398A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ346398A3 (cs
Inventor
Hertel@Cornelia
Hoffmann@Torsten
Jakob-Roetne@Roland
David Norcross@Roger
Original Assignee
F. Hoffmann-La Roche Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F. Hoffmann-La Roche Ag filed Critical F. Hoffmann-La Roche Ag
Publication of CZ346398A3 publication Critical patent/CZ346398A3/cs
Publication of CZ296252B6 publication Critical patent/CZ296252B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/12—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/56—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D419/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D419/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Abstract

D-Proliny obecných vzorcu I-A a I-B, kde R je skupina SH, benzylskupina nebo fenylskupinu, poprípade substituovaná hydroxyskupinou nebo nizsí alkoxyskupinou, nebo 2-karboxypyrrolidinoskupina, R.sup.1.n. je vodík nebo halogen, X je -(CH.sub.2.n.).sub.n.n.-, -CH(R.sup.2.n.)(CH.sub.2.n.).sub.n.n.-, -CH.sub.2.n.O(CH.sub.2.n.).sub.n.n.-, -CH.sub.2.n.NH-, benzyl, -C(R.sup.2.n.)=CH-, -CH.sub.2.n.CH(OH)-nebo thiazol-2,5-diyl, Y je -S-S-, -(CH.sub.2.n.).sub.n.n.-, -O-, -NH-, -N(R.sup.2.n.)-, -CH=CH-, -NHC(O)NH-, -N(R.sup.2.n.)C(O)N(R.sup.2.n.)-, -N[CH.sub.2.n.C.sub.6.n.H.sub.3.n.(OCH.sub.3.n.).sub.2.n.]-, -N(CH.sub.2.n.C.sub.6.n.H.sub.5.n.)-, -N(CH.sub.2.n.C.sub.6.n.H.sub.5.n.)C(O)N(CH.sub.2.n.C.sub.6.n.H.sub.5.n.)-, -N(alkoxyalkyl)-, -N(cykloalkylmethyl)-, 2,6-pyridyl, 2,5-furanyl, 2,5-thienyl, 1,2-cyklohexyl, 1,3-cyklohexyl, 1,4-cyklohexyl, 1,2-naftyl, 1,4-naftyl, 1,5-naftyl, 1,6-naftyl, bifenyl nebo 1,2-fenylen, 1,3-fenylen a 1,4-fenylen, kde fenylenové skupiny jsou poprípade substituovány, X' je -(CH.sub.2.n.).sub.n.n.-, -(CH.sub.2.n.).sub.n.n.CH(R.sup.2.n.)-, -(CH.sub.2.n.).sub.n.n.OCH.sub.2.n.-, -NHCH.sub.2.n.-, benzyl, -CH=C(R.sup.2.n.)-, -CH(OH)CH.sub.2.n.- nebo thiazol-2,5-diyl, R.sup.2.n. je nizsí alkyl, nizsí alkoxy nebo benzyl a n je 0 az 3, a prívlastek "nizsí" znamená, ze skupina obsahuje 1 az 4 atomy uhlíku; a jejich farmaceuticky vhodné soli a jejich monoestery a diestery s nizsím alkylovým nebo fenolickým zbytkem v esterové cásti. Zpusob jejich výroby a pouzití a lécivo pro lécení amyloidózy s jejich obsahem.

Description

D-Proliny, způsob jejich výroby a použití a léčivo s jejich obsahem
Oblast techniky
Vynález se týká D-prolinů, způsobu jejich výroby a použití a léčiva s jejich obsahem.
Dosavadní stav techniky
Sloučeniny dále uvedeného obecného vzorce I-B, kde R je -SH, R1 je vodík a X je -(CH2)nnebo -CH(R2)CH2-, přičemž R2 znamená alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo benzylskupinu, a n znamená číslo 1 až 3 jsou známé z DE 27 03 828 a WO 97/10 225, jakožto inhibitory enzymu konvertujícího angiotension nebo antibakteriální činidla. Tyto sloučeniny jsou z nárokovaného rozsahu vyloučeny uvedením omezující výhrady.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou D-proliny obecných vzorců I-A a I-B
nebo (l-A)
kde
R je skupina SH, benzylskupina nebo fenylskupina, popřípadě substituovaná hydroxyskupinou nebo nižší alkoxyskupinou, nebo skupina vzorce
R1 je vodík nebo halogen,
X je -(CH2)n-, -CH(R2)(CH2)n-, -CH2O(CH2)n-, -CH2NH-, benzyl, -C(R>CH-CH2CH(OH)~ nebo thiazol-2,5-diyl,
Y je -S-S-, -(CH2)„- -Ο-, -NH-, -N(R2)-, -CH=CH- -NHC(O)NH-, -N(R2)C(O)N(R2)-N[CH2C6H3(OCH3)2]-, -N(CH2C6H5)-, -N(CH2C6H5)C(O), -N(alkoxyalkyl)-N(cykloalkylmethyl)-, 2,6-pyridyl, 2,5-furanyl, 2,5-thienyl, 1,2-cyklohexyl, 2,6-pyridyl,
2,5-furanyl, 2,5-thienyl, 1,2-cyklohexyl, 1,3-cyklohexyl, 1,4-cyklohexyl, 1,2-naftyl,
1,4-naftyl, 1,5-naftyl, 1,6-naftyl, bifenyl nebo 1,2-fenylen, 1,3-fenylen a 1,4—fenylen, kde fenylenové skupiny jsou popřípadě substituovány jedním až čtyřmi substituenty vybranými z halogenu, nižší alkylskupiny, nižší alkoxyskupiny, hydroxyskupiny, karboxyskupiny,
-1 CZ 296252 B6
-COO-nižší alkylskupiny, nitriloskupiny, 5-tetrazolové skupiny, (2-karboxypyrrolidin-lyl)-2-oxoethoxyskupiny, N-hydroxykarbamimidoylskupiny, 5-oxo-[ 1,2,4]oxadiazolylskupiny, 2-oxo-[l ,2,3,5]oxathiadiazolylskupiny, 5-thioxo-[l,2,4]oxadiazolylskupiny a 5-íerc-butylsulfanyl-[l,2,4]oxadiazolylskupiny,
X' je -(CH2)n-, -(CH2)nCH(R2)-, -(CH2)nOCH2-, -NHCH2-, benzyl, -CH=C(R2)-, -CH(OH)CH2- nebo thiazol-2,5-diyl,
R2 je nižší alkyl, nižší alkoxy nebo benzyl a n je 0 až 3, a přívlastek „nižší“ znamená, že skupina obsahuje 1 až 4 atomy uhlíku;
přičemž když ve vzorci I-B R znamená SH a R1 je vodík, potom X neznamená -(CH2)n- nebo -CH(R2)-CH2-, kde R2 představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo benzylskupinu, a n je číslo 1 až 3;
a jejich farmaceuticky vhodné soli a jejich monoestery a diestery s nižším alkylovým nebo fenolickým zbytkem v esterové části.
Předmětem vynálezu je dále také způsobu výroby D-prolinů podle definovaných výše, jehož podstata spočívá v tom, že zahrnuje
a) odštěpení chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce III nebo IV
kde R, R1, X, Ya X' jsou popsány v nároku 1 a R3 je chránící skupina, čímž se získá sloučenina vzorce I-A nebo I-B, a v případě potřeby
b) převedení sloučeniny obecného vzorce I-A nebo I-B na farmaceuticky použitelnou sůl nebo na její monoester nebo diester definovaný v nároku 1.
Předmětem vynálezu jsou dále také D-proliny definované výše pro použití jako terapeuticky aktivní látky, zejména proti centrálním a systemickým formám amyloidózy.
Konečně je předmětem vynálezu také použití D-prolinů definovaných výše, včetně těch D-prolinů obecného vzorce I-B, kde R znamená SH, R1 je vodík, X znamená -(CH2)n- nebo -CH(R2)-CH2-, kde R2 představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo benzylskupinu, a n je číslo 1 až 3, pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci centrálním a systemických forem amyloidózy.
Sloučeniny vzorců I-A nebo I-B mohou obsahovat 4 nebo 2 asymetrické atomy uhlíku.
V souhlase s tím předložený vynález zahrnuje všechny stereoizomerní formy sloučenin vzorce I-A nebo I-B včetně každého z jednotlivých enantiomerů a jejich směsí.
-2CZ 296252 B6
Bylo překvapivě zjištěno, že D-proliny vzorce I-A a Ι-Β mohou být použity při léčení nebo prevenci všech forem centrální a systemické amyloidózy, což je porucha metabolizmu proteinů, při níž normálně rozpustné autologní proteiny se ukládají v tkáních jako abnormálně nerozpustné fibrily, které vyvolávají strukturní a funkční trhliny. Nejběžnější poruchy spojené s amyloidózou jsou Alzheimerova choroba (AD), diabetes vzniklý v dospělosti nebo amyloidóza
- jako významná příčina neischemického selhání srdce,
- jako komplikace dlouhodobé hemodialýzy při selhání ledvin,
- jako komplikace monoklonální gamopathie, z chronických zánětlivých poruch,
- z chronických infekcí nebo z různých typů rakoviny.
Dále amyloidóza zahrnuje mnoho rozdílných chorob, jako jsou formy dědičné amyloidózy nejběžnější familiární amyloidní polyneuropathie (FAP), svrbivku a Kreuzfeld-Jakobovu nemoc.
Běžný patologický rys je extracelulární uložení tzv. amyloidních proteinů v b-strukturovaných vláknech a stejné barvicí charakteristiky.
Sérová amyloidní P komponenta (SAP) je normální plazmový protein a prekurzor amyloidní komponenty, univerzální složky abnormálních tkáňových uloženin při amyloidóze. Je rezistentní vůči proteázám a tudíž hraje klíčovou roli při perzistenci amyloidu in vivo. Pro terapii farmaceuticky aktivních sloučenin se musí zjistit, které by zabránily interakci SAP s amyloidními fibrilami. Tato interakce jak bylo demonstrováno, je interakcí proteinového vlákna spíše než interakcí s obecnějšími vláknitými složkami jako jsou glykosaminoglykany.
SAP sestává jako pentamer z 5 identických nekovalentně spojených subjednotek. Dva penamery se mohou nekovalentně spojit do dekameru s dvěma pentamemími diskovitými kruhy působícími čelem k sobě. SAP je na vápníku závislý ligandový vazební protein. Vytváří se a degraduje exkluzivně v hepatocytech a je extrémně stabilní mimo játra.
Participace SAP v patogenezi amyloidu in vivo potvrzuje, že inhibice vazby k amyloidním fibrilám je atraktivním terapeutickým cílem v oblasti vážných lidských nemocí.
Předmětem předloženého vynálezu jsou výše uvedené sloučeniny vzorce I-A a I-B a jejich soli a estery jako takové a jako terapeuticky účinné látky, jejich výroba a jejich použití pro terapeutické účely a případně pro produkci odpovídajících léčiv stejně jako léčiv obsahujících sloučeninu vzorce I-A a I-B nebo její sůl a produkce těchto léčiv pro uvedený účel.
Výraz „nižší alkyl“ se týká nerozvětvených nebo rozvětvených nasycených uhlovodíkových zbytků, výhodně s jedním až čtyřmi atomy uhlíku jako je methyl, ethyl, propyl, izopropyl, n-butyl, 2butyl, izobutyl a Zerc-butyl.
„Halogen“ znamená chlor, jod, fluor a brom.
Sloučeniny vzorce I-A a I-B mohou tvořit soli s kovy například soli s alkalickými kovy jako je sodík nebo draslík nebo soli s kovy alkalických zemin jako jsou vápenaté nebo hořečnaté soli s organickými bázemi, například soli s aminy jako je N-ethylpiperidin, prokain nebo dibenzylamin nebo soli se základními aminokyselinami jako jsou soli s argininem nebo lysinem. Tyto soli mohou být vytvořeny a izolovány postupy dobře známými v dosavadním stavu techniky.
Sloučeniny mohou být také použity v esterové formě, přičemž tyto estery mohou být alifatické nebo aromatické jako jsou například alkylestery a fenolické estery. Nejvýhodnější estery jsou alkylestery odvozené od Cj^alkanolů, zejména methylestery a ethylestery.
-3CZ 296252 B6
Sloučeniny vzorců I-A a I-B mohou být také použity ve formě jejich předléčiv buď v jedné, nebo obou karbonylových funkcích. Příklady jsou estery, intramolekulámí estery, fosfátové estery, podvojné estery, glykolamidové estery, glyceridové konjugáty, dihydropyridinové deriváty nebo 8-(hydroxymethyl)-l-naftylmethyldisulfídové estery. Předléčiva mohou přidat hodnotu předložených sloučenin výhodnou při absorpci, farmakokinetice při distribuci a transportu do mozku. (WO 9514705, H. Bundgaard a j., Drugs of the Future, 16, 443, 1991, A. N. Saab a j., Pharmaceutical Science, 79, 802, 1990, D. M. Lambert a j., Current Medical Chemistry 1, 376, 1995).
Výhodné jsou sloučeniny vzorce I-A. Zvlášť výhodné sloučeniny vzorce I-A v rozsahu tohoto vynálezu jsou ty, kde X je CH(R2)(CH2)n- a kde R2 je methyl nebo methoxy a n je 0 nebo 1.
Dále jsou uvedeny příklady takovýchto sloučenin.
(R)-l-[(S)-3-~[(S)-3-[(R)-2~Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-methyl-3-oxopropyldisulfanyl]-2methylpropionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[8-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2,7-dimethyl-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[8-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2,7-dimethoxy-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethyl-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (směs tří diastereomerů).
Zvlášť výhodné jsou také sloučeniny, v nichž X je -(CH2)n- a n je 0 nebo 1. Takovéto sloučeniny jsou (R)-l-[7-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-7-oxoheptanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[5-[(R-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]ureido]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)~ 1 -[[benzyl-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethyl] amino] acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina, (R)-1 -[cis-4-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -karbonyl] cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-1 -[ [3-[(R-2-karboxypyrrolidin-l -yl]-2-oxoethyl]fenyl] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina.
Výhodné jsou další sloučeniny vzorce I-A, kde X je -CH2-4CZ 296252 B6
Příklady takovýchto sloučenin jsou následující:
(R)-1 -[ [2-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy] fenoxy] acetyl]pyrrolidin--2-karboxylová kyselina, (R)-1 -[ [4—[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy] fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-2-methoxyfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]”2-methylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina a (R)-1 -[[5-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]naftalen- 1-yloxy] acetyljpyrrolidin-2-karboxylová kyselina.
Dále jsou výhodné sloučeniny, ve kterých Xje-CH2NH. Příkladem takovéto sloučeniny je (R)-1 -[[4-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethylamino] fenylamino] acetyl]pyrrolidin2-karboxylová kyselina.
Dále jsou výhodné sloučeniny, ve kterých X je -CH2CH(OH)-. Taková sloučenina je například (2E,4E)-(R)-l-[6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethyl-6--oxohexa-2,4-dienoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina.
Výše zmíněné sloučeniny vzorce I-A a I-B mohou být vyrobeny podle vynálezu
a) převedením sloučeniny vzorce II μη ,0
na sloučeninu vzorce I-B-I .0
SH
O
-5CZ 296252 B6 a pak na sloučeninu vzorce I-A-l
kde R1, X a X' mají výše uvedené významy a R2 je nižší alkyl, nebo
b) zpracováním sloučeniny vzorce VIII
se sloučeninou vzorce V
na sloučeninu vzorce I-A odštěpením chránící skupiny, kde X, Y a X' mají výše uvedené významy a R4 je hydroxid nebo halogen
c) reakcí sloučeniny vzorce IX
s aminem vzorce nh2r5
-6CZ 296252 B6 a odštěpením chránící skupiny ze sloučeniny vzorce XI
kde R1 a R3 mají výše uvedené významy a R5 je vodík, nižší alkyl, nižší alkoxy, benzyl, nižší alkoxyalkyl, cykloalkylmethyl nebo -CH2C6H3(OCH3)2, nebo
d) reakcí sloučeniny vzorce V se sloučeninou vzorce XV
a odštěpením chránící skupiny sloučeniny vzorce XVI
kde R1, R3 a X mají výše uvedené významy, nebo
e) reakcí sloučeniny vzorce XV se sloučeninou vzorce XVII
a odštěpením chránící skupiny sloučenin vzorce
kde R1, R3 a X mají výše uvedené významy a R7 je halogen, nižší alkyl, nižší alkoxy, hydroxy, karboxy, -COO-nižší alkyl, nitrilo, 5-tetrazol, (2-karboxylová kyselma-pyrrolidin-l-yl)-2oxoethoxy, N-hydroxykarbamimidoyl, 5-oxo-[l,2,4]oxadiazolyl, 2-oxo-[ 1,2,3,5]oxathiadiazolyl, 5-thioxo-[ 1,2,4]oxadiazolyl a 5-/erc-butylsulfanyl-[l,2,4]oxadiazolyl a m je 0 - 4, nebo
f) odštěpením chránící skupiny ze sloučeniny vzorců III a IV
kde R, R1, X, Y a X' mají výše uvedený význam a R3 je chránící skupina, čímž se získá sloučenina vzorce I-A nebo I-B a když je třeba převedením sloučeniny obecných vzorců I-A a I-B na farmaceuticky využitelné soli nebo na monoester a diester.
Podle postupu varianta a) se sloučenina vzorce I-A-l získá převedením sloučeniny vzorce II například l-[(S)-3-acetylsulfanyl-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny na sloučeninu vzorce I—B—1 a pak na sloučeninu vzorce I-A-l.
-8CZ 296252 B6
Reakce se vhodně provádí pod inertní atmosférou při teplotě místnosti v přítomnosti amoniaku v rozpouštědle jako je methanol. Po míchání po dobu asi 2 hodin se sloučenina oddělí a následně může být reakční produkt zpracován na požadovaný čistý produkt pomocí obecně obvyklých postupů.
Sloučeniny vzorce I-A-l se získají mícháním výše uvedené sloučeniny v roztoku CuSO4 ve vodě při teplotě místnosti. Přesné reakční podmínky jsou popsány detailněji v příkladech provedení vynálezu.
Podle reakční varianty b) se chráněný D-prolin zpracuje s odpovídající dikarboxylovou kyselinou nebo s odpovídajícím acetylhalogenidem při 0 °C.
Výhodné jsou následující dikarboxylové kyseliny:
2.4- dimethylglutarová kyselina, 2,3-dimethyljantarová kyselina, cyklohexan-1,4-dikarboxylová kyselina, cyklohexan-1,3-dikarboxylová kyselina, cyklohexan-1,2-dikarboxylová kyselina,
1.4- fenylendioctová kyselina, 1,3-fenylendioctová kyselina, benzen-1,4-diová kyselina, benzen-l,3-diová kyselina, pyridin-2,6-dikarboxylová kyselina, thiofen-2,5-dikarboxylová kyselina, furan-2,5-dikarboxylová kyselina, adipová kyselina, 1,4—fenylendioctová kyselina, 1,2fenylendioctová kyselina, (4-karboxymethylnaftylen-l-yl)octová kyselina, (6-karboxymethylpyridin-2-yl)octová kyselina, (5-karboxymethylthiofen-2-yl)octová kyselina, 2,5-dimethoxyhexandiová kyselina, 2,5-dibenzyl-hex-3-endiová kyselina nebo 2,5-diizopropylhex-3-endiová kyselina. Detailní postup je popsán v příkladech v obecném postupu A.
Reakční varianta c) popisuje zpracování aminu například propylaminu, cyklopropylmethylaminu, methoxyethylaminu, benzylaminu nebo veratrylaminu se sloučeninou vzorce IX. Tato reakce se provádí při teplotě 20 až 80 °C v rozpouštědle jako je acetonitril.
Podle varianty d) se připraví sloučenina vzorce I-B. Ke sloučenině vzorce XV v dichlormethanu při 0 °C se přidá odpovídající bromacetylový derivát jako je bromacetylbromid a sloučenina vzorce V. Deprotekce se provede postupy známými v dosavadním stavu techniky.
Sloučeniny, ve kterých Y je případně substituován 1,2-, 1,3- nebo 1,4-fenylenovou skupinou, mohu být připraveny podle reakční varianty e). Ke sloučenině vzorce XV se přidá odpovídající dihydroxyderivát vzorce XVII. Reakce se provádí v dimethylformamidu při teplotě místnosti. Výhodné jsou následující dihydroxyderiváty: hydrochinon, tetrafluorhydrochinon, chlorhydrochinon, methoxyhydrochinon, resorcinol, 2,6-dihydroxytoluen, 5-methoxyresorcinol, 3,5—dihydroxybenzoát, 3,5-dihydroxybenzonitrol, floroglucinol, pyrogallol-l-methylether, 3-methylkatechol, tetrachlorkatechol, 2,6-dihydroxynaftalen, 1,5-dihydroxynaftalen, 2,3-dihydroxynaftalen, 2,2'-dihydroxybifenyl, 1,4-naftochinon nebo 2,7-dihydroxynaftalen.
Podle postupové varianty f) se sloučenina III nebo IV deprotektuje na sloučeninu obecného vzorce I-A nebo I-B. Vhodné chránící skupiny a postupy pro jejich odštěpení jsou dobře známy kterémukoli odborníku v oboru, ačkoli ovšem mohou být použity jen ty chránící skupiny, které mohou být odštěpeny postupy za takových podmínek, za kterých jiné strukturální prvky nejsou ovlivněny. Terc-butylová skupina a benzylová skupina jsou výhodnými O-chránicími skupinami. Postup se provádí konvenčním způsobem. Například sloučenina vzorce III se rozpustí ve vhodném rozpouštědle nebo směsi rozpouštědel jako je ethanol a ethylacetát a hydrogenuje se v přítomností Pd na uhlíku při teplotě místnosti a atmosférickém tlaku.
Farmaceuticky akceptovatelné soli a estery mohou být vyráběny postupy, které jsou o sobě známy a jsou běžné pro odborníky v oboru.
-9CZ 296252 B6
Ve schématech 1 až 9 jsou popsány postupy pro přípravu sloučenin vzorců I-A a I-B, přičemž se vychází ze známých sloučenin nebo ze sloučenin, které mohou být připraveny konvenčním způsobem.
Výchozí látky vzorců V, VI, VIII, IX, X, XII, XIV, XVII, XX a XXIV jsou komerčními produkty nebo mohou být připraveny postupy o sobě známými.
Příprava sloučenin vzorců I-A a I-B je popsána detailněji v příkladech provedení 1 až 104.
o
Schéma 1
(I-A-l) kde R1, X a X' mají výše uvedené významy, R2 je nižší alkyl a R3 je chránící skupina.
- 10CZ 296252 B6
Schéma 2
kde X, Y a X' mají výše uvedené významy a R4 je hydroxy nebo halogen.
Schéma 3
kde R1 a R3 mají výše uvedené významy a R4 je vodík, nižší alkyl, nižší alkoxy, benzyl, nižší alkoxyalkyl, cykloalkylmethyl nebo -CH2C6H3(OCH3)2;
-11 CZ 296252 B6
Schéma 4
kde R1, R3, X a X' mají výše uvedené významy a R6 je vodík, nižší alkyl, nižší alkoxy nebo benzyl.
Schéma 5
kde R1, R3 a X mají výše uvedené významy.
- 12 CZ 296252 B6
Schéma 6
kde R1, R3 a X mají výše uvedené významy a R7 je halogen, nižší alkyl, nižší alkoxy, hydroxy, karboxy, -COO-nižší alkyl, nitrilo, 5-tetrazol, (2-karboxylová kyselina-pyrrolidin-l-yl)-25 oxoethoxy, N-hydroxykarbamimidoyl, 5-oxo-[l,2,4]oxadiazolyl, 2-oxo[l,2,3,5]oxathiadiazolyl, 5-thioxo-[l,2,4]oxadiazolyl, a 5-/erc-butylsulfanyl-[l,2,4]oxadiazolyl, a m je 0 až 4.
Schéma 7
kde R1, R3, R5, X a X' mají výše uvedené významy.
-13 CZ 296252 B6
Schéma 8
kde R1 a R2 mají výše uvedené významy.
Schéma 9
(XXIV)
(XXVI) kde R3 má výše uvedený význam.
Příprava následujících příkladných sloučenin je popsána detailněji:
- 14CZ 296252 B6
X Y X’ R R' příklad
-ČH-CHj- -s-s- -CHj-ČH- - H ld
1 -CH-CH,- - - SH H lc
I -CH-CH,- -s-s- I -CHj-CH- - H 2c
-ch-ch2- - - SH H 2b
-(CHjJr -s-s- -(ch2)j- H 3
-(CH2)3- -CHj- H 4b
-CH(CH3)CH2- -(CH2)j- -CH2CH(CH3)- - H 5
CH(OCH3)CH2 -(CH2)2- -CH2CH(OCH3)- H 6b
-(CH2)2- -ch2- ‘(CHj)j- H 7
-ch2- -(CH2)j- -ch2- H 8b (R)*(R)
-ch2- -CHj- -CHj- H 9b
-ch2- vaz bii -ch2- H 10b
-CH2O(CH2)r -O- -(CH2)2OCH2- H 11
-(CHŽ)2- -o- •(ch2)2. H 12
-CHj- -o- -ch2- H 13 (R),(R)
-ch2o- -och3- - Η 14b (R),(R)
-(ch2)2- A -(CHj)j- - H 15c
-(CH2)2- -N[(CHj)2CH3]- -(CHj)j- - H 16c
-ch2- -NHC(O)NH- -ch2- w H 17c
-(CH2)3- -(CH2)2- -(CHj)3- H 18
- 15 CZ 296252 B6
-(CH2)2- -<CH2)r -(CH2)2- - H 19
vazba β - H 20b
-ch2- - - H 21d
-CHjO- -O- -OCHj- H 22b
-CH2O- -K- -OCHj- - H 23b
-CH2O- A •OCHj- - H 24b
-ch2o- A -OCHr - H 25b
-ch2o- - - A H 26b
-ch2o- A -OCHr - H 27b
-ch2o- A H 28b
-ch2o- -OCHj- - H 29b
-ch2o- Λ -OCH,- - H 30b
-ch2o- A -OCHr - H 31b
-ch2o- ογβ” A -OCHr - H 32
-ch2o- A -OCHj- - H 33b
-ch2o- f \ A -OCHj- - H 34
-16CZ 296252 B6
-ch2o- OH A -och2- - H 35b
-ch2o- ζ?γ0Η A -och2- - H 36b
-ch2o- OH 4γ*ι A -och2- - H 37b
-ch2o- A -och2- - H 38b
-ch2o- o o-s; Νχ,ΝΗ A -och2- - H 39b
-ch2o- Z p-< -och2- - H 40b
-ch2o- Q-°' _ZN_ -och2- - H 41b
-ch2o- -och2- - H 42b
-ch2o- Cl Ci -OCHr H 43b
-ch2o- XXX -ogh2- - H 44b
-ch2o- άφ -och2- H 45b
-ch2o- O \z -och2- H 46b
-17CZ 296252 B6
-ch2o- & -och2- H 47b
-ch2o- -och2- H 48b
-ch2o- XXX -och2- H 49b
-ch2nh- A -nhch2- - H 50b
-ch2nh- -o- -nhch2- H 51b
-ch2- -N[(CH2)3CH3]- -ch2- - H 52b
-CHr -N[(CH2)2OCH3]- -ch2- - H 53b
-CHj- -N(CH2C5Hs)- -ch2- H 54b
-CHr -Ň[(CH2)3CH3J- CO-N[(CH2)3CH3]- -ch2- - H 55c
-CH2- -N[CH2C6Hs]- CO-N[ CH2CsH5]- -ch2- - H 56c
-ch2nh- benzyl H 57
-CH(CHj)- -ch2- -CH(CHj)- H 58b
-CH(CHj)- vazba -CH(CHj)- H 59b
vazba ..... vazba - H 60b
vazba -O- vazba - H 61b
vazba A vazba - H 62b
vazba A vazba - H 63b
-CH2- OH V OH -ch2- - H 64b
- 18CZ 296252 B6
-ch2- A -ch2- - H 65b
vazba <A vazba H 66b
vazba A vazba - H 67b
vazba Χλ vazba - H 68b
vazba vazba - H 69b
vazba ΛΚ vazba - H 70b
-ch2- -CH2- -CHr H 71b (S),(S)
-ch2- ~o~ -ch2- H 72b (S),(S)
-ch2o- A -och2- - H 73b (S),(S)
-ch2- -ch2- - H 74d
-ch2- Xk -CH,- - H 75d
-ch2- -ch2- - H 76e
/ 0 -ČH· -(CH2)2- Z o Ah- - H 77d
o' -Ah -<CH2)2- ox -Ah - H 78f
o' •Ah -(CH2)2- o' -Ah - H 79 2 diastereomer.y
CH(CH2C6H5) -(CH2)2- -CH(CH2C6H5)- - H 80d
-CH[(CH2)4J- -(CH2)r -CH[(CH2)4J- H 81d
-CH[(CH2)4]- -(CH2)2- -CH[(CH2)J- - H 82 2 diastereomeiy
-CH(i-prop.)- -(ch2)2- -CH(i-prop.)- H 83d
- 19CZ 296252 B6
-CH[(CH2)2O ch3j- ’(ch2)2- -CH[(CH2)jOCH3]- - H 84d
-CH(CH3)- -O- -CH(CHj) - - H 85e 3 díastereomeiy
-C(CH3)=CH- vazba -CH=C(CH3)- H 86b
-CH(CH3)- -(CH2)2- -CH(CH3)- H 87
-CHíCH(OH)- vazba -CH(OH)CH2- H 88c
-ch2- -CH=CH- -ch2- H 89b
-(CH2)j- -N[(CH2)2CH3]- -(CH2)2- - H 90c
-(CH2)2- -N(CHjcyklopropyl)- -(CH,)2- H 91b
-(ch2)2- -N[CH2C6H3(OCH3)2]- -(CH2)2- - H 92c
-(CH2)2- -N[CH2)2OCH3J- -(CH2)2- - H 93b
’(CH2)2- -N(CH2C6Hs)- -(CH2)2- H 94b
-(CH2)2- -NH- -(ch2)2- H 95c
-(CH2)2- -N(CH2CH3)- -(CH2)2- H 96
-(CH2)2- -N{CH2C6H4CF3]- -(CH2)2- - H 97
-ch2- -(ch2)2- -ch2- H 98c (R),(S)
-ch2- -(CH2)2- -CHj- H 99c
-CHr -(ch2)2- -CH2- F lOOe
-ch2o- A -och2- - F 101b
-ch2- -O- -CHj- F 102b
-ch2- -(CH2)2- -CHj- - H, var. 103f
-ch2o- A -OCHj- H, vaz. 104b
-20CZ 296252 B6
Jak bylo uvedeno dříve, sloučeniny obecného vzorce I-A a I-B podle vynálezu mají významné farmakologické vlastnosti. Mohou být použity proti všem formám centrální a systemické amyloidózy, což je porucha metabolizmu proteinů, při které normálně rozpustné autologní proteiny se ukládají v tkáních jako abnormální nerozpustné fibrily, které vyvolávají strukturální a funkční poškození.
Sloučeniny vzorce I-A a I-B byly testovány následující metodou:
Testovací metoda
Vazba SAP (sérový amyloid P) na lidské amyloidní Αβ(1-42) fibrily
Nunc Fluoro Polysorp 96 důlkové plotny byly pokryty 0,5 mikrogramy/důlek Αβ1-42, které byly ponechány uležet po dobu 7 dní při 37 °C. Plotny byly sušeny po dobu 3 dnů při teplotě 37 °C, promyty dvakrát 150 mikrolitry TC (10 mM tris, 138 mM NaCl, 6mM CaCl2, 0,05%NaN3, pH 8,0) s 1 % bovinního sérového albuminu. Pak bylo přidáno 50 mikrolitrů TC obsahujícího 8 % bovinního sérového albuminu, 25 mikrolitrů sloučeniny v TC a 25 mikrolitrů 40 nM [1251] sérového amyloidního proteinu v TE (10 mM EGTA místo Ca) na důlek. Inkubace byla prováděna přes noc při teplotě místnosti a důlky byly promyty dvakrát 180 mikrolitry TC obsahujícího 1 % bovinního sérového albuminu. K určení radioaktivity bylo přidáno 100 mikrolitrů Microscintu 40 na důlek a radioaktivita byla měřena vToCount (Packard). IC50 (mikroM) výhodných sloučenin vzorce I-A a I-B jsou v rozmezí asi 0,2 až 2,0.
Sloučeniny vzorce I-A a I-B a jejich farmaceuticky akceptovatelné adiční soli s kyselinami, jejich monoestery a diestery a jejich cyklické imidy mohou být použity jako léčiva, například ve formě farmaceutických přípravků.
Farmaceutické přípravky mohou být podávány orálně, například ve formě tablet, povlečených tablet, dražé, tvrdých a měkkých želatinových tobolek, roztoků, emulzí nebo suspenzí. Podávání může však být prováděno také rektálně, například ve formě čípků, parenterálně, například ve formě injekčních roztoků nebo nasálně.
Pro výrobu farmaceutických přípravků mohou být sloučeniny vzorců I-A a I-B a jejich farmaceuticky akceptovatelné soli s kyselinou a jejich estery zpracovány s farmaceuticky inertními anorganickými nebo organickými nosiči. Laktóza, kukuřičný škrob nebo jeho deriváty, talek, kyselina stearová nebo její soli a podobně mohou být použity například jako takové nosiče pro tablety, povlečené tablety, dražé a tvrdé želatinové tobolky. Vhodné nosiče pro měkké želatinové tobolky jsou například rostlinné oleje, vosky, tuky, polotuhé a kapalné polyoly a podobně. V závislosti na původu aktivní látky žádné nosiče nejsou však obvykle vyžadovány v případě měkkých želatinových tobolek.
Vhodné nosiče pro výrobu roztoků a sirupů jsou například voda, polyoly, glycerol, rostlinné oleje a podobně. Vhodné nosiče pro čípky jsou například přírodní nebo ztužené oleje, vosky, tuky, polokapalné nebo kapalné polyoly a pod.
Farmaceutické přípravky mohou navíc obsahovat konzervační látky, solubilizační prostředky, stabilizátory, smáčecí prostředky, emulgátory, sladidla, barviva, ochucovadla, soli pro změnu osmotického tlaku, pufry, povlakové prostředky nebo antioxidanty. Mohou také obsahovat ještě jiné terapeuticky hodnotné látky.
Léčiva obsahující sloučeninu vzorců I-A nebo I-B nebo její farmaceuticky akceptovatelnou adiční sůl s kyselinou nebo její monoestery a diestery a terapeuticky inertní nosič jsou také předmětem předloženého vynálezu stejně jako způsob jejich výroby, který zahrnuje přivedení jedné nebo více sloučenin vzorce I-A a I-B a/nebo farmaceuticky akceptovatelných adičních solí
-21 CZ 296252 B6 s kyselinou ajejich monoesterů a diesterů do galenické podávači formy společně s jedním nebo více terapeuticky inertním nosiči.
Podle vynálezu sloučeniny obecného vzorce I-A a I-B stejně jako jejich farmaceuticky akceptovatelné adiční soli s kyselinou ajejich monoestery a diestery mohou být použity při léčení nebo prevenci centrální systemické amyloidózy. Nejběžnější poruchy spojené s amyloidózou jsou Alzheimerova nemoc (AD), diabetes vzniklá v dospělosti nebo amyloidóza
- jako významná příčina neischemického selhání srdce,
- jako komplikace dlouhodobé hemodialýzy při selhání ledvin,
- jako komplikace monoklonální gamopathie,
- z chronických zánětlivých poruch,
- z chronických infekcí, a
- z určitých typů rakoviny.
Dále amyloidóza zahrnuje mnoho různých nemocí jako jsou formy dědičné amyloidózy, nejběžnější familiární amyloidní polyneuropatie (FAP), svrbivky a Kreuzfeld-Jakobovy nemoci.
Dále předložený vynález může být použit pro výrobu odpovídajících léčiv. Dávkování může kolísat v širokých hranicích a bude ovšem vyhovovat jednotlivým požadavkům v každém příslušném případě. V případě orálního podávání dávkování leží v rozmezí asi 0,1 mg na dávku do asi 5 000 mg na den sloučeniny obecných vzorců I-A nebo I-B nebo odpovídajícího množství farmaceuticky akceptovatelné adiční soli s kyselinou nebo jejího monoesterů a diesterů, ačkoli horní limit může být také překročen, když se ukáže, že je to vhodné.
Příklady provedení vynálezu
Následující příklady znázorňují předložený vynález podrobněji. Avšak nejsou určeny žádným způsobem k omezení jeho rozsahu. Všechny teploty jsou uvedeny ve °C.
Příklad 1 (R)-l-[(S)-3-[(S)-3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-methyl-3-oxopropyldisulfanyl]-2methylpropionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Terc-butylester l-[(S)-3-(acetylsulfanyl)-20-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2karboxylové kyseliny a terc-butylester l-[(R)-3-(acetylsulfanyl)-20-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
18,6 ml triethylaminu bylo dáno při 0 až 5 °C do roztoku 23,3 g (135 mmol) íerc-butylesteru D-prolinu v 230 ml suchého dichlormethanu. Roztok 24,5 g (135 mmol) esteru S-(3-chlor-2methyl-3-oxopropyl)ethanthiové kyseliny ve 116 ml dichlormethanu byl přidán při této teplotě během 1 hodiny a míchání pokračovalo při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Sraženina byla odstraněna filtrací. Roztok byl promyt vodou a vysušen síranem sodným. Odpaření rozpouštědla při sníženém tlaku poskytlo 41,4 g bezbarvého oleje, který byl chromatografován na 4 kg silikagelu směsí ether/cyklohexan 2/1, čímž se získalo 19,6 g (46 %) Zerc-butylesteru l-[(R)-3(acetylsulfanyl)-20-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a 18,2 g (43,0 %) l-[(S)-3-(acetylsulfanyl)-20-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny také ve formě Zerc-butylesteru a 1,6 g směsi epimerů.
-22CZ 296252 B6
MS m/z (%) = 315 (M+, 3), 259(10), 242(10), 214(100), 172(10), 145(32), 70(22), [a]D = -0,7° (1% EtOH).
MS m/e (%) = 315 (M+, 4), 259(7), 242(9), 214(100), 172(9), 145(33), 70(33), [a]D = + 156,7° (1% EtOH).
b) l-[(S)-3-acetylsulfanyl-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
15,45 g (48,9 mmol) terc-butylesteru l-[(S)-3-(acetylsulfanyl)-20-methylpropionyl]-(R)pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny bylo mícháno s 99 ml trifluorové kyseliny a 55 ml anisolu pod argonem po dobu 3 hodin. Směs byla odpařena za vakua. Zbytek byl rozpuštěn v asi 100 ml ledově studeného ethylacetátu a promyt asi 200 ml ledově studeného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Pak byla přidána koncentrovaná chlorovodíková kyselina za chlazení ledem až do pH 1 až 2. Vodná fáze byla extrahována 4x ledově studeným ethylacetátem, vysušena síranem sodným a odpařena. Výtěžek byl 11,6 g (91 %) l-[(S)-3-acetylsulfanyl-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny, která byla použita bez dalšího čištění.
[a]D = —11,8° (1,6% EtOH).
c) 1 -[(S)-3-Merkapto-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin2-karboxylová kyselina
11,59 g (44,69 mmol) l-[(S)-3-acetylsulfanyl-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny bylo rozpuštěno při teplotě místnosti pod argonem v 70 ml argonem promytého methanolu. Po přidání 70 ml 10N amoniaku v methanolu pokračovalo míchání po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Pak bylo rozpouštědlo oddestilováno za vakua. Zbytek byl vyzvednut 5% vodným roztokem KHSO4 a extrahován 6x dichlormethanem. Organické vrstvy byly promyty 2x 5% vodným roztokem KHSO4, 3x IN kyselinou chlorovodíkovou a vysušeny nad síranem sodným. Odpaření rozpouštědla a krystalizace ze směsi ethylacetát/hexan poskytlo 6,25 g (64 %) 1[(S)-3-merkapto-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny s teplotou tání 99 až 101 °C.
[a]D = +40,7° (1% EtOH).
d) (R)-l-[(S)-3-[(S)-3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-methyl-3-oxopropyldisulfanyl]2-methylpropionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 749 mg (3,0 mmol) CuSO4 . 5H2O v 90 ml vody byl přidán při teplotě místnosti do roztoku 651,85 mg (3,0 mmol) l-[(S)-3-merkapto-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 90 ml dichlormethanu. Směs byla živě míchána po dobu 10 minut a zfiltrována. Vodná fáze byla promyta 5x dichlormethanem, organické fáze byly promyty solankou a vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědlo a bylo odstraněno za vakua. Krystalizace ze směsi dichlormethan/hexan poskytla 275,3 mg (43,0 %) (R)-l-[(S)-3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-lyl]-2-methyl-3-oxopropyldisulfanyl]-2-methylpropionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny s teplotou tání 142 až 144 °C.
[a]D = +42,8° (1% CHC13).
Příklad 2 (R)-l-[(R)-3-[(R)-3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-meťhyl-3-oxopropyldisulfanyl]-2methylpropionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
-23 CZ 296252 B6
a) l-[(R)-3-Acetylsulfanyl-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
18,9 g (60,0 mmol) terc-butylesteru l-(3-acetylsulfanyl-2-methylpropionyl)pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny bylo přidáno se 120 ml trifluorové kyseliny a 75 ml anisolu pod argonem po dobu 3 hodin. Směs byla odpařena za vakua. Zbytek byl rozpuštěn v ledově studeném ethylacetátu a promyt ledově studeným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Koncentrovaná kyselina chlorovodíková byla přidána za chlazení ledem až do pH 2 až 3.
Vodná fáze byla extrahována 3x ledově studeným ethylacetátem, vysušena síranem sodným a odpařena. Výtěžek byl 15,3 g (98 %) l-[(R)-3-acetylsulfanyl-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny, která byla použita bez dalšího čištění.
[a]D = +127,8° (1% EtOH).
b) 1 -[(R)-3-Merkapto-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
2,98 g (11,5 mmol) l-[(R)-3-acetylsulfanyl-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny bylo rozpuštěno při teplotě místnosti pod argonem v 15 ml argonem promytého methanolu. Po přidání 15 ml 10N amoniaku v methanolu míchání pokračovalo po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Pak bylo rozpouštědlo oddestilováno za vakua při teplotě místnosti. Zbytek byl vyzvednut 5%ním vodným roztokem KHSO4 a extrahován 6x dichlormethanem a 3x ethylacetátem. Organické vrstvy byly promyty 2x 5% vodným roztokem KHSO4, 3x IN chlorovodíkovou kyselinou a vysušeny nad síranem sodným. Odpaření rozpouštědla a krystalizace ze směsi ethylacetát/hexan poskytlo 1,59 g (64 %) l-[(R)-3-merkapto-2-methylpropionyl]-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny s teplotou tání 98 až 100 °C.
[a]D = +128,8° (1% EtOH).
c) (R)-l-[(R)-3-[(R)-3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-methyl-3-oxopropyldisulfanyl]2-methylpropionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Analogicky jako v příkladu ld).
MS m/s (%): 432(M+, 2), 217(100), 184(76), 172(67), 142(13), 70(79), 41(21).
Příklad 3 (R)--l-[3-[3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyldisulfanyl]propionyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
0,9 g (4 mmol) l-(3-merkaptopropionyl)-(R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (surová látka) bylo rozpuštěno v dichlormethanu a extrahováno 50 ml nasyceného vodného roztoku CuSO4. Vodná fáze byla extrahována 2x dichlormethanem, sloučené organické fáze zfiltrovány, vysušeny síranem hořečnatým a odpařeny. Chromatografíe směsí dichlormethan/aceton/kyselina mravenčí 80/20/1 poskytla 70 mg (R)-l-[3-[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyldisulfanyl]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
ISN-MS: 403 (M-H)“.
Příklad 4 (R)-l-[9-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-9-oxononanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
-24CZ 296252 B6
a) benzylester (R)-l-[9-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-9-oxononanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
0,97 g (4 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu v 25 ml dichlormethanu bylo mícháno s 450 mg (2 mmol) azelaoylchloridu a 1,2 ml (8 mmol) triethylaminu po dobu 20 hodin pod argonem při teplotě místnosti. Extrakce 2N chlorovodíkovou kyselinou a solankou, vysušení síranem sodným a odpaření poskytlo 1,2 g oleje, který byl chromatografován přes silikagel s acetoctanem, čímž se získalo 0,9 g (80 %) benzylesteru (R)-l-[9-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-9-oxononanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
'H-NMR (CDCIj, ppm): 1,1 - 2,4 (m, 22H), 3,4 - 3,7 (m, 4H), 4,4-4,6 (m, 2H), 5,1 - 5,3 (2.AB, 4H), 7,34 (m, 10H).
b) (R)-l-[9-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-9-oxononanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
100 mg (0,18 mmol) benzylesteru (R)-l-[9-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-9-oxononanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 20 ml ethanolu bylo hydrogenováno v přítomnosti 20 mg 5% Pd na uhlíku po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Filtrace a odpaření poskytly 60 mg (R)-1 -[9-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-9-oxononanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
ISP-MS: 383(MH+).
Příklad 5 (R)-l-[8-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2,7-dimethyl-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
1,2 g (5,0 mmol) 2,7-dimethyloktandioylchloridu bylo rozpuštěno ve 100 ml dimethylformamidu, a bylo přidáno 1,15 g (10 mmol) D-prolinu a 1,4 ml (10 mmol) triethylaminu a směs zahřívána na 50 °C po dobu 5 minut. Míchání pokračovalo při teplotě místnosti přes noc. Rozpouštědlo bylo oddestilováno a zbytek vyzvednut ve 30 ml 2N chlorovodíkové kyseliny. Extrakce ethylacetátem, vysušení síranem sodným, odpaření a chromatografíe přes silikagel pomocí směsi chloroform/aceton/kyselina mravenčí 80/15/5 poskytly 0,11 g (R)-l-[8-[(R)-2karboxypyrrolidin-l-yl]-2,7-dimethyl-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
ISP-MS: 397(MH)+.
Příklad 6 (R)-l-[8-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2,7-dimethoxy-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) benzylester (R)-l-[8-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2,7-dimethoxy-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do 0,25 g (1,1 mmol) 2,7-dimethoxyoktandiové kyseliny ve směsi 25 ml tetrahydrofuranu a 20 ml dichlormethanu byl přidán roztok 0,35 g (2,1 mmol) karbonyldiimidazolu v 15 ml tetrahydrofuranu. Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 hodin bylo přidáno 0,52 g (2,16 mmol)
D-prolinbenzylesterhydrochloridu v 10 ml dichlormethanu a 0,54 g triethylaminu a míchání pokračovalo po dobu 18 hodin.
-25 CZ 296252 B6
Po filtraci bylo rozpouštědlo oddestilováno a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu a extrahován 2N chlorovodíkovou kyselinou a vodou. Vysušení síranem sodným, odpaření rozpouštědla a chromatografíe přes silikagel pomocí ethylacetátu poskytlo 0,21 g benzylesteru (R)-l-[8-[(R)2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2,7-dimethoxy-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny j ako bezbarvý olej.
S-ISP: 609 (M+H)+.
b) (R)-l-[8-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2,7-dimethoxy-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
182 mg (0,3 mmol) benzylesteru (R) T [8 [(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin—l—yl]—2,7—dimethoxy-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 10 ml methanolu bylo hydrogenováno v přítomnosti 30 mg 5% Pd na uhlíku. Filtrace a odpaření rozpouštědla poskytly 109 mg (84 %) (R)-1 -[8-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2,7-dimethoxy-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
MS: 427 (M-H)“.
Příklad 7 (R)-l-[7-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-7-oxoheptanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Směs 0,99 g (5 mmol) pimeloylchloridu, 1,15 g (10 mmol) D-prolinu a 1,4 ml (10 mmol) triethylaminu v 100 ml dimethylformamidu bylo zahříváno až do získání čistého roztoku a pak mícháno přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo oddestilováno za vakua. Zbytek byl vyzvednut 2N chlorovodíkovou kyselinou a extrahován dichlormethanem. Odpaření rozpouštědla a chromatografíe přes silikagel směsí chloroform/aceton/kyselina mravenčí v poměru 80:15:5 poskytlo 0,27 g (R)-l-[7-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-7-oxoheptanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyseliny jako olej.
MS: 353 (M-H)”.
Příklad 8 (R)-1 -[6-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-l-[6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
0,97 g (10 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu v 70 ml dichlormethanu bylo mícháno s 0,92 g (5 mmol) adipoylchloridu a 2,8 ml (20 mmol) triethylaminu po dobu víkendu pod argonem při teplotě místnosti. Extrakce 2N chlorovodíkovou kyselinou a vodou, vysušení síranem sodným, odpařením a chromatografováním přes silikagel pomocí acetoctanu se získalo 0,42 g (16 %) benzylesteru (R)-l-[6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidm-2-karboxylové kyseliny.
MS-ISP: 521 (M+H)+.
b) (R)-l-[6-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
-26CZ 296252 B6
410 mg (0,79 mmol) benzylesteru (R)-l-[6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 100 ml methanolu bylo hydrogenováno v přítomnosti 50 mg 5% Pd na uhlíku. Filtrace a odpaření rozpouštědla poskytly 160 mg (59 %) (R)l-[6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylovou kyselinu jako bezbarvý olej.
MS: 339 (M-H)’.
Příklad 9 (R)-1 -[5-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-l-[5-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
0,97 g (10 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu v 70 ml dichlormethanu bylo mícháno s 0,85 g (5 mmol) glutaryldichloridu a 2,8 ml (20 mmol) triethyleminu přes noc pod argonem při teplotě místnosti. Extrakce 2N chlorovodíkovou kyselinou a solankou, vysušení síranem sodným, odpaření a chromatografie přes silikagel pomocí acetoctanu se získalo 0,44 g (17 %) benzylesteru (R)- 1 -[5-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
MS-ISP: 507 (M+H)+.
b) (R)-1 -[5-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
440 mg (0,87 mmol) benzylesteru (R)-l-[5-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 100 ml ethanolu bylo hydrogenováno v přítomnosti 40 mg 5% Pd na uhlíku. Filtrace a odpaření rozpouštědla poskytlo 130 mg (46 %) (R)-l[5-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny j ako bezbarvý olej.
MS-ISP: 327 (M+H)+.
Příklad 10 (R)-1 -[4-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-4-oxobutyryl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-1 -[4-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-4-oxobutyry] Jpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 300 mg (1,2 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 0,35 ml (2,5 mmol) triethylaminu v 9 ml dichlormethanu při 0 °C bylo po kapkách přidáno 68 ml (0,6 mmol) sukcinylchloridu a míchání pokračovalo po dobu 24 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs pak byla promyta postupně nasyceným roztokem chloridu amonného, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nakonec vodou a zpětně extrahované vodné fáze pomocí dichlormethanu. Sloučené organické extrakty byly vysušeny síranem sodným a koncentrovány za vakua, čímž se získalo 286 mg (94 %) nadepsané sloučeniny jako bleděžlutý olej.
MS m/e (%): 510 (M+NH4 +, 20), 493(M+H+, 100), 288 (80).
-27CZ 296252 B6
b) (R)-1 -[4-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-4-oxobutyryl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 256 mg (0,5 mmol) benzylesteru (R)-l-[4-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]4-oxobutyryl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml ethanolu bylo mícháno se 13 mg 10% palladia na uhlíku pod tlakem 0,1 MPa vodíku po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Po filtraci k odstranění katalyzátoru, koncentraci za vakua, bylo získáno 170 mg (100 %) nadepsané sloučeniny, to je (R)-l-[4-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-4-oxobutyryl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý viskózní olej.
MS m/e (%): 313 (M+H)+> 100)·
Příklad 11 (R)-1 -[ [2-[2-[2-[(R)-2-Karboxypyrrol idin-1 -yl]-2-oxoethoxy] ethoxy] ethoxy] acetyljpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Směs 1,04 g (4 mmol) 2,2'-[oxybis(-2,l-ethandiyloxy)]bisacetylchloridu, 0,92 g (8 mmol) D-prolinu a 1,2 ml triethylaminu ve 200 ml dimethylformamidu byla míchána po dobu 3 dní při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo oddestilováno za vakua. Zbytek byl chromatografován přes silikagel pomocí methanolu, čímž se získalo 0,42 g (R)-l-[[2-[2-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidml-yl]-2-oxoethoxy]ethoxy]ethoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako béžová hygroskopická tuhá látka.
MS-ISP: 417 (M+H)+.
Příklad 12 (R)-l-[3-[4-[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]fenyl]propionyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
Směs 0,3 g (5 mmol) 1,4-benzendipropanoyldichloridu, 1,15 g (10 mmol) D-prolinu a 1,5 ml triethylaminu ve 100 ml dimethylformamidu byla míchána po dobu 24 hodin při teplotě okolí. Suspenze byla zfíltrována a rozpouštědlo bylo oddestilováno za vakua.
Zbytek byl vyzvednut v acetonitrilu, promyt 2N chlorovodíkovou kyselinou, vysušen nad síranem sodným a chromatografován přes silikagel pomocí směsi dichlormethan/aceton/kyselina mravenčí v poměru 80/5/15, čímž se získalo 0,48 g (R)-l-[3-[4-[3-[(R)-2-karboxypyrrolidinl-yl]-3-oxopropyl]fenyl]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvá pěna.
MS-ISP: 417 (M+H)+.
Příklad 13 (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Směs 1,15 g (5 mmol) 1,4-benzendiacetyldichloridu, 1,15 g (10 mmol) D-prolinu a 1,5 ml triethylaminu ve 100 ml dimethylformamidu byla míchána po dobu 20 hodin při okolní teplotě.
Rozpouštědlo bylo oddestilováno za vakua. Zbytek byl vyzvednut ve 30 ml 2N chlorovodíkové kyseliny, zpracován ultrazvukem, zfíltrován a vysušen, čímž se získalo 1,19 g hnědé tuhé látky.
-28CZ 296252 B6
Tato tuhá látka byla míchána a refluxována po dobu 30 minut ve 300 ml methanolu. Filtrace, odpaření a rekrystalizace ze směsi methanol/acetoctan poskytly 0,18 g (R)—1—[[4—[2—[(R)—2— karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethyl]-fenyl] acetyl]pyrrolidin-2-karboxy lové kyseliny j ako žluté krystaly s teplotou tání 210 až 214 °C.
MS-ISP: 389 (M+H)+.
Příklad 14 (R)-1 -[ [2-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l -yl]-2-oxoethoxy] fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)—1—[[2—[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin......l - yl] -2-oxoethoxy]- fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do 0,566 g (2,5 mmol) 1,2-fenylendioctové kyseliny v 60 ml tetrahydrofuranu byl přidán roztok 0,81 g (5 mmol) karbonyldiimidazolu v 25 ml tetrahydrofuranu. Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 hodin bylo přidáno 1,21 g (5 mmol) D-prolinbenzylesterhydrochloridu ve 30 ml dichlormethanu a 1,4 ml triethylaminu a míchání pokračovalo přes víkend. Směs byla extrahována 2N kyselinou chlorovodíkovou a solankou.
Vysušení síranem sodným, odpaření rozpouštědla a chromatografie přes silikagel pomocí ethylacetátu poskytlo 0,25 g benzylesteru (R)-l-[[-2-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 600 (1,M+), 509 (1), 368 (25), 246 (17), 217 (19), 204 (14), 91 (100).
b) (R)-l-[ [2-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy] fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
230 mg (0,38 mmol) benzylesteru (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 100 ml ethanolu bylo hydrogenováno v přítomnosti 30 mg 5% Pd na uhlíku. Filtrace a odpaření rozpouštědla poskytlo 0,2 g (R)-1 -[ [2-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy] fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvé sklo (které ještě obsahovalo malá množství ethanolu).
MS-ISP: 421 (M+H)+.
Příklad 15 (R)-l-[3-[6-[3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]pyridin-2-yl]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) 3-[6-(2-Karboxyethyl)pyridin-2-yl]propionová kyselina
Směs 25,6 g (0,2 mol) naftalinu a 1,39 g (0,2 mol) lithia ve 150 ml tetrahydrofuranu byla míchána po dobu 30 hodin při teplotě místnosti. Po ochlazení na -15 °C byl přidán roztok 5,72 ml (0,1 mol) kyseliny octové v 10 ml tetrahydrofuranu a míchání pokračovalo po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Pak bylo přidáno 13,3 g (0,5 mol) 2,6-bis(brommethyl)pyridinu v 65 ml tetrahydrofuranu a míchání pokračovalo přes noc při teplotě místnosti. Bylo přidáno 200 ml etheru a směs byla extrahována vodou. Vodné vrstvy byly zfíltrovány přes 200 ml BioRad AG1-X8 měnič iontů. Iontoměnič byl promyt vodou až byl neutrální a pak eluován směsí kyselina octová/voda. Produkt obsahující frakce byl odpařen, rozpuštěn ve vodě
-29CZ 296252 B6 a lyofilizován, čímž se získalo 3,9 g (35 %) 3-[6-(2-karboxyethyl)pyridin-2-yl]propionové kyseliny jako světležlutý prášek.
MS m/e (%): 223 (M+, 15), 178(100), 160(81), 132(68), 104(16), 77(13).
b) Benzylester (R)-l-[3-[6-[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]pyridin-2-yl]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do 0,45 g (2,0 mmol) 3-[6-(2-karboxyethyl)pyridin-2-yl]propionové kyseliny ve směsi 0,25 ml tetrahydrofuranu a 25 ml dichlormethanu byl přidán roztok 0,65 g (4,0 mmol) karbonyldiimidazolu ve 20 ml tetrahydrofuranu. Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 hodin bylo přidáno 0,97 g (4,0 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu v 50 ml dichlormethanu a 1,2 g triethylaminu a míchání pokračovalo po dobu 18 hodin.
Pak byl přidán do směsi ethylacetát, načež následovala extrakce vodou. Vysušení síranem sodným, odpaření rozpouštědla a chromatografie přes silikagel pomocí směsi ethylacetát/hexan v poměru 2/8, pak ethylacetátem, pak směsí ethylacetát/methanol 95/5, načež následovala druhá chromatografie produktu obsahujícího frakce na silikagelu pomocí aceton/hexan 6/4, poskytlo 0,18 g (15 %) benzylesteru (R)-l-[3-[6-[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]pyridin-2-yl]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
MS-ISP: 598 (M+H)+.
c) (R)-1 -[3-[6-[3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-3-oxopropyl]pyridin-2-yl]propionyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
0,17 g (0,29 mmol) benzylesteru (R)-l-[3-[6-[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3oxopropyl]pyridin-2-yl]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 100 ml ethanolu bylo hydrogenováno v přítomnosti 35 mg 5% Pd na uhlíku. Filtrace a odpaření rozpouštědla poskytly 0,11 g (92%) (R)-l-[3-[6-[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]pyridin-2-yl]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
MS-ISP: 418 (M+H)+.
Příklad 16 (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]propylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-l-akryloylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 390 mg (1,6 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 0,47 ml (3,4 mmol) triethylaminu ve 20 ml dichlormethanu při 0 °C byl přidán po kapkách 0,2 ml (2,4 mmol) akryloylchloridu a míchání pokračovalo po dobu 24 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs pak byla promyta postupně vodou, 1M kyselinou chlorovodíkovou a ještě jednou vodou a vodné fáze zpětně extrahovány dichlormethanem. Sloučené organické extrakty byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány ve vakuu, čímž se získalo 420 mg (100 %) nadepsané sloučeniny, benzylesteru, (R)-l-akryloylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 259 (M+, 25), 124(100), 91(25), 70(21).
b) Benzylester (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]propylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
-30CZ 296252 B6
Roztok 400 mg (1,5 mmol) benzylesteru (R)-l-akryloylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a 63 ml (0,75 mmol) propylaminu v 5 ml acetonitrilu byl míchán po dobu 16 hodin při teplotě místnosti, pak po dobu 6 hodin při 45 °C a nakonec po dobu 16 hodin při 80 °C. Koncentrace za vakua a mžiková chromatografie (20 % H2O v acetonu) poskytla 84 mg (19 %) nadepsané sloučeniny benzylesteru (R)-1 -[-3-[[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-3-oxopropyl]propylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bleděžlutý olej.
MS m/e (%): 578 (M+H+, 100).
c) (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]propylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 84 mg (0,15 mmol) benzylesteru (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-lyl]-3-oxopropyl]propylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 3 ml ethanolu byl míchán s 10 mg 10% palladia na uhlíku pod tlakem 0,1 MPa vodíku po dobu 16 hodin při teplotě místnosti.
Po filtraci k odstranění katalyzátoru, koncentraci za vakua, se získalo 58 mg (100 %) nadepsané sloučeniny (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]propylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina jako bílá tuhá látka.
MS m/e (%): 398 (M+H+, 100).
Příklad 17 (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]ureido]pyrrolidin]-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-l-terc-butoxykarbonylaminoacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
1,21 g (5 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu bylo rozpuštěno ve 100 ml dichlormethanu a mícháno s 0,7 ml triethylaminu. Směs byla extrahována vodou, vysušena síranem sodným a odpařena. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi 100 ml tetrahydrofuranu a 50 ml chloroformu. Bylo přidáno 1,03 g (5 mmol) Ν,Ν'-dicyklohexylkarbodiimidu a 0,88 g (5 mmol) BOC-glycinu a míchání pokračovalo po dobu 18 hodin při teplotě místnosti.
Bylo přidáno 5 kapek kyseliny octové a po 10 minutách při teplotě místnosti byla směs zfiltrována a rozpouštědla byla oddestilována. Zbytek byl vyzvednut v acetooctanu, promyt vodnou kyselinou citrónovou, vodným hydrogenuhličitanem sodným a vodou, vysušen síranem sodným a rozpouštědlo bylo oddestilováno. Chromatografie na silikagelu pomocí směsi dichlormethan/methanol 99/1 poskytla 1,43 g (79 %) benzylesteru (R)-l-/erc-butoxykarbonylammoacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny j ako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 363(M+H, 1), 306(29), 289(10), 114(44), 91(76), 70(100), 57(64).
b) Benzylester (R)-1 -[ [3-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l -yl]-2-oxoethoxy] ureido]pyrrolidin]-2-karboxylové kyseliny
8,6 ml trifluorové kyseliny bylo přidáno po kapkách při 0 °C do roztoku 1,57 g (4,34 mmol) benzylesteru (R)-l-/erc-butoxykarbonylaminoacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 8,6 ml dichlormethanu a míchání pokračovalo po dobu 0,5 hodiny při teplotě místnosti. Roztok byl promyt vodným hydrogenuhličitanem sodným, vysušen síranem sodným a odpařen. Zbytek byl rozpuštěn ve 200 ml dichlormethanu a míchán s 0,21 g (0,7 mmol) trifosgenu a 0,18 ml (13 mmol) triethylaminu po dobu 4 hodin při teplotě místnosti.
-31 CZ 296252 B6
Směs byla extrahována IN kyselinou chlorovodíkovou, vysušena síranem sodným a odpařena. Zbývajících 1,15 g zbytku bylo chromatografováno na silikagelu pomocí směsi dichlormethan/methanol 96/4 a frakce obsahující produkt byly chromatografovány znovu na silikagelu směsí dichlormethan/aceton/kyselina mravenčí v poměru 80/15/5, čímž se získalo 0,23 g (33%) benzylesteru (R)-1 -[ [3-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]ureido] pyrrolidin]-2-karboxylové kyseliny jako olej.
MS-ISP: 551 (M+H)+.
c) (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]ureido]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
0,14 g (0,36 mmol) benzylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2oxoethoxy]ureido]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 60 ml ethanolu bylo hydrogenováno v přítomnosti 45 mg 5% Pd na uhlíku. Filtrace, odpaření rozpouštědla a krystalizace ze směsi methanol/ethylacetát poskytlo 0,07 g (52 %) jako bílé krystaly s teplotou tání 157 až 160 °C.
Příklad 18
Vápenatá sůl (R)-1 -[ 10-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-10-oxodekanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
Směs 1,20 g (5 mmol) sebakoylchloridu, 1,15 g (10 mmol) D-prolinu a 1,4 ml (10 mmol) triethylaminu ve 100 ml dimethylformamidu bylo mícháno přes víkend při teplotě okolí. Rozpouštědlo bylo oddestilováno za vakua. Zbytek byl vyzvednut 40 ml vodné kyseliny citrónové a extrahován ethylacetátem. Odpaření rozpouštědla a chromatografie na silikagelu směsí chloroform/aceton/kyselina mravenčí 80/5/15 poskytlo 1,21 g (R)-l-[10-[(R)-2-karboxypyrrolidin-lyl]-10-oxodekanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako olej.
MS-ISP: 397 (M+H)+.
0,89 g (2,24 mmol) tohoto oleje bylo rozpuštěno ve 20 ethanolu a mícháno s 0,75 g (2,24 mmol) hydroxidu vápenatého po dobu 48 hodin. Suspenze byla zfiltrována. Tuhý zbytek byl vyzvednut v 15 ml vody, ohřát na 80 °C, zfíltrován za horka a odpařen. Zbytek byl suspendován v etheru, zfíltrován a promyt etherem, čímž se získalo 0,5 g vápenaté soli (R)-l-[10-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-10-oxodekanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1) jako bílá tuhá látka.
C (teorie) 55,28, H (teorie) 6,96, N (teorie) 6,45.
C (nalez.) 55,29, H (nalez.) 7,11, N (nalez.) 6,08.
Příklad 19
Ca sůl (R)-l-[8-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
Směs 1,10 g (5 mmol) suberoylchloridu, 1,15 g (10 mmol) D-prolinu a 1,5 ml (10 mmol) triethylaminu ve 100 ml dimethylformamidu byla míchána po dobu 20 h při teplotě místnosti.
Rozpouštědlo bylo oddestilováno za vakua. Zbytek byl vyzvednut 40 ml vodné kyseliny citrónové a extrahován ethylacetátem. Odpaření rozpouštědla a chromatografie na silikagelu pomocí směsi chloroform/aceton/kyselina mravenčí 80/5/15 poskytlo 0,8 g (R)-l-[8-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako olej.
MS-ISM: 367 (M-H)’.
-32CZ 296252 B6
0,79 g (2,15 mmol) tohoto oleje bylo rozpuštěno ve 40 ml ethanolu a mícháno s 0,167 g (2,15 mmol) hydroxidu vápenatého po dobu 20 hodin. Suspenze byla zfíltrována a tuhý zbytek byl téměř rozpuštěn ve 25 ml vody. Roztok byl zfíltrován a odpařen, čímž se získalo 0,5 g Ca soli (R)-l-[8-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1) jako bílá tuhá látka.
Příklad 20 (R)-l-[4'-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-ylkarbonyl]-[2,2]-bithiazolyM-yl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-1 -[4'-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -ylkarbonyl][2,2]bithiazolyl-4-yl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Thionylchlorid (2 ml) byl přidán do roztoku 0,26 g (1 mmol) [2,2']bithiazolyl-4,4'-dikarboxylové kyseliny ve 20 ml tetramethylmočoviny a směs byla míchána po dobu 3 dnů při teplotě místnosti. Přebytek thionylchloridu a rozpouštědla byl oddestilován za vakua. Zbytek byl třikrát vyzvednut v dimethylformamidu a odpařen a pak rozpuštěn v 50 ml pyridinu. Bylo přidáno 0,28 g (1,00 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a míchání pokračovalo při teplotě místnosti po dobu 24 hodin.
Rozpouštědlo bylo oddestilováno, zbytek vyzvednut v acetoctanu a extrahován 2N HC1 a solankou, Vysušení uhličitanem sodným, odpaření rozpouštědla a chromatografie na silikagelu pomocí směsi acetoctan/hexan 1/1 poskytlo 0,094 g benzylesteru (R)-l-[4'-[(R)-2-karboxypyrrolidinl-ylkarbonyl]-[2,2]bithiazolyl-4-yl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny.
MS m/e (%): 630 (M+, 24), 539(17), 495(44), 449(51), 380(25), 329(33), 313(30), 223(38), 194(83), 180(66), 145(24), 137(21),91/100).
b) (R)- 1 -[4'-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl-karbonyl]-[2,2]bi thiazolyl^4-yl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
0,51 g (0,08 mmol) benzylesteru (R)-l-[4'-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-[2,2]bithiazol-4-yl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 55 ml methanolu bylo mícháno s 5 ml 2N roztoku hydroxidu sodného při teplotě místnosti po dobu 64 hodin. Po přídavku 2N kyseliny chlorovodíkové až do pH 1 byla směs extrahována dichlormethanem. Extrakty byly vysušeny síranem sodným a odpařeny. Chromatografie na silikagelu pomocí směsi dichlormethanu/acetonu/kyselina mravenčí 80/15/5 poskytla 0,04 (Rj-l-[4'-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-ylkarbonyl]-[2,2]bithiazolyl-4-yl]pyrrolidin-2-karboxylovou kyselinu jako bezbarvou tuhou látku.
MS-ISP: 451 (M+H)+.
Příklad 21 (R)-1 -[ [(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) terc-Butylester (R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Nadepsaná sloučenina byla připravena podle postupu uvedeného v literatuře (M. Thorsen,
T. P. Andersen, U. Pedersen, B. Yde a S. O. Lawesson, Tetrahedron 1985, 41, 5633-5636).
-33 CZ 296252 B6
Vycházeje z 25,0 g (217 mmol) D-prolinu, bylo získáno 27,52 g (74 %) terc-butylesteru (R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
b) fórc-Butylester (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 64,9 g (322 mmol) bromacetylbromidu v 250 ml dichlormethanu při 0 °C byl po kapkách přidán roztok 27,5 g (161 mmol) terc-butylesteru (R)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a 30 ml (177 mmol) N-ethyldiizopropylaminu ve 150 ml dichlormethanu během 40 minut. Reakční směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti přes noc a byla nalita do 600 ml vody.
Organická fáze byla oddělena a vodná fáze byla extrahována 600 ml dichlormethanu. Sloučené organické fáze byly promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysušeny (síran hořečnatý) a odpařeny, čímž se získalo 44,1 g (94 %) nadepsané sloučeniny jako hnědý olej, který krystalizoval při stání při teplotě místnosti.
Teplota tání 51,5 až 53,2 °C.
c) terc-Butylester (R)—1—[ [(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl] acetyl]pyrrolidin-2karboxylové kyseliny
Do roztoku 34,3 g (200 mmol) /erc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 350 ml dichlormethanu při 0 °C bylo po kapkách přidáno 27,9 ml (200 mmol) triethylaminu. Po míchání po dobu 45 minut při této teplotě bylo po kapkách přidáno 17,8 g (200 mmol) bromacetylbromidu. Míchání pokračovalo při 0 °C po dobu 3 hodin a bylo přidáno 250 ml IN kyseliny chlorovodíkové. Organická fáze byla oddělena a byla promyta nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysušena (síran hořečnatý) a odpařena, čímž se získalo 45 g hnědého oleje.
Triturace ethylacetátem a ochlazení na -78 °C poskytlo 7,1 g (9 %) bleděžluté tuhé látky.
Teplota tání 75,0 až 76,0 °C.
MS m/e (%): 405 (M+Na+, 11), 383 (M+H+, 100).
d) (R)-1 -[ [(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 382 mg (1,0 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-lyl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 300 mg (kvantitativně) RO-64—2799/000 jako bleděžlutou amorfní a hygroskopickou tuhou látku, která ještě obsahuje stopová množství trifluoroctové kyseliny.
MS m/e (%): 269 (M-H”, 4,5), 113(CF3CO2”, 100).
Příklad 22 (R)-1 -[ [4-2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy] fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) tórc-Butylester (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
-34CZ 296252 B6
Do roztoku 236 mg (2,1 mmol) terc-butylátu draselného ve 2 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok 110 mg (1,0 mmol) hydrochinonu ve 2 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 584 mg (2,0 mmol) terc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut.
Reakční směs byla míchána po další 3 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 380 mg (71 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 550 (M+W, 100), 477(23), 421(65).
b) (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy] fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
Roztok 350 mg (0,66 mmol) íerc-butylesteru (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml trifluoroctové kyseliny byla míchána po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua, zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a sušení poskytly 265 mg (96 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 443 (M+Na+, 48), 438 (M+NH4 +, 39), 421 (M+H+, 100).
Příklad 23 (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-2,3,5,6-tetrafluorfenoxy] acetyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Zerc-butylester (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]2,3,5,6-tetrafluorfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 185 mg (1,65 mmol) terc-butylátu draselného v 1 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok 137 mg (0,75 mmol) tetrafluorhydrochinonu v 1 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 438 mg (1,5 mmol) terc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 2 ml dimethylformamidu v rozmezí 1 až 2 minuty. Reakční směs byla míchána po další 4 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek vyčištěn mžikovou chromatografií, čímž se získalo 87 mg (19 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 622 (M+NH4 +, 100), 549 (32), 493 (57).
b) (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-2,3,5,6-tetrafluorfenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 80 mg (0,13 mmol) terc-butylesteru (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-íerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-2,3,5,6-tetrafluorfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1,5 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 64 mg (96 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 491 (M-H“, 100).
-35 CZ 296252 B6
Příklad 24 (R)-1 -[ [4—[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-2-chlorfenoxy] acetyljpyrrolidin2-karboxylová kyselina
a) /erc-Butylester (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]2-chlorfenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylo vé kyseliny
Do roztoku 185 mg (1,65 mmol) /erc-butylátu draselného ve 100 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok 108 mg (0,75 mmol) chlorhydrochinonu v 1 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 438 mg (1,5 mmol) /erc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 2 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána po další 4 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 149 mg (35 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 584 (M+NH4 +, 100), 511(48), 455(96).
b) (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-2-chlorfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 140 mg (0,25 mmol) /erc-butylesteru (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-2-chlorfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 126 mg (kvantitativně) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 453 (Μ-ΙΓ, 100).
Příklad 25 (R)~ 1 -[ [4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-2-methoxyfenoxy] acetyljpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) /erc-Butylester (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]2-methoxyfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 236 mg (2,1 mmol) /erc-butylátu draselného ve 2 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok 140 mg (1,0 mmol) methoxyhydrochinonu ve 2 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán během 1 až 2 minut roztok 584 mg (2,0 mmol) /erc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml dimethylformamidu. Reakční směs byla míchána po další 3 Hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek vyčištěn mžikovou chromatografii, čímž se získalo 280 mg (50 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 580 (M+NH4 +, 100), 563 (M+H+, 75), 507 (62), 451 (67).
b) (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-2-methoxyfenoxy] acetyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 250 mg (0,44 mmol) /erc-butylesteru (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-2-methoxyfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo
-36CZ 296252 B6 odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 188 mg (94 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 473 (M+Na+, 45), 468 (M+NH4 +, 24), 451 (M+H+, 100).
Příklad 26
Směs (R)-l-[(4—hydroxy-3- a -2-methoxyfenoxy)acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
a) Směs /erc-butylesteru (R)-l-[(4-hydroxy-3- a -2-methoxyfenoxy)acetyl]pyrrolidin-2karboxylové kyseliny
Nadepsané sloučeniny byly vytvořeny jako vedlejší produkty během přípravy Zerc-butylesteru (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-íerc-butoxykarbonylpyrro Hdin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-2-methoxyfenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny.
Izolace a vyčištění mžikovou chromatografíí poskytly 80 mg (23 %) RO-64—2915/000 jako bezbarvý olej.
'H-NMR (CDC13, (ppm): 1,41 (s, 2,4,H), 1,45 (s, 6,6 H), 1,81- 2,32 (m, 4H), 3,55 - 3,82 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 4,39 - 4,78 (m, 3H), 6,16 - 6,26 (m, 1H), 6,40 - 6,43 (m, 1H), 6,67 - 6,74 (m, 1H).
b) Směs (R)-l-[(4-hydroxy-3- a -2-methoxyfenoxy)acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 80 mg (0,23 mmol) směsí terc-butylesteru (R)-l-[(4-hydroxy-3- a -2-methoxyfenoxy)acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1 dichlormethanu bylo přidáno 5 ml 4N roztoku chlorovodíkové kyseliny v dioxanu. Po 24 hodinách bylo rozpouštědlo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 65 mg (97 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 296 (M+H+, 100).
Příklad 27 (R)-l-[[3-[2-(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Zerc-Butylester (RT)-l-[[3-[2-(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 561 mg (5,0 mmol) tórc-butylátu draselného ve 4 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok 275 mg (2,5 mmol) resorcinolu v 4 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a pak byl přidán roztok 1,46 mg (5,0 mmol) (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve formě Zerc-butylesteru v 5 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána po další 3 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 830 mg (62 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 550 (M+NH4 +, 100), 533 (M+H+, 95), 477 (48), 421 (95).
-37CZ 296252 B6
b) (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
Roztok 750 mg (1,41 mmol) tórc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-tórc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin--2-karboxylové kyseliny v 6 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 15 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 581 mg (98%) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 443 (M+Na+, 32), 438 (M+NH4 +, 20) 421 (M+H+, 100).
Příklad 28 (R)-l-[(3-Hydroxyfenoxy)acetyl]pynOlidin-2-karboxylová kyselina
a) íerc-Butylester (R)-l-[(3-hydroxyfenoxy)acetyl]pyrrolidin--2-karboxylové kyseliny
Nadepsaná sloučenina byla vytvořena jako vedlejší produkt během přípravy /erc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Izolace a vyčištění mžikovou chromatografíí poskytly 120 mg (37 %) RO-64-2802/000 jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 344 (M+Na+, 9), 322 (N+H+, 73), 266 (100).
b) (R)-l-[(3-Hydroxyfenoxy)acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Do roztoku 120 mg (0,37 mmol) terc-butylesteru (R)-l-[(3-hydroxyfenoxy)acetyl]pyrrolidin2-karboxylové kyseliny v 1 ml dichlormethanu bylo přidáno 5 ml 4N roztoku chlorovodíkové kyseliny v dioxanu. Po 3 dnech bylo rozpouštědlo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 95 mg (97 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 264 (Μ-ΙΓ, 100).
Příklad 29 (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-2-methylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) fórc-Butylester (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-rerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]2-methylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Do roztoku 236 mg (2,1 mmol) terc-butylátu draselného ve 2 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl po kapkách přidán roztok 124 mg (1,0 mmol) 2,6-dihydroxytoluenu ve 2 ml dimethylformamidu.
Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 584 mg (2,0 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml dimethylformamidu během až 2 minut. Reakční směs byla míchána po další 3 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 335 mg (61 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
-38CZ 296252 B6
MS m/e (%): 564 (M+NH4 +, 100), 491 (27), 435 (71).
b) (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-2-methylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 300 mg Zerc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2oxoethoxy]-2-methylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a 'vysušení poskytly 226 mg (95 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 457 (M+Na+, 54), 452 (M+NH?, 55), 435 (M+H+, 100).
Příklad 30 (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-methoxyfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Zerc-Butylester (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]5-methoxyfenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 236 mg (2,1 mmol) Zerc-butylátu draselného ve 2 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok 140 mg (1,0 mmol) 5-methoxyresorcinolu ve 2 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 584 mg (2,0 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána po další 3 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 407 mg (72 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 580 (M+NH?, 98), 563 (M+H+, 100), 507 (54), 451 (95).
b) (R)-1 -[ [3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2--oxoethoxy]-5-methoxyfenoxy] acetyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 370 mg (0,66 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5--methoxyfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 287 mg (97 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 473 (M+Na+, 45), 468 (Μ+ΝΉ/, 30), 451 (M+H+, 100).
Příklad 31 (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]methoxykarbonylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Zerc-Butylester (R)-l -[ [3-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]5-methoxykarbonylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 595 mg (5,3 mmol) Zere-butylátu draselného ve 4 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok 420 mg (2,5 mmol) 3,5-dihydroxybenzoátu ve 4 ml
-39CZ 296252 B6 dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 1,46 mg (5,0 mmol) tórc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána po další 2 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografií, čímž se získalo 1,01 g (68 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MA m/e (%): 608 (M+NH4 +, 92), 591 (M+H+, 48), 535 (41), 479 (100).
b) (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-methoxykarbonylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 710 mg (1,2 mmol) terc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin- 1 —yl]—2—oxoethoxy]—5—methoxykarbonylfenoxy] acetyl] pyrrolidm 2—karboxylové kyseliny v 10 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl suspendován ve 20 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 540 mg (94 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 477 (M-FT, 100).
Příklad 32 (R)-l-[[3-Karboxy-5-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Do 10 ml 0,5Nroztoku hydroxidu lithného v methanol/voda = 3:1 bylo přidáno 100 mg (0,2 mmol) (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-methoxykarbonylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny. Roztok byl ponechán stát při teplotě místnosti po dobu 24 hodin. Směs byla nastavena na pH 6 přídavkem roztoku chlorovodíkové kyseliny po kapkách a lyofilizována, čímž se získalo 800 mg bílého prášku. Produkt byl izolován chromatografií pomocí iontoměnné pryskyřice (Dowex). Lyofilizace poskytla 20 mg (22 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 487 (M+Na+, 61), 482 (M+NH4 +, 54), 465 (M+H+, 100).
Příklad 33
a) íerc-Butylester (R)-l-[[3-Karboxy-5-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 1,35 g (10 mmol) 3,5-dihydroxybenzonitrilu a 5,84 g (20 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidinu-2-karboxylové kyseliny ve 25 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti bylo přidáno 7 g bezvodého uhličitanu draselného. Po míchání po dobu dalších 20 byly draselné soli odfiltrovány a rozpouštědlo odstraněno za vakua. Zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografií, čímž se získalo 4,77 g (86 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvá pěna.
MS m/e (%): 575 (M+NH4 +, 100), 557 (M+H+, 42), 502 (35), 446 (85).
b) (R)-1 -[ [3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-5-kyanfenoxy] acetyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 280 mg (0,5 mmol) tórc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-tórc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-kyanfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml tri-40CZ 296252 B6 fluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 18 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 280 mg (72 %) nadepsané sloučeniny jako bílýprášek.
MS m/e (%): 444 (Μ-ΕΓ, 100).
Příklad 34 (R)-l -[ [3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-5-1 H-tetrazol-5-yl] fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Do roztoku 110 mg (0,2 mmol) terc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-5-kyanfenoxy] acetyljpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 10 ml 1,2-dimethoxyethanu bylo přidáno 200 mg (0,6 mmol) tributylcínazidu. Směs byla zahřívána při refluxu po dobu 3 dnů. Po ochlazení na teplotu místnosti bylo probubláno 1,4 g plynné chlorovodíkové kyseliny do roztoku, čímž se získal 4N roztok chlorovodíkové kyseliny v 1,2-dimethoxyethanu a míchání pokračovalo po dobu 12 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a olejový zbytek byl triturován etherem, čímž se získalo 61 mg (92 %) nadepsané sloučeniny jako bleděžlutá amorfní tuhá látka.
MS m/e (%): 511 (M+Na+, 41), 506 (M+NH4 +, 32), 489 (M+H+, 100).
Příklad 35 (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-hydroxyfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Zerc-Butylester (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidm-l-yl]-2-oxoethoxy]5-hydroxyfenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 95 mg (0,75 mmol) floroglucinolu a 438 mg (1,5 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetyl-l-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 2 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti bylo přidáno 520 mg bezvodého uhličitanu sodného. Po míchání přes noc byly draselné soli odfiltrovány a rozpouštědlo odstraněno za vakua. Zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografií, čímž se získalo 50 mg (12 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 566 (M+NH4 +, 96), 549 (M+H+, 88), 493 (47), 437 (100).
b) (R)-1 -[ [3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-5-hydroxyfenoxy] acetyl] pyrrolidm-2-karboxylová kyselina
Roztok 46 mg (0,084 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-hydroxyfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 5 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 35 mg (96 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý prášek.
MS m/e (%): 435 (M-H+, 100).
Příklad 36 (R)-l-[[3,5-bis-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
-41 CZ 296252 B6
a) Zerc-Butylester (R)-l-[[3,5-bis-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy] fenoxy] acetyl]pyrrolidin--2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 95 mg (0,75 mmol) floroglucinolu a 220 mg (0,75 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 2 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti bylo přidáno 520 mg bezvodého uhličitanu draselného. Po 2 hodinách a 6 hodinách míchání při teplotě místnosti bylo přidáno 220 mg (0,75 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin--2-karboxylové kyseliny (na přídavek) a míchání pokračovalo po dobu 18 hodin. Draselné soli byly odfiltrovány a rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua. Zbytek byl vyčištěn 10 mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 465 mg (82 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvá pěna.
MS m/e (%): 777 (M+NH4 +, 100), 760 (M+H+, 4), 704 (11), 648 (22), 592 (22).
b) (R)-l-[[3,5-bis-[2-[(R)-2~Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 350 mg (0,47 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[[3,5-bis-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1,5 ml tri20 fluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 254 mg (92 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý prášek.
MS m/e (%): 614 (M+Na+, 73), 609 (M+NH4 +, 100), 592 (M+H+, 56).
Příklad 37
Směs (E)- a (Z)-(R)-l-[[3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(N-hydroxy30 karbamimidoyl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
a) Směs Zerc-butylesteru (E)- a (Z)-(R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-lyl]-2-oxoethoxy]-5-(N-hydroxykarbamimidoyl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 1,25 g (17,9 mmol) hydroxylaminhydrochloridu v 6 ml dimethylsulfoxidu bylo přidáno 1,82 g (18 mmol) triethylaminu. Nerozpustný materiál byl odfiltrován a byl promyt 5 ml tetrahydrofuranu. Filtrát byl koncentrován za vakua při 100 milibarech k odstranění tetrahydrofuranu a bylo přidáno 2,0 g (3,59 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Zerc-butoxy40 karbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-kyanfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny.
Po míchání po dobu 20 hodin při 75 °C byla směs zředěna vodou a extrahována ethylacetátem. Organický roztok byl extrahován IN roztokem chlorovodíkové kyseliny. Vodný roztok byl 45 nastaven na pH 10 roztokem IN hydroxidu sodného a extrahován ethylacetátem. Organický roztok byl promyt vodou, vysušen (síran sodný) a odpařen, čímž se získalo 1,74 g nadepsané sloučeniny jako bezbarvá pěna.
MS m/e (%): 613 (M+Na+, 7), 591 (M+H+, 100), 535 (21), 479 (15).
b) Směs (E)- a (Z)-(R)-l-[[-3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(Nhydroxykarbamimidoyl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Roztok 120 mg (0,2 mmol) směsi Zerc-butylesteru (E)- a (Z)-(R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Zerc-butoxy55 karbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(N-hydroxykarbamimidoyl)fenoxy]acetyl]pyrrol-42 CZ 296252 B6 idin-2-karboxylové kyseliny v 1,5 ml trifluoroctové kyseliny byla míchána po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 96 mg (kvantitativně) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý prášek.
MS m/e (%): 501 (M+Na+, 31), 479 (M+H+, 100).
Příklad 38 (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(5-oxo-4,5-dihydro-[l,2,4]oxadiazol-3-yl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) íerc-Butylester (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-íerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]5-(5-oxo-4,5~dihydro-[l,2,4]oxadiazol-3-yl)-fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do ledově studeného roztoku 300 mg (0,51 mmol) směsi Zerc-butylesteru (E)- a (Z)-(R)-l-[[3[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(N-hydroxykarbamimidoyl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a 43 mg (0,55 mmol) pyridinu v 2 ml dimethylformamidu bylo po kapkách přidáno 200 mg (0,51 mmol) 2-ethylhexylchlorformátu.
Směs byla míchána při 0 °C po dobu 30 minut, zředěna vodou a extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla vysušena (síran sodný), odpařena a olejovitý zbytek byl rozpuštěn ve 20 ml toluenu. Po 16 h míchání při teplotě místnosti byl toluenový roztok promyt solankou, vysušen (síran sodný) a zfiltrován přes silikagel, čímž se získalo 280 mg (89 %) nadepsané sloučeniny jako viskózní olej.
MS m/e (%): 639 (M+Na+, 51), 634 (M+NH/, 100), 617 (M+H+, 14), 561 (40), 505 (79).
b) (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(5-oxo-4,5-dihydro- [ 1,2,4]oxadiazol-3-yl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 220 mg (0,36 mmol) Zerc-butylesteru (R-l-[[3-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-5-(5-oxo-4,5-dihydro [1,2,4] oxadiazol-3-yl)fenoxy] acetyljpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1,5 ml trifluoroctové kyseliny byla míchána po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 135 mg (74 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý prášek.
MS m/e (%): 527 (M+Na+, 73), 522 (M+NH4 +, 75), 505 (M+H+, 100).
Příklad 39 (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(2-oxo-2,3-dihydro[l,2,3,5]oxathiadiazol-4-yl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (konfigurace S-oxid R:S = 1:1)
a) Zerc-Butylester (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]5-(2-oxo-2,3-dihydro [1,2,3,5] oxathiadiazol-4-yl)fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (konfigurace S-oxid R:S = 1:1)
Do ledově studeného roztoku 300 mg (0,51 mmol) směsi fórc-butylesteru (E)- a (Z)—(R)—l—[[3— [2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(N-hydroxykarbamimidoyl)-43 CZ 296252 B6 fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a 80 mg (1 mmol) pyridinu ve 2 ml dichlormethanu byl po kapkách přidán thionylchlorid v množství 60 mg (0,51 mmol) (rozpuštěný v 0,3 ml dichlormethanu). Směs byla míchána při 0 °C po dobu 45 minut, zředěna dichlormethanem, promyta vodou, vysušena (síran sodný) a odpařena. Mžiková chromatografíe poskytla 190 mg (59 %) nadepsané sloučeniny jako polotuhou kapalinu.
MS m/e (%): 659 (M+Na+, 14), 654 (M+NH4 +, 100), 637 (M+H+, 11), 581 (14), 525 (74).
b) (R)-l-[[3-[2-[(R)“2-Karboxypyrrolidm-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(2-oxo-2,3-dihydro[1,2,3,5]oxathiadiazol-4-yl)fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (uspořádání S-oxidR:S = 1:1)
Roztok 165 mg (0,26 mmol) tórc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(2-oxo-2,3-dihydro[l,2,3,5]oxathiadiazol-4-yl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (konfigurace S-oxid R:S = 1:1) v 1,5 ml triíluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 115 mg (85 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý prášek.
MS m/e (%): 547 (M+Na+, 65), 542 (M+NH4 +, 86), 525 (M+H+, 100).
Příklad 40 (R)-1 -[ [3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l -yl]-2-oxoethoxy]-5-(5-terc-butylsulfanyl [1,2,4]oxadiazol-3-yl)fenoxy] acetyljpyrrolidm-2-karboxylová kyselina
a) terc-Butylester (R)-1 -[ [3-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]5-(5-thioxo-4,5-dihydro[l,2,4]oxadiazol“3-yl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Směs 515 mg (0,87 mmol) směsi /erc-butylesteru (E)- a (Z)-(R)-l-[[3-[2-[(R)-2--/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(N-hydroxykarbamimidoyl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny, 177 mg (0,94 mmol) l,l'-thiokarbonyldiimidazolu a 530 mg (3,5 mmol) l,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-enu v 10 ml acetonitrilu byla míchána při teplotě místnosti po dobu 4 hodin. Směs byla koncentrována za vakua, zředěna vodou, nastavena na pH 4 až 5 IN roztokem kyseliny chlorovodíkové a extrahována ethylacetátem.
Extrakt byl znovu koncentrován, zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml IN roztoku hydroxidu sodného a promyt etherem. Vodný roztok byl nastaven na pH 4 IN roztokem kyseliny chlorovodíkové a byl extrahován ethylacetátem. Organická fáze byla promyta vodou, vysušena, (síran sodný) a byla odpařena, čímž se získalo 490 mg (89 %) nadepsané sloučeniny jako bleděhnědá pěna.
MS m/e (%): 665 (M+Na+, 35), 650 (M+NH4 +, 100), 633 (M+H+, 14), 577 (31), 521 (52).
b) (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(5-/erc-butylsulfanyl- [ 1,2,4]oxadiazol-3-yl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 315 mg (0,5 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-tórc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-5-(5-thioxo-4,5~dihydro[l,2,4]oxadiazol-3-yl)fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1,5 ml triíluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 160 mg (57 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 599 (M+Na+, 54), 594 (M+NH4 +, 71), 577 (M+H+, 100), 521 (37).
-44CZ 296252 B6
Příklad 41 (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-3-methoxyfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) terc-Butylester (R)-1 -[[2-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]~2-oxoethoxy]~ 3-methoxyfenoxy]acetyl]-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 236 mg (2,1 mmol) Zerc-butylátu draselného ve 2 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl po kapkách přidán roztok 140 mg (1,0 mmol) pyrogallol-l-methyletheru ve 2 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 584 mg (2,0 mmol) terc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin--2-karboxylové kyseliny ve 4 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána po další 3 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 375 mg (67%) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 580 (M+NH4 +, 14), 563 (M+H+, 100), 507 (14), 451 (12).
b) (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-3-methoxyfenoxy]acetylJpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 345 mg (0,61 mmol) terc-butylesteru (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-3-methoxyfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 265 mg (96 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 473 (M+Na+, 54), 451 (M+H+, 100).
Příklad 42 (R)-1 -[ [2-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-3-methylfenoxy] acetyljpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) terc-Butylester (R)-1 -[ [2-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin- l-yl]-2-oxoethoxy]3-methylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 236 mg (2,1 mmol) /erc-butylátu draselného ve 2 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl po kapkách přidán roztok 124 mg (1,0 mmol) 3-methylkatecholu ve 2 ml dímethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 584 mg (2,0 mmol) terc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána po další 3 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 356 mg (65 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 547 (M+H+, 100), 491 (14), 435 (17).
b) (R)— 1—[ [2—[2—[ (R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]-3-methylfenoxy] acetyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 325 mg (0,60 mmol) tórc-butylesteru (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-3-methylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo
-45CZ 296252 B6 odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 235 mg (91 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 457 (M+Na+, 59), 435 (M+H+, 100).
Příklad 43 (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-3,4,5,6-tetrachlorfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) /erc-Butylester (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]3,4,5,6-tetrachlorfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 185 mg (1,65 mmol) Zerc-butylátu draselného v 1 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl po kapkách přidán roztok 186 mg (0,75 mmol) tetrachlorkatecholu v 1 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 438 mg (1,50 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2--karboxylové kyseliny ve 2 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána po dobu dalších 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 229 mg (45 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 671 (M+H+, 100), 615 (19), 559 (14).
b) (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-3,4,5,6-tetrachlorfenoxy]acetyljpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 220 mg (0,34 mmol) terc-butylesteru (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-3,4,5,6-tetrachlorfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1,5 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 172 mg (94 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 559 (M-H“, 100).
Příklad 44 (R)-1 -[ [6-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]naftalen-2-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) terc-Butylester (R)-l-[[6-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-2-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 236 mg (2,1 mmol) Zerc-butylátu draselného ve 2 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl po kapkách přidán roztok 160 mg (1,0 mmol) 2,6-dihydroxynaftalenu ve 2 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 584 mg (2,0 mmol) tórc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána po další 3 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 120 mg (21 %) nadepsané sloučeniny jako bílá tuhá látka.
MS m/e (%): 605 (M+Na+, 14), 600 (M+NH4 +, 92), 583 (M+H+, 5), 527 (32), 471 (100).
-46CZ 296252 B6
b) (R)-1 -[ [6-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yI]-2-oxoethoxy]naftalen-2-yloxy] acetyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 75 mg (0,13 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[[6-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-2-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1,5 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 18 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 60 mg (98 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 493 (M+Na+, 58), 488 (M+NH4 +, 33), 471 (M+H+, 100).
Příklad 45 (R)-l-[[5-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-l-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) tórc-Butylester (R)-l-[[5-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin--l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-l-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 236 mg (2,1 mmol) Zerc-butylátu draselného ve 2 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl po kapkách přidán roztok 160 mg (1,0 mmol) 1,5-dihydroxynaftalenu ve 2 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 584 mg (2,0 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána po dobu dalších 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek vyčištěn mžikovou chromatografií, čímž se získalo 470 mg (81 %) nadepsané sloučeniny jako bleděžlutá pěna.
MS m/e (%): 605 (M+Na+, 10), 600 (M+NH4 +, 100), 527 (20), 471 (63).
b) (R)~ 1 -[ [ 5-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen- 1-yloxy] acetyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 290 mg (0,5 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[[5-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-l-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 18 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 230 mg (98 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 493 (M+Na+, 45), 488 (M+NH4 +, 37), 471 (M+H+, 100).
Příklad 46 (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-2-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Zerc-Butylester (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidm-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-2-yIoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 236 mg (2,1 mmol) Zerc-butylátu draselného ve 2 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok 160 mg (1,0 mmol) 2,3-dihydroxynaftalenu ve 2 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 584 mg (2,0 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána po další 3 hodiny při tep-47CZ 296252 B6 lote místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 310 mg (53 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 605 (M+Na+, 27), 600 (M+NH4 +, 16), 583 (M+H+, 100), 527 (16), 471 (24).
b) (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-2-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 230 mg (0,4 mmol) terc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-íerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-2-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 18 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 180 mg (96 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 469 (M-FT, 100).
Příklad 47 (R)-1 -[ [2'-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]bifenyl-2-yloxy] acetyljpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) terc-Butylester (R)-l-[[2'-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]bifenyl-2-yloxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 160 mg (1,44 mmol) terc-butylátu draselného v 1,6 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok 127 mg (0,69 mmol) 2,2'-dihydroxybifenylu ve 100 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 400 mg (1,37 mmol) terc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 84 mg (20 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý olej.
MS m/e (%): 631 (M+Na+, 22), 626 (M+NH+, 100), 609 (M+H+, 16).
b) (R)-l-[[2'-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]bifenyl-2-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 87 mg (0,14 mmol) /erc-butylesteru (R)-l-[[2'-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]bifenyl-2-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 31 mg (47 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý prášek.
MS m/e (%): 519 (M+Na+, 62), 497 (M+H+, 100).
Příklad 48 (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-l-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) terc-Butylester (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-l-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
-48CZ 296252 B6
Do roztoku 160 mg (1,44 mmol) /erc-butylátu draselného v 1,6 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok 116 mg (0,69 mmol) 1,4-naftochinonu v 1 ml dimethylformamidu. Míchání pokračovalo po dobu 2 až 3 minut a byl přidán roztok 400 mg (1,37 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml dimethylformamidu během 1 až 2 minut. Reakční směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získali 269 mg (67 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědá pěna.
MS m/e (%): 600 (M+NH4 +, 100).
b) (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l -yl]-2-oxoethoxy]naftalen-l-yloxy] acetyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 172 mg (0,30 mmol) terc-butylesteru (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-l-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1,5 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 140 mg (kvantitativně) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý prášek.
MS m/e (%): 469 (M-H+, 100).
Příklad 49 (R)-l-[[7-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-2-yloxy]acetyl]pynOlidin-2-karboxylová kyselina
a) Zerc-Butylester (R)-1 -[ [7-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy] naftalen-2-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 110 mg (0,69 mmol) Zerc-butylesteru 2,7-dihydroxynaftalenu a 400 mg (1,37 mmol) terc-butylesteru (R)-(l)-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1,5 ml dimethylformamidu při teplotě místnosti bylo přidáno 480 mg bezvodého uhličitanu draselného. Po míchání po dobu dalších 20 hodin byly draselné soli odfiltrovány a rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua. Zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 296 mg (74 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 600 (M+NH4 +, 100), 528 (25), 471 (99).
b) (R)-l-[[7-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-2-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 272 mg (0,47 mmol) terc-butylesteru (R)-l-[[7-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-2-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 1,5 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 209 mg (95 %) nadepsané sloučeniny jako bílý prášek.
MS m/e (%): 493 (M+Na+, 48), 488 (M+NH4 +, 23), 471 (M+H+, 100).
-49CZ 296252 B6
Příklad 50
Trifluoracetát (R)~ 1 -[ [3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-~oxoethylamino] fenylamino] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:2)
a) íerc-Butylester (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethylamino]fenylamino]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 75 mg (0,69 mmol) 1,3-fenylendiaminu a 400 mg (1,37 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 3 ml dichlormethanu při teplotě místnosti bylo přidáno 0,21 ml (1,5 mmol) triethylaminu. Reakční směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti. Organická fáze byla promyta IN roztokem uhličitanu sodného a solankou vysušena (síran sodný) a odpařena. Zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 285 mg (78 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědá pěna.
MS m/e (%): 553 (M+Na+, 15), 531 (M+H+, 100), 475 (20), 419 (10).
b) Trifluoracetát (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethylamino]fenylamino]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:2)
Roztok 170 mg (0,32 mmol) /erc-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethylamino] fenylamino] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 130 mg (63 %) nadepsané sloučeniny jako hnědou pěnu.
MS m/e (%): 417 (M-H+, 100).
Příklad 51
Trifluoracetát (R)-l -[ [4-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethylamino] fenylamino] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
a) terc-Butylester (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-íerc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethylamino]fenylamino]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 75 mg (0,69 mmol) 1,4-fenylendiaminu a 400 mg (1,37 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4 ml tetrahydrofuranu při teplotě místnosti bylo přidáno 190 mg bezvodého uhličitanu draselného. Reakční směs byla míchána přes noc při 40 °C. Draselné soli byly odfiltrovány a rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua. Zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 180mg (50 %) nadepsané sloučeniny jako hnědá pěna.
MS m/e (%): 553 (M+Na+, 26), 531 (M+H+, 100).
b) Trifluoracetát (R)-1 -[[4-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethylamino]fenylamino] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:2)
Roztok 168 mg (0,32 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethylamino]fenylamino]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 2 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno, zbytek suspendován v toluenu a rozpouštědlo znovu odstraněno, aby se eliminoval přebytek trifluoroctové kyseliny. Zbytek byl resuspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze
-50CZ 296252 B6 byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 160 mg (78 %) nadepsané sloučeniny jako hnědá pěna.
MS m/e (%): 470 (Μ-ΙΓ, 100).
Příklad 52
Trifluoracetát (R)-1 -[ [ [2-[(R)-2-karbonylpyrrolidin-l -yl]-2-oxoethyl]butylamino] acetyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
a) íerc-Butylester (R)-l-[[[2-[(R)-2-íerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]butylamino] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 136 mg (1,86 mmol) butylaminu a 995 mg (3,40 mmol) íerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 4ml dichlormethanu při teplotě místnosti bylo přidáno 0,52 ml (3,74 mmol) triethylaminu. Suspenze byla míchána přes noc při teplotě místnosti. Organická fáze byla promyta IN roztokem uhličitanu sodného a solankou, vysušena (síran sodný) a odpařena. Zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografii, čímž sezískalo 830 mg (98 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý olej.
MS m/e (%): 524 (2M+Ni+, 37), 496 (M+H+, 100), 468 (2), 440 (7).
b) Trifluoracetát (R)-1 -[ [ [2-[(R)-2-karbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]butylamino] acetyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
Roztok 50 mg (0,1 mmol) íerc-butylesteru (R)-l-[[[2-[(R)-2-tórc-butoxykarbonylpyrrolidinl-yl]-2-oxoethyl]butylamino]acetyl]pynOlidin-2-karboxylové kyseliny v 0,2 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 46 mg (92 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý prášek.
MS m/e (%): 382 (Μ-ΙΓ, 100).
Příklad 53
Trifluoracetát (R)-l-[[[2-[(R)-2-karbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]-(2-methoxyethyl)amino] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
a) íerc-Butylester (R)-l-[[[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]-(2-~ methoxyethyl)amino] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 137 mg (1,83 mmol) 2-methoxyethylaminu a 970 mg (3,33 mmol) íerc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrroIídin-2-karboxylové kyseliny ve 4 mí dichlormethanu při teplotě místností bylo přidáno 0,51 ml (3,66 mmol) triethylaminu. Suspenze byla míchána přes noc při teplotě místnosti. Organická fáze byla promyta IN roztokem uhličitanu sodného a solankou, vysušena (síran sodný) a odpařena. Zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografii, čímž se získalo 397 mg (48 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý olej.
MS m/e (%): 520 (M+Na+, 50), 498 (M+H+, 100).
b) Trifluoracetát (R)~ 1 -[[ [2-[(R)-2-karbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethyl]-(2-methoxyethyl)amino]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
-51 CZ 296252 B6
Roztok 367 mg (0,74 mmol) ferc-butylesteru (R)-l-[[[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]-(2-methoxyethyl)amino]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 2 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 350 mg (95 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědou pěnu.
MS m/e (%): 384 (Μ-ΕΓ, 100).
Příklad 54
Trifluoracetát (R)-l-[[benzyl-[2-[(R)-2-karboxypynOlidin-l-yl]-2-oxoethyl]amino]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
a) terc-Butylester (R)-l-[[benzyl-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]amino]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 104 mg (0,97 mmol) benzylaminu a 514 mg (1,76 mmol) ferc-butylesteru (R)-lbromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml dichlormethanu při teplotě místnosti bylo přidáno 0,27 ml (1,94 mmol) triethylaminu. Suspenze byla míchána přes noc při teplotě místnosti. Organická fáze byla promyta IN roztokem uhličitanu sodného a solankou, vysušena (síran sodný) a odpařena. Zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíi, čímž se získalo 270mg (58 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý olej.
MS m/e (%): 52 (M+Na+, 12), 530 (M+H+, 100).
b) Trifluoracetát (R)-l-[[benzyl-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]amino]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Roztok 200 mg (0,38 mmol) terc-butylesteru (R)-l-[[benzyl-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl] amino] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 2 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl suspendován v 10 ml etheru. Výsledná suspenze byla míchána přes noc. Filtrace a vysušení poskytly 189 mg (94 %) nadepsané sloučeniny jako bílé krystaly.
MS m/e (%): 440 (M+Na+, 16), 418 (M+H+, 100).
Příklad 55 (R)-l-[[3~[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin--l-yl]-2-oxoethyl]-l,3-dibutylureido]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) terc-Butylester (Rj-l-butylaminoacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 1,58 ml (16 mmol) butylaminu v 1 ml dichlormethanu byl po kapkách přidán roztok 470 mg (1,6 mmol) /erc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 2 ml dichlormethanu při teplotě místnosti. Suspenze byla míchána přes noc. Organická fáze byla promyta IN roztokem uhličitanu sodného a solankou, vysušena (síran sodný) a odpařena. Zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíi, čímž se získalo 370mg (81 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý olej.
MS m/e (%): 285 (M+H+, 100).
-52CZ 296252 B6
b) terc-Butylester (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]1,3-dibutylureido]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 165 mg (0,58 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-butylaminoacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml toluenu bylo přidáno 305 mg bezvodého uhličitanu sodného. Suspenze byla odpařena do sucha a zbytek byl resuspendován ve 2 ml tetrahydrofuranu. Pak bylo přidáno 1,4 ml (2,80 mmol) roztoku fosgenu (20% v toluenu) a míchání pokračovalo po dobu 6 hodin při teplotě 50 °C. Sodné soli byly odfiltrovány a promyty tetrahydrofuranem. Filtrát byl odpařen a znovu bylo přidáno 165 mg (0,58 mmol) RO-64—2576/000 rozpuštěného ve 2 ml tetrahydrofuranu a 305 mg bezvodého uhličitanu sodného. Po míchání přes noc při teplotě 50 °C byla organická fáze promyta IN roztokem kyseliny chlorovodíkové, vysušena (síran hořečnatý) a odpařena, čímž se získalo 330 mg (91 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý prášek.
MS m/e (%): 617 (M+Na, 19), 595 (M+H+, 100).
c) (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]-l,3-dibutylureido]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 278 mg (0,47 mmol) /erz-butylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]-l,3-dibutylureido]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 2 ml trifluoroctové kyseliny byl míchán po dobu 4 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl vysušen, čímž se získalo 167 mg (74 %) nadepsané sloučeniny jako hnědá pěna.
MS m/e (%): 505 (M+Na+, 11), 487 (33), 483 (M+H+, 33), 465 (100).
Příklad 56 (R)-l-[[l,3-Dibenzyl-3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]ureido]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Zerc-Butylester (R)-l-benzylaminoacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 1,25 ml (11,4 mmol) benzylaminu v 1 ml dichlormethanu byl po kapkách přidán roztok 335 mg (1,14 mmol) terc-butylesteru (R)-l-bromacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 2 ml dichlormethanu při 0 °C. Suspenze byla míchána po dobu 4 hodin při této teplotě. Organická fáze byla promyta IN roztokem uhličitanu sodného, vysušena (síran sodný) a odpařena. Zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 312 mg (86 %) nadepsané sloučeniny jako amorfní tuhá látka.
MS m/e (%): 319 (M+H, 100).
b) terc-Butylester (R)-l-[[l,3-dibenzyl-3-[2-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]2-oxoethyl]ureido] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do roztoku 233 mg (0,73 mmol) íerc-butylesteru (R)-l-benzylaminoacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 2 ml toluenu při teplotě místnosti bylo přidáno 0,20 ml (1,34 mmol) triethylaminu. Po době 3 hodin bylo přidáno 0,30 ml (0,70 mmol) roztoku fosgenu (20% v toluenu) v 6 podílech a míchání pokračovalo po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Organická fáze byla promyta IN roztokem kyseliny chlorovodíkové, IN roztokem uhličitanu sodného a solankou, vysušena (síran hořečnatý) a odpařena. Zbytek byl vyčištěn mžikovou chromatografíí, čímž se získalo 345 mg (50 %) nadepsané sloučeniny jako světležlutý olej.
MS m/e (%): 685 (M+Na+, 28), 680 (M+NH4 +, 100), 663 (M+H, 30).
-53 CZ 296252 B6
c) (R)-l-[[ 1,3-dibenzyl-3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]ureido]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 220 mg (0,33 mmol) /erc-butylesteru (R)-l-[[l,3-dibenzyl-3-[2-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]ureido]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml 4N roztoku kyseliny chlorovodíkové v dioxanu byl míchán po dobu 5 hodin při teplotě místnosti. Produkt byl extrahován IN roztokem hydroxidu sodného, zásaditý extrakt byl okyselen IN roztokem kyseliny chlorovodíkové na pH 4 a produkt extrahován ethylacetátem. Organická fáze byla vysušena (síran hořečnatý) a odpařena, čímž se získalo 74 mg (41 %) nadepsané sloučeniny jako hnědý olej.
MS m/e (%): 549 (Μ-ΙΓ, 100).
Příklad 57 (R)-l-Benzylaminoacetylpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Nadepsaná sloučenina byla vytvořena pomocí odštěpení močoviny jako vedlejšího produktu během přípravy (R)—1—[ [ 1,3-dibenzyl-3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]ureido]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny. Byla izolována z okyseleného vodného roztoku následovně.
Vodná fáze byla koncentrována a zbytek byl suspendován ve 2-propanolu. Organické soli byly odfiltrovány přes celit. Odpaření a vysušení poskytly 78 mg (45 %) (Rj-l-benzylaminoacetylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvou pěnu.
MS m/e (%): 261 (Μ-ΙΓ, 100).
V následujících příkladech jsou použity tyto obecné postupy:
Obecný postup A: EDC kopulační reakce
Do míchaného roztoku benzylesterhydrochloridu D-prolinu (2 ekvivalenty), dikarboxylové kyseliny (1 ekvivalent), N-methylmorfolinu (6 ekvivalentů) a hydroxybenztriazolu (2 ekvivalenty) v dichlormethanu při 0 °C byl přidán N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidhydrochlorid (2 ekvivalenty) a míchání pokračovalo při 0 °C po dobu 2 hodin a pak při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Reakční směs pak byla promyta postupně 1M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nakonec nasycenou solankou a vodné fáze byly zpětně extrahovány dichlormethanem. Sloučené organické extrakty byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua. Vyčištěním mžikovou chromatografií na silikagelu se pak získala nadepsaná sloučenina.
Obecný postup B: Hydrogenolýza benzylesteru
Roztok benzylesteru v izopropanolu byl míchán s 5 hmotnostními % 10% palladia na aktivním uhlí za tlaku 0,1 MPa vodíku po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Po filtraci k odstranění katalyzátoru byla reakční směs koncentrována za vakua a azeotropována 3 x chloroformem na rotační odparce, čímž se odstranily poslední stopy izopropanolu. Výsledný produkt (často viskózní olej, polotuhá látka nebo pěna) byl triturován v etheru a pak vysušen za vakua (10 mbar) při teplotě 50 °C po dobu 16 hodin.
-54CZ 296252 B6
Příklad 58 (R)- 1 -[5-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 —y 1]—2,4-dimethyl-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (směs 3 diastereoizomerů)
a) Benzylester (R)-l-[5-[(R)-2-benzyloxymethylpyrrolidin-l-yl]-2,4-dimethyl-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs 3 diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu A s 6,05 g (25 mmol) benzylesterhydrochloru D-prolinu a 2,0 g (12,5 mmol) 2,4-dimethylglutaróvé kyseliny se získalo po mžikové chromatografíí (EtOAc), 4,3 g (64 %) nadepsané sloučeniny jako světležlutý olej.
MS m/e (%): 535 (M+H+, 100).
b) (R)-l-[5-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2,4-dimethyl-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina (směs 3 diastereoizomerů)
Pomocí obecného postupu B se 4,30 g (8,05 mmol) benzylesteru (R)-l-[5-[(R)-2-benzyloxymethylpyrrolidin-l-yl]-2,4-dimethyl-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs 3 diastereoizomerů) se získalo 2,58 g (91 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 355 (M+H+, 100).
Příklad 59 (R)—1—[4—[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2,3-dimethyl-4-oxobutyryl]pyrrolidm-2-karboxylová kyselina (směs 3 diastereoizomerů)
a) Benzylester (R)-l-[4-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2,3-dimethyl-4-oxobutyryl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs 3 diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu A s 2,0 g (8,2 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 600 mg (4,1 mmol) 2,3-dimethyljantarové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíí (EtOAc) 1,45 g (69 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 521 (M+H+, 100).
b) (R)-l-[4-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2,3-dimethyl-4-oxobutyryl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina (směs 3 diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu B s 1,45 g (2,78 mmol) benzylesteru (R)-l-[4-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2,3-dimethyl-4-oxobutyryl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs 3 diastereoizomerů) se získalo 780 mg (80 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 341 (M+H+, 100).
Příklad 60 (R)-l-[íran5-4-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-l-[tran5-4-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidm-l-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
-55 CZ 296252 B6
Za použití obecného postupu A s 2,0 g (8,2 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 700 mg (4,1 mmol) transcyklohexan-l,4-dikarboxylové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíí (EtOAc), 1,67 g (76 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 547 (M+H, 100).
b) (R)- 1 -[trans—4-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -karbonyl] cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 1,61 g (2,95 mmol) benzylesteru (R)-l-[trízws-4-[(R)-2benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 1,07 g (99 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 367 (M+H+, 100).
Příklad 61 (R)-l-[cA-4-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-l-|cz.s·—4--[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 2,0 g (8,2 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 700 mg (4,1 mmol) cA-cyklohexan-1,4—dikarboxylové kyseliny se získalo, po mžikové chromatografíi (EtOAc), 2,0 g (91 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 547 (M+H+, 100).
b) (R)-1 -[czs-4-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l -karbonyl] cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B se 2,0 g (3,66 mmol) benzylesteru (R)-l-[cz.v-4-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 930 mg (69 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 365 (M-H~, 100).
Příklad 62 (R)-l-[3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidm-2-karboxylová kyselina (směs tří distereoizomerů)
a) Benzylester (R)-1 -[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -karbonyl] cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs tří diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu A s 5,6 g (23,2 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 2,0 g (11,5 mmol) cyklohexan-l,3-dikarboxylové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíi (EtOAc), 4,4 g (70 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 547 (M+H+, 100).
-56CZ 296252 B6
b) (R)-l-[3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina (směs tří diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu B s 4,4 g (8,05 mmol) benzylesteru (R)-l-[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs tří diastereoizomerů se získalo 2,9 g (98 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 367 (M+H+, 100).
Příklad 63
Směs (R)-1-[(1R,2R)- a -[(lS,2S)-2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
a) Směs benzylesteru (R)-1-[(1R,2R)_ a -[(lS,2S)-2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidinl-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A se 2,0 g (8,2 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 700 mg (4,1 mmol) transcyklohexan-l,2-dikarboxylové kyseliny se získalo po mžikové chromatografii (EtOAc) 1,36 g (62 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 547 (M+H+, 100).
b) Směs (R)-1-[(1R,2R)- a -[(lS,2S)-2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu B s 1,36 g (2,48 mmol) benzylesteru směsi (R)-1-[(1R,2R)a-[(lS,2S)-2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-karbonyl]cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 900 mg (99 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 367 (M+H+, 100).
Příklad 64 (R)-1 -[ [2,5-Dihydroxy-A-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l -yl]-2-oxoethyl] fenyl] acetyljpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]-2,5-dihydroxyfenyl] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Pomocí obecného postupu A s 10,7 g (44,2 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 5,0 g (22,1 mmol) 2,5-dihydroxy-l,4-fenylendioctové kyseliny se získalo po mžikové chromatografii (gradient: 70-100 % EtOAc/hexan) 3,17 g (24 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvá pěna.
MS m/e (%): 601 (M+H+, 100).
b) (R)-l-[[2,5-Dihydroxy-4-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 3,17 g (5,3 mmol) benzylesteru (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethyl]-2,5-dihydroxyfenyl] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 2,2 g (99 %) nadepsané sloučeniny jako bílá krystalická látka.
-57CZ 296252 B6
MS m/e (%); 421 (M+H+, 100).
Příklad 65 (R)-1 -[ [3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-2-1 -yl]-2-oxoethyl] fenyl] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-1 -[ [3-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethyl] fenyl] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Pomocí obecného postupu A s 2,0 g (8,2 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 800 mg (4,1 mmol), 1,3-fenylendioctové kyseliny se získalo po mžikové chromatografií (EtOAc) 1,93 g (84 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 586 (M+NH4 +, 100), 569 (M+H+, 60).
b) (R)-1 -[[3-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l -yl]-2-oxoethyl] fenyl] acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 1,84 g (3,2 mmol) benzylesteru (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 1,21 g (97 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 421 (M+H+, 100).
Příklad 66 (R)-1 -[4-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -karbonyl]benzoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-1 -[4-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -karbonyl]benzoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 5,8 g (24,0 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 2,0 g (12,0 mmol) benzen-1,4-diové kyseliny, bylo získáno po mžikové chromatografií (EtOAc), 4,66 g (72 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 558 (M+NH4 +, 100), 541 (M+H+, 95).
b) (R)-l-[4-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-karbonyl]benzoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 4,66 g (8,62 mmol) benzylesteru (R)-l-[4-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-karbonyl]benzoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 3,05 g (95 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvá pěna.
MS m/e (%): 378 (M+NH4 +, 100), 361 (M+H+, 55).
Příklad 67 (R)-l-[3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-karbonyl]benzoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
-58CZ 296252 B6
a) Benzylester (R)-l-[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidm-l-karbonyl]benzoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 5,8 g (24,0 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 2,0 g (12,0 mmol) benzen-l,3-diové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíi (EtOAc), 4,68 g (72 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 558 (M+NH4 +, 100), 541 (M+H+, 90).
b) (R)-1 -[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -karbonyljbenzoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 2,83 g (5,24 mmol) benzylesteru (R)-l-[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-karbonyl]benzoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 1,9 g (100 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvá pěna.
MAm/e (%): 378 (M+NH4 +, 100), 351 (M+H+, 35).
Příklad 68 (R)-1 -[6-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -karbonyl]pyridin-2-karbonyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-l-[6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-karbonyl]pyridin-2-karbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 5,8 g (24,0 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 2,0 g (12,0 mmol) pyridin-2,6-dikarboxylové kyseliny se získalo po mžikové chromatografií (EtOAc), 5,0 g (77 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 559 (M+NH4 +, 60), 542 (M+H+).
b) (R)-l-[6-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-karbonyl]pyridin-2-karbonyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 3,2 g (5,9 mmol) benzylesteru (R)-l-[6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-karbonyl]pyridin-2-karbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 1,9 g (90 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 379 (M+NH4 +, 100), 362 (M+H+, 65).
Příklad 69 (R)-l-[5-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-karbonyl]thiofen-2-karbonyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-l-[5-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-karbonyl]thiofen-2-karbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 2,0 g (8,2 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 700 mg (4,1 mmol) thiofen-2,5-dikarboxylové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíi (EtOAc)
1,84 g (84 %) nadepsané sloučeniny jako žlutá krystalická tuhá látka.
-59CZ 296252 B6
MS m/e (%): 564 (M+NH?, 70), 547 (M+H, 100).
b) (R)-l-[5-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-karbonyl]thiofen-2-karbonyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného vzorec B se 1,84 g (3,3 mmol) benzylesteru (R)-l-[5-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-karbonyl]thiofen-2-karbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 770 mg (63 %) nadepsané sloučeniny RO-64-2667/000 jako bílá krystalická látka.
MS m/e (%): 365 (Μ-ΡΓ, 65).
Příklad 70 (R) -l-[5-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-karbonyl]furan-2--karbonyl]pyrrolidm-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)~1 -[5-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -karbonyl] furan-2-karbonyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 2,0 g (8,2 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 640 mg (4,1 mmol) furan-2,5-dikarboxylové kyseliny se získalo po mžikové chromatografii (EtOAc) 1,7 g (78 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
b) (R)-l-[5-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-karbonyl]furan-2-karbonyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 1,7 g (3,2 mmol) benzylesteru (R)-l-[5-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1-karbonyl] furan-2-karbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 1,02 g (91 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 351 (M+H, 100).
Příklad 71 (S) -1 -[6-[(S)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (S)-l-[6-[(S)-2-Benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu As 1,0 g (4,1 mmol) benzylesterhydrochloridu L-prolinu a 300 mg (2,1 mmol) kyseliny adipové se získalo po mžikové chromatografíí (EtOAc) 1,07
MS m/e (%): 521 (M+H+, 100).
b) (S)-l-[6-[(S)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 1,07 g (2,1 mmol) benzylesteru (S)-l-[6-[(S)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 609 mg (87 %) nadepsané sloučeniny jako bílá krystalická tuhá látka.
MS m/e (%): 341 (M+H+, 100).
-60CZ 296252 B6
Příklad 72 (S)-l-[[4-[2-[(S)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (S)-l-[[4-[2-[(S)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu As 1,0 g (4,1 mmol) benzylesterhydrochloridu L-prolinu a 400 mg (2,1 mmol) 1,4-fenylendioctové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíi (EtOAc) 1,07 g (91 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 586 (M+NH4 +, 100), 569 (M+H+, 97).
b) (S)-l-[[4-[2-[(S)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 1,07 g (1,88 mmol) benzylesteru (S)-l-[[4-[2-[(S)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 410 mg (56 %) nadepsané sloučeniny jako bílá krystalická tuhá látka.
MS m/e (%): 389 (M+H+, 100).
Příklad 73 (S)-1 -[ [2-[2-[(S)-2-Karboxypyrrolidin- l-yl]-2-oxoethoxy] fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (S)—1 -[[2-[2-[(S)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l -yl]-2-oxoethoxy] fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu As 1,0 g (4,1 mmol) benzylesterhydrochloridu L-prolinu a 790 mg (2,1 mmol) 1,2-fenylendioxyoctové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíi (EtOAc), 1,08 g (87 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 601 (M+H+, 100).
b) (S)-l-[[2-[2-[(S)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 1,08 g (1,8 mmol) benzylesteru (S)-l-[[2-[2-[(S)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 717 mg (95 %) nadepsané sloučeniny jako bílá krystalická tuhá látka.
MS m/e (%): 421 (M+H+, 100).
Příklad 74 (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethyl]naftalen-l -yl] acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
-61 CZ 296252 B6
a) 2-Diazo-1 -(4-diazoacetylnaftalen-1 -yl)ethanon
Do míchaného roztoku 3,0 g (13,9 mmol) naftalen-1,4-dikarboxylové kyseliny a 4,4 ml (30,6 mmol) triethylaminu ve 200 ml THF při -15 °C bylo přidáno po kapkách 2,9 ml (30,6 mmol) ethylchlorformatu.
Po míchání po dobu 15 minut bylo přidáno 250 ml (přibližně 0,3M, přibližně 75 mmol) etherického roztoku diazomethanu při 0 °C a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs pak byla promyta postupně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, nasyceným roztokem chloridu amonného a nakonec nasycenou solankou a vodné fáze byly zpětně extrahovány etherem.
Sloučené organické extrakty byly vysušeny nad síranem hořečnatým a koncentrovány za vakua. Mžiková chromatografie (gradient: 15 až 50 % EtOAc/hexan) poskytla 450 mg (12 %) nadepsané sloučeniny jako žlutou krystalickou látku.
MS m/e (%): 323 (M+OAc, 100).
b) (4-Karboxymethylnaftalen-l-yl)octová kyselina
Do míchaného roztoku 450 mg (1,7 mmol) 2-diazo-l-(4-diazoacetylnaftalen-l-yl)ethanonu ve 20 ml THF při -20 °C bylo přidáno postupně ve tmě 1,5 ml vody, 86 mg (375 mmol) benzoátu stříbrného (0,22 ekvivalentu) a 687 ml (4,9 mmol) triethylaminu (2,9 ekvivalentu) a míchání pokračovalo po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs pak byla zředěna 100 ml etheru a extrahována 2x nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného.
Sloučené vodné fáze byly extrahovány 3x etherem, pak okyseleny koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou a extrahovány znovu 3x etherem. Poslední organické extrakty byly sloučeniny a vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua, čímž se získalo 330 mg (80 %) nadepsané sloučeniny jako žlutá krystalická látka.
MS m/e (%): 244 (M+, 100), 199 (M-CO2H, 80).
c) Benzylester (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]naftalen-1 -yl] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 200 mg (0,82 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 100 mg (0,41 mmol) (4—karboxymethylnaftalen-l-yl)octové kyseliny se získalo po mžikové chromatografií (EtOAc) 188 mg (75 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 636 (M+NH4 +, 100), 619 (M+H+, 75).
d) (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]naftalen-l-yl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B se 130 mg (0,21 mmol) benzylester (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoeťhyl]naftalen-1 -yl] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 79 mg (86 %) nadepsané sloučeniny jako bílá krystalická látka.
MS m/e (%): 437 (M-H~, 100).
-62CZ 296252 B6
Příklad 75 (R)-1 -[ [6-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidm-1 -yl]-2-oxoethyl]pyridin-2-yl] acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
a) (6-Kyanmethylpyridin-2-yl)acetonitril
Do míchaného roztoku 3,47 g (13,1 mmol) 2,6-bis(brommethyl)pyridinu v 50 ml dichlormethanu byl po kapkách přidán roztok 4,1 g (26,2 mmol) tetraethylamoniumkyanidu ve 20 ml dichlormethanu a reakční směs pak byla zahřívána při 45 °C po dobu 72 hodin. Reakční směs pak byla ochlazena na teplotu místnosti a zfiltrována.
Filtrát byl zkoncentrován za vakua, resuspendován v ethylacetátu, znovu zfíltrován a druhý filtrát koncentrován za vakua. Mžiková chromatografíe (33% EtOAc/hexan) poskytla 1,77 g (84 %) nadepsané sloučeniny jako bílou krystalickou látku.
MS m/e (%): 157 (M+, 100), 130 (M-HCN+, 95), 90 (55).
b) (6-Karboxymethylpyridin-2-yl)octová kyselina
Roztok 3,0 g (19,1 mmol) (6-kyanmethylpyridin-2-yl)acetonitrilu v 30 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové byl zahříván při teplotě 100 °C po dobu 24 hodin. Reakční směs pak byla ochlazena na teplotu místnosti a koncentrována za vakua. Zbytek byl znovu rozpuštěn ve vodě, bylo přidáno aktivní uhlí a směs byla zahřívána při 50 °C po dobu 30 minut. Po odstranění aktivního uhlí filtrací byl filtrát koncentrován za vakua a zbytek rekrystalizován z vody při 4 °C, čímž se získalo 2,48 g (100 %) nadepsané sloučeniny jako bělavé krystalické tuhé látky.
‘H-NMR d (250 MHz, D2O) 8,42 (1H, t, J = 8 Hz), 7,80 (2H, d, J = 8 Hz).
c) Benzylester (R)-1 -[ [6-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l -yl]-2-oxoethyl]pyridin2-yl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 9,7 g (40 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 3,9 g (20 mmol) (6-karboxymethylpyridin-2-yl)octové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíí (gradient: 0 až 10% MeOH/EtOAc), 890 mg (8 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 570 (M+H+, 100).
d) (R)-l-[[6-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]pyridin-2-yl]acetyl]pyrrolidin2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 890 mg (1,56 mmol) benzylesteru (R)—l—[[6—[2—[(R)—2— benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]pyridin-2-yl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 410 mg (67 %) nadepsané sloučeniny jako žlutá krystalická látka.
MS m/e (%): 390 (M+H+, 100).
Příklad 76 (R)-l-[[5-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]thiofen-2-yl]acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina
-63CZ 296252 B6
a) 2,5-bischlormethylthiofen
Do 63,4 ml 37% vodního roztoku formaldehydu byl přidán po kapkách za chlazení ledem koncentrovaný roztok chlorovodíkové kyseliny v množství 15,3 ml a pak bylo po kapkách přidáno 20 ml (0,25 mol) thiofenu a míchání pokračovalo po dobu 90 minut při teplotě místnosti. Reakční směs pak byla extrahována etherem a organické fáze byly postupně promyty vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nakonec nasycenou solankou. Vodné fáze byly zpětně extrahovány etherem a sloučené organické extrakty byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua, čímž se získalo 38,8 g (86 %) nadepsané sloučeniny
RO-64-4463/000 jako jantarově zbarvený olej.
MS m/e (%): 184 (M+, 8), 182 (M+, 15), 180 (M+, 24), 147 ([M-Cl], 44), 145 ([M-C1]+, 100), 110(64).
b) (5-Kyanmethylthiofen-2-yl)acetonitril
Do míchaného roztoku 15 g (82,8 mmol) 2,5-bis-chlormethylthiofenu v 500 ml dichlormethanu byl přidán po kapkách roztok 28,5 g (182 mmol) triethylamoniumkyanidu ve 100 ml dichlormethanu a reakční směs pak byla zahřívána při 45 °C po dobu 24 hodin. Reakční směs pak byla ochlazena na teplotu místnosti a promyta dvakrát vodou. Organická fáze byla vysušena nad síranem sodným a koncentrována ve vakuu. Mžiková chromatografíe (20% EtOAc/hexan) poskytla 4,88 g (36 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 162 (M+, 44), 122 ([M-CH2CN]+, 100).
c) (5-Karboxymethylthiofen-2-yl)octová kyselina
Do míchaného roztoku 1,2 g (7,4 mmol) (5-kyanmethylthiofen-2-yl)acetonitrilu v 5 ml ethanolu a 5 ml vody bylo přidáno 1,74 g (31,8 mmol) hydroxidu draselného a reakční směs byla zahřívána při teplotě 100 °C po dobu 1 hodiny. Reakční směs pak byla ochlazena na teplotu místnosti a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl okyselen chlorovodíkovou kyselinou a extrahován třikrát etherem. Sloučené organické fáze byly vysušeny nad síranem hořečnatým a koncentrovány za vakua, čímž se získalo 1,3 g (88 %) nadepsané sloučeniny jako hnědá krystalická tuhá látka.
MS m/e (%): 221 ([M+Na-H]”, 50), 199 ([M-H], 45), 155 ([M-CO2H]’, 100).
d) ierc-Butylester (R)-l-[[5-[2-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]thiofen-2-yl] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 2,23 g (13 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 1,3 g (6,5 mmol) (5-karboxymethylthiofen-2-yl)octové kyseliny se získalo po mžikové chromatografii (gradient: 1 až 10 % MeOH/EtOAc), 2,6 g (79 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 524 (M+NH4 +, 90), 507 (M+H+, 10), 451 ([M+H-C4H8]+, 30), 395 ([M+H2CH4H8]+, 100).
e) (R)-l-[[5-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]thiofen-2-yl]acetyl]pyrrolidin2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 600 mg (1,18 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[[5-[2-[(R)-2Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]thiofen-2-yl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 100 mg (21 %) nadepsané sloučeniny jako béžová krystalická látka.
MS m/e (%): 395 (M+H+, 100).
-64CZ 296252 B6
Příklad 77 (R)~ 1 -[ (2R,5 S)-6-[ (R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2,5-dimethoxy-6-oxohexanoyl]pyrrolidin2-karboxylová kyselina
a) (3R,6S)-3,6-Dimethoxycyklohexen
Literatura J. Org. Chem. 1988, 53, 5695.
Do míchaného roztoku 0,70 g (3,1 mmol) octanu palladia, 16,9 g (156 mmol) benzochinonu a 0,4 ml (6,2 mmol) methansulfonové kyseliny ve 200 ml methanolu při teplotě místnosti bylo přidáno lineárním čerpadlem během 4 hodin roztok 5,95 ml (62 mmol) 1,3-cyklohexadienu v 5 ml methanolu a míchání pokračovalo po dobu dalších 16 hodin. Reakční směs byla extrahována třikrát etherem a sloučené organické extrakty byly postupně promyty vodou 2M roztokem hydroxidu sodného a nasyceným solným roztokem. Organické fáze byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány ve vakuu. Destilace (6 mbar, teplota v sušárně 120 °C) poskytla 5,42 g (61 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
'H NMR d (250 MHz, CDC13) 5,92 (2H, s), 3,70 (2H, t, J = 5 Hz), 3,37 (6H, s), 1,90- 1,65 (4H, m).
b) (2R,5S)-2,5-dimethoxyhexandiová kyselina
Literatura J. Am. Chem. Soc. 1983, 105, 5688.
Do míchaného roztoku 5,0 g (35,2 mmol) (3R,6S)-3,6-dimethoxycyklohexanu ve 120 ml acetonu a 120 ml vody bylo přidáno 37,6 g (176 mmol) jodistanu sodného a 50 mg (0,24 mmol) chloridu ruthenitého a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Bylo přidáno 5 ml izopropanolu a míchání pokračovalo po dobu 30 minut, pak byla reakční směs zfiltrována a filtrát koncentrován za vakua na poloviční objem. Pak bylo po částech přidáno 5 g hydrogenuhličitanu sodného a směs extrahována třikrát ethylacetátem. Sloučené organické fáze byly promyty nasyceným solným roztokem, vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua, čímž se získalo 1,0 g (14 %) nadepsané sloučeniny jako oranžový olej.
MS m/e (%): 205 ([M-H]~, 100).
c) Benzylester (R)-l-[(2R,5S)-6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethoxy-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití postupu A s 1,51 g (6,2 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 643 mg (3,1 mmol) (2R,5S)-2,5-dimethoxyhexandiové kyseliny se získalo po mžikové chromatografií (gradient: 10 až 100% EtOAc/hexan, pak 10% MeOH/EtOAc), 643 mg (36 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 581 (M+H+, 100).
d) (R)-1 -[(2R,5 S)-6-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl]-2,5-dimethoxy-6-oxohexanoyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 640 mg (1,10 mmol) benzylesteru (R)-l-[(2R,5S)-6-[(R)-2benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethoxy-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 440 mg (100 %) nadepsané sloučeniny jako žlutá tuhá látka.
MS m/e (%): 399 [M-H]’, 100).
-65CZ 296252 B6
Příklad 78 (R)-1-[(2S,5S)- nebo -[(2R,5R)-6-[(R)-2-Hydroxymethylpyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethoxy-6oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) (lRS,4RS)-4-acetoxycyklohex-2-enylester kyseliny octové
Literatura J. Org. Chem. 1984, 49, 4619.
Do míchaného roztoku 2,8 g (12,5 mmol) octanu palladia, 27,2 g (267 mmol) octanu lithného a 7,64 g (70,7 mmol) benzochinonu ve 200 ml kyseliny octové při teplotě místnosti bylo přidáno 26,1 g (300 mmol) oxidu manganičitého a roztok 23,8 ml (250 mmol) 1,3-cyklohexadienu ve 400 ml pentanu a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin. Dvoufázová reakční směs byla rozdělena a fáze kyseliny octové extrahována dvakrát pentanem. Sloučené organické extrakty byly postupně promyty nasyceným solným roztokem, vodou a 2N roztokem hydroxidu sodného, pak byly organické fáze vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány ve vakuu. Rekrystalizace z pentanu poskytla 16,1 g (33,0%) nadepsané sloučeniny jako bělavou krystalickou látku.
MS m/e (%): 138 ([M-AcOH]+, 8), 96 ([M-AcOH-COCH2]+, 100), 43 (40).
b) (1 RS,4RS)-Cyklohex-2-en-l ,4-diol
Literatura J. Org. Chem. 1984, 49, 4619.
Do míchaného roztoku 19,8 g (99,8 mmol) (lRS,4RS)^4-acetoxycyklohex-2-enylesteru kyseliny octové v 500 ml methanolu bylo přidáno 120 ml 2M roztoku hydroxidu sodného a reakční směs byla refluxována po dobu 15 minut. Po ochlazení na teplotu místnosti byla reakční směs koncentrována ve vakuu na 100 ml a pak nasycena peletami hydroxidu sodného. Směs byla opakovaně extrahována ethylacetátem a sloučené organické fáze vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua, čímž se získalo 10,2 g (90 %) nadepsané sloučeniny jako bělavé krystalické látky.
MS m/e (%): 113 ([M-H]+, 13), 96 ([M-H2O]+, 36), 70 ([M-H2C=CHOH]+, 100).
c) (3RS,6RS)-3,6-Dimethoxycyklohexen
Literatura J. Org. Chem. 1988, 53, 5695.
Do 14,3 g (328 mmol) hydridu sodného (55%ní disperze v oleji) bylo přidáno po kapkách při 0 °C za míchání roztok 10,1 g, (8,85 mmol) (lRS,4RS)-cyklohex-2-en-l,4-diolu ve 100 ml THF. Pak bylo přidáno 34 ml (546 mmol) methyljodidu a míchání pokračovalo po dalších 48 hodin při teplotě místnosti. Reakce byla zchlazena nasyceným roztokem chloridu amonného a extrahována etherem. Sloučené organické extrakty byly promyty postupně nasyceným roztokem chloridu amonného a nasyceným solným roztokem, vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua, čímž se získalo 11,5 g (91 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
Ή NMR d (250 MHz, CDC13) 5,90 (2H, s), 3,82 (2H, br t), 3,37 (6H, s), 2,10 (2H, m), 1,51 (2H,m).
d) (2RS,5RS)-2,5-Dimethoxyhexandiová kyselina
Do míchaného roztoku 6,0 g (42,2 mmol) (3RS,6RS)-3,6-dimethoxycyklohexenu ve 140 ml acetonu a 140 ml vody bylo přidáno 50,5 g (236 mmol) jodistanu sodného a 67 mg (0,32 mmol) chloridu ruthenitého a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Bylo přidáno ml izopropanolu a míchání pokračovalo po dobu 30 minut, pak byla reakční směs zfiltrována
-66CZ 296252 B6 a filtrát koncentrován za vakua na polovinu objemu. Pak bylo po částech přidáno 5 g hydrogenuhličitanu sodného a směs extrahována třikrát etherem. Vodná fáze byla okyselena 25% kyselinou chlorovodíkovou a extrahována opakovaně ethylacetátem. Sloučené organické fáze byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua, čímž se získalo 1,32 g (15 %) nadepsané sloučeniny RO-64-5650/000 jako oranžový olej.
Pokračující extrakce vodné fáze po dobu 48 hodin poskytla dalších 608 mg (7 %) produktu.
MS m/e (%): 161 ([M=CO2H]+, 20), 113 (58), 101 (69), 85 (50), 71 (100).
e) Benzylester (R)-1-[(2S,5S)- nebo -[(2R,5R)-6-[(R)-2-benzyloxymethylpyrrolidin-l-yl]-
2,5-dimethoxy-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a benzylester (R)-l[(2R,5R)~ nebo -[(2S,5S)-6-[(R)-2-benzyloxymethylpyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethoxy-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 1,67 g (6,9 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 250 mg (1,2 mmol) (2RS,5RS)-2,5-dimethoxyhexandiové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíi (gradient: 50-100 % EtOAc/hexan, pak 10% MeOH/EtOAc), 95 mg (13 %) nadepsané sloučeniny (směs dvou diastereoizomerů) jako hnědý olej a 172 mg (24 %) nadepsané sloučeniny (jednotlivé separované diastereoizomery) jako žlutý olej.
MS m/e (%): 581 (M+H+, 100).
f) (R)-1-[(2S,5S)- nebo -[(2R,5R)-6-[(R)-2-Hydroxymethylpyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethoxy-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 160 mg (0,28 mmol) benzylesteru (R)-1-[(2R,5R)- nebo -[(2S,5S)-6-[(R)~2-benzyloxymethylpyrrolidin-l-yl]-2,5--dimethoxy-6-oxohexanoyl]pynOlidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 90 mg (82 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 399 ([M-H]’, 100), 355 ([M-H-CO2]’, 61).
Příklad 79 (R)-1-[(2R,5R)- nebo -[(2S,5S)-6-[(R)-2-Hydroxymethylpyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethoxy-6oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 95 mg (0,28 mmol) benzylesteru (R)-1-[(2S,5S)- nebo -[(2R,5R)-6-[(R)-2-benzyloxymethylpyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethoxy-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 70 mg (100 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 399 ([M-H] , 100), 355 ([M-H-CO2]’, 20).
Příklad 80 (R)-l-[(2,5-Dibenzyl-6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (směs tří diastereoizomerů)
a) Směs diethylesterů (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-2,5-dibenzylhex-3-endiové kyseliny
Do míchaného roztoku 688 mg (3,44 mmol) diethylesterů trans-2-buten-l ,4-dikarboxylové kyseliny v 35 ml THF bylo přidáno 1,46 g (34,4 mmol) bezvodého chloridu lithného a výsledná suspenze ochlazena na -78 °C. Po kapkách bylo přidáno 3,44 ml (6,88 mmol) 2M roztoku LDA
-67CZ 296252 B6 v THF a míchání pokračovalo po dobu 45 minut. Pak bylo přidáno 0,82 ml (6,9 mmol) benzylbromidu a míchání pokračovalo po dobu 1 hodiny při -78 °C a 10 minut při 0 °C. Reakce byla při této teplotě zchlazena přídavkem nasyceného roztoku chloridu amonného a směs byla extrahována třikrát etherem. Sloučené organické fáze byly promyty nasyceným solným roztokem, vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua. Mžiková chromatografie (5% EtOAc v hexanu) poskytla 927 mg (71 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 398 ([M+NH4]+, 100).
b) Směs (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-2,5-dibenzylhex-3-endiové kyseliny
Do míchaného roztoku 200 mg (0,53 mmol) směsi diethylesteru (E)-(2R,5S)- a (2RS,5SR)-2,5dibenzylhex-3-endiové kyseliny v 5 ml THF bylo přidáno 4,3 ml (4,3 mmol) 1M roztoku hydroxidu sodného.
Po míchání po dobu 68 hodin při teplotě místnosti byla reakční směs okyselena na pH 3 přídavkem 1M kyseliny chlorovodíkové a extrahována třikrát ethylacetátem. Sloučené organické fáze byly promyty postupně vodou a nasyceným solným roztokem a vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua. Mžiková chromatografie (50% EtOAc v hexanu obsahujícím 1% AcOH) poskytla 127 mg (74 %) nadepsané sloučeniny jako bílou krystalickou látku.
MS m/e (%): 342 ([M+NH4]+, 100).
c) Benzylester (E)-(R)-1 -[2,5-dibenzyl-6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 —yl]—6— oxohex-3-enoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs tří diastereoizomerů).
Za použití obecného postupu A s 1,04 g (4,3 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 700 mg (2,16 mmol) směsi diethylesteru (E)-(2R,5S)~ a -(2RS,5SR)-2,5-dibenzylhex-3endiové kyseliny se získalo po mžikové chromatografii (5% MeOH v EtOAc) 926 mg (61 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 716 (M+NH4 +, 100), 699 (M+H+, 85).
d) (R)-1 -[2,5-Dibenzyl-6-[(R)-2-karboxypyrrolidin- l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina (směs tří diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu B s 926 mg (1,33 mmol) benzylesteru (E)-(R)-l-[2,5-dibenzyl-6[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6-oxohex-3-enoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs tří diasteroizomerů) poskytlo 610 mg (89 %) nadepsané sloučeniny jako bílou krystalickou látku.
MS m/e (%): 519 ([M-H]”, 100).
Příklad 81 (R)-l-[2,5-Dibutyl-6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (jeden z 3 možných diastereoizomerů)
a) Směs diethylesteru (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-2,5-dibutylhex-3-endiové kyseliny
Do míchaného roztoku 2,0 g (9,99 mmol) diethylesteru trans-2-buten-l,4-dikarboxylové kyseliny v 80 ml THF bylo přidáno 2,54 g (59,9 mmol) bezvodého chloridu lithného a výsledná suspenze byla ochlazena na -78 °C. Po kapkách bylo přidáno 10,0 ml (20,0 mmol) 2M roztoku LDA v THF a míchání pokračovalo po dobu 45 minut. Pak bylo přidáno 2,2 ml (20,4 mmol) butyl-68CZ 296252 B6 bromidu a míchání pokračovalo po dobu 15 minut při -78 °C, pak 30 minut při 0 °C a pak 4 hodiny při teplotě místnosti.
Reakce byla zchlazena přídavkem nasyceného roztoku chloridu sodného a směs extrahována třikrát etherem. Sloučené organické fáze byly postupně promyty nasyceným roztokem chloridu amonného, vodou a nasyceným solným roztokem, vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua. Následná mžiková chromatografie (10% EtOAc v hexanu pro první kolonu, pak gradient 10 až 100 % toluenu vcyklohexanu pro druhou kolonu) poskytla 500 mg (16%) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 330 ([M+NH4]+, 100).
b) Směs (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-2,5-dibutylhex-3-endiové kyseliny
Do míchaného roztoku 435 mg (1,39 mmol) směsi diethylesteru (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-
2,5-dibutylhex-3-endiové kyseliny v 10 ml THF bylo přidáno 26 ml (26 mmol) 1M roztoku hydroxidu sodného.
Po míchání po dobu 72 hodin při teplotě místnosti byla reakční směs okyselena na pH 3 přídavkem 1M chlorovodíkové kyseliny a extrahována 3x ethylacetátem. Sloučené organické fáze byly promyty postupně vodou a nasycenou solankou, vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua, čímž se získalo 346 mg (97 %) nadepsané sloučeniny jako bílá krystalická látka.
MS m/e (%): 255 ([M-H]~, 60), 211 ([M-H-CO2]”, 100).
c) Benzylester (E)-(R)-l-[2,5-dibutyl-6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6-oxohex-3-enoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs 2 ze 3 možných diastereoizomerů) a benzylester (E)-(R)-1 -[2,5-dibutyl-6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-6-oxohex3-enoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (v podstatě jeden ze tří možných diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu A s 653 mg (2,70 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 346 mg (1,35 mmol) směsi (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-2,5-dibutylhex-3-endiové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíí (gradient 33 až 50 % EtOAc v hexanu) 148 mg (17 %) nadepsané sloučeniny RO-64-3271/000 (směs dvou diastereoizomerů) jako žlutý olej a 116 mg (14 %) nadepsané sloučeniny (jeden diastereoizomerů jako žlutý olej.
MS m/e (%): 648 (M+NH4 +, 90), 631 (M+H+, 100).
d) (R)-l-[2,5-Dibutyl-6-[(R)-karboxypyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (jeden ze tří možných diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu B se 140 mg (0,22 mol) benzylesteru (E)-(R)-l-[2,5-dibutyl-6[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6-oxohex-3-enoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (v podstatě jeden ze tří možných diastereoizomerů) se získalo 81 mg (81 %) nadepsané sloučeniny RO-64—3273/000 (jeden diastereoizomer jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 451 ([M-H], 100).
Příklad 82 (R)-l-[2,5-Dibutyl-6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (směs dvou ze tří možných diastereoizomerů)
-69CZ 296252 B6
Za použití obecného postupu B se 110 mg (0,22 mmol) benzylesteru (E)—(R)—l—[2,5—dibutyl—6— [(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6-oxohex-3-enoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs dvou ze tří možných diastereoizomerů) se získalo 69 mg (88 %) nadepsané sloučeniny (2 diastereoizomery) jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 451 ([M-H]“, 100).
Příklad 83 (R)-l -[2,5-Diizopropyl-6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina (směs tří diastereoizomerů)
a) Směs diethylesteru (E)-(2R,5S)- a (2RS,5SR)-2,5-diizopropylhex-3-endiové kyseliny
Do míchaného roztoku 5,0 g (25,0 mmol) diethylesteru trans-2-buten-l ,4-dikarboxylové kyseliny ve 120 ml THF bylo přidáno 6,35 g (150 mmol) bezvodého chloridu lithného a výsledná suspenze byla ochlazena na -78 °C. Po kapkách bylo přidáno 25,0 ml (50,0 mmol) 2M roztoku LDA v THF a míchání pokračovalo po dobu 45 minut. Pak bylo přidáno 4,7 ml (50 mmol) izopropylbromidu a míchání pokračovalo po dobu 15 minut při -78 °C, pak 4 hodiny při 0 °C a pak 48 hodin při teplotě místnosti.
Reakce byla zchlazena přídavkem nasyceného roztoku chloridu amonného a směs extrahována třikrát etherem.
Sloučené organické fáze byly promyty postupně nasyceným roztokem chloridu amonného a nasyceným solným roztokem, vysušeny na síranem sodným a koncentrovány za vakua. Následná mžiková chromatografie (20% EtOAc v hexanu pro první kolonu, 5% EtOAc v hexanu pro druhou kolonu, 10% EtOAc v hexanu pro třetí kolonu) poskytla 259 mg (4 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 302 ([M+NH4]+, 100).
b) Směs (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-2,5-diizopropylhex-3-endiové kyseliny
Do míchaného roztoku 108 mg (0,38 mmol) směsi diethylesteru (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-
2,5-diizopropylhex-3-endiové kyseliny v 5 ml THF bylo přidáno 10 ml (10 mmol) 1M roztoku hydroxidu sodného. Po míchání po dobu 96 hodin při teplotě místnosti byla reakční směs okyselena přídavkem 1M kyseliny chlorovodíkové a extrahována třikrát ethylacetátem. Sloučené organické fáze byly promyty postupně vodou a nasyceným solným roztokem, vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány ve vakuu, čímž se získalo 70 mg (81 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 227 ([M-H]“, 100).
c) Benzylester (E)-(R)-l-[2,5-diizopropyl-6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6oxohex-3-enoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs tří diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu A se 114 mg (0,47 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 54 mg (0,24 mmol) směsi (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-2,5-diizopropylhex-3-endiové kyseliny poskytlo po mžikové chromatografii (gradient 33 až 50% EtOAc v hexanu) 15 mg (11%) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 620 (M+NH4 +, 100).
-70CZ 296252 B6
d) (R)-l-[2,5-Diizopropyl-6-[(R)-2-karboxypyrrolidm-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina (směs tří diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu B s 41 mg (0,07 mmol) benzylesteru (E)-(R)-l-[2,5-diizopropyl6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6-oxohex-3-enoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs tří diastereoizomerů) se získalo 28 mg (100%) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 423 ([M-H]~, 100).
Příklad 84 (R)-1 -[5-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -karbonyl]-7-methoxy-2-(2-methoxyethyl)heptanoyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (směs tří diastereoizomerů)
a) Směs diethylesteru (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-2,5-bis-(2-methoxyethyl)hex-3-endiové kyseliny
Do míchaného roztoku 5,0 g (25,0 mmol) diethylesteru trans-l-buten-l,4-dikarboxylové kyseliny ve 125 ml THF bylo přidáno 6,35 g (150 mmol) bezvodého chloridu lithného a výsledná suspenze ochlazena na -78 °C. Pak bylo přidáno po kapkách 25,0 ml (50,0 mmol) 2M roztoku LDA v THF a míchání pokračovalo po dobu 45 minut. Pak bylo přidáno 7,4 ml (78,7 mmol) 2-methoxyethylbromidu a míchání pokračovalo po dobu 15 minut při -78 °C, pak 1 hodinu při 0 °C a pak 2 hodiny při teplotě místnosti. Reakce byla zchlazena přídavkem nasyceného roztoku chloridu amonného a směs byla extrahována třikrát etherem. Sloučené organické fáze byly promyty postupně nasyceným roztokem chloridu amonného, vodou a nasycenou solankou, vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua. Mžiková chromatografie (50% toluen v EtOAc) poskytla 1,29 g (16 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 334 ([M+NH4]+, 100).
b) Směs (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-2,5-bis(2-methoxyethyl)hex-3-endiová kyselina
Do míchaného roztoku 1,29 g (4,08 mmol) směsi diethylesteru (E)-(2R,5S)- a -(2RS,5SR)-2,5bis(2-methoxyethyl)hex-3-endiové kyseliny v 10 ml THF bylo přidáno 33 ml (33 mmol) 1M roztoku hydroxidu sodného. Po míchání po dobu 18 hodin při teplotě místnosti byla reakční směs okyselena na pH 3 přídavkem 1M kyseliny chlorovodíkové a extrahovány třikrát ethylacetátem. Sloučené organické fáze byly promyty postupně vodou a nasyceným solným roztokem, vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua, čímž se získalo 894 mg (84 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 259 ([M-H]’, 100).
c) Benzylester (E)-(R)-l-[5-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-karbonyl]-7-methoxy2-(2-methoxyethyl)heptanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs tří diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu A s 1,86 g (7,69 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 894 mg (3,84 mmol) směsi (E)-(2R,5S)- a (2RS,5SR)-2,5-bis(2-methoxyethyl)hex-3-endiové kyseliny se získalo po následné mžikové chromatografíí (gradient 50 až 100 % EtOAc v hexanu, pak 10 % MeOH v EtOAc pro první kolonu, 20 % toluenu EtOAc pro druhou kolonu, 20 % toluenu v EtOAc pro třetí kolonu, gradient 25 až 20 % toluenu v EtOAc pro čtvrtou kolonu), 146 mg (7 %) nadepsané sloučeniny jako světležlutý olej.
MS m/e (%): 652 (M+NH4 +, 50), 635 (M+H+, 100).
-71 CZ 296252 B6
d) (R)-l-[5-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-karbonyl]-7-methoxy-2-(2-methoxyethyl)heptanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (směs tří diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu B se 140 mg (0,23 mmol) benzylesteru (E)-(R)-l-[5-((R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-7-methoxy-2-(2-methoxyethyl)heptanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs tří diastereoizomerů) se získalo 92 mg (88 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 455 ([M-H]’, 100).
Příklad 85 (R)-l-[2-[4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-l-methyl-2-oxoethyl]fenyl]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (směs tří diastereoizomerů)
a) Benzylester (4-benzyloxykarbonylmethylfenyl)octové kyseliny
Do suspenze 10,0 g (51,5 mmol) benzen-1,4-dioctové kyseliny, 0,94 g (7,73 mmol) 4-dimethylaminopyridinu a 5,33 ml (51,5 mmol) benzylalkoholu ve 150 ml dichlormethanu při 0 °C bylo přidáno 11,85 g (61,8 mmol) N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidu a míchání pokračovalo při 0 °C po dobu 2 hodin a pak při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Reakční směs pak byla promyta postupně 1M kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a konečně nasyceným solným roztokem a vodná fáze zpětně extrahována dichlormethanem. Sloučené organické extrakty byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua. Mžiková chromatografíe (50 % EtOAc v hexanu) pak poskytla nadepsanou sloučeninu jako světležlutý olej, který při stání krystalizoval.
MS m/e (%): 374 (M+, 10), 283 ([M-Bn]+, 16), 239 ([M-Bn-CO2]+, 18), 91 (Bn+, 100).
b) Směs benzylesteru (R)~2-[4-[(S)- a (RS)-2-[4—[(RS)-l-benzyloxykarbonylethyl]fenyl]propionové kyseliny
Do míchaného roztoku 2,0 g (5,3 mmol) benzylesteru (4-benzyloxykarbonylmethylfenyl)octové kyseliny v 80 ml THF bylo přidáno 1,35 g (32 mmol) bezvodého chloridu lithného a výsledná suspenze byla ochlazena na -78 °C. Po kapkách bylo přidáno 10,7 ml (21,4 mmol) 2M roztoku LDA v THF a míchání pokračovalo po dobu 45 minut. Pak bylo přidáno 1,33 ml (21,3 mmol) methyljodidu a míchání pokračovalo po dobu 15 minut při-78 °C, pak 20 minut při 0 °C. Reakce byla zchlazena při této teplotě přídavkem nasyceného chloridu amonného a směs byla extrahována třikrát etherem. Sloučené organické fáze byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua. Mžiková chromatografíe (EtOAc) poskytla 2,1 g (100 %) nadepsané sloučeniny jako hnědý olej.
MS m/e (%): 420 ([M+NH4]+, 100).
c) Směs (R)-2-[4-[(S)- a (RS)-2-[4-[(RS)-l-karboxyethyl]fenyl]propionové kyseliny
Roztok 230 mg (0,57 mmol) benzylesteru směsi (R)-2-[4-[(S)- a (RS)-2-[4—[(RS)-l-benzyloxykarbonylethyl]fenyl]propionové kyseliny ve 20 ml ethanolu byl míchán s 5 hmotnostními % 10% palladia na aktivním uhlí pod 1 atm vodíku po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Po filtraci k odstranění katalyzátoru byla reakční směs koncentrována ve vakuu, čímž se získalo 70 mg (55 %) nadepsané sloučeniny jako bílá krystalická látka.
MS m/e (%): 222 (M+, 23), 177 ([M-CO2H]”, 100), 131.
-72CZ 296252 B6
d) Benzylester (R)-l-[2-[4-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-l-methyl-2-oxoethyl]fenyl]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs tří diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu A s 370 mg (1,53 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 170 mg (0,77 mmol) směsi (R)-2-[4-[(S)- a (RS)-2-[4-[(RS)-l-karboxyethyl]fenyl]propionové kyseliny poskytla po mžikové chromatografií (EtOAc) 170 mg (38 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 614 (M+NH4 _, 100), 597 (M+H+, 60).
e) (R)-l-[2-[4-[2-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-l-methyl-2-oxoethyl]fenyl]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (směs tří diastereoizomerů)
Za použití obecného postupu B se 170 mg (0,20 mmol) benzylesteru (R)-l-[2-[4-[2-[(R)-2benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 —y 1]—1 -methyl-2-oxoethyl] fenyl]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (směs tří diastereoizomerů) se získalo 50 mg (42 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 415 ([M-H]“, 100).
Příklad 86 (2E,4E)-(R)-1 -[6-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l —y 1]—2,5-dimethyl-6-oxohexa-2,4-dienoyl] pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (2E,4E)-(R)-l-[6-[(R)“2--benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethyl6-oxohexa-2,4-dieonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do míchané suspenze 0,91 g (5,33 mmol) 2,5-dimethylhex-2,4-dien-l,6-diové kyseliny v 80 ml dichlormethanu obsahujícím 2 kapky pyridinu byl přidán po kapkách při teplotě místnosti 0,77 ml (10,6 mmol) thionylchloridu a reakční směs pak byla zahřívána při teplotě 50 °C po dobu 2 hodin. Výsledný roztok byl ochlazen na 0 °C a přidán po kapkách do roztoku 2,57 g (10,6 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 3,0 ml (21,5 mmol) triethylaminu v 50 ml dichlormethanu při 0 °C. Míchání pokračovalo po dobu 2 hodin při 0 °C a pak 24 hodiny při teplotě místnosti. Reakční směs byla pak promyta postupně 1M chlorovodíkovou kyselinou a vodou a vodné fáze zpětně extrahovány dichlormethanem. Sloučené organické extrakty byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány ve vakuu. Mžiková chromatografíe (EtOAc) poskytla 2,79 g (96 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 562 (M+NH4 +, 100), 545 (M+H+, 5).
b) (2E,4E)-(R)-l-[6-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethyl-6-oxohexa-2,4-dieonyljpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Za použití obecného postupu B s 1,14 g (2,09 mmol) benzylesteru (2E,4E)-(R)-l-[6-[(R)-2benzyloxykarbonyl]pyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethyl-6-oxohexa-2,4—dieonylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a s dioxanem jako rozpouštědlem se získalo 127 mg (16 %) nadepsané sloučeniny jako bílá tuhá látka.
MS m/e (%): 365 (M+H+, 100).
-73 CZ 296252 B6
Příklad 87 (R)-l-[6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethyl-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (směs tří diastereoizomerů)
Roztok 593 mg (1,09 mmol) benzylesteru (2E,4E)-(R)-l-[6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-2,5-dimethyl-6-oxohexa-2,4-dienoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 15 ml dioxanu byl míchán s 25 mg (0,11 mmol) oxidu platiničitého pod 1 atm vodíku po dobu 72 hodin při teplotě místnosti. Po filtraci pro odstranění katalyzátoru byla reakční směs koncentrována za vakua a azeotropována třikrát chloroformem na rotační odparce k odstranění posledních stop dioxanu, pak triturována v etheru, čímž se získalo 400 mg (100 %) nadepsané sloučeniny jako bílá pěna.
MS m/e (%): 369 (M+H+, 100).
Příklad 88
Směs (R)-1-[(3R,4R)- a -[(3S,4S)-3,4-dihydroxy-6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
a) Benzylester (R)-l-[6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]pyridin-2-karbonylJpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 5,0 g (20,6 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 1,5 g (10,3 mmol) Zraws-3-hexendiové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíi (EtOAc) 3,15 g (59 %) nadepsané sloučeniny jako světležlutý olej.
MS m/e (%): 536 (M+NH4 +, 100), 519 (M+H+, 80).
b) Benzylester směsi (R)-1-[(3R,4R)- a -[(3S,4S)-6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-lyl]-3,4-dihydroxy-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do míchaného roztoku 3,13 g (6,04 mmol) benzylesteru (R)-l-[6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-karbonyl]pyridin-2-karbonyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 10 ml acetonu a 10 ml vody bylo přidáno 980 mg (7,25 mmol) 4-methylmorfolin-4-oxidu a 0,6 ml 2,5% roztoku oxidu osmičelého v Zerc-butanolu a míchání pokračovalo po dobu 82 hodin při teplotě místnosti. Pak bylo přidáno 50 ml 38% roztoku hydrogensiřičitanu sodného při 0 °C a míchání pokračovalo po dobu dalších 15 minut. Reakční směs pak byla zfíltrována a extrahována třikrát ethylacetátem. Sloučené organické extrakty byly promyty postupně 1M chlorovodíkovou kyselinou a nasycenou solankou, vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány ve vakuu, čímž se získalo 3,34 g (100 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 575 (M+Na+, 35), 570 (M+NH4 +, 55), 535 (M+H+, 100).
c) Směs (R)-1-[(3R,4R)- a -[(3S,4S)-3,4-dihydroxy-6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-6oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu B s 506 mg (0,92 mmol) směsi benzylesteru (R)-1-[(3R,4R)a -[(3S,4S)-6-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3,4-dihydroxy-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny se získalo 341 mg (100 %) nadepsané sloučeniny jako bílá tuhá látka.
MS m/e (%): 395 (M+NH4 +, 55), 373 (M+H+, 100).
-74CZ 296252 B6
Příklad 89 (E)-(R)-l-[6-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-oxohex-3-enoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Zerc-Buty lester (E)-(R)-1 -[6-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl)-6-oxohex-3enoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu A s 1,5 g (8,76 mmol) íerc -butylesteru D-prolinu a 630 mg (4,37 mmol) trans-3-hexendiové kyseliny se získalo po mžikové chromatografíi (10% EtOH v EtOAc) 1,59 g (77 %) nadepsané sloučeniny jako bílá krystalická látka.
MS m/e (%): 568 (M+NH+, 35), 451 (M+H+, 100), 395 ([M+H-C3H8]+, 32), 339 ([M+H-2C3H8]+, 40).
b) (E)-(R)-1 -[6-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-1 -yl)-6-oxohex-3-enoyl]pynOlidin-2-karboxylová kyselina
Do míchaného roztoku 600 mg (1,33 mmol) (E)-(R)-l-[6-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-6-oxohex-3-enoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve formě Zerc-butylesteru v 15 ml dichlormethanu při 0 °C bylo přidáno po kapkách 4,4 ml (57,8 mmol) trifluoroctové kyseliny a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Koncentrace za vakua a azeotropování 3 x chloroformem na rotační odparce poskytlo 402 mg (90 %) nadepsané sloučeniny jako bílou pěnu.
MS m/e (%): 339 (M+H+, 100).
Příklad 90 (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-KarboxypynOlidin-l-yl]-3-oxopropyl]propylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-l-akryloylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do míchaného roztoku 390 mg (1,6 mmol) benzylesterhydrochloridu D-prolinu a 0,47 ml (3,4 mmol) triethylaminu ve 20 ml dichlormethanu a 0,47 ml (3,4 mmol) triethylaminu ve 20 ml dichlormethanu při 0 °C bylo po kapkách přidáno 0,2 ml (2,4 mmol) akryloylchloridu a míchání pokračovalo po dobu 24 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs pak byla promyta postupně vodou, 1M chlorovodíkovou kyselinou a ještě jednou vodou a vodné fáze byly zpětně extrahovány dichlormethanem. Sloučené organické extrakty byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány ve vakuu, čímž se získalo 420 mg (100 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 259 (M+, 25), 124 (100), 91 (25), 70 (21).
b) Benzylester (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]propylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Roztok 400 mg (1,5 mmol) benzylesteru (R)-l-akryloylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a 63 ml (0,75 mmol) propylaminu v 5 ml acetonitrilu byl míchán po dobu 16 hodin při teplotě místnosti, pak po dobu 6 hodin při 45 °C a nakonec 16 hodin při 80 °C. Koncentrace za vakua a mžiková chromatografie (20% H2O v acetonu) poskytlo 84 mg (19 %) nadepsané sloučeniny jako bleděžlutý olej.
MS m/e (%): 578 (M+H+, 100).
-75CZ 296252 B6
c) (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]~3-oxopropyl]propylamino]propionylJpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 84 mg (0,15 mmol) benzylesteru (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-lyl]-3-oxopropyl]propylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 3 ml ethanolu byl míchán s 10 mg 10% palladia na aktivním uhlí pod tlakem 0,1 MPa vodíku po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Po filtraci k odstranění katalyzátoru, koncentraci za vakua se získalo 58 mg (100 %) nadepsané sloučeniny jako bílá tuhá látka.
MS m/e (%): 398 (M+H+, 100).
Příklad 91 (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]cyklopropylmethylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-1—[3—[[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-3-oxopropyl]cyklopropylmethylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Roztok 444 mg (1,71 mmol) benzylesteru (R)-l-akryloylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a 74 ml (0,85 mmol) cyklopropylmethylaminu v 5 ml acetonitrilu byl míchán po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti, pak po dobu 16 hodin při 80 °C. Koncentrace za vakua a mžiková chromatografíe (gradient 0 až 100 % MeOH v EtOAc) poskytla 220 mg (44 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 590 (M+H+, 100).
b) (R)-l -[3-[ [3-[(R)-2-Karboxypyrrolidin-l -yl]-3-oxopropyl] cyklopropylmethylamino] propionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Roztok 220 mg (0,37 mmol) benzylesteru (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-benzyloxykarbonylpyrrolidin1 -yl]-3-oxopropyl] cyklopropylmethylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 20 ml izopropanolu bylo mícháno s 10 mg 10% palladia na aktivním uhlí pod 0,1 MPa vodíku po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Po filtraci pro odstranění katalyzátoru, koncentraci za vakua, se získalo 153 mg (100 %) nadepsané sloučeniny jako žlutá tuhá látka.
MS m/e (%): 408 ([M-H]’, 100).
Příklad 92
Trifluoracetát (R)-l-[3-[3-(3,4-dimethoxybenzyl)-[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl] amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
a) /erc-Butylester (R)-l-akryloylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do míchaného roztoku 5,0 g (29,2 mmol) /erc-butylesteru D-prolinu a 4,5 ml (32,1 mmol) triethylaminu ve 180 ml dichlormethanu při 0 °C bylo přidáno po kapkách 3,6 ml (43,8 mmol) akryloylchloridu a míchání pokračovalo po dobu 48 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs pak byl promyta postupně vodou, nasyceným roztokem chloridu amonného, znovu vodou a pak nasycenou solankou a vodné fáze byly zpětně extrahovány dichlormethanem. Sloučené organické extrakty byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua, čímž se získalo 6,6 g (100 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
-76CZ 296252 B6
MS m/e (%): 243 (M+NH4 +, 33), 226 (M+H+, 100).
b) terc-Butylester (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-terc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-Oxopropyl](3,4-dimethoxybenzyl)amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Roztok 1,0 g (4,44 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-akryloylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a 0,33 ml (2,22 mmol) veratrylaminu ve 25 ml acetonitrilu byl míchán po dobu 16 hodin při teplotě 80 °C. Koncentrace za vakua a mžiková chromatografíe (gradient 0 až 10 % MeOH v EtOAc) poskytly 150 mg (10 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý olej.
MS m/e (%): 618 (M+H+, 100).
c) Trifluoracetát (R)-l-[3-[(3,4-dimethoxybenzyl)-[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3oxopropyl]amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
Do míchaného roztoku 150 mg (0,24 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-terc- butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-3-oxopropyl]-(3,4-dimethoxybenzyl)amino]propionyl]pyrrolidin-2karboxylové kyseliny v 5 ml dichlormethanu při 0 °C byla po kapkách přidána trifluoroctová kyselina v množství 1,0 ml a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Koncentrace za vakua a azeotropování 3 x chloroformem na rotační odparce poskytly po trituraci v etheru 130 mg (87 %) nadepsané sloučeniny jako žlutou krystalickou látku.
MS m/e (%): 506 (M+H+, 100).
Příklad 93
Trifluoracetát (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]-(2-methoxyethyl)amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
a) Zerc-B utylester (R)-1 -[3-[[3-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-3-oxopropylj(2-methoxyethyl)amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Roztok 1,0 g (4,44 mmol) terc-butylesteru (R)-l-akryloylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a 0,19 ml (2,22 mmol) 2-methoxyethylaminu ve 25 ml acetonitrilu byl míchán po dobu 16 hodin při 80 °C. Koncentrace za vakua a mžiková chromatografíe (gradient 0 až 10 % MeOH v EtOAc) poskytly 300 mg (23 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý olej.
MS m/e (%): 526 (M+H+, 100).
b) Trifluoracetát (R)-1—[3—[ [3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-3-oxopropyl]-(2-methoxyethyl)amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
Do míchaného roztoku 150 mg (0,29 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-/erc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]-(2-methoxyethyl)amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml dichlormethanu při 0 °C byl po kapkách přidán 1,0 ml trifluoroctové kyseliny a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Koncentrace za vakua a azeotropování třikrát chloroformem na rotační odparce poskytly po resuspenzi ve vodě a následné lyofilizaci 100 mg (67 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 436 (M+Na+, 35), 414 (M+H+, 100).
-77CZ 296252 B6
Příklad 94
Trifluoracetát (R)-l-[3-[benzyl-[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]-amino]propionyl]pyrrolidm-2-karboxylové kyseliny (1:1)
a) Zerc-Butylester (R)-l-[3-[benzyl-[3-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl] amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Roztok 1,0 g (4,44 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-akryloylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a 0,24 ml (2,22 mmol) benzylaminu v 25 ml acetonitrilu byl míchán po dobu 16 hodin při teplotě 80 °C. Koncentrace za vakua a mžiková chromatografie (gradient 0 až 10 % MeOH v EtOAc) poskytly 470 mg (34 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 558 (M+H+, 100).
b) Trifluoracetát (R)-l-[3-[benzyl-[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
Do míchaného roztoku 200 mg (0,36 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[3-[benzyl-[3-[(R)-2-Zercbutoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml dichlormethanu při 0 °C byl přidán po kapkách 1,0 ml trifluoroctové kyseliny a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Koncentrace za vakua a trojnásobné azeotropování chloroformem na rotační odparce poskytly po trituraci v etheru 160 mg (80 %) nadepsané sloučeniny jako žlutou krystalickou látku.
MS m/e (%): 468 (M+Na+, 30), 446 (M+H+, 100).
Příklad 95
Trifluoracetát (R)-1 -[3-[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-3-oxopropylamino]propionyl] pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
a) Zerc-Butylester (R)-1 -[3-[ [3-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidm-1 -yl]-3-oxopropyl](4-trifluormethylbenzyl)amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Roztok 1,0 g (4,44 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-akryloylpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a 0,32 ml (2,22 mmol) para-trifluormethylbenzylaminu ve 25 ml acetonitrilu byl míchán po dobu 16 hodin při 80 °C. Koncentrace za vakua a mžiková chromatografie (gradient 0 až 10 % MeOH v EtOAc) poskytly 480 mg (31 %) nadepsané sloučeniny jako světlehnědý olej.
MS m/e (%): 626 (M+H+, 100).
b) Zerc-Butylester (R)-l-[3-[3-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a Zerc-butylester (R)-l-[3-[[3-[(R)-2Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]ethylamino]propionyl]pyrrolidm-2-karboxylové kyseliny
Roztok 290 mg (0,46 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]-(4-trifluormethylbenzyl)amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 50 ml ethanolu byl míchán s 30 mg 10% palladia na aktivním uhlí pod tlakem
0,1 MPa vodíku po dobu 72 hodin při teplotě místnosti. Po filtraci k odstranění katalyzátoru poskytla koncentrace ve vakuu a mžiková chromatografie (gradient 0 až 100 MeOH v EtOAc obsahujícím 1 % Et3N) 36 mg (17 %) nadepsané sloučeniny Zerc-butylesteru (R)—1—[3—[3—[(R)—
-78CZ 296252 B6
2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidm-l-yl]-3-oxopropylammo]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 468 (M+H+, 100).
Další mžiková chromatografie méně polárních frakcí (gradient 0 až 20 % MeOH v EtOAc obsahujícím 1 % Et3N) poskytla 87 mg (38 %) vedlejšího produktu Zerc-butylesteru (R)—l—[3—[[3— [(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]ethylamino]propionyl]pyrrolidin-2karboxylové kyseliny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 496 (M+H+, 100)
c) Trifluoracetát (R)-l-[3-[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
Do míchaného roztoku 33 mg (0,07 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[3-[3-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml dichlormethanu při 0 °C byl přidán po kapkách 1,0 ml trifluoroctové kyseliny a míchání pokračovalo po dobu 16 h při teplotě místnosti. Koncentrace ve vakuu a azeotropování třikrát chloroformem na rotační odparce poskytly po resuspendaci ve vodě a následné lyofilizaci 19 mg (76 %) nadepsané sloučeniny jako žlutou sklovitou látku.
MS m/e (%): 354 ([M-H]“, 100).
Příklad 96
Trifluoracetát (R)-l-[3-[ethyl-[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
Do míchaného roztoku 85 mg (0,17 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl]-3-oxopropyl] ethylamino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny v 5 ml dichlormethanu při 0 °C byl po kapkách přidán 1,0 ml trifluoroctové kyseliny a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Koncentrace za vakua a azeotropování třikrát chloroformem na rotační odparce poskytly po resuspendaci ve vodě a lyofilizaci 63 mg (97 %) nadepsané sloučeniny jako žlutou krystalickou látku.
MS m/e (%): 442 ([M+OAcf, 35), 382 ([M-H]~, 100).
Příklad 97
Trifluoracetát (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]-(4-trifluonnethylbenzyl)amino]propionyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do míchaného roztoku 200 mg (0,32 mmol) Zerc-butylesteru (R)-l-[3-[[3-[(R)-2-Zerc-butoxykarbonylpyrrolidin-l-yl]-3-oxopropyl]-(4-trifluormethylbenzyl)amino]propionyl]pyrrolidin-2karboxylové kyseliny v 5 ml dichlormethanu při 0 °C byl přidán po kapkách 1,0 ml trifluoroctové kyseliny a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Koncentrace za vakua a azeotropování třikrát s chloroformem na rotační odparce poskytly po trituraci v etheru 150 mg (75 %) nadepsané sloučeniny jako žlutou krystalickou látku.
MS m/e (%): 536 (M+Na+, 20), 514 (M+H+, 100).
-79CZ 296252 B6
Příklad 98
Směs (R)-l-[6-[(S)- a (RS)-l-[6-[(RS)-2-karboxypyrrolidin--l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester lH-pyrrol-2--karboxylové kyseliny
Literatura J. Org. Chem. 1979,44, 975.
Do míchaného roztoku 5,0 g (45,0 mmol) pyrrol-2-karboxylové kyseliny a 31,3 ml (225 mmol) triethylaminu ve 100 ml DMF bylo přidáno 26 ml (225 mmol) benzylbromidu a míchání pokračovalo po dobu 72 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs pak byla koncentrována za vakua a zbytek resuspendován v dichlormethanu a promyt dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a dvakrát vodou a vodné fáze zpětně extrahovány dichlormethanem. Sloučené organické extrakty byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua. Mžiková chromatografíe (25 % EtOAc v hexanu) poskytla 8,23 g (90 %) nadepsané sloučeniny jako žlutý olej.
MS m/e (%): 201 (M+, 33), 94 ([M-OBn]+, 22), 91 (Bn+, 100).
b) Benzylester 1 -[6-(2-benzyloxykarbonylpyrrol-1 -yl)-6-oxohexanoyl]-1 H-pyrrol-2-karboxylové kyseliny
Do míchaného roztoku 1,0 g (4,97 mmol) benzylesteru lH-pyrrol-2-karboxylové kyseliny, 0,06 g (0,50 mmol) 4-dimethylammopyridinu a 0,82 ml (5,47 mmol) 1,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-enu v 40 ml dichlormethanu při 0 °C bylo po kapkách přidáno 0,36 ml (2,49 mmol) adipoylchloridu a míchání pokračovalo po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Reakční směs pak byla promyta postupně IN chlorovodíkovou kyselinou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nakonec nasycenou solankou a vodné fáze zpětně extrahovány dichlormethanem.
Sloučené organické extrakty byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua. Mžiková chromatografíe (25 % EtOAc v hexanu) poskytla 450 mg (35 %) nadepsané sloučeniny jako bílou krystalickou tuhou látku.
MS m/e (%): 530 (M+NH4 +, 100).
c) Směs (R)—1—[6—[(S)— a (RS)-l-[6-[(RS)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Za použití obecného postupu B s 800 mg (1,56 mmol) benzylesteru l-[6-(2-benzyloxykarbonylpyrrol-l-yl)-6-oxohexanoyl]-lH-pyrrol-2-karboxylové kyseliny se získalo 470 mg (91 %) nadepsané sloučeniny jako bílá krystalická látka.
MS m/e (%): 339 ([M-H]”, 100).
Příklad 99 l-[6-(2-karboxypyrrol-l-yl)-6-oxohexanoyl]-lH-pyrrol-2-karboxylová kyselina
a) íerc-Butylester lH-pyrrol-2-karboxylové kyseliny
Literatura Tetrahedron 1985, 41, 5633.
-80CZ 296252 B6
Do míchaného roztoku 10,0 g (90,0 mmol) pyrrol-2-karboxylové kyseliny ve 180 ml dioxanu bylo po kapkách přidáno při 0 °C 18 ml koncentrované kyseliny sírové. 2-methylpropen pak byl kondenzován do reakční baňky během 1 hodiny za použití chladiče se suchým ledem a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při 0 °C, přičemž chladič se suchým ledem byl periodicky znovu naplňován tak, aby se udržoval mírný reflux 2-methylpropenu. Reakční směs pak byla nalita opatrně do ledem chlazené směsi 400 ml etheru a 150 ml 2M roztoku hydroxidu sodného. Byly odděleny fáze a vodná fáze extrahována ještě dvakrát etherem. Sloučené organické fáze byly promyty postupně 2M roztokem hydroxidu sodného, vodou a nakonec nasycenou solankou, pak byly vysušeny nad síranem sodným, koncentrovány za vakua, čímž se získalo 9,07 g (60 %) nadepsané sloučeniny jako bezbarvý olej, který ještě obsahoval nějaký dioxan.
!H NMR d (250 MHz, CDC13) 9,60 (1H, br,s), 6,90 (1H, m), 6,83 (1H, m), 6,22 (1H, m), 1,56 (9H, s).
b) fórc-Butylester 1 -[6-(2-terc-butoxykarbonylpyrrol-1 -yl)-6-oxohexanoyl]-1 H-pyrrol-2karboxylové kyseliny
Do míchaného roztoku 1,3 g (7,77 mmol) terc-butylesteru lH-pyrrol-2-karboxylové kyseliny, 95 mg (0,78 mmol) 4-dimethylaminopyridinu a 1,28 ml (8,56 mmol) l,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-enu ve 40 ml dichlormethanu při 0 °C bylo po kapkách přidáno 0,57 ml (3,91 mmol) adipoylchloridu a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Dále bylo přidáno 95 mg (0,78 mmol) 4-dimethylaminopyridinu a 1,28 ml (8,56 mmol) l,8-diazabicyklo[5,4]undec-7-enu a míchání pokračovalo po dobu dalších 4 hodin při teplotě místnosti.
Reakční směs pak byla promyta postupně 1M chlorovodíkovou kyselinou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nakonec nasycenou solankou a vodné fáze byly zpětně extrahovány dichlormethanem. Sloučené organické extrakty byly vysušeny nad síranem sodným a koncentrovány za vakua. Mžiková chromatografie (gradient 10 až 20 % EtOAc v hexanu) poskytla 464 mg (13 %) nadepsané sloučeniny jako světležlutou krystalickou látku.
MS m/e (%): 462 (M+NH4 +, 100).
c) 1 -[5-(2-Karboxypyrrol-1 -yl)-6-oxohexanoyl]-1 H-pyrrol-2-karboxylová kyselina
Do míchaného roztoku 55 mg (0,12 mmol) íerc-butylesteru l-[6-(2-/erc-butoxykarbonylpyrrol-l-yl)-6-oxo-hexanoyl]-lH-pyrrol-2-karboxylové kyseliny v 8 ml dichlormethanu při 0 °C bylo po kapkách přidáno 0,15 ml (1,97 mmol) trifluoroctové kyseliny a míchání pokračovalo po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Koncentrace za vakua a azeotropování třikrát s chloroformem na rotační odparce poskytly 39 mg (95 %) nadepsané sloučeniny jako bělavou krystalickou látku.
MS m/e (%): 350 (M+NH4 +, 100).
Příklad 100 (R)-l-[6-[(R)-2-Karboxy-4,4-difluorpyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]-4,4-difluorpyrrolidin2-karboxylová kyselina
a) 2-Benzylester-l-fórc-butylester (2R)^1—oxopyrrolidin-1,2-dikarboxylové kyseliny
Roztok 15,6 ml (0,22 mol) dimethylsulfoxidu v 50 ml dichlormethanu byl dán do 9,6 ml oxalylchloridu ve 150 ml dichlormethanu při -65 °C během 10 minut. Po 5 minutách při -65 °C byl přidán 2-benzylester-l-terc-butylester (2R,2R)-4-hydroxypyrrolidin-l ,2-dikarboxylové kyseliny ve 100 ml dichlormethanu a po dalších 15 minutách 24,4 ml (0,18 mol) triethylaminu. Chla-81 CZ 296252 B6 dici lázeň byla odstraněna, míchání pokračovalo přes noc a pak byla směs nalita do vody s ledem. Extrakce dichlormethanem následovaná promytím 0,05N HC1, hydrogenuhličitanem a vodou a chromatografie přes silikagel dichlor/ethylacetát 98:2 poskytly 11,1 g (35 %) 2-benzylester-líerc-butylesteru (2R)-4-oxopyrrolidin-l,2-dikarboxylové kyseliny jako bezbarvou kapalinu.
MS m/e (%): 263 (M-izobutylen, 7), 219 (8), 184 (24), 128 (14), 91 (58), 84 (40), 57 (100), [alfa]D = +1,1° (C = 1 % v methanolu).
b) 2-Benzylester-l-fórc-butylester (2R)-4,4-difluorpyrrolidm-l ,2-dikarboxylové kyseliny
Roztok 0,64 g (0,002 mol) 2-benzylester-l-/erc-butylesteru (2R)-4-oxopyrrolidin-l,2-dikarboxylové kyseliny ve 3 ml dichlormethanu byl zpracován při 0 °C 0,79 ml (0,006 mol) diethylaminosulfurtrifluoridu, míchání pokračovalo při teplotě místnosti po dobu 32 hodin a pak byla směs nalita na led. Extrakce dichlormethanem a filtrace přes silikagel s hexanem následovaná elucí dichlormethanem poskytly 0,62 g (90 %) 2-benzylester-l-terc-butylesteru (2Rý-4,4difluorpyrrolidin-l,2-dikarboxylové kyseliny jako světležlutý olej.
MS m/e (%): 285 (1), 206 (6), 106 (33), 91 (35), 57 (100), [a]D = +43,0° (c = 1 % v methanolu).
c) Benzylesterhydrochlorid (2R)-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1)
100 ml suchého chlorovodíku v diethyletheru bylo přidáno do roztoku 71,5 g (0,022 mol) 2-benzylester-l-terc-butylesteru (2R)-4,4-difluorpyrrolidin-l,2-dikarboxylové kyseliny ve směsi 100 ml diethyletheru a 20 ml dichlormethanu. Po míchání po dobu 2 dnů bylo filtrací izolován 5,84 g (96 %) benzylesterhydrochloridu (2R)-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1) a vysušeno za sníženého tlaku.
t.t.: 118 až 120 °C, [cc]D = +29,3° (c = 1 % v methanolu).
d) Benzylester (R)-l-[6-[(R)-2-benzyloxykarbonyl-4,4-difluorpyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]—4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do suspenze 1,11 g (0,04 mol) benzylesterhydrochloridu (2R)-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1) ve 20 ml dichlormethanu bylo přidáno 1,17 ml (0,008 mol) triethylaminu a 0,29 ml (0,002 mol) adipoyldichloridu v 5 ml dichlormethanu. Po míchání při teplotě místnosti přes noc byla směs extrahována IN HC1, vodou a vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysušena síranem sodným. Chromatografie přes silikagel pomocí dichlormethan/ethylacetát 8:2 poskytla 0,79 g (66 %) benzylesteru (R)-l-[6-[(R)-2-benzyloxykarbonyl-4,4-difluorpyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
ISP-MS: 593 (MH)+, [a]D = +67,3° (c = 1 % v methanolu).
e) (R)-l-[6-[(R)~2~Karboxy-4,4—difluorpyrrolidin-l-yl]-6oxohexanoyl]^4-,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
0,59 g (0,001 mol) benzylesteru (R)-l-[6-[(R)-2-benzyloxykarbonyl-4,4-difluorpyrrolidin-lyl]-6-oxohexanoyl]-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 20 ml ethanolu bylo hydrogenováno při teplotě místnosti a atmosférickém tlaku v přítomnosti 0,12 g 5% palladia na aktivním uhlí. Po dokončení reakce byl katalyzátor odfiltrován, rozpouštědlo oddestilováno a zbytek byl rozpuštěn v dichlormethanu. Odpaření poskytlo 0,4 g (97 %) (R)-l-[6-[(R)-2-karboxy-4,4-difluorpyrrolidm-l-yl]-6-oxohexanoyl]-4,4-difluorpynOlidin-2-karboxylové kyseliny jako bílou pěnu.
-82CZ 296252 B6
ISP-MS: 413 (MH)+, [a]D = +54,2° (c = 1 % v dimethylsulfoxidu).
Příklad 101 (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-Karboxy-4,4-difluorpyrrolidin-l-yl]-6-Oxoethoxy]fenoxy]acetyl]-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-1 - [[2-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonyl-4,4-difluorpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]-4,4-difluorpyrrolidm-2-karboxylové kyseliny
Do směsi 1,11 g (0,003 mol) benzylesterhydrochloridu (2R)-4,4—difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1), 0,45 g (0,002 mol) 1,2-fenylendioxydioctové kyseliny, 1,21 g (0,012 mol) N-methylmorfolinu a 0,61 g (0,004 mol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu v 90 ml dichlormethanu bylo přidáno 0,77 g (0,004 mol) l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidhydrochloridu. Po míchání při teplotě místnosti po dobu 18 hodin byla směs extrahována IN HC1, vodou, 10% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a znovu vodou. Chromatografíe přes silikagel pomocí dichlormethan/dichloracetát 9:1 poskytla 0,52 g (39 %) benzylesteru (R)-l-[[2-[2-[(R)2-benzyloxykarbonyl-4,4-difluorpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxyl]fenoxy]acetyl]-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
ISP-MS: 673 (MH)+, [a]D = + 68,4° (c = 1 % v methanolu).
b) (R)-l -[ [2-[2-[(R)-2-Karboxy-4,4-difluorpynrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxyl] fenoxy] acetyl]-
4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
0,47 g (0,0007 mol) benzylesteru (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonyl—4,4-difluorpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxyl] fenoxy] acetyl]-4,4-difluorpyrrolidm-2-karboxylové kyseliny ve ml ethanolu bylo hydrogenováno při teplotě místnosti a atmosférickém tlaku v přítomnosti 0,09 g 5 % palladia na aktivním uhlí. Po dokončení reakce byl katalyzátor odfiltrován, rozpouštědlo oddestilováno a zbytek byl rozpuštěn v dichlormethanu. Odpaření poskytlo 0,32 g (94 %) (R)-1 -[ [2-[2-[(R)-2-karboxy-4,4- difluorpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxyl] fenoxy] acetyl]-4,4difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako světležlutou pěnu.
ISP-MS: 493 (MH)+, [a]D = + 46,8° (c = 1 % v dimethylsulfoxidu).
Příklad 102 (R)~ 1 -[ [4-[2-[(R)-2-Karboxy-4,4-difluorpyrrolidin-l -yl]-2-oxoethyl] fenyl] acetyl]-4,4—di fluorpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
a) Benzylester (R)-1 -[[4—[2-[(R)-2-benzyloxykarbonyl-4,4—difluorpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethyl] fenyl]acetyl]-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny
Do směsi 1,11 g (0,004 mol) benzylesterhydrochloridu (2R)-4,4-diíluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (1:1), 0,39 g (0,002 mol) 1,4-fenylendioctové kyseliny, 1,21 g (0,012 mol) Nmethylmorfolinu a 0,61 g (0,004 mol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu v 90 ml dichlormethanu bylo přidáno 0,77 g (0,004 mol) l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidhydrochloridu. Po míchání při teplotě místnosti po dobu 18 hodin byla směs extrahována IN HC1, vodou, 10% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a znovu vodou.
Chromatografíe přes silikagel pomocí dichlormethan/ethylacetát 9:1 poskytla 0,72 g (56%) (R)-4-[[4-[2~-[(R)-2-benzyloxykarbonyl-4,4—difluorpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]ace-83CZ 296252 B6 tyl]-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve formě jejího benzylesteru jako bezbarvý olej.
ISP-MS: 658 (MNH4)+, [a]D = +55,5° (c = 1 % v methanolu).
b) (R)-1 -[ [4-[2-[(R)-2-Karboxy-4,4-difluorpyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethyl] fenyl] acetyl]-4,4difluorpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
0,64 g (0,001 mol) benzylesteru (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-benzyloxykarbonyl-4,4-difluorpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny ve 20 ml ethanolu bylo hydrogenováno při teplotě místnosti a atmosférickém tlaku v přítomnosti 0,13 g (5 % palladia na uhlíku). Po dokončení reakce byl katalyzátor odfiltrován, rozpouštědlo bylo oddestilováno a zbytek byl rozpuštěn v dichlormethanu. Odpaření poskytlo 0,28 g (61%) (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-karboxy-4,4-difluorpyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]-4,4-difluorpyrrolidin-2-karboxylové kyseliny jako světležlutou pěnu.
ISP-MS: 478 (MNH4)+, [a]D = +50,3° (c = 0,44 %) v dimethylsulfoxidu).
Příklad 103 (R)-l-[6-[(R)-2-Karboxy-2,5-dihydropyrrol-l-yl]-6-oxohexanoyl]-2,5-dihydropyrrol-2karboxylová kyselina
a) 2-Benzylester-l-/erc-butylester (2R,4R)-4—(toluen-4-sulfonyloxy)pyrrolidin-l ,2-dikarboxylové kyseliny
Roztok 2,35 g (0,07 mol) 2-benzylester-l-Zerc-butylesteru (2R,2R)-4-hydroxypyrrolidin-l,2dikarboxylové kyseliny ve 22 ml pyridinu byl zpracován při 5 °C 1,53 g (0,008 mol) p-toluensulfonylchloridem a udržován v chladničce po dobu 15 dnů. Pyridin byl pak oddestilován za vakua a zbytek byl vyčištěn chromatografií na silikagelu pomocí dichlormethan/ethylacetát 95:5, čímž se získalo 2,081 g (81 %) 2-benzylester-l-Zerc-butylesteru (2R,4R)^1—(toluen-4-sulfonyloxy)pyrrolidin-l,2-dikarboxylové kyseliny jako bezbarvá kapalina.
MS m/e (%): 376 (2), 340 (10), 284 (6), 240 (21), 91 (48), 68 (100), 57 (63), [<x]D = +24,5° (c = 1 % v methanolu).
b) 1 -Zerc-Butyl es ter-2-ethyl ester (2R,4S)^l-fenylselanylpyrrolidin-1,2-dikarboxylové kyseliny
Roztok 7,99 g (0,026 mol) difenyldiselenidu v 250 ml ethanolu byl zpracován s 1,59 g (0,042 mol) tetrahydroboritanu sodného a míchání pokračovalo až se ze žlutého roztoku stal roztok bezbarvý. Po přídavku 20,0 g (0,042 mol) 2-benzylester-l-/erc-butylesteru (2R,4R)-4(toluen-4-sulfonyloxy)pyrrolidin-l,2-dikarboxylové kyseliny byla směs refluxována po dobu 2,5 hodiny. Bílá sraženina byla odfiltrována a rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua. Chromatografie na silikagelu pomocí dichlormethan/methanol 98:2 poskytla 8,48 g (51 %) l-řerc-butylester-2-ethylesteru (2R,4S)-4-fenylselanylpyrrolidin-l ,2-dikarboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 399 (7), 326 (13), 270 (18), 226 (38), 186 (35), 68 (60), 57 (100), 41 (28). [cc]d = +40,4° (c = 1 % v methanolu).
Navíc bylo izolováno 0,6 g 2-benzylester-l-íerc-butylesteru (2R,4S)^l-fenylselanylpyrrolidin1,2-dikarboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
-84CZ 296252 B6
MS m/e (%): 461 (7), 326 (21(, 270 (37), 248 (48), 226 (49), 209 (30), 91 (100), 68 (54), 57 (96).
[a]D = +33,2° (c = 1 % v methanolu).
c) lZerc-Butylester-2-ethylester (R)-2,5-dihydropyrrol-l,2-dikarboxylové kyseliny
Do roztoku 7,35 g (0,016 mol) l-/erc-butylester-2-ethylesteru (2R,4S)-4-fenylselanylpyrrolidin-l,2-dikarboxylové kyseliny v 80 ml dichlormethanu bylo přidáno při 0 až 5 °C 1,93 ml (0,024 mol) pyridinu a 4,6 ml 30% peroxidu vodíku a míchání pokračovalo po dobu 1,5 hodin. Směs byla extrahována 5% vodnou HC1, nasycena vodným uhličitanem sodným a vodou. Chromatografie na silikagelu pomocí ethylacetát/hexan 1:5 poskytla 2,99 g (77 %) 1-Zerc-butylester2-ethylesteru (R)-2,5-dihydropyrrol-l,2-dikarboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
MS m/e (%): 186 (11), 168 (48), 140 (32), 112 (100), 68 (85), 57 (58). [a]D = +242° (c = 1 % v chloroformu).
d) Ethylestertrifluoracetát (R)-2,5-dihydro-l H~pyrrol-2-karboxylové kyseliny (1:1)
1,5 g (0,06 mol) l-Zerc-butylester-2-ethylesteru (R)-2,5-dihydropyrrol-l,2-dikarboxylové kyseliny bylo rozpuštěno při 5 °C v 10 ml trifluoroctové kyseliny a míchání pokračovalo při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Odpaření rozpouštědla za vakua poskytlo 2,05 (kvantitativně ethylestertriíluoracetátu (R)-2,5-dihydro-lH-pyrrol-2-karboxylové kyseliny (1:1) jako žlutý olej.
MS m/e (%): 142 (1), 68 (100), 45 (10), 41 (15).
[cc]D = +95,5° (c = 1 % v methanolu).
e) Ethylester (R)-l-[6-[(R)-2-ethyloxykarbonyl-2,5-dihydropyrrol-l-yl]-6-oxohexanoyl]-
2,5-dihydropyrrol-2-karboxylové kyseliny
Do suspenze 0,99 g (0,003 mol) ethylestertrifluoracetátu (R)-2,5-dihydro-lH-pyrrol-2-karboxylové kyseliny (1:1) ve 20 ml dichlormethanu bylo přidáno 1,3 ml (0,09 mol) triethylaminu a 0,22 ml (0,0015 mol) adipoyldichloridu v 5 ml dichlormethanu. Po míchání při teplotě místnosti přes noc byla směs extrahována IN HC1, vodou a vodným hydrogenuhličitanem sodným a vysušena síranem sodným. Chromatografie přes silikagel pomocí ethylacetátu poskytla 0,37 g (32 %) ethylesteru (R)-l-[6-[(R)-2-ethyloxykarbonyl-2,5-dihydropyrrol-l-yl]-6-oxohexanoyl]-2,5dihydropyrrol-2-karboxylové kyseliny jako žlutý olej.
ISP-MS: 393 (MH)+.
f) (R)-l-[6-[(R)-2-Karboxy-2,5-dihydropyrrol-l-yl]-6-oxohexanoyl]-2,5-dihydropyrrol2-karboxylová kyselina
0,09 g (0,0002 mol) ethylesteru (R)-l-[6-[(R)-2-ethyloxykarbonyl-2,5-dihydropyrrol-l-yl]-6oxohexanoyl]-2,5-dihydropyrrol-2-karboxylové kyseliny bylo mícháno s vodnou HC1 při 50 °C po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo odpařeno a zbytek rozpuštěn ve vodě a lyofilizován, čímž se získalo 0,08 g (97 %) (R)-l-[6-[(R)-2-karboxy-2,5-dihydropyrrol-l-yl]-6-oxohexanoyl]-2,5dihydropyrrol-2-karboxylové kyseliny jako světležlutá pěna.
ISP-MS: 335 (M-H)~.
-85CZ 296252 B6
Příklad 104 (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-Karboxy-2,5-dihydropyrrol-l-yl]-2-oxoethoxyl]fenoxy]acetyl]-2,5-dihydropyrrol-2-karboxylová kyselina
a) Ethylester (R)-1 -[ [2-[2-[(R)-2-ethylkarbonyl-2,5-dihydropyrrol-1 -yl]-2-oxoethoxyl] fenoxy]acetyl]-2,5-dihydropyrrol-2-karboxylové kyseliny
Do směsi 0,99 g (0,003 mol) ethylestertrifluoracetátu (R)-2,5-dihydro-lH-pyrrol-2-karboxy10 lově kyseliny (1:1), 0,34 g (0,0015 mol) 1,2-fenylendioxydioctové kyseliny, 1,3 ml (0,012 mol)
N-methylmorfolinu a 0,46 g (0,003 mol) 1-hydroxybenzotriazolhydrátu v 80 ml dichlormethanu bylo přidáno 0,57 g (0,003 mol) l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidhydrochloridu. Po míchání při teplotě místnosti po dobu 18 hodin byla směs extrahována IN HC1, vodou, 10% vodným hydrogenuhličitanem sodným a znovu vodou. Chromatografíe přes silikagel pomocí 15 ethylacetátu poskytla 0,45 g (32 %) ethylesteru (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-ethylkarbonyl-2,5dihydropyrrol-l-yl]-2-oxoethoxyl]fenoxy]acetyl]-2,5-dihydropyrrol-2-karboxylové kyseliny jako bezbarvý olej.
ISP-MS: 473 (MH)+.
b) (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-Karboxy-2,5-dihydropyrrol-l-yl]-2-oxoethoxyl]fenoxy]acetyl]-
2,5-dihydropyrrol-2-karboxylová kyselina
0,17 g (0,0004 mol) ethylesteru (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-ethylkarbonyl-2,5-dihydropyrrol-l-yl]25 2-oxoethoxyl]fenoxy]acetyl]-2,5-dihydropyrrol-2-karboxylové kyseliny bylo mícháno s vodou
HC1 při teplotě 50 °C po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo odpařeno a zbytek rozpuštěn ve vodě a lyofílizován, čímž se získalo 0,13 g (86 %) (R)-l-[[2-[2-[(R)-2-karboxy-2,5-dihydropyrroll-yl]-2-oxoethoxyl]fenoxy]acetyl]-2,5-dihydropyrrol-2-karboxylové kyseliny jako bílý amorfní prášek.
ISP-MS: 417 (MH)+.
Příklad A
Tablety následujícího složení byly připraveny obvyklým způsobem:
mg/tableta
aktivní složka 100
prášková laktóza 95
bílý kukuřičný škrob 35
polyvinylpyrrolidon 8
Na karboxymethylškrob 10
stearan hořečnatý 2
hmotnost tablety
250
Příklad B
Tablety následujícího složení se připraví obvyklým způsobem:
-86CZ 296252 B6 mg/tableta
aktivní složka 200
prášková laktóza 100
bílý kukuřičný škrob 64
polyvinylpyrrolidon 12
Na karboxymethylškrob 20
stearan hořečnatý 4
hmotnost tablety 400
Příklad C
Tobolky následujícího složení se připraví:
mg/tableta
aktivní složka 50
krystalická laktóza 60
mikrokrystalická celulóza 34
talek 5
stearan hořečnatý 1
hmotnost náplně tobolky
150
Aktivní složka mající vhodnou velikost částic, krystalická laktóza a mikrokrystalická celulóza se homogenně vzájemně smíchají, prosejí a pak se přimísí talek a stearan hořečnatý. Konečná směs se naplní do tvrdých želatinových tobolek vhodné velikosti.

Claims (16)

PATENTOVÉ NÁROKY
1. D-Proliny obecných vzorců I-A a I-B kde
R je skupina SH, benzylskupina nebo fenylskupina, popřípadě substituovaná hydroxyskupinou nebo nižší alkoxyskupinou, nebo skupina vzorce
-87CZ 296252 B6
R1 je vodík nebo halogen,
X je -(CH2)n- -CH(R2)(CH2)n-, -CH2O(CH2)n-, -CH2NH_, benzyl, -C(R2)=CH-, -CH2CH5 (OH)- nebo thiazol-2,5-diyl,
Y je -S-S-, -(CH2)n-, -Ο-, -NH- -N(R2)-, -CH=CH- -NHC(O)NH-, -N(R2)C(O)N(R2)-, -N[CH2C6H3(OCH3)2]-, -N(CH2C6H5)-, -N(CH2C6Hs)C(O), -N(alkoxyalkyl)-, -N(cykloalkylmethyl)-, 2,6-pyridyl, 2,5-furanyl, 2,5-thienyl, 1,2-cyklohexyl, 2,6-pyridyl, 10 2,5-furanyl, 2,5-thienyl, 1,2-cyklohexyl, 1,3-cyklohexyl, 1,4-cyklohexyl, 1,2-naftyl, 1,4-naftyl, 1,5-naftyl, 1,6-naftyl, bifenyl nebo 1,2-fenylen, 1,3-fenylen a 1,4-fenylen, kde fenylenové skupiny jsou popřípadě substituovány jedním až čtyřmi substituenty vybranými z halogenu, nižší alkylskupiny, nižší alkoxyskupiny, hydroxyskupiny, karboxyskupiny, -COO-nižší alkylskupiny, nitriloskupiny, 5-tetrazolové skupiny, (2-karboxypyrrolidin-l15 yl)-2-oxoethoxyskupiny, N-hydroxykarbamimidoylskupiny, 5-oxo-[l,2,4]oxadiazolylskupiny, 2-oxo-[l,2,3,5]oxathiadiazolylskupiny, 5-thioxo-[l,2,4]oxadiazolylskupiny a 5-tercbutylsulfanyl-[ 1,2,4]oxadiazolylskupiny,
X' je -(CH2)n-, -(CH2)nCH(R2)-, -(CH2)nOCH2- -NHCH2-, benzyl, -CH=C(R2)-, -CH(OH)20 CH2- nebo thiazol-2,5-diyl,
R2 je nižší alkyl, nižší alkoxy nebo benzyl a n je 0 až 3, a přívlastek „nižší“ znamená, že skupina obsahuje 1 až 4 atomy uhlíku;
přičemž když ve vzorci I-B R znamená SH a R1 je vodík, potom X neznamená -(CH2)n- nebo -CH(R2)-CH2-, kde R2 představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo benzylskupinu, 30 a n je číslo 1 až 3;
a jejich farmaceuticky vhodné soli a jejich monoestery a diestery s nižším alkylovým nebo fenolickým zbytkem v esterové části.
35 2. D-Proliny obecného vzorce I-A podle nároku 1.
2,5-dimethyl-6-oxohexa-2,4-dienoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina.
3. D-Proliny podle nároku 2, kde X je -CH(R2)(CH2)n- a R2 je methyl nebo methoxy a n je 0 nebo 1.
40
4. D-Proliny podle nároku 3, kterými jsou (R)-l-[(S)-3-[(S)-3-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-methyl-3-oxopropyldisulfanyl]-2methylpropionyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina;
45 (R)-1 -[ 8-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 —y 1]—2,7-dimethyl-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[8-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2,7-dimethoxy-8-oxooktanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina a
-88CZ 296252 B6 (R)-1 - [6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 —y 1]—2,5-dimethyl-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina (směs tří diastereomerů).
5. D-Proliny podle nároku 2, kde X je -(CH2)n~, a n je 0 nebo 1.
6. D-Proliny podle nároku 5, kterými j sou (R)-l-[7-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-7-oxoheptanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-6-oxohexanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-1 -[5-[(R2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-5-oxopentanoyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]ureido]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-1 -[ [benzyl-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l -yl]-2-oxoethyl] amino] acetyl]pyrrolidin-2karboxylová kyselina, (R)-1 -[ci s-4-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -karbonyl] cyklohexankarbonyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina a (R)-l-[[3-[(R-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethyl]fenyl]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina.
7. D-Proliny podle nároku 2, kde X je -CH2O-
8. D-Proliny podle nároku 7, kterými j sou (R)-1 -[ [2-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy] fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]fenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-2-methoxyfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-1 -[ [3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-1 -yl]-2-oxoethoxy] fenoxy] acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina, (R)-l-[[3-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]-2-methylfenoxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina a (R)-l-[[5-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethoxy]naftalen-l-yloxy]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina.
9. D-Proliny podle nároku 2, kde X je CH2NH-
10. D-Prolin podle nároku 9, kterým je (R)-l-[[4-[2-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-2-oxoethylamino]fenylamino]acetyl]pyrrolidin-2-karboxylová kyselina.
-89CZ 296252 B6
11. D-Proliny podle nároku 2, kde X j e -CH2CH(OH)-.
12. D-Prolin podle nároku 11, kterým je (2E,4E)-(R)-l-[6-[(R)-2-karboxypyrrolidin-l-yl]-
13. Léčivo, zejména pro léčení nebo prevenci amyloidózy, vyznačující se tím, že obsahuje D-prolin podle kteréhokoliv z nároků 1 až 12 a terapeuticky inertní nosný materiál.
14. Způsob výroby D-prolinů podle kteréhokoliv z nároků 1 až 12, vyznačující se t í m, že zahrnuje
a) odštěpení chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce III nebo IV kde R, R1, X, Y a X' jsou popsány v nároku 1 a R3 je chránící skupina, čímž se získá sloučenina vzorce I-A nebo I-B, a v případě potřeby
b) převedení sloučeniny obecného vzorce I-A nebo I-B na farmaceuticky použitelnou sůl nebo na její monoester nebo diester definovaný v nároku 1.
15. D-Proliny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 12 pro použití jako terapeuticky aktivní látky, zejména proti centrálním a systemickým formám amyloidózy.
16. Použití D-prolinů podle kteréhokoliv z nároků 1 až 12, včetně těch D-prolinů obecného vzorce I-B, kde R znamená SH, R1 je vodík, X znamená -(CH2)n- nebo -CH(R2)-CH2-, kde R2 představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo benzylskupinu, a n je číslo 1 až 3, pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci centrálních a systemických forem amyloidózy.
CZ0346398A 1997-10-31 1998-10-29 D-Proliny, zpusob jejich výroby a pouzití a lécivo s jejich obsahem CZ296252B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP97119031 1997-10-31
EP98113851 1998-07-24

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ346398A3 CZ346398A3 (cs) 1999-05-12
CZ296252B6 true CZ296252B6 (cs) 2006-02-15

Family

ID=26145860

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0346398A CZ296252B6 (cs) 1997-10-31 1998-10-29 D-Proliny, zpusob jejich výroby a pouzití a lécivo s jejich obsahem

Country Status (35)

Country Link
US (4) US6103910A (cs)
EP (1) EP0915088B1 (cs)
JP (1) JP3048558B2 (cs)
KR (2) KR100313637B1 (cs)
CN (1) CN100357270C (cs)
AR (1) AR015473A1 (cs)
AT (1) ATE224366T1 (cs)
AU (1) AU750734B2 (cs)
BR (1) BR9804378B1 (cs)
CA (1) CA2252163C (cs)
CO (1) CO5011076A1 (cs)
CZ (1) CZ296252B6 (cs)
DE (1) DE69808017T2 (cs)
DK (1) DK0915088T3 (cs)
EG (1) EG23756A (cs)
ES (1) ES2182203T3 (cs)
HK (1) HK1019875A1 (cs)
HR (1) HRP980572B1 (cs)
HU (1) HUP9802465A1 (cs)
ID (1) ID21194A (cs)
IL (1) IL126787A (cs)
MA (1) MA26559A1 (cs)
MY (1) MY142803A (cs)
NO (1) NO312064B1 (cs)
PE (1) PE123499A1 (cs)
PL (1) PL196967B1 (cs)
PT (1) PT915088E (cs)
RS (1) RS49589B (cs)
RU (1) RU2201937C2 (cs)
SA (1) SA98190749B1 (cs)
SG (1) SG74094A1 (cs)
SI (1) SI0915088T1 (cs)
TR (1) TR199802197A2 (cs)
TW (1) TW585854B (cs)
UY (1) UY25230A1 (cs)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2793245B1 (fr) * 1999-05-05 2002-10-11 Adir Nouveaux composes pyridiniques ou piperidiniques substitues, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US20060211731A1 (en) * 1999-05-05 2006-09-21 Les Laboratories Servier New substituted pyridine or piperidine compounds
AU6611800A (en) * 1999-08-05 2001-03-05 Procter & Gamble Company, The Method of treating hair loss using multivalent ketoamides and amides
US6638950B2 (en) 2000-06-21 2003-10-28 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Piperidine amides as modulators of chemokine receptor activity
FI20011466A0 (fi) 2001-07-04 2001-07-04 Orion Corp Prolyylioligopeptidaasia inhiboivaa aktiivisuutta omaavia yhdisteitä, niiden valmistusmenetelmiä ja käyttö
GB0119370D0 (en) * 2001-08-08 2001-10-03 Univ London Therapeutic agent
DE60219926T2 (de) 2001-08-08 2007-11-22 Pentraxin Therapeutics Ltd. Wirkstoff zur entfernung einer unerwünschten proteinpopulation aus dem plasma
US6903129B2 (en) 2001-12-14 2005-06-07 Hoffman-La Roche Inc. D-proline prodrugs
US7091357B2 (en) * 2001-12-26 2006-08-15 University Of Kentucky Research Foundation Chain-modified pyridino-N substituted nicotine compounds for use in the treatment of CNS pathologies
US20050026929A1 (en) * 2002-04-23 2005-02-03 Axys Pharmaceuticals, Inc. Novel phenyl derivatives as inducers of apoptosis
DE10240026A1 (de) * 2002-08-27 2004-03-11 Merck Patent Gmbh Verfahren zur Herstellung von Monoalkylaminoketonen
FI20030014A0 (fi) * 2003-01-03 2003-01-03 Orion Corp Prolyylioligopeptidaasia inhiboivaa aktiivisuutta omaavia yhdisteitä
CA2525302A1 (en) * 2003-05-12 2004-11-18 David Bundle Multivalent inhibitors of serum amyloid p component
DE602004023080D1 (de) * 2003-05-20 2009-10-22 Novartis Ag N-acyl stickstoffheterocyclen als liganden von peroxisom-proliferator-aktivierten rezeptoren
GB0313386D0 (en) 2003-06-10 2003-07-16 Univ London Treatment of disease
DE102004010943A1 (de) * 2004-03-03 2005-09-29 Degussa Ag Verfahren zur Herstellung von N-geschützten 4-Ketprolinderivaten
ITMI20041567A1 (it) * 2004-07-30 2004-10-30 Maycos Italiana Di Comini Miro "derivati n-acilati di acidi bicarbossilici con amminoacidi e con idrolizzati proteici vegetali e loro applicazione in prodotti cosmetici, dermofarmaceutici e farmaceutici"
CN1834095B (zh) * 2005-03-18 2011-04-20 中国科学院上海药物研究所 一类非核苷类抗病毒抑制剂及其制备方法和用途
JP2009504756A (ja) * 2005-08-17 2009-02-05 シェーリング コーポレイション 新規な高親和性のチオフェンベースおよびフランベースのキナーゼリガンド
US9345722B2 (en) * 2006-07-24 2016-05-24 Emisphere Technologies, Inc. Pharmaceutical formulations for the treatment of alzheimer's disease
GB0712503D0 (en) * 2007-06-27 2007-08-08 Therapeutics Pentraxin Ltd Use
WO2009155962A1 (en) * 2008-06-27 2009-12-30 Pentraxin Therapeutics Limited Use
GB2470187A (en) * 2009-05-11 2010-11-17 Pharmapatents Global Ltd Captopril polymers
UA108227C2 (xx) * 2010-03-03 2015-04-10 Антигензв'язуючий білок
US9434716B2 (en) 2011-03-01 2016-09-06 Glaxo Group Limited Antigen binding proteins
CN106220546B (zh) * 2012-03-30 2018-11-30 奇华顿股份有限公司 作为食品加香化合物的n-酰基脯氨酸衍生物
CN103333095B (zh) * 2013-06-26 2015-06-24 中国人民解放军第二军医大学 己二酰二d-羟脯氨酸衍生物及其作为核酸疫苗佐剂的应用
DE102013012622A1 (de) * 2013-07-30 2015-02-05 Clariant lnternational Ltd Neue sterisch gehinderte cyclische Amine
GB201407506D0 (en) 2014-04-29 2014-06-11 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Novel compound
DE102015000124A1 (de) * 2015-01-07 2016-07-07 Clariant International Ltd. Verfahren zur Stabilisierung von Polyamiden
GB201518950D0 (en) * 2015-10-27 2015-12-09 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Compound
WO2017072090A1 (en) * 2015-10-27 2017-05-04 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Combination therapy

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2328391A1 (de) * 1972-06-19 1974-01-10 Degussa Trialkoxycinnamoylaminocarbonsaeuren
US4105776A (en) * 1976-06-21 1978-08-08 E. R. Squibb & Sons, Inc. Proline derivatives and related compounds
US4046889A (en) * 1976-02-13 1977-09-06 E. R. Squibb & Sons, Inc. Azetidine-2-carboxylic acid derivatives
AU509899B2 (en) * 1976-02-13 1980-05-29 E.R. Squibb & Sons, Inc. Proline derivatives and related compounds
JPS53108922A (en) * 1977-03-04 1978-09-22 Sumitomo Chem Co Ltd Novel synthesis of opticallactive hydroxyacid
US4499102A (en) * 1979-12-13 1985-02-12 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Thiazolidine and pyrrolidine compounds and pharmaceutical compositions containing them
US4386075A (en) * 1982-02-17 1983-05-31 Smithkline Beckman Corporation Renally active tetrapeptides
CA1247086A (en) * 1982-02-17 1988-12-20 Francis R. Pfeiffer Renally active tetrapeptides
CA1333807C (en) * 1987-06-15 1995-01-03 David R. Kronenthal Process for preparing (trans)-4-phenyl-l-proline derivatives
JPH0832704B2 (ja) * 1987-11-30 1996-03-29 キッセイ薬品工業株式会社 プロリルエンドペプチダーゼ阻害剤
JPH01250370A (ja) * 1987-12-23 1989-10-05 Zeria Pharmaceut Co Ltd 新規アミノ酸イミド誘導体、製法ならびに用途
JPH02157262A (ja) * 1988-12-10 1990-06-18 Meiji Seika Kaisha Ltd 生理活性を有する新規なピロリジン誘導体
US4999417A (en) * 1989-03-30 1991-03-12 Nova Pharmaceutical Corporation Biodegradable polymer compositions
GB8912303D0 (en) * 1989-05-27 1989-07-12 Pfizer Ltd Therapeutic agents
US5439930A (en) * 1992-04-14 1995-08-08 Russian-American Institute For New Drug Development Biologically active n-acylprolydipeptides having antiamnestic, antihypoxic and anorexigenic effects
JPH0661099A (ja) * 1992-08-05 1994-03-04 Mitsubishi Petrochem Co Ltd 電解コンデンサ駆動用電解液
JP3274247B2 (ja) * 1993-09-20 2002-04-15 杏林製薬株式会社 光学活性なインドリン誘導体の製法と中間体
FR2712888B1 (fr) * 1993-11-23 1996-02-09 Bioeurope Utilisation de alpha-D-alkylglucopyranosides et esters de ceux-ci pour la préparation de prodrogues capables de traverser la barrière hématoencéphalique, prodrogues obtenues et précurseurs de celles-ci.
JPH0840896A (ja) * 1994-08-04 1996-02-13 Teisan Seiyaku Kk カプトプリル類似体からなる医薬製剤
WO1997010225A1 (en) * 1995-09-15 1997-03-20 Smithkline Beecham Plc Pyrrolidine and thiazole derivatives with antibacterial and metallo-beta-lactamase inhibitory properties
JPH09157251A (ja) * 1995-10-06 1997-06-17 Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd Ｎ−（Ｄ−α−メチル−β−メルカプトプロピオニル）−Ｌ−プロリン及び該中間体の製造方法
AU1072897A (en) * 1995-12-12 1997-07-03 Karolinska Innovations Ab Peptide binding the klvff-sequence of amyloid beta

Also Published As

Publication number Publication date
PL329440A1 (en) 1999-05-10
CZ346398A3 (cs) 1999-05-12
UY25230A1 (es) 2001-01-31
AU750734B2 (en) 2002-07-25
CN1217327A (zh) 1999-05-26
AR015473A1 (es) 2001-05-02
KR20010083247A (ko) 2001-08-31
ATE224366T1 (de) 2002-10-15
TR199802197A3 (tr) 1999-05-21
MY142803A (en) 2011-01-14
HUP9802465A1 (hu) 2000-12-28
US6512001B1 (en) 2003-01-28
YU47698A (sh) 2001-07-10
HU9802465D0 (en) 1998-12-28
US6262089B1 (en) 2001-07-17
US6740760B2 (en) 2004-05-25
BR9804378B1 (pt) 2010-07-13
CN100357270C (zh) 2007-12-26
RS49589B (sr) 2007-06-04
MA26559A1 (fr) 2004-12-20
BR9804378A (pt) 2000-06-13
HRP980572B1 (en) 2004-06-30
SA98190749B1 (ar) 2006-05-13
RU2201937C2 (ru) 2003-04-10
TW585854B (en) 2004-05-01
ID21194A (id) 1999-05-06
NO985059L (no) 1999-05-03
CA2252163C (en) 2008-09-09
US6103910A (en) 2000-08-15
ES2182203T3 (es) 2003-03-01
SG74094A1 (en) 2000-07-18
KR100342284B1 (ko) 2002-06-29
EG23756A (en) 2007-08-08
DE69808017D1 (de) 2002-10-24
SI0915088T1 (en) 2002-12-31
PE123499A1 (es) 1999-12-13
IL126787A (en) 2003-12-10
EP0915088A1 (en) 1999-05-12
US20030100770A1 (en) 2003-05-29
TR199802197A2 (xx) 1999-05-21
JPH11209343A (ja) 1999-08-03
HRP980572A2 (en) 1999-08-31
HK1019875A1 (en) 2000-03-03
DK0915088T3 (da) 2003-01-27
PL196967B1 (pl) 2008-02-29
PT915088E (pt) 2003-01-31
CA2252163A1 (en) 1999-04-30
KR19990037520A (ko) 1999-05-25
DE69808017T2 (de) 2003-04-30
NO312064B1 (no) 2002-03-11
NO985059D0 (no) 1998-10-30
CO5011076A1 (es) 2001-02-28
AU8959998A (en) 1999-05-20
KR100313637B1 (ko) 2002-01-12
EP0915088B1 (en) 2002-09-18
IL126787A0 (en) 1999-08-17
JP3048558B2 (ja) 2000-06-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ296252B6 (cs) D-Proliny, zpusob jejich výroby a pouzití a lécivo s jejich obsahem
US6297233B1 (en) Lactam inhibitors of FXa and method
ES2325077T3 (es) Derivados de 1-(fenilamida)-2-(4-(3-oxo-morfolin-4-il)-fenilamida) del acido pirrolidin-1,2-dicarboxilico y compuestos emparentados como inhibidores del factor de la coagulacion xa, para el tratamiento de las enfermedades tromboembolicas.
US6555542B1 (en) Sulfonamide lactam inhibitors of FXa and method
AU2017238504A1 (en) 6-hydroxy-4-oxo-1,4-dihydropyrimidine-5-carboxamides as APJ agonists
RU2156763C2 (ru) Азотсодержащие гетероциклические производные, фармацевтическая композиция на их основе и способ лечения или профилактики тромботических заболеваний
WO2008006479A1 (de) 2- (heteroaryl) alkyl-indazole-6-phenyl und thienylmethylamide als thrombininhibitoren
US11008301B2 (en) Piperidinone formyl peptide 2 receptor agonists
MXPA05010445A (es) Derivados de azaprolina.
US6544981B2 (en) Lactam inhibitors of factor Xa and method
US6201006B1 (en) Aromatic amidine derivatives useful as selective thrombin inhibitors
US5814654A (en) Substituted guanidine derivatives
WO2008128832A1 (en) Nitroderivatives of non-peptidic renin inhibitors for the treatment of cardiovascular, renal and chronic liver disease, inflammations and metabolic syndrome
KR101983880B1 (ko) 신규 벤조아제핀 유도체 및 그 의약 용도
US20080306045A1 (en) 1-Benzazepine-3-Sulfonylamino-2-Pyrroridones as Factor Xa Inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20111029