CZ294823B6

CZ294823B6 - Fungicidní tetrahydrofurany

Info

Publication number: CZ294823B6
Application number: CZ19961805A
Authority: CZ
Inventors: Anil K. Saksena; Viyyoor M. Girijavallabhan; Raymond G. Lovey; Russell E. Pike; Haiyan Wang; Yi-Tsung Liu; Ashit K. Ganguly; Frank Bennet
Original assignee: Schering Corporation
Priority date: 1993-12-21
Filing date: 1994-12-20
Publication date: 2005-03-16
Also published as: NO2006002I1; ZA9410142B; FR06C0009I2; NO962616D0; BR1100154B1; CN1142828A; DE69428125D1; NO2006002I2; FR06C0009I1; HK1008820A1; ES2159623T3; NO316173B1; WO1995017407A1; PL315169A1; PL181193B1; CA2179396A1; CZ180596A3; NL300219I2; KR0179990B1; SK283035B6

Abstract

Tetrahydrofurany obecného vzorce I, ve kterém X znamenají nezávisle F nebo Cl nebo jedno X znamená nezávisle F a druhé X znamená nezávisle Cl, R.sub.1.n. znamená přímý nebo rozvětvený (C.sub.4.n. až C.sub.5.n.) alkyl, substituovaný jednou hydroxylovou skupinou, jejich estery, například polyesterestery nebo fosforečnanové estery, jejich farmaceuticky použitelné soli a jejich farmaceutické přípravky použitelné pro léčení a/nebo prevenci fungicidních nemocí.ŕ

Description

Oblast techniky

Tento vynález se týká fungicidních tetrahydrofuranů, jako jsou (2R-c«-)-4-[4-[4-[4-[[(5-(2,4dihalofenyl)-tetrahydro-5-(lH-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)tetrahydrofuran-3-yl]methoxy]fenyl]-

2,4-dihydro-2-[mono-substituované(C5-C₆)alkyl]-3H-l,2,4-triazol-3-on substituované fungicidy, jejich farmaceuticky použitelných esterů, solí a farmaceutických prostředků, jež je obsahují.

Dosavadní stav techniky

Mezinárodní přihláška číslo WO 89/04829, publikovaná 1. června 1990 a patent US 5 039 676 (A. K. Saksena a kol.) popisuje (+)cw a (+)trans fungicidní sloučeniny, reprezentované obecným vzorcem

kde X znamená F, Cl, Z znamená nižší alkyl, (C₂-C₈)alkanoyl nebo fenyl substituovaný 2-nižší alkyl-3-oxo-l,2,4-triazoM-yl skupinou, například (+)-czs a (+)-Zraz?.s-l-[4-[[2-(2,4-difluorfenyl)-2-[(lH-l,2,4-triazol-l-yl)methyl]tetrahydro-4-furanyl]methoxy]fenyl]-4-(l-methylethyl)piperazin. Viz, např. strany 77-79 (příklady 63-64) a strany 103-111 dokumentu WO 89/04829 a příklady 63 a 64 a nároky patentu US 5 039 676. Nicméně WO 89/04829 nepopisuje sloučeniny podle tohoto vynálezu.

Evropská patentová publikace EP 0 539 938, publikovaná 5. května 1993 popisuje například [(5 R)-c/.s-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-dihalofenyl)-5-{ 1 H-l ,2,4-triazol-1 -ylmethyljtetrahydrofuran-

3-7yl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyI]fenyl]-2,4-dihydro-2-(Ci-Cio)alkyl]-3H-l,2,4-triazol-3onové fungicidy a sloučeniny Příkladu 29 na straně 28, ale nepopisuje sloučeniny podle tohoto vynálezu. Viz také tabulku III na straně 33, kde jsou příklad 68 dokumentu WO/89/04824 a patentu US 5 039 676 porovnávány se sloučeninou z příkladu 28 dokumentu EP 0 539 938.

Patent US firmy Janssen 4 791 111 popisuje například (+)c«-4-[4-[4-[4-[[2-(2,4-dichlorfenyl)-2-( 1 H-l ,2,4-triazol-l-ylmethyl)-l ,3-dioxolan-4yl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]-2,4dihydro-2-(2-hydroxy-l-methylpropyl)-3H-l,2,4-triazol-3-on, který je použitelný jako antimikrobiální činidlo a který má větší rozpustnost, ale nepopisuje sloučeniny podle tohoto vynálezu, kterými jsou tetrahydrofuranylové deriváty a nikoliv v kyselém prostředí labilní 1,3—dioxolanové deriváty patentu US firmy Janssen.

Je však zapotřebí širší spektrum fungicidních činidel, které mají zvýšenou rozpustnost a které vykazují příznivou účinnost pro ošetřování systémových fungicidních infekcí, zejména infekcí Aspergillus, Candida, Cryptococcus a oportunistických infekcí.

-1 CZ 294823 B6

Podstata vynálezu

Tento vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce I

ve kterém obě X znamenají nezávisle F nebo Cl nebo jedno X znamená nezávisle F a druhé X znamená nezávisle Cl,

Ri znamená (C4-C₅)alkylskupinu s rovným nebo rozvětveným řetězcem, substituovanou jednou hydroxylovou částí nebo jejich estery nebo jejich farmaceuticky použitelné soli.

Podle výhodného aspektu předkládaný vynález poskytuje tetrahydrofuranový derivát obecného vzorce I, ve kterém Rj znamená hydroxysubstituovanou C₄- nebo C₅-alkylskupinu vybranou ze souboru, který zahrnuje * * * *

-CH(C₂H₅)CH(OH)CH₃, -CH(C₂H₅)CH₂CH₂OH, -(CH)₂-CH(OH)C₂H₅, * * * *

-CH(CH₃)CH(OH)CH₃, -CH(C₂H₅)CH₂OH, -CH(CH₃)CH₂CH₂OH kde atomy uhlíku označené (*) mají absolutní konfiguraci R nebo S:

Podle dalšího výhodného aspektu předkládaný vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce III

-2CZ 294823 B6

ve kterém R₅ znamená

.a—Me

OH '

nebo

kde

Me znamená CH₃

Podle dalšího aspektu poskytuje tento vynález sloučeniny obecného vzorce IV

ve kterém R₉ znamená -CH(C₂H₅)CH(OH)CH₃) nebo -CH(CH₃)CH(OH)CH₃.

Podle dalšího aspektu předkládaný vynález poskytuje sloučeninu obecného vzorce III, kde R je

kde

Me znamená CH₃.

Podle dalšího aspektu předkládaný vynález poskytuje sloučeninu vzorce

OH kde

Me znamená CH₃.

Termín „(C4-C₅)alkylskupina substituovaná jednou nebo dvěma hydroxylovými částmi“ je zde použit ve významu označující uhlovodíkové skupiny s přímým nebo rozvětveným řetězcem, mající od pěti do šesti atomů uhlíku, přičemž v sobě zahrnují, aniž by byl tím výběr omezován, M-, sek-, izo- a terc-butyl, η-, sek-, izo-, terč- a neo-pentyl, substituované jednou hydroxylovou částí a zahrnuje R a S stereoizomery takových (C₄-C₅)alkylskupin.

Termín „hydroxysubstituovaná C₄ nebo C₅ alkylskupina“ znamená * * * *

-CH(C₂H₅)CH(OH)CH₃, -CH(C₂H₅)CH₂CH₂OH, -(CH)₂-CH(OH)C₂H₅,

-CH(CH₃)CH(OH)CH₃, -CH(C₂H5)CH₂OH, kde každý atom uhlíku označený hvězdičkou (*) má R nebo S absolutní konfiguraci.

Termín „estery“ znamená (a) polyetherestery, (b) fosfátové estery, (c) heterocyklické estery, (d) alkanoátové a alkenoátové estery (e) aminoalkanoátové estery a (f) estery kyselin a (g) sulfátové estery.

Termín „polyetherestery“ je zde použit ve významu polyetheresterů představovaných obecným vzorcem

O (CHR₇)_s-O-(CHR₇CHR₇)_t-R₈ kde R₇ znamená (C i—C₆)alkyl s přímým nebo rozvětveným řetězcem definovaný a s znamená celé číslo 1 až 6, výhodně s znamená 1 až 3, výhodněji znamená s 1, t znamená číslo 1 až 6, výhodně t znamená 1 až 3, výhodněji znamená 12 nebo 3.

R₈ znamená R₇ nebo skupinu -(CHR₇)_S-CO₂R₇, výhodně R₈ znamená CH₃ nebo C₂H₅ nebo -CH₂CO₂H nebo -CH₂CO₂CH₃. Typicky výhodné polyetherestery zahrnují -COCH₂O(CHoCtLOLCHs, -COCH₂O(CH₂CH₂O)₂CH₃ a-COCH₂O(CH₂CH₂O)₃CH₃.

-4CL 294823 B6

Termín „fosfátové estery“ je zde použit ve významu esterů fosforečných kyselin představované obecným vzorcem

II

-[C“(0)]z<CHR₇)_n.(O)_m-P-(0W)2 , kde z znamená 0 nebo 1, R₇ má význam uvedený výše a výhodně znamená Η, n znamená celé 5 číslo 0 až 6, m znamená 0 nebo 1 a W znamená H, CH₂Ar nebo

OH kde Ar znamená fenyl, fenyl substituovaný halogenem, zejména chlorem nebo bromem nebo nitroskupinou, kyanoskupinou a trihalomethylskupinou, zejména trifluormethylskupinou.

ío Typicky vhodné fosforečné kyseliny a estery zahrnují

O

-P-(OCH₂C₆H₅)₂,

(OH)

f

o o

Π II

-C-(CH) -0-P(OH)₂, o o m = η = 1 až 4 nebo -C-CH(CH₃)-O-P(OH)₂ a jejich farmaceuticky použitelné soli.

Termín „heterocyklický ester“ je zde použit ve významu heterocyklických esterů představovali ných obecným vzorcem

ve kterém R₇ má význam definovaný výše, W znamená celé číslo 1 až 5, výhodně W znamená 1 až 3, q znamená 3 nebo 4 a Y znamená CHR₇, -Ο-, NH, NR₇, S, SO nebo SO₂.

-5CZ 294823 B6

Typicky vhodné heterocyklické estery zahrnují

Termín „alkanoátové nebo alkenoátové estery“ je zde použit ve významu alkanoátových nebo alkenoátových skupin s přímým nebo rozvětveným řetězcem, popřípadě substituované hydroxy5 skupinou nebo její část nebo takovými alkanoáty nebo alkenoáty.

Výhodné alkanoátové estery zahrnují acetát až dekanoát, zejména acetát až butanoát. Výhodné hydroxysubstituované alkanoátové estery zahrnují Ci až C₆ alkanoátové estery substituované jednou hydroxylovou částí, zejména

OO

W ’*/

-CCHqOH a -C-CH(OH)CHt

ZJ

Výhodné alkanoátové estery znamenají Cio až C₂o alkenoáty a zahrnují C14 až Cu alkenoáty, jako je czs-7-hexadecenoát.

Termín „aminoalkanoát“ je zde použit ve významu přírodních a syntetických zbytků amino15 kyselin výhodně s aminoskupinami chráněnými konvenčními chránícími skupinami dobře známými ve stavu techniky, jako je fenylacetát.

Termín „ester kyseliny“ je zde použit ve významu esterů kyselin reprezentovaný obecným vzorcem

O O

II II

-C-C(CR₇R₇)_k-C-OH , kde R7 má význam uvedený výše a k znamená celé číslo od 1 do 8. Typicky vhodné estery kyselin zahrnují estery odvozené od kyseliny šťavelové, malonové, jantarové, glutarové a adipové a rovněž od rozvětvených dvojsytných kyselin srozvětveným řetězcem, jako je

O O

H lt

-cchch₃-coh ,

Sloučeniny podle vynálezu a rovněž jejich estery prokazují široké spektrum fungicidní aktivity při rozmanitých in vitro zkouškách vůči Candida, ostatním kvasinkám, dematofytům,AspergiUus a oportunistickým houbám. In vitro testy na fungicidní účinnost se prováděly konvenčními agarovými zřeďovacími metodami v Sabouradově dextrózové živné půdě („SBD“) u velkého množství hub. Minimální inhibiční koncentrace („MIC“) se měřily po 24, 48 a 72 hodinách.

-6CZ 294823 B6

Termín „oportunistická houba“ zahrnuje Cryptococcus, Histoplasmu, Blastomyces, Coccidioides, Fusarium, Mucor, Paracoccidioides, Fonsecaea, Wangiellu, Sporothrix, Pneumocystis, Trichospron, jak bylo ukázáno in vitro účinností u vhodných zvířecích druhů, například myší, krys nebo králíků. Předpokládá se, že sloučeniny podle vynálezu vykazují účinnost proti řadě rodů a druhů bakterií, prvoků, gramnegativním, grampozitivním, Anaerobes, Legionella Borrelia, Mycoplasma, Treponema, Gardneralla, Trichomononas a Trypanosoma.

Výhodné sloučeniny obecného vzorce III, kde R₅ znamená hydroxysubstituované C₄ a C₅alkylskupiny vykazují následující fungicidní účinnost SBD proti 37 druhům Aspergillus niger, flavus, fumigatus a terreus: geometrickou střední hodnotu MIC v rozsahu <0,05 až >1,53 (mg/ml) a geometrickou střední hodnotu minimální fungicidní koncentrace („MFC“) v rozsahu 0,27 až > 4,24 mg/ml.

Výhodné sloučeniny obecného vzorce III, ve kterém R₅ znamená hydroxysubstituovanou C₅alkylskupinu vykazují (1) lepší fungicidní účinnost jak bylo naměřeno geometrickou střední hodnotou MIC a MFC při různých in vitro zkouškách proti C. albicans (N = 26), C. krusei (N = 26), C. glabrata (N = 9), C. tropicalis (N = 4), C. stellatoidea (N = 1), C. neoformans (N = 3) a dermatofytům, T. rubrum, T. menta a T. tonsurans (N = 6) (po 48 nebo po 78 hodinách) při porovnání s flukonazolem a rovněž (2) lepší fungicidní účinnost v následujícím in vivo modelech: Aspergillus flavus a fumigatus (čtyři kmeny) v pulmonálním modelu myši (PO-1XDX4D) v porovnání s jinými azoly, například itrakonazolem a Candida albicans (čtyři druhy) systematický model s normální a porovnávací myší (PO-1XDX4D) ve srovnání s jinými azoly, například flukonazolem.

In vivo fungicidní účinnost sloučenin podle tohoto vynálezu byla porovnávána s azolovými fungicidy, například flukonazolem v Aspergillus pulmonárním infekčním modulu v myši. Byl použit postup popsaný Davidem Loebenbergem a kol. „Sch 42427, The Active Enantiomer of Antifungal agent Sch 39304; In vitro Activity“, Antimicrobial Agents and Chemotherapy, (1982), 36 498-501. Aspergillus flavus pulmonámí model je také popsán v Evropské patentové přihlášce EP 0 539 938 Al, publikovaná 5. května 1993.

Výhodné sloučeniny obecného vzorce III vykazují lepší fungicidní in vitro účinnost SBD proti 37 druhům Aspergillus v (a) geometrické střední hodnotě MIC <0,05 až < 0,81 v porovnání s flukonazolem (geometrická střední hodnota MIC > 32 a (b) v geometrické střední hodnotě MFC < 0,89 až < 3,78 v porovnání s flukonazolem (geometrická střední hodnota MFC > 32).

Tabulky Q, R a S uvedené dále ukazují lepší in vitro fungicidní účinnost tří výhodných sloučenin obecného vzorce III v porovnání s flukonazolem. Tabulka Q ukazuje fungicidní účinnost jako procento kmenů různých hub s MIC < 1 pg/ml pro tři výhodné sloučeniny obecného vzorce III v porovnání s flukonazolem. Tabulka R ukazuje fungicidní účinnost jako procento stejných kmenů s MFC < 1 μg/ml. Tabulka S ukazuje in vitro hodnoty MIC 90 pro tři výhodné sloučeniny obecného vzorce III proti stejným organizmům uvedeným vtabulce Q a R.

Nejvýhodnější sloučeniny obecného vzorce III kde R₅ =

OH vykázaly konzistentně vyšší úroveň séra u myší, krys, psů a opic po orálním dávkování v methylcelulózové formulaci v porovnání s azoly podobné struktury a také vykázaly velmi dlouhou životnost poločasu séra při dávkování lx denně s dobrou tkáňovou distribucí. Výše

-7CZ 294823 B6 uvedené nejvýhodnější sloučeniny obecného vzorce III nejsou induktory cytochromu P 450 jaterních enzymů metabolizujících léčiva po orálním podání v in vivo krysím modelu.

Tabulka Q

In vitro fungicidní aktivita pro vybrané sloučeniny vzorce III¹

Procento kmenů s MIC < 1 pg(ml pg/ml

	R⁵	7* OH M.^/S	4”* 7<0H Me^/S	gr-Me 5-»
Organizmus	Kmeny				FLZ²
Aspergillus	37	100	100	100	0
Candida albicans	26	100	100	100	100
Candida kursei	16	100	100	100	100
Candida tropicalis & Stellatoidea	5	100	100	100	100
Candida glabrata	9	22	22	33	0
Cryptococcus neoformans	3	100	100	100	0
Dermatophytes	6	100	100	100	100

ίο 1.

2. FLZ = flukonazol [a-(2,4-difluorfenyl)-a(lH-L2,4-triazol-l-ylmethyl)-lH-l,2,4-triazol-1 -ethanol]

-8CZ 294823 B6

Tabulka R

In vitro fungicidní aktivita pro vybrané sloučeniny vzorce III¹

Procento kmenů s MIC < 1 pg(ml Pg/ml

Organizmus	R⁵ Kmeny	rT** \|Μ·-Ϊ 7* OH u/^s		m/™⁰	FLZ^{2 *}
Aspergillus	37	50	62	89	0
Candida albicans	26	100	100	100	100
Candida kursei	1-16	88	94	100	0
Candida tropicalis & Stellatoidea	5	100	100	100	100
Candida glabrata	9	22	22	22	0
Cryptococcus neoformans	3	100	100	100	0
Dermatophytes 5 1.	6	67	83	100	0

2. FLZ = flukonazol

-9CZ 294823 B6

Tabulka S

In vitro fungicidní aktivita pro vybrané sloučeniny vzorce III¹

Procento kmenů s MIC < 1 pg(ml Pg^/ml

Organizmus	R⁵ Kmeny	IM·—Z Me^/s	ή-ΟΗ Me^/S	4· ^^0H	FLZ²
Aspergillus	37	0,122	0,096	0,112	29,9
Candida albicans	26	0,274	0,174	0,139	0,887
Candida kursei	16	0,058	0,014	0,12	29,9
Candida tropicalis & Stellatoidea	5	0,117	0,117	0,354	0,917
Candida glabrata	9	28,8	17,1	28,8	29,3
Cryptococcus neoformans	3	0,05	0,007	0,101	25,9
Dermatophytes	6	0,165	0,101	0,707	29,4

1.

2. FLZ = flukonazol

-10CZ 294823 B6

Výhodné estery sloučenin podle vynálezu vzorce IV také vykazují vynikající in vivo fungicidní účinky proti širokému spektru hub po orálním nebo parenterálním podání například sloučeniny IV myším, krysám psům nebo opicím. Výhodné estery vzorce IV jsou uvedeny dále, kde R₉znamená:

r₉

V*OCH2C₆H_s

OCH₂C₆H_s

e

NT 961.4

M* 759.3

-11 CZ 294823 B6

Rg

R_g

/—Me

Avyj o k^N.Me e M*841

O no

ΛΓ826

M*905

Me

ΛΓ891 r~Me /—Me

O

Γ.Γ828

0PO₃H_z. 2NMG -Al o

M*817

M* 853,2

o

ΛΓ861

.NMG f\CH -2NMG

NT 801

l₂. 2NMG

O

.. 2NMG

ΛΓ 881,3

- 12CZ 294823 B6

OCH^s

o

M* 961,2

M* 742,4

.ŽEIA-I

873,3 y-Me —<R

W

Me fiOH -2NMG

OH

M*781,8

M*S39

0-vO

NH.CO.CHjCeHj

ΛΓ983

Zvlášť výhodné estery uvedené dále jsou snadno metabolizovány in vivo na odpovídající alkoholy, například R₅ znamená ^J

-13 CZ 294823 B6

Nejvýhodnější metabolizovatelné estery zahrnují sloučeniny vzorce IV, ve kterém 1¾ znamená

kde Y, a q mají význam definovaný výše

♦2NMG

NMG - N-methylglutamin

Fungicidní sloučeniny podle tohoto vynálezu reprezentované obecným vzorcem I mají R absolutní stereochemickou konfiguraci na uhlíku v tetrahydrofuranovém kruhu nesoucím 5 di-halogenfenylovou a 1H, 1,2,4-triazol-l-ylmethylovou část a CH₂OY má „cis“ stereochemickou konfiguraci relativně k lH-l,2,4-triazol-l-ylmethylové části. Viz dále uvedený obecný vzorec I

- 14CZ 294823 B6

kde R] znamená (C₃-C₈)alkylovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem substituovanou jednou nebo více hydroxyskupinami, která výhodně existuje jako jeden stereoizomer, přičemž směs izomeru je také zahrnuta do rozsahu tohoto vynálezu.

Sloučeniny obecného vzorce I jsou genericky, nikoliv však specificky popsány jako „cis“ série, typ ii v patentovém spise US 5 039 676, Saksena a kol., sloupec 9, řádek 59-68 a v příkladu 68, sloupec 5, řádek 16 až sloupec 52, řádek 44.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu lze připravit kroky, ilustrovanými následujícími schématy I až V. Ve schéma I se sloučenina 3 snadno připraví z komerčně dostupné sloučeniny I podle příkladů la, lb a lc. Sloučenina 4 se připraví reakcí L(+)-diethylvinanu (L-DET“) a molekulových sít za přítomnosti tetra-izopropoxidu titanu (i-PrO)₄Ti v aprotickém rozpouštědle, jako je methylenchlorid při teplotě 0 °C až -35 °C. Viz například T. Katsuki, K. B. Sharpless, J, Am. Chem. Soc.. 102, 5974 (1980) a 103, 464 (1981). Ktéto reakční směsi se přidává oxidační činidlo, například terc.butylhydroperoxid („TBHP“) (krok d ve schéma I). Přidá se sloučenina 3 a získá se sloučenina obecného vzorce 4 (když se použije L(+)-diethylvinan). Reakce sloučeniny 4 s 1 H-l,2,4-triazolem za přítomnosti silné zásadité látky, například NaH v aprotickém rozpouštědle, jako je DMF, při teplotě 0 až 80 °C poskytne diolovou sloučeninu obecného vzorce 5. Primární hydroxyskupina ve sloučenině obecného vzorce 5 se konvertuje na odstupující skupinu, například mesylát nebo tosylát (sloučenina 6) reakcí sloučeniny obecného vzorce 5 například s mesylchloridem („MsCl“) v aprotickém rozpouštědle, například methylenchloridu, za přítomnosti zásadité látky, například triethylaminu („Et₃N“). Sloučenina obecného vzorce 6 se zpracovává se silně zásaditou látkou, například hydridem sodným (NaH) v aprotickém rozpouštědle, například DMF za teploty místnosti, za vzniku oxiranové sloučeniny obecného vzorce 7. Reakce sloučeniny obecného vzorce 7 s diethylmalonátem za přítomnosti silně zásadité látky, například hydridu sodného v aprotickém rozpouštědle, například DMSO při teplotě 25 °C až 75 °C poskytuje lakton 8. Redukce 8 s hydridem kovu, například tetrahydroboritanem lithným (LiBH₄) v alkoholu, například v ethanolu (EtOH) poskytuje triol 9. Konverze dvou primárních alkoholů 9 na odstupující skupiny (methansulfonáty nebo /?-toluensulfonáty) reakcí 9 s přebytkem p-toluensulfonylchloridu v aprotickém rozpouštědle, například THF, za přítomnosti zásadité látky, například Et₃N se poskytuje di-jp-toluensulfonát. Sloučenina 10 se přivede do styku se silnou zásaditou látkou, například NaH v aprotickém rozpouštědle, jako je toluen, za zvýšené teploty od 100 °C do 120 °C, přičemž se získá směs dvou p-toluensulfonátů (cis a trans), které se separují chromatograficky za získání czs-p-toluensulfonátu 11. Reakce sloučeniny 11 s alkoholy HOY za přítomnosti silně zásadité látky, jako je NaH, v aprotickém rozpouštědle, jako je DMSO, za teploty 25 °C až 75 °C poskytuje sloučeninu obecného vzorce I.

Schéma II poskytuje alternativní reakční sekvenci za získání sloučenin podle tohoto vynálezu. Reakcí sloučeniny lis komerčně dostupnou sloučeninou 12 za přítomnosti NaH se získá sloučenina obecného vzorce 13. Hydrolýza N-acetalové skupiny ve sloučenině 13 se provádí silně zásaditou látkou, jako je NaH za přítomnosti π-BuOH, čímž se získá sloučenina 14. Je pochopitelné, že místo N-acetylové skupiny ve sloučenině 12 může být použita jiná zásaditá labilní skupina, jako je N-formyl, N-benzoyl atd., za poskytnutí korespondujících N-formylových a N-benzylových derivátů sloučeniny obecného vzorce 13. Reakce sloučeniny 13 s p-chlornitrobenzenem za přítomnosti kolektoru kyseliny chlorovodíkové, jako je K₂CO₃poskytuje nitrosloučeninu obecného vzorce 15. Katalytickou reakcí sloučeniny 15 za přítomnosti platinového nebo palladiového katalyzátoru se získá amin obecného vzorce 16. Zpracováním sloučeniny 16 s fenylchlorformiátem za přítomnosti pyridinu se získá urethanový meziprodukt

- 15CZ 294823 B6 obecného vzorce 17. Reakcí sloučeniny 17 s hydrazinem se získá semikarbazid obecného vzorce 18, jež cyklizuje za přítomnosti formamidinacetátu za poskytnutí klíčového triazolonu obecného vzorce 19. Alky láce sloučeniny 19 podle příkladu 19 a 20 poskytne sloučeninu obecného vzorce 20, včetně sloučenin obecného vzorce I, kde Ri má význam uvedený výše.

Schéma III poskytuje ze stereospecifíckého hlediska přístup k eřs-alkoholu obecného vzorce 26 a cw-/2-toluensulfonátu obecného vzorce 11, a to aplikováním enzymové chemie. Například reakce triolu obecného vzorce 9 s ethylacetátem za přítomnosti prasečí pankreatické lipázy dává jednoduchý monoacetát obecného vzorce 21. Zbývající primární hydroxyskupina ve sloučenině 21 je chráněna kyselou labilní skupinou, jako je tetrahydropyranylová skupina a získá se sloučenina jako je 22. Hydrolýza acetoxyskupiny ve sloučenině obecného vzorce 22 se provádí se zásaditou látkou, jako je KOH, přičemž se získá sloučenina obecného vzorce 23. Zbývající kroky jsou: (i) tosylace sloučeniny obecného vzorce 23 za získání sloučeniny obecného vzorce 24; cyklizace sloučeniny obecného vzorce 24 za přítomnosti NaH, čímž se získá sloučenina obecného vzorce 25; (iii) sejmutí chránící skupiny THP etheru ve sloučenině obecného vzorce 25 za použití kyselého katalyzátoru, jako je p-toluensulfonová kyselina (k získání sloučeniny obecného vzorce 26), následované tosylací výsledné sloučeniny obecného vzorce 26 za získání klíčového meziproduktu 11.

Podrobný popis přípravy klíčového meziproduktu je popsán v patentu US 5 403 937 uděleném a publikovaném 4. dubna 1995.

Schéma I

- 16CZ 294823 B6

Reagencie: (a) NaOAc; (b) Wittigova reakce; (c) KOH; (d) L-DET, TBHP, (z-Pr)₄Ti; (e) NaH,

1,2,4-triazol, DMF; (f) MsCl, Et₃N, CH₂C1₂; (g) NaH, DMF; (h) NaH, CH₂(COOEt)₂, DMSO; (i) LiBH₄, EtOH; (j) TsCl, Et₃N, THF; (k) NaH, toluen, zahřívání; (m) NaOY, DMSO

X = F, Cl

Schéma II

-17CZ 294823 B6

Schéma II (pokračování) i'

Reagencie: (a) NaH; (b) NaOH/w-BuOH; (c) p-Cl-C₆H₄NO₂/K₂CO₃/DMSO, (d) H₂/Pt/C; (e) C6H5OCOCl/pyridin/CH₂Cl₂; (f) NH₂-NH₂/H₂O/dioxan; (g) formamidinacetát/DMF/zahřívání; 5 (h) podle příkladů 19 a 20.

-18CZ 294823 B6

Schéma III

Reagencie: (a) prasečí pankreatická lipáza/EtOAc; (b) dihydropyran/H⁺; (c) KOH; (d) 5 p-toluensulfonylchlorid/pyridin; (e) NaH; (f) methanol/H⁺; (g) /Moluensulfonylchlorid/pyridin.

-19CZ 294823 B6

Schéma IV

I x= r₅

-20CZ 294823 B6

Schéma V

-21 CZ 294823 B6

Schéma VI

O

0R«

R^1X je výhodně CH₃

je výhodně CH₂Ph

N-NHCHO

OCHjPh

N-NHCHO

OCHjPh

OCH₂Ph (Syn isomer > 9:1) 39 38

tg

O

Mě

R^4X znamená výhodně CH₂fenyl

R^IX znamená výhodně CH₃ (syn izomer >9:1) (a) pyrrolidin, reakční doba 24 hodin; (b) R^4x-X, NaH; DMF; (c) RED-AL, toluen, -20 °C; (d) H2NNHCHO, MeOH; (e) R^2xMgBr, Et2O, -10 °C, reakční doba 24 hodin; (f) 17F schématu V ío a postup příkladu 32d; (g) H₂, Pd, HCOOH, 80 °C.

-22CZ 294823 B6

Schéma VII

Příprava polyetheresterů

RefOCHRyCHRyhOH R₈(0CHR₇CHR₇)_t-O(CHR7)_s-CQ2H

DCCD, DMAP¹,44

CH₂CI₂

DCCD = Dicyklohexylkarbodiamid

DMAP = 4-(N,N-Dimethylamino)pyridin

Tabulka pro schéma VII

užití 20F (X=F)

42	43	45	M.S.
		X	M+
-	LG OCH₂CO₂H PG = chránící skupina, např. CH₂fenyl	COCH₂OH	759,3
CH₃(OCH₂CH₂)₃OH	C1CH₂CO₂H	COCH₂O(CH₂CH₂O)₃Me	905

-23 CZ 294823 B6

Tabulka pro schéma VII

CH₃(OCH₂CH₂)OH	ClCH₂CO₂Na	-COCH₂O(CH₂CH₂O)Me	817
CH₃(OCH₂CH)₂OH	ClCH₂CO₂Na	-COCH₂O(CH₂CH₂O)Me	861
CH₃(OCH₂CH₂)₃OH	ClCH₂CO₂Na	-COCH₂(CH₂CH₂O)₃Me	905
HO₂C(OCH₂CH₂)₂OH	ClCH₂CO₂Na	-COCH₂O(CH₂CH₂O)₂COOH	905

FosforeČnanové estery

Schéma VIIIA

20F

46R,

(>- kN-P-ÍOCHsCsHsIs

Tetrazol, t-BuOOH

Rt

_z/(OCH₂C₆H₅)2 o

Pd/C. H₂

AcOH, ETOH

· 2NMG

NMG - N-methylglutamin

-24CZ 294823 B6

Schéma VIIIB

20F, R, =

	'0 II
HO-	c	ÍCHR₇)„LG (49)

R

DCCD. DMAP, CH₂CI₂

LG = Hal

(CHr?7)_nHal

i. AgOPfOCHjCgHs )₂

2. AcOH W/oPd/C, H₂ ETOH

Tabulka pro schéma VIIIA

X=F

R1

.2NMG

M.S. (M+)

781,8

781,7

873,3

NMG = N-methylglutamin

-25 CZ 294823 B6

Tabulka pro schéma VIIIB

52Eh

HOCOCH₂CI

HOCO(CH₂)₄OH

.2NMG

OCOCH2OPO3H2 .2NMG

OCO(CH2)₄OP0₃H2 .2NMG

S-HOCOCH(.OH)CH₃ \s —«OCO(CH2)₄OPO3H₂

Me /-—-Me initm/ 0 OPO3H2 \s 11 I ^oco-c^n

Me » .2NMG ^CH3

M.S. (M+)

961,4

961,2 (M+)

839

881,3

853,2

NMG = N-methylglutamin

-26CZ 294823 B6

Schéma VIIIC

CH₂OPh lO%Pd/C. h_2>

ElOH, AcOH ch₂oh

20F

(b)

OCHjPh OCH₂Ph z-Me <R e II OH

O

Me II O ^^chjO-f^-wqh Η OH o .2NMG Sůl

58.2NMG

Ύ (a)/·—N”P(OCH₂Ph)₂ .Tetrazol, ΛΒυΟΟΗ;

(b)1O%Pd/C. H₂, EIOH, AcOH; (c)2NMG

NMG = N-methylglutamin

-27CZ 294823 B6

Schéma IX

Příprava heterocyklických esterů

20F.

Hal-(CHR₇)_wCOHal

Báze

O (CHH₇) ^O^HR7)

Tabulka pro schéma IX

M..S·.........(M±)

828

841

826

-28CZ 294823 B6

826

Schéma IV poskytuje další reakční sekvence k získání sloučenin podle tohoto vynálezu. Sloučenina 27 se připraví z methyletheru sloučeniny 12 ve schématu II tak, že se methylester 12 podrobí reakčním krokům a až g reakčního schéma II. Reakce sloučeniny 27 s vodným HBr nebo BBr₃ dá fenolovou sloučeninu 28. Reakce sloučeniny 28 s jedním ekvivalentem NaH a následným zpracováním např. s 2-(trimethyl)silylethoxymethylchloridem („SEM-C1“) a DMF při teplotě okolí se získá chráněná sloučenina 29 s vazbou SEM-dusík. Deprotonací sloučeniny 29 s NaH následovanou reakcí vzniklého anionu s tosylátem 11 v DMF nebo DMSO při zvýšené teplotě se získá sloučenina 30. Dusík chránící skupina sloučeniny 30, např. SEM se odstraní zpracováním například 6N HC1 v methanolu při zvýšené teplotě po dobu 3 hodin a získá se sloučenina 19. Sloučenina 19 se zpracuje s NaH a DMSO při teplotě 20 °C po dobu 3/4 hodiny a potom se alkyluje s R]X za vzniku sloučeniny I. Ve sloučenině RiX znamená R] C₃-C₈alkylskupinu která má alespoň jednu chráněnou hydroxylovou část, například O-SEM a X' znamená odcházející skupinu, například brosylát. Odstraněním hydroxy chránící skupiny ze sloučeniny 31, například O-SEM, které se provede například 6N HC1 v methanolu, se získá sloučenina podle vynálezu obecného vzorce I.

Schéma V poskytuje výhodnou cestu pro přípravu sloučenin podle tohoto vynálezu uvedených ve schématu II. Sodná sůl sloučeniny 31 připravená reakcí 4-[4-(4-nitrofenyl)-l-piperazinyl)fenolu s NaH v bezvodém DMSO při teplotě 50 °C až 60 °C po dobu 30 minut reaguje s 2,4-difluorfenyltosylátem 11F (sloučenina 11 v schéma II, kde X = F) po dobu 1 hodiny při 50 °C až 70 °C a po mžikové chromatografii na silikagelu nebo po krystalizaci se získá sloučenina 15F (sloučenina 15 v schéma II, kde X = F). Redukcí 15F hydrogenací v přítomnosti 5% Pd/C v ethanolu obsahujícím IN HC1 se získá aminosloučenina 16F (sloučenina 16 ve schéma II, kde X = F). Reakcí 16 F s fenylchlorformiátem v bezvodém pyridinu při teplotě 0 až 5 °C po dobu 2 hodin se získá fenylkarbamát 17F (sloučenina 17 schéma II, kde X = F). Reakcí 17F s hydrazinhydrátem v 1,2-dimethoxyethanu při teplotě 80 °C po dobu 4 hodin se získá semikarbazid 18F (sloučenina 18 schéma II, kde X = F). Reakce 18F s formamidinacetátem a Et₃N v 2-methoxyethanolu pod argonem v míchaném reaktoru při 80 °C přes noc se získá 3H-l,2,4-triazol-3-on 19F (sloučenina 19 schéma II, kde X = F). Reakcí sloučeniny 19F s R]X podle postupu uvedeném ve schéma IV se získají sloučeniny obecného vzorce I.

Schéma VI poskytuje alternativní, stereoselektivní cestu pro přípravu výhodných sloučenin podle vynálezu. Na sloučeninu 35 (například methylester kyseliny S-mléčné) se působí přebytkem pyrrolidinu v methylenchloridu po dobu 24 hodin při teplotě místnosti a získá se amid 36. Reakcí sloučeniny 36 a NaH s například benzylhalogenidem v DMF se získá sloučenina 37. Selektivní redukcí amidu 37 s 3,4M roztokem Z>z5(2-methoxyethoxy)aluminiumhydridem sodným („RED-Al“) v toluenu při teplotě -20 °C se získá aldehyd 38. Reakcí aldehydu 38 s H₂NNHCHO v methanolu se získá sloučenina 39, která reaguje s Grignardovým činidlem například ethylmagneziumbromidem v suchém etheru při teplotě -10 °C až do teploty místnosti po dobu 24 hodin a získá se sloučenina 40, kde poměr S,S izomerů : S,R izomerů je 94 : 6. Jestliže se grignardova reakce provede v přítomnosti 1,2 ekvivalentů ůzs(trimethylsilyl)acetamidu, pak poměr SS ku SR je 99 : 1. Sloučenina 40 reaguje se sloučeninou 17F reakčního schéma V v toluenu v přítomnosti DBU (l,8-diazabicyklo[5.4.0]undek-7-enu) po dobu 6 hodin při teplotě 80 °C. Cyklizace se dosáhne zvýšením teploty na 100 °C až 110 °C a pokračováním v udržování této teploty přes noc. Po vyčištění pomocí TLC se získá sloučenina 20F. Zpracováním 20F vodíkem a palladiovou černí v methanolu obsahujícím kyselinu mravenčí zahřátou na

-29CZ 294823 B6 °C se získá surový produkt, který se izoluje a čistí (TLC) a získá se 20F, tj. sloučenina obecného vzorce III, kde

a X = F, Mt = 701’

Reakcí Grignardova činidla na propanimin 39 vzniká sloučenina 40, ve které je absolutní stereochemie zavedená na nové chirální centrum v 40 v podstatě stejná (tj. S) jako na chirálním atomu uhlíku v 39. Termín „v podstatě stejná“ je zde užit ve významu, že poměr S:S k S:R (v například 40) je větší než 9:1, výhodně větší než 15:1, nejvýhodněji 99:1.

Hmotová spektrální data uváděná zde jako M+ jsou výchozí ionty, které byly stanoveny technikou rychlého bombardování atomů (FAB) a představují píky M+l.

Schéma VII poskytuje obecnou metodu pro přípravu polyetheresterů alkoholů podle tohoto vynálezu. Alkoholát alkoholetheru 42 například CH₃(OCH₂CH₂)₃OH, tj. sloučenina 42, kde R₇ = H a t = 3 se připraví reakcí 42 s přebytkem silné báze, například NaH v bezvodém etheru, například v THF při teplotách ledové lázně. Takto vzniklá reakční směs se míchá několik hodin, tj. 2 nebo více a přidá se kní sodná sůl kyseliny 43, například sodná sůl kyseliny chloroctové (43, kde LG = Cl, R₇ = H a s = 1). Vzniklá reakční směs se míchá při teplotách ledové lázně a v míchání se pokračuje až do dosažení teploty místnosti. Potom se opatrně přidá voda a polyetherkyselina 44 se oddělí konvenčními technikami.

K roztoku sloučeniny 44 v CH₂C1₂ se přidá 1,3 až 1,5 ekvivalentů báze 4-(N,N-dimethylamino)pyridinu („DMAP“) a sloučenina 20F, ve které

Teplota takto vzniklé reakční směsi se sníží použitím ledové lázně a ke směsi se přidá 1,3 až 1,5 ekvivalentů dicyklohexylkarbodiimidu („DCCP“). Vzniklá reakční směs se kontinuálně míchá až do dosažení teploty místnosti. Sraženina močoviny se odstraní a surový produkt se izoluje obvyklými technikami. Vzniklý zbytek se čistí chromatografíí na silikagelu a získá se čistá sloučenina [M+H]⁺ = 906 (FAB). Vhodnou substitucí výchozích látek 42 a 43 se získají sloučeniny 45 uvedené v tabulce pro schéma VIII. Hodnoty MS pro produkty uvedené pod 45 v tabulce pro schéma VII byly naměřeny metodou FAB.

Schéma VIII A-C znázorňuje obecné způsoby pro přípravu fosfátových esterů alkoholů podle vynálezu. Schéma VIIIA poskytuje způsob přípravy fosfátových esterů obecného vzorce IV, ve kterém Ré znamená

O (CHR₇V(O)^P(OW)₂ kde z = m = n - 0

-30CZ 294823 B6

Sloučenina 20F ze schéma II v methylenchloridu reaguje při teplotě místnosti s 1,5 ekvivalenty N,N-diizopropyldibenzylfosforamidu, 1,5 ekvivalenty /erc-butylperoxidu (3M v izooktanu) a bází, jako je tetrazol po několik hodin. Postup reakce se sleduje TLC (5% methanol: EtOAc, 5 objemově) na silikagelu. Surový produkt v EtOAc se promyje thiosulfátem sodným a čistí se za použití standardních technik a získá se dibenzylfosfátový ester 46. Dibenzylesterová skupina sloučeniny 46 se odstraní a zpracováním sloučeniny 46 rozpuštěné ve stejných objemech ethanolu a ledové kyseliny octové v přítomnosti přebytku 10% Pd/C pod atmosférou vodíku při teplotě místnosti a mícháním přes noc se získá sloučenina 47. Reakce pokračuje, dokud je ío zjištěna přítomnost výchozích látek (TLC nebo NMR). Katalyzátor se odstraní filtrací a surový fosfátový ester 47 se čistí standardními technikami. Zpracováním sloučeniny 47 v methanolu při teplotě místnosti dvěma ekvivalenty báze, například NMG (nebo Et₃N) se získá sloučenina 47 2NMG. Sloučeniny 46 a 47 připravené podle schéma VIIIA jsou uvedeny v tabulce pro schéma VIIA.

Schéma VIIIB znázorňuje přípravu fosfátových esterů obecného vzorce IV, ve kterém

O (CHR₇)r(O)5rP(OW)₂ z=m=lan=0.

Sloučenina 20F rozpuštěná v methylenchloridu se zpracuje 1,3 ekvivalenty DMAD, 1,3 ekvivalenty DCCD a 1,3 ekvivalenty kyseliny 49 obecného vzorce

HO

O II — (CHR₇)_nLG například HO₂C(CH₂)4Br, tj. z = 1, n = 4, R₇ = H a odcházející skupina LG znamená Br. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti dokud je zjištěna přítomnost výchozích látek (TLC) a čištěním surového produktu se získá bromid 50 ve formě bílé pevné látky, kde

Me

OjCfCHgUBr

Bromid 50 v benzenu se zahřívá při teplotě 80 °C přes noc s 1,5 ekvivalenty dibenzylfosforečnanu stříbrného (Sigma Chemical Co., St. Louis). Reakční směs se ochladí a promyje se vodnou bází, například K₇CO₃. Surový produkt se oddělí a čištěním chromatografií na silikagelu se získá dibenzylfosfátový ester 51. Zpracováním sloučeniny 51 ve směsi ethanolu a ledové kyseliny octové s přebytkem 10% Pd/C pod atmosférou vodíku přes noc při teplotě místnosti se získá 30 fosforečnanový ester 52. Zpracováním sloučeniny 52 v methanolu dvěma ekvivalenty báze, například NMG (nebo Et₃N) se získá sloučenina 52. 2NMG.

Schéma VIIIC poskytuje alternativní postup přípravy fosforečnanových esterů obecného vzorce IV, ve kterém Ró má význam definovaný výše pro schéma VIIIB a z = 1 a n = 1. Benzyl35 ether methylacetátu 53 ve směsi methanolu a vody a přebytek báze, například K₂CO₃ se míchají přes noc při teplotě místnosti a získá se benzylether 54. Reakce roztoku sloučeniny 20F a 54 v methylenchloridu s 1,3 až 1,5 ekvivalenty DCCD a DMAP při teplotě místnosti přes noc poskytuje ster 55. Benzyletherová skupina sloučeniny 55 se odstraní zpracováním s přebytkem 10% Pd/C ve směsi ethanolu a ledové kyseliny octové pod atmosférou vodíku a při teplotě

-31 CZ 294823 B6 místnosti přes noc. Čištěním surového produktu se získá sloučenina 56. Zpracováním sloučeniny 56 s 1,5 ekvivalenty diizopropyldibenzylfosforečnanu a 1,5 ekvivalenty terc.butylperoxidu a tetrazolem podle postupu uvedeném v schéma VIIIB se získá dibenzylester 57. Odstraněním dibenzylových skupin 10% Pd/C ve směsi ethanolu a ledové kyseliny octové pod atmosférou vodíku (jak popsáno výše) se získá fosforečnanový ester 58. Zpracováním sloučeniny 58 dvěma ekvivalenty báze, například NMG se získá sloučenina 58 · 2NMG.

Schéma IX znázorňuje přípravu heterocyklických esterů podle tohoto vynálezu. Sloučenina 20F, kde

rozpuštěná v methylenchloridu reaguje se sloučeninou 62 (Hal - Br nebo Cl, w = 1 až 5, např. C1-CH₂-COC1) v přítomnosti báze, jako je pyridin, při teplotě 0 °C až 5 °C po dobu čtyř hodin. Reakční směs se umístí přes noc do lednice. Je-li to nezbytné přidá se další sloučenina 62 a báze a reakce pokračuje dokud je zjištěna přítomnost sloučeniny 20F pomocí TLC. Čištěním surového produktu sloupcovou chromatografíí na silikagelu se získá čistá sloučenina 59 (w = 1, Hal = Cl). Reakcí sloučeniny 59 s přebytkem dusíkaté heterocyklické sloučeniny 60 (například Y = NH, R₇ = H a q = 4) při teplotě 50 °C až 60 °C po dobu jedné hodiny se získá sloučenina 61. Substitucí dusíkaté heterocyklické sloučeniny 60 pěti nebo šestičlennými sloučeninami, například morfolinem, N-methylpiperidinem se získají sloučeniny pod schéma IX.

Alkanoátové a alkenoátové estery 20F připravené standardními syntetickými technikami (například reakcí anhydridu nebo halogenidů alkanových nebo alkenových kyselin v přítomnosti báze, např. pyridinu) produkují alkanoáty nebo alkenoáty sloučenin obecného vzorce I.

Sulfátové estery se připravují reakcí alkoholů obecného vzorce I až IV s oxidem sírovým v přítomnosti přebytku pyridinu při teplotě 70 °C až 90 °C po dobu alespoň 2 hodin podle postupu R. M. Moriarty a kol. Tetrahedron Letters, díl 35, č. 44, str. 8103-8106 (1994).

Sloučeniny obecného vzorce I se také připraví reakcí sloučeniny lis alkoholy vzorce HOY v přítomnosti silné báze, například NaH v aprotickém rozpouštědle, jako je DMSO.

(R)-„Tosyláť‘ série

Viz příklad 15 kde X = F nebo Cl,

-32CZ 294823 B6

a Ri = (Cj-Ce) alkylskupina substituovaná jednou nebo více hydroxylovými částmi.

Sloučeniny reprezentované obecným vzorcem I projevují široké spektrum fungicidní účinnosti, a to při obvyklých fungicidních kontrolních zkouškách, vůči lidskýma zvířecím choroboplodným zárodkům, jako jsou následující: Aspergillus, Blastomyces, Candida, Cryptococcus, Coccidioides, Epidermophyton, Fonsecaea, Fusarium, Mucor, Saccharomyces, Torulopsis, Trichophyton, Trichosporon, Sporothrix a Pneumocysitis.

Výhodné sloučeniny obecného vzorce IV vykazují místní, orální a parenterální fungicidní účinnost in vivo testováním na zvířatech, přičemž je tato účinnost neočekávaně lepší než u známých fungicidních činidel, například intrakonazolu a flukonazolu a u těch azolových sloučenin, které byly specificky objeveny Saksamem a kol. v patentu US 5 039 676 a v Mezinárodní publikaci WO 93/09114.

Fungicidní sloučeniny obecného vzorce I a farmaceutické prostředky podle tohoto vynálezu dávají předpoklad v tom, že budou projevovat antialergickou, protizánětovou a imunomodulační účinnost, široké spektrum antiinfekční účinnosti, například antibakteriální, antiprotozonální a antihelmintové účinnosti.

Tento vynález též poskytuje prostředek pro ošetřování nebo prevenci plísňových infekcí, zahrnující fungicidně účinné množství sloučeniny reprezentované obecným vzorcem I nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí a farmaceuticky přijatelného nosiče nebo ředidla.

Farmaceutické prostředky podle tohoto vynálezu mohou také obsahovat fungicidně účinné množství jiné fungicidně účinné sloučeniny, jako například sloučeniny aktivní vůči buněčné stěně. Termín „sloučeniny aktivní vůči buněčné stěně“ znamená ve zde použitém významu, že se jedná o jakoukoliv sloučeninu, jež interferuje stěnou buňky houby a zahrnuje, aniž by tím ohraničoval jejich výběr, takové sloučeniny, jako papulacandiny, echinocandiny a aculeaciny i inhibitory vůči buněčné stěně houby, jako nikkomyciny, například nikkomycinK a jiné, které jsou popsány v patentu US 5 006 513, který se zde uvádí jako odkaz.

Farmaceuticky použitelné soli sloučenin podle tohoto vynálezu zahrnují adiční soli farmaceuticky použitelných kyselin a solí.

Výhodné farmaceuticky přijatelné kyselé adiční soli jsou netoxické adiční soli, tvořící se tím, že se ke sloučenině podle tohoto vynálezu přidává stechiometrické množství minerální kyseliny, jako je HC1, HBr, H2SO4, HNO3 nebo H3PO4 nebo organické kyseliny, jako je alkyl nebo arylsulfonová kyselina, například methansulfonová kyselina, kyselina izothionová, /zara-toluensulfonová, naftylsulfonová apod.

Farmaceuticky použitelné báze vhodné pro použití v tomto vynálezu jsou báze, které tvoří farmaceuticky použitelné soli kyselých farmaceuticky použitelných esterů fungicidních sloučenin obecných vzorců I, II, III nebo IV a zahrnují vhodné organické a anorganické báze. Vhodné organické báze zahrnují primární, sekundární a terciární alkylaminy, alkanolaminy, aromatické aminy, alkylaromatické aminy a cyklické aminy. Jako příklady organických aminů se uvádějí chlorprokain, prokain, piperazin, glukamin, N-methylglukamin, N,N-dimethylglukamin, ethylendiamin, diethanolamin, diizopropylamin, diethylamin, N-benzylendiamin, N-benzyl-2fenylethylamin, Ν,Ν'-dibenzylethylendiamin, cholin, klemizol, triethylamin („Et₃N“), tris(hydroxymethyl)aminomethan nebo D-glukosamin. Výhodné organické báze zahrnují N-methylglukamin („NMG“), diethanolamin a írzs(hydroxymethyl)aminomethan („TRIS“). Použití dvou

-33 CZ 294823 B6 ekvivalentů NMG v tomto vynálezu je zvlášť vhodné. Vhodné anorganické báze zahrnují hydroxidy alkalických kovů, jako je hydroxid sodný.

Farmaceutické prostředky podle tohoto vynálezu mohou být přizpůsobeny pro orální, parenterální, místní nebo vaginální podání nebo inhalací (orálně nebo nazálně). Mohou být formulovány kombinováním sloučeniny obecného vzorce I nebo ekvivalentního množství farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce I s vhodným, farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.

Vhodnými prostředky mohou být například pevné nebo kapalné prostředky pro orální podávání, jako jsou tablety, kapsle, pilulky, granule, prášky, roztoky, čípky, pastilky, suspenze nebo emulze. Pevným nosičem může být jedna nebo více substancí, jež mohou také působit jako ředidla, aromatizační přísady, solubilizátory, maziva, suspenzační prostředky, pojivá nebo tablety dezintegrující činidla; ta také mohou působit zapouzdření materiálu. V případě prášku je nosič jemně rozemlet a přimíšen k jemně rozmělněné aktivní sloučenině. V tabletě je aktivní sloučenina smíchána s nosičem majícím nezbytné vazebné vlastnosti, a to ve vhodných podílech a pak lisována do žádaného tvaru a velikosti.

Formy pro místní dávkování lze připravit podle způsobů, známých v dané oblasti techniky, a mohou obsahovat rozmanité ingredience, excipienty a aditiva. Formulace pro místní zevní použití v sobě zahrnují masti, krémy, tekuté lokové formy, pudry, aerosoly, pesary a spreje.

Při přípravě čípků se nejprve roztaví nízkotající vosk, jako je směs glyceridů mastných kyselin nebo kakaové máslo a aktivní ingredienty se pak homogenně dispergují do tohoto přípravku pomocí vmíchávání. Roztavená homogenní směs se pak nalije do forem obvyklých velikostí a poté následuje ochlazení a dále ztužení.

Mezi kapalné formy přípravků patří roztoky, suspenze a emulze. Jako příklad lze uvést vodné nebo směsné vodné a propylenglykolové roztoky pro parenterální injekce. Kapalné přípravky mohou být také formulovány jako roztoky s přiměřeným množstvím některého hydroxypropyl α-, β-, nebo γ-cyklodextrinu majícího 2 až 11 hydroxypropylových skupin na molekulu cyklodextrinu, polyethylenglykolu, například PEG-200 nebo propylenglykolu, přičemž tyto roztoky mohou také obsahovat vodu. Vodné roztoky vhodné pro orální podávání mohou být připraveny přidáním aktivní složky do vody a přidáváním vhodných barviv, ochucovadel, stabilizačních činidel, sladidel, solubilizačních činidel a zahušťovacích činidel podle přání a požadavků. Vodné suspenze pro orální podávání mohou být připraveny dispergováním aktivní složky ve velmi rozmělněné formě do vody. Zvlášť výhodné vodné farmaceutické prostředky mohou být připraveny ze sloučenin obecného vzorce I nebo Ha nebo lib dohromady s hydroxypropyl-P-cyklodextrinem ve vodě. Například použití derivátů α-, β- a γ-cyklodextrinů například hydroxypropyl^-cyklodextrinu je popsáno N. Bodorem v patentu US 4 983 586, Pithou v patentu US 4 727 064 a Jansen Pharmaceutical Intemational Patent Application č. PCT/EP 84/00417.

Farmaceutické prostředky podle tohoto vynálezu se připraví mícháním farmaceuticky přijatelného nosiče, například hydroxypropyl-^-cyklodextrinu ve vodě a jeho přidáním k fungicidně účinnému množství léčiva podle tohoto vynálezu. Takto vzniklý roztok se filtruje a popřípadě se odstraňuje voda a to známými způsoby, například pomocí rotační odparky nebo vymrazením. Tvorba roztoku může probíhat při teplotě od 15 °C do 35 °C. Používá se běžně sterilizovaná voda a může též obsahovat farmaceuticky přijatelné soli a tlumivé roztoky, například fosforečnany nebo citráty i konzervační prostředky. Molámí poměr fungicidní sloučeniny obecného vzorce I k hydroxypropyl-^-cyklodextrinu je 1:1 až 1:80, s výhodou 1:1 až 1:2. Normálně je hydroxypropyl-p-cyklodextrin přítomen v molárním přebytku.

Lze také zahrnout preparáty v pevném stavu, které jsou určeny k převedení, krátce před použitím, do kapalné formy preparátu pro orální nebo parenterální podávání. Tyto preparáty v pevném

-34CZ 294823 B6 stavu, určené pro převedení do kapalné formy, mohou obsahovat kromě aktivních složek, jako jsou sloučeniny podle tohoto vynálezu a popřípadě sloučeniny aktivní vůči buněčné stěně, zejména inhibitory vůči stěnám houbových buněk, například nikomycin, ochucovadla, barviva, stabilizátory, tlumivé roztoky, umělá a přírodní sladidla, dispergační prostředky, zahušťovadla, solubilizační činidla a podobně. Rozpouštědlem, jež lze použít pro přípravu kapalné formy preparátu může být voda, izotonická voda, ethanol, glycerin, polyethylenglykoly, propylenglykol a podobně, jakož i jejich směsi.

Parenterální formy injekcí bývají jako intravenózní injekce, nitrosvalové nebo podkožní, jsou obvykle ve formě sterilního roztoku, a mohou obsahovat soli nebo glukózu pro utvoření izotonického roztoku.

Pro místní zevní podávání u lidí při fungicidním použití se používá farmaceutická formulace, jež obsahuje sloučeninu obecného vzorce I (obvykle v rozmezí koncentrací 0,1 do 20 % hmotnostních, s výhodou od 0,5 do 10 % hmotnostních) spolu s netoxickým, farmaceuticky přijatelným nosičem pro místní použití, přičemž se aplikuje denně, dokud se stav léčené pokožky nezlepší.

Obvyklá orální dávka u lidí pro fungicidní použití je v rozmezí 1 mg na kilogram tělesné hmotnosti do 50 mg na kilogram tělesné hmotnosti denně, a to v jednorázových nebo rozdělených dávkách, přičemž výhodně se podává 2 mg na kilogram tělesné hmotnosti až 20 mg na kilogram tělesné hmotnosti denně, ještě výhodněji 5 mg na kilogram tělesné hmotnosti až 10 mg na kilogram tělesné hmotnosti denně.

Obvyklá parenterální dávka pro člověka pro fungicidní použití je v rozmezí od 0,5 mg na kilogram tělesné hmotnosti denně do 20 mg na kilogram tělesné hmotnosti denně, a to jednorázově nebo v rozdělených dávkách, přičemž je výhodné rozmezí od 1 do 10 mg na kilogram tělesné hmotnosti denně.

Přesné množství a frekvence podání sloučenin podle tohoto vynálezu pro fungicidní použití bude závislé na pohlavím, věku a stavu pacienta a rovněž na obtížnosti infekce, jak byla stanovena ošetřujícím lékařem.

Příklady provedení vynálezu

Sloučeniny podle tohoto vynálezu se připraví podle schémat I-IX uvedených výše a v následujících příkladech se používá komerčně dostupných výchozích materiálů.

+ NaOAc

Příklad la

2-Acety loxy-1 -(2,4-difluorfenyl)ethanon

Ke směsi 246 g octanu sodného, 3 g jodidu sodného a 3 1 DMF se přidá 191 g 2-chlor-2',4'-difluoracetofenonu (Aldrich Chemical Co.). Směs se míchá při teplotě 20 °C po dobu 18 hodin a potom se koncentrace na 1 1. Zbytek se nalije do 6 1 zředěné vodné HC1 a extrahuje se pomocí EtOAc. Extrakt se promyje solankou, suší se nad bezvodým Na₂SO₄, filtruje se a po odpaření

-35CZ 294823 B6 filtrátu se získá zbytek. Chromatografováním tohoto zbytku na silikagelu, eluováním pomocí CH₂Cl₂-hexanu se získá 198 g sloučeniny uvedené v titulu.

Příklad lb

1-(2-(2,4-Difluorfenyl)]-2-propenolacetát

Suspenduje se 131 g MEPh₃PBr v 270 ml mechanicky míchaného bezvodého THF při teplotě 20 °C. Přidá se 393 ml 1M NaN(Me₃Si)₂ v THF, nejprve pomalu a potom rychle během pěti minut, přičemž se aplikuje chlazení ledem tak, aby se teplota udržovala nižší než 23 °C. Tvořící se směs se míchá po dobu jedné hodiny při teplotě 20 až 24 °C, chladí se pak na teplotu -70 °C a míchá se po další půl hodiny. Pak se k této směsi přidá roztok 65,5 g produktu z příkladu la ve 140 ml bezvodého THF natolik pomalu, aby se teplota udržela pod -70 °C. V míchání se pokračuje, přičemž je tvořící se reakční směs vystavena působení chladicí lázně po celou noc, během níž se postupně teplota zvyšuje na 20 °C. K takto utvořené suspenzi se přidá 50 ml EtOAc a poté se přidají 3 1 hexanu. Směs se nechá stát po dobu 15 minut a pomocí vakuového filtru se odstraní Ph₃Po. Ještě vlhký filtrační koláč se převede do kádinky. Koláč se důkladně rozetře s 1/2 1 hexanu a opět se použije vakuový filtr pro odstranění zbytků produktu. Spojené hexanové filtráty se promyjí dvakrát 1 1 směsi methanolu a vody v objemovém poměru 1:1a potom solankou. Organická vrstva se suší nad MgSO₄, filtruje se a po odpaření se získá červený olej. Přidá se 1,5 1 hexanu a filtruje se pomocí vakuového filtru přes Celitovou přepážku, přičemž se získá jasně žlutý roztok, kteiý je čirý. Žlutý olej se podrobí chromatografií na silikagelu, eluuje pomocí 1/2 1 hexanu, poté 1 1 hexanu a EtOAc v objemovém poměru 15:1. Spojením homogenních frakcí se získá 38,6 g sloučeniny uvedené v titulu, jako olej.

Příklad lc

2-(2,4-Difluorfenyl)-2-propenol

Rozpustí se 40 g produktu z příkladu 1 b ve 400 ml dioxanu. Přidá se roztok 18 g 85% KOH ve 315 ml vody. Takto vzniklá směs se intenzivně míchá po dobu jedné hodiny a potom se nalije směs do 1 1 Et₂O. Vodná vrstva se separuje a extrahuje se 250 ml Et₂O. Organické vrstvy se spojí a promývají se vodou a potom solankou. Organický extrakt se suší nad bezvodým K₂CO₃ a přidá se k němu 10 g aktivního uhlí. Filtrací a odpařením filtrátu se získá 31,3 g sloučeniny uvedené v titulu, jako olej plavé barvy.

Příklad ld (S)-(-)-[2-[2-(2,4-Difluorfenyl)]oxiranyl]methanol

-36CZ 294823 B6

K roztoku 13 g L-(+)-diethylvinanu v 2,3 1 CH₂C1₂ se přidá 33 g aktivovaného práškového 3.10“' nm molekulového síta a takto utvořená směs se ochladí na teplotu -5 °C. Přidá se roztok 15,4 ml tetra-izopropoxidu titanu ve 100 ml CH₂C1₂ během 2 až 3 minut a poté se vzniklá směs ochladí na teplotu -22 °C. Přidá se 109,5 ml 5,5M roztoku terc.butylhydroperoxidu ve 2,2,4-trimethylpentanu během 4 až 6 minut a utvořená směs se ochladí na teplotu -25 °C. Směs se míchá při teplotě -25 °C po dobu 25 minut a potom se přidá roztok 40 g 2-(2,4-difluorfenyl)-3propenolu z příkladu lc ve 100 ml CH₂C1₂ během 3 až 4 minut. Takto utvořená směs se míchá při teplotě -27 °C po dobu 4,5 hodin. Přidá se 102 ml 30% vodného hydroxidu sodného nasyceného chloridem sodným a vzniklá směs se míchá za zahřívání na teplotu +10 °C po dobu půl hodiny. Ke směsi se přidá 100 g bezvodého MgSO₄ a 33 g Celitu a míchá se při teplotě +10 °C po dobu půl hodiny. Směs se filtruje pomocí vakuového filtru, utvořený filtrační koláč se promyje 1,2 litrem diethyletheru (Et₂O) a poté 1,5 litrem toluenu a spojené organické vrstvy se suší nad bezvodým MgSO₄. Organická vrstva se filtruje a filtrát se odpaří ve vakuu za vzniku zbytku. Zbytek se rozpustí v 1 litru Et₂O a filtrací směsi pomocí vakuového filtru se odstraní nerozpustné podíly. Filtrát se filtruje vakuovým filtrem přes 100 g silikagelu a filtrační přepážka se promyje 200 ml čerstvého Et₂O. Odpařením filtrátu ve vakuu se získá 41 g (94 %) surové sloučeniny uvedené v titulu ve formě žlutavého oleje, [a]_D ²⁵ -36,7° (c = 1, MeOH); PMR (CDC1₃) d 7,40 (m, 1H), 6,85 (m, 2H), 3,95 (m, 2H), 3,31 (d, 1H), 2,84 (d, 1H), 1,91 (m, 1H, zaměnitelný deuteriem).

Příklad 2 (R)-(+)-[2-[2-(2,4-Difluorfenyl)]oxiranyl]methanol

Postupuje se stejným způsobem jako v příkladu ld, kromě toho, že se použije ekvivalentní množství D-(-)-diethylvinanu místo L-(+)-diethylvinanu, přičemž se získá surová sloučenina uvedená v titulu, [oc]d²⁵ + 33,9° (c = 1, MeOH). Purifikací části surové sloučeniny pomocí silikagelové chromatografie se získá homogenní vzorek podle TLC [a_D ²⁵ +40,0°] (c = 1, MeOH).

Příklad 3 (R)-(-)-2-(2,4-Difluorfenyl)-3-( 1,2,4-triazol-l-yl)-l ,2-propandiol

Rozpustí se 8,91 g lH-l,2,4-triazolu ve 150 ml bezvodého DMF a ochladí se na teplotu 0 až 5 °C. Přidá se 2,81 g hydridu sodného (60% olejové disperze) a vzniklá směs se míchá po dobu 30 minut při teplotě místnosti. K ní se pak přidá 10,9 g produktu z příkladu ld. Utvořená směs se míchá po dobu dvě hodiny při teplotě 60 až 70 °C. Směs se ochladí na teplotu místnosti přidáním k ní 10 ml vody a odpařením ve vakuu se získá zbytek. Tento zbytek se rozpustí ve 100 ml vody a 900 ml ethylacetátu (EtOAc). Vodná vrstva se extrahuje dalšími 250 ml EtOAc. Ethylacetátové vrstvy se spojí a promyjí se 100 ml solanky. Tyto ethylacetátové extrakty se dále suší nad bezvodým MgSO₄ a odpaří se. Takto utvořený olejový zbytek se jemně rozetře s 10 ml CH₂C1₂a přidá se 100 ml Et₂O. Tato směs s CH₂Cl₂-Et₂O se míchá po dobu jedné hodiny za teploty místnosti. Po filtraci se získá ll,2g (75%) sloučeniny uvedené v titulu, [a]_D ²⁵ -70,7° (c = l,MeOH), hmotnostní spektrum (FAB): 256 [M+H]⁺. Rekrystalizací 1,0 g filtrovaného produktu z 5 ml CH3CN se získá 0,83 g sloučeniny uvedené v titulu, teploty tání 99 až 100 °C [oc]d²⁵ -71,5° (c = 1,0, MeOH); elementární analýza: počítáno pro CiiHnF2N₃O₂l/2CH₃CN; 52,27 C, 4,57 H, 17,78 N, 13,78 F; nalezeno: 52,26 C, 4,58 H, 17,54 N, 13,78 F; PMR(DMSO) d 8,25 (s, 1), 7,66 (s, 1H), 7,33 (m, 1H), 7,09 (t, 1), 5,72 (s, 1), 5,05 (t, 1), 4,53 (s, 2), 3,61 (m, 2).

Příklad 4 (S)-(+)-2-(2,4-Difluorfenyl)-3-( 1,2,4-triazol-1 -yl)-1,2-propandiol

-37CZ 294823 B6

Postup byl stejný jako u příkladu 3, kromě toho, že se použije ekvivalentní množství z příkladu 2 místo produktu z příkladu 1, přičemž se získala sloučenina uvedená v titulu, t.t. 95 až 101 °C; [cc]d²⁵ + 70,0° (c = 1, MeOH). Hodnota PMR a hmotnostní spektrum bylo konzistentní se strukturou sloučeniny uvedené v titulu.

Příklad 5 (R) -2-(2,4-Difluorfenyl)-3-(l,2,4-triazol-l-yl)-l,2-propandiol-l-methansulfonát

Suspenduje se 10,9 g práškového produktu z příkladu 3 ve 150 ml CH₂C1₂. Kněmu se přidá 8,95 ml triethylaminu a takto vzniklá směs se ochladí na teplotu 0 až 5 °C. Přidá se 3,64 ml methansulfonylchloridu ve 20 ml CH₂C1₂ během 10 minut. Utvořená směs se míchá po dobu jedné hodiny za teploty místnosti. Pak se ochladí na teplotu 0 až 5 °C, extrahuje se 100 ml studeného (0 až 5 °C) 5% KH₂PO₄, dále 100 ml studené (0 až 5 °C) vody, dále 50 ml solanky. Separovaná organická vrstva se suší nad bezvodým MgSO₄ a po odpaření se získá 13,7 g (96 %) sloučeniny uvedené v titulu. PMR (CDC1₃) d 7,95 (s, 1), 7,82 (s, 1), 7,53 (m, 1H), 6,81 (m, 2), 4,84 (d, 1), 4,65 (d, 1), 4,46 (m, 2), 3,05 (s, 3).

Příklad 6 (S) -2-(2,4-Difluorfenyl)-3-(l,2,4-triazol-l-yl)-l,2-propandiol-l-methansulfonát

Postup je stejný jako u příkladu 5, kromě toho, že se použije ekvivalentní množství produktu z příkladu 4 místo produktu z příkladu 3, přičemž se získá sloučenina uvedená v titulu. Hodnota PMR je konzistentní se strukturou sloučeniny uvedené v titulu.

Příklad 7 (R) -l-[2-[2-(2,4-Difluorfenyl)]oxiranylmethyl]-l,2,4-triazol

Rozpustí se 13,7 g produktu z příkladu 5 ve 200 ml bezvodého DMF a takto vytvořený roztok se ochladí na teplotu 10 až 15 °C. K němu se přidá 1,71 g hydridu sodného (60% olejová disperze) a získaná reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 90 minut. Pak se koncentruje ve vakuu na 50 ml. Poté se přidá 200 ml chladné vody (0 až 5 °C) a extrahuje se třemi dávkami 200 ml EtOAc. Spojené extrakty se promyjí 100 ml solanky. Extrakty EtOAc se suší nad bezvodým MgSO₄ a odpaří se na 10,8 g zbytku. Zbytek se aplikuje do CH₂C1₂ na kolonu se 400 g MPLC stupně silikonového gelu, předem připraveného ze suspenzí náplně s CH₂C1₂ obsahující 1 ml Et₃N na litr. Eluuje se 1 litrem, každý s 25, 50 a 75% EtOAc v CH₂C1₂, následovaný 2 litry EtOAc. Spojením frakcí se získá 6,92 g (68 %) sloučeniny uvedené v titulu. Hmotnostní spektrum (FAB): 238 [M+H]⁺; PMR (CDC1₃) d 7,98 (s, 1), 7,77 (s, 1H), 7,07 (m, 1), 6,73 (m, 2), 4,73 (d, 1), 4,41 (d, 1), 2,84 (d, 1), 2,78 (d, 1).

Příklad 8 (S) -l-[2-[2-(2,4-Difluorfenyl)]oxiranylmethyl]-l,2,4-triazol

Postup je stejný jako u příkladu 7, kromě toho, že se použije ekvivalentní množství produktu z příkladu 6 místo produktu z příkladu 5, přičemž se získá sloučenina uvedená v titulu. Hodnota PMR je konzistentní se strukturou sloučeniny uvedené v titulu.

-38CZ 294823 B6

Příklad 9

Ethyl (5R-cis)-, a (SR-trans)-5-(2,4-Difluorfenyl)-2-oxo-5-[(lH-l,2,4-triazol-l-yl)methyl]tetrahydro-3-furankarboxylát

Rozpustí se 9,35 ml diethylmalonátu v 70 ml bezvodého DMSO. Přidá se 2,24 ghydridu sodného (60% olejová disperze) ve dvou dávkách a takto vzniklá směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Přidá se 6,65 g produktu z příkladu 7 a reakční směs se dále míchá po dobu 18 hodin při teplotě 50 až 55 °C. Reakční směs se pak ochladí na teplotu místnosti a nalije se do dobře míchané směsi, složené z 500 ml KH₂PO₄, 500 ml solanky a 1 1 EtOAc. Vodná vrstva se oddělí a promyje dalšími 300 ml EtOAc. Spojené extrakty EtOAc se promyjí 500 ml solanky, poté se suší nad bezvodým MgSO₄ a po odpaření se získá olej. Olej se aplikuje na kolonu s 400 g MPLC stupně silikagelu připraveného s hexanem. Dále se eluuje 500 ml hexanu, poté 2 1 směsi 50 % EtOAc: hexan (objemově), dále 2 1 EtOAc. Spojením frakcí se získá 8,66 g (80 %) sloučeniny uvedené v titulu. Hmotnostní spektrum (FAB): 352 [M+H]⁺, PMR (CDC1₃) d 8,08 (s, 2H), 7,91 (s, 1), 7,71 (s, 1), 7,42 (m, 1), 7,13 (m, 1), 7,85 (m, 2), 4,60 (m, 4), 3,49 (t, 1), 3,14 (t, 1),3,89 (m, 4), 1,18 (m, 6).

Příklad 10

Ethyl (5S-cis), a (5S-/ra«5)-5-(2,4-difluorfenyl)-2-oxo-5-(lH-1,2,4-triazo 1-1-yl)methyltetrahydro-3-furankarboxylát

Postup je stejný jako u příkladu 9, kromě toho, že se použije ekvivalentní množství produktu z příkladu 8 místo produktu z příkladu 7, přičemž se získá sloučenina uvedená v titulu. Hodnota PMR je konzistentní se strukturou sloučeniny uvedené v titulu.

Příklad 11 (R) -(-)-4-(2,4-DifIuorfenyl)-2-hydroxymethyl-5-[lH-(l,2,4-triazol-l-yl]-l,4-pentandiol

Rozpustí se 8,5 g produktu z příkladu 9 ve 125 ml EtOH a přidá se 2,15 g LÍCI. Směs se ochladí na teplotu 0 °C, míchá se a po částech se přidá 1,92 g NaBH₄. Směs se míchá po dobu 18 hodin bez dalšího chlazení. Ke směsi se přidá 125 ml MeOH a 10 ml vody a míchá se po dobu 4 hodin. Směs se odpaří dosucha a precipitát se extrahuje horkým EtOH. Extrakt se odpaří dosucha, přidá se 200 ml THF a na míchanou směs se působí ultrazvukem po dobu 15 minut. Směs se filtruje a filtrát se odpaří. Získaný zbytek se chromatografuje na silikagelu, eluuje se směsí CH₂C1₂: MeOH : NHtOH (v objemovém poměru 95 : 5 : 1) a získá se 3,9 g sloučeniny uvedené v titulu. Hmotnostní spektrum (FAB): 314 (M+H)⁺; PMR (DMSO) d 8,25 (s, 1), 7,69 (s, 1), 7,35 (m, 1), 7,13 (m, 1), 6,94 (m, 1), 6,27 (s, 1), 5,16 (t, 1), 4,44 (m, 4), 3,39 (m, 1), 3,20 (m, 1), 3,05 (t, 2), 2,11 (m, 1),1,52 (m, 1).

Příklad 12 (S) -(+)-4-(2,4-Difluorfenyl)-2-hydroxymethyl-5-[ 1 H-( 1,2,4-triazolyl)]-l ,4-pentadiol

Postup je stejný jako u příkladu 11, kromě toho, že se použije ekvivalentní množství produktu z příkladu 10 místo produktu z příkladu 9, přičemž se získá sloučenina uvedená v titulu. Část surového produktu se chromatografuje na silikagelu eluováním směsí CH₂C1₂: MeOH : NH₄OH, získá se homogenní produkt pomocí TLC. Rozpuštěním látky ve vodě a filtrováním a lyofilizací filtrátu se získá sloučenina uvedená v titulu. [a]_D ²⁵ + 54,50° (c = 1, MeOH).

-39CZ 294823 B6

Příklad 13 (R)-(-)-4-(2,4-Difluorfenyl)-2-[[(4-methylfenyl)-sulfonyloxy]methyl]-5-[ 1 H-( 1,2,4-triazoly 1)]-1,4-pentadiol-1 -(4-methylbenzen)sulfonát

Rozpustí se 4,4 g produktu z příkladu 11 v 50 ml směsi CH₂C1₂: THF (1:1, objemově). Přidá se

4,7 ml Et₃N a 180 mg Ν,Ν'-dimethylaminopyridinu a roztok se ochladí na teplotu 0 °C. K němu se pak přidá 5,9 g p-toluensulfonylchloridu po částech a takto utvořená reakční směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu půl hodiny a potom se míchá při teplotě místnosti po dobu 5 hodin. Přidá se 100 ml EtOAc a směs se filtruje za pomoci vakuového filtru. Filtrát se koncentruje a přidá se kněmu 150 ml EtOAc a promyje se 5% vodným roztokem KH₂PO₄. Organická vrstva se promyje studeným 5% vodným NaHCO₃, potom nasycenou solankou a pak se suší nad bezvodým MgSO₄. Směs se filtruje a filtrát se odpaří. Získaný zbytek se chromatografuje na silikagelu, eluuje se směsí EtOAc a hexanu a získá se 6,4 g (73 %) sloučeniny uvedené v titulu, PMR(CDC1₃) d 7,95 (s, 1), 7,67 (m, 5), 7,30 (m, 6), 6,70 (t, 2), 4,74 (d, 1), 4,53 (d, 1), 4,13 (m, 1), 3,97 (m, 1), 3,8 (m, 2), 2,43 (s, 6), 1,95 (m, 2), 1,77 (m, 1). Hmotnostní spektrum (FAB): 622 [M+H]⁺.

Příklad 14 (S)-(+)-4-(2,4-Difluorfenyl)-2-[[(4-methylfenyl)-sulfonyloxy]methyl]-5-[ 1 H-( 1,2,4-triazolyl)]-l,4-pentandiol-l-(4-methylbenzen)sulfonát

Postup je stejný jako u příkladu 13, kromě toho, že se použije ekvivalentní množství produktu z příkladu 12 místo produktu z příkladu 11, přičemž se získá sloučenina uvedená v titulu. [a]_D ²⁵ + 14,2° (c = 1, MeOH).

Příklad 15 (-)-(5R-c« )-5-(2,4-Difluorfenyl)-5-[(lH-l, 2,4-triazol-l-yl)methyl]-tetrahydro-3-furanmethanol,4-toluensulfonát

Rozpustí se 6,3 g surového produktu z příkladu 13 ve 150 ml toluenu a takto vzniklý roztok se zahřeje na teplotu 100 °C. Přidá se 2,4 g 60% disperze NaH v oleji, a to po částech, a tato reakční směs se zahřívá pod zpětným chladičem dokud není cyklizace úplná (přibližně 3 až 4 hodiny). Reakční směs se ochladí a roztok se dekantuje, aby se odstranil přebytek NaH. Roztok se promyje 5% vodným KH₂PO₄. Odpařením organické vrstvy vzniklý zbytek se chromatografuje na silikagelu, eluuje se směsí acetonu a hexanu, přičemž se získá 1,6 g (35 %) sloučeniny uvedené v titulu, jako méně polární ze dvou produktů. [ot]_D ²⁵ -39,4°, (c = 1, CHC1₃); PMR (CDC1₃) d 8,09 (s, 1), 7,88 (m, 3), 7,31 (m, 3), 6,81 (m, 2), 4,52 (ABq, 2), 3,99 (m, 1), 3,85 (m, 1), 3,70 (m, 1), 3,59 (m, 1), 2,49 (m, 2), 2,47 (s, 3), 1,90 (m, 1). Hmotnostní spektrum (FAB): 450 [M+H]⁺.

Příklad 16 (+)-(5S-c«)-5-(2,4-Difluorfenyl)-5-[(lH-l,2,4-triazol-l-yl)methyl]-tetrahydro-3-furanmethanol,4-toluensulfonát

Postup je stejný jako u příkladu 15, kromě toho, že se použije ekvivalentní množství produktu z příkladu 14 místo produktu z příkladu 13, přičemž se získá sloučenina uvedená v titulu. [a]_D ²⁵ +40,3° (c = 0,3, CHC1₃), t.t. 96 až 98 °C.

-40CZ 294823 B6

Příklad 17 (-)-[(2R)-cz5']-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-( 1 H-l ,2,4-triazol-l-ylmethyl)furan-3-yl]methoxy]fenyl-l-piperazinyl]fenyl-2,4-dihydro-3H-l,2,4-triazol-3-on

Sloučenina uvedená v titulu se připraví z /z-toluensulfonátu uvedeném v příkladu 15 a z 4-[4-(4nitrofenyl)-l-piperazinyl]fenolu (příklad 3a patentu US 4 791 111) za použití syntetického schématu uvedeného ve schématu V a podle J. Heres a kol. J, Med. Chem. 1984, díl 27, str. 894900, na straně 898 a 900.

Příklad 18 (-)-[(2R)-č'z.$^,]-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-( 1 H-l ,2,4-triazol-l-ylmethyl)-3-furanyl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[l(S)-methyl-2(R)hydroxypropyl]-3H-l,2,4-triazol-3-on

a. 2-O-SEM ether (2R,3R)-2,3-butandiolu

K míchanému roztoku 4,95 g (2R,3R)-2,3-butandiolu (55 mmol) a 9,3 g SEM-C1 (55,7 mmol) v 55 ml bezvodého DMF se při teplotě 0 °C přidá ve 4 částech během 10 minut 2,34 g 60% olejové disperze NaH (58,5 mmol). Vzniklá směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu 4 hodin a potom přes noc při teplotě místnosti. Zakalená reakční směs se nalije do 0,5 1 roztoku 5% KH2PO4 a pak se extrahuje 2 x 300 ml etheru. Spojené etherové roztoky se promyjí jedenkrát destilovanou vodou, nasycenou solankou, suší se nad MgSO₄ a po odpaření se získá bezbarvá kapalina. Mžikovou chromatografíí přes silikagel (350 g) 1 1 7% ETOAC v hexanu, 2 1 10% ETOAC v hexanu a 1 1 15% ETOAC v hexanu se získá 1,74 g titulní sloučeniny (výtěžek 14,4%) MS: (M+H)⁺ = 221.

b. Brosylace

Směs 0,7 g 2-0-SEM etheru z příkladu 18(a), (3,18 mmol) a 0,97 g 4-brombenzensulfonylchloridu (3,82 mmol) v 5 ml bezvodého pyridinu se míchá při teplotě místnosti pod atmosférou dusíku 6 hodin. Načervenalá kašovitá reakční směs se zředí 50 ml ledem chlazené vody a extrahuje se 2 x 25 ml etheru. Spojené etherové roztoky se promyjí 2 x 25 ml 1% roztoku CuSO₄, destilovanou vodou, nasycenou solankou, suší se nad MgSO₄ a po odpaření se získá načervenalý olejovitý zbytek. Mžikovou chromatografíí přes 50 g silikagelu s 1 1 10% ETOAC v hexanu se získá 1,02 g p-bromtoluensulfonátu jako bezbarvá kapalina (výtěžek 72,9 %) [a]_D ²³ = -3,69° (CHCI3; c = 1).

c. Alky lační reakce

Směs 0,98 g p-bromtoluensulfonátu z příkladu 18(b) (2,23 mmol), 0,69 g 3H-l,2,4-triazol-3onu z příkladu 17(1,12 mmol) a 0,37 g uhličitanu česného (1,12 mmol) v 20 ml bezvodého DMF se míchá při teplotě 80 °C pod atmosférou dusíku přes noc (cca 20 hodin). Reakční směs se zředí 100 ml ledové vody a extrahuje se 2 x 50 ml ethylacetátu. Spojené organické roztoky se promyjí jedenkrát destilovanou vodou, nasycenou solankou, suší se nad MgSO₄ a po odpaření se získá hnědý pevný zbytek. Mžikovou chromatografíí zbytku přes 125 g silikagelu s 1,2 1 80% ETOAC v hexanu se získá 0,327 g produktu jako hnědá pevná látka (výtěžek 35,7 %).

MS = (M+H)⁺ = 81,7.

d. Kyselá hydrolýza sloučeniny 18(c) na produkt uvedený v titulu.

-41 CZ 294823 B6

Směs 0,32 g SEM-etheru z příkladu 18(c) a 6 ml 6N HC1 v 6 ml methanolu se míchá při okolní teplotě 4 hodiny a potom se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se zředí 5 ml ledové vody a opatrně se alkalizuje 10% roztokem Na₂CO₃ na pH = 8-9. Extrakcí vytvořené reakční směsi s 2 x 25 ml CH₂C1₂ a potom promytím nasycenou solankou, sušením nad MgSO₄ a odpařením se získá hnědý zbytek. Filtrací tohoto hnědého zbytku přes 50 g silikagelovou kolonu a eluováním s 0,75 1 4% MEOH v CH₂C1₂ se získá 0,26 g produktu uvedeném v titulu jako hnědá pevná látka, výtěžek 96,6 %. MS = (M+H)⁺ = 687; [a]D²³ = -23,65° (CHC13; c = 1).

Příklad 19 (-)-[(2R)-cís]-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-(lH-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)-3-furanyl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[l(R)-methyl-2(R)hydroxypropyl]-3H-l,2,4-triazol-3-on

a. Mitsunobuova reakce

K míchanému roztoku 0,72 g 2-O-SEM etheru z příkladu 18(a) (3,27 mmol), 2,1 g trifenylfosfínu (8,06 g) a 1,2 g kyseliny />-nitrobenzoové (7,17 mmol) v 30 ml suchého benzenu se při teplotě 0 °C přidá po kapkách 1,25 ml (8,06 mmol) diethylazodikarboxylátu („DEAD“). Vzniklý čirý žlutý roztok se zakalí a směs se míchá při teplotě místnosti 2 hodiny a potom se směs převede do 100 g silikagelové kolony. Eluování se provádí 15% ETOAC v hexanu a získá se 1,5 g 3~3-nitrobenzoátu s absolutní konfigurací S (95% výtěžek) MS: 219 (M⁺-150), 252 (M⁺-117).

b. Alkalická hydrolýza p-nitrobenzoátu

Roztok 1,12 g p-nitrobenzoátu z příkladu 19(a) (3 mmol) a 3,5 ml IN roztoku NaOH v 20 ml methanolu se míchá při teplotě okolí 3 hodiny. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se zředí 10 ml destilované vody a extrahuje se 2 x 20 ml etheru. Spojené etherové roztoky se promyjí jedenkrát nasycenou solankou, suší se nad MgSO₄ a po odpaření se získá 0,67 g odpovídajícího alkoholu jako bezbarvá kapalina (cca 100%), který se použije bez dalšího čištění přímo pro příští reakci.

c. Brosylace, alkylace a kyselá hydrolýza

Postupuje se stejně jako v příkladu 18(c) a (d) a sloučenina uvedená v titulu se připraví v 32% výtěžku ve 3 stupních z produktů příkladu 19(b) a příkladu 17. MS: [M+H]⁺= 687; [a]o²³ = -23,65° (CHC1₃; c = 1).

Příklad 20 (~)-[(2R)-cw]-4-[4-[4-[4-[ [5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-( 1 Η-1,2,4-triazol-1 -ylmethyl)-3-furanyl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[(S)-l-methyl-3hydroxypropyl]-3H-l,2,4-triazol-3-on

a. Tvorba TBDPS etheru

K roztoku 0,9 g (R)—(—)—1,3-butandiolu (10 ml), 1,5 g imidazolu (22 mmol) v 10 ml bezvodého DMF se při teplotě 0 °C během 3 minut přidají 3 ml terc-butylchlordifenylsilanu („TBDPS“) (11 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu 4 hodin, zředí se 50 ml ledové vody a extrahuje se 2 x 30 ml etheru. Vodná fáze se extrahuje 50 ml etheru a spojené etherové roztoky se promyjí jednou nasycenou solankou, suší se nad MgSO₄ a po odpaření se získá bezbarvý zbytek. Mžikovou chromatografíí přes 150 g silikagelu 1,5 1 5% ETOAC v hexanu a 1 1 10%

-42CZ 294823 B6

ETOAC v hexanu se získá 2,87 g TBDPS etheru (87,5 %). MS: [M+H]⁺: 329; [a]D²³ = +0,64° (CHCl3;c = 1).

b. Brosylace

K roztoku 0,984 g TBDPS etheru z příkladu 20(a) (3 mmol) v 7 ml bezvodého pyridinu se přidá 0,845 g 4-brombenzensulfonylchloridu (3,3 mmol). Reakční směs se zpracuje a čistí postupem uvedeným v příkladu 18(b) a získá se 1,02 g //-bromtoluensulfonátu v 61,1% výtěžku; MS: [M +23]⁺ = 569/571; [oc]D²³ = +2,45° (CHC13; c = 1).

c. Alkylace jT-Bromtoluensulfonát z příkladu 20(b), 0,95 g (1,74 mmol) reaguje se sloučeninou z příkladu 17 podle postupu příkladu 18(c) a získá se 0,49 odpovídajícího alkylovaného produktu ve výtěžku 60,3 %. MS: [M+H]⁺ = 925; [a]D²³ = -32,27° (CHC13; c = 1).

d. Kyselá hydrolýza

0,32 g sloučeniny z příkladu 20(c), 0,32 g (0,35 mmol) se hydrolyzuje 6N roztokem HC1 podle postupu uvedeném v příkladu 18(d) a získá se 0,22 g sloučeniny uvedené v titulu (výtěžek 92,4 %); MS: M⁺ = 686; [M+Na]⁺ = 709; [a]D²³ = -38,52° (CHC13; c = 1).

Alternativně se roztok 0,19 g sloučeniny z příkladu 20(c) a 60 mg tetrabutylamoniumfluoridu (0,23 mmol) v 5 ml THF míchá při teplotě místnosti po dobu 24 hodin. Hnědý roztok se koncentruje na sirup. Mžikovou chromatografíí sirupu přes 50 g silikagelu 0,5 1 2% roztoku MeOH v CH2CI2 a potom 0,5 1 4% roztoku MeOH v CH2CI2 se získá 0,11 g titulní sloučeniny (výtěžek

88,7 %).

Příklad 21 (~)-[(2R)-cw]-4-[4-[4-[4-[ [5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-( 1 Η-1,2,4-tríazol-l -ylmethyl)-3-furanyl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[(R)-l-methyl-3hydroxypropyl]-3H-l,2,4-triazol-3-on

Postupuje se stejně jako v příkladu 20, kromě toho, že ekvivalentní množství S-(+)-l,3-butandiolu nahradí odpovídající enantiomer R. Celkový 31,8% výtěžek sloučeniny uvedené v titulu se získá ve čtyřech stupních; MS = [M+H]⁺ = 687.

Příklad 22 (-)-[(2R)-cw]-4-[4-[4-[4-[ [5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-( 1 Η-1,2,4-triazol-1 -ylmethyl)-3-furanyl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[l(S)-methyl-2hydroxypropyl]-3H-l,2,4-triazol-3-on

a. Benzylace

K roztoku 10 g (2R,3R)-(-)-2,3-butandiolu (111 mmol) v 40 ml bezvodého CH₂C1₂ a 80 ml cyklohexanu se při teplotě 0 °C přidá 1 ml trifluormethansulfonové kyseliny (TfOH) a potom po kapkách 21 ml benzyltrichloracetimidátu (113 mmol). Vzniklá kaše se míchá při teplotě místnosti přes noc a potom se zředí 125 ml hexanu a filtruje se. Spojené koncentráty se spojí na žlutý sirup. Mžikovou chromatografíí žlutého sirupu přes 250 g silikagelu 1,5 1 7% ETOAC v hexanu, 2 1 15% ETOAC v hexanu, 2 1 25% ETOAC v hexanu a 1,5 1 10% MEOH v CH₂C1₂ se získá 11,88 g

-43 CZ 294823 B6

2-monobenzyletheru výchozí látky (74,5% výtěžek) a 2,03 g nezreagované výchozí látky MS: [M+H]⁺: 181.

b. Mitsunobuova reakce

5,4 g 2-monobenzyletheru z příkladu 22(a) se převede na 6,6 g 3-benzoátového esteru (výtěžek 66,9 %) Mitsunobuovou reakcí podle postupu popsaném v příkladu 19(a); MS: [M+H]⁺ = 330.

c. Alkalická hydrolýza

5,3 g produktu z příkladu 22(b) se alkalicky hydrolyzuje podle postupu uvedeném v příkladu 19(b) a získá se 2,33 g 2-monobenzyletheru (2R,3S)-2,3-butandiolu (výtěžek 80,3 %); MS: [M+H]⁺: 181; [a]D²⁵ = -23,75° (CHC13; c = 1).

d. Tvorba SEM etheru

K míchanému roztoku 3,14 g produktu z příkladu 22(c) (17,44 mmol) a 3,8 ml diizopropylethylaminu (2,82 g, 21,8 mmol) v 30 ml bezvodého CH₂C1₂ se při teplotě místnosti přidá v jedné dávce 3,8 ml SEM-C1 (3,64 g, 21,8 mmol). Tvoří se dým a vzniklý žlutý roztok se míchá 20 hodin. Oranžově zbarvená reakční směs se odpaří za sníženého tlaku a pevné zbytky se rozdělí mezi ether a vodu. Etherový roztok se promyje jednou destilovanou vodou, nasycenou solankou, suší se a koncentrováním se získá surový produkt. Mžikovou chromatografíí surového produktu přes 250 g silikagelu 2 13% ETOAC v hexanu se získá 5,3 g 3-O-SEM etheru produktu z příkladu 22(c) (98% výtěžek) jako bezbarvá kapalina; MS: [M+HJ¹ =311.

e. Hydrogenolýza

Směs 5,25 g produktu z příkladu 22(d), (16,94 mmol) a 0,5 g 10% Pd/C v 150 ml methanolu se hydrogenuje za sníženého tlaku při atmosférickém tlaku 6 hodin. Katalyzátor se odfiltruje a promyje se dalším methanolem. Spojené filtráty se koncentrují a získá se bezbarvá kapalina. Mžikovou chromatografíí této kapaliny přes 150 g silikagelu 2 1 10% ETOAC v hexanu se získá 3,53 g volného alkoholu (výtěžek 95 %) jako bezbarvá kapalina; MS: 174, 103.

f. Brosylace g produktu z příkladu 22(e) se převede na odpovídající p-bromtoluensulfonát v 76,2% výtěžku podle postupu uvedeném v příkladu 18(b); [a]_D ²³ = -1,53° (CHC1₃; c = 1).

g. Alkylační reakce

1,48 g p-toluensulfonátu z příkladu 22(f) reaguje s produktem z příkladu 17 a získá se 0,75 g 2-alkylovaného triazol-3-onu (výtěžek 54,3 %); [a]_D ²³ = -32,69° (CHC1₃; c = 1).

h. Kyselá hydrolýza

Hydrolýzou 0,7 g produktu z příkladu 32(g) podle postupu uvedeném v příkladu 18(d) se získá 0,51 g sloučeniny uvedené v titulu ve formě krému (výtěžek 86,7 %); [a]_D ²³ = -32,69° (CHC1₃; c = l).

-44CZ 294823 B6

Příklad 23 (-)-[(2R)-cís]-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-(lH-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)-3-furanyl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[l(S)-methyl-2(S)hydroxypropyl]-3 Η-1,2,4-triazol-3-on

a. Mitsunobuova reakce

Produkt ze stupně e příkladu 22 (1,99 g, 9,05 mmol) reaguje s kyselinou p-nitrobenzoovou podle postupu popsaném v příkladu 19(a) a získá se 3,3 g produktu (výtěžek 98,9 %); MS = [M+H]⁺ = 221.

b. Alkalická hydrolýza

Produkt ze stupně (a) tohoto příkladu (2,36 g, 6,4 mmol) se hydrolyzuje 7 ml IN NaOAc a získá se 1,18 g 3-O-SEM etheru (2S,3S)-2,3-butandiolu (výtěžek 83,7 %). MS: [M+H]⁺: 221; [a]D²³ = +55,15° (CHC13; c = 1).

Tvorba p-bromtoluensulfonátu

Produkt ze stupně (b) tohoto příkladu (1,15 g) se převede na p-bromtoluensulfonát podle postupu popsaném v příkladu 18 (b) a získá se 3,47 g p-bromtoluensulfonátu (výtěžek 97,7 %).

d. Alkylace a kyselá hydrolýza

Postupuje se stejně jako v příkladu 18(c) a (d), kromě toho, že se použije produkt z příkladu 23(c) místo produktu z příkladu 18(b) a získá se sloučenina uvedená v titulu.

Příklad 24 (2R-czs)-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-(lH-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)furan-3-yl]methoxy] fenyl]-1 -piperazinyl] fenyl]-2,4-dihydro-2-[( S)-1 -ethyl-2( S)-hydroxypropyl]-3H-l ,2,4-triazol-3-on

a. Methylester kyseliny (S)-mléčné se převede na odpovídající benzyloxymethylether podle postupu který popsal W. C. Still a kol., Tetrahedron Letters, 21, 1035-1038 (1980).

Redukce na aldehyd

37,7 ml 1M roztoku DIBAL-H se po kapkách přidá pod atmosférou dusíku k míchanému roztoku 7,67 g esteru ze stupně (a) tohoto příkladu v toluenu při teplotě -78 °C (suchý led, acetonová lázeň). Po 6 minutách se přidá methanol (10 ml) a potom vodný roztok Rochelesovy soli. Po zahřátí na teplotu místnosti se směs rozdělí mezi ETOAc a vodu. Organická fáze se oddělí, promyje se vodou, suší se (MgSO₄) a koncentrací se získá surový aldehyd, který se použije bez čištění v dalším stupni.

b. Grignardova reakce

THF roztok 80 ml 1M roztoku Grignardova činidla, ethylmagneziumbromidu, se přidá po kapkách a při teplotě -78 °C (suchý led/acetonová lázeň) pod atmosférou dusíku k míchanému THF roztoku surového aldehydu získaného ze stupně (b) tohoto příkladu. Po skončení přidávání se vzniklá směs nechá pomalu přes noc vyhřát na teplotu místnosti a potom se pokračuje v míchání po dobu 48 hodin. Přidá se vodný roztok Rochellesovy soli a vzniklá směs se rozdělí mezi aceton a vodu. Organická fáze se oddělí, promyje vodou, suší (MgSO₄) a kon

-45CZ 294823 B6 centruje. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografíí na silikagelu za použití směsi ETOAC a hexanu v poměru 1 : 10 jako elučního činidla a získá se (i) nepolární alkohol (2S,3S) 2,31 g, 31 % jako bezbarvý olej (ii) směs obou alkoholů, 1,23 g, 41 % a (iii) polární alkohol (2S,3R), 1,23 G, 16 % jako bezbarvý olej.

c. Brosylace polárního alkoholu

4-Brombenzylsulfonylchlorid (1,035 g, 4,1 mmol) se přidá při teplotě místnosti pod atmosférou dusíku k míchanému roztoku (0,605 g, 2,7 mmol) polárního (2S,3R) alkoholu ze stupně (b) tohoto příkladu a 2,20 g (5,9 mmol) DMAP v CH₂C1₂. Vzniklá směs se míchá 12 hodin a potom se rozdělí mezi ETOAC a vodu. Organická fáze se oddělí, promyje se vodou, suší a koncentruje. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografíí na silikagelu za použití směsi ETOAC a hexanu (1 : 10) jako elučního činidla a získá se žádanýg-bromtoluensulfonát (85 %) jako bezbarvý olej.

d. Alkylace a kyselá hydrolýza

Postupuje se stejně jako v příkladu 18(c), kromě toho, že se použije (2S,3R)-p-bromtoluensulfonát ze stupně (c) tohoto příkladu místo produktu z příkladu 18(c). Získá se sloučenina uvedená v titulu jako bílá pevná látka, teploty tání 170 až 172 °C.

Příklad 25 (2R-cŽ5)-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-DifluorfenyI)-tetrahydro-5-(lH-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)furan-3-yl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[(R)-l-ethyl-2(S)-hydroxypropyl]-3H-l ,2,4-triazol-3-on

Postupuje se stejně jako v příkladu 24, kromě toho, že nepolární alkohol ze stupně (b) příkladu 24 se převede na (2S,3S)-3-/?-bromtoluensulfonát. Alkylací 72-bromtoluensulfonátu následovanou kyselou hydrolýzou SEM-chránicí skupiny podle postupu popsaném v příkladu 24(d) se získá sloučenina uvedená v titulu.

Příklad 26 (2R-c»')-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difiuorfenyl)-tetrahydro-5-( 1 H-l ,2,4-triazol-l-ylmethyl)furan-3-yl]methoxy] fenyl]-1 -piperazinyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[(R)~ 1 -ethyl-2(R)-hydroxypropyl]-3H-l ,2,4-triazol-3-on

Postupuje se stejně jako v příkladu 24, kromě toho, že se použije methylester kyseliny (R) mléčné místo methylesteru kyseliny (S)-mléčné ze stupně (a) příkladu 24. Ve stupních (c) a (d) se použije (2R,3S) alkohol a získá se sloučenina uvedená v titulu.

Příklad 27 (2R-cz'ó')-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-(lH-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)furan-3-yl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[(S)-l-ethyl-2(R)-hydroxypropyl]-3H-l ,2,4-triazol-3-on

-46CZ 294823 B6

Postupuje se stejně jako v příkladu 26, kromě toho, že se použije v kroku (c) a (d) (23,3R) alkohol a získá se sloučenina uvedená v titulu.

Příklad 28 (2R-€/s)-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-(lH-l,2,4-tríazol-l-ylmethyl)furan-3-yl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyljfenyl]-2,4-dihydro-2-[(R)-l-ethyl-3-hydroxypropyl]-3H-l ,2,4-triazol-3-on

a. Redukce

K methyl (3R)-hydroxyvalerátu (5,289 g, 40,0 mmol) rozpuštěném v 100 ml bezvodého THF se při teplotě 0 až 5 °C přidá po kapkách 60 ml 1M THF roztoku LiAlH₄ (60 mmol). Roztok se nechá ohřát na teplotu místnosti a ke vzniklé směsi se postupně přidá 2,5 ml vody, po kapkách 2,5 ml 15% NaOH a 7,5 ml vody. Vzniklá reakční směs se míchá při teplotě okolí 4 hodiny. Anorganická pevná látka se odfiltruje a filtrát se odpaří a získá se 4,31 g (3R)-l,3-pentandiolu.

b. Tvorba 1-O-SEM etheru

Postupuje se stejně jako v příkladu 18(a), kromě toho, že se použije ekvivalentní množství produktu ze stupně (a) tohoto příkladu místo (2R,3R)-2,3-butandiolu a získá se sloučenina uvedená v titulu.

c. Mitsunobuova reakce

Postupuje se stejně jako v příkladu 19(a), kromě toho, že se použije ekvivalentní množství produktu ze stupně (b) tohoto příkladu místo 2-SEM etheru (2R,3R)-2,3-butandiolu a získá se 3,34 g odpovídajícího/?-nitrobenzoátu.

d. Alkalická hydrolýza

Postupuje se stejně jako v příkladu 19(b), kromě toho, že se použije ekvivalentní množství p-nitrobenzoátového esteru ze stupně (c) tohoto příkladu a získá se 1,88 g 1-O-SEM etheru (3S)-l-pentadiolu.

e. Brosylace, alkylace a kyselá hydrolýza

Postupuje se stejně jako v příkladu 18(b), (c) a (d) kromě toho, že se použije ekvivalentní množství produktu ze stupně (d) tohoto příkladu místo odpovídajícího 1-O-SEM etheru (2R,3R) 2,3-butandiolu použitém v příkladu 19(b) a získá se 1,04 g sloučeniny uvedené v titulu tohoto příkladu.

[a]_D ²³ = -8,42° (CHCl₃;c = l).

Příklad 29 (2R-cA)-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-(lH-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)furan-3-yl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]fenyl]-2,4-díhydro-2-[(S)-l-ethyl-3-hydroxypropyl]-3H-l ,2,4-triazol-3-on

Podle postupů (a) a (b) příkladu 28 se připraví l-O-SEM-(3R)-l,3-pentandiol, který se převede přímo na 3R /^-bromtoluensulfonát podle postupu uvedeném v příkladu 18(b). 3R /j-bromtoluensulfonát se použije k alkylaci produktu z příkladu 17 podle postupů uvedených v příkladu 18(c).

-47CZ 294823 B6

Vzniklý produkt se zpracuje kyselou hydrolýzou podle postupu uvedeném v příkladu 18(d) a získá se 368 mg (90% výtěžek) sloučeniny uvedené vtitulu; [a]_D ²³ = -47,11° (CHC1₃; c = 1).

Příklad 30 (2R-cw)-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-(lH-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)-3furanyl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[l-hydroxy-(2R)-butyl]-3H-l,2,4-triazol-3-on

a. Příprava (2 S)— 1,2-butandiolu

Roztok (2S)-3-buten-l,2-diolu, zakoupen od fy Eastman Kodak (3 g, 0,034 mmol) v 40 ml ethanolu se hydrogenuje v přítomnosti 300 mg 10% Pd/C přes noc. Vzniklá směs se filtruje přes Celit. Filtrační koláč se promyje ethanolem a spojené filtráty se odpaří a získá se 2,08 g (68% výtěžek) sloučeniny uvedené v titulu.

b. Tvorba 1-O-SEM etheru, brosylace, alkylace a kyselá hydrolýza

Postupuje se stejným postupem jako v příkladu 18(a) až (d), kromě toho, že se použije ekvivalentní množství produktu ze stupně (a) tohoto příkladu místo (2R,3R) 2,3-butandiolu příkladu 18 a získá se sloučenina uvedená v titulu. [a]_D ²³ = -24,3° (CHC1₃; c = 1).

Příklad 31 (2R-czs)-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-(lH-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)-3furanyl]methoxy]fenyl]-l-piperazmyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[l-hydroxy-(2S)-butyl]-3H-l,2,4-triazol-3-on

Postupuje se stejným postupem jako v 30, kromě toho, že se použije ekvivalentní množství (2Rý3-buten-l,2-diolu, zakoupeného od fy Eastman Kodak, místo (2S)-3-buten-l,2-diolu stupně (a) příkladu 30. Následujícími postupy podle příkladu 30(b) se získá sloučenina uvedená v titulu [a]_D ²³ = -29,4° (CHC1₃; c = 1).

Příklad 32 (2R-czs)-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-Difluorfenyl)-tetrahydro-5-(l H-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)furan-3-yl]methoxy]fenyl]-l-piperazinyl]fenyl]-2,4-dihydro-2-[(S)-l-ethyl-(2S)-hydroxy]propyl-3H-l ,2,4-triazol-3-on

a. (S)-2-(benzyloxy)propionaldehyd selektivní redukcí pyrrolidinamidu kyseliny (S)-(Obenzyl)mléčné

K roztoku pyrrolidinamidu kyseliny S-(O-benzyl)mléčné připraveném podle postupu uvedeném v Tetrahedron, 1989, díl 45, str. 57-67 (5 g, 0,0214 mol) rozpuštěném v 20 ml toluenu ochlazeném v ledové methanolové lázni se přidá pomalu a za míchání 4,25 ml RED-AL (3,4 M roztok bis(2-methoxyethoxy)aluminiumhydrid sodný) v toluenu, dostupný podle Aldrich Chemical Catalogue #19, 619-3. Roztok se míchá 5 hodin, ochladí se 2,5 ml acetonu a potom 35 ml 2N HC1. Vzniklá směs se extrahuje EtOAc. Organické extrakty se promyjí vodou, NaHCO₃ a solankou a suší se přes Na₂SO₄ a po odpaření se získá produkt uvedený v titulu.

b. (S)-2-(Benzyloxy)-N-(formylammo)propanimin

-48CZ 294823 B6

Propionaldehyd ze stupně (a) (1 g, 16,09 mmol) se přidá po kapkách k roztoku mravenčanu hydrazinu (0,73 g, 12,18 mmol) rozpuštěném v 5 ml methanolu a vzniklá reakční směs se míchá přes noc. Odpařením se odstraní rozpouštědlo a vzniklý zbytek se míchá s etherem. Nerozpuštěný přebytek mravenčanu hydrazinu se odstraní filtrací a po odstranění etheru se získá zbytek, který se chromatografuje na silikagelu za použití 20% EtOAc v hexanu (objemově) a získá se 805 mg titulního produktu jako světle žlutá voskovitá pevná látka mající silnou aktivitu UV; MS | M+H]⁺ = 207.

c. Hydrazid kyseliny 2-[3-(2S,3S)-2-(benzyloxy)pentyl]mravenčí

Ethylmagneziumbromid (1,3 ml, 3,9 mmol, 3,0 molární v ethyletheru) se přidá k míchanému roztoku 200 mg (0,97 mmol) propaniminu ze stupně (b) v 10 ml ethyletheru při 10 °C. Vzniklá reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a potom se ochladí vodou. Organická vrstva se oddělí a odstraní se rozpouštědlo a získá se zbytek, který se chromatografuje na silikagelu za použití 30 až 50% EtOAc v hexanu (objemově) a získá se 113 mg (50% výtěžek) sloučeniny uvedené v titulu jako olej. Poměr S,S izomeru k S,R izomeru je 94 : 6. Jestliže se reakce opakuje v přítomnosti 1,2 ekvivalentů ów(trimethylsilyl)acetamidu, poměr izomeru S,S k izomeru S,R se zlepší na 99 : 1, MS: [M+H]⁺ = 327.

d. Cyklizační reakce

Roztok 156,3 mg (0,66 mmol) produktu ze stupně (c) a 400 mg (0,60 mmol) sloučeniny 17F ze schéma V a 1 mol DBU (l,8-diazabicyklo[5.4.0]undek-7-en) se míchá při teplotě 80 °C po dobu 6 hodin. Potom se zvýší teplota na 100 až 110 °C a míchání pokračuje přes noc. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a míchání pokračuje přes víkend. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a zbytek se čistí preparativní TLC (80% EtOAc v hexanu, objemově) a získá se 200 mg benzyletheru sloučeniny uvedené v titulu tohoto příkladu jako pěnovitá pevná látka; MS: [M+H]⁺ = 792. Cyklizační reakce je vynálezem Mergelsberga Gala a kol., která je popsána v US patentové přihlášce S. N. (zástupce Docket#CD0475).

e. Hydrogenolýza

K roztoku benzyletheru (190 mg, 0,24 mmol) ze stupně d rozpuštěném v 10 ml methanolu se přidá 40 mg Pd sazí na uhlíku a 4 ml kyseliny mravenčí. Reakční nádoba se uzavře velkou kulatou baňkou a zahřívá se na teplotu 60 °C po dobu 4 hodin. Katalyzátor se odfiltruje přes Celit a filtrát se nalije do studené vody. U vzniklého roztoku se upraví pH pomocí amoniaku na hodnotu 4 až 5. Vzniklá směs se extrahuje EtOAc. Organická vrstva se oddělí a suší se přes Na₂SO₄. Rozpouštědlo se odstraní a surový produkt se čistí preparativní TLC (5% methanol v CH₂C1₂, objemově) a získá se 95 mg sloučeniny uvedené v titulu tohoto příkladu (57 %) jako hnědá pevná látka. MS: [M+H]⁺: 701; [a]D²³ = -28,4° (CHC13; c = 1).

-49CZ 294823 B6

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Tetrahydrofuranový derivát obecného vzorce I ve kterém obě X znamenají nezávisle F nebo Cl nebo jedno X znamená nezávisle F a druhé X znamená nezávisle Cl,

Ri znamená (C₄-C₅)alkylskupinu s rovným nebo rozvětveným řetězcem, substituovanou jednou hydroxylovou skupinou nebo jeho farmaceuticky přijatelný ester nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
2. Tetrahydrofuranový derivát podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém Ri znamená hydroxysubstituovanou C₄- nebo C₅-alkylskupinu vybranou ze souboru, který zahrnuje * * * *

-CH(C₂H₅)CH(OH)CH₃, -CH(C₂H₅)CH₂CH₂OH, -(CH)₂-CH(OH)C₂H₅, * * * *

-CH(CH₃)CH(OH)CH₃, -CH(C₂H₅)CH₂OH, -CH(CH₃)CH₂CH₂OH, kde atomy uhlíku označené * mají absolutní konfiguraci R nebo S nebo jeho farmaceuticky přijatelný ester.
3. Tetrahydrofuranový derivát obecného vzorce III

-50CZ 294823 B6 ve kterém R₅ znamená

_ Me 5/ \ JÍHtf >ΟΗ )«OH , Me* ‘ Me H Me S

kde Me je methyl

5 nebo jeho farmaceuticky přijatelný ester nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
4. Tetrahydrofuranový derivát obecného vzorce IV * * * * io ve kterém R₉ znamená -CH(C₂H₅)CH(OH)CH₃ nebo -CH(CH₃)CH(OH)CH₃ nebo jeho farmaceuticky přijatelný ester nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

-51 CZ 294823 B6
5. Tetrahydrofuranový derivát podle nároku 3, kde R₅ j e nebo

I]

Me znamená CH₃ nebo jeho farmaceuticky přijatelný ester.
6.

Tetrahydrofuranový derivát vzorce znamená CH₃

Me nebo jeho farmaceuticky přijatelný ester.
7. Farmaceuticky přijatelný ester sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 6, kde atom vodíku uvedené hydroxyskupiny je nahrazen skupinou obecného vzorce

O

U

-C-(CHR₇)_s-O-(CHR₇CIIR₇)_t-R₈ , kde R₇ znamená H, (Ci-C₆)alkylskupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem; a s je celé číslo od 1 do 6; t je celé číslo od 1 do 6; R₈ znamená R₇ nebo skupinu -<CHR₇)_S-CO₂R₇.
8. Farmaceuticky přijatelný ester sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 6, kde atom vodíku uvedené hydroxyskupiny je nahrazen skupinou obecného vzorce

I

J_z-(chr_7;v(O)s-p(ow)2 kde z je 0 nebo 1; m je 0 nebo 1; R₇ znamená H, (C]-C6)alkylskupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem a výhodně Η; n je celé číslo od 0 do 6; W je H, CFI₂Ar nebo

-52CZ 294823 B6 a kde Ar je fenyl nebo fenyl substituovaný halogenem, kyano, nitro nebo trihalomethylem.
9. Farmaceuticky přijatelný ester sloučeniny jak je nárokována v kterémkoli z předchozích nároků, kde vodík uvedené hydroxylové části je nahrazen SO(OH)>.
10. Farmaceuticky přijatelný ester sloučeniny jak je nárokována v kterémkoli z nároků 1 až 6, kde vodík uvedené hydroxylové části je nahrazen skupinou obecného vzorce

O

-C-(CHH₇)„__n (CHR₇)_q , kde R₇ je atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku s přímým nebo rozvětveným řetězcem, W je celé číslo od 1 do 5, výhodně je W 1 až 3; q je 3 nebo 4 a Y je CHR₇, -Ο-, NH, NR₇, S, SO nebo SO₂.
11. Farmaceuticky přijatelný ester sloučeniny jak je nárokována v kterémkoli z nároků 1 až 6, kde vodík uvedené hydroxylové části je nahrazen alkanoylovou skupinou s přímým nebo rozvětveným řetězcem nebo alkanoylovou skupinu, která je případně substituována hydroxylovou nebo etherovou částí.
12. Farmaceuticky přijatelný ester sloučeniny jak je nárokována v kterémkoli z nároků 1 až 6, kde uvedená jedna hydroxylová část je esterifikována zbytkem přírodní aminokyseliny, kde aminoskupina je případně chráněna obvyklými chránícími skupinami.
13. Farmaceuticky přijatelný ester sloučeniny jak je nárokována v kterémkoli z nároků 1 až 6, kde vodík uvedené hydroxylové části je nahrazen skupinou obecného vzorce

O O lí I —C-(CR₇R₇)jrC~OH kde R₇ je atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku s přímým nebo rozvětveným řetězcem a kje celé číslo od 1 do 8.
14. Farmaceuticky přijatelný ester sloučeniny jak je nárokována v kterémkoli z nároků 1 až 6, kde vodík uvedené hydroxylové části je nahrazen skupinou obecného vzorce

O

- C - (CHR₇)^(OCHR₇CHR₇)_t-OR₈

-53 CZ 294823 B6 kde R₇ je H nebo (C]-C₆) alkylová skupina s přímým nebo rozvětveným řetězcem, Rg je R₇ nebo skupina

O —(CHR₇)_s-C-OR₇ a s je 1 až 6 atje 1 až 6.
15. Farmaceuticky přijatelný ester sloučeniny jak je nárokována v kterémkoli z nároků 1 až 6, kde vodík uvedené hydroxylové části je nahrazen skupinou obecného vzorce

O II C

O (CHR₇^(O)-P(OW)₂ , kde z je 0 nebo 1, m je 0 nebo 1, n je 0 až 6 a R₇ je H nebo (C]-C₆) alkylová skupina s přímým nebo rozvětveným řetězcem a W je H nebo CH₂Ar nebo skupina

OH kde Ar je fenyl nebo fenyl substituovaný halo, kyano, nitro nebo trihalomethylem.
16. Farmaceuticky přijatelný ester sloučeniny jak je nárokována v nároku 5 nebo nároku 6, kde vodík uvedené hydroxylové části je nahrazen skupinou obecného vzorce (^c) JzH^chr7V(O)^-p(ow)₂ kde z je 0 nebo 1, R₇ je H; m je 0 nebo 1, n je celé číslo od 0 do 6 a Wje H.
17. Farmaceuticky přijatelný ester sloučeniny jak je nárokována v nároku 5 nebo nároku 6, kde vodík uvedené hydroxylové části je nahrazen skupinou obecného vzorce

O

II

O

---C (CHjJn — O ~ P(OH}₂

-54CZ 294823 B6
18. Tetrahydrofuranový derivát vzorce ^CH2°(CH₂CH₂O)yde nebo ,kde

Me znamená CH₃ nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
19. Farmaceutický prostředek pro ošetření nebo prevenci fungicidních infekcí, vyznačující se tím, že obsahuje fungicidně účinné množství tetrahydrofuranového derivátu podle kteréhokoliv z předchozích nároků společně s farmaceuticky použitelným nosičem.
20. Farmaceutický prostředek podle nároku 19, vyznačující se tím, že se tento prostředek je ve formě pro orální nebo parenterální podání.