CZ286928B6 - Farmaceutický přípravek aktivní proti HIV a způsob jeho přípravy - Google Patents

Farmaceutický přípravek aktivní proti HIV a způsob jeho přípravy Download PDF

Info

Publication number
CZ286928B6
CZ286928B6 CZ19941188A CZ118894A CZ286928B6 CZ 286928 B6 CZ286928 B6 CZ 286928B6 CZ 19941188 A CZ19941188 A CZ 19941188A CZ 118894 A CZ118894 A CZ 118894A CZ 286928 B6 CZ286928 B6 CZ 286928B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
bis
methylene
tetraazacyclotetradecane
phenylene
compound
Prior art date
Application number
CZ19941188A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ118894A3 (en
Inventor
Sreenivasan Padmanabhan
Renato Tony Skerlj
David Michael Thornton
Gary James Bridger
Original Assignee
Anormed Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=10706343&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ286928(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Anormed Inc. filed Critical Anormed Inc.
Publication of CZ118894A3 publication Critical patent/CZ118894A3/cs
Publication of CZ286928B6 publication Critical patent/CZ286928B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Polyoxymethylene Polymers And Polymers With Carbon-To-Carbon Bonds (AREA)
  • Liquid Crystal Substances (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Macromolecular Compounds Obtained By Forming Nitrogen-Containing Linkages In General (AREA)

Abstract

Farmaceutický antivirový přípravek, zejména proti HIV spočívá v tom, že jako aktivní složku obsahuje sloučeninu na bázi spojených cyklických polyaminů obecného vzorce I, kde Z a Y jsou monocyklické polyaminové zbytky, mající 9 až 20 členné kruhy se 3 až 6 dusíky v kruhu, oddělenými nejméně dvěma atomy uhlíku mezi nimi, kde A je fenylen, bifenylen, pyridylen nebo bipyridylen, naftylen nebo thiofenylenový zbytek, každý zbytek je popřípadě substituovaný jednou nebo více C.sub.1 až 4.n.alkyl-, thio-, C.sub.1 až 4.n.thioalkyl-, hydroxyl-, C.sub.1 až 4.n.alkoxyl-, amino-, karboxy-, karboxamido- nebo sulfoskupinami, nebo atomy halogenu, methylenové skupiny jsou připojeny k atomům dusíku zbytků Z a Y, nebo její netoxické kyselé adiční soli nebo její kovové komplexy, ve směsi nebo spojení s farmaceuticky vhodným rozpouštědlem nebo nosičem. Dále je předmětem řešení nová cyklická sloučenina obecného vzorce Ia, kde Z a Y mají vpředu uvedený význam, a A' je A definované výše s podmínkou, že jestližŕ

Description

Farmaceutický antivirový přípravek, aktivní složka a způsob její přípravy
Oblast techniky
Vynález se týká farmaceutického antivirového přípravku, zejména proti HTV, aktivní složky a způsobu její přípravy. Jedná se zejména o sloučeniny, které jsou aktivní při in vitro testování buněk, napadených virem HIV.
Dosavadní stav techniky
Onemocnění, známé jako AIDS, které vzniká v důsledku infikování virem HIV, vyvolalo nesmírně velkou aktivitu v oblasti výzkumu, především díky účinkům nemoci u nakažených jedinců a nebezpečí rozšíření onemocnění do nejširších vrstev populace. I když byly vyvinuty rozličné chemickoterapeutické způsoby léčby a objevily se některé látky, které mohou sloužit jako základ pro potencionální léčbu tohoto onemocnění, je stále ještě nutné pracovat na výzkumu jiných účinnějších látek. Většina léků, jako je například látka, známá pod názvem AZT (azidothimidin), má vysoce toxické účinky na buňky; je proto velmi žádoucí nalézt látku méně toxickou. Dalším klinickým problémem při léčení pacientů je to, že lidský organizmus si během určité doby vypěstuje odolnost vůči působení AZT.
2,2' - dimer cyclamu byl izolován jako 2% vedlejší produkt při syntéze cyclamu (1,4,8,11-tetraazocyklotetradekan) (Barefield et al, J C S Chem Comm (1981), 302). Tato sloučenina je ve vodě nerozpustná. Předpokládá se, že nerozpustný 2,2' - bicyclam je směsí 2R, 2'R a 2S, 2'S enantiomerů; meso 2R, 2'S izomer je rozpustný dimer. Izomer 6,6' - bicyclam byl uveden ve Fabbrizzi et al, Anorg Chem. 25, 2671 (1986). Jisté bicyklické sloučeniny s vazbou N, N' uvedl Ciampolini et al, Anorg Chem 26, 3527 (1987). U těchto látek nebyla zjištěna žádná biologická aktivita.
US patent 4 156 683 uvádí monocyklické a bicyklické makrocyklické látky, u kterých byly zjištěny biologické účinky při regulaci hladiny sodíku, draslíku a vápníku u savců. Kromě toho bylo zjištěno, že zvláštní skupina N-alkylovaných monocyklických látek působí proti chřipkovým virům A2 v modifikovaném Hermanově testu, prováděném na vláknité tkáni kuřete. Bicyklické sloučeniny, které mají mezi hlavními dusíkovými atomy tři řetězcové můstkové vazby tvoří stabilnější komplexy.
EP-A-0296522 uvádí určité funkčně modifikované cyklické polyaminy, včetně látky známé jako „cyclam“, které vytvářejí komplexy s rhodiem a mohou být vázány na protilátky nebo jejich fragmenty. Předmětem tohoto vynálezu však nejsou aromatické cyklické polyaminy, ani jejich antivirové účinky.
EP-A-0305320 také popisuje několik modifikovaných polyaminů; nezabývá se však spolu vázanými identickými cyklickými polyaminy.
WO-A-9105726 popisuje polyaminy, které jsou užitečné z hlediska jejich vícenásobné chelační aktivity, nezabývá se však spojenými cyklickými polyaminy.
WO-A-9216494 popisuje polyaminy s dlouhými řetězci, které jsou popřípadě spojeny v cyklické polyaminy, jako látky, působící proti viru HIV. Žádné z popisovaných látek nemají v molekule dva cyklické polyaminy spojené aromatickou vazbou.
-1 CZ 286928 B6
Náš USP 5 021 409 (ekvivalent k EP-A-0434385) popisuje vázané cyklické sloučeniny, které se při testování in vitro projevily jako účinné proti HIV-1 a HIV-2. Nyní jsme zjistili, že některé z těchto spojených cyklických sloučenin mají překvapivě vysoké účinky proti HIV. Námi předkládaný vynález se týká vybrané skupiny látek, uvedených ve zmíněném USP patentu, jejichž účinky jsou z hlediska rozsahu větší než u látek, testovaných ve zmíněném USP.
Podstata vynálezu
Farmaceutický antivirový přípravek, zejména proti HIV podle vynálezu spočívá v tom, že jako aktivní složku obsahuje sloučeninu na bázi spojených cyklických polyaminů obecného vzorce I,
Z-CH2-A-CH2-Y (I), kde Z a Y jsou monocyklické polyaminové zbytky, mající 9 až 20 členů v kruhu, se 3 až 6 atomy dusíku v kruhu oddělenými vždy nejméně dvěma atomy uhlíku, a A je fenylen, bifenylen, pyridylen nebo bipyridylen, naftylen nebo thienylenový zbytek, každý zbytek je popřípadě substituovaný jednou nebo více Cia^ alkyl-, thio-, C]až4 thioalkylhydroxy- Ci 4 alkoxy-, amino-, karboxy-, karboxamido-, nebo sulfoskupinami, nebo atomy halogenu, methylenové skupiny jsou každá samostatně připojeny k atomům dusíku zbytků Z a Y nebo její netoxické adiční soli s kyselinou nebo její kovové komplexy, společně s farmaceuticky vhodným rozpouštědlem nebo nosičem.
S výhodou obsahuje jako aktivní složku sloučeninu obecného vzorce I, kde zbytek Z a Y má 14 členů v kruhu a 4 aminové dusíky v kruhu.
Přípravek s výhodou obsahuje aktivní složku vybranou ze skupiny tvořené:
1, l'-[ 1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
I, Γ-[3,3 '-bifenylen-bis-(methylen)]-bis-1,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
II, 11'—[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1 '-[2,6-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1 '-[3,5-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1 '-[2,5-thiofen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1 '-[4,4'-(2,2'-bipyridin)-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1'-[ 1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,10-tetraazacyklotetradekanem
1,11,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,10-tetraazacyklotetradekanem
-2CZ 286928 B6 nebo bis-komplexem zinku nebo mědi a l,l'-[l>4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,8,ll-tetraazacyklotetradekanu.
Přípravek se používá v jednotkové dávkovači formě.
Dále předmětem vynálezu nová sloučenina na bázi spojených cyklických polyaminů obecného vzorce Ia,
Z-CH2-A'-CH2-Y (Ia) kde Z a Y mají vpředu uvedený význam, a A' je A definované výše spodmínkou, že jestliže oba zbytky Za Y jsou 14-členné tetraazakruhy, A nemůže být nesubstituovaný fenylen, s výjimkou sloučeniny
11.1 r-[l,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,7,l 1-tetraazacyklotetradekanu a jejich adiční soli nebo kovové komplexy.
A' je s výhodou substituovaný nebo nesubstituovaný fenylen nebo substituovaný nebo nesubstituovaný naftylen.
Zvláště vhodné jsou sloučeniny vybrané ze skupiny tvořené:
1.1 '-[5-nitro-l ,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem l,l'-[2,4,5,6-tetrachlor-l,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,8,ll-tetraazacyklotetradekanem
1,1 '-[2,3,5,6-tetrachlor-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1'-[ 1,4-naftylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1'-[ 1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,5,9,13-tetraazacyklohexadekanem
1, l'-[l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,5,9,13-tetraazacyklohexadekanem
1,1 '-[3,3'-bifenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1 '-[2,6-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1 '-[3,5-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1 '-[2,5-thiofen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1 '-[4,4'-(2,2'-bipyridin)-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1'-[ 1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,10-tetraazacyklododekanem
1,1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,10-tetraazacyklododekanem
1,1 '-[2,5-dimethyl-l ,4-fenyIen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekanem
-3CZ 286928 B6
1,1 '-[2,5-dichlor-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekanem
1,1 '-[2-brom-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem, nebo
1,1 '-[6-fenyl-2,4-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem a popřípadě jej ich adiční soli s kyselinou.
Způsob přípravy cyklické sloučeniny obecného vzorce Ia, spočívá vtom, že se sloučenina obecného vzorce Π
X-CH2-A'-CH2-X (Π), kde A' má význam podle nároku 6, a X je odštěpující se skupina, podrobí nukleofílní reakci s nechráněným aminovým dusíkem heterocyklických zbytků Z a Y, definovaných vpředu, přičemž všechny ostatní aminové dusíky v kruhu jsou chráněny, a následující deprotekcí aminových dusíků v kruhu.
Nukleofílní reakce se provádí v rozpouštědle a v zásaditém prostředí.
Atomy dusíku heterocyklických zbytků Z a Y jsou chráněny methansulfonyl- a/nebo 4-tolylsulfonyl- a/nebo diethylfosforyl-skupinou.
Chránící skupiny se odstraní působením směsí kyseliny bromovodíkové a kyseliny octové v případě ochrany atomů dusíku methansulfonyl- a 4-tolylsulfonyl-skupinou, nebo kyselinou chlorovodíkovou v tetrahydrofuranu nebo dioxanu v případě ochrany diethylfosfoiyl-skupinou.
Ochrana aminového dusíku, je dobře známá zkušeným a schopným syntetickým chemikům. Doporučuje se používat k substituci methansulfonovou a/nebo 4-tolylsulfonylovou a/nebo diethylfosfoiylovou skupinu. Sloučeniny obecného vzorce Π jsou známé.
Způsob přípravy je s výhodou prováděn reakcí 2 ekvivalentů chráněného polyaminu se sloučeninou obecného vzorce II zejména v acetonitrilu nebo dimethylformamidu, tetrahydrofuranu nebo dioxanu a v přítomnosti zásady, například uhličitanu sodného nebo draselného. Reakce se provádí s výhodou při teplotě místnosti nebo vyšší. Získanou směs je výhodné chromatograficky separovat.
Chrániči skupiny se odstraní s výhodou zahříváním k varu chráněné molekuly ve směsi vodné kyseliny bromovodíkové a kyseliny octové nebo plynným chlorovodíkem vTHF (tetrahydrofuranu) nebo dioxanu v případě ochrany diethylfosforyl-skupinou.
Spojené cyklické sloučeniny mohou být v léčebné formě označované „pro-drugs“, z níž se aktivní spojené cyklické sloučeniny uvolňují po podání pacientovi. Například sloučenina má ochrannou skupinu, která se odštěpí v tělních tekutinách, například v krevním řečišti, kde se teprve aktivní sloučenina uvolní. Diskuse o „pro-drugs“ lze najít v „Smith and Williams0 Introduction to the Principles of Drug Design“, H. J. Smith, Wright 2. vydání, Londýn 1988.
-4CZ 286928 B6
Několik aktivních sloučenin podle vynálezu je známo (Inorg. Chem. 26, (1987), p 3527-3533 a J. Chem. Soc., Chem. Commun., (1991), 206,207).
Sloučeniny jsou indikovány pro léčení virových infekcí, zejména retrovirových infekcí a HIV infekcí a sloučeniny vzorce I jsou významnou aktivní složkou farmaceutických přípravků. Postup jejich přípravy a způsob zpracování byl vpředu popsán. Podle vynálezu se rozumí, že obecný vzorec I v sobě zahrnuje mezoformy, enantiomeiy a opticky aktivní formy. V mezích tohoto vynálezu je uvažováno, že sloučeniny obecného vzorce I jsou zředěné netoxickými nebo dalšími aktivními látkami.
Předmětem vynálezu jsou také adiční soli, například hydrochloridy a netoxické labilní kovové komplexy sloučenin obecného vzorce I. Netoxicita v uvedeném kontextu musí být uvažována s ohledem na zdravé jedince. Jsou preferovány komplexy mědi a zinku, ačkoliv kovy jako nikl mohou být rovněž použity. Méně labilní kovové atomy jako kobalt, rhodium jsou méně vhodné, neboť mají nižší selektivitu.
Aktivní sloučeniny podle vynálezu při sledování buněk in vitro, napadených virem HTV-1 a/nebo HTV-2 vykazují určité obranné schopnosti. Tyto schopnosti lze využít při léčbě AIDS a souboru obtíží sAIDS spojených, nebo jiných virových a především retrovirových onemocnění. Tento objev umožní použití níže definovaných látek ve farmaceutických přípravcích, určených pro léčbu pacientů, nakažených virem HIV. Kromě toho tento objev umožní použití farmaceutických přípravků, obsahujících takovou látku, v kombinaci nebo spolu s léčebně vhodnými rozpouštědly nebo excipienty pro léčbu pacientů, infikovaných virem HIV. Dále tento vynález povede k zahájení výroby farmaceutického přípravku pro léčení pacientů s HIV, který se bude skládat z kombinace vpředu definované látky a vhodného rozpouštědla nebo excipientu. Přípravek bude mít takovou formu, která bude vhodná pro léčbu zmíněných pacientů. Tento vynález umožní novou metodu léčby pacientů, která umožňuje efektivní dávkování zmíněné látky. Musíme si však uvědomit, že léčba zahrnuje profylaktickou léčbu pacientů a je zde určité riziko, týkající se zjištěných obranných schopností. Tyto látky lze také použít k léčbě buněk lidského organismu, infikovaných nebo přenášejících HIV, která povede k prevenci nebo k regulaci šíření HIV. Tato metoda bude spočívat v kontrole zmíněných buněk a efektivním dávkování uvedené látky. I když je tento popis zaměřen především na boj s HIV, má tento vynález i další aspekty, díky kterým by bylo možné léčit i jiná onemocnění, např. mikrobiální infekce.
Vynález je blíže ilustrován následujícími příklady.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
a) 2,3,5,6-tetrafluor-p-xylen-a,a'-diol
K míchanému roztoku perfluortereftalové kyseliny (1,0 g, 4,2 mmol) vbezvodém THF (tetrahydrofuran) (10 ml) v atmosféře suchého argonu byl přidán Boran (BH3). THF komplex (1,0 M roztok v THF, 10 ekvivalentů, 42 ml) byl po kapkách přidáván a směs se míchala při teplotě místnosti přes noc. Roztok se odpařil při sníženém tlaku až do získání bezbarvého oleje a přebytek Boranu byl rozložen přídavkem bezvodého metanolu (40 ml) a odpařen (třikrát opakováno). Ke zbytku byl přidán 5% vodný roztok kyseliny chlorovodíkové, potom bylo pH směsi upraveno na pH9 1M vodným roztokem hydroxidu sodného a extrahováno dichlormethanem (3 krát 50 ml). Kombinované organické extrakty byly sušeny (MgSO4) a po odpaření
-5CZ 286928 B6 byl získán 2,3,5,6-tetrafluoro-p-xylen-a,a'-diol (0,75 g, 86 %) jako bílá tuhá látka, která byla použita bez dalšího čištění.
b) 2,3,5,6-tetrafluoro-p-xylen-a,a'-diol dimesylat
K míchanému roztoku 2,3,5,6-tetrafluoro-p-xylen-<x,a'-diolu (0,72 g, 3,4 mmolu) v dichlormethanu (40 ml) obsahujícího triethylamin (1,2 ml, 2,5 ekvivalentu) byl přidán methansulfonylchlorid (0,59 ml, 2,2 ekvivalentu) po kapkách při 0 °C a přes noc se směs ohřála na pokojovou teplotu. Roztok se promyl nasyceným vodným roztokem hydrokarbonátu sodného a solanky (2 krát 20 ml) pak se sušil (MgSO4) a odpařil za sníženého tlaku. Zbytek byl suspendován veteru, zfiltrován a získal se 2,3,5,6-tetrafluoro-p-xylen-a,a'-diol dimesylat (0,9 g, 72 %) jako bílá tuhá látka.
c) 1,1 '-[2,3,5,6-tetrafluoro-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,11tetraazacyklotetradekan
2.3.5.6- tetrafluoro-p-xylen-a,a'-diol dimesylat (150 mg, 0,4 mmol), tris-(p-toluensulfonyl)-
1.4.8.11- tetraazacyklotetradekan monohydrát (826 mg, 1,2 mmol, 3,0 ekvivalentů) a uhličitan draselný (252 mg, 3,0 ekvivalentů) v bezvodém acetonitrilu (20 ml) byly zahřívány v atmosféře argonu za současného míchání a vracení destilátu po dobu 48 hodin dokud se všechen dimesylat nespotřeboval; kontrolováno TL (silikagel, 2% metanol v dichlormetanu jako rozpouštědlo). Směs byla odpařena za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (40 ml) a promyt nasyceným vodným roztokem hydrokarbonátu sodného (2 krát 20 ml a solankou (2 x 20 ml), pak sušen (MGSO4) a odpařen. Zbytek byl přečištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu, po promytí 2% metanolem v dichlormetanu byla získána bílá pěna identifikovaná ’HNMR a FABMS jako 1,1 '-[2,3,5,6-tetrafluoro-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-
1.4.8.11- tetraazacyklotetradekan.
C7oHg6NgOi2S6F4: vypočteno: C, 56,05; H, 5,78; N, 7,47; nalezeno: C, 55,81; H, 5,73; N, 7,36.
d) 1,1 '-[2,3,5,6-tetrafluoro-l ,4—fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan
1,1 '-[2,3,5,6-tetrafluoro-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,11tetraazacyklotetradekan (200 mg, 0,13 mmol) byl rozpuštěn ve směsi kyseliny octové a bromovodíkové (48 %) v objemovém poměru přibližně 3:2 (10 ml) a směs byla zahřívána na 100 °C po dobu 24 hodin. Ze směsi vypadla bílá sraženina. Směs byla ochlazena, sedlina odfiltrována a promyta kyselinou octovou a eterem a sušena ve vakuu. Byla získána bílá tuhá látka identifikovaná ’HNMR a FAB-MS jako l,l'-[2,3,5,6-tetrafluoro-l,4-fenylen-bis(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromid dihydrát (65 mg, 40 %).
C28H62N8O2Br8F4: vypočteno: C, 26,73; H, 4,96; N, 8,90; nalezeno: C, 26,84; H, 5,05; N, 8,21.
Následující sloučeniny byly připraveny použitím analogických metod, popsaných v krocích b) až d):
5-nitro-m-xylen-a,a'-diol poskytuje l,l'-[5-nitro-l,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,8,l 1tetraazacyklotetradekan oktahydrobromid dihydrát.
C28H65N9O4Br8: vypočteno: C, 27,31; H, 5,31; N, 10,24; nalezeno: C, 27,49; H, 5,26;, N, 9,75.
2.4.5.6- tetrachloro-m-xylen-a,a'-diol poskytuje 1,1 '-[2,4,5,6-tetrachloro-l ,3-fenylen-bis(methylen)J-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromid dihydrát.
-6CZ 286928 B6
C2gH62N8O2C14Br8: vypočteno: C, 25,40; H, 4,71; N, 8,46; nalezeno: C, 25,72; H, 4,76; N, 8,05.
Příklad 2
a) a,a'-dibromo-l,4-dimethylnaftalen
K roztoku 1,4—dimethylnaftalenu (0,5 g, 3,2 mmol) a benzoylperoxidu (0,08 ekvivalentu, 62 mg) tetrachlormethanu (20 ml) byl přidán N-bromsukcinimid (1,14 g, 2,0 ekvivalentů) a směs byla zahřívána pod zpětným chladičem 24 hodin. Během této doby vypadla bílá sraženina. Směs byla za tepla zfiltrována (odstranění sukcinimidu od produktu) a nechala se vychladnout několik hodin během nichž vypadla bílá krystalická látka. Ta byla odfiltrována a po vysušení byl získán
1.4- dimethylnaftalen-a,a'-dibromid (473 mg, 50 %).
Další sloučenina byla připravena použitím metod analogickým krokům c) až d) v příkladu 1.
1.4- dimethylnaftalen-a,a'-dibromid poskytuje 1,1 '-[1,4-naftylen-bis-(methylen)]-bis-
1,4,8,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromid tetrahydrát.
C32H72N8O4Br8: vypočteno: C, 30,20; H, 5,69; N, 8,81; nalezeno: C,30,28; H, 5,52; N, 8,66.
Příklad 3
a) l-benzyl-5,13-di-(p-toluensulfonyl)-9-metansulfonyl-l ,5,9,13-tetraazacyklohexadekan
K roztoku N,N-bis-[3-(p-toluensulfonylamidopropyl)]benzylaminhydrochloridu (25 g) (NL patent 6603655) v suchém DMF byl pod argonem přidán hydrid sodný (10 ekvivalentů) v malých dávkách přes 3 hodiny. Po skončení přidávání se roztok zahřál na 60 °C po dobu 1 hodiny, potom byl ochlazen a přebytek hydridu sodného byl odstraněn filtrací pod argonem. Filtrát byl převeden do další suché nádoby a roztok byl zahříván na teplotu 100 až 110 °C a po kapkách se za intenzivního míchání po dobu 8 hodin přidával bis-propanolamintrimetansulfonat (1,0 ekvivalent) v DMF (500 ml) [P. Moore, J. Chem. Soc. Dalton Trans. 1985 (7) 1361-1364], Teplota byla udržována na 100 až 110 °C po dobu více než 16 hodin, následovalo ochlazení, směs byla vlita do ledové vody (1500 ml). Vzniklá bílá sraženina byla odfiltrována, rozpuštěna v dichlormetanu (250 ml) a roztok byl promyt vodou (5 x 50 ml), potom sušen (MgSO4) a opařen za sníženého tlaku. Byla získána žlutá olejovitá kapalina. Triturací s etanolem (200 ml) byla získána bílá kiystalická látka která se odfiltrovala, promyla malým množstvím etanolu, potom esterem a po vysušení ve vakuu byl získán l-benzyl-5,13-di-(p-toluensulfonyl)-9-metansulfonyl1,5,9,13-tetraazacyklohexadekan (45 %), který byl identifikován 'H NMR a FAB-MS.
b) 1,9-di-(p-toluensulfonyl)-5-metansulfonyl-1,5,9,13-tetraazacyklohexadekan
K roztoku l-benzyl-5,13-di-(p-toluensulfonyl)-9-metansulfonyl-l ,5,9,13-tetraazacyklohexadekanu v kyselině mravenčí (20 ml) byl přidán palladium hydroxid na uhlíku (Pearlmans catalyst, 4,0 g) a výsledná suspenze byla zahřívána pod zpětným chladičem po dobu 72 hodin za současného míchání. Směs byla ochlazena, potom zfiltrována přes celit a filtrát odpařen za sníženého tlaku. Zbytek byl bezbarvá olejovitá látka, která byla rozpuštěna v dichlormetanu (50 ml) a promyta 10% vodným roztokem hydroxidu sodného (2 x 20 ml) a vodou (2 x 20 ml), potom přesušena (MgSO4) a odpařena za sníženého tlaku. Zbytek byl přečištěn chromatograficky na silikagelu a eluován 3% metanolem v dichlormetanu. Byla získána tuhá látka identifikovaná ’HNMR a FAB-MS jako l,9-di-(p-toluensulfonyl)-5-metansulfonyl-l,5,9,13-tetraazacyklohexadekan.
Tetraazacyklohexadekanový makrocyklus s jedním nechráněným dusíkem popsaný v kroku b) byl použit, jak je popsáno v příkladu 1 v krocích c) a d), k přípravě dimeru tetraazacyklohexadekanu.
Tímto způsobem byly připraveny následující sloučeniny:
α,α'-dibrom-m-xylen poskytl 1,1 '-[1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,5,9,13-tetraazacyklohexadekan oktahydrobromid hexahydrát.
C32H76NgO6Brg: vypočteno: C, 29,29; H, 6,15; N, 8,54; nalezeno: C, 29,37; H, 5,50; N, 7,90.
α,α'-dibrom-p-xylen poskytl 1,1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,5,9,13-tetraazacyklohexadekan oktahydrobromid hexahydrát.
Cj2H76NgO6Br8: vypočteno: C, 29,29; H, 6,15; N, 8,54; nalezeno: C, 28,96; H, 5,47; N, 7,96.
Tímto způsobem dle vynálezu lze připravit další sloučeniny:
1,1'-[ l,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,5,9,13-tetraazacyklohexadekan
1,1'—[ 1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,5,9-triazacyklododekan
1,1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,5,9-triazacyklododekan
Příklad 4
Syntéza sloučeniny F:
1,1'-[ 1,4~fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11 -tetraazacyklotetradekan Zn-dichloridmonohydrát.
K míchanému roztoku l,l'-[l,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,8,l 1-tetraazacyklotetradekanu (1 g) v metanolu (25 ml) byl přidán chlorid zinečnatý (0,54 g, 2,0 ekvivalentu) v metanolu (5 ml). Ke konci přidávání se vytvořila bílá sraženina. Přidal se přebytek metanolu a vody. Získal se homogenní roztok, který se odpařil ve vakuu. Pevná látka byla suspendována ve směsi metanol-eter a po filtraci se získal l,l'-[l,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,8,lltetraazacyklotetradekan Zn-dichloridmonohydrát (1,45 g, 94 %), jako bílý prášek.
C28H56N8Cl4OZn2: vypočteno: C, 42,38; H, 7,11; N, 14,12; Cl, 17,88 nalezeno: C, 42,64; H, 7,14; N, 14,18; Cl, 17,89.
Příklad 5
Syntéza sloučeniny G:
1,1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan Cu-diacetatheptahydrát.
K míchanému roztoku 1,1 '-[1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanu (100 mg) byl přidán octan měďnatý (72 mg, 2,0 ekvivalenty) v jedné dávce. Roztok se
-8CZ 286928 B6 většinou okamžitě zbarví do tmavě modrofíalové barvy. Směs se míchala jednu hodinu, potom byla zředěna eterem a získala se modrá sraženina. Pevná modrá látka byla odfiltrována a sušena. Byl získán l,r-[l,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,8,11-tetraazacyklotetradekan Cu-diacetatheptahydrát (80 mg, 46 %).
C36H8oN8Oi5Cu2: vypočteno: C, 43,58; H, 8,13; N, 11,29; nalezeno: C, 43,24; H, 7,88; N, 11,13.
Příklad 6
1,1 '-[3,3'-bifenylen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan
Směs 3,3'-bis-(brommethyl)-l,r-bifenylu [W. Wenner, J. Org. Chem. (1952), 17,525-528], (200 mg, 0,59 mmol), bezvodého uhličitanu sodného (325 mg, 2,35 mmol, 4 ekvivalenty) a tris— (p-toluensulfonyl)-l,4,8,11-tetraazacyklotetradekan (801 mg, 1,18 mmol, 2 ekvivalenty) vbezvodém acetonitrilu (15 ml) byla míchána při 50 °C pod argonem. Po 6 hodinách byla reakční směs ochlazena, byl přidán dichlormethan (75 ml) a získaný roztok byl zfiltrován a odpařen ve vakuu a získána sklovitá bílá tuhá látka, identifikovaná ’HNMR jako l,r-[3,3'-bifenylen-bis(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l,4,8,l 1-tetraazacyklotetradekan (665 mg, 76 %).
Syntéza sloučeniny J:
l,l'-[3,3'-bifenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,8,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromidtetrahydrát.
Per-tosylovaný derivát (450 mg, 0,30 mmol) byl rozpuštěn v ledové kyselině octové (9 ml). Byla přidána kyselina bromovodíková (48 hmot./objem, Aldrich, 3,5 ml) a směs byla zahřívána pod zpětným chladičem. Po 24 hodinách byl tmavohnědý roztok ochlazen v ledové lázni. Během dvou hodin se vytvořila bílá sraženina, která byla odstředěna a promyta ledovou kyselinou octovou (3 x 10 ml), potom diethyleterem (4x 10 ml) a sušena přes noc ve vakuu. Byl získán bílý prášek, identifikovaný 'HNMR a elementární analýzou jako l,l'-[3,3'-bifenylen-bis(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromidtetrahydrát (194 mg, 50 %).
C34H74N8Br8O4: vypočteno: C, 31,46; H, 5,70; N, 8,63; nalezeno: C, 31,30; H, 5,68; N, 8,60.
Příklad 7
1,1 '-[4,4'-(2,2'-bipyridin)-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan
Směs 4,4'-bis-(brommethyl)-2,2'-bipyridinu [T. J. Meyer, Inorg. Chem. (1991), 30, 29422949], (200 Mg, 0,57 mmol), bezvodého uhličitanu draselného (314 mg, 2,27 mmol, 4 ekv.) atris-(p-toluensulfonyl)-l,4,8,ll-tetraazacyklotetradekanu (774 mg, 1,14 mmol, 2 ekv.) vbezvodém acetonitrilu (20 ml) se míchala při 50 °C 2 hodiny. Po ochlazení se přidal dichlormethan (100 ml) a směs se zfiltrovala přes celit. Filtrát se odpařil ve vakuu. Vzniklá žlutá sklovitá pevná látka se přečistila chromatograficky na sloupci silikagelu (3 x 20 cm kolona) za použití směsi triethylamin-metanol-dichlormethan v objemovém poměru 1:1:100. Získaná sklovitá bílá tuhá látka byla identifikována ’HNMR jako l,l'-[4,4'-(2,2/-bipyridin)-bis-(methylen)]-bis-tris-(ptoluensulfonyl)-l,4,8,l 1-tetraazacyklotetradekan (600 mg, 70 %).
-9CZ 286928 B6
Syntéza sloučeniny K:
1,1 '-[4,4'-(2,2'-bipyridin)-bis-(methyl)]-bis-1,4,8,11 -tetraazacyklotetradekan dekahydrobromidpentahydrát
Per-tosylovaný derivát (570 mg, 0,38 mmol) byl rozpuštěn v ledové kyselině octové (6,5 ml). Přidala se kyselina bromovodíková (přibližně 48% hm./obj., Aldrich, 3,0 mmol) a směs se zahřívala pod zpětným chladičem 24 hodin. Vzniklý tmavohnědý roztok se ochladil v ledové lázni po dobu 2 hodin. Vzniklá bílá sraženina se odstředila, promyla 3 x 10 ml ledové kyseliny octové, potom diethyleterem (5x10 ml) a vysušila přes noc ve vakuu. Vzniklý bílý prášek byl identifikován *HNMR a elementární analýzou jako l,l'-[4,4'-(2,2'-bipyridin)-bis-(methyl)]bis-l,4,8,ll-tetraazacyklotetradekan dekahydrobromidpentahydrát (450 mg, 81 %).
C32H76NioBrio05: vypočteno: C, 25,97; H, 5,17; N, 9,46; nalezeno: C, 26,07; H, 4,57; N, 9,47.
Příklad 8
1,1 '-[2,9-( 1,10-fenantrolin)-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan
Směs 2,9-bis-(brommethyl)-l,10-fenantrolin [C. J. Chandler, J. Heterocykl. Chem. (1981), 18, 599-601], (200 mg, 0,54 mmol), bezvodého uhličitanu draselného (300 mg, 2,17 mmol, 4 ekv.) atris-(p-toluensulfonyl)-l,4,8,ll-tetraazacyklotetradekanu (740 mg, 1,09 molu, 2 ekv.) vbezvodém acetonitrilu (20 ml) byla míchána při 50 °C pod argonem 3 hodiny. Následovalo ochlazení, přidal se dichlormethan (100 ml) a vzniklý roztok byl zfiltrován přes celit. Filtrát se zahustil ve vakuu a vzniklá žlutá sklovitá tuhá látka se přečistila chromatograficky na sloupci silikagelu (3 x 20 cm kolona) za použití směsi triethylamin-metanol-dichlormethan v objemovém poměru 1:3:100. Vzniklá světležlutá tuhá látka byla identifikována *H NMR jako 1,1-[2,9(1,10-fenantrolin)-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan (575 mg, 69 %).
Syntéza sloučeniny L:
1,1 '-[2,9-( 1,10-fenantrolin)-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklodekan dekahydrobromidtrihydrát.
Per-tosylovaný derivát (400 mg, 0,26 mmol) byl rozpuštěn v ledové kyselině octové (8 ml). Přidala se kyselina bromovodíková (přibl. 48 % hm./obj., Aldrich, 3,5 ml) a směs se zahřívala pod zpětným chladičem 16 hodin. Vzniklý tmavohnědý roztok se ochladil v ledové lázni 2 hodiny, přičemž z roztoku vypadla bílá sraženina. Sraženina se odstředila a přečistila se přesrážením ze směsi kyseliny bromovodíkové (přibl. 48 % hm./obj. 2 ml) a vody (2 ml) ledovou kyselinou octovou (5 ml). Bílá tuhá látka byla znovu odstředěna a promyta ledovou kyselinou octovou (3x 10 ml) a diethyleterem (4x 10 ml) a vysušena přes noc ve vakuu. Vzniklý bílý prášek byl identifikován ’HNMRa elementární analýzou jako l,l'-[2,9-(l,10-fenantrolin)-bis(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan dekahydrobromidtrihydrát.
C34H72NioBrio03: vypočteno: C, 27,82; H, 4,94; N, 9,54; nalezeno: C, 27,81; H, 4,97; N, 9,17.
-10CZ 286928 B6
Příklad 9
Tato sloučenina a odpovídající meziprodukty jsou popsány u T. A. Kaděn, Helv. Chim. Acta, (1985), 69, 53-61. Alternativní postup uvádíme následně.
11,1 l'-[l,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l,4,7,l 1-tetraazacyklotetradekan
Směs α,α'-dibrom-p-xylenu (249 mg, 0,94 mmol), a tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekanu [T. A. Kaděn, Helv. Chim. Acta (1983), 66,861-870] (1,25 g, 1,89 mmol, 2 ekv.) v acetonitrilu (15 ml) byla za míchání zahřívána na 50 °C pod argonem po dobu 18 hodin. Reakční směs se ochladila, přidal se dichlormethan (50 ml) a roztok se zfiltroval přes celit. Filtrát se odpařil ve vakuu a vzniklá bílá pěna se přečistila chromatografícky přes sloupec silikagelu za použití směsi metanol - dichlormethan v objemovém poměru 1:40. Získaná bílá pevná látka byla identifikována ’H NMR jako 1 l,ll'-[l,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-tris-(ptoluensulfonyl)-l,4,7,ll-tetraazacyklotetradekan (1,0 g, 74 %).
Syntéza sloučeniny M:
11,1 Γ-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromiddihydrát.
Per-tosylovaný derivát (500 mg, 0,35 mmol) byl rozpuštěn v ledové kyselině octové (7 ml). Přidala se kyselina bromovodíková (přibl. 48 % hm./obj., 4 ml) a směs se zahřívala pod zpětným chladičem 20 hodin. Byla přidána další ledová kyselina octová (10 ml) a roztok se ochladil v ledové lázni po dobu 1 hodiny. Vzniklá bílá sraženina se odstředila a promyla ledovou kyselinou octovou (2x10 ml) a diethyleterem (4x10 ml) a vysušena přes noc ve vakuu. Vzniklý bílý prášek byl identifikován ‘HNMR a elementární analýzou jako ll,lT-[l,4-fenylen-bis(methylen)]-bis-l,4,7,l 1-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromiddihydrát (280 mg, 67 %).
CzgHóeNgBrgCh: vypočteno: C, 28,35; H, 5,61; N, 9,45; nalezeno: C, 28,34; H, 5,42; N, 9,02.
Příklad 10
11- [(l-methylen-4-brommethylen)-fenylen]-tris-(p-toluensulfonyl}-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekan
Směs α,α'-dibrom-p-xylenu (3,98 g, 15,1 mmol, lOekviv.) a bezvodého uhličitanu sodného (417 mg, 3,02 mmol, 2 ekviv.) vbezvodém acetonitrilu byla zahřáta na 50 °C. Za lychlého míchání, po kapkách, byl po dobu 4 hodin přidáván roztok tris-(p-toluensulfonyl)-l,4,7,l 1tetraazacyklotetradekanu (1,0 g, 1,51 mmol) vbezvodém acetonitrilu (20ml). Po další hodině byla směs ochlazena a rozpouštědlo vakuově odpařeno. Zbytek byl přečištěn chromatografícky na sloupci silikagelu (5x20 cm) vymýváním dichlormethanem se stoupajícím gradientem poměru metanol : dichlormethanu až na 1 : 20 při celkovém objemu 2 litry. Ke vzniklému bezbarvému sklovitému produktu byl přidán přesušený hexan (150 ml), směs se zahřála pod zpětným chladičem a nechala vychladnout na teplotu místnosti. Vzniklá sraženina se odfiltrovala, promyla hexanem (3x10 ml), potom diethyleterem (20 ml) a dosušila přes noc ve vakuu. Získala se v názvu uvedená sloučenina ve formě bílého prášku (710 mg, 53 %).
-11CZ 286928 B6
1,11'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekantris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekan
Směs 1 l-[(l-methylen-4-brommethylen)-fenylen]-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekanu (350 mg, 0,41 mmol), bezvodého uhličitanu draselného (230 mg, 1,66 mmol, 4ekviv.) a tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanu (422 mg, 0,62 mmol, 1,5 ekviv.) v bezvodém acetonitrilu (20 ml) byla za míchání zahřívána pod argonem na teplotu 50 °C po dobu 7 hodin. Reakční směs byla ochlazena a rozpouštědlo vakuově odpařeno. Zbytek byl přečištěn chromatografícky na sloupci silikagelu (kolona: 2,5 x 25 cm) za použití směsi metanol - dichlormethan v objemovém poměru 1:60, následně pak tenkovrstvou chromatografií na silikagelu směsí rozpouštědel metanol-dichlormethan v objemovém poměru 1:40, 20 mg na desku). Získal se bezbarvý sklovitý produkt identifikovaný ’HNMR jako nahoře uvedená sloučenina (130 mg, 30 %).
Syntéza sloučeniny N:
1,1 1'—[ 1 ,4-fenylen-bis-(methylen)]-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromidhexahydrát.
Per-tosylovaný derivát (115 mg, 0,08 mmol) byl rozpuštěn v ledové kyselině octové (3 ml). Přidala se kyselina bromovodíková (přibl. 48 % hm./obj., Aldrich, 1,5 mmol) a směs se zahřívala pod zpětným chladičem 48 hodin. Tmavohnědý roztok se ochladil v ledové lázni a vyloučila se bílá sraženina. Vzniklá bílá sraženina se odstředila a promyla ledovou kyselinou octovou (3 x 10 ml) a diethyleterem (5x10 ml). Po vysušení přes noc ve vakuu byl získán bílý prášek, který byl identifikován ’HNMR a elementární analýzou jako 1,1 l'-[l,4-fenylen-bis(methylen)J-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromidhexahydrát (71 mg, 75 %).
C29H74NgBrgO6: vypočteno: C, 26,73; H, 5,93; N, 8,91; nalezeno: C, 26,50; H, 5,69; N, 9,31.
Příklad 11
1,1 '-[2,6-pyridin-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,1 l-tetraazacyklotetradekan
Za stálého míchání byla směs 2,6-bis(brommethyl)pyridin hydrobromidu (Μ. E. Haeg, B. J. Whilock, H. W. Whitlock Jr. J. Am. Chem. Soc. (1989), 111, 692), (131 mg, 0,378 mmol), tris(p-toluensulfony 1)-1,4,8,11-tetraazacyklotetradekanu (500 mg, 0,75 mmol) a uhličitanu draselného (400 mg, 2,88 mmol) v bezvodém acetonitrilu (15 ml) zahřívána na 80 °C pod argonem po dobu 22 hodin. Reakční směs se potom ochladila na teplotu místnosti a zkoncentrovala ve vakuu. Zbytek byl pak přečištěn chromatografícky na sloupci silikagelu za použití 3 % roztoku metanolu v dichlormetanu jako rozpouštědla. Vzniklá matná, bílá, tuhá látka byla identifikována *H NMR a FAB-MS jako l,l'-[2,6-pyridin-n-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l,4,8,lltetraazacyklotetradekan (500 mg, 93 %).
Hmot, spektrum (FAB): m/e (relat. intenzita): 1428 (M+1,100), 1272 (35).
Syntéza sloučeniny O:
1,1 '-[2,6-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromidtetrahydrát.
-12CZ 286928 B6
Za stálého míchání byla k roztoku l,l'-[2,6-pyridin-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfony 1)-1,4,8,11-tetraazacyklotetradekanu (500 mg, 0,35 mmol) v kyselině octové (16 ml) přidána 48 % kyselina bromovodíková (12 ml) a roztok se zahříval na 110 °C po dobu 48 hodin. Vysrážela se bílá tuhá látka. Reakční směs se ochladila na teplotu místnosti a vzniklá tuhá látka se odfiltrovala, promyla nejprve kyselinou octovou, potom diethyleterem a vysušila se ve vakuu. Vzniklá látka byla identifikována *H NMR, 13C NMR, FAM-MS a elementární analýzou jako
1,1 '-[2,6-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromidtetrahydrát (230 mg, 65 %).
C27H69N9BrgO4: vypočteno: C, 26,50; H, 5,64; N, 10,31; Br, 52,29; nalezeno: C, 26,91; H, 5,31;
N, 10,08; Br 51,99.
Hmot, spektrum (FAB); m/e (rel intenzita); 586 (M+HBr, 48), 584 (M+HBR, 50), 504 (M+l, 100), 201 (60).
Příklad 12
1,1 '-[3,5-pyridin-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan
Za stálého míchání byla směs 3,5-bis-(brommethyl)pyridin hydrobromidu (M. Momenteau, J. Mispelter, B. Loock, J. Lhoste, J. Chem. Soc. Perkin, Trans. 1, (1985), 61), (131 mg,
O, 37 mmol), tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanu (500 mg, 0,755 mmol) a uhličitanu draselného (400 mg, 2,88 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (15 ml) zahřívána pod argonem na 71 °C po dobu 21 hodin. Reakční směs se pak ochladila na teplotu místnosti a zkoncentrovala ve vakuu. Zbytek byl přečištěn chromatograficky na sloupci silikagelu za použití 2 % roztoku metanolu v dichlormetanu. Vznikla bílá pěnovitá tuhá látka, která byla identifikována *HNMR a FAB-MS jako l,l'-[3,5-pyridin-bis-(methylen)]-bis-tris-(ptoluensulfonyl)-l,4,8,l 1-tetraazacyklotetradekan (320 mg, 78 %).
Hmot, spektrum (FAB); m/e (relat. intenzita); 1428 (M+l,100), 1272 (45).
Syntéza sloučeniny P:
1,1 '-[3,5-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan nonahydrobromiddi- hydrát.
Za stálého míchání byla kroztoku l,l'-[3,5-pyridin-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l,4,8,l 1-tetraazacyklotetradekanu (320 mg, 0,224 mmol) v kyselině octové (12 ml) přidána 48 % kyselina bromovodíková (8 ml) a roztok se zahříval na 100 °C po dobu 48 hodin. Vysrážela se bílá tuhá látka. Reakční směs se ochladila na teplotu místnosti a vzniklá tuhá látka se odfiltrovala, promyla nejprve kyselinou octovou, potom diethyleterem a vysušila se ve vakuu. Vzniklá látka byla identifikována *H NMR, 13C NMR, FAM-MS a elementární analýzou jako
1,1 '-[3,5-pyridin-bis-(methylen)]bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan nonahydrobromiddihydrát (150 mg, 53 %).
C27H66N9Br9O2: vypočteno: C, 25,56; H, 5,21; N, 9,94; Br, 56,74; nalezeno: C, 25,71; H, 5,25; N, 9,76; Br 56,28.
Hmot, spektrum (FAB); m/e (rel. intenzita); 586 (M+HBr, 39), 584, (M+HBr, 41), 504 (M+l, 60), 201 (100).
-13CZ 286928 B6
Příklad 13
1,1'-[ 1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,7,10-tetraazacyklododekan
Za stálého míchání byla směs α,α'-dibrom-m-xylenu (125 mg, 0,472 mmol), tris-(p-toluensulfonyl)-l,4,7,10-tetraazacyklododekanu (M. F. Tweedle, et al, Inorg. Chem., (1992), 30, 1265), (600 mg, 0,945 mmol) a uhličitanu draselného (400 mg, 2,88 mmol) v bezvodém acetonitrilu (15 ml) byla zahřívána pod zpětným chladičem pod atmosférou argonu. Vzniklý bíle zakalený roztok byl ochlazen na teplotu místnosti, pevná látka odfiltrována a promyta acetonitrilem. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi dichlormetanu (100 ml) a vody (15 ml). Organická fáze byla separována, promyta vodou (15 ml), vysušena (MgSO4) a zahuštěna za sníženého tlaku. Zbytek byl vysušen ve vakuu. Bílá pěnová látka byla identifikována *HNMR jako 1,1'-[1,3fenylen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,7,10-tetraazacyklododekan (330 mg, 51 %).
Syntéza sloučeniny Q:
I, 1'-[ 1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,10-tetraazacyklododekan hexahydrobromid.
K míchanému roztoku l,l'-[l,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l,4,7,10tetraazacyklododekanu (330 mg, 0,24 mmol) vbezvodé směsi metanol/tetrahydrofuran (1:2, 15 ml) byl přidán 3% amalgam sodný (20 g) a fosforečnan dvojsodný (400 mg). Reakční směs byla silně míchána a po dobu 41 h držena při teplotě 70 °C pod argonem. Potom byla reakční směs ochlazena na teplotu místnosti a odsazený roztok byl oddělen od tuhé látky dekantací a zahuštěn ve vakuu. Ke zbytku byla přidána směs chloroformu (50 ml) a vody (5 ml). Vodní fáze byla extrahována chloroformem (3x 50 ml). Spojené organické podíly byly koncentrovány aviskózní olejovitá látka byla identifikována 'HNMRjako l,l'-[l,3-fenylen-bis-(methylen)]bis-1,4,7,10-tetraazacyklododekan.
Do míchaného roztoku l,l'-[l,3-fenylenbis-(methylen)]-bis-l,4,7,10-tetraazacyklododekanu v etanolu (20 ml, 95 %) byl probubláván bromovodík po dobu 15 min za tvorby bílé sraženiny, která byla odfiltrována a promyta etanolem a eterem a ihned sušena ve vakuu 48 hodin. Po tom byla bílá látka identifikována ‘HNMR, 13CNMR, FAB-MS a elementární analýzou jako 1,1'[l,3-fenylenbis-(methylen)]-bis-l,4,7,10-tetrazacyklododekan hexahydrobromid (130 mg, 63 %).
C27H52NgBr6: vypočteno: C, 30,92; H, 5,62; N, 12,02; Br, 51,43; nalezeno: C, 31,09; H, 5,80; N,
II, 90; Br, 51,17.
Hmot, spektrum (FAB); m/e (rel. intenzita); 529 (M+HBr, 53), 527 (M+HBr, 55), 447 (M+1,100), 277(40), 185 (35).
Příklad 14
1,1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,7,10-tetraazacyklododekan
Míchaný roztok α,α'-dibromo-p-xylenu (99 mg, 0,374 mmol), tris-(p-toluensulfonyl)1,4,7,10-tetraazacyklododekanu (475 mg, 0,748 mmol) a uhličitanu draselného (320 mg, 2,24 mmol) v bezvodém acetonitrilu (15 ml) byl zahříván pod zpětným chladičem 14 hodin v atmosféře argonu. Získaný, bíle zakalený roztok byl ochlazen na teplotu místnosti a filtrací získaná bílá látka byla promyta acetonitrilem. Tuhý zbytek byl rozpuštěn ve směsi dichlormetanu (120 ml) a vody (15 ml). Organická fáze byla oddělena a promyta vodou (15 ml) a sušena
-14CZ 286928 B6 (MgSO4) a zahuštěna za sníženého tlaku. Zbytek byl sušen ve vakuu. Bílá tuhá látka byla identifikována ]H NMR jako l,l'-[l,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)1,4,7,10-tetraazacyklododekan (360 mg, 70 %).
Hmotové spektrum (FAB); m/e (relat. intenzita); 1371 (M+l, 12), 1217 (8).
Syntéza sloučeniny R:
I, 1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,10-tetraazacyklododekan hexahydrobromid.
Do míchaného roztoku l,l'-[l,3-fenylenbis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l,4,7,10tetraazacyklododekanu (360 mg, 0,262 mmol) vbezvodé směsi metanol-dimethylsulfoxid (1:5, 18 ml) byl přidán 3 % amalgam sodný (23 g) a fosforečnan dvojsodný (400 mg). Reakční směs byla intenzivně míchána pod atmosférou argonu při 100 °C po dobu 4 hodin, potom se ochladila na teplotu místnosti. Vzniklá sraženina se od roztoku oddělila dekantací a roztok se zahustil ve vakuu. Ke zbytku byl přidán chloroform (50 ml) a voda (5 ml). Vodná fáze se extrahovala chloroformem (3 x 50 ml). Spojené extrakty se zkoncentrovaly a vznikla bílá pěnovitá tuhá látka, která byla identifikována *H NMR jako 1,1'-[1,4—fenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,7,10-tetraazacyklododekan.
Míchaným roztokem 1,1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-1,4,7,10-tetraazacyklododekanu v etanolu (15 ml, 95 %) byl probubláván plynný HBr po dobu 15 min za vzniku bílé sraženiny, která byla odfiltrována, promyta etanolem a eterem a sušena ve vakuu po dobu 48 h. Bílý produkt byl identifikován !HNMR, 13C NMR, FAB-MS a elementární analýzou jako 1,1'-[1,4fenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,7,l0-tetraazacyklododekan hexahydrobromid (115 mg, 47 %).
C27H52NgBr6: vypočteno: C, 30,92; H, 5,62; N, 12,02; Br, 51,43; nalezeno: C, 30,90; H, 5,83; N,
II, 83; Br, 51,19.
Hmotové spektrum (FAB); m/e (relat. intenzita); 529 (M+HBr, 40), 447(M+1, 58), 185 (100).
Příklad 15
1,1 '-[2,5-thiofen-bis-methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan
K roztoku Ι,Γ-tris-p-toluensulfonyl-l,4,8,11-tetraazacyklotetradekan monohydrátu (1,0 g, 1,5 mmol) a uhličitanu draselného (300 g, 2,2 mmol) v acetonitrilu (20 ml) byl přidán 2,5dichlormethylthiofen (J. M. Griffing, L. F. Salisbury, J. Am. Chem. Soc. (1948), 70, 3416— 3419), (137 mg, 0,76 mmol) a směs byla zahřívána pod zpětným chladičem přes noc za intenzivního míchání. Potom byla reakční směs ochlazena a tuhá látka odfiltrována. Filtrát se odpařil ve vakuu a rozdělil se vytřepáním mezi methylenchlorid (50 ml) a vodu (25 ml). Organická fáze se oddělila, vysušila (Na2SO4) odpařila ve vakuu. Vzniklý surový produkt byla tuhá látka světle hnědé barvy. Izolací sloupcovou chromatografií (silikagel, methylenchloridmetanol 40:1) se získala bílá tuhá látka identifikovaná *HNMR a FAB-MS jako 1,1'-[2,5thiofen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfonyl)-l,4,8,11-tetraazacyklotetradekan (315 mg, 29%).
Hmotové spektrum (FAB); m/e (relat. intenzita); 1434 (M+l,49),1277 (31), 772 (100), 616 (30), 508 (24).
-15CZ 286928 B6
Syntéza sloučeniny T:
1,1 '-[2,5-thiofen-bis-(methylen)]-bis-l 4,8,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromid.
K míchanému roztoku l,l'-[2,5-thiofen-bis-(methylen)]-bis-tris-(p-toluensulfbnyl)-l,4,8,l 1tetraazacyklotetradekanu (177 mg, 0,12 mmol) v kyselině octové (6 ml) byla přidána kyselina bromovodíková (Aldricg, 48% vodná 4 ml). Směs byla zahřívána 16 hodin pod zpětným chladičem za stálého míchání a z tmavohnědého roztoku vypadla světlehnědá sraženina. Po ochlazení byl přidán další díl kyseliny octové (10 ml) a tuhá látka byla odfiltrována, promyta kyselinou octovou (10 ml) a eterem (20 ml) a vysušena ve vakuu. Bílá tuhá látka byla identifikována *HNMR a FAB-MS jako 1,1 '-[2,5-thiofen-bis-(methylen)]-bis-l,4,8,11-tetraazacyklotetradekan oktahydrobromid (82 mg, 97 %).
Hmotové spektrum (FAB); m/e (relat. intenzita); 591 (M+HBr,26), 589 (M+HBr,26), 509(M+l, 23),311 (23), 201 (71), 185(100).
Sloučeniny podle vynálezu byly testovány MTT metodou (J. Virol. Methods 120: 309-321 (1988)). MT-4 buňky (2,5 x 104/jamku) byly zaočkovány HIV-l(HTLV-IIIB) nebo HTV-2 (LAV- 2 ROD) v koncentraci 100 CCID50 a inkubováno při různých koncentracích testovaných látek, které byly přidávány hned po zaočkování virem. Po pětidenní kultivaci při 37 °C v COrinkubátoru byl stanoven počet životaschopných buněk MTT (tetrazolium) metodou. Antivirová aktivita a cytotoxicita sloučenin je uvedena v následující tabulce jako IC50 (pg/ml) a CC50 (pg/ml). Potenciální terapeutické použití bylo stanoveno výpočtem selektivního indexu (SI) odpovídajícího poměru CC5o:IC5o. Kontrolní test byl proveden se známým anti HTV léčivem AZT (azidothimidinem).
V následující tabulce I jsou uvedeny zkoušené sloučeniny:
AZT: známá anti-HIV sloučenina
A: 1,1'-[ 1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-1,4,8,11-tetraazacyklotetradekan B: 1,1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-1,4,8,11 -tetraazacyklotetradekan C: 1,1 '-[5-nitro-l ,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan D: 1,1 '-[2,3,5,6-tetrafluoro-l ,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan E. 1, Γ-[ 1,4-naftylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan
F - V: vzorky připravené popsaným způsobem
W: 1,1 '-[2,5-dimethyl-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan X: 1,1 '-[2,5-dichlor-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan Y: 1,1 '-[2-brom-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekan Z: l,T-[6-fenyl-2,4-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l,4,8,11-tetraazacyklotetradekan
-16CZ 286928 B6
Tabulka 1
CMPD AZT porovnání HTV-1 (IH6) IC5O pg/ml <0,008 CC50 pg/ml >1 HTV-2 (ROD)
SI >125 IC50 pg/ml CC50 pg/ml SI
A 0,03 >500 >l,6xl04 <0,01 >500 >5xl04
B 0,006 >500 >8,3x104 <0,01 >500 >5x104
C 0,05 55 1100 0,07 55 756
D 0,01 60 6000 0,01 60 6000
E 0,07 71 1014 0,05 71 1420
F 0,0026 >200 >7,6x104 0,0019 >200 >lxl05
G 0,18 >200 >l,lxl04 0,027 >200 >7,4x103
J 0,16 >200 >1250 0,22 >200 >900
K 0,38 117 300 0,35 117 334
L 0,29 >200 >690 0,32 >200 >625
M 0,03 >500 >1,6x104 0,07 >500 >7, lxl O3
A 0,01 >500 >5x104 0,07 >500 >7,lxl03
0 0,03 >500 >1,6x104 0,08 >500 >6,2x103
P 0,04 >500 >l,2xl04 0,09 >500 >5,5x103
Q 0,07 19 271 0,5 19 38
R 0,3 51 170 2,2 51 23
T 0,01 >500 >5,0x104 0,02 >500 >2,5x104
w 0,0076 >250 >3,2xl04 0,0013 >250 >l,9xl05
X 0,0131 71,87 5461 0,0030 72,66 2,4xl04
Y 0,0075 >250 >3,2xl04 0,0043 >250 >5,7x104
z 0,0489 >250 5112 0,0246 >250 1,0x104
Látky, které jsou předmětem tohoto vynálezu, při testech in vitro, byly velmi aktivní proti HTV-1 a HIV-2 a mají nízkou toxicitu.
Sloučenina B, která je nejvýznamnější v celém objevu, byla dále testována na antivirové účinky v buňkách MT-4, infikovaných virem HTV-1, různých laboratorních mikroorganizmů pomocí zkoušky MIT. Bylo zjištěno, že sloučenina B má IC50 v rozsahu 2 až 5 ng/ml proti kmenům Illb, RF, HE a NDK, což dokazuje, že její vysoká účinnost nezávisí na druhu kmenu.
Lymfocyty T4 a monocyty jsou hlavními místy infekce virem HTV-1 in vivo. Následující testovací metoda dokazuje, že sloučenina B inhibuje množení virů také v primárních buňkách T4 a primárních kulturách monocytů.
Primární lymfocyty T4 byly získány z lidských slezin od zdravých dárců za použití technického zařízení „Lympho-Kwik“, které kombinují reakci buněk se specifickými monoklonálními protilátkami sgradientním odstřeďováním pro oddělování buněk. Vzorky, získané touto metodou, obsahují podle analýz FACS 60 až 80 % pozitivních buněk CD4. Buňky byly stimulovány 2 pg/ml PHA po dobu 24 hodin. Pak byly odstředěny a infikovány virem HTV-1 kmen Hlb. Adsorpce probíhala po dobu 2 hodin při teplotě 37 °C. Inokulum bylo získáno odstředěním a buňky byly suspendovány na původní koncentrace v čerstvém médiu kultury, obsahujícím IL-2 (40IE/mI). Po stimulacia adsorpci virů byla přidána zkoumaná látka. Každé 3 až 4 dny po infikování byla polovina supematantů infikované kultury odstraněna a nahrazena čerstvým médiem, obsahujícím testovanou látku v příslušné koncentraci. Koncentrace virového antigenu p24 byla stanovena v supematantu pomocí technického zařízení ELISA (Coulter) a sloužila jako parametr pro produkci virů. Sloučenina B neinterferuje s p24 Elisa testem (nejvyšší testované koncentrace: 100 pg/ml).
Mononukleámí buňky byly získány od zdravých, HIV- negativních dárců, pomocí „Ficoll density separation“. Buňky (4 x 106/ml) byly po dobu 5ti dní inkubovány ve 48 nádobách (Costar) vmonocytovém médiu, skládajícím se zRPMI1640, doplněného 20% ECS a 10% lidského séra. Pátý den byly nepřilnoucí buňky čtyřikrát vyplavovány teplým PBS, obsahujícím 2 % lidského séra. Preparát, získaný tímto způsobem byl >95% pozitivní pro nespecifickou esterázu (Sigma) a životaschopnost buňky (stanovená vylučováním trypanové modři) byla vždy vyšší než 95 %.
Pro infikování těchto monocytových preparátů byl použit monocytotropní kmen HIV-1 BaL (Pemo et al, J. Ecp. Med., 169, 933, 1989).
Přilnuté monocyty byly vystaveny 50 pg/jamku roztoku HTV-1 BaL zředěného 1:30 nepřetržitě po dobu 30 minut; do 1 ml/jamku bylo přidáno monocytové médium. Adsorpce probíhala po dobu 24 hodin při teplotě 37 °C. Pak se sondy dvakrát propláchly, aby se odstranil přebytečný virus a byly kultivovány za pomoci různých koncentrací léku. Po adsorpci byly přidány testované sloučeniny. Každé 3 až 4 dny po infikování se supematanty infikovaných kultur odstranily a nahradily se čerstvým médiem, obsahujícím testovanou látku v příslušné koncentraci. Stanovení koncentrace virového antigenu p24 bylo popsáno výše.
Hodnoty IC50 a IC90 byly vypočteny porovnáním koncentrací antigenu p24 vsupematantu léčených infikovaných buněk a neléčených infikovaných buněk v 11. a 14. dnu po infikování.
Tabulka 2 ukazuje, že sloučenina 2 je potencionálním inhibitorem množení viru HTV-1 v obou buňkách primárního typu, s hodnotami IC90 1 až 2 ng/ml. Při nejvyšší testované koncentraci (100 ng/ml) nebyla zjištěna žádná cytotoxicita.
Tabulka 2
Působení látek B a AZT proti množení HTV-1, Illb v primárních lymfocytech T4 a proti množení HTV-1, BaL v primárních monocytech.
Sloučenina Typ buňky IC50 (pg/ml) IC90 (pg/ml)
11. den 14. den 11. den 14. den
B lymfocyty <0,001 <0,001 <0,001 0,0010
AZT lymfocyty 0,00045 0,00043 0,0022 0,0011
B monocyty <0,001 0,0011 0,0019 0,0021
AZT monocyty 0,0010 0,0010 0,0015 0,0017
Pomocí stejné metody bylo také zjištěno, že látka B působí jako silný inhibitor při množení virů v primárních buňkách T4, infikovaných klinicky izolovanými viry HTV-1 ze tří různých geografických oblastí (K31 Zaire, D370 Kalifornie a K6/2 Německo).
Nízká cytotoxicita látky B byla také prokázána inkubací exponenciálně rostoucích buněk s látkou B nebo AZT a stanovením počtu buněk po dvou, třech a čtyřech dnech po infikování. Látka B neomezuje růst MT4, MOLT4, HUT78, Jurkat buněk (všechny buňky s T vazbou), ani růst monocyklických buněk U937 při koncentracích nižších než 300 ug/ml. Ve všech případech, kromě HUT78, vykazoval AZT vyšší cytotoxicitu, než látka B s hodnotami TC50 (pg/ml) 23, 37, 184 a 5 pro MT4, MOLT4, Jurkat a U937.
-18CZ 286928 B6
Na rozdíl od inhibitorů HTV-proteázy neblokují látky, které jsou předmětem tohoto objevu, produkci viru z chronicky infikovaných buněk; antivirové účinky působí hned od raného počátku infekčního procesu, před nebo při integraci proviru. Pro stanovení stavu, ve kterém sloučenina reaguje s replikativním cyklem HTV, byl proveden dodatečný pokus na buňkách MT4, infikovaných HTV-1 kmen Illb při vysoké násobnosti viru, aby bylo zajištěno, že kroky při replikaci viru budou synchronizovány v celé buněčné populaci. Testované sloučeniny byly přidávány 1, 2, 3, ...... 22, 23, 24 hodin po infikování a produkce virového antigenu p24 byla stanovena po 29 hodinách od infikování.
V závislosti na stavu, ve kterém látky působí a vzhledem k potřebám intracelulámího metabolismu buňky může být přidávání sloučenin zpožděno o „n“ hodin bez ztráty jejich účinnosti. Síran dextranu, který se podílí na adsorpci viru, musí být přidáván najednou s virem (n=0), aby jeho působení bylo účinné. Pro AZT, který vzhledem ke své intercelulámí fosforylaci působí při kroku reverzní transkriptázy, musí být přidávání sledovaných látek do buněk zpožděno asi o 4 hodiny (n=4) od provedení infikování. Pro TIBO deriváty (R829013), které nevyžadují intracelulámí transformaci před tím, než mohou reagovat s reverzní transkriptázou, by mělo být přidání látky zpožděno o další 2 hodiny (n=6). Inhibitor proteázy Ro31-8959, který reaguje s opožděným stavem ve virovém cyklu (soubor zralého viru) byl stále ještě účinný, i když látka byla přidána až po 12ti hodinách po infikování (n=12). Z dodatečného pokusu vyplynulo, že pro sloučeninu B je n=l nebo 2, takže sloučenina musí reagovat v okamžiku po absorpci viru, ale před reverzní transkripcí (např. syntéza vir-buňka a/nebo odstraňování obalu).
Pro další potvrzení inhibičního účinku látky B na odstraňování obalu (nebo syntézu) viru HTV byl připraven pokus, ve kterém byla u virové RNA, získané zprávě infikovaných buněk, sledována citlivost na odbourávání ribonukleázou. Uvažovalo se, že pokud by odstraňování obalu (syntéza) byla narušena, zůstaly by proteiny virového kapsidu (nebo obálky) spojené s virovým genomem DNA a tím by byla RNA chráněna proti účinku ribonukleázy. Když byly buňky MT4 vystaveny působení ozářených virových částic při velmi vysokém násobku infekce a pak byly ošetřeny látkou B o různých koncentracích, vykazovala virová RNA, získaná z buněk 4 hodiny po infikování, odolnost vůči odbourávání ribonukleázy.
Kromě toho bylo zjištěno, že látka B inhibuje syntézu, prostřednictvím které vnikají viry do buněk a pomocí které jsou viry nebo infekční materiály přenášeny z jedné buňky na druhou. Formace mezi chronicky infikovanými a neinfíkovanými buňkami odráží syntetický proces vstupu virové nákazy, zprostředkovaný gp 120/41. Zkouška inhibice této formace (Baba et al, J AIDS 3 493, 1990), při které bylo použito buňky HUT78 a MOLT4, infikované HIV-1 Illb, dokazuje, že látka B je při inhibici syntézy přinejmenším stejně schopná, jako síran dextranu. Požadované koncentrace (asi 1 pg/ml) jsou mnohem vyšší než antivirové hodnoty IC50, jsou však stále ještě pod úrovní cytotoxicity.
Z těchto výsledků jasně vyplývá, že látky, které jsou předmětem tohoto vynálezu, primárně zpomalují proces porušování obalu a do určité míry i proces syntézy v replikačním cyklu viru. To je unikátní způsob působení u anti-HIV prostředků; vzhledem k dvojímu způsobu účinků, je zde menší pravděpodobnost odporu organizmů léčených pacientů proti působení těchto látek.
I když neexistují žádné vhodné zvířecí modely pro testování účinnosti anti-HIV činidel iv vivo, bylo provedeno testování hladin lékového séra na králících a po sc podání 10 mg/kg látky B byly odebrány vzorky králičího séra. Měření anti-HIV aktivity v séru ukazuje hladiny léku, překračující in vitro hladinu IC50 o faktor sto po nejméně 6 hodin po podání. Z toho vyplývá, že látka by měla anti-HTV účinky na osoby nebo zvířata, náchylné na infekci HIV.
Látky obecného vzorce I jsou tedy vhodné pro léčbu a/nebo profylaxi infekce virem HTV, a to buď samostatně, nebo v kombinaci s jinými účinnými látkami. Správně dávkování se bude
-19CZ 286928 B6 samozřejmě měnit v závislosti na například použité látce se vzorcem I, na příjemci léku, způsobu podání a povaze a závažnosti stavu, který se má léčit. Všeobecně platí, že uspokojivých výsledků u lidských pacientů lze dosáhnout při denním dávkování asi 0,01 až 20mg/kg tělesné váhy. Uvedená denní dávka u lidí je v rozsahu od 0,7 mg do asi 1400 mg látky se vzorcem I, která je vhodně podávána například po částech čtyřikrát denně.
Látky obecného vzorce mohou být podávány jakýmkoliv běžným způsobem; enterálně - přednost se dává orálnímu podávání, například ve formě tablet, kapslí nebo v kapalné formě, například jako sirup, nebo parenterálně, např. ve formě roztoku nebo suspenze pro iv nebo sc podávání.
Z látek obecného vzorce I je dávána přednost především látce B. Z hlediska její účinnosti v průběhu výše popsaných testovacích metod je zřejmé, že látka B může být podávána pacientům v denních dávkách od 2 do 200 mg (nejlépe 10 až 70 mg) parenterálním způsobem, např. prostřednictvím podkožních injekcí.
Látky obecného vzorce I mohou být podávány ve volné formě, ve formě farmaceuticky přijatelných solí kyselin nebo kovových komplexů. Tyto soli a komplexy se mohou připravovat běžným způsobem, popsaným v příkladech provedení vynálezu. Působí stejně jako volné báze. Farmaceutické směsi, obsahující látky vzorce I, mohou být vyráběny obvyklým způsobem. Jednotně dávkované formy obsahují např. 0,5 až 100 mg látky vzorce I ve volné bázi nebo ve formě soli kyseliny.

Claims (12)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Farmaceutický antivirový přípravek, zejména proti HIV, vyznačující se tím, že obsahuje jako aktivní složku sloučeninu na bázi spojených cyklických polyaminů obecného vzorce I,
    Z-CH2-A-CH2-Y (I), kde Z a Y jsou monocyklické polyaminové zbytky, mající 9 až 20 členů v kruhu, se 3 až 6 atomy dusíku v kruhu oddělenými vždy nejméně dvěma atomy uhlíku, a A je fenylen, bifenylen, pyridylen nebo bipyridylen, naftylen nebo thienylenový zbytek, každý zbytek je popřípadě substituovaný jednou nebo více Ci 4 alkyl-, thio-, 0^4 thioalkylhydroxy-, C] ώ 4 alkoxy-, amino-, karboxy-, karboxamido-, nebo sulfoskupinami, nebo atomy halogenu, methylenové skupiny jsou každá samostatně připojeny k atomům dusíku zbytků Z a Y, nebo její netoxické adiční soli s kyselinou nebo její kovové komplexy, společně s farmaceuticky vhodným rozpouštědlem nebo nosičem.
  2. 2. Přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje jako aktivní složku sloučeninu obecného vzorce I, kde zbytek Za Y má 14 členů v kruhu a 4 aminové dusíky v kruhu.
    -20CZ 286928 B6
  3. 3. Přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje aktivní složku vybranou ze skupiny tvořené:
    1,1'-[ 1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11 -tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1.1 '-[3,3'-bifenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    11.1 l'-[l,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l, 4,7,11-tetraazacyklotetradekanem
    1.1 '-[2,6-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[3,5-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[2,5-thiofen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1.1 '-[4,4'-(2,2'-bipyridin)-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1'-[ 1,3-feny len-bis-(methylen)]-bis-1,4,7,10-tetraazacyklotetradekanem
    1,1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,10-tetraazacyklotetradekanem.
  4. 4. Přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje aktivní složku, kterou je bis-komplex zinku nebo mědi a l,l'-[l,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,8,ll-tetraazacyklotetradekanu.
  5. 5. Přípravek podle nároků laž4, vyznačující se tím, že je v jednotkové dávkovači formě.
  6. 6. Sloučenina na bázi spojených cyklických polyaminů, obecného vzorce Ia
    Z-CH2-A'-CH2-Y (Ia) kde Z a Y mají vpředu uvedený význam, a A' je A definované v nároku 1 s podmínkou, že jestliže oba zbytky Z a Y jsou 14-členné tetraazakruhy, A nemůže být nesubstituovaný fenylen, s výjimkou sloučeniny
    11.1 T-[l,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l,4,7,11-tetraazacyklotetradekanu a jejich adiční soli nebo kovové komplexy.
  7. 7. Sloučenina podle nároku 6 obecného vzorce Ia, kde A' je substituovaný nebo nesubstituovaný fenylen nebo substituovaný nebo nesubstituovaný naftylen.
    -21CZ 286928 B6
  8. 8. Sloučenina podle nároku 6 obecného vzorce Ia vybraná ze skupiny tvořené:
    1,1 '-[5-nitro-l ,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[2,4,5,6-tetrachlor-l ,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[2,3,5,6-tetrachlor-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[1,4-naftylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1'-[ 1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,5,9,13-tetraazacyklohexadekanem
    1,1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,5,9,13-tetraazacyklohexadekanem
    1,1 '-[3,3'-bifenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[2,6-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[3,5-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[2,5-thiofen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11 -tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[4,4'-(2,2'-bipyridin)-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1'-[ 1,3-fenylen-bis-(methylen)]-bÍs-l ,4,7,10-tetraazacyklododekanem
    1,1'-[ 1,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,10-tetraazacyklododekanem
    1,1 '-[2,5-dimethyl-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[2,5-dichIor-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,7,11-tetraazacyklotetradekanem
    1,1 '-[2-brom-l ,4-fenylen-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem, nebo
    1,1 '-[6-fenyl-2,4-pyridin-bis-(methylen)]-bis-l ,4,8,11-tetraazacyklotetradekanem a popřípadě jejich adiční soli s kyselinou.
  9. 9. Způsob přípravy cyklické sloučeniny obecného vzorce Ia, podle nároku 6, vyznačující se tím, že se sloučenina obecného vzorce Π
    X-CHr-A'-CH2-X (Π), kde A' má význam podle nároku 6, a X je odštěpující se skupina,
    -22CZ 286928 B6 podrobí nukleofilní reakci s nechráněným aminovým dusíkem heterocyklických zbytků Z a Y, definovaných v nároku 1, přičemž všechny ostatní aminové dusíky v kruhu jsou chráněny, a následující deprotekci aminových dusíků v kruhu.
  10. 10. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že se nukleofilní reakce provádí v rozpouštědle a v zásaditém prostředí.
  11. 11. Způsob podle nároku 9 nebo 10, vyznačující se tím, že atomy dusíku heterocyklických zbytků Za Y jsou chráněny methansulfonyl- a/nebo 4-tolylsulfonyl- a/nebo diethylfosforyl-skupinou.
  12. 12. Způsob podle nároků 9 až 11, vyznačující se tím, že chránící skupiny se odstraní působením směsí kyseliny bromovodíkové a kyseliny octové v případě ochrany atomů dusíku methansulfonyl- a 4-tolylsulfonyl-skupinou, nebo kyselinou chlorovodíkovou v tetrahydrofuranu nebo dioxanu v případě ochrany diethylfosforyl-skupinou.
    Konec dokumentu
CZ19941188A 1991-12-16 1992-12-16 Farmaceutický přípravek aktivní proti HIV a způsob jeho přípravy CZ286928B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB919126677A GB9126677D0 (en) 1991-12-16 1991-12-16 Improvements in chemical compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ118894A3 CZ118894A3 (en) 1995-10-18
CZ286928B6 true CZ286928B6 (cs) 2000-08-16

Family

ID=10706343

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19941188A CZ286928B6 (cs) 1991-12-16 1992-12-16 Farmaceutický přípravek aktivní proti HIV a způsob jeho přípravy

Country Status (26)

Country Link
US (2) USRE42152E1 (cs)
EP (2) EP1223166A1 (cs)
JP (1) JP3375961B2 (cs)
KR (1) KR100286235B1 (cs)
AT (1) ATE273964T1 (cs)
AU (1) AU661086B2 (cs)
CA (1) CA2125978C (cs)
CZ (1) CZ286928B6 (cs)
DE (2) DE69233401T2 (cs)
DK (1) DK0619813T3 (cs)
ES (1) ES2224096T3 (cs)
FI (1) FI942849A (cs)
GB (1) GB9126677D0 (cs)
HK (2) HK1049328A1 (cs)
HU (1) HU224013B1 (cs)
IL (1) IL103984A (cs)
MX (1) MX9207316A (cs)
MY (1) MY110897A (cs)
NL (1) NL300425I1 (cs)
NO (2) NO305984B1 (cs)
NZ (1) NZ246179A (cs)
PL (1) PL173643B1 (cs)
PT (1) PT619813E (cs)
RU (1) RU94031208A (cs)
WO (1) WO1993012096A1 (cs)
ZA (1) ZA929632B (cs)

Families Citing this family (107)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9126677D0 (en) 1991-12-16 1992-02-12 Johnson Matthey Plc Improvements in chemical compounds
GB9318550D0 (en) * 1993-09-07 1993-10-20 Nycomed Salutar Inc Chelants
GB9400411D0 (en) * 1994-01-11 1994-03-09 Johnson Matthey Plc Improvements in chemical compounds
US5663161A (en) 1995-02-17 1997-09-02 The Research Foundation Of State University Of New York Anti-viral triaza compounds
US5612478A (en) * 1995-03-30 1997-03-18 Johnson Matthey Plc Process for preparing 1,1'-[1,4-phenylenebis-(methylene)]-bis-1,4,8,11-tetraazacyclotetradecane
US5606053A (en) * 1995-05-02 1997-02-25 Johnson Matthey Plc Process for preparing 1,1'-[1,4-phenylenebis-(methylene)]-bis-1,4,8,11-tetraazacyclotetradecane
US6506770B1 (en) * 1996-06-06 2003-01-14 Anormed, Inc. Antiviral compounds
GB9511357D0 (en) * 1995-06-06 1995-08-02 Johnson Matthey Plc Improved antiviral compounds
US5608061A (en) * 1995-08-02 1997-03-04 Johnson Matthey Plc Process for preparing 1,4,8,11-tetraazacyclotetradecane
US7087648B1 (en) * 1997-10-27 2006-08-08 The Regents Of The University Of California Methods for modulating macrophage proliferation using polyamine analogs
US6498155B1 (en) 1998-11-17 2002-12-24 Smithkline Beecham Corporation Methods of treating thrombocytopenia
US6365583B1 (en) 1999-02-02 2002-04-02 Anormed, Inc. Methods to enhance white blood cell count
US6750348B1 (en) * 1999-03-24 2004-06-15 Anormed, Inc. Chemokine receptor binding heterocyclic compounds
CZ20013421A3 (cs) * 1999-03-24 2002-03-13 Anormed Inc. Heterocyklické sloučeniny váľící chemokinové receptory
JP2002543126A (ja) * 1999-05-03 2002-12-17 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション Ｃｘｃｒ−４受容体アンタゴニスト−トロンボポエチン模倣物
CN100335478C (zh) * 1999-12-17 2007-09-05 阿诺麦德股份有限公司 结合趋化因子受体的杂环化合物
CA2400157A1 (en) * 2000-02-22 2001-08-30 Ram W. Sabnis Organic polymeric antireflective coatings deposited by chemical vapor deposition
AU9156901A (en) * 2000-09-15 2002-03-26 Anormed Inc Chemokine receptor binding heterocyclic compounds
ES2269465T3 (es) * 2000-09-15 2007-04-01 Anormed Inc Compuestos heterociclicos de union a los receptores de la quimioquina.
AU2001293551B2 (en) * 2000-09-15 2007-08-23 Anormed Inc. Chemokine receptor binding heterocyclic compounds
PL359292A1 (en) 2000-09-29 2004-08-23 Anormed Inc. Process for preparation of n-1 protected n ring nitrogen containing cyclic polyamines and products thereof
DE10117206A1 (de) * 2001-04-06 2002-10-10 Bayer Ag Verfahren zur Herstellung von halogensubstituierten Dibenzylalkoholen, diese halogensubstituierten Dibenzylalkohole sowie deren Verwendung
US7169750B2 (en) * 2001-07-31 2007-01-30 Anormed, Inc. Methods to mobilize progenitor/stem cells
ATE538785T1 (de) * 2001-07-31 2012-01-15 Genzyme Global S A R L Verfahren zur mobilisierung von vorläufer/stammzellen
CN101353324A (zh) * 2001-09-12 2009-01-28 阿诺麦德股份有限公司 对映体纯的氨基取代稠合双环的合成
US7354932B2 (en) * 2001-12-21 2008-04-08 Anormed, Inc. Chemokine receptor binding heterocyclic compounds with enhanced efficacy
EP1465889B1 (en) * 2001-12-21 2017-03-22 Genzyme Corporation Chemokine receptor binding heterocyclic compounds with enhanced efficacy
US7638536B2 (en) * 2002-01-18 2009-12-29 Astellas Pharma Inc. 2-Acylaminothiazole derivative or salt thereof
EP1613613B1 (en) * 2003-04-11 2021-06-02 Genzyme Corporation Cxcr4 chemokine receptor binding compounds
US7501518B2 (en) * 2003-04-22 2009-03-10 Genzyme Corporation Methods of making 2,6-diaryl piperidine derivatives
AU2004232361A1 (en) * 2003-04-22 2004-11-04 Anormed Inc. Chemokine receptor binding heterocyclic compounds with enhanced efficacy
US7498346B2 (en) * 2003-12-11 2009-03-03 Genzyme Corporation Chemokine receptor binding compounds
EP1708703A4 (en) * 2003-12-11 2008-04-09 Anormed Inc CHEMOKIN RECEPTOR BINDING COMPOUNDS
RU2006136381A (ru) * 2004-03-15 2008-04-27 Анормед, Инк. (Ca) Способ получения антагониста cxcr4
US7678947B2 (en) * 2004-08-05 2010-03-16 Sumitomo Chemical Company, Limited Method for producing halogen-substituted benzenedimethanol
AU2005272653A1 (en) * 2004-08-13 2006-02-23 Anormed Inc. Chemokine combinations to mobilize progenitor/stem cells
TW200619206A (en) * 2004-09-29 2006-06-16 Anormed Inc Chemokine-binding heterocyclic compound salts, and methods of use thereof
CA2586765A1 (en) 2004-11-05 2006-12-28 The General Hospital Corporation Purposeful movement of human migratory cells away from an agent source
EP1942890A4 (en) * 2005-06-15 2009-08-26 Genzyme Corp CHEMOKINE RECEPTOR BINDING COMPOUNDS
MX2008002214A (es) * 2005-08-16 2008-11-27 Genzyme Corp Compuestos de unión del receptor de quimiocina.
AU2006280945A1 (en) * 2005-08-19 2007-02-22 Genzyme Corporation Methods to enhance chemotherapy
EP1971368A4 (en) * 2005-11-08 2009-08-05 Astellas Pharma Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING THROMBOCYTOPENIA
ATE517075T1 (de) 2006-01-24 2011-08-15 Sumitomo Chemical Co Verfahren zur herstellung von halogensubstituiertem benzoldimethanol
BRPI0621369A2 (pt) * 2006-02-24 2011-12-06 Genzyme Corp uso de compostos que ligam-se ao receptor quimiocina cxcr4 e métodos para aumentar o fluxo de sangue e promover a regeneração do tecido
AR063470A1 (es) * 2006-08-02 2009-01-28 Genzyme Corp Terapia combinada
WO2008019371A1 (en) * 2006-08-07 2008-02-14 Genzyme Corporation Combination therapy
CA2660283C (en) * 2006-08-08 2014-11-18 Akarx, Inc. 2-acylaminothiazole compositions and methods for increasing blood platlelet levels in humans
WO2008109076A1 (en) * 2007-03-02 2008-09-12 Oxigene, Inc. Methods for enhancing the efficacy of vascular disrupting agents
EP2164953A4 (en) 2007-06-18 2010-06-30 Childrens Hosp & Res Ct Oak METHOD OF ISOLATING STAIN AND PRECIPITATING CELLS FROM PLAZENTA
US9822364B2 (en) 2008-03-11 2017-11-21 Yale University Compositions and methods for controlled delivery of inhibitory ribonucleic acids
US9241898B2 (en) 2008-03-11 2016-01-26 Yale University Compositions and methods for controlled delivery of inhibitory ribonucleic acids
EP2149567A1 (en) * 2008-07-18 2010-02-03 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Cyclic polyamines for binding phosphatidylserine
US8771677B2 (en) * 2008-12-29 2014-07-08 Vladimir B Serikov Colony-forming unit cell of human chorion and method to obtain and use thereof
BR112013029482A2 (pt) 2011-05-16 2016-08-09 Genzyme Corp utilização de antagonistas cxr4
US9895451B2 (en) 2011-12-02 2018-02-20 Yale University Formulations for targeted release of agents to low pH tissue environments or cellular compartments and methods of use thereof
WO2013082529A1 (en) 2011-12-02 2013-06-06 Yale University Enzymatic synthesis of poly(amine-co-esters) and methods of use thereof for gene delivery
US10465042B2 (en) 2011-12-02 2019-11-05 Yale University Poly(amine-co-ester) nanoparticles and methods of use thereof
WO2014125499A1 (en) 2013-02-13 2014-08-21 Natco Pharma Limited Improved and commercially viable process for the preparation of high pure plerixafor base
PT107018A (pt) * 2013-06-20 2014-12-22 Inst Superior Técnico Síntese e uso de ciclamas com atividade antibacteriana
WO2015031722A1 (en) 2013-08-30 2015-03-05 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Method for treating amyotrophic lateral sclerosis by inhibition of cxcr4/cxcl12 signaling
EP3721875B1 (en) 2014-05-09 2023-11-08 Yale University Particles coated with hyperbranched polyglycerol and methods for their preparation
US11918695B2 (en) 2014-05-09 2024-03-05 Yale University Topical formulation of hyperbranched polymer-coated particles
US10682422B2 (en) 2014-11-18 2020-06-16 Yale University Formulations for targeted release of agents under low pH conditions and methods of use thereof
WO2016081621A1 (en) 2014-11-18 2016-05-26 Yale University Formulations for targeted release of agents under low ph conditions and methods of use thereof
EP3613435A1 (en) 2015-01-28 2020-02-26 Universite De Bordeaux Chemokine receptor cxcr4 inhibitors for treating and/or preventing chronic obstructive pulmonary disease
JP2018513201A (ja) 2015-04-25 2018-05-24 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 抗ｆｕｇｅｔａｃｔｉｃ剤と抗癌剤の併用療法、および、癌の治療のための組成物
AU2016269839B2 (en) 2015-06-03 2021-07-08 The University Of Queensland Mobilizing agents and uses therefor
EP3344608B1 (en) 2015-09-02 2019-10-23 Fresenius Kabi Oncology Ltd A process for the preparation of xylene linked cyclam compounds
EP3349797A4 (en) 2015-09-18 2019-06-12 The General Hospital Corporation Dba Massachusetts General Hospital LOCALIZED DELIVERY OF ANTICHIMIOREPULSION AGENT FOR THE TREATMENT OF CANCER
WO2017106332A1 (en) 2015-12-14 2017-06-22 X4 Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancer
JP6864296B2 (ja) 2015-12-14 2021-04-28 エックス４ ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド がんを処置する方法
EP3389720A1 (en) 2015-12-18 2018-10-24 The General Hospital Corporation Polyacetal polymers, conjugates, particles and uses thereof
DK3393468T3 (da) 2015-12-22 2022-12-19 X4 Pharmaceuticals Inc Fremgangsmåder til behandling af en immundefektsygdom
US11136597B2 (en) 2016-02-16 2021-10-05 Yale University Compositions for enhancing targeted gene editing and methods of use thereof
WO2017143061A1 (en) 2016-02-16 2017-08-24 Yale University Compositions and methods for treatment of cystic fibrosis
WO2017177230A1 (en) 2016-04-08 2017-10-12 X4 Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancer
WO2017197128A1 (en) 2016-05-11 2017-11-16 Yale University Poly(amine-co-ester) nanoparticles and methods of use thereof
CN109641838A (zh) 2016-06-21 2019-04-16 X4 制药有限公司 Cxcr4抑制剂及其用途
JP7084624B2 (ja) 2016-06-21 2022-06-15 エックス４ ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Ｃｘｃｒ４阻害剤およびその使用
EP3471727B1 (en) 2016-06-21 2020-12-09 X4 Pharmaceuticals, Inc. Cxcr4 inhibitors and uses thereof
US11453706B2 (en) 2016-09-09 2022-09-27 The General Hospital Corporation HSP fusion protein with anti-chemorepellant agent for treatment of infectious disease
WO2018049120A1 (en) 2016-09-09 2018-03-15 The General Hospital Corporation Ex vivo antigen-presenting cells or activated cd-positive t cells for treatment of cancer
US11325951B2 (en) 2016-09-09 2022-05-10 The General Hospital Corporation HSP fusion protein with anti-chemorepellant agent for treatment of cancer
US11419894B2 (en) 2016-09-16 2022-08-23 The General Hospital Corporation Modified natural killer cells for the treatment of cancer
WO2018106738A1 (en) 2016-12-05 2018-06-14 Massachusetts Institute Of Technology Brush-arm star polymers, conjugates and particles, and uses thereof
EP3600395A4 (en) 2017-03-23 2021-05-05 The General Hospital Corporation BLOCKING OF CXCR4 / CXCR7 AND TREATMENT OF HUMAN PAPILLOMAVIRUS-ASSOCIATED DISEASE
US20200113821A1 (en) 2017-04-04 2020-04-16 Yale University Compositions and methods for in utero delivery
CA3079405A1 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Magenta Therapeutics Inc. Compositions and methods for the expansion of hematopoietic stem and progenitor cells
EP3703715A1 (en) 2017-10-31 2020-09-09 Magenta Therapeutics, Inc. Compositions and methods for hematopoietic stem and progenitor cell transplant therapy
US11260079B2 (en) 2017-12-06 2022-03-01 Magenta Therapeutics, Inc. Dosing regimens for the mobilization of hematopoietic stem and progenitor cells
US10058573B1 (en) 2017-12-06 2018-08-28 Magenta Therapeutics, Inc. Dosing regimens for the mobilization of hematopoietic stem cells
BR112020011186A2 (pt) 2017-12-06 2020-11-17 Magenta Therapeutics, Inc. regimes de dosagem para a mobilização de células-tronco e progenitoras hematopoiéticas
WO2019136159A1 (en) 2018-01-03 2019-07-11 Magenta Therapeutics Inc. Compositions and methods for the expansion of hematopoietic stem and progenitor cells and treatment of inherited metabolic disorders
US20210189431A1 (en) 2018-08-10 2021-06-24 Yale University Compositions and methods for embryonic gene editing in vitro
US10548889B1 (en) 2018-08-31 2020-02-04 X4 Pharmaceuticals, Inc. Compositions of CXCR4 inhibitors and methods of preparation and use
US11814464B2 (en) 2019-04-29 2023-11-14 Yale University Poly(amine-co-ester) polymers and polyplexes with modified end groups and methods of use thereof
WO2020257779A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 Yale University Hydroxymethyl-modified gamma-pna compositions and methods of use thereof
US20220243211A1 (en) 2019-06-21 2022-08-04 Yale University Peptide nucleic acid compositions with modified hoogsteen binding segments and methods of use thereof
WO2021022161A1 (en) 2019-07-31 2021-02-04 Yale University Compositions and methods for treating sickle cell disease
EP4051298A1 (en) 2019-11-01 2022-09-07 Magenta Therapeutics, Inc. Dosing regimens for the mobilization of hematopoietic stem and progentor cells
EP4143302A1 (en) 2020-04-27 2023-03-08 Magenta Therapeutics, Inc. Methods and compositions for transducing hematopoietic stem and progenitor cells in vivo
EP4168471A1 (en) 2020-06-19 2023-04-26 Yale University Poly(amine-co-ester) polymers with modified end groups and enhanced pulmonary delivery
US20220031633A1 (en) 2020-07-28 2022-02-03 Yale University Poly(amine-co-ester) polymeric particles for selective pulmonary delivery
WO2022197776A1 (en) 2021-03-16 2022-09-22 Magenta Therapeutics, Inc. Dosing regimens for hematopoietic stem cell mobilization for stem cell transplants in multiple myeloma patients
CA3234340A1 (en) 2021-10-01 2023-04-06 Janssen Pharmaceutica N.V. Methods of increasing progenitor cell production
US20230172870A1 (en) 2021-12-08 2023-06-08 Yale University Surface conjugation to poly(amine-co-ester) nanoparticles for targeting to cells and tissues
WO2023159189A1 (en) 2022-02-18 2023-08-24 Yale University Branched poly(amine-co-ester) polymers for more efficient nucleic expression

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4994560A (en) 1987-06-24 1991-02-19 The Dow Chemical Company Functionalized polyamine chelants and radioactive rhodium complexes thereof for conjugation to antibodies
DE3728525A1 (de) 1987-08-24 1989-03-16 Schering Ag Mehrkernige substituierte komplexbildner, komplexe und komplexsalze, verfahren zu deren herstellung und diese enthaltende pharmazeutische mittel
US5047572A (en) * 1988-11-18 1991-09-10 Ici Americas Inc. Trisubstituted benzoic acid intermediates
FR2644453A1 (fr) 1989-03-20 1990-09-21 Centre Nat Rech Scient Procede de preparation de tetramines cycliques monofonctionnalisees
CA2069886A1 (en) 1989-10-23 1991-04-24 David Love Multi-site metal chelating agents
US5021409A (en) * 1989-12-21 1991-06-04 Johnson Matthey Plc Antiviral cyclic polyamines
FR2672051B1 (fr) 1991-01-24 1993-05-21 Guerbet Sa Nouveaux ligands macrocycliques azotes, procede de preparation, complexes polymetalliques, composition de diagnostic et therapeutique.
GB9105489D0 (en) * 1991-03-15 1991-05-01 Johnson Matthey Plc Improvements in chemical compounds
GB9126677D0 (en) 1991-12-16 1992-02-12 Johnson Matthey Plc Improvements in chemical compounds

Also Published As

Publication number Publication date
ES2224096T3 (es) 2005-03-01
PL173643B1 (pl) 1998-04-30
NL300425I1 (nl) 2010-01-04
NO2010001I2 (no) 2012-08-27
EP0619813B1 (en) 2004-08-18
MY110897A (en) 1999-06-30
DE122010000001I1 (de) 2010-08-26
AU661086B2 (en) 1995-07-13
IL103984A0 (en) 1993-05-13
USRE42152E1 (en) 2011-02-15
HK1014368A1 (en) 1999-09-24
CA2125978C (en) 2005-09-20
JP3375961B2 (ja) 2003-02-10
JPH07501816A (ja) 1995-02-23
HK1049328A1 (zh) 2003-05-09
NO2010001I1 (no) 2010-03-08
RU94031208A (ru) 1996-09-10
US5583131A (en) 1996-12-10
HU224013B1 (hu) 2005-04-28
NZ246179A (en) 1996-03-26
CA2125978A1 (en) 1993-06-24
WO1993012096A1 (en) 1993-06-24
EP1223166A1 (en) 2002-07-17
FI942849A0 (fi) 1994-06-15
KR100286235B1 (ko) 2001-04-16
DE69233401T2 (de) 2005-10-13
NO942254D0 (no) 1994-06-15
NO942254L (no) 1994-06-15
IL103984A (en) 1998-10-30
ATE273964T1 (de) 2004-09-15
GB9126677D0 (en) 1992-02-12
CZ118894A3 (en) 1995-10-18
DK0619813T3 (da) 2004-12-20
AU3165593A (en) 1993-07-19
FI942849A (fi) 1994-06-15
ZA929632B (en) 1993-06-18
DE69233401D1 (de) 2004-09-23
EP0619813A1 (en) 1994-10-19
HU9401786D0 (en) 1994-09-28
PT619813E (pt) 2004-12-31
HUT67544A (en) 1995-04-28
NO305984B1 (no) 1999-08-30
MX9207316A (es) 1993-06-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ286928B6 (cs) Farmaceutický přípravek aktivní proti HIV a způsob jeho přípravy
JPH09506604A (ja) 免疫抑制剤として有用なラパマイシン誘導体
MX2011006244A (es) Nuevos peptidos de 4-amino-4-oxobutanoilo como inhibidores de replica viral.
JP2000510815A (ja) ラパマイシン誘導体
JPH034056B2 (cs)
EP4034123A1 (en) Combination therapies
AU2005204369A1 (en) Azabenzofuran substituted thioureas as inhibitors of viral replication
JP5681226B2 (ja) メチルフェニデート誘導体を含む治療剤
FI102755B (fi) Menetelmä uuden, terapeuttisesti käyttökelpoisen yhdisteen tai sen suo lan valmistamiseksi
AU2011237629A1 (en) Glycomimetic compounds and methods to inhibit infection by HIV
JPH11500130A (ja) 抗ウイルス性トリアザ化合物
CN110372692B (zh) 二氢喹唑啉酮类反向转运过程阻断剂、其制备方法及用途
CN117916234A (zh) 作为tyk2/jak1假激酶结构域抑制剂的化合物及合成和使用方法
WO2013138600A1 (en) Radioprotector compounds
WO2002080856A2 (en) Triaza compound immunoregulatory agents
JP6562926B2 (ja) １−（３−アミノプロピル）置換環状アミン系化合物、その製造方法、薬物組成物および使用
Camplo et al. Synthesis and antiviral activity of N-4′-dihydropyridinyl and dihydroquinolinylcarbonyl-2-hydroxymethyl-5-[cytosin-1′-yl]-1, 3-oxathiolane derivatives against human immunodeficiency virus and duck hepatitis B virus
JPH07504405A (ja) 置換アザスピラン化合物の投与によるｈｉｖ個体ａｉｄｓの遅延方法
JP2022525293A (ja) 貧血の処置におけるムスカリン性アセチルコリン受容体サブタイプ４アンタゴニスト
KR20240051464A (ko) 3-옥신돌-2-카르복실레이트 유도체 화합물, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 항 인간 면역결핍 바이러스 1형(hiv-1)용 약학적 조성물
JP2001247575A (ja) 抗マラリア活性を有する新規化合物
KR20070005345A (ko) ２,５-디히드로-４-알킬-２,５-디옥소퓨란 유도체 및이것의 용도
RU2419431C1 (ru) ПРОИЗВОДНЫЕ β-КАРБОЛИНА, ОБЛАДАЮЩИЕ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, ИХ ПРИМЕНЕНИЯ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА, СПОСОБ ИХ СИНТЕЗА, А ТАКЖЕ НОВЫЕ МЕТОДЫ ЛЕЧЕНИЯ С ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ
KR20130072387A (ko) 면역 억제용 약학적 조성물
JP2006219456A (ja) 抗バベシア剤および新規ベンズオキサゾリノン誘導体

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20081216